KR102470508B1 - 관류 생물반응기 플랫폼 - Google Patents

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그레고리 로저 마틴
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Abstract

세포 배양 장치는 제1 주 표면 및 대립하는 제2 주 표면을 갖는 하나 이상의 플레이트를 포함한다. 상기 제1 주 표면은 다수의 웰을 한정하는 구조화된 표면을 포함한다. 각 웰은 상부 개구 및 천저를 한정하는 내부 표면을 가지며, 여기서 각 웰의 상부 개구는 100 micrometers 내지 2000 micrometers 범위에서 직경 치수를 갖는다. 상기 장치는 또한 바닥 표면의 길이를 따라 제1 주 표면으로부터 연장되는 복수의 스페이서를 포함한다. 다수의 흐름 채널은 인접한 레일 사이에 한정된다.

Description

관류 생물반응기 플랫폼 {PERFUSION BIOREACTOR PLATFORM}
본 개시는 2014년 10월 29일자로 출원된 미국 가 특허출원 제62/072,039호의 우선권을 주장하며, 이의 전체적인 내용은 참조로서 여기에 혼입된다.
본 개시는 세포를 배양하는 장치, 시스템 및 방법에 관한 것이다.
유지될 수 있는 생존 가능한 세포 밀도 (VCD)는 생물반응기 용기의 생산성과 비용을 좌우하는 주요 변수이다. 생물반응기에서, 가장 높은 가능한 VCD를 달성하는데 하나의 제한은, 백 (bags)이 빠르게 흔들리거나 또는 임펠러 속도가 증가되어, 배양에서 세포의 높은 밀도 때문에 상승된 영양분과 가스 교환 요건을 수용할 때 세포가 겪는 전단력 (shear force)이다. 부가적으로, 스크린, 세포 치료 또는 재생 의학 적용을 위한 세포의 생산의 경우와 같이, 부착 의존성 세포가 생산물인 적용의 경우, 반응기에서 세포를 수확하는 것이 어려울 수 있다.
최근 몇 년간, 자동화된 공정에서 일정한 품질을 유지하면서 생산 비용을 크게 줄이기 위해 지속적으로 관류된 모드 (perfused mode)인, 안정 상태에서 생물반응기를 운전하려는 노력이 있었다. 이 방법이 높은 세포 밀도를 유지하는 강력한 방법인 것으로 밝혀졌지만, 치료용 단백질의 상업적 생산에 대한 이의 적합성과 관련하여 어려움이 있다. 시간에 따라 선택된 관심의 단백질을 발현하는 세포보다는 가장 빠른 성장 잠재력을 나타내는 세포가 갖는, 하나의 위험은, 장기간에 걸친 배양 후에 불안정한 발현 수준이다.
따라서, 관심의 세포의 증가된 안정성, 부착 의존성 세포의 수확의 용이성, 또는 증가된 생존 가능한 세포 밀도 중 하나 이상을 제공하는 새로운 세포 배양 장치는 바람직할 것이다.
본 개시의 다양한 구체 예에 따르면, 적층될 (stacked) 수 있는, 하나 이상의 플레이트 (plates)를 갖는 세포 배양 장치는 기재된다. 상기 플레이트는 구조화된 표면을 한정하는 주 표면을 갖는다. 상기 구조화된 표면은 세포가 배양될 수 있는 다수의 웰 (wells)을 한정한다. 상기 웰은 micrometers 스케일의 치수를 가질 수 있으며, 회전 타원체 세포 클러스터 (spheroid cell clusters)의 형성을 촉진하도록 구성될 수 있다. 여기에 개시된 장치는 또한 적층된 플레이트 사이의 공간을 유지하기 위해 복수의 스페이서 (spacers)를 갖는다. 구체 예에서, 이러한 스페이서는 플레이트의 길이를 따라 주 표면으로부터 연장되는 포스트 (posts) 또는 이격된 레일 (rails)을 포함한다. 다수의 흐름 채널 (flow channels)은 세포 배양 배지 (culture media)의 관류를 위해 인접 플레이트 및/또는 레일 사이에 형성된다. 상기 구조화된 표면은, 회전 타원체 형성에 의해 향상될 수 있는, 매우 높은 세포 밀도의 세포 성장을 지원할 수 있다. 회전 타원체 형성은 또한, 단층으로 성장한 세포에 비해 오히려 생채 내에 가까운 반응을 나타내는 분화된 세포 기능을 유지할 수 있기 때문에, 세포 기능적 안정성을 향상시킬 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 세포가 배양되는 웰은, 세포에 비-부착성이고, 이는 세포의 수확을 용이하게 할 수 있다. 여기에 기재된 다양한 구체 예에서, 상기 장치는 대사 가스의 수동 확산을 허용하도록 설계되어, 더 낮은 배지 관류 속도 (media perfusion rates)를 가능하게 하고, 따라서 배양된 세포를 덜 전단 (shear)시킬 수 있다.
다양한 구체 예에서, 본 개시는 세포 배양 장치를 기재한다. 상기 세포 배양 장치는 제1 주 표면 및 대립하는 제2 주 표면을 갖는 하나 이상의 플레이트를 포함한다. 상기 제1 주 표면은 다수의 웰을 한정하는 구조화된 표면을 포함한다. 각 웰은 상부 개구 (aperture) 및 천저 (nadir)를 한정하는 내부 표면을 가지며, 여기서 각 웰의 상부 개구는 200 micrometers 내지 500 micrometers의 범위, 또는 100 micrometers 내지 2000 micrometers의 범위에서 직경 치수를 갖는다. 상기 장치는 또한 제1 주 표면의 길이를 따라 제1 주 표면으로부터 연장되는 복수의 이격된 레일 (스페이서)을 포함한다. 다수의 흐름 채널은 인접한 레일 사이에 형성된다.
몇몇 구체 예에서, a) 여기에 기재된 바와 같은 세포 배양 장치의 웰에서 단백질을 발현하는 세포를 배양하는 단계; 및 b) 상기 세포로부터 단백질을 분리하는 단계를 포함하는 단백질 (예를 들어, 치료용 항체 또는 항체 단편과 같은, 치료용 단백질)의 생산 방법은 여기에 제공된다.
몇몇 구체 예에서, 웰 (예를 들어, 마이크로웰 (microwells))은 사인파 (sine wave)에 근접한 단면 형상을 갖는다. 이러한 구체 예에서, 웰의 바닥은 둥글고 (예를 들어, 반구형으로 둥근), 측벽은 웰의 바닥으로부터 상부로 직경이 증가하고, 웰들 사이의 경계는 둥글다. 이로써, 웰의 상부는 직각으로 경계를 짓지 않는다. 몇몇 구체 예에서, 웰은 바닥과 상부 사이에 중간 지점에서의 직경 D (또한 Dhalf - way이라 함), 웰의 상부에서의 직경 (Dtop) 및 웰의 바닥으로부터 상부로의 높이 (H)를 갖는다. 이들 구체 예에서, Dtop은 D보다 크다. 부가적인 구체 예는 도 15에 나타내고, 여기서, 웰의 폭은 연속적인 웰 사이의 장벽 (barrier)의 폭을 초과한다. 이러한 구체 예는, 배양 표면의 주어진 영역 내에서 더 많은 수의 웰을 허용한다.
본 개시의 주제의 부가적인 특색 (features) 및 이점은, 이하의 상세한 설명에서 서술될 것이고, 부분적으로는 그 상세한 설명으로부터 당업자에게 명백할 것이며, 또는 이하 상세한 설명, 청구 범위뿐만 아니라 첨부된 도면을 포함하는, 여기에 기재된 바와 같은 본 개시의 주제를 실시함으로써 인식될 것이다.
전술한 배경기술 및 하기 상세한 설명은 본 개시의 주제의 구체 예를 제시하고, 및 청구된 바와 같은 본 개시의 주제의 본질 및 특성을 이해하기 위한 개요 또는 틀거리를 제공하도록 의도된 것으로 이해될 것이다. 수반되는 도면은 본 개시의 주제의 또 다른 이해를 제공하기 위해 포함되며, 본 명세서에 혼입되고, 본 명세서의 일부를 구성한다. 도면은 본 개시의 주제의 다양한 구체 예를 예시하고, 상세한 설명과 함께 본 개시의 주제의 원리 및 작동을 설명하는 역할을 한다. 부가적으로, 도면 및 상세한 설명은 단지 예시적인 것을 의미하며, 어떠한 방식으로도 청구 범위의 범주를 한정하는 것은 아니다.
본 개시의 특정 구체 예의 하기 상세한 설명은, 유사한 구조가 동일한 참조 번호로 표시되는, 하기 도면들과 관련하여 판독하는 경우 가장 잘 이해될 수 있다.
도 1은 세포를 배양하기 위한 웰을 갖는 구조화된 표면을 갖는 기판의 구체 예의 개략적인 측면도이다.
도 2는 구조화된 표면의 웰의 구체 예의 개략적인 단면도이다.
도 3은 구조화된 표면의 웰의 구체 예의 개략적인 단면도이다.
도 4는 구조화된 표면을 갖는 기판의 구체 예의 이미지이다.
도 5는 구조화된 표면의 구체 예의 웰에서 성장한 세포의 개략적인 평면도이다.
도 6a-c는 플레이트 및 레일의 구체 예의 개략적인 사시도이다.
도 7은 세포 배양 장치의 구체 예의 개략적인 단면도이다.
도 8은 세포 배양 장치의 구체 예의 개략적인 측면도이다.
도 9a-b는 매니폴드 (9a) 및 확장기 (expander: 9b)의 구체 예의 겉면 (face)의 개략도이다.
도 10a-b는 배치 모드 (batch mode: 10a) 및 연속 모드 (10b)에서 작동하는 시스템의 구체 예의 개략도이다.
도 11a-b는 웰의 구체 예의 개략적인 단면도이다.
도 12는 플레이트 및 레일의 적층된 유닛 (stacked units)의 구체 예의 개략적인 단면도이다.
도 13은 플레이트 및 레일의 적층된 유닛의 구체 예의 개략적인 절개 사시도이다.
도 14는 세포 배양 장치의 구체 예의 개략적인 측면도이다.
도 15a는, 웰이 가스 투과성 물질로 형성되는, 세포 배양 장치 (600)의 개략적인 절개 사시도를 나타낸다. 이 대표적인 구체 예에서, 배지는 주입구 포트 (625)를 통해 장치의 일측 말단부으로 들어가고, (배출구 포트 (635)를 통해) 빠져나가기 전에 전체 장치를 통해 순환하여, 각 챔버를 통한 흐름을 역전시킨다. 도 15b는 도 15a에 예시된 세포 배양 장치를 통한 흐름을 조절하기 위한 시스템을 나타낸다.
도 16a는, 웰이 가스 투과성 물질로 형성되는, 세포 배양 장치 (600)의 개략적인 절개 사시도를 나타낸다. 이 대표적인 구체 예에서, 배지는 주입구 포트 (625)를 통해 진입하고, 배출구 포트 (635)에 부착된 배출구 매니폴드 (630)를 통해 대립 말단부를 빠져나가기 전에 모든 구획으로 (주입구 매니폴드 (620)를 통해) 분배된다. 도 16b는 도 16a에 예시된 세포 배양 장치를 통한 흐름을 조절하기 위한 시스템을 나타낸다.
도 17a 및 b는 웰의 어레이 (100)의 대표적인 구체 예의 개략도이다. 도 17a는 단면도의 예시이다. 도 17b는 도 17a의 라인 B-B에서 취해진, 웰들의 어레이의 대표적인 구체 예의 평면도 (top-down drawing)이다.
도 18a 및 b는 웰의 어레이 (100)의 다른 대표적인 구체 예의 개략도이다. 도 18a는 단면도의 예시이다. 도 18b는, 도 18a의 라인 B-B에서 취해진, 웰들의 어레이의 대표적인 구체 예의 평면도이다.
도 19a-c는 웰들의 어레이 (100)의 다른 대표적인 구체 예의 개략도이다. 도 19a는 단면도의 예시이다. 도 19b는, 도 19a의 라인 B-B에서 취해진, 웰의 어레이의 대표적인 구체 예의 평면도이다. 도 19c는 사인곡선 또는 포물선 형상을 갖는 웰의 어레이의 도면이다.
언급은 본 개시의 주제의 다양한 구체 예에 대해 더 상세하게 이루어질 것이며, 이의 몇몇 구체 예는 수반되는 도면에 예시된다. 도면에서 사용된 유사한 번호는 유사한 구성요소, 단계 및 이와 유사한 것을 나타낸다. 그러나, 주어진 도면에서 구성요소를 나타내기 위한 번호의 사용은 동일한 번호로 표지된 다른 도면에서 구성요소를 제한하려는 의도가 아니라는 것을 이해할 것이다. 부가적으로, 구성요소를 나타내기 위한 다른 수의 사용은, 다른 번호의 구성요소가 다른 번호의 구성요소와 동일하거나 또는 유사할 수 없음을 나타내도록 의도된 것은 아니다.
본 개시는, 다른 것들 중에서도, 제1 주 표면 및 대립하는 제2 주 표면을 각각 갖는, 복수의 적층된 플레이트를 갖는 세포 배양 장치를 기재한다. 상기 제1 주 표면은 복수의 마이크로웰 또는 마이크로웰의 어레이를 한정하는 구조화된 표면을 포함한다. 구체 예에서, 구조화된 표면은 마이크로웰의 어레이를 갖는 기판이다. 각 웰은 상부 개구 및 천저를 한정하는 내부 표면을 가지며, 여기서, 각 웰의 상부 개구는 200 micrometers 내지 500 micrometers의 범위 또는 100 micrometers 내지 2000 micrometers의 범위에서 직경 치수를 갖는다. 상기 장치는 또한 적층된 플레이트들 사이에 갭을 유지하기 위한 복수의 스페이서들을 포함한다. 상기 스페이서는 제1 주 표면의 길이를 따라 제1 주 표면으로부터 연장되는 복수의 이격된 레일을 포함할 수 있다. 다수의 흐름 채널은 인접한 레일 사이에서 한정된다.
몇몇 구체 예에서, 웰은 배양된 세포가 회전 타원체를 형성하도록 구성될 수 있다. 예를 들어, 웰의 내부 표면은 웰 내에 세포가 서로 연관되어 구체를 형성하도록 세포에 비-부착성일 수 있다. 회전 타원체는 웰의 기하학에 의해 부과된 제한으로 크기를 바꾸도록 확장될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 웰을 세포에 비-부착성으로 만들기 위해 초-저 결합 물질 (ultra-low binding material)로 웰은 코팅될 수 있다.
세포가 표면상에 단층을 형성하는, 2-차원 세포 배양과는 대조적으로, 회전 타원체와 같은 3-차원 (3D) 세포 응집체의 형성은, 세포 배양 장치에서 성장한 세포의 밀도를 증가시킬 수 있다. 증가된 세포 밀도는 증가된 대사 부담 (metabolic burden)을 초래할 수 있다. 여기에 기재된 다양한 구체 예에서, 세포 배양 배지의 흐름에 의존하기보다는, 플레이트 물질을 통해 일어나는 대사 가스의 확산은, 기재된다. 이러한 장치는 고밀도로 배양된 세포의 대사 요구를 충족시키는데 더 적합할 수 있다.
회전 타원체와 같은 3-차원으로 배양된 세포는, 단층의 2차원으로 배양된 이들의 대조군보다 오히려 생체 내에 가까운 기능성을 나타낼 수 있다. 2차원 세포 배양 시스템에서, 세포는 이들이 배양되는 기판에 부착될 수 있다. 그러나, 세포가 회전 타원체와 같은, 3-차원으로 성장하는 경우, 세포는 기판에 부착하는 것이 아니라 서로 상호 작용한다. 3-차원으로 배양된 세포는 세포 간 통신 및 세포 외 매트릭스 (matrices)의 발달의 측면에서 생체 내 조직과 좀 더 유사하다. 따라서, 회전 타원체는 세포 이동, 분화, 생존 및 성장을 위한 우수한 모델을 제공하며, 따라서 연구, 진단, 및 약물 효능, 약리학, 및 독성 테스트를 위한 더 우수한 시스템을 제공한다.
몇몇 구체 예에서, 상기 장치는 장치에서 배양된 세포가 회전 타원체를 형성하도록 구성된다. 예를 들어, 세포가 성장한 웰은 웰 내에 세포가 서로 결합하여 구체를 형성하도록 세포에 비-부착성일 수 있다. 회전 타원체는 웰의 기하학에 의해 부과된 제한으로 크기를 변경하도록 확장된다. 몇몇 구체 예에서, 웰은 비-부착성 물질로 코팅된다. 구체 예에서, 상기 비-부착성 물질은 웰을 세포에 비-부착성으로 만드는 초-저 결합 물질이다.
비-부착성 물질의 예로는 퍼플루오르화 중합체, 올레핀, 또는 이와 유사한 중합체 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 다른 예로는 아가로스, 폴리아크릴아미드와 같은 비-이온성 하이드로겔, 폴리에틸렌 옥사이드와 같은 폴리에테르 및 폴리비닐알코올과 같은 폴리올, 또는 이와 유사한 물질 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 구체 예에서, 이들은 초-저 결합 물질일 수 있다. 예를 들어, 비-부착성 웰, 웰 기하학 (예를 들어, 크기 및 형상), 및/또는 중력의 조합은, 웰에서 배양된 세포가 회전 타원체로 자기-조립 (self-assemble)되도록 유도한다. 몇몇 회전 타원체는, 단층에서 성장한 세포와 비교하여, 오히려 생체 내에 가까운 반응을 나타내는 분화된 세포 기능을 유지한다. 간엽 간질 세포 (mesenchymal stromal cells)와 같은, 다른 세포 타입은, 회전 타원체로 배양된 경우, 그들의 전분화능 (pluripotency)을 보유한다.
몇몇 구체 예에서, 여기에서의 시스템, 장치 및 방법은, 하나 이상의 세포를 포함한다. 몇몇 구체 예에서, 상기 세포는 냉동보존된다. 몇몇 구체 예에서, 세포는 3-차원 배양액이다. 몇몇 이러한 구체 예에서, 시스템, 장치 및 방법은, 하나 이상의 회전 타원체를 포함한다. 몇몇 구체 예에서, 하나 이상의 세포는 활동적으로 분열한다. 몇몇 구체 예에서, 시스템, 장치 및 방법은, 배양 배지 (예를 들어, 영양소 (예를 들어, 단백질, 펩타이드, 아미노산), 에너지 (예를 들어, 탄수화물), 필수 금속 및 무기물 (예를 들어, 칼슘, 마그네슘, 철, 인산염, 황산염), 완충제 (예를 들어, 인산염, 초산염), pH 변화에 대한 표시기 (예를 들어, 페놀 레드, 브로모-크레졸 퍼플), 선택 제제 (예를 들어, 화학제, 항균제), 등)를 포함한다. 몇몇 구체 예에서, 하나 이상의 시험 화합물 (예를 들어, 약물)은 시스템, 장치 및 방법에 포함된다.
다양한 종류의 세포는 배양될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 회전 타원체는 단일 세포 타입을 함유한다. 몇몇 구체 예에서, 회전 타원체는 하나 이상의 세포 타입을 함유한다. 하나 이상의 회전 타원체가 성장되는 몇몇 구체 예에서, 각 회전 타원체는 동일한 타입이지만, 다른 구체 예에서, 둘 이상의 다른 타입의 회전 타원체는 성장된다. 회전 타원체에서 성장한 세포는 천연 세포 또는 변경된 세포 (예를 들어, 하나 이상의 변성 유전자 변경을 포함하는 세포)일 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 세포는 체세포이다. 몇몇 구체 예에서, 세포는 임의의 원하는 분화 상태 (예를 들어, 전분화능, 다-분화능 (multi-potent), 운명 결정 (fate determined), 불멸화 (immortalized), 등)의 줄기세포 또는 전구 세포 (예를 들어, 배아 줄기세포, 유도된 전분화능 줄기세포)이다. 몇몇 구체 예에서, 세포는 질병 세포 또는 질병 모델 세포 (disease model cell)이다. 예를 들어, 몇몇 구체 예에서, 회전 타원체는 과-증식 상태 (예를 들어, 형질전환된 세포)로 유도될 수 있는, 하나 이상의 타입의 암세포 또는 세포들을 포함한다. 세포는, 부신, 방광, 혈관, 뼈, 골수, 뇌, 연골, 자궁 경부, 각막, 자궁 내막, 식도, 위장관, 면역계 (예를 들어, T 림프구, B 림프구, 백혈구, 대식세포 및 수지상 세포), 간, 폐, 임파선, 근육 (예를 들어, 심장 근육), 신경, 난소, 췌장 (예를 들어, 섬 세포), 뇌하수체, 전립선, 신장, 타액, 피부, 힘줄, 고환 및 갑상선을 포함하지만, 이에 제한되지 않는, 임의의 원하는 조직 또는 기관 타입으로부터 유래 또는 형성될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 세포는 포유류 세포 (예를 들어, 인간, 마우스, 래트, 토끼, 개, 고양이, 소, 돼지, 닭, 염소, 말, 등)이다.
배양된 세포는 다양한 연구, 진단, 약물 스크린 및 시험, 치료, 및 산업적 적용에서 사용된다.
몇몇 구체 예에서, 세포는 단백질 또는 바이러스의 생산을 위해 사용된다. 병렬로 다수의 회전 타원체를 배양하는 시스템, 장치 및 방법은, 단백질 생산에 특히 효과적이다. 3-차원 배양은 증가된 세포 밀도, 및 세포 성장 표면적의 제곱 센티미터당 더 높은 단백질 수율을 가능하게 한다. 백신 생산을 위한 임의의 원하는 단백질 또는 바이러스는, 세포에서 성장될 수 있고, 원하는 대로 사용하기 위해 분리되거나 정제될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 단백질은 세포에 대한 비변성 단백질 (native protein)이다. 몇몇 구체 예에서, 단백질은 변성-단백질이다. 몇몇 구체 예에서, 단백질은 재조합으로 발현된다. 바람직하게는, 단백질은 변성-프로모터 (non-native promoter)를 사용하여 과발현된다. 단백질은 융합 단백질로서 발현될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 정제 또는 검출 태그 (detection tag)는 이의 정제 및/또는 검출을 용이하게 하기 위해 관심의 단백질에 대한 융합 파트너 (fusion partner)로서 발현된다. 몇몇 구체 예에서, 융합체 (fusions)는 정제 이후에 융합 파트너의 분리를 가능하게 하기 위해 절단 가능한 링커 (cleavable linker)로 발현된다.
몇몇 구체 예에서, 단백질은 치료용 단백질이다. 이러한 단백질은, 결핍되거나 비정상적인 단백질 (예를 들어, 인슐린)을 대체하거나, 기존 경로 (예를 들어, 억제제 또는 작용제 (agonists))를 증가시키거나, 새로운 기능 또는 활성을 제공하거나, 분자 또는 유기체를 방해하거나, 또는 다른 화합물 또는 단백질 (예를 들어, 방사성 핵종, 세포독성 약물, 이펙터 단백질 (effector proteins), 등)을 전달하는, 단백질 및 펩타이드를 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 몇몇 구체 예에서, 단백질은 임의의 타입 (예를 들어, 인간화, 이중-특이적, 다중-특이적, 등)의 항체 (예를 들어, 단일클론 항체)와 같은 면역글로불린이다. 치료적 단백질 카테고리는, 항체-기반 약물, Fc 융합 단백질, 항응고제, 항원, 혈액 요소, 뼈 형성 단백질 (bone morphogenetic proteins), 유전자 조작된 단백질 비계 (engineered protein scaffolds), 효소, 성장 인자, 호르몬, 인터페론, 인터루킨, 및 혈전용해제를 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 치료용 단백질은 암, 면역 장애, 대사 장애, 유전 질환, 감염, 및 기타 질병 및 질환을 예방하거나 치료하는데 사용될 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 단백질은 진단 단백질이다. 진단 단백질은, 항체, 친화성 결합 파트너 (예를 들어, 수용체-결합 리간드), 억제제, 길항제, 및 이와 유사한 것을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 몇몇 구체 예에서, 진단 단백질은, 검출 가능한 모이어티 (moiety) (예를 들어, 형광 모이어티, 발광 모이어티 (예를 들어, 루시퍼라제), 비색 모이어티 (colorimetric moiety), 등)이거나 또는 발현된다.
몇몇 구체 예에서, 단백질은 산업용 단백질이다. 산업용 단백질은 식품 성분, 산업 효소, 농업 단백질, 분석 효소, 등을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
몇몇 구체 예에서, 세포는 약물 발견, 특성화 (characterization), 효능 시험, 및 독성 시험에 사용된다. 이러한 시험에는 약리학적 효과 평가, 발암성 평가, 의학 이미징 제제 특성 평가, 반감기 평가, 방사선 안전성 평가, 유전독성 시험, 면역독성 시험, 생식 및 발달 시험, 약물 상호작용 평가, 선량 평가, 흡착 평가, 소인 평가 (disposition assessment), 신진 대사 평가, 제거 연구 등을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 특정 세포 타입은, 특별한 시험 (예를 들어, 간 독성에 대한 간세포, 신장독성에 대한 신장 근위 세뇨관 상피 세포, 혈관 독성에 대한 혈관 내피세포, 신경독성에 대한 신경 및 신경교 세포들 (glial cells), 심장독성에 대한 심근세포, 횡문근 융해 (rhabdomyolysis)에 대한 골격근 세포, 등)을 위해 사용될 수 있다. 처리된 세포는, 막 무결성 (membrane integrity), 세포 대사 산물 함량, 미토콘드리아 기능, 리소좀 기능, 세포사멸, 유전적 변경, 유전자 발현 차이, 및 이와 유사한 것을 포함하지만, 이에 제한되지 않는, 임의의 수의 원하는 매개변수에 대해 평가될 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 세포 배양 장치는 더 큰 시스템의 구성요소이다. 몇몇 구체 예에서, 시스템은 복수의 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 50, 100, 1000 등) 이러한 세포 배양 장치를 포함한다. 몇몇 구체 예에서, 상기 시스템은 최적 배양 조건 (예를 들어, 온도, 분위기, 습도, 등)에서 배양 장치를 유지시키기 위한 인큐베이터 (incubator)를 포함한다. 몇몇 구체 예에서, 상기 시스템은 세포를 이미징하거나 또는 그렇지 않으면 분석하기 위한 검출기를 포함한다. 이러한 검출기에는 형광측정기, 조도계, 카메라, 현미경, 플레이트 판독기 (예를 들어, PERKIN ELMER ENVISION 플레이트 판독기, PERKIN ELMER VIEWLUX 플레이트 판독기), 세포 분석기 (GE IN Cell Analyzer 2000 및 2200, THERMO/CELLOMICS CELLNSIGHT High Content Screening Platform) 및 공초점 이미징 시스템 (예를 들어, PERKIN ELMER OPERAPHENIX 고효율 컨텐츠 스크리닝 시스템, GE INCELL 6000 Cell Imaging System)을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 몇몇 구체 예에서, 시스템은, 배양된 세포에 배양 배지 또는 다른 구성요소를 공급, 재-공급 및 순환시키기 위한 관류 시스템 (perfusion systems) 또는 다른 구성요소를 포함한다. 몇몇 구체 예에서, 상기 시스템은, 배양 장치의 취급, 사용, 및/또는 분석을 자동화하기 위한 로봇 구성요소 (예를 들어, 피펫, 아암, 플레이트 이동장치, 등)을 포함한다.
이하, 도 1을 참조하면, 제1 주 표면 (112) 및 대립하는 제2 주 표면 (114)을 갖는, 플레이트 (110) 또는 그 일부의 구체 예의 개략적인 측면도는 도시된다. 상기 제1 주 표면 (112)은 세포를 배양하기 위한 구조화된 표면을 한정한다. 상기 제1 주 표면 (112)의 구조화된 표면은, 다수의 웰 (115)을 갖는 기판이다. 회전 타원체 (200)는 웰 (115) 내부에 존재하는 것으로 나타낸다.
여기에서 기재된 플레이트의 구조화된 표면은 임의의 적합한 크기 또는 형상을 가질 수 있는 임의의 적절한 수의 웰을 한정할 수 있다. 웰은 이들의 크기와 모양에 기초하여 부피를 한정한다. 많은 구체 예에서, 하나 이상의 또는 모든 웰은 종축을 중심으로 대칭이다. 몇몇 구체 예에서, 하나 이상의 또는 모든 웰의 길이 방향 축은 서로 평행하다. 웰은 균일하거나 또는 비-균일하게 이격될 수 있다. 구체 예에서, 웰은 균일하게 이격된다. 하나 이상의 또는 모든 웰은 동일한 크기 및 형태를 가질 수 있거나 또는 다른 크기 및 형태를 가질 수 있다.
이하, 도 2 및 도 3을 참조하면, 웰 (115)의 몇몇 구체 예의 개략적인 단면도는 도시된다. 도 1과 관련하여 전술한 바와 같이, 웰 (115)은 플레이트 (110)의 구조화된 표면에 의해 한정된다. 플레이트 (110)의 제2 주 표면 (114) 또는 비-배양 표면은 임의의 적절한 형상을 가질 수 있다. 도 2에 도시된 바와 같이, 웰 (115)을 형성하는 플레이트 (110)는 웰을 따라 실질적으로 일정하고 비교적 얇은 두께를 갖는다. 대조적으로, 도 3에서 웰 (115)을 한정하는 플레이트 (110)의 두께는, 웰의 상부 개구 (118)에 근접하여, 두께가 상대적으로 두껍고, 천저 (116)에서 두께가 상대적으로 얇도록, 웰을 따라 변한다.
몇몇 구체 예에서, 웰 (115)은 플레이트 (110)를 통해, 즉, 웰 벽을 통해 가스 투과성이다. 플레이트 (110)를 통한 제2 주 표면 (114)으로 웰 (115)의 가스 투과성은 플레이트의 물질 및 웰에 따른 플레이트의 두께에 부분적으로 의존할 것이다. 다른 모든 것들이 동일하다면, 도 2의 웰은 도 3의 웰보다 좀 더 가스 투과성일 것이다. 그러나, 사용된 물질 및 사용된 두께에 의존하여, 도 2 또는 도 3에서 형상화된 플레이트 (110)는, 본 개시의 목적을 위해 충분히 가스 투과성일 수 있다.
구체 예에서, 웰 (115)은 2000 cc/㎡/일 또는 그 이상의 플레이트 (110)를 통과하는 산소 투과율을 갖는다. 구체 예에서, 웰은 3000 cc/㎡/일 또는 그 이상의 플레이트를 통과하는 가스 투과성을 갖는다. 구체 예에서, 웰은 5000 cc/㎡/일 또는 그 이상의 플레이트를 통과하는 가스 투과성을 갖는다.
플레이트 (110)는 웰의 적어도 일부에 걸쳐 적절한 가스 투과성을 갖는 임의의 물질로 형성될 수 있다. 적합한 물질의 예는 폴리디메틸실록산 (PDMS), (폴리)4-메틸펜텐 (PMP), 폴리에틸렌 (PE), 및 폴리스티렌 (PS)을 포함한다. PDMS는 고도의 가스 투과성을 가질 수 있으며, 최대 3 내지 4 centimeters의 두께에서 충분한 가스 투과성을 달성할 수 있다. PMP는 약 0.03 인치까지의 두께에서 충분한 가스 투과성을 달성할 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 약 0.001 인치 내지 약 0.025 인치 범위의 두께를 갖는 PMP는 웰을 형성하는데 사용된다. PE 또는 PS는, 0.003 인치 이하와 같은, 0.005 인치까지의 두께에서 충분한 가스 투과성을 달성할 수 있다. 몇몇 더 얇은 플레이트는 충분한 구조적 완전성을 가질 수 없다. 불량한 구조적 완전성을 보완하기 위해, 개방 프레임 (open frame), 스탠드오프 (standoff), 또는 이와 유사한 것은, 하부로부터 플레이트 또는 이의 구조화된 표면 부분을 지지하는데 사용될 수 있다.
웰 (115)이 플레이트 (110)를 통한 가스 투과성이 아닌 구체 예에서, 더 두꺼운 또는 비-가스 투과성 물질은 사용될 수 있다. 여기에 기재된 플레이트 또는 다른 세포 배양 구성요소를 형성하기 위한 적합한 물질의 예로는, 폴리스티렌, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리비닐클로라이드, 폴리카보네이트, 폴리설폰, 폴리스티렌 공중합체, 플루오로중합체, 폴리에스테르, 폴리아미드, 폴리스티렌 부타디엔 공중합체, 완전 수소화 스티렌계 중합체, 폴리카보네이트 PDMS 공중 합체, 및 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리메틸 펜텐, 폴리프로필렌 공중합체 및 고리 형 올레핀 공중 합체와 같은 폴리올레핀, 및 이와 유사한 것을 포함한다.
여전히, 도 2 및 도 3을 참조하면, 웰 (115)은 천저 (116)로부터 상부 개구 (118)까지의 높이에 의해 한정된 깊이 (d)를 갖는다. 웰 (115)은 또한 상부 개구 (118)에 의해 한정된 웰을 가로지르는, 직경, 폭 등과 같은, 직경 치수 (w)를 갖는다. 상기 웰은 임의의 적당한 깊이 (d) 및 직경 치수 (w)를 가질 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 웰의 깊이 (d), 직경 치수 (w) 및 형상은, 웰을 형성하는 물질과 함께, 세포가 성장할 수 있는 부피를 한정하는 역할을 한다.
몇몇 구체 예에서, 웰 (115)의 내부 표면은 세포에 비-부착성이다. 웰은 비-부착성 물질로 형성되거나 또는 비-부착성 물질로 코팅되어 비-부착성 웰을 형성할 수 있다. 비-부착성 물질의 예로는 퍼플루오르화 중합체, 올레핀 또는 이와 유사한 중합체 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 다른 예로는 아가로스, 폴리아크릴아미드와 같은 비-이온성 하이드로겔, 폴리에틸렌 옥사이드와 같은 폴리에테르 및 폴리비닐알코올과 같은 폴리올, 또는 이와 유사한 물질 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 예를 들어, 비-점착성 웰, 웰 기하학, 및 중력의 조합은, 웰에서 배양된 세포가 회전 타원체로 자기-조립되도록 유도할 수 있다. 몇몇 회전 타원체는, 단층으로 성장한 세포와 비교하여 오히려 생채 내에 가까운 반응을 나타내는 분화된 세포 기능을 유지할 수 있다.
예를 들어, 비-부착성 웰, 웰 기하학 및 중력의 조합은, 웰 내에서 배양된 세포의 성장이 제한되는 제한 부피 (confinement volume)를 한정할 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 하나 이상의 웰은, 반구면, 둥근 바닥을 갖는 원뿔면, 및 이와 유사한 표면 기하학 또는 이들의 조합과 같은 오목한 표면을 갖는다. 상기 웰 및 웰 하부는, 딤플 (dimple), 피트 (pit) 및 이와 유사한 오목한 절두 원추형 릴리프 (frusto-conical relief) 표면 또는 이들의 조합과 같은, 회전 타원체를 촉진하는 둥근 또는 만곡된 표면에서 궁극적으로 종단, 말단 또는 마감될 수 있다. 가스 투과성 회전 타원체-촉진 웰 (spheroid-conducive wells)의 다른 형태 및 구성은 일반-양도된 미국 특허출원 제14/087,906호에 기재되어 있으며, 상기 출원은 본 개시와 상충되지 않는 범위 내에서 그 전체가 참조로서 혼입된다.
몇몇 구체 예에서, 웰 하부는 편평하거나 점에 이른다. 웰 하부는 다른 적절한 형상 또는 치수를 가질 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 여기에 기재된 웰 (115)은 약 200 micrometers 내지 약 500 micrometers의 범위, 예를 들어 200, 250, 300, 350, 400, 450 또는 500 micrometers, 이들 사이의 범위를 포함하는 직경 치수 (w)를 갖는다. 이러한 직경 치수는, 회전 타원체의 내부에 세포가 건강한 상태로 유지되도록, 그 내부에서 성장한 회전 타원체의 크기를 조절할 수 있다. 몇몇 구체 예들에서, 웰들 (115)은 약 200 micrometers 내지 약 500 micrometers의 범위, 예를 들어, 200, 250, 300, 350, 400, 450 또는 500 micrometers, 이들 사이의 범위를 포함하는 깊이 (d)를 갖는다. 물론, 다른 적절한 치수는 또한 사용될 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 상기 웰을 한정하는 구조화된 표면은, 육방 밀집 구조 (hexagonal close-packed well structures)의 어레이를 포함한다. 이러한 구조화된 표면을 갖는 제1 주 표면 (112)의 구체 예의 이미지는, 웰 (115)을 형성하는 표면 (112)을 나타내는, 도 4에 나타낸다. 도 5는 육방 밀집 웰 구조를 한정하는 구조화된 표면을 포함하는 제1 주 표면 (112)을 갖는 플레이트의 구체 예의 웰 (115)에서 성장한 세포 (200)을 나타내는 개략도이다. 몇몇 구체 예에서, 각 웰 (115) 내에 세포 (200)는 단일 회전 타원체를 형성한다.
여기에 기재된 바와 같은 구조화된 표면은 임의의 적합한 물질로 형성될 수 있다. 예를 들어, 플레이트 또는 필름은 성형되거나 또는 엠보싱되어 구조화된 표면을 형성할 수 있다. 또 다른 실시 예에서, 가열된 개질 도구 (heated reform tool)는 성형 플레이트에 적용될 수 있다. 또는, 구조화된 표면은 사출 성형에 의해 형성될 수 있다.
상기에서 기재된 바와 같은 구조화된 표면을 갖는 플레이트는, 세포 배양 장치에 혼입될 수 있다. 상기 플레이트는 세포 배양 장치를 형성하도록 적층될 수 있다. 구체 예에서, 적층된 플레이트는, 레일에 의해 분리되고, 인접한 레일 사이에 구조화된 표면 위에 형성된 흐름 채널을 갖는다.
이하, 도 6a-c를 참조하면, 레일 (300A, 300B, 300C, 300D) 및 플레이트 (110)를 갖는 단일 적층 유닛 (500)의 구체 예의 개략적인 사시도는 도시된다. 레일 (300A, 300B, 300C, 300D)은 플레이트의 길이를 따라 플레이트 (110)로부터 연장된다. 흐름 채널 (400A, 400B, 400C)은 인접한 레일 사이에 형성된다. 도 6a에 도시된 구체 예에서, 레일 (300A, 300B, 300C, 300D)은 플레이트 (110)의 제1 주 표면상에 배치된다. 도 6b에 도시된 구체 예에서, 레일 (300A, 300B, 300C, 300D)은 플레이트의 제1 주 표면 아래로 연장된다. 도 6c에 도시된 구체 예에서, 플레이트 (110) 및 레일 (300A, 300B, 300C, 300D)은 일체화된 부분 (unitary part)을 포함한다. 레일과 플레이트는 적절한 방식으로 조립될 수 있다. 예를 들어, 플레이트와 레일은 단일 부분으로 성형될 수 있다. 구체 예에서, 플레이트 또는 이의 일부는 레일을 형성하기 위해 오버-몰딩된다 (over-molded). 구체 예에서, 플레이트 및 레일은 용접 (예를 들어, 열, 레이저, 긴 IR 또는 초음파 용접, 또는 이와 유사한 것), 접착, 용매-결합 또는 이와 유사한 것에 의해 형성된다. 플레이트 및 레일은, 여기에 기재된 바와 같은 세포 배양 장치의 조립 동안에 적층될 수 있는, 유닛 (500)을 형성할 수 있다.
이하, 도 7을 참조하면, 복수의 적층된 유닛 (500A-L)을 갖는 세포 배양 장치 (600)의 구체 예의 개략적인 단면도는 도시된다. 각 유닛은 플레이트 (110) 및 복수의 레일 (300)을 포함한다. 흐름 채널 (400)은 플레이트 (110)의 제1 주 표면 (112) 위 및 상기 적층 유닛의 인접한 플레이트 (110)의 대립하는 제2 주 표면 (114) 아래에 인접한 레일 (300) 사이에 형성된다. 상부 플레이트 (610)는 최상부 유닛 (500A) 위에 배치될 수 있다. 각 유닛은 다수의 웰 (115)을 갖는다.
이하, 도 8을 참조하면, 주입구 포트 (625)를 한정하는 주입구 매니폴드 (620) 및 배출구 포트 (635)를 한정하는 배출구 매니폴드 (630)를 갖는 세포 배양 장치 (600)의 구체 예의 개략적인 측면도는 도시된다. 장치 (600)는 복수의 적층된 유닛 (500) (예를 들어, 도 6a-c 및 도 7에 도시된 바와 같은 플레이트 및 레일을 갖는 유닛)을 포함한다. 각 유닛의 각 흐름 채널은, 매니폴드 (620)를 통해 주입구 포트 (625)와 유체 연통하며, 매니폴드 (630)를 통해 배출구 포트 (635)와 유체 연통한다. 몇몇 구체 예에서, 매니폴드 대신에 주입구 포트 (625)를 갖는 확장기는 사용될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 배출구 포트 (635)를 갖는 리듀서 (reducer)는 매니폴드 대신에 사용될 수 있다. 장치의 상부 겉면는 또한 도시된다 (610).
예를 들어, 도 9a-b를 참조하면, 매니폴드 (620)의 구체 예의 내부 겉면 (도 9a) 및 매니폴드 (620)의 구체 예의 상부 겉면 (622) (도 9b)의 개략도는 도시된다. 도 9a에서 매니폴드 (620)는, 복수의 개구 (621)을 한정하며, 각각의 개구는 액체 기밀 밀봉 (liquid tight seal)을 생성하기 위해 각각의 흐름 채널과 정렬되고 용접될 수 있다. 도 9b는 포트 (625)를 갖는 매니폴드의 상부 겉면을 나타낸다. 선택적으로, 조립된 유닛의 겉면이 본질적으로 각 흐름 채널에 접근할 수 있는 매니폴드를 형성할 수 있기 때문에, 단순화된 확장기 (620)는 세포 배양 유체를 주입구 포트를 통해 흐름 채널에 전달하는데 사용될 수 있다.
주입구 포트 및 배출구 포트는, 세포 배양 배지를 세포 배양 장치의 흐름 채널에 전달하기 위해 펌프에 결합될 수 있는, 튜브에 결합될 수 있다.
여기에 기재된 세포 배양 장치의 최종 조립은, 임의의 적합한 방식으로 수행될 수 있다. 예를 들어, 유닛은 용접, 결합, 접착 또는 함께 연결될 수 있다. 매니폴드, 리듀서 또는 확장기는 조립된 유닛에 용접, 결합, 접착 또는 연결될 수 있다. 예로서, 유닛은 주입구 및 배출구 매니폴드가 연결되는 슬리브 (sleeve)에 삽입될 수 있으며; 적층 및 매니폴드된 유닛은 조립되고 오버몰드될 수 있고; 백 (bags)은 열 수축하여 적층된 유닛 주위에 기밀 맞춤 (tight fit)을 형성할 수 있으며; 유닛은 적층되고 형성된 챔버 또는 형성된 백으로 팩킹되고; 및 이와 유사하게 될 수 있다.
이하, 도 10a-b를 참조하면, 여기에 기재된 바와 같은 세포 배양 장치 (600)의 구체 예를 사용하는 시스템의 구체 예의 개략도는 도시된다. 도 10a에 도시된 도해 (diagram)는 배치 모드의 시스템을 예시한다. 배지의 흐름은 주입구 (625)을 통해 배양 장치 (600)로 들어간다. 배지는 선택적 산소 공급기 (660)에 의해 산소가 공급된다. 흐름의 동력은 세포 배양 배지의 공급원에 작동 가능하게 결합된, 재순환 펌프 (650)에 의해 생성 및 조절된다. 배지는 배출구 (635)를 통해 배양 장치 (600)의 밖으로 유출된다. 흐름 (예를 들어, 유속)은 (예를 들어, 밸브의 조절을 통해) 조절장치 (640)에 의해 관리된다. 조절장치는 또한 산소 공급기로의 가스 흐름을 조절하고, 필요 또는 원하는 바에 따라, 보조 영양물 또는 pH 조절제의 흐름을 조절할 수 있다. 배양된 세포는 배출구 (635)로부터 세포 수집 카트리지 (670)로 배지를 유도함으로써 수확된다. 각각의 구성요소들은 튜빙 (tubing), 채널 (예를 들어, 마이크로채널) 또는 임의의 다른 원하는 유체 연결부에 의해 연결된다. 도 10b에서 도해는 연속 모드의 시스템을 예시한다. 시스템은 유체가 세포 배양 장치 (600) 내로 흐르는 주입 흐름 채널 (680) 및 유체가 세포 배양 장치 (600) 밖으로 흐를 수 있은 배출 흐름 채널 (690)을 더욱 포함한다. 세포 배양 장치가 대사 가스의 확산을 허용하도록 구성된, 하기에 기재된 몇몇 구체 예에서, 산소 공급기는 생략될 수 있다.
플레이트의 구조화된 표면의 웰의 내부 표면이 세포에 비-부착성인 구체 예에서, 장치 (600)의 흐름 채널을 통한 세포 배양 배지의 유속은 증가될 수 있어, 세포 수집 카트리지로 세포 배양 배지의 흐름과 함께 수행될 웰로부터, 회전 타원체일 수 있는, 배양된 세포를 제거한다. 웰 내에서 세포를 성장시키고 유지하기 위해 더 낮은 유속은 사용될 수 있다. 웰의 형상 및 치수는 웰에 세포를 유지하거나 웰로부터 세포를 제거하기 위한 유속을 변경하도록 변형될 수 있는 것으로 이해될 것이다.
예로서 및 도 11a-b를 참조하면, 선택적 웰 기하학의 개략 단면도는 도시된다. 도 11b의 웰 (115)은 도 11a의 웰 (115)보다 깊고, 및 따라서, 회전 타원체 (200)는 도 11a의 웰 (115)에서보다 도 11b의 웰 (115)에서 더 깊다. 따라서, 도 11b에서 웰 (115)은 회전 타원체 (200)를 제거하지 않고 세포 배양 장치를 통해 더 높은 유속을 허용한다. 유사하게, 도 11a에 웰 (115)은 수확을 용이하게 하기 위해 더 낮은 유속에서 회전 타원체 (200)의 탈착을 가능하게 한다. 전술한 바와 같이, 여기에 기재된 플레이트의 구조화된 표면의 웰은 임의의 적합한 기하학적 형상을 가질 수 있다. 웰의 모양 및 크기 및 특성은, 사용자의 요구에 따라, 세포 특성 (예를 들어, 회전 타원체 형성)을 조정하기 위해, 세포 제거를 용이하게 하기, 배양된 세포에 충분한 영양소 및 가스 분포를 보장하기 위해, 및 이와 유사한 것을 목적으로 조정될 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 가스 흐름 채널은 플레이트와 함께 연장되는 레일에 형성될 수 있다. 이러한 구체 예에서, 레일은 레일에 인접한 흐름 채널로부터의 대사 가스 교환을 허용하기에 충분한 두께를 갖는 가스 투과성 물질로 형성될 수 있다. 적합한 가스 투과성 물질 및 두께의 실시 예는 전술되어 있다. 몇몇 구체 예에서, 레일은 상대적으로 가스 투과성인 PDMS로 형성된다. 예로서, 레일은 이를 통하여 흐르는 공기 채널을 갖는 압출된 PDMS로부터 형성될 수 있다. PDMS는 열경화성 PDMS보다 높은 가스 교환 속도를 가질 수 있는 Wacker의 Geniomer 145와 같은 열경화성 또는 열가소성 PDMS일 수 있다. 그러나, PDMS는, 세포 배양에 바람직하지 않을 수 있는, 작은 분자를 결합하는 것으로 잘 알려져 있다. 이는 다층 압출, 오버몰딩, 코팅 또는 다른 처리로 피할 수 있어, 비-세포 부착층으로 작용할 수 있은 흡수에 대한 장벽을 생성한다. 레일 내에 공기 채널은 레일의 길이 또는 높이를 이을 수 있다. 여러 개의 공기 채널은 레일에 형성될 수 있다.
예를 들어 및 도 12를 참조하면, 플레이트 (110) 및 (예를 들어, 전술한 바와 같은) 레일 사이에 형성된 흐름 채널 (400)을 갖는 레일 (300)을 각각 갖는, 적층 유닛 (500A, 500B, 500C, 500D)의 개략적인 단면도는 도시된다. 회전 타원체 (200)는 플레이트 (110)의 구조화된 표면의 웰 (115)과 함께 나타낸다. 도시된 구체 예에서, 레일 (300)은 레일의 길이를 잇는 공기 채널 (310)을 한정한다. 채널 (310)과 인접한 배지 흐름 채널 (400) 사이의 레일 (300)의 두께는 레일의 물질을 통한 대사 가스의 교환을 허용하기에 충분히 작다.
이하, 도 13을 참조하면, (예를 들어, 전술한 바와 같은) 레일들 사이에 형성된 흐름 채널 (400)을 갖는 레일 (예를 들어, 레일 (300A-D)) 및 플레이트 (110)를 각각 갖는, 적층 유닛 (500A, 500B, 500C, 500D)의 개략적인 절-개 사시도는 도시된다. 이 구체 예에서, 각 레일 (예를 들어, 레일 (300A-D))은 레일의 높이를 연장하는 복수의 공기 채널 (310)을 형성한다. 각각의 레일 (예를 들어, 레일 (300A-D))의 공기 채널 (310)은 유닛 (500A, 500B, 500C, 500D)이 적층될 때 공기 채널 (310)이 정렬되도록 배향된다. 유닛 (500A, 500B, 500C, 500D)이 적층된 경우, 레일은 최하부 유닛 (예를 들어, 유닛 (500D))에서 최상부 유닛 (예를 들어 유닛 (500A))까지 벽 (350)을 형성한다. 레일 (예를 들어, 레일 (300A-D))에 의해 형성된 정렬된 공기 채널 (310)의 열은 조립된 장치의 높이 전체에 걸쳐 연장된다.
도 12에 도시된 바와 같은 레일의 길이를 따라 또는 도 13에 도시된 바와 같이 레일 또는 벽의 높이를 따라) 공기 채널의 배향에 관계없이, 공기 채널은 매니폴드, 확장기 또는 리듀서에 연결될 수 있어 장치를 나가는 벤트 포트 (vent port) 및 단일 공급을 형성한다. 몇몇 구체 예에서, 별도의 매니폴드, 확장기 또는 리듀서는 장치의 공기 채널의 양 말단에 결합되어 가스 흐름이 적층된 유닛을 통해 조절될 수 있게 한다.
예를 들어 및 도 14를 참조하면, 제1 (370) 및 제2 (380) 벤트 매니폴드를 포함하는 세포 배양 장치 (600)의 구체 예의 개략적인 측면도는 도시된다. 도 14의 장치에 도시된 많은 구성요소는, 도 8의 장치와 관련하여 도시되고 전술되었다. 도 14에 도시된 장치 (600)는, 도 13에 도시된 유닛의 조립체로 구상될 수 있으며, 여기서 레일은 장치의 높이에 걸친 공기 채널 기둥을 형성하는 벽을 형성한다. 벤트 매니폴드 (370 및 380)는 각각 포트 (375 및 385)를 형성한다. 포트는 대기로 배출될 수 있거나 또는 장치에 조절된 가스 환경을 제공하기 위해 튜빙에 연결될 수 있다.
이하, 도 15a를 참조하면, 웰이 가스 투과성 물질로 형성되는, 세포 배양 장치 (600)의 개략적인 절개 사시도는 도시된다. 이 대표적인 구체 예에서, 배지는 주입구 포트 (625)를 통해 장치의 일측 말단부로 들어가고, (배출구 포트 (635)를 통해) 빠져나가기 전에, 전체 장치를 통해 순환하여, 마이크로웰 (115)에 존재하는 회전 타원체 (200)를 공급하여, 각 챔버를 통한 흐름을 역전시킨다. 챔버/용기는 또한 적절한 구조를 유지하기 위해 지지 보스 (support bosses) 또는 포스트 (도시되지 않음)를 가질 수 있다. 공기 채널 (310)은 가스 투과성 웰의 하부를 따라 이어져서, 공기 교환이 웰 내에 회전 타원체를 공급하는 것을 가능하게 한다. 레일 (300)은 다양한 공기 채널 (310)의 형성을 가능하게 한다. 도 15b는 도 15a의 세포 배양 장치를 나타내고, 및 구체적으로는, 공기가 공기 채널 (310) (장치의 전방에 있는 흰색 선)을 통해 장치 내로 침투하는 방법을 나타낸다. 이와 관련하여, 도 15b에 나타낸 바와 같이, 공기 채널 (310) (또한 도관 공간 (tracheal spaces)이라 함)이 가스 투과성 웰 물질을 통한 가스 교환을 제공하기 때문에, 산소 공급기는 필요하지 않다. 도 15b는 배지를 관리하기 위한 시스템 구성요소를 더욱 나타낸다. 조절장치 펌프 (1600)는 신선한 배지 공급원 (1610)로부터 세포 배양 장치 (600)로 신선한 배지를 펌핑한다. 폐기물을 함유하는 용기 (1620)는 사용된 배지를 수집한다. 밸브 (1630)는 또한, 배지가 장치를 빠져나감에 따라, 배지를 수집하고, 배지에 존재할 수 있는 화합물을 수확하는데 사용될 수 있다.
이하, 도 16a를 참조하면, 웰이 가스 투과성 물질로 형성되는, 세포 배양 장치 (600)의 개략적인 절개 사시도는 도시된다. 이 대표적인 구체 예에서, 배지는 주입구 포트 (625)를 통해 들어가고, (주입구 매니폴드 (620)를 통해) 배출구 포트 (635)에 부착된 배출구 매니폴드 (630)를 통해 대립 말단부를 나가기 전에 모든 구획으로 분배된다. 챔버/용기는 또한 적절한 구조를 유지하기 위해 지지 보스 또는 포스트 (도시되지 않음)를 가질 수 있다. 공기 채널 (310)은 가스 투과성 웰의 하부를 따라 이어져서, 공기 교환이 웰 내에 회전 타원체를 공급하는 것을 가능하게 한다. 레일 (300)은 다양한 공기 채널 (310)의 형성을 가능하게 한다. 도 16b는 도 16a의 세포 배양 장치를 나타내고, 및 구체적으로는, 공기가 공기 채널 (310) (장치의 전방에 있는 흰 선)을 통해 장치 내로 어떻게 침투하는지를 나타낸다. 이와 관련하여, 도 16b에 나타낸 바와 같이, 공기 채널 (310) (또한 도관 공간이라 함)이 가스 투과성 웰 물질을 통한 가스 교환을 제공하기 때문에, 산소 공급기는 필요하지 않다. 도 16b는 배지를 관리하기 위한 시스템 구성요소를 더욱 나타낸다. 조절장치 펌프 (1600)는 신선한 배지 (1610)로부터 세포 배양 장치 (600)로 신선한 배지를 펌핑한다. 폐기물을 함유하는 용기 (1620)는 사용된 배지를 수집한다.
부가적인 구체 예 및 기하학은 도 17, 도 18 및 도 19에 나타낸다. 도 17은, 개별 웰 (115)을 나타내는, 웰의 어레이 (100)의 대표적인 구체 예의 개략도이다. 도 17에 예시된 구체 예에서, 웰 (115)은 마우스 (101)를 갖는다. 마우스 (101)는, 세포가 회전 타원체를 형성하기 위해 정착되는 웰-하부를 형성하기 위해 웰이 수축되기 전에, 좀 더 개방 구역을 제공하는, 웰 (115)의 상부 개구 (111)에 인접한, 웰의 상부 부분의 영역이다. 구체 예에서, 마우스 (101)는 원뿔형 (마우스의 하부보다 마우스의 상부가 넓음) 및 (도 17a 및 도 18a에 나타낸 바와 같이, 여기서 웰은 둥글다) 모양이 둥글 수 있다. 부가적인 구체 예에서, 예를 들어, 웰이 둥근 개구부를 갖지만, 모양이 포물선인, 도 19a에 나타낸 바와 같이, 마우스 (101)는 포물선일 수 있다.
몇몇 구체 예에서, 웰 기하학은 웰에 액체가 유입될 때 공기가 빠져나가기 쉽도록 웰 벽에 (예를 들어, 마우스, 릿지 열극 (ridge fissure), 둥근 또는 포물선 상부 개구, 등을 포함하는) 모세관 구조를 포함한다. 도 17b는, 도 17a의 라인 B-B을 취한, 평면도 (top-down)로, 리지 (170)를 예시한다. 도 17b에 나타낸 바와 같이, 리지는 웰의 마우스 (101) 또는 측벽 (113)으로부터 융기 또는 돌기이다. 구체 예에서, 리지는 마이크로웰의 길이를 상부 개구 (111)로부터 웰 하부 (116)까지 연장시킨다. 부가적인 구체 예에서, 상기 리지는 마우스 (111)의 상부로부터 마우스 (112)의 하부까지 연장된다. 상기 리지 (170)의 양 측면에 형성된 예리한 각도는 수성 유체 상에 모세관력을 생성하여, 마이크로웰로 공기 포획 없는 유체 유입 (fluid entry)을 위해 제공된다.
도 18b는 도 18a의 횡단면도로 나타낸 웰의 어레이 (100)의 평면도이다. 도 18b는 열극 (270)을 예시한다. 도 18b에 나타낸 바와 같이, 열극은 웰 (115)의 측벽 (113)의 함몰부이다. 열극 (270)의 양측에 형성된 예리한 각도는 마이크로웰로의 수성 유체 흐름을 허용하도록 모세관력을 생성한다.
도 19a 및 b는 웰의 어레이 (100)의 다른 대표적인 구체 예의 개략도이다. 도 19a는 단면도의 예시이다. 도 19b는 도 19a의 라인 B-B에서 취해진, 웰 어레이의 대표적인 구체 예의 평면도이다. 도 19a 및 b는 각 웰 (115)이 둘 이상의 리지 (170) 또는 열극 (270)을 가질 수 있고, 리지 (170) 또는 열극 (270)이 웰 (115) 내의 어레이에 배열될 수 있음을 예시한다. 도 19a 및 b에 나타낸 바와 같이, 구체 예에서, 릿지 및/또는 열극의 반사상 분포 (radial distribution)는 구상된다. 모세관 구조의 수는 마이크로웰당 하나에 제한되지 않는다. 몇몇 구체 예에서, 더 많은 수의 모세 혈관은 마이크로웰 내로의 유체 유입의 속도를 증가시킨다.
도 19a-c는 측벽 내에 다수의 (예를 들면, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 16, 20, 24, 28, 32 또는 그 안에 임의의 범위) 수직-배향된 모세관 구조의 포함을 나타낸다. 특색들은 (도 19에 도시된 바와 같이) 규칙적으로-이격될 수 있고, 불규칙적으로 이격될 수 있으며, 그룹화/다발화될 수 있다. 몇몇 구체 예에서, 모세관 구조는 웰의 상부 개구로부터 웰 하부까지 연장된다. 다수의 모세관 구조가 단일 웰 내에 존재할 때, 다수의 특색은 다른 타입 (예를 들어, 능선 및/또는 열극)일 수 있고 및 다른 형상 (예컨대, 정사각형, 둥근, 등)을 포함할 수 있다.
도 19c는 웰의 어레이 (100)가 사인파 또는 포물선 형상을 가질 수 있음을 예시한다. 이 형상은, 구체 예들에서, 웰의 상부에서 예리한 코너 또는 90도 각도에서 공기의 포획을 감소시키는, 둥근 상부 에지 또는 웰 에지를 생성한다. 이 사인파 또는 포물선 모양 또는 둥근 상부 웰 에지는, 또한 모세관 구조이다. 도 19c에 나타낸 바와 같이, 웰 (115)은 상부 직경 (Dtop), 웰 (116)의 하부로부터 웰의 상부까지의 높이 (H), 및 웰의 상부와 웰의 하부 (116) 사이의 중간 높이에서 웰의 직경 (Dhalf-way)을 갖는 상부 개구를 갖는다.
웰의 상대적 및 절대적 치수 모두는 원하는 배양 조건을 위해 선택될 수 있다. 회전 타원체 성장을 위해, 직경 (D)은 웰에서 배양될 3D 세포 응집체의 원하는 직경의 1배 내지 3배인 것이 바람직하다. 높이 (H)는 바람직하게는 D의 0.7 내지 1.3배이다. 직경 (Dtop)은 바람직하게는 D의 1.5 내지 2.5배이며, D는 바람직하게는 100 micrometers (㎛) 내지 약 2000 micrometers (예컨대, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1600, 1800, 또는 2000 micrometers, 이들 사이의 범위 (예를 들어, 200-1000 ㎛, 200-750 ㎛, 300-750 ㎛, 400-600 ㎛ 등)이다. 그러나, 선택적인 상대적인 또는 절대적인 치수는 사용될 수 있다. 예를 들어, D는 세포 응집체의 원하는 직경의 1 내지 10배 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9) 또는 그 사이의 임의의 값 또는 범위 (예를 들어, 1, 1 내지 1.5, 1 내지 2, 2, 1 내지 2.5, 1 내지 3, 2 내지 3, 1 내지 5, 3 내지 5, 2 내지 7, 등)일 수 있다. D는 100 ㎛ 내지 10,000 ㎛ 또는 그 사이의 임의의 값 (예를 들어, 100, 200, 500, 1000, 2000, 5000) 또는 그 범위 (예를 들어, 100-2000, 200-1000, 300-700, 400-600, 500, 등)일 수 있다. H는 0.5 내지 10배의 D (예를 들어, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 이들 사이의 임의의 값 또는 범위)일 수 있다. Dtop은 D의 1.1 내지 5배 (예를 들어, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 3, 4, 5 또는 이들 사이의 임의의 값 또는 범위)일 수 있다.
특정 구현 예에서, 본 개시의 가스 투과성 세포 배양 장치 (예를 들어, 회전 타원체 관류 생물반응기)는 각 배양 구획 내의 각 표면상에 모든 회전 타원체에 대해 연속적인 배지 보충 및 기체 교환을 가능하게 한다. 일반적으로, 배지 보충 및 가스 교환은 각 배양 구획의 모든 회전 타원체에 대해 동일하거나 거의 동일할 것이다. 웰/구획에서 회전 타원체 형성 기하학의 사용은, 이러한 생물반응기에 첨가된 세포가 모두 거의 동일한 크기의 회전 타원체를 형성하는 것을 가능하게 한다. 배양 구획의 가스 투과성으로 인해, 생물반응기에 대해 통상적으로 요구되는 산소 공급기는 이 시스템이 최적으로 기능하는데 요구되지 않을 것이다.
특정 구체 예에서, 가스 투과성 세포 배양 장치는 작은 풋프린트 (footprint)에서 대량의 세포를 성장시키는 것을 가능하게 한다. 예를 들어, 400 micrometers 직경의 회전 타원체는 3D로 평균 30,000개의 세포를 포함할 수 있다. 직경이 400 micrometers 인 2D 표면에서, ≒ 305개의 세포는 부착할 수 있다. 그래서, 2D에서 성장할 수 있는 것과 동일한 3D 유닛 구역에서 대략 100배 더 많은 세포는 성장될 수 있다. 소형의 풋프린트에서 이 많은 세포를 성장시키는 것은, 일반적으로 더 많은 영양분을 필요로 하고 및 더 많은 폐기물을 제거해야 한다. 여기에 개시된 관류 시스템은 지속적인 개입 (constant intervention)을 요구하지 않고 이러한 해법을 제공한다. 또한, 3D로 성장하는 세포의 품질은 일반적으로 더 높은데, 생체 내 세포와 좀 더 유사하게 기능하기 때문이다.
특정 구체 예에서, 생물반응기 챔버/웰은 가스 투과성 물질로 성형되거나 열성형될 수 있거나, 또는 가스 투과성 및 비-가스 투과성 물질의 조합으로 구성될 수 있다. 구조적 지지는, 예를 들어, 보스와 기둥을 포함하는 다양한 형태로 이루어질 수 있다. 챔버/웰은 모든 챔버에 균등하게 분배되는 매니폴드를 통해 병렬로 신선한 배지를 수신하거나, 또는 챔버는 하나의 챔버에서 다른 챔버로 역전되는 흐름과 함께, 직렬로 공급될 수 있다.
일반적으로, 용기 내의 세포에 대한 가스 교환 요건은, 관류 속도에 영향을 주고, 구조물의 가스 투과성 물질을 통해 호흡 요건을 충족시킴으로써 관류 속도를 현저히 감소시킨다. 이는 회전 타원체에 대한 감소된 전단 흐름을 가능하게 하여, 기판에 회전 타원체 형성/보유 특색 (formation/retention features) 내에서 회전 타원체를 보유하는 것을 용이하게 한다.
웰이 세포에 비-부착성인 구체 예에서, 여기에 기재된 장치에서 배양된 세포는, 중력에 의해 세포가 웰로부터 옮겨지는 것이 가능하여 장치를 뒤집어서 수확될 수 있다. 선택적으로, 배지 흐름 채널을 통한 유체의 유속은, 전술한 바와 같이 웰로부터 세포를 제거하기 위해 증가될 수 있다.
여기에 사용된 모든 과학적 및 기술적 용어는 별도로 명시되지 않는 한 당해 분야에서 통상적으로 사용되는 의미를 갖는다. 여기에 제공된 정의는 여기에서 빈번하게 사용되는 특정 용어의 이해를 용이하게 하기 위한 것이고, 본 개시의 범주를 제한하려는 것은 아니다.
여기에 사용된 용어의 "단수 형태"는 문맥이 별도로 지시하지 않는 한 복수 대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "구조화된 표면"에 대한 언급은, 문맥이 다른 것을 명확하게 나타내지 않는 한, 둘 이상의 "구조화된 표면들"을 갖는 실시 예를 포함한다.
본 명세서 및 첨부된 청구 범위에서 사용된 바와 같은, 용어 "또는"은, 내용이 명확하게 별도로 지시하지 않는 한, 일반적으로 "및/또는"을 포함하는 의미로 사용된다. 용어 "및/또는"은 열거된 요소들 중 하나 또는 모두 또는 열거된 요소들 중 둘 또는 그 이상의 조합을 의미한다.
여기에 사용된 바와 같은, "가지는", "갖는", "가지고 있는", "포함하는", "포함하며", "포함하고", "포함", "포함한다", 또는 이와 유사한 용어는, 개방적인 포괄적인 의미로 사용되고, 일반적으로 "포함하지만 이에 제한되지 않는", "포함하지만 이에 국한되지 않는" 또는 "포함하지만 이에 한정되지 않는"을 의미한다.
"선택적" 또는 "선택적으로"는 나중에 기재된 사건, 상황 또는 구성요소가, 발생할 수 있거나 또는 발생할 수 없는 것을 나타내며, 설명이 사건, 상황 또는 구성요소가 발생하는 경우 및 발생하지 않는 경우를 포함하는 것을 나타낸다.
단어 "바람직한" 및 "바람직하게"는, 특정 상황하에서 특정 이익을 제공할 수 있는 본 개시의 구현 예를 나타낸다. 그러나, 동일 또는 다른 상황하에서, 다른 구체 예가 또한 바람직할 수 있다. 더군다나, 하나 이상의 바람직한 구체 예들의 나열은 다른 구체 예들이 유용하지 않다는 것을 의미하지 않으며, 다른 구체 예들을 본 발명의 기술 범주로부터 배제하도록 의도된 것은 아니다.
범위는 여기에서 "약" 하나의 특정 값으로부터 및/또는 "약" 다른 특정 값으로부터 표시될 수 있다. 이러한 범위가 표시된 경우, 실시 예는 하나의 특정 값 및/또는 다른 특정 값을 포함한다. 유사하게, 값이 근사 값으로 표시된 경우, 선행사 "약"의 사용에 의해, 특정 값이 또 다른 관점을 형성하는 것으로 이해될 것이다. 범위 각각의 말단점은 다른 말단점과 관련하여 및 다른 말단점과는 독립적으로 의미가 있는 것으로 더욱 이해될 것이다.
또한, 여기에서, 말단점에 의한 수치 범위의 나열은 그 범위 내에 포괄된 모든 숫자를 포함한다. (예를 들어, 1 내지 5는 1, 1.5, 2, 2.75, 3, 3.80, 4, 5 등을 포함 함). 값의 범위가 "초과", "미만" 등의 특정 값인 경우, 해당 값은 범위 내에 포함된다.
여기에서 "상", "하", "좌측", "우측", "상부", "하부", "위", "아래" 및 다른 방향 및 배향과 같은 임의의 방향은, 도면을 참조하여 명료성을 위해 여기에서 기재되며 및 실제 장치 또는 시스템, 또는 장치 또는 시스템의 사용을 제한하는 것은 아니다. 여기에 기재된 많은 장치, 제품 또는 시스템은, 다수의 방향 및 배향으로 사용될 수 있다. 세포 배양 장치와 관련하여 여기서 사용된 방향성의 기술어 (descriptors)는, 종종 장치가 장치 내의 세포를 배양할 목적을 위해 배향될 때의 방향과 관련된다.
별도로 명확히 언급되지 않는 한, 여기에 서술된 임의의 방법은 그 단계가 특정 순서로 수행될 것을 요구하는 것으로서 해석되는 것으로 의도되지 않는다. 따라서, 방법 청구항이 그 단계들에 뒤따라야 할 순서를 실제로 나열하지 않거나 또는 단계들이 특정 순서로 제한되어야 한다는 것이 청구항들 또는 상세한 설명들에 별도로 구체적으로 언급되지 않는 경우, 임의의 특정 순서로 유추되는 것으로 의도되지 않는다. 임의의 하나의 청구항에서 나열된 단일 또는 다수의 특색 또는 관점은, 임의의 다른 청구항 또는 청구항들에서 나열된 다른 특색 또는 관점과 결합되거나 치환될 수 있다.
여기에서 열거는 특정 방식으로 기능하도록 "구성" 또는 "채택"된 구성요소를 의미한다는 점에 또한 주목된다. 이와 관련하여, 이러한 구성요소는 특정 방식으로 특정 특성 또는 기능을 구현하도록 "구성" 또는 "채택"되며, 여기서, 이러한 열거는 의도된 용도의 열거와 반대로 구조적인 열거이다. 좀 더 구체적으로, 구성요소가 "구성" 또는 "채택"되는 방식에 대한 여기에서 언급은, 구성요소의 현존하는 물리적 조건을 나타내며, 이로써, 구성요소의 구조적 특징의 명확한 열거로 간주되어야 한다.
특정 구체 예의 다양한 특색, 요소 또는 단계가 전환 문구 "포함하는"을 사용하여 개시될 수 있는 경우, 전환 문구 "이루어지는" 또는 "필수적으로 이루어지는"을 사용하여 기재될 수 있는 것을 포함하는, 선택적 구체 예가 함축되어 있는 것으로 이해될 것이다. 따라서, 예를 들어, 구조화된 표면을 한정하는 플레이트, 하나 이상의 레일, 상부 및 하나 이상의 매니폴드를 포함하는 세포 배양 장치에 대해 함축된 선택적 구체 예는, 세포 배양 장치가 구조화된 표면을 한정하는 플레이트, 하나 이상의 레일, 상부 및 하나 이상의 매니폴드로 이루어진 경우의 구체 예 및 세포 배양 장치가 구조화된 표면을 한정하는 플레이트, 하나 이상의 레일, 상부 및 하나 이상의 매니폴드로 필수적으로 이루어진 경우의 구체 예를 포함한다.
기술분야의 당업자에게 본 개시의 사상 및 범주를 벗어나지 않고 본 발명의 기술에 대해 다양한 변형 및 변화가 이루어질 수 있음은 명백할 것이다. 본 발명 기술의 사상 및 물질을 혼입하는 개시된 구체 예의 변형, 조합, 서브-조합 및 변화가 기술분야의 당업자에게 발생할 수 있으므로, 본 발명의 기술은 첨부된 청구 범위의 범주 내에 있는 모든 것 및 이의 균등물을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (21)

  1. 세포 배양 장치로서,
    서로 적층된 복수의 플레이트, 복수의 플레이트의 각 플레이트는 제1 주 표면 및 대립하는 제2 주 표면을 갖고, 여기서 상기 제1 주 표면은 둥근 바닥(rounded bottom)을 갖는 복수의 마이크로웰을 포함하고;
    적층된 플레이트를 분리하는 복수의 스페이서;
    인접한 스페이서 사이 및 제2 주 표면 아래에 한정되는 복수의 공기 채널; 및
    인접한 플레이트 사이에서 한정되는 복수의 세포 배양 배지 흐름 채널을 포함하는, 세포 배양 장치.
  2. 청구항 1에 있어서,
    상기 스페이서는 상기 플레이트의 길이를 따라 제1 주 표면으로부터 연장되고, 여기서 복수의 세포 배양 배지 흐름 채널은 인접한 스페이서 사이에 한정되는, 세포 배양 장치.
  3. 청구항 1에 있어서,
    각 마이크로웰은 상부 개구 및 천저를 한정하는 내부 표면을 가지며, 여기서 각 마이크로웰의 상부 개구는 100 micrometers 내지 2000 micrometers 범위에서 직경 치수를 갖는, 세포 배양 장치.
  4. 삭제
  5. 청구항 1에 있어서,
    주입구 및 배출구를 더욱 포함하고, 여기서 각각의 복수의 배지 흐름 채널은 상기 주입구 및 배출구와 유체 연통하는, 세포 배양 장치.
  6. 청구항 5에 있어서,
    상기 주입구를 한정하고 및 복수의 주입구 흐름 채널 개구를 한정하는 주입구 매니폴드를 더욱 포함하고, 여기서 각각의 복수의 주입구 흐름 채널 개구는 각각의 배지 흐름 채널과 유체 연통하는, 세포 배양 장치.
  7. 청구항 5에 있어서,
    상기 배출구를 한정하고 및 복수의 배출구 흐름 채널 개구를 한정하는 배출구 매니폴드를 더욱 포함하고, 여기서 각 배출구 흐름 채널 개구는 각각의 배지 흐름 채널과 유체 연통하는, 세포 배양 장치.
  8. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    적어도 한 쌍의 인접한 적층된 플레이트는 적층된 플레이트 중 하나의 제1 주 표면에 의해 한정된 하부 표면 및 인접한 적층된 플레이트의 제2 주 표면에 의해 한정된 상부 표면을 갖는 세포 배양 챔버를 한정하는, 세포 배양 장치.
  9. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    복수의 적층된 플레이트의 최상부의 세포 배양 플레이트 위에 배치된 상판 (top plate)을 더욱 포함하는, 세포 배양 장치.
  10. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    적어도 하나의 스페이서는 스페이서의 길이를 연장하는 공기 채널을 포함하고, 여기서 상기 공기 채널은 세포 배양 장치의 외부와 가스 연통하며 및 상기 스페이서에 의해 한정된 복수의 배지 흐름 채널 중 적어도 하나와 가스 연통하는, 세포 배양 장치.
  11. 청구항 10에 있어서,
    상기 플레이트는 인접한 플레이트의 스페이서를 정렬하도록 적층되고, 상기 정렬된 스페이서는 최하부 플레이트로부터 최상부 플레이트로 연장되는 벽을 한정하는, 세포 배양 장치.
  12. 청구항 11에 있어서,
    적어도 하나의 벽은 최하부 플레이트로부터 최상부 플레이트까지 연장하는 공기 채널을 한정하고, 여기서 상기 공기 채널은 세포 배양 장치의 외부와 가스 연통하며, 및 상기 벽의 스페이서에 의해 한정된 각각의 배지 흐름 채널과 가스 연통하는, 세포 배양 장치.
  13. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 복수의 마이크로웰은 육방 밀집 마이크로웰의 어레이를 포함하는, 세포 배양 장치.
  14. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 마이크로웰은 상부 개구로부터 천저까지 한정된 깊이를 가지며, 여기서 상기 깊이는 200 micrometers 내지 2000 micrometers의 범위인, 세포 배양 장치.
  15. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    각 마이크로웰은 세포에 비-부착성인, 세포 배양 장치.
  16. 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 플레이트는 마이크로웰을 통해 가스 투과성인, 세포 배양 장치.
  17. 세포 배양 시스템으로서,
    청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 따른 세포 배양 장치; 및
    주입구에 연결된 산소 공급기를 포함하는, 세포 배양 시스템.
  18. 청구항 17에 있어서,
    상기 주입구에 연결된 펌프를 더욱 포함하는, 세포 배양 시스템.
  19. 청구항 1에 따른 세포 배양 장치의 마이크로웰에 세포를 도입하는 단계; 및 상기 세포 배양 장치의 배지 흐름 채널을 통해 제1 속도로 세포 배양 배지를 관류시켜 상기 마이크로웰에서 세포를 배양하는, 관류 단계를 포함하는, 세포 배양 방법.
  20. 청구항 19에 있어서,
    상기 마이크로웰로부터 상기 세포를 제거하기 위해 상기 제1 속도보다 빠른 제2 속도로 상기 배지 흐름 채널을 통해 상기 세포 배양 배지를 관류시키는 단계를 더욱 포함하는, 세포 배양 방법.
  21. a) 청구항 1-3 및 5-7 중 어느 한 항에 따른 세포 배양 장치의 마이크로웰에서 단백질을 발현하는 세포를 배양하는 단계; 및
    b) 상기 세포로부터 상기 단백질을 분리하는 단계를 포함하는, 단백질의 생산 방법.
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Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9790465B2 (en) 2013-04-30 2017-10-17 Corning Incorporated Spheroid cell culture well article and methods thereof
CN113481097A (zh) 2014-10-29 2021-10-08 康宁股份有限公司 灌注生物反应器平台
WO2018057769A1 (en) * 2016-09-22 2018-03-29 Corning Incorporated Gravity flow cell culture devices, systems and methods of use thereof
JP2018108038A (ja) * 2016-12-28 2018-07-12 クアーズテック株式会社 細胞培養担体
JP7251725B2 (ja) * 2017-01-18 2023-04-04 伸晃化学株式会社 化学物質評価用のデバイス、および、化学物質評価方法
US11767499B2 (en) 2017-07-14 2023-09-26 Corning Incorporated Cell culture vessel
JP7245222B2 (ja) * 2017-07-14 2023-03-23 コーニング インコーポレイテッド 手動又は自動で培地を交換するための３ｄ細胞培養容器
US11857970B2 (en) 2017-07-14 2024-01-02 Corning Incorporated Cell culture vessel
EP3652292A1 (en) 2017-07-14 2020-05-20 Corning Incorporated Cell culture vessel for 3d culture and methods of culturing 3d cells
WO2020013851A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Corning Incorporated Fluidic devices including microplates with interconnected wells
PL3649229T3 (pl) 2018-07-13 2021-12-06 Corning Incorporated Naczynia do hodowli komórkowych ze stabilizującymi urządzeniami
WO2020013847A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Corning Incorporated Microcavity dishes with sidewall including liquid medium delivery surface
JP7179548B2 (ja) * 2018-09-18 2022-11-29 テルモ株式会社 バイオリアクタ、細胞培養システム及び細胞培養方法
CN109251859B (zh) * 2018-10-11 2021-11-05 广州洁特生物过滤股份有限公司 一种细胞培养装置及其细胞盒
JP7348586B2 (ja) * 2019-01-18 2023-09-21 東洋製罐グループホールディングス株式会社 培養容器、培養方法、及び培養装置
WO2020246572A1 (ja) * 2019-06-07 2020-12-10 株式会社日本触媒 細胞及び／又はその集合体の回収方法
US20220403315A1 (en) * 2019-09-30 2022-12-22 OminiWell Pty Ltd. Three-dimensional cell culture platform and uses thereof
CN116685669A (zh) * 2020-10-30 2023-09-01 康宁股份有限公司 微腔板
JP2023551403A (ja) * 2020-11-20 2023-12-08 コーニング インコーポレイテッド 開放ウェル型マイクロキャビティプレート
KR20220092275A (ko) * 2020-12-24 2022-07-01 주식회사 넥스트앤바이오 세포 배양 플레이트 적층 배열체
TWI751902B (zh) * 2021-01-29 2022-01-01 錢家琪 細胞培養平台及其製造方法
CN113070108B (zh) * 2021-03-01 2022-05-06 清华大学 图案化水凝胶微粒制备方法及微流控装置

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3139350B2 (ja) * 1995-12-05 2001-02-26 トヨタ自動車株式会社 電磁弁装置
WO2005047464A2 (en) 2003-11-10 2005-05-26 Advanced Pharmaceutical Sciences, Inc. Cell culture tool and method
WO2009094125A2 (en) 2008-01-25 2009-07-30 Corning Incorporated Limited access multi-layer cell culture system
JP2011521642A (ja) * 2008-05-30 2011-07-28 コーニング インコーポレイテッド 細胞培養容器の組立体

Family Cites Families (234)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2947116A (en) 1954-02-26 1960-08-02 Wilton R Earle Method of producing tissue culture flasks
US3630849A (en) 1969-04-24 1971-12-28 David B Land Surface micro-organism contamination assays
US4382685A (en) 1979-07-17 1983-05-10 Techne (Cambridge) Limited Method and apparatus for stirring particles in suspension such as microcarriers for anchorage-dependent living cells in a liquid culture medium
DE8309876U1 (de) 1983-04-02 1983-12-22 Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt Zweiphasige blutkulturflasche
GB8321239D0 (en) 1983-08-05 1983-09-07 Orbec Ltd Innoculating means
US4670396A (en) 1985-05-02 1987-06-02 Bioassy Systems Corporation Vertical culture system with removable culture unit
US5171994A (en) 1986-08-13 1992-12-15 Northrop Corporation Infrared staring imaging array
US5047347A (en) 1987-08-17 1991-09-10 Cline Martin J Gas permeable culture flask and method for culturing mammalian cells
US4839292B1 (en) 1987-09-11 1994-09-13 Joseph G Cremonese Cell culture flask utilizing membrane barrier
US4927764A (en) 1987-11-17 1990-05-22 Costar Corporation Tissue culture flask
US4980293A (en) 1988-09-02 1990-12-25 Multi-Technology Inc. Dispensing reagents in a specimen well
US5240854A (en) * 1989-06-05 1993-08-31 Berry Eric S Continuous high-density cell culture system
JP2850982B2 (ja) 1989-10-25 1999-01-27 ユニ・チャーム株式会社 使い捨て着用物品
US5712137A (en) 1990-03-05 1998-01-27 Smith & Nephew Plc Laminate of a culture substrate on a carrier for producing an apertured wound dressing
GB9004911D0 (en) 1990-03-05 1990-05-02 Smith & Nephew Cell culture products
DE4030699C1 (ko) 1990-09-28 1991-10-10 Bruker Analytische Messtechnik Gmbh, 7512 Rheinstetten, De
US5272083A (en) 1990-10-10 1993-12-21 Costar Corporation Culture device and method of use having a detachable cell or tissue growth surface
US5151366A (en) 1991-05-24 1992-09-29 Invitro Scientific Products, Inc. Cell culture flask
DE4132379A1 (de) 1991-09-28 1993-04-08 Kernforschungsz Karlsruhe Substrat fuer zellkulturen und kultur von zellen oder zellaggregaten
US5272084A (en) 1991-12-18 1993-12-21 Corning Incorporated Cell culture vessels having interior ridges and method for cultivating cells in same
US5319436A (en) 1992-05-28 1994-06-07 Packard Instrument Company, Inc. Microplate farming wells with transparent bottom walls for assays using light measurements
IT1266389B1 (it) 1993-02-15 1996-12-30 Alberto Degrassi Struttura di contenitore, particolarmente per le colture cellulari
US5374557A (en) 1993-04-29 1994-12-20 Verma; Kuldeep Fermentation vessels and closures therefor
JP3152933B2 (ja) 1993-05-17 2001-04-03 アマーシャム・インターナショナル・ピーエルシー 細胞生化学プロセスを測定するための装置および方法
JP2716646B2 (ja) 1993-05-21 1998-02-18 住友ベークライト株式会社 細胞凝集体の形成方法
CN2186755Y (zh) 1994-03-25 1995-01-04 中国科学院成都生物研究所 多用途培养板
US5487872A (en) 1994-04-15 1996-01-30 Molecular Device Corporation Ultraviolet radiation transparent multi-assay plates
US5707869A (en) 1994-06-28 1998-01-13 Wolf; Martin L. Compartmentalized multiple well tissue culture plate
US5693537A (en) 1994-06-28 1997-12-02 Wilson; John R. Compartmentalized tissue culture flask
US5635344A (en) 1994-12-07 1997-06-03 Cedra Corp. Shipping medium for organ-derived cells
US5554536A (en) 1995-01-05 1996-09-10 Millipore Investment Holdings Limited Biological analysis device having improved contamination prevention
GB9509487D0 (en) 1995-05-10 1995-07-05 Ici Plc Micro relief element & preparation thereof
US5710043A (en) 1995-09-25 1998-01-20 Becton Dickinson And Company In vitro cell culture assembly
US5759494A (en) 1995-10-05 1998-06-02 Corning Incorporated Microplates which prevent optical cross-talk between wells
US5772905A (en) 1995-11-15 1998-06-30 Regents Of The University Of Minnesota Nanoimprint lithography
FR2741357B1 (fr) 1995-11-22 1998-01-16 Corning Inc Procede de fabrication d'une plaquette de support d'un reseau bidimensionnel de micropuits, notamment pour essais ou cultures biologiques
JPH09173049A (ja) 1995-12-27 1997-07-08 Sumitomo Bakelite Co Ltd 培養用容器
JPH09234811A (ja) 1995-12-27 1997-09-09 Mitsubishi Gas Chem Co Inc フィルム状又はシート状の脱酸素多層体とその製造方法
US5858309A (en) 1996-03-22 1999-01-12 Corning Incorporated Microplates with UV permeable bottom wells
US5783440A (en) 1996-09-30 1998-07-21 Becton Dickinson And Company Culture vessel
AU4747197A (en) 1996-10-10 1998-05-05 Corning Incorporated Tool for the transport of liquid drops and method for the transfer of drops using such a tool
WO1998031466A1 (en) 1997-01-17 1998-07-23 Corning Incorporated Multi-well plate
JPH10210966A (ja) 1997-01-29 1998-08-11 Sumitomo Bakelite Co Ltd 培養容器
JPH10210866A (ja) 1997-01-30 1998-08-11 Masayuki Minato 強風でも倒れない植木鉢の転倒予防器具
US5972694A (en) 1997-02-11 1999-10-26 Mathus; Gregory Multi-well plate
US5859896A (en) 1997-03-05 1999-01-12 Rosen; Howard B. Telephone line automatic prefix dialer
DE19712484C2 (de) 1997-03-25 1999-07-08 Greiner Gmbh Microplatte mit transparentem Boden und Verfahren zu deren Herstellung
CH692583A5 (de) 1998-03-03 2002-08-15 Weidmann H Ag Kulturgefäss.
DE19825812C1 (de) 1998-06-09 2000-01-13 Gsf Forschungszentrum Umwelt Zellkulturgefäß für die Kultivierung nicht adhärenter Zellen
GB9812783D0 (en) 1998-06-12 1998-08-12 Cenes Ltd High throuoghput screen
GB9912641D0 (en) 1999-05-28 1999-07-28 Ashby Scient Ltd Textured and porous silicone rubber
JP4315544B2 (ja) 1999-10-04 2009-08-19 日油株式会社 共重合体、その製造法、医療用材料及び眼科用材料
US6521451B2 (en) 1999-12-09 2003-02-18 California Institute Of Technology Sealed culture chamber
DE10019862A1 (de) 2000-04-18 2001-11-08 Cell Lining Ges Fuer Zellkulti Verfahren und Vorrichtung zur Automatisierung des Medienwechsels in Zellkulturen
WO2001080997A1 (en) 2000-04-19 2001-11-01 Corning Incorporated Multi-well plate and method of manufacture
DE10046175A1 (de) 2000-09-19 2002-03-28 Augustinus Bader Verfahren und Vorrichtung zum Züchten und/oder Behandeln von Zellen
US6811752B2 (en) 2001-05-15 2004-11-02 Biocrystal, Ltd. Device having microchambers and microfluidics
JP3809165B2 (ja) 2001-06-14 2006-08-16 ミリポア・コーポレイション マルチウェル試験装置
CA2351156A1 (en) 2001-07-04 2003-01-04 Peter W. Zandstra A bioprocess for the generation of pluripotent cell derived cells and tissues
CN1798832B (zh) 2001-07-26 2010-04-28 片冈一则 含有动物培养细胞球状体的培养细胞构成物及其用途
US6767607B2 (en) 2001-08-09 2004-07-27 Corning Incorporated Multiwell plate having transparent well bottoms
FR2830107B1 (fr) 2001-09-24 2004-09-24 Gemplus Card Int Cle electronique destinee a etre connectee a un port d'un dispositif de telecommunication et procede de fabrication de la cle
AU2002363076A1 (en) 2001-10-26 2003-05-06 Virtual Arrays, Inc. Assay systems with adjustable fluid communication
JP2003135056A (ja) 2001-10-30 2003-05-13 Mitsuo Ochi 移植用組織等価物の製造方法及びその製造用器具
JP2003180335A (ja) 2001-12-21 2003-07-02 Sumitomo Bakelite Co Ltd 収納培養容器
WO2003069373A1 (en) 2002-02-12 2003-08-21 Bhp Billiton Innovation Pty Ltd Airborne vector magnetic surveys
AU2003265228A1 (en) 2002-03-12 2003-12-22 Surface Logix, Inc. Assay device that analyzes the absorption, metabolism, permeability and/or toxicity of a candidate compound
WO2003083044A2 (en) 2002-03-25 2003-10-09 Condros, Inc. Tissue analogs for in vitro testing and method of use therefor
US20030183958A1 (en) 2002-03-28 2003-10-02 Becton, Dickinson And Company Multi-well plate fabrication
ATE360057T1 (de) 2002-09-20 2007-05-15 Becton Dickinson Co Rollflasche
JP3764959B2 (ja) 2002-10-10 2006-04-12 独立行政法人理化学研究所 細胞培養用容器および細胞培養方法
US20040125266A1 (en) 2002-10-30 2004-07-01 Akihiro Miyauchi Functioning substrate with a group of columnar micro pillars and its manufacturing method
US20040091397A1 (en) 2002-11-07 2004-05-13 Corning Incorporated Multiwell insert device that enables label free detection of cells and other objects
FI115060B (fi) 2003-04-22 2005-02-28 Chip Man Technologies Oy Analyysi- ja kasvatuslaitteisto
CA2523749A1 (en) 2003-04-25 2004-11-11 Jsr Corporation Biochip and biochip kit, and production process and use thereof
US7425440B2 (en) 2003-06-10 2008-09-16 The Automation Partnership (Cambridge) Limited Culture flask
US20050032208A1 (en) 2003-06-18 2005-02-10 Oh Steve Kah Weng Materials and methods to produce stem cells
US8597597B2 (en) 2003-06-26 2013-12-03 Seng Enterprises Ltd. Picoliter well holding device and method of making the same
AU2004256209B2 (en) 2003-07-08 2010-04-08 Axiogenesis Ag Novel method for the preparation of embryoid bodies (EBs) and uses thereof
US20050112030A1 (en) 2003-08-21 2005-05-26 Gaus Stephanie E. Meshwell plates
EP2336293B1 (en) 2003-10-08 2016-02-10 Wilson Wolf Manufacturing Corporation Cell culture methods and devices utilizing gas permeable materials
US8658349B2 (en) 2006-07-13 2014-02-25 Seahorse Bioscience Cell analysis apparatus and method
US7919319B2 (en) 2003-12-19 2011-04-05 University Of Waterloo Cultured cell and method and apparatus for cell culture
US8206981B2 (en) 2004-03-05 2012-06-26 Dsm Ip Assets B.V. Process for cell culturing by continuous perfusion and alternating tangential flow
PT1773978E (pt) 2004-05-19 2014-05-29 Massachusetts Inst Technology Modelo de doença com células/tecidos tri-dimensionais perfundidos
WO2006019836A1 (en) 2004-07-22 2006-02-23 Corning Incorporated Culture flask
US7767446B2 (en) 2004-09-16 2010-08-03 Becton, Dickinson And Company Perfusion bioreactors for culturing cells
EP1810004A1 (en) * 2004-10-18 2007-07-25 Molecular Cytomics Ltd. Current damper for the study of cells
JP3981929B2 (ja) 2004-10-29 2007-09-26 財団法人北九州産業学術推進機構 細胞組織体マイクロチップ
JP4672376B2 (ja) 2005-01-11 2011-04-20 株式会社クラレ 伸展方向が制御された細胞の培養方法
GB2427688A (en) 2005-06-28 2007-01-03 Inogen S A Microwell plate
EP1910300A2 (en) 2005-07-15 2008-04-16 Laboratorios del Dr. Esteve S.A. Prodrugs of pyrazoline compounds, their preparation and use as medicaments
US7745209B2 (en) 2005-07-26 2010-06-29 Corning Incorporated Multilayered cell culture apparatus
US8329470B2 (en) 2005-08-01 2012-12-11 Life Technologies Corporation Labels, containers, system and method for providing reagents
US8361781B2 (en) 2006-01-24 2013-01-29 Brown University Cell aggregation and encapsulation device and method
WO2007097121A1 (ja) 2006-02-21 2007-08-30 Scivax Corporation スフェロイドおよびスフェロイド群並びにこれらの製造方法
JP5421588B2 (ja) 2006-02-24 2014-02-19 株式会社クラレ 細胞培養容器およびその製造方法
ITMI20061063A1 (it) 2006-05-31 2007-12-01 Mindseeds Lab S R L Metrodo e apparato pe rla selezione e la modifica di singole cellule e loro piccoli aggregati
DE102006030068A1 (de) 2006-06-28 2008-01-03 M2P-Labs Gmbh Vorrichtung und Verfahren zur Zu- und Abfuhr von Fluiden in geschüttelten Mikroreaktoren Arrays
US7745210B2 (en) 2006-06-30 2010-06-29 Corning Incorporated Fluid flow diverter for cell culture vessel
US8551770B2 (en) 2006-07-07 2013-10-08 University Of Miami Enhanced oxygen cell culture platforms
US9175254B2 (en) 2006-07-07 2015-11-03 University Of Miami Enhanced oxygen cell culture platforms
US8053230B2 (en) 2006-09-07 2011-11-08 Nalge Nunc International Corporation Culture dish with lid
US8486692B2 (en) 2006-11-14 2013-07-16 Acme Biosystems Llc Cell culture apparatus and associated methods
US20080118974A1 (en) 2006-11-20 2008-05-22 Gregory Roger Martin Large scale cell culture vessel
DE202006017853U1 (de) 2006-11-23 2007-01-18 Forschungszentrum Karlsruhe Gmbh Einsatz für eine Mikrotiterplatte
US20080176318A1 (en) 2006-12-07 2008-07-24 Wilson John R Highly efficient devices and methods for culturing cells
US7897379B2 (en) * 2007-02-26 2011-03-01 Corning Incorporated Device and method for reducing bubble formation in cell culture
WO2008106771A1 (en) 2007-03-02 2008-09-12 Mark Ungrin Devices and methods for production of cell aggregates
WO2008118500A1 (en) 2007-03-27 2008-10-02 Wafergen, Inc. Nutrient perfusion plate with heater & gas exchange for high content screening
KR100836827B1 (ko) 2007-04-09 2008-06-10 전남대학교산학협력단 배아줄기세포의 배상체 형성용 배양용기
WO2008140295A1 (en) 2007-05-16 2008-11-20 Erasmus University Medical Center Rotterdam Cell culture substrate, culture flasks and methods for cell cultivation employing said substrate
DE102007027273A1 (de) 2007-05-24 2008-11-27 Heipha Gmbh Behältnis zur Aufnahme von Nährmedien
FR2916451A1 (fr) 2007-05-25 2008-11-28 Mhs Ind Soc Par Actions Simpli Systeme de culture de cellules biologiques
US9309491B2 (en) 2007-05-29 2016-04-12 Corning Incorporated Cell culture apparatus for co-culture of cells
DK2173863T3 (en) 2007-06-29 2019-01-21 Fujifilm Cellular Dynamics Inc Automated method and apparatus for embryonic stem cell culture
JP5233187B2 (ja) 2007-07-11 2013-07-10 パナソニック株式会社 細胞電気生理センサ
JP2009050194A (ja) 2007-08-27 2009-03-12 Sumitomo Bakelite Co Ltd 細胞凝集塊形成培養用容器
JP3139350U (ja) * 2007-11-27 2008-02-14 株式会社クラレ 細胞培養容器
ATE481472T1 (de) 2008-02-01 2010-10-15 Eppendorf Ag Kulturplatte mit klappe zur seitlichen belüftung
US20100112014A1 (en) 2008-04-11 2010-05-06 Gilbert Ryan J Novel hydrogel compositions and methods of using
CN102046773A (zh) 2008-05-30 2011-05-04 康宁股份有限公司 具有不同微孔外形的细胞培养装置
US8178345B2 (en) 2008-05-30 2012-05-15 Corning Incorporated Multilayer cell culture vessels
CN102105578A (zh) 2008-05-30 2011-06-22 康宁股份有限公司 具有可变表面形状的细胞培养装置
US8518692B2 (en) * 2008-07-08 2013-08-27 Wilson Wolf Manufacturing Corporation Gas permeable cell culture device and method of use
CN102099459B (zh) * 2008-07-16 2013-05-01 Emd密理博公司 单层或多层细胞培养系统
EP2342317B1 (en) 2008-09-22 2012-12-19 University Of Zurich Prorektorat Forschung Hanging drop plate
JP5578779B2 (ja) 2008-10-08 2014-08-27 国立大学法人東北大学 スフェロイド培養方法及びスフェロイド培養容器
US9249383B2 (en) * 2008-10-08 2016-02-02 Agency For Science Technology & Research Apparatus for culturing anchorage dependent cells
JP5288171B2 (ja) 2008-10-31 2013-09-11 旭硝子株式会社 培養用容器
EP2361302A4 (en) 2008-11-05 2013-10-16 Nanopoint Inc ACTIVE MICROFLUID SYSTEM FOR IN VITRO CULTURES
US8956867B2 (en) 2008-11-07 2015-02-17 Wisconsin Alumni Research Foundation Method for culturing stem cells
ES2343721B1 (es) 2008-12-19 2011-06-06 Histocell, S.L. Sistema de transporte de celulas.
JP2010158214A (ja) 2009-01-09 2010-07-22 Olympus Corp 培養容器
DE102009005526A1 (de) * 2009-01-20 2010-07-22 Universität Duisburg-Essen Bioreaktor und Verfahren zur Biomasseerzeugung
WO2010085751A2 (en) 2009-01-26 2010-07-29 The Regents Of The University Of California Apparatus and method for culturing stem cells
US8163537B2 (en) 2009-01-27 2012-04-24 Corning Incorporated Nested permeable support device and method for using the nested permeable support device
DE102009013673A1 (de) 2009-03-09 2010-09-16 Eppendorf Ag Zellkulturschale
WO2010107497A2 (en) 2009-03-18 2010-09-23 The Regents Of The University Of California Honeycomb shrink wells for stem cell culture
WO2010110754A1 (en) 2009-03-26 2010-09-30 Agency For Science, Technology And Research Apparatus for cell or tissue culture
JP2012527217A (ja) 2009-04-24 2012-11-08 ジ・オハイオ・ステート・ユニバーシティ 双方向微小環境系
US9169460B2 (en) 2009-05-19 2015-10-27 Lifeglobal Group Llc Flooding dish and method for changing media in the dish in the preparation of mammalian specimen culture and for cryo-preservation, freezing, vitrification and the thawing and warming of such specimens
US8778669B2 (en) 2009-07-22 2014-07-15 Corning Incorporated Multilayer tissue culture vessel
US8143053B2 (en) 2009-10-26 2012-03-27 Biomerieux, Inc. Lockable cell growth chamber with antilocking feature
JP2013510582A (ja) 2009-11-12 2013-03-28 ザ テキサス エーアンドエム ユニバーシティー システム 間葉幹細胞の球状集合体
US20130122580A1 (en) 2010-01-08 2013-05-16 Sumitomo Bakelite Co., Ltd. Culture vessel for forming aggregated cell mass
US9493733B2 (en) 2010-01-18 2016-11-15 Becton, Dickinson And Company Container assembly
EP2529238A4 (en) 2010-01-28 2014-10-08 The Regents Of The University Of Michigan HANGING DRIPPING DEVICES, SYSTEMS AND / OR METHODS
CN201626959U (zh) 2010-02-01 2010-11-10 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 用于细胞培养的微灌流装置
JP2011172533A (ja) 2010-02-25 2011-09-08 Fusao Komada マイクロ空間構造体を用いた高密度三次元細胞培養法
SG185113A1 (en) 2010-05-04 2012-12-28 Agency Science Tech & Res A microsieve for cells and particles filtration
JP5703302B2 (ja) * 2010-09-08 2015-04-15 株式会社島津製作所 細胞培養容器及びその容器を用いた細胞培養方法
SG188505A1 (en) 2010-09-14 2013-05-31 Asahi Glass Co Ltd Culture substrate
US9260684B1 (en) 2010-11-11 2016-02-16 Stemcell Technologies Inc. Cell culture device
CA2825553A1 (en) 2011-01-24 2012-08-02 California Stem Cell, Inc. Neural cell purification for transplantation
TWI438273B (zh) 2011-03-08 2014-05-21 Univ Chang Gung High-throughput perfusative microfluidic cell culture wafers for miniaturized three-dimensional cell culture
GB201105226D0 (en) 2011-03-29 2011-05-11 Univ Leiden Methods
CN104673670A (zh) 2011-03-30 2015-06-03 独立行政法人国立长寿医疗研究中心 膜分选培养器、膜分选培养试剂盒、和使用其的干细胞分选方法、以及分离膜
JP2012249547A (ja) 2011-05-31 2012-12-20 Oji Holdings Corp 細胞培養用基材及びその製造方法
WO2012170232A1 (en) 2011-06-09 2012-12-13 Bellbrook Labs, Llc Device for washing suspended cells or particles
JP5853512B2 (ja) 2011-09-08 2016-02-09 大日本印刷株式会社 細胞培養容器とその製造方法
CN103814125B (zh) 2011-09-20 2015-09-16 株式会社可乐丽 粘附性细胞的培养方法
US9200246B2 (en) 2011-12-01 2015-12-01 Acea Biosciences, Inc. Co-culture device assembly
WO2013108293A1 (ja) 2012-01-19 2013-07-25 ヤマハ発動機株式会社 ウェルプレートおよび該ウェルプレートを備えた吸引装置
WO2013116449A1 (en) 2012-02-02 2013-08-08 Corning Incorporated Automatic continuous perfusion cell culture microplate consumables
CN202450098U (zh) 2012-03-09 2012-09-26 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一种用于组织块培养细胞的培养瓶
EP2653531A1 (de) 2012-04-18 2013-10-23 Oxyphen AG Kulturanordnung
US20140004086A1 (en) 2012-06-29 2014-01-02 Tissue Genesis Inc. Formation of cell aggregates
JP6111673B2 (ja) 2012-07-25 2017-04-12 住友電気工業株式会社 炭化珪素半導体装置
USD685497S1 (en) 2012-08-31 2013-07-02 Corning Incorporated Cell culture flask
US9573128B1 (en) 2012-09-06 2017-02-21 SciKon Innovation, Inc. Fluidics device allowing fluid flow between a plurality of wells
WO2014042162A1 (ja) 2012-09-14 2014-03-20 住友ベークライト株式会社 マイクロウェルプレート
CN202849407U (zh) 2012-09-26 2013-04-03 无锡耐思生物科技有限公司 一种细胞培养瓶结构
US9701938B2 (en) 2012-10-12 2017-07-11 Lena Biosciences, Inc. Intra-culture perfusion methods and applications thereof
KR20140048733A (ko) 2012-10-16 2014-04-24 삼성전자주식회사 다중 웰 플레이트 및 상기 다중 웰 플레이트를 이용한 표적 물질 분석 방법
US9176115B2 (en) 2012-10-26 2015-11-03 The University Of Akron Engineering individually addressable cellular spheroids using aqueous two-phase systems
GB2507744A (en) 2012-11-07 2014-05-14 Universitaetsklinikum Freiburg Matrix for generating and cultivating uniform cell aggregations
CN104471052B (zh) 2012-11-13 2017-06-13 海马生物科学公司 用于基于控制介质流动的三维组织测量的装置和方法
JP2014132869A (ja) 2013-01-11 2014-07-24 Sumitomo Bakelite Co Ltd 細胞培養容器
US10072241B2 (en) 2013-03-13 2018-09-11 Innovative Surface Technologies, Inc. Conical devices for three-dimensional aggregate(s) of eukaryotic cells
KR20140113139A (ko) 2013-03-15 2014-09-24 고려대학교 산학협력단 세포 스페로이드 배양판
EP2781591B1 (en) 2013-03-19 2017-05-03 Unisense Fertilitech A/S A tray, a system and a method for monitoring and culturing of a cell culture
WO2014156455A1 (ja) 2013-03-28 2014-10-02 富士フイルム株式会社 細胞培養用具
USD748812S1 (en) 2013-04-12 2016-02-02 Corning Incorporated Arched cell culture flask
KR102234887B1 (ko) 2013-04-19 2021-04-01 주식회사 에이엔케이 세포배양 기판
US9790465B2 (en) 2013-04-30 2017-10-17 Corning Incorporated Spheroid cell culture well article and methods thereof
WO2014197550A1 (en) 2013-06-05 2014-12-11 David Kranbuehl Multi point method and apparatus for monitoring the aging and changes in corresponding tensile performance properties of a polymer
US10494593B2 (en) 2013-06-07 2019-12-03 Corning Incorporated Culture chamber and culture method
JP6307802B2 (ja) 2013-07-05 2018-04-11 株式会社Ihi 培養容器
JP2015029431A (ja) 2013-07-31 2015-02-16 大日本印刷株式会社 細胞培養容器
CN203513696U (zh) 2013-08-27 2014-04-02 浙江硕华医用塑料有限公司 细胞培养瓶
DE102013109450B4 (de) 2013-08-30 2015-04-02 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Expositionsapparat
PT3041926T (pt) 2013-09-05 2020-06-17 Univ Bern Dispositivo para a modelação in vitro de tecidos in vivo de órgãos
JP2015050964A (ja) 2013-09-06 2015-03-19 住友ベークライト株式会社 多段式培養フラスコおよび細胞培養フラスコの製造方法
JP6185816B2 (ja) 2013-10-11 2017-08-23 Ａｇｃテクノグラス株式会社 細胞培養容器
AU2014344726B2 (en) 2013-10-30 2019-01-17 Milica Radisic Devices and methods for three-dimensional tissue culturing
US20160312164A1 (en) 2013-12-12 2016-10-27 Yamaha Hatsudoki Kabushiki Kaisha Well plate and subject selection device provided with well plate
WO2015134550A1 (en) 2014-03-03 2015-09-11 Kiyatec Inc. 3d tissue culture devices and systems
US10392593B2 (en) 2014-03-04 2019-08-27 Pluristem Ltd. Systems and methods for growing and harvesting cells
DE102014214077A1 (de) 2014-07-18 2016-01-21 Hamilton Bonaduz Ag Laborbehälter, insbesondere Zellkulturbehälter, mit einer in das Behältervolumen hinein verlaufenden Gas-Ausgleichsleitung
EP2985343A1 (en) 2014-08-11 2016-02-17 Karlsruher Institut für Technologie In vitro-co-culturesystem
WO2016064757A1 (en) 2014-10-19 2016-04-28 Nortis, Inc. Modular microfluidic system for perfused cell culture
WO2016069930A1 (en) 2014-10-29 2016-05-06 Corning Incorporated Microwell design and fabrication for generation of cell culture aggregates
US20170342363A1 (en) 2014-10-29 2017-11-30 Corning Incorporated Devices and methods for generation and culture of 3d cell aggregates
JP2017532974A (ja) 2014-10-29 2017-11-09 コーニング インコーポレイテッド ３ｄ細胞凝集体の生成及び培養のための装置及び方法
KR102460969B1 (ko) 2014-10-29 2022-10-31 코닝 인코포레이티드 세포 배양 인서트
CN113481097A (zh) 2014-10-29 2021-10-08 康宁股份有限公司 灌注生物反应器平台
CN107109340B (zh) 2014-10-29 2021-10-22 康宁股份有限公司 球状体捕获插入件
DE102014017728A1 (de) 2014-12-01 2016-06-02 Merck Patent Gmbh Kulturschale für Mikrooganismen
JP2016136921A (ja) 2015-01-29 2016-08-04 大日本印刷株式会社 細胞培養容器
JP2016136920A (ja) 2015-01-29 2016-08-04 大日本印刷株式会社 細胞培養容器
CN204752742U (zh) 2015-03-12 2015-11-11 广州医科大学 一种可用于慢生长细胞培养的细胞培养皿
CN204702760U (zh) 2015-04-15 2015-10-14 上海诺狄生物科技有限公司 一种培养皿
CN204714819U (zh) 2015-04-21 2015-10-21 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司 一种带支架的细胞培养瓶
CN204608026U (zh) 2015-04-22 2015-09-02 广州洁特生物过滤股份有限公司 一种具有超亲水生长表面的细胞嵌入皿
CN204803327U (zh) 2015-06-30 2015-11-25 广州洁特生物过滤股份有限公司 一种透气细胞培养皿
WO2017025584A1 (en) 2015-08-12 2017-02-16 Cytovac A/S A cell cultivation method, a cell cultivation vessel, and uses thereof
US20170067019A1 (en) 2015-09-07 2017-03-09 Bioreactor Sciences Llc Method of Continuous Mass Production of Progenitor Stem-like Cells Using a Bioreactor System
CN205990396U (zh) 2015-09-09 2017-03-01 广州市迪景微生物科技有限公司 一种盖子不易脱落的培养皿
JP6767375B2 (ja) 2015-09-17 2020-10-14 Ａｇｃテクノグラス株式会社 細胞培養容器
ES2615512B1 (es) 2015-11-06 2018-03-15 Universidad De Zaragoza Dispositivo y sistema microfluídico para el estudio de cultivos celulares
CN205170866U (zh) 2015-12-08 2016-04-20 湖南人文科技学院 一种无透明带胚胎培养皿
NL2016281B1 (en) 2016-02-18 2017-08-24 Perkinelmer Health Sciences B V Means and methods for spheroid cell culturing and analysis.
US10774296B2 (en) 2016-04-05 2020-09-15 Corning Incorporated Lidded cell culture devices with improved handling performance and methods for using same
CN205669029U (zh) 2016-05-09 2016-11-02 浙江硕华生命科学研究股份有限公司 一种细胞培养用具
CN205839030U (zh) 2016-07-27 2016-12-28 浙江译美生物科技有限公司 细胞培养皿
EP3296018A1 (en) 2016-09-19 2018-03-21 Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) Organoid arrays
JP2018108032A (ja) 2016-12-28 2018-07-12 Ａｇｃテクノグラス株式会社 培養容器
US20200199006A1 (en) 2017-04-27 2020-06-25 Corning Incorporated Process and apparatus for forming curved glass via differential heating of glass sheet
US11767499B2 (en) 2017-07-14 2023-09-26 Corning Incorporated Cell culture vessel
CN111094535A (zh) 2017-07-14 2020-05-01 康宁股份有限公司 细胞培养容器
JP7245222B2 (ja) 2017-07-14 2023-03-23 コーニング インコーポレイテッド 手動又は自動で培地を交換するための３ｄ細胞培養容器
EP3652289A1 (en) 2017-07-14 2020-05-20 Corning Incorporated Handling features for microcavity cell culture vessel
JP7385585B2 (ja) 2018-03-13 2023-11-22 ディスカバリー ライフ サイエンシズ エルエルシー 薬剤ａｄｍｅ研究のための高密度３ｄ肝細胞スフェロイドプラットフォーム

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3139350B2 (ja) * 1995-12-05 2001-02-26 トヨタ自動車株式会社 電磁弁装置
WO2005047464A2 (en) 2003-11-10 2005-05-26 Advanced Pharmaceutical Sciences, Inc. Cell culture tool and method
WO2009094125A2 (en) 2008-01-25 2009-07-30 Corning Incorporated Limited access multi-layer cell culture system
JP2011521642A (ja) * 2008-05-30 2011-07-28 コーニング インコーポレイテッド 細胞培養容器の組立体

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