JPH09173049A - 培養用容器 - Google Patents
培養用容器Info
- Publication number
- JPH09173049A JPH09173049A JP34106595A JP34106595A JPH09173049A JP H09173049 A JPH09173049 A JP H09173049A JP 34106595 A JP34106595 A JP 34106595A JP 34106595 A JP34106595 A JP 34106595A JP H09173049 A JPH09173049 A JP H09173049A
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- JP
- Japan
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- container
- vessel
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- Pending
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 複数個の容器が一体となったもしくは組み合
わされた容器の集合体を用いて、顕微鏡で培養されてい
る組織、細胞の観察を行うとともに、隣接した他の容器
が放出する光の影響を受けずに組織、細胞もしくは培養
液中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象を利
用した定量分析方法が行える培養用容器を提供すること
にある。 【解決手段】 容器の側壁を構成する部材、あるいは容
器の側壁の外側または内側を被覆する部材が不透明であ
り、かつ該容器の底部を構成する部材が透明である培養
用容器。
わされた容器の集合体を用いて、顕微鏡で培養されてい
る組織、細胞の観察を行うとともに、隣接した他の容器
が放出する光の影響を受けずに組織、細胞もしくは培養
液中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象を利
用した定量分析方法が行える培養用容器を提供すること
にある。 【解決手段】 容器の側壁を構成する部材、あるいは容
器の側壁の外側または内側を被覆する部材が不透明であ
り、かつ該容器の底部を構成する部材が透明である培養
用容器。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、発光物質を標識物
質とする組織培養や細胞培養に使用する培養用容器に関
するものである。
質とする組織培養や細胞培養に使用する培養用容器に関
するものである。
【０００２】
【従来の技術】一般に組織培養、細胞培養の分野おい
て、培養用容器は顕微鏡による観察に便利なように光学
的に透明性が高く歪みの少ないガラスやプラスチックな
どの材質からなり、複数個の容器が一体となったもしく
は組み合わされた容器の集合体は、同時に複数個の培養
用容器を操作するのに便利であり広く用いられている。
（以下、容器の集合体を「マルチプレート」と記す。）
て、培養用容器は顕微鏡による観察に便利なように光学
的に透明性が高く歪みの少ないガラスやプラスチックな
どの材質からなり、複数個の容器が一体となったもしく
は組み合わされた容器の集合体は、同時に複数個の培養
用容器を操作するのに便利であり広く用いられている。
（以下、容器の集合体を「マルチプレート」と記す。）
【０００３】また、培養を行う組織や細胞内に標識物質
として発光物質または発光に寄与する物質を組み込み、
この発光物質または発光に寄与する物質による発光現象
を利用して、培養容器中で培養を行いながら組織内、細
胞内の被標識物質の挙動や変化などを顕微鏡などを用い
て観察したり、組織、細胞もしくは培養液中に含まれて
いる極微量物質の含有量を測定するために、遮光された
環境下で光センサーを用い容器中の発光物質より放出さ
れる光の発光量を測定して、被標識物質の定量分析を行
う手法が用いられている。
として発光物質または発光に寄与する物質を組み込み、
この発光物質または発光に寄与する物質による発光現象
を利用して、培養容器中で培養を行いながら組織内、細
胞内の被標識物質の挙動や変化などを顕微鏡などを用い
て観察したり、組織、細胞もしくは培養液中に含まれて
いる極微量物質の含有量を測定するために、遮光された
環境下で光センサーを用い容器中の発光物質より放出さ
れる光の発光量を測定して、被標識物質の定量分析を行
う手法が用いられている。
【０００４】しかし、光学的に透明性が高い材質からな
る従来のマルチプレートを用いて組織培養、細胞培養を
行った場合、容器内で培養された組織、細胞を顕微鏡を
用いて観察を行うと同時に、組織、細胞もしくは培養液
中に含まれている極微量物質の含有量を測定するため、
前述の発光現象を利用した定量分析方法を行うと、隣接
する容器より放出される光は容器を通過して測定を行う
容器に侵入し散乱して該容器の発光量の測定に影響す
る。そのため、測定に必要な容器の内容物を発光量の測
定に支障のない他のマルチプレートの容器に移し変えて
発光量の測定を行う必要があった。
る従来のマルチプレートを用いて組織培養、細胞培養を
行った場合、容器内で培養された組織、細胞を顕微鏡を
用いて観察を行うと同時に、組織、細胞もしくは培養液
中に含まれている極微量物質の含有量を測定するため、
前述の発光現象を利用した定量分析方法を行うと、隣接
する容器より放出される光は容器を通過して測定を行う
容器に侵入し散乱して該容器の発光量の測定に影響す
る。そのため、測定に必要な容器の内容物を発光量の測
定に支障のない他のマルチプレートの容器に移し変えて
発光量の測定を行う必要があった。
【０００５】また、光学的に不透明な材質を使用したマ
ルチプレートを用いれば、容器内で組織、細胞の培養を
行い、組織、細胞もしくは培養液中に含まれている極微
量物質の含有量を発光現象を利用して測定することが可
能であるが、容器の底部分も光が通らないため、光学顕
微鏡を用いて培養している組織、細胞を観察すること実
質的に不可能である。
ルチプレートを用いれば、容器内で組織、細胞の培養を
行い、組織、細胞もしくは培養液中に含まれている極微
量物質の含有量を発光現象を利用して測定することが可
能であるが、容器の底部分も光が通らないため、光学顕
微鏡を用いて培養している組織、細胞を観察すること実
質的に不可能である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、組織や細胞
の培養で発光現象を利用した観察や測定分析におけるこ
のような問題点を解決しようとしたもので、その目的と
するところは、複数個の容器が一体となったもしくは組
み合わされた容器の集合体を用いて、顕微鏡で培養され
ている組織、細胞の観察を行うとともに、隣接した他の
容器が放出する光の影響を受けずに組織、細胞もしくは
培養液中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象
を利用した定量分析方法が行える培養用容器を提供する
ことにある。
の培養で発光現象を利用した観察や測定分析におけるこ
のような問題点を解決しようとしたもので、その目的と
するところは、複数個の容器が一体となったもしくは組
み合わされた容器の集合体を用いて、顕微鏡で培養され
ている組織、細胞の観察を行うとともに、隣接した他の
容器が放出する光の影響を受けずに組織、細胞もしくは
培養液中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象
を利用した定量分析方法が行える培養用容器を提供する
ことにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】即ち本発明は、発光現象
を用いた標識物質の測定と、顕微鏡観察を可能にするた
めに、容器の側壁を構成する部材、あるいは容器の側壁
の外側または内側を被覆する部材が不透明であり、かつ
該容器の底部を構成する部材が透明であることを特徴と
する培養用容器である。
を用いた標識物質の測定と、顕微鏡観察を可能にするた
めに、容器の側壁を構成する部材、あるいは容器の側壁
の外側または内側を被覆する部材が不透明であり、かつ
該容器の底部を構成する部材が透明であることを特徴と
する培養用容器である。
【０００８】
【発明の実施の形態】以下、図面により本発明を詳細に
説明する。図１は本発明の１実施例となる培養用容器で
ある。対象となる培養用容器の形状としては特に限定は
しないが、一般には図２に示したように、複数の容器
（１３）からなるマルチプレート本体（１１）、蓋（１
２）及び遮光板（１４）からなる、培養用容器が用いら
れる。尚、本発明においては、マルチプレート本体（１
１）または遮光板（１４）を構成する部材の数や蓋の有
無は特に限定しない。マルチプレート本体（１１）を構
成する部材としては、細胞毒性のないこと、耐水性を有
することなどが必要とされるが、上記条件を満たしてい
れば特に制限はない。またマルチプレート本体（１１）
を構成する部材に接着剤、塗料などを用いる場合には、
前述の条件の他、室温で硬化するタイプが好適である。
説明する。図１は本発明の１実施例となる培養用容器で
ある。対象となる培養用容器の形状としては特に限定は
しないが、一般には図２に示したように、複数の容器
（１３）からなるマルチプレート本体（１１）、蓋（１
２）及び遮光板（１４）からなる、培養用容器が用いら
れる。尚、本発明においては、マルチプレート本体（１
１）または遮光板（１４）を構成する部材の数や蓋の有
無は特に限定しない。マルチプレート本体（１１）を構
成する部材としては、細胞毒性のないこと、耐水性を有
することなどが必要とされるが、上記条件を満たしてい
れば特に制限はない。またマルチプレート本体（１１）
を構成する部材に接着剤、塗料などを用いる場合には、
前述の条件の他、室温で硬化するタイプが好適である。
【０００９】次に、容器（１３）の構造について説明す
る。図２に本発明を用いた培養容器の１実施例の容器
（１３）の断面図を示す。まず側壁（１５）は、外界ま
たは他の容器が放出する光を遮断するために、不透明な
材質で側壁全面を構成し、該側壁（１５）は、隣接する
容器の側壁と接している場合もある。底部（１６）は、
顕微鏡による観察を行うために、透明な材質で底面を構
成する。そして側壁と底部は、一体成形、凹凸による勘
合、接着剤等の使用により一体となって容器（１３）を
構成している。
る。図２に本発明を用いた培養容器の１実施例の容器
（１３）の断面図を示す。まず側壁（１５）は、外界ま
たは他の容器が放出する光を遮断するために、不透明な
材質で側壁全面を構成し、該側壁（１５）は、隣接する
容器の側壁と接している場合もある。底部（１６）は、
顕微鏡による観察を行うために、透明な材質で底面を構
成する。そして側壁と底部は、一体成形、凹凸による勘
合、接着剤等の使用により一体となって容器（１３）を
構成している。
【００１０】しかし不透明な材質や接着剤を組織、細胞
及び培養液と接触する容器の側壁に用いると、厳密には
従来使用している培養容器とは違う材質の容器となるた
め、組織や細胞の培養実験で従来の容器での実験と異な
る結果が得られる場合が考えられる。そこで、外部から
の光が遮断されていれば、側壁内側に従来の透明な材質
の部材を使用することも可能であるので、図３のよう
に、透明な材質の部材（１８）を底部から側壁の少なく
とも一部まで用い、側壁の一部または透明な材質の側壁
部分の外側に不透明な材質の部材（１７）を用いて外部
からの光を遮断すると、より好適である。
及び培養液と接触する容器の側壁に用いると、厳密には
従来使用している培養容器とは違う材質の容器となるた
め、組織や細胞の培養実験で従来の容器での実験と異な
る結果が得られる場合が考えられる。そこで、外部から
の光が遮断されていれば、側壁内側に従来の透明な材質
の部材を使用することも可能であるので、図３のよう
に、透明な材質の部材（１８）を底部から側壁の少なく
とも一部まで用い、側壁の一部または透明な材質の側壁
部分の外側に不透明な材質の部材（１７）を用いて外部
からの光を遮断すると、より好適である。
【００１１】また図４のような従来の透明な材質で作ら
れた容器の側壁外面に遮光性の塗料（１９）を付与した
ものを、突起部を設ける等の手段で固定させてマルチプ
レート（１１）を構成しても良い。また図３の状態では
透明な部材の底部（１６）が脱落するおそれがあるた
め、図５のように容器を構成する部材に突起部等を設
け、底面を支えても良い。
れた容器の側壁外面に遮光性の塗料（１９）を付与した
ものを、突起部を設ける等の手段で固定させてマルチプ
レート（１１）を構成しても良い。また図３の状態では
透明な部材の底部（１６）が脱落するおそれがあるた
め、図５のように容器を構成する部材に突起部等を設
け、底面を支えても良い。
【００１２】次に遮光板（１４）について説明する。図
６に本発明を用いた容器に遮光板を取り付けた状態での
１実施例の容器（１３）と遮光板（１４）の断面図を示
す。これは標識物の発光現象を用いた測定法を行う際
に、必要となるもので、容器底部の顕微鏡観察を行うた
めの透明な部分を遮光するために、不透明な材質で容器
（１３）の底部から外部の光が容器内部に侵入しないよ
うに構成している。また図７に示すように、顕微鏡の観
察と発光量の測定をくり返し行ため、勘合あるいはスラ
イドなどの手段でマルチプレート（１１）の底部に脱着
可能なように構成している。
６に本発明を用いた容器に遮光板を取り付けた状態での
１実施例の容器（１３）と遮光板（１４）の断面図を示
す。これは標識物の発光現象を用いた測定法を行う際
に、必要となるもので、容器底部の顕微鏡観察を行うた
めの透明な部分を遮光するために、不透明な材質で容器
（１３）の底部から外部の光が容器内部に侵入しないよ
うに構成している。また図７に示すように、顕微鏡の観
察と発光量の測定をくり返し行ため、勘合あるいはスラ
イドなどの手段でマルチプレート（１１）の底部に脱着
可能なように構成している。
【００１３】次に、本発明による培養容器の使用方法を
説明する。培養方法は、一般の組織培養用のシャーレや
マルチプレート中での培養に準じて行えばよい。培養途
中での倒立顕微鏡による観察を行う時は遮光板を取り外
し、一般の培養容器と同様に観察可能であり不具合がな
い。培養途中もしくは培養後に標識物質である発光物質
または発光に寄与する物質を加え、組織、細胞（１）も
しくは培養液（２）中に含まれている極微量物質の含有
量を発光現象時の発光量で測定するには、マルチプレー
ト（１１）の底部に遮光板（１４）を取り付け、容器
（１３）の開口部から光センサー（３）を用いて発光量
の測定を行う。（図８に１測定例を示す。）
説明する。培養方法は、一般の組織培養用のシャーレや
マルチプレート中での培養に準じて行えばよい。培養途
中での倒立顕微鏡による観察を行う時は遮光板を取り外
し、一般の培養容器と同様に観察可能であり不具合がな
い。培養途中もしくは培養後に標識物質である発光物質
または発光に寄与する物質を加え、組織、細胞（１）も
しくは培養液（２）中に含まれている極微量物質の含有
量を発光現象時の発光量で測定するには、マルチプレー
ト（１１）の底部に遮光板（１４）を取り付け、容器
（１３）の開口部から光センサー（３）を用いて発光量
の測定を行う。（図８に１測定例を示す。）
【００１４】
【実施例】次に実施例により、本発明をより具体的に説
明する。 〔実施例〕容器の形状は図３の構造を元にし、透明な材
質の部材はポリスチレン（住友化学社製 Ｍ−１４０）
で高さ１２ｍｍ、内径５ｍｍ、外形６ｍｍの円柱状の容
器９６個を射出成型で作製、不透明な材質の部材はポリ
スチレンに酸化チタンを５％加えた材料で内径６ｍｍで
底がない９６穴マルチプレートを射出成型で作製し、容
器をプレートの穴に入れて接着剤で固定した。遮光板は
７４ｍｍ×１１０ｍｍの板にマルチプレートの底に着脱
できるよう突起部を設け、ポリスチレンに酸化チタンを
５％加えた材料で射出成形した。
明する。 〔実施例〕容器の形状は図３の構造を元にし、透明な材
質の部材はポリスチレン（住友化学社製 Ｍ−１４０）
で高さ１２ｍｍ、内径５ｍｍ、外形６ｍｍの円柱状の容
器９６個を射出成型で作製、不透明な材質の部材はポリ
スチレンに酸化チタンを５％加えた材料で内径６ｍｍで
底がない９６穴マルチプレートを射出成型で作製し、容
器をプレートの穴に入れて接着剤で固定した。遮光板は
７４ｍｍ×１１０ｍｍの板にマルチプレートの底に着脱
できるよう突起部を設け、ポリスチレンに酸化チタンを
５％加えた材料で射出成形した。
【００１５】〔比較例１〕ポリスチレン製組織培養用９
６穴マルチプレート（住友ベークライト社製 ＭＳ−８
０９６Ｆ）を使用。
６穴マルチプレート（住友ベークライト社製 ＭＳ−８
０９６Ｆ）を使用。
【００１６】〔比較例２〕ポリスチレンに酸化チタンを
５％加えた材料で射出成形したマルチプレートにコロナ
放電処理して培養面を親水化し、γ線滅菌を施した。各
試料について、次のような評価を行った。実施例、比較
例１及び比較例２について、ヒト肝癌由来株細胞を各試
料で培養し、倒立顕微鏡による観察の操作具合を評価し
た。培養に用いられた培地はダルベッコ変法ＭＥＭ培地
５００ｍｌに、牛胎児血清５０ｍｌを添加したものを用
い、５×１０４個／ｍｌの濃度で３００μｌずつ各容器
に播種し、２日間培養した。評価結果は、表１に示した
通りであった。
５％加えた材料で射出成形したマルチプレートにコロナ
放電処理して培養面を親水化し、γ線滅菌を施した。各
試料について、次のような評価を行った。実施例、比較
例１及び比較例２について、ヒト肝癌由来株細胞を各試
料で培養し、倒立顕微鏡による観察の操作具合を評価し
た。培養に用いられた培地はダルベッコ変法ＭＥＭ培地
５００ｍｌに、牛胎児血清５０ｍｌを添加したものを用
い、５×１０４個／ｍｌの濃度で３００μｌずつ各容器
に播種し、２日間培養した。評価結果は、表１に示した
通りであった。
【００１７】
【表１】
【００１８】実施例、比較例１及び比較例２について、
隣接した容器が放出する光の影響を評価した。ある１つ
の容器にだけ発光する物質を含む溶液を加え、その容器
と隣接する空の容器の光の量を発光用プレートリーダ
（ベルトールド社製 ＬＢ−９６Ｐ）を用いて測定し
た。発光する物質を含む溶液にはＡＴＰ発光キット（東
洋インキ社製 ＬＬ−１００−１）を２００μｌ用い
た。評価結果は、表２に示した通りであった。尚、評価
結果は各試料ごとに、発光する物質を含む溶液が入った
容器を１００％として比較した。
隣接した容器が放出する光の影響を評価した。ある１つ
の容器にだけ発光する物質を含む溶液を加え、その容器
と隣接する空の容器の光の量を発光用プレートリーダ
（ベルトールド社製 ＬＢ−９６Ｐ）を用いて測定し
た。発光する物質を含む溶液にはＡＴＰ発光キット（東
洋インキ社製 ＬＬ−１００−１）を２００μｌ用い
た。評価結果は、表２に示した通りであった。尚、評価
結果は各試料ごとに、発光する物質を含む溶液が入った
容器を１００％として比較した。
【００１９】
【表２】
【００２０】
【発明の効果】本発明に従うと、複数個の容器が一体と
なったもしくは組み合わされた容器の集合体である培養
容器を用いて、顕微鏡で培養されている組織、細胞の観
察を行うとともに、隣接した他の容器（１３）が放出す
る光の影響を受けずに組織、細胞（１）もしくは培養液
（２）中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象
を利用した定量分析方法が行える。
なったもしくは組み合わされた容器の集合体である培養
容器を用いて、顕微鏡で培養されている組織、細胞の観
察を行うとともに、隣接した他の容器（１３）が放出す
る光の影響を受けずに組織、細胞（１）もしくは培養液
（２）中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象
を利用した定量分析方法が行える。
【図１】本発明の１実施例となるマルチプレートの全体
図である。
図である。
【図２】本発明の１実施例となる容器の断面図である。
【図３】本発明の１実施例となる容器の断面図である。
【図４】本発明の１実施例となる容器の断面図である。
【図５】本発明の１実施例となる容器の断面図である。
【図６】本発明の１実施例となる容器と遮光板の断面図
である。
である。
【図７】本発明の１実施例となる容器と遮光板の全体図
である。
である。
【図８】本発明の１実施例となるマルチプレートを用い
た発光量の１測定例である。
た発光量の１測定例である。
１．組織または細胞 ２．培養液 ３．光センサーおよび遮光板 １１．マルチプレート １２．蓋 １３．容器 １４．遮光板 １５．側壁 １６．底部 １７．不透明な材質の部材 １８．透明な材質の部材 １９．遮光性塗料
Claims (2)
- 【請求項１】 発光現象を用いた標識物質の測定と、顕
微鏡観察を可能にするために、容器の側壁を構成する部
材、あるいは容器の側壁の外側または内側を被覆する部
材が不透明であり、かつ該容器の底部を構成する部材が
透明であることを特徴とする培養用容器。 - 【請求項２】 容器の底部外面に脱着可能で、容器の底
部を遮光しうる不透明な部材を取り付ける請求項１記載
の培養用容器。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34106595A JPH09173049A (ja) | 1995-12-27 | 1995-12-27 | 培養用容器 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34106595A JPH09173049A (ja) | 1995-12-27 | 1995-12-27 | 培養用容器 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09173049A true JPH09173049A (ja) | 1997-07-08 |
Family
ID=18342927
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34106595A Pending JPH09173049A (ja) | 1995-12-27 | 1995-12-27 | 培養用容器 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09173049A (ja) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013099286A (ja) * | 2011-11-08 | 2013-05-23 | Dainippon Printing Co Ltd | 細胞培養容器 |
| US20140322806A1 (en) * | 2013-04-30 | 2014-10-30 | Corning Incorporated | Spheroid cell culture well article and methods thereof |
| JP2017042094A (ja) * | 2015-08-26 | 2017-03-02 | 学校法人神奈川大学 | シャーレ型細胞培養容器 |
| JP2017116523A (ja) * | 2015-12-22 | 2017-06-29 | 閤康生物科技股▲ふん▼有限公司Ｂｉｏ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ． | サンプル収集素子およびその製造方法 |
| JP2020005553A (ja) * | 2018-07-06 | 2020-01-16 | ニプロ株式会社 | インキュベーションシステム及びインキュベータ |
| US11345880B2 (en) | 2017-07-14 | 2022-05-31 | Corning Incorporated | 3D cell culture vessels for manual or automatic media exchange |
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| US11613722B2 (en) | 2014-10-29 | 2023-03-28 | Corning Incorporated | Perfusion bioreactor platform |
| US11661574B2 (en) | 2018-07-13 | 2023-05-30 | Corning Incorporated | Fluidic devices including microplates with interconnected wells |
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| US11857970B2 (en) | 2017-07-14 | 2024-01-02 | Corning Incorporated | Cell culture vessel |
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| US11976263B2 (en) | 2014-10-29 | 2024-05-07 | Corning Incorporated | Cell culture insert |
-
1995
- 1995-12-27 JP JP34106595A patent/JPH09173049A/ja active Pending
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