JP2005519883A - 処理済み脂肪吸引細胞で患者を治療するためのシステムと方法 - Google Patents
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Abstract
Description
この出願は、2001年12月7日に提出した表題“処理済み脂肪吸引細胞と脂肪由来幹細胞のベッドサイド装置、システム及び使用”の米国仮出願第60/338,856号(参照によってそのすべての内容が本明細書に取り込まれる)の利益を主張する。
(発明の背景)
1.発明の分野
この発明は、一般的に脂肪組識由来の細胞に関し、さらに詳細には、脂肪由来幹細胞、脂肪由来幹細胞の使用方法、脂肪由来幹細胞を含有する組成物、並びに脂肪由来幹細胞を調製及び使用するためのシステムに関する。
再生医療は、正常な治癒機構の一部ではない仕方で、或いは正常な機構を人工的に増強することで体の再生機構を使用する、臨床的に目標とした様式で体の再生機構を利用することとして定義することができる。このプロセスの1つの規範となる例は、骨髄移植に見られ、造血幹細胞と前駆細胞をドナーから収集し、正常な造血再生機構が除去され、或いは実質的に欠失又は損なっているレシピエント中に置くことによって、レシピエントの造血能力を元に戻し又は再生する(Thomas 1994)。最近の臨床又は前臨床研究では、このアプローチは骨(Connolly 1998:Horwitz, Prockopら 1999;Horwitz, Prockopら 2001)、心臓(Fukuda 2001;Orlic, Kajsturaら 2001;Orlic, Kajsturaら 2001;Struer, Brehmら 2002)、及び肝臓(Avital, Inderbitzinら 2001)を含む組織を再生する(又は再生を試みる)研究によって、骨髄の非造血幹細胞成分に拡張されてきた。これら研究は、骨髄内における非造血幹細胞及び内皮前駆細胞の存在の検出に基づいている(Prockop, Aziziら 2000)(Pittenger, Mackayら 1999)(Shi, Rafiiら 1998;Carmeliet及びLuttun 2001)。
本発明は、治療的、構造的、又は美容的な利益を高め、生じさせ、又は維持するのに必要な添加剤と共にレシピエント内に直接置かれる脂肪組織から誘導される細胞を使用するための組成物、方法、及びシステムに関する。
本明細書で述べるいずれの特徴又は特徴の組合せも、いずれの該組合せに含まれる特徴が、文脈、この明細書、及び本技術の当業者の知識から明かなように相互に矛盾しないことを条件として本発明の範囲内に包含される。本発明のさらなる利点及び局面は、以下の詳細な説明で明らかになる。
以下、実施例が添付図面に示されている本発明の現在好ましい実施形態について詳細に言及する。可能な限り、同一又は同等の部分を言及するため図面と説明で同一又は同様の参照番号を使用する。図面は単純化した形態であり、正確な寸法でないことに留意すべきである。本明細書の開示に関しては、便宜と明瞭さだけの目的で、頂、底、左、右、上へ(up)、下へ(down)、上方(over)、上に(above)、下に(below)、下に(beneath)、後ろ(rear)及び前(front)のような方向を示す用語が添付図面について用いられる。このような方向を示す用語は、いかなる様式でも本発明の範囲を限定するものと解釈すべきでない。
本明細書で使用する場合、“脂肪組織の単位”は、脂肪組織の分離した或いは測定できる量を意味する。1単位の脂肪組織は、該単位の重量及び/又は体積を決定することで測定することができる。上で同定したデータに基づき、患者から除去したような1単位の処理済み脂肪吸引物は、少なくとも0.1%の細胞成分が幹細胞である細胞成分を有する。本明細書の開示に関しては、1単位の脂肪組織は患者から除去した脂肪組織の全量、又は患者から除去した脂肪組織の全量より少ない量を指す。従って、1単位の脂肪組織は、別単位の脂肪組織と組み合わせて、個々の単位の合計である重量又は体積を有する脂肪組織の単位を形成することができる。
本明細書で使用する場合、“幹細胞”は、1つ以上の特有機能を果たし、かつ自己複製能力を有する種々の他の細胞型に分化する可能性を有する多能性細胞を意味する。本明細書で開示される幹細胞のいくらかは多分化能性でありうる。
本明細書で使用する場合、“処理済み脂肪吸引物(processed lipoaspirate)”(PLA)は、成熟脂肪細胞と結合組織から活性細胞成分(例えば、幹細胞を含有する成分)を分離するために処理した脂肪組織を意味する。典型的に、PLAは、脂肪組織由来の細胞を洗浄かつ分離して得られる細胞ペレットを指す。ペレットは、典型的に、遠心容器の底に細胞が凝集するように、細胞の懸濁液を遠心分離機にかけることによって得る。
患者から除去した脂肪組織は、さらなる処理のために装置内に集められる。本明細書で論じるように、また一実施形態では、装置は、幹細胞及び/又は内皮前駆細胞を含む、処理した脂肪組織細胞集団の製造用組織を収集する目的のために設計され、かつその目的専用である。他の実施形態では、装置は抽出措置を行う医者によって組織収集用に典型的に使用されるいずれの従来型装置でもよい。
一実施形態では、例えば、米国特許第5,034,135号及び第5,234,608号に開示されているシステムのような連続流れスピニング膜システムなどを介して細胞集団を通過させて、細胞を濃縮し、コラゲナーゼを除去する。
上述の方法に加え、活性細胞集団をさらに精製するために適用できる多くの後洗浄法がある。これらの方法としては、ポジティブ選択(標的細胞を選択する)、ネガティブ選択(不要細胞の選択的除去)、又はその組合せが挙げられる。
抗体媒介ポジティブ選択実施形態は、細胞の固相支持体からの脱着を促す第3添加剤を含めることによって、ほとんど同様に達成できる。この実施形態では、酵素パパイン又はシモパパインを添加して抗体分子を切断し、かつ固相支持体から細胞を離すことができる(Civin, C.I.ら, ポジティブ幹細胞選択基礎科学, Prog Clin Biol Res, 1990. 333(38):p.387-401;考察402)。別の代替は、Tseng Lawら,米国特許第6,017,719号に記載されているような、抗体に対する結合性について細胞表面抗原と競合する特異的ペプチドの使用である。
しわの低減、器官量の増強などを含む物理的特徴を増強又は改良することによってのような美容目的で患者に幹細胞を投与することもできる。
この装置内の処理への一般的アプローチは、手動の細胞処理についてのこの開示の他の箇所で述べたのと同一パラメーターを使用するだろう。
taf/dynapage.taf?file=/ncb/biotech/v18/n9/full/nbt0900_959.html
taf/dynapage.taf?file=/ncb/biotech/v18/n9/abs/nbt0900_959.html;Gao, J.ら,ラット骨髄由来の間充織幹細胞による骨軟骨性複合移植片の組織操作製作, Tissue Eng, 2001. 7(4):p.363-71;Ohgushi, H.及びA.I. Caplan, 幹細胞技術とバイオセラミックス:細胞から遺伝子操作,J Biomed Mater Res, 1999. 48(6):p.913-27;Caplan, A.I.及びV.M. Goldberg, 骨格組織の組織操作再生の原理,Clin Orthop, 1999(367 Suppl):p.S12-6)との混合を含む細胞のさらなる操作を可能にする追加成分を添加することができる。後処理操作は、細胞培養(Caplan, A.I.及びS.P. Bruder,間充織幹細胞:21世紀の分子医学用基礎単位,Trends Mol Med, 2001. 7(6):p.259-64;Petite,既出;Zuk, P.A.ら,ヒト脂肪組織由来の多血統細胞:細胞を基礎とした療法の含意)、遺伝子伝達(Luskey, B.D.ら, マウス造血幹細胞及び骨髄間質細胞中への遺伝子伝達,Ann N Y Acad Sci, 1990. 612(398):p.398-406;Grompe, M.ら, 遺伝性I型チロシン血症のマウスモデルでの治療試験:進行レポート,J Inherit Metab Dis、1998. 21(5):p.518-31;Gazit, D.ら,操作した多分化能性間充織細胞は骨の再生で統合かつ分化する:新規な細胞媒介遺伝子療法,J Gene Med, 1999. 1(2):p.121-33;Mosca, J.D.ら,遺伝子送達用媒体としての間充織幹細胞,2000(379 Suppl):p.S71-90)、又はさらなる細胞精製(Greenberg, A.W.及びD.A. Hammer,差次的回転付着によって媒介される細胞分離,Biotechnol Bioeng, 2001. 73(2):p.111-24;Mainwaring, G.及びA.F. Rowley, 密度勾配遠心分離及びカバーガラスへの差次的付着を用いた小型サメ(Scyliorhinus canicula)の白血球の分離,Cell Tissue Res, 1985. 241(2):p.283-90;Schweitzer, C.M.ら,ヒト骨髄内皮細胞の単離と培養,Exp Hematol, 1995. 23(1):p.41-8)を含む。このような機能を実行するための機構は、図4に示される装置内に組み込むことができ、或いは別個の装置内に組み込んでもよい。
以下の実施例は、この技術を適用しうる特定の状況及びセッティングを示すために提供されたものであり、本発明及びこの開示に包含される特許請求の範囲を制限することを意図していない。
自家脂肪転移は、同一個体内のある位置から脂肪組織を収集し、別の位置に再移植することを含む比較的普通の美容及び構造的措置である(Coleman, S.R.(1995),“脂肪移植片の長期生存:対照つき実証”, Aesthetic Plast Surg 19(5):421-5;Coleman, S.R.(2001),“構造的脂肪移植片:理想のフィラー?”Clin Plast Surg 28(1):111-9;Coleman, W.P.,3版(1991),“自家脂肪移植”,Plast Reconstr Surg 88(4):736)。しかし、上述したように、この措置は、移植した物質が全体的又は部分的に再吸収され、或いは瘢痕組織によって置換されるといった矛盾する移植によって損なわれることが多い(Eremia, S.及びN. Newman(2000),“自家脂肪移植後の長期追跡検査:最少2回治療の最後の治療を受けて少なくとも12カ月後の116人の患者の結果の分析”, Dermatol Surg 26(12):1150-8)。新しい血管が生成して移植片を養うのにかかる時間中、機能の損失の少なくとも一部は、移植した脂肪組織の壊死に起因しうる。従って、筋肉基盤のような高度に血管性の領域内に移植した組織は、あまりよく潅流されない組織内に移植した場合より良い移植を示す(Guerrerosantos, J., A. Gonzalez-Mendozaら(1996),“筋肉内の遊離脂肪移植片の長期生存:ラットでの実験的研究”, Aesthetic Plast Surg 20(5):403-8)。
この技術の臨床適用では、この開示によって誘導される処理済み脂肪吸引物を調製し、上記開示どおりの無傷(非脱凝集)脂肪組織断片と混合する。脂肪組織と幹細胞の混合物を含む組成物は、輪郭欠陥の補正用の自家軟組織フィラーを供給するため(しわ、“ディヴォット(divots)”、あばた、及び大きい欠損)(Coleman,S.R.(2001),“構造的脂肪移植片:理想のフィラー?”,Clin Plast Surg 28(1):111-9)、又は尿道のような損傷構造に支持体を供給するため(Palma, P.C., C. L. Riccettoら(1997),“圧迫尿失禁のための反復脂肪注入”, J Endourol 11(1):67-70;Lee, P.E., R. C. Kungら(2001).“女性の圧迫尿失禁の治療としての尿道周囲自家脂肪注入:ランダム化二重盲検対照つき試験”, J Urol 165(1):153-8)レシピエント内に移植することができる。
アリルアルコールによる腹腔内注射によって誘発された肝臓障害は、門脈周囲の急性肝臓損傷の一般モデルである(Lee, J. H., Z. Ilicら(1996),“マウスにおけるアリルアルコール誘発肝臓壊死後の修復の細胞キネティクス”, Int J Exp Pathol 77(2):63-72;Werlich, T., K. J. Stillerら(1999),“肝臓再生の幹細胞概念に関する実験的研究II”, Exp Toxicol Pathol 51(1):93-8;Yin, L., D. Lynchら(1999),“アリルアルコールによって誘発された門脈周囲損傷に対するラット肝臓の復旧反応における異なる細胞型の関与”, J Hepatol 31(3):497-507)。このモデルは、肝臓再生に重大な意味をもつ幹細胞集団の存在を実証するために使用されてきた(Yavorkovsky, L., E. Laiら(1995),“アリルアルコールによって誘発された門脈周囲壊死に対するラット肝臓の復旧反応における小さい門脈内幹細胞の関与”,Hepatology 21(6):1702-12;Werlich, T., K. J. Stillerら(1999),“肝臓再生の幹細胞概念に関する実験的研究II”,Exp Toxicol Pathol 51(1):93-8)。我々は、Swiss Websterマウスのこのモデルを改変し、アルコール誘発損傷後処理済み脂肪吸引物を注入した。動物を1週間で犠牲にし、肝臓を除去し、秤量し、かつ組織学検査用に調製した。結果(図6及び7)は、処理済み脂肪吸引物を受けた当該動物における肝臓重量が実質的に向上したことを示す。組織学分析は、白血球浸潤物又は肝臓の重量を異常に増やしうる他のいずれの機構の証拠もない、処理動物内の正常な組織構造を示した。
臨床セッティングでは、肝臓損傷のある患者は、この開示に従って抽出かつ処理した脂肪組織を有する。そして、処理済み脂肪吸引物を全身送達のため静脈内注射し、或いは肝循環系を通じて肝臓を標的にすることができる。
急性心筋梗塞(心臓発作)は心筋に対する虚血性損傷という結果になる。損傷した組織の再潅流及び心筋組織の再生によって組織損傷を最小にすることができる(Murry, C. E., R. W. Wisemanら(1996),“心筋壊死の修復のための骨格筋芽細胞移植術”, J Clin Invest 98(11):2512-23;Orlic, D., J. Kajsturaら(2001),“骨髄細胞は閉塞した心筋を再生する”, Nature 410(6829):701-5;Rajnoch, C.、J. C. Chachquesら(2001),“細胞療法は心筋機能障害を逆転させる”, J Thorac Cardiovasc Surg 121(5):871-8;Struer, B. E., M. Brehmら(2002),“ヒトの閉塞した心筋の自家冠内単核骨髄細胞移植による修復”, Circulation 106(15):1913-8)。この開示で述べたベッドサイドアプローチは、骨髄収集に付随する病的状態なしで、より多くの数と高純度の細胞を供給できるという点で、再生細胞の潜在的に優れた起源を供給するだろう。
Horwitzらは、骨髄由来の幹細胞が、非造血性障害、特に骨形成不全症の患者に対して臨床的利益を提供できることを実証した(Horwitz, E. M., D. J. Prockopら(1999),“骨形成不全症の子供における骨髄由来間充織細胞の移植可能性及び治療効果”, Nat Med 5(3):309-13;Horwitz, E. M., D. J. Prockopら(2001),“重篤な骨形成不全症の子供の骨髄移植に対する臨床反応”Blood 97(5):1227-31)。これら研究では、著者は、培養内で細胞を成長させてMSC成分を膨張させて精製することによって、骨髄内の非造血性幹細胞の低い数と頻度を補うことを試みた。しかし、上述したように、培養内で細胞を成長させることは実質的な技術的及び臨床的な問題を伴い、かつこの開示に従って処理した脂肪組織の、細胞培養を必要とせずに多数の幹細胞の起源を供給する可能性は患者ケアにおける強力な現実的改善を意味する。血縁でないドナーの使用はこの発明の範囲内であるが、このモデルでは、遺伝病(正常な遺伝子型又は無症候性保有者)によって影響を受けない適切に調和したドナー、好ましくは兄弟又は他の第1度の親類が、ドナー細胞の起源である。妥協した組織機能又は再生をもたらす遺伝病の患者内に注入するため細胞を脂肪組織から抽出する。例としては、限定するものではないが、骨形成不全症、デュシュネ筋ジストロフィー(及び他の筋ジストロフィー)、遺伝性網膜変性疾患、遺伝性チロシン血症、及び多くの遺伝病が挙げられる。
本明細書では、多くの出版物及び特許を引用した。引用した出版物及び特許はそれぞれその全体が参照によって本明細書に取り込まれる。
Claims (92)
- 患者の治療方法であって、以下の工程:
(a)組織除去システムを供給する工程;
(b)この組織除去システムを用いて、ある濃度の幹細胞を有する脂肪組織を前記患者から除去する工程;
(c)この脂肪組織の少なくとも一部を処理し、処理前の該脂肪組織の幹細胞の濃度以外の濃度の幹細胞を得る工程;及び
(d)この幹細胞を患者に投与する前に前記組織除去システムから除去せずに、該幹細胞を前記患者に投与する工程
を含む方法。 - 工程(b)で、前記脂肪組織を患者から前記組織除去システム内に方向づけ;
工程(c)で、前記脂肪組織を前記組織除去システム内で処理し;かつ
工程(d)で、前記幹細胞を前記組織除去システムから患者に投与する、
請求項1に記載の方法。 - 工程(b)が、除去すべき脂肪組織に近接して前記患者内にカニューレを挿入する工程と、前記患者から脂肪組織を吸引する工程の少なくとも1つを含む、請求項1に記載の方法。
- さらに以下の工程:
(e)前記患者から除去した前記脂肪組織をろ過して、非脂肪組織から脂肪組織を分離する工程
を含む、請求項1に記載の方法。 - 工程(e)が、脂肪組織を保持し、かつ非脂肪組織を通す大きさの多数の孔を有する容器に、前記除去した脂肪細胞を送達する工程を含む、請求項4に記載の方法。
- 工程(c)が、前記患者から除去した脂肪組織を分解して、該組織内に含まれる細胞を実質的に傷つけずに該組織を分解する工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 工程(c)が、前記脂肪組織を、細胞間接触を破壊する少なくとも1種の酵素と混合する工程を含む、請求項6に記載の方法。
- コラゲナーゼ、ディスパーゼ、リパーゼ、リベラーゼ H1、及びトリプシンから成る群より選択される酵素と前記脂肪組織を混合する、請求項7に記載の方法。
- 前記酵素は、除去しなければ前記脂肪組織上に残って該組織を完全に脱凝集させたであろう量の時間と比較して早期に該脂肪組織から除去される、請求項6に記載の方法。
- 工程(c)が、前記幹細胞は実質的に成熟脂肪細胞と結合組織がないように、前記除去した脂肪組織から該幹細胞を分離する工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 工程(c)が、遠心分離を含む、請求項10に記載の方法。
- 工程(c)が、スピニング膜フィルターを使用する工程を含む、請求項11に記載の方法。
- さらに以下の工程:
(e)遠心分離後、前記幹細胞を再懸濁させる工程
を含む、請求項11に記載の方法。 - 工程(c)が、前記脂肪組織を処理して、より高濃度の幹細胞を得る工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 工程(c)が、前記少なくとも一部の脂肪組織を分解して前記濃度の幹細胞を生成する工程を含み、かつ工程(d)が、前記濃度の幹細胞を、前記脂肪細胞の他の部分と結合させて、この結合物を前記患者に投与する工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも一部の脂肪組織の体積が、該脂肪組織の他の部分の体積と25%より多く異なる、請求項15に記載の方法。
- 前記少なくとも一部の脂肪組織の体積が、該脂肪組織の他の部分の体積と100%より多く異なる、請求項15に記載の方法。
- 前記分解工程が、1種以上の酵素によって達成され、該酵素は、除去しなければ前記少なくとも一部の脂肪組織上に残って該組織を完全に脱凝集させたであろう量の時間と比較して早期に該少なくとも一部の脂肪組織から除去される、請求項15に記載の方法。
- 工程(c)の後に、前記少なくとも一部の脂肪組織からの前記濃度の幹細胞を、該脂肪組織の他の部分と混合し、かつ工程(d)が、この混合物を患者に投与する工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記分解工程が、1種以上の酵素によって達成され、該酵素は、除去しなければ前記少なくとも一部の脂肪組織上に残って該組織を完全に脱凝集させたであろう量の時間と比較して早期に該少なくとも一部の脂肪組織から除去される、請求項19に記載の方法。
- 前記少なくとも一部の脂肪組織の体積が、該脂肪組織の他の部分の体積と50%より多く異なる、請求項19に記載の方法。
- 前記少なくとも一部の脂肪組織の体積が、該脂肪組織の他の部分の体積と150%より多く異なる、請求項19に記載の方法。
- さらに以下の工程:
(e)前記患者由来の前記幹細胞の拒絶反応を阻害する免疫抑制剤を投与する工程
を含む、請求項1に記載の方法。 - 工程(e)が、シクロスポリン、ミオフェニレートモフェティル、ラパマイシン、抗-胸腺細胞グロブリン、及び前記患者のB細胞とT細胞の副刺激を減少させる薬剤から成る群より選択される免疫抑制剤を投与する工程を含む、請求項23に記載の方法。
- さらに以下の工程:
(e)前記患者に投与したときの前記幹細胞の分化を特定するため、該患者に細胞分化因子を投与する工程
を含む、請求項1に記載の方法。 - 工程(c)が、前記少なくとも一部の脂肪組織を部分的にだけ脱凝集させる工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 工程(c)が、前記脂肪組織を処理して複数部分の脂肪組織にする工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 工程(c)が、前記複数部分の脂肪組織の少なくとも一部分を部分的にだけ脱凝集させる工程を含む、請求項27に記載の方法。
- 前記部分の少なくとも二部分の脂肪組織を一緒に混合する工程を含む、請求項27に記載の方法。
- 前記部分の少なくとも一部分の脂肪組織を処理して、幹細胞を含有するペレットを形成する、請求項27に記載の方法。
- 工程(d)が、前記脂肪組織を除去した前記患者に前記幹細胞を投与する工程を含む、請求項1に記載の方法。
- さらに以下の工程:
(e)前記脂肪組織から得た前記幹細胞を冷却する工程
を含む、請求項1に記載の方法。 - さらに以下の工程:
(e)前記脂肪組織から得た前記幹細胞の一部分を前記組織除去システムから除去する工程;及び
(f)前記組織除去システムから除去した前記部分の幹細胞を保存する工程
を含む、請求項1に記載の方法。 - 工程(f)が、前記システムから除去した前記部分の幹細胞を凍結保存する工程を含む、請求項33に記載の方法。
- 前記幹細胞を患者に投与して病気を治療する、請求項1に記載の方法。
- 前記幹細胞を患者に投与して、該患者の美容特徴を治療する、請求項1に記載の方法。
- 前記幹細胞を患者に投与して、骨関連障害、疾患、又は損傷、脂肪関連障害又は疾患;肝臓関連疾患、障害、又は損傷、心筋梗塞、腎臓病又は腎臓損傷;網膜疾患又は障害又は壊死;創傷治癒;骨格筋障害;軟骨及び関節修復;肺損傷;糖尿病;腸障害;及び神経系障害、疾患、又は損傷を治療する、請求項1に記載の方法。
- 工程(b)と(c)を自動化した、請求項1に記載の方法。
- さらに、(e)前記幹細胞を前記患者に投与した後に、体液と接触した前記組織除去システムの部分を処分する工程を含む、請求項1に記載の方法。
- 患者を治療するための組織除去システムであって、
(a)以下の部品:
(i)患者から除去した脂肪組織を受ける構造の組織収集入口ポート;及び
(ii)該容器内に配置され、患者から除去した脂肪組織を保持し、かつ該患者から除去した非脂肪組織を通す構造のフィルター
を含む組織収集容器、
(b)前記組織収集容器に連結され、前記脂肪組織から得た幹細胞を、該組織除去システムから除去せずに受ける混合容器であって、この中に含まれる前記幹細胞と混合するための少なくとも1種の添加剤を投与するための添加ポートを含む混合容器、及び
(c)前記混合容器内の幹細胞を患者に投与するために該組織収集システムから除去可能な構造の出口
を含むシステム。 - 前記組織収集入口ポートが、患者内に挿入されて該患者から脂肪組織を除去するカニューレに連結されている、請求項40に記載のシステム。
- 前記組織収集容器が、吸引装置に連結される構造の吸引ポートを含む、請求項40に記載のシステム。
- さらに、前記組織収集容器と前記混合容器との間に配置された細胞収集容器を含むので、前記幹細胞は、前記組織収集容器から前記混合容器に進む前に該細胞収集容器に進む、請求項40に記載のシステム。
- 前記細胞収集容器が、懸濁液内の前記幹細胞の該懸濁液の流体からの分離を容易にする細胞濃縮器を含む、請求項43に記載のシステム。
- 前記細胞収集容器がスピニング膜フィルターを含む、請求項43に記載のシステム。
- 前記細胞収集容器がフレキシブルバッグを含む、請求項43に記載のシステム。
- さらに、前記幹細胞を前記細胞収集容器から前記混合容器に通し、かつ少なくともその中に含まれる前記幹細胞より大きい物質の通過を妨げる構造の他のフィルターを含む、請求項43に記載のシステム。
- 前記他のフィルターが直径約200μm未満の多数の孔を含む、請求項47に記載のシステム。
- 前記他のフィルターが直径約20μm〜200μmの多数の孔を含む、請求項47に記載のシステム。
- 前記他のフィルターが前記細胞収集容器から間隔を置いて離れている、請求項47に記載のシステム。
- 前記他のフィルターが前記細胞収集容器の部品である、請求項47に記載のシステム。
- さらに、前記組織収集容器内に保持されている組織を前記混合容器に通すための前記組織収集容器から前記混合容器への導管を与える組織回収ラインを含む、請求項40に記載のシステム。
- さらに、該システム内の前記脂肪組織の除去と処理を自動化する構造の処理装置を含む、請求項40に記載のシステム。
- 前記組織収集容器が、吸引装置によって該容器に吸引力が加えられたとき、その形態を保持する本体を含む、請求項40に記載のシステム。
- 前記組織収集容器が剛性体を含む、請求項54に記載のシステム。
- 前記組織収集容器がフレキシブルバッグを含む、請求項54に記載のシステム。
- 第1フィルターが約20μm〜5mmの範囲の大きさの多数の孔を含む、請求項40に記載のシステム。
- さらに、前記組織収集容器内に含まれる物質の温度を調整する温度制御装置を含む、請求項40に記載のシステム。
- 前記温度制御装置が加熱器である、請求項58に記載のシステム。
- 前記温度制御装置が、前記組織収集容器に送達される流体の温度を調整するように配置される、請求項58に記載のシステム。
- 前記出口が前記混合容器の部品である、請求項40に記載のシステム。
- 前記出口が前記混合容器から間隔を置いて離れている、請求項40に記載のシステム。
- 前記出口が流体不浸透性膜である、請求項40に記載のシステム。
- 前記組織収集容器と、前記混合容器と、前記出口とが、外部環境に開放していない閉鎖系を画定する、請求項40に記載のシステム。
- さらに、前記出口に連結された、前記混合容器内に含まれる幹細胞を患者に送達するための組織投与装置を含む、請求項40に記載のシステム。
- 該組織除去システムの、体液に接触した部分が、1回の使用後に処分される構造である、請求項40に記載のシステム。
- 患者に投与するための組成物であって、以下の成分:
a)ある幹細胞濃度を有する第1部分の脂肪組織;
b)前記第1部分の脂肪組織より高い濃度の幹細胞を有する第2部分の脂肪組織
を含む組成物。 - 前記第1及び第2部分が一緒に混合される、請求項67に記載の組成物。
- 前記第2部分の脂肪組織が、実質的に成熟脂肪細胞と結合組織のない幹細胞を含む、請求項68に記載の組成物。
- 前記第2部分内の幹細胞の量が、該第2部分内に存在する細胞の総量の約0.1%より多い、請求項69に記載の組成物。
- 前記第2部分内の幹細胞の量が、該第2部分内の細胞の総量の約0.1%〜約100%である、請求項70に記載の組成物。
- 前記第2部分内の幹細胞の量が、該第2部分内の細胞の総量の約20%より多い、請求項70に記載の組成物。
- 前記混合した部分の幹細胞の濃度が、前記第1部分の幹細胞の濃度より少なくとも50%多い、請求項69に記載の組成物。
- 前記混合した部分の幹細胞の濃度が、前記第1部分の幹細胞の濃度より少なくとも2倍多い、請求項69に記載の組成物。
- 前記混合した部分の幹細胞の濃度が、前記第1部分の幹細胞の濃度より少なくとも3倍多い、請求項69に記載の組成物。
- さらに、前記幹細胞の分化を制御するための量で存在する細胞分化因子を含む、請求項67に記載の組成物。
- 前記第2部分が、少なくとも部分的に解離した脂肪組織を含む、請求項67に記載の組成物。
- 前記第2部分の脂肪組織が、少なくとも2つの別個部分の脂肪組織の組合せを含む、請求項67に記載の組成物。
- 前記第2部分の脂肪組織が、培養又は凍結保存以外によって処理された、請求項67に記載の組成物。
- 患者の治療方法であって、以下の工程:
a)脂肪組織除去システムを供給する工程;
b)この脂肪組織除去システムを用いて、ある濃度の幹細胞を有する脂肪組織を患者から除去する工程;
c)この脂肪組織を処理して、該脂肪組織内の幹細胞の濃度を高める工程;
d)この濃縮幹細胞を有する脂肪組織を、他の部分の脂肪組織と混合する工程;及び
e)この幹細胞の濃度が高められた脂肪組織を患者に投与する工程
を含む方法。 - 工程(b)が、前記患者から脂肪組織を吸引する工程と、前記患者から脂肪組織を切除する工程の少なくとも1つを含む、請求項80に記載の方法。
- 工程(c)が、さらに、ろ過した脂肪組織を脱凝集させ、次いでスピニング膜フィルターを使用する工程を含む、請求項81に記載の方法。
- 工程(c)が、前記脂肪組織を部分に分け、かつ少なくとも一部分の脂肪組織内の幹細胞の濃度を高める工程を含む、請求項80に記載の方法。
- 前記少なくとも一部分の脂肪組織を部分的にだけ脱凝集させる、請求項83に記載の方法。
- 工程(c)が、さらに、高められた濃度の幹細胞を有する前記少なくとも一部分の脂肪組織を、幹細胞の濃度が高められていない部分の脂肪組織と混合する工程を含む、請求項83に記載の方法。
- 高められた濃度の幹細胞を有する前記少なくとも一部分の脂肪組織が、凍結保存した組織から得られる、請求項85に記載の方法。
- 前記組織除去システムが閉鎖系であり、かつこの閉鎖系内で工程(c)が全体的に行われる、請求項80に記載の方法。
- 工程(b)及び(c)が自動化されている、請求項80に記載の方法。
- 工程(b)、(c)、及び(d)が自動化されている、請求項88に記載の方法。
- 前記少なくとも一部分の脂肪組織の体積が、該脂肪組織の他の部分の体積と25%より多く異なる、請求項80に記載の方法。
- 前記少なくとも一部分の脂肪組織の体積が、該脂肪組織の他の部分の体積と100%より多く異なる、請求項80に記載の方法。
- さらに、(f)前記患者に前記幹細胞を投与した後に、体液に接触した前記組織除去システムの部分を処分する工程を含む、請求項80に記載の方法。
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