BRPI0808509A2 - Derivados de 3-ciano-4-(4- tetra-hidropiran-fenil)-piridin-2-ona - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOS DE 3-CIANO*4-(4- TETRA-HIDROPIRAN-FENIL)-PIRIDIN-2-ONA".

Campo da Invenção

A presente invenção refere-se a novos derivados de piridin-2- ona os quais são moduladores alostéricos positivos do receptor do receptor de glutamato metabotrópico do subtipo 2 ("mGluR2") e os quais são úteis para o tratamento ou prevenção de distúrbios neurológicos e psiquiátricos associados à disfunção de glutamato e doenças nas quais o subtipo mGluR2 de receptores metabotrópicos está envolvido. A invenção é também dirigida à composições farmacêuticas compreendendo tais compostos, a processos para preparar tais compostos e tais composições e ao uso de tais compostos para a prevenção ou tratamento de distúrbios e doenças neurologias e psiquiátricas nas quais mGluR2 está envolvido.,

Antecedentes da Invenção

O glutamato é o principal neurotransmissor de aminoácido no sistema nervoso central de mamífero. O glutamato exerce um papel principal em numerosas funções biológicas, tais como aprendizado e memória, mas também percepção sensória, desenvolvimento de plasticidade sináptica, controle motor, respiração e regulação de função cardiovascular. Além disso, o glutamato está no centro de diversas doenças neurológicas e psiquiátricas diferentes, onde há um desequilíbrio na neuretransmissão glutamatérgica.

O glutamato media a neurotransmissão sináptica através da ativação de canais de receptores de glutamato ionotrópicos (iGluRs) e dos receptores de NMDA, AMPA e cainato, os quais são responsáveis pela rápida transmissão excitatória.

Além disso, o glutamato ativa receptores de glutamato metabotrópicos (mGluRs), os quais têm um papel mais modulatório que contribui para a sintonização fina de eficácia sináptica.

O glutamato ativa os mGluRs através de ligação ao grande domínio amino terminal extracelular do receptor, aqui denominado o sítio de ligação ortostérica. Essa ligação induz a uma alteração conformacional no receptor, a qual resulta na ativação da proteína G e vias de sinalização intracelulares.

O subtipo mGluR2 é negativamente acoplado à ciclase de adeniIato via ativação de proteína Gai e sua ativação leva à inibição de liberação de glutamato na sinapse. No sistema nervoso central (CNS), receptores de 5 mGluR2 são abundantes principalmente através do córtex, regiões talámicas, bulbo olfatório acessório, hipocampo, amídala, caudado-putamen e nucleus accumbens.

Foi mostrado, em experimentos clínicos, que a ativação de mGluR2 é eficaz para tratar distúrbios de ansiedade. Além disso, foi mostrado, 10 em vários modelos animais, que a ativação de mGluR2 é eficaz, assim, representando uma nova abordagem terapêutica potencial para o tratamento de esquizofrenia, epilepsia, vício/dependência de droga, mal de Parkinson, dor, distúrbios do sono e doença de Huntington.

Até o momento, a maioria das ferramentas farmacológicas disponíveis que objetivam mGluRs são Iigantes ortostéricos os quais ativam vários membros da família, uma vez que eles são análogos estruturais de glutamato.

Uma nova estratégia para desenvolvimento de compostos seletivos que atuam em mGluRs é identificar compostos que atuam através de mecanismos alostéricos, modulando o receptor através de ligação a um local diferente do sítio de ligação ortostérico altamente conservado.

Moduladores alostéricos positivos de mGluRs têm surgido recentemente como novas entidades farmacológicas que oferecem essa alternativa atraente. Vários compostos foram descritos como moduladores alostéricos positivos de mGluR2.

O W02004/092135 (NPS & Astra Zeneca), W02004/018386, W02006/014918 e W02006/015158 (Merck), W02001/56990 (Eli Lilly) e W02006/030032 (Addex & Janssen Pharmaceutica) descrevem, respectivamente, derivados de fenil sulfonamida, acetofenona, indanona, piridilmetil 30 sulfonamida e piridinona como moduladores alostéricos positivos de mGluR2. Nenhum dos compostos especificamente descritos é estruturalmente relacionado aos compostos da invenção. O W02007/104783 descreve derivados de 3-ciano-piridona 1,4- dissubstituídos que são moduladores alostéricos positivos de receptores metabotrópicos do subtipo 2 ("mGluR2").

Foi demonstrado que tais compostos não ativam o receptor em 5 si. Antes, eles permitem que o receptor produza uma resposta máxima a uma concentração de glutamato a qual, em si, induz a uma resposta mínima. Análise mutacional demonstrou, inequivocadamente, que a ligação de moduladores alostéricos positivos de mGluR2 não ocorre no local ortostérico, mas antes em um local alostérico situado dentro da região transmembrana sete 10 do receptor.

Dados com animais sugerem que moduladores alostéricos positivos de mGluR2 têm efeitos em modelos de ansiedade e psicose similares àqueles obtidos com agonistas ortostéricos. Foi mostrado que moduladores alostéricos de mGluR2 são ativos em modelos de temor potencializado pelo 15 medo e hipertermia induzida por estresse de ansiedade. Além disso, foi mostrado que tais compostos são ativos na reversão de hiperlocomoção induzida por cetamina ou anfetamina e na reversão de ruptura induzida por anfetamina de inibição pré-pulso dos modelos de efeito de temor acústico de esquizofrenia (J. Pharmacol. Exp. Ther. 2006, 318, 173-185; Psychopharmacology 20 2005, 179, 271-283).

Estudos recentes com animais revelaram ainda que o modulador alostérico positivo seletivo do receptor de glutamato metabotrópico do subtipo 2 bifenil-indanona (BINA) bloqueia um modelo de psicose com fármaco alucinógico, sustentando a estratégia de objetivação de receptores mGluR2 25 para o tratamento de disfunção glutamatérgica em esquizofrenia (Mol. Pharmacol. 2007, 72, 477-484).

Moduladores alostéricos positivos permitem a potencialização da resposta ao glutamato, mas também foi mostrado que eles potencializam a resposta a agonistas de mGluR2 ortostérico, tais como LY379268 ou 30 DCG-IV. Esses dados fornecem evidência para ainda outra nova abordagem terapêutica para tratar as doenças neurológicas e psiquiátricas acima mencionadas envolvendo mGluR2, a qual usaria uma combinação de um moduIador alostérico positivo de mGluR2 junto com um agonista ortostérico de mGluR2.

central de piridina-2-ona substituída na posição 3 por ciano e na posição 4 5 por fenila opcionalmente substituída a qual, por sua vez, é substituída por fenila na posição 4, via um ligante, por tetra-hidropirano opcionalmente substituído. Os presentes compostos são moduladores alostéricos positivos potentes de mGluR2.

Descrição da Invenção 10 A invenção refere-se a compostos tendo atividade moduladora

do receptor 2 de glutamato metabotrópico. A presente invenção proporciona um composto de acordo com a fórmula (I):

incluindo qualquer forma estereoquimicamente isomérica das mesmas, em que:

20 ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A presente invenção também se refere ao uso de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo para a produção de um medicamento para o tratamento ou prevenção, em particular para tratamento, de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento 25 ou prevenção da qual é realizado ou facilitado pelo efeito neuromodulatório de um modulador alostérico de mGluR2, em particular um modulador alostérico positivo.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I):

Os presentes compostos são caracterizados por uma porção

15

Ri é C^alquila ou C1-Salquila substituída por C3.7Cidoalquila; R2 é hidrogênio, halo ou trifluorometila;

R3 é hidrogênio ou Ci^alquila substituída por hidroxila;

X é O ou NH;

n é um inteiro do valor 1 ou 2; incluindo qualquer forma estereoquimicamente isomérica da mesma, em que:

Ri é C4.6alquila ou Ci-3alquila substituída por C3-7Cicloalquila;

R2 é hidrogênio, halo ou trifluorometila;

R3 é hidrogênio ou Ci^alquila substituída por hidroxila;

X é O ou NH;

n é um inteiro do valor 1 ou 2; ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; contanto que o composto seja outro que não:

-R1 R2 -R3 -XH -H V 2-F -H "O'' 2-F -H ''N'* H 3-F -H '"N"' M 3-CI -H ''N'' H Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos

de fórmula (I) em que R1 é C4.6alquila, em particular C4.5alquila tal como, por exemplo, 1-butila, 2-metil-1-propila, 3-metil-1-butila; em particular 1-butila ou

3-metil-1-butila.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) em que R1 é C1-Salquila substituída por C3-7Cicloalquila, em particular ciclopropilmetila ou 2-(ciclopropil)-1 -etila, mais particularmente ciclopropilmetila.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que R2 é hidrogênio.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que R2 é halo, em particular flúor ou cloro.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que R2 é trifluorometila.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que R3 é hidrogênio.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que R3 é Ci-4alquila substituída por hidroxila; em particular em que R3 é CH2OH.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que X é O.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que X é NH.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que n é 1.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos

de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que n é 2,

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que n é 1 e R2 é outro que não hidrogênio e o referido R2 está colocado na posição meta comparado com a porção de piridinona. Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou, sempre que possível, qualquer subgrupo dos mesmos, conforme mencionado acima como uma modalidade, em que n é 1 e R2 é outro que não hidrogênio e o referido R2 está colocado na posição orto com5 parado com a porção de piridinona.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I), em que Ri é C^alquila, em particular 1-butila ou 3-metil-1- butila; ou Ci.3alquila substituída por C3.7cicloalquila, em particular ciclopropilmetila ou 2-(ciclopropil)-1-etila;

10 R2 é hidrogênio, flúor, cloro ou trifluorometila;

R3 é hidrogênio;

n é 1.

Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) selecionados de:

-H1 K1 -R, -X3-F -H ''N'' H 3-CI -H H 3-CP, -H 3-CI -H ’0 3-Ct -H ''O'' J-Cl -H H 3-CF, -H H H -H vN'* H 2-F -H 'O'' 2-F ---H '■‘Η'' H 3-F -H ''N'' M 3-CI -H 'N' H 15 ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo. Uma modalidade da presente invenção são aqueles compostos de fórmula (I) selecionado de:

-R1 R1 -X3-F -H '''W H 3-0 -H H -'"sV 3-CFj -H 3-CI -H 'o"‘ 3-CI -H ’o'’ ^A 3-CI -H Ύ ,^A 3 -CF, -H ''N'' H ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Conforme usado aqui antes ou aqui depois, a denominação Ci5 3alquila, como um grupo ou parte de um grupo, define um radical hidrocarboneto saturado, reto ou ramificado, tendo de 1 a 3 átomos de carbono, tais como metila, etila, 1-propila e 1 -metil-1 -etila. De preferência, Ci_3alquila representa metila.

Conforme usado aqui antes ou aqui depois, a denominação Ci4alquila, como um grupo ou parte de um grupo, define um radical hidrocarboneto saturado, reto ou ramificado, tendo de 1 a 4 átomos de carbono, tais como metila, etila, propila, 1-metil-1-etila, 1-butila, 2-metil-1-propila. De preferência, Ci-4alquila representa metila.

Conforme usado aqui antes ou aqui depois, a denominação C4. 6alquila, como um grupo ou parte de um grupo, define um radical hidrocarboneto saturado, reto ou ramificado, tendo de 4 a 6 átomos de carbono, tais como 1-butila, 2-metil-1 -propila, 1-pentila, 2-metil-1-butila, 3-metil-1-butila, 1- hexila e similares. De preferência, C4.6alquila representa 1-butila. Conforme usado aqui antes ou aqui depois, a denominação C4- ealquila, como um grupo ou parte de um grupo, define um radical hidrocarboneto saturado, reto ou ramificado tendo 4 ou 5 átomos de carbono, tais como 1-butila, 2-metil-1-propila, 1-pentila, 2-metil-1-butila, 3-metil-1 -butila e 5 similares.

Conforme usado aqui antes ou aqui depois, a denominação C3. 7Cidoalquila define um radical hidrocarboneto cíclico saturado tendo de 3 a 7 átomos de carbono, tais como ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila e ciclo-heptila. De preferência, C3-7Cidoalquila representa ciclopropila.

Conforme usado aqui antes ou aqui depois, a denominação halo

é genérica a flúor, cloro, bromo e iodo.

Para uso terapêutico, sais de compostos de fórmula (I) são aqueles em que o contra-íon é farmaceuticamente aceitável. Contudo, sais de ácidos e bases os quais não são farmaceuticamente aceitáveis também po15 dem encontrar uso, por exemplo, no preparo ou purificação de um composto farmaceuticamente aceitável. Todos os sais, quer farmaceuticamente aceitáveis ou não, são incluídos dentro do âmbito da presente invenção.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis sao definidos como compreendendo as formas de sal de adição de ácido não-tóxico terapeuticamente ativos que os compostos de acordo com a fórmula (I) são capazes de formar. Os referidos sais podem ser obtidos através de tratamento da forma de base dos compostos de acordo com a fórmula (I) com ácidos apropriados, por exemplo, ácidos inorgânicos, por exemplo, ácido hidro-hálico, em particular ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico e ácido fosfórico; ácidos orgânicos, por exemplo, ácido acético, ácido hidróxiacético, ácido propanóico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido malônico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido metanossulfônico, ácido etano-sulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido ciclâmico, ácido salicílico, ácido p-aminossalicílico e ácido pamóico.

Inversamente, as referidas formas de sal de ácido podem ser convertidas à forma de base livre através de tratamento com uma base apropriada.

Os compostos de acordo com a fórmula (I) contendo prótons ácidos podem também ser convertidos à suas formas de sal de base nãotóxico terapeuticamente ativas através de tratamento com bases orgânicas e 5 inorgânicas apropriadas. Formas de sal de base apropriadas compreendem, por exemplo, os sais de amônio, os sais de metal alcalino e alcalino-terroso, em particular sais de lítio, sódio, potássio, magnésio e cálcio, sais com bases orgânicas, por exemplo, os sais de benzatina, /V-metil-D-glucamina, hibramina e sais com aminoácidos, por exemplo, arginina e lisina.

Inversamente, as referidas formas de sal de base podem ser

convertidas às formas de ácido livre através de tratamento com um ácido apropriado.

As formas de sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis fórmula (I) são as formas de sal farmaceuticamente aceitáveis preferídas dos compostos de fórmula (I).

O termo solvato compreende as formas de adição de solvente, bem como os sais farmaceuticamente aceitáveis das mesmas, as quais os compostos de fórmula (I) sao capazes de formar. Exemplos de tais formas de adição de solvente são, por exemplo, hidratos, alcoolatos e similares.

Será apreciado que alguns dos compostos de fórmula (I) e seus

sais e solvatos podem conter um ou mais centros de quiralidade e existir como formas estereoquimicamente isoméricas.

O termo "formas estereoquimicamente isoméricas", conforme usado aqui antes, define todas as possíveis formas isoméricas que os com25 postos de fórmula (I) podem possuir. A menos que de outro modo mencionado ou indicado, a designação química de compostos denota a mistura de todas as possíveis formas estereoquimicamente puras, as referidas misturas contendo todos os diastereômeros e enantiômeros da estrutura molecular básica. Mas a invenção também abrange cada uma das formas isoméricas 30 individuais de fórmula (I) e seus sais ou solvatos, substancialmente isentos, isto é, associados a menos de 10%, de preferência menos de 5%, em particular menos de 2% e, ainda mais preferivelmente, menos de 1% dos outros isômeros. Assim, quando um composto de fórmula (I) é, por exemplo, especificado como (R), isso significa que o composto é substancialmente isento do isômero (S).

Em particular, centros estereogênicos podem ter a configuração 5 R ou S; substituintes sobre radicais (parcialmente) saturados cíclicos bivaIentes podem ter a configuração cis ou trans.

Seguindo as convenções de nomenclatura da CAS, quando dois centros estereogênicos de configuração absoluta conhecida estão presentes em um composto, um descritor Rou S é atribuído (baseado na regra de sequência de Cahn-Ingold-Prelog) ao centro quiral de número mais baixo, o centro de referência. A configuração do segundo centro estereogênico é indicada usando descritores relativos ou [R*,S*\, onde R* é sempre especificado como o centro de referência e [/?*,/?*] indica centros com a mesma quiralidade e [/?*,S*] indica centros de quiralidade diferente. Por exemplo, se o centro quiral com menor número no composto tem uma configuração Seo segundo centro é R, o descritor estéreo será especificado como S-[R*,S*|. Se "a" e "β" são usados: a posição do substituinte de maior prioridade sobre o átomo de carbono assimétrico no sistema de anel tendo o menor número de anel, está arbitrariamente sempre na posição "α" o plano mediano determinado pelo sistema de anel. A posição do substituinte de maior prioridade sobre o outro átomo de carbono assimétrico no sistema de anel (átomo de hidrogênio em compostos de acordo com a Fórmula (I)) com relação à posição do substituinte de maior prioridade sobre o átomo de referência é denominada "a", se ela está sobre o mesmo lado do plano mediano determinado pelo sistema de anel ou "β", se ela está sobre o outro lado do plano mediano determinado pelo sistema de anel.

Onde quer que usado aqui depois, o termo "compostos de fórmula (I)" ou qualquer subgrupo dos mesmos, se destina também a incluir suas formas estereoquimicamente isoméricas, seus sais e seus solvatos farmaceuticamente aceitáveis. De interesse especial são os referidos compostos de fórmula (I) os quais são estereoquimicamente puros.

Na estrutura da presente invenção, um elemento, em particular quando mencionado em relação a um composto de acordo com a fórmula (I), compreende todos os isótopos e misturas isotópicas desse elemento, seja que ocorrem naturalmente ou sinteticamente produzidos, com abundância natural ou em uma forma isotopicamente enriquecida. Em particular, , quan5 do hidrogênio é mencionado, ele é entendido como se referindo a 1H, 2H, 3H ou misturas dos mesmos; quando carbono é mencionado, ele é entendido como se referindo a 11C1 12C, 13C, 14C ou misturas dos mesmos; quando nitrogênio é mencionado, ele é entendido como se referindo a 13N, 14N, 15N ou misturas dos mesmos; quando oxigênio é mencionado, ele é entendido co10 mo se referindo a 14O, 15O, 160,170,18O ou misturas dos mesmos; e quando flúor é mencionado, ele é entendido como se referindo a 18F119F ou misturas dos mesmos. Os compostos de acordo com a invenção, portanto, também compreendem compostos com um ou mais isótopos de um ou mais elementos e misturas dos mesmos, incluindo compostos radioativos, também de15 nominados compostos radio-rotulados, em que um ou mais átomos não radioativos foram substituídos por um de seus isótopos radioativos. Em particular, o átomo radioativo é selecionado do grupo de hidrogênio, carbono, nitrogênio, enxofre, oxigênio e halogênio. De preferência, o átomo radioativo é selecionado do grupo de hidrogênio, carbono e halogênio. Em particular, o 20 isótopo radioativo é selecionado do grupo de 3H, 11C, 18F, 122I, 123I, 125I, 131I, 75Br1 76Br, 77Br e 82Br. De preferência, o isótopo radioativo é selecionado do grupo de 3H, 11C e 18F.

Sempre que usados aqui anteriormente ou aqui a seguir, aqueles substituintes podem ser selecionados, cada um independentemente, de uma lista de definições; todas as combinações as quais são pretendidas, são quimicamente possíveis.

As linhas desenhadas a partir de substituintes em sistemas de anel indicam que a ligação pode ser presa a qualquer um dos átomos adequados no anel.

Em geral, compostos de fórmula (I) podem ser preparados de

acordo com o Procedimento Experimental 1.

Procedimento experimental 1 Compostos de fórmula (I) podem ser preparados através de reação do intermediário de fórmula (II) em que Y representa um grupo adequado para acoplamento mediado por Pd com ácidos borônicos ou ésteres borônicos tais como, por exemplo, um halo ou triflato, com um intermediário de fórmula 5 (III) em que R4 e R5 representam hidrogênio ou Ci-4alquila ou em que R4 e R5 podem ser tomados juntos para formar, por exemplo, o radical bivalente de fórmula -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- ou -C(CH3)2C(CH3)2-, de acordo com o esquema de reação (1). A reação pode ser realizada em um solvente de reação inerte adequado tal como, por exemplo, 1,4-dioxano ou misturas de 10 solventes inerte tal como, por exemplo, 1,4-dioxano/DMF, na presença de uma base adequada tal como, por exemplo, NaHCO3 aquosa ou Na2CO3, um catalisador adequado tal como, por exemplo, um catalisador de complexo de Pd tal como, por exemplo, Pd(PPh3)4, sob condições térmicas tais como, por exemplo, aquecimento da mistura de reação a 150 0C sob irradiação 15 de micro-ondas durando, por exemplo, 10 minutos. No esquema de reação (1), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I) ou conforme definido aqui acima.

Esquema de reação (1)

invenção podem conter um átomo de carbono assimétrico. Formas estereoquimicamente isoméricas puras dos referidos compostos e referidos intermediários podem ser obtidas através da aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. Por exemplo, diastereoisômeros podem ser separados através de métodos físicos, tais como cristalização seletiva ou técnicas cro25 matográficas, por exemplo, distribuição contra corrente, cromatografia de líquido quiral e métodos similares. Enantiômeros podem ser obtidos a partir

OR,

N

Os compostos de fórmula (I) e alguns intermediários na presente de misturas racêmicas primeiro através de conversão das referidas misturas racêmicas com agentes de decomposição adequados tais como, por exemplo, ácidos quirais, em misturas de sais ou compostos diastereoméricos; então, separação física das referidas misturas de sais ou compostos diastere5 oméricos, por exemplo, através de cristalização seletiva ou técnicas cromatográficas, por exemplo, cromatografia de líquido e métodos similares; e, finalmente, conversão dos referidos sais ou compostos diastereoméricos separados aos enantiômeros correspondentes. Formas estereoquimicamente isoméricas puras também podem ser obtidas a partir das formas estereo10 quimicamente isoméricas puras dos intermediários e materiais de iniciação apropriados, contanto que as reações intervenientes ocorram estéreoespecificamente.

Uma maneira alternativa de separação das formas enantioméricas dos compostos de fórmula (I) e intermediários envolve cromatografia de líquido ou cromatografia em SCF (Fluido Supercrítico), em particular usando uma fase estacionária quiral.

Alguns dos intermediários e materiais de iniciação são compostos conhecidos e podem estar comercialmente disponíveis ou podem ser preparados de acordo com procedimentos conhecidos na técnica.

Os intermediários também podem ser preparados de acordo

com os procedimentos experimentais 2 a 11 abaixo.

Procedimento experimental 2

Intermediários de fórmula (II) em que Y representa halo, os referidos intermediários sendo representados pela fórmula (ll-a), podem ser pre25 parados através de reação de um intermediário de fórmula (IV) com um agente de halogenação adequado tal como, por exemplo, P(=0)Br3. A reação pode ser executada em um solvente de reação inerte adequado tal como, por exemplo, DMF, em uma temperatura moderadamente elevada tal como, por exemplo, 110 0C. No Esquema de reação (3), todas as variáveis são 30 conforme definido na fórmula (I).

Esquema de reacão (2) "agente de halogenação"

O

Procedimento experimental 3

Intermediários de fórmula (II) em que Y representa triflato, os

referidos intermediários sendo representados pela fórmula (ll-b), podem ser preparados através de reação do intermediário de fórmula (IV) com anidrido 5 tríflico (também denominado anidrido triflorometano sulfônico) de acordo com o esquema de reação (4). A reação pode ser executada em um solvente de reação inerte adequado tal como, por exemplo, diclorometano, na presença de uma base adequada tal como, por exemplo, piridina em uma temperatura baixa tal como, por exemplo, -78 °C. No esquema de reação (3), 10 todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I).

Esauema de reacão (3)

de procedimentos conhecidos na técnica através da reação de um interme15 diário de fórmula (V) com um reagente adequado para clivagem de metiléter tal como, por exemplo, NaOH1 em um solvente adequado tal como, por exemplo, água, em uma temperatura moderadamente alta tal como, por exemplo, 100 0C. No esquema de reação (4), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I).

Esquema de reação (4)

(IW»>

Procedimento experimental 4

Intermediários de fórmula (IV) podem ser preparados por meio

(V)

Procedimento experimental 5

(IV) Intermediários de fórmula (V) podem ser preparados por meio de procedimentos conhecidos na técnica através de reação de 4-metóxi-2-oxo1,2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila comercialmente disponível com um agente de alquilação de fórmula (VI) tal como, por exemplo, brometo de ciclopropil5 metila, de acordo com o esquema de reação (5). A reação pode ser executada em um solvente inerte tal como, por exemplo, acetonitrila, usando uma base adequada tal como, por exemplo, K2CO3 e, opcionalmente, um sal de iodo tal como, por exemplo, Kl, em uma temperatura moderadamente alta tal como, por exemplo, 120 0C. No esquema de reação (5), todas as variáveis 10 são conforme definido na fórmula (I) e Z é um grupo de condução adequado tal como, por exemplo, halo, por exemplo, bromo.

Esquema de reação (5)

V- V·--'

(V)

Procedimento experimental 6

Intermediários de fórmula (III) podem ser preparados por meio 15 de procedimentos conhecidos na técnica através da reação de um intermediário de fórmula (VII), em que halo pode representar cloro, bromo ou iodo, com uma fonte adequada de boro tal como, por exemplo, bis(pinacolato)diboro, na presença de um catalisador adequado tal como um catalisador de paládio, tal como, por exemplo, dicloreto de 1,1'20 bis(difenilfosfino)ferrocenopaládio (II), de acordo com o esquema de reação

(6). A reação pode ser executada em um solvente inerte tal como, por exemplo, diclorometano, na presença de um sal adequado tal como, por exemplo, acetato de potássio, em uma temperatura moderadamente alta tal como, por exemplo, 1100C, durando, por exemplo, 16 horas.

Alternativamente, intermediários de fórmula (III) também podem

ser preparados por meio de procedimentos conhecidos na técnica de troca de metal-halogênio e subsequente reação com uma fonte de boro apropriada a partir de intermediários de fórmula (VII). Assim, por exemplo, reação de um intermediário de fórmula (VII) com um composto de organolítio tal como, por exemplo, n-butil-lítio, em uma temperatura moderadamente baixa tal como, por exemplo, -40°C, em um solvente inerte tal como, por exemplo, THF, seguido por subsequente reação com uma fonte de boro apropriada tal como, por exemplo, trimetoxiborano.

No esquema de reação (6), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I) e R4 e R5 são conforme definido acima.

Esquema de reação (6)

JCT

Ri

(Vll)

Procedimento experimental 7

Intermediários de fórmula (VII) em que X representa NH e R3 representa hidrogênio, os referidos intermediários sendo representados pela fórmula (Vll-a), podem ser preparados por meio de procedimentos conhecidos na técnica através de reação de um intermediário de anilina de fórmula (Vlll-a) com tetra-hidro-4H-piran-4-ona de acordo com o esquema de reação

(7). A reação pode ser executada na presença de um agente de redução 15 adequado tal como, por exemplo, hidreto de sódio, em um solvente inerte tal como, por exemplo, 1,2-dicloroetano, em uma temperatura moderadamente baixa tal como, por exemplo, 25 0C durando, por exemplo, 3 dias. No esquema de reação (7), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I) e halo pode ser cloro, bromo ou iodo.

Esquema de reacão (7)

o

Il aminaçâo redutiva O^vI

' (fU 0 H (fU

(Vlll-a) (Vll-a)

Procedimento experimental 8

Intermediários de fórmula (VII) em que X representa O e R3 representa hidrogênio, os referidos intermediários sendo representados pela fórmula (Vll-b), podem ser preparados por meio de procedimentos conhecidos na técnica através de reação de um intermediário de fenol de fórmula (Vlll-b) com tetra-hidro-4-piranol de acordo com o esquema de reação (8). A reação pode ser executada na presença de uma fosfina tal como, por exemplo, trifenilfosfina e um agente de acoplamento adequado para acoplamentos 5 similares a Mitsunobu tal como, por exemplo, azodicarboxilato de di-tercbutila, em um solvente inerte tal como, por exemplo, diclorometano, em uma temperatura moderadamente baixa tal como, por exemplo, 25 0C durando, por exemplo, 2 horas. No esquema de reação (8), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I) e halo pode ser cloro, bromo ou iodo.

Esauema de reação (8)

Procedimento experimental 9

Intermediários de fórmula (VII) também pode ser preparados através de procedimentos conhecidos na técnica a partir de um intermediário similar à anilina de fórmula (IX) via uma reação do tipo Sandmeyer de acor15 do com o esquema de reação (9). No esquema de reação (9), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I) e halo pode ser cloro, bromo ou iodo.

Esauema de reacão (9)

NH; Reação tipo Sandmeyer ^a*0

procedimentos conhecidos na técnica a partir de um intermediário de nitro de fórmula (X) via redução do grupo nitro à função amino por meio de procedimentos conhecidos na técnica, tal como hidrogenação catalítica ou o uso de di-hidrato de cloreto de estanho(ll) como um agente de redução, de acordo

(VllW)J

(VIM»)

(RiJn

(K)

(Vll)

20

Procedimento experimental 10

Intermediários de fórmula (IX) podem ser preparados através de com o esquema de reação (10). No esquema de reação (10), todas as variáveis são conforme definido na fórmula (I) e halo pode ser cloro, bromo ou iodo.

Esquema de reacão (10)

Procedimento experimental 11

Intermediários de fórmula (X) podem ser preparados por meio de procedimentos conhecidos na técnica através da reação de um intermediário de fórmula (XI) com um intermediário de tetra-hidropiranila adequado de fórmula (XII) tal como, por exemplo, tetra-hidro-4-piranol, de acordo com o es10 quema de reação (11). A reação pode ser executada na presença de uma base adequada tal como, por exemplo, carbonato de césio, em um solvente inerte tal como, por exemplo, tetra-hidrofurano, em uma temperatura moderadamente alta tal como, por exemplo, 140 0C, durando, por exemplo, 16 horas. No esquema de reação (11), todas as variáveis são conforme definido 15 na fórmula (I) e halo pode ser cloro, bromo ou iodo.

Esquema de reação (11)

(Xl) (XIf) (X)

Farmacologia

Os compostos proporcionados pela presente invenção são moduladores alostéricos positivos de receptores de glutamato metabotrópicos, 20 em particular eles são moduladores alostéricos positivos de mGluR2. Os compostos da presente invenção não parecem se ligar ao sítio de reconhecimento de glutamato, o sítio do Iigante ortostérico, mas antes, a um sítio alostérico dentro da região transmembrana sete do receptor. Na presença de glutamato ou um agonista de mGluR2, os compostos da presente invenção aumentam a resposta de mGluR2. Espera-se que os compostos fornecidos na presente invenção tenham seu efeito no mGluR2 em virtude de sua capacidade de aumentar a resposta de tais receptores ao glutamato ou agonistas de mGluR2, intensificando a resposta do receptor. Consequentemente, a presente invenção se refere a um composto de acordo com a presente invenção para uso como um medicamento, assim como para o uso de um composto de acordo com a invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a invenção para a fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção, em particular tratamento, de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento ou prevenção da qual é realizado ou facilitado pelo efeito neuromodulatório de moduladores alostéricos de mGluR2, em particular moduladores alostéricos positivos do mesmo. A presente invenção também se refere a um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a invenção para uso na fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção, em particular tratamento, de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento ou prevenção da qual é realizado ou facilitado pelo efeito neuromodulatório de moduladores alostéricos de mGluR2, em particular moduladores alostéricos positivos do mesmo. A presente invenção também se refere a um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a invenção para tratamento ou prevenção, em particular tratamento, de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento ou prevenção da qual é realizado ou facilitado pelo efeito neuromodulatório de moduladores alostéricos de mGluR2, em particular moduladores alostéricos positivos do mesmo.

Também, a presente invenção se refere ao uso de um composto de acordo com a invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a invenção para a fabricação de um medicamento para tratamento, prevenção, alívio, controle ou redução do risco de vários distúrbios neurológicos e 30 psiquiátricos associados à disfunção de glutamato em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento ou prevenção do qual é realizado ou facilitado pelo efeito neuromodulatório de moduladores alostéricos positivos de mGluR2.

Onde a invenção é dita como se referindo ao uso de um composto ou composição de acordo com a invenção para a fabricação de um medicamento, por exemplo, para o tratamento de um mamífero, deve ser 5 entendido que tal uso deve ser interpretado, em determinadas modalidades, como um método, por exemplo, de tratamento de um mamífero compreendendo administração, a um mamífero que precisa do mesmo, por exemplo, tratamento, de uma quantidade eficaz de um composto ou composição de acordo com a invenção.

Em particular, os distúrbios neurológicos e psiquiátricos associa

dos à disfunção de glutamato incluem uma ou mais das seguintes condições ou doenças: distúrbios neurológicos e psiquiátricos agudos tais como, por exemplo, déficits cerebrais subsequentes à cirurgia de "bypass" e enxerto cardíaco, derrame, isquemia cerebral, trauma da coluna espinhal, trauma na 15 cabeça, hipóxia perinatal, ataque cardíaco, dano neuronal hipoglicêmico, demência (incluindo demência induzida pela AIDS), mal de Alzheimer, Coréia de Huntington, esclerose lateral amiotrófica, dano ocular, retinopatia, distúrbios cognitivos, mal de Parkinson induzido por fármaco e idiopático, espasmos musculares e distúrbios associados à espasticidade muscular, 20 incluindo tremores, epilepsia, convulsões, enxaqueca (incluindo dor de cabeça por enxaqueca), incontinência urinária, tolerância de substância, abstinência de substância (incluindo substâncias tais como, por exemplo, opiatos, nicotina, produtos de tabaco, álcool, benzodiazepinas, cocaína, sedativos, hipnóticos, etc.), psicose, esquizofrenia, ansiedade (incluindo distúrbio de 25 ansiedade generalizada, distúrbio do pânico e distúrbio obsessivo compulsivo), distúrbios de humor (incluindo depressão, mania, distúrbios bipolares), neuralgia trigeminal, perda de audição, zumbido, degeneração macular dos olhos, emese, edema cerebral, dor (incluindo estados agudos e crônicos, dor severa, dor intratável, dor neuropática e dor pós-traumática), discinesia tar30 dia, distúrbios do sono (incluindo narcolepsia), distúrbio de déficit de atenção/hiperatividade e distúrbio de conduta.

Em particular, a presente invenção se refere ao uso de um composto de fórmula (I) para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção, em particular para tratamento, de um distúrbio do sistema nervoso central selecionado do grupo de distúrbios de ansiedade, distúrbios psicóticos, distúrbios de personalidade, distúrbios relacionados à substância, 5 distúrbios de alimentação, distúrbios de humor, enxaqueca, epilepsia ou distúrbios convulsivos, distúrbios da infância, distúrbios cognitivos, neurodegeneração, neurotoxicidade e isquemia.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é distúrbio de ansiedade selecionado do grupo de agorafobia, distúrbio de ansiedade generalizado (GAD), distúrbio obsessivo-compulsivo (OCD), distúrbio de pânico, distúrbio de estresse pós-traumático (PTSD), fobia social e outras fobias.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio psicótico selecionado do grupo de esquizofrenia, distúrbio ilusório, distúrbio esquizoafetivo, distúrbio esquizofreniforme e distúrbio psicótico induzido por substância.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio de personalidade selecionado do grupo de distúrbio de personalidade obsessivo-compulsivo e distúrbio esquizoide, esquizotípico.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é um dis

túrbio relacionado à substância selecionado do grupo de abuso de álcool, dependência de álcool, abstinência de álcool, delírio por abstinência de álcool, distúrbio psicótico induzido por álcool, dependência de anfetamina, abstinência de anfetamina, dependência de cocaína, abstinência de cocaína, 25 dependência de nicotina, abstinência de nicotina, dependência de opoide e abstinência de opioide.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio de alimentação selecionado do grupo de anorexia nervosa e bulimia nervosa.

De preferência, o dispositivo do sistema nervoso central é um

distúrbio do humor selecionado do grupo de distúrbios bipolares (I & II), distúrbio ciclotímico, depressão, distúrbio distímico, grande distúrbio depressivo e distúrbio de humor induzido por substância.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é enxaqueca.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é epilep5 sia ou um distúrbio convulsivo selecionado do grupo de epilepsia nãoconvulsiva generalizada, epilepsia convulsiva generalizada, estado de pequeno mal epiléptico, estado de grande mal epiléptico, epilepsia parcial com ou sem prejuízo da consciência, espasmos infantis, epilepsia parcial contínua e outras formas de epilepsia.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é distúrbio

de déficit de atenção/hiperatividade.

De preferência, o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio cognitivo selecionado do grupo de delírio, delírio persistente induzido por substância, demência, demência em virtude de doença pelo HIV, de15 mência em virtude de doença de Huntington, demência em virtude de mal de Parkinson, demência do tipo Alzheimer, demência persistente induzida por substância e lesão cognitiva branda.

Dos distúrbios mencionados acima, o tratamento de ansiedade, esquizofrenia, enxaqueca, depressão e epilepsia são de importância particular.

No momento, a quarta edição do Diagnostic & Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-IV) da American Psychiatric Association proporciona uma ferramenta diagnostica para a identificação dos distúrbios descritos aqui. Aqueles versados na técnica reconhecerão que existem nomencla25 turas, nosologias e sistemas de classificação alternativos para distúrbios neurológicos e psiquiátricos descritos aqui e que esses evoluem com o progresso médico e científico.

Em virtude do fato de tais moduladores alostéricos positivos de mGluR2, incluindo os compostos de fórmula (I), intensificarem a resposta de mGluR2 ao glutamato, é uma vantagem que os presentes métodos utilizem glutamato endógeno.

Em virtude do fato de que os moduladores alostéricos positivos de mGluR2, incluindo compostos de fórmula (I), intensificarem a resposta de mGluR2 a agonistas, deve ser entendido que a presente invenção se estende ao tratamento de distúrbios neurológicos e psiquiátricos associados à disfunção de glutamato através de administração de uma quantidade eficaz 5 de um modulador alostérico positivo de mGluR2, incluindo compostos de fórmula (I), em combinação com um agonista de mGluR2.

Os compostos da presente invenção podem ser utilizados em combinação com um ou mais de outros fármacos no tratamento, prevenção, controle, alívio ou redução do risco de doenças ou condições para as quais 10 os compostos de fórmula (I) ou os outros fármacos podem ter utilidade, onde a combinação dos fármacos juntos é segura ou mais eficaz do que o fármaco sozinho.

Composições farmacêuticas

A invenção também se refere a uma composição farmacêutica 15 compreendendo um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável e, como ingrediente ativo, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a invenção, em particular um composto de acordo com a fórmula (I), incluindo uma forma estereoquimicamente isomérica do mesmo ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Os compostos de acordo com a invenção, em particular os com

postos de acordo com a fórmula (I), incluindo uma forma estereoquimicamente isomérica do mesmo ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável dos mesmos ou qualquer subgrupo ou combinação dos mesmos pode ser formulada em várias formas farmacêuticas para fins de administração. 25 Como composições apropriadas, podem ser citadas todas as composições usualmente empregadas para fármacos sistemicamente administrados.

Para preparar as composições farmacêuticas da presente invenção, uma quantidade eficaz do composto em particular, opcionalmente na forma de sal, como o ingrediente ativo, é combinada em mistura íntima com 30 um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável, veículo ou diluente o qual pode tomar uma ampla variedade de formas, dependendo do preparado desejado para administração. Essas composições farmacêuticas são desejáveis em uma forma de dosagem unitária adequada, em particular para administração oralmente, retalmente, percutaneamente, através de injeção parenteral ou através de inalação. Por exemplo, no preparo das composições na forma de dosagem oral, qualquer um dos meios farmacêuticos usuais 5 pode ser empregado tal como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e similares no caso de preparados líquidos orais tais como, por exemplo, suspensões, xaropes, elixires, emulsões e soluções; ou veículos sólidos tais como, por exemplo, amidos, açúcares, caulim, diluentes, lubrificantes, aglutinantes, agentes de desintegração e similares no caso de pós, pílulas, cáp10 sulas e comprimidos. Em virtude da facilidade de administração, administração oral é preferida e comprimidos e cápsulas representam as formas de unidade de dosagem oral mais vantajosas, caso no qual veículos farmacêuticos sólidos são, obviamente, empregados. Para composições parenterais,

o veículo usualmente compreenderá água estéril, pelo menos em grande parte, embora outros ingredientes, por exemplo, para auxiliar na solubilidade, possam ser incluídos. Soluções injetáveis, por exemplo, podem ser preparadas, nas quais o veículo compreende solução salina, solução de glicose ou uma mistua de saliva e solução de glicose. Suspensões injetáveis também podem ser preparadas em cujo caso veículos líquidos apropriados, agentes de suspensão e outros podem ser empregados. Também estão incluídas preparações na forma sólida que se destinam a ser convertidos, exatamente antes de uso, a preparados na forma líquida. Nas composições adequadas para administração percutânea, o veículo compreende, opcionalmente, um agente para intensificação de penetração e/ou um agente de umedecimento adequado, opcionalmente combinado com aditivos adequados de qualquer natureza em proporções mínimas, aditivos os quais não introduzem um efeito prejudicial significativo sobre a pele. Os referidos aditivos podem facilitar a administração à pele e/ou podem ser úteis para preparar as composições desejadas. Estas composições podem ser administrados de várias formas, por exemplo, como um emplastro transdérmico, como um "spot-on", como uma pomada.

É especialmente vantajoso formular as composições farmacêuticas antes mencionadas em uma forma de dosagem unitária para facilidade de administração e uniformidade de dosagem. Forma de dosagem unitária, conforme usado aqui, se refere à unidades fisicamente distintas adequadas como dosagens unitárias, cada unidade contendo uma quantidade prede5 terminada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o veículo farmacêutico requerido. Exemplos de tais formas de unidade são comprimidos (incluindo comprimido graduados ou revestidos), cápsulas, pílulas, embalagens de pó, wafers, supositórios, soluções ou suspensões injetáveis e similares e múltiplos segregados 10 dos mesmos.

A dosagem e frequência de administração exatas dependem do composto de fórmula (I) usado em particular, da condição que está sendo tratada em particular, da gravidade da condição que está sendo tratada, da idade, peso, sexo, extensão do distúrbio e condição física geral do paciente 15 em particular, bem como outra medicação que o indivíduo possa estar tomando, conforme é bem conhecido por aqueles versados na técnica. Além disso, é evidente que a referida quantidade diária eficaz pode ser diminuída ou aumentada, dependendo da resposta do indivíduo tratado e/ou dependendo da avaliação do médico que prescreve os compostos da presente in20 venção.

Dependendo do modo de administração, a composição farmacêutica compreenderá de 0,05 a 99% em peso, de preferência de 0,1 a 70% em peso, mais preferivelmente de 0,1 a 50% em peso do ingrediente ativo e de 1 a 99,95% em peso, de preferência de 30 a 99,9% em peso, mais prefe25 rivelmente de 50 a 99,9% em peso de um veículo farmaceuticamente aceitável, todos os percentuais sendo baseados no peso total da composição.

Conforme já mencionado, a invenção também se refere a uma composição farmacêutica compreendendo os compostos de acordo com a invenção e um ou mais de outros fármacos no tratamento, prevenção, controle, alivio ou redução do risco de doenças ou condições para as quais os compostos de fórmula (I) ou os outros fármacos podem ter utilidade, bem como ao uso de tal composição para a fabricação de um medicamento. A presente invenção também se refere a uma combinação de um composto de acordo com a invenção e um agonista ortostérico de mGluR2. A presente invenção também se refere a tal combinação para uso como um medicamento. A presente invenção também se refere a um produto compreendendo 5 (a) um composto de acordo com a invenção, um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável e (b) um agonista ortostérico de mGluR2, como um preparado combinado para uso simultâneo, separado ou seqüencial no tratamento ou prevenção de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano,

o tratamento ou prevenção da qual é realizado ou facilitado pelo efeito neu10 romodulatório de moduladores alostéricos de mGluR2, em particular moduladores alostéricos positivos de mGluR2. Os diferentes fármacos de tal combinação ou produto podem ser combinados em um único preparado junto com veículos ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis ou eles podem, cada um, estar presentes em um preparado separado junto com veículos ou 15 diluentes farmaceuticamente aceitáveis.

Os exemplos a seguir se destinam a ilustrar, mas não limitar, o escopo da presente invenção.

Parte Experimental

Vários métodos para preparo dos compostos da presente invenção são ilustrados nos Exemplos a seguir. A menos que de outro modo observado, todos os materiais de iniciação foram obtidos de fornecedores comerciais e usados sem outra purificação. Especificamente, as seguintes abreviações podem ser usadas nos exemplos e por toda a especificação:

DCM (diclorometano) DMF (dimetilformamida) Et2O (dietil éter) EtOAc (acetato de etila) g (gramas) HPLC (cromatografia de líquido de alta pressão ) LCMS (espectro de massa por cromatografia de líquido) MeOH (metanol) MHz (megahertz) ml (mililitros) min (minutos) mmol (milimol) Pd(PPh3)4 (tetraquis(trifenilfosfina)paládio(O)) THF (tetra-hidrofurano) Todas as referências à salmoura se referem a uma solução saturada aquosa de NaCI. A menos que de outro modo indicado, todas as temperaturas são expressas em 0C (graus Celsius). Todas as reações são conduzidas não sob uma atmosfera inerte e em temperatura ambiente, a menos que de outro modo observado.

As reações auxiliadas por micro-ondas foram realizadas em um reator de modo único: reator com micro-ondas Emrys® Optimizer (Personal Chemistry A.B., atualmente Biotage) ou em um reator multimodo: MicroSYNTH Labstation (Milestone, Inc.).

A. Preparo dos intermediários Exemplo A.1

Éster 2-ciclopropil-etílico de ácido metano-sulfônico (intermediário 1)

A uma solução de 2-ciclopropil-etanol (15,1 g, 175,3 mmoles) e trietilamina (48,6 ml, 350,6 mmoles) em diclorometano (300 ml) a 0 0C1 foi 15 adicionado cloreto de metano-sulfonila (20,35 ml, 262,9 mmoles) gota a gota e a mistura foi, então, agitada em temperatura ambiente 2 horas. Água foi adicionada e as camadas foram separadas. A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e evaporada in vacuo para proporcionar o intermediário bruto 1 (100 %), usado sem outra purificação.

Exemplo A.2

1 -Ciclopropilmetil-4-metóxi-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 2)

A uma solução de 4-metóxi-2-oxo-1,2-di-hidro-piridina-3- carbonitrila (12,2 g, 81,48 mmoles) em acetonitrila (250 ml) foram adicionados bromometil-ciclopropano (11 g, 81,48 mmoles) e carbonato de potássio (22,48 g, 162,9 mmoles) e a mistura foi aquecida a 110 0C durante 24 horas. A mistura foi esfriada para a temperatura ambiente e o sólido foi filtrado. O filtrado foi evaporado até secagem e o resíduo bruto resultante foi, então, triturado com dietiléter para proporcionar o intermediário puro 2 (15,72 g, 94%) como um sólido branco.

Exemplo A.3

1 -(2-Ciclopropil-etil)-4-metóxi-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 3)

Q

kN'

Il

A uma solução de 4-metóxi-2-oxo-1,2-di-hidro-piridina-3-

carbonitrila (19,81 g, 131,98 mmoles) em acetonitrila (520 ml) foram adicionados intermediário 1 (34,36 g, 171,57 mmoles) e carbonato de potássio (56,73 g, 410,3 mmoles) e a mistura foi aquecida a 105 0C durante 12 horas. A mistura foi esfriada para a temperatura ambiente e o sólido foi filtrado. O

filtrado foi evaporado até secagem. O produto bruto foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/ EtOAc até 20% como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 3 (13,18 g, 46 %).

Exemplo A.4

1-Butil-4-metóxi-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 4)

A uma solução de 4-metóxi-2-oxo-1,2-di-hidro-piridina-3- carbonitrila (20 g, 133 mmoles) em acetonitrila (800 ml) foram adicionados 1- bromobutano (15,8 ml, 146 mmoles) e carbonato de potássio (36,7 g, 266 mmoles) e a mistura foi aquecida a 110 0C durante 24 horas. A mistura foi 25 esfriada para a temperatura ambiente e o sólido foi filtrado. O filtrado foi evaporado até secagem e o resíduo bruto resultante foi, então, triturado com dietiléter para proporcionar o intermediário puro 4 (27,39 g, >99%) como um sólido branco.

Exemplo A.5

1 -Ciclopropilmetil-4-hidróxi-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (interme

ratura ambiente, a uma solução aquosa a 1N de hidróxido de sódio (300 ml) e THF (50 ml). A mistura de reação foi aquecida a 140 0C (temperatura de banho do óleo) durante 16 horas. A mistura foi esfriada para a temperatura 10 ambiente e o THF foi, em sua maioria, evaporado in vacuo. A camada aquosa foi esfriada para 0 0C e acidificada com adição de HCI aquoso a 2N, ajustando o pH para cerca de 3, ponto no qual um sólido branco se precipitou. O sólido foi filtrado, lavado com Et2O e seco in vacuo para proporcionar o intermediário 5 como um sólido branco (10,44 g, 71%) que foi usado sem ou15 tra purificação.

Exemplo A.6

1 -(2-Ciclopropil-etil)-4-hidróxi-2-oxo-1,2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 6)

peratura ambiente, a uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 0,5N (221 ml). A mistura de reação foi aquecida a 110 0C (temperatura de banho do óleo) durante 12 horas. A mistura foi esfriada para 0 0C e acidificada através da adição de HCI aquoso a 2N, ajustando o pH para cerca de 3, ponto no qual um sólido branco se precipitou. O sólido foi filtrado, lavado com Et2O e 25 seco in vacuo para proporcionar o intermediário 6 como um sólido branco (11,24 g, 91 %) que foi usado sem outra purificação.

diário 5)

Intermediário 2 (15,7 g, 76,8 mmoles) foi adicionado, em tempe

Intermediário 3 (13,18 g, 60,4 mmoles) foi adicionado, em temExemplo A.7

1 -Butil-4-hidróxi-2-oxo-1 ^-di-hidro-piridina^-carbonitrila (intermediário 7)

O

Intermediário 4 (27,39 g, 133 mmoles) foi adicionado, em tempe

ratura ambiente, a uma solução aquosa a 1N de hidróxido de sódio (500 ml) 5 e THF (100 ml). A mistura de reação foi aquecida a 110 0C (temperatura de banho do óleo) durante 24 horas. A mistura foi esfriada para a temperatura ambiente e o solvente foi evaporado in vacuo até que o volume estivesse reduzido para aproximadamente 250 ml. A camada aquosa foi, então, esfriada para 0 0C e acidificada através da adição de HCI aquoso a 2N, ajustando 10 o pH para cerca de 3, ponto no qual um sólido branco se precipitou. O sólido foi filtrado, lavado com Et2O e seco in vacuo para proporcionar o intermediário 7 como um sólido branco (25 g, 98%) que foi usado sem outra purificação.

Exemplo A.8

4-Bromo-1 -ciclopropilmetil-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 8)

DMF (250 ml) foi adicionado oxibrometo de fósforo (III) (31,3 g, 109,3 mmoles) e a mistura foi aquecida a 110 0C durante 1,5 horas. Após esfriar em um 20 banho de gelo, a solução foi dividida entre água e EtOAc. Após três extrações com EtOAc, as frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4 e o solvente evaporado in vacuo. O produto bruto foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para 25 proporcionar o intermediário 8 (8,83 g, 64 %).

Exemplo A.9

A uma solução de intermediário 5 (10,4 g, 54,67 mmoles) em 4-Bromo-1 -(2-ciclopropil-etil)-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 9)

DMF (150 ml) foi adicionado oxibrometo de fósforo (III) (16,84 g, 58,75 mmo5 les) e a mistura foi aquecida a 110 0C durante 3 horas. Após esfriar em um banho de gelo, a solução foi dividida entre água e EtOAc. Após três extrações com EtOAc, as frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre NaaSO4 e o solvente evaporado in vacuo. O produto bruto foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM co10 mo eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 9 (7,0 g, 89 %).

Exemplo A. 10

4-Bromo-1-butil-2-oxo-1.2-di-hidro-piridina-3-carbonitrila (intermediário 10)

(600 ml) foi adicionado oxibrometo de fósforo (III) (116 g, 406 mmoles) e a mistura foi aquecida a 110 0C durante 1,5 horas. Após esfriar em um banho de gelo, a solução foi dividida entre água e EtOAc. Após três extrações com EtOAc, as frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e o solvente evaporado in vacuo. O produto bruto foi puri20 ficado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 10 (36,7 g, 72 %).

Exemplo A. 11

(4-Bromo-2-fluoro-fenil)-(tetra-hidro-piran-4-il)-amina (intermediário 11)

A uma solução de intermediário 6 (6,0 g, 29,37 mmoles) em

A uma solução de intermediário 7 (39 g, 203 mmoles) em DMF Br

H

Uma mistura de 4-bromo-2-fluoro-fenilamina (1 g, 5,26 mmoles),

tetra-hidro-4H-piran-4-ona (0,73 ml, 7,89 mmoles) e triacetoxiborohidrato de sódio (1,66 g, 7,89 mmoles) em 1,2-dicloroetano (50 ml) foi agitada em temperatura ambiente durante 72 horas. A mistura foi filtrada através de uma 5 almofada de terra diatomácea. A almofada de terra diatomácea foi lavada com diclorometano. Os filtrados combinados foram lavados com NaHCO3 (solução saturada aquosa), secos sobre Na2SO4 e evaporados até secagem. O produto bruto assim obtido foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/MeOH(NH3) até 5%). As frações desejadas fo10 ram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 11 como um óleo amarelo (1,44 g, 100 %).

Exemplo A. 12

(4-Bromo-2-cloro-fenil)-(tetra-hidro-piran-4-il)-amina (intermediário 12)

tetra-hidro-4/-/-piran-4-ona (2,69 ml, 29,05 mmoles), peneiras moleculares de

4 Â secas em um forno (2 g) e triacetóxi boro-hidrato de sódio (6,12 g, 29,05 mmoles) em 1,2-dicloroetano (100 ml) foi agitada em temperatura ambiente durante 72 horas. A mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. A almofada de terra diatomácea foi lavada com diclorometano. 20 Os filtrados combinados foram lavados com NaHCO3 (solução saturada aquosa), secos sobre Na2SO4 e evaporados até secagem. O produto bruto assim obtido foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/MeOH(NH3) até 5%). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 12 como um óleo 25 marrom (4,83 g, 86 %).

Exemplo A. 13

(4-Bromo-2-trifluorometil-fenil)-(tetra-hidro-piran-4-il)-amina (intermediário

H

Uma mistura de 4-bromo-2-cloro-fenilamina (4 g, 19,37 mmoles), 13}

Br

F

Uma mistura de 4-bromo-2-trifluorometil-fenilamina (0,88 g, 3,66

mmoles), tetra-hidro-4H-piran-4-ona (0,5 ml, 5,49 mmoles), peneiras moleculares de 4 A secas em um forno (1 g) e triacetóxi borohidrato de sódio (1,15 5 g, 5,49 mmoles) em 1,2-dicloroetano (30 ml) foi agitada em temperatura ambiente durante 72 horas. A mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. A almofada de terra diatomácea foi lavada com diclorometano. Os filtrados combinados foram lavados com NaHCO3 (solução saturada aquosa), secos sobre Na2SO4 e evaporados até secagem. O produto bru10 to assim obtido foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/MeOH(NH3) até 5%). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 13 como um óleo amarelo (1,11 g, 99 %).

Exemplo A. 14

15 4-(4-Bromo-2-cloro-fenóxi)-tetra-hidro-pirano (intermediário 14)

tra-hidro-4-piranol (2,20 ml, 23,13 mmoles) e trifenilfosfina suportada em polímero (17,29 g, 39,29 mmoles; adquirida da Argonaut, carga de 2,23 mmoles/g) foi suspensa em diclorometano (250 ml) e, então, esfriada para 0 °C.

20 Azadicarboxilato de di-ferc-butila (6,65 g, 28,92 mmoles) foi adicionado aos poucos e a mistura de reação foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 2 horas. A resina foi filtrada e lavada com diclorometano. Os filtrados combinados foram evaporados até secagem. O produto bruto assim obtido foi purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a

DCM/MeOH(NH3) até 2%). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o intermediário 14 como um óleo incolor

Uma mistura de 4-bromo-2-cloro-fenol (4 g, 19,28 mmoles), te(5,38 g, 95 %).

Exemplo A. 15

í2-Flúor-4-(4.4.5.5-tetrametil-ri.3.21dioxaborolan-2-il)-fenin-(tetra-hidro-piran4-il)-amina (intermediário 15)

5 A uma solução de intermediário 11 (0,7 g, 2,55 mmoles) em 1,4-

dioxano (4,5 ml) e DMF (0,5 ml) foram adicionados bis(pinacolato)diboro (0,77 g, 3,06 mmoles) e acetato de potássio (0,75 g, 7,65 mmoles). A mistura foi desgaseificada e, então, [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio(ll); complexo com DCM (1:1) (0,062 g, 0,07 mmoles) foi adi10 cionado. A mistura de reação foi aquecida a 150 0C durante 10 minutos sobre irradiação de micro-ondas. Após esfriar para a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. A terra diatomácea foi lavada com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e o solvente evaporado in va15 cuo para proporcionar o boronato desejado como um intermediário bruto 15 (100%) que foi usado sem outra purificação.

Exemplo A. 16

f2-Cloro-4-(4.4.5.5-tetrametil-í1.3.21dioxaborolan-2-il)-fenin-(tetra-hidro-piran4-il)-amina (intermediário 16)

A uma solução de intermediário 12 (2 g, 6,88 mmoles) em 1,4-

dioxano (10,8 ml) e DMF (1,2 ml) foram adicionados bis(pinacolato)diboro (2,09 g, 8,25 mmoles) e acetato de potássio (2,02 g, 20,64 mmoles). A mistura foi desgaseificada e, então, [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio(ll); complexo com DCM (1:1) (0,16 g, 0,2 mmoles) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 150 0C durante 10 minutos sobre irradiação de micro-ondas. Após esfriar para a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. A terra diatomácea foi lavada com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram Ia

5 vados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e o solvente evaporado in vacuo para proporcionar o boronato desejado como um intermediário bruto 16 (100%) que foi usado sem outra purificação.

Exemplo A. 17

(Tetra-hidropiran-4-il)-r4-(4.4.5.5-tetrametil-f1.3.21dioxaborolan-2-il)-2- trifluorometil-fenill-amina (intermediário 17)

A uma solução de intermediário 13 (1,11 g, 3,42 mmoles) em 1,4-dioxano (4,5 ml) e DMF (0,5 ml) foram adicionados bis(pinacolato)diboro (1,04 g, 4,1 mmoles) e acetato de potássio (1,00 g, 10,26 mmoles). A mistura foi desgaseificada e, então, [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]15 dicloropaládio(ll); complexo com DCM (1:1) (0,083 g, 0,1 mmoles) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 150 0C durante 10 minutos sobre irradiação de micro-ondas. Após esfriar para a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. A terra diatomácea foi lavada com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram Ia20 vados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e o solvente evaporado in vacuo para proporcionar o boronato desejado como um intermediário bruto 17 (100%) que foi usado sem outra purificação.

Exemplo A. 18

4-r2-Cloro-4-(4.4.5.5-tetrametil-n.3.21dioxaborolan-2-il)-fenóxiHetra-hidropirano (intermediário 18) A uma solução de intermediário 14 (2 g, 6,85 mmoles) em 1,4- dioxano (10,8 ml) e DMF (1,2 ml) foram adicionados bis(pinacolato)diboro (2,01 g, 8,23 mmoles) e acetato de potássio (2,01 g, 20,55 mmoles). A mistura foi desgaseificada e, então, [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]5 dicloropaládio(ll); complexo com DCM (1:1) (0,16 g, 0,2 mmoles) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 150 0C durante 10 minutos sob irradiação de micro-ondas. Após esfriar para a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. A terra diatomácea foi lavada com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram Ia10 vados com salmoura, secos sobre Na2S04 e o solvente evaporado in vacuo para proporcionar o boronato desejado como um intermediário bruto 18 (100%) que foi usado sem outra purificação.

B. Preparo dos compostos finais Exemplo B.1

1-Ciclopropilmetil-4-í3-flúor-4-(tetra-hidro-piran-4-ilamino)-fenin-2-oxo-1.2-dihidro-piridina-3-carbonitrila (composto 1)

A uma solução de intermediário 15 (0,8 g, 2,55 mmoles) em 1,4- dioxano (3 ml) e uma solução saturada de Na2C03 (3 ml) foi adicionado intermediário 8 (0,58 g, 2,31 mmoles). A solução resultante foi desgaseificada 20 usando uma corrente de nitrogênio e à mesma foi adicionado Pd(PPh3)4 (0,26 mg, 0,23 mmoles). A reação foi, então, submetida a micro-ondas em um tubo vedado a 150 0C durante 10 minutos. A mistura de reação esfriada resultante foi, então, diluída com EtOAc e filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. O filtrado foi lavado com salmoura, seco sobre Na2SÜ4 e concentrado in vacuo. A mistura de reação bruta foi, então, purificada através de coluna cromatográfica (sílica-gel; DCM a DCM/EtOAc até 30% como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o composto 1 (0,241 g, 30%).

5 Exemplo B.2

1-Ciclopropilmetil-4-í3-cloro-4-(tetra-hidro-piran-4-ilamino)-fenill-2-oxo-1.2-dihidro-piridina-3-carbonitrila (composto 2)

A uma solução de intermediário 16 (0,57 g, 1,7 mmoles) em 1,4- dioxano (2 ml) e uma solução saturada de Na2CÜ3 (2 ml) foi adicionado in10 termediário 8 (0,43 g, 1,7 mmoles). A solução resultante foi desgaseificada usando uma corrente de nitrogênio e à mesma foi adicionado Pd(PPh3)4 (0,19 mg, 0,17 mmoles). A reação foi, então, submetida a micro-ondas em um tubo vedado a 150 0C durante 10 minutos. A mistura de reação esfriada resultante foi, então, diluída com EtOAc e filtrada através de uma almofada 15 de terra diatomácea. O filtrado foi lavado com salmoura, seco sobre Na2S04 e concentrado in vacuo. A mistura de reação bruta foi, então, purificado através de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/EtOAc até 30% como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o composto 2 (0,103 g, 16 %).

Exemplo B.3

1-Ciclopropilmetil-2-oxo-4-f4-(tetra-hidro-piran-4-ilaminoK3-trifluorometilA uma solução de intermediário 17 (0,63 g, 1,69 mmoles) em 1,4-dioxano (3 ml) e uma solução saturada de Na2CO3 (3 ml) foi adicionado intermediário 8 (0,42 g, 1,69 mmoles). A solução resultante foi desgaseificada usando uma corrente de nitrogênio e à mesma foi adicionado Pd(PPha)4 5 (0,19 mg, 0,17 mmoles). A reação foi, então, submetida a micro-ondas em um tubo vedado a 150 0C durante 10 minutos. A mistura de reação esfriada resultante foi, então, diluída com EtOAc e filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. O filtrado foi lavado com salmoura, seco sobre Na2SO4 e concentrado in vacuo. A mistura de reação bruta foi, então, purificada atra10 vés de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/EtOAc até 30% como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o composto 3 (0,59 g, 9 %).

Exemplo B.4

4-r3-Cloro-4-(tetra-hidro-piran-4-ilóxi)-fenill-1-(2-ciclopropil-etil)-2-oxo-1.2-dihidro-piridina-3-carbonitrila (composto 4)

dioxano (2 ml) e uma solução saturada de Na2CO3 (2 ml) foi adicionado intermediário 9 (0,45 g, 1,7 mmoles). A solução resultante foi desgaseificada usando uma corrente de nitrogênio e à mesma foi adicionado Pd(PPh3)4 20 (0,19 mg, 0,17 mmoles). A reação foi, então, submetida a micro-ondas em um tubo vedado a 150 0C durante 10 minutos. A mistura de reação esfriada resultante foi, então, diluída com EtOAc e filtrada através de uma almofada de terra diatomácea. O filtrado foi lavado com salmoura, seco sobre Na2SO4 e concentrado in vacuo. A mistura de reação bruta foi, então, purificada atra25 vés de cromatografia em coluna (sílica-gel; DCM a DCM/EtOAc até 30% como eluente). As frações desejadas foram coletadas e evaporadas in vacuo para proporcionar o composto 4 (0,108 g, 17 %).

Cl

A uma solução de intermediário 18 (0,57 g, 1,7 mmoles) em 1,4- A Tabela 1 lista compostos de fórmula (I) que foram preparados de acordo com um dos Exemplos acima (Ex. n°).

Tabela 1 :

Rt

Co. Ex. -R1 R1 ---Rj -XN0 N0 t Bl -~V 3-F -H H 2 B2 3*CI -H ''N*" N 3 B3 '"nV S-CF5 -H H 4 B4 /V^ 3-C1 B4 3CI -H vO'' 6 Bl 3-Cl -H ’’N'" H 7 B3 Í-CF, -H ''N'" H X Bl H -H H 9 B4 2-F ---H '-o” 1« Bl 2-F -H 'vN**" H C. Parte analítica

Para caracterização por LCMS dos compostos da presente in

venção, o seguinte método foi usado.

LCMS - Procedimento geral

A medição por HPLC foi realizada usando um HP 1100 da AgiIent Technologies compreendendo uma bomba (quaternária ou binária) com um desgaseificador, um amostrador automático, um forno com coluna, um detector com série de diodo (DAD) e uma coluna conforme especificado nos respectivos métodos abaixo. Fluxo da coluna foi dividido para um detector de MS. O detector de MS foi configurado com uma fonte de ionização para eletropulverização. Nitrogênio foi usado como o gás nebulizador. A temperatura da fonte foi mantida a 140 °C. A aquisição de dados foi realizada com um software MassLynx-OpenIynx.

5 Método 1:

Além do procedimento geral: HPLC de fase reversa foi realizada sobre um cartucho XDB-C18 (1,8 μιτι, 2,1 x 30 mm) da Agilent, com uma taxa de fluxo de 1 ml/min, a 60°C. As condições de gradiente usadas são: 90% A (0,5 g/l de solução de acetato de amônio), 5% de B (acetonitrila), 5% 10 de C (metanol) a 50% de B e 50% de C em 6,5 minutos a 100% de B a 7 minutos e equilibrado para as condições finais a 7,5 minutos até 9,0 minutos. Volume de injeção de 2 μΙ. Espectros de massa em alta resolução ("Time of Flight", TOF) foram adquiridos apenas no modo de ionização positivo através de exploração de 100 a 750 em 0,5 segundos usando um tempo de re15 sidência de 0,1 segundo. A tensão da agulha capilar foi de 2,5 kV e a tensão de cone foi de 20 V. Leucina-Encefalina foi a substância padrão usada para a calibração em massa.

Método 2:

Além do procedimento geral: HPLC de fase reversa foi realizada sobre uma coluna ACE-C18 (3,0 μηι, 4,6 x 30 mm) da Advanced Chromatography Technologies, com uma taxa de fluxo de 1,5 ml/min, a 40 0C. As condições de gradiente usadas são: 80% de A (0,5 g/l de solução de acetato de amônio), 10 % de B (acetonitrila), 10 % de C (metanol) a 50 % de B e 50 % de C em 6,5 minutos a 100 % de B a 7 minutos e equilibrado para as condições finais a 7,5 minutos até 9,0 minutos. Volume de injeção de 5 μΙ. Espectros de massa em alta resolução ("Time of Flight'', TOF) foram adquiridos apenas no modo de ionização positivo através de exploração de 100 a 750 em 0,5 segundos usando um tempo de residência de 0,1 segundo. A tensão da agulha capilar foi de 2,5 kV e a tensão de cone foi de 20 V. LeucinaEncefalina foi a substância padrão usada para a calibração em massa. Determinação de ponto de fusão

As determinações de ponto de fusão foram realizadas sobre um aparelho Mettler FP62.

Tabela 2: Dados analíticos (Rt significa tempo de retenção em minutos; (MH)+ significado a massa protonada do composto (base livre).

Comp. N0 Ponto de fusão (0C) (MH)+ Rt (min) Método LCMS 1 249,5 368 3,56 1 2 Decompõe 384 3,81 1 3 Decompõe 418 4,17 1 4 Decompõe 399 4,26 1 5 nd 401 4,58 1 6 >300 398 4,20 1 7 nd 432 4,44 1 8 195 352 3,64 1 9 136 371 4,04 2 10 nd 384 4,22 2 11 nd 384 4,21 1 12 Decompõe 400 4,48 1 n.d.: não determinado

D. Exemplos farmacológicos

Os compostos fornecidos na presente invenção são moduladores alostéricos positivos de mGluR2. Esses compostos parecem potencializar as respostas ao glutamato através de ligação a um outro sítio alostérico que não o sítio de ligação de glutamato. A resposta de mGluR2 a uma con10 centração de glutamato é aumentada quando compostos da fórmula (I) estão presentes. Espera-se que compostos de fórmula (I) tenham seu efeito substancialmente em mGluR2 em virtude de sua capacidade de intensificar a função do receptor. O comportamento de moduladores alostéricos positivos testados em mGluR2 usando o método do ensaio de ligação a [35SjGTPyS 15 descrito abaixo e o qual é adequado para a identificação de tais compostos

e, mais particularmente, compostos de acordo com a fórmula (I) são mostrados na Tabela 3.

Ensaio de lioacão a í35S1GTPyS

O ensaio de ligação a [35S]GTPyS é um ensaio funcional baseado em membrana usado para estudar a função de receptor proteína-G acoplado (GPCR), pelo que incorporação de uma forma não hidrolisável de GJpi [35SJGTPyS (5-trifosfato de guanosina, rotulado com 35S de gamaemissão), é medida. A subunidade γ de proteína-G catalisa a troca de 5'5 difosfato de guanosina (GDP) para trifosfato de guanosina (GTP) e, quando de ativação do GPCR por um agonista, [35S]GTPyS, se torna incorporado e não pode ser clivado para continuar o ciclo de troca (Harper (1998) Current Protocols in Pharmacology 2.6.1-10, John Wiley & Sons, Inc.). A quantidade de incorporação de [35SjGTPyS radioativo é uma medida direta da atividade 10 da proteína G e, consequentemente, a atividade do agonista pode ser determinada. É mostrado que receptores mGluR2 são, de preferência, acoplados à proteína-Gyi, um acoplamento preferencial para esse método e, consequentemente, é amplamente usado para estudar a ativação de receptor de receptores mGluR2 em linhagens de célula recombinantes e em tecidos (S15 chaffhauser e outros, 2003, Pinkerton e outros, 2004, Mutel e outros (1998) Journal of Neurochemistry. 71: 2558-64; Schaffhauser e outros (1998) Molecular Pharmacology 53: 228-33). Aqui, é descrito o uso do ensaio de ligação de [35S]GTPyS usando membranas de células transfectadas com o receptor mGluR2 humano e adaptado de Schaffhauser e outros ((2003) Molecular 20 Pharmaeology 4: 798-810) para a detecção das propriedades de modulação alostérica positiva (PAM) dos compostos da presente invenção.

Preparo de membrana

Células CHO foram cultivadas até a pré-confluência e estimuladas com butirato a 5 mM durante 24 horas, antes de lavagem em PBS e, 25 então, coleta através de raspagem em tampão de homogeneização (tampão de Tris-HCI a 50 mM, pH de 7,4, 4°C). Os Iisatos de célula foram rapidamente homogeneizados (15 s) usando um homogeneizador Ultra-turrax. O homogenato foi centrifugado a 23 500 x g durante 10 minutos e o sobrenadante descartado. O pélete foi ressuspensa em Tris-HCI a 5 mM, pH de 7,4 e cen30 trifugada novamente (30 000 x g, 20 min, 4°C). O pélete final foi ressuspensa em HEPES a 50 mM, pH de 7,4 e armazenada a -80°C em alíquotas apropriadas antes de uso. A concentração de proteína foi determinada através do método de Bradford (Bio-Rad, EUA) com albumina de soro bovino como padrão.

Ensaio de ligação a [35SIGTPyS

Medição de atividade modulatória alostérica positiva de mGluR2 de compostos de teste em membranas contendo mGluR2 humano foi realizada usando membranas congeladas que foram descongeladas e rapidamente homogeneizadas antes de pré-incubação em microplacas com 96 poços (15 pg/poço de ensaio, 30 minutos, 30°C) em tampão de ensaio (HEPES a 50 mM, pH de 7,4, NaCI a 100 mM, MgCI2 a 3 mM, GDP a 50 μΜ, 10 Mg/ml de saponina) com concentrações crescentes de modulador alostérico positivo (de 0,3 nM a 50 μΜ) e uma concentração predeterminada mínima de glutamato (ensaio de PAM) ou sem glutamato adicionado. Para o ensaio de PAM, membranas foram pré-incubadas com glutamato na concentração EC25, isto é, uma concentração que proporciona 25 % da resposta máxima ao glutamato e está de acordo com dados publicados (Pin e outros (1999) Eur. J. Pharmacol. 375: 277-294). Após a adição de [35SjGTPyS (0,1 nM,

f.c.) para obter um volume total de reação de 200 μΙ, as microplacas foram rapidamente agitadas e ainda incubadas para permitir incorporação de [35SJGTPyS quando de ativação (30 minutos, 30 °C). A reação foi cessada através de rápida filtração a vácuo sobre placas de fibra de vidro (placas com filtro Unifilter 96-well GF/B, Perkin-Elmer, Downers Grove, EUA) usando um coletor de células com 96 poços (Filtermate, Perkin-Elmer, EUA) e, então, lavando três vezes com 300 μΙ de tampão de lavagem gelado (Na2P04,2H20 a 10 mM, NaH2PO4H2O a 10 mM, pH = 7,4). Os filtros foram, então, secos ao ar e 40 μΙ de coquetel de cintilação de líquido (Microscint-O) foram adicionados a cada poço e o [35SJGTPyS ligado à membrana foi medido em um leitor para placa de cintilação com 96 poços (Top-Count, Perkin-Elmer, EUA). A ligação a [35SJGTPyS não específica é determinada na presença de GTP gelado a 10 μΜ. Cada curva foi realizada pelo menos uma vez usando amostras duplicatas por ponto de dados e as 11 concentrações. Análise de dados

As curvas de concentração-resposta de compostos representativos da presente invenção na presença da EC25 de agonista de mGluR2, glutamato, adicionada para determinar a modulação alostérica positiva (PAM), foram geradas usando o software Prism GraphPad (Graph Pad Inct San Diego, EUA). As curvas foram adaptadas a uma equação logística com quatro 5 parâmetros (Y = Inferior + (Superior - lnferior)/(1+10A((LogEC50-X)*Declínio de Hill), permitindo a determinação de valores de EC50. A EC50 é a concentração de um composto que causa metade da potencialização máxima da resposta ao glutamato. Isso é calculado subtraindo-se as respostas máximas ao glutamato na presença de uma concentração de saturação total de um 10 modulador alostérico positivo a partir da resposta ao glutamato na ausência de um modulador alostérico positivo. A concentração que produz metade do efeito máximo é, então, calculada como EC5O

Tabela 3. Dados farmacológicos para compostos de acordo com a invenção Todos os compostos foram testados na presença do agonista de mGluR2, glutamato, em uma concentração EC25 predeterminada, para determinar a modulação alostérica positiva (GTPyS-PAM). Os valores mostrados são as médias de valores em duplicata de curvas de resposta a 11 concentrações, a partir de pelo menos um experimento. Todos os compostos testados mostraram um valor de pEC50 (-IogEC50) de mais de 5,0. O erro de determinação de um valor de pEC5o para um único experimento é estimado

como sendo de cerca de 0,3 unidades log.

Comp. N0 GTPgS - hR2 PAM pEC5o 1 Em torno de 6 2 6,17 3 5,91 4 6,55 5 6,79 6 6,66 7 6,36 8 5,6 9 6,2 10 5,8 11 6,4 12 6,5 nm : não medido E. Exemplos de composicão

"Ingrediente ativo", conforme usado por todos os exemplos, se refere ao composto final de fórmula (I), aos sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmos, aos solvatos e formas estereoquimicamente isoméricas dos mesmos.

Exemplos típicos de receitas para a formulação da invenção são como segue:

1. Comprimidos

Ingredienteativo 5 a 50 mg

Fosfato de di-cálcio 20 mg

Lactose 30 mg

Talco 10 mg

Estearato de Magnésio 5 mg

AmidodeBatata 200 mg

Neste exemplo, ingrediente ativo pode ser substituído pela mesma quantidade de qualquer um dos compostos de acordo com a presente invenção, em particular pela mesma quantidade dos compostos exemplificados.

2. Suspensão

Uma suspensão aquosa é preparada para administração oral de modo que 1 mililitro contenha 1 a 5 mg de um dos compostos ativos, 50 mg de carboximetil celulose de sódio, 1 mg de benzoato de sódio, 500 mg de sorbitol e água ad 1 ml.

3. Injetáveis

Uma composição parenteral é preparada através de agitação de ingrediente ativo da invenção a 1,5% em peso em propileno glicol em água a 10% em volume.

4. Pomada

Ingrediente ativo 5 a 1000 mg

Álcool Estearílico 3 g

Lanolina 5 g Petrolato branco 15 g

Água adIOOg

Neste exemplo, ingrediente ativo pode ser substituído pela mesma quantidade de qualquer um dos compostos de acordo com a presente invenção, em particular pela mesma quantidade dos compostos exemplificados.

Variações razoáveis não devem ser consideradas como um desvio do escopo da invenção. Será óbvio que a invenção assim descrita pode ser variada de muitas formas por aqueles versados na técnica.

Claims (40)

1. Composto de fórmula (I): <formula>formula see original document page 49</formula> incluindo qualquer forma estereoquimicamente isomérica da mesma, em que: Ri é C4-6alquila ou Ci.3alquila substituída por C3-7Cicloalquila; R2 é hidrogênio, halo ou trifluorometila; R3 é hidrogênio ou Ci-4alquila substituída por hidroxila; X é O ou NH; n é um número inteiro do valor 1 ou 2; ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é outro que não: <formula>formula see original document page 49</formula> <table>table see original document page 49</column></row><table>

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que Ri é C4-6alquila.

4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que Ri é 1- butila ou 3-metil-1-butila.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri é Ci3alquila substituída por C3.7cicloalquila.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, em que Ri é ciclopropilmetila ou 2-(ciclopropil)-1 -etila.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes em que R2 é hidrogênio.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R2 é halo.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R2 é trifluorometila.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes em que R3 é hidrogênio.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, em que R3 é Ci^alquila substituída por hidroxila.

12. Composto de acordo com a reivindicação 11, em que R3 é CH2OH.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, em que X é O.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, em que X é NH.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes em que n é 1.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, em que n é 2.

17. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, em que n é 1 e R2 é outro que não hidrogênio e 0 referido R2 está colocado na posição meta comparado com a porção de piridinona.

18. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri é 1- butila, 3-metíl-1-butila, ciclopropilmetila ou 2-(ciclopropil)-1-etila; R2 é hidrogênio, flúor, cloro ou trifluorometila; R3 é hidrogênio; n é 1.

19. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é selecionado de; <formula>formula see original document page 51</formula> ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

20. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que o composto é selecionado de: <formula>formula see original document page 51</formula> <table>table see original document page 52</column></row><table> ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

21. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, para uso como um medicamento.

22. Composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como defindio em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceito.

23. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20 ou uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 22 para tratamento ou prevenção de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento ou prevenção da qual é realizada ou facilitada através do efeito neuromodulatório de um modulador alostérico positivo de mGluR2.

24. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 ou uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 22 para a fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção de uma condição em um mamífero, incluindo um ser humano, o tratamento ou prevenção da qual é realizado ou facilitado através do efeito neuromodulador de um modulador alostérico positivo de mGluR2.

25. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 ou uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 22 para a fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção de um distúrbio do sistema nervoso central selecionado do grupo de distúrbios de ansiedade, distúrbios psicóticos, distúrbios de personalidade, distúrbios relacionados à substância, distúrbios de alimentação, distúrbios de humor, enxaqueca, epilepsia ou distúrbios convulsivos, distúrbios da infância, distúrbios cognitivos, neurodegeneração, neurotoxicidade e isquemia.

26. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio de ansiedade selecionado do grupo de agorafobia, distúrbio de ansiedade generalizada (GAD), distúrbio obsessivo-compulsivo (OCD), distúrbio de pânico, distúrbio de estresse póstraumático (PTSD), fobia social e outras fobias.

27. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio psicótico selecionado do grupo de esquizofrenia, distúrbio ilusório, distúrbio esquizoafetivo, distúrbio esquizofreniforme e distúrbio psicótico induzido por substância.

28. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio de personalidade selecionado do grupo de distúrbio de personalidade obsessivo-compulsivo e distúrbio esquizoide, esquizotípico.

29. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio relacionado à substância selecionado do grupo de abuso de álcool, dependência de álcool, abstinência de álcool, delírio por abstinência de álcool, distúrbio psicótico induzido por álcool, dependência de anfetamina, abstinência de anfetamina, dependência de cocaína, abstinência de cocaína, dependência de nicotina, abstinência de nicotina, dependência de opoide e abstinência de opioide.

30. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio relacionado à substância selecionado do grupo de anorexia nervosa e bulimia nervosa.

31. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio relacionado à substância selecionado do grupo de distúrbios bipolares (I & II), distúrbio ciclotímico, depressão, distúrbio distímico, grande distúrbio depressivo e distúrbio de humor induzido por substância.

32. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é enxaqueca.

33. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é epilepsia ou um distúrbio convulsivo selecionado do grupo de epilepsia não convulsiva generalizada, epilepsia convulsiva generalizada, estado de pequeno mal epiléptico, estado de grande mal epiléptico, epilepsia parcial com ou sem prejuízo da consciência, espasmos infantis, epilepsia parcial contínua e outras formas de epilepsia.

34. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio da infância.

35. Uso de acordo com a reivindicação 34, em que o distúrbio da infância é distúrbio de déficit de atenção/hiperatividade.

36. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é um distúrbio cognitivo selecionado do grupo de delírio, delírio persistente induzido por substância, demência, demência em virtude de doença pelo HIV, demência em virtude de doença de Huntington, demência em virtude de mal de Parkinson, demência do tipo Alzheimer, demência persistente induzida por substância e lesão cognitiva branda.

37. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que o distúrbio do sistema nervoso central é selecionado do grupo de ansiedade, esquizofrenia, enxaqueca, depressão e epilepsia.

38. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 em combinação com um agonista ortostérico de mGluR2 para a fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção de uma condição de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 37, em um mamífero, incluindo um ser humano.

39. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 para o tratamento de uma condição ou distúrbio.

40. Processo para o preparo de um composto como definido na reivindicação 1 caracterizado por: a) reação a um intermediário de fórmula (II) em que Y representa um grupo adequado para acoplamento mediado por Pd com ácidos borônicos ou ésteres borônicos, com um intermediário de fórmula (III) em que R4 e R5 representam hidrogênio ou Ci.4alquila ou em que R4 e R5 podem ser tomados juntos para formar 0 radical bivalente de fórmula -CH2CH2-, CH2CH2CH2- ou -C(CHa)2C(CH3)2-, em um solvente inerte à reação adequado, na presença de uma base adequada e um catalisador adequado, sob condições térmicas: <formula>formula see original document page 55</formula> com R1, R2, R3, X e n conforme definido na reivindicação 1; ou, se desejado, ainda conversão de compostos da fórmula (I) uns aos outros seguindo transformações conhecidas na técnica; ou ainda, se desejado, conversão dos compostos de fórmula (I) a um sal de adição de ácido nãotóxico terapeuticamente ativo através de tratamento com um ácido ou, inversamente, conversão da forma de sal de adição de ácido à base livre através de tratamento com álcali; ou, se desejado, preparo de formas estereoquimicamente isoméricas dos mesmos.