JP5357061B2 - ３−シアノ−４−（４−テトラヒドロピラン−フェニル）−ピリジン−２−オン誘導体 - Google Patents

Description

本発明は、代謝型グルタミン酸受容体サブタイプ２（「ｍＧｌｕＲ２」）のポジティブアロステリックモジュレーターであり、かつグルタミン酸機能障害と関連する神経および精神障害ならびに代謝型受容体のｍＧｌｕＲ２サブタイプが関与する疾患の治療または予防に有用である新規なピリジン−２−オン誘導体に関する。本発明はまた、このような化合物を含む医薬組成物、このような化合物およびこのような組成物の調製方法、ならびにｍＧｌｕＲ２が関与する神経障害および精神障害および疾病の予防または治療のためのこのような化合物の使用に関する。

グルタミン酸塩（エステル）は、哺乳類の中枢神経系における主要なアミノ酸神経伝達物質である。グルタミン酸塩（エステル）は、学習および記憶だけでなく、知覚、シナプス可塑性の発達、運動制御、呼吸、および心臓血管機能の調節などの多くの生理機能に大きな役割を果たす。さらにグルタミン酸塩（エステル）は、グルタミン酸神経伝達の不均衡が存在する様々な神経疾患および精神病の中核をなす。

グルタミン酸塩（エステル）は、イオンチャネル型グルタミン酸受容体チャネル（ｉＧｌｕＲ）ならびに急速な興奮性伝達に関与するＮＭＤＡ受容体、ＡＭＰＡ受容体およびカイニン酸受容体の活性化を通じてシナプス神経伝達を仲介する。

加えて、グルタミン酸塩（エステル）は、シナプス効果の微調整に寄与するさらに修飾的な役割を有する代謝型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲ）を活性化する。

グルタミン酸塩（エステル）は、本明細書ではオルソステリック結合部位と呼ばれる受容体の大きな細胞外Ｎ末端ドメインへ結合することによってｍＧｌｕＲを活性化する。この結合は受容体における構造変化を引き起こし、Ｇタンパク質および細胞内シグナル伝達経路の活性化をもたらす。

ｍＧｌｕＲ２サブタイプは、Ｇαｉタンパク質の活性化を介してアデニル酸シクラーゼと負の結合（negatively coupled）をし、その活性化はシナプスにおけるグルタミン酸放出の阻害を引き起こす。中枢神経系（ＣＮＳ）において、ｍＧｌｕＲ２受容体は主に、皮質、視床領域、副嗅球、海馬、扁桃、尾状核被殻および側坐核にわたって豊富にある。

ｍＧｌｕＲ２の活性化は不安障害の治療に効果的であることが臨床試験で示された。さらに、様々な動物モデルにおいてｍＧｌｕＲ２の活性化が有効なことが示され、したがって、統合失調症、てんかん、中毒／薬物依存症、パーキンソン病、疼痛、睡眠障害およびハンチングトン病の新規な治療手段である可能性があることを示している。

現在まで、ｍＧｌｕＲを標的とする利用可能な薬理学的手段のほとんどは、ｍＧｌｕＲファミリーのいくらかのメンバーを活性化するオルソステリックリガンド（グルタミン酸塩（エステル）の構造的アナログであるので）である。

ｍＧｌｕＲにおいて作用する選択的化合物を開発するための新規な経路としては、高度に保存されたオルソステリック結合部位とは異なる部位に結合することによって受容体を修飾するアロステリック機構を通して作用する化合物を同定することである。

ｍＧｌｕＲのポジティブアロステリックモジュレーターは、新規な薬理学的存在として最近になって出現し、この魅力的な選択肢を提供している。種々の化合物がｍＧｌｕＲのポジティブアロステリックモジュレーターとして記載されている。

ＷＯ２００４／０９２１３５（ＮＰＳ社およびアストラゼネカ社）（特許文献１）、ＷＯ２００４／０１８３８６（特許文献２）、ＷＯ２００６／０１４９１８（特許文献３）およびＷＯ２００６／０１５１５８（メルク社）（特許文献４）、ＷＯ２００１／５６９９０（イーライリリー社）（特許文献５）ならびにＷＯ２００６／０３００３２（アデックス社およびヤンセンファーマ社）（特許文献６）は、それぞれフェニルスルホンアミド、アセトフェノン、インダノン、ピリジルメチルスルホンアミドおよびピリジノン誘導体をｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターとして記載している。具体的に開示された化合物はいずれも本発明の化合物とは構造的に関連していない。

ＷＯ２００７／１０４７８３（特許文献７）は、代謝型受容体サブタイプ２（「ｍＧｌｕＲ２」）のポジティブアロステリックモジュレーターである１，４−二置換３−シアノ−ピリドン誘導体を記載している。

このような化合物は、自身は受容体を活性化しないことが示され、むしろ、このような化合物は、受容体のみでは最小応答が誘発されるグルタミン酸塩（エステル）濃度に対して最大応答を受容体に奏させることができる。変異解析では、ｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターの結合はオルソステリック部位では起こらず、むしろ受容体の７回膜貫通型領域内に位置するアロステリック部位で起きることがはっきりと示された。

動物データは、ｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターが不安症および精神病モデルにおいて、オルソステリックアゴニストで得られたものに類似する効果があることを示唆している。ｍＧｌｕＲ２のアロステリックモジュレーターは、恐怖増強的驚愕、およびストレス誘発性異常高熱の不安症モデルにおいて活性があることが示された。さらに、このような化合物は、ケタミンまたはアンフェタミン誘発性の運動過剰の改善ならびにアンフェタミン誘発性の聴覚性驚愕効果のプレパルス阻害の破壊を伴う統合失調症モデルの改善において活性があることが示された（「ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・エクスペリメンタルセラピーズ（J. Pharmacol. Exp. Ther.）」２００６年、３１８、１７３〜１８５（非特許文献１）；「サイコファーマコロジー（Psychopharmacology）」２００５年、１７９、２７１〜２８３）（非特許文献２）。

最近の動物研究はさらに、代謝型グルタミン酸受容体サブタイプ２であるビフェニル−インダノン（ＢＩＮＡ）の選択的なポジティブアロステリックモジュレーターは幻覚剤の精神病モデルをブロックすることを示し、これは統合失調症におけるグルタミン酸作動性機能障害の治療のためのｍＧｌｕＲ２受容体を標的化する戦略をサポートするものである（「モレキュラーファーマコロジー（Mol. Pharmacol.）」２００７年、７２、４７７〜４８４）（非特許文献３）。

国際公開第２００４／０９２１３５号パンフレット 国際公開第２００４／０１８３８６号パンフレット 国際公開第２００６／０１４９１８号パンフレット 国際公開第２００６／０１５１５８号パンフレット 国際公開第２００１／５６９９０号パンフレット 国際公開第２００６／０３００３２号パンフレット 国際公開第２００７／１０４７８３号パンフレット

ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・エクスペリメンタルセラピーズ（J. Pharmacol. Exp. Ther.）、２００６年、３１８、１７３〜１８５． サイコファーマコロジー（Psychopharmacology）、２００５年、１７９、２７１〜２８３． モレキュラーファーマコロジー（Mol. Pharmacol.）、２００７年、７２、４７７〜４８４

ポジティブアロステリックモジュレーターは、グルタミン酸塩（エステル）応答を増強できるが、ＬＹ３７９２６８またはＤＣＧ−ＩＶなどのオルソステリックｍＧｌｕＲ２アゴニストに対する応答を増強することも示されている。これらのデータは、ｍＧｌｕＲ２が関連する上記の神経障害および精神障害を治療するための、ｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターとｍＧｌｕＲ２のオルソステリックアゴニストとの組み合わせを用いるさらに別の新規な治療手法の根拠を示す。

本発明の化合物は、３位がシアノそして４位が置換されていてもよいフェニル（このフェニルの４位は、リンカー基を介して、置換されていてもよいテトラヒドロフランで置換されている）で置換された中心にあるピリジン−２−オン部分を特徴とする。本発明の化合物は、強力なｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターである。

発明の説明
本発明は、代謝型グルタミン酸受容体２修飾活性を有する化合物に関する。本発明は式（Ｉ）の化合物（その任意の立体化学的異性体形態も含む）あるいはその薬学的に許容される塩またはその溶媒和物を提供し、

式中、Ｒ₁はＣ_4-6アルキル、またはＣ_3-7シクロアルキルで置換されたＣ_1-3アルキルであり；
Ｒ₂は水素、ハロまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ₃は水素、またはヒドロキシルで置換されたＣ_1-4アルキルであり；
ＸはＯまたはＮＨであり；
ｎは値が１または２の整数である。

本発明はまた、ヒトを含む哺乳類における症状の治療または予防（特に治療）用薬剤の製造のための式（Ｉ）の化合物あるいはその任意のサブグループの使用に関し、この症状の治療または予防は、ｍＧｌｕＲ２のアロステリックモジュレーター（特にポジティブアロステリックモジュレーター）の神経修飾効果により作用されるかまたは促進される。

本発明の一実施形態は、式（Ｉ）の化合物（その任意の立体化学的異性体形態も含む）あるいはその薬学的に許容される塩またはその溶媒和物であり、

式中、Ｒ₁はＣ_4-6アルキル、またはＣ_3-7シクロアルキルで置換されたＣ_1-3アルキルであり；
Ｒ₂は水素、ハロまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ₃は水素、またはヒドロキシルで置換されたＣ_1-4アルキルであり；
ＸはＯまたはＮＨであり；
ｎは値が１または２の整数であるが、但し上記化合物は下記のもの以外である。

本発明の一実施形態は、Ｒ₁がＣ_4-6アルキル、特にＣ_4-5アルキル、例えば、１−ブチル、２−メチル−１−プロピル、３−メチル−１−ブチル；特に１−ブチルまたは３−メチル−１−ブチルである式（Ｉ）の化合物である。

本発明の一実施形態は、Ｒ₁がＣ_3-7シクロアルキルで置換されたＣ_1-3アルキル、特にシクロプロピルメチルまたは２−（シクロプロピル）−１−エチル、より具体的にはシクロプロピルメチルである式（Ｉ）の化合物である。

本発明の一実施形態は、Ｒ₂が水素である、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物またはその任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、Ｒ₂がハロ、特にフルオロまたはクロロである、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、Ｒ₂がトリフルオロメチルである、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、Ｒ₃が水素である、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、Ｒ₃がヒドロキシルで置換されたＣ_1-4アルキル、特にＲ₃がＣＨ₂ＯＨである、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、ＸがＯである、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、ＸがＮＨである、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、ｎが１である、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、ｎが２である、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、ｎが１であり、Ｒ₂が水素以外であり、当該Ｒ₂がピリジノン部分に対してメタ位にある、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、ｎが１であり、Ｒ₂が水素以外であり、当該Ｒ₂がピリジノン部分に対してオルト位にある、実施形態として上記された式（Ｉ）の化合物または、可能な場合は常に、その任意のサブグループである。

本発明の一実施形態は、Ｒ₁がＣ_4-6アルキル、特に１−ブチルもしくは３−メチル−１−ブチル；またはＣ_3-7シクロアルキルで置換されたＣ_1-3アルキル、特にシクロプロピルメチルもしくは２−（シクロプロピル）−１−エチルであり；
Ｒ₂が水素、フルオロ、クロロまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ₃が水素であり；
ｎが１である、式（Ｉ）の化合物である。

本発明の一実施形態は下記から選ばれる式（Ｉ）の化合物あるいはその薬学的に許容される塩またはその溶媒和物である。

本発明の一実施形態は下記から選ばれる式（Ｉ）の化合物あるいはその薬学的に許容される塩またはその溶媒和物である。

上記または下記に用いられるように、基または基の一部としてのＣ_1-3アルキルなる記載は、メチル、エチル、１−プロピルおよび１−メチル−１−エチルなどの、飽和し、直鎖または分岐鎖であり、１〜３個の炭素原子を有する炭化水素ラジカルを規定する。好ましくは、Ｃ_1-3アルキルはメチルを表す。

上記または下記に用いられるように、基または基の一部としてのＣ_1-4アルキルなる記載は、メチル、エチル、プロピル、１−メチル−１−エチル、１−ブチル、２−メチル−１−プロピルなどの、飽和し、直鎖または分岐鎖であり、１〜４個の炭素原子を有する炭化水素ラジカルを規定する。好ましくは、Ｃ_1-4アルキルはメチルを表す。

上記または下記に用いられるように、基または基の一部としてのＣ_4-6アルキルなる記載は、１−ブチル、２−メチル−１−プロピル、１−ペンチル、２−メチル−１−ブチル、３−メチル−１−ブチル、１−ヘキシルなどの、飽和し、直鎖または分岐鎖であり、４〜６個の炭素原子を有する炭化水素ラジカルを規定する。好ましくは、Ｃ_4-6アルキルは１−ブチルを表す。

上記または下記に用いられるように、基または基の一部としてのＣ_4-5アルキルなる記載は、１−ブチル、２−メチル−１−プロピル、１−ペンチル、２−メチル−１−ブチル、３−メチル−１−ブチルなどの、飽和し、直鎖または分岐鎖であり、４個または５個の炭素原子を有する炭化水素ラジカルを規定する。

上記または下記に用いられるように、Ｃ_3-7シクロアルキルなる記載は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルなどの、飽和した３〜７個の炭素原子を有する環式炭化水素ラジカルを規定する。好ましくは、Ｃ_3-7シクロアルキルはシクロプロピルを表す。

上記または下記に用いられるように、ハロなる記載は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードに対する総称である。

治療上の使用に関して、式（Ｉ）の化合物の塩とは、対イオンが薬学的に許容されるものである。しかしながら、薬学的に許容されるものではない酸および塩基の塩もまた、例えば、薬学的に許容される化合物の調製または精製に用いられる可能性がある。薬学的に許容されてもされなくても塩はすべて本発明の範囲内に包含される。

上記薬学的に許容できる塩は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる治療上効果のある非毒性の酸付加塩形態を含むと定義される。当該塩は、式（Ｉ）の化合物の塩基形態を適切な酸、例えば、無機酸（例えば、ハロゲン化水素酸、特に、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸）；有機酸（例えば、酢酸、ヒドロキシ酢酸、プロパン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸およびパモ酸）で処理することにより得ることができる。

逆に、当該酸性塩形態は、適切な塩基で処理することにより遊離塩基形態に変換することができる。

酸性プロトンを含む式（Ｉ）の化合物はまた、適切な有機および無機塩基で処理することにより、治療効果があり非毒性であるそれらの塩基性塩形態に変換され得る。適切な塩基性塩形態としては、例えば、アンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ土類金属塩（特に、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウム塩）、有機塩基（例えば、ベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）との塩、ヒブラミン塩、ならびにアミノ酸（例えば、アルギニンおよびリジン）との塩が挙げられる。

逆に、当該塩基性塩形態は、適切な酸で処理することにより遊離酸形態に変換することができる。

式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される酸付加塩形態は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される好ましい塩形態である。

溶媒和物なる語は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる溶媒付加形態およびその薬学的に許容される塩形態を包含する。このような溶媒付加形態の例としては、例えば、水和物、アルコラートなどが挙げられる。

なお、式（Ｉ）化合物ならびにその塩および溶媒和物のうちのいくつかは、１つ以上のキラル中心を含み立体化学的異性体形態として存在し得る。

上記に用いられるような「立体化学的異性体形態」なる語は、式（Ｉ）の化合物が有し得る考えられる異性体をすべて規定する。特に記載または表示が無ければ、化合物の化学名称は、考えられるすべての立体化学的異性体形態の混合物を表わし、当該混合物は、基本となる分子構造のジアステレオマーおよびエナンチオマーをすべて含む。しかし本発明はまた、他の異性体を実質的に含まない（すなわち、１０％未満、好ましくは５％未満、特に２％未満、最も好ましくは１％未満の他の異性体を伴う）式（Ｉ）の単一の異性体形態およびその塩または溶媒和物のそれぞれも包含する。したがって、式（Ｉ）の化合物が例えば（Ｒ）と明記される場合、これはこの化合物が（Ｓ）異性体を実質的に含まないことを意味する。

特に、立体中心はＲ配置またはＳ配置を有する可能性があり、二価の環式（部分）飽和ラジカル上の置換基はシス配置またはトランス配置のいずれかを有する可能性がある。

ＣＡＳ命名法の取り決めに従って、化合物中に既知の絶対配置の立体中心が２つ存在する場合、最も小さい数字のキラル中心（すなわち標準となる中心）に対してＲまたはＳの表示が割り当てられる(カーン−インゴールド−プレログ順位則に基づく)。第２の立体中心の配置は、相対的な記述子［Ｒ^*、Ｒ^*］または［Ｒ^*、Ｓ^*］を用いて示され、ここでＲ^*は常に標準となる中心として特定され、［Ｒ^*、Ｒ^*］は同一のキラリティーの中心を示し、［Ｒ^*、Ｓ^*］は異なるキラリティーの中心を示す。例えば、化合物中の最も数字の小さいキラル中心がＳ配置をとり２番目の中心がＲ配置の場合、その立体表示は、Ｓ−［Ｒ^*、Ｓ^*］と特定されることになる。「α」および「β」が用いられる場合、最も少ない環番号を有する環系における非対称炭素原子上の最も優先順位が高い置換基の位置は、任意的に常に環系により決定される平均面の「α」位置にある。環系におけるもう一方の非対称炭素原子上の優先順位が最も高い置換基（式（Ｉ）の化合物における水素原子）の位置は、基準原子上における優先順位が最も高い置換基の位置に対して、それが環系により決定される平均面の同じ側にある場合、「α」と特定され、またはそれが環系により決定される平均面の反対側にある場合、「β」と特定される。

「式（Ｉ）の化合物」なる語またはその任意のサブグループは、以下で用いられる場合は常にそれらの立体化学的異性体形態、それらの薬学的に許容される塩およびそれらの溶媒和物も含むように意図されている。立体化学的に純粋な式（Ｉ）の化合物が特に興味深い。

本出願の範囲内では、元素（特に、式（Ｉ）の化合物に関して言及された場合）はこの元素の全ての同位体および同位体混合物を包含し、天然に存在しても合成されても、天然に豊富にあってもまた同位体的に濃縮された形態であってもよい。特に、水素に言及する場合、¹Ｈ、²Ｈ、³Ｈまたはこれらの混合物を指すと理解され、炭素に言及する場合、¹¹Ｃ、¹²Ｃ、¹³Ｃ、¹⁴Ｃまたはこれらの混合物を指すと理解され、窒素に言及する場合、¹³Ｎ、¹⁴Ｎ、¹⁵Ｎまたはこれらの混合物を指すと理解され、酸素に言及する場合、¹⁴Ｏ、¹⁵Ｏ、¹⁶Ｏ、¹⁷Ｏ、¹⁸Ｏまたはこれらの混合物を指すと理解され、かつフルオロに言及する場合、¹⁸Ｆ、¹⁹Ｆまたはこれらの混合物を指すと理解される。したがって本発明の化合物はまた、１種以上の元素の１種以上の同位体を有する化合物およびその混合物を包含する（１個以上の非放射性原子がその放射性同位体の１個以上と置換されている放射性標識化合物とも呼ばれる放射性化合物を含む）。特に、放射性原子は、水素、炭素、窒素、硫黄、酸素およびハロゲンからなる群から選ばれる。好ましくは放射性原子は、水素、炭素およびハロゲンからなる群から選ばれる。特に、放射性同位体は、³Ｈ、¹¹Ｃ、¹⁸Ｆ、¹²²Ｉ、¹²³Ｉ、¹²⁵Ｉ、¹³¹Ｉ、⁷⁵Ｂｒ、⁷⁶Ｂｒ、⁷⁷Ｂｒおよび⁸²Ｂｒからなる群から選ばれる。好ましくは放射性同位体は、³Ｈ、¹¹Ｃおよび¹⁸Ｆからなる群から選ばれる。

定義のものの一覧から置換基をそれぞれ独立して選択することができるということが上記または下記に適用される場合は常に、化学的に可能性のあるすべての組み合わせが意図される。

置換基から環構造の中まで引かれた線は、適切な環原子のうちのいずれに結合してもよいことを示す。

一般に、式（Ｉ）の化合物は下記の実験手順１に従って調製することができる。

［実験手順１］
式（Ｉ）の化合物は、反応スキーム（１）に従って式（ＩＩ）の中間体（式中Ｙは、ボロン酸またはボロン酸エステルとのＰｄが介在するカップリングに適切な基（例えば、ハロまたはトリフラートなど）を表わす）を式（ＩＩＩ）の中間体（式中Ｒ₄およびＲ₅は、水素またはＣ_1-4アルキルを表わすか、あるいはＲ₄およびＲ₅は一緒になって、例えば、式−ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−または−Ｃ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₂−の二価のラジカルを形成してもよい）と反応させることにより調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、１，４−ジオキサンなど）または不活性溶媒の混合物（例えば、１，４−ジオキサン／ＤＭＦなど）中で、適切な塩基（例えば、ＮａＨＣＯ₃またはＮａ₂ＣＯ₃水溶液など）および適切な触媒（例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄などのＰｄ錯体触媒など）の存在下に、加熱条件下（例えば、１５０℃でマイクロ波照射下で、例えば、１０時間反応混合物を加熱する）で行われてもよい。反応スキーム（１）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してとまたは上記と同様に規定される。

本発明における式（Ｉ）の化合物および中間体のいくつかは不斉炭素原子を含む可能性がある。これら化合物および中間体の純粋な立体化学的異性体形態は、当該技術分野で公知の手順を適用することにより得ることができる。例えば、ジアステレオマーは、選択的結晶化またはクロマトグラフ法（例えば、向流分配、キラル液体クロマトグラフィー等の方法）などの物理的方法により分離することができる。エナンチオマーは、まず適切な分割剤（例えば、キラル酸など）でラセミ混合物をジアステレオマー塩または化合物の混合物に変換し、例えば、選択的結晶化またはクロマトグラフ法（例えば、液体クロマトグラフィー等の方法）により当該ジアステレオマー塩または化合物の混合物を物理的に分離し、最後に分離されたジアステレオマー塩または化合物を対応するエナンチオマーに変換することにより当該ラセミ混合物から得ることができる。純粋な立体化学的異性体形態はまた、介在する反応が立体特異的に起こるという条件で、純粋な立体化学的異性体形態の適切な中間体および出発物質から得られ得る。

エナンチオマー形態の式（Ｉ）の化合物および中間体を分割する別の方法は、特にキラル固定相を用いる液体クロマトグラフィーまたはＳＣＦ（超臨界流体）クロマトグラフィーを含む。

中間体および出発物質のいくつかは公知の化合物であり、市販されている可能性があり、また当該技術分野で公知の手順に従って調製されてもよい。

中間体はまた下記の実験手順２〜１１に従って調製することができる。

［実験手順２］
Ｙがハロを表す式（ＩＩ）の中間体（当該中間体は式（ＩＩ−ａ）で表される）は、式（ＩＶ）の中間体を適切なハロゲン化剤（Ｐ（＝Ｏ）Ｂｒ₃など）と反応させることにより調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、ＤＭＦなど）中でやや高温（例えば、１１０℃）で行われてもよい。反応スキーム（３）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定される。

［実験手順３］
Ｙがトリフラートを表す式（ＩＩ）の中間体（当該中間体は式（ＩＩ−ｂ）で表される）は、反応スキーム（４）に従って式（ＩＶ）の中間体をトリフル酸無水物（トリフルオロメタンスルホン酸無水物とも呼ばれる）と反応させることにより調製することができる。この反応は、適切な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中で適切な塩基（例えば、ピリジンなど）の存在下に低温（例えば、−７８℃）で行われてもよい。反応スキーム（３）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定される。

［実験手順４］
式（ＩＶ）の中間体は、当該技術分野で公知の手順により式（Ｖ）の中間体を、適切な溶媒（例えば、水など）中やや高温（例えば、１００℃）で、適切なメチルエーテル開裂試薬（例えば、ＮａＯＨなど）と反応させることにより調製することができる。反応スキーム（４）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定される。

［実験手順５］
式（Ｖ）の中間体は、反応スキーム（５）に従って当該技術分野で公知の手順により市販の４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリルを式（ＶＩ）のアルキル化剤（例えば、臭化シクロプロピルメチル）と反応させることにより調製することができる。この反応は、不活性溶媒（例えば、アセトニトリルなど）中で適切な塩基（例えば、Ｋ₂ＣＯ₃など）および必要に応じてヨウ素塩（例えば、ＫＩなど）を用いてやや高温（例えば、１２０℃）で行われてもよい。反応スキーム（５）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、Ｚは例えばハロ（例えば、臭素）などの適切な脱離基を表す。

［実験手順６］
式（ＩＩＩ）の中間体は、反応スキーム（６）に従って当該技術分野で公知の手順により式（ＶＩＩ）の中間体（式中ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードを表わしてもよい）を、例えば、パラジウム触媒（例えば、１、１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）ジクロリドなど）などの適切な触媒の存在下に、適切なホウ素源（例えば、ビス（ピナコラト）ジボロンなど）と反応させることにより調製することができる。この反応は、不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中で適切な塩（例えば、酢酸カリウムなど）の存在下にやや高温（例えば、１１０℃）で、例えば、１６時間行われてもよい。

あるいは、式（ＩＩＩ）の中間体はまた、当該技術分野で公知の手順である、金属−ハロゲン交換とそれに続く適切なホウ素源との反応によっても式（ＶＩＩ）の中間体から調製することができる。したがって、例えば、式（ＶＩＩ）の中間体を、やや低温（例えば、−４０℃）で不活性溶媒（例えば、ＴＨＦなど）中で有機リチウム化合物（例えば、ｎ−ブチルリチウムなど）と反応させ、続いて適切なホウ素源（例えば、トリメトキシボランなど）と反応させる。

反応スキーム（６）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、Ｒ₄およびＲ₅は上記と同様に規定される。

［実験手順７］
ＸがＮＨを表し、Ｒ₃が水素を表す式（ＶＩＩ）の中間体（当該中間体は式（ＶＩＩ−ａ）で表される）は、反応スキーム（７）に従って当該技術分野で公知の手順により式（ＶＩＩＩ−ａ）のアニリン中間体をテトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−４−オンと反応させることにより調製することができる。この反応は、適切な還元剤（例えば、水素化ナトリウムなど）の存在下に、不活性溶媒（１，２−ジクロロエタンなど）中でやや低温（例えば、２５℃）で、例えば、３日間行なわれてもよい。反応スキーム（７）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、ハロはクロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

［実験手順８］
ＸがＯを表し、Ｒ₃が水素を表す式（ＶＩＩ）の中間体（当該中間体は式（ＶＩＩ−ｂ）で表される）は、反応スキーム（８）に従って当該技術分野で公知の手順により式（ＶＩＩＩ−ｂ）のフェノール中間体をテトラヒドロ−４−ピラノールと反応させることにより調製することができる。この反応は、ホスフィン（例えば、トリフェニルホスフィンなど）および光延反応様のカップリングに適切なカップリング剤（例えば、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボン酸など）の存在下に、不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中で、やや低温（例えば、２５℃）で、例えば、２時間行われてもよい。反応スキーム（８）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、ハロはクロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

［実験手順９］
式（ＶＩＩ）の中間体はまた、反応スキーム（９）に従って当該技術分野で公知の手順により式（ＩＸ）のアニリン様の中間体からザンドマイヤー型反応を介して調製することもできる。反応スキーム（９）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、ハロはクロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

［実験手順１０］
式（ＩＸ）の中間体は、反応スキーム（１０）に従って、接触水素化または還元剤としての塩化スズ（ＩＩ）二水和物の使用などの当該技術分野で公知の手順により式（Ｘ）のニトロ中間体からアミノ官能基までのニトロ基の還元を介して当該技術分野で公知の手順により調製することができる。反応スキーム（１０）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、ハロはクロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

［実験手順１１］
式（Ｘ）の中間体は、反応スキーム（１１）に従って当該技術分野で公知の手順により式（ＸＩ）の中間体を適切な式（ＸＩＩ）のテトラヒドロピラニル中間体（例えば、テトラヒドロ−４−ピラノールなど）と反応させることにより調製することができる。この反応は、適切な塩基（例えば、炭酸セシウムなど）の存在下に、不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）中でやや高温（例えば、１４０℃）で、例えば、１６時間行われてもよい。反応スキーム（１１）では、すべての変数は式（Ｉ）に関してと同様に規定され、ハロはクロロ、ブロモまたはヨードであってもよい。

［薬理］
本発明で提供される化合物は代謝型グルタミン酸受容体のポジティブアロステリックモジュレーターであり、特にｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターである。本発明の化合物は、グルタミン酸認識部位（オルソステリックリガンド部位）へ結合するのではなく、むしろ受容体の７回膜貫通型領域内のアロステリック部位に結合するようである。グルタミン酸塩（エステル）またはｍＧｌｕＲ２のアゴニストの存在下では、本発明の化合物はｍＧｌｕＲ２応答を増加させる。本発明で提供される化合物は、グルタミン酸塩（エステル）またはｍＧｌｕＲ２アゴニストに対するこのような受容体の応答を増加させる能力によりｍＧｌｕＲ２において効果がある（これにより受容体の応答が増強される）と予想される。したがって本発明は、薬として用いられる本発明の化合物、ならびにヒトを含む哺乳類における症状の治療または予防（特に治療）用薬剤の製造のための本発明の化合物または本発明の医薬組成物の使用に関し、この症状の治療または予防はｍＧｌｕＲ２のアロステリックモジュレーター（特にそのポジティブアロステリックモジュレーター）の神経修飾効果により作用されるかまたは促進される。本発明はまた、ヒトを含む哺乳類における症状の治療または予防（特に治療）用薬剤の製造で用いる本発明の化合物あるいは本発明の医薬組成物に関し、この症状の治療または予防はｍＧｌｕＲ２のアロステリックモジュレーター（特にそのポジティブアロステリックモジュレーター）の神経修飾効果により作用されるかまたは促進される。本発明はまた、ヒトを含む哺乳類における症状の治療または予防（特に治療）のための本発明の化合物あるいは本発明の医薬組成物に関し、この症状の治療または予防はｍＧｌｕＲ２のアロステリックモジュレーター（特にそのポジティブアロステリックモジュレーター）の神経修飾効果により作用されるかまたは促進される。

また、本発明はヒトを含む哺乳類におけるグルタミン酸機能障害と関連する様々な神経障害および精神障害の治療、予防、改善、制御、またはその危険性の減少用薬剤の製造のための本発明の化合物あるいは本発明の医薬組成物の使用に関し、この症状の治療または予防はｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターの神経修飾効果により作用されるかまたは促進される。

本発明が薬剤（例えば、哺乳類の治療用）の製造のための本発明の化合物または組成物の使用に関すると記載されている場合、特定の司法権限の管轄域ではこのような使用は、例えば、このような治療を必要とする哺乳類に有効量の本発明の化合物または組成物を投与することを含む、例えば、哺乳類の治療方法として理解される。

特に、グルタミン酸機能障害と関連する神経障害および精神障害としては、以下の１種以上の症状または疾患が挙げられる。心臓バイパス手術および移植後の脳欠損などの急性神経障害および急性精神障害、卒中、脳虚血、脊髄損傷、頭部外傷、周生期低酸素症 、心停止、低血糖性神経細胞損傷、認知症（エイズ誘発認知症を含む）、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症、視覚障害、網膜症、認識障害、特発性および薬物誘発性パーキンソン病、振戦を含む筋痙直と関連する筋肉痙攣および障害、てんかん、痙攣、片頭痛（片頭痛性の頭痛を含む）、尿失禁、物質耐性、物質禁断症状（アヘン剤、ニコチン、タバコ製品、アルコール、ベンゾジアゼピン、コカイン、鎮静剤、睡眠薬などの物質を含む）、精神病、統合失調症、不安症（全般性不安障害、パニック障害、および強迫観念障害を含む）、気分障害（うつ病、躁病、両相性障害）、三叉神経痛、難聴、耳鳴り、眼の黄斑変性症、嘔吐、脳浮腫、疼痛（急性および慢性の状態、激痛、難治性疼痛、神経因性疼痛、および外傷後の疼痛を含む）、遅発性ジスキネジア、睡眠障害（ナルコレプシーを含む）、注意欠陥／多動性障害および行為障害。

特に本発明は、不安障害、精神障害、人格障害、物質関連障害、摂食障害、気分障害、片頭痛、てんかんまたは痙攣性障害、幼児期障害、認知障害、神経変性、神経毒症状および虚血からなる群から選ばれる中枢神経系障害の治療または予防（特に、治療）用薬剤の製造のための式（Ｉ）の化合物の使用に関する。

上記中枢神経系障害は好ましくは、広場恐怖症、全般性不安障害（ＧＡＤ）、強迫観念障害（ＯＣＤ）、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、対人恐怖および他の恐怖症からなる群から選ばれる不安障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、統合失調症、妄想性障害、統合失調性感情障害、統合失調症様障害および物質誘発性精神障害からなる群から選ばれる精神障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、強迫性人格障害および統合失調症、統合失調型障害からなる群から選ばれる人格障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、アルコール乱用、アルコール依存症、アルコール禁断症状、アルコール禁断せん妄、アルコール誘発性精神障害、アンフェタミン依存症、アンフェタミン禁断症状、コカイン依存症、コカイン禁断症状、ニコチン依存症、ニコチン禁断症状、オピオイド依存症およびオピオイド禁断症状からなる群から選ばれる物質関連障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、神経性食欲不振症および神経性過食症からなる群から選ばれる摂食障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、両相性障害（ＩおよびＩＩ）、気分循環性障害、うつ病、気分変調性障害、大うつ病性障害および物質誘発性気分障害からなる群から選ばれる気分障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、片頭痛である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、非痙攣性全般てんかん、痙攣性全般てんかん、小発作性てんかん重積、大発作性てんかん重積、意識障害を伴うかまたは伴わない部分てんかん、幼児痙攣症、持続性部分てんかんおよび他の形態のてんかんからなる群から選ばれるてんかんまたは痙攣性の障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、注意欠陥／多動性障害である。

上記中枢神経系障害は好ましくは、せん妄、物質誘発持続性せん妄、認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、ハンチントン病による認知症、パーキンソン病による認知症、アルツハイマー型認知症、物質誘発持続性認知症および軽度認知障害からなる群から選ばれる認知障害である。

上記障害のうち、不安症、統合失調症、片頭痛、うつ病およびてんかんの治療が特に重要である。

現時点では、米国精神医学会（American Psychiatric Association）の「精神障害の診断と統計の手引き（Diagnostic & Statistical Manual of Mental Disorders）」第４版（ＤＳＭ−ＩＶ）が本明細書に記載の障害を識別するための診断用手段を提供している。当業者であれば、本明細書に記載した神経障害および精神障害について別の命名法、疾病分類および分類体系が存在すること、そしてこれらは医学および科学の進歩とともに発展することを認識しているであろう。

式（Ｉ）の化合物を含むこのようなｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターはグルタミン酸塩（エステル）に対するｍＧｌｕＲ２の応答を増強させるため、本発明の方法は内因性のグルタミン酸塩（エステル）を利用するのが有利である。

式（Ｉ）の化合物を含むｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターはアゴニストに対するｍＧｌｕＲ２の応答を増強させるため、本発明は、有効量のｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーター（式（Ｉ）の化合物を含む）をｍＧｌｕＲ２アゴニストと組合せて投与することによりグルタミン酸機能障害と関連する神経障害および精神障害を治療することにまで及ぶと理解される。

本発明の化合物は、薬剤を互いに組み合わせたものがいずれかの薬剤単独よりも安全であるかまたはより有効である場合、式（Ｉ）の化合物または他の薬剤が効用を有する疾患または症状の治療、予防、制御、改善、またはその危険性の低減において１種以上の薬剤と組み合わせて利用されてもよい。

［医薬組成物］
本発明はまた、薬学的に許容される担体または希釈剤と、有効成分として治療上有効な量の本発明の化合物、特に式（Ｉ）の化合物（その立体化学的異性体形態またはその薬学的に許容される塩もしくはその溶媒和物を含む）とを含有する医薬組成物に関する。

本発明の化合物、特に式（Ｉ）の化合物（その立体化学的異性体形態、またはその薬学的に許容される塩もしくはその溶媒和物、またはその任意のサブグループもしくは組み合わせを含む）は、投与目的に関して種々の剤型に処方されてもよい。適切な組成物としては薬剤を全身投与するために通常用いられる全ての組成物が挙げられる。

本発明の医薬組成物を調製するため、有効成分として有効な量の特定の化合物（必要に応じて塩形態）は薬学的に許容される担体または希釈剤と完全な混合物として組み合わされる。この担体または希釈剤は投与に関して所望される剤型に応じて種々様々の形態であってもよい。上記医薬組成物は、特に、注射または吸入による経口、経直腸、経皮投与に適切な単回投与形態であることが望ましい。例えば、経口投薬形態に組成物を調製する際、例えば、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤および液剤などの経口液体製剤の場合は、例えば、水、グリコール、オイル、アルコールなど；あるいは散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合は、例えば、デンプン、糖、カオリン、希釈剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの固体担体などの通常の製剤媒体のいずれが使用されてもよい。投与の容易さのため、経口投与が好ましく、錠剤およびカプセル剤が最も有利な経口投薬単位形態であり、この場合言うまでもなく固体医薬担体が用いられる。非経口組成物に関して、担体は通常少なくとも大部分が滅菌水を含むことになるが、例えば、溶解性を増加させるため他の成分が含まれもよい。例えば、担体が食塩水、グルコース溶液、または食塩水とグルコース溶液との混合物を含む注射液が調製されてもよい。注射用懸濁液が調製されてもよく、この場合適切な液体担体、懸濁化剤などが用いられてもよい。また使用直前に液体形態の製剤に変換されることが意図される固体形態の製剤も含まれる。経皮投与に適した組成物において、担体は必要に応じて浸透促進剤および／または適切な湿潤剤を含んでもよく、任意の性質を有する適切な添加剤（この添加剤は皮膚に著しい有害作用をもたらさない）と低い割合で必要に応じて組み合わされてもよい。当該添加剤は、皮膚への投与を容易にしかつ／または所望の組成物の調製に役立つ可能性がある。これら組成物は様々な様式、例えば、経皮パッチとして、スポットオンとして、軟膏として投与されてもよい。

投与のしやすさおよび用量の均一性のため、上記医薬組成物を単位用量形態に処方することが特に有利である。本明細書では単位用量形態とは、単一の用量として適切な物理的に別々の単位を指し、各単位は必要な製剤担体と関連して所望の治療効果を生むように計算された所定量の有効成分を含む。このような単位用量形態の例としては、錠剤（刻線付き錠剤またはコーティングされた錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、散剤包、ウエハー、坐剤、注射液または注射用懸濁液など、ならびにそれらの分割された複数回分が挙げられる。

正確な用量および投与頻度は、当業者に周知のように、使用される特定の式（Ｉ）の化合物、治療されている特定の症状、治療されている症状の重症度、年齢、体重、性別、障害の程度、および特定の患者の全身的な健康状態、そして個体が服用している可能性のある他の薬剤によって異なる。さらに、上記の有効な１日量は、治療されている被験者の応答に応じておよび／または本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて減量または増量されてもよいことは明らかである。

投与様式によっては、上記医薬組成物は、有効成分を０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％、そして薬学的に許容される担体を１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％を含むこととなる。ここでパーセントは全て組成物の全重量に基づいている。

上述のように、本発明はまた、式（Ｉ）の化合物または他の薬物が効用を有する可能性のある疾患または症状の治療、予防、制御、改善、あるいはその危険性の低減における、本発明の化合物と１種以上の他の薬物とを含む医薬組成物に関し、そして薬剤の製造のためのそのような化合物の使用に関する。本発明はまた、本発明の化合物とｍＧｌｕＲ２のオルソステリックアゴニストとの組み合わせに関する。本発明はまた、薬として用いられるこのような組み合わせに関する。本発明はまた、ヒトを含む哺乳類における症状の治療または予防における、同時に、個別にまたは順次に使用される併用薬剤として（ａ）本発明の化合物、その薬学的に許容される塩またはその溶媒和物と（ｂ）ｍＧｌｕＲ２のオルソステリックアゴニストとを含む製品に関し、この治療または予防はｍＧｌｕＲ２のアロステリックモジュレーター（特にポジティブアロステリックモジュレーター）の神経修飾効果により作用されるかまたは促進される。このような組み合わせまたは製品中の異なる薬物は、薬学的に許容される担体または希釈剤と共に単一の製剤中で組み合わされてもよいし、それぞれ薬学的に許容される担体または希釈剤と共に別々の製剤中に存在してもよい。

下記実施例により本発明の範囲を示すことが意図されるが、本発明の範囲を制限するものではない。

［実験の部］
下記実施例において本発明の化合物を調製するためのいくつかの方法が示される。特に明記しない場合、出発物質はすべて民間の供給業者から入手され、さらなる精製を行わないで使用された。特に、以下の略称が実施例および明細書全体にわたって使用される場合がある。

塩水に対する言及はすべて飽和ＮａＣｌ水溶液を指す。特に明記しない場合、温度はすべて℃（摂氏）で表される。特に明記しない場合、反応はすべて室温で不活性雰囲気下でない条件で行われた。

マイクロ波を使った反応は、単一モード反応器であるＥｍｒｙｓ（登録商標）Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒマイクロ波反応器（パーソナルケミストリー社(Personal Chemistry A.B.)、現在はバイオタージ社）またはマルチモード反応器であるＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（マイルストーン社（Milestone, Inc.））中で行なわれた。

［Ａ．中間体の調製］
［実施例Ａ．１］
メタンスルホン酸２−シクロプロピル−エチルエステル（中間体１）

ジクロロメタン（３００ｍｌ）中の２−シクロプロピル−エタノール（１５．１ｇ、１７５．３ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（４８．６ｍｌ、３５０．６ｍｍｏｌ）との溶液に、塩化メタンスルホニル（２０．３５ｍｌ、２６２．９ｍｍｏｌ）を０℃で滴下し、次いで、この混合物を室温で２時間撹拌した。水を加え、層を分離させた。有機相を乾燥させ（Ｎａ₂ＳＯ₄）、真空蒸発させて粗中間体１（１００％）を得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．２］
１−シクロプロピルメチル−４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体２）

アセトニトリル（２５０ｍｌ）中の４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（１２．２ｇ、８１．４８ｍｍｏｌ）の溶液に、ブロモメチル−シクロプロパン（１１ｇ、８１．４８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２２．４８ｇ、１６２．９ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を１１０℃で２４時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、固形物をろ去した。ろ液を蒸発乾固させ、次いで、得られた粗残渣をジエチルエーテルでトリチューレションして純粋な中間体２（１５．７２ｇ、９４％）を白色の固形物として得た。

［実施例Ａ．３］
１−（２−シクロプロピル−エチル）−４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体３）

アセトニトリル（５２０ｍｌ）中の４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（１９．８１ｇ、１３１．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、中間体１（３４．３６ｇ、１７１．５７ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（５６．７３ｇ、４１０．３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を１０５℃で１２時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、固形物をろ去した。ろ液を蒸発乾固させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、２０％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体３（１３．１８ｇ、４６％）を得た。

［実施例Ａ．４］
１−ブチル−４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体４）

アセトニトリル（８００ｍｌ）中の４−メトキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（２０ｇ、１３３ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ブロモブタン（１５．８ｇ、１４６ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（３６．７ｇ、２６６ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を１１０℃で２４時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、固形物をろ去した。ろ液を蒸発乾固させ、次いで、得られた粗残渣をジエチルエーテルでトリチューレションして純粋な中間体４（２７．３９ｇ、＞９９％）を白色の固形物として得た。

［実施例Ａ．５］
１−シクロプロピルメチル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体５）

中間体２（１５．７ｇ、７６．８ｍｍｏｌ）を室温で水酸化ナトリウムの１Ｎ水溶液（３００ｍｌ）とＴＨＦ（５０ｍｌ）に加えた。この反応混合物を１４０℃（油浴温度）で１６時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、ＴＨＦをほぼ真空蒸発させた。水層を０℃まで冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液を加えて酸性化させてｐＨを約３まで調節すると、この時点で白色の固形物が析出した。この固形物をろ去し、Ｅｔ₂Ｏで洗浄し、真空乾燥させて、中間体５を白色の固形物（１０．４４ｇ、７１％）として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．６］
１−（２−シクロプロピル−エチル）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体６）

中間体３（１３．１８ｇ、６０．４ｍｍｏｌ）を室温で水酸化ナトリウムの０．５Ｎ水溶液（２２１ｍｌ）に加えた。この反応混合物を１１０℃（油浴温度）で１２時間加熱した。この混合物を０℃まで冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液を加えて酸性化させてｐＨを約３まで調節すると、この時点で白色の固形物が析出した。この固形物をろ去し、Ｅｔ₂Ｏで洗浄し、真空乾燥させて、中間体６を白色の固形物（１１．２４ｇ、９１％）として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．７］
１−ブチル−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体７）

中間体４（２７．３９ｇ、１３３ｍｍｏｌ）を室温で水酸化ナトリウムの１Ｎ水溶液（５００ｍｌ）とＴＨＦ（１００ｍｌ）に加えた。反応混合物を１１０℃（油浴温度）で２４時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、容量がほぼ２５０ｍｌに減少するまで溶媒を真空蒸発させた。次いで、水層を０℃まで冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液を加えて酸性化させてｐＨを約３まで調節すると、この時点で白色の固形物が析出した。この固形物をろ去し、Ｅｔ₂Ｏで洗浄し、真空乾燥させて、中間体７を白色の固形物（２５ｇ、９８％）として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．８］
４−ブロモ−１−シクロプロピルメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体８）

ＤＭＦ（２５０ｍｌ）中の中間体５（１０．４ｇ、５４．６７ｍｍｏｌ）の溶液にオキシ臭化リン（ＩＩＩ）（３１．３ｇ、１０９．３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を１１０℃で１．５時間加熱した。氷浴中で冷却後、溶液を水とＥｔＯＡｃで分液した。ＥｔＯＡｃで３回抽出後、合わせた有機画分を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液としてＤＣＭ）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体８（８．８３ｇ、６４％）を得た。

［実施例Ａ．９］
４−ブロモ−１−（２−シクロプロピル−エチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体９）

ＤＭＦ（１５０ｍｌ）中の中間体６（６．０ｇ、２９．３７ｍｍｏｌ）の溶液にオキシ臭化リン（ＩＩＩ）（１６．８４ｇ、５８．７５ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を１１０℃で３時間加熱した。氷浴中で冷却後、溶液を水とＥｔＯＡｃで分液した。ＥｔＯＡｃで３回抽出後、合わせた有機画分を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液としてＤＣＭ）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体９（７．０ｇ、８９％）を得た。

［実施例Ａ．１０］
４−ブロモ−１−ブチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（中間体１０）

ＤＭＦ（６００ｍｌ）中の中間体７（３９ｇ、２０３ｍｍｏｌ）の溶液にオキシ臭化リン（ＩＩＩ）（１１６ｇ、４０６ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を１１０℃で１．５時間加熱した。氷浴中で冷却後、溶液を水とＥｔＯＡｃで分液した。ＥｔＯＡｃで３回抽出後、合わせた有機画分を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液としてＤＣＭ）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体１０（３６．７ｇ、７２％）を得た。

［実施例Ａ．１１］
（４−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミン（中間体１１）

１，２−ジクロロエタン（５０ｍｌ）中の４−ブロモ−２−フルオロ−フェニルアミン（１ｇ、５．２６ｍｍｏｌ）とテトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−４−オン（０．７３ｍｌ、７．８９ｍｍｏｌ）とトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．６６ｇ、７．８９ｍｍｏｌ）との混合物を室温で７２時間撹拌した。この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土のパッドをジクロロメタンで洗浄した。合わせたろ液をＮａＨＣＯ₃（飽和水溶液）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、蒸発乾固させた。このように得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（ＮＨ₃）、５％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体１１を黄色の油状物として得た（１．４４ｇ、１００％）。

［実施例Ａ．１２］
（４−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミン（中間体１２）

１，２−ジクロロエタン（１００ｍｌ）中の４−ブロモ−２−クロロ−フェニルアミン（４ｇ、１９．３７ｍｍｏｌ）とテトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２．６９ｍｌ、２９．０５ｍｍｏｌ）と炉乾された分子篩４Å（２ｇ）とトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６．１２ｇ、２９．０５ｍｍｏｌ）との混合物を室温で７２時間撹拌した。この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土のパッドをジクロロメタンで洗浄した。合わせたろ液をＮａＨＣＯ₃（飽和水溶液）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、蒸発乾固させた。このように得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（ＮＨ₃）、５％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体１２を茶色の油状物として得た（４．８３ｇ、８６％）。

［実施例Ａ．１３］
（４−ブロモ−２−トリフルオロメチル−フェニル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミン（中間体１３）

１，２−ジクロロエタン（３０ｍｌ）中の４−ブロモ−２−トリフルオロメチル−フェニルアミン（０．８８ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）とテトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−４−オン（０．５ｍｌ、５．４９ｍｍｏｌ）と炉乾された分子篩４Å（１ｇ）とトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．１５ｇ、５．４９ｍｍｏｌ）との混合物を室温で７２時間撹拌した。この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土のパッドをジクロロメタンで洗浄した。合わせたろ液をＮａＨＣＯ₃（飽和水溶液）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、蒸発乾固させた。このように得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（ＮＨ₃）、５％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体１３を黄色の油状物として得た（１．１１ｇ、９９％）。

［実施例Ａ．１４］
４−（４−ブロモ−２−クロロ−フェノキシ）−テトラヒドロ−ピラン（中間体１４）

４−ブロモ−２−クロロ−フェノール（４ｇ、１９．２８ｍｍｏｌ）とテトラヒドロ−４−ピラノール（２．２０ｍｌ、２３．１３ｍｍｏｌ）とポリマー担持トリフェニルホスフィン（１７．２９ｇ、３９．２９ｍｍｏｌ；アルゴノート社（Argonaut）から購入、担持量２．２３ｍｍｏｌ／ｇ）との混合物をジクロロメタン（２５０ｍｌ）に懸濁し、次いで、０℃まで冷却した。アザジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．６５ｇ、２８．９２ｍｍｏｌ）を回分的に加え、この反応混合物を室温まで温め、２時間振とうした。樹脂をろ去し、ジクロロメタンで洗浄した。合わせたろ液を蒸発乾固させた。このように得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（ＮＨ₃）、２％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、中間体１４を無色の油状物として得た（５．３８ｇ、９５％）。

［実施例Ａ．１５］
［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミン（中間体１５）

１，４−ジオキサン（４．５ｍｌ）およびＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の中間体１１（０．７ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）の溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（０．７７ｇ、３．０６ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．７５ｇ、７．６５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を脱気し、次いで、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＤＣＭとの錯体（１：１）、０．０６２ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１０分間マイクロ波照射下で１５０℃で加熱した。室温まで冷却後、この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土をＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させて所望のボロン酸塩中間体１５（１００％）を粗生成物として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．１６］
［２−クロロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミン（中間体１６）

１，４−ジオキサン（１０．８ｍｌ）およびＤＭＦ（１．２ｍｌ）中の中間体１２（２ｇ、６．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（２．０９ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（２．０２ｇ、２０．６４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を脱気し、次いで、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＤＣＭとの錯体（１：１）、０．１６ｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１０分間マイクロ波照射下で１５０℃で加熱した。室温まで冷却後、この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土をＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させて所望のボロン酸塩中間体１６（１００％）を粗生成物として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．１７］
（テトラヒドロピラン−４−イル）−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−２−トリフルオロメチル−フェニル］−アミン（中間体１７）

１，４−ジオキサン（４．５ｍｌ）およびＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の中間体１３（１．１１ｇ、３．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（１．０４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（１．００ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を脱気し、次いで、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＤＣＭとの錯体（１：１）、０．０８３ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１０分間マイクロ波照射下で１５０℃で加熱した。室温まで冷却後、この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土をＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させて所望のボロン酸塩中間体１７（１００％）を粗生成物として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［実施例Ａ．１８］
４−［２−クロロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェノキシ］−テトラヒドロ−ピラン（中間体１８）

１，４−ジオキサン（１０．８ｍｌ）およびＤＭＦ（１．２ｍｌ）中の中間体１４（２ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）の溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（２．０１ｇ、８．２３ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（２．０１ｇ、２０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を脱気し、次いで、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＤＣＭとの錯体（１：１）、０．１６ｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１０分間マイクロ波照射下で１５０℃で加熱した。室温まで冷却後、この混合物をケイソウ土のパッドに通してろ過した。このケイソウ土をＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空蒸発させて所望のボロン酸塩中間体１８（１００％）を粗生成物として得、これをさらなる精製をしないで使用した。

［Ｂ．最終化合物の調製］
［実施例Ｂ．１］
１−シクロプロピルメチル−４−［３−フルオロ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−フェニル］−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（化合物１）

１，４−ジオキサン（３ｍｌ）およびＮａ₂ＣＯ₃の飽和溶液（３ｍｌ）中の中間体１５（０．８ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）の溶液に、中間体８（０．５８ｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を窒素気流を用いて脱気し、これにＰｄ（ＰＰｈ₃）₄（０．２６ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物をシールドチューブ中１５０℃で１０分間マイクロ波照射した。次いで、得られた反応混合物を冷却後にＥｔＯＡｃで希釈し、ケイソウ土のパッドに通してろ過した。ろ液を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮させた。次いで、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、３０％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、化合物１（０．２４１ｇ、３０％）を得た。

［実施例Ｂ．２］
１−シクロプロピルメチル−４−［３−クロロ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−フェニル］−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（化合物２）

１，４−ジオキサン（２ｍｌ）およびＮａ₂ＣＯ₃の飽和溶液（２ｍｌ）中の中間体１６（０．５７ｇ、１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、中間体８（０．４３ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を窒素気流を用いて脱気し、これにＰｄ（ＰＰｈ₃）₄（０．１９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物をシールドチューブ中１５０℃で１０分間マイクロ波照射した。次いで、得られた反応混合物を冷却後にＥｔＯＡｃで希釈し、ケイソウ土のパッドに通してろ過した。ろ液を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮させた。次いで、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、３０％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、化合物２（０．１０３ｇ、１６％）を得た。

［実施例Ｂ．３］
１−シクロプロピルメチル−２−オキソ−４−［４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（化合物３）

１，４−ジオキサン（３ｍｌ）およびＮａ₂ＣＯ₃の飽和溶液（３ｍｌ）中の中間体１７（０．６３ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）の溶液に、中間体８（０．４２ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を窒素気流を用いて脱気し、これにＰｄ（ＰＰｈ₃）₄（０．１９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物をシールドチューブ中１５０℃で１０分間マイクロ波照射した。次いで、得られた反応混合物を冷却後にＥｔＯＡｃで希釈し、ケイソウ土のパッドに通してろ過した。ろ液を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮させた。次いで、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、３０％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、化合物３（０．５９ｇ、９％）を得た。

［実施例Ｂ．４］
４−［３−クロロ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルオキシ）−フェニル］−１−（２−シクロプロピル−エチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−カルボニトリル（化合物４）

１，４−ジオキサン（２ｍｌ）およびＮａ₂ＣＯ₃の飽和溶液（２ｍｌ）中の中間体１８（０．５７ｇ、１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、中間体９（０．４５ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を窒素気流を用いて脱気し、これにＰｄ（ＰＰｈ₃）₄（０．１９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物をシールドチューブ中１５０℃で１０分間マイクロ波照射した。次いで、得られた反応混合物を冷却後にＥｔＯＡｃで希釈し、ケイソウ土のパッドに通してろ過した。ろ液を塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮させた。次いで、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液としてＤＣＭ〜ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、３０％まで）により精製した。所望の画分を採取し、真空蒸発させて、化合物４（０．１０８ｇ、１７％）を得た。

表１は、上記の実施例の１つ（実施例番号）に従って調製された式（Ｉ）の化合物を記載している。

［Ｃ．分析の部］
本発明の化合物のＬＣＭＳ特性解析に関して下記の方法を使用した。

［ＬＣＭＳ−基本手順］
ＨＰＬＣ測定は、下記それぞれの方法において規定されているように脱気装置付きポンプ（クォータナリまたはバイナリ）、オートサンプラー、カラムオーブン、ダイオードアレー検出器（ＤＡＤ）およびカラムを有するアジレントテクノロジー社（Agilent Technologies）からのＨＰ１１００を用いて行った。カラムからの流れはＭＳ検出器に分配された。このＭＳ検出器はエレクトロスプレーイオン化源が装備されていた。窒素をネブライザーガスとして使用した。イオン化源温度を１４０℃に維持した。データ収集はＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアで行った。

［方法１］
上記基本手順に加えて、アギレント社（Agilent）からのＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ、２．１×３０ｍｍ）上で１ｍｌ／分の流量および６０℃で逆相ＨＰＬＣを行なった。用いた勾配条件は次のとおりである。Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液）を９０％、Ｂ（アセトニトリル）を５％、Ｃ（メタノール）を５％から、６．５分でＢを５０％およびＣを５０％まで、７分時点でＢを１００％まで、そして７．５分時点で初期条件まで平衡化し９．０分まで維持した。注入量は２μｌであった。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ）は、０．１秒の滞留時間を用いて０．５秒で１００から７５０まで走査することにより陽イオン化モードでのみ得られた。キャピラリーニードル電圧は２．５ｋＶであり、コーン電圧は２０Ｖであった。ロイシン−エンケファリンが質量較正（ロックマス）に用いた標準物質であった。

［方法２］
上記基本手順に加えて、アドバンスドクロマトグラフィーテクノロジーズ社（Advanced Chromatography Technologies）からのＡＣＥ−Ｃ１８カラム（３．０μｍ、４．６×３０ｍｍ）上で１．５ｍｌ／分の流量および４０℃で逆相ＨＰＬＣを行った。用いた勾配条件は次のとおりである。Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液）を８０％、Ｂ（アセトニトリル）を１０％、Ｃ（メタノール）を１０％から、６．５分でＢを５０％およびＣを５０％まで、７分時点でＢを１００％まで、そして７．５分時点で初期条件まで平衡化し９．０分まで維持した。注入量は５μｌであった。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ）は、０．１秒の滞留時間を用いて０．５秒で１００から７５０まで走査することにより陽イオン化モードでのみ得られた。キャピラリーニードル電圧は陽イオン化モード用では２．５ｋＶであり、コーン電圧は２０Ｖであった。ロイシン−エンケファリンが質量較正（ロックマス）に用いた標準物質であった。

［融点測定］
融点測定はメトラーＦＰ６２装置上で行なわれた。

［Ｄ．薬理例］
本発明で提供される化合物は、ｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターである。当該化合物は、グルタミン酸塩（エステル）結合部位以外のアロステリック部位に結合することによりグルタミン酸塩（エステル）応答を増強させると考えられる。式（Ｉ）の化合物が存在すると、グルタミン酸塩（エステル）濃度に対応するｍＧｌｕＲ２の応答が増加される。式（Ｉ）の化合物は、受容体の機能を増強する能力によって実質的にｍＧｌｕＲ２においてその効果を有すると考えられる。下記の［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイ法を用いてｍＧｌｕＲ２において試験されたポジティブアロステリックモジュレーターの挙動を表３に示す。このアッセイ法は、そのような化合物（特に式（Ｉ）の化合物）の同定に適している。

［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイ
［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイは、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）の機能の研究に用いられる機能性の細胞膜に基づくアッセイであり、これによりＧＴＰの非加水分解性形態である［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ（ガンマ線を放射する³⁵Ｓで標識されたグアノシン５’‐三リン酸）の取り込みが測定される。Ｇタンパク質γサブユニットは、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）によりグアノシン５’−二リン酸（ＧＤＰ）の交換を触媒し、アゴニスト（［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ）によりＧＰＣＲが活性化された場合に取り込まれて交換サイクルを継続するための開裂ができなくなる（ハーパー（Harper）（１９９８年）「カレントプロトコルズ・イン・ファーマコロジー（Current Protocols in Pharmacology）」２．６．１−１０、ジョンワイリーアンドサンズ社（John Wiley & Sons, Inc.））。放射性［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳの取り込み量はＧタンパク質の活性の直接的な尺度であり、したがってアゴニストの活性を測定できる。ｍＧｌｕＲ２受容体は、Ｇγｉタンパク質に優先的に共役することが示されており（本方法のための優先的な共役）、したがって組み換え細胞株中そして組織中の両方でｍＧｌｕＲ２受容体の受容体活性化を研究するために広く使用されている（シャフハウザー（Schaffhauser）ら（２００３年）、ピンカートン（Pinkerton）ら（２００４年）、ムテル（Mutel）ら１９９８年「ジャーナル・オブ・ニューロケミストリー（Journal of Neurochemistry）」７１：２５５８〜６４；シャフハウザーら（１９９８年）「モレキュラーファーマコロジー（Molecular Pharmacology）」５３：２２８〜３３）。ここでは、我々は、本発明の化合物のポジティブアロステリック修飾（ＰＡＭ）特性を検出するために、ヒトｍＧｌｕＲ２受容体でトランスフェクトされシャフハウザーら（２００３年）「（モレキュラーファーマコロジー」４：７９８〜８１０から作成された細胞に由来する細胞膜を用いた［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイの使用を記載する。

［細胞膜調製］
ＣＨＯ細胞をプレコンフルエントまで培養し５ｍＭの酪酸で２４時間刺激した後、ＰＢＳ中で洗浄し、次いで、均質化用緩衝液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ７．４、４℃）中ですくい取って採取した。細胞溶解物をウルトラタラックスホモジナイザーを用いて短時間（１５秒）均質化した。ホモジネートを２３５００×ｇで１０分間遠心分離し、そして上清を廃棄した。ペレットを５ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）に再懸濁し、再び遠心分離した（３００００×ｇ、２０分、４℃）。最終的なペレットを５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）に再懸濁し、使用前は適切なアリコート中で−８０℃で保存した。タンパク質濃度をウシ血清アルブミンを標準としてブラッドフォード法（バイオラッド社（Bio-Rad）、米国）により測定した。

［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイ
ヒトｍＧｌｕＲ２を含む細胞膜における試験化合物のｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリック修飾活性の測定は、前培養前に解凍され短時間均質化された凍結細胞膜を用いて、９６ウェルマイクロプレート（１５μｇ／アッセイウェル、３０分、３０℃）中でポジティブアロステリックモジュレーターの濃度を増加させながら（０．３ｎＭから５０μＭまで）所定の最小濃度のグルタミン酸塩（エステル）を加える（ＰＡＭアッセイ）かまたはグルタミン酸塩（エステル）を加えないでアッセイ緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＭｇＣｌ₂、５０μＭ ＧＤＰ、１０μｇ／ｍｌサポニン）中で行った。このＰＡＭアッセイのため、細胞膜はＥＣ₂₅の濃度（すなわちグルタミン酸塩（エステル）の最大応答の２５％が得られ、出版済みデータ（ピン（Pin）ら（１９９９年）ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー（Eur. J. Pharmacol.）３７５：２７７〜２９４）と一致する濃度）のグルタミン酸塩（エステル）で前培養された。［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ（０．１ｎＭ、ｆ．ｃ．）を加えて総反応容量を２００μｌとした後、マイクロプレートを短時間振とうし、さらに培養して、活性化させて［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳを取り込ませた（３０分、３０℃）。９６ウェルプレートセルハーベスター（フィルターメート、パーキンエルマー社、米国）を用いてグラスファイバーフィルタープレート（ユニフィルター９６ウェルＧＦ／Ｂフィルタープレート、パーキンエルマー社、ダウナーズグローヴ、米国）マイクロプレート上で急速に真空ろ過し、次いで、３００μｌの氷冷した洗浄用緩衝液（１０ｍＭ Ｎａ₂ＰＯ₄・２Ｈ₂Ｏ、１０ｍＭ ＮａＨ₂ＰＯ₄・Ｈ₂Ｏ、ｐＨ７．４）で３回洗浄することにより反応を停止させた。次いで、フィルターを風乾し、各ウェルに４０μｌの液体シンチレーションカクテル（Microscint-O）を加え、細胞膜に結合した［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳを９６ウェルシンチレーションプレートリーダー（トップカウント、パーキンエルマー社、米国）中で測定した。非特異的［³⁵Ｓ］ＧＴＰγＳ結合は、１０μＭの冷ＧＴＰの存在下で測定される。各曲線は、データ点毎に試料をデュプリケートで用いて１１種類の濃度で少なくとも１度作成した。

［データ分析］
ポジティブアロステリック修飾（ＰＡＭ）を調べるため、添加されたＥＣ₂₅のｍＧｌｕＲ２アゴニストグルタミン酸の存在下での本発明の代表的な化合物の濃度応答曲線をプリズムグラフパッドソフトウェア（グラフパッド社（GraphPad）、サンディエゴ、米国）を用いて作成した。当該曲線は４変数ロジスティック方程式

にフィッティングされ、ＥＣ₅₀値が決定された。ＥＣ₅₀は、グルタミン酸塩（エステル）応答の増強の最大半量をもたらす化合物濃度である。これは、ポジティブアロステリックモジュレーターの非存在下のグルタミン酸塩（エステル）応答から完全飽和濃度のポジティブアロステリックモジュレーターの存在下のグルタミン酸塩（エステル）の最大応答を引くことにより計算される。次いで、最大半量効果を生む濃度をＥＣ₅₀として求める。

表３：本発明の化合物に関する薬理学的データ
化合物を所定のＥＣ₂₅濃度のｍＧｌｕＲ２アゴニスト（グルタミン酸塩（エステル））の存在下で試験して、ポジティブアロステリック修飾（ＧＴＰγＳ−ＰＡＭ）を調べた。示されている値は、少なくとも１つの実験からの１１種類の濃度応答曲線のデュプリケートの値の平均である。試験化合物はすべて５．０を超えるｐＥＣ₅₀（−ｌｏｇＥＣ₅₀）値を示した。１実験におけるｐＥＣ₅₀値の測定誤差は約０．３ｌｏｇ単位であると推測される。

［Ｅ．組成物例］
これらの実施例にわたって用いられる「有効成分」は、式（Ｉ）の最終化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物および立体化学的異性体形態に関する。

本発明の製剤の代表的な処方例は以下のとおりである。

［１．錠剤］
有効成分 ５〜５０ｍｇ
第二リン酸カルシウム ２０ｍｇ
ラクトース ３０ｍｇ
滑石 １０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｍｇ
バレイショデンプン ２００ｍｇまで
この実施例において、有効成分は、同じ量の本発明の化合物のいずれとも、特に、同じ量の例示された化合物のいずれとも置き換えられ得る。

［２．懸濁剤］
１ミリリットル毎に有効化合物１種を１〜５ｍｇ、カルボキシルメチルセルロースナトリウムを５０ｍｇ、安息香酸ナトリウムを１ｍｇ、ソルビトールを５００ｍｇ、および水を１ｍｌまで含むように経口投与用水性懸濁剤が調製される。

［３．注射剤］
非経口組成物は、１０容量％のプロピレングリコール水溶液中で１．５重量％の本発明の有効成分を撹拌することにより調製される。

［４．軟膏］
有効成分 ５〜１０００ｍｇ
ステアリルアルコール ３ｇ
ラノリン ５ｇ
白色ワセリン １５ｇ
水 １００ｇまで
この実施例において、有効成分は、同じ量の本発明の化合物のいずれとも、特に、同じ量の例示された化合物のいずれとも置き換えられ得る。

妥当な変更は本発明の範囲から逸脱すると見なされるべきではない。上記発明は当業者によって様々に変更される可能性があることは明らかである。

Claims (15)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   （式中、Ｒ₁はＣ_4-6アルキル、またはＣ_3-7シクロアルキルで置換されたＣ_1-3アルキルであり；
   Ｒ₂は水素、ハロまたはトリフルオロメチルであり；
   Ｒ₃は水素、またはヒドロキシルで置換されたＣ_1-4アルキルであり；
   ＸはＯまたはＮＨであり；
   ｎは値が１または２の整数である）の化合物（その立体化学的異性体形態も含む）
   ［ただし、下記の化合物を除く
   

   

   

   ］
   あるいはその薬学的に許容される塩またはその溶媒和物。
2. Ｒ₁が、１−ブチルもしくは３−メチル−１−ブチル、またはシクロプロピルメチルもしくは２−（シクロプロピル）−１−エチルである、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ₃がＣＨ₂ＯＨである、請求項１または２に記載の化合物。
4. ｎが１であり、Ｒ₂が水素以外であり、前記Ｒ₂がピリジノン部分に対してメタ位にある、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
5. Ｒ₁が１−ブチル、３−メチル−１−ブチル、シクロプロピルメチルまたは２−（シクロプロピル）−１−エチルであり；Ｒ₂が水素、フルオロ、クロロまたはトリフルオロメチルであり；Ｒ₃が水素であり；ｎが１である、請求項１に記載の化合物。
6. 下記から選ばれる請求項１に記載の化合物あるいはその薬学的に許容される塩またはその溶媒和物。
   

   

   
7. 請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を含む医薬組成物。
8. 薬学的に許容される担体または希釈剤を更に含み、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物が、治療上有効な量で含有される請求項７に記載の医薬組成物。
9. ヒトを含む哺乳類における症状の治療または予防のための請求項７または８に記載の医薬組成物であって、前記症状の治療または予防がｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターの神経修飾効果により作用されるかまたは促進されることを特徴とする医薬組成物。
10. 不安障害、精神障害、人格障害、物質関連障害、摂食障害、気分障害、片頭痛、てんかんもしくは痙攣性障害、幼児期障害、認知障害、神経変性、神経毒症状および虚血からなる群から選ばれる中枢神経系障害の治療または予防のための請求項７または８に記載の医薬組成物。
11. 前記中枢神経系障害が、広場恐怖症、全般性不安障害（ＧＡＤ）、強迫観念障害（ＯＣＤ）、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、対人恐怖および他の恐怖症からなる群から選ばれる不安障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、統合失調症、妄想性障害、統合失調性感情障害、統合失調症様障害および物質誘発性精神障害からなる群から選ばれる精神障害であるか；
    前記中枢神経系障害が、強迫性人格障害および統合失調症、統合失調型障害からなる群から選ばれる人格障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、アルコール乱用、アルコール依存症、アルコール禁断症状、アルコール禁断せん妄、アルコール誘発性精神障害、アンフェタミン依存症、アンフェタミン禁断症状、コカイン依存症、コカイン禁断症状、ニコチン依存症、ニコチン禁断症状、オピオイド依存症およびオピオイド禁断症状からなる群から選ばれる物質関連障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、神経性食欲不振症および神経性過食症からなる群から選ばれる摂食障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、両相性障害（ＩおよびＩＩ）、気分循環性障害、うつ病、気分変調性障害、大うつ病性障害および物質誘発性気分障害からなる群から選ばれる気分障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、片頭痛であるか；または
    前記中枢神経系障害が、非痙攣性全般てんかん、痙攣性全般てんかん、小発作性てんかん重積、大発作性てんかん重積、意識障害を伴うかまたは伴わない部分てんかん、幼児痙攣症、持続性部分てんかんおよび他の形態のてんかんからなる群から選ばれるてんかんまたは痙攣性の障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、幼児期障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、せん妄、物質誘発持続性せん妄、認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、ハンチントン病による認知症、パーキンソン病による認知症、アルツハイマー型認知症、物質誘発持続性認知症および軽度認知障害からなる群から選ばれる認知障害であるか；または
    前記中枢神経系障害が、不安症、統合失調症、片頭痛、うつ病およびてんかんからなる群から選ばれる、請求項１０に記載の医薬組成物。
12. 前記幼児期障害が注意欠陥／多動性障害である、請求項１１に記載の医薬組成物。
13. ｍＧｌｕＲ２のオルソステリックアゴニストを更に含む請求項１０〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。
14. 式（ＩＩ）の中間体（式中Ｙは、ボロン酸またはボロン酸エステルとのＰｄが介在するカップリングに適切な基を表わす）を、適切な反応不活性溶媒中で、適切な塩基および適切な触媒の存在下、加熱条件下で、式（ＩＩＩ）の中間体（式中Ｒ₄およびＲ₅は、水素またはＣ_1-4アルキルを表わすか、あるいはＲ₄およびＲ₅は一緒になって式−ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−または−Ｃ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₂−の二価のラジカルを形成してもよい）と反応させること
    

    

    （Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｘおよびｎは、請求項１で規定されたとおりである）を特徴とする請求項１に記載の化合物の調製方法。
15. 式（Ｉ）の化合物を酸で処理することによって治療効果のある非毒性の酸付加塩に変換すること、または逆に酸付加塩形態をアルカリで処理することによって遊離塩基に変換すること；あるいは、
    その立体化学的異性体形態を調製することを
    さらに含む請求項１４に記載の調製方法。