UA127372C2 - Моноспецифічне pd-1-сполучне моноклональне антитіло - Google Patents

Моноспецифічне pd-1-сполучне моноклональне антитіло Download PDF

Info

Publication number
UA127372C2
UA127372C2 UAA201801414A UAA201801414A UA127372C2 UA 127372 C2 UA127372 C2 UA 127372C2 UA A201801414 A UAA201801414 A UA A201801414A UA A201801414 A UAA201801414 A UA A201801414A UA 127372 C2 UA127372 C2 UA 127372C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
mat
domain
cancer
binding
domains
Prior art date
Application number
UAA201801414A
Other languages
English (en)
Inventor
Калпана Шах
Дуглас Х. Сміт
Дуглас Х. Смит
Мотте-Мос Росс Ла
Леслі С. Джонсон
Лесли С. Джонсон
Пол А. Мур
Еціо Бонвіні
Эцио Бонвини
Скотт Кьоніг
Скотт КЕНИГ
Original Assignee
Макродженікс, Інк.
Макродженикс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Макродженікс, Інк., Макродженикс, Инк. filed Critical Макродженікс, Інк.
Publication of UA127372C2 publication Critical patent/UA127372C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G01N2333/70521—CD28, CD152
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)

Description

Перехресне посилання на споріднені заявки
І0О0О1| Дана заявка претендує на пріоритет згідно із заявкою на патент США Меб2/198867 (поданою 30 липня 2015 р.; заявка в стадії розгляду), 62/239559 (поданою 9 жовтня 2015 р.; заявка в стадії розгляду), 62/255140 (поданою 13 листопада, 2015 р.; заявка в стадії розгляду) і 62/322974 (поданою 15 квітня 2016 р.; заявка в стадії розгляду), зміст яких повністю включений у дану заявку за допомогою посилання.
Посилання на перелік послідовностей
ІЇОО2| Дана заявка включає один або більше переліків послідовностей відповідно до параграфа 1.821 розділу 37 Зводу федеральних правил США та далі, які розкриті на машинозчитуваних носіях (файл озаглавлений: 1301 0122РСТ Зедиепсе Гівіпд 5Т2514Хї, створений 1 липня 2016 року та має розмір 282789 байт), зазначений файл повністю включений у дану заявку за допомогою посилання.
Область техніки 003) Даний винахід відноситься до РО-1-сполучних молекул, які містять РО-1-сполучний домен із відібраних антитіл до РО-1, здатних зв'язуватися з РО-1 яванських макак і РО-1 людини: моноклонального антитіла 1 (МАТ 1) до РО-1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до
РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до
РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1.
Зокрема, згідно з даним винаходом запропоновані РО-1-сполучні молекули, які являють собою гуманізовані або химерні варіанти зазначених антитіл або містять РО-1-сполучні фрагменти зазначених антитіл до РО-1 (зокрема, імунокон'югати, діатіла, ВІіТЕ, біспецифічні антитіла та т.п.). Зокрема згідно з даним винаходом запропоновані РО-1-сполучні молекули, які додатково здатні зв'язуватися з епітопом молекули, що брали участь у регуляції контрольної точки імунної відповіді, яка присутня на поверхні імунної клітини. Згідно з даним винаходом також запропоновані способи застосування зазначених РО-1-сполучних молекул для детектування
РО-1 або для стимуляції імунної відповіді. Згідно з даним винаходом також запропоновані способи комбінованої терапії, в яких РО-1-сполучну молекулу, яка містить один або більше РО- 1-сполучних доменів зазначених відібраних антитіл до РО-1, вводять в комбінації з однією або більше додатковими молекулами, які ефективно стимулюють імунну відповідь, та/або в
Зо комбінації з однією або більше додатковими молекулами, які специфічно зв'язуються з раковим антигеном.
Рівень техніки
І Імунні відповіді, опосередковувані клітинами
ЇО0О4| Імунна система людини та інших ссавців забезпечує захист від інфекцій та захворювань. Такий захист забезпечується як гуморальною імунною відповіддю, так й імунною відповіддю, опосередковуваною клітинами. Гуморальна відповідь призводить до вироблення антитіл й інших біологічних молекул, які здатні розпізнати та нейтралізувати чужорідні мішені (антигени). Напроти, опосередковувана клітинами імунна відповідь включає активацію Т- клітинами макрофагів, природних клітин-кілерів (МК) й антигенспецифічних цитотоксичних Т- лімфоцитів, а також вивільнення різних цитокінів у відповідь на розпізнавання антигена (опо,
С. еї аї. (2003) "Іттипе Недшіайоп ру Моме! Совіїтиіацгу Моїесшев", Іттипоїо9д. Не. 28(1):39-
АВ).
ІОО5І Здатність Т-клітин оптимально опосередковувати імунну відповідь на антиген потребує двох різних сигнальних взаємодій (Мідіена, М. еї аї. (2007) "Моадшіайпа Со-5йтшиайоп",
Мешйгоїпегарешіісв 4:666-675; Коптап, А.). еї а. (2007) "СпесКроїпї ВіосКаде іп Сапсег
Іттипоїпегару", Адм. Іттипої. 90:297-339). По-перше, антиген, який був розташований на поверхні антигенпрезентуючих клітин (АПК), повинен бути презентований антигенспецифічним наївним СО4- Т-клітинам. Процес презентації включає передачу сигналу за допомогою Т- клітинного рецептора (ТСК), що керує Т-клітиною для ініціювання імунної відповіді, яка буде специфічною у відношенні презентованого антигена. По-друге, ряд костимулюючих й інгібуючих сигналів, опосередковуваних взаємодіями між АПК і різними поверхневими молекулами Т- клітин, запускає спочатку активацію та проліферацію Т-клітин і, в остаточному підсумку, їх інгібування. Отже, перший сигнал надає специфічність імунній відповіді, тоді як другий сигнал служить для визначення характеру, величини та тривалості відповіді.
ІОО6Ї Імунна система ретельно контролюється костимулюючими та коінгібуючими лігандами та рецепторами. Згадані молекули забезпечують другий сигнал для активації Т-клітин і забезпечують збалансований комплекс позитивних і негативних сигналів, щоб максимально збільшити імунні відповіді на інфекцію, при цьому зводячи до мінімуму аутоімунні відповіді (Ууапо, І. єї аї. (Магсй 7, 2011) "МІЗТА, А Моме! Моизе Ід Зирепатіу Гідапа Тнаї Медаїїмеїу 60 Веашаїез Т-СеїЇ Везропзев", У. Ехр. Мед. 10.1084/ет.20100619:1-16; І ерепіев, В. еї аї. (2008)
"Те Воїє ОЇ Медаїме Созійїтшаюгт5 Юигіпуд Рагавіїйс Іптесіоп5", Епдостгіпе, Меїабоїїс «5 Іттипе
Різогаеєтв - Огид Тагдеїв 8:279-288). Особливе значення має зв'язування лігандів В7.1 (СО80) і
В7.2 (6086) антигенпрезентуючої клітини, а також СО28 і рецепторів СТІ А-4 СА: Т-лімфоциту (Зпагре, А.Н. еї аї. (2002) "Тне 87-С028 Бирепатіїу", Маїиге ВНеу. Іттипої!. 2:116-126; опо, С. єї а. (2003) "Іттипе Недшіайоп ру Моме! Совіїтшіаюгу Моїіесшіев", Іттипоїод. Невз. 28(1):39-48;
ІіпаїІеу, Р.5. еї аї. (2009) "ТНе Сіїпіса! ШНІйу ОГ Іппірйіпа СО28-теадаіаїва Совіїтшиіаноп", Іттипо).
Веу. 229:307-321). Зв'язування В7.1 або В7.2 з СО28 стимулює активацію Т-клітин; зв'язування
В7.1 або В7.2 з СТІ А-4 інгібує таку активацію (бопо, С. еї аї. (2003) "ттипе НРеашаїйоп Бу Момеї
Совіїти|аюгту Моіесшев", Іттипо/од. Без. 28(1):39-48; І іпаІєу, Р.5. еї а!. (2009) "Тне Сіїпіса! ШНЙУ
ОГ Іппібйіпа СО28-тедаіаїєд Совійтиіайоп", Іттипої. Вем. 229:307-321; Стеепулаій, В.У. єї аї. (2005) "Те В7 Ратйу ВАВемівзйей", Апп. Нем. Іттипої. 23:515-548). 0028 конститутивно експресується на поверхні Т-клітин (Сіго55, у., еї а!. (1992) "Ідепійісайоп Апа різшіршіоп ОЇ Те
Совіїтиіаюгу Ресеріог СО28 Іп Тне Моизе", У. Іттипої. 149:380-388), тоді як експресія СТІ А-4 швидко підсилюється після активації Т-клітин (Гіпвієу, Р. еї аї. (1996) "Іпігасеїміаг Тгайіскіпуд ОЇ
СТІ А4 Апа Росаї) І осаїїгайоп Томагах 5йез ОЇ ТСА Епдадетепі", Іттипйу 4:535-543). Оскільки
СТІ А-4 є більше високоафінним рецептором (Зпагре, А.Н. еї аї. (2002) "Пе 87-С028 зЗирепатіу", Маїште Вем. Іттипої. 2:116-126), зв'язування спочатку ініціює проліферацію Т- клітин ( за допомогою СО28) і потім інгібує його (за допомогою експресії СТІ А-4, що розвивається), послабляючи тим самим ефект, якщо проліферація більше не потрібна.
І007| Подальші дослідження лігандів рецептора СО28 призвели до ідентифікації й опису набору родинних молекул В7 ("суперсімейство В7") (Соуїеє, А.у. єї а). (2001) "не Ехрапаїпд В7 зЗирепатіу: Іпстеазіпа Сотрієехйу Іп Совіїтиіаюту 5ідпаіє Неашіаїйпа Т-Сеї! Рипсійоп", Маїшиге
Іттипої. 2(3):203-209; Зпагре, А.Н. еї а!. (2002) "не В7-СО28 Зуирепатіїу", Маїиге Вем. Іттипої. 2:116-126; Стеепмаїйа, В... єї а!. (2005) "Пе В7 Ратіїу Вемівіїесй", Апп. Веу. Іттипої. 23:515-548;
Сов, М. еї аї. (2005) "Пе В7 ЕРатійу ОЇ Іттипе-Кедшіаїйюгу Гідапав", Сепоте Віої. 6:223.1- 223.7; 1 оКе, Р. еї аї. (2004) "ЕГтегдіпд Меспапізтв ОЇ Іттипе Ведшіаїйоп: Тне Ехіеєпаєйд В7 Ратіїу
Апа Редшаїюгу Т-СеїІв". АйНийїв Невз. ТНег. 6:208-214; Коптап, А.У. еї аї. (2007) "СпесКроїіпі
ВіосКкаде іп Сапсег ІттипоїНегару", Адм. Іттипої. 90:297-339; НРііе5, О.В. еї а. (2007) "не Мем
В75: Ріауїпд а Рімоїа! Роїє іп Титог Іттипйу", У. Іттипоїпег. 30(3):251-260; Адагмаї, А. еї аї.
Зо (2008) "те Роїе ОЇ Розіййме Совіїтціаюгу Моіесшцез Іп Тгтапгеріапіайоп Апа ТоіІегапсе", Сит. Оріп.
Огдап Тгапвріапі. 13:366-372; Іепвзспому, О.). еї аї. (1996) "СО28/87 Бузівт ої Т-Сеї
Совіїтиайоп", Апп. Неу. Іттипої. 14:233-258; Мапа, 95. єї аї. (2004) "Со-5ідпаїйпту Моїесшев ОЇ
Тне В7-С028 Ратіїу Іп Розййме Апа Медаїїме Ведшиїайоп ОЇ Т І утрпосуїе Незропзев", Місторе5
Іптесі. 6:759-766). У цей час існує декілька відомих членів сімейства: В7.1 (2080), 87.2 (СО86), індукований костимулюючий ліганд (ІСО5-Ї), ліганд програмованої смерті-ї (РО-І1; В7-НІ), ліганд програмованої смерті-2 (РО-12, В7-О0С), В7-НЗ, В7-НА і В7-Нб (Соїпв, М. еї аї. (2005) "Тне
В7 Ратіу ОЇ Іттипе-Недшіайогу Гідапав", Сепоте Віо!. 6:223.1-223.7; Ніа|пік, М.Р. еї аї. (2012) "Емоїшіоп ОЇ Те В7 Ратіїу: Со-Емоїшіоп ОЇ В7Нб Апа МкКрЗзо, Ідепійісайоп ОЇ А Мем В7 Ратіїу
Метрбег, В7Н7, Апа ої В75 Нівогіса! Кеїапйопейпір УМІВ Те МНС", Іттиподепеїіс5 ери дої.ога/10.1007/500251-012-0616-2).
ЇЇ Білок програмованої смерті-1 ("РО-1")
ІОО8І Білок програмованої смерті-ї ("РО-1", також відомий як "СбО279") являє собою мембранний білок типу | масою 31 кДа, що є членом розширеного сімейства регуляторів Т- клітин СО28/СТІ А-4, який у цілому негативно регулює імунні відповіді (Ібпіда, У. еї аї. (1992) "Іпдисей Ехргезвіоп ОЇ РО-1, А МомеІ! Метбрег ОЇ Те Іттиподіориїйп Сепе Зирепатйіу, Ороп
Ргодгаттей Се Овєай", ЕМВО 3. 11:3887-3895; публікація заявки на патент США
Мо2007/0202100; 2008/0311117; 2009/00110667, патенти США МоМоб808710, 7101500, 7488802, 7635757, 7722868, РСТ публікація УМО 01/14557).
Ї009| РО-1 експресується на активованих Т-клітинах, В-клітинах і моноцитах (Адаїа, У. еї а). (1996) "Ехргезвіоп ОЇ Те РО-1 Апідеп Оп Те бипйасе ОЇ бійтшаювй Моизе Т Апа в
Гутрпосуїев", Іпї. Іттипої. 8(5):765-772; Мата?гакі, Т. еї аї. (2002) "Ехргезвіоп ОЇ Ргодгаттєа
Беаїйй 1 І ідапах Ву Мигіпе Т-СеїІз Апа АРС", У. Іттипої. 169:5538-5545) і з низькими рівнями на природних кілерних Т-клітинах (МК-клітинах) (Мівпітига, Н. еї аї. (2000) "Расіїнайоп ОЇ Веїа зЗеїесіп Апа Модіїїсайоп ОЇ Розійме ЗеІесіюп Іп Те Тпутив ОЇ РО-1-Оеєїїсієпі Місе", У. Ехр. Мед. 191:891-898; Мапіп-Ого2со, М. еї аї. (2007) "ппірпйогу Совіїтиціайоп Апа Апії-Титог Іттипйу", зетіп. Сапсег Віо!. 17(4):288-298).
Ї0О0О10| Позаклітинна область РО-1 складається з одного варіабельного домену (М) імуноглобуліну (Ід), який на 2395 ідентичний еквівалентному домену в СТІ А-4 (Мапіп-Ого2со, М. еї а. (2007) "Іпрпірйогу Совіїтиіайоп Апа Апіі-Титог Іттипйу", Зетіп. Сапсег Віо!. 17(4):288-298). 60 Після позаклітинного варіабельного домену Ід розташована трансмембранна область та внутрішньоклітинний хвіст. Внутрішньоклітинний хвіст містить два сайти фосфорилювання, розташованих в імунорецепторному тирозиновому інгібуючому мотиві й імунорецепторному тирозиновому перемикаючому мотиві, це свідчить про те, що РО-1 негативно регулює сигнали
ТОВ (Ізпіда, У. еї а. (1992) "Іпдисед Ехргеззіоп ОЇ РО-1, А Моме! Метьег ОЇ Тне Іттипоадіориїїп
Сбепе б5урепйатіу, Ороп Ргодгаттєа Сеї! Оєаїйн", ЕМВО .). 11:3887-3895; ВіапкК, С. єї а!. (2006) "Сопігіршіоп ОЇ Те РО-І1/РО-1 Раїйжау То Т-СеїЇ Ехпаивіюп: Ап ОРбаїє Оп Ітріїсайопве Гог
СНгопіс ІпТесіопв Апа Титог Емазіоп Сапсег", Іттипої. ІттипоїНег. 56(5):739-745).
Ї0011| РО-1 інгібує імунну систему шляхом зв'язування з В7-НІ і В7-ОС (Рііев, О.В. єї аї. (2007) "пе Мем В75: Ріауіпд а Рімоїа! Роїеє іп Титог Іттипйу", У. Іттипоїйпег. 30(3):251-260; патенти США МоМоб803192, 7794710, публікації заявок на патент США МоМо2005/0059051, 2009/0055944, 2009/0274666, 2009/0313687, РСТ публікація УМО 01/39722, УМО 02/086083). 0012) В7-НІ ї В7-ОС широко експресуються на поверхнях тканин людини та миші, таких як серце, плацента, м'язи, фетальна печінка, селезінка, лімфатичні вузли та тимус, а також печінка, легені, нирки, клітини острівців підшлункової залози та тонкого кишечнику миші (Мапйіп-
Огосо, М. єї аї. (2007) "Іппірйогу Совіїтиіайоп Апа Апіі-Титог Іттипйу", бетіп. Сапсег Віо). 17(4):288-298). У людини експресія білка В7-НІ була виявлена в клітинах ендотелію людини (Спеп, У. еї а. (2005) "Ехргезвзіоп ої В7-НІ іп Іпїаттаїцйогу Репаї! Тибшаг Еріїнеїа! СеїїІв", Мернгоп.
Ехр. Мерпгої. 102:е81-е92; де Наї), 5. єї аї. (2005) "Вепа! Тибшаг Еріїпеїїа! Се Модшіате Т-Сеї
Везропзев Міа ІСО5-Ї Апа В7-НІ1" Кідпеу Іпі. 68:2091-2102; Магапеї, М.М. еї аї. (2002) "В7-НІ І5
Ехргеззейа Ву Нитап ЕпаоїНнеїїа! Сей Апа Зирргеззез Т-СеїЇ СуюКіпе БЗупіпевів", У. Іттипої. 169:3581-3588), міокарді (Вгом/п, У.А. еї аї. (2003) "Віоскаде ОЇ Ргодгаттєа Оеаїн-1 І ідапаз Оп
Оепатййіс Сеї5 Еппапсе5 Т-Сеї| Асіїмайоп Апа СуїоКіпе Ргодисійоп", У. Іттипої. 170:1257-1266), синцитіотрофобластах (Реїгоїї, М... єї аї. (2002) "87 Батійу Моїесшціев: Моме! Іттипотоамціаютгв5
АГ Тне Маїегпа!-РеїаІ Іпіепасе", Ріасепіа 23:595-5101). Молекули також експресуються резидентними макрофагами деяких тканин, макрофагами, які були активовані інтерфероном (ІФН)-у або фактором некрозу пухлини (ФНО)-а (І аїсптап, У. еї аї. (2001) "РО-12 Із А Зесопа
Пдапа Рог РО-1 Апа Іппіріїв Т-Сеї! Асіїмайоп", Маї. Іттипої! 2:261-268), й у пухлинах (опо, Н. (2003) "В7-НІ Раїпмжау Апа їз Воїє Іп Те Емазіоп ОЇ Титог Іттипйу", У. Мої. Мед. 81:281-287).
ЇО0О13| Було виявлено, що взаємодія В7-НІ і РО-1 посилає істотний негативний
Зо костимулюючий сигнал Т- і В-клітинам (Мапіп-Ого2со, М. єї аї. (2007) ""прпірйогу Созіїтшайноп Апа
Апіі-Титог Іттипйу", бЗетіп. Сапсег Вісі. 17(4):288-298) і виконує функцію індуктора загибелі клітин (Івпіда, У. еї а!. (1992) "пдисей Ехргезвіоп ОЇ РО-1, А Моме! Метрбег ОЇ ТНе Іттиподіориїїп
Сепе Зуирепатіу, Ороп Ргодгаттей Сеїї ЮОєаї", ЕМВО у. 11:3887-3895; Бириані, 5.К. еї аї. (2005) "Те Ваіапсе ОЇ Іттипе Незропзев: Созійтиіайоп Мегзе Соіппібйіоп", У. Моїес. Меа. 83:193-202). Більше конкретно, було виявлено, що взаємодія рецептора РО-1 у низьких концентраціях і ліганда В7-НІ1 призводить до передачі інгібуючого сигналу, який сильно інгібує проліферацію антигенспецифічних СОВ8- Т-клітин; при більше високих концентраціях взаємодії з
РО-1 не інгібують проліферацію Т-клітин, а значно знижують вироблення багатьох цитокінів (Зпагре, А.Н. еї аї. (2002) "Тне В7-С028 Зирепатіу", Маїште Вем. Іттипої. 2:116-126). Було виявлено, що проліферація Т-клітин і вироблення цитокінів під дією спочиваючих і раніше активованих СО4 і СО8 Т-клітин, і навіть наївних Т-клітин із пуповинної крові, інгібується розчинними гібридними білками В7-НІ1-Ес (Егеетап, а... єї а). (2000) "Епдадетепі ОЇ Те РО-1
Ітітипоїппірйогу НКесеріої Ву А Моме! В7 Ратіу Метбрег І еад5 То Медаїме Недшіайоп ОЇ
Гутрпосуїе Асіїмайоп", ). Ехр. Мей. 192:1-9; І аїсптап, У. еї аї. (2001) "РО-12 Ів А 5есопа Гідапа
Рог РО-1 Апа Іппібіїв Т-Сеї| Асіїмайоп", Маїшге Іттипої. 2:261-268; Сапег, Ї. еї аї. (2002) "РО- 1:РО-Ї. Іппірйогу Раїнжау Айесів Воїй СО4() апа СОВ8(-) Т-сеїів Апа Із Омегсоте Ву ІІ -2", Еишг. у.
Іттипої. 32(3):634-643; ЗПпагре, А.Н. еї а). (2002) "Те В7-С028 Зирепатійіу", Маїште Веу.
Іттипої. 2:116-126).
І0014|Роль В7-НІ їі РО-1 в інгібуванні активації та проліферації Т-клітин дозволяє припустити, що зазначені біологічні молекули можуть служити терапевтичними мішенями для лікування запалення та раку. У цьому зв'язку було запропоноване застосування антитіл до РО-1 для лікування інфекцій та пухлин, а також активуючої модуляції адаптивної імунної відповіді (див. публікації заявок на патент США МоМо2010/0040614; 2010/0028330; 2004/0241745; 2008/0311117; 2009/0217401, патенти США МеМе7521051, 7563869, 7595048, РСТ публікації УМО 2004/056875, УМО 2008/083174). Антитіла, здатні специфічно зв'язуватися з РО-1, були описані
Адаїа, Т. еї а). (1996) "Ехргезвіоп ОЇ Те РО-1 Апіїдеп Оп ТНне 5ипасе ОЇ 5іітиціаїєд Моизе Т Апа
В Гутрпосуїев", Іпї. Іттипої. 8(5):765-772; і Вегдег, К. еї а. (2008) "Рпазе І Заїеїу Апа
РіпаптасокКіпеїйс 5ішау ОЇ СТ-011, А Нитапігей Апіїроду Іпіегасіїптд УА РО-1, Іп Райепів М
Адуапсед Нетапйоіодіс Маїїдпапсіев", СіІїп. Сапсег Вев. 14(10):3044-3051 (див. також патенти 60 США МоМо8008449 і 8552154, публікації патентів США МоМо2007/0166281; 2012/0114648;
2012/0114649; 2013/0017199; 2013/0230514 і 2014/0044738; і РСТ публікації патентів УУО 2003/099196 МО 2004/004771, МО 2004/056875, МО 2004/072286, МО 2006/121168, МО 2007/005874, МО 2008/083174, МО 2009/014708, МО 2009/073533; МО 2012/135408, МО 2012/145549 ії УМО 2013/014668). 0015 Однак, незважаючи на всі попередні досягнення, залишається потреба у поліпшених композиціях, здатних більше активно направляти імунну систему організму на ураження ракових клітин або інфікованих патогенами клітин, особливо у більше низьких терапевтичних концентраціях. Незважаючи на те, що адаптивна імунна система може бути потужним захисним механізмом проти раку та захворювання, найчастіше їй перешкоджають механізми придушення імунітету в мікрооточенні пухлини, такі як експресія РО-1. Крім того, коіїнгібуючі молекули, що експресуються пухлинними клітинами, імунними клітинами та стромальними клітинами у пухлинному середовищі, можуть переважно послабляти відповіді Т-клітин на ракові клітини.
Отже, залишається потреба в ефективних РО-1-сполучних молекулах. Зокрема, існує потреба в ефективних РО-1-сполучних молекулах, що мають бажаний профіль кінетики зв'язування та здатних виступати антагоністами осі РО-1/РО-І1, блокуючи взаємодію РО-1/РО-І1, що може забезпечити поліпшену терапевтичну дію у пацієнтів, що страждають раком або іншими захворюваннями та станами. Даний винахід спрямований на зазначені та інші мети.
Короткий опис винаходу 0016) Даний винахід відноситься до РО-1-сполучних молекул, що містять РО-1-сполучний домен із відібраних антитіл до РО-1, здатних зв'язуватися з РО-1 яванських макак і РО-1 людини: МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1. Згідно з даним винаходом, зокрема, запропоновані РЮО-1-сполучні молекули, які є гуманізованими або химерними варіантами зазначених антитіл або які містять РО-1-сполучні фрагменти зазначених антитіл до
РО-1 (зокрема, імунокон'югати, діатіла, ВіТЕ, біспецифічні антитіла та т.п.). Зокрема, згідно з даним винаходом запропоновані РО-1-сполучні молекули, які додатково здатні зв'язуватися з епітопом молекули, що брали участь у регуляції контрольної точки імунної відповіді, яка присутня на поверхні імунної клітини. Згідно з даним винаходом також запропоновані способи
Зо застосування зазначених РО-1-сполучних молекул для детектування РО-1 або для стимуляції імунної відповіді. Згідно з даним винаходом також запропоновані способи комбінованої терапії, в яких РО-1-сполучну молекулу, яка містить один або більше РО-1-сполучних доменів зазначених відібраних антитіл до РО-1, вводять в комбінації з однією або більше додатковими молекулами, які ефективно стимулюють імунну відповідь, та/або в комбінації з однією або більше додатковими молекулами, які специфічно зв'язуються з раковим антигеном.
ІЇ0017| Зокрема, згідно з даним винаходом запропонована молекула, що зв'язує РО-1 людини, яка містить три домену гіперваріабельних ділянок (СОК) важкого ланцюга (Н) СОВНн!1,
Сова ії СОКНЗ і три домену СОК легкого ланцюга (І) СОВІ1, СОВІ2 і СОКІЗ, причому: (А) (1) Домен СОВНнНі, домен СОВнаг і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ до РО-1 1 ї, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 71, ЗЕО
ІО МО: 72 ї БЕО ІО МО: 73; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ до РО-1 1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 76, 5ЕО ІЮО МО: 77 і ЗБОЮ МО: 78; або (В) 1) Домен СОВНІ, домен СОВнаг і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 2 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: 5ЕО ІЮ МО: 85, 5ЕО
ІО МО: 86 ї БЕО ІО МО: 87; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
БО МАТ 2 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 90, 5ЕО ІЮО МО: 91 і ЗБОЮ МО: 92; або (С) (1) Домен СОРАНІ, домен СОВнаг і домен СОНнЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ З до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: 5ЕО ІЮ МО: 99, 5ЕО
ІО МО: 100 ї БЕО ІЮ МО: 101; ї (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ З до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: 5ЕО ІЮ МО: 104, 5ЕО ІЮО МО: 105 ї БЕО ІЮ МО: 106; або 60 (С) (1) Домен СОРАНІ, домен СОВнаг і домен СОНнЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 4 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 109, ЗЕО
ІО МО: 110 ї БЕО І МО: 111; ї (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 4 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІЮ МО: 115 5ЕО ІО МО: 116; або (Е) 1) Домен СОВНІ, домен СОВнаг і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 5 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 119, ЗЕО
ІО МО: 120 ї БЕО ІЮО МО: 121; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 5 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 124, 5ЕО ІЮ МО: 125 і 5ЕО ІЮО МО: 126; або (Є) 1) Домен СОВНнІ1, домен СОВнае і домен СОВНнЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 6 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: зЕО ІЮ МО: 129, 5ЕО
ІО МО: 130 ії БЕО ІЮО МО: 131; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 6 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 134, 5ЕО ІЮ МО: 135 і 5ЕО ІЮО МО: 136; або (С) (1) Домен СОВНІ, домен СОВна і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 7 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 139, ЗЕО
ІО МО: 140 ї БЕО ІЮО МО: 141; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 7 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 144, 5ЕО ІЮ МО: 145 і 5ЕО ІЮО МО: 146; або (Н) (І) Домен СОРАНІ, домен СОВнаг і домен СОНнЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 8 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 161, 5ЕО
ІО МО: 162 і БЕО ІЮО МО: 163; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 8 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: 5ЕО ІЮ МО: 166, 5ЕО ІЮО МО: 167 і ЗЕО ІО МО: 168; або () 1) Домен СОВн1, домен СОВнаг і домен СОВнЗ3 являють собою домени СОК важкого ланцюга МАТ 9 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 171, ЗЕО
ІО МО: 172 і БЕО ІЮО МО: 173; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОНВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 9 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 176, ЗЕО ІЮ МО: 177 і5ЕО ІО МО: 178; або (У) (1) Домен СОВНІ, домен СОВна2 і домен СОВнЗ3 являють собою домени СОК важкого ланцюга МАТ 10 до РО-1 ії, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮО МО: 192, 5ЕО ІЮ МО: 193 ї БЕО ІЮ МО: 194; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 10 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 197, 5ЕО ІЮО МО: 198 і ЗЕО ІО МО: 199; або (К) (1) Домен СОВНІ, домен СОВнаг і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 11 до РО-1 ії, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 202, 5ЕО ІЮ МО: 203 ії БЕО ІЮ МО: 204; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 11 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 207, 5ЕО ІЮО МО: 208 і ЗЕО ІЮО МО: 209; або () (1) Домен СОРАНн!1, домен СОВнаг і домен СОВНнНЗ являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 12 до РО-1 ії, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮО МО: 212, 5ЕО ІЮ МО: 213 ії БЕО ІЮ МО: 214; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга 60 МАТ 12 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 217, 5ЕО ІЮО МО:
218 і 5ЕО ІЮ МО: 219 або (М) (1) Домен СОРАНІ, домен СОВнае і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОК важкого ланцюга МАТ 13 до РО-1 ії, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮО МО: 222, 5ЕО ІЮ МО: 223 і БЕО ІЮ МО: 224; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 13 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: 5ЕО 10 МО: 227, 5ЕО ІЮ МО: 228 і 5ЕО ІЮ МО: 229; або (М) 1) Домен СОРАНІ, домен СОВнае і домен СОНнЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 14 до РО-1 ії, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮО МО: 232, 5ЕО ІЮ МО: 233 і БЕО ІЮ МО: 234; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 14 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 237, 5ЕО ІЮО МО: 238 і 5ЕО ІЮ МО: 239; або (0) (1) Домен СОВНІ, домен СОВна і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ 15 до РО-1 ії, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮО МО: 242, 5ЕО ІЮ МО: 243 і БЕО ІЮ МО: 244 і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ 15 до РО-1 і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 247, 5ЕО ІЮО МО: 248 і 5ЕО ІЮ МО: 249; або (Р) (1) Домен СОВНІ, домен СОВнаг і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ до РО-1 людини (лРО-1) 7 (1.2) і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: 5ЕО ІЮ МО: 139, 5ЕО ІЮ МО: 140 ї ЗЕО ІЮ МО: 141; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ до лРО-1 7 (1.2) і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 157, 5ЕО І
МО: 145 і БЕО І МО: ІЮ МО: 146;
Зо або (0) (1) Домен СОВНІ, домен СОВна і домен СОВнНЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ до лРО-1 7 (1.3) і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕ ІЮ МО: 139, 5ЕО ІЮО МО: 140 і 5ЕО ІЮ МО: 141; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ до лРО-1 7 (1.3) і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 157, 5ЕО ІЮ
МО: 158 і ЗЕО І МО: ІЮ МО: 145; або (КЮ) (1) Домен СОРАНІ, домен СОВнаг і домен СОНнЗ3 являють собою домени СОМ важкого ланцюга МАТ до лРО-1 9 (2.2) і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕ ІЮ МО: 183, ЗЕО ІЮО МО: 172 і БЕО ІЮ МО: 173; і (2) Домен СОВІТ, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ являють собою домени СОК легкого ланцюга
МАТ до лРО-1 9 (2.2) і, відповідно, містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 188, 5ЕО ІЮ
МО: 189 і БЕО ІО МО: 178. 0018) Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації всіх зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому зазначена молекула являє собою антитіло, і зокрема зазначена молекула являє собою химерне антитіло або гуманізоване антитіло.
Ї0019| Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому варіабельний домен важкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в зЕО ІЮ МО: 79, 5ЕО ІЮО МО: 93, 5ЕО ІО МО: 147, 5ЕО
ІО МО: 149, ЗЕО ІО МО: 179, ЗЕО ІЮ МО: 181 або 5ЕО ІО МО: 250.
І002О| Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому варіабельний домен легкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в зЕО ІЮ МО: 81, 5ЕО ІО МО: 95, 5ЕО ІО МО: 151, 5ЕО
ІО МО: 153, 5ЕО ІЮО МО: 155, 5ЕО ІЮ МО: 184, 5ЕО ІЮ МО: 186 або 5ЕО ІЮО МО: 251.
І0021| Згідно з даним винаходом також запропонований варіант реалізації, в якому молекула, що зв'язує РО-1 людини, являє собою біспецифічну сполучну молекулу, здатну одночасно зв'язуватися з РО-1 людини і з другим епітопом, і зокрема запропонований варіант реалізації, в якому другий епітоп є епітопом молекули, що брали участь у регуляції контрольної точки імунної відповіді, що присутня на поверхні імунної клітини (зокрема, якщо другий епітоп бо являє собою епітоп В7-НЗ, В7-Н4, ВТІ А, С0О40, 0401, 2047, 070, С080, С086, 2094, СО137, б
Ср1371, Сб0226, СТІ А-4, галектину-9, СІТА, СІТАЇ, ННГА2, ІСОБ5, ІСОБІ, КІВ, ГАа-3, ПСНТ,
ГКГС класу І або ІІ, МКОга, МКО2а, охХ40, ОХ40І, РОН, РО-1, РО-І 1, РО-І2, РМЕ, 5ігтра, ТОВ,
ТІСІТ, ТІМ-3 або МІ5ТА, і найбільше конкретно, якщо другий епітоп являє собою епітоп СО137,
СТІ А-4, І ДОА-3, ОХ40, ТІСІТ або ТІМ-3). (0022 Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації, в яких молекула, що зв'язує РО-1 людини, являє собою біспецифічну молекулу, що містить сайт зв'язування епітопу ГАС-3, зокрема, в якій сайт зв'язування епітопу ГАС-3 містить: (А) (1) Домен СОВНІ, домен СОВне і домен СОВнНЗ варіабельної області важкого ланцюга
МАТ до Г АС-3 1, що містять амінокислотні послідовності: ЗЕО І МО: 42, 5ЕО ІО МО: 43 і 5ЕО
ІО МО: 44, відповідно; і (2) Домен СОВІ1, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ варіабельної області легкого ланцюга МАТ до ГАО-3 1, що містять амінокислотні послідовності: БЕО ІО МО: 46, БЕО ІЮО МО: 47 і 5ЕО ІЮ МО: 48, відповідно; або (В) (1) Домен СОВНІ, домен СОВне і домен СОВнНЗ варіабельної області важкого ланцюга
МНІ1 МАТ до ГАС-3 людини (лі АС-3) 1, що містять амінокислотні послідовності: ЗЕО ІЮ МО: 42,
ЗЕО ІЮ МО: 43 і 5ЕО ІЮО МО: 44, відповідно; і (2) Домен СОВИ, домен СОНВІ2 і домен СОВІЗ варіабельної області легкого ланцюга МІ 4
МАТ до лі АС-3 1, що містять амінокислотні послідовності: зХЕО ІЮ МО: 55, ЗЕО ІЮ МО: 47 і ЗЕО
ІО МО: 48, відповідно; або (С) (1) Домен СОВНІ, домен СОВнае і домен СОВнНЗ варіабельної області важкого ланцюга
МАТ до ГАС-3 6, що містять амінокислотні послідовності: 5ЕО ІЮ МО: 57, 5ЕО ІО МО: 58 і ЗЕО
ІО МО: 59, відповідно; і (2) Домен СОВІ1, домен СОКІ2 і домен СОКІЗ варіабельної області легкого ланцюга МАТ до ГАО-3 6, що містять амінокислотні послідовності: БЕО ІО МО: 61, БЕО ІЮО МО: 62 і 5ЕО ІЮ МО: 63, відповідно; або (Б) (1) Домен СОВНІ, домен СОВнаг і домен СОВнНЗ варіабельної області важкого ланцюга
Зо МНІ МАТ до лі до-3 6, що містять амінокислотні послідовності: зЗЕО ІЮ МО: 57, 5ЕО ІЮО МО: 581
ЗЕО ІЮО МО: 59, відповідно; і (2) Домен СОВІ1, домен СОВІ2 і домен СОВІЗ варіабельної області легкого ланцюга МАТ до ГАС-3 6, що містять амінокислотні послідовності: БЕО ІЮ МО: 298, 5ЕО ІЮ МО: 62 і 5ЕО І
МО: 63, відповідно.
І0023| Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому зазначена молекула являє собою діатіло, і зокрема зазначене діатіло являє собою ковалентно зв'язаний комплекс, який містить два або три, або чотири, або п'ять поліпептидних ланцюгів. Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому зазначена молекула являє собою тривалентну сполучну молекулу та зокрема зазначена тривалентна сполучна молекула являє собою ковалентно зв'язаний комплекс, який містить три, чотири, п'ять або більше п'яти поліпептидних ланцюгів. Згідно з даним винаходом додатково запропоновані варіанти реалізації зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому зазначена молекула містить область Ес. Згідно з даним винаходом додатково запропоновані варіанти реалізації зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому зазначена молекула містить домен, що зв'язує альбумін, і зокрема деімунізований домен, що зв'язує альбумін. 0024) Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації всіх зазначених молекул, що зв'язують РО-1 людини, причому зазначена молекула містить область Ес, і при цьому область Ес являє собою варіант області Ес, який містить одну або більше модифікацій амінокислот, які знижують афінність варіанта області Ес у відношенні ЕсукК і/або збільшують період напіввиведення з сироватки крові, і більше конкретно, в якій зазначені модифікації містять щонайменше одну заміну амінокислоти, вибрану з групи, що складається 3: (1)1234А;1235А; (2)1234А і І 235А; (3) М252У; М252У і 52547; (4) М252У і Т256Е; (5) М252У, 52541 і Т256Е; або (6) К2880 і НаЗБК; бо де нумерація являє собою індекс за системою нумерації ЄС, описаною в Кабат.
00251 Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації, в яких будь-яку з вищеописаних РО-1-сполучних молекул застосовують для стимуляції імунної відповіді, опосередковуваної Т-клітинами. Згідно з даним винаходом додатково запропоновані варіанти реалізації в яких будь-яку з вищеописаних РЮО-1-сполучних молекул застосовують для лікування захворювання або стану, пов'язаного з подавленою імунною системою, зокрема, раку або інфекції. (0026) Згідно з даним винаходом, зокрема, запропонований варіант застосування в лікуванні або діагностиці, або прогнозуванні раку, причому рак характеризується присутністю ракової клітини, вибраної з групи, що складається з клітини: пухлини наднирників, асоційованої зі
СНІДом раку, альвеолярної саркоми м'яких тканин, астроцитарної пухлини, раку сечового міхура, раку костей, раку головного та спинного мозку, метастатичної пухлини головного мозку, раку молочної залози, пухлини сонної артерії, раку шийки матки, хондросаркоми, хордоми, хромофобної саркоми клітин нирок, світлоклітинної саркоми, раку товстої кишки, колоректального раку, шкірної доброякісної фіброзної гістіоцитоми, десмопластичної дрібнокруглоклітинної пухлини, епендимоми, пухлини Юінга, екстракістякової міксоїдної хондросаркоми, недосконалого кісткового фіброгенезу, фіброзної дисплазії кістки, раку жовчного міхура або жовчної протоки, раку шлунка, гестаційного трофобластного захворювання, герміногенної пухлини, раку голови та шиї, гепатоцелюлярної карциноми, пухлини острівцевих клітин, саркоми Капоши, раку нирок, лейкозу, ліпоми/доброякісної ліпоматозної пухлини, ліпосаркоми/злоякісної ліпоматозної пухлини, раку печінки, лімфоми, раку легенів, медулобластоми, меланоми, менінгіоми, множинної ендокринної неоплазії, множинної мієломи, мієлодиспластичного синдрому, нейробластоми, нейроендокринної пухлини, раку яєчників, раку підшлункової залози, папілярної тиреокарциноми, пухлини паращитовидної залози, педіатричного раку, пухлини оболонок периферичних нервів, феохромоцитоми, пухлини гіпофізу, раку передміхурової залози, постеріальної увеальної меланоми, рідкого гематологічного розладу, метастатичного раку нирок, рабдоїдної пухлини, рабдоміосаркоми, саркоми, раку шкіри, саркоми м'яких тканин, плоскоклітинної саркоми, раку шлунка, синовіальної саркоми, раку яєчка, карциноми тимуса, тимоми, метастатичного раку щитовидної залози та раку матки.
І0027| Згідно з даним винаходом запропонований спосіб застосування в лікуванні або діагностиці, або прогнозуванні раку, причому рак являє собою колоректальний рак, гепатоцелюлярну карциному, гліому, рак нирок, рак молочної залози, множинну мієлому, рак сечового міхура, нейробластому; саркому, неходжкінську лімфому, недрібноклітинний рак легенів, рак яєчників, рак підшлункової залози, ректальний рак, гострий мієлоїдний лейкоз (АМІ), хронічний мієлолейкоз (СМІ), гострий В-лінійний лімфобластний лейкоз (В-АЇ |), хронічний лімфоцитарний лейкоз (СІ), лейкоз ворсистих клітин (НСІ), бластну пухлину з плазмоцитоїдних дендритних клітин (ВРОСМ), неходжкінські лімфоми (МН), включаючи лейкоз мантійних клітин (МСГ) ї дрібноклітинну лімфоцитарну лімфому (5/3, лімфому Ходжкіна, системний мастоцитоз або лімфому Беркітта. 0028) Згідно з даним винаходом також запропоновані варіанти реалізації, в яких будь-яка з вищеописаних РО-1-сполучних молекул містить детектовану мітку та застосовується для детектування РО-1.
Короткий опис креслень
І0029| На Фігурі 1 представлене схематичне зображення типового ковалентно зв'язаного діатіла, що містить два епітопсполучних сайти, що складаються з двох поліпептидних ланцюгів, кожний з яких містить домен, що сприяє утворенню гетеродимера, з Е-спіраллю або К-спіраллю.
Залишок цистеїну може бути присутнім у лінкері та/або в домені, що стимулює утворення гетеродимера, як показано на Фігурі ЗВ. Домени МІ ії МН, які розпізнають один і той самий епітоп, показані з використанням однакового затінення або заливання.
І0ОЗО|На Фігурі 2 представлене схематичне зображення типової ковалентно зв'язаної молекули діатіла, що містить два епітопсполучних сайти, що складаються з двох поліпептидних ланцюгів, кожний з яких містить домен СНЕаІ і СНЗ, так, що відповідні ланцюги утворюють повну область Ес або її частину. Домени МІ. і МН, які розпізнають один і той самий епітоп, показані з використанням однакового затінення або заливання.
І0ООЗ1| На Фігурах ЗА-3С представлені схеми, що ілюструють типове чотиривалентне діатіло, що містить чотири епітопсполучних сайти, що складаються з двох пар поліпептидних ланцюгів (тобто, в цілому з чотирьох поліпептидних ланцюгів). Один поліпептид кожної пари містить домен СН2 і СНЗ, так, що відповідні ланцюги утворюють повну область Ес або її частину.
Домени МІ ії МН, які розпізнають один і той самий епітоп, показані з використанням однакового бо затінення або заливання. Дві пари поліпептидних ланцюгів можуть бути однаковими. У варіантах реалізації даного винаходу, в яких домени МІ і МН розпізнають різні епітопи (як показано на Фігурах ЗА-3С), отримана молекула має чотири сайти зв'язування епітопів і є біспецифічною та двовалентною стосовно кожного зв'язаного епітопу. У варіантах реалізації даного винаходу, в яких домени У. і МН розпізнають один і той самий епітоп (наприклад, в обох ланцюгах використані аналогічні СОК домену МІ й аналогічні СОК домену МН), отримана молекула має чотири сайти зв'язування епітопів і є моноспецифічною та чотиривалентною стосовно одного епітопу. В іншому варіанті дві пари поліпептидів можуть бути різними. У варіантах реалізації даного винаходу, в яких домени Мі і МН кожної пари поліпептидів розпізнають різні епітопи (як показано на Фігурах ЗА-3С), отримана молекула містить чотири епітопсполучних сайти і є тетраспецифічною та моновалентною стосовно кожного зв'язаного епітопу. На Фігурі ЗА представлене діатіло, що містить область Ес, яке містить пептид домену, що стимулює утворення гетеродимера, що містить залишок цистеїну. На Фігурі ЗВ представлене діатіло, що містить область Ес, яке містить домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е-спіраллю та К-спіраллю, що містять залишок цистеїну та лінкер (необов'язково містить залишок цистеїну). На Фігурі ЗС представлене діатіло, що містить область Ес, яке містить домени СНІ і СІ. 0032 На Фігурах 4А і 48 представлені схеми типової ковалентно зв'язаної молекули діатіла, що містить два епітопсполучних сайти, що складаються з трьох поліпептидних ланцюгів. Два поліпептидні ланцюги містять домени СН2 і СНЗ, так, що відповідні ланцюги утворюють повну область Ес або її частину. Поліпептидні ланцюги, що містять домен МІ. і МН, додатково містять домен, що сприяє утворенню гетеродимера. Домени МІ. і МН, які розпізнають один і той самий епітоп, показані з використанням однакового затінення або заливання. 0033) На Фігурі 5 представлена схема типової ковалентно зв'язаної молекули діатіла, що містить чотири епітопсполучних сайти, що складаються з п'яти поліпептидних ланцюгів. Два поліпептидні ланцюги містять домен СНІ і СНЗ, так, що відповідні ланцюги утворюють область
Ес, яка включає повну область Ес або її частину. Поліпептидні ланцюги, що містять з'єднані домени МІ. і МН, додатково містять домен, що сприяє утворенню гетеродимера. Домени МІ і ун, які розпізнають один і той самий епітоп, показані з використанням однакового затінення або заливання.
Зо І0034| На Фігурах 6А-6Е представлені схеми типових тривалентних сполучних молекул, що містять область Ес, які містять три епітопсполучних сайти. На Фігурах бА і 68, відповідно, схематично представлені домени тривалентних сполучних молекул, що містять два домену зв'язування, характерних для діатіла, і зв'язуючий домен типу Бар, що мають різні орієнтації доменів, у яких сполучні домени, характерні для діатіла, є М-кінцевими або С-кінцевими стосовно області Ес. Молекули на Фігурах бА і 6В містять чотири ланцюги. На Фігурах 6С і 60, відповідно, схематично представлені домени тривалентних сполучних молекул, що містять два сполучних домену, характерних для діатіла, М-кінцевих стосовно області Ес, і зв'язуючий домен типу Раб, у яких легсий ланцюг і важкий ланцюг з'єднаний за допомогою поліпептидного спейсера або сполучного домену типу 5сЕм. Тривалентні сполучні молекули на Фігурах 6Е і бЕ, відповідно, схематично ілюструють домени тривалентних сполучних молекул, що містять два сполучних домену, характерних для діатіла, С-кінцевих стосовно області Ес, і зв'язуючий домен типу Раб, або сполучний домен типу 5сЕм, у якому знаходяться сполучні домени, характерні для діатіла. Тривалентні сполучні молекули на Фігурах 6С-6Е містять три ланцюги. Домени МІ. і МН, які розпізнають один і той самий епітоп, показані з використанням однакового затінення або заливання. 0035) На Фігурах 7А-7О показано, що МАТ до РО-1 1-15 зв'язуються з РО-1 людини. Криві зв'язування для зв'язування з 5ПРО-1-Ні5 представлені на Фігурі 7А (МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до
РО-1, МАТ 4 до РО-1 їі МАТ 9 до РО-1), Фігурі 7В (МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1 і МАТ 7 до РО- 1) ї Фігурі 7С (МАТ З до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО- 1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 ії МАТ 15 до РО-1). Криві зв'язування для зв'язування з 5АРО-1-Ес людини представлені на Фігурі 70 (МАТ З до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 10 до РО-1,
МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1).
І0036| На Фігурах ВА-8С показано, що МАТ до РО-1 1-15 зв'язуються з РО-1 яванських макак. Криві зв'язування для зв'язування з зсупоРБО-1-пЕс представлені на Фігурі ВА (МАТ до
РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1), Фігурі 8В (МАТ 9 до РО-1) і Фігурі 8С (МАТ З до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО- 1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1).
І0037|На Фігурах 9А-90 представлені результати оцінки здатності МАТ до РО-1 1-15 блокувати зв'язування РО-Ї1 людини з РО-1 людини. Криві інгібування представлені на Фігурі 60 9А (МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 15 до РО-1 і МАТ до РО-1 А), Фігурі 98
(МАТ 4 до РО-1), Фігурі 9С (МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1 і МАТ до РО-1 А) і
Фігурі 90 (МАТ З до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1,
МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1, МАТ 15 до РО-1 і МАТ до РО-1 А).
І00З8| На Фігурах 10А-108 представлені результати оцінки тканинної специфічності МАТ до лЛРО-1 7. На фігурі 10А представлені результати гістологічного фарбування тканини нормальної товстої кишки (панелі і та мії), печінки (панелі її та мії), легенів (панелі їїї та їх), підшлункової залози (панелі ім і х), нирок (панелі м і хі) і серця (панелі мі та хії). На Фігурі 10А, панелі і-мі, представлені результати дослідження тканини, яку інкубували з міченим МАТ 7 до РО-1 (0,313 мкг/мл). На Фігурі 10А, панелі мії-хі, представлені результати дослідження тканини, яку інкубували з міченим МАТ для контролю ізотипу (0,314 мкг/мл). На Фігурі 108 представлені результати гістологічного фарбування шкіри (панелі і та ім), мигдалин (панелі її та м) і клітин лінії
М5О, що експресують РО-1 (панелі їїї та мі). На Фігурі 108, панелі і-ії, представлені результати дослідження тканини, яку інкубували з міченим МАТ 7 до РО-1 (0,313 мкг/мл).
І00З39| На Фігурі 11 представлені профілі зв'язування гуманізованих антитіл до РО-1 людини,
МАТ до лРО-12, МАТ до лРО-1 7 (1.1), МАТ до лРО-1 7 (1.2), МАТ до лРО-19 (141), і контрольних антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В, що містять Їдсе1 (АА) або Ідс4 (Р), для зв'язування з РО-1 на поверхні клітин. 0040) На Фігурі 12А-128 представлені результати оцінки здатності гуманізованих антитіл до
РО, МАТ до лРО-12, МАТ до лРО-1 7 (1.1), МАТ до лРО-1 7(1.2), МАТ до лРО-19 (1.1), еталонних антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В, що містять ІДС1 (АА) або Ідса (Р), блокувати зв'язування розчинного РО-Ї1 людини (Фігура 12А) і розчинного РО-/2 людини (Фігура 128) з РО-1 людини на поверхні клітин.
ІО041| На Фігурі 13 представлені результати оцінки здатності гуманізованих антитіл до РО,
МАТ до лРО-1 2, МАТ до лРО-1 7(1.1), МАТ до лРО-1 7(1.2), МАТ до лРО-1 9(1.1), й еталонних антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В, що містять ІдДС1 (АА) або Ідс4 (Р), виступати антагоністами осі РО-1/РО-І1, блокуючи взаємодію РО-1/РО-І1 і запобігаючи придушення відповідей Т-клітин у кількісному дослідженні з використанням репортера люциферази дигкаї-
Інс-МЕАТ/СНО-РО-1 1. 0042) На Фігурі 14 представлені результати, що свідчать про те, що МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 здатні стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, порівнянних або вище тих, які характерні для еталонних антитіл до РО-1 (МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В), і що обробка з використанням МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 у комбінації з МАТ до ГАС-3 1 забезпечила найбільше збільшення вивільнення цитокінів. Представлені профілі секреції ІФН-у з мононуклеарних клітин периферичної крові (МКПК), стимульованих ентеротоксином В стафілокока (ЕВ), оброблених антитілами до РО-1 й антитілами до ГАс-3 окремо та в комбінації. 0043) На Фігурах 15А-158 представлені результати оцінки здатності гуманізованих антитіл до РО, МАТ до лРО-1 2, МАТ до лРО-1 7(1.2), МАТ до лРО-1 9(1.1), й еталонних антитіл до РО- 1, МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-ї1 В, що містять ІдДС1 (АА) або Ідс4 (Р), стимулювати вироблення цитокінів. Представлені профілі секреції ІФН-у (Фігура 15А) і ФНО-а (Фігура 158) з 5ЕВ- стимульованих МКПК, оброблених антитілами до РО-1.
І0044| На Фігурах 16А-168 представлені результати, що свідчать про те, що конструкції біспецифічних діатіл РО-1хІ! АО-3, ПАКТ А, ВАКТ 0, БАКТ Е, БАКТ Е, САКТ о і САКТ Н, здатні стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, порівнянних або оперевищуючих рівні, спостережувані при введенні комбінації МАТ до РО-1 я МАТ до ГГ АС-3 (МАТ до РО-ї1 А - МАТ до
ГАС-3 А), а також про те, що конструкції біспецифічних діатіл РО-1х| АС-3, ОАВТ А, АВТ 0, рАКТ Е, БАКТ Е їі САКТ с, забезпечили найбільше посилення вивільнення цитокінів. Профілі секреції ІФН-у з МКПК, стимульованих низькою концентрацією ЗЕВ (0,2 нг/мл), оброблених біспецифічними діатілами РО-1х| АС-3 або антитілами до РО-1 і ГАС-3 окремо та в комбінації, представлені у графічній формі. Результати, отримані з використанням МКПК від двох типових донорів, представлені на Фігурі 16А і Фігурі 168.
І0045| На Фігурах 17А-17В представлені результати, що свідчать про те, що конструкції біспецифічних діатіл РО-їхІ ДО-3, ОАКТ А, САКТ В і САКТ С, здатні стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, що перевищують рівні, спостережувані при введенні комбінації МАТ до РО-1 ї- МАТ до ГАС-3 (МАТ до РО-1 А ї- МАТ до ГАО-3 А). Профілі секреції ІФН-у з МКПК від двох типових донорів, стимульованих високою концентрацією ЗЕВ (85 нг/мл), які обробляли біспецифічними діатілами РО-1х| АО-3 або антитілами до РО-1 й антитілами до ГАС-3 окремо та в комбінації, представлені у графічній формі. Результати, отримані з використанням МКПК від двох типових донорів, представлені на Фігурі 17А і Фігурі 178. бо І0046| На Фігурах 18А-188 представлені результати, що свідчать про те, що конструкції біспецифічних діатіл РО-1хІ АС-3, ОАКТ А, ВАКТ В і САКТ С, здатні стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, що перевищують рівні, спостережувані при введенні комбінації МАТ до РО-1 я МАТ до ГАС-3 (МАТ до РО-1 А ї- МАТ до ГАС-3 А). Профілі секреції ІФН-у з МКПК від двох типових донорів, стимульованих середньою концентрацією 5ЕВ (0,5 нг/мл), які обробляли біспецифічними діатілами РО-1х| АО-3 або антитілами до РО-1 й антитілами до ГАС-3 окремо або в комбінації, представлені у графічній формі. Результати, отримані з використанням МКПК від двох типових донорів, представлені на Фігурі 184А і Фігурі 188.
І0047|На Фігурі 19 представлені результати, що свідчать про те, що конструкції біспецифічних діатіл РО-Тх АО-3, САКТ 0 і САКТ Н, здатні стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, порівнянних або перевищуючих рівні, які спостерігають при введенні комбінації МАТ до РО-1 я МАТ до ГАС-3 (МАТ до РО-1 А ж МАТ до ГАС-3 А), а також про те, що ОАКТ 0 забезпечило найбільше збільшення вивільнення цитокінів. Профілі секреції ІЛ-2 із МКПК від типового донора, стимульованих високою концентрацією ЗЕВ (85 нг/мл), які обробляли біспецифічними діатілами РО-1хІ| АС-3 або антитілами до РО-1 й антитілами до ГАс-3, окремо та в комбінації, представлені у графічній формі.
І0048|На Фігурі 20 представлені результати, що свідчать про те, що конструкції біспецифічних діатіл РО-1хІ АОС-3, АКТ В і БАКТ І, здатні стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, що перевищують ті, які спостерігали при введенні комбінації МАТ до РО-1 ї- МАТ до
ГАа-3 (МАТ до РО-1 А ж МАТ до ГАС-3 А, МАТ до лРО-1 7(1.2) я МАТ до лі АО-3 1(1.4), МАТ до лЛРО-1 7(1.2) ї- МАТ до лі Ас-3 6(1.1)). Профілі секреції ІФН-у з МКПК від типового донора, стимульованих середньою концентрацією ЗЕВ (0,5 нг/мл), які обробляли біспецифічними діатілами РО-1х| АС-3 або антитілами до РО-1 й антитілами до ГАс-3, окремо та в комбінації, представлені у графічній формі.
Ї0049| На Фігурах 21А-210 представлені результати, що свідчать про те, що біспецифічне діатіло РО-їх АС-3, БАКТ |, здатне стимулювати вироблення цитокінів до рівнів, що перевищують ті, які спостерігали при введенні комбінації МАТ до РО-1 ї- МАТ до ГАС-3 (МАТ до
РО-1 А я МАТ до Г Аа-3 А). Профілі секреції ІФН-у (Фігури 21А і 21С) й ІЛ-2 (Фігури 218 і 210) з бра Т-клітин пам'яті від двох типових донорів, стимульованих правцевим анатоксином (5 мкг/мл), які обробляли біспецифічним діатілом РО-1хІ( ДО-3, РАНВТ-Ї, антитілами до РО-1 й
Зо антитілами до І АС-3 в комбінації або антитілом для контролю ізотипу, представлені у графічній формі. Результати, отримані на 7 день з використанням СО4 Т-клітин пам'яті від двох типових донорів, представлені на Фігурах 21А-В і Фігурах 210-0.
І0О5О|На Фігурі 22 представлені результати, що свідчать про те, що параметри фармакокінетики біспецифічної молекули РО-1хІ АС-3, САКТ І, порівнянні з такими для антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 А 1Ідса4 (Р), в яванських макак. Лінії вказують середню концентрацію в сироватці крові САКТ І (суцільна лінія) і МАТ до РО-1 А (пунктирна лінія). Окремі значення для самців (заповнені символи) і самок (відкриті символи) мавп представлені у графічній формі для
ПАКТ І (трикутники) і МАТ до РО-1 А (кола).
ІООБ51| На Фігурах 23А-23С представлені концентрації антитіл у сироватці крові та відсоток зв'язаного РО-1 на поверхні СО4: або СО8: Т-клітин залежно від часу у тварин після лікування з використанням різних антитіл до РО-1. Відсоток зв'язаного РО-1 на поверхні СО4: або СО8: Т- клітин після лікування з використанням МАТ до РО-1 представлений у графічній формі на правих осях ОХ; символи являють собою відсоток (95) зв'язаного РО-1 на Т-клітинах для кожної окремої тварини, і пунктирні лінії являють собою середні значення. Концентрації МАТ у сироватці крові представлені у графічній формі на лівих осях ОУ; символи являють собою рівні в сироватці крові для кожної окремої тварини, і суцільні лінії являють собою криві нелінійної апроксимації даних. На кожній панелі представлені дані для тварин (п - 1/стать/група), яким вводили 10 мг/кг МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ідс4 (Р) (Фігура 23А), МАТ до РО-1 А Ідса4 (Р) (Фігура 238) або МАТ до РО-ї1 В Ідся (Р) (Фігура 23В) шляхом внутрішньовенної (в/в) інфузії на 1 день.
Докладний опис винаходу 0052) Згідно з даним винаходом запропоновані РО-1-сполучні молекули, які містять РО-1- сполучний домен відібраних антитіл до РО-1, здатних зв'язуватися з РО-1 яванських макак і РО- 1 людини: МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1,
МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1. Зокрема, згідно з даним винаходом запропоновані РО-1-сполучні молекули, які є гуманізованими або химерними варіантами зазначених антитіл, або які містять РО-1-сполучні фрагменти зазначених антитіл до
РО-1 (зокрема, імунокон'югати, діатіла (включаючи, але не обмежуючись ними, ОАВТ-А, ОАНТ-
В, САВТ-С, САВТ-О, САВТ-Е, САВТ-Е, ОАВТ-с, ВСАВТ-Н, ВАВТ-Ї ії САКТ..))), ВІТЕ, біспецифічні 60 антитіла та т.п.). Згідно з даним винаходом запропоновані РО-1-сполучні молекули, які додатково здатні зв'язуватися з епітопом молекули, що брали участь у регуляції контрольної точки імунної відповіді, яка присутня на поверхні імунної клітини. Згідно з даним винаходом також запропоновані способи застосування зазначених РО-1-сполучних молекул для детектування РО-1 або для стимуляції імунної відповіді. Згідно з даним винаходом також запропоновані способи комбінованої терапії, в яких РО-1-сполучну молекулу, яка містить один або більше РО-1-сполучних доменів зазначених відібраних антитіл до РО-1, вводять в комбінації з однією або більше додатковими молекулами, які ефективно стимулюють імунну відповідь, та/або в комбінації з однією або більше додатковими молекулами, які специфічно зв'язуються з раковим антигеном. | Антитіла та їх сполучні домени 0053) Антитіла згідно з даним винаходом являють собою молекули імуноглобулінів, здатні специфічно зв'язуватися з мішенню, такою як вуглевод, полінуклеотид, ліпід, поліпептид і т.п., за допомогою щонайменше одного сайту розпізнавання антигена, розташованого у варіабельному домені молекули імуноглобуліну. У даній заявці терміни "антитіло" й "антитіла" відносяться до моноклональних антитіл, мультиспецифічних антитіл, антитіл людини, гуманізованих антитіл, синтетичних антитіл, химерних антитіл, поліклональних антитіл, антитіл верблюдових, одноланцюгових Ем5 (50Ем), одноланцюгових антитіл, фрагментів Раб, фрагментів Е(аб), з'єднаних дисульфідними зв'язками біспецифічним Еме5 (5сСЕм), внутрішньоклітинних антитіл й епітопсполучних фрагментів будь-якого з вищевказаних.
Зокрема, антитіла включають молекули імуноглобулінів й імунологічно активні фрагменти молекул імуноглобулінів, тобто молекули, які містять антигенсполучний сайт. Молекули імуноглобулінів можуть бути будь-якого типу (наприклад, Ідс, ІДЕ, ІМ, дО, ІдА та дк), класу (наприклад, Ідсі, ІдС2, ІдСз, ІдсСзм, ДА: ії ІдАг) або підкласу. Було показано, що, крім відомих способів застосування антитіл у діагностиці, антитіла можна застосовувати в якості терапевтичних агентів. Антитіла здатні імунологічно специфічно зв'язуватися з поліпептидом або білком або небілюковою молекулою внаслідок присутності на такій молекулі певного домену або фрагмента або конформації ("епітопу"). Утримуюча епітоп молекула може мати імуногенну активність так, що вона викликає вироблення антитіл у тварини, такі молекули називаються "антигенами". В останні декілька десятиліть спостерігається відродження інтересу до
Зо терапевтичного потенціалу антитіл, й антитіла стали одним із провідних класів біотехнологічних препаратів (Спап, С.Е. еї а. (2009) "Те О5е ОГ Апіїродіез й Те Ттєаійтепі ОГ Іптесійбив різеазев", 5іпдароге Мед. у. 50(7):663-666). Більше 200 лікарських препаратів на основі антитіл були схвалені для застосування або знаходяться на стадії розробки. 0054) Термін "моноклональне антитіло" відноситься до гомогенної популяції антитіл, причому моноклональне антитіло складається з амінокислот (природних і неприродних), які беруть участь у селективному зв'язуванні антигена. Моноклональні антитіла «є високоспецифичними та спрямовані до одного епітопу (або антигенного сайту). Термін "моноклональне антитіло" включає не тільки інтактні моноклональні антитіла та повнорозмірні моноклональні антитіла, а також їх фрагменти (такі як Раб, Раб", Е(аб)», Гм), одноланцюгові фрагменти (з5сЕм), їх мутовані варіанти, гібридні білки, що містять частину антитіла, гуманізовані моноклональні антитіла, химерні моноклональні антитіла та будь-яку іншу модифіковану конфігурацію молекули імуноглобуліну, яка містить сайт розпізнавання антигена, що має необхідну специфічність та здатність зв'язуватися з антигеном. Термін не є обмежуючим відносно джерела антитіла або способу його одержання (наприклад, за допомогою гібридоми, відбору фага, рекомбінантної експресії, трансгенних тварин і т.п). Термін включає повнорозмірні імуноглобуліни, а також фрагменти та т.п., описані вище під визначенням "антитіло". Способи одержання моноклональних антитіл відомі в даній області техніки. Одним зі способів, які можуть бути використані, є спосіб, описаний Копіег, сх. єї а). (1975) "Сопііписив5
Сийигез ОЇ Ризеай СеїІ5 Зестеїїпа Апіїроду ОЇ Ргедеїїпед Зресіїісйу", Маїшге 256:495-497, або його модифікація. Як правило, моноклональні антитіла виробляються у мишей, пацюків або кроликів.
Антитіла одержують шляхом імунізації тварини імуногенною кількістю клітин, клітинних екстрактів або білкових препаратів, які містять бажаний епітоп. Імуноген може являти собою, але не обмежується ними, первинні клітини, культивовані лінії клітин, ракові клітини, білки, пептиди, нуклеїнові кислоти або тканина. Клітини, що використовуються для імунізації, можна культивувати протягом певного періоду часу (наприклад, щонайменше 24 годин) до їх використання в якості імуногена. Клітини можуть бути використані в якості імуногенів самі по собі або в комбінації з неденатуруючим ад'ювантом, таким як Кібі (див., наприклад, Удеппіподв,
М.М. (1995) "Веміеу/ ої Зеївсієд Адіимапів Озей іп Апіїбоду Ргодисійоп", ІП АВ У. 37(3):119-125). У цілому клітини повинні підтримуватися в інтактному стані та переважно життєздатному стані при бо використанні в якості імуногенів. Інтактні клітини можуть забезпечити більш ефективне детектування антигенів, ніж ушкоджені клітини, імунізованим тваринам. Використання денатурації або твердих ад'ювантів, наприклад, ад'юванта Фрейда, може призвести до ушкодження клітин і, отже, не рекомендується. Імуноген можна вводити декілька разів із періодичними інтервалами, такими як один раз на два тижні або щотижня, або можна вводити так, щоб підтримувати життєздатність тварини (наприклад, у тканинній рекомбінанті). В іншому варіанті, існуючі моноклональні антитіла та будь-які інші еквівалентні антитіла, які є імуноспецифічними для бажаного патогенного епітопу, можуть бути секвеновані й отримані з використанням будь-яких рекомбінантних способів, відомих в даній області техніки. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу підходяще антитіло секвенують, ( полінуклеотидну послідовність потім клонують у вектор для експресії або розмноження.
Послідовність, що кодує антитіло, що представляє інтерес, можна підтримувати у векторі в клітині-хазяїні, і потім клітина-хазяїн може бути розмножена та заморожена для наступного використання. Полінуклеотидну послідовність підходящих антитіл можна використовувати для генетичної маніпуляції щоб одержати моноспецифічні або поліспецифічні (наприклад, біспецифічні, триспецифічні та тетраспецифічні) молекули згідно з даним винаходом, а також антитіло з оптимізованою афінністю, химерне антитіло, гуманізоване антитіло й/або антитіло, що містить фрагменти антитіл собачих, щоб поліпшити афінність або інші характеристики антитіла. Загальний принцип гуманізації антитіла включає збереження основної послідовності антигенсполучної частини антитіла та заміну частини антитіла, що залишилася, з виду, відмінного від людини, послідовностями антитіл людини.
Ї0055)| Природні антитіла (такі як антитіла дос) складаються з двох легких ланцюгів, пов'язаних із двома важкими ланцюгами. Кожний легкий ланцюг містить варіабельний домен (МУ) ії константний домен (СІ). Кожний важкий ланцюг містить варіабельний домен (МН), три константні домену (СНІ, СН2 їі СНЗ) і шарнірний домен, розташований між доменами СНІ і СН2.
Основна структурна одиниця природних імуноглобулінів (наприклад, дос), таким чином, являє собою тетрамер, що містить дві легких ланцюги та два важких ланцюги, що зазвичай експресуються у вигляді глікопротеїну масою приблизно 150000 Да. Аміно-кінцева ("М-кінцева") частина кожного ланцюга містить варіабельний домен, що містить від 100 до 110 або більше амінокислот, в основному відповідальних за розпізнавання антигена. Карбокси-кінцева ("С-
Зо кінцева") частина кожного ланцюга визначає константну область, при цьому легкі ланцюги містять один константний домен, і важкі ланцюги зазвичай містять три константних домену та шарнірний домен. Отже, структура легких ланцюгів молекули дб являє собою п-Мі -Сі -с, і структура важких ланцюгів (ДС являє собою п-МН-СНІ-Н-СН2г-СНЗ-с (де Н являє собою шарнірний домен, і п ії с представляють, відповідно, М-кінець та С-кінець поліпептиду).
Варіабельні домени молекули дО складаються з гіперваріабельних ділянок (СОК), які містять залишки, що вступають у контакт із епітопом, і сегменти, відмінні від СОК, називані каркасними сегментами (ЕК), які в цілому підтримують структуру та визначають розташування петель СОК, щоб забезпечити такий контакт (хоча деякі залишки каркасних ділянок також можуть зв'язуватися з антигеном). Відповідно, домени Мі. і МН мають структуру п-ЕН1-СОВ1-ЕН2-СОВ82-
ЕВЗ3-СОВЗ3-ЕВа4-с. Поліпептиди, які являють собою (або можуть виконувати їхні функції) перший, другий та третій СОР. легкого ланцюга антитіла, позначені, відповідно, як домен СОН, домен
СОВІ2 і домен СОКІЗ. Аналогічним чином, поліпептиди, які являють собою (або можуть виконувати їхні функції) перший, другий та третій СОК важкого ланцюга антитіла, позначені, відповідно, як домен СОВнН1, домен СОКНнНа2 і домен СОКнЗ. Відповідно, терміни домен СОНВІ1, домен СОВІ2, домен СОВІЗ, домен СОНні, домен СОНн2 і домен СОРнЗ відносяться до поліпептидів, які, коли вони входять до складу білка, надають зазначеному білку здатність зв'язуватися з певним епітопом незалежно від того, чи є зазначений білок антитілом, що містять легкі та важкі ланцюги, або діатілом або одноланцюговою сполучною молекулою (наприклад, 5СЕМ, ВіТЕ та т.п.), або являє собою інший тип білка. Відповідно, у даній заявці термін "епітопсполучний фрагмент" означає фрагмент антитіла, здатний імуноспецифічно зв'язуватися з епітопом, і термін "епітопсполучний сайт" відноситься до тієї частини молекули, яка містить епітопсполучний фрагмент, який відповідає за зв'язування епітопу. Епітопсполучний сайт може містити 1, 2, 3, 4, 5 або всі 6 доменів СОК зазначеного антитіла та, незважаючи на те, що він здатний імуноспецифічно зв'язуватися із зазначеним епітопом, може проявляти імуноспецифічність, афінність або селективність у відношенні епітопу, який відрізняється від епітопу зазначеного антитіла. Переважно, однак, епітопсполучний фрагмент містить всі 6 доменів СОК зазначеного антитіла. Епітопсполучний фрагмент антитіла може являти собою один поліпептидний ланцюг (наприклад, 5сЕм) або може містити дві або більше поліпептидних ланцюгів, кожний з яких має аміно-кінець та карбокси-кінець (наприклад, діатіло, фрагмент Раб, 60 фрагмент К(аб/» і т.п.).
Ї0056| Згідно з даним винаходом зокрема запропоновані одноланцюгові фрагменти варіабельних доменів ("5сЕм") антитіл до РО-1 згідно з даним винаходом і мультиспецифічні сполучні молекули, що містять їх. Одноланцюгові фрагменти варіабельних доменів одержують шляхом з'єднання варіабельних доменів легкого ланцюга та/лабо важкого ланцюга з використанням короткого з'єднуючого пептиду. У роботі Віга еї а!. (1988) ("Зіпдіє-Снаіп Апіїдеп-
Віпаїпа Ргоїєїпв", Зсієпсе 242:423-426) описаний приклад з'єднуючих пептидів, які утворюють зв'язок довжиною приблизно 3,5 нм між карбокси-кінцем одного варіабельного домену й аміно- кінцем іншого варіабельного домену. Були розроблені та використані лінкери, що мають інші послідовності (Віка єї аї. (1988) "Біпдіе-СНаіп Апіїдеп-Віпаїпу Ргоївїпв", 5сіепсе 242:423-426). У свою чергу, лінкери можуть бути модифіковані для надання їм додаткових функцій, таких як прикріплення лікарських препаратів або прикріплення до твердих основ. Одноланцюгові варіанти можуть бути отримані рекомбінантними або синтетичними способами. Для одержання 5СЕм за допомогою синтетичних способів може бути використаний автоматизований синтезатор.
Для одержання 5сЕм за допомогою рекомбінантних способів підходяща плазміда, що містить полінуклеотид, який кодує 5сЕм, може бути введена у підходящу клітину-хазяїна, наприклад, еукаріотичну клітину, таку як клітини дріжджів, рослин, комах або ссавців, або прокаріотичну клітину, таку як Е. соїї. Полінуклеотиди, які кодують 5сЕм, що представляють інтерес, можуть бути отримані за допомогою стандартних маніпуляцій, таких як лігування полінуклеотидів.
Отриманий 5сЕм може бути виділений з використанням стандартних способів очищення білка, відомих в даній області техніки.
Ї0057| В область даного винаходу зокрема також включені гуманізовані варіанти антитіл до
РО-1 згідно з даним винаходом і поліспецифічні сполучні молекули, що містять їх. Термін "гуманізоване" антитіло відноситься до химерної молекули, яку зазвичай отримують з використанням рекомбінантних методик, що містить антигенсполучний сайт імуноглобуліну з видів, відмінних від людини, й іншу імуноглобулінову структуру молекули, яка заснована на структурі та/або послідовності імуноглобуліну людини. Антитіла до РО-1 людини згідно з даним винаходом включають гуманізовані, химерні варіанти та варіанти, що містять фрагменти антитіл собачих, антитіл МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1,
МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-
Зо 1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1. Полінуклеотидна послідовність варіабельних доменів зазначених антитіл може бути використана для генетичної маніпуляції, щоб одержати зазначені похідні та поліпшити афінність або інші характеристики зазначених антитіл. Загальний принцип гуманізації антитіла включає збереження основної послідовності антигенсполучної частини антитіла із заміною частини антитіла, що залишилася, з виду, відмінного від людини, послідовностями антитіл людини. Існують чотири загальні етапи гуманізації моноклонального антитіла. Зазначені етапи включають: (1) визначення нуклеотидної та передбаченої амінокислотної послідовності вихідних варіабельних доменів легких і важких ланцюгів антитіла, (2) дизайн гуманізованого антитіла або антитіла, що містить фрагменти антитіл собачих, тобто приймається рішення про те, яка каркасна ділянка антитіла буде використана під час процесу гуманізації або включення фрагментів антитіл собачих, (3) фактичні методології/методики гуманізації або включення фрагментів антитіл собачих, і (4) трансфекцію й експресію гуманізованого антитіла. Див., наприклад, патенти США МоМе4816567; 5807715; 5866692; і 6331415. 0058) Антигенсполучний сайт може містити повний варіабельний домен, гібридизований з константним доменом, або тільки гіперваріабельні ділянки (СОК) зазначеного варіабельного домену, привиті на відповідні каркасні ділянки. Антигенсполучні сайти можуть бути дикого типу або можуть бути модифіковані однією або більше замінами амінокислот. Це виключає константну область в якості імуногена в людини, однак зберігається можливість імунної відповіді на чужорідний варіабельний домен (І оридіїйо, А.Р. еї аї. (1989) "Моизе/Нитап Спітегіс
Мопосіопа! Апіїбоду Іп Мап: Кіпеїйсв Апа Іттипе НКезропзе", Ргос. Май. Асай. сі. (0.5.А.) 86:4220-4224). Інший підхід зосереджений не тільки на забезпеченні константних областей людського походження, але і на модифікації варіабельних доменів, щоб як можна більше точно змінити їх на людську форму. Відомо, що варіабельні домени важких і легких ланцюгів містять три гіперваріабельні ділянки (СОК), які змінюються залежно від розглянутих антигенів і визначають здатність до зв'язування, фланкованих чотирма каркасними ділянками (ЕК), які є відносно консервативними у даного виду й які приблизно забезпечують каркас для СОК. При одержанні антитіл з виду, відмінного від людини, стосовно певного антигена, варіабельні домени можуть бути "перетворені" або "гуманізовані" шляхом щеплення СОР, отриманих з антитіл з видів, відмінних від людини, на ЕК, присутні в антитілі людини, що підлягає бо модифікації. Застосування згаданого підходу до різних антитіл було описано в бай, К. еї а).
(1993) Сапсег Не5 53:851-856. Вівесптапп, І. еї аї. (1988) "Ве5паріпд Нитап Апіїрбодієв ог
Тпегару", Маїшге 332:323-327; Мептоеуеєп, М. еї аї. (1988) "Везпаріпд Нитап Апіїродієвв: Станіпд
Ап Апійузогуте Асіїмйу", Зсіеєпсе 239:1534-1536; КешШеброгоцди, С. А. еї аї. (1991) "Нитапігайоп
ОТГ А Моизе Мопосіопа! Апіїбоду Ву Саг-дганіпоа: Тне Ітропапсе ОЇ ЕгатемжогК Везідиев5 Оп І оор
Сопіоптаїйоп", Ргоїєїп Епдіпеєгіпд 4:773-3783; Маєада, Н. еї аї. (1991) "Сопвігисіоп ОЇ Везпарєй
Нитап Апііїродієвз М/Н Нім-пецігаїїгіпд Асіїмпу", Нитап Апіїродієз Нубгідота 2:124-134; Согтап,
З. р. еї а. (1991) "Везпаріпу А ТНегарешіс СА Апіїроду", Ргос. Маї). Асад. бсі. (0О.5.А.) 88:4181- 4185; Тетребві, Р.В. єї аї. (1991) "Незпаріпяа А Нитап Мопосіопа! Апіїбоду То Іппірії Нитап
Везрігаюгу Зупсуйа! Мігиб5 Іптесійоп іп мімо", Віо/Гесппоіоду 9:266-271; Со, М. 5. еї аї. (1991) "Нитапігейд Апіїродієв Рог Апіїміга! Тнегару", Ргос. Маї!. Асай. сі. (0О.5.А.) 88:2869-2873; Сапег!,
Р. єї аї. (1992) "Нитапігайоп ОЇ Ап Апіїі-рі85пег2 Апіїбоду Рог Нитап Сапсег ТНегару", Ргос. Маї!.
Асад. 5сі. (0.5.А.) 89:4285-4289; і Со, М.5. еї аї. (1992) "Спітегіс Апа Нитапігеа Апііродіе5 УМ
Зресійсйпу Бог Те СОЗ3З3 Апіїдеп", 9). ІттипоїЇ. 148:1149-1154. Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу гуманізовані антитіла зберігають всі послідовності СОЄ. (наприклад, гуманізоване мишаче антитіло, яке містить всі шість СОК з мишачих антитіл). Згідно з іншими варіантами реалізації даного винаходу гуманізовані антитіла містять один або більоше СО (один, два, три, чотири, п'ять або шість), послідовності яких відрізняються у порівнянні з вихідним антитілом.
Ї0059| Був описаний ряд молекул "гуманізованих" антитіл, що містять антигенсполучний сайт, отриманий з імуноглобуліну з виду, відмінного від людини, включаючи химерні антитіла, що містять варіабельний домен гризуна або модифікований варіабельний домен гризуна, і пов'язані з ними гіперваріабельні ділянки (СОК), гібридизовані з константними доменами людини (див., наприклад, У/іпіег єї а. (1991) "Мап-таде Апііродієв", Маїшге 349:293-299; І оридіїо еї аї. (1989) "Моизе/Нитап Спітегіс Мопосіопа! Апіїроду Іп Мап: Кіпеїїсв Апа Іттипе Незропзе",
Ргос. МаїЇ. Асай. осі. (0.5.А.) 86:4220-4224 (1989), 5Нам/ єї аї. (1987) "СНагасієгігайоп ОГ А
Моизе/Нитап СпНітегіс Мопосіопа! Апіроду (17-1А) То А Сооп Сапсег Титог-Авзосіаїєа
Апіідеп", у. Іттипої. 138:4534-4538, і Вгомп еї а. (1987) "Титог-бресіїїс СепеїїсаПу Епдіпеетейд
Мигіпе/Нитап Спітегіс Мопосіопа! Апіїроду", Сапсег Вев5. 47:3577-3583). В інших посиланнях описані СОК гризунів, привиті у підтримуючу каркасну ділянку людини (ЕК), перед гібридизацією з відповідними константними доменами людини (див., наприклад, Ніесптапп, Ї. еї аї. (1988) "НезПпаріпу Нитап Апііродіеє тої ТПнегару", Маїште 332:323-327; Метоеуеп, М. еї аї. (1988) "Везпаріпд Нитап Апіїрбодієв: Стайіпа Ап Апійузогуте Асіїмпу", зсіепсе 239:1534-1536; і допез еї а!. (1986) "Веріасіпа Те Сотріетепіатпу-Оеїеттіпіпд Ведіоп5 Іп А Нитап Апіїроду М/йЙ Тро5е
Екот А Моизе", Маїшцге 321:522-525). В іншому посиланні описані СОК гризунів, підтримувані каркасними ділянками гризунів після рекомбінації поверхневих залишків. Див., наприклад, публікацію європейського патенту Ме519596. Зазначені "гуманізовані" молекули призначені для мінімізації небажаної імунологічної відповіді на молекули антитіл гризунів до білків людини, що обмежує тривалість й ефективність терапевтичного застосування зазначених фрагментів у реципієнтів-людей. Інші способи гуманізації антитіл, які також можуть бути використані, розкриті в ОацаНепу сеї аї. (1991) "Роїутегазе СНаіп Реасіюп Расійатєвз Те Сіопіпуд, Саг-дганіпу, Апа
Варій Ехргезвзіоп ОЇ А Мигіпе Мопосіопа! Апіїбоду Оігесієй Адаіїйвї Те СО18 Сотропепі ОЇ
Ї енКосуїе Іпіедгіпв", Мисі. Асіає Нев. 19:2471-2476, й у патентах США МоМоб180377; 6054297; 5997867; і 5866692.
ІЇ Рецептори Есу (Есук) 0060 Домени СН?2 ї СНЗ двох важких ланцюгів взаємодіють з утворенням області Ес, яка являє собою домен, розпізнаваний клітинними рецепторами Ес, включаючи, але не обмежуючись ними, рецептори БЕо-гамма (сук). У даній заявці термін "область Ес" використовується для визначення С-кінцевої області важкого ланцюга до. Амінокислотна послідовність домену СН2-СНЗ зразкового ЇДС1 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 1): 231 240 250 260 270 280
АРЕГГСааРБМ РІ ЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУММОУМЗНЕО РЕМКЕММУ МО 290 з00 310 320 330
СМЕМНМАКТК РВЕЕОУМЗТУ АМУБМІ ТМ Н ОБУ МЕКЕМК СКУЗМКАГ РА
340 350 360 370 380
РІЕКТІЗКАК СОРВЕРОМУМТ І РРОВЕЄМТК МОМУБІ ТС УК СЕМРЗОІАМЕ
390 400 410 420 430
МЕЗМСОРЕММ УКТТРРМІ О5 ССЗЕРІ КІ ТМОКЗАМСОСЇ ММЕ5ОЗУМНЕ 440 447 60 АЇ НМНУТОКЗ І 5І 5РОХ пронумеровану з використанням індексу ЄС, як викладено в роботі Кабат, де Х являє собою лізин (К) або відсутній.
Ї0061| Амінокислотна послідовність домену СН2-СНЗ зразкового ЇД52 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 2): 231 240 250 260 270 280
АРРМА-ВРБМ РІ ЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУММОУМЗНЕО РЕМОЕЄМУ УМО 290 300 310 Зз20 330
СМЕМНМАКТК РВЕЕОЕЄМ5ЗТЕ ВУЗУ ТУМН ОБУ МОКЕУК СКУЗМКаї РА 340 350 360 370 380
РІЕКТІЗКТК СОРРБЕРОММТ І РРОВЕЕМТК МОМ5І ТОЇ УК СЕМРБЗОІЗМЕ 390 400 410 420 430
МЕБМСОРЕММ УКТТРРМІ О5 ВСЗЕРІ ЗК ТМОКЗАМСОСЇ ММЕЗСЗУМНЕ 440 447
АЇ НМНУТОКЗ І 5І 5РОХ пронумеровану з використанням індексу ЄС, як викладено в роботі Кабат, де Х являє собою лізин (К) або відсутній.
І0062| Амінокислотна послідовність домену СН2-СНЗ зразкового ЇД63 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 3): 231 240 250 260 270 280
АРЕГГСааРБМ РІ ЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУММОУЗНЕО РЕМОГЕКМУ УМО 290 300 310 Зз20 330
СМЕМНМАКТК РВЕЕОУМ5ЗТЕ ВУУЗМІ ТМІ Н ОБМ/ЛІ МЕОКЕМК СКУМЗМКАЇГ РА 340 350 360 370 380
РІЕКТІЗКТК СОРРБЕРОММТ І РРОВЕЕМТК МОМ5І ТОЇ УК СЕМРБЗОІАМЕ 390 400 410 420 430
МЕББООРЕММ УМТТРРМІ О5 ВСОЗЕРІ УЗКІ ТМОКЗАМООСЇ МІЕЄСЗУМНЕ 440 447
АЇ НМАЕТОКЗ І 5І 5РОХ пронумеровану з використанням індексу ЄС, як викладено в роботі Кабат, де Х являє собою
Зо лізин (К) або відсутній. 0063) Амінокислотна послідовність домену СН2-СНЗ зразкового ІД54 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 4): 231 240 250 260 270 280
АРЕНІ ааРБМУ ЕБГЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУМУМОМБОЄО РЕМОЄММ МО 290 з00 310 320 330
СМЕМНМАКТК РВЕЕОЕМ5ЗТУ АУУБМІ ТМІ Н ОБУМІ МСОКЕМК СКУЗМКаї Р 340 350 360 370 380
ЗІЕКТІЗКАК СОРАЕРОМУМТ І РРІЗОЕЄЕМТК МОМ5І ТОЇ УК СЕМРЗОІАМЕ 390 400 410 420 430
МЕЗМСОРЕММ УКТТРРМІ О5 ССЗЕРІ МА ТМОКЗАМОвєа ММЕЗСЗУМНЕ 440 447
А НМНУТОК5 ІІ БІ ИХ пронумеровану з використанням індексу ЄС, як викладено в роботі Кабат, де Х являє собою лізин (К) або відсутній.
ЇОО64| У даному описі нумерація залишків у константній області важкого ланцюга Ідс відповідає індексу ЄС, як викладено в роботі Кабаї єї а!І., Зедоепсев ої Ргоївіпв ої Іттипо|одісаї
Іпієгеві, 5 Ей. Рибіїс Неайй 5егуісе, МНІ1, МО (1991) ("Кабат"), повністю включеної у дану заявку за допомогою посилання. Термін "індекс ЄС, як викладено в роботі Кабат" відноситься до нумерації відповідно до системи ЄС антитіла ЇДО1 людини. Амінокислоти з варіабельних доменів зрілих важких і легких ланцюгів імуноглобулінів позначені відповідно до положення амінокислоти в ланцюзі. У роботі Кабаї єї аї. описані численні амінокислотні послідовності для антитіл, ідентифікована амінокислотна консенсусна послідовність для кожної підгрупи і кожній амінокислоті привласнений номер залишку, і СОК ідентифіковані, як визначено в роботі Кабаї єї аІ. (слід розуміти, що СОВНІ, визначений в роботі Споїйіа, С. 8. І е5К, А. М. ((1987) "Сапопісаї вігисіигев Тог Ше Ппурегмагтіавіє тедіопв5 ої іттиподіориїйпв",. у). Мої. Вісі. 196:901-917), починається на п'ять залишків раніше). Схема нумерації Кабат може бути розширена на антитіла, не включені в його збірник, шляхом зіставлення розглянутого антитіла з однією з консенсусних послідовностей у Кабат стосовно консервативних амінокислот. Цей спосіб присвоєння номерів залишків став стандартним в даній області техніки і дозволяє легко ідентифікувати бо амінокислоти в еквівалентних положеннях в різних антитілах включаючи химерні або гуманізовані варіанти. Наприклад, амінокислота у положенні 50 легкого ланцюга антитіла людину займає положення, еквівалентне такому для амінокислоти у положенні 50 легкого ланцюга мишачого антитіла. 0065) Поліморфізми спостерігали в ряді різних положень в константних областях антитіла (наприклад, у положеннях СНІ, включаючи, але не обмежуючись ними, положення 192, 193 і 214, у положеннях Ес, включаючи, але не обмежуючись ними, положення 270, 272, 312, 315, 356 і 358, відповідно до системи нумерації ЄС, викладеної в Кабат), і, відповідно, можуть існувати невеликі відмінності між представленою послідовністю та послідовностями, відомими з попереднього рівня техніки. Добре відомі поліморфні форми імуноглобулінів людини. У цей час відоме 18 М-алотипів: С1т (1, 2, 3, 17) або С1т (а, х, ї, 7), с2т (23) або с2т (п), СЗт (5, 6, 10, 11, 13, 14, 15, 16, 21, 24, 26, 27, 28) або СЗт (61, с3, 63,60, 53, 54, 5,1, 91, с5, М, м, 95) (Гемпапс, еї аі., "Те Нитап Ідд 5и!ибсіаззе5: Моїіесціаг Апаїувів ОЇ Бігисіцге, Еипсіоп Апа
Веашаїйоп". Регдатоп, Охіога, рр. 43-78 (1990); І езапс, С. єї а!., 1979, Нит. Сепеї: 50, 199- 211). Згідно з даним винаходом конкретно передбачено, що антитіла згідно з даним винаходом можуть включати будь-який алотип, ізоалотип або гаплотип будь-якого гена імуноглобуліну та не обмежені алотипом, ізоалотипом або гаплотипом послідовностей, забезпечених у даному документі. Крім цього, у деяких системах експресії С-кінцевий залишок амінокислоти (виділений жирним шрифтом) домену СНЗ може бути вилучений після трансляції. Відповідно, С-кінцевий залишок домену СНЗ являє собою необов'язковий залишок амінокислоти у РО-1-сполучних молекулах згідно з даним винаходом. В область даного винаходу конкретно включені РО-1- сполучні молекули, позбавлені С-кінцевого залишку домену СНЗ. В область даного винаходу також конкретно включені конструкції, що містять С-кінцевий залишок лізину домену СНЗ.
Ї0О66б| Активуючі й інгібуючі сигнали передаються за допомогою лігування області Ес із клітинним рецептором Бсо-гамма (Есуй). Здатність зазначеного лігування здійснювати діаметрально протилежні функції обумовлена структурними відмінностями між різними Есук.
Два різних домену у цитоплазматичних сигнальних доменух рецептора, називаних імунорецепторними тирозиновими активуючими мотивами (ІТАМ) й імунорецепторними тирозиновими інгібуючими мотивами (ІТІМ), є причиною різних відповідей. Залучення різних цитоплазматичних ферментів до цих структур обумовлює результат опосередковуваних Есук клітинних відповідей. ІТАМ-вмісні комплекси Есук включають ЕсСУуКІ, ЕСсуУКПА, ЕсукКПА, тоді як
ІТІМ-вмісні комплекси включають тільки ЕСсуУКІІВ. Нейтрофіли людини експресують ген ЕСуУКПА.
Кластеризація ЕсукІПА за допомогою імунних комплексів або специфічної зшивки антитіл служить для агрегації ІТАМ разом з рецептор-асоційованими кіназами, які сприяють фосфорилюванню ІТАМ. Фосфорилювання ІТАМ служить місцем стикування для ЗукК-кінази, активація якої призводить до активації наступних субстратів (наприклад, РізК). Клітинна активація призводить до вивільнення прозапальних медіаторів. Ген ЕСУКІІВ експресується у В- лімфоцитах; позаклітинний домен ЕсукКІІВ на 9695 ідентичний ЕсукКІА та зв'язується з комплексами Ідс аналогічним чином. Присутність ІТІМ у цитоплазматичному домені ЕсукІІВ визначає даний інгібуючий підклас ЕсукК. Недавно була встановлена молекулярна основа такого інгібування. При спільному лігуванні з активуючим Есук ІТІМ у ЕсукКІІВ стає фосфорилованим і притягує домен 5Н2 інозитолполіфосфат-5'-фосфатази (ЗНІР), який гідролізує фосфоінозитні месинджери, які вивільняються в результаті активації тирозинкінази, опосередковуваної ІТАМ- вмісним Есуг, що згодом веде до запобігання припливу внутрішньоклітинного Са--. Відповідно, зшивка ЕсукіВ опослабляє активуючу відповідь на лігування Есуюк й інгібує клітинну сприйнятливість. Як наслідок, запобігається активація В-клітин, проліферація В-клітин і секреція антитіл.
І Біспецифічні антитіла, поліспецифічні діатіла та діатіла ОАКТО
І0067| Здатність антитіла зв'язуватися з епітопом антигена залежить від присутності й амінокислотної послідовності доменів Мі. ії МН антитіла. Взаємодія легкого ланцюга антитіла та важкого ланцюга антитіла, і, зокрема, взаємодія їх доменів МІ. і МН утворює один із двох сайтів зв'язування епітопів природного антитіла. Природні антитіла здатні зв'язуватися тільки з одним видом епітопів (тобто, вони моноспецифічні), незважаючи на те, що вони можуть зв'язуватися з декількома копіями зазначеного виду епітопу (тобто проявляють бівалентність або полівалентність).
ЇОО68| Сполучні домени згідно з даним винаходом зв'язуються 3 епітопами "Імуноспецифічним" чином. У даній заявці антитіло, діатіло або інша сполучна епітоп молекула, як вважають, "імуноспецифічно" зв'язується з областю іншої молекули (тобто, епітопом), якщо вона реагує або зв'язується частіше, швидше, з більшою тривалістю та/або з більшою афінністю з даним епітопом у порівнянні з іншими епітопами. Наприклад, антитіло, яке бо імуноспецифічно зв'язується з вірусним епітопом, являє собою антитіло, яке зв'язується з даним вірусним епітопом з більшою афінністю, авідністю, більше легко та/або з більшою тривалістю, у порівнянні з його імуноспецифічним зв'язуванням з іншими вірусними епітопами або невірусними епітопами. Також слід розуміти, прочитавши це визначення, що, наприклад, антитіло (або фрагмент або епітоп), яке імуноспецифічно зв'язується з першою мішенню, може, але необов'язково, специфічно або переважно зв'язуватися з другою мішенню. Відповідно, "імуноспецифічне зв'язування" необов'язкове потребує (хоча і може включати його) виняткового зв'язування. Як правило, але необов'язково, посилання на зв'язування означає "специфічне" зв'язування. Вважається, що дві молекули здатні зв'язуватися одна з одною "фізіоспецифічним" чином, якщо таке зв'язування проявляє специфічність, з якою рецептори зв'язуються зі своїми відповідними лігандами.
Ї0069| Функціональність антитіл може бути підвищена шляхом одержання поліспецифічних молекул на основі антитіл, які можуть одночасно зв'язуватися з двома окремими та різними антигенами (або різними епітопами того самого антигена) та/"або шляхом одержання молекули на основі антитіла, що має більше високу валентність (тобто більше двох сайтів зв'язування) у відношенні одного і того самого епітопу та/або антигена.
Ї0070| Для того, щоб забезпечити молекули, що мають більші функціональні можливості, ніж природні антитіла, був розроблений широкий спектр форматів рекомбінантних біспецифічних антитіл (див., наприклад, РСТ публікації М/О 2008/003116, УМО 2009/132876, МО 2008/003103, УМО 2007/146968, УМО 2009/018386, УМО 2012/009544, УМО 2013/070565), у більшості з яких використовують лінкерні пептиди, щоб гібридизувати додатковий епітопсполучний фрагмент (наприклад, 5сСЕм, МІ, МН і т.п.) з або в межах центральної частини антитіла (ІдА, дО, ІЧЕ, Ідс або ІдМм) або гібридизувати декілька фрагментів, що зв'язують епітоп (наприклад, два фрагменти Раб або 5сЕм) В альтернативних форматах використовують лінкерні пептиди для гібридизації фрагмента, що зв'язує епітоп (наприклад, 5сСЕм, МІ, МН і т.п.), з доменом димеризації, таким як домен СН2-СНЗ, або альтернативними поліпептидами (МО 2005/070966, УМО 2006/107786А УМО 2006/107617А, УМО 2007/046893). Як правило, згадані підходи включають компромісні варіанти та прийнятні варіанти. Наприклад, у РСТ публікаціях
УМО 2013/174873, УМО 2011/133886 і МО 2010/136172 розкрито, що використання лінкерів може викликати проблеми в терапевтичних умовах, і описане триспецифічне антитіло, в якому домени СІ і СНІ пересунені з їх відповідних природних положень, а також домени У. і МН були диверсифіковані (ММО 2008/027236, ММО 2010/108127), щоб надати їм здатність зв'язуватися більше ніж з одним антигеном. Відповідно, у молекулах, розкритих у зазначених документах, специфічність зв'язування змінена на користь здатності зв'язуватися з додатковими видами антигенів. У РСТ публікаціях УМО 2013/163427 і МО 2013/119903 розкриті модифікації домену
СН? для включення адукта гібридного білка, що містить сполучний домен. У документі відзначено, що домен СН, імовірно, грає лише мінімальну роль як посередник ефекторної функції У РСТ публікаціях УУО 2010/028797, МО2010028796 і УМО 2010/028795 розкриті рекомбінантні антитіла, області Ес яких були замінені додатковими доменами МІ. і УН так, щоб одержати тривалентні сполучні молекули. У РСТ публікаціях МО 2003/025018 ії М/О2003012069 розкриті рекомбінантні діатіла, окремі ланцюги яких містять домени 5сЕуУ. У РСТ публікації УМО 2013/006544 розкриті полівалентні молекули Рар, які синтезують як один поліпептидний ланцюг і потім піддають протеолізу з утворенням гетеродимерних структур. Відповідно, у молекулах, розкритих у зазначених документах, всі або деякі функціональні можливості виступати посередниками ефекторної функції змінені на користь здатності зв'язуватися з додатковими видами антигенів. У РСТ публікаціях УМО 2014/022540, МО 2013/003652, УМО 2012/162583, УМО 2012/156430, МО 2011/086091, МО 2008/024188, МО 2007/024715, МО 2007/075270, МО 1998/002463, УМО 1992/022583 і УМО 1991/003493 розкриті способи додавання додаткових сполучних доменів або функціональних груп до антитіла або частини антитіла (наприклад, додавання діатіла до легкого ланцюга антитіла або додавання додаткових доменів Мі. і МН до
БО легких і важких ланцюгів антитіла, або додавання гетерологічного гібридного білка, або зв'язування декількох доменів Бар один з одним). Відповідно, у молекулах, розкритих у зазначених документах, нативна структура антитіл змінена на користь здатності зв'язуватися з додатковими видами антигенів. 0071 В даній області техніки також згадана можливість одержання діатіл, які відрізняються від зазначених природних антитіл своєю здатністю зв'язуватися з двома або більше різними видами епітопів (тобто проявляють біспецифічність або поліспецифічність на додаток до бівалентної або полівалентної форми) (див., наприклад, Ноїїїдег еї аї. (1993) "Оіабродіев" ЗтаїїЇ
ВімаІепі Апа Вівресіїйс Апіїроду Егадтепів", Ргос. МаїЇ. Асай. сі. (0.5.А.) 90:6444-6448; 05 2004/0058400 (Ноїїпдег єї а); 05 2004/0220388/МО 02/02781 (Мепепз еї аї.); АЇї еї аї. (1999) бо ЕРЕВ5 Гей. 454(1-2):90-94; и, 0. еї аї. (2005) "А шу Нитап Несотрбіпапі Ідд-їКе Візресіїїс
Апіїбоду То Воїй Те Ерідента! Стоули Расіог Несеріог Апа Те Іпзшіп-ГіКе Стомй Расіюг
Весеріог Рог Еппапсей Апійитог Асіїмну", у. Віої. Спет. 280(20):19665-19672; МО 02/02781 (Мепепз еї аї.); Огаїзеп, Т. єї а. (2004) "Сомаїепі Оізиніде-СіпКкед Апії-сеа Оіароду АйПом/в 5Йе- зЗресіїїс Сопішдайоп Апа НРадіоіабеїїпа Рог Титог Тагдеїіпу Арріїсаййоп5", Ргоївіп Епд. Оев5. Зеї. 17(11)ух21-27; Ми, А. єї аї. (2001) "Мийітетігайоп ОА Спітетіс Апії-саго біпдіеє СНаїіп Ем-Ем Еивіоп
Ргоївїп І Медіаїєд Тпгоцдп Магпаріє Юотаїп Ехспапде", Ргоївіїп Епдіпеегіпд 14(2):1025-1033;
Азапо еї аї. (2004) "А Оіароду Рог Сапсег Іттипоїпегару Апа 5 Рипсіопа! Епнапсетепі Ву
Еивіоп ОЇ Нитап Ес Юотаїп", Арзігасі ЗР-683, у). Віоспет. 76(8):992; ТаКетига, 5. єї а. (2000) "Сопвігисіоп ОЇ А Оіароду (Зтаї! Весотрбіпапі Візресіїїс Апіїбоду) Овіпа А Веїйоїдіпд Зувівт",
Ргоївіп Епд. 13(8):583-588; Ваєцепіе, Р.А. єї аї. (2009) "Візресіїїс Т-Сеі! Епдадіпад Апіїродієв Рог
Сапсег ТНегару", Сапсег Вез. 69(12):4941-4944).
І0072| Дизайн діатіл заснований на одержанні похідної антитіла, відомої як одноланцюговий фрагмент варіабельних доменів (5СЕм). Підходящі молекули одержують шляхом зв'язування варіабельних доменів легкого ланцюга та/або важкого ланцюга з використанням короткого з'єднуючого пептиду. У роботі Віка єї аї. (1988) ("ЗіпдІєе-СНаїп Апіідеп-Віпаїпуд Ргоївїпв", Зсієпсе 242:423-426) описаний приклад з'єднуючих пептидів, які утворюють місток довжиною приблизно 3,5 нм між карбокси-кінцем одного варіабельного домену й аміно-кінцем іншого варіабельного домену. Були розроблені та використані лінкери, що мають інші послідовності (Віго єї аї. (1988) "Біпдіє-СнНаїп Апііїдеп-Віпаїпа Ргоївїп5", 5сіепсе 242:423-426). У свою чергу, лінкери можуть бути модифіковані для надання їм додаткових функцій, таких як прикріплення лікарських препаратів або прикріплення до твердих основ. Одноланцюгові варіанти можуть бути отримані рекомбінантними або синтетичними способами. Для одержання 5сЕм синтетичним способом може бути використаний автоматизований синтезатор. Для одержання 5сЕм рекомбінантними способами підходяща плазміда, що містить полінуклеотид, який кодує 5сЕм, може бути введена у підходящу клітину-хазяїна, наприклад, еукаріотичну клітину, наприклад, клітини дріжджів, рослин, комах або ссавців, або прокаріотичну клітину, таку як клітина Е. соїї. Полінуклеотиди, які кодують 5сЕм, що представляють інтерес, можуть бути отримані за допомогою стандартних маніпуляцій, таких як лігування полінуклеотидів. Отриманий 5сЕм може бути виділений з використанням стандартних способів очищення білка, відомих в даній області техніки.
Зо Ї0073| Забезпечення немоноспецифічних діатіл представляє значну перевагу у порівнянні з антитілами, включаючи, але не обмежуючись ними, здатність колігувати і колокалізувати клітини, які експресують різні епітопи. Відповідно, біспецифічні діатіла мають широке застосування, включаючи терапію й імунодіагностику. Біспецифічність забезпечує більшу гнучкість у розробці та модифікації діатіл для різних варіантів застосування, забезпечуючи підвищену авідність у відношенні мультимерних антигенів, зшивання різних антигенів і спрямоване націлювання на конкретні типи клітин, яке засновано на присутності обох антигенів- мішеней. Внаслідок своєї підвищеної валентності, низьких швидкостей дисоціації та швидкого кліренсу із системи кровообігу (для діатіл невеликого розміру близько або менше -50 кДа), молекули діатіл, відомі в даній області техніки, також знайшли особливе застосування в області візуалізації пухлин (Рійгдетгаїй еї аї. (1997) "Ітргомед Титоиг Тагдеїйпу Ву Оізшрніде еїабіїї:еа ріародієз Ехргеззеа Іп Ріспіа равіогів", Ргоївіп Епд. 1071221). 0074) Біспецифічність діатіл лягла в основу їх застосування для колігування різних клітин, наприклад, зшивки цитотоксичних Т-клітин із пухлинними клітинами (5іаеєг2 еї аї. (1985) "Нубгій
Апіїродієє Сап Тагаєї 5пйез Рог Анаск Ву Т СеїІв", Маїште 314:628-631, і Ноїїдег еї а. (1996) "Бресіїйс Кіїїпду СО Гутрпота СеїІх Ву Суююхіс Т-СеїІє Медіаїеа Ву А Візресіїіс Оіароду", Ргоївіп
Епа. 9:299-305; Магміп сеї аї. (2005) "Несотбріпапі Арргоаснев То Іда-їКе Візресіїїс Апіїродієв",
Асіа Рпаптасої. 5іп. 26:649-658). В іншому варіанті, або додатково, біспецифічні діатіла можуть бути використані для колігування рецепторів на поверхні різних клітин або на одній клітині.
Колігування різних клітин і/або рецепторів можна застосовувати для модуляції ефекторних функцій та/або передачі сигналів за участю імунних клітин. Поліспецифічні молекули (наприклад, біспецифічні діатіла), що містять сайти зв'язування епітопів, можуть бути спрямовані на поверхневу детермінанту будь-якої імунної клітини, таку як В7-НЗ (СО0276), В7-НА (МТСМІ1), ВТ А (00272), СбО03, 008, 0016, 0027, 60032, 0040, Ср401, 0047, СбО0б64, 6070 (сбргл3, Срво (8В7-1), 6086 (87-2), 6094 (КІ АО1), Сб0137 (4-188), СО1371 (4-1881), СО226,
СТІ А-4 (С0О152), галектин-9, СІТА, СІТВІ, ННГА2, ІСОБ5 (00278), ІБО5І (00275), рецептор активації клітин-кілерів (КІН), ГАа-3 (Сбрггз3), Пант (ТМЕ5Е14, СОр258), ГКГС класу І або Ії,
Мкага, МКага, ох40 (00134), ОХ40І (СО01341І), РОТН, РО-1 (00279), РО-І 1 (В7-НІ, СО274),
РО-І2 (87-СО, СО273), РУВ (МЕСІ 5, 20155), 5ІвРа, ТОВ, ТІСІТ, ТІМ-3 (НАМСКЗ), і/або МІ5ТА (РО-ІН), які експресуються на Т-лімфоцитах, природних клітинах-кілерах (МК), бо антигенпрезентуючих клітинах або інших мононуклеарних клітинах. Зокрема, сайти зв'язування епітопів, спрямовані на рецептор клітинної поверхні (або його ліганд), який бере участь у регулюванні контрольної точки імунної відповід, можна застосовувати для одержання біспецифічних або поліспецифічних сполучних молекул, які виступають антагоністами або блокують інгібуючу передачу сигналів молекулами контрольної точки імунної відповіді та тим самим стимулюють, активують або підсилюють імунні відповіді у суб'єкта. Молекули, що беруть участь у регулюванні імунних контрольних точок, включають, але не обмежуються ними, В7-НЗ,
В7-Н4, ВТ А, 2040, С0р401, 0047, 2070, С080, С086, 6094, 60137, С01371, С0226, СТІ А-4, галектин-9, СІТА, СІТАГ, ННІ А2, ІСОБ5, ІСОБІ, КІВ, І АС-3, ПСНТ, ГКГС класу І або ІІ, МКога,
Мкага, ох40, ОХ40І, РОН, РО-1, РО-І 1, РО-І 2, РУВ, 5ІВРа, ТОВ, ТІСІТ, ТІМ-3 і/або МІЗТА.
І0075| Однак вищезгадані переваги сполучені зі значними витратами. Для утворення зазначених немоноспецифічних діатіл необхідне успішне складання двох або більше окремих і різних поліпептидів (тобто зазначений процес утворення потребує, щоб діатіла були утворені шляхом гетеродимеризації різних типів поліпептидних ланцюгів). Цей факт відрізняється від ситуації з моноспецифічними діатілами, які утворюються шляхом гомодимеризації ідентичних поліпептидних ланцюгів. Оскільки щонайменше два різних поліпептида (тобто дві поліпептидні молекули) повинні бути забезпечені для утворення немоноспецифічного діатіла й оскільки гомодимеризація таких поліпептидів призводить до одержання неактивних молекул (ТаКетига,
З. еї аі. (2000) "Сопвігисіоп ОЇ А Оіароду (Зтаї! Весотбіпапі Візресіїс Апіїроду) Овіпд А
Веоїідіпд Зувіет", Ргоївїп Епод. 13(8):583-588), одержання зазначених поліпептидів повинно бути виконано так, щоб запобігти ковалентному зв'язуванню між поліпептидами одного і того самого типу (тобто, щоб запобігти гомодимеризації) (ТаКетига, 5. еї аЇ. (2000) "Сопвігисіоп ОГ А ріароду (Зтаї! Весотрбіпапі Візресіїіс Апіїроду) Овіпа А Веідіпуд Зувіет", Ргоїєїп Епа. 13(8):583- 588). У цьому зв'язку в даній області техніки було запропоноване нековалентне з'єднання таких поліпептидів (див., наприклад, Оіаївеп сеї аї. (2004) "СомаІепі Рівиніде-ГіпКед Апіі-свєа Ріароду
АЙйомув 5іе-5ресіїїс Сопішдайоп Апа Радіоїабеїїпуд Рог Титог Тагдеїїпо Арріїсайоп5", Ргої. Епаг.
Оев. 5еї!. 17:21-27; Азапо еї аї. (2004) "А біароду Рог Сапсег ІттипоїШегару Апа 5 Еипсііопаї!
Епнапсетепі Ву Ривзіоп ОЇ Нитап Ес Ботаїп", Абзігасі ЗР-683, 9. Віоспет. 76(8):992; ТаКетига,
З. еї аі. (2000) "Сопвігисіоп ОЇ А Оіароду (Зтаї! Ресотрбіпапі Візресіїйс Апіїроду) Ов5іпд А
Веіаїпа бувієт", Ргоївїп Епа. 13(8):583-588; І и, 0. єї а. (2005) "А Ешіу Нитап Ресотрбіпапі Ідад-
Зо ІКе Візресіїїс Апіїбоду То Воїй Тне Ерідепта! Стоули Расіог Весеріог Апа Тне Інзицп-ГіКе СтоУлп
ЕРасіог Несеріог Бог Еппапсейд Апійитог Асіїмну", у. Віої. Спет. 280(20):19665-19672). 0076) Однак в даній області техніки встановлено, що біспецифічні діатіла, що складаються з нековалентно зв'язаних поліпептидів, є нестабільними і легко дисоціюють на нефункціональні мономери (див., наприклад, ГИ, О. еї аї. (2005) "А Ешу Нитап Несотрбіпапі Ідд-ІїКе Візресіїїс
Апіроду То Воїй Те Ерідента! Стоули Еасіог Весеріог Ап Те Іпзцііп-ііКе Стоулпи ГРасіог
Весеріог Рог Епнапсей Апійитог Асіїмігу", у. Віої. Спет. 280(20):19665-19672).
ЇОО77|У світлі цієї проблеми в даній області техніки вдалося розробити стабільні, ковалентно зв'язані гетеродимерні немоноспецифічні діатіла, які називають діатіла ОАКТО (Оца! Айіппйу Не-Тагодеєїїпд Неадепіб5 (переспрямовані реагенти з подвійною афінністю)); див., наприклад, публікації патентів США МоМо2013-0295121; 2010-0174053 і 2009-0060910; публікації європейських патентів ЕР 2714079; ЕР 2601216; ЕР 2376109; ЕР 2158221; і РСТ публікації МО 2012/162068; УМО 2012/018687; МО 2010/080538; і Зіоап, О.О. еї аїЇ. (2015) "Тагдеїйнптд НІМ
Везегмоїг іп Іпт'єсієй СО4 Т Сеїїє Бу ЮпйаІ-Аніпйу Ве-іагдеїйпо9 Моїіесціез (Оагів) їйаї Віпа НІМ
Епмеоре апа Аестий Суфїюхіс ТТ СеїІв", Ріов Раїса. 11(11)Ме1005233. дао: 10.1371/Лоигпаї.рраї.1005233; АІ Низзаїпі, М. еї аї. (2015) "Тагдейпа СО123 Іп АМІ. Овіпу А Т-Сеї
Оігестїєа Юпа!І-Айніпйу Ве-Тагдейпд (САКТФ) Ріаногт", Віоса рії: Біооа-2014-05-575704; Спіснії,
С.А. еї аї. (2015) "А СОЗхса123 Візресіїс САВТ Рог Недігесіїпд Нові Т СеїІє То Муеіодепоив5
Ї енкетіа: Ргєсіїпіса! Асіїмпу Апа Заїеїу Іп Моппитап Ргітаїев", Зсі. Тгапв5і. Мед. 7(289):289гавег;
Мооге, Р.А. еї аї. (2011) "Арріїсайоп ОЇ Юа! Айіпійу Веїагдєїїптд Моїіесшев То Аспієме Оріїтаї
Веадігесієд Т-Сеї! Кіїйпоа ОЇ В-Сеїї Гутрпота", Віоой 117(17):4542-4551; Мет, М.С. еї аї. (2010) "Тнегарешііс Сопіго!ї ОЇ В Сеї| Асіїмайоп Міа Весгийтепі ОЇ Рсдатта Весеріог Ії (СОЗ2В)
Іппібйогу Еипсіп М/йН А Момеї! Візресіїїс Апіїбоду Зсайноїа", Апййі АВНейт. 62(7):1933-1943;
Уоппзоп, 5. єї аї. (2010) "ЕнНесюг СеїЇ Весгийтепі М/йй Моме! Ем-Вазей Юиа!І-Аніпйу Ве-Тагоеїіпд
Ргоївїп І єад5 То Роїепі Титог Сую/увзів Апа іп мімо В-Сеї! Оерієїоп", 9. Мої. Віої. 399(3):436-449).
Зазначені діатіла містять два або більше ковалентно зв'язаних поліпептидів і включають модифікацію одного або більше залишків цистеїну в кожній з використовуваних поліпептидних молекул, що дозволяє формувати дисульфідні зв'язки і тим самим ковалентно зв'язувати два поліпептидні ланцюги. Наприклад, було показано, що додавання залишку цистеїну до С-кінця зазначених конструкцій забезпечує утворення дисульфідного зв'язку між поліпептидними 60 ланцюгами, стабілізуючи отриманий гетеродимер без негативного впливу на характеристики зв'язування двовалентної молекули.
Ї0078|Кожний з двох поліпептидів найпростішого біспецифічного діатіла ОСАКТФ складається з трьох доменов. Перший поліпептид містить (у напрямку від М-кінця до С-кінця): (і) перший домен, який містить сполучну область з варіабельного домену легкого ланцюга першого імуноглобуліну (МІ 1), (її) другий домен, який містить сполучну область з варіабельного домену важкого ланцюга другого імуноглобуліну (МН), і (ії) третій домен, який містить залишок цистеїну (або домен, що містить цистеїн), і домен, що сприяє утворенню гетеродимера, який служить для стимулювання гетеродимеризації з другим поліпептидом діатіла та для ковалентного зв'язку першого та другого поліпептидів діатіла один з одним. Другий поліпептид містить (у напрямку від М-кінця до С-кінця): (ї) перший домен, який містить сполучну область з варіабельного домену легкого ланцюга другого імуноглобуліну (МІ 2), (її) другий домен, який містить сполучну область з варіабельного домену важкого ланцюга першого імуноглобуліну (МНІ), ії (ії) третій домен, який містить залишок цистеїну (або домен, що містить цистеїн), і комплементарний домен, що сприяє утворенню гетеродимера, який поєднується з доменом, що стимулює утворення гетеродимера, першому поліпептидному ланцюгу, щоб стимулювати гетеродимеризацію з першим поліпептидним ланцюгом. Залишок цистеїну (або домен, що містить цистеїн) третього домену другого поліпептидного ланцюга стимулює утворення ковалентного зв'язку між другим поліпептидним ланцюгом і першим поліпептидним ланцюгом діатіла. Зазначені молекули є стабільними, ефективними та мають здатність одночасно зв'язуватися з двома або більше антигенами. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу треті домени першого та другого поліпептидів містять залишок цистеїну, який служить для зв'язування поліпептидів за допомогою дисульфідного зв'язку. На Фігурі 1 представлена схема зазначеного діатіла, в якому для утворення ковалентного зв'язку використовуються домени, що сприяють утворенню гетеродимера, що містять Е-спіраль/К-спіраль, і лінкер, що містить цистеїн. Як показано на Фігурі 2 і Фігурах ЗА-3С, один або обидва поліпептида можуть додатково містити послідовність домену СН2-СНЗ так, що з'єднання двох поліпептидів діатіла утворює область Ес, яка здатна зв'язуватися з рецептором Ес клітин (таких як В-лімфоцити, дендритні клітини, природні клітини-кілери, макрофаги, нейтрофіли, еозинофіли, базофіли та гладкі клітини). Як більше докладно описано нижче, домени СН2 і/або СНЗ зазначених поліпептидних ланцюгів не обов'язково повинні мати ідентичні послідовності, і переважно модифіковані, щоб сприяти з'єднанню двох поліпептидних ланцюгів.
Ї0079| Була описана множина варіантів зазначених молекул (див, наприклад, публікації патентів США МоМо2015/0175697; 2014/0255407; 2014/0099318, 2013/0295121, 2010/0174053 і 2009/0060910; публікації європейських патентів ЕР 2714079 ЕР 2601216, ЕР 2376109, ЕР 2158221; ії РСТ публікації МУЛО 2012/162068, МО 2012/018687, МО 2010/080538). Зазначені діатіла ЮСАКТФ, що містять область Ес, можуть містити дві пари поліпептидних ланцюгів.
Перший поліпептидний ланцюг містить (у напрямку від М-кінця до С-кінця): () перший домен, який містить сполучну область з варіабельного домену легкого ланцюга першого імуноглобуліну (МІ-1), (ї) другий домен, який містить сполучну область з варіабельного домену важкого ланцюга другого імуноглобуліну (МН), (іїї) третій домен, який містить залишок цистеїну (або домен, що містить цистеїн) і стимулює гетеродимеризацію з другим поліпептидом діатіла й утворення ковалентного зв'язку між першим і другим поліпептидами діатіла, і (м) домен СН2-СНЗ. Другий поліпептид містить (у напрямку від М-кінця до С-кінця): () перший домен, який містить сполучну область з варіабельного домену легкого ланцюга другого імуноглобуліну (МІ2), (її) другий домен, який містить сполучну область з варіабельного домену важкого ланцюга першого імуноглобуліну (МН), і (ії) третій домен, який містить залишок цистеїну (або домен, що містить цистеїн), і домен, що сприяє утворенню гетеродимера, який стимулює гетеродимеризацію з першим поліпепгидним ланцюгом. У цьому випадку два перші поліпептиди з'єднуються один з одним з утворенням області Ес. На Фігурах ЗА-3С представлені схеми трьох варіантів зазначених діатіл, у яких використовуються різні домени, що сприяють утворенню гетеродимера. 00801 Інші діатіла ОАКТФ, що містять область Ес, можуть містити три поліпептидні ланцюги.
Перший поліпептид зазначених діатіл ПОАКТЄ містить три домену: (ї) домен, що містить Мі 1, (ії) домен, що містить МНа, і (ії) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ. Другий поліпептид зазначених діатіл ОАКТФ містить: (ії) домен, що містить МІ2, (ії) домен, що містить УНІЯ, і (її) домен, який стимулює гетеродимеризацію й утворення ковалентного зв'язку з першим поліпептидним ланцюгом діатіла. Третій поліпептид зазначених діатіл ЮАКТФ містить послідовність СН2-СНЗ. Відповідно, перший та другий поліпептидні ланцюги зазначених діатіл
БАКТФ зв'язуються з утворенням сайту зв'язування МІ 1//НІ, який здатний зв'язуватися з бо епітопом, а також сайту зв'язування МІ 2//Н2, який здатний зв'язуватися з другим епітопом. Такі більше складні молекули ЮАКТФ також містять цистеїнвмісні домени, які беруть участь в утворенні ковалентно зв'язаного комплексу. Відповідно, перший та другий поліпептиди зв'язані один з одним за допомогою дисульфідного зв'язку між залишками цистеїну в їх відповідних третіх доменух. Примітно, що перший та третій поліпептидні ланцюги з'єднуються один з одним з утворенням області Ес, яка стабілізується за допомогою дисульфідного зв'язку. На Фігурі 4А- 4В представлені схеми зазначених діатіл, що містять три поліпептидні ланцюги.
І0081| Інші діатіла ОАКТФ, що містять область Ес, можуть містити п'ять поліпептидних ланцюгів, які можуть містити сполучні області з варіабельних доменів легкого ланцюга та важкого ланцюга аж від трьох різних імуноглобулінів (називаних МІ 1/Л/НІ, МІ 2Л/Н2 ії МІ З//НЗ).
Наприклад, перший поліпептидний ланцюг зазначених діатіл може містити: (ї) домен, що містить
МНІТ, (її) домен, що містить СНІ, і (її) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ. Другий та п'ятий поліпептидні ланцюги зазначених діатіл можуть містити: (і) домен, що містить МІ, і (ії) домен, що містить СІ. Третій поліпептидний ланцюг зазначених діатіл може містити: (ї) домен, що містить МНІ, (ії) домен, що містить СНІ, (ії) домен, що містить послідовність СН2-СНВЗ, (ім) домен, що містить МІ/2, (м) домен, що містить МНЗ, і (м) домен, що сприяє утворенню гетеродимера, причому домени, що сприяють утворенню гетеродимера, стимулюють димеризацію третього ланцюга з четвертим ланцюгом. Четвертий поліпептид зазначених діатіл може містити: (ї) домен, що містить МІ 3, (ії) домен, що містить МН, і (ії) домен, який стимулює гетеродимеризацію й утворення ковалентного зв'язку з третім поліпептидним ланцюгом діатіла.
У цьому випадку перший та третій поліпептиди з'єднуються один з одним з утворенням області
Ес. Такі більше складні молекули ОАКТФ також містять цистеїнвмісні домени, які беруть участь в утворенні ковалентно зв'язаного комплексу так, що кожний поліпептидний ланцюг пов'язаний з щонайменше одним додатковим поліпепгидним ланцюгом за допомогою дисульфідного зв'язку за участю залишків цистеїну. Переважно зазначені домени впорядковані у напрямку від М-кінця до С-кінця. На Фігурі 5 представлені схеми зазначених діатіл, що містять п'ять поліпептидних ланцюгів.
І00821| Альтернативні конструкції відомі в даній області техніки для варіантів застосування, в яких переважною є чотиривалентна молекула, але область Ес не потрібна, включаючи, але не обмежуючись ними, чотиривалентні тандемні антитіла, також називані "Тапааре" (див.,
Зо наприклад, публікації патентів США МоМо2005-0079170, 2007-0031436, 2010-0099853, 2011- 020667 2013-0189263; публікації європейських патентів ЕР 1078004, ЕР 2371866, ЕР 2361936 і
ЕР 1293514; РСТ публікації УУО 1999/057150, УМО 2003/025018 і УМО 2013/013700), які утворені шляхом гомодимеризації двох ідентичних ланцюгів, кожний з яких містить домен МНІ, МІ 2, МН2 і МІ 2. 0083) Недавно були описані тривалентні структури, що включають два сполучних домену, характерних для діатіл, й один домен типу, не характерного для діатіл, й область Ес (див., наприклад, РСТ публікацію: РСТ/О515/33076, озаглавлену "Триспецифічні сполучні молекули та способи їх застосування", подану 29 травня 2015 р. і РСТ/О515/33081, озаглавлену "Триспецифічні сполучні молекули, які специфічно зв'язуються з декількома антигенами раку та способи їх застосування", подану 29 травня 2015 р.). Зазначені тривалентні молекули можуть бути використані для одержання моноспецифічних, біспецифічних або триспецифічних молекул. На Фігурах бА-6Е представлені схеми зазначених тривалентних молекул, що містять З або 4 поліпептидні ланцюги.
ЇМ Молекули, що зв'язують РО-1 людини, згідно з даним винаходом 0084) Переважні РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом включають антитіла, діатіла, ВІТЕ та т.п. і здатні зв'язуватися з безперервною або переривчастою (наприклад, конформаційною) частиною (епітопом) РО-1 людини (СО279). Молекули, що зв'язують РО-1 людини, згідно з даним винаходом переважно також здатні зв'язуватися з молекулами РО-1 одного або більше видів, відмінних від людини, зокрема з РО-1 приматів (і, зокрема, таких видів приматів як яванські макаки). Типовий поліпептид РО-1 (послідовність в МСВІ МР 005009.2; включаючи сигнальну послідовність з 20 залишків амінокислот (показані підкресленням) і 268 залишків амінокислот зрілого білка) містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО
ІО МО: 68):
МОІРОАРМРУ МАМІ ОГСМ/А РОМ/Р О5РОВ РМУМРРТЕБРА ГГ МУТЕСОМА
ТЕТО5ЕЗМТ5 ЕЗЕМІ МУУМАМ ЗРУОМОТОКІГА АЕРЕОНЗОРОа ОССАВЕВМТОЇ
РМаВОєЕНМ5МУ МААВАМОБЗИтТ мі СОСАІ5І АР КАОІКЕБІ ВА ЕГАМТЕВВАЕ
МРТАНРОРБЗР ВРАСОРОТІ М МОУУаСсІ а5 І М ММУМІ АМ ІС5ВААВСТІ
САВЕТСОаОРІ К ЕОРБАМРУЕ5 МОМСаЕІ ОБРОМ/ ВЕКТРЕРРУР СМРЕОТЕМАТ 0085) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу молекули, що зв'язують РО-1 60 людини, згідно з даним винаходом характеризуються будь-яким (одним або більше) з наступних критеріїв: (1) специфічно зв'язується з РО-1 людини, що ендогенно експресується на поверхні стимульованої Т-клітини людини; (2) специфічно зв'язується з РО-1 людини з рівноважною константою зв'язування (Ко) 40 нм або менше; (3) специфічно зв'язується з РО-1 людини з рівноважною константою зв'язування (Ко) 5 нм або менше; (4) специфічно зв'язується з РО-1 людини зі швидкістю прямої реакції (Ка) 1,5х107 М"хв" або більше; (5) специфічно зв'язується з РО-1 людини зі швидкістю прямої реакції (Ка) 90,0х107 М-хв" або більше; (6) специфічно зв'язується з РО-1 людини зі швидкістю зворотньої реакції (Ка) 7х107 хв" або менше; (7) специфічно зв'язується з РО-1 людини зі швидкістю зворотньої реакції (Ка) 2х107 хв" або менше; (8) специфічно зв'язується з РО-1 примата, відмінного від людини (наприклад, РО-ї1 яванської макаки); (9) інгібує (тобто блокує або перешкоджає) зв'язування/інгібуючу активність ліганду РО-1 (РО-І1/РО-1І2) з РО-1; (10) стимулює імунну відповідь; та/або (11) виявляє синергічну дію з антитілом до ГАС-3 людини, щоб стимулювати антигенспецифічну відповідь Т-клітин.
ЇО086| У даній заявці термін "антигенспецифічна відповідь Т-клітин" відноситься до відповідей Т-клітини, які є результатом стимуляції Т-клітини антигеном, у відношенні якого специфічна Т-клітина. Необмежуючі приклади відповідей Т-клітин при антигенспецифічній стимуляції включають проліферацію та вироблення цитокінів (наприклад, вироблення ФНО-а,
ІФН-у). Здатність молекули стимулювати антигенспецифічну відповідь Т-клітин може бути визначена, наприклад, з використанням кількісного дослідження МКПК, стимульованих ентеротоксином типу В старпуіососсив айгеив ("ЕВ"), описаного у даному документі.
І0087| Переважні молекули, що зв'язують РО-1 людини, згідно з даним винаходом містять домени МН і/або МІ. мишачих моноклональних антитіл до РО-1 людини "МАТ до РО-1 1", "МАТ 2 до РО-1", "МАТ З до РО-1", "МАТ 4 до РО-1", "МАТ 5 до РО-1", "МАТ 6 до РО-1", "МАТ 7 до РО- 1", "МАТ 8 до РО-1", "МАТ 9 до РО-1", "МАТ 10 до РО-1", "МАТ 11 до РО-1", "МАТ 12 до РО-1", "МАТ 13 до РО-1", "МАТ 14 до РО-1" або "МАТ 15 до РО-1", і більше переважно містять 1, 2 або всі З СОВн домену МН і/або 1, 2 або всі З СОВІ домену МІ. зазначених моноклональних антитіл до РО-1 людини. Зазначені переважні молекули, що зв'язують РО-1 людини, включають біспецифічні (або поліспецифічні) антитіла, химерні або гуманізовані антитіла, ВІіТЕ, діатіла та т.п., і зазначені сполучні молекули, що містять варіанти областей Ес. 0088) Згідно з даним винаходом, зокрема, запропоновані РО-1-сполучні молекули, що містять РО-1-сполучний домен, які містять: (А) (1) три СОВн домену МН МАТ до РО-1 1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ до РО-1 1; (3) три СОВн домену МН МАТ до РО-1 1 і три СОВІ домену МІ. МАТ до РО-1 1; (4) домен МН з МНІ МАТ до лРО-1 1; (5) домен МІ. з МІ1 МАТ до лРО-1 1; (6) домени МН і МІ. МАТ до лРО-1 1; (В) (1) три СОВн домену МН МАТ 2 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 2 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 2 до РО-1 і три СОВІ домену МІ. МАТ 2 до РО-1; (4) домен МН з МНІ МАТ до лРО-1 2; (5) домен МІ. з МІ1 МАТ до лРО-1 2; (6) домени МН і МІ. МАТ до лРО-1 2; (С) (1) три СОВн домену МН МАТ З до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ З до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ З до РО-1 і три СОВІ домену МІ. МАТ З до РО-1; (0) (1) три СОВн домену МН МАТ 4 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 4 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 4 до РО-1 і три СОВІ домену МІ. МАТ 4 до РО-1; (Є) (0) три СОВн домену МН МАТ 5 до РО-1; 60 (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 5 до РО-1;
(3) три СОВн домену МН МАТ 5 до РО-1 і три СОВІ домену МІ. МАТ 5 до РО-1; (Р) (1) три СОВн домену МН МАТ 6 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 6 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 6 до РО-1 і три СОВІ домену МІ. МАТ 6 до РО-1; (С) (1) три СОВн домену МН МАТ 7 до РО-1; (2) три СОВІ домену МІ. МАТ 7 до РО-1 або МІ 2 МАТ до лРО-1 7 або МІ З МАТ до лРО-1 7; (3) три СОАВн домену МН МАТ 7 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 7 до РО-1 або МІ2 МАТ до ЛлРО-1 7, МІЗ МАТ до лРО-1 7; (4) домен МН із МНІ1 МАТ до лРО-1 7 або МН2 МАТ до лРО-1 7; (5) домен МІ із МІ 1 МАТ до лРО-1 7 або МІ 2 МАТ до лРО-1 7, або МІ З МАТ до лРО-1 7; (6) домени МН і МІ. МАТ до лРО-1 7(1.1) або МАТ до лРО-1 7(1.2), або МАТ до лРО-1 7(1.3), або МАТ до лРО-1 7(2.1), або МАТ до лРО-1 7(2.2), або МАТ до лРО-1 7(2.3); (Н) (І) три СоАРндомену МН МАТ 8 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 8 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 8 до РО-1 і три СОВІ домену МІ. МАТ 8 до РО-1; () 1) три СОВн домену МН МАТ 9 до РО-1 або УН2 МАТ до лРО-1 9; (2) три СОВІ домену МІ. МАТ 9 до РО-1 або МІ 2 МАТ до лРО-1 9; (3) три СОВн домену МН МАТ 9 до РО-1 або МН2 МАТ до лРО-1 9 і три СОВІ домену МІ МАТ 9 до РО-1 або МІ 2 МАТ до лРО-1 9; (4) домен МН із МНІ1 МАТ до лРО-1 9 або МН2 МАТ до лРО-1 9; (5) домен МІ із МІ 1 МАТ до лРО-1 9 або МІ 2 МАТ до лРО-1 9; (6) домени МН і МІ. МАТ до лРО-1 9(1.1) або МАТ до лРО-1 9(1.2), або МАТ до лРО-1 9(2.1), або МАТ до лРО-1 9(2.2); (3) (1) три СОВн домену МН МАТ 10 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 10 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 10 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 10 до РО-1; (КЮ) (1) три СОВн домену МН МАТ 11 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 11 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 11 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 11 до РО-1;
Зо ()9Ч (1) три СОВн домену МН МАТ 12 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 12 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 12 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 12 до РО-1; (М) (1) три СОВн домену МН МАТ 13 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 13 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 13 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 13 до РО-1; (М) (1) три СОВн домену МН МАТ 14 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 14 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 14 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 14 до РО-1; (0) (1) три СОВн домену МН МАТ 15 до РО-1; (2) три СОВ; домену МІ. МАТ 15 до РО-1; (3) три СОВн домену МН МАТ 15 до РО-1 і три СОВІ домену МІ МАТ 15 до РО-1; (4) домен МН із УНІ МАТ до лРО-1 15; (5) домен МІ із МІ 1 МАТ до лРО-1 15; (6) домени МН і МІ. МАТ до лРО-1 15; або який зв'язується або конкурує за зв'язування з одним і тим самим епітопом, що і МАТ до РО- 11, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до
РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1.
А Моноклональне антитіло до РО-1 людини 1 1 Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 1
І0089| Нижче представлена амінокислотна послідовність домену МН МАТ до РО-1 1 (ЗЕО ІЮ
МО: 69) (залишки СОРАНн виділені підкресленням).
РМОГОЕБОаРО ВУКРБОБІ БІ ТОТУТаБ5ІТ МОМАУМ/МУМ/ЛВО ЕРОМКІ ЕМУМОа НІТУбБа5тТ5У
МРБІ-К5ВІ5І ТАОТОКМНЕРЕ ГО 55УТРЕО ТАТУУСАВОУ а5ОУРУТІОУ МуСОСТВУТМУ5 5
СОВНІ МАТ до РО-1 1 (5ЕО ІО МО: 71): МОМАМ/М
СОВн2 МАТ до РО-1 1 (5ЕО ІЮО МО: 72): НІТУИ5БОаЗТЗУМРБІ К5
СОВнЗ МАТ до РО-1 1 (5ЕО І МО: 73): ОМОБИМРУТІ СОУ 0090) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен УН МАТ до РО-1 1, містить послідовність, 60 наведену в ЗЕО ІО МО: 70 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням):
садаїссаді даїдідсадс йсаддадіс дддассюддс сддаїдааас спсісадіс ісідісссіс ассідсасід їсасідусії сісааїсасс ааїдацад ссіддаасід даїссдасад Шессаддаа асааасіядда аюдадчадс сасайаассії асадіддсад сасіадсіас аасссаїсіс (саааадісу ааїсісіаїс асісдддаса саїссаадаа ссаснейе сідсадіїда днсдідас іссдаддас асадссасаї айасдюдс аададацас дагадіддсі ассссіайас шШадасіас ддодісаад діассісаді сассдісісс їсс
Ї0091| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ до РО-11 (5ЕБЕО І МО: 74) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОЇМГТО5РАЇ М5АЗРОЕКМТ МТС5АТБЗІМ5 УУУМУМООКРО 55ГРОРМ/ІМІТ ЗМІ АБаУРАВН
ЕзОаБаБатТеМ 5І ТІЗЗМЕАЕ ОДАТУУСООМ 5ОМРУТРССС ТКІ БІК
СОВИ МАТ до РО-1 1 (5ЕО ІО МО: 76): БАТ5ІМЗУМУ
СОВІ2 МАТ до РО-1 1 (ЗЕО І МО: 77): І ТМ АБ
СОВІЗ МАТ до РО-1 1 (5ЕО ІО МО: 78): ООМ/ЗОМРУТ 0092) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ. МАТ до РО-1 1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 75 (нуклеотиди, що кодують залишки СОНЇ|, виділені підкресленням): сааайцуйс ісасссадіс іссадсасіс аїдісюсаї сіссадддда дааддісасс ашдассідса аїдссассіс аацдіааді (асашасі ддіассадса даадссіда іссісссссс аасссіддаї Наїсісаса іссаассіда снсіддаді сссідсісдс Псадіддса дідддісща дассіснас ісісісасаа іІсадсадсаї ддаддсідаа дадсідсса сНацасід ссадсадіда адідадаасс сдіасасадїї сддадддуду ассаадсіду азааїаааа 2 Гуманізація моноклонального антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 1, щоб одержати "МАТ до
ЛРО-1 1"
Ї0093| Вищеописане мишаче антитіло до РО-1 людини, МАТ до РО-1 1, було гуманізовано та додатково деїімунізовано після ідентифікації антигенних епітопів, щоб продемонструвати можливість гуманізації антитіла до РО-1 людини з метою зменшення його антигенності при введенні людині-реципієнту. В результаті гуманізації одержали один гуманізований домен УН, позначений у даному документі як "МНІ МАТ до лРО-1 1", й один гуманізований домен Мі, позначений у даному документі як "М/ї МАТ до лРО-1 1". Відповідно, антитіло, що містить гуманізовані домени МІ, спарені з гуманізованим доменом УН, називається "МАТ до лРО-1 1".
І0094| Амінокислотна послідовність домену МН із МНІ МАТ до лРО-1 1 (5ЕО ІО МО: 79) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
Зо РМОГОЕБОаРОЕ ІУМКРБОТІ5І ТоТУБаББІЗ МОМАМУМ/МУМ/ЛВО РРОКОСІ ЕМ НІТУбБа5тТ5У
МРБІ КОВІ ТІ ТАВОТОКМОЕМ І ТМТММОРМО ТАТУУСАВОУ а5аУРУТІ У УусОсСТТУТУ5 5 0095) Зразковий полінуклеотид, який кодує МНІ МАТ до лРО-1 1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 80 (нуклеотиди, що кодують залишки СОН, виділені підкресленням): дасдіасадс іссаддааад їддсссадді сіддідаадс саїсссадас асюдадссід асндсассуд Юдадаодсії сіссаїсіса ааїдасіасд ссіддаацо данаддсад ссісссуддіа аадддсюдда доддаїсдудс сасаїсасаї асадсддсіс сасаїсайаї ааїсссадіс Ідаададссуд ісцассанй асісодсудаса сіадіаадаа ссадшщай сщассаюда ссаасадда сссідюддаї асідсаасаї асіацуїдс сдадаЧаї адансіддн асссНагас асісдасіас Юдддасада даассасюді дассддадс їсс
Ї0096| Амінокислотна послідовність домену МІ із МТ МАТ до лРО-1 1 (5ЕО ІО МО: 81) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ЕІМІГТО5РАТ ІБУЗРОЕКМТ ІТС5АТ5ІУ5 УМУМУМООКРО ОАРОРІЇМІТ МІГ АБЗИІРАВ
ЕЗОаБИаБОаТОЕ ТІ ТІЗ5І ЕАЕ ОДАТУУСООМ 56ОМРУТЕСОСС ТКМЕЇК
Ї0097| Зразковий полінуклеотид, який кодує М/1 МАТ до лРО-1 1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 82 (нуклеотиди, що кодують залишки СОН, виділені підкресленням): даааїсунс їШЩЗЩасссадад сссадсаасс сідісіцісЇ сссссддада аааддісасс анасцдсі сідсіасцс їаїсдідісєс (асаїдіасі ддіаїсадса даадсссуді саддудсісссс адссайдаї агафсідасс адсаассіда снсіддіаї сссадсісді Шіссудіа дсдоадісєс99 дасічзашс асщшодасіа ісадсісісї ддаддсадаа дасдссдсса ссіацацу ісаасадіда (садасааїс сагасасін додсдаюдс ассааадісуд аааіїааад
В Моноклональне антитіло до РО-1 людини 2 1 Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 2 0098) Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 2 до РО-1 (5ЕБО І МО: 83) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
РМОЇМЕЗОССІЯ І МОРОСЗАКІ 5СААБаєМЕ5 БЕОМНУУВОА РЕКаОЇ ЕМ/МАХУ ІЗЗОаЗМ5ІЗУ
АОТУКОВЕТМУ ТАОМАКМТІ Е ГОМТ5І АБЕО ТАІМУСАБІ5 ОМЕОУМ СОС ТІ ТУ
СОВНІ МАТ 2 до РО-1 (5ЕО І МО: 85): БЕСМН
СОВн2 МАТ 2 до РО-1 (5ЕО І МО: 86): МІЗБИЗМ5ІЗМАОТУКОа
СОВнЗ МАТ 2 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 87): І 5ОМЕрУ 0099) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен УН МАТ 2 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 84 (нуклеотиди, що кодують залишки СОН, виділені підкресленням): 60 дашідсадс ісаюдадіс юдоаоддадудс Падідсадс сюдадудіє ссуддааасіс іссідюдсад ссісюдаїй сушсаді адсшШадаа ідсасіддді ісдісаддсі ссададаадд досіддаду одісосаїас аїсадіадіа асадіаїдад сацшессіаї дсадасасад іІдаадддссу айсассуісєс ассададаса аїдссаадаа сасссюднс сдсааашюа ссадісіаад дісідаддас асддссайі айасідідс аїсссідаді дасіасшща асіасюоддао ссааддсасс асісісасад ісіссісс
Ї00100)| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 2 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 88) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОМУМ5БОТРІЗ ГРУБІ РОА ІЗСВ5ЗБОБІМ НОТОМТУЇ НМ М ОКРООБРК І ПМВУЗМВЕ
БаУРОВЕБЗа5 а5аИатТОгЕТІ КІ БАМЕАЕОГ ОМ ЕЕСБОТТНУР МТРИаСсИткі ЕЕ ІК
СОВИ МАТ 2 до РО-1 (ЗЕО Ір МО: 90): НЗЗОБІ УНЗТОаМТМІ Н
СОНВІ2 МАТ 2 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 91): ВМУ5МАЕ5
СОВІЗ МАТ 2 до РО-1 (ЗЕО 10 МО: 92): БОТТНУРМТ
Ї00101| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 2 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 89 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВі, виділені підкресленням): дацдноюа дісссааас ссасісісс сідссідіса діснпудада ісаадссісс аїсісцуса даїсіадіса дадссцдії сасадіасід дааасассіа Шасайод їассідсада адссаддсса дісіссааад сіссюаїсі асаддаціє (аассдаці ісіддоддїсс ссдасадудй садоддсаді ддаїсаддда садашсас асісаадаїс адіадачюд адодсюадда ісдддадн ннсіусї сісааасіас асадНсса (адасайсуд дюодаддсас саадсіддаа аїсааа 2 Гуманізація моноклонального антитіла до РО-1 людини, МАТ 2 до РО-1, щоб одержати "МАТ до лРО-1 2"
І00102)| Вищеописане мишаче моноклональне антитіло РО-1 людини, МАТ 2 до РО-1, було гуманізовано та додатково деімунізовано після ідентифікації антигенних епітопів, щоб продемонструвати можливість гуманізації антитіла до РО-1 людини з метою зменшення його антигенності при введенні людині-реципієнту. В результаті гуманізації одержали один гуманізований домен МН, позначений у даному документі як "МНІ МАТ до лРО-1 2", й один гуманізований домен МІ, позначений у даному документі як "М.1 МАТ до лРО-1 1". Відповідно, будь-яке антитіло, що містить гуманізовані домени МІ, спарені з гуманізованим доменом МН, називається "МАТ до лРО-1 2". 00103) Амінокислотна послідовність домену МН із МНІ МАТ до лРО-1 2 (5ЕО ІО МО: 93) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ЕМО! МЕЗО І МОРОСБІ ВІ 5БСААБаєМЕ5 БЕОМНУУВОА РОКИ ЕМУМАХ ІЗЗОаЗМ5ІЗУ
АОТУКОВЕТІ 5ЗВОМАКМТІ М ГОММ5І АТЕО ТАГ УУСАБІ.5 ОМЕОУМУСОСТ ТУТУ55 00104) Зразковий полінуклеотид, який кодує МНІ МАТ до лРО-1 2, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 94 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даадідсааї юдднНдадад щюашюдюодс сюдідсадс саддюдаад ісідсдану іссідідсад саадсддаїй їдіднсадс ісіШадда (асацодуї дсдссадуддсі сссддудсаадуд дісісдаду ддіадсайас аїсіссадса дагссаїдіс (айадцаї дссдасасад ідаааддсад ощшасіаїс ісссудідаса аюдсаааааа сасасщіас сдсаааюда аїадссідсд сассдаддас ассуссцаї асіасідсос Носсідісїї дацаснсЯ асіасюоддао іїсадддсаса асідщдасад Шейсс
Ї00105)| Амінокислотна послідовність домену МІ із МТ МАТ до лРО-12 (5ЕО ІЮО МО: 95) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ОМУМТО5РІЗ ІРМП ЕОРАБ ІЗСНЗ5ОБІМ НЗТОМТУІ НМ М ОКРООБРО ГПМАУЗМАЕ 5БОУРОВЕЗОа5 С5СТОЕТІ КІ БВМЕАЕОМаМ УУС5ОТТНУР МТЕСОСТКІЕ ІК 00106) Зразковий полінуклеотид, який кодує МТ МАТ до лРО-1 2, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 96 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): дасуйдіща ЩЧасасадіс ассасідаді сідссадца сссідддсса дссадссаді ацшсндіс ддаднсаса дадісіддїа сацйссасад адааайасайа ісіссандд іассідсааа аассадддса дадсссссад сюдсідайії агададщіс іааїсдац (сіддсадїдс садаїсодії садсддсадс дддісіддса сюдайцсас асдааааїгєс ісіаддіа аддсададда саїаддсції іїасїасщдіа дісадассас ссаїдіассс (ддасіща дссааддіас іаадсюдаа аїсаад
С Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини З
Ї00107| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ З до РО-1 (5ЕБЕО ІЮО МО: 97) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ОМОГОО5САЕ І МАРОАБЗМТІ ЗСКАБОаМТЕТ ОУУМНУ/УКОТ РУНО ЕМ/ІСТ ІЮРЕТОСТАУ
МОКЕКОИКАЇЇ. ТАОКООМТАМ МЕЇ ВА5І Т5ЕО 5АУУУЕТАВЕК ІТТІМЕСТУМ МЕОУМСИТаИатт УТУ55
СОВНІ МАТ З до РО-1 (5ЕО І МО: 99): ОМУМН
СОВн2 МАТ З до РО-1 (5ЕО І МО: 100): ТІОРЕТаСТАУМОКЕКа
СОРАнЗ МАТ З до РО-1 (5ЕО 10 МО: 101): ЕКІТТІМЕИТ УМ УБОМ 00108) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ З до РО-1, містить 60 послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 98 (нуклеотиди, що кодують залишки СОН, виділені підкресленням): саддіїсаас Юсаасадіс ддддсющад сіддідаддс сіддуддснс адюдасосід іссідсаадуд сПсддаосіа сасашасі дасіаїдіаа (дсасіддді даадсадаса ссідюса дссіюддааю дайпддаасі айдаїссід ааасіддідд їасідссіас ааісадааді (саадддсаа доссаїасід асідсадаса адіссіссаа сасадссіас аюддадсісс дсадссдас аїсщаддас ісідссдісЇ анйасшас аадададаад ацасіасда (адіададдаа дасайасідад (аснсадайд ісідддосас адддассасу дісассдісі ссіса
Ї00109| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 3 до РО-1 (5ЕБЕО І МО: 102) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОМ ТОТРІ5 ІРУБІ арОАВ ІЗСНЗБОМІМ НЗМОаОТУСТЕМ МІОКРООБРК ІП ПУКУЗМВЕ
БаМРОВЕБЗа5 а5аТОгЕТІКІ 5ВАУМЕАЕОІ СМ МУСЕОСЗНІР УТЕРССИТКІ Е ІК
СОВИ МАТ З до РО-1 (ЗЕО І МО: 104): ВББОМІМУНОМОаОТМІ Е
СОНВІ2 МАТ З до РО-1 (ЗЕО І МО: 105): КИ5МАЕ5
СОВІЗ МАТ З до РО-1 (5ЕО І МО: 106): РОСЗНІ РУТ
Ї00110| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ З до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 103 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дацднідс асссааас іссасісісс сідссідіса дісйудудада ісаадссісс аїсісцуса даїсіадіса даасацадіа саадіааїд дадасассіа Шадааюд їассідсада аассаддсса дісіссааад сіссюаїсі аааадцшіє саассдаці (сіддоддісс садасадд!ї садюдсаді доддісаддда садаїйШас асісаааас адсададідд адосічадда ісідддадії іїацасідсі Нсаададцс асаїсцссЯд (асасансуд даддоддоадас саадсіддаа аїаааа
О Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 4
Ї00111|) Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 4 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 107) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
РМОЇМЕЗОССІЯ І МОРОСЗАКІ 5СААБаєМЕ5 БЕОМНУУВОА РЕКаОЇ ЕМ/МАХУ ІЗ5ОЗМ5ІЗУ
АОТУКОВЕТМУ ТАОМАКМТІ Е ГОМТ5І АБЕО ТАІМУСАБІТ ОМЕОУМУСсОСТ ТІ ТУ55
СОВНІ МАТ 4 до РО-1 (5ЕО І МО: 109): БРОМН
СОАна2 МАТ 4 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 110): МІЗБИЗМ5ІЗМАОЮТУКО
СОРАнЗ МАТ 4 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 111): ГТОМЕрхУ
ІЇ00112| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 4 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 108 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): дашідсадс ісаюдадіс юдоаоддадудс Падідсадс сюдадудіє ссуддааасіс іссідюдсад ссісюдаїй сушсаді адсшадаа ідсасідуді ісдісадосі ссададаадд досіддадід додісдсайаї айадеавдіа асадіаїдад Фашссіаї дсадасасад ідааддадссу айсассдіс ассададаса аїдссаадаа сасссіднс сюсаааюа ссадісіаад дісдаддас асдуддссацш айасідідс аїсссідасі дасіасшща асіасюодад ссааддсасс асісісасад ісіссіса
Ї00113)| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 4 до РО-1 (5ЕБЕО ІЮ МО: 112) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОМУМ5БОТРІЗ ГРУБІ ЯООА ІЗСНОБОБІ М НЗТОМТУЕНМ М ОКРООБРК ГПМАУМЗМАЕ 5БОУРОВЕЗОа5 С5СТОЕТІ КІ БВМЕАЕОГ ЯМ МЕСБОТТНУР МТЕСССТКІ ЕЕ ІК
ОМУМ5БОТРІБЗ ГРУБІ РОА5 ІЗСВН5ЗБОБІМ НОЗТОМТУЕНМ/ М ОКРООБРК І МВУЗМВЕ
БаУРєРОоВЕЗОаБ5 аЗОаТОЕТІ КІ БАМЕАЕОЇ ЯМ УЕСБОТТНУР МТРИаСИткі Е ІК
СОВИ МАТ 4 до РО-1 (ЗЕО І МО: 114): Н5БОБІ УНОТаМТ МЕН
СОНВІ2 МАТ 4 до РО-1 (ЗЕО І МО: 115): ВУЗМАЕ5
СОВІЗ МАТ 4 до РО-1 (5ЕО 10 МО: 116): БОТТНУРМТ 00114) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 4 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 113 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дацдноюда щісссааас їссасісісс сідссідіса діснуддада ісаадссісс аїсіссідса даїсіадіса дадссцдії сасадіасід дааасассіа Шесайод їассідсада адссаддсса дісіссааад сіссюаїсі асаддацісє їаассдацші (сіддуддієс ссдасаддан садюддсаді одаїсаддда садацшсас асісаадаїс адсададчідд адоасдадда їКвюддади їашсідсі сісааасіас асадНссЯ (адасайсуд додаддсас саадсіддаа аїсааа
Е Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 5
Ї00115)| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 5 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 117) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ОМОГООРОМЕ І УАРОАБЗУКІ ЗСКАБИаУЗЕТ АУМ/МММУМКОВ РОСС ЕУ/ЛОМ ІНРЗОЗЕТМ. бо МОКЕКОКАТІ ТМОК55ЗТАМ МОГІЗРТЗЕО БАМУМСАВЕН Ма55РЕАУМ С ОСТІ МТУБА
СОВНІ МАТ 5 до РО-1 (5ЕО І МО: 119): АМ/ММ
СОгВнг МАТ 5 до РО-1 (5ЕО І МО: 120): МІНРЕЗОБЕТУМІ МОКЕКО
СОАнНЗ МАТ 5 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 121): ЕНМО5ЗРЕАДУ
Ї00116)| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 5 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 118 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): саддіссаас Юсадсадсс дддандаа сідодадос сіддадснс адюдаадсід іссідсаадд сНсіддсіа сісснсасс адссіасідда ідаасюдаї дааасададд ссддасаад дссідадід дандосдід айсаїсси ссдайадіда аасбдудНа ааїсадааді (сааддасаа ддссасандуд асідіадаса ааїссіссад сасадссіас адсаасіса ісадсссдас аїсдаддас ісідсудісї анасідідяс аадададсас (асддіадіа дсссашас
Насіддоддс саадддасіс ддісасідї сісюдса
Ї00117| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 5 до РО-1 (5ЕБЕО І МО: 122) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІМГТОЗРАБ І АУБ БОВАТ ІЗСВАМЕЗУМО ММОМ5ЕМММУЕЄ ООКРООРРКІ ПІМААЗМОС5
СУРАНЕЗИаБа БаТОЕ5І МІН РМЕЕООТАМУ ЕСООЗКЕМУРУ ТРОССИ,ИтТКІ ЕІ К
СОВИ МАТ 5 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 124): ВАМЕЗМОМУСМЗЕММ
СОНВІ2 МАТ 5 до РО-1 (ЗЕО І МО: 125): ААБМОСЗ
СОВІЗ МАТ 5 до РО-1 (5ЕО І МО: 126): ООБКЕМРУТ 00118) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 5 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 123 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасайдідс Щасссааїс іссадснсї НоосідіЧї сісїіадддса дадддссасс аїсіссідса дадссаасда аадідйдаї аацаїддса їідадішаї даасідунс саасадааас саддасадсс асссааасіс сісаїсіаїд сідсаїссаай ссааддаїсс ддддісєссід ссаддшад щосадіддд їсідддасад ашсадссі саасаїссаї ссіаддадд аддаїдаїас ідсааїдіаї Нсіцісадс ааадіаадда дайссдіас асайсоддад дддддассаа дсддаааїйа ааа
Е Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 6
Ї00119| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ б до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 127) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням).
Зо ЕМКІМЕЗОСО І УМРОСОІ КІ ЗСААБаєТЕ5 МОМОТ РЕКВІ ЕМ/УАТ ІЗасаа5зортуу
РОБУКОРВЕТІ ЗАЕОМАКММІ М І ОМ55І АЗЕО ТА УУСАВОК АТТМЕАУМСО СТІ МТУ
СОВНІ МАТ 6 до РО-1 (5ЕО І МО: 129): БУМСМ5
СОгВнг МАТ 6 до РО-1 (5ЕО І МО: 130): ТІБЗСССОСБЗОТГУМРОБУКОа
СОАнНЗ МАТ 6 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 131): ОКАТТМУ/БАУ
І00120| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ б до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 128 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): даааїсдуіас ісасссадіс ассідсаасс сШсісщда дссссдудда асдідссасі сісадсдса дадсаадіда дадідіддас аацЦасддса ідіссцЦсаї даасіюдднц садсадаадс сюдодсадсс ассіаадсід сісаїссаса ссдссісіаа ссасддаїсі доадаїдссії сасдіщіс юддаїсадда адддсасід аснсасссі іасааїсадс ісісюдадс сададдасії юссдісіаї нсідссадс ааісіааада ддідсссіаї асішодід дсдддассаа да дадаїс аваа
ІЇ00121| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ б до РО-1 (5ЕБО І МО: 132) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІМГЕІТО5РАБ ГАУБІБОВАТ ІЗСВАЗЕЗМО МУСІЗЕМММУЄ ООКРООРРКІ ПМРАЗМОСО
СМРАНЕЗИаБа БаТОЕ5І МІН РМЕЕОСААМУ ЕСООЗКЕМРМ ТРССИТКІ ЕІ К
СОВИ МАТ 6 до РО-1 (ЗЕО І МО: 134): ВАБЕЗБМОММСІЗЕММ
СОНВІ2 МАТ 6 до РО-1 (ЗЕО І МО: 135): РАБМОСО
СОВІЗ МАТ 6 до РО-1 (5ЕО І МО: 136): ООБКЕМРУ/Т
І00122| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ б до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 133 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасайдідс Юасссааїс іссадсисі ПодсідЧіЧї сісїіадддса дадддссасс аїсіссідса дадссадсда аадідндаї аацаїддса Цадіцаї даасідунс саасадааас саддасадсс асссааасіс сісаїсіаїс сідсаїйссаа ссааддаїсс ддддісссід ссаддашад щдодсадЧіддд їсщдоддасад аснсадссі саасаїссаї ссіаддадд аддаїдаїдс ідсаацдіаї Псідісадс ааадіаадда дайссадаїдад асайсодді даддсассаа дсддаааїс ааа
Сі Моноклональне антитіло до РО-1 людини 7 1 Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 7 00123) Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 7 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 137) 60 представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ОМОГООРОАЕ І МАРОАБУКІ 5СКАБОаМЗЕТ 5УММММУУКОВ РИСІ ЕМ/ЛОСМУ ІНРЗО5ЕТУМ.
РОКЕКОКАТІ. ТМОК5ОЗТТАМ МОГІЗРТЗЕО БАМУУСАВЕН МОТ5РЕАМУУМС ОСТІ МТУ
СОВНІ МАТ 7 до РО-1 (5ЕО І МО: 139): БУМ ММ
Сова МАТ 7 до РО-1 (5ЕО І МО: 140): МІНРЕЗОБЕТУМІ ВОКЕКО
СОАнНЗ МАТ 7 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 141): ЕНМОТ5РЕАДУ 00124) Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 7 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 138 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): даддіссаас їдсадсадсс Юддосідаа сіддідадудс сіддадснс аддаадсід іссідсааду сНсіддсіа сіссйсасс адсіасідда ідаасіддді даадсададд ссіддасаад дссндадю данддсаїд ансаїсси ссдайадіда ааснддНа даїсадааді (сааддасаа ддссасайцу асщдіадаса ааїссіссас сасадссіас адсаасіса ісадсссудас аїсідаддас ісідсудісї айасіддс аадддадсас (асддіасіа дсссашщас
Насіддоддс саадддасіс ддісасідї діснос 00125) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 7 до РО-1 (5ЕБЕО І МО: 142) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІМГТОЗРАБ ГАУБІ БОВАТ ІЗСВАМЕЗУО МУОМ5ЗЕМММ/РЄ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОС5
СУРАНЕЗИаБа РИТОБЕ5І МІН РМЕЕОРААМУ ЕСООЗКЕМУРУ ТРОаСИТКІ ЕІ К
СОВИ МАТ 7 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 144): ВАМЕЗМОМУСМЗЕММ
СОНВІ2 МАТ 7 до РО-1 (ЗЕО І МО: 145): ААБМОСЗ
СОВІЗ МАТ 7 до РО-1 (5ЕО І МО: 146): ООБКЕМРУТ
І00126)| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 7 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 143 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасайдідс Щасссааїс іссадснсї НоосідіЧї сісїіадддса дадддссасс аїсіссідса дадссаасда аадідйдаї аацаїддса іїдадішаї даасідднс саасадааас саддасадсс асссааасіс сісаїссаїд сідсаїйссаа ссааддаїсс ддодісссід ссаддайад щосадоз9ду Шоддасад асісадссі саасаїссаї ссіаюдаду аддаюаюс іїдсаашціаї Псідісадс ааадіаадда дайссдіас асдайсодад ддоаоддассаа дсддаааїйа ааа 2 Гуманізація моноклонального антитіла до РО-1 людини 7, щоб одержати "МАТ до лРО-1 7"
І00127| Вищеописане мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини, МАТ 7 до РО-1, було гуманізовано та додатково деїімунізовано після ідентифікації антигенних епітопів, щоб продемонструвати можливість гуманізації антитіла до РО-1 людини з метою зменшення його антигенності при введенні людині-реципієнту. В результаті гуманізації одержали два гуманізованих домену МН, позначених у даному документі як "УНІ МАТ до лРО-1 7" і "МН2 МАТ до лЛРО-1 7", і три гуманізованих домену МІ, позначених у даному документі як "М/1 МАТ до
ЛРО-1 7", "М 2 МАТ до лРО-1 7" і "М З МАТ до лРО-1 7". Будь-який з гуманізованих доменів МІ. може бути спарений з будь-яким із гуманізованих доменів УН. Відповідно, будь-яке антитіло, що містить один із гуманізованих доменів М, спарених із гуманізованим доменом УН, у загальному називається "МАТ до лРО-1 7", і конкретні комбінації гуманізованих доменів МНЛ/. згадуються з посиланням на певні домени УН/Л/І, наприклад, гуманізоване антитіло, що містить МН1І МАТ до лЛРО-1 7 і М 2 МАТ до лРО-1 1, зокрема називається "МАТ до лРО-1 7(1.2)". 00128) Амінокислотна послідовність домену МН із МНІ МАТ до лРО-1 7 (З5ЕО ІЮ МО: 147) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ ЗБСКАБЗИОУЗЕТ ЗБУМММУУУВОА РИСІ ЕМІСМ ІНРЗОЗЕТМ.
РОКЕКОРМТІ ТМОКЗТЗТАМ МЕ! 551 85ЕО ТАМУУСАВЕН МОаТ5РЕАМУУМС ОСТІ МТУ
І00129| Зразковий полінуклеотид, який кодує МНІ МАТ до лРО-1 7, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 148 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): саадіїсааї Юдіасадад сддддсадад дідаадааас ссддсдссад юпНаадоїд іссідсааад ссадсуддна садсшШаса адсіайдда (ідаацодуї одсодісаадса ссаддасадд дісюдааю дандддад аасаїфссц сідасадсда аасаїдднд дассадаааї Чааадайсд ююасааїй асадісдайїа адіссасаад сасідснас аюдаасісї ссадсносу діссдаддас ассудсідщші ананусудс садададсас іасддсасаї сассіас айасюддаоас садддаасіс ісдіаассої аїссісс 00130) Амінокислотна послідовність домену МН із МН2 МАТ до лРО-1 7 (З5ЕО ІЮ МО: 149) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ОМОГ МОБОАЕ МККРОАБУКМ ЗБСКАБИаУЗЕТ ЗБУММММУУВОА РИСІ ЕМ СМ ІНРЗОЗЕТУММІ.
РОКЕКОРМТІ ТМОКЗТЗТАМ МЕ! 551 85ЕО ТАМУУСАВЕН МОаТ5РЕАМУУМС ОСТІ МТУ
Ї001391| Зразковий полінуклеотид, який кодує МН2 МАТ до лРО-1 7, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 150 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): саадіїсааї Юдіасадад сддддсадад дідаадааас ссддсдссад юпНаадоїд іссідсааад ссадсуддна 60 садсшШаса адсіайдда (ідаацодуді дсуісаадса ссадддсадд дісюдааю досіюдодав айасаїссиц сідасадсда аасаїдданод дассадаааї Чааадаїсуд дасаай асадісдаїа адіссасаад сасідснас аддаасісї ссадснусо діссдаддас ассдсідідї айанудсудс садададсас (іасддсасаї сассішас айасюддаоас садддаасіс ісдіаассої аїссісс 00132) Амінокислотна послідовність домену МІ із МТ МАТ до лРО-1 7 (5ЕО ІО МО: 151) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ЕІМІГТО5РАТ І5І5РОЕВАТ ІЗСВАМЕЗМО ММОаМ5ЕММУМУЄ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОС5
СуРЗАЕЗаБа ато ТІВ 5 ЕРЕОБАМУ ЕСООЗКЕМРУ ТРаСОИткКМЕї Кк 00133) Зразковий полінуклеотид, який кодує МТ МАТ до лРО-1 7, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 152 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даааїсдіас Ісасссадіс ассідсаасс сіШсісда дссссддда асдідссасі сісадсідса дадсаааїда дадідаіддас аацасддса їдіссцсаї даасідудні садсадаадс сідддсадсс ассіаадсід сісаїссасд ссассісіаа ссададаїсі ддодідссії сасуцшс Юддаїсадда аддодсасід асіїсасссі іасааїсадс ісісїіддадс сададдасії юссдісіаї псдссадс аасіааада ддідсссіаї асіунододід дсдддассаа ддаоадаїйс ааа 00134) Амінокислотна послідовність домену МІ із М/2 МАТ до лРО-1 7 (5ЕО ІО МО: 153) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ЕІМІГТО5РАТ ІБІ 5РОЕВАТ І5ЗСВАЗЕЗУМО МУОМ5ЗЕМММ/Є ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОС5
СуРЗАЕЗаБа ато ТІВ 5 ЕРЕОБАМУ ЕСООЗКЕМРУ ТРаСОИткКМЕї Кк 00135) Зразковий полінуклеотид, який кодує М/2 МАТ до лРО-1 7, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 154 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даааїсдуіас ісасссадіс ассідсаасс сШсісщда дссссдудда асдідссасі сісадсдса дадсаадіда дадідаіддас аацасддса їдіссцсаї даасідудні садсадаадс сідддсадсс ассіаадсід сісаїссасд ссассісіаа ссададаїсі ддодідссії сасуцшс Юддаїсадда аддодсасід асіїсасссі іасааїсадс ісісїіддадс сададдасії юссдісіаї псдссадс аасіааада ддідсссіаї асіунододід дсдддассаа ддаоадаїйс ааа 00136) Амінокислотна послідовність домену МІ із МІЗ3 МАТ до лРО-1 7 (5ЕО ІО МО: 155) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ЕІМІГТО5РАТ ІБІЗРОЕВАТ І5СВАЗЕЗМО МУМОМ5ЕМММУЕЄ ООКРООРРКІ ПІНААЗМВОа5
СуРЗАЕЗаБа ато ТІВ 5 ЕРЕОБАМУ ЕСООЗКЕМРУ ТРаСОИткКМЕї Кк
І00137| Зразковий полінуклеотид, який кодує М/З МАТ до лРО-1 7, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 156 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням):
Зо даааїсдуіас ісасссадіс ассідсаасс сШсісщда дссссдудда асдідссасі сісадсдса дадсаадіда дадідіддас аацЦасддса ідіссцЦсаї даасіюдднц садсадаадс сюдодсадсс ассіаадсід сісаїссаса ссассісіаа ссасадаїсі дододідссії сасуцшс Юддаїсадда аддодсасід асіїсасссі іасааїсадс ісісїіддадс сададдасії юссдісіаї псдссадс аасіааада ддідсссіаї асіунододід дсдддассаа ддаоадаїйс ааа
Ї00138| СОВІТ домену МІ із М2 МАТ до лРО-17 і М 3 МАТ до лРО-1 7 містить заміну 35 аспарагіну амінокислотою серином і містить амінокислотну послідовність:
ВАБЕЗМОММОаМ5ЕММ ((ЗЕО І МО: 157), замінений серин виділений підкресленням). Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з доменів СОВІТ МАТ 7 до РО-1, описаних вище.
Ї0О0О139| Крім цього, СОВІ2 домену МІ МІЗ МАТ до лРО-1 7 містить заміну глутаміну 40 амінокислотою аргініном і містить амінокислотну послідовність: АДАМС (ЗЕО ІО МО: 158), замінений аргінін виділений підкресленням). Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з доменів СОВІ2 МАТ 7 до РО-1, описаних вище.
Н Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 8 45 Ї00140| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 8 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 159) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ЕСОЇ ОО5БОРЕ ГУКРОАБУКІ 5БСКАБОУТЕТ ЮОМУММУУУКОМ НОаКБІеЕМІСО ІМРКМООТНУ
МОКЕКСЕАТІ ТМОКЗОЗТТАМ МЕ ВБ5І ТЕО 5АМУМСАБОЕ ОВМУУ/СОСТТІ ТТ У
СОВНІ МАТ 8 до РО-1 (5ЕО І МО: 161): ОМУММ 50 Сова МАТ 8 до РО-1 (5ЕО І МО: 162): ВІМРКМСООТНУМОКЕКИа
СОРАнЗ МАТ 8 до РО-1 (5ЕО І МО: 163): ОБОМ
Ї00141| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 8 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 160 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): 55 дадддссадс їдсаасааїс Юдассідад сіддідаадс сіддуддснс адодаадаїа іссідіааду сисіддаїа сасунсасі дасіасіаса їдаасіддоаї даадсадаас саїдааада дссідадід дапйодадаї ацНааїссіа ааааддіда сасісасіас аассадааді ісаадддсда ддссасацу асідіадаса адіссіссас сасадссіас аддадсісс дсадссідас аїсідаддас ісюдсадісї анйасідіяс дадсданй дасіасіддд дссааддсас сасісісаса дісіссісс 60 00142) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 8 до РО-1 (5ЕБЕО І МО: 164)
представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОМУМТОТРІЗ ГРУ ЯрОАБ ІЗСВ5БОТІ М УЗМОаМТМІ ММ РГОКРООБРК ГП ПУКУЗМВЕ
БаУРОВНЕБЗа5 а5аИаТОгЕТІКІ 5ЗАМЕАЕОГ ОМ МЕС5ОБЗТНМУР ЕТРаЗаткі Е ІК
СОВИ МАТ 8 до РО-1 (ЗЕО І МО: 166): В55ОТІ УУЗМОаМТ МІ М
СОНВІ2 МАТ 8 до РО-1 (ЗЕО І МО: 167): КУИ5МАЕ5
СОВІЗ МАТ 8 до РО-1 (5ЕО І МО: 168): БОБТНУМРЕТ
Ї00143| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 8 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 165 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): даюноудюда їдасссааас іссасісісс сідссідієд діснуддада ісаадссісс аїсіснуса даїсіадіса дасссНаїа (айадіааїд дааасассіа ЩШааацод йссідсада адссаддсса дісіссааад сіссюаїйсі асааадішс саассдаці (ісіддодієс садасаддії садддсаді ддаїсаддда садацісас асісаадаєс адсададчідд аддсідзадда їюддадуи іїашсідсі сісааадіас асаїдцнсса Нсасаїйсдуд дсісддддас ааадіюддаа аїаааа | Моноклональне антитіло до РО-1 людини 9 1 Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 9 00144) Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 9 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 169) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ЕММІМЕБОСО ІМКРОСОІ КІ ЗСААЗОЕТЕ5 ЗМІ М5УМУУВОТ РЕКВІ ЕМУМАТ ІБССССМТУУ 5ОБУКОВЕТІ 5ЗВОМАКМТІ М І ОІ551 А5ЕО ТА УХСАНМа ЕОСАМЕАУМ С ОСТІ МТУ
СОВНІ МАТ 9 до РО-1 (5ЕО І МО: 171): БМІ 5
СОгВнг МАТ 9 до РО-1 (5ЕО І МО: 172): ТІБЗССОССМТУУЗОБУКОа
СОАнНЗ МАТ 9 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 173): МОЕОСАМ/ГАУ
Ї00145| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 9 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 170 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): даадщдайс ддіддадіс ддоаддадоас Надюаадс сіддадддаіє ссідааасіс іссідідсад ссісюдаїй сасішсаді аднаєсйца (асп ісдссадасі ссуддадаада досіддадід ддісдсаасс ацЧадідага діда(дагаа сассіасіаї і(садасадід іІдаадддісу айсассаїс іссададаса адссаадаа сасссідіас
Зо сідсаааїса дсадісюдад дісюаддас асдуддссноаї анасідідс аадодіаддаі Нсдасдадаса ссіддафас
НЧНасюдоодс сааддодасіс ддісасіді сіснос
Ї00146)| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 9 до РО-1 (5ЕБЕО І МО: 174) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІОМТО5РАБ І ЗАБУСРІМТ ІСВАБЗЕМІМ ЗМІАМУМООКО ЕКЗРОЇІ МУМ АКТІГдДАСУР5 вЕЗИаБИаБИТО Е5І ТІМ ОР ЕОРГЯМУМСОН НУАМРМТРСОИ Иатві ЕІТ
СОВІІ МАТ 9 до РО-1 (ЗЕО 10 МО: 176): ВАБЕМІУЗМІ А
СОНВІ2 МАТ 9 до РО-1 (ЗЕО І МО: 177): МАКТІ АА
СОВІЗ МАТ 9 до РО-1 (5ЕО 10 МО: 178): ОННХАМРМУ/Т
Ї00147| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 9 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 175 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасаїссада ідасісадіс іссадссісс сіаїсюсаї сідшющоддада іайдісасс аїсасащдіс дадсаадіда даагашщас адцЧашад саюдіаїса одсадааасад даааааїсіс сісадсіссі ддісіаїааї адсааааассі їддсадсадо дідссаїса аддднсадію осадіддаїс аддсасасад Нйсісіда ссаїсаасад ссідсадссі даадацно доаанайца сдісадсаї сацагдсід Нссаїддас айсддідда доасассадас ддаааїсаса 2 Гуманізація моноклонального антитіла до РО-1 людини 9, щоб одержати "МАТ до лРО-1 9"
ІЇ00148| Вищеописане мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 9 гуманізували і додатково деїімунізували після ідентифікації антигенних епітопів, щоб продемонструвати можливість гуманізації антитіла до РО-1 людини з метою зменшення його антигенності при введенні людині-реципієнту. В результаті гуманізації одержали два гуманізованих домену МУН, позначених у даній заявці як "УНІ МАТ до лРО-1 9" ї "УН2 МАТ до лРО-1 9", і два гуманізованих домену МІ, позначених у даній заявці як "М/1 МАТ до лРО-1 9" і "М/2 МАТ до лРО-1 9". Будь- який з гуманізованих доменів МІ може бути спарений з гуманізованими доменами УН.
Відповідно, будь-яке антитіло, що містить один із гуманізованих доменів Мі, спарених з гуманізованим доменом МН, у загальному випадку називається "МАТ до лРО-1 9", ї конкретні комбінації гуманізованих доменів МН/// згадуються з посиланням на певні домени МНЛ/Ї., наприклад, гуманізоване антитіло, що містить МНІ МАТ до лРО-1 9 ії М/2 МАТ до лРО-1 9, зокрема називається "МАТ до лРО-1 9(1.2)".
Ї00149| Амінокислотна послідовність домену МН з МНІ МАТ до лРО-1 9 (5ЕО ІО МО: 179) 60 представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ЕМО! МЕЗО ІМАРОСБІКІ ЗСААБаЕТЕ5 ЗМІ М5МУУВОА РОКаї ЕМУМАТтТ ІБасаТмМмтУУу 5ОБУКОВЕТІ ЗВОМАКМ5І М ГОММ5І ВАЕО ТАТИМСАВУа ЕОСАМЕАУМ С ОСТІ МТУ 00150) Зразковий полінуклеотид, який кодує МНІ МАТ до лРО-1 9, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 180 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даддідсадс їддіддааад щФадддсоддс сіддосдас ссдддддаад ісдааасід іссідідсад саїсаддай їасіцШіса ісЦаїсісд їідісЦцОдодї аадасаадса сссддаааад осноддааю дддюдодссасі аїсіссаддіа даддіддсаа сассіасіаї адсдасадід (саадддаад ашассаїс адісдсдаса асдсіаадаа іадссідіас сіссадаюда асісссідсуд соссудаддас ассдссассі айцасідідс асосіаїдда Шадасдасд саїддашас сіасідддда садддсасаї ддіаассоді їадсісс
Ї00151| Амінокислотна послідовність домену МН із МН2 МАТ до лРО-1 9 (5ЕО ІЮ МО: 181) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ЕМО! МЕЗО І АВРОСОІ КІ 5СААБаЕТЕВ ЗММОМУВОА РОКаї ЕМУТАТ ІБссамМТУУ 5ОБУКОВЕТІ 5ВОМАКМ5І М ГОММЗАВАЕО ТАТУУСАВНУОа ЕОСАМЕАДУМ С ОСТІ МТУ55 00152) Зразковий полінуклеотид, який кодує МН2 МАТ до лРО-1 9, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 182 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даддідсадс дюдіддааад юддододсдодс сіддсосдас ссддаддаад ісдааасід іссідідсад саїсаддаїй їасіцШіса ісЧаїсісд (адасідої аадасаадса сссуддаааад одсипддаад дасддссасі аїсіссаддіа даддіддсаа сассіасіаї адсдасадід (саадддаад ашассаїс адісдсдаса асдсіаадаа іадссідіас сіссадаюда асіссдсасд судссдаддас ассдссассі анасідідс асосіаїдда Шадасдадсад саЇдашас сіасюдодда садддсасаї ддіаассді їадсісс
І00153| СОВнНІ домену МН із МН2 МАТ до лРО-1 9 містить заміну серину амінокислотою гліцином і містить амінокислотну послідовність: ЗУ Ма (5ЕО 10 МО: 183), замінений гліцин виділений підкресленням). Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з доменів СОВні МАТ 9 до РО-1, описаних вище. 00154) Амінокислотна послідовність домену МІ із МТ МАТ до лРО-1 9 (5ЕО І МО: 184) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
БІОМТО5РОБЗ І5АБУООВМТ ІСВАБЗЕМІУ ЗМІГ АММООКР СКАРКИ ММ АКТІ ДАСУР5 вЕЗОаБИаБИаТО ЕТ ТІЗ5І ОР ЕОРАТУУСОН НУАМРУТЕРСО СТКІ БІК 00155) Зразковий полінуклеотид, який кодує МТ МАТ до лРО-1 9, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 185 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): дасайсада Юасісадіс Ісссадсаді сідіссдсаї ссуюддудда ісдддісасс аїсассідсс аїдссісада ааасаїсіаї (сайассісд ссіддіаїса асадааассі ддіааадссс саааацусі сашасаас ассаадассс їсасадсідд соїдссааді адонсісад дсадсоддсіс адддасадаї йсасссіса ссаїаїссіс асідсадссс даддацно ссасцасіа сідссадсаї сайасдсад іІдсссіддас сісоддасаа додсасіаадс ісдадаїсаа а 00156) Амінокислотна послідовність домену МІ із М/2 МАТ до лРО-1 9 (5ЕО І МО: 186) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
БІОМТО5РОЗ І 5АБУСОВМТ ІПСВАБЗБЕМІМ ММ АММООКР СКАРКИЦІМО АКТІ дДАСУР5 вЕЗОаБИаБИаТО ЕТ ТІЗ5І ОР ЕОРАТУУСОН НУАМРУТЕРСО СТКІ БІК
ІЇ00157| Зразковий полінуклеотид, який кодує М/2 МАТ до лРО-1 9, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 187 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): дасайсада Юасісадіс Ісссадсаді сідіссдсаї ссуюддудда ісдддісасс аїсассідсс аїдссісада ааасаїсіаї аасіассісд ссіддіаїса асадааассі доїааадссс саааайудсі сашасдас адссаадассс їсасадсідд соїдссааді адонсісад дсадсоддсіс адддасадаї йсасссіса ссаїаїссіс асідсадссс даддацно ссасцасіа сідссадсаї сайасдсад іІдсссіддас сісоддасаа додсасіаадс ісдадаїсаа а 00158 СОВІТ! домену МІ із МІ2 МАТ до лРО-1 9 містить заміну серину амінокислотою аспарагіном і містить амінокислотну послідовність: ВАБЕМІМММІ А (5ЕО ІО МО: 188), замінений аспарагін виділений підкресленням). Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з доменів СОВІЇ МАТ 9 до РО-1, описаних вище. 00159) СОВІ2 домену Мі із М 2 МАТ до лРО-1 9 містить заміну аспарагіну амінокислотою аспартатом і містить амінокислотну послідовність: ОАКТГАА (5ЕО ІО МО: 189), замінений аспартат виділений підкресленням). Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з доменів СОВІ2 МАТ 7 до РО-1, описаних вище.
У Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 10
Ї00160| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 10 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 190) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ЕМІМЕЗССИЯ ІУКРОСБІКІ ЗСААБаЕТЕ5 ММІМ5УУУВОТ РЕКВІ ЕМУ/МУА5 І5зСааьзмМмІмУ
РОБУКОРВЕТІ ЗАОМАКМТІ М І ОММ5І АЗЕО ТА УМСАВОЕ ГАгОУМ/СОСТ ТІ ТУ55
СОВНІ МАТ 10 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 192): ММ М5
Сова МАТ 10 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 193): БІЗССаЗМІУМРОБУКО бо СОАнЗ МАТ 10 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 194): ОБ АЕОУ
Ї00161| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 10 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 191 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): даадідаїас ддіддадіс ддоаддадоас Надюаадс сіддадддаіє ссідааасіс іссідідсад ссісюдаїй сасшсаді аасіаїсіса (діс(Ооддї ісдссадасі ссуддадаада досддасдід ддісосааді анадідага аідагадіаа (аїсіасіаї ссадасадід ідааддаїсу айсассайїа іссадддаса аїдссаадаа сасссідіас сідсаааюда асадісідад дісюаддас асдудодссної айасщдідс аадасаадаа сіддс(ща асіасюоддд ссааддсасс асісісасад ісіссісс 00162) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 10 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 195) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
БІОМТОТТ55 ІБАБІСОВМТ ІЗСВТБОСІ5 МЕСМУМООКР ОСТІКІИ ММ ТЗВЕНБОаМУР5 вЕЗОаБИаБИТО БІ ТІЗМІ ЕО ЕПІАТУРСОО СЗТ РМТЕСИ Иткі ЕЇЇ
СОВИ МАТ 10 до РО-1 (5ЕО 0 МО: 197): ВТ5ООІБМРЇ М
СОВІ2 МАТ 10 до РО-1 (5ЕО І МО: 198): МТ5ВІ Но
СОВІЗ МАТ 10 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 199): ООСБТІ РУТ
Ї00163| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 10 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 196 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): даїаїссада Юасасадас їасаїссісс сідісідссі сісідддада сададісасс аїсадідса ддасаадіса ддасацадс аашцшаа асіддіаїса дсадааасса даюддаасіа Цааасіссі даїсіасіас асаїсаадаї їасасісадд адісссаїса адодйсадід осадідЧдіє їддаасадаї їайсісіса ссацйадсаа ссіддадсаа даадаїанцну ссаснНасії Ндассаасад дагадіасдс Нссадаїддас дісддідда ддсассаадс Юдааасаїа
К Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 11 00164) Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 11 до РО-1 (5ЕБЕО ІЮО МО: 200) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ЕУХОГООВИТМУ ГАВРОАБУКМ зокКтБахтТЕт СУММНУУКОВ РИСІ КУМаИад
ІМРОаМЗОТНУ МОКЕКОКАКІ ТАМТЗАБТАМ МЕЇ!55ІТМЕО БАМУСттат У5УгруУумата
ТтТУТУ55
СОВНІ МАТ 11 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 202): СУМУ МН
Зо Сова МАТ 11 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 203): АІМРОМЗОТНУМОКЕКа
СОВнЗ МАТ 11 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 204): ТУ5МЕрМ
Ї00165| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 11 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 201 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): дадднсадс Іссадсадіс щЮдддасіцд сіддсаадус сіддддснс адюдаадаї іссідсаада сНисіддсіа сасашасс адасіасідда ідсасідуді аааасададд ссЮдасадоа дісдааад сдашодуддасі ашаїссід дааагадіда (асісасіас аассадааді (саадддсаа ддссааасід асідсадіса саїссдссад сасюдссіас аюддадсіса дсадссщас аааїдаддас ісідсдудаїсі анНасідіас іасідддасс (асісдіасі (сдафдісю дадсасадда ассасддіса ссдісіссю а 00166) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 11 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 205) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РП ГТО5РАЇ І5М5РОЕНУЗ БЕЗСВАбБОбБІ Т5ІНМУОНАТ МОРАВІЇ ІКМ АБЕЗІЗИІР5 вЕЗИаБИаБИТО ЕТІ ЗІМБЗМЕ5 ЕПІАЮУУСОО 5МЗУЛ.ТЕсАС ТКІ ЕІ К
СОВИ МАТ 11 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 207): ВАБОБІСТОІН
СОНВІ2 МАТ 11 до РО-1 (5ЕО І МО: 208): МАБЕ5ІВ
СОВІЗ МАТ 11 до РО-1 (5ЕО І МО: 209): ООБМЗУМІ Т
Ї00167| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 11 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 206 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасаїсноОс Часісадіс іІссадссаїс сщісідща діссаддада аададісаді Нсіссідса дддссадіса дадсайддс асаадсайас асіддіаїса дсасадааса ааюдднсіс саадуснсї саїааацдціаї асисідаді сіаїсісідд даїссснсос аддшасдід дсадіддаїс адддасідаї Шасісна дсаїсаасад щдаавдісї даадатайд садацаца сюдісаасаа адіааадсі ддсісасаїї сддідсідда ассаадсідд адсдааа
Ї Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 12 00168) Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 12 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 210) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ОСНІГОО5аАЕ І МАРОАБЗМТІ ЗСКАБОЕТЕТ ОМЕМНУ/УКОТ РУНО ЕМІСТ ІОРЕТаСТАУ
МОКЕКИКАЇЇ ТМОКООТТТМ МЕЇ АБІТ5ЕО БАМЕМОСЗАЕВ ІТТУМЕСАУМ МЕОУМСаТИтт УТУ55
СОВНІ МАТ 12 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 212): ОМЕМН бо Сова МАТ 12 до РО-1 (ЗЕО І МО: 213): ПОРЕТаСТАУМОКЕКСОИ
СОАнНЗ МАТ 12 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 214): ЕВІТТУМЕСАММ УГЕОМ
Ї00169| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 12 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 211 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): садддісасс їдсадсадіс юдаодсідад сідадідаддс сідоадусіс адодасосід іссідсаадд сісдадсії сасашасі дасіаїдада (їдсасіддді дааасадаса ссдюдсад дссіюддааю дапдддасі айдаїссід ааасіддідд іїасідссіас ааіїсадааді (саадддсаа ддссаїасід асадіадаса ааїснНосас іасаассіас аюддадсісс дсадссщас асщдаддас ісідссдієї Шацонс аададададд ацасіасдд Накдадаа дасагасіда Сгаснсадаїйд (сіддододсас адддассасу дісассдісї ссіса
Ї00170| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 4 до РО-1 (5ЕБЕО І МО: 215) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОМІМТОТРІ5 ІРУБІРОАВ ІЗСВЗБОМІМ НЗМОМТУСЕМ МІ ОКРООБЗРК ПІСКУ5ТНЕ
БаУРєРОоВЕЗзЗОа5 а5ОаТОЕТІ КІ БАМЕАЕОГ ЯМ УУСЕОаЗНУР УТРаСИткКІ Е ІК
СОВИ МАТ 12 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 217): ВББОМІМНОМОаМТ МІ Е
СОВІ2 МАТ 12 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 218): КУЗТАЕ5
СОВІЗ МАТ 12 до РО-1 (5ЕО І МО: 219): ГОСЗНУРУТ
Ї00171| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 12 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 216 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дадніда дЧасссадас іссасісісс сідссідіса діснпудада ісаадссісс аїсісцуса даїсіадіса даасацдіа сайадіааїд дааасассіа ЩШадаацюод їассідсада аассаддсса дісіссааад сіссідаїйсі дсааадцісє сасссдацші ісідудуддієс садасаддй садюддсаді оддаїсаддда садашсас асісаадаїс адсададчідд адодсідадда сідддади їанайосі Нсааддцнс асадзнссЯд (асасансуд даддддадас саадсіддаа аїаааа
М Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 13
Ї00172| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 13 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 220) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ЕММІМЕЗОСОЯ ІУКРОСБІ КІ ЗСААБаЕєТЕ5 ЗНІМ5УМУМВОТ РЕКВАГЕМУМАТ ІБасаьзМмІУ
РОБУКОРВЕТІ ЗАОМАКМТІ М І ОМ55І А5ЕО ТА УХСАВОА УМаМУММЕоМ уМататтУтУвз
Зо СОВНІ МАТ 13 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 222): БНТМ5
Сова МАТ 13 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 223): ТтІЗСССИЗМІММРОБУКОа
СОАнЗ МАТ 13 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 224): ОДУМамМММ Мер
Ї00173| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 13 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 221 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): даадщдайс ддіддадіс ддоаддадоас Надюаадс сіддадддаіє ссідааасіс іссідідсад ссісюдаїй саснісаді адссайасса ідісцудуї ісдссадасі ссддадаада додсіддадід одісосаасс ацадідага аідансіаа (абсіасіаї ссадасадід (даадддісєд айсассаїс Іссададаса адссаадаа сасссідіас сідсаааюда дсадієдад сісдадудас асуддсснуї айасдідс аадасаадсі (асіасддіа ацасіддіа сцсадаїдіс дюдодосасад ддассасодої сассдісісс їсс 00174) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 13 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 225) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
БІОМТО5РАТ ОБАБІСЕЗМТ ІТСГАБОТІ ТУЛАММООКР СКОРО ПІМА АТ5ГАОСУР5 вЕзаБзаБаткК ЕЗЕКІЗОІ ОА ЕОЕУБУМСОО ГОБІРМ/ТЕСОИ СИТтТКІ БІК
СОВІ МАТ 13 до РО-1 (5ЕО І МО: 227): ЇГ АБО ТМ А
СОВІ2 МАТ 13 до РО-1 (5ЕО ІЮ МО: 228): ААТОІ А
СОВІЗ МАТ 13 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 229): ОСОГОБІРМТ
Ї00175| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 13 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 226 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасайсада асссадіс іссідссасс садісюдсаї сісідддада аадіцісасс аїсасдідсс (ддсаадіса дассайддаї асаддцЧад саддіаїса дсадааасса доддаааїсіс сісадсіссї дашадсі асаассадсі їдасадао одісссаїса адднсадія діадіддаїс Юдсасаааа (НсЦса адаїсадсад ссіасаддсі даадаод їааднацна сщісаасаа сідасадіа ссдіддас ансддаода досассаадс юдаааїсаа а
М Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 14
Ї00176)| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 14 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 230) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням).
ОМОГООРОАЕ І УКРОАБУКМ 5СКАБОаММЕІ БУМЛТУУКОВ РООСІ СУЛОМ ІМРаТтратту
МЕКЕК5КАТІ ТМОТ555ТАМ МНІ ВІ Т5ЕО БАУУУСАТСОЇ НУМЕОУМИаТта туту бо СОВНІ МАТ 14 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 232): БМУМІТ
СОгВнг МАТ 14 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 233): МІМРОТОСТТУМЕКЕК5
СОРВнЗ МАТ 14 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 234): І НМУМЕОМ
Ї00177| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 14 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 231 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): саддіссаас Юсадсадсс дддасідад споіаадс сідддоснс адодаадаю іссдсааддуд сісіддсіа саасинсаїс адсіасідда іаассіддої дааасададд ссіддасаад дссНнсадію данддаааї ащцаїссід діасідаїдд (асіассіас ааїдадааді (саададсаа ддссасасід асідіадаса саїссіссад сасадссіас адсассіса дісдссідас аїсдаддас ісідсудісї айнасідідс аасідддсіа сасіддіасі (сдаїдісю доадсасадда ассасодіса ссдісіссіс с
Ї00178)| Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 14 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 235) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТОБОКЕ МЗ5ТЗУСОВУ5 УТСКАбБОВУСС ТММАММООКР СОБРКА! ІМ АЗЗВЕЗСОМУРО
ВЕТазавзато ТІ ТІЗММО5 ЕОГАЕМЕСОО УМ5УРУТЕРСОИ СТКІ БІК
СОВИ МАТ 14 до РО-1 (5ЕО І МО: 237): КАБОВБМаТММА
СОВІ2 МАТ 14 до РО-1 (5ЕО І МО: 238): БАБОВЕ5З
СОВІЗ МАТ 14 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 239): ООУМЗУРМУТ
Ї00179| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 14 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 236 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасайдіща Юасссадіс ісааааанс аїдіссасаї садіаддада садддісаді дісассюса аддссадіса дадіаіддді асіааїдіад ссіддіаїюа асадаадссс ддісааїсіс сіааадсасі дашасісд асаїссіссс дансадіду сдісссюаї сдснНсасад дсадддаїс дддасадаї Нсасісіса ссаїсадіаа щідсадісї даадасндд сададіаш сюісадсаа іагаасадсі аїссдіасас апсддаддо дддассаадс Юдаааїааа а
О Моноклональне антитіло до РО-1 людини 15 1 Мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини 15
Ї00180| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ 15 до РО-1 (5ЕБЕО ІО МО: 240) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням).
ЕММІМЕЗОСОЯ ІМКРОСОІ КІ ЗСААБОРІРЗ 5МІІЗУМУУВОТ РЕКВІ ЕМ/УМАА ІЗсасАОТУУ
Зо АОЗУКОВЕТІ ЗВОМАКМТІ М ГОМ55І АЗЕО ТА Уста ТУАМОУМУсСОС Т5УТУ55
СОВНІ МАТ 15 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 242): ЗМІ 15
Сова МАТ 15 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 243): АІЗСССАрТУУАрБУКОа
СОВнЗ МАТ 15 до РО-1 (ЗЕО ІЮ МО: 244): ВАТМАМОУ
Ї00181| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МН МАТ 15 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 241 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВНн, виділені підкресленням): даадщдайс ддіддадіс ддоаддадоас Надюаадс сіддадддаіє ссідааасіс іссідідсад ссісюдаїй сашісаді адсіаєсіса ісісцЦОдої їсдссадасі ссуддадаада досіддадід сдісудсідсс аНадідага аіда(дсіда сассіасіаї дссдасадід (даадддісу айсассаїс Іссададаса адссаадаа сасссщіаї сідсаааюда дсадієдад дісдаддас асддсесНаї айасщіас аадасдаддд ассіаїдсіа іддасіасю дадісаадда ассісадіса ссдісіссіс с 00182) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ 15 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 245) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІОМТО5РАБ ОБАБбБІСЕЗМТ ІТСГАБОТІ ТУЛАМ/МООКР СКОРО ІІМА АТЗГАОСУР5 вЕЗзаБзаБаткК ЕЗЕКІЗБІ ОА ЕСЕУМУУСОО І У5ІРМ/ТЕСОИ ИТКІ БІК
СОВІ МАТ 15 до РО-1 (5ЕО І МО: 247): Ї АБОТІСТУМ А
СОВІ2 МАТ 15 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 248): ААТОІ А
СОВІЗ МАТ 15 до РО-1 (5ЕО ІО МО: 249): ОСІ МБІРМТ
Ї00183| Зразковий полінуклеотид, який кодує домен МІ МАТ 15 до РО-1, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 246 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВІ|, виділені підкресленням): дасайсада ШЩасссадіс ісссдссісс садісюсаї сісюддада аадцісасс аїсасаюдсс (ддсаадіса дассайддаї асаддцЧад саддіаїса дсадааасса доддаааїсіс сісадсіссї дашадсі асаассадсі їдасадао одісссаїса адднсадія діадіддаїс Юдсасаааа (НсЦса адаїсадсад ссіасаддсі даадаод іааанаца сідісаасаа сщасадіа нссаїддас айсддаюда ддсассаадс ддаааїсаа а 2 Гуманізація моноклонального антитіла до РО-1 людини 15, щоб одержати "МАТ до лРО- 115" 00184) Вищеописане мишаче моноклональне антитіло до РО-1 людини було гуманізовано та додатково деїімунізовано після ідентифікації антигенних епітопів, щоб продемонструвати бо можливість гуманізації антитіла до РО-1 людини з метою зменшення його антигенності при введенні людині-реципієнту. В результаті гуманізації одержали один гуманізований домен УН, позначений у даному документі як "МНІ МАТ до лРО-1 2", й один гуманізований домен Мі, позначений у даному документі як "МТ МАТ до лРО-1 1". Антитіло, що містить гуманізований домен МІ,, спарений з гуманізованим доменом МН, називається "МАТ до лРО-1 15". 00185) Амінокислотна послідовність домену МН із МНІ МАТ до лРО-1 15 (5ЕО ІЮО МО: 250) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ЕМО! МЕЗО ІМАРОСБІ ВІ ЗСААЗОЕТЕ5 ЗМІ І5МУУВОА РОКИ ЕУУМАА ІЗсСсаСсСАОТУУ
АОЗУКОВЕТІ ЗВОМАКМ5І М ГОММ5І ВАЄО ТАТУУСАВНОа ТМАМОУМУ СОС ТІ УТУ55 00186) Зразковий полінуклеотид, який кодує МНІ МАТ до лРО-1 15, містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 251 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даадідсаас їддндааад ідодсдоас9дда сіддідсдодс саддідойс асісадасід існдідсад сісадосії іїасацсісс ісЧЦаїсЦа ісісцЦОудуді дсоссаадсс ссаддіаадуд дсснпдаацю ддісдассдсс ацадідада ададссда (асагацаї дссдасадсд ісаадддасу Шсассаїс адсадддаса асдссаадаа іадссшЩас сюсадаюда асісаснад адсідаадас ассодсіасй анасідідс ссддсдсадда асцасдсіа (адасіа(9 дадссадддс асснодіса сідісісаїс с
Ї00187| Амінокислотна послідовність домену МН із МТ МАТ до лРО-1 15 (5ЕО ІЮ МО: 252) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням):
БІОМТО5РОЗ І5АБМООВМТ ІТС АБОТІ ТУ/ЛАММООКР СКАРКІИ МА АТЗІГАОСУР5 вЕЗИаБИаБатТО ЕТЕТІЗБ ОР ЕОБАТУУСОО ЕУБІРМТРСО СТКІ БІК 00188) Зразковий полінуклеотид, який кодує М/1 МАТ до лРО-1 15, містить послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 253 (нуклеотиди, що кодують залишки СОВН, виділені підкресленням): даїаїссада Юасссадіс ісссадсісї сісадідсаа дсдуіаддсда ссдідідасс аїсассідіс іддссадіса дассайдда ассіддсісд ссіддіаїса дсадааассі ддсааддссс сіаадсідсі дашасудсс ассассіссс їсасадаєдо адісссісс сдашадсуд содіссддадієс сдудудсассдас Нсасайса сааїсадсад ссіссадссс даддацісу сіасайїасіа сідісаасад сісіасісса цссаїддас сшодісад даїасіааас Юдадаїсааа
М Моноклональні антитіла до РО-1 людини 1-15 та їх похідні, що містять модифіковану область Ес
І00189| При нормальному функціонуванні імунної системи взаємодія комплексів антитіло- антиген із клітинами імунної системи призводить до широкого спектра відповідей, починаючи від
Зо ефекторних функцій, таких як залежна від антитіл цитотоксичність, дегрануляція гладких клітин і фагоцитоз, до імуномодулюючих сигналів, таких як регулювання проліферації лімфоцитів і секреції антитіл. Усі зазначені взаємодії ініціюються шляхом зв'язування області Ес антитіл або імунних комплексів зі спеціалізованими поверхневими рецепторами клітин на кровотворних клітинах. Різноманітність клітинних відповідей, викликаних антитілами й імунними комплексами, обумовлене структурною гетерогенністю трьох рецепторів Ес: ЕсукІ (СО64), ЕсукіІ! (СО32) і
Есукп (2016). Есук! (СО64), РсукПА (СОЗ32А) і ЕсукІ (СО016) є активуючими (тобто, підсилюючими імунну систему) рецепторами; ЕсукіІвВ (СО328) є інгібуючим (тобто, послабляючим імунну систему) рецептором. Крім цього взаємодія з неонатальним рецептором
Ес (ЕсКп) виступає посередником рециркуляції молекул до з ендосоми до поверхні клітини та вивільнення в кров. Амінокислотна послідовність зразкового ЇдДО1 дикого типу (ЗЕО ІЮО МО: 1),
Іда2 (5ЕО ІО МО: 2), ІЗ (5ЕО ІО МО: 3) і І(дс4 (5ЕО І МО: 4) представлена нижче.
Ї00190)| Модифікація області Ес зазвичай призводить до зміненого фенотипу, наприклад, зміненому періоду напіввиведення з сироватки крові, зміненої стабільності, зміненої сприйнятливості до клітинних ферментів або зміненої ефекторної функції. Бажаною може бути модифікація антитіла або іншої сполучної молекули згідно з даним винаходом у відношенні ефекторної функції, наприклад, для того, щоб підвищити ефективність зазначеної молекули в лікуванні раку. Зниження або усунення ефекторної функції є бажаним у деяких випадках, наприклад, у випадку антитіл, механізм дії яких включає блокування, або антагоністична дія, але не лізис клітин, що несуть антиген-мішень. Підвищена ефекторна функція зазвичай є бажаною, коли вона спрямована на небажані клітини, такі як пухлинні та чужорідні клітини, у яких ЕсукК експресуються з низькими рівнями, наприклад, пухлинноспецифічні В-клітини з низьким рівнем ЕсуКІІВ (наприклад, неходжкінська лімфома, СІіЇ ії лімфома Беркітта).. У зазначених варіантах реалізації молекули згідно з даним винаходом, яким надали або які мають змінену ефекторну функціональну активність, можна застосовувати для лікування та/або запобігання захворювання, розладу або інфекції, при яких бажаною є підвищена ефективність ефекторної функціональної активності. 00191) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять область Ес, яка містить одну або більше модифікацій (наприклад, замін, делецій або вставок) в амінокислотній послідовності області Ес дикого типу 60 (наприклад, 5ЕО ІО МО: 1), які знижують афінність й авідність області Ес, і, відповідно,
молекули згідно з даним винаходом, у відношенні одного або більше рецепторів Есук. Згідно з іншими варіантами реалізації даного винаходу молекули згідно з даним винаходом містять область Ес, яка містить одну або більше модифікацій амінокислот області Ес дикого типу, які збільшують афінність й авідність області Ес і, відповідно, молекули згідно з даним винаходом, у відношенні одного або більше рецепторів ЕсукК. Згідно з іншими варіантами реалізації даного винаходу молекули містять варіант області Ес, причому зазначений варіант надає або опосередковує підвищену активність, пов'язану з антитіло-залежною клітинною цитотоксичністю (АЗКЦ), і/або підвищене зв'язування з ЕсуйІІА у порівнянні з молекулою, що не містить область
Ес або містить область Ес дикого типу. В інших варіантах реалізації даного винаходу молекули містять варіант області Ес, причому зазначений варіант надає або опосередковує знижену активність АЗКЦ (або іншої ефекторної функції) і/або підвищене зв'язування з ЕсукіІІВ у порівнянні з молекулою, що не містить область Ес або містить область Ес дикого типу. Згідно з деякими варіантами реалізації в область даного винаходу включені РО-1-сполучні молекули, що містять варіант області Ес, причому зазначений варіант області Ес не проявляє детектованого зв'язування з будь-яким Есук у порівнянні з порівнянною молекулою, що містить область Ес дикого типу. Згідно з іншими варіантами реалізації в область даного винаходу включені РО-1- сполучні молекули, що містять варіант області Ес, причому зазначений варіант області Ес зв'язується тільки з одним Есук, переважно з одним із ЕсукІПА, ЕсукІІВ або ЕсукК ША. Будь-яке підходяще підвищення афінності й/або авідності переважно оцінюють шляхом вимірювання в умовах іп мійго ступені детектованого зв'язування з Есук або Есук-зв'язаної активності в клітинах, які експресують низькі рівні Есук, коли активність зв'язування вихідної молекули (без модифікованої області Ес) не піддається детектуванню в клітинах, або в клітинах, які експресують цільові антигени, відмінні від рецепторів Есу, в щільності від 30000 до 20000 молекул/клітину, в щільності від 20000 до 10000 молекул/клітину, в щільності від 10000 до 5000 молекул/клітину, в щільності від 5000 до 1000 молекул/клітину, в щільності від 1000 до 200 молекул/клітину або в щільності 200 молекул/клітину або менше (але не менше 10, 50, 100 або 150 молекул/клітину). 00192) РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можуть містити варіант області
Ес, що має змінену афінність у відношенні активуючого й/або інгібуючого рецептора Есу.
Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула містить варіант області Ес, який має підвищену афінність у відношенні ЕсуКІіІВ і знижену афінність у відношенні ЕсукКПША і/або ЕсуКІІА у порівнянні з порівнянною молекулою, що містить область Ес дикого типу. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула згідно з даним винаходом, містить варіант області Ес, який має зменшену афінність у відношенні ЕсукіІІВ і підвищену афінність у відношенні ЕсукКІША і/або ЕсукКПА у порівнянні з порівнянною молекулою, що містить область Ес дикого типу. В іншому варіанті реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, який має зменшену афінність у відношенні ЕСуКІІВ і зменшену афінність у відношенні ЕСуУКПША і/або
ЕсукІА у порівнянні з порівнянною молекулою, що містить область Ес дикого типу. В іншому варіанті реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Бс, який має незмінну афінність у відношенні ЕсукіІВ і зменшену (або підвищену) афінність у відношенні ЕсукША і/або ЕсукПА щодо порівнянної молекули, що містить область Есу дикого типу. 00193) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, що має змінену афінність у відношенні
ЕсукПША і/або ЕсукІА, так, що імуноглобулін має підвищену ефекторну функцію. Необмежуючі приклади ефекторних функцій клітин включають антитіло-залежну клітинну цитотоксичність, антитіло-залежний фагоцитоз, фагоцитоз, опсонізацію, опсонофагоцитоз, зв'язування клітин, утворення розеток, зв'язування з компонентом комплементу С14 і комплемент-залежну клітинну цитотоксичність.
Ї00194|У переважному варіанті реалізації даного винаходу афінність або ефекторна функція змінюється щонайменше в 2 рази, переважно щонайменше в 4 рази, щонайменше в 5 разів, щонайменше в 6 разів, щонайменше в 7 разів, щонайменше в 8 разів, щонайменше в 9 разів, щонайменше в 10 разів, щонайменше в 50 разів або щонайменше в 100 разів у порівнянні з порівнянною молекулою, що містить область Ес дикого типу. Згідно з іншими варіантами реалізації даного винаходу варіант області Есу імуноспецифічно зв'язується з одним або більше
ЕСК з величиною афінності, яка щонайменше на 6595, переважно щонайменше на 7095, 75965, 8095, 8595, 9095, 9595, 10095, 12595, 15095, 17595, 20095, 22595 або 25095 перевищує афінність молекули, що містить область Ес дикого типу. Такі вимірювання можуть являти собою кількісні бо дослідження в умовах іп мімо або іп міго, й у переважному варіанті являють собою кількісні дослідження в умовах іп місто, такі як твердофазний імуноферментний аналіз (ІФА) або поверхневий плазмонний резонанс. 00195) Згідно з різними варіантами реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, причому зазначений варіант є агоністом щонайменше одного виду активності рецептора Есук або є антагоністом щонайменше одного виду активності рецептора Есук. Згідно з переважним варіантом реалізації даного винаходу молекули містять варіант, який є антагоністом одного або більше видів активності ЕсСУуВІЇІВ, наприклад, опосередковуваної В-клітинами передачі сигналів, активації В-клітин, проліферації
В-клітин, вироблення антитіл, внутрішньоклітинного припливу кальцію у В-клітини, прогресування клітинного циклу, ЕсуКІІВ-опосередковуваного інгібування передачі сигналів за участю ЕсєКІ, фосфорилювання ЕсуКІІВ, залучення ЗНІР, фосфорилювання 5НІР і зв'язування з ЗПС, або активності однієї або більше молекул наступних каскадів реакцій (наприклад, МАР- кінази, УМК, р38 або АКО у шляху передачі сигналу за участю ЕсуРІІВ. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант, який є агоністом одного або більше видів активності ЕсукКіІ, наприклад, активації гладких клітин, мобілізації кальцію, дегрануляції, вироблення цитокінів або вивільнення серотоніну.
Ї00196) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу молекули містять область
Ес, що містить області з двох або більше ізотипів Ї(дс (наприклад, Ідс1, Ідс2, доз і Ідс4). У даній заявці область Ес, як вважають, має конкретний ізотип ДС, якщо її амінокислотна послідовність найбільше гомологічна зазначеному ізотипу щодо інших ізотипів до. Різні ізотипи
Іцо проявляють різні фізичні та функціональні властивості, включаючи період напіввиведення з сироватки крові, зв'язування комплементу, афінність зв'язування у відношенні Есук й активність ефекторних функцій (наприклад, АЗКЦ, КЗЦ і т.п.), внаслідок відмінностей в амінокислотних послідовностях шарнірної області й/або області Ес, наприклад, як описано у Ріеєзсй апа Меррей (1999) 9. Сііп. ар. Апаї. 14:141-156; СНарреї! еї аї. (1993) 9. Віої. Снет. 33:25124-25131; Спарреї! еї а. (1991) Ргос. Маї). Асай. бсі. (0О.5.А.) 88:9036-9040; або Вгаддетапп еї аї!. (1987) 9. Ехр. Мей 166:1351-1361. Зазначений тип варіанта області Есу можна застосовувати окремо, або в комбінації з модифікацією амінокислот, для впливу на Ес-опосередковувану ефекторну функцію й/або активність зв'язування. У випадку використання в комбінації, модифікація амінокислоти і
Зо шарнірна областьлобласть Ес дб можуть проявляти подібну функціональність (наприклад, підвищену афінність у відношенні ЕсукІІА) та можуть діяти адитивно або, більше переважно, синергічно, щоб модифікувати ефекторну функціональність у молекулі згідно з даним винаходом, у порівнянні з молекулою згідно з даним винаходом, яка містить область Ес дикого типу. Згідно з іншими варіантами реалізації даного винаходу модифікація амінокислот й область
Ес до можуть проявляти протилежну функціональність (наприклад, підвищення та зменшення афінності у відношенні ЕСУКІІА, відповідно) і можуть селективно регулювати або знижувати специфічну функціональність у молекулі згідно з даним винаходом, у порівнянні з молекулою згідно з даним винаходом, що не містить область Ес або містить область Ес дикого типу такого самого ізотипу.
ІЇ00197| У переважному конкретному варіанті реалізації РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, причому зазначений варіант області Ес містить щонайменше одну модифікацію амінокислоти, у порівнянні з областю Ес дикого типу, так, що зазначена молекула має змінену афінність у відношенні ЕСЕ, за умови, що зазначений варіант області Ес не містить заміну у положеннях, які безпосередньо вступають у контакт із ЕсукК, на підставі даних кристалографічного та структурного аналізу взаємодій Ес-РСК, таких як ті, які описані бопдептапп єї аі. (2000) Маїште 406:267-73. Приклади положень в області Ес, які безпосередньо вступають у контакт із ЕсуК, являють собою залишки амінокислот 234-239, залишки амінокислот 265-269 (петля В/С), залишки амінокислот 297-299 (петля С/Е) і залишки амінокислот 327-332 (петля Б/5). Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу молекули згідно з даним винаходом містять варіанти області Ес, що містять модифікацію щонайменше одного залишку, який не вступає у безпосередній контакт із ЕсукК, на підставі даних структурного та кристалографічного аналізу, наприклад, знаходяться поза сайтом зв'язування Ес-Есук. 00198) Варіанти області Ес добре відомі в даній області техніки, і будь-який відомий варіант області Ес може бути використаний згідно з даним винаходом для надання або модифікації ефекторної функції, що проявляється молекулою згідно з даним винаходом, що містить область
Ес (або її частину), відповідно до даних функціональних досліджень, наприклад, в МК- залежному або залежному від макрофагів кількісному дослідженні. Наприклад, варіанти області
Ес, ідентифіковані як варіанти, що змінюють ефекторну функцію, розкриті у РСТ публікаціях УМО 60 04/063351; УУМО 06/088494; УМО 07/024249; УМО 06/113665; УМО 07/021841; УМО 07/106707; ії УМО
2008/140603, і будь-який підходящий варіант, розкритий у зазначених публікаціях, можна застосовувати в молекулах згідно з даним винаходом. 00199) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, що містить одну або більше модифікацій амінокислот в одній або більше областях, модифікація (модифікації) яких змінює (щодо області
Ес дикого типу) співвідношення величин афінності варіанта області Ес на користь активуючого
Есук (наприклад, ЕСуКІІА або Есуг ПА) відносно інгібуючого ЕсукК (такого як ЕсуКІІВ):
Співвідношення величин афінності - Зміна афінності варіанта Ес, щодо дикого типу, на користь активуючого ЕсукК/Зміна афінності варіанта Ес, щодо дикого типу, на користь інгібуючого Есук 00200) Особливо переважними є РО-1-сполучні молекули згідно 3 даним винаходом, які містять варіант області Ес (у порівнянні з областю Ес дикого типу), в яких варіант області Ес має співвідношення величин афінності більше 1. Зазначені молекули особливо корисні в забезпеченні терапевтичного або профілактичного лікування захворювання, розладу або інфекції або поліпшення її симптому, коли бажаною є підвищена ефективність ефекторної функції клітин (наприклад, АЗКЦ), опосередковуваної Есук, наприклад, при раку або інфекційному захворюванні. Напроти, варіант області Ес, що має співвідношення величин афінності менше 1, викликає зменшення ефективності ефекторної функції клітин. У таблиці 1 наведені зразкові одинарні, подвійні, потрійні, чотириразові та п'ятиразові мутації, незалежно від того, характерно для них співвідношення величин афінності більше або менше 1.
Таблиця 1
Типові одинарні та множинні мутації, перераховані відповідно до співвідношення величин афінності
В292Р Мм42гіК УЗОО. "ЗО. і РЗОбІ.
УЗзбО. УЗ. УЗОО. "ЗО. і РЗОбІ.
РЗ9бІ. МЗО5І УЗОО. "ЗО. і РЗОбІ. век пе кек Док
РЗ9бІ. РЗ9бІ. Міг Кк об фо рев
УЗОО. РЗ9бІ. РЗОбІ. т екю ве
МЗО5І Мм42гіК вва
СЕ б є др
РЗОбІ. РЗ9бІ. РЗОбІ. ож ве дев
РЗОбІ. вва Оа19н вико ве дв 0419Н РЗ9бІ. РЗОбІ. об ан РЗОбІ. ек ее кЗ7оМ МК вк ур
РЗ9бІ. і РЗОбІ. п
РЗОбІ.
ПН ПН ПНО ііі НИМ вва
Е2431 іР243Ї, К292Р.ш і
Увооі орав 101
РЗЯЄІ |ЇРОЯТЬ ЇЇ 11111111
Таблиця 1
Типові одинарні та множинні мутації, перераховані відповідно до співвідношення величин афінності 1 0меїк Її 111 и ЗШ0Ш04100000
РЗОбІ. 00000000
МЗО5І 00000000
РЗОбІ. 001
Оа19н
І0ОО2О1| Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу варіанти області Ес містять будь-які модифікації амінокислот (наприклад, заміни) у будь-якому з положень 235, 240, 241, 243, 244, 247, 262, 263, 269, 298, 328 або 330 і переважно один або більше з наступних залишків: А240, 1240, І 241, І 243, Н244, М298, ІЗ28 або М330. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу варіанти області Ес містять будь-які модифікації амінокислот (наприклад, заміни) у будь-якому з положень 268, 269, 270, 272, 276, 278, 283, 285, 286, 289, 292, 293, 301, 303, 305, 307, 309, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 або 439 і переважно один або більше з наступних залишків: Н280, 0280, 280, 2290, 5290, 10290, 290, М294, К295, Р296, 0298, М298, Р298, М298, ІЗО0 або І 300. 00202 Згідно з переважним варіантом реалізації даного винаходу варіанти області Ес, які зв'язуються з Есук зі зміненою афінністю, містять будь-які модифікації амінокислот (наприклад, заміни) у будь-якому з положень 255, 256, 258, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 300, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 320, 322, 326, 329, 330, 332, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 339, 340, 359, 360, 373, 376, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 або 439. Переважно варіант області Ес містить будь-який з наступних залишків: А256б, М268,
О272, 0286, 0286, 5286, А290, 5290, А298, М301, АЗ12, ЕЗ20, М320, 0320, 8320, ЕЗ22, АЗ26, р326, ЕЗ26б, М326, 5326, КЗ330, Т339, АЗ33, АЗ34, ЕЗ334, НЗЗ34, 1334, М334, 0334, М334, КЗ35, 0335, АЗ359, АЗбО або А430.
І0О2О3| Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу варіанти області Ес, які зв'язуються з Есук ( за допомогою своєї області Ес) зі зниженою афінністю, містять будь-які модифікації амінокислот (наприклад, заміни) у будь-якому з положень 252, 254, 265, 268, 269, 270, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 300, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 або 439. 00204) Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу варіанти області Ес, які зв'язуються з Есук ( за допомогою своєї області Ес) з підвищеною афінністю, містять будь-які модифікації амінокислот (наприклад, заміни) у будь-якому з положень 280, 283, 285, 286, 290, 294, 295, 298, 300, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 або 430.
Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу варіанти області Ес, які зв'язуються з
ЕсукІА з підвищеною афінністю, містять будь-який з наступних залишків: А255, А256, А258,
А267, А268, М268, А272, 0272, А276, А280, А283, А285, А286, 0286, 0286, 5286, А290, 5290,
МЗ301, ЕЗ20О, М320, 0320, 8320, ЕЗ22, АЗ26, 0326, ЕЗ26, 5326, КЗ30, АЗ31, 9335, АЗ337 або
А430. 00205) Переважні варіанти містять одну або більше модифікацій у будь-якому з положень: 228, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 247, 262, 263, 264, 265, 266, 271, 273, 275, 281, 284, 291, 296, 297, 298, 299, 302, 304, 305, 313, 323, 325, 326, 328, 330 або 332. 00206) Особливо переважні варіанти містять одну або більше модифікацій, вибраних із груп
А-АЇ: в |230А,230Е,230уабо2300;.71777771111111111 0 (232Е23аК 2323;
2390, 239Е, 239М або 2390; 0000 1240А, 2401, 240М або 2401; 243Б, 243, 243У, 2431., 2430, 243МУ, 243Н або 2431; 244Н; 245А; 2470, 247М або 2471: 262А, 262Е, 2621, 2627, 262Е або 282Е;
ОО 1263А, 2631, 283М або 26317;
РО 0 1264Е, 264Е, 264, 2641, 264А, 2647 або 264МУ;
ОО 000 1265Е, 265У,, 265Н, 2651, 265І., 2657Т, 265М, 265М або 2650);
А 1266А, 2661, 266М або 2661; в 2710, 271Е, 271М, 2710, 271К, 2718, 2715, 271Т, 271Н, 271А, 271М, 2711, 2711, 271Е, 271М, 271, 271ММ або 2710; 2731; 2151. або 275МУ; 2810, 281К, 281У або 281Р; 284Е, 284М, 284, 2841, 284У або 284М; 2910, 291Е, 2910, 291Т, 291Н, 2911 або 2910; у 299А, 2990, 299Е, 299Е, 2990, 299Н, 2991, 299К, 2991, 299М, 299М, 299Р, 2990, 2998, 2995, 299М, 299ММ або 2997; 3021; 3040, 304М, 304Т, 304Н або 3041.
ЗОБІ;
ЗЗР; 3231; дЕ |325А, 3250, З25Е, 3250, З25Н, З25І, 3251, З25К, 3258, 3255, З25Р, З25М, 3257, З25У, 325У, 325ММ або 325Р;
ДЕ 3280, 3280, 328К, 3288, 3285, 328Т, З28М, 3281, 328, 328, З28Р, 3280, З28А, З28Е, 328Е, 328Н, 328М або 328М; 330І-, 330, 3301 або З30М; дно |ЗЗ2А, 3320, ЗЗ2Е, З32Н, З32М, 3320, З332Т, З32К, 3328, 3325, З32У, 3321, З32Р, З32М, 332ММ, 332Р, 3320 або 332; і 336Е, 336К або 336У
І00207| Ще більше переважні варіанти містять одну або більше модифікацій, вибраних із груп 1-105:
АЗЗОЇ /332Е 52390/02651/М2970/332Е рагб5Е/м2г97Е/З3З32Е 52390/026571/ч2970/1332Е ргбб5у/м2970/332Е 52390/0265М/М2970/332Е ргбб5у/м2970/1 2991 /ЛЗ32Е 52390/0265У/М2970/332Е
Е2А1Е/Е243СУМ2621/М264Е 52390/13320 в гак ПЕОМ БИТВ ве 2390/1332
Е2А1Е/Е243В/у/262Е/у2648 60 |52390/332Е/АЗЗОЇ в рен Е/Е243В//262Е/У264В8/І33 «2390/1332 0090000 ТЕ2А1Е/Е243У/у2621/у2648 52390/3320 гак ПЕВ МИВОТМВІНИВИ вз в2390/М2970/332Е
ЕгАТЛ/Е243І /М2621/2641 52390/М2970/І332Е/АЗЗ0У 52390/М2970/332Е/АЗЗОУ/Е241 5/Е243Н/
Гея ува Мгв2т/угват
Е2418В/г2430/М262т/у2648 | 66 | 52390/М2970/І332Е/КЗ26Е рен В/Е243СуМУ262т/уи264В/33 в2390/М2970/І332ЕЛ 2350
Е241УМ/Е243Му/М262А/ЛУ26Д4А | 006800 | 52390/5298А/332Е
Е241У/Е243У//2621//264Т 69 |52390/у2641/АЗЗ01 /332Е лі
Егау/г243у/у2621//2641/М29 27 |щЗавтЛУЗаЕ 1180 |5239БЕ/ЛМОбЯИЗЗАЕ ////:СССССС:С 33 |мег97р/т299Л33аЕ 0000186 |5239МИЗЗаМ777777777771 м2г97р/1299г/ІЗ3З2Е/М2970/129 36 |мг97р/т299лЗ3аЕ 0189 |52390И3320.77..:КЙ:И К(У/.:И КК: (СУ 37 |мее7р/таеоуиУЗаЕ 0190 |52390Л332Е ГГ: /СС:(//: ЖЯ 43 |52390/АЗЗОУЛУЗАЕ 0096 |Моб4МАЗЗОМУЗаЕ З: 45 |52390/АЗЗОУЛУЗаЕЗаЄТ 00098 |МобаМЗЗаЕ ССС: С 46 |52390/АЗЗОУЛЗЗАЕЛОЗАІ 099 |МоблуЗгОВАЛЗЗаЕЇ З: 53 |5239р/раббуМге7оЛЯЗаЕ С | /(/: ЇЇ 77777771 (002081 Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула згідно з даним винаходом буде містити варіант області Ес, що містить щонайменше одну модифікацію в області Ес. Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу варіант області Ес містить щонайменше одну заміну, вибрану з групи, що складається з І 235М, Е243І,
К292Р, УЗО00І., МЗО5І і РЗ9бІ.. 002091 Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу варіант області Ес містить: (А) щонайменше одну заміну, вибрану з групи, що складається з Е243І, В292Р, УЗО00І, МЗ3О5І і РЗОБбІ ; (В) щонайменше дві заміни, вибрані з групи, що складається з: (1) Е243І і РЗ3961І; (2) Е243І і К292Р; (3) К292Р і МЗ3О5І; (С) щонайменше три заміни, вибрані з групи, що складається 3: (1) 2431, К292Р і 3001; (2) Е243І, К292Р їі М3О51І; (3) Е243І, К292Р і РЗ396І і (4) К292Р, МЗО5І і РЗ96І ; (р) щонайменше чотири заміни, вибрані з групи, що складається з:
(1) Е243ЇІ, К292Р, УЗО0І і РЗ3961 і (2) Е243І, К292Р, МЗО5І і РЗ396І ; або (Е) щонайменше п'ять замін, вибраних із групи, що складається з: (1) Е243ЇІ, К292Р, УЗ00І, МЗО5І і РЗ396І і (2)1235М, Е243І, К292Р, УЗО0І і Р3961. (00210) В іншому конкретному варіанті реалізації даного винаходу варіант області Ес містить заміни: (А) 2431, К292Р і У300І; (В) 1235М, 2431, К292Р, УЗО0І і Р3961 ; або (С) Е243І, К292Р, 3001, УЗО5І і РЗОбІ.. (00211 Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула згідно з даним винаходом містить варіант області Ес, який проявляє зменшене (або по суті відсутнє) зв'язування з ЕСуУКІА (СОб64), ЕсукКПА (СОЗ32А), ЕсукІІВ (СО0328), ЕсукША (СО16а) або
ЕсукнВ (СО16Б) (у порівнянні зі зв'язуванням, що проявляється областю Ес ІдДС1 дикого типу (ЗЕБЕО ІО МО: 1)). Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула згідно з даним винаходом буде містити варіант області Ес, яка проявляє знижене (або по суті відсутнє) зв'язування з Есук (наприклад, ЕсукІША) і знижену (або по суті відсутню) ефекторну функцію АЗКЦ. Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу варіант області Ес містить щонайменше одну заміну, вибрану з групи, що складається з І 234А, І 235А, р2г65А, М2970) і М2970. Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу варіант області Ес містить заміну І 234А; І 235А; І 234А і І 235А; 0265А; М2970О або М2970. (00212) Переважні послідовності Її для доменів СН2 Її СНЗ РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом будуть містити заміни І 234А/ 235А (ЗЕО ІО МО: 5):
АРЕААСОРОМ РГЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУМУМОУЗНЕО РЕМКЕММУМУр СМЕМНМАКТК
РВЕЕОМУМОТМ ВАМУБМІТМІН ОБУ МОаКЕМУК СКУМ5МКАГ РА РІЕКТІЗКАК СсСОРАВЕРОМУТ
ІРР5ВЕЕМТК МОУБІТСІМК СЕМРООІАМЕ М/ЕЗМООРЕММ УКТТРРМІОБЗ равеЕнгім5кІ.
ТУОКБАМООС ММЕЗСЗУМНЕ А НМНУТОКЬ І І 5РОХ де Х являє собою лізин (К) або відсутній. (00213) Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула згідно
Зо з даним винаходом містить область Ес, яка за своєю природою проявляє зменшене (або по суті відсутнє) зв'язування з ЕСУКІА (СО1ба) і/або знижену ефекторну функцію (у порівнянні зі зв'язуванням, що проявляється Ес ІДС! дикого типу (5ЕО ІЮ МО: 1)). Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу РО-1-сполучна молекула згідно з даним винаходом не містить область Ес Ід62 (5ЕО ІЮ МО: 2) або область Ес Ід054 (ЗЕО ІЮО МО: 4). У випадку використання області Ес Ід024, в область даного винаходу також включене введення стабілізуючої мутації, такої як заміна 5228Р шарнірної області Ідс4 (див., наприклад, 5ЕО ІЮ
МО: 13: ЕЗКУХОРРСОСРРСР, (І и єї а)ї., (2008) "Те Енесі ОГ А Роїпі Миїайоп Оп Те сгабіїйу ОГ ЗИ
А5 Мопіюгей Ву Апаїуїйса! ОПгасепіпидайоп", ). РНаптасеціїса! бсіепсез 97:960-969), щоб зменшити частоту обміну ниток. Інші стабілізуючі мутації, відомі в даній області техніки, можуть бути введені в область Ес Ідс4 (Реїегз, Р еї аї., (2012) "Епдіпеегіпд ап Ітргомейд ІдДа4 Моїесиїе мій Ведисей Різиніде Вопа Неїегодепейу апа Іпстєазей баб Ботаїп Тнепта! іабіїйу", 9. Віої.
Спет., 287:24525-24533; РСТ публікація патенту УХО 2008/145142). 00214) Згідно з іншими варіантами реалізації в область даного винаходу включене застосування будь-якого варіанта області Ес, відомого в даній області техніки, такого як ті, які розкриті в Уеїегів, В.у). еї аї. (2002) "Іпіегасіоп 5пйе5з Оп Нитап Іда-Ес Рог ЕсдаттавВ: Сигтепі
Моадве!в5", Іттипої. Гей. 82:57-65; Ргевіа, І.С. єї а. (2002) "Епдіпеегіпд Тнегарешіс Апіїродієв5 Еог
Ітргомед Еипсійоп", Віоспет. бос. Тгтапе. 30:487-90; Ідиводіє, Е.Е. еї аїЇ. (2001) "Епаіпеегєйд
Апііродієз М/Н Іпстєазей Асіїміу То Весгий Сотріетепі", У. Іттипої. 166:2571-75; ЗНівід5, В.І. єї а! (2001) "Нідп Резоїшіоп Марріпа ОЇ Тне Віпаіпд 5йе Оп Нитап ІдСсІ Рог Ес Сатта ВІ, Ес
Сатта ВІЇ, Ес Сатта ВІ, Апа РсАп Апа Оєзідп ОГ дат Мапапів М/Ий Ітргомейа Віпаїпд То Те
Ес датта В", у). Віої. Спет. 276:6591-6604; Ідиводіє, Е.Е. єї аї. (2000) "Марріпа ОЇ Те Ста
Віпаіпд 5йе Оп Айихап, А СПпітегіс Апібоду М/йй А Нитап да Ес", у. Іттипої. 164:4178-84;
Ведау, М.Р. еї аї. (2000) "Еїтіпайоп ОЇ Ес Весеріогї-Оерепдепі Емесіог Рипсіїоп5 ОЇ А Моаіїіва
Ідс4 Мопосіопаї! Апіїроду То Нитап СО", .). Іттипої. 164:1925-1933; Хи, 0. еї аї. (2000) "іп міго
СНагасієгігайоп ої Ріме Нитапігеа ОКТЗ ЕнНесіог ЕРипсіп Магіапі Апііродіев", СеїЇ. Іттипої. 200:16-26; Аптоиг, К.Г. еї аіІ. (1999) "ВНесотбріпапі питап ІдсС; МоіІесшев Іаскіпд Есдатта
Весерюг І Віпаіпа Апа Мопосуїе Тгіддегіпо Асіїміціев", Єик. у. Іттипої. 29:2613-24; деПетгів, В. еї аї. (1996) "Моайшіайоп ОЇ БРс(Сатта): Апа Нитап Сотріетепі Асіїмайоп Ву /ІдазЗ-соге
Оїіїдозасснагіде Іпіегасіпв", Іттипої. Гей. 54:101-04; І шипа, у. еї аі. (1996) "Мийіріє Іпіегасіїп5 60 0 ОгіІдс; УМУйН 5 Соге ОіїдозассНнагіде Сап Модиіаїє Ресодпйоп Ву Сотрієтепі Апа Нитап Ес
Сатта ВРесеріог І Ап ІпПйшепсе Те БЗупіпезіз ОЇ 5 Оіїдозасснагтде СНаїпв", У. Іттипої. 157:4963-4969; Ниїспіп5 єї аї. (1995) "тргомей Віодівінібшіоп, Титог Тагдеїйпу, Апа Недисеа
Іттиподепісйу Іп Місе М/йН А Сатта 4 Маїапі ОГ Сатраїй-1Н", Ргос. Май). Асад. 5сі. (0.5. А.) 92:11980-84; деНегів, В. еї а. (1995) "Несодпійоп 5йе5з Оп Нитап ІдСї Рог Ес Сатта РНесеріогв:
Те Воїє ОЇ Спіусозуїайоп", Іттипої. Гей. 44:111-17; І пос), у. еї а). (1995) "ОіїдозассНагтіде-Ргоївїп
Іптегасіопз Іп ЇДС Сап Модиїіате Ресодпійоп Ву Ес Сатта Ресеріюогв5", ЕАБЕВ 4). 9:115-19; АІедге,
М.С. еї а. (1994) "А Моп-Асіїмайпу "Нитапігей" Апіі-СОЗ Мопосіопа! Апіїроду Реїаїп5
Іттипозирргезвзіме Ргорепіевв іп мімо", Тгапзріапіайоп 57:1537-1543; І па еї аї. (1992) "Мийіріе
Віпаіпд 5йез Оп Те СН2 Ботаїп ОЇ Ід Бог Моизе Рс Сатта Н11", Мої. Іттипої. 29:53-59;
Гипа еї аї. (1991) "Нитап Ес Сатта ВІ Апа Ес Сатта ВІЇ! Іпіегасі М/Н Оівіїпсі Виї Омепарріпд
Зпйез Оп Нитап Ідаг", у. Іттипої. 147:2657-2662; Юипсап, А.В. єї а!. (1988) "І осаїї2анйоп ОЇ Те
Віпаіпд 5йе Рог Те Нитап Нідп-Айіпіу Ес Весеріог Оп Іда", Маїшге 332:563-564; патентах США
МоМо5624821; 5885573; 6194551; 7276586; і 7317091; і РСТ публікаціях УМО 00/42072 і РСТ УМО 99/58572.
І0О0215) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу молекули згідно з даним винаходом додатково містять один або більше сайтів глікозилювання так, що один або більше вуглеводних фрагментів ковалентно приєднані до молекули. Переважно молекули згідно з даним винаходом, що містять один або більше сайтів глікозилювання й/або одну або більше модифікацій в області Ес, забезпечують або мають підвищену ефекторну функцію, опосередковану антитілом, наприклад, підвищеною активністю АЗКЦ, у порівнянні з немодифікованим антитілом. Згідно 3з деякими варіантами реалізації даного винаходу запропоновані молекули, що містять одну або більше модифікацій амінокислот, які, як відомо, безпосередньо або побічно взаємодіють з вуглеводним фрагментом області Ес, включаючи, але не обмежуючись ними, амінокислоти у положеннях 241, 243, 244, 245, 245, 249, 256, 258, 260, 262, 264, 265, 296, 299 і 301. Амінокислоти, які прямо або побічно взаємодіють з вуглеводним фрагментом області Ес, відомі в даній області техніки, див., наприклад, удейегів єї аї., 1995
Іттипо!іоду І ебегв, 44: 111-7, яка повністю включена у дану заявку за допомогою посилання. (00216) Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу запропоновані молекули, які були модифіковані шляхом уведення одного або більше сайтів глікозилювання в один або
Зо більше сайтів молекул, переважно без зміни функціональності молекул, наприклад, активності зв'язування з антигеном-мішенню або ЕсукК. Сайти глікозилювання можуть бути введені у варіабельну та/або константну область молекул згідно з даним винаходом. У даній заявці термін "сайти глікозилювання" включає будь-яку конкретну амінокислотну послідовність в антитілі, до якої буде специфічно або ковалентно прикріплений олігосахарид (тобто, вуглеводи, що містять два або більше простих цукри, з'єднаних разом). Олігосахаридні бічні ланцюги, як правило, приєднані до кістяка антитіла за допомогою М- або О-зв'язків. М-зв'язане глікозилювання відноситься до приєднання олігосахаридного фрагмента до бічного ланцюга залишку аспарагіну. О-зв'язане глікозилювання відноситься до приєднання олігосахаридного фрагмента до гідроксіамінокислоти, наприклад, серину, треоніну. Молекули згідно з даним винаходом можуть містити один або більше сайтів глікозилювання, включаючи М-зв'язані та О- зв'язані сайти глікозилювання. Будь-який сайт глікозилювання для М-зв'язаного або О- зв'язаного глікозилювання, відомий в даній області техніки, може бути використаний відповідно до даного винаходу. Зразковий М-зв'язаний сайт глікозилювання, який можна застосовувати згідно зі способами згідно з даним винаходом, являє собою амінокислотну послідовність: Авп-Х-
Тиг/зег, у якій Х може являти собою будь-яку амінокислоту, і Тиг/5ег означає треонін або серин.
Підходящий сайт або сайти можуть бути введені в молекулу згідно з даним винаходом із використанням способів, добре відомих в даній області техніки, до якої відноситься даний винахід (див., наприклад, іп міо МИОТАСЕМЕ5І5, ВЕСОМВІМАМТ ОМА: А БНОВТ СОИШВЗЕ, у. ОЮ. УМаївоп, еї а. М.Н. Ргеетап апа Сотрапу, Мем МогКк, 1983, спарієг 8, рр. 106-116, яка повністю включена у дану заявку за допомогою посилання. Зразковий спосіб уведення сайту глікозилювання в молекулу згідно з даним винаходом може включати: модифікацію або мутовання амінокислотної послідовності молекули так, щоб одержати бажану послідовність Абп-Х- Гиг/56г.
І00217| Згідно з деякими варіантами реалізації згідно з даним винаходом запропоновані способи модифікації вмісту вуглеводів у молекулі згідно з даним винаходом шляхом додавання або видалення сайту глікозилювання. Способи модифікації вмісту вуглеводів в антитілах (і молекулах, що містять домени антитіл, наприклад, область Ес) добре відомі в даній області техніки і включені в область даного винаходу, див., наприклад, патент США Моб218149; ЕР 0359096 В1; публікацію патенту США 05 2002/0028486; УМО 03/035835; публікацію патенту США 2003/0115614; патент США Моб218149; патент США Моб472511; всі з яких повністю включені у 60 дану заявку за допомогою посилання. Згідно з іншими варіантами реалізації згідно з даним винаходом запропоновані способи модифікації вмісту вуглеводів у молекулі згідно з даним винаходом шляхом видалення одного або більше ендогенних вуглеводних фрагментів молекули. Згідно з конкретним варіантом реалізації згідно з даним винаходом запропонований зсув сайту глікозилювання області Ес антитіла шляхом модифікації положень, суміжних із 297.
Згідно з конкретним варіантом реалізації згідно з даним винаходом запропонована модифікація положення 296 так, що положення 296, але не положення 297, є глікозилованим. (00218) Ефекторна функція також може бути модифікована за допомогою методик, таких як уведення одного або більше залишків цистеїну в область Ес, забезпечуючи тим самим можливість утворення міжланцюгового дисульфідного зв'язку в зазначеній області з одержанням гомодимерного антитіла, яке може мати поліпшену здатність до інтерналізації та/або підвищену комплемент-залежну цитотоксичність й АЗКЦ (Сагоп, Р.бС. єї аї. (1992) "Епдіпеетей Нитапігед Оітегпс Ропт5 ОЇ дб»: Аге Моге ЕпПесіїме Апііродіев", ). Ехр. Меа. 176:1191-1195; ЗНорез, В. (1992) "А Сепеїїсау Епдіпеетеа Нитап ДС; Миїапі МУйН Епнапсей
Суоїуїйс Асіїмйу" У. Іттипої. 148(9):2918-2922. Гомодимерні антитіла з підвищеною протипухлинною активністю також можуть бути отримані з використанням гетеробіфункціональних зшиваючих агентів, описаних у УМОЇН, Е.А. єї аїЇ. (1993) "Мопосіопаї!
Апіїбоду Нотодітегв: Епнапсей Апійитог Асіїміу Іп Миде Місе", Сапсег Везвєагсп 53:2560-2565.
В іншому варіанті, антитіло може бути модифіковано для включення двох областей Ес і, відповідно, може мати підвищену активність комплемент-опосередкованої цитотоксичності й
АЗКЦ (5іємепзоп, О.Т. єї аі. (1989) "А Спітегіс Апіїбоду МН Опаї! Ес Ведіопз (різРабкнс) Ргерагєйд
Ву Мапіршіаїйопз Аї Тне Іда Ніпде", Апії-Сапсег Огид Оевідп 3:219-230) (00219) Період напіввиведення із сироватки крові молекул згідно з даним винаходом, що містять області Ес, може бути збільшений за рахунок збільшення афінності зв'язування області
Ес у відношенні ЕсКп. У даній заявці термін "період напіввиведення" означає фармакокінетичну властивість молекули, яка є мірою середнього часу існування молекул після їх введення. Період напіввиведення може бути виражений як час, необхідний для виведення п'ятдесяти відсотків (5095) відомої кількості молекули з організму суб'єкта (наприклад, пацієнта-людини або іншого ссавця) або конкретного компартмента його організму, наприклад, при вимірюванні в сироватці крові, тобто, період напіввиведення з кровотоку, або в інших тканинах. У цілому, збільшення
Зо періоду напіввиведення призводить до збільшення середнього часу втримання (МКТ) у кровотоці для введеної молекули. (00220 Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, причому зазначений варіант області Ес містить щонайменше одну модифікацію амінокислоти, у порівнянні з областю Ес дикого типу, так, що зазначена молекула має збільшений період напіввиведення (у порівнянні з областю Ес дикого типу). (00221) Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом містять варіант області Ес, причому зазначений варіант області Ес містить заміну амінокислоти, яка збільшує період напіввиведення, в одному або більше положеннях, вибраних із групи, що складається з 238, 250, 252, 254, 256, 257, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 308, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424, 428, 433, 434, 435 і 436. Численні специфічні мутації, здатні збільшувати період напіввиведення молекули, що містить область Ес, відомі в даній області техніки і включають, наприклад, М252У, 5254Т, Т256Е та їх комбінації. Наприклад, див. мутації, описані у патентах США МоМоб6277375, 7083784; 7217797, 8088376; публікації заявок на патент США 2002/0147311; 2007/0148164; і міжнародні публікації УМО 98/23289; УМО 2009/058492; і МО 2010/033279, які повністю включені у дану заявку за допомогою посилання. Молекули, що містять область Ес, зі збільшеним періодом напіввиведення також включають ті, які містять заміни у двох або більше залишках області Ес 250,252, 254, 256, 257, 288, 307, 308, 309, 311, 378, 428, 433, 434, 435 і 436. Зокрема, зазначені
БО молекули містять дві або більше замін, вибраних із: Т2500, М252Уу, 5254Т, Т256Е, К2г880,
Т3070, МЗО8Р, АЗ78МУ, М4281,, М434А, Н4ІЗ5К і 4361. (002221 Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу варіант області Ес містить заміни: (А) М252У, 52541 і Т256Е; (В) М252У і 52547; (С) М252У і Т256Е; (0) 12500 і М4281'; (Е) 13070 і МАЗ4А; (Є) АЗ378М і МАЗ4А; 60 (с) М4З4А і 4361;
(Н) М3О8Р і М434А; або (І) К2880 і НАЗ5К. 00223) В область даного винаходу додатково включені варіанти областей Ес, які містять: (А) одну або більше мутацій, які змінюють ефекторну функцію та/або Есук; й (В) одну або більше мутацій, які збільшують період напіввиведення із сироватки крові.
МІ Біспецифічні молекули, що зв'язують РО-1 людини (00224) Відповідно до одного варіанта реалізації згідно з даним винаходом запропоновані біспецифічні сполучні молекули, які здатні зв'язуватися з "першим епітопом" і "другим епітопом", причому зазначений перший епітоп являє собою епітоп РО-1 людини, і зазначений другий епітоп аналогічний або відрізняється від епітопу РО-1, або являє собою епітоп іншої молекули, який є присутнім на поверхні імунної клітини (такий як Т-лімфоцит) і бере участь у регулюванні контрольної точки імунної відповіді. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу другий епітоп являє собою епітоп В7-НЗ, В7-Н4, ВТ А, СО3, СО8, С016, С027, 0032, С040,
Ср401ї, 0047, 6064, 2070, СО080, С086, 2094, 20137, 201371, С0226, СТІ А-4, галектину-9,
СІТА, СІТАЇ, ННІ А2, ІСОБ5, ІСОБІ, КІВ, ГАС-3, ПІСНТ, ГКГС класу І або ІІ, МКО2а, МКО2а,
ОХ40, ОХ40І, РОН, РО-1, РО-І1, РО-І2, РМА, 5ігра, ТСВ, ТІСІТ, ТІМ-3 або МІЗТА. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу другий епітоп не є епітопом РО-1. Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу другий епітоп являє собою СО137, СТІ А-4,
ІГАС-3, ОХ40, ТІСІТ або ТІМ-3. Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу біспецифічна молекула містить більше двох сайтів зв'язування епітопів. Зазначені біспецифічні молекули можуть зв'язувати два або більше різних епітопів ГАС-3 і щонайменше один епітоп молекули, яка відмінна від ГАС-3.
І00225| В область даного винаходу включені біспецифічні антитіла, здатні одночасно зв'язуватися з РО-1 і другим епітопом (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТ А, С040, СО80, СО86,
СО137, СТІ А-4, ІСОБ5, КІВ, І АС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І1, ТОВ, ТІМ-3 і т.п.). Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу біспецифічне антитіло, здатне одночасно зв'язуватися з РО-1 і другим епітопом, одержують з використанням будь-якого зі способів, описаних у РСТ публікаціях М/О 1998/002463, М/О 2005/070966, МО 2006/107786 МО 2007/024715, МО 2007/075270, МО 2006/107617, МО 2007/046893, МО 2007/146968, МО
Зо 2008/003103, МО 2008/003116, МО 2008/027236, МО 2008/024188, МО 2009/132876, МО 2009/018386, УМО 2010/028797, МО2010028796, МО 2010/028795, МО 2010/108127, МО 2010/136172, МО 2011/086091, М/О 2011/133886, МО 2012/009544, МО 2013/003652, МО 2013/070565, УМО 2012/1162583, ММО 2012/156430, МО 2013/174873 і УМО 2014/022540, кожна з яких повністю включена у дану заявку за допомогою посилання.
А Біспецифічні діатіла, що не містять області Ес (00226) Відповідно до одного варіанта реалізації згідно з даним винаходом запропоновані біспецифічні діатіла, які містять, і найбільше переважно складаються з них, перший поліпептидний ланцюг і другий поліпептидний ланцюг, послідовності яких забезпечують ковалентне зв'язування зазначених поліпептидних ланцюгів один з одним з утворенням ковалентно зв'язаного діатіла, яке здатне одночасно зв'язуватися з першим епітопом і другим епітопом, причому зазначені епітопи не ідентичні один одному. Відповідно, зазначені біспецифічні діатіла містять домени "МІ 1"7/"МНІ1", які здатні зв'язуватися з першим епітопом, і домени "М 2"/"УНа2г", які здатні зв'язуватися з другим епітопом. Позначення "МІ 1" ї "МН1" означає, відповідно, варіабельний домен легкого ланцюга та варіабельний домен важкого ланцюга, які зв'язуються з "першим" епітопом, зазначеного біспецифічного діатіла. Аналогічним чином, позначення "Мі 2" і "МН2г" означає, відповідно, варіабельний домен легкого ланцюга та варіабельний домен важкого ланцюга, які зв'язуються з "другим" епітопом, зазначеного біспецифічного діатіла. Незалежно від того, чи позначений конкретний епітоп як перший та другий епітоп; таке позначення має відношення тільки до присутності й орієнтації доменів поліпептидних ланцюгів сполучних молекул згідно з даним винаходом. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу один із зазначених епітопів являє собою епітоп РО-1, й інший із зазначених епітопів не є епітопом РО-1 (наприклад, епітоп В7-НЗ, В7-Н4, ВТІ А, 2040,
Сорв8о, С086, СО137, СТІ А-4, ІСО5, КІВ, І АС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І 1, ТОВ, ТІМ-З і т.п.).
І00227|Домен МІ першого поліпептидного ланцюга взаємодіє з доменом МН другого поліпептидного ланцюга з утворенням першого функціонального антигенсполучного сайту, який специфічний відносно першого антигена (тобто РО-1 або антигена, який містить другий епітоп).
Аналогічним чином, домен МІ другого поліпептидного ланцюга взаємодіє з доменом УН першого поліпептидного ланцюга з утворенням другого функціонального антигенсполучного бо сайту, який специфічний відносно другого антигена (тобто, антигена, який містить другий епітоп,
або РО-1). Отже, вибір доменів МІ і МН першого та другого поліпептидних ланцюгів скоординований так, що два поліпептидні ланцюги діатіла в сукупності містять домени МІ. і МН, здатні зв'язуватися як з епітопом РО-1, так і з другим епітопом (тобто вони містять Мі вго-1/МНрео-: і
МІ2/МН2, де РО-1 являє собою "перший" епітоп, або МІ 1/Л/НІ1 ії Мі го-1/МНео-ї, де РО-1 являє собою "другий" епітоп). (00228) Перший поліпептидний ланцюг варіанта реалізації зазначених біспецифічних діатіл містить, у напрямку від М-кінця до С-кінця, М-кінець, домен МІ1 моноклонального антитіла, здатний зв'язуватися з першим або другим епітопом (тобто, Мі го- або Мі епітоп г), перший проміжний спейсерний пептид (лінкер 1), домен МН2 моноклонального антитіла, здатний зв'язуватися з другим епітопом (якщо зазначений перший поліпептидний ланцюг містить Мі рго-1) або першим епітопом (якщо зазначений перший поліпептидний ланцюг містить Мі епітопг), Другий проміжний спейсерний пептид (лінкер 2), що необов'язково містить залишок цистеїну, домен, що сприяє утворенню гетеродимера, і С-кінець (Фігура 1). (002291) Другий поліпептидний ланцюг зазначеного варіанта реалізації біспецифічних діатіл містить, у напрямку від М-кінця до С-кінця, М-Кінець, домен МІ 2 моноклонального антитіла, здатний зв'язуватися з РО-1 або другим епітопом (тобто, Мі го-ї або Мі епітоп 2, і при цьому зазначений домен МІ. не є підходящим для включення у перший поліпептидний ланцюг діатіла), проміжний лінкерний пептид (лінкер 71), домен МНІ моноклонального антитіла, здатний зв'язуватися з другим епітопом (якщо зазначений другий поліпептидний ланцюг містить Мі ро-1) або РО-1 (якщо зазначений другий поліпептидний ланцюг містить Мі епітопг), другий проміжний спейсерний пептид (лінкер 2), що необов'язково містить залишок цистеїну, домен, що сприяє утворенню гетеродимера, і С-кінець (Фігура 1). 00230) Найбільше переважно довжина проміжного лінкерного пептиду (наприклад, лінкера 1), який розділяє зазначені домени Мі і МН, вибрана так, щоб по суті або повністю перешкоджати зв'язуванню доменів МІ. і МН поліпептидного ланцюга один з одним. Відповідно, домени МІ ї МН першого поліпептидного ланцюга по суті або повністю нездатні зв'язуватися один з одним. Аналогічним чином, домени МІ. і МН другого поліпептидного ланцюга по суті або повністю нездатні зв'язуватися один з одним. Переважний проміжний спейсерний пептид (лінкер 1) містить послідовність, представлену в (ЗЕО ІЮ МО: 14): ОСО5ОСОО.
Зо І00231| Довжина та склад другого проміжного лінкерного пептиду (лінкера 2) вибрані на підставі вибору доменів, що стимулюють утворення гетеродимера. Як правило, другий проміжний лінкерний пептид (лінкер 2) буде містити 3-20 залишків амінокислот. Зокрема, якщо домени, що сприяють утворенню гетеродимера, не містять залишок цистеїну, використовують другий проміжний лінкерний пептид, що містить цистеїн (лінкер 2). Другий проміжний лінкерний пептид, що містить цистеїн (лінкер 2), буде містити 1, 2, З або більше залишків цистеїну.
Переважний цистеїновмісний спейсерний пептид (лінкер 2) містить послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮ МО: 15: особ. В іншому варіанті, лінкер 2 не містить цистеїн (наприклад, СС, свав(5ЕОЮ МО: 29), Г асюиава (5ЕО І МО: 261), асазасавасна (5ЕО О МО: 262), АЗТКОа (ЗЕО І МО: 30), ГЕРК55 (ЗЕО ІО МО: 33), АРЗ55 (5ЕО ІО МО: 34), і т.п.), і використовується цистеїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера, описаний нижче. Необов'язково, може бути використаний цистеїновмісний лінкер 2 і цистеїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера. (00232) Домени, що сприяють утворенню гетеродимера, можуть являти собою (5ЕО ІЮ МО: 16) або МЕРК5С (ЗЕО ІО МО: 17), або АЕРКЗС (ЗЕО ІЮ МО: 18) на одному поліпептидному ланцюзі, і ЗЕМАСЕС (5ЕО ІЮ МО: 19) або ЕМКОЕЄС (5ЕО ІЮ МО: 20) на іншому поліпептидному ланцюзі (052007/0004909).
І00233| Більше переважно, однак, домени, що сприяють утворенню гетеродимера, зазначених діатіл утворені одним, двома, трьома або чотирма тандемно повторюваними спіральними доменами протилежного заряду, які містять послідовність з щонайменше шести, щонайменше семи або щонайменше восьми залишків амінокислот, так, що домен, що сприяє утворенню гетеродимера, має загальний заряд (Арозіоіоміс, В. єї а!. (2008) "рРН-5епвйймйу ої Те
ЕЗ/КЗ Неїегодітетгіс Соїїейд Сої", Віотасготоїесціев 9:3173-3180; Атоаї, К.М. еї аї. (2001) "Неїїх- віабіїїгей Ем (н5Ем) Апіїбоду Егадтепів: ЗиБ5ійшіпдуд Ште Сопеїапі Оотаїнз ої а Гар Егадтепі га
Неїегодітетіс Соїед-соїї ботаїп", у. Моїес. Віої. 312:221-228; Атаї, К.М. еї аї. (2002) "Сотрагізоп ої іп мімо ЗеІесіоп апа Раїйопа! Оевзідп ої Неїегодітегпс Сойей Соїїв", Зігисіште 10:1235-1248;
Воиснег, С. єї а!. (2010) "Ргоївїп Оєїесіп Ву УУевзієтп Віої Міа Соїєа-Сої! Іпіегасііопв", Апаїуїїсаї!
Віоспетівігу 399:138-140; Сасніа, Р.). еї а). (2004) "Зупійеїїс Реріїде Массіпе ЮОемеіортепі:
Меазитетепі ОЇ Роїусіопа! Апіїрбоду АНіпйу Апа Сто55-Неасіїмну Овіпуд А Мем Реріїде Саріиге Апа
Веієазе бувієт Рог Зипасе Ріазтоп Везопапсе Зресігозсору", у). Мої. Несодпії. 17:540-557; Ое 60 Стезсепо, С.О. еї аї. (2003) "ВКеаІ-Тіте Мопійогіпа ої Ше Іпівегасіюопе ої Гуо-5ігапдєд де помо
Оезідпей Соїеа-Соїїв: ЕПесі ої Спаіп Гепдій оп Ше Кіпеїїс апа ТПнептодупатіс Сопвіапів ої
Віпаіпа", ВіосПпетівігу 42:1754-1763; Регпапде2-Ноадіід0е72, 9. еї аї. (2012) "Іпаисейд
Неїегодітетгігайоп Апа Ритіїїсайоп ОЇ Тмо Тагодеї Ргоїєїп5 Ву А Зупіпеїйс Соїей-Сої! Тад", Ргоївїп
Зсівпсе 21:511-519; Сови, Т.5. еї а). (2009) "Епа-То-Епа Апа Епа-То-Мідає Іпегпеїісаї
Іптегасіпе: Мем Сіаззевз ОЇ Іпіегасіїпа Неїїх Раїг5 Іп Ргоївіїп бігисіигев", Асіа СтувіаПодгарніса 065:1032-1041; Стідогуап, С. єї аі. (2008) "Біписіига! Зресіїйсну Іп Соїєа-Сої! Іптегасіїопв", Ст.
Оріп. іс. Віої!. 18:477-483; | помувкі, У.В. єї аї. (2002) "Оевідпіпуд Неїегодітетгіс Тмо-5ігапаєй а-
Пеїїса! Сойед-Соїв: Те ЕпПесі5 ОЇ Нуагорпобісйу Апа а-Неїїса! Ргореп5зйу Оп Ргоївїп Роідіпо, зЗіабіїйу, Апа 5ресіїйісйу", у. Віої. Спет. 277:37272-37279; ЗіеіпКгидег, 9.0. еї аї. (2012) "Тне а--а"
Мепіса! Тай із І е55 Оібвстітіпайпд Гнап Пе а--а Мепіса! Тгіай іп Ше Апіїрагаве! Сойеа-сої! Оітег
Мої", у). Атег. Спет. ос. 134(5):2626-2633; 5ігаиззтап, В. еї аї. (2007) "Кіпкіпуд їйПе Соїва Соїї - МедаїїмеІу Спагдей Резідиез аї ШТїе Соїеа-сої! Іпіенасе", У. Моїес. Вісі. 366:1232-1242; Тіреї, В. еї а. (2002) "Кіпеїїс Апаїузів ої їІйе Іпієгасіопе Беїмеєп Тгоропіп С апа Ше С-ї1ептіпа! Тгоропіп
Веашайюгу Недіоп апа Маїїдайоп ої а Мем Реріїде ОеїЇїмегу/Саріцте БЗувзієт изей бог 5ипасе
Ріазтоп ВНезопапсе", ). Моїес. Віо!. 323:345-362; Мооїївоп, О.М. (2005) "Пе Оевзідп ОЇ Сойеа-СоїЇ
Зігисішгез Апа Авзетріїев", Айм. Ргої. Спет. 70:79-112; 7епд, М. еї аї. (2008) "А І/ідапа-
Рзецйдогесеріог Зузієт Вазед Оп де помо Резідпед Реріїде5 Бог Тне Сепегаїйоп Ої Адепомігаї!
Месіогв: Мп Айегей Тгорівт", у). Сх6пе Мед. 10:355-367). 00234) Зазначені повторювані спіральні домени можуть бути точними повторами або можуть містити заміни. Наприклад, спіральний домен із домену, що стимулює утворення гетеродимера, першого поліпептидного ланцюга може містити послідовність з восьми залишків амінокислот, вибрану для надання негативного заряду зазначеному домену, що стимулює утворення гетеродимера, і спіральний домен із домену, що стимулює утворення гетеродимера, другого поліпептидного ланцюга може містити послідовність з восьми залишків амінокислот, відібраних для надання позитивного заряду зазначеному домену, що стимулює утворення гетеродимера. Незалежно від того, яка спіраль передбачена для першого або другого поліпептидних ланцюгів, передбачено, що для іншого поліпептидного ланцюга використовується спіраль протилежного заряду. Позитивно заряджена амінокислота може являти собою лізин, аргінін, гістидин і т.п. і/або негативно заряджена амінокислота може являти
Зо собою глутамінову кислоту, аспарагінову кислоту та т.п. Позитивно заряджена амінокислота переважно являє собою лізин і/або негативно заряджена амінокислота переважно являє собою глутамінову кислоту. Можливе використання тільки одного домену, що стимулює утворення гетеродимера (оскільки зазначений домен буде інгібувати гомодимеризацію та тим самим сприяти гетеродимеризації), однак переважно, щоб перший та другий поліпептидні ланцюги діатіл згідно з даним винаходом містили домени, що сприяють утворенню гетеродимера. (00235) Згідно з переважним варіантом реалізації даного винаходу один із доменів, що стимулюють утворення гетеродимера, буде містити чотири тандемних спіральних домени "Е- спіраль" (ЗЕО ІЮ МО: 21: ЕМААІЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААЇ ЕК-ЕМААЇ ЕК), в яких залишки глутамату будуть надавати негативний заряд при рН-7, у той час як інші домени, що стимулюють утворення гетеродимера, будуть містити чотири тандемних домени "К-спіраль" (5ЕО ІЮ МО: 22:
КМУААЇІ КЕ-КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-КУААЇ КЕ), в яких залишки лізину будуть надавати позитивний заряд при рН-7. Присутність зазначених заряджених доменів сприяє асоціації першого та другого поліпептидів і, відповідно, сприяє утворенню гетеродимера. Особливо переважним є домен, що сприяє утворенню гетеродимера, в якому один із чотирьох тандемних спіральних доменів "Е-спіраль", що містить послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 21, був модифікований для включення залишку цистеїну: ЕМААСЕК-ЕМААІ ЕК-ЕМААЇ ЕК-ЕМААЇ ЕК (5ЕО ІО МО: 23).
Аналогічним чином, особливо переважним є домен, що сприяє утворенню гетеродимера, в якому один із чотирьох тандемних спіральних доменів "К-спіраль", що містить послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 22, був модифікований для включення залишку цистеїну: КМААСКЕ-
КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ (5ЕО ІО МО: 24).
І002Зб|Як розкрито у УМО 2012/018687, для того, щоб поліпшити фармакокінетичні властивості діатіл в умовах іп мімо, діатіло може бути модифіковане, щоб містити поліпептидну частину сироваткового сполучного білка на одному або більше кінцях діатіла. Найбільше переважно зазначена поліпептидна частина сироваткового сполучного білка буде вбудована на
С-кінці діатіла. Альбумін є найпоширенішим білком у плазмі крові та має період напіввиведення 19 днів у людини. Альбумін містить декілька сайтів зв'язування невеликих молекул, які дозволяють йому нековалентно зв'язуватися з іншими білками і тим самим продовжувати їх періоди напіввиведення із сироватки крові. Альбумінсполучний домен З (АВОЗ) білка С штаму
Зігеріососси5 (53148 складається з 46 залишків амінокислот, що утворюють стабільний бо трьохгвинтовий джгут, і має широку альбумінсполучну специфічність (опапезоп, М.О. еї аї.
(2002) "Зігисіиге, Зресіїісйу, Апа Моде ОГ Іпіегасіп Рог Васівтіа! Аіритіп-Віпаїпу Моди!ев", 9.
Віої. Спет. 277(10):8114-8120). Відповідно, особливо переважна поліпептидна частина сироваткового сполучного білка для поліпшення фармакокінетичних властивостей діатіла в умовах іп мімо являє собою альбумінсполучний домен (АВО) зі стрептококового білка с і більше переважно альбумінсполучний домен З (АВОЗ) білка С штаму 5ігеріососси5 ауздаїасіає Сс148 (ЗЕО ІЮ МО: 25): АЕАКМІ АМА ЕГОКМаУБОМ УКМЛОМАКО АЕСУКАПОЕ ІГААЇ Р.
І00237| Як розкрито у УМО 2012/162068 (який включений у дану заявку за допомогою посилання), "деімунізовані" варіанти, що містять послідовність ЗЕО ІО МО: 25, здатні послабляти або усувати зв'язування з ГКГС класу Ії. Виходячи з результатів комбінованих мутацій, наступні комбінації замін розглядають як переважні заміни для одержання зазначеного деімунізованого АВО: 66б0/705 -71А; 6655/7705 -71А; 665/705 -79А; б4А/65А//1А; 64А/65А/71А-665; 64А/65А/71А-660; 64А/65А/71А-66Е; 64А/65А/79А-665; 64А/65А/79А-660; 64А/65А/79А466Е. Варіанти АВО містять модифікації І 64А, ІбЄ5А і Ш079А або модифікації Меб5, 7705 і 079А. Варіанти деімунізованого АВО, що містить амінокислотну послідовність:
ГАГАКМІАМА ЕГОКУСУЗОМ УКМІ ОвеМАКЗ?о А? ЕСМКАПОЕ ІГААЇГ Р (ЗЕО О МО: 26), або амінокислотну послідовність:
ГАЄАКМІАМА ЕГОКМОаМЗОМ УКМ Зв МАК5?о МЕСУКАГІА?еЕ ІГААЇГ Р (ЗЕО І МО: 27), або амінокислотну послідовність:
ГАЄАКМІАМА ЕГОКМОаМЗОМ УКМ Зв МАК5?о МЕСУКАГІА?еЕ ІГААЇГ Р (ЗЕО І МО: 28), є особливо переважними, оскільки зазначені деіїмунізовані АВО проявляють по суті зв'язування дикого типу, забезпечуючи при цьому ослаблене зв'язування з ГКГС класу І.
Відповідно, перший поліпептидний ланцюг зазначеного діатіла, що містить АВО, містить пептидний лінкер, переважно розташований на С-кінці щодо домену, який містить Е-спіраль (або К-спіраль), зазначеного поліпептидного ланцюга, так, щоб зазначений лінкер перебував між доменом, який містить Е-спіраль (або К-спіраль) й АВО (який переважно являє собою деімунізований АВО). Переважна послідовність для зазначеного лінкерного пептиду являє собою послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮО МО: 29: СССО5.
В Біспецифічні діатіла, що містять області Ес (002381 Відповідно до одного варіанта реалізації згідно з даним винаходом запропоновані
Зо біспецифічні діатіла, що містять область Ес, здатну одночасно зв'язуватися з РО-1 і другим епітопом (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТІ А, 2040, 2080, СО86, СО137, СТІ А-4, ІСО5, КІВ, І да-
З, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-1, РО-І1, ТОВ, ТІМ-3 і т.п.). Додавання домену СН2-СНЗ дО до одного або обох поліпептидних ланцюгів антитіла так, що з'єднання ланцюгів діатіла призводить до утворення області Ес, збільшує біологічний період напіввиведення та/або змінює валентність діатіла. Включення доменів СН2-СНЗ до в обидва поліпептида діатіла забезпечить утворення дволанцюгового біспецифічного діатіла, що містить область Ес (Фігура 2).
І00239| В іншому варіанті, включення доменів СН2-СНЗ Ід тільки в один із поліпептидів діатіла забезпечить утворення більше складного чотириланцюгового біспецифічного діатіла, що містить область Ес (Фігури ЗА-3С). На Фігурі ЗС представлене типове чотириланцюгове діатіло, що містить константний домен легкого ланцюга (СІ) та константний домен важкого ланцюга
СНІ, однак в якості альтернативи можуть бути використані фрагменти зазначених доменів, а також інші поліпептиди (див., наприклад, Фігури ЗА і ЗВ, публікації патентів США 2013-0295121; 2010-0174053 ї 2009-0060910; публікацію європейського патенту ЕР 2714079; ЕР 2601216; ЕР 2376109; ЕР 2158221 їі РСТ публікації УМО 2012/162068; УМО 2012/018687; УМО 2010/080538).
Отже, наприклад, замість домену СНІ можна застосовувати пептид, що містить амінокислотну послідовність ЗМЕРКЗС (5ЕО ІЮО МО: 16), МЕРК5С (5ЕО ІО МО: 17) або АЕРКЗС (5ЕО ІО МО: 18), отриману з шарнірного домену до людини, і замість домену Сі. можна застосовувати 6 С- кінцевих амінокислот легкого каппа-ланцюга людини СЕМКОСЕС (ЗЕО ІЮ МО: 19) або ЕМКОЕС (ЗЕО І МО: 20). Типове чотириланцюгове діатіло, що містить пептид, представлено на Фігурі
ЗА. В іншому варіанті або, на додаток, можна застосовувати пептид, що містить тандемні спіральні домени протилежного заряду, такі як спіральні домени "Е-спіраль" (ЗЕО ІЮ МО: 21:
ЕМААГЕК-ЕМААГЕК-ЕМААІ ЕК-ЕМААГЕК або ЗЕ ІЮ МО: 23: ЕМААСЕК-ЕМААЇ ЕК-ЕМААЇГ ЕК-
ЕМААГ ЕК); і домени "К-спіраль" (ЗЕО ІО МО: 22: КМААІ КЕ-КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ або
ЗБО І МО: 24: КМААСКЕ-КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-КМААІ КЕ). Типовий спіральний домен, що входить до складу чотириланцюгового діатіла, представлений на Фігурі ЗВ. 00240) Молекули діатіл, що містять області Ес, згідно з даним винаходом зазвичай містять додаткові проміжні лінкерні пептиди (лінкери). Як правило, додаткові лінкери будуть містити 3- 20 залишків амінокислот. Додаткові або альтернативні лінкери, які можуть бути використані в молекулах антитіл, що містять область Ес, згідно з даним винаходом, включають: СОС5 (5ЕО 60 ІО МО: 29), Гацспиава (5ЕО ІЮ МО: 261), СсСсЗзОСИаБИасо (5ЕО ІО МО: 262), АЗТКа (5ЕО І
МО: 30), ОКТНТСРРОСР (5ЕО ІО МО: 31), ЕРКЗСОКТНТСРРСОР (ЗЕО ІО МО: 32), І ЕРК55 (5ЕО
ІО МО: 33), АРЗ5З (5ЕО ІЮ МО: 34), й АРЗЗ5РМЕ (5ЕО ІО МО: 35), ГГ ЕРКЗАЮОКТНТСРРСО 5ЕО
ІО МО: 36), БОС і об. 5ЕО ІЮ МО: 33 можна використовувати замість СОС або ОС, щоб полегшити клонування. Крім цього безпосередньо після амінокислот (04:52 або послідовності, представленої у ЗЕО ІЮ МО: 33, може бути розташована послідовність, представлена у ЗЕО ІЮ
МО: 31, з утворенням альтернативних лінкерів: зОООКТНТІСРРСР (ЗЕБО ІЮ МО: 263); і
ГЕРКЗЗОКТНТСРРСР (5ЕО ІЮО МО: 37). Молекула діатіла, що містить область Ес, згідно з даним винаходом може містити шарнірну область до на додаток або замість лінкера. Зразкова шарнірна область містить: ЕРКОСОКТНТСРРСР (ЗЕО ІО МО: 32) з (901, ЕЕКССУМЕСРРСР (ЗЕО ІО МО: 11) з (902, ЕЗКУОРРСРБЗСР (5ЕО ІО МО: 12) з (9054 й ЕЗКУСРРСРРСР (5ЕО ІО
МО: 13) і варіант шарнірної області Ід4, що містить стабілізуючу заміну для зменшення обміну ниток.
І00241| Як показано на Фігурі ЗА-3С, діатіла згідно з даним винаходом можуть містити чотири різні ланцюги. Перший та третій поліпептидні ланцюги зазначеного діатіла містять три домени: (ї) домен, що містить Мі 1, (ії) домен, що містить МУНАа, (ії) домен, що сприяє утворенню гетеродимера, і (ім) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ. Другий та четвертий поліпептидні ланцюги містять: (і) домен, що містить Мі 2, (ії) домен, що містить МН, і (ії) домен, що сприяє утворенню гетеродимера, причому домени, що сприяють утворенню гетеродимера, сприяють димеризації першого/третього поліпептидних ланцюгів із другим/четвертим поліпептидними ланцюгами. Домени Мі і/або МН третього та четвертого поліпептидних ланцюгів, а також домени МІ. і/або МН першого та другого поліпептидних ланцюгів можуть бути однаковими або різними, щоб забезпечити чотиривалентне зв'язування, яке є моноспецифічним, біспецифічним або тетраспецифічним. Позначення "МІ 3" ії "УНЗ" означає, відповідно, варіабельний домен легкого ланцюга та варіабельний домен важкого ланцюга, які зв'язуються з "третім" епітопом, зазначеного діатіла. Аналогічним чином, позначення "Мі 4" і "УнН4" означає, відповідно, варіабельний домен легкого ланцюга та варіабельний домен важкого ланцюга, які зв'язуються з "четвертим" епітопом, зазначеного діатіла. Загальна структура поліпептидних ланцюгів типових чотириланцюгових діатіл, що містять область Ес, згідно з даним винаходом представлена в таблиці 2:
Таблиця 2
Біспецифічне діатіло тетраспецифічне діатіло
НРО - домен, що сприяє утворенню гетеродимера (00242 Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу діатіла згідно з даним винаходом є біспецифічними, чотиривалентними (тобто, містять чотири епітопсполучних сайти),
Ес-вмісними діатілами (Фігури ЗА-3С), які складаються з чотирьох повних поліпептидних ланцюгів. Біспецифічні чотиривалентні діатіла, що містять область Ес, згідно з даним винаходом містять два епітопсполучних сайти, імунологічно специфічних у відношенні РО-1 (які можуть бути здатні зв'язуватися з тим самим епітопом РО-1 або з різними епітопами РО-1), і два епітопсполучних сайти, специфічних у відношенні другого епітопу (наприклад, В7-НЗ, В7-НА,
ВТ А, 6040, 080, С0О86, 20137, СТІ А-4, ІСОБ5, КІВ, І АС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І 1,
ТСВ, ТІМ-3 і т.п.). 002431) Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу біспецифічні діатіла, що містять області Ес, можуть містити три поліпептидні ланцюги. Перший поліпептид зазначеного діатіла містить три домени: (Її) домен, що містить МІ, (її) домен, що містить МНЕа, ії (ії) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ. Другий поліпептид зазначених діатіл містить: (|) домен, що містить МІ 2, (її) домен, що містить МНІ, і (ії) домен, який стимулює гетеродимеризацію й утворення ковалентного зв'язку з першим поліпептидним ланцюгом діатіла. Третій поліпептид зазначених діатіл містить послідовність СН2-СНЗ. Відповідно, перший та другий поліпептидні ланцюги зазначених діатіл зв'язуються один з одним з утворенням сайту зв'язування МІ 1/Л/Н1, 5О0 який здатний зв'язуватися з першим епітопом, а також сайту зв'язування МІ 2//Н2, який здатний зв'язуватися з другим епітопом. Перший та другий поліпептиди зв'язані один з одним за допомогою дисульфідного зв'язку, що включає залишки цистеїну в їх відповідних третіх доменах. Примітно, що перший та третій поліпептидні ланцюги з'єднуються один з одним з утворенням області Ес, яка стабілізується за допомогою дисульфідного зв'язку. Зазначені діатіла мають підвищену ефективність. На Фігурах 4А і 48 представлені структури зазначених діатіл. Зазначені біспецифічні діатіла, що містять область Ес, можуть мати одну з двох орієнтацій (таблиця 3):
Таблиця З
Перша орієнтація
Друга орієнтація
НРО - домен, що сприяє утворенню гетеродимера (00244) Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу діатіла згідно з даним винаходом є біспецифічними, двовалентними (тобто, містять два епітопсполучних сайти), Ес- вмісними діатілами (Фігури 4А-4В), які складаються з трьох повних поліпептидних ланцюгів.
Біспецифічні, двовалентні Ес-вмісні діатіла згідно з даним винаходом містять один сайт зв'язування епітопу, імунологічно специфічний у відношенні РО-1, й один сайт зв'язування епітопу, специфічний у відношенні другого епітопу (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТ А, С040, сСрво, С086, СО137, СТІ А-4, ІСОБ5, КІВ, І АС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І1, ТОВ, ТІМ-3 і т.п.). 002451 Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу біспецифічні діатіла, що містять області Ес, можуть містити в цілому п'ять поліпептидних ланцюгів. Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу два із зазначених п'яти поліпептидних ланцюгів містять однакову амінокислотну послідовність. Перший поліпептидний ланцюг зазначених діатіл містить: () домен, що містить МНІ, (ії) домен, що містить СНІ, ії (ії) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ. Перший поліпептгидний ланцюг може являти собою важкий ланцюг антитіла, який містить УНІ і константну область важкого ланцюга. Другий та п'ятий поліпептидні ланцюги зазначених діатіл містять: (ії) домен, що містить МІ 1, і (ії) домен, що містить СГ. Другий та/або п'ятий поліпептидні ланцюги зазначених діатіл можуть являти собою легкі ланцюги антитіла, яке містить М1, комплементарний МНІ першого/третього поліпептидного ланцюга.
Перший, другий та/або п'ятий поліпептидні ланцюги можуть бути виділені з природних антитіл.
Зо В іншому варіанті, вони можуть бути сконструйовані рекомбінантно. Третій поліпептидний ланцюг зазначених діатіл містить: (і) домен, що містить МНІ, (ії) домен, що містить СНІ, (її) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ, (ім) домен, що містить МІ 2, (м) домен, що містить
МНЗ, ї (м) домен, що сприяє утворенню гетеродимера, причому домени, що сприяють утворенню гетеродимера, сприяють димеризації третього ланцюга з четвертим ланцюгом.
Четвертий поліпептид зазначених діатіл містить: () домен, що містить МІ З, (ії) домен, що містить МНЕ, і (ії) домен, який сприяє гетеродимеризації й утворенню ковалентного зв'язку з третім поліпептидним ланцюгом діатіла. (00246) Відповідно, перший та другий, а також третій та п'ятий, поліпептидні ланцюги зазначених діатіл зв'язуються з утворенням двох сайтів зв'язування МІ1//Н1, здатних зв'язуватися з першим епітопом. Третій та четвертий поліпептидні ланцюги зазначених діатіл зв'язуються з утворенням сайту зв'язування МІ 2//Н2, який здатний зв'язуватися з другим епітопом, а також сайтом зв'язування МІ З/Л/НЗ, який здатний зв'язуватися з третім епітопом.
Перший та третій поліпептиди зв'язуються один з одним за допомогою дисульфідного зв'язку, що включає залишки цистеїну в їх відповідних константних областях. Примітно, що перший та третій поліпептидні ланцюги з'єднуються один з одним з утворенням області Ес. Зазначені діатіла мають підвищену ефективність. На Фігурі 5 представлена структура зазначених діатіл.
Слід розуміти, що домени МІ1Л/НІТ, МІ 2//Н2 ї МЗЛ/НЗ можуть бути однаковими або різними так, щоб забезпечити зв'язування, яке є моноспецифічним, біспецифічним або триспецифічним.
Однак, як зазначено у даному документі, зазначені домени переважно вибрані так, щоб зв'язуватися з РО-1 і другим епітопом (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТ А, С040, СО80, СО86,
СО0137, СТІ А-4, ІСО5, КІВ, І АС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І 1, ТОВ, ТІМ-3 і т.п.).
І00247|Домени Мі і МН поліпептидних ланцюгів вибрані так, щоб утворювати сайти зв'язування МІЛ/Н, специфічні у відношенні бажаного епітопу. Сайти зв'язування МІЛ/Н, утворені при зв'язуванні поліпептидних ланцюгів, можуть бути однаковими або різними, щоб забезпечити тетравалентне зв'язування, яке є моноспецифічним, біспецифічним, триспецифічним або тетраспецифічним. Зокрема, домени У. їі МН можуть бути вибрані так, що біспецифічне антитіло може містити два сайти зв'язування для першого епітопу та два сайти зв'язування для другого епітопу або три сайти зв'язування для першого епітопу й один сайт зв'язування для другого епітопу, або два сайти зв'язування для першого епітопу, один сайт зв'язування для другого епітопу й один сайт зв'язування для третього епітопу (як показано на
Фігурі 5). Загальна структура поліпептидних ланцюгів типових п'ятиланцюгових діатіл, що містять область Ес, представлена в таблиці 4:
Таблиця 4 специфічне діатіло (охо) специфічне діатіло (91) триспецифічне діатіло хх)
НРО - домен, що сприяє утворенню гетеродимера. (002481 Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу діатіла згідно з даним винаходом є біспецифічними чотиривалентними (тобто містять чотири епітопсполучних сайти) діатілами, що містять область Ес, які складаються з п'яти повних поліпептидних ланцюгів, що містять два сайти зв'язування для першого епітопу та два сайти зв'язування для другого епітопу. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу біспецифічні чотиривалентні діатіла, що містять область Ес, згідно з даним винаходом містять два епітопсполучних сайти, імунологічно специфічних у відношенні РО-1 (які можуть бути здатні зв'язуватися з тим самим епітопом РО-1 або з різними епітопами РО-1), і два епітопсполучних сайти, специфічних у відношенні другого епітопу (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТІ А, 2040, 2080, 2086, СО137, СТІ А-4,
ІСО5, КІВ, І АС-3 ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І1, ТСН, ТІМ-3З і т.п.). Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу біспецифічні чотиривалентні діатіла, що містять область Ес, згідно з даним винаходом містять три епітопсполучних сайти, імунологічно специфічних у відношенні
РО-1, які можуть бути здатні зв'язуватися з тим самим епітопом РО-1 або з різними епітопами
РО-1), й один епітопсполучний сайт, специфічний у відношенні другого епітопу (наприклад, В7-
НЗ, В7-Н4, ВТ А, 2040, СбО80, 2086, 20137, СТІ А-4, ІСО5, КІВ, ГГ АС-3 ГКГС класу І або Ії,
Зо ОХ40, РО-І1, ТСВА, ТІМ-3З ії т.п). Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу біспецифічні чотиривалентні діатіла, що містять область Ес, згідно з даним винаходом містять один епітопсполучний сайт, імунологічно специфічний у відношенні РО-1, і три епітопсполучних сайти, специфічних у відношенні другого епітопу (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТІ А, 2040, СО80,
Сбореб, СО0137, СТІ А-4, ІСО5, КІВ, І АС-3 ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-11, ТОВ, ТІМ-3З і т.п.).
С Біспецифічні тривалентні сполучні молекули, що містять області Ес
І00249| Згідно з іншим варіантом реалізації згідно з даним винаходом запропоновані біспецифічні тривалентні сполучні молекули, що містять область Ес, здатні одночасно зв'язуватися з першим епітопом, другим епітопом і третім епітопом, причому щонайменше один із зазначених епітопів не ідентичний іншому. Відповідно, зазначені біспецифічні діатіла містять домени "МІ 177"МНІ", які здатні зв'язуватися з першим епітопом, домени "МІ 2""УНаг", які здатні зв'язуватися з другим епітопом, і домени "МІ 3"/"УНЗ", які здатні зв'язуватися з третім епітопом.
Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу один або два із зазначених епітопів являють собою епітоп РО-1, й інший (або інші) із зазначених епітопів не є епітопом РО-1 (наприклад, епітоп В7-НЗ, В7-Н4, ВТ А, 2040, СО80, С086, 20137, СТІ А-4, ІСОБ, КІВ, І Аа-3,
ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-1, РО-І1, ТСВ, ТІМ-3 і т.п.). Зазначені біспецифічні тривалентні сполучні молекули містять три епітопсполучних сайти, два з яких є сполучними доменами, характерними для діатіл, які забезпечують сайт зв'язування А та сайт зв'язування В, й один із яких є сполучним доменом, не характерним для діатіл, який забезпечує сайт зв'язування С (див., наприклад, Фігури бА-6Е і РСТ заявку: РСТ/О5З15/33081; і РСТ/О515/33076).
І00250| Як правило, тривалентні сполучні молекули згідно з даним винаходом будуть містити чотири різні поліпептидні ланцюги (див. Фігури б6А-6В), однак молекули можуть містити меншу або більшу кількість поліпептидних ланцюгів, наприклад, шляхом гібридизації зазначених поліпептидних ланцюгів один з одним (наприклад, за допомогою пептидного зв'язку) або шляхом розподілу зазначених поліпептидних ланцюгів із утворенням додаткових поліпептидних ланцюгів або шляхом зв'язування меншої кількості або додаткових поліпептидних ланцюгів за допомогою дисульфідних зв'язків. На Фігурах 68-6Є проілюстрований даний аспект даного винаходу шляхом схематичного представлення зазначених молекул, що містять три поліпептидні ланцюги. Як показано на Фігурах бА-6Е, тривалентні сполучні молекули згідно з даним винаходом можуть мати альтернативні орієнтації, в яких сполучні домени, характерні для діатіл, є М-кінцевими (Фігури бА, 6С і 60) або С-кінцевими (Фігури 68, 6Е і 6Е) щодо області Ес.
І00251| Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу перший поліпептидний ланцюг зазначених тривалентних сполучних молекул згідно з даним винаходом містить: (Її) домен, що містить МІ, (її) домен, що містить МН2, (ії) домен, що сприяє утворенню гетеродимера, і (м) домен, що містить послідовність СН2-СНЗ. Домени МІ1 їі МІ 2 будуть розташовані у напрямку М-кінця або С-кінця відносно домену, що містить СН2-СНЗ, як представлено в таблиці 5 (Фігури бА і 68). Другий поліпептидний ланцюг зазначених варіантів реалізації містить: (і) домен, що містить МІ 2, (ії) домен, що містить МНЯІ, і (ії) домен, що сприяє утворенню гетеродимера. Третій поліпептидний ланцюг зазначених варіантів реалізації містить: (Ї) домен, що містить УНЗ, (ії) домен, що містить СНЯІЯ, і (ії) домен, що містить послідовність СН2 -
СНЗ. Третій поліпептидний ланцюг може являти собою важкий ланцюг антитіла, який містить
Зо МНЗ і константну область важкого ланцюга. Четвертий поліпептид зазначених варіантів реалізації містить: () домен, що містить МІЗ, і (ії) домен, що містить Сі. Четвертий поліпептидний ланцюг може являти собою легкий ланцюг антитіла, який містить МІЗ, комплементарний МНЗ третього поліпептидного ланцюга. Третій або четвертий поліпептидні ланцюги можуть бути виділені з природних антитіл. В іншому варіанті, вони можуть бути сконструйовані за допомогою рекомбінантних, синтетичних або інших способів. (00252) Варіабельні домени легкого ланцюга першого та другого поліпептидних ланцюгів відділені від варіабельних доменів важкого ланцюга зазначених поліпептидних ланцюгів проміжним спейсерним лінкером, довжина якого недостатня для з'єднання їх доменів МІ 1//Н2 (або МІ 2//НІ) з утворенням епітопсполучного сайту, здатного зв'язуватися з будь-яким із першого або другого епітопів. Переважний проміжний спейсерний пептид (лінкер 1) для цієї мети містить послідовність, представлену в (ЗЕО ІЮ МО: 14). соОо5050(050. Інші домени тривалентних сполучних молекул можуть бути розділені одним або більше проміжними спейсерними пептидами, що необов'язково містять залишок цистеїну. Зразкові лінкери, придатні для одержання тривалентних сполучних молекул, запропоновані у даному документі та також запропоновані у РСТ заявці: РСТ/О515/33081; і РСТ/О515/33076. Відповідно, перший та другий поліпептидні ланцюги зазначених тривалентних сполучних молекул з'єднуються з утворенням сайту зв'язування МІ 1/Л/НІ, здатного зв'язуватися з першим епітопом, а також сайту зв'язування МІ 2//Н2, який здатний зв'язуватися з другим епітопом. Третій та четвертий поліпептидні ланцюги зазначених тривалентних сполучних молекул з'єднуються з утворенням сайту зв'язування МІ З/Л/НЗ, який здатний зв'язуватися з третім епітопом. Слід розуміти, що домени МІ 1/Л/Н1, МІ 2//Н2 і МІ З//НЗ можуть бути однаковими або різними так, щоб забезпечити зв'язування, яке є моноспецифічним, біспецифічним або триспецифічним. (00253) Як описано вище, тривалентні сполучні молекули згідно з даним винаходом можуть містити три поліпептиди. Тривалентні сполучні молекули, що містять три поліпептидні ланцюги, можуть бути отримані шляхом приєднання доменів четвертого поліпептиду до М-кінця МНЗ- вмісного домену третього поліпептиду. В іншому варіанті, використовується третій поліпептидний ланцюг тривалентної сполучної молекули згідно з даним винаходом, що містить наступні три домени: (і) домен, що містить МІ-3З, (її) домен, що містить МНУ, ії (ії) домен, що містить СН2-СНЗ, причому МІЗ ї МНЗ відділені один від одного проміжним спейсерним 60 пептидом, який є досить довгим (містить щонайменше 9 або більше амінокислотних залишків),
щоб забезпечити можливість з'єднання зазначених доменів з утворенням епітопсполучного сайту. (002541 Слід розуміти, що домени МІ 1/Л/НІ1, МІ 2//Н2 ії МІ ЗЛ/НЗ можуть бути однаковими або різними так, щоб забезпечити зв'язування, яке є моноспецифічним, біспецифічним або триспецифічним. Однак у даному документі зазначені домени переважно вибрані так, щоб зв'язуватися з РО-1 і другим епітопом (або другим і третім епітопом) (переважно зазначені епітопи являють собою епітопи В7-НЗ, В7-Н4, ВТІ А, 2040, 2080, 2086, СО137, СТІ А-4, ІСО5,
КІВ, ГАИ-3 ГКГС класу І або Ії, ОХ40, РО-І1, ТОВ, ТІМ-3 і т.п.).
І00255| Зокрема, домени МІ і МН можуть бути вибрані так, що тривалентна сполучна молекула містить два сайти зв'язування для першого епітопу й один сайт зв'язування для другого епітопу або один сайт зв'язування для першого епітопу та два сайти зв'язування для другого епітопу, або один сайт зв'язування для першого епітопу, один сайт зв'язування для другого епітопу й один сайт зв'язування для третього епітопу. Загальна структура поліпептидних ланцюгів типових тривалентних сполучних молекул згідно з даним винаходом представлена на
Фігурах бА-6БЕ і в таблиці 5:
Таблиця 5
Чотири ланцюги 1 орієнтація
Чотири ланцюги 2 орієнтація три ланцюти орієнтація три ланцюти о орієнтація
НРО - домен, що сприяє утворенню гетеродимера. (00256) Відповідно до одного варіанта реалізації згідно з даним винаходом запропоновані біспецифічні тривалентні сполучні молекули, які містять два епітопсполучних сайти для РО-1 й один епітопсполучний сайт для другого епітопу, присутнього на молекулі, відмінній від РО-1 (наприклад, В7-НЗ, В7-Н4, ВТ А, 2040, 2080, 2086, 20137, СТІ А-4, ІСО5, КІВ, ГАС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І1, ТОВ, ТІМ-3 і т.п.). Два епітопсполучних сайти для РО-1 можуть зв'язуватися з одним і тим самим епітопом або різними епітопами. Згідно з іншим варіантом реалізації згідно з даним винаходом запропоновані біспецифічні тривалентні сполучні молекули, які містять один епітопсполучний сайт для РО-1 і два епітопсполучних сайти, які зв'язуються з другим антигеном, що присутній на молекулі, відмінній від РО-1 (наприклад, В7-НЗ, В7-НА,
ВТ А, 6040, 080, С0О86, 20137, СТІ А-4, ІСОБ5, КІВ, І АС-3, ГКГС класу І або ІІ, ОХ40, РО-І 1,
ТСВ, ТІМ-3 і т.п.). Два епітопсполучних сайти для другого антигена можуть зв'язуватися з одним і тим самим епітопом або різними епітопами антигена (наприклад, з однаковими або різними
Зо епітопами ГАС-3). Як зазначено вище, зазначені біспецифічні тривалентні сполучні молекули можуть містити три або чотири поліпептидні ланцюги.
МІЇ Константні домени й області Ес
І00257| Згідно з даним винаходом запропоновані константні домени антитіла, які можна застосовувати в одержанні РО-1-сполучних молекул (наприклад, антитіл, діатіл, тривалентних сполучних молекул і т.п.) згідно з даним винаходом. 00258) Переважний домен Сі являє собою домен Сі легкого каппа-ланцюга ДС людини.
Амінокислотна послідовність зразкового домену Сі. легкого каппа-ланцюга людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 8):
ВАВТУААРБУРІ ЕРРБОЕОЇ К5 аТАБУМСІЇ М МЕМРАЕАКМО МУКМОМАГОБОа МБОЕЗМУТЕОЮ
ЗКОБ5ТУБІ 55 ТІ ТІ ЗКАЮОМЕ КНКУМАСЕМТ НОСІ 55РУТК 5БЕМАИаЕС (00259) В іншому варіанті зразковий домен Сі являє собою домен Сі лямбда-ланцюга дО людини. Амінокислотна послідовність зразкового домену СІ лямбда-ланцюга людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 9):
ОРКААРБМТІ ЕРРО5БЕБЕГ ОА МКАТІ МСІІ5 ОБГМРОАМТМА МУКАОБЗОРУКА ОМЕТТРОКОБ
ММКМААББОМІ БІ ТРЕОМУК5ОН АЗ5УЗСОМТНЕ ОЗ5ТМЕКТМАР
ТЕС5 (002601) Згідно з даним винаходом РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можуть містити область Ес. Область Ес зазначених молекул згідно з даним винаходом може бути будь- якого ізотипу (наприклад, Ідс1, Ідс2, ІдОЗ або Ідс4). РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можуть додатково містити домен СНІ і/або шарнірну область. Якщо домен СНІ і/або шарнірна область присутні в зазначених молекулах, то вони можуть бути будь-якого ізотипу (наприклад, ІДдДС1, Ідс2, ІдСЗ або Ід054) і переважно мають той самий ізотип, що і бажана область Ес.
І00261| Зразковий домен СНІ являє собою домен СНІ ІдСї людини. Амінокислотна послідовність зразкового домену СНІ ІдДе1 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕОІЮ МО: 10):
АБТКОРОМЕР ГАРББО5КОТ5О СТААГОСІ МК ОМЕРЕРМТУ5 ММА Т5ОаМ НТЕРАМІ О55
СІ М5І 55ММТ МРБУББІ аТОТ МІСМУМНКРО МТКУОКАМ
І00262| Зразковий домен СНІ являє собою домен СНІ Ідб2 людини. Амінокислотна послідовність зразкового домену СНІ ІдД052 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 257):
АБТКОРОМЕР ГАРСБЗАБТОЕ 5ТААГ ОСІ МК ОМЕРЕРМТМ5 МУМ5ОСАІГТ5ОаМ НТЕРАМІ О55
СІ М5І 55ММТ УРОБМЕИаТОТ УТСОММОНКРЗ МТКМОКТМУ
І00263| Зразковий домен СНІ являє собою домен СНІ ІдДб4 людини. Амінокислотна послідовність зразкового домену СНІ ІдД054 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 254):
АБТКОРОМЕР ГАРСБЗАБТОЕ 5ТААГ ОСІ МК ОМЕРЕРМТМ5 МУМ5ОСАІГТ5ОаМ НТЕРАМІ О55
СІ М5І 55ММТ МРОББІ аТКкТ УТОММОонНкКРЗ МТКМОКАМ
І00264| Одна зразкова шарнірна область являє собою шарнірну область ЇдДсСї людини.
Амінокислотна послідовність зразкової шарнірної області ІдсС! людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 32): ЕРКОСОКТНТСРРОР.
Зо І00265| Інша зразкова шарнірна область являє собою шарнірну область Їдс2 людини.
Амінокислотна послідовність зразкової шарнірної області ІдсС2 людини являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 11): ЕВКССУМЕСРРОР.
І00266| Інша зразкова шарнірна область являє собою шарнірну область ІД54 людини.
Амінокислотна послідовність зразкової шарнірної області ІдсС4 людини являє собою послідовність наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 12): ЕЗКМОРРОРБОСР. Як описано у даному документі, шарнірна область Ідс54 може містити стабілізуючу мутацію, таку як заміна 5228Р.
Амінокислотна послідовність типової стабілізованої шарнірної області ІдС4 являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 13): ЕБЕКУОРРСОРРСР.
І00267| Область Ес молекул, що містять область Ес (наприклад, антитіл, діатіл і тривалентних молекул), згідно з даним винаходом може являти собою повну область Ес (наприклад, повну область Ес Ідс) або тільки фрагмент області Ес. Необов'язково, область Ес молекул, що містять область Ес, згідно з даним винаходом не має С-кінцевого амінокислотного залишку лізину. Зокрема, область Ес молекул, що містять область Ес, згідно з даним винаходом може являти собою модифікований варіант області Ес. Незважаючи на те, що область Ес біспецифічних молекул, що містять області Ес, згідно з даним винаходом може бути здатна зв'язуватися з одним або більше рецепторами Ес (наприклад, Есук), більше переважно зазначений варіант області Ес має змінені характеристики зв'язування з ЕСуУКІА (СО64), ЕсукПА (СО32А), ЕсукІІвВ (СО328), ЕсукША (СО1ба) або ЕсукПпІвВ (СО16Б5) (щодо зв'язування, що проявляється областю Ес дикого типу) або буде мати суттєво знижену або відсутню здатність зв'язуватися з інгібуючим рецептором. Відповідно, область Ес молекул, що містять область Ес, згідно з даним винаходом може містити деякі або всі домени СНІ і/або деякі або всі домени
СНЗ повної області Ес або може містити варіант послідовності СН2 і/або варіант послідовності
СНЗ (який може містити, наприклад, одну або більше вставок й/або одну або більше делецій стосовно доменів СН2 або СНЗ повної області Ес). Зазначені області Ес можуть містити ділянки поліпептиду, відмінні від області Ес, або можуть містити частини областей Ес, які у природних умовах не є повними, або можуть містити неприродні орієнтації доменів СН2 і/або СНЗ (такі як, наприклад, два домени СН2 або два домени СНЗ, або, у напрямку від М-кінця до С-кінця, домен
СНУ, з'єднаний з доменом СНУЕ, і т.п.). (00268) Модифікації області Ес, ідентифіковані як змінюючі ефекторну функцію, відомі в бо даній області техніки, включаючи модифікації, які збільшують зв'язування з активуючими рецепторами (наприклад, ЕСУРІА (СО16А) і зменшують зв'язування з інгібуючими рецепторами (наприклад, ЕсукіІІВ (СО32В) (див., наприклад, біахепнадеп, -.В. єї аї!. (2007) "Ес Оріітігайноп ОЇ
Тпегарешііс Апіїродієє Еппапсез ТПеїг АБійу То Кії Титог Сеїїє іп міго Апа Сопігоїв Титог
Ехрапвіоп іп мімо Міа Гом/-АНіппу Асіїмайпуд Есдатта Ресеріогвг", Сапсег Вев. 57(18):8882-8890).
Зразкові варіанти областей Ес ІдСї1ї людини зі зниженим зв'язуванням із СО32В і/або підвищеним зв'язуванням із СЮОТ6А містять заміни Б243І, В292Р, М3001, М305І або Р2961.
Зазначені заміни амінокислот можуть бути присутніми в області Ес ЇДС1 людини у будь-якій комбінації або додатковій комбінації. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу варіант області Ес ЇдДое1 людини містить заміну Е243І, К292Р і Уз0О01. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу варіант області Ес ЇдДс1 людини містить заміну Е243І, В292Р, УЗО0І,
МЗО5І і Р2961І..
І00269| Зокрема, переважно області Ес поліпептидних ланцюгів молекул, що містять область Ес, згідно з даним винаходом проявляють зменшене (або по суті відсутнє) зв'язування з
ЕсуйіІА (СО64), ЕсуКПА (СО32А), ЕсукІІВ (СО32В), ЕсукША (СО16а) або ЕсукПІВ (СО166Б) (щодо зв'язування, що проявляється областю Ес Ідс1 дикого типу (ЗЕО ІЮО МО: 1). Варіанти областей
Ес і мутовані форми, здатні опосередковувати таке змінене зв'язування, описані вище. Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу молекули, що містять області Ес, згідно з даним винаходом містять область Ес дО, яка проявляє знижену ефекторну функцію АЗКЦ.
Згідно з переважним варіантом реалізації даного винаходу домен СН2-СНЗ першого та/або третього поліпептидних ланцюгів зазначених молекул, що містять область Ес, містить будь-яку 1, 2 або З заміни: І 234А, І235А, М2970 і М2970. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу варіант області Ес Ід людини містить заміну М2970, заміну М2970, заміни 1234А і
Ї235А або заміну 0265А, оскільки ці мутації усувають зв'язування з ЕСК. В іншому варіанті використовують домен СН2-СНЗ області Ес, який за своєю природою проявляє зменшене (або по суті відсутнє) зв'язування з ЕсуУКША (СО1ба) і/або знижену ефекторну функцію (щодо зв'язування, що проявляється областю Ес ІдС1 дикого типу (ЗЕО ІЮО МО: 1)). Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу молекули, що містять області Ес, згідно з даним винаходом містять область Ес Ідш2 (ЗЕО ІО МО: 2) або область Ес Іде4 (ЗЕО ІЮО МО: 4). При використанні області Ес Ід54 в область даного винаходу включене введення стабілізуючої
Зо мутації, такої як заміна 5228Р в шарнірній області, описаній вище (див., наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 13). Оскільки заміни М2970, М2970), І 234А, І 235А і 0265А усувають ефекторну функцію, у тих випадках, коли бажаною є ефекторна функція, зазначені заміни переважно не будуть використані.
І00270| Зокрема, переважно області Ес поліпептидних ланцюгів молекул, що містять область Ес, згідно з даним винаходом проявляють збільшений період напіввиведення із сироватки крові (щодо періоду напіввиведення, що проявляється відповідною Ес дикого типу).
Варіанти області Ес і мутовані форми, що мають збільшений період напіввиведення із сироватки крові, описані вище. Згідно з переважним варіантом реалізації даного винаходу домен СН2-СНЗ першого та/або третього поліпептидних ланцюгів зазначених молекул, що містять область Ес, містить будь-яку 1, 2 або З із замін: М252У, 52541 і Т256Е. В область даного винаходу також включені молекули, що містять область Ес, згідно з даним винаходом, що містять варіанти області Ес, які містять: (А) одну або більше мутацій, які змінюють ефекторну функцію та/або Есук; і (В) одну або більше мутацій, які збільшують період напіввиведення із сироватки крові.
І00271| Переважна послідовність ЇДО1 для доменів СН2 і СНЗ молекул, що містять область
Ес, згідно з даним винаходом буде містити заміни І 234А/ 235А/М252у/52541/1256Е (5ЕО Ір
МО: 258):
АРЕААСОРОМ РІ ЕРРКРКОТ ІМІТВЕРЕМТ СУУМОУЗНЕЮ РЕМКЕММУМУр СМЕМНМАКТК
РВЕЕОМУМОТМ ВАМУУБЗМІТМН ОбУМІМОКЕУК СКУБМКАГЇ РА РІЕКТІЗКАК СОРВЕРОММТ
ІРР5ВЕЕМТК МОУБІ ТС УК СаЕМРБЗОІАМЕ М/ЕЗМООРЕММ УКТТРРУМГО5 равеЕгім5кіІ.
ТУОКБАМООСЇ ММЕЗСЗУМНЕ А НМНУТОКЗ І 5І 5РОХ де Х являє собою лізин (К) або відсутній. (00272) Переважна послідовність Ід4 для доменів СН2 і СНЗ молекул, що містять область
Ес, згідно з даним винаходом буде містити заміни М252у/52541/1256Е (ЗЕО ІО МО: 259):
АРЕРЯСРОМ РІГ ЕРРКРКОТ ГМІТВЕРЕМТ СУУМОУБОЄО РЕМОЕММ/ММО СМЕМНМАКТК
РАВЕЕЄОРМОТМ ВУУБ5МІТМІН ОБУ МОаКЕМК СКУ5МКОаї РОБ 5ІЕКТІЗКАК СОРВЕРОММТ
ІРРБОЕЕМТК МОМУ5І ТС УК аЕМРБЗОІАМЕ М/ЕЗМООРЕММ УКТТРРМГОБ разеЕнімУЗнвіІ.
ТУОКЗАУМОБС! ММЕЗСЗУМНЕ А НМНУТОКЗІБВІ ах де Х являє собою лізин (К) або відсутній. бо І00273| Для діатіл і тривалентних сполучних молекул, перший та третій поліпептидні ланцюги яких не ідентичні, бажаним є зниження або запобігання гомодимеризації між доменами
СнН2г-СНЗ двох перших поліпептидних ланцюгів або між доменами СН2-СНЗ двох третіх поліпептидних ланцюгів. Домени СН2 і/або СНЗ зазначених поліпептидних ланцюгів не обов'язково повинні мати однакові послідовності, і переважно модифіковані, щоб стимулювати комплексоутворення між двома поліпептидними ланцюгами. Наприклад, заміна амінокислоти (переважно заміна амінокислотою, що містить об'ємну бічну групу, що утворює "виступ", наприклад, триптофаном), може бути введена в домен СН2 або СНЗ так, що стеричний вплив запобіжить взаємодії з доменом, мутованим аналогічним чином, і призведе до спарювання мутованого домену з доменом, у який була введена комплементарна або сприяюча мутація, тобто "западина" (наприклад, заміна гліцином). Такі групи мутацій можуть бути введені у будь- яку пару поліпептидів, що містять домени СН2-СНЗ, які утворюють область Ес. Способи модифікації білків для стимулювання гетеродимеризації стосовно гомодимеризації добре відомі в даній області техніки, зокрема, відносно модифікації молекул, подібних імуноглобулінів, і включені в область даного винаходу (див., наприклад, роботи Кіддулау еї аї. (1996) "Кпобз-Іпю-
Ноїез" Епдіпеегіпд ОЇ Апібоду СНЗ Ботаїп5 Рог Неаму Спаїп Негегодітегігайоп", Ргоївїп Епадг. 9:617-621, Аїмеї! єї аї. (1997) "Забіє Неїегодітет5 Егот Ветоавїїпд Те Ротаїп Іпіенасе ОТ А
Нотодаітег Овіпа А Рпаде Оізріау ІГіргагу", у. Мої. Віої. 270: 26-35, і Хіє еї аїІ. (2005) "А Мем/
Еогтаї ОЇ Візресіїїс Апіїроду: Нідніу ЕНісієепі Неїегодітетгігайоп, Ехргезвіоп Апа Титог Сеї! ГГ увів",
У. Іттипої. МеїШтоа5 296:95-101; кожна з яких повністю включена у дану заявку за допомогою посилання). Переважно "виступ" вводять у домени СН2-СНЗ першого поліпептидного ланцюга, і "западину" вводять у домени СН2-СНЗ третього поліпептидного ланцюга діатіл, що містять три поліпептидні ланцюги. Відповідно, "виступ" запобіжить гомодимеризацію першого поліпептидного ланцюга за допомогою його доменів СН2 і/або СНЗ. Оскільки третій поліпептидний ланцюг переважно містить заміну, що забезпечує "западину", вона буде гетеродимеризуватися з першим поліпептидним ланцюгом, а також гомодимеризуватися сама з собою. Зазначена стратегія може бути використана для антитіл і тривалентних сполучних молекул, що містять три, чотири або п'ять ланцюгів, описаних вище, в яких "виступ" введений у домени СН2-СНЗ першого поліпептидного ланцюга, і "западина" введена в домени СН2-СНЗ третього поліпептидного ланцюга.
Зо (00274) Переважний виступ створюють шляхом модифікації області Ес (ДО для включення модифікації Т366МУ. Переважну западину створюють шляхом модифікації області Ес дО для включення модифікації 73665, І 368А і 407. Щоб полегшити очищення гомодимера третього поліпептидного ланцюга, що несе западину, з готової біспецифічної гетеродимерної молекули, що містить область Ес, сайт зв'язування білка А доменів СН2 і СНЗ, що несуть западину, третього поліпептидного ланцюга переважно мутують шляхом заміни амінокислоти у положенні 435 (Н4ІЗ5К). Відповідно, гомодимер третього поліпептидного ланцюга, що несе западину, не буде зв'язуватися з білком А, тоді як біспецифічний гетеродимер збереже свою здатність зв'язуватися з білююм А за допомогою сайту зв'язування білка А у першому поліпептидному ланцюзі. В іншому варіанті реалізації третій поліпептидний ланцюг, що несе западину, може містити заміни амінокислот у положеннях 434 і 435 (МАЗ4А/М435К).
І00275| Переважна амінокислотна послідовність (901 для доменів СН2 ії СНЗ першого поліпептидного ланцюга молекули, що містить область Ес, згідно з даним винаходом буде містити послідовність "несучу виступ", представлену нижче (5ЕО ІО МО: 6):
АРЕААСОРОМ БГЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУУМОУ5НЕО РЕМКЕММУМУМО СМЕМНМАКТК
РВЕЕОМУМОТМ ВАМУУБЗМІТМН ОбУМІМОКЕУК СКУБМКАГЇ РА РІЕКТІЗКАК СОРВЕРОММТ
ІРР5ВЕЕМТК МОУБІМСІМК СЕМРОЗОІАМЕ М/ЕЗМООРЕММ УКТТРРМОБЗ равзеЕнгіІчм5кіІ.
ТУОКЗАМООС ММЕЗСЗУМНЕ А НМНУТОКЗ5 І БІ 5РОХ де Х являє собою лізин (К) або відсутній.
І00276| Переважна амінокислотна послідовність (951 для доменів СН2 і СНЗ другого поліпептидного ланцюга молекули, що містить область Ес, згідно з даним винаходом, що містить два поліпептидні ланцюги (або третього поліпептидного ланцюга молекули, що містить область Ес, що містить три, чотири або п'ять поліпептидних ланцюгів), буде містити "несучу западину" послідовність, представлену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 7):
АРЕААССРОМ РІГ ЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СММУМОУЗ5НЕО РЕМКЕММУМО СМЕМНМАКТК
РВЕЕОМУМОТМ ВАМУУБЗМІТМН ОбУМІМОКЕУК СКУБМКАГЇ РА РІЕКТІЗКАК СОРВЕРОММТ
ІРРОВЕЕМТК МОМ5І5САУК СЕМРООІАМЕ УМЕЗМООРЕММ УКТТРРМОБ5 равеЕнгімЗкіІ.
ТУОКЗАМООС ММЕЗСЗУМНЕ А НМАУТОКЗ5 І БІ 5РОХ де Х являє собою лізин (К) або відсутній. (00277 Як слід відзначити, домени СН2-СНЗ з послідовностей, представлених у 5ЕО ІЮ МО: бо бі 5ЕО ІЮ МО: 7, містять заміну у положенні 234 залишком аланіну й у положенні 235 залишком аланіну й, відповідно, утворюють область Ес, яка проявляє зменшене (або по суті відсутнє) зв'язування з ЕСуУКкКІА (СО64), ЕсуКПА (СО32А), ЕсуКІІВ (СО0328), ЕсукША (СО16а) або ЕсукПІВ (СО16Б) (щодо зв'язування, що проявляється областю Ес дикого типу (ЗЕО ІЮ МО: 1). В область даного винаходу також включені зазначені домени СН2-СНЗ, які містять альтернативні та/або додаткові заміни, які модифікують ефекторну функцію й/або активність зв'язування області Ес з
ЕУК. В область даного винаходу також включені зазначені домени СІН2-СНЗ, які додатково містять одну або більше замін амінокислот, що збільшують період напіввиведення. Зокрема, в область даного винаходу включені зазначені "несучі западину" та "несучі виступ" домени СН2-
СНУЗ, які додатково містять М252у/52541/1256Б.
І00278| Переважно перший поліпептидний ланцюг буде містити "несучу виступ" послідовність СН2-СНЗ, наприклад, представлену в 5ЕО ІЮ МО: 6. Однак, як буде відзначено, "несучий западину" домен СН2-СНЗ (наприклад, ЗЕО ІЮО МО: 7) може бути використаний у першому поліпептгидному ланцюзі, й у цьому випадку "несучий виступ" домен СН2-СНЗ (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: б) може бути використаний у другому поліпептидному ланцюзі молекули, що містить область Ес, згідно з даним винаходом, що містить два поліпептидні ланцюги (або у третьому поліпептидному ланцюзі молекули, що містить область Ес, що містить три, чотири або п'ять поліпептидних ланцюгів).
І00279| Як докладно описано вище, в область даного винаходу включені молекули, що містять область Ес (наприклад, антитіла та діатіла, що містять область Ес), що містять домени
СН? ї СНЗ дикого типу або містять домени СН2 і СНЗ з комбінаціями замін, описаними вище.
Зразкова амінокислотна послідовність домену СН2-СНЗ ІдДС1, що включає такі варіанти, являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО І МО: 260):
АРЕХ:ІХг2аайРБМ ЕГЕРРКРКОТ Ї ХзіІХААХБРЕМТ СУУМОБУЗНЕО РЕУКЕММ УМО
СМЕМНМАКТК РВЕЕОУМ5ЗТУ АУМ5МІ ТМ Н ОрБмМІМаТакЕУК СКМ5МКАЇ РА
РІЕКТІЗКАК СОРВЕРОММТ І РРОВЕЕМТК МОМ5І ХеСХ7УК СЕУРЗОІАМЕ МЕЗМООРЕММ
УКТТРРМ'ОЗ ВОЗЕРІ ХвЗКІ ТМОКЗАМООС, ММЕЗСЗМУМНЕ АГ НХеХіоу ТОК І 5І ЗРаах у якій: (а) Хі ії Х» обидва являють собою | (дикий тип) або обидва являють собою А (зменшене зв'язування з ЕСУуК);
Зо (Б) Х», Ха і Х5, відповідно, являють собою М, 5 і Т (дикий тип) або У, Т і Е (збільшений період напіввиведення), (с) Хв, Х7 і Хв, відповідно, являють собою Т, І і М (дикий тип) або МУ, І і М (виступ), або 5, А і
М (западина); (9) Хе і Хо, відповідно, являють собою М і Н (дикий тип) або являють собою М і Е (відсутнє зв'язування з білком А), або А і К (відсутнє зв'язування з білком А); і (є) Хіт являє собою К або відсутній. 002801 Згідно з іншими варіантами реалізації в область даного винаходу включені РО-1- сполучні молекули, що містять домени СН2 і/або СНЗ, які були модифіковані, щоб сприяти гетеродимеризації у порівнянні з гомодимеризацією, з використанням мутацій, відомих в даній області техніки, таких як ті, які розкриті у РСТ публікаціях УУМО 2007/110205; УМО 2011/143545;
УМО 2012/058768; УМО 2013/06867, всі з яких повністю включені у дану заявку за допомогою посилання.
МІ Біспецифічні сполучні молекули РО-1х! АОо-3 00281 Згідно з даним винаходом, зокрема, запропоновані біспецифічні сполучні молекули
РО-1хГ АС-3 (наприклад, біспецифічні антитіла, біспецифічні діатіла та т.п.), що містять епітопсполучний фрагмент антитіла до РО-1 і переважно одне з нових антитіл до РО-1 людини, запропонованих у даному документі, й епітопсполучний фрагмент антитіла до ГАС-3 людини, переважно одне з нових антитіл до ГАС-3 людини, запропонованих у даному документі.
Переважні біспецифічні сполучні молекули РО-їх! дО-3 згідно з даним винаходом містять епітопсполучні фрагменти антитіл, які дозволяють їм скоординовано зв'язуватися з двома різними епітопами: епітопом РО-1 й епітопом ГАС-3 так, щоб послабити інгібіторну активність зазначених молекул. У даній заявці таке ослаблення відноситься до зменшення щонайменше на 2095, зменшення щонайменше на 5095, зменшення щонайменше на 8095 або зменшення щонайменше на 9095 детектованої інгібіторної активності РО-1 і/або ГАС-3, або до повного усунення детектованої інгібіторної активності РО-1 і/або ІГАС-3. Вибір епітопсполучних фрагментів (наприклад, доменів МІ і МН) антитіла до РО-1 людини й антитіла до ГАО-3 координується так, що поліпептидні ланцюги, які утворюють зазначені біспецифічні сполучні молекули РО-їх( АС-3, з'єднуються з утворенням щонайменше одного функціонального антигенсполучного сайту, який є специфічним відносно першого антигена (тобто, РО-1 або І АС- бо 3), і щонайменше одного функціонального антигенсполучного сайту, який є специфічним у відношенні другого антигена (тобто, РО-1 або ГАО-3, залежно від ідентичності першого антигена). (002821 Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу біспецифічна сполучна молекула РО-їх( АС-3 згідно з даним винаходом являє собою біспецифічне антитіло, яке переважно містить два, три, чотири або п'ять поліпептидних ланцюгів, описаних у даному документі. В іншому конкретному варіанті реалізації біспецифічна сполучна молекула РО- 1хГАС-3 згідно з даним винаходом являє собою біспецифічне антитіло, яке переважно містить два, три або чотири поліпептидні ланцюги, описані у даному документі (див., наприклад, УУО 2007/024715; МО2007/110205; МО 2009/080251; МО 2009/080254; МО 2009/089004; МО 2011/069104; МО 2011/117329; МО 2011/131746; МО 2011/133886; МО 2011/143545; МО 2012/023053; МО 2013/060867, всі з яких повністю включені у дану заявку за допомогою посилання).
А Антитіла до ГАС-3 людини (00283) Зразкові антитіла, які є імуноспецифічними для ГАС-3 людини, наведені нижче.
Додаткові бажані антитіла можуть бути отримані шляхом виділення гібридом, секретуючих антитіла, виявлених з використанням ГАС-3 або його пептидного фрагмента, або шляхом скринінгу бібліотек рекомбінантних антитіл для визначення зв'язування з ГАС-3 або його пептидним фрагментом. (ГАС-3 людини (включаючи сигнальну послідовність, що складається з 28 залишків амінокислот (виділена підкресленням), і зрілий білок, що складається з 497 залишків амінокислот) містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 38):
ММ/ЕДОЕБГ СІ. ЕГОРІІМ/УАРМ КРОРСАЕМР УММ/АОБЕСАРА ОЇ РОБРТІРІ.
ОПІБІ И АВАСО УТМУОНОРОБОа РРАДАРСЕНРІ. АРАРНРААРБ5 БМОРАРАВУТ
Мі 5МарРОаІА ЗОаВІ Р ОРВАВМ ОГРЕВНИС НОВО ОБ5І МІ АРАВ ВАСАСЕУВАА
МНІВОВАІ ЗО ВІ ВІ ВІ ОА МТАБРРОБІ А АБОМУМІ МО ЕЗАРОВРАБУ
НУГАМАСОСВА УРУВЕЗРННН І АЕЗРІ РРО М5РМОБа РУС СІ ТУвракєєм
МБІМУМІ ТМ СГЕРРТРІ ТМ ХАСДОаЗАМОаЇ РСВІ РАСУСТ ВЕ ТАКУМУТР рРасаРОГГ МТ аОМареЕтВі ЕОМБОАОАИтТ УТСНІНІГОЄО ОЇ МАТМТІ АЇ
ІТМТРКБЕОа5 РОБІ аКИЇ СЕ МТРУБООЕВЕ ММУ55І ЮТРБО ВЗЕБОаРУЛ ЕА
ОЕБАОІ І ЗОРУ ОСОЇ МОСЕНІ І СААММУЕТЕЇ 55РаАОВЗаВ АРОАЇ РАСНІ
Зо ПРОМ ЗІ ШІ МТОаАга ЕН МУАВОМ АР АВЕЗАЇ ЕОСІ НРРОАОБКІЄ
ЕГЕОЕРЕРЕР ЕРЕРЕРЕРЕР ЕРЕОЇГ. 1 Моноклональне антитіло до ГАС-3 А (00284) Антитіло до ГАС-3 людини, ВМ5-986016 (25Е7; Медагех/вм5), позначене у даному документі "МАТ до ГАО-3 А", і його варіанти були описані (див., наприклад, М/О 2014/008218).
Амінокислотна послідовність варіабельного домену важкого ланцюга МАТ до ГАс-3 А містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 39) (СОК виділені підкресленням):
ОМОГ ООМСИАИ ІІ КРОЗЕТІ 51 ТСАУУсаБЕЗ ОУУММУВОР РОКИ ЕМИЕ
ІМНМОМТМ5М РБІ-КЗАМТІ 5 ГОТ5КМОЕБ5І КІ АЗМТААОТ АМУУСАгахв
ОМЕУММ/ЕОРМ/ СОСТІ УТУ55 (о02851І
Амінокислотна послідовність варіабельного домену легкого ланцюга МАТ до ГАС-3 А містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО І МО: 40) (СОК виділені підкресленням):
ЕІММГТО5РАТ І 5І 5РОЕВАТ І ЗСВА5БОБІЗ ЗМІ АМ/МООКР ЧОАРА МО
АЗМВАТИаІРА НЕЗОаЗИаБИтТо ЕТІ ТІЗ5І ЕР ЕОБАУУУСОО ВЗ5ММ/РІТЕСО
СТМІ ЕК
І00286)| Недавно були ідентифіковані додаткові мишачі антитіла до ГАС-3 людини, що мають унікальні характеристики зв'язування (див. заявку на патент США Моб2/172277).
Переважні біспецифічні сполучні молекули РО-їх! дО-3 згідно з даним винаходом містять епітопсполучні фрагменти антитіла до ГАС-3, МАТ до ГАС-31 або МАТ до ГАС-36, які зв'язуються з новим епітопом і не конкурують з ВМ5-986016 за зв'язування з ГГ АС-3. Особливо переважними є біспецифічні сполучні молекули РО-1хІ! АС-3 згідно з даним винаходом, які містять гуманізовані домени УН і/або МІ. МАТ до І АС-3 1 або МАТ до І АО-3 6. 2 МАТ до І АО-3 1
І00287| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ до ГАС-31 (5ЕБЕО ІЮ МО: 41) представлена нижче (залишки СОВНн виділені підкресленням).
ОІОЇ МОБОРЕ І ККРОЕТУКІ БСКАБОаМТЕВ ММаММУМУКОА РЕКМІ КУМОМ
ІМТУТСОЕЗТУ АООБГЕСЕРГЕАЕ 5І СТ5ЗАБЗТАМ І ОІМІ КМЕО ТАТУЕСАВЕ5 г УрУУЗМмоУМУ востоУТУ55 60 СОВНІ МАТ до ГАО-3 1 (5ЕО І МО: 42): ВМУЯ ММ
Сова МАТ до ГАС-3 1 (5ЕО ІЮ МО: 43): ММІМТМТаЕЗТУАОБЕа
СОАнНЗ МАТ до І дДа-3 1 (5ЕО І МО: 44): ЕБІ МОМУ5МОМ (00288) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ до ГАС-31 (5ЕБЕО ІО МО: 45) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
ОУММТОТРІТ Г5МТІБОРАБ ІЗСК5БОБІІ. НІЗВОКТУС ММ ПП ОВРООБРЕ
ВИМІ.М5ЕСО БОУРОВЕТа5 аЗОатТОгТІ КІ ЗВМЕАЕОГ ЯМ УУСМОСТНЕР
УтРасаткКгЕ ІК
СОВИ МАТ до ГАС-3 1 (5ЕО 10 МО: 46): КОБОБІИ ЇЇ НЗрОакКТтмІ М
СОНВІ2 МАТ до ГАС-3 1 (5ЕО ІЮ МО: 47): І М5ЕЇГ 05
СОВІЗ МАТ до ГГ АС-3 1 (5ЕО 10 МО: 48): МОСТНЕРМУТ
І00289| Два зразкових гуманізованих домени МН МАТ до ГАС-3 1, позначених у даному документі "МНІ МАТ до лі до-3 1" і "МАТ до лі дОо-3 1 МНа", і чотири зразкових гуманізованих домени МІ МАТ до І АС-3 1 "МІ 1 МАТ до лі АС-3 1", "М 2 МАТ до лі АС-3 1", "МІ З МАТ до лі АС-
З" і "МІ 4 МАТ до лі АО-3 1", наведені нижче. Будь-який з гуманізованих доменів МІ. може бути спарений з будь-яким із гуманізованих доменів МН, щоб одержати ІГАС-3-сполучний домен.
Відповідно, будь-яке антитіло, що містить один із гуманізованих доменів Мі, спарений з гуманізованим доменом МН, загалом називається "МАТ до лі АО-3 1", і конкретні комбінації гуманізованих доменів МНЛ// згадуються за допомогою посилання на певні домени МН//., наприклад, гуманізоване антитіло, що містить МНІ МАТ до лі АС-3 1 ї М/2 МАТ до лі Ас-3 1, зокрема називається "МАТ до лігАс-3 1 (1.2)". (00290) Амінокислотна послідовність домену МН із МНІ МАТ до лі АС-3 1 (5ЕО ІЮ МО: 49) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБОУТЕТ ММаММУУУВОА РОСС ЕУМСаМ
ІМТУТСЕЗТУ АООГЕСЕЕМЕ 5БМОТ5АБЗТАМ І 01551 КАЄО ТАМУУСАВЕ5
ГЕ МОУУЗМоУМ СОСаТТУТУ5о
І00291| Амінокислотна послідовність домену МН із МН2 МАТ до лі АС-3 1 (5ЕО ІЮ МО: 50) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ОМОЇ МОБаАєЕ УККРИАБУКМ ЗБСКАБОМТЕТ ММаммМУУпАоА РОСТ ЕМ МИМ
ІМТУТСОЕЗТУ АООБЕСАЕМЕ 5МОТЗА5ТАМ ГОІ5БІ КАЄО ТАМУРСАНЕ5
І МОУУЗМоУМ сСОаТтТУТУ55 (00292) Амінокислотна послідовність домену МІ із МТ МАТ до лі АС-3 1 (5ЕО ІО МО: 51) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТОТРІ 5 І 5МТРООРАБ ІЗСКЗБОЗІІ. НІЗООКТУСМУМ ПП ОКРООБРЕ
ВИМІСМ5ЕСО 5БОУРОВЕЗОаЗ ПЗОаТОЕТІКІ БАМЕАЕОМаМ МУСМУОСТНЕР
ХтРаСаткКМЕ ІК (00293) Амінокислотна послідовність домену МІ із М 2 МАТ до лі АС-3 1 (5ЕО ІО МО: 52) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТОТРІ 5 І 5МТРООРАБ ІЗСКЗБОБЗІІ. НІЗООКТУСММ ПП ОАРООБРЕ
ВИМІ.М5ЕСО 5БаУРОВЕЗаЗ ПЗОаТОЕТІКІ БАМЕАЕОМаМ УУСУМОСТНЕР
УтРаастТкКМЕ ІК (00294) Амінокислотна послідовність домену МІ із МІ З МАТ до лі АС-3 1 (5ЕО ІЮО МО: 53) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТОТРІ 5 І 5МТРООРАБ ІЗСК5ЗБОЗІІ. НІЗООКТУСММ ПП ОКРИООРРЕ
ВИМІСУМ5ЕСО 5БаУРОВЕЗаЗ ПЗОаТОЕТІКІ БАМЕАЕОМаМ УУСМОСТНЕР
ХтРаСаткМЕ ІК (00295) Амінокислотна послідовність домену МІ із М 4 МАТ до лі Ас-3 1 (5ЕО ІЮО МО: 54) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТОТРІ 5 І 5МТРООРАБ ІЗСК5ЗБОЗІІ. НЗОАКТУІ ММ ПГОКРИОРРЕ
ВИМІ.М5ЕСО 5БаУРОВЕЗаЗ ПЗОаТОЕТІКІ БАМЕАЕОМаМ УУСУМОСТНЕР
УутРасааткмЕ ІК (00296) СОВИ домену МІ із МІ 4 МАТ до лі АС-3 1 містить заміну гліцину залишком аланіну та містить амінокислотну послідовність: КЗБОБЗІГІ-НЗОАКТУІ М (5ЕО ІО МО: 55), замінений аланін виділений підкресленням. Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з описаних вище доменів СОВІ1 МАТ до І АО-3 1.
З МАТ до І АО-3 6
І00297| Амінокислотна послідовність домену МН МАТ до ГАС-36 (5ЕБО ІЮ МО: 56) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ЕМП СОО5ОРЕ Г УКРОАБУКІ РСКАБИаУТтЕТ ОВУММОМУУКОБЗ НОЕБІ ЕМО
ІМРОМОа УТІМ МОКЕЕСКАТІ ТМОКЗ5О5ОТАМ МЕ А5І ТЕО ТАМУМСАВЕА 60 ОУЄМЕОУМ/СО СТ ТУ55 бо
СОВНІ МАТ до ГАС-3 6 (5ЕО І МО: 57): ОМММО
Сова МАТ до ГАО-3 6 (5ЕО І МО: 58): ВІМРОМОМТІММОКЕЕС
СОРВнНЗ МАТ до ГАО-3 6 (5ЕО І МО: 59): ЕАОМЕМЕ ПУ 00298) Амінокислотна послідовність домену МІ МАТ до ГАС-36 (5ЕБЕО ІО МО: 60) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТО5НАЕ М5ТЗУСОВМУ5 ІТСКАБЗБООМУ5 5БММАМУООКР СОЗРК ГЕ
АБУВУТОаМУРО ВЕТабзавзато ЕТЕТІЗЗМОА А АУУУСОО НУЗТРИТЕСОА
СТКІ БІК
СОВИ МАТ до ГАС-3 6 (5ЕО ІО МО: 61): КАІБОВУЗЗММА
СОНВІ2 МАТ до ГАС-3 6 (5ЕО І МО: 62): БАБУВУТ
СОВІЗ МАТ до ГАС-3 6 (5ЕО ІЮ МО: 63): НУЗТРМТ
І00299| Два зразкових гуманізованих домени МН МАТ до ГАС-3 6, позначених у даному документі як "ИМНІ МАТ до лі Ао-3 6" і "МН2 МАТ до лі да-3 6", і два зразкових гуманізованих домени МІ МАТ до ГАО-36, позначених "М/1 МАТ до лі АО-3 1" і "М/2 МАТ до лі Ас-3 1", наведені нижче. Будь-який з гуманізованих доменів МІ може бути спарений з будь-яким із гуманізованих доменів МН, щоб одержати ГАС-3-сполучний домен. Відповідно, будь-яке антитіло, що містить один із гуманізованих доменів МІ, спарений з гуманізованим доменом УН, загалом називається "МАТ до лі до-3 6", і конкретні комбінації гуманізованих доменів МН/Л/. згадуються за допомогою посилання на певні домени МН/Л/І,, наприклад, гуманізоване антитіло, що містить МНІ МАТ до лі АОо-3 6 і МІ 2 МАТ до лі до-3 6, зокрема називається "МАТ до лі Ас-
З 6(1.2у.
Ї0ОЗО0| Амінокислотна послідовність домену МН із МНІ МАТ до лі Ас-3 6 (5ЕО І МО: 294) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУТЕТ ОВУММОМУУВОА РОСС ЕУ Мао ІМРОМамтіУу
МОКЕЕСАУТМ ТТОТОТОТАМ МЕ АБ АЗОО ТАМУУСАВЕА ОМЕУМЕО УМ СО СТІ ТУ
Ї0ОЗО1| Амінокислотна послідовність домену МН із МН2 МАТ до лі Ас-3 6 (5ЕО І МО: 295) представлена нижче (залишки СОРВНн виділені підкресленням):
ЕМО! МЕЗО ІМКРОСОІ ВІ 5СААБаЕТЕВ ОУМММОМУУВОА РОКИ ЕМУЗО ІМРОМмамтІу
МОКЕЕСЕЕТІ 5АОМАКМ5І М ГОММ5І ВАЕО ТАМУМСАВЕА ОМЕМЕО УМ СО СТІ ТУ 00302) Амінокислотна послідовність домену Мі із МІ 1 МАТ до лі АС-3 6 (5ЕО ІЮ МО: 296) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІОМТО5РОЗ І 5АБУСОВУТ ІТСВАБОВУ5 ЗУМАМУМУООКР СКАРКИ І ІМ5 АБЗУНУТОМУРБ5 вЕЗИаБИаБИТО ЕТ ТІ ОР ЕОРАТУУСОО НУЗТРМИТЕСОИ СТтКІ БІК
Ї00303| Амінокислотна послідовність домену Мі із МІ 2 МАТ до лі АС-3 6 (5ЕО ІЮ МО: 297) представлена нижче (залишки СОН; виділені підкресленням):
РІММТО5РУОЗ І5АБМОаОВМТ ІТСНАБОВУ5 З5УУМАМУХУООКР СКАРКИ ІМ5 АЗУВУТОаМРО вЕЗИаБИаБаТО ЕТЕТІЗБ ОР ЕПВІАУУУСОО НУЗТРМИТЕСОИ СТКІ БІК 00304 СОВІТ домену Мі із МІ1 і М/2 МАТ до лі АС-3 6 містить заміну лізину залишком амінокислоти аргініну, і містить амінокислотну послідовність: НАБОЮУ55ЗУМА (5ЕО ІО МО: 298), замінений аргінін виділений підкресленням. Згідно з даним винаходом передбачено, що аналогічна заміна може бути включена у будь-який з доменів СОВІТ МАТ до ГГ АО-3 6, описаних вище.
В Зразкові чотириланцюгові діатіла, які містять область Ес, що мають Е/К-спіраль
ЇООЗО5| Були отримані чотири зразкових біспецифічних чотириланцюгових діатіла, що містять область Ес, РО-1х| АС-3, що мають домени, які сприяють утворенню гетеродимера, з
Е/К-спіралями (позначені "АВТ А", "АВТ В", "АВТ С" ї "АВТ І"). Структура зазначених діатіл, що містять область Ес, докладно описана нижче. Зазначені типові діатіла РО-1хІ АО-3 є ілюстративними і жодним чином не обмежують обсяг даного винаходу. 1ТОСАВТА 00306) АВТ А являє собою біспецифічне чотириланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні І АС-3, варіант області Ес Ід04, модифікований так, щоб збільшити період напіввиведення, і цистеїновмісні домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К- спіраллю. Перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ А містять, у напрямку від М-кінця до С- кінця: М-кінець, домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АСІ-3 (Мі І до-з МІ 4
МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІО МО: 54); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: ССО5БОСОО (5ЕО І
МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео- МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 147); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СО.сАСОСО (ЗЕБЕО І МО: 15)); цистетїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера (Е-спіраль) 60 (ЕМААСЕК-ЕМААГІ ЕК-ЕМААІ ЕК-ЕМААГЕК (5ЕО ІЮ МО: 23)); стабілізовану шарнірну область
Іц4 (5ЕО ІЮ МО: 13); варіант домену СН2-СНЗ ІдС4, що містить заміни М252Уу/52541/1256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 259); і С-кінець.
І00307| Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів ОАКТ А являє собою варіант послідовності, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 267:
БІММТОТРІ 5 І 5МТРООРАБЗ ІЗСКЗБОБІ ЇЇ НЗОХІКТУЇ МУ ПОКРООРРЕВІ ІМ М5ЕГ 0 заУРовЕЗзав5 а5атоОвТІКкІ БЗАМЕАЕОУаМ СМ ОатТнНЕР УтТеаСІаткМЕ ІКасазасиас
ОМОГМОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУЗЕТ УМ ММММАОА РОСС ЕУМІИМ ІНРЗОЗЕТМІ
ВСОКЕКОВАМТІ ТМОКОТОТАМ МЕ! 55185ЕО ТАУММУСАВЕН МатТт5РЕАММУуСсС; ОСТІ УТУЗБа сСОасаЕМААС ЕКЕМААГЕКЕ МААГЕКЕМАА І ЕКЕЗКУМОРР СРРОРАРЕРІ саРБМРБІ ЕРР
КРКОТІХаЇХзА ХІЕРЕМТСУУМО М5ОБОРЕМОЄ МУМУрамЕМН МАКТКРАЕЕО ЕМЗТУ ВУ У
ІТМІНООУМІМ СКЕУКСКУЗМ КОаЇ РЗБІЕКТ ІЗКАКООРВЕ РОМУТІ РРБО ЕЕМТКМОМ5І
ТСІУКагМРБЗ ІАМЕЖМЕЗМОа ОРЕММУКТТР РУ ОБрОаЗЕЕ МАТОК ВМОБСМУБЕЗСо
ЗУММНЕАЇНМН УТОКБІ БІ БІ. с в якій Хі, Х», Хз і Ха вибрані незалежно, і в якій Хі являє собою А або с; Хо являє собою У або М; Хз являє собою Т або 5; і Хі являє собою Е або Т. 00308) Амінокислотні послідовності першого та третього поліпептидних ланцюгів ОАКТ А являють собою послідовність, представлену в ЗЕО ІЮО МО: 267, в якій Хі являє собою А; Х2 являє собою У; Хз являє собою Т; і Х4- являє собою Е.
І00ОЗО9| Другий та четвертий поліпептидні ланцюги САКТ А містять у напрямку від М-кінця до
С-кінця: М-кінець, домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі во-ї МІ 2
МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: ССОБОСОО (5ЕО ІЮ
МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (МНі доз МНІ МАТ до лі АС-3 1) (ЗЕО ІЮ МО: 49); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СЕсССОСО (ЗЕБЕО І МО: 15)); цистетїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера (К-спіраль) (КМААСКЕ-КМУААЇ КЕ-КУААЇ КЕ-КМААЇ КЕ (5ЕО ІЮ МО: 24); і С-кінець. 00310) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів ОАКТ А являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 268):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО
Зо аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаЗасаИасО
МОГМО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОУТЕТМ МОаММУМУМАВОАР СОС ЕМУМОМ/І МІМТаЕЗТМА
СОРЕСВЕМЕ5 МОТ5АБТАМІ ОІ55ІКАЕОТ АМУУСАВЕЗІ УруУЗмМОрУМмус Ф доаттУтУзБа аСОасакмМААС КЕКМУААЇ КЕК УАДАЇ КЕКМАА І КЕ 2 АВТ В
І00311| ПАКТ В ідентично САКТ А, за винятком того, що перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ В містять домен МІ. із МІ З МАТ до лі АС-3 1 (5ЕО ІО МО: 53), який містить заміну амінокислоти в СОВІ1. Відповідно, перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ В містять у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінецьх; домен Мі моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГАС-3 (Міїдсоз МІ З МАТ до лі до-3 1) (БО ІО МО: 53); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: с(е(о5(0((0( (5ЕО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео-ї МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 147); проміжний лінкерний пептид (ліннер 2: Сс(ИСО(с0(а (5БО ІО МО: 15)); цистеїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера (Е-спіраль) (ЕМААСЕК-ЕМААІЇ ЕК-ЕМААЇ ЕК-ЕМААГ ЕК (5ЕБЕО ОО МО: 23)); стабілізовану шарнірну область 954 (ЗЕО ІЮ МО: 13); варіант домену СН2-СНЗ ІдСЯ4, що містить заміни М252Уу/5254Т/1256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (5ЗЕО ІО МО: 259); і С- кінець. (00312) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів ОАКТ В являє собою послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 267, в якій Хі являє собою с; Хо являє собою У; Хз являє собою Т; і Хі являє собою Е. 00313) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів ОАКТ В являє собою послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 268.
ЗОАВНТС
І00314| ОАКТ С ідентично САКТ В, за винятком того, що перший та третій поліпептидні ланцюги ВАКТ В містять домен СН2-СНЗ досі дикого типу, позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 4). Відповідно, перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ С містять у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінець, домен МІ моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з
ГАС-3 (Мі доз МІ З МАТ до лі АС-3 1) (5ЕО ІЮ МО: 53); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: ссовБоосоо (560 ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з
РО-1 (МНео-ї МНІ МАТ до лРО-1 7) (5ЕО ІЮ МО: 147); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: во ссабоасца (5ЕО ІЮ МО: 15)); цистеїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера (Е-
спіраль) (ЕМААСЕК-ЕМААГІ ЕК-ЕМААІ ЕК-ЕМААІ ЕК (ЗЕО ІЮО МО: 23)); стабілізовану шарнірну область Ід4 (ЗЕО ІО МО: 13); домен СН2-СНЗ Ід04, позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ
МО: 4); і С-кінець. 00315) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів СОАКТ С являє собою послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 267, в якій Хі являє собою с; Хо являє собою М; Хз являє собою 5; і Х. являє собою Т. 00316) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів ОАКТ С являє собою послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 268.
АРБАВТІ
Ї00317| БАКТ І являє собою біспецифічне чотириланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні І АС-3, варіант області Ес Ід04, модифікований так, щоб збільшити період напіввиведення, і цистеїновмісні домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К- спіраллю. Перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ І містять у напрямку від М-кінця до С- кінця: М-кінець, домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (Мі І до-з МІ 1
МАТ до лі АС-3 6) (5ЕО ІЮО МО: 296); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: бБбОЗОСОО (5ЕО
ІО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНеро- МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО І МО: 147); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СССОСО (ЗЕБЕО І МО: 15)); цистетїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера (Е-спіраль) (ЕМААСЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААГЕК (5ЕБО ІО МО: 23)); стабілізовану шарнірну область
Іц4 (5ЕО ІЮ МО: 13); варіант домену СН2-СНЗ ІдС4, що містить заміни М252Уу/52541/1256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 259); і С-кінець. 00318) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів САКТ І являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 290):
БІОМТО5РОЗ І ЗАБУМаОВМТ ІТСВАБОВУ5 5УММАМУМООКР СКАРКИІМ5 АБУВУТОаМРБ
ВЕЗаБИаБИаТО Б ТІТІЗБОР ЕОРАТУУСОО НУБТРИУТРаСсС аткІБгКОСсСЯа БОсСИ,СОМОЇМ
ОБСОАЕМККРОа АБУКУЗСКА5 СУЗЕТЗУМУММ ММАОАРОПОСІ ЕУМІСМІНРЗО ЗЕТМІ ВОКЕК
ОАМТІТМОКО ТЗ5ТАУМЕ! 55 ІВ5ЕОТАМУУ САВЕНМОТО5Р БАУУуСсОСТМ туУзБОСССО,ИаС
ЕМААСЕКЕМА АГЕКЕМААЇ Е КЕМААГЕКЕВ5 КМОаРРСОРРСОР АРЕР СРОМ БГЕРРКРКОТ
Зо ІЇМІТВЕРЕМТ СУММОУБОЕО РЕМОРММУМУО СМЕМНМАКТК РА!ЕЕОРМОТУ вМУМБМІТМІН
ООУІМОКЕМК СКУБМКОЇ РО БІЕКТІЗКАК СОРАВЕРОММТ ІРРБОБЄЕМТК МОМ5І ТО УК
СЕМРБЗОІАМЕ М/ЕЗБМСООРЕММ УКТТРРМОБ БОБЕР МВА ТУОК5АМОБЯ МУЕЗСЗУМНЕ
АЇ НМНУТОКЗ І 51 5І С 00319) Другий та четвертий поліпептидні ланцюги САКТ І містять у напрямку від М-кінця до
С-кінця: М-кінець, домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі во-ї МІ 2
МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СбОСОСЗОСОС (5ЕО Ір
МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (МНі доз МНІ МАТ до лі АО-36) (ЗБО ІЮО МО: 294); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: сс!басцса (5ЕО ІЮ МО: 15)); цистеїновмісний домен, що сприяє утворенню гетеродимера (К- спіраль) (КМААСКЕ-КМААЇ КЕ-КУААЇ КЕ-КМУААЇ КЕ (ЗЕО ІО МО: 24); і С-кінець.
І00320| Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів САКТ І являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 291):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ПІНААЗМОСО аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаЗасаИасО
МОЇ МО5ОАЄЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОаМТЕТО МММОМУМАОАР СОС ЕМУМарІ МРОМОаМмТтІММ
ОКЕРЕСАМТМТ ТОТ5ТЗТАММ Б АБІА5ООТ АМУУСАВЕАО МЕМРруУмусоОос!с пі тУЗЗасс ас сакКмМААСКЕ КУААЇ КЕКМА АЇ КЕКМААЇ К Е
С Зразкові чотириланцюгові діатіла, що містять область Ес, що мають домени СІ /СНІ1
Ї0ОЗ21| Були отримані чотири зразкових біспецифічних чотириланцюгових діатіла, що містять область Ес, РО-1хІ АО-3, що містять домени СІГ/СНІ, і позначені "ПАВТ 0", "АВТ Е", "НАКТ У" ї "ПАВТ 1". Структура зазначених діатіл, що містять область Ес, докладно описана нижче. Зазначені зразкові діатіла РО-1х| АС-3 є ілюстративними і жодним чином не обмежують обсяг даного винаходу. 1ОСАВТО (00322) САКТ 0 являє собою біспецифічне чотириланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні Г АС-3, домени СІ/СНІ і варіант області Ес Ідс4, модифікований так, щоб збільшити період напіввиведення. Перший та третій поліпептидні ланцюги БАКТ О містять у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінецьх; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного 60 зв'язуватися з РО-1 (Мі во-ї МІ 2 МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮО МО: 153); проміжний лінкерний пептид
(лінкнер 1: сОСОсБ5БОСОСО (5БО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГАС-3 (МНідоз МНІ МАТ до ліАО-3 1) (5ЕО ІЮ МО: 49); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: 40050: (5ЕО ІЮ МО: 261)); домен СНІ Ід4 (ЗЕО ІЮО МО: 254); стабілізовану шарнірну область Ідс4 (5ЕО ІЮО МО: 13); варіант домену СН2-СНЗ ІдС4, що містить заміни
М252Уу/52541/1256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 259); і С-кінець. (00323) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів ОАКТ О являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 269):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаЗасаИасО
МОГ МО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОУТЕТМ МОаММУМУМАОАР СОС ЕМУМИМ/ МТМТОаЕЗТУА
СОРЕСВАЕМЕБ5 МОТ5АБЗТАМІ ОІ55ІКАЕОТ АМУУСАВЕ5ЗІ мруУУЗМОУМус оатТтУТУ55І сса5БаАЗТІКОа РБЗМЕРІАРСЗ ВАБЗТІЗЕБЗТААЇ ОСІМКОМЕРЕ РУТУБМУМБИаА І Т5аМУНТЕРА
М'ОБ55О15І 5БЗУМТУРБЗБО 1СТКТМТСОММ ОНКРУОМТКМО КАМЕЗБКУОРР СРРОРАРЕНІ
СОаРБМЕГЕРР КРКОТІМІТА ЕРЕМТСМММО УМБОБЕОРЕМОРЄ ММ/УМрамЕМН МАКТКРАЕЕО
ЕМЗТУВМУБМ ІТМІНОБСУМІМ СКЕУКСКУ5М КагРБЗБІЕКТ ІЗКАКООРАВЕ РОММТІРРБО
ЕЕМТКМОМ5І ТС МКавмРБ5 ОІАМЕМЕЗМО ОРЕМММКТТР РМІОБООБЕР ГУБАСТУОК5
ВУМОБСММЕБС 5ЗММНЕАЇІ НМН УТОКБІ 5І 5 С (00324 Другий та четвертий поліпептидні ланцюги АКТ О містять у напрямку від М-кінця до
С-кінця: М-кінець; домен Мі. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (Мі г дс-з
МІ 4 МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІЮ МО: 54); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СООСЗОССІЗО (ЗЕО ІО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНрРо-:
МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 147); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: І (40502 (5ЕО
ІО МО: 261)); домен СІ. каппа-ланцюга (5ЕО ІЮ МО: 8); і С-кінець. (00325) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів ОАКТ О являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 270):
РІММТОТРІ5 ІБМТРЕООРАБ ІЗСК5БОБІЇ НЗБАКТУМІ ММ ІПГОКРООРРЕ ВИМ М5ЕЇГО зауУРєРОоВЕЗав аБаТОгТІКкІ 5АМЕАЕєЕОМаМ МУСМуОсаСТнНЕР УтТРОасаткМЕ ІКОсазааас
ОМОГМО5ОАЕ УМККРОАБУКМ 5СКАБОМОЕТ 5УМУММУМУМУВОА РОСС ЕМОМ ІНРБОБЕТУМІ
РОКЕКОВМТІ ТМОКОТОТАМ МЕ! 551А85ЕО ТАМУМСАВЕН мМаТ5РЕАМУМС ОСТІ МТУ сосаБавВТМАА РБОЗМЕРІЕРРРБЗО БО! КБОаТАБМ МС! ММЕМРА ЕАКМОМУКМОМ АГОБаМЗОЕЗ
МТЕООБКОБ5Т УБІ 551Т1І ТІ 5 КАОМЕКНКУМ АСЕМУТНОСІ 5 БРУТКЗЕМНО ЕС 2БАВТ ЕЕ
І00З326| АКТ Е являє собою інше біспецифічне чотириланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні ГАС-3, домени СГ/СНІ і варіант Ес Іде4, модифікований так, щоб збільшити період напіввиведення. Сайти зв'язування РО-1 і ГАОо-3 САВТ Е розташовані у зворотному порядку у порівнянні з ПАКТ 0.
І00327| Перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ Е містять у напрямку від М-кінця до С- кінця: М-кінець, домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГГ АС-3 (Мі І до-з МІ 4
МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІО МО: 54); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: ССО5БОСОО (5ЕО І
МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео- МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 147); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: І 00502 (5ЕО ІЮ МО: 261)); домен СНІ Ід04 (ЗЕО ІЮ МО: 254); стабілізовану шарнірну область Ідс4 (5ЕО ІЮО МО: 13); варіант домену СН2-СНЗ Ід04, що містить заміни М252Уу/52541/1256Е і позбавлений С- кінцевого залишку (5ЕО ІЮ МО: 259); і С-кінець. (00328) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів ОАКТ Е являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 271):
РІММТОТРІ5 ІБМТРЕООРАБ ІЗСК5БОБІЇ НЗБАКТУМІ ММ ІПГОКРООРРЕ ВИМ М5ЕЇГО зауУРОоВЕЗав а5атТОгТІКкІ 5АМЕАЕОМаМ УУСМуОсаТнНЕР МтТРасаткМЕ ІКкКссаБасОас
ОМОГМО5ОАЕ УМККРОАБУКМ 5СКАБОМОЕТ 5УМУММУМУМУВОА РОСС ЕМОМ ІНРБОБЕТУМІ
РОКЕКОВМТІ ТМОКОТОТАМ МЕ! 551А85ЕО ТАМУМСАВЕН мМаТ5РЕАМУМС ОСТІ МТУ сса5БаАЗТІКОа РБЗМЕРІАРСЗ ВАБЗТІЗЕБЗТААЇ ОСІМКОМЕРЕ РУТУБМУМБИаА І Т5аМУНТЕРА
М'ОБ5Б5О15І 5БЗУМТУРБЗБЗ 1СТКТМТСОММ ОНКРУОМТКМО КАМЕЗ5КУОРР СРРОРАРЕРНІ
СОаРБМЕГЕРР КРКОТІМІТА ЕРЕМТСМММО УМБОБЕОРЕМОРЄ ММ/УМрамЕМН МАКТКРАЕЕО
ЕМЗ5ТУВМУБМ ІТМІНОСУМІМ СКЕУКСКУЗМ КО РБЗБІЕКТ ІЗКАКООРАЕ РОММТІ РРбО
ЕЕМТКМОМ5І ТС МКавмРБ5 ОІАМЕМЕЗМО ОРЕМММКТТР РМІОБООБЕР ГУБАСТУОК5
ВУМОБОММЕБЗСОС 5ЗММНЕАЇІ НМН УТОКБІ 5І 5 С
І00З29| Другий та четвертий поліпептидні ланцюги САКТ Е містять у напрямку від М-кінця до
С-кінця: М-кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі во-ї МІ 2 60 МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СОСОБООСОО (5ЕО ІЮ
МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (МНі доз МНІ МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІО МО: 49); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СОС 5БИа (5ЕО І МО: 261)); домен СІ. каппа-ланцюга (ЗЕО ІО МО: 8); і С-кінець. 00330) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів ОАКТ Е являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 272):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАММ ЕСООБКЕМРУ ТРасатТкМУБ! КкасоазБОСаСО
МОГМО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОаУТЕТМ МОаММУМУМАВОАР СОС ЕМУМИМ/І МТМТОаЕЗТУА
СОРЕСВАЕМЕБ5 МОТ5АБЗТАМІ ОІ55ІКАЕОТ АМУУСАВЕбБІ мрУуУЗМОрУМма оаттУТУ5БІ сосаБавВТМАА РБОЗМЕРІЕРРРБЗО БО! КБОаТАБМ МС! ММЕМРА ЕАКМОМУКМОМ АГОБаМЗОЕЗ
МТЕООБКО5Т УБІ 55Т1І ТІ 5 КАОМЕКНКММ АСЕМУТНОСІ 5 БРУИТКОЕМНа ЕС
ЗОАВТУ
Ї00331| САКТ У являє собою біспецифічне чотириланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні ГАС-3, домени СІ/СНІ і варіант Ес Ідс4, модифікований так, щоб збільшити період напіввиведення. Перший та третій поліпептидні ланцюги САКТ У містять у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінецьх; домен Мі моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГАС-3 (Мі ідоз МІ/1 МАТ до лі до-3 6) (5ЕО ІЮ МО: 296); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: с(е(о5(0((0( (5ЕО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео-ї МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 147); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: 1 2СсО50 (5ЕБЕО І МО: 261)); домен СНІ ІдС4 (5ЕО ІЮ МО: 254); стабілізовану шарнірну область Ідс4 (5ЕО ІЮО МО: 13); варіант домену СН2-СНЗ ІдС4, що містить заміни
М252Уу/52541/1256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 259); і С-кінець. (00332) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів САКТ У являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 292):
БІОМТО5РОЗ І ЗАБУМаОВМТ ІТСВАБОВУ5 5УММАМУМООКР СКАРКИІМ5 АБУВУТОаМРБ
ВЕБЗаБИаБИаТО Б ТІТІ5БОР ЕОРАТУУСОО НУБТРИУТРаСсС аткІБКОСсСа БпаСсевОМОЇмМ
ОБСОАЕМККРО АБУКУЗСКА5 СУЗЕТЗУМУММ ММАОАРОПОСІ ЕУМІСМІНРЗО ЕТ СОКЕК
ОВМТІТМОКО ТЗТАММЕ!55 ІВ5ЕОТАМУМ САВЕНУИТОР БАММСсСОСТІМ тУБЗ сасаБа
АЗІКОРОМЕР ГТАРСЗАЗТІЗЕ 5ЗТААГОСІМК ОМЕРЕРМТУМ5 М/М5СаАІТ502М НТЕРАМО55
СІМ5І55УМТ МРБОБЗБОЗІ ТК МТОМУОНнКкКРО МІКМОКАМЕЗ КМОаРРСОРРСР АРЕРІ ааРБМ
ЕЕРРКРКОТ ІГМІТВЕРЕМТ СУМУрУБОЕО РЕМОЕММУМУМО СаМЕМНМАКТК РЕЕЄОЕМ5ЗТУ
ВМУ5МІТМІН ОМ МОаКЕМК СКУБМКОЇ РО БІЕКТІЗКАК СОРАВЕРОММТ І РРБОЕЕМТК
МОМ5І ТС УК аЕМРЗОІАМЕ М/ЕЗМООРЕММ УКТТРРМОБЗ БОБЕР ЗВ ТМОКЗАМОвгС
МУМЕЗСЗУМНЕ АЇ НМНУТОКЗ5 І 5І БІ С 00333) Другий та четвертий поліпептидні ланцюги САКТ ./ містять у напрямку від М-кінця до
С-кінця: М-кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі во-ї МІ 2
МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СбОСОСЗОСОС (5ЕО Ір
МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (МНі доз МНІ МАТ до лі АС-3 6) (БЕО ІО МО: 294); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: І с(сІС502 (5ЕО ІЮО МО: 261)); домен СІ. каппа-ланцюга (ЗЕО ІО МО: 8); і С-кінець. (00334) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів АКТ . являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 293):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОгТІТтІ5 51ЕРЕОБАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаБасаво
МОГМО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОаМТЕТО УММОМУМАОАР СОС ЕМУМарІ МРОМОаМмТІММ
ОКЕРЕСВАМТМТ ТОТ5Т5ТАУМ Б АБІАБООТ АМУУСАВЕАО МЕМРруУмусоОсь ті тУБВІ са а5аВвВТуМААРБ МРІЕРРБОЕО ІКБаИТАБУУМС 1 ММЕУРАВЕА КМОМУКМОМАЇ ОБаМЗОЕЗМТ
ЕООБКОБТУ5 І 551ТІ ТІ КА ОМЕКНКММАС ЕМТНОСІ 55Р. УТКЗЕМВСЕС
АРБАВТ1
Ї00335)| САКТ 1 являє собою біспецифічне чотириланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні ГАС-3, домени СГ /СНІ, і варіант області Ес ІдДС1, модифікований для зниження зв'язування з ЕсуК. Перший та третій поліпептидні ланцюги ЮАКТ 1 містять у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінецьх; домен Мі моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі го-- М МАТ до РО-1 А) (ЗЕО ІЮО МО: 65); проміжний лінкерний пептид (ліннер 1: СсОСОсБ5БОСОСО (5БО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГАС-3 (МНідсз МНІ МАТ до ГАС-3 А) (5ЕБЕО ІЮ МО: 39); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: 40050 (ЗЕО ІЮ МО: 261)); домен СНІ ІдСї (5ЕО ІЮ МО: 10); шарнірну бо область Ідс1 (ЗЕО ІО МО: 32); варіант домену СН2-СНЗ ІдДС1, що містить заміни І 234А/ 235А і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 5); і С-кінець. 00336) Амінокислотна послідовність першого та третього поліпептидних ланцюгів САКТ 1 являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 284):
ЕІМІГТО5РАТ ІБІЗРОЕВАТ І5СВАБОБІЗ ЗМІ АМУМООКР СсСОАРВЦІМО АЗМААТаЇІРА вЕБаБОаБаТО ВБЕТІТІ55ІЕР ЕОРАМУУСОО в!БММУРТРЯО атм єІКаса БОСИаСОМОМ
ЕЗОСОУМОРОа ВОІВ ОСКАВ СІТЕЗМ5ОМН МУВОАРОКОЇ ЕМУМАМІММОсС 5КАУМАОБУК
САЕТІЗВОМО КМТ ЕГОММ5 І ВАЕОТАМУМ САТМОрУМУсСО стіМтУ55а со5БаАвТКаР
ЗМЕРІ АРОК ЗІБаСТАА с СІМКОМЕРЕР УТУБМУМЗСОСАЇ Т5ОМНТЕРАМ 05501 515
ЗММТМРБОББІ аТОТМІСМУМ НКРОЬМТКМОК АМЕРКЗСОКТ НТСРРОРАРЕ АдАССРБМУНІ ЕЕ
РРКРКОТІ МІ ТАЕРЕМТСММ МОМ5НЕОРЕМ КЕММУУМУраМЕ УНМАКТКРАЕ ЕОУМЗТУВУМ
ЗМІ ТМІНОСМУ ІМОКЕМКСКМ ЗМКАГРАРІЕ КТІЗКАКОЕОР ВЕРОМУТІРР 5ВЕЕМТКМОМ
ЗІТСІУКОаЕМ РБЗОІАМЕМЕВ МООРЕММУКТ ТРРМОБОСО БЕРІУБ5КІТМО КкБАУМУОСаММЕ
ЗСЗУММНЕАЇІ Н МНУТОК5БІ БІ РА
І00337| Другий та четвертий поліпептидні ланцюги САКТ 1 містять у напрямку від М-кінця до
С-кінця: М-кінець; домен Мі. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (Мі г дс-з
МІ. МАТ до ІГ АО-3 А) (ЗЕО ІЮО МО: 40); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СбЄСО5ООСО (5ЕО
ІО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео-ї МН МАТ до РО-1 А) (ЗЕО ІЮО МО: 64); проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: | пСс(50 (ЗЕО ІЮ МО: 261)); домен Сі. каппа-ланцюга (ЗЕО ІЮО МО: 8); і С-кінець. 00338) Амінокислотна послідовність другого та четвертого поліпептидних ланцюгів САКТ 1 являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 285):
ЕІМІГТО5РАТ ІБІЗРОЕВАТ ІЗСВАБОБУО ЗМІ АММУООКР СОАРВИІМО АЗМААТаїІРА вЕБаБОаБаТО БТІТІЗ5ІЕР ЕОБАМУМСОО 55ММРАТРОО аткМвІКоса БаСспаОмМОГгО
ОМУСАСІІКРО ЕТІ5ІТСАММ спаБЕБОМУМУМ УМВОРРОКОЇ ЕУМІСЕІМНМО МІМОМРБІ Кк
ВМТІ5ІОТ5К МОББ5ЗІКІ АЗМ ТААОТАУМУУС АБаХБОМЕММ МгОРМЖУСОСТІ МТУ асо
САТМААРБМЕ ІЕРРБОЕОЇК БОТАБМУСІЇ ММЕМРАЕАКМ ОМУКМОМАГОВ аМЗОЕЗМТЕО
О5КОБЗТУ5БІ 5 5ТІ ТІ КАВУ ЕКНКУМАСЕМ ТНОСІ 55РМТ К5ЕМАСЕС р Зразкові п'ятиланцюгові діатіла, що містять область Ес
Ї00О339| Були отримані два зразкових біспецифічних п'ятиланцюгових діатіла, що містять область Ес, РО-їхГ дО-3, що містять домени СІ/СНІ і домени, що сприяють утворенню гетеродимерів, з Е/К-спіраллю, і позначені "АВТ Е" ї "ПАВТ а". Структура зазначених діатіл, що містять область Ес, докладно описана нижче. Зазначені зразкові діатіла РО-1х! АО-3 є ілюстративними і жодним чином не обмежують обсяг даного винаходу. 1ОАВТЕ
Ї00340| БАКТ Е являє собою біспецифічне п'ятиланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить три сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, один сайт зв'язування, специфічний у відношенні ГАС-3, домени Сі/СНІ, варіант області Ес ІдсСї!, що несе виступ/западину, модифікований для зниження зв'язування з Есук і збільшення періоду напіввиведення, і домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К-спіраллю. Перший поліпептидний ланцюг БАКТ РЕ містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінець; домен УН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео-ї МНІ МАТ до лРО-1 7) (З5ЕО ІЮ
МО: 147); домен СНІ ІдС1 (5ЕО ІЮ МО: 10); шарнірну область Їд1 (ЗЕО ІО МО: 32); несучий западину домен СН2-СНЗ ІдС1, що містить заміни І 234А/ 235А/М252у/52541/1256Е/М4З4А/
НаЗБК їі позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІО МО: 260, в якій Хі являє собою А, Хг2 являє собою А; Хз являє собою У, Ха. являє собою Т, Хо являє собою Е, Хв являє собою 5, Х7 являє собою А, Хв являє собою У, Хе являє собою А, Хо являє собою К і Хі: відсутній); і С-кінець.
Ї00341| Амінокислотна послідовність першого поліпептидного ланцюга САКТ Е являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 273):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУЗЕТ 5БУММУММУМУУВОА РООСІГЕУМЛаМ ІНРЗОЗЕТМІ
РОКЕКОВМТІ ТУМОКБ5ТЗТАМ МЕ! 55185мО ТАМУМСАВЕН УСсТОРЕАУМса ОСТІ МТУ5БА
ЗІКОРОМЕРІ АРБЗБКОТЗОС ТААГОесСіМкКО МЕРЕРУТУБМУ МА! Т5ОаМН ТЕРАМ О5505
ЇМ5ІЗБУМТМ РБББІТОГМ ІСМУМНКРОМ ТКУОКАМЕРК ЗСОКТНТІСРР СРАРЕАДСаР
ЗМЕГЕРРКРК ОТІМІТВЕРЕ МТСУУМОМ5Н ЕОРЕМКЕМУМУМ МрамМЕМНМАК ТКРАЕЄєОУМ5
ТУВУМ5МІ ТМ ІНООУМІМОКЕ УКСКМ5МКАЇ РАРІЕКТІЗК АКОСОРАВЕРОМ УТІ РРОВЕЕМ
ТКМОУБІБСА УКагУРБОІА МЕМЕЗМООРЕ ММУКТТРРМІ ОБОСОЗЕР М КІТУрКЗАМО
ОСММЕЗСЗУМ НЕАЇ НАКУТО КБІ 5І ЗР 00342 Другий та п'ятий поліпептидні ланцюги САКТ Е містять у напрямку від М-кінця до С- кінця: М-кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі рої МІ 2
МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 153), домен СГ. каппа-ланцюга (5ЕО ІЮ МО: 8) і С-кінець. 60 00343) Амінокислотна послідовність другого та п'ятого поліпептидного ланцюга ОАКТ Е являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 274):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО
СУРЗАЕБаБа БОаТОРТІТІЗ БІЕРЕОРАММ ЕСООБКЕМРУ ТРОаСпаткМЕ! КАТУААРБМЕ
ІЕРРБОБОЇК БИатТАБММУСІЇ ММЕМРАЕАКМ ОМКМОМАГОБ СМБОЕБМТЕО ОБКОБТУБІ 5
ПІ ЗКАОМ ЕКНКУМАСЕМ ТНОІ 55РМТ К5ЕМАСЕС (00344) Третій поліпептидний ланцюг БАКТ Е містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео-ї МНІ МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІЮО МО: 147); домен СНІ ІдС1 (ЗЕО ІЮО МО: 10); шарнірну область Ідс1 (5ЕО ІЮ
МО: 32); несучий виступ домен СН2-СНЗ Ід, що містить заміни І 234А/Л 235А/М252У/52547Т/
Т256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 260, в якій Хі являє собою А, Х2 являє собою А, Хз являє собою У, Ха являє собою Т, Хо являє собою Е, Хв являє собою М, Х7 являє собою Ї, Хв являє собою У, Хо являє собою Н, Хо являє собою Н і Хі: відсутній); проміжний лінксерний пептид (СйСС5БИаСКИвОСИа (БО ІЮ МО: 262)); домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГАС-3 (Міїлсоз М4 МАТ до лі АО-3 1) (5ЕБО ІО МО: 54); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: сОос5БОСОО (5БО ІЮ МО: 14));) домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮО МО: 147); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СССОИсСС (ЗЕО ІЮО МО: 15))); домен, що сприяє утворенню гетеродимера (Е-спіраль) (ЕМААГЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААЇГ ЕК (5ЕО 10
МО: 21)); ї С-кінець. 00345) Амінокислотна послідовність третього поліпептидного ланцюга САКТ Е являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 275):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУЗЕТ 5БУММУММУМУУВОА РООСІГЕУМЛаМ ІНРЗОЗЕТМІ
РОКЕКОВМТІ ТУМОКБ5ТЗТАМ МЕ! 55185мО ТАМУМСАВЕН УСсТОРЕАУМса ОСТІ МТУ5БА
ЗІКОРОМЕРІ АРБЗБКОТЗОС ТААГОаСіУкКО МЕРЕРУТУМО5МУ М5ОАІЇТ5ОУН ТЕРАМ О5505
ЇМ5ІЗБУМТМ РБББІТОГМ ІСМУМНКРОМ ТКУОКАМЕРК ЗСОКТНТІСРР СРАРЕАДСаР
ЗМЕГЕРРКРК ОТІМІТВЕРЕ МТСУУМОМ5Н ЕОРЕМКЕМУМУМ МрамМЕМНМАК ТКРАЕЄєОУМ5
ТУВУМ5МІ ТМ ІНООУМІМОКЕ МКСКМ5МКАЇ РАРІЕКТІЗК АКОСОРАВЕРОМ УТІ РРОВЕЕМ
ТКМОМУБІ МС! МКагмРБОІА МЕМЖЕЗМООРЕ ММУКТТРРМІ О5БОрОаБЕРІ М КІТУрКЗАУМО
ОСМУРЗСЗММ НЕАГНМНУТО КБІ БІ РОС сБСаСсОЮЗВИасСИО ІММТОТРІБІ 5МТРИаОРАБІ
ЗСК55О5БІІН ЗОАКТУІ! ММ! ГОКРООРРЕВ 01 1МІ МУ5Е 05 сУРОВЕБОаБа ЗатоЕТІКІЗ
ВМЕАЕОУМаММ УСМОСТНнНЕРМ ТРаСсСОЕаТКУєІ КОСОЗОСОСО МОЇ МОБОАЕМ ККРОАБУКУ5
СКАБОаУОЕТО УМУММУМУМАОАР сОСІГЕУМЛОМІ НРБЗОБЕТУМГО ОКЕКОВМТІТ МОКЗТЗТАУМ
ЕЇ55ІВЗЕОТ АМУУСАВЕНУ СсСТ5РЕАУМСО стіУтУ5Бас СассЕМААГЕ КЕМААЇ ЕКЕМ
ААЇ ЕКЕМААЇ ЕК
(00346) Четвертий поліпептидний ланцюг САКТ Е містить у напрямку від М-кінця до С-кінця:
М-кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі ро-ї М 2 МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СОСОБОСОО (5ЕО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (МНідсз МНІ МАТ до лі да-3 1) (ЗЕО ІЮ МО: 49); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: ССС (ЗЕО ІЮ МО: 15)); домен, що сприяє утворенню гетеродимера (К-спіраль) (КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-
КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ (ЗЕО ІО МО: 22))); і С-кінець.
І00347| Амінокислотна послідовність четвертого поліпептидного ланцюга ЮАКТ ГЕ являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 276):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаЗасаИасО
МОГМО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОаУТЕТМ МаММУМУМУВОАР СпСОСІЕМУМОМ/І МТУТаЕЗТМА
СОРЕСВЕМЕ5 МОТ5АБТАМІ ОІ55ІКАЕОТ АМУУСАВЕЗІ УруУЗмМОрУМмус Ф доаттУтУзБа аСОасакмМААї КЕКМААЇ КЕК МААЇ КЕКМАА І КЕ 2рАНТОа 00348) АКТ о являє собою біспецифічне п'ятиланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить два сайти зв'язування, специфічних у відношенні РО-1, два сайти зв'язування, специфічних у відношенні ГАС-3, домени СІ/СНІ, варіант області Ес ІдсС1, що несе виступ/западину, модифікований так, щоб знижувати зв'язування з Есук і збільшувати період напіввиведення, і домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К-спіраллю. Перший поліпептидний ланцюг САКТ С містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-кінець; домен УН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з ГАС-3 (МНідс-з МНІ МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО
ІО МО: 49); домен СНІ ІдС1 (5ЕО ІО МО: 10); шарнірну область Їд1 (5ЕО ІО МО: 32); несучий западину домен СН2-СНЗ дос, що містить заміни 1234А/235А/М252Уу/525471/1256БЕ/
М4З4А/НаЗ5К і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІЮ МО: 260, в якій Хі являє собою А, Хо 60 являє собою А; Хз являє собою У, Ха являє собою Т, Хо являє собою Е, Хв являє собою 5, Х7 являє собою А, Хв являє собою У, Хо являє собою А, Х:іо являє собою К і Хі: відсутній); і С- кінець.
Ї00349| Амінокислотна послідовність першого поліпептидного ланцюга ОАКТ С являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 277):
ОМОЇ МОБСОАЕ УККРОАБУКМ БСКАБОУТЕТ ММаММУММУАОА РОСС ЕМ МОМ ІМТУТИЕБТУ
АРОБРЕСВЕМЕ 5МОТ5АБТАМ І1О0І55ІКАЕО ТАМУУСАВЕЗ ІМОУМ5МОоУМ аОоатТтУТУ55
АБТКОРОМЕР ІАРББ5БКОТ5ОС СТААГОЯСІМК ОМЕРЕРМТМ5 М/М5БОаАІТ5ОМ НТЕРАМІ 055
СІМ5БІ5БММТ МРБОББІТОТ МІСМУМНКРО МТКУМОКАМЕР К5О5СОКТНТСР РОРАРЕДАСО
РОМЕЕРРКР КОТІМІТВЕР ЕМТСУМУМОУ5 НЕОРЕМКЕММ МУрОаМЕМНМА КТКРАЕЄЕОММ
ЗГУВАМУ5МІТ МІНОБУМІ МаК ЕМКСКУ5МКА І РАРІЕКТІ5 КАКОСОРАЕРО МУУТІ РРОВЕЕ
МТКМОМ5І5С АМКОРЕМУРБОЇ АМЕМЕБЗМООР ЕММУКТТРРМ 1О5ОСБЕРІМ КІ ТМОКБАМ
ООООММЕБСОМ МНЕАЇ НАКМТ ОКБІ 5І РИ 00350 Другий та п'ятий поліпептидні ланцюги САКТ С містять у напрямку від М-кінця до С- кінця: М-кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (Мі І до-з МІ 4
МАТ до лі АС-3 1) (5ЕО ІО МО: 54), домен СІ. каппа-ланцюга (5ЕО ІЮ МО: 8) і С-кінець.
Ї00351| Амінокислотна послідовність другого та п'ятого поліпептидного ланцюга ОАКТ о являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 278):
РІММТОТРІ5 ІБМТРООРАБ ІЗСК55ОБІЇ НеБОАКТМІ ММ ПГОКРООРРЕ ВИМІМ5ЕЇ о
ЗаМРОВЕБОав5 с5ОаТОБТІКІ 5АМЕАЕОМОаМ УУСМОСсСТНнНЕР УТРОсаОаТКкМЕ ІКВАТМААРБМ
ЕЕРРБОБЕОЇ К5аИатАБММСІ ІММЕМРАЕАК МОМУКМОМАГО 5аМ5ОЕБМТЕ О0БКОБТУБІ.
З5ТІ ТІ ЗКАЮ МЕКНКУМАСЕ УТНОІ 55РМ ТК5ЕМАОЕС (00352) Третій поліпептидний ланцюг САКТ С містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (МНідсз МНІ МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІЮ МО: 49); домен ІДС1 СНІ (ЗЕО ІЮ МО: 10); шарнірну область ІдД1 (5ЕО ІЮ
МО: 32); несучий виступ домен СН2г-СНЗ дсті, що містить заміни 1234А/235А/
М252Уу/52541/1256Е і позбавлений С-кінцевого залишку (ЗЕО ІО МО: 260, в якій Хі являє собою
А, Х2 являє собою А, Хз являє собою У, Ха являє собою Т, Хо являє собою Е, Хв являє собою МУ,
Х? являє собою |, Хв являє собою У, Хо являє собою Н, Хо являє собою Н і Хі: відсутній); проміжний лінкерний пептид (ССС (ЗЕО ІЮ МО: 262)); домен МІ. моноклонального
Зо антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі ро-ї М 2 МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: сОос5БОСОО (5БО ІЮ МО: 14));) домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео МНІ МАТ до лРО-1 7) (ЗЕО ІЮО МО: 147); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СССОИсСС (ЗЕО ІЮО МО: 15))); домен, що сприяє утворенню гетеродимера (Е-спіраль) (ЕМААГЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААГ ЕК-ЕМААЇГ ЕК (5ЕО 10
МО: 21)); і С-кінець.
Ї00353)| Амінокислотна послідовність третього поліпептидного ланцюга ОАКТ о являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІО МО: 279):
ОМОЇ МОБСОАЕ УККРОАБУКМ БСКАБОУТЕТ ММаММУММУАОА РОСС ЕМ МОМ ІМТУТИЕБТУ
АРОБРЕСВЕМЕ 5МОТ5АБТАМ І1О0І55ІКАЕО ТАМУУСАВЕЗ ІМОУМ5МОоУМ аОоатТтУТУ55
АБТКОРОМЕР ІАРББ5БКОТ5ОС СТААГОЯСІМК ОМЕРЕРМТМ5 М/М5БОаАІТ5ОМ НТЕРАМІ 055
СІМ5БІ5БММТ МРБОББІТОТ МІСМУМНКРО МТКУМОКАМЕР К5СОКТНТІСР РОРАРЕАДАСО
РОМЕЕРРКР КОТІМІТВЕР ЕМТСУМУМОУ5 НЕОРЕМКЕММ МУрОаМЕМНМА КТКРАЕЄЕОММ
ЗГУВАМУ5МІТ МІНОБУМІ МаК ЕМКСКУ5МКА І РАРІЕКТІ5 КАКОСОРАЕРО МУТІ РРОВЕЕ
МТКМОМ5І МС І МКОРМРБОЇ АМЕМЕБМООР ЕММУКТТРРМ ГО5БО5ЕРІ М КІ ТМОКБАМ
ООСОММЕ5СеМ МНЕАІЇНМНУТ ОКбІБІЗРОС сОаБаСИБОасСо БМ ТО5РАТ І5І5РОЕВАТ
І5СВАБЕВБМО ММОаМ5ЕМММЕ ООКРООРРКІ ГІНААБМОСе сМРОВЕБаБа БатовЕТтІТІБ
З ЕРЕОРАММ ЕГСООБКЕМРУ ТРсасаткМєІ КкасаБасиасОо МОЇ мМОБОАЕМ ККРОАБУКМУ5
СКАБОУБЕТ5 ММУМММУМАОАР СОС ЕУМОМІ НРООБЕТУМГО ОКЕКОВМТІТ МОК5Т5ТАУМ
ЕГ/55ІА5ЕОТ АМУУСАВЕНУ СТ5РЕАУМУСО сТтІМТУ55Оас СОсОЕМААгЕ КЕМААГЕКЕМ
БО ААЇ ЕКЕМААЇ ЕК
(00354) Четвертий поліпептидний ланцюг САКТ с містить у напрямку від М-кінця до С-кінця:
М-кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (Мі ро-ї М 2 МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СОСОБОСОО (5ЕО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео- МНІ МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 147); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: КСО (ЗЕО ІЮ МО: 15)); домен, що сприяє утворенню гетеродимера (К-спіраль) (КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-
КМААЇІ КЕ-КМААЇ КЕ (ЗЕО ІЮО МО: 22)); і С-кінець. 00355) Амінокислотна послідовність четвертого поліпептидного ланцюга САКТ С являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 280): бо ЕІМГТО5РАТ І5І5РОЕНВАТ І 5СВАБЕБМО МУОаМ5ЕМММЕ ООКРООРРКІ. ІПІНААБМОСО аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаЗасаИасО
МОГМО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОаМОЕТО УМУММУМУМАВОАР СОС ЕУМСМІ НРЗОБЕТМ 0
ОКЕКОВМТІТ МОК5ОТЗТАМУМ Б! 551А85ЕОТ АМУУСАВЕНУ СТ5РЕАУМСО атіУТУЗЗас
СасКкакКМАдІ Кк ЕКМААЇ КЕКМ ААЇ КЕКМААЇ. КЕ
Е Зразкове трьохланцюгове діатіло, що містить область Ес, що має Е/К-спіраль
Ї0ОЗ356)| Згідно з даним винаходом додатково запропоновані біспецифічні трьохланцюгові діатіла, що містять область Ес, РО-їхГ АО-3, які містять домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К-спіраллю. Було отримане зразкове біспецифічне трьохланцюгове діатіло, що містить область Ес, РО-1хІГ АС-3, які містять домени, що сприяють утворенню гетеродимера, 3 Е/К-спіраллю, позначене як "САНТ Н". Нижче докладно описана структура зазначеного діатіла, що містить область Ес. Зазначене зразкове діатіло РО-їхГ АО-3 є ілюстративним і жодним чином не обмежує обсяг даного винаходу.
Ї00357| САКТ Н являє собою біспецифічне трьохланцюгове діатіло, що містить область Ес, яке містить один сайт зв'язування, специфічний у відношенні РО-1, один сайт зв'язування, специфічний у відношенні ГАС-3, варіант несучої виступ/западину області Ес Ідс1, модифікований для зниження зв'язування з ЕсуК, і домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К-спіраллю. 00358) Перший поліпептидний ланцюг АКТ Н містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; домен МІ моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МІ ро МІ/2 МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІО МО: 153); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СОСОБОСОО (5ЕО ІЮО МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (МНідсз МНІ МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІЮ МО: 49); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: СКС (ЗЕО ІЮ МО: 15)); домен, що сприяє утворенню гетеродимера, (Е-спіраль) (ЕМААГЕК-ЕМААГЕК-
ЕМААЇ ЕК-ЕМААЇ ЕК (ЗЕО ІО МО: 21)); проміжний лінкер (спейсер-лінкер 3: СОССОСОКТНТСРРОР (ЗЕО ІЮО МО: 263)); несучий виступ домен СН2-СНЗ ІдсС1І, що містить заміни І234АЛ/Л 235А і містить С-кінцевий залишок лізину (ЗЕО ІЮ МО: 6); і С-кінець.
Ї00359| Амінокислотна послідовність першого поліпептидного ланцюга САКТ Н являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 281):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММаМ5ЕМММЕ ООКРООРРКІ ПІНААЗМОСО
Зо аУРЗАЕБЗаБа ЗаТОРТІТтІ5 51ЕРЕОБРАМУ ЕСООБКЕМРУ тТРасаткМЕ КкасаЗасаИасО
МОГМО5ОАЕМ ККРОАБУКУ5 СКАБОаУТЕТМ МОаММУМУМАВОАР СОС ЕМУМИМ/І МТМТОаЕЗТУА
СОРЕСВЕМЕ5 МОТ5АБТАМІ ОІ55ІКАЕОТ АМУУСАВЕЗІ УруУЗмМОрУМмус Ф доаттУтУзБа сСОсОаЕМАА! ЕКЕМААГЕКЕ МААГЕКЕМАА ГЕКаСООКТН ТОРРСОРАРЕА даайРБМРБІ ЕР
РКРКОТІМІЗ АТРЕМТСУМУМ ОМ5НЕОРЕМК ЕММУУМрамЕМ НМАКТКРАЕЕ ОУМ5ТУВУМ5
З5 МІ ТМІНООСУММІ МОакКЕМУКСКУЗ МКАГРАРІЕК ТІЗКАКОЕОРА ЕРОМУТІРР5 ВЕЕМТКМОМ5
ЇМУСІМКОаЕМР 5ОІАМЕМЖМЕЗМ СОРЕММУКТТ РРМОБОСОР РІ УБ5КІТУЮОК 5АМООСММУЕ5
СЗУМНЕА НМ НУТОКОІ 51 5
Рак 00360) Другий поліпептидний ланцюг БАКТ Н містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; домен МІ. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (Мі г дс-з МІ 4 МАТ до лі Ас-3 1) (5ЕО ІЮО МО: 54); проміжний лінкерний пептид (лінкер 1: СбССО5БОСОО (5ЕО ІЮ МО: 14)); домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео- МНІ МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 147); цистеїновмісний проміжний лінкерний пептид (лінкер 2: КСО (ЗЕО ІЮ МО: 15)); домен, що сприяє утворенню гетеродимера (К-спіраль) (КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ-
КМААЇ КЕ-КМААЇ КЕ (5ЕО ІЮ МО: 22)); і С-кінець.
Ї00361| Амінокислотна послідовність другого поліпептидного ланцюга АКТ Н являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 282):
РІММТОТРІ5 ІБМТРЕООРАБ ІЗСК5БОБІЇ НЗБАКТУМІ ММ ІПГОКРООРРЕ ВИМ У5ЕГО замуУРОовЕЗав абзатТОгТтІКкІ 5АМЕАЕєЕОМаМ МУСМОсСТнНЕР УтТРОасОаткМЕ ІКОСсО,аБаСОС
ОМОГМО5ОАЕ УМККРОАБУКМ 5СКАБОМОЕТ 5УМУММУМУМУВОА РОСС ЕМОМ ІНРБОБЕТУМІ
ВОКЕКОВМТІ ТУМОКЗТЗТАМ МЕІ!551А8А5ЕО ТАМУУСАВЕН УсаТОРЕАММУсС ОСТІ МгУ5Ба аСОасакмМААї КЕКМААЇ КЕК МААЇ КЕКМАА І КЕ (00362 Третій поліпептидний ланцюг САКТ Н містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; шарнірну область (ОКТНТОСРРСР (5ЕО ІО МО: 31), несучий виступ домен СН2-СНЗ ІДС, що містить заміни І 234А/ 235А і містить С-кінцевий залишок лізину (ЗЕО ІЮО МО: 7) і С-кінець. 00363) Амінокислотна послідовність третього поліпептидного ланцюга САКТ Н являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 283):
ОКТНТСРРСОР АРЕДАСОРБЗМ РГЕРРКРКОТ І МІЗАТРЕМТ СУМУМОУЗНЕО РЕМКЕМУ/ УМО
СМЕМНМАКТК РАЕЕОУМЗТУ ВАМУМУБ5МІТМІН ООУМІМОаКЕМК СКУЗМКАГ РА РІЕКТІЗКАК 60 СОРВЕРОМУТ ІГРРОВЕЄЕМТК МОУБІЗСАМУК сСЕМРЗОІАМЕ МЕЗМООРЕММ УКТТРРМІ 05 равегнгі ук тМоКкЗАМООСС ММЕЗСЗМУМНЕ А НМАУТОКЗ І 5І РОК
Е Зразкове біспецифічне антитіло
Ї00364| Було отримане зразкове чотириланцюгове біспецифічне антитіло РО-1хіІ АО-3, позначене як "ВБАВ А". Структура зазначеного біспецифічного антитіла докладно описана нижче. Зазначене зразкове біспецифічне антитіло РО-1х| АО-3 є ілюстративним і жодним чином не обмежує обсяг даного винаходу.
Ї00365| ВБАВ А являє собою біспецифічне антитіло, що містить один сайт зв'язування, специфічний у відношенні РО-1, один сайт зв'язування, специфічний у відношенні ГАс-3, варіант Ес Ідс1ї, модифікований для зниження зв'язування з Есук і для сприяння комплексоутворенню між двома різними поліпептидами важкого ланцюга (див. наприклад, УМО 2011/143545). 00366) Перший поліпептидний ланцюг В5АВ А містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МНео-ї МНІ МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІЮО МО: 147); домен СНІ Ід01 (ЗЕО ІЮ МО: 10); варіант шарнірної області Ід, що містить заміни 0221Е/Р228Е (пронумеровані відповідно до системи ЕС, описаної в Кабаї єї аІ., і виділені підкресленням у 5ЕО ІЮ МО: 286 нижче); варіант домену СН2-СНЗ ІДС1, що містить заміни І 234А/ 235А/ З368Е (заміни виділені підкресленням у 5ЕО ІЮ МО: 286 нижче) і позбавлений С-кінцевого залишку; і С-кінець.
Ї00367| Амінокислотна послідовність першого поліпептидного ланцюга В5АВ А являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 286):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУЗЕТ БУММУММУМУУВОА РОСС ЕУЛОаМ ІНРЗОЗЕТУММ
БОКЕКОВМТІ ТМОК5ОТЗТАМ МЕ! 55ІА5ЕО ТАМУУСАВЕН УсТ5РЕАУМС ОСТІ МУЗА
ЗІКОРОМЕРІ АРЗБЗКОТООСС ТААГОесСіМкКО МЕРЕРУТУБМУ МБОАІТ5ОаМН ТЕРАМ О5505
ЇМ5ІЗБУМТМ РБЗББІТОГТМ ІСМУМНКРОМ ТКМОКАМЕРК ЗСЕКТНІСРЕ СРАРЕАДАСаР
ЗМЕГЕРРКРК ОТІМІЗВТРЕ МТСУММУОУ5Н ЕОРЕУМКЕМММ МрамМЕМНМАК ТКРАЕЄОУМ5
ТУВУМ5МІ ТМ ІНОСУЛМОКЕ УКСКУБМКАЇ РАРІЕКТІЗК АКОСОРВЕРОМ МТ РРОВЕЕМ
ТКМОМБІТСЕ МКОаРЕМРБОІА МЕМЕЗМООРЕ ММУКТТРРМІ О5БООБЕР МБ КІТМОКАУО
ОСММЕБСОСЗУМ НЕАЇ НМНУТО КІ 5І Ра 00368) Другий поліпептидний ланцюг ВБЗАВ містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М-
Зо кінець; домен МІ моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з РО-1 (МІ ро МІ/2 МАТ до лЛРО-1 7) (ЗЕО ІЮ МО: 153); домен СІ. каппа-ланцюга (ЗЕО ІЮ МО: 8) і С-кінець. 00369) Амінокислотна послідовність другого поліпептидного ланцюга ВЗАВ являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 287):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО
СУРЗАЕБаБа БОаТОРТІТІЗ БІЕРЕОРАММ ЕСООБКЕМРУ ТРОаспаткМЕ! КАТМААРБЗМЕ
ІЕРРБОБОЇК БОТАБМУСІЇ ММЕМРАЕАКМ ОМКМОМАГОБ СМБОЕЗМТЕО ОБКОБТУБІ 5
ЗТ ТІ ЗКАВУ ЕКНКУУМАСЕМ ТНОСІ 55РМТ К5ЕМВОЕС 00370 Третій поліпептидний ланцюг В5АВ А містить у напрямку від М-кінця до С-кінця: М- кінець; домен МН моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з | АС-3 (МНідсз МНІ МАТ до лі Ас-3 1) (ЗЕО ІЮ МО: 49); домен СНІ ІдС1 (ЗЕО ІЮО МО: 10); варіант шарнірної області Ідс1, що містить заміни 02212/Р228К (заміни виділені підкресленням у 5ЕО ІЮ МО: 288 нижче); варіант домену СН2-СНЗ Ідс1!І, що містить заміни Г/234А//235А/1409НА (заміни виділені підкресленням у ЗЕО ІЮ МО: 288 нижче) і позбавлений С-кінцевого залишку; і С-кінець.
Ї00371| Амінокислотна послідовність третього поліпептидного ланцюга ВЗАВ А являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 288):
ОМОГ МОБОАЕ МККРОАБУКМ ЗСКАБИаМУТЕТ ММаММУМУУВОА РОС ЕМ МОМ ІМТУТОЕЗТУ
АРОРЕСВЕМЕ 5МОТ5АБЗТАМ 1ОІ55ІКАЕО ТАМУУСАВЕЗ ІМрУУЗМОММУ сОоатТтУТУБ5
АЗТІКОРОМЕР ІГАРББЗКОТ5О СТААгОаСІМК ОМЕРЕРМТУМ5 МУМЗОАІ!Т5ОаМ НТЕРАМ О55
СІ М5І55ММІ МРБББІТОТ МІСМУМНКРО МТКМОКАМЕР КЗСВКТНТСР ВСРАРЕАДААСС
РБУБЕРРКР КОТІМІЗВТР ЕМТСУУММОУМ5 НЕОРЕМКЕМУ МУрамМЕУНМА КТКРАВЕЕОУМ
ЗТУВУУБ5МІТ МІНОСМЛМОаК ЕМКСКМОМКА І РАРІЕКТІБ КАКОСОРАВЕРО МУМТІ РРОВЕЕ
МТКМОМБІТО ГУКОаЕМРБОЇ АМЕМЖЕБМООР ЕММУКТТРРМ ГО5ООаБЕРІ М БВІТМОКВАМ
ОООСММУЕБСЗМ МНЕАЇ НМНУТ ОКБІ БІ ЗРО
(00372) Четвертий поліпептидний ланцюг В5АВ А містить у напрямку від М-кінця до С-кінця:
М-кінець; домен Мі. моноклонального антитіла, здатного зв'язуватися з І АС-3 (МІ гдс-з М 4 МАТ до лі АО-3 1) (ЗЕО ІО МО: 54); домен СІ. каппа-ланцюга (5ЕО ІЮО МО: 8) і С-кінець.
І00373| Амінокислотна послідовність четвертого поліпептидного ланцюга ВБАВ А являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 289):
РІММТОТРІ5 ІБМТРЕООРАБ ІЗСК5БОБІЇ НЗБАКТУМІ ММ ІПГОКРООРРЕ ВИМ М5ЕЇГО 60 зЗауУРОоВЕЗав абзатОгТІКкІ 5АМЕАЕОМаМ УУСМОсСТнНЕР УТРасаткМЕ ІКАТУААРБМ
ЕЕРРБОБЕОЇ К5аИатАБММСІ ІММЕМРАЕАК МОМУКМОМАГО 5аМ5ОЕБМТЕ О0БКОБТУБІ.
З5ТІ ТІ ЗКАЮ МЕКНКУМАСЕ УТНОІ 55РМ ТК5ЕМАОЕС
ЇХ Еталонні антитіла
А Еталонні антитіла до РО-1 людини 003741 Для того, щоб оцінити й описати нові молекули, що зв'язують РО-1 людини, згідно з даним винаходом, використовували наступні еталонні антитіла: ніволюмаб (також відоме як 504, ВМ5-936558, ОМО-4538, МОХ-1106 і випущене на ринок під найменуванням ОРОІМОФ компанією ВгізіоІ-Муег5 Запцірб), антитіло Ід4 людини, позначене у даному документі як "МАТ до РО-їЇ А", і пембролізумаб (раніше відоме як ламбролізумаб, також відоме як МК-3475, 5СН- 900475, і випущене на ринок під найменуванням КЕУТКОВАФ компанією МегскК) гуманізоване антитіло ІдД04, позначене у даному документі як "МАТ до РО-1 В". 1 Ніволюмаб ("МАТ до РО-1 А") 00375) Амінокислотна послідовність варіабельного домену важкого ланцюга МАТ до РО-1 А містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 64) (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ОМОЇ МЕЗЗОСІЯ ММОРОВБІ ВІ ОСКАЗИаЇТЕ5 МБаМНУМУРОА РОаКаИагЕММАМ мУразквуУ дозУКанеЕтіІ 5ЗАОМ5КМТІ ЕЕ ГОММСВАЕО ТАМУМСАТМО рУМСОСТІ МТ У55 00376) Амінокислотна послідовність варіабельного домену легкого ланцюга МАТ до РО-1 А містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 65) (залишки СОВ. виділені підкресленням):
ЕІММГТО5РАТ І 5І 5РОЕВАТ І ЗСВАБЗОБЗУ5 ЗМІ АМ/МООКР СОАРА МО
АЗМВАТИаІРА НЕЗОаЗИаБИтТо ЕТІ ТІЗ5І ЕР ЕОБАУУУСОО 554 РАТЕСО
ОСТКМЕїК 2 Пембролізумаб ("МАТ до РО-1 В")
Ї00377| Амінокислотна послідовність варіабельного домену важкого ланцюга МАТ до РО-1 В містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 66) (залишки СОВНн виділені підкресленням):
ОМОЇ МОБОаМЕ УККРЕАБУКМ ЗБСКАБОМТЕТ МУУМУМУВОА РООСІ Еу/МОаа
Зо ІМРЗМаатМЕ МЕКЕКМАМТІ ТТО55ТТТАМ МЕ КОГО ТАМУУСАННЮ
ХВЕОМавгОоУМ СОСТТУТУ55 00378) Амінокислотна послідовність варіабельного домену легкого ланцюга МАТ до РО-1 В містить амінокислотну послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮ МО: 67) (залишки СОВ. виділені підкресленням):
ЕІМГТО5РАТ І 5І 5РОЕВАТ І 5СВАЗКОаМУ5 ТЗОаУЗМУІ НУМ ООКРООСАРВІ.
ПМГ АЗМІЕВ СМРАВЕбОаБОа 5ИаТОгТІ ТІВ БІ ЕРЕОБАМУ УСОНЗІВОІ РІ. тРаСсОСТКМУБІК
Х Способи одержання
І00379| Полінуклеотид до РО-1 людини та інші агоністи, антагоністи і модулятори. РО-1 можуть бути створені з полінуклеотидів і/або послідовностей антитіл до РО-1 1-15 за допомогою способів, відомих в даній області техніки, наприклад, синтетичних або рекомбінантних способів.
Один зі способів одержання зазначених пептидних агоністів, антагоністів і модуляторів включає хімічний синтез поліпептиду з наступною обробкою в умовах окиснення, що підходять для одержання нативної конформації, тобто правильних дисульфідних зв'язків. Зазначений спосіб можна здійснювати з використанням методологій, добре відомих фахівцям в даній області техніки (див., наприклад, КеїПеу, А. ЕР. еї аіЇ. (1990) й: СЕМЕТІС ЕмМсСІМЕЕВІМа РВІМСІРІЕ5 АМО
МЕТНОО5, Зейому, У.К. Ед., Рієпит Ргевзв, М.У., мої. 12, рр 1-19; Біеулат, У.М еї а!ї. (1984) 501
РНАБЕ РеЕРТІОЕ 5УМТНЕЗІ5, Рівтсе СПетіса! Со., ВНосКіога, І; див. також патенти США
МоМо4105603; 3972859; 3842067; і 3862925).
Ї0ОЗ80| Поліпептиди згідно з даним винаходом можуть бути легко отримані з використанням твердофазного пептидного синтезу (Ме!тійїйєїа, В. (1986) "Боїй Рназе 5Зупіпевів", 5сієпсе 232(4748):341-347; Ноцдніеп, В.А. (1985) "Сепега! Меїйоай Рог Тне Варіа Зоїїа-Рназе Зупіпевів ОЇ
Іагде Митбегїз ОЇ Реріїдев: З5ресіїйсну ОГ Апіідеп-Апіїроду Іпіегасіюп Аї Тне І єме! ОЇ Іпаїмідца!
Атіпо Асідв", Ргос. Май). Асад. сі. (0О.5.А.) 82(15):5131-5135; Сапезап, А. (2006) "Зоїїа-Рназе
БЗупіпевів Іп Пе Гмепіу-Рігвї Сепішгу", Міпі Веєу. Мед. Спет. 6(1):3-10).
І0ООЗ81| Згідно з іншим варіантом реалізації повністю людські антитіла, що містять один або більше СОР із МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1,
МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО- 1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1, або тих, які 60 конкурують з МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1,
МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО- 1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1 за зв'язування з РО-1 людини або його розчинною формою, можна одержати за допомогою комерційно доступних ліній мишей, які були модифіковані для експресії специфічних білків імуноглобулінів людини.
Трансгенні тварини, які призначені для одержання більше бажаної (наприклад, повністю людських антитіл) або більше стійкої імунної відповіді, також можуть бути використані для одержання гуманізованих антитіл або антитіл людини. Приклади підходящої технології включають ХЕМОМОШОВЕ"М (Ардеєпіх, Іпс., Фрімонт, Каліфорнія, США), НОМАВ-МООбЕФ і ТО
МОИЗЕ "М (обидві технології від Медагех, Іпс., Прінстон, Нью-Джерсі, США).
І00382| В іншому варіанті антитіла можуть бути отримані рекомбінантними способами й експресовані з використанням будь-якого способу, відомого в даній області техніки. Антитіла можуть бути отримані рекомбінантним способом, шляхом спочатку виділення антитіл, отриманих від тварин-хазяїнів, одержання послідовності гена та потім використання послідовності гена для рекомбінантної експресії антитіла в клітинах-хазяїнах (наприклад, клітинах лінії СНО). Інший спосіб, який можна застосовувати, являє собою експресію послідовності антитіла в рослинах (наприклад, тютюні) або трансгенному молоці. Були розкриті підходящі способи рекомбінантної експресії антитіл в рослинах або молоці (див., наприклад,
Ревїіегз вї аї. (2001) "Ргодисіюп ОЇ Апіїродієз Апа Апііїроду Егадтепів Іп Ріапів", Массіпе 19:2756;
Гопрего, М. єї а. (1995) "Нитап Апіїродієз гот Тгапздепіс Місе", Іпі. Неум. Іттипої! 13:65-93; і
Роїоск еї аї. (1999) "Ттапздепіс МІіЇК Аз А Меїнойд Рог Тпе Ргодисіюп ОЇ Весотрбіпапі Апііродієв",
У. Іттипо! Меїноде» 231:147-157). Підходящі способи одержання похідних антитіл, наприклад, гуманізованих, одноланцюгових і т.п., відомі в даній області техніки. В іншому варіанті антитіла можуть бути отримані рекомбінантними способами за допомогою технології фагового дисплея (див., наприклад, патенти США МоМо5565332, 5580717, 5733743, 6265150 і М/іпіег, С. єї а!. (1994) "Макіпд Апіїродієх Ву Рпаде бізріау Тесппоіоду", Аппи. Неу. Іттипої. 12.433-455). 00383) Антитіла або білок, що представляє інтерес, можуть бути піддані секвенуванню за допомогою розщеплення за Едманом, яке добре відоме фахівцям в даній області техніки.
Інформація про пептид, отримана на підставі даних мас-спектрометрії або розщеплення за
Едманом, може бути використана для розробки зондів або праймерів, які використовують для
Зо клонування білка, що представляє інтерес. 00384) Альтернативний спосіб клонування білка, що представляє інтерес, являє собою "панорамування" з використанням очищеного РО-1 або його частин для клітин, які експресують антитіло, що представляє інтерес, або білок, який містить один або більше СОК із МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО- 1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до
РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1, або антитіла, яке конкурує з МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1,
МАТ 14 до РО-1ї або МАТ 15 до РО-1 за зв'язування з РО-1 людини. Процедура "панорамування" може бути проведена шляхом одержання бібліотеки кКДНК з тканин або клітин, які експресують РО-1, гіперекспресії КДНК у другому типі клітин і скринінгу трансфікованих клітин другого типу для оцінки специфічного зв'язування з РО-1 у присутності або під час відсутності МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1,
МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1. Докладні описи способів, які використовують у клонуванні генів ссавців, що кодують білки клітинної поверхні, шляхом "панорамування", можна знайти в даній області техніки (див., наприклад, Агийо, А. вії аї. (1987) "МоіІесшаг Сіопіпд ОТ А СО28 сОМА Ву А Нідп-ЕПісіеєпсу СО5 Сеї! Ехргезвіоп Зувіет",
Ргос. Май). Асайд. осі. (0.5.А.) 84:8573-8577 і Єгерпап, у. еї а. (1999) "ЗеІесіїме СіІопіпу ОЇ СеїЇ
Бипасе Ргоїєїпв Іпмоїмей п Огдап ОеємеІортепі: Еріїпеїйа! Спіусоргоїєїп І Іпмоїмед Іп Могтаї
Еріїйеїа! Оійегепіайоп", Епдосіїпої. 140:5841-5854). 00385) Вектори, які містять полінуклеотиди, що представляють інтерес, можуть бути введені в клітину-хазяїна будь-яким із ряду підходящих способів, включаючи електропорацію, трансфекцію з використанням хлориду кальцію, хлориду рубідію, фосфату кальцію, ОЕАЕ- декстрану або інших речовин; бомбардування мікрочастинками; ліпофекцію; й інфікування (наприклад, якщо вектор являє собою інфекційний агент, такий як вірус коров'ячої віспи). Вибір векторів або полінуклеотидів для введення часто буде залежати від особливостей клітини- хазяїна. 00386) Будь-яка клітина-хазяїн, здатна до гіперекспресії гетерологічних ДНК, може бути 60 використана для виділення генів, що кодують антитіло, поліпептид або білок, що представляє інтерес. Необмежуючі приклади підходящих клітин-хазяїнів ссавців включають, але не обмежуються ними, клітини лінії СО5, Нега і СНО. Переважно клітини-хазяїни експресують
КДНК на рівні приблизно у 5 разів вище, більше переважно у 10 разів вище, ще більше переважно у 20 разів вище, ніж рівень відповідного ендогенного антитіла або білка, що представляє інтерес, якщо він присутній, в клітині-хазяїні. Скринінг клітин-хазяїнів для визначення специфічного зв'язування з РО-1 здійснюють за допомогою імунологічного кількісного дослідження або флуоресцентно-активованого сортування клітин (РГАС5). Клітина, яка гіперекспресує антитіло або білок, що представляє інтерес, може бути ідентифікована.
Ї00387| В область даного винаходу включені поліпептиди, які містять амінокислотну послідовність антитіл згідно з даним винаходом. Поліпептиди згідно з даним винаходом можуть бути отримані способами, відомими в даній області техніки. Поліпептиди можуть бути отримані шляхом протеолітичного або іншого типу розщеплення антитіл, рекомбінантними способами (тобто одиночні або гібридні поліпептиди), як описано вище, або за допомогою хімічного синтезу. Поліпептиди антитіл, особливо більше короткі поліпептиди, які містять не більше приблизно 50 амінокислот, зазвичай одержують шляхом хімічного синтезу. Способи хімічного синтезу відомі в даній області техніки й є комерційно доступними. Наприклад, поліпептид до
РО-1 людини може бути отриманий за допомогою автоматичного синтезатора поліпептидів, використовуючи твердофазний спосіб. 00388) В область даного винаходу включені варіанти антитіл МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО- 1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО- 1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1 і їх поліпептидних фрагментів, які зв'язуються з РО-1, включаючи функціонально еквівалентні антитіла та гібридні поліпептиди, які не виявляють істотного впливу на властивості зазначених молекул, а також варіанти, які мають підвищену або знижену активність. Модифікація поліпептидів є стандартним способом в даній області техніки і не має потреби в докладному описі у даному документі. Приклади модифікованих поліпептидів включають поліпептиди з консервативними замінами залишків амінокислот, однією або більше делеціями або додаваннями амінокислот, які не виявляють значного шкідливого впливу на функціональну активність, або використання хімічних аналогів. Залишки амінокислот, які можуть бути консервативно заміщені один одним, включають, але не обмежуються ними: гліцин/аланін; серин/треонін; валін/ізолейцин/лейцин; аспарагін/глутамін; аспарагінову кислоту/глутамінову кислоту; лізин/аргінін; і фенілаланін/тирозин. Підходящі поліпептиди також включають глікозиловані та неглікозиловані поліпептиди, а також поліпептиди з іншими посттрансляційними модифікаціями, такими як, наприклад, глікозилювання різними цукрами, ацетилування та фосфорилювання. Переважно заміни амінокислот будуть консервативними, тобто замінена амінокислота буде мати хімічні властивості, подібні з такими вихідної амінокислоти. Підходящі консервативні заміни відомі в даній області техніки, і приклади були наведені вище. Модифікації амінокислот можуть варіюватися від зміни або модифікації однієї або більше амінокислот до повної реорганізації області, такої як варіабельний домен. Зміни у варіабельному домені можуть змінювати афінність зв'язування та/або специфічність. Інші способи модифікації включають використання методик з'єднання, відомих в даній області техніки, включаючи, але не обмежуючись ними, ферментативні способи, окисну заміну та хелатування. Модифікації можуть бути використані, наприклад, для прикріплення міток для імунологічного кількісного дослідження, таких як прикріплення радіоактивних фрагментів для радіоїмунологічного кількісного дослідження. Модифіковані поліпептиди одержують з використанням процедур, традиційних в даній області техніки, і можуть бути піддані скринінгу з використанням стандартних кількісних досліджень, відомих в даній області техніки.
Ї00389| В область даного винаходу включені гібридні білки, які містять один або більше поліпептидів або антитіл МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1 згідно з даним винаходом. Відповідно до одного варіанта реалізації згідно з даним винаходом запропонований гібридний поліпептид, який містить легкий ланцюг, важкий ланцюг або обидва легкий та важкий ланцюги. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу гібридний поліпептид містить гетерологічну константну область імуноглобуліну. Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу гібридний поліпептид містить варіабельний домен легкого ланцюга та варіабельний домен важкого ланцюга антитіла, вироблюваного гібридомами, депонованими у загальнодоступних базах. Для цілей даного винаходу гібридний білок антитіла містить один або більше поліпептидних доменів, які специфічно зв'язуються з РО-1, й іншу амінокислотну 60 послідовність, до якої він не приєднаний у нативній молекулі, наприклад, гетерологічну послідовність або гомологічну послідовність з іншої області.
ХІ Застосування РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом
ЇООЗ390| В область даного винаходу включені композиції, включаючи фармацевтичні композиції, які містять РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом (наприклад, антитіла до РО-1, біспецифічні діатіла до РО-1 ї т.п.), поліпептиди, отримані із зазначених молекул, полінуклеотиди, що містять послідовності, які кодують зазначені молекули або поліпептиди, й інші агенти, описані у даному документі.
А Варіанти терапевтичного застосування
ЇОО391| Як обговорювалося вище, РО-1 відіграє важливу роль у негативній регуляції проліферації, функції та гомеостазу Т-клітин. Деякі з РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом мають здатність інгібувати функцію РО-1 і тим самим обертати інгібування імунної системи, опосередковане РО-1. У цьому зв'язку МАТ до РО-1 1, МАТ З до РО-1, МАТ 5 до РО-1,
МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО- 1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1, їх гуманізовані похідні та молекули, що містять їх РЮО-1-сполучні фрагменти (наприклад, біспецифічні антитіла, біспецифічні діатіла (включаючи, але не обмежуючись ними, САНТ-А, ОВАВТ-В, ОАВТ-С, ОСАВТ- р, САВТ-Е, ОАВТ-Е, ОАВТ-С, САВТ-Н, рАВТ-Ї і САКТ-У) і т.п.), або ті, які конкурують за зв'язування із зазначеними антитілами, можуть бути використані для блокування інгібування імунної системи, опосередкованого РО-1, і тим самим сприяють активації імунної системи. 00392 Зазначені біспецифічні РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом, які зв'язуються з РО-1, й іншою молекулою, що брали участь у регуляції контрольної точки імунної відповіді, яка присутня на поверхні клітини (наприклад, ГАс-3), підсилюють імунну систему, блокуючи інгібування імунної системи, опосередковане РО-1 і зазначеними молекулами контрольної точки імунної відповіді. Відповідно, зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна застосовувати для посилення імунної відповіді (наприклад, опосередкованої Т-клітинами імунної відповіді) суб'єкта. Зокрема, зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна застосовувати для лікування будь-яких захворювань або станів, пов'язаних із небажано подавленою імунною системою, включаючи рак і захворювання, які пов'язані з присутністю патогена (наприклад, бактеріальну, грибкову, вірусну
Зо інфекцію або інфекцію найпростішими). 00393) Види раку, які можна лікувати з використанням зазначених РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом, включають види раку, що характеризуються присутністю ракової клітини, вибраної з групи, що складається з клітини: пухлини наднирників, асоційованого зі
СНІДом раку, альвеолярної саркоми м'яких тканин, астроцитарної пухлини, раку сечового міхура, раку кісток, раку головного та спинного мозку, метастатичної пухлини головного мозку, раку молочної залози, пухлин сонної артерії, раку шийки матки, хондросаркоми, хордоми, хромофобної карциноми клітин нирок, світлоклітинної карциноми, раку товстої кишки, колоректального раку, шкірної доброякісної фіброзної гістіоцитоми, десмопластичної дрібнокруглоклітинної пухлини, епендимоми, пухлини Юінга, екстракістякової міксоїдної хондросаркоми, недосконалого кісткового фіброгенезу, фіброзної дисплазії кістки, раку жовчного міхура або жовчної протоки, раку шлунка, гестаційного трофобластного захворювання, герміногенної пухлини, раку голови і шиї, гепатоцелюлярної карциноми, пухлини острівцевих клітин, саркоми Капоши, раку нирок, лейкозу, ліпоми/доброякісної ліпоматозної пухлини, ліпосаркоми/злоякісної ліпоматозної пухлини, раку печінки, лімфоми, раку легенів, медулобластоми, меланоми, менінгіоми, множинної ендокринної неоплазії, множинної мієломи, мієлодиспластичного синдрому, нейробластоми, нейроендокринних пухлин, раку яєчників, раку підшлункової залози, папілярної карциноми щитовидної залози, пухлини паращитовидної залози, педіатричного раку, пухлини оболонок периферичних нервів, феохромоцитоми, пухлини гіпофізу, раку передміхурової залози, постеріальної увеальної меланоми, рідкого гематологічного розладу, метастатичного раку нирок, рабдоїдної пухлини, рабдоміосаркоми, саркоми, раку шкіри, саркоми м'яких тканин, плоскоклітинного раку, раку шлунка, синовіальної саркоми, раку яєчка, карциноми тимуса, тимоми, метастатичного раку щитовидної залози і раку матки. 00394) Зокрема, зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можуть бути використані для лікування колоректального раку, гепатоцелюлярної карциноми, гліоми, раку нирок, раку молочної залози, множинної мієломи, раку сечового міхура, нейробластоми, саркоми, неходжкінської лімфоми, недрібноклітинного раку легенів, раку яєчників, раку підшлункової залози і раку прямої кишки.
Ї00395| Пов'язані з патогенами захворювання, які можна лікувати з використанням 60 зазначених РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом, включають хронічні вірусні,
бактеріальні, грибкові та паразитарні інфекції. Хронічні інфекції, які можна лікувати з використанням РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом, включають вірус Епштейна-
Барр, вірус гепатиту А (НАМ); вірус гепатиту В (НВМ); вірус гепатиту С (НСМУ); віруси герпесу (наприклад, НЗМУ-1, НБУ-2, ННУ-6, СМУ), вірус імунодефіциту людини (ВІЛ), вірус везикулярного стоматиту (М5М), інфекції, викликані Васійї, Сішторасієї, СНоїега, Оірпійегпа, Епіегорасіеєг,
Сюопососсі, Неїїсобасієг руїогі, КІерзіє!Іа, І едіопеа, Мепіпдососсі, Мусобасієтійт, Рзейдотопав,
Рпеитопососсі, бактеріями рикетсіями, ЗаіІтопеїа, бетайа, 5іарпуіососсі, зігеріососсі, Теїапив,
Азрегаойив (Титідагв, підег і т.п.), Віавіотусев дептайаів, Сапаїда (аїІрісап5, Кгивеї, діабгайа,
Ігорісаїїв і т.п.), Стуріососси5 пеоїоптап5, видами роду Мисогаїе5 (тисог, арвзідіа, гпігорив),
Зрогоїнгіх зспепкії, Рагасоссідіоїдев Бгавзіїепвів, Соссідіоїдеб5 іттіїйв, Нібіоріазта сарзшашт,
Іеріозрігові5, Во!ітеїйа Бигодопегі, гельмінтними паразитами (анкілостомами, стрічковими хробаками, трематодами, плоскими хробаками (наприклад, Сіагдіа Іатбріа, МіспіпейЇа,
Ріептатоеба Ргадіїї5, Ттгурапозота бгисеї, Ттгурапозота сги?лі та І еїізптапіа допомапі). 00396) Зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна комбінувати з іншими протираковими агентами, зокрема, молекулами, які специфічно зв'язуються з раковим антигеном (наприклад, антитілами, діатілами). Протиракові препарати, які можна комбінувати з
РО-1-сполучними молекулами згідно з даним винаходом, включають молекули, які специфічно зв'язуються з ще одним раковим антигеном, включаючи: 19.9, виявлений при раку товстої кишки, у муцинах при раку шлунка; 4.2; АЗЗ (антиген колоректальної карциноми, АїЇтдміві, У. 2006, Мис! Мей Віої. Мом;33(8):991-998); АБАМ-9 (публікація патенту США 2006/0172350, РСТ публікація МО 06/084075); АНб, виявлений при раку шлунка; АЇСАМ (РСТ публікація. УМО 03/093443); АРО-1 (злоякісний антиген лімфоцитів людини) (Тгашій еї аї. (1989) "Мопосіопаї!
Апіїроду-Медіаїєд Титог Ведгеззіоп Ву Іпдисіп ОЇ Ароріозів", Зсіепсе 245:301-304); В1 (Евдіой,
А.М. еї а. 2006, Сапсег Нев. 66(1):6-9); В7-НЗ (Соїпв, М. еї аї. (2005) "не В7 Ратіу ОЇ Іттипе-
Ведшіаюту Гідапав5", Сепоте Віої. 6:223.1-223.7). СпаромаІЇ, А. еї аї. (2001) "В7-НЗ: А
Совіїтиіайту Моїієсцше Рог Т Сеї| Асіїмайоп апа ІЄМ-у Ргодисійоп", Маїшге Іттипої. 2:269-274;
Зип, М. еї аї. (2002) "Спагасівгігайоп ої Моизе апа Нитап В7-НЗ Сепев", у. Іттипої. 168:6294- 6297); ВАСЕ (Водеу, В. 2002 Ехреп Оріп Віо! Тнег. 2(6):577-84); бета-катенін (Ргапде МУ. еї аї. 2003 У Раїпої. 201(2):250-9); антигени групи крові А ег/І єу, виявлені при аденокарциномі товстої кишки; антиген лімфоми Беркітта-38.13, С14, виявлений при аденокарциномі товстої кишки;
СА125 (антиген карциноми яєчників) (Вабі, К.С. г. еї аіІ. 2005 Іпї У Супесо!ї Сапсег 15 Зиррі 3:274-81 ; Ми еї аї. (1991) "Соехргезвіоп ОЇ Оіїегепі Апіїдепіс Макет Оп Моїіевїіез Тнаї Веаг СА 125 Оеєїегтіпапів", Сапсег Вев. 51(2):468- 475); карбоксипаптидазу М (публікація патенту США 2006/0166291); СО5 (Саїіп, С.А. єї аІ. 2006 бетіп Опсої. 33(2):167-73; СО19 (СНеце еї а!. (1994) "Апіі-СО19 Іппірів Те Столи ОЇ Нитап В-Сеї!Ї Титог І іпев5 іп міто Апа ої Рацаї СеїІв Іп 5СІЮ
Місе Ву Іпдисіпуд Сеї! Сусіє Аттеві", Віоса 83:1329-1336; Тгоивзага, Х. еї аІ. 1998 Нетаїй! Сеї
Тнег. 40(4):139-48); СО20 (Неї еї аї. (1994) "Оерієїоп ОЇ В Сеїї5 іп мімо Ву А Спітегіс Моизе
Нитап Мопосіопа! Апіїбоду То СО20", Віоса 83:435-445; Тпотазв, О.А. єї аї. 2006 Нетай! Опсої
Сіїп МопА Ат. 20(5):1125-36); СО22 (Ктейтап, Н.У. 2006 ААРЗ 4). 18:8(3):Е532-51); СО23 (Возаї!,
З. еі ані. 2005 Сит Тор Містобвіо! Іттипої. 5:294:91-107); 025 (Ттоиззаго, Х. еї аІ. 1998 Нетай!і
Сеї! Тнег. 40(4):139-48); 0027 (Ваїайе, В. 2006 Наєтайоіодіса 91(9):1234-40); С028 (Ваїайе, В. 2006 Наеєтаїйоіодіса 91(9):1234-40); СО33 (Бдопйгов еї аї. (1993) "Модеїпуд Апа Ровзітену ОЇ
Мопосіопаї! Апіїбоду М195 (Апіі-СО33) Іп Асше МуєІодепоиз І еиКетіа", У. Мисі. Мед. 34:422-430);
СОз36 (Се, У. 2005 І аю Нетай!і. 11(1):31-7); С0О40/С0154 (Меззтет", 0. єї аі. 2005 Апп М М Асад
Осі. 1062:51-60); 6045 (дигсіс, У. 2005 Сцт Опсої Вер. 7(5):339-46); СО56 (Ваїайе, В. 2006
Наетаїйоіодіса 91(9):1234-40); СО46 (патент США Ме7148038; РСТ публікація УМО 03/032814);
СО52 (Екейогр, 5.5. вії аї. (2014) "АіІетіигитаь (Апії-СО52 Мопосіопаї! Апіїбоду) Ав 5іпдіе-Адепі
Тпегару Іп Раїїепіз МУйНп ВРеїЇарзед/Неїгасіогу СНгопіс Гутрпосуїїс І еиКкаетіа (СГ)-А 5іпдіє
Ведіоп Ехрегіеєпсе Оп Сопзесшіїме Раїєпів", Апп Нетаїої!. 93(10):1725-1733; Зигезп, Т. еї аї. (2014) "Мем Апіїроду Арргоаспез То І утрпота ТПнегару", У. Нетайю!. Опсої. 7:58; Ное!2ег, 0. (2013) "Тагдеїєд Тнегару М/Н Мопосіопаї! Апііродієв Іп Асціє І утрпобіавіїйс І еиКетіа", Ст. Оріп.
Опсої. 25(6):701-706); СО56 (Ваїайе, А. 2006 Наєтайюіодіса 91(9)1234-40); СО07За/60р79р (Ттоивззага, Х. еї ам. 1998 Нетаїйо! СеїЇ Тпег. 40(4):139-48; Спи, Р... еї а). 2001 Аррі
Іттипойівіоспет Мо! Могрпої. 9(2):97-106); СО103 (Тгоиззага, Х. єї аІ. 1998 Нетай! Сеї! Тег. 40(4):139-48); СО317 (Каумаї, 5. еї аї. (2008) "Іпїепегоп-А Еппапсе5 СО317 Ехргеззіоп Апа Те
Апійшитог Асіїмйу ОЇ Апіі-СО317 Мопосіопа! Апіїроду Іп Вепаї! СеїЇ Сагсіпота Хепоагай Моавів",
Сапсег Зсіепсе 99(12):2461-2466; ММапо, МУ. еї аІ. (2009) НМ1.24 (СО317) Ів А Моме! Тагдеї
Адаїпві Гипуд Сапсег Рог Іттипоїпегару Овіпд Апіі-НМ1.24 Апіїроду", Сапсег Іттипоіоду,
Ітітипоїпегару 58(6):967-976; МУапо, МУ. еї аї. (2009) "Спітегіс Апа Нитапігейд Апі-НМ1.24 60 Апіїродіез Медіате Апіїроду-Оерепаєпі СеїЇшіаг Суїоїохіспу Адаїпбзі Гипуд Сапсег Сеїїв. Гипа
Сапсег!", 63(1):23-31; Зауеєд, А. єї аї. (2013) "Аретапі Беашаїйоп ОЇ Те В5ОТа2 (ТеїНегіп) Рготоїег
Епнапсез Сеї! РгоїїїТегайоп Апа Ароріовзі5 Емавіоп Іп Нідн Стгаде Вгєавзі Сапсег СеїІв", Ріов ОМЕ 8(6б)е67191, рр. 1-10); СОКА4 (Геє, М.М. сеї а. 2006 Се Сусіє 5(18):2110-4); СЕА (карциноембріональний антиген; ЕРооп еї аї. (1995) "І ттипе Везропзе То ТНне Сагсіпоетьгуопіс
Апіідеп Іп Раїйепів Тгеаїєд М/Н Ап Апії-Ідіоїуре Апіїбоду Массіпе", У. Сіїп. Іпмеві. 96(1):334-42);
Маїнеїйп, С. 2006 Супесо! Обрвівї Репії. 34(7-8):638-46; ТеПе-Аміїа, Е.І. еї аіІ. 2005 Вем Іпмезі Сііп. 57(6):814-99у СЕАСАМО/СЕАСАМБб (7Пепо, С. єї аї. (2011) "А Моме!ї Апіі-СЕАСАМ5 Мопосіопаї!
Апіїбоду, СС4, Зирргеззе5 Соіогесіаї Титог Столи апоа Еппапсе5з МК СеїІв-Медіаїєд Титог
Іттицййу", Ріо5 Опе 6(6) 621146, рр. 1-11); СО17-1А (Вадпнпаттаг еї а. (1993) "ЕпПесі Ої
Мопосіопа! Апіїбоду 17-141А Апа СМ-С5БЕ Іп Раїієпів М/йп Адмапсей Соіогесіа! Сагсіпота - І опд-
І азііпу, Сотрієїе Ветівзіоп5 Сап Ве Іпдисеа", Іпі. У. Сапсег 53:751-758); СО-43 (антиген групи крові Ге»); 2О-514 (антиген групи крові І ег), виявлений при аденокарциномі; СТА-1; СТІ А-4 (Реадв5, К.5. єї аіІ. 2006 Сит Оріп Іттипої. 18(2):206-13); цитокератин 8 (РСТ публікація УМО 03/024191); 01.1; 0156-22; ОВО (Арашодпапі, у. еї аї. (2010) "ТВАЇЇ Ресеріог зЗідпаїїпо Апа
ТНегарешісв", Ехреп Оріп. ТНег. Тагдеїв 14(10):1091-1108; Апаега, ГІ. (2009) "Бідпаїїпуд Асіїмаїейд
Ву Те Овєаїй Весеріогз ОЇ Те ТМЕВА Ратіу", Віотед. Рар. Мед. Рас. Опім. Раіїаску ОСОіотошс
Слесі. Вериб. 153(3):173-180; Сапо-51іеїІа, С. еї аї. (2007) "Тагдеїйпу ТВАЇЇ. Адопівіїс Несеріогб ог Сапсег Тнегару", Сіїпй, Сапсег 13(8):2313-2317; Спнацанагі, В.В. єї аї. (2006) "БоПом/іпа їпе
ТВАЇЇ ю Ароріозів", Іттипоодіс Нев. 35(3):249-262); ряд Ез (група крові В), виявлений при раку підшлункової залози; ЕСЕК (рецептор епідермального фактора росту, Адепі5, А. єї аїІ. 2003 Виї
Сапсег. 90 брес Мо:5228-32); ефрин (і, зокрема, ЕрпАг (патент США 7569672, РСТ публікація
МО 06/084226), Еп (ЕТЬВІ, ЕТЬВЗ, ЕпоВА4, 2Пои, Н. еї а. 2002 Опсодепе 21(57):8732-8740;
Вітоп, Е. еї аі. 2004 Іпї ) Опсої. 24(5):1325-1338); ОАХСЕ (йАСЕ-1; САСЕ-2; АКсакКапаї, А. еї аї. 2006 Іпї ) Сапсег. 118(1):123-128); ЧО2/503/аМ2 (І їміпудзіоп, Р.О. еї а). 2005 Сапсег Іттипої
Ітітипоїйпег. 54(10):1018-1025); гангліозид 502 (Сог; Заїенп еї аї. (1993) "Сепегайоп ОЇ А Нитап
Апіі-Іаіоїуріс Апіїбоду Тнаї Мітісх Тне СО2 Апіїдеп", У.Лттипої!., 151, 3390-3398); гангліозид СОЮЗ (Союз; Зпйага єї ак. (1993) "А Моизе/Нитап СПітегіс Апії-((апдіовіде С2ОЗ3) Апіїроду У/йй
Еппапсейд Апійитог Асіїміціев", Сапсег Іттипої. Іттипоїпег. 36:373-380); гангліозид ОМ2 (См?;
МІміпувіоп еї аї. (1994) "Ітроомед Бигуїма! іп Єїаде ЇЇ Меіапота Раїепів М/Щй Ма Апііродієв: А
Зо Вапдотігей Та! Ої Адіимапі Массіпайоп М/Н Ма Саподіовзіде", У. Сііп. Опсої. 12:1036-1044); гангліозид ЗМЗ (Смз; Нооп еї аї. (1993) "МоїІесшаг Сіопіпд ОЇ А Нитап Мопосіопа! Апіїроду
Веасіїме То Сапдіїозіде СМЗ Апіїдеп Оп Нитап Сапсегв", Сапсег Вев. 53:5244-5250); СІСА 19-9 (Непуп еї аї. (1982) "Мопосіопа! Апіїбоду Оеїесіїоп ОГ А Сігсціайпуд Титог-Авзосіаїєд Апіїдеп. І.
Ргезепсе ОЇ Апіідеп Іп бега ОЇ Раїїєпів М/Ий Соіогесіа!, Савітс, Апа Рапсгеаїйс Сагсіпота", У. Сііп.
Ітітипої. 2:135-140); др100 (І оїтет, М. еї аї. 2006 У ІттипоїНег. 29(6):616-27); Ссрз7 (Т-клітинний антиген лейкозу людини, Впайаспагуа-Снацегіеє сеї аї. (1988) "Ідіотуре Массіпе5 Адаїпвї Нитап Т
Сеї І ейкетіа. ІІ. Ссепегайоп Апа СНагасієгігайоп ОГ А Мопосіопаї! Ідіоїуре Сазсаде (АБ, АБ2, апа
АБЗ)", у. Іттипої. 141:1398-1403); др/5 (антиген меланоми; Міауазагдані еї аї. (1990) "Те
Меїапота Апіідеп Сср75 Із Те Нитап Нотоіодие ОЇ Те Моизе В (Вгомпп) І осив Сієпе Ргодисі",
У. Ехр. Мей. 171(4):1375-1380); дрАЗЗ (Неаїй, 9.К. еї аї. (1997) "Тпе Нитап АЗЗ Апіідеп І5 А
Тгтапзтетрбгапе Спусоргоївіп Апа А Моме! Метбег ОЇ ТНе Іттиподіориїп Зирепатіу", Ргос. Маї!.
Асайд. сі. (0.5.А.) 94(2):469-474; ВіНег, сх. єї аї. (1997) "Спагасієгігайоп ОЇ Розйнгапзіайопаї
Модіїісайопе ОЇ Нитап АЗЗ Апіїдеп, А Моме! РаїІтіоуїаїса 5и!ипйасе СПусоргоївїп ОЇ Нитап
Савзігоїпіевіїпа! Еріїпеїїйшт", Віоспет. Віорпуз. Не5. Соттип. 236(3):682-686; УМопо, М.А. еї а). (2006) "ЕРСАМ апа одрАЗ3 Аге Магкег5 ОЇ Ваїтей5 Меїаріавзіа", У. Сіїп. Раїпої. 59(3):260-263); антиген НЕК2 (НЕКг/пеи, рі85нЕРг; Кутаг, Ра! 5 єї аі. 2006 бетіп Опсої. 33(4):386-91); НМЕС (антиген глобули молочного жиру людини, М/01995015171); папіломавірус-Еб людини/папіломавірус-Е7 людини (Оітаїйо, О. еї аі. 2006 Аайм Міги5 Вев5. 66:125-59; НМУУ-МАА (високомолекулярний антиген меланоми, Маїаїї еї а. (1987) "І(ттипопізіюсНетіса! Оеїесіоп ОЇ
Апіідеп Іп Нитап Ргітагу Апа Меїавзіаїйс МеІапота5 Ву Пе Мопосіопа! Апіїбоду 140.240 Апа 5
Розвіріє Ргодповіїс Бідпіїсапсе", Сапсег 59:55-63; Мійеітап єї аї. (1990) "Асіїме Зресіїйс
Ітітипоїпегару Іп Раїйепіб5 М/йНп Меїапота. А Сіїпіса! Та! М/Н Моизе Апійаїіоїуріс Мопосіопаї
Апіїродієв ЕїЇїсйеда МйНп Зупдепеїс АМТІ-НІСН-МОГ ЕСОГАВ-ШЖЕІСНТ-МЕГАМОМА-АЗБЗОСІАТЕО
Апіїдеп Мопосіопа! Апіїрбодієв", У. Сіїп. Іпмезі. 86:2136-2144); антиген І (диференціювальний антиген, Ееїі (1985) "Оетопвігайоп Ву Мопосіопа! Апіїродіез Тнаї СагтоНуагаїє Зітисішгев5 ОЇ
Сіусоргоївїп5 Апа апусоїїрід5 Аге Опсо-ОємеІортепіаї Апіїдепв5", Маїиге 314:53-57); І.13Каг (РСТ публікація УМО 2008/146911; Вгомуп, С.Б. еї аї. (2013) "Сіота І/13Ка2 І5 Авзосіаїєй УМА
Мезепспутаї! 5Зідпайшге Сепе Ехргезвіоп Апа Роог Раїйепі Ргодповів", Ріоз Опе. 18;8(10):677769;
Вагаегав, В. еї а!. (2012) "Нідп Ехргеззвіоп ОЇ ІІ -13 Кесеріог А2 Іп Соіогесіа! Сапсег І5 Аззосіаїєа 60 М/йй Іпмавіоп, І імег Меїавіавзів5, Апа Роог Ргодповів", Сапсег Нев. 72(11):2780-2790; Казаїап, М.Т.
еї аї. (2011) "1-13 Апііродієв ІпПепсе ІІ -13 СіІвєагапсе Іп Нитапз5 Ву Модиїіаййпд Зсамепдег Асіїмну
ОГІ-13кКаг", У. Іттипої. 187(1):561-569; Вогіпом, О. еї а. (2010) "Оестеазіпд Ехргевзіоп ОЇ Те
ІптепешКіп-13 Весеріог ІІ -1З3Раїрнаг Іп Тгєаіїєд Веситепі Маїїдпапі Спіюотав", Мецгої. Мед. Сніг. (Токуо) 50(8):617-621; Рціізама, ГТ. еї аї. (2009) "А помеї! гоїЇе ої іпіепеиКіп-13 гесеріог аІрнаг іп рапсгєаїійс сапсег іплмавіоп ап теїавіавів", Сапсег Вез. 69(22):8678-8685); інтегрин Вб (РСТ публікація УМО 03/087340); ЗАМ-3 (РСТ публікація УМО 06/084078); КІОЗ (РСТ публікація УМО 05/028498); КІОЗ31 (РСТ публікація МО 06/076584); загальний антиген карциноми К5 1/4
Неїївігот еї аї. (1986) "Мопосіопаї Моизе Апіїродіеє5 Наїзей Адаїп5і Нитап І ипд Сагсіпота",
Сапсег Вевз. 46:3917-3923); І ЕА; І ОСА-2 (публікації патентів США 2006/0172349; РСТ публікація
МО 06/083852); М1:22:25:8; М18; М39; МАСЕ (МАСЕ-1; МАСЕ-3; (Водеу, В. 2002 Ехреп Оріп Віої!
ТНег. 2(6):577-84); МАВТ (Коишпаїйаків, М. єї а. 2005 Сцт Опсої! Вер. 7(5):377-82; мезотелін (Спапду
К, апа Равіап І. 1996 "МоІесшаг сіопіпд ої тезоїПпеїйп, а айегепііайоп апіїдеп ргевепі оп тезоїпеЇйййт, тезоїПпеЇйотав, апа омагіап сапсегв", Ргос Маї!ї Асад сі ОБА 93:136-40), МОС-1 (Маїнеїп, С. 2006 Супесої Орзівї ЕРепії. 34(7-8):638-46); МОМ-1 (Савівєїїї, б. єї аі. 2000 9 Сеї
Рпузіої. 182(3):323-31); Му!; М-ацетилглюкозамінілтрансферазу (Оеппіз, У.ММ. 1999 Віоспіт
Віорпуз Асіа. 6;1473(1):21-34); неоглікопротеїн; М5-10, виявлений при аденокарциномах; ОБА-1;
ОБГА-2; онкостатин М (рецептор онкостатину бета, патент США Ме7572896, РСТ публікація УМО 06/084092); р15 (сії, У. ех аі. 2006 Маї НКем Мої! Сеї! ВіоіІ. 7(9):667-77); р97 (асоційований з меланомою антиген; Евііп евї аї!. (1989) "ТгапеТесівєд Моизе Меїапота І іпе5 ТНаї Ехрге55 Мапи
Ї емеів ОЇ Нитап Меїапота-Авзосіаїєд Апіїдеп р9о7", у. Майї). Сапсег Іпвій. 81(6):445-454); РЕМ (поліморфний епітеліальний муцин, НіїКеп5 сеї аї. (1992) "Се! Метьгапе-Аззосіаїєд Мисіп5 Апа
ТНеїг Адпезіоп-Модиіайпуд Ргорепу", Тгтепдв іп Віоспет. сі. 17:359-363)) РЕМА (антиген поліморфного епітеліального муцину); РІРА (патент США Ме7405061, РСТ публікація УУО 04/043239); РБА (антиген передміхурової залози, Непйци еї аї. (1989) "сОМА Содіпу Рог Тне Епіїге
Нитап Рговзіайїе 5ресіїїс Апіїдеп Зпом5 Нідп Нотоїіодіеєз То Те Нитап Тізвце КаїїКгєїп Сепев",
Віоспет. Віорпуб. Нев. Сотт. 10(2):903-910; Івгаєїї еєї а. (1993) "МоїІесшаг Сіопіп9 ОГ А
Сотріетепіагу ОМА Епсодіпуд А Рговіаїе-5ресіїс Метрбгапе Апіідеп", Сапсег Вев5. 53:227-230;
Стассо, С.М. єї аІ. 2005 Міпегуа Ого! Меїтої. 57(4):301-11); РОМА (специфічний для простати мембранний антиген, Кадираїйі, 5. 2005 Сапсег Тгеаї Ке5. 123:157-180); простатична кисла
Зо фосфатаза (Тайог єї аї. (1990) "Мисієоїйде бедиєепсе ОЇ Нитап Ргозіаїйс Асій Рпозрпаїазе
Оеїептіпей Егот А Еші-Гепдій сОМА Сіопе", Мисі. Асіаз Вев5. 18(16):4928); Ага, виявлений при меланомі; КОКІ (патент США Мо5843749); сфінголіпіди; ЗЗЕА-1; 5ОЕА-3; 55ЕА-4; 5Тп (Ноїтрего, Г.А. 2001 Ехреп Оріп Віо!ї Тнег. 1(5):881-91); Т-клітинний рецептор, отриманий зі шкірної Т-клітинної лімфоми (див. Едеі5оп (1998) "Сшапеоив Т-Сеїї їутрипота: А Модеї! Гог
ЗеїІесіме Іттипоїпегару", Сапсег ) Зсі Ат. 4:62-71); Т5А?7, виявлений в мієлоїдних клітинах;
ТАа-72 (ХокКоїа еї а!. (1992) "Варій Титог Репеїгайоп Ої А 5іпдіє-Снпаіп Ем Апа Сотрагізоп М/йН
Оїнег Іттипоадіобиййп Рогпт5", Сапсег Вевз. 52:3402-3408); ТІ 5 (група крові А); рецептор ТМЕ (рецептор ТМЕ-а, рецептор ТМЕ-В; рецептор ТМЕ-у (мап Ногезеп, К. еї аїІ. 2006 Опсоподіві. 11(4):397-408; Сагапегома, М. еї аї. 2000 Сит Огид Тагоеїв. 1(4):327-64); ТВА-1-85 (група крові
Н), рецептор трансферину (патент США Ме7572895, РСТ публікація УМО 05/121179), 574 (ТРВО, глікопротеїн трофобласту; Воднаєгі, Е.К. еї аї. (2008) "Пе Опсогеїа! Ргоїєїп, 514, Ів А Зийаріє
Тагдеї Рог Апіїроду-Сцідей Апії-Сапсег Спетоїпегару М/йН Саїїспеатісіп", Іпії. У. Опсої. 32(1)221- 234; Еібвеп, ГТ. еї аї. (2014) "Маріштотар Евіаїепайх: Тагудеїед Іттипоїпегару мій а Момеї
Іттипоїохіп", о бит. ОпсоЇ. Вер. 16:370, рр. 1-6); ТЗТА (пухлинно-специфічний трансплантаційний антиген), наприклад, вірусно-індуковані пухлинні антигени, включаючи Т- антиген ДНК-вмісних пухлинних вірусів й антигени оболонки РНК-вмісних пухлинних вірусів, онкофетальний антиген-альфа-фетопротеїн, такий як СЕА товстої кишки, онкофетальний антиген пухлини сечового міхура (Неїїбігот еї аї. (1985) "Мопосіопа! Апііїродієз То СеїЇ Зипасе
Апіїдеп5 Зпагед Ву СпетісаПу Іпдисед Моизе Віадаєг Сагсіпотав", Сапсег. Ве5. 45:2210-2188);
МЕСЕ (Рієеїгапіопіо, КЕ. евї аї. (2015) "Вемасігитар-Вазед Меоадіимапі СпетоїНегару Еог Соіогесіа)!
Сапсег Імег Меїавіазев: Рінаїв Апа Неїріц! ТисК5 Іп А Немієм Рог Сіїпісіап5", Стії. Вем. Опсої.
Нетаїйо!. 95(3):272-281; Старомувкі, У.Р. (2015) "Ситепі Мападетепі ОЇ Омагіап Сапсег", Міпегуа
Меа. 106(3):151-156; Рієїд, К.М. (2015) "Вемасігитар Апа Сійобіазіюта: 5сієпіййс Веміем/, Меулу
Веропвд ОРбБаїез, Апа Опдоіпа Сопігомегвіввз", Сапсег 121(7):997-1007; й, О.Н. еї аї. (2015) "Майог Сііпіса! Везєвагсп Адмапсев Іп СупесоЇодіс Сапсег Іп 2014", У. Супесої. Опсої. 26(2):156- 167; Пи, К.У. еї аї. (2015) "Вемасігитар Іп Сотрбіпайоп МУйй Апіїсапсег ЮОгидв Рог Ргеміоивіу
Тгєаіед Адмапсей Моп-Зтаї! СеїЇ Гипд Сапсег", Титоиг Віо!. 36(3)71 323-1327; бі Вапоіотео, М. єї аІ. (2015) "Вемасігитаь ігеаїйтепі іп Ше єЇІдепу раїєпі м/йй теїавіаїййс соіогесіа! сапсег", Сііп.
Іптегу. Адіпа 10:127-133); рецептор МЕСЕ (О'Омуег. Р.ЮУ. 2006 Опсоїодівї. 11(9):992-998); МЕРВ; 60 МЕРОУ; МІМ-О5; і гаптен У, І єу, виявлений у клітинах ембріональної карциноми.
І00397| Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом використовують у комбінації з однією або більше молекулами, які специфічно зв'язуються з 514, В7НЗ, 2019, СбО020, Сб051, С0123, ЮОВА5, ЕСЕВ,
ЕрСат, 202, дрАЗЗ, НЕН2г, ВОВ-1, ТАС-72, антитілом до МЕСБЕ-А і/або МЕСЕК2.
Ї00398)| Зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна комбінувати з імуногенним агентом, таким як пухлинна вакцина. Підходящі вакцини можуть містити очищені пухлинні антигени (включаючи рекомбінантні білки, пептиди і молекули вуглеводів), аутологічні або алогенні пухлинні клітини. Було описано декілька стратегій, що стосуються пухлинних вакцин (див., наприклад, Раїепа, С., єї аї., (2006) "Сапсег массіпев: ргесіїпіса! вщшаїев апа помеї зігаїедієв", ду. Сапсег Вез. 95, 115-145; Меїтанп, І., еї аї. (2011) "Сапсег іттипоїНегару сотев ої аде", Маїиге 480, 480-489; 7папо, Х. М. еї аї. (2008) "ПНе апіі--штог іттипе гезропзе іпдисєй ру а сотбіпайоп ої МАСЕ-З/МАСЕ-п-аегімей реріїде5", Опсої. Вер. 20, 245-252; Оівів, М. ї. єї а!. (2002) "Сепегайоп ої Т-сеїЇ іттипйу ю Ше НЕВ-2/пеи ргоївїп айег асіїме іттипігайоп Улій
НЕВ-2/пеи рерііде-разед массіпев", у. Сіїп. Опсої. 20, 2624-2632; Мептеї), А. єї аї. (2012) "Роїепііайоп ої а р53-5І Р массіпе Бу сусіорпозрпатіде іп омагіап сапсег: а віпдіє-апи рНазе ЇЇ взішау." Ійї У. Сапсег 131, Еб70О-Е680). Зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна комбінувати з хіміотерапевтичними схемами. У цих випадках існує можливість зниження дози хіміотерапевтичного реагенту, що вводиться (МоКуг еї аї. (1998)
Сапсег Незеагсй 58: 5301-5304).
Ї00399| Зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна комбінувати з іншими імуностимулюючими молекулами, такими як антитіла, які активують сприйнятливість імунної системи хазяїна, щоб забезпечити підвищені рівні активації Т-клітин. Зокрема, було показано, що антитіла до РО-1, антитіла до РО-11 й/або антитіла до СТІ А-4 активують імунну систему (див., наприклад, аеї! Віо, М-Ї. еї аї. (2005) "Апіїроду-Меаіаїей Зідпаїпу Тигоцдп РО-1
Совіїтиіафез Т СеїЇз Апа Епнапсе5 СО28-дерепаеєпі РгоїНегайоп", Ешг. у). Іттипої! 35:3545-3560;
Вагбег, 0. Ї. єї а. (2006) "Вевюгіпд тпсійоп іп ехнайзівй СО8 Т сеїІ5 дигіпу спгопіс міга! іптесііоп",
Маїшге 439, 682-687; Імаї, У. еї аї. (2002) ""пмоїметепі ОЇ РО-І1 Оп Титог СеїІ5 п Те Езсаре
Егот Нові Іттипе Зувівт Апа Титог Іттипоїпегару Ву РО-І1 ВіосКаде", Ргос. Маї! Асай. зсі.
ИБА 99, 12293-12297; І вас, 0. В., єї аї., (1996) "ЕЕпнапсетепі ОЇ Апійитог Іттипйу Ву СТІ А-4
Зо ВіосКаде", Зсієпсе 271, 1734-1736). Додаткові імуностимулюючі молекули, які можна комбінувати з РО-1-сполучними молекулами згідно з даним винаходом, включають антитіла до молекул на поверхні дендритних клітин, які активують функцію дендритних клітин (ДК) і представлення антигена, антитіла до СО40, здатні замінити активність хелперних Т-клітин, й активуючі антитіла до костимулюючих молекул Т-клітин, таких як РО-І 1, СТІ А-4, ОХ-40 4-188 й
ЇСО5 (див., наприклад, Мо єї а!. (2000) "ЕНесіїме Рііїтіпа ОЇ Суююхіс Т І утрпосуїє Ргесигзог5 Ву зирсшапеоив Аатіпівігайоп ОЇ Реріїде Апіїдепв Іп Гірозоте5 Ассотрапієд Ву Апії-С040 Апа
Апіі-СТІ А-4 Апііродієв" Іттипобіоіоду 201:527-40; патент США Ме5811097; Меїпрего еї а. (2000) "Епдадетепі ої Те ОХ-40 Несеріог іп мімо Епнапсе5 Апійштог Іттипйу", Іттипої! 164:2160-2169;
Меїего еї а!. (1997) "Мопосіопа! Апіїродієз Адаїпвї Те 4-188 Т-Сеї! Асіїманйоп МоїІесшіе Егадісаїе
Евіабіїзй ей Титогв", Майте Меадісіпе 3: 682-685; Ншийоїї еї аї. (1999) "ІСО5 І5 Ап Іпдисіріє Т-СеїЇ
Со-етітиїают Зтисішгапу Апа ЕРипсііопаїІу Реїіаїєа То СО28", Майте 397: 263-266; і Могап, А.Е. еї аІ. (2013) "Тне ТМЕН5 ОХ40, 4-188, апа СО040 Аз Тагодєїв Рог Сапсег ІттипоїНегару", Сит Оріп
Іттипої. 2013 Ар 25(2): 10.1016/.соії.2013.01.004), і/або стимулюючі химерні антигенні рецептори (САК), що містять антигенсполучний домен, спрямований до антигена захворювання, гібридизований з одним або більше внутрішньоклітинними сигнальними доменами з різних костимулюючих білкових рецепторів (наприклад, СО28, 4-188, ІСО5, ОХ40 і т.п.), які служать для стимуляції Т-клітин при зв'язуванні антигена (див., наприклад, Тейатапії,
З. еї аї. (2013) "Тагдеїпуд ОЇ Асше Муєїоід ІГеикаєтіа Ву СуїюКіпе-Іпдисед КіПег СеїІ5 Ведігесієйд
Мпа А Моме! СО123-вресіїїс Спітетіс Апіїдеп Несеріог", Вг. У. Наєтаїйо!. 161:389-401; Сі, 5. єї аї. (2014) "ЕНісасу Адайїйпбї Нитап Асціє Муєїоій ІешКетіа Апа МувєїЇоабіайоп ОЇ МоптаїЇ
Нетаїйороїєвів Іп А Моизе Модеї! Овіпд Спітетгіс Апіїдеп Несеріог-Модіїїєа Т СеїІв", Віоса 123(15): 2343-2354; Магаїгов, А. єї аї. (2013) "Т СеїІ Ехргеззіпа СО123-5ресіїйс Спітетгіс Апіїдеп Весеріог5
ЕхпіБії Зресіїїс Суїоїуйс ЕпПесіог Рипсіпе Ап Апійштог ЕПесів Адаїп5і Нитап Асціє Муеїоіа
Ї енкетіа", Віооса 122:3138-3148; Рі7іюїа, І. еї аі. (2014) "СНнітегіс Апіїдеп Несеріогв Адаїпві
СОо33/060123 Апіїдеп5 ЕПісіепцу Тагоєї Ргітагу Асшеє Муеїоід І ейКетіа СеїЇ5 іп мімо", | еикетіа доі:110.1038/Леи.2014.62).
Ї00400)| Зазначені РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом можна комбінувати з інібуючим химерним антигенним рецептором (ІСАК) для перенаправлення націлених імунотерапевтичних відповідей. ІСАК містить антигенсполучний домен, спрямований до бо антигена захворювання, гібридизований з одним або більше внутрішньоклітинними сигнальними доменами з різних інгібуючих білкових рецепторів (наприклад, СТІ А-4, РО-1 і т.п.), які служать для обмеження відповідей Т-клітин при зв'язуванні з антигеном (див., наприклад,
Еедогом М.О. (2013) "РО-1- апа СТІ А-4-Вазедй Іппірйогу Спітетгіс Апіїдеп Несеріогз (ісагв) ЮОімег
ОП-Тагдєї Іттипоїйегару Вевзропеев5", Зсі. Ттапі. Мей. 5:215га172 аоі:10.1126/ 5сйгапвітеа.3006597.
Ї00401| Зокрема, зазначені РЮО-1-сполучні молекули згідно 3 даним винаходом використовують у комбінації з антитілом до СО137, антитілом до СТІ А-4, антитілом до ОХ40, антитілом до ГАС-3, антитілом до РО-1Ї1, антитілом до ТІСІТ, антитілом до ТІМ-3 і/або протираковою вакциною.
В Діагностична та лікувально-діагностична корисність 00402 Деякі з РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом не здатні або проявляють слабку здатність блокувати зв'язування РО-1 з лігандом РО-1Ї.. У цьому зв'язку антитіла МАТ 2 до РО-1 і МАТ 4 до РО-1, їх гуманізовані похідні, а також молекули, що містять їх РО-1-сполучні фрагменти (наприклад, біспецифічні діатіла, і т.п.), або ті, які конкурують за зв'язування із зазначеними антитілами, можуть бути позначені детектованою міткою (наприклад, з використанням радіоактивних, ферментативних, флуоресцентних, хемілюмінесцентних, парамагнітних, діамагнітних або інших мічених фрагментів) і використовуються для детектування РО-1 у зразках або візуалізації РО-1 на клітинах. Оскільки зазначені молекули не впливають на біологічну активність РО-1, вони особливо корисні в способах визначення ступеня, місця розташування та зміни експресії РО-1 у суб'єктів (наприклад, у суб'єктів, яких лікують від раку, пов'язаного з експресією або націленим впливом на РО-1).
ХІІ Фармацевтичні композиції 00403) Композиції згідно з даним винаходом включають нерозфасовані лікарські композиції, придатні для виготовлення фармацевтичних композицій (наприклад, неочищених або нестерильних композицій) та фармацевтичних композицій (тобто, композицій, які підходять для введення суб'єкту або пацієнту), які можуть бути використані у приготуванні стандартних лікарських форм. Підходящі композиції містять профілактично або терапевтично ефективну кількість РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом або комбінацію підходящих агентів і фармацевтично прийнятного носія. Переважно композиції згідно з даним винаходом містять
Зо профілактично або терапевтично ефективну кількість РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом і фармацевтично прийнятний носій. В область даного винаходу, зокрема, включені підходящі фармацевтичні композиції, в яких РО-1-сполучна молекула являє собою: МАТ до РО- 11, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до
РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1; гуманізоване МАТ до РО-1 1; МАТ 2 до РО-1,
МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1,
МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до
РО-1 або МАТ 15 до РО-1; РО-1-сполучний фрагмент будь-якого зазначеного антитіла; або в яких РО-1-сполучна молекула являє собою біспецифічне діатіло до РО-1 (наприклад, біспецифічне діатіло РО-1хІ! АС-3). В область даного винаходу включені зокрема молекули, які містять З СОН; і З СОВНн із МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1; гуманізованого МАТ до РО-1 1; МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1,
МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО- 1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1.
Ї00404| В область даного винаходу також включені такі фармацевтичні композиції, які додатково містять друге терапевтичне антитіло (наприклад, специфічне для пухлин моноклональне антитіло), яке є специфічним у відношенні конкретного ракового антигена, і фармацевтично прийнятний носій. 00405) Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу термін "фармацевтично прийнятний" означає схвалений регулювальним органом федерального уряду або уряду штату або перерахований у Фармакопеї США або іншій загальновизнаній фармакопеї для використання у тварин і, більше конкретно, у людини. Термін "носій" відноситься до розріджувача, ад'юванта (наприклад, ад'юванта Фрейнда (повного та неповного), допоміжної речовини або носія, з яким вводять лікарську сполуку. Підходящими фармацевтичними носіями можуть бути стерильні рідини, такі як вода й олії, включаючи олію нафтопродуктів, олію тваринного, рослинного або синтетичного походження, такі як арахісова олія, соєва олія, мінеральна олія, кунжутна олія та таке інше. Вода є переважним носієм при внутрішньовенному бо введенні фармацевтичної композиції. Фізіологічні сольові розчини та водні розчини декстрози і гліцерину також можуть бути використані в якості рідких носіїв, зокрема для ін'єкційних розчинів.
Підходящі фармацевтичні допоміжні речовини включають крохмаль, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, борошно, крейду, силікагель, стеарат натрію, моностеарат гліцерину, тальк, хлорид натрію, сухе знежирене молоко, гліцерин, пропілен, гліколь, воду, етанол і т.п.
Композиція, якщо необхідно, також може містити незначні кількості змочувальних або емульгуючих агентів або буферних агентів для підтримки рН. Підходящі композиції можуть бути у формі розчинів, суспензій, емульсій, таблеток, пігулок, капсул, порошків, композицій з уповільненим вивільненням і т.п. 00406) Зазвичай інгредієнти композицій згідно з даним винаходом поставляють окремо або змішують з одержанням стандартної дозованої форми, наприклад, у вигляді сухого ліофілізованого порошку або концентрату, що не містить води, у герметично закритому контейнері, такому як ампула або саше, з вказівкою кількості активного агента. У тому випадку, якщо композиція повинна бути введена шляхом інфузії вона може бути розподілена з інфузійною пляшкою, що містить стерильну фармацевтичну воду або фізіологічний розчин. У тому випадку, якщо композицію вводять шляхом ін'єкції може бути забезпечена ампула стерильної води для ін'єкцій або фізіологічного розчину так, що інгредієнти можуть бути змішані перед введенням.
Ї00407| Композиції згідно з даним винаходом можуть бути виготовлені у вигляді нейтральних або сольових форм. Фармацевтично прийнятні солі включають, але не обмежуються ними, солі, утворені з аніонами, такими як аніони, отримані з соляної, фосфорної, оцтової, щавлевої, винної кислот і т.п., Її ті, які утворені катіонами, такими як катіони, отримані з натрію, калію, амонію, кальцію, гідроксидів заліза, ізопропіламіну, триетиламіну, 2-етиламіноетанолу, гістидину, прокаїну та т.п.
Ї004081| Згідно з даним винаходом також запропоноване фармацевтичне впакування або набір, який містить один або більше контейнерів, заповнених РО-1-сполучною молекулою згідно з даним винаходом (і більше переважно МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО- 1; гуманізованим МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-
Зо 1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до
РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1, РО-1-сполучним фрагментом будь-якого із зазначених антитіл, або РО-1-сполучною молекулою, яка являє собою біспецифічне діатіло до РО-1 (наприклад, біспецифічне діатіло РО-1хІ| АС-3)). В область даного винаходу зокрема включені молекули, які містять З СОВІ і З СОВНнІ із МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до
РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до
РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 або МАТ 15 до РО-1, окремо або з підходящим фармацевтично прийнятним носієм.
Крім цього, один або більше інших профілактичних або терапевтичних агентів, придатних для лікування захворювання, також можуть бути включені у фармацевтичний пакет або набір. Згідно з даним винаходом також запропоноване фармацевтичне впакування або набір, який містить один або більше контейнерів, заповнених одним або більше інгредієнтами фармацевтичних композицій згідно з даним винаходом. Повідомлення у формі, запропонованої урядовим агентством, що регулюють виготовлення, застосування або продаж фармацевтичних препаратів або біологічних продуктів, яке відображає схвалення зазначеним агентством виробництва, застосування або продажі для введення людині, може бути необов'язково прикріплене до зазначеного контейнера (контейнерів).
Ї00409| Згідно з даним винаходом також запропоновані набори, які можна застосовувати у вищевказаних способах. Набір може містити будь-яку з РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом. Набір може додатково містити один або більше інших профілактичних і/або терапевтичних агентів, придатних для лікування раку, в одному або більше контейнерах; і/або набір може додатково містити одне або більше цитотоксичних антитіл, які зв'язуються з одним або більше раковими антигенами, асоційованими з раком. Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу інший профілактичний або терапевтичний агент являє собою хіміотерапевтичний агент. Згідно з іншими варіантами реалізації даного винаходу профілактичний або терапевтичний агент являє собою біологічний або гормональний терапевтичний засіб.
ХІЇЇ Способи введення
Ї00410| Композиції згідно з даним винаходом можуть бути забезпечені для лікування, профілактики та поліпшення одного або більше симптомів, пов'язаних із захворюванням, 60 розладом або інфекцією, шляхом введення суб'єкту ефективної кількості гібридного білка або кон'югованої молекули згідно з даним винаходом, або фармацевтичної композиції, що містить гібридний білок або кон'юговану молекулу згідно з даним винаходом. Згідно з переважним аспектом зазначені композиції по суті очищені (тобто по суті не містять речовини, які обмежують їхню дію або викликають небажані побічні ефекти). Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу суб'єкт являє собою тварину, переважно ссавця, такого як ссавець, що не відноситься до приматів (наприклад, бичачих, кінських, котячих, собачих, гризунів і т.п.), або примата (наприклад, мавпу, таку як яванська макака, людина та т.п.). Згідно з переважним варіантом реалізації даного винаходу суб'єкт є людиною.
Ї00411| Різні системи доставки відомі та можуть бути використані для введення композицій згідно з даним винаходом, наприклад, інкапсулювання в ліпосомах, мікрочастинках, мікрокапсулах, рекомбінантні клітини, здатні експресувати антитіло або гібридний білок, опосередкований рецепторами ендоцитоз (див., наприклад, УМи еї аї. (1987) "Несеріог!-Медіаїєа іп міо Сепе Тгапеіогтайоп Ву А 5оЇшШріе ОМА Саїтієг Бузієт", у). Віої. Спет. 262:4429-4432), конструювання нуклеїнової кислоти як частини ретровірусного або іншого вектора та т.п.
Ї00412| Способи введення молекули згідно з даним винаходом включають, але не обмежуються ними, парентеральне введення (наприклад, внутрішньошкірне, внутрішньом'язове, внутрішньочеревинне, внутрішньовенне та підшкірне), епідуральне та через слизуваті оболонки (наприклад, інтраназальний та пероральний шляхи). Згідно з конкретним варіантом реалізації даного винаходу РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом вводять внутрішньом'язово, внутрішньовенно або підшкірно. Композиції можна вводити будь- яким зручним способом, наприклад, шляхом інфузії або болюсної ін'єкції, шляхом усмоктування через епітеліальні або слизуваті оболонки (наприклад, слизувату оболонку порожнини рота, слизувату оболонку прямої кишки і кишечнику та т.п.) і можна вводити разом з іншими біологічно активними агентами. Введення може бути системним або локальним. Крім цього, також можна застосовувати легеневе введення, наприклад, з використанням інгалятора або розпилювача та складу з аерозольним агентом. Див., наприклад, патенти США МоМоб6019968; 5985320; 5985309; 5934272; 5874064; 5855913; 5290540; і 4880078; і РСТ публікації УУО 92/19244; МО 97/32572; УМО 97/44013; МО 98/31346; і МО 99/66903, які всі повністю включені у дану заявку за допомогою посилання. 00413) Згідно з даним винаходом також запропоновані РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом, упаковані в герметично закритий контейнер, такий як ампула або саше, з вказівкою кількості молекули. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу зазначені молекули поставляються у вигляді сухого стерилізованого ліофілізованого порошку або концентрату, що не містить води, у герметично закритому контейнері та можуть бути відновлені, наприклад, з використанням води або фізіологічного розчину до відповідної концентрації для введення суб'єкту. Переважно РЮО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом поставляють у вигляді сухого стерильного ліофілізованого порошку в герметично закритому контейнері. 00414) Ліофілізовані РО-1-сполучні молекули згідно з даним винаходом слід зберігати при температурі від 2 "С до 8 "С в їх первинному контейнері, і молекули повинні бути введені протягом 12 годин, переважно протягом б годин, протягом 5 годин, протягом З годин або протягом 1 години після відновлення. В іншому варіанті реалізації зазначені молекули поставляють у рідкій формі в герметично закритому контейнері з вказівкою кількості та концентрації молекули, гібридного білка або кон'югованої молекули. Переважно зазначені РО-1- сполучні молекули, якщо вони забезпечені у рідкій формі, поставляють в герметично закритому контейнері. 00415) Кількість композиції згідно з даним винаходом, яка буде ефективною при лікуванні, запобіганні або поліпшенні одного або більше симптомів, пов'язаних із розладом, може бути визначена за допомогою стандартних клінічних методик. Точна доза, яка буде застосована в складі, також буде залежати від способу введення та від тяжкості стану, і повинна бути визначена відповідно до рішення практикуючого лікаря й обставин кожного пацієнта. Ефективні дози можуть бути екстрапольовані з кривих залежності відповіді від дози, отриманих з досліджувальних систем в умовах іп міго або тваринних моделей. 00416) У даній заявці термін "ефективна кількість" фармацевтичної композиції в одному варіанті реалізації являє собою кількість, достатню для одержання сприятливих або бажаних результатів, включаючи, але не обмежуючись ними, клінічні результати, такі як зменшення симптомів, що виникають в результаті захворювання, ослаблення симптому інфекції (наприклад, вірусного навантаження, лихоманки, болі, сепсису та т.п.) або симптому раку (наприклад, проліферації ракових клітин, присутності пухлини, метастаз пухлини і т.п.), бо підвищуючи тим самим якість життя індивідуумів, що страждають зазначеним захворюванням,
зменшення дози інших лікарських засобів, необхідних для лікування захворювання, посилення дії іншого лікарського засобу, наприклад, шляхом націленого впливу й/або інтерналізації, вповільнення прогресування захворювання та/або продовження періоду виживання індивідуумів.
Ї00417| Ефективну кількість можна вводити за допомогою одного або більше введень. Для цілей даного винаходу ефективна кількість лікарського препарату, сполуки або фармацевтичної композиції являє собою кількість, достатню для зниження проліферації (або ефекту) присутнього вірусу та для зменшення та/або вповільнення розвитку вірусного захворювання, прямо або побічно. Згідно з деякими варіантами реалізації даного винаходу ефективна кількість лікарського препарату, сполуки або фармацевтичної композиції може бути, але необов'язково, досягнута в комбінації з іншим лікарським препаратом, сполукою або фармацевтичною композицією. Відповідно, "ефективна кількість" може бути розглянута стосовно до введення одного або більше хіміотерапевтичних агентів, й один агент можна розглядати як введений в ефективній кількості, якщо, у комбінації з одним або більше іншими агентами, досягнутий або може бути досягнутий бажаний результат. Незважаючи на те, що індивідуальні потреби відрізняються, визначення оптимальних діапазонів ефективних кількостей кожного компонента перебуває в межах компетенції фахівців у даній області техніки. 00418) Для РО-1-сполучних молекул, включених в область даного винаходу, дозування, що вводиться пацієнту, переважно визначене на підставі маси тіла (кг) суб'єкта-реципієнта. Для
РО-1-сполучних молекул, включених в область даного винаходу, дозування, що вводиться пацієнту, як правило, становить щонайменше приблизно 0,01 мкг/кг, щонайменше приблизно 0,05 мкг/кг, щонайменше приблизно 0,1 мкг/кг, щонайменше приблизно 0,2 мкг/кг, щонайменше приблизно 0,5 мкг/кг, щонайменше приблизно 1 мкг/кг, щонайменше приблизно 2 мкг/кг, щонайменше приблизно 5 мкг/кг, щонайменше приблизно 10 мкг/кг, щонайменше приблизно 20 мкг/кг, щонайменше приблизно 50 мкг/кг, щонайменше приблизно 0,1 мг/кг, щонайменше приблизно 1 мг/кг, щонайменше приблизно З мг/кг, щонайменше приблизно 5 мг/кг, щонайменше приблизно 10 мг/кг, щонайменше приблизно 30 мг/кг, щонайменше приблизно 50 мг/кг, щонайменше приблизно 75 мг/кг, щонайменше приблизно 100 мг/кг, щонайменше приблизно 125 мг/кг, щонайменше приблизно 150 мг/кг або більше маси тіла суб'єкта. 00419) Дозування та частота введення РО-1-сполучної молекули згідно з даним винаходом може бути знижена або змінена шляхом посилення поглинання та проникнення молекули в тканині за допомогою модифікацій, таких як, наприклад, ліпідування.
І00420| Дозування РО-1-сполучної молекули згідно з даним винаходом, що вводиться пацієнту, може бути розрахована для застосування в якості монотерапії. В іншому варіанті, молекула може бути використана в комбінації з іншими терапевтичними композиціями, і дозування, що вводиться пацієнту, є більше низьким, ніж при введенні зазначених молекул у вигляді монотерапії.
І00421| Фармацевтичні композиції згідно з даним винаходом можна вводити локально в область, що потребує лікування; таке введення може бути досягнуте, наприклад, але не обмежуючись ними, шляхом місцевої інфузії, шляхом ін'єкції або за допомогою імплантата, причому зазначений імплантат являє собою пористий, непористий або желатиноподібний матеріал, включаючи мембрани, такі як силастичні мембрани, або волокна. Переважно при введенні молекули згідно з даним винаходом слід проявляти обережність при використанні матеріалів, які не поглинають молекулу. (004221) Композиції згідно з даним винаходом можуть бути доставлені у везикулі, зокрема, у ліпосомі (див. І апдег (1990) "Мем Меїйодз ОЇ Огид Оеєїїмегу", Зсіепсе 249:1527-1533); Тгєаї еї аї., в ПРОВЗОМЕЗ ІМ ТНЕ ТНЕВАРУ ОЕ ІМЕЕСТІЮО5 ОБІЗЕАБЗЕ АМО САМСЕВ, І оре2-Вегезівіп апа РіаІег (єдв.),
Гі65, Мем ХогК, рр. 353- 365 (1989); І оре2-Вегевівіп, іБріа., рр. З 17-327).
Ї00423| Композиції згідно з даним винаходом можуть бути доставлені в системі з контрольованим вивільненням або в системі з уповільненим вивільненням. Будь-яка методика, відома фахівцю в даній області техніки, може бути використана для одержання складів із уповільненим вивільненням, що містять одну або більше РО-1-сполучних молекул згідно з даним винаходом. Див., наприклад, патент США Ме4526938; РСТ публікацію М/О 91/05548; РСТ публікацію УУО 96/20698; Міпо єї аї. (1996) "Іпташтога! Радіоїттипоїпегарну ОЇ А Нитап СоЇоп
Сапсег Хепоагай Ов5іпу А Зивіаіпейд- ВРеІєазе Сі!", Вадіотегару 4 Опсоіоду 39:179- 189, опа єї аІ. (1995) "Апіїроду Медіаїєд ІГипд Тагодєїпуд ОЇ Гопд-Сіксцанйпуд Етиївіопв", РОА дЦошттаї ої
Рпагтасешіїса! Зсіепсе 5 Тесппоіоду 50:372- 397; Сіеек еї аї. (1997) "Віодедгадаріє Роїтутетс
Сатегв Рог А біді Апіїроду Рог Сагаіомазсціаг Арріїсайоп", Рго. ІпгІ. Зутр. Сопігої. Неї. Віоасі.
Магег. 24:853- 854; і ат еї аї. (1997) "Містоепсарзціайоп ОЇ Весотбіпапі Нитапігед Мопосіопаї! 60 Апіїбоду Рог Госа! Оеєїїмегу", Ргос. ІП. Зутр. Сопіго! Веї. Віоасі. Маїег. 24:759- 760, які всі повністю включені у дану заявку за допомогою посилання. Відповідно до одного варіанта реалізації даного винаходу в системі з контрольованим вивільненням може бути використаний насос (див. І апдег, вище; 5ейоп, (1987) "Ітріапіабіе Ритрз", САС Ст. Нем. Віотей. Епад. 14:201- 240; ВиспмаїЇй еї аї. (1980) "Гопд-Тепт, Сопіїпиои5 Іпігахепои5 Нерагіп Айтіпівзігайоп Ву Ап
Ітріапіабіе Іпіибвіоп Ритр Іп Атбриїайогу Раїйєепів М/йй Неситепі Мепоиб5 Тиготрозвів", Зигдегу 88:507-516; і Зацадек еї аї. (1989) "А Ргєїїтіпагу Та! ОЇ Те Ргодгаттабіе Ітптріапіарбіе Меадісайоп
Зувівт Гог Іпвиїїп Оеїїмегу", М. Епоі. У. Мей. 321:574-579). Згідно з іншим варіантом реалізації даного винаходу полімерні матеріали можуть бути використані для досягнення контрольованого вивільнення молекул (див., наприклад, Медіса! АРРИСАТІОМ5 ОЄ СОМТВОЕО ВЕГЕАЗЕ, І апдег апа
Му/іве (ед5.), САС Рге5., Воса Ваїйоп, Ріогіда (1974); СОоМтВОцЕЮ ОВС ВІОАМАІАВШТУ, Юа
РВОорист ОЕБІЯМ АМО РЕВЕРОВМАМСЕ, Зтоїеп апа Ваї! (едв.), МПеу, Мем Мої Кк (1984); І ему еї аї. (1985) "Іппібйоп Ої Саїсіїйсайоп ОО Віоргозіпейс Неай Маїмез Ву Іоса! СопігоІІєа-ВеЇІєазе
Бірпозрпопаїе", Зсіеєпсе 228:190-192; Витіпа єї аї. (1989) "СопігоЇей РНеїєазе ОЇ Соратіпе Егот А
Роїутегіс Вгаїп Ітріапі: іп мімо Спагасієгігайоп", Апп. Мешгої. 25:351-356; Ноуага еї аї. (1989) "Іпігасегебга! Огид Оевїїмегу Іп Наїв М/йА І езіоп-Іпдисед Метогу Оеїісіїв", у). Мешигозигу. 7(1):7105- 112); патент США Мое5679377; патент США Ме5916597; патент США Ме5912015; патент США
Мо5989463; патент США Мое5123232; РСТ публікацію УМО 99/15154; і РСТ публікацію УМО 99/20253). Приклади полімерів, які використовують у препаратах із уповільненим вивільненням, включають, але не обмежуються ними, полі-2-гідроксіетилметакрилат, поліметилметакрилат, поліакрилову кислоту, співполімер етилену та вінілацетату, поліметакрилову кислоту, полігліколіди (РІ С), поліангідриди, полі-М-вінілпіролідон, полівініловий спирт, поліакриламід, поліетиленгліколь, полілактиди (РІА), співполімер молочної та гліколевої кислот (РІ А) і поліортоефіри. Система з контрольованим вивільненням може бути розміщена поблизу терапевтичної мішені (наприклад, легенів), в результаті цього необхідна лише частка системної дози (див., наприклад, Соойзоп, в МЕОІСАЇ!. АРРИСАТІОМО ОЄ СОМТВО ТЕО ВЕГЕАЗЕ, 5!ирга, мої. 2, рр. 115-138 (1984)). Полімерні композиції, які можна застосовувати в якості імплантатів із контрольованим вивільненням, можуть бути використані відповідно до Юипп еї аї. (см. патент
США Ме5945155). Даний конкретний спосіб заснований на терапевтичному ефекті контрольованого вивільнення біоактивного матеріалу з полімерної системи в умовах іп 5.
Зо Імплантація зазвичай може відбуватися у будь-якому місці організму пацієнта, що потребує терапевтичного лікування. Можна використовувати неполімерну систему вповільненої доставки, в якій неполімерний імплантат в організмі суб'єкта використовується як система доставки лікарського препарату. При імплантації в організмі органічний розчинник імплантата буде розподілятися, диспергуватися або вилуговуватися з композиції в навколишню тканинну рідину, і неполімерний матеріал буде поступово коагулювати або осаджуватися з утворенням твердої мікропористої матриці (див. патент США Мо5888533).
І00424| Системи з контрольованим вивільненням обговорюються в огляді Іапдег (1990, "Мем Меїйодз ОЇ Огид Оеєїїмегу", Зсіеєпсе 249:1527-1533). Будь-яка методика, відома фахівцю в даній області техніки, може бути використана для одержання складів із уповільненим вивільненням, що містять один або більше терапевтичних агентів згідно з даним винаходом.
Див., наприклад, патент США Ме4526938; міжнародні публікації МО 91/05548 і УМО 96/20698;
Міпа єї а. (1996) "Іпташтога! РадіоіттипоїНегарну ОА Нитап СоЇоп Сапсег Хеподгай О5іпд А зЗивіаійпейд- ВеіІєазе Сте!", Вадіоштегару 5 ОпсоІоду 39:179- 189, опа еї аї. (1995) "Апііроду
Меаіаїей І пд Тагодеїіпу ОЇ Гопод-Сігсціайпуд Етиїівіопв", РОА дошгпаї ої Рнаптасешісаї! бсієпсе 5
Тесппоїоду 50:372- 397; СіеекК еї аї. (1997) "Віодедагадабіє Роїутетс Саттієгв Рог А Баг Апіїбоду
Еог Сагаіомазсшіаг Арріїсайоп", Рго. ІпгІ. Зутр. Сопігої. Веї. Віоасі. Маїег. 24:853- 854; ії ат еї а. (1997) "Містоепсарзшайоп ОЇ Весотбіпапі Нитапігей Мопосіопа! Апіїроду Рог Госаї! Овєїїмегу",
Ргос. ІпгІ. Бутр. Сопігої! Веї. Віоасі. Маїег. 24:759-760, які всі повністю включені у дану заявку за допомогою посилання. 00425) Якщо композиція згідно з даним винаходом являє собою нуклеїнову кислоту, що кодує РО-1-сполучну молекулу згідно з даним винаходом, то нуклеїнову кислоту можна вводити в умовах іп мімо, щоб стимулювати експресію РО-1-сполучної молекули, яку вона кодує, шляхом конструювання її як частини відповідного вектора експресії нуклеїнової кислоти і шляхом введення так, щоб зазначений вектор став внутрішньоклітинним, наприклад, з використанням ретровірусного вектора (див. патент США Мо4980286) або шляхом прямої ін'єкції, або з використанням бомбардування мікрочастинками (наприклад, генної гармати; Віоїївііс, биропі), або шляхом покриття ліпідами, або поверхневими рецепторами клітин або трансфікуючими агентами, або шляхом введення зазначеного вектора, з'єднаного з гомеобоксоподібним пептидом, який, як відомо, проникає в ядро (див., наприклад, дЧоїйої єї а!. (1991) "Апіеппаредіа 60 Нотеоброх Реріїде Неашаїез Мешгта! Могрподепезів", Ргос. Маї!. Асад. сі. (0.5.А.) 88:1864-1868),
і т.п. В іншому варіанті, нуклеїнова кислота може бути введена внутрішньоклітинно та вбудована в ДНК клітини-хазяїна для експресії шляхом гомологічної рекомбінації. 00426) Лікування суб'єкта з використанням терапевтично або профілактично ефективної кількості РО-1-сполучної молекули згідно з даним винаходом може включати однократну обробку або переважно може включати серію обробок. У переважному прикладі суб'єкта лікують з використанням зазначеного діатіла один раз на тиждень протягом від 1 до 10 тижнів, переважно від 2 до 8 тижнів, більше переважно від З до 7 тижнів і ще більше переважно протягом приблизно 4, 5 або 6 тижнів. Фармацевтичні композиції згідно 3 даним винаходом можна вводити один раз на добу, два рази на добу або три рази на добу. В іншому варіанті фармацевтичні композиції можна вводити один раз на тиждень, два рази на тиждень, раз у два тижні, один раз на місяць, один раз кожні шість тижнів, один раз у два місяці, два рази на рік або один раз на рік. Також буде зрозуміло, що ефективне дозування молекул, які використовують для лікування, може збільшуватися або зменшуватися в ході конкретного лікування.
Приклади
І00427| Наступні приклади ілюструють різні способи для композицій в діагностичних або лікувальних способах згідно з даним винаходом. Приклади наведені в ілюстративних цілях і жодним чином не обмежують обсяг даного винаходу.
Приклад 1
Характеристика моноклональних антитіл до РО-1 людини 00428) П'ятнадцять мишачих моноклональних антитіл, здатних специфічно зв'язуватися як з РО-1 людини, так і з РО-1 яванських макак, виділяли і позначали "МАТ до РО-1 1", "МАТ 2 до
РО-1", "МАТ З до РО-1", "МАТ 4 до РО-1", "МАТ 5 до РО-1", "МАТ 6 до РО-1", "МАТ 7 до РО-1", "МАТ 8 до РО-1", "МАТ 9 до РО-1", "МАТ 10 до РО-1", "МАТ 11 до РО-1", "МАТ 12 до РО-1", "МАТ 13 до РО-1", "МАТ 14 до РО-1" і "МАТ 15 до РО-1". Було виявлено, що СОК зазначених антитіл відрізняються та представлені вище. Зв'язування з позаклітинним доменом РО-1 людини й яванських макак оцінювали у такий спосіб: 9б-ямкові планшети з плоским дном Махі-5огре покривали розчинним РО-1 людини або РО-1 яванських макак (позаклітинний домен РО-1 людини, гібридизований з полігістидиновою міткою (5ПРО-1 Ні) або областю Ес людини (5ПРО- 1 Ес), або позаклітинний домен РО-1 яванських макак, гібридизований з областю Ес людини
Зо (зсупо-РО1 Ес)), кожний у концентрації 0,5 або 1 мкг/мл, планшети промивали й інкубували з одним із виділених антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 1-15. Для проведення даних досліджень антитіла до РО-1 використовували в концентрації 3, 1,0, 0,3333, 0,1111, 0,0370, 0,0123 або 0,0041 мкг/мл (трикратні послідовні розведення). Кількість антитіла, що зв'язується з іммобілізованим РО-1 (людини або яванських макак), оцінювали за допомогою кон'югованого з пероксидазою хрону (ПХ) вторинного антитіла кози до ДО миші. Всі зразки досліджували на зчитувачі для планшетів (Місг 2 МаїІас, РеїКіп ЕІтег5). Типові криві зв'язування для розчинного
РО-1 людини їі розчинного РО-1 яванських макак представлені на Фігурі 7А-70О і Фігурі 8ВА-8С, відповідно. 00429) Результати проведених досліджень зв'язування (Фігури 7А-7О і Фігури 8А-860) свідчать про те, що всі антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 1-15, зв'язуються як з розчинним РО-1 людини, так і з розчинним РО-1 яванських макак. 00430) Щоб додатково охарактеризувати мишачі антитіла до РО-1, їхню здатність блокувати зв'язування розчинного РО-Ї1 людини з розчинним РО-1 людини оцінювали в двох різних кількісних дослідженнях. В одному кількісному дослідженні оцінювали здатність антитіл блокувати зв'язування РО-1 людини з РО-11, іммобілізованим на поверхні. Для проведення даного кількісного дослідження кожне з антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 1-15, або контрольне антитіло до РО-1 (МАТ до РО-1 А) змішували з гібридним білком 5АРО-1 Ні (у концентрації 2,5 мкг/мл) й окремо інкубували з міченим біотином розчинним РО-1І1 людини (позаклітинний домен
РО-І1, гібридизований з Ес людини (5РО-11)), у концентрації 1 мкг/мл, іммобілізованим на планшеті, покритому стрептавідином. Для проведення даних досліджень антитіла до РО-1 використовували в концентрації 10, 5,0, 2,5, 1,25, 0,625, 0,3125 або 0,1563 мкг/мл (дворазові послідовні розведення). Кількість 5ЗПРО-1 Ні, пов'язаного з іммобілізованим 5РО-11, оцінювали за допомогою Ніб-мітки з використанням вторинного антитіла до Ніб-мітки, кон'югованого з ПХ.
Всі зразки досліджували на зчитувачі для планшетів (Місіог 2 МаїЇІас, Регкіп ЕІтег5). Результати даного експерименту представлені на Фігурі 9А-90.
Ї00431| Результати проведених кількісних досліджень інгібування (Фігури 9А-903) свідчать про те, що антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 1, МАТ З до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1,
МАТ 7 до РО-1, МАТ 8 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до
РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1, були здатні блокувати зв'язування бо розчинного РО-Ї1 людини з розчинним РО-1 людини в різному ступені, у той час як МАТ 2 до
РО-1 і МАТ 4 до РО-1 виявили незначну або відсутню блокувальну активність у даному форматі кількісних досліджень. 00432 У другому кількісному дослідженні оцінювали здатність мишачих антитіл до РО-1,
МАТ до РО-1 1-15, блокувати зв'язування ліганду РО-1 (тобто РО-І 1 людини або РО-І/2 людини) з РО-1, експресованим на поверхні клітин лінії МБО. Для проведення даного кількісного дослідження кожне з антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 1-15, або контрольне антитіло до РО-1 (МАТ до РО-1 А або МАТ до РО-1 В) окремо змішували з біотинільованим розчинним РО-І/1 людини (гібридний білок 5пРО-1Ї1) або біотинільованим розчинним гібридним білком РО-Ї2-тиЇднс людини (5ПРО-12; АпсеїЇ, каталожний номер 573-030), кожний у концентрації 0,1 мкг/дослідження, й інкубували з клітинами лінії М5О, що експресують РО-1 людини (5250000 клітин/'ямку) у блокувальному буфері (ГАС ж 1095 сироваткового альбуміну людини). Для проведення даних досліджень антитіла до РО-1 використовували в концентрації 4,0, 1,0, 2,5х10- 1, 6б25х102, 1,56х102, 3,90х103, 9,76х107, 2,4х107, 0,6х107 мкг/дослідження (чотириразові послідовні розведення). Кількість ЗПРО-І1 (або 5пПРО-12), пов'язаного з поверхнею клітин лінії
МБО, визначали з використанням кон'югованого з фікоеритрином вторинного антитіла, пов'язаного зі стрептавідином, за допомогою РГАС5. Визначали значення ІКоо для інгібування зв'язування РО-1/РО-11, і середнє значення вибірки ( Х) щонайменше двох експериментів (за винятком тих випадків, коли це зазначено) представлено в таблиці 6.
Таблиця 6
МАТ7доРО-ЇЇ | 00024
Трезультати одного експерименту
Ї00433)| Результати кількісних досліджень інгібування 5пРО-11 (таблиця 6) свідчать про те, що антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО-1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до
РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до РО-1, МАТ 11 до РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1, МАТ 14 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1, були здатні блокувати зв'язування
РО-І1 людини з РО-1 людини, експресованим на поверхні клітин лінії М5О. Зокрема, МАТ до
РО-1 1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 10 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 блокували зв'язування 5ПРО-1 1 аналогічно або більш ефективно, ніж еталонні антитіла до РО-1 (МАТ до РО-ї1 А, МАТ до РО-1 В), тоді як МАТ 8 до РО-1 по суті не виявляло блокувальної дії у даному форматі кількісних досліджень. Обидва МАТ 2 до РО-1 і МАТ 4 до РО-1 були здатні
Зо блокувати зв'язування РО-1/РО-11 у даному форматі кількісних досліджень. (00434) Аналогічним чином, антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ З до РО- 1, МАТ 4 до РО-1, МАТ 5 до РО-1, МАТ 6 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1, МАТ 10 до
РО-1, МАТ 12 до РО-1, МАТ 13 до РО-1 і МАТ 14 до РО-1, були здатні блокувати зв'язування
РО-І2 людини з РО-1 людини, експресованим на поверхні клітин лінії М5О, тоді як МАТ 8 до РО- 1 по суті не виявляло блокувальної дії у даному форматі кількісних досліджень. Зокрема, МАТ до РО-11, МАТ 5 до РО-1, МАТ б до РО-1, МАТ 7 до РО-1 і МАТ 10 до РО-1 блокували зв'язування 5ПРО-12 аналогічно або більш ефективно, ніж еталонні антитіла до РО-1 (МАТ до
РО-ї А, МАТ до РО-1 В). Антитіла до РО-1, МАТ 11 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1, не випробовували в даному кількісному дослідженні. Нижче наведені результати для декількох гуманізованих антитіл до РО-1, включаючи МАТ до лРО-1 15.
Приклад 2
Гуманізація та подальша характеристика 00435) Варіабельні домени антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1,
МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1, гуманізували, у тих випадках, коли були ідентифіковані антигенні епітопи, антитіла додатково деімунізували для одержання готових гуманізованих варіабельних доменів. Гуманізація МАТ до РО-1 1, МАТ 2 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 дозволила одержати один гуманізований домен МН й один гуманізований домен Мі. для кожного антитіла, позначені у даному документі як "МНІ МАТ до лРО-1 1" ії "М'1 МАТ до лРО-1 1"; "УНІ МАТ до лЛРО-1 2" ї "М1 МАТ до лРО-1 2"; ї "УНІ МАТ до лРО-1 15" ї "М/1 МАТ до лРО-1 15". Гуманізація
МАТ 7 до РО-1 дозволила одержати два гуманізованих домени МН, позначених у даному документі як "УНІ МАТ до лРО-1 7" ії "МН2 МАТ до лРО-1 7", і три гуманізованих домени МІ, позначених у даному документі як "М/1 МАТ до лРО-1 1", "М 2 МАТ до лРО-1 7" і "М З МАТ до
ЛРО-1 7". Гуманізація МАТ 9 до РО-1 дозволила одержати два гуманізованих домени УН, позначених у даному документі як "ЖН1 МАТ до лРО-1 9" ії "МН2 МАТ до лРО-19" їі два гуманізованих домени МГ, позначених у даному документі як "М-1 МАТ до лРО-1 9" ії "М 2 МАТ до лРО-1 1". У тих випадках, коли було отримано декілька гуманізованих варіабельних доменів, гуманізовані варіабельні домени важкого та легкого ланцюгів конкретного антитіла до РО-1 (наприклад, МАТ 7 до РО-1) можна застосовувати у будь-якій комбінації, і конкретні комбінації гуманізованих ланцюгів згадуються з посиланням на певні домени МН/Мі, наприклад, гуманізоване антитіло, що містить МНІ МАТ до лРО-17 і М/2 МАТ до лРО-1 7, зокрема називається "МАТ до лРО-1 7 (1.239у". Гуманізовані повнорозмірні антитіла одержували за допомогою константної області (3901 людини, що містить заміни І 234А/ 235А (ІДС1 (АА)), або константної області Ід4 людини, що містить заміну 5228Р (9404 (Р)). 00436) Повнорозмірні важкі ланцюги гуманізованого антитіла (951 конструювали у такий спосіб: С-кінець гуманізованого домену МН гібридизували з М-кінцем константної області Ідс1 людини, що містить варіант домену СН2-СНЗ (містить заміни І 234АЛ 235А (АА)) і позбавленого
С-кінцевого залишку лізину (5ЕО ІЮО МО: 255):
АЗТКОРОМЕР ГАРБЗКОЗТ5Оа СТААГ ОСІ УК ОМЕРЕРУТУ5 МУМЗОАІТ5ОаМ НТЕРАМО55
СІМ5І55УМТ МРБОББІ ТОЇ МІСМУМНКРО МІТКУОКАМЕР КЗСОКТНТІСР РОРАРЕААСС
РБУБЕРРКР КОТІМІЗАТР ЕМТСУУММОУМ5 НЕОРЕМКЕМУ МУрамМЕУНМА КТКРАВЕЕОУМ
ЗТУВУУБ5МІТ МІНОСМЛМОаК ЕМКСКМОМКА І РАРІЕКТІБ КАКОСОРАВЕРО МУМТІ РРОВЕЕ
МТКМОМУБІ ТО І МКагМРБОЇ АМЕМЖЕЗМООР ЕММУКТТРРМ ГО5рОаБЕРІ М БКІТМОКАМУ
ОООСММУЕБСЗМ МНЕАЇ НМНУТ ОКБІ БІ ЗРО
І00437| У 5ЕО ІО МО: 255 залишки амінокислот 1-98 відповідають домену СНІ ІдС1 (5ЕО ІЮ
МО: 10), залишки амінокислот 99-113 відповідають шарнірній області (91 (5ЕО ІЮО МО: 32) і залишки амінокислот 114-329 відповідають домену СН2-СНЗ ІдДОЇ, що містить заміни
І 234А/ 235А (виділені підкресленням) (ЗЕО ІЮО МО: 5), але позбавленого С-кінцевого залишку лізину. 00438) Амінокислотна послідовність важкого ланцюга зразкового гуманізованого антитіла (МАТ до лРО-1 7 (1.2)), що містить константну область важкого ланцюга Ідс1, що містить мутацію І234А/І235А і позбавленого С-кінцевого залишку лізину, являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 265):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУЗЕТ БУММУММУМУУВОА РОСС ЕУЛОаМ ІНРЗОЗЕТУММ
ВОКЕКОВМТІ ТМОК5ОТЗТАМ МЕ! 55ІА5ЕО ТАМУУСАВЕН УсТ5РЕАУМС ОСТІ МУЗА
ЗІКОРОМЕРІ АРЗБЗКОТООСС ТААГОесСіМкКО МЕРЕРУТУБМУ МБОАІТ5ОаМН ТЕРАМ О5505
ЇМ5БІЗБММТМ РБЗББ'СТОТМ ІСМУМНКРОМ ТКМОКАМЕРК 5СОКТНТСРР СРАРЕАДАСОР
ЗМЕГЕРРКРК ОТІМІЗВТРЕ МТСУММУОУ5Н ЕОРЕУМКЕМММ МрамМЕМНМАК ТКРАЕЄОУМ5
ТУВУМ5МІ ТМ ІНОСУЛМОКЕ УКСКУБМКАЇ РАРІЕКТІЗК АКОСОРВЕРОМ МТ РРОВЕЕМ
ТКМОУБІ ТС УМКагМУРБОІА МЕМЕЗМООРЕ ММУКТТРРМІ ОБрОаБЕРІ 5 КІТУОКАМО
ОСММЕБСОСЗУМ НЕАЇ НМНУТО КІ 5І Ра
Ї00439| У 5ЕО ІЮО МО: 265 залишки амінокислот 1-119 відповідають домену МН із МНІ МАТ до лРО-1 7 (ЗЕО ІЮ МО: 147), залишки амінокислот 120-217 відповідають домену СНІ ІдО1 (ЗЕО ІО МО: 10), залишки амінокислот 218-232 відповідають шарнірній області (91 (ЗЕО ІЮ
МО: 32) і залишки амінокислот 233-448 відповідають домену СН2-СНЗ ІдС1, що містить заміни
ІЇ234А// 235А (виділені підкресленням) (ЗЕО ІЮ МО: 5) і позбавленого С-кінцевого залишку лізину. 00440) Повнорозмірні важкі ланцюги гуманізованого антитіла Ід54 конструювали у такий спосіб: С-кінець гуманізованого домену МН гібридизували з М-кінцем константної області дві людини, що містить стабілізовану шарнірну область (містить заміну 5228Р) та позбавлену С- кінцевого залишку лізину (ЗЕО ІЮ МО: 256):
АЗТКОРОМЕР ГАРСЗАОТОЕ ЗТААГОЯСІ УК ОМЕРЕРМТУ5 М/М5ОАІ ТОМ НТЕРАМІ О55
СІМ5І55УМТ МРБОББІ ТК МТоМУМОНнКкКРЗ МІКУМОКАМЕВ КУСРРОРРСР АРЕРІ СОаРБМУ
ЕЕРРКРКОТ ІМІЗАТРЕМТ СУУМОУБОЕО РЕМОЕЄММУУМО СМЕУНМАКТК РАЕЕЄОЕМЗТУ
ВМУМ5МІТМІН О0ОУМІМОаКЕМК СКУЗМКОІ РО БІЕКТІЗКАК СОРВЕРОМУТ ІРРБОЕЕМТК
МОМ5І ТС УК аЕМРОЗОІАМЕ УМЕЗМООРЕММ УКТТРРМІОЗ БОБЕР УВІ ТУОКЗАУМОвгС 60 ММЕ5С5БУМНЕ А НМНУТОКЗ І БІ 5 С
І00441| У 5ЕО ІО МО: 256 залишки амінокислот 1-98 відповідають домену СНІ Ід024 (5ЕО ІЮ
МО: 254), залишки амінокислот 99-110 відповідають стабілізованій шарнірній області Ідс4, що містить заміни 5228Р (виділені підкресленням) (ЗЕО ІЮ МО: 13) і залишки амінокислот 111-326 відповідають домену СН2-СНЗ Ідс4 (ЗЕО ІЮ МО: 4), позбавленого С-кінцевого залишку лізину. (00442) Амінокислотна послідовність важкого ланцюга зразкового гуманізованого антитіла (МАТ до лРО-1 7 (1.2)), що містить константну область важкого ланцюга Ідс4, що містить стабілізовану шарнірну область з мутацією 5228Р і позбавлену С-кінцевого залишку лізину, являє собою послідовність, наведену нижче (5ЕО ІЮ МО: 266):
ОМОГ МОБОАЕ УККРОАБУКМ 5БСКАБИаУЗЕТ БУММУММУМУУВОА РОСС ЕУЛОаМ ІНРЗОЗЕТУММ
ВОКЕКОВМТІ ТМОК5ОТЗТАМ МЕ! 55ІА5ЕО ТАМУУСАВЕН УсТ5РЕАУМС ОСТІ МУЗА
ЗІКОРОМЕРІ АРСЗА5ОТЗЕЗ ТААГОСІМКО МЕРЕРУТУБМУ МСА! Т5ОаМН ТЕРАМ О5505
ЇМ5І5ЗБУМТМ РБЗББІСТКТУ ТОМУМОНКРОМ ТКМОКАМЕЗК МаРРСОРРСРА РЕБРІ СРБМУЕ
ІГРРРКРКОТІ МІ5ЗВАТРЕМТСО МУМУМОУБОБЕОР ЕМОЄММУУМОс МЕМНМАКТКР ВЕЄЕОЄМЗТУВ
МУ5МІТМІНО ОУМІМОКЕМКОС КУЗМКОЇ РОБ ЕКТІЗКАКаИ ОРАВЕРОМУТІ РРБОЕЕМТКМ
ОМ5ІТСІУКОа ЕМРБЗОІАМЕМ/ ЕЗМООРЕММУ КТТРРМО5О с5ЕРІ МВТ МОК5АУМОБаМ
МЕЗСЗУМНЕА І НМНУТОК5БІ 5І 51 Са
І00443| У 5ЕО ІЮ МО: 266 залишки амінокислот 1-119 відповідають домену МН із МНІ МАТ до лРО-1 7 (ЗЕО ІЮ МО: 147), залишки амінокислот 120-217 відповідають домену СНІ ІдС4 (ЗЕО ІО МО: 254), залишки амінокислот 218-229 відповідають стабілізованій шарнірній області 3054, що містить заміну 5228Р (виділена підкресленням) (ЗЕБО ІЮ МО: 13), і залишки амінокислот 230-445 відповідають домену СН2-СНЗ ІдсС4 (ЗЕО ІЮО МО: 4), позбавленого С- кінцевого залишку лізину. 00444) Повнорозмірні гуманізовані легкі ланцюги конструювали у такий спосіб: С-кінець гуманізованого домену МГ. гібридизували з М-кінцем легкого каппа-ланцюга людини (5ЕО ІЮ МО: 8). Аналогічний легкий ланцюг спаровували з важкими ланцюгами Ідс1 (АА) й Ід (Р). (00445) Амінокислотна послідовність легкого ланцюга зразкового гуманізованого антитіла до
РО-1 (МАТ до лРО-1 7 (1.2)), що містить константну область каппа-ланцюга, являє собою послідовність, наведену нижче (ЗЕО ІЮО МО: 264):
ЕІМІГТО5РАТ ІЗІ5РОЕВАТ І5СВАЗЕЗУМО ММОаМ5ЕММУУЕ ООКРООРРКІ ІПІНААЗМОСО
Зо СУРЗАЕБаБа БОаТОРТІТІЗ БІЕРЕОРАММ ЕСООБКЕМРУ ТРОаспаткМЕ! КАТМААРБЗМЕ
ІЕРРБОБОЇК БИатТАБММУСІЇ ММЕМРАЕАКМ ОМКМОМАГОБ СМБОЕБМТЕО ОБКОБТУБІ 5
ЗТ ТІ ЗКАВУ ЕКНКУУМАСЕМ ТНОСІ 55Р МТ КЗЕМВОЕС
І00446| У 5ЕО ІО МО: 264 залишки амінокислот 1-111 відповідають домену МІ. МІ 2 МАТ до лЛРО-1 7 (ЗЕБЕО ІЮ МО: 151), і залишки амінокислот 112-218 відповідають константній області легкого каппа-ланцюга (5ЕО ІО МО: 8).
І00447|Антитіла до РО-1, що містять альтернативні константні області, наприклад, модифіковані області Ес, можуть бути легко отримані шляхом включення різних константних областей та/"або шляхом введення однієї або більше амінокислотних замін, додавань або делецій. Наприклад, якщо бажаним є використання біспецифічного антитіла, то для полегшення гетеродимеризації використовують несучі виступ і западину домени СН2-СНЗ. Химерні антитіла до РО-1, що містять мишачі варіабельні домени та константні області людини, одержували, як описано вище. 00448) Гуманізовані антитіла (ІДдс1 (АА) і/або Ідс4 (Р)) випробовували для оцінки активності зв'язування та блокування, як описано вище. Зв'язування з РО-1 людини (5ПРО-1 Нів і 5пПРО-1
Ес) і РО-1 яванських макак (5ПРО-Ї1 Ес) гуманізованих антитіл було порівнянно зі зв'язуванням відповідного мишачого антитіла. Крім цього, гуманізовані антитіла зберігали здатність блокувати зв'язування РО-І1 людини з РО-1 людини в дослідженні методом ІФА. (00449) Кінетику зв'язування мишачих антитіл МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО- 1, МАТ 15 до РО-1, гуманізованих антитіл МАТ до лРО-1 2, МАТ до лРО-1 7 (1.2), МАТ до лРО- 19 (1.1), МАТ до лРО-1 15 і контрольних антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В, досліджували з використанням аналізу Віасоге. Антитіла до РО-1 захоплювали на іммобілізованому білку А й інкубували з Ніз-міченим розчинним РО-1 людини (5ПРО-1-Ніх) або розчинним гібридним білком РО-1 Ес людини-яванських макак (5супо РО-1 пЕс), розщепленим для видалення ділянки Ес, і кінетику зв'язування визначали за допомогою аналізу Віасоге. У додаткових дослідженнях антитіла до РО-1, МАТ до лРО-1 7 (1.2) І9С1 (АА), МАТ до лРО-1 7 (1.2) 1904 (Р), МАТ до лРО-1 9 (1.1) ІДС1 (АА), МАТ до лРО-1 9 (1.1) Ід4 (Р), МАТ до РО-- А 91 (АА), МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р), МАТ до РО-1 В ІдС1 (АА) і МАТ до РО-1 В Ідс4 (Р), захоплювали на іммобілізованому козячому Е(абр)»2 до Ес людини, і кінетику зв'язування визначали за допомогою аналізу Віасоге, як описано вище. Розраховані значення Ка, Ка і КО із 60 даних досліджень представлені в таблиці 7.
Таблиця 7
Захоплення білком А
Людина | | Яванськамакакаб.//-/З 0 АнтитлодоРот орто ре о ке КД ето 1 кам
МАТдДоРОЛА 60 | 18 з || 14 | 96 69
МАТдоРО-ЯВ 777711 7140 | 35 | 25 || 37 | 712 | з2
МАТ7доРО-ЇЇ 77771721 | 28 | 13 || 17 | 6 | з5
ОМАТдолРО-1 71.2) 17 7110 | 43 | 039 || 37 | 64 | 17
МАТУдоРО-ЇЇ 7/1 43 | 42 | 98 || 22 | 16 | 727
ОМАТдолРО-1 901.1) 771,8 | 65 | зб | | 75 | 71 | 733
ОМАТІ5 до РОЇ 77 171145 | 13 | 29 || 27 | 71 | 407
МАТдолЛРО-115 7/7 24 | 32 | 133 | | 23 | 718 | 783
МАТадоРО-ЇЇ ///777/17115,5 | 56 | 102 | | 42 | 60 | 143
МАТдолРО-12 1 32 | 16 | 50 || 23 | 39 | 17
МАТдоРО-ЇАСІ(АА) | 13 | 84 | 65 | | 81 | 45 | 56
МАТдоРО-ЇАСЯ(Р. 13 | 79 | 61 || 84 | 50 | 60
МАТдоРО-ЇВідСІ1(АА) 25 | 28 | 112 | | 20 | 64 | з2
МАТдоРО-ЇВідаЯ4(Р) 26 | 25 | 96 || 20 | 79 | 40 пкт візі в | тн
ОМАТдолРО-1 7. 2)дса(Р) 27 | 41 | 15 || 17 | 78 | 46
Мк ве ви тю везе ве
МАТ до лРО-1 90. 1)дс4(РУ 61 | 58 | 95 | | 49 | 74 | 51 аМічений полігістидиновою міткою розчинний РО-1 людини (5пРО-1 Нів).
ЬРозщеплений розчинний РО-1 яванських макак (зсупо РО-1 НЕс). 00450) Результати свідчать про те, що МАТ 7 до РО-1 і гуманізоване МАТ до лРО-1 7 (1.2) демонструють переважну кінетику зв'язування у порівнянні з еталонними антитілами до РО-1,
МАТ до РО-1 А ії МАТ до РО-1 В. Показники кінетики зв'язування МАТ 2 до РО-1 і МАТ до лРО- 12 приблизно у два рази перевищують аналогічні показники для еталонних антитіл до РО-1, у той час як показники кінетики зв'язування МАТ 9 до РО-1, МАТ до лРО-1 9 (1.1), МАТ 15 до РО-1 і МАТ до лРО-1 15 приблизно у 2-6 разів перевищують аналогічні показники для еталонних антитіл до РО-1.
Ї00451| Була вивчена тканинна специфічність антитіла до РО-1 людини, МАТ до лРО-1 7.
Нормальну тканину піддавали впливу МАТ 7 до РО-1 або антитіла для контролю ізотипу (0,313 мкг/мл), і візуалізували ступінь забарвлення. Віохайї"М використовували для блокування ендогенних ферментів, щоб зменшити неспецифічне забарвлення муцину в тканині товстої кишки. Як показано на Фігурі 10А, панелі і-хії, МАТ 7 до РО-1 й антитіло для контролю ізотипу не були здатні позначати клітини нормальної товстої кишки, печінки, легенів, підшлункової залози, нирок і тканини серця. Крім цього, МАТ 7 до РО-1 й антитіло для контролю ізотипу не були здатні забарвлювати нормальну шкіру (Фігура 108, панелі і-ї). Напроти, було виявлено, що МАТ 7 до РО-1 інтенсивно забарвлює лімфоцити, що присутні в нормальній тканині мигдалин, і трансфіковані РОСОТ1 клітини лінії М5О, що експресують РО-1 (Фігура 108, панелі їїї й м), у той час як антитіло для контролю ізотипу не було здатне забарвлювати клітини обох зазначених типів (Фігура 108, панелі ім і мі). Відповідно, результати, представлені на Фігурах 10А-108В, вказують на те, що МАТ 7 до РО-1 здатне специфічно зв'язуватися з лімфоцитами та клітинами, що експресують РО-1. 00452) Досліджували профілі насичення зв'язування МАТ до лРО-1 2 ІдСс1т (АА), МАТ до лЛРО-1 7(1.1) ї3с1 (АА), МАТ до лРО-1 7(1.2) Ідс21, (АА), МАТ до лРО-1 7(1.2) Іа4 (Р), МАТ до лЛРО-1 9(1.1) ї3с21 (АА), МАТ до лРО-1 9(1.1) І9Д24 (Р), МАТ до лРО-1 15 ІдДа1 (АА) й еталонних антитіл до РО-1 МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В. Загалом, кожне з антитіл до РО-1, МАТ до РО- 1 1-15 або еталонних антитіл до РО-1 (МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В) змішували з клітинами лінії МБО, що експресують РО-1 людини (5250000 клітин/ямку) у блокувальному буфері (ЕАС5 Ж
1095 сироваткового альбуміну людини). Для проведення даних досліджень антитіла до РО-1 використовували в концентрації 50, 12,5, 3,13, 2,0х107, 4,9х102, 1,2х102, 3,0х103, 1,9х107, 7,бх107, 4,75х105 або 1,19х105 мкг/дослідження (чотириразові послідовні розведення).
Кількість антитіла, пов'язаного з поверхнею клітин лінії МБО, визначали з використанням кон'югованого з АРС вторинного козячого антитіла до Їд людини методом ЕАС5. Типові криві насичення представлені на Фігурі 11. Визначали значення ЕК5о і ЕКео, і середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (5О, о) чотирьох окремих експериментів наведені в таблиці 8.
Таблиця 8 111111 наменнязвяуваня 0000000 о ЕКво (мкг/дослідження) ЕКоо (мкг/ дослідження)
МАТ до РО-1 А ІДС (АА 0,1991 0,1309 1,4528 0,8040
МАТ до РО-1 А Іда4 (Р 0,1581 0,1161 1,5464 1,7690
МАТ до РО-1 В ІДС (АА 0,1347 0,0681 1,3917 0,9573
МАТ до РО-1 В Іда4 (Р 0,1398 0,0951 1,1619 1,2681
МАТ до лРО-1 2 ІДС (АА 0,4431 0,1997 2,4374 1,2637
МАТ до лРО-1 7(1.1) ІЧС1 (АА 0,1069 0,0500 0,9102 0,5476
МАТ до лРО-1 7(1.2) ІЗС1 (АА 0,1872 0,1553 0,6810 0,3226
МАТ до лРО-1 7(1.2) (404 (Р 0,1376 0,0926 0,6609 0,3437
МАТ до лРО-1 9(1.1) ІЧС1 (АА 0,3123 0,2291 1,6486 0,9117
МАТ до лРО-1 9(1.1) (404 (Р 0,5128 02228 3,0563 0,9437
МАТ до лРО-1 15 Іде (АА 0,2927 01333 2,0640 0,6096 00453) Дослідження насичення зв'язування демонструють, що гуманізовані варіанти МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 мають сприятливий профіль для зв'язування з поверхневим РО-1. Зокрема, гуманізовані МАТ 7 до РО-1 (МАТ до лРО-1 7 (1.1) ї
МАТ до лРО-1 7 (1.2), що містять область Ес Ідс1 (АА) або Ідса4 (Р), мають найнижчі значення
ЕКоео із усіх досліджених антитіл. 00454) Щоб додатково охарактеризувати гуманізовані антитіла до РО-1, МАТ до лРО-1 2
Іча1 (АА), МАТ до лРО-1 7(1.1) Да (АА), МАТ до лРО-1 7(1.2) І4с21, (АА), МАТ до лРО-1 7(1.2)
І4с24 (Р), МАТ до лРО-1 9(1.1) ДС (АА), МАТ до лРО-1 9(1.1) Ід04 (Р) і МАТ до лРО-1 15 Іде (АА), досліджували їхню здатність блокувати зв'язування РО-Ї1 людини (5ПРО-І1) і РО-І2 людини (5ПРО-І2) із РО-1, що експресується на поверхні клітин лінії МБО. Зазначені кількісні дослідження виконували, як описано вище. Типові криві інгібування зв'язування 5РО-1 1 і 5РО-І2 із РО-1, що експресується у клітинах лінії МБО, представлені на Фігурах 12А і 128, відповідно.
Визначали значення ІКбо і ІКео, і середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, об) трьох окремих експериментів наведені в таблиці 9.
Таблиця 9
ІКвго ІКоо ІКго ІКео (мкг/дослідження) | (мкг/дослідження) |(мкг/дослідження) |(мкг/дослідження) мАг до РО АОС о о2оз| 0оове | 0гевв | 03279 | 00414 | 0,0124 | 01601) 0,066
Мат до РОЛ Ася оо15в| 00096 | 00776 | 0,02ов | 00280 | 0,0070 | 01584 | 01153 мАг до РОЛ ВЗ от4в| 0008 | о0моз4 | 00100 | 00280 | 0,0059 | 01190) 0,060
Мат до РОЛ ВСЯ оот43| 00013 | 00798 | 00239 | 00280 | 0,0055 | 0,0924 | 0,0065 неАЮ, 7 0о5в| 00124 | 0гаво | 0оБО | 024 | 0,0143 | 0,813 | 0,0656
Таблиця 9
ІКго ІКео ІКво ІКоо (мкг/дослідження) | (мкг/дослідження) |(мкг/дослідження) |(мкг/дослідження) пет М ооівв| 00032 | 00674 | 00041 | 00283 | 0,0147 | 0,0886 | 0,0166 пет Я оот1в| 00027 | 00678 | 00031 | 00212 | 0,0031 | 0,0672 | 0,0043 меді Ля оотоз| 00023 | 00520 | 00033 | 00213 | 0,0019 | 0,0616 | 0,0063 пет М оовез| 00036 | 03238 | 00508 | 04002 | 0,5000 | 0,4573 | 01805 са доли ЗИ ово ботів | бабі | 00513 | 0105 | 00146 0,2914 | 0,0526 мету 7 оо440| 00092 | боб | 0,035 | 00945 | 0,0022 | 0,3093 | 0,0588 00455) Дослідження інгібування зв'язування лігандів демонструють, що гуманізовані варіанти МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 здатні інгібувати зв'язування 5РО-11 і 5РО-12 із РО-1 на поверхні клітини. Зокрема, гуманізовані МАТ 7 до РО-1 (МАТ до лРО-1 7 (1.1) і МАТ до лРО-1 7 (1.2)) мають найнижчі значення ІКоео із усіх досліджених антитіл.
Приклад З
Блокування контрольної точки РО-1/РО-І1 гуманізованими антитілами до РО-1 людини 00456) Здатність МАТ до лРО-1 2 Іда1 (АА), МАТ до лРО-1 7(1.1) ІДС1 (АА), МАТ до лРО- 1 741.2) да, (АА), МАТ до лРО-1 7(1.2) ІДС4 (Р), МАТ до лРО-1 9(1.1) ІДС (АА), МАТ до лРО- 1 941.1) да (Р), МАТ до лРО-1 15 Іда1 (АА) й еталонних антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В, виступати антагоністами осі РО-1/РО-Ї1 (тобто блокувати взаємодію РО-1/РО-І1 і запобігати придушенню відповідей Т-клітин), досліджували в кількісному дослідженні з використанням репортера люциферази дииКкаї-Інс-МЕАТ/СНО-РО-1 1. Загалом, клітини лінії СНО, що експресують РО-Ї1 (СНО/РО-І1), висіювали в щільності 40000 клітин/ямку в 100 мкл культурального середовища (КРІМІ ї- 1095 фетальної бичачої сироватки (ФБС) ж 100 мкг/мл гігроміцину В ж- 100 мкг/мл 5418) й інкубували протягом ночі. Наступного дня середовища видаляли, і в кожну ямку вносили клітини Уигїкаї ММЕАТ-Іис2г/РО-1 (Рготеда) у щільності 50000 клітин/ямку в 40 мкл буфера для аналізу (КРМІ я 295 ФБС) й антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 1- 15, або еталонні антитіла до РО-1 (МАТ до РО-1 А і МАТ до РО-1 В) (0-25 мкг/мл, вісім послідовних розведень у 2,5 рази у буфері для аналізу), інкубували протягом 6 годин при 37 "С з додатковою інкубацією протягом 5-10 хв при температурі навколишнього середовища. Потім в кожну ямку додавали по 80 мкл субстрату ВіосСіо (Рготеда), і планшет інкубували ще протягом 5-10 хвилин при температурі навколишнього середовища, інтенсивність люмінесценції вимірювали в зчитувачі для планшетів Місіог. Типові криві насичення представлені на Фігурі 13.
Визначали значення ЕкК?бо і ЕКео, і середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, о) чотирьох окремих експериментів наведені в таблиці 10.
Таблиця 10
Сигнал репортера
Антитіло до РО-1 ЕКб:о (мкг/дослідження) ЕКоео (мкг/дослідження)
МАТ до РО-1 А дат (АА 0,2549 0,0480 2,4474 1,2228
МАТ до РО-1 А да (Р 0,2049 0,0719 2,5535 1,2139
МАТ до РО-1 В Ід (АА 0,2119 0,1781 2,2036 2,0118
МАТ до РО-1 В да (Р 0,1142 0,0323 0,9418 0,2863
МАТ до лРО-1 2 Ідс21 (АА 0,3539 0,0983 3,8975 2,0054
МАТ до лРО-1 7(1.1) (дсе1 (АА 0,1080 0,0386 1,1992 0,5103
МАТ до лРО-1 7(1.2) (91 (АА 0,0944 0,0153 0,6452 0,2615
МАТ до лРО-1 7(1.2) Ідс4 (Р 0,0965 0,0169 0,6885 0,01858
Таблиця 10
І00457| Дослідження інтенсивності сигналів репортера демонструють, що гуманізовані варіанти МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 можуть блокувати вісь
РО-1/РО-І1 ї будуть запобігати придушенню відповідей Т-клітин. Зокрема, гуманізоване МАТ 7 до РО-1 (МАТ до лРО-1 7 (1.1) і МАТ до лРО-1 7 (1.2), що містить область Ес ІдС1 (АА) або ІдС4 (Р), має найнижчі значення ЕК5о/ЕКоео.
Приклад 4
Функціональна активність антитіл до РО-1 людини
Ї00458)| Ентеротоксин типу В З(арпуіюососси5 ацгеи5 (ЗЕВ) являє собою мікробний суперантиген, здатний активувати значну частку Т-клітин (5-3090) у ХЕВ-чутливих донорів. ЗЕВ зв'язується з ГКГС ІІ поза борозною зв'язування пептидів і, отже, залежить від ГКГС ІІ, але необмежений і опосередкований ТОК. ЗЕВ-стимуляція Т-клітин призводить до проліферації олігоклональних Т-клітин і вироблення цитокінів (хоча може спостерігатися мінливість відповідей донорів, і деякі донори не будуть відповідати на 5ЕВ). Протягом 48 годин ЗЕВ- стимуляції МКПК активують РО-1 ї ГАС-3 із наступним посиленням, яке спостерігається на 5-й день після висадження вторинної культури в 9б-ямковий планшет із 5ЕВ-стимуляцією.
Активація білків контрольної точки імунної відповіді РО-1 і ГАС-3 після ЗЕВ-стимуляції МКПК обмежує виділення цитокінів при повторній стимуляції. Була досліджена здатність антитіл до
РО-1 окремо й у комбінації з антитілами до ГАС-3 підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки.
Ї00459| Загалом, МКПК очищали із суцільної крові, отриманої від здорових донорів, що підписали форму інформованої згоди (Віоіодіса! Зресіапну Согрогайоп), з використанням способу центрифугування в градієнті щільності РісоїІ-Радине Різ (СЕ Неаїсаге) відповідно до інструкцій виготовлювача, і Т-клітини потім очищали, використовуючи набір для виділення Т- клітин людини Юупареад5зФ Опіоиспей"м (ІШМе Тесппоіодіе5) відповідно до інструкцій виробника.
Очищені МКПК культивували в середовищах КРМІ -«- 1095 інактивованої нагріванням ФБС «т 190 пеніциліну/стрептоміцину в об'ємних колбах Т-25 протягом 2-3 днів окремо або з 5ЕВ (Зідта-
Аїдгісп) у концентрації 0,1 нг/мл (первинна стимуляція). Наприкінці першого раунду ЗЕВ- стимуляції МКПК двічі промивали фосфатно-сольовим буфером (ФСБ) і відразу ж висіювали в
Зо 9б-ямкові планшети для культивування тканини в концентрації 1-5х105 клітин/ямку тільки в середовища, середовища з контрольним антитілом або антитілом до РО-1, середовища з 5ЕВ у концентрації 0,1 нг/мл (вторинна стимуляція) і без антитіл або середовища з 5ЕВ і контрольним
Іцо або антитілом до РО-1, з додаванням або без антитіла до І Ас-3, і культивували протягом ще 2-3 днів. Наприкінці другої стимуляції супернатанти збирали для вимірювання секреції цитокінів із використанням наборів для ІФА Юиозбеї для вимірювання ІФН-у, ФНО-а, ІЛ-10 й ІЛ-4 людини (КУО Зузіетв) відповідно до інструкцій виробника. 00460) Досліджували здатність МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до
РО-1, окремо або в комбінації з унікальним МАТ до ГГ АС-3 1, підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки. Дані дослідження також включали використання одного або більше з наступних еталонних антитіл до РО-1: МАТ до РО-1 А; МАТ до РО-1 В; і
МАТ до І АС-3 А, окремо або в комбінації. На Фігурі 14 представлені профілі секреції ІФН-у з
ЗЕВ-стимульованих (0,1 нг/мл) МКПК від типового донора, що має належну відповідь (0: 38941), оброблених: контролем без антитіла; антитілом для контролю ізотипу; МАТ 7 до РО-1 і/або МАТ до ГАС-3 7; МАТ 9 до РО-1 і/або МАТ до І АО-3 1; МАТ 15 до РО-1 і/або МАТ до І АС-3 1; МАТ 2 до РО-1 і/або МАТ до І АС-3 1; або еталонними антитілами до РО-1, МАТ до РО-1 В і/або МАТ до ГАО-3 А (антитіла використовували в концентрації 10 мкг/мл).
ІЇ00461| У додаткових дослідженнях оцінювали здатність гуманізованих варіантів МАТ 2 до
РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 (містять Ес ІдДС1 (АА) людини або Ідс4 (Р) людини), а також еталонних антитіл до РО-1, МАТ до РО-1 А ії МАТ до РО-1 В, підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки. Для проведення даних досліджень антитіла використовували в концентрації 0,625, 2,5 і 10 мкг/мл. На Фігурах 15А-158 представлені профілі секреції ІФН-у (Фігура 15А) ї ФНО-ос; (Фігура 158) із БЕВ-стимульованих (0,2 нг/мл) МКПК від типового донора, що має відповідь (0: 57709), які обробляли контролем без антитіла або одним із наступних антитіл: антитілом для контролю ізотипу; МАТ до лРО-1 2 да (АА); МАТ до лРО-1 7(1.2) їзс1 (АА); МАТ до лРО-1 7(1.2) 4234 (Р); МАТ до лРО-1 9(1.1) Ідс1 (АА); МАТ до лРО-1 9(1.1) Іда4 (Р); МАТ до лРО-1 15 ІдДС1 (АА); або еталонними антитілами до
РО-1, МАТ до РО-1 А да (АА), МАТ до РО-1 А да (Р), МАТ до РО-1 В Іда1 (АА), МАТ до РО-1
В 1924 (Р). Загальну кількість ІФН-у (пг/мг) у зразках, оброблених 5ЕВ «ж антитіло, визначали для зразків, оброблених антитілами до РО-1 у концентрації 0,625, 2,5 і 10 мкг/мл, і середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, б) для трьох різних донорів, що мають відповідь (за винятком зазначених випадків), наведені в таблиці 11. Співвідношення рівнів ІФН- у, секретованого в зразку, обробленому гуманізованими варіантами МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до
РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1 (містять Ес Ідс1 (АА) людини або Ідс4 (Р) людини), у порівнянні з рівнями, індукованими контрольними антитілами до РО-1, МАТ до РО-1 А і МАТ до
РО-1 В (тобто гуманізованим МАТ до РО-1/МАТ до РО-1 А і гуманізованим МАТ до РО-1/МАТ до
РО-1 В), представлено в таблиці 12 та таблиці 13, відповідно.
Таблиця 11
Антитіло до РО (мкг/мл) 0,625 мкг/мл
МАТ до РО-1 А ІдСа (АА 221,18 110,89 341,13 247,93 347,46 144,72
МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р 281,36 132,65 495,15 190,57 399,41 117,56
МАТ до РО-1 В Іда1 (АА 366,69 196,64 387,682 215,51 387,32 282,81
МАТ до РО-1 В Ідс4 (Р 348,40 185,96 433,382 163,23 551,68 125,08
МАТ до лРО-1 7(1.2) ІЧС1 (АА 302,05 185,71 610,70 209,77 414,63 272,65
МАТ до лРО-1 7(1.2) (404 (Р 384,571 | 323,79 411,40 398,59 370,06 108,12
МАТ до лРО-1 9(1.1) (421 (АА 340,81 207,76 442,598 303,70 655,29 567,91
МАТ до лРО-1 9(1.1) (404 (Р 309,82 130,30 468,62 350,15 424,35 288,95
МАТ до лРО-1 15 ІдДСІ1 (АА 360,00 274,28 373,32 160,25 541,83 444 22
МАТ до лРО-1 2 да (АА 275,88 135,23 372,73 53,53 496,70 235,37 137,14 76,61 100,65 48,67 | 138,10 | 120,81 120,05 | 73,90 | 120,05 73,90 | 10946| 85,18
Її Результати, отримані у двох донорів, що мали відповідь.
Таблиця 12
Співвідношення рівнів секреції ІФН-у (нове МАТ до РО-1/МАТ до РО-- А
МАТ до РО-1 А ІдС1 (АА 700 1 000 | ї00 | 000 | 100 | 000
МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р 7100 1 000 | ї00 | 000 | 100 | 000
МАТ до РО-1 В ІДС (АА
МАТ до РО-1 В ІдСА4 (Р
МАТ до лРО-1 71.2) ІДС (АА
МАТ до лРО-1 7(1.2) ІДО4 (Р 120 | 0355
МАТ до лРО-1 911.1) ІДС (АА
МАТ до лРО-1 9(1.1) Ід04 (Р
МАТ до лРО-1 15 ІДС (АА
МАТ до лРО-1 2 ІДС (АА
Її Результати, отримані у двох донорів, що мали відповідь.
Таблиця 13 вів КВ ти 1/МАТ до РО-1 В
МАТдоРО-ЇВідсі(АА) 10 | 000 | То | 000 | 10 | 000
МАТдоРО-ЇВідйЯ4(Р) 10 | 000 | То | 000 | 10 | 000
МАТдолРО-1 90.1) ідса(Р) 0,92 | 009 | 099 | 036 | 0,75 | 0959
Її Результати, отримані у двох донорів, що мали відповідь. (00462) Результати даних досліджень демонструють, що антитіла до РО-1, МАТ 2 до РО-1,
МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 і МАТ 15 до РО-1, різко підсилювали вироблення ІФН-у (Фігури 14 ї 15А ї таблиці 11-13) ї ФНО-а (Фігура 158) із ЗЕВ-стимульованих МКПК при повторній стимуляції. Крім цього, комбінація антитіл до РО-1 із антитілами до ГАС-3 призводила до додаткового посилення вивільнення цитокінів (Фігура 14) із «ЕВ-стимульованих МКПК при повторній стимуляції. Зокрема, комбінація МАТ 2 до РО-1, МАТ 7 до РО-1, МАТ 9 до РО-1 або
МАТ 15 до РО-1 з унікальним антитілом до ГАС-3, МАТ до ГАс-3 1, забезпечила найбільше посилення.
Приклад 5
Дослідження зв'язування біспецифічних молекул РО-1хІ! ДО-3 00463) Одержували ряд біспецифічних молекул РО-1х! АС-3, включаючи діатіла, що містять області Ес, які містять три, чотири та п'ять ланцюгів і біспецифічне антитіло. Одержували чотири діатіла, що містять чотири ланцюги і містять домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К-спіраллю, і позначали "ОАВТ А", "САВТ В", "АВТ С" ї "АВТ І".
Одержували чотири діатіла, що містять чотири ланцюги і містять домени СН1/СІ, і позначали "ВАВТ 0", "ОПАВТ Е", "АВТ У" ї "АВТ 1". Одержували два діатіла, що містять п'ять ланцюгів і містять домени, що сприяють утворенню гетеродимера, з Е/К-спіраллю, і домени СН1І/СІ, і позначали "САВТ Е" ії "АВТ а". Одержували одне антитіло, що має три ланцюги і містить Е/К- спіраль, і позначали "СПАВТ Н". Одержували одне біспецифічне антитіло, що містить чотири ланцюги, і позначали "В5АВ А". Структура й амінокислотні послідовності зазначених біспецифічних молекул РО-1х| АС-3 наведені вище й узагальнені в таблиці 14 нижче.
Таблиця 14
МАТ до лі Ас-3 1(1.4 МТЕ Хх3-1І; Х4:Е) і 268) Фігуру ЗВ
МАТ до лі Ас-3 1(1.3 МТЕ хХ3-тТ; Х4-Е) і 268| фігуру ЗВ 267 (Х1-0; соді
МАТ до лРО-1 7(1.2) кл. мес. 0) Б/К-спіралі; див.
МАТ до лРО-1 7(1.2 ІдаА . СІУСНІ; див. Фіг
МАТ до лРО-1 7(1.2 ІдаА . СІУСНІ; див. Фіг
Таблиця 14
ІДС - | СУСНІ і Е/К-
МАТ до лРО-1 7(1.2) 273, 214, 2751 п .
ІДС - | СУСНІ і Е/К-
МАТ до лРО-1 7(1.2) 277, 218, 2791 п .
МАТ до лРО-1 7(1.2) ІДС . Е/К-спіралі; див.
САНТА) Мдтдо ліАС-3 (1.4) | (ДА З 281,2821283 | фуру А
МАТ до лРО-1 7(1.2) ІдаА . Е/К-спіралі; див.
САНТІ | мАтдолідо-36(1.1) | (УТЕ 4 2901291. |Фіурузв
МАТ до лРО-1 7(1.2) ІдаА . С/УСНІ; див. Фігуру
БАНТУ | мдтдолідо-36(1.1) | (УТЕ 4 2921293 |З
МАТ до РО--А ІДС . С/УСНІ; див. Фігуру рАВТ 1 МАТ до ГАС-ЗА АД 4 284 і 285 зс
МАТ, що містить
В5АВА МАТ до лРО-1 7(1.2) ІДС А 286, 287, 2881 |область Ес із
МАТ до ліАС-3 1(1.4) (АА) 289 модифікованим зарядом
Її Молекули, що містять області Ес Іде4, також містять стабілізовану шарнірну область досі. 00464) Додаткові біспецифічні молекули РО-1х! АС-3, що містять альтернативні сайти зв'язування епітопів РО-1 і/або ГАС-3, можуть бути легко отримані шляхом включення різних доменів МН ї М. Аналогічним чином, молекули, що зв'язують антиген, відмінний від ГАс-3, можуть бути отримані шляхом включення МН і МІ, що мають бажану специфічність. 00465) Профілі насичення зв'язування конструкцій біспецифічних діатіл РО-ТхІ АО-3: ОАВТ
А, рРАВТ В, БАВТ ОО, АВТ Е, АВТ ГЕ, САВТ С, САВТ Н, ВАКТ І і БАКТ 1; антитіл до РО-1: МАТ до лРО-1 7(1.2) ІД4 (Р), МАТ до лРО-1 7(1.2) ІДС1 (АА), МАТ до РО-1 А Ідс1 (АА) і МАТ до РО- 1 А Ідса4 (Р); й антитіл до І АС-3: МАТ до лі АС-3 1(1.4) Ід04 (Р), МАТ до ГАС-3 А Ідс4 (Р), МАТ до лі Ас-3 1(1.4) ІДС1 (АА) і МАТ до ГАО-3 А ІдО1 (АА), досліджували по суті, як описано вище.
Конструкції біспецифічних антитіл РО-їх| ДО-3 досліджували для оцінки зв'язування з РО-1 і
І АС-3, тоді як антитіла до РО-1 й антитіла до ІГ АС-3 досліджували тільки для оцінки зв'язування з їх відповідними антигенами. Для проведення даних досліджень використовували клітини лінії
М5О, що експресують РО-1 або ГАс-3. Використовували діатіла й антитіла (170,0-0,013 мкМ або 85,0-0,0021 мкМ (чотириразові послідовні розведення). Значення ЕКб:о і ЕКоо визначали та представляли в таблицях 15-16. Представлене середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, б) для тих випадків, коли проводили два або більше окремих експериментів.
Таблиця 15
Насичення зв'язування РО-1
Молекула ЕКбво (мкМ) ЕКзго (мкМ)
АВТ А 1,9297 0,4324 9,6027 0,4801
РАВТ В 176405 | («0 | 1227005 рРАВТО 2.2267 0,4140 10,9313 2,6351
АВТ Е 3,2180 0,5742 23,840 3,2385
САВТ є 143205 | (Р | 71458005 рАВТ С 1,1488 0,6227 34220 2,4600
АВТ Н 453105 | (./и/ | 2266005 рАВТ І 1,3232 0,4890 7,8135 4,0821 рАВТ 1 2,1329 1,4850 13,8113 9,0256
МАТ до лРО-1 7(1.2) Ідс4 (Р 1,2083 0,8112 3,9340 1,8746
МАТ до РО-1 А да (Р 2,3470 12362 221110 15,0690
МАТ до лРО-1 7(1.2) (91 (АА 1,0879 0,3958 7,153 3,0794
МАТ до РО-1 А дат (АА 1,6733 0,5464 9,9543 6,6569
5Результати, отримані в одному експерименті.
Таблиця 16
Насичення зв'язування І АО-3
Молекула ЕКво (мкМ) ЕКзво (мкМ)
РАВТА 0,8402 0,2231 4,4448 2,4770
РАВТ В 107505 | | 985805
РАНТО 0,8985 0,5326 5,7967 4,7329
АВТ Е 0,9250 0,8075 5,6450 5,6809
АВТ г 5,0090 0,5770 19,3350 4,7447 рАВТ С 0,9396 0,3045 8,5507 4,7448
РАВТ Н 2,38405 | | 9,7810 42412 рАВТ І 0,5321 0,0547 4,198 32188 рАВТ 1 20,0233 2,1454 115,97 15,2425
МАТ до лі Ас-3 1(1.4) ІДс4 (Р 1,0057 0,1969 5,1360 4,7904
МАТ до ГАС-3 А Іда4 (Р 0,5968 0,1376 2,0833 0,3244
МАТ до лі Ас-3 1(1.4) ІДС (АА 0,6069 0,3430 3,6373 2,4162
МАТ до ГАС-3 А Іда1 (АА 0,4523 0,1660 2,0187 0,7035 5Результати, отримані в одному експерименті. 00466) Дослідження насичення зв'язування демонструють, що конструкції біспецифічних антитіл РО-ТхІ АО-3 зберігають зв'язування з РО-1 і мають профілі зв'язування, які подібні з профілями зв'язування антитіл до РО-1. Аналогічним чином, конструкції біспецифічних антитіл
РО-1хІ| АС-3 зберігають зв'язування з І АС-3 і, за винятком САКТ 1, мають профілі зв'язування, які подібні з профілями зв'язування вихідних антитіл до І Ас-3.
Приклад 6
Дослідження інгібіторної здатності біспецифічних молекул РО-1хІ! АС-3
Ї00467| Здатність біспецифічних молекул РО-1хІ АС-3: ВАВТ А, САНВТ В, САНВТ 0, БАНТ Е, рАКТ Е, САКТ б, БАКТ Н, БАКТ І, БАКТ 1 ї В5АВ А; й антитіл до РО-1: МАТ до лРО-1 7(1.2)
Ід4 (Р), МАТ до лРО-1 7(1.2) 91 (АА), МАТ до РО-1 А Ідс1 (АА) і МАТ до РО-1 А Ідаса (Р), блокувати зв'язування РО-Ї1 людини (5ПРО-Ї1) ії РО-Ї2 людини (ЗНРО-І2) із РО-1, що експресується на поверхні клітин лінії МБО, досліджували по суті, як описано вище. Діатіла й антитіла використовували в концентрації 33,75-0,002 мкМ або 107,5-0,0001 мкМ (чотириразові послідовні розведення). 00468) Значення ІКео і ІКоо визначали та представляли в таблиці 17. Середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, о) представляли для тих випадків, коли проводили 2 або більше окремих експериментів.
Таблиця 17
Блокування зв'язування Блокування зв'язування 5РО-І1/РО-1 5РО-І 2/РО-1
Молекула ІЇК5О (мкм) ІК9О (мкм) ІЇК5О (мкм) ІК9О (мкм)
САВТА 0,9645 | 0,1485 | 5,6312 1,5247 | 1,6273 | 0,4285 | 6,9335 | 3,9849 рАВТ В 1,1515 | 0,0007 | 4,68615 0,2199 | 21150 | 0,3154 | 7,9550 | 0,0933
РАНТО 1,5548 | 01692 | 7,68950 2,5135 | 3,1255 | 0,5869 | 92973 | 5,5426
АВТ Е 1,6533 | 0,3307 | 7,8470 1,1642 | 2,9460 | 0,7736 | 6,6135 | 0,0177
АВТ г 0,5697 | 0,1729 | 2,0360 0,1174 | 0,8389 | 0,0846 | 1,7995 | 0,2171 рАВТ Са 1,6013 | 0,93581 8,1953 1,5708 | 2,5540 | 0,7891 | 7,4810 | 0,2333
РАВТ Н 3,3950 | 01018 | 18,640 9,5742 | 62065 | 3,6847 | 29,395 | 3,8679
РАВ І 0,8363 | 01302 | 5,3115 0,3125 1,286 0,3125 | 6,2485 | 1,3951 рАВТ 1 1,7467 | 0,3097 | 5,4533 1,0214 | 2,8355 | 1,8250 | 7,2735 | 3,9831
В5АВА 2,1590 1 0,3097 | 11,075 0,8132 | 4,8775 | 0,5438 | 15,580 | 1,3294
Таблиця 17
Блокування зв'язування Блокування зв'язування 5РО-І1/РО-1 5РО-Ї 2/РО-1
Молекула ІЇК5О (мкм) ІК9О (мкм) ІЇК5О (мкм) ІК9О (мкм)
МАТ долРО ) овівб | 0мввв | 38050 | 1,2227 | 1,0425 | 02563 | 34880 | 0,5459 1 711.2) ІЯ04 (Р " ' ' ' ' ' " !
Мир 09209 Зоб | 43023 | 0,7069 | 13859 | 03882 | 51675 | 0,2943
МАТ до лРО- 41 714 2МаС1(АА 0,7320 | 02337 | 3,2048 1,1479 | 0,9769 | 0,2893 | 2,8437 | 1,4801
Мат тАА, 70765 02393 | 52775 | 09933 | 19510 | 08814 | 50880 | 1,3831
Ї00469| Дослідження інгібування зв'язування ліганду демонструють, що конструкції біспецифічних антитіл РО-1хІ АО-3 зберігають здатність інгібувати зв'язування 5РО-1 1 і 5РО-12 із РО-1 на поверхні клітини. 004701 Крім цього, досліджували здатність біспецифічних молекул РО-1хІ АО-3: САВТ А, рАКТ В, БАКТ 0, САКТ Е, САКТ Е, САКТ б, САКТ Н, БАКТ І, БАКТ 1 ії ВЗАВ А; й антитіл до
ГАС-3: МАТ до лі АО-3 1(1.4) ІдД04 (Р), МАТ до І АС-3 А Ідс4 (Р), МАТ до лі АО-3 1(1.4) ІДС (АА) і МАТ до ГАс-3 А ІдС1 (АА), блокувати зв'язування І АС-3 людини з нативним ГКГС класу ІЇ на поверхні клітин Дауді. Загалом, кожну біспецифічну молекулу РО-1х| АС-3 і контрольне антитіло до ГАС-3 змішували з біотинільованим розчинним гібридним білком ГАС-3-Ес людини (вп АСі-3) (у концентрації 0,5 мкг/мл) й окремо інкубували з ГКГС ІПІ-позитивними клітинами
Дауді (2,5х105 клітин). Кількість ГАС-3, пов'язаного з поверхнею клітин Дауді, визначали з використанням ФЕ-кон'югованого вторинного антитіла, зв'язаного зі стрептавідином, методом
ЕАСЗ. Діатіла й антитіла використовували в концентрації 27,5-0,026 мкМ (дворазові послідовні розведення) або 107,5-0,0001 мкМ (чотириразові послідовні розведення) або 35-0,002 мкМ (чотириразові послідовні розведення).
Ї00471| Значення ІКео і ІКоо визначали та представляли в таблиці 18. Середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, о) надавали у тих випадках, коли проводили 2 або більше окремих експериментів.
Таблиця 18
Блокування зв'язування 5ПІ АС-З/ГКГС класу ІЇ
Молекула ІЇК5О (мкм) ІК9О (мкМ)
АВТ А 1,3835 1,6465 8,396102 8,3962 рАВТ В 0,4081 0,1104 3,0645 0,3924 рРАВТО 1,1843 1,1398 8,0041 7,3317
АВТ Е 32706 2,9177 28,9683 24,1694
АВТ г 1,5347 1,2674 10,3920 11,2555 рАВТ С 2,0618 3,3552 11,4422 12,4964
АВТ Н 2,8967 4,9817 17,2533 21,1420 рАВТ І 0,4864 0,1549 2,339 1,1780 рАВТ 1 15,9610 14,0883 87,1486 109,533
ВЗАВ А 0,7101 0,0571 7,2470 1,0706
МАТ до лі Ас-3 1(1.4)3 ІдДа4 (Р 0,4815 0,2176 3,4837 1,7564
МАТ до ГАС-3 А Іда4 (Р 0,7011 0,1900 24232 0,3481
МАТ до лі Ас-3 1(1.4) ІДС (АА 0,3637 0,1409 9,4422 7,9319
МАТ до ГАС-3 А Іда1 (АА 0,5923 0,3407 2,1451 1,1139 00472) Дослідження інгібування зв'язування лігандів демонструють, що конструкції біспецифічних антитіл РО-1хІ АО-3 зберігають здатність інгібувати зв'язування гібридного білка
ЗП АСІ-3-Ес із ГКГС класу ІІ на поверхні клітини. За винятком БАКТ 1, біспецифічні молекули
РО-1хІ| АС-3 мають аналогічні профілі інгібування, як і вихідні антитіла до І АС-3.
Приклад 7
Блокування молекул контрольної точки РО-1/РО-11 під дією біспецифічних молекул
РО-1хГ ДО-3 004731) Здатність біспецифічних молекул РО-1хІ! АС-3: ВАВТ А, САНВТ В, САНВТ 0, БАНТ Е, рАКТ Е, САКТ б, БАКТ Н, БАКТ І, БАКТ 1 ї В5АВ А; й антитіл до РО-1: МАТ до лРО-1 7(1.2)
Ід4 (Р), МАТ до лРО-1 7(1.2) І9ДС1 (АА), МАТ до РО-1 А Ідс1 (АА) і МАТ до РО-1 А Ідаса (Р), виступати антагоністами осі РО-1/РО-І1 (тобто блокувати взаємодію РО-1/РО-11 і запобігати придушенню відповідей Т-клітин), оцінювали в кількісному дослідженні з використанням репортера люциферази «игКаніис2-МЕАТ/СНО-РО-І1 (з використанням клітин СНО/РБ-І1 і клітин Ушигїкаї ММРАТ-Іис2/РО-1), як описано вище. Діатіла й антитіла використовували в концентрації 100-0,0065 мкМ |(чотириразові послідовні розведення) або 100-0,0013 мкМ (п'ятикратні послідовні розведення). 00474) Значення ІКео і ІКоо визначали та представляли в таблиці 19. Середнє значення вибірки (ЗМ) і стандартне відхилення (50, о) представляли у тих випадках, коли проводили 2 або більше окремих експериментів.
Таблиця 19
Ї00475)| Дослідження інтенсивності сигналу репортера демонструють, що більшість конструкцій біспецифічних антитіл РО-1хІ ДО-3 зберігають здатність інгібувати зв'язування 5РО-
Ї1 їз РО-1 на поверхні клітини. Конструкції чотиривалентних біспецифічних діатіл РО-1х! АС-3, рРАВТ А, АНТ В, АНТ 0, ОАНВТ-Е, САКТ Е, БАКТ о і АКТ І, були найдужчими інгібіторами в даному кількісному дослідженні. Аналогічні результати були отримані для декількох із зазначених біспецифічних конструкцій, розглянутих у кількісному дослідженні зв'язування РО-І 2 з використанням репортера.
Приклад 8
Функціональна активність біспецифічних молекул РО-1х! АС-3 00476) Здатність біспецифічних молекул РО-1х! АС-3 підсилювати виділення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки досліджували в 5ЕВ-стимульованих МКПК при повторній стимуляції, як описано вище, за винятком відзначених випадків.
Зо Ї00477| У початкових дослідженнях оцінювали здатність біспецифічних молекул РО-1х! АС- 3: РАКТ А, БАКТ 0, САКТ Е, БАКТ РЕ, БАКТ б, БАКТ Н; й антитіл до РО-1 й антитіл до І Ас:
МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р) і МАТ до ГАС-3 А Ідс4 (Р), окремо або в комбінації, підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки. У даних кількісних дослідженнях біспецифічні молекули й антитіла РО-їх! АОС-3 використовували в загальній концентрації 3,125, 12,5 або 50 нМ, і МКПК стимулювали з використанням 0,2 нг/мл ЗЕВ (у попередніх дослідженнях використовували 0,1 нг/мл). Для проведення даних досліджень, при використанні комбінації антитіл, концентрація кожного антитіла становила половину від загальної концентрації (тобто, 1,563, 6,25, або 25 нМ). На Фігурах 16А і 168 представлені профілі секреції ІФН-у із ЗЕВ-стимульованих МКПК двох типових донорів, що мали відповідь, 0:
35644 і Ю: 59697, відповідно. 00478) Як ми вже відзначали, не всі донори відповідали на ЗЕВ у концентрації 0,1 або 0,2 нг/мл. Для посилення 5ЕВ-стимуляції МКІПК від більшої кількості донорів у додаткових дослідженнях ЗЕВ використовували у високій концентрації 85 нг/мл або середній концентрації 0,5 нг/мл. При зазначених концентраціях стимуляція ЗЕВ більше стійка у більшого числа донорів, незважаючи на те, що все ще може спостерігатися варіабельність відповідей донорів. 00479) В одному із зазначених досліджень оцінювали здатність біспецифічних молекул РО- 1хГАО-3: ОАКТ А, ВАКТ В; антитіла до РО-1: МАТ до лРО-1 7 (1.2) 904 (Р); антитіла до ГАс-3:
МАТ до І АС-3 1 (1.4) Ід04 (Р); і комбінації: МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р) і МАТ до ГАС-3 А Ід (Р), підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки. У зазначених кількісних дослідженнях біспецифічні молекули й антитіла РО-їх! АС-3 використовували в концентрації 0,019, 0,078, 0,3125, 1,25, 5 або 20 нМ, і МКПК стимулювали з використанням 85 нг/мл ЗЕВ. Для проведення даного кількісного дослідження, при використанні комбінації антитіл, кожне антитіло забезпечували в зазначеній концентрації, і, відповідно, загальна концентрація антитіл у два рази вище концентрації, яку використовували для кожного антитіла (тобто, 0,038, 0,156, 0,625, 2,5, 10 або 40 нм). На фігурах 17А їі 17В представлені профілі секреції ІФН-у із
ЗЕВ-стимульованих МКПК від двох типових донорів О: 55515 і Ю: 54024, відповідно.
Ї00480| В іншому дослідженні оцінювали здатність біспецифічних молекул РО-1хІ| АО-3: рАКТ А, САКТ В, САКТ С; антитіла до РО-1: МАТ до лРО-1 7(1.2) Ід4 (Р); антитіла до І АО-3:
МАТ до ГАС-3 1(1.4) Ід04 (Р); і комбінації: МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р) і МАТ до ГАС-3 А да (Р), підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки. У даних кількісних дослідженнях біспецифічні молекули й антитіла РО-їх! АС-3 використовували в загальній концентрації 0,048, 0,195, 0,78, 3,125, 12,5 або 50 нМ, і МКПК стимулювали з використанням 0,5 нг/мл ЗЕВ. Для проведення даних досліджень, у тих випадках, коли використовували комбінацію антитіл, концентрація кожного антитіла становила половину загальної концентрації (тобто, 0,024, 0,098, 0,39, 1,563, 6,25 або 25 нМ). На Фігурах 18А і 188 представлені профілі секреції ІФН-у із «ХЕВ-стимульованих МКПК від двох типових донорів О: 20990 і Ю: 54947, відповідно.
Ї00481|У додатковому дослідженні оцінювали вивільнення цитокіну ІЛ-2. Зокрема, досліджували здатність біспецифічних молекул РО-1хІ! АС-3: ОАКТ 0, БАКТ Н; антитіл до РО-1:
МАТ до РО-1 А Ід04 (Р), МАТ до лРО-1 7(1.2) Ід04 (Р); антитіл до ГАС-3: МАТ до І АО-3 А Іда4 (Р) і МАТ до І АО-3 1(1.4) Ід04 (Р); і комбінації: МАТ до РО-1 А Ідса4 (Р) і МАТ до І АО-3 А Ідс4 (Р), і МАТ до лРО-1 7(1.2) ІДС (Р) і МАТ до І АО-3 1(1.4) Ід04 (Р), підсилювати вивільнення ІЛ-2 за допомогою інгібування контрольної точки. У даних кількісних дослідженнях біспецифічні молекули РО-1х| АС-3 й антитіла використовували в загальній концентрації 3,125, 12,5 або 50
НМ, і МКПК стимулювали високою концентрацією 5ЕВ 85 нг/мл. Для проведення даних досліджень, в яких використовували комбінацію антитіл, концентрація кожного антитіла становила половину загальної концентрації (тобто, 1,563, 6,25, або 25 нМ). На Фігурі 19 представлений профіль секреції ІЛ-2 із ЗЕВ-стимульованих МКПК від типового донора (0: 54024). 00482) У додаткових дослідженнях оцінювали здатність біспецифічних молекул РО-1х!І АС- 3: РАКТ В і САКТ І; антитіл до РО-1: МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р), ії МАТ до лРО-1 7(1.2) ЗИ (Р); антитіл до ГАС-3: МАТ до ГАО-3 А ІдО4 (Р), МАТ до лі АО-3 1(1.4) Ід04 (Р) і МАТ до лі АС-
З 6(1.1) 1904 (Р); і комбінацій: МАТ до РО-1 А Ідс4 (Р) і МАТ до ГАС-3 А Ідс4 (Р), МАТ до лРО- 1 741.2) 9454 (Р) і МАТ до лі АО-3 1(1.4) Ід04 (Р), а також МАТ до лРО-1 7(1.2) ІдДС4 (Р) і МАТ до лі Ас-36(1.1) 19054 (Р), підсилювати вивільнення цитокінів за допомогою інгібування контрольної точки. У даних дослідженнях біспецифічні молекули й антитіла РО-1х! АО-3 використовували в концентрації 0,0061, 0,024, 0,09, 0,39, 1,56, 6,25 або 25 нМ, і МКПК стимулювали з використанням 0,5 нг/мл 5ЕВ. Для проведення даних досліджень, в яких використовували комбінацію антитіл, кожне антитіло забезпечували в зазначеній концентрації, і, відповідно, загальна концентрація антитіл у два рази вище концентрації, використаної для кожного антитіла (тобто, 0,0122, 0,048, 0,18, 0,78, 3,12, 12,5 або 50 нМ). На Фігурі 20 представлені профілі секреції ІФН-у із БЕВ-стимульованих МКПК, отриманих від типового донора 0: 56041. 004831) Здатність біспецифічної молекули РО-1хІ! АС-3 ВАКТ І; комбінації антитіла до РО-1,
МАТ до РО-1 А Ідбоа4 й антитіла до ГАС-3, МАТ до І АО-3 А Ідс4 (Р); й антитіла для негативного контролю, підсилювати відповіді антигенспецифічних Т-клітин досліджували з використанням кількісного дослідження вторинної імунної відповіді на правцевий анатоксин. Зокрема, відповідь антигенспецифічної посиленої секреції цитокінів вимірювали з використанням правцевого 60 анатоксину як антигена для індукції вторинної імунної відповіді в системі для кількісного дослідження на основі спільної культури. Загалом, СО4 Т-клітини пам'яті (0,5-1,0х105 клітин/'ямку) виділяли з використанням наборів для виділення на основі негативної селекції (Мінепуї Віоїес, Сан-Дієго, Каліфорнія, й Іпмігодеп, Карлобад, Каліфорнія, США) з периферичної крові людини і культивували протягом 5-7 днів із опроміненими моноцитами (0,01-0,05х105 клітин/'ямку, 3500 рад) від того самого донора у присутності або під час відсутності 5 мкг/мл антигена правцевого анатоксину для індукції вторинної імунної відповіді (ТЯ) та розведень (починаючи з 25 нМ) БАКТ І, МАТ до РО-1 А Іда4 я МАТ до ГГ АС-3 А Ід (Р), або антитіла для контролю ізотипу. У паралельних планшетах проліферацію вимірювали шляхом вбудовування тритованого тимідину й ІЛ-2 і ІФН-у вимірювали методом ІФА (КО 5узіетв5, Міннеаполіс,
Мінесота) на 5-7 день. На фігурах 21А-О представлені профілі секреції ІФН-у (Фігура 21А, 21С) й
ІЛ-2 (Фігура 218, 210) на 7 день для двох типових донорів (050702 і 054267). 00484) Результати проведених досліджень демонструють, що біспецифічні молекули РО- 1хГ АС-3 значно підсилювали вироблення ІФН-у (Фігури 16А-168, 17А-17В, 18А-188, 20) й ІЛ-2 (Фігура 19) із ЗЕВ-стимульованих МКПК при повторній стимуляції. На додаток біспецифічні молекули РО-1хІ| АС-3 значно підсилювали вироблення ІФН-у (Фігури 21А і 21С) із СО4 Т-клітин пам'яті, стимульованих правцевим анатоксином. Зокрема, чотиривалентні біспецифічні молекули РО-1х| АС-3 забезпечили більше значне посилення, ніж комбінація антитіл до РО-1 й антитіл до І АС-3.
Приклад 9
Фармакокінетика біспецифічних молекул РО-1хІ! АО-3 00485) Фармакокінетику типової біспецифічної молекули РО-1хІ АС-3, БАКТ І, і типового антитіла до РО-1, МАТ до РО-1 А, досліджували в яванських макак. Загалом, двом яванським макакам (одному самцю й одній самці) вводили шляхом інфузії однократну дозу САКТ І (5 мг/кг) або МАТ до РО-1 А (10 мг/кг), і концентрацію молекул у сироватці крові контролювали з плином часу, використовуючи ІФА у форматі "сендвіч". Загалом, 96-ямкові планшети для кількісного дослідження Махі-5огр"М покривали розчинним РО-1 людини (5ПРО-1), блокували бичачим сироватковим альбуміном, промивали й інкубували з каліброваними стандартами, стандартами для контролю якості та розведеними зразками сироватки. Кількість захопленого САКТ І і МАТ до РО-1 А оцінювали шляхом послідовного додавання вторинного козячого біотинільованого
Зо антитіла до до Ес людини і кон'югату стрептавідин-пероксидаза хрону (СА-ПХ). Активність ПХ визначали з використанням субстрату ТМВ. Усі зразки аналізували за допомогою зчитувача для мікропланшетів (ЗресігаМах М2е, Моїесшаг Оемісе, Саннівейл, Каліфорнія, США), і сигнали ОО, що випускаються стандартами для калібрування, використовували у чотирипараметричній логістичній моделі з використанням програмного забезпечення бойМах Рго (версія 5.4,
МоїІесшіаг ЮОемісе5). Концентрації МАТ до РО-1 А або АКТ І визначали на підставі інтерполяції даних сигналу ОЮ за допомогою рівняння, що описує стандартну криву. За оцінками, нижня межа кількісного визначення (ІІ 00) для даного дослідження склала 9,775 нг/мл.
І00486|На Фігурі 22 представлена залежність концентрації в сироватці від часу, лиінії представляють середнє значення для самців (заповнені символи) і самок (відкриті символи) мавп, яким шляхом інфузії вводили АКТ І (суцільна лінія, трикутники) або МАТ до РО-- А (пунктирна лінія, кола). Отримані дані свідчать про те, що фармакокінетика біспецифічної молекули РО-Тх| дДО-3 порівнянна з фармакокінетикою антитіла до РО-1 в яванських макак.
Приклад 10
Токсикологічне дослідження антитіл до РО-1 і біспецифічних молекул РО-1хГ АО-3 00487) Профіль безпеки типового антитіла до РОТ, МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІдД04 (Р), і типової біспецифічної молекули РОїх! АС-3, ЮАКТ І, оцінювали в дослідженні з добору дози в яванських макак, проведеному не в рамках НЛП (Належна лабораторна практика). 00488) У даному дослідженні оцінювали потенційну токсичність та токсикокінетику антитіла до РО-1 (МАТ до лРО-17 (1.2) Ід054 (Р)), при введенні з використанням декількох внутрішньовенних інфузій. Крім цього, оцінювали потенційну токсичність та фармакокінетику молекули ОАКТ РО-ІїхГ АО-3 (ОАНТ І) при введенні шляхом однократної внутрішньовенної інфузії. Дизайн дослідження представлений в таблиці 20.
Таблиця 20 о групи й - матеріал (мг/кг) дозування | дози (мг/мл) 1 ФКонтроль /.:.:. |: | // | 0 2 | 7.8,615 5 | 0 | 712 | т
МАТ до / лРО-1 7
Таблиця 20
Ме групи| Досліджуваний |Рівеньдози Дні | Об'єм | Доза | Кількість тварин
МАТ до / лРО-1 7
МАТ до / лРО-1 7
МАТ до / лРО-1 7 аВ групах 1, 2А ії ЗА дози вводили, починаючи з 1 дня, і розтин проводили через 72 години після введення останньої (третьої) дози на 18 день.
ЬВ групах 2В і ЗВ дози вводили, починаючи з 1 дня, і розтин проводили через 7 днів після введення останньої (третьої) дози на 22 день. «В групі 4 дозу вводили на 1 день та потім спостерігали за тваринами протягом 28 днів після введення однократної дози (до 29 дня); тварин потім повертали в колонію.
І00489| У даному дослідженні оцінювали наступні параметри і кінцеві точки: клінічні ознаки, масу тіла, споживання їжі, температуру тіла, параметри клінічної патології (показники гематології, згортання крові та клінічної хімії), бісаналітичні та токсикокінетичні параметри, рівні антитіл до лікарського препарату, дані проточної цитометрії, рівні цитокінів, результати макроскопічного розтину, масу органів і результати гістопатологічних досліджень.
Ї00490| Всі тварини вижили до запланованої евтаназії на 18 або 22 день або вибули з дослідження на 29 день. Для МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід054 (Р) були відсутні пов'язані з досліджуваним виробом зміни клінічних ознак, споживання їжі, маси тіла, температури тіла, показників гематології, згортання крові або клінічної хімії або результатів макроскопічного розтину. На 18 і 22 дні у тварин, що одержували МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід04 (Р) у дозі 1 або 100 мг/кг, спостерігали збільшення маси селезінки та залежну від дози лімфогістіоцитарну інфільтрацію червоної пульпи легкого та помірного ступеня тяжкості. У порівнянні з навколишніми лімфоцитами лімфогістіоцитарні клітини мали світлу цитоплазму та нерегулярні ядра. Рідкі мітотичні фігури були очевидні. На мікроскопічному рівні інфільтрат корелював зі збільшенням маси селезінки.
І00491| Профілі залежності концентрації в сироватці крові від часу для тварин, що одержували МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід04 (Р), проявляють профіль, очікуваний для антитіла у цього виду, за деякими виключеннями. Нахил кривих після введення третьої дози знижувався більше різко, ніж після першої дози для двох тварин у групі дози 1 мг/кг й у двох тварин у групі дози 100 мг/кг, що вказує на можливу появу антитіл до лікарського препарату (АВБА) на більше пізніх циклах. Аналіз показав, що у 2/4 тварин АБА розбудовувалися в групі 1 мг/кг, і в 1/4 тварин АВА розбудовувалися в групі 100 мг/кг. 00492) На закінчення необхідно відзначити, що введення МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід (Р) шляхом внутрішньовенної інфузії один раз на тиждень протягом З тижнів (1, 8 їі 15 дні) добре переносилося в яванських омакак при рівнях дози 1 і 100 мг/кг. Дозозалежний лімфогістіоцитарний клітинний інфільтрат червоної пульпи селезінки легкого та помірного ступеня тяжкості був присутній при введенні доз 1 і 100 мг/кг МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІЧа4 (Р).
Ї00493|Для ОАКТ | були відсутні зміни клінічних ознак, споживання їжі, маси тіла,
Зо температури тіла, показників гематології або параметрів згортання крові. Зміни, пов'язані з
БАКТ І, параметрів клінічної хімії включали не несприятливе, короткочасне підвищення активності аспартатамінотрансферази (АСТ) і лактатдегідрогенази (ЛДГ) на 2 день. Середня зміна активності АСТ була у 3,2 рази вище, ніж активність у контрольних тварин, що одержували носій, й у 7,8 разів вище рівнів до початку дослідження, при цьому рівні були вище контрольного еталонного діапазону. Середня зміна активності ЛДГ була у 2,5 рази вище, ніж активність у контрольних тварин, що одержували носій, й у 6,9 разів вище рівнів до початку дослідження. Обидва параметра повернулися до вихідних рівнів на 8 день. На закінчення необхідно відзначити, що однократне введення ВБАКТ-ЇІ шляхом внутрішньовенної інфузії добре переносилося в яванських макак при рівні дози 5 мг/кг.
Приклад 11
Дослідження фармакокінетики антитіл до РО-1 при введенні однократної дози 00494) Дослідження фармакокінетики (ФК) при введенні однократної дози з вибраними токсикологічними кінцевими точками проводили в яванських макак. У даному дослідженні МАТ до лРО-1 7 (1.2) (904 (Р) порівнювали з двома іншими антитілами до РО1 Ідс4 (Р): МАТ до РО- 1 А Ідея (Р) ії МАТ до РО-1 В Ідс4 (Р). Кожне антитіло вводили двом мавпам (1 самцю, 1 самці) у дозі 10 мг/кг шляхом внутрішньовенної інфузії протягом 1 год, і тварини перебували під спостереженням протягом 65 днів.
Ї0О0495) Були відсутні пов'язані з досліджуваним виробом зміни клінічних ознак, зміни маси тіла, споживання їжі, вивільнення цитокінів або імунофенотипування, пов'язані з введенням
МАТ до лРО-1 7 (1.2) І(Д04 (Р) або МАТ до РО-1 А Ідо4 (Р). Отримані дані були подібні з даними для МАТ до РО-1 В Ід04 (Р), за винятком того, що при введенні МАТ до РО-1 В Ідас4 (Р) спостерігали підвищення рівнів ІЛ-5. 00496) Зв'язування антитіла до РО-1 із РО-1 на поверхні Т-клітин визначали методом проточної цитометрії з використанням способу конкурентного зв'язування, в якому оцінювали середню інтенсивність флуоресценції (МЕЇ) флуоресцентноміченого МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІДС4 (Р), що зв'язується з Т-клітинами під час відсутності (контроль, ФСБ) або у присутності надлишку конкурента (неміченого МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід04 (Р)), для зразків крові, зібраних у всіх часових точках в яванських макак, що одержували МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІдДа4 (Р), МАТ до
РО-1 А Ідс4 (Р) або МАТ до РО-1 В Ідс4 (Р). Як показано на фігурах 23А-23С, МАТ до лРО-1 7 (1.2) ї9054 (Р) і МАТ до РО-1 В Ідш4 (Р) продемонстрували тривале зв'язування з РО-1 на поверхні СО4: і СО8: Т-клітин (зв'язування з РО-1 підтримувалося на рівні 28095 протягом 28 днів або більше) (Фігури 23А ії 23С, відповідно) у порівнянні з МАТ до РО-1 А Ідса (Р) (зв'язування з РО-1 підтримувалося на рівні 28095 протягом 21 дня або менше) (Фігура 23В).
Для кожного з антитіл до РО-1 дані із зв'язування з РО-1 на Т-клітинах корелюють з їх концентрацією в сироватці крові.
Приклад 12
Дослідження токсичності при повторному введенні
Ї00497| Для оцінки безпеки, токсикокінетичного та фармакодинамічного профілю терапевтичних молекул згідно з даним винаходом, зразкову молекулу (МАТ до лРО-1 7 (1.2)
ІЧ04 (Р)) вводили яванським макакам і виконували дослідження з добору дози не в рамках НЛП.
У даному дослідженні чотири групи тварин (по 10 на групу, 5 самців і 5 самок) одержували МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід4 (Р) або контрольний препарат один раз на тиждень шляхом інфузії при З
Зо рівнях дози. Тварин оцінювали для виявлення будь-якої потенційної токсичності протягом 4- тижневого періоду дозування лікарського препарату та потім протягом додаткового 10- тижневого періоду без введення лікарського препарату. Експериментальний дизайн даного дослідження представлений в таблиці 21. Тваринам вводили дози один раз на тиждень шляхом внутрішньовенної інфузії протягом 1 год за допомогою відкаліброваного інфузійного насоса на 1, 8, 15 і 22 день дослідження. Одного самця й одну самку з кожної групи умертвляли на 25 день, інших тварин умертвляли на 95 день дослідження. Оцінювали вплив уведення МАТ до лЛРО-1 7 (1.2) Ід04 (Р) на субпопуляції лейкоцитів у кровотоці, включаючи заняття рецепторів
РО-1 на Т-лімфоцитах. Також визначали профілі антитіл до лікарського препарату (АБВА).
Таблиця 21 . . Рівень Об'єм : матеріала (мг/мл) дослідження відновлення ко у (млко 1 | Контоль/-/-:-/ 0 | 588 | 0 | з | з | 2 | 2
МАТ до лРО-1 7
МАТ до лРО-1 7 9 Мовецв 00 |овевве ззгг
МАТ до лРО-1 7 а Контроль та МАТ до лРО-1 7 (1.2) (9054 (Р) вводили щотижня шляхом внутрішньовенної інфузії. ь Шість мавп (З самця/З самки) на групу розтинали на 25 день, і мавп, що залишилися, у групі відновлення (2 самця/2 самки) розтинали на 95 день. 00498) Яванські макаки добре переносили щотижневі внутрішньовенні (в/в) інфузії МАТ до
ЛРО-1 7 (1.2) Ід54 (Р) у дозах 0, 10, 40 ї 150 мг/кг, і всі тварини вижили до запланованої евтаназії на 25 або 95 день. Не було виявлено пов'язаних із МАТ до лРО-1 7 (1.2) 04 (Р) змін клінічних ознак, споживання їжі, маси тіла, показників фізичних, офтальмологічних і неврологічних обстежень, електрокардіологічних параметрів, температури тіла, частоти подиху, артеріального тиску та пульсу, параметрів згортання крові, клінічної хімії й аналізу сечі, маси органів або результатів макроскопічного розтину.
Ї00499| Зміни гематологічних параметрів, пов'язані з МАТ до лРО-17 (1.2) Ідса4 (Р), включали короткочасне зниження титрів лімфоцитів. Титри лімфоцитів помірно зменшувалися у порівнянні з вихідними рівнями (1 день до введення дози) на 2 день (23 години після інфузії) У самців і самок при дозі 210 мг/кг, статистично вірогідно для самців при дозі 10 і 40 мг/кг і в самок при дозі 40 ї 150 мг/кг у порівнянні з контролями. Титри лімфоцитів поверталися практично до вихідних рівнів на 8 день до початку дозування, але помірно знижувалися у деяких самців і самок при всіх рівнях дози (в 0,47-0,68 рази щодо вихідних рівнів) на 9 день (23 години після інфузії). Титри лімфоцитів збільшувалися до введення дози на 15 і 22 день, але зменшувалися у деяких самців і самок (в 0,36-0,54 рази щодо вихідних рівнів) на 16 і 23 день (23 години після інфузії).
Ї00500| Дозозалежне, короткочасне зниження популяцій циркулюючих імунних клітин, включаючи загальну популяцію лейкоцитів, Т-клітини, В-клітини і МК-клітини, спостерігали через 23 години після закінчення інфузії у тварин, що одержували МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід4 (Р), у порівнянні з контрольною групою. Найбільшу величину змін спостерігали після введення першої дози у 1 день; зміни меншої величини короткочасно спостерігали після введення наступних доз на 8, 15 або 22 дні. Популяції імунних клітин зазвичай відновлювалися до вихідних значень, або близьких до вихідних, до 72 години після закінчення інфузії та протягом фази відновлення. У тварин, що одержували МАТ до лРО-1 7 (1.2) 1904 (Р), не спостерігали змін, що стосуються циркулюючих моноцитів, у порівнянні з контрольною групою.
Ї00501)| Максимальне зв'язування МАТ до лРО-1 7 (1.2) 454 (Р) із РО-1-/С04- і РО-1:/С08- клітинами спостерігали протягом фази лікування МАТ до лРО-1 7 (1.2) 954 (Р) дослідження при всіх перевірених дозах (10, 40 або 150 мг/кг). Під час періоду відновлення у тварин, у яких не вироблялися антитіла до лікарського препарату (АБА), концентрації МАТ до лРО-1 7 (1.2) І4с4 (Р) у сироватці крові залишалися вище 29 мкг/мл, і максимальне зв'язування РО-1:/С04: і РО-
Зо 1/008: Т-клітинами підтримувалося протягом усього 10-тижневого періоду відновлення. У зазначених тварин були відсутні докази модуляції РО-1 на Т-клітинах. Під час періоду відновлення у тварин, у яких розвивалися АбА-відповіді, частота МО0БО12-зв'язаних РО-1- Т- клітин знижувалася до вихідного рівня. Зниження від максимального зв'язування МАТ до лРО- 17 (1.23 Ід4 (Р) з РО-1:/б04з і РО-1:/С6087 клітинами АБА-позитивних тварин зазвичай мало місце, коли удавана концентрація МАТ до лРО-1 7 (1.2) І(дДс4 (Р) у сироватці крові зменшувалася нижче приблизно 25 мкг/мл. Однак невідомо, чи відносилося дане удаване граничне співвідношення до АбА-негативних тварин, оскільки присутність АБА в АБА-позитивних тварин може сприяти блокуванню зв'язування антитіл до РО-1 із РО-1. 00502 Відмінності фармакокінетичних відповідей МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІЧД04 (Р), пов'язані зі статтю тварин, були мінімальними та лінійними в межах дослідженого діапазону доз (10-150 мг/кг). Для МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід4 (Р) у дозі 10, 40 ї 150 мг/кг комбіноване середнє значення
Стах для обох статей склало 240 мкг/мл (0,240 мг/мл), 1078 мкг/мл (1,08 мг/мл) і 3938 мкг/мл (3,94 мг/мл), і значення АОС склали 47310 годе"мкг/мл (47,3 годе"мкг/мл), 205723 годе"мкг/мл (206 годемкг/мл) і 745681 годемкг/мл (746 годемкг/мл), відповідно. Середній кліренс згідно з результатами некомпартментного аналізу (МСА) першого циклу МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІдДа4 (Р) до появи АБА склав 0,21 мл/год/кг, що значно нижче, ніж швидкість клубочкової фільтрації яванських макак, як й очікувалося для високомолекулярного білка. Середній стаціонарний об'єм розподілу згідно з результатами МСА першого циклу МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід4 (Р) склав 68 мл/кг, що приблизно у 1,5 рази більше об'єму сироватки, але менше, ніж позаклітинний водний простір. Це свідчить про те, що МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід04 (Р) витікає з судин у позаклітинний простір тканини, але не весь позаклітинний простір був доступний для зазначеної молекули.
Середнє значення середнього часу втримання (МКТ) згідно з результатами МСА першого циклу
МАТ до лРО-1 7 (1.2) ЇДС4 (Р) склало 335 годин або приблизно 14 днів. Поява АСА зменшувала концентрації МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід4 (Р) у циклах 2-4. Докази зниження концентрацій МАТ до лЛРО-1 7 (1.2) Ідс4 (Р) у сироватці крові після введення повторних доз МАТ до лРО-1 7 (1.2) І4с34 (Р) спостерігали в 7/10, 4/10 і 3/10 тварин у групах доз 10, 40 і 150 мг/кг, відповідно. Присутність
АБА до МАТ до лРО-1 7 (1.2) ІД4 (Р) була підтверджена в 4, 2 і 1 із зазначених тварин у групах доз 10, 40 і 150 мг/кг, відповідно; всі тварини, в яких АБА не були підтверджені, були в групі термінального розтину, в якій концентрації МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ід4 (Р) в сироватці крові, 60 імовірно, перешкоджали детектуванню АМБА. Відповідно, у наступних дослідженнях токсикокінетики, якщо залишкова концентрація була нижче, ніж попередня залишкова концентрація, дані, починаючи з цього моменту часу, піддавали перегляду. На підставі результатів двокомпартментного моделювання даних за всіма циклами для З груп дозування, за винятком часових точок, які підпали під вплив АБА, середні значення для первинних параметрів ТК для двокомпартментної моделі склали 0,22 мл/год/кг для кліренсу, 38,5 мл/кг для первинного об'єму розподілу (Мі) і 33,8 мл/кг для Ме, що дало середній рівноважний об'єм розподілу (Ме) 72,3 мл/кг і МКТ 329 годин. Отримані значення узгоджуються з параметрами, отриманими з МСА першої дози. Результати моделювання свідчать про те, що, під час відсутності АБА, при щотижневому дозуванні стійкий стан в яванських макак буде досягнутий після 5 дози, й індекс накопичення буде рівний 2,4. 00503) На 25 день мінімальні мультифокальні периваскулярні інфільтрати мононуклеарних клітин, пов'язані з МАТ до лРО-1 7 (1.2) Ідс4 (Р), були присутні у поверхневих шарах дерми в сайті в/в ін'єкції в самців при дозі 240 мг/кг і в самок при дозі 210 мг/кг і були очікуваною реакцією на повторну ін'єкцію чужорідного білка (моноклонального антитіла). На 95 день не було відзначено яких-небудь мікроскопічних змін, пов'язаних із МАТ до лРО-1 7 (1.2) да (Р), це вказує на відновлення зміни, пов'язаної з досліджуваним виробом, спостережуваним на 25 день.
Ї00504) На закінчення необхідно відзначити, що результати даного дослідження вказують на те, що введення МАТ до лРО-1 7 (1.2) (954 (Р) шляхом внутрішньовенної інфузії один раз на тиждень (1, 8, 15 і 22 дні) клінічно добре переносилося в яванських макак при рівнях дози 10, 40 або 150 мг/кг. Спостережувані ефекти були обмежені короткочасним зниженням кількості циркулюючих лімфоцитів і мінімальними змінами в місці ін'єкції, пов'язаними з ін'єкцією чужорідного білка. На підставі цих результатів рівень без спостережуваних побічних ефектів (МОАЕЇ) вважали рівним 150 мг/кг (комбіноване середнє Стах для обох статей 3,94 мг/мл й АОС 746 годе"мг/мл).
Ї0О5О5)| Всі публікації та патенти, згадані в даному описі, включені у дану заявку за допомогою посилання тією самою мірою, як якби кожна окрема публікація або патентна заявка була конкретно й індивідуально зазначена для повного включення за допомогою посилання.
Незважаючи на те, що даний винахід був описаний стосовно до конкретних варіантів реалізації, слід розуміти, що він може бути додатково модифікований, і передбачено, що дана заявка включає будь-які варіанти, способи застосування або адаптовані варіанти згідно з даним винаходом, слідуючи загалом принципам даного винаходу та включаючи такі відхилення від даного винаходу, які входять у відому або звичайну практику в області, до якої відноситься даний винахід, й які можуть бути застосовані до основних ознак, викладених вище.
Перелік послідовностей «1105 Масгкосепісв, Іпс. зпапй, Каірапа зшщшіїЄр, Роцдіав
Та Моєсе-Мобе, Во
ЧопПпвоп, Іевіїє
Мооге, Рачі
Вопуіпі, Е7хіо
Коепід, БбБсогеЕ «1205 РО-1-сполучні молекули та способи їх застосування «130» 1301.0122РСТ «1505 785 62/198,867 «1515 2015-07-30 «1505 75 62/239,559 «1515 2015-10-09 «1505 785 62/255,140 «1515 2015-11-13 бо «1505 7у8562/322,974 «1515 2016-04-15
«1605 298 «1705 РабепсІпПп версія 3.5 «2105 1 «2115 217 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(217) «223» Домен СН2-СНЗ Ідбі людини «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 1
Аза Ркго бій Гец Гец біу б1і1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 5 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Меє І1їе бек Агуд ТПг Рго бі Уа1і ТПкг Сув Уаї 20 25 30
Уаї Уаї Авр Уа1 Бек Нів біц Авр Рго сіц Уаї пуб Ропе АБвБп Тгр Туг
Зо 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і сій Уа1ї Нібв Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд сбіц сі 50 55 бо сіп Тук Авп бек ТПг Туг Агуд Уа! Уаї Бек Уаії Гей ТіПг Уаї Гей Нів 65 70 75 80 біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї Бек Авп Гув 85 90 95
Аза Гей Рго Аза Рго І1е бій пуб ТПг І1е бек Гпув Аза пув с1у сіп 100 105 110
Рго Агд біц Рго біп Маї Тук ТБПг ІТец Рго Рго бБег Агуд бі сій Меє 115 120 125
ТПЕ пув Авп обіп Уаї бек Тїец ТПг Сув Гец Уаї Гуз б1у Рпе Тукг Рго 130 135 140 зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер бій бек Авп б1у біп Рго бій Авп АвБп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уа! Гец Авр бБег Авр біу Бек РПе Ріе Іей 165 170 175
Тук Бек Гпув Гей ТПг Уаії Авр пув бек Агд Тгр біп бі1іп с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаі Меє Нів біц Аза Іїецй Нів Авп о Нів Туг ТПг сіп 60 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 «2105 2 «211» 216 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(216) «223» Домен СН2-СНЗ Ідб22 людини «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (216)..(216) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 2
Аза Ркго Рго Уаі Аза б1у Рго бек Уаі Рпе Гей Рпе Рго Рго Пув Рго 1 5 10 15 ув Авр ТПг Гей Меє Іїе бек Агуд ТПг Рго бій Уа! ТіПг Сув Уа1ї Уаї 20 25 30
Уаї Авр Уаі Бек Нів бій Авр Рго біц Уаі1 сіп Рбе Авп Тгр Тукг Уаї
Зо Авр с1іу Уаі біц Уаї Ні Авп Аїа Ппув ТПг Гув Рго Агд сій бій сі1іп бо
Рпе Авп о бекг ТПг Рре Агуд Уаії Уаії бек Уаії Гей ТПг Уа1і Уа1і1 Нів сіп 65 70 75 80
З5
Авр Тер гец Авп о біу Гуз бій Тук пув Сув КГув Уаії Бек Авп гув 1У 85 90 95
Тец Рго Аза Рго Іїе бій Ппув ТПг Іїе Бек Ппув ТПг пув б1у біп Рго 40 100 105 110
Акуд бій Рго біп Уаі Тук ТПг Гец Рго Рго бек Агд бі бі Меє ТЕГ 115 120 125 45 пув Авп обіп УМаії бек Гей ТПг Сув Гей Маії Ппув с1у Рібе Тукг Рго 5ег 130 135 140
Авр І1ї1е бек Уаії біц Ткгр бій бБег Авп о біу біп Рго бій Авп Авп о Туг 145 150 155 160 50
ТПув ТП ТпПг Рго Рго Меє Гей Авр бБег Авр сіу бек РПе Ріе Іец Туг 165 170 175 зек Мпув Пец ТПг Уаі Авр Гув бБег Агд Тер біп сіп с1у Авп Уа1 Ре 55 180 185 190 зек Сув бек Уаі Меє Нів сій Аза ІТецй Нів Авп о Нів Тук ТПкг сіп Гув 195 200 205 бо зек Гей бек Гей бек Рго с1Уу Хаа 210 215
«2105 З «2115 217 «212» РЕТ «213» Ното варієпз «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(217) «223» Домен СН2-СНЗ ІдбЗ3 людини «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собой лізин (К) або відсутній «4005 З
Аза Ркго бій Гец Гец біу б1і1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 5 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Меє І1ї1е бек Агуд ТПг Рго сіц Уаї ТіК Сув Уаї 20 25 30
Уа1ї Уаї Авр Уаії бек Нів сбіц Авр Рго бій Уаі біп Рпбе Ппув Тер Туг
Уаї Авр сі1у Уа1і біц Уа1! Нібв Авп Аїа Гу ТПг Гпув Рго Агд бій сій бо
Зо біп Тук Авп о бБег ТПг Рпе Акуд Уаі Уа1і Бек Уа1! Ггецй ТБПг Уаї Іец Нів 65 70 75 80 біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув сій Тук пув Сув Кпув Уаї Бек Авп Гув
З5 85 90 95
Аза Гей Рго Аза Рго І1е бій пуб ТПг І1е бек Ппув ТПг Гпув с1у сіп 100 105 110 40 Рго Акд бій Рго біп Уаї Тук ТБг Гей Ркго Рго Бек Агд бі бій Мес 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек ІТец ТПг Сув Пец Уаії пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140 45 зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер сіц бек бек б1у біп Рго бій Авп Авп 145 150 155 160
Тук Ап оТПг Тбг Рго Рго Меє Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 50 165 170 175
Тук Бек Гпув Гей ТПг Уаії Авр пув бБег Агд Тгр біп бі1іп с1у АБп Ше 180 185 190 55 Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів бій Аза Тей Нів АвБп Агуд Рпе Тібг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 60 «2105 4
«2115 217 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(217) «223» Домен СН2-СНЗ Ідбс4і людини «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 4
Аза Ркго сій Рбе Гец біу б1і1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 5 10 15
Рго Ппув Авр ТПг Гей Меє І1їе бек Акуд ТПг Рго біц Уа1і ТПг Сув Уаї 20 25 30
Уаї Уаії Авр Уа1і Бек сбіп біц Авр Рго біц Уаі біп Робе АБвБп Тгр Туг 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і біц Уа1! Нів Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд бій сій 50 55 бо біп Рпе Авп о бБег ТПг Туг Агуд Уаі Уа1і Бек Уа1! Ггецй ТБПг Уаї Іец Нів
Зо 65 70 75 80 біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Ппув Уаї бек Авп Гув 85 90 95 с1у Гей Рго бек бек І1їе бій Пув ТПг І1е бек пув Аїа Гув с1у сіп 100 105 110
Рго Агд біц Рго біп Маї Тук ТБПг Іец Рго Рго бек біп біц сі Меє 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек ІТец ТПг Сув Пец Уаії пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140 ек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер біц бек АБп о бі1у сбіп Рго біц АвБп Авп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг Тбг Рго Рго Уаії Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 165 170 175
Тук Бек Агкд Гей ТПг Уаії Авр Гуз бек Агуд Тгр біп сій с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів біц Аза Іїецй Нів АвБп Нів Тук ТПкг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Ге с1у Хаа 210 215 «2105 М5 60 «2115 217 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» Домен СН2-СНЗ Ідс1і людини, що містить заміни І234А/1235А «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 5
Аза Рго сбіц Аза Аза сбіу б1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 5 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Меє І1їе бек Агуд ТПг Рго бі Уа1і ТПкг Сув Уаї
Уаї Уаї Авр Уа1 Бек Нів біц Авр Рго сіц Уаї пуб Ропе АБвБп Тгр Туг 20 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і сій Уа1ї Нібв Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд сбіц сі 50 55 бо 25 сіп Тук Авп бек ТПг Туг Агуд Уа! Уаї Бек Уаії Гей ТіПг Уаї Гей Нів 65 70 75 80 біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї Бек Авп Гув 85 90 95
Зо
Аза Гей Рго Аза Рго І1е бій пуб ТПг І1е бек Гпув Аза пув с1у сіп 100 105 110
Рго Агд біц Рго біп Маї Тук ТБПг ІТец Рго Рго бБег Агуд бі сій Меє 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек ІТец ТПг Сув Пец Уаії пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140 зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер бій бек Авп б1у біп Рго бій Авп АвБп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг Тбг Рго Рго Уаії Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 165 170 175
Тук Бек Гпув Гей ТПг Уаії Авр пув бек Агд Тгр біп бі1іп с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів біц Аза Іїецй Нів АвБп Нів Тук ТПкг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 «2105 6 «2115 217 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність бо «2205 «223» "Несучий виступ" домен СН2-СНЗ Ідбі людини
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 6
Аза Рго сбіц Аза Аза б1у б1і1у Рго Бек Уа1і Рпе Гей Робе Рго Рго Гу 1 2 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Меє І1їе бек Агуд ТПг Рго бі Уа1і ТПкг Сув Уаї 20 25 30
Уа1ї Уаї Авр Уаї бек Нів біц Авр Рго біц УМаї пуб Ропе Авп Тгр Туг 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і сій Уа1ї Нібв Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд сбіц сі 50 55 бо біп Тук Авп о бБег ТПг Туг Акуд Уаї Уаї Бек Уа1! Ггецй ТБПг Уаї Іец Нів 65 70 75 80 біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї Бек Авп Гув 85 90 95
Аза Гей Рго Аза Рго І1е біп Ппув ТПг І1е бек Гпув Аза пув с1у сіп 100 105 110
Зо Рго Акад бій Рго біп Уаї Тук ТПК Гей Рго Рго Бек Агд бі бій Мес 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек Іец Тер Сув Пец Уаї пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140
З5 зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер біц бек АБп б1у біп Рго бій Авп Авп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг Тбг Рго Рго Уаії Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 165 170 175
Тук Бек Гпув Гей ТПг Уаії Авр пув бек Агд Тгр біп бі1іп с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів сій Аза Тей Нів АвБп Нів Туг ТіПг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 «2105 17 «2115 217 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» "Несучий западину" домен СН2-СНЗ Ідбі людини «220» бо «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217)
«223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 7
А1а Рго сій Аїа Аїа сіу сіу Рго бек Уаі Рібе Гей Рре Рго Рго Тувг 1 5 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Меє І1їе бек Агуд ТПг Рго бі Уа1і ТПкг Сув Уаї 20 25 30
Уаї Уаї Авр Уа1 Бек Нів біц Авр Рго сіц Уаї пуб Ропе АБвБп Тгр Туг 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і сій Уа1ї Нібв Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд сбіц сі 50 З бо біп Тук Авп о бБег ТПг Туг Агуд Уаі Уа1і Бек Уа1 Гей ТПг Уаї Іец Нів 65 70 75 80 сіп Авр Тгр Гецп Авп с1іу Ппув бій Тук Ппув Сув Пув Ма1! бек Авп Гув 85 90 95
А1їа Гей Рго Аза Рго І1е біцп пуб ТПг І1е бек Гпув Аза пув бі1у сіп 100 105 110
Рго Агд біц Рго біп Маї Тук ТБПг ІТец Рго Рго бБег Агуд бі сій Меє 115 120 125
ТПЕ пув Авп обіп Уаї бек ІТец бек Сув Аїа Уаї Гуз б1у Рпе Тукг Рго
Зо 130 135 140 зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер біц бек АБп б1у біп Рго бій Авп Авп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаії Гей Авр бек Авр сіу бек РіПе РБре Гей 165 170 175
Уаї бек Ппув Гей ТпПг Уа1 Авр Ппув Бек Агуд Тер біп біп с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаі Меє Нів біц Аза Гей Нів Авп Агуд Туг ТПг біп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 «2105 8 «2115 107 «212» РЕТ «213» Ното варієпз «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Каппа-домен СІ ІдбС людини «4005 8
Акуд ТВП Уаії Аза Аза Ркго бек Уа! Рпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр с1ц 60 1 2 10 15 біп Гей Гпув Бек с1іу ТПг Аїа бек Уаі Уа1 Сув Гей Гец Авп Авп Ріе 20 25 30
Тук Рго Акуд сіц Аїа пув Уаі сіп Тер пув Уаії Авр АБп Аза Іец сіп 35 40 45 зек сб1у Авп бек біп бій бек Уаі Тс біц біп Авр бек Ппув Авр б5ег 50 55 бо
ТПг Тук бек Гей бек бек ТПг Гей ТПг Гей бек Гув Аїа Авр Тук с1іци 65 70 75 80
Тпув Нів Гпув Уаї Туг Аїа Сув бій Уаії ТПг Нів сіп сіу Гец бек 5бег 85 90 95
Рко Уаї ТіПг пуб бек Рпе АБп Агуд сбі1у бій Сув 100 105 «2105 19 «211» 104 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(104) «223» Лямбда-домен СІ Ідб людини «4005 9
Зо біп Ркго пув Аза Аза Рго Бек Уа1і ТПг Гей Рпе Рго Рго бек бек бій 1 5 10 15 бі Гей біп Аза Авп пув Аїа ТПг Гей Уа1і Сув Гей І1е бБег Авр РіПе
З5 20 25 30
Тук Рго сіу Аїа Уаії ТПг Уаії Аза Тгр пув Аза Авр бек бек Рго Уаї1ї 40 пув Аїа сб1і1у Маї сій ТБг ТБг Рко бек Ппув біп бек Авп Авп о пув Туг бо
А1їіа Аза бек бек Тукг Іец бек Гец ТПг Рго біц біп Тер Ппув Бек Нів 65 70 75 80 45
Акуд Бек Тук бек Сув біп Уаі ТПг Нів біц б1і1у бек ТПг Уаі сій Гув 85 90 95
ТпПг Уаі1 Аза Рго ТПг біц Сув бБег 50 100 «2105 10 «2115 98 «212» РЕТ 55 «213» Ното варієпз «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(98) бо «223» Домен СНІ Ідсі людини
«4005 10
А1їа бек ТПг Ппув біу Ркго бек Уаії РіПе Рго Іїец Аза Рго Бек Бек Гув 1 5 10 15 зек ТПг бек біу бі1у ТПпг Аза Аїа Іец с1у Сув Гей Уа1і Гпув Авр Туг 20 25 30
Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр АБп бек с1іу Аїа Гей ТПг 5ег 35 40 45 сбі1у Маї Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаі Гей біп бек бек сіу Гец Тукг в5ег 50 55 бо
Тен бек бек Уаії Уаії ТіПг Уа1ї Рко бек бек бек Ге с1у ТПг сіп Тіг 65 70 75 80
Тук Іїе Сув Авп Уаі Авп о Нів Ппув Рго бек Авп ТП Гув Уа1і Авр Гув 85 90 95
Ак Уаї «2105 11 «2115 12 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220»
Зо «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(12) «223» Шарнірна область Ідб2 людини «4005 11
З5 бі Агд ув Сув Сув Уа1і1 сій Сув Рго Рго Сув Рго 1 5 10 «2105 12 «2115 12 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(12) «223» Шарнірна область Ідб4і людини «4005 12 біц бек Гпув Тук с1у Рго Рго Сув Рго Бек Сув Рго 1 5 10 «2105 13 «2115 12 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» 60 «223» Стабілізована шарнірна область Ідос4
«4005 13 біц бек Гпув Тук с1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго 1 5 10 «2105 14 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер 1 «4005 14 сі1у б1у с1у Бек б1у с01у Шу щу 1 5 «2105 15 «2115 6 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер 2, що містить цистеїн «4005 15 сі1у б1у Сув С1у с1у С.У
Зо 1 5 «2105 16 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера «4005 16 сбі1у Маї бій Рго Ппув Бек Сув 1 5 «2105 17 «2115 6 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера «4005 17
Уаї бій Рго Ппув бек Сув 1 5 «2105 18 «2115 6 бо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність
«223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера «4005 18
Аза сій Рго Ппув бек Сув 1 5 «2105 19 «2115 7 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера «4005 19 с1у Рбе АБп Агд с1у січ Сув 1 5 «2105 20 «2115 6 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера
Зо «4005 20
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 1 5
З5 «2105 21 «2115 28 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера (Е-спіраль) «4005 21 бі Маї Аза Аза гейш біш пув сі Уаі Аїа Аїа Гей сіц пув біц Уаї 1 5 10 15
Аза Аїа Гецй сіц пув біц Маі Аїа Аїа Іецш б1ц Гув 20 25 «2105 22 «2115 28 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Домен, який сприяє утворенню гетеродимера, що містить "К-спіраль" бо «4005 щД 22 пув Маї Аї1а Аза Гей пув бій Ппув Уаі Аїа Аїа Гей пув біц Гуз Уаї 1 5 10 15
Аза Аїа Гец пув біцш Гув Уаії Аїа Аїа Іецй Гув с1и 20 25 «2105 23 «2115 28 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен, що містить цистеїн, який сприяє утворенню гетеродимера, що містить "Е-спіраль" «4005 23 бі Маї Азї1а Аза Сув бій пув сбіц Уаі Аїа Аїа Гей сіц пув біц Уаї 1 5 10 15
Аза Аїа Гей сбіц пув біц УМаі Аїа Аїа Іец бі Гув 20 25 «2105 24 «2115 28 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен, що містить цистеїн, який сприяє утворенню гетеродимера, що містить "К-спіраль" «4005 24 пув Маії Аї1а Аїа Сув Ппув бій пув Уаії Аїа Аїа Гей Ппуз сбіц Ппув Уаї1ї 1 5 10 15
Аза Аїа Гец пув біцш Гув Уаії Аїа Аїа Іецй Гув с1и 20 25 «2105 25 «211» 46 «2125 РЕТ «213» вЕгереЕососсив дувдаіїастгіае «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..146) «223» Альбумінсполучний домен 3 білка б штаму 5БЕсгерсбососсив с148 «4005 25
Тец Аї1а сій Аза пув Уаі геш Аза Авп Агуд бій Гей Авр Гув Туг с1У 1 5 10 15
Уаї Бек Авр Тук Тук Ппув Авп Гей Іїе Авр АвБп Аїа їув бек Аїа сіци 20 25 30 сі1у Маї гув Аїа гейш Іїе Авр бій Іїе Гей Аза Аїа Іецй Рго бо 35 40 45
«2105 26 «211» 46 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Варіант деімунізованого альбумінсполучного домену «4005 26
Тец Аї1а сій Аза пув Уаі геш Аза Авп Агуд бій Гей Авр Гув Туг с1У 1 5 10 15
Уаї Бек Авр Тук Тук Ппув Авп Гей Іїе Авр АвБп Аїа їув бек Аїа сіци сі1у Маї гув Аїа гейш Іїе Авр бій Іїе Гей Аза Аїа Іецй Рго 20 «2105 27 «211» 46 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність 25 «2205 «223» Варіант деімунізованого альбумінсполучного домену «4005 27
Зо Те Аїа сбіц Аїа Ппув Уаі ІТей Аїа АвБп Агуд бій Гей Авр Гув Ту 1У 1 5 10 15
Уаї Бек Авр Тук Тук пув Авп Аїа Аза Авп АвБп Аза Гу ТПг Уаї сіци 20 25 30
З5 сі1у Маї гув Аза гейш Іїе Аїа сій Іїе Гей Аза Аїа Іецй Рго 35 40 45 «2105 28 40 «211» 46 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 45 «223» Варіант деімунізованого альбумінсполучного домену «4005 28
Тец Аї1а сій Аза пув Уаі геш Аза Авп Агуд бій Гей Авр Гув Туг с1У 1 2 10 15
Уаї Бек Авр Тук Тук Ппув Авп Гец Іїе бБег Авп Аза Гув5 бек Уа1і сіци 20 25 30 сіу Маї гув Аза Гей Іїе Аїа сій І1їе еп Аза Аїа Іецй Рго 35 40 45 «2105 29 «2115 4 бо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність
«223» Альтернативний лінкер 2 «4005 29 сі1у б1у с1у 5ег 1 «2105 30 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Альтернативний лінкер 2 «4005 30
А1а бек ТПг Гув 01У 1 5 «2105 31 «2115 10 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер
Зо «4005 31
Авр пув ТПг Нів ТПг Сув Рго Рго Суб Рго 1 5 10
З5 «2105 32 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер «4005 32 біц Рко Ппув Бек Сув Авр ГПув ТПг Нів ТпПг Сув Рго Рго Сув Ркго 1 5 10 15 «2105 33 «2115 6 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Альтернативний лінкер 2 «4005 33
Тец бій Рго Ппув Бек бег бо 1 5
«2105 34 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Альтернативний лінкер 2 «4005 34
Аза Ркго бек бек бег 1 5 «2105 35 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер «4005 35
Аза Рко бек бек бек Ркго Меє с1ци 1 5 «2105 36 «2115 15 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер «4005 36
Тец бій Рго Ппув Бек Аїа Авр Пув ТПг Нів ТПг Сув Рго Рго Сув 1 5 10 15 «2105 37 «2115 16 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер «4005 37
Тем бій Рго пуб бек бек Авр Пув ТПг Нів ТП Сув Рго Рго Сув Рго 1 5 10 15 «2105 38 «2115 525 «2125 РЕТ «213» Ношто варієпь «2205 «2215 МІ ЗС ЕЕАТОВЕ бо «222» (1)..(525) «223» І1Аб-3 людини (сигнальна послідовність та зрілий білок)
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(28) «223» Сигнальна послідовність «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (29)..(525) «223» Зрілий білок «4005 38
Меє ТЕр бій Аїа сіп Рбе Гец сіу Гей Гец Робе Іец біп Рго Іецй Тгр 1 2 10 15
Уаї Аза Рго Уа1 Ппув Рго Гец біп Рго б1у Аї1а сі Уа1і Рго Уа1 Уаї 20 Тгр Аїа сіп сбіц бі1у Аїа Рго Аї1а сіп Гей Ркго Сув бек Рго ТПг І1е
Ркго Гей біп Авр ІТец бек Гей Гей Агд Агуд Аї1а сіу Уаі ТПг Тер сіп бо 25
Нів біп Рго Авр бек біу Рго Рго Аїа Аза Аза Рго б1у Нів Рго Іецй 65 70 75 80
Аза Рго сіу Рго Ні Рго Аї1а Аза Рго бек бек Тгр б1у Рго Агд Рго
Зо 85 90 95
Акуд Агуд Тут ТБг Уаії Іец бек Уаї сбіу Рго б1у сб1у Гей Агд Бех щЩ1У 100 105 110 35 Агд Гей Рго Те біп Рго Агкуд Уаії сіп Гей Авр бій Агуд с1у Акд сіп 115 120 125
Акуд с1у Авр Робе бек Іецй Тгр Гец Агд Рго Аї1а Агуд Агуд Аїа Ар Аї1а 130 135 140 40 сб1у бій Тук Агуд Аїа Аїа Уа1 Нів гей Агуд Авр Агуд Аза Іецй бек Сув 145 150 155 160
Акуд Гей Агуд Гец Агд Тец біу біп А1їа бек Меє ТПг Аза Бек Рго Рго 45 165 170 175 бі1у бек Гей Агуд Аза Бек Авр Тгр Уаі Іїе гей Авп Сув бек РПе б5ег 180 185 190 50 Агуд Рго Авр Агкуд Рго Аза бек Уаі Нів Ткгр Рбе Агд АвБп Агуд с1у сіп 195 200 205 б1у Акд Уаі Рго Уаі Агу бій бек Рго Нів Нів Нів Гей Аїа сіц б5ег 210 215 220 55
Рпе Гей Рібе Тец Рго біп Уаії бек Рго Меє Авр бек с1у Рго Тер Щ1У 225 230 235 240
Сув І1е Гей ТПг Туг Агуд Авр о сб1іу Рпе Ап Уа1 бек І1їе Меєсє Туг Авп 60 245 250 255
Тецп ТПпг Уаї Гей с1у Гей бій Рго Рго ТПг Рго Гей ТПг Уаї Туг А1а 260 265 270 сб1у А1ї1а сі1у Бек Агуд Уа1 сіу Гей Рго Сув Акд Гей Рго Аїа Сіу Уаї 275 280 285 б1у ТПпг Агуд бек Рпе Гей ТПг Аза Ппув Тер ТпПг Рго Рго сіу с1і1у с1У 290 295 300
Рго Авр їем Гей Уаії ТПг с1у Авр Авп б1іу Авр Ррпе ТПг Гецп Акг9д Іецй 305 310 315 320 бі Авр Уаії бек біп Аїа сіп Аза с1у ТПг Тук ТПг Сув Нів І1е Нів 325 330 335
Те біп біц біп сбіп Гей АвБп Аїа ТПг Уаії ТПг Гей Аза Іїе І1е Тіг 340 345 350
Уаї ТПЕ Рго Ппув Бек РіПе сіу Бек Рго сіу бек Гец біу Гув ТІец Іецй 355 360 365
Сув бій Маї ТПг Рго Уаі Бек сі1у сбіп бій Акуд Рбе Уаї Тгр бек 5ег 370 375 380
Тем Авр ТПг Рго бек біп Агуд бек Рібе бек с1іу Рго Тер Тей с1ц Аїа 385 390 395 400 біп бі Аза сіп Гей Гей бек біп Рго Тер біп Сув біп Гец Туг сіп 405 410 415
Зо сб1у бій Акд Гей Геш сіу Аїа Аза Уа1і Тук Рпе ТПг сій Гец бек 5ег 420 425 430
Рго сі1у Аїа біп Агд бек б1у Агд Аїа Рго сб1у Аза Гей Рго Аіїа 0Щ1У 435 440 445
Нів Гей Гей Гей Рібе Гец І1е Гей сіу Уаї Гец бек Іецй Іец Іец Іеєецй 450 455 460
Уаї ТпкгЕ сб1у Аїа Рбе сіу Рбе Нів Гей Тгр Агд Агкуд біп Тгр Агд Рго 465 470 475 480
Агуд Агуд Рбе бег Аза Іїец бій біп сіу І1е Ні Рго Рго сбіп Аїа сіп 485 490 495 зек Мпув І1е біц біш ІТейп бій біп б1іц Рго бій Рго бій Рго бій Рго 500 505 510 бій Рго біц Рго бій Рго бій Рго бій Рго біц сіп ТГеч 515 520 525 «2105 39 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Мив штивси1ив5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(120) бо «223» Варіабельний домен важкого ланцюга МАТ до ІАС-3 А
«4005 39 біп УМаї біп Гей сбіп біп Тер с1у Аїа сіу Гец Іец Гув Рго бек с1ц 1 5 10 15
ТПЕ Гей бек Гей ТПг Сув Аза Уа1 Тук сіу біу бек Рре бек Авр Туг 20 25 30
Тук Тер Авп Тер І1е Агд біп Рго Рго сбі1у Ппув с1у Гей бій Тер Те 35 40 45 сб1у бій І1їе Авп Нів Ап сіу Авп о ТПг Авп бек Авп о Рго бек Іецй Гу 50 55 бо зек Акад Уа1 ТПг Гец бек Гей Авр ТПг бек Ппув Ап біп Робе бек Гей 65 70 75 80 ув Тецй Агуд Бек Уаі ТПг Аза Аза Авр ТПг Аїа Уа1 Тукг Тук Субв А1а 85 90 95
Рпе сіу Тук Бек Авр Тук бій Туг Авп Тер Рпе Авр Рго Тер сі1у сіп 100 105 110 сбі1у ТПпг Гей Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 40 «2115 107 «212» РЕТ
Зо «2135 Мив штивси1ив5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Варіабельний домен легкого ланцюга МАТ до ІАС-3 А «4005 40 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек біп бек І1е бек бек Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг с1іу Іїе Рго Аіїа Акд Ріе бег 01Уу бо 50 зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд бек АвБп Тгр Рго Іецй 55 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТПг АвБп Гец біц І1е Гув 100 105 60 «2105 41 «2115» 120
«212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Варіабельний домен важкого ланцюга МАТ до ІАС-3 1 «4005 41 біп І1е сбі1іп Гей Уаі сбіп бек с1іу Рго бій Гей Ппув Пув Рго біу бій 1 5 10 15
ТПЕ Уаї Ппув Іїе бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПгЕ Рре Агд Авп Туг бі1у Меє АвБп Тер Уаі пув сбіп Аза Рго сіу Ппув Уа1і! Гей пув Тгр Меє 20 с1у Тер І1е АвБп ТПг Тук ТПг сб1у бій бек ТПг Туг Аза Авр Авр РІе бо бі б1у Акуд Рпе Аза РпПе бек Гей сіу ТПг Бек Аїа бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80 25
Тец біп І1їе Авп Іїе Гей Гпув АвБп бій Авр ТБПг Аїа ТіПг Тук Ропе Сув 85 90 95
Аза Акуд бій бек Іец Тук Авр Туг Тук бек Меє Авр Тугє Тер 1у сіп
Зо 100 105 110 бі1у ТПг бек Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 35 «2105 42 «2115 6 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив 40 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(6) «223» СОвБН1і МАТ до ІАС-3 1 45 «4005 42
Ак Авп о Тук біу Меє Авп 1 5 50 «2105 43 «2115 17 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив 55 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВБН2 МАТ до ІАС-3 1 60 «4005 43
ТЕр Іїе Авп ТПг Тук ТПг біу бій бек ТПг Туг Азїа АБр АвБр Рпе сіи 1 5 10 15 о1у «2105 44 «2115 11 «212» РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(11) «223» СОБНЗ МАТ до ІАС-3 1 «4005 44 біц бек Гей Туг Авр Тук Тук Бек Меє Авр Туг 1 2 10 «2105 45 «2115 112 «212» РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(112) «223» Домен МІ МАТ до ІАС-3 1 «4005 45
Авр Уа1 Уаї Уаї ТПг біп ТПг Рго Іїец ТПг Іецй бек Уаі ТПг Ше .Щ1У
З5 1 2 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег 20 25 30 40 Авр с1у Ппув ТПг Тук Гей Авп Тгр Гей Гей біп Агуд Рго с1у біп 5бег
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго бо 45
Авр Агуд Рпе ТПг о біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр їец сіу Ма1ії Тугк Тугк Сув ТЕр біп Щ1У 50 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу ТП Гув ІТеп сій І1е Гув 100 105 110 55 «2105 46 «2115 16 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив 60 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
«2225 (1)..(16) «223» СОВІ1 МАТ до ІАС-3 1 «4005» 46
Пув бек бек біп Бек Гей Гей Нів Бек Авр сіу Ппув ТПг Тук Гей Авп 1 5 10 15 «2105 47 «2115 7 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до ІАС-3 1 «4005 47
Тецп Уаї бек бій Гей Авр 5ег 1 5 «2105 48 «2115 9 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205
Зо «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до ІАС-3 1 «4005 48
З5
ТЕр біп с1у ТПкг Нів Рібе Рго Тук ТЕПг 1 5 «2105 49 40 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 45 «223» Домен УН із МН1І МАТ до ІАС-3 людини 1 «4005 49 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 50 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авп о Туг 20 25 30 55 сіу Меє АБп Тгр Уаі Акуд біп Аїа Рго сбі1у сбіп с1у Те бій Тгр Меє сб1у Тер І1е АвБп ТПг Тук ТПг сіу бій Бек ТПг Туг Аза АвБр АвБр РіПе бо 60 бі б1у Акуд Рпе Уаі РпПе бек Ме Авр ТПг бек Аїа бек ТПг Аїа Туг
65 70 75 80
Тец біп І1їе бек Бек Гей пув Аза бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд бій бек Іец Тук Авр Туг Тук бек Меє Авр Тугє Тер 1у сіп 100 105 110 бі1у ТПпг ТпПг Уа1ї ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 50 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МН із МН2 МАТ до ГАС-3 людини 1 «4005 50 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу Тук ТП Рпе ТПг Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє АвБп Тгр Уаі Агуд сбіп Аза Рго сіу біп сіу Гец біц Тгр Меє
Зо сб1у Тер І1е АвБп ТПг Тук ТПг сіу бій Бек ТПг Туг Аза АвБр АвБр РіПе бо бі б1у Акуд Рпе Уаі РпПе бек Ме Авр ТПг бек Аїа бек ТПг Аїа Туг 35 65 70 75 80
Тец біп І1їе бек Бек Гей пув Аза бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук РПе Сув 85 90 95 40 А1а Агуд сій бек Гей Тук Авр Тук Тук бек Мес Авр Туг Тер 1у сіп 100 105 110 бі1у ТПпг ТпПг Уа1ї ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 45 «2105 51 «2115 112 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 50 «2205 «223» Домен МН із МІ1 МАТ до ГАС-3 людини 1 «4005 ч,151 55
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Гец бек Тец бек Уа1і! ТПг Рго 01Уу 1 5 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег 60 20 25 30
Авр с1у Ппув ТПг Тук Тец АвБп о Тгр Тец Те біп пув Рго сбіу біп 5ег 35 40 45
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго 50 З бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек с1у ТПг Авр Рбе ТПг Гец Гув І1е 65 70 75 80 зек Акад Уаі бій Аї1а бій Авр Уаї сіу Уа1 Туг Тук Сув Тер сбіп 01Уу 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Тук ТПг Ре бі1у бі1у с1у ТПг Ппув Уа1і сій І1е Гув 100 105 110 «2105 чБ52 «2115 112 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен Мі із М102 МАТ до ГАС-3 людини 1 «4005 Д 52
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Гей бек Гей бек Уа1і! ТПг Рго 01Уу 1 5 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег
Зо 20 25 30
Авр с1у Ппув ТПг Тук Тец АвБп Тер Гей Гей біп Агуд Рго сбіу біп 5ег 35 Рго бі Акуд Гей І1е Тук Гей Уаї бек бій Гей Авр бек с1іу Уа1і! Рго бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу Бек с1іу ТПг Авр Рпе ТПг Гей Гуз І1е 65 70 75 80 40 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Тукг ТПг Роре б1у сіу сбіу Тс Гув УМаї сій І1е Гув 45 100 105 110 «2105 53 «2115 112 «212» РЕТ 50 «213» Штучна послідовність «220» «223» Домен МІ із МІЗ3 МАТ до ГАС-3 людини 1 55 «4005 53
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Іїец бек ІТецй бек Уаі ТПг Рго Щ1У 1 5 10 15 бо біп Рго Аїа Бек І1їе бек Сув Пув бек бек біп бек Гей Іецй Нів 5ег 20 25 30
Авр с1у Ппув ТПг Тук Тец АвБп о Тгр ІТец ІТецй біп Ппув Рго с1у біп Рго 35 40 45
Рго бі Акуд Гей І1е Тук Гей Уаї бек бій Гей Авр бек с1іу Уа1і! Рго 50 55 бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу Тс Гув УМаї сій І1е Гув 100 105 110 «2105 ч54 «2115 112 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен Мі із М14 МАТ до ГАС-3 людини 1 «4005 54
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Іїец бек ІТецйп бек Уаі ТПг Рго Щ1У 1 5 10 15
Зо біп Рго Аїа Бек І1їе бек Сув Пув бек бек біп бек Гей Іецй Нів 5ег 20 25 30
Авр Аза пуб ТПг Тук Тец Авп Тгр ІТец ІТецй біп Ппув Рго с1у біп Рго
З5
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 40 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У 85 90 95 45 ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Ррпе сіу сіу с1у ТБг Гпув УМаії сій І1е Туз 100 105 110 «2105 щ55 «2115 16 50 «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» СОВІ1 домену Мі із М14 МАТ до ГАС-3 людини 1 55 «4005 Б55
Пув бек бек біп Бек Гей Гей Нів Бек Авр Аїа Ппув ТПг Тукг Гей Авп 1 5 10 15 60 «2105 56
«211» 118 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(118) «223» Домен МН МАТ до ІАС-3 6 «4005 МЯ56 бі Маї Гей Гей сбіп біп бек с1іу Рго біц Гей Уа! пуб Рго с1у А1а 1 5 10 15 зек Уаї Ппув І1їе Рго Сув Ппув Аза бек біу Тук ТП Рпе ТПг Авр Туг
Авп оМеє Авр о Тгр Уаі! Гпув біп бек Нів бі1у бій бек Гей бі Тер Те 20 б1у Авр І1е Авп Рго Ар Авп сіу Уаі ТПг Іїе Тукг Авп біп Гув РБПе бо бі б1у пув Аза ТПг Гей ТПг Уа1і Авр Гпув Бек бек бек ТПг Аїа Туг 25 65 70 75 80
Меє бій ге Агуд Бек Гей ТПг бек бій Авр ТБбПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Зо Аза Агуд бій Аза Авр Тук Рпе Тук Рпе Авр Туг Тгр о1у сіп с1у ТЕГ 100 105 110
ТПЕ Ге ТпПкг Уаї бек 5ег 115
З5 «2105 57 «2115 5 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив 40 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(5) «223» СОВН1і МАТ до ІАС-3 6 45 «4005 57
Авр Тук АвБп Меєс Авр 1 5 50 «2105 58 «2115 17 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив 55 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до ІАС-3 6 60 «4005 58
Авр І1е Авп о Рго АвБр АБп обіу Уаії ТПг І1е Тук АвБп сбіп пув Рпе сіц 1 5 10 15 у «2105 59 «2115 9 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОВБНЗ МАТ до ІАС-3 б «4005 59 сі Азїа Авр Тук Рпе Туг Рібе Авр Туг 1 5 «2105 60 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
Зо «222» (1)..(107) «223» Домен МІ МАТ до ІчІАС-3 6 «4005 60
Авр І1е Уаі Меє ТПг сіп бек Нів Агкуд Ріе Мес бек ТПг бек Уа1 с1Уу 1 5 10 15
Авр Агуд Уаї бек І1е ТПпг Сув пуб Аза бек біп Авр Уаі1і Бек бек Уаї 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп біп Пув Рго сіу біп бек Рго Гув Іецп Гей Ше 35 40 45
Рпе бек Аїа бек Туг Агуд Тук ТПг біу Маі Рго Авр Агуд Рпе ТПг с01У бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Ррпе ТПг І1ї1е бек Бек Уа1і сіп Аї1а 65 70 75 80 50 А1а Авр Гей Аїа Уаї Тук Тук Сув біп біп Нів Тук бек ТПг Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гув 100 105 55 «2105 61 «2115 11 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив 60 «220»
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(11) «223» СОВІ1 МАТ до ІАС-3 6 «4005 61 туз Аза бек біп Авр Уа1 бек Бек Уа1і Уа1 Аї1а 1 5 10 «2105 62 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до ІАС-3 6 «4005 62 зек Аїа бек Туг Агд Тук ТПг 1 5 «2105 6563 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5
Зо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІЗ МАТ до ІАС-3 б «4005 63
Нів Тук Бек ТПг Рго Тгр ТЕПг 1 5 «2105 64 «2115 113 «2125 РЕТ «213» Ношто варієпь «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(113) «223» Варіабельний домен важкого ланцюга МАТ до РО-1 А «4005 64 біп УМаї біп Гей Уаі бі бек сіу сіу сіу Уа1 Уаі1і сіп Рго с1у Агд 1 5 10 15 зек Гей Агд Тец Авр Сув Гув Аза бек біу І1е ТПг Ррпе бБег Авп бег 20 25 30 сбі1у Меє Нів Тер Уаі Агуд сіп Аза Рго сіу Ппув сіу Гец біц Тгр Уаї 35 40 45 60
А1їа Уаі1ї І1їе Тср Туг Авр біу бек Гув Агуд Туг Туг Аїа Авр бек Уаї
50 55 бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек Пув Авп о ТПг Іецй РБПе 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза ТПг Авп о Авр о Авр оТуг Тер біу біп б1у ТПг Гей Уа1і ТПг Уа1ї 5ег 100 105 110 зег «2105 65 «2115 107 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Варіабельний домен легкого ланцюга МАТ до РО-1 А «4005 65 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бек Гей бБег Рго Щ1У 1 5 10 15
Зо сій Агуд Азїа ТБ оГецй бек Сув Акуд Аїа бек біп бек Уа1! бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше
З5
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг Іїе бек бек Гей бій Рго 40 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Бек бек Авп Тгр Рго Агд 85 90 95 45 ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПг Ппув Уаії сій І1їе Гув 100 105 «2105 66 «2115» 120 50 «2125 РЕВТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ 55 «222» (1)..(120) «223» Варіабельний домен важкого ланцюга МАТ до РО-1 В «4005 66 бо сіп УМаії біп Гецшп Уаі сіп бек сіу Маї сій Уа1ї Ппув Ппув Рго с1Уу Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авп о Туг 20 25 30
Тук Меє Тук Тер Уа1і Агуд сбіп Аза Рго сіу сбіп с1іу Гей сі Тгр Меєс 35 40 45 сі1у б1у І1їе Авп Рго Бек Авп сіу с1у ТПг Авп Рпе Авп біц Тув РБПе 50 55 бо ув Авп Агуд Уа1і ТПг Гей Тпг ТБг Авр обекг бек ТПг ТПг ТПпг Аза Туг 65 70 75 80
Меє сій Гей Ппув Бек Гей сіп Рпе Авр Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Агуд Авр оТуг Агуд Рпе Авр Меє б1у Рпе Авр Туг Тер с1у сіп 100 105 110 с1у Тк ТПкЕ Уаї ТПг Уаі1ї бек 5ег 115 120 «2105 67 «2115 111 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
Зо «222» (1)..(111) «223» Варіабельний домен легкого ланцюга МАТ до РО-1 В «4005 67 січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго Аїа ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек пув біу УМаії бек ТПг 5ег 20 25 30 сб1і1у Тук бек Тук Гей Нів Тер Тує біп біп пув Рго сі1у біп Аза Рго 35 40 45
Акд Гей Гец Ії1е Туг Іец А1їа бек Тук Гей бій бек сіу Уаї Рго А1а бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 50 зек Гей бій Рго біц Авр Рпе Аїа МУМаї Тук Тук Сув біп Нів бБег Агд 85 90 95
Авр Гей Рго Гец ТПг Рпе бі1іу сбіу сіу Тс Ггув Уаії сій І1е Гув 100 105 110 55 «2105 68 «211» 288 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь 60 «220»
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(288) «223» Поліпептид РО-1і людини (послідовність МСІ МР 005009.2) «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(20) «223» Сигнальна послідовність РО-1 людини «4005 68
Меє сіп І1їе Рго сбіп Аза Рго Тгр Рго Уаі Уаі Тгр Аїа Уа1ії Іец сіп 1 5 10 15
Тем бі1у Тгр Агд Рго сб1у Тер Рібе Гей Авр бек Рго Авр Агуд Рго Тгр
АвпоРго Рго ТПг Робре бек Рго Аза Гей Іїецй Уаі Уаі ТП сі с1у Авр 20
Авп Аза ТПг Рре ТПг Сув бек Рібе бек АвБп о ТПг бек бій бек Ріе Уаї бо
Тец АвБп о Тгр Туг Агуд Меє бек Рго Бек Авп біп ТПг Авр Гув Іецй А1а 25 65 70 75 80
Аза Рпе Рго біц Авр Агуд бек біп Рго бі1у бі1іп Авр Сув Агд Рпе Аг4д 85 90 95
Зо Уа1ї ТЕ біп Гей Рго Авп о сб1у Агуд Авр Рпе Нів Меє бек Уа! Уаі Агд 100 105 110
Аза Агуд Агуд АвБп о Авр обек біу ТПг Тук Іецп Сув с1у Аза Іїе бек Іец 115 120 125
З5
Аза Рго пув Аїа біп І1е Гпув біц бек ІТейп Агуд Аїа бій Гей Аг9д Уаї 130 135 140
ТП біш Агуд Агуд Аїа біц Уаї Рго ТБг Аза Нів Рго бек Рго бек Рго 40 145 150 155 160
Акуд Рго Аїа сбіу біп Рпе біп ТБг Іец Уаії Уаї сі1у Уаі Уа1і О1у щу 165 170 175 45 Пес Гей сі1у Бек Гей Уа! Гей Іїейп Уаї Тгр Уаі Гей Аїа Уаї І1е Сув 180 185 190 зехг Агуд Аїа Аза Агуд б1у ТПг І1е сб1у Аза Агуд Агуд ТП с1у біп Рго 195 200 205 50
Тешц Ггув бій Авр Рго Бек Аїа Уаі Рго Уаі Рпе бек Уаі Авр Туг 1У 210 215 220 біш тей Авр Рпе сбіп Тер Агуд бій Ппув ТПг Рго бій Рго Рго Уаі1ї! Рго 55 225 230 235 240
Сув Маї Рго бій сбіп ТПг бій Тук Аза ТПг Іїе Уаі1і Рібе Рго бег 01Уу 245 250 255 бо Меє с1у ТрПг бек бек Рго А1ї1а Агуд Агуд сіу бек Аіїа АБр б1у Рго Аг4д 260 265 270 зек Аїа біп Рго ІТец Агуд Рго біц Авр б1і1у Нів Сув Бек Тер Рго Іец 275 280 285 «2105 69 «2115 121 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(121) «223» Домен МН МАТ до РІО-1 1 «4005 69
Авр Уаі1 сіп Гец біп біц бек біу Рго б1у Акуд Уаі Ппув Рго Бек сіп 1 2 10 15 зек Гей бек Гей ТПг Сув ТПг Уаї ТПг с1іу Рпре бек І1їе ТПг Авп АвБр 20 25 30
Ту Аїа Тер Авп Тгр І1е Агд сбіп Робе Рго біу АвБп Гув Іеп сі Тгр 35 40 45
Мен сі1у Нів Іїе ТПг Тук бек сіу Бек ТПг бек Туг Авп Рго бек Іецй 50 З бо
Тпув век Агуд Іїе Бек Іїе ТПг Агуд Авр ТПг бек Ппув Авп о Нів Рое РіПе
Зо 65 70 75 80 теп біп Гей бек Бек Уа1і ТПкг Рго бій Авр ТПг Аїа ТПг Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Авр Тугк б1іу бек с1у Тук Рго Тук ТПг Гей Авр Туг Тер 01У 100 105 110 біп б1у ТПг бек Уа1і ТПг Уа1і бек 5ег 115 120 «2105 70 «2115 373 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(373) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РІО-1 1 «4005 Ло сачдзаєссадс дасдсдсадс сссаддадсс ддадассіддс сдддедааас сЕссссадес бо
ЕЄЕсЕДЕССсССсСЕСсС асседсасьд єсаседдсеє сесааєсасс ааєдчаєтавд сседдаастд 120 чаєссдасад єсЕесСсаддаа асааасеєдда Чдеддаєддадс сасаєаасся асадеддсад 180 сассадссас аасссасссс ссаааадессу аасссстаєс асссдддадаса сасссаадаа 240 бо ссассесессс ссдсадеЕєда чЕССЕдЕЧЄас ЕССЕЧдаддас асадссасає астассдедс Зоо аачачаєсас доадсадеЕддсеЕ асссссасас сссодассас соддддссаад дсассссадес 3З6о сассдЕсьсс сс 373 «2105 71 «2115 6 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(6) «4005 71
Авп Авр Тут Аза Тгр Авп 1 2 «2105 72 «2115 16 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 1 «4005 72
Зо
Нів Іїе ТПг Тук бек біу бек ТПг бек Тукг Авп Рго бек ТІецп Пув бег 1 2 10 15 «2105 73 «2115 12 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(12) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 1 «4005 73
Авр Тук сіу бек біу Тук Рго Тук ТПг Іецй Авр Туг 1 2 10 «2105 174 «2115» 106 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(106) «223» Домен МІ МАТ до РІО-1 1 «4005 74 60 біп І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза Гей Меє бБег Аза бег Рго 01Уу
1 2 10 15 бі Ггув Маї ТПг Меє ТПг Сув Бек Аза ТПг бек І1е Уаї бек Тук Уаї 20 25 30
Тук Тер Тук біп біп Ппув Рго сіу бек бек Рго біп Рго Тгр ІШе Туг 35 40 45
Тецп ТПг бек Авп Геш Аїа бек сіу Уаі Рго Аїа Агд Рре бек с1у 5бег 50 З бо бі1у бек б1у ТПг Бек Тук Бек Гей ТПг Іїе Бек бек Меє сбіц Аїа с1ц 65 70 75 80
Авр Аїа Аза ТПг Туг Тук Сув біп біп Тгр бек Авр Авп Рго Тукг ТіПг 85 90 95
Рпе сіу біу біу ТП Гув Гей біц І11е Гув 100 105 «2105 75 «2115» 318 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(318) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РІО-1 1
Зо «4005 75 сааассдеЕсс ссасссадесс сСссадсассс асдсссдсає ссссадддда дааддесасс бо аєдассеєдса деЕдссассеєс ааєєдеЕааде басадєсєсасе додсассадса даадсссддва 120
З5
ЕссеЕсСссссс аассстрддає єгаєсеєсаса Ессаасстдд сеЕєСсСЕддаде сссрдсессдс 180
Еєсадеддса деЕЧдоддЕСЄЯдо дассеєсеЕсас єсеЕсСссасаа Єсадсадсає овдадассдаа 240 чаєдссдсса сеЕсСаєстасьуд ссадсадсду адедасаасс соуасбасасЯяєе содадоддчоадд Зоо ассаадсєдд ааагаааа 318 «2105 76 «2115 10 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(10) «223» СОВІ1 МАТ до РІО-1 1 «4005 7176 зек Аїа ТПг бек І1е Уаї бек Тук Уаї Туг 1 2 10 «2105 177 60 «2115 7 «2125 РЕТ
«213» Мив шивси1и5 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 1 «4005 77
Тем ТіПг бек Авп Гец Аїа 5ег 1 5 «2105 78 «2115 9 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 1 «4005 78 сбіп біп Тгр Бек Авр Авп Рго Туг ТЕПг 1 5 «2105 79 «2115» 121
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МН із МН1і МАТ до РО-1 людини 1
З5 «4005 79
Авр Уаі1 сіп Гец біп біц бек біу Ркго бі1у Геп Уаії Ппув Рго Бек сіп 1 5 10 15
ТПЕ Гей бек Гей ТПг Сув ТПг Уа1! бек біу Роре бек І1е бек Авп Авр 20 25 30
Ту Аїа Тер Авп Тгр І1е Агд біп Рго Рго біу Ппув б1у Те сі Тгр 35 40 45
І1е сі1у Нів І1е ТПг Тук бек біу бек ТПг бек Туг Авп Рго бек Іец бо 50 пув бек Агуд Гецп ТПг І1е ТПг Акуд Авр о ТбПг бек пув Авп о біп Роре Уаї 65 70 75 80
Тецп ТПг Меє ТПг Авп Меє Авр Рго Уаі Авр ТПг Аїа ТПг Тук Тук Сув 85 90 95 55
Аза Акуд Авр Туг біу бек біу Тук Ркго Тук ТПг Іецй Авр Тугє Тер 01У 100 105 110 біп б1у ТПг ТпПг Уа1ї ТПг Уа1 бек 5ег 60 115 120
«2105 80 «2115 363 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид, що кодує МН1і МАТ до РО-1 людини «4005 80 часдєасадс Ессаддааад СдодсссадчдЕ сеЕддсдаадс саєсссадас ассдадсстд бо асеЕєдсасся ЕдадеЕддсеЕє сессаєссса аасдассасу сссддааєсд даєссаддсад 120 ссесссддсба аадддссдда дсддасєсддес сасаєсасає асадсддсесес сасаєсатає 180 ааєсссадеЕс ЕЄдаададсс ЕЄсЕсассаєсс асссдсдаса ссадсаадаа ссадесессдєс 240 сєдассаєда ссаасасдда ссссдсддає асгсдсаасає астасрєдедс єсдадаєтає Зоо даЕЕССЯЧЕС асссеЕвсасас асесдассас сддодасадуда даассассдЕ дассдеЕдадс 360 сс 363 «2105 81 «2115» 106 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен МІ із МІ11 МАТ до РО-1 людини 1 «4005 81 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Уаі1ї бек Рго 01Уу 1 2 10 15 біш Ггув Маї ТПг Іїе ТПг Сув Бек Аза ТПг бек Іїе Уаї бек Тук Уаї 20 25 30
Тук Тер Тук біп біп Гуз Рго сб1у біп Аїа Рго біп Рго Ге І1е Туг 35 40 45
Тецп ТПг бек Авп Геш Аїа бек с1іу Іїе Рго Аіїа Акуд Ріе бек сбіу бег 50 З бо бі1у бек б1у ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Іїе Бек бек Гей біц Аїа с1ц 65 70 75 80
Авр Аза Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Тгр бек Авр Авп Рго Тук ТЕПг 85 90 95
Рпе сіу біу біу ТПг Гув Уаї сбіц І11е Гув 100 105 «2105 82 «2115» 318 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність бо «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МІ1 МАТ до РО-1 людини 1
«4005 82 чаааєсдеєс єдасссадад сссадсаасс сЕдЕСсСЕдЕсСЕ сссссудада аааддесасс бо асстасссуусс седстассеєс саєсдєдесЕсс сасоуасдрасеЕ ддсаєсадса даадсссдадЧе 120 саддсссссс адссассдає асассєсдасс адсаасстдд сЕсСсСтсддрає сссадсессде 180
ЄЕЄЕєсСсоодва дсододдеЕссоод дасеєчдчасссс ассссдасса сСсадсесссе оддаддасадаа 240 часдссдсса ссраєвсаєєд єсаасадсдуд Ссадасааєсєс сасбсасасеЕсс сддсдоддегддас Зоо ассааадесд ааагааад 318 «2105 83 «2115» 116 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(116) «223» Домен МН МАТ до РО-1 2 «4005 83
Авр Уа1 сіп Гец Уаі біц бек біу сбіу б1у Іїейп Уаі сіп Рго с01у ЩУ 1 2 10 15
Зо зек Акад Пув Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе Уаі! РрПе бек бек РіПе 20 25 30 сбі1у Меє Нів Тер Уаі Агуд сбіп Аза Рго бій пув сіу Гец біц Тгр Уаї
З5
Аза Тук І1їе бек бек біу бек Мес бек І1е бек Туг Аза Авр ТПг Уаї
З бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Уаі1і ТПг Агуд Авр Авп Аїа пуб Ап о ТБПг Іецй РБПе 40 65 70 75 80
Тецп біп Меє ТПг бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа І1е Тук Тук Сув 85 90 95 45 А1а бек Гей бек Авр Тук Рпе Авр Туг Тгр бі1у сбіп с1у ТПг ТБг ТІецй 100 105 110
ТПг Уаї бек 5ег 115 50 «2105 84 «2115» 348 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(348) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 2 60 «4005 84 чаєдеЕдсадс ЕсдсодадеЕС Сододддадоас Сгадсдсадс ссддаддЧчдеЕєс ссддааасьс бо
ЕссеЕдеЕдсад ссеЕСЄдЧдаєє счеєссесаде адсеЕссддаа Єдсасєдададс Єсоассадасе 120 ссадачаадуд ддсеЕддачсд ддссосаєас ассадсадед дсадеаєдад сарсссстає 180 чдсадасасад Єдаадддссд аєєсассдсс ассададаса асбдссаадаа сасссудесєсс 240 ссдсаааєда ссадсссаад дсссдаддас асддссаєєе аєстаседедс ассссодаде Зоо частасеЕсєвд ассаседудду ссааддсасс асссссасад ЄсЕссьссо 348 «2105 85 «2115 5 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 2 «4005 85 зек Рпе сіу Меє Нів 1 2 «2105 986 «2115 17
Зо «2125 РЕВТ «213» Мив шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
З5 «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 2 «4005 86
ТУуУкг Іїе бек бек біу бек Меє бек Іїе бек Туг Аза Авр ТПкг Уаї Гув 1 2 10 15 о1у «2105 87 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 2 «4005 87
Тецп бек Авр Тук Рпе Авр Туг 1 2 бо «2105 88
«2115 112 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(112) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 2 «4005 88
Авр Уа1 Уаї Меєсє бек біп ТПг Ркго Іїец бек Тецйп Рго Уаі Бек Ге 0Щ1У 1 2 10 15
Авр біп Аїа бек І1е бек Сув Акуд бек бек біп бек Гей Уаї Нів 5бег
ТпПкЕ б1у Авп ТПг Тук Гец Нів Тер Тук Гец біп Гув Рго б1у біп 5ег 20
Ркго пув Пец ІТец І1е Туг Агуд Уаі бек АвБп Агкуд Рпе бек сіу Уа1і Рго
З бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 25 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Іїец біу Маі Рпе Рпе Сув Бек біп ТЕГ 85 90 95
Зо ТПЕ Нів УМа1ї Ркго Тер ТПг Рпе сіу сіу с1у ТБг Гув Геп бі І1е Туз 100 105 110 «2105 89 «211» 336 35 «2125» ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге 40 «2225 (1)..1336) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 2 «4005 89 чаєдеЕєдеЕда єдЕсСссааас єссасеЕсьсс сеЕдсстдЕСса дЕСЕєддада ссаадссьсс бо 45 аєсеЕСсСЕєдса даєстадеса дадссеЕрдеЕ сасадрасьд дааасасста єЕегасаєв9ао 120
Бассеєдсада адссаддсса деЕсСЕєСсСсааад сЕССЄДдаєсеі асададдеЕсєсс саассцдчасесс 180 50 ЕСсЕоддддЕСсСсС ссдасаддеє садсддсадеЕ ддаєсадода садареєссас асесаадаєсс 240 адеачадеду аддсеєдЧчадчда єСсСЕЧдддадеЕсє єеЕсеЕЕеЕСЕЧдСсСЕ сеЕСааастас асаєдеЕсссдх Зоо бддасЯдєссд дЕддаддсас саадседдаа ассааа 336 «2105 90 «2115 16 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив 60 «2205
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 2 «4005 90
Акуд Бек бек біп бек Іец Уа! Нів Бек ТПг б1у АБп ТПг Тук ГІецй Нів 1 5 10 15 «2105 91 «2115 7 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 2 «4005 191
Агуд Уа1 Бек Авп Агд Робе 5ег 1 5 «2105 192 «2115 9 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5
Зо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 2 «4005 92 зек біп ТПг ТПг Нів Уаї Рго Тгр ТЕПг 1 5 «2105 93 «211» 116 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МН із МН1іІ МАТ до РО-1 людини 2 «4005 93 сій Маї біп Гецп Уаі сій бек сі1у сбіу сб1у Геп Уаі сбіп Рго сб1у С01У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аїа бек б1і1у Рпе Уаі РпПе Бек бек Ріє 20 25 30 сбі1у Меє Нів Тер Уаі Агуд сіп Аза Рго сіу Ппув сіу Гец біц Тгр Уаї 35 40 45
Аза Тук І1їе бек бек біу бек Мес бек І1е бек Туг Аза Авр ТПг Уаї бо 50 З бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд ТпПг бій Авр ТБг Аїа Гец Тук Тук Сув 85 90 95
Аза бек Ггец бек Авр Тук Рпе Авр Туг Тгр б1у сбіп с1у ТПкг ТПг Уаї 100 105 110
ТПг Уаї бек 5ег 115 «2105 194 «2115» 348 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид, що кодує МН1і МАТ до РО-1 людини 2 «4005 894 чаадеєдсаає ЄдЧдЕеЕєЧададч єдаєоддсдадс ссддсдсадс саддсддаад ЄссдсоадЕсд бо
ЕссеЕдедсад саадсоадавєє єдеЕЧдЕсССадс ссСЕсссодда сСдсаєссдддаєс дсдссаддсе 120 сссддсаадд дЕсссдадсд ддсадсагас ассессадсуд ддессаєрдеЕс гбаєсадетає 180 дссдасасад Єдаааддсад дЕЄсассаєс ссссдєдаса асбдсаааааа сасассдгас 240
Зо сЕдсаааєда асадссдсуд сассдаддас ассудссеЕсдЕ ж асрассдсдс ЕЄсСсседессяе 300 чаєтасессд ассаседудду Есадддсаса асеЕдеЕдасад сєЕссСЕссс 348 «2105 195
З5 «2115 112 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» 40 «223» Домен МІ із МІ1 МАТ до РО-1 людини 2 «4005 95
Авр Уа1 Уаї Меєсє ТПг біп бек Рго Іїец бек ІГецйп Рго Уаі ТПг Гей 0Щ1У 45 1 2 10 15 біп Рго Аїа бек Іїе Бек Сув Агуд Бек Бек біп бек Гей Уаї Нів 5ег 20 25 30 50 ТП б1у Авп ТПг Тук Гецп Нів Тгр Тук Гей сбіп Пув Рго с1іу біп 5ег
Ркго біп Гец Іїец І1е Туг Агуд Уаі бек АвБп Агкуд Рпе бек сіу Уа1і Рго
З бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уа1і сСі1у Ма1ї Тук Тук Сув Бек біп ТЕГ 60 85 90 95
ТПЕ Нів Уа1 Рго Тер ТПг Рре сіу біп сіу ТПг Гув Теп сій І1е Гув 100 105 110 «2105 96 «211» 336 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид, що кодує МІИ1 МАТ до РО-1 людини 2 «4005 96 часЧчдеєєдеЕЧда єЄдасасадес ассассдадс ссдссадсса ссссдддсса дссадссадс бо ассєссеєЧчеЕСсС додадеЕєсаса дадесседдра саєсссасад дааасасаєба Ессссаєссод 120
Бассеєдсааа аассадддса дадсссссад ссдсеєдассс асададесдесс сааєссцваєсєсс 180
ЕсЕддсодєдс садаєсоддеЕє садсоддсадс доддсЕссддса ссдасєсссас ассдааааєс 240
Есгадоддедуа аддсададда сабаддсдсс Сассассдса дссадассас ссаєбдгассс Зоо гддасЕєсвд дссааддерас баадссддаа аєссаад 336 «2105 397 «2115 125 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив
Зо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(125) «223» Домен МН МАТ до РО-1 З «4005 97 біп Маї біп Гей сбіп біп бек сі1у Аїа бій Гей Уаі Агд Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї ТБг Гей бек Сув Ппув Аїа бек сі1у Тук ТП Рпе ТПг Авр Туг 20 25 30
Уаї Мен Нів Тер Уа1 Ппув біп ТпПг Ркго Уаї Нів с1у ІТецп б1й Тгр Ше 35 40 45 сб1у ТПпг І1їе Авр Рго бій ТПг сіу с1у ТПг АТа Тук Авп біп Гув РБПе
З бо їпув б1у пув Аза Іїе гейш ТПг Аза Авр Гпув бек бек Авп ТПг Аїа Туг 50 65 70 75 80
Меє сій гей Агуд бек Гей ТПг бек бій Авр бег Аза Уа1ії Тук Тук РПе 85 90 95
ТПЕ Агд сій пув І1е ТПг ТПг І1е Уаї сій с1у ТПг Тук Тер Тук Ріе 100 105 110
Авр Уа1 Тер біу ТПг б1у ТП ТБг Уа1ї ТПг Уаї бек 5ег 115 120 125 60 «2105 198
«2115 375 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(375) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 З «4005 198 саддеЕссаас Сдсаасадсс соддддссдад ссддсдаддс ссддддсесєсс адсдасдастд бо
Есседсаадд сЕєЄсдддсва сасаєєсасе дассаєдсаа ЄдсасєдоаддЕс даадсадаса 120 ссЕЯДсддсаєсо дсседдааєд часєдддаасе асєдаєсссд ааассддедда басеєдсстас 180 ааєсадааде Єсаадддсаа ддссагбасрд аседсадаса адессессаа сасадсстас 240 аєддадсесс дсадссеєдас аєсеєдаддас ЕСЕдссудєст аєтасеЕєвас аадададаад Зоо аєсасвасда бадесададоад дасасассдд бассссодаєд сСссддддсас адддассасд 3З6о чдЕсассдєсь ссеса 375 «2105 99 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив
Зо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 З «4005 99
Авр Тук Уа1 Меє Нів 1 2 «2105 100 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 З «4005 100
ТПЕ Іїе Авр Рго біц ТПг біу с1іу ТБг Аза Туг АБп обіп Гпув Рпе Гув 1 2 10 15 у «2105 101 «2115 16 бо «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 З «4005 101 біш ув І1ї1е ТПг ТПг Іїе Уаі1 сі с1у ТпПкг Тук Тер Тук Рібе Авр Уаї 1 2 10 15 «2105 102 «2115 112 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(112) «223» Домен МУІ МАТ до РІО-1 З «4005 102
Авр Уаі1 Гей Гец ТПг біп ТП Рго Тец бек Тецйп Рго Уаі Бек їеш 0Щ1У 1 2 10 15
Авр сбіп Аза бБег І1е бек Сув Агд бек бек біп АБп Іїе Уаі1і Нів 5ег 20 25 30
Зо Авп об1іу Авр ТПг Туг Геп бій Тер Тук Гей біп пуб Рго с1у біп 5бег
Ркго Ппув Пец ІТец І1е Тук Ппув Уаі Бек АвБп Агкуд Рпе бек сіу Уа1і Рго
З бо
З5
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр їец сіу Ма1ії Тук Тук Сув Рпе сбіп 0Щ1У 40 85 90 95 зек Нів Гец Рго Тук ТПг Рпе сіу бі1у сбі1у ТПг Ппув гейш бій І1е Гув 100 105 110 45 «2105 103 «211» 336 «212» ДНК «2135 Мив шивси1ив 50 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(336) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 З «4005 103 чаєдеЕсевєдс єдасссааас єссасеЕсьсс сеЕдсстдЕСса дЕСЕєддада ссаадссьсс бо аєсеЕСсСЕєдса даєстадеса даасаєєдеа сасадесааєуд дадасасста ЄЕЄЕєддаає9во 120 бо бассєдсада аассаддсса дЕСсСсссааад ссссеєДдаєссі агааадесеєс саассчассяе 180
ЕсЕдоддудеЕсСс садасаддеє садеддсадеЕ доддеЕсаддда садареєеєвас асесааааєс 240 адсачадеду аддсеєдадчда єСЕЧдоодадееє гаєтаседсеЕ ЕЄсСааддееєс асаєстєсссд Зоо басасдєссу дадоддоддас саадсєддаа асаааа 336 «2105 104 «2115 16 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 З «4005 104
Акуд Бек бек біп АвБп о І1е Уаі! Нів бек Авп о б1і1у Авр ТПг Туг Гей с1ц 1 2 10 15 «2105 105 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7)
Зо «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 З «4005 105
Тпув УМаї Бек Авп Агуд Рпе 5ег
З5 1 2 «2105 106 «2115 9 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 З «4005 106
Рпе сіп сіу бек Нів Іецй Рго Тук ТЕПг 1 2 «2105 107 «2115» 116 «2125 РЕТ «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(116) 6о0 «223» Домен УМН МАТ до РО-1 4
«4005 107
Авр Уа1 сіп Гец Уаі біц бек біу сбіу б1у Іїейп Уаі сіп Рго с01у ЩУ 1 2 10 15 зек Агд Мпув ІТец бек Сув Аї1а Аїа бек б1і1у Рпе Уаі РпПе Бек бек Ріє 20 25 30 сбі1у Меє Нів Тер Уаі Агуд сбіп Аза Рго бій пув сіу Гец біц Тгр Уаї 35 40 45
Аза Тук І1їе бек бек біу бек Мес бек І1е бек Туг Аза Авр ТПг Уаї 50 З бо пув бі1у Акуд Рпе ТпПг Уа1! ТБг Акуд Авр АБп Аза пув Авп ТБПг Гей РБГе 65 70 75 80 теп біп Меє ТПг бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа І1е Тук Тук Сув 85 90 95
Аза бек Гецп ТПг Авр Тук Рпе Авр Туг Тгр б1у біп с1у ТПг ТпПЕг Гей 100 105 110
ТПг Уаї бек 5ег 115 «2105 108 «2115» 348 «2125 ДНК
Зо «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(348) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 4 «4005 108 чаєдеЕдсадс ЕсдЕддадеЕСсС єдоадоададдс сСсадсдсадс ссддадддес ссддааасес бо
ЕссЕдсдсад сссстуодаєе сЯогссеСадЕ адссстдддаа ЄдсассдодадЕ Есдссаддасе 120 ссададаадд дассддадсд ддссдсагає ассадсадед дсадсаєдад гаєесстає 180 чдсадасасад Єдаадддссд аєссассудрс ассададаса агрдссаадаа сассстдеес 240 ссдсаааєда ссадсссаад дсЕссдаддас асддссаєєс ассаседесдс ассстдасье Зоо частасесєвд ассаседудду ссааддсасс асєсєсасад ЕсЕссеса 348 «2105 109 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 4 60 «4005 109 зек Рпе сіу Меє Нів 1 5 «2105 110 «2115 17 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 4 «4005 110
ТУуг Іїе Бек бек сіу бек Меєсє бек І1ї1е бек Туг Аза Авр ТПг Уа1ї Гув 1 5 10 15 о1у «2105 111 «2115 7 «212» РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7)
Зо «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 4 «4005 111
Тецп ТПг Авр Тук Рпе Авр Туг
З5 1 5 «2105 112 «2115 112 «212» РЕТ 40 «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(112) 45 «223» Домен МІ МАТ до РІО-1 4 «4005 112
Авр Уа1 Уаї Меєс бек біп ТП Рго Гей бек Гей Рго Уа1і бек ГІец с1Уу 50 1 2 10 15
Авр сбіп Аза бБег І1е бек Сув Агд бек бек біп бек Гей Уаі1і Нів бег 20 25 30 55 ТПЕ б1у Ап ТПг Тук Рре Нів Тер Туг Гей біп Пув Рго сбіу сіп 5ег
Ркго Ппув Пец ІТец І1е Туг Агуд Уаі бек АвБп Агкуд Рпе бек сіу Уа1і Рго бо 60
Авр Агуд Робе бек біу бек біу Бек с1іу ТПг Авр Рпе ТПг Гей Гуз І1е
65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Іїец біу Маії Тук Рпе Сув Бек біп ТЕГ 85 90 95
ТПЕ Нів Уа1 Рго Тер ТПг Рре б1у сіу сбіу ТП Гув ІТеп сій І1е Гув 100 105 110 «2105 113 «211» 336 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щівс ТГеабиге «222» (1)..(336) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 «4005 113 чаєчЕсСдЕЧда Едссссааас СссасеЕсссс ссдсссдеЕса дЕСЕсддада Ссаадссссс бо аєсеЕСсстьдса даєстадеса дадссеЕєрдеЕ сасадрасьд дааасасста єеЕессаєв9ад 120
Бассеєдсада адссаддсса деЕсСЕєСсСсааад сЕССЄДдаєсеі асададдеЕсєсс саассцдчасесс 180
ЕсЕдоддудЕсСсС ссдасаддеє садеддсаде ддаєсаддда садареєссас асесаадаєс 240 адсачадеду аддсеєдЧдадчда єСЕдодадее ргавєєстьдсе сесааастас асаєдеЕсссд Зоо
Зо бддасдєссу деЕддаддсас саадсєддаа ассааа 336 «2105 114 «2115 16 «2125 РЕТ
З5 «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 4 «4005 114
Акуд Бек бек біп бек Іец Уа! Нів бек ТПг б1у АвБп ТПг Тугк РПе Нів 1 2 10 15 «2105 115 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 4 «4005 115
Агуд Уа1 Бек Авп Агд Робе 5ег бо 1 5
«210» 116 «2115 19 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 4 «400» 116 зек біп ТПг ТПг Нів Уаї Рго Тгр ТЕПг 1 5 «2105 117 «2115 119 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(1195) «223» Домен МН МАТ до РО-1 5 «4005 117 біп Маї біп Гей біп біп Рго сіу Уаі бій Гей Уаі Агд Рго с1у А1а 1 5 10 15
Зо зек Уаї Ппув Іїец бек Сув Гув Аїа бек біу Тук Бек Рпе ТПг Аїа Туг 20 25 30
ТЕр Меє Авп Тер Меєсє пуб біп Агуд Рго біу біп б1у Іейп бій Тгр Ше 35 40 45 сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр Бек бій ТПг Тер Гей Авп біп Гув РБПе 50 55 бо ув Авр Гпув Аза ТПг о Тїей ТПг о Уа1ї Авр Ппув бек бек бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє сбіп Гей Іїе Бек Рго ТПг Бек бій Авр бек Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Туг біу бек бек Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТП Ггецп Уаі ТіПг Уаї бек Аїа 115 «2105 118 «2115 357 «212» ДНК «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(357) 6о0 «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РІО-1 5
«4005 118 саддсссаас Сдсадсадсс сддддЕєдаа седдеЕдаддс стддадсеєс адесдаадсьд бо
Есседсаадд сЕєсЕддста сеЕсСсЕсСсасс дсссассдда Сдаассддає дааасададд 120 сссддасаад дссссдадесд дассддсудєда арссаєрссвєс ссдагсадеєда аасеЕєсддета 180 ааєсадааде Єсааддасаа ддссасаєссд ассдсадаса аассссссад сасадсстас 240 асдсаасеєса Есадсссдас аєссдаддас СсеЕдсдЧаєсЕ астассдедс аадададсас Зоо
Басоддеєадва дсссдЕсвсдс Еєсасеєддддс саадддассс сддссассдс ссссдса 357 «2105 119 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 5 «4005 119
Аза Тукг Тер Меє Авп 1 2 «2105 120
Зо «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205
З5 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 5 «4005 120
Уаї Іїе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тер Гей Авп біп Гуз РпПе Гу 1 2 10 15
Авр «2105 121 «2115 10 «2125 РЕТ «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(10) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 5 «4005 121 бі Нів Тук сіу Бек бек Рго Рпе Аїа Туг 60 1 2 10
«2105 122 «2115 111 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(111) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 5 «4005 122
Авр І1е Уаї Гецш ТПг біп бек Рго Аїа бек ІТейп Аїа Уаі бек їеш Ш0Щ1У 1 2 10 15 біп Агуд Аза ТПг о І1їе Бек Сув Агуд Аза Ап біц бек Уаї Авр Авп Туг бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 20 35 40 45 ув Теп Гей Іїе Туг Аїа Аза Бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго А1а 50 З бо 25 Агуд Рпе бек біу бек сіу бек б1у ТПг Авр Рібе бег Гей АвБп І1е Нів 65 70 75 80
Ркго Меє біц біц Авр Авр ТПг Аза Меє Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95
Зо бі Маї Рго Тує ТПг Рпе сіу сіу с1і1у ТПкг Ппув Гец біц І1е Гув 100 105 110 «2105 123
З5 «2115 333 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щівс ТГеабиге «222» (1)..(333) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 5 «4005 123 часаєсдеЕдс Едасссааєс СссадсеЕссеЕ єсодссдЕдс сЕССадддса дадддссасс бо аєсеЕсСстьдса дадссаасдда аадеЕдеЕєдЧдає ааєтаєдодаса єдадеЕееєвтає даастЕдуєес 120 саасадааас саддасадсс асссааассс сссаєсєсстаєд ссдсаєссаа ссааддаєсс 180 чададЕсСссвд ссаддеЕєсад єддсадедоад Єссдоадасадч ассссадссо саасаєссає 240 сссбасддадд аддаєдасас сСдсаасдсрає ссссдссадс ааадсаадда ддЕсссдерас Зоо асдЕєсддад доадодассаа дсеЕддаааса ааа 333 «2105 124 «2115 15 «2125 РЕТ 60 «2135 Мив штивси1ив5
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(15) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 5 «4005 124
Акуд Аза Авп обіц бек Уаі Авр Авп Туг біу Меє бек Рпе Меє Авп 1 5 10 15 «2105 125 «2115 7 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 5 «4005 125
Аза Аїа бек Авп біп сіу б5ег 1 5 «2105» 126 «2115 9 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5
Зо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 5
З5 «400» 126 біп біп бек пув бі Уа1і Рго Тугє ТПг 1 5 «2105 127 «211» 118 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(118) «223» Домен МН МАТ до РІО-1 6 «4005 127 бі Маї Гув Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі Авп Рго сі1у с1У 1 5 10 15 зек Гей пуб ІТец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ррпе Бек бек Туг 20 25 30 сбі1у Меє бек Тгр Уаі Агуд сбіп ТПг Рго бі пув Агд Гей біц Тгр Уаї бо 35 40 45
Аза ТПг І1їе бек біу б1у біу Бек Авр ТПг Тук Тук Рго Авр бек Уаї 50 З бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Ап Ап Тец Туг 65 70 75 80
Тецп біп Меє бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Гец Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд сбіп Туз Аїа ТПг ТпПс Тер Рпе Аїа Туг Тер с1у сіп с1у ТЕГ 100 105 110
Тен Ма! ТПг Уаї бек ТЕГ 115 «2105 128 «2115 333 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(333) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 6 «4005 128 чаааєсдбас єсасссадеЕс ассеєдсаасс сЕссссссда дссссоддесда асдсдссасео бо сесадссдса дадсаадсда дадсдсддас аассасддса гдЕСсСЕссає даастодеЕее 120
Зо садсадаадс ссдддсадсс асссаадсрд сссаєссасуд ссдссестаа ссдсддаєсе 180 чЧадЧдєдссеЕе сасЧчеЕєеєееєс єддаєсадда адесддсасьд асеЕссассс гасааєсадс 240
ЕСсСЕСєдддадс сададчасеє СдссдЕєССсТає сЕССдссадс ааєссааада дасдссстає Зоо асЕвЕєсдаед дсдуддассаа ддєєдадаєс ааа 333 «2105 129 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 6 «4005 129 зек Тук біу Меє 5ег 1 2 «2105 130 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 60 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17)
«223» СОВН2 МАТ до РО-1 6 «4005 130
ТПгЕ Іїе бек с1у біу сбі1у Бек Авр ТПг Тук Тук Рго Авр бек Уаї Тув 1 5 10 15 о1у «2105 131 «2115 9 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 6 «4005 131 біп гув Аза ТПг ТпПс Тер Рпе Азїа Туг 1 5 «2105 132 «2115 111 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив
Зо «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(111) «223» Домен МІ МАТ до РІО-1 6
З5 «4005 132
Авр І1ї1е Уаї Гецш ТПг біп бек Рго Аза бек Гей Аїа Уа1 бек Іец с01Уу 1 5 10 15 біп Агуд Аза ТПг о І1їе Бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 сб1у І1е бек Рпе Меє Ап Тер Ропе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 35 40 45 ув Тецп Гей Іїе Туг Рго Аїа Бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго А1а бо 50 Агуд Рпе бек біу бек сіу бек с1у ТПг Авр Рібе бег Гей АвБп І1е Нів 65 70 75 80
Ркго Меє біц біц Авр Авр Аза Аза Меє Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 55 бі Маї Рго Тер ТПг Рпе сіу сіу с1і1у ТПкг Ппув Гец біц І1е Гув 100 105 110 «2105 133 60 «2115 333 «212» ДНК
«2135 Мив шивси1ив «221» щшівс Теаєбиге «2225 (1)..1333) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 6 «4005 133 часаєєдеЕдс єдасссааєс ЕссадсеЕсєсеЕ ЕєЧдУдсСЕЧдЕдЕ сЕСтадддса дадддссасс бо аєсеЕСсСстьдса дадссадсда аадеЕдеЕєдЧдає ааєтаєддаса єсадеЕевтає даастЕдуєес 120 саасадааас саддасадсс асссааассс сссаєсстаєс ссдсаєссаа ссааддаєсс 180 чададЕєсСссед ссаддеєссад сСодсадедоад Єседоодасад ассссадссе саасаєссає 240 сссбасддадд аддаєдаєсдс сСдсаасдсрає ссссдссадс ааадсаадда ддЕсссдасдд Зоо асдЕєсддеЕд даддсассаа дсеЕддаааєс ааа 333 «2105 134 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(15) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 6
Зо «4005 134
Акуд Аза бек біц бек Уаі Авр Авп Тук б1у І1їе Бек Рпе Меє Авп 1 2 10 15 «2105 135 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВБІ2 МАТ до РО-1 6 «4005 135
Рго Аїа бБег АБп біп с1і1у 5бег 1 2 «2105 136 «2115 139 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 6 бо «4005 136 біп біп бек пув бі Уа1і Рго Тер ТПпг 1 2 «2105 137 «2115 119 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(119) «223» Домен МН МАТ до РО-1 7 «4005 137 біп Маї біп Гей сбіп біп Рго сі1іу Аїа бій Гей Уаі Агд Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Гей бек Сув Ппув Аїа бек біу Тук Бек Рпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє Авп Тер Уаї пув біп Агуд Рго біу біп б1у Іейп бій Тгр Ше 35 40 45 сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр Бек бій ТПг Тер Гей Авр біп Тув РБПе 50 З бо
Тув Авр Гув Аїа ТПг Гей ТПг Уа1і Авр Гпув бек бек ТПг ТПг Аїа Туг
Зо 65 70 75 80
Меє сбіп Гей Іїе Бек Рго ТПг Бек бій Авр бек Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд сій Нів Тук с1іу ТпПкК Бек Рго Робе Аїа Туг Тгр с1у сбіп с1Уу 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115 «2105 138 «2115 357 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(357) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 7 «4005 138 чаддеЕссаас ЕЄдсадсадсс єдоаддоассдаа ссддсдаддс ссддадсеєссс адсдаадссд бо
Есседсаадд сЕєсЕддста сеЕСсСЕсСсасс адссассдда Сдаассдоадс даадсададд 120 сссддасаад дссссдадесд дассддсудєда арссаєрссвєс ссдагсадеєда аасеЕєсддета 180 чаєсадааде Єсааддасаа ддссасассд ассдсадаса аасссосссас сасадсстас 240 бо асдсаасеєса Есадсссдас аєссдаддас СсеЕдсдЧаєсЕ астассдедс аадддадсас Зоо
Басоддеасва дсссЯдєсєсдс єсасеєдоадддс саадддассіс сддесасьдес дЕсессс 357 «2105 139 «2115 5 «2125 РЕВТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 7 «4005 139 зек Тук Тер Меє Авп 1 2 «2105 140 «2115 17 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 7 «4005 140
Зо Уаї І1е Нів Рго бек Авр бек бій ТПг Тер Гей Авр біп Гуз Роре Був 1 2 10 15
Авр
З5 «210» 141 «2115 10 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(10) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 7 «400» 141 бі Нів Тук с1у ТПг Бек Рго Рпе Аїа Туг 1 2 10 «2105 142 «2115 111 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(111) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 7 60 «4005 142
Авр І1е Уаї Гецш ТПг біп бек Рго Аїа бек ІТейп Аїа Уаі бек їеш Ш0Щ1У 1 2 10 15 сіп Агкуд Аїа ТПг о Іїе бек Сув Агуд А1ї1а АБп о біц бек Уа1і Авр АквБп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго А1а 50 З бо
Акуд Рпе бек біу бек біу Рпе сіу ТПг Авр Ррпе бек Гей АБп І1е Нів 65 70 75 80
Ркго Меє біц біц Авр Авр Аза Аза Меє Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 сі Маї Рго Тук ТПг Рбе сіу сіу сбі1у ТПЕ Ппув Гей біц І1е Гув 100 105 110 «2105 143 «2115 333 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге
Зо «2225 (1)..1333) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 7 «4005 143 часаєєдеЕдс єдасссааєс ЕссадсеЕсєсеЕ ЕєЧдУдсСЕЧдЕдЕ сЕСтадддса дадддссасс бо
З5 аєсеЕсСстьдса дадссаасдда аадеЕдеЕєдЧдає ааєтаєдодаса єдадеЕееєвтає даастЕдуєес 120 саасадааас саддасадсс асссааассс сссасссаєбд ссдсаєссаа ссааддаєсс 180 чададєсСссед ссаддеєссад сСодсадедоад ЄСеддоодасад ассссадссе саасаєссає 240 сссбасддадд аддаєдаєсдс сдсаасдсрає ссссдссадс ааадсаадда ддЕсссдерас Зоо асдЕєсддад доадоддассаа дсеЕддаааса ааа 333 «2105 144 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(15) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 7 «4005 144
Акуд Аза Авп обіц бек Уаі Авр Авп Тук біу Меє бек Рпе Меє Авп 1 2 10 15 60 «2105 145
«2115 7 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 7 «4005» 145
Аза Аїа бек Авп біп сіу б5ег 1 5 «210» 146 «2115 9 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 7 «400» 146 біп біп бек пув бі Уа1і Рго Тугє ТПг 1 5
Зо «2105 147 «2115 119 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МН із МН1іІ МАТ до РО-1 людини 7 «4005 147 сіп Уаії біп Гецп Уаії сіп бек бі1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Гув Рго с1у Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє Авп Тер Уаі Агуд біп Аза Рго сбіу біп сб1у Іейп бій Тгр Ше 35 40 45 сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр Бек бій ТПг Тер Гей Авр біп Тув РБПе 50 З бо
Тув Авр Агуд Уа1і ТПг Іїе ТПг Уа1і Авр Гпув Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Те Агуд бек біц Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110 60
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег
«2105 148 «2115 357 «2125» ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид, що кодує МН1і МАТ до РО-1 людини 7 «4005 148 саадсссаасє сСддсасадад сддддсадад деЕдаадааас ссддсдссад ЄдЕсааддаєд бо
Есседсааад ссадсоддеЕса садсеЕссаса адссаєссода Сдаассдддас дсдссаадса 120 ссадддсадд дЕСссддааєсд дассдододдед асасарссес седасадсда аасаєсдчєвд 180 чассадааає Єсааадаєсд ЄдеЕЧдасааєсс асадссдаса адсссасаад саседсесас 240 асдчаасеЕсс ссадсесдсу дЕСсСдаддас ассдседсдЕ астаєссдсудсес садададсас Зоо
Басддсасає сассЕсєеєвсєдс аєасеєддддсес садддаассіс сСсдсаассудє асссосс 357 «2105 149 «2115 119 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен УН із МН2 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 149 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
Тер Меє Авп Тгр Уаі! Агуд сбіп Азїа Рго сіу сбіп с1у Іеп біц Тер Аїа 35 40 45 сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр Бек бій ТПг Тер Гей Авр біп Тув РБПе 50 З бо
Тув Авр Агуд Уа1і ТПг Іїе ТПг Уа1і Авр Гпув Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115 «2105 150 «2115 357 6о0 «2125» ДНК «2135 Штучна послідовність
«223» Полінуклеотид, що кодує МН2 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 150 саадсссаасє сСддсасадад сддддсадад дедаадааас ссддсдссад ЕДдЕсаадчаєд бо
Есседсааад ссадсоддеЕса садсеЕссаса адссаєссода Сдаассдддас дсдссаадса 120 ссадддсаду дЕсСЕддааєд доассддодЧчаєд асасаєссьтє сеЕдасадсда аасаєсддЧвЕєд 180 чассадааає Єсааадаєсд ЄдеЕЧдасааєсс асадссдаса адсссасаад саседсесас 240 аєддаасесеЕ ссадсеєєсдсу дЕССсСЯдаддас ассдссдсдс ассассдсдес садададсас Зоо
Басддсасає сассЕєеєвеєдс агаседдддс садддаасес Есдраассюр арссесс 357 «2105 151 «2115 111 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен Мі із МІ1 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 151 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15
Зо бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Ап бій бек Уаї Авр Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго
З5 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 50 З бо
Агуд Рпе бек біу бек сіу бек б1іу ТПг Авр Робе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 біц Маї Рго Тує ТПг Рпе сіу сіу с1і1у ТПг Ппув Уаії сіц І1е Гув 100 105 110 «2105 152 «2115 333 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МІИ1 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 152 чаааєсдбрас єсасссадеЕс ассеєдсаасс сЕссссссда дссссддеЕда асасдссасе бо бо сЕсадсеєдса дадсаааєда дчадеЕдчсодас аассасддса ЕдсссеЕссає даассодеЕсе 120 садсадаадс ссдддсадсс ассгаадссд сссаєссасу ссдссессаа ссадддчассе 180
ЧадЧдєЄдссеЕЄ сасЧчеЕєеееєс єддаєсадда адсддсассд ассссасссо гбасааєссадс 240
ЕСсСЕСєдддадс сададчасеє Сдссудєсстає сЕССдссадс ааєссааада дасдссстає Зоо асЕвЕєсдаед дсдуддассаа ддєєдадаєс ааа 333 «2105 153 «2115 111 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен МІ із М12 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 153 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Пув5 Рго с1у біп Рго Рго ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег
З бо
Зо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув
З5 85 90 95 бі Маї Рго Тує ТПг Рпе сіу сіу с1і1у ТПкг Ппув Уаії сбіц І11е Гув 100 105 110 40 «2105 154 «2115 333 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність 45 «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МІ2 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 154 чаааєсдбас єсасссадеЕс ассеєдсаасс сЕссссссда дссссоддесда асдсдссасео бо 50 сесадссдса дадсаадсда дадсдсддас аассасддса гдЕСсСЕссає даастодеЕее 120 садсадаадс ссдддсадсс асссаадсврд сссаєссасуд ссдссеєстаа ссаддадаєсе 180 чЧадаєдссЕС сасчєессеєс содаєссадда адеддсассдд асеЕєсасссс гасааєсадес 240
ЕсЕСєддадс сададдасеє єдссоассстає ссссдссадс аасссааада ддсдссстає Зоо асЕвЕєсдаед дсдуддассаа ддєєдадаєс ааа 333 бо «2105 155
«2115 111 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МІ із МІЗ3 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 155 січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго Аїа ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Акуд Аїа бек біц бек Уаі Авр Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп Агуд сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 50 З бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гей бій Рго б1іп Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 бі Маї Рго Тує ТПг Рпе сіу сіу с1і1у ТПкг Ппув Уаії сбіц І11е Гув 100 105 110
Зо «2105 156 «2115 333 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
З5 «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МІЗ3 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 156 чаааєсдбрас ЕсасссадеЕс асссдсаасс сЕЄсСсСЕСсда дссссдоддеЕда асдесдссасе бо сесадссдса дадсаадсда дадсдсддас аассасддса гдЕССЕЄСає даассоддеЕсес 120 садсадаадс ссдддсадсс асссаадсрд сссаєссасуд ссдссестаа ссдсддаєсе 180
ЧадЧдєЄдссеЕЄ сасЧчеЕєеееєс єддаєсадда адсддсассд ассссасссо гбасааєссадс 240
ЕсЕСєддадс сададдасеє єдссоассстає ссссдссадс аасссааада ддсдссстає Зоо асЕсесддед дсдддассаа ддЕєдадаєс ааа 333 «2105 157 «2115 15 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» СОВІ1 домену Мі із М102 МАТ до РО-1 людини 7 і МІЗ3 МАТ до РО-1 людини 7 60 «4005 157
Акуд Аза бек біц бек УМаі Авр Авп Тук сіу Меє бек Ріе Меє Авп 1 5 10 15 «2105 158 «2115 7 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» СОВІ2 домену Мі із МІЗ3 МАТ до РО-1 людини 7 «4005 158
А1а Аїа бек Авп Агуд с1у 5ег 1 5 «2105 159 «2115 113 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(113) «223» Домен МН МАТ до РО-1 8 «4005 159
Зо сі б1і1у біп Гецп сіп біп бек б1іу Рго біш Гецп Уаї Гуз Рго с1у Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув І1е бек Сув Гув Аїа бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авр Туг 20 25 30
З5
Тук Меє Авп Тер Уаї пув біп Авп Нів біу пуб бек ІТепй б1й Тгр Ше б1у Авр І1е Авп Рго Пув Авп о сб1іу Авр ТПг Нів Тукг Авп біп Гув РБПе 40 50 55 бо пув б1у бій Аза ТПг Гей ТпПг Уа1і Авр Гпув бек бек ТПг ТПг Аїа Туг 65 70 75 80 45 Меє бій Ггецп Агуд бек Тей ТПг бек бі Авр бек Аїа Уа1! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Бек Авр Рбе Авр Туг Тгр біу біп б1у ТПг ТПг Гей ТПг Уа1ї! 5ег 100 105 110 зег «2105» 160 «2115 339 «212» ДНК «213» Мив шивси1и5 «2205 60 «221» щтівс Геабиге «222» (1)..(339)
«223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 8 «4005 160 чадддссадс Єдсаасааєс Єддассєдад седадєдаадс седаддасЕсс адсдаачаєа бо
ЕссеЕЧдеаадд сЕсєстддава сасудеєєсасе дасрасраса єдааседддЕ даадсадаас 120 саєсддааада дссссдадсд дассддадає ассааєсєссста аааасддбда сасссастас 180 аассадаадс Есаадддсда ддссасаєссд аседсадаса адсссеєссас сасадссстас 240 аєддадсесс дсадссєдас аєсєдаддас ЄссдсадеЕсс ассаседедс дадсчасесссес Зоо часврасєддд дссааддсас сасеєсссаса дЕсСЕссесес 339 «2105 161 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 8 «4005 161
Авр Тук Тук Меє Авп 1 2
Зо «2105 162 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 8 «4005 162
Авр І1е Авп о Рго пуб Авп обіу Авр ТПг Ні Туг АвБп обіп Гпув Рпе Гув 1 2 10 15 о1у «2105 163 «2115 4 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(4) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 8 «4005 163 бо
Авр Ріпе Авр Туг
«2105 164 «2115 112 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(112) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 8 «4005 164
Авр Уаї Уаї Меє ТПг сбіп ТПг Рго Гей бек Гей Рго Уаї с1у Іеч 01Уу 1 2 10 15
Авр сбіп Аза бБег І1е бек Сув Агд бек бек біп ТПг Гей Уа1і Тук 5ег 20
Авп ос1іу Авп о ТБПг Туг Тец АвБп Тер Робе ІТецй біп Гпув Рго сбіу біп бег
Ркго Ппув Пец ІТец І1е Тук Ппув Уаі Бек АвБп Агкуд Рпе бек сіу Уа1і Рго 25 50 З бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80
Зо зек Акад Уаі! бій Аї1а бій Ар Гей сіу Ма1 Тук Рре Сув бек біп 5ег 85 90 95
ТПЕ Нів Уа1 Ркго Рбе ТПг Рре сіу бек біу ТПгЕ Гув ІТеп бій І1їе Гув 100 105 110
З5 «2105 165 «211» 336 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив 40 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(336) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 8 45 «4005 165 чаєдеЕєдеЕда єдасссааас єссасеЕсьсс сЕдсстдЕсуд дЕСЕсдддада ссаадссьсс бо аєсЕСсСЕєдса даєстадеса дасссеЕєднта гасадсааєд дааасасста єЕЄгаааєв9во 120
БбЕсседсада адссаддсса деЕСсСЕСсСсааад сЕССЄДдаєсеі асааадеесс саассцачасесс 180
ЕсЕдоддудеЕсСс садасаддеє садеддсаде ддаєсаддда садареєссас асесаадаєс 240 адсачадеду аддсеЕЧчадда СсеЕдддадсеє сасрсєєсєстдсс сесааадсас асаєсдеєсса Зоо бЕСсасдєсєсд дсєсодддадас ааадесєддаа асаааа 336 «210» 166 60 «2115 16 «2125 РЕТ
«213» Мив шивси1и5 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 8 «4005 166
Агдуд бек бек біп ТПг Гецп Уа1і Тук бек Авп б1іу АБп ТПг Туг ТІечй Авп 1 5 10 15 «2105 167 «2115 7 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 8 «4005 167 пув Маї Бек Авп Акуд Рібе 5ег 1 5 «2105» 168 «2115 19
Зо «2125 РЕВТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
З5 «222» (1)..(8) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 8 «4005» 168 зек біп бек ТПг Нів Уаї Рго Рпе ТЕПг 1 5 «210» 169 «2115 119 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(1195) «223» Домен МН МАТ до РО-1 9 «4005 169 сі Уаї Месє Гей Уаї бій бек біу с1іу с1у Гей УМаї Ппув5 Рго с1у с1Уу 1 5 10 15 зек Гей пуб ІТец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ррпе Бек бек Туг 20 25 30 60
Тец Маї бек Тер Уаі Агу біп ТБбг Рго біц їГубв Агд ІТеп бій Тгр Уаї
35 40 45
Аза ТПг І1їе бек біу б1у бі1у б1у Авп ТПг Туг Туг Бек Авр бек Уаї 50 З бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр АвБп Аза Тув АБп о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп І1їе бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Гец Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд Тук біу Рпбе Авр б1у Аза Тгр Рпбе Аз1а Туг Тгр ОШ1Уу біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115 «2105 170 «2115 357 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» щшівс Теаєбиге «2225 (1)..(357) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 9 «4005 170 чаадеєчаєдс єдадеЕддадеЕсС єдоадоададдс СсСсадсдаадс ссддадддеЕс ссеєдааасес бо
Зо
ЕссеЕдедсад ссессуддасе сасеЕеєссаде адстаєсьвсуд ЕдЕСЕвдоадЕ Есдссадасе 120 ссддадаада дассддадсд ддссдсаасс ассадсодесд дсддсддсаа сасстастає 180
Есадасадед Едаадоддссу асесассаєс сСссададаса асдссаадаа сасссеєдбсас 240 ссдсаааєса дсадсссдад дсЕссдаддас асддсесеЕєсдеЕ ассасеєдесдс ааддтаєсодЧве Зоо
ЕЕєСсСдасуддсуд ссЕддЕсєедс Егаседдддс саадддассс Сддессасьде сЕсьесс 357 «2105 171 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 9 «4005 171 зек Тук Гец Уаї 5ег 1 2 «2105 172 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив 60 «2205
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 9 «4005 172
ТПгЕ Іїе Бек сіу сіу біу б1у Авп ТПг Тук Тук бек Авр Бек Уа1ї! Гув 1 5 10 15
Ку «2105 173 «2115 10 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(10) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 9 «4005 173
Тук б1у Рпе Авр б1у Аї1а Тер Рпбе Аїа Туг 1 5 10 «2105 174 «2115 107
Зо «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
З5 «222» (1)..(107) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 9 «4005 174 40 Авр чІ1е сіп Меє ТПг сбіп бек Рго Аїа бек ІТей бек Аїа бек Уа1і с1Уу 1 5 10 15
Авр І1ї1е Уаї ТПг І1е ТПг Сув Агуд Аїа бек бій АБп І1е Тук бек Туг 20 25 30 45
Тец А1їа Тер Тук біп біп пув біп бій Ппув бек Рго біп Гец Іец Уаї
Тук Авп Аза пуб ТПг Іец Азї1а Аїа сіу Уаі Ркго Бек Акд Ріе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг біп Рпе бек Іїецйп ТПг І1їе Авп Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 сій Авр Рпе б1іу Авп Туг Тук Сув біп Нів Нів Туг Аїа Уаї Рго Ткгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу сіу ТБг Агд Гей сбіц І1е ТЕг 100 105 60 «2105 175
«2115 321 «2125 ДНК «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(321) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 9 «4005 175 часаєссада Єдасеєсадес Ессадссеєсс стаєсьєдсає сеЕдеЕдоддада гаєрєдесасес бо аєсасаєдеЕсС дадсаадеда даасгаєєвсас адевтаєєвсад саєддраєса дсадааасад 120 чаааваєсеєс сеЕСадссссЕ додєссаєаає дсааааассо гддсадсадд СдЕеЕдссаєса 180 аддеЕєсадед дсадеддаєс аддсасасад ЄЕСссСЕеЕсСЄда ссаєсаасад ссєдсадссе 240 чаачаєєєвєд ддааєсаєса седесадсає саєсаєдсся Єсссоаєсодас Ядесссоадсова Зоо чдодасассадас Єддаазаєсас а 321 «2105 176 «2115 11 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
Зо «2225 (1)..(11) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 9 «4005 176
Агуд Аза бек бій АБп І1е Тук бек Туг Іец А1а 1 2 10 «2105 177 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 9 «4005 177
АБп Аїа пув ТіПг Тей Аза Аїа 1 2 «2105 178 «2115 139 «2125 РЕВТ «213» Мив шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ 60 «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 9
«4005 178 біп Нів Нів Туг Аза Уаі1і Рго Тер ТПпг 1 2 «2105 179 «2115 119 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МН із МН1 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 179 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі Агд Рго сі1у с1У 1 2 10 15 зек Гпечп пув Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Тец Маї бек Тгр Уаі Агуд сіп Аза Рго сіу Ппув сіу Гец біц Тгр Уаї 35 40 45
Аза ТПг І1їе бек біу б1у бі1у б1у Авп ТПг Туг Туг Бек Авр бек Уаї 50 З бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп бекг Іец Туг
Зо 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа ТПг Тук Тук Сув 85 90 95
А1а Агуд Тук біу Рпбе Авр с1іу Аїа Тер Рбе Аїа Туг Тгр с1у сбіп 01Уу 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115 «2105 180 «2115 357 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МН1і МАТ до РО-1 людини 9 «4005 180 чадаєдсадс гдодсодааач Сододддасдодс сеЕддсдсдас ссододддаад ЕСсСдааасьд бо
ЕссеЕдедсад саєсаддаєє сасеЕєсссса ссесаєсєсссдя сДдсЕсссддуасє аадасаадса 120 сссддаааад дсссддаасд ддсддссасе ассессоддбд даддесддсаа сасстастає 180 адсдасадед єсаадоддаад аєєсассаєс адссдсдаса асдссаадаа Сбадссгдгас 240 ссссадаєда ассссссдсд сдссдаддас ассдссасст асстасеєдесдс асддстаєддва Зоо бо ЕсеЧдасоодсду сасдуєссддс стассододдда садддсасає гддсаассує бадсесс 357
«2105 181 «2115 119 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен МН із МН2 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 181 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек с1у сі1у с1у гейш Аза Агд Рго сіу с1У 1 2 10 15 зек Гей пуб ІТец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ррпе Бек бек Туг
Тец Маї с1у ТЕр Уаі Агуд сбіп Аза Рго с1і1у Ппув сіу Гей біц Тгр Тс 20 А1їа ТПг І1їе бек сб1у сіу с1у б1у Авп ТПг Туг Тук бек Авр бек Уаї
З бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп бекг Іец Туг 65 70 75 80 25
Тец біп Меє Авп бБег Аза Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа ТПг Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд Тук біу Робе Авр б1у Аїа Тгр Рпбе Азї1а Туг Тгр 01у сбіп 01У
Зо 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115
З5 «2105 182 «2115 357 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність 40 «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МН2 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 182 чададєдсадс єдЧдеЕддааадч єдоадоадсоддс ссддсдсдас ссодддддаад Єссдааасстд бо 45
ЕссеЕдедсад саєсаддаєє сасеЕєсссса ссесаєссссдя сдддссдддс аадасаадса 120 сссддаааад дсссддаасд дасддссасе ассессоддед даддесддсаа сасстастає 180 50 адсчасадед Есаадоддаач асєсассасєс адесдсдаса асдссаадаа Садсседсас 240 ссссадаєда ассссдсасд сдссдаддас ассдссасст асстасеєдесдс асддстаєддва Зоо єєєДЧдасоодсоу саєдадесєсєдс сеасеєдддда садддсасає сддсаассддєс бадсессс 357 «2105 183 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність 60 «220»
«223» СОВНі домену УМН із МН2 МАТ до РО-1 людини 9, що містить заміну серину гліцином «4005 183 зек Тук Гец Уаї с1У 1 2 «2105 184 «2115 107 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен МІ із МІ1 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 184
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПг Сув Агуд Азїа бек бій АБп чІ1е Тук Бек Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Ркго сбі1у Ппув Аїа Рго ГУу5 Іецй Гей Іе
Тук Авп Аза пуб ТПг Іец А1ї1а Аїа сіу Уаі Рго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У
З бо
Зо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Тук Сув сбіп Нів Нів Туг Аїа Уаї Рго Тгр
З5 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гув 100 105 40 «2105 185 «2115 321 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність 45 «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МІ1 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 185 часаєєсада єЄдасеєсадес Єсссадсадс ссдсссдсає ссдсддддда ссдддесасс бо 50 аєсассеєдсс дЕдссЕСада ааасаєсстає ссасассосду сссддсбаєса асадааассо 120
Чдабааадссс сааааєєдся саєеєвсасаас дссаадассс сСсдасадссдда сдсдссаадс 180 аддЕєсеЕсад дсадсоуддсес адоддасадає сЕсассссса ссагасссеєс ассдсадсссе 240 чадчаєєсєвєд ссасесаста седссадсає сассасдсад Сдсссгддас сеЕссддасаа Зоо чадасасєаадс Єсдадаєсаа а 321 60 «2105 186
«2115 107 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен Мі із М102 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 186
Авр чІ1е сіп Меє ТПг сбіп бек Рго бек бек ІГей бек Азїа бек Уа1і с1Уу 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПг Сув Агуд Аїа Бек бій Авп чІ1е Тукг Авп Туг 20 25 30
Тец Азїа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу Ппув Аїа Рго пуб Гей Іецй І1е 35 40 45
Тук Авр Аїа пуб ТПг Іец Азї1а Аза сіу Уаі Рго Бек Акд Ріе бег 01Уу 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аза ТПг Туг Тук Сув біп Нів Нів Туг Аїа Уаї Рго Ткгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гув 100 105
Зо «2105 187 «2115 321 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
З5 «2205 «223» Полінуклеотид, що кодує МІ2 МАТ до РО-1 людини 9 «4005 187 часаєссада ЕдчасесадеЕс СсссадсадеЕ сеЕдсссосає ссдгдддода ЕсдддеЕсасс бо аєсассеєдсс дЕдссЕСада ааасаєсстає аассассосду сссддсаєса асадааассо 120
Чдабааадссс сааааєєдсяе саєєсасдас дссаадассс Єсдсадсєда сасдссааде 180 аддеЕєсеЕсад дсадсоддсес аддадасадасє сссассссса ссабсаєсєссєіс ассдсадссс 240 чадчаєєсєвєд ссасесаста седссадсає сассасдсад Сдсссгддас сеЕссддасаа Зоо дасассаадс Есдадаєсаа а 321 «2105 188 «2115 11 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» СОВІ1 домену Мі із М102 МАТ до РО-1 людини 9 60 «4005 188
Агкуд Аза бек біц АБп о І1е Туг Авп Туг Іецй А1а 1 5 10 «210» 189 «2115 7 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» СОВІ2 домену МІ із МІ12 МАТ до РО-1 людини 9 «400» 189
Авр Аза пуб ТПг Іец Аї1а А1а 1 5 «2105 190 «211» 116 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(116) «223» Домен УН МАТ до РО-1 10 «4005 190 бі Маї І1їе Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уа1і1 пув Рго сб1і1у с1У
Зо 1 2 10 15 зек Гец пуб ІТец бек Сув А1ї1а Аїа бек біу Рпе ТПг Рпе 5Бег Ап Туг 20 25 30
Тен Меєс бек Тгр Уаі Акуд біп ТБг Рго сбіц пув Агкд Те бій Тгр Уаї 35 40 45
Аза бек І1їе бек біу бі1у біу Бек Авп І1е Туг Туг Рго Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гец Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Гей Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд біп біц Іец Аза Рпе Авр Туг Тгр б1у біп с1у ТПг ТпПЕг Гей 100 105 110
ТВг Уа1 бек 5ег 115 «2105 191 «211» 348 «2125» ДНК «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге 60 «222» (1)..(348) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 10
«4005 191 чаадеєдчаєсас єдадеЕддадеЕсС єдоадоададдс СсСсадсдаадс ссддадддеЕс ссеєдааасес бо
ЕссЕдсдсад сссстудаєе сасесесадеЕ аастассєса гДдссЕєддЧчЕ Ссооссадасе 120 ссддадаада дассддадсд ддссдсааде ассадеодооєда деЕддсадсаа сбасстастає 180 ссадасадсд Сдаадддссд асссассара сссадддаса асдссаадаа сассстрдтгас 240 ссдсаааєда асадсссдад дсЕссдаддас асуддссеЕрдеЕ аєтаседсдс аадасаадаа Зоо сЕДдЯсСЕсЕеЕсуд асрасєдддда ссааддсасс асеЕсссасад ЕсЕссесе 348 «2105 192 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 10 «4005 192
Авп о Тук Геч Меєс 5ег 1 2
Зо «2105 193 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 10 «4005 193 зек І1е бек біу бі1у бі1іу Бек Авп І1е Туг Тук Рго Авр Бек Уаі1ї! Гув 1 2 10 15
Ку «2105 194 «2115 7 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 10 «4005 194 бо сіп бій Геп Аза Рпе Авр Туг 1 2
«2105 195 «2115 107 «2125 РЕТ «2135 Мив штивси1ив5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 10 «4005 195
Авр І1е сбіп Месє ТПг біп Тс ТБг обег бек ІТецйп бек Аза бек їеш 0Щ1У 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТПг І11е бек Сув Агд ТПг бек біп Авр І1е Бек Авп Ріє 20 Тем АвБп оТгр Тук біп біп Гпув Ркго Авр с1у ТПг Іїе ГУ Іецй Гей Іе
Тук Тук ТПг бек Агд Тец Нів бек біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех 0Щ1У
З бо 25 зек сіу бек біу ТПг Авр Тук бек Іец ТПг І1е бек Авп Гей бій сіп 65 70 75 80 бі Авр чІ1е Аза ТПг Тук Рпе Сув біп біп сіу Бек ТПг Гей Рго Тгр
Зо 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу сіу ТПг Гув Гей сбіц І1е І1е 100 105
З5 «2105 196 «2115 321 «2125 ДНК «213» Мив шивси1и5 40 «220» «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(321) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 10 45 «4005 196 чаєсаєссада Єдасасадас басаєрссеєсс сЕдЕСЕдссЕ сЕСЕЧдддада сададесасс бо аєсадеЕєдса ддасаадеєса ддасаєсадс аасєссссаа ассддсбаєса дсадааасса 120 50 чаєддааста ЕЄбааассссе даєссассас асассаадає басасссадда адссссаєса 180 аддЕєсадед дсадеЕдоддЕСсС Сддаасадає баєссессса ссаєсадсаа сссддадсаа 240 чаачавсаєєд ссасеЕсасеє єсдссаасад ддсадсасдс Єсссоаєсддас дЕссддсддва Зоо чдадасассаадс Єддаазаєсає а 321 «2105 197 «2115 11 бо «2125 РЕВТ «213» Мив шивси1и5
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(11) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 10 «4005 197
Акуд Тк бек біп Авр І1е бек Авп Ропе Гей Авп 1 5 10 «2105 198 «2115 7 «212» РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 10 «400» 198
Тук ТПкг Бек Агд Гец Нів 5ег 1 5 «2105 199 «2115 9 «212» РЕТ
Зо «2135 Мив штивси1ив5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (19)..() «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 10 «4005 199 біп бі1іп сб1у Бек ТПг Гей Рго Тгр ТПг 1 5 «2105 200 «2115 117 «212» РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(117) «223» Домен МН МАТ до РО-1 11 «4005 200 бі Маї біп Гей біп біп бек сіу ТПг Уаі гей Аза Агуд Рго сС1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Меє бек Сув Гув ТПг Бек с1у Тук ТПкг Робе ТПг с1у Туг 20 25 30 бо Тер Меє Нів Ткгр Ма1! Гуз біп Агуд Рго с1іу біп сбі1у Ге Ппув Тер Меє 35 40 45 сб1у Аї1а І1е Тук Рго б1у Авп бек Авр ТПг Нів Тук АБп обіп Гпув РБПе 50 З бо пув бі1у пув Аїа Ппув Гей ТПг Аза Уаї ТПг бек Аїа бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей ТПг Авп біц Авр бек Азїа І1е Туг Тук Сув 85 90 95
ТПЕ ТпПкЕ с1у ТБг Тук бек Тук Рпе Авр Уаї Тер сбі1у ТПпг б1у ТПпг ТПпс 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 «2105 201 «2115» 351 «2125 ДНК «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(351) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 11 «4005 201 чаддеЕєсадс ЕєссадсадеЕс Едддаседед седдсааддс сЕддддсеЕс адесдаадаєд бо
Зо ЕссЕдсаада сЕсСсСЕдудста сасасеєвасс ддстассддда єдсасеєддЧчЕ аааасададд 120 сссддасадд дсЕссдаааєсд дасдддддсєс асссаєссстд дааасадесда басссастас 180 аассадааде Єсаадддсаа ддссааасерд аседсадеса саєссдссад саседсстас 240 аєддадсеєса дсадссеєдас аааєдчаддас ЕСЕдсдаєст аєтаседвас гаседдодасс Зоо
БасеЕсдврасе єсдаєдеЕстьд дддсасаддд ассасддсса ссдсссссоса 351 «2105 202 «2115 5 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 11 «4005 Щ 202 сбі1у Тук Тер Меє Нів 1 2 «2105 203 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив бо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
«2225 (1)..(17) «223» СОВБН2 МАТ до РО-1 11 «4005 203
А1їа І1їе Тук Рго б1іу АвБп бек Авр ТПг Нів Тук Авп о біп пув Рпе Гу 1 5 10 15 о1у «2105 204 «2115 8 «212» РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОБНЗ МАТ до РО-1 11 «4005 204 бі1у ТпПг Тук Бек Тук Рпе Авр Уаї 1 5 «2105 205 «211» 106 «212» РЕТ
Зо «2135 Мив штивси1ив5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(106) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 11 «4005 205
Авр І1е Гей Гец ТПг біп бек Рго Аїа І1е Іїецй бек Уаі Бек Рго щЩ1У 1 2 10 15 бі Агуд Уаї Бек Рпе бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Ії1е с1іу ТПг 5ег 20 25 30
І1їе Нів Тер Тук біп Нів Акуд ТПг о Авзп біу бек Рго Агд Геч Іецй І1е 35 40 45
Ппув Тук Аїа бек бі Бек Іїе бек с1іу Іїе Рго Бек Агд Рое бег 01Уу бо 50 зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іец бек І1е Авп Бек Уаі сій б5ег 65 70 75 80 бі Авр чІ1е Аза Авр Туг Тук Сув біп біп Бек Авп бек Тгр Гей ТЕПг 55 85 90 95
Рпе сі1у Аїа сіу ТПг Гув Гей біц Іецй Гув 100 105 60 «210» 206 «211» 318
«2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «220» «221» щтівс Геабиге «222» (1)..(318) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 11 «4005 206 часаєсєєвєдс ЕдасеЕсадеЕс Сссадссаєс ссдЕССсдЕЧда дЕССаддада аачадесаде бо
БбЕСЕССсСЕєдса доддссадеса дадсаєєддс асаадсаєбас ассддсбаєса дсасадааса 120 ааєддеЕєсеЕс сааддсеєсяе саєсааадтає дсеЕєсеЕЧдадеі стаєсеЕстду дарсссткссс 180 адзЧчдеЕєвсадед дсадеддаєс адоадчасеєчдчає сєессасесеєса дсаєсаасадч Єасодадесся 240 чаачасаєєд садаєтаєвта седеЕсаасаа адсаасадсеЕ ддсеЕсасуаєеє содаєдстг9д99 Зоо ассаадссдуа адсеєдааа 318 «2105 207 «2115 11 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(11)
Зо «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 11 «4005 207
Акуд Аза бек біп бек І1е б1у ТПг бек І1е Нів
З5 1 2 10 «2105 208 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 11 «4005 208
Туг Аїа Бек сіц бек І1е 5ег 1 5 «2105 209 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Мив штивси1ив5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(8) 60 «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 11
«4005 209 біп біп бек Авп бек Тер Гей ТПг 1 2 «2105 210 «2115 125 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(125) «223» Домен МН МАТ до РО-1 12 «4005 210 біп б1у Нів Гей сбіп біп бек с1іу Аїа бій Гей Уаі Агд Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї ТПг Іец бек Сув Гув Аза бек біу Рпе ТПг Рпе ТПг Авр Туг 20 25 30 бі Меє Нів Тер Уаі Ппув біп ТПг Рго Уаі Нів сіу Гец біц Тгр І1е сб1у ТПпг І1їе Авр Рго бій ТПг сіу с1у ТПг АТа Тук Авп біп Гув РБПе
З бо
Зо пув бі1у пув Аїа І1їе Гей ТПг Уа1ї Авр Ппув бек бек ТПг ТПг ТПг Туг 65 70 75 80
Меє бій ге Агуд Бек Гей ТПг бек бій Авр бБег Аїа Уаї! РПе Тук Сув 85 90 95
З5 зект Агуд біц Агд І1е ТПг ТПпг оУаії Уаі бі с1у Аза Тук Тер Тук Ріє 100 105 110
Авр Уа1 Тер біу ТПг б1у ТП ТБг Уа1ї ТПг Уаї бек 5ег 40 115 120 125 «2105 211 «2115 375 «2125 ДНК 45 «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(375) 50 «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 12 «4005 211 садддессасс сСдсадсадсс сддддссдад ссддсдаддс ссддддсесссс адсдасдастд бо
Есседсаадд СЕССсСоОддсЕЕ сасасевасе дастаєсдада ЄдсаседдЧдЕ дааасадаса 120 ссгдсдсаєсд дсссддаасдд дассдддасс ассдаєссстд ааассддеєдда баседсстас 180 ааєсадааде Єсаадддсаа ддссагбасед асадсадаса аарсесссас гасаасстас 240 60 аєддадсесс дсадссеєдас аєсеєдаддас ЕсСЕдссуєст єеЕгаєєдеЕс аададададд Зоо аєсасвтасудд ЄЕєЧдЕеЕєЧадоад додсагаседу бгасеЕсєсдвавєд єСЕддддсас адддассасд 3З6о чдЕсассдєсь ссеса 375 «2105 212 «2115 5 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОвБН1і МАТ до РО-1 12 «4005 212
Авр Тук сіц Меє Нів 1 2 «2105» 213 «2115 17 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВБН2 МАТ до РО-1 12
Зо «4005 213
ТПЕ Іїе Авр Рго біц ТПг біу с1іу ТБг Аза Туг АБп обіп Гпув Рпе Гув 1 2 10 15
З5 о1у «2105 214 «2115 16 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(16) «223» СОБНЗ МАТ до РО-1 12 «4005 214 бі Агуд І1е ТПпс ТП о Уа1! Уаі1 сіш с1у Аїа Тук Тер Тук Рібе Авр Уаї 1 2 10 15 «2105 215 «2115 112 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 бо «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(112)
«223» Домен МІ МАТ до РО-1 4 «4005 215
Авр Уаї Гей Меє ТПг сбіп ТПг Рго Гей бек Гей Рго Уаії бек Іеч 01Уу 1 2 10 15
Авр сбіп Аза бБег І1е бек Сув Агд бек бек біп АБп Іїе Уаі1і Нів 5ег 20 25 30
Авп ос1іу Авп ТПг Тук Тец бій Тер Тук Іец біп Ппув Рго сб1іу біп бег 35 40 45
Ркго Ппув Пец ІТец І1е Сув Ппув Уаі бек ТПг Агуд Рпе бек сіу Уа1і Рго 50 З бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Акад Уаі! бій Аї1а бій Ар Гей сіу Уа1 Туг Тук Сув Рпе сіп с1Уу 85 90 95 зек Нів Уаії Рго Тук ТПг Рпе сіу бі1у сбі1у ТПг Ппув Гей бій І1е Гув 100 105 110 «2105» 216 «211» 336 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив
Зо «220» «221» щшівс Теаєбиге «2225 (1)..1336) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 12
З5 «4005 216 чаєдеЕсевеєда єдасссадас єссасеЕсьсс сеЕдсстЕдЕСса дЕСЕєддада ссаадссьсс бо аєсеЕСсСЕєдса даєстадеса даасаєєдеа сасадесааєуд дааасасста ЕЄгадаає9 120
Бассеєдсада аассаддсса деЕсСЕєСсСсааад сеЕССЄДдаєсеі дсааадеЕссс сасссцдчасессе 180
ЕсЕдоддудеЕсСс садасаддеє садеддсаде ддаєсаддда садареєссас асесаадаєс 240 адсачадедо аддсеЕЧчадчда СсеЕдддчадееє басстасесдусс гєєСсСааддеєс асасдєєєссд Зоо басасдєєссд даддддддас саадсеєддаа асаааа 336 «2105 217 «2115 16 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(16) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 12 «4005 217 60
Акуд Бек бек біп АвБп о І1е Уа1і! Нів бек Авп о бі1іу АвБп ТПг Туг Гей с1іц
1 5 10 15 «2105 218 «2115 7 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 12 «4005 218 пув Маї Бек ТПг Акуд Ріре 5ег 1 5 «2105 219 «2115 9 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(8) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 12 «4005 219
Зо Рпе сіп сбіу бек Нів Уаї Рго Тук ТЕПг 1 5 «2105 220 «2115» 121 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(121) «223» Домен МН МАТ до РІО-1 13 «4005 220 сі Уаї Месє Гей Уаї бій бек сбіу сб1у сб1у Гей Уа1! Гув Рго с1у с1Уу 1 5 10 15 зек Гец пуб Іец бек Сув Аза Аза бек бі1у Рпе ТПг Ррпе бек бек Нів 20 25 30
ТПЕ Меє бек Тер Уаі Агд біп ТПг Рго біц губ Агд Тейп бій Тер Уаї 35 40 45
Аза ТПг І1їе бек біу б1у біу Бек Авп І1е Туг Тугк Рго Авр бек Уаї 50 З бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр АвБп Аїа губ АБп о ТПг Іец Туг 65 70 75 80 бо Тен біп Мес бек бек Гей Агуд бек бій Авр ТПг Аїа ІТецй Тукг Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіп Аза Тук Тук б1у Авп Туг Тгр Тук Рпе Авр Уаї Тер с1У 100 105 110
ТПг б1іу ТПг ТБг Уа! ТПг Уаї бек 5ег 115 120 «2105 221 «2115 363 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «220» «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(363) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 13 «4005 221 чаадеєчаєдс єдЧеЕддчадеЕс єдоддоададдс єсадедаадс седдадддеЕс ссеєдааасьс бо
ЕссеЕдеЕдсад ссеЕСЕЄддаєє сасеЕсєеєсаде адссаєбасса ЄдЕСсСЕсддаєЄ ссоассадасе 120 ссддадаада дассддадсд ддссдсаасс ассадсодесд дсддеЕсссаа Сасстсасстсає 180 ссадасадсд Єдаадддесуд аєссассаєс сСссададаса асдссаадаа сасссеєдбсас 240 ссдсаааєда дсадсссдад дсЕссдаддас асддссссдс ассассдсдс аадасаадсео Зоо
Басрасоддра аєстаседдеа сеЕссдаєдеЕс єддддсасад ддассасудде сассудусьсс 3З6о
Зо сс 363 «2105 222 «2115 5 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОВН1 МАТ до РО-1 13 «4005 ЩД 222 зек Нів ТПг Меє 5ег 1 2 «2105 223 «2115 17 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 13 «4005 223 бо ТПгЕ Іїе бек с1і1у біу сі1у Бек АБп І1е Тук Тук Рго Авр бек Уаї Тув 1 2 10 15 о1у «2105 224 «2115 12 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(12) «223» СОБНЗ МАТ до РО-1 13 «4005 224 біп Аз1а Тук Тук с1у Авп Тук Тер Тук Рпе Авр Уаї 1 5 10 «2105 225 «2115 107 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 13
Зо «4005 225
Авр І1е сіп Месє ТПг біп бек Рго Аїа ТПг біп бек Аза бек їеш Ш0Щ1У 1 5 10 15 сій бек Уаії ТПг Іїе ТБПг Сув Гей Аїа бек сбіп ТПг І1е с1у ТПг Тер 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу Ппув Бек Рго біп Гец Іецй І1е 35 40 45
Ту Аїа Аза ТПг бБег Іїец Аза Авр сіу Уаі Рго бек Агд Рпе Бех щЩ1У 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Гув Рпе бек Рпе Гув І1е Бек Бек Гей сіп Аї1а 65 70 75 80 бі Авр Рпе Уаії бек Тук Тук Сув біп біп Гей Авр бег І1е Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу с1і1у біу ТПЕ Ппув Геп бі І1е Гув 100 105 «2105 226 «2115 321 «2125» ДНК «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге 60 «222» (1)..(321) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 13
«4005 226 часаєєсада єдасссадес ЕссрЕдссасс садеЕсеєдсає сеЕСЕЧдддада аадердесасс бо ассасдеЕдсс гддсаадсса дассаєєудЕ асаєддесад сасддєаєса дсадааасса 120 чадаааєсеєс сеЕСсадсеєсся даєєвсаєдсе дсаассадсе Єдоасачаєда дадссссаєса 180 аддеЕєсадед деадеддаєс єддсасаааа ЄЄСЕсСсСЕссса адаєсадсад сссасадасе 240 чаачаєєєвєд єаадесаєса седесаасаа сЕсЄдасадса Єсссоаєсодас ЯдЕссоадсова Зоо чдадасассаадс Єддаазаєсаа а 321 «2105 227 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(11) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 13 «4005 Щ 227
Тец А1а бек сбіп ТПг Іїе сіу ТПг Тер Гей Аї1а 1 2 10
Зо «2105 228 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 13 «4005 228
Аза Аза ТПг бек Гец А1а Авр 1 2 «2105 229 «2115 139 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 13 «4005 229 сіп б1іп Гей Авр бек І1е Рго Тгр ТПг 1 2 60 «2105 230 «2115 117
«2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(117) «223» Домен МН МАТ до РО-1 14 «4005 230 біп Маї біп Гей сбіп біп Рго сіу Аїа бій Гей Уа1! пуб Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Меє бек Сув Гув Аза бек біу Тук Авп Рпе Іїе Бек Туг
ТЕр Іїе ТПкг Тер Уаї пув біп Агуд Рго біу біп б1у Іей б1п Тгр Ше 20 с1у Авп І1е Тук Рго б1у ТПг Авр б1у ТПг ТПг Туг Авп бій пув РБе
З бо
Тпув бек Ггув Аїа ТПг Гей ТПг Уаі Авр ТПг бек бек бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80 25
Ме Нів Гей бек Агуд Гей ТПг бек бій Авр бБег Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза ТПг с1і1у Пец Нів Тгр Тук Робе Авр Уа! Тгр с1у ТПгЕ о1у ТПкг ТЕбг
Зо 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115
З5 «2105 231 «2115» 351 «2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив 40 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(351) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 14 45 «4005 231 саддсссаас Сдсадсадсс сддддссдад сеЕсдсдаадс ссддддесєсс адсдаадаєд бо
Есседсаадд сЕєсЕддста саасеєсаєс адстасердда гбаасседддЕ дааасададд 120 50 ссеЕддасаад дссЕєссадед чассоодааає асрєсаєсссд дсасеєдаєдда бастасстас 180 ааєчадааде Єсаададсаа ддссасасрд асеєдсрадаса саєссессад сасадсстас 240 аєдсассеєса дЕСдссєДдас аєсєдаддас ЄссдсоадЕСсСе ассаседедс аассдадсста Зоо сассддсбасс ссоаааєсдсссд дддсасаддуд ассасддсса ссусссссес с 351 «2105 232 «2115 5 60 «2125 РЕВТ «2135 Мив шивси1ив
«221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5) «223» СОвБН1і МАТ до РО-1 14 «4005 232
Ззек Тут Тгр І1е ТЕПг 1 5 «2105 233 «2115 17 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВБН2 МАТ до РО-1 14 «4005 233
Ап отІ1е Тук Рго біу ТПг Авр с1у ТПг ТпПг Тук Авп о біц губ Ропе Гу 1 2 10 15 зег
Зо «2105 234 «2115 8 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(8) «223» СОБНЗ МАТ до РО-1 14 «4005 234 сб1у Гешп Нів Тер Тук Рпе Авр Уаї 1 5 «2105 235 «2115 107 «212» РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 14 «4005 235
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп бек біп пуб Рре Меє бек ТПг бек Уаі с1У 1 5 10 15 бо Авр Агуд Уаі бек Уаії ТПг Сув пув Аїа бек біп бек Уаії с1у ТБг Авп 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу Сбіп бек Рго Гпув Аїа Іецй І1е 35 40 45
Тук Бек Аїа бек бек Агуд Рпе бек сіу Уаі Рго АвБр Агд Рпе ТіПг с1Уу 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг Іїе бек Авп Уаї Сіп 5ег 65 70 75 80 бі Авр Тейп Аза бій Тук Рпе Сув біп біп Тук Авп бек Тук Рго Туг 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТП Гув Геп бій І1е Гув 100 105 «2105 236 «2115 321 «2125 ДНК «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «222» (1)..(321) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 14 «4005 236 часаєєдеЕда єдасссадес Єсаааааєєс аєдессасає садсаддадча сададдесаде бо
Зо ЧдЕсассєдса аддссадсса чдчадсдеЕдЧоадЕ асграасдрад сссддеєаєса асадаадссс 120 чдаєсааєсєс сегааадсасе даєєсасесо дсаєссєссс даєєсєсадеда саєссссеєдає 180 сдсеЕссасад дсадсддаєсєс сдддасадає сссассссса ссаєссадсаа Сдсдсадссе 240
З5 чаачасеєєдуда сададртаєєє седесадсаа басаасадсе аєссдрасас дЕєСодад9ад Зоо чодадассаадс Єддаазаасааа а 321 «2105 237 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(11) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 14 «4005 237 туз Аза бек біп Бек Уа1 сіу ТПг Авп Уа1 Аї1а 1 2 10 «2105 238 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив 60 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
«2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 14 «4005 238 зехт Аїа бек бБег Агд РПпе 5ег 1 5 «2105 239 «2115 9 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 14 «4005 239 біп бі1іп Тук Авп бБег Тук Рго Туг ТПг 1 5 «2105» 240 «2115 117 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив «220»
Зо «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(117) «223» Домен МН МАТ до РО-1 15 «4005 240
З5 бі Маї Меє Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уа1і1 пув Рго сб1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей пуб ІТец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе Іїе РпПе Бек бек Туг 40 20 25 30
Тецп І1е бек Тгр Уаі Агу сбіп ТПг Рго бі пув Агд Гей біц Тгр Уаї 45 А1а Аїа І1їе бек сб1у сіу б1у Аїа Авр ТіПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80 50
Тецп біп Меє бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Гец Тук Тук Сув 85 90 95
ТПгЕ Агуд Агуд сіу ТБг Туг Азїа Месє Авр Туг Тер б1у сбіп с1у ТПкг 5бег 55 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 60 «2105 241 «211» 351
«2125 ДНК «2135 Мив шивси1ив «220» «221» щтівс Геабиге «222» (1)..(351) «223» Полінуклеотид, що кодує домен МН МАТ до РО-1 15 «4005 241 чаачеєдаєдс гдЧоасодадеЕС Сододддаддс Єсадедаадс сеЕддадддЕс ссеєдааассс бо
ЕссеЕдеЕдсад ссеЕСЕЄддаєє саєєеєєеєсаде адссаєсєса ЄсеЕСЕсддаєЄ ссоассадасе 120 ссддадаада дассддадесд ддссдссдсс ассадсодесд дсддсдссда сасстастає 180 чдссдасадед єдаадддеєсуд аєссассаєс єЄссададаса асдссаадаа сассседсає 240 ссдсаааєда дсадсссдад дсЕссдаддас асддсесеєсає ассассдсас аадасдад4ад Зоо асстаєсдста гддасвтасьуд додЕсаадда ассесадеса ссуссессьс с 351 «2105 242 «2115 5 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(5)
Зо «223» СОВН1 МАТ до РО-1 15 «4005 242 зек Тук Гец І1е 5ег 1 5 «2105 243 «2115 17 «2125 РЕТ «213» Ми5 шивси1и5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(17) «223» СОВН2 МАТ до РО-1 15 «4005 243
А1ї1а І1їе бек сіу біу б1у Азї1а Авр ТПг Туг Туг Аза Авр Бек Уа1ї! Гув 1 2 10 15 о1у «2105 244 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив бо «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
«2225 (1)..(8) «223» СОВНЗ МАТ до РО-1 15 «4005 244
Акуд с1у ТБг Туг Аза Меє Авр Туг 1 2 «2105 245 «2115 107 «2125 РЕТ «2135 Мив шивси1ив «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (1)..(107) «223» Домен МІ МАТ до РО-1 15 «4005 245
Авр І1е сіп Месє ТПг біп бек Рго Аїа бек біп бек Аза бек їеш Щ0Щ1У 1 2 10 15 біц бек Уаї ТПг Іїе ТпПг Сув Ге Аза бек біп ТПг І1е с1у ТПг Тгр 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу Ппув Бек Рго біп Гец Іецй І1е
Зо Тухг Аза Аїа ТПг бек Гец Аза Авр сіу Уа1і Рго бБег Агд Рпе бек 01Уу
З бо зек сіу бек біу ТПг Гув Рпе бек Рпе Гув І1е Бек Бек Гей сіп Аї1а 65 70 75 80
З5 бі Авр Рпе Уаі Авп Туг Тук Сув біп біп Гей Тук бек І1е Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гув 40 100 105 «2105» 246 «2115 321 «2125 ДНК 45 «213» Ми5 шивси1и5 «2205 «221» щшівс Теаєбиге «2225 (1)..1321) 50 «223» Полінуклеотид, що кодує домен МІ МАТ до РО-1 15 «4005 246 часаєєсада єдасссадес ЕсссудссеЕсс садеЕсеєдсає сеЕСЕЧдддада аадердесасс бо ассасаєдсс гддсаадсса дассаєєудЕ асаєддесад сасддєаєса дсадааасса 120 чадаааєсеєс сеЕСсадсеєсся даєєвсаєдсе дсаассадсе Єдоасачаєда дадссссаєса 180 аддеЕєсадед деадеддаєс єддсасаааа ЄЄСЕсСсСЕссса адаєсадсад сссасадасе 240 60 чаачаєєєвєд баааєсаєса седесаасаа сЕЄсасадса Єсссоаєсодас ЯдЕссоадсова Зоо чдадасассаадс Єддаазаєсаа а 321 «2105 247 «2115 11 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(11) «223» СОВІ1 МАТ до РО-1 15 «4005 247
Тец А1а бек сбіп ТПг Іїе сіу ТПг Тер Гей Аї1а 1 5 10 «2105» 248 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(7) «223» СОВІ2 МАТ до РО-1 15 «4005» 248
Зо
Аза Аза ТПг бек Гец А1а Авр 1 5 «2105 249 «2115 139 «2125 РЕТ «213» Мив шивси1и5 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(89) «223» СОВІЗ МАТ до РО-1 15 «4005 249 біп бі1іп Гей Туг Бек Іїе Рго Тгр ТПг 1 5 «2105 250 «2115 117 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен УМН із МАТ до РО-1 людини 15 УНІ «4005 250 бі Маї біп Ге Уаі сій бек с1у сі1у с1і1у Гей Уаі Агд Рго б1у щу бо 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
Тец І1е бек Тгр Уаі Агу сіп Аза Рго сіу Ппув бі1у Те бій Тгр Уаї 35 40 45
Аза Аза І1е бек біу б1у б1у Аїа Авр ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 З бо пув бі1у Акуд Рпе ТПг І1їе бБег Акуд Авр Авп Аза Пув АвБп бек Геч Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа ТПг Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Агуд біу Тс Туг Азїа Мес Авр Туг Тер с1у сіп с1іу Тік Іей 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 «2105 251 «2115» 351 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид, що кодує МН1і МАТ до РО-1 людини 15
Зо «4005 251 чаадеєдсаас єдЧдЕеЕєЧааад Єдадсодсоядда ссддсдсддс саддсддеЕсс асссадассд бо
ЄсеЕгдеЕдсад сеЕсСсСаддсесе басарссеєсс ссеваєсьса ЕсСЕСЕгдуддЕ дсдссаадсе 120 ссаддеаадуд дссЕсдааєсд ддссоссодсс ассадсдодачда дЕддеЕдссда Сасасаєсає 180 чдссдасадсд Єсаадддасд ЄЄЄсСассаєс адсадддаса асдссаадаа Садссеєстас 240 сгсдсадаєда асссасссад адссдаадас ассдстасеє аєсаседесдс ссоддсдс9а9д Зоо асЕбасдсва Єддасваєсдд доддссаддадс ассеЕсддеЕса сеЕдЕСЕСаєс с 351 «2105 252 «2115 107 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Домен МН із МАТ до РО-1 людини 15 УТ1 «4005 Щ 252
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПг Сув Гец Аза бек біп ТПг Ії1е с1у ТПг Тгр 20 25 30
Тец Азїа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу Ппув Аїа Рго пуб Гей Іецй І1е 60 35 40 45
Ту Аїа Аза ТПг бБег Іїец Аза Авр сіу Уаі Рго Бек Акд Ріе бег 01Уу 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Ррпе ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Туг Тук Сув біп біп Іїец Тук бек І1е Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПЕ Ппув Геп бі І1е Гув 100 105 «2105 253 «2115 321 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» Полінуклеотид, що кодує МІ1 МАТ до РО-1 людини 15 «4005 253 чаєаєссада Єдасссадес Єсссадсссо сссадсдсаа дсдсаддсда ссдєдесдасс бо аєсасседеЕсС Еєддссадеса дассаєссдда асссддсссду сссддсбаєса дсадааассєо 120 чдасааддссс страадседсеЕ даєреєвасудсес дссассессс Есдсадаєдуа адрдсссесс 180 счаєсєссадсд ддсЕссдддсс сддсассдас сссасаєсса сааєссадсад ссессадссс 240
Зо чадчассєсєсду серасаєаста седссаасад сЕССасесса ЄсСссасдддас сЕСЄдддссад Зоо чабасврааас Єддадаєсаа а 321 «2105 254 «2115 98 «2125 РЕТ «213» Ношто варієпь «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(98) «223» Домен СНІ Ідб4і людини «4005 254
Аза бек ТПг Ппув біу Ркго бек Уаі! РпПе Рго Іїеп Аза Рго Сув Бек Аг4д 1 2 10 15 зек ТПг бек біц бек ТПпг Аза Аза Іец с1у Сув Гей Уа1і Гпув Авр Туг 20 25 30
Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр АБп бек с1іу Аїа Гей ТПг 5ег 35 40 45 сіу Ма1ї Нів Тр Рпе Рго Аїа Уаї Гей сіп бек бек с1у Гей Тукг 5ег 50 З бо
Тец бек бек Уаі Уа1і ТПг Уа1 Рго Бек Бек бек Гей с1іу ТПг пув ТП 65 70 75 80 60
Тук ТпПк Сув Авп оУаі Авр о Нів пуб Рго бек Авп ТП Гув Уа1і Авр Гув
85 90 95
Ак Уаї «2105 255 «2115 329 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований важкий ланцюг Ідс1 «4005 255
А1їа бек ТПг Ппув біу Ркго бек Уаії РіПе Рго Іїец Аза Рго Бек Бек Гув 1 5 10 15 зек ТПг бек біу бі1у ТПпг Аза Аїа Іец с1у Сув Гей Уаі Ггув Авр Туг 20 25 30
Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр АБп бек с1іу Аїа Гей ТПг 5ег 35 40 45 сіу Ма1ї Нів Тр Рпе Рго Аїа Уаї Гей сіп бек бек с1у Гецп Тук 5ег 50 55 бо
Тец бек бек Уаі Уа1і ТПг Уа1 Рго Бек Бек бек Гей с1іу ТПг біп Тс 65 70 75 80
Зо
Тук Іїе Сув Авп Уаії Авп о Нів Ппув Рго бек Авп оТПг Ппув Уа1 Авр Гув 85 90 95
Акуд Уаі1 бій Рго пуб бек Сув Авр Пув ТПг Нів ТП Сув Рго Рго Сув
З5 100 105 110
Рго Аїа Рго біц Аза Аза сіу біу Ркго бек Уа1 Рпе Гец Робе Рго Рго 115 120 125
Пув Рго Ппув Авр ТПг Гей Мес І1їе бБег Агуд ТПг Рго бій Уаї ТіПкг Сув 130 135 140
Уаї Уаї Уаі Авр Уа1і бек Нів бій Авр Рго бій Уаі Ппув Рпе Авп Тгр 145 150 155 160
Тук Уаі1 Авр сіу Уаії біц Уаії Нів Авп Аїа пуб ТПг Гув Рго Агд с1ци 165 170 175 бі біп Тук Авп о бБег ТПг Туг Акуд Уаї Уаї бек Уаії Іецй ТПг Уаї Іеєц 180 185 190
Нів біп Авр Тер гец Авп біу пув сій Тук Ппув Сув КГув Уаї бек Авп 195 200 205 пув Аїа Гей Рго Аза Рго І1е сбіц Ппув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Гуз 01Уу 210 215 220 біп Рго Агд бій Рго біп Уа1 Тук ТПг Гей Рго Рго бБег Агд біц сій 225 230 235 240 60
Ме ТПпг пув Авп о біп Уа1! бек Гецп ТПг Сув Гец Уаї пув б1у Рпе Туг
245 250 255
Ркго бБекг Авр І1е Аї1а Уаії бій Тгр біц бек АБп с1іу біп Рго бій Авп 260 265 270
АвпоТук пув ТПг ТБг Рго Рго Уаі Іец Авр бек Авр с1іу Бек Рпе Ріє 275 280 285
Тецп Тук бек Ппув Гей ТПг Уаі1 Авр Ппув бБег Агд Тер сбіп біп с1у Авп 290 295 300
Уаї Рпе бек Сув Бек Уа1ї Меє Нів сій Аза Гец Нібв АвБп о Нів Тук ТПг 305 310 315 320 сіп Ппув бек Гей бек Гей бек Рго б1Уу 325 «2105 256 «211» 326 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гуманізований важкий ланцюг Ідс04 зі стабілізованою шарнірною областю «4005 256
Аза бек ТПг Ппув біу Ркго бек Уаі! РпПе Рго Іїеп Аза Рго Сув Бек Аг4д 1 5 10 15
Зо зек ТПг бек біц бек ТПпг Аза Аза Геш с1у Сув Гей Уаї пуб Авр Туг 20 25 30
Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр АБп бек с1іу Аїа Гей ТПг 5ег
З5 35 40 45 сбі1у Маї Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уа1і! Ггец біп бек бек сіу Гец Тукг в5ег 50 55 бо
Пен бек бек Уаії Уаії ТБбг УМа1ї Рко бек бек бек Гей с1у ТПг Ппув ТіПг 65 70 75 80
Тук ТпПк Сув Авп оУаі Авр о Нів пуб Рго бек Авп ТП Гув Уа1і Авр Гув 85 90 95
Акуд Уа1 сіц бек пуб Тук б1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго 100 105 110 бі Рпе Гей сіу сіу Рго Бек Уаі Рпе Гей Рпбе Рго Рго пув Рго Гу 115 120 125
Авр ТПг Гец Месє І1е бек Агуд ТПг Рго бій Уа1ї ТПг Сув Уа1 Уа1 Уаї 130 135 140
Авр Уаії бек біп біц Авр Рго біц Уаі біп Рбе АБп Тгр Туг Уа1 Авр 145 150 155 160 сі1у Маї бій Уаії Нів Авп Аза Ппув ТПг пув Рго Агд біц біц біп РБбе 165 170 175 60
АвпобБек ТПг Тут Агуд Уаії Уаї бек Уаії Іецйп ТПг Уаії Гей Нів сбіп Авр
180 185 190
ТЕр гей Авп о сіу пув біц Тук пув Сув МПув Уаї бек Авп Гув с1Уу Іецй 195 200 205
Ркго бек бек І1е біцп Гув ТПг І1е бек ув Аї1а Ппув с1у біп Рго Агд 210 215 220 бі Рко біп Уаії Тук ТпПкг Гей Рго Рго Бек біп сбіц біц Меє ТПг Гув 225 230 235 240
Авпобіп Уаї бек Іецп ТПг Сув Пец Уаі Гуз б1у Рпе Туг Рго Бек Авр 245 250 255
І1їе Аїа Уа1і! сій Тгр бій бек Авп с1у біп Рго бій Ап Авп Тук Гув 260 265 270
ТПЕ ТПЕ Ркго Ркго Уаії Ггец Авр бек Авр біу бек РПе РіПе Іец Туг 5ег 275 280 285
Акуд Гей ТБПг Уаї Авр Гув бек Агд Тгр біп бій с1у Авп Уа1і РПе 5ег 290 295 300
Сув бек Уаї Меє Нів бій Аїа Гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп Гпув бег 305 310 315 320
Тецй бек Геи бек Гей Щ1У 325
Зо «2105 257 «2115 98 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (1)..(98) «223» Домен СНІ Ідб2 людини «4005 257
Аза бек ТПг Ппув біу Ркго бек Уаі! РпПе Рго Іїеп Аза Рго Сув Бек Аг4д 1 5 10 15 зек ТПг бек бій бек ТПг Аїа Аїа Гей с1у Сув Гпечп Уа1! Гпув Авр Туг 20 25 30
Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр АБп бек с1іу Аїа Гей ТПг 5ег 35 40 45 сбі1у Маї Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уа1! Гей бСіп бек бек б1у Іецп Тук 5ег 50 55 бо
Тец бек бек Уаі Уа1і ТПг Уа1 Рго Бек Бек Авп Ропе сіу ТПг біп Тс 65 70 75 80
Тук ТпПк Сув Авп оУаі Авр о Нів пуб Рго бБег Авп ТП Гув Уа1і Авр Гув 85 90 95 60 ТВг Уа1ї
«2105 258 «2115 217 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Послідовність Ідбі для доменів СН? і СНЗ «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 258
Аза Рго сбіц Аза Аза сбіу б1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 5 10 15
Рго Ппув Авр ТПг Гей Тук І1їе ТБг Агуд бій Рго сі Уа! ТПг Сув Уаї 20 25 30
Уаї Уаї Авр Уа1 Бек Нів біц Авр Рго сіц Уаї пуб Ропе АБвБп Тгр Туг 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і біц Уа1! Нібв Авп Аїа Гу ТПг Гпув Рго Агд бій сій 50 55 бо біп Тук Авп о бБег ТПг Туг Агуд Уаі Уа1і Бек Уа1! Ггецй ТБПг Уаї Іец Нів
Зо 65 70 75 80 біп Авр Тер гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї Бек Авп Гув 85 90 95
А1їа Гей Рго Аїа Рго Іїе сій Ппув ТПг І1їе бек Ппув Аїа пув с1у сіп 100 105 110
Рго Агд біц Рго біп Маї Тук ТБПг ІТец Рго Рго бБег Агуд бі сій Меє 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек ІТец ТПг Сув Пец Уаії пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140 зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер біц бек АБп б1у біп Рго бій Авп Авп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг Тбг Рго Рго Уаії Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 165 170 175
Тук Бек Ппув Гесй ТПг Уаії Авр Гпув бек Агд Ткгр біп сбіп с1у Авп Уаї1! 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів біц Аза Іїецй Нів АвБп Нів Тук ТПкг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 «2105 259 60 «2115 217 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» Послідовність Ідс4 для доменів СН? і СНЗ «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа являє собою лізин (К) або відсутній «4005 259
Аза Ркго сій Рбе Гец біу б1і1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 5 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Туг І1їе ТПг Агуд бій Рго сі Уа1і ТПкг Сув Уаї
Уаї Уаії Авр Уа1і Бек сбіп біц Авр Рго біц Уаі біп Робе АБвБп Тгр Туг 20 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і сій Уа1ї Нібв Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд сбіц сі 50 55 бо 25 сіп Рбе АвБп бек ТПг Туг Агуд Уа! Уаї Бек Уаії Гей ТіПг Уаї Гей Нів 65 70 75 80 біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї бек Авп Гув 85 90 95
Зо сб1у Гей Рго Бек Бек Іїе бій Ппув ТПг Іїе Бек пув Аїа пув сбіу сіп 100 105 110
Рго Агд біц Рго біп Маї Тук ТБПг Іец Рго Рго бек біп біц бі Меє 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек ІТец ТПг Сув Пец Уаії пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140 зек Авр І1е Аїа Уаії бій Тер бій бек Авп б1іу біп Рго бій АБп Авп 145 150 155 160
Тук Ппув ТПг Тбг Рго Рго Уаії Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 165 170 175
Тук Бек Агкд Гей ТПг Уаії Авр пув бБег Агд Тгр біп бі с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів біц Аза Іїецй Нів АвБп Нів Тук ТПкг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Гей с1у Хаа 210 215 «2105» 260 «2115 217 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 60 «2205 «223» Домени дикого типу та варіант доменів СНО і СНЗ Ідбі людини
«2215 МІ5С ЕЕАТОВЕ «2225 (4)..(5) «223» Хаа4 і Хааб5 являють собою Ії (дикий тип), або обидва являють собою А (знижене зв'язування з рецептором Ес-гамма) «2205 «2215 МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (22)..(26) «223» Хаа?22, Хаа24 і Хаа2б, відповідно, являють собою М, 5 1 Т (дикий тип), або являють собою У, Т і Е (більше тривалий період напіввиведення) «2205 «2215 МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (136)..(177) «223» Хаа136, Хаа138 і Хаа177, відповідно, являють собою: Т, їі У (дикий тип), або являють собою М, І і У (виступ), або 5, А і У (западина) «2205 «2215 МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (204)..(205) «223» Хаа204 і Хаа205, відповідно, являють собою М і Н (дикий тип), або являють собою М і БВ (зв'язування з білком А відсутнє), або А і Кк (зв'язування з білком А відсутнє) «2205 «2215 МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (217)..(217) «223» Хаа217 являє собою К або відсутній «4005 260
Аза Ркго сій Хаа Хаа сбіу б1у Рго бек Уаі! РпПе Гей Рпе Рго Рго Гув 1 З 10 15
Ркго Мпув Авр ТПг Іец Хаа І1ї1е Хаа Агуд Хаа Рго сі Уа1і ТПг Сув Уаї 20 25 30
Уа1ї Уаї Авр Уаії бек Нів сбіц Авр Рго бій Уаії їув Робе Авп Тер Туг 35 40 45
Уаї Авр сі1у Уа1і сій Уа1ї Нібв Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд сбіц сі 50 55 бо біп Тук Авп о бБег ТПг Туг Агуд Уаі Уа1і Бек Уа1! Ггецй ТБПг Уаї Іец Нів 65 70 75 во біп Авр Тер Гей Авп сб1іу пув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї Бек Авп Гув 85 90 95
Аза Гей Рго Аза Рго І1е бій пуб ТПг І1е бек Гпув Аза пув с1у сіп 100 105 110
Рго Акад бій Рго біп Уаї Тук ТПК Гей Рго Рго Бек Агд бі бій Мес 115 120 125
ТПЕ Ппув Авп обіп Уаї бек Іец Хаа Сув Хаа Уаі пув б1у Рпе Туг Рго 130 135 140 бо зек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер біц бек АБп б1у біп Рго бій Авп Авп
145 150 155 160
Тук Ппув ТПг Тбг Рго Рго Уаії Гей Авр бег Авр біу бек Рпе РПе Гей 165 170 175
Хаа бек пуб ТГецй ТПг Уаії Авр Гув бек Агуд Тгр біп біп с1у Авп Уаї 180 185 190
Рпе бек Сув бек Уаії Меє Нів біц Аза Іецй Нів Хаа Хаа Тук ТПкг сіп 195 200 205
Тпув бек Гецп бек Гей бек Рго сі1Уу Хаа 210 215 «2105 261 «2115 6 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Альтернативний лінкер 2 «4005 261 їеч сі1у сб1у с1у бек "ШУ 1 2 «2105 262 «2115 11
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер З
З5 «4005 262 сі1у б1у с1у Бек сбі1у сі1у сіу Бек б1у сш1у щу 1 2 10 «2105 263 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Лінкер З «4005 263 сі1у б1у б1у Авр Пув ТПЕ Нів ТПг о Сув Рго Рго Сув Рго 1 2 10 «2105» 264 «211» 218 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 бо «223» Легкий ланцюг гуманізованого антитіла до РО-1 (МАТ до РО-1 людини 7(1.2))
«4005 264 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бБег Іец бег Рго Щ1Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Гпу5 Рго с1у біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 50 55 бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг пув Уаі б1іцп І1е Гув Аг4д 100 105 110
ТПг Маії Аза Аїа Рго бек Ма! Рпе І1їе Рпе Рго Рго б5Бег Авр сій сіп 115 120 125
Тецп Кпув бек сіу ТПг Аїа бек Уаі Уаї Сув Гец Тец Авп Авп Рпе Туг 130 135 140
Зо
Рго Агд біц Аза Гуз УМаї біп Тер Гуз Маії Авр АвБп Аїа Гей сіп б5ег 145 150 155 160 б1у АвБп бек біп бі Бек Уа1і1 ТПг сій біп Авр бек Гув Авр бек ТПг
З5 165 170 175
Тук Бек Гей бек бек ТПг Іец ТПг Ггец бек їув Аза Авр Тук сій Гув 180 185 190
Нів Ппув Уа1ї Туг Аїа Сув біц Уаії ТБбг Нів сбіп сіу Гей бек бек Рго 195 200 205
Уаї ТПпгЕ Ппув Бек Рпе Авп Агд сіу сіц Сув 210 215 «2105 265 «211» 448 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Важкий ланцюг гуманізованого антитіла до РО-1 ((МАТ до РО-1 людини 7(1.2)) «4005 265 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 5 10 15 бо зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек с1і1у Тук бек Рібе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє Авп Тер Уаі Агуд біп Аза Рго сбіу біп сб1у Іейп бій Тгр Ше 35 40 45 сіу Маї І1е Нів Рго бек Авр бек біц ТПг Ткгр Гей АБр біп Пув Ріе 50 55 бо
Тув Авр Агуд Уа1і ТПг Іїе ТПг Уа1і Авр Гпув Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд бек біц Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггеш Уа1 ТПг Уаї бек бек Аза бек ТПг пуб біу Рго бек Уаі1ї РПе 115 120 125
Рго Гей Аза Рго бек бек Ппув бек ТПг бек сбіу сіу ТПг Аїа Аїа Гей 130 135 140 с1у Сув Геп Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уаї бек Тгр 145 150 155 160
АвпобБек сі1у Аїа Іецйп ТПг бек біу Уаі Ні ТПг Рпе Рго Аїа Уаі1ї Іец 165 170 175 біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей бек Бек Уа1 Уа1 ТБПг Уаї Рго 5ег
Зо 180 185 190 зек Бек Гец біу ТПг біп ТПпг Тук І1е Сув Авп Уаі Авп Нів Гпув Рго 195 200 205 зек Авп ТПг Ппув Маі Авр пув Агуд Уаі бій Рго Ппув Бек Сув Авр Гув 210 215 220
ТПЕ Нів ТПкг Сув Рго Рго Суб Рго Аїа Рго біц Аза Азї1а с1у с1у Рго 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаії Маї Авр Уаі Бек Нів бій Авр 260 265 270
Ркго сіц Уаї пуб Рпе АвБп Тгр Туг Уаі Авр с1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
А1їа Ппув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Туг Авп бек ТПг Туг Аг Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о пув Аза Гей Рго Аї1а Рго І1е сій Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек пув Аїа пув біу сбіп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 60 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг Гпув Авп біп Уаї бек Гей ТЕПг 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 век Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТук Гув ТПг ТП Рго Рго Уаі1і Іец 385 390 395 400
Авр бек Авр біу бек Ррпе Рпе Гей Тук бек ТУув Гей ТПг Уаї Авр Тув 405 410 415 зек Агуд Тгр біп біп б1у Авп Уаі! РПе бек Сув Бек Уа1і Меє Нів сіц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445 «210» 266 «211» 445 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Важкий ланцюг гуманізованого антитіла ((МАТ до РО-1 людини 7(1.2)) «400» 266 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а
Зо 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук Бек РоПе ТПг бек Туг 20 25 30
Тер Меє Авп Тгр Уаі! Агуд сбіп Азїа Рго сіу сбіп с1у Іеп біц Тер І1е 35 40 45 сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тер Тец Авр біп Гпув РБПе 50 55 бо
Тув Авр Агуд Уа1і ТПг Іїе ТПг Уа1і Авр Гпув Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд Бек біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТП Гецп Уа1і ТПг Уа1ї бек бек Аїа бек ТПг Ппув с1у Рго бек Уа1! РіПе 115 120 125
Ркго Гец Аза Ркго Сув Бек Агуд Бек ТПг бек біц бек ТПг Аїа Аїа Гей 130 135 140 с1у Сув Геп Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр 145 150 155 160
АвпобБек сі1у Аїа Іецйп ТПг бек біу Уаі Ні ТПг Рпе Рго Аїа Уаі1ї Іец 60 165 170 175 біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей бек Бек Уа1 Уа1 ТБПг Уаї Рго 5ег 180 185 190 зек бек Гец біу ТП Гув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаі Авр Нів Гпув Рго 195 200 205 зек Авп ТПг Гуз УМаі Авр Гув Агд Уаі бій бек Ппув Тук о1у Рго Рго 210 215 220
Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго бій Робе Ге сіу с1іу Ркго бек Уаії РБіГе 225 230 235 240
Тецп Рпе Рго Рго Пув Рго Пув Авр ТПг Гей Меє І1їе бег Агд ТПг Рго 245 250 255 бі Маї ТПпг Сув Уаі1і Уа1 Уаі1 Авр Уаі Бек сбіп сбіц Авр Рго бій Уаї 260 265 270 біп Рпе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сіу Уаі біш Уа1 Нів Авп Аїа Гпув ТЕПг 275 280 285
ТПув Рго Агд бій бі біп Рбе Авп о бБег ТПг Туг Агуд Уаї Уаії бек Уаї 290 295 300
Тем ТПг Уаї Гецп Нів біп Авр Ткгр Гей АБп о сіу Ппув бій Тук Ппув Сув 305 310 315 320
Тпув Маї Бек Авп Ппув с1іу Гей Рго Бек Бек Іїе сій пуб ТПг І1е 5ег 325 330 335
Зо пуб Аїа Ггув сіу біп Рго Акуд бій Рго біп Уа1 Тук ТБг Гей Рго Рго 340 345 350 зек біп біц біц Меє ТПпг Гув Авп обіп Уаї бек Гей ТПг Сув Гей Уаї
З5 355 360 365
Тпув б1у Рпе Туг Рго Бек Авр Іїе Аїа Уаі бій Тер сій бБег АвБп 01Уу 370 375 380 біп Рго біц Авп о Авп Тук ГПув ТБг Тк Рго Рго Уаі Іей Авр 5Бег Авр 385 390 395 400 б1і1у бек Рпе Рпе Гей Туг бек Агуд Гей ТПг Уа1 Авр пуб бБег Агд Тгр 405 410 415 біп бій б1у Авп Уа1і Рпе бек Сув Бек Уа1і Меє Нів біц Аїа Іецй Нів 420 425 430
Авп оНів Тук ТіПг біп Гуз бек Гец бег Іец бек Те Ш1У 435 440 445 «2105 267 «2115 501 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Перший та третій поліпептидні ланцюги АВТ А 60 «2205 «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ
«222» (34)..(34) «223» Хаа34 являє собою А або с «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (307)..(307) «223» Хаа307 являє собою У або М «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (309)..(309) «223» ХааЗ309 являє собою Т або 5 «220» «221» МІ5С ЕЕАТОВЕ «222» (311)..(311) «223» ХааЗ31і1 являє собою Е або Т «4005 267
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Іїец бек ІТецйп бек Уаі ТПг Рго Щ1У 1 5 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек ІТецйц Іецп Нів 5бег 20 25 30
Авр Хаа пуб ТПг Тук Тец Авп Тгр ІТец ІТецй біп Ппув Рго с1у біп Рго
Зо Рго бі Акуд Гей І1е Тук Гей Уаї бек біц Гецп Авр бек сбіу Уаї Рго бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80
З5 зек Агуд Уаі біц Азїа б1цп Авр Уаі сіу Уа1 Тук Тук Сув Трр біп с1Уу 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу Тс Гув УМаї сій І1е Гув 40 100 105 110 сі1у б1у с1у Бек сбіу сіу сіу сіу біп Уаі біп Гей Уаі сбіп Бех щу 115 120 125 45 А1ї1а сій Уаї Пув Ппув Рго сіу Аїа бек Уа1! Ппув УМаії бек Сув ТУув А1а 130 135 140 зек сіу Тук бек РПе ТПг бек Туг Тер Меє АвБп Тгр Уаі Агдуд сіп Аї1а 145 150 155 160 50
Рго сіу біп с1у Те бій Тер І1е сС1у Маії І1ї1е Нів Рго Бек Авр 5ег 165 170 175 біц ТЕ Тер гей Авр обіп пув Робе Гпув Авр Акуд Уа! ТПг І1е ТіПг Уаї 55 180 185 190
Авр Ппув бек ТПг бек ТПг Аза Туг Меє бій Гей бек Бек Гей Агд бег 195 200 205 бо сі Авр ТПг АТа Уаї Туг Тук Сув Аїа Агкуд сбіц Нів Тугк сбіу ТПгЕ 5ег 210 215 220
Ркго Рпе Аїа Туг Ткгр б1у біп с1у ТПг Іец Уаї ТПг Уаі Бек Бех щу 225 230 235 240 сі1у Сув б1у сбіу с1у біц Маії Аїа Аїа Сув бій пув біц Уаї Аз1а Аїа 245 250 255
Тец бі гув сі Уаі Аїа Аїа Гей сі пув біц Уаі Аза Аїа Іец Сс1іц 260 265 270
Тпув бій бек Ппув Тук с1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго бій 275 280 285
Рпе Гей сіу біу Ркго бек Уаі Рбе Іїецй Рпе Рго Рго Пув Рго ГПув Авр 290 295 300
ТПЕ Гей Хаа Іїе Хаа Агкд Хаа Рго сіц Уаі! ТПг Сув Уаї Уаї Уаї Авр 305 310 315 320
Уаї бек біп бій Авр Рго сбіц Маї сбіп Рпе Азп Ткгр Туг Уаі АБр Щ1У 325 330 335
Ууаї бі Уаі Нів Авп Аза пуб ТПг пуб Рго Агд біц бі бі1іп Рпбе Авп 340 345 350 зек ТПг Тут Агд Уаії Уаї бек Уаії Іец ТПпг Уаї Гей Нів сбіп Авр Тгр 355 3З6о 365
Тец Авп б1у Ппув бій Тук Ппув Сув Ппув Уа1і Бек Авп Гпув С1у Іецй Ркго
Зо 370 375 380 зек бек Ії1е біцш Гпув ТПг І1їе бек їув Аїа Гпув с1у біп Рго Агд сіц 385 390 395 400
Рго сіп Уа1! Тук ТПЕ Гей Рго Рго бек біп біц бі Меє ТПг Тув Авп 405 410 415 біп Маї бек Гей ТПг Сув Гей Уаі Ппув с1у Рпе Тук Рго бБег Авр І1е 420 425 430
А1їа Уа1 сіц Тгр біц бек АвБп о біу біп Рго бій Авп Авп Туг Ппув ТПг 435 440 445
ТПЕ Рго Ркго Уаі1! Ггец Авр бБег Авр сіу бек РіПе РоПе Іецй Туг бек Аг4д 450 455 460
Тецп ТПпг Уаії Авр Гпув Бек Агуд Тгр біп біц с1у Авп Уаї РПе бек Сув 465 470 475 480 зек Уаії Меє Нів сіц Аїа Гей Ні Авп Нів Туг ТПг сіп Пув бек Іецй 485 490 495 зек Гей бек Іец с1У 500 «210» 268 «2115 273 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 60 «220»
«223» Другий та четвертий поліпептидні ланцюги АВТ А «4005» 268 січ Іїе УМаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Тей бек Гей бек Рго б1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Авп Тер Рпе сіп біп Гув Рго б1у біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 50 55 бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек с1у ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гей бій Рго б1іп Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу сі1у ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110 сі1у б1у бек сіу сіу сбіу сіу сбіп Уаі сбіп Гей Уа1і! сіп бек С1у А1а 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег
Зо 130 135 140 сб1і1у Тук ТПг Рпе ТПг Авп Тук сіу Меє Авп Тер Уаі Агд сСіп Аїа Рго 145 150 155 160 сіу біп сб1у Геп сій Ткгр Меє с1і1у Тгр І1е АвБп ТПг Туг ТПг с1у с1ц 165 170 175 зек ТПг Туг Аза Авр Авр Рпе біц б1у Акуд Рпе Уаі РпПе Бек Меє Авр 180 185 190
ТПг Бек Аїа бек ТПг Аїа Туг Гей сіп І1е бек бек ІТецй Гув Аїа с1и 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Агкд бій бек Гей Туг Авр Тук Туг 210 215 220 зек Меє Авр Туг Тгр б1у біп сбі1у ТП ТПг Уаї ТПг Уаі Бек Бех щу 225 230 235 240 сі1у Сув б1у сбіу с1у Ппув Маії Аїа Аїа Сув Ппув сі їув Уаї Аї1а Аїа 245 250 255
Тец гув бій Ппув Уаі Аза Аїа Гей пув біц пув Уаі Аїа Аїа Іецй Гу 260 265 270 січ «2105 269 60 «2115 571 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» Перший та третій поліпептидні ланцюги АВТ 0 «4005» 269 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 50 55 бо
Агуд Рпе бек біу бек сіу бек б1іу ТПг Авр Робе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110 сі1у б1у бек сіу сіу сбіу сіу сбіп Уаі сбіп Гей Уа1і! сіп бек С1у А1а
Зо 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег 130 135 140 сіу Тук ТПЕ Рре ТПг Авп Туг с1і1у Мес АБп Тгр Уаі Акуд сбіп Аза Рго 145 150 155 160 сбі1у бі1іп сб1у Гей бі Тер Меє сі1у Тер Іїе Авп ТПг Туг ТПг с1у с1ц 165 170 175 зек ТПг Туг Аза Авр Авр Рпе біц б1у Агкуд Рпе Уаі РпПе Бек Меє Авр 180 185 190
ТПг Бек Аїа бек ТПг Аїа Туг Гей сіп І1е бек бек ІТецй Гув Аїа с1и 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Агкд біц бек Гей Тукг Авр Тук Туг 210 215 220 зек Меє Авр Туг Тгр б1іу сіп с1іу ТПг ТБг Уаї ТрПг Уаї бек бек Ієцй 225 230 235 240 сі1у б1у сб1у Бек с1у Аїа Бек ТПг Ппув с1іу Рго бек Уаі! РПпе Рго Іецй 245 250 255
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув 260 265 270
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаі ТіПг Уаї бек Тер Авп 5ег 60 275 280 285 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 290 295 300 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі Уа1і ТПг Уа1 Рго бек бек в5ег 305 310 315 320
Тец б1у ТПг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаі Авр Нів пуб Рго бек Авп 325 330 335
ТП Ппув Уаії Авр їув Агкгуд УМаії сій бек пув Тук б1у Рго Рго Сув Рго 340 345 350
Ркго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Іїец біу бі1у Рго Бек Уа1і Рпе Гей Ріє 355 3З6о 365
Ркго Рго Пув Рго Гу Авр ТПг Гей Туг Іїе ТПг Агуд біц Ркго сій Уаї 370 375 380
ТПгЕ Сув Уа1 Уаї Уаї Авр Уаії бек сбіп біц Авр Рго бій Уаії сіп РПе 385 390 395 400
АвпоТер Тук Уаії Авр б1у Уаі сій Уаі Нів АвБп Аза Ппув ТПкгЕ Гпув Рго 405 410 415
Агд бій бій біп Рбе АвБп бек ТПг Туг Акуд Уаї Уаії бек Уаії Іей ТПг 420 425 430
Уаї Гей Нів сбіп Авр Тер Гей Авп сіу Ппув сій Тук Ппув Сув КГув Уаї 435 440 445
Зо зек Авп о Мпув біу Гей Рго бек бек І1е біцп Ппув ТПг Іїе Бек Гув Аї1а 450 455 460
Тпув б1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаі Тук ТПг Гей Рго Рго бек біп 465 470 475 480 бі бій Меє ТПпг пув Авп біп Уаії Бек Гей ТпПг Сув Гей Уаї пув с1У 485 490 495
Рпе Тук Ркго бек Авр І1їе Аїа Уаі сій Тгр бій Бек АвБп с1у біп Рго 500 505 510 бішц Авп о Авп о Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаі Гей Авр бБег Авр Сіу б5ег 515 520 525
Рпе РібПе Гпец Туг бек Агуд Гей ТПг Уаі Авр Гув Бек Агд Тер сбіп сіц 530 535 540 б1у Авп Уаі РПпе бек Сув бек Уаі Меє Нів сій Аза Гец Нібв Авп Нів 545 550 555 560
Тук ТпПкг біп Ппув бек Гец бек Гей бек ГІец б1Уу 565 570 «2105 270 «2115 352 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 60 «2205 «223» Другий та четвертий поліпептидні ланцюги РАВТ р
«4005 270
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Гец бек ІТецйп бек Уаі ТПг Рго Щ1У 1 2 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег 20 25 30
Авр Аїа Ппув ТПг Тук Гецш Авп Тгр Гей Гей біп пуб Рго с1у біп Рго 35 40 45
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго 50 55 бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу Тс Гув УМаї сій І1е Гув 100 105 110 сіу біу б1у Бек сіу с1у сбіу с1у біп Уаі сбіп Гей Уаі сбіп бБег Щ1Уу 115 120 125
А1їа сій Уаї Ппув пув Рго бі1у Аїа бек Уаії Ппув Уа1ії Бек Сув Гув Аїа 130 135 140
Зо зек сіу Тук бек Рпе ТПг бек Туг Тгр Меє АвБп Тгр Уаі Агдуд сіп Аї1а 145 150 155 160
Рго сіу біп с1у Те бій Тер І1е сС1у Маії І1ї1е Нів Рго Бек Авр 5ег
З5 165 170 175 біц ТЕ Тер гей Авр обіп пуб Рпе Гпув Авр Акуд Уа! ТПг І1е ТіПг Уаї 180 185 190
Авр Ппув бек ТПг бек ТПг Аїа Тук Меє бій Гей бек бек Гецп Агк9д 5ег 195 200 205 бі Авр ТПпг Аза Уа1ї Тук Тук Сув Аза Агуд бій Нів Тук с1і1у ТПг 5ег 210 215 220
Ркго Рпе Аїа Туг Ткгр б1у біп сбі1у ТПг Іецй Уаї ТПг Уа1ї Бек бек ГІец 225 230 235 240 сі1у б1у сб1у Бек сб1у Агуд ТПг Уаі Аза Аїа Рго бек Уаії Робе І1е РБПе 245 250 255
Ркго Рго Бек Авр біц біп Гей Гув бек біу ТПг Аїа Бек Уа1 Уаї1ї Сув 260 265 270
Тем Гей АБп о Авп Рпе Туг Рго Акуд біц Аза Ппув Уаії біп Тгр Ппув Уаї 275 280 285
Авр Авп Аза Гец біп бек б1у Авп бек біп бій бек Уаі ТП сій сіп 290 295 300 60
Авр Бек Гпув Авр бек ТПг Тук бек Іецй бек бек ТПг Гей ТПг Гей б5ег
305 310 315 320 пув Аза Авр Тук бій Ппув Нів Ппув Уа1і Туг Аїа Сув біц Уаї Тік Нів 325 330 335 біп б1у Гей Бек Бек Рго Уа1 ТПг пув бек Робе Авп Агд сбіу біц Сув 340 345 350 «2105 271 «2115 571 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Перший та третій поліпептидні ланцюги АВТ Е «4005 271
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Іїец бек ІТецйп бек Уаі ТПг Рго Щ1У 1 2 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег 20 25 30
Авр Аїа Ппув ТПг Тук Гецш Авп Тгр Гей Гей біп пуб Рго с1у біп Рго
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго бо
Зо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей Гпув5 І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У
З5 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу ТПг Гуз УМаї сій І1е Гув 100 105 110 40 сіу біу б1у Бек сіу с1у сбіу с1у біп Уаі сбіп Гей Уаі сбіп бБег Щ1Уу 115 120 125
А1їа сій Уаї Ппув пуб Рго бі1у Аїа бек Уаії Ппув Уа1 бек Сув ГУув А1а 130 135 140 45 зек сіу Тук бек Рпе ТПг бек Туг Тгр Меє АвБп Тгр Уаі Агдуд сіп Аї1а 145 150 155 160
Рго сіу біп с1у Те бій Тер І1е сС1у Маії Іїе Нів Рго бек Авр 5ег 50 165 170 175 біц ТЕ Тер гей Авр обіп пуб Рпе Гпув Авр Акуд Уа! ТПг І1е ТіПг Уаї 180 185 190 55 Авр Ппув бек ТПг бек ТПг Аїа Тук Меєсє сіц Гей бек бек ІТецй Агд 5ег 195 200 205 бі Авр ТПпг Аза Уа1ї Тук Тук Сув Аза Агуд бій Нів Тук с1і1у ТПг 5ег 210 215 220 60
Ркго Рпе Аїа Туг Ткгр б1у біп сіу ТПг Ггеш Уа1! ТПг Уаї бек бек Ієей
225 230 235 240 сі1у б1у сб1у Бек с1у Аїа Бек ТПг Ппув с1іу Рго бек Уаї Ріе Рго Іей 245 250 255
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек бі Бек ТПг Аза Аїа Іец С1у Сув 260 265 270
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 275 280 285 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рібе Рго Аза Уаї Гец сіп 5ег 290 295 300 зек с1у Пен Тук Бек Гей бек бек Уаі Уа1 ТПг Уа1ї Рго бек бек 5бег 305 310 315 320
Тец б1у ТПг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп о Уаі Авр Нів пуб Рго бек Авп 325 330 335
ТПЕ Ппув Уаі1 Авр Гув Агд Уаі! сій бек пув Тук бі1у Рго Рго Сув Рго 340 345 350
Ркго Сув Рго Аїа Ркго бій Рпе Іїец біу бі1у Рго Бек Уа1і Рпе Гей Ріє 355 3З6о 365
Ркго Рго Пув Рго Гу Авр ТПг Іец Туг І1е ТПпг Агуд бій Рго сіц Уаї 370 375 380
Зо ТП Сув Уа1ї Уа1ї Ма1 Авр Уаії бек біп бій Авр Рго сбіц Уаї сіп Ріе 385 390 395 400
АвпоТер Тук Уаії Авр б1у Уаі сіц Уаі Нів АвБп Аза Ппув ТПкгЕ Гпув Рго 405 410 415
З5
Акуд бій бі біп Рбе Авп бек ТПг Туг Агуд Уаії Уаії Бек Уаі1і Гей ТЕГ 420 425 430
Уаї Гей Нів сбіп Авр Тер Гей Авп сбіу Ппув сій Тук Ппув Сув КГув Уаї 435 440 445 зек Авп о Мпув біу Гей Рго бек бек І1е біцп Ппув ТПг Іїе Бек Гув Аї1а 450 455 460 пув біу біп Рго Акуд бій Рго біп УМаї Тук ТПг Гей Рго Рго бек сіп 465 470 475 480 бі бій Меє ТПпг пув Авп біп Уаії Бек Гей ТпПг Сув Гей Уаї пув с1У 485 490 495
Рпе Тукг Рго Бек Авр І1е Аї1а Уаі біцп Тер бій бек АвБп б1у сбіп Рго 500 505 510 бішц Авп о Авп о Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаі Гей Авр бБег Авр Сіу б5ег 515 520 525
Рпе РібПе Гпец Туг бек Агуд Гей ТПг Уаі Авр Гув Бек Агд Тер сбіп сіц 530 535 540 бо с1у Авп Уаі! РірПе бек Сув бек Уа1! Мес Ні сій Аїа Іецй Нів АвБп Нів 545 550 555 560
Тук ТпПкг біп Ппув бек Гец бек Гей бек ГІец б1Уу 565 570 «2105 272 «2115 352 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий та четвертий поліпептидні ланцюги РАВБТ Е «4005 ЩД 272 січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго Аїа ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 25 50 55 бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80
Зо зек Гей бій Рго б1іп Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110
З5 сі1у б1у бек сіу сіу сбіу сіу сбіп Уаі сбіп Гей Уа1і! сіп бек С1у А1а 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег 40 130 135 140 сб1і1у Тук ТПг Рпе ТПг Авп Тук сіу Меє Авп Тер Уаі Агд сСіп Аїа Рго 145 150 155 160 45 сіу біп сб1у Геп сій Ткгр Меє с1і1у Тгр І1е АвБп ТПг Туг ТПг с1у с1ц 165 170 175 зек ТПг Туг Аза Авр Авр Рпе біц б1у Акуд Рпе Уаі РпПе Бек Меє Авр 180 185 190
ТПг Бек Аїа бек ТПг Аїа Туг Гей сіп І1е бек бек ІТецй Гув Аїа с1и 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Агкд бій бек Гей Туг Авр Тук Туг 210 215 220 зек Меє Авр Туг Тгр б1у біп сбі1у ТПг ТПг о Уаї ТПг Уа1ї Бек бек ГІец 225 230 235 240 бо сіу біу б1у Бек с1у Акуд ТПг Уаі! Аза Аза Рго бек Уа1і Рбе І1е Ріе 245 250 255
Ркго Рго Бек Авр біц біп Гей Гув бек біу ТПг Аїа Бек Уа1 Уаї1ї Сув 260 265 270
Тем Гей АБп о Авп Рпе Туг Рго Акуд біц Аза Ппув Уаії біп Тгр Ппув Уаї 275 280 285
Авр Авп Аза Гец біп бек б1у Авп бек біп бій бек Уаі ТП сій сіп 290 295 300
Авр Бек Гпув Авр бек ТПг Тук бек Іецй бек бек ТПг Гей ТПг Гей б5ег 305 310 315 320 пуб Аза Авр Тук бій Ппув Нів Ппув Уа1і Туг Аїа Сув біц Уаї Тік Нів 325 330 335 біп б1у Гей Бек Бек Рго Уа1 ТПг пув бек Робе Авп Агд сбіу біц Сув 340 345 350 «2105 273 «211» 448 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Перший поліпептидний ланцюг РАВБТ Е «4005 273
Зо сіп Уаії біп Гецп Уаії сіп бек бі1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Гув Рго с1у Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук Бек Рпе ТПг бек Туг 20 25 30
З5
ТЕр Меє Авп Тер Уаі Агуд біп Аза Рго сбіу біп сб1у Іейп бій Тгр Ше сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тер Гей Авр біп Гпув РПе 40 50 55 бо
Тув Авр Агуд Уа1і ТПг Іїе ТПг Уа1і Авр Гпув Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80 45 Меє бій Гей бек бек ІТей Агуд бек біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггеш Уа1 ТПг Уаї бек бек Аза бек ТПг пув с1іу Рго Бек Уа1 Ре 115 120 125
Ркго Гец Аза Ркго бек бек пув бек ТПг бек бі1у с1у ТПг Аїа Аїа Гей 130 135 140 с1у Сув Геп Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго біц Ркго Уа! ТПг Уаї бек Тгр 145 150 155 160 бо АвБп бек с1у Аїа Гей ТПг бек сіу Уаії Нів ТПг Рре Рго Аїа Уаі1 Іецй 165 170 175 біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей бек бек Уаії Уаії ТПг Уаї Рго 5ег 180 185 190
Ззек бек Пес біу ТПкгЕ біп ТПг Тук Іїе Сув Авп Уаі Авп Нів Гув Рго 195 200 205 век Авп ТПг Гуз Маі Авр Гув Агуд Уа1і бій Ркго Ппув бек Сув Авр Гув 210 215 220
ТПЕ Нів ТПкг Сув Рго Рго Суб Рго Аїа Рго біц Аза Азї1а с1у с1у Рго 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго пуб Авр ТПг Гей Туг Ії1е ТЕГ 245 250 255
Акуд бій Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаії Маї Авр Уаі Бек Нів бій Авр 260 265 270
Рго сі Уа1! Ппув Рре Авп Тер Туг Уаі Авр с1у Уаі сій Уаї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Тук Авп обБег ТПг Туг Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о пув Аза Гей Рго Аї1а Рго І1е сій Гув
Зо 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек пув Аїа пув біу сбіп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тем Рго Рго Бек Агуд бій бій Меє ТПг пуб Авп о біп Уа1ї! бек Гей 5ег 355 3З6о 365
Сув А1ї1а Уаї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 век Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТук Гув ТПг ТП Рго Рго Уаі1і Іец 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Уаї бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Агуд Тгр біп біп б1у Авп Уаі! РПе бек Сув Бек Уа1і Меє Нів сіц 420 425 430
А1їа Ггеч Нів Аїа Ппув Тук ТПпПкК біп Ппув бек Гей бек Гей бек Рго б1Уу 435 440 445 «2105 274 «211» 218 «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий та п'ятий поліпептидні ланцюги АВТ Е 60 «4005 274 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 сій Агуд Азїа ТБ оГецй бек Сув Акуд Аїа бек бій бек Уа1і Авр АквБп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Ав5п Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег 50 55 бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 сі Маї Рго Тук ТПг Рбе сіу сіу сбі1у ТПЕ Ппув Уаії січ І1їе Гпув Агд 100 105 110
ТпПг Уаі1 Аза Аза Рго бек Уаі! Рпе І1їе Рібе Рго Рго б5ег АБр бій сіп 115 120 125
Тецп Кпув бек сіу ТПг Аїа бек Уаі Уаї Сув Гей Гей Авп Авп Рое Туг 130 135 140
Рго Агд біц Аза Гуз УМаї біп Тер Гуз Маії Авр АвБп Аїа Гей сіп б5ег
Зо 145 150 155 160 б1у АвБп бек біп бі Бек Уа1 ТПпг бі біп Авр бек Пув Авр бек ТЕГ 165 170 175
Тук Бек Гей бек бек ТПг Гей ТПг Гей бек Пув Аза АБр Тук сі Тув 180 185 190
Нів Ппув Уа1 Туг Аїа Сув біц Уа1! ТБг Нів біп б1у ІТецй бек бек Рго 195 200 205
Уаї ТПпгЕ Ппув Бек Рпе Авп Агд сіу сіц Сув 210 215 «2105 275 «2115 732 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Третій поліпептидний ланцюг АВТ Е «4005 275 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30 бо Тер Меє Авп Тгр Уаі! Агуд сбіп Азїа Рго сіу сбіп с1у Іеп біц Тер І1е 35 40 45 сі1у Маї І1їе Нів Рго Бек Авр Бек бій ТПг Тер Гей Авр біп Тув РБПе 50 55 бо пув Авр Агуд УМаії ТПг Іїе ТПг Уа1ї Авр Ппув бек ТПг бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггеш Уа1 ТПг Уаї бек бек Аза бек ТПг пуб біу Рго бек Уаі1ї РПе 115 120 125
Ркго Гец Аза Ркго бек бек пув бек ТПг бек бі1у с1у ТПг Аїа Аїа Гей 130 135 140 сіу Сув Геш Маї Ппув Авр Тукг РібПе Рго бі Рго Уаі ТіПг Уаї Бек Тер 145 150 155 160
АвпобБек сі1у Аїа Іецйп ТПг бек біу Уаі Ні ТПг Рпе Рго Аїа Уаі1ї Іец 165 170 175 біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей бек Бек Уа1 Уа1 ТБПг Уаї Рго 5ег 180 185 190 зек Бек Гец біу ТПг біп ТПпг Тук І1е Сув Авп Уаі Авп Нів Гпув Рго
Зо 195 200 205 век Авп ТПг Гуз Маії Авр Гув Агд Уаї бій Рго Ппув Бек Сув Авр Гув 210 215 220
ТПЕ Нів ТПкК Сув Рго Рго Суб Рго Аза Рго біц Аїа Аїа с1у с1Уу Ркго 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Гпув Рго Гув Авр ТПг Гей Туг Ії1е ТЕГ 245 250 255
Акуд бій Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї Маї Авр Уаії Бек Нів бій Авр 260 265 270
Ркго сіц Уаї пуб Рпе АвБп Тгр Туг Уаі Авр с1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Тук Авп обБег ТПг Туг Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Маії Гей ТПг Уаї Ге Нів сіп Авр Тер тей АБп с1у Ппув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп пуб Аза Гей Рго Аїа Рго Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек пув Аїа пув біу сбіп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг Гпув Авп о біп Уаї бек ГІеч Тгр 60 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Рго бій АвБп Авп о Туг Гув ТПг Тбг Рго Рго Уаї Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Акад Ткгр біп біп б1у Авп Уа! Ріе бек Сув бек Уа1і Меєсє Нів сій 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445 сі1у б1у сб1у Бек сіу сіу сіу Бек сіу біу б1у Авр І1е Уа1ї Меє ТПг 450 455 460 біп ТП Рго Гей бек Гей бек Уаі ТПг Рго сіу сіп Рго Аїа бек І1е 465 470 475 480 зек Сув Пув бек бек біп бек Гей Гей Нів бек Авр Аїа пуб ТПг Туг 485 490 495
Тем АвБп Тер Гецп Гей біп Гув Рго біу біп Рго Рго бій Агуд Гецй Іе 500 505 510
Тук Ггеш Уа1 бек біц Іїец Авр бек сіу Уаі Рго Авр Агд Рпе Бех щ1У 515 520 525
Зо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іец Гув І1е бБег Агуд Уаі сій Аї1а 530 535 540 бі Авр Уаї сіу Уа1ї Тук Тук Сув Тгр біп с1іу ТПкг Нів Робе Рго Туг 545 550 555 560
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гуз Уаї сіц І1е ув с1у с1у с1у Бех щЩУ 565 570 575 сіу бі1у б1у біп Уаі біп Гей Уа! сіп бек с1іу Аїа бій Уаї Ппув Гув 580 585 590
Рго сіу Аїа бек Уаі Гув Уаії бек Сув Гув Аї1а бек с1у Тук Бек Ріє 595 бо 605
ТПЕ Бек Тукг Тер Мес Авп Тгр Уа1 Агд біп Аза Рго бі1у біп с1Уу Іецй 610 615 620 біш Тер І1е сіу Уаі Іїе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тгр Іецй Авр 625 630 635 640 біп гув Рпе Ппув Авр Агуд Уа1 ТПг І1їе ТПг Уа1 Авр Пув бек ТПг 5ег 645 650 655
ТПг АТїа Тук Меє бій Гец бек бек Гецп Агуд бек бій АвБр ТПг Аїа Уаї1ї 6бво 665 670
Тук Тук Сув Аїа Акд біц Нів Тук сіу ТБПг бек Рго Рпе Аза Туг Тгр 675 68 685 60 сбі1у біп сб1у ТПпг Геш Уаі1і ТПг Уаії бек Бек сіу сіу Сув сіу б1у 1У
690 695 700 бі Маї Аза Аза гейш біш пув сі Уаі Аїа Аїа Гей сіц пув біц Уаї 705 710 715 720
Аза Аїа Гецй сіц пув біц Маі Аїа Аїа Іецш б1ц Гув 725 730 «2105 276 «2115 273 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Четвертий поліпептидний ланцюг АВТ ЕЕ «4005 276 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Пув5 Рго с1у біп Рго Рго ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег бо
Зо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув
З5 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110 40 сіу бі1у бек сбіу сі1у б1у біу біп Уаї сбіп Гецп Уаі сіп бек с1у Аїа 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег 130 135 140 45 сб1і1у Тук ТПг Рпе ТПг Авп Тук сіу Меє Авп Тер Уаі Агд сСіп Аїа Рго 145 150 155 160 сбі1у бі1іп сб1у Гей бі Тер Меє сі1у Тер Іїе Авп ТПг Туг ТПг с1у с1ц 50 165 170 175 зек ТПг Туг Аза Авр Авр Рпе біц б1у Акуд Рпе Уаі РпПе Бек Меє Авр 180 185 190 55 ТПг Бек Аїа бек ТПг Аїа Тук Ге біп І1їе бек бек Іец Гпув Аїа с1іци 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Агкд бій бек Гей Туг Авр Тук Туг 210 215 220 60 зек Меє Авр Туг Тгр б1у біп сбі1у ТП ТПг Уаї ТПг Уаі Бек Бех щу
225 230 235 240 с1у Сув б1у сіу с1у пув Уаі1 Аїа Аїа Гей пув сій пув Уаії Аза А1а 245 250 255
Тец гув бій Ппув Уаі Аза Аїа Гей пув біц пув Уаі Аїа Аїа Іецй Гу 260 265 270 січ «2105 277 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Перший поліпептидний ланцюг АВТ о «4005 ЩД 277 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу Тук ТП Рпе ТПг Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє АвБп Тгр Уаі Агуд сбіп Аза Рго сіу біп сіу Гец біц Тгр Меє
Зо сб1у Тер І1е АвБп ТПг Тук ТПг сіу бій Бек ТПг Туг Аза АвБр АвБр РіПе бо бі б1у Акуд Рпе Уаі РпПе бек Ме Авр ТПг бек Аїа бек ТПг Аїа Туг 35 65 70 75 80
Тец біп І1їе бек Бек Гей пув Аза бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95 40 А1а Агуд бій бек Гей Тук Авр Тук Тук бек Меєс Авр Тугє Тер С1у сіп 100 105 110 бі1у ТПг ТпПг оУаї ТПг о Уа1ї бек Бек Аза Бек ТПг Ппув сіу Ркго бек Уаї 115 120 125 45
Рпе Рго Гец Аза Ркго бек бек пуб бек ТПг бек сіу с1у ТПг АїТїа А1а 130 135 140
Тец б1у Сув Гей Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Ркго Уаї ТіПг Уаї1ї 5ег 50 145 150 155 160
ТЕр Ап бек сіу Аїа Гец ТПг бек сіу Уаії Нів ТП Рпе Рго Аїа Уаї 165 170 175 55 Пес біп бек бек с1у Гей Тукг бек Гей бек бек Уаі Уа1 ТіПг Уаї Рго 180 185 190 зек бек бек Іец біу ТПг біп Тс Тук І1ї1е Сув Авп Уаії Авп о Нів Гув 195 200 205 60
Ркго Бек Авп о ТПг Гуз Маї Авр їубв Агд Уаії бій Рго Ппув Бек Сув Авр
210 215 220
Тпув ТПЕ Нів ТП Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго бі1іп Аза Аїа с01у щу 225 230 235 240
Ркго Бек Уаії РпПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Туг І1е 245 250 255
ТПЕ Агуд бій Рго біц Уаі! ТПг Сув Уаії Уа1і Уа1і Авр Уа1і бек Нів сій 260 265 270
Авр Ркго сій Уаї пуб Рбе Авп о Тгр Туг Уаі Авр б1у Уаі сі Уаї Нів 275 280 285
Авп о Аїа пув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Тук Авп бек ТПг Туг Агд 290 295 300
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1і Бек Авп Гув Аїа Тїец Рго Аї1а Рго ІШе сіи 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Ппув с1іу біп Рго Агуд бій Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бБег Агуд біц біц Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
Зо зек Сув Аїа Маї Ппув с1у Рпе Тук Рго бек Авр І1їе Аїа Уаі сій Тгр 370 375 380 бі бек АвБп сіу біп Рго бій Авп Авп Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаї 385 390 395 400
З5
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гей Уа1і бек Ппув Гей ТПг Уа1ї Авр 405 410 415
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Аїа Ппув Тук ТПг сбіп Ппув бек Гей бек Гец бек Рго 435 440 445
Ку «2105 278 «2115» 219 «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий та п'ятий поліпептидні ланцюги АВТ о «4005 278
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Іїец бек ІТецйп бек Уаі ТПг Рго Щ1У 1 5 10 15 60 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег
20 25 30
Авр Аза пуб ТПг Тук Тец Авп Тгр ІТец ІТецй біп Ппув Рго с1у біп Рго 35 40 45
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго 50 55 бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Ррпе сіу сіу с1у ТБг Гпув УМаії сій І1е Туз 100 105 110
Акуд ТВП Уаії Аза Аза Ркго бек Уа! Рпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр с1ц 115 120 125 біп Гей Гпув Бек с1іу ТПг Аїа бек Уаі Уа1 Сув Гей Гец Авп Авп Ріе 130 135 140
Тук Рго Акуд сіц Аїа пув Уаі сіп Тер пув Уаії Авр АБп Аза Іец сіп 145 150 155 160 зек сб1у Авп бек біп бій бек Уаі Тс біц біп Авр бек Ппув Авр б5ег 165 170 175
Зо ТПг Тук бек Гей бек бек ТПг Гей ТПг Гей бек Гув Аїа Авр Тук с1іци 180 185 190
Тпув Нів Гпув Уаї Туг Аїа Сув бій Уаі ТПг Нів сіп сіу Гец бек б5ег 195 200 205
З5
Рко Уаї ТіПг пуб бек Рпе АБп Агуд сбі1у бій Сув 210 215 «2105 279 40 «2115 732 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» 45 «223» Третій поліпептидний ланцюг АВТ о «4005 279 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 50 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авп о Туг 20 25 30 55 сіу Меє АБп Тгр Уаі Акуд біп Аїа Рго сбі1у сбіп с1у Те бій Тгр Меє сб1у Тер І1е АвБп ТПг Тук ТПг сіу бій Бек ТПг Туг Аза АвБр АвБр РіПе бо 60 бі б1у Акуд Рпе Уаі РпПе бек Ме Авр ТПг бек Аїа бек ТПг Аїа Туг
65 70 75 80
Тец біп І1їе бек Бек Гей пув Аза бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд бій бек Іец Тук Авр Туг Тук бек Меє Авр Тугє Тер 1у сіп 100 105 110 бі1у ТПг ТпПг оУаї ТПг о Уа1ї бек Бек Аза Бек ТПг Ппув сіу Ркго бек Уаї 115 120 125
Рпе Рго Гец Аза Ркго бек бек пуб бек ТПг бек сіу с1у ТПг Аз1а Аї1а 130 135 140
Те біу Сув Гецп Уаї Ппув Авр Тук Рібе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уаї 5екг 145 150 155 160
ТЕр Ап бек сіу Аїа Гец ТПг бек сіу Уаії Ні ТП Рпе Рго Аїа Уаї 165 170 175
Тецп біп бек бек с1іу Гей Тук Бек Гей бек бек Уа1і Уаї ТіПг Уаї1ї Ркго 180 185 190 зек бек бек Іец бі1іу ТПг біп ТП Тук І1ї1е Сув Авп Уаі Авп Нів Гув 195 200 205
Ркго Бек Авп о ТПг Гуз Маї Авр їубв Агд Уаії бій Рго Ппув Бек Сув Авр 210 215 220
Зо Пув ТПг Нів ТПКг Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго сій Аїа Аїа с1у С0Щ1У 225 230 235 240
Ркго Бек Уаії РпПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Туг І1е 245 250 255
З5
ТПЕ Агуд бій Рго біц Уаї ТБПг Сув Уаї Уаї Уаї Авр Уаї бек Нів с1ци 260 265 270
Авр Рго сіц Уаї Гуз Рпе Авп Тгр Туг Уаі Авр сіу Уаі сій Уаї Нів 275 280 285
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Туг Авп о бБегк ТПг Туг Агд 290 295 300
Уаї Уаї Бек Уаї Гей ТБг Уаї Іїейп Нів біп Авр Тер тей АвБп с1Уу Тув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек АвБп Гпув Аїа Гей Рго Аза Рго І1е с1іц 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бБег Агуд біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТЕр Сув гейш Уа1! пув бі1у Робе Туг Рго бБег Авр Іїе Аїа Уаі1і сій Тгр 370 375 380 бо бій бек АБп о біу біп Ркго бій Авп Авп о Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаї 385 390 395 400
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гец Туг бек пуб Тецй ТПг Уаії Авр 405 410 415 пув бек Агуд Тер біп біп б1у Авп Уаї Ріре бек Сув бек Уаї Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Туг ТПг біп пуб бек ІТецй бек Гецй бек Рго 435 440 445 сі1у б1у сб1у сіу Бек сбіу сіу сіу Бек сбіу сіу сіу сій І1е Уаї Іей 450 455 460
ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Іец бек Гей бек Рго сіу бій Агд Аїа ТЕПг 465 470 475 480
Тец бек Сув Агуд Аїа Бек бій бек Уаі Авр Авп Тук сіу Меє бек РіПе 485 490 495
Меє АБп Тер Рпе сіп біп пуб Рго с1іу біп Ркго Рго Пув Гец Ге І1е 500 505 510
Нів Аїа Аза бек Авп о біп біу бек біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У 515 520 525 зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 530 535 540 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Рпе Сув сбіп біп Бек пув біц Уаї Рго Туг
Зо 545 550 555 560
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гув Уаї сіц І1е ув с1у с1у сС1у Бех щЩУ 565 570 575 сіу бі1у б1у біп Уаі сбіп Гей Уа! сіп бек с1іу Аїа бій Уаї Ппув Гув 580 585 590
Рго сіу Аїа бек Уаі Гув Уаії бек Сув Гув Аї1а бек с1у Тук Бек Ріє 595 бо 605
ТПЕ Бек Тукг Тер Мес Авп Тгр Уа1 Агд біп Аза Рго бі1у біп с1Уу Іецй 610 615 620 біш Тер І1е сіу Уаі Іїе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тгр Іецй Авр 625 630 635 640 біп гув Рпе Ппув Авр Агуд Уа1 ТПг І1їе ТПг Уа1 Авр Пув бек ТПг 5ег 645 650 655
ТПг АТїа Тук Меє бій Гец бек бек Гецп Агуд бек бій АвБр ТПг Аїа Уаї1ї 6бво 665 670
Тук Тук Сув Аїа Акд біц Нів Тук сіу ТБПг бек Рго Рпе Аза Туг Тгр 675 68 685 сбі1у біп сб1у ТПпг Геш Уаі1і ТПг Уаії бек Бек сіу сіу Сув сіу б1у 1У 690 695 700 бі Маї Аза Аза гейш біш пув сі Уаі Аїа Аїа Гей сіц пув біц Уаї бо 705 710 715 720
Аза Аїа Гецй сіц пув біц Маі Аїа Аїа Іецш б1ц Гув 725 730 «2105» 280 «2115 272 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Четвертий поліпептидний ланцюг РАВТ б «4005» 280 біц І1е Уаї Гей ТПг біп Бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Пув5 Рго с1у біп Рго Рго ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег бо 25
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув
Зо 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110 35 сіу бі1у бек сбіу сі1у б1у біу біп Уаї сбіп Гецп Уаі сіп бек с1у Аїа 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег 130 135 140 40 сб1і1у Тук бек Рпе ТПг Бек Туг Тер Меє Ап Тер Уаі Агд сСіп Аїа Рго 145 150 155 160 сбі1у бі1іп с1у Гей бі Тер Іїе сіу Уаі Іїе Нів Рго бБег Авр бек бій 45 165 170 175
ТПЕ Тер гей Авр біп пув Робе пуб Авр Агд Уа! ТПг І1е ТПг Уа1ї Авр 180 185 190 50 пув бек ТПг Бек ТПг Аїа Туг Меє бій Гей бек бек Гей Агуд бек сіц 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Агкгд біцп Нів Тук с1у ТПкг бек Рго 210 215 220 55
Рпе Аїа Туг Тгр б1у біп сб1у ТБг Іец Уаі! ТПг Уаі Бек Бек б01у щу 225 230 235 240
Сув б1у сб1у сі1у Ппув Уаі Аїа Аза Гей пув біц пув Уаії Аїа Аїа Іей 60 245 250 255
Тпув бі гув Уаі Аза Аїа Гей пув бій пув Уаі1 Аза Аїа Гец пув с1іц 260 265 270 «2105 281 «2115 503 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Перший поліпептидний ланцюг АВТ Н «4005» 281 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Пув5 Рго с1у біп Рго Рго ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег бо 25
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув
Зо 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110 35 сіу бі1у бек сбіу сі1у б1у біу біп Уаї сбіп Гецп Уаі сіп бек с1у Аїа 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег 130 135 140 40 сб1і1у Тук ТПг Рпе ТПг Авп Туг сіу Меє Авп Тер Уаі Агд сбіп Аза Рго 145 150 155 160 сбі1у бі1іп сб1у Гей бі Тер Меє сі1у Тер Іїе Авп ТПг Туг ТПг с1у с1ц 45 165 170 175 зек ТПг Туг Аза Авр Авр Рпе біц б1у Акуд Рпе Уаі Рпе Бек Меє Авр 180 185 190 50 ТПг Бек Аїа бек ТПг Аїа Тук Ге біп І1їе бек бек Іец Гпув Аїа с1іци 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Агкд біц бек Гей Туг Авр Тук Туг 210 215 220 55 зек Меє Авр Туг Тгр б1у біп сбі1у ТП ТПг Уаї ТПг Уаі Бек Бех щу 225 230 235 240 с1у Сув б1у сіу с1у біш Уаі1 Аїа Аїа гейш сбіц ув бій Уаї Аза Аїа 60 245 250 255
Тец бі гув сі Уаі Аїа Аїа Гей сі пув біц Уаі Аза Аїа Іец Сс1іц 260 265 270 пув б1у б1у с1у Авр Пув ТПкг Нів ТПг Сув Рго Рго Сув Рго Азїа Рго 275 280 285 бі Аза Аза сіу с1іу Рго Бек Уаі Рпе Гей Рпбе Рго Рго пув Рго Гу 290 295 300
Авр ТПг Гей Меє І1е бек Агуд ТПг Рго сбіц Уаї ТПг Сув Уаї Уа1ї Уаї 305 310 315 320
Авр Уа1 бек Нів біц Авр Рго біц Уаі Гув Рпе Авп Тгр Тук Уа1 Авр 325 330 335 сі1у Маї бій Уаії Нів Авп Аїа Ппув ТПг пув Рго Агд біц бій сбіп Туг 340 345 350
АвпобБек ТПг Тут Агуд Уаії Уаї бек Уаії Іецйп ТПг Уаії Гей Нів сбіп Авр 355 3З6о 365
ТЕр гец Авп о сіу пув біц Тук Гув Сув Ппув Уа1і Бек Авп Гув Аїа Іей 370 375 380
Рго Аїа Рго І1е сбіш Ппув ТПг І1їе бек їув Аїа Ппув с1у сбіп Рго Агд 385 390 395 400 бі Рко біп Уаії Тук ТПкг Гей Рго Рго Бек Акуд біц біц Меє ТПг Гув 405 410 415
Зо
Авпобіп Уаї бек Іецп Ткгр Сув Пец Уаії Гув б1у Рпе Туг Рго Бек Авр 420 425 430
І1е Аїа Уаї біцш Тер бій бек Авп о бі1іу біп Рго бій Ап Авп о Тук Гув 435 440 445
ТПЕ ТПЕ Ркго Ркго Уаії Ггец Авр бек Авр біу бек РПе РіПе Іец Туг 5ег 450 455 460
Тпув Гей ТП Маії Авр Пув бек Акуд Тгр біп біп с1у Авп Уаї РрПе 5ег 465 470 475 480
Сув бек Уаї Меє Нів бій Аїа Гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп Гпув бег 485 490 495
Тец бек Гей бек Рго с1УуУ Гув 500 «2105 282 «2115 273 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий поліпептидний ланцюг ПАВТ Н «4005 282
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп ТП Рго Іїец бек ІТецйп бек Уаі ТПг Рго Щ1У 60 1 2 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег 20 25 30
Авр Аза пуб ТПг Тук Тец АвБп о Тгр ІТец ІТец біп Гпув Рго с1у біп Ркго 35 40 45
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго 50 55 бо
Авр Агуд Рпе бек сіу бек сіу бек с1у ТБПг Авр Рпе ТПг Гей пув Те 65 70 75 80 зек Агд Уаі біц Азїа бій Авр Уаії сСі1у Ма1ї Тугк Тук Сув ТЕр біп Щ1У 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу ТПгЕ Гуз Уа1 сій І1е Гув 100 105 110 сі1у б1у сб1у Бек сбі1у сіу сіу с1у сбіп Уаі сбіп Гей Уа1і сіп бек с01У 115 120 125
А1їа сій Уаї Ппув пуб Рго бі1у Аїа бек Уаії Ппув Уа1 бек Сув ГУув А1а 130 135 140 зек с1іу Тук бек Ррпе ТПг бек Тук Тер Меє АБп Тгр Уаі Агкуд сіп А1а 145 150 155 160
Рго сіу біп с1у Те бій Тер І1е сС1у Уа1і Іїе Нів Рго бек Авр 5ег 165 170 175
Зо біц ТЕ Тер гей Авр обіп пуб Рпе Гпув Авр Акуд Уа! ТПг І1е ТіПг Уаї 180 185 190
Авр Ппув бек ТПг бек ТПг Аза Туг Меє бій Гей бек бек Гец Агд 5ег
З5 195 200 205 бі Авр ТПпг Аза Уа1ї Тук Тук Сув Аза Агуд бій Нів Тук с1і1у ТПг 5ег 210 215 220
Рго Рпе Аїа Туг Тгр сб1іу біп с1у ТПг Ге Уаії ТПг Уа1і бек Бех Ш1Уу 225 230 235 240 с1у Сув б1у сіу с1у пув Уаі1 Аїа Аїа Гей пув сій пув Уаії Аза А1а 245 250 255
Тец гув бій Ппув Уаі Аїа Аїа Гей пув біц Гуз Маі Аї1а Аїа Гей Гув 260 265 270 січ «2105» 283 «2115 227 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Третій поліпептидний ланцюг АВТ Н 60 «4005 283
Авр пув ТПг Нів ТБг Суб Рго Рго Суб Рго Аза Рго сій Аза Аїа 0Щ1У 1 5 10 15 б1у Ркго Бек Уаі Рпе Гей Рпе Рго Рго Ппув Рго Пув Авр ТПг Іец Меє 20 25 30
ІТ1е бек Агд ТПг Рго бій Уаі! ТПг Сув Уаії Уа1і Уаі Авр Уа1і1 бек Нів 35 40 45 січ Авр Рго біц Уаї Пув Рібе Авп Тгр Тук Уаії Авр сіу Уаї сіц Уаї 50 55 бо
Нів Авп Аза Ппув ТПг пув Рго Акуд бій бі біп Туг Авп бек ТПг Туг 65 70 75 80
Акуд Уа1 Уаї бек Уаії Іец ТПг Уаї Іец Ні біп Авр Тгр Гей А5Бп 1У 85 90 95
Тпув бій Тук Ппув Сув Ппув Уа1 Бек Авп пув Аїа Гей Рго Аза Рго І1е 100 105 110 біш Гув ТПг Іїе Бек Ппув Аїа Ппув с1у біп Рго Агд біц Рго Сбіп Уаї 115 120 125
Тук ТПкг Гей Рго Рго Бек Агд біц біц Меє ТБбг Гуз АвБп о біп Уаії 5ег 130 135 140
Тец бек Сув Аїа Уаії Ппув сіу Рпе Туг Рго Бек Авр Ії1е Аїа Уа1ї сій 145 150 155 160
Зо
ТЕр бі Бек Авп сбіу біп Рго бій Авп Авп Туг Гув ТПг ТпПг Рго Рго 165 170 175
Уаї Гей Авр Бек Авр сіу бек Рпе РпПе Гей Уа1 бек пув Гец ТПг Уаї
З5 180 185 190
Авр Гпув бек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа! Рпе бБег Сув Бек Уа1 Меє 195 200 205
Нів біц Аїа Гей Нів Авп Агуд Туг ТПг обіп Пув бек Гей бек Геч 5ег 210 215 220
Ркго с1у Пув 225 «2105 284 «2115 563 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Перший та третій поліпептидні ланцюги РАВБТ 1 «4005 284 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек І1ї1е бек бек Туг 60 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу біп Аїа Рго Агд Гец Те Ше 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аїа Уа1ї Тугк Тук Сув біп біп Агуд бек Авп Тгр Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТБгЕ АвБп Гец біц І1е Гуз сбі1у сіу сі1у бек б01Уу 100 105 110 сі1у б1у б1у сбіп Уаі сбіп Гей Уаі сі Бек сіу сіу сіу Уаї Уа1ї сіп 115 120 125
Ркго с1у Агд бек Іец Агд Гей Авр Сув Гув Аїа бек с1іу І1е ТПг РБПе 130 135 140 век Авп бек біу Меє Нів Тгр Уаі Агд біп Аза Рго с1у Ппув с1Уу ГІец 145 150 155 160 сій Тер УМаії Аїа Уаї І1їе Тер Туг Авр с1іу бек Пув Агуд Тук Туг Аїа 165 170 175
Авр Бек Уаї Ппув б1у Акуд Рпе ТПг І1е бек Агуд Авр АвБп о бБег Пув Авп 180 185 190
Зо
ТПЕ гейш Рпе Гей сіп Мес Авп бек Те Агуд Аза бій Авр ТПг Аїа Уаї 195 200 205
Тук Тук Сув Аза ТБПг Авп Авр о Авр Тут Тер біу біп б1у ТПг Геци Уаї 210 215 220
ТПг Уа1ї бек бек Ггец сіу біу бі1у бек б1у Аза Бек ТПг Ппув сС1у Ркго 225 230 235 240 зек Уаі Рібе Рго Гецш Аза Рго бек бек Гув бек ТПг бек с1у б1у ТПг 245 250 255
Аза Аїа Гец сіу Суб ІТец Маії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1 ТЕГ 260 265 270
Уаї Бек Тгр Авп бек сіу Аїа Гей ТПг бек біу Уаі Ні ТПг Рпе Рго 275 280 285
А1їа Уаі1і Гей біп бек бек біу Гей Тук бек Гецп бек Бек Уа1і Уа1 ТЕПг 290 295 300
Уаї Ркго Бек Бек бек Гей сіу ТПг біп ТбПг Тук І1е Сув Авп Уаі1і Авп 305 310 315 320
Нів пуб Рго бек Авп о ТПг Ппув Маі Авр Пув Акуд Уа! бі Рго Ппув бег 325 330 335
Сув Авр Гув ТПг Нів ТпПг Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго біц Аїа А1а 340 345 350 60 бі1у б1у Ркго Бек Уаі Рпе Гей Рпе Рго Рго Ппув Рго Пув Авр ТПг Іей
355 3З6о 365
Тук Іїе ТПг Акуд біц Рго біц Уа1! ТБг Сув Уаї Уаї Уаї Авр Уаї1ї 5ег 370 375 380
Нів бій Авр Рго сіц Уаї пуб Рбе Авп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уа1і с1и 385 390 395 400
Уаї Нів Авп Аїа Ппув ТПг пув Рго Акд бій бі біп Туг АвБп бек ТПг 405 410 415
Тук Агуд Уа1 Уа1 бек Уаї Іїец ТПг Уаї Гец Нів біп Авр Тер Гей Авп 420 425 430 сі1у пув біц Тук Ппув Сув Пув Уа1! бек АБп пув Аїа Тей Рго Аза Рго 435 440 445
І1е сіц пув ТБПг І1е бек Гпув Аїа їув б1у біп Рго Агуд бій Рго сіп 450 455 460
Уаї Тук ТПгЕ Гей Рго Рго бек Агуд біц біц Меє ТПг пуб Авп біп Уаї 465 470 475 480 зек Гецп ТПг Сув Тец Маї Ппув біу Рпе Туг Рго Бек Авр Іїе Аїа Уаї 485 490 495 бі Тер бій Бек Авп б1іу біп Рго бій Авп Авп о Тук пуб ТПг Тк Рго 500 505 510
Зо Рго Уаі Гей Авр бек Авр сіу бек Рпе Рібе Гей Тук бек Пув Тем ТПг 515 520 525
Уаї Авр Ппув Бек Агуд Тер сбіп біп сб1іу Авп Уа1 Ріе бек Сув бек Уаї 530 535 540
З5
Меє Нів сі Аїа Гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп пуб бек ТІецй бек Іеєц 545 550 555 560 зек Рго б1У 40 «2105 285 «211» 348 «212» РЕТ 45 «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий та четвертий поліпептидні ланцюги РАВБТ 1 50 «4005 285 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 55 сій Агуд Азїа ТБ Гей бек Сув Акуд Аїа бек біп бек Уаї! Бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 60
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аза Акд Ріе бег 01Уу
50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп бек бек АвБп Тгр Рго Аг4д 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТБПг Гуз Уаї сіц І1е ув с1у с1у сС1у Бех щЩУ 100 105 110 сі1у б1у б1у сбіп Уаі сбіп Гей сбіп біп Тср сб1у Аїа с1у Гей Гей Гув 115 120 125
Рго Бек бій ТПг Гецй бек Гей ТПг Сув Аїа Уаї Тук с1іу с1у бек Ріе 130 135 140 ек Авр Туг Туг Тгр АБп Тгр І1е Агуд біп Рго Рго сіу Ппув С1Уу Іей 145 150 155 160 бі Тер І1е сі1у бій Іїе Авп Нів Авп б1іу Авп ТПг Авп о бег АвБп Рго 165 170 175 зек Гец пуб бБег Агд Уа! ТПг Гей бек Гей Авр ТПг бек пуб АвБп о біп 180 185 190
Рпе бек Ггец пуб Іец Агуд бек Уа! ТПг Аза Аза Авр ТПг Аїа Уа1ї Туг 195 200 205
Зо Тук Сув Аїа Рпе сіу Тук Бек Авр Тук бій Туг Авп Тгр Роре Авр Рго 210 215 220
ТЕр б1у біп сіу ТБг Гец Уа! ТПг Уаї бек бек Іец б1у б1у с1у 5бег 225 230 235 240
З5 б1у Акуд ТПпг Уаі Аза Аїа Рго бек Уаі Рпе Іїе Рпбе Рго Рго б5ег Авр 245 250 255 бі біп Гей Ппув бек с1іу ТПг Азїа бек Уа1і Уа1 Сув Гей Гец Авп Авп 260 265 270
Рпе Тукг Рго Агд біц Азїа Гуз Уаі біп Тер Гув Уаі Авр Ап Аїа Гей 275 280 285 сіп бек б1у Авп бек біп бій бек Уаї ТПг бій сбіп Авр бек Ппув Авр 290 295 300 зек ТПг Тук бек ТІГецй бек бек ТПг Іец ТПг Гей бек Ппув Аїа Авр Туг 305 310 315 320 біш ув Нів Ппув Уаії Туг Аїа Сув бі Уаі ТпПкг Нів сіп с1іу Гец б5ег 325 330 335 зек Рго Уаії ТПг Гув бек Рпе АБп Агд с1у сій Сув 340 345 «210» 286 «211» 448 «212» РЕТ 6о0 «213» Штучна послідовність
«223» Перший поліпептидний ланцюг В5АВ А «400» 286 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сіу Аїа біц Уаї Гпув Гув Рго с1у Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє Авп Тер Уаії Агуд біп Азїа Рго сб1у сіп с1у Гей бій Тер Те 35 40 45 сіу Маї І1е Нів Рго бек Авр бек бій ТПг Тер Гей Авр біп пув РБГе 50 55 бо
Тув Авр Агуд Уа1і ТПг Іїе ТПг Уа1 Авр Гпув Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц Нів Тук бі1іу ТПг бБег Рго Рпе Азї1а Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггеш Уа1 ТПг Уаї бек бек Аза бек ТПг пуб біу Рго бек Уаі1ї РПе 115 120 125
Зо Рго Гей Аза Рго бек бек Ппув бек ТПг бек сбіу сіу ТПг Аїа Аїа Гей 130 135 140 с1у Сув Геп Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уаї бек Тгр 145 150 155 160
З5
АвпобБек сі1у Аїа Іецйп ТПг бек біу Уаі Ні ТПг Рпе Рго Аїа Уаі1ї Іец 165 170 175 біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей бек Бек Уа1 Уа1 ТБПг Уаї Рго 5ег 180 185 190 зек Бек Гец біу ТПг біп ТПпг Тук І1е Сув Авп Уаі Авп Нів Гпув Рго 195 200 205 зек Авп ТПг Ппув Маі Авр пув Агуд Уаі бій Рго пуб бек Сув бій Гув 210 215 220
ТПЕ Нів ТПг Сув Рго біц Суб Рго Аїа Рго біц Аза Азї1а с1у с1у Рго 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаії Маї Авр Уаі Бек Нів бій Авр 260 265 270
Ркго сіц Уаї пуб Рпе АвБп Тгр Туг Уаі Авр с1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285 бо А1їа Ппув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Туг Авп бек ТПг Туг Аг Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Пув Ма! бек Авп пув Аїа Гей Рго Аїа Рго І1е сі Тув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек пув Аїа пув біу сбіп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг Гпув Авп біп Уаї бек Гей ТЕПг 355 3З6о 365
Сув бі Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 век Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТук Гув ТПг ТП Рго Рго Уаі1і Іец 385 390 395 400
Авр бек Авр біу бек Ррпе Рпе Гей Тук бек ТУув Гей ТПг Уаї Авр Тув 405 410 415 зек Агуд Тгр біп біп б1у Авп Уаі! РПе бек Сув Бек Уа1і Меє Нів сіц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445 «2105 287
Зо «211» 218 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий поліпептидний ланцюг В5АВ А «4005 287 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Пув5 Рго с1у біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег бо 50
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг І1їе 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 55 85 90 95 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е Гув Агд 100 105 110 бо ТПг Маії Аза Аїа Рго бек Ма! Рпе І1їе Рпе Рго Рго б5Бег Авр сій сіп 115 120 125
Тецп Кпув бек сіу ТПг Аїа бек Уаії Уаї Сув Гей Гей АвБп АвБп Рпе Туг 130 135 140
Рго Акад біц Аїа Ппуз Уаї сіп Тер пув Уа1і! Авр АБп Аїа Гей біп 5ег 145 150 155 160 б1у АвБп бек біп бі Бек Уа1і ТПпг сі біп Авр бек Гув Авр бек ТПг 165 170 175
Тук Бек Гей бек бек ТПг Іец ТПг Ггец бек їув Аза Авр Тук сій Гув 180 185 190
Нів Ппув Уа1 Тукг Аїа Сув біц Уа1! ТБг Нів сіп с1іу Гей бек бек Рго 195 200 205
Уаї ТПпгЕ Ппув Бек Рпе Авп Агд сіу сіц Сув 210 215 «210» 288 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Третій поліпептидний ланцюг В5АВ А «4005» 288
Зо сіп Уаії біп Гецп Уаії сіп бек бі1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Гув Рго с1у Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авп о Туг 20 25 30
З5 бі1у Меє АвБп Тгр Уаі Агуд сбіп Аза Рго сіу біп сіу Гец біц Тгр Меє сб1у Тер І1е АвБп ТПг Тук ТПг сіу бій Бек ТПг Туг Аза АвБр АвБр РіПе 40 50 55 бо бі б1у Акуд Рпе Уаі РпПе бек Ме Авр ТПг бек Аїа бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80 45 Пен біп І1е бек бек Гей Ггув Аїа бій Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд бій бек Іец Тук Авр Туг Тук бек Меє Авр Тугє Тер 1у сіп 100 105 110 бі1у ТПпг ТпПг оУаї ТПг о Уа1ї бек бек Аза Бек ТПг Ппув с1іу Ркго бек Уаї 115 120 125
Рпе Рго Гец Аза Ркго бек бек пуб бек ТПг бек сіу с1у ТПг Аз1а Аї1а 130 135 140
Тец б1у Сув Гей Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і! ТПг Уаї 5ег 145 150 155 160 бо ТЕр Авп бек с1у Аїа Гей ТПг бек сіу Уаії Нів ТПг Рре Рго Аїа Уаї1! 165 170 175 2А1
Тецп біп бек бек с1іу Гей Тук Бек Гей бек бек Уа1і Уаї ТПг Уа1ї Рго 180 185 190
Ззек бек бек Гей сб1у ТПг сіп ТПК Туг Іїе Сув Авп Уаі Авп Нів Гуз 195 200 205
Ркго Бек Авп о ТПг Гуз Маії Авр Гув Агд Уаі! бій Ркго Ппув бек Сув Агд 210 215 220
Тпув ТПЕ Нів ТПг о Сув Рго Агуд Сув Рго Аїа Рго бій Аза Аїа с1і1у с1У 225 230 235 240
Ркго бек Уаії РПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго Пув Авр ТПг Гец Меє І1е 245 250 255 зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уа1і Бек Нів сіц 260 265 270
Авр Рго сій Уа! Ппув Рре Авп Тгр Туг Уаі Авр с1іу Уа1і! сій Уаї Нів 275 280 285
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Туг Авп о бБегк ТПг Туг Агд 290 295 300
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаії Гец Ні біп Авр Тер Гей АБп со1Уу Гув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек АвБп Гпув Аїа Гей Рго Аза Рго І1е с1іц
Зо 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Ппув сіу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бек Акуд біц біц Меє ТпПг пув Авп обіп Уаї бек Геч 355 3З6о 365
ТПЕ Сув Гей Уа1ї пув бі1у Робе Туг Рго бБег Авр І1е Аї1а Уа1і сі Тгр 370 375 380 бі бек АвБп сіу біп Рго бій Авп Авп Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаї 385 390 395 400
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе РіПе Гей Туг Бек Агд Гей ТПг Уа1ї Авр 405 410 415
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 420 425 430 сі Аїа Гецп Ні Авп Нів Туг ТПг біп пуб бек Гей бек ІГецй бек Рго 435 440 445 о1у «2105 289 «2115» 219 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 60 «220»
«223» Четвертий поліпептидний ланцюг В5АВ А «4005» 289
Авр І1е Уаі Меє ТПг сбіп ТПг Рго Гей бек Гей бек Уа! ТПг Рго с1Уу 1 5 10 15 біп Ркго Аїа бек Іїе Бек Сув Пув Бек Бек біп бек Гей Гей Нів 5ег 20 25 30
Авр Аза пуб ТПг Тук Тец Авп Тгр ІТец ІТецй біп Ппув Рго с1у біп Рго 35 40 45
Рго біц Агд Тец І1е Тук Гей Уаі бек бій Гей Авр бек сіу Уа1і Рго 50 55 бо
Авр Агуд Робе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ув І1е 65 70 75 80 зек Акад Уаі бій Аї1а бій Авр Уаї сіу Уа1 Туг Тук Сув Тер сбіп 01Уу 85 90 95
ТПЕ Нів Рпе Рго Туг ТПг Рре сіу сіу біу Тс Гув УМаї сій І1е Гув 100 105 110
Акуд ТВП Уаії Аза Аза Ркго бек Уа! Рпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр с1ц 115 120 125 біп Гей Гпув Бек с1іу ТПг Аїа бек Уаі Уа1 Сув Гей Гец Авп Авп Ріе
Зо 130 135 140
Тук Рго Акуд сіц Аїа пув Уаі сіп Тер пув Уаії Авр АБп Аза Іец сіп 145 150 155 160 зек б1у Авп бек біп бій бек Уаі ТПг бій б1іп Авр бек Пув Авр 5ег 165 170 175
ТПЕ Тук Бек Гей бек бек ТПг Гей ТПг Гец бек їув Аза АБр Тук с1и 180 185 190
Тпув Нів Гпув Уаї Туг Аїа Сув бій Уаі ТПг Нів сіп сіу Гец бек б5ег 195 200 205
Рко Уаї ТіПг пуб бек Рпе АБп Агуд сбі1у бій Сув 210 215 «2105 290 «211» 496 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» Перший та третій поліпептидні ланцюги РАВБТ І «4005 290
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15 бо Авр Агуд Уаі ТПг І1е ТПг Сув Агуд Аза бек біп Авр Уаі! бек бек Уаї 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу Пув Аза Ркго Гув Іечп Гей Ше 35 40 45
Тук Бек Аїа бек Туг Агуд Тук ТПг сіу Уа1і Рго бБег Агд Рпе бек 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Нів Тук бек ТПг Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТБПгЕ Гув Гец сбіц І1е ув с1у с1у сС1у Бех щу 100 105 110 сі1у б1у сб1у сбіп Уаі сбіп Гей Уаі сбіп бек сіу Аїа біц Уаї пув Гув 115 120 125
Рго с1і1у Аїа бек Уаії Ппув Уа1ї бек Сув їув Аїа бек с1іу Тук бек Ріре 130 135 140
ТПЕ Бек Тукг Тер Мес Авп Тгр Уа1 Агд біп Аза Рго бі1у біп с1Уу Іецй 145 150 155 160 біш Тер І1е сіу Уаі Іїе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тгр Іецй Авр 165 170 175 біп гув Рпе Ппув Авр Агуд Уа1 ТПг І1їе ТПг Уа1 Авр Пув бек ТПг 5ег
Зо 180 185 190
ТПг АТїа Тук Меє біц Гец бек бек Ггец Агд бек біц Авр ТПг Аїа Уаї 195 200 205
Тут Тук Сув Аїа Акуд сбіц Ні Тук с1у ТПг бек Рго Рпе Аза Туг Тер 210 215 220 сбі1у біп сб1у ТПпг Геш Уаі1і ТПг Уаії бек Бек сіу сіу Сув сіу б1у 1У 225 230 235 240 бі Маї Азї1а Аза Сув бій пув сбіц Уаі Аїа Аїа Гей сіц пув біц Уаї 245 250 255
Аза Аїа Гец біц Гуз біц Маі Аїа Аза їец бій Ппув бій Бек Ппув Туг 260 265 270 б1у Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго бій Рбе Гец сіу с1у Ркго 275 280 285 зек Уаії Рібе Гей Рбе Рго Рго Ппув Рго Пув Авр ТПг Гей Туг І1е Тіг 290 295 300
Акуд бій Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уа1і УМаї Авр Уаі Бек біп бій Авр 305 310 315 320
Ркго сбіц Уаії біп Робе АвБп Тгр Туг Уаі Авр б1у Уаі сій Уаї Нібв Авп 325 330 335
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Туг Агд Уаї 60 340 345 350 2АА
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаі1! Ггец Нів сбіп Авр Тгр Гей АвБп с1у Ппув с1ц 355 3З6о 365
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Гец Рго бек бек І1е сій Гув 370 375 380
ТПЕ Іїе Бек пув Аїа пуб б1у біп Рго Агкд бій Рго сіп Уаї Тук Тс 385 390 395 400
Тем Рго Рго бек біп біц бій Меє ТПг пуб Авп о біп Уа1! бек Гей Тіг 405 410 415
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бест Авр І1е Аїа Уаі сії Тгр с1и 420 425 430 век Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТук Гув ТПг ТП Рго Рго Уаі1і Іец 435 440 445
Авр Бек Авр біу бек Рпе Рпе Гей Туг Бек Агд Гей ТПг Уаї Авр Гу 450 455 460 зек Агд Тер біп біц б1у Авп Уаі! РПе бек Сув Бек Уа1і Меє Нів сіц 465 470 475 480
А1а Ггечп Нів Авп Нів Тук ТпПкК о сіп Гуз бБег Гей бек Гей бег Те 1У 485 490 495 «2105 291 «2115 271
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Другий та четвертий поліпептидні ланцюги РАВБТ І
З5 «4005 291 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 бі1у Меє бек Рпе Меє Ап Тер Рпе сіп сбіп пув Рго с1іу біп Рго Рго 35 40 45 ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег бо 50 Агуд Рпе бек біу бек сіу бек б1іу ТПг Авр Робе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 85 90 95 55 біц Маї Рго Тук ТПг Рпе сіу сіу с1іу ТПг Ппув Уаі1 сій І1е пув С1У 100 105 110 сі1у б1у бек сіу сіу сбіу сіу сбіп Уаі сбіп Гей Уа1і! сіп бек С1у А1а 60 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаі Ппув Уа1 бек Сув Мпув Аїа б5ег 130 135 140 сб1і1у Тук ТПг Рпе ТПг Авр Туг Авп Меє Авр Тер Уаі Агд сСіп Аї1а Рго 145 150 155 160 сб1у бі1іп сб1у Гей бій Тер Меє сі1у Авр Іїе Авп Рго Авр АвБп біу Уаї 165 170 175
ТПЕ Іїе Тук Авп біп Гуз Рпе сіц с1у Акуд Уа1і ТПг Мес Трг ТпПс Авр 180 185 190
ТПг Бек ТПг бек ТПг Аза Тук Меє сіц Гец Агд бек ІТецй Агд бек Авр 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Акд бій Аза Авр Тук Рпе Тук Ріє 210 215 220
Авр Тут Тер біу біп бі1у ТП ТБг Гец ТПг Уаії бек бек с1у с1Уу Сув 225 230 235 240 сі1у б1у сб1у Ппув Уаі Аїа Аїа Сув Ппув біц пув Уаі Аїа Аїа Іецй Гу 245 250 255 сі пув УМаі Аза Аїа Іїейп Гуз бій Ппув Маі Аїа Аїа Тей Гув сі1ц 260 265 270 «2105 292 «211» 566
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Перший та третій поліпептидні ланцюги АВТ 7
З5 «4005 292
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув Агуд Азїа бек біп Авр Уа1і Бек бек Уаї 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу Пув Аза Ркго Гув Іечп Гей Ше 35 40 45
Тук Бек АТїа бек Тут Агд Тук ТПг біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У бо 50 Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп біп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Нів Тук бек ТПг Рго Тгр 85 90 95 55
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТБПгЕ Гув Гец сбіц І1е ув с1у с1у сС1у Бех щу 100 105 110 сі1у б1у сб1у сбіп Уаі сбіп Гей Уаі сбіп бек сіу Аїа біц Уаї пув Гув 60 115 120 125
Рго сіу Аїа бек Уаі Гув Уаії бек Сув Гув Аї1а бек с1у Тук Бек Ріє 130 135 140
ТПЕ Бек Тукг Тер Мес Авп Тгр Уа1 Агд біп Аза Рго бі1у біп с1Уу Іецй 145 150 155 160 біш Тер І1е сіу Уаі Іїе Нів Рго Бек Авр бек бій ТПг Тгр Іецй Авр 165 170 175 сіп пув Рпе Ппув Авр Акуд Ма! ТПг І1е ТПг Уаї Авр Гуз бек ТПкг 5ег 180 185 190
ТПг АТїа Тук Меє біц Гец бек бек Ггец Агд бек біц Авр ТПг Аїа Уаї 195 200 205
Тук Тук Сув Аза Агкд біц Нів Тук сіу ТПг бек Рго Рпе Аїа Тукг Тгр 210 215 220 сбі1у біп сб1у ТПпг Геш Уаі1і ТПг Уаії бек Бек Геш сіу сіу сі1у бек с01У 225 230 235 240
Аза бек ТПг Ппув біу Ркго бек Уаі РпПе Рго Іїецйп Аза Рго Сув бБег Агд 245 250 255 зек ТпПг бек бій бек ТПг Аза Аїа Гей сіу Сув Гецп Уаї Пув Авр Туг 260 265 270
Рпе Рго біц Ркго Уаі! ТПг Уаї бек Тер АБп бек сіу Аїа Гец ТПг 5ег 275 280 285
Зо сбі1у Маї Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаі Гей біп бек бек сіу Гец Тукг в5ег 290 295 300
Тец бек бек Уаі Уа1і ТПг Уа1 Рго Бек бек бек Іец б1у ТПг Гув ТПг 305 310 315 320
Тук ТпПк Сув Авп оУаі Авр о Нів пуб Рго бек Авп ТП Гув Уа1і Авр Гув 325 330 335
Агуд Уаї сій бек Ппув Тук с1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго 340 345 350 бі Рпе Гей сіу с1іу Рго Бек Уаі Рпе Гей Рпбе Рго Рго пув Рго Гу 355 3З6о 365
Авр ТПг Гец Туг І1е ТПг Акуд бій Рго бі Уа1! ТПг Сув Уаї Уа1ї Уаї 370 375 380
Авр Уаі1 бек біп біц Авр Рго біц Уаі біп Рпе Авп Тгр Тук Уа1 Авр 385 390 395 400 сі1у Маї бій Уаі Нів Авп Аза пуб ТПг пув Рго Акгд біц біц біп РБбе 405 410 415
Авп обБек ТПг Туг Агуд Уаії Уаії бек Уаі Гей ТПг Уаї Гей Нів біп Авр 420 425 430
ТЕр гей Авп о сіу пув біц Тук пув Сув Ппув Уаї бек Авп Гув с1Уу Іецй 435 440 445 60
Ркго бек бек І1е біцп Гув ТПг І1е бек ув Аї1а Ппув с1у біп Рго Агд
450 455 460 бі Рко біп Уаії Тук ТпПкг Гей Рго Рго Бек біп сбіц біц Меє ТПг Гув 465 470 475 480
Авпобіп Уаї бек Іецп ТПг Сув Пец Уаі Гуз б1у Рпе Туг Рго Бек Авр 485 490 495
І1е Аїа Уаї біцш Тер бій бек Авп о бі1іу біп Рго бій Ап Авп о Тук Гув 500 505 510
ТПЕ ТПЕ Ркго Ркго Уаії Ггец Авр бек Авр біу бек РПе РіПе Іец Туг 5ег 515 520 525
Агд Геї ТПг о Уа1і! Авр пуб бек Агд Тер біп бій б1у Авп Уаії РіБе 5ег 530 535 540
Сув бек Уаї Меє Нів бій Аїа Гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп Гпув бег 545 550 555 560
Тецй бек Геи бек Гей Щ1У 565 «2105 293 «211» 350 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
Зо «223» Другий та четвертий поліпептидні ланцюги АВТ 7 «4005 293 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бек Іец бек Рго Щ1У
З5 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Уаії Авр Авп Туг 20 25 30 40 сіу Меє бек Рре Меє Авп Тгр Рбе сбіп сіп Гпу5 Рго с1у біп Рго Рго ув ІТеп Гей Іїе Ні Аїа Аза бек Авп біп сіу бек сіу Уаї Рго 5ег бо 45
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Рго б1ц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Рпе Сув біп біп бек Гув 50 85 90 95 бі Маї Рго Тує ТПг Рпе сіу сіу сіу ТЕ Гув Уаі бій І1е гув Щ1Уу 100 105 110 55 сіу бі1у бек сбіу сі1у б1у біу біп Уаї сбіп Гецп Уаі сіп бек с1у Аїа 115 120 125 бі Маї Гпув Ппув Рго сіу Аїа Бек Уаї Ппув Уаї бек Сув Гув Аїа 5ег 130 135 140 60 сб1і1у Тук ТПг Рпе ТПг Авр Туг Авп Меє Авр Тер Уаі Агд сСіп Аї1а Рго
145 150 155 160 сб1у бі1іп сб1у Гей бій Тер Меє сіу Авр І1е Авп Рго Авр АвБп сіу Уаї 165 170 175
ТПЕ Іїе Тук Авп біп пув Рое сіц сіу Акд Уаі ТПг Меє ТПг ТпПг Авр 180 185 190
ТПг Бек ТПг бек ТПг Аїа Туг Меє біц ІГей Агуд бек Гей Агуд бБег Авр 195 200 205
Авр ТПг АТїа Уаї Тук Тук Сув Аїа Акд бій Аза Авр Тук Рпе Тук Ріє 210 215 220
Авр Тук Тер бі1у біп с1іу ТпПкК ТБбг Те ТПг Уаї бек бек Ге с1іу с1Уу 225 230 235 240 сбі1у бек б1у Агкуд ТП Уаі Аза Аза Рго Бек Уа1і1 Рпе І1е Робе Рго Рго 245 250 255 зек Авр біц біп ІТецшп Гув бек біу ТПг Аза бек Уаії Уаї Сув Гей ГІец 260 265 270
Авп о Авп о Рпе Туг Рго Агкуд бій Аза Гуз Уаї біп Тер Ппув Уаі1і Авр Авп 275 280 285
Аза гей сбіп бек б1і1у Авп бек біп біц бек Уаі ТПпг бі біп Авр бег 290 295 300
Зо пув Авр бек ТПг Тук бек Гей бек бек ТПг Гей ТПг Тей бек Ппув Аїа 305 310 315 320
Авр Тук сіц пув Нів пув УМаї Тут Аїа Сув біц Уаї ТП НівБ сбіп Щ1У 325 330 335
З5
Тецп бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув Бек Рпе Авп Агуд сіу сіц Сув 340 345 350 «2105 294 40 «211» 118 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» 45 «223» Домен УН із МН1і МАТ до І1АС0-3 людини 6 «4005 294 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 50 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авр Туг 20 25 30 55 Авп оМеє Ар Тер Уаі Агуд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес б1у Авр І1е Авп Рго Ар Авп сіу Уаі ТПг Іїе Тукг Авп біп Гув РБПе бо 60 бі б1у Акуд Уа1і ТПг Меє ТПг ТПг Авр о ТПг бек ТПг бек ТПг Аїа Туг
65 70 75 80
Меє бій ге Агуд Бек Гей Агуд Бек Авр Авр ТПг Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд біц Аза Авр Тук Рпе Туг Робе Авр Туг Тгр С1у біп с1у ТЕПг 100 105 110
ТПЕ Ге ТпПкг Уаї бек 5ег 115 «2105 295 «211» 118 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен МН із МН2 МАТ до ІАС-3 людини 6 «4005 295 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уа1і1 пув Рго сб1і1у с1У 1 5 10 15 зек Геп Акуд Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе ТПг Ррпе бег Авр Туг 20 25 30
Авп оМеє Авр Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бі Тер Уаї
Зо зек Авр І1е АвБп Рго АвБр АБп о біу Уа! ТПг І1е Тук Авп біп Гпув Ріе бо бі б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп бек ТІецч Туг 35 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95 40 Аза Агуд бій Аза Авр Тук Рпе Тук Рпе Авр Туг Тгр С1у біп с1у Тіг 100 105 110
ТПЕ Ге ТпПкг Уаї бек 5ег 115 45 «210» 296 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 50 «2205 «223» Домен Мі із МІ1 МАТ до ЇАС-3 людини 6 «400» 296 55
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув Агуд Азїа бек біп Авр Уа1і Бек бек Уаї 60 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу Пув Аза Ркго Гув Іечп Гей Ше 35 40 45
Тук Бек АТїа бек Тут Агд Тук ТПг біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аза ТПг Тугк Туг Сув біп сбіп Нів Тугк бек ТПг Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гув 100 105 «2105 297 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Домен Мі із М12 МАТ до ЇАС-3 людини 6 «4005 297
Авр І1е Уаї Меєсє ТПг біп бек Рго Бек Бек ІТецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув Агуд Азїа бек біп Авр Уа1і Бек бек Уаї
Зо 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Ркго сіу Пув Аза Ркго Гув Іечп Гей Ше 35 Тук Бек Аїа бек Туг Агуд Тук ТПпг с1іу Уаі Рго АвБр Агд Рпе бек 01Уу бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Ррпе ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 40 бі Авр чІ1е Аза Уа1і Тук Тук Сув біп біп Нів Тук бек ТПг Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гув 45 100 105 «2105 298 «2115 11 «212» РЕТ 50 «213» Штучна послідовність «2205 «223» СОВІ1 домену Мі із МП1 і М12 МАТ до ЇАС-3 людини 6 55 «4005 298
Агкуд Аза бек біп Авр Уаі! бек бек Уа1і Уаї Аїа 1 5 10

Claims (5)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, яке містить варіабельний домен важкого ланцюга та варіабельний домен легкого ланцюга, причому: зазначений варіабельний домен важкого ланцюга містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 147 і зазначений варіабельний домен легкого ланцюга містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 153.
2. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 1, яке характеризується тим, що зазначене антитіло являє собою химерне антитіло або гуманізоване антитіло.
3. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 1-2, яке характеризується тим, що зазначене антитіло містить область Ес.
4. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 3, яке характеризується тим, що зазначена область Ес належить до ізотипів Ідсе1, Ідс2, ДЗ або Іда4.
5. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 4, яке характеризується тим, що зазначене антитіло додатково містить шарнірний домен.
6. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 5, яке характеризується тим, що зазначена область Ес і зазначений шарнірний домен належать до ізотипу Ідс4, і при цьому зазначений шарнірний домен містить стабілізуючу мутацію.
7. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 3-5, яке характеризується тим, що зазначене антитіло містить ЗЕО ІО МО: 264 і
265.
8. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 3-6, яке характеризується тим, що зазначена область Ес являє собою варіант області Ес, яка містить: Зо (а) одну або більше модифікацій амінокислот, які знижують афінність варіанта області Ес відносно Есук; й/або (Б) одну або більше модифікацій амінокислот, які збільшують період напіввиведення із сироватки крові варіанта області Ес.
9. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 8, яке характеризується тим, що зазначені модифікації, які знижують афінність варіанта області Ес відносно ЕсукК, містять заміну І 234 А; І 2354А; або І 234А і І 235А, при цьому зазначена нумерація відповідає індексу ЄС за Кабатом.
10. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 8 або 9, яке характеризується тим, що зазначені модифікації, які збільшують період напіввиведення із сироватки крові варіанта області Ес, містять заміну М252У; М252У і 52541; М252У і Т256Е; М252У, 52541 і Т256Е; або К2880 і Н4З5К, при цьому зазначена нумерація відповідає індексу ЄС за Кабатом.
11. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 1-10, яке характеризується тим, що зазначене антитіло помічене детектованою міткою та застосовується для детектування РО-1.
12. Фармацевтична композиція, яка містить моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 1-10, і фармацевтично прийнятний носій.
13. РО-1-сполучне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 1-10 або фармацевтична композиція за п. 12, що характеризується тим, що зазначене антитіло або фармацевтична композиція застосовується для лікування раку.
14. РО-1-сполучне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, або фармацевтична композиція за п. 13, що характеризується тим, що зазначений рак характеризується наявністю ракової клітини, вибраної з групи, що складається з клітини: пухлини надниркових залоз, асоційованого зі СНІДом раку, альвеолярної саркоми м'яких тканин, астроцитарної пухлини, раку сечового міхура, раку кісток, раку головного та спинного мозку, метастатичної пухлини головного мозку, раку молочної залози, пухлин сонної артерії, раку шийки матки, хондросаркоми, хордоми, хромофобної карциноми клітин нирок, світлоклітинної карциноми, раку товстої кишки, колоректального раку, шкірної доброякісної фіброзної гістіоцитоми, десмопластичної 60 дрібнокруглоклітинної пухлини, епендимоми, пухлини Юнга, екстракістякової міксоїдної хондросаркоми, недосконалого кісткового фіброгенезу, фіброзної дисплазії кістки, раку жовчного міхура або жовчної протоки, раку шлунка, гестаційного трофобластного захворювання, герміногенної пухлини, раку голови і шиї гепатоцелюлярної карциноми, пухлини острівцевих клітин, саркоми Капоши, раку нирок, лейкозу, ліпоми/доброякісної ліпоматозної пухлини, ліпосаркоми/злоякісної ліпоматозної пухлини, раку печінки, лімфоми, раку легенів, медулобластоми, меланоми, менінгіоми, множинної ендокринної неоплазії, множинної мієломи, мієлодиспластичного синдрому, нейробластоми, нейроендокринних пухлин, раку яєчників, раку підшлункової залози, папілярної карциноми щитовидної залози, пухлини паращитовидної залози, педіатричного раку, пухлини оболонок периферичних нервів, феохромоцитоми, пухлини гіпофізу, раку передміхурової залози, постеріальної увеальної меланоми, рідкого гематологічного розладу, метастатичного раку нирок, рабдоїдної пухлини, рабдоміосаркоми, саркоми, раку шкіри, саркоми м'яких тканин, плоскоклітинного раку, раку шлунка, синовіальної саркоми, раку яєчка, карциноми тимуса, тимоми, метастатичного раку щитовидної залози і раку матки.
15. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою рак матки.
16. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою плоскоклітинний рак.
17. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою гліому.
18. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою рак шийки матки.
19. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою рак нирки.
20. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою рак легенів.
21. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою недрібноклітинний рак легенів.
22. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, Зо за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою рак голови і шиї.
23. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою метастатичний рак нирок.
24. Моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за п. 13, яке характеризується тим, що рак являє собою хромофобну карциному клітин нирок.
25. Вектор експресії нуклеїнової кислоти, що кодує моноспецифічне РО-1-сполучне моноклональне антитіло, спрямоване проти РО-1 людини, за будь-яким із пп. 1-11.
Ме, о : "Зав М. : й КК сою : кована ее і . ; «чо а ВДВ ся МН ! ; Позівовтидний сов ее сраку в пзицян і Ї | Яінкою 0 ововаанвввиннни те : і і Нинкше і й дакела я 0. Поліпевтидний Фасон «ММ ос се, яке Зах ХАОЖКНУ чн й ланцюг й Блтдуатх а (або котра с Зв ун пн я А А А КА А КК Ас А АК К чек Кн Кекси ке ен НК УК Ус Кс Кін ух неон чеку кн чкникнтинни ЗбБраве діювіпо щН. ; 7 ооовоя У дк 5 ЗВ х ММ КН ОН Мр Се НВ пек вив ре 35 ше; ди Ж по Фігура 1 щН.
Й ЧИ: , вано шо ц ' В З «и шнн Ша поь Жанни КЕ. с НІ Лівхер? наван о прео СО ший спетенентуто с ше же КА ве Покке й с ї МЕ Ж КУЛАКА з Пш З : "СО КИ ой Поліпентидний ей панцяюм З ренти ад Ме пр о ншшшшш я Зоване діятио хх МЕ ще -е» се У щеЗ кОоН ОО Шев сх союз фр ПОН рі женш У вне СН Се терито м ей що ве в Фігура 2
Й я Зно МК сосок ИЙ Шо хв, з с нь сте СО хан Ши осн Є КАВУ о СБ Зло ; ; ча чн ща є Анни нн чу У і щі Б Вк, з Я З сзххною ЗДО жен с пай ення ех ее 5 ду 000 чу ок, -й дж сккосв оон м х М ох т» с СН Кк ей " й ее у, | , ЩІ НК У де я 35 Що хі шення у і Ек, «СЯ ще и дюн со є а - Енн вве покер, шо й З, дюн сне Дня сн ь Мом зх - себя УЖ ко о рн вм
Домен, ЯКНй споняє тетеравимеризації ме позі : з век кокони Повиоеуниві анпннної я союв «ВВ одне НК, дідее по мо УНК Лікер з й й нн ОЗ ІННЕНУя ЯЗКИ оон ух пі утучино іже Й ее ще ; ЗДИВІНКОМ ДЕН не ди х щи ЩО БИ ншкОМ де т, фоцеих що Заеш У Залишив Мн, Домен. вки сприяє шо пнсеіну гетеродимеризанії о Гл фс дннннннннтсевь Лінке тех , ПинЕеН Я ухх ЩІ чно ле званим шк СН нин завицком цист ну Поліпостптихні даною о і і і ее М ВН, 7 земні окт хрехи Що Ві. ї їх ОСОКО Біспецифічне чозиривалентне оон «Коен Ге-вмісне діжтою ше шк: Ши! , дует я Я счиння АКА Домен БЕ 5 Знищ 5, ку З вавжаВ о ооо я АВ од дн Вимога Я ВЕС лк а ов В ООН ще о НН ЩО) ї КК ще І: ее Фігура ЗВ
Ума ех КХ зе с М У 5 с АЕУ мя Ж Ж г. й «в є КНХ о ТИКИ у Б км ЯН ЩІ ТК Ко «ЙО рон УМ я Кикан В ШИН ї СНИ Ея ка 2 Пенн зов ще св ха мно ЖЕ : Ей закл " я ра у х Ша я "кв х х лек с Ме х Ей - їх і ТИ сер втемсе хз МВ пи М От, я дов ст др АВ ма У Ше и ретехкчну ВВ ЩО шення сх ТК ; «Й МН жня | кН зи я сх те х Ме з зу ги Фрі ежії еп 7 Ши т ст х сон санях їх ПН її тонни. ння У КЕ «і. Е У іт» о. Мт й ПІ ОС ЗКУ шо НЕ а «он о ж сухі ох ч сна кВ к юн ко, кв, с века ув їж М 3 в че док с с че ч ев х х М Мо и З МО. о В Ше УМХ, ФУ я у Ух ХУ ? і Же Ода о У Би
ТЕ. Ж ОВ ей м МЕ, кн по КН с ВІ юне х сь. кв, ОК» У-х ОО" щ Б ї вч Х 5 З Шк М Зх сх М тоді БО Фігура З3С
Пекннентнннй лено п МЕ ; щюм і ння ї зп Коапіряать | ше що ЗШ «є сабо Ечатірать ьо па о др сн Ск ДЦ Є сен й нннаннннннннння Пінкер- З аб Нівнев Я давнини й совисер-вінкева З і Мне ОО і : АйддЕх М І о ї Кві АЛЕ Є онко бул і
З . и З ж Щ А чи Е Н Повнота линй ланцюг М Пінкев З я й і Еоютрала я і аск ви є КИ М І іо Коолрале НИ: ! с В ї в і їні . КК Х с : КЕН Б оуьке : я Н к «В В КУКИ ї Позівснтнаний пани Я СА Косваненнн КН Во» . : сов Ж Шрьь. Лінкео З ! соя МО сам ве мн. : т Зкурне Ко-вмісне доле вар 1
Ми. , ж сон З З знеідннн «а щщ а а Ко СВ БК її є «КК Ко сво Мосс ми. чне де Й бу, Кн, Фігура 4А
Пінкер З Не Мн неснис че Повпезтнаннй ленуог | іо Костровве; чо дай з З : сор Де пон дн новий Лінкерії ень ШЕ Лінкер ; соон «ДДИД буненненнняй 3 ря : Пивізевтидняй пани є ї Дню Ї Ук шк і Бервіралх де : їжа Коспузаняї Моз о : Я Н же ї
МА. ї Лінкет З 7 ї МВ «все с ехо Кт щи ку хккоую ке х з пом, с ї Повилентидний занцю З х 5 соби ММ ще пев я МАН с В НН й ХХ ух за сна і і ЗУ У У У У У У У А У А КК АН Ал о ла п Кат КК яна тнянтннятннянЯ І ту я. х з 5 Ж Зібране Бо-ямієное дщатіло окол кам тка іваріант 5)
ще. МОМ В хо Ме, СМ о ОН . М ее Ко ення 0 сек ПИЛА ща» Бе цу у 5 с хе КК о у ак ОД шу сеов ДЛЯ ну м, Фігура 4855
М Цезівехтванва ля У о ООН ат М гООН З , ух ; евро - з Ї КО ММ, Позінентваний ленням ФЇ М сні сю й да як ше й аОК Й г те тре Кн. с Ль.ш ЩЕ и 7 да ; дюн Незнизе нання лена З ХЕ Му я Миша ЗСИЙ ОХ КК, рук у ден Те 43 ШЕ ВН сн тн ка кю -о ше Косніваль ОХ ск . що . сджкемитя вк сх че, Проівенуванвй зано Ж іо Кваювле У ОК, кедах ом сови В Уна Фе з І хну Оу ; друк юю М : ; дк здавкх : : ! У У я едцемчкеннння Кожух я їхКЖ : Молинвтидний к вих Ееспівале завиюг Я че іабо к-спірань; : фену дет отртт Кто тост о дрон кухонна ккоретеетоопнокурнкооння юні ММ, : КН Ки ХХ КН, аа , у «в з м 7 У ух а си де КУ пюи Шея сООВ тт; НДО КтАт» чи з КК: Те що кож і х ше КЕ КЕ НН узд, , охо ук офі ка «З Оу УК би ях КК --КУ х Кк Ку УК: мкг МАВ МУК х см сскккккнх ЗАЙВА: - ї ел я в В сус її - НЕ КК ше а, з ке. ще Бе 7 К й чих ок. А ; кВ, Фігура 5 ме, . хв Періжня хозпентваннй лавцює кое» , оон І а й х а К А ща УНІ З «ВІ А ке "донна ко, 00000 сен ДААААК сл, ММ АНА пихи УЖ УХ р: ; : х и сво Дихснй водіентедний пани ке ді шо ооо Й дей КО вон же ох . ; су. ях Се 775 Тренв понінентидней лавяюч І мк хв Шернірна КО Звь кві ше вн Ж КОХ, ке : ме 7 З мВ, : «вовки ве , З он щ ть. да ! ; "Є Четвертий попу ланше Бен, че Двасполучних ломени, характерних для дннли ме. за ме кч Заееех Ж о Кай А КМ У чо. гоен «ВІДА » зни п ; ак» ее ок й У УУту нн Ти " 7 хуя Я Хм Е «в ДО й с а аа ви В Я байев Шавнірна 5 ММ, Ой ИивоТь. ЗА Зак» подо я шу ЯЗ я пон її С, с хх Я дух і КУ; ОХ и КВК с туоНУ чний домен. не : ОО, СпОоЛУЧННЯ домен. не січної о хараетерний зав дівжіла і я тв Фігура ВА
Півкеря Й неону ді і ях ЯН ве» Сл КН, я М Й СН Яйневр «І коовіраль ж або Є-спідаль? Дівкею ї Зртено ЛІ «СІНА екоюю чу Перше волінептицдиий ланиюч . ЯМ УДК нех Днкерї УНН роду МИЛЕ ЮЮВ: х м ! сома пути М . о й Зв Лверя Котра зав : Заг М ЗАЦо Камножлкі М ОО» Соду М кебонннк нн о» . 7 шо М Й М Кв се ЯЗ вк Друсей долвінентивний даною Брекій воліествднни лпанцжю 006 ке Фе 7 Царівна ОБ "ве обла веди ль НЕ з ес ОК, мно ни Ко хі ОБ У КЗ СХ че з І ке М в.
ЕВ у Ї Четвертий попВкчтвдНняй пан ї СОН і : й і ї й ї кн, і і " : Днаспонечнах довени, Характормнх ик ВХ кн3 ж жо ен нс, 7 кв Шо сМУ КК есте СМ! З де ОМ 2АДДА пах ЄВ іравніких З й Еф ОН УНІ по НН "СЕК тв ве : не защех со Сайт рр З я т Лбласт, Ве о Н іх Ши сі сою ки се х о з Що це х бою юс Тож - 7 о х т Те і М». х Ме "вка, ї л С. з ме І ІІ я Ми Ме щН. ! хз бори зІвих В при ще СОН ЧВЕЙ доме НЕ каптктеннй для Ді Фігура 6
Двв'еполучних ДОМеНЯ, характерних алж аняв МН, ст А А "р Ко вка В. я в» у 38 УМ х ХО я А Ще сиди КИ ПОКИ нн о і дрееннно в ма Ж вч В ї кл Хе ОУН Не я у ї УУЩУ фени / пен СЕТ, ші и ве» ев са Я цвюнівна обиаєть 5 Льк. се Кк, ний я МО 5. Я М, «Ні ВО ух яз Ї ч 5 ч 7 ва о є. ДУХ хо СПОЗУЧВНЙ ДОМЕНІ НЕ 0 чав характерний дна дівтіла що ще Фігура 5С Давололучних ломи, характерних для дівтіла : ше А А р жк как . хх о КО, х ДЕ «сен «Й А ше С хх ме за ЗЕ УК ї ані КОН СНІ Й КВ СХ ї Ха шк ше К І ТЕ я З і а ї ох ХВ: . сполучний домену ве о Шен ХІН ЕТе СЕК міх літе У в І ий характерний дах явна я ко сайте
Два спозучних ДОМЕНИ, характевння дай аа х сна М сама и 0 З рон яті ун нс, л а « 7 ура о Савко Од М о Ох ЗХ Коня - СЯ ке ; : Ж сяк ю ха Уа жуидАй М ОКХ -й ех, ВО ква ЧЕ туї я хе кн УМХ З ох. х НО ще ох ' с» чи сова, В умі Ше х 4 м ме БО Я хи М вв, / О Спопечний домен ве Характерний для дегча Фігура ВЕ Два сполучних Домен; хапактерних дих підтіза щи х Сайт А Я са В я орд Шевтю ява о ан 000 М, а я АЯЧИВАК ЗУ руни В і ее ї кій збласв» че Х ї Ве х ї що МОН Х ОУН бе х кох, : ; з х ух . 1 ий ще МВ, ЇВ В рт . Сину чнНий Зсмен, Не характерний де діда Фігура БЕ
Пекривнази «РО Ні мкм) і деуекттвани ковіюговане з НИХ козиче вино до бо мав НК овоово я ші ДАЙ жо МАТ ДОРОЛІ в : ЕЙ : ще
Е . й що ее МАТ до РОМА З Пооюо о дуттА 009 МАТ доРОма В ме «Й й «че МАТ де РО ке свде ке що ою; шк. я дрон нор ерчерннентррфуртр р енрррр ртернрр ни анН ОН А 4 3 Зо Концентовиців (НАЙ Фігура 7А Покрнивали зве Кб (0,5 мим і детекууваля кож ннчоване я ПХ козяче аитетізо до Вб зані М ВІНКННІЯ їх БІЧНУ І оре З ой й ее МАТ до ВСЯ ї 4000004 Ко лнаєто «У МАТ до РО Є ю Й Й хе МАТ Де РОН - 00000 й в - Ка я г ще дос Й п й З че 88 концентрація (на Фігура 7В
Покривиля ВІ Ні ОБ мкг і детектува жиаче вититіло ло беб мив чкоопобч ; «в МАТ де ВА З ш я я «а. МАТ де РОЯ 40 щ ОВО я ! се х що . м ск - Е ; ; щ й ан МАТ до РЕЯ Я ш у й ку зенену хи АТ де во 8 : і век дб років пиши: й Щі 2 ї Е - кВ 7 да Я ях доххох во дже хо - М щобовоя Я МАТ до РО-1 13 м | Щі з й а а Є х як фев дою : | 7 ди МАТ до Р ЗА - я сей мат до РО 35 я ; ОК ее що ди в 4 ча Концентваців (НМ) Покривали зп БКе Я мемл)і і детектеУналя козяче зитизіло ло їв мив НН ВН» «Щ МАТ до РО щ 4000005 в «Ве матда РОЛ В х | ще ІВ зх же ! йо ре Як МАТ до ВАЗ За ї- За00005 Я ен Що | Ду «і МАТ до ВО Я
З в. жи А т ВАТ дя З 0000» уз я сон МАТ до ВІ ЯЗ ве ; я 7 КУ Кс Й зо о В ШК, я сяя» МАХ до РВ-Я 4 ве і; но В, ді т Ши вда ще 04 З 10 Концентрація (ні
Покриваля хсуво КУ.
Ке 0,3 мер мар ілдетектували кон'юговане з ЙХ козиче витио до б яна ВВ рони «в МАТ де ВОМ шо ВООЮ: й м». -а- МАТ де РОЯЛ 2 Ж й ЩІ шк І КЗ й так МАТ де РЕЯ 5 Е ла й якою» Ма з-- МАТ де РОЛ В З БЕ тя» МАТ до ВЕН 7 В а о Май Ід пн соску рн укр орнкрлмн нанні Емо дев цоркре о, и ЗА З КЕ 0 Концентеація (М Фігура ВА Покривали суть РОТ ЕУ»ВКе і мкглня) і детектувадя козяче аититідне до їв миші НО. нива 2 За00005 де 8 ; г: Ж а МАТ до РІМІ З ж х В - ш ВМО00- я Е | ще В своє я фін учевкереннну ре енереу нер речи ни по вл і за Концентрація (німі) Фігура 88
Покринани хеуво РУКУ» ВЕ С крона і зетектували козиче знизило до б мав 1) во0о0оз ш | «- МАТ до ВВА З В кож Ї «й кое ВЕУ ВОюЮв» | сон МАЗ да ВО В У «Б БО «вк жах ; У ; як ня 7" МАТ де ВО ЯО БУ во «А же: Х кое ва й Ве» о ; и - й «фе вк з вт Я що дая К ие я же З МАТ де РК З 5 БА нон МАХ до БО 35 Кк Ж й а «Ж яна й ях Ко в че МАТ до РЕЯ 13 І НОЯ я з, т Е й з
Що . ше Й рт Щі що ще осн де І де йде оо р ме МАТ де во 15 вом вам ва і ча Концентрація (еВ) Захоплаювали М Бебіотнн Її мкглюдії летектуваза ЗК ОА-НІіВ
ВВ. м а МВА до РБК ІВ 5 ВІКЮФО- т ше че мате Я 5 п у. 000 Ат дав во о, ку матда Роз т 0000 ох ОТ Е й А "ЧК мАТде РО тВ 5 зравдо- ча Хе м ше а пооофунуррмрефч р фер онорнурккдермони ет кн рн в Я о то Концентениня (НМ
Звннюопеваля РО Бебі мкселіі зетектували ЯР БО з С | - й й зе МАТ де ьЯ А НН АХ ЗКЮ0У й І я і Ж вх зве МАТ до ВО Я ї ; К щ «КО я ка в З 10 заз концентрація (нм Фігура 985 Захеплювали ОА Бебвенн мкрлняр і детектувади ЗРО ВОННОЙ в В Я МАТ до ОА А ЩО АХ 5 0009 ооо В, Я МАт до РО 5 5 ці «ке МАТ до РО В я жа ся МАТ до РОЇ с бор» -
х. М Х і вові « Хь кої ей нн я ва Е ча зов Конценувація (ЗМ Фігура 9С
Захоиювали РТ Ке-біотнв ЇЇ меслч і детектували ВЧ ОН кавова» «ве МАТ дя БО А оС АКА . «аж МАТ де ВО Я ЯН ен ік їх и МАТ де Я В ш х ОКХ МК Ко о дра с «В к ее ВН я ОО --Х ше ке «фе МАТ до РОЮ зв Еш Я як она м Б З КЕ бвовов ; ж х тк Мт де ВОМ. ж о тен МАТ до РО 1 є У я -е МАТ до РО З НВО» З ТОМАТ до РВЯ в МАТ до ТЯ 5 вл 4 їв 188 Концентраців антитіла (меми ібрма т СЕТИ й ї5 Ж й ще З І , ув З с с с. ех ХХ сам ЕЕ вх к у
Кк . й я у КО кВ КЕ шо М г г і о. й в в в х і - п о її а є : п лях Пезі і; Б Ж тя і з У За м я о КОЖ що ШЕ ВСУ о з ІНН я о КИ ор Б г шо О Ж жо М о шу . ; й х й : п о. КК хх ще ж . йо й па КОЖ СХ СХ в ж І с хо КТ о ПЕ п ОК "З в о ж о. С Пл Ех о хе о о С. її се " а во й п Кі о. З З про ще ЗЕ 5 иа Б : о і АК Кс і. с о ще й | » и 7 ї я ТЕЖ ЕК 5. П х Ж ж ее и зак про же КЕ Ж Я пл о її 0 | з , й. . ; її і. В ї Б пи Х ЦИ її її о ее о. що За їх Е Ох с о | то» Гх о п в г і-ї: : - | . . . 5 ЖЕ т о т ти ав, хх хх ХВ х ж п сх. ПЕ і о о. МЕ 0 пе Б. і т х о ще в о 5 ; ще и о ще «В . не с о МОЖЕ о ик ПК то сх ще ерец - пох о п се с шт В т ее КУ В о п г дк ОО пох о я В я хе ТЕ п я 5 о с в на КЕЯх СЕКАХ : о. С КЗ с ЕЕ пл Ву м т с. ї о х: Хе їх М. си Ки га г пн, хх о В е п 5» В шо і. ! . . В ПоСЛВ ПК і що ж А ВУ шт тт о х
І . КАХ їх Ж КО х с і Хо ст т шо я М я ЕК я 2. М ї МОХ 5 политі Яе Ех С т о. КОБЦЕ й ТЕХ і я ; й се т ко с: ще Те по ЖЖ: ОХ М СК о я ШЕ: т СК ЕЕ о. СЕ М Б п 2 с ї . | ; ї шо ок М ця Кі о о її п. ех ж . ! сх п НЕ КК ОК ЗК дае овес : с ї й : : і я й се пе Б о и ХК У СК о хх т ей Ії її оо о ою І СК вх г. й о 5. о о Я й
Щ о. : Ве з Ех СОЯ г З. 5. кі Ж НАУ з ТЕ в п. нь ЩЕ ЗУ п о | о Ж с ХК дих Що їв їм з о п о СОУ З а з ЗВ я т. о я . ІВ Е до й пов: ков МЖК 5 п о. ка Се Нези п ще я в . п о Я Як Б ско оЕлЕн п що що - п ХЕ ТОВ х що Кк ПЕНЯ То КК ж що о ш о ши ЗЕ лися шо. - з ОХ кох т х з М х я: 7 с . Ж о 55 ие Ах ЩО в ж ши ЕЕ 2 зі С пк оо «Ж М. дея я о с. щі щ- що с т : . : - ея їх ОК с КЗ м п пкт а о . я ік о о п ста : С я у о ще Е о . ї я еще й п що 5 о с її її ; є я і я о я о я І : : . . І ве | о : і оішеее Нр ще я о ОО хх м :- . | ї рка о у А ох М п: 7 - г о ЗК ЖИ т ще» Бо п пк в с. т | : і ! : ще щ в Шну Го х ДЕ о що о а я Хе Бен т Б п . . . т. С лк СЯ Кок ОК КЕ В що о. о г її. у її ТК ї і: сх ЕК ещ. : ; - - пе ПІТ М вет зе ха х в : - х 0 хн ТЕО АК Б й Й 1. до ще ї і с Є : ; і ї ВЕ Ан во шк, ТЕ пк Сх ОХ Ме КЕ 5 МОХ а хе С ш ях І М С к ї о ; ї я пу ТЕЖ З ТЕ пк Ж ще се - т Ок, У о р її я Б о лок щи | що З о о. т : т о 5 З їх По З по Сх, та з ще ї : г ЗХ енеи пох Б Ле св, о. 0 ме. шу ЕЕ т А в . се тат ї вх | їх п с : ; Ж ОшИ ї а де м нок щей с щ ж га кох ЩО . по сх м Ох о ; І | . ен. її Шо с ї і й ї 5 . : т п п ОО хх о п: ще о : сих о ва о по Пе ДІ хі. що п ЗК з Ку Кт т. м -х сок Ди КЕ Коня ко п по ня Лл М п ал ве АХ У Ще Кк г щі Б пу пору й п о с . пе о тя с шк КО Я . шм Що ОВ ДНК ї я ке МК Ку ї м жКНЯ шк р У Я ЯКЕ СЕ. вон Ол . . г ПОС х С Б и ШК жо ще пох ж ЗЕ п. ЖЕ
Б. З о п сх в о ще ш т о Ко о сх ЕК я М ї я - Ох ех о ше ще . ; | . ї о . шу Тдшх ЕВ ох пт я ше п п ця Мо х о - М ве і. с і. - й . о п ще ок п ще ж о п ке п зе ще о о ЩЕ З : п т. лм п о в пе ї і о В я що о о : Й ! т і Ки ОО ро о о о с . : : с її СО Ід ще ВЕ СЕ ши Ж , : 5 по т но х ; ро | БВ о де о й КУ з а с п т ШИ ій шк х : . Ж -ї пли, я п : в. :
МЕ. : / У п і . ім Ко о. і онтро шо Фігура нтроль із Е ко НУТ З мкг/м щі же ооо опо Кок ни ПК чу Жвх ж ти Кок Крок окт ння МЕНЯ КО КККНЕ М ОШЕЕАТІХ п «БК ЖЖ Ко Ж пою С в я клік ше що ОК ее в "тенет ек ен 7 Я ОХ ГИХ ВИ. Олово ши окюнккаккю ше сш ВК Пас КС В пиши ї с пекти -ї оп - -і ПЕ Ки ПК Не пон Кі є Я и КУ МЕ ру лиЖ Я МК ее пе тя ше З х но НМ ех МО ня п ЩЕ х а Б я 5 Ж и й че їй в Сл ще Квт ОО ЕТ СЕ А т Їм. ВК ох и ХК усю пе ХУ я СКМ о ТИ у КК ше я Ко Шк а дО пк ве ОК дк тТУКМ под Урни: в 0: до си х с б СО сивою й о. со о я о. Су СО сов Ї Ме От пед ВВ шов он ВЕ САКЕ до я Шк КК ЕЕ ВК о ЖИ шиї у КоААЖХ пожвека КА КК ник, сера Ід я я СКК ки В мк Зх ГО ее їх сх : пом се ав ; ще В по З т що Ох МК КН пи що Я у що пр пе г ше ек Кс Ж ВН КК ТК тк ОХ ПК ВУХ С сни Ах 7 ЕВ ТЯ а я КО КО ПДВ ее Ж т АК подукний ше я "КЕ Дю КЕНКеХ УК МОВИ тн ПК Болю стих ке ШЕ З МА а По КОЖ ик ВО ГТ ШІ Мом ПІ ЕВ а АК ТЕ и пив А ще Би по ху бо Б що АЖ дн ня пу км ТЯ. подо й Зееооо вна кс ТУ пт ве х с о Мод шо хх Ще во ВО КО о СХ оо кв с ОБ ли т . с ї у ооо кон й ТУ КУ пе хх Іо пече» КВ Б з У ОО о ЕКО тех В петеевовех Що КУ
; й. ДО и УК ОВ з п: ша нина с с с о УКя Б п х . о. СО С ОО о вх А м п. ще о С Ох ЗВ КВК СА, ХК АК Моя Ж ЗА ЕКОККХ . ж ЗНО ЗХ ЗК МОП ж ще Кн по я Б. о т ДУХ ЗХ 5 ЗЕ ше рних зе Ох ти ока Ми ше о. ОО ОВ Ко вя У г ие с ОКУ З щ КОМ СОУ КОХ п. що ОМ що о . с г т шо - ЕКО ж МУК ОХ ОВ АК ТКА ВИ же ВО ше . о о. 5 КО СТЕ, У ах шк ШО Ки Ж о: лк, с о. В п ше БУ ДАХ КК ХХ У КК Ко 5. ОО КД я ОХ КО 0. З МО Ме М КМ ОО а УТ нЕ У ее УК З КК С ОКО КК КОДАХ ик КОМАХ ОО ХХ КК п ТК Хо КО с о 5 СА З ОО КОКО ОО СО С СЕ п - а. "а ОККО Х М хх о й С о. с о м ши -- с о х их ОБОХ КК ПИ КК ня ПЕК АК с І 5 й о. В - хі» ОК КК ПК дов з КК зовн . ОН ХУ - ХХ о ХХ СК . КОКО с 5 я У КО с я Т ж Хомик г чу с ох щи Те ЗМ с Ж а ПОИХТОМ Ж ТЕ с в с. па хе ОВ ОХ ОО С фе о ВХ З є 0. о а ех с ТК в я У с ВЕЖ нс веж й с по ша ща . КК ОКО З ЕЕ х Я че Е є МИ 13 мііми жнтраль і уми 0343 ізотипу ЕЕ 5 В й КЕ і я
Кинві насичення (розведення 124) - - : З М а нн їж Х я Ве КК Я я 0040005 / ПИ 1 10 109 не Мкгмп Ос ей)» МАТ дело З ОМ А МАТ де ВРО ТИ ВН АК МАТ до РО ТИ ОМ ІВ) МАТ да лем То) ОМ «ін МАТ Дер ВИ ЛИН А зай» МАТ де лес ВТМ В «й» МАТ до а НИЗСМ (аа ее» МАТ до ВТ АК АД зу» МАТ ДОРА ЩОВРІ «вн МАТ де РЕМ В ОН (м зефк» МАТ деРОЯ ВМ І Фігура 11
Блокування ЗР Цеевелення Я «Ол . є 10005 М У що їх с З і щь З З х тах за за 1 те Концентраців (мкитесті
«ан МАТ де пе З дО (АХ) В пльжвщ
В МАТ до ПРОМ ТО ат гАА) (2 Незабарвленнй
«В МАТ де ВО ТА ВИ
«ЩЕ МАТ до яв ТИ З) ВОЗ
«й МАТ до ЯР! ВЛ) ДО АД)
"ее МАТ до ас ЗИ ТНеся (В)
"Ще МАТ де ВО 16 ВО (АД
"Ох МАТ до БТ АВ МО
"ЖЕ: МАТ до РЕМ А 904 (В)
"Я МАТ до БО ВІЗОК)
"Кк МАТ до РОЛ В ЩО В
Фігура 12А
Блокування ЧИЯ (розвезення 1:54) . ово І - се нн жк 5 па З як ОО їх ши кое ееь. їх ех я б о, ш З з хо 5 5 40004 а я З Б-ка щу е У 5 М 5 М ра З 5 533 я 20005 щу м х ШЕ в іч щі хх З й ЗКУ я У 105 103 102 104 109 Концентрація мигтест «ВД» МАТ дея яв АХ В льки РН Я МАТ до ПРОМ ЧИЮ АХ) СО Незабарвлений МАТ доп ЕМя що кН -щ МАТ до яв Кен «во» МАТ до РО Я КМ ТАК нір» МАТ доли ВИ ЕОР) МАТ до РН ЛО (АХ) я ши «а МАТ до РЕМ А ЩО (АКА) « МАТ до РОЗА А ОБО ж в «в МАТ до РО В ККУ АХ о МАТ до РО В ВОВІР КК я
СНО Я твою МЕА т ЛЬСЯЛЧИ Закат (50 тнео), б год. гуманізеване МАТ (розведення 150 ЩИКЮ» Сі й Ме с ТЗ она т 00007 дл й задйле Я АК око ненні)
х . Я й й т | з ж жк ке Ах вн | сх ж. КН я ча та 10 109 не Мейми 0 «Ве МАТ до ес 2 С АКА г МАТ де пес ЯМ ТС ТАКА «Б МАТ до яЯБОС УП ЯРе (АХ) «ве МАТ де пе ЙО НОЯ (Р «іх МАТ до пе Я ОСТ АД «фе МАТ де РО ЩО 4 "ЩЕ МАТ до РО ТЛО САД) "В МАТ де РО А С АК) Я МАТ до РО- А вд (В) ях І зі ка ки МАТ до ВО В БО (АД) ск ща що ж ще МАТ до ВСЯ В кн (В Фігура 13
НУ (онов ЗИ мат дух мат дв іже МО ОТТО ТЕТ мах лотом пла воли з 1 "МОНТЕ вк мя вл пи НН НЯНЯ НН МЕ НН НЕ НЕННЯ ВАННЯ МАТ до БОМ ВАМАТ да Б х АКОТ ТИТА ль Мат мая у МАТ домі ПН МАТ да РІ ВМ МАТ дея й НК МММьм матяе вол я У БоАт до Тс! ВМАТ дова ПИВНИЙ МАт дез АоА ТІ МАТ де В В ЛЬ ня ізо КЗ її ; звовввй то ото Тільки середови їх вахта я ЩО З яма ЕВ з в КЗ ав вв во 8 ок ще «іх прі іДонею: 778 В о миглянм є середовище шк ? ЩО 30 мегляй є ЗЕ н КМ ОВО меми є ЗВ ев ї ЦІ т І ! о ї І і ЗВ | ; | і є Е їй З х х з х В - т НВ м хх КВ: ге ТА ХЕ я УВІ Ех З, |, їх і Б.В : ЗА фе ЮК ще о п | | 0. о і К Мк ЗХ ЗКУ хе М ОК УЗ ЗК ХК Я К-Я 3 в КУ я З дк с у дя: . з 3 З с х Дохохх кох «В ах «о З й хе їх В ххх с ву аз НВК В В нен НМ шу в У я - с.
ОК ож ОК А я ляду дах скАжу Аг ку Зх че Му АК - кВ ЕЕ 5 5 шо ї ша о ша Ж де АВ дк Ж в Б в Б в В до шо й ж я ду ще ю те - с - о х щ- т м ко : не хх 5 й в фа т вовожоо в Божок ВЕ а 5 Яд у з т, що В І як. є їх г : КЕ ї у « е У а оо сх В Во т сх і» І» ве зе В.
М Кз ї - шЕ їн Кк ш ж 5 Бу 5 ща а че Х ФО З ож яко жо кЕ Кк ям Ж ж е е м м Ж -е о я Я с З ї с. ТУ ц Й Донор: БУТО8
ДЦ. ЩО соми ІМК МА Же ; ЩО 46 мкг середонище смбувія я ЕХ ка Іо меми є СВ Зав 2 й ввуй я ха Ї БМ ме : у У м ж | : Б Оди мкг є ЗКВ ї їма є ЗКВ я хЗ Ге- ЗХ ЖЕ що З 5-0 Зв кШ. ; КУ В з 3 і х І ! КЗ і ЕК з Б, ж ІЗ КУ З і З ВУ 5 Ку в З у МУ БЕ В З х і в З 5 г г Цо х В.В еВ ях ВВ Р я ВЕ ЗЕ І КІЗ ЗА У Я бах З УА що . ОО ЕЕ ОВНА З в . ке БОКИ ОБ ОЗ З ВК В ЕЕ ЯКО МН и ЗК ВСЕ ЕВ ЗВ КОНКУ ко Зк Б ху Я о ях мн Те НВ ВО В а У ЯКІ и І Вр кн БО БО МОХ ЖК; зе кет З а п а в В Б В В ВН В : в. о і; В і ІШЕНОІ ВО ВЗ ККУ ВВЕ УК ННЕЧКК ДТЕК ВЕ ЯК ще ЗКУ ВОНО а Я Я, НИК: ТЕ МНЕ Я ВЕК В Маки ВОЗА ВУ ЗБ с з УКВ НЯ КУ: Я ТК У УЗ ЗХ ЗКУ Я З ВЕУ КЗ. ще ш ож м «МО ння ЩЕ о. НЕ у ОО Е. ке Я з як КА т КН КОХ В НУ хе Б я Ж я 5 и и Ши ши скл АЖ х ї ТУ ц щ г т чех кох хе ще ех В в із о 5 5 5 й «ож Ов А їх як , її Кк щі 7 а Ух ще к- З ї Ти у з т СЕ Ох х МАО 5; В В їх ще 5 і Ї « й х я Ка ко кози хх їх т с С щем т -Х « сх х Же Ж хе т не я ; в се. в я ооо шо хо ще ок Ж х гЗ 5 то Кооже Я тоже й В б. ЕС Б о я г В шо ж м ше х КЕ ; й ож роя М го ря хз «А я ще - р те те в й. і шо КЕ ме. кх я фе М Я т гу ? ще р «Е ск Го жк й ве з» З. ї «У ме М ре 0 їх хх су ха -к г я Щщ з : З га УСЕ 5 - т ек ох в ях «ко щ Що Є я ро з. ре т з, - х ке У Є я КЕ х ве ве кое ки «З Те мо «х 5 ХЕ ж Я м ФІ зо (Донор ЗО) вий ієпецинойчна БІ хе АЮ» евввв ех кв я хх я куль шана 50 НМ МАТАЄТ в середовищах зоб і: БО НМ МАТЯЗАКТ я ЕВ и . 125 ВМ МАТОАНТ є ЕВ С | 3125 НМ МАТЮАНТ я ЕВ З зво т. Я БО /комеіне. МАТ шині шиш й ши ж, І А кн в Ех о я шо чо ша. Кк КО щі по Ж «К З ІЗ - я я 3 ща Ж во їх в - В т т і Б
(Донор: БОБОВІ Щоб Біспецефіче ВОЯ же раз Г КЕ 50 М МАТЮАНТ є БЕВ в в 12,5 НМ МАТ/САВТ « ЗЕВ Ж І КК 3155 НМ МАТЮАНТ я ЗЕВ - «в ; а . Комбіна» МАТ 305 В 0 ванеМмАтТ Рол дез жо 1 й кіноднененстьнн - в її В я КЗ 5 у Я Я ЗУ ВУ З З і, нен с І що і 8533 5 ЕН Кн ВО КК КВ В КК ВОВК я пре ум жк» в, «5 її. їх з с ї шо їй Ко ш паца он на а я ше ИН НС На м цк ІЗ ЕС Жов «х 5 ж м в ке ве м м би З КЕ З Е з ж «о В в ї з хо Кх и че т «Ж х ху а Ку г ї Р К- ре Ж 7 | Ф Фігура 168
Щі бо М МАТОЮАВТ є вЕВ КІ НМ МАТОВІ є ЗВ й ЩОБ НМ МАТАНТ я ЕВ Сни не ВК КХ МО РЕ дл гум кю (Донор: ВВЕТЕ) 0,315 ВМ МАТЛОАВТ » ЕВ з б нема ЗЕВ щ по нМ МАТлАНТ я ВЕВ І фіспецифіане РО кА вав ПОТОМ МАТЛОАВТ є ЕВ Ук я Бо я и Комбіно. нт ях ЕВ Зк Я. ване МАТ т Ак гр За В ТО М Бе КК КККК КТК КАК КАТ КК АКККАКААЛМКК КК КА. ей: РТВ В Му ке ТВ ЕХ М ех яз Яся Я -щ- в в к: ха жа ОДУ Ше ЗУ ою ее У жк З Де КК ВЕ НВ Я НО в Я як до ЗКУ ее Оя с; НН МО змо ВН ЗК хо ко в о Керр хоп вон окол ходх донос ак І ве В БО В НО й я В соя В ок Ка В п: в. а їй «о Же ди од З БЕ Її Ж З в гр «в ЕХ хх х « в Є 5 ч Ж сі й З в З х і: ТЕ ту их МУ хх г ФС як в. БЕЗ му ЖЕ ч Є вх м М х Хе х щі ех мя к В ха я ж Е 5 Ж ко Ж НЯ Фігура 17А ЩО ЯМ МАТЛОАНІТ з БЕ ідонор ВВІВ ГОМ МАТОАВТ є ВЕВ Вб нейав ЗЕВ ОТО НМ МА Т/ЗАКТ є ЕВ М фуепецифічне ТЯ х» (ав БО Я НМ МАТОАВТ я ЕВ : Кк О.078 НМ МАТОАВТ я ВЕВ Ж ве КЕ 0019 НМ МАТЛАКТ я БЕВ Ж в вав, хз Е я ще Комбімо» ші
ЖХ. і В ок вана МТ ва Вся М док Ух дик о ОКА КАКАО авею й Ка ка ще кн ; я БОС ще З як 55 ЕК як ЗХ Я ВОК як З я Ж:
ші . ШЕ: ЖЕ 3 В МО 5 а 0 ВУ дя В ОМВО Я их В їй НО т з с КН я ОЗ о 5 ще ВУ ЗКУ я ЗХ АК: я 1 МЕ КО З о м Не : - о Ох ї нен її 55 Я, Борн є о хх не не т ев У Ж КЕ ех т 5 ВЕ Ж є т снів по КУ хв г З дух пов Кк ш ЕЕ кН хЗ гу Не: Я КУ Ж К 5 х х в ве Ж У те ш - КУ ЕН Фігура 178
ЩО Бо нм МаТАНТ я ЗЕВ КО а НМ МАТАВТ є ЕВ Б ОО ТОБ НМ МАТАВТ є ЕВ гу лица ЕВ ВИ НМ МАТЛАКТ я ЗЕВ й ОН 095 М МАТЛОАВІ я ВКЕВ ре З ХХ и од кв хе зок днк я що і ве ОМ НМ МАТЯЗАНТ я ВЕ І біспацивічне БО хх АД о. ЗОВ в Кома» МАТ хе В ване МАТ ва зава у що ах ПІ Мою нини нини З ЗБЕ с БЕ я Я. 5 З тукоокхкн і в Бін С В що о г о . 5 За В щі й З ; ЕІ СУ БІ ЗБ КЗ мак Не Уч Жх« вн БО В іх 55 ОУН МЕККА в ВН ЗХ БЕЗ ИВ В І ОК ш» ОХ ВСЯ «МО ен ВО БО ВН В М Ус ПАН ка Нв В В НЕ В НИ ве ах Я її ї: «КЕ зх, шжю ж хх їх їх їх ан зу реж ВЕ 8 рЯ « т г ВІК - ОХ т З М Б В хх шк ак як с ЇХ о те ЖЕ я КВ БЖ - мо ех В ГА -х ех ше ГУ У т Ж М жу У їх т ор ух т ж в с рих ЖХ г - ке ш х Фігура ТВА ЩО хо ВМ МАТОАНКТ є ЕВ СА НМ МАТИАКТ я ЕВ БО ЗО НМ МАТЛАНТ є ЕВ З ОТО НМ МАТНУМАТ в ОВ зма: ВОК нм МАТААКТ з ЕВ вно ЗбБнішп ЕВ ща ЗО М МАТИАКТ я ЕВ Біспецуфічне РО ка АНЯ гео пото ооо тво оо ато М Ку ж щ - в З зане! ум іа Бе во а Е с ошснах ЗВ ІВ Я з По г па о з й ЗОВ» ЕІ ХУ ЗАЗ ех 15 ЕКЗ во хх. і У с: ї МОУ ШОУ СВІ Бе В ж Б 5 ща у. ий 5 І НО Б с а з НВ Я ККЗ я ТК І ЗК вх ве ХК Яке с» т як . ОК. і в Не 0 оз 5 вв кое КЕ я в в ж я Я т я ох мод дк мл, ж в щ хх. У Кк ї ї ях їх Я щок її її хх ч-7 5 г їх З ЩЕ 5 Ж Ф ж су ВА Ж х КЕ й їз її 5 то 5 Е З й сх ую Но У Ба що пох 2к Х ко НаКоа хо ле Їх ж ко во Ж їх Мо - « Е й Фігура 188
Аа кате. Янка ЕВ то меле Вічне сс вгмЯ» хід ще що НМ МАТОАНТ я ВЕ ва ї - КА КУ хо ре як сх Комбіноване в с ЗМ МА ПОВЕ щЕВ га ї МАТ ка ЗО НМ МАТАНТ є ЕВ в У кух 2 ях Ще г я зх КЕ удсодря ля й М хх І: В М КЕ КУЗ х Я ї М в їн МАТ ї- ТІ КА КО а і к ЩІ . З 8 . пн яння АС КЗ я Хо я КУ ЗАВ . і у В пе о я й о 2 ВК ЗКУ
5. МІ СОЯ г. Б сш і зе кр м г В ще КУ а хх Ек дк жк В гу г КЕ я ск хо Ж же ка ж УЗ ек ав м дво хх. св ння ПІ БАН ЗЕ щи Я ОК Я а Ка ж сх ше че нео рен ї5 їх - ай « ох 5 са я ще -к 23. ьо жиоже х м їх С ЩЕ ж їй ш вп Хо в ка Го о се Се в Ма В вв в зе 056 му У «ее «і оОХу ск Б лях Бу Ко а я Я 5жВвоо вк ок в очей М Ех, Е х ее в с З З я й В Й ХЕ - в ж НЯ Я
UAA201801414A 2015-07-30 2016-07-28 Моноспецифічне pd-1-сполучне моноклональне антитіло UA127372C2 (uk)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562198867P 2015-07-30 2015-07-30
US201562239559P 2015-10-09 2015-10-09
US201562255140P 2015-11-13 2015-11-13
US201662322974P 2016-04-15 2016-04-15
PCT/US2016/044430 WO2017019846A1 (en) 2015-07-30 2016-07-28 Pd-1-binding molecules and methods use thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA127372C2 true UA127372C2 (uk) 2023-08-02

Family

ID=57884977

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201801414A UA127372C2 (uk) 2015-07-30 2016-07-28 Моноспецифічне pd-1-сполучне моноклональне антитіло

Country Status (36)

Country Link
US (3) US10577422B2 (uk)
EP (3) EP3328419B1 (uk)
JP (4) JP6959907B2 (uk)
KR (2) KR20180093127A (uk)
CN (4) CN107847574B (uk)
AU (4) AU2016298227B9 (uk)
CA (1) CA2993948A1 (uk)
CL (1) CL2018000254A1 (uk)
CO (1) CO2018000867A2 (uk)
CR (3) CR20220194A (uk)
CY (2) CY1124634T1 (uk)
DK (2) DK3456346T3 (uk)
EA (1) EA201890296A1 (uk)
EC (1) ECSP18006831A (uk)
ES (2) ES2898958T3 (uk)
GE (3) GEP20227419B (uk)
HK (1) HK1248106A1 (uk)
HR (2) HRP20211645T1 (uk)
HU (2) HUE056201T2 (uk)
IL (4) IL297090A (uk)
JO (2) JO3736B1 (uk)
LT (2) LT3328419T (uk)
MA (1) MA42542B1 (uk)
MD (2) MD3328419T2 (uk)
MX (3) MX2018001227A (uk)
PE (3) PE20231958A1 (uk)
PH (1) PH12018500232A1 (uk)
PL (2) PL3456346T3 (uk)
PT (2) PT3328419T (uk)
RS (2) RS62568B1 (uk)
SG (2) SG10201906059VA (uk)
SI (2) SI3456346T1 (uk)
TW (3) TWI762879B (uk)
UA (1) UA127372C2 (uk)
WO (1) WO2017019846A1 (uk)
ZA (2) ZA201800500B (uk)

Families Citing this family (258)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9963510B2 (en) 2005-04-15 2018-05-08 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
EP2559690B1 (en) 2005-05-10 2016-03-30 Incyte Holdings Corporation Modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of using the same
KR101927291B1 (ko) 2008-07-08 2018-12-10 인사이트 홀딩스 코포레이션 인돌아민 ２,３-디옥시게나아제의 억제제로서의 １,２,５-옥사디아졸
PT3176170T (pt) 2012-06-13 2019-02-05 Incyte Holdings Corp Compostos tricíclicos substituídos como inibidores de fgfr
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
EP3620473A1 (en) 2013-01-14 2020-03-11 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
SG10201708520YA (en) 2013-04-19 2017-12-28 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
UA119167C2 (uk) 2014-03-28 2019-05-10 Зенкор, Інк. Біспецифічне антитіло, яке зв'язується з cd38 та cd3
BR112016027912A2 (pt) * 2014-05-29 2018-02-20 Macrogenics, Inc. molécula de ligação triespecífica capaz de se ligar de maneira imunoespecífica a três epítopos diferentes, composição farmacêutica, método de tratamento de câncer, método de tratamento de uma doença associada à presença de um patógeno, anticorpo anti-ror1, ou fragmento de ligação a ror1, fragmento de anticorpo biespecífico, bite ou anticorpo de cadeia simples, e método de tratamento de câncer
CN107406512A (zh) 2014-11-26 2017-11-28 Xencor公司 结合cd3和cd38的异二聚体抗体
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
EP3223845B1 (en) 2014-11-26 2021-05-19 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20
WO2016105450A2 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
TWI712601B (zh) 2015-02-20 2020-12-11 美商英塞特公司 作為fgfr抑制劑之雙環雜環
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
TW201709929A (zh) 2015-06-12 2017-03-16 宏觀基因股份有限公司 治療癌症的聯合療法
CA2991976A1 (en) 2015-07-13 2017-01-19 Cytomx Therapeutics, Inc. Anti-pd-1 antibodies, activatable anti-pd-1 antibodies, and methods of use thereof
PE20231958A1 (es) * 2015-07-30 2023-12-06 Macrogenics Inc Moleculas de union a pd-1 y metodos de uso de las mismas
EP3344656A1 (en) 2015-09-01 2018-07-11 Agenus Inc. Anti-pd-1 antibodies and methods of use thereof
AR106184A1 (es) 2015-09-29 2017-12-20 Celgene Corp Proteínas de unión a pd-1 y sus métodos de uso
KR20180069903A (ko) 2015-11-02 2018-06-25 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. Cd80 세포외 도메인 폴리펩타이드 및 이들의 암 치료에서의 용도
AU2016348391A1 (en) 2015-11-03 2018-05-17 Janssen Biotech, Inc. Antibodies specifically binding TIM-3 and their uses
KR20180085800A (ko) 2015-12-07 2018-07-27 젠코어 인코포레이티드 Cd3 및 psma에 결합하는 이종이합체성 항체
TW202208440A (zh) 2015-12-14 2022-03-01 美商宏觀基因股份有限公司 對於pd-1和ctla-4具有免疫反應性的雙特異性分子及其使用方法
CN109715657A (zh) 2016-04-15 2019-05-03 高山免疫科学股份有限公司 Cd80变体免疫调节蛋白及其用途
MA45255A (fr) 2016-06-14 2019-04-17 Xencor Inc Anticorps inhibiteurs de points de contrôle bispécifiques
CN109475603B (zh) 2016-06-20 2023-06-13 科马布有限公司 抗pd-l1抗体
AU2017290086A1 (en) 2016-06-28 2019-01-24 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
WO2018022945A1 (en) 2016-07-28 2018-02-01 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US11471488B2 (en) 2016-07-28 2022-10-18 Alpine Immune Sciences, Inc. CD155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP3515944A4 (en) 2016-09-19 2020-05-06 Celgene Corporation METHODS OF TREATING IMMUNE DISORDERS WITH PD-1 BINDING PROTEINS
EP3515943A4 (en) 2016-09-19 2020-05-06 Celgene Corporation METHODS OF TREATING VITILIGO WITH PD-1 BINDING PROTEINS
SG11201903302UA (en) 2016-10-14 2019-05-30 Xencor Inc Bispecific heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ralpha fc-fusion proteins and pd-1 antibody fragments
CA3046082A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
WO2018127916A1 (en) 2017-01-05 2018-07-12 Kahr Medical Ltd. A pd1-cd70 fusion protein and methods of use thereof
HRP20230937T1 (hr) 2017-01-05 2023-11-24 Kahr Medical Ltd. Pd1-41bbl fuzijski protein i metode korištenja istog
ES2916217T3 (es) 2017-01-05 2022-06-29 Kahr Medical Ltd Una proteína de fusión SIRP1 ALPHA-41BBL y métodos de uso de la misma
US11299530B2 (en) 2017-01-05 2022-04-12 Kahr Medical Ltd. SIRP alpha-CD70 fusion protein and methods of use thereof
CN110121510A (zh) 2017-01-06 2019-08-13 克雷森多生物制剂有限公司 程序性细胞死亡(pd-1)的单结构域抗体
ES2902670T3 (es) * 2017-01-13 2022-03-29 Taizhou Hanzhong Biopharmaceutics Inc Anticuerpo monoclonal contra PD-1 y aplicaciones del mismo
EP3571231A4 (en) 2017-01-20 2020-12-02 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. ANTI-PD-1 ANTIBODIES AND USES THEREOF
CN108341871A (zh) * 2017-01-24 2018-07-31 三生国健药业（上海）股份有限公司 抗pd-1单克隆抗体及其制备方法和应用
CA3053989A1 (en) * 2017-02-22 2018-08-30 I-Mab Anti-lag-3 antibodies and uses thereof
US11459394B2 (en) 2017-02-24 2022-10-04 Macrogenics, Inc. Bispecific binding molecules that are capable of binding CD137 and tumor antigens, and uses thereof
KR20190124750A (ko) 2017-02-28 2019-11-05 사노피 치료적 rna
CN110809581A (zh) 2017-03-16 2020-02-18 高山免疫科学股份有限公司 Pd-l2变体免疫调节蛋白及其用途
WO2018170026A2 (en) 2017-03-16 2018-09-20 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
JP7458188B2 (ja) 2017-03-31 2024-03-29 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍を処置する方法
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
BR112019021520A2 (pt) 2017-04-14 2020-08-04 Tollnine, Inc. oligonucleotídeo, composto, polinucleotídeo imunomodulador, composição, conjugado, método para modular um receptor, método de tratamento de um tumor, método de tratamento de câncer, método para tratar um tumor, método de prevenção de câncer, método para induzir uma resposta imune
JOP20190248A1 (ar) 2017-04-21 2019-10-20 Amgen Inc بروتينات ربط مولد ضد trem2 واستخداماته
WO2018201014A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Five Prime Therapeutics, Inc. Methods of treatment with cd80 extracellular domain polypeptides
WO2018217944A1 (en) * 2017-05-24 2018-11-29 Sutro Biopharma, Inc. Pd-1/lag3 bi-specific antibodies, compositions thereof, and methods of making and using the same
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
CN110678200B (zh) 2017-05-30 2024-05-17 百时美施贵宝公司 包含抗lag-3抗体或抗lag-3抗体和抗pd-1或抗pd-l1抗体的组合物
CA3060989A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising a combination of an anti-lag-3 antibody, a pd-1 pathway inhibitor, and an immunotherapeutic agent
BR112019020610A2 (pt) 2017-05-30 2020-04-22 Bristol-Myers Squibb Company tratamento de tumores positivos para o lag-3
WO2018223040A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor using an anti-pd-1 antibody
AU2018282094A1 (en) 2017-06-05 2019-12-12 Janssen Biotech, Inc. Antibodies that specifically bind PD-1 and methods of use
US11466084B2 (en) 2017-06-25 2022-10-11 Systimmune, Inc. Anti-PD-1 antibodies and methods of making and using thereof
EP3649156A1 (en) * 2017-07-06 2020-05-13 Merus N.V. Antibodies that modulate a biological activity expressed by a cell
CN111164100B (zh) 2017-08-03 2024-03-12 美国安进公司 白介素-21突变蛋白和治疗方法
JP7437301B2 (ja) 2017-08-25 2024-02-22 ファイヴ プライム セラピューティクス インク Ｂ７－ｈ４抗体及びその使用方法
JP2020536552A (ja) 2017-10-10 2020-12-17 アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド Ｃｔｌａ−４変異型免疫調節タンパク質およびそれらの使用
JP2020536894A (ja) 2017-10-15 2020-12-17 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 腫瘍処置法
TW201925223A (zh) 2017-10-18 2019-07-01 美商艾爾潘免疫科學有限公司 變異型icos 配位體免疫調節蛋白及相關組合物及方法
BR112020008316A2 (pt) 2017-11-06 2020-10-20 Bristol-Myers Squibb Company métodos para o tratamento de um tumor
CA3082383A1 (en) * 2017-11-08 2019-05-16 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-pd-1 sequences
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN109897111B (zh) * 2017-12-08 2021-02-23 杭州翰思生物医药有限公司 抗pd-1/cd47的双特异性抗体及其应用
WO2019125732A1 (en) 2017-12-19 2019-06-27 Xencor, Inc. Engineered il-2 fc fusion proteins
CN109971712B (zh) * 2017-12-28 2023-06-20 上海细胞治疗研究院 特异性靶向cd19抗原且高水平稳定表达pd-1抗体的car-t细胞及用途
CN109971714B (zh) * 2017-12-28 2023-06-20 上海细胞治疗研究院 自表达pd-1抗体并靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰t细胞及其用途
CR20210319A (es) 2018-01-12 2021-07-27 Amgen Inc ANTICUERPOS ANTI-PD-1 Y MÉTODOS DE TRATAMIENTO (Div. 2020-330)
AU2019210332A1 (en) 2018-01-22 2020-09-10 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
WO2019148412A1 (en) * 2018-02-01 2019-08-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-pd-1/lag3 bispecific antibodies
GB201802573D0 (en) 2018-02-16 2018-04-04 Crescendo Biologics Ltd Therapeutic molecules that bind to LAG3
JP7110369B2 (ja) 2018-02-23 2022-08-01 ユーキュア・（ベイジン）・バイオファーマ・カンパニー・リミテッド 抗ｐｄ－１抗体及びその用途
AU2019227607C1 (en) 2018-02-27 2023-07-20 Incyte Corporation Imidazopyrimidines and triazolopyrimidines as A2A / A2B inhibitors
CN111971308A (zh) 2018-03-02 2020-11-20 戊瑞治疗有限公司 B7-h4抗体及其使用方法
CN112236456B (zh) * 2018-03-20 2023-12-22 上海药明生物技术有限公司 新型双特异性pd-1/lag-3抗体分子
AU2019236865A1 (en) 2018-03-23 2020-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against MICA and/or MICB and uses thereof
CN108546297B (zh) * 2018-03-29 2019-08-02 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 针对pd-1的单克隆抗体及其应用
KR20200139724A (ko) 2018-03-30 2020-12-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
WO2019195621A1 (en) * 2018-04-04 2019-10-10 Immutics, Inc. Methods and compositions for blocking interaction between non-glycosylated pd-1 polypeptides
CA3096052A1 (en) 2018-04-04 2019-10-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
JP2021520850A (ja) * 2018-04-15 2021-08-26 サルブリス （チョンドゥ） バイオテック カンパニー リミテッド Ｐｄ−１結合抗体及びその使用
US11524991B2 (en) 2018-04-18 2022-12-13 Xencor, Inc. PD-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra Fc-fusion proteins and PD-1 antigen binding domains and uses thereof
CN112437777A (zh) 2018-04-18 2021-03-02 Xencor股份有限公司 包含IL-15/IL-15RA Fc融合蛋白和TIM-3抗原结合结构域的靶向TIM-3的异源二聚体融合蛋白
US20210188980A1 (en) 2018-05-03 2021-06-24 Shanghai Epimab Biotherapeutics Co., Ltd. High affinity antibodies to pd-1 and lag-3 and bispecific binding proteins made therefrom
MA52493A (fr) 2018-05-04 2021-03-10 Incyte Corp Sels d'un inhibiteur de fgfr
US11466004B2 (en) 2018-05-04 2022-10-11 Incyte Corporation Solid forms of an FGFR inhibitor and processes for preparing the same
JP2021523158A (ja) 2018-05-07 2021-09-02 ゲンマブ エー／エス 抗ｐｄ−１抗体と抗組織因子抗体−薬物コンジュゲートとの組み合わせを用いるがんの治療方法
JP7391046B2 (ja) 2018-05-18 2023-12-04 インサイト・コーポレイション Ａ２ａ／ａ２ｂ阻害剤としての縮合ピリミジン誘導体
US11987629B2 (en) 2018-06-01 2024-05-21 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and uses thereof for treating disease or condition
EP3810651A1 (en) 2018-06-20 2021-04-28 Incyte Corporation Anti-pd-1 antibodies and uses thereof
TWI832871B (zh) 2018-06-29 2024-02-21 美商英塞特公司 Axl/mer 抑制劑之調配物
CN110684113A (zh) * 2018-07-06 2020-01-14 复旦大学 一种抗PD-1抗原和抗c-Met抗原的双特异性抗体及其构建方法
MX2021000398A (es) * 2018-07-12 2021-05-27 F Star Therapeutics Ltd Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y cd137.
WO2020015722A1 (en) * 2018-07-19 2020-01-23 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-pd-1 antibodies, dosages and uses thereof
SG11202100693UA (en) 2018-07-26 2021-02-25 Bristol Myers Squibb Co Lag-3 combination therapy for the treatment of cancer
US11591390B2 (en) 2018-09-27 2023-02-28 Celgene Corporation SIRP-α binding proteins and methods of use thereof
CA3115096A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Xencor, Inc. Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
US11066404B2 (en) 2018-10-11 2021-07-20 Incyte Corporation Dihydropyrido[2,3-d]pyrimidinone compounds as CDK2 inhibitors
EA202191086A1 (ru) 2018-10-19 2021-09-20 Бристоль-Мейерз Сквибб Компани Комбинированная терапия меланомы
CN112912403A (zh) 2018-10-23 2021-06-04 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
EP3880247A4 (en) 2018-11-13 2022-10-26 JN Biosciences, LLC BISPECIFIC ANTIBODIES TO ACTIVATE IMMUNE CELLS
CN113316590A (zh) 2018-11-16 2021-08-27 百时美施贵宝公司 抗nkg2a抗体及其用途
JP2022510407A (ja) 2018-12-04 2022-01-26 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 多重反応同位体分子種反応モニタリングによる、サンプル内検量線を用いた分析方法
EP3666905A1 (en) 2018-12-11 2020-06-17 Sanofi E. coli positive for pks island as marker of positive response to anti-pd1 therapy in colorectal cancer
CN111349162A (zh) * 2018-12-21 2020-06-30 神州细胞工程有限公司 人源化抗pd-1抗体及其用途
CA3122914A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Ose Immunotherapeutics Bifunctional anti-pd-1/sirp.alpha. molecule
EP3898677A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 OSE Immunotherapeutics Bifunctional anti-pd-1/il-7 molecule
CN111423510B (zh) * 2019-01-10 2024-02-06 迈威(上海)生物科技股份有限公司 重组抗人pd-1抗体及其应用
KR20210118870A (ko) 2019-01-21 2021-10-01 사노피 진행성 단계의 고형 종양 암에 대한 치료용 rna 및 항-pd1 항체
WO2020151572A1 (en) * 2019-01-23 2020-07-30 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-pd-l1 diabodies and the use thereof
TWI829857B (zh) 2019-01-29 2024-01-21 美商英塞特公司 作為a2a / a2b抑制劑之吡唑并吡啶及三唑并吡啶
MX2021009041A (es) * 2019-02-03 2021-08-19 Jiangsu Hengrui Medicine Co Anticuerpo anti-pd-1, fragmento de union a antigeno del mismo y uso farmaceutico del mismo.
WO2020165374A1 (en) 2019-02-14 2020-08-20 Ose Immunotherapeutics Bifunctional molecule comprising il-15ra
MA54947A (fr) 2019-02-15 2021-12-22 Incyte Corp Biomarqueurs de kinase 2 dépendant de la cycline et leurs utilisations
US11384083B2 (en) 2019-02-15 2022-07-12 Incyte Corporation Substituted spiro[cyclopropane-1,5′-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin]-6′(7′h)-ones as CDK2 inhibitors
EP3930850A1 (en) 2019-03-01 2022-01-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
WO2020180959A1 (en) 2019-03-05 2020-09-10 Incyte Corporation Pyrazolyl pyrimidinylamine compounds as cdk2 inhibitors
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
CN113677402A (zh) 2019-03-28 2021-11-19 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
JP2022526960A (ja) 2019-03-28 2022-05-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍を処置する方法
WO2020205560A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 Incyte Corporation Sulfonylamide compounds as cdk2 inhibitors
WO2020223469A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Incyte Corporation N-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-4,5-di hydro-1h-imidazo[4,5-h]quinazolin-8-amine derivatives and related compounds as cyclin-dependent kinase 2 (cdk2) inhibitors for treating cancer
WO2020223558A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as cdk2 inhibitors
WO2020239558A1 (en) 2019-05-24 2020-12-03 Pfizer Inc. Combination therapies using cdk inhibitors
CN114127315A (zh) 2019-05-30 2022-03-01 百时美施贵宝公司 鉴定适合于免疫肿瘤学(i-o)疗法的受试者的方法
JP2022534967A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 多腫瘍遺伝子シグネチャーおよびその使用
US20220233691A1 (en) 2019-05-30 2022-07-28 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
CN117447596A (zh) * 2019-06-30 2024-01-26 福州创方医药科技有限公司 一种靶向pd-1的单克隆抗体及其应用
CN112225809B (zh) * 2019-06-30 2023-09-05 福州创方医药科技有限公司 一种靶向pd-1的单克隆抗体及其应用
TWI809286B (zh) 2019-07-05 2023-07-21 日商小野藥品工業股份有限公司 以pd-1/cd3雙特異性蛋白質所進行之血液性癌症治療
US11591329B2 (en) 2019-07-09 2023-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CN112239506B (zh) * 2019-07-16 2023-09-26 复旦大学 一种抗PD-1及c-Met抗原的小分子双特异性抗体Diabody
JP2022543062A (ja) 2019-08-01 2022-10-07 インサイト・コーポレイション Ｉｄｏ阻害剤の投与レジメン
JP2022543114A (ja) * 2019-08-02 2022-10-07 シーティーティーキュー－アケソ（シャンハイ） バイオメド テク カンパニー リミテッド 抗ｐｄ－１抗体およびその医学的使用
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
TW202120550A (zh) 2019-08-08 2021-06-01 日商小野藥品工業股份有限公司 雙特異性蛋白質
EP4013750A1 (en) 2019-08-14 2022-06-22 Incyte Corporation Imidazolyl pyrimidinylamine compounds as cdk2 inhibitors
KR20220066334A (ko) 2019-09-22 2022-05-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Lag-3 길항제 요법에 대한 정량적 공간 프로파일링
CA3152263A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Julia SANTUCCI PEREIRA DEL BUONO Composite biomarker for cancer therapy
KR20220070201A (ko) * 2019-09-30 2022-05-30 쓰촨 케룬-바이오테크 바이오파마수티컬 컴퍼니 리미티드 항-pd-1 항체 및 이의 용도
WO2021072232A1 (en) 2019-10-11 2021-04-15 Incyte Corporation Bicyclic amines as cdk2 inhibitors
CA3157361A1 (en) 2019-10-14 2021-04-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
US20220390455A1 (en) 2019-11-05 2022-12-08 Bristol-Myers Squibb Company M-protein assays and uses thereof
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
KR20220093349A (ko) 2019-11-08 2022-07-05 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 흑색종에 대한 lag-3 길항제 요법
US20220395553A1 (en) 2019-11-14 2022-12-15 Cohbar, Inc. Cxcr4 antagonist peptides
WO2021097800A1 (en) * 2019-11-22 2021-05-27 Abl Bio Inc. Anti-pd-l1/anti-b7-h3 multispecific antibodies and uses thereof
BR112022010664A2 (pt) 2019-12-04 2022-08-16 Incyte Corp Derivados de um inibidor de fgfr
JP2023505258A (ja) 2019-12-04 2023-02-08 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤としての三環式複素環
WO2021122866A1 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Ose Immunotherapeutics Bifunctional molecules comprising an il-7 variant
CN115243721A (zh) 2019-12-19 2022-10-25 百时美施贵宝公司 Dgk抑制剂和检查点拮抗剂的组合
WO2021121373A1 (zh) * 2019-12-20 2021-06-24 广东菲鹏制药股份有限公司 抗人程序死亡因子-1单克隆抗体
WO2021133653A1 (en) * 2019-12-23 2021-07-01 Macrogenics, Inc. Therapy for the treatment of cancer
WO2021138512A1 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Incyte Corporation Combination therapy comprising a2a/a2b and pd-1/pd-l1 inhibitors
CN115244175A (zh) 2020-01-07 2022-10-25 得克萨斯大学体系董事会 用于癌症治疗的改进的人甲硫腺苷/腺苷消耗酶变体
WO2021152005A1 (en) 2020-01-28 2021-08-05 Universite De Strasbourg Antisense oligonucleotide targeting linc00518 for treating melanoma
KR20220133996A (ko) 2020-01-30 2022-10-05 오엔에이 테라퓨틱스 에스.엘. 암 및 암 전이를 치료하기 위한 병용 요법
EP4100426A1 (en) 2020-02-06 2022-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Il-10 and uses thereof
US11920136B2 (en) 2020-02-28 2024-03-05 Tallac Therapeutics, Inc. Transglutaminase-mediated conjugation
MX2022011050A (es) 2020-03-06 2022-12-15 Ona Therapeutics S L Anticuerpos anti-cd36 y su uso para tratar cancer.
CA3174539A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Incyte Corporation Combination therapy comprising axl/mer and pd-1/pd-l1 inhibitors
CN115484958A (zh) 2020-03-06 2022-12-16 赛尔基因昆蒂赛尔研究公司 用于治疗sclc或sqnsclc的lsd-1抑制剂和纳武单抗的组合
CR20220584A (es) 2020-04-16 2023-02-15 Incyte Corp Inhibidores de kras tricíclicos fusionados
CN113583127A (zh) * 2020-04-30 2021-11-02 迈威(上海)生物科技股份有限公司 一种靶向nkg2a和pd-l1的双特异性抗体及应用
CA3176497A1 (en) 2020-05-07 2021-11-11 Fatima MECHTA-GRIGORIOU Antxr1 as a biomarker of immunosuppressive fibroblast populations and its use for predicting response to immunotherapy
WO2021231526A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 Incyte Corporation Fused pyrimidine compounds as kras inhibitors
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
MX2023000197A (es) 2020-07-07 2023-02-22 BioNTech SE Arn terapeutico para el cancer positivo para vph.
IL300666A (en) 2020-08-19 2023-04-01 Xencor Inc ANTI–CD28 COMPOSITIONS
BR112023003427A2 (pt) 2020-08-28 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Terapia com antagonista de lag-3 para carcinoma hepatocelular
WO2022047093A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Incyte Corporation Vinyl imidazole compounds as inhibitors of kras
BR112023003553A2 (pt) 2020-08-31 2023-04-04 Bristol Myers Squibb Co Assinatura de localização celular e imunoterapia
US11767320B2 (en) 2020-10-02 2023-09-26 Incyte Corporation Bicyclic dione compounds as inhibitors of KRAS
CN116406369A (zh) 2020-10-05 2023-07-07 百时美施贵宝公司 用于浓缩蛋白质的方法
WO2022076596A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle-aso constructs targeting stat6
CA3193688A1 (en) 2020-10-09 2022-04-14 Vladimir Lazar Novel prediction method and gene signatures for the treatment of cancer
WO2022087402A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
US20240148740A1 (en) 2020-10-28 2024-05-09 Ikena Oncology, Inc. Combination of an ahr inhibitor with a pdx inhibitor or doxorubicine
EP4247849A2 (en) 2020-11-17 2023-09-27 Seagen Inc. Methods of treating cancer with a combination of tucatinib and an anti-pd-1/anti-pd-l1 antibody
WO2022112198A1 (en) 2020-11-24 2022-06-02 Worldwide Innovative Network Method to select the optimal immune checkpoint therapies
WO2022118197A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Pfizer Inc. Time to resolution of axitinib-related adverse events
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
WO2022124866A1 (ko) * 2020-12-10 2022-06-16 주식회사 유틸렉스 항-pd-1 항체 및 이의 용도
CA3201729A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 Nicolas Poirier Bifunctional anti-pd1/il-7 molecules
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
AU2021411486A1 (en) 2020-12-28 2023-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
EP4267172A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Subcutaneous administration of pd1/pd-l1 antibodies
US20220233529A1 (en) 2020-12-29 2022-07-28 Incyte Corporation Combination therapy comprising a2a/a2b inhibitors, pd-1/pd-l1 inhibitors, and anti-cd73 antibodies
WO2022148781A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Institut Curie Combination of mcoln activators and immune checkpoint inhibitors
KR102576861B1 (ko) * 2021-01-11 2023-09-11 주식회사 유틸렉스 항-4-1bb 항체 및 pd-1 단백질 또는 이의 단편을 포함하는 이중특이적 에피토프 결합 단백질 및 이의 용도
CN113336848B (zh) * 2021-02-03 2022-08-19 上海莱馥医疗科技有限公司 一种抗pd-1抗体及其用途
WO2022192403A1 (en) 2021-03-09 2022-09-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6
EP4305065A1 (en) 2021-03-10 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
TW202304506A (zh) 2021-03-25 2023-02-01 日商安斯泰來製藥公司 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症
KR20240005700A (ko) 2021-03-29 2024-01-12 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 체크포인트 억제제 요법 및 car t 세포 요법의 조합을 사용한 투여 및 치료 방법
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
WO2022214652A1 (en) 2021-04-09 2022-10-13 Ose Immunotherapeutics Scaffold for bifunctioanl molecules comprising pd-1 or cd28 and sirp binding domains
WO2022214653A1 (en) 2021-04-09 2022-10-13 Ose Immunotherapeutics New scaffold for bifunctional molecules with improved properties
WO2022221170A1 (en) 2021-04-12 2022-10-20 Incyte Corporation Combination therapy comprising an fgfr inhibitor and a nectin-4 targeting agent
WO2022240741A1 (en) 2021-05-12 2022-11-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Lag3 and gal3 inhibitory agents, xbp1, cs1, and cd138 peptides, and methods of use thereof
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
EP4352060A1 (en) 2021-06-09 2024-04-17 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
EP4352059A1 (en) 2021-06-09 2024-04-17 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US11981671B2 (en) 2021-06-21 2024-05-14 Incyte Corporation Bicyclic pyrazolyl amines as CDK2 inhibitors
IL309642A (en) 2021-07-07 2024-02-01 Incyte Corp Tricyclic compounds as inhibitors of Kras
CA3225254A1 (en) 2021-07-13 2023-01-19 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
WO2023287896A1 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Incyte Corporation Tricyclic compounds as inhibitors of kras
AU2022320051A1 (en) 2021-07-30 2024-01-25 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
WO2023034290A1 (en) 2021-08-31 2023-03-09 Incyte Corporation Naphthyridine compounds as inhibitors of kras
US20230151005A1 (en) 2021-09-21 2023-05-18 Incyte Corporation Hetero-tricyclic compounds as inhibitors of kras
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
CA3234375A1 (en) 2021-10-01 2023-04-06 Incyte Corporation Pyrazoloquinoline kras inhibitors
WO2023057882A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Pfizer Inc. Combinations of azalactam compounds with a pd-1 axis binding antagonist for the treatment of cancer
WO2023057534A1 (en) 2021-10-06 2023-04-13 Genmab A/S Multispecific binding agents against pd-l1 and cd137 in combination
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
US11939328B2 (en) 2021-10-14 2024-03-26 Incyte Corporation Quinoline compounds as inhibitors of KRAS
US20230272072A1 (en) * 2021-10-21 2023-08-31 Seismic Therapeutic, Inc. Dual targeted immune regulating compositions
AU2022375806A1 (en) 2021-10-29 2023-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023079428A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Pfizer Inc. Combination therapies using tlr7/8 agonist
WO2023083439A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment
TW202320792A (zh) 2021-11-22 2023-06-01 美商英塞特公司 包含ｆｇｆｒ抑制劑及ｋｒａｓ抑制劑之組合療法
US11976073B2 (en) 2021-12-10 2024-05-07 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK2 inhibitors
AR128043A1 (es) 2021-12-22 2024-03-20 Incyte Corp Sales y formas sólidas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023196987A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
US20230326022A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine Learning Identification, Classification, and Quantification of Tertiary Lymphoid Structures
WO2023218046A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023239768A1 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Incyte Corporation Tricyclic triazolo compounds as dgk inhibitors
WO2024003360A1 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Institut Curie Biomarkers and uses thereof for the treatment of neuroblastoma
WO2024015731A1 (en) 2022-07-11 2024-01-18 Incyte Corporation Fused tricyclic compounds as inhibitors of kras g12v mutants
EP4310197A1 (en) 2022-07-21 2024-01-24 Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda Method for identifying lung cancer patients for a combination treatment of immuno- and chemotherapy
WO2024023740A1 (en) 2022-07-27 2024-02-01 Astrazeneca Ab Combinations of recombinant virus expressing interleukin-12 with pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2024028386A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Ose Immunotherapeutics Multifunctional molecule directed against cd28
WO2024072893A1 (en) * 2022-09-28 2024-04-04 Incyte Corporation Anti-pd-1/lag-3 bispecific antibodies and uses thereof
WO2024069009A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Alentis Therapeutics Ag Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma
WO2024097328A1 (en) 2022-11-03 2024-05-10 Incyte Corporation Combination therapies comprising an anti-gitr antibody for treating cancers
WO2024105180A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Boehringer Ingelheim International Gmbh Predictive efficacy biomarkers for anti-sirpa antibodies
WO2024108100A1 (en) 2022-11-18 2024-05-23 Incyte Corporation Heteroaryl fluoroalkenes as dgk inhibitors

Family Cites Families (247)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5985A (en) 1848-12-26 Pianoforte-action
US320A (en) 1837-07-31 John dainty
US3862925A (en) 1973-07-05 1975-01-28 American Home Prod Preparation of somatotropin release inhibiting factor and intermediates therefor
US3842067A (en) 1973-07-27 1974-10-15 American Home Prod Synthesis of(des-asn5)-srif and intermediates
JPS5726506B2 (uk) 1974-03-08 1982-06-04
US4105603A (en) 1977-03-28 1978-08-08 The Salk Institute For Biological Studies Peptides which effect release of hormones
ATE37983T1 (de) 1982-04-22 1988-11-15 Ici Plc Mittel mit verzoegerter freigabe.
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5128326A (en) 1984-12-06 1992-07-07 Biomatrix, Inc. Drug delivery systems based on hyaluronans derivatives thereof and their salts and methods of producing same
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
AU600575B2 (en) 1987-03-18 1990-08-16 Sb2, Inc. Altered antibodies
US4880078A (en) 1987-06-29 1989-11-14 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Exhaust muffler
EP0359096B1 (en) 1988-09-15 1997-11-05 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Antibodies having modified carbohydrate content and methods of preparation and use
AU6290090A (en) 1989-08-29 1991-04-08 University Of Southampton Bi-or trispecific (fab)3 or (fab)4 conjugates
AU6430190A (en) 1989-10-10 1991-05-16 Pitman-Moore, Inc. Sustained release composition for macromolecular proteins
EP0550436A1 (en) 1989-11-06 1993-07-14 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Protein microspheres and methods of using them
FR2656800B1 (fr) 1990-01-08 1992-05-15 Roussy Inst Gustave Nouvelles proteines produits par les lymphocytes humains, sequence d'adn codant pour ces proteines et applications pharmaceutiques et biologiques.
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
FR2664500B1 (fr) 1990-07-13 1994-10-28 Lille Ii Universite Droit Sant Procede de preparation d'une lipoproteine modifiee par incorporation d'une substance active lipophile, lipoproteine modifiee ainsi obtenue et composition pharmaceutique ou cosmetique la contenant.
US5972337A (en) 1990-11-01 1999-10-26 Cancer Research Fund Of Contra Costa 46 kilodalton human milk fat globule (HMFG) antigen, fragments and fusion protein
JPH06507404A (ja) 1991-05-01 1994-08-25 ヘンリー　エム．ジャクソン　ファウンデイション　フォー　ザ　アドバンスメント　オブ　ミリタリー　メディスン 感染性の呼吸性疾患の治療方法
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
GB9112536D0 (en) 1991-06-11 1991-07-31 Celltech Ltd Chemical compounds
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
GB9115364D0 (en) 1991-07-16 1991-08-28 Wellcome Found Antibody
US5843749A (en) 1991-07-26 1998-12-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ehk and Ror tyrosine kinases
CA2078539C (en) 1991-09-18 2005-08-02 Kenya Shitara Process for producing humanized chimera antibody
US5565332A (en) 1991-09-23 1996-10-15 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
US5912015A (en) 1992-03-12 1999-06-15 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Modulated release from biocompatible polymers
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
GB9225453D0 (en) 1992-12-04 1993-01-27 Medical Res Council Binding proteins
US5934272A (en) 1993-01-29 1999-08-10 Aradigm Corporation Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug
US5885573A (en) 1993-06-01 1999-03-23 Arch Development Corporation Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
IL108501A (en) 1994-01-31 1998-10-30 Mor Research Applic Ltd Antibodies and pharmaceutical compositions containing them
EP0758383B1 (fr) 1994-05-06 2007-01-24 Institut Gustave Roussy Fractions polypeptidiques solubles de la proteine lag-3; procede de production; composition therapeutique; anticorps anti-idiotype
ATE252894T1 (de) 1995-01-05 2003-11-15 Univ Michigan Oberflächen-modifizierte nanopartikel und verfahren für ihre herstellung und verwendung
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
US6265150B1 (en) 1995-06-07 2001-07-24 Becton Dickinson & Company Phage antibodies
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
CA2230494A1 (en) 1995-08-31 1997-03-06 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Composition for sustained release of an agent
US5736152A (en) 1995-10-27 1998-04-07 Atrix Laboratories, Inc. Non-polymeric sustained release delivery system
US5942328A (en) 1996-02-29 1999-08-24 International Business Machines Corporation Low dielectric constant amorphous fluorinated carbon and method of preparation
ATE508733T1 (de) 1996-03-04 2011-05-15 Penn State Res Found Materialien und verfahren zur steigerung der zellulären internalisierung
US5985309A (en) 1996-05-24 1999-11-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of particles for inhalation
US5855913A (en) 1997-01-16 1999-01-05 Massachusetts Instite Of Technology Particles incorporating surfactants for pulmonary drug delivery
US5874064A (en) 1996-05-24 1999-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
WO1998023289A1 (en) 1996-11-27 1998-06-04 The General Hospital Corporation MODULATION OF IgG BINDING TO FcRn
AU728911B2 (en) 1996-11-28 2001-01-18 Institut Gustave Roussy Mutants of the LAG-3 proteins, products for the expression of these mutants and use
ES2236832T3 (es) 1997-01-16 2005-07-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparacion de particulas para inhalacion.
JP2001512438A (ja) 1997-02-11 2001-08-21 イムノメディクス，インコーポレイテッド αガラクトシルエピトープで標識された抗体による免疫応答の刺激
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
EP0900841A1 (en) 1997-06-18 1999-03-10 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) LAG-3 splice variants
US5989463A (en) 1997-09-24 1999-11-23 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Methods for fabricating polymer-based controlled release devices
SE512663C2 (sv) 1997-10-23 2000-04-17 Biogram Ab Inkapslingsförfarande för aktiv substans i en bionedbrytbar polymer
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
DE19819846B4 (de) 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
AU747231B2 (en) 1998-06-24 2002-05-09 Alkermes, Inc. Large porous particles emitted from an inhaler
US20030187196A1 (en) 1998-12-30 2003-10-02 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
ES2694002T3 (es) 1999-01-15 2018-12-17 Genentech, Inc. Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante
CA2383456C (en) 1999-08-23 2016-06-07 Clive Wood Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
US6936704B1 (en) 1999-08-23 2005-08-30 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Nucleic acids encoding costimulatory molecule B7-4
DK1234031T3 (en) 1999-11-30 2017-07-03 Mayo Foundation B7-H1, AN UNKNOWN IMMUNE REGULATORY MOLECULE
US6803192B1 (en) 1999-11-30 2004-10-12 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1, a novel immunoregulatory molecule
JP5179689B2 (ja) 2000-02-11 2013-04-10 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 抗体ベース融合タンパク質の循環系内半減期の増強
CA2410551A1 (en) 2000-06-30 2002-01-10 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw (Vib) Heterodimeric fusion proteins
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
PT1355919E (pt) 2000-12-12 2011-03-02 Medimmune Llc Moléculas com semivida longa, composições que as contêm e suas utilizações
WO2002086083A2 (en) 2001-04-20 2002-10-31 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of enhancing cell responsiveness
US20040241745A1 (en) 2001-07-31 2004-12-02 Tasuku Honjo Substance specific to pd-1
US6833441B2 (en) 2001-08-01 2004-12-21 Abmaxis, Inc. Compositions and methods for generating chimeric heteromultimers
EP1293514B1 (en) 2001-09-14 2006-11-29 Affimed Therapeutics AG Multimeric single chain tandem Fv-antibodies
AU2002327704A1 (en) 2001-09-21 2003-04-01 Raven Biotechnologies, Inc. Antibodies that bind to cancer-associated antigen cytokeratin 8 and methods of use thereof
US7148038B2 (en) 2001-10-16 2006-12-12 Raven Biotechnologies, Inc. Antibodies that bind to cancer-associated antigen CD46 and methods of use thereof
WO2003088808A2 (en) 2002-04-16 2003-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
CN100423777C (zh) 2001-10-25 2008-10-08 杰南技术公司 糖蛋白组合物
JP4488740B2 (ja) 2001-11-13 2010-06-23 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート，インコーポレイテッド 免疫細胞活性化を調節する作用剤およびその使用方法
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20040048312A1 (en) 2002-04-12 2004-03-11 Ronghao Li Antibodies that bind to integrin alpha-v-beta-6 and methods of use thereof
CA2483912A1 (en) 2002-05-03 2003-11-13 Raven Biotechnologies, Inc. Alcam and alcam modulators
IL149820A0 (en) 2002-05-23 2002-11-10 Curetech Ltd Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency
AU2003281200A1 (en) 2002-07-03 2004-01-23 Tasuku Honjo Immunopotentiating compositions
US7217797B2 (en) 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US7405061B2 (en) 2002-11-13 2008-07-29 Raven Biotechnologies, Inc. Antigen PIPA and antibodies that bind thereto
AU2003288675B2 (en) 2002-12-23 2010-07-22 Medimmune Limited Antibodies against PD-1 and uses therefor
US7355008B2 (en) 2003-01-09 2008-04-08 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
EP1591527B1 (en) 2003-01-23 2015-08-26 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Substance specific to human pd-1
SI1897548T1 (sl) 2003-02-28 2013-12-31 The Johns Hopkins University Regulacija celic T
BRPI0412272A (pt) 2003-07-07 2006-09-05 Scripps Research Inst composições de pares de lisil-trna e aminoacil-trna sintetase ortogonais e usos destes
WO2005019258A2 (en) 2003-08-11 2005-03-03 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
US7790855B2 (en) 2003-09-18 2010-09-07 Macrogenics, Inc. KID3 and KID3 antibodies that bind thereto
EP2385069A3 (en) 2003-11-12 2012-05-30 Biogen Idec MA Inc. Neonatal Fc rReceptor (FcRn)- binding polypeptide variants, dimeric Fc binding proteins and methods related thereto
ATE504599T1 (de) 2004-01-16 2011-04-15 Regeneron Pharma Zur aktivierung von rezeptoren fähige fusionspolypeptide
WO2006107617A2 (en) 2005-04-06 2006-10-12 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Methods for generating stably linked complexes composed of homodimers, homotetramers or dimers of dimers and uses
KR20050082389A (ko) 2004-02-18 2005-08-23 메덱스젠 주식회사 직렬 연쇄체를 갖는 면역접합체를 포함하는 장기이식합병증 치료용 약제학적 조성물
JP4824025B2 (ja) 2004-06-07 2011-11-24 マクロジェニックス ウエスト，インコーポレイテッド トランスフェリンレセプター抗体
US20070166281A1 (en) 2004-08-21 2007-07-19 Kosak Kenneth M Chloroquine coupled antibodies and other proteins with methods for their synthesis
WO2006021955A2 (en) 2004-08-23 2006-03-02 Mor Research Applications Ltd. Use of bat monoclonal antibody for immunotherapy
CN104104517B (zh) 2004-10-15 2017-11-07 弗里塞恩公司 一次性密码验证的方法和系统
US7632497B2 (en) 2004-11-10 2009-12-15 Macrogenics, Inc. Engineering Fc Antibody regions to confer effector function
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
EP1846767B1 (en) 2005-01-12 2012-06-06 MacroGenics West, Inc. Kid31 and antibodies that bind thereto
EP1846032A4 (en) 2005-01-31 2009-01-28 Raven Biotechnologies Inc LUCA2 AND ANTIBODY BINDING
JP5328155B2 (ja) 2005-02-02 2013-10-30 マクロジェニックス ウエスト， インコーポレイテッド Ａｄａｍ−９モジュレータ
US20060171952A1 (en) 2005-02-02 2006-08-03 Mather Jennie P JAM-3 and antibodies that bind thereto
WO2006084092A2 (en) 2005-02-03 2006-08-10 Raven Biotechnologies, Inc. Antibodies to oncostatin m receptor
WO2006084226A2 (en) 2005-02-04 2006-08-10 Raven Biotechnologies, Inc. Antibodies that bind to epha2 and methods of use thereof
AU2006232310B9 (en) 2005-04-06 2011-07-21 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Improved stably tethered structures of defined compositions with multiple functions or binding specificities
US9284375B2 (en) 2005-04-15 2016-03-15 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US9889197B2 (en) 2005-04-15 2018-02-13 Macrogenics, Inc. Covalently-associated diabody complexes that possess charged coil domains and that are capable of enhanced binding to serum albumin
ES2707152T3 (es) 2005-04-15 2019-04-02 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y usos de los mismos
US9963510B2 (en) 2005-04-15 2018-05-08 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
CN109485727A (zh) 2005-05-09 2019-03-19 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
KR101600225B1 (ko) 2005-06-08 2016-03-04 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 예정 세포사 1(ｐｄ-1) 경로를 억제함으로써 지속 감염 및 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
JP2006345852A (ja) 2005-06-16 2006-12-28 Virxsys Corp 抗体複合体
MX2007015942A (es) 2005-07-01 2008-03-07 Medarex Inc Anticuerpos monoclonales humanos para ligandos 1 (pd-l1) de muerte programada.
SI1919503T1 (sl) 2005-08-10 2015-02-27 Macrogenics, Inc. Identifikacija in inĺ˝eniring protiteles z variantnimi fc regijami in postopki za njih uporabo
EP1928506A4 (en) 2005-08-19 2009-10-21 Abbott Lab IMMUNOGLOBULIN HAVING TWO VARIABLE DOMAINS AND USES THEREOF
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
JP5231231B2 (ja) 2005-10-19 2013-07-10 アイビーシー・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド 複雑性が増大した生理活性アセンブリーを生成するための方法および組成物ならびに使用
CN105709237A (zh) 2005-12-16 2016-06-29 Ibc 医药公司 基于免疫球蛋白的多价生物活性装配体
AU2007226752A1 (en) 2006-03-10 2007-09-20 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant heavy chains and methods of using same
PL1999154T3 (pl) 2006-03-24 2013-03-29 Merck Patent Gmbh Skonstruowane metodami inżynierii heterodimeryczne domeny białkowe
KR101571027B1 (ko) 2006-06-12 2015-11-23 이머전트 프로덕트 디벨롭먼트 시애틀, 엘엘씨 효과기 기능을 갖는 단일쇄 다가 결합 단백질
AT503902B1 (de) 2006-07-05 2008-06-15 F Star Biotech Forsch & Entw Verfahren zur manipulation von immunglobulinen
AT503889B1 (de) 2006-07-05 2011-12-15 Star Biotechnologische Forschungs Und Entwicklungsges M B H F Multivalente immunglobuline
EP2471816A1 (en) 2006-08-30 2012-07-04 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
US8652466B2 (en) 2006-12-08 2014-02-18 Macrogenics, Inc. Methods for the treatment of disease using immunoglobulins having Fc regions with altered affinities for FcγRactivating and FcγRinhibiting
WO2008083174A2 (en) 2006-12-27 2008-07-10 Emory University Compositions and methods for the treatment of infections and tumors
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
US20100267934A1 (en) 2007-05-31 2010-10-21 Genmab A/S Stable igg4 antibodies
JP2010190572A (ja) 2007-06-01 2010-09-02 Sapporo Medical Univ ＩＬ１３Ｒａ２に対する抗体およびこれを含む診断・治療薬
DK2170959T3 (da) 2007-06-18 2014-01-13 Merck Sharp & Dohme Antistoffer mod human programmeret dødsreceptor pd-1
JP5718637B2 (ja) 2007-06-21 2015-05-13 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 共有結合型ダイアボディおよびその使用
US20090028857A1 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
JP2010535032A (ja) 2007-07-31 2010-11-18 メディミューン，エルエルシー 多重特異性エピトープ結合性タンパク質およびその用途
US8062852B2 (en) 2007-10-01 2011-11-22 The Children's Hospital And Regional Medical Center Detection and treatment of autoimmune disorders
AU2008334063A1 (en) 2007-11-30 2009-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-B7H4 monoclonal antibody-drug conjugate and methods of use
US8227577B2 (en) 2007-12-21 2012-07-24 Hoffman-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
PL2235064T3 (pl) 2008-01-07 2016-06-30 Amgen Inc Sposób otrzymywania cząsteczek przeciwciał z heterodimerycznymi fc z zastosowaniem kierujących efektów elektrostatycznych
ES2639857T3 (es) 2008-02-11 2017-10-30 Cure Tech Ltd. Anticuerpos monoclonales para el tratamiento del tumor
EP2113255A1 (en) 2008-05-02 2009-11-04 f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. Cytotoxic immunoglobulin
US7565048B1 (en) 2008-05-30 2009-07-21 Ofs Fitel Llc Undersea optical fiber transmission systems
US20110081347A1 (en) 2008-06-04 2011-04-07 Macrogenics, Inc. Antibodies with Altered Binding to FcRn and Methods of Using Same
JP5945096B2 (ja) 2008-07-04 2016-07-05 小野薬品工業株式会社 抗ヒトｐｄ−１抗体の癌に対する治療効果を最適化するための判定マーカーの使用
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
CA2734908A1 (en) 2008-08-25 2010-03-11 Amplimmune, Inc. Compositions of pd-1 antagonists and methods of use
WO2010028796A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Trispecific hexavalent antibodies
WO2010028797A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Multivalent antibodies
WO2010028795A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Multivalent antibodies
CN102264762B (zh) 2008-09-26 2018-03-27 达纳-法伯癌症研究公司 人抗pd‑1、pd‑l1和pd‑l2的抗体及其应用
RU2593720C2 (ru) * 2008-12-19 2016-08-10 Макродженикс, Инк. Ковалентные диантитела и их применение
EP3192811A1 (en) 2009-02-09 2017-07-19 Université d'Aix-Marseille Pd-1 antibodies and pd-l1 antibodies and uses thereof
SG174378A1 (en) 2009-03-20 2011-10-28 Genentech Inc Bispecific anti-her antibodies
KR101431319B1 (ko) 2009-05-27 2014-08-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 삼중특이성 또는 사중특이성 항체
US8277919B2 (en) 2009-07-23 2012-10-02 VMO Systems, Inc. Reflective coating for an optical disc
CA2776385C (en) 2009-10-07 2019-04-09 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
EP2504028A4 (en) 2009-11-24 2014-04-09 Amplimmune Inc SIMULTANEOUS INHIBITION OF PD-L1 / PD-L2
KR20120123299A (ko) 2009-12-04 2012-11-08 제넨테크, 인크. 다중특이적 항체, 항체 유사체, 조성물 및 방법
GB201000467D0 (en) 2010-01-12 2010-02-24 Ucb Pharma Sa Antibodies
US20110206672A1 (en) 2010-02-25 2011-08-25 Melvyn Little Antigen-Binding Molecule And Uses Thereof
PT2361936T (pt) 2010-02-25 2016-07-15 Affimed Gmbh Molécula que se liga a antigénio e utilizações desta
PH12018501083A1 (en) * 2010-03-04 2019-02-18 Macrogenics Inc Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
WO2011110604A1 (en) 2010-03-11 2011-09-15 Ucb Pharma, S.A. Pd-1 antibody
AR080794A1 (es) 2010-03-26 2012-05-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos bivalentes biespecificos anti- vegf/ anti-ang-2
BR112012026766B1 (pt) 2010-04-20 2021-11-03 Genmab A/S Métodos in vitro para gerar um anticorpo igg heterodimérico, para a seleção de um anticorpo biespecífico, vetor de expressão, anticorpo igg heterodimérico, composição farmacêutica, e, uso de um anticorpo igg heterodimérico
US8876892B2 (en) 2010-04-21 2014-11-04 Medtronic, Inc. Prosthetic heart valve delivery system with spacing
BR112012027001A2 (pt) 2010-04-23 2016-07-19 Genentech Inc produção de proteínas heteromultiméricas
CA2797981C (en) 2010-05-14 2019-04-23 Rinat Neuroscience Corporation Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them
WO2011159877A2 (en) 2010-06-18 2011-12-22 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
EP2596114A4 (en) 2010-07-14 2014-01-08 Amgen Inc IMMUNOGLOBULIN WITH DOMAIN INSERTION
JP5997154B2 (ja) 2010-08-16 2016-09-28 ノビミューン エスアー 多重特異性多価抗体の生成方法
CN103429620B (zh) 2010-11-05 2018-03-06 酵活有限公司 在Fc结构域中具有突变的稳定异源二聚的抗体设计
WO2013119903A1 (en) 2012-02-10 2013-08-15 Research Corporation Technologies, Inc. Fusion proteins comprising immunoglobulin constant domain-derived scaffolds
KR102031020B1 (ko) 2011-03-31 2019-10-14 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 인간 프로그램화된 사멸 수용체 pd-1에 대한 항체의 안정한 제제 및 관련된 치료
RU2625034C2 (ru) 2011-04-20 2017-07-11 МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи Антитела и другие молекулы, которые связывают в7-н1 и pd-1
US9750806B2 (en) 2011-05-17 2017-09-05 Trion Research Gmbh Vaccine preparation containing trifunctional antibodies with antigen immunogenicity enhancer properties
EA201391753A1 (ru) 2011-05-21 2014-08-29 Макродженикс, Инк. Домены, связывающиеся с деиммунизованной сывороткой, и их применение для увеличения времени полужизни в сыворотке
EP2714733B1 (en) 2011-05-21 2019-01-23 MacroGenics, Inc. Cd3-binding molecules capable of binding to human and non-human cd3
WO2012162583A1 (en) 2011-05-26 2012-11-29 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Design and construction of novel multivalent antibodies
WO2013003652A1 (en) 2011-06-28 2013-01-03 Sea Lane Biotechnologies, Llc Multispecific stacked variable domain binding proteins
JP6157461B2 (ja) 2011-06-30 2017-07-05 ジェンザイム・コーポレーション Ｔ細胞活性化の阻害剤
WO2013006544A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Medimmune, Llc Methods for making multimeric polypeptides
WO2013006867A1 (en) 2011-07-07 2013-01-10 Massachussetts Institute Of Technology Methods and apparatus for ultrathin catalyst layer for photoelectrode
RU2613368C2 (ru) 2011-07-22 2017-03-16 Аффимед Гмбх Поливалентная антиген-связывающая fv-молекула
US8686119B2 (en) 2011-07-24 2014-04-01 Curetech Ltd. Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies
US10344050B2 (en) 2011-10-27 2019-07-09 Genmab A/S Production of heterodimeric proteins
CA2854806A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Medimmune, Llc Multispecific and multivalent binding proteins and uses thereof
WO2013163427A1 (en) 2012-04-25 2013-10-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Antibodies to treat hiv-1 infection
US9212224B2 (en) 2012-05-15 2015-12-15 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies that bind PD-L1 and uses thereof
KR20150013188A (ko) 2012-05-24 2015-02-04 에프. 호프만-라 로슈 아게 다중특이적 항체
UY34887A (es) * 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
US20150203591A1 (en) 2012-08-02 2015-07-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mutivalent antigen-binding proteins
CN104936982B (zh) 2012-08-03 2020-04-24 丹娜法伯癌症研究院 抗-pd-l1和pd-l2双结合抗体单一试剂及其使用方法
DK2900061T3 (da) 2012-09-17 2020-03-02 Galectin Therapeutics Inc Fremgangsmåde til forstærkning af specifikke immunterapier ved cancerbehandling
NZ631405A (en) 2012-10-02 2017-01-27 Bristol Myers Squibb Co Combination of anti-kir antibodies and anti-pd-1 antibodies to treat cancer
EP2906241B1 (en) 2012-10-12 2020-01-08 The Brigham and Women's Hospital, Inc. Enhancement of the immune response
EP2912063A1 (en) 2012-10-23 2015-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-kir and anti-ctla-4 antibodies to treat cancer
WO2014066834A1 (en) 2012-10-26 2014-05-01 The University Of Chicago Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
AU2014230741B2 (en) 2013-03-15 2017-04-13 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Anti-LAG-3 binding proteins
MX2015015037A (es) 2013-05-02 2016-07-08 Anaptysbio Inc Anticuerpos dirigidos contra la proteina muerte programada-1 (pd-1).
WO2014194302A2 (en) * 2013-05-31 2014-12-04 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind pd-1
US20160145355A1 (en) 2013-06-24 2016-05-26 Biomed Valley Discoveries, Inc. Bispecific antibodies
DK177790B1 (en) 2013-08-08 2014-07-07 Liqtech Internat A S A METHOD OF PRODUCING A CERAMIC FILTER MEMBRANE, A METHOD OF IMPROVING A CERAMIC FILTER MEMBRANE AND THE CERAMIC FILTER MEMBRANE OBTAINED BY THE METHOD
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
EP2840091A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific diabodies that are capable of binding gpA33 and CD3 and uses thereof
EP2839842A1 (en) * 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof
WO2015036394A1 (en) 2013-09-10 2015-03-19 Medimmune Limited Antibodies against pd-1 and uses thereof
ES2792183T3 (es) 2013-09-13 2020-11-10 Beigene Switzerland Gmbh Anticuerpos anti-PD1 y su uso como productos terapéuticos y de diagnóstico
HUE044730T2 (hu) 2013-09-20 2019-11-28 Bristol Myers Squibb Co Anti-LAG-3 antitestek és Anti-PD-1 antitestek kombinációja tumorok kezelésére
WO2015048312A1 (en) 2013-09-26 2015-04-02 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
EA035037B1 (ru) 2013-12-12 2020-04-21 Шанхай Хэнжуй Фармасьютикал Ко., Лтд. Антитело к pd-1, его антигенсвязывающий фрагмент и их медицинское применение
CN106459182B (zh) 2013-12-30 2021-09-03 岸迈生物科技有限公司 串联fab免疫球蛋白及其用途
CA2936244A1 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Medimmune, Llc Compositions and methods for modulating and redirecting immune responses
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
EA201691361A1 (ru) 2014-01-28 2016-12-30 Бристол-Маерс Сквибб Компани Антитела к lag-3 для лечения гематологических злокачественных опухолей
TWI777174B (zh) 2014-03-14 2022-09-11 瑞士商諾華公司 針對lag-3之抗體分子及其用途
US20150307620A1 (en) 2014-04-16 2015-10-29 University Of Connecticut Linked immunotherapeutic agonists that costimulate multiple pathways
US20170158776A1 (en) 2014-05-15 2017-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lung cancer using a combination of an anti-pd-1 antibody and another anti-cancer agent
BR112016027912A2 (pt) 2014-05-29 2018-02-20 Macrogenics, Inc. molécula de ligação triespecífica capaz de se ligar de maneira imunoespecífica a três epítopos diferentes, composição farmacêutica, método de tratamento de câncer, método de tratamento de uma doença associada à presença de um patógeno, anticorpo anti-ror1, ou fragmento de ligação a ror1, fragmento de anticorpo biespecífico, bite ou anticorpo de cadeia simples, e método de tratamento de câncer
WO2015195163A1 (en) 2014-06-20 2015-12-23 R-Pharm Overseas, Inc. Pd-l1 antagonist fully human antibody
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
EP3160497A4 (en) 2014-06-27 2018-01-17 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Conjugates for immunotherapy
KR102524920B1 (ko) 2014-07-22 2023-04-25 아폴로믹스 인코포레이티드 항-pd-1 항체
CN105330740B (zh) 2014-07-30 2018-08-17 珠海市丽珠单抗生物技术有限公司 抗pd-1抗体及其应用
MX2017001597A (es) 2014-08-05 2017-11-17 Cb Therapeutics Inc Anticuerpos anti-pd-l1.
CN107074947B (zh) 2014-08-05 2021-04-09 马布奎斯特公司 结合至pd-1的免疫试剂
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
GB201419084D0 (en) 2014-10-27 2014-12-10 Agency Science Tech & Res Anti-PD-1 antibodies
US10822414B2 (en) 2014-11-11 2020-11-03 Sutro Biopharma, Inc. Anti-PD-1 antibodies, compositions comprising anti-PD-1 antibodies and methods of using anti-PD-1 antibodies
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
EP3916017A1 (en) 2014-12-22 2021-12-01 PD-1 Acquisition Group, LLC Anti-pd-1 antibodies
CN107708732A (zh) 2015-02-06 2018-02-16 卡德门企业有限公司 免疫调节剂
BR112017021688A2 (pt) 2015-04-17 2018-08-14 Bristol-Myers Squibb Company composições compreendendo uma combinação de um anticorpo anti-pd-1 e outro anticorpo
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
TW201709929A (zh) * 2015-06-12 2017-03-16 宏觀基因股份有限公司 治療癌症的聯合療法
PE20231958A1 (es) * 2015-07-30 2023-12-06 Macrogenics Inc Moleculas de union a pd-1 y metodos de uso de las mismas
CN108136010A (zh) 2015-10-08 2018-06-08 宏观基因有限公司 用于治疗癌症的联合疗法
AU2016348391A1 (en) 2015-11-03 2018-05-17 Janssen Biotech, Inc. Antibodies specifically binding TIM-3 and their uses

Also Published As

Publication number Publication date
IL290571B (en) 2022-11-01
CY1124723T1 (el) 2022-07-22
GEP20227419B (en) 2022-10-10
HUE056201T2 (hu) 2022-02-28
ES2898958T3 (es) 2022-03-09
PE20240111A1 (es) 2024-01-22
US11623959B2 (en) 2023-04-11
EP3456346B1 (en) 2021-07-07
HUE055207T2 (hu) 2021-11-29
MA42542B1 (fr) 2021-09-30
AU2020200054B2 (en) 2022-03-03
PL3328419T3 (pl) 2021-12-27
TWI762879B (zh) 2022-05-01
PH12018500232A1 (en) 2018-08-29
CN108976300A (zh) 2018-12-11
CY1124634T1 (el) 2022-07-22
RS62374B1 (sr) 2021-10-29
IL287916B1 (en) 2023-05-01
IL287916B2 (en) 2023-09-01
IL257216A (en) 2018-03-29
CL2018000254A1 (es) 2018-07-20
MD3456346T2 (ro) 2021-11-30
JO3736B1 (ar) 2021-01-31
IL257216B (en) 2022-03-01
JOP20200213A1 (ar) 2022-10-30
JP6959907B2 (ja) 2021-11-05
CN116333138A (zh) 2023-06-27
ES2898511T3 (es) 2022-03-07
IL290571B2 (en) 2023-03-01
EA201890296A1 (ru) 2018-08-31
US20230357404A1 (en) 2023-11-09
TW201710292A (zh) 2017-03-16
CO2018000867A2 (es) 2018-04-19
HK1248106A1 (zh) 2018-10-12
IL287916A (en) 2022-01-01
HRP20211645T1 (hr) 2022-02-04
JP2018524394A (ja) 2018-08-30
AU2016298227A8 (en) 2018-03-08
AU2016298227B2 (en) 2019-10-03
AU2018214151B2 (en) 2019-10-31
US10577422B2 (en) 2020-03-03
CN107847574A (zh) 2018-03-27
AU2016298227A1 (en) 2018-02-22
ECSP18006831A (es) 2018-04-30
TWI833183B (zh) 2024-02-21
GEP20237538B (en) 2023-09-11
AU2016298227A2 (en) 2018-09-13
GEP20227438B (en) 2022-11-10
IL290571A (en) 2022-04-01
EP3328419B1 (en) 2021-08-25
CR20180062A (es) 2018-05-25
EP3456346A1 (en) 2019-03-20
MD3328419T2 (ro) 2022-01-31
CR20200423A (es) 2021-01-20
EP3328419A1 (en) 2018-06-06
AU2016298227B9 (en) 2019-10-31
SI3456346T1 (sl) 2021-11-30
SG10201906059VA (en) 2019-08-27
AU2018214151A1 (en) 2018-08-30
JP2023075241A (ja) 2023-05-30
DK3328419T3 (da) 2021-10-11
SI3328419T1 (sl) 2021-11-30
PT3456346T (pt) 2021-09-28
ZA201807856B (en) 2020-09-30
IL297090A (en) 2022-12-01
PT3328419T (pt) 2021-11-26
HRP20211333T1 (hr) 2021-11-26
CR20220194A (es) 2022-06-16
TW202229357A (zh) 2022-08-01
WO2017019846A1 (en) 2017-02-02
SG10202010506TA (en) 2020-11-27
JP6959897B2 (ja) 2021-11-05
LT3328419T (lt) 2021-11-10
TW202028234A (zh) 2020-08-01
MX2018001227A (es) 2018-03-26
RS62568B1 (sr) 2021-12-31
MA42542A (fr) 2021-05-26
JP7245304B2 (ja) 2023-03-23
LT3456346T (lt) 2021-09-27
WO2017019846A8 (en) 2018-01-25
MX2022014645A (es) 2022-12-15
US20200231675A1 (en) 2020-07-23
MX2019001161A (es) 2019-07-04
KR20180093127A (ko) 2018-08-20
EP3981792A1 (en) 2022-04-13
JP2022002540A (ja) 2022-01-11
ZA201800500B (en) 2020-10-28
AU2020200054A1 (en) 2020-01-30
US20190127467A1 (en) 2019-05-02
PE20181151A1 (es) 2018-07-17
JP2019055948A (ja) 2019-04-11
CN108976300B (zh) 2023-04-14
DK3456346T3 (da) 2021-08-30
TWI691509B (zh) 2020-04-21
AU2022200168A1 (en) 2022-02-10
PL3456346T3 (pl) 2021-12-20
CN114773475B (zh) 2024-01-12
EP3328419A4 (en) 2018-12-26
CN114773475A (zh) 2022-07-22
CA2993948A1 (en) 2017-02-02
KR20180034588A (ko) 2018-04-04
CN107847574B (zh) 2023-05-23
PE20231958A1 (es) 2023-12-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA127372C2 (uk) Моноспецифічне pd-1-сполучне моноклональне антитіло
US10774151B2 (en) Anti-human 4-1BB antibodies and uses thereof
US11639386B2 (en) Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD19 and CD3, and uses thereof
EP3161004B1 (en) Covalently bonded diabodies having immunoreactivity with pd-1 and lag-3, and methods of use thereof
UA123310C2 (uk) Зв'язуюча lag-3 молекула та спосіб її застосування
UA125611C2 (uk) Біспецифічні молекули, що мають імунореактивність відносно pd-1 і ctla-4, і способи їх застосування
UA128001C2 (uk) Націлені на пухлину агоністичні cd28-антигензв'язувальні молекули
JP5564049B2 (ja) 抗ｃｄ１４７抗体、方法及び使用
WO2019174603A1 (zh) 靶向ctla-4抗体、其制备方法和用途
TW201940515A (zh) 抗-cd25抗體藥劑
TW201627322A (zh) 抗-ｄｒ５抗體和包括其ｄｒ５-結合結構域的分子
JP2022528030A (ja) 多機能性融合タンパク質及びその使用
JP2024028761A (ja) 変異したＴＧＦβ１－ＲＩＩ細胞外ドメインおよび免疫グロブリン足場で構成される抗腫瘍アンタゴニスト
CN113717942A (zh) 一种联合嵌合抗原受体和i型干扰素的免疫治疗方法及其应用
JP2021526013A (ja) 抗ヒトｌａｇ−３モノクローナル抗体とその応用
CN110339364B (zh) Lgr4/rspo阻断剂与抗免疫检查点抑制剂联合用于肿瘤的免疫治疗
RU2777573C2 (ru) Антитела против 4-1bb человека и их применение
WO2023045977A1 (zh) 白介素2突变体以及其融合蛋白
WO2023177974A2 (en) Anti-mesothelin antibodies and uses thereof