KR20150128705A - 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 효율적인 생성 - Google Patents

재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 효율적인 생성 Download PDF

Info

Publication number
KR20150128705A
KR20150128705A KR1020157024717A KR20157024717A KR20150128705A KR 20150128705 A KR20150128705 A KR 20150128705A KR 1020157024717 A KR1020157024717 A KR 1020157024717A KR 20157024717 A KR20157024717 A KR 20157024717A KR 20150128705 A KR20150128705 A KR 20150128705A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
gene
rebaudioside
steviol
polypeptide
transporter
Prior art date
Application number
KR1020157024717A
Other languages
English (en)
Inventor
에르네스토 시몬
아이벤 노르트마르크 안데르센
마이클 달가드 미켈슨
요르겐 한센
베로니크 도우친
Original Assignee
에볼바 에스아
베로니크 도우친
마이클 달가드 미켈슨
요르겐 한센
에르네스토 시몬
아이벤 노르트마르크 안데르센
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 에볼바 에스아, 베로니크 도우친, 마이클 달가드 미켈슨, 요르겐 한센, 에르네스토 시몬, 아이벤 노르트마르크 안데르센 filed Critical 에볼바 에스아
Publication of KR20150128705A publication Critical patent/KR20150128705A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/37—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi
    • C07K14/39—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi from yeasts
    • C07K14/395—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi from yeasts from Saccharomyces
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
    • C12N9/0036—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6)
    • C12N9/0038—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6) with a heme protein as acceptor (1.6.2)
    • C12N9/0042—NADPH-cytochrome P450 reductase (1.6.2.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0071—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14)
    • C12N9/0073—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14) with NADH or NADPH as one donor, and incorporation of one atom of oxygen 1.14.13
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C12N9/1062—Sucrose synthase (2.4.1.13)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/90—Isomerases (5.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P15/00—Preparation of compounds containing at least three condensed carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y106/00—Oxidoreductases acting on NADH or NADPH (1.6)
    • C12Y106/02—Oxidoreductases acting on NADH or NADPH (1.6) with a heme protein as acceptor (1.6.2)
    • C12Y106/02004—NADPH-hemoprotein reductase (1.6.2.4), i.e. NADP-cytochrome P450-reductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
    • C12Y114/13—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with NADH or NADPH as one donor, and incorporation of one atom of oxygen (1.14.13)
    • C12Y114/13078—Ent-kaurene oxidase (1.14.13.78)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C12Y204/01013—Sucrose synthase (2.4.1.13)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C12Y204/01035—Phenol beta-glucosyltransferase (2.4.1.35)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y205/00—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5)
    • C12Y205/01—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5) transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5.1)
    • C12Y205/01029—Geranylgeranyl diphosphate synthase (2.5.1.29)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y402/00—Carbon-oxygen lyases (4.2)
    • C12Y402/03—Carbon-oxygen lyases (4.2) acting on phosphates (4.2.3)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y402/00—Carbon-oxygen lyases (4.2)
    • C12Y402/03—Carbon-oxygen lyases (4.2) acting on phosphates (4.2.3)
    • C12Y402/03019—Ent-kaurene synthase (4.2.3.19)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y505/00—Intramolecular lyases (5.5)
    • C12Y505/01—Intramolecular lyases (5.5.1)
    • C12Y505/01013—Ent-copalyl diphosphate synthase (5.5.1.13)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)

Abstract

스테비올 글리코시드를 생성하거나, 하나 이상의 내인성 트랜스포터 또는 전사 인자 유전자의 변형된 발현을 지니거나, 하나 이상의 이종성 트랜스포터를 과다발현하여 관심 대상의 스테비올 글리코시드의 분비를 증가시키는, 재조합 미생물이 기재되어 있다.

Description

재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 효율적인 생성 {EFFICIENT PRODUCTION OF STEVIO GLYCOSIDES IN RECOMBINANT HOSTS}
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 2013년 2월 11일 출원된 미국 가출원 번호: 61/763,290, 및 2013년 2월 11일 출원된 미국 가출원 번호: 61/763,308의 이익을 청구하며, 이들 각각의 기재내용은 참조로 통합된다.
기술 분야
본 발명은 스테비올 글리코시드의 재조합 생성 및 이의 분리 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 재조합 숙주 예컨대, 재조합 미생물에 의한 스테비올 글리코시드 예컨대, 레바우디오시드 A (RebA), 레바우디오시드 B (RebB), 레바우디오시드 D (RebD), 레바우디오시드 E (RebE) 및 레바우디오시드 M (RebM)의 생성에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 스테비올 글리코시드의 생성, 분비 또는 이 둘 모두를 증가시키기 위한 재조합 숙주에서의 수송 시스템에 대한 변형에 관한 것이다.
감미료는 식품, 음료, 또는 과자 산업에서 가장 흔히 이용되는 성분들로 잘 알려져 있다. 감미료는 생산 동안 최종 식품에 통합될 수 있거나 단독 용도로 적절하게 희석시켰을 때, 식탁 감미료 또는 베이킹에서 설탕을 대체하는 가정용 대체물로 이용할 수 있다. 감미료는 예를 들어 수크로스, 고과당 옥수수 시럽, 당밀, 메이플 시럽, 및 꿀과 같은 천연 감미료, 및 예를 들어 아스파르탐, 사카린 및 수크랄로스와 같은 인공 감미료를 포함한다. 스테비아(Stevia) 추출물은 다년생 관목, 스테비아 레바우디아나(Stevia rebaudiana)로부터 분리되고 추출될 수 있는 천연 감미료이다. 스테비아 추출물의 상업적 생산을 위한 스테비아는 남미 및 아시에에서 흔히 자란다. 다양한 수준으로 정제된 스테비아 추출물은 식품 및 블렌드에서 고감도 감미료로 또는 단독으로 식탁 감미료로 상업적으로 이용된다.
스테비아 식물의 추출물들은 레바우디오시드 및 단맛에 기여하는 기타 스테비올 글리코시드를 함유하지만, 각 글리코시드의 양은 다양한 생산 일괄량 (batches)에 따라 흔히 변화한다. 전형적으로, 스테비오시드 및 레바우디오시드 A는 시판되는 스테비아 추출물의 주요 화합물이다. 스테비오시드는 레바우디오시드 A에 비해 보다 쓴맛이며 단맛이 덜한 것으로 보고된다. 스테비아 추출물의 조성물은 식물이 성장하는 토양 및 기후에 따라 매우 다양할 수 있다. 원료 식물, 기후 조건, 및 추출 공정에 따라, 상업적 제조 과정에서 레바우디오시드 A의 양은 총 스테비올 글리코시드 함량의 20 내지 97%로 다양한 것으로 보고된다. 또 다른 스테비올 글리코시드는 스테비아 추출물 중에 다양한 양으로 존재한다. 예를 들어, 레바우디오시드 B는 통상적으로 1-2% 미만으로 존재하는 반면, 레바우디오시드 C는 7-15% 만큼 높은 수준으로 존재할 수 있다. 레바우디오시드 D는 총 스테비올 글리코시드의 통상적으로 2% 이하의 수준으로 존재하고, 레바우디오시드 M은 통상적으로 미량 수준 (<0.1%)으로 존재하고, 레바우디오시드 F는 통상적으로 3.5% 이하로 조성물에 존재한다. 소량의 스테비올 글리코시드는 스테비아 추출물의 향미 프로필에 영향을 줄 수 있다.
디테르펜 스테비올 및 다양한 스테비올 글리코시드를 포함하여 스테비아 추출물들에서 발견된 몇몇 화합물에 대한 화학 구조물들을 표 1에 나타내었다. CAS 번호는 하기 표 1에 나타낸다. 또한, 문헌 [Hariet Wallin, Food Agric.Org (2007)]에 의해 제시된 스테비올 글리코시드 화학적 및 기술적 평가 (Steviol Glycosides Chemical and Technical Assessment) 69th JECFA를 참조하라.
화합물 CAS #
스테비올 471-80-7
레바우디오시드 A (RebA) 58543-16-1
스테비올비오시드 41093-60-1
스테비오시드 57817-89-7
레바우디오시드 B (RebB) 58543-17-2
레바우디오시드 C (RebC) 63550-99-2
레바우디오시드 D (RebD) 63279-13-0
레바우디오시드 E (RebE) 63279-14-1
레바우디오시드 F (RebF) 438045-89-7
레바우디오시드 M (RebM) 1220616-44-3
루부소시드 (Rubu) 63849-39-4
둘코시드 A 64432-06-0
개요
본 문헌은 스테비올 글리코시드의 분비에 관련된 재조합 숙주에서 수송 시스템의 변형에 의해 스테비올 글리코시드 조성물을 유효하게 생성하는데 이용될 수 있는 물질 및 방법을 기술한다. 일부 구체예에서, 본원에 기술된 재조합 숙주는 적어도 하나의 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있으며, 항생제를 활성적으로 분비하는 트랜스포터와 같은 이종성 트랜스포터를 발현할 수 있다. 일부 구체예에서, 본원에 기술된 재조합 숙주는 적어도 하나의 스테비올 글리코시드를 생성하며, 내인성 트랜스포터 유전자의 발현이 숙주에서 변형되고/거나 전사 인자 유전자의 발현이 변형되며, 여기에서 전사 인자는 적어도 하나의 내인성 트랜스포터 유전자의 발현을 조절한다. 활성적으로 항생제를 분비하는 내인성 트랜스포터의 발현 변형이 특히 유용하다. 일부 구체예에서, 복수의 내인성 트랜스포터 유전자, 전사 인자 유전자 또는 이 둘 모두의 발현이 변형된다. 이러한 재조합 숙주는 하나 이상의 생합성 유전자를 포함할 수 있는데, 이러한 유전자의 발현은 스테비올 글리코시드 예컨대, 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E, 또는 레바우디오시드 M의 생성을 유도한다. 이러한 생합성 유전자는 13-모노글루코시드 베타 1,2 글리코실트랜스퍼라제 및/또는 19-모노글루코시드-베타 1,2-글루코실트랜스퍼라제 (예를 들어, 91D2e 및 EUGT11) 및 기타 UDP 글리코실 트랜스퍼라제 예컨대, UGT74G1, UGT76G1, 및/또는 UGT85C2를 포함하여, 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 생성을 허용한다.
본 문헌은 또한, 스테비올 글리코시드 생성물을 생성하는 방법을 특징으로 한다. 이들 방법은 내인성 트랜스포터 유전자의 변형된 발현을 갖는 재조합 미생물 (예를 들어, 사카로마이세스 세레비시애 (Saccharomyces cerevisiae))을 이용하여 스테비올 글리코시드를 생성하고, 이어서 이를 선택적으로 발효 브로쓰로부터 정제할 수 있는, 발효 방법을 포함한다.
일 양태에서, 본 문헌은 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 유전자 또는 유전자들을 확인하는 것은 물론 본원에 제시된 바와 같은 스테비올 글리코시드를 생성하도록 재조합 세포 특히, 미생물을 유전적으로 조작하기 위한 이의 재조합 구체예를 이용하는 대안적 방법을 특징으로 한다. 이들 방법은 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있는 재조합 미생물에서 적어도 하나의 내인성 트랜스포터의 발현을 변형시키고; 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 변형된 미생물을 배양하고; 변형이 결여된 상응하는 미생물에 의해 생성된 양과 비교하여 배양 단계 동안 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드의 양을 측정하여 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 것으로서 내인성 트랜스포터를 확인하는 것을 포함한다.
본 문헌은 또한, 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 유전자 또는 유전자들을 확인하는 것은 물론 본원에 제시된 바와 같은 스테비올 글리코시드를 생성하도록 재조합 세포 특히, 미생물을 유전적으로 조작하기 위한 이의 재조합 구체예를 이용하는 방법을 특징으로 한다. 이들 방법은 미생물에서 적어도 하나의 내인성 트랜스포터의 발현을 변형시켜 변형된 미생물을 생성시키고; 변형된 미생물로 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있는 하나 이상의 재조합 유전자를 도입시키고; 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 변형된 미생물을 배양하고; 변형이 결여된 상응하는 미생물에 의해 생성된 양과 비교하여 배양 단계 동안 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드의 양을 측정함으로써, 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 것으로서 내인성 트랜스포터를 확인하는 것을 포함한다.
본 문헌은 또한, 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 유전자 또는 유전자들을 확인하는 추가적인 방법을 여전히 특징으로 한다. 이들 방법은 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있는 재조합 미생물에서 내인성 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 적어도 하나의 내인성 전사 인자의 발현을 변형시키고; 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 변형된 미생물을 배양하고; 변형이 결여된 상응하는 미생물에 의해 생성된 양과 비교하여 배양 단계 동안 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드의 양을 측정함으로써, 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 것으로서 전사 인자를 확인하는 것을 포함한다.
또 다른 구체예에서, 본 문헌은 여전히 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 유전자 또는 유전자들을 확인하기 위한 더욱 추가의 방법을 특징으로 한다. 이들 방법은 미생물에서 내인성 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 적어도 하나의 내인성 전사 인자의 발현을 변형시켜 변형된 미생물을 생성시키고; 변형된 미생물로 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있는 하나 이상의 재조합 유전자를 도입시키고; 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 변형된 미생물을 배양하고; 변형이 결여된 상응하는 미생물에 의해 생성된 양과 비교하여 배양 단계 동안 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드의 양을 측정함으로써, 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 것으로서 전사 인자를 확인하는 것을 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 문헌은 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 것으로 확인된 유전자 또는 유전자들의 발현을 변형시킴으로써 스테비올 글리코시드의 분비를 증가시키는 방법으로서, 확인된 유전자의 발현이 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있는 재조합 미생물에서 변형될, 방법에 관한 것이다. 일부 구체예에서, 확인된 유전자 또는 유전자들은 내인성 프로모터를 야생형 프로모터와 비교하여 각각 더 강한 프로모터 또는 더 약한 프로모터로 대체함으로써 과다발현 또는 억제될 수 있는 내인성 유전자이다. 또 다른 구체예에서, 확인된 유전자 또는 유전자들은 내인성 유전자 또는 유전자들을 과다발현하거나 억제하도록 조작된 외인성 DNA를 도입시킴으로써 과다발현되거나 억제되는 내인성 유전자일 수 있다. 추가의 또 다른 구체예에서, 확인된 내인성 유전자의 상동성 또는 이종상동성 유전자가 과다발현될 수 있다. 추가의 구체예에서, 내인성 유전자는 재조합 미생물에 대한 천연 메카니즘 (예를 들어, 열 쇼크, 스트레스, 중금속 또는 항생제 노출)을 이용하여 과다발현되거나 억제되도록 유도될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 방법에서, 발현 변형은 상응하는 비변형된 미생물에서 관찰된 발현 수준보다 적어도 5% 초과 또는 미만으로 내인성 트랜스포터 또는 전사 인자의 발현 또는 활성을 증가시키거나 감소시키는 것을 포함할 수 있다.
본원에 기술된 임의의 방법에서, 재조합 유전자는 외인성 핵산에 의해 인코딩된 하기 유전자 중 하나 이상을 포함할 수 있다:
(a) 수크로스 트랜스포터 및 수크로스 신타제를 인코딩하는 하나 이상의 재조합 유전자;
(b) GGPPS 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(c) ent-코팔릴 디포스페이트 신타제 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(d) 카우렌 신타제 (KS) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(e) 카우렌 옥시다제 (KO) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(f) 스테비올 신타제 (KAH) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(g) 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 및 또한, 적절한 조합의,
(h) UGT85C2 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(i) UGT76G1 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(j) UGT74G1 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
(k) UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 또는
(l) EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산.
본 문헌은 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 유전자 또는 유전자들을 확인하는 방법은 물론 본원에 제시된 바와 같은 스테비올 글리코시드를 생성하도록 재조합 세포 특히, 미생물을 유전적으로 조작하기 위한 이의 재조합 구체예를 이용하는 방법을 특징으로 한다. 본 방법은 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 생성할 수 있는 재조합 미생물에서 적어도 하나의 이종성 트랜스포터를 발현시키고; 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 미생물을 배양하고; 변형이 결여된 상응하는 미생물에 의해 생성된 양과 비교하여 배양 단계 동안 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드의 양을 측정함으로써, 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 이종성 트랜스포터를 확인하는 것을 포함한다. 이종성 트랜스포터는 스테비아 (Stevia) 트랜스포터일 수 있다.
본원에 기술된 임의의 방법에서, 미생물은 아가리쿠스 (Agaricus), 아스퍼길루스 (Aspergillus), 바실루스 (Bacillus), 캔디다 (Candida), 코리네박테리움 (Corynebacterium), 에스체리치아 (Escherichia), 푸사리움/깁베렐라 (Fusarium/Gibberella), 클루이베로마이세스 (Kluyveromyces), 래티포루스 (Laetiporus), 렌티누스 (Lentinus), 파피아 (Phaffia), 파네로새테 (Phanerochaete), 피치아 (Pichia), 피스코미트렐라 (Physcomitrella), 로도투룰라 (Rhodoturula), 사카로마이세스 (Saccharomyces), 쉬조사카로마이세스 (Schizosaccharomyces), 스파셀로마 (Sphaceloma), 잔토필로마이세스 (Xanthophyllomyces) 및 야로위아 (Yarrowia)로 구성된 군으로부터 선택된 속으로부터의 적합한 종을 포함할 수 있으나 이에 제한되지 않는다. 이러한 속으로부터의 예시적인 종은 비제한적으로, 사카로마이세스 세레비시애 (Saccharomyces cerevisiae), 쉬조사카로마이세스 폼베 (Schizosaccharomyces pombe), 야로위아 리폴리티카 (Yarrowia lipolytica), 캔디다 글라브라타 (Candida glabrata), 아쉬비아 고스시피 (Ashbya gossypii), 사이버린드네라 자디니 (Cyberlindnera jadinii), 피치아 파스토리스 (Pichia pastoris), 클루이베로마이세스 락티스 (Kluyveromyces lactis), 한세눌라 폴리모르파 (Hansenula polymorpha), 캔디다 보이디니 (Candida boidinii), 아르술라 아데니니보란스 (Arxula adeninivorans), 잔토필로마이세스 덴드로로우스 (Xanthophyllomyces dendrorhous) 또는 캔디다 알비칸스 (Candida albicans) 종을 포함한다.
본 발명의 이러한 및 그 밖의 특징 및 이점은 첨부된 청구범위와 함께 취해진 본 발명의 하기 상세한 설명으로부터 더욱 잘 이해될 것이다. 청구범위는 청구범위의 기술에 의해 규정되며 본 설명에서 제시된 특징 및 이점의 특정 논의에 의해 규정되지 않음이 주지된다.
도 1은 다양한 스테비올 글리코시드에 대한 화학 구조 및 합성 경로를 보여준다.
도 2는 트랜스포터 유전자를 과다발현하는 RebA-생성 효모 균주로부터의 배양 상청액중 RebA 퍼센트의 막대 그래프이다. 천연 트랜스포터 프로모터는 상동성 재조합에 의해 강한 항시성 프로모터 TEF1으로 대체되었다. 균주를 48 시간 동안 합성 완전 (SC) 배지에서 성장시키고, RebA 함량은 LC-MS에 의해 펠렛 및 상청액 분획에서 측정하였다.
도 3은 YOR1 유전자 앞에 천연 프로모터를 갖는 야생형 균주와 비교하여 YOR1 과다발현 효모 균주의 상청액중 RebA 퍼센트의 막대 그래프이다. RebA 함량은 LC-MS에 의해 펠렛 및 상청액 분획에서 측정하였다.
도 4a-m은 빈 플라스미드 (PSB314)를 함유하는 효모 균주와 비교하여 효모 균주 EFSC2797에서 2 마이크론 플라스미드에서 과다발현된 다양한 트랜스포터의 각 도면에 지시된 바와 같은 전체 양 또는 상청액중 각 스테비올 글리코시드의 분비된 퍼센트 (도 4a-i) 또는 마이크로몰/OD600 (도 4j-k) 또는 마이크로몰 농도 (도 4l-m)의 막대 그래프이다. 내인성 효모 트랜스포터 유전자 PDR1, PDR3, PDR13, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1, FLR1, AZR1 및 DTR1은 EFSC2797 Reb 생성 균주에서 PSB314 플라스미드를 사용하여 과다발현되었으며, 각 스테비올 글리코시드의 함량은 LC-MS에 의해 펠렛 및 상청액 분획에서 측정하였다.
도 5a-i는 대조군 균주 (PSB314)와 비교하여 효모 균주 EFSC2797에서 PSB314를 사용하여 과다발현된 내인성 효모 트랜스포터 유전자 PDR1, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1 및 FLR1의 상청액중의 양 (도 5a-d), 분비된 각 스테비올 글리코시드 퍼센트 (도 5e-i)의 막대 그래프이다. 내인성 효모 트랜스포터 유전자 PDR1, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1 및 FLR1는 ERSC2797 Reb 생성 균주에서 PSB314 플라스미드를 사용하여 과다발현되었으며, 각 스테비올 글리코시드의 함량은 LC-MS에 의해 펠렛 및 상청액 분획에서 측정하였다.
도 6은 효모 ERSC2797 균주에서 과다발현하는 내인성 효모 트랜스포터 유전자 PDR1, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1 및 FLR1로부터 효모 성장에 대한 영향을 설명하는 막대 그래프이다.
도 7은 RebA 생성 균주에서 S. 레바우디아나 (S. rebaudiana) 트랜스포터의 발현 효과를 설명하는 막대 그래프이다.
도 8은 4개의 내인성 트랜스포터에 대한 로커스에서 돌연변이를 수반하는 효모 균주를 스테비올-공급 배지에서 배양한 후 생성된 스테비올-19-O-글루코시드의 농도 (마이크로몰)를 보여주는 막대 그래프이다. Sup 19-SMG = 상청액중 스테비올-19-O- 글루코시드의 양; Pel 19-SMG = 세포 펠렛중 스테비올-19-O-글루코시드의 양; WT = 4개의 S. 레바우디아나 UGT (76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2)를 발현하는 야생형; 및 4X KO = 4개의 S. 레바우디아나 UGT를 발현하고, pdr5 , pdr10, pdr15 , snq2 트랜스포터 로커스의 결실을 수반하는 4X 트랜스포터 파괴 변이체 효모 균주.
도 9는 스테비올-공급 배지에서 4X 트랜스포터 파괴 효모 균주의 배양 후 생성된 19-SMG 및 레바우디오시드 A의 농도 (마이크로몰)를 보여주는 막대 그래프이다. 제시된 양은 각 균주에 대한 전체 세포외 (왼쪽 막대) 및 세포내 (오른쪽 막대) 19-SMG 및 레바우디오시드 A이다.
도 10은 4개의 S. 레바우디아나 UGT (76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2)를 발현하는 효모 야생형 균주에 의해 생성된 크로마토그래픽 미량의 스테비올 글리코시드이다. Y-축 = 디스플레이에서 자동화된 스켈링에 따른 상대량. 위부터 아래쪽으로의 횡은 m/z 자동기록 (trace)이며, 이는 모노글루코시드, 비오시드, 스테비올 플러스 3 글루코스 잔류물, 스테비올 + 4 글루코스 잔류물, 및 스테비올 + 5 글루코스 잔류물에 상응한다.
도 11은 4개의 S. 레바우디아나 UGT (76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2)를 발현하는 효모 4X 트랜스포터 파괴 변이체 균주에 의해 생성된 크로마토그래픽 미량의 스테비올 글리코시드이다. Y-축 = 디스플레이에서 자동화된 스켈링에 따른 상대량. 위부터 아래쪽으로의 행은 m/z 자동기록이며, 이는 모노글루코시드, 비오시드, 스테비올 플러스 3 글루코스 잔류물, 스테비올 + 4 글루코스 잔류물, 및 스테비올 + 5 글루코스 잔류물에 상응한다.
도 12는 4개의 S. 레바우디아나 UGT (76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2)를 발현하는 효모 7X 트랜스포터 파괴 변이체 균주에 의해 생성된 크로마토그래픽 미량의 스테비올 글리코시드이다. Y-축 = 디스플레이에서 자동화된 스켈링에 따른 상대량. 위부터 아래쪽으로의 행은 m/z 자동기록이며, 이는 모노글루코시드, 비오시드, 스테비올 플러스 3 글루코스 잔류물, 스테비올 + 4 글루코스 잔류물, 및 스테비올 + 5 글루코스 잔류물에 상응한다.
도 13a-d는 특정 트랜스포터 유전자 (PDR5, SNQ2, YOR1, YHK8, FLR1)가 단일 결실된 효모 균주의 상청액에 분비된 각 스테비올 글리코시드의 농도 (도 13a-b) 또는 마이크로몰/OD600 (도 13c) 또는 퍼센트 (도 13d-f)의 막대 그래프이다.
상세한 설명
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본 발명을 실시하는데 사용될 수 있으나, 적합한 방법 및 물질은 하기에 기재된다. 본원에 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허, 및 다른 참고문헌은 이들의 전체내용이 참조로서 포함된다. 상충되는 경우, 정의를 포함하는 본 명세서가 기준이 될 것이다. 또한, 물질, 방법, 및 예는 단지 예시이고, 제한하고자 하는 것이 아니다. 본 발명의 다른 특징 및 장점은 하기 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다. 본 출원인은 특허법 하에서 표준 실시에 따라 과도적 관용구 "포함하는", "-로 본질적으로 구성되는" 또는 "-로 구성되는"을 이용하여 임의의 개시된 발명을 대안적으로 주장할 권리를 보유한다.
당업자에게 널리 공지된 방법을 이용하여 본 발명에 따른 유전자 발현 작제물 및 재조합 세포를 작제할 수 있다. 이러한 방법은 시험관내 재조합 DNA 기법, 합성 기법, 생체내 재조합 기법, 및 중합효소 연쇄 반응 (PCR) 기법을 포함한다. 예를 들어, 문헌[Maniatis et al., 1989, MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory, New York; Ausubel et al., 1989, CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, Greene Publishing Associates and Wiley Interscience, New York, and PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications (Innis et al., 1990, Academic Press, San Diego, CA)]에 기재된 기법을 참조하라.
본 발명을 상세히 기재하기에 앞서, 다수의 용어가 정의될 것이다. 본원에서 사용되는 단수 형태는 문맥에서 달리 명백하게 기술하지 않는 한 복수 대상물을 포함한다. 예를 들어 "핵산"에 대한 언급은 하나 이상의 핵산을 의미한다.
"바람직하게는", "보통", 및 "전형적으로"와 같은 용어는 청구된 발명의 범위를 제한한다거나 특정 특성이 청구된 발명의 구조나 기능에 결정적이거나, 필수적이거나, 심지어 중요함을 의미하기 위해 본원에서 이용된 것이 아님에 유의한다. 오히려, 이러한 용어들은 본 발명의 특정 구체예에 이용될 수 있거나 이용될 수 없는 대안적이거나 추가적인 특성을 단지 강조하기 위한 것이다.
본 발명을 기재하고 정의할 목적으로, 용어 "실질적으로"는 임의의 정량적 비교, 값, 측정, 또는 다른 표현에서 비롯될 수 있는 고유의 불확실성 정도를 나타내기 위해 본원에 이용된 것임에 유의한다. 용어 "실질적으로"는 또한 정량적인 표현이 관심 주제의 기본적인 기능에서의 변화를 발생시키지 않으며 언급 기준으로부터 변화될 수 있음을 나타내기 위해 본원에서 이용된다.
본원에서 사용되는 용어 "폴리누클레오티드", "누클레오티드", "올리고누클레오티드", 및 "핵산"은 DNA, RNA, 이의 유도체, 또는 이의 조합물을 포함하는 핵산을 나타내기 위해 상호교환적으로 이용될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "및/또는"은 또 다른 것과 함께 또는 서로에 배타적으로 여러 구성요소를 기재하기 위해 이용된다. 예를 들어, "x, y, 및/또는 z"는 "x" 단독, "y" 단독, "z" 단독, "x, y, 및 z," "(x 및 y) 또는 z", "x 및 (y 또는 z)" 또는 "x 또는 y 또는 z"를 나타낼 수 있다. 일부 구체예에서, "및/또는"은 재조합 세포가 포함하는 외인성 핵산을 나타내는데 이용되며, 이 때 재조합 세포는 그룹에서 선택되는 하나 이상의 외인성 핵산을 포함한다. 일부 구체예에서, "및/또는"은 스테비올 글리코시드의 생성을 나타내는데 이용되며, 이 때 하나 이상의 그룹에서 선택되는 스테비올 글리코시드가 생성된다. 일부 구체예에서, "및/또는"은 스테비올 글리코시드의 생성을 나타내는데 이용되며, 이 때 하나 이상의 스테비올 글리코시드가 재조합 미생물을 배양하는 단계, 재조합 미생물에서 하나 이상의 스테비올 글리코시드를 합성하는 단계, 및 하나 이상의 스테비올 글리코시드를 분리시키는 단계 중 하나 이상을 통해 생성된다.
본 문헌은 스테비올 글리코시드의 분비에 관련된 재조합 숙주에서 수송 시스템을 변형시켜 스테비올 글리코시드 조성물을 효율적으로 생성하는데 사용될 수 있는 재료 및 방법을 기술한다. 일부 구체예에서, 본원에 기술된 재조합 숙주는 적어도 하나의 스테비올 글리코시드를 생성하며, 이종성 트랜스포터 예컨대, 항생제를 활성적으로 분비하는 트랜스포터를 발현한다. 일부 구체예에서, 본원에 기술된 재조합 숙주는 적어도 하나의 스테비올 글리코시드를 생성하며, 내인성 트랜스포터 유전자의 발현은 숙주에서 변형되고/거나 전사 인자 유전자의 발현이 변형되며, 여기에서 전사 인자는 적어도 하나의 내인성 트랜스포터 유전자의 발현을 조절한다. 항생제를 활성적으로 분비하는 내인성 트랜스포터의 발현 변형이 특히 유용하다. 일부 구체예에서, 복수의 내인성 트랜스포터 유전자, 전사 인자 유전자 또는 이 둘 모두의 발현이 변형된다. 이러한 재조합 숙주는 하나 이상의 생합성 유전자를 포함할 수 있으며 이의 발현은 스테비올 글리코시드 예컨대, 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 또는 레바우디오시드 M의 생성을 유도한다. 이러한 생합성 유전자는 13-모노글루코시드 베타 1,2 글리코실트랜스퍼라제 및/또는 19-모노글루코시드-베타 1,2-글루코실트랜스퍼라제 (예를 들어, UGT91D2e 및 EUGT11) 및 기타 UDP 글리코실 트랜스퍼라제 예컨대, UGT74G1, UGT76G1, 및/또는 UGT85C2를 포함하여, 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 생성을 허용한다.
일 양태에서, 본 문헌은 트랜스포터 유전자, 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자 유전자 또는 이 둘 모두인 적어도 하나의 유전자의 변형된 발현을 포함하는 적어도 하나의 스테비올 글리코시드를 합성할 수 있는 재조합 미생물에 관한 것이다. 일 구체예에서, 트랜스포터 유전자는 내인성 트랜스포터 유전자 또는 이종성 트랜스포터 유전자일 수 있다. 또 다른 구체예에서, 트랜스포터 유전자는 ABC 트랜스포터 또는 MFS 트랜스포터를 인코딩할 수 있으며, 여기에서 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자는 PDR1, PDR3, PDR5, PDR8, PDR10, PDR11, PDR12, PDR15, PDR18, YOR1, AUS1, SNQ2, PDR12, STE6, THI73, NFT1, ADP1, FLR1, QDR1, QDR2, QDR3, DTR1, TPO1, TPO2, TPO4, TPO3, AQR1, AZR1, ENB1, SGE1, YHK8, GEX2, HOL1, ATR1, HXT11, ENB1, ARN1, ARN2, SSU1, THI7, TPN1, SEO1, SIT1 또는 DTR1이다.
또 다른 구체예에서, 재조합 미생물에서 표적 유전자의 변형된 발현은 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자의 과다발현 또는 감소된 발현을 포함한다. 추가의 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 복수의 내인성 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자의 과다발현 또는 감소된 발현을 포함한다. 일 구체예에서, 재조합 미생물은 각 유전자 로커스를 파괴함으로써 PDR5, PDR10, PDR15 및 SNQ2 유전자의 감소된 발현을 포함한다. 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 각 유전자 로커스를 파괴함으로써 PDR1, PDR3, PDR5, PDR10, PDR15, SNQ2 및 TPO1 유전자의 감소된 발현을 포함한다.
추가의 구체예에서, 본 문헌의 재조합 미생물은 하기 외인성 핵산 중 하나 이상을 포함한다: 수크로스 트랜스포터 및 수크로스 신타제를 인코딩하는 하나 이상의 재조합 유전자; GGPPS 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; ent-코팔릴 디포스페이트 신타제 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 카우렌 신타제 (KS) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 카우렌 옥시다제 (KO) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 스테비올 신타제 (KAH) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR)폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; UGT85C2 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; UGT76G 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; UGT74G1 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 또는 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산. 일 구체예에서, 재조합 미생물은 UGT85C2, UGT76G1 및 UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함한다. 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, 및 UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함한다. 추가의 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, 및 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함한다. 추가의 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, UGT91D2 (특히, 91D2e, 91D2m, 91D2e-b 및 이의 기능성 호몰로그 포함) 및 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 문헌은 레바우디오시드를 생성하는 방법으로서; GGPPS; ent-코팔릴 디포스페이트 신타제 (CDPS) 폴리펩티드; 카우렌 옥시다제 (KO) 폴리펩티드; 카우렌 신타제 (KS) 폴리펩티드; 스테비올 신타제 (KAH) 폴리펩티드; 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR) 폴리펩티드; UGT85C2 폴리펩티드; UGT74G1 폴리펩티드; UGT76G1 폴리펩티드; UGT91D2 폴리펩티드; 또는 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 유전자의 유도성 발현 또는 항시성 발현을 포함하여, 상기 유전자가 발현되는 조건하에 배양 배지에서 본원에 기술된 재조합 미생물을 배양하고; 재조합 미생물에서 레바우디오시드를 포함하는 화합물 중 하나 이상을 합성하고; 레바우디오시드를 포함하는 화합물 중 하나 이상을 분리하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다. 일 구체예에서, 레바우디오시드는 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E, 또는 레바우디오시드 M이다. 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 YOR1, SNQ2, PDR1 또는 FLR1를 과다발현한다.
일 구체예에서, 재조합 미생물은 본원에 기술된 미생물로서, 비제한적으로, 아가리쿠스, 아스퍼길루스, 바실루스, 캔디다, 코리네박테리움, 에스체리치아, 푸사리움/깁베렐라, 클루이베로마이세스, 래티포루스, 렌티누스, 파피아, 파네로새테, 피치아, 피스코미트렐라, 로도투룰라, 사카로마이세스, 쉬조사카로마이세스, 스파셀로마, 잔토필로마이세스 및 야로위아 속으로부터 선택된다. 또 다른 구체예에서, 재조합 미생물은 사카로마이세스 세레비시애, 쉬조사카로마이세스 폼베, 야로위아 리폴리티카, 캔디다 글라브라타, 아쉬비아 고스시피, 사이버린드네라 자디니, 피치아 파스토리스, 클루이베로마이세스 락티스, 한세눌라 폴리모르파, 캔디다 보이디니, 아르술라 아데니니보란스, 잔토필로마이세스 덴드로로우스 또는 캔디다 알비칸스 종으로부터의 효모 세포이다.
추가의 또 다른 양태에서, 본 문헌은 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 방법으로서, 본원에 기술된 방법을 이용하여 스테비올 글리코시드를 생성하고, 이때 적어도 하나의 재조합 유전자가 발현되며, 재조합 미생물을 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 배양하고; 트랜스포터 유전자, 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자 유전자 또는 이 둘 모두인 적어도 하나의 유전자를 발현시키고, 배양 단계 동안 생성된 스테비올 글리코시드를 분리하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.
I. 스테비올 및 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드
A. 스테비올 생합성 폴리펩티드
이종성 트랜스포터 및/또는 전사 인자 유전자를 발현하거나 상기 기술된 바와 같은 내인성 트랜스포터 유전자의 발현을 변형시키는 것 이외에, 본원에 기술된 숙주는 스테비올로의 이소프레노이드 전구체의 전환에 관련된 유전자 생성물을 함유하고 이를 발현한다.
스테비올을 생성하기 위한 생화학적 경로는 스테비올 형성을 위한, 게라닐게라닐 디포스페이트의 형성, (-) 코팔릴 디포스페이트로의 고리화, 이어서 산화, 및 하이드록실화를 수반한다. 이에 따라, 재조합 미생물에서 게라닐게라닐 디포스페이트의 스테비올로의 전환은 카우렌 신타제 (KS)를 인코딩하는 유전자, 카우렌 옥시다제 (KO)를 인코딩하는 유전자, 및 스테비올 신타제 (KAH)를 인코딩하는 유전자의 발현을 수반한다. 스테비올 신타제는 카우렌산 13-하이드록실라제로도 알려져 있다.
적합한 KS 폴리펩티드는 공지되어 있다. 예를 들어, 적합한 KS 효소는 스테비아 레바우디아나, 제아 메이즈 (Zea mays) 및 포풀루스 트리초카르파 (Populus trichocarpa), 및 아라비돕시스 탈리아나 (Arabidopsis thaliana)에 의해 제조된 것들을 포함한다. 표 2 및 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호를 참조하라.
표 2.: 카우렌 신타제 (KS) 클론
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 작제물 명칭 길이 (nt)
스테비아 레바우디아나 4959241 AAD34295
(SEQ ID NO: 1)		 MM-12 2355
스테비아 레바우디아나 4959239 AAD34294
(SEQ ID NO: 2)		 MM-13 2355
제아 메이즈 162458963 NP_001105097
(SEQ ID NO: 3)		 MM-14 1773
포풀루스 트리초카르파 224098838 XP_002311286
(SEQ ID NO: 4)		 MM-15 2232
아라비돕시스 탈리아나 3056724 AF034774
(SEQ ID NO: 5)
AAC39443
(SEQ ID NO: 6)		 EV-70 2358
적합한 KO 폴리펩티드는 공지되어 있다. 예를 들어, 적합한 KO 효소는 스테비아 레바우디아나, 아라비돕시스 탈리아나, 깁베렐라 푸지코로이(Gibberella fujikoroi) 및 트라메테스 베르시컬러(Trametes versicolor)에 의해 제조된 것들을 포함한다. 표 3 및 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호를 참조하라.
표 3: 카우렌 옥시다제 (KO 클론)
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 작제물 명칭 길이 (nt)
스테비아 레바우디아나 76446107 ABA42921
(SEQ ID NO: 7)		 MM-18 1542
아라비돕시스 탈리아나 3342249 AAC39505
(SEQ ID NO: 8)		 MM-19 1530
깁베렐라 푸지코로이 4127832 CAA76703
(SEQ ID NO: 9)		 MM-20 1578
트라메테스 베르시컬러 14278967 BAB59027
(SEQ ID NO: 10)		 MM-21 1500
적합한 KAH 폴리펩티드는 공지되어 있다. 예를 들어, 적합한 KAH 효소는 스테비아 레바우디아나, 아라비돕시스 탈리아나, 비티스 비니페라(Vitis vinifera) 및 메디카고 트룬쿨라타(Medicago trunculata)에 의해 제조된 것들을 포함한다. 예컨대, 표 4 및 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호, 미국특허공개 2008/0271205호 및 2008/0064063호, 및 Genbank 수탁 번호 gi 189098312 (SEQ ID NO: 11) 및 GenBank 수탁 ABD60225; GI:89242710 (SEQ ID NO: 12)을 참조하라. 아라비돕시스 탈리아나로부터의 스테비올 신타제는 CYP714A2로서 분류된다.
표 4: 스테비올 신타제 ( KAH ) 클론
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 플라스미드 명칭 작제물 명칭 길이(nt)
스테비아 레바우디아나 --* (SEQ ID NO: 13) pMUS35 MM-22 1578
스테비아 레바우디아나 189418962 ACD93722
(SEQ ID NO: 14)		 pMUS36 MM-23 1431
아라비돕시스 탈리아나 15238644 NP_197872
(SEQ ID NO: 15)		 pMUS37 MM-24 1578
비티스 비니페라 225458454 XP_002282091
(SEQ ID NO: 16)		 pMUS38 MM-25 1590
메디카고 트룬쿨라타 84514135 ABC59076
(SEQ ID NO: 17)		 pMUS39 MM-26 1440
* = 서열은 미국특허공개 No. 2008-0064063에 도시된 서열 식별 번호 2로 확인된다.
또한, PCT 출원 PCT/US2012/050021호에 기재된 대로 확인된 스테비아 레바우디아나로부터의 KAH 폴리펩티드는 재조합 숙주에 특히 유용하다. S. 레바우디아나 KAH (SrKAHe1; SEQ ID NO:18)를 인코딩하는 누클레오티드 서열 및 효모에서 발현하기 위해 코돈-최적화된 S. 레바우디아나 KAH는 S. 레바우디아나 KAH (SEQ ID NO: 19)의 인코딩된 아미노산 서열인 것으로서 동일 PCT 출원에 기재되어 있다. S. 레바우디아나 KAH는 S. 세레비시애에서 발현되는 경우 야마구치 등 (Yamaguchi et al., 미국특허공개 2008/0271205호 A1)에 의해 기재된 아라비돕시스 탈리아나 ent-카우렌산 하이드록실라제와 비교하여, 현저하게 더 높은 스테비올 신타제 활성을 보여준다. S. 레바우디아나 KAH 폴리펩티드는 미국특허공개 2008/0271205호의 KAH와 20% 미만의 동일성을 지니고 미국특허공개 2008/0064063호의 KAH와 35% 미만의 동일성을 지닌다.
일부 구체예에서, 재조합 미생물은 KO 및/또는 KAH 폴리펩티드를 인코딩하는 재조합 유전자를 함유한다. 이러한 미생물은 전형적으로 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR) 폴리펩티드를 인코딩하는 재조합 유전자를 또한 함유하는데, 그 이유는 KO 및/또는 KAH 폴리펩티드의 특정 조합은 외인성 CPR 폴리펩티드의 발현을 필요로 하기 때문이다. 특히, 트랜스포터 기원의 KO 및/또는 KAH 폴리펩티드의 활성은 외인성 CPR 폴리펩티드를 인코딩하는 재조합 유전자의 포함에 의해 현저하게 증가될 수 있다. 적합한 CPR 폴리펩티드는 공지되어 있다. 예를 들어, 적합한 CPR 효소는 스테비아 레바우디아나 및 아라비돕시스 탈리아나에 의해 제조된 것들을 포함한다. 예컨대, 표 5 및 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호를 참조하라.
표 5: 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR) 클론
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 플라스미드 명칭 작제물 명칭 길이(nt)
스테비아 레바우디아나 93211213 ABB88839
(SEQ ID NO: 20)		 pMUS40 MM-27 2133
아라비돕시스 탈리아나 15233853 NP_194183
(SEQ ID NO: 21)		 pMUS41 MM-28 2079
깁베렐라 푸지쿠로이 32562989 CAE09055
(SEQ ID NO: 22)		 pMUS42 MM-29 2142
예를 들어, 스테비아 레바우디아나 KAHe1에 의해 인코딩된 스테비올 신타제는 유전자 NCP1 (YHR042W)에 의해 인코딩된 S. 세레비시애 CPR에 의해 활성화된다. SrKAHe1에 의해 인코딩된 스테비올 신타제의 더욱 우수한 활성화는 유전자 ATR2 (SEQ ID NO: 99)에 의해 인코딩된 아라비돕시스 탈리아나 CPR 또는 유전자 CPR7 (SEQ ID NO: 23) 또는 CPR8 (SEQ ID NO: 24)에 의해 인코딩된 S. 레바우디아나 CPR이 공동-발현되는 경우 관찰된다. A. 탈리아나 폴리펩티드 ATR1 (SEQ ID NO: 25) 및 ATR2 (SEQ ID NO: 26) 및 S. 레바우디아나 CPR7 (SEQ ID NO: 27) 및 CPR8 (SEQ ID NO: 28) 폴리펩티드의 아미노산 서열은 PCR 출원 PCT/US2012/050021호에 도시되어 있다.
재조합 미생물에서 이러한 유전자의 발현은 게라닐게라닐 디포스페이트를 스테비올로 전환시킬 수 있다.
B. 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드
상기 기술된 수송 돌연변이에 더하여, 본원에 기술된 바와 같은 숙주 세포는 스테비올을 스테비올 글리코시드로 전환시킬 수 있다. 이러한 숙주 (예를 들어, 미생물)은 UGT로도 알려진 하나 이상의 UDP 글리코실 트랜스퍼라제를 인코딩하는 유전자를 함유한다. UGT는 활성화된 누클레오티드 당으로부터의 모노사카라이드 단위체를 수용체 모이어티, 본 경우에 스테비올 상의 -OH 또는 -COOH 모이어티, 스테비올 글리코시드 상의 글루코스 모이어티 또는 스테비올 유도체에 전달한다. UGT는 서열 상동성에 기반하여 패밀리 및 서브패밀리로 분류되었다. 문헌[Li et al., J. Biol. Chem. 276:4338-4343 (2001)].
B.1 루부소시드 생합성 폴리펩티드
루부소시드의 생합성은 스테비올의 13-OH 및 19-COOH의 글리코실화를 수반한다. 도 1을 참조하라. 미생물과 같은 재조합 숙주에서 스테비올의 루부소시드로의 전환은 글루코스 단위체를 스테비올의 각각 13-OH 또는 19-COOH로 전달하는 UGT 85C2 및 74G1을 인코딩하는 유전자(들)의 발현에 의해 달성될 수 있다.
적합한 UGT85C2는 우리딘 5'-디포스포 글루코실:스테비올 13-OH 트랜스퍼라제, 및 우리딘 5'-디포스포 글루코실:스테비올-19-O-글루코시드 13-OH 트랜스퍼라제로서 기능한다. 기능성 UGT85C2 폴리펩티드는 또한 스테비올 및 스테비올-19-O-글루코시드 이외의 스테비올 글리코시드 기질을 이용하는 글루코실 트랜스퍼라제 반응을 촉매작용할 수 있다.
적합한 UGT74G1 폴리펩티드는 우리딘 5'-디포스포 글루코실: 스테비올 19-COOH 트랜스퍼라제 및 우리딘 5'-디포스포 글루코실: 스테비올-13-O-글루코시드 19-COOH 트랜스퍼라제로서 기능한다. 기능성 UGT74G1 폴리펩티드는 또한 스테비올 및 스테비올-13-O-글루코시드 이외의 스테비올 글리코시드 기질을 이용하거나, 우리딘 디포스페이트 글루코스 이외의 공여체로부터 당 모이어티를 전달하는 글루코실 트랜스퍼라제 반응을 촉매작용할 수 있다.
기능성 UGT74G1 및 기능성 UGT85C2를 발현하는 재조합 미생물은 스테비올이 배지에서 공급원료로서 사용될 때 루부소시드 및 두 스테비올 모노시드 모두 (즉, 스테비올 13-O-모노글루코시드 및 스테비올 19-O-모노글루코시드)를 만들 수 있다. 이러한 유전자 중 하나 이상은 숙주에서 천연으로 존재할 수 있다. 그러나, 전형적으로, 이러한 유전자는 자연적으로 이들을 지니지 않는 숙주 (예컨대, 미생물)로 형질전환된 재조합 유전자이다.
본원에서 사용되는 용어 재조합 숙주는 숙주로서, 이의 유전체가 적어도 하나의 혼입된 DNA 서열에 의해 보강된 숙주를 나타내는 것으로 의도된다. 그러한 DNA 서열은 자연적으로 존재하지 않는 유전자, RNA로 일반적으로 전사되지 않거나 단백질로 번역("발현")되지 않는 DNA 서열, 및 비재조합 숙주에 도입하고자 하는 그 밖의 유전자 또는 DNA 서열을 포함하나 이로 제한되는 것은 아니다. 본원에 기재된 재조합 숙주의 유전체는 전형적으로 하나 이상의 재조합 유전자의 안정적인 도입을 통하여 보강되는 것이 이해될 것이다. 일반적으로, 도입된 DNA는 그 DNA의 수용체인 숙주에 원래 존재하는 것은 아니지만, 주어진 숙주로부터 DNA 세그먼트를 단리시키고, 후속하여 동일한 숙주 안에 그 DNA의 하나 이상의 추가적인 복사체를 도입시켜, 예컨대 유전자 생성물의 생성을 향상시키거나 유전자의 발현 패턴을 변경시키는 것은 본 발명의 범위 내에 있다. 일부 예에서, 도입된 DNA는, 예를 들어 상동 재조합 또는 부위-특이적 돌연변이유발에 의해 내인성 유전자 또는 DNA 서열을 변형시키거나 심지어 대체할 수 있다. 적합한 재조합 숙주는 미생물을 포함한다.
용어 "재조합 유전자"는, 동일하거나 유사한 유전자 또는 DNA 서열이 이미 그러한 숙주에 존재할 수 있는 것과 무관하게, 수용체 숙주에 도입되는 유전자 또는 DNA 서열을 의미한다. 이러한 문맥에서 "도입"되거나 "보강된"은 사람의 손에 의해 도입되거나 보강되는 것을 의미함이 당 분야에 알려져 있다. 따라서, 재조합 유전자는 또 다른 종으로부터의 DNA 서열일 수 있거나, 동일한 종으로부터 기원하거나 동일한 종에 존재하는 DNA 서열일 수 있으나, 이는 재조합 숙주를 형성하기 의해 재조합 방법에 숙주에 혼입되었다. 숙주에 도입되는 재조합 유전자는 형질전환되는 숙주에 일반적으로 존재하고, DNA의 하나 이상의 추가적인 복사체를 제공하기 위해 도입되어 그 DNA의 유전자 생성물의 과다발현 또는 변형된 발현을 허용하는 DNA 서열과 동일할 수 있음이 이해될 것이다.
적합한 UGT74G1 및 UGT85C2 폴리펩티드는 S. 레바우디아나에 의해 제조된 것들을 포함한다. 스테비아로부터 기능성 UGT74G1 및 UGT85C2 폴리펩티드를 인코딩하는 유전자는 문헌[Richman et al., Plant J. 41: 56-67, (2005)]에서 보고된다. S. 레바우디아나 UGT74G1 (SEQ ID NO: 29) 및 UGT85C2 (SEQ ID NO: 30) 폴리펩티드의 아미노산 서열은 PCT 출원 PCT/US2012/050021호의 서열 식별 번호 1 및 3에 각각 제시되어 있다. 효모에서의 발현에 최적화된 UGT74G1 (SEQ ID NO: 100) 및 UGT85C2(SEQ ID NO: 31)는 물론 UGT 서열, 예를 들어, UGT 85C2 (SEQ ID NO: 32), 91D2e, 91D2e-b, EUGT11 및 76G1을 인코딩하는 누클레오티드 서열이 제공된다. 또한, "기능성 호몰로그"섹션에 하기 기재된 UGT85C2 및 UGT74G1 변이체를 참조하라. 예를 들어, 위치 65, 71, 270, 289, 및 389에서 치환을 함유할 수 있는 UGT85C2 폴리펩티드가 사용될 수 있다 (예컨대, A65S, E71Q, T270M, Q289H, 및 A389V).
일부 구체예에서, 재조합 숙주는 미생물이다. 재조합 미생물은 루부소시드를 생성하기 위하여 스테비올을 함유하는 배지에서 성장할 수 있다. 다른 구체예에서, 그러나, 재조합 미생물은 스테비올 생합성에 관련된 하나 이상의 재조합 유전자, 예컨대, CDPS 유전자, KS 유전자, KO 유전자, 및/또는 KAH 유전자를 발현시킨다. 적합한 CDPS 폴리펩티드가 공지되어 있다.
예를 들어, 적합한 CDPS 효소는 스테비아 레바우디아나, 스트렙토마이세스 클라불리게루스(Streptomyces clavuligerus), 브라디리조비움 자포니쿰(Bradyrhizobium japonicum), 제아 메이즈, 및 아라비돕시스에 의해 제조된 것들을 포함한다. 예컨대, 표 6 및 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호를 참조하라.
일부 구체예에서, 변형되지 않은 폴리펩티드의 아미노 말단에서 엽록체 운반 펩티드가 결여된 CDPS 폴리펩티드를 이용할 수 있다. 예를 들어, PCT 공개 번호 PCT/US2012/050021의 도 14에 도시된 제아 메이즈 CDPS 코딩 서열의 5' 말단으로부터 처음 150개 누클레오티드가 제거될 수 있다. 이렇게 함으로써 엽록체 운반 펩티드를 인코딩하는 아미노산 서열의 아미노 말단 50개 잔기가 제거된다. 절두된 CDPS 유전자는 새로운 ATG 번역 개시 부위에 핏팅되어, 프로모터, 전형적으로 항시성 또는 고도 발현성 프로모터에 작동적으로 연결될 수 있다. 절두된 코딩 서열의 복수의 복사체가 미생물에 도입될 때, 프로모터로부터 CDPS 폴리펩티드의 발현은 ent-카우렌 생합성을 향한 증가된 탄소 유동을 발생시킨다.
표 6: CDPS 클론
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 플라스미드 명칭 작제물 명칭 길이(nt)
스테비아 레바우디아나 2642661 AAB87091
(SEQ ID NO: 33)		 pMUS22 MM-9 2364
스트렙토마이세스 클라불리게루스 197705855 EDY51667
(SEQ ID NO: 34)		 pMUS23 MM-10 1584
브라디리조비움 자포니쿰 529968 AAC28895.1
(SEQ ID NO: 35)		 pMUS24 MM-11 1551
제아 메이즈 50082774

50082775
 AY562490
(SEQ ID NO: 36)
AAT70083
(SEQ ID NO: 37)		 EV65 2484
아라비돕시스 탈리아나 18412041

15235504		 NM_116512
(SEQ ID NO: 38)
NP_192187
(SEQ ID NO: 39)		 EV64 2409
CDPS-KS 이기능성 단백질도 이용될 수 있다. 표 7에 제시된 CDPS-KS 이기능성 효소를 인코딩하는 누클레오티드 서열은 효모에서의 발현을 위해 변형되었다 (PCT 출원 PCT/US2012/050021호를 참조하라). 깁베렐라 푸지쿠로이로부터의 이기능성 효소도 이용될 수 있다.
표 7: CDPS -KS 클론
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 작제물 명칭 길이
(bp)
포몹시스 아미그달리 (Phomopsis amygdali ) 186704306 BAG30962
(SEQ ID NO: 40)		 MM-16 2952
피스코미트렐라 파텐스 146325986 BAF61135
(SEQ ID NO: 41)		 MM-17 2646
깁베렐라 푸지쿠로이 62900107 Q9UVY5.1
(SEQ ID NO: 42)		 2859
따라서, UGT74G1 및 UGT85C2 유전자 외에 CDPS 유전자, KS 유전자, KO 유전자 및 KAH 유전자를 함유하는 미생물은 공급원료로서 스테비올을 사용할 필요 없이 스테비올 모노시드 및 루부소시드 둘 모두를 생성할 수 있다.
일부 구체예에서, 재조합 미생물은 게라닐게라닐 디포스페이트 신타제 (GGPPS)를 인코딩하는 재조합 유전자를 추가로 발현시킨다. 적합한 GGPPS 폴리펩티드는 공지되어 있다. 예를 들어, 적합한 GGPPS 효소는 스테비아 레바우디아나, 깁베렐라 푸지쿠로이, 무스 무스쿨루스(Mus musculus), 탈라시오시라 슈도나나(Thalassiosira pseudonana), 스트렙토마이세스 클라불리게루스, 술풀로부스 아시도칼다리우스(Sulfulobus acidocaldarius), 시네초코쿠스 종 및 아라비돕시스 탈리아나에 의해 제조된 것들을 포함한다. 표 8 및 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호를 참조하라.
표 8: GGPPS 클론
효소 공급 유기체 gi 번호 수탁 번호 플라스미드 명칭 작제물 명칭 길이(nt)
스테비아 레바우디아나 90289577 ABD92926
(SEQ ID NO: 43)		 pMUS14 MM-1 1086
깁베렐라 푸지쿠로이 3549881 CAA75568
(SEQ ID NO: 44)		 pMUS15 MM-2 1029
무스 무스쿨루스 47124116 AAH69913
(SEQ ID NO: 45)		 pMUS16 MM-3 903
탈라시오시라 슈도나나 223997332 XP_002288339
(SEQ ID NO: 46)		 pMUS17 MM-4 1020
스트렙토마이세스 클라불리게루스 254389342 ZP_05004570
(SEQ ID NO: 47)		 pMUS18 MM-5 1068
술풀로부스 아시도칼다리우스 506371 BAA43200
(SEQ ID NO: 47)		 pMUS19 MM-6 993
시네초코쿠스 종 86553638 ABC98596
(SEQ ID NO: 49)		 pMUS20 MM-7 894
아라비돕시스 탈리아나 15234534 NP_195399
(SEQ ID NO: 50)		 pMUS21 MM-8 1113
일부 구체예에서, 재조합 미생물은 디테르펜 생합성 또는 테르페노이드 전구체의 생성에 관여하는 재조합 유전자, 예컨대, 하기에서 논의된 메틸에리트리톨 4-포스페이트 (MEP) 경로의 유전자 또는 메발로네이트 (MEV) 경로의 유전자를 추가로 발현시키고/거나, 감소된 포스파타제 활성을 갖고/거나, 본원에서 논의된 수크로스 신타제 (SUS)를 발현시킬 수 있다. 다른 구체예에서, 내인성 유전자 (예를 들어, DPP1)는 일부 GGPP/FPP 전구체의 이용가능성에 영향을 끼치기 위해 불활성화되거나 결실될 수 있다.
B.2 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시 드 E, 및 레바우디오시드 M 생합성 폴리펩티드
레바우디오시드 A의 생합성은 아글리콘 스테비올(aglycone steviol)의 글루코실화를 수반한다. 특히, 레바우디오시드 A는 13-O-스테비올모노시드를 형성하는 스테비올의 13-OH의 글루코실화, 스테비올-1,2-비오시드를 형성하는 스테비올모노시드의 13-O-글루코스의 C-2'의 글루코실화, 스테비오시드를 형성하는 스테비올-1,2-비오시드의 C-19 카르복실의 글루코실화, 및 스테비오시드의 C-13-O-글루코스의 C-3'의 글루코실화에 의해 형성될 수 있다. 각 글리코실화 반응이 일어나는 순서는 변화될 수 있다. 도 1을 참조하라.
레바우디오시드 B의 생합성은 아글리콘 스테비올의 글루코실화를 포함한다. 구체적으로, 레바우디오시드 B는 13-O-스테비올모노시드를 형성하는 스테비올의 13-OH의 글루코실화, 스테비올-1,2-비오시드를 형성하는 스테비올모노시드의 13-O-글루코스의 C-2'의 글루코실화, 및 스테비올-1,2-비오시드의 C-13-O-글루코스의 C-3'의 글루코실화에 의해 형성될 수 있다. 각 글루코실화 반응이 발생하는 순서는 변화될 수 있다.
레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 D의 생합성은 아글리콘 스테비올의 글루코실화를 수반한다. 구체적으로, 레바우디오시드 E는 스테비올-13-O-글루코시드를 형성하는 스테비올의 13-OH의 글루코실화, 스테비올-1,2-비오시드를 형성하는 스테비올-13-O-글루코시드의 13-O-글루코스의 C-2'의 글루코실화, 1,2-스테비오시드를 형성하는 1,2-비오시드의 C-19 카르복실의 글루코실화, 및 레바우디오시드 E를 형성하는 1,2-스테비오시드의 19-O-글루코스의 C-2'의 글루코실화에 의해 형성될 수 있다. 레바우디오시드 D는 레바우디오시드 E의 C-13-O-글루코스의 C-3'의 글루코실화에 의해 형성될 수 있다. 각 글리코실화 반응이 일어나는 순서는 변화될 수 있다. 예를 들어, 19-O-글루코스의 C-2'의 글루코실화가 경로의 마지막 단계일 수 있고, 이 때 레바우디오시드 A는 경로의 중간체이다. 도 1을 참조하라.
재조합 숙주에서 스테비올의 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 M, 및/또는 레바우디오시드 E로의 전환이 하기 기능성 UGT를 발현함으로써 달성될 수 있음이 밝혀졌다: EUGT11, 91D2, 74G1, 85C2, 및 76G1. 따라서, 이들 UGT의 조합물을 발현하는 재조합 미생물은 스테비올이 공급원료로서 사용되는 경우 레바우디오시드 A 및 레바우디오시드 D를 제조할 수 있다. 전형적으로, 이들 유전자들 중 하나 이상은 자연적으로는 이들을 지니지 않는 미생물 내로 형질전환된 재조합 유전자이다. 또한, SM12UGT로서 본원에 지정된 UGT는 UGT91D2 대신에 치환될 수 있음이 밝혀졌다.
일부 구체예에서, 5개 미만 (예를 들어, 1, 2, 3 또는 4개)의 UGT가 숙주에서 발현된다. 예를 들어, 기능성 EUGT11을 발현하는 재조합 미생물은 공급원료로서 레바우디오시드 A가 사용되는 경우 레바우디오시드 D를 제조할 수 있다. UGT 85C, 91D2e 또는 EUGT11, 그러나 바람직하게는, 91D2e, 및 76G1를 발현하는 재조합 미생물은 레바우디오시드 B를 제조할 수 있다. EUGT11, 76G1, 및 91D12 (예를 들어, 91D2e)를 발현하는 재조합 미생물은 루부소시드 또는 1,2-스테비오시드가 공급원료로서 사용되는 경우 레바우디오시드 D를 제조할 수 있다. 또 다른 대안으로서, 3개의 기능성 UGT 즉, EUGT11, 74G1, 76G1 및 임의적으로 91D2를 발현하는 재조합 미생물이 매질중에 모노시드, 스테비올-13-O-글루코시드가 공급될 경우 레바우디오시드 D를 제조할 수 있다. 유사하게는, 재조합 미생물에서 스테비올-19-O-글루코시드의 레바우디오시드 D로의 전환은 스테비올-19-O-글루코시드가 공급될 경우, UGT EUGT11, 85C2, 76G1, 및 91D2 (예를 들어, 91D2e)을 인코딩하는 유전자의 발현에 의해 달성될 수 있다. 전형적으로, 이들 유전자 중 하나 이상은 자연적으로는 이들을 지니지 않는 숙주내로 형질전환된 재조합 유전자이다.
레바우디오시드 M 폴리펩티드
재조합 숙주에서 스테비올의 레바우디오시드 M으로의 전환은 하기 기능성 UGT 91D2, EUGT11, 74G1, 85C2, 및 76G1의 조합물을 발현시킴에 의해 달성될 수 있다. 도 1을 참조하라. 높은 복사체수 플라스미드를 이용하거나, 강한 프로모터, 또는 다수의 통합된 유전자의 복사체, 또는 에피솜을 높은 복사체수의 유전자를 위한 선택 하에 이용하여 EUGT11을 높은 수준으로 발현시키는 것이 특히 유용하다. 따라서, 이러한 UGT의 조합물을 발현시키는 재조합 미생물은 레바우디오시드 A (85C2; 76G1; 74G1; 91D2e), 레바우디오시드 D (85C2; 76G1; 74G1; 91D2e; EUGT11), 레바우디오시드 E (85C2; 74G1; 91D2e; EUGT11), 또는 레바우디오시드 M (85C2; 76G1; 74G1; 91D2e; EUGT11)을 제조할 수 있다. 도 1을 참조하라. 전형적으로, 이러한 유전자 중 하나 이상은 자연적으로 이들을 지니지 않는 미생물로 형질전환된 재조합 유전자이다. 또한, 본원에서 SM12UGT로서 지정된 UGT는 UGT91D2를 대신하여 치환될 수 있음이 발견되었다.
도 1에 도시된 바와 같은 개별적인 레바우디오시드의 표적화 생성은 UDP-글리코실 트랜스퍼라제 활성의 상대적 수준을 제어함으로써 달성된다. 이는 UGT-인코딩 유전자의 차별적인 복사체 수, 차별적인 프로모터 강도에 의해, 및/또는 관심 생성물로의 증가된 특이성/활성을 갖는 돌연변이체를 이용함에 의해 달성될 수 있다. 도 1 참조하라. 예를 들어, EUGT11이 다른 UGT에 비해 낮은 수준으로 발현되는 경우 낮은 수준의 레바우디오시드 D, E, 및 M이 형성되어, 레바우디오시드 A 형성을 촉진할 것이다. 높은 수준의 EUGT11 발현은 레바우디오시드 M을 형성하기 위해 반응할 UGT76G1에 대한 더 많은 19-O 1,2 디글루코시드 기질을 발생시킨다. 이는 UGT76G1 폴리펩티드의 선호되는 활성이 아니기 때문에, UGT76G1의 추가적인 복사체 또는 변이체 버젼이 레바우디오시드 D로부터 레바우디오시드 M 형성 속도를 증가시킬 수 있다. 적합한 UGT76G1은 또한 수용체 분자의 19-O 글루코스의 C-3'로의 글루코스 모이어티의 전달을 촉매작용하며, 여기서 수용체 분자는 스테비올의 19-O 위치에서 1,2 글리코시드 모이어티를 함유할 수 있다.
적합한 UGT74G1 및 UGT85C2 폴리펩티드는 상기 논의된 것들을 포함한다. 적합한 UGT76G1은 글루코스 모이어티를 수용체 분자, 스테비올 1,2 글리코시드의 C-13-O-글루코스의 C-3'에 첨가한다. 이에 따라, UGT76G1은, 예를 들어, 우리딘 5'-디포스포 글루코실: 스테비올 13-O-1,2 글루코시드 C-3' 글루코실 트랜스퍼라제 및 우리딘 5'-디포스포 글루코실: 스테비올-19-O-글루코스, 13-O-1,2 비오시드 C-3' 글루코실 트랜스퍼라제로서 기능한다. 기능성 UGT76G1 폴리펩티드는 또한 글루코스 이외의 당을 함유하는 스테비올 글리코시드 기질을 이용하는 글루코실 트랜스퍼라제 반응을 촉매작용할 수 있다. 적합한 UGT76G1 폴리펩티드는 S. 레바우디아나에 의해 제조되고 문헌[Richman et al. Plant J. 41: 56-67 (2005)]에 보고된 것들을 포함한다. S. 레바우디아나 UGT76G1 폴리펩티드의 아미노산 서열 (예를 들어, SEQ ID NO: 85)은 UGT76G1 폴리펩티드를 인코딩하고 효모에서의 발현에 최적화된 누클레오티드 서열로서, PCT 공개 번호 PCT/US2012/050021에 제시되어 있다. 또한 "기능성 호몰로그" 섹션에 제시된 UGT76G1 변이체를 참조하라.
적합한 EUGT11 또는 UGT91D2 폴리펩티드는 우리딘 5'-디포스포 글루코실: 스테비올-13-O-글루코시드 트랜스퍼라제 (스테비올-13-모노글루코시드 1,2-글루코실라제로도 언급됨)로서 기능하여, 글루코스 모이어티를 수용체 분자, 스테비올-13-O-글루코시드의 13-O-글루코스의 C-2'에 전달한다.
적합한 EUGT11 또는 UGT91D2 폴리펩티드는 또한 글루코스 모이어티를 수용체 분자, 루부소시드의 13-O-글루코스의 C-2'에 전달하여 스테비오시드를 생성하는 우리딘 5'-디포스포 글루코실: 루부소시드 트랜스퍼라제로서 기능한다. EUGT11 폴리펩티드는 또한 글루코스 모이어티를 수용체 분자, 루부소시드의 19-O-글루코스의 C-2'에 효율적으로 전달하여 19-O-1,2-디글리코실화된 루부소시드를 생성할 수 있다. EUGT11은 19-O-글루코스 치환된 스테비올 글리코시드 분자로의 글루코스 분자의 전달에 특히 효율적이다.
기능성 EUGT11 또는 UGT91D2 폴리펩티드는 또한 스테비올-13-O-글루코시드 및 루부소시드 이외의 스테비올 글리코시드 기질을 이용하는 반응을 촉매작용시킬 수 있다. 예를 들어, 기능성 EUGT11 폴리펩티드는 기질로서 스테비오시드를 효율적으로 이용하여, 글루코스 모이어티를 19-O-글루코스 잔기의 C-2'에 전달함으로써 레바우디오시드 E를 생성할 수 있다. 기능성 EUGT11 및 UGT91D2 폴리펩티드는 또한 기질로서 레바우디오시드 A를 이용하여, 글루코스 모이어티를 레바우디오시드 A의 19-O-글루코스 잔기의 C-2'에 전달함으로써 레바우디오시드 D를 생성할 수 있다. EUGT11 (SEQ ID NO: 51)은 반응이 유사한 조건 즉, 유사한 시간, 온도, 순도, 및 기질 농도 하에 수행될 때 상응하는 UGT91D2e (SEQ ID NO: 54)의 속도보다 적어도 20배 더 빠른 속도로 (예컨대, 적어도 25배 또는 적어도 30배 더 빠름) 레바우디오시드 A를 레바우디오시드 D로 전환시킬 수 있다. 이와 같이, EUGT11은 유사한 조건 하에 인큐베이션되는 경우, UGT91D2e 보다 많은 양의 RebD를 생성한다.
또한, 기능성 EUGT11은 기질로서 루부소시드 또는 스테비오시드 이용시 상당한 C-2' 19-O-디글리코실화 활성을 나타내는 반면, UGT91D2e는 이러한 기질에 의해 디글리코실화 활성을 덜 갖는다. 따라서, 기능성 EUGT11은 스테비올 글리코시드 기질-특이성에서의 차이에 의해 UGT91D2e와 구별될 수 있다.
기능성 EUGT11 또는 UGT91D2 폴리펩티드는 전형적으로, 글루코스 모이어티를 C-13 위치에 1,3-결합된 글루코스를 갖는 스테비올 화합물에 전달하지 않으며, 즉 스테비올-1,3-비오시드 및 1,3-스테비오시드로의 글루코스 모이어티의 전달은 대부분의 조건하에서 검출가능한 수준으로 발생하지 않는다.
적합한 EUGT11 폴리펩티드가 오리자 사티바 (Oryza sativa)로부터의 EUGT11 폴리펩티드 (GenBank 수탁 번호 AC133334; SEQ ID NO:51)를 포함할 수 있다. 예를 들어, EUGT11 폴리펩티드는 SEQ ID NO:51에 개시된 아미노산 서열과 적어도 70% 서열 동일성 (예컨대, 적어도 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 또는 99% 서열 동일성)을 갖는 아미노산 서열을 지닐 수 있다. EUGT11의 아미노산 서열을 인코딩하는 누클레오티드 서열은 또한 SEQ ID NO:52에 개시되며, 효모에서의 발현에 코돈 최적화된 누클레오티드 서열과 같다 (SEQ ID NO:53).
적합한 기능성 UGT91D2 폴리펩티드는 UGT91D2e 및 UGT91D2m로 지정된 폴리펩티드를 포함한다. 스테비아 레바우디아나로부터의 예시적인 UGT91D2e 폴리펩티드의 아미노산 서열은 SEQ ID NO:54 (PCT 출원 PCT/US2012/050021의 누클레오티드 서열 식별 번호 5에 의해 인코딩됨)로 개시되며, 이는 또한 폴리펩티드를 인코딩하는 S. 레바우디아나 누클레오티드 서열, 폴리펩티드를 인코딩하고 효모 발현을 위해 코돈 최적화된 누클레오티드 서열 (SEQ ID NO:158), S. 레바우디아나로부터의 예시적인 UGT91D2m 폴리펩티드의 아미노산 서열, 및 예시적인 UGT91D2m 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 개시한다. 예시적인 UGT91D2m의 아미노산 서열은 SEQ ID NO:55에 제시되어 있다. 아미노산 잔기 206, 207, 및 343에서 치환을 함유하는 UGT91D2 변이체가 또한, 이용될 수 있다. 예를 들어, 야생형 UGT92D2e에 비해 G206R, Y207C, 및 W343R 돌연변이를 갖는 아미노산 서열이 이용될 수 있다. 또한, 아미노산 잔기 211 및 286에 치환을 함유하는 UGT91D2 변이체가 이용될 수 있다. 예를 들어, UGT91D2 변이체는 위치 211에 류신을 대신한 메티오닌의 치환 및 위치 286에 발린을 대신한 알라닌의 치환을 포함할 수 있다. 또한, "기능성 호몰로그" 섹션에 기술된 UGT91D2 변이체를 참조하라.
상기에서 지시된 바와 같이, 본원에서 SM12UGT로서 지정된 UGT는 UGT91D2를 대신에 치환될 수 있다. 적합한 기능성 SM12UGT 폴리펩티드는 이포모에아 푸르푸레아(Ipomoea purpurea)(일본산 나팔꽃)에 의해 제조되고 문헌[Morita et al. Plant J. 42: 353-363 (2005)]에 기재된 것들을 포함한다. I. 푸르푸레아 IP3GGT 폴리펩티드를 인코딩하는 아미노산 서열 (SEQ ID NO: 56)이 PCT 출원 번호 PCT/US2012/050021의 서열 식별 번호 76을 사용하여 제시되며, 이는 폴리펩티드를 인코딩하며 효모에서의 발현에 코돈 최적화된 누클레오티드 서열 (SEQ ID NO: 57)이다. 또 다른 적합한 SM12UGT 폴리펩티드는 R25S 돌연변이를 갖는 Bp94B1 폴리펩티드이다. 문헌 [Osmani et al. Plant Phys. 148: 1295-1308 (2008) and Sawada et al. J. Biol. Chem. 280: 899-906 (2005)]을 참조하라. 벨리스 페렌니스(Bellis perennis)(붉은 데이지) UGT94B1 폴리펩티드의 아미노산 서열 (SEQ ID NO: 58)은 PCT 출원 번호 PCT/US2012/050021에서 서열 식별 번호 78을 사용하여 제시되며, 이는 폴리펩티드를 인코딩하며 효모에서의 발현에 코돈 최적화된 누클레오티드 서열 (SEQ ID NO: 59)이다.
일부 구체예에서, 재조합 미생물은 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 M을 생성하기 위해 스테비올-13-O-글루코시드 또는 스테비올-19-O-글루코시드를 함유하는 배지에서 성장한다. 그러한 구체예에서, 미생물은 기능성 EUGT11, 기능성 UGT74G1, 기능성 UGT85C2, 기능성 UGT76G1, 및 기능성 UGT91D2를 인코딩하는 유전자를 함유하고 발현시키며, 스테비올, 하나 또는 둘 모두의 스테비올모노시드, 또는 루부소시드가 공급원료로서 이용될 때 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 M을 축적시킬 수 있다.
다른 구체예에서, 재조합 미생물은 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 M을 생성하기 위하여 루부소시드를 함유하는 배지에서 성장한다. 그러한 구체예에서, 미생물은 기능성 EUGT11, 기능성 UGT76G1, 및 기능성 UGT91D2를 인코딩하는 유전자를 함유하고 발현시키며, 루부소시드가 공급원료로서 이용될 때 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 M을 생성시킬 수 있다.
다른 구체예에서, 재조합 미생물은 스테비올 생합성에 관련된 하나 이상의 유전자, 예컨대, CDPS 유전자, KS 유전자, KO 유전자 및/또는 KAH 유전자를 발현시킨다. 이에 따라, 예를 들어, EUGT11, UGT74G1, UGT85C2, UGT76G1, 및 임의적으로, 기능성 UGT91D2 (예컨대, UGT91D2e) 외에 CDPS 유전자, KS 유전자, KO 유전자 및 KAH 유전자를 함유하는 미생물은 배양 배지에 스테비올을 포함시킬 필요 없이 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 M을 생성할 수 있다. 또 다른 예에서, UGT74G1, UGT85C2, UGT76G1, 및 임의적으로 기능적 UGT91D2 (예를 들어, UGT91D2e)에 더하여 CDPS 유전자, KS 유전자, KO 유전자 및 KAH 유전자를 함유하는 미생물은 배양 배지에 스테비올을 포함시킬 필요없이 레바우디오시드 A를 생성할 수 있다. 추가의 또 다른 예에서, UGT85C2, UGT76G1, 및 임의적으로, 기능적 UGT91D2 (예를 들어, UGT91D2e)에 더하여, CDPS 유전자, KS 유전자, KO 유전자 및 KAH 유전자를 함유하는 미생물은 배양 배지에 스테비올을 포함시킬 필요없이 레바우디오시드 B를 생성할 수 있다.
일부 구체예에서, 재조합 숙주는 스테비올 생합성 경로를 통한 증가된 유동을 위하여 디테르펜 전구체 게라닐게라닐 디포스페이트의 증가된 수준을 제공하기 위해 재조합 GGPPS 유전자를 추가로 함유하고 발현한다.
일부 구체예에서, 재조합 숙주는 게라닐게라닐 디포스페이트, ent-카우렌산 또는 파르네실 피로포스페이트를 소비하는 비-스테비올 경로의 발현에 침묵하여, 스테비올 및 스테비올 글리코시드 생합성 경로를 통한 증가된 유동을 제공하는 작제물을 추가로 함유한다. 예를 들어, 에르고스테롤과 같은 스테롤 생성 경로로의 유동은 ERG9 유전자의 하향조절에 의해 감소될 수 있다. 하기 섹션 C.4을 참조하라. 깁베렐린을 생성하는 세포에서, 깁베렐린 합성은 스테비올로의 ent-카우렌산의 유동을 증가시키기 위해 하향조절될 수 있다. 카로테노이드-생성 유기체에서, 스테비올로의 유동은 하나 이상의 카로테노이드 생합성 유전자의 하향조절에 의해 증가될 수 있다. 일부 구체예에서, 재조합 미생물은 추가로 디테르펜 생합성 또는 테르페노이드 전구체의 생성에 관여하는 재조합 유전자, 예컨대, MEP 또는 MEV 경로에서의 유전자를 추가로 발현시키고/거나, 감소된 포스파타제 활성을 갖고/거나, SUS를 발현시킬 수 있다.
당 업계의 숙련자는 상이한 UGT 유전자들의 상대적 발현 수준을 변경시킴으로써, 재조합 숙주가 소정의 비율로 스테비올 글리코시드 생성물을 특정하게 생성하도록 만들 수 있다는 것을 인지할 것이다. 스테비올 생합성 유전자 및 스테비올 글리코시드 생합성 유전자의 전사 조절은 당 업자에게 공지된 기술들을 이용하여 전사 활성 및 억제의 조합을 통해 달성할 수 있다. 시험관 내 반응의 경우, 당업계의 숙련자는 상이한 수준의 UGT 효소들을 조합하여 첨가 또는 상이한 UGTS의 상대적 활성들에 영향을 주는 조건들을 조합하여 각 스테비올 글리코시드의 소정의 비율을 위한 생합성을 지시할 것임을 인지할 것이다. 당 업계의 숙련자는 레바우디오시드 D 또는 E의 보다 높은 비율, 또는 레바우디오시드 D 또는 E로 보다 효과적인 전환은 13-O-글루코시드 반응 (기질 레바우디오시드 A 및 스테비오시드)와 비교하여 19-O-글루코시드 반응 동안 보다 높은 활성을 갖는 디글리코실화 효소를 사용하여 수득될 수 있음을 인지할 것이다.
일부 구체예에서, 미생물과 같은 재조합 숙주는 총 스테비올 글리코시드중량에 대해 적어도 3% 초과의 레바우디오시드 D, 예를 들어 적어도 4% 레바우디오시드 D, 적어도 5%의 레바우디오시드 D, 10 내지 20% 레바우디오시드 D, 20 내지 30%의 레바우디오시드 D, 30 내지 40%의 레바우디오시드 D, 40 내지 50%의 레바우디오시드 D, 50 내지 60%의 레바우디오시드 D, 60 내지 70%의 레바우디오시드 D, 70 내지 80%의 레바우디오시드 D를 갖는 레바우디오시드 D-풍부 스테비올 글리코시드 조성물을 생성한다.
일부 구체예에서, 미생물과 같은 재조합 숙주는 적어도 90%의 레바우디오시드 D, 예를 들어 90 내지 99%의 레바우디오시드 D를 갖는 스테비올 글리코시드 조성물을 생성한다. 존재하는 기타 스테비올 글리코시드는 스테비올 모노시드, 스테비올 글루코비오시드, 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 E, 및 스테비오시드를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 숙주 (예를 들어, 미생물)로부터 생성된 레바우디오시드 D-풍부 조성물은 또한 추가로 정제될 수 있고, 그렇게 정제된 레바우디오시드 D 또는 레바우디오시드 E는 이후 소정의 향미 시스템 또는 감미 조성물을 수득하기 위해 다른 스테비올 글리코시드, 향료 또는 감미료와 혼합될 수 있다. 예를 들어, 재조합 숙주에 의해 생성된 레바우디오시드 D-풍부 조성물은 상이한 재조합 숙주에 의해 생성된 레바우디오시드 A 또는 F-풍부 조성물, 스테비아 추출물로부터 정제된 레바우디오시드 A 또는 F, 또는 시험관 내에서 생성된 레바우디오시드 A 또는 F와 조합될 수 있다.
일부 구체예에서, 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E 및/또는 레바우디오시드 M은 식물 추출물로부터 유래된 스테비올 글리코시드의 혼합물을 포함하는, 스테비올 및/또는 스테비올 글리코시드와 같은 전구체 분자를 함유하는 원재료(raw materials)에 공급되는 전체 재조합 세포를 이용하여 생성될 수 있으며, 여기에서 상기 재조합 세포는 모든 UGT 폴리펩티드 또는 이의 적절한 조합을 발현하여 상기 스테비올의 각각의 특정 글루코실화된 레바우디오시드로의 글루코실화를 수행한다. 일부 구체예에서, 재조합 세포는 투과제를 첨가할 필요 없이 레바우디오시드를 효과적으로 분비하도록 선택적으로 트랜스포터를 발현할 수 있다. 원재료는 세포 성장 동안 또는 세포 성장 이후에 공급될 수 있다. 전세포는 현탁되거나 고정될 수 있다. 전세포는 비드(beads), 예를 들어 칼슘 또는 소듐 알기네이트 비드 포집될 수 있다. 전세포는 중공 섬유 (hollow fiber) 튜브 반응기 시스템에 연결될 수 있다. 전세포는 막형 반응기 (membrane reactor) 시스템 내에서 농축되고 포집될 수 있다. 전세포는 발효 브로쓰 또는 반응 완충액 내에 있을 수 있다. 일부 구체예에서, 투과성 시약이 기질을 세포로 효과적으로 전달되기 위해 사용될 수 있다. 일부 구체예에서, 세포는 톨루엔과 같은 용매, 또는 트리톤-X (Triton-X) 또는 트윈 (Tween)과 같은 유기세제로 투과가능하게 된다. 일부 구체예에서, 세포는 계면활성제, 예를 들어 세틸트리메틸암모늄 브로마이미드 (CTAB)와 같은 양이온성 계면활성제로 투과가능하게 된다. 일부 구체예에서, 세포는 전기천공법 (electroporation) 또는 경미한 삼투압 충격 (osmotic shock)과 같은 주기적인 기계 충격으로 투과가능하게 된다. 세포는 하나의 재조합 UGT 또는 다수의 재조합 UGT를 포함할 수 있다. 예를 들어, 세포는 스테비오시드 및 RebA의 혼합물이 RebD로 효과적으로 전환되도록 UGT76G1 및 EUGT11을 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 전세포는 섹션 III A에 기재된 숙주 세포이다. 일부 구체예에서, 전세포는 E. 콜라이와 같은 그람-음성 박테리아이다. 일부 구체예에서, 전세포는 바실러스 (Bacillus)와 같은 그람-양성 박테리아이다. 일부 구체예에서, 전세포는 아스퍼길루스와 같은 진균종, 또는 사카로마이세스 (Saccharomyces)와 같은 효모이다. 일부 구체예에서, 용어 "전세포 생촉매(whole cell biocatalysis)"는 전세포가 상기 기재된 바와 같이 성장하고 (예를 들어, 배지에서 및 선택적으로는 투과가능하게), RebA 또는 스테비오시드와 같은 기질이 제공되고 세포로부터의 효소를 이용하여 최종 생성물로 전환되는 과정을 언급하는데 사용한다. 세포는 생세포이거나 아닐 수 있고, 생전환 반응 동안 성장하거나 안할 수 있다. 반대로, 발효의 경우 세포를 성장 배지에서 배양시키고 글루코스와 같은 탄소 및 에너지원을 공급하며, 최종 생성물은 생세포로 생성된다.
C. 기타 폴리펩티드
유전자의 발현으로 좀더 효과적인 또는 더 큰 규모의 스테비올 또는 스테비올 글리코시드의 생성을 도모할 수 있는 추가의 폴리펩티드들의 유전자가 또한 재조합 숙주 안으로 도입될 수 있다. 예를 들어, 재조합 미생물은 게라닐게라닐 디포스페이트 신타제 (GGPPS, GGPDS로도 언급됨)를 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 또한 포함할 수 있다. 또 다른 예로서, 재조합 숙주는 람노스 신타제를 인코딩하는 하나 이상의 유전자, 또는 UDP-글루코스 탈수소효소 및/또는 UDP-글루쿠론산 데카르복실라제를 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 포함할 수 있다. 또 다른 예로는, 재조합 숙주는 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR)을 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 또한 포함할 수 있다. 재조합 CPR의 발현은 테르페노이드 생합성을 위한 보조인자로 사용되는 NADPH를 재생하기 위해 NADP+의 순환을 촉진시킨다. NADHP 수준을 재생하기 위한 다른 방법들도 물론 사용될 수 있다. NADPH가 제한되는 환경에서; 균주들은 외인성 트랜스히드로제나제 (transhydrogenase) 유전자를 포함하도록 변형될 수도 있다. 예를 들어, 문헌 [Sauer et al., J. Biol . Chem . 279:6613-6619(2004)] 참조. 요망되는 보조인자 수준이 증가되도록 NADH/NADPH의 비율을 감소시키거나 달리 변경시키는 다른 방법들은 당업계의 숙련자들에게 공지되어 있다.
또 다른 예로서, 재조합 숙주는 MEP 경로 또는 메발로네이트 경로에서 하나 이상의 효소들을 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 포함할 수 있다. 이러한 유전자는 이들이 디테르펜 생합성 경로로 탄소 유동을 증가시킬 수 있어, 이 경로에 의해 생성된 이소펜테닐 디포스페이트 및 디메틸알릴 디포스페이트로부터 게라닐게라닐 디포스페이트를 생성하기 때문에 유용하다. 이렇게 생성된 게라닐게라닐 디포스페이트는 스테비올 생합성 폴리펩티드 및 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드의 발현으로 인하여 스테비올 및 스테비올 글리코시드 생합성으로 향하게 될 것이다.
또 다른 실시예로서, 재조합 숙주는 수크로스 신타제를 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 포함할 수 있으며, 추가적으로 필요에 따라 수크로스 흡수 유전자를 함유할 수 있다. 수크로스 신타제 반응은 발효 숙주 또는 전세포 생전환(bioconversion) 과정에서 UDP-글루코스 풀(pool)을 증가시키기 위해 이용될 수 있다. 이것은 글리코실화 동안 생성된 UDP로부터 UDP-글루코스 및 수크로스를 재생시켜 효과적인 글리코실화를 허용한다. 일부 유기체에서, 내인성 인베르타제(invertase)의 파괴는 수크로스의 분해를 방해하는데 잇점이 있다. 예를 들어, S. 세레비시애 SUC2 인베르타제는 파괴될 수 있다. 수크로스 신타제 (SUS)는 임의의 적합한 유기체로부터 기인할 수 있다. 예를 들어, 비제한적으로 아라비돕시스 탈리아나, 스테비아 레바우디아나, 또는 코페아 아라비카로부터의 수크로스 신타제 코딩 서열은 적합한 프로모터의 조절하에서 발현 플라스미드로 클로닝되고, 미생물에서 발현될 수 있다. 수크로스 신타제는 수크로스 트랜스포터 (예를 들어, A. 탈리아나 SUC1 트랜스포터 또는 그의 기능성 호몰로그) 및 하나 이상의 UGT (예를 들어, UGT85C2, UGT74G1, UGT76G1, 및 UGT91D2e, EUGT11 또는 그들의 기능성 호몰로그 중 하나 이상)를 조합하여 이러한 균주에서 발현될 수 있다. 수크로스를 함유하는 배지에서 숙주를 배양하면 UDP-글루코스 뿐만 아니라 하나 이상의 글루코시드 (예를 들어, 스테비올 글리코시드)의 생성을 촉진시킬 수 있다.
스쿠알렌 신타제 (SQS)를 인코딩하는 ERG9 유전자의 발현은 또한, 재조합 숙주에서 스쿠알렌 신타제에 대한 전구체가 증가되도록 재조합 숙주에서 감소될 수 있다. SQS는 EC 2.5.1.21 하에 분류되며, 스테롤의 생성을 이끄는 생합성 경로의 첫번째 헌신적(committed) 효소이다. 이는 중간 프리스쿠알렌 피로포스페이트를 통하여 파르네실 피로포스페이트로부터 스쿠알렌의 합성을 촉매작용한다. 이러한 효소는 테르페노이드/이소프레노이드의 생합성에서 중요한 분기점(critical branch) 효소이고, 스테롤 경로를 통해 이소프렌 중간체의 유동을 조절하는 것으로 간주된다. 상기 효소는 종종 파르네실-디포스페이트 파르네실트랜스퍼라제 (FDFT1)으로 언급된다. SQS의 메카니즘은 파르네실 피로포스페이트의 2개 단위체를 스쿠알렌으로 전환시키는 것이다. SQS는 적어도 하나의 원핵생물이 기능적으로 유사한 효소를 지니는 것으로 입증되었으나, 진핵생물 또는 진화된 유기체의 효소로 간주된다.
폴리펩티드의 불활성화가 스테비올 또는 스테비올 글리코시드의 더욱 효율적이거나 더 큰 규모의 생성을 조장하는 폴리펩티드의 유전자는 재조합 숙주에서 변형될 수 있다. 예를 들어, DPP1 유전자에 의해 인코딩된 포스파타제 예컨대, 효모 디아실글리세롤 피로포스페이트 포스파타제 및/또는 LPP1 유전자에 의해 인코딩된 효모 지질 포스페이트 포스파타제를 인코딩하는 내인성 유전자는, 파르네솔로의 파르네실 피로포스페이트 (FPP)의 분해가 감소되고 게라닐게라니올 (GGOH)의 게라닐게라닐피로포스페이트 (GGPP)의 분해가 감소되도록 불활성화될 수 있다. 이러한 유전자는 공지된 기법 예컨대, 상동 재조합, 돌연변이유발 또는 전사 활성인자-유사 이펙터 누클레아제 (TALEN)에 의해 불활성되거나 발현 감소될 수 있다.
C.1 MEP 생합성 폴리펩티드
일부 구체예에서, 재조합 숙주는 이소프레노이드 생합성을 위한 메틸에리트리톨 4-포스페이트 (MEP) 경로에 관련된 효소들을 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 함유하다. MEP 경로의 효소들은 데옥시자일룰로스 5-포스페이트 신타제 (DXS), D-1-데옥시자일룰로스 5-포스페이트 리덕토이소머라제 (reductoisomerase; DXR), 4-디포스포씨티딜-2-C-메틸-D-에리트리톨 신타제 (CMS), 4-디포스포씨티딜-2-메틸-D-에리트리톨 키나제 (CMK), 4-디포스포씨티딜-2-C-메틸-D-에리트리톨 2,4-사이클로디포스페이트 신타제 (MCS), 1-히드록시-2-메틸-2(E)-부테닐 4-디포스페이트 신타제 (HDS) 및 1-히드록시-2-메틸-2(E)-부테닐 4-디포스페이트 리덕타제 (HDR)를 포함한다. 하나 이상의 DXS 유전자, DXR 유전자, CMS 유전자, CMK 유전자, MCS 유전자, HDS 유전자 및/또는 HDR 유전자는 재조합 미생물에서 통합될 수 있다. 문헌 [Rodriguez-Concepcion and Boronat, Plant Phys.130:1079-1089 (2002)] 참조.
DXS, DXR, CMS, CMK, MCS, HDS 및/또는 HDR 폴리펩티드를 인코딩하는 적합한 유전자는 E. 콜라이, 아라비돕시스 탈리아나 및 시네초코쿠스 레오폴리엔시스에 의해 만들어진 것들을 포함한다. DXR 폴리펩티드를 인코딩하는 누클레오티드 서열을 예를 들어 미국 특허 번호 제7,335,815호에 기재되어 있다.
C. 2 메발로네이트 생합성 폴리펩티드
일부 구체예에서, 재조합 숙주는 이소프레노이드 생합성을 위한 메발로네이트 경로에 관련된 효소들을 인코딩하는 하나 이상의 유전자를 포함한다. 숙주 안으로 형질전환시키기에 적합한 유전자는 메발로네이트 경로의 효소, 예를 들어 절두된 3-히드록시-3-메틸-글루타릴 (HMG)-CoA 리덕타제 (tHMG)를 인코딩하고/거나 메발로네이트 키나제 (MK)를 인코딩하는 유전자, 및/또는 포스포메발로네이트 키나제 (PMK)를 인코딩하는 유전자, 및/또는 메발로네이트 피로포스페이트 데카르복실라제 (MPPD)를 인코딩하는 유전자가 있다. 따라서, 하나 이상의 HMG-CoA 리덕타제 유전자, MK 유전자, PMK 유전자, 및/또는 MPPD 유전자는 미생물과 같은 재조합 숙주에 통합될 수 있다.
메발로네이트 경로 폴리펩티드를 인코딩하는 적합한 유전자는 공지되어 있다. 예를 들어, 적합한 폴리펩티드는 E. 콜라이, 파라코쿠스 데니트리피칸스 (Paracoccus denitrificans), 사카로마이세스 세레비시애, 아라비돕시스 탈리아나, 키타사토스포라 그리세올라 (Kitasatospora griseola), 호모 사피엔스 (Homo sapiens), 드로소필라 멜라노가스터 (Drosophila melanogaster), 갈루스 갈루스 (Gallus gallus), 스트렙토마이세스 종 (Streptomyces sp.) KO-3988, 니코티아나 아테누아타 (Nicotiana attenuata), 키타사토스포라 그리세올라 (Kitasatospora griseola), 헤베아 브라실리엔시스 (Hevea brasiliensis), 엔테로코쿠스 패시움 (Enterococcus faecium) 및 헤마토코커스 플루비알리스 (Haematococcus pluvialis)에 의해 만들어진 것들을 포함한다. 예컨대, 표 9, 그 전문이 본원에 참조로서 포함되는 미국특허 7,183,089호, 5,460,949호, 및 5,306,862호, 및 PCT 출원 PCT/US2012/050021호 및 PCT/US2011/038967호를 참조하라.
표 9. HMG CoA 리덕타제 및 기타 메발로네이트 유전자의 공급원
수탁# 유기체 효소 크기 (nt) 유전자 명칭
XM_001467423
(aa SEQ ID NO: 60)		 레이쉬마니아 인판툼 ( Leishmania infantum) 아세틸-CoA C-아세틸트랜스퍼라제 1323
(nt SEQ ID NO: 61)		 MEV-4
YML075C
(aaSEQ ID NO: 62)		 사카로마이세스 세레비시애 절두된 HMG (tHMG1) 1584
(nt SEQ ID NO: 63)		 tHMG1
EU263989
(aaSEQ ID NO: 64)		 가노데르마 루시둠 (Ganoderma lucidum) 3-HMG-CoA 리덕타제 3681
(nt SEQ ID NO: 65)		 MEV-11
BC153262
(aa SEQ ID NO: 66)		 보스 타우루스 (Bos taurus) 3-HMG-CoA 리덕타제 2667
(nt SEQ ID NO: 67)		 MEV-12
AAD47596
(aa SEQ ID NO: 68)		 아르테미시아 안누아 ( Artemisia annua) 3-HMG-CoA 리덕타제 1704
(nt SEQ ID NO: 69)		 MEV-13
AAB62280
(aa SEQ ID NO: 70)		 트리파노소마 크루지 ( Trypanosoma cruzi) 3-HMG-CoA 리덕타제 1308
(nt SEQ ID NO: 71)		 MEV-14
CAG41604
(aa SEQ ID NO: 72)		 스타피 아우레우스 (Staph aureus ) 3-HMG-CoA 리덕타제 1281
(nt SEQ ID NO: 73)		 MEV-15
DNA2.0 서열
(aa SEQ ID NO: 74)		 아르채오글로부스 풀기두스 (Archaeoglobus fulgidus) 3-HMG-CoA 리덕타제 1311
(nt SEQ ID NO: 75)		 HMG 리덕타제
DNA2.0 서열
(aa SEQ ID NO: 76)		 슈도모나스 메발로니 ( Pseudomonas mevalonii) 3-HMG-CoA 리덕타제 1287
(nt SEQ ID NO: 77)		 HMG 리덕타제
C.3 수크로스 신타제 폴리펩티드
수크로스 신타제 (SUS)는 UDP-당을 생성하는 도구로 이용될 수 있다. SUS (EC 2.4.1.13)은 수크로스 및 UDP로부터 UDP-글루코스와 프룩토오스의 생성을 촉매작용한다. 따라서, UGTs의 반응으로 생성된 UDP는 수크로스의 존재하에서 UDP-글루코스로 전환될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Chen et al. (2001) J. Am. Chem . Soc . 123:8866-8867; Shao et al. (2003) Appl . Env . Microbiol . 69:5238-5242; Masada et al. (2007) FEBS Lett. 581:2562-2566; and Son et el. (2009) J. Microbiol . Biotechnol. 19:709-712] 참조.
수크로스 신타제는 UDP-글루코스를 생성하고 UDP를 제거하는데 사용되어, 다양한 시스템에서 화합물들의 효과적인 글리코실화를 도모할 수 있게 한다. 예를 들어, 수크로스를 이용하는 능력이 결여된 효모는 수크로스 트랜스포터 및 SUS를 도입함으로써 수크로스에서 성장하도록 만들 수 있다. 예를 들어, 사카로마이세스 세레비시애는 효과적인 수크로스 흡수 시스템을 가지고 있지 않아, 수크로스를 이용하기 위한 세포외 SUC2에 의존한다. 내인성 S. 세레비시애 SUC2 인베르타제의 파괴 및 재조합 SUS 발현의 조합은 세포내 수크로스를 대사작용할 수 있으나 세포외 수크로스는 그럴 수 없는 효모 균주를 나타낼 수 있다 (Riesmeier et al. (1992) EMBO J. 11:4705-4713). 균주는, cDNA 발현 라이브러리로 형질전환되고 수크로스를 취하는 능력을 얻게된 형질전환체(transformants)의 선별에 의해 수크로스 트랜스포터를 단리하는데 사용되었다.
생체내에서 재조합 수크로스 신타제와 수크로스 트랜스포터의 조합된 발현은 증가된 UDP-글루코스 이용가능성 및 원치않는 UDP의 제거를 가져올 수 있다. 예를 들어, 재조합 수크로스 신타제, 수크로스 트랜스포터, 및 글리코실 트랜스퍼라제의 기능적 발현은 자연적 수크로스 분해 시스템 (S. 세레비시애의 경우에는 SUC2)의 넉아웃과 조합되어 스테비올 글리코시드와 같은 글리코실화된 화합물의 양을 증가 생성할 수 있는 세포를 생성하는데 이용될 수 있다. 이러한 보다 높은 글리코실화 성능은 적어도 (a) 보다 고효율로 UDP-글루코스를 생성하는 높은 성능, 및 (b) 글리코실화 반응을 저해하는 UDP의 성장 배지로부터 제거로 인한 것일 수 있다.
수크로스 신타제는 임의의 적합한 유기체로부터 비롯될 수 있다. 예를 들어, 비제한적으로, 아라비돕시스 탈리아나 (예를 들어, SEQ ID NO: 78 또는 79), 또는 코페아 아라비카 (예를 들어, SEQ ID NO:80) (예를 들어, PCT/US2012/050021의 SEQ ID NO: 178, 179 및 180 참조)로부터의 수크로스 신타제 코딩 서열은 적합한 프로모터의 조절하에서 발현 플라스미드로 클로닝될 수 있고, 숙주 (예를 들어, 미생물 또는 식물) 내에서 발현될 수 있다. SUS 코딩 서열은 효모에 의해 세포외 수크로스의 분해를 피하기 위해 SUC2 (수크로스 가수분해 효소) 결여된 S. 세레비시애 균주에서 발현될 수 있다. 수크로스 신타제는 이러한 균주에서 수크로스 트랜스포터 (예를 들어, A. 탈리아나 SUC1 트랜스포터 또는 그의 기능성 호몰로그) 및 하나 이상의 UGT (예를 들어, UGT85C2, UGT74G1, UGT76G1, EUGT11, 및 UGT91D2e, 또는 그들의 기능적 호몰로그 중 하나 이상)와 조합되어 발현될 수 있다. 수크로스가 함유된 배지에서 숙주를 배양하면 UDP-글루코스 뿐만 아니라 하나 이상의 글루코시드 (예를 들어, 스테비올 글리코시드)의 생성을 촉진시킬 수 있다. 몇몇 경우에서, 수크로스 신타제 및 수크로스 트랜스포터가 또한, 특정 화합물 (예를 들어, 스테비올)의 생성을 위한 재조합체인 숙주 세포에서 UGT와 함께 발현될 수 있음이 주지된다.
C.4 스쿠알렌 신타제 폴리펩티드
내인성 스쿠알렌 신타제 유전자의 발현은 예를 들어, 각각 스쿠알렌 신타제를 인코딩하는 유전자의 프로모터 또는 스쿠알렌 신타제를 인코딩하는 오픈 리딩 프레임 (ORF)의 5' 말단 내의 유전체 서열의 일부에 상동인 2개 영역을 함유하는 핵산 작제물을 사용하여 본원에 기술된 재조합 숙주에서 변형될 수 있다. 효모에서, 예를 들어, 이러한 작제물은 각각 ERG9 프로모터 또는 ERG9 오픈 리딩 프레임의 5' 말단 내의 유전체 서열의 일부에 상동인 2개의 영역을 함유할 수 있다. 작제물은 효모에 대해 야생형 ScKex2 또는 야생형 ScCyc1과 같은 프로모터를 추가로 포함할 수 있다. 프로모터는 헤어핀과 같은 이종성 삽입물을 이의 3'-말단에 추가로 포함할 수 있다. ORF에 의해 인코딩되는 폴리펩티드는 스쿠알렌 신타제 (EC 2.5.1.21) 또는 이의 생물학적 활성 단편과 적어도 70% 동일성을 갖고, 상기 단편은 적어도 100개 아미노산의 중첩 범위에서 상기 스쿠알렌 신타제와 적어도 70% 서열 동일성을 갖는다. 예를 들어, PCT/US2012/050021을 참조하라.
이종성 삽입물은 헤어핀 루프를 갖는 헤어핀의 이차 구조 요소에 적합화될 수 있다. 이종성 삽입물 서열은 다음 일반식 (I)을 갖는다:
-X1-X2-X3-X4-X5,
X2는 X4의 적어도 4개의 연속 누클레오티드에 상보적이며, X4의 적어도 4개의 연속 누클레오티드를 지니는 헤어핀 이차 구조 요소를 형성하는 적어도 4개의 연속 누클레오티드를 포함하여, X3은 임의적이며, 존재하는 경우, X2 및 X4 사이에 헤어핀 루프를 형성하는데 관련되는 누클레오티드를 포함하고,
X1 및 X5는 개별적으로 그리고 임의로 하나 이상의 누클레오티드를 포함하고, X2 및 X4는, X2의 적어도 4개의 누클레오티드의 연속 서열이 X4의 적어도 4개의 누클레오티드의 연속 서열에 상보적인 한, 개별적으로 임의의 적합한 수의 누클레오티드로 구성될 수 있다. 일부 구체예에서, X2 및 X4는 동일한 수의 누클레오티드로 구성된다.
이종성 삽입물은 헤어핀을 완성할 수 있도록 충분히 길지만, 인-프레임(in-frame) 및 이종성 삽입물에 대해 바로 3'측에 존재하는 ORF의 제한된 번역이 가능하도록 충분히 짧다. 전형적으로, 이종성 삽입물은 10-50개 누클레오티드 길이, 예컨대, 10-30개 누클레오티드, 15-25개 누클레오티드, 17-22개 누클레오티드, 18-21개 누클레오티드, 18-20개 누클레오티드, 또는 19개 누클레오티드 길이이다.
X2는 예를 들어 4 내지 25개 범위의 누클레오티드, 예컨대 4 내지 20개, 4 내지 15개, 6 내지 12개, 8 내지 12개, 또는 9 내지 11개 범위의 누클레오티드로 구성될 수 있다.
X4는 예를 들어 4 내지 25개 범위의 누클레오티드, 예컨대 4 내지 20개, 4 내지 15개, 6 내지 12개, 8 내지 12개, 또는 9 내지 11개 범위의 누클레오티드로 구성될 수 있다.
일부 구체예에서, X2는 X4의 누클레오티드 서열과 상보적인 누클레오티드 서열로 구성되고, X2의 모든 누클레오티드는 X4의 누클레오티드 서열과 상보적이다.
X3은 부재할 수 있고, 즉 X3은 0개의 누클레오티드로 구성될 수 있다. X3은 1 내지 5개 범위의 누클레오티드, 예컨대 1 내지 3개 범위의 누클레오티드로 구성되는 것이 또한 가능하다.
X1은 부재할 수 있고, 즉 X1은 0개의 누클레오티드로 구성될 수 있다. X1은 1 내지 25개 범위의 누클레오티드, 예컨대 1 내지 20개, 1 내지 15개, 1 내지 10개, 1 내지 5개, 또는 1 내지 3개 범위의 누클레오티드로 구성되는 것이 또한 가능하다.
X5는 부재할 수 있고, 즉 X5는 0개의 누클레오티드로 구성될 수 있다. X5는 1 내지 5개 범위의 누클레오티드, 예컨대 1 내지 3개 범위의 누클레오티드로 구성되는 것이 또한 가능하다.
이종성 삽입물은 본원에 정의된 요건을 충족시키는 임의의 적합한 서열일 수 있다. 예를 들어, 이종성 삽입물은 tgaattcgttaacgaattc (SEQ ID NO: 81), tgaattcgttaacgaactc (SEQ ID NO: 82), tgaattcgttaacgaagtc (SEQ ID NO: 83), 또는 tgaattcgttaacgaaatt (SEQ ID NO: 84)를 포함할 수 있다.
특정 메커니즘에 얽매이지 않으며, 효모에서 ERG9 발현은 RNA에 대한 리보솜의 결합을 적어도 부분적으로 입체적으로 방해함에 의해 감소되어, 스쿠알렌 신타제의 번역을 감소시킬 수 있다. 그러한 작제물을 이용하는 것은 파르네실-피로포스페이트에서 스쿠알렌으로의 턴오버를 감소시키고/거나 파르네실-피로포스페이트, 이소펜테닐-피로포스페이트, 디메틸알릴-피로포스페이트, 게라닐-피로포스페이트 및 게라닐게라닐-피로포스페이트로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물의 축적을 향상시킬 수 있다.
때때로, 본원에 기재된 재조합 숙주를 배양할 때 스쿠알렌 신타제 억제제를 포함시키는 것이 유리할 수 있다. 스쿠알렌 신타제, 예컨대, 라파퀴스태트(lapaquistat)에 의한 화학적 억제가 당 분야에 공지되어 있다. 그 밖의 스쿠알렌 신타제 억제제는 자라고직산(Zaragozic acid) 및 RPR 107393을 포함한다. 따라서, 한 구체예에서 본원에 정의된 방법(들)의 배양 단계는 스쿠알렌 신타제 억제제의 존재하에 수행된다.
일부 구체예에서, 본원에 기재된 재조합 효모 숙주는 ERG9 오픈 리딩 프레임에 돌연변이를 함유한다.
일부 구체예에서, 본원에 기재된 재조합 효모 숙주는 ERG9[Δ]::HIS3 결실/삽입 대립유전자를 함유한다.
D. 기능성 호몰로그
본원에 기재된 폴리펩티드의 기능성 호몰로그는 또한 재조합 숙주에서 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 생성하는데 이용하기 적합하다. 기능성 호몰로그는 기준 폴리펩티드에 대한 서열 유사성을 지니고, 기준 폴리펩티드의 생화학적 또는 생리학적 기능(들) 중 하나 이상을 보유하는 폴리펩티드이다. 기능성 호몰로그 및 기준 폴리펩티드는 자연 발생 폴리펩티드일 수 있고, 서열 유사성은 수렴성 (convergent) 또는 분기성 (divergnt) 진화 사건 때문일 수 있다. 이와 같이, 기능성 호몰로그는 때로 문헌에서 호몰로그, 또는 오르톨로그(ortholog), 또는 파라로그 (paralog)로 명명된다. 자연 발생 기능성 호몰로그의 변이체, 예컨대 야생형 코딩 서열의 돌연변이체에 의해 인코딩되는 폴리펩티드는 그 자체가 기능성 호몰로그일 수 있다. 기능성 호몰로그는 또한 폴리펩티드에 대한 코딩 서열의 부위-특이적 돌연변이유발을 통해, 또는 상이한 자연-발생 폴리펩티드들에 대한 코딩 서열로부터의 도메인을 조합시켜 ("도메인 교환 (swapping)") 생성될 수 있다. 본원에 기재된 기능성 UGT 폴리펩티드를 인코딩하는 유전자를 변형시키는 기법은 공지되어 있고, 그 중에도 특히, 지향된 진화 기법, 부위-특이적 돌연변이유발 기법 및 무작위 돌연변이유발 기법을 포함하며, 이는 폴리펩티드의 특이적 활성을 증가시키거나, 기질 특이성을 변경시키거나, 발현 수준을 변경시키거나, 아세포(subcellular) 위치를 변경시키거나, 폴리펩티드:폴리펩티드 상호작용을 요망되는 방식으로 변형시키는데 유용할 수 있다. 그러한 변형된 폴리펩티드는 기능성 호몰로그로 간주된다. 용어 "기능성 호몰로그"는 때로 기능적으로 상동인 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산에 적용된다.
기능성 호몰로그는 누클레오티드 및 폴리펩티드 서열 정렬의 분석에 의해 확인될 수 있다. 예를 들어, 누클레오티드 또는 폴리펩티드 서열의 데이터베이스에 쿼리 (query)를 실행함으로써 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드 또는 트랜스포터 유전자 또는 단백질 또는 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자 유전자 또는 단백질의 호몰로그를 확인할 수 있다. 서열 분석은 GGPPS, CDPS, KS, KO, KAH 또는 트랜스포터 또는 전사 인자 아미노산 서열을 기준 서열로 이용하는 비중복된 (nonredundant) 데이터베이스의 BLAST, 상호 BLAST, 또는 PSI-BLAST 분석을 포함할 수 있다. 아미노산 서열은, 일부 경우에, 누클레오티드 서열로부터 유추된다. 데이터베이스에서 40% 초과의 서열 동일성을 갖는 이들 폴리펩티드는 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드에 대한 기능성 호몰로그 또는 트랜스포터 단백질 또는 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자에 대한 기능성 호몰로그로서의 적합성을 추가로 평가하기 위한 후보들이다. 아미노산 서열 유사성은 보존적 아미노산 치환, 예를 들어 하나의 소수성 잔기를 또 다른 소수성 잔기로 치환하거나 하나의 극성 잔기를 또 다른 극성 잔기로 치환하는 것을 허용한다. 요망되는 경우, 추가로 평가되어야 하는 후보의 수를 좁히기 위해 그러한 후보의 수동 검사를 수행할 수 있다. 수동 검사는 스테비올 생합성 폴리펩티드 또는 트랜스포터 단백질 또는 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자에 존재하는 도메인, 예컨대 보존된 기능성 도메인을 갖는 것으로 보이는 후보를 선택함에 의해 수행될 수 있다.
보존된 영역은 반복되는 서열이거나, 일부 이차 구조 (예를 들어, 나선형 및 베타 시트)를 형성하거나, 양 또는 음으로 하전된 도메인을 확립하거나, 단백질 모티프 또는 도메인을 나타내는 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드 또는 트랜스포터 유전자 또는 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자의 일차 아미노산 서열 내의 영역의 위치를 찾아냄에 의해 확인될 수 있다. 예컨대, 월드와이드웹 상에서 다양한 단백질 모티프 및 도메인에 대한 컨센서스 서열을 기재하고 있는 Pfam 웹사이트 sanger.ac.uk/Software/Pfam/ 및 pfam.janelia.org/를 참조하라. Pfam 데이터베이스에 포함된 정보는 문헌[Sonnhammer et al., Nucl. Acids Res., 26:320-322 (1998); Sonnhammer et al., Proteins, 28:405-420 (1997); and Bateman et al., Nucl. Acids Res., 27:260-262 (1999)]에 기재된다. 보존된 영역은 밀접하게 관련된 종으로부터의 동일하거나 관련된 폴리펩티드의 서열을 정렬함으로써 또한 결정할 수 있다. 밀접하게 관련된 종은 바람직하게는 동일한 패밀리로부터의 종이다. 일부 구체예들에서, 두 상이한 종으로부터의 서열을 정렬하는 것이 적합하다.
전형적으로, 적어도 약 40%의 아미노산 서열 동일성을 나타내는 폴리펩티드가 보존된 영역을 확인하는데 유용하다. 관련 폴리펩티드의 보존된 영역은 적어도 45%의 아미노산 서열 동일성 (예컨대, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 적어도 90%의 아미노산 서열 동일성)을 나타낸다. 일부 구체예에서, 보존된 영역은 적어도 92%, 94%, 96%, 98%, 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 나타낸다.
예를 들어, 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드를 생성하는데 적합한 폴리펩티드는 EUGT11, UGT91D2e, UGT91D2m, UGT85C, 및 UGT76G의 기능성 호몰로그를 포함한다. 그러한 호몰로그는 PCT 출원 PCT/US2012/050021호에 기재된 EUGT11, UGT91D2e, UGT91D2m, UGT85C, 또는 UGT76G의 아미노산 서열과 90% 초과 (예컨대, 적어도 95% 또는 99%)의 서열 동일성을 갖는다. EUGT11, UGT91D2, UGT85C, 및 UGT76G 폴리펩티드의 변이체는 전형적으로 일차 아미노산 서열 내에 10개 또는 그 미만의 아미노산 치환을 갖고, 예컨대, 7개 또는 그 미만의 아미노산 치환, 5개 또는 보존적 아미노산 치환, 또는 1 내지 5개의 치환을 갖는다. 그러나, 일부 구체예에서, EUGT11, UGT91D2, UGT85C, 및 UGT76G 폴리펩티드의 변이체는 10개 또는 그 초과의 아미노산 치환 (예컨대, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 10-20, 10-35, 20-30, 또는 25-35개 아미노산 치환)을 지닐 수 있다. 치환은 보존적이거나, 일부 구체예에서, 비-보존적일 수 있다. UGT91D2e 폴리펩티드에서 비-보존적 변화의 비제한적인 예는 글리신에서 아르기닌 및 트립토판에서 아르기닌으로의 변화를 포함한다. UGT76G 폴리펩티드에서 비-보존적 치환의 비제한적인 예는 발린에서 글루탐산, 글리신에서 글루탐산, 글루타민에서 알라닌 및 세린에서 프롤린으로의 치환을 포함한다. UGT85C 폴리펩티드에 대한 변화의 비제한적인 예는 히스티딘에서 아스파르트산, 프롤린에서 세린, 리신에서 트레오닌, 및 트레오닌에서 아르기닌으로의 변화를 포함한다.
일부 구체예에서, 유용한 UGT91D2 호몰로그는 예측된 루프의 밖에 있는 폴리펩티드의 영역에 아미노산 치환 (예컨대, 보존적 아미노산 치환)을 지닐 수 있고, 예컨대, 잔기 20-26, 39-43, 88-95, 121-124, 142-158, 185-198, 및 203-214는 N-말단 도메인의 예측된 루프이고 잔기 381-386는 91D2e의 C-말단 도메인의 예측된 루프이다 (SEQ ID NO:54 참조). 예를 들어, 유용한 UGT91D2 호몰로그는 잔기 1-19, 27-38, 44-87, 96-120, 125-141, 159-184, 199-202, 215-380, 또는 387-473에 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, UGT91D2 호몰로그는 잔기 30, 93, 99, 122, 140, 142, 148, 153, 156, 195, 196, 199, 206, 207, 211, 221, 286, 343, 427, 및 438로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 잔기에 아미노산 치환을 지닐 수 있다. 예를 들어, UGT91D2 기능성 호몰로그는 잔기 206, 207, 및 343 중 하나 이상에 아미노산 치환을 지닐 수 있고, 예컨대 잔기 206에 아르기닌, 잔기 207에 시스테인, 및 잔기 343에 아르기닌을 지닐 수 있다. 예를 들어, SEQ ID NO:86 참조. UGT91D2의 그 밖의 기능성 호몰로그는 하기 중 하나 이상을 지닐 수 있다: 잔기 30에 티로신 또는 페닐알라닌, 잔기 93에 프롤린 또는 글루타민, 잔기 99에 세린 또는 발린, 잔기 122에 티로신 또는 페닐알라닌, 잔기 140에 히스티딘 또는 티로신, 잔기 142에 세린 또는 시스테인, 잔기 148에 알라닌 또는 트레오닌, 잔기 152에 메티오닌, 잔기 153에 알라닌, 잔기 156에 알라닌 또는 세린, 잔기 162에 글리신, 잔기 195에 류신 또는 메티오닌, 잔기 196에 글루탐산, 잔기 199에 리신 또는 글루탐산, 잔기 211에 류신 또는 메티오닌, 잔기 213에 류신, 잔기 221에 세린 또는 페닐알라닌, 잔기 253에 발린 또는 이소류신, 잔기 286에 발린 또는 알라닌, 잔기 427에 리신 또는 아스파라긴, 잔기 438에 알라닌, 및 잔기 462에 알라닌 또는 트레오닌. 또 다른 구체예에서, UGT91D2 기능성 호몰로그는 잔기 211에 메티오닌 및 잔기 286에 알라닌을 함유한다.
일부 구체예에서, 유용한 UGT85C 호몰로그는 잔기 9, 10, 13, 15, 21, 27, 60, 65, 71, 87, 91, 220, 243, 270, 289, 298, 334, 336, 350, 368, 389, 394, 397, 418, 420, 440, 441, 444, 및 471에 하나 이상의 아미노산 치환을 지닐 수 있다. 유용한 UGT85C 호몰로그의 비제한적인 예 (SEQ ID NO: 30에 비해)는 잔기 65 (예컨대, 잔기 65에 세린), 잔기 15 (잔기 15에 류신)와 함께 잔기 65, 270 (예컨대, 잔기 270에 메티오닌, 아르기닌, 또는 알라닌), 418 (예컨대, 잔기 418에 발린), 440 (예컨대, 잔기 440에 아스파르트산), 또는 441 (예컨대, 잔기 441에 아스파라긴); 잔기 13 (예컨대, 잔기 13에 페닐알라닌), 15, 60 (예컨대, 잔기 60에 아스파르트산), 270, 289 (예컨대, 잔기 289에 히스티딘), 및 418에 치환; 잔기 13, 60, 및 270에 치환; 잔기 60 및 87 (예컨대, 잔기 87에 페닐알라닌)에 치환; 잔기 65, 71 (예컨대, 잔기 71에 글루타민), 220 (예컨대, 잔기 220에 트레오닌), 243 (예컨대, 잔기 243에 트립토판), 및 270에 치환; 잔기 65, 71, 220, 243, 270, 및 441에 치환; 잔기 65, 71, 220, 389 (예컨대, 잔기 389에 발린), 및 394 (예컨대, 잔기 394에 발린)에 치환; 잔기 65, 71, 270, 및 289에 치환; 잔기 220, 243, 270, 및 334 (예컨대, 잔기 334에 세린)에 치환; 또는 잔기 270 및 289에 치환을 갖는 폴리펩티드를 포함한다. 하기 아미노산 돌연변이는 85C2 폴리펩티드에서 활성의 손실을 발생시키지 않았다: V13F, F15L, H60D, A65S, E71Q, I87F, K220T, R243W, T270M, T270R, Q289H, L334S, A389V, I394V, P397S, E418V, G440D, 및 H441N. 활성 클론에서 보여지는 추가의 돌연변이는 K9E, K10R, Q21H, M27V, L91P, Y298C, K350T, H368R, G420R, L431P, R444G, 및 M471T를 포함한다. 일부 구체예에서, UGT85C2는 위치 65 (예컨대, 세린), 71 (글루타민), 270 (메티오닌), 289 (히스티딘), 및 389 (발린)에 치환을 함유한다.
인간의 MDM2 단백질의 처음 158 아미노산이 N-말단에서 프레임안에 융합된 스테비아 레바우디아나 UGT 74G1, 76G1 및 91D2e, 및 합성된 PMI 펩티드의 4개의 반복서열 (4 X TSFAEYWNLLSP, 서열 번호:87)이 N-말단에서 프레임안에 융합된 스테비아 레바우디아나 UGT85C2의 아미노산 서열은 서열 번호: 88, 89, 90, 및 91에 각각 제시된다.
일부 구체예에서, 유용한 UGT76G 호몰로그는 SEQ ID NO:85의 잔기 29, 74, 87, 91, 116, 123, 125, 126, 130, 145, 192, 193, 194, 196, 198, 199, 200, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 266, 273, 274, 284, 285, 291, 330, 331, 및 346에 하나 이상의 아미노산 치환을 지닐 수 있다.
유용한 UGT76G 호몰로그의 비제한적인 예는 잔기 74, 87, 91, 116, 123, 125, 126, 130, 145, 192, 193, 194, 196, 198, 199, 200, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 및 291; 잔기 74, 87, 91, 116, 123, 125, 126, 130, 145, 192, 193, 194, 196, 198, 199, 200, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 266, 273, 274, 284, 285, 및 291; 또는 잔기 74, 87, 91, 116, 123, 125, 126, 130, 145, 192, 193, 194, 196, 198, 199, 200, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 266, 273, 274, 284, 285, 291, 330, 331, 및 346에 치환을 갖는 폴리펩티드를 포함한다. 표 10을 참조하라.
클론 돌연변이
76G_G7 M29I, V74E, V87G, L91P, G116E, A123T, Q125A, I126L, T130A,
V145M, C192S, S193A, F194Y, M196N, K198Q, K199I, Y200L, Y203I, F204L, E205G, N206K, I207M, T208I, P266Q, S273P, R274S, G284T, T285S, 287-3 bp 결실, L330V, G331A, L346I
76G_H12 M29I, V74E, V87G, L91P, G116E, A123T, Q125A, I126L, T130A,
V145M, C192S, S193A, F194Y, M196N, K198Q, K199I, Y200L, Y203I, F204L, E205G, N206K, I207M, T208I, P266Q, S273P, R274S, G284T, T285S, 287-3 bp 결실
76G_C4 M29I, V74E, V87G, L91P, G116E, A123T, Q125A, I126L, T130A,
V145M, C192S, S193A, F194Y, M196N, K198Q, K199I, Y200L, Y203I, F204L, E205G, N206K, I207M, T208I
예를 들어, EUGT11 또는 UGT91D2e의 기질 특이성을 변경시키는 방법은 당업자에게 공지되어 있으며, 부위-특이적/논리적 돌연변이유발 접근법, 무작위 유도되는 진화 접근법 및 무작위 돌연변이유발/포화 기법이 효소의 활성 부위 부근에서 수행되는 조합법을 포함하나, 이로 한정되는 것은 아니다. 예를 들어, 문헌[Osmani, et al., Phytochemistry 70 325-347 (2009)]을 참조하라.
후보 서열은 전형적으로 기준 서열 길이의 80 퍼센트 내지 200 퍼센트의 길이, 예컨대, 기준 서열 길이의 82, 85, 87, 89, 90, 93, 95, 97, 99, 100, 105, 110, 115, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 또는 200 퍼센트의 길이를 갖는다. 기능성 호몰로그 폴리펩티드는 전형적으로 기준 서열 길이의 95 퍼센트 내지 105 퍼센트의 길이, 예컨대, 기준 서열 길이의 90, 93, 95, 97, 99, 100, 105, 110, 115, 또는 120 퍼센트의 길이, 또는 그 사이의 임의의 범위의 길이를 갖는다. 기준 핵산 또는 폴리펩티드에 대한 임의의 후보 핵산 또는 폴리펩티드의 퍼센트 동일성은 다음과 같이 결정될 수 있다. 기준 서열 (예컨대, 핵산 서열 또는 아미노산 서열)은 컴퓨터 프로그램 ClustalW (버전 1.83, 디폴트 파라미터)를 이용하여 하나 이상의 후보 서열에 정렬되는데, 이는 이들의 전장에 걸쳐 핵산 또는 폴리펩티드 서열의 정렬이 수행될 수 있게 한다 (글로벌 정렬). 문헌[Chenna et al., Nucleic Acids Res., 31(13):3497-500 (2003)].
ClustalW는 기준 서열과 하나 이상의 후보 서열 간의 최상의 매칭을 계산하고, 동일성, 유사성 및 차이가 결정될 수 있게 이들을 정렬시킨다. 하나 이상의 잔기의 갭이 기준 서열, 후보 서열 또는 둘 모두에 삽입되어 서열 정렬을 최대화시킬 수 있다. 핵산 서열의 신속한 쌍(pairwise) 정렬을 위해, 다음의 디폴트 파라미터가 이용된다: 워드 크기: 2; 윈도 크기: 4; 득점 방법: 백분율; 상부 대각선의 수: 4; 및 갭 페널티: 5. 핵산 서열의 다수 정렬을 위해, 다음의 파라미터가 이용된다: 갭 개방 페널티: 10.0; 갭 연장 페널티: 5.0; 및 중량 변화: 있음. 단백질 서열의 신속한 쌍 정렬을 위해, 다음의 파라미터가 이용된다: 워드 크기: 1; 윈도 크기: 5; 득점 방법: 백분율; 상부 대각선의 수: 5; 갭 페널티: 3. 단백질 서열의 다수 정렬을 위해, 다음의 파라미터가 이용된다: 중량 매트릭스: 블로섬(blosum); 갭 개방 페널티: 10.0; 갭 연장 페널티: 0.05; 친수성 갭: 켜짐(on); 친수성 잔기: Gly, Pro, Ser, Asn, Asp, Gln, Glu, Arg, 및 Lys; 잔기-특이적 갭 페널티: 켜짐. ClustalW 결과는 서열 간의 관계를 반영하는 서열 정렬이다. ClustalW는, 예를 들어, 월드와이드웹 상의 Baylor College of Medicine Search Launcher 사이트 (searchlauncher.bcm.tmc.edu/multi-align/multi-align.html) 및 월드와이드웹 상의 European Bioinformatics Institute 사이트 (ebi.ac.uk/clustalw)에서 실행될 수 있다.
기준 서열에 대한 후보 핵산 또는 아미노산 서열의 퍼센트 동일성을 결정하기 위해, 서열을 ClustalW를 이용하여 정렬시키고, 정렬에서 동일한 매칭의 수를 기준 서열의 길이로 나누고, 그 결과에 100을 곱한다. 퍼센트 동일성 값은 가장 근접한 소수점 첫째 자리까지 반올림할 수 있음에 유의한다. 예를 들어, 78.11, 78.12, 78.13, 및 78.14는 78.1로 반내림되는 반면, 78.15, 78.16, 78.17, 78.18, 및 78.19는 78.2로 반올림된다.
기능성 UGT는 글루코실화 또는 효소에 의해 수행되는 그 밖의 효소 활성에 관여하지 않는 추가의 아미노산을 포함할 수 있어서, 이러한 폴리펩티드는 그렇지 않은 경우보다 더 길어질 수 있음을 인지할 것이다. 예를 들어, EUGT11 폴리펩티드는 아미노 또는 카르복시 말단에 첨가되는 정제 태그 (예컨대, HIS 태그 또는 GST 태그), 엽록체 운반 펩티드, 미토콘드리아 운반 펩티드, 녹말체 펩티드, 신호 펩티드, 또는 분비 태그를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, EUGT11 폴리펩티드는 리포터로서 기능하는 아미노산 서열, 예컨대, 그린 형광 단백질 또는 옐로우 형광 단백질을 포함한다.
II. 스테비올 및 스테비올 글리코시드 생합성 핵산
본원에 기재된 폴리펩티드를 인코딩하는 재조합 유전자는 폴리펩티드 발현에 적합한 하나 이상의 조절 영역에 센스 배향으로 작동적으로 연결된, 상기 폴리펩티드에 대한 코딩 서열을 포함한다. 많은 미생물이 폴리시스트론 mRNA로부터 다수의 유전자 생성물을 발현할 수 있으므로, 요망되는 경우 다수의 폴리펩티드가 상기 미생물에 대한 단일한 조절 영역의 제어 하에 발현될 수 있다. 코딩 서열 및 조절 영역은, 조절 영역과 코딩 서열이 상기 서열의 전사 또는 번역을 조절하는데 유효하도록 정위될 때 작동적으로 연결된 것으로 간주된다. 전형적으로, 코딩 서열의 번역적 리딩 프레임의 번역 개시 부위는 모노시스트론 유전자에 대한 조절 영역의 1 내지 약 50개 누클레오티드 다운스트림 사이에 위치한다.
많은 경우에, 본원에 기재된 폴리펩티드에 대한 코딩 서열은 재조합 숙주 이외의 종에서 확인되며, 즉, 이종성 핵산이다. 따라서, 재조합 숙주가 미생물인 경우, 코딩 서열은 그 밖의 원핵 또는 진핵 미생물, 식물 또는 동물로부터 유래될 수 있다. 그러나, 일부 경우에 코딩 서열은 상기 숙주에 고유한 서열이며 해당 유기체에 재도입된다. 천연 서열은 종종 외인성 핵산에 연결된 비-자연 서열, 예를 들어 재조합 핵산 작제물에서 천연 서열의 측면에 있는 비-천연 조절 서열의 존재에 의해 자연 발생 서열과 구별될 수 있다. 또한, 안정하게 형질전환된 외인성 핵산은 전형적으로 천연 서열이 발견되는 위치가 아닌 다른 위치에 통합된다. "조절 영역"은 전사 또는 번역 개시 및 속도, 및 전사 또는 번역 생성물의 안정성 및/또는 운동성에 영향을 주는 누클레오티드 서열을 지닌 핵산을 의미한다. 조절 영역은, 비제한적으로, 프로모터 서열, 인핸서 서열, 반응 요소, 단백질 인지 부위, 유도성 요소, 단백질 결합 서열, 5' 및 3' 비번역된 영역 (UTR), 전사 출발 부위, 종결 서열, 폴리아데닐화 서열, 인트론, 및 이의 조합물을 포함한다. 조절 영역은 전형적으로 적어도 코어(기저) 프로모터를 포함한다. 조절 영역은 또한 적어도 하나의 제어 요소, 예를 들어 인핸서 서열, 업스트림 요소 또는 업스트림 활성화 영역 (UAR)을 포함할 수 있다. 조절 영역은, 조절 영역이 서열의 전사 또는 번역을 조절하는데 유효하도록 조절 영역과 코딩 서열을 정위시킴으로써 코딩 서열에 작동적으로 연결된다. 예를 들어, 코딩 서열 및 프로모터 서열을 작동적으로 연결시키기 위해, 코딩 서열의 번역적 리딩 프레임의 번역 개시 부위는 전형적으로 프로모터의 1 내지 약 50개 누클레오티드 다운스트림에 정위된다. 그러나, 조절 영역은 번역 개시 부위의 약 5,000개 만큼 많은 누클레오티드 업스트림, 또는 전사 출발 부위의 약 2,000개 누클레오티드 업스트림에 정위될 수 있다.
포함되는 조절 영역의 선택은 비제한적으로 특정 배양 단계 동안의 효율, 선택성, 유도성, 요망되는 발현 수준, 및 우선적인 발현을 포함하는 여러 인자에 의해 좌우된다. 코딩 서열에 대한 조절 영역을 적절하게 선택하고 정위함에 의해 코딩 서열의 발현을 조절하는 것은 당업자에게는 일상적인 것이다. 하나를 초과하는 조절 영역, 예컨대 인트론, 인핸서, 업스트림 활성화 영역, 전사 터미네이터, 및 유도성 요소가 존재할 수 있음이 이해될 것이다.
하나 이상의 유전자는 스테비올 및/또는 스테비올 글리코시드 생성의 별개의 양태에 유용한 "모듈"로 재조합 핵산 작제물에 조합될 수 있다. 모듈, 특히 폴리시스트론 모듈에서 복수의 유전자를 조합시키는 것은 다양한 종에서의 모듈의 이용을 촉진한다. 예를 들어, 스테비올 생합성 유전자 클러스터, 또는 UGT 유전자 클러스터는 폴리시스트론 모듈에서 조합될 수 있어서, 적합한 조절 영역의 삽입 후, 상기 모듈은 광범하게 다양한 종에 도입될 수 있다. 또 다른 예로서, UGT 유전자 클러스터는 각각의 UGT 코딩 서열이 분리된 조절 영역에 작동적으로 연결되어 UGT 모듈을 형성하도록 조합될 수 있다. 그러한 모듈은 모노시스트론 발현이 필수적이거나 또는 바람직한 종들에서 이용될 수 있다. 재조합 작제물은 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생성에 유용한 유전자 외에, 전형적으로 복제 기점, 및 적절한 종에서 작제물의 유지를 위한 하나 이상의 선택 마커를 또한 함유한다.
유전자 코드의 축퇴로 인해, 다수의 핵산은 특정한 폴리펩티드를 인코딩할 수 있으며; 즉, 다수의 아미노산의 경우, 아미노산에 대한 코돈으로서 작용하는 하나를 초과하는 누클레오티드 트리플렛(triplet)이 존재함을 인지할 것이다. 따라서, 주어진 폴리펩티드에 대한 코딩 서열의 코돈은 특정 숙주에서 최적의 발현이 얻어지도록, 그 숙주 (예를 들어, 미생물)에 적절한 코돈 바이어스 테이블을 이용하여 변형될 수 있다. 분리된 핵산으로서, 이러한 변형된 서열은 정제된 분자로서 존재할 수 있고 재조합 핵산 작제물에 대한 모듈을 구성하는데 사용하기 위해 벡터 또는 바이러스에 혼입될 수 있다.
일부 경우에 대사 중간체를 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생합성 쪽으로 전용시키기 위해 내인성 폴리펩티드의 하나 이상의 기능을 억제하는 것이 바람직하다. 예를 들어, 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생성을 더 증가시키기 위해, 예컨대 스쿠알렌 에폭시다제를 하향조절함으로써, 효모 균주에서 스테롤의 합성을 하향조절하는 것이 바람직할 수 있다. 또 다른 예로서, 특정한 내인성 유전자 생성물, 예를 들어 본원에 논의된 대로 이차 대사산물로부터 글루코스 모이어티를 제거하는 글리코하이드롤라제 또는 포스파타제의 분해 기능을 억제하는 것이 바람직할 수 있다. 또 다른 예로서, 스테비올 글리코시드의 수송에 관여하는 막 트랜스포터의 발현이 억제될 수 있어서, 글리코실화된 스테비오시드의 분비가 억제된다. 그러한 조절은 미생물의 배양 중에 요망되는 기간 동안 스테비올 글리코시드의 분비를 억제시킬 수 있어서, 이에 의해 회수되는 글리코시드 생성물(들)의 수율을 증가시키는데 유리할 수 있다. 그러한 경우에, 폴리펩티드 또는 유전자 생성물의 발현을 억제하는 핵산은 균주로 형질전환되는 재조합 작제물에 포함될 수 있다. 대안적으로, 돌연변이유발을 이용하여 기능을 억제하는 것이 요망되는 유전자의 돌연변이체를 생성할 수 있다.
III. 트랜스포터 발현
본 문헌은 내인성 트랜스포터 유전자의 발현이 변형되거나 이종성 트랜스포터 유전자가 발현되는 재조합 숙주 세포에 관한 것이다. 일부 구체예에서, 내인성 트랜스포터의 발현은 내인성 프로모터를 트랜스포터 단백질의 증가된 발현을 유도하는 상이한 프로모터로 대체함으로써 변형될 수 있다 (예를 들어, 적어도 5% 발현 증가 예컨대, 적어도 10%, 15%, 20%, 또는 25% 발현 증가). 예를 들어, 내인성 프로모터는 트랜스포터의 증가된 발현을 유도하는 항시성 또는 유도성 프로모터로 대체될 수 있다. 상동 재조합은 내인성 유전자를, 트랜스포터의 증가된 발현을 유도하는 상이한 프로모터로 대체하는데 이용될 수 있다. 기타 구체예에서, 유도성 또는 항시성 프로모터 및 내인성 프로모터 또는 전사 인자 유전자는 상동 재조합을 이용하여 유전체의 또 다른 로커스로 통합될 수 있다. 기타 구체예에서, 트랜스포터 유전자는 미생물에서 트랜스포터의 과다발현을 유도하는 프로모터를 갖는 외인성 플라스미드를 사용하여 미생물내로 도입될 수 있다. 추가의 또 다른 구체예에서, 외인성 플라스미드는 또한, 트랜스포터 유전자의 다수의 복사체를 함유할 수 있다. 추가의 구체예에서, 내인성 트랜스포터는 재조합 미생물에 대한 천연 메카니즘 (예를 들어, 열 쇼크, 스트레스, 중금속 또는 항생제 노출)을 이용하여 과다발현되는 것으로 유도될 수 있다. 예를 들어, 올리고마이신 및/또는 카드뮴이 배양 배지 (여기서, YOR1 발현은 상기 분자에 의해 유도될 수 있음)에 첨가되어 YOR1의 발현을 증가시키고, 이에 따라 스테비올 글리코시드의 분비를 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Hallstrom & Moye-Rowley (1998) JBC 273(4): 2098-104; Nagy et al., (2006) Biochimie. 88(11):1665-71; and Katzmann et al., 　(1995) Mol Cell Biol. 15(12):6875-83] 참조.
본원에 기술된 바와 같이, 특정 내인성 트랜스포터의 발현을 증가시키거나 재조합 숙주에서 이종성 트랜스포터를 발현 (예를 들어, 미생물 예컨대, S. 세레비시애에서 S. 레바우디아나 트랜스포터를 발현)시키는 것은 스테비올 글리코시드를 더욱 효율적으로 생성하고 분비하는 능력을 그 숙주에 부여할 수 있다. 숙주를 배양하는 동안 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드의 양은 본원에 기술된 바와 같은 액체 크로마토그래피 - 질량 분광계 (LC-MS)에 의해 측정될 수 있다.
트랜스포터 (또한, 멤브레인 수송 단백질로서 언급됨)는 생물학적 멤브레인을 횡단하는 분자 및 이온의 움직임과 관련된 멤브레인 단백질이다. 트랜스포터는 이들이 위치하는 막에 걸쳐 있으며 이러한 막을 가로질러 물질을 수송한다. 트랜스포터는 조장된 확산 또는 활성 수송에 의해 물질을 이동시키도록 작동할 수 있다. 수송 단백질은 트랜스포터 분류 데이타베이스 (Transporter Classification Database)에서 다양한 기준에 따라 분류되었다. 문헌 [Saier Jr. et al., Nucl. Acids Res., 37:D274-278 (2009)]을 참조하라. 2개 패밀리의 플라즈마 멤브레인 트랜스포터는 생 유기체에 편재된 것으로 여겨진다: ATP-결합 카세트 (ABC) 트랜스포터 및 주요 촉진자 슈퍼패밀리 (MFS) 트랜스포터. ATP-결합 카세트 트랜스포터 (ABC 트랜스포터)는 멤브레인을 횡단하여 다양한 물질의 전위를 수행하기 위해 아데노신 트리포스페이트 (ATP) 가수분해의 에너지를 이용하는 트랜스멤브레인 단백질이다. 이들은 세포외 및 세포내 멤브레인을 횡단하여 대사 산물, 지질 및 스테롤, 및 약물을 포함하는 매우 다양한 물질을 수송할 수 있다. 단백질은 이들의 ATP-결합 카세트 도메인의 서열 및 구성을 기반으로 하여 ABC 트랜스포터로서 분류된다. 전형적으로, ABC 패밀리 트랜스포터는 ATP 가수분해에 반응하여 분자를 수송할 수 있는 다중성분 주 활성 트랜스포터이다. 내인성 ABC 트랜스포터 유전자의 비제한적 예는 PDR5, PDR10, PDR15, SNQ2, YOR1, YOL075c 및 PDR18에서의 유전자 (또는 이의 기능적 호몰로그)를 포함한다.
주요 촉진자 슈퍼패밀리 (MFS) 트랜스포터는 화학삼투 이온 구배에 반응하여 작은 용질을 수송할 수 있는 폴리펩티드이다. 문헌 [Saier, Jr. et al., J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 1:257-279 (1999)]. MFS 트랜스포터 패밀리는 종종 단일트랜스포터-공동트랜스포터-역트랜스포터 패밀리로서 언급된다. MFS 트랜스포터는 특히 당 흡수 및 약물 유출 시스템에서 작용한다. MFS 트랜스포터는 전형적으로 보존된 MSF-특이적 모티프를 함유한다. 내인성 MFS 트랜스포터 유전자의 비제한적 예는 TPO1, TPO3, 및 FLR1 로커스에서의 유전자 (또는 이의 기능적 호몰로그)를 포함한다.
그 밖의 트랜스포터 패밀리는 SMR (작은 다중약물 내성) 패밀리, RND (내성-근류형성-세포 분열) 패밀리, 및 MATE (다중약물 및 독성 화합물 압출) 패밀리를 포함한다. SMR 패밀리 구성원은 광범위한 소독제, 친유성 사차 암모늄 화합물 (QAC)에 대한 내성 및 박테리아에서 아미노글리코시드 내성을 부여하는 4개의 알파-헬릭스 트랜스멤브레인 가닥을 특징으로 하는 내재막 단백질이다. 문헌 [Bay and Turner, BMC Evol Biol., 9: 140 (2009)] 참조. 예를 들어, 에스체리치아 콜라이 (GenBank: BAE76318.1; SEQ ID NO: 92)의 EmrE 유출 트랜스포터는 아미노글리코시드 내성과 관련된다. 이는 2개 양성자에 대한 교환시 양으로 하전된 방향족 약물 (즉, 메틸 비올로겐 또는 에티듐)을 압출하는 호모올리고머이다.
RND 패밀리 구성원은 그람-음성 박테리아를 포함하여 이 중에 널리 분포되며, 많은 항생제 및 화학요법제의 활성 유출을 촉매작용한다. 문헌 [Nikaido and Takatsuk, Biochim Biophys Acta., 1794(5):769-81 (2009)] 참조. 예시적인 단백질은 에리트로마이신 D 수송에 관련된 에스체리치아 콜라이로부터의 AcrAB이다 (GenBank: BAE76241.1; SEQ ID NO: 93, 및 AAA23410.1; SEQ ID NO: 94).
MATE 패밀리 구성원은 12개 트랜스멤브레인 (TM) 도메인을 함유한다. MATE 패밀리의 구성원은 원핵생물, 효모 예컨대, 사카로마이세스 세레비시애 및 쉬조사카로마이세스 폼베, 및 식물에서 확인되었다. 문헌 [Diener et al., Plant Cell. 13(7): 1625-1638 (2001)]. MATE 패밀리 구성원은 소듐 또는 양성자 역트랜스포터이다. 예시적인 표적 분자는 E. 콜라이로부터의 ydhE (GenBank AAB47941.1; SEQ ID NO: 95)이며, 이는 플루오로퀴놀론, 카나마이신, 스트렙토마이신, 기타 아미노글리코시드 및 베르베린 (Berberine)을 수송한다.
A. 전사 인자
전사 인자 발현의 변형이 또한, 트랜스포터 발현을 증가시키는데 이용될 수 있다. 예를 들어, 효모 전사 인자 PDR1 및/또는 PDR3는 ABC 트랜스포터 PDR5, SNQ2 및 YOR1를 인코딩하는 유전자의 발현을 조절한다. 따라서, 일부 구체예에서, 내인성 PDR1 및 PDR3 로커스에 대한 프로모터는 전사 인자의 증가된 발현을 유도하는 상이한 프로모터로 대체될 수 있으며, 이는 내인성 트랜스포터의 생성을 증가시킬 수 있다. 다른 구체예에서, 전사 인자는 미생물에서 전사 인자의 과다발현을 유도하는 프로모터를 지닌 외인성 플라스미드를 사용하여 미생물 내로 도입될 수 있다. 또 다른 추가의 구체예에서, 외인성 플라스미드는 또한 전사 인자의 다수의 복사체를 함유할 수 있다. 추가의 구체예에서, 내인성 전사 인자는 재조합 미생물에 대한 천연 메카니즘 (예를 들어, 열 쇼크, 스트레스, 중금속 또는 항생제 노출)을 이용하여 과다발현되도록 활성화되거나 유도될 수 있다.
B. 스테비올 분비 경로 중간체에 영향을 끼치는 유전자 식별
스테비올 분비 경로 중간체에 영향을 끼치는 유전자를 식별하는 방법이 본원에 기술되어 있다. 이러한 방법은 적어도 하나의 내인성 트랜스포터 유전자의 발현을 불활성화시키거나 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 변형시키는 것을 포함할 수 있다. 전형적으로, 변이체 미생물의 라이브러리가 준비되며, 라이브러리에서 각 변이체는 불활성화된 상이한 내인성 트랜스포터 유전자를 갖는다. 일부 구체예에서, 상이한 내인성 트랜스포터 유전자의 발현은 라이브러리의 각 미생물에서 변형된다. 변형이 발생하는 어미 미생물은 스테비올 글리코시드 경로 유전자가 결여될 수 있으며, 요망되는 경우 이러한 유전자중 하나 이상을 함유할 수 있긴 하다. 일반적으로, 스테비올 글리코시드 경로 유전자의 부재하에 변형을 발생시키고 후속하여 요망되는 상이한 표적 글리코시드 생성물의 생성을 촉진하는 그러한 경로 유전자를 도입시키는 것이 더욱 편리하다. 하나 이상의 스테비올 글리코시드 경로 유전자를 함유하는 변이체 미생물이 스테비올 또는 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에서 배지에서 배양되며, 미생물에 의해 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드 경로 중간체의 양은 본원에 기술된 바와 같이 (예를 들어, LC-MS를 사용하여) 측정될 수 있다.
특징지어진 중간체(들)는 미생물에서 특정 관심 경로에 의존적이다. 예를 들어, 76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2 UGT (하기 기술됨)를 발현하는 미생물은 스테비올로부터 중간체 화합물 스테비올-19-O-글루코시드 (19-SMG), 루부소시드 및 스테비오시드를 경유해 표적 생성물 레바우디오시드 A를 합성할 수 있다. 도 1을 참조하라. 따라서, 레바우디오시드 A가 표적 생성물인 경우, 미생물에 의해 배양 상청액으로 분비된 19-SMG의 양 및 미생물 내부에 유지된 19-SMG의 양이 측정될 수 있다. 미생물의 배양 동안 생성된 각 중간체의 양 또는 개별 중간체의 양이 측정될 수 있다. 변이체 미생물에 의해 생성된 세포외 경로 중간체(들)의 양이 트랜스포터 유전자에 대해 야생형인 상응하는 미생물에 의해 생성된 양보다 큰 경우, 내인성 트랜스포터 유전자는 스테비올 경로 중간체의 분비에 영향을 끼치는 것으로서 확인된다. 트랜스포터가 기타 중간체의 분비에 영향을 끼치는 지를 측정하는데 유사한 방법이 이용될 수 있다.
IV. 내인성 트랜스포터 불활성화
본 문헌은 하나 이상의 불활성화된 내인성 트랜스포터 유전자를 포함하는 재조합 숙주에 관한 것일 수 있다. 내인성 트랜스포터 유전자는 전형적으로, 유전자의 발현을 파괴함으로써 또는 돌연변이를 도입시킴으로써 불활성화되어 돌연변이 예를 들어, 하나 이상의 내인성 트랜스포터 유전자의 파괴를 포함하는 숙주에서 트랜스포터 활성을 감소시키거나 심지어 완전히 제거하며, 이렇게 하여 숙주가 파괴된 유전자에 의해 인코딩된 트랜스포터에 대한 감소된 트랜스포터 발현 또는 활성을 갖는다.
일부 구체예에서, 넉아웃되는 트랜스포터는 또한, 더 큰 분자량의 레바우디오시드 (예를 들어, RebA)의 분비에 대한 특이성을 가질 수 있으며, 따라서, RebA의 배지로의 분비가 요망되는 균주에서 과다발현시키는데 유용할 수 있다. 경로 UGT의 발현을 통한 글리코실화 활성 비율의 적절한 균형을 이용하여, 더 적은 분자량의 스테비올 글리코시드가 이들이 배지로 분비되기 전에 추가로 글리코실화된다. 예를 들어, UGT74G1 및 UGT85C2 효소와 비교하여 UGT76G1 및 UGT91D2e 및/또는 EUGT11의 더 높은 발현 수준은 더욱 용이하게 분비되는 스테비올 모노글루코시드의 축적을 방지할 수 있다. UGT 활성 수준이 수송의 속도보다 높다면 (그래서, 글리코실화 속도가 더 빠르면), 더 높은 분자량의 스테비올 글리코시드가 생성될 것이다.
많은 트랜스포터는 중복되는 기질 특이성을 가지기 때문에 그리고, 특정 트랜스포터에서의 파괴는 기타 트랜스포터의 상향-조절에 의해 보완되기 때문에, 이는 복수의 불활성화된 트랜스포터 유전자를 함유하는 숙주를 생성시키는데 종종 유용하다. 예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이, PDR5, PDR10, PDR15 및 SNQ2 로커스는 하기 실시예에 제시된 바와 같이 파괴될 수 있다. 일부 구체예에서, TPO1, PDR5, PDR10, PDR15 및 SNQ2 로커스는 하기 실시예에 제시된 바와 같이 파괴될 수 있다.
불활성화될 수 있는 추가적인 트랜스포터 유전자는 관련된 서열 예를 들어, 효모 PDR5, PDR10, PDR15 및 SNQ2 로커스에서 발견된 서열의 기능을 기반으로 확인될 수 있다. 내인성 트랜스포터 유전자는 유전자를 파괴하는 돌연변이에 의해 불활성화될 수 있다. 예를 들어, 유전자 대체 벡터는 상동 재조합을 매개하는데 충분한 길이의 트랜스포터 유전자의 일부에 의해 5' 및 3' 말단 둘 모두에서 플랭킹된 선택 마커 유전자를 포함하는 방식으로 작제될 수 있다. 선택 마커는 숙주 세포 영양요구를 보완하거나, 항생제 내성을 제공하거나 색상 변화를 유도하는 임의의 수의 유전자중 하나일 수 있다. 이어서, 플라스미드 DNA 또는 ars 요소를 함유하지 않는 유전자 대체 벡터의 선형화된 DNA 단편이 공지된 방법을 이용하여 세포내로 도입된다. 선형 단편의 유전체로의 통합 및 트랜스포터 유전자의 파괴는 선택 마커를 기초로 결정될 수 있으며 예를 들어, 서던 블롯 분석에 의해 입증될 수 있다. 생성 세포는 트랜스포터에 대한 로커스에서 선택 마커의 삽입으로 인해 불활성화된 변이체 트랜스포터 유전자를 함유한다. 결실-파괴 유전자 대체 벡터는 공지된 기법을 이용하여 유사한 방식으로 작제될 수 있고, 상동 재조합에 의해 내인성 트랜스포터 유전자에 통합되어 이를 불활성화시킬 수 있다. 일부 구체예에서, 선택 마커는 요망된 파괴 돌연변이가 도입되었음을 결정한 후 숙주 세포의 유전체로부터 제거될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Gossen et al. (2002) Ann. Rev. Genetics 36:153-173] 및 미국 출원 공개 번호 20060014264를 참조하라.
내인성 트랜스포터 유전자는 또한, 전사 활성인자-유사 이펙터 누클레아제 (TALEN) 또는 변형된 아연 핑거 누클레아제를 사용함으로써 불활성화되어 요망되는 삽입 또는 결실 돌연변이를 도입할 수 있다. 미국 특허 공개 번호 2012-0178169를 참조하라. 일부 구체예에서, 내인성 트랜스포터 유전자는 누클레오티드의 삽입, 누클레오티드의 결실, 또는 야생형 트랜스포터 유전자 서열에서 전이 또는 전환 점변이를 유도하는 돌연변이를 도입함으로써 불활성화된다. 트랜스포터 유전자에 도입될 수 있는 다른 유형의 돌연변이는 야생형 서열에서의 복제 및 전도를 포함한다. 돌연변이는 트랜스포터 로커스에서의 코딩 서열은 물론 비코딩 서열 예컨대, 조절 영역, 인트론 및 기타 비번역된 서열에서 이루어질 수 있다. 코딩 서열에서의 돌연변이는 상응하는 유전자 생성물에서 하나 이상의 아미노산의 삽입, 하나 이상의 아미노산의 결실 및/또는 비-보존적 아미노산 치환을 유도할 수 있다. 일부 경우에, 트랜스포터 유전자의 서열은 하나 초과의 돌연변이 또는 하나 초과의 유형의 돌연변이를 포함한다. 코딩 서열에서 아미노산의 삽입 또는 결실은 예를 들어, 생성 유전자 생성물의 기질 결합 포켓의 형태를 파괴할 수 있다.
아미노산 삽입 또는 결실은 또한 유전자 생성물 활성에 중요한 촉매 부위를 파괴할 수 있다. 더 큰 수의 인접 아미노산의 삽입 또는 결실은 더 적은 수의 삽입되거나 결실된 아미노산과 비교하여, 유전자 생성물이 좀 더 비-기능성을 띠게 하는 것 같다. 비-보존적 치환은 유전자 생성물의 전하 또는 소수성에서의 실질적인 변화를 유도할 수 있다. 비-보존적 아미노산 치환은 또한, 대부분의 측쇄 잔기에서의 실질적 변화, 예를 들어, 이소류신 잔기 대신 알라닌 잔기로의 치환을 유도할 수 있다. 비-보존적 치환의 예는 비-극성 아미노산 대신 염기성 아미노산, 또는 산성 아미노산 대신 극성 아미노산을 포함한다.
일부 구체예에서, 트랜스포터 유전자에서의 돌연변이는 아미노산 변화를 유도할 수 없으나, 비록 인코딩된 트랜스포터의 아미노산 서열에 영향을 끼치지 않지만, 전사 수준을 변화시킬 수 있거나 (예를 들어, 전사 증가 또는 감소), 번역 수준을 감소시키거나, DNA 또는 mRNA의 이차 구조를 변형시키거나, 전사 또는 번역 기기에 대한 결합 부위를 변경시키거나 tRNA 결합 효율을 감소시킬 수 있다.
트랜스포터 로커스에서의 돌연변이는 시험관내에서 트랜스포터 유전자 서열의 부위-특이적 돌연변이 유발에 이어서, 상동 재조합에 의해 발생되어 돌연변이를 상기 기술된 비와 같은 숙주 유전체로 도입시킬 수 있다. 그러나, 돌연변이는 또한, 돌연변이 유인제를 사용하여 숙주 세포에서 돌연변이 유발을 유도함으로써 발생하여 세포 군집내에서 유전자 돌연변이를 유도할 수 있다. 돌연변이 유발은 특히, 시험관내에서 돌연변이 유발 및 상동 재조합이 덜 잘 확립되거나 불편한 그러한 종 또는 균주에 유용하다. 특정 종 또는 균주에 대한 돌연변이 유발 화학물질 또는 방사선의 용량은, 치사 또는 재현가능한 멸균을 특징으로 하는 한계 수준 미만의 빈도의 돌연변이가 수득되도록 실험적으로 결정된다.
A. 전사 인자
전사 인자 발현의 변형은 또한 트랜스포터 발현을 감소시키거나 제거하는데 이용될 수 있다. 예를 들어, 효모 전사 인자 PDR1 및/또는 PDR3은 ABC 트랜스포터 PDR5, SNQ2 및 YOR1을 인코딩하는 유전자의 발현을 조절한다. 로커스 파괴 또는 PDR1 및/또는 PDR3의 발현 감소는 스테비올 글리코시드 중간체의 분비의 검출가능한 감소를 유도할 수 있다. 따라서, 일부 구체예에서, 효모 숙주는 복수의 불활성화된 트랜스포터 유전자와 조합된 불활성화된 내인성 PDR1 및 PDR3 로커스를 함유하여 임의의 단일 트랜스포터 또는 전사 인자의 불활성화에 의해 제공되는 것보다 더 많이 감소된 중간체의 분비를 제공한다. 또 다른 구체예에서, 전사 인자의 발현을 파괴하거나 감소시킴으로써 스테비올 글리코시드 분비를 감소시키는 것으로 확인된 전사 인자는 이어서 스테비올 글리코시드의 분비를 증가시키기 위해 재조합 미생물에서 과다발현될 수 있다.
B. 스테비올 분비 경로 중간체에 영향을 끼치는 유전자 식별
스테비올 분비 경로 중간체에 영향을 끼치는 유전자를 확인하는 방법이 본원에 기술되어 있다. 이러한 방법은 적어도 하나의 내인성 트랜스포터 유전자를 불활성화시키거나 파괴하거나 감소시키는 것을 포함할 수 있다. 전형적으로, 변이체 미생물의 라이브러리가 준비되며, 라이브러리에서 각 변이체는 불활성화되거나 파괴되거나 발현이 감소된 상이한 내인성 트랜스포터 유전자를 갖는다. 변형이 발생하는 어미 미생물은 스테비올 글리코시드 경로 유전자가 결여될 수 있으나, 요망되는 경우 이러한 유전자 중 하나 이상을 함유할 수 있긴 하다. 일반적으로, 스테비올 글리코시드 경로 유전자의 부재하에 돌연변이를 발생시키고 후속하여 요망되는 상이한 표적 글리코시드 생성물의 생성을 촉진하는 그러한 경로 유전자를 도입시키는 것이 더욱 편리하다. 하나 이상의 스테비올 글리코시드 경로 유전자를 함유하는 변이체 미생물이 스테비올 또는 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에서 배지에서 배양될 수 있으며, 미생물에 의해 생성된 세포외 및/또는 세포내 스테비올 글리코시드 경로 중간체의 양이 측정될 수 있다.
특징지어진 중간체(들)는 미생물에서 특정 관심 경로에 의존적이다. 예를 들어, 76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2 UGT (하기 기술됨)를 발현하는 미생물은 스테비올로부터 중간체 화합물 스테비올-19-O-글루코시드 (19-SMG), 스테비올-13-O-글루코스 (13-SMG), 루부소시드 및 스테비오시드를 경유해 표적 생성물 레바우디오시드 A를 합성할 수 있다. 도 1을 참조하라. 따라서, 레바우디오시드 A가 표적 생성물인 경우, 미생물에 의해 배양 상청액으로 분비된 19-SMG의 양 및 미생물 내부에 유지된 19-SMG의 양이 측정될 수 있다 (예를 들어, 액체 크로마토그래프 - 질량 분광계 (LC-MS)를 사용). 미생물의 배양 동안 생성된 각 중간체의 양 또는 개별 중간체의 양이 측정될 수 있다. 변이체 미생물에 의해 생성된 세포외 경로 중간체(들)의 양이 트랜스포터 유전자에 대해 야생형인 상응하는 미생물에 의해 생성된 양보다 큰 경우, 내인성 트랜스포터 유전자는 스테비올 경로 중간체의 분비에 영향을 끼치는 것으로서 확인된다. 트랜스포터가 기타 중간체의 분비에 영향을 끼치는 지를 측정하는데 유사한 방법이 이용될 수 있다.
V. 숙주
많은 원핵생물 및 진핵생물이 본원에 기재된 재조합 미생물, 예를 들어 그람-음성 박테리아, 효모 및 진균을 구성하는데 적합하다. 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생성 균주로 사용하도록 선택한 종 및 균주는 우선 생성 유전자가 이 균주에 내인성인지, 유전자가 존재하지 않는 지를 판단하기 위하여 분석한다. 균주에 내인성 대응 부분이 존재하지 않는 유전자는 하나 이상의 재조합 작제물에 통합되고, 이는 그 다음 손실 기능(들)을 공급하기 위하여 균주내로 형질전환된다.
예시적인 원핵생물 및 진핵생물 종들은 하기에서 더욱 상세하게 설명한다. 그러나, 기타 다른 종들이 적합할 수 있음을 인지할 것이다. 예를 들어, 적합한 종은 사카로미케스강에 존재할 수 있다. 추가적인 적합한 종은 아가리쿠스, 아스퍼길루스, 바실루스, 캔디다, 코리네박테리움, 에스체리치아, 푸사리움/깁베렐라, 클루이베로마이세스, 래티포루스, 렌티누스, 파피아, 파네로새테, 피치아, 피스코미트렐라, 로도투룰라 사카로마이세스, 쉬조사카로마이세스 , 스파셀로마, 잔토필로마이세스, 및 야로위아로 구성된 군으로부터 선택된 속에 속할 수 있다.
이러한 속으로부터 선택된 예시적은 종은 렌티누스 티그리누스 (Lentinus tigrinus), 래티포루스 술푸레우스 (Laetiporus sulphureus), 파네로새테 크리소스포리움 (Phanerochaete chrysosporium), 피치아 파스토리스 (Pichia pastoris), 피스코미트렐라 파텐스 (Physcomitrella patens), 로도투룰라 글루티니스 (Rhodoturula glutinis) 32, 로도투룰라 무실라기노사 (Rhodoturula mucilaginosa), 파피아 로도자이마 (Phaffia rhodozyma) UBV-AX, 잔토필로마이세스 덴드로우스, 푸사리움 푸지쿠로이/깁베렐라 푸지코로이, 캔디다 유틸리스 (Candida utilis), 및 야로위아 리폴리티카를 포함한다. 일부 구체예에서, 미생물은 아스코미세테 (Ascomycete), 예를 들어 기베레라 푸지코로이, 클루이베로마이세스 락티스, 쉬조사카로마이세스 폼베, 아스퍼길루스 나이저 또는 사카로마이세스 세레비시애일 수 있다. 일부 구체예에서, 미생물은 원핵생물, 예컨대 에스체리치아 콜라이 로도박터 스패로이데스 (Rhodobacter sphaeroides), 또는 로도박터 캡슐라투스 (Rhodobacter capsulatus)일 수 있다. 특정 미생물은 관심 유전자를 고처리량 (high throughput) 방식으로 스크리닝하고 테스트하는데 이용될 수 있는 반면, 원하는 생산성 또는 성장 특징을 가진 기타 다른 미생물은 스테비올 글리코시드를 대규모로 생산하는데 이용할 수 있음을 인지할 것이다.
사카로마이세스 세레비시애 및 관련 효모 종
사카로마이세스 세레비시애는 합성 생물학에서 광범위하게 이용되는 새시 (chassis) 유기체이고, 재조합 미생물 플랫폼으로 이용될 수 있다. S. 세레비시애에 이용할 수 있는 변이체의 라이브러리, 플라스미드, 상세한 대사 컴퓨터 모델 및 기타 정보가 있어서, 생성물 수율을 향상시키기 위한 다양한 모듈의 합리적인 설계가 가능하다. 재조합 미생물을 만드는 방법은 공지되어 있다. 다수의 공지된 프로모터를 이용하여 스테비올 생합성 유전자 클러스터를 효모, 특히 사카로미케스강에서 발현시킬 수 있다. 테르펜을 과다 생성하는 균주는 공지되어 있으며, 이를 이용하여 스테비올 및 스테비올 글리코시드 생성에 이용할 수 있는 게라닐게라닐 디포스페이트의 양을 증가시킬 수 있다. 사카로마이세스 세레비시애는 예시적인 사카로마이세스 종이다.
아스퍼길루스 종
아스퍼길루스 종, 예를 들어, A. 오리재 (A. oryzae), A. 니거 (A. niger), 및 A. 소재 (A. sojae)는 식품 생산에 광범위하게 이용되는 미생물이며, 재조합 미생물 플랫폼으로 또한 이용될 수 있다. 누클레오티드 서열은 A. 니둘란스 (A. nidulans), A. 푸미가투스 (A. fumigatus), A. 오리재, A. 플래버스 (A. flavus), A. 니거, 및 A. 테레우스 (A. terreus)의 유전체로 이용가능하여, 유동을 증대시키고, 생성물 수율을 증가시키기 위하여 내인성 경로의 합리적인 설계 및 변경이 가능하게 한다. 아스퍼길루스 뿐만 아니라 트랜스크립토믹 (transcriptomic) 연구와 프로테오믹스 (proteomics) 연구를 위한 대사 모델이 개발되어 왔다. A. 니거는 많은 식품 성분, 예를 들어, 시트르산 및 글루콘산의 산업적 생산을 위해 배양되며, 이에 따라, A. 니거는 스테비올 및 스테비올 글리코시드와 같은 식품 성분의 생산에 일반적으로 적합하다.
에스체리치아 콜라이
합성 생물학에서 광범위하게 이용되는 또 다른 플랫폼 유기체인 에스체리치아 콜라이는 재조합 미생물 플랫폼으로 또한 이용할 수 있다. 사카로마이세스와 유사하게, E. 콜라이에 이용가능한 돌연변이체의 라이브러리, 플라스미드, 상세한 대사 컴퓨터 모델 및 기타 정보가 있어서, 생성물 수율을 향상시키기 위해 다양한 모듈의 합리적인 설계가 가능하다. 사카로마이세스에 대해 상기에서 기재한 바와 유사한 방법들을 이용하여 재조합 E. 콜라이 미생물을 만들 수 있다.
아가리쿠스, 깁베렐라 및 파네로새테 종
아가리쿠스, 깁베렐라, 및 파네로새테 종은 이들이 배양액에서 다량의 깁베렐린을 생성하는 것으로 공지되어 있기 때문에 유용할 수 있다. 따라서, 다량의 스테비올 및 스테비올 글리코시드를 생성하기 위한 테르펜 전구체는 이미 내인성 유전자에 의해 생성된다. 따라서, 스테비올 또는 스테비올 글리코시드 생합성 폴리펩티드에 대한 재조합 유전자를 포함하는 모듈은 메발로네이트 또는 MEP 경로 유전자를 도입할 필요없이 이러한 속으로부터의 종에 도입될 수 있다.
아르술라 아데니니보란스 ( 블라스토보트리스 아데니니보란스 ( Blastobotrys adeniniborans ))
아르술라 아데니니보란스는 일반적이지 않은 생화학적 특성들을 갖는 이형태 효모이다 (42℃의 온도까지 빵효모와 같은 출아 효모로서 성장하고, 이러한 임계값 위에서 필라멘트 모양으로 성장함). 이것은 광범위한 기질 상에서 성장할 수 있는 니트레이트를 흡수할 수 있다. 이는 천연 플라스틱을 생성할 수 있는 균주의 생성 또는 환경 샘플에서 에스트로겐에 대한 바이오센서의 개발에 성공적으로 적용되어 왔다.
야로위아 리폴리티카
야로위아 리폴리티카는 광범위한 기질에서 성장할 수 있는 이형태 효모이다 (아르술라 아데니니보란스 참조). 이것은 산업상 이용가능성에서 높은 가능성을 갖지만, 아직 시판되는 재조합 생성물은 없다.
로도박터 종 ( Rhodobacter spp.)
로도박터 종은 재조합 미생물 플렛폼으로 이용될 수 있다. E. 콜라이과 유사하게, 이용가능한 돌연변이체 라이브러리 뿐만 아니라 적합한 플라스미드 벡터들이 있어, 생성물 수율을 증대시키기 위한 다양한 모듈의 합리적인 설계가 가능하다. 카로테노이드 및 CoQ10의 생성 증가를 위하여, 로도박터의 막세균 종의 이소프레노이드 경로들이 조작되었다. 미국 특허 공개 번호 제20050003474호 및 제20040078846호 참조. E. 콜라이에 대해 상기 기재한 것과 유사한 방법을 이용하여 재조합 로도박터 미생물을 만들 수 있다.
캔디다 보이디니
캔디다 보이디니는 (메탄올에서 성장할 수 있는) 메탄올자화(methylotrophic) 효모이다. 한세눌라 폴리모르파 및 피치아 파스토리스와 같은 다른 메탄올자화종과 같이, 이것은 이종성 단백질 생성에 탁월한 플랫폼을 제공한다. 멀티그램 범위의 분비된 외래 단백질의 수율이 보고되었다. 컴퓨터활용 방법, IPRO은 캔디다 보이디니 자일로스 리덕타제의 보조인자 특이성을 NADPH로부터 NADH로으로 실험적으로 교환시키는 돌연변이를 최근에 예측하였다.
한세눌라 폴리모르파 ( 피치아 안구스타 ( Pichia angusta ))
한세눌라 폴리모르파는 또 다른 메탄올자화 효모이다 (캔디다 보이디니 참조). 이것은 더욱이 광범위한 또 다른 기질에서도 많이 성장할 수 있다; 이것은 열-내성이며 니트레이트를 흡수할 수 있다 (클루이베로마이세스 락티스 참조). 이것은 B형 간염 백신, 인슐린 및 C형 간염의 치료를 위한 인터페론 알파-2a의 생성, 더 나아가 기술적 효소 범위에 활용되고 있다.
클루이베로마이세스 락티스
클루이베로마이세스 락티스는 케피어 (kefir)의 생성에 정기적으로 활용되는 효모이다. 이것은 여러 당들, 가장 중요하게는 우유 및 유장에 존재하는 락토스에서 성장할 수 있다. 이것은 특히 치즈 생산을 위한 키모신 (대개 소 위장에 존재하는 효소)의 생성에 성공적으로 활용되었다. 생성은 40,000L 크기의 발효조에서 일어난다.
피치아 파스토리스
피치아 파스토리스는 메탄올자화 효모이다 (캔디다 보이디니 및 한세눌라 폴리모르파 참조). 이것은 외래 단백질의 생성을 위한 효과적인 플랫폼을 제공한다. 플랫폼 요소는 키트로 이용가능하며, 단백질 생성을 위해 전세계적으로 학계에서 이용된다. 균주는 복잡한 인간 N-글리칸 (효모 글리칸은 인간에서 발견되는 것과 유사하나 동일하지는 않음)을 생성할 수 있도록 조작되었다.
피스코미트렐라 종
피스코미트렐라 이끼는 현탁 배양액에서 성장할 때 효모 또는 기타 진균 배양과 유사한 특징을 갖는다. 이 속은 식물 2차 대사물의 생성에 중요해진 유형의 세포인데, 이는 일부 다른 유형의 세포에서는 생성하기 어렵다.
VI. 스테비올 글리코시드 생성 방법
본원에 기재된 재조합 미생물은 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 생성하는 방법에 이용할 수 있다. 예를 들어, 상기 방법은 스테비올 및/또는 스테비올 글리코시드 생합성 유전자가 발현되는 조건하에서 배양 배지에 재조합 미생물을 성장시키는 것을 포함할 수 있다. 재조합 미생물은 유가식 배양 (fed batch) 또는 연속 공정에서 성장할 수 있다. 전형적으로, 재조합 미생물은 원하는 기간 동안 정해진 온도(들)에서 발효기에서 성장한다. 방법에 이용되는 특정 미생물에 따라, 다른 재조합 유전자, 예를 들어 이소펜테닐 생합성 유전자 및 테르펜 신타제 및 시클라제 유전자가 또한 존재하고, 발현될 수 있다. 기질 및 중간체, 예를 들어 이소펜테닐 디포스페이트, 디메틸알릴 디포스페이트, 게라닐게라닐 디포스페이트, 카우렌 및 카우레논산의 수준은 공개된 방법에 따라 분석용 배양 배지로부터 시료를 추출하여 측정될 수 있다.
재조합 미생물을 원하는 기간 동안 배양물에서 성장시킨 후, 스테비올 및/또는 하나 이상의 스테비올 글리코시드를 당업계에 공지되어 있는 다양한 기술을 이용하여 배양물로부터 회수할 수 있다. 일부 구체예에서, 투과제 (permeabilizing agent)는 공급원료가 숙주로 들어가고 생성물이 밖으로 나오는 것을 돕기 위해 첨가될 수 있다. 예를 들어, 배양된 미생물의 미정제 용해물을 원심분리시켜 상청액을 수득할 수 있다. 이어서, 생성된 상청액을 크로마토그래피 칼럼, 예컨대 C-18 칼럼에 가하고, 물로 세척하여 친수성 화합물을 제거하고, 메탄올과 같은 용매를 이용하여 관심 화합물(들)을 용리시킨다. 이어서 화합물(들)은 분취용 HPLC에 의해 추가 정제될 수 있다. 또한, WO 2009/140394를 참조하라.
생성된 스테비올 글리코시드 (예를 들어, 레바우디오시드 A 또는 레바우디오시드 D)의 양은 약 1mg/L 내지 약 2000 mg/L, 예를 들어, 약 1 내지 약 10 mg/L, 약 3 내지 약 10 mg/L, 약 5 내지 약 20 mg/L, 약 10 내지 약 50 mg/L, 약 10 내지 약 100 mg/L, 약 25 내지 약 500 mg/L, 약 100 내지 약 1,500 mg/L, 또는 약 200 내지 약 1,000 mg/L, 적어도 약 1,000 mg/L, 적어도 약 1,200 mg/L, 적어도 약 1,400 약 mg/L, 적어도 약 1,600 mg/L, 적어도 약 1,800mg/L 또는 적어도 약 2,000 mg/L, 일 수 있다. 일반적으로, 배양시간이 길면 더 많은 양의 생성물을 얻을 수 있다. 따라서, 재조합 미생물은 1일 내지 7일까지, 1일 내지 5일까지, 3일 내지 5일까지, 약 3일, 약 4일, 또는 약 5일 동안 배양할 수 있다.
본원에 기재된 다양한 유전자와 모듈은 단일 미생물보다는 2가지 이상의 재조합 미생물에 존재할 수 있음을 인지할 것이다. 복수의 재조합 미생물이 이용될 때, 이들은 스테비올 및/또는 스테비올 글리코시드를 생성하기 위하여 혼합된 배양액에서 성장할 수 있다. 예를 들어, 제 1 미생물은 스테비올을 생성하기 위한 하나 이상의 생합성 유전자 및 내인성 트랜스포터의 제 1 군에서의 삭제 돌연변이를 포함할 수 있는 반면, 제 2 미생물은 스테비올 글리코시드 생합성 유전자 및 내인성 트랜스포터의 제 2 군에서의 삭제 돌연변이를 포함한다.
대안으로, 2개 이상의 미생물 각각이 별도의 배양 배지에서 성장될 수 있고, 제 1 배양 배지의 생성물, 예를 들어 스테비올을 제 2 배양 배지로 도입하여, 후속 중간 생성물로 전환시키거나 레바우디오시드 A와 같은 최종 생성물로 전환시킬 수 있다. 제 2 또는 최종 미생물에 의해 생성된 생성물을 이어 회수한다. 미생물은 내인성 트랜스포터에서 동일하거나 상이한 군의 돌연변이를 가질 수 있다. 일부 구체예에서, 재조합 미생물은 배양 배지 이외의 영양 원천을 사용하고, 발효기 이외의 시스템을 이용하여 성장됨이 또한 인지할 것이다.
스테비올 글리코시드는 상이한 식품 시스템에서 동일한 성능을 반드시 가질 필요는 없다. 따라서, 선택된 스테비올 글리코시드 조성물로 합성을 유도하는 능력을 보유하는 것이 바람직하다. 본원에 기재된 재조합 숙주는 특이적 스테비올 글리코시드 (예를 들어, 레바우디오시드 D)에 대해 선택적으로 풍부하고, 일관된 맛 프로파일을 보유하는 조성물을 생성할 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 재조합 미생물은 주어진 식품 생성물에 바람직한 단맛 프로파일에 부합되도록 맞춰지고, 배치 (batch) 간에 일관된 각 스테비올 글리코시드 비율을 보유하는 조성물의 생성을 용이하게 할 수 있다. 본원에 기재된 미생물은 스테비아 추출물에서 볼 수 있는 원치않는 식물 부산물을 생성하지 않는다. 따라서, 본원에 기재된 재조합 미생물에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은 스테비아 식물로부터 유래된 조성물과는 구별된다.
VII. 스테비올 글리코시드, 조성물 및 식품
본원에 기재된 방법에 의해 수득한 스테비올 글리코시드 및 조성물은 식품, 규정식 보충물 및 감미료 조성물을 만드는데 이용될 수 있다. 예를 들어, 실질적으로 순수한 스테비올 또는 스테비올 글리코시드, 예를 들어 레바우디오시드 A 또는 레바우디오시드 D는 식품 제품, 예를 들어 아이스크림, 탄산음료, 과일 쥬스, 요거트, 구운 제품, 츄잉검, 단단하고 부드러운 캔디, 및 소스에 포함될 수 있다. 실질적으로 순수한 스테비올 또는 스테비올 글리코시드는 비-식품 제품, 예를 들어 약제품, 의학 제품, 규정식 보충물 및 영양 보충물에 또한 포함될 수 있다. 실질적으로 순수한 스테비올 또는 스테비올 글리코시드는 또한 농업 산업 및 애완동물 산업 둘 모두를 위한 동물 사료 제품에 포함될 수 있다. 대안으로, 스테비올 및/또는 스테비올 글리코시드의 혼합물은 재조합 미생물을 별도로 배양하고, 특이적 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 각각 생성하고, 각 미생물로부터 실질적으로 순수한 형태로 스테비올 또는 스테비올 글리코시드를 회수하고, 그 뒤 원하는 비율의 각 화합물을 포함하는 혼합물을 수득하기 위하여 이러한 화합물을 조합시켜 만들 수 있다. 본원에 기재된 재조합 미생물은 현재 스테비아 제품과 비교하여 좀더 정확하고 일관된 혼합물의 수득을 허용한다. 또 다른 대안에서, 실질적으로 순수한 스테비올 또는 스테비올 글리코시드는 다른 감미료, 예를 들어 사카린, 덱스트로스, 수크로스, 푸룩토스, 에리트리톨, 아스파르탐, 수크랄로스, 모나틴, 또는 아세술팜 포타슘과 함께 식품 제품에 통합될 수 있다. 기타 감미료에 대하여 스테비올 또는 스테비올 글리코시드의 중량비는 최종 식품 제품에서 만족할 만한 맛에 도달하기 위해 필요에 따라 변화될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 공개 번호 제2007/0128311호 참조. 일부 구체예에서, 스테비올 또는 스테비올 글리코시드는 향미 조절제로서 향미료 (예를 들어, 시트루스)와 함께 제공될 수 있다.
본원에 기재된 재조합 미생물에 의해 생성된 조성물은 식품 제품에 통합될 수 있다. 예를 들어, 재조합 미생물에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은 스테비올 글리코시드 및 식품 제품의 유형에 따라 건중량을 기준으로 약 20 mg 스테비올 글리코시드/kg 식품 내지 약 1800 mg 스테비올 글리코시드/kg 식품 범위의 양으로 식품 제품에 통합될 수 있다. 예를 들어, 재조합 미생물에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은, 식품 제품이 건중량을 기준으로 최대 500 mg의 스테비올 글리코시드/kg 식품을 갖도록 디저트, 차가운 과자류 (예를 들어, 아이스크림), 유제품 (예를 들어, 요거트), 또은 음료 (예를 들어, 탄산 음료)에 통합될 수 있다. 재조합 미생물에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은, 식품 제품이 건중량을 기준으로 최대 300 mg의 스테비올 글리코시드/kg 식품을 갖도록 구운 제품 (예를 들어, 비스킷)에 통합될 수 있다. 재조합 미생물에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은, 식품 제품이 건중량을 기준으로 최대 1000 mg의 스테비올 글리코시드/kg 식품을 갖도록 소스 (예를 들어, 초콜릿 시럽) 또는 식물 제품 (예를 들어, 피클)에 통합될 수 있다. 재조합 미생물에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은, 식품 제품이 건중량을 기준으로 최대 160 mg의 스테비올 글리코시드/kg 식품을 갖도록 빵에 통합될 수 있다. 재조합 미생물, 식물 또는 식물 세포에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은, 식품 제품이 건중량을 기준으로 최대 1600 mg의 스테비올 글리코시드/kg 식품을 갖도록 단단한 또는 부드러운 사탕에 통합될 수 있다. 재조합 미생물, 식물, 또는 식물 세포에 의해 생성된 스테비올 글리코시드 조성물은, 식품 제품이 건중량을 기준으로 최대 1000 mg의 스테비올 글리코시드/kg 식품을 갖도록 가공된 과일 제품 (예를 들어, 과일 쥬스, 과일 필링, 잼 및 젤리)에 통합될 수 있다.
예를 들어, 상기 스테비올 글리코시드 조성물은 90-99% 레바우디오시드 A와 검출불가능한 양의 스테비아 식물-유래된 오염물질을 함유할 수 있고, 건중량을 기준으로 25-1600 mg/kg, 예를 들어, 100-500 mg/kg, 25-100 mg/kg, 250-1000 mg/kg, 50-500 mg/kg 또는 500-1000 mg/kg이 되도록 식품 제품에 통합될 수 있다.
이러한 스테비올 글리코시드 조성물은 3% 초과의 레바우디오시드 B를 함유하는 레바우디오시드 B-풍부 조성물일 수 있고, 레바우디오시드 B의 양이 건중량을 기준으로 25-1600 mg/kg, 예를 들어, 100-500 mg/kg, 25-100 mg/kg, 250-1000 mg/kg, 50-500 mg/kg 또는 500-1000 mg/kg이 되도록 식품 제품에 통합될 수 있다. 전형적으로, 레바우디오시드 B-풍부 조성물은 스테비아 식물-유래된 검출불가능한 양의 오염물질을 함유한다.
이러한 스테비올 글리코시드 조성물은 3% 초과의 레바우디오시드 D를 함유하는 레바우디오시드 D-풍부 조성물일 수 있고, 제품 중의 레바우디오시드 D의 양은 건중량을 기준으로 25-1600 mg/kg, 예를 들어, 100-500 mg/kg, 25-100 mg/kg, 250-1000 mg/kg, 50-500 mg/kg 또는 500-1000 mg/kg이 되도록 식품 제품에 통합될 수 있다. 전형적으로, 레바우디오시드 D-풍부 조성물은 스테비아 식물-유래된 검출불가능한 양의 오염물질을 함유한다.
이러한 스테비올 글리코시드 조성물은 3% 초과의 레바우디오시드 E를 함유하는 레바우디오시드 E-풍부 조성물일 수 있고, 제품 중의 레바우디오시드 E의 양은 건중량을 기준으로 25-1600 mg/kg, 예를 들어 100-500 mg/kg, 25-100 mg/kg, 250-1000 mg/kg, 50-500 mg/kg 또는 500-1000 mg/kg이 되도록 식품 제품에 통합될 수 있다. 전형적으로, 레바우디오시드 E-풍부 조성물은 스테비아 식물-유래된 검출불가능한 양의 오염물질을 함유한다.
이러한 스테비올 글리코시드 조성물은 3% 초과의 레바우디오시드 M을 함유하는 레바우디오시드 M-풍부 조성물일 수 있고, 제품 중의 레바우디오시드 M의 양은 건중량을 기준으로 25-1600 mg/kg, 예를 들어 100-500 mg/kg, 25-100 mg/kg, 250-1000 mg/kg, 50-500 mg/kg 또는 500-1000 mg/kg이 되도록 식품 제품에 통합될 수 있다. 전형적으로, 레바우디오시드 M이 풍부한 조성물은 스테비아 식물에서 유도된 검출불가능한 양의 오염물질을 함유한다.
일부 구체예에서, 실질적으로 순수한 스테비올 또는 스테비올 글리코시드는 탁상용 감미료 또는 "컵-포-컵(cup-for-cup)" 제품에 통합된다. 이러한 제품은 전형적으로 하나 이상의 증량제, 예를 들어 당업자에게 공지되어 있는 말토덱스트린을 이용하여 적절한 단맛 수준으로 희석될 수 있다. 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E, 또는 레바우디오시드 M이 풍부한 스테비올 글리코시드 조성물은 식탁용으로 건중량을 기준으로 10,000 내지 30,000 mg 스테비올 글리코시드/kg 제품으로 한 봉지에 포장될 수 있다.
본 발명은 하기 실시예에서 추가로 기술될 것이며, 이는 청구범위에 기술된 본 발명의 범위를 제한하지 않는다.
실시예
실시예 1. LC-MS 분석 절차
LC-MS 분석은 달리 언급되지 않는 한, 가열된 전자분사 이온 (HESI) 공급원을 갖춘 TSQ Quantum Access (써모피셔 사이언티픽) 삼중 쿼드로폴 질량 분광계에 연결된 워터 액퀴티 (water acquity) UPLC®BEH 쉴드 RP18 칼럼 (2.1 x 50 mm, 1.7 ㎛ 입자, 130 Å 포어 크기)로 제작한 Ultimate 3000 UPLC 시스템 (Dionex)을 사용하여 수행하였다. 용리는 용리제 B (0.1% 포름산 함유 MeCN) 및 용리제 A (0.1% 포름산 함유 물)의 이동상을 이용하여, 0.0분에서 4.0분까지 25%에서 47%로 B 증가, 4.0분에서 5.0분까지 47%에서 100%로 B 증가, 5.0분에서 6.5분까지 100% B를 유지하여 재평형 (re-equilibration)시킴으로써 실행하였다. 유속은 0.4ml/min이며, 칼럼 온도는 35℃이다. 스테비올 글리코시드는 하기의 m/z-자동기록장치 (trace)를 갖는 SIM (단일 이온 모니터링; Single Ion Monitering)을 사용하여 검출하였다.
표 11: 스테비올 글리코시드에 대한 MS 분석 정보
설명 추출물 질량 m/z 자동기록 화합물 (통상 분당 t R )
스테비올 + 1 글루코스 [M+H]+ 481.2796
[M+Na]+ 503.2615		 481.2± 0.5
503.1± 0.5 		19-SMG (2.29), 13-SMG (3.5)
스테비올 + 2 글루코스 [M+Na]+ 665.3149 665± 0.5 루부소시드 (2.52)
스테비올-1,2-비오시드 (2.92)
스테비올-1,3-비오시드 (2.28)
스테비올 + 3 글루코스 [M+Na]+ 827.3677 827.4 ± 0.5 1,2-스테비오시드 (2.01)
1,3-스테비오시드 (2.39)
레바우디오시드 B (2.88)
스테비올 + 4 글루코스 [M+Na]+ 989.4200 989.4 ± 0.5 레바우디오시드 A (2.0)
스테비올 + 5 글루코스 [M+Na]+ 1151.4728 1151.4 ± 0.5 레바우디오시드 D (1.1)
스테비올 + 6 글루코스 [M+Na]+ 1313.5257 1313.5 ± 0.5 레바우디오시드 M (1.3)
스테비올 글리코시드의 수준은 LGC 표준으로부터 진정 (authentic) 기준으로 획득한 검정 곡선 (calibration curve)과 비교하여 정량화하였다. 예를 들어, 0.5 내지 100 μM 레바우디오시드 A의 표준 용액을 검정 곡선을 만드는데 전형적으로 이용하였다.
실시예 2. 레바우디오시드 생성 효모 균주의 작제
A. 효모 균주 EFSC2772는 3개의 영양요구 변형을 함유한, 즉 URA3, LEU2 및 HIS3의 결실을 갖는 야생형 사카로마이세스 세레비시애 균주로부터 작제하였다. 상기 야생형 균주는 표준 유전자 방법을 이용하여 조작될 수 있고 보통의 이배체 또는 반수체 효모 균주로서 이용될 수 있다. EFSC2772는 4개 DNA 작제물의 유전체-통합에 의해 스테비올 글리코시드 생성 효모로 전환되었다. 각각의 작제물은 다수의 유전자를 함유하였고 이는 상동 재조합에 의해 효모 유전체에 도입되었다. 더욱이, 작제물 1 및 2는 상동 재조합에 의해 어셈블링되었다.
제 1 작제물은 8개의 유전자를 함유하였고 DPP1 로커스에 삽입되어 DPP1 (포스파타제)를 붕괴시키고 부분적으로 결실시켰다. 삽입된 DNA는 natMX 유전자 (선택 마커)를 발현시키는 아쉬비아 고스시피 TEF1 프로모터 다음에 A. 고스시피로부터의 TEF 터미네이터; 천연 효모 GPD1 프로모터로부터 발현되는 Gene Art 코돈 최적화 스테비아 레바우디아나 UGT85C2 (GenBank AAR06916.1; SEQ ID NO:32) 및 이어서 천연 효모 CYC1 터미네이터; 천연 효모 TPI1 프로모터를 이용하여 발현되는 S. 레바우디아나 CPR-8 (SEQ ID NO:24) 다음에 천연 효모 TDH1 터미네이터; 천연 효모 PDC1 프로모터로부터 발현되는 아라비돕시스 탈리아나 카우렌 신타제 (GenBank AEE36246.1과 유사함; SEQ ID NO:96) 및 이어지는 천연 효모 FBA1 터미네이터; 천연 효모 TEF2 프로모터를 이용하여 발현되는 시네초코쿠스 종 GGPPS (GenBank ABC98596.1, SEQ ID NO: 97) 및 이어지는 천연 효모 PGI1 터미네이터; 천연 효모 TEF1 프로모터로부터 발현되는 DNA2.0 코돈-최적화 S. 레바우디아나 KAHe1 (SEQ ID NO:18) 및 이어지는 천연 효모 ENO2 터미네이터; 천연 효모 FBA1 프로모터를 이용하여 발현되는 S. 레바우디아나 KO-1 (GenBank ABA42921.1, gi76446107; SEQ ID NO: 98) 및 이어지는 천연 효모 TDH2 터미네이터; 및 천연 효모 PGK1 프로모터를 이용하여 발현되는 제아 메이즈 절두된 CDPS 및 이어지는 천연 효모 ADH2 터미네이터를 함유한다
제 2 작제물은 YPRCΔ15 로커스에 삽입되었고, kanMX 유전자 (선택 마커)의 앞에 A. 고스시피로부터의 TEF1 프로모터, 이어서 A. 고스시피로부터의 TEF1 터미네이터; 천연 효모 PGK1 프로모터로부터 발현되는 Gene Art 코돈 최적화된 A. 탈리아나 ATR2 (SEQ ID NO: 99) 이어서 천연 효모 ADH2 터미네이, 천연 효모 TPI1 프로모터로부터 발현되는 S. 레바우디아나 UGT74G1 (GenBank AAR06920.1; SEQ ID NO:100) 이어서 천연 효모 TDH1 터미네이터, 천연 효모 TEF1 프로모터로부터 발현되는 Gene Art 코돈-최적화된 S. 레바우디아나 UGT76G1 (GenBank AAR06912; SEQ ID NO:101) 이어서 천연 효모 ENO2 터미네이터, 및 천연 효모 GPD1 프로모터로부터 발현되는, 아미노산 변형 L211M 및 V286A를 갖는 UGT91D2e 폴리펩티드를 생성하는 GeneArt 코돈-최적화 S. 레바우디아나 UGT91D2e-b (UGT91D2e 아미노산 서열에 대한 야생형 서열의 경우 SEQ ID NO: 54; 코돈 최적화 누클레오티드 서열은 SEQ ID NO: 102에 제시됨) 및 이어지는 천연 효모 CYC1 터미네이터를 함유하였다.
제 1 및 제 2 작제물은 메이팅 및 절단에 의해 동일한 스포어 클론에서 조합되었다. 이러한 효모 균주는 이후 두 가지 연속 사건으로 제 3 및 제 4 작제물로 형질전환되었다.
제 3 작제물은 유전자 PRP5 및 YBR238C 사이에 통합되었고, K. 락티스 leu2 유전자를 발현시키는 클루이베로마이세스 락티스 LEU2 프로모터 이어서 K. 락티스로부터의 LEU2 터미네이터, DNA2.0-최적화 S. 레바우디아나 KAHe1 (SEQ ID NO:18)을 발현시키는 천연 효모 GPD1 프로모터 이어서 천연 효모 CYC1 터미네이터, 및 제아 메이즈 절두된 CDPS (SEQ ID NO: 103)를 발현시키는 천연 효모 TPI1 프로모터 이어서 천연 효모 TPI1 터미네이터를 함유하였다.
제 4 작제물은 유전체에서 유전자 ECM3 및 YOR093C 사이에 통합되었고, K. 뉴모니애 (K. pneumoniae) hphMX 유전자를 발현시키는 A. 고스시피로부터의 TEF 프로모터 이어서 A. 고스시피로부터의 TEF1 터미네이터; 천연 효모 GPD1 프로모터로부터 발현되는 시네초코쿠스 종 GGPPS (SEQ ID NO: 97) 이어서 천연 효모 CYC1 터미네이터, 이어서 A. 탈리아나 카우렌 신타제 (SEQ ID NO: 96)를 발현시키는 천연 효모 TPI1 프로모터 이어서 천연 효모 TPI1 터미네이터를 함유하였다.
균주는 형질전환에 의한 2개 플라스미드 p413TEF (HIS3 마커를 갖는 CEN/ARS 셔틀 플라스미드) 및 p416-TEF (URA3 마커를 갖는 CEN/ARS 셔틀 플라스미드)의 도입에 의해 독립영양식으로 제조하였으며, EFSC2772로 지정되었다.
LC-MS에 의해 입증된 바와 같이, 조합된 세포성 및 세포외 생성물 농도는 EFSC2772의 2개의 상이한 배치에서 920-1660 mg/L의 RebA 및 대략 300-320 mg/L의 RebD이며, 더 높은 역가 결과가 수득되는 경우 대략 700 mg/L의 RebA가 브로쓰에서 검출되었다. 추가적으로, RebB에 대한 큰 피크가 관찰되었으며, 당업자는 UGT74G1의 추가적인 복사체 또는 UGT74G1의 상향조절이 RebB의 RebA로의 전환을 추가로 증가시킬 것임을 인지할 것이다. 반대로, RebB가 표적 글리코시드인 경우, 그러면 UGT74G1은 크로모좀으로부터 붕괴되거나 결실될 수 있다.
B. EFSC2763 효모 균주는 3가지 영양요구 변경, 즉 URA3, LEU2 및 HIS3의 결손을 갖는 야생형 사카로마이세스 세레비시애) 균주로부터 유래된다. 균주의 유전자는 안정화되어 있어, 보통 이배체 (diploid) 또는 반수체 (haploid) 효모 균주로서 사용될 수 있다. EFSC2763은 4개의 DNA 작제물의 유전체 통합에 의해 스테비올 글리코시드 생성 효모로 전환될 수 있다. 각 작제물은 동종 재조합으로 효모 유전체에 도입된 다수의 유전자를 포함한다. 또한, 제 1 및 2 작제물은 동종 재조합에 의해 어셈블링된다.
제 1 작제물은 8개 유전자를 포함하고, DPP1 로커스에 삽입되어 DPP1를 붕괴하거나 부분적으로 결실시킨다. 삽입된 DNA는 다음을 포함한다: NatMX 유전자 (선택 마커)를 발현시키는 A. 고스시피 TEF 프로모터 이어서 A. 고스시피로부터의 TEF 터미네이터; 천연 효모 GPD1 프로모터로부터 발현되는 GeneArt 코돈 최적화된 S. 레바우디아나 UGT85C2 (SEQ ID NO: 32) 및 이어서 천연 천연 효모 CYC1 터미네이터; TPI1 프로모터를 이용하여 발현된 S. 레바우디아나 CPR-8 (SEQ ID NO: 24) 이어서 천연 효모 TDH1 터미네이터; PDC1 프로모터로부터 발현된 A. 탈리아나 카우렌 신타제 (KS-5; SEQ ID NO: 96) 이어서 천연 효모 FBA1 터미네이터; TEF2 프로모터를 이용하여 발현된 시네초코쿠스 종 GGPPS (GGPPS-7; SEQ ID NO: 97) 및 이어서 천연 효모 PFI1 터미네이터; TEF1 프로모터로부터 발현된 DNA2.0 코돈-최적화된 S. 레바우디아나 KAHe1 (SEQ ID NO:18) 및 이어서 ENO2 터미네이터; FBA1 프로모터를 이용하여 발현된 S. 레바우디아나 KO-1 (SEQ ID NO: 98) 및 이어서 천연 효모 TDH2 터미네이터; 및 PGK1 프로모터를 이용하여 발현된 제아 메이즈 절두된 CDPS (SEQ ID NO: 103) 및 이어서 천연 효모 ADH2 터미네이터.
제 2 작제물은 YPRCΔ15 로커스에 삽입되었고, KanMX 유전자 (선택 마커)를 먼저 발현시키는 A. 고스시피로부터의 천연 효모 TEF 프로모터 이어서 A. 고스시피로부터의 TEF 터미네이터; PGK1 프로모터로부터 발현된 Gene Art 코돈 최적화돈 A. 탈리아나 ATR2 (SEQ ID NO: 9) 이어서 효모 ADH2 터미네이터; TPI1 프로모터로부터 발현된 S. 레바우디아나 UGT74G1 (SEQ ID NO:100) 이어서 효모 TDH1 터미네이터; TEF1 프로모터로부터 발현된 Gene Art 코돈 최적화된 S. 레바우디아나 UGT76G1 (SEQ ID NO: 101) 이어서 효모 ENO2 터미네이터, 및 GPD1 프로모터로부터 발현된 GeneArt 코돈-최적화된 S. 레바우디아나 UGT91D2e-b (SEQ ID NO: 102) 및 이어서 효모 CYC1 터미네이터를 포함하였다.
제 1 및 제 2 작제물은 메이팅 및 절단에 의해 동일한 스포어 클론에서 조합되었다. 이 효모 균주는 이후 두 가지 후속 사건에서 제 3 및 제 4 작제물로 형질전환되었다.
제 3 작제물은 유전자 PRP5 및 YBR238C 사이에 통합되었고, K. 락티스 LEU2 유전자를 발현시키는 A. 고스시피으로부터의 TEF 프로모터 이어서 A. 고스시피로부터의 TEF 터미네이터, DNA2.0 최적화된 S. 레바우디아나 KAHe1 (SEQ ID NO: 18)을 발현시키는 GPD1 프로모터 이어서 CYC1 터미네이터, 및 제아 메이즈 절두된 CDPS (SEQ ID NO: 103)를 발현시키는 TPI1 프로모터를 포함하였다.
제 4 작제물은 유전자 ECM3과 YOR093C 사이의 유전체에 통합되었고, K. 뉴모니애 hph 유전자 (SEQ ID NO: 157; 문헌 [Gritz et al., (1983) Gene 25:179-88] 참조)를 발현시키는 A. 고스시피로부터의 TEF 프로모터 이어서 A. 고스시피로부터의 TEF 터미네이터, GPD1 프로모터로부터 발현된 시네초코쿠스 종 GGPPS 이어서 CYC1 터미네이터, 및 A. 탈리아나 카우렌 신타제를 발현시키는 TPI1 프로모터를 포함하는 발현 카세트를 갖는다. 사용된 4가지 유전 마커는 이후 제거되었다.
세포 및 브로쓰로부터 전체 스테비올 글리코시드의 DMSO-추출 후 LC-MS에 의해 분석한 것으로서, 딥-웰 플레이트에서 30℃ 및 320 RPM 진탕하에 3 ml SC (합성 완전) 배지에서 4일 동안 성장시킨 후 EFSC2763은 40-50 μM 또는 2-3 μM/OD600 레바우디오시드 A를 생성하였다.
C. YORW 로커스에 어셈블리 작제물을 하나 더 첨가함으로써 균주 EFSC2763으로부터 균주 EFSC2797을 생성시켰다. 추가적인 작제물은 하기와 같다. S. 폼베로부터의 HIS 유전자 (선택 마커)를 발현시키는 A. 고스시피 TEF 프로모터 이어서, A. 고스시피로부터의 TEF 터미네이터; GPD1 프로모터를 사용하여 발현된 S. 레바우디아나 KO-1 (SEQ ID NO:98) 및 이어서 천연 효모 tCYC1 터미네이터; TPI1 프로모터를 사용하여 발현된 S. 레바우디아나 CPR-8 (SEQ ID NO: 24) 이어서 천연 효모 TDH1 터미네이터; PDC1 프로모터로부터 발현된 A. 탈리아나 카우렌 신타제 (KS-5; SEQ ID NO: 96) 및 이어서 천연 효모 FBA1 터미네이터; TEF2 프로모터로부터 발현된 오리자 사티바 (Oryza sativa) EUGT11 (SEQ ID NO: 53) 이어서 효모 PGI1 터미네이터; TEF1 프로모터로부터 발현된 DNA2.0 코돈-최적화된 S. 레바우디아나 KAHe1 (SEQ ID NO: 18) 및 이어서 ENO2 터미네이터; PGK1 프로모터로부터 발현된 제아 메이즈 절두된 CDPS (SEQ ID NO: 103) 및 이어서 ADH2 터미네이터.
세포 (4일 동안 30℃에서 24-웰 플레이트에서 성장한 세포) 및 브로쓰로부터의 전체 스테비올 글리코시드의 DMSO-추출 후 LC-MS 분석은 EFSC2797이 다양한 양의 RebA, RebB, RebD, RebM 및 루부소시드를 생성함을 입증하였다 (하기 표 12 참조).
표 12. EFSC2797로부터 스테비올 글리코시드 생성
Rubu
( μM /OD600) 		RebB
( μM /OD600) 		RebA
( μM /OD600) 		RebD
( μM /OD600) 		RebM
( μM /OD600) 		OD600에 의해 표준화됨
0.110 0.634 3.364 3.451 5.411 평균
0.065 0.263 1.119 1.222 1.614 표준 편차
Rubu ( μM ) RebB ( μM ) RebA ( μM ) RebD ( μM ) RebM ( μM )
1.349 8.477 46.737 47.691 75.952 평균
0.0611 2.2025 16.7505 17.1447 28.1131 표준 편차
D. EFSC3248 효모 균주는 상기 기술된 동일한 어미 야생형 사카로마이세스 세레비시애 균주로부터 유래하며, 상기와 유사한 방법을 이용하여 표 13에 기술된 하기 유전자를 통합하였다. 또한, 이러한 균주는 교배형에서 스위칭을 방지하기 위한 HO-이다.
표 13. 균주 EFSC 3248에서 사용된 재조합 경로 유전자 및 프로모터의 목록.
이종성 경로 유전자 복사체의 수 사용된 프로모터(들)
GGPPS7 (시네초코쿠스 종) 합성 (SEQ ID NO: 97) 1 TEF2
CDPS (절두됨, 제아 메이즈) 천연 유전자 (SEQ ID NO: 103) 2 PGK1 X 2
KS5 (A. 탈리아나) 천연 유전자 (SEQ ID NO: 96) 2 PDC1 X 2
KO-1 (S. 레바우디아나 KO1) 합성 유전자 (SEQ ID NO: 98) 2 FBA1, GPD1
ATR2 합성 유전자 (SEQ ID NO: 99) 1 PGK1
KAH (S. 레바우디아나 KAHe1) 합성 유전자 (SEQ ID NO: 18) 2 TEF1 X 2
S. 레바우디아나 CPR 8 천연 유전자 (SEQ ID NO: 24) 2 TPI1 X 2
UGT85C2 (S. 레바우디아나) 합성 (SEQ ID NO: 32) 1 GPD1
UGT74G1 천연 (S. 레바우디아나) (SEQ ID NO: 100) 1 TPI1
UGT76G1 합성 (S. 레바우디아나) (SEQ ID NO: 101) 1 TEF1
91D2e-b 2X 변이체, 합성, S. 레바우디아나로부터 유래 (SEQ ID NO: 102) 1 GPD1
EUGT11 합성 (오리자 사티바) (SEQ ID NO: 53) 1 TEF2
실시예 3. 트랜스포터를 과다발현하는 효모 균주의 작제
레바우디오시드를 생성하는 효모 균주는 상기 실시예 2 및 국제 출원 번호: PCT/US2011/038967 (WO/2011/153378) 및 PCT/US2012/050021 (WO/2013/022989) (이 둘 모두는 그 전체가 본원에 참조로서 통합됨)에 기술되어 있다. 유사한 균주의 진탕 플라스크 연구로부터의 관찰은 상청액중 RebA의 분획이 시간에 따라 증가함을 나타내며, 이러한 효과는 세포 용해의 결과가 아닌 것으로 측정되었다. 사카로마이세스 세레비시애에서 스테비올 글리코시드 분비에 대한 다양한 트랜스포터의 효과를 측정하기 위해, 사카로마이세스 세레비시애 균주의 라이브러리를 트랜스포터 유전자에 대한 내인성 프로모터 대신에 TEF1 항시성 프로모터로 치환함으로써 작제하였다.
TEF 프로모터, 및 lox P 부위에 의해 플랭킹된 HIS5 (쉬조사카로마이세스 폼베) 마커로 구성된 카세트를 작제하였다. 특정 테일을 갖는 프라이머를 카세트의 PCR 증폭에 사용하였으며, 생성물을 상기 기술된 RebA 생산자 EFSC2763에서 상동 재조합에 의해 관심 유전자로부터의 업스트립에 통합시켰다. 유전자의 출발부에 어닐링시킨 프라이머 테일에 Kosak 서열을 부가하여, 출발 코돈 바로 앞에 위치시켰다. 카세트의 올바른 삽입은 TEF1 프로모터에 어닐링되는 전방향 프라이머 및 특이적 트랜스포터 유전자에 어닐링되는 유전자 특이적 역 프라이머를 사용하여 PCR에 의해 확인하였다. 표 14는 TEF1 항시성 프로모터를 사용하여 내인성 프로모터를 대체한 44개 수송 관련 유전자의 목록을 함유한다.
표 14: 수송 관련 유전자 ( UniProtKB /Swiss- Prot 넘버링 )
유전자 ORF 수탁 번호
1 PDR1 YGL013C P12383 (SEQ ID NO: 104)
2 PDR3 YBL005W P33200 (SEQ ID NO: 105)
3 PDR8 YLR266C Q06149 (SEQ ID NO: 106)
4 PDR5 YOR153W P33302 (SEQ ID NO: 107)
5 PDR10 YOR328 P51533 (SEQ ID NO: 108)
6 PDR11 YIL013 P40550 (SEQ ID NO: 109)
7 PDR12 YPL058 Q02785 (SEQ ID NO: 110)
8 PDR15 YDR406 Q04182 (SEQ ID NO: 111)
9 PDR18 YNR070w P53756 (SEQ ID NO: 112)
10 SNQ2 YOR328 P32568 (SEQ ID NO: 113)
11 STE6 YKL209c P12866 (SEQ ID NO: 114)
12 YOR1 YGR281 P53049 (SEQ ID NO: 115)
13 AUS1 YOR011W Q08409 (SEQ ID NO: 116)
14 - YOL075c Q08234 (SEQ ID NO: 117)
15 - YIL166c P40445 (SEQ ID NO: 118)
16 THI73 YLR004c Q07904 (SEQ ID NO: 119)
17 NFT1 YKR103w P0CE68 (SEQ ID NO: 120)
18 ADP1 YCR011C P25371 (SEQ ID NO: 121)
19 FLR1 YBR008C P38124 (SEQ ID NO: 122)
20 QDR1 YIL120W P40475 (SEQ ID NO: 123)
21 QDR2 YIL121W P40474 (SEQ ID NO: 124)
22 QDR3 YBR043C P38227 (SEQ ID NO: 125)
23 TPO1 YLL028W Q07824 (SEQ ID NO: 126)
24 TPO2 YGR138C P53283 (SEQ ID NO: 127)
25 TPO3 YPR156c Q06451 (SEQ ID NO: 128)
26 TPO4 YOR273C Q12256 (SEQ ID NO: 129)
27 AQR1 YNL065W P53943 (SEQ ID NO: 130)
28 AZR1 YGR224W P50080 (SEQ ID NO: 131)
29 SGE1 YPR198W P33335 (SEQ ID NO: 132)
30 YHK8 YHR048W P38776 (SEQ ID NO: 133)
31 ATR1 YML116W P13090 (SEQ ID NO: 134)
32 GEX2 YKR106W P36173 (SEQ ID NO: 135)
33 HOL1 YNR055C P53389 (SEQ ID NO: 136)
34 - YOR378W Q08902 (SEQ ID NO: 137)
35 - YMR279C Q03263 (SEQ ID NO: 138)
36 ENB1 YOL158C Q08299 (SEQ ID NO: 139)
37 ARN1 YHL040C P38731 (SEQ ID NO: 140)
38 ARN2 YHL047C P38724 (SEQ ID NO: 141)
39 SSU1 YPL092W P41930 (SEQ ID NO: 142)
40 THI7 YLR237W Q05998 (SEQ ID NO: 143)
41 TPN1 YGL186C P53099 (SEQ ID NO: 144)
42 SEO1 YAL067C P39709 (SEQ ID NO: 145)
43 SIT1 YEL065W P39980 (SEQ ID NO: 146)
44 DTR1 YBR180W P38125 (SEQ ID NO: 147)
44개 균주를 RebA 분비에 대해 평가하였다. 복제 배양물을 48 시간 동안 3 ml 합성 완전 (SC) 배지에서 인큐베이션하였다 (30℃, 310 rpm, 24 웰 플레이트). 100 ㎕의 배양물을 원심분리하여 (4000 rcf, 7 분) 상청액 샘플을 수득하였다. 상청액의 25㎕를 두배량의 50% DMSO에 첨가하였다.
상청액 (세포-비함유) 샘플로서의 이들 샘플을 LC-MS로 분석하였다. 이용된 LC-MS 방법은 Phenomenex® 키네텍스 (kinetex) C18 칼럼 (150 x 2.1 mm, 2.6 μM 입자, 100 Å 포어 크기)을 사용하고, 40-50%B의 더욱 얕은 구배를 이용하여 전형적으로 더 긴 체류 시간을 유도한다는 점을 제외하고는 실시예 1과 유사하다. 원래 샘플로부터 잔존하는 상청액을 제거하고 펠렛을 100 ㎕ 물로 세척하였다. 펠렛을 100 ㎕ 50% DMSO에서 재현탁시키고 10분 동안 80℃로 가열한 후 샘플을 원심분리하였다 (4000 rcf, 5 분). 재현탁된 펠렛으로부터 수득된 25 ㎕의 상청액을 동량의 50% DMSO 및 동량의 물에 첨가한 후, 샘플을 필터 플레이트로 옮겼다. 필터 플레이트로부터 샘플을 채취하고 (2000 rcf, 2 분), 펠렛 샘플로서 LC-MS에서 측정하였다. 결과는 도 2에 도시되어 있다.
균주 "12_YOR1"은 EFSC2763 대조군 균주와 비교하여 펠렛에서 보다 높은 백분율의 상청액중 RebA를 보여주었다. "18_ADP1" 및 "EFSC2763" 균주는 다른 균주보다 적은 총 RebA를 생성하였으며, "40_THI7"은 샘플간의 큰 편차를 갖는다. YOR1 과다발현 균주를 다시 평가하였다. 제 2 실험에서, YOR1 과다발현 균주 "YOR1_OE"는 EFSC2763 대조군 균주보다 적은 총 RebA를 생성하였으나, 대조군 균주보다 상청액중 더 높은 백분율의 RebA를 여전히 보여주었다 (도 3). 메신저 RNA 수준은 후보 트랜스포터에 대해 측정하고, 많은 경우에서, 발현 수준은 야생형 수준으로부터 실질적으로 증가하지 않았다.
9개 후보 (PDR1, PDR3, PDR13, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1, FLR1, AZR1 및 DTR1)를 또 다른 생성 균주 EFSC2797 (상기 기술됨)에서 레바우디오시드 생성 및 분비에 대해 그리고, 2 마이크론 플라스미드 (PSB314)에 대해 재-평가하였다. 복제 배양물을 3 ml 합성 완전 (SC) 배지에서 48 시간 (30℃, 310 rpm, 24 웰 플레이트) 동안 인큐베이션하였다. 상청액 샘플은 100 ㎕의 배양물 (13,000 rcf, 5 분)을 원심분리함으로써 수득하였다. 50 마이크로리터의 상청액을 동량의 100% DMSO에 첨가하였다. 이들 샘플을 상청액 샘플로서 LC-MS에 의해 분석하였다. 총 브로쓰 샘플을 동일 용적의 100% DMSO와 혼합하고, 10분 동안 80℃로 가열한 후, 샘플을 원심분리하고 (4000 rcf, 5 분), 액체 부분을 "전체" 스테비올 글리코시드 수준으로서 LC-MS에 의해 분석하였다. 배양 상청액으로 분비된 다양한 스테비올 글리코시드 (RebA, RebB, RebD, RebM, 루부소시드, 13-SMG, 1.2 스테비오시드, 1.2 비오시드 및 비공지의 스테비올 글리코시드 (4.13분에서 LC-MS 피크)를 포함)의 양은 물론 전체 배양 브로쓰 중의 총 양을 실시예 1에 기술된 바와 같이 LC-MS로 측정하였다. 결과는 도 4a-m에 도시되어 있다. 분비에 대해 플롯팅된 백분율은 도 4a-k에서 "총" 량으로 나눈 상청액 값에 대한 것이거나, OD600 당 마이크로몰 농도를 플롯팅하거나 (도 4j-k), 상청액 또는 전체 중 농도를 플롯팅하였다 (도 4l-m).
각 9개 후보 유전자 (PDR1, PDR3, PDR13, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1, FLR1, AZR1 및 DTR1)의 독립적인 과다발현은 다양한 스테비올 글리코시드가 대조군 균주 (대조군은 빈 PSB314 플라스미드를 갖는 EFSC2797임; 도 4a-m에서 "PSB314"로서 도시됨)와 비교하여 상청액 중 더 높은 백분율 및/또는 농도로 분비되었음이 입증되었다. YOR1_BY (SEQ ID NO: 148)은 BY 4741 유전체 DNA로부터 증폭되고 URA 영양요구성 마커 (P426-GPD)를 함유하는 2 마이크론 플라스미드에서 클로닝된 YOR1 유전자의 DNA 서열을 나타내며; YOR1_IS1 (SEQ ID NO: 149)은 YOR1 유전자의 DNA 서열이 추가적인 야생형 사카로마이세스 세레비시애 유전체 DNA로부터 증폭되고, URA 영양요구성 마커 (P426-GPD)를 함유하는 2 마이크론 플라스미드에서 클로닝됨을 나타낸다. 예를 들어, 균주 "SNQ2"는 상청액중 더 높은 백분율의 RebA, RebB, RebD, RebM, 1.2 스테비오시드, 1.2 비오시드 및 4.13분에서의 비공지의 스테비올 글리코시드를 보여주었으며, 총 생성은 빈 PSB314 플라스미드 (도 4-6에서 "PSB314" 또는 "빈 플라스미드"로서 도시됨)를 갖는 EFSC2797 대조군 균주와 비교하여 동일하다. 균주 "YOR1_IS1"는 EFSC2797 대조군 균주와 비교하여 총 샘플중에서 상청액 중에 더 높은 백분율의 RebB, RebD, 루부소시드, 1.2 스테비오시드, 1.2 비오시드 및 4.13분에서의 비공지의 스테비올 글리코시드를 보여주었다. 게다가, SNQ2 및 YOR1 과다발현은 대조군과 비교하여 상청액에서 RebD 및 RebA의 농도 증가를 입증하였다 (도 4j-m 참조).
상기 9개 후보중 4개를 트랜스포터를 과다발현하기 위해 PSB314 2 마이크론 플라스미드를 사용하여 생성 EFSC2797 균주에서 레바우디오시드 생성 및 분비에 대해 다시 평가하엿다. 배양물을 72시간 동안 (30℃, 310 rpm, 24 웰 플레이트) 3 ml 합성 완전 (SC) 배지 -URA (압력 선택)에서 인큐베이션하였다. 상청액 샘플을 100 ㎕의 배양물 (13,000 rcf, 5 분)의 원심분리에 의해 수득하였다. 50 마이크로리터의 상청액을 50 ul의 100% DMSO에 첨가하였다. 이들 샘플을 상청액 샘플로서 LC-MS로 분석하였다. 50 ㎕의 세포 현탁액을 50 ㎕의 100% DMSO와 혼합하고, 10분 동안 80℃로 가열한 후 샘플을 원심분리하고 (4000 rcf, 5 분); 액체 부분을 "총" 샘플로서 LC-MS에서 측정하였다. 배양 상청액으로 분비된 다양한 스테비올 글리코시드 (RebA, RebB, RebD, RebM, 루부소시드, 13-SMG, 1.2 스테비오시드, 1.2 비오시드 및 비공지된 스테비올 글리코시드 (4.13분에서 LC-MS 피크) 포함)의 양은 물론 전체 배양 브로쓰 중의 총 양을 실시예 1에 기술된 바와 같이 LC-MS로 측정하였다. 곡선하 영역 (AUC)은 Xcalibur 소프트웨어 (Thermo)를 사용하여 데이타 처리 동안 적분에 의해 결정하였다. 분비된 양을 보여주는 결과 (AUC)는 도 5a-d에서 보여주며, 결과는 상청액에 분비된 퍼센트 (상청액/총 값의 비)를 보여주며, 도 5e-i에 도시되어 있다.
각각 4개 후보 유전자 각각의 과다발현 (PDR1, SNQ2, YOR1_BY, YOR1_IS1 및 FLR1)은 다양한 스테비올 글리코시드가 대조군 균주 (빈 PSB314 플라스미드를 갖는 EFSC2797; 도 5a-i에서 "PSB314"로서 도시됨)와 비교하여 상청액중에 더 높은 백분율 및/또는 농도로 분비됨을 입증하였다. 예를 들어, 균주 "YOR1_BY" 및 "YOR1_IS1" 둘 모두는 EFSC2797 대조군 균주와 비교하여 전체에서 보다 상청액중에서 더 높은 백분율의 RebA, RebB, 1.2 스테비오시드 및 4.13분의 비공지된 스테비올 글리코시드를 보여주었다. 게다가, 과다발현된 SNQ2, YOR1, PDR1 및 FLR1은 대조군과 비교하여 상청액중에서 RebB의 AUC 증가를 별도로 입증하였다 (도 5a-d 참조). 각각 4개 후보 유전자의 각각의 과다발현은 대조군과 비교하여 EFSC2797 효모 균주의 OD600에 의해 측정할 경우 성장 속도를 현저하게 변경시키지 않았다 (도 6 참조).
실시예 4. 스테비아 트랜스포터를 과다발현하는 효모 균주
6개의 추정되는 S. 레바우디아나 RebA 트랜스포터를 피로시퀀싱 데이타에서 확인하였다: SrDTX24 (SEQ ID NO: 150), SrMRP10 (SEQ ID NO: 151), SrPDR12 (SEQ ID NO: 152), SrMRP2 (SEQ ID NO: 153), SrMRP4a (SEQ ID NO: 154), 및 SrMRP4b (SEQ ID NO: 155). 추정되는 트랜스포터중 5개 즉, SrDTX24, SrMRP10, SrPDR12, SrMRP4a 및 SrMRP4b를 추가 연구를 위해 선택하고 클로닝하였다. 클로닝된 트랜스포터 서열은 안정한 RebA-생성 S. 세레비시애에서 발현시켰다. 스테비올-글리코시드 분비 수준을 측정하고 도 7에서 도시하였다.
실시예 5. 효모에서 레바우디오시드 트랜스포터를 식별하는 방법
4중 트랜스포터 변이체 효모 균주의 작제
레바우디오시드를 생성하는 효모 균주는 상기 실시예 2 및 그 전체가 본원에 참조로서 통합된 국제 출원 번호 PCT/US2011/038967 (WO/2011/153378) 및 PCT/US2012/050021 (WO/2013/022989)에 기술되어 있다. 유사한 균주의 진탕 플라스크 연구로부터의 관찰은, 스테비올 글리코시드가 분자의 분자량이 증가함에 따라 감소하는 것으로 보여지는 효율을 갖는 S. 세레비시애 세포로부터 분비됨을 나타냈다. S. 세레비시애에서 스테비올 글리코시드 분비에 대한 다양한 트랜스포터의 효과를 측정하기 위해, 내인성 트랜스포터의 파괴를 각각 수반하는 S. 세레비시애 변이체의 라이브러리를 작제하였다.
원형질막-위치한 ABC 및 MFS 트랜스포터는 45-65 bp 유전자 특이적 장-테일을 갖는 프라이머로 증폭된 항생제 마커 카세트를 사용하여, S. 세레비시애 균주 BY4741 및/또는 BY4742 (BY4741은 ATCC 201388로서 입수가능하고, BY4742는 ATCC 201389로서 입수가능함; 문헌 [Brachmann, et al. "Designer deletion strains derived from Sacchromyces cerevisiae S288C: a useful set of strains and plasmids for PCR-mediated gene disruption and other applications." Yeast 14:115-32, 1998] 참조)에서 하나씩 파괴하였다. 카세트는 균주로 형질전환되고, 특이적 트랜스포터 유전자는 항생제 마커 카세트의 상동 재조합에 의해 파괴하였다. 천연 트랜스포터 유전자의 파괴는 천연 유전자의 업스트림 서열에 특이적인 전방향 프라이머 및 항생제 마커 카세트에서 내부에 위치한 역 프라이머를 사용하여 PCR에 의해 확인하였다. 변이체 라이브러리는 총 34개 트랜스포터 (14 ABC, 19 MFS, 및 1 기타) 및 2개의 전사 인자를 포함하였다. 표 15 참조.
표 15: 라이브러리 균주에서 효모 변이체를 생성하기 위한 수송-관련 유전자 넉아웃
명칭 ORF 타입/단백질 위치 수탁 번호*
PDR1 /3 YGL013C/YBL005W 전사 인자 P12383/ (SEQ ID NO: 104)
P33200 (SEQ ID NO: 105)
PDR3 YBL005W 전사 인자 P33200 (SEQ ID NO: 105)
1 PDR11 YIL013 원형질막 P40550 (SEQ ID NO: 109)
2 PDR15 YDR406 원형질막 Q04182 (SEQ ID NO: 111)
3 PDR10 YOR328 원형질막 P51533 (SEQ ID NO: 108)
4 PDR5 YOR153W 원형질막 P33302 (SEQ ID NO: 107)
5 YOR1 YGR281 원형질막 P53049 (SEQ ID NO: 115)
6 AUS1 YOR011W 미토콘드리아 ( 원형질막) Q08409 (SEQ ID NO: 116)
7 SNQ2 YDR011 원형질막 P32568 (SEQ ID NO: 113)
8 PDR12 YPL058 원형질막 Q02785 (SEQ ID NO: 110)
9 STE6 YKL209c 원형질막 P12866 (SEQ ID NO: 114)
10 - YOL075c (막) Q08234 (SEQ ID NO: 117)
11 - YIL166c (막) P40445 (SEQ ID NO: 118)
12 THI73 YLR004c (원형질/ER 막) Q07904 (SEQ ID NO: 119)
13 NFT1 YKR103w/YKR104w 막 P0CE68 (SEQ ID NO: 120)
14 PDR18 YNR070w (미토콘드리아) P53756 (SEQ ID NO: 112)
15 FLR1 YBR008C 원형질막 P38124 (SEQ ID NO: 122)
16 QDR1 YIL120W 원형질막 P40475 (SEQ ID NO: 123)
17 QDR2 YIL121W 원형질막 P40474 (SEQ ID NO: 124)
18 QDR3 YBR043C 원형질막 P38227 (SEQ ID NO: 125)
19 DTR1 YBR180W (프로스포어 막) P38125 (SEQ ID NO: 147)
20 TPO1 YLL028W 원형질막 Q07824 (SEQ ID NO: 126)
21 TPO2 YGR138C 원형질막 P53283 (SEQ ID NO: 127)
22 AQR1 YNL065W 원형질막 P53943 (SEQ ID NO: 130)
23 AZR1 YGR224W 원형질막 P50080 (SEQ ID NO: 131)
24 ENB1 YOL158C 원형질막 Q08299 (SEQ ID NO: 139)
25 SGE1 YPR198W 원형질막 P33335 (SEQ ID NO: 132)
26 YHK8 YHR048W 막 P38776 (SEQ ID NO: 133)
27 GEX2 YKR106W 막 P36173 (SEQ ID NO: 135)
28 HOL1 YNR055C 원형질막 /미토콘드리아 P53389 (SEQ ID NO: 136)
29 TPO4 YOR273C 원형질막 /(액포) Q12256 (SEQ ID NO: 129)
30 TPO3 YPR156c 원형질막 /(액포) Q06451 (SEQ ID NO: 128)
31 ATR1 YML116W 원형질막 (액포) P13090 (SEQ ID NO: 134)
32 - YOR378W - Q08902 (SEQ ID NO: 137)
33 - YMR279C - Q03263 (SEQ ID NO: 138)
34 HXT11 YOL156W 원형질막 P54862 (SEQ ID NO: 156)
* -- <uniprot.org/uniprot> 웹사이트에서 기록된 수탁 번호.
개시 분석은 이러한 36개 유전자의 변이체 중에서, 효모 PDR5 , PDR10 , PDR15 및 SNQ2 로커스에 의해 인코딩된 트랜스포터는 스테비올 글리코시드 예컨대, 19-SMG 및 루부소시드의 배양 배지로의 분비에 대한 검출가능한 효과를 가짐을 보여주었다. TPO1 , TPO3 , YOR1 , YOL075c , PDR18 , 및 FLR1 로커스에 의해 인코딩된 효모 내인성 트랜스포터는 물론 PDR1 및 PDR3 로커스에 의해 인코딩된 전사 인자는 또한, PDR5 , PDR10 , PDR15 및 SNQ2의 것보다 더 적은 정도이긴 하나, 스테비올 글리코시드 분비에 대한 검출가능한 효과를 가졌다. 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 수개의 트랜스포터가 확인되었기 때문에, 단일 트랜스포터는 효모에서 스테비올 글리코시드의 분비를 단독으로 책임지는 것으로 보이지 않는다.
스테비올 글리코시드 분비에 대한 하나 초과의 트랜스포터의 파괴 효과를 측정하기 위해, 4중 파괴 변이체 (pdr5 , pdr10 , pdr15 , snq2)를 생성시켰다. 결실 변이체 pdr15 (BY4742를 기반으로 하는 S. 세레비시애 균주에서 생성됨)를 테일로서 PDR10 플래킹 서열을 갖는 프라이머를 사용하여 PCR로부터 제조된 선택 마커 결실 카세트로 형질전환시켜, 형질전환시 생동 재조합을 허용한다. 동일한 방식으로, snq2 결실 균주를 생성시키고 (BY4741 기반으로 함), 프라이머 테일로서 PDR5 플랭킹 서열을 사용하여 제 2 선택 마커 결실 카세트로 형질전환시켰다. 생성되는 2개의 이중 변이체 균주 (pdr15-pdr10 및 snq2-pdr5)를 메이팅시켜 모두 4개의 트랜스포터 유전자에서 파괴된 스포어 생성물을 생성시켰다. 단일 파괴 변이체에 대해 기술된 바와 같은 프라이머 전법을 이용하여 파괴를 PCR에 의해 입증하였으며, 4X 파괴 변이체로서 언급된 4중 pdr5 , pdr10 , pdr15, snq2 파괴 변이체의 형성을 유도하였다.
4X 파괴 변이체는 4개의 스테비아 레바우디아나 UGT를 인코딩하는 2 마이크론 플라스미드로 형질전환시켰다: 76G1, 74G1, 91D2e, 및 85C2. WO 2011/153378A1 참조. 4개의 UGT를 발현하는 4X 파괴 변이체의 배양물을 히스티딘 및 우라실이 결여된 2-3 ml의 합성 완전 (SC) 배지를 함유하는 13-ml 배양 튜브에서 밤새 사전-성장시켰다. UGT 플라스미드를 가지나 PDR5 , PDR10 , PDR15, SNG2 로커스에서 야생형인 어미 균주의 배양물을 대조군으로서 제공하였다.
다음날 0.25 OD600 단위체를 스핀다운시키고, 100 μM 스테비올을 함유하는 새로운 배지에 재현탁시키고, 배양 튜브에서 2h 동안 30℃에서 진탕하였다. 100 ㎕의 배양물 분취액을 스핀다운시키고, 동량의 DMSO를 상청액에 첨가하였다. 세포 펠렛을 H2O로 세척하고, 후속하여 200 ㎕의 50% DMSO에 재현탁하였다. 이어서, 혼합물을 볼텍싱하고, 10분 동안 80℃에서 가열하고, 원심분리하여 찌꺼기를 제거하였다. 생성 용액 (세포 펠렛 샘플)을, Phenomenex® 키네텍스 C18 칼럼 (150 x 2.1 mm, 2.6 μM 입자, 100 Å 포어 크기)를 사용하고, 40-50% B의 더 얕은 구배를 사용하여 전형적으로 더 긴 체류 시간을 유도한다는 점을 제외하고는 실시예 1에 기술된 것과 유사한 방법을 이용하여 LC-MS에 의해 19-SMG의 양에 대해 분석하였다. 도 8에 도시된 결과는 4X 파괴 변이체 균주에 의해 제조된 전체 19-SMG의 대략 90%가 펠렛에 존재함을 나타낸다. 반대로, 야생형 균주에 의해 제조된 전체 19-SMG의 단지 약 25%만이 펠렛에 존재하였다.
4개의 S. 레바우디아나 UGT를 발현하는 4X 파괴 변이체 균주를 레바우디오시드 A 생성에 대해 평가하였다. 사전-배양된 세포를 250 ㎕ 스테비올 함유 배지 (SC-His-Ura, 100 μM 스테비올)에서 OD600 = 20으로 농축하였다. 24 시간 인큐베이션 (30℃ 및 200 rpm) 후, 세포를 채취하였다. 배양물의 100 ㎕ 분취액을 스핀다운시키고, 동일 용적의 DMSO를 이러한 샘플의 상청액에 첨가하였다. 세포 펠렛을 H2O에서 1회 세척하고, 200 ㎕의 50% DMSO를 펠렛에 첨가하였다. 샘플을 볼텍싱하고, 10분 동안 80℃로 가열시키고 원심분리하였다. 2개의 DMSO 혼합물로부터의 상청액을 풀링시키고, 스테비올 글리코시드 함량을 Phenomenex® 키네텍스 C18 칼럼을 사용한 LC-MS에 의해 분석하였다. 결과는 도 9에 도시하였다. 이러한 결과는 RebA 축적에서의 큰 증가가, 4개의 S. 레바우디아나 UGT를 발현하는 야생형 균주와 비교하여 4개의 S. 레바우디아나 UGT를 발현하는 4X 변이체 균주에서 관찰되었음을 나타낸다. 이러한 결과는 모노글루코시드 중간체가 4X 변이체 균주에서 아마도 덜 분비되고, 대신에 이들 효모 균주의 세포질에서 추가의 글리코실화에 대한 기질로서 기능함을 암시한다. 그러나, 넉아웃된 트랜스포터중 일부는 또한 RebA와 같은 더 큰 분자량의 레바우디오시드의 분비에 대한 특이성을 가질 수 있으며, 배지에서의 RebA의 분비가 요망되는 균주에서 과다발현시키기에 유용할 수 있다. 경로 UGT의 발현을 통해 글리코실화 활성 속도의 적절한 균형을 이용하여, 더 적은 분자량의 스테비올 글리코시드는 추가로 글리코실화된 후 배지로 분비된다. 예를 들어, UGT74G1 및 UGT85C2 효소와 비교하여 UGT76G1 및 UGT91D2e 및/또는 EUGT11 UGT의 더 높은 발현 수준은 스테비올 모노글루코시드의 축적을 방지하며, 이는 더욱 용이하게 분비된다. UGT 활성 수준이 특정 스테비올 글리코시드에 대한 수송 속도보다 높은 경우 (따라서, 글리코실화 속도가 더 빠른 경우), 더 높은 분자량의 스테비올 글리코시드가 생성될 것이다.
7X 트랜스포터 변이체 효모 균주의 작제
상기 기술된 4중 트랜스포터 변이체 결과를 기반으로 하여, 7X 트랜스포터 파괴 변이체 (pdr15 - pdr10 - snq2 - pdr5 - tpo1 - pdr1 - pdr3)를 생성시켰다. pdr1 및 pdr3 이중 변이체는 BY4741 배경에서 생성시켰다. 그 후, 이중 변이체를 생성하기 위해 사용된 마커를 제거하였다. 생성된 이중 변이체를 선택 마커 결실 카세트로 형질전환시켰다. 테일로서 TPO1 플랭킹 서열을 갖는 프라이머를 사용하여 PCR로부터 카세트를 제조하여 형질전환시 상동 재조합을 허용하게 하였다. 3중 변이체 pdr1 - pdr3-tpo1를 상기 기술된 4X 파괴 변이체 (BY4742 기반)와 메이팅시켰다. 생성 스포어에서, 모두 7개 위치에서 파괴된 균주를 발견하였다. 유전자의 파괴는 PCR에 의해 확인하였다. 표적화된 유전자를 대체하는 카세트의 경우에, 상기 기술된 PCR 방법을 적용하여 유전자의 파괴를 확인하였다. pdr1 및 pdr3 로커스에 있어서, 각 유전자로부터의 업스트림 및 다운스트림 서열에 어닐링하기 위해 설계된 전방향 및 역방향 프라이머를 사용하여 파괴를 확인하였다. PCR 생산물은 모든 클론에 존재하였으며, 짧은 PCR 생산물은 표적화된 유전자의 손실을 나타내었다.
상기 기술된 4개의 S. 레바우디아나 UGT를 4X 및 7X 트랜스포터 파괴 변이체는 물론 야생형 균주의 유전체으로 상동 재조합을 이용하여 통합시켰다. 스테비올-구배 시간-과정 실험을 수행하여 야생형, 4X 및 7X 변이체 균주에서 스테비올-글리코시드 축적에 대한 영향을 평가하였다. 4개의 S. 레바우디아나 UGT를 각각 발현하는 4X 및 7X 파괴 변이체 균주의 사전-배양된 세포를 400 ㎕ 스테비올 함유 배지 (SC-Ura, 0 μM, 20 μM, 50 μM, 100 μM, 또는 250 μM 스테비올)에서 OD600 = 1로 농축하였다. 균주를 30℃, 320 rpm하에 96 딥 웰 플레이트에서 성장시키고, 대략 0, 1, 2, 4, 8 또는 24 시간 배양 후, 각 배양물의 50 ㎕ 분취액을 스핀다운시키고, 동일 용적의 DMSO를 각 분취액의 상청액에 첨가하였다. 스테비올 글리코시드 함량을 Phenomenex® 키네텍스 C18 칼럼을 이용하여 상기 기술된 바와 같은 LC-MS에 의해 분석하였다.
결과는 도 10-12에 도시되어 있다. 도 10에 도시된 바와 같이, 야생형 균주는 19-SMG 및 13-SMG를 세포외 브로쓰로 분비하였다. 도 11 및 도 12에 도시된 바와 같이, 4X 및 7X 트랜스포터 파괴 변이체는 세포외 브로쓰로 19-SMG 및 13-SMG를 분비하지 않았다. 그러나, 4X- 및 7X 트랜스포터 파괴 변이체는 야생형 균주보다 더 많은 양의 1,3-비오시드를 분비하였다 (도 12 참조). 이들 데이타는 파괴되는 내인성 트랜스포터가 효모에서 스테비올 글리코시드 축적에 영향을 끼침을 보여준다.
상기 데이타는 효모에서 내인성 트랜스포터의 넉아웃은 단독으로 또는 스테비올 글리코시드의 증가된 보유에 대한 스크리닝과 조합되어 배지에서 스테비올 글리코시드 분비를 증가시키기 위한 과다발현에 대한 잠재적 트랜스포터를 확인하기 위한 우수한 방법임을 설명한다.
트랜스포터 변이체의 추가 스크리닝
더 높은 분자량의 레바우디오시드의 분비에 대한 효모 유전자 넉아웃 효과를 실시예 2에 기술된 효모 균주 EFSC3248에서 평가하였다. 크로모좀에 대한 각 특이적 트랜스포터 유전자 (PDR5, SNQ2, YOR1, YHK8 및 FLR1)의 파괴를 이전에 기술된 바와 같은 상동 재조합에 의해 수행하였다. 96 시간 인큐베이션 (30℃ 및 200 rpm) 후, 세포를 채취하였다. 배양물의 100 ㎕ 분취액을 스핀다운시키고, 동일 용적의 100% DMSO를 상청액에 첨가하였다. 80 마이크로리터의 혼합물을 '상청액' 샘플로서 LC-MS에 의해 분석하였다. 100uL의 100% DMSO중 100 마이크로리터의 세포 현탁액을 10분 동안 80℃에서 가열한 후 원심분리하였다. 혼합물을 볼텍싱하고, 80℃에서 10분 동안 가열하고 원심분리하여 임의의 잔류하는 찌꺼기를 제거하였다. 40 마이크로리터의 생성 용액을 40uL DMSO (50%)와 혼합하고 샘플을 '총' 샘플로서 LC-MS에 의해 분석하였다. 배양 상청액으로 분비된 다양한 스테비올 글리코시드 (RebA, RebB, RebD, RebM, 루부소시드, 13-SMG, 1.2 스테비오시드, 1.2 비오시드 및 비공지된 스테비올 글리코시드 (4.13분에서의 LC-MS 피크) 포함)의 양은 물론 전체 배양 브로쓰에서의 총 양을 실시예 1에 기술된 바와 같이 LC-MS에 의해 측정하였다. 데이타는 단일의 내인성 효모 트랜스포터 유전자의 파괴가 배양 배지의 상청액중 다양한 스테비올 글리코시드의 분비된 양 (도 13a-c) 및 백분율 (도 13d-f)의 감소를 유도함을 입증한다. 구체적으로, SNQ2, YOR1 및 FLR1의 파괴는 대조군과 비교하여, 상청액 또는 효모 균주에서 분비된 RebA, RebB 및 RebD의 감소 또는 효모 균주에서 RebA, RebB 및 RebD 농도의 감소를 유도하였다 (도 13a-f 참조; 도 13의 대조군은 "EFSC3248"임).
본 발명이 이의 특정 구체예를 참조로 상세히 기술되어 있으나, 변형 및 변경이 첨부된 청구범위에 규정된 본 발명의 범위로부터 벗어나지 않으면서 가능하다는 것이 자명할 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명의 일부 양태가 특히 유리한 것으로 본원에서 확인되었으나, 본 발명은 본 발명의 이러한 특정 양태로 반드시 제한될 필요가 없음이 고려된다.
SEQUENCE LISTING <110> Evolva SA Simon, Ernesto Stockler, Iben Nordmark Mikkelsen, Michael Dalgaard Hansen, Jorgen Dalgaard Douchin, Veronique <120> PRODUCTION OF STEVIOL GLYCOSIDES IN RECOMBINANT HOSTS <130> 13-1790-WO <150> US 61/763,290 <151> 2013-02-11 <150> US 61/763,308 <151> 2013-02-11 <160> 158 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 784 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 1 Met Asn Leu Ser Leu Cys Ile Ala Ser Pro Leu Leu Thr Lys Ser Asn 1 5 10 15 Arg Pro Ala Ala Leu Ser Ala Ile His Thr Ala Ser Thr Ser His Gly 20 25 30 Gly Gln Thr Asn Pro Thr Asn Leu Ile Ile Asp Thr Thr Lys Glu Arg 35 40 45 Ile Gln Lys Gln Phe Lys Asn Val Glu Ile Ser Val Ser Ser Tyr Asp 50 55 60 Thr Ala Trp Val Ala Met Val Pro Ser Pro Asn Ser Pro Lys Ser Pro 65 70 75 80 Cys Phe Pro Glu Cys Leu Asn Trp Leu Ile Asn Asn Gln Leu Asn Asp 85 90 95 Gly Ser Trp Gly Leu Val Asn His Thr His Asn His Asn His Pro Leu 100 105 110 Leu Lys Asp Ser Leu Ser Ser Thr Leu Ala Cys Ile Val Ala Leu Lys 115 120 125 Arg Trp Asn Val Gly Glu Asp Gln Ile Asn Lys Gly Leu Ser Phe Ile 130 135 140 Glu Ser Asn Leu Ala Ser Ala Thr Glu Lys Ser Gln Pro Ser Pro Ile 145 150 155 160 Gly Phe Asp Ile Ile Phe Pro Gly Leu Leu Glu Tyr Ala Lys Asn Leu 165 170 175 Asp Ile Asn Leu Leu Ser Lys Gln Thr Asp Phe Ser Leu Met Leu His 180 185 190 Lys Arg Glu Leu Glu Gln Lys Arg Cys His Ser Asn Glu Met Asp Gly 195 200 205 Tyr Leu Ala Tyr Ile Ser Glu Gly Leu Gly Asn Leu Tyr Asp Trp Asn 210 215 220 Met Val Lys Lys Tyr Gln Met Lys Asn Gly Ser Val Phe Asn Ser Pro 225 230 235 240 Ser Ala Thr Ala Ala Ala Phe Ile Asn His Gln Asn Pro Gly Cys Leu 245 250 255 Asn Tyr Leu Asn Ser Leu Leu Asp Lys Phe Gly Asn Ala Val Pro Thr 260 265 270 Val Tyr Pro His Asp Leu Phe Ile Arg Leu Ser Met Val Asp Thr Ile 275 280 285 Glu Arg Leu Gly Ile Ser His His Phe Arg Val Glu Ile Lys Asn Val 290 295 300 Leu Asp Glu Thr Tyr Arg Cys Trp Val Glu Arg Asp Glu Gln Ile Phe 305 310 315 320 Met Asp Val Val Thr Cys Ala Leu Ala Phe Arg Leu Leu Arg Ile Asn 325 330 335 Gly Tyr Glu Val Ser Pro Asp Pro Leu Ala Glu Ile Thr Asn Glu Leu 340 345 350 Ala Leu Lys Asp Glu Tyr Ala Ala Leu Glu Thr Tyr His Ala Ser His 355 360 365 Ile Leu Tyr Gln Glu Asp Leu Ser Ser Gly Lys Gln Ile Leu Lys Ser 370 375 380 Ala Asp Phe Leu Lys Glu Ile Ile Ser Thr Asp Ser Asn Arg Leu Ser 385 390 395 400 Lys Leu Ile His Lys Glu Val Glu Asn Ala Leu Lys Phe Pro Ile Asn 405 410 415 Thr Gly Leu Glu Arg Ile Asn Thr Arg Arg Asn Ile Gln Leu Tyr Asn 420 425 430 Val Asp Asn Thr Arg Ile Leu Lys Thr Thr Tyr His Ser Ser Asn Ile 435 440 445 Ser Asn Thr Asp Tyr Leu Arg Leu Ala Val Glu Asp Phe Tyr Thr Cys 450 455 460 Gln Ser Ile Tyr Arg Glu Glu Leu Lys Gly Leu Glu Arg Trp Val Val 465 470 475 480 Glu Asn Lys Leu Asp Gln Leu Lys Phe Ala Arg Gln Lys Thr Ala Tyr 485 490 495 Cys Tyr Phe Ser Val Ala Ala Thr Leu Ser Ser Pro Glu Leu Ser Asp 500 505 510 Ala Arg Ile Ser Trp Ala Lys Asn Gly Ile Leu Thr Thr Val Val Asp 515 520 525 Asp Phe Phe Asp Ile Gly Gly Thr Ile Asp Glu Leu Thr Asn Leu Ile 530 535 540 Gln Cys Val Glu Lys Trp Asn Val Asp Val Asp Lys Asp Cys Cys Ser 545 550 555 560 Glu His Val Arg Ile Leu Phe Leu Ala Leu Lys Asp Ala Ile Cys Trp 565 570 575 Ile Gly Asp Glu Ala Phe Lys Trp Gln Ala Arg Asp Val Thr Ser His 580 585 590 Val Ile Gln Thr Trp Leu Glu Leu Met Asn Ser Met Leu Arg Glu Ala 595 600 605 Ile Trp Thr Arg Asp Ala Tyr Val Pro Thr Leu Asn Glu Tyr Met Glu 610 615 620 Asn Ala Tyr Val Ser Phe Ala Leu Gly Pro Ile Val Lys Pro Ala Ile 625 630 635 640 Tyr Phe Val Gly Pro Lys Leu Ser Glu Glu Ile Val Glu Ser Ser Glu 645 650 655 Tyr His Asn Leu Phe Lys Leu Met Ser Thr Gln Gly Arg Leu Leu Asn 660 665 670 Asp Ile His Ser Phe Lys Arg Glu Phe Lys Glu Gly Lys Leu Asn Ala 675 680 685 Val Ala Leu His Leu Ser Asn Gly Glu Ser Gly Lys Val Glu Glu Glu 690 695 700 Val Val Glu Glu Met Met Met Met Ile Lys Asn Lys Arg Lys Glu Leu 705 710 715 720 Met Lys Leu Ile Phe Glu Glu Asn Gly Ser Ile Val Pro Arg Ala Cys 725 730 735 Lys Asp Ala Phe Trp Asn Met Cys His Val Leu Asn Phe Phe Tyr Ala 740 745 750 Asn Asp Asp Gly Phe Thr Gly Asn Thr Ile Leu Asp Thr Val Lys Asp 755 760 765 Ile Ile Tyr Asn Pro Leu Val Leu Val Asn Glu Asn Glu Glu Gln Arg 770 775 780 <210> 2 <211> 784 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 2 Met Asn Leu Ser Leu Cys Ile Ala Ser Pro Leu Leu Thr Lys Ser Ser 1 5 10 15 Arg Pro Thr Ala Leu Ser Ala Ile His Thr Ala Ser Thr Ser His Gly 20 25 30 Gly Gln Thr Asn Pro Thr Asn Leu Ile Ile Asp Thr Thr Lys Glu Arg 35 40 45 Ile Gln Lys Leu Phe Lys Asn Val Glu Ile Ser Val Ser Ser Tyr Asp 50 55 60 Thr Ala Trp Val Ala Met Val Pro Ser Pro Asn Ser Pro Lys Ser Pro 65 70 75 80 Cys Phe Pro Glu Cys Leu Asn Trp Leu Ile Asn Asn Gln Leu Asn Asp 85 90 95 Gly Ser Trp Gly Leu Val Asn His Thr His Asn His Asn His Pro Leu 100 105 110 Leu Lys Asp Ser Leu Ser Ser Thr Leu Ala Cys Ile Val Ala Leu Lys 115 120 125 Arg Trp Asn Val Gly Glu Asp Gln Ile Asn Lys Gly Leu Ser Phe Ile 130 135 140 Glu Ser Asn Leu Ala Ser Ala Thr Asp Lys Ser Gln Pro Ser Pro Ile 145 150 155 160 Gly Phe Asp Ile Ile Phe Pro Gly Leu Leu Glu Tyr Ala Lys Asn Leu 165 170 175 Asp Ile Asn Leu Leu Ser Lys Gln Thr Asp Phe Ser Leu Met Leu His 180 185 190 Lys Arg Glu Leu Glu Gln Lys Arg Cys His Ser Asn Glu Ile Asp Gly 195 200 205 Tyr Leu Ala Tyr Ile Ser Glu Gly Leu Gly Asn Leu Tyr Asp Trp Asn 210 215 220 Met Val Lys Lys Tyr Gln Met Lys Asn Gly Ser Val Phe Asn Ser Pro 225 230 235 240 Ser Ala Thr Ala Ala Ala Phe Ile Asn His Gln Asn Pro Gly Cys Leu 245 250 255 Asn Tyr Leu Asn Ser Leu Leu Asp Lys Phe Gly Asn Ala Val Pro Thr 260 265 270 Val Tyr Pro Leu Asp Leu Tyr Ile Arg Leu Ser Met Val Asp Thr Ile 275 280 285 Glu Arg Leu Gly Ile Ser His His Phe Arg Val Glu Ile Lys Asn Val 290 295 300 Leu Asp Glu Thr Tyr Arg Cys Trp Val Glu Arg Asp Glu Gln Ile Phe 305 310 315 320 Met Asp Val Val Thr Cys Ala Leu Ala Phe Arg Leu Leu Arg Ile His 325 330 335 Gly Tyr Lys Val Ser Pro Asp Gln Leu Ala Glu Ile Thr Asn Glu Leu 340 345 350 Ala Phe Lys Asp Glu Tyr Ala Ala Leu Glu Thr Tyr His Ala Ser Gln 355 360 365 Ile Leu Tyr Gln Glu Asp Leu Ser Ser Gly Lys Gln Ile Leu Lys Ser 370 375 380 Ala Asp Phe Leu Lys Gly Ile Leu Ser Thr Asp Ser Asn Arg Leu Ser 385 390 395 400 Lys Leu Ile His Lys Glu Val Glu Asn Ala Leu Lys Phe Pro Ile Asn 405 410 415 Thr Gly Leu Glu Arg Ile Asn Thr Arg Arg Asn Ile Gln Leu Tyr Asn 420 425 430 Val Asp Asn Thr Arg Ile Leu Lys Thr Thr Tyr His Ser Ser Asn Ile 435 440 445 Ser Asn Thr Tyr Tyr Leu Arg Leu Ala Val Glu Asp Phe Tyr Thr Cys 450 455 460 Gln Ser Ile Tyr Arg Glu Glu Leu Lys Gly Leu Glu Arg Trp Val Val 465 470 475 480 Gln Asn Lys Leu Asp Gln Leu Lys Phe Ala Arg Gln Lys Thr Ala Tyr 485 490 495 Cys Tyr Phe Ser Val Ala Ala Thr Leu Ser Ser Pro Glu Leu Ser Asp 500 505 510 Ala Arg Ile Ser Trp Ala Lys Asn Gly Ile Leu Thr Thr Val Val Asp 515 520 525 Asp Phe Phe Asp Ile Gly Gly Thr Ile Asp Glu Leu Thr Asn Leu Ile 530 535 540 Gln Cys Val Glu Lys Trp Asn Val Asp Val Asp Lys Asp Cys Cys Ser 545 550 555 560 Glu His Val Arg Ile Leu Phe Leu Ala Leu Lys Asp Ala Ile Cys Trp 565 570 575 Ile Gly Asp Glu Ala Phe Lys Trp Gln Ala Arg Asp Val Thr Ser His 580 585 590 Val Ile Gln Thr Trp Leu Glu Leu Met Asn Ser Met Leu Arg Glu Ala 595 600 605 Ile Trp Thr Arg Asp Ala Tyr Val Pro Thr Leu Asn Glu Tyr Met Glu 610 615 620 Asn Ala Tyr Val Ser Phe Ala Leu Gly Pro Ile Val Lys Pro Ala Ile 625 630 635 640 Tyr Phe Val Gly Pro Lys Leu Ser Glu Glu Ile Val Glu Ser Ser Glu 645 650 655 Tyr His Asn Leu Phe Lys Leu Met Ser Thr Gln Gly Arg Leu Leu Asn 660 665 670 Asp Ile His Ser Phe Lys Arg Glu Phe Lys Glu Gly Lys Leu Asn Ala 675 680 685 Val Ala Leu His Leu Ser Asn Gly Glu Ser Gly Lys Val Glu Glu Glu 690 695 700 Val Val Glu Glu Met Met Met Met Ile Lys Asn Lys Arg Lys Glu Leu 705 710 715 720 Met Lys Leu Ile Phe Glu Glu Asn Gly Ser Ile Val Pro Arg Ala Cys 725 730 735 Lys Asp Ala Phe Trp Asn Met Cys His Val Leu Asn Phe Phe Tyr Ala 740 745 750 Asn Asp Asp Gly Phe Thr Gly Asn Thr Ile Leu Asp Thr Val Lys Asp 755 760 765 Ile Ile Tyr Asn Pro Leu Val Leu Val Asn Glu Asn Glu Glu Gln Arg 770 775 780 <210> 3 <211> 590 <212> PRT <213> Zea mays <400> 3 Met Ala Met Pro Val Lys Leu Thr Pro Ala Ser Leu Ser Leu Lys Ala 1 5 10 15 Val Cys Cys Arg Phe Ser Ser Gly Gly His Ala Leu Arg Phe Gly Ser 20 25 30 Ser Leu Pro Cys Trp Arg Arg Thr Pro Thr Gln Arg Ser Thr Ser Ser 35 40 45 Ser Thr Thr Arg Pro Ala Ala Glu Val Ser Ser Gly Lys Ser Lys Gln 50 55 60 His Asp Gln Glu Ala Ser Glu Ala Thr Ile Arg Gln Gln Leu Gln Leu 65 70 75 80 Val Asp Val Leu Glu Asn Met Gly Ile Ser Arg His Phe Ala Ala Glu 85 90 95 Ile Lys Cys Ile Leu Asp Arg Thr Tyr Arg Ser Trp Leu Gln Arg His 100 105 110 Glu Glu Ile Met Leu Asp Thr Met Thr Cys Ala Met Ala Phe Arg Ile 115 120 125 Leu Arg Leu Asn Gly Tyr Asn Val Ser Ser Asp Glu Leu Tyr His Val 130 135 140 Val Glu Ala Ser Gly Leu His Asn Ser Leu Gly Gly Tyr Leu Asn Asp 145 150 155 160 Thr Arg Thr Leu Leu Glu Leu His Lys Ala Ser Thr Val Ser Ile Ser 165 170 175 Glu Asp Glu Ser Ile Leu Asp Ser Ile Gly Ser Arg Ser Arg Thr Leu 180 185 190 Leu Arg Glu Gln Leu Glu Ser Gly Gly Ala Leu Arg Lys Pro Ser Leu 195 200 205 Phe Lys Glu Val Glu His Ala Leu Asp Gly Pro Phe Tyr Thr Thr Leu 210 215 220 Asp Arg Leu His His Arg Trp Asn Ile Glu Asn Phe Asn Ile Ile Glu 225 230 235 240 Gln His Met Leu Glu Thr Pro Tyr Leu Ser Asn Gln His Thr Ser Arg 245 250 255 Asp Ile Leu Ala Leu Ser Ile Arg Asp Phe Ser Ser Ser Gln Phe Thr 260 265 270 Tyr Gln Gln Glu Leu Gln His Leu Glu Ser Trp Val Lys Glu Cys Arg 275 280 285 Leu Asp Gln Leu Gln Phe Ala Arg Gln Lys Leu Ala Tyr Phe Tyr Leu 290 295 300 Ser Ala Ala Gly Thr Met Phe Ser Pro Glu Leu Ser Asp Ala Arg Thr 305 310 315 320 Leu Trp Ala Lys Asn Gly Val Leu Thr Thr Ile Val Asp Asp Phe Phe 325 330 335 Asp Val Ala Gly Ser Lys Glu Glu Leu Glu Asn Leu Val Met Leu Val 340 345 350 Glu Met Trp Asp Glu His His Lys Val Glu Phe Tyr Ser Glu Gln Val 355 360 365 Glu Ile Ile Phe Ser Ser Ile Tyr Asp Ser Val Asn Gln Leu Gly Glu 370 375 380 Lys Ala Ser Leu Val Gln Asp Arg Ser Ile Thr Lys His Leu Val Glu 385 390 395 400 Ile Trp Leu Asp Leu Leu Lys Ser Met Met Thr Glu Val Glu Trp Arg 405 410 415 Leu Ser Lys Tyr Val Pro Thr Glu Lys Glu Tyr Met Ile Asn Ala Ser 420 425 430 Leu Ile Phe Gly Leu Gly Pro Ile Val Leu Pro Ala Leu Tyr Phe Val 435 440 445 Gly Pro Lys Ile Ser Glu Ser Ile Val Lys Asp Pro Glu Tyr Asp Glu 450 455 460 Leu Phe Lys Leu Met Ser Thr Cys Gly Arg Leu Leu Asn Asp Val Gln 465 470 475 480 Thr Phe Glu Arg Glu Tyr Asn Glu Gly Lys Leu Asn Ser Val Ser Leu 485 490 495 Leu Val Leu His Gly Gly Pro Met Ser Ile Ser Asp Ala Lys Arg Lys 500 505 510 Leu Gln Lys Pro Ile Asp Thr Cys Arg Arg Asp Leu Leu Ser Leu Val 515 520 525 Leu Arg Glu Glu Ser Val Val Pro Arg Pro Cys Lys Glu Leu Phe Trp 530 535 540 Lys Met Cys Lys Val Cys Tyr Phe Phe Tyr Ser Thr Thr Asp Gly Phe 545 550 555 560 Ser Ser Gln Val Glu Arg Ala Lys Glu Val Asp Ala Val Ile Asn Glu 565 570 575 Pro Leu Lys Leu Gln Gly Ser His Thr Leu Val Ser Asp Val 580 585 590 <210> 4 <211> 775 <212> PRT <213> Populus trichocarpa <400> 4 Met Ser Cys Ile Arg Pro Trp Phe Cys Pro Ser Ser Ile Ser Ala Thr 1 5 10 15 Leu Thr Asp Pro Ala Ser Lys Leu Val Thr Gly Glu Phe Lys Thr Thr 20 25 30 Ser Leu Asn Phe His Gly Thr Lys Glu Arg Ile Lys Lys Met Phe Asp 35 40 45 Lys Ile Glu Leu Ser Val Ser Ser Tyr Asp Thr Ala Trp Val Ala Met 50 55 60 Val Pro Ser Pro Asp Cys Pro Glu Thr Pro Cys Phe Pro Glu Cys Thr 65 70 75 80 Lys Trp Ile Leu Glu Asn Gln Leu Gly Asp Gly Ser Trp Ser Leu Pro 85 90 95 His Gly Asn Pro Leu Leu Val Lys Asp Ala Leu Ser Ser Thr Leu Ala 100 105 110 Cys Ile Leu Ala Leu Lys Arg Trp Gly Ile Gly Glu Glu Gln Ile Asn 115 120 125 Lys Gly Leu Arg Phe Ile Glu Leu Asn Ser Ala Ser Val Thr Asp Asn 130 135 140 Glu Gln His Lys Pro Ile Gly Phe Asp Ile Ile Phe Pro Gly Met Ile 145 150 155 160 Glu Tyr Ala Lys Asp Leu Asp Leu Asn Leu Pro Leu Lys Pro Thr Asp 165 170 175 Ile Asn Ser Met Leu His Arg Arg Ala Leu Glu Leu Thr Ser Gly Gly 180 185 190 Gly Lys Asn Leu Glu Gly Arg Arg Ala Tyr Leu Ala Tyr Val Ser Glu 195 200 205 Gly Ile Gly Lys Leu Gln Asp Trp Glu Met Ala Met Lys Tyr Gln Arg 210 215 220 Lys Asn Gly Ser Leu Phe Asn Ser Pro Ser Thr Thr Ala Ala Ala Phe 225 230 235 240 Ile His Ile Gln Asp Ala Glu Cys Leu His Tyr Ile Arg Ser Leu Leu 245 250 255 Gln Lys Phe Gly Asn Ala Val Pro Thr Ile Tyr Pro Leu Asp Ile Tyr 260 265 270 Ala Arg Leu Ser Met Val Asp Ala Leu Glu Arg Leu Gly Ile Asp Arg 275 280 285 His Phe Arg Lys Glu Arg Lys Phe Val Leu Asp Glu Thr Tyr Arg Phe 290 295 300 Trp Leu Gln Gly Glu Glu Glu Ile Phe Ser Asp Asn Ala Thr Cys Ala 305 310 315 320 Leu Ala Phe Arg Ile Leu Arg Leu Asn Gly Tyr Asp Val Ser Leu Glu 325 330 335 Asp His Phe Ser Asn Ser Leu Gly Gly Tyr Leu Lys Asp Ser Gly Ala 340 345 350 Ala Leu Glu Leu Tyr Arg Ala Leu Gln Leu Ser Tyr Pro Asp Glu Ser 355 360 365 Leu Leu Glu Lys Gln Asn Ser Arg Thr Ser Tyr Phe Leu Lys Gln Gly 370 375 380 Leu Ser Asn Val Ser Leu Cys Gly Asp Arg Leu Arg Lys Asn Ile Ile 385 390 395 400 Gly Glu Val His Asp Ala Leu Asn Phe Pro Asp His Ala Asn Leu Gln 405 410 415 Arg Leu Ala Ile Arg Arg Arg Ile Lys His Tyr Ala Thr Asp Asp Thr 420 425 430 Arg Ile Leu Lys Thr Ser Tyr Arg Cys Ser Thr Ile Gly Asn Gln Asp 435 440 445 Phe Leu Lys Leu Ala Val Glu Asp Phe Asn Ile Cys Gln Ser Ile Gln 450 455 460 Arg Glu Glu Phe Lys His Ile Glu Arg Trp Val Val Glu Arg Arg Leu 465 470 475 480 Asp Lys Leu Lys Phe Ala Arg Gln Lys Glu Ala Tyr Cys Tyr Phe Ser 485 490 495 Ala Ala Ala Thr Leu Phe Ala Pro Glu Leu Ser Asp Ala Arg Met Ser 500 505 510 Trp Ala Lys Asn Gly Val Leu Thr Thr Val Val Asp Asp Phe Phe Asp 515 520 525 Val Gly Gly Ser Glu Glu Glu Leu Val Asn Leu Ile Glu Leu Ile Glu 530 535 540 Arg Trp Asp Val Asn Gly Ser Ala Asp Phe Cys Ser Glu Glu Val Glu 545 550 555 560 Ile Ile Tyr Ser Ala Ile His Ser Thr Ile Ser Glu Ile Gly Asp Lys 565 570 575 Ser Phe Gly Trp Gln Gly Arg Asp Val Lys Ser His Val Ile Lys Ile 580 585 590 Trp Leu Asp Leu Leu Lys Ser Met Leu Thr Glu Ala Gln Trp Ser Ser 595 600 605 Asn Lys Ser Val Pro Thr Leu Asp Glu Tyr Met Thr Thr Ala His Val 610 615 620 Ser Phe Ala Leu Gly Pro Ile Val Leu Pro Ala Leu Tyr Phe Val Gly 625 630 635 640 Pro Lys Leu Ser Glu Glu Val Ala Gly His Pro Glu Leu Leu Asn Leu 645 650 655 Tyr Lys Val Met Ser Thr Cys Gly Arg Leu Leu Asn Asp Trp Arg Ser 660 665 670 Phe Lys Arg Glu Ser Glu Glu Gly Lys Leu Asn Ala Ile Ser Leu Tyr 675 680 685 Met Ile His Ser Gly Gly Ala Ser Thr Glu Glu Glu Thr Ile Glu His 690 695 700 Phe Lys Gly Leu Ile Asp Ser Gln Arg Arg Gln Leu Leu Gln Leu Val 705 710 715 720 Leu Gln Glu Lys Asp Ser Ile Ile Pro Arg Pro Cys Lys Asp Leu Phe 725 730 735 Trp Asn Met Ile Lys Leu Leu His Thr Phe Tyr Met Lys Asp Asp Gly 740 745 750 Phe Thr Ser Asn Glu Met Arg Asn Val Val Lys Ala Ile Ile Asn Glu 755 760 765 Pro Ile Ser Leu Asp Glu Leu 770 775 <210> 5 <211> 2506 <212> DNA <213> Arabidopsis thaliana <400> 5 cgtcagtcat caaggctaat tcgtcgcgag ttgctacgac gccgtttcgg ttgcttctgg 60 tttctttatg tctatcaacc ttcgctcctc cggttgttcg tctccgatct cagctacttt 120 ggaacgagga ttggactcag aagtacagac aagagctaac aatgtgagct ttgagcaaac 180 aaaggagaag attaggaaga tgttggagaa agtggagctt tctgtttcgg cctacgatac 240 tagttgggta gcaatggttc catcaccgag ctcccaaaat gctccacttt tcccacagtg 300 tgtgaaatgg ttattggata atcaacatga agatggatct tggggacttg ataaccatga 360 ccatcaatct cttaagaagg atgtgttatc atctacactg gctagtatcc tcgcgttaaa 420 gaagtgggga attggtgaaa gacaaataaa caagggtctc cagtttattg agctgaattc 480 tgcattagtc actgatgaaa ccatacagaa accaacaggg tttgatatta tatttcctgg 540 gatgattaaa tatgctagag atttgaatct gacgattcca ttgggctcag aagtggtgga 600 tgacatgata cgaaaaagag atctggatct taaatgtgat agtgaaaagt tttcaaaggg 660 aagagaagca tatctggcct atgttttaga ggggacaaga aacctaaaag attgggattt 720 gatagtcaaa tatcaaagga aaaatgggtc actgtttgat tctccagcca caacagcagc 780 tgcttttact cagtttggga atgatggttg tctccgttat ctctgttctc tccttcagaa 840 attcgaggct gcagttcctt cagtttatcc atttgatcaa tatgcacgcc ttagtataat 900 tgtcactctt gaaagcttag gaattgatag agatttcaaa accgaaatca aaagcatatt 960 ggatgaaacc tatagatatt ggcttcgtgg ggatgaagaa atatgtttgg acttggccac 1020 ttgtgctttg gctttccgat tattgcttgc tcatggctat gatgtgtctt acgatccgct 1080 aaaaccattt gcagaagaat ctggtttctc tgatactttg gaaggatatg ttaagaatac 1140 gttttctgtg ttagaattat ttaaggctgc tcaaagttat ccacatgaat cagctttgaa 1200 gaagcagtgt tgttggacta aacaatatct ggagatggaa ttgtccagct gggttaagac 1260 ctctgttcga gataaatacc tcaagaaaga ggtcgaggat gctcttgctt ttccctccta 1320 tgcaagccta gaaagatcag atcacaggag aaaaatactc aatggttctg ctgtggaaaa 1380 caccagagtt acaaaaacct catatcgttt gcacaatatt tgcacctctg atatcctgaa 1440 gttagctgtg gatgacttca atttctgcca gtccatacac cgtgaagaaa tggaacgtct 1500 tgataggtgg attgtggaga atagattgca ggaactgaaa tttgccagac agaagctggc 1560 ttactgttat ttctctgggg ctgcaacttt attttctcca gaactatctg atgctcgtat 1620 atcgtgggcc aaaggtggag tacttacaac ggttgtagac gacttctttg atgttggagg 1680 gtccaaagaa gaactggaaa acctcataca cttggtcgaa aagtgggatt tgaacggtgt 1740 tcctgagtac agctcagaac atgttgagat catattctca gttctaaggg acaccattct 1800 cgaaacagga gacaaagcat tcacctatca aggacgcaat gtgacacacc acattgtgaa 1860 aatttggttg gatctgctca agtctatgtt gagagaagcc gagtggtcca gtgacaagtc 1920 aacaccaagc ttggaggatt acatggaaaa tgcgtacata tcatttgcat taggaccaat 1980 tgtcctccca gctacctatc tgatcggacc tccacttcca gagaagacag tcgatagcca 2040 ccaatataat cagctctaca agctcgtgag cactatgggt cgtcttctaa atgacataca 2100 aggttttaag agagaaagcg cggaagggaa gctgaatgcg gtttcattgc acatgaaaca 2160 cgagagagac aatcgcagca aagaagtgat catagaatcg atgaaaggtt tagcagagag 2220 aaagagggaa gaattgcata agctagtttt ggaggagaaa ggaagtgtgg ttccaaggga 2280 atgcaaagaa gcgttcttga aaatgagcaa agtgttgaac ttattttaca ggaaggacga 2340 tggattcaca tcaaatgatc tgatgagtct tgttaaatca gtgatctacg agcctgttag 2400 cttacagaaa gaatctttaa cttgatccaa gttgatctgg caggtaaact cagtaaatga 2460 aaataagact ttggtcttct tctttgttgc ttcagaacaa gaagag 2506 <210> 6 <211> 785 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 6 Met Ser Ile Asn Leu Arg Ser Ser Gly Cys Ser Ser Pro Ile Ser Ala 1 5 10 15 Thr Leu Glu Arg Gly Leu Asp Ser Glu Val Gln Thr Arg Ala Asn Asn 20 25 30 Val Ser Phe Glu Gln Thr Lys Glu Lys Ile Arg Lys Met Leu Glu Lys 35 40 45 Val Glu Leu Ser Val Ser Ala Tyr Asp Thr Ser Trp Val Ala Met Val 50 55 60 Pro Ser Pro Ser Ser Gln Asn Ala Pro Leu Phe Pro Gln Cys Val Lys 65 70 75 80 Trp Leu Leu Asp Asn Gln His Glu Asp Gly Ser Trp Gly Leu Asp Asn 85 90 95 His Asp His Gln Ser Leu Lys Lys Asp Val Leu Ser Ser Thr Leu Ala 100 105 110 Ser Ile Leu Ala Leu Lys Lys Trp Gly Ile Gly Glu Arg Gln Ile Asn 115 120 125 Lys Gly Leu Gln Phe Ile Glu Leu Asn Ser Ala Leu Val Thr Asp Glu 130 135 140 Thr Ile Gln Lys Pro Thr Gly Phe Asp Ile Ile Phe Pro Gly Met Ile 145 150 155 160 Lys Tyr Ala Arg Asp Leu Asn Leu Thr Ile Pro Leu Gly Ser Glu Val 165 170 175 Val Asp Asp Met Ile Arg Lys Arg Asp Leu Asp Leu Lys Cys Asp Ser 180 185 190 Glu Lys Phe Ser Lys Gly Arg Glu Ala Tyr Leu Ala Tyr Val Leu Glu 195 200 205 Gly Thr Arg Asn Leu Lys Asp Trp Asp Leu Ile Val Lys Tyr Gln Arg 210 215 220 Lys Asn Gly Ser Leu Phe Asp Ser Pro Ala Thr Thr Ala Ala Ala Phe 225 230 235 240 Thr Gln Phe Gly Asn Asp Gly Cys Leu Arg Tyr Leu Cys Ser Leu Leu 245 250 255 Gln Lys Phe Glu Ala Ala Val Pro Ser Val Tyr Pro Phe Asp Gln Tyr 260 265 270 Ala Arg Leu Ser Ile Ile Val Thr Leu Glu Ser Leu Gly Ile Asp Arg 275 280 285 Asp Phe Lys Thr Glu Ile Lys Ser Ile Leu Asp Glu Thr Tyr Arg Tyr 290 295 300 Trp Leu Arg Gly Asp Glu Glu Ile Cys Leu Asp Leu Ala Thr Cys Ala 305 310 315 320 Leu Ala Phe Arg Leu Leu Leu Ala His Gly Tyr Asp Val Ser Tyr Asp 325 330 335 Pro Leu Lys Pro Phe Ala Glu Glu Ser Gly Phe Ser Asp Thr Leu Glu 340 345 350 Gly Tyr Val Lys Asn Thr Phe Ser Val Leu Glu Leu Phe Lys Ala Ala 355 360 365 Gln Ser Tyr Pro His Glu Ser Ala Leu Lys Lys Gln Cys Cys Trp Thr 370 375 380 Lys Gln Tyr Leu Glu Met Glu Leu Ser Ser Trp Val Lys Thr Ser Val 385 390 395 400 Arg Asp Lys Tyr Leu Lys Lys Glu Val Glu Asp Ala Leu Ala Phe Pro 405 410 415 Ser Tyr Ala Ser Leu Glu Arg Ser Asp His Arg Arg Lys Ile Leu Asn 420 425 430 Gly Ser Ala Val Glu Asn Thr Arg Val Thr Lys Thr Ser Tyr Arg Leu 435 440 445 His Asn Ile Cys Thr Ser Asp Ile Leu Lys Leu Ala Val Asp Asp Phe 450 455 460 Asn Phe Cys Gln Ser Ile His Arg Glu Glu Met Glu Arg Leu Asp Arg 465 470 475 480 Trp Ile Val Glu Asn Arg Leu Gln Glu Leu Lys Phe Ala Arg Gln Lys 485 490 495 Leu Ala Tyr Cys Tyr Phe Ser Gly Ala Ala Thr Leu Phe Ser Pro Glu 500 505 510 Leu Ser Asp Ala Arg Ile Ser Trp Ala Lys Gly Gly Val Leu Thr Thr 515 520 525 Val Val Asp Asp Phe Phe Asp Val Gly Gly Ser Lys Glu Glu Leu Glu 530 535 540 Asn Leu Ile His Leu Val Glu Lys Trp Asp Leu Asn Gly Val Pro Glu 545 550 555 560 Tyr Ser Ser Glu His Val Glu Ile Ile Phe Ser Val Leu Arg Asp Thr 565 570 575 Ile Leu Glu Thr Gly Asp Lys Ala Phe Thr Tyr Gln Gly Arg Asn Val 580 585 590 Thr His His Ile Val Lys Ile Trp Leu Asp Leu Leu Lys Ser Met Leu 595 600 605 Arg Glu Ala Glu Trp Ser Ser Asp Lys Ser Thr Pro Ser Leu Glu Asp 610 615 620 Tyr Met Glu Asn Ala Tyr Ile Ser Phe Ala Leu Gly Pro Ile Val Leu 625 630 635 640 Pro Ala Thr Tyr Leu Ile Gly Pro Pro Leu Pro Glu Lys Thr Val Asp 645 650 655 Ser His Gln Tyr Asn Gln Leu Tyr Lys Leu Val Ser Thr Met Gly Arg 660 665 670 Leu Leu Asn Asp Ile Gln Gly Phe Lys Arg Glu Ser Ala Glu Gly Lys 675 680 685 Leu Asn Ala Val Ser Leu His Met Lys His Glu Arg Asp Asn Arg Ser 690 695 700 Lys Glu Val Ile Ile Glu Ser Met Lys Gly Leu Ala Glu Arg Lys Arg 705 710 715 720 Glu Glu Leu His Lys Leu Val Leu Glu Glu Lys Gly Ser Val Val Pro 725 730 735 Arg Glu Cys Lys Glu Ala Phe Leu Lys Met Ser Lys Val Leu Asn Leu 740 745 750 Phe Tyr Arg Lys Asp Asp Gly Phe Thr Ser Asn Asp Leu Met Ser Leu 755 760 765 Val Lys Ser Val Ile Tyr Glu Pro Val Ser Leu Gln Lys Glu Ser Leu 770 775 780 Thr 785 <210> 7 <211> 513 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 7 Met Asp Ala Val Thr Gly Leu Leu Thr Val Pro Ala Thr Ala Ile Thr 1 5 10 15 Ile Gly Gly Thr Ala Val Ala Leu Ala Val Ala Leu Ile Phe Trp Tyr 20 25 30 Leu Lys Ser Tyr Thr Ser Ala Arg Arg Ser Gln Ser Asn His Leu Pro 35 40 45 Arg Val Pro Glu Val Pro Gly Val Pro Leu Leu Gly Asn Leu Leu Gln 50 55 60 Leu Lys Glu Lys Lys Pro Tyr Met Thr Phe Thr Arg Trp Ala Ala Thr 65 70 75 80 Tyr Gly Pro Ile Tyr Ser Ile Lys Thr Gly Ala Thr Ser Met Val Val 85 90 95 Val Ser Ser Asn Glu Ile Ala Lys Glu Ala Leu Val Thr Arg Phe Gln 100 105 110 Ser Ile Ser Thr Arg Asn Leu Ser Lys Ala Leu Lys Val Leu Thr Ala 115 120 125 Asp Lys Thr Met Val Ala Met Ser Asp Tyr Asp Asp Tyr His Lys Thr 130 135 140 Val Lys Arg His Ile Leu Thr Ala Val Leu Gly Pro Asn Ala Gln Lys 145 150 155 160 Lys His Arg Ile His Arg Asp Ile Met Met Asp Asn Ile Ser Thr Gln 165 170 175 Leu His Glu Phe Val Lys Asn Asn Pro Glu Gln Glu Glu Val Asp Leu 180 185 190 Arg Lys Ile Phe Gln Ser Glu Leu Phe Gly Leu Ala Met Arg Gln Ala 195 200 205 Leu Gly Lys Asp Val Glu Ser Leu Tyr Val Glu Asp Leu Lys Ile Thr 210 215 220 Met Asn Arg Asp Glu Ile Phe Gln Val Leu Val Val Asp Pro Met Met 225 230 235 240 Gly Ala Ile Asp Val Asp Trp Arg Asp Phe Phe Pro Tyr Leu Lys Trp 245 250 255 Val Pro Asn Lys Lys Phe Glu Asn Thr Ile Gln Gln Met Tyr Ile Arg 260 265 270 Arg Glu Ala Val Met Lys Ser Leu Ile Lys Glu His Lys Lys Arg Ile 275 280 285 Ala Ser Gly Glu Lys Leu Asn Ser Tyr Ile Asp Tyr Leu Leu Ser Glu 290 295 300 Ala Gln Thr Leu Thr Asp Gln Gln Leu Leu Met Ser Leu Trp Glu Pro 305 310 315 320 Ile Ile Glu Ser Ser Asp Thr Thr Met Val Thr Thr Glu Trp Ala Met 325 330 335 Tyr Glu Leu Ala Lys Asn Pro Lys Leu Gln Asp Arg Leu Tyr Arg Asp 340 345 350 Ile Lys Ser Val Cys Gly Ser Glu Lys Ile Thr Glu Glu His Leu Ser 355 360 365 Gln Leu Pro Tyr Ile Thr Ala Ile Phe His Glu Thr Leu Arg Arg His 370 375 380 Ser Pro Val Pro Ile Ile Pro Leu Arg His Val His Glu Asp Thr Val 385 390 395 400 Leu Gly Gly Tyr His Val Pro Ala Gly Thr Glu Leu Ala Val Asn Ile 405 410 415 Tyr Gly Cys Asn Met Asp Lys Asn Val Trp Glu Asn Pro Glu Glu Trp 420 425 430 Asn Pro Glu Arg Phe Met Lys Glu Asn Glu Thr Ile Asp Phe Gln Lys 435 440 445 Thr Met Ala Phe Gly Gly Gly Lys Arg Val Cys Ala Gly Ser Leu Gln 450 455 460 Ala Leu Leu Thr Ala Ser Ile Gly Ile Gly Arg Met Val Gln Glu Phe 465 470 475 480 Glu Trp Lys Leu Lys Asp Met Thr Gln Glu Glu Val Asn Thr Ile Gly 485 490 495 Leu Thr Thr Gln Met Leu Arg Pro Leu Arg Ala Ile Ile Lys Pro Arg 500 505 510 Ile <210> 8 <211> 509 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 8 Met Ala Phe Phe Ser Met Ile Ser Ile Leu Leu Gly Phe Val Ile Ser 1 5 10 15 Ser Phe Ile Phe Ile Phe Phe Phe Lys Lys Leu Leu Ser Phe Ser Arg 20 25 30 Lys Asn Met Ser Glu Val Ser Thr Leu Pro Ser Val Pro Val Val Pro 35 40 45 Gly Phe Pro Val Ile Gly Asn Leu Leu Gln Leu Lys Glu Lys Lys Pro 50 55 60 His Lys Thr Phe Thr Arg Trp Ser Glu Ile Tyr Gly Pro Ile Tyr Ser 65 70 75 80 Ile Lys Met Gly Ser Ser Ser Leu Ile Val Leu Asn Ser Thr Glu Thr 85 90 95 Ala Lys Glu Ala Met Val Thr Arg Phe Ser Ser Ile Ser Thr Arg Lys 100 105 110 Leu Ser Asn Ala Leu Thr Val Leu Thr Cys Asp Lys Ser Met Val Ala 115 120 125 Thr Ser Asp Tyr Asp Asp Phe His Lys Leu Val Lys Arg Cys Leu Leu 130 135 140 Asn Gly Leu Leu Gly Ala Asn Ala Gln Lys Arg Lys Arg His Tyr Arg 145 150 155 160 Asp Ala Leu Ile Glu Asn Val Ser Ser Lys Leu His Ala His Ala Arg 165 170 175 Asp His Pro Gln Glu Pro Val Asn Phe Arg Ala Ile Phe Glu His Glu 180 185 190 Leu Phe Gly Val Ala Leu Lys Gln Ala Phe Gly Lys Asp Val Glu Ser 195 200 205 Ile Tyr Val Lys Glu Leu Gly Val Thr Leu Ser Lys Asp Glu Ile Phe 210 215 220 Lys Val Leu Val His Asp Met Met Glu Gly Ala Ile Asp Val Asp Trp 225 230 235 240 Arg Asp Phe Phe Pro Tyr Leu Lys Trp Ile Pro Asn Lys Ser Phe Glu 245 250 255 Ala Arg Ile Gln Gln Lys His Lys Arg Arg Leu Ala Val Met Asn Ala 260 265 270 Leu Ile Gln Asp Arg Leu Lys Gln Asn Gly Ser Glu Ser Asp Asp Asp 275 280 285 Cys Tyr Leu Asn Phe Leu Met Ser Glu Ala Lys Thr Leu Thr Lys Glu 290 295 300 Gln Ile Ala Ile Leu Val Trp Glu Thr Ile Ile Glu Thr Ala Asp Thr 305 310 315 320 Thr Leu Val Thr Thr Glu Trp Ala Ile Tyr Glu Leu Ala Lys His Pro 325 330 335 Ser Val Gln Asp Arg Leu Cys Lys Glu Ile Gln Asn Val Cys Gly Gly 340 345 350 Glu Lys Phe Lys Glu Glu Gln Leu Ser Gln Val Pro Tyr Leu Asn Gly 355 360 365 Val Phe His Glu Thr Leu Arg Lys Tyr Ser Pro Ala Pro Leu Val Pro 370 375 380 Ile Arg Tyr Ala His Glu Asp Thr Gln Ile Gly Gly Tyr His Val Pro 385 390 395 400 Ala Gly Ser Glu Ile Ala Ile Asn Ile Tyr Gly Cys Asn Met Asp Lys 405 410 415 Lys Arg Trp Glu Arg Pro Glu Asp Trp Trp Pro Glu Arg Phe Leu Asp 420 425 430 Asp Gly Lys Tyr Glu Thr Ser Asp Leu His Lys Thr Met Ala Phe Gly 435 440 445 Ala Gly Lys Arg Val Cys Ala Gly Ala Leu Gln Ala Ser Leu Met Ala 450 455 460 Gly Ile Ala Ile Gly Arg Leu Val Gln Glu Phe Glu Trp Lys Leu Arg 465 470 475 480 Asp Gly Glu Glu Glu Asn Val Asp Thr Tyr Gly Leu Thr Ser Gln Lys 485 490 495 Leu Tyr Pro Leu Met Ala Ile Ile Asn Pro Arg Arg Ser 500 505 <210> 9 <211> 525 <212> PRT <213> Fusarium fujikuroi <400> 9 Met Ser Lys Ser Asn Ser Met Asn Ser Thr Ser His Glu Thr Leu Phe 1 5 10 15 Gln Gln Leu Val Leu Gly Leu Asp Arg Met Pro Leu Met Asp Val His 20 25 30 Trp Leu Ile Tyr Val Ala Phe Gly Ala Trp Leu Cys Ser Tyr Val Ile 35 40 45 His Val Leu Ser Ser Ser Ser Thr Val Lys Val Pro Val Val Gly Tyr 50 55 60 Arg Ser Val Phe Glu Pro Thr Trp Leu Leu Arg Leu Arg Phe Val Trp 65 70 75 80 Glu Gly Gly Ser Ile Ile Gly Gln Gly Tyr Asn Lys Phe Lys Asp Ser 85 90 95 Ile Phe Gln Val Arg Lys Leu Gly Thr Asp Ile Val Ile Ile Pro Pro 100 105 110 Asn Tyr Ile Asp Glu Val Arg Lys Leu Ser Gln Asp Lys Thr Arg Ser 115 120 125 Val Glu Pro Phe Ile Asn Asp Phe Ala Gly Gln Tyr Thr Arg Gly Met 130 135 140 Val Phe Leu Gln Ser Asp Leu Gln Asn Arg Val Ile Gln Gln Arg Leu 145 150 155 160 Thr Pro Lys Leu Val Ser Leu Thr Lys Val Met Lys Glu Glu Leu Asp 165 170 175 Tyr Ala Leu Thr Lys Glu Met Pro Asp Met Lys Asn Asp Glu Trp Val 180 185 190 Glu Val Asp Ile Ser Ser Ile Met Val Arg Leu Ile Ser Arg Ile Ser 195 200 205 Ala Arg Val Phe Leu Gly Pro Glu His Cys Arg Asn Gln Glu Trp Leu 210 215 220 Thr Thr Thr Ala Glu Tyr Ser Glu Ser Leu Phe Ile Thr Gly Phe Ile 225 230 235 240 Leu Arg Val Val Pro His Ile Leu Arg Pro Phe Ile Ala Pro Leu Leu 245 250 255 Pro Ser Tyr Arg Thr Leu Leu Arg Asn Val Ser Ser Gly Arg Arg Val 260 265 270 Ile Gly Asp Ile Ile Arg Ser Gln Gln Gly Asp Gly Asn Glu Asp Ile 275 280 285 Leu Ser Trp Met Arg Asp Ala Ala Thr Gly Glu Glu Lys Gln Ile Asp 290 295 300 Asn Ile Ala Gln Arg Met Leu Ile Leu Ser Leu Ala Ser Ile His Thr 305 310 315 320 Thr Ala Met Thr Met Thr His Ala Met Tyr Asp Leu Cys Ala Cys Pro 325 330 335 Glu Tyr Ile Glu Pro Leu Arg Asp Glu Val Lys Ser Val Val Gly Ala 340 345 350 Ser Gly Trp Asp Lys Thr Ala Leu Asn Arg Phe His Lys Leu Asp Ser 355 360 365 Phe Leu Lys Glu Ser Gln Arg Phe Asn Pro Val Phe Leu Leu Thr Phe 370 375 380 Asn Arg Ile Tyr His Gln Ser Met Thr Leu Ser Asp Gly Thr Asn Ile 385 390 395 400 Pro Ser Gly Thr Arg Ile Ala Val Pro Ser His Ala Met Leu Gln Asp 405 410 415 Ser Ala His Val Pro Gly Pro Thr Pro Pro Thr Glu Phe Asp Gly Phe 420 425 430 Arg Tyr Ser Lys Ile Arg Ser Asp Ser Asn Tyr Ala Gln Lys Tyr Leu 435 440 445 Phe Ser Met Thr Asp Ser Ser Asn Met Ala Phe Gly Tyr Gly Lys Tyr 450 455 460 Ala Cys Pro Gly Arg Phe Tyr Ala Ser Asn Glu Met Lys Leu Thr Leu 465 470 475 480 Ala Ile Leu Leu Leu Gln Phe Glu Phe Lys Leu Pro Asp Gly Lys Gly 485 490 495 Arg Pro Arg Asn Ile Thr Ile Asp Ser Asp Met Ile Pro Asp Pro Arg 500 505 510 Ala Arg Leu Cys Val Arg Lys Arg Ser Leu Arg Asp Glu 515 520 525 <210> 10 <211> 499 <212> PRT <213> Trametes versicolor <400> 10 Met Glu Asp Pro Thr Val Leu Tyr Ala Cys Leu Ala Ile Ala Val Ala 1 5 10 15 Thr Phe Val Val Arg Trp Tyr Arg Asp Pro Leu Arg Ser Ile Pro Thr 20 25 30 Val Gly Gly Ser Asp Leu Pro Ile Leu Ser Tyr Ile Gly Ala Leu Arg 35 40 45 Trp Thr Arg Arg Gly Arg Glu Ile Leu Gln Glu Gly Tyr Asp Gly Tyr 50 55 60 Arg Gly Ser Thr Phe Lys Ile Ala Met Leu Asp Arg Trp Ile Val Ile 65 70 75 80 Ala Asn Gly Pro Lys Leu Ala Asp Glu Val Arg Arg Arg Pro Asp Glu 85 90 95 Glu Leu Asn Phe Met Asp Gly Leu Gly Ala Phe Val Gln Thr Lys Tyr 100 105 110 Thr Leu Gly Glu Ala Ile His Asn Asp Pro Tyr His Val Asp Ile Ile 115 120 125 Arg Glu Lys Leu Thr Arg Gly Leu Pro Ala Val Leu Pro Asp Val Ile 130 135 140 Glu Glu Leu Thr Leu Ala Val Arg Gln Tyr Ile Pro Thr Glu Gly Asp 145 150 155 160 Glu Trp Val Ser Val Asn Cys Ser Lys Ala Ala Arg Asp Ile Val Ala 165 170 175 Arg Ala Ser Asn Arg Val Phe Val Gly Leu Pro Ala Cys Arg Asn Gln 180 185 190 Gly Tyr Leu Asp Leu Ala Ile Asp Phe Thr Leu Ser Val Val Lys Asp 195 200 205 Arg Ala Ile Ile Asn Met Phe Pro Glu Leu Leu Lys Pro Ile Val Gly 210 215 220 Arg Val Val Gly Asn Ala Thr Arg Asn Val Arg Arg Ala Val Pro Phe 225 230 235 240 Val Ala Pro Leu Val Glu Glu Arg Arg Arg Leu Met Glu Glu Tyr Gly 245 250 255 Glu Asp Trp Ser Glu Lys Pro Asn Asp Met Leu Gln Trp Ile Met Asp 260 265 270 Glu Ala Ala Ser Arg Asp Ser Ser Val Lys Ala Ile Ala Glu Arg Leu 275 280 285 Leu Met Val Asn Phe Ala Ala Ile His Thr Ser Ser Asn Thr Ile Thr 290 295 300 His Ala Leu Tyr His Leu Ala Glu Met Pro Glu Thr Leu Gln Pro Leu 305 310 315 320 Arg Glu Glu Ile Glu Pro Leu Val Lys Glu Glu Gly Trp Thr Lys Ala 325 330 335 Ala Met Gly Lys Met Trp Trp Leu Asp Ser Phe Leu Arg Glu Ser Gln 340 345 350 Arg Tyr Asn Gly Ile Asn Ile Val Ser Leu Thr Arg Met Ala Asp Lys 355 360 365 Asp Ile Thr Leu Ser Asp Gly Thr Phe Leu Pro Lys Gly Thr Leu Val 370 375 380 Ala Val Pro Ala Tyr Ser Thr His Arg Asp Asp Ala Val Tyr Ala Asp 385 390 395 400 Ala Leu Val Phe Asp Pro Phe Arg Phe Ser Arg Met Arg Ala Arg Glu 405 410 415 Gly Glu Gly Thr Lys His Gln Phe Val Asn Thr Ser Val Glu Tyr Val 420 425 430 Pro Phe Gly His Gly Lys His Ala Cys Pro Gly Arg Phe Phe Ala Ala 435 440 445 Asn Glu Leu Lys Ala Met Leu Ala Tyr Ile Val Leu Asn Tyr Asp Val 450 455 460 Lys Leu Pro Gly Asp Gly Lys Arg Pro Leu Asn Met Tyr Trp Gly Pro 465 470 475 480 Thr Val Leu Pro Ala Pro Ala Gly Gln Val Leu Phe Arg Lys Arg Gln 485 490 495 Val Ser Leu <210> 11 <211> 1678 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 11 aaacaaagaa tgattcaagt tctaacaccg atccttctct tcctcatttt cttcgttttc 60 tggaaggttt acaagcacca gaaaaccaaa atcaatcttc caccgggaag cttcggatgg 120 ccatttctgg gcgaaactct ggcactccta cgtgcaggtt gggactcaga gccggagaga 180 tttgttcgtg aacggatcaa gaaacacgga agtcctctag tgtttaagac gtcgttgttt 240 ggcgaccgtt ttgcggtgtt gtgtggacct gccggaaaca agttcctgtt ctgcaacgag 300 aacaagctgg tggcgtcgtg gtggccggtt ccggtgagga agcttttcgg caagtctctg 360 ctcacgattc gtggtgatga agctaagtgg atgaggaaga tgttgttatc gtatctcggt 420 cctgatgctt tcgcaactca ttatgccgtc accatggacg tcgtcacccg tcggcatatc 480 gacgttcatt ggcgagggaa ggaagaggtg aacgtattcc aaaccgttaa gttatatgcc 540 tttgagcttg catgtcgttt attcatgaac ctagacgacc caaaccacat tgcaaaactc 600 ggttccttgt tcaacatttt cttgaaaggc atcattgagc ttccaatcga cgtcccaggg 660 acacgatttt atagctccaa aaaagcagca gcagctatca ggattgaact aaaaaaattg 720 attaaagcaa gaaaactgga actgaaagaa gggaaggcat catcttcaca agacctctta 780 tcacatttgc ttacatctcc agatgaaaat ggtatgtttc taaccgaaga agagattgta 840 gacaacatct tgttactact ctttgcgggt catgatacct cggctctttc aatcactttg 900 ctcatgaaga ctcttggcga acattctgat gtttatgaca aggtgttaaa agagcaacta 960 gagatatcga agacgaaaga agcatgggag tccctgaaat gggaggacat acaaaagatg 1020 aaatactcct ggagtgttat atgtgaagtc atgagactaa atccacctgt tataggaacc 1080 tatagagagg cccttgtgga tattgattat gcgggttata ccatccccaa aggatggaag 1140 ctgcactgga gtgctgtatc gacacaaagg gacgaggcta actttgaaga cgtaacacgt 1200 tttgacccat cacggtttga aggcgcagga ccgactccat tcacctttgt tccgtttgga 1260 ggggggccta gaatgtgttt agggaaagaa tttgctcgat tggaagtact tgcgtttctt 1320 cacaatattg tcaccaattt caaatgggac ctgttgatac ctgatgagaa aatagaatat 1380 gatcccatgg ctaccccagc aaaggggctt ccaattcgtc ttcatcccca tcaagtttga 1440 ttacttcaag catgaatcag tgatgtgaag gtaaaccata atggatctta ttggtagtta 1500 cagattatgt gtttttatgg catgaagaag ttatgataaa taaaattgtg ttattctaca 1560 acttatgtaa tttgtgcctg taagtaactg aatctattaa tgttttatgt gacatgaaac 1620 ataaatgtat aattagtaaa ttttctgctc aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa 1678 <210> 12 <211> 476 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 12 Met Ile Gln Val Leu Thr Pro Ile Leu Leu Phe Leu Ile Phe Phe Val 1 5 10 15 Phe Trp Lys Val Tyr Lys His Gln Lys Thr Lys Ile Asn Leu Pro Pro 20 25 30 Gly Ser Phe Gly Trp Pro Phe Leu Gly Glu Thr Leu Ala Leu Leu Arg 35 40 45 Ala Gly Trp Asp Ser Glu Pro Glu Arg Phe Val Arg Glu Arg Ile Lys 50 55 60 Lys His Gly Ser Pro Leu Val Phe Lys Thr Ser Leu Phe Gly Asp Arg 65 70 75 80 Phe Ala Val Leu Cys Gly Pro Ala Gly Asn Lys Phe Leu Phe Cys Asn 85 90 95 Glu Asn Lys Leu Val Ala Ser Trp Trp Pro Val Pro Val Arg Lys Leu 100 105 110 Phe Gly Lys Ser Leu Leu Thr Ile Arg Gly Asp Glu Ala Lys Trp Met 115 120 125 Arg Lys Met Leu Leu Ser Tyr Leu Gly Pro Asp Ala Phe Ala Thr His 130 135 140 Tyr Ala Val Thr Met Asp Val Val Thr Arg Arg His Ile Asp Val His 145 150 155 160 Trp Arg Gly Lys Glu Glu Val Asn Val Phe Gln Thr Val Lys Leu Tyr 165 170 175 Ala Phe Glu Leu Ala Cys Arg Leu Phe Met Asn Leu Asp Asp Pro Asn 180 185 190 His Ile Ala Lys Leu Gly Ser Leu Phe Asn Ile Phe Leu Lys Gly Ile 195 200 205 Ile Glu Leu Pro Ile Asp Val Pro Gly Thr Arg Phe Tyr Ser Ser Lys 210 215 220 Lys Ala Ala Ala Ala Ile Arg Ile Glu Leu Lys Lys Leu Ile Lys Ala 225 230 235 240 Arg Lys Leu Glu Leu Lys Glu Gly Lys Ala Ser Ser Ser Gln Asp Leu 245 250 255 Leu Ser His Leu Leu Thr Ser Pro Asp Glu Asn Gly Met Phe Leu Thr 260 265 270 Glu Glu Glu Ile Val Asp Asn Ile Leu Leu Leu Leu Phe Ala Gly His 275 280 285 Asp Thr Ser Ala Leu Ser Ile Thr Leu Leu Met Lys Thr Leu Gly Glu 290 295 300 His Ser Asp Val Tyr Asp Lys Val Leu Lys Glu Gln Leu Glu Ile Ser 305 310 315 320 Lys Thr Lys Glu Ala Trp Glu Ser Leu Lys Trp Glu Asp Ile Gln Lys 325 330 335 Met Lys Tyr Ser Trp Ser Val Ile Cys Glu Val Met Arg Leu Asn Pro 340 345 350 Pro Val Ile Gly Thr Tyr Arg Glu Ala Leu Val Asp Ile Asp Tyr Ala 355 360 365 Gly Tyr Thr Ile Pro Lys Gly Trp Lys Leu His Trp Ser Ala Val Ser 370 375 380 Thr Gln Arg Asp Glu Ala Asn Phe Glu Asp Val Thr Arg Phe Asp Pro 385 390 395 400 Ser Arg Phe Glu Gly Ala Gly Pro Thr Pro Phe Thr Phe Val Pro Phe 405 410 415 Gly Gly Gly Pro Arg Met Cys Leu Gly Lys Glu Phe Ala Arg Leu Glu 420 425 430 Val Leu Ala Phe Leu His Asn Ile Val Thr Asn Phe Lys Trp Asp Leu 435 440 445 Leu Ile Pro Asp Glu Lys Ile Glu Tyr Asp Pro Met Ala Thr Pro Ala 450 455 460 Lys Gly Leu Pro Ile Arg Leu His Pro His Gln Val 465 470 475 <210> 13 <211> 522 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 13 Met Gly Leu Phe Pro Leu Glu Asp Ser Tyr Ala Leu Val Phe Glu Gly 1 5 10 15 Leu Ala Ile Thr Leu Ala Leu Tyr Tyr Leu Leu Ser Phe Ile Tyr Lys 20 25 30 Thr Ser Lys Lys Thr Cys Thr Pro Pro Lys Ala Ser Gly Glu His Pro 35 40 45 Ile Thr Gly His Leu Asn Leu Leu Ser Gly Ser Ser Gly Leu Pro His 50 55 60 Leu Ala Leu Ala Ser Leu Ala Asp Arg Cys Gly Pro Ile Phe Thr Ile 65 70 75 80 Arg Leu Gly Ile Arg Arg Val Leu Val Val Ser Asn Trp Glu Ile Ala 85 90 95 Lys Glu Ile Phe Thr Thr His Asp Leu Ile Val Ser Asn Arg Pro Lys 100 105 110 Tyr Leu Ala Ala Lys Ile Leu Gly Phe Asn Tyr Val Ser Phe Ser Phe 115 120 125 Ala Pro Tyr Gly Pro Tyr Trp Val Gly Ile Arg Lys Ile Ile Ala Thr 130 135 140 Lys Leu Met Ser Ser Ser Arg Leu Gln Lys Leu Gln Phe Val Arg Val 145 150 155 160 Phe Glu Leu Glu Asn Ser Met Lys Ser Ile Arg Glu Ser Trp Lys Glu 165 170 175 Lys Lys Asp Glu Glu Gly Lys Val Leu Val Glu Met Lys Lys Trp Phe 180 185 190 Trp Glu Leu Asn Met Asn Ile Val Leu Arg Thr Val Ala Gly Lys Gln 195 200 205 Tyr Thr Gly Thr Val Asp Asp Ala Asp Ala Lys Arg Ile Ser Glu Leu 210 215 220 Phe Arg Glu Trp Phe His Tyr Thr Gly Arg Phe Val Val Gly Asp Ala 225 230 235 240 Phe Pro Phe Leu Gly Trp Leu Asp Leu Gly Gly Tyr Lys Lys Thr Met 245 250 255 Glu Leu Val Ala Ser Arg Leu Asp Ser Met Val Ser Lys Trp Leu Asp 260 265 270 Glu His Arg Lys Lys Gln Ala Asn Asp Asp Lys Lys Glu Asp Met Asp 275 280 285 Phe Met Asp Ile Met Ile Ser Met Thr Glu Ala Asn Ser Pro Leu Glu 290 295 300 Gly Tyr Gly Thr Asp Thr Ile Ile Lys Thr Thr Cys Met Thr Leu Ile 305 310 315 320 Val Ser Gly Val Asp Thr Thr Ser Ile Val Leu Thr Trp Ala Leu Ser 325 330 335 Leu Leu Leu Asn Asn Arg Asp Thr Leu Lys Lys Ala Gln Glu Glu Leu 340 345 350 Asp Met Cys Val Gly Lys Gly Arg Gln Val Asn Glu Ser Asp Leu Val 355 360 365 Asn Leu Ile Tyr Leu Glu Ala Val Leu Lys Glu Ala Leu Arg Leu Tyr 370 375 380 Pro Ala Ala Phe Leu Gly Gly Pro Arg Ala Phe Leu Glu Asp Cys Thr 385 390 395 400 Val Ala Gly Tyr Arg Ile Pro Lys Gly Thr Cys Leu Leu Ile Asn Met 405 410 415 Trp Lys Leu His Arg Asp Pro Asn Ile Trp Ser Asp Pro Cys Glu Phe 420 425 430 Lys Pro Glu Arg Phe Leu Thr Pro Asn Gln Lys Asp Val Asp Val Ile 435 440 445 Gly Met Asp Phe Glu Leu Ile Pro Phe Gly Ala Gly Arg Arg Tyr Cys 450 455 460 Pro Gly Thr Arg Leu Ala Leu Gln Met Leu His Ile Val Leu Ala Thr 465 470 475 480 Leu Leu Gln Asn Phe Glu Met Ser Thr Pro Asn Asp Ala Pro Val Asp 485 490 495 Met Thr Ala Ser Val Gly Met Thr Asn Ala Lys Ala Ser Pro Leu Glu 500 505 510 Val Leu Leu Ser Pro Arg Val Lys Trp Ser 515 520 <210> 14 <211> 476 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 14 Met Ile Gln Val Leu Thr Pro Ile Leu Leu Phe Leu Ile Phe Phe Val 1 5 10 15 Phe Trp Lys Val Tyr Lys His Gln Lys Thr Lys Ile Asn Leu Pro Pro 20 25 30 Gly Ser Phe Gly Trp Pro Phe Leu Gly Glu Thr Leu Ala Leu Leu Arg 35 40 45 Ala Gly Trp Asp Ser Glu Pro Glu Arg Phe Val Arg Glu Arg Ile Lys 50 55 60 Lys His Gly Ser Pro Leu Val Phe Lys Thr Ser Leu Phe Gly Asp Arg 65 70 75 80 Phe Ala Val Leu Cys Gly Pro Ala Gly Asn Lys Phe Leu Phe Cys Asn 85 90 95 Glu Asn Lys Leu Val Ala Ser Trp Trp Pro Val Pro Val Arg Lys Leu 100 105 110 Phe Gly Lys Ser Leu Leu Thr Ile Arg Gly Asp Glu Ala Lys Trp Met 115 120 125 Arg Lys Met Leu Leu Ser Tyr Leu Gly Pro Asp Ala Phe Ala Thr His 130 135 140 Tyr Ala Val Thr Met Asp Val Val Thr Arg Arg His Ile Asp Val His 145 150 155 160 Trp Arg Gly Lys Glu Glu Val Asn Val Phe Gln Thr Val Lys Leu Tyr 165 170 175 Ala Phe Glu Leu Ala Cys Arg Leu Phe Met Asn Leu Asp Asp Pro Asn 180 185 190 His Ile Ala Lys Leu Gly Ser Leu Phe Asn Ile Phe Leu Lys Gly Ile 195 200 205 Ile Glu Leu Pro Ile Asp Val Pro Gly Thr Arg Phe Tyr Ser Ser Lys 210 215 220 Lys Ala Ala Ala Ala Ile Arg Ile Glu Leu Lys Lys Leu Ile Lys Ala 225 230 235 240 Arg Lys Leu Glu Leu Lys Glu Gly Lys Ala Ser Ser Ser Gln Asp Leu 245 250 255 Leu Ser His Leu Leu Thr Ser Pro Asp Glu Asn Gly Met Phe Leu Thr 260 265 270 Glu Glu Glu Ile Val Asp Asn Ile Leu Leu Leu Leu Phe Ala Gly His 275 280 285 Asp Thr Ser Ala Leu Ser Ile Thr Leu Leu Met Lys Thr Leu Gly Glu 290 295 300 His Ser Asp Val Tyr Asp Lys Val Leu Lys Glu Gln Leu Glu Ile Ser 305 310 315 320 Lys Thr Lys Glu Ala Trp Glu Ser Leu Lys Trp Glu Asp Ile Gln Lys 325 330 335 Met Lys Tyr Ser Trp Ser Val Ile Cys Glu Val Met Arg Leu Asn Pro 340 345 350 Pro Val Ile Gly Thr Tyr Arg Glu Ala Leu Val Asp Ile Asp Tyr Ala 355 360 365 Gly Tyr Thr Ile Pro Lys Gly Trp Lys Leu His Trp Ser Ala Val Ser 370 375 380 Thr Gln Arg Asp Glu Ala Asn Phe Glu Asp Val Thr Arg Phe Asp Pro 385 390 395 400 Ser Arg Phe Glu Gly Ala Gly Pro Thr Pro Phe Thr Phe Val Pro Phe 405 410 415 Gly Gly Gly Pro Arg Met Cys Leu Gly Lys Glu Phe Ala Arg Leu Glu 420 425 430 Val Leu Ala Phe Leu His Asn Ile Val Thr Asn Phe Lys Trp Asp Leu 435 440 445 Leu Ile Pro Asp Glu Lys Ile Glu Tyr Asp Pro Met Ala Thr Pro Ala 450 455 460 Lys Gly Leu Pro Ile Arg Leu His Pro His Gln Val 465 470 475 <210> 15 <211> 525 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 15 Met Glu Ser Leu Val Val His Thr Val Asn Ala Ile Trp Cys Ile Val 1 5 10 15 Ile Val Gly Ile Phe Ser Val Gly Tyr His Val Tyr Gly Arg Ala Val 20 25 30 Val Glu Gln Trp Arg Met Arg Arg Ser Leu Lys Leu Gln Gly Val Lys 35 40 45 Gly Pro Pro Pro Ser Ile Phe Asn Gly Asn Val Ser Glu Met Gln Arg 50 55 60 Ile Gln Ser Glu Ala Lys His Cys Ser Gly Asp Asn Ile Ile Ser His 65 70 75 80 Asp Tyr Ser Ser Ser Leu Phe Pro His Phe Asp His Trp Arg Lys Gln 85 90 95 Tyr Gly Arg Ile Tyr Thr Tyr Ser Thr Gly Leu Lys Gln His Leu Tyr 100 105 110 Ile Asn His Pro Glu Met Val Lys Glu Leu Ser Gln Thr Asn Thr Leu 115 120 125 Asn Leu Gly Arg Ile Thr His Ile Thr Lys Arg Leu Asn Pro Ile Leu 130 135 140 Gly Asn Gly Ile Ile Thr Ser Asn Gly Pro His Trp Ala His Gln Arg 145 150 155 160 Arg Ile Ile Ala Tyr Glu Phe Thr His Asp Lys Ile Lys Gly Met Val 165 170 175 Gly Leu Met Val Glu Ser Ala Met Pro Met Leu Asn Lys Trp Glu Glu 180 185 190 Met Val Lys Arg Gly Gly Glu Met Gly Cys Asp Ile Arg Val Asp Glu 195 200 205 Asp Leu Lys Asp Val Ser Ala Asp Val Ile Ala Lys Ala Cys Phe Gly 210 215 220 Ser Ser Phe Ser Lys Gly Lys Ala Ile Phe Ser Met Ile Arg Asp Leu 225 230 235 240 Leu Thr Ala Ile Thr Lys Arg Ser Val Leu Phe Arg Phe Asn Gly Phe 245 250 255 Thr Asp Met Val Phe Gly Ser Lys Lys His Gly Asp Val Asp Ile Asp 260 265 270 Ala Leu Glu Met Glu Leu Glu Ser Ser Ile Trp Glu Thr Val Lys Glu 275 280 285 Arg Glu Ile Glu Cys Lys Asp Thr His Lys Lys Asp Leu Met Gln Leu 290 295 300 Ile Leu Glu Gly Ala Met Arg Ser Cys Asp Gly Asn Leu Trp Asp Lys 305 310 315 320 Ser Ala Tyr Arg Arg Phe Val Val Asp Asn Cys Lys Ser Ile Tyr Phe 325 330 335 Ala Gly His Asp Ser Thr Ala Val Ser Val Ser Trp Cys Leu Met Leu 340 345 350 Leu Ala Leu Asn Pro Ser Trp Gln Val Lys Ile Arg Asp Glu Ile Leu 355 360 365 Ser Ser Cys Lys Asn Gly Ile Pro Asp Ala Glu Ser Ile Pro Asn Leu 370 375 380 Lys Thr Val Thr Met Val Ile Gln Glu Thr Met Arg Leu Tyr Pro Pro 385 390 395 400 Ala Pro Ile Val Gly Arg Glu Ala Ser Lys Asp Ile Arg Leu Gly Asp 405 410 415 Leu Val Val Pro Lys Gly Val Cys Ile Trp Thr Leu Ile Pro Ala Leu 420 425 430 His Arg Asp Pro Glu Ile Trp Gly Pro Asp Ala Asn Asp Phe Lys Pro 435 440 445 Glu Arg Phe Ser Glu Gly Ile Ser Lys Ala Cys Lys Tyr Pro Gln Ser 450 455 460 Tyr Ile Pro Phe Gly Leu Gly Pro Arg Thr Cys Val Gly Lys Asn Phe 465 470 475 480 Gly Met Met Glu Val Lys Val Leu Val Ser Leu Ile Val Ser Lys Phe 485 490 495 Ser Phe Thr Leu Ser Pro Thr Tyr Gln His Ser Pro Ser His Lys Leu 500 505 510 Leu Val Glu Pro Gln His Gly Val Val Ile Arg Val Val 515 520 525 <210> 16 <211> 526 <212> PRT <213> Vitis vinifera <400> 16 Met Tyr Phe Leu Leu Gln Tyr Leu Asn Ile Thr Thr Val Gly Val Phe 1 5 10 15 Ala Thr Leu Phe Leu Ser Tyr Cys Leu Leu Leu Trp Arg Ser Arg Ala 20 25 30 Gly Asn Lys Lys Ile Ala Pro Glu Ala Ala Ala Ala Trp Pro Ile Ile 35 40 45 Gly His Leu His Leu Leu Ala Gly Gly Ser His Gln Leu Pro His Ile 50 55 60 Thr Leu Gly Asn Met Ala Asp Lys Tyr Gly Pro Val Phe Thr Ile Arg 65 70 75 80 Ile Gly Leu His Arg Ala Val Val Val Ser Ser Trp Glu Met Ala Lys 85 90 95 Glu Cys Ser Thr Ala Asn Asp Gln Val Ser Ser Ser Arg Pro Glu Leu 100 105 110 Leu Ala Ser Lys Leu Leu Gly Tyr Asn Tyr Ala Met Phe Gly Phe Ser 115 120 125 Pro Tyr Gly Ser Tyr Trp Arg Glu Met Arg Lys Ile Ile Ser Leu Glu 130 135 140 Leu Leu Ser Asn Ser Arg Leu Glu Leu Leu Lys Asp Val Arg Ala Ser 145 150 155 160 Glu Val Val Thr Ser Ile Lys Glu Leu Tyr Lys Leu Trp Ala Glu Lys 165 170 175 Lys Asn Glu Ser Gly Leu Val Ser Val Glu Met Lys Gln Trp Phe Gly 180 185 190 Asp Leu Thr Leu Asn Val Ile Leu Arg Met Val Ala Gly Lys Arg Tyr 195 200 205 Phe Ser Ala Ser Asp Ala Ser Glu Asn Lys Gln Ala Gln Arg Cys Arg 210 215 220 Arg Val Phe Arg Glu Phe Phe His Leu Ser Gly Leu Phe Val Val Ala 225 230 235 240 Asp Ala Ile Pro Phe Leu Gly Trp Leu Asp Trp Gly Arg His Glu Lys 245 250 255 Thr Leu Lys Lys Thr Ala Ile Glu Met Asp Ser Ile Ala Gln Glu Trp 260 265 270 Leu Glu Glu His Arg Arg Arg Lys Asp Ser Gly Asp Asp Asn Ser Thr 275 280 285 Gln Asp Phe Met Asp Val Met Gln Ser Val Leu Asp Gly Lys Asn Leu 290 295 300 Gly Gly Tyr Asp Ala Asp Thr Ile Asn Lys Ala Thr Cys Leu Thr Leu 305 310 315 320 Ile Ser Gly Gly Ser Asp Thr Thr Val Val Ser Leu Thr Trp Ala Leu 325 330 335 Ser Leu Val Leu Asn Asn Arg Asp Thr Leu Lys Lys Ala Gln Glu Glu 340 345 350 Leu Asp Ile Gln Val Gly Lys Glu Arg Leu Val Asn Glu Gln Asp Ile 355 360 365 Ser Lys Leu Val Tyr Leu Gln Ala Ile Val Lys Glu Thr Leu Arg Leu 370 375 380 Tyr Pro Pro Gly Pro Leu Gly Gly Leu Arg Gln Phe Thr Glu Asp Cys 385 390 395 400 Thr Leu Gly Gly Tyr His Val Ser Lys Gly Thr Arg Leu Ile Met Asn 405 410 415 Leu Ser Lys Ile Gln Lys Asp Pro Arg Ile Trp Ser Asp Pro Thr Glu 420 425 430 Phe Gln Pro Glu Arg Phe Leu Thr Thr His Lys Asp Val Asp Pro Arg 435 440 445 Gly Lys His Phe Glu Phe Ile Pro Phe Gly Ala Gly Arg Arg Ala Cys 450 455 460 Pro Gly Ile Thr Phe Gly Leu Gln Val Leu His Leu Thr Leu Ala Ser 465 470 475 480 Phe Leu His Ala Phe Glu Phe Ser Thr Pro Ser Asn Glu Gln Val Asn 485 490 495 Met Arg Glu Ser Leu Gly Leu Thr Asn Met Lys Ser Thr Pro Leu Glu 500 505 510 Val Leu Ile Ser Pro Arg Leu Ser Ser Cys Ser Leu Tyr Asn 515 520 525 <210> 17 <211> 479 <212> PRT <213> Medicago truncatula <400> 17 Met Glu Pro Asn Phe Tyr Leu Ser Leu Leu Leu Leu Phe Val Thr Phe 1 5 10 15 Ile Ser Leu Ser Leu Phe Phe Ile Phe Tyr Lys Gln Lys Ser Pro Leu 20 25 30 Asn Leu Pro Pro Gly Lys Met Gly Tyr Pro Ile Ile Gly Glu Ser Leu 35 40 45 Glu Phe Leu Ser Thr Gly Trp Lys Gly His Pro Glu Lys Phe Ile Phe 50 55 60 Asp Arg Met Arg Lys Tyr Ser Ser Glu Leu Phe Lys Thr Ser Ile Val 65 70 75 80 Gly Glu Ser Thr Val Val Cys Cys Gly Ala Ala Ser Asn Lys Phe Leu 85 90 95 Phe Ser Asn Glu Asn Lys Leu Val Thr Ala Trp Trp Pro Asp Ser Val 100 105 110 Asn Lys Ile Phe Pro Thr Thr Ser Leu Asp Ser Asn Leu Lys Glu Glu 115 120 125 Ser Ile Lys Met Arg Lys Leu Leu Pro Gln Phe Phe Lys Pro Glu Ala 130 135 140 Leu Gln Arg Tyr Val Gly Val Met Asp Val Ile Ala Gln Arg His Phe 145 150 155 160 Val Thr His Trp Asp Asn Lys Asn Glu Ile Thr Val Tyr Pro Leu Ala 165 170 175 Lys Arg Tyr Thr Phe Leu Leu Ala Cys Arg Leu Phe Met Ser Val Glu 180 185 190 Asp Glu Asn His Val Ala Lys Phe Ser Asp Pro Phe Gln Leu Ile Ala 195 200 205 Ala Gly Ile Ile Ser Leu Pro Ile Asp Leu Pro Gly Thr Pro Phe Asn 210 215 220 Lys Ala Ile Lys Ala Ser Asn Phe Ile Arg Lys Glu Leu Ile Lys Ile 225 230 235 240 Ile Lys Gln Arg Arg Val Asp Leu Ala Glu Gly Thr Ala Ser Pro Thr 245 250 255 Gln Asp Ile Leu Ser His Met Leu Leu Thr Ser Asp Glu Asn Gly Lys 260 265 270 Ser Met Asn Glu Leu Asn Ile Ala Asp Lys Ile Leu Gly Leu Leu Ile 275 280 285 Gly Gly His Asp Thr Ala Ser Val Ala Cys Thr Phe Leu Val Lys Tyr 290 295 300 Leu Gly Glu Leu Pro His Ile Tyr Asp Lys Val Tyr Gln Glu Gln Met 305 310 315 320 Glu Ile Ala Lys Ser Lys Pro Ala Gly Glu Leu Leu Asn Trp Asp Asp 325 330 335 Leu Lys Lys Met Lys Tyr Ser Trp Asn Val Ala Cys Glu Val Met Arg 340 345 350 Leu Ser Pro Pro Leu Gln Gly Gly Phe Arg Glu Ala Ile Thr Asp Phe 355 360 365 Met Phe Asn Gly Phe Ser Ile Pro Lys Gly Trp Lys Leu Tyr Trp Ser 370 375 380 Ala Asn Ser Thr His Lys Asn Ala Glu Cys Phe Pro Met Pro Glu Lys 385 390 395 400 Phe Asp Pro Thr Arg Phe Glu Gly Asn Gly Pro Ala Pro Tyr Thr Phe 405 410 415 Val Pro Phe Gly Gly Gly Pro Arg Met Cys Pro Gly Lys Glu Tyr Ala 420 425 430 Arg Leu Glu Ile Leu Val Phe Met His Asn Leu Val Lys Arg Phe Lys 435 440 445 Trp Glu Lys Val Ile Pro Asp Glu Lys Ile Ile Val Asp Pro Phe Pro 450 455 460 Ile Pro Ala Lys Asp Leu Pro Ile Arg Leu Tyr Pro His Lys Ala 465 470 475 <210> 18 <211> 1503 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized Stevia rebaudiana KAHe1 <400> 18 atggaagcct cttacctata catttctatt ttgcttttac tggcatcata cctgttcacc 60 actcaactta gaaggaagag cgctaatcta ccaccaaccg tgtttccatc aataccaatc 120 attggacact tatacttact caaaaagcct ctttatagaa ctttagcaaa aattgccgct 180 aagtacggac caatactgca attacaactc ggctacagac gtgttctggt gatttcctca 240 ccatcagcag cagaagagtg ctttaccaat aacgatgtaa tcttcgcaaa tagacctaag 300 acattgtttg gcaaaatagt gggtggaaca tcccttggca gtttatccta cggcgatcaa 360 tggcgtaatc taaggagagt agcttctatc gaaatcctat cagttcatag gttgaacgaa 420 tttcatgata tcagagtgga tgagaacaga ttgttaatta gaaaacttag aagttcatct 480 tctcctgtta ctcttataac agtcttttat gctctaacat tgaacgtcat tatgagaatg 540 atctctggca aaagatattt cgacagtggg gatagagaat tggaggagga aggtaagaga 600 tttcgagaaa tcttagacga aacgttgctt ctagccggtg cttctaatgt tggcgactac 660 ttaccaatat tgaactggtt gggagttaag tctcttgaaa agaaattgat cgctttgcag 720 aaaaagagag atgacttttt ccagggtttg attgaacagg ttagaaaatc tcgtggtgct 780 aaagtaggca aaggtagaaa aacgatgatc gaactcttat tatctttgca agagtcagaa 840 cctgagtact atacagatgc tatgataaga tcttttgtcc taggtctgct ggctgcaggt 900 agtgatactt cagcgggcac tatggaatgg gccatgagct tactggtcaa tcacccacat 960 gtattgaaga aagctcaagc tgaaatcgat agagttatcg gtaataacag attgattgac 1020 gagtcagaca ttggaaatat cccttacatc gggtgtatta tcaatgaaac tctaagactc 1080 tatccagcag ggccattgtt gttcccacat gaaagttctg ccgactgcgt tatttccggt 1140 tacaatatac ctagaggtac aatgttaatc gtaaaccaat gggcgattca tcacgatcct 1200 aaagtctggg atgatcctga aacctttaaa cctgaaagat ttcaaggatt agaaggaact 1260 agagatggtt tcaaacttat gccattcggt tctgggagaa gaggatgtcc aggtgaaggt 1320 ttggcaataa ggctgttagg gatgacacta ggctcagtga tccaatgttt tgattgggag 1380 agagtaggag atgagatggt tgacatgaca gaaggtttgg gtgtcacact tcctaaggcc 1440 gttccattag ttgccaaatg taagccacgt tccgaaatga ctaatctcct atccgaactt 1500 taa 1503 <210> 19 <211> 500 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 19 Met Glu Ala Ser Tyr Leu Tyr Ile Ser Ile Leu Leu Leu Leu Ala Ser 1 5 10 15 Tyr Leu Phe Thr Thr Gln Leu Arg Arg Lys Ser Ala Asn Leu Pro Pro 20 25 30 Thr Val Phe Pro Ser Ile Pro Ile Ile Gly His Leu Tyr Leu Leu Lys 35 40 45 Lys Pro Leu Tyr Arg Thr Leu Ala Lys Ile Ala Ala Lys Tyr Gly Pro 50 55 60 Ile Leu Gln Leu Gln Leu Gly Tyr Arg Arg Val Leu Val Ile Ser Ser 65 70 75 80 Pro Ser Ala Ala Glu Glu Cys Phe Thr Asn Asn Asp Val Ile Phe Ala 85 90 95 Asn Arg Pro Lys Thr Leu Phe Gly Lys Ile Val Gly Gly Thr Ser Leu 100 105 110 Gly Ser Leu Ser Tyr Gly Asp Gln Trp Arg Asn Leu Arg Arg Val Ala 115 120 125 Ser Ile Glu Ile Leu Ser Val His Arg Leu Asn Glu Phe His Asp Ile 130 135 140 Arg Val Asp Glu Asn Arg Leu Leu Ile Arg Lys Leu Arg Ser Ser Ser 145 150 155 160 Ser Pro Val Thr Leu Ile Thr Val Phe Tyr Ala Leu Thr Leu Asn Val 165 170 175 Ile Met Arg Met Ile Ser Gly Lys Arg Tyr Phe Asp Ser Gly Asp Arg 180 185 190 Glu Leu Glu Glu Glu Gly Lys Arg Phe Arg Glu Ile Leu Asp Glu Thr 195 200 205 Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ser Asn Val Gly Asp Tyr Leu Pro Ile Leu 210 215 220 Asn Trp Leu Gly Val Lys Ser Leu Glu Lys Lys Leu Ile Ala Leu Gln 225 230 235 240 Lys Lys Arg Asp Asp Phe Phe Gln Gly Leu Ile Glu Gln Val Arg Lys 245 250 255 Ser Arg Gly Ala Lys Val Gly Lys Gly Arg Lys Thr Met Ile Glu Leu 260 265 270 Leu Leu Ser Leu Gln Glu Ser Glu Pro Glu Tyr Tyr Thr Asp Ala Met 275 280 285 Ile Arg Ser Phe Val Leu Gly Leu Leu Ala Ala Gly Ser Asp Thr Ser 290 295 300 Ala Gly Thr Met Glu Trp Ala Met Ser Leu Leu Val Asn His Pro His 305 310 315 320 Val Leu Lys Lys Ala Gln Ala Glu Ile Asp Arg Val Ile Gly Asn Asn 325 330 335 Arg Leu Ile Asp Glu Ser Asp Ile Gly Asn Ile Pro Tyr Ile Gly Cys 340 345 350 Ile Ile Asn Glu Thr Leu Arg Leu Tyr Pro Ala Gly Pro Leu Leu Phe 355 360 365 Pro His Glu Ser Ser Ala Asp Cys Val Ile Ser Gly Tyr Asn Ile Pro 370 375 380 Arg Gly Thr Met Leu Ile Val Asn Gln Trp Ala Ile His His Asp Pro 385 390 395 400 Lys Val Trp Asp Asp Pro Glu Thr Phe Lys Pro Glu Arg Phe Gln Gly 405 410 415 Leu Glu Gly Thr Arg Asp Gly Phe Lys Leu Met Pro Phe Gly Ser Gly 420 425 430 Arg Arg Gly Cys Pro Gly Glu Gly Leu Ala Ile Arg Leu Leu Gly Met 435 440 445 Thr Leu Gly Ser Val Ile Gln Cys Phe Asp Trp Glu Arg Val Gly Asp 450 455 460 Glu Met Val Asp Met Thr Glu Gly Leu Gly Val Thr Leu Pro Lys Ala 465 470 475 480 Val Pro Leu Val Ala Lys Cys Lys Pro Arg Ser Glu Met Thr Asn Leu 485 490 495 Leu Ser Glu Leu 500 <210> 20 <211> 710 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 20 Met Gln Ser Asp Ser Val Lys Val Ser Pro Phe Asp Leu Val Ser Ala 1 5 10 15 Ala Met Asn Gly Lys Ala Met Glu Lys Leu Asn Ala Ser Glu Ser Glu 20 25 30 Asp Pro Thr Thr Leu Pro Ala Leu Lys Met Leu Val Glu Asn Arg Glu 35 40 45 Leu Leu Thr Leu Phe Thr Thr Ser Phe Ala Val Leu Ile Gly Cys Leu 50 55 60 Val Phe Leu Met Trp Arg Arg Ser Ser Ser Lys Lys Leu Val Gln Asp 65 70 75 80 Pro Val Pro Gln Val Ile Val Val Lys Lys Lys Glu Lys Glu Ser Glu 85 90 95 Val Asp Asp Gly Lys Lys Lys Val Ser Ile Phe Tyr Gly Thr Gln Thr 100 105 110 Gly Thr Ala Glu Gly Phe Ala Lys Ala Leu Val Glu Glu Ala Lys Val 115 120 125 Arg Tyr Glu Lys Thr Ser Phe Lys Val Ile Asp Leu Asp Asp Tyr Ala 130 135 140 Ala Asp Asp Asp Glu Tyr Glu Glu Lys Leu Lys Lys Glu Ser Leu Ala 145 150 155 160 Phe Phe Phe Leu Ala Thr Tyr Gly Asp Gly Glu Pro Thr Asp Asn Ala 165 170 175 Ala Asn Phe Tyr Lys Trp Phe Thr Glu Gly Asp Asp Lys Gly Glu Trp 180 185 190 Leu Lys Lys Leu Gln Tyr Gly Val Phe Gly Leu Gly Asn Arg Gln Tyr 195 200 205 Glu His Phe Asn Lys Ile Ala Ile Val Val Asp Asp Lys Leu Thr Glu 210 215 220 Met Gly Ala Lys Arg Leu Val Pro Val Gly Leu Gly Asp Asp Asp Gln 225 230 235 240 Cys Ile Glu Asp Asp Phe Thr Ala Trp Lys Glu Leu Val Trp Pro Glu 245 250 255 Leu Asp Gln Leu Leu Arg Asp Glu Asp Asp Thr Ser Val Thr Thr Pro 260 265 270 Tyr Thr Ala Ala Val Leu Glu Tyr Arg Val Val Tyr His Asp Lys Pro 275 280 285 Ala Asp Ser Tyr Ala Glu Asp Gln Thr His Thr Asn Gly His Val Val 290 295 300 His Asp Ala Gln His Pro Ser Arg Ser Asn Val Ala Phe Lys Lys Glu 305 310 315 320 Leu His Thr Ser Gln Ser Asp Arg Ser Cys Thr His Leu Glu Phe Asp 325 330 335 Ile Ser His Thr Gly Leu Ser Tyr Glu Thr Gly Asp His Val Gly Val 340 345 350 Tyr Ser Glu Asn Leu Ser Glu Val Val Asp Glu Ala Leu Lys Leu Leu 355 360 365 Gly Leu Ser Pro Asp Thr Tyr Phe Ser Val His Ala Asp Lys Glu Asp 370 375 380 Gly Thr Pro Ile Gly Gly Ala Ser Leu Pro Pro Pro Phe Pro Pro Cys 385 390 395 400 Thr Leu Arg Asp Ala Leu Thr Arg Tyr Ala Asp Val Leu Ser Ser Pro 405 410 415 Lys Lys Val Ala Leu Leu Ala Leu Ala Ala His Ala Ser Asp Pro Ser 420 425 430 Glu Ala Asp Arg Leu Lys Phe Leu Ala Ser Pro Ala Gly Lys Asp Glu 435 440 445 Tyr Ala Gln Trp Ile Val Ala Asn Gln Arg Ser Leu Leu Glu Val Met 450 455 460 Gln Ser Phe Pro Ser Ala Lys Pro Pro Leu Gly Val Phe Phe Ala Ala 465 470 475 480 Val Ala Pro Arg Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Ile Ser Ser Ser Pro 485 490 495 Lys Met Ser Pro Asn Arg Ile His Val Thr Cys Ala Leu Val Tyr Glu 500 505 510 Thr Thr Pro Ala Gly Arg Ile His Arg Gly Leu Cys Ser Thr Trp Met 515 520 525 Lys Asn Ala Val Pro Leu Thr Glu Ser Pro Asp Cys Ser Gln Ala Ser 530 535 540 Ile Phe Val Arg Thr Ser Asn Phe Arg Leu Pro Val Asp Pro Lys Val 545 550 555 560 Pro Val Ile Met Ile Gly Pro Gly Thr Gly Leu Ala Pro Phe Arg Gly 565 570 575 Phe Leu Gln Glu Arg Leu Ala Leu Lys Glu Ser Gly Thr Glu Leu Gly 580 585 590 Ser Ser Ile Phe Phe Phe Gly Cys Arg Asn Arg Lys Val Asp Phe Ile 595 600 605 Tyr Glu Asp Glu Leu Asn Asn Phe Val Glu Thr Gly Ala Leu Ser Glu 610 615 620 Leu Ile Val Ala Phe Ser Arg Glu Gly Thr Ala Lys Glu Tyr Val Gln 625 630 635 640 His Lys Met Ser Gln Lys Ala Ser Asp Ile Trp Lys Leu Leu Ser Glu 645 650 655 Gly Ala Tyr Leu Tyr Val Cys Gly Asp Ala Lys Gly Met Ala Lys Asp 660 665 670 Val His Arg Thr Leu His Thr Ile Val Gln Glu Gln Gly Ser Leu Asp 675 680 685 Ser Ser Lys Ala Glu Leu Tyr Val Lys Asn Leu Gln Met Ser Gly Arg 690 695 700 Tyr Leu Arg Asp Val Trp 705 710 <210> 21 <211> 692 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 21 Met Thr Ser Ala Leu Tyr Ala Ser Asp Leu Phe Lys Gln Leu Lys Ser 1 5 10 15 Ile Met Gly Thr Asp Ser Leu Ser Asp Asp Val Val Leu Val Ile Ala 20 25 30 Thr Thr Ser Leu Ala Leu Val Ala Gly Phe Val Val Leu Leu Trp Lys 35 40 45 Lys Thr Thr Ala Asp Arg Ser Gly Glu Leu Lys Pro Leu Met Ile Pro 50 55 60 Lys Ser Leu Met Ala Lys Asp Glu Asp Asp Asp Leu Asp Leu Gly Ser 65 70 75 80 Gly Lys Thr Arg Val Ser Ile Phe Phe Gly Thr Gln Thr Gly Thr Ala 85 90 95 Glu Gly Phe Ala Lys Ala Leu Ser Glu Glu Ile Lys Ala Arg Tyr Glu 100 105 110 Lys Ala Ala Val Lys Val Ile Asp Leu Asp Asp Tyr Ala Ala Asp Asp 115 120 125 Asp Gln Tyr Glu Glu Lys Leu Lys Lys Glu Thr Leu Ala Phe Phe Cys 130 135 140 Val Ala Thr Tyr Gly Asp Gly Glu Pro Thr Asp Asn Ala Ala Arg Phe 145 150 155 160 Tyr Lys Trp Phe Thr Glu Glu Asn Glu Arg Asp Ile Lys Leu Gln Gln 165 170 175 Leu Ala Tyr Gly Val Phe Ala Leu Gly Asn Arg Gln Tyr Glu His Phe 180 185 190 Asn Lys Ile Gly Ile Val Leu Asp Glu Glu Leu Cys Lys Lys Gly Ala 195 200 205 Lys Arg Leu Ile Glu Val Gly Leu Gly Asp Asp Asp Gln Ser Ile Glu 210 215 220 Asp Asp Phe Asn Ala Trp Lys Glu Ser Leu Trp Ser Glu Leu Asp Lys 225 230 235 240 Leu Leu Lys Asp Glu Asp Asp Lys Ser Val Ala Thr Pro Tyr Thr Ala 245 250 255 Val Ile Pro Glu Tyr Arg Val Val Thr His Asp Pro Arg Phe Thr Thr 260 265 270 Gln Lys Ser Met Glu Ser Asn Val Ala Asn Gly Asn Thr Thr Ile Asp 275 280 285 Ile His His Pro Cys Arg Val Asp Val Ala Val Gln Lys Glu Leu His 290 295 300 Thr His Glu Ser Asp Arg Ser Cys Ile His Leu Glu Phe Asp Ile Ser 305 310 315 320 Arg Thr Gly Ile Thr Tyr Glu Thr Gly Asp His Val Gly Val Tyr Ala 325 330 335 Glu Asn His Val Glu Ile Val Glu Glu Ala Gly Lys Leu Leu Gly His 340 345 350 Ser Leu Asp Leu Val Phe Ser Ile His Ala Asp Lys Glu Asp Gly Ser 355 360 365 Pro Leu Glu Ser Ala Val Pro Pro Pro Phe Pro Gly Pro Cys Thr Leu 370 375 380 Gly Thr Gly Leu Ala Arg Tyr Ala Asp Leu Leu Asn Pro Pro Arg Lys 385 390 395 400 Ser Ala Leu Val Ala Leu Ala Ala Tyr Ala Thr Glu Pro Ser Glu Ala 405 410 415 Glu Lys Leu Lys His Leu Thr Ser Pro Asp Gly Lys Asp Glu Tyr Ser 420 425 430 Gln Trp Ile Val Ala Ser Gln Arg Ser Leu Leu Glu Val Met Ala Ala 435 440 445 Phe Pro Ser Ala Lys Pro Pro Leu Gly Val Phe Phe Ala Ala Ile Ala 450 455 460 Pro Arg Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Ile Ser Ser Ser Pro Arg Leu 465 470 475 480 Ala Pro Ser Arg Val His Val Thr Ser Ala Leu Val Tyr Gly Pro Thr 485 490 495 Pro Thr Gly Arg Ile His Lys Gly Val Cys Ser Thr Trp Met Lys Asn 500 505 510 Ala Val Pro Ala Glu Lys Ser His Glu Cys Ser Gly Ala Pro Ile Phe 515 520 525 Ile Arg Ala Ser Asn Phe Lys Leu Pro Ser Asn Pro Ser Thr Pro Ile 530 535 540 Val Met Val Gly Pro Gly Thr Gly Leu Ala Pro Phe Arg Gly Phe Leu 545 550 555 560 Gln Glu Arg Met Ala Leu Lys Glu Asp Gly Glu Glu Leu Gly Ser Ser 565 570 575 Leu Leu Phe Phe Gly Cys Arg Asn Arg Gln Met Asp Phe Ile Tyr Glu 580 585 590 Asp Glu Leu Asn Asn Phe Val Asp Gln Gly Val Ile Ser Glu Leu Ile 595 600 605 Met Ala Phe Ser Arg Glu Gly Ala Gln Lys Glu Tyr Val Gln His Lys 610 615 620 Met Met Glu Lys Ala Ala Gln Val Trp Asp Leu Ile Lys Glu Glu Gly 625 630 635 640 Tyr Leu Tyr Val Cys Gly Asp Ala Lys Gly Met Ala Arg Asp Val His 645 650 655 Arg Thr Leu His Thr Ile Val Gln Glu Gln Glu Gly Val Ser Ser Ser 660 665 670 Glu Ala Glu Ala Ile Val Lys Lys Leu Gln Thr Glu Gly Arg Tyr Leu 675 680 685 Arg Asp Val Trp 690 <210> 22 <211> 713 <212> PRT <213> Fusarium fujikuroi <400> 22 Met Ala Glu Leu Asp Thr Leu Asp Ile Val Val Leu Gly Val Ile Phe 1 5 10 15 Leu Gly Thr Val Ala Tyr Phe Thr Lys Gly Lys Leu Trp Gly Val Thr 20 25 30 Lys Asp Pro Tyr Ala Asn Gly Phe Ala Ala Gly Gly Ala Ser Lys Pro 35 40 45 Gly Arg Thr Arg Asn Ile Val Glu Ala Met Glu Glu Ser Gly Lys Asn 50 55 60 Cys Val Val Phe Tyr Gly Ser Gln Thr Gly Thr Ala Glu Asp Tyr Ala 65 70 75 80 Ser Arg Leu Ala Lys Glu Gly Lys Ser Arg Phe Gly Leu Asn Thr Met 85 90 95 Ile Ala Asp Leu Glu Asp Tyr Asp Phe Asp Asn Leu Asp Thr Val Pro 100 105 110 Ser Asp Asn Ile Val Met Phe Val Leu Ala Thr Tyr Gly Glu Gly Glu 115 120 125 Pro Thr Asp Asn Ala Val Asp Phe Tyr Glu Phe Ile Thr Gly Glu Asp 130 135 140 Ala Ser Phe Asn Glu Gly Asn Asp Pro Pro Leu Gly Asn Leu Asn Tyr 145 150 155 160 Val Ala Phe Gly Leu Gly Asn Asn Thr Tyr Glu His Tyr Asn Ser Met 165 170 175 Val Arg Asn Val Asn Lys Ala Leu Glu Lys Leu Gly Ala His Arg Ile 180 185 190 Gly Glu Ala Gly Glu Gly Asp Asp Gly Ala Gly Thr Met Glu Glu Asp 195 200 205 Phe Leu Ala Trp Lys Asp Pro Met Trp Glu Ala Leu Ala Lys Lys Met 210 215 220 Gly Leu Glu Glu Arg Glu Ala Val Tyr Glu Pro Ile Phe Ala Ile Asn 225 230 235 240 Glu Arg Asp Asp Leu Thr Pro Glu Ala Asn Glu Val Tyr Leu Gly Glu 245 250 255 Pro Asn Lys Leu His Leu Glu Gly Thr Ala Lys Gly Pro Phe Asn Ser 260 265 270 His Asn Pro Tyr Ile Ala Pro Ile Ala Glu Ser Tyr Glu Leu Phe Ser 275 280 285 Ala Lys Asp Arg Asn Cys Leu His Met Glu Ile Asp Ile Ser Gly Ser 290 295 300 Asn Leu Lys Tyr Glu Thr Gly Asp His Ile Ala Ile Trp Pro Thr Asn 305 310 315 320 Pro Gly Glu Glu Val Asn Lys Phe Leu Asp Ile Leu Asp Leu Ser Gly 325 330 335 Lys Gln His Ser Val Val Thr Val Lys Ala Leu Glu Pro Thr Ala Lys 340 345 350 Val Pro Phe Pro Asn Pro Thr Thr Tyr Asp Ala Ile Leu Arg Tyr His 355 360 365 Leu Glu Ile Cys Ala Pro Val Ser Arg Gln Phe Val Ser Thr Leu Ala 370 375 380 Ala Phe Ala Pro Asn Asp Asp Ile Lys Ala Glu Met Asn Arg Leu Gly 385 390 395 400 Ser Asp Lys Asp Tyr Phe His Glu Lys Thr Gly Pro His Tyr Tyr Asn 405 410 415 Ile Ala Arg Phe Leu Ala Ser Val Ser Lys Gly Glu Lys Trp Thr Lys 420 425 430 Ile Pro Phe Ser Ala Phe Ile Glu Gly Leu Thr Lys Leu Gln Pro Arg 435 440 445 Tyr Tyr Ser Ile Ser Ser Ser Ser Leu Val Gln Pro Lys Lys Ile Ser 450 455 460 Ile Thr Ala Val Val Glu Ser Gln Gln Ile Pro Gly Arg Asp Asp Pro 465 470 475 480 Phe Arg Gly Val Ala Thr Asn Tyr Leu Phe Ala Leu Lys Gln Lys Gln 485 490 495 Asn Gly Asp Pro Asn Pro Ala Pro Phe Gly Gln Ser Tyr Glu Leu Thr 500 505 510 Gly Pro Arg Asn Lys Tyr Asp Gly Ile His Val Pro Val His Val Arg 515 520 525 His Ser Asn Phe Lys Leu Pro Ser Asp Pro Gly Lys Pro Ile Ile Met 530 535 540 Ile Gly Pro Gly Thr Gly Val Ala Pro Phe Arg Gly Phe Val Gln Glu 545 550 555 560 Arg Ala Lys Gln Ala Arg Asp Gly Val Glu Val Gly Lys Thr Leu Leu 565 570 575 Phe Phe Gly Cys Arg Lys Ser Thr Glu Asp Phe Met Tyr Gln Lys Glu 580 585 590 Trp Gln Glu Tyr Lys Glu Ala Leu Gly Asp Lys Phe Glu Met Ile Thr 595 600 605 Ala Phe Ser Arg Glu Gly Ser Lys Lys Val Tyr Val Gln His Arg Leu 610 615 620 Lys Glu Arg Ser Lys Glu Val Ser Asp Leu Leu Ser Gln Lys Ala Tyr 625 630 635 640 Phe Tyr Val Cys Gly Asp Ala Ala His Met Ala Arg Glu Val Asn Thr 645 650 655 Val Leu Ala Gln Ile Ile Ala Glu Gly Arg Gly Val Ser Glu Ala Lys 660 665 670 Gly Glu Glu Ile Val Lys Asn Met Arg Ser Ala Asn Gln Tyr Gln Val 675 680 685 Cys Ser Asp Phe Val Thr Leu His Cys Lys Glu Thr Thr Tyr Ala Asn 690 695 700 Ser Glu Leu Gln Glu Asp Val Trp Ser 705 710 <210> 23 <211> 2130 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 23 atgcaatcgg aatccgttga agcatcgacg attgatttga tgactgctgt tttgaaggac 60 acagtgatcg atacagcgaa cgcatctgat aacggagact caaagatgcc gccggcgttg 120 gcgatgatgt tcgaaattcg tgatctgttg ctgattttga ctacgtcagt tgctgttttg 180 gtcggatgtt tcgttgtttt ggtgtggaag agatcgtccg ggaagaagtc cggcaaggaa 240 ttggagccgc cgaagatcgt tgtgccgaag aggcggctgg agcaggaggt tgatgatggt 300 aagaagaagg ttacgatttt cttcggaaca caaactggaa cggctgaagg tttcgctaag 360 gcacttttcg aagaagcgaa agcgcgatat gaaaaggcag cgtttaaagt gattgatttg 420 gatgattatg ctgctgattt ggatgagtat gcagagaagc tgaagaagga aacatatgct 480 ttcttcttct tggctacata tggagatggt gagccaactg ataatgctgc caaattttat 540 aaatggttta ctgagggaga cgagaaaggc gtttggcttc aaaaacttca atatggagta 600 tttggtcttg gcaacagaca atatgaacat ttcaacaaga ttggaatagt ggttgatgat 660 ggtctcaccg agcagggtgc aaaacgcatt gttcccgttg gtcttggaga cgacgatcaa 720 tcaattgaag acgatttttc ggcatggaaa gagttagtgt ggcccgaatt ggatctattg 780 cttcgcgatg aagatgacaa agctgctgca actccttaca cagctgcaat ccctgaatac 840 cgcgtcgtat ttcatgacaa acccgatgcg ttttctgatg atcatactca aaccaatggt 900 catgctgttc atgatgctca acatccatgc agatccaatg tggctgttaa aaaagagctt 960 catactcctg aatccgatcg ttcatgcaca catcttgaat ttgacatttc tcacactgga 1020 ttatcttatg aaactgggga tcatgttggt gtatactgtg aaaacctaat tgaagtagtg 1080 gaagaagctg ggaaattgtt aggattatca acagatactt atttctcgtt acatattgat 1140 aacgaagatg gttcaccact tggtggacct tcattacaac ctccttttcc tccttgtact 1200 ttaagaaaag cattgactaa ttatgcagat ctgttaagct ctcccaaaaa gtcaactttg 1260 cttgctctag ctgctcatgc ttccgatccc actgaagctg atcgtttaag atttcttgca 1320 tctcgcgagg gcaaggatga atatgctgaa tgggttgttg caaaccaaag aagtcttctt 1380 gaagtcatgg aagctttccc gtcagctaga ccgccacttg gtgttttctt tgcagcggtt 1440 gcaccgcgtt tacagcctcg ttactactct atttcttcct ccccaaagat ggaaccaaac 1500 aggattcatg ttacttgcgc gttggtttat gaaaaaactc ccgcaggtcg tatccacaaa 1560 ggaatctgct caacctggat gaagaacgct gtacctttga ccgaaagtca agattgcagt 1620 tgggcaccga tttttgttag aacatcaaac ttcagacttc caattgaccc gaaagtcccg 1680 gttatcatga ttggtcctgg aaccgggttg gctccattta ggggttttct tcaagaaaga 1740 ttggctctta aagaatccgg aaccgaactc gggtcatcta ttttattctt cggttgtaga 1800 aaccgcaaag tggattacat atatgagaat gaactcaaca actttgttga aaatggtgcg 1860 ctttctgagc ttgatgttgc tttctcccgc gatggcccga cgaaagaata cgtgcaacat 1920 aaaatgaccc aaaaggcttc tgaaatatgg aatatgcttt ctgagggagc atatttatat 1980 gtatgtggtg atgctaaagg catggctaaa gatgtacacc gtacacttca caccattgtg 2040 caagaacagg gaagtttgga ctcgtctaaa gcggagttgt atgtgaagaa tctacaaatg 2100 tcaggaagat acctccgtga tgtttggtaa 2130 <210> 24 <211> 2124 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 24 atgcaatcta actccgtgaa gatttcgccg cttgatctgg taactgcgct gtttagcggc 60 aaggttttgg acacatcgaa cgcatcggaa tcgggagaat ctgctatgct gccgactata 120 gcgatgatta tggagaatcg tgagctgttg atgatactca caacgtcggt tgctgtattg 180 atcggatgcg ttgtcgtttt ggtgtggcgg agatcgtcta cgaagaagtc ggcgttggag 240 ccaccggtga ttgtggttcc gaagagagtg caagaggagg aagttgatga tggtaagaag 300 aaagttacgg ttttcttcgg cacccaaact ggaacagctg aaggcttcgc taaggcactt 360 gttgaggaag ctaaagctcg atatgaaaag gctgtcttta aagtaattga tttggatgat 420 tatgctgctg atgacgatga gtatgaggag aaactaaaga aagaatcttt ggcctttttc 480 tttttggcta cgtatggaga tggtgagcca acagataatg ctgccagatt ttataaatgg 540 tttactgagg gagatgcgaa aggagaatgg cttaataagc ttcaatatgg agtatttggt 600 ttgggtaaca gacaatatga acattttaac aagatcgcaa aagtggttga tgatggtctt 660 gtagaacagg gtgcaaagcg tcttgttcct gttggacttg gagatgatga tcaatgtatt 720 gaagatgact tcaccgcatg gaaagagtta gtatggccgg agttggatca attacttcgt 780 gatgaggatg acacaactgt tgctactcca tacacagctg ctgttgcaga atatcgcgtt 840 gtttttcatg aaaaaccaga cgcgctttct gaagattata gttatacaaa tggccatgct 900 gttcatgatg ctcaacatcc atgcagatcc aacgtggctg tcaaaaagga acttcatagt 960 cctgaatctg accggtcttg cactcatctt gaatttgaca tctcgaacac cggactatca 1020 tatgaaactg gggaccatgt tggagtttac tgtgaaaact tgagtgaagt tgtgaatgat 1080 gctgaaagat tagtaggatt accaccagac acttactcct ccatccacac tgatagtgaa 1140 gacgggtcgc cacttggcgg agcctcattg ccgcctcctt tcccgccatg cactttaagg 1200 aaagcattga cgtgttatgc tgatgttttg agttctccca agaagtcggc tttgcttgca 1260 ctagctgctc atgccaccga tcccagtgaa gctgatagat tgaaatttct tgcatccccc 1320 gccggaaagg atgaatattc tcaatggata gttgcaagcc aaagaagtct ccttgaagtc 1380 atggaagcat tcccgtcagc taagccttca cttggtgttt tctttgcatc tgttgccccg 1440 cgcttacaac caagatacta ctctatttct tcctcaccca agatggcacc ggataggatt 1500 catgttacat gtgcattagt ctatgagaaa acacctgcag gccgcatcca caaaggagtt 1560 tgttcaactt ggatgaagaa cgcagtgcct atgaccgaga gtcaagattg cagttgggcc 1620 ccaatatacg tccgaacatc caatttcaga ctaccatctg accctaaggt cccggttatc 1680 atgattggac ctggcactgg tttggctcct tttagaggtt tccttcaaga gcggttagct 1740 ttaaaggaag ccggaactga cctcggttta tccattttat tcttcggatg taggaatcgc 1800 aaagtggatt tcatatatga aaacgagctt aacaactttg tggagactgg tgctctttct 1860 gagcttattg ttgctttctc ccgtgaaggc ccgactaagg aatatgtgca acacaagatg 1920 agtgagaagg cttcggatat ctggaacttg ctttctgaag gagcatattt atacgtatgt 1980 ggtgatgcca aaggcatggc caaagatgta catcgaaccc tccacacaat tgtgcaagaa 2040 cagggatctc ttgactcgtc aaaggcagaa ctctacgtga agaatctaca aatgtcagga 2100 agatacctcc gtgacgtttg gtaa 2124 <210> 25 <211> 692 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 25 Met Thr Ser Ala Leu Tyr Ala Ser Asp Leu Phe Lys Gln Leu Lys Ser 1 5 10 15 Ile Met Gly Thr Asp Ser Leu Ser Asp Asp Val Val Leu Val Ile Ala 20 25 30 Thr Thr Ser Leu Ala Leu Val Ala Gly Phe Val Val Leu Leu Trp Lys 35 40 45 Lys Thr Thr Ala Asp Arg Ser Gly Glu Leu Lys Pro Leu Met Ile Pro 50 55 60 Lys Ser Leu Met Ala Lys Asp Glu Asp Asp Asp Leu Asp Leu Gly Ser 65 70 75 80 Gly Lys Thr Arg Val Ser Ile Phe Phe Gly Thr Gln Thr Gly Thr Ala 85 90 95 Glu Gly Phe Ala Lys Ala Leu Ser Glu Glu Ile Lys Ala Arg Tyr Glu 100 105 110 Lys Ala Ala Val Lys Val Ile Asp Leu Asp Asp Tyr Ala Ala Asp Asp 115 120 125 Asp Gln Tyr Glu Glu Lys Leu Lys Lys Glu Thr Leu Ala Phe Phe Cys 130 135 140 Val Ala Thr Tyr Gly Asp Gly Glu Pro Thr Asp Asn Ala Ala Arg Phe 145 150 155 160 Tyr Lys Trp Phe Thr Glu Glu Asn Glu Arg Asp Ile Lys Leu Gln Gln 165 170 175 Leu Ala Tyr Gly Val Phe Ala Leu Gly Asn Arg Gln Tyr Glu His Phe 180 185 190 Asn Lys Ile Gly Ile Val Leu Asp Glu Glu Leu Cys Lys Lys Gly Ala 195 200 205 Lys Arg Leu Ile Glu Val Gly Leu Gly Asp Asp Asp Gln Ser Ile Glu 210 215 220 Asp Asp Phe Asn Ala Trp Lys Glu Ser Leu Trp Ser Glu Leu Asp Lys 225 230 235 240 Leu Leu Lys Asp Glu Asp Asp Lys Ser Val Ala Thr Pro Tyr Thr Ala 245 250 255 Val Ile Pro Glu Tyr Arg Val Val Thr His Asp Pro Arg Phe Thr Thr 260 265 270 Gln Lys Ser Met Glu Ser Asn Val Ala Asn Gly Asn Thr Thr Ile Asp 275 280 285 Ile His His Pro Cys Arg Val Asp Val Ala Val Gln Lys Glu Leu His 290 295 300 Thr His Glu Ser Asp Arg Ser Cys Ile His Leu Glu Phe Asp Ile Ser 305 310 315 320 Arg Thr Gly Ile Thr Tyr Glu Thr Gly Asp His Val Gly Val Tyr Ala 325 330 335 Glu Asn His Val Glu Ile Val Glu Glu Ala Gly Lys Leu Leu Gly His 340 345 350 Ser Leu Asp Leu Val Phe Ser Ile His Ala Asp Lys Glu Asp Gly Ser 355 360 365 Pro Leu Glu Ser Ala Val Pro Pro Pro Phe Pro Gly Pro Cys Thr Leu 370 375 380 Gly Thr Gly Leu Ala Arg Tyr Ala Asp Leu Leu Asn Pro Pro Arg Lys 385 390 395 400 Ser Ala Leu Val Ala Leu Ala Ala Tyr Ala Thr Glu Pro Ser Glu Ala 405 410 415 Glu Lys Leu Lys His Leu Thr Ser Pro Asp Gly Lys Asp Glu Tyr Ser 420 425 430 Gln Trp Ile Val Ala Ser Gln Arg Ser Leu Leu Glu Val Met Ala Ala 435 440 445 Phe Pro Ser Ala Lys Pro Pro Leu Gly Val Phe Phe Ala Ala Ile Ala 450 455 460 Pro Arg Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Ile Ser Ser Ser Pro Arg Leu 465 470 475 480 Ala Pro Ser Arg Val His Val Thr Ser Ala Leu Val Tyr Gly Pro Thr 485 490 495 Pro Thr Gly Arg Ile His Lys Gly Val Cys Ser Thr Trp Met Lys Asn 500 505 510 Ala Val Pro Ala Glu Lys Ser His Glu Cys Ser Gly Ala Pro Ile Phe 515 520 525 Ile Arg Ala Ser Asn Phe Lys Leu Pro Ser Asn Pro Ser Thr Pro Ile 530 535 540 Val Met Val Gly Pro Gly Thr Gly Leu Ala Pro Phe Arg Gly Phe Leu 545 550 555 560 Gln Glu Arg Met Ala Leu Lys Glu Asp Gly Glu Glu Leu Gly Ser Ser 565 570 575 Leu Leu Phe Phe Gly Cys Arg Asn Arg Gln Met Asp Phe Ile Tyr Glu 580 585 590 Asp Glu Leu Asn Asn Phe Val Asp Gln Gly Val Ile Ser Glu Leu Ile 595 600 605 Met Ala Phe Ser Arg Glu Gly Ala Gln Lys Glu Tyr Val Gln His Lys 610 615 620 Met Met Glu Lys Ala Ala Gln Val Trp Asp Leu Ile Lys Glu Glu Gly 625 630 635 640 Tyr Leu Tyr Val Cys Gly Asp Ala Lys Gly Met Ala Arg Asp Val His 645 650 655 Arg Thr Leu His Thr Ile Val Gln Glu Gln Glu Gly Val Ser Ser Ser 660 665 670 Glu Ala Glu Ala Ile Val Lys Lys Leu Gln Thr Glu Gly Arg Tyr Leu 675 680 685 Arg Asp Val Trp 690 <210> 26 <211> 712 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 26 Met Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ser Met Ile Asp Leu Met Ala 1 5 10 15 Ala Ile Ile Lys Gly Glu Pro Val Ile Val Ser Asp Pro Ala Asn Ala 20 25 30 Ser Ala Tyr Glu Ser Val Ala Ala Glu Leu Ser Ser Met Leu Ile Glu 35 40 45 Asn Arg Gln Phe Ala Met Ile Val Thr Thr Ser Ile Ala Val Leu Ile 50 55 60 Gly Cys Ile Val Met Leu Val Trp Arg Arg Ser Gly Ser Gly Asn Ser 65 70 75 80 Lys Arg Val Glu Pro Leu Lys Pro Leu Val Ile Lys Pro Arg Glu Glu 85 90 95 Glu Ile Asp Asp Gly Arg Lys Lys Val Thr Ile Phe Phe Gly Thr Gln 100 105 110 Thr Gly Thr Ala Glu Gly Phe Ala Lys Ala Leu Gly Glu Glu Ala Lys 115 120 125 Ala Arg Tyr Glu Lys Thr Arg Phe Lys Ile Val Asp Leu Asp Asp Tyr 130 135 140 Ala Ala Asp Asp Asp Glu Tyr Glu Glu Lys Leu Lys Lys Glu Asp Val 145 150 155 160 Ala Phe Phe Phe Leu Ala Thr Tyr Gly Asp Gly Glu Pro Thr Asp Asn 165 170 175 Ala Ala Arg Phe Tyr Lys Trp Phe Thr Glu Gly Asn Asp Arg Gly Glu 180 185 190 Trp Leu Lys Asn Leu Lys Tyr Gly Val Phe Gly Leu Gly Asn Arg Gln 195 200 205 Tyr Glu His Phe Asn Lys Val Ala Lys Val Val Asp Asp Ile Leu Val 210 215 220 Glu Gln Gly Ala Gln Arg Leu Val Gln Val Gly Leu Gly Asp Asp Asp 225 230 235 240 Gln Cys Ile Glu Asp Asp Phe Thr Ala Trp Arg Glu Ala Leu Trp Pro 245 250 255 Glu Leu Asp Thr Ile Leu Arg Glu Glu Gly Asp Thr Ala Val Ala Thr 260 265 270 Pro Tyr Thr Ala Ala Val Leu Glu Tyr Arg Val Ser Ile His Asp Ser 275 280 285 Glu Asp Ala Lys Phe Asn Asp Ile Thr Leu Ala Asn Gly Asn Gly Tyr 290 295 300 Thr Val Phe Asp Ala Gln His Pro Tyr Lys Ala Asn Val Ala Val Lys 305 310 315 320 Arg Glu Leu His Thr Pro Glu Ser Asp Arg Ser Cys Ile His Leu Glu 325 330 335 Phe Asp Ile Ala Gly Ser Gly Leu Thr Met Lys Leu Gly Asp His Val 340 345 350 Gly Val Leu Cys Asp Asn Leu Ser Glu Thr Val Asp Glu Ala Leu Arg 355 360 365 Leu Leu Asp Met Ser Pro Asp Thr Tyr Phe Ser Leu His Ala Glu Lys 370 375 380 Glu Asp Gly Thr Pro Ile Ser Ser Ser Leu Pro Pro Pro Phe Pro Pro 385 390 395 400 Cys Asn Leu Arg Thr Ala Leu Thr Arg Tyr Ala Cys Leu Leu Ser Ser 405 410 415 Pro Lys Lys Ser Ala Leu Val Ala Leu Ala Ala His Ala Ser Asp Pro 420 425 430 Thr Glu Ala Glu Arg Leu Lys His Leu Ala Ser Pro Ala Gly Lys Asp 435 440 445 Glu Tyr Ser Lys Trp Val Val Glu Ser Gln Arg Ser Leu Leu Glu Val 450 455 460 Met Ala Glu Phe Pro Ser Ala Lys Pro Pro Leu Gly Val Phe Phe Ala 465 470 475 480 Gly Val Ala Pro Arg Leu Gln Pro Arg Phe Tyr Ser Ile Ser Ser Ser 485 490 495 Pro Lys Ile Ala Glu Thr Arg Ile His Val Thr Cys Ala Leu Val Tyr 500 505 510 Glu Lys Met Pro Thr Gly Arg Ile His Lys Gly Val Cys Ser Thr Trp 515 520 525 Met Lys Asn Ala Val Pro Tyr Glu Lys Ser Glu Lys Leu Phe Leu Gly 530 535 540 Arg Pro Ile Phe Val Arg Gln Ser Asn Phe Lys Leu Pro Ser Asp Ser 545 550 555 560 Lys Val Pro Ile Ile Met Ile Gly Pro Gly Thr Gly Leu Ala Pro Phe 565 570 575 Arg Gly Phe Leu Gln Glu Arg Leu Ala Leu Val Glu Ser Gly Val Glu 580 585 590 Leu Gly Pro Ser Val Leu Phe Phe Gly Cys Arg Asn Arg Arg Met Asp 595 600 605 Phe Ile Tyr Glu Glu Glu Leu Gln Arg Phe Val Glu Ser Gly Ala Leu 610 615 620 Ala Glu Leu Ser Val Ala Phe Ser Arg Glu Gly Pro Thr Lys Glu Tyr 625 630 635 640 Val Gln His Lys Met Met Asp Lys Ala Ser Asp Ile Trp Asn Met Ile 645 650 655 Ser Gln Gly Ala Tyr Leu Tyr Val Cys Gly Asp Ala Lys Gly Met Ala 660 665 670 Arg Asp Val His Arg Ser Leu His Thr Ile Ala Gln Glu Gln Gly Ser 675 680 685 Met Asp Ser Thr Lys Ala Glu Gly Phe Val Lys Asn Leu Gln Thr Ser 690 695 700 Gly Arg Tyr Leu Arg Asp Val Trp 705 710 <210> 27 <211> 709 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 27 Met Gln Ser Glu Ser Val Glu Ala Ser Thr Ile Asp Leu Met Thr Ala 1 5 10 15 Val Leu Lys Asp Thr Val Ile Asp Thr Ala Asn Ala Ser Asp Asn Gly 20 25 30 Asp Ser Lys Met Pro Pro Ala Leu Ala Met Met Phe Glu Ile Arg Asp 35 40 45 Leu Leu Leu Ile Leu Thr Thr Ser Val Ala Val Leu Val Gly Cys Phe 50 55 60 Val Val Leu Val Trp Lys Arg Ser Ser Gly Lys Lys Ser Gly Lys Glu 65 70 75 80 Leu Glu Pro Pro Lys Ile Val Val Pro Lys Arg Arg Leu Glu Gln Glu 85 90 95 Val Asp Asp Gly Lys Lys Lys Val Thr Ile Phe Phe Gly Thr Gln Thr 100 105 110 Gly Thr Ala Glu Gly Phe Ala Lys Ala Leu Phe Glu Glu Ala Lys Ala 115 120 125 Arg Tyr Glu Lys Ala Ala Phe Lys Val Ile Asp Leu Asp Asp Tyr Ala 130 135 140 Ala Asp Leu Asp Glu Tyr Ala Glu Lys Leu Lys Lys Glu Thr Tyr Ala 145 150 155 160 Phe Phe Phe Leu Ala Thr Tyr Gly Asp Gly Glu Pro Thr Asp Asn Ala 165 170 175 Ala Lys Phe Tyr Lys Trp Phe Thr Glu Gly Asp Glu Lys Gly Val Trp 180 185 190 Leu Gln Lys Leu Gln Tyr Gly Val Phe Gly Leu Gly Asn Arg Gln Tyr 195 200 205 Glu His Phe Asn Lys Ile Gly Ile Val Val Asp Asp Gly Leu Thr Glu 210 215 220 Gln Gly Ala Lys Arg Ile Val Pro Val Gly Leu Gly Asp Asp Asp Gln 225 230 235 240 Ser Ile Glu Asp Asp Phe Ser Ala Trp Lys Glu Leu Val Trp Pro Glu 245 250 255 Leu Asp Leu Leu Leu Arg Asp Glu Asp Asp Lys Ala Ala Ala Thr Pro 260 265 270 Tyr Thr Ala Ala Ile Pro Glu Tyr Arg Val Val Phe His Asp Lys Pro 275 280 285 Asp Ala Phe Ser Asp Asp His Thr Gln Thr Asn Gly His Ala Val His 290 295 300 Asp Ala Gln His Pro Cys Arg Ser Asn Val Ala Val Lys Lys Glu Leu 305 310 315 320 His Thr Pro Glu Ser Asp Arg Ser Cys Thr His Leu Glu Phe Asp Ile 325 330 335 Ser His Thr Gly Leu Ser Tyr Glu Thr Gly Asp His Val Gly Val Tyr 340 345 350 Cys Glu Asn Leu Ile Glu Val Val Glu Glu Ala Gly Lys Leu Leu Gly 355 360 365 Leu Ser Thr Asp Thr Tyr Phe Ser Leu His Ile Asp Asn Glu Asp Gly 370 375 380 Ser Pro Leu Gly Gly Pro Ser Leu Gln Pro Pro Phe Pro Pro Cys Thr 385 390 395 400 Leu Arg Lys Ala Leu Thr Asn Tyr Ala Asp Leu Leu Ser Ser Pro Lys 405 410 415 Lys Ser Thr Leu Leu Ala Leu Ala Ala His Ala Ser Asp Pro Thr Glu 420 425 430 Ala Asp Arg Leu Arg Phe Leu Ala Ser Arg Glu Gly Lys Asp Glu Tyr 435 440 445 Ala Glu Trp Val Val Ala Asn Gln Arg Ser Leu Leu Glu Val Met Glu 450 455 460 Ala Phe Pro Ser Ala Arg Pro Pro Leu Gly Val Phe Phe Ala Ala Val 465 470 475 480 Ala Pro Arg Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Ile Ser Ser Ser Pro Lys 485 490 495 Met Glu Pro Asn Arg Ile His Val Thr Cys Ala Leu Val Tyr Glu Lys 500 505 510 Thr Pro Ala Gly Arg Ile His Lys Gly Ile Cys Ser Thr Trp Met Lys 515 520 525 Asn Ala Val Pro Leu Thr Glu Ser Gln Asp Cys Ser Trp Ala Pro Ile 530 535 540 Phe Val Arg Thr Ser Asn Phe Arg Leu Pro Ile Asp Pro Lys Val Pro 545 550 555 560 Val Ile Met Ile Gly Pro Gly Thr Gly Leu Ala Pro Phe Arg Gly Phe 565 570 575 Leu Gln Glu Arg Leu Ala Leu Lys Glu Ser Gly Thr Glu Leu Gly Ser 580 585 590 Ser Ile Leu Phe Phe Gly Cys Arg Asn Arg Lys Val Asp Tyr Ile Tyr 595 600 605 Glu Asn Glu Leu Asn Asn Phe Val Glu Asn Gly Ala Leu Ser Glu Leu 610 615 620 Asp Val Ala Phe Ser Arg Asp Gly Pro Thr Lys Glu Tyr Val Gln His 625 630 635 640 Lys Met Thr Gln Lys Ala Ser Glu Ile Trp Asn Met Leu Ser Glu Gly 645 650 655 Ala Tyr Leu Tyr Val Cys Gly Asp Ala Lys Gly Met Ala Lys Asp Val 660 665 670 His Arg Thr Leu His Thr Ile Val Gln Glu Gln Gly Ser Leu Asp Ser 675 680 685 Ser Lys Ala Glu Leu Tyr Val Lys Asn Leu Gln Met Ser Gly Arg Tyr 690 695 700 Leu Arg Asp Val Trp 705 <210> 28 <211> 707 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 28 Met Gln Ser Asn Ser Val Lys Ile Ser Pro Leu Asp Leu Val Thr Ala 1 5 10 15 Leu Phe Ser Gly Lys Val Leu Asp Thr Ser Asn Ala Ser Glu Ser Gly 20 25 30 Glu Ser Ala Met Leu Pro Thr Ile Ala Met Ile Met Glu Asn Arg Glu 35 40 45 Leu Leu Met Ile Leu Thr Thr Ser Val Ala Val Leu Ile Gly Cys Val 50 55 60 Val Val Leu Val Trp Arg Arg Ser Ser Thr Lys Lys Ser Ala Leu Glu 65 70 75 80 Pro Pro Val Ile Val Val Pro Lys Arg Val Gln Glu Glu Glu Val Asp 85 90 95 Asp Gly Lys Lys Lys Val Thr Val Phe Phe Gly Thr Gln Thr Gly Thr 100 105 110 Ala Glu Gly Phe Ala Lys Ala Leu Val Glu Glu Ala Lys Ala Arg Tyr 115 120 125 Glu Lys Ala Val Phe Lys Val Ile Asp Leu Asp Asp Tyr Ala Ala Asp 130 135 140 Asp Asp Glu Tyr Glu Glu Lys Leu Lys Lys Glu Ser Leu Ala Phe Phe 145 150 155 160 Phe Leu Ala Thr Tyr Gly Asp Gly Glu Pro Thr Asp Asn Ala Ala Arg 165 170 175 Phe Tyr Lys Trp Phe Thr Glu Gly Asp Ala Lys Gly Glu Trp Leu Asn 180 185 190 Lys Leu Gln Tyr Gly Val Phe Gly Leu Gly Asn Arg Gln Tyr Glu His 195 200 205 Phe Asn Lys Ile Ala Lys Val Val Asp Asp Gly Leu Val Glu Gln Gly 210 215 220 Ala Lys Arg Leu Val Pro Val Gly Leu Gly Asp Asp Asp Gln Cys Ile 225 230 235 240 Glu Asp Asp Phe Thr Ala Trp Lys Glu Leu Val Trp Pro Glu Leu Asp 245 250 255 Gln Leu Leu Arg Asp Glu Asp Asp Thr Thr Val Ala Thr Pro Tyr Thr 260 265 270 Ala Ala Val Ala Glu Tyr Arg Val Val Phe His Glu Lys Pro Asp Ala 275 280 285 Leu Ser Glu Asp Tyr Ser Tyr Thr Asn Gly His Ala Val His Asp Ala 290 295 300 Gln His Pro Cys Arg Ser Asn Val Ala Val Lys Lys Glu Leu His Ser 305 310 315 320 Pro Glu Ser Asp Arg Ser Cys Thr His Leu Glu Phe Asp Ile Ser Asn 325 330 335 Thr Gly Leu Ser Tyr Glu Thr Gly Asp His Val Gly Val Tyr Cys Glu 340 345 350 Asn Leu Ser Glu Val Val Asn Asp Ala Glu Arg Leu Val Gly Leu Pro 355 360 365 Pro Asp Thr Tyr Ser Ser Ile His Thr Asp Ser Glu Asp Gly Ser Pro 370 375 380 Leu Gly Gly Ala Ser Leu Pro Pro Pro Phe Pro Pro Cys Thr Leu Arg 385 390 395 400 Lys Ala Leu Thr Cys Tyr Ala Asp Val Leu Ser Ser Pro Lys Lys Ser 405 410 415 Ala Leu Leu Ala Leu Ala Ala His Ala Thr Asp Pro Ser Glu Ala Asp 420 425 430 Arg Leu Lys Phe Leu Ala Ser Pro Ala Gly Lys Asp Glu Tyr Ser Gln 435 440 445 Trp Ile Val Ala Ser Gln Arg Ser Leu Leu Glu Val Met Glu Ala Phe 450 455 460 Pro Ser Ala Lys Pro Ser Leu Gly Val Phe Phe Ala Ser Val Ala Pro 465 470 475 480 Arg Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Ile Ser Ser Ser Pro Lys Met Ala 485 490 495 Pro Asp Arg Ile His Val Thr Cys Ala Leu Val Tyr Glu Lys Thr Pro 500 505 510 Ala Gly Arg Ile His Lys Gly Val Cys Ser Thr Trp Met Lys Asn Ala 515 520 525 Val Pro Met Thr Glu Ser Gln Asp Cys Ser Trp Ala Pro Ile Tyr Val 530 535 540 Arg Thr Ser Asn Phe Arg Leu Pro Ser Asp Pro Lys Val Pro Val Ile 545 550 555 560 Met Ile Gly Pro Gly Thr Gly Leu Ala Pro Phe Arg Gly Phe Leu Gln 565 570 575 Glu Arg Leu Ala Leu Lys Glu Ala Gly Thr Asp Leu Gly Leu Ser Ile 580 585 590 Leu Phe Phe Gly Cys Arg Asn Arg Lys Val Asp Phe Ile Tyr Glu Asn 595 600 605 Glu Leu Asn Asn Phe Val Glu Thr Gly Ala Leu Ser Glu Leu Ile Val 610 615 620 Ala Phe Ser Arg Glu Gly Pro Thr Lys Glu Tyr Val Gln His Lys Met 625 630 635 640 Ser Glu Lys Ala Ser Asp Ile Trp Asn Leu Leu Ser Glu Gly Ala Tyr 645 650 655 Leu Tyr Val Cys Gly Asp Ala Lys Gly Met Ala Lys Asp Val His Arg 660 665 670 Thr Leu His Thr Ile Val Gln Glu Gln Gly Ser Leu Asp Ser Ser Lys 675 680 685 Ala Glu Leu Tyr Val Lys Asn Leu Gln Met Ser Gly Arg Tyr Leu Arg 690 695 700 Asp Val Trp 705 <210> 29 <211> 460 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 29 Met Ala Glu Gln Gln Lys Ile Lys Lys Ser Pro His Val Leu Leu Ile 1 5 10 15 Pro Phe Pro Leu Gln Gly His Ile Asn Pro Phe Ile Gln Phe Gly Lys 20 25 30 Arg Leu Ile Ser Lys Gly Val Lys Thr Thr Leu Val Thr Thr Ile His 35 40 45 Thr Leu Asn Ser Thr Leu Asn His Ser Asn Thr Thr Thr Thr Ser Ile 50 55 60 Glu Ile Gln Ala Ile Ser Asp Gly Cys Asp Glu Gly Gly Phe Met Ser 65 70 75 80 Ala Gly Glu Ser Tyr Leu Glu Thr Phe Lys Gln Val Gly Ser Lys Ser 85 90 95 Leu Ala Asp Leu Ile Lys Lys Leu Gln Ser Glu Gly Thr Thr Ile Asp 100 105 110 Ala Ile Ile Tyr Asp Ser Met Thr Glu Trp Val Leu Asp Val Ala Ile 115 120 125 Glu Phe Gly Ile Asp Gly Gly Ser Phe Phe Thr Gln Ala Cys Val Val 130 135 140 Asn Ser Leu Tyr Tyr His Val His Lys Gly Leu Ile Ser Leu Pro Leu 145 150 155 160 Gly Glu Thr Val Ser Val Pro Gly Phe Pro Val Leu Gln Arg Trp Glu 165 170 175 Thr Pro Leu Ile Leu Gln Asn His Glu Gln Ile Gln Ser Pro Trp Ser 180 185 190 Gln Met Leu Phe Gly Gln Phe Ala Asn Ile Asp Gln Ala Arg Trp Val 195 200 205 Phe Thr Asn Ser Phe Tyr Lys Leu Glu Glu Glu Val Ile Glu Trp Thr 210 215 220 Arg Lys Ile Trp Asn Leu Lys Val Ile Gly Pro Thr Leu Pro Ser Met 225 230 235 240 Tyr Leu Asp Lys Arg Leu Asp Asp Asp Lys Asp Asn Gly Phe Asn Leu 245 250 255 Tyr Lys Ala Asn His His Glu Cys Met Asn Trp Leu Asp Asp Lys Pro 260 265 270 Lys Glu Ser Val Val Tyr Val Ala Phe Gly Ser Leu Val Lys His Gly 275 280 285 Pro Glu Gln Val Glu Glu Ile Thr Arg Ala Leu Ile Asp Ser Asp Val 290 295 300 Asn Phe Leu Trp Val Ile Lys His Lys Glu Glu Gly Lys Leu Pro Glu 305 310 315 320 Asn Leu Ser Glu Val Ile Lys Thr Gly Lys Gly Leu Ile Val Ala Trp 325 330 335 Cys Lys Gln Leu Asp Val Leu Ala His Glu Ser Val Gly Cys Phe Val 340 345 350 Thr His Cys Gly Phe Asn Ser Thr Leu Glu Ala Ile Ser Leu Gly Val 355 360 365 Pro Val Val Ala Met Pro Gln Phe Ser Asp Gln Thr Thr Asn Ala Lys 370 375 380 Leu Leu Asp Glu Ile Leu Gly Val Gly Val Arg Val Lys Ala Asp Glu 385 390 395 400 Asn Gly Ile Val Arg Arg Gly Asn Leu Ala Ser Cys Ile Lys Met Ile 405 410 415 Met Glu Glu Glu Arg Gly Val Ile Ile Arg Lys Asn Ala Val Lys Trp 420 425 430 Lys Asp Leu Ala Lys Val Ala Val His Glu Gly Gly Ser Ser Asp Asn 435 440 445 Asp Ile Val Glu Phe Val Ser Glu Leu Ile Lys Ala 450 455 460 <210> 30 <211> 481 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 30 Met Asp Ala Met Ala Thr Thr Glu Lys Lys Pro His Val Ile Phe Ile 1 5 10 15 Pro Phe Pro Ala Gln Ser His Ile Lys Ala Met Leu Lys Leu Ala Gln 20 25 30 Leu Leu His His Lys Gly Leu Gln Ile Thr Phe Val Asn Thr Asp Phe 35 40 45 Ile His Asn Gln Phe Leu Glu Ser Ser Gly Pro His Cys Leu Asp Gly 50 55 60 Ala Pro Gly Phe Arg Phe Glu Thr Ile Pro Asp Gly Val Ser His Ser 65 70 75 80 Pro Glu Ala Ser Ile Pro Ile Arg Glu Ser Leu Leu Arg Ser Ile Glu 85 90 95 Thr Asn Phe Leu Asp Arg Phe Ile Asp Leu Val Thr Lys Leu Pro Asp 100 105 110 Pro Pro Thr Cys Ile Ile Ser Asp Gly Phe Leu Ser Val Phe Thr Ile 115 120 125 Asp Ala Ala Lys Lys Leu Gly Ile Pro Val Met Met Tyr Trp Thr Leu 130 135 140 Ala Ala Cys Gly Phe Met Gly Phe Tyr His Ile His Ser Leu Ile Glu 145 150 155 160 Lys Gly Phe Ala Pro Leu Lys Asp Ala Ser Tyr Leu Thr Asn Gly Tyr 165 170 175 Leu Asp Thr Val Ile Asp Trp Val Pro Gly Met Glu Gly Ile Arg Leu 180 185 190 Lys Asp Phe Pro Leu Asp Trp Ser Thr Asp Leu Asn Asp Lys Val Leu 195 200 205 Met Phe Thr Thr Glu Ala Pro Gln Arg Ser His Lys Val Ser His His 210 215 220 Ile Phe His Thr Phe Asp Glu Leu Glu Pro Ser Ile Ile Lys Thr Leu 225 230 235 240 Ser Leu Arg Tyr Asn His Ile Tyr Thr Ile Gly Pro Leu Gln Leu Leu 245 250 255 Leu Asp Gln Ile Pro Glu Glu Lys Lys Gln Thr Gly Ile Thr Ser Leu 260 265 270 His Gly Tyr Ser Leu Val Lys Glu Glu Pro Glu Cys Phe Gln Trp Leu 275 280 285 Gln Ser Lys Glu Pro Asn Ser Val Val Tyr Val Asn Phe Gly Ser Thr 290 295 300 Thr Val Met Ser Leu Glu Asp Met Thr Glu Phe Gly Trp Gly Leu Ala 305 310 315 320 Asn Ser Asn His Tyr Phe Leu Trp Ile Ile Arg Ser Asn Leu Val Ile 325 330 335 Gly Glu Asn Ala Val Leu Pro Pro Glu Leu Glu Glu His Ile Lys Lys 340 345 350 Arg Gly Phe Ile Ala Ser Trp Cys Ser Gln Glu Lys Val Leu Lys His 355 360 365 Pro Ser Val Gly Gly Phe Leu Thr His Cys Gly Trp Gly Ser Thr Ile 370 375 380 Glu Ser Leu Ser Ala Gly Val Pro Met Ile Cys Trp Pro Tyr Ser Trp 385 390 395 400 Asp Gln Leu Thr Asn Cys Arg Tyr Ile Cys Lys Glu Trp Glu Val Gly 405 410 415 Leu Glu Met Gly Thr Lys Val Lys Arg Asp Glu Val Lys Arg Leu Val 420 425 430 Gln Glu Leu Met Gly Glu Gly Gly His Lys Met Arg Asn Lys Ala Lys 435 440 445 Asp Trp Lys Glu Lys Ala Arg Ile Ala Ile Ala Pro Asn Gly Ser Ser 450 455 460 Ser Leu Asn Ile Asp Lys Met Val Lys Glu Ile Thr Val Leu Ala Arg 465 470 475 480 Asn <210> 31 <211> 1586 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 31 atggatgcaa tggctacaac tgagaagaaa ccacacgtca tcttcatacc atttccagca 60 caaagccaca ttaaagccat gctcaaacta gcacaacttc tccaccacaa aggactccag 120 ataaccttcg tcaacaccga cttcatccac aaccagtttc ttgaatcatc gggcccacat 180 tgtctagacg gtgcaccggg tttccggttc gaaaccattc cggatggtgt ttctcacagt 240 ccggaagcga gcatcccaat cagagaatca ctcttgagat ccattgaaac caacttcttg 300 gatcgtttca ttgatcttgt aaccaaactt ccggatcctc cgacttgtat tatctcagat 360 gggttcttgt cggttttcac aattgacgct gcaaaaaagc ttggaattcc ggtcatgatg 420 tattggacac ttgctgcctg tgggttcatg ggtttttacc atattcattc tctcattgag 480 aaaggatttg caccacttaa agatgcaagt tacttgacaa atgggtattt ggacaccgtc 540 attgattggg ttccgggaat ggaaggcatc cgtctcaagg atttcccgct ggactggagc 600 actgacctca atgacaaagt tttgatgttc actacggaag ctcctcaaag gtcacacaag 660 gtttcacatc atattttcca cacgttcgat gagttggagc ctagtattat aaaaactttg 720 tcattgaggt ataatcacat ttacaccatc ggcccactgc aattacttct tgatcaaata 780 cccgaagaga aaaagcaaac tggaattacg agtctccatg gatacagttt agtaaaagaa 840 gaaccagagt gtttccagtg gcttcagtct aaagaaccaa attccgtcgt ttatgtaaat 900 tttggaagta ctacagtaat gtctttagaa gacatgacgg aatttggttg gggacttgct 960 aatagcaacc attatttcct ttggatcatc cgatcaaact tggtgatagg ggaaaatgca 1020 gttttgcccc ctgaacttga ggaacatata aagaaaagag gctttattgc tagctggtgt 1080 tcacaagaaa aggtcttgaa gcacccttcg gttggagggt tcttgactca ttgtgggtgg 1140 ggatcgacca tcgagagctt gtctgctggg gtgccaatga tatgctggcc ttattcgtgg 1200 gaccagctga ccaactgtag gtatatatgc aaagaatggg aggttgggct cgagatggga 1260 accaaagtga aacgagatga agtcaagagg cttgtacaag agttgatggg agaaggaggt 1320 cacaaaatga ggaacaaggc taaagattgg aaagaaaagg ctcgcattgc aatagctcct 1380 aacggttcat cttctttgaa catagacaaa atggtcaagg aaatcaccgt gctagcaaga 1440 aactagttac aaagttgttt cacattgtgc tttctattta agatgtaact ttgttctaat 1500 ttaatattgt ctagatgtat tgaaccataa gtttagttgg tctcaggaat tgatttttaa 1560 tgaaataatg gtcattaggg gtgagt 1586 <210> 32 <211> 1446 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized nucleotide sequence encoding Stevia rebaudiana UGT85C2 <400> 32 atggatgcaa tggcaactac tgagaaaaag cctcatgtga tcttcattcc atttcctgca 60 caatctcaca taaaggcaat gctaaagtta gcacaactat tacaccataa gggattacag 120 ataactttcg tgaataccga cttcatccat aatcaatttc tggaatctag tggccctcat 180 tgtttggacg gagccccagg gtttagattc gaaacaattc ctgacggtgt ttcacattcc 240 ccagaggcct ccatcccaat aagagagagt ttactgaggt caatagaaac caactttttg 300 gatcgtttca ttgacttggt cacaaaactt ccagacccac caacttgcat aatctctgat 360 ggctttctgt cagtgtttac tatcgacgct gccaaaaagt tgggtatccc agttatgatg 420 tactggactc ttgctgcatg cggtttcatg ggtttctatc acatccattc tcttatcgaa 480 aagggttttg ctccactgaa agatgcatca tacttaacca acggctacct ggatactgtt 540 attgactggg taccaggtat ggaaggtata agacttaaag attttccttt ggattggtct 600 acagacctta atgataaagt attgatgttt actacagaag ctccacaaag atctcataag 660 gtttcacatc atatctttca cacctttgat gaattggaac catcaatcat caaaaccttg 720 tctctaagat acaatcatat ctacactatt ggtccattac aattacttct agatcaaatt 780 cctgaagaga aaaagcaaac tggtattaca tccttacacg gctactcttt agtgaaagag 840 gaaccagaat gttttcaatg gctacaaagt aaagagccta attctgtggt ctacgtcaac 900 ttcggaagta caacagtcat gtccttggaa gatatgactg aatttggttg gggccttgct 960 aattcaaatc attactttct atggattatc aggtccaatt tggtaatagg ggaaaacgcc 1020 gtattacctc cagaattgga ggaacacatc aaaaagagag gtttcattgc ttcctggtgt 1080 tctcaggaaa aggtattgaa acatccttct gttggtggtt tccttactca ttgcggttgg 1140 ggctctacaa tcgaatcact aagtgcagga gttccaatga tttgttggcc atattcatgg 1200 gaccaactta caaattgtag gtatatctgt aaagagtggg aagttggatt agaaatggga 1260 acaaaggtta aacgtgatga agtgaaaaga ttggttcagg agttgatggg ggaaggtggc 1320 cacaagatga gaaacaaggc caaagattgg aaggaaaaag ccagaattgc tattgctcct 1380 aacgggtcat cctctctaaa cattgataag atggtcaaag agattacagt cttagccaga 1440 aactaa 1446 <210> 33 <211> 787 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 33 Met Lys Thr Gly Phe Ile Ser Pro Ala Thr Val Phe His His Arg Ile 1 5 10 15 Ser Pro Ala Thr Thr Phe Arg His His Leu Ser Pro Ala Thr Thr Asn 20 25 30 Ser Thr Gly Ile Val Ala Leu Arg Asp Ile Asn Phe Arg Cys Lys Ala 35 40 45 Val Ser Lys Glu Tyr Ser Asp Leu Leu Gln Lys Asp Glu Ala Ser Phe 50 55 60 Thr Lys Trp Asp Asp Asp Lys Val Lys Asp His Leu Asp Thr Asn Lys 65 70 75 80 Asn Leu Tyr Pro Asn Asp Glu Ile Lys Glu Phe Val Glu Ser Val Lys 85 90 95 Ala Met Phe Gly Ser Met Asn Asp Gly Glu Ile Asn Val Ser Ala Tyr 100 105 110 Asp Thr Ala Trp Val Ala Leu Val Gln Asp Val Asp Gly Ser Gly Ser 115 120 125 Pro Gln Phe Pro Ser Ser Leu Glu Trp Ile Ala Asn Asn Gln Leu Ser 130 135 140 Asp Gly Ser Trp Gly Asp His Leu Leu Phe Ser Ala His Asp Arg Ile 145 150 155 160 Ile Asn Thr Leu Ala Cys Val Ile Ala Leu Thr Ser Trp Asn Val His 165 170 175 Pro Ser Lys Cys Glu Lys Gly Leu Asn Phe Leu Arg Glu Asn Ile Cys 180 185 190 Lys Leu Glu Asp Glu Asn Ala Glu His Met Pro Ile Gly Phe Glu Val 195 200 205 Thr Phe Pro Ser Leu Ile Asp Ile Ala Lys Lys Leu Asn Ile Glu Val 210 215 220 Pro Glu Asp Thr Pro Ala Leu Lys Glu Ile Tyr Ala Arg Arg Asp Ile 225 230 235 240 Lys Leu Thr Lys Ile Pro Met Glu Val Leu His Lys Val Pro Thr Thr 245 250 255 Leu Leu His Ser Leu Glu Gly Met Pro Asp Leu Glu Trp Glu Lys Leu 260 265 270 Leu Lys Leu Gln Cys Lys Asp Gly Ser Phe Leu Phe Ser Pro Ser Ser 275 280 285 Thr Ala Phe Ala Leu Met Gln Thr Lys Asp Glu Lys Cys Leu Gln Tyr 290 295 300 Leu Thr Asn Ile Val Thr Lys Phe Asn Gly Gly Val Pro Asn Val Tyr 305 310 315 320 Pro Val Asp Leu Phe Glu His Ile Trp Val Val Asp Arg Leu Gln Arg 325 330 335 Leu Gly Ile Ala Arg Tyr Phe Lys Ser Glu Ile Lys Asp Cys Val Glu 340 345 350 Tyr Ile Asn Lys Tyr Trp Thr Lys Asn Gly Ile Cys Trp Ala Arg Asn 355 360 365 Thr His Val Gln Asp Ile Asp Asp Thr Ala Met Gly Phe Arg Val Leu 370 375 380 Arg Ala His Gly Tyr Asp Val Thr Pro Asp Val Phe Arg Gln Phe Glu 385 390 395 400 Lys Asp Gly Lys Phe Val Cys Phe Ala Gly Gln Ser Thr Gln Ala Val 405 410 415 Thr Gly Met Phe Asn Val Tyr Arg Ala Ser Gln Met Leu Phe Pro Gly 420 425 430 Glu Arg Ile Leu Glu Asp Ala Lys Lys Phe Ser Tyr Asn Tyr Leu Lys 435 440 445 Glu Lys Gln Ser Thr Asn Glu Leu Leu Asp Lys Trp Ile Ile Ala Lys 450 455 460 Asp Leu Pro Gly Glu Val Gly Tyr Ala Leu Asp Ile Pro Trp Tyr Ala 465 470 475 480 Ser Leu Pro Arg Leu Glu Thr Arg Tyr Tyr Leu Glu Gln Tyr Gly Gly 485 490 495 Glu Asp Asp Val Trp Ile Gly Lys Thr Leu Tyr Arg Met Gly Tyr Val 500 505 510 Ser Asn Asn Thr Tyr Leu Glu Met Ala Lys Leu Asp Tyr Asn Asn Tyr 515 520 525 Val Ala Val Leu Gln Leu Glu Trp Tyr Thr Ile Gln Gln Trp Tyr Val 530 535 540 Asp Ile Gly Ile Glu Lys Phe Glu Ser Asp Asn Ile Lys Ser Val Leu 545 550 555 560 Val Ser Tyr Tyr Leu Ala Ala Ala Ser Ile Phe Glu Pro Glu Arg Ser 565 570 575 Lys Glu Arg Ile Ala Trp Ala Lys Thr Thr Ile Leu Val Asp Lys Ile 580 585 590 Thr Ser Ile Phe Asp Ser Ser Gln Ser Ser Lys Glu Asp Ile Thr Ala 595 600 605 Phe Ile Asp Lys Phe Arg Asn Lys Ser Ser Ser Lys Lys His Ser Ile 610 615 620 Asn Gly Glu Pro Trp His Glu Val Met Val Ala Leu Lys Lys Thr Leu 625 630 635 640 His Gly Phe Ala Leu Asp Ala Leu Met Thr His Ser Gln Asp Ile His 645 650 655 Pro Gln Leu His Gln Ala Trp Glu Met Trp Leu Thr Lys Leu Gln Asp 660 665 670 Gly Val Asp Val Thr Ala Glu Leu Met Val Gln Met Ile Asn Met Thr 675 680 685 Ala Gly Arg Trp Val Ser Lys Glu Leu Leu Thr His Pro Gln Tyr Gln 690 695 700 Arg Leu Ser Thr Val Thr Asn Ser Val Cys His Asp Ile Thr Lys Leu 705 710 715 720 His Asn Phe Lys Glu Asn Ser Thr Thr Val Asp Ser Lys Val Gln Glu 725 730 735 Leu Val Gln Leu Val Phe Ser Asp Thr Pro Asp Asp Leu Asp Gln Asp 740 745 750 Met Lys Gln Thr Phe Leu Thr Val Met Lys Thr Phe Tyr Tyr Lys Ala 755 760 765 Trp Cys Asp Pro Asn Thr Ile Asn Asp His Ile Ser Lys Val Phe Glu 770 775 780 Ile Val Ile 785 <210> 34 <211> 527 <212> PRT <213> Streptomyces clavuligerus <400> 34 Met Pro Asp Ala His Asp Ala Pro Pro Pro Gln Ile Arg Gln Arg Thr 1 5 10 15 Leu Val Asp Glu Ala Thr Gln Leu Leu Thr Glu Ser Ala Glu Asp Ala 20 25 30 Trp Gly Glu Val Ser Val Ser Glu Tyr Glu Thr Ala Arg Leu Val Ala 35 40 45 His Ala Thr Trp Leu Gly Gly His Ala Thr Arg Val Ala Phe Leu Leu 50 55 60 Glu Arg Gln His Glu Asp Gly Ser Trp Gly Pro Pro Gly Gly Tyr Arg 65 70 75 80 Leu Val Pro Thr Leu Ser Ala Val His Ala Leu Leu Thr Cys Leu Ala 85 90 95 Ser Pro Ala Gln Asp His Gly Val Pro His Asp Arg Leu Leu Arg Ala 100 105 110 Val Asp Ala Gly Leu Thr Ala Leu Arg Arg Leu Gly Thr Ser Asp Ser 115 120 125 Pro Pro Asp Thr Ile Ala Val Glu Leu Val Ile Pro Ser Leu Leu Glu 130 135 140 Gly Ile Gln His Leu Leu Asp Pro Ala His Pro His Ser Arg Pro Ala 145 150 155 160 Phe Ser Gln His Arg Gly Ser Leu Val Cys Pro Gly Gly Leu Asp Gly 165 170 175 Arg Thr Leu Gly Ala Leu Arg Ser His Ala Ala Ala Gly Thr Pro Val 180 185 190 Pro Gly Lys Val Trp His Ala Ser Glu Thr Leu Gly Leu Ser Thr Glu 195 200 205 Ala Ala Ser His Leu Gln Pro Ala Gln Gly Ile Ile Gly Gly Ser Ala 210 215 220 Ala Ala Thr Ala Thr Trp Leu Thr Arg Val Ala Pro Ser Gln Gln Ser 225 230 235 240 Asp Ser Ala Arg Arg Tyr Leu Glu Glu Leu Gln His Arg Tyr Ser Gly 245 250 255 Pro Val Pro Ser Ile Thr Pro Ile Thr Tyr Phe Glu Arg Ala Trp Leu 260 265 270 Leu Asn Asn Phe Ala Ala Ala Gly Val Pro Cys Glu Ala Pro Ala Ala 275 280 285 Leu Leu Asp Ser Leu Glu Ala Ala Leu Thr Pro Gln Gly Ala Pro Ala 290 295 300 Gly Ala Gly Leu Pro Pro Asp Ala Asp Asp Thr Ala Ala Val Leu Leu 305 310 315 320 Ala Leu Ala Thr His Gly Arg Gly Arg Arg Pro Glu Val Leu Met Asp 325 330 335 Tyr Arg Thr Asp Gly Tyr Phe Gln Cys Phe Ile Gly Glu Arg Thr Pro 340 345 350 Ser Ile Ser Thr Asn Ala His Val Leu Glu Thr Leu Gly His His Val 355 360 365 Ala Gln His Pro Gln Asp Arg Ala Arg Tyr Gly Ser Ala Met Asp Thr 370 375 380 Ala Ser Ala Trp Leu Leu Ala Ala Gln Lys Gln Asp Gly Ser Trp Leu 385 390 395 400 Asp Lys Trp His Ala Ser Pro Tyr Tyr Ala Thr Val Cys Cys Thr Gln 405 410 415 Ala Leu Ala Ala His Ala Ser Pro Ala Thr Ala Pro Ala Arg Gln Arg 420 425 430 Ala Val Arg Trp Val Leu Ala Thr Gln Arg Ser Asp Gly Gly Trp Gly 435 440 445 Leu Trp His Ser Thr Val Glu Glu Thr Ala Tyr Ala Leu Gln Ile Leu 450 455 460 Ala Pro Pro Ser Gly Gly Gly Asn Ile Pro Val Gln Gln Ala Leu Thr 465 470 475 480 Arg Gly Arg Ala Arg Leu Cys Gly Ala Leu Pro Leu Thr Pro Leu Trp 485 490 495 His Asp Lys Asp Leu Tyr Thr Pro Val Arg Val Val Arg Ala Ala Arg 500 505 510 Ala Ala Ala Leu Tyr Thr Thr Arg Asp Leu Leu Leu Pro Pro Leu 515 520 525 <210> 35 <211> 516 <212> PRT <213> Bradyrhizobium diazoefficiens <400> 35 Met Asn Ala Leu Ser Glu His Ile Leu Ser Glu Leu Arg Arg Leu Leu 1 5 10 15 Ser Glu Met Ser Asp Gly Gly Ser Val Gly Pro Ser Val Tyr Asp Thr 20 25 30 Ala Gln Ala Leu Arg Phe His Gly Asn Val Thr Gly Arg Gln Asp Ala 35 40 45 Tyr Ala Trp Leu Ile Ala Gln Gln Gln Ala Asp Gly Gly Trp Gly Ser 50 55 60 Ala Asp Phe Pro Leu Phe Arg His Ala Pro Thr Trp Ala Ala Leu Leu 65 70 75 80 Ala Leu Gln Arg Ala Asp Pro Leu Pro Gly Ala Ala Asp Ala Val Gln 85 90 95 Thr Ala Thr Arg Phe Leu Gln Arg Gln Pro Asp Pro Tyr Ala His Ala 100 105 110 Val Pro Glu Asp Ala Pro Ile Gly Ala Glu Leu Ile Leu Pro Gln Phe 115 120 125 Cys Gly Glu Ala Ala Trp Leu Leu Gly Gly Val Ala Phe Pro Arg His 130 135 140 Pro Ala Leu Leu Pro Leu Arg Gln Ala Cys Leu Val Lys Leu Gly Ala 145 150 155 160 Val Ala Met Leu Pro Ser Gly His Pro Leu Leu His Ser Trp Glu Ala 165 170 175 Trp Gly Thr Ser Pro Thr Thr Ala Cys Pro Asp Asp Asp Gly Ser Ile 180 185 190 Gly Ile Ser Pro Ala Ala Thr Ala Ala Trp Arg Ala Gln Ala Val Thr 195 200 205 Arg Gly Ser Thr Pro Gln Val Gly Arg Ala Asp Ala Tyr Leu Gln Met 210 215 220 Ala Ser Arg Ala Thr Arg Ser Gly Ile Glu Gly Val Phe Pro Asn Val 225 230 235 240 Trp Pro Ile Asn Val Phe Glu Pro Cys Trp Ser Leu Tyr Thr Leu His 245 250 255 Leu Ala Gly Leu Phe Ala His Pro Ala Leu Ala Glu Ala Val Arg Val 260 265 270 Ile Val Ala Gln Leu Glu Ala Arg Leu Gly Val His Gly Leu Gly Pro 275 280 285 Ala Leu His Phe Ala Ala Asp Ala Asp Asp Thr Ala Val Ala Leu Cys 290 295 300 Val Leu His Leu Ala Gly Arg Asp Pro Ala Val Asp Ala Leu Arg His 305 310 315 320 Phe Glu Ile Gly Glu Leu Phe Val Thr Phe Pro Gly Glu Arg Asn Ala 325 330 335 Ser Val Ser Thr Asn Ile His Ala Leu His Ala Leu Arg Leu Leu Gly 340 345 350 Lys Pro Ala Ala Gly Ala Ser Ala Tyr Val Glu Ala Asn Arg Asn Pro 355 360 365 His Gly Leu Trp Asp Asn Glu Lys Trp His Val Ser Trp Leu Tyr Pro 370 375 380 Thr Ala His Ala Val Ala Ala Leu Ala Gln Gly Lys Pro Gln Trp Arg 385 390 395 400 Asp Glu Arg Ala Leu Ala Ala Leu Leu Gln Ala Gln Arg Asp Asp Gly 405 410 415 Gly Trp Gly Ala Gly Arg Gly Ser Thr Phe Glu Glu Thr Ala Tyr Ala 420 425 430 Leu Phe Ala Leu His Val Met Asp Gly Ser Glu Glu Ala Thr Gly Arg 435 440 445 Arg Arg Ile Ala Gln Val Val Ala Arg Ala Leu Glu Trp Met Leu Ala 450 455 460 Arg His Ala Ala His Gly Leu Pro Gln Thr Pro Leu Trp Ile Gly Lys 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Cys Pro Thr Arg Val Val Arg Val Ala Glu Leu Ala Gly 485 490 495 Leu Trp Leu Ala Leu Arg Trp Gly Arg Arg Val Leu Ala Glu Gly Ala 500 505 510 Gly Ala Ala Pro 515 <210> 36 <211> 4577 <212> DNA <213> Zea mays <400> 36 gacctgacca ccaccccccg gccggccctt tcattctttc cttactttct tcctcctgct 60 gctcttgccg tttcagtgat tattagctgc tgtacgtgcg tgcgtacatt gttctctctg 120 ctgacaccca tacacgctgt agcttctaca cataccagtt cgatcgcaag ctatagcatg 180 gggcttcaat catcgcccat gctgctgcca gcgccgacgg caacggcggc cggcagcggg 240 tcacagtggc gcacggctgt ggcgggtaat ggtaactcgt ttatcttctt ctacacgtaa 300 tctctattat atacctagat tttctccaca ggcagatcag attctttaca cagctgtatt 360 ctcaaaaaaa actcatagaa aaaaaagaaa aaactaaacc aaaggagcga cctcaacctg 420 taccagtgcc cctgctagca gtagcttcgt tctgtccctt ttttttcatt tggatcctct 480 acataaatgc tgggtggtgg tgtcctttca cgcacacatc cgcagatagc gccccagcag 540 catttatgtg gggacgacgg ctctgaaatg aattactagt cagtttcatg cgtttcagtg 600 cgagtattat agtagtagat ctcttctccg atatatccgg ccaaaggaag aagagaagag 660 aaaccacaca tctcattctc aactagtagt agaaaagtaa aaacgtacta caagcgcaag 720 cgcaaagatg gttctttcat cgtcttgcac aacagttcct cacctttctt cccttgcggt 780 cgttcaacta ggcccatgga gttcccgcat caagaagaag acggatacag tcgccgtccc 840 cgcggccgcc ggccggtgga ggagggcact ggcgcgggcc cagcacacca gcgaatccgc 900 cgccgtcgcc aaaggtacgg gtgatcgcta gctttgatag ctccaaatct gagcagcaaa 960 ttaaatagct aggtttgtaa cgcacgcacg catgcaggtt cgtccctaac gcccatcgtg 1020 agaaccgatg ccgaaagccg ccgcacgaga tggcctacgg acgacgacga cgctgagccg 1080 ctggtcgacg agatcagggc aatgctgacg tcgatgagcg acggggacat cagcgtgtcg 1140 gcgtacgaca ccgcctgggt gggtcttgtg cccaggctgg acggcggcga gggcccgcag 1200 ttcccggccg ccgtgcggtg gatccggaac aaccagctcc ccgacggctc gtggggcgac 1260 gcggccctgt tctccgcgta cgaccgcctg atcaacacgc tggcgtgcgt cgtcacgctc 1320 accaggtggt cgctggagcc cgagatgcgc ggcagaggta cgtaattact gtgtgctggc 1380 cgatcgagag aacacacgac ggcagtgtac ctcgacagaa aacgggcgtt gctgaagact 1440 caagtgtgtg tgtgtgtgtg ttcacagggc tctctttcct cggccggaac atgtggaagc 1500 tagcgacgga ggacgaggag tccatgccga tagggttcga gctcgcgttc ccttctctca 1560 tcgaactagc caagagtctg ggcgtccacg acttcccgta cgaccaccag gctctgcagg 1620 gaatatactc gagcagggag atcaagatga agaggattcc taaggaagtg atgcacacgg 1680 ttcccacatc cattctccac agcctggaag ggatgcccgg gctagactgg gcgaagctgc 1740 tgaaactgca gtcgagcgac gggtccttcc tcttctctcc cgcggccacc gcgtacgctc 1800 tcatgaacac cggcgacgac aggtgcttca gctacatcga caggacagtc aagaaattca 1860 acggaggagg tacgcaagca gtagcgtaga tacatgggca tagcatgcat gcatgcaatg 1920 cagcgttgcc cactgcatgc gccttccttc cttccttctc gtctcttcaa cggttcgtct 1980 tctctcgccg tttctcgcag tgcccaacgt ctaccccgtg gaccttttcg agcacatatg 2040 ggctgtcgat cgcctggagc gtctcgggat ctcccgctac ttccagaaag agattgagca 2100 gtgcatggac tacgtgaaca ggcactggac tgaggacggg atctgctggg cgaggaactc 2160 cgacgtgaag gaggtggacg acacggccat ggctttccgc ctgctacggc tgcacggata 2220 cagcgtctcg ccaggtacgt aacaaacaca aaaaaaaaaa acgcgcagac aacagagatc 2280 gtcacgtcat acacacgcgt gtcctgaaca tttttcattt ggtctcccac ccatcgtacg 2340 taataataat aaaaaaaaac gtgcttctgc cctgcctgtg tacgtgtaga tgtgttcaag 2400 aacttcgaga aggacgggga gttcttcgcc ttcgtggggc agtcgaacca ggcggtgacg 2460 gggatgtaca acctcaacag ggcctcccag ataagcttcc cgggggagga cgtcctgcac 2520 cgtgcagggg ctttctcgta cgagtttctc aggcggaaag aggccgaggg agcgctccgt 2580 gacaaatgga tcatatctaa ggacctgcct ggggaggtag tgtacaccct ggacttccct 2640 tggtatggga acctgccgcg cgtggaggcg agagactatc tggaacagta cggcggcggc 2700 gacgatgtct ggatcgggaa gacgctctac aggtagatag atctttttag ctattaattg 2760 gtttcagatc gaccagataa aatttgcatt attggttctt ttgatgcatg taattgaaag 2820 ccaataaata acctcagtat gcgtgatggc tgacttttgc attggcagga tgcctcttgt 2880 gaataacgat gtgtatcttg agctggctag gatggacttc aaccattgcc aagccctaca 2940 tcagcttgag tggcaaggcc tgaaaaggta tgtatgttac tatatatata cagcccggtt 3000 gttgagtttt ttttttattt tatttttttc gcgattacca tttcttctcg atgcaaaata 3060 aatctgcaca gatcatcata tatatccttg atgatatata agggcttctc gtatatatat 3120 cttatcacct atatatacat aggtggtaca ctgagaaccg gctcatggat ttcggagtgg 3180 cgcaagagga tgctctgcga gcgtatttcc tggccgccgc ttccgtctac gagccgtgcc 3240 gagccgcgga gcggcttgcg tgggccagag cggcgatact tgccaacgcc gtctctaccc 3300 atctccgtaa cagcccctca ttcagagaac gcttggaaca ctccttgcgt tgccgcccca 3360 gtgaagaaac ggatggatca tggtaataag ctgatcgatg ggaaattaaa aatttaagtt 3420 ttttttttct tttttgttgc cattatctga gaccaatgca atgtggtgca tatatatcca 3480 ggttcaactc atcaagtgga agtgacgctg ttcttgtgaa ggcagttctg cggcttaccg 3540 actcgttagc gcgagaagcg cagccgattc atggcggtga tccggaggac atcatccaca 3600 agctactgag atcagctgta agttaaacgt aacgttcaga agaagatttt tttttttttt 3660 tgcagttaac aagtactacg acatctatcg tttttgttca gcatgcacag tcatcctagc 3720 tactaatacc attattcttc tgtgaacttg tgtagtgggc tgaatgggtc agggagaagg 3780 cagatgcagc agacagcgtg tgtaatggat ccagtgctgt ggaacaagaa gggtcgcgca 3840 tggttcatga caagcaaacg tgtctgcttt tagctcgaat gatcgagatc agcgctgggc 3900 gagctgcagg tgaggctgcg agcgaagatg gtgaccgtcg gattatccag ctcactgggt 3960 ctatatgtga cagtctcaag cagaagatgc tagtatctca ggtatagcac atatatacta 4020 cagaaagttt gtgcgtagtt attatttccc ttttttcatg tgacgaacat gatgacctga 4080 tgatgcatgt atatggcttc atataggacc ccgagaagaa cgaagagatg atgagccatg 4140 tcgatgacga attgaagctg cgtatacgag agttcgttca gtatcttctg agactcggtg 4200 agaagaaaac cggcagcagc gagacaaggc agacctttct gagcatcgtg aaaagctgtt 4260 actacgctgc tcactgcccg ccgcatgtgg tagacaggca tatttccaga gttatttttg 4320 aacctgtttc cgccgcaaaa taatggtaat ggtagatgtg aatgtgatat ggagataaga 4380 gagagagaaa atgttgatag tggaaattgg cgttgatgtc gcctccacat tctttacgca 4440 aaagtagcgt ctgttttgga taaaaaaaat ccagtttctg taaattatag aataaatcaa 4500 tcgctgtgtc ccaaactcta aaatgttatt ctgtgaagta tggaataaat cggtcactat 4560 acctatcttg tggatgc 4577 <210> 37 <211> 827 <212> PRT <213> Zea mays <400> 37 Met Val Leu Ser Ser Ser Cys Thr Thr Val Pro His Leu Ser Ser Leu 1 5 10 15 Ala Val Val Gln Leu Gly Pro Trp Ser Ser Arg Ile Lys Lys Lys Thr 20 25 30 Asp Thr Val Ala Val Pro Ala Ala Ala Gly Arg Trp Arg Arg Ala Leu 35 40 45 Ala Arg Ala Gln His Thr Ser Glu Ser Ala Ala Val Ala Lys Gly Ser 50 55 60 Ser Leu Thr Pro Ile Val Arg Thr Asp Ala Glu Ser Arg Arg Thr Arg 65 70 75 80 Trp Pro Thr Asp Asp Asp Asp Ala Glu Pro Leu Val Asp Glu Ile Arg 85 90 95 Ala Met Leu Thr Ser Met Ser Asp Gly Asp Ile Ser Val Ser Ala Tyr 100 105 110 Asp Thr Ala Trp Val Gly Leu Val Pro Arg Leu Asp Gly Gly Glu Gly 115 120 125 Pro Gln Phe Pro Ala Ala Val Arg Trp Ile Arg Asn Asn Gln Leu Pro 130 135 140 Asp Gly Ser Trp Gly Asp Ala Ala Leu Phe Ser Ala Tyr Asp Arg Leu 145 150 155 160 Ile Asn Thr Leu Ala Cys Val Val Thr Leu Thr Arg Trp Ser Leu Glu 165 170 175 Pro Glu Met Arg Gly Arg Gly Leu Ser Phe Leu Gly Arg Asn Met Trp 180 185 190 Lys Leu Ala Thr Glu Asp Glu Glu Ser Met Pro Ile Gly Phe Glu Leu 195 200 205 Ala Phe Pro Ser Leu Ile Glu Leu Ala Lys Ser Leu Gly Val His Asp 210 215 220 Phe Pro Tyr Asp His Gln Ala Leu Gln Gly Ile Tyr Ser Ser Arg Glu 225 230 235 240 Ile Lys Met Lys Arg Ile Pro Lys Glu Val Met His Thr Val Pro Thr 245 250 255 Ser Ile Leu His Ser Leu Glu Gly Met Pro Gly Leu Asp Trp Ala Lys 260 265 270 Leu Leu Lys Leu Gln Ser Ser Asp Gly Ser Phe Leu Phe Ser Pro Ala 275 280 285 Ala Thr Ala Tyr Ala Leu Met Asn Thr Gly Asp Asp Arg Cys Phe Ser 290 295 300 Tyr Ile Asp Arg Thr Val Lys Lys Phe Asn Gly Gly Val Pro Asn Val 305 310 315 320 Tyr Pro Val Asp Leu Phe Glu His Ile Trp Ala Val Asp Arg Leu Glu 325 330 335 Arg Leu Gly Ile Ser Arg Tyr Phe Gln Lys Glu Ile Glu Gln Cys Met 340 345 350 Asp Tyr Val Asn Arg His Trp Thr Glu Asp Gly Ile Cys Trp Ala Arg 355 360 365 Asn Ser Asp Val Lys Glu Val Asp Asp Thr Ala Met Ala Phe Arg Leu 370 375 380 Leu Arg Leu His Gly Tyr Ser Val Ser Pro Asp Val Phe Lys Asn Phe 385 390 395 400 Glu Lys Asp Gly Glu Phe Phe Ala Phe Val Gly Gln Ser Asn Gln Ala 405 410 415 Val Thr Gly Met Tyr Asn Leu Asn Arg Ala Ser Gln Ile Ser Phe Pro 420 425 430 Gly Glu Asp Val Leu His Arg Ala Gly Ala Phe Ser Tyr Glu Phe Leu 435 440 445 Arg Arg Lys Glu Ala Glu Gly Ala Leu Arg Asp Lys Trp Ile Ile Ser 450 455 460 Lys Asp Leu Pro Gly Glu Val Val Tyr Thr Leu Asp Phe Pro Trp Tyr 465 470 475 480 Gly Asn Leu Pro Arg Val Glu Ala Arg Asp Tyr Leu Glu Gln Tyr Gly 485 490 495 Gly Gly Asp Asp Val Trp Ile Gly Lys Thr Leu Tyr Arg Met Pro Leu 500 505 510 Val Asn Asn Asp Val Tyr Leu Glu Leu Ala Arg Met Asp Phe Asn His 515 520 525 Cys Gln Ala Leu His Gln Leu Glu Trp Gln Gly Leu Lys Arg Trp Tyr 530 535 540 Thr Glu Asn Arg Leu Met Asp Phe Gly Val Ala Gln Glu Asp Ala Leu 545 550 555 560 Arg Ala Tyr Phe Leu Ala Ala Ala Ser Val Tyr Glu Pro Cys Arg Ala 565 570 575 Ala Glu Arg Leu Ala Trp Ala Arg Ala Ala Ile Leu Ala Asn Ala Val 580 585 590 Ser Thr His Leu Arg Asn Ser Pro Ser Phe Arg Glu Arg Leu Glu His 595 600 605 Ser Leu Arg Cys Arg Pro Ser Glu Glu Thr Asp Gly Ser Trp Phe Asn 610 615 620 Ser Ser Ser Gly Ser Asp Ala Val Leu Val Lys Ala Val Leu Arg Leu 625 630 635 640 Thr Asp Ser Leu Ala Arg Glu Ala Gln Pro Ile His Gly Gly Asp Pro 645 650 655 Glu Asp Ile Ile His Lys Leu Leu Arg Ser Ala Trp Ala Glu Trp Val 660 665 670 Arg Glu Lys Ala Asp Ala Ala Asp Ser Val Cys Asn Gly Ser Ser Ala 675 680 685 Val Glu Gln Glu Gly Ser Arg Met Val His Asp Lys Gln Thr Cys Leu 690 695 700 Leu Leu Ala Arg Met Ile Glu Ile Ser Ala Gly Arg Ala Ala Gly Glu 705 710 715 720 Ala Ala Ser Glu Asp Gly Asp Arg Arg Ile Ile Gln Leu Thr Gly Ser 725 730 735 Ile Cys Asp Ser Leu Lys Gln Lys Met Leu Val Ser Gln Asp Pro Glu 740 745 750 Lys Asn Glu Glu Met Met Ser His Val Asp Asp Glu Leu Lys Leu Arg 755 760 765 Ile Arg Glu Phe Val Gln Tyr Leu Leu Arg Leu Gly Glu Lys Lys Thr 770 775 780 Gly Ser Ser Glu Thr Arg Gln Thr Phe Leu Ser Ile Val Lys Ser Cys 785 790 795 800 Tyr Tyr Ala Ala His Cys Pro Pro His Val Val Asp Arg His Ile Ser 805 810 815 Arg Val Ile Phe Glu Pro Val Ser Ala Ala Lys 820 825 <210> 38 <211> 2570 <212> DNA <213> Arabidopsis thaliana <400> 38 cttcttcact aaatacttag acagagaaaa cagagctttt taaagccatg tctcttcagt 60 atcatgttct aaactccatt ccaagtacaa cctttctcag ttctactaaa acaacaatat 120 cttcttcttt ccttaccatc tcaggatctc ctctcaatgt cgctagagac aaatccagaa 180 gcggttccat acattgttca aagcttcgaa ctcaagaata cattaattct caagaggttc 240 aacatgattt gcctctaata catgagtggc aacagcttca aggagaagat gctcctcaga 300 ttagtgttgg aagtaatagt aatgcattca aagaagcagt gaagagtgtg aaaacgatct 360 tgagaaacct aacggacggg gaaattacga tatcggctta cgatacagct tgggttgcat 420 tgatcgatgc cggagataaa actccggcgt ttccctccgc cgtgaaatgg atcgccgaga 480 accaactttc cgatggttct tggggagatg cgtatctctt ctcttatcat gatcgtctca 540 tcaataccct tgcatgcgtc gttgctctaa gatcatggaa tctctttcct catcaatgca 600 acaaaggaat cacgtttttc cgggaaaata ttgggaagct agaagacgaa aatgatgagc 660 atatgccaat cggattcgaa gtagcattcc catcgttgct tgagatagct cgaggaataa 720 acattgatgt accgtacgat tctccggtct taaaagatat atacgccaag aaagagctaa 780 agcttacaag gataccaaaa gagataatgc acaagatacc aacaacattg ttgcatagtt 840 tggaggggat gcgtgattta gattgggaaa agctcttgaa acttcaatct caagacggat 900 ctttcctctt ctctccttcc tctaccgctt ttgcattcat gcagacccga gacagtaact 960 gcctcgagta tttgcgaaat gccgtcaaac gtttcaatgg aggagttccc aatgtctttc 1020 ccgtggatct tttcgagcac atatggatag tggatcggtt acaacgttta gggatatcga 1080 gatactttga agaagagatt aaagagtgtc ttgactatgt ccacagatat tggaccgaca 1140 atggcatatg ttgggctaga tgttcccatg tccaagacat cgatgataca gccatggcat 1200 ttaggctctt aagacaacat ggataccaag tgtccgcaga tgtattcaag aactttgaga 1260 aagagggaga gtttttctgc tttgtggggc aatcaaacca agcagtaacc ggtatgttca 1320 acctataccg ggcatcacaa ttggcgtttc caagggaaga gatattgaaa aacgccaaag 1380 agttttctta taattatctg ctagaaaaac gggagagaga ggagttgatt gataagtgga 1440 ttataatgaa agacttacct ggcgagattg ggtttgcgtt agagattcca tggtacgcaa 1500 gcttgcctcg agtagagacg agattctata ttgatcaata tggtggagaa aacgacgttt 1560 ggattggcaa gactctttat aggatgccat acgtgaacaa taatggatat ctggaattag 1620 caaaacaaga ttacaacaat tgccaagctc agcatcagct cgaatgggac atattccaaa 1680 agtggtatga agaaaatagg ttaagtgagt ggggtgtgcg cagaagtgag cttctcgagt 1740 gttactactt agcggctgca actatatttg aatcagaaag gtcacatgag agaatggttt 1800 gggctaagtc aagtgtattg gttaaagcca tttcttcttc ttttggggaa tcctctgact 1860 ccagaagaag cttctccgat cagtttcatg aatacattgc caatgctcga cgaagtgatc 1920 atcactttaa tgacaggaac atgagattgg accgaccagg atcggttcag gccagtcggc 1980 ttgccggagt gttaatcggg actttgaatc aaatgtcttt tgaccttttc atgtctcatg 2040 gccgtgacgt taacaatctc ctctatctat cgtggggaga ttggatggaa aaatggaaac 2100 tatatggaga tgaaggagaa ggagagctca tggtgaagat gataattcta atgaagaaca 2160 atgacctaac taacttcttc acccacactc acttcgttcg tctcgcggaa atcatcaatc 2220 gaatctgtct tcctcgccaa tacttaaagg caaggagaaa cgatgagaag gagaagacaa 2280 taaagagtat ggagaaggag atggggaaaa tggttgagtt agcattgtcg gagagtgaca 2340 catttcgtga cgtcagcatc acgtttcttg atgtagcaaa agcattttac tactttgctt 2400 tatgtggcga tcatctccaa actcacatct ccaaagtctt gtttcaaaaa gtctagtaac 2460 ctcatcatca tcatcgatcc attaacaatc agtggatcga tgtatccata gatgcgtgaa 2520 taatatttca tgtagagaag gagaacaaat tagatcatgt agggttatca 2570 <210> 39 <211> 802 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 39 Met Ser Leu Gln Tyr His Val Leu Asn Ser Ile Pro Ser Thr Thr Phe 1 5 10 15 Leu Ser Ser Thr Lys Thr Thr Ile Ser Ser Ser Phe Leu Thr Ile Ser 20 25 30 Gly Ser Pro Leu Asn Val Ala Arg Asp Lys Ser Arg Ser Gly Ser Ile 35 40 45 His Cys Ser Lys Leu Arg Thr Gln Glu Tyr Ile Asn Ser Gln Glu Val 50 55 60 Gln His Asp Leu Pro Leu Ile His Glu Trp Gln Gln Leu Gln Gly Glu 65 70 75 80 Asp Ala Pro Gln Ile Ser Val Gly Ser Asn Ser Asn Ala Phe Lys Glu 85 90 95 Ala Val Lys Ser Val Lys Thr Ile Leu Arg Asn Leu Thr Asp Gly Glu 100 105 110 Ile Thr Ile Ser Ala Tyr Asp Thr Ala Trp Val Ala Leu Ile Asp Ala 115 120 125 Gly Asp Lys Thr Pro Ala Phe Pro Ser Ala Val Lys Trp Ile Ala Glu 130 135 140 Asn Gln Leu Ser Asp Gly Ser Trp Gly Asp Ala Tyr Leu Phe Ser Tyr 145 150 155 160 His Asp Arg Leu Ile Asn Thr Leu Ala Cys Val Val Ala Leu Arg Ser 165 170 175 Trp Asn Leu Phe Pro His Gln Cys Asn Lys Gly Ile Thr Phe Phe Arg 180 185 190 Glu Asn Ile Gly Lys Leu Glu Asp Glu Asn Asp Glu His Met Pro Ile 195 200 205 Gly Phe Glu Val Ala Phe Pro Ser Leu Leu Glu Ile Ala Arg Gly Ile 210 215 220 Asn Ile Asp Val Pro Tyr Asp Ser Pro Val Leu Lys Asp Ile Tyr Ala 225 230 235 240 Lys Lys Glu Leu Lys Leu Thr Arg Ile Pro Lys Glu Ile Met His Lys 245 250 255 Ile Pro Thr Thr Leu Leu His Ser Leu Glu Gly Met Arg Asp Leu Asp 260 265 270 Trp Glu Lys Leu Leu Lys Leu Gln Ser Gln Asp Gly Ser Phe Leu Phe 275 280 285 Ser Pro Ser Ser Thr Ala Phe Ala Phe Met Gln Thr Arg Asp Ser Asn 290 295 300 Cys Leu Glu Tyr Leu Arg Asn Ala Val Lys Arg Phe Asn Gly Gly Val 305 310 315 320 Pro Asn Val Phe Pro Val Asp Leu Phe Glu His Ile Trp Ile Val Asp 325 330 335 Arg Leu Gln Arg Leu Gly Ile Ser Arg Tyr Phe Glu Glu Glu Ile Lys 340 345 350 Glu Cys Leu Asp Tyr Val His Arg Tyr Trp Thr Asp Asn Gly Ile Cys 355 360 365 Trp Ala Arg Cys Ser His Val Gln Asp Ile Asp Asp Thr Ala Met Ala 370 375 380 Phe Arg Leu Leu Arg Gln His Gly Tyr Gln Val Ser Ala Asp Val Phe 385 390 395 400 Lys Asn Phe Glu Lys Glu Gly Glu Phe Phe Cys Phe Val Gly Gln Ser 405 410 415 Asn Gln Ala Val Thr Gly Met Phe Asn Leu Tyr Arg Ala Ser Gln Leu 420 425 430 Ala Phe Pro Arg Glu Glu Ile Leu Lys Asn Ala Lys Glu Phe Ser Tyr 435 440 445 Asn Tyr Leu Leu Glu Lys Arg Glu Arg Glu Glu Leu Ile Asp Lys Trp 450 455 460 Ile Ile Met Lys Asp Leu Pro Gly Glu Ile Gly Phe Ala Leu Glu Ile 465 470 475 480 Pro Trp Tyr Ala Ser Leu Pro Arg Val Glu Thr Arg Phe Tyr Ile Asp 485 490 495 Gln Tyr Gly Gly Glu Asn Asp Val Trp Ile Gly Lys Thr Leu Tyr Arg 500 505 510 Met Pro Tyr Val Asn Asn Asn Gly Tyr Leu Glu Leu Ala Lys Gln Asp 515 520 525 Tyr Asn Asn Cys Gln Ala Gln His Gln Leu Glu Trp Asp Ile Phe Gln 530 535 540 Lys Trp Tyr Glu Glu Asn Arg Leu Ser Glu Trp Gly Val Arg Arg Ser 545 550 555 560 Glu Leu Leu Glu Cys Tyr Tyr Leu Ala Ala Ala Thr Ile Phe Glu Ser 565 570 575 Glu Arg Ser His Glu Arg Met Val Trp Ala Lys Ser Ser Val Leu Val 580 585 590 Lys Ala Ile Ser Ser Ser Phe Gly Glu Ser Ser Asp Ser Arg Arg Ser 595 600 605 Phe Ser Asp Gln Phe His Glu Tyr Ile Ala Asn Ala Arg Arg Ser Asp 610 615 620 His His Phe Asn Asp Arg Asn Met Arg Leu Asp Arg Pro Gly Ser Val 625 630 635 640 Gln Ala Ser Arg Leu Ala Gly Val Leu Ile Gly Thr Leu Asn Gln Met 645 650 655 Ser Phe Asp Leu Phe Met Ser His Gly Arg Asp Val Asn Asn Leu Leu 660 665 670 Tyr Leu Ser Trp Gly Asp Trp Met Glu Lys Trp Lys Leu Tyr Gly Asp 675 680 685 Glu Gly Glu Gly Glu Leu Met Val Lys Met Ile Ile Leu Met Lys Asn 690 695 700 Asn Asp Leu Thr Asn Phe Phe Thr His Thr His Phe Val Arg Leu Ala 705 710 715 720 Glu Ile Ile Asn Arg Ile Cys Leu Pro Arg Gln Tyr Leu Lys Ala Arg 725 730 735 Arg Asn Asp Glu Lys Glu Lys Thr Ile Lys Ser Met Glu Lys Glu Met 740 745 750 Gly Lys Met Val Glu Leu Ala Leu Ser Glu Ser Asp Thr Phe Arg Asp 755 760 765 Val Ser Ile Thr Phe Leu Asp Val Ala Lys Ala Phe Tyr Tyr Phe Ala 770 775 780 Leu Cys Gly Asp His Leu Gln Thr His Ile Ser Lys Val Leu Phe Gln 785 790 795 800 Lys Val <210> 40 <211> 983 <212> PRT <213> Diaporthe amygdali <400> 40 Met Glu Phe Asp Glu Pro Leu Val Asp Glu Ala Arg Ser Leu Val Gln 1 5 10 15 Arg Thr Leu Gln Asp Tyr Asp Asp Arg Tyr Gly Phe Gly Thr Met Ser 20 25 30 Cys Ala Ala Tyr Asp Thr Ala Trp Val Ser Leu Val Thr Lys Thr Val 35 40 45 Asp Gly Arg Lys Gln Trp Leu Phe Pro Glu Cys Phe Glu Phe Leu Leu 50 55 60 Glu Thr Gln Ser Asp Ala Gly Gly Trp Glu Ile Gly Asn Ser Ala Pro 65 70 75 80 Ile Asp Gly Ile Leu Asn Thr Ala Ala Ser Leu Leu Ala Leu Lys Arg 85 90 95 His Val Gln Thr Glu Gln Ile Ile Gln Pro Gln His Asp His Lys Asp 100 105 110 Leu Ala Gly Arg Ala Glu Arg Ala Ala Ala Ser Leu Arg Ala Gln Leu 115 120 125 Ala Ala Leu Asp Val Ser Thr Thr Glu His Val Gly Phe Glu Ile Ile 130 135 140 Val Pro Ala Met Leu Asp Pro Leu Glu Ala Glu Asp Pro Ser Leu Val 145 150 155 160 Phe Asp Phe Pro Ala Arg Lys Pro Leu Met Lys Ile His Asp Ala Lys 165 170 175 Met Ser Arg Phe Arg Pro Glu Tyr Leu Tyr Gly Lys Gln Pro Met Thr 180 185 190 Ala Leu His Ser Leu Glu Ala Phe Ile Gly Lys Ile Asp Phe Asp Lys 195 200 205 Val Arg His His Arg Thr His Gly Ser Met Met Gly Ser Pro Ser Ser 210 215 220 Thr Ala Ala Tyr Leu Met His Ala Ser Gln Trp Asp Gly Asp Ser Glu 225 230 235 240 Ala Tyr Leu Arg His Val Ile Lys His Ala Ala Gly Gln Gly Thr Gly 245 250 255 Ala Val Pro Ser Ala Phe Pro Ser Thr His Phe Glu Ser Ser Trp Ile 260 265 270 Leu Thr Thr Leu Phe Arg Ala Gly Phe Ser Ala Ser His Leu Ala Cys 275 280 285 Asp Glu Leu Asn Lys Leu Val Glu Ile Leu Glu Gly Ser Phe Glu Lys 290 295 300 Glu Gly Gly Ala Ile Gly Tyr Ala Pro Gly Phe Gln Ala Asp Val Asp 305 310 315 320 Asp Thr Ala Lys Thr Ile Ser Thr Leu Ala Val Leu Gly Arg Asp Ala 325 330 335 Thr Pro Arg Gln Met Ile Lys Val Phe Glu Ala Asn Thr His Phe Arg 340 345 350 Thr Tyr Pro Gly Glu Arg Asp Pro Ser Leu Thr Ala Asn Cys Asn Ala 355 360 365 Leu Ser Ala Leu Leu His Gln Pro Asp Ala Ala Met Tyr Gly Ser Gln 370 375 380 Ile Gln Lys Ile Thr Lys Phe Val Cys Asp Tyr Trp Trp Lys Ser Asp 385 390 395 400 Gly Lys Ile Lys Asp Lys Trp Asn Thr Cys Tyr Leu Tyr Pro Ser Val 405 410 415 Leu Leu Val Glu Val Leu Val Asp Leu Val Ser Leu Leu Glu Gln Gly 420 425 430 Lys Leu Pro Asp Val Leu Asp Gln Glu Leu Gln Tyr Arg Val Ala Ile 435 440 445 Thr Leu Phe Gln Ala Cys Leu Arg Pro Leu Leu Asp Gln Asp Ala Glu 450 455 460 Gly Ser Trp Asn Lys Ser Ile Glu Ala Thr Ala Tyr Gly Ile Leu Ile 465 470 475 480 Leu Thr Glu Ala Arg Arg Val Cys Phe Phe Asp Arg Leu Ser Glu Pro 485 490 495 Leu Asn Glu Ala Ile Arg Arg Gly Ile Ala Phe Ala Asp Ser Met Ser 500 505 510 Gly Thr Glu Ala Gln Leu Asn Tyr Ile Trp Ile Glu Lys Val Ser Tyr 515 520 525 Ala Pro Ala Leu Leu Thr Lys Ser Tyr Leu Leu Ala Ala Arg Trp Ala 530 535 540 Ala Lys Ser Pro Leu Gly Ala Ser Val Gly Ser Ser Leu Trp Thr Pro 545 550 555 560 Pro Arg Glu Gly Leu Asp Lys His Val Arg Leu Phe His Gln Ala Glu 565 570 575 Leu Phe Arg Ser Leu Pro Glu Trp Glu Leu Arg Ala Ser Met Ile Glu 580 585 590 Ala Ala Leu Phe Thr Pro Leu Leu Arg Ala His Arg Leu Asp Val Phe 595 600 605 Pro Arg Gln Asp Val Gly Glu Asp Lys Tyr Leu Asp Val Val Pro Phe 610 615 620 Phe Trp Thr Ala Ala Asn Asn Arg Asp Arg Thr Tyr Ala Ser Thr Leu 625 630 635 640 Phe Leu Tyr Asp Met Cys Phe Ile Ala Met Leu Asn Phe Gln Leu Asp 645 650 655 Glu Phe Met Glu Ala Thr Ala Gly Ile Leu Phe Arg Asp His Met Asp 660 665 670 Asp Leu Arg Gln Leu Ile His Asp Leu Leu Ala Glu Lys Thr Ser Pro 675 680 685 Lys Ser Ser Gly Arg Ser Ser Gln Gly Thr Lys Asp Ala Asp Ser Gly 690 695 700 Ile Glu Glu Asp Val Ser Met Ser Asp Ser Ala Ser Asp Ser Gln Asp 705 710 715 720 Arg Ser Pro Glu Tyr Asp Leu Val Phe Ser Ala Leu Ser Thr Phe Thr 725 730 735 Lys His Val Leu Gln His Pro Ser Ile Gln Ser Ala Ser Val Trp Asp 740 745 750 Arg Lys Leu Leu Ala Arg Glu Met Lys Ala Tyr Leu Leu Ala His Ile 755 760 765 Gln Gln Ala Glu Asp Ser Thr Pro Leu Ser Glu Leu Lys Asp Val Pro 770 775 780 Gln Lys Thr Asp Val Thr Arg Val Ser Thr Ser Thr Thr Thr Phe Phe 785 790 795 800 Asn Trp Val Arg Thr Thr Ser Ala Asp His Ile Ser Cys Pro Tyr Ser 805 810 815 Phe His Phe Val Ala Cys His Leu Gly Ala Ala Leu Ser Pro Lys Gly 820 825 830 Ser Asn Gly Asp Cys Tyr Pro Ser Ala Gly Glu Lys Phe Leu Ala Ala 835 840 845 Ala Val Cys Arg His Leu Ala Thr Met Cys Arg Met Tyr Asn Asp Leu 850 855 860 Gly Ser Ala Glu Arg Asp Ser Asp Glu Gly Asn Leu Asn Ser Leu Asp 865 870 875 880 Phe Pro Glu Phe Ala Asp Ser Ala Gly Asn Gly Gly Ile Glu Ile Gln 885 890 895 Lys Ala Ala Leu Leu Arg Leu Ala Glu Phe Glu Arg Asp Ser Tyr Leu 900 905 910 Glu Ala Phe Arg Arg Leu Gln Asp Glu Ser Asn Arg Val His Gly Pro 915 920 925 Ala Gly Gly Asp Glu Ala Arg Leu Ser Arg Arg Arg Met Ala Ile Leu 930 935 940 Glu Phe Phe Ala Gln Gln Val Asp Leu Tyr Gly Gln Val Tyr Val Ile 945 950 955 960 Arg Asp Ile Ser Ala Arg Ile Pro Lys Asn Glu Val Glu Lys Lys Arg 965 970 975 Lys Leu Asp Asp Ala Phe Asn 980 <210> 41 <211> 881 <212> PRT <213> Physcomitrella patens <400> 41 Met Ala Ser Ser Thr Leu Ile Gln Asn Arg Ser Cys Gly Val Thr Ser 1 5 10 15 Ser Met Ser Ser Phe Gln Ile Phe Arg Gly Gln Pro Leu Arg Phe Pro 20 25 30 Gly Thr Arg Thr Pro Ala Ala Val Gln Cys Leu Lys Lys Arg Arg Cys 35 40 45 Leu Arg Pro Thr Glu Ser Val Leu Glu Ser Ser Pro Gly Ser Gly Ser 50 55 60 Tyr Arg Ile Val Thr Gly Pro Ser Gly Ile Asn Pro Ser Ser Asn Gly 65 70 75 80 His Leu Gln Glu Gly Ser Leu Thr His Arg Leu Pro Ile Pro Met Glu 85 90 95 Lys Ser Ile Asp Asn Phe Gln Ser Thr Leu Tyr Val Ser Asp Ile Trp 100 105 110 Ser Glu Thr Leu Gln Arg Thr Glu Cys Leu Leu Gln Val Thr Glu Asn 115 120 125 Val Gln Met Asn Glu Trp Ile Glu Glu Ile Arg Met Tyr Phe Arg Asn 130 135 140 Met Thr Leu Gly Glu Ile Ser Met Ser Pro Tyr Asp Thr Ala Trp Val 145 150 155 160 Ala Arg Val Pro Ala Leu Asp Gly Ser His Gly Pro Gln Phe His Arg 165 170 175 Ser Leu Gln Trp Ile Ile Asp Asn Gln Leu Pro Asp Gly Asp Trp Gly 180 185 190 Glu Pro Ser Leu Phe Leu Gly Tyr Asp Arg Val Cys Asn Thr Leu Ala 195 200 205 Cys Val Ile Ala Leu Lys Thr Trp Gly Val Gly Ala Gln Asn Val Glu 210 215 220 Arg Gly Ile Gln Phe Leu Gln Ser Asn Ile Tyr Lys Met Glu Glu Asp 225 230 235 240 Asp Ala Asn His Met Pro Ile Gly Phe Glu Ile Val Phe Pro Ala Met 245 250 255 Met Glu Asp Ala Lys Ala Leu Gly Leu Asp Leu Pro Tyr Asp Ala Thr 260 265 270 Ile Leu Gln Gln Ile Ser Ala Glu Arg Glu Lys Lys Met Lys Lys Ile 275 280 285 Pro Met Ala Met Val Tyr Lys Tyr Pro Thr Thr Leu Leu His Ser Leu 290 295 300 Glu Gly Leu His Arg Glu Val Asp Trp Asn Lys Leu Leu Gln Leu Gln 305 310 315 320 Ser Glu Asn Gly Ser Phe Leu Tyr Ser Pro Ala Ser Thr Ala Cys Ala 325 330 335 Leu Met Tyr Thr Lys Asp Val Lys Cys Phe Asp Tyr Leu Asn Gln Leu 340 345 350 Leu Ile Lys Phe Asp His Ala Cys Pro Asn Val Tyr Pro Val Asp Leu 355 360 365 Phe Glu Arg Leu Trp Met Val Asp Arg Leu Gln Arg Leu Gly Ile Ser 370 375 380 Arg Tyr Phe Glu Arg Glu Ile Arg Asp Cys Leu Gln Tyr Val Tyr Arg 385 390 395 400 Tyr Trp Lys Asp Cys Gly Ile Gly Trp Ala Ser Asn Ser Ser Val Gln 405 410 415 Asp Val Asp Asp Thr Ala Met Ala Phe Arg Leu Leu Arg Thr His Gly 420 425 430 Phe Asp Val Lys Glu Asp Cys Phe Arg Gln Phe Phe Lys Asp Gly Glu 435 440 445 Phe Phe Cys Phe Ala Gly Gln Ser Ser Gln Ala Val Thr Gly Met Phe 450 455 460 Asn Leu Ser Arg Ala Ser Gln Thr Leu Phe Pro Gly Glu Ser Leu Leu 465 470 475 480 Lys Lys Ala Arg Thr Phe Ser Arg Asn Phe Leu Arg Thr Lys His Glu 485 490 495 Asn Asn Glu Cys Phe Asp Lys Trp Ile Ile Thr Lys Asp Leu Ala Gly 500 505 510 Glu Val Glu Tyr Asn Leu Thr Phe Pro Trp Tyr Ala Ser Leu Pro Arg 515 520 525 Leu Glu His Arg Thr Tyr Leu Asp Gln Tyr Gly Ile Asp Asp Ile Trp 530 535 540 Ile Gly Lys Ser Leu Tyr Lys Met Pro Ala Val Thr Asn Glu Val Phe 545 550 555 560 Leu Lys Leu Ala Lys Ala Asp Phe Asn Met Cys Gln Ala Leu His Lys 565 570 575 Lys Glu Leu Glu Gln Val Ile Lys Trp Asn Ala Ser Cys Gln Phe Arg 580 585 590 Asp Leu Glu Phe Ala Arg Gln Lys Ser Val Glu Cys Tyr Phe Ala Gly 595 600 605 Ala Ala Thr Met Phe Glu Pro Glu Met Val Gln Ala Arg Leu Val Trp 610 615 620 Ala Arg Cys Cys Val Leu Thr Thr Val Leu Asp Asp Tyr Phe Asp His 625 630 635 640 Gly Thr Pro Val Glu Glu Leu Arg Val Phe Val Gln Ala Val Arg Thr 645 650 655 Trp Asn Pro Glu Leu Ile Asn Gly Leu Pro Glu Gln Ala Lys Ile Leu 660 665 670 Phe Met Gly Leu Tyr Lys Thr Val Asn Thr Ile Ala Glu Glu Ala Phe 675 680 685 Met Ala Gln Lys Arg Asp Val His His His Leu Lys His Tyr Trp Asp 690 695 700 Lys Leu Ile Thr Ser Ala Leu Lys Glu Ala Glu Trp Ala Glu Ser Gly 705 710 715 720 Tyr Val Pro Thr Phe Asp Glu Tyr Met Glu Val Ala Glu Ile Ser Val 725 730 735 Ala Leu Glu Pro Ile Val Cys Ser Thr Leu Phe Phe Ala Gly His Arg 740 745 750 Leu Asp Glu Asp Val Leu Asp Ser Tyr Asp Tyr His Leu Val Met His 755 760 765 Leu Val Asn Arg Val Gly Arg Ile Leu Asn Asp Ile Gln Gly Met Lys 770 775 780 Arg Glu Ala Ser Gln Gly Lys Ile Ser Ser Val Gln Ile Tyr Met Glu 785 790 795 800 Glu His Pro Ser Val Pro Ser Glu Ala Met Ala Ile Ala His Leu Gln 805 810 815 Glu Leu Val Asp Asn Ser Met Gln Gln Leu Thr Tyr Glu Val Leu Arg 820 825 830 Phe Thr Ala Val Pro Lys Ser Cys Lys Arg Ile His Leu Asn Met Ala 835 840 845 Lys Ile Met His Ala Phe Tyr Lys Asp Thr Asp Gly Phe Ser Ser Leu 850 855 860 Thr Ala Met Thr Gly Phe Val Lys Lys Val Leu Phe Glu Pro Val Pro 865 870 875 880 Glu <210> 42 <211> 952 <212> PRT <213> Fusarium fujikuroi <400> 42 Met Pro Gly Lys Ile Glu Asn Gly Thr Pro Lys Asp Leu Lys Thr Gly 1 5 10 15 Asn Asp Phe Val Ser Ala Ala Lys Ser Leu Leu Asp Arg Ala Phe Lys 20 25 30 Ser His His Ser Tyr Tyr Gly Leu Cys Ser Thr Ser Cys Gln Val Tyr 35 40 45 Asp Thr Ala Trp Val Ala Met Ile Pro Lys Thr Arg Asp Asn Val Lys 50 55 60 Gln Trp Leu Phe Pro Glu Cys Phe His Tyr Leu Leu Lys Thr Gln Ala 65 70 75 80 Ala Asp Gly Ser Trp Gly Ser Leu Pro Thr Thr Gln Thr Ala Gly Ile 85 90 95 Leu Asp Thr Ala Ser Ala Val Leu Ala Leu Leu Cys His Ala Gln Glu 100 105 110 Pro Leu Gln Ile Leu Asp Val Ser Pro Asp Glu Met Gly Leu Arg Ile 115 120 125 Glu His Gly Val Thr Ser Leu Lys Arg Gln Leu Ala Val Trp Asn Asp 130 135 140 Val Glu Asp Thr Asn His Ile Gly Val Glu Phe Ile Ile Pro Ala Leu 145 150 155 160 Leu Ser Met Leu Glu Lys Glu Leu Asp Val Pro Ser Phe Glu Phe Pro 165 170 175 Cys Arg Ser Ile Leu Glu Arg Met His Gly Glu Lys Leu Gly His Phe 180 185 190 Asp Leu Glu Gln Val Tyr Gly Lys Pro Ser Ser Leu Leu His Ser Leu 195 200 205 Glu Ala Phe Leu Gly Lys Leu Asp Phe Asp Arg Leu Ser His His Leu 210 215 220 Tyr His Gly Ser Met Met Ala Ser Pro Ser Ser Thr Ala Ala Tyr Leu 225 230 235 240 Ile Gly Ala Thr Lys Trp Asp Asp Glu Ala Glu Asp Tyr Leu Arg His 245 250 255 Val Met Arg Asn Gly Ala Gly His Gly Asn Gly Gly Ile Ser Gly Thr 260 265 270 Phe Pro Thr Thr His Phe Glu Cys Ser Trp Ile Ile Ala Thr Leu Leu 275 280 285 Lys Val Gly Phe Thr Leu Lys Gln Ile Asp Gly Asp Gly Leu Arg Gly 290 295 300 Leu Ser Thr Ile Leu Leu Glu Ala Leu Arg Asp Glu Asn Gly Val Ile 305 310 315 320 Gly Phe Ala Pro Arg Thr Ala Asp Val Asp Asp Thr Ala Lys Ala Leu 325 330 335 Leu Ala Leu Ser Leu Val Asn Gln Pro Val Ser Pro Asp Ile Met Ile 340 345 350 Lys Val Phe Glu Gly Lys Asp His Phe Thr Thr Phe Gly Ser Glu Arg 355 360 365 Asp Pro Ser Leu Thr Ser Asn Leu His Val Leu Leu Ser Leu Leu Lys 370 375 380 Gln Ser Asn Leu Ser Gln Tyr His Pro Gln Ile Leu Lys Thr Thr Leu 385 390 395 400 Phe Thr Cys Arg Trp Trp Trp Gly Ser Asp His Cys Val Lys Asp Lys 405 410 415 Trp Asn Leu Ser His Leu Tyr Pro Thr Met Leu Leu Val Glu Ala Phe 420 425 430 Thr Glu Val Leu His Leu Ile Asp Gly Gly Glu Leu Ser Ser Leu Phe 435 440 445 Asp Glu Ser Phe Lys Cys Lys Ile Gly Leu Ser Ile Phe Gln Ala Val 450 455 460 Leu Arg Ile Ile Leu Thr Gln Asp Asn Asp Gly Ser Trp Arg Gly Tyr 465 470 475 480 Arg Glu Gln Thr Cys Tyr Ala Ile Leu Ala Leu Val Gln Ala Arg His 485 490 495 Val Cys Phe Phe Thr His Met Val Asp Arg Leu Gln Ser Cys Val Asp 500 505 510 Arg Gly Phe Ser Trp Leu Lys Ser Cys Ser Phe His Ser Gln Asp Leu 515 520 525 Thr Trp Thr Ser Lys Thr Ala Tyr Glu Val Gly Phe Val Ala Glu Ala 530 535 540 Tyr Lys Leu Ala Ala Leu Gln Ser Ala Ser Leu Glu Val Pro Ala Ala 545 550 555 560 Thr Ile Gly His Ser Val Thr Ser Ala Val Pro Ser Ser Asp Leu Glu 565 570 575 Lys Tyr Met Arg Leu Val Arg Lys Thr Ala Leu Phe Ser Pro Leu Asp 580 585 590 Glu Trp Gly Leu Met Ala Ser Ile Ile Glu Ser Ser Phe Phe Val Pro 595 600 605 Leu Leu Gln Ala Gln Arg Val Glu Ile Tyr Pro Arg Asp Asn Ile Lys 610 615 620 Val Asp Glu Asp Lys Tyr Leu Ser Ile Ile Pro Phe Thr Trp Val Gly 625 630 635 640 Cys Asn Asn Arg Ser Arg Thr Phe Ala Ser Asn Arg Trp Leu Tyr Asp 645 650 655 Met Met Tyr Leu Ser Leu Leu Gly Tyr Gln Thr Asp Glu Tyr Met Glu 660 665 670 Ala Val Ala Gly Pro Val Phe Gly Asp Val Ser Leu Leu His Gln Thr 675 680 685 Ile Asp Lys Val Ile Asp Asn Thr Met Gly Asn Leu Ala Arg Ala Asn 690 695 700 Gly Thr Val His Ser Gly Asn Gly His Gln His Glu Ser Pro Asn Ile 705 710 715 720 Gly Gln Val Glu Asp Thr Leu Thr Arg Phe Thr Asn Ser Val Leu Asn 725 730 735 His Lys Asp Val Leu Asn Ser Ser Ser Ser Asp Gln Asp Thr Leu Arg 740 745 750 Arg Glu Phe Arg Thr Phe Met His Ala His Ile Thr Gln Ile Glu Asp 755 760 765 Asn Ser Arg Phe Ser Lys Gln Ala Ser Ser Asp Ala Phe Ser Ser Pro 770 775 780 Glu Gln Ser Tyr Phe Gln Trp Val Asn Ser Thr Gly Gly Ser His Val 785 790 795 800 Ala Cys Ala Tyr Ser Phe Ala Phe Ser Asn Cys Leu Met Ser Ala Asn 805 810 815 Leu Leu Gln Gly Lys Asp Ala Phe Pro Ser Gly Thr Gln Lys Tyr Leu 820 825 830 Ile Ser Ser Val Met Arg His Ala Thr Asn Met Cys Arg Met Tyr Asn 835 840 845 Asp Phe Gly Ser Ile Ala Arg Asp Asn Ala Glu Arg Asn Val Asn Ser 850 855 860 Ile His Phe Pro Glu Phe Thr Leu Cys Asn Gly Thr Ser Gln Asn Leu 865 870 875 880 Asp Glu Arg Lys Glu Arg Leu Leu Lys Ile Ala Thr Tyr Glu Gln Gly 885 890 895 Tyr Leu Asp Arg Ala Leu Glu Ala Leu Glu Arg Gln Ser Arg Asp Asp 900 905 910 Ala Gly Asp Arg Ala Gly Ser Lys Asp Met Arg Lys Leu Lys Ile Val 915 920 925 Lys Leu Phe Cys Asp Val Thr Asp Leu Tyr Asp Gln Leu Tyr Val Ile 930 935 940 Lys Asp Leu Ser Ser Ser Met Lys 945 950 <210> 43 <211> 361 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 43 Met Ala Leu Val Asn Pro Thr Ala Leu Phe Tyr Gly Thr Ser Ile Arg 1 5 10 15 Thr Arg Pro Thr Asn Leu Leu Asn Pro Thr Gln Lys Leu Arg Pro Val 20 25 30 Ser Ser Ser Ser Leu Pro Ser Phe Ser Ser Val Ser Ala Ile Leu Thr 35 40 45 Glu Lys His Gln Ser Asn Pro Ser Glu Asn Asn Asn Leu Gln Thr His 50 55 60 Leu Glu Thr Pro Phe Asn Phe Asp Ser Tyr Met Leu Glu Lys Val Asn 65 70 75 80 Met Val Asn Glu Ala Leu Asp Ala Ser Val Pro Leu Lys Asp Pro Ile 85 90 95 Lys Ile His Glu Ser Met Arg Tyr Ser Leu Leu Ala Gly Gly Lys Arg 100 105 110 Ile Arg Pro Met Met Cys Ile Ala Ala Cys Glu Ile Val Gly Gly Asn 115 120 125 Ile Leu Asn Ala Met Pro Ala Ala Cys Ala Val Glu Met Ile His Thr 130 135 140 Met Ser Leu Val His Asp Asp Leu Pro Cys Met Asp Asn Asp Asp Phe 145 150 155 160 Arg Arg Gly Lys Pro Ile Ser His Lys Val Tyr Gly Glu Glu Met Ala 165 170 175 Val Leu Thr Gly Asp Ala Leu Leu Ser Leu Ser Phe Glu His Ile Ala 180 185 190 Thr Ala Thr Lys Gly Val Ser Lys Asp Arg Ile Val Arg Ala Ile Gly 195 200 205 Glu Leu Ala Arg Ser Val Gly Ser Glu Gly Leu Val Ala Gly Gln Val 210 215 220 Val Asp Ile Leu Ser Glu Gly Ala Asp Val Gly Leu Asp His Leu Glu 225 230 235 240 Tyr Ile His Ile His Lys Thr Ala Met Leu Leu Glu Ser Ser Val Val 245 250 255 Ile Gly Ala Ile Met Gly Gly Gly Ser Asp Gln Gln Ile Glu Lys Leu 260 265 270 Arg Lys Phe Ala Arg Ser Ile Gly Leu Leu Phe Gln Val Val Asp Asp 275 280 285 Ile Leu Asp Val Thr Lys Ser Thr Glu Glu Leu Gly Lys Thr Ala Gly 290 295 300 Lys Asp Leu Leu Thr Asp Lys Thr Thr Tyr Pro Lys Leu Leu Gly Ile 305 310 315 320 Glu Lys Ser Arg Glu Phe Ala Glu Lys Leu Asn Lys Glu Ala Gln Glu 325 330 335 Gln Leu Ser Gly Phe Asp Arg Arg Lys Ala Ala Pro Leu Ile Ala Leu 340 345 350 Ala Asn Tyr Asn Ala Tyr Arg Gln Asn 355 360 <210> 44 <211> 342 <212> PRT <213> Fusarium fujikuroi <400> 44 Met Ala Glu Gln Gln Ile Ser Asn Leu Leu Ser Met Phe Asp Ala Ser 1 5 10 15 His Ala Ser Gln Lys Leu Glu Ile Thr Val Gln Met Met Asp Thr Tyr 20 25 30 His Tyr Arg Glu Thr Pro Pro Asp Ser Ser Ser Ser Glu Gly Gly Ser 35 40 45 Leu Ser Arg Tyr Asp Glu Arg Arg Val Ser Leu Pro Leu Ser His Asn 50 55 60 Ala Ala Ser Pro Asp Ile Val Ser Gln Leu Cys Phe Ser Thr Ala Met 65 70 75 80 Ser Ser Glu Leu Asn His Arg Trp Lys Ser Gln Arg Leu Lys Val Ala 85 90 95 Asp Ser Pro Tyr Asn Tyr Ile Leu Thr Leu Pro Ser Lys Gly Ile Arg 100 105 110 Gly Ala Phe Ile Asp Ser Leu Asn Val Trp Leu Glu Val Pro Glu Asp 115 120 125 Glu Thr Ser Val Ile Lys Glu Val Ile Gly Met Leu His Asn Ser Ser 130 135 140 Leu Ile Ile Asp Asp Phe Gln Asp Asn Ser Pro Leu Arg Arg Gly Lys 145 150 155 160 Pro Ser Thr His Thr Val Phe Gly Pro Ala Gln Ala Ile Asn Thr Ala 165 170 175 Thr Tyr Val Ile Val Lys Ala Ile Glu Lys Ile Gln Asp Ile Val Gly 180 185 190 His Asp Ala Leu Ala Asp Val Thr Gly Thr Ile Thr Thr Ile Phe Gln 195 200 205 Gly Gln Ala Met Asp Leu Trp Trp Thr Ala Asn Ala Ile Val Pro Ser 210 215 220 Ile Gln Glu Tyr Leu Leu Met Val Asn Asp Lys Thr Gly Ala Leu Phe 225 230 235 240 Arg Leu Ser Leu Glu Leu Leu Ala Leu Asn Ser Glu Ala Ser Ile Ser 245 250 255 Asp Ser Ala Leu Glu Ser Leu Ser Ser Ala Val Ser Leu Leu Gly Gln 260 265 270 Tyr Phe Gln Ile Arg Asp Asp Tyr Met Asn Leu Ile Asp Asn Lys Tyr 275 280 285 Thr Asp Gln Lys Gly Phe Cys Glu Asp Leu Asp Glu Gly Lys Tyr Ser 290 295 300 Leu Thr Leu Ile His Ala Leu Gln Thr Asp Ser Ser Asp Leu Leu Thr 305 310 315 320 Asn Ile Leu Ser Met Arg Arg Val Gln Gly Lys Leu Thr Ala Gln Lys 325 330 335 Arg Cys Trp Phe Trp Lys 340 <210> 45 <211> 300 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 45 Met Glu Lys Thr Lys Glu Lys Ala Glu Arg Ile Leu Leu Glu Pro Tyr 1 5 10 15 Arg Tyr Leu Leu Gln Leu Pro Gly Lys Gln Val Arg Ser Lys Leu Ser 20 25 30 Gln Ala Phe Asn His Trp Leu Lys Val Pro Glu Asp Lys Leu Gln Ile 35 40 45 Ile Ile Glu Val Thr Glu Met Leu His Asn Ala Ser Leu Leu Ile Asp 50 55 60 Asp Ile Glu Asp Ser Ser Lys Leu Arg Arg Gly Phe Pro Val Ala His 65 70 75 80 Ser Ile Tyr Gly Val Pro Ser Val Ile Asn Ser Ala Asn Tyr Val Tyr 85 90 95 Phe Leu Gly Leu Glu Lys Val Leu Thr Leu Asp His Pro Asp Ala Val 100 105 110 Lys Leu Phe Thr Arg Gln Leu Leu Glu Leu His Gln Gly Gln Gly Leu 115 120 125 Asp Ile Tyr Trp Arg Asp Thr Tyr Thr Cys Pro Thr Glu Glu Glu Tyr 130 135 140 Lys Ala Met Val Leu Gln Lys Thr Gly Gly Leu Phe Gly Leu Ala Val 145 150 155 160 Gly Leu Met Gln Leu Phe Ser Asp Tyr Lys Glu Asp Leu Lys Pro Leu 165 170 175 Leu Asp Thr Leu Gly Leu Phe Phe Gln Ile Arg Asp Asp Tyr Ala Asn 180 185 190 Leu His Ser Lys Glu Tyr Ser Glu Asn Lys Ser Phe Cys Glu Asp Leu 195 200 205 Thr Glu Gly Lys Phe Ser Phe Pro Thr Ile His Ala Ile Trp Ser Arg 210 215 220 Pro Glu Ser Thr Gln Val Gln Asn Ile Leu Arg Gln Arg Thr Glu Asn 225 230 235 240 Ile Asp Ile Lys Lys Tyr Cys Val Gln Tyr Leu Glu Asp Val Gly Ser 245 250 255 Phe Ala Tyr Thr Arg His Thr Leu Arg Glu Leu Glu Ala Lys Ala Tyr 260 265 270 Lys Gln Ile Glu Ala Cys Gly Gly Asn Pro Ser Leu Val Ala Leu Val 275 280 285 Lys His Leu Ser Lys Met Phe Thr Glu Glu Asn Lys 290 295 300 <210> 46 <211> 339 <212> PRT <213> Thalassiosira pseudonana <400> 46 Met Ala Arg Phe Tyr Phe Leu Asn Ala Leu Leu Met Val Ile Ser Leu 1 5 10 15 Gln Ser Thr Thr Ala Phe Thr Pro Ala Lys Leu Ala Tyr Pro Thr Thr 20 25 30 Thr Thr Ala Leu Asn Val Ala Ser Ala Glu Thr Ser Phe Ser Leu Asp 35 40 45 Glu Tyr Leu Ala Ser Lys Ile Gly Pro Ile Glu Ser Ala Leu Glu Ala 50 55 60 Ser Val Lys Ser Arg Ile Pro Gln Thr Asp Lys Ile Cys Glu Ser Met 65 70 75 80 Ala Tyr Ser Leu Met Ala Gly Gly Lys Arg Ile Arg Pro Val Leu Cys 85 90 95 Ile Ala Ala Cys Glu Met Phe Gly Gly Ser Gln Asp Val Ala Met Pro 100 105 110 Thr Ala Val Ala Leu Glu Met Ile His Thr Met Ser Leu Ile His Asp 115 120 125 Asp Leu Pro Ser Met Asp Asn Asp Asp Leu Arg Arg Gly Lys Pro Thr 130 135 140 Asn His Val Val Phe Gly Glu Asp Val Ala Ile Leu Ala Gly Asp Ser 145 150 155 160 Leu Leu Ser Thr Ser Phe Glu His Val Ala Arg Glu Thr Lys Gly Val 165 170 175 Ser Ala Glu Lys Ile Val Asp Val Ile Ala Arg Leu Gly Lys Ser Val 180 185 190 Gly Ala Glu Gly Leu Ala Gly Gly Gln Val Met Asp Leu Glu Cys Glu 195 200 205 Ala Lys Pro Gly Thr Thr Leu Asp Asp Leu Lys Trp Ile His Ile His 210 215 220 Lys Thr Ala Thr Leu Leu Gln Val Ala Val Ala Ser Gly Ala Val Leu 225 230 235 240 Gly Gly Ala Thr Pro Glu Glu Val Ala Ala Cys Glu Leu Phe Ala Met 245 250 255 Asn Ile Gly Leu Ala Phe Gln Val Ala Asp Asp Ile Leu Asp Val Thr 260 265 270 Ala Ser Ser Glu Asp Leu Gly Lys Thr Ala Gly Lys Asp Glu Ala Thr 275 280 285 Asp Lys Thr Thr Tyr Pro Lys Leu Leu Gly Leu Glu Glu Ser Lys Ala 290 295 300 Tyr Ala Arg Gln Leu Ile Asp Glu Ala Lys Glu Ser Leu Ala Pro Phe 305 310 315 320 Gly Asp Arg Ala Ala Pro Leu Leu Ala Ile Ala Asp Phe Ile Ile Asp 325 330 335 Arg Lys Asn <210> 47 <211> 355 <212> PRT <213> Streptomyces clavuligerus <400> 47 Met His Leu Ala Pro Arg Arg Val Pro Arg Gly Arg Arg Ser Pro Pro 1 5 10 15 Asp Arg Val Pro Glu Arg Gln Gly Ala Leu Gly Arg Arg Arg Gly Ala 20 25 30 Gly Ser Thr Gly Cys Ala Arg Ala Ala Ala Gly Val His Arg Arg Arg 35 40 45 Gly Gly Gly Glu Ala Asp Pro Ser Ala Ala Val His Arg Gly Trp Gln 50 55 60 Ala Gly Gly Gly Thr Gly Leu Pro Asp Glu Val Val Ser Thr Ala Ala 65 70 75 80 Ala Leu Glu Met Phe His Ala Phe Ala Leu Ile His Asp Asp Ile Met 85 90 95 Asp Asp Ser Ala Thr Arg Arg Gly Ser Pro Thr Val His Arg Ala Leu 100 105 110 Ala Asp Arg Leu Gly Ala Ala Leu Asp Pro Asp Gln Ala Gly Gln Leu 115 120 125 Gly Val Ser Thr Ala Ile Leu Val Gly Asp Leu Ala Leu Thr Trp Ser 130 135 140 Asp Glu Leu Leu Tyr Ala Pro Leu Thr Pro His Arg Leu Ala Ala Val 145 150 155 160 Leu Pro Leu Val Thr Ala Met Arg Ala Glu Thr Val His Gly Gln Tyr 165 170 175 Leu Asp Ile Thr Ser Ala Arg Arg Pro Gly Thr Asp Thr Ser Leu Ala 180 185 190 Leu Arg Ile Ala Arg Tyr Lys Thr Ala Ala Tyr Thr Met Glu Arg Pro 195 200 205 Leu His Ile Gly Ala Ala Leu Ala Gly Ala Arg Pro Glu Leu Leu Ala 210 215 220 Gly Leu Ser Ala Tyr Ala Leu Pro Ala Gly Glu Ala Phe Gln Leu Ala 225 230 235 240 Asp Asp Leu Leu Gly Val Phe Gly Asp Pro Arg Arg Thr Gly Lys Pro 245 250 255 Asp Leu Asp Asp Leu Arg Gly Gly Lys His Thr Val Leu Val Ala Leu 260 265 270 Ala Arg Glu His Ala Thr Pro Glu Gln Arg His Thr Leu Asp Thr Leu 275 280 285 Leu Gly Thr Pro Gly Leu Asp Arg Gln Gly Ala Ser Arg Leu Arg Cys 290 295 300 Val Leu Val Ala Thr Gly Ala Arg Ala Glu Ala Glu Arg Leu Ile Thr 305 310 315 320 Glu Arg Arg Asp Gln Ala Leu Thr Ala Leu Asn Ala Leu Thr Leu Pro 325 330 335 Pro Pro Leu Ala Glu Ala Leu Ala Arg Leu Thr Leu Gly Ser Thr Ala 340 345 350 His Pro Ala 355 <210> 48 <211> 330 <212> PRT <213> Sulfolobus acidocaldarius <400> 48 Met Ser Tyr Phe Asp Asn Tyr Phe Asn Glu Ile Val Asn Ser Val Asn 1 5 10 15 Asp Ile Ile Lys Ser Tyr Ile Ser Gly Asp Val Pro Lys Leu Tyr Glu 20 25 30 Ala Ser Tyr His Leu Phe Thr Ser Gly Gly Lys Arg Leu Arg Pro Leu 35 40 45 Ile Leu Thr Ile Ser Ser Asp Leu Phe Gly Gly Gln Arg Glu Arg Ala 50 55 60 Tyr Tyr Ala Gly Ala Ala Ile Glu Val Leu His Thr Phe Thr Leu Val 65 70 75 80 His Asp Asp Ile Met Asp Gln Asp Asn Ile Arg Arg Gly Leu Pro Thr 85 90 95 Val His Val Lys Tyr Gly Leu Pro Leu Ala Ile Leu Ala Gly Asp Leu 100 105 110 Leu His Ala Lys Ala Phe Gln Leu Leu Thr Gln Ala Leu Arg Gly Leu 115 120 125 Pro Ser Glu Thr Ile Ile Lys Ala Phe Asp Ile Phe Thr Arg Ser Ile 130 135 140 Ile Ile Ile Ser Glu Gly Gln Ala Val Asp Met Glu Phe Glu Asp Arg 145 150 155 160 Ile Asp Ile Lys Glu Gln Glu Tyr Leu Asp Met Ile Ser Arg Lys Thr 165 170 175 Ala Ala Leu Phe Ser Ala Ser Ser Ser Ile Gly Ala Leu Ile Ala Gly 180 185 190 Ala Asn Asp Asn Asp Val Arg Leu Met Ser Asp Phe Gly Thr Asn Leu 195 200 205 Gly Ile Ala Phe Gln Ile Val Asp Asp Ile Leu Gly Leu Thr Ala Asp 210 215 220 Glu Lys Glu Leu Gly Lys Pro Val Phe Ser Asp Ile Arg Glu Gly Lys 225 230 235 240 Lys Thr Ile Leu Val Ile Lys Thr Leu Glu Leu Cys Lys Glu Asp Glu 245 250 255 Lys Lys Ile Val Leu Lys Ala Leu Gly Asn Lys Ser Ala Ser Lys Glu 260 265 270 Glu Leu Met Ser Ser Ala Asp Ile Ile Lys Lys Tyr Ser Leu Asp Tyr 275 280 285 Ala Tyr Asn Leu Ala Glu Lys Tyr Tyr Lys Asn Ala Ile Asp Ser Leu 290 295 300 Asn Gln Val Ser Ser Lys Ser Asp Ile Pro Gly Lys Ala Leu Lys Tyr 305 310 315 320 Leu Ala Glu Phe Thr Ile Arg Arg Arg Lys 325 330 <210> 49 <211> 297 <212> PRT <213> Synechococcus sp. <400> 49 Met Val Ala Gln Thr Phe Asn Leu Asp Thr Tyr Leu Ser Gln Arg Gln 1 5 10 15 Gln Gln Val Glu Glu Ala Leu Ser Ala Ala Leu Val Pro Ala Tyr Pro 20 25 30 Glu Arg Ile Tyr Glu Ala Met Arg Tyr Ser Leu Leu Ala Gly Gly Lys 35 40 45 Arg Leu Arg Pro Ile Leu Cys Leu Ala Ala Cys Glu Leu Ala Gly Gly 50 55 60 Ser Val Glu Gln Ala Met Pro Thr Ala Cys Ala Leu Glu Met Ile His 65 70 75 80 Thr Met Ser Leu Ile His Asp Asp Leu Pro Ala Met Asp Asn Asp Asp 85 90 95 Phe Arg Arg Gly Lys Pro Thr Asn His Lys Val Phe Gly Glu Asp Ile 100 105 110 Ala Ile Leu Ala Gly Asp Ala Leu Leu Ala Tyr Ala Phe Glu His Ile 115 120 125 Ala Ser Gln Thr Arg Gly Val Pro Pro Gln Leu Val Leu Gln Val Ile 130 135 140 Ala Arg Ile Gly His Ala Val Ala Ala Thr Gly Leu Val Gly Gly Gln 145 150 155 160 Val Val Asp Leu Glu Ser Glu Gly Lys Ala Ile Ser Leu Glu Thr Leu 165 170 175 Glu Tyr Ile His Ser His Lys Thr Gly Ala Leu Leu Glu Ala Ser Val 180 185 190 Val Ser Gly Gly Ile Leu Ala Gly Ala Asp Glu Glu Leu Leu Ala Arg 195 200 205 Leu Ser His Tyr Ala Arg Asp Ile Gly Leu Ala Phe Gln Ile Val Asp 210 215 220 Asp Ile Leu Asp Val Thr Ala Thr Ser Glu Gln Leu Gly Lys Thr Ala 225 230 235 240 Gly Lys Asp Gln Ala Ala Ala Lys Ala Thr Tyr Pro Ser Leu Leu Gly 245 250 255 Leu Glu Ala Ser Arg Gln Lys Ala Glu Glu Leu Ile Gln Ser Ala Lys 260 265 270 Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Gly Ser Gln Ala Glu Pro Leu Leu Ala Leu 275 280 285 Ala Asp Phe Ile Thr Arg Arg Gln His 290 295 <210> 50 <211> 371 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 50 Met Ala Ser Val Thr Leu Gly Ser Trp Ile Val Val His His His Asn 1 5 10 15 His His His Pro Ser Ser Ile Leu Thr Lys Ser Arg Ser Arg Ser Cys 20 25 30 Pro Ile Thr Leu Thr Lys Pro Ile Ser Phe Arg Ser Lys Arg Thr Val 35 40 45 Ser Ser Ser Ser Ser Ile Val Ser Ser Ser Val Val Thr Lys Glu Asp 50 55 60 Asn Leu Arg Gln Ser Glu Pro Ser Ser Phe Asp Phe Met Ser Tyr Ile 65 70 75 80 Ile Thr Lys Ala Glu Leu Val Asn Lys Ala Leu Asp Ser Ala Val Pro 85 90 95 Leu Arg Glu Pro Leu Lys Ile His Glu Ala Met Arg Tyr Ser Leu Leu 100 105 110 Ala Gly Gly Lys Arg Val Arg Pro Val Leu Cys Ile Ala Ala Cys Glu 115 120 125 Leu Val Gly Gly Glu Glu Ser Thr Ala Met Pro Ala Ala Cys Ala Val 130 135 140 Glu Met Ile His Thr Met Ser Leu Ile His Asp Asp Leu Pro Cys Met 145 150 155 160 Asp Asn Asp Asp Leu Arg Arg Gly Lys Pro Thr Asn His Lys Val Phe 165 170 175 Gly Glu Asp Val Ala Val Leu Ala Gly Asp Ala Leu Leu Ser Phe Ala 180 185 190 Phe Glu His Leu Ala Ser Ala Thr Ser Ser Asp Val Val Ser Pro Val 195 200 205 Arg Val Val Arg Ala Val Gly Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Thr Glu 210 215 220 Gly Leu Val Ala Gly Gln Val Val Asp Ile Ser Ser Glu Gly Leu Asp 225 230 235 240 Leu Asn Asp Val Gly Leu Glu His Leu Glu Phe Ile His Leu His Lys 245 250 255 Thr Ala Ala Leu Leu Glu Ala Ser Ala Val Leu Gly Ala Ile Val Gly 260 265 270 Gly Gly Ser Asp Asp Glu Ile Glu Arg Leu Arg Lys Phe Ala Arg Cys 275 280 285 Ile Gly Leu Leu Phe Gln Val Val Asp Asp Ile Leu Asp Val Thr Lys 290 295 300 Ser Ser Lys Glu Leu Gly Lys Thr Ala Gly Lys Asp Leu Ile Ala Asp 305 310 315 320 Lys Leu Thr Tyr Pro Lys Ile Met Gly Leu Glu Lys Ser Arg Glu Phe 325 330 335 Ala Glu Lys Leu Asn Arg Glu Ala Arg Asp Gln Leu Leu Gly Phe Asp 340 345 350 Ser Asp Lys Val Ala Pro Leu Leu Ala Leu Ala Asn Tyr Ile Ala Tyr 355 360 365 Arg Gln Asn 370 <210> 51 <211> 462 <212> PRT <213> Oryza sativa <400> 51 Met Asp Ser Gly Tyr Ser Ser Ser Tyr Ala Ala Ala Ala Gly Met His 1 5 10 15 Val Val Ile Cys Pro Trp Leu Ala Phe Gly His Leu Leu Pro Cys Leu 20 25 30 Asp Leu Ala Gln Arg Leu Ala Ser Arg Gly His Arg Val Ser Phe Val 35 40 45 Ser Thr Pro Arg Asn Ile Ser Arg Leu Pro Pro Val Arg Pro Ala Leu 50 55 60 Ala Pro Leu Val Ala Phe Val Ala Leu Pro Leu Pro Arg Val Glu Gly 65 70 75 80 Leu Pro Asp Gly Ala Glu Ser Thr Asn Asp Val Pro His Asp Arg Pro 85 90 95 Asp Met Val Glu Leu His Arg Arg Ala Phe Asp Gly Leu Ala Ala Pro 100 105 110 Phe Ser Glu Phe Leu Gly Thr Ala Cys Ala Asp Trp Val Ile Val Asp 115 120 125 Val Phe His His Trp Ala Ala Ala Ala Ala Leu Glu His Lys Val Pro 130 135 140 Cys Ala Met Met Leu Leu Gly Ser Ala His Met Ile Ala Ser Ile Ala 145 150 155 160 Asp Arg Arg Leu Glu Arg Ala Glu Thr Glu Ser Pro Ala Ala Ala Gly 165 170 175 Gln Gly Arg Pro Ala Ala Ala Pro Thr Phe Glu Val Ala Arg Met Lys 180 185 190 Leu Ile Arg Thr Lys Gly Ser Ser Gly Met Ser Leu Ala Glu Arg Phe 195 200 205 Ser Leu Thr Leu Ser Arg Ser Ser Leu Val Val Gly Arg Ser Cys Val 210 215 220 Glu Phe Glu Pro Glu Thr Val Pro Leu Leu Ser Thr Leu Arg Gly Lys 225 230 235 240 Pro Ile Thr Phe Leu Gly Leu Met Pro Pro Leu His Glu Gly Arg Arg 245 250 255 Glu Asp Gly Glu Asp Ala Thr Val Arg Trp Leu Asp Ala Gln Pro Ala 260 265 270 Lys Ser Val Val Tyr Val Ala Leu Gly Ser Glu Val Pro Leu Gly Val 275 280 285 Glu Lys Val His Glu Leu Ala Leu Gly Leu Glu Leu Ala Gly Thr Arg 290 295 300 Phe Leu Trp Ala Leu Arg Lys Pro Thr Gly Val Ser Asp Ala Asp Leu 305 310 315 320 Leu Pro Ala Gly Phe Glu Glu Arg Thr Arg Gly Arg Gly Val Val Ala 325 330 335 Thr Arg Trp Val Pro Gln Met Ser Ile Leu Ala His Ala Ala Val Gly 340 345 350 Ala Phe Leu Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Thr Ile Glu Gly Leu Met 355 360 365 Phe Gly His Pro Leu Ile Met Leu Pro Ile Phe Gly Asp Gln Gly Pro 370 375 380 Asn Ala Arg Leu Ile Glu Ala Lys Asn Ala Gly Leu Gln Val Ala Arg 385 390 395 400 Asn Asp Gly Asp Gly Ser Phe Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ala Ile 405 410 415 Arg Ala Val Ala Val Glu Glu Glu Ser Ser Lys Val Phe Gln Ala Lys 420 425 430 Ala Lys Lys Leu Gln Glu Ile Val Ala Asp Met Ala Cys His Glu Arg 435 440 445 Tyr Ile Asp Gly Phe Ile Gln Gln Leu Arg Ser Tyr Lys Asp 450 455 460 <210> 52 <211> 1389 <212> DNA <213> Oryza sativa <400> 52 atggactccg gctactcctc ctcctacgcc gccgccgccg ggatgcacgt cgtgatctgc 60 ccgtggctcg ccttcggcca cctgctcccg tgcctcgacc tcgcccagcg cctcgcgtcg 120 cggggccacc gcgtgtcgtt cgtctccacg ccgcggaaca tatcccgcct cccgccggtg 180 cgccccgcgc tcgcgccgct cgtcgccttc gtggcgctgc cgctcccgcg cgtcgagggg 240 ctccccgacg gcgccgagtc caccaacgac gtcccccacg acaggccgga catggtcgag 300 ctccaccgga gggccttcga cgggctcgcc gcgcccttct cggagttctt gggcaccgcg 360 tgcgccgact gggtcatcgt cgacgtcttc caccactggg ccgcagccgc cgctctcgag 420 cacaaggtgc catgtgcaat gatgttgttg ggctctgcac atatgatcgc ttccatagca 480 gacagacggc tcgagcgcgc ggagacagag tcgcctgcgg ctgccgggca gggacgccca 540 gcggcggcgc caacgttcga ggtggcgagg atgaagttga tacgaaccaa aggctcatcg 600 ggaatgtccc tcgccgagcg cttctccttg acgctctcga ggagcagcct cgtcgtcggg 660 cggagctgcg tggagttcga gccggagacc gtcccgctcc tgtcgacgct ccgcggtaag 720 cctattacct tccttggcct tatgccgccg ttgcatgaag gccgccgcga ggacggcgag 780 gatgccaccg tccgctggct cgacgcgcag ccggccaagt ccgtcgtgta cgtcgcgcta 840 ggcagcgagg tgccactggg agtggagaag gtccacgagc tcgcgctcgg gctggagctc 900 gccgggacgc gcttcctctg ggctcttagg aagcccactg gcgtctccga cgccgacctc 960 ctccccgccg gcttcgagga gcgcacgcgc ggccgcggcg tcgtggcgac gagatgggtt 1020 cctcagatga gcatactggc gcacgccgcc gtgggcgcgt tcctgaccca ctgcggctgg 1080 aactcgacca tcgaggggct catgttcggc cacccgctta tcatgctgcc gatcttcggc 1140 gaccagggac cgaacgcgcg gctaatcgag gcgaagaacg ccggattgca ggtggcaaga 1200 aacgacggcg atggatcgtt cgaccgagaa ggcgtcgcgg cggcgattcg tgcagtcgcg 1260 gtggaggaag aaagcagcaa agtgtttcaa gccaaagcca agaagctgca ggagatcgtc 1320 gcggacatgg cctgccatga gaggtacatc gacggattca ttcagcaatt gagatcttac 1380 aaggattga 1389 <210> 53 <211> 1389 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized Oryza sativa sequence encoding EUGT11 <400> 53 atggatagtg gctactcctc atcttatgct gctgccgctg gtatgcacgt tgtgatctgc 60 ccttggttgg cctttggtca cctgttacca tgtctggatt tagcccaaag actggcctca 120 agaggccata gagtatcatt tgtgtctact cctagaaata tctctcgttt accaccagtc 180 agacctgctc tagctcctct agttgcattc gttgctcttc cacttccaag agtagaagga 240 ttgccagacg gcgctgaatc tactaatgac gtaccacatg atagacctga catggtcgaa 300 ttgcatagaa gagcctttga tggattggca gctccatttt ctgagttcct gggcacagca 360 tgtgcagact gggttatagt cgatgtattt catcactggg ctgctgcagc cgcattggaa 420 cataaggtgc cttgtgctat gatgttgtta gggtcagcac acatgatcgc atccatagct 480 gatagaagat tggaaagagc tgaaacagaa tccccagccg cagcaggaca aggtaggcca 540 gctgccgccc caacctttga agtggctaga atgaaattga ttcgtactaa aggtagttca 600 gggatgagtc ttgctgaaag gttttctctg acattatcta gatcatcatt agttgtaggt 660 agatcctgcg tcgagttcga acctgaaaca gtacctttac tatctacttt gagaggcaaa 720 cctattactt tccttggtct aatgcctcca ttacatgaag gaaggagaga agatggtgaa 780 gatgctactg ttaggtggtt agatgcccaa cctgctaagt ctgttgttta cgttgcattg 840 ggttctgagg taccactagg ggtggaaaag gtgcatgaat tagcattagg acttgagctg 900 gccggaacaa gattcctttg ggctttgaga aaaccaaccg gtgtttctga cgccgacttg 960 ctaccagctg ggttcgaaga gagaacaaga ggccgtggtg tcgttgctac tagatgggtc 1020 ccacaaatga gtattctagc tcatgcagct gtaggggcct ttctaaccca ttgcggttgg 1080 aactcaacaa tagaaggact gatgtttggt catccactta ttatgttacc aatctttggc 1140 gatcagggac ctaacgcaag attgattgag gcaaagaacg caggtctgca ggttgcacgt 1200 aatgatggtg atggttcctt tgatagagaa ggcgttgcag ctgccatcag agcagtcgcc 1260 gttgaggaag agtcatctaa agttttccaa gctaaggcca aaaaattaca agagattgtg 1320 gctgacatgg cttgtcacga aagatacatc gatggtttca tccaacaatt gagaagttat 1380 aaagactaa 1389 <210> 54 <211> 473 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> UGT91D2e <400> 54 Met Ala Thr Ser Asp Ser Ile Val Asp Asp Arg Lys Gln Leu His Val 1 5 10 15 Ala Thr Phe Pro Trp Leu Ala Phe Gly His Ile Leu Pro Tyr Leu Gln 20 25 30 Leu Ser Lys Leu Ile Ala Glu Lys Gly His Lys Val Ser Phe Leu Ser 35 40 45 Thr Thr Arg Asn Ile Gln Arg Leu Ser Ser His Ile Ser Pro Leu Ile 50 55 60 Asn Val Val Gln Leu Thr Leu Pro Arg Val Gln Glu Leu Pro Glu Asp 65 70 75 80 Ala Glu Ala Thr Thr Asp Val His Pro Glu Asp Ile Pro Tyr Leu Lys 85 90 95 Lys Ala Ser Asp Gly Leu Gln Pro Glu Val Thr Arg Phe Leu Glu Gln 100 105 110 His Ser Pro Asp Trp Ile Ile Tyr Asp Tyr Thr His Tyr Trp Leu Pro 115 120 125 Ser Ile Ala Ala Ser Leu Gly Ile Ser Arg Ala His Phe Ser Val Thr 130 135 140 Thr Pro Trp Ala Ile Ala Tyr Met Gly Pro Ser Ala Asp Ala Met Ile 145 150 155 160 Asn Gly Ser Asp Gly Arg Thr Thr Val Glu Asp Leu Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Lys Trp Phe Pro Phe Pro Thr Lys Val Cys Trp Arg Lys His Asp Leu 180 185 190 Ala Arg Leu Val Pro Tyr Lys Ala Pro Gly Ile Ser Asp Gly Tyr Arg 195 200 205 Met Gly Leu Val Leu Lys Gly Ser Asp Cys Leu Leu Ser Lys Cys Tyr 210 215 220 His Glu Phe Gly Thr Gln Trp Leu Pro Leu Leu Glu Thr Leu His Gln 225 230 235 240 Val Pro Val Val Pro Val Gly Leu Leu Pro Pro Glu Ile Pro Gly Asp 245 250 255 Glu Lys Asp Glu Thr Trp Val Ser Ile Lys Lys Trp Leu Asp Gly Lys 260 265 270 Gln Lys Gly Ser Val Val Tyr Val Ala Leu Gly Ser Glu Val Leu Val 275 280 285 Ser Gln Thr Glu Val Val Glu Leu Ala Leu Gly Leu Glu Leu Ser Gly 290 295 300 Leu Pro Phe Val Trp Ala Tyr Arg Lys Pro Lys Gly Pro Ala Lys Ser 305 310 315 320 Asp Ser Val Glu Leu Pro Asp Gly Phe Val Glu Arg Thr Arg Asp Arg 325 330 335 Gly Leu Val Trp Thr Ser Trp Ala Pro Gln Leu Arg Ile Leu Ser His 340 345 350 Glu Ser Val Cys Gly Phe Leu Thr His Cys Gly Ser Gly Ser Ile Val 355 360 365 Glu Gly Leu Met Phe Gly His Pro Leu Ile Met Leu Pro Ile Phe Gly 370 375 380 Asp Gln Pro Leu Asn Ala Arg Leu Leu Glu Asp Lys Gln Val Gly Ile 385 390 395 400 Glu Ile Pro Arg Asn Glu Glu Asp Gly Cys Leu Thr Lys Glu Ser Val 405 410 415 Ala Arg Ser Leu Arg Ser Val Val Val Glu Lys Glu Gly Glu Ile Tyr 420 425 430 Lys Ala Asn Ala Arg Glu Leu Ser Lys Ile Tyr Asn Asp Thr Lys Val 435 440 445 Glu Lys Glu Tyr Val Ser Gln Phe Val Asp Tyr Leu Glu Lys Asn Ala 450 455 460 Arg Ala Val Ala Ile Asp His Glu Ser 465 470 <210> 55 <211> 473 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> UGT91D2m <400> 55 Met Ala Thr Ser Asp Ser Ile Val Asp Asp Arg Lys Gln Leu His Val 1 5 10 15 Ala Thr Phe Pro Trp Leu Ala Phe Gly His Ile Leu Pro Tyr Leu Gln 20 25 30 Leu Ser Lys Leu Ile Ala Glu Lys Gly His Lys Val Ser Phe Leu Ser 35 40 45 Thr Thr Arg Asn Ile Gln Arg Leu Ser Ser His Ile Ser Pro Leu Ile 50 55 60 Asn Val Val Gln Leu Thr Leu Pro Arg Val Gln Glu Leu Pro Glu Asp 65 70 75 80 Ala Glu Ala Thr Thr Asp Val His Pro Glu Asp Ile Pro Tyr Leu Lys 85 90 95 Lys Ala Ser Asp Gly Leu Gln Pro Glu Val Thr Arg Phe Leu Glu Gln 100 105 110 His Ser Pro Asp Trp Ile Ile Tyr Asp Tyr Thr His Tyr Trp Leu Pro 115 120 125 Ser Ile Ala Ala Ser Leu Gly Ile Ser Arg Ala His Phe Ser Val Thr 130 135 140 Thr Pro Trp Ala Ile Ala Tyr Met Gly Pro Ser Ala Asp Ala Met Ile 145 150 155 160 Asn Gly Ser Asp Gly Arg Thr Thr Val Glu Asp Leu Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Lys Trp Phe Pro Phe Pro Thr Lys Val Cys Trp Arg Lys His Asp Leu 180 185 190 Ala Arg Leu Val Pro Tyr Lys Ala Pro Gly Ile Ser Asp Gly Tyr Arg 195 200 205 Met Gly Leu Val Leu Lys Gly Ser Asp Cys Leu Leu Ser Lys Cys Tyr 210 215 220 His Glu Phe Gly Thr Gln Trp Leu Pro Leu Leu Glu Thr Leu His Gln 225 230 235 240 Val Pro Val Val Pro Val Gly Leu Leu Pro Pro Glu Val Pro Gly Asp 245 250 255 Glu Lys Asp Glu Thr Trp Val Ser Ile Lys Lys Trp Leu Asp Gly Lys 260 265 270 Gln Lys Gly Ser Val Val Tyr Val Ala Leu Gly Ser Glu Val Leu Val 275 280 285 Ser Gln Thr Glu Val Val Glu Leu Ala Leu Gly Leu Glu Leu Ser Gly 290 295 300 Leu Pro Phe Val Trp Ala Tyr Arg Lys Pro Lys Gly Pro Ala Lys Ser 305 310 315 320 Asp Ser Val Glu Leu Pro Asp Gly Phe Val Glu Arg Thr Arg Asp Arg 325 330 335 Gly Leu Val Trp Thr Ser Trp Ala Pro Gln Leu Arg Ile Leu Ser His 340 345 350 Glu Ser Val Cys Gly Phe Leu Thr His Cys Gly Ser Gly Ser Ile Val 355 360 365 Glu Gly Leu Met Phe Gly His Pro Leu Ile Met Leu Pro Ile Phe Gly 370 375 380 Asp Gln Pro Leu Asn Ala Arg Leu Leu Glu Asp Lys Gln Val Gly Ile 385 390 395 400 Glu Ile Pro Arg Asn Glu Glu Asp Gly Cys Leu Thr Lys Glu Ser Val 405 410 415 Ala Arg Ser Leu Arg Ser Val Val Val Glu Lys Glu Gly Glu Ile Tyr 420 425 430 Lys Ala Asn Ala Arg Glu Leu Ser Lys Ile Tyr Asn Asp Thr Lys Val 435 440 445 Glu Lys Glu Tyr Val Ser Gln Phe Val Asp Tyr Leu Glu Lys Asn Thr 450 455 460 Arg Ala Val Ala Ile Asp His Glu Ser 465 470 <210> 56 <211> 459 <212> PRT <213> Ipomoea purpurea <400> 56 Met Gly Ser Gln Ala Thr Thr Tyr His Met Ala Met Tyr Pro Trp Phe 1 5 10 15 Gly Val Gly His Leu Thr Gly Phe Phe Arg Leu Ala Asn Lys Leu Ala 20 25 30 Gly Lys Gly His Arg Ile Ser Phe Leu Ile Pro Lys Asn Thr Gln Ser 35 40 45 Lys Leu Glu Ser Phe Asn Leu His Pro His Leu Ile Ser Phe Val Pro 50 55 60 Ile Val Val Pro Ser Ile Pro Gly Leu Pro Pro Gly Ala Glu Thr Thr 65 70 75 80 Ser Asp Val Pro Phe Pro Ser Thr His Leu Leu Met Glu Ala Met Asp 85 90 95 Lys Thr Gln Asn Asp Ile Glu Ile Ile Leu Lys Asp Leu Lys Val Asp 100 105 110 Val Val Phe Tyr Asp Phe Thr His Trp Leu Pro Ser Leu Ala Arg Lys 115 120 125 Ile Gly Ile Lys Ser Val Phe Tyr Ser Thr Ile Ser Pro Leu Met His 130 135 140 Gly Tyr Ala Leu Ser Pro Glu Arg Arg Val Val Gly Lys Gln Leu Thr 145 150 155 160 Glu Ala Asp Met Met Lys Ala Pro Ala Ser Phe Pro Asp Pro Ser Ile 165 170 175 Lys Leu His Ala His Glu Ala Arg Gly Phe Thr Ala Arg Thr Val Met 180 185 190 Lys Phe Gly Gly Asp Ile Thr Phe Phe Asp Arg Ile Phe Thr Ala Val 195 200 205 Ser Glu Ser Asp Gly Leu Ala Tyr Ser Thr Cys Arg Glu Ile Glu Gly 210 215 220 Gln Phe Cys Asp Tyr Ile Glu Thr Gln Phe Gln Lys Pro Val Leu Leu 225 230 235 240 Ala Gly Pro Ala Leu Pro Val Pro Ser Lys Ser Thr Met Glu Gln Lys 245 250 255 Trp Ser Asp Trp Leu Gly Lys Phe Lys Glu Gly Ser Val Ile Tyr Cys 260 265 270 Ala Phe Gly Ser Glu Cys Thr Leu Arg Lys Asp Lys Phe Gln Glu Leu 275 280 285 Leu Trp Gly Leu Glu Leu Thr Gly Met Pro Phe Phe Ala Ala Leu Lys 290 295 300 Pro Pro Phe Glu Thr Glu Ser Val Glu Ala Ala Ile Pro Glu Glu Leu 305 310 315 320 Lys Glu Lys Ile Gln Gly Arg Gly Ile Val His Gly Glu Trp Val Gln 325 330 335 Gln Gln Leu Phe Leu Gln His Pro Ser Val Gly Cys Phe Val Ser His 340 345 350 Cys Gly Trp Ala Ser Leu Ser Glu Ala Leu Val Asn Asp Cys Gln Ile 355 360 365 Val Leu Leu Pro Gln Val Gly Asp Gln Ile Ile Asn Ala Arg Ile Met 370 375 380 Ser Val Ser Leu Lys Val Gly Val Glu Val Glu Lys Gly Glu Glu Asp 385 390 395 400 Gly Val Phe Ser Arg Glu Ser Val Cys Lys Ala Val Lys Ala Val Met 405 410 415 Asp Glu Lys Ser Glu Ile Gly Arg Glu Val Arg Gly Asn His Asp Lys 420 425 430 Leu Arg Gly Phe Leu Met Asn Ala Asp Leu Asp Ser Lys Tyr Met Asp 435 440 445 Ser Phe Asn Gln Lys Leu Gln Asp Leu Leu Gly 450 455 <210> 57 <211> 1380 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized I. purpurea IP3GGT nucleotide sequence <400> 57 atgggttctc aagctacaac ttaccatatg gccatgtatc catggtttgg ggttggacat 60 ttgactggtt tcttccgttt ggcaaacaaa ttagctggca aaggacatag aatctcattt 120 ctaattccta aaaacactca atctaagtta gaatctttca accttcatcc acacttaatc 180 tcttttgtgc ctatcgttgt cccaagtata ccaggcctgc cacctggtgc agagactaca 240 tcagatgttc ctttcccaag tacacatttg ctaatggaag caatggacaa gactcaaaac 300 gatatagaga ttatcctgaa ggatcttaaa gtagatgttg ttttctatga ttttactcac 360 tggttgcctt ctctggccag aaagattggc attaagagtg tcttttactc caccatttct 420 cctttaatgc atggatatgc tttatcacca gaaagacgtg tagttggtaa gcaattgaca 480 gaggcagata tgatgaaggc cccagcttct ttcccagacc catccattaa gctacatgca 540 catgaagcta ggggttttac agccagaacc gttatgaaat tcggtggtga catcaccttt 600 ttcgatagaa tattcacagc agtttccgaa agtgatggcc tggcctactc tacttgtaga 660 gagatcgagg gacaattctg tgattacatt gaaacacaat tccagaagcc agtcttgtta 720 gccggtccag ctttgccagt cccatccaaa tccactatgg aacaaaagtg gtcagattgg 780 ttggggaaat tcaaggaagg ctccgtcatc tactgtgctt tcgggtctga atgtacattg 840 agaaaggaca aatttcagga acttttatgg ggtttggaat tgacaggaat gcctttcttc 900 gctgctctga agccaccttt tgagactgag tctgttgagg ctgctatccc tgaggaacta 960 aaggaaaaga ttcagggaag aggtatagta catggagaat gggtacaaca acaattgttt 1020 cttcaacacc catctgtcgg gtgcttcgtt tctcactgcg gctgggcaag tttatctgaa 1080 gcccttgtta atgattgtca aatcgtgtta cttccacaag ttggcgatca gattatcaac 1140 gccagaataa tgtcagtatc acttaaagtg ggcgtggaag ttgaaaaggg tgaggaggac 1200 ggtgtctttt caagagaatc tgtgtgcaag gctgttaaag cagtaatgga tgaaaaatct 1260 gaaatcggta gagaagtcag aggtaatcat gataaactga ggggtttctt gatgaatgca 1320 gacttagatt caaagtacat ggattcattc aatcaaaagc tacaagattt gctaggttaa 1380 <210> 58 <211> 438 <212> PRT <213> Bellis perennis <400> 58 Met Asp Ser Lys Ile Asp Ser Lys Thr Phe Arg Val Val Met Leu Pro 1 5 10 15 Trp Leu Ala Tyr Ser His Ile Ser Ser Phe Leu Val Phe Ala Lys Arg 20 25 30 Leu Thr Asn His Asn Phe His Ile Tyr Ile Cys Ser Ser Gln Thr Asn 35 40 45 Met Gln Tyr Leu Lys Asn Asn Leu Thr Ser Gln Tyr Ser Lys Ser Ile 50 55 60 Gln Leu Ile Glu Leu Asn Leu Pro Ser Ser Ser Glu Leu Pro Leu Gln 65 70 75 80 Tyr His Thr Thr His Gly Leu Pro Pro His Leu Thr Lys Thr Leu Ser 85 90 95 Asp Asp Tyr Gln Lys Ser Gly Pro Asp Phe Glu Thr Ile Leu Ile Lys 100 105 110 Leu Asn Pro His Leu Val Ile Tyr Asp Phe Asn Gln Leu Trp Ala Pro 115 120 125 Glu Val Ala Ser Thr Leu His Ile Pro Ser Ile Gln Leu Leu Ser Gly 130 135 140 Cys Val Ala Leu Tyr Ala Leu Asp Ala His Leu Tyr Thr Lys Pro Leu 145 150 155 160 Asp Glu Asn Leu Ala Lys Phe Pro Phe Pro Glu Ile Tyr Pro Lys Asn 165 170 175 Arg Asp Ile Pro Lys Gly Gly Ser Lys Tyr Ile Glu Arg Phe Val Asp 180 185 190 Cys Met Arg Arg Ser Cys Glu Ile Ile Leu Val Arg Ser Thr Met Glu 195 200 205 Leu Glu Gly Lys Tyr Ile Asp Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Gly Lys Lys 210 215 220 Val Leu Pro Val Gly Pro Leu Val Gln Glu Ala Ser Leu Leu Gln Asp 225 230 235 240 Asp His Ile Trp Ile Met Lys Trp Leu Asp Lys Lys Glu Glu Ser Ser 245 250 255 Val Val Phe Val Cys Phe Gly Ser Glu Tyr Ile Leu Ser Asp Asn Glu 260 265 270 Ile Glu Asp Ile Ala Tyr Gly Leu Glu Leu Ser Gln Val Ser Phe Val 275 280 285 Trp Ala Ile Arg Ala Lys Thr Ser Ala Leu Asn Gly Phe Ile Asp Arg 290 295 300 Val Gly Asp Lys Gly Leu Val Ile Asp Lys Trp Val Pro Gln Ala Asn 305 310 315 320 Ile Leu Ser His Ser Ser Thr Gly Gly Phe Ile Ser His Cys Gly Trp 325 330 335 Ser Ser Thr Met Glu Ser Ile Arg Tyr Gly Val Pro Ile Ile Ala Met 340 345 350 Pro Met Gln Phe Asp Gln Pro Tyr Asn Ala Arg Leu Met Glu Thr Val 355 360 365 Gly Ala Gly Ile Glu Val Gly Arg Asp Gly Glu Gly Arg Leu Lys Arg 370 375 380 Glu Glu Ile Ala Ala Val Val Arg Lys Val Val Val Glu Asp Ser Gly 385 390 395 400 Glu Ser Ile Arg Glu Lys Ala Lys Glu Leu Gly Glu Ile Met Lys Lys 405 410 415 Asn Met Glu Ala Glu Val Asp Gly Ile Val Ile Glu Asn Leu Val Lys 420 425 430 Leu Cys Glu Met Asn Asn 435 <210> 59 <211> 1317 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized Bellis perennis UGT94B1 nucleotide sequence <400> 59 atggattcta aaatcgattc aaagacattc agagtcgtta tgttgccttg gcttgcatac 60 tcacacattt catcattcct agtgtttgcc aagagactaa caaatcataa cttccacatc 120 tacatttgtt cctctcaaac aaatatgcaa tacctgaaaa acaacttgac gtctcagtat 180 tcaaaatcta tacaactgat tgagttgaat cttccatcta gttccgaatt gcctctgcag 240 tatcatacta ctcacggact accaccacac cttacgaaaa cattgtctga tgattatcaa 300 aagtccggac ctgactttga aaccattttg atcaaattga acccacatct ggtaatctac 360 gactttaatc aactttgggc tccagaggtt gctagtacac ttcatattcc atccatacag 420 ttactgtctg gttgcgtcgc cttatatgcc ttagacgccc atctgtacac aaagccacta 480 gacgaaaact tggctaagtt tcctttccca gaaatctatc ctaaaaacag agatattcct 540 aagggaggta gtaaatacat cgaaaggttc gtagactgta tgagaagatc ttgtgaaatc 600 atattagtca gaagtaccat ggaacttgaa ggaaaataca ttgattactt gtctaagaca 660 ttagggaaaa aggtgttgcc agtagggcct ctggtgcaag aggcttcttt gttgcaagat 720 gatcatatat ggattatgaa gtggttagac aaaaaggagg agtcatccgt cgtgtttgtt 780 tgttttggtt ctgagtacat cttatcagac aacgaaatag aagatattgc ttatggccta 840 gagttgtccc aagtaagttt cgtttgggca ataagagcta agacttctgc cttaaatggc 900 ttcattgata gagtgggtga taaaggctta gtcatcgata aatgggttcc acaggctaac 960 atcttatctc actcttctac tggtggattc attagtcatt gcggttggtc atcaacaatg 1020 gaatctatta gatatggggt tcctattatc gccatgccaa tgcaattcga tcaaccttac 1080 aatgctaggt tgatggaaac tgttggtgca ggtatcgaag ttggcagaga tggcgaaggt 1140 agattgaaaa gagaagagat tgctgccgtg gttagaaagg tcgttgttga agattctggg 1200 gaatccataa gggagaaggc aaaggaattg ggagaaatca tgaaaaaaaa catggaggcc 1260 gaagtagatg gtatagtgat tgaaaatcta gttaagctat gtgagatgaa caattaa 1317 <210> 60 <211> 440 <212> PRT <213> Leishmania infantum <400> 60 Met His Ser Thr Arg His Ile Leu Arg Gln Arg Ala Val Leu Val Thr 1 5 10 15 Gly Ala Arg Thr Pro Phe Val Lys Ser Phe Gly Ala Leu Met Lys Ala 20 25 30 Asp Thr Leu Glu Leu Ala Ser Ala Ser Val Ala Gly Leu Leu Asn Lys 35 40 45 Thr Ser Leu Asp Pro Arg Asp Ile Asp His Ile Val Trp Gly Asn Val 50 55 60 Val Leu Gln Gly Ser Ala His Asn Cys Ala Arg Glu Ile Val Ile Asp 65 70 75 80 Leu Asn Met Pro Lys Lys Ile Ile Gly Asn Leu Thr Ser Met Ala Cys 85 90 95 Ala Ser Gly Leu Ser Ser Leu Ser Gln Ala Cys Met Leu Ile Glu Gly 100 105 110 Gly His Ala Asp Val Val Ile Ala Gly Gly Ser Asp Ser Val Ser Asn 115 120 125 Thr Glu Val Pro Leu Pro Arg Ser Val Thr Tyr Gly Leu Met Met Ala 130 135 140 Gln Arg Lys Gly Val Met Gly Phe Phe Lys Glu Ala Gly Tyr Asn Pro 145 150 155 160 Phe Lys Trp Phe Pro Gly Gly Ile Ala Leu Thr Glu Arg Ser Thr Gly 165 170 175 Lys Thr Met Gly Trp His Gly Asp Leu Ile Ala Glu Leu Asn Ser Ile 180 185 190 Ser Arg Asp Asp Gln Glu Ala Leu Ala Val Ala Ser His Ala Asn Ala 195 200 205 Ala Arg Ala Glu Lys Ala Gly Tyr Phe Lys Glu Glu Ile Val Pro Val 210 215 220 Thr Ile Asp Lys Lys Gly Lys Lys Thr Glu Val Thr Cys Asp Asp Val 225 230 235 240 Met Gln Arg Asp Thr Glu Lys Met Lys Ala Lys Met Pro Ser Leu Lys 245 250 255 Pro Val Phe Arg Lys Glu Gly Gly Thr Ile Thr Ala Ala Thr Ser Ser 260 265 270 Thr Leu Thr Asp Gly Gly Ser Ala Met Leu Val Met Ser Glu Glu Lys 275 280 285 Ala Lys Lys Leu Gly Tyr Pro Thr Asp Val Cys Val Lys Ser Trp Tyr 290 295 300 Phe Ser Gly Ile Asp Pro Tyr Pro Gln Leu Leu Leu Ala Pro Val Leu 305 310 315 320 Gly Trp Gly Pro Ala Leu Lys Lys Ala Gly Leu Thr Pro Lys Asp Ile 325 330 335 Asp Leu Tyr Glu Ile His Glu Ala Phe Ala Ala Gln Val Leu Ala Thr 340 345 350 Ile Lys Cys Leu Lys Ser Gln Glu Phe Phe Asp Arg Tyr Ala Asn Gly 355 360 365 Ala Lys Pro Val Leu Thr Glu Asp Ile Asp Leu Ser Lys Leu Asn Val 370 375 380 Asn Gly Gly Ser Leu Ala Leu Gly His Pro Phe Ala Ala Thr Gly Gly 385 390 395 400 Arg Ile Val Ile Ser Leu Ala Asn Glu Leu Arg Arg Ser Gly Lys Arg 405 410 415 His Gly Leu Val Ser Ile Cys Ala Ala Gly Gly Leu Gly Gly Val Ala 420 425 430 Ile Leu Glu His Thr Ala Ser Lys 435 440 <210> 61 <211> 1323 <212> DNA <213> Leishmania infantum <400> 61 atgcactcga ctcgccatat tttgcgtcaa cgagcggtcc tcgtcaccgg ggcgaggacg 60 ccgtttgtca agtcctttgg ggctctgatg aaggcagaca cgctggagct ggcgagtgca 120 tccgtagccg gtctcctcaa caagacgtcg ctggatccca gagacattga ccacattgtg 180 tggggcaacg tggtgcttca aggaagcgct cacaactgcg cgcgcgagat agtgattgat 240 ctgaacatgc cgaagaagat catcggcaat ctcacaagca tggcatgcgc gagtggactt 300 agctcgctct cgcaggcatg catgctgatc gagggtgggc atgctgatgt cgttattgcc 360 ggtgggagcg acagtgtgag caatacagag gtcccactgc cacgctccgt gacgtacggg 420 ctgatgatgg cccagaggaa gggcgtcatg ggcttcttca aggaagcggg ctacaatccg 480 ttcaagtggt ttccgggcgg cattgcgctg acagagcgga gcactggaaa gaccatgggg 540 tggcacgggg atctcattgc ggagctcaac agcatctcgc gcgacgacca ggaggctctg 600 gcggtggctt cgcacgctaa tgccgcccgg gctgaaaagg cggggtactt caaagaggaa 660 attgtccctg tcacgattga taagaaaggt aagaagaccg aggtgacctg cgacgacgtt 720 atgcagcgcg acactgagaa aatgaaagcc aaaatgccaa gcctcaagcc cgtttttcga 780 aaggagggag gaaccatcac ggctgccacg tcaagcacct tgacagatgg aggtagcgcg 840 atgctcgtca tgtctgagga gaaggcgaag aagcttggat acccgaccga tgtttgtgtc 900 aagagctggt acttctccgg aattgatcct tatccgcagc tccttctcgc acctgttctg 960 ggctggggcc cagcgctgaa gaaggcgggc ctgacgccga aggacatcga tctctacgag 1020 atccacgaag cctttgcggc tcaggtgctc gcgacgatca agtgcctgaa gtcgcaggag 1080 ttctttgacc ggtacgctaa cggcgccaaa cctgttctaa cggaagacat cgacttgtcg 1140 aagctgaacg tgaatggcgg gtccctggca ctgggtcacc cgttcgctgc aactggtggt 1200 cggattgtga cctcgcttgc caatgagctg cgacggtccg gcaagcgcca tggccttgtg 1260 agcatttgcg ctgctggcgg tctcggcggc gttgctattc tagagcacac tgccagtaag 1320 tag 1323 <210> 62 <211> 527 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> truncated Saccharomyces cerevisiae HMG <400> 62 Met Ala Ala Asp Gln Leu Val Lys Thr Glu Val Thr Lys Lys Ser Phe 1 5 10 15 Thr Ala Pro Val Gln Lys Ala Ser Thr Pro Val Leu Thr Asn Lys Thr 20 25 30 Val Ile Ser Gly Ser Lys Val Lys Ser Leu Ser Ser Ala Gln Ser Ser 35 40 45 Ser Ser Gly Pro Ser Ser Ser Ser Glu Glu Asp Asp Ser Arg Asp Ile 50 55 60 Glu Ser Leu Asp Lys Lys Ile Arg Pro Leu Glu Glu Leu Glu Ala Leu 65 70 75 80 Leu Ser Ser Gly Asn Thr Lys Gln Leu Lys Asn Lys Glu Val Ala Ala 85 90 95 Leu Val Ile His Gly Lys Leu Pro Leu Tyr Ala Leu Glu Lys Lys Leu 100 105 110 Gly Asp Thr Thr Arg Ala Val Ala Val Arg Arg Lys Ala Leu Ser Ile 115 120 125 Leu Ala Glu Ala Pro Val Leu Ala Ser Asp Arg Leu Pro Tyr Lys Asn 130 135 140 Tyr Asp Tyr Asp Arg Val Phe Gly Ala Cys Cys Glu Asn Val Ile Gly 145 150 155 160 Tyr Met Pro Leu Pro Val Gly Val Ile Gly Pro Leu Val Ile Asp Gly 165 170 175 Thr Ser Tyr His Ile Pro Met Ala Thr Thr Glu Gly Cys Leu Val Ala 180 185 190 Ser Ala Met Arg Gly Cys Lys Ala Ile Asn Ala Gly Gly Gly Ala Thr 195 200 205 Thr Val Leu Thr Lys Asp Gly Met Thr Arg Gly Pro Val Val Arg Phe 210 215 220 Pro Thr Leu Lys Arg Ser Gly Ala Cys Lys Ile Trp Leu Asp Ser Glu 225 230 235 240 Glu Gly Gln Asn Ala Ile Lys Lys Ala Phe Asn Ser Thr Ser Arg Phe 245 250 255 Ala Arg Leu Gln His Ile Gln Thr Cys Leu Ala Gly Asp Leu Leu Phe 260 265 270 Met Arg Phe Arg Thr Thr Thr Gly Asp Ala Met Gly Met Asn Met Ile 275 280 285 Ser Lys Gly Val Glu Tyr Ser Leu Lys Gln Met Val Glu Glu Tyr Gly 290 295 300 Trp Glu Asp Met Glu Val Val Ser Val Ser Gly Asn Tyr Cys Thr Asp 305 310 315 320 Lys Lys Pro Ala Ala Ile Asn Trp Ile Glu Gly Arg Gly Lys Ser Val 325 330 335 Val Ala Glu Ala Thr Ile Pro Gly Asp Val Val Arg Lys Val Leu Lys 340 345 350 Ser Asp Val Ser Ala Leu Val Glu Leu Asn Ile Ala Lys Asn Leu Val 355 360 365 Gly Ser Ala Met Ala Gly Ser Val Gly Gly Phe Asn Ala His Ala Ala 370 375 380 Asn Leu Val Thr Ala Val Phe Leu Ala Leu Gly Gln Asp Pro Ala Gln 385 390 395 400 Asn Val Glu Ser Ser Asn Cys Ile Thr Leu Met Lys Glu Val Asp Gly 405 410 415 Asp Leu Arg Ile Ser Val Ser Met Pro Ser Ile Glu Val Gly Thr Ile 420 425 430 Gly Gly Gly Thr Val Leu Glu Pro Gln Gly Ala Met Leu Asp Leu Leu 435 440 445 Gly Val Arg Gly Pro His Ala Thr Ala Pro Gly Thr Asn Ala Arg Gln 450 455 460 Leu Ala Arg Ile Val Ala Cys Ala Val Leu Ala Gly Glu Leu Ser Leu 465 470 475 480 Cys Ala Ala Leu Ala Ala Gly His Leu Val Gln Ser His Met Thr His 485 490 495 Asn Arg Lys Pro Ala Glu Pro Thr Lys Pro Asn Asn Leu Asp Ala Thr 500 505 510 Asp Ile Asn Arg Leu Lys Asp Gly Ser Val Thr Cys Ile Lys Ser 515 520 525 <210> 63 <211> 1584 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic nucleotide sequence encoding truncated Saccharomyces cerevisiae HMG <400> 63 atggcagctg accaattggt gaaaactgaa gtcaccaaga agtcttttac tgctcctgta 60 caaaaggctt ctacaccagt tttaaccaat aaaacagtca tttctggatc gaaagtcaaa 120 agtttatcat ctgcgcaatc gagctcatca ggaccttcat catctagtga ggaagatgat 180 tcccgcgata ttgaaagctt ggataagaaa atacgtcctt tagaagaatt agaagcatta 240 ttaagtagtg gaaatacaaa acaattgaag aacaaagagg tcgctgcctt ggttattcac 300 ggtaagttac ctttgtacgc tttggagaaa aaattaggtg atactacgag agcggttgcg 360 gtacgtagga aggctctttc aattttggca gaagctcctg tattagcatc tgatcgttta 420 ccatataaaa attatgacta cgaccgcgta tttggcgctt gttgtgaaaa tgttataggt 480 tacatgcctt tgcccgttgg tgttataggc cccttggtta tcgatggtac atcttatcat 540 ataccaatgg caactacaga gggttgtttg gtagcttctg ccatgcgtgg ctgtaaggca 600 atcaatgctg gcggtggtgc aacaactgtt ttaactaagg atggtatgac aagaggccca 660 gtagtccgtt tcccaacttt gaaaagatct ggtgcctgta agatatggtt agactcagaa 720 gagggacaaa acgcaattaa aaaagctttt aactctacat caagatttgc acgtctgcaa 780 catattcaaa cttgtctagc aggagattta ctcttcatga gatttagaac aactactggt 840 gacgcaatgg gtatgaatat gatttctaaa ggtgtcgaat actcattaaa gcaaatggta 900 gaagagtatg gctgggaaga tatggaggtt gtctccgttt ctggtaacta ctgtaccgac 960 aaaaaaccag ctgccatcaa ctggatcgaa ggtcgtggta agagtgtcgt cgcagaagct 1020 actattcctg gtgatgttgt cagaaaagtg ttaaaaagtg atgtttccgc attggttgag 1080 ttgaacattg ctaagaattt ggttggatct gcaatggctg ggtctgttgg tggatttaac 1140 gcacatgcag ctaatttagt gacagctgtt ttcttggcat taggacaaga tcctgcacaa 1200 aatgttgaaa gttccaactg tataacattg atgaaagaag tggacggtga tttgagaatt 1260 tccgtatcca tgccatccat cgaagtaggt accatcggtg gtggtactgt tctagaacca 1320 caaggtgcca tgttggactt attaggtgta agaggcccgc atgctaccgc tcctggtacc 1380 aacgcacgtc aattagcaag aatagttgcc tgtgccgtct tggcaggtga attatcctta 1440 tgtgctgccc tagcagccgg ccatttggtt caaagtcata tgacccacaa caggaaacct 1500 gctgaaccaa caaaacctaa caatttggac gccactgata taaatcgttt gaaagatggg 1560 tccgtcacct gcattaaatc ctaa 1584 <210> 64 <211> 1226 <212> PRT <213> Ganoderma lucidium <400> 64 Met Arg Ala Val Leu Arg Leu Leu Ser Thr His Thr Val Phe Ser Pro 1 5 10 15 Ile Glu Thr Ile Val Ser Val Phe Val Leu Ala Thr Leu Ala Tyr Phe 20 25 30 His Ile Leu Ser Gly Ile Lys His Ser Ser Phe Phe Ala Ser Ser His 35 40 45 Pro Pro Ala Ile Arg Pro Ala Phe Ala His Leu Thr Asn Gly Glu Trp 50 55 60 Val Ala Val Ser Gln His Asp Trp Thr Glu Ala Trp Lys His Pro Gly 65 70 75 80 Gly Ser Leu Asp Ala Leu Glu Leu Gln Gln Val Val Phe Thr Leu Asp 85 90 95 Asp Lys Thr Gln Pro Ser Ala Val Leu Asp Ala Ser Ala Ile Ser Gln 100 105 110 His Leu Val Ser Asn Val Pro Ala Leu Ser Gly Lys Ala Tyr Ser Ser 115 120 125 Leu Cys His His Pro Asn Val Ser Gly Thr Ser Cys Phe Thr Ser Val 130 135 140 Ser Gly Pro Gly Ala Ser Pro Ile Leu Thr Leu Ser Phe Lys Pro Gly 145 150 155 160 Thr Arg Asp Asp Trp Leu Gly Ser Leu Arg Lys Glu Lys Thr Ile Thr 165 170 175 Leu Asp Gly Val Lys Tyr Asp Val Gly Ala Gly Lys Arg Gln Glu Ser 180 185 190 Ile Gly Asp Met Glu Ser Ser Lys Trp Val Ala Tyr Ala Leu Ser Ala 195 200 205 Leu Val Leu Arg Phe Trp Glu Leu Thr Lys Ala Asp Ser Leu Asp Ile 210 215 220 Leu Val Val Leu Thr Gly Tyr Ile Leu Met His Val Thr Phe Met Arg 225 230 235 240 Leu Phe Leu Ala Ser Arg Ala Leu Gly Ser Asn Phe Trp Leu Ser Ala 245 250 255 Gly Ile Phe Ser Ser Ala Thr Ile Ser Phe Leu Phe Thr Leu Pro Met 260 265 270 Cys Arg Ser Met Asp Ile Pro Leu Asp Pro Ile Ala Leu Thr Glu Ala 275 280 285 Leu Pro Phe Leu Val Cys Thr Val Gly Phe Asp Lys Pro Leu Arg Leu 290 295 300 Ala Arg Ala Val Met Ala His Pro Asn Ile Leu Lys Pro Gln Asp Asp 305 310 315 320 Gly Arg Met Lys Ala Ala Gly Asp Val Ile Leu Glu Ala Leu Asp Arg 325 330 335 Val Gly Asn Met Ile Leu Arg Asp Tyr Ala Leu Glu Ile Ala Val Leu 340 345 350 Phe Val Gly Val Asn Ser Arg Val Gly Gly Leu Lys Glu Phe Cys Ala 355 360 365 Val Ala Ala Ala Leu Leu Ala Met Asp Arg Leu Met Thr Phe Thr Leu 370 375 380 Tyr Thr Ala Val Leu Thr Ile Met Val Glu Val Arg Arg Ile Lys Lys 385 390 395 400 Val Arg Asp Met Thr Lys Ala Arg Ser Arg Ser Ser Ser Ile Thr Ala 405 410 415 Val Thr Ala Asn Gly Thr Ala Ile Arg Gly Val Leu Ser Arg Lys Ser 420 425 430 Ser Lys Gln Ser Val Thr Glu Pro Glu Thr Thr Lys Asn Leu Arg Gln 435 440 445 Arg Ala Thr Asp Ser Ala Ile Gly Val Lys Gly Ser Leu Leu Lys Asp 450 455 460 Gly Gly Arg Leu Gln Glu Ala Glu Glu Asn Pro Met Ala Arg Leu Lys 465 470 475 480 Leu Leu Leu Ile Ala Ser Phe Leu Thr Leu His Ile Leu Asn Phe Cys 485 490 495 Thr Thr Leu Thr Ser Ala Thr Ala Asn Ala Arg His Gln Arg His Pro 500 505 510 Phe Arg Thr Val Gln Glu Val Val Pro Ile Pro Arg Val Asp Ile Thr 515 520 525 Thr Pro Ala Ile Ala Asn Ile Leu Ser His Leu Ala Val Ala Gln Glu 530 535 540 Pro Met Phe Thr Val Val Gly Ser Glu Pro Ile Glu Leu Leu Val Lys 545 550 555 560 Val Ala Ala Pro Val Tyr Val His Ala Leu Pro Leu Ala Pro Ala Leu 565 570 575 Arg Ala Ser Asn Thr Asn Thr Gly Glu Ala Ile Glu Asn Phe Met Ser 580 585 590 Ser Trp Ser Ser Leu Val Gly Asp Pro Val Val Ser Lys Trp Ile Val 595 600 605 Ala Leu Leu Ala Val Ser Val Ala Leu Asn Gly Tyr Leu Leu Lys Gly 610 615 620 Ile Ala Ala Gly Ser Gly Leu Ala Ala Met Arg Ala Val Arg Ser Gln 625 630 635 640 Gly Val Arg Phe Arg Ser Arg Ala Arg Ser Ile Val Lys Ile Ser Asp 645 650 655 Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu His Ser Ile Asp Pro Ala Pro Val Val 660 665 670 Phe Phe Ala Ser Ala Ala Pro Ala Val Glu Ala Pro Ala Pro Ala Pro 675 680 685 Ala Pro Glu Pro Glu Pro Pro Val Asn Arg Pro Pro Pro Leu Thr Ile 690 695 700 Phe Ser Arg Pro Leu Asn Leu Glu Thr Val Asp Lys Lys Leu Gln Asp 705 710 715 720 Ala Leu Pro Ile Arg Ser Pro Pro Pro Val Glu Pro Ile Thr Pro Glu 725 730 735 Ser Arg Glu Val Glu Pro Thr Gln Val Glu Val Arg Ser Leu Ala Glu 740 745 750 Cys Val Asp Val Phe Glu Asn Gly Pro Arg Pro Val Ser Val Ala Leu 755 760 765 Lys Thr Leu Asn Asp Glu Glu Val Ile Leu Leu Cys Gln Thr Gly Lys 770 775 780 Ile Ala Pro Tyr Ala Leu Val Lys Met Leu Ala Asp Phe Asp Arg Ala 785 790 795 800 Val Arg Val Arg Arg Ala Leu Ile Ser Arg Ala Ser Arg Thr Lys Thr 805 810 815 Leu Glu Asn Ser Leu Val Pro Met Lys Asp Tyr Asp Tyr Ala Arg Val 820 825 830 Met Gly Ala Cys Cys Glu Asn Val Ile Gly Tyr Met Pro Leu Pro Leu 835 840 845 Gly Ile Ala Gly Pro Leu Lys Ile Asp Gly Leu Met Tyr Pro Ile Pro 850 855 860 Met Ala Thr Ala Glu Gly Thr Leu Val Ala Ser Thr Ser Arg Gly Cys 865 870 875 880 Lys Ala Leu Asn Ala Gly Gly Gly Val Thr Thr Val Leu Thr Ala Asp 885 890 895 Gly Met Thr Arg Gly Pro Ala Ile Asp Phe Pro Ser Ile Val Arg Ala 900 905 910 Ala Glu Ala Lys Ala Phe Ile Glu Ser Glu Asp Gly Tyr Ala Thr Ile 915 920 925 Arg Glu Ala Phe Glu Ser Thr Ser Arg Phe Ala Lys Leu Gln Lys Ile 930 935 940 Lys Cys Ala Leu Ala Gly Arg Thr Leu Phe Val Arg Phe Ala Thr Arg 945 950 955 960 Thr Gly Asp Ala Met Gly Met Asn Met Ile Ser Lys Ala Thr Glu Lys 965 970 975 Ala Leu Asp Val Leu Ser His Glu Phe Pro Glu Met Val Val Leu Ala 980 985 990 Leu Ser Gly Asn Tyr Cys Thr Asp Lys Lys Pro Ala Ala Ile Ser Trp 995 1000 1005 Ile Glu Gly Arg Gly Lys Ser Ile Val Ala Glu Ala Val Ile Pro 1010 1015 1020 Gly Lys Val Val Lys Ser Val Leu Lys Thr Thr Val Glu Ser Leu 1025 1030 1035 Cys Asn Val Asn Thr Lys Lys Asn Leu Ile Gly Ser Ala Met Ala 1040 1045 1050 Gly Ser Val Gly Gly Phe Asn Ala His Ala Ala Asn Ile Leu Thr 1055 1060 1065 Ala Val Phe Leu Ala Thr Gly Gln Asp Pro Ala Gln Asn Val Glu 1070 1075 1080 Ser Ser Asn Cys Met Thr Leu Met Glu Pro Thr Asn Gly Gly Glu 1085 1090 1095 Asp Leu Leu Met Thr Ile Ser Met Pro Cys Ile Glu Val Gly Thr 1100 1105 1110 Val Gly Gly Gly Thr Ile Leu Glu Pro Gln Gly Ala Val Leu Asp 1115 1120 1125 Leu Leu Gly Val Arg Gly Ala His Pro Thr Asn Pro Gly Gln Asn 1130 1135 1140 Ala Gln Gln Leu Ala Arg Ile Ile Ala Ser Ala Val Met Ala Gly 1145 1150 1155 Glu Leu Ser Leu Ile Ser Ala Leu Ala Ala Gly His Leu Val Arg 1160 1165 1170 Ala His Leu Ala His Asn Arg Ser Gln Leu Asn Thr Pro Met Pro 1175 1180 1185 Ser Arg Pro His Thr Pro Gly Pro Glu Asp Val Ser His Val Gln 1190 1195 1200 Gln Leu Pro Thr Pro Ser Ala Ser Asp Asp Lys Gly Val Thr Ala 1205 1210 1215 Gln Gly Tyr Val Val Glu Ala Lys 1220 1225 <210> 65 <211> 3681 <212> DNA <213> Ganoderma lucidium <400> 65 atgcgtgcgg ttctgcgcct gctgtccaca cacacagtct tctcccccat cgagaccatt 60 gtctccgtct tcgtccttgc aaccctcgca tacttccata tcctctcggg catcaagcac 120 tcctctttct ttgcctcctc acaccctcct gccatccgcc cggcgttcgc ccatctcacc 180 aacggagaat gggttgcggt ctcacagcac gattggacag aagcctggaa gcatcctggt 240 ggtagcctcg acgcgttgga gttgcagcag gtggtcttca cgcttgacga caagacgcag 300 ccgagtgccg tgcttgacgc gtctgccatc tcacaacacc tggtgtcaaa cgttcctgcg 360 ctttccggca aagcctactc atccctttgc caccatccta acgtatccgg aacgtcgtgt 420 ttcaccagtg tctctggccc cggagcatct cccatcctca ctctttcctt caagcctgga 480 actcgggacg attggcttgg ttcgctccgg aaggagaaga cgatcacgct tgatggtgtc 540 aagtacgacg ttggtgcagg gaaacgccag gagagcatcg gagacatgga gagtagcaag 600 tgggttgctt acgctctcag tgcgctcgtc ttgcgtttct gggagctcac caaggcggac 660 tcgcttgata tcctcgtcgt cctgacagga tatattctca tgcatgtgac gttcatgagg 720 ctattcctgg cttctcgggc actgggttcc aacttctggc tctccgccgg catattctcc 780 tcggcaacta tttccttcct cttcactcta cccatgtgca gatccatgga cattcccctc 840 gatcccatcg cccttacgga ggccctaccc ttcctggttt gcactgtcgg attcgacaag 900 ccgctccgtc tcgcacgtgc cgtcatggcc catcccaaca tccttaagcc acaggacgat 960 gggcggatga aggcggctgg cgacgtcatt cttgaggcgc tcgatcgcgt cggtaacatg 1020 atccttcgcg actacgcttt ggagatcgct gtgctctttg tcggtgtcaa cagccgcgtc 1080 ggtggcctca aggagttctg cgccgttgcc gctgcgctgc tcgctatgga ccgtttaatg 1140 actttcacgc tttacactgc ggttctgacg atcatggtgg aggttcgtcg tatcaagaag 1200 gtccgggaca tgacgaaggc ccgttcccgg tccagttcca tcacagcggt tacggctaat 1260 gggacggcta ttcgcggagt cttgtctcgc aagagcagca agcagagcgt gactgagccg 1320 gagacgacga agaacttgcg ccagcgggca accgactcag ctattggcgt caaaggttcg 1380 ttactgaagg acggtggcag gttgcaggaa gccgaggaga acccgatggc gaggctcaag 1440 ctgcttttga tcgcctcttt cctcacgcta cacatcctga acttctgcac gaccctcact 1500 tctgccaccg ccaacgctcg tcaccaaaga catccctttc gcacagttca ggaggttgtt 1560 cctatcccgc gtgtcgacat cactaccccg gccattgcga acatcctttc tcatctcgca 1620 gtggcacagg agcccatgtt caccgtggtg ggctcggagc ccatcgaact tttggtcaag 1680 gtcgccgcgc ccgtctacgt ccacgctctc cctcttgccc cggccctccg tgcttctaac 1740 accaacaccg gggaggccat cgagaacttc atgtcgtcct ggagctcgct cgtcggcgac 1800 cccgttgtct cgaagtggat tgtcgccctc ctcgcagtca gcgtggcact gaacggttac 1860 ctgctcaagg gtatcgctgc tggttctggt ctcgcggcca tgcgtgcggt ccgcagccaa 1920 ggcgttcgtt tccgttcgcg cgcccgctcc atcgtcaaga tctccgacga gccggaaccg 1980 gaaccggaac actcgattga tcccgctccc gtcgtgttct tcgccagtgc tgccccagct 2040 gtggaggctc ccgcacccgc ccctgctccc gaacccgagc ctcccgtgaa ccgtccccct 2100 cccttgacta tcttcagccg tccgttgaac ttggagaccg tcgacaagaa gctccaggat 2160 gcccttccca tccggtcgcc gcctcccgtg gagcctatta cccccgaatc gcgcgaagtc 2220 gagcctaccc aggttgaggt gcggtctctt gccgaatgtg tcgatgtctt cgagaacggt 2280 ccgcgccccg tatcggttgc gctcaagacc ttgaacgacg aagaggtcat cctcctatgc 2340 caaactggaa agatcgcccc gtacgccctc gtgaagatgc ttgctgactt cgaccgcgct 2400 gtgcgggtcc gtcgtgccct catttcccgt gcttcgcgaa ccaagaccct cgagaactcg 2460 ctcgtcccga tgaaggacta cgactacgcc cgtgtgatgg gcgcgtgctg cgagaacgtc 2520 attggctaca tgcctctgcc cctcggtatc gccggcccgc tcaagatcga cggcctcatg 2580 taccccatcc cgatggccac cgctgaaggc acgctcgtcg cgtcaacatc tcggggctgc 2640 aaggctctca acgccggcgg aggtgttacc acggtcctca ccgctgacgg catgacgcgc 2700 ggccccgcga tcgacttccc gtccattgtg cgcgcggcgg aggcgaaggc gttcatcgag 2760 tccgaggacg gctacgcgac gattagggag gcgttcgagt cgacatcgcg gttcgcgaag 2820 ctgcagaaga tcaagtgcgc gctcgcgggg cggacgctgt tcgtgcggtt cgccacgcgg 2880 acaggggacg cgatgggcat gaacatgatc tcgaaggcga cggagaaggc gctcgatgtg 2940 ctcagccacg agttcccgga gatggtcgtg ctcgcgctgt cgggcaacta ctgcacggac 3000 aagaagcctg ccgcgatcag ctggatcgag ggccgcggga agagtatcgt cgcggaggcg 3060 gtcatccccg ggaaggtcgt caagagtgtg ctcaagacga cagtcgagag cctgtgcaac 3120 gtgaacacga agaagaactt gatcgggagt gcgatggcgg gctcggtcgg cggattcaac 3180 gcgcatgcgg cgaacatcct caccgcggtc ttccttgcga ctggccagga tcctgcacag 3240 aacgtggaga gctcgaactg catgaccctc atggagccaa caaatggcgg tgaggaccta 3300 ctcatgacca tctccatgcc ctgcatcgag gtcggcactg tcggcggcgg caccatcctc 3360 gagccccagg gcgctgtcct cgacctgctt ggcgtccgcg gcgcgcaccc tacgaaccct 3420 ggacagaacg cgcagcagct cgcgcgcatc atcgcgtcag cggtcatggc gggcgagctc 3480 tcgctcatct ctgcactcgc cgctggccac ctcgtacgtg cgcaccttgc gcacaaccgc 3540 tcgcagctca acacgccgat gccgtcgcgg ccacatacgc caggccccga ggatgtctcg 3600 cacgtgcagc agctgccgac accaagtgcg agcgacgaca agggcgtcac cgcgcagggg 3660 tacgtcgtcg aggcgaagtg a 3681 <210> 66 <211> 888 <212> PRT <213> Bos taurus <400> 66 Met Leu Ser Arg Leu Phe Arg Met His Gly Leu Phe Val Ala Ser His 1 5 10 15 Pro Trp Glu Val Ile Val Gly Thr Val Thr Leu Thr Ile Cys Met Met 20 25 30 Ser Met Asn Met Phe Thr Gly Asn Asn Lys Ile Cys Gly Trp Asn Tyr 35 40 45 Glu Cys Pro Lys Leu Glu Glu Asp Val Leu Ser Ser Asp Ile Ile Ile 50 55 60 Leu Thr Ile Thr Arg Cys Ile Ala Ile Leu Tyr Ile Tyr Phe Gln Phe 65 70 75 80 Gln Asn Leu Arg Gln Leu Gly Ser Lys Tyr Ile Leu Gly Ile Ala Gly 85 90 95 Leu Phe Thr Ile Phe Ser Ser Phe Val Phe Ser Thr Val Val Ile His 100 105 110 Phe Leu Asp Lys Glu Leu Thr Gly Leu Asn Glu Ala Leu Pro Phe Phe 115 120 125 Leu Leu Leu Val Asp Leu Ser Arg Ala Ser Ala Leu Ala Lys Phe Ala 130 135 140 Leu Ser Ser Asn Ser Gln Asp Glu Val Arg Glu Asn Ile Ala Arg Gly 145 150 155 160 Met Ala Ile Leu Gly Pro Thr Phe Thr Leu Asp Ala Leu Val Glu Cys 165 170 175 Leu Val Ile Gly Val Gly Thr Met Ser Gly Val Arg Gln Leu Glu Ile 180 185 190 Met Cys Cys Phe Gly Cys Met Ser Val Leu Ala Asn Tyr Phe Val Phe 195 200 205 Met Thr Phe Phe Pro Ala Cys Val Ser Leu Val Leu Glu Leu Ser Arg 210 215 220 Glu Ser Arg Glu Gly Arg Pro Ile Trp Gln Leu Ser His Phe Ala Arg 225 230 235 240 Val Leu Glu Glu Glu Glu Asn Lys Pro Asn Pro Val Thr Gln Arg Val 245 250 255 Lys Met Ile Met Ser Leu Gly Leu Val Leu Val His Ala His Ser Arg 260 265 270 Trp Ile Ala Asp Pro Ser Pro Gln Asn Ser Thr Ala Asp Asn Ser Lys 275 280 285 Val Ser Leu Gly Leu Asp Glu Asn Val Ser Lys Arg Ile Glu Pro Ser 290 295 300 Val Ser Leu Trp Gln Phe Tyr Leu Ser Lys Met Ile Ser Met Asp Ile 305 310 315 320 Glu Gln Val Ile Thr Leu Ser Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Lys Tyr 325 330 335 Ile Phe Phe Glu Gln Ala Glu Thr Glu Ser Thr Leu Ser Leu Lys Asn 340 345 350 Pro Ile Thr Ser Pro Val Val Thr Gln Lys Lys Ile Thr Asp Asp Cys 355 360 365 Cys Arg Arg Asp Pro Val Leu Val Arg Asn Asp Gln Lys Phe His Ala 370 375 380 Met Glu Glu Glu Thr Arg Lys Asn Arg Glu Arg Lys Val Glu Val Ile 385 390 395 400 Lys Pro Leu Leu Ala Glu Asn Asp Thr Ser His Arg Ala Thr Phe Val 405 410 415 Val Gly Asn Ser Ser Leu Leu Gly Thr Ser Leu Glu Leu Glu Thr Gln 420 425 430 Glu Pro Glu Met Glu Leu Pro Val Glu Pro Arg Pro Asn Glu Glu Cys 435 440 445 Leu Gln Ile Leu Glu Asn Ala Glu Lys Gly Ala Lys Phe Leu Ser Asp 450 455 460 Ala Glu Ile Ile Gln Leu Val Asn Ala Lys His Ile Pro Ala Tyr Lys 465 470 475 480 Leu Glu Thr Leu Met Glu Thr His Glu Arg Gly Val Ser Ile Arg Arg 485 490 495 Gln Leu Leu Ser Lys Lys Leu Pro Glu Pro Ser Ser Leu Gln Tyr Leu 500 505 510 Pro Tyr Arg Asp Tyr Asn Tyr Ser Leu Val Met Gly Ala Cys Cys Glu 515 520 525 Asn Val Ile Gly Tyr Met Pro Ile Pro Val Gly Val Ala Gly Pro Leu 530 535 540 Cys Leu Asp Gly Lys Glu Phe Gln Val Pro Met Ala Thr Thr Glu Gly 545 550 555 560 Cys Leu Val Ala Ser Thr Asn Arg Gly Cys Arg Ala Ile Gly Leu Gly 565 570 575 Gly Gly Ala Ser Ser Arg Val Leu Ala Asp Gly Met Thr Arg Gly Pro 580 585 590 Val Val Arg Phe Pro Arg Ala Cys Asp Ser Ala Glu Val Lys Ala Trp 595 600 605 Leu Glu Thr Pro Glu Gly Phe Thr Val Ile Lys Glu Ala Phe Asp Ser 610 615 620 Thr Ser Arg Val Ala Arg Leu Gln Lys Leu His Met Ser Val Ala Gly 625 630 635 640 Arg Asn Leu Tyr Ile Arg Phe Gln Ser Arg Ser Gly Asp Ala Met Gly 645 650 655 Met Asn Met Ile Ser Lys Gly Thr Glu Lys Ala Leu Ser Lys Leu Gln 660 665 670 Glu Tyr Phe Pro Glu Met Gln Ile Leu Ala Val Ser Gly Asn Tyr Cys 675 680 685 Thr Asp Lys Lys Pro Ala Ala Ile Asn Trp Ile Glu Gly Arg Gly Lys 690 695 700 Ser Val Val Cys Glu Ala Val Ile Pro Ala Lys Val Val Arg Glu Val 705 710 715 720 Leu Lys Thr Thr Thr Glu Ala Met Ile Glu Val Asn Ile Asn Lys Asn 725 730 735 Leu Val Gly Ser Ala Met Ala Gly Ser Ile Gly Gly Tyr Asn Ala His 740 745 750 Ala Ala Asn Ile Val Thr Ala Ile Tyr Ile Ala Cys Gly Gln Asp Ala 755 760 765 Ala Gln Asn Val Gly Ser Ser Asn Cys Ile Thr Leu Met Glu Ala Ser 770 775 780 Gly Pro Thr Asn Glu Asp Leu Tyr Ile Ser Cys Thr Met Pro Ser Ile 785 790 795 800 Glu Ile Gly Thr Val Gly Gly Gly Thr Asn Leu Leu Pro Gln Gln Ala 805 810 815 Cys Leu Gln Met Leu Gly Val Gln Gly Ala Cys Arg Asp Asn Pro Gly 820 825 830 Glu Asn Ala Arg Gln Leu Ala Arg Ile Val Cys Gly Thr Val Met Ala 835 840 845 Gly Glu Leu Ser Leu Met Ala Ala Leu Ala Ala Gly His Leu Val Arg 850 855 860 Ser His Met Ile His Asn Arg Ser Lys Ile Asn Leu Gln Asp Leu Gln 865 870 875 880 Gly Thr Cys Thr Lys Lys Ala Ala 885 <210> 67 <211> 4618 <212> DNA <213> Bos taurus <400> 67 ccgcgtctcc gttgactgga gacgggtgga gcgccggctc ccgggaactg tggcctctag 60 tgagatccgg aggatccgag gactctgcag ctgcaatgct gtcaagactt ttccgaatgc 120 atggcctctt cgtggcctcc catccctggg aagtcatagt ggggacagtg acgctgacca 180 tctgcatgat gtccatgaac atgtttactg gcaacaataa gatctgcggt tggaattatg 240 aatgtccgaa gttggaagag gatgttttga gcagcgacat cataattctg acaataacac 300 gatgcatagc aatattgtat atttacttcc agttccagaa tttacgccaa cttggatcaa 360 aatatatttt gggtattgct ggactcttca caattttctc cagtttcgta ttcagtacag 420 ttgtcattca tttcttagat aaagaattga caggtttgaa tgaagctttg ccctttttcc 480 tgctgctggt cgacctttct agagcaagtg cgctagccaa gttcgccctc agttctaact 540 cacaggatga agtgagggag aacattgctc gtgggatggc gattttaggt cccaccttca 600 ccctggatgc tcttgtagaa tgtcttgtga ttggagttgg taccatgtca ggggtgcgtc 660 agctcgaaat catgtgctgc tttggctgca tgtcggttct cgccaactac tttgtgttca 720 tgactttctt cccagcttgt gtgtccttgg ttctggagct ttctcgggaa agccgcgagg 780 gccgtccaat ctggcagctc agccattttg cccgagtctt agaagaagaa gaaaataagc 840 caaatcctgt tactcagagg gttaagatga ttatgtctct aggcttggtt cttgttcacg 900 ctcacagtcg ctggatagct gatccttctc ctcaaaacag cacagcagac aattctaagg 960 tctctttagg actggatgaa aatgtgtcca agagaattga accgagtgtt tccctctggc 1020 aattttatct ctctaaaatg atcagcatgg atattgaaca agttattacc ctaagtttag 1080 ctctccttct ggctgtcaag tacatcttct ttgaacaagc agagacagaa tctacactct 1140 cgttaaaaaa tcctatcaca tctcctgtag tgacccaaaa gaaaatcaca gacgattgtt 1200 gtagacgtga ccctgtactg gtcagaaatg accagaaatt ccatgcaatg gaggaggaga 1260 ccaggaaaaa cagagaaaga aaagttgagg ttataaaacc cttactggca gaaaatgaca 1320 cctcacacag agccacattc gtggtgggga actcctcctt actcggtact tcgctggaac 1380 tagagacaca ggagcctgaa atggaactcc ctgtggagcc tcggcctaat gaagagtgtc 1440 tgcagattct tgagaatgca gagaaaggtg caaaattcct tagtgatgct gagatcatcc 1500 agttggtcaa tgcaaagcat atcccagctt acaaattgga aactctgatg gaaacccatg 1560 agcgaggtgt atctattcgc cgacagctac tttccaaaaa acttccagag ccttcttctc 1620 tccagtatct accttacagg gactataatt actccttggt gatgggagct tgctgtgaga 1680 acgttattgg atatatgccc atccctgttg gagtggcagg acctctgtgc ttggatggaa 1740 aagaatttca ggttccaatg gcaacaacag aaggctgtct tgtggccagc actaatagag 1800 gctgcagagc aataggcctt ggtggaggtg ccagcagccg agtccttgca gacgggatga 1860 ctcgtggccc agtggtgcgt tttccccgtg cttgtgactc tgcagaagtg aaggcctggc 1920 ttgagacgcc tgaagggttc acagtgataa aggaagcctt cgacagcacc agcagggttg 1980 cacgtctaca gaaactgcat atgagtgtgg ccggacgcaa cctttacatc cgttttcagt 2040 ccaggtcagg tgatgccatg gggatgaaca tgatttcaaa gggtacagag aaagcactgt 2100 ccaaacttca ggagtatttc cccgaaatgc agattttggc cgtcagtggg aactattgta 2160 cagacaagaa acctgcggcc atcaactgga tagagggacg aggaaagtct gtggtctgtg 2220 aagctgtcat tccagccaag gttgtcagag aagtattaaa gactacaaca gaggctatga 2280 ttgaggtcaa cattaataaa aacctggtgg gctctgccat ggctgggagc atcggcggct 2340 acaacgccca cgcagcgaac attgtaactg ccatctacat tgcctgtgga caggatgcag 2400 cacagaatgt tggtagttcg aactgtatta ctttaatgga agcaagcggt cccacgaacg 2460 aagacctgta catcagctgc accatgccat ctatagaaat aggaaccgtg ggcgggggca 2520 ccaacttgct gcctcagcag gcctgcctgc agatgctagg cgtccaagga gcatgcagag 2580 acaaccccgg ggaaaatgcg cggcagctgg cccgaatcgt gtgcggcacg gtgatggctg 2640 gggagctgtc tctgatggca gcactggcag caggccatct ggtcagaagt cacatgattc 2700 acaacaggtc aaagataaat ttgcaagacc tccaaggaac ttgcactaag aaggcagctt 2760 gaacagcctg accattcaga actaaaaaat gggcattggg ttctaaagga ctaacgtaaa 2820 atctgtgaat taaaaaactc aatgcaatgt cgtgttgaga atgagtagac atgatcagtg 2880 agacgactgc ttggtttctg gctctttcag aatgattgag gttcttcttt ccatgcagag 2940 ttctcagatc tgaaaacagt ttacatgctt tacatgctgt gtcctctgca agatctcgac 3000 atggatatta tgcctttata gcatcacaga tggtaatcta cagcacactt ctgaaggaga 3060 atacagctgg aaaaaaaact gttttctttt catggaactc atggagatca gtgtgagatt 3120 gaaccctcct cctgtccaca cccacccggc cccaaccctg ggttgaaaat ggatttttaa 3180 attatattgt agctgacaaa actcctgatt tcatagttaa tttattaagt ctgggttgta 3240 gacctttaag aaataggagc taagtttatt ttttgtaaac taatacttca tttggtgctg 3300 gtctattttg atttcgggga atagccaaca taattcttca gaaagggacc tgctttctta 3360 aaaggaagaa ttactcttat tcccagatta cagaattatg tgctaagcag tgctaaacag 3420 ttttctttca agaaaacaaa tcactgcatt tatttttgca ggctatttgt tcagagacga 3480 cttgtctaaa tataaatgtt tgtctagatt gattataacg gatctttcag tatataaggc 3540 tttaagaagc agagttttgt gctctttatt aaagatacaa gagctcttaa tattgcttag 3600 acaaaggtga ctatttatca atgaaataca agtctgtgac ctctctcaga actcagaggg 3660 tggaaaagga caggtttggg agaaatttac catttcttga agccaactta aatttcttaa 3720 gagacaaatt tatttagctg aaaaatctag gtagtttttg taaagaactg taccagatct 3780 gtatatgttg taataaagtt tcttgtgcta ggagtttatt gaaagtgttc aagaaataaa 3840 taaaatcaac tgatattctg gtaaaatact ctcagcttgg gccagagcag acagtattct 3900 ttaatgttgt ccaggaaacc ctggcttgct tgttgagcct aatgaagggg agagtcctct 3960 ttcagagcca gtgaaggcac cgcatgaatg gccttggagg gagtgtccct tgtcctgtgg 4020 ccaggaggtt ggtggctgaa aggttcacac agggctattt gatggaccca aaaaagcttc 4080 ctcagggggt cagcagagtt gttgaatctt aatttttttt aatgtaactt ttgtataaat 4140 aataaagaac tccttatttt gtattacatc aaatgcttca agtgttggtc ctggaaggct 4200 ggaggctcat gcagaagatg gactttgaga accattccag tcatgccatg gcagcatgga 4260 gagcctgaat ggtggtgtct gctttattgc tggggaagac tgacattttc tgttgttata 4320 taaaagttta aattgtttct gttgtgactt ttcatccagt gacttcttat ttatctgaat 4380 tttttatgga agtggcagtg aaaaatattt tgggtcctca ttttggtgac tgtaacacat 4440 atcatcttgc taaactgatg ttttgtacaa ttactaaact gtatacattt tgttatactt 4500 ttttcccccc agttccagta aattatgaaa aggaagttaa tactaaaaaa aaaaaaaaaa 4560 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa 4618 <210> 68 <211> 567 <212> PRT <213> Artemisia annua <400> 68 Met Asp Leu Arg Arg Lys Leu Pro Pro Lys Pro Pro Ser Ser Thr Thr 1 5 10 15 Thr Lys Gln Pro Ser His Arg Ser His Ser Pro Thr Pro Ile Pro Lys 20 25 30 Ala Ser Asp Ala Leu Pro Leu Pro Leu Tyr Leu Thr Asn Thr Phe Phe 35 40 45 Phe Thr Leu Phe Phe Ser Val Ala Tyr Tyr Leu Leu His Arg Trp Arg 50 55 60 Asp Lys Ile Arg Ser Gly Thr Pro Leu His Val Val Thr Leu Thr Glu 65 70 75 80 Leu Ser Ala Ile Val Leu Leu Ile Ala Ser Phe Ile Tyr Leu Leu Gly 85 90 95 Phe Phe Gly Ile Asp Phe Val Gln Ser Phe Thr Ser Arg Glu Asn Glu 100 105 110 Gln Leu Asn Asn Asp Asp His Asn Val Val Ser Thr Asn Asn Val Leu 115 120 125 Ser Asp Arg Arg Leu Val Tyr Asp Tyr Gly Phe Asp Val Thr Gly Asp 130 135 140 Asn Asp Asn Asp Asn Asp Asp Asp Val Ile Val Lys Ser Val Val Ser 145 150 155 160 Gly Glu Val Asn Ser Tyr Ser Leu Glu Ala Ser Leu Gly Asp Cys Tyr 165 170 175 Arg Ala Ala Lys Ile Arg Lys Arg Ala Val Glu Arg Ile Val Gly Arg 180 185 190 Glu Val Leu Gly Leu Gly Phe Glu Gly Phe Asp Tyr Glu Ser Ile Leu 195 200 205 Gly Gln Cys Cys Glu Met Pro Ile Gly Tyr Val Gln Val Pro Val Gly 210 215 220 Val Ala Gly Pro Leu Leu Leu Asn Gly Gly Glu Phe Met Val Pro Met 225 230 235 240 Ala Thr Thr Glu Gly Cys Leu Val Ala Ser Thr Asn Arg Gly Cys Lys 245 250 255 Ala Ile Cys Leu Ser Gly Gly Ala Thr Ala Ile Leu Leu Lys Asp Gly 260 265 270 Met Thr Arg Ala Pro Val Val Arg Phe Ala Thr Ala Glu Arg Ala Ser 275 280 285 Gln Leu Lys Phe Tyr Leu Glu Asp Gly Val Asn Phe Asp Thr Leu Ser 290 295 300 Val Val Phe Asn Lys Ser Ser Arg Phe Ala Arg Leu Gln Asn Ile Gln 305 310 315 320 Cys Ser Ile Ala Gly Lys Asn Leu Tyr Ile Arg Phe Thr Cys Ser Thr 325 330 335 Gly Asp Ala Met Gly Met Asn Met Val Ser Lys Gly Val Gln Asn Val 340 345 350 Leu Asp Phe Leu Gln Asn Asp Phe Pro Asp Met Asp Val Ile Gly Ile 355 360 365 Ser Trp Lys Phe Cys Ser Asp Lys Lys Pro Thr Ala Val Asn Trp Ile 370 375 380 Glu Gly Arg Gly Lys Ser Val Val Phe Gln Ala Val Ile Thr Lys Lys 385 390 395 400 Val Val Arg Lys Ser Ala Leu Asn Pro Gln Thr Cys Thr Cys Arg Thr 405 410 415 Leu Thr Cys Leu Arg Pro Leu Leu Val Leu Leu Leu Leu Val Leu Leu 420 425 430 Val Asp Leu Met His Met Leu His Ile Val Ser Ala Val Phe Ile Ala 435 440 445 Thr Gly Gln Asp Pro Ala Gln Asn Ile Glu Ser Ser His Cys Ile Thr 450 455 460 Met Met Glu Ala Val Asn Asn Gly Lys Asp Leu His Val Asn Val Thr 465 470 475 480 Met Pro Ser Ile Glu Val Gly Thr Val Gly Gly Gly Thr Gln Leu Ala 485 490 495 Ser Gln Ser Ala Cys Leu Asn Leu Leu Gly Val Lys Gly Ala Cys Ile 500 505 510 Glu Ser Pro Gly Ser Asn Ala Gln Leu Leu Ala Arg Ile Val Ala Gly 515 520 525 Ser Val Leu Ala Gly Glu Leu Ser Leu Met Ser Ala Ile Ser Ala Gly 530 535 540 Gln Leu Val Lys Ser His Met Lys Tyr Asn Arg Ser Ser Arg Asp Met 545 550 555 560 Ser Ala Ile Ala Ser Lys Val 565 <210> 69 <211> 1704 <212> DNA <213> Artemisia annua <400> 69 atggatttga gaaggaaatt accacctaag cctccatctt caacaacaac aaaacagcca 60 agtcataggt cccattctcc tacgccaatt ccaaaggctt cagatgcatt gcctcttcca 120 ttgtacctga ccaatacgtt tttcttcact cttttctttt ccgtagcata ttacctgttg 180 cataggtgga gagacaagat tagatccgga acacctttac acgttgtgac actgactgaa 240 ctatccgcaa ttgtactgct gattgcttcc ttcatctatc ttttaggctt tttcggtatt 300 gattttgtgc aatctttcac atcaagagaa aatgagcaac taaacaacga tgatcacaac 360 gtcgtgtcaa caaacaatgt tttatctgat agaaggttag tttacgacta tggattcgat 420 gtgacaggag acaacgataa cgataatgat gacgatgtta ttgtgaaaag tgtcgtttct 480 ggggaagtta attcttatag tttggaggct tccctaggag attgttacag agccgcaaag 540 attagaaaga gagccgtcga gagaattgtc gggagagaag tattaggctt gggtttcgag 600 ggatttgatt atgaatctat cctggggcaa tgttgtgaaa tgcctatcgg gtacgtccaa 660 gtgccagtag gtgtcgctgg acctttattg ttaaatggtg gggaattcat ggttccaatg 720 gctacaactg aaggctgtct tgtagcttcc actaatagag gttgtaaagc catatgctta 780 tcaggtggtg ccactgccat attgctaaaa gatggtatga caagagcccc agtagtgaga 840 ttcgccacag ctgagagagc ttcacaacta aagttttact tggaagatgg tgtcaatttc 900 gatacattgt ctgttgtctt taacaaaagt tcaagatttg ccagattgca aaacatccaa 960 tgctcaattg ccggtaaaaa cttgtacatt aggtttactt gctccacagg cgacgccatg 1020 ggtatgaaca tggtttcaaa aggagtacaa aatgtattag actttttaca aaatgatttt 1080 cctgatatgg acgtaattgg gatctcttgg aagttctgct ctgacaaaaa gccaacagct 1140 gtcaactgga ttgagggcag aggaaagtct gtcgttttcc aggccgtaat taccaaaaag 1200 gtggttagaa agtctgcact gaaccctcaa acttgcacat gtagaacttt gacctgttta 1260 agaccattat tggttctgct acttctggtt ttgctagtgg acttaatgca tatgcttcat 1320 atcgtgtctg ccgtgttcat cgctaccggt caagatccag ctcagaatat cgaatctagt 1380 cactgtatca ctatgatgga ggctgtcaac aatggtaagg atttgcacgt taatgttacg 1440 atgccatcta tagaagttgg cacggtggga ggtggcactc agctagcctc tcaatcagcc 1500 tgtttgaact tgcttggtgt aaagggtgcc tgtatagaat ccccaggatc aaacgcccag 1560 ttgttagcta gaatcgttgc tggttctgtt ctggcaggcg aattaagttt gatgtcagct 1620 ataagtgctg ggcaactagt taaatctcat atgaaataca ataggtctag tagagatatg 1680 tcagcaatag cttctaaggt ctaa 1704 <210> 70 <211> 435 <212> PRT <213> Trypanosoma cruzi <400> 70 Met Phe Arg Arg Ala Ile Leu Leu Gly Cys Ser Ala Ala Lys Thr Pro 1 5 10 15 Trp Ser Glu Cys Ser Asn Ala Gln Leu Val Asp Ala Val Lys Ser Arg 20 25 30 Lys Ile Ser Phe Tyr Gly Leu Glu Gln Ala Leu Glu Pro Asp Tyr Arg 35 40 45 Arg Ala Ile Glu Val Arg Arg Glu Val Val Ser Glu Ile Ala Ser Gln 50 55 60 Gln Pro Glu Ala Lys Lys Lys Gln Ser Ala Leu His Thr Ile Pro Phe 65 70 75 80 Glu Asn Tyr Asp Trp Asn Lys Val Val Gly Gln Asn Cys Glu Asn Ile 85 90 95 Ile Gly Tyr Val Pro Ile Pro Leu Gly Val Ala Gly Pro Ile Leu Ile 100 105 110 Asp Gly Lys Glu Tyr Pro Ile Pro Met Ala Thr Thr Glu Gly Ala Leu 115 120 125 Val Ala Ser Thr His Arg Gly Ala Arg Ala Ile Thr Arg Ser Gly Gly 130 135 140 Cys Lys Thr Leu Leu Leu Gly Glu Gly Met Thr Arg Ala Pro Val Val 145 150 155 160 Glu Leu Pro Ser Leu Glu Glu Ala Gly Arg Leu His Lys Tyr Cys Asn 165 170 175 Glu Asn Phe Leu Ser Leu Lys Glu Ala Phe Glu Ser Thr Thr Gln Tyr 180 185 190 Gly Lys Leu Asn Ser Leu Lys Cys Val Leu Ala Gly Arg Lys Ala Tyr 195 200 205 Leu Arg Phe Arg Ala Thr Thr Gly Asp Ala Met Gly Met Asn Met Ile 210 215 220 Thr Lys Gly Val Asp Lys Ala Leu Ser Val Leu Gln Gln His Phe Pro 225 230 235 240 Ser Met Glu Ile Leu Ala Leu Ser Gly Asn Tyr Cys Thr Asp Lys Lys 245 250 255 Pro Ser Ala Val Asn Trp Ile Asp Gly Arg Gly Lys Ser Val Val Ala 260 265 270 Glu Ala Thr Leu Leu Ala Asp Val Val Glu Asp Thr Leu Lys Cys Thr 275 280 285 Val Asp Ser Leu Val Ser Leu Asn Ile Asp Lys Asn Leu Val Gly Ser 290 295 300 Ala Met Ala Gly Ser Val Gly Gly Phe Asn Ala Gln Ala Ala Asn Ala 305 310 315 320 Val Ala Ala Ile Phe Ile Ala Thr Gly Gln Asp Pro Ala Gln Val Val 325 330 335 Glu Ser Ser Met Cys Ile Thr Thr Met Ser Lys Val Gly Asn Asp Leu 340 345 350 Leu Ile Ser Val Thr Met Pro Ser Ile Glu Val Gly Val Val Gly Gly 355 360 365 Gly Thr Gly Leu Ala Ala Gln Arg Gly Cys Leu Glu Leu Ile Gly Cys 370 375 380 Gly Gly Pro Ser Lys Glu Ser Pro Gly Thr Asn Ala Gln Leu Leu Ser 385 390 395 400 Arg Val Val Ala Ala Gly Val Leu Ser Ala Glu Leu Ser Leu Met Ser 405 410 415 Gly Leu Ala Ala Gly His Leu Leu Ser Ala His Met Arg Leu Asn Arg 420 425 430 Lys Lys Lys 435 <210> 71 <211> 1308 <212> DNA <213> Trypanosoma cruzi <400> 71 atgtttagaa gagctatact gttaggatgc tctgctgcca agacaccatg gtctgagtgt 60 tctaacgctc aattagttga tgcagttaag tctagaaaga tctcattcta cggtcttgaa 120 caagccttgg aaccagatta tagaagggct atcgaagtaa ggagagaggt tgtctctgaa 180 atcgcctcac aacagccaga agcaaaaaag aagcaatccg cattgcacac aataccattt 240 gagaattatg attggaataa ggtcgttggc caaaactgtg aaaacattat tggatacgtc 300 ccaataccac tgggcgttgc tggccctatt ttgattgatg gtaaagagta cccaatacca 360 atggctacaa cagaaggcgc tttggtcgct agtactcata gaggtgctag agctattaca 420 agatccggag gttgtaagac attgttatta ggtgaaggta tgacaagagc accagtggtt 480 gaattgcctt cattagagga agctgggcgt ttgcacaagt actgtaatga gaacttctta 540 tctttaaagg aagcatttga atcaactacc caatatggaa aacttaattc tttaaagtgc 600 gtactagctg gtagaaaagc ataccttaga ttcagagcca ctacaggcga tgctatgggc 660 atgaacatga taacaaaggg tgtagacaaa gcactgtctg ttctacagca acatttccct 720 tcaatggaaa tcctagccct aagtggtaat tactgtaccg acaaaaagcc atctgctgta 780 aattggattg atggcagagg taaatcagtg gttgcagaag ccactttatt ggctgatgtt 840 gtcgaagata ctctgaaatg tacagtcgat tctttggtat ccttgaatat cgacaaaaac 900 cttgttgggt cagctatggc tggttctgtt ggaggtttta acgcccaggc tgcaaacgct 960 gtggcagcca ttttcattgc aaccggtcaa gatcctgctc aagtggtaga aagttcaatg 1020 tgtatcacta caatgtccaa ggtaggtaac gatctattga tctctgtgac catgccttct 1080 atcgaggtcg gggtcgtggg aggagggact ggtcttgctg cccaaagagg atgcttagag 1140 ttaatagggt gcggaggccc atctaaggag tctcctggta ctaatgccca acttctaagt 1200 agagttgttg cagctggcgt tttatcagcc gaactttcct tgatgtccgg actggcagca 1260 ggtcatctat tgtcagcaca tatgagattg aacagaaaga agaaataa 1308 <210> 72 <211> 426 <212> PRT <213> Staphylococcus aureus <400> 72 Met Gln Ser Leu Asp Lys Asn Phe Arg His Leu Ser Arg Gln Gln Lys 1 5 10 15 Leu Gln Gln Leu Val Asp Lys Gln Trp Leu Ser Glu Glu Gln Phe Asn 20 25 30 Ile Leu Leu Asn His Pro Leu Ile Asp Glu Glu Val Ala Asn Ser Leu 35 40 45 Ile Glu Asn Val Ile Ala Gln Gly Ala Leu Pro Val Gly Leu Leu Pro 50 55 60 Asn Ile Ile Val Asp Asp Lys Ala Tyr Val Val Pro Met Met Val Glu 65 70 75 80 Glu Pro Ser Val Val Ala Ala Ala Ser Tyr Gly Ala Lys Leu Val Asn 85 90 95 Gln Thr Gly Gly Phe Lys Thr Val Ser Ser Glu Arg Ile Met Ile Gly 100 105 110 Gln Ile Val Phe Asp Gly Val Asp Asp Thr Glu Lys Leu Ser Ala Asp 115 120 125 Ile Lys Ala Leu Glu Lys Gln Ile His Gln Ile Ala Asp Glu Ala Tyr 130 135 140 Pro Ser Ile Lys Ala Arg Gly Gly Gly Tyr Gln Arg Ile Ala Ile Asp 145 150 155 160 Thr Phe Pro Glu Gln Gln Leu Leu Ser Leu Lys Val Phe Val Asp Thr 165 170 175 Lys Asp Ala Met Gly Ala Asn Met Leu Asn Thr Ile Leu Glu Ala Ile 180 185 190 Thr Ala Phe Leu Lys Asn Glu Phe Pro Gln Ser Asp Ile Leu Met Ser 195 200 205 Ile Leu Ser Asn His Ala Thr Ala Ser Val Val Lys Val Gln Gly Glu 210 215 220 Ile Asp Val Lys Asp Leu Ala Arg Gly Glu Arg Thr Gly Glu Glu Val 225 230 235 240 Ala Lys Arg Met Glu Arg Ala Ser Val Leu Ala Gln Val Asp Ile His 245 250 255 Arg Ala Ala Thr His Asn Lys Gly Val Met Asn Gly Ile His Ala Val 260 265 270 Val Leu Ala Thr Gly Asn Asp Thr Arg Gly Ala Glu Ala Ser Ala His 275 280 285 Ala Tyr Ala Ser Lys Asp Gly Gln Tyr Arg Gly Ile Ala Thr Trp Arg 290 295 300 Tyr Asp Gln Glu Arg Gln Arg Leu Ile Gly Thr Ile Glu Val Pro Met 305 310 315 320 Thr Leu Ala Ile Val Gly Gly Gly Thr Lys Val Leu Pro Ile Ala Lys 325 330 335 Ala Ser Leu Glu Leu Leu Asn Val Glu Ser Ala Gln Glu Leu Gly His 340 345 350 Val Val Ala Ala Val Gly Leu Ala Gln Asn Phe Ala Ala Cys Arg Ala 355 360 365 Leu Val Ser Glu Gly Ile Gln Gln Gly His Met Ser Leu Gln Tyr Lys 370 375 380 Ser Leu Ala Ile Val Val Gly Ala Lys Gly Asp Glu Ile Ala Gln Val 385 390 395 400 Ala Glu Ala Leu Lys Gln Glu Pro Arg Ala Asn Thr Gln Val Ala Glu 405 410 415 Arg Ile Leu Gln Asp Leu Arg Ser Gln Gln 420 425 <210> 73 <211> 1281 <212> DNA <213> Staphylococcus aureus <400> 73 atgcaatccc tggacaaaaa ctttagacac ttatcaagac aacagaagtt acaacagcta 60 gttgataaac aatggctatc agaggaacaa ttcaatattc tacttaacca cccacttatt 120 gatgaagagg tagcaaactc attgatagaa aatgtcatcg cacagggcgc actgcctgtt 180 ggtttactac caaatatcat cgttgatgac aaagcatacg tcgtgcctat gatggtggaa 240 gagccatctg ttgttgccgc tgcttcatac ggcgctaaat tggtgaacca aacaggtggt 300 ttcaaaaccg tgtcctcaga acgtatcatg ataggtcaaa tagtatttga tggagtcgat 360 gataccgaga aactgtctgc agatatcaag gctcttgaaa aacaaatcca tcagattgca 420 gatgaggctt acccttctat taaggccaga ggtggaggct atcaaaggat cgccatcgat 480 acattcccag aacaacagtt gctttcattg aaggttttcg ttgatactaa ggatgctatg 540 ggcgctaata tgttaaacac aatcctagaa gcaatcacag cctttttgaa aaacgaattc 600 ccacaatctg atatcttgat gtctatcctt tccaaccacg caacagccag tgttgtcaag 660 gtccagggtg aaatagacgt taaggatttg gcaagaggag aacgtactgg agaagaggtc 720 gctaagagaa tggaaagagc atctgtgtta gctcaagtgg acattcatag agcagcaaca 780 cacaataagg gtgttatgaa tggcattcat gctgtagtct tggctacagg taatgatact 840 agaggtgcag aagcctctgc tcacgcttac gcttccaaag acggtcaata tagagggata 900 gctacatgga gatacgatca agagagacaa aggttaatag gaactataga agttccaatg 960 actctggcca ttgttggtgg cggtaccaag gtactgccta ttgctaaggc ctctttagaa 1020 ctgttaaacg tagaaagtgc ccaagagttg ggacatgttg tcgctgccgt tggactagct 1080 caaaacttcg ctgcatgtag agctttggtt tccgaaggta ttcaacaagg gcatatgtct 1140 ttgcaataca agtctttagc catcgtagtc ggggctaagg gcgatgaaat tgctcaggta 1200 gccgaagcac taaagcaaga gccaagagca aacactcaag ttgcagagag aattttgcaa 1260 gatttgagaa gtcaacaata a 1281 <210> 74 <211> 436 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized Archaeoglobus fulgidus polypeptide <400> 74 Met Gln Val Leu Arg Leu Asp Arg Arg His Tyr Lys Ser Gly Lys Ile 1 5 10 15 Arg Arg Ala Met Ser Ser Arg Ile Pro Gly Phe Tyr Lys Leu Ser Val 20 25 30 Glu Glu Arg Leu Lys Lys Val Ala Glu Phe Ala Gly Leu Ser Asp Glu 35 40 45 Glu Val Lys Ala Val Leu Ser Gln Gly Leu Pro Leu Asp Val Ala Asp 50 55 60 Arg Met Ile Glu Asn Val Ile Gly Thr Phe Glu Leu Pro Leu Gly Ile 65 70 75 80 Ala Thr Asn Phe Leu Ile Asp Gly Lys Asp Tyr Leu Ile Pro Met Ala 85 90 95 Ile Glu Glu Pro Ser Val Val Ala Ala Ala Ser Asn Ala Ala Arg Met 100 105 110 Ala Arg Glu Ser Gly Gly Phe Thr Thr Asp Tyr Thr Gly Ser Leu Met 115 120 125 Ile Gly Gln Ile Gln Val Thr Lys Leu Leu Asn Pro Asn Ala Ala Lys 130 135 140 Phe Glu Val Leu Arg Gln Lys Asp Glu Ile Ile Glu Arg Ala Asn Glu 145 150 155 160 Cys Asp Pro Met Leu Val Asn Leu Gly Gly Gly Cys Lys Asp Ile Glu 165 170 175 Ala Arg Val Ile Asp Thr Ile Met Gly Lys Met Leu Ile Val His Leu 180 185 190 Ile Val Asp Val Lys Asp Ala Met Gly Ala Asn Ala Val Asn Thr Met 195 200 205 Cys Glu Lys Val Ala Pro Phe Ile Glu Arg Ile Thr Gly Gly Lys Val 210 215 220 Tyr Leu Arg Ile Ile Ser Asn Leu Ala Ala Tyr Arg Leu Ala Arg Ala 225 230 235 240 Lys Ala Val Phe Asp Lys Asp Val Ile Gly Gly Glu Glu Val Val Glu 245 250 255 Gly Ile Met Leu Ala Tyr Ala Phe Ala Ala Ala Asp Pro Phe Arg Cys 260 265 270 Ala Thr His Asn Lys Gly Ile Met Asn Gly Ile Ser Ala Leu Met Ile 275 280 285 Ala Thr Gly Asn Asp Phe Arg Ala Ile Glu Ala Gly Ala His Ser Tyr 290 295 300 Ala Ala Ile Gly Gly Tyr Lys Pro Leu Thr Thr Tyr Glu Val Asp Arg 305 310 315 320 Lys Gly Asn Leu Val Gly Thr Ile Glu Ile Pro Met Ala Val Gly Val 325 330 335 Ile Gly Gly Ala Thr Lys Val Asn Pro Leu Ala Lys Ile Ser Leu Lys 340 345 350 Ile Leu Gly Val Asn Thr Ala Glu Glu Leu Ala Arg Val Ala Ala Ala 355 360 365 Leu Gly Leu Ala Gln Asn Phe Ala Ala Leu Arg Ala Leu Ala Thr Glu 370 375 380 Gly Ile Gln Arg Gly His Met Glu Leu His Ala Arg Asn Leu Ala Ile 385 390 395 400 Met Ala Gly Ala Thr Gly Asp Glu Val Asp Arg Val Val Glu Ile Met 405 410 415 Val Arg Asp Gly Lys Ile Arg Leu Asp Tyr Ala Lys Glu Val Leu Glu 420 425 430 Arg Leu Arg Ser 435 <210> 75 <211> 1311 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized Archaeoglobus fulgidus nucleotide sequence <400> 75 atgcaggtct taagattgga taggagacat tacaaaagtg gcaagattag aagagcaatg 60 agttctagaa ttcctggttt ctacaaattg tcagtcgagg aaagactgaa aaaggttgct 120 gaatttgcag ggttatctga tgaggaagtg aaagctgttt tgtcacaagg tttacctttg 180 gacgtagctg atagaatgat cgaaaatgtg atcggtacat ttgaattacc acttggtata 240 gcaaccaatt tccttattga tggcaaggat tatctaatcc ctatggctat agaggaacca 300 tcagtagttg cagctgcttc taacgcagct agaatggcca gagagtctgg cgggtttaca 360 actgattaca cagggtccct gatgattggt caaattcaag tcacaaaact gttgaatcca 420 aatgcagcta agttcgaagt tctacgtcaa aaagacgaaa tcatagaaag agcaaatgag 480 tgtgatccaa tgttggtgaa tttgggcggt ggatgtaaag atatagaagc aagggtgatc 540 gatacaatca tgggtaagat gctaattgtt catctgatcg ttgatgttaa agacgctatg 600 ggtgcaaatg ctgtcaacac tatgtgtgaa aaagttgctc ctttcatcga acgtattact 660 gggggaaagg tctatcttag aatcatttcc aacttggctg catatagact tgctagagca 720 aaggccgttt ttgacaaaga cgttattggc ggagaggagg ttgtagaagg gatcatgctt 780 gcatacgcct tcgctgccgc tgacccattt cgttgcgcca cccacaataa gggtatcatg 840 aatggcatat cagccttaat gatcgctaca ggaaacgact ttagagccat tgaagcagga 900 gctcattcct atgctgcaat aggtggatac aaaccactaa ctacctacga agttgataga 960 aaaggtaatc tagtaggcac aattgaaata cctatggcag taggcgtgat tggtggtgca 1020 accaaagtca acccactagc caagatctct cttaagatac taggagtgaa cactgctgaa 1080 gagttagcca gagtcgcagc cgctctaggt ttggctcaaa actttgctgc cttaagagcc 1140 ttggccacag aaggtatcca aagaggtcac atggaattac atgccaggaa cttagcaatc 1200 atggctggag ctactggaga tgaggttgac agagttgtag agattatggt gagagatggc 1260 aaaatcagat tggactacgc taaggaagta ttggagagac tgcgttccta a 1311 <210> 76 <211> 428 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized Pseudomonas mevalonii polypeptide <400> 76 Met Ser Leu Asp Ser Arg Leu Pro Ala Phe Arg Asn Leu Ser Pro Ala 1 5 10 15 Ala Arg Leu Asp His Ile Gly Gln Leu Leu Gly Leu Ser His Asp Asp 20 25 30 Val Ser Leu Leu Ala Asn Ala Gly Ala Leu Pro Met Asp Ile Ala Asn 35 40 45 Gly Met Ile Glu Asn Val Ile Gly Thr Phe Glu Leu Pro Tyr Ala Val 50 55 60 Ala Ser Asn Phe Gln Ile Asn Gly Arg Asp Val Leu Val Pro Leu Val 65 70 75 80 Val Glu Glu Pro Ser Ile Val Ala Ala Ala Ser Tyr Met Ala Lys Leu 85 90 95 Ala Arg Ala Asn Gly Gly Phe Thr Thr Ser Ser Ser Ala Pro Leu Met 100 105 110 His Ala Gln Val Gln Ile Val Gly Ile Gln Asp Pro Leu Asn Ala Arg 115 120 125 Leu Ser Leu Leu Arg Arg Lys Asp Glu Ile Ile Glu Leu Ala Asn Arg 130 135 140 Lys Asp Gln Leu Leu Asn Ser Leu Gly Gly Gly Cys Arg Asp Ile Glu 145 150 155 160 Val His Thr Phe Ala Asp Thr Pro Arg Gly Pro Met Leu Val Ala His 165 170 175 Leu Ile Val Asp Val Arg Asp Ala Met Gly Ala Asn Thr Val Asn Thr 180 185 190 Met Ala Glu Ala Val Ala Pro Leu Met Glu Ala Ile Thr Gly Gly Gln 195 200 205 Val Arg Leu Arg Ile Leu Ser Asn Leu Ala Asp Leu Arg Leu Ala Arg 210 215 220 Ala Gln Val Arg Ile Thr Pro Gln Gln Leu Glu Thr Ala Glu Phe Ser 225 230 235 240 Gly Glu Ala Val Ile Glu Gly Ile Leu Asp Ala Tyr Ala Phe Ala Ala 245 250 255 Val Asp Pro Tyr Arg Ala Ala Thr His Asn Lys Gly Ile Met Asn Gly 260 265 270 Ile Asp Pro Leu Ile Val Ala Thr Gly Asn Asp Trp Arg Ala Val Glu 275 280 285 Ala Gly Ala His Ala Tyr Ala Cys Arg Ser Gly His Tyr Gly Ser Leu 290 295 300 Thr Thr Trp Glu Lys Asp Asn Asn Gly His Leu Val Gly Thr Leu Glu 305 310 315 320 Met Pro Met Pro Val Gly Leu Val Gly Gly Ala Thr Lys Thr His Pro 325 330 335 Leu Ala Gln Leu Ser Leu Arg Ile Leu Gly Val Lys Thr Ala Gln Ala 340 345 350 Leu Ala Glu Ile Ala Val Ala Val Gly Leu Ala Gln Asn Leu Gly Ala 355 360 365 Met Arg Ala Leu Ala Thr Glu Gly Ile Gln Arg Gly His Met Ala Leu 370 375 380 His Ala Arg Asn Ile Ala Val Val Ala Gly Ala Arg Gly Asp Glu Val 385 390 395 400 Asp Trp Val Ala Arg Gln Leu Val Glu Tyr His Asp Val Arg Ala Asp 405 410 415 Arg Ala Val Ala Leu Leu Lys Gln Lys Arg Gly Gln 420 425 <210> 77 <211> 1287 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized Pseudomonas mevalonii nucleotide sequence <400> 77 atgtccttag attcaagact gccagctttc agaaatctgt ctccagctgc aagactagat 60 cacattggcc aacttttggg actaagtcat gacgacgttt cccttttagc aaacgccggt 120 gctttaccaa tggatatcgc taatggtatg attgaaaatg taatcgggac ctttgaactg 180 ccatatgcag tggccagtaa ctttcagatc aatggccgtg acgtcttagt accattagtt 240 gtggaggaac ctagtatcgt tgctgcagcc tcttacatgg caaagttagc tagagccaat 300 ggtgggttca ctacatcttc atctgctcca ctaatgcatg cacaagtaca aattgtcggc 360 attcaggatc cactaaacgc aagattgtct ttactgcgta gaaaggatga gatcatagaa 420 ttagccaata ggaaggacca acttctgaat tcattgggcg gtggttgcag agacatagag 480 gtgcatacat ttgccgatac tccaagagga ccaatgcttg tagcacacct tattgtcgat 540 gtgcgtgatg ccatgggagc taatactgtt aacactatgg ctgaagcagt agcacctctg 600 atggaagcca taacaggtgg ccaggtaaga ttgagaatcc tttccaattt ggctgatctt 660 agattggcca gagcccaagt gagaatcact cctcagcaat tggaaactgc cgaattctca 720 ggtgaggcag taattgaggg tatcttggac gcatatgctt ttgccgctgt ggacccttac 780 agagccgcta cccacaacaa aggcataatg aacggtatcg atcctttgat cgtcgctaca 840 ggaaatgatt ggagagctgt tgaggcagga gctcatgcat acgcttgtag atccggacat 900 tacggttcat taacaacatg ggaaaaagat aacaatggac acttggtcgg gacattggaa 960 atgcctatgc cagttggttt agttgggggt gctacaaaaa cccatcctct tgctcaattg 1020 tctttgagga tacttggtgt caaaactgct caagcactag ccgaaattgc cgttgctgtt 1080 ggtttggcac aaaacttggg tgcaatgcgt gctttagcta cagaaggcat ccaaagagga 1140 catatggctc tacacgctag aaacattgca gttgttgcag gagccagagg tgatgaggtt 1200 gattgggtgg ctagacaact tgtcgaatat catgatgtca gagcagacag ggctgtggca 1260 ttactgaaac agaagagagg tcaataa 1287 <210> 78 <211> 481 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 78 Met His Ile Thr Lys Pro His Ala Ala Met Phe Ser Ser Pro Gly Met 1 5 10 15 Gly His Val Ile Pro Val Ile Glu Leu Gly Lys Arg Leu Ser Ala Asn 20 25 30 Asn Gly Phe His Val Thr Val Phe Val Leu Glu Thr Asp Ala Ala Ser 35 40 45 Ala Gln Ser Lys Phe Leu Asn Ser Thr Gly Val Asp Ile Val Lys Leu 50 55 60 Pro Ser Pro Asp Ile Tyr Gly Leu Val Asp Pro Asp Asp His Val Val 65 70 75 80 Thr Lys Ile Gly Val Ile Met Arg Ala Ala Val Pro Ala Leu Arg Ser 85 90 95 Lys Ile Ala Ala Met His Gln Lys Pro Thr Ala Leu Ile Val Asp Leu 100 105 110 Phe Gly Thr Asp Ala Leu Cys Leu Ala Lys Glu Phe Asn Met Leu Ser 115 120 125 Tyr Val Phe Ile Pro Thr Asn Ala Arg Phe Leu Gly Val Ser Ile Tyr 130 135 140 Tyr Pro Asn Leu Asp Lys Asp Ile Lys Glu Glu His Thr Val Gln Arg 145 150 155 160 Asn Pro Leu Ala Ile Pro Gly Cys Glu Pro Val Arg Phe Glu Asp Thr 165 170 175 Leu Asp Ala Tyr Leu Val Pro Asp Glu Pro Val Tyr Arg Asp Phe Val 180 185 190 Arg His Gly Leu Ala Tyr Pro Lys Ala Asp Gly Ile Leu Val Asn Thr 195 200 205 Trp Glu Glu Met Glu Pro Lys Ser Leu Lys Ser Leu Leu Asn Pro Lys 210 215 220 Leu Leu Gly Arg Val Ala Arg Val Pro Val Tyr Pro Ile Gly Pro Leu 225 230 235 240 Cys Arg Pro Ile Gln Ser Ser Glu Thr Asp His Pro Val Leu Asp Trp 245 250 255 Leu Asn Glu Gln Pro Asn Glu Ser Val Leu Tyr Ile Ser Phe Gly Ser 260 265 270 Gly Gly Cys Leu Ser Ala Lys Gln Leu Thr Glu Leu Ala Trp Gly Leu 275 280 285 Glu Gln Ser Gln Gln Arg Phe Val Trp Val Val Arg Pro Pro Val Asp 290 295 300 Gly Ser Cys Cys Ser Glu Tyr Val Ser Ala Asn Gly Gly Gly Thr Glu 305 310 315 320 Asp Asn Thr Pro Glu Tyr Leu Pro Glu Gly Phe Val Ser Arg Thr Ser 325 330 335 Asp Arg Gly Phe Val Val Pro Ser Trp Ala Pro Gln Ala Glu Ile Leu 340 345 350 Ser His Arg Ala Val Gly Gly Phe Leu Thr His Cys Gly Trp Ser Ser 355 360 365 Thr Leu Glu Ser Val Val Gly Gly Val Pro Met Ile Ala Trp Pro Leu 370 375 380 Phe Ala Glu Gln Asn Met Asn Ala Ala Leu Leu Ser Asp Glu Leu Gly 385 390 395 400 Ile Ala Val Arg Leu Asp Asp Pro Lys Glu Asp Ile Ser Arg Trp Lys 405 410 415 Ile Glu Ala Leu Val Arg Lys Val Met Thr Glu Lys Glu Gly Glu Ala 420 425 430 Met Arg Arg Lys Val Lys Lys Leu Arg Asp Ser Ala Glu Met Ser Leu 435 440 445 Ser Ile Asp Gly Gly Gly Leu Ala His Glu Ser Leu Cys Arg Val Thr 450 455 460 Lys Glu Cys Gln Arg Phe Leu Glu Arg Val Val Asp Leu Ser Arg Gly 465 470 475 480 Ala <210> 79 <211> 806 <212> PRT <213> Coffea arabica <400> 79 Met Ala Glu Arg Val Leu Thr Arg Val His Ser Leu Arg Glu Arg Leu 1 5 10 15 Asp Ala Thr Leu Ala Ala His Arg Asn Asp Val Leu Leu Phe Met Ser 20 25 30 Arg Leu Glu Thr His Gly Lys Gly Ile Leu Lys Pro His Gln Leu Leu 35 40 45 Ala Glu Phe Glu Glu Ile Asn Lys Asp Gly Lys Gln Lys Ile His Asp 50 55 60 His Ala Phe Glu Glu Val Leu Lys Ser Thr Gln Glu Ala Ile Val Leu 65 70 75 80 Pro Pro Trp Val Ala Leu Ala Ile Arg Leu Arg Pro Gly Val Trp Glu 85 90 95 Tyr Val Arg Val Asn Val His Ala Leu Val Val Glu Glu Leu Thr Val 100 105 110 Pro Glu Tyr Leu His Phe Lys Glu Glu Leu Val Asp Gly Ser Lys Asn 115 120 125 Gly Asn Phe Val Leu Glu Leu Asp Phe Glu Pro Phe Thr Ala Ser Phe 130 135 140 Pro Lys Pro Thr Leu Thr Lys Tyr Ile Gly Asp Gly Val Glu Phe Leu 145 150 155 160 Asn Arg His Leu Ser Ala Lys Met Phe His Asp Lys Glu Ser Met Ala 165 170 175 Pro Leu Leu Asp Phe Leu Arg Val His Gln Tyr Lys Gly Lys Thr Met 180 185 190 Met Leu Asn Asp Arg Ile Lys Asp Leu Asn Thr Leu Gln Ala Val Leu 195 200 205 Arg Lys Ala Glu Glu Tyr Leu Thr Thr Leu Ser Ala Asp Thr Pro Tyr 210 215 220 Ser Glu Phe Glu His Lys Phe Gln Glu Ile Gly Leu Glu Arg Gly Trp 225 230 235 240 Gly Asp Thr Ala Glu Arg Val Leu Glu Met Ile Cys Met Leu Leu Asp 245 250 255 Leu Leu Gly Ala Pro Asp Ser Cys Thr Leu Glu Lys Phe Leu Gly Arg 260 265 270 Ile Pro Met Val Phe Asn Val Val Ile Leu Ser Pro His Gly Tyr Phe 275 280 285 Ala Gln Glu Asn Val Leu Gly Tyr Pro Asp Thr Gly Gly Gln Val Val 290 295 300 Tyr Ile Leu Asp Gln Val Pro Ala Leu Glu Arg Glu Met Leu Lys Arg 305 310 315 320 Ile Lys Glu Gln Gly Leu Asp Val Lys Pro Arg Ile Leu Ile Ile Thr 325 330 335 Arg Leu Leu Pro Asp Ala Pro Gly Thr Thr Cys Gly Gln Arg Leu Glu 340 345 350 Lys Val Tyr Gly Ser Glu Tyr Ser His Ile Leu Arg Val Pro Phe Arg 355 360 365 Thr Glu Lys Gly Val Val Arg Lys Trp Ile Ser Arg Phe Glu Val Trp 370 375 380 Pro Tyr Met Glu Thr Phe Thr Glu Asp Val Ala Lys Glu Val Thr Ala 385 390 395 400 Glu Leu Gln Ala Lys Pro Asp Leu Val Ile Gly Asn Tyr Ser Glu Gly 405 410 415 Asn Leu Val Ala Ser Leu Leu Ala His Lys Leu Gly Val Thr Gln Cys 420 425 430 Thr Ile Ala His Ala Leu Glu Lys Thr Lys Tyr Pro Asp Ser Asp Ile 435 440 445 Tyr Leu Ser Lys Phe Asp Glu Lys Tyr His Phe Ser Cys Gln Phe Thr 450 455 460 Ala Asp Leu Ile Ala Met Asn His Thr Asp Phe Ile Ile Thr Ser Thr 465 470 475 480 Phe Gln Glu Ile Ala Gly Ser Lys Asp Thr Val Gly Gln Tyr Glu Ser 485 490 495 His Met Ala Phe Thr Met Pro Gly Leu Tyr Arg Val Val His Gly Ile 500 505 510 Asp Val Phe Asp Pro Lys Phe Asn Ile Val Ser Pro Gly Ala Asp Thr 515 520 525 Asn Leu Tyr Phe Pro His Thr Glu Lys Glu Lys Arg Leu Thr Ser Phe 530 535 540 His Pro Glu Ile Glu Glu Leu Leu Phe Ser Asp Val Glu Asn Glu Glu 545 550 555 560 His Leu Cys Val Leu Lys Asp Lys Lys Lys Pro Ile Leu Phe Thr Met 565 570 575 Ala Arg Leu Asp Arg Val Lys Asn Leu Thr Gly Leu Val Glu Leu Tyr 580 585 590 Ala Lys Asn Pro Lys Leu Arg Glu Leu Val Asn Leu Val Val Val Gly 595 600 605 Gly Asp Arg Arg Lys Glu Ser Lys Asp Leu Glu Glu Gln Ala Glu Met 610 615 620 Lys Lys Met Tyr Ser Leu Ile Glu Thr Tyr Asn Leu Asn Gly Gln Phe 625 630 635 640 Arg Trp Ile Ser Ser Gln Met Asn Arg Val Arg Asn Gly Glu Leu Tyr 645 650 655 Arg Tyr Ile Ala Asp Thr Arg Gly Ala Phe Val Gln Pro Ala Phe Tyr 660 665 670 Glu Ala Phe Gly Leu Thr Val Val Glu Ala Met Thr Cys Gly Leu Pro 675 680 685 Thr Phe Ala Thr Asn His Gly Gly Pro Ala Glu Ile Ile Ile His Gly 690 695 700 Lys Ser Gly Phe His Ile Asp Pro Tyr His Gly Glu Gln Val Ser Glu 705 710 715 720 Leu Leu Ala Asn Phe Phe Glu Arg Cys Lys Lys Glu Pro Ser Tyr Trp 725 730 735 Asp Thr Ile Ser Ala Gly Gly Leu Lys Arg Ile Gln Glu Lys Tyr Thr 740 745 750 Trp Gln Ile Tyr Ser Asp Arg Leu Leu Thr Leu Ala Gly Val Tyr Gly 755 760 765 Phe Trp Lys Cys Val Ser Lys Leu Asp Arg Gln Glu Ile Arg Arg Tyr 770 775 780 Leu Glu Met Phe Tyr Ala Leu Lys Tyr Arg Lys Leu Ala Glu Ala Val 785 790 795 800 Pro Leu Ala Val Asp Gln 805 <210> 80 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 80 tgaattcgtt aacgaattc 19 <210> 81 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 81 tgaattcgtt aacgaactc 19 <210> 82 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 82 tgaattcgtt aacgaagtc 19 <210> 83 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 83 tgaattcgtt aacgaaatt 19 <210> 84 <211> 458 <212> PRT <213> Stevia rebaudiana <400> 84 Met Glu Asn Lys Thr Glu Thr Thr Val Arg Arg Arg Arg Arg Ile Ile 1 5 10 15 Leu Phe Pro Val Pro Phe Gln Gly His Ile Asn Pro Ile Leu Gln Leu 20 25 30 Ala Asn Val Leu Tyr Ser Lys Gly Phe Ser Ile Thr Ile Phe His Thr 35 40 45 Asn Phe Asn Lys Pro Lys Thr Ser Asn Tyr Pro His Phe Thr Phe Arg 50 55 60 Phe Ile Leu Asp Asn Asp Pro Gln Asp Glu Arg Ile Ser Asn Leu Pro 65 70 75 80 Thr His Gly Pro Leu Ala Gly Met Arg Ile Pro Ile Ile Asn Glu His 85 90 95 Gly Ala Asp Glu Leu Arg Arg Glu Leu Glu Leu Leu Met Leu Ala Ser 100 105 110 Glu Glu Asp Glu Glu Val Ser Cys Leu Ile Thr Asp Ala Leu Trp Tyr 115 120 125 Phe Ala Gln Ser Val Ala Asp Ser Leu Asn Leu Arg Arg Leu Val Leu 130 135 140 Met Thr Ser Ser Leu Phe Asn Phe His Ala His Val Ser Leu Pro Gln 145 150 155 160 Phe Asp Glu Leu Gly Tyr Leu Asp Pro Asp Asp Lys Thr Arg Leu Glu 165 170 175 Glu Gln Ala Ser Gly Phe Pro Met Leu Lys Val Lys Asp Ile Lys Ser 180 185 190 Ala Tyr Ser Asn Trp Gln Ile Leu Lys Glu Ile Leu Gly Lys Met Ile 195 200 205 Lys Gln Thr Lys Ala Ser Ser Gly Val Ile Trp Asn Ser Phe Lys Glu 210 215 220 Leu Glu Glu Ser Glu Leu Glu Thr Val Ile Arg Glu Ile Pro Ala Pro 225 230 235 240 Ser Phe Leu Ile Pro Leu Pro Lys His Leu Thr Ala Ser Ser Ser Ser 245 250 255 Leu Leu Asp His Asp Arg Thr Val Phe Gln Trp Leu Asp Gln Gln Pro 260 265 270 Pro Ser Ser Val Leu Tyr Val Ser Phe Gly Ser Thr Ser Glu Val Asp 275 280 285 Glu Lys Asp Phe Leu Glu Ile Ala Arg Gly Leu Val Asp Ser Lys Gln 290 295 300 Ser Phe Leu Trp Val Val Arg Pro Gly Phe Val Lys Gly Ser Thr Trp 305 310 315 320 Val Glu Pro Leu Pro Asp Gly Phe Leu Gly Glu Arg Gly Arg Ile Val 325 330 335 Lys Trp Val Pro Gln Gln Glu Val Leu Ala His Gly Ala Ile Gly Ala 340 345 350 Phe Trp Thr His Ser Gly Trp Asn Ser Thr Leu Glu Ser Val Cys Glu 355 360 365 Gly Val Pro Met Ile Phe Ser Asp Phe Gly Leu Asp Gln Pro Leu Asn 370 375 380 Ala Arg Tyr Met Ser Asp Val Leu Lys Val Gly Val Tyr Leu Glu Asn 385 390 395 400 Gly Trp Glu Arg Gly Glu Ile Ala Asn Ala Ile Arg Arg Val Met Val 405 410 415 Asp Glu Glu Gly Glu Tyr Ile Arg Gln Asn Ala Arg Val Leu Lys Gln 420 425 430 Lys Ala Asp Val Ser Leu Met Lys Gly Gly Ser Ser Tyr Glu Ser Leu 435 440 445 Glu Ser Leu Val Ser Tyr Ile Ser Ser Leu 450 455 <210> 85 <211> 473 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> UGT91D2 <400> 85 Met Ala Thr Ser Asp Ser Ile Val Asp Asp Arg Lys Gln Leu His Val 1 5 10 15 Ala Thr Phe Pro Trp Leu Ala Phe Gly His Ile Leu Pro Tyr Leu Gln 20 25 30 Leu Ser Lys Leu Ile Ala Glu Lys Gly His Lys Val Ser Phe Leu Ser 35 40 45 Thr Thr Arg Asn Ile Gln Arg Leu Ser Ser His Ile Ser Pro Leu Ile 50 55 60 Asn Val Val Gln Leu Thr Leu Pro Arg Val Gln Glu Leu Pro Glu Asp 65 70 75 80 Ala Glu Ala Thr Thr Asp Val His Pro Glu Asp Ile Pro Tyr Leu Lys 85 90 95 Lys Ala Ser Asp Gly Leu Gln Pro Glu Val Thr Arg Phe Leu Glu Gln 100 105 110 His Ser Pro Asp Trp Ile Ile Tyr Asp Tyr Thr His Tyr Trp Leu Pro 115 120 125 Ser Ile Ala Ala Ser Leu Gly Ile Ser Arg Ala His Phe Ser Val Thr 130 135 140 Thr Pro Trp Ala Ile Ala Tyr Met Gly Pro Ser Ala Asp Ala Met Ile 145 150 155 160 Asn Gly Ser Asp Gly Arg Thr Thr Val Glu Asp Leu Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Lys Trp Phe Pro Phe Pro Thr Lys Val Cys Trp Arg Lys His Asp Leu 180 185 190 Ala Arg Leu Val Pro Tyr Lys Ala Pro Gly Ile Ser Asp Arg Cys Arg 195 200 205 Met Gly Leu Val Leu Lys Gly Ser Asp Cys Leu Leu Ser Lys Cys Tyr 210 215 220 His Glu Phe Gly Thr Gln Trp Leu Pro Leu Leu Glu Thr Leu His Gln 225 230 235 240 Val Pro Val Val Pro Val Gly Leu Leu Pro Pro Glu Ile Pro Gly Asp 245 250 255 Glu Lys Asp Glu Thr Trp Val Ser Ile Lys Lys Trp Leu Asp Gly Lys 260 265 270 Gln Lys Gly Ser Val Val Tyr Val Ala Leu Gly Ser Glu Val Leu Val 275 280 285 Ser Gln Thr Glu Val Val Glu Leu Ala Leu Gly Leu Glu Leu Ser Gly 290 295 300 Leu Pro Phe Val Trp Ala Tyr Arg Lys Pro Lys Gly Pro Ala Lys Ser 305 310 315 320 Asp Ser Val Glu Leu Pro Asp Gly Phe Val Glu Arg Thr Arg Asp Arg 325 330 335 Gly Leu Val Trp Thr Ser Arg Ala Pro Gln Leu Arg Ile Leu Ser His 340 345 350 Glu Ser Val Cys Gly Phe Leu Thr His Cys Gly Ser Gly Ser Ile Val 355 360 365 Glu Gly Leu Met Phe Gly His Pro Leu Ile Met Leu Pro Ile Phe Gly 370 375 380 Asp Gln Pro Leu Asn Ala Arg Leu Leu Glu Asp Lys Gln Val Gly Ile 385 390 395 400 Glu Ile Pro Arg Asn Glu Glu Asp Gly Cys Leu Thr Lys Glu Ser Val 405 410 415 Ala Arg Ser Leu Arg Ser Val Val Val Glu Lys Glu Gly Glu Ile Tyr 420 425 430 Lys Ala Asn Ala Arg Glu Leu Ser Lys Ile Tyr Asn Asp Thr Lys Val 435 440 445 Glu Lys Glu Tyr Val Ser Gln Phe Val Asp Tyr Leu Glu Lys Asn Ala 450 455 460 Arg Ala Val Ala Ile Asp His Glu Ser 465 470 <210> 86 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 86 Thr Ser Phe Ala Glu Tyr Trp Asn Leu Leu Ser Pro 1 5 10 <210> 87 <211> 630 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 87 Met Cys Asn Thr Asn Met Ser Val Pro Thr Asp Gly Ala Val Thr Thr 1 5 10 15 Ser Gln Ile Pro Ala Ser Glu Gln Glu Thr Leu Val Arg Pro Lys Pro 20 25 30 Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys Ser Val Gly Ala Gln Lys Asp Thr Tyr 35 40 45 Thr Met Lys Glu Val Leu Phe Tyr Leu Gly Gln Tyr Ile Met Thr Lys 50 55 60 Arg Leu Tyr Asp Glu Lys Gln Gln His Ile Val Tyr Cys Ser Asn Asp 65 70 75 80 Leu Leu Gly Asp Leu Phe Gly Val Pro Ser Phe Ser Val Lys Glu His 85 90 95 Arg Lys Ile Tyr Thr Met Ile Tyr Arg Asn Leu Val Val Val Asn Gln 100 105 110 Gln Glu Ser Ser Asp Ser Gly Thr Ser Val Ser Glu Asn Arg Cys His 115 120 125 Leu Glu Gly Gly Ser Asp Gln Lys Asp Leu Val Gln Glu Leu Gln Glu 130 135 140 Glu Lys Pro Ser Ser Ser His Leu Val Ser Arg Pro Ser Thr Gly Gly 145 150 155 160 Ser Gly Ser Ser Gly Gly Ser Ala Ser Lys Met Ala Glu Gln Gln Lys 165 170 175 Ile Lys Lys Ser Pro His Val Leu Leu Ile Pro Phe Pro Leu Gln Gly 180 185 190 His Ile Asn Pro Phe Ile Gln Phe Gly Lys Arg Leu Ile Ser Lys Gly 195 200 205 Val Lys Thr Thr Leu Val Thr Thr Ile His Thr Leu Asn Ser Thr Leu 210 215 220 Asn His Ser Asn Thr Thr Thr Thr Ser Ile Glu Ile Gln Ala Ile Ser 225 230 235 240 Asp Gly Cys Asp Glu Gly Gly Phe Met Ser Ala Gly Glu Ser Tyr Leu 245 250 255 Glu Thr Phe Lys Gln Val Gly Ser Lys Ser Leu Ala Asp Leu Ile Lys 260 265 270 Lys Leu Gln Ser Glu Gly Thr Thr Ile Asp Ala Ile Ile Tyr Asp Ser 275 280 285 Met Thr Glu Trp Val Leu Asp Val Ala Ile Glu Phe Gly Ile Asp Gly 290 295 300 Gly Ser Phe Phe Thr Gln Ala Cys Val Val Asn Ser Leu Tyr Tyr His 305 310 315 320 Val His Lys Gly Leu Ile Ser Leu Pro Leu Gly Glu Thr Val Ser Val 325 330 335 Pro Gly Phe Pro Val Leu Gln Arg Trp Glu Thr Pro Leu Ile Leu Gln 340 345 350 Asn His Glu Gln Ile Gln Ser Pro Trp Ser Gln Met Leu Phe Gly Gln 355 360 365 Phe Ala Asn Ile Asp Gln Ala Arg Trp Val Phe Thr Asn Ser Phe Tyr 370 375 380 Lys Leu Glu Glu Glu Val Ile Glu Trp Thr Arg Lys Ile Trp Asn Leu 385 390 395 400 Lys Val Ile Gly Pro Thr Leu Pro Ser Met Tyr Leu Asp Lys Arg Leu 405 410 415 Asp Asp Asp Lys Asp Asn Gly Phe Asn Leu Tyr Lys Ala Asn His His 420 425 430 Glu Cys Met Asn Trp Leu Asp Asp Lys Pro Lys Glu Ser Val Val Tyr 435 440 445 Val Ala Phe Gly Ser Leu Val Lys His Gly Pro Glu Gln Val Glu Glu 450 455 460 Ile Thr Arg Ala Leu Ile Asp Ser Asp Val Asn Phe Leu Trp Val Ile 465 470 475 480 Lys His Lys Glu Glu Gly Lys Leu Pro Glu Asn Leu Ser Glu Val Ile 485 490 495 Lys Thr Gly Lys Gly Leu Ile Val Ala Trp Cys Lys Gln Leu Asp Val 500 505 510 Leu Ala His Glu Ser Val Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Phe Asn 515 520 525 Ser Thr Leu Glu Ala Ile Ser Leu Gly Val Pro Val Val Ala Met Pro 530 535 540 Gln Phe Ser Asp Gln Thr Thr Asn Ala Lys Leu Leu Asp Glu Ile Leu 545 550 555 560 Gly Val Gly Val Arg Val Lys Ala Asp Glu Asn Gly Ile Val Arg Arg 565 570 575 Gly Asn Leu Ala Ser Cys Ile Lys Met Ile Met Glu Glu Glu Arg Gly 580 585 590 Val Ile Ile Arg Lys Asn Ala Val Lys Trp Lys Asp Leu Ala Lys Val 595 600 605 Ala Val His Glu Gly Gly Ser Ser Asp Asn Asp Ile Val Glu Phe Val 610 615 620 Ser Glu Leu Ile Lys Ala 625 630 <210> 88 <211> 533 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 88 Met Thr Ser Phe Ala Glu Tyr Trp Asn Leu Leu Ser Pro Thr Ser Phe 1 5 10 15 Ala Glu Tyr Trp Asn Leu Leu Ser Pro Thr Ser Phe Ala Glu Tyr Trp 20 25 30 Asn Leu Phe Ser Pro Thr Ser Phe Ala Glu Tyr Trp Asn Leu Leu Ser 35 40 45 Pro Ala Ser Lys Met Asp Ala Met Ala Thr Thr Glu Lys Lys Pro His 50 55 60 Val Ile Phe Ile Pro Phe Pro Ala Gln Ser His Ile Lys Ala Met Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ala Gln Leu Leu His His Lys Gly Leu Gln Ile Thr Phe Val 85 90 95 Asn Thr Asp Phe Ile His Asn Gln Phe Leu Glu Ser Ser Gly Pro His 100 105 110 Cys Leu Asp Gly Ala Pro Gly Phe Arg Phe Glu Thr Ile Pro Asp Gly 115 120 125 Val Ser His Ser Pro Glu Ala Ser Ile Pro Ile Arg Glu Ser Leu Leu 130 135 140 Arg Ser Ile Glu Thr Asn Phe Leu Asp Arg Phe Ile Asp Leu Val Thr 145 150 155 160 Lys Leu Pro Asp Pro Pro Thr Cys Ile Ile Ser Asp Gly Phe Leu Ser 165 170 175 Val Phe Thr Ile Asp Ala Ala Lys Lys Leu Gly Ile Pro Val Met Met 180 185 190 Tyr Trp Thr Leu Ala Ala Cys Gly Phe Met Gly Phe Tyr His Ile His 195 200 205 Ser Leu Ile Glu Lys Gly Phe Ala Pro Leu Lys Asp Ala Ser Tyr Leu 210 215 220 Thr Asn Gly Tyr Leu Asp Thr Val Ile Asp Trp Val Pro Gly Met Glu 225 230 235 240 Gly Ile Arg Leu Lys Asp Phe Pro Leu Asp Trp Ser Thr Asp Leu Asn 245 250 255 Asp Lys Val Leu Met Phe Thr Thr Glu Ala Pro Gln Arg Ser His Lys 260 265 270 Val Ser His His Ile Phe His Thr Phe Asp Glu Leu Glu Pro Ser Ile 275 280 285 Ile Lys Thr Leu Ser Leu Arg Tyr Asn His Ile Tyr Thr Ile Gly Pro 290 295 300 Leu Gln Leu Leu Leu Asp Gln Ile Pro Glu Glu Lys Lys Gln Thr Gly 305 310 315 320 Ile Thr Ser Leu His Gly Tyr Ser Leu Val Lys Glu Glu Pro Glu Cys 325 330 335 Phe Gln Trp Leu Gln Ser Lys Glu Pro Asn Ser Val Val Tyr Val Asn 340 345 350 Phe Gly Ser Thr Thr Val Met Ser Leu Glu Asp Met Thr Glu Phe Gly 355 360 365 Trp Gly Leu Ala Asn Ser Asn His Tyr Phe Leu Trp Ile Ile Arg Ser 370 375 380 Asn Leu Val Ile Gly Glu Asn Ala Val Leu Pro Pro Glu Leu Glu Glu 385 390 395 400 His Ile Lys Lys Arg Gly Phe Ile Ala Ser Trp Cys Ser Gln Glu Lys 405 410 415 Val Leu Lys His Pro Ser Val Gly Gly Phe Leu Thr His Cys Gly Trp 420 425 430 Gly Ser Thr Ile Glu Ser Leu Ser Ala Gly Val Pro Met Ile Cys Trp 435 440 445 Pro Tyr Ser Trp Asp Gln Leu Thr Asn Cys Arg Tyr Ile Cys Lys Glu 450 455 460 Trp Glu Val Gly Leu Glu Met Gly Thr Lys Val Lys Arg Asp Glu Val 465 470 475 480 Lys Arg Leu Val Gln Glu Leu Met Gly Glu Gly Gly His Lys Met Arg 485 490 495 Asn Lys Ala Lys Asp Trp Lys Glu Lys Ala Arg Ile Ala Ile Ala Pro 500 505 510 Asn Gly Ser Ser Ser Leu Asn Ile Asp Lys Met Val Lys Glu Ile Thr 515 520 525 Val Leu Ala Arg Asn 530 <210> 89 <211> 628 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 89 Met Cys Asn Thr Asn Met Ser Val Pro Thr Asp Gly Ala Val Thr Thr 1 5 10 15 Ser Gln Ile Pro Ala Ser Glu Gln Glu Thr Leu Val Arg Pro Lys Pro 20 25 30 Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys Ser Val Gly Ala Gln Lys Asp Thr Tyr 35 40 45 Thr Met Lys Glu Val Leu Phe Tyr Leu Gly Gln Tyr Ile Met Thr Lys 50 55 60 Arg Leu Tyr Asp Glu Lys Gln Gln His Ile Val Tyr Cys Ser Asn Asp 65 70 75 80 Leu Leu Gly Asp Leu Phe Gly Val Pro Ser Phe Ser Val Lys Glu His 85 90 95 Arg Lys Ile Tyr Thr Met Ile Tyr Arg Asn Leu Val Val Val Asn Gln 100 105 110 Gln Glu Ser Ser Asp Ser Gly Thr Ser Val Ser Glu Asn Arg Cys His 115 120 125 Leu Glu Gly Gly Ser Asp Gln Lys Asp Leu Val Gln Glu Leu Gln Glu 130 135 140 Glu Lys Pro Ser Ser Ser His Leu Val Ser Arg Pro Ser Thr Gly Gly 145 150 155 160 Ser Gly Ser Ser Gly Gly Ser Ala Ser Lys Met Glu Asn Lys Thr Glu 165 170 175 Thr Thr Val Arg Arg Arg Arg Arg Ile Ile Leu Phe Pro Val Pro Phe 180 185 190 Gln Gly His Ile Asn Pro Ile Leu Gln Leu Ala Asn Val Leu Tyr Ser 195 200 205 Lys Gly Phe Ser Ile Thr Ile Phe His Thr Asn Phe Asn Lys Pro Lys 210 215 220 Thr Ser Asn Tyr Pro His Phe Thr Phe Arg Phe Ile Leu Asp Asn Asp 225 230 235 240 Pro Gln Asp Glu Arg Ile Ser Asn Leu Pro Thr His Gly Pro Leu Ala 245 250 255 Gly Met Arg Ile Pro Ile Ile Asn Glu His Gly Ala Asp Glu Leu Arg 260 265 270 Arg Glu Leu Glu Leu Leu Met Leu Ala Ser Glu Glu Asp Glu Glu Val 275 280 285 Ser Cys Leu Ile Thr Asp Ala Leu Trp Tyr Phe Ala Gln Ser Val Ala 290 295 300 Asp Ser Leu Asn Leu Arg Arg Leu Val Leu Met Thr Ser Ser Leu Phe 305 310 315 320 Asn Phe His Ala His Val Ser Leu Pro Gln Phe Asp Glu Leu Gly Tyr 325 330 335 Leu Asp Pro Asp Asp Lys Thr Arg Leu Glu Glu Gln Ala Ser Gly Phe 340 345 350 Pro Met Leu Lys Val Lys Asp Ile Lys Ser Ala Tyr Ser Asn Trp Gln 355 360 365 Ile Leu Lys Glu Ile Leu Gly Lys Met Ile Lys Gln Thr Lys Ala Ser 370 375 380 Ser Gly Val Ile Trp Asn Ser Phe Lys Glu Leu Glu Glu Ser Glu Leu 385 390 395 400 Glu Thr Val Ile Arg Glu Ile Pro Ala Pro Ser Phe Leu Ile Pro Leu 405 410 415 Pro Lys His Leu Thr Ala Ser Ser Ser Ser Leu Leu Asp His Asp Arg 420 425 430 Thr Val Phe Gln Trp Leu Asp Gln Gln Pro Pro Ser Ser Val Leu Tyr 435 440 445 Val Ser Phe Gly Ser Thr Ser Glu Val Asp Glu Lys Asp Phe Leu Glu 450 455 460 Ile Ala Arg Gly Leu Val Asp Ser Lys Gln Ser Phe Leu Trp Val Val 465 470 475 480 Arg Pro Gly Phe Val Lys Gly Ser Thr Trp Val Glu Pro Leu Pro Asp 485 490 495 Gly Phe Leu Gly Glu Arg Gly Arg Ile Val Lys Trp Val Pro Gln Gln 500 505 510 Glu Val Leu Ala His Gly Ala Ile Gly Ala Phe Trp Thr His Ser Gly 515 520 525 Trp Asn Ser Thr Leu Glu Ser Val Cys Glu Gly Val Pro Met Ile Phe 530 535 540 Ser Asp Phe Gly Leu Asp Gln Pro Leu Asn Ala Arg Tyr Met Ser Asp 545 550 555 560 Val Leu Lys Val Gly Val Tyr Leu Glu Asn Gly Trp Glu Arg Gly Glu 565 570 575 Ile Ala Asn Ala Ile Arg Arg Val Met Val Asp Glu Glu Gly Glu Tyr 580 585 590 Ile Arg Gln Asn Ala Arg Val Leu Lys Gln Lys Ala Asp Val Ser Leu 595 600 605 Met Lys Gly Gly Ser Ser Tyr Glu Ser Leu Glu Ser Leu Val Ser Tyr 610 615 620 Ile Ser Ser Leu 625 <210> 90 <211> 643 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 90 Met Cys Asn Thr Asn Met Ser Val Pro Thr Asp Gly Ala Val Thr Thr 1 5 10 15 Ser Gln Ile Pro Ala Ser Glu Gln Glu Thr Leu Val Arg Pro Lys Pro 20 25 30 Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys Ser Val Gly Ala Gln Lys Asp Thr Tyr 35 40 45 Thr Met Lys Glu Val Leu Phe Tyr Leu Gly Gln Tyr Ile Met Thr Lys 50 55 60 Arg Leu Tyr Asp Glu Lys Gln Gln His Ile Val Tyr Cys Ser Asn Asp 65 70 75 80 Leu Leu Gly Asp Leu Phe Gly Val Pro Ser Phe Ser Val Lys Glu His 85 90 95 Arg Lys Ile Tyr Thr Met Ile Tyr Arg Asn Leu Val Val Val Asn Gln 100 105 110 Gln Glu Ser Ser Asp Ser Gly Thr Ser Val Ser Glu Asn Arg Cys His 115 120 125 Leu Glu Gly Gly Ser Asp Gln Lys Asp Leu Val Gln Glu Leu Gln Glu 130 135 140 Glu Lys Pro Ser Ser Ser His Leu Val Ser Arg Pro Ser Thr Gly Gly 145 150 155 160 Ser Gly Ser Ser Gly Gly Ser Ala Ser Lys Met Ala Thr Ser Asp Ser 165 170 175 Ile Val Asp Asp Arg Lys Gln Leu His Val Ala Thr Phe Pro Trp Leu 180 185 190 Ala Phe Gly His Ile Leu Pro Tyr Leu Gln Leu Ser Lys Leu Ile Ala 195 200 205 Glu Lys Gly His Lys Val Ser Phe Leu Ser Thr Thr Arg Asn Ile Gln 210 215 220 Arg Leu Ser Ser His Ile Ser Pro Leu Ile Asn Val Val Gln Leu Thr 225 230 235 240 Leu Pro Arg Val Gln Glu Leu Pro Glu Asp Ala Glu Ala Thr Thr Asp 245 250 255 Val His Pro Glu Asp Ile Pro Tyr Leu Lys Lys Ala Ser Asp Gly Leu 260 265 270 Gln Pro Glu Val Thr Arg Phe Leu Glu Gln His Ser Pro Asp Trp Ile 275 280 285 Ile Tyr Asp Tyr Thr His Tyr Trp Leu Pro Ser Ile Ala Ala Ser Leu 290 295 300 Gly Ile Ser Arg Ala His Phe Ser Val Thr Thr Pro Trp Ala Ile Ala 305 310 315 320 Tyr Met Gly Pro Ser Ala Asp Ala Met Ile Asn Gly Ser Asp Gly Arg 325 330 335 Thr Thr Val Glu Asp Leu Thr Thr Pro Pro Lys Trp Phe Pro Phe Pro 340 345 350 Thr Lys Val Cys Trp Arg Lys His Asp Leu Ala Arg Leu Val Pro Tyr 355 360 365 Lys Ala Pro Gly Ile Ser Asp Gly Tyr Arg Met Gly Leu Val Leu Lys 370 375 380 Gly Ser Asp Cys Leu Leu Ser Lys Cys Tyr His Glu Phe Gly Thr Gln 385 390 395 400 Trp Leu Pro Leu Leu Glu Thr Leu His Gln Val Pro Val Val Pro Val 405 410 415 Gly Leu Leu Pro Pro Glu Ile Pro Gly Asp Glu Lys Asp Glu Thr Trp 420 425 430 Val Ser Ile Lys Lys Trp Leu Asp Gly Lys Gln Lys Gly Ser Val Val 435 440 445 Tyr Val Ala Leu Gly Ser Glu Val Leu Val Ser Gln Thr Glu Val Val 450 455 460 Glu Leu Ala Leu Gly Leu Glu Leu Ser Gly Leu Pro Phe Val Trp Ala 465 470 475 480 Tyr Arg Lys Pro Lys Gly Pro Ala Lys Ser Asp Ser Val Glu Leu Pro 485 490 495 Asp Gly Phe Val Glu Arg Thr Arg Asp Arg Gly Leu Val Trp Thr Ser 500 505 510 Trp Ala Pro Gln Leu Arg Ile Leu Ser His Glu Ser Val Cys Gly Phe 515 520 525 Leu Thr His Cys Gly Ser Gly Ser Ile Val Glu Gly Leu Met Phe Gly 530 535 540 His Pro Leu Ile Met Leu Pro Ile Phe Gly Asp Gln Pro Leu Asn Ala 545 550 555 560 Arg Leu Leu Glu Asp Lys Gln Val Gly Ile Glu Ile Pro Arg Asn Glu 565 570 575 Glu Asp Gly Cys Leu Thr Lys Glu Ser Val Ala Arg Ser Leu Arg Ser 580 585 590 Val Val Val Glu Lys Glu Gly Glu Ile Tyr Lys Ala Asn Ala Arg Glu 595 600 605 Leu Ser Lys Ile Tyr Asn Asp Thr Lys Val Glu Lys Glu Tyr Val Ser 610 615 620 Gln Phe Val Asp Tyr Leu Glu Lys Asn Ala Arg Ala Val Ala Ile Asp 625 630 635 640 His Glu Ser <210> 91 <211> 110 <212> PRT <213> Escherichia coli <400> 91 Met Asn Pro Tyr Ile Tyr Leu Gly Gly Ala Ile Leu Ala Glu Val Ile 1 5 10 15 Gly Thr Thr Leu Met Lys Phe Ser Glu Gly Phe Thr Arg Leu Trp Pro 20 25 30 Ser Val Gly Thr Ile Ile Cys Tyr Cys Ala Ser Phe Trp Leu Leu Ala 35 40 45 Gln Thr Leu Ala Tyr Ile Pro Thr Gly Ile Ala Tyr Ala Ile Trp Ser 50 55 60 Gly Val Gly Ile Val Leu Ile Ser Leu Leu Ser Trp Gly Phe Phe Gly 65 70 75 80 Gln Arg Leu Asp Leu Pro Ala Ile Ile Gly Met Met Leu Ile Cys Ala 85 90 95 Gly Val Leu Ile Ile Asn Leu Leu Ser Arg Ser Thr Pro His 100 105 110 <210> 92 <211> 1049 <212> PRT <213> Escherichia coli <400> 92 Met Pro Asn Phe Phe Ile Asp Arg Pro Ile Phe Ala Trp Val Ile Ala 1 5 10 15 Ile Ile Ile Met Leu Ala Gly Gly Leu Ala Ile Leu Lys Leu Pro Val 20 25 30 Ala Gln Tyr Pro Thr Ile Ala Pro Pro Ala Val Thr Ile Ser Ala Ser 35 40 45 Tyr Pro Gly Ala Asp Ala Lys Thr Val Gln Asp Thr Val Thr Gln Val 50 55 60 Ile Glu Gln Asn Met Asn Gly Ile Asp Asn Leu Met Tyr Met Ser Ser 65 70 75 80 Asn Ser Asp Ser Thr Gly Thr Val Gln Ile Thr Leu Thr Phe Glu Ser 85 90 95 Gly Thr Asp Ala Asp Ile Ala Gln Val Gln Val Gln Asn Lys Leu Gln 100 105 110 Leu Ala Met Pro Leu Leu Pro Gln Glu Val Gln Gln Gln Gly Val Ser 115 120 125 Val Glu Lys Ser Ser Ser Ser Phe Leu Met Val Val Gly Val Ile Asn 130 135 140 Thr Asp Gly Thr Met Thr Gln Glu Asp Ile Ser Asp Tyr Val Ala Ala 145 150 155 160 Asn Met Lys Asp Ala Ile Ser Arg Thr Ser Gly Val Gly Asp Val Gln 165 170 175 Leu Phe Gly Ser Gln Tyr Ala Met Arg Ile Trp Met Asn Pro Asn Glu 180 185 190 Leu Asn Lys Phe Gln Leu Thr Pro Val Asp Val Ile Thr Ala Ile Lys 195 200 205 Ala Gln Asn Ala Gln Val Ala Ala Gly Gln Leu Gly Gly Thr Pro Pro 210 215 220 Val Lys Gly Gln Gln Leu Asn Ala Ser Ile Ile Ala Gln Thr Arg Leu 225 230 235 240 Thr Ser Thr Glu Glu Phe Gly Lys Ile Leu Leu Lys Val Asn Gln Asp 245 250 255 Gly Ser Arg Val Leu Leu Arg Asp Val Ala Lys Ile Glu Leu Gly Gly 260 265 270 Glu Asn Tyr Asp Ile Ile Ala Glu Phe Asn Gly Gln Pro Ala Ser Gly 275 280 285 Leu Gly Ile Lys Leu Ala Thr Gly Ala Asn Ala Leu Asp Thr Ala Ala 290 295 300 Ala Ile Arg Ala Glu Leu Ala Lys Met Glu Pro Phe Phe Pro Ser Gly 305 310 315 320 Leu Lys Ile Val Tyr Pro Tyr Asp Thr Thr Pro Phe Val Lys Ile Ser 325 330 335 Ile His Glu Val Val Lys Thr Leu Val Glu Ala Ile Ile Leu Val Phe 340 345 350 Leu Val Met Tyr Leu Phe Leu Gln Asn Phe Arg Ala Thr Leu Ile Pro 355 360 365 Thr Ile Ala Val Pro Val Val Leu Leu Gly Thr Phe Ala Val Leu Ala 370 375 380 Ala Phe Gly Phe Ser Ile Asn Thr Leu Thr Met Phe Gly Met Val Leu 385 390 395 400 Ala Ile Gly Leu Leu Val Asp Asp Ala Ile Val Val Val Glu Asn Val 405 410 415 Glu Arg Val Met Ala Glu Glu Gly Leu Pro Pro Lys Glu Ala Thr Arg 420 425 430 Lys Ser Met Gly Gln Ile Gln Gly Ala Leu Val Gly Ile Ala Met Val 435 440 445 Leu Ser Ala Val Phe Val Pro Met Ala Phe Phe Gly Gly Ser Thr Gly 450 455 460 Ala Ile Tyr Arg Gln Phe Ser Ile Thr Ile Val Ser Ala Met Ala Leu 465 470 475 480 Ser Val Leu Val Ala Leu Ile Leu Thr Pro Ala Leu Cys Ala Thr Met 485 490 495 Leu Lys Pro Ile Ala Lys Gly Asp His Gly Glu Gly Lys Lys Gly Phe 500 505 510 Phe Gly Trp Phe Asn Arg Met Phe Glu Lys Ser Thr His His Tyr Thr 515 520 525 Asp Ser Val Gly Gly Ile Leu Arg Ser Thr Gly Arg Tyr Leu Val Leu 530 535 540 Tyr Leu Ile Ile Val Val Gly Met Ala Tyr Leu Phe Val Arg Leu Pro 545 550 555 560 Ser Ser Phe Leu Pro Asp Glu Asp Gln Gly Val Phe Met Thr Met Val 565 570 575 Gln Leu Pro Ala Gly Ala Thr Gln Glu Arg Thr Gln Lys Val Leu Asn 580 585 590 Glu Val Thr His Tyr Tyr Leu Thr Lys Glu Lys Asn Asn Val Glu Ser 595 600 605 Val Phe Ala Val Asn Gly Phe Gly Phe Ala Gly Arg Gly Gln Asn Thr 610 615 620 Gly Ile Ala Phe Val Ser Leu Lys Asp Trp Ala Asp Arg Pro Gly Glu 625 630 635 640 Glu Asn Lys Val Glu Ala Ile Thr Met Arg Ala Thr Arg Ala Phe Ser 645 650 655 Gln Ile Lys Asp Ala Met Val Phe Ala Phe Asn Leu Pro Ala Ile Val 660 665 670 Glu Leu Gly Thr Ala Thr Gly Phe Asp Phe Glu Leu Ile Asp Gln Ala 675 680 685 Gly Leu Gly His Glu Lys Leu Thr Gln Ala Arg Asn Gln Leu Leu Ala 690 695 700 Glu Ala Ala Lys His Pro Asp Met Leu Thr Ser Val Arg Pro Asn Gly 705 710 715 720 Leu Glu Asp Thr Pro Gln Phe Lys Ile Asp Ile Asp Gln Glu Lys Ala 725 730 735 Gln Ala Leu Gly Val Ser Ile Asn Asp Ile Asn Thr Thr Leu Gly Ala 740 745 750 Ala Trp Gly Gly Ser Tyr Val Asn Asp Phe Ile Asp Arg Gly Arg Val 755 760 765 Lys Lys Val Tyr Val Met Ser Glu Ala Lys Tyr Arg Met Leu Pro Asp 770 775 780 Asp Ile Gly Asp Trp Tyr Val Arg Ala Ala Asp Gly Gln Met Val Pro 785 790 795 800 Phe Ser Ala Phe Ser Ser Ser Arg Trp Glu Tyr Gly Ser Pro Arg Leu 805 810 815 Glu Arg Tyr Asn Gly Leu Pro Ser Met Glu Ile Leu Gly Gln Ala Ala 820 825 830 Pro Gly Lys Ser Thr Gly Glu Ala Met Glu Leu Met Glu Gln Leu Ala 835 840 845 Ser Lys Leu Pro Thr Gly Val Gly Tyr Asp Trp Thr Gly Met Ser Tyr 850 855 860 Gln Glu Arg Leu Ser Gly Asn Gln Ala Pro Ser Leu Tyr Ala Ile Ser 865 870 875 880 Leu Ile Val Val Phe Leu Cys Leu Ala Ala Leu Tyr Glu Ser Trp Ser 885 890 895 Ile Pro Phe Ser Val Met Leu Val Val Pro Leu Gly Val Ile Gly Ala 900 905 910 Leu Leu Ala Ala Thr Phe Arg Gly Leu Thr Asn Asp Val Tyr Phe Gln 915 920 925 Val Gly Leu Leu Thr Thr Ile Gly Leu Ser Ala Lys Asn Ala Ile Leu 930 935 940 Ile Val Glu Phe Ala Lys Asp Leu Met Asp Lys Glu Gly Lys Gly Leu 945 950 955 960 Ile Glu Ala Thr Leu Asp Ala Val Arg Met Arg Leu Arg Pro Ile Leu 965 970 975 Met Thr Ser Leu Ala Phe Ile Leu Gly Val Met Pro Leu Val Ile Ser 980 985 990 Thr Gly Ala Gly Ser Gly Ala Gln Asn Ala Val Gly Thr Gly Val Met 995 1000 1005 Gly Gly Met Val Thr Ala Thr Val Leu Ala Ile Phe Phe Val Pro 1010 1015 1020 Val Phe Phe Val Val Val Arg Arg Arg Phe Ser Arg Lys Asn Glu 1025 1030 1035 Asp Ile Glu His Ser His Thr Val Asp His His 1040 1045 <210> 93 <211> 397 <212> PRT <213> Escherichia coli <400> 93 Met Asn Lys Asn Arg Gly Phe Thr Pro Leu Ala Val Val Leu Met Leu 1 5 10 15 Ser Gly Ser Leu Ala Leu Thr Gly Cys Asp Asp Lys Gln Ala Gln Gln 20 25 30 Gly Gly Gln Gln Met Pro Ala Val Gly Val Val Thr Val Lys Thr Glu 35 40 45 Pro Leu Gln Ile Thr Thr Glu Leu Pro Gly Arg Thr Ser Ala Tyr Arg 50 55 60 Ile Ala Glu Val Arg Pro Gln Val Ser Gly Ile Ile Leu Lys Arg Asn 65 70 75 80 Phe Lys Glu Gly Ser Asp Ile Glu Ala Gly Val Ser Leu Tyr Gln Ile 85 90 95 Asp Pro Ala Thr Tyr Gln Ala Thr Tyr Asp Ser Ala Lys Gly Asp Leu 100 105 110 Ala Lys Ala Gln Ala Ala Ala Asn Ile Ala Gln Leu Thr Val Asn Arg 115 120 125 Tyr Gln Lys Leu Leu Gly Thr Gln Tyr Ile Ser Lys Gln Glu Tyr Asp 130 135 140 Gln Ala Leu Ala Asp Ala Gln Gln Ala Asn Ala Ala Val Thr Ala Ala 145 150 155 160 Lys Ala Ala Val Glu Thr Ala Arg Ile Asn Leu Ala Tyr Thr Lys Val 165 170 175 Thr Ser Pro Ile Ser Gly Arg Ile Gly Lys Ser Asn Val Thr Glu Gly 180 185 190 Ala Leu Val Gln Asn Gly Gln Ala Thr Ala Leu Ala Thr Val Gln Gln 195 200 205 Leu Asp Pro Ile Tyr Val Asp Val Thr Gln Ser Ser Asn Asp Phe Leu 210 215 220 Arg Leu Lys Gln Glu Leu Ala Asn Gly Thr Leu Lys Gln Glu Asn Gly 225 230 235 240 Lys Ala Lys Val Ser Leu Ile Thr Ser Asp Gly Ile Lys Phe Pro Gln 245 250 255 Asp Gly Thr Leu Glu Phe Ser Asp Val Thr Val Asp Gln Thr Thr Gly 260 265 270 Ser Ile Thr Leu Arg Ala Ile Phe Pro Asn Pro Asp His Thr Leu Leu 275 280 285 Pro Gly Met Phe Val Arg Ala Arg Leu Glu Glu Gly Leu Asn Pro Asn 290 295 300 Ala Ile Leu Val Pro Gln Gln Gly Val Thr Arg Thr Pro Arg Gly Asp 305 310 315 320 Ala Thr Val Leu Val Val Gly Ala Asp Asp Lys Val Glu Thr Arg Pro 325 330 335 Ile Val Ala Ser Gln Ala Ile Gly Asp Lys Trp Leu Val Thr Glu Gly 340 345 350 Leu Lys Ala Gly Asp Arg Val Val Ile Ser Gly Leu Gln Lys Val Arg 355 360 365 Pro Gly Val Gln Val Lys Ala Gln Glu Val Thr Ala Asp Asn Asn Gln 370 375 380 Gln Ala Ala Ser Gly Ala Gln Pro Glu Gln Ser Lys Ser 385 390 395 <210> 94 <211> 457 <212> PRT <213> Escherichia coli <400> 94 Met Gln Lys Tyr Ile Ser Glu Ala Arg Leu Leu Leu Ala Leu Ala Ile 1 5 10 15 Pro Val Ile Leu Ala Gln Ile Ala Gln Thr Ala Met Gly Phe Val Ser 20 25 30 Thr Val Met Ala Gly Gly Tyr Ser Ala Thr Asp Met Ala Ala Val Ala 35 40 45 Ile Gly Thr Ser Ile Trp Leu Pro Ala Ile Leu Phe Gly His Gly Leu 50 55 60 Leu Leu Ala Leu Thr Pro Val Ile Ala Gln Leu Asn Gly Ser Gly Arg 65 70 75 80 Arg Glu Arg Ile Ala His Gln Val Arg Gln Gly Phe Trp Leu Ala Gly 85 90 95 Phe Val Ser Val Leu Ile Met Leu Val Leu Trp Asn Ala Gly Tyr Ile 100 105 110 Ile Arg Ser Met Glu Asn Ile Asp Pro Ala Leu Ala Asp Lys Ala Val 115 120 125 Gly Tyr Leu Arg Ala Leu Leu Trp Gly Ala Pro Gly Tyr Leu Phe Phe 130 135 140 Gln Val Ala Arg Asn Gln Cys Glu Gly Leu Ala Lys Thr Lys Pro Gly 145 150 155 160 Met Val Met Gly Phe Ile Gly Leu Leu Val Asn Ile Pro Val Asn Tyr 165 170 175 Ile Phe Ile Tyr Gly His Phe Gly Met Pro Glu Leu Gly Gly Val Gly 180 185 190 Cys Gly Val Ala Thr Ala Ala Val Tyr Trp Val Met Phe Leu Ala Met 195 200 205 Val Ser Tyr Ile Lys Arg Ala Arg Ser Met Arg Asp Ile Arg Asn Glu 210 215 220 Lys Gly Thr Ala Lys Pro Asp Pro Ala Val Met Lys Arg Leu Ile Gln 225 230 235 240 Leu Gly Leu Pro Ile Ala Leu Ala Leu Phe Phe Glu Val Thr Leu Phe 245 250 255 Ala Val Val Ala Leu Leu Val Ser Pro Leu Gly Ile Val Asp Val Ala 260 265 270 Gly His Gln Ile Ala Leu Asn Phe Ser Ser Leu Met Phe Val Leu Pro 275 280 285 Met Ser Leu Ala Ala Ala Val Thr Ile Arg Val Gly Tyr Arg Leu Gly 290 295 300 Gln Gly Ser Thr Leu Asp Ala Gln Thr Ala Ala Arg Thr Gly Leu Met 305 310 315 320 Val Gly Val Cys Met Ala Thr Leu Thr Ala Ile Phe Thr Val Ser Leu 325 330 335 Arg Glu Gln Ile Ala Leu Leu Tyr Asn Asp Asn Pro Glu Val Val Thr 340 345 350 Leu Ala Ala His Leu Met Leu Leu Ala Ala Val Tyr Gln Ile Ser Asp 355 360 365 Ser Ile Gln Val Ile Gly Ser Gly Ile Leu Arg Gly Tyr Lys Asp Thr 370 375 380 Arg Ser Ile Phe Tyr Ile Thr Phe Thr Ala Tyr Trp Val Leu Gly Leu 385 390 395 400 Pro Ser Gly Tyr Ile Leu Ala Leu Thr Asp Leu Val Val Glu Pro Met 405 410 415 Gly Pro Ala Gly Phe Trp Ile Gly Phe Ile Ile Gly Leu Thr Ser Ala 420 425 430 Ala Ile Met Met Met Leu Arg Met Arg Phe Leu Gln Arg Leu Pro Ser 435 440 445 Ala Ile Ile Leu Gln Arg Ala Ser Arg 450 455 <210> 95 <211> 2358 <212> DNA <213> Arabidopsis thaliana <400> 95 atgtctatta atttgagatc ttccggttgt agctccccaa taagcgcaac tttggaaagg 60 ggtctagact ctgaagttca aacaagagca aacaatgtat cttttgagca gaccaaagag 120 aagatcagga aaatgcttga gaaggtcgag ttgagcgtga gtgcctatga cactagttgg 180 gtagctatgg tcccatcacc atccagtcaa aacgcacctc ttttcccaca gtgcgtcaaa 240 tggctacttg ataatcaaca tgaggacggc tcttggggat tggataacca cgaccatcag 300 agcttaaaga aagatgtgtt gtcatccaca ttagcctcta tcctagctct taagaaatgg 360 ggaataggcg aaagacagat caataagggt ctacagttca ttgaattaaa ctctgcacta 420 gttaccgatg aaactataca aaaacctaca ggtttcgaca tcatttttcc aggaatgatt 480 aagtacgcca gggaccttaa tttgaccata cctcttggct cagaagtagt cgacgatatg 540 atcaggaaaa gagatctaga cttaaagtgt gatagcgaga aattcagcaa aggtagagag 600 gcttatcttg cctatgttct tgaaggaact aggaacttga aggactggga cttaattgtg 660 aaatatcaga gaaagaacgg tagtctattt gatagtccag ctacaaccgc cgcagctttc 720 actcaatttg gcaatgacgg ttgcttgagg tacttatgtt cacttttaca gaaattcgag 780 gccgcagtgc ctagtgtata tccatttgat caatacgcta gattaagcat aatcgtcact 840 ttagaatcat tgggaattga cagagatttc aagactgaga taaaaagcat attggatgag 900 acctataggt actggcttag aggtgacgaa gaaatttgcc tagatttggc cacatgtgca 960 cttgctttta ggttgctttt agcccacggc tatgacgtgt catacgatcc tctaaagcca 1020 tttgcagagg aatctggttt cagcgatacc cttgagggat atgttaaaaa caccttttcc 1080 gtattagagc ttttcaaggc tgcccaaagt taccctcatg agagtgcttt gaaaaagcag 1140 tgttgctgga caaaacaata tctagaaatg gaactaagtt catgggttaa aacaagcgtt 1200 agggacaagt acttgaaaaa ggaagtggag gatgctttgg catttccatc atatgcctct 1260 ttagaaagaa gtgaccacag aaggaaaatt cttaatggct cagcagttga aaacacaaga 1320 gtaaccaaga cctcttacag gttgcataat atatgtacat cagatatctt aaaacttgct 1380 gtcgacgatt tcaacttttg ccaatctatt catagagagg aaatggaaag attggataga 1440 tggatagtgg agaatagact acaggaatta aagttcgcca gacaaaaatt ggcttactgt 1500 tactttagtg gcgctgccac actattctct ccagaattgt ctgacgcaag gatctcatgg 1560 gctaagggag gtgttctaac cacagtagtc gatgactttt ttgatgttgg cggtagtaaa 1620 gaagagcttg agaacttaat tcacttggtg gaaaagtggg atcttaatgg agttcctgaa 1680 tactcttcag agcatgtaga aataattttc tctgtcctaa gagacactat cttagaaacc 1740 ggtgataaag cctttacata tcagggcaga aacgttactc accatattgt gaaaatatgg 1800 ttggacttac ttaagagcat gctaagggag gctgaatggt ccagtgacaa atcaacccca 1860 tctttggaag attacatgga gaatgcctat atcagcttcg cattaggtcc tattgtattg 1920 ccagctacat accttatagg acctccacta cctgaaaaga ctgtcgactc ccaccaatat 1980 aatcaattat acaaattggt tagtaccatg ggtagactat taaacgatat ccagggcttt 2040 aagagggaat cagccgaggg aaaacttaat gcagtgtctc tacatatgaa gcatgaaaga 2100 gacaacagaa gcaaagaggt tattatagaa tccatgaaag gattggctga aaggaaaaga 2160 gaggaattac acaaacttgt actagaagag aaaggtagtg tcgttccaag agaatgcaag 2220 gaagccttct taaaaatgtc aaaagtgttg aacctttttt ataggaagga tgatggcttc 2280 acatctaacg acttgatgag ccttgtgaaa tccgtcatct acgagcctgt ttcacttcaa 2340 aaggagagtc taacttga 2358 <210> 96 <211> 894 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized nucleotide sequence encoding Synechococcus sp. GGPPS <400> 96 atggtcgcac aaactttcaa cctggatacc tacttatccc aaagacaaca acaagttgaa 60 gaggccctaa gtgctgctct tgtgccagct tatcctgaga gaatatacga agctatgaga 120 tactccctcc tggcaggtgg caaaagatta agacctatct tatgtttagc tgcttgcgaa 180 ttggcaggtg gttctgttga acaagccatg ccaactgcgt gtgcacttga aatgatccat 240 acaatgtcac taattcatga tgacctgcca gccatggata acgatgattt cagaagagga 300 aagccaacta atcacaaggt gttcggggaa gatatagcca tcttagcggg tgatgcgctt 360 ttagcttacg cttttgaaca tattgcttct caaacaagag gagtaccacc tcaattggtg 420 ctacaagtta ttgctagaat cggacacgcc gttgctgcaa caggcctcgt tggaggccaa 480 gtcgtagacc ttgaatctga aggtaaagct atttccttag aaacattgga gtatattcac 540 tcacataaga ctggagcctt gctggaagca tcagttgtct caggcggtat tctcgcaggg 600 gcagatgaag agcttttggc cagattgtct cattacgcta gagatatagg cttggctttt 660 caaatcgtcg atgatatcct ggatgttact gctacatctg aacagttggg gaaaaccgct 720 ggtaaagacc aggcagccgc aaaggcaact tatccaagtc tattgggttt agaagcctct 780 agacagaaag cggaagagtt gattcaatct gctaaggaag ccttaagacc ttacggttca 840 caagcagagc cactcctagc gctggcagac ttcatcacac gtcgtcagca ttaa 894 <210> 97 <211> 1542 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized nucleotide sequence encoding S. rebaudiana KO-1 <400> 97 atggatgctg tgacgggttt gttaactgtc ccagcaaccg ctataactat tggtggaact 60 gctgtagcat tggcggtagc gctaatcttt tggtacctga aatcctacac atcagctaga 120 agatcccaat caaatcatct tccaagagtg cctgaagtcc caggtgttcc attgttagga 180 aatctgttac aattgaagga gaaaaagcca tacatgactt ttacgagatg ggcagcgaca 240 tatggaccta tctatagtat caaaactggg gctacaagta tggttgtggt atcatctaat 300 gagatagcca aggaggcatt ggtgaccaga ttccaatcca tatctacaag gaacttatct 360 aaagccctga aagtacttac agcagataag acaatggtcg caatgtcaga ttatgatgat 420 tatcataaaa cagttaagag acacatactg accgccgtct tgggtcctaa tgcacagaaa 480 aagcatagaa ttcacagaga tatcatgatg gataacatat ctactcaact tcatgaattc 540 gtgaaaaaca acccagaaca ggaagaggta gaccttagaa aaatctttca atctgagtta 600 ttcggcttag ctatgagaca agccttagga aaggatgttg aaagtttgta cgttgaagac 660 ctgaaaatca ctatgaatag agacgaaatc tttcaagtcc ttgttgttga tccaatgatg 720 ggagcaatcg atgttgattg gagagacttc tttccatacc taaagtgggt cccaaacaaa 780 aagttcgaaa atactattca acaaatgtac atcagaagag aagctgttat gaaatcttta 840 atcaaagagc acaaaaagag aatagcgtca ggcgaaaagc taaatagtta tatcgattac 900 cttttatctg aagctcaaac tttaaccgat cagcaactat tgatgtcctt gtgggaacca 960 atcattgaat cttcagatac aacaatggtc acaacagaat gggcaatgta cgaattagct 1020 aaaaacccta aattgcaaga taggttgtac agagacatta agtccgtctg tggatctgaa 1080 aagataaccg aagagcatct atcacagctg ccttacatta cagctatttt ccacgaaaca 1140 ctgagaagac actcaccagt tcctatcatt cctctaagac atgtacatga agataccgtt 1200 ctaggcggct accatgttcc tgctggcaca gaacttgccg ttaacatcta cggttgcaac 1260 atggacaaaa acgtttggga aaatccagag gaatggaacc cagaaagatt catgaaagag 1320 aatgagacaa ttgattttca aaagacgatg gccttcggtg gtggtaagag agtttgtgct 1380 ggttccttgc aagccctttt aactgcatct attgggattg ggagaatggt tcaagagttc 1440 gaatggaaac tgaaggatat gactcaagag gaagtgaaca cgataggcct aactacacaa 1500 atgttaagac cattgagagc tattatcaaa cctaggatct aa 1542 <210> 98 <211> 2139 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon optimized nucleotide seqeunce encoding A. thaliana ATR2 <400> 98 atgtcttcct cttcctcttc cagtacctct atgattgatt tgatggctgc tattattaaa 60 ggtgaaccag ttatcgtctc cgacccagca aatgcctctg cttatgaatc agttgctgca 120 gaattgtctt caatgttgat cgaaaacaga caattcgcca tgatcgtaac tacatcaatc 180 gctgttttga tcggttgtat tgtcatgttg gtatggagaa gatccggtag tggtaattct 240 aaaagagtcg aacctttgaa accattagta attaagccaa gagaagaaga aatagatgac 300 ggtagaaaga aagttacaat atttttcggt acccaaactg gtacagctga aggttttgca 360 aaagccttag gtgaagaagc taaggcaaga tacgaaaaga ctagattcaa gatagtcgat 420 ttggatgact atgccgctga tgacgatgaa tacgaagaaa agttgaagaa agaagatgtt 480 gcatttttct ttttggcaac ctatggtgac ggtgaaccaa ctgacaatgc agccagattc 540 tacaaatggt ttacagaggg taatgatcgt ggtgaatggt tgaaaaactt aaagtacggt 600 gttttcggtt tgggtaacag acaatacgaa catttcaaca aagttgcaaa ggttgtcgac 660 gatattttgg tcgaacaagg tgctcaaaga ttagtccaag taggtttggg tgacgatgac 720 caatgtatag aagatgactt tactgcctgg agagaagctt tgtggcctga attagacaca 780 atcttgagag aagaaggtga caccgccgtt gctaccccat atactgctgc agtattagaa 840 tacagagttt ccatccatga tagtgaagac gcaaagttta atgatatcac tttggccaat 900 ggtaacggtt atacagtttt cgatgcacaa cacccttaca aagctaacgt tgcagtcaag 960 agagaattac atacaccaga atccgacaga agttgtatac acttggaatt tgatatcgct 1020 ggttccggtt taaccatgaa gttgggtgac catgtaggtg ttttatgcga caatttgtct 1080 gaaactgttg atgaagcatt gagattgttg gatatgtccc ctgacactta ttttagtttg 1140 cacgctgaaa aagaagatgg tacaccaatt tccagttctt taccacctcc attccctcca 1200 tgtaacttaa gaacagcctt gaccagatac gcttgcttgt tatcatcccc taaaaagtcc 1260 gccttggttg ctttagccgc tcatgctagt gatcctactg aagcagaaag attgaaacac 1320 ttagcatctc cagccggtaa agatgaatat tcaaagtggg tagttgaatc tcaaagatca 1380 ttgttagaag ttatggcaga atttccatct gccaagcctc cattaggtgt cttctttgct 1440 ggtgtagcac ctagattgca accaagattc tactcaatca gttcttcacc taagatcgct 1500 gaaactagaa ttcatgttac atgtgcatta gtctacgaaa agatgccaac cggtagaatt 1560 cacaagggtg tatgctctac ttggatgaaa aatgctgttc cttacgaaaa atcagaaaag 1620 ttgttcttag gtagaccaat cttcgtaaga caatcaaact tcaagttgcc ttctgattca 1680 aaggttccaa taatcatgat aggtcctggt acaggtttag ccccattcag aggtttcttg 1740 caagaaagat tggctttagt tgaatctggt gtcgaattag gtccttcagt tttgttcttt 1800 ggttgtagaa acagaagaat ggatttcatc tatgaagaag aattgcaaag attcgtcgaa 1860 tctggtgcat tggccgaatt atctgtagct ttttcaagag aaggtccaac taaggaatac 1920 gttcaacata agatgatgga taaggcatcc gacatatgga acatgatcag tcaaggtgct 1980 tatttgtacg tttgcggtga cgcaaagggt atggccagag atgtccatag atctttgcac 2040 acaattgctc aagaacaagg ttccatggat agtaccaaag ctgaaggttt cgtaaagaac 2100 ttacaaactt ccggtagata cttgagagat gtctggtga 2139 <210> 99 <211> 1555 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 99 atggcggaac aacaaaagat caagaaatca ccacacgttc tactcatccc attcccttta 60 caaggccata taaacccttt catccagttt ggcaaacgat taatctccaa aggtgtcaaa 120 acaacacttg ttaccaccat ccacacctta aactcaaccc taaaccacag taacaccacc 180 accacctcca tcgaaatcca agcaatttcc gatggttgtg atgaaggcgg ttttatgagt 240 gcaggagaat catatttgga aacattcaaa caagttgggt ctaaatcact agctgactta 300 atcaagaagc ttcaaagtga aggaaccaca attgatgcaa tcatttatga ttctatgact 360 gaatgggttt tagatgttgc aattgagttt ggaatcgatg gtggttcgtt tttcactcaa 420 gcttgtgttg taaacagctt atattatcat gttcataagg gtttgatttc tttgccattg 480 ggtgaaactg tttcggttcc tggatttcca gtgcttcaac ggtgggagac accgttaatt 540 ttgcagaatc atgagcaaat acagagccct tggtctcaga tgttgtttgg tcagtttgct 600 aatattgatc aagcacgttg ggtcttcaca aatagttttt acaagctcga ggaagaggta 660 atagagtgga cgagaaagat atggaacttg aaggtaatcg ggccaacact tccatccatg 720 taccttgaca aacgacttga tgatgataaa gataacggat ttaatctcta caaagcaaac 780 catcatgagt gcatgaactg gttagacgat aagccaaagg aatcagttgt ttacgtagca 840 tttggtagcc tggtgaaaca tggacccgaa caagtggaag aaatcacacg ggctttaata 900 gatagtgatg tcaacttctt gtgggttatc aaacataaag aagagggaaa gctcccagaa 960 aatctttcgg aagtaataaa aaccggaaag ggtttgattg tagcatggtg caaacaattg 1020 gatgtgttag cacacgaatc agtaggatgc tttgttacac attgtgggtt caactcaact 1080 cttgaagcaa taagtcttgg agtccccgtt gttgcaatgc ctcaattttc ggatcaaact 1140 acaaatgcca agcttctaga tgaaattttg ggtgttggag ttagagttaa ggctgatgag 1200 aatgggatag tgagaagagg aaatcttgcg tcatgtatta agatgattat ggaggaggaa 1260 agaggagtaa taatccgaaa gaatgcggta aaatggaagg atttggctaa agtagccgtt 1320 catgaaggtg gtagctcaga caatgatatt gtcgaatttg taagtgagct aattaaggct 1380 taaatttttg ttgctttgta ttttatgtgt tatggttttt tgatttagat gtattcaatt 1440 aatattgaat cataactaaa ttcaagatta ttgtttgtaa tattctttgt cctaaaattt 1500 tgcgacttaa aacctttagt ttataaaaag aaattagaaa atactattgc acgga 1555 <210> 100 <211> 1377 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized S. rebaudiana UGT76G1 <400> 100 atggaaaaca agaccgaaac aacagttaga cgtaggcgta gaatcattct gtttccagta 60 ccttttcaag ggcacatcaa tccaatacta caactagcca acgttttgta ctctaaaggt 120 ttttctatta caatctttca caccaatttc aacaaaccaa aaacatccaa ttacccacat 180 ttcacattca gattcatact tgataatgat ccacaagatg aacgtatttc aaacttacct 240 acccacggtc ctttagctgg aatgagaatt ccaatcatca atgaacatgg tgccgatgag 300 cttagaagag aattagagtt acttatgttg gcatccgaag aggacgagga agtctcttgt 360 ctgattactg acgctctatg gtactttgcc caatctgtgg ctgatagttt gaatttgagg 420 agattggtac taatgacatc cagtctgttt aactttcacg ctcatgttag tttaccacaa 480 tttgacgaat tgggatactt ggaccctgat gacaagacta ggttagagga acaggcctct 540 ggttttccta tgttgaaagt caaagatatc aagtctgcct attctaattg gcaaatcttg 600 aaagagatct taggaaagat gatcaaacag acaaaggctt catctggagt gatttggaac 660 agtttcaaag agttagaaga gtctgaattg gagactgtaa tcagagaaat tccagcacct 720 tcattcctga taccattacc aaaacatttg actgcttcct cttcctcttt gttggatcat 780 gacagaacag tttttcaatg gttggaccaa caaccaccta gttctgtttt gtacgtgtca 840 tttggtagta cttctgaagt cgatgaaaag gacttccttg aaatcgcaag aggcttagtc 900 gatagtaagc agtcattcct ttgggtcgtg cgtccaggtt tcgtgaaagg ctcaacatgg 960 gtcgaaccac ttccagatgg ttttctaggc gaaagaggta gaatagtcaa atgggttcct 1020 caacaggaag ttttagctca tggcgctatt ggggcattct ggactcattc cggatggaat 1080 tcaactttag aatcagtatg cgaaggggta cctatgatct tttcagattt tggtcttgat 1140 caaccactga acgcaagata catgtctgat gttttgaaag tgggtgtata tctagaaaat 1200 ggctgggaaa ggggtgaaat agctaatgca ataagacgtg ttatggttga tgaagagggg 1260 gagtatatca gacaaaacgc aagagtgctg aagcaaaagg ccgacgtttc tctaatgaag 1320 ggaggctctt catacgaatc cttagaatct cttgtttcct acatttcatc actgtaa 1377 <210> 101 <211> 1422 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized nucleotide sequence encoding S. rebaudiana UGT91D2e-b <400> 101 atggctactt ctgattccat cgttgacgat agaaagcaat tgcatgttgc tacttttcca 60 tggttggctt tcggtcatat tttgccatac ttgcaattgt ccaagttgat tgctgaaaag 120 ggtcacaagg tttcattctt gtctaccacc agaaacatcc aaagattgtc ctctcatatc 180 tccccattga tcaacgttgt tcaattgact ttgccaagag tccaagaatt gccagaagat 240 gctgaagcta ctactgatgt tcatccagaa gatatccctt acttgaaaaa ggcttccgat 300 ggtttacaac cagaagttac tagattcttg gaacaacatt ccccagattg gatcatctac 360 gattatactc attactggtt gccatccatt gctgcttcat tgggtatttc tagagcccat 420 ttctctgtta ctactccatg ggctattgct tatatgggtc catctgctga tgctatgatt 480 aacggttctg atggtagaac taccgttgaa gatttgacta ctccaccaaa gtggtttcca 540 tttccaacaa aagtctgttg gagaaaacac gatttggcta gattggttcc atacaaagct 600 ccaggtattt ctgatggtta cagaatgggt atggttttga aaggttccga ttgcttgttg 660 tctaagtgct atcatgaatt cggtactcaa tggttgcctt tgttggaaac attgcatcaa 720 gttccagttg ttccagtagg tttgttgcca ccagaaattc caggtgacga aaaagacgaa 780 acttgggttt ccatcaaaaa gtggttggat ggtaagcaaa agggttctgt tgtttatgtt 840 gctttgggtt ccgaagcttt ggtttctcaa accgaagttg ttgaattggc tttgggtttg 900 gaattgtctg gtttgccatt tgtttgggct tacagaaaac ctaaaggtcc agctaagtct 960 gattctgttg aattgccaga tggtttcgtt gaaagaacta gagatagagg tttggtttgg 1020 acttcttggg ctccacaatt gagaattttg tctcatgaat ccgtctgtgg tttcttgact 1080 cattgtggtt ctggttctat cgttgaaggt ttgatgtttg gtcacccatt gattatgttg 1140 ccaatctttg gtgaccaacc attgaacgct agattattgg aagataagca agtcggtatc 1200 gaaatcccaa gaaatgaaga agatggttgc ttgaccaaag aatctgttgc tagatctttg 1260 agatccgttg tcgttgaaaa agaaggtgaa atctacaagg ctaacgctag agaattgtcc 1320 aagatctaca acgataccaa ggtcgaaaaa gaatacgttt cccaattcgt tgactacttg 1380 gaaaagaatg ctagagctgt tgccattgat catgaatctt ga 1422 <210> 102 <211> 2343 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Truncated CDPS from Zea mays <400> 102 atggcacagc acacatcaga atccgcagct gtcgcaaagg gcagcagttt gacccctata 60 gtgagaactg acgctgagtc aaggagaaca agatggccaa ccgatgacga tgacgccgaa 120 cctttagtgg atgagatcag ggcaatgctt acttccatgt ctgatggtga catttccgtg 180 agcgcatacg atacagcctg ggtcggattg gttccaagat tagacggcgg tgaaggtcct 240 caatttccag cagctgtgag atggataaga aataaccagt tgcctgacgg aagttggggc 300 gatgccgcat tattctctgc ctatgacagg cttatcaata cccttgcctg cgttgtaact 360 ttgacaaggt ggtccctaga accagagatg agaggtagag gactatcttt tttgggtagg 420 aacatgtgga aattagcaac tgaagatgaa gagtcaatgc ctattggctt cgaattagca 480 tttccatctt tgatagagct tgctaagagc ctaggtgtcc atgacttccc ttatgatcac 540 caggccctac aaggaatcta ctcttcaaga gagatcaaaa tgaagaggat tccaaaagaa 600 gtgatgcata ccgttccaac atcaatattg cacagtttgg agggtatgcc tggcctagat 660 tgggctaaac tacttaaact acagagcagc gacggaagtt ttttgttctc accagctgcc 720 actgcatatg ctttaatgaa taccggagat gacaggtgtt ttagctacat cgatagaaca 780 gtaaagaaat tcaacggcgg cgtccctaat gtttatccag tggatctatt tgaacatatt 840 tgggccgttg atagacttga aagattagga atctccaggt acttccaaaa ggagatcgaa 900 caatgcatgg attatgtaaa caggcattgg actgaggacg gtatttgttg ggcaaggaac 960 tctgatgtca aagaggtgga cgacacagct atggccttta gacttcttag gttgcacggc 1020 tacagcgtca gtcctgatgt gtttaaaaac ttcgaaaagg acggtgaatt tttcgcattt 1080 gtcggacagt ctaatcaagc tgttaccggt atgtacaact taaacagagc aagccagata 1140 tccttcccag gcgaggatgt gcttcataga gctggtgcct tctcatatga gttcttgagg 1200 agaaaagaag cagagggagc tttgagggac aagtggatca tttctaaaga tctacctggt 1260 gaagttgtgt atactttgga ttttccatgg tacggcaact tacctagagt cgaggccaga 1320 gactacctag agcaatacgg aggtggtgat gacgtttgga ttggcaagac attgtatagg 1380 atgccacttg taaacaatga tgtatatttg gaattggcaa gaatggattt caaccactgc 1440 caggctttgc atcagttaga gtggcaagga ctaaaaagat ggtatactga aaataggttg 1500 atggactttg gtgtcgccca agaagatgcc cttagagctt attttcttgc agccgcatct 1560 gtttacgagc cttgtagagc tgccgagagg cttgcatggg ctagagccgc aatactagct 1620 aacgccgtga gcacccactt aagaaatagc ccatcattca gagaaaggtt agagcattct 1680 cttaggtgta gacctagtga agagacagat ggctcctggt ttaactcctc aagtggctct 1740 gatgcagttt tagtaaaggc tgtcttaaga cttactgatt cattagccag ggaagcacag 1800 ccaatccatg gaggtgaccc agaagatatt atacacaagt tgttaagatc tgcttgggcc 1860 gagtgggtta gggaaaaggc agacgctgcc gatagcgtgt gcaatggtag ttctgcagta 1920 gaacaagagg gatcaagaat ggtccatgat aaacagacct gtctattatt ggctagaatg 1980 atcgaaattt ctgccggtag ggcagctggt gaagcagcca gtgaggacgg cgatagaaga 2040 ataattcaat taacaggctc catctgcgac agtcttaagc aaaaaatgct agtttcacag 2100 gaccctgaaa aaaatgaaga gatgatgtct cacgtggatg acgaattgaa gttgaggatt 2160 agagagttcg ttcaatattt gcttagacta ggtgaaaaaa agactggatc tagcgaaacc 2220 aggcaaacat ttttaagtat agtgaaatca tgttactatg ctgctcattg cccacctcat 2280 gtcgttgata gacacattag tagagtgatt ttcgagccag taagtgccgc aaagtaaccg 2340 cgg 2343 <210> 103 <211> 1068 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 103 Met Arg Gly Leu Thr Pro Lys Asn Gly Val His Ile Glu Thr Gly Pro 1 5 10 15 Asp Thr Glu Ser Ser Ala Asp Ser Ser Asn Phe Ser Thr Gly Phe Ser 20 25 30 Gly Lys Ile Arg Lys Pro Arg Ser Lys Val Ser Lys Ala Cys Asp Asn 35 40 45 Cys Arg Lys Arg Lys Ile Lys Cys Asn Gly Lys Phe Pro Cys Ala Ser 50 55 60 Cys Glu Ile Tyr Ser Cys Glu Cys Thr Phe Ser Thr Arg Gln Gly Gly 65 70 75 80 Ala Arg Ile Lys Asn Leu His Lys Thr Ser Leu Glu Gly Thr Thr Val 85 90 95 Gln Val Lys Glu Glu Thr Asp Ser Ser Ser Thr Ser Phe Ser Asn Pro 100 105 110 Gln Arg Cys Thr Asp Gly Pro Cys Ala Val Glu Gln Pro Thr Lys Phe 115 120 125 Phe Glu Asn Phe Lys Leu Gly Gly Arg Ser Ser Gly Asp Asn Ser Gly 130 135 140 Ser Asp Gly Lys Asn Asp Asp Asp Val Asn Arg Asn Gly Phe Tyr Glu 145 150 155 160 Asp Asp Ser Glu Ser Gln Ala Thr Leu Thr Ser Leu Gln Thr Thr Leu 165 170 175 Lys Asn Leu Lys Glu Met Ala His Leu Gly Thr His Val Thr Ser Ala 180 185 190 Ile Glu Ser Ile Glu Leu Gln Ile Ser Asp Leu Leu Lys Arg Trp Glu 195 200 205 Pro Lys Val Arg Thr Lys Glu Leu Ala Thr Thr Lys Phe Tyr Pro Asn 210 215 220 Lys Ser Ile Glu Thr Gln Leu Met Lys Asn Lys Tyr Cys Asp Val Val 225 230 235 240 His Leu Thr Arg Tyr Ala Ala Trp Ser Asn Asn Lys Lys Asp Gln Asp 245 250 255 Thr Ser Ser Gln Pro Leu Ile Asp Glu Ile Phe Gly Leu Tyr Ser Pro 260 265 270 Phe Gln Phe Leu Ser Leu Gln Gly Ile Gly Lys Cys Phe Gln Asn Tyr 275 280 285 Arg Ser Lys Ser Lys Cys Glu Ile Phe Pro Arg Thr Ala Lys Glu Thr 290 295 300 Ile Tyr Ile Met Leu Arg Phe Phe Asp Val Cys Phe His His Ile Asn 305 310 315 320 Gln Gly Cys Val Ser Ile Ala Asn Pro Leu Glu Asn Tyr Leu Gln Lys 325 330 335 Met Asn Leu Leu Pro Ser Thr Pro Ser Ser Ile Ser Ser Ala Gly Ser 340 345 350 Pro Asn Thr Ala His Thr Lys Ser His Val Ala Leu Val Ile Asn His 355 360 365 Leu Pro Gln Pro Phe Val Arg Asn Ile Thr Gly Ile Ser Asn Ser Glu 370 375 380 Leu Leu Ser Glu Met Asn Asn Asp Ile Ser Met Phe Gly Ile Leu Leu 385 390 395 400 Lys Met Leu Asp Met His Lys Asn Ser Tyr Gln Asn Phe Leu Met Glu 405 410 415 Ile Thr Ser Asn Pro Ser Val Ala Lys Asn Thr Gln Ser Ile Asp Val 420 425 430 Leu Gln Glu Phe Ile His Tyr Cys Gln Ala Gly Glu Ala Leu Ile Ala 435 440 445 Leu Cys Tyr Ser Tyr Tyr Asn Ser Thr Leu Tyr Asn Tyr Val Asp Phe 450 455 460 Thr Cys Asp Ile Thr His Leu Glu Gln Leu Leu Tyr Phe Leu Asp Leu 465 470 475 480 Leu Phe Trp Leu Ser Glu Ile Tyr Gly Phe Glu Lys Val Leu Asn Val 485 490 495 Ala Val His Phe Val Ser Arg Val Gly Leu Ser Arg Trp Glu Phe Tyr 500 505 510 Val Gly Leu Asp Glu Asn Phe Ala Glu Arg Arg Arg Asn Leu Trp Trp 515 520 525 Lys Ala Phe Tyr Phe Glu Lys Thr Leu Ala Ser Lys Leu Gly Tyr Pro 530 535 540 Ser Asn Ile Asp Asp Ser Lys Ile Asn Cys Leu Leu Pro Lys Asn Phe 545 550 555 560 Arg Asp Val Gly Phe Leu Asp Asn Arg Asp Phe Ile Glu Asn Val His 565 570 575 Leu Val Arg Arg Ser Glu Ala Phe Asp Asn Met Cys Ile Ser Asp Leu 580 585 590 Lys Tyr Tyr Gly Glu Leu Ala Val Leu Gln Ile Val Ser His Phe Ser 595 600 605 Ser Ser Val Leu Phe Asn Glu Lys Phe Thr Ser Ile Arg Asn Thr Ser 610 615 620 Lys Pro Ser Val Val Arg Glu Lys Leu Leu Phe Glu Val Leu Glu Ile 625 630 635 640 Phe Asn Glu Thr Glu Met Lys Tyr Asp Ala Ile Lys Glu Gln Thr Gly 645 650 655 Lys Leu Phe Asp Ile Ala Phe Ser Lys Asp Ser Thr Glu Leu Lys Val 660 665 670 Ser Arg Glu Asp Lys Ile Met Ala Ser Lys Phe Val Leu Phe Tyr Glu 675 680 685 His His Phe Cys Arg Met Val Asn Glu Ser Asp Asn Ile Val Ala Arg 690 695 700 Leu Cys Val His Arg Arg Pro Ser Ile Leu Ile Glu Asn Leu Lys Ile 705 710 715 720 Tyr Leu His Lys Ile Tyr Lys Ser Trp Thr Asp Met Asn Lys Ile Leu 725 730 735 Leu Asp Phe Asp Asn Asp Tyr Ser Val Tyr Arg Ser Phe Ala His Tyr 740 745 750 Ser Ile Ser Cys Ile Ile Leu Val Ser Gln Ala Phe Ser Val Ala Glu 755 760 765 Phe Ile Lys Val Asn Asp Val Val Asn Met Ile Arg Val Phe Lys Arg 770 775 780 Phe Leu Asp Ile Lys Ile Phe Ser Glu Asn Glu Thr Asn Glu His Val 785 790 795 800 Phe Asn Ser Gln Ser Phe Lys Asp Tyr Thr Arg Ala Phe Ser Phe Leu 805 810 815 Thr Ile Val Thr Arg Ile Met Leu Leu Ala Tyr Gly Glu Ser Ser Ser 820 825 830 Thr Asn Leu Asp Val Ile Ser Lys Tyr Ile Asp Glu Asn Ala Pro Asp 835 840 845 Leu Lys Gly Ile Ile Glu Leu Val Leu Asp Thr Asn Ser Cys Ala Tyr 850 855 860 Arg Phe Leu Leu Glu Pro Val Gln Lys Ser Gly Phe His Leu Thr Val 865 870 875 880 Ser Gln Met Leu Lys Asn Arg Lys Phe Gln Glu Pro Leu Met Ser Asn 885 890 895 Glu Asp Asn Lys Gln Met Lys His Asn Ser Gly Lys Asn Leu Asn Pro 900 905 910 Asp Leu Pro Ser Leu Lys Thr Gly Thr Ser Cys Leu Leu Asn Gly Ile 915 920 925 Glu Ser Pro Gln Leu Pro Phe Asn Gly Arg Ser Ala Pro Ser Pro Val 930 935 940 Arg Asn Asn Ser Leu Pro Glu Phe Ala Gln Leu Pro Ser Phe Arg Ser 945 950 955 960 Leu Ser Val Ser Asp Met Ile Asn Pro Asp Tyr Ala Gln Pro Thr Asn 965 970 975 Gly Gln Asn Asn Thr Gln Val Gln Ser Asn Lys Pro Ile Asn Ala Gln 980 985 990 Gln Gln Ile Pro Thr Ser Val Gln Val Pro Phe Met Asn Thr Asn Glu 995 1000 1005 Ile Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Lys Asn Asn Ile 1010 1015 1020 Asn Asn Ile Asn Asn Asn Asn Ser Asn Asn Phe Ser Ala Thr Ser 1025 1030 1035 Phe Asn Leu Gly Thr Leu Asp Glu Phe Val Asn Asn Gly Asp Leu 1040 1045 1050 Glu Asp Leu Tyr Ser Ile Leu Trp Ser Asp Val Tyr Pro Asp Ser 1055 1060 1065 <210> 104 <211> 976 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 104 Met Lys Val Lys Lys Ser Thr Arg Ser Lys Val Ser Thr Ala Cys Val 1 5 10 15 Asn Cys Arg Lys Arg Lys Ile Lys Cys Thr Gly Lys Tyr Pro Cys Thr 20 25 30 Asn Cys Ile Ser Tyr Asp Cys Thr Cys Val Phe Leu Lys Lys His Leu 35 40 45 Pro Gln Lys Glu Asp Ser Ser Gln Ser Leu Pro Thr Thr Ala Val Ala 50 55 60 Pro Pro Ser Ser His Ala Asn Val Glu Ala Ser Ala Asp Val Gln His 65 70 75 80 Leu Asp Thr Ala Ile Lys Leu Asp Asn Gln Tyr Tyr Phe Lys Leu Met 85 90 95 Asn Asp Leu Ile Gln Thr Pro Val Ser Pro Ser Ala Thr His Ala Pro 100 105 110 Asp Thr Ser Asn Asn Pro Thr Asn Asp Asn Asn Ile Leu Phe Lys Asp 115 120 125 Asp Ser Lys Tyr Gln Asn Gln Leu Val Thr Tyr Gln Asn Ile Leu Thr 130 135 140 Asn Leu Tyr Ala Leu Pro Pro Cys Asp Asp Thr Gln Leu Leu Ile Asp 145 150 155 160 Lys Thr Lys Ser Gln Leu Asn Asn Leu Ile Asn Ser Trp Asn Pro Glu 165 170 175 Ile Asn Tyr Pro Lys Leu Ser Ser Phe Ser Pro Arg Pro Gln Arg Ser 180 185 190 Ile Glu Thr Tyr Leu Leu Thr Asn Lys Tyr Arg Asn Lys Ile His Met 195 200 205 Thr Arg Phe Ser Phe Trp Thr Asp Gln Met Val Lys Ser Gln Ser Pro 210 215 220 Asp Ser Phe Leu Ala Thr Thr Pro Leu Val Asp Glu Val Phe Gly Leu 225 230 235 240 Phe Ser Pro Ile Gln Ala Phe Ser Leu Arg Gly Ile Gly Tyr Leu Ile 245 250 255 Lys Lys Asn Ile Glu Asn Thr Gly Ser Ser Met Leu Ile Asp Thr Lys 260 265 270 Glu Thr Ile Tyr Leu Ile Leu Arg Leu Phe Asp Leu Cys Tyr Glu His 275 280 285 Leu Ile Gln Gly Cys Ile Ser Ile Ser Asn Pro Leu Glu Asn Tyr Leu 290 295 300 Gln Lys Ile Lys Gln Thr Pro Thr Thr Thr Ala Ser Ala Ser Leu Pro 305 310 315 320 Thr Ser Pro Ala Pro Leu Ser Asn Asp Leu Val Ile Ser Val Ile His 325 330 335 Gln Leu Pro Gln Pro Phe Ile Gln Ser Ile Thr Gly Phe Thr Thr Thr 340 345 350 Gln Leu Ile Glu Asn Leu His Asp Ser Phe Ser Met Phe Arg Ile Val 355 360 365 Thr Gln Met Tyr Ala Gln His Arg Lys Arg Phe Ala Glu Phe Leu Asn 370 375 380 Gln Ala Phe Ser Leu Pro His Gln Glu Lys Ser Val Leu Phe Ser Ser 385 390 395 400 Phe Cys Ser Ser Glu Tyr Leu Leu Ser Thr Leu Cys Tyr Ala Tyr Tyr 405 410 415 Asn Val Thr Leu Tyr His Met Leu Asp Ile Asn Thr Leu Asp Tyr Leu 420 425 430 Glu Ile Leu Val Ser Leu Leu Glu Ile Gln Asn Glu Ile Asp Glu Arg 435 440 445 Phe Gly Phe Glu Lys Met Leu Glu Val Ala Val Thr Cys Ser Thr Lys 450 455 460 Met Gly Leu Ser Arg Trp Glu Tyr Tyr Val Gly Ile Asp Glu Asn Thr 465 470 475 480 Ala Glu Arg Arg Arg Lys Ile Trp Trp Lys Ile Tyr Ser Leu Glu Lys 485 490 495 Arg Phe Leu Thr Asp Leu Gly Asp Leu Ser Leu Ile Asn Glu His Gln 500 505 510 Met Asn Cys Leu Leu Pro Lys Asp Phe Arg Asp Met Gly Phe Ile Asn 515 520 525 His Lys Glu Phe Leu Thr Lys Ile Gly Thr Ser Ser Leu Ser Pro Ser 530 535 540 Ser Pro Lys Leu Lys Asn Leu Ser Leu Ser Arg Leu Ile Glu Tyr Gly 545 550 555 560 Glu Leu Ala Ile Ala Gln Ile Val Gly Asp Phe Phe Ser Glu Thr Leu 565 570 575 Tyr Asn Glu Lys Phe Thr Ser Leu Glu Val Ser Val Lys Pro Thr Ile 580 585 590 Ile Arg Gln Lys Leu Leu Glu Lys Val Phe Glu Asp Ile Glu Ser Phe 595 600 605 Arg Leu Lys Leu Ala Lys Ile Lys Leu His Thr Ser Arg Val Phe Gln 610 615 620 Val Ala His Cys Lys Tyr Pro Glu Tyr Pro Lys Asn Asp Leu Ile Glu 625 630 635 640 Ala Ala Lys Phe Val Ser Tyr His Lys Asn Thr Trp Phe Ser Ile Leu 645 650 655 Gly Ala Val Asn Asn Leu Ile Ala Arg Leu Ser Glu Asp Pro Glu Val 660 665 670 Ile Thr Glu Gln Ser Met Lys Tyr Ala Asn Glu Met Phe Gln Glu Trp 675 680 685 Arg Glu Ile Asn Gln Phe Leu Ile Gln Val Asp Thr Asp Phe Ile Val 690 695 700 Trp Ala Cys Leu Asp Phe Tyr Glu Leu Ile Phe Phe Val Met Ala Ser 705 710 715 720 Lys Phe Tyr Val Glu Asp Pro His Ile Thr Leu Glu Asp Val Ile Asn 725 730 735 Thr Leu Lys Val Phe Lys Arg Ile Thr Asn Ile Ile Ser Phe Phe Asn 740 745 750 Asn Asn Leu Asp Glu Lys Asp Tyr Asp Cys Gln Thr Phe Arg Glu Phe 755 760 765 Ser Arg Ser Ser Ser Leu Val Ala Ile Ser Ile Arg Ile Ile Phe Leu 770 775 780 Lys Tyr Cys Tyr Ala Glu Gln Ile Asp Arg Ala Glu Phe Ile Glu Arg 785 790 795 800 Leu Lys Glu Val Glu Pro Gly Leu Ser Asp Leu Leu Arg Glu Phe Phe 805 810 815 Asp Thr Arg Ser Phe Ile Tyr Arg Tyr Met Leu Lys Ser Val Glu Lys 820 825 830 Ser Gly Phe His Leu Ile Ile Arg Lys Met Leu Glu Ser Asp Tyr Lys 835 840 845 Phe Leu Tyr Arg Asp Lys Leu Ala Thr Gly Asn Ile Pro Asp Gln Gly 850 855 860 Asn Ser Ser Gln Ile Ser Gln Leu Tyr Asp Ser Thr Ala Pro Ser Tyr 865 870 875 880 Asn Asn Ala Ser Ala Ser Ala Ala Asn Ser Pro Leu Lys Leu Ser Ser 885 890 895 Leu Leu Asn Ser Gly Glu Glu Ser Tyr Thr Gln Asp Ala Ser Glu Asn 900 905 910 Val Pro Cys Asn Leu Arg His Gln Asp Arg Ser Leu Gln Gln Thr Lys 915 920 925 Arg Gln His Ser Ala Pro Ser Gln Ile Ser Ala Asn Glu Asn Asn Ile 930 935 940 Tyr Asn Leu Gly Thr Leu Glu Glu Phe Val Ser Ser Gly Asp Leu Thr 945 950 955 960 Asp Leu Tyr His Thr Leu Trp Asn Asp Asn Thr Ser Tyr Pro Phe Leu 965 970 975 <210> 105 <211> 701 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 105 Met Asp Gly Ser His Phe Pro Met Lys Ser Thr Thr Gly Glu Pro Val 1 5 10 15 Ser Ser Gly Lys Lys Gly Lys Arg Arg Lys Val Ile Lys Ser Cys Ala 20 25 30 Phe Cys Arg Lys Arg Lys Leu Lys Cys Ser Gln Ala Arg Pro Met Cys 35 40 45 Gln Gln Cys Val Ile Arg Lys Leu Pro Gln Cys Val Tyr Thr Glu Glu 50 55 60 Phe Asn Tyr Pro Leu Ser Asn Thr Glu Leu Phe Glu Gln Val Pro Asn 65 70 75 80 Val Ala Leu Val Gln Lys Ile Glu Asn Leu Gln Thr Leu Leu Lys Glu 85 90 95 Asn Asp Asn Asn Asn Ala Lys Pro Val Tyr Cys Arg Ser Ser Glu Asn 100 105 110 Pro Leu Arg Ser Leu Arg Thr Ser Val Leu Gly Asp Asn Gly Ser Arg 115 120 125 Tyr Val Phe Gly Pro Thr Ser Trp Lys Thr Leu Ser Leu Phe Glu Gln 130 135 140 Asn Lys Phe Gln Thr Glu Phe Gln Asn Leu Trp Lys Val Leu Lys Pro 145 150 155 160 Leu Pro Glu Cys Thr Lys Ser Gln Leu Asn Glu Asn Asp Val Val Ala 165 170 175 Asp Leu Pro Ser Phe Pro Gln Met Glu Ser Cys Ile Lys Ser Phe Phe 180 185 190 Ala Gly Pro Leu Phe Gly Ile Leu His Ile Phe Asn Gln Asp Asp Ile 195 200 205 Leu Ser Leu Leu Asp Arg Leu Phe Ile Arg Asp Thr Thr Asp Lys Asn 210 215 220 Leu Val Ile Leu Leu Asp Leu Gln Gly Asn Ala Lys Asp Lys Tyr Asn 225 230 235 240 Leu Gly Ile Val Leu Gln Ile Leu Cys Leu Gly Tyr Tyr Asn Gln Asp 245 250 255 Ile Pro Ser Ser Val Ser His Phe Leu His Thr Leu Ser Ala Ala Ser 260 265 270 Leu Ser Ser Ser Ser Ser Asn Phe Val Glu Lys Leu Gln Phe Phe Leu 275 280 285 Leu Ser Tyr Ile Ser Val Met Ile Asn Cys Thr Asp Gly Val Trp Asp 290 295 300 Ala Thr Gln Gly Val Asp Leu Ile Asn Glu Leu Cys Gln Gly Cys Ile 305 310 315 320 Ser Leu Gly Leu Asn Asp Ile Asp Lys Trp Tyr Leu Asn Glu Ser Glu 325 330 335 Glu Thr Lys Gln Asn Leu Arg Cys Ile Trp Phe Trp Ala Leu Phe Leu 340 345 350 Asp Val Ser Thr Ser Tyr Asp Ile Gly Asn Pro Pro Ser Ile Ser Asp 355 360 365 Asp Leu Leu Asp Leu Ser Ile Phe Thr Ala Gln Asn Phe Gln Ser Pro 370 375 380 Ser Ile Asp Phe Arg Arg Val Lys Leu Met His Asp Phe Leu Asp Val 385 390 395 400 Ser Arg Phe Thr Thr Arg Glu Ile His Lys Arg Glu Met Asn Glu Lys 405 410 415 Leu Thr Thr Phe Ser Leu Arg Leu Ile Glu Phe Ile Gln Ser Asn Phe 420 425 430 Ser Pro Ile Glu His Tyr Thr Asn Ser Val Tyr Tyr Ser Asp Ile Asp 435 440 445 Pro Phe Asp Ile Leu Ile Leu Ser Arg Ser Leu Ser Ile Val Ala Ser 450 455 460 Ile Tyr Asn Ile Glu Met Ile Ile Ala Gln Gln Ser Arg Ile Ile Asp 465 470 475 480 Lys Asn Arg Met Val Gln Phe Leu Leu Ile Ser Ile Ser Val Cys Val 485 490 495 Asn Thr Met Val Phe His Phe Lys Glu Pro Ile Asn Asp Gln Glu Asn 500 505 510 Val Leu Thr Glu Gly Leu Lys Leu Ser Ile Ile Leu Ile Asn Pro Leu 515 520 525 Leu Ile Arg Ile Val Ser Gln Val Tyr Ser Leu Ala Phe Asn Arg Leu 530 535 540 Ile Phe Arg Glu Lys Ala Phe Leu Phe Leu Ile Asp Leu Asp Thr Gly 545 550 555 560 Lys Lys Ile Gln Phe Ile Lys Tyr Glu Glu Glu Asn Phe Asp Glu Leu 565 570 575 Leu Thr Gly Phe Asp Val Arg Thr Asp Lys Phe Leu Ser Phe Ser Gly 580 585 590 Thr Ile Ile Arg Phe Tyr Glu Ile Ile Asp Ser Ile Phe Ala Val Asn 595 600 605 Glu Arg Asn Lys Arg Leu Leu Lys Ala Val Ser Asn Phe Tyr Gln Leu 610 615 620 Thr Ser Thr Leu Ala Phe Glu Arg Val Ser Arg Val Leu Phe Asp Lys 625 630 635 640 Ala Ser Gln Ala Arg Ile Glu Thr Glu Lys Ile Trp Leu Lys Lys Gly 645 650 655 Ile Asn Met Glu His Phe Ser Asp Leu Met Ile Glu Asp Phe Ile Asn 660 665 670 Asp Val Trp Lys Thr Phe Lys Glu Ile Ser Lys Asp Leu Trp Ser Ile 675 680 685 Asp Lys Lys Lys Phe Tyr Lys Gln Tyr His Phe Asp Leu 690 695 700 <210> 106 <211> 1511 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 106 Met Pro Glu Ala Lys Leu Asn Asn Asn Val Asn Asp Val Thr Ser Tyr 1 5 10 15 Ser Ser Ala Ser Ser Ser Thr Glu Asn Ala Ala Asp Leu His Asn Tyr 20 25 30 Asn Gly Phe Asp Glu His Thr Glu Ala Arg Ile Gln Lys Leu Ala Arg 35 40 45 Thr Leu Thr Ala Gln Ser Met Gln Asn Ser Thr Gln Ser Ala Pro Asn 50 55 60 Lys Ser Asp Ala Gln Ser Ile Phe Ser Ser Gly Val Glu Gly Val Asn 65 70 75 80 Pro Ile Phe Ser Asp Pro Glu Ala Pro Gly Tyr Asp Pro Lys Leu Asp 85 90 95 Pro Asn Ser Glu Asn Phe Ser Ser Ala Ala Trp Val Lys Asn Met Ala 100 105 110 His Leu Ser Ala Ala Asp Pro Asp Phe Tyr Lys Pro Tyr Ser Leu Gly 115 120 125 Cys Ala Trp Lys Asn Leu Ser Ala Ser Gly Ala Ser Ala Asp Val Ala 130 135 140 Tyr Gln Ser Thr Val Val Asn Ile Pro Tyr Lys Ile Leu Lys Ser Gly 145 150 155 160 Leu Arg Lys Phe Gln Arg Ser Lys Glu Thr Asn Thr Phe Gln Ile Leu 165 170 175 Lys Pro Met Asp Gly Cys Leu Asn Pro Gly Glu Leu Leu Val Val Leu 180 185 190 Gly Arg Pro Gly Ser Gly Cys Thr Thr Leu Leu Lys Ser Ile Ser Ser 195 200 205 Asn Thr His Gly Phe Asp Leu Gly Ala Asp Thr Lys Ile Ser Tyr Ser 210 215 220 Gly Tyr Ser Gly Asp Asp Ile Lys Lys His Phe Arg Gly Glu Val Val 225 230 235 240 Tyr Asn Ala Glu Ala Asp Val His Leu Pro His Leu Thr Val Phe Glu 245 250 255 Thr Leu Val Thr Val Ala Arg Leu Lys Thr Pro Gln Asn Arg Ile Lys 260 265 270 Gly Val Asp Arg Glu Ser Tyr Ala Asn His Leu Ala Glu Val Ala Met 275 280 285 Ala Thr Tyr Gly Leu Ser His Thr Arg Asn Thr Lys Val Gly Asn Asp 290 295 300 Ile Val Arg Gly Val Ser Gly Gly Glu Arg Lys Arg Val Ser Ile Ala 305 310 315 320 Glu Val Ser Ile Cys Gly Ser Lys Phe Gln Cys Trp Asp Asn Ala Thr 325 330 335 Arg Gly Leu Asp Ser Ala Thr Ala Leu Glu Phe Ile Arg Ala Leu Lys 340 345 350 Thr Gln Ala Asp Ile Ser Asn Thr Ser Ala Thr Val Ala Ile Tyr Gln 355 360 365 Cys Ser Gln Asp Ala Tyr Asp Leu Phe Asn Lys Val Cys Val Leu Asp 370 375 380 Asp Gly Tyr Gln Ile Tyr Tyr Gly Pro Ala Asp Lys Ala Lys Lys Tyr 385 390 395 400 Phe Glu Asp Met Gly Tyr Val Cys Pro Ser Arg Gln Thr Thr Ala Asp 405 410 415 Phe Leu Thr Ser Val Thr Ser Pro Ser Glu Arg Thr Leu Asn Lys Asp 420 425 430 Met Leu Lys Lys Gly Ile His Ile Pro Gln Thr Pro Lys Glu Met Asn 435 440 445 Asp Tyr Trp Val Lys Ser Pro Asn Tyr Lys Glu Leu Met Lys Glu Val 450 455 460 Asp Gln Arg Leu Leu Asn Asp Asp Glu Ala Ser Arg Glu Ala Ile Lys 465 470 475 480 Glu Ala His Ile Ala Lys Gln Ser Lys Arg Ala Arg Pro Ser Ser Pro 485 490 495 Tyr Thr Val Ser Tyr Met Met Gln Val Lys Tyr Leu Leu Ile Arg Asn 500 505 510 Met Trp Arg Leu Arg Asn Asn Ile Gly Phe Thr Leu Phe Met Ile Leu 515 520 525 Gly Asn Cys Ser Met Ala Leu Ile Leu Gly Ser Met Phe Phe Lys Ile 530 535 540 Met Lys Lys Gly Asp Thr Ser Thr Phe Tyr Phe Arg Gly Ser Ala Met 545 550 555 560 Phe Phe Ala Ile Leu Phe Asn Ala Phe Ser Ser Leu Leu Glu Ile Phe 565 570 575 Ser Leu Tyr Glu Ala Arg Pro Ile Thr Glu Lys His Arg Thr Tyr Ser 580 585 590 Leu Tyr His Pro Ser Ala Asp Ala Phe Ala Ser Val Leu Ser Glu Ile 595 600 605 Pro Ser Lys Leu Ile Ile Ala Val Cys Phe Asn Ile Ile Phe Tyr Phe 610 615 620 Leu Val Asp Phe Arg Arg Asn Gly Gly Val Phe Phe Phe Tyr Leu Leu 625 630 635 640 Ile Asn Ile Val Ala Val Phe Ser Met Ser His Leu Phe Arg Cys Val 645 650 655 Gly Ser Leu Thr Lys Thr Leu Ser Glu Ala Met Val Pro Ala Ser Met 660 665 670 Leu Leu Leu Ala Leu Ser Met Tyr Thr Gly Phe Ala Ile Pro Lys Lys 675 680 685 Lys Ile Leu Arg Trp Ser Lys Trp Ile Trp Tyr Ile Asn Pro Leu Ala 690 695 700 Tyr Leu Phe Glu Ser Leu Leu Ile Asn Glu Phe His Gly Ile Lys Phe 705 710 715 720 Pro Cys Ala Glu Tyr Val Pro Arg Gly Pro Ala Tyr Ala Asn Ile Ser 725 730 735 Ser Thr Glu Ser Val Cys Thr Val Val Gly Ala Val Pro Gly Gln Asp 740 745 750 Tyr Val Leu Gly Asp Asp Phe Ile Arg Gly Thr Tyr Gln Tyr Tyr His 755 760 765 Lys Asp Lys Trp Arg Gly Phe Gly Ile Gly Met Ala Tyr Val Val Phe 770 775 780 Phe Phe Phe Val Tyr Leu Phe Leu Cys Glu Tyr Asn Glu Gly Ala Lys 785 790 795 800 Gln Lys Gly Glu Ile Leu Val Phe Pro Arg Ser Ile Val Lys Arg Met 805 810 815 Lys Lys Arg Gly Val Leu Thr Glu Lys Asn Ala Asn Asp Pro Glu Asn 820 825 830 Val Gly Glu Arg Ser Asp Leu Ser Ser Asp Arg Lys Met Leu Gln Glu 835 840 845 Ser Ser Glu Glu Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Glu Ile Gly Leu Ser Lys 850 855 860 Ser Glu Ala Ile Phe His Trp Arg Asn Leu Cys Tyr Glu Val Gln Ile 865 870 875 880 Lys Ala Glu Thr Arg Arg Ile Leu Asn Asn Val Asp Gly Trp Val Lys 885 890 895 Pro Gly Thr Leu Thr Ala Leu Met Gly Ala Ser Gly Ala Gly Lys Thr 900 905 910 Thr Leu Leu Asp Cys Leu Ala Glu Arg Val Thr Met Gly Val Ile Thr 915 920 925 Gly Asp Ile Leu Val Asn Gly Ile Pro Arg Asp Lys Ser Phe Pro Arg 930 935 940 Ser Ile Gly Tyr Cys Gln Gln Gln Asp Leu His Leu Lys Thr Ala Thr 945 950 955 960 Val Arg Glu Ser Leu Arg Phe Ser Ala Tyr Leu Arg Gln Pro Ala Glu 965 970 975 Val Ser Ile Glu Glu Lys Asn Arg Tyr Val Glu Glu Val Ile Lys Ile 980 985 990 Leu Glu Met Glu Lys Tyr Ala Asp Ala Val Val Gly Val Ala Gly Glu 995 1000 1005 Gly Leu Asn Val Glu Gln Arg Lys Arg Leu Thr Ile Gly Val Glu 1010 1015 1020 Leu Thr Ala Lys Pro Lys Leu Leu Val Phe Leu Asp Glu Pro Thr 1025 1030 1035 Ser Gly Leu Asp Ser Gln Thr Ala Trp Ser Ile Cys Gln Leu Met 1040 1045 1050 Lys Lys Leu Ala Asn His Gly Gln Ala Ile Leu Cys Thr Ile His 1055 1060 1065 Gln Pro Ser Ala Ile Leu Met Gln Glu Phe Asp Arg Leu Leu Phe 1070 1075 1080 Met Gln Arg Gly Gly Lys Thr Val Tyr Phe Gly Asp Leu Gly Glu 1085 1090 1095 Gly Cys Lys Thr Met Ile Asp Tyr Phe Glu Ser His Gly Ala His 1100 1105 1110 Lys Cys Pro Ala Asp Ala Asn Pro Ala Glu Trp Met Leu Glu Val 1115 1120 1125 Val Gly Ala Ala Pro Gly Ser His Ala Asn Gln Asp Tyr Tyr Glu 1130 1135 1140 Val Trp Arg Asn Ser Glu Glu Tyr Arg Ala Val Gln Ser Glu Leu 1145 1150 1155 Asp Trp Met Glu Arg Glu Leu Pro Lys Lys Gly Ser Ile Thr Ala 1160 1165 1170 Ala Glu Asp Lys His Glu Phe Ser Gln Ser Ile Ile Tyr Gln Thr 1175 1180 1185 Lys Leu Val Ser Ile Arg Leu Phe Gln Gln Tyr Trp Arg Ser Pro 1190 1195 1200 Asp Tyr Leu Trp Ser Lys Phe Ile Leu Thr Ile Phe Asn Gln Leu 1205 1210 1215 Phe Ile Gly Phe Thr Phe Phe Lys Ala Gly Thr Ser Leu Gln Gly 1220 1225 1230 Leu Gln Asn Gln Met Leu Ala Val Phe Met Phe Thr Val Ile Phe 1235 1240 1245 Asn Pro Ile Leu Gln Gln Tyr Leu Pro Ser Phe Val Gln Gln Arg 1250 1255 1260 Asp Leu Tyr Glu Ala Arg Glu Arg Pro Ser Arg Thr Phe Ser Trp 1265 1270 1275 Ile Ser Phe Ile Phe Ala Gln Ile Phe Val Glu Val Pro Trp Asn 1280 1285 1290 Ile Leu Ala Gly Thr Ile Ala Tyr Phe Ile Tyr Tyr Tyr Pro Ile 1295 1300 1305 Gly Phe Tyr Ser Asn Ala Ser Ala Ala Gly Gln Leu His Glu Arg 1310 1315 1320 Gly Ala Leu Phe Trp Leu Phe Ser Cys Ala Phe Tyr Val Tyr Val 1325 1330 1335 Gly Ser Met Gly Leu Leu Val Ile Ser Phe Asn Gln Val Ala Glu 1340 1345 1350 Ser Ala Ala Asn Leu Ala Ser Leu Leu Phe Thr Met Ser Leu Ser 1355 1360 1365 Phe Cys Gly Val Met Thr Thr Pro Ser Ala Met Pro Arg Phe Trp 1370 1375 1380 Ile Phe Met Tyr Arg Val Ser Pro Leu Thr Tyr Phe Ile Gln Ala 1385 1390 1395 Leu Leu Ala Val Gly Val Ala Asn Val Asp Val Lys Cys Ala Asp 1400 1405 1410 Tyr Glu Leu Leu Glu Phe Thr Pro Pro Ser Gly Met Thr Cys Gly 1415 1420 1425 Gln Tyr Met Glu Pro Tyr Leu Gln Leu Ala Lys Thr Gly Tyr Leu 1430 1435 1440 Thr Asp Glu Asn Ala Thr Asp Thr Cys Ser Phe Cys Gln Ile Ser 1445 1450 1455 Thr Thr Asn Asp Tyr Leu Ala Asn Val Asn Ser Phe Tyr Ser Glu 1460 1465 1470 Arg Trp Arg Asn Tyr Gly Ile Phe Ile Cys Tyr Ile Ala Phe Asn 1475 1480 1485 Tyr Ile Ala Gly Val Phe Phe Tyr Trp Leu Ala Arg Val Pro Lys 1490 1495 1500 Lys Asn Gly Lys Leu Ser Lys Lys 1505 1510 <210> 107 <211> 1564 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 107 Met Leu Gln Ala Pro Ser Ser Ser Asn Ser Gly Leu Asn Gln Gly Asn 1 5 10 15 Ala Ala Pro Asp Gly Pro Pro Asn Glu Thr Gln Pro Tyr Glu Gly Leu 20 25 30 Asp Ala Ala Ala Gln Glu Glu Ile Lys Glu Leu Ala Arg Thr Leu Thr 35 40 45 Ser Gln Ser Ser Leu Leu Ser Gln Glu Lys Arg Ile Thr Gly Thr Gly 50 55 60 Asp Pro Asn Thr Leu Thr Ala Ala Ser Ser Ser Ser Leu Ser Arg Ser 65 70 75 80 Ile Phe Ala Ser Asp Ile Lys Gly Val Asn Pro Ile Leu Leu Asp Val 85 90 95 Asn Asp Pro Asp Tyr Asp Glu Thr Leu Asp Pro Arg Ser Glu Asn Phe 100 105 110 Ser Ser Val Arg Trp Val Arg Asn Met Ala Gln Ile Cys Glu Asn Asp 115 120 125 Ser Asp Phe Tyr Lys Pro Phe Ser Leu Gly Cys Ala Trp Lys Asp Leu 130 135 140 Ser Ala Ser Gly Asp Ser Ala Asp Ile Thr Tyr Gln Gly Thr Phe Gly 145 150 155 160 Asn Met Pro Ile Lys Tyr Leu Lys Met Ser Trp Arg Cys Ile Ser Arg 165 170 175 Arg Leu Phe His Arg Thr His Gly Lys Ser Glu Asp Asn Asp Ser Gly 180 185 190 Phe Gln Ile Leu Lys Pro Met Asp Gly Cys Ile Asn Pro Gly Glu Leu 195 200 205 Leu Val Val Leu Gly Arg Pro Gly Ala Gly Cys Thr Thr Leu Leu Lys 210 215 220 Ser Ile Ser Val Asn Thr His Gly Phe Lys Ile Ser Pro Asp Thr Ile 225 230 235 240 Ile Thr Tyr Asn Gly Phe Ser Asn Lys Glu Ile Lys Asn His Tyr Arg 245 250 255 Gly Glu Val Val Tyr Asn Ala Glu Ser Asp Ile His Ile Pro His Leu 260 265 270 Thr Val Phe Gln Thr Leu Tyr Thr Val Ala Arg Leu Lys Thr Pro Arg 275 280 285 Asn Arg Ile Lys Gly Val Asp Arg Asp Thr Phe Ala Lys His Met Thr 290 295 300 Glu Val Ala Met Ala Thr Tyr Gly Leu Ser His Thr Ala Asp Thr Lys 305 310 315 320 Val Gly Asn Asp Phe Val Arg Gly Val Ser Gly Gly Glu Arg Lys Arg 325 330 335 Val Ser Ile Ala Glu Val Ser Ile Cys Gly Ser Lys Phe Gln Cys Trp 340 345 350 Asp Asn Ala Thr Arg Gly Leu Asp Ser Ala Thr Ala Leu Glu Phe Ile 355 360 365 Lys Ala Leu Lys Thr Gln Ala Thr Ile Thr Lys Ser Ala Ala Thr Val 370 375 380 Ala Ile Tyr Gln Cys Ser Lys Asp Ala Tyr Asp Leu Phe Asp Lys Val 385 390 395 400 Cys Val Leu Tyr Asp Gly Tyr Gln Ile Phe Phe Gly Pro Ser Lys Gln 405 410 415 Ala Lys Lys Tyr Phe Gln Arg Met Gly Tyr Val Cys Pro Glu Arg Gln 420 425 430 Thr Thr Ala Asp Tyr Leu Thr Ser Ile Thr Ser Pro Ser Glu Arg Ile 435 440 445 Lys Asp Lys Asp Met Val Lys His Gly Ile Met Ile Pro Gln Thr Ala 450 455 460 Tyr Glu Met Asn Gln Tyr Trp Ile Gln Ser Glu Glu Tyr Lys Gln Leu 465 470 475 480 Gln Val Gln Val Asn Lys His Leu Asp Thr Asp Ser Ser Gln Gln Arg 485 490 495 Glu Gln Ile Lys Asn Ala His Ile Ala Lys Gln Ser Lys Arg Ala Arg 500 505 510 Pro Ser Ser Pro Tyr Thr Val Ser Phe Phe Leu Gln Val Lys Tyr Ile 515 520 525 Leu Ile Arg Asp Ile Trp Arg Ile Lys Asn Asp Pro Ser Ile Gln Leu 530 535 540 Phe Thr Val Leu Ser His Ala Ala Met Ala Leu Ile Leu Gly Ser Met 545 550 555 560 Phe Tyr Glu Val Met Leu Ser Thr Thr Thr Thr Thr Phe Tyr Tyr Arg 565 570 575 Gly Ala Ala Ile Phe Phe Ala Ile Leu Phe Asn Ala Phe Ser Ser Leu 580 585 590 Leu Glu Ile Phe Ser Leu Tyr Glu Thr Arg Pro Ile Thr Glu Lys His 595 600 605 Lys Thr Tyr Ser Leu Tyr Arg Pro Ser Ala Asp Ala Phe Ala Ser Thr 610 615 620 Phe Ser Asp Val Pro Thr Lys Leu Ala Thr Ala Val Thr Phe Asn Ile 625 630 635 640 Pro Tyr Tyr Phe Leu Ile Asn Leu Lys Arg Asp Ala Gly Ala Phe Phe 645 650 655 Phe Tyr Phe Leu Ile Asn Ile Ile Thr Val Phe Ala Met Ser His Leu 660 665 670 Phe Arg Cys Ile Gly Ser Val Ser Lys Thr Leu Pro Gln Ala Met Val 675 680 685 Pro Ala Ser Val Leu Leu Leu Ala Phe Ala Met Tyr Thr Gly Phe Ala 690 695 700 Ile Pro Arg Val Gln Met Leu Gly Trp Ser Lys Trp Ile Ser Tyr Ile 705 710 715 720 Asn Pro Leu Ser Tyr Leu Phe Glu Ser Leu Met Ile Asn Glu Phe His 725 730 735 Gly Arg Asn Phe Pro Cys Ala Gln Tyr Ile Pro Ser Gly Pro Asn Tyr 740 745 750 Val Asn Ala Thr Gly Asp Glu Val Thr Cys Ser Ala Leu Gly Ser Ile 755 760 765 Pro Gly Asn Asn Tyr Val Ser Gly Asp Asp Phe Ile Gln Thr Asn Tyr 770 775 780 Gly Tyr Arg His Lys Asn Lys Trp Arg Ser Val Gly Ile Gly Leu Ala 785 790 795 800 Tyr Ile Ile Phe Phe Leu Phe Leu Tyr Leu Phe Phe Cys Glu Tyr Asn 805 810 815 Glu Gly Ala Lys Gln Asn Gly Glu Met Leu Val Phe Pro His Ser Val 820 825 830 Val Lys Lys Met Lys Lys Lys Gly Ile Val Ser Glu Lys Lys Lys Lys 835 840 845 Asn Gln Pro Thr Leu Ser Thr Ser Asp Ala Glu Lys Asp Val Glu Met 850 855 860 Asn Asn Asn Ser Ser Ala Thr Asp Ser Arg Phe Leu Arg Asp Ser Asp 865 870 875 880 Ala Ala Ile Met Gly Asn Asp Lys Thr Val Ala Lys Glu His Tyr Ser 885 890 895 Ser Pro Ser Ser Ser Ala Ser Gln Ser Asn Ser Phe Ser Lys Ser Asp 900 905 910 Asp Ile Glu Leu Ser Lys Ser Gln Ala Ile Phe His Trp Lys Asn Leu 915 920 925 Cys Tyr Asp Ile Pro Ile Lys Asn Gly Lys Arg Arg Ile Leu Asp Asn 930 935 940 Val Asp Gly Trp Val Lys Pro Gly Thr Leu Thr Ala Leu Ile Gly Ala 945 950 955 960 Ser Gly Ala Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asp Cys Leu Ala Glu Arg Thr 965 970 975 Thr Met Gly Leu Ile Thr Gly Asp Val Phe Val Asp Gly Arg Pro Arg 980 985 990 Asp Gln Ser Phe Pro Arg Ser Ile Gly Tyr Cys Gln Gln Gln Asp Leu 995 1000 1005 His Leu Lys Thr Ala Thr Val Arg Glu Ser Leu Arg Phe Ser Ala 1010 1015 1020 Tyr Leu Arg Gln Ala Asp Asp Val Ser Ile Glu Glu Lys Asp Lys 1025 1030 1035 Tyr Val Glu Glu Val Ile Glu Val Leu Glu Met Lys Leu Tyr Ala 1040 1045 1050 Asp Ala Ile Val Gly Val Pro Gly Glu Gly Leu Asn Val Glu Gln 1055 1060 1065 Arg Lys Arg Leu Thr Ile Gly Val Glu Leu Ala Ala Lys Pro Lys 1070 1075 1080 Leu Leu Val Phe Leu Asp Glu Pro Thr Ser Gly Leu Asp Ser Gln 1085 1090 1095 Thr Ala Trp Ser Thr Cys Gln Leu Met Lys Lys Leu Ala Ser Arg 1100 1105 1110 Gly Gln Ala Ile Leu Cys Thr Ile His Gln Pro Ser Ala Leu Leu 1115 1120 1125 Met Gln Glu Phe Asp Arg Leu Leu Phe Leu Gln Glu Gly Gly Gln 1130 1135 1140 Thr Val Tyr Phe Gly Glu Leu Gly Lys Gly Cys Lys Thr Met Ile 1145 1150 1155 Asn Tyr Phe Glu Ala His Gly Ala His Lys Cys Pro Pro Asp Ala 1160 1165 1170 Asn Pro Ala Glu Trp Met Leu Glu Ile Val Gly Ala Ala Pro Gly 1175 1180 1185 Thr His Ala Ser Gln Asp Tyr Phe Ala Ile Trp Arg Asp Ser Glu 1190 1195 1200 Glu Tyr Arg Glu Met Gln Lys Glu Leu Asp Trp Met Glu Arg Glu 1205 1210 1215 Leu Pro Lys Arg Thr Glu Gly Ser Ser Asn Glu Glu Gln Lys Glu 1220 1225 1230 Phe Ala Thr Ser Thr Leu Tyr Gln Ile Lys Leu Val Ser Tyr Arg 1235 1240 1245 Leu Phe His Gln Tyr Trp Arg Thr Pro Phe Tyr Leu Trp Ser Lys 1250 1255 1260 Phe Phe Ser Thr Ile Val Ser Glu Leu Phe Ile Gly Phe Thr Phe 1265 1270 1275 Phe Lys Ala Asn Thr Ser Leu Gln Gly Leu Gln Asn Gln Met Leu 1280 1285 1290 Ala Ile Phe Met Phe Thr Val Val Phe Asn Pro Ile Leu Gln Gln 1295 1300 1305 Tyr Leu Pro Leu Phe Val Gln Gln Arg Glu Leu Tyr Glu Ala Arg 1310 1315 1320 Glu Arg Pro Ser Arg Thr Phe Ser Trp Lys Ala Phe Ile Val Ser 1325 1330 1335 Gln Ile Leu Val Glu Ile Pro Trp Asn Leu Leu Ala Gly Thr Ile 1340 1345 1350 Ala Phe Phe Val Tyr Tyr Tyr Pro Val Gly Phe Tyr Arg Asn Ala 1355 1360 1365 Ser Tyr Ala Asn Gln Leu His Glu Arg Gly Ala Leu Phe Trp Leu 1370 1375 1380 Phe Ala Cys Ala Phe Tyr Val Tyr Ile Ser Ser Met Gly Val Leu 1385 1390 1395 Val Ile Ser Cys Ile Glu Ile Ala Glu Asn Ala Ala Asn Leu Ala 1400 1405 1410 Ser Leu Phe Phe Ile Met Ser Leu Ser Phe Cys Gly Val Leu Ala 1415 1420 1425 Thr Pro Asn Ile Leu Pro Arg Phe Trp Ile Phe Met Tyr Arg Val 1430 1435 1440 Ser Pro Leu Thr Tyr Leu Ile Asp Ala Leu Leu Ser Val Gly Leu 1445 1450 1455 Ala Asn Ala Ser Val Val Cys Ser Ser Asn Glu Leu Leu Lys Ile 1460 1465 1470 Val Pro Pro Ser Gly Met Thr Cys Ser Glu Tyr Met Glu Pro Tyr 1475 1480 1485 Met Gln Ser Thr Gly Thr Gly Tyr Leu Leu Asp Gly Ser Ser Glu 1490 1495 1500 Thr Glu Cys His Phe Cys Gln Phe Ser Ser Thr Asn Asp Tyr Leu 1505 1510 1515 Ala Thr Val Ser Ser Ser Tyr Ser Arg Arg Trp Met Asn Tyr Gly 1520 1525 1530 Ile Phe Ser Ala Tyr Ile Val Phe Asp Tyr Cys Ala Ala Ile Phe 1535 1540 1545 Leu Tyr Trp Leu Val Arg Val Pro Lys Lys Ser Lys Lys Leu Lys 1550 1555 1560 Lys <210> 108 <211> 1411 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 108 Met Ser Leu Ser Lys Tyr Phe Asn Pro Ile Pro Asp Ala Ser Val Thr 1 5 10 15 Phe Asp Gly Ala Thr Val Gln Leu Glu Glu Ser Leu Gly Ala Val Gln 20 25 30 Asn Asp Glu Glu Ser Ala Ser Glu Phe Lys Asn Val Gly His Leu Glu 35 40 45 Ile Ser Asp Ile Thr Phe Arg Ala Asn Glu Gly Glu Val Val Leu Val 50 55 60 Leu Gly Asn Pro Thr Ser Ala Leu Phe Lys Gly Leu Phe His Gly His 65 70 75 80 Lys His Leu Lys Tyr Ser Pro Glu Gly Ser Ile Arg Phe Lys Asp Asn 85 90 95 Glu Tyr Lys Gln Phe Ala Ser Lys Cys Pro His Gln Ile Ile Tyr Asn 100 105 110 Asn Glu Gln Asp Ile His Phe Pro Tyr Leu Thr Val Glu Gln Thr Ile 115 120 125 Asp Phe Ala Leu Ser Cys Lys Phe His Ile Pro Lys Gln Glu Arg Ile 130 135 140 Glu Met Arg Asp Glu Leu Leu Lys Glu Phe Gly Leu Ser His Val Lys 145 150 155 160 Lys Thr Tyr Val Gly Asn Asp Tyr Val Arg Gly Val Ser Gly Gly Glu 165 170 175 Arg Lys Arg Ile Ser Ile Ile Glu Thr Phe Ile Ala Asn Gly Ser Val 180 185 190 Tyr Leu Trp Asp Asn Ser Thr Lys Gly Leu Asp Ser Ala Thr Ala Leu 195 200 205 Glu Phe Leu Ser Ile Thr Gln Lys Met Ala Lys Ala Thr Arg Ser Val 210 215 220 Asn Phe Val Lys Ile Ser Gln Ala Ser Asp Lys Ile Val Ser Lys Phe 225 230 235 240 Asp Lys Ile Leu Met Leu Gly Asp Ser Phe Gln Val Phe Tyr Gly Thr 245 250 255 Met Glu Glu Cys Leu Thr His Phe His Asp Thr Leu Gln Ile Lys Lys 260 265 270 Asn Pro Asn Asp Cys Ile Ile Glu Tyr Leu Thr Ser Ile Leu Asn Phe 275 280 285 Lys Phe Lys Glu Thr Ser Asn Ser Ile Val Gly Leu Asp Thr Pro Ser 290 295 300 Val Val Ser Glu Glu Asn Gln Ala Leu Asn Ile Asn Asn Glu Thr Asp 305 310 315 320 Leu His Thr Leu Trp Ile Gln Ser Pro Tyr Tyr Lys His Trp Lys Ala 325 330 335 Ile Thr Ser Lys Thr Val Gln Glu Cys Thr Arg Lys Asp Val Asn Pro 340 345 350 Asp Asp Ile Ser Pro Ile Phe Ser Ile Pro Leu Lys Thr Gln Leu Lys 355 360 365 Thr Cys Thr Val Arg Ala Phe Glu Arg Ile Ile Gly Asp Arg Asn Tyr 370 375 380 Leu Ile Ser Gln Phe Val Ser Val Val Val Gln Ser Leu Val Ile Gly 385 390 395 400 Ser Leu Phe Tyr Asn Ile Pro Leu Thr Thr Ile Gly Ser Phe Ser Arg 405 410 415 Gly Ser Leu Thr Phe Phe Ser Ile Leu Phe Phe Thr Phe Leu Ser Leu 420 425 430 Ala Asp Met Pro Ala Ser Phe Gln Arg Gln Pro Val Val Arg Lys His 435 440 445 Val Gln Leu His Phe Tyr Tyr Asn Trp Val Glu Thr Leu Ala Thr Asn 450 455 460 Phe Phe Asp Cys Cys Ser Lys Phe Ile Leu Val Val Ile Phe Thr Ile 465 470 475 480 Ile Leu Tyr Phe Leu Ala His Leu Gln Tyr Asn Ala Ala Arg Phe Phe 485 490 495 Ile Phe Leu Leu Phe Leu Ser Val Tyr Asn Phe Cys Met Val Ser Leu 500 505 510 Phe Ala Leu Thr Ala Leu Ile Ala Pro Thr Leu Ser Met Ala Asn Leu 515 520 525 Leu Ala Gly Ile Leu Leu Leu Ala Ile Ala Met Tyr Ala Ser Tyr Val 530 535 540 Ile Tyr Met Lys Asp Met His Pro Trp Phe Ile Trp Ile Ala Tyr Leu 545 550 555 560 Asn Pro Ala Met Phe Ala Met Glu Ala Ile Leu Ser Asn Glu Leu Phe 565 570 575 Asn Leu Lys Leu Asp Cys His Glu Ser Ile Ile Pro Arg Gly Glu Tyr 580 585 590 Tyr Asp Asn Ile Ser Phe Ser His Lys Ala Cys Ala Trp Gln Gly Ala 595 600 605 Thr Leu Gly Asn Asp Tyr Val Arg Gly Arg Asp Tyr Leu Lys Ser Gly 610 615 620 Leu Lys Tyr Thr Tyr His His Val Trp Arg Asn Phe Gly Ile Ile Ile 625 630 635 640 Gly Phe Leu Cys Phe Phe Leu Phe Cys Ser Leu Leu Ala Ala Glu Tyr 645 650 655 Ile Thr Pro Leu Phe Thr Arg Glu Asn Leu Leu Arg Trp Asn Asn Tyr 660 665 670 Leu Lys Arg Tyr Cys Pro Phe Leu Asn Ser Gln Lys Lys Asn Asn Lys 675 680 685 Ser Ala Ile Thr Asn Asn Asp Gly Val Cys Thr Pro Lys Thr Pro Ile 690 695 700 Ala Asn Phe Ser Thr Ser Ser Ser Ser Val Pro Ser Val Ser His Gln 705 710 715 720 Tyr Asp Thr Asp Tyr Asn Ile Lys His Pro Asp Glu Thr Val Asn Asn 725 730 735 His Thr Lys Glu Ser Val Ala Met Glu Thr Gln Lys His Val Ile Ser 740 745 750 Trp Lys Asn Ile Asn Tyr Thr Ile Gly Asp Lys Lys Leu Ile Asn Asp 755 760 765 Ala Ser Gly Tyr Ile Ser Ser Gly Leu Thr Ala Leu Met Gly Glu Ser 770 775 780 Gly Ala Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asn Val Leu Ser Gln Arg Thr Glu 785 790 795 800 Ser Gly Val Val Thr Gly Glu Leu Leu Ile Asp Gly Gln Pro Leu Thr 805 810 815 Asn Ile Asp Ala Phe Arg Arg Ser Ile Gly Phe Val Gln Gln Gln Asp 820 825 830 Val His Leu Glu Leu Leu Thr Val Arg Glu Ser Leu Glu Ile Ser Cys 835 840 845 Val Leu Arg Gly Asp Gly Asp Arg Asp Tyr Leu Gly Val Val Ser Asn 850 855 860 Leu Leu Arg Leu Pro Ser Glu Lys Leu Val Ala Asp Leu Ser Pro Thr 865 870 875 880 Gln Arg Lys Leu Leu Ser Ile Gly Val Glu Leu Val Thr Lys Pro Ser 885 890 895 Leu Leu Leu Phe Leu Asp Glu Pro Thr Ser Gly Leu Asp Ala Glu Ala 900 905 910 Ala Leu Thr Ile Val Gln Phe Leu Lys Lys Leu Ser Met Gln Gly Gln 915 920 925 Ala Ile Leu Cys Thr Ile His Gln Pro Ser Lys Ser Val Ile Ser Tyr 930 935 940 Phe Asp Asn Ile Tyr Leu Leu Lys Arg Gly Gly Glu Cys Val Tyr Phe 945 950 955 960 Gly Ser Leu Pro Asn Ala Cys Asp Tyr Phe Val Ala His Asp Arg Arg 965 970 975 Leu Thr Phe Asp Arg Glu Met Asp Asn Pro Ala Asp Phe Val Ile Asp 980 985 990 Val Val Gly Ser Gly Ser Thr Asn Ile Pro Met Asp Asp Ala Glu Lys 995 1000 1005 Pro Thr Ser Ser Lys Ile Asp Glu Pro Val Ser Tyr His Lys Gln 1010 1015 1020 Ser Asp Ser Ile Asn Trp Ala Glu Leu Trp Gln Ser Ser Pro Glu 1025 1030 1035 Lys Val Arg Val Ala Asp Asp Leu Leu Leu Leu Glu Glu Glu Ala 1040 1045 1050 Arg Lys Ser Gly Val Asp Phe Thr Thr Ser Val Trp Ser Pro Pro 1055 1060 1065 Ser Tyr Met Glu Gln Ile Lys Leu Ile Thr Lys Arg Gln Tyr Ile 1070 1075 1080 Cys Thr Lys Arg Asp Met Thr Tyr Val Phe Ala Lys Tyr Ala Leu 1085 1090 1095 Asn Ala Gly Ala Gly Leu Phe Ile Gly Phe Ser Phe Trp Arg Thr 1100 1105 1110 Lys His Asn Ile Asn Gly Leu Gln Asp Ala Ile Phe Leu Cys Phe 1115 1120 1125 Met Met Leu Cys Val Ser Ser Pro Leu Ile Asn Gln Val Gln Asp 1130 1135 1140 Lys Ala Leu Gln Ser Lys Glu Val Tyr Ile Ala Arg Glu Ala Arg 1145 1150 1155 Ser Asn Thr Tyr His Trp Thr Val Leu Leu Ile Ala Gln Thr Ile 1160 1165 1170 Val Glu Leu Pro Leu Ala Ile Ser Ser Ser Thr Leu Phe Phe Leu 1175 1180 1185 Cys Cys Tyr Phe Cys Cys Gly Phe Glu Thr Ser Ala Arg Val Ala 1190 1195 1200 Gly Val Phe Tyr Leu Asn Tyr Ile Leu Phe Ser Met Tyr Tyr Leu 1205 1210 1215 Ser Phe Gly Leu Trp Leu Leu Tyr Ser Ala Pro Asp Leu Gln Thr 1220 1225 1230 Ala Ala Val Phe Val Ala Phe Leu Tyr Ser Phe Thr Ala Ser Phe 1235 1240 1245 Cys Gly Val Met Gln Pro Tyr Ser Leu Phe Pro Arg Phe Trp Thr 1250 1255 1260 Phe Met Tyr Arg Val Ser Pro Tyr Thr Tyr Phe Ile Glu Thr Phe 1265 1270 1275 Val Ser Leu Leu Leu His Asp Arg Glu Val Asn Cys Ser Thr Ser 1280 1285 1290 Glu Met Val Pro Ser Gln Pro Val Met Gly Gln Thr Cys Gly Gln 1295 1300 1305 Phe Met Lys Pro Phe Ile Asp Glu Phe Gly Gly Lys Leu His Ile 1310 1315 1320 Asn Asn Thr Tyr Thr Val Cys Ala Tyr Cys Met Tyr Thr Val Gly 1325 1330 1335 Asp Asp Phe Leu Ala Gln Glu Asn Met Ser Tyr His His Arg Trp 1340 1345 1350 Arg Asn Phe Gly Phe Glu Trp Val Phe Val Cys Phe Asn Ile Ala 1355 1360 1365 Ala Met Phe Val Gly Phe Tyr Leu Thr Tyr Ile Lys Lys Ile Trp 1370 1375 1380 Pro Ser Val Ile Asp Gly Ile Lys Lys Cys Ile Pro Ser Met Arg 1385 1390 1395 Arg Ser Lys Thr Ser His Asn Pro Asn Glu Gln Ser Val 1400 1405 1410 <210> 109 <211> 1511 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 109 Met Ser Ser Thr Asp Glu His Ile Glu Lys Asp Ile Ser Ser Arg Ser 1 5 10 15 Asn His Asp Asp Asp Tyr Ala Asn Ser Val Gln Ser Tyr Ala Ala Ser 20 25 30 Glu Gly Gln Val Asp Asn Glu Asp Leu Ala Ala Thr Ser Gln Leu Ser 35 40 45 Arg His Leu Ser Asn Ile Leu Ser Asn Glu Glu Gly Ile Glu Arg Leu 50 55 60 Glu Ser Met Ala Arg Val Ile Ser His Lys Thr Lys Lys Glu Met Asp 65 70 75 80 Ser Phe Glu Ile Asn Asp Leu Asp Phe Asp Leu Arg Ser Leu Leu His 85 90 95 Tyr Leu Arg Ser Arg Gln Leu Glu Gln Gly Ile Glu Pro Gly Asp Ser 100 105 110 Gly Ile Ala Phe Lys Asn Leu Thr Ala Val Gly Val Asp Ala Ser Ala 115 120 125 Ala Tyr Gly Pro Ser Val Glu Glu Met Phe Arg Asn Ile Ala Ser Ile 130 135 140 Pro Ala His Leu Ile Ser Lys Phe Thr Lys Lys Ser Asp Val Pro Leu 145 150 155 160 Arg Asn Ile Ile Gln Asn Cys Thr Gly Val Val Glu Ser Gly Glu Met 165 170 175 Leu Phe Val Val Gly Arg Pro Gly Ala Gly Cys Ser Thr Phe Leu Lys 180 185 190 Cys Leu Ser Gly Glu Thr Ser Glu Leu Val Asp Val Gln Gly Glu Phe 195 200 205 Ser Tyr Asp Gly Leu Asp Gln Ser Glu Met Met Ser Lys Tyr Lys Gly 210 215 220 Tyr Val Ile Tyr Cys Pro Glu Leu Asp Phe His Phe Pro Lys Ile Thr 225 230 235 240 Val Lys Glu Thr Ile Asp Phe Ala Leu Lys Cys Lys Thr Pro Arg Val 245 250 255 Arg Ile Asp Lys Met Thr Arg Lys Gln Tyr Val Asp Asn Ile Arg Asp 260 265 270 Met Trp Cys Thr Val Phe Gly Leu Arg His Thr Tyr Ala Thr Lys Val 275 280 285 Gly Asn Asp Phe Val Arg Gly Val Ser Gly Gly Glu Arg Lys Arg Val 290 295 300 Ser Leu Val Glu Ala Gln Ala Met Asn Ala Ser Ile Tyr Ser Trp Asp 305 310 315 320 Asn Ala Thr Arg Gly Leu Asp Ala Ser Thr Ala Leu Glu Phe Ala Gln 325 330 335 Ala Ile Arg Thr Ala Thr Asn Met Val Asn Asn Ser Ala Ile Val Ala 340 345 350 Ile Tyr Gln Ala Gly Glu Asn Ile Tyr Glu Leu Phe Asp Lys Thr Thr 355 360 365 Val Leu Tyr Asn Gly Arg Gln Ile Tyr Phe Gly Pro Ala Asp Lys Ala 370 375 380 Val Gly Tyr Phe Gln Arg Met Gly Trp Val Lys Pro Asn Arg Met Thr 385 390 395 400 Ser Ala Glu Phe Leu Thr Ser Val Thr Val Asp Phe Glu Asn Arg Thr 405 410 415 Leu Asp Ile Lys Pro Gly Tyr Glu Asp Lys Val Pro Lys Ser Ser Ser 420 425 430 Glu Phe Glu Glu Tyr Trp Leu Asn Ser Glu Asp Tyr Gln Glu Leu Leu 435 440 445 Arg Thr Tyr Asp Asp Tyr Gln Ser Arg His Pro Val Asn Glu Thr Arg 450 455 460 Asp Arg Leu Asp Val Ala Lys Lys Gln Arg Leu Gln Gln Gly Gln Arg 465 470 475 480 Glu Asn Ser Gln Tyr Val Val Asn Tyr Trp Thr Gln Val Tyr Tyr Cys 485 490 495 Met Ile Arg Gly Phe Gln Arg Val Lys Gly Asp Ser Thr Tyr Thr Lys 500 505 510 Val Tyr Leu Ser Ser Phe Leu Ile Lys Ala Leu Ile Ile Gly Ser Met 515 520 525 Phe His Lys Ile Asp Asp Lys Ser Gln Ser Thr Thr Ala Gly Ala Tyr 530 535 540 Ser Arg Gly Gly Met Leu Phe Tyr Val Leu Leu Phe Ala Ser Val Thr 545 550 555 560 Ser Leu Ala Glu Ile Gly Asn Ser Phe Ser Ser Arg Pro Val Ile Val 565 570 575 Lys His Lys Ser Tyr Ser Met Tyr His Leu Ser Ala Glu Ser Leu Gln 580 585 590 Glu Ile Ile Thr Glu Phe Pro Thr Lys Phe Val Ala Ile Val Ile Leu 595 600 605 Cys Leu Ile Thr Tyr Trp Ile Pro Phe Met Lys Tyr Glu Ala Gly Ala 610 615 620 Phe Phe Gln Tyr Ile Leu Tyr Leu Leu Thr Val Gln Gln Cys Thr Ser 625 630 635 640 Phe Ile Phe Lys Phe Val Ala Thr Met Ser Lys Ser Gly Val Asp Ala 645 650 655 His Ala Val Gly Gly Leu Trp Val Leu Met Leu Cys Val Tyr Ala Gly 660 665 670 Phe Val Leu Pro Ile Gly Glu Met His His Trp Ile Arg Trp Leu His 675 680 685 Phe Ile Asn Pro Leu Thr Tyr Ala Phe Glu Ser Leu Val Ser Thr Glu 690 695 700 Phe His His Arg Glu Met Leu Cys Ser Ala Leu Val Pro Ser Gly Pro 705 710 715 720 Gly Tyr Glu Gly Ile Ser Ile Ala Asn Gln Val Cys Asp Ala Ala Gly 725 730 735 Ala Val Lys Gly Asn Leu Tyr Val Ser Gly Asp Ser Tyr Ile Leu His 740 745 750 Gln Tyr His Phe Ala Tyr Lys His Ala Trp Arg Asn Trp Gly Val Asn 755 760 765 Ile Val Trp Thr Phe Gly Tyr Ile Val Phe Asn Val Ile Leu Ser Glu 770 775 780 Tyr Leu Lys Pro Val Glu Gly Gly Gly Asp Leu Leu Leu Tyr Lys Arg 785 790 795 800 Gly His Met Pro Glu Leu Gly Thr Glu Asn Ala Asp Ala Arg Thr Ala 805 810 815 Ser Arg Glu Glu Met Met Glu Ala Leu Asn Gly Pro Asn Val Asp Leu 820 825 830 Glu Lys Val Ile Ala Glu Lys Asp Val Phe Thr Trp Asn His Leu Asp 835 840 845 Tyr Thr Ile Pro Tyr Asp Gly Ala Thr Arg Lys Leu Leu Ser Asp Val 850 855 860 Phe Gly Tyr Val Lys Pro Gly Lys Met Thr Ala Leu Met Gly Glu Ser 865 870 875 880 Gly Ala Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asn Val Leu Ala Gln Arg Ile Asn 885 890 895 Met Gly Val Ile Thr Gly Asp Met Leu Val Asn Ala Lys Pro Leu Pro 900 905 910 Ala Ser Phe Asn Arg Ser Cys Gly Tyr Val Ala Gln Ala Asp Asn His 915 920 925 Met Ala Glu Leu Ser Val Arg Glu Ser Leu Arg Phe Ala Ala Glu Leu 930 935 940 Arg Gln Gln Ser Ser Val Pro Leu Glu Glu Lys Tyr Glu Tyr Val Glu 945 950 955 960 Lys Ile Ile Thr Leu Leu Gly Met Gln Asn Tyr Ala Glu Ala Leu Val 965 970 975 Gly Lys Thr Gly Arg Gly Leu Asn Val Glu Gln Arg Lys Lys Leu Ser 980 985 990 Ile Gly Val Glu Leu Val Ala Lys Pro Ser Leu Leu Leu Phe Leu Asp 995 1000 1005 Glu Pro Thr Ser Gly Leu Asp Ser Gln Ser Ala Trp Ser Ile Val 1010 1015 1020 Gln Phe Met Arg Ala Leu Ala Asp Ser Gly Gln Ser Ile Leu Cys 1025 1030 1035 Thr Ile His Gln Pro Ser Ala Thr Leu Phe Glu Gln Phe Asp Arg 1040 1045 1050 Leu Leu Leu Leu Lys Lys Gly Gly Lys Met Val Tyr Phe Gly Asp 1055 1060 1065 Ile Gly Pro Asn Ser Glu Thr Leu Leu Lys Tyr Phe Glu Arg Gln 1070 1075 1080 Ser Gly Met Lys Cys Gly Val Ser Glu Asn Pro Ala Glu Tyr Ile 1085 1090 1095 Leu Asn Cys Ile Gly Ala Gly Ala Thr Ala Ser Val Asn Ser Asp 1100 1105 1110 Trp His Asp Leu Trp Leu Ala Ser Pro Glu Cys Ala Ala Ala Arg 1115 1120 1125 Ala Glu Val Glu Glu Leu His Arg Thr Leu Pro Gly Arg Ala Val 1130 1135 1140 Asn Asp Asp Pro Glu Leu Ala Thr Arg Phe Ala Ala Ser Tyr Met 1145 1150 1155 Thr Gln Ile Lys Cys Val Leu Arg Arg Thr Ala Leu Gln Phe Trp 1160 1165 1170 Arg Ser Pro Val Tyr Ile Arg Ala Lys Phe Phe Glu Cys Val Ala 1175 1180 1185 Cys Ala Leu Phe Val Gly Leu Ser Tyr Val Gly Val Asn His Ser 1190 1195 1200 Val Gly Gly Ala Ile Glu Ala Phe Ser Ser Ile Phe Met Leu Leu 1205 1210 1215 Leu Ile Ala Leu Ala Met Ile Asn Gln Leu His Val Phe Ala Tyr 1220 1225 1230 Asp Ser Arg Glu Leu Tyr Glu Val Arg Glu Ala Ala Ser Asn Thr 1235 1240 1245 Phe His Trp Ser Val Leu Leu Leu Cys His Ala Ala Val Glu Asn 1250 1255 1260 Phe Trp Ser Thr Leu Cys Gln Phe Met Cys Phe Ile Cys Tyr Tyr 1265 1270 1275 Trp Pro Ala Gln Phe Ser Gly Arg Ala Ser His Ala Gly Phe Phe 1280 1285 1290 Phe Phe Phe Tyr Val Leu Ile Phe Pro Leu Tyr Phe Val Thr Tyr 1295 1300 1305 Gly Leu Trp Ile Leu Tyr Met Ser Pro Asp Val Pro Ser Ala Ser 1310 1315 1320 Met Ile Asn Ser Asn Leu Phe Ala Ala Met Leu Leu Phe Cys Gly 1325 1330 1335 Ile Leu Gln Pro Arg Glu Lys Met Pro Ala Phe Trp Arg Arg Leu 1340 1345 1350 Met Tyr Asn Val Ser Pro Phe Thr Tyr Val Val Gln Ala Leu Val 1355 1360 1365 Thr Pro Leu Val His Asn Lys Lys Val Val Cys Asn Pro His Glu 1370 1375 1380 Tyr Asn Ile Met Asp Pro Pro Ser Gly Lys Thr Cys Gly Glu Phe 1385 1390 1395 Leu Ser Thr Tyr Met Asp Asn Asn Thr Gly Tyr Leu Val Asn Pro 1400 1405 1410 Thr Ala Thr Glu Asn Cys Gln Tyr Cys Pro Tyr Thr Val Gln Asp 1415 1420 1425 Gln Val Val Ala Lys Tyr Asn Val Lys Trp Asp His Arg Trp Arg 1430 1435 1440 Asn Phe Gly Phe Met Trp Ala Tyr Ile Cys Phe Asn Ile Ala Ala 1445 1450 1455 Met Leu Ile Cys Tyr Tyr Val Val Arg Val Lys Val Trp Ser Leu 1460 1465 1470 Lys Ser Val Leu Asn Phe Lys Lys Trp Phe Asn Gly Pro Arg Lys 1475 1480 1485 Glu Arg His Glu Lys Asp Thr Asn Ile Phe Gln Thr Val Pro Gly 1490 1495 1500 Asp Glu Asn Lys Ile Thr Lys Lys 1505 1510 <210> 110 <211> 1529 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 110 Met Ser Ser Asp Ile Arg Asp Val Glu Glu Arg Asn Ser Arg Ser Ser 1 5 10 15 Ser Ser Ser Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ala Gln Ser Ile Gly Gln His 20 25 30 Pro Tyr Arg Gly Phe Asp Ser Glu Ala Ala Glu Arg Val His Glu Leu 35 40 45 Ala Arg Thr Leu Thr Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Thr Ala Asn Ser Asn 50 55 60 Asn Ser Ser Ser Ser Asn His Asn Ala His Asn Ala Asp Ser Arg Ser 65 70 75 80 Val Phe Ser Thr Asp Met Glu Gly Val Asn Pro Val Phe Thr Asn Pro 85 90 95 Asp Thr Pro Gly Tyr Asn Pro Lys Leu Asp Pro Asn Ser Asp Gln Phe 100 105 110 Ser Ser Thr Ala Trp Val Gln Asn Met Ala Asn Ile Cys Thr Ser Asp 115 120 125 Pro Asp Phe Tyr Lys Pro Tyr Ser Leu Gly Cys Val Trp Lys Asn Leu 130 135 140 Ser Ala Ser Gly Asp Ser Ala Asp Val Ser Tyr Gln Ser Thr Phe Ala 145 150 155 160 Asn Ile Val Pro Lys Leu Leu Thr Lys Gly Leu Arg Leu Leu Lys Pro 165 170 175 Ser Lys Glu Glu Asp Thr Phe Gln Ile Leu Lys Pro Met Asp Gly Cys 180 185 190 Leu Asn Pro Gly Glu Leu Leu Val Val Leu Gly Arg Pro Gly Ser Gly 195 200 205 Cys Thr Thr Leu Leu Lys Ser Ile Ser Ser Asn Ser His Gly Phe Lys 210 215 220 Ile Ala Lys Asp Ser Ile Val Ser Tyr Asn Gly Leu Ser Ser Ser Asp 225 230 235 240 Ile Arg Lys His Tyr Arg Gly Glu Val Val Tyr Asn Ala Glu Ser Asp 245 250 255 Ile His Leu Pro His Leu Thr Val Tyr Gln Thr Leu Phe Thr Val Ala 260 265 270 Arg Met Lys Thr Pro Gln Asn Arg Ile Lys Gly Val Asp Arg Glu Ala 275 280 285 Tyr Ala Asn His Val Thr Glu Val Ala Met Ala Thr Tyr Gly Leu Ser 290 295 300 His Thr Arg Asp Thr Lys Val Gly Asn Asp Leu Val Arg Gly Val Ser 305 310 315 320 Gly Gly Glu Arg Lys Arg Val Ser Ile Ala Glu Val Ala Ile Cys Gly 325 330 335 Ala Arg Phe Gln Cys Trp Asp Asn Ala Thr Arg Gly Leu Asp Ser Ala 340 345 350 Thr Ala Leu Glu Phe Ile Arg Ala Leu Lys Thr Gln Ala Asp Ile Gly 355 360 365 Lys Thr Ala Ala Thr Val Ala Ile Tyr Gln Cys Ser Gln Asp Ala Tyr 370 375 380 Asp Leu Phe Asp Lys Val Cys Val Leu Asp Asp Gly Tyr Gln Leu Tyr 385 390 395 400 Phe Gly Pro Ala Lys Asp Ala Lys Lys Tyr Phe Gln Asp Met Gly Tyr 405 410 415 Tyr Cys Pro Pro Arg Gln Thr Thr Ala Asp Phe Leu Thr Ser Ile Thr 420 425 430 Ser Pro Thr Glu Arg Ile Ile Ser Lys Glu Phe Ile Glu Lys Gly Thr 435 440 445 Arg Val Pro Gln Thr Pro Lys Asp Met Ala Glu Tyr Trp Leu Gln Ser 450 455 460 Glu Ser Tyr Lys Asn Leu Ile Lys Asp Ile Asp Ser Thr Leu Glu Lys 465 470 475 480 Asn Thr Asp Glu Ala Arg Asn Ile Ile Arg Asp Ala His His Ala Lys 485 490 495 Gln Ala Lys Arg Ala Pro Pro Ser Ser Pro Tyr Val Val Asn Tyr Gly 500 505 510 Met Gln Val Lys Tyr Leu Leu Ile Arg Asn Phe Trp Arg Met Lys Gln 515 520 525 Ser Ala Ser Val Thr Leu Trp Gln Val Ile Gly Asn Ser Val Met Ala 530 535 540 Phe Ile Leu Gly Ser Met Phe Tyr Lys Val Met Lys Lys Asn Asp Thr 545 550 555 560 Ser Thr Phe Tyr Phe Arg Gly Ala Ala Met Phe Phe Ala Ile Leu Phe 565 570 575 Asn Ala Phe Ser Cys Leu Leu Glu Ile Phe Ser Leu Tyr Glu Thr Arg 580 585 590 Pro Ile Thr Glu Lys His Arg Thr Tyr Ser Leu Tyr His Pro Ser Ala 595 600 605 Asp Ala Phe Ala Ser Val Leu Ser Glu Met Pro Pro Lys Leu Ile Thr 610 615 620 Ala Val Cys Phe Asn Ile Ile Phe Tyr Phe Leu Val Asp Phe Arg Arg 625 630 635 640 Asn Gly Gly Val Phe Phe Phe Tyr Phe Leu Ile Asn Val Ile Ala Thr 645 650 655 Phe Thr Leu Ser His Leu Phe Arg Cys Val Gly Ser Leu Thr Lys Thr 660 665 670 Leu Gln Glu Ala Met Val Pro Ala Ser Met Leu Leu Leu Ala Ile Ser 675 680 685 Met Tyr Thr Gly Phe Ala Ile Pro Lys Thr Lys Ile Leu Gly Trp Ser 690 695 700 Ile Trp Ile Trp Tyr Ile Asn Pro Leu Ala Tyr Leu Phe Glu Ser Leu 705 710 715 720 Met Ile Asn Glu Phe His Asp Arg Arg Phe Pro Cys Ala Gln Tyr Ile 725 730 735 Pro Ala Gly Pro Ala Tyr Gln Asn Ile Thr Gly Thr Gln Arg Val Cys 740 745 750 Ser Ala Val Gly Ala Tyr Pro Gly Asn Asp Tyr Val Leu Gly Asp Asp 755 760 765 Phe Leu Lys Glu Ser Tyr Asp Tyr Glu His Lys His Lys Trp Arg Gly 770 775 780 Phe Gly Ile Gly Met Ala Tyr Val Val Phe Phe Phe Phe Val Tyr Leu 785 790 795 800 Ile Leu Cys Glu Tyr Asn Glu Gly Ala Lys Gln Lys Gly Glu Met Val 805 810 815 Val Phe Leu Arg Ser Lys Ile Lys Gln Leu Lys Lys Glu Gly Lys Leu 820 825 830 Gln Glu Lys His Arg Pro Gly Asp Ile Glu Asn Asn Ala Gly Ser Ser 835 840 845 Pro Asp Ser Ala Thr Thr Glu Lys Lys Ile Leu Asp Asp Ser Ser Glu 850 855 860 Gly Ser Asp Ser Ser Ser Asp Asn Ala Gly Leu Gly Leu Ser Lys Ser 865 870 875 880 Glu Ala Ile Phe His Trp Arg Asp Leu Cys Tyr Asp Val Pro Ile Lys 885 890 895 Gly Gly Gln Arg Arg Ile Leu Asn Asn Val Asp Gly Trp Val Lys Pro 900 905 910 Gly Thr Leu Thr Ala Leu Met Gly Ala Ser Gly Ala Gly Lys Thr Thr 915 920 925 Leu Leu Asp Cys Leu Ala Glu Arg Val Thr Met Gly Val Ile Thr Gly 930 935 940 Asn Ile Phe Val Asp Gly Arg Leu Arg Asp Glu Ser Phe Pro Arg Ser 945 950 955 960 Ile Gly Tyr Cys Gln Gln Gln Asp Leu His Leu Lys Thr Ala Thr Val 965 970 975 Arg Glu Ser Leu Arg Phe Ser Ala Tyr Leu Arg Gln Pro Ser Ser Val 980 985 990 Ser Ile Glu Glu Lys Asn Arg Tyr Val Glu Glu Val Ile Lys Ile Leu 995 1000 1005 Glu Met Gln Gln Tyr Ser Asp Ala Val Val Gly Val Ala Gly Glu 1010 1015 1020 Gly Leu Asn Val Glu Gln Arg Lys Arg Leu Thr Ile Gly Val Glu 1025 1030 1035 Leu Ala Ala Arg Pro Lys Leu Leu Val Phe Leu Asp Glu Pro Thr 1040 1045 1050 Ser Gly Leu Asp Ser Gln Thr Ala Trp Asp Thr Cys Gln Leu Met 1055 1060 1065 Arg Lys Leu Ala Thr His Gly Gln Ala Ile Leu Cys Thr Ile His 1070 1075 1080 Gln Pro Ser Ala Ile Leu Met Gln Gln Phe Asp Arg Leu Leu Phe 1085 1090 1095 Leu Gln Lys Gly Gly Gln Thr Val Tyr Phe Gly Asp Leu Gly Glu 1100 1105 1110 Gly Cys Lys Thr Met Ile Asp Tyr Phe Glu Ser Lys Gly Ala His 1115 1120 1125 Lys Cys Pro Pro Asp Ala Asn Pro Ala Glu Trp Met Leu Glu Val 1130 1135 1140 Val Gly Ala Ala Pro Gly Ser His Ala Thr Gln Asp Tyr Asn Glu 1145 1150 1155 Val Trp Arg Asn Ser Asp Glu Tyr Lys Ala Val Gln Glu Glu Leu 1160 1165 1170 Asp Trp Met Glu Lys Asn Leu Pro Gly Arg Ser Lys Glu Pro Thr 1175 1180 1185 Ala Glu Glu His Lys Pro Phe Ala Ala Ser Leu Tyr Tyr Gln Phe 1190 1195 1200 Lys Met Val Thr Ile Arg Leu Phe Gln Gln Tyr Trp Arg Ser Pro 1205 1210 1215 Asp Tyr Leu Trp Ser Lys Phe Ile Leu Thr Ile Phe Asn Gln Val 1220 1225 1230 Phe Ile Gly Phe Thr Phe Phe Lys Ala Asp Arg Ser Leu Gln Gly 1235 1240 1245 Leu Gln Asn Gln Met Leu Ser Ile Phe Met Tyr Thr Val Ile Phe 1250 1255 1260 Asn Pro Ile Leu Gln Gln Tyr Leu Pro Ser Phe Val Gln Gln Arg 1265 1270 1275 Asp Leu Tyr Glu Ala Arg Glu Arg Pro Ser Arg Thr Phe Ser Trp 1280 1285 1290 Leu Ala Phe Phe Leu Ser Gln Ile Ile Val Glu Ile Pro Trp Asn 1295 1300 1305 Ile Leu Ala Gly Thr Ile Ala Tyr Cys Ile Tyr Tyr Tyr Ala Val 1310 1315 1320 Gly Phe Tyr Ala Asn Ala Ser Ala Ala Gly Gln Leu His Glu Arg 1325 1330 1335 Gly Ala Leu Phe Trp Leu Phe Ser Ile Ala Phe Tyr Val Tyr Ile 1340 1345 1350 Gly Ser Met Gly Leu Leu Met Ile Ser Phe Asn Glu Val Ala Glu 1355 1360 1365 Thr Ala Ala His Met Gly Thr Leu Leu Phe Thr Met Ala Leu Ser 1370 1375 1380 Phe Cys Gly Val Met Ala Thr Pro Lys Val Met Pro Arg Phe Trp 1385 1390 1395 Ile Phe Met Tyr Arg Val Ser Pro Leu Thr Tyr Met Ile Asp Ala 1400 1405 1410 Leu Leu Ala Leu Gly Val Ala Asn Val Asp Val Lys Cys Ser Asn 1415 1420 1425 Tyr Glu Met Val Lys Phe Thr Pro Pro Ser Gly Thr Thr Cys Gly 1430 1435 1440 Asp Tyr Met Ala Ser Tyr Ile Lys Leu Ala Gly Thr Gly Tyr Leu 1445 1450 1455 Ser Asp Pro Ser Ala Thr Asp Ile Cys Ser Phe Cys Ala Val Ser 1460 1465 1470 Thr Thr Asn Ala Phe Leu Ala Thr Phe Ser Ser His Tyr Tyr Arg 1475 1480 1485 Arg Trp Arg Asn Tyr Gly Ile Phe Ile Cys Tyr Ile Ala Phe Asp 1490 1495 1500 Tyr Ile Ala Ala Thr Phe Leu Tyr Trp Leu Ser Arg Val Pro Lys 1505 1510 1515 Lys Asn Gly Lys Ile Ser Glu Lys Pro Lys Lys 1520 1525 <210> 111 <211> 1333 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 111 Met Glu Cys Val Ser Val Glu Gly Leu Asp Ser Ser Phe Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Thr Phe Gly Asp Ile Leu Cys Leu Pro Trp Thr Ile Ile Lys Gly 20 25 30 Ile Arg Glu Arg Lys Asn Arg Asn Lys Met Lys Ile Ile Leu Lys Asn 35 40 45 Val Ser Leu Leu Ala Lys Ser Gly Glu Met Val Leu Val Leu Gly Arg 50 55 60 Pro Gly Ala Gly Cys Thr Ser Phe Leu Lys Ser Ala Ala Gly Glu Thr 65 70 75 80 Ser Gln Phe Ala Gly Gly Val Thr Thr Gly His Ile Ser Tyr Asp Gly 85 90 95 Ile Pro Gln Lys Glu Met Met Gln His Tyr Lys Pro Asp Val Ile Tyr 100 105 110 Asn Gly Glu Gln Asp Val His Phe Pro His Leu Thr Val Lys Gln Thr 115 120 125 Leu Asp Phe Ala Ile Ser Cys Lys Met Pro Ala Lys Arg Val Asn Asn 130 135 140 Val Thr Lys Glu Glu Tyr Ile Thr Ala Asn Arg Glu Phe Tyr Ala Lys 145 150 155 160 Ile Phe Gly Leu Thr His Thr Phe Asp Thr Lys Val Gly Asn Asp Phe 165 170 175 Ile Ser Gly Val Ser Gly Gly Glu Arg Lys Arg Val Ser Ile Ala Glu 180 185 190 Ala Leu Ala Ala Lys Gly Ser Ile Tyr Cys Trp Asp Asn Ala Thr Arg 195 200 205 Gly Leu Asp Ser Ser Thr Ala Leu Glu Phe Ala Arg Ala Ile Arg Thr 210 215 220 Met Thr Asn Leu Leu Gly Thr Thr Ala Leu Val Thr Val Tyr Gln Ala 225 230 235 240 Ser Glu Asn Ile Tyr Glu Thr Phe Asp Lys Val Thr Val Leu Tyr Ala 245 250 255 Gly Arg Gln Ile Phe Cys Gly Lys Thr Thr Glu Ala Lys Asp Tyr Phe 260 265 270 Glu Asn Met Gly Tyr Leu Cys Pro Pro Arg Gln Ser Thr Ala Glu Tyr 275 280 285 Leu Thr Ala Ile Thr Asp Pro Asn Gly Leu His Glu Ile Lys Pro Gly 290 295 300 Phe Glu Tyr Gln Val Pro His Thr Ala Asp Glu Phe Glu Lys Tyr Trp 305 310 315 320 Leu Asp Ser Pro Glu Tyr Ala Arg Leu Lys Gly Glu Ile Gln Lys Tyr 325 330 335 Lys His Glu Val Asn Thr Glu Trp Thr Lys Lys Thr Tyr Asn Glu Ser 340 345 350 Met Ala Gln Glu Lys Ser Lys Gly Thr Arg Lys Lys Ser Tyr Tyr Thr 355 360 365 Val Ser Tyr Trp Glu Gln Ile Arg Leu Cys Thr Ile Arg Gly Phe Leu 370 375 380 Arg Ile Tyr Gly Asp Lys Ser Tyr Thr Val Ile Asn Thr Cys Ala Ala 385 390 395 400 Ile Ala Gln Ala Phe Ile Thr Gly Ser Leu Phe Tyr Gln Ala Pro Ser 405 410 415 Ser Thr Leu Gly Ala Phe Ser Arg Ser Gly Val Leu Phe Phe Ser Leu 420 425 430 Leu Tyr Tyr Ser Leu Met Gly Leu Ala Asn Ile Ser Phe Glu His Arg 435 440 445 Pro Ile Leu Gln Lys His Lys Val Tyr Ser Leu Tyr His Pro Ser Ala 450 455 460 Glu Ala Leu Ala Ser Thr Ile Ser Ser Phe Pro Phe Arg Met Ile Gly 465 470 475 480 Leu Thr Phe Phe Ile Ile Ile Leu Tyr Phe Leu Ala Gly Leu His Arg 485 490 495 Ser Ala Gly Ala Phe Phe Thr Met Tyr Leu Leu Leu Thr Met Cys Ser 500 505 510 Glu Ala Ile Thr Ser Leu Phe Gln Met Val Ser Ser Leu Cys Asp Thr 515 520 525 Leu Ser Gln Ala Asn Ser Ile Ala Gly Val Val Met Leu Ser Ile Ala 530 535 540 Met Tyr Ser Thr Tyr Met Ile Gln Leu Pro Ser Met His Pro Trp Phe 545 550 555 560 Lys Trp Ile Ser Tyr Ile Leu Pro Ile Arg Tyr Ala Phe Glu Ser Met 565 570 575 Leu Asn Ala Glu Phe His Gly Arg His Met Asp Cys Gly Gly Thr Leu 580 585 590 Val Pro Ser Gly Pro Gly Phe Glu Asn Ile Leu Pro Glu Asn Gln Val 595 600 605 Cys Ala Phe Val Gly Ser Arg Pro Gly Gln Ser Trp Val Leu Gly Asp 610 615 620 Asp Tyr Leu Arg Ala Gln Tyr Gln Tyr Glu Tyr Lys Asn Thr Trp Arg 625 630 635 640 Asn Phe Gly Ile Met Trp Cys Phe Leu Ile Gly Tyr Ile Val Leu Arg 645 650 655 Ala Val Phe Thr Glu Tyr Lys Ser Pro Val Lys Ser Gly Gly Asp Ala 660 665 670 Leu Val Val Lys Lys Gly Thr Lys Asn Ala Ile Gln Arg Ser Trp Ser 675 680 685 Ser Lys Asn Asp Glu Glu Asn Leu Asn Ala Ser Ile Ala Thr Gln Asp 690 695 700 Met Lys Glu Ile Ala Ser Ser Asn Asp Asp Ser Thr Ser Ala Asp Phe 705 710 715 720 Glu Gly Leu Glu Ser Thr Gly Val Phe Ile Trp Lys Asn Val Ser Phe 725 730 735 Thr Ile Pro His Ser Ser Gly Gln Arg Lys Leu Leu Asp Ser Val Ser 740 745 750 Gly Tyr Cys Val Pro Gly Thr Leu Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ser Gly 755 760 765 Ala Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asn Thr Leu Ala Gln Arg Asn Val Gly 770 775 780 Thr Ile Thr Gly Asp Met Leu Val Asp Gly Leu Pro Met Asp Ala Ser 785 790 795 800 Phe Lys Arg Arg Thr Gly Tyr Val Gln Gln Gln Asp Leu His Val Ala 805 810 815 Glu Leu Thr Val Lys Glu Ser Leu Gln Phe Ser Ala Arg Met Arg Arg 820 825 830 Pro Gln Ser Ile Pro Asp Ala Glu Lys Met Glu Tyr Val Glu Lys Ile 835 840 845 Ile Ser Ile Leu Glu Met Gln Glu Phe Ser Glu Ala Leu Val Gly Glu 850 855 860 Ile Gly Tyr Gly Leu Asn Val Glu Gln Arg Lys Lys Leu Ser Ile Gly 865 870 875 880 Val Glu Leu Val Gly Lys Pro Asp Leu Leu Leu Phe Leu Asp Glu Pro 885 890 895 Thr Ser Gly Leu Asp Ser Gln Ser Ala Trp Ala Val Val Lys Met Leu 900 905 910 Lys Arg Leu Ala Leu Ala Gly Gln Ser Ile Leu Cys Thr Ile His Gln 915 920 925 Pro Ser Ala Thr Leu Phe Glu Gln Phe Asp Arg Leu Leu Leu Leu Gly 930 935 940 Lys Gly Gly Gln Thr Ile Tyr Phe Gly Glu Ile Gly Lys Asn Ser Ser 945 950 955 960 Ser Val Ile Lys Tyr Phe Glu Lys Asn Gly Ala Arg Lys Cys Gln Gln 965 970 975 Asn Glu Asn Pro Ala Glu Tyr Ile Leu Glu Ala Ile Gly Ala Gly Ala 980 985 990 Thr Ala Ser Val Gln Gln Asn Trp Pro Asp Ile Trp Gln Lys Ser His 995 1000 1005 Glu Tyr Ala Asn Ile Asn Glu Lys Ile Asn Asp Met Ile Lys Asp 1010 1015 1020 Leu Ser Ser Thr Thr Leu His Lys Thr Ala Thr Arg Ala Ser Lys 1025 1030 1035 Tyr Ala Thr Ser Tyr Ser Tyr Gln Phe His His Val Leu Lys Arg 1040 1045 1050 Ser Ser Leu Thr Phe Trp Arg Asn Leu Asn Tyr Ile Met Ala Lys 1055 1060 1065 Met Met Leu Leu Met Ile Ser Gly Leu Phe Ile Gly Phe Thr Phe 1070 1075 1080 Phe His Val Gly Val Asn Ala Ile Gly Leu Gln Asn Ser Leu Phe 1085 1090 1095 Ala Cys Phe Met Ala Ile Val Ile Ser Ala Pro Ala Thr Asn Gln 1100 1105 1110 Ile Gln Glu Arg Ala Thr Val Ala Lys Glu Leu Tyr Glu Val Arg 1115 1120 1125 Glu Ser Lys Ser Asn Met Phe His Trp Ser Leu Leu Leu Ile Thr 1130 1135 1140 His Tyr Leu Asn Glu Leu Pro Tyr His Leu Leu Phe Ser Thr Ile 1145 1150 1155 Phe Phe Val Ser Ser Tyr Phe Pro Leu Gly Val Phe Thr Glu Ala 1160 1165 1170 Ser Arg Ser Ser Val Phe Tyr Leu Asn Tyr Ala Ile Leu Phe Gln 1175 1180 1185 Leu Tyr Tyr Ile Gly Leu Ala Leu Met Ile Leu Tyr Met Ser Pro 1190 1195 1200 Asn Leu Gln Ser Ala Asn Val Ile Val Gly Phe Ile Leu Ser Phe 1205 1210 1215 Leu Leu Ser Phe Cys Gly Ala Val Gln Pro Ala Ser Leu Met Pro 1220 1225 1230 Gly Phe Trp Thr Phe Met Trp Lys Leu Ser Pro Tyr Thr Tyr Phe 1235 1240 1245 Leu Gln Asn Leu Val Gly Leu Leu Met His Asp Lys Pro Val Arg 1250 1255 1260 Cys Ser Lys Lys Glu Leu Ser Leu Phe Asn Pro Pro Val Gly Gln 1265 1270 1275 Thr Cys Gly Glu Phe Thr Lys Pro Phe Phe Glu Phe Gly Thr Gly 1280 1285 1290 Tyr Ile Ala Asn Pro Asp Ala Thr Ala Asp Cys Ala Tyr Cys Gln 1295 1300 1305 Tyr Lys Val Gly Asp Glu Tyr Leu Ala Arg Ile Asn Ala Ser Phe 1310 1315 1320 Ser Tyr Leu Trp Arg Asn Phe Gly Phe Ile 1325 1330 <210> 112 <211> 1501 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 112 Met Ser Asn Ile Lys Ser Thr Gln Asp Ser Ser His Asn Ala Val Ala 1 5 10 15 Arg Ser Ser Ser Ala Ser Phe Ala Ala Ser Glu Glu Ser Phe Thr Gly 20 25 30 Ile Thr His Asp Lys Asp Glu Gln Ser Asp Thr Pro Ala Asp Lys Leu 35 40 45 Thr Lys Met Leu Thr Gly Pro Ala Arg Asp Thr Ala Ser Gln Ile Ser 50 55 60 Ala Thr Val Ser Glu Met Ala Pro Asp Val Val Ser Lys Val Glu Ser 65 70 75 80 Phe Ala Asp Ala Leu Ser Arg His Thr Thr Arg Ser Gly Ala Phe Asn 85 90 95 Met Asp Ser Asp Ser Asp Asp Gly Phe Asp Ala His Ala Ile Phe Glu 100 105 110 Ser Phe Val Arg Asp Ala Asp Glu Gln Gly Ile His Ile Arg Lys Ala 115 120 125 Gly Val Thr Ile Glu Asp Val Ser Ala Lys Gly Val Asp Ala Ser Ala 130 135 140 Leu Glu Gly Ala Thr Phe Gly Asn Ile Leu Cys Leu Pro Leu Thr Ile 145 150 155 160 Phe Lys Gly Ile Lys Ala Lys Arg His Gln Lys Met Arg Gln Ile Ile 165 170 175 Ser Asn Val Asn Ala Leu Ala Glu Ala Gly Glu Met Ile Leu Val Leu 180 185 190 Gly Arg Pro Gly Ala Gly Cys Ser Ser Phe Leu Lys Val Thr Ala Gly 195 200 205 Glu Ile Asp Gln Phe Ala Gly Gly Val Ser Gly Glu Val Ala Tyr Asp 210 215 220 Gly Ile Pro Gln Glu Glu Met Met Lys Arg Tyr Lys Ala Asp Val Ile 225 230 235 240 Tyr Asn Gly Glu Leu Asp Val His Phe Pro Tyr Leu Thr Val Lys Gln 245 250 255 Thr Leu Asp Phe Ala Ile Ala Cys Lys Thr Pro Ala Leu Arg Val Asn 260 265 270 Asn Val Ser Lys Lys Glu Tyr Ile Ala Ser Arg Arg Asp Leu Tyr Ala 275 280 285 Thr Ile Phe Gly Leu Arg His Thr Tyr Asn Thr Lys Val Gly Asn Asp 290 295 300 Phe Val Arg Gly Val Ser Gly Gly Glu Arg Lys Arg Val Ser Ile Ala 305 310 315 320 Glu Ala Leu Ala Ala Lys Gly Ser Ile Tyr Cys Trp Asp Asn Ala Thr 325 330 335 Arg Gly Leu Asp Ala Ser Thr Ala Leu Glu Tyr Ala Lys Ala Ile Arg 340 345 350 Ile Met Thr Asn Leu Leu Lys Ser Thr Ala Phe Val Thr Ile Tyr Gln 355 360 365 Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Glu Thr Phe Asp Lys Val Thr Val Leu Tyr 370 375 380 Ser Gly Lys Gln Ile Tyr Phe Gly Leu Ile His Glu Ala Lys Pro Tyr 385 390 395 400 Phe Ala Lys Met Gly Tyr Leu Cys Pro Pro Arg Gln Ala Thr Ala Glu 405 410 415 Phe Leu Thr Ala Leu Thr Asp Pro Asn Gly Phe His Leu Ile Lys Pro 420 425 430 Gly Tyr Glu Asn Lys Val Pro Arg Thr Ala Glu Glu Phe Glu Thr Tyr 435 440 445 Trp Leu Asn Ser Pro Glu Phe Ala Gln Met Lys Lys Asp Ile Ala Ala 450 455 460 Tyr Lys Glu Lys Val Asn Thr Glu Lys Thr Lys Glu Val Tyr Asp Glu 465 470 475 480 Ser Met Ala Gln Glu Lys Ser Lys Tyr Thr Arg Lys Lys Ser Tyr Tyr 485 490 495 Thr Val Ser Tyr Trp Glu Gln Val Lys Leu Cys Thr Gln Arg Gly Phe 500 505 510 Gln Arg Ile Tyr Gly Asn Lys Ser Tyr Thr Val Ile Asn Val Cys Ser 515 520 525 Ala Ile Ile Gln Ser Phe Ile Thr Gly Ser Leu Phe Tyr Asn Thr Pro 530 535 540 Ser Ser Thr Ser Gly Ala Phe Ser Arg Gly Gly Val Leu Tyr Phe Ala 545 550 555 560 Leu Leu Tyr Tyr Ser Leu Met Gly Leu Ala Asn Ile Ser Phe Glu His 565 570 575 Arg Pro Ile Leu Gln Lys His Lys Gly Tyr Ser Leu Tyr His Pro Ser 580 585 590 Ala Glu Ala Ile Gly Ser Thr Leu Ala Ser Phe Pro Phe Arg Met Ile 595 600 605 Gly Leu Thr Cys Phe Phe Ile Ile Leu Phe Phe Leu Ser Gly Leu His 610 615 620 Arg Thr Ala Gly Ser Phe Phe Thr Ile Tyr Leu Phe Leu Thr Met Cys 625 630 635 640 Ser Glu Ala Ile Asn Gly Leu Phe Glu Met Val Ser Ser Val Cys Asp 645 650 655 Thr Leu Ser Gln Ala Asn Ser Ile Ser Gly Ile Leu Met Met Ser Ile 660 665 670 Ser Met Tyr Ser Thr Tyr Met Ile Gln Leu Pro Ser Met His Pro Trp 675 680 685 Phe Lys Trp Ile Ser Tyr Val Leu Pro Ile Arg Tyr Ala Phe Glu Ser 690 695 700 Met Leu Asn Ala Glu Phe His Gly Arg His Met Asp Cys Ala Asn Thr 705 710 715 720 Leu Val Pro Ser Gly Gly Asp Tyr Asp Asn Leu Ser Asp Asp Tyr Lys 725 730 735 Val Cys Ala Phe Val Gly Ser Lys Pro Gly Gln Ser Tyr Val Leu Gly 740 745 750 Asp Asp Tyr Leu Lys Asn Gln Phe Gln Tyr Val Tyr Lys His Thr Trp 755 760 765 Arg Asn Phe Gly Ile Leu Trp Cys Phe Leu Leu Gly Tyr Val Val Leu 770 775 780 Lys Val Ile Phe Thr Glu Tyr Lys Arg Pro Val Lys Gly Gly Gly Asp 785 790 795 800 Ala Leu Ile Phe Lys Lys Gly Ser Lys Arg Phe Ile Ala His Ala Asp 805 810 815 Glu Glu Ser Pro Asp Asn Val Asn Asp Ile Asp Ala Lys Glu Gln Phe 820 825 830 Ser Ser Glu Ser Ser Gly Ala Asn Asp Glu Val Phe Asp Asp Leu Glu 835 840 845 Ala Lys Gly Val Phe Ile Trp Lys Asp Val Cys Phe Thr Ile Pro Tyr 850 855 860 Glu Gly Gly Lys Arg Met Leu Leu Asp Asn Val Ser Gly Tyr Cys Ile 865 870 875 880 Pro Gly Thr Met Thr Ala Leu Met Gly Glu Ser Gly Ala Gly Lys Thr 885 890 895 Thr Leu Leu Asn Thr Leu Ala Gln Arg Asn Val Gly Ile Ile Thr Gly 900 905 910 Asp Met Leu Val Asn Gly Arg Pro Ile Asp Ala Ser Phe Glu Arg Arg 915 920 925 Thr Gly Tyr Val Gln Gln Gln Asp Ile His Ile Ala Glu Leu Thr Val 930 935 940 Arg Glu Ser Leu Gln Phe Ser Ala Arg Met Arg Arg Pro Gln His Leu 945 950 955 960 Pro Asp Ser Glu Lys Met Asp Tyr Val Glu Lys Ile Ile Arg Val Leu 965 970 975 Gly Met Glu Glu Tyr Ala Glu Ala Leu Val Gly Glu Val Gly Cys Gly 980 985 990 Leu Asn Val Glu Gln Arg Lys Lys Leu Ser Ile Gly Val Glu Leu Val 995 1000 1005 Ala Lys Pro Asp Leu Leu Leu Phe Leu Asp Glu Pro Thr Ser Gly 1010 1015 1020 Leu Asp Ser Gln Ser Ser Trp Ala Ile Ile Gln Leu Leu Arg Lys 1025 1030 1035 Leu Ser Lys Ala Gly Gln Ser Ile Leu Cys Thr Ile His Gln Pro 1040 1045 1050 Ser Ala Thr Leu Phe Glu Glu Phe Asp Arg Leu Leu Leu Leu Arg 1055 1060 1065 Lys Gly Gly Gln Thr Val Tyr Phe Gly Asp Ile Gly Lys Asn Ser 1070 1075 1080 Ala Thr Ile Leu Asn Tyr Phe Glu Arg Asn Gly Ala Arg Lys Cys 1085 1090 1095 Asp Ser Ser Glu Asn Pro Ala Glu Tyr Ile Leu Glu Ala Ile Gly 1100 1105 1110 Ala Gly Ala Thr Ala Ser Val Lys Glu Asp Trp His Glu Lys Trp 1115 1120 1125 Leu Asn Ser Val Glu Phe Glu Gln Thr Lys Glu Lys Val Gln Asp 1130 1135 1140 Leu Ile Asn Asp Leu Ser Lys Gln Glu Thr Lys Ser Glu Val Gly 1145 1150 1155 Asp Lys Pro Ser Lys Tyr Ala Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Phe Arg 1160 1165 1170 Tyr Val Leu Ile Arg Thr Ser Thr Ser Phe Trp Arg Ser Leu Asn 1175 1180 1185 Tyr Ile Met Ser Lys Met Met Leu Met Leu Val Gly Gly Leu Tyr 1190 1195 1200 Ile Gly Phe Thr Phe Phe Asn Val Gly Lys Ser Tyr Val Gly Leu 1205 1210 1215 Gln Asn Ala Met Phe Ala Ala Phe Ile Ser Ile Ile Leu Ser Ala 1220 1225 1230 Pro Ala Met Asn Gln Ile Gln Gly Arg Ala Ile Ala Ser Arg Glu 1235 1240 1245 Leu Phe Glu Val Arg Glu Ser Gln Ser Asn Met Phe His Trp Ser 1250 1255 1260 Leu Val Leu Ile Thr Gln Tyr Leu Ser Glu Leu Pro Tyr His Leu 1265 1270 1275 Phe Phe Ser Thr Ile Phe Phe Val Ser Ser Tyr Phe Pro Leu Arg 1280 1285 1290 Ile Phe Phe Glu Ala Ser Arg Ser Ala Val Tyr Phe Leu Asn Tyr 1295 1300 1305 Cys Ile Met Phe Gln Leu Tyr Tyr Val Gly Leu Gly Leu Met Ile 1310 1315 1320 Leu Tyr Met Ser Pro Asn Leu Pro Ser Ala Asn Val Ile Leu Gly 1325 1330 1335 Leu Cys Leu Ser Phe Met Leu Ser Phe Cys Gly Val Thr Gln Pro 1340 1345 1350 Val Ser Leu Met Pro Gly Phe Trp Thr Phe Met Trp Lys Ala Ser 1355 1360 1365 Pro Tyr Thr Tyr Phe Val Gln Asn Leu Val Gly Ile Met Leu His 1370 1375 1380 Lys Lys Pro Val Val Cys Lys Lys Lys Glu Leu Asn Tyr Phe Asn 1385 1390 1395 Pro Pro Asn Gly Ser Thr Cys Gly Glu Tyr Met Lys Pro Phe Leu 1400 1405 1410 Glu Lys Ala Thr Gly Tyr Ile Glu Asn Pro Asp Ala Thr Ser Asp 1415 1420 1425 Cys Ala Tyr Cys Ile Tyr Glu Val Gly Asp Asn Tyr Leu Thr His 1430 1435 1440 Ile Ser Ser Lys Tyr Ser Tyr Leu Trp Arg Asn Phe Gly Ile Phe 1445 1450 1455 Trp Ile Tyr Ile Phe Phe Asn Ile Ile Ala Met Val Cys Val Tyr 1460 1465 1470 Tyr Leu Phe His Val Arg Gln Ser Ser Phe Leu Ser Pro Val Ser 1475 1480 1485 Ile Leu Asn Lys Ile Lys Asn Ile Arg Lys Lys Lys Gln 1490 1495 1500 <210> 113 <211> 1290 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 113 Met Asn Phe Leu Ser Phe Lys Thr Thr Lys His Tyr His Ile Phe Arg 1 5 10 15 Tyr Val Asn Ile Arg Asn Asp Tyr Arg Leu Leu Met Ile Met Ile Ile 20 25 30 Gly Thr Val Ala Thr Gly Leu Val Pro Ala Ile Thr Ser Ile Leu Thr 35 40 45 Gly Arg Val Phe Asp Leu Leu Ser Val Phe Val Ala Asn Gly Ser His 50 55 60 Gln Gly Leu Tyr Ser Gln Leu Val Gln Arg Ser Met Ala Val Met Ala 65 70 75 80 Leu Gly Ala Ala Ser Val Pro Val Met Trp Leu Ser Leu Thr Ser Trp 85 90 95 Met His Ile Gly Glu Arg Gln Gly Phe Arg Ile Arg Ser Gln Ile Leu 100 105 110 Glu Ala Tyr Leu Glu Glu Lys Pro Met Glu Trp Tyr Asp Asn Asn Glu 115 120 125 Lys Leu Leu Gly Asp Phe Thr Gln Ile Asn Arg Cys Val Glu Glu Leu 130 135 140 Arg Ser Ser Ser Ala Glu Ala Ser Ala Ile Thr Phe Gln Asn Leu Val 145 150 155 160 Ala Ile Cys Ala Leu Leu Gly Thr Ser Phe Tyr Tyr Ser Trp Ser Leu 165 170 175 Thr Leu Ile Ile Leu Cys Ser Ser Pro Ile Ile Thr Phe Phe Ala Val 180 185 190 Val Phe Ser Arg Met Ile His Val Tyr Ser Glu Lys Glu Asn Ser Glu 195 200 205 Thr Ser Lys Ala Ala Gln Leu Leu Thr Trp Ser Met Asn Ala Ala Gln 210 215 220 Leu Val Arg Leu Tyr Cys Thr Gln Arg Leu Glu Arg Lys Lys Phe Lys 225 230 235 240 Glu Ile Ile Leu Asn Cys Asn Thr Phe Phe Ile Lys Ser Cys Phe Phe 245 250 255 Val Ala Ala Asn Ala Gly Ile Leu Arg Phe Leu Thr Leu Thr Met Phe 260 265 270 Val Gln Gly Phe Trp Phe Gly Ser Ala Met Ile Lys Lys Gly Lys Leu 275 280 285 Asn Ile Asn Asp Val Ile Thr Cys Phe His Ser Cys Ile Met Leu Gly 290 295 300 Ser Thr Leu Asn Asn Thr Leu His Gln Ile Val Val Leu Gln Lys Gly 305 310 315 320 Gly Val Ala Met Glu Lys Ile Met Thr Leu Leu Lys Asp Gly Ser Lys 325 330 335 Arg Asn Pro Leu Asn Lys Thr Val Ala His Gln Phe Pro Leu Asp Tyr 340 345 350 Ala Thr Ser Asp Leu Thr Phe Ala Asn Val Ser Phe Ser Tyr Pro Ser 355 360 365 Arg Pro Ser Glu Ala Val Leu Lys Asn Val Ser Leu Asn Phe Ser Ala 370 375 380 Gly Gln Phe Thr Phe Ile Val Gly Lys Ser Gly Ser Gly Lys Ser Thr 385 390 395 400 Leu Ser Asn Leu Leu Leu Arg Phe Tyr Asp Gly Tyr Asn Gly Ser Ile 405 410 415 Ser Ile Asn Gly His Asn Ile Gln Thr Ile Asp Gln Lys Leu Leu Ile 420 425 430 Glu Asn Ile Thr Val Val Glu Gln Arg Cys Thr Leu Phe Asn Asp Thr 435 440 445 Leu Arg Lys Asn Ile Leu Leu Gly Ser Thr Asp Ser Val Arg Asn Ala 450 455 460 Asp Cys Ser Thr Asn Glu Asn Arg His Leu Ile Lys Asp Ala Cys Gln 465 470 475 480 Met Ala Leu Leu Asp Arg Phe Ile Leu Asp Leu Pro Asp Gly Leu Glu 485 490 495 Thr Leu Ile Gly Thr Gly Gly Val Thr Leu Ser Gly Gly Gln Gln Gln 500 505 510 Arg Val Ala Ile Ala Arg Ala Phe Ile Arg Asp Thr Pro Ile Leu Phe 515 520 525 Leu Asp Glu Ala Val Ser Ala Leu Asp Ile Val His Arg Asn Leu Leu 530 535 540 Met Lys Ala Ile Arg His Trp Arg Lys Gly Lys Thr Thr Ile Ile Leu 545 550 555 560 Thr His Glu Leu Ser Gln Ile Glu Ser Asp Asp Tyr Leu Tyr Leu Met 565 570 575 Lys Glu Gly Glu Val Val Glu Ser Gly Thr Gln Ser Glu Leu Leu Ala 580 585 590 Asp Pro Thr Thr Thr Phe Ser Thr Trp Tyr His Leu Gln Asn Asp Tyr 595 600 605 Ser Asp Ala Lys Thr Ile Val Asp Thr Glu Thr Glu Glu Lys Ser Ile 610 615 620 His Thr Val Glu Ser Phe Asn Ser Gln Leu Glu Thr Pro Lys Leu Gly 625 630 635 640 Ser Cys Leu Ser Asn Leu Gly Tyr Asp Glu Thr Asp Gln Leu Ser Phe 645 650 655 Tyr Glu Ala Ile Tyr Gln Lys Arg Ser Asn Val Arg Thr Arg Arg Val 660 665 670 Lys Val Glu Glu Glu Asn Ile Gly Tyr Ala Leu Lys Gln Gln Lys Asn 675 680 685 Thr Glu Ser Ser Thr Gly Pro Gln Leu Leu Ser Ile Ile Gln Ile Ile 690 695 700 Lys Arg Met Ile Lys Ser Ile Arg Tyr Lys Lys Ile Leu Ile Leu Gly 705 710 715 720 Leu Leu Cys Ser Leu Ile Ala Gly Ala Thr Asn Pro Val Phe Ser Tyr 725 730 735 Thr Phe Ser Phe Leu Leu Glu Gly Ile Val Pro Ser Thr Asp Gly Lys 740 745 750 Thr Gly Ser Ser His Tyr Leu Ala Lys Trp Ser Leu Leu Val Leu Gly 755 760 765 Val Ala Ala Ala Asp Gly Ile Phe Asn Phe Ala Lys Gly Phe Leu Leu 770 775 780 Asp Cys Cys Ser Glu Tyr Trp Val Met Asp Leu Arg Asn Glu Val Met 785 790 795 800 Glu Lys Leu Thr Arg Lys Asn Met Asp Trp Phe Ser Gly Glu Asn Asn 805 810 815 Lys Ala Ser Glu Ile Ser Ala Leu Val Leu Asn Asp Leu Arg Asp Leu 820 825 830 Arg Ser Leu Val Ser Glu Phe Leu Ser Ala Met Thr Ser Phe Val Thr 835 840 845 Val Ser Thr Ile Gly Leu Ile Trp Ala Leu Val Ser Gly Trp Lys Leu 850 855 860 Ser Leu Val Cys Ile Ser Met Phe Pro Leu Ile Ile Ile Phe Ser Ala 865 870 875 880 Ile Tyr Gly Gly Ile Leu Gln Lys Cys Glu Thr Asp Tyr Lys Thr Ser 885 890 895 Val Ala Gln Leu Glu Asn Cys Leu Tyr Gln Ile Val Thr Asn Ile Lys 900 905 910 Thr Ile Lys Cys Leu Gln Ala Glu Phe His Phe Gln Leu Thr Tyr His 915 920 925 Asp Leu Lys Ile Lys Met Gln Gln Ile Ala Ser Lys Arg Ala Ile Ala 930 935 940 Thr Gly Phe Gly Ile Ser Met Thr Asn Met Ile Val Met Cys Ile Gln 945 950 955 960 Ala Ile Ile Tyr Tyr Tyr Gly Leu Lys Leu Val Met Ile His Glu Tyr 965 970 975 Thr Ser Lys Glu Met Phe Thr Thr Phe Thr Leu Leu Leu Phe Thr Ile 980 985 990 Met Ser Cys Thr Ser Leu Val Ser Gln Ile Pro Asp Ile Ser Arg Gly 995 1000 1005 Gln Arg Ala Ala Ser Trp Ile Tyr Arg Ile Leu Asp Glu Lys His 1010 1015 1020 Asn Thr Leu Glu Val Glu Asn Asn Asn Ala Arg Thr Val Gly Ile 1025 1030 1035 Ala Gly His Thr Tyr His Gly Lys Glu Lys Lys Pro Ile Val Ser 1040 1045 1050 Ile Gln Asn Leu Thr Phe Ala Tyr Pro Ser Ala Pro Thr Ala Phe 1055 1060 1065 Val Tyr Lys Asn Met Asn Phe Asp Met Phe Cys Gly Gln Thr Leu 1070 1075 1080 Gly Ile Ile Gly Glu Ser Gly Thr Gly Lys Ser Thr Leu Val Leu 1085 1090 1095 Leu Leu Thr Lys Leu Tyr Asn Cys Glu Val Gly Lys Ile Lys Ile 1100 1105 1110 Asp Gly Thr Asp Val Asn Asp Trp Asn Leu Thr Ser Leu Arg Lys 1115 1120 1125 Glu Ile Ser Val Val Glu Gln Lys Pro Leu Leu Phe Asn Gly Thr 1130 1135 1140 Ile Arg Asp Asn Leu Thr Tyr Gly Leu Gln Asp Glu Ile Leu Glu 1145 1150 1155 Ile Glu Met Tyr Asp Ala Leu Lys Tyr Val Gly Ile His Asp Phe 1160 1165 1170 Val Ile Ser Ser Pro Gln Gly Leu Asp Thr Arg Ile Asp Thr Thr 1175 1180 1185 Leu Leu Ser Gly Gly Gln Ala Gln Arg Leu Cys Ile Ala Arg Ala 1190 1195 1200 Leu Leu Arg Lys Ser Lys Ile Leu Ile Leu Asp Glu Cys Thr Ser 1205 1210 1215 Ala Leu Asp Ser Val Ser Ser Ser Ile Ile Asn Glu Ile Val Lys 1220 1225 1230 Lys Gly Pro Pro Ala Leu Leu Thr Met Val Ile Thr His Ser Glu 1235 1240 1245 Gln Met Met Arg Ser Cys Asn Ser Ile Ala Val Leu Lys Asp Gly 1250 1255 1260 Lys Val Val Glu Arg Gly Asn Phe Asp Thr Leu Tyr Asn Asn Arg 1265 1270 1275 Gly Glu Leu Phe Gln Ile Val Ser Asn Gln Ser Ser 1280 1285 1290 <210> 114 <211> 1477 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 114 Met Thr Ile Thr Val Gly Asp Ala Val Ser Glu Thr Glu Leu Glu Asn 1 5 10 15 Lys Ser Gln Asn Val Val Leu Ser Pro Lys Ala Ser Ala Ser Ser Asp 20 25 30 Ile Ser Thr Asp Val Asp Lys Asp Thr Ser Ser Ser Trp Asp Asp Lys 35 40 45 Ser Leu Leu Pro Thr Gly Glu Tyr Ile Val Asp Arg Asn Lys Pro Gln 50 55 60 Thr Tyr Leu Asn Ser Asp Asp Ile Glu Lys Val Thr Glu Ser Asp Ile 65 70 75 80 Phe Pro Gln Lys Arg Leu Phe Ser Phe Leu His Ser Lys Lys Ile Pro 85 90 95 Glu Val Pro Gln Thr Asp Asp Glu Arg Lys Ile Tyr Pro Leu Phe His 100 105 110 Thr Asn Ile Ile Ser Asn Met Phe Phe Trp Trp Val Leu Pro Ile Leu 115 120 125 Arg Val Gly Tyr Lys Arg Thr Ile Gln Pro Asn Asp Leu Phe Lys Met 130 135 140 Asp Pro Arg Met Ser Ile Glu Thr Leu Tyr Asp Asp Phe Glu Lys Asn 145 150 155 160 Met Ile Tyr Tyr Phe Glu Lys Thr Arg Lys Lys Tyr Arg Lys Arg His 165 170 175 Pro Glu Ala Thr Glu Glu Glu Val Met Glu Asn Ala Lys Leu Pro Lys 180 185 190 His Thr Val Leu Arg Ala Leu Leu Phe Thr Phe Lys Lys Gln Tyr Phe 195 200 205 Met Ser Ile Val Phe Ala Ile Leu Ala Asn Cys Thr Ser Gly Phe Asn 210 215 220 Pro Met Ile Thr Lys Arg Leu Ile Glu Phe Val Glu Glu Lys Ala Ile 225 230 235 240 Phe His Ser Met His Val Asn Lys Gly Ile Gly Tyr Ala Ile Gly Ala 245 250 255 Cys Leu Met Met Phe Val Asn Gly Leu Thr Phe Asn His Phe Phe His 260 265 270 Thr Ser Gln Leu Thr Gly Val Gln Ala Lys Ser Ile Leu Thr Lys Ala 275 280 285 Ala Met Lys Lys Met Phe Asn Ala Ser Asn Tyr Ala Arg His Cys Phe 290 295 300 Pro Asn Gly Lys Val Thr Ser Phe Val Thr Thr Asp Leu Ala Arg Ile 305 310 315 320 Glu Phe Ala Leu Ser Phe Gln Pro Phe Leu Ala Gly Phe Pro Ala Ile 325 330 335 Leu Ala Ile Cys Ile Val Leu Leu Ile Val Asn Leu Gly Pro Ile Ala 340 345 350 Leu Val Gly Ile Gly Ile Phe Phe Gly Gly Phe Phe Ile Ser Leu Phe 355 360 365 Ala Phe Lys Leu Ile Leu Gly Phe Arg Ile Ala Ala Asn Ile Phe Thr 370 375 380 Asp Ala Arg Val Thr Met Met Arg Glu Val Leu Asn Asn Ile Lys Met 385 390 395 400 Ile Lys Tyr Tyr Thr Trp Glu Asp Ala Tyr Glu Lys Asn Ile Gln Asp 405 410 415 Ile Arg Thr Lys Glu Ile Ser Lys Val Arg Lys Met Gln Leu Ser Arg 420 425 430 Asn Phe Leu Ile Ala Met Ala Met Ser Leu Pro Ser Ile Ala Ser Leu 435 440 445 Val Thr Phe Leu Ala Met Tyr Lys Val Asn Lys Gly Gly Arg Gln Pro 450 455 460 Gly Asn Ile Phe Ala Ser Leu Ser Leu Phe Gln Val Leu Ser Leu Gln 465 470 475 480 Met Phe Phe Leu Pro Ile Ala Ile Gly Thr Gly Ile Asp Met Ile Ile 485 490 495 Gly Leu Gly Arg Leu Gln Ser Leu Leu Glu Ala Pro Glu Asp Asp Pro 500 505 510 Asn Gln Met Ile Glu Met Lys Pro Ser Pro Gly Phe Asp Pro Lys Leu 515 520 525 Ala Leu Lys Met Thr His Cys Ser Phe Glu Trp Glu Asp Tyr Glu Leu 530 535 540 Asn Asp Ala Ile Glu Glu Ala Lys Gly Glu Ala Lys Asp Glu Gly Lys 545 550 555 560 Lys Asn Lys Lys Lys Arg Lys Asp Thr Trp Gly Lys Pro Ser Ala Ser 565 570 575 Thr Asn Lys Ala Lys Arg Leu Asp Asn Met Leu Lys Asp Arg Asp Gly 580 585 590 Pro Glu Asp Leu Glu Lys Thr Ser Phe Arg Gly Phe Lys Asp Leu Asn 595 600 605 Phe Asp Ile Lys Lys Gly Glu Phe Ile Met Ile Thr Gly Pro Ile Gly 610 615 620 Thr Gly Lys Ser Ser Leu Leu Asn Ala Met Ala Gly Ser Met Arg Lys 625 630 635 640 Thr Asp Gly Lys Val Glu Val Asn Gly Asp Leu Leu Met Cys Gly Tyr 645 650 655 Pro Trp Ile Gln Asn Ala Ser Val Arg Asp Asn Ile Ile Phe Gly Ser 660 665 670 Pro Phe Asn Lys Glu Lys Tyr Asp Glu Val Val Arg Val Cys Ser Leu 675 680 685 Lys Ala Asp Leu Asp Ile Leu Pro Ala Gly Asp Met Thr Glu Ile Gly 690 695 700 Glu Arg Gly Ile Thr Leu Ser Gly Gly Gln Lys Ala Arg Ile Asn Leu 705 710 715 720 Ala Arg Ser Val Tyr Lys Lys Lys Asp Ile Tyr Leu Phe Asp Asp Val 725 730 735 Leu Ser Ala Val Asp Ser Arg Val Gly Lys His Ile Met Asp Glu Cys 740 745 750 Leu Thr Gly Met Leu Ala Asn Lys Thr Arg Ile Leu Ala Thr His Gln 755 760 765 Leu Ser Leu Ile Glu Arg Ala Ser Arg Val Ile Val Leu Gly Thr Asp 770 775 780 Gly Gln Val Asp Ile Gly Thr Val Asp Glu Leu Lys Ala Arg Asn Gln 785 790 795 800 Thr Leu Ile Asn Leu Leu Gln Phe Ser Ser Gln Asn Ser Glu Lys Glu 805 810 815 Asp Glu Glu Gln Glu Ala Val Val Ala Gly Glu Leu Gly Gln Leu Lys 820 825 830 Tyr Glu Ser Glu Val Lys Glu Leu Thr Glu Leu Lys Lys Lys Ala Thr 835 840 845 Glu Met Ser Gln Thr Ala Asn Ser Gly Lys Ile Val Ala Asp Gly His 850 855 860 Thr Ser Ser Lys Glu Glu Arg Ala Val Asn Ser Ile Ser Leu Lys Ile 865 870 875 880 Tyr Arg Glu Tyr Ile Lys Ala Ala Val Gly Lys Trp Gly Phe Ile Ala 885 890 895 Leu Pro Leu Tyr Ala Ile Leu Val Val Gly Thr Thr Phe Cys Ser Leu 900 905 910 Phe Ser Ser Val Trp Leu Ser Tyr Trp Thr Glu Asn Lys Phe Lys Asn 915 920 925 Arg Pro Pro Ser Phe Tyr Met Gly Leu Tyr Ser Phe Phe Val Phe Ala 930 935 940 Ala Phe Ile Phe Met Asn Gly Gln Phe Thr Ile Leu Cys Ala Met Gly 945 950 955 960 Ile Met Ala Ser Lys Trp Leu Asn Leu Arg Ala Val Lys Arg Ile Leu 965 970 975 His Thr Pro Met Ser Tyr Ile Asp Thr Thr Pro Leu Gly Arg Ile Leu 980 985 990 Asn Arg Phe Thr Lys Asp Thr Asp Ser Leu Asp Asn Glu Leu Thr Glu 995 1000 1005 Ser Leu Arg Leu Met Thr Ser Gln Phe Ala Asn Ile Val Gly Val 1010 1015 1020 Cys Val Met Cys Ile Val Tyr Leu Pro Trp Phe Ala Ile Ala Ile 1025 1030 1035 Pro Phe Leu Leu Val Ile Phe Val Leu Ile Ala Asp His Tyr Gln 1040 1045 1050 Ser Ser Gly Arg Glu Ile Lys Arg Leu Glu Ala Val Gln Arg Ser 1055 1060 1065 Phe Val Tyr Asn Asn Leu Asn Glu Val Leu Gly Gly Met Asp Thr 1070 1075 1080 Ile Lys Ala Tyr Arg Ser Gln Glu Arg Phe Leu Ala Lys Ser Asp 1085 1090 1095 Phe Leu Ile Asn Lys Met Asn Glu Ala Gly Tyr Leu Val Val Val 1100 1105 1110 Leu Gln Arg Trp Val Gly Ile Phe Leu Asp Met Val Ala Ile Ala 1115 1120 1125 Phe Ala Leu Ile Ile Thr Leu Leu Cys Val Thr Arg Ala Phe Pro 1130 1135 1140 Ile Ser Ala Ala Ser Val Gly Val Leu Leu Thr Tyr Val Leu Gln 1145 1150 1155 Leu Pro Gly Leu Leu Asn Thr Ile Leu Arg Ala Met Thr Gln Thr 1160 1165 1170 Glu Asn Asp Met Asn Ser Ala Glu Arg Leu Val Thr Tyr Ala Thr 1175 1180 1185 Glu Leu Pro Leu Glu Ala Ser Tyr Arg Lys Pro Glu Met Thr Pro 1190 1195 1200 Pro Glu Ser Trp Pro Ser Met Gly Glu Ile Ile Phe Glu Asn Val 1205 1210 1215 Asp Phe Ala Tyr Arg Pro Gly Leu Pro Ile Val Leu Lys Asn Leu 1220 1225 1230 Asn Leu Asn Ile Lys Ser Gly Glu Lys Ile Gly Ile Cys Gly Arg 1235 1240 1245 Thr Gly Ala Gly Lys Ser Thr Ile Met Ser Ala Leu Tyr Arg Leu 1250 1255 1260 Asn Glu Leu Thr Ala Gly Lys Ile Leu Ile Asp Asn Val Asp Ile 1265 1270 1275 Ser Gln Leu Gly Leu Phe Asp Leu Arg Arg Lys Leu Ala Ile Ile 1280 1285 1290 Pro Gln Asp Pro Val Leu Phe Arg Gly Thr Ile Arg Lys Asn Leu 1295 1300 1305 Asp Pro Phe Asn Glu Arg Thr Asp Asp Glu Leu Trp Asp Ala Leu 1310 1315 1320 Val Arg Gly Gly Ala Ile Ala Lys Asp Asp Leu Pro Glu Val Lys 1325 1330 1335 Leu Gln Lys Pro Asp Glu Asn Gly Thr His Gly Lys Met His Lys 1340 1345 1350 Phe His Leu Asp Gln Ala Val Glu Glu Glu Gly Ser Asn Phe Ser 1355 1360 1365 Leu Gly Glu Arg Gln Leu Leu Ala Leu Thr Arg Ala Leu Val Arg 1370 1375 1380 Gln Ser Lys Ile Leu Ile Leu Asp Glu Ala Thr Ser Ser Val Asp 1385 1390 1395 Tyr Glu Thr Asp Gly Lys Ile Gln Thr Arg Ile Val Glu Glu Phe 1400 1405 1410 Gly Asp Cys Thr Ile Leu Cys Ile Ala His Arg Leu Lys Thr Ile 1415 1420 1425 Val Asn Tyr Asp Arg Ile Leu Val Leu Glu Lys Gly Glu Val Ala 1430 1435 1440 Glu Phe Asp Thr Pro Trp Thr Leu Phe Ser Gln Glu Asp Ser Ile 1445 1450 1455 Phe Arg Ser Met Cys Ser Arg Ser Gly Ile Val Glu Asn Asp Phe 1460 1465 1470 Glu Asn Arg Ser 1475 <210> 115 <211> 1394 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 115 Met Ser Ile Ser Lys Tyr Phe Thr Pro Val Ala Asp Gly Ser Leu Thr 1 5 10 15 Phe Asn Gly Ala Asn Ile Gln Phe Gly Ala Asp Ala Gln Gly Glu Ser 20 25 30 Lys Lys Ser Tyr Asp Ala Glu Asp Ser Met Pro Asn Pro Ala Asn Gln 35 40 45 Leu Asn Asp Ile Thr Phe Gln Ala Glu Ala Gly Glu Met Val Leu Val 50 55 60 Leu Gly Tyr Pro Thr Ser Thr Leu Phe Lys Thr Leu Phe His Gly Lys 65 70 75 80 Thr Ser Leu Ser Tyr Ser Pro Pro Gly Ser Ile Lys Phe Lys Asn Asn 85 90 95 Glu Phe Lys Ser Phe Ser Glu Lys Cys Pro His Gln Ile Ile Tyr Asn 100 105 110 Asn Glu Gln Asp Val His Phe Pro Phe Leu Thr Val Glu Gln Thr Ile 115 120 125 Asp Phe Ala Leu Ser Cys Lys Phe Asp Ile Pro Lys Gly Glu Arg Asp 130 135 140 Gln Ile Arg Asn Glu Leu Leu Arg Glu Phe Gly Leu Ser His Val Leu 145 150 155 160 Lys Thr Ile Val Gly Asn Asp Phe Phe Arg Gly Val Ser Gly Gly Glu 165 170 175 Arg Lys Arg Ile Ser Ile Ile Glu Thr Phe Ile Ala Asn Gly Ser Val 180 185 190 Tyr Leu Trp Asp Asn Ser Thr Lys Gly Leu Asp Ser Ala Thr Ala Leu 195 200 205 Asp Phe Leu Glu Ile Leu Arg Lys Met Ala Lys Ala Thr Arg Ser Val 210 215 220 Asn Leu Val Arg Ile Ser Gln Ala Ser Asp Lys Ile Val Asp Lys Phe 225 230 235 240 Asp Lys Ile Leu Met Leu Ser Asp Ser Tyr Gln Leu Phe Tyr Gly Thr 245 250 255 Val Asp Glu Cys Leu Thr Tyr Phe Arg Asp Thr Leu Gly Ile Glu Lys 260 265 270 Asp Pro Asn Asp Cys Ile Ile Glu Tyr Leu Thr Ser Ile Leu Asn Phe 275 280 285 Gln Phe Lys Asn Lys Asn Leu Gly Asn Leu Ser Asn Ser Ser Ser Ala 290 295 300 Ser Val Leu Lys Thr Ala Thr Gly Glu Val Thr Lys Tyr Thr Tyr Asn 305 310 315 320 Ser Asp Phe Asp Leu Tyr Asp Gln Trp Lys His Ser Ser Tyr Tyr Arg 325 330 335 Asn Ile Lys Gln Gln Ile Gln Gly Ser Ser Ile Asp Asp Ser Ile Lys 340 345 350 Glu Val Asp Pro Ser Asp Val Ser Pro Ile Phe Asn Ile Pro Leu Lys 355 360 365 Lys Gln Leu Leu Phe Cys Thr Lys Arg Ala Phe Gln Arg Ser Leu Gly 370 375 380 Asp Lys Ala Tyr Met Thr Ala Gln Phe Ile Ser Val Val Ile Gln Ser 385 390 395 400 Leu Val Ile Gly Ser Leu Phe Tyr Glu Ile Pro Leu Thr Thr Ile Gly 405 410 415 Ser Tyr Ser Arg Gly Ser Leu Thr Phe Phe Ser Ile Leu Phe Phe Thr 420 425 430 Phe Leu Ser Leu Ala Asp Met Pro Ile Ala Phe Gln Arg Gln Pro Val 435 440 445 Val Lys Lys Gln Ser Gln Leu His Phe Tyr Thr Asn Trp Val Glu Thr 450 455 460 Leu Ser Thr Thr Val Phe Asp Tyr Cys Phe Lys Leu Cys Leu Val Ile 465 470 475 480 Val Phe Ser Ile Ile Leu Tyr Phe Leu Ala His Leu Gln Tyr Lys Ala 485 490 495 Ala Arg Phe Phe Ile Phe Leu Leu Phe Leu Ser Phe Tyr Asn Phe Cys 500 505 510 Met Val Ser Leu Phe Ala Leu Thr Thr Leu Val Ala Pro Thr Ile Ser 515 520 525 Val Ala Asn Leu Phe Ala Gly Ile Leu Leu Leu Ala Ile Ala Met Tyr 530 535 540 Ala Ser Tyr Val Ile Tyr Leu Lys Asn Met His Pro Trp Phe Val Trp 545 550 555 560 Ile Ala Tyr Leu Asn Pro Ala Met Tyr Ala Met Glu Ala Ile Leu Ser 565 570 575 Asn Glu Leu Tyr Asn Leu Lys Leu Asp Cys Ser Glu Thr Ile Val Pro 580 585 590 Arg Gly Pro Thr Tyr Asn Asp Val Pro Phe Ser His Lys Ala Cys Ala 595 600 605 Trp Gln Gly Ala Thr Leu Gly Asn Asp Tyr Val Arg Gly Arg Asp Tyr 610 615 620 Leu Lys Gln Gly Leu Ser Tyr Thr Tyr His His Val Trp Arg Asn Phe 625 630 635 640 Gly Ile Ile Ile Gly Phe Leu Val Phe Phe Ile Ala Cys Thr Leu Phe 645 650 655 Ala Ser Gln Tyr Ile Lys Pro Tyr Phe Asn Lys Asp Glu Ile Glu Arg 660 665 670 Asn Asn Ser Arg Leu Thr Arg Trp Leu Pro Phe Leu Asn Lys Lys Arg 675 680 685 Gly Thr Arg Ser Ser Ala Arg Asn Asp Ser Lys Tyr Val Gly Ile Pro 690 695 700 Lys Ser His Ser Val Ser Ser Ser Ser Ser Ser Leu Ser Ala Val Pro 705 710 715 720 Tyr Gln Ile Ser Pro Ser Asn Lys Glu Met Ala Leu Asn Asp Tyr Asn 725 730 735 Glu Gln Pro Ile Thr Glu Thr Val Glu Thr Gln Lys His Ile Ile Ser 740 745 750 Trp Lys Asn Ile Asn Tyr Thr Val Gly Thr Lys Lys Leu Ile Asn Asn 755 760 765 Ala Ser Gly Phe Ile Ser Ser Gly Leu Thr Ala Leu Met Gly Glu Ser 770 775 780 Gly Ala Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asn Val Leu Ser Gln Arg Val Glu 785 790 795 800 Thr Gly Val Val Ser Gly Glu Ile Leu Ile Asp Gly His Pro Leu Thr 805 810 815 Asp Glu Asp Ala Phe Lys Arg Ser Ile Gly Phe Val Gln Gln Gln Asp 820 825 830 Leu His Leu Asp Leu Leu Ser Val Lys Glu Ser Leu Glu Ile Ser Cys 835 840 845 Leu Leu Arg Gly Asp Gly Asp Arg Ala Tyr Leu Asp Thr Val Ser Asn 850 855 860 Leu Leu Lys Leu Pro Ser Asp Ile Leu Val Ala Asp Leu Asn Pro Thr 865 870 875 880 Gln Arg Lys Leu Leu Ser Ile Gly Val Glu Leu Val Thr Lys Pro Ser 885 890 895 Leu Leu Leu Phe Leu Asp Glu Pro Thr Ser Gly Leu Asp Ala Glu Ala 900 905 910 Ala Leu Thr Ile Val Lys Phe Leu Lys Gln Leu Ser Leu Gln Gly Gln 915 920 925 Ala Ile Phe Cys Thr Ile His Gln Pro Ser Lys Ser Val Ile Ser His 930 935 940 Phe Asp Asn Ile Phe Leu Leu Lys Arg Gly Gly Glu Cys Val Phe Phe 945 950 955 960 Gly Pro Met Asp Asp Ala Cys Gly Tyr Phe Met Ser His Asp Asn Thr 965 970 975 Leu Val Tyr Asp Lys Glu His Asp Asn Pro Ala Asp Phe Val Ile Asp 980 985 990 Ala Val Gly Asn Ser Asn Ser Ser Ala Gly Lys Asp Thr Ala Glu Glu 995 1000 1005 Ala Leu Thr Leu Asn Lys Glu Ala Ile Asp Trp Ser Ala Leu Trp 1010 1015 1020 Glu Ser Ser Val Glu Lys Lys Leu Val Lys Lys Glu Thr Ala Arg 1025 1030 1035 Leu Glu Asp Asp Ala Arg Ala Ser Gly Val Asp Tyr Thr Thr Ser 1040 1045 1050 Leu Trp Lys Gln Pro Ser Tyr Leu Gln Gln Leu Ala Leu Ile Thr 1055 1060 1065 Arg Arg Gln Tyr Ile Cys Thr Lys Arg Asp Met Thr Tyr Val Met 1070 1075 1080 Ala Lys Tyr Cys Leu Asn Gly Gly Ala Gly Leu Phe Ile Gly Phe 1085 1090 1095 Ser Phe Trp His Ile Lys His Asn Ile Ile Gly Leu Gln Asp Ser 1100 1105 1110 Ile Phe Phe Cys Phe Met Ala Leu Cys Val Ser Ser Pro Leu Ile 1115 1120 1125 Asn Gln Ile Gln Asp Lys Ala Leu Lys Thr Lys Glu Val Tyr Val 1130 1135 1140 Ala Arg Glu Ala Arg Ser Asn Thr Tyr His Trp Thr Val Leu Leu 1145 1150 1155 Leu Ser Gln Ser Ile Ile Glu Leu Pro Leu Ala Leu Thr Ser Ser 1160 1165 1170 Thr Leu Phe Phe Val Cys Ala Phe Phe Ser Cys Gly Phe Asn Asn 1175 1180 1185 Ala Gly Trp Ser Ala Gly Val Phe Phe Leu Asn Tyr Met Leu Phe 1190 1195 1200 Ala Ala Tyr Tyr Ser Thr Leu Gly Leu Trp Leu Ile Tyr Thr Ala 1205 1210 1215 Pro Asn Leu Gln Thr Ala Ala Val Phe Val Ala Phe Ile Tyr Ser 1220 1225 1230 Phe Thr Ala Ser Phe Cys Gly Val Met Gln Pro Tyr Ser Leu Phe 1235 1240 1245 Pro Thr Phe Trp Lys Phe Met Tyr Arg Val Ser Pro Tyr Thr Tyr 1250 1255 1260 Phe Val Glu Thr Phe Val Ser Ile Leu Leu His Asn Trp Glu Ile 1265 1270 1275 Lys Cys Asp Met Ser Glu Met Val Pro Gly Gln Pro Leu Thr Gly 1280 1285 1290 Gln Ser Cys Gly Gln Phe Met Glu Ala Phe Ile Glu Glu Tyr Gly 1295 1300 1305 Gly Tyr Leu His Asn Lys Asn Thr Phe Thr Val Cys Ala Tyr Cys 1310 1315 1320 Thr Tyr Thr Val Gly Asp Asp Phe Leu Lys Asn Glu Asn Met Ser 1325 1330 1335 Tyr Asp His Val Trp Arg Asn Phe Gly Ile Glu Trp Ala Phe Val 1340 1345 1350 Gly Phe Asn Phe Phe Ala Met Phe Ala Gly Tyr Tyr Leu Thr Tyr 1355 1360 1365 Val Ala Arg Ile Trp Pro Lys Val Phe Lys Ile Ile Thr Lys Val 1370 1375 1380 Ile Pro His Arg Gly Lys Lys Pro Val Gln Asn 1385 1390 <210> 116 <211> 1294 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 116 Met Ser Gln Gln Glu Asn Gly Asp Val Ala Thr Glu Leu Ile Glu Asn 1 5 10 15 Arg Leu Ser Phe Ser Arg Ile Pro Arg Ile Ser Leu His Val Arg Asp 20 25 30 Leu Ser Ile Val Ala Ser Lys Thr Asn Thr Thr Leu Val Asn Thr Phe 35 40 45 Ser Met Asp Leu Pro Ser Gly Ser Val Met Ala Val Met Gly Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asn Val Leu Ala Ser Lys Ile Ser 65 70 75 80 Gly Gly Leu Thr His Asn Gly Ser Ile Arg Tyr Val Leu Glu Asp Thr 85 90 95 Gly Ser Glu Pro Asn Glu Thr Glu Pro Lys Arg Ala His Leu Asp Gly 100 105 110 Gln Asp His Pro Ile Gln Lys His Val Ile Met Ala Tyr Leu Pro Gln 115 120 125 Gln Asp Val Leu Ser Pro Arg Leu Thr Cys Arg Glu Thr Leu Lys Phe 130 135 140 Ala Ala Asp Leu Lys Leu Asn Ser Ser Glu Arg Thr Lys Lys Leu Met 145 150 155 160 Val Glu Gln Leu Ile Glu Glu Leu Gly Leu Lys Asp Cys Ala Asp Thr 165 170 175 Leu Val Gly Asp Asn Ser His Arg Gly Leu Ser Gly Gly Glu Lys Arg 180 185 190 Arg Leu Ser Ile Gly Thr Gln Met Ile Ser Asn Pro Ser Ile Met Phe 195 200 205 Leu Asp Glu Pro Thr Thr Gly Leu Asp Ala Tyr Ser Ala Phe Leu Val 210 215 220 Ile Lys Thr Leu Lys Lys Leu Ala Lys Glu Asp Gly Arg Thr Phe Ile 225 230 235 240 Met Ser Ile His Gln Pro Arg Ser Asp Ile Leu Phe Leu Leu Asp Gln 245 250 255 Val Cys Ile Leu Ser Lys Gly Asn Val Val Tyr Cys Asp Lys Met Asp 260 265 270 Asn Thr Ile Pro Tyr Phe Glu Ser Ile Gly Tyr His Val Pro Gln Leu 275 280 285 Val Asn Pro Ala Asp Tyr Phe Ile Asp Leu Ser Ser Val Asp Ser Arg 290 295 300 Ser Asp Lys Glu Glu Ala Ala Thr Gln Ser Arg Leu Asn Ser Leu Ile 305 310 315 320 Asp His Trp His Asp Tyr Glu Arg Thr His Leu Gln Leu Gln Ala Glu 325 330 335 Ser Tyr Ile Ser Asn Ala Thr Glu Ile Gln Ile Gln Asn Met Thr Thr 340 345 350 Arg Leu Pro Phe Trp Lys Gln Val Thr Val Leu Thr Arg Arg Asn Phe 355 360 365 Lys Leu Asn Phe Ser Asp Tyr Val Thr Leu Ile Ser Thr Phe Ala Glu 370 375 380 Pro Leu Ile Ile Gly Thr Val Cys Gly Trp Ile Tyr Tyr Lys Pro Asp 385 390 395 400 Lys Ser Ser Ile Gly Gly Leu Arg Thr Thr Thr Ala Cys Leu Tyr Ala 405 410 415 Ser Thr Ile Leu Gln Cys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe Asp Thr Tyr Arg 420 425 430 Leu Cys Glu Gln Asp Ile Ala Leu Tyr Asp Arg Glu Arg Ala Glu Gly 435 440 445 Ser Val Thr Pro Leu Ala Phe Ile Val Ala Arg Lys Ile Ser Leu Phe 450 455 460 Leu Ser Asp Asp Phe Ala Met Thr Met Ile Phe Val Ser Ile Thr Tyr 465 470 475 480 Phe Met Phe Gly Leu Glu Ala Asp Ala Arg Lys Phe Phe Tyr Gln Phe 485 490 495 Ala Val Val Phe Leu Cys Gln Leu Ser Cys Ser Gly Leu Ser Met Leu 500 505 510 Ser Val Ala Val Ser Arg Asp Phe Ser Lys Ala Ser Leu Val Gly Asn 515 520 525 Met Thr Phe Thr Val Leu Ser Met Gly Cys Gly Phe Phe Val Asn Ala 530 535 540 Lys Val Met Pro Val Tyr Val Arg Trp Ile Lys Tyr Ile Ala Phe Thr 545 550 555 560 Trp Tyr Ser Phe Gly Thr Leu Met Ser Ser Thr Phe Thr Asn Ser Tyr 565 570 575 Cys Thr Thr Asp Asn Leu Asp Glu Cys Leu Gly Asn Gln Ile Leu Glu 580 585 590 Val Tyr Gly Phe Pro Arg Asn Trp Ile Thr Val Pro Ala Val Val Leu 595 600 605 Leu Cys Trp Ser Val Gly Tyr Phe Val Val Gly Ala Ile Ile Leu Tyr 610 615 620 Leu His Lys Ile Asp Ile Thr Leu Gln Asn Glu Val Lys Ser Lys Gln 625 630 635 640 Lys Lys Ile Lys Lys Lys Ser Pro Thr Gly Met Lys Pro Glu Ile Gln 645 650 655 Leu Leu Asp Asp Val Tyr His Gln Lys Asp Leu Glu Ala Glu Lys Gly 660 665 670 Lys Asn Ile His Ile Thr Ile Lys Leu Glu Asp Ile Asp Leu Arg Val 675 680 685 Ile Phe Ser Ala Pro Phe Ser Asn Trp Lys Glu Gly Asn Phe His His 690 695 700 Glu Thr Lys Glu Ile Leu Gln Ser Val Asn Ala Ile Phe Lys Pro Gly 705 710 715 720 Met Ile Asn Ala Ile Met Gly Pro Ser Gly Ser Gly Lys Ser Ser Leu 725 730 735 Leu Asn Leu Ile Ser Gly Arg Leu Lys Ser Ser Val Phe Ala Lys Phe 740 745 750 Asp Thr Ser Gly Ser Ile Met Phe Asn Asp Ile Gln Val Ser Glu Leu 755 760 765 Met Phe Lys Asn Val Cys Ser Tyr Val Ser Gln Asp Asp Asp His Leu 770 775 780 Leu Ala Ala Leu Thr Val Lys Glu Thr Leu Lys Tyr Ala Ala Ala Leu 785 790 795 800 Arg Leu His His Leu Thr Glu Ala Glu Arg Met Glu Arg Thr Asp Asn 805 810 815 Leu Ile Arg Ser Leu Gly Leu Lys His Cys Glu Asn Asn Ile Ile Gly 820 825 830 Asn Glu Phe Val Lys Gly Ile Ser Gly Gly Glu Lys Arg Arg Val Thr 835 840 845 Met Gly Val Gln Leu Leu Asn Asp Pro Pro Ile Leu Leu Leu Asp Glu 850 855 860 Pro Thr Ser Gly Leu Asp Ser Phe Thr Ser Ala Thr Ile Leu Glu Ile 865 870 875 880 Leu Glu Lys Leu Cys Arg Glu Gln Gly Lys Thr Ile Ile Ile Thr Ile 885 890 895 His Gln Pro Arg Ser Glu Leu Phe Lys Arg Phe Gly Asn Val Leu Leu 900 905 910 Leu Ala Lys Ser Gly Arg Thr Ala Phe Asn Gly Ser Pro Asp Glu Met 915 920 925 Ile Ala Tyr Phe Thr Glu Leu Gly Tyr Asn Cys Pro Ser Phe Thr Asn 930 935 940 Val Ala Asp Phe Phe Leu Asp Leu Ile Ser Val Asn Thr Gln Asn Glu 945 950 955 960 Gln Asn Glu Ile Ser Ser Arg Ala Arg Val Glu Lys Ile Leu Ser Ala 965 970 975 Trp Lys Ala Asn Met Asp Asn Glu Ser Leu Ser Pro Thr Pro Ile Ser 980 985 990 Glu Lys Gln Gln Tyr Ser Gln Glu Ser Phe Phe Thr Glu Tyr Ser Glu 995 1000 1005 Phe Val Arg Lys Pro Ala Asn Leu Val Leu Ala Tyr Ile Val Asn 1010 1015 1020 Val Lys Arg Gln Phe Thr Thr Thr Arg Arg Ser Phe Asp Ser Leu 1025 1030 1035 Met Ala Arg Ile Ala Gln Ile Pro Gly Leu Gly Val Ile Phe Ala 1040 1045 1050 Leu Phe Phe Ala Pro Val Lys His Asn Tyr Thr Ser Ile Ser Asn 1055 1060 1065 Arg Leu Gly Leu Ala Gln Glu Ser Thr Ala Leu Tyr Phe Val Gly 1070 1075 1080 Met Leu Gly Asn Leu Ala Cys Tyr Pro Thr Glu Arg Asp Tyr Phe 1085 1090 1095 Tyr Glu Glu Tyr Asn Asp Asn Val Tyr Gly Ile Ala Pro Phe Phe 1100 1105 1110 Leu Ala Tyr Met Thr Leu Glu Leu Pro Leu Ser Ala Leu Ala Ser 1115 1120 1125 Val Leu Tyr Ala Val Phe Thr Val Leu Ala Cys Gly Leu Pro Arg 1130 1135 1140 Thr Ala Gly Asn Phe Phe Ala Thr Val Tyr Cys Ser Phe Ile Val 1145 1150 1155 Thr Cys Cys Gly Glu Ala Leu Gly Ile Met Thr Asn Thr Phe Phe 1160 1165 1170 Glu Arg Pro Gly Phe Val Val Asn Cys Ile Ser Ile Ile Leu Ser 1175 1180 1185 Ile Gly Thr Gln Met Ser Gly Leu Met Ser Leu Gly Met Ser Arg 1190 1195 1200 Val Leu Lys Gly Phe Asn Tyr Leu Asn Pro Val Gly Tyr Thr Ser 1205 1210 1215 Met Ile Ile Ile Asn Phe Ala Phe Pro Gly Asn Leu Lys Leu Thr 1220 1225 1230 Cys Glu Asp Gly Gly Lys Asn Ser Asp Gly Thr Cys Glu Phe Ala 1235 1240 1245 Asn Gly His Asp Val Leu Val Ser Tyr Gly Leu Val Arg Asn Thr 1250 1255 1260 Gln Lys Tyr Leu Gly Ile Ile Val Cys Val Ala Ile Ile Tyr Arg 1265 1270 1275 Leu Ile Ala Phe Phe Ile Leu Lys Ala Lys Leu Glu Trp Ile Lys 1280 1285 1290 Trp <210> 117 <211> 542 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 117 Met Ser Val Gln Lys Glu Glu Tyr Asp Ile Val Glu Lys Ala Gln Leu 1 5 10 15 Ser Val Ser Ala Glu Ser Leu Thr Ser Asp Ser Glu Ser Ile Ser His 20 25 30 Asn Pro Phe Asp Asp Phe His Lys Ala Glu Arg Trp Arg Lys Val Tyr 35 40 45 Glu Ser Ser Gly Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Phe Asp Pro Glu Phe Thr 50 55 60 Trp Thr Lys Asp Glu Glu Lys Lys Leu Val Arg Lys Met Asp Leu Lys 65 70 75 80 Ile Phe Leu Trp Val Phe Ile Met Phe Ala Phe Leu Asp Leu Ile Arg 85 90 95 Lys Asn Ile Ala Arg Ala Val Ser Asp Asn Phe Ile Val Asp Leu Lys 100 105 110 Met Asn Thr Asn Asp Tyr Asn Leu Gly Gln Thr Val Tyr Leu Val Ile 115 120 125 Phe Leu Ala Ser Glu Leu Pro Gly Asn Leu Leu Ser Lys Arg Phe Gly 130 135 140 Pro Glu Arg Val Ile Pro Val Gln Ile Val Leu Trp Ser Val Ile Cys 145 150 155 160 Ile Thr Gln Ala Gly Leu Lys Asn Arg Gly Gln Phe Ile Ala Thr Arg 165 170 175 Cys Leu Leu Gly Met Val Gln Gly Gly Phe Ile Pro Asp Asn Ile Leu 180 185 190 Tyr Leu Ser Tyr Tyr Tyr Thr Gly Ala Glu Leu Thr Phe Arg Leu Ser 195 200 205 Phe Phe Trp Cys Ala Ile Pro Leu Phe Gln Ile Leu Gly Ser Leu Leu 210 215 220 Ala Ser Gly Ile Ile Glu Met Arg Gly Ile His Asn Leu Ala Gly Trp 225 230 235 240 Gln Tyr Leu Phe Ile Ile Glu Gly Phe Leu Ser Leu Ser Val Gly Val 245 250 255 Ala Ser Phe Tyr Leu Met Arg Arg Gly Pro Thr Gln Thr Gly Glu Ser 260 265 270 Ala Phe His Lys Gly Lys Ser Leu Phe Thr Glu Tyr Glu Glu Lys Ile 275 280 285 Met Val Asn Arg Ile Leu Arg Asp Asp Pro Ser Lys Gly Asp Met Ser 290 295 300 Asn Arg Gln Pro Val Thr Phe Lys Glu Ile Leu Tyr Thr Leu Thr Glu 305 310 315 320 Phe Asp Leu Trp Pro Leu Phe Ile Gln Gly Ile Thr Ala Phe Ile Ser 325 330 335 Leu Gln Thr Val Gly Ser Tyr Leu Ser Leu Ile Leu Lys Ser Leu Asn 340 345 350 Tyr Ser Thr Phe Leu Ser Asn Ile Leu Ala Ile Pro Gly Gln Ala Leu 355 360 365 Leu Leu Ile Asn Leu Pro Leu Ala Ala Leu Leu Ser Arg Lys Leu Lys 370 375 380 Glu Lys Ser Leu Cys Val Gly Ile Ala Asn Val Trp Val Leu Pro Phe 385 390 395 400 Ile Val Ser Leu Val Ala Leu Pro Thr Asp Thr Asn Pro Trp Ile Lys 405 410 415 Tyr Ile Leu Leu Thr Gly Ile Leu Gly Leu Pro Tyr Thr His Ser Ile 420 425 430 Leu Ala Gly Trp Val Ser Glu Ile Ser Asn Ser Val Arg Ser Arg Thr 435 440 445 Val Gly Thr Ala Leu Tyr Asn Met Ser Ala Gln Val Gly Ala Ile Ile 450 455 460 Ala Ser Asn Met Tyr Arg Asn Asp Asp Lys Pro Tyr Tyr Thr Arg Gly 465 470 475 480 Asn Lys Ile Leu Leu Gly Phe Thr Cys Phe Asn Ile Cys Met Ala Val 485 490 495 Ala Thr Lys Phe Tyr Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Tyr Lys Asp Arg Lys 500 505 510 Trp Asn Ser Met Thr Lys Glu Glu Gln Ile Asn Tyr Leu Asp Thr Thr 515 520 525 Lys Asp Lys Gly Met Lys Arg Leu Asp Tyr Arg Phe Ile His 530 535 540 <210> 118 <211> 523 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 118 Met Lys Asn Met Ser Gln Arg Ser Met Asp Val Glu Lys Lys Ala Ala 1 5 10 15 Asn Ala Asp Ser Cys Ser Val Ser Thr Ser Ser Ile Asn Val Asp Asp 20 25 30 Ala Asp Val Ala Leu Arg Phe Leu Lys Gln Asn Gly Leu Asp Glu Ser 35 40 45 Ser Thr Ala Asn Glu Asp Asp Val Val Ala Gly Glu Glu Ala Asn Phe 50 55 60 Tyr Gly Ser His Glu Leu Ser Pro Lys Val Leu Arg Lys Val Asp Leu 65 70 75 80 Phe Ile Leu Pro Phe Leu Cys Cys Thr Tyr Leu Leu Met Phe Leu Asp 85 90 95 Lys Ala Leu Leu Asn Tyr Ala Ala Ser Met Gly Ile Lys Asp His Leu 100 105 110 Lys Gly Asn Glu Phe Ser Asn Leu Gly Thr Ile Phe Ser Ala Ala Tyr 115 120 125 Ile Phe Met Glu Pro Val Val Thr Tyr Leu Ile Gln Lys Phe Pro Ile 130 135 140 Ser Lys Ile Leu Gly Thr Phe Ile Thr Val Trp Gly Ile Val Leu Ala 145 150 155 160 Cys His Ala Ala Cys Lys Thr Tyr Ala Ser Leu Met Val Val Arg Thr 165 170 175 Leu Leu Gly Leu Phe Glu Ser Ser Ser Ala Val Gly Cys Ile Ala Ile 180 185 190 Ser Gly Met Tyr Tyr Thr Lys Ser Glu Gln Ser Ala Arg Ile Gly Phe 195 200 205 Trp Ala Thr Gln Ala Gly Thr Gly Tyr Ile Val Gly Gly Leu Ile Ser 210 215 220 Phe Gly Phe Leu His Tyr His Gly Thr Ala Phe Thr Ser Trp Gln Ile 225 230 235 240 Met Phe Leu Val Val Gly Leu Val Thr Val Ala Phe Gly Val Leu Thr 245 250 255 Phe Leu Tyr Leu Pro Asp Asn Val Thr Asn Ala Trp Phe Leu Asn Lys 260 265 270 Glu Glu Lys Ile Gln Val Val Glu His Ile Arg Ala Asn Gln Thr Gly 275 280 285 Leu Glu Thr Lys Lys Phe Lys Lys Gln Gln Val Lys Glu Leu Phe Leu 290 295 300 His Asp Lys Phe Thr Trp Pro Met Leu Leu Leu Thr Ala Cys Ser Gln 305 310 315 320 Ile Ser Thr Gly Ala Ile Gly Thr Phe Ser Val Thr Ile Thr Gly Thr 325 330 335 Phe Gly Phe Asp Lys Tyr Glu Thr Ala Leu Leu Gln Leu Pro Ile Gly 340 345 350 Ala Ile Thr Ala Met Ile Ile Leu Ile Thr Thr Gln Met Leu Ser Arg 355 360 365 Trp Gly His Ile Thr Leu Ile Thr Thr Ser Met Tyr Ile Pro Ala Ile 370 375 380 Ile Gly Cys Ile Val Leu Ile Ser Leu Pro Leu Ser His Lys Ile Gly 385 390 395 400 Asn Leu Phe Ser Leu Tyr Leu Leu Tyr Ser Gly Ser Cys Val Ile Thr 405 410 415 Asn Ile Tyr Ile Trp Asn Ser Cys Asn Thr Ser Gly Tyr Thr Lys Arg 420 425 430 Val Phe Arg Asn Ala Ile Thr Met Ile Val Tyr Asn Val Ser Cys Ile 435 440 445 Ile Ala Pro Gln Met Phe Arg Ala Tyr Ser Ala Pro Arg Tyr Ile Pro 450 455 460 Ala Lys Ile Ala Leu Leu Val Thr Gln Cys Val Cys Val Pro Leu Gln 465 470 475 480 Leu Tyr Ile Gly Tyr Ile Cys Lys Lys Glu Asn Glu Lys Arg Asp Lys 485 490 495 Glu Gln Glu Gly Gln Glu Arg Lys Lys Tyr Gln Phe Leu Asp Leu Thr 500 505 510 Asp Ile Glu Asn Arg Asn Phe Arg Tyr Ile Tyr 515 520 <210> 119 <211> 1218 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 119 Met Ile Lys Asn Gly Thr Cys Pro Tyr Trp Glu Arg Asp Asp Leu Ser 1 5 10 15 Glu Cys Ala Arg Arg Glu Tyr Ile Glu Phe Lys Phe Pro Leu Phe Ile 20 25 30 Leu Leu Thr Gly Met Ile Tyr Ala Phe Cys Lys Val Phe Arg Ala Phe 35 40 45 Tyr Leu Arg Gly Lys Asn His Thr Asn Glu Ala Pro Glu Phe Glu Glu 50 55 60 Gln Gly Asn Gly Asn His Glu Tyr Ala Arg Phe Ser Val Leu Arg Leu 65 70 75 80 Lys Ser Ala Trp Glu Ser Arg Ser Phe Cys Asn Val Asn Asn Arg Ser 85 90 95 Thr Phe Asp Lys Phe Lys Lys Phe Ile Glu Gly Ala Phe Ile Val Leu 100 105 110 Gln Leu Thr Ile His Leu Tyr Ile Leu Ser Ser Met Pro Met Asp Asn 115 120 125 Lys Lys Phe Phe His Gln Gly Phe Leu Val Gln Met Phe Leu Trp Ile 130 135 140 Leu Leu Leu Val Val Ile Thr Leu Arg Leu Ile Ser Ala Ser Gln Ser 145 150 155 160 Phe Arg Trp Val Leu Ala Cys Lys Arg Asp Leu Trp Ala Val Ser Phe 165 170 175 Tyr Ser Tyr Ala Ser Leu Phe Thr Leu Ser Ile Leu Pro Leu Arg Ser 180 185 190 Val Phe Ile Gly Lys Ile Lys Asp Lys Ile Met Val Lys Tyr Ile Ile 195 200 205 Ser Glu Thr Phe Ile Asp Leu Ala Leu Leu Leu Leu Leu Ser Thr Ser 210 215 220 Ser Ile Glu Gly Thr Arg Tyr Ser Phe Leu Val Glu Asn Glu Asn Lys 225 230 235 240 Lys Leu Pro Pro Ala Pro Thr Val Phe Gly Leu Leu Thr Phe Ser Arg 245 250 255 Ile Asp Arg Leu Ile Trp Lys Ala Tyr Lys His Cys Leu Gly Asn Ala 260 265 270 Asp Ile Trp Asp Leu Asp Ile Asn Asn Lys Ser Ile Ala Ile Leu Ala 275 280 285 Asn Phe Glu Met Ser Ser Lys Lys Gly Arg Leu Leu Pro Asn Ile Ile 290 295 300 Cys Tyr Phe Lys Ala Val Phe Ile Ser Gln Leu Phe Leu Ala Phe Val 305 310 315 320 Ser Ser Phe Leu Asn Phe Val Pro Ser Leu Leu Met Pro Arg Ile Leu 325 330 335 Ser Tyr Val Asn Asp Pro Lys Ser Lys Ser Trp Asn Leu Val Ser Leu 340 345 350 Tyr Val Ser Ser Met Leu Val Ser Lys Ile Ile Ala Thr Thr Cys Arg 355 360 365 Gly Gln Gly Leu Phe Leu Gly Glu Lys Gly Thr Met Gln Leu Arg Thr 370 375 380 Val Leu Ile Ser Asn Ile Tyr Ser Lys Thr Leu Arg Arg Thr Ile Leu 385 390 395 400 Lys Asp Ser Thr Thr Ser Leu Gln Lys Asn Ala Ser Thr Ser Phe Glu 405 410 415 Glu Asn Pro Asp Ser Ser Glu Ala Glu Pro Arg Lys Lys Ser Ser Arg 420 425 430 Lys Asp Asn Ser Val Asn Asn Val Met Ser Ile Asp Ala Phe Lys Val 435 440 445 Ser Glu Ala Met Asn Thr Phe Tyr Leu Ala Cys Glu Ala Val Phe Met 450 455 460 Thr Val Thr Ala Leu Met Ile Leu Tyr Ser Leu Leu Gly Trp Ser Ala 465 470 475 480 Phe Ala Gly Thr Phe Ala Leu Leu Ala Met Ile Pro Leu Asn Phe Trp 485 490 495 Cys Ala Thr Phe Tyr Gly Asn Tyr Gln Ala Asp Gln Leu Ile Leu Thr 500 505 510 Asp Lys Arg Thr Ser Gly Ile Ser Glu Ala Leu Asn Ser Ile Arg Val 515 520 525 Ile Lys Leu Leu Ala Trp Glu Asn Leu Phe Tyr Gln Lys Ile Ile Asn 530 535 540 Val Arg Asp Gly Glu Ile Arg Leu Leu Lys Lys Lys Ala Thr Ile Phe 545 550 555 560 Phe Leu Asn His Leu Ile Trp Phe Phe Gly Pro Thr Leu Val Ser Ala 565 570 575 Ile Thr Phe Ser Val Phe Ile Lys Phe Gln Asn Gln Thr Leu Thr Pro 580 585 590 Thr Ile Ala Phe Thr Ala Leu Ser Leu Phe Ala Ile Leu Arg Thr Pro 595 600 605 Met Asp Gln Ile Ala Ser Thr Val Ser Leu Leu Ile Gln Ser Phe Ile 610 615 620 Ser Leu Glu Arg Ile Gln Asp Tyr Leu Asn Glu Ser Glu Thr Arg Lys 625 630 635 640 Tyr Glu Ile Leu Glu Gln Ser Asn Thr Lys Phe Gly Phe Glu Asp Ala 645 650 655 Ser Met Glu Trp Glu Ala Ala Glu Thr Ser Phe Lys Leu Lys Asn Ile 660 665 670 Ser Ile Asp Phe Lys Leu Asn Ser Leu Asn Ala Ile Ile Gly Pro Thr 675 680 685 Gly Ser Gly Lys Ser Ser Leu Leu Leu Gly Leu Leu Gly Glu Leu Asn 690 695 700 Leu Leu Ser Gly Lys Ile Tyr Val Pro Thr Val Glu Ser Arg Asp Asp 705 710 715 720 Leu Glu Ile Gly Lys Asp Gly Met Thr Asn Ser Met Ala Tyr Cys Ser 725 730 735 Gln Thr Pro Trp Leu Ile Ser Gly Thr Ile Lys Asp Asn Val Val Phe 740 745 750 Gly Glu Ile Phe Asn Lys Gln Lys Phe Asp Asp Val Met Lys Ser Cys 755 760 765 Cys Leu Asp Lys Asp Ile Lys Ala Met Thr Ala Gly Ile Arg Thr Asp 770 775 780 Val Gly Asp Gly Gly Phe Ser Leu Ser Gly Gly Gln Gln Gln Arg Ile 785 790 795 800 Ala Leu Ala Arg Ala Ile Tyr Ser Ser Ser Arg Tyr Leu Ile Leu Asp 805 810 815 Asp Cys Leu Ser Ala Val Asp Pro Glu Thr Ala Leu Tyr Ile Tyr Glu 820 825 830 Glu Cys Leu Cys Gly Pro Met Met Lys Gly Arg Thr Cys Ile Ile Thr 835 840 845 Ser His Asn Ile Ser Leu Val Thr Lys Arg Ala Asp Trp Leu Val Ile 850 855 860 Leu Asp Arg Gly Glu Val Lys Ser Gln Gly Lys Pro Ser Asp Leu Ile 865 870 875 880 Lys Ser Asn Glu Phe Leu Arg Glu Ser Ile Asn Asn Asp Ser Lys Asn 885 890 895 Thr Thr His Asn Gln Ile Asp Leu Lys Arg Ser Thr Thr Ser Lys Lys 900 905 910 Thr Lys Asn Gly Asp Pro Glu Gly Gly Asn Ser Gln Asp Glu Val Cys 915 920 925 Ala Glu Val Glu Asn Phe Glu Glu Thr Lys Met Glu Gly Ser Val Lys 930 935 940 Phe Ser Ala Tyr Lys Trp Leu Ala Asp Tyr Phe Gly Gly Leu Gly Val 945 950 955 960 Val Phe Val Phe Thr Ser Ser Ser Ile Leu Ile His Gly Ile Thr Leu 965 970 975 Ser Gln Gly Phe Trp Leu Arg Tyr Trp Leu Asp Thr Gly Ser Ser Gly 980 985 990 Ser Lys Ser Thr Trp Leu Tyr Arg Ile Val Glu Gly His Ser Asn Ile 995 1000 1005 Tyr Phe Leu Leu Thr Tyr Ile Ile Ile Gly Leu Val Ser Ser Phe 1010 1015 1020 Leu Thr Ser Gly Lys Val Trp Ile Ala Ile Ile Ser Gly Thr Asn 1025 1030 1035 Val Thr Lys Lys Ile Phe Ala Lys Leu Leu Ser Ser Ile Leu Tyr 1040 1045 1050 Ala Lys Leu Arg Phe His Asn Val Thr Pro Thr Gly Arg Ile Met 1055 1060 1065 Asn Arg Phe Ser Lys Asp Met Asp Ile Ile Asp Gln Gln Leu Ile 1070 1075 1080 Pro Asn Phe Glu Gly Leu Ser Tyr Ser Val Val Val Cys Leu Trp 1085 1090 1095 Ile Ile Leu Leu Ile Gly Tyr Val Thr Pro Gln Phe Leu Leu Phe 1100 1105 1110 Ala Ile Pro Leu Cys Ala Leu Tyr Tyr Thr Val Cys Thr Leu Tyr 1115 1120 1125 Leu Arg Ala Ser Arg Glu Leu Lys Arg Ile Asp Asn Ile Asn Ile 1130 1135 1140 Ser Pro Ile His Gln Leu Phe Ala Glu Ala Ile Lys Gly Val Thr 1145 1150 1155 Thr Ile Arg Ala Leu Ala Asp Glu Arg Arg Phe Ile Thr Gln Ser 1160 1165 1170 Leu Val Ala Ile Asp Arg Ser Asn Ala Pro Phe Phe Tyr Leu Asn 1175 1180 1185 Met Ala Thr Glu Trp Ile Thr Tyr Arg Val Asp Ile Ile Gly Thr 1190 1195 1200 Leu Val Leu Phe Ser Ser Ser Val Met Ile Ile Met Lys Ala Ser 1205 1210 1215 <210> 120 <211> 1049 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 120 Met Gly Ser His Arg Arg Tyr Leu Tyr Tyr Ser Ile Leu Ser Phe Leu 1 5 10 15 Leu Leu Ser Cys Ser Val Val Leu Ala Lys Gln Asp Lys Thr Pro Phe 20 25 30 Phe Glu Gly Thr Ser Ser Lys Asn Ser Arg Leu Thr Ala Gln Asp Lys 35 40 45 Gly Asn Asp Thr Cys Pro Pro Cys Phe Asn Cys Met Leu Pro Ile Phe 50 55 60 Glu Cys Lys Gln Phe Ser Glu Cys Asn Ser Tyr Thr Gly Arg Cys Glu 65 70 75 80 Cys Ile Glu Gly Phe Ala Gly Asp Asp Cys Ser Leu Pro Leu Cys Gly 85 90 95 Gly Leu Ser Pro Asp Glu Ser Gly Asn Lys Asp Arg Pro Ile Arg Ala 100 105 110 Gln Asn Asp Thr Cys His Cys Asp Asn Gly Trp Gly Gly Ile Asn Cys 115 120 125 Asp Val Cys Gln Glu Asp Phe Val Cys Asp Ala Phe Met Pro Asp Pro 130 135 140 Ser Ile Lys Gly Thr Cys Tyr Lys Asn Gly Met Ile Val Asp Lys Val 145 150 155 160 Phe Ser Gly Cys Asn Val Thr Asn Glu Lys Ile Leu Gln Ile Leu Asn 165 170 175 Gly Lys Ile Pro Gln Ile Thr Phe Ala Cys Asp Lys Pro Asn Gln Glu 180 185 190 Cys Asn Phe Gln Phe Trp Ile Asp Gln Leu Glu Ser Phe Tyr Cys Gly 195 200 205 Leu Ser Asp Cys Ala Phe Glu Tyr Asp Leu Glu Gln Asn Thr Ser His 210 215 220 Tyr Lys Cys Asn Asp Val Gln Cys Lys Cys Val Pro Asp Thr Val Leu 225 230 235 240 Cys Gly Ala Lys Gly Ser Ile Asp Ile Ser Asp Phe Leu Thr Glu Thr 245 250 255 Ile Lys Gly Pro Gly Asp Phe Ser Cys Asp Leu Glu Thr Arg Gln Cys 260 265 270 Lys Phe Ser Glu Pro Ser Met Asn Asp Leu Ile Leu Thr Val Phe Gly 275 280 285 Asp Pro Tyr Ile Thr Leu Lys Cys Glu Ser Gly Glu Cys Val His Tyr 290 295 300 Ser Glu Ile Pro Gly Tyr Lys Ser Pro Ser Lys Asp Pro Thr Val Ser 305 310 315 320 Trp Gln Gly Lys Leu Val Leu Ala Leu Thr Ala Val Met Val Leu Ala 325 330 335 Leu Phe Thr Phe Ala Thr Phe Tyr Ile Ser Lys Ser Pro Leu Phe Arg 340 345 350 Asn Gly Leu Gly Ser Ser Lys Ser Pro Ile Arg Leu Pro Asp Glu Asp 355 360 365 Ala Val Asn Asn Phe Leu Gln Asn Glu Asp Asp Thr Leu Ala Thr Leu 370 375 380 Ser Phe Glu Asn Ile Thr Tyr Ser Val Pro Ser Ile Asn Ser Asp Gly 385 390 395 400 Val Glu Glu Thr Val Leu Asn Glu Ile Ser Gly Ile Val Lys Pro Gly 405 410 415 Gln Ile Leu Ala Ile Met Gly Gly Ser Gly Ala Gly Lys Thr Thr Leu 420 425 430 Leu Asp Ile Leu Ala Met Lys Arg Lys Thr Gly His Val Ser Gly Ser 435 440 445 Ile Lys Val Asn Gly Ile Ser Met Asp Arg Lys Ser Phe Ser Lys Ile 450 455 460 Ile Gly Phe Val Asp Gln Asp Asp Phe Leu Leu Pro Thr Leu Thr Val 465 470 475 480 Phe Glu Thr Val Leu Asn Ser Ala Leu Leu Arg Leu Pro Lys Ala Leu 485 490 495 Ser Phe Glu Ala Lys Lys Ala Arg Val Tyr Lys Val Leu Glu Glu Leu 500 505 510 Arg Ile Ile Asp Ile Lys Asp Arg Ile Ile Gly Asn Glu Phe Asp Arg 515 520 525 Gly Ile Ser Gly Gly Glu Lys Arg Arg Val Ser Ile Ala Cys Glu Leu 530 535 540 Val Thr Ser Pro Leu Val Leu Phe Leu Asp Glu Pro Thr Ser Gly Leu 545 550 555 560 Asp Ala Ser Asn Ala Asn Asn Val Ile Glu Cys Leu Val Arg Leu Ser 565 570 575 Ser Asp Tyr Asn Arg Thr Leu Val Leu Ser Ile His Gln Pro Arg Ser 580 585 590 Asn Ile Phe Tyr Leu Phe Asp Lys Leu Val Leu Leu Ser Lys Gly Glu 595 600 605 Met Val Tyr Ser Gly Asn Ala Lys Lys Val Ser Glu Phe Leu Arg Asn 610 615 620 Glu Gly Tyr Ile Cys Pro Asp Asn Tyr Asn Ile Ala Asp Tyr Leu Ile 625 630 635 640 Asp Ile Thr Phe Glu Ala Gly Pro Gln Gly Lys Arg Arg Arg Ile Arg 645 650 655 Asn Ile Ser Asp Leu Glu Ala Gly Thr Asp Thr Asn Asp Ile Asp Asn 660 665 670 Thr Ile His Gln Thr Thr Phe Thr Ser Ser Asp Gly Thr Thr Gln Arg 675 680 685 Glu Trp Ala His Leu Ala Ala His Arg Asp Glu Ile Arg Ser Leu Leu 690 695 700 Arg Asp Glu Glu Asp Val Glu Gly Thr Asp Gly Arg Arg Gly Ala Thr 705 710 715 720 Glu Ile Asp Leu Asn Thr Lys Leu Leu His Asp Lys Tyr Lys Asp Ser 725 730 735 Val Tyr Tyr Ala Glu Leu Ser Gln Glu Ile Glu Glu Val Leu Ser Glu 740 745 750 Gly Asp Glu Glu Ser Asn Val Leu Asn Gly Asp Leu Pro Thr Gly Gln 755 760 765 Gln Ser Ala Gly Phe Leu Gln Gln Leu Ser Ile Leu Asn Ser Arg Ser 770 775 780 Phe Lys Asn Met Tyr Arg Asn Pro Lys Leu Leu Leu Gly Asn Tyr Leu 785 790 795 800 Leu Thr Ile Leu Leu Ser Leu Phe Leu Gly Thr Leu Tyr Tyr Asn Val 805 810 815 Ser Asn Asp Ile Ser Gly Phe Gln Asn Arg Met Gly Leu Phe Phe Phe 820 825 830 Ile Leu Thr Tyr Phe Gly Phe Val Thr Phe Thr Gly Leu Ser Ser Phe 835 840 845 Ala Leu Glu Arg Ile Ile Phe Ile Lys Glu Arg Ser Asn Asn Tyr Tyr 850 855 860 Ser Pro Leu Ala Tyr Tyr Ile Ser Lys Ile Met Ser Glu Val Val Pro 865 870 875 880 Leu Arg Val Val Pro Pro Ile Leu Leu Ser Leu Ile Val Tyr Pro Met 885 890 895 Thr Gly Leu Asn Met Lys Asp Asn Ala Phe Phe Lys Cys Ile Gly Ile 900 905 910 Leu Ile Leu Phe Asn Leu Gly Ile Ser Leu Glu Ile Leu Thr Ile Gly 915 920 925 Ile Ile Phe Glu Asp Leu Asn Asn Ser Ile Ile Leu Ser Val Leu Val 930 935 940 Leu Leu Gly Ser Leu Leu Phe Ser Gly Leu Phe Ile Asn Thr Lys Asn 945 950 955 960 Ile Thr Asn Val Ala Phe Lys Tyr Leu Lys Asn Phe Ser Val Phe Tyr 965 970 975 Tyr Ala Tyr Glu Ser Leu Leu Ile Asn Glu Val Lys Thr Leu Met Leu 980 985 990 Lys Glu Arg Lys Tyr Gly Leu Asn Ile Glu Val Pro Gly Ala Thr Ile 995 1000 1005 Leu Ser Thr Phe Gly Phe Val Val Gln Asn Leu Val Phe Asp Ile 1010 1015 1020 Lys Ile Leu Ala Leu Phe Asn Val Val Phe Leu Ile Met Gly Tyr 1025 1030 1035 Leu Ala Leu Lys Trp Ile Val Val Glu Gln Lys 1040 1045 <210> 121 <211> 548 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 121 Met Val Tyr Thr Ser Thr Tyr Arg His Thr Ile Val Val Asp Leu Leu 1 5 10 15 Glu Tyr Leu Gly Ile Val Ser Asn Leu Glu Thr Leu Gln Ser Ala Arg 20 25 30 Glu Asp Glu Thr Arg Lys Pro Glu Asn Thr Asp Lys Lys Glu Cys Lys 35 40 45 Pro Asp Tyr Asp Ile Glu Cys Gly Pro Asn Arg Ser Cys Ser Glu Ser 50 55 60 Ser Thr Asp Ser Asp Ser Ser Gly Ser Gln Ile Glu Lys Asn Asp Pro 65 70 75 80 Phe Arg Val Asp Trp Asn Gly Pro Ser Asp Pro Glu Asn Pro Gln Asn 85 90 95 Trp Pro Leu Leu Lys Lys Ser Leu Val Val Phe Gln Ile Met Leu Leu 100 105 110 Thr Cys Val Thr Tyr Met Gly Ser Ser Ile Tyr Thr Pro Gly Gln Glu 115 120 125 Tyr Ile Gln Glu Glu Phe His Val Gly His Val Val Ala Thr Leu Asn 130 135 140 Leu Ser Leu Tyr Val Leu Gly Tyr Gly Leu Gly Pro Ile Ile Phe Ser 145 150 155 160 Pro Leu Ser Glu Thr Ala Arg Tyr Gly Arg Leu Asn Leu Tyr Met Val 165 170 175 Thr Leu Phe Phe Phe Met Ile Phe Gln Val Gly Cys Ala Thr Val His 180 185 190 Asn Ile Gly Gly Leu Ile Val Met Arg Phe Ile Ser Gly Ile Leu Cys 195 200 205 Ser Pro Ser Leu Ala Thr Gly Gly Gly Thr Val Ala Asp Ile Ile Ser 210 215 220 Pro Glu Met Val Pro Leu Val Leu Gly Met Trp Ser Ala Gly Ala Val 225 230 235 240 Ala Ala Pro Val Leu Ala Pro Leu Leu Gly Ala Ala Met Val Asp Ala 245 250 255 Lys Asn Trp Arg Phe Ile Phe Trp Leu Leu Met Trp Leu Ser Ala Ala 260 265 270 Thr Phe Ile Leu Leu Ala Phe Phe Phe Pro Glu Thr Gln His His Asn 275 280 285 Ile Leu Tyr Arg Arg Ala Leu Lys Leu Arg Lys Glu Thr Gly Asp Asp 290 295 300 Arg Tyr Tyr Thr Glu Gln Asp Lys Leu Asp Arg Glu Val Asp Ala Arg 305 310 315 320 Thr Phe Leu Ile Asn Thr Leu Tyr Arg Pro Leu Lys Met Ile Ile Lys 325 330 335 Glu Pro Ala Ile Leu Ala Phe Asp Leu Tyr Ile Ala Val Ala Tyr Gly 340 345 350 Cys Phe Tyr Leu Phe Phe Glu Ala Phe Pro Ile Val Phe Val Gly Ile 355 360 365 Tyr His Phe Ser Leu Val Glu Val Gly Leu Ala Tyr Met Gly Phe Cys 370 375 380 Val Gly Cys Val Leu Ala Tyr Gly Leu Phe Gly Ile Leu Asn Met Arg 385 390 395 400 Ile Ile Val Pro Arg Phe Arg Asn Gly Thr Phe Thr Pro Glu Ala Phe 405 410 415 Leu Ile Val Ala Met Cys Val Cys Trp Cys Leu Pro Leu Ser Leu Phe 420 425 430 Leu Phe Gly Trp Thr Ala Arg Val His Trp Ile Leu Pro Val Ile Ser 435 440 445 Glu Val Phe Phe Val Leu Ala Val Phe Asn Ile Phe Gln Ala Thr Phe 450 455 460 Ala Tyr Leu Ala Thr Cys Tyr Pro Lys Tyr Val Ala Ser Val Phe Ala 465 470 475 480 Gly Asn Gly Phe Cys Arg Ala Ser Phe Ala Cys Ala Phe Pro Leu Phe 485 490 495 Gly Arg Ala Met Tyr Asp Asn Leu Ala Thr Lys Asn Tyr Pro Val Ala 500 505 510 Trp Gly Ser Ser Leu Val Gly Phe Leu Thr Leu Gly Leu Ala Ile Ile 515 520 525 Pro Phe Ile Leu Tyr Lys Tyr Gly Pro Ser Leu Arg Thr Arg Ser Ser 530 535 540 Tyr Thr Glu Glu 545 <210> 122 <211> 563 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 122 Met Thr Lys Gln Gln Thr Ser Val Met Arg Asn Ala Ser Ile Ala Lys 1 5 10 15 Glu Glu Arg Glu Gly Ser Asp Asn Asn Asn Val Asp Arg Ser Ser Ser 20 25 30 Asp Ala Ile Ser Asp Asn Asp Ala Glu Arg Ser Asn Ser His Ser Glu 35 40 45 Ile Asp Asn Glu Ser Asn Phe Asp Met Val Pro Tyr Ser Arg Phe Ser 50 55 60 His Lys Gln Lys Met Leu Leu Val Val Gln Cys Ala Phe Thr Gly Phe 65 70 75 80 Phe Ser Thr Val Ala Gly Ser Ile Tyr Tyr Pro Val Leu Thr Ile Ile 85 90 95 Glu Arg Lys Phe Asn Ile Thr Glu Glu Leu Ala Asn Val Thr Ile Val 100 105 110 Val Tyr Phe Ile Phe Gln Gly Val Ala Pro Ser Ile Met Gly Gly Leu 115 120 125 Ala Asp Thr Phe Gly Arg Arg Pro Ile Val Leu Trp Ala Ile Leu Ala 130 135 140 Tyr Phe Cys Ala Cys Ile Gly Leu Ala Cys Ala His Asn Tyr Ala Gln 145 150 155 160 Ile Leu Ala Leu Arg Cys Leu Gln Ala Ala Gly Ile Ser Pro Val Ile 165 170 175 Ala Ile Asn Ser Gly Ile Met Gly Asp Val Thr Thr Lys Val Glu Arg 180 185 190 Gly Gly Tyr Val Gly Leu Val Ala Gly Phe Gln Val Val Gly Thr Ala 195 200 205 Phe Gly Ala Leu Ile Gly Ala Gly Leu Ser Ser Lys Trp Gly Trp Arg 210 215 220 Ala Ile Phe Trp Phe Leu Ala Ile Gly Ser Gly Ile Cys Leu Val Phe 225 230 235 240 Ser Thr Leu Leu Met Pro Glu Thr Lys Arg Thr Leu Val Gly Asn Gly 245 250 255 Ser Val Thr Pro Arg Ser Phe Leu Asn Arg Ser Leu Ile Leu His Val 260 265 270 Gly Ser Val Lys Lys Thr Leu His Leu Asp Asp Pro Asp Pro Glu Thr 275 280 285 Leu Glu Pro Arg Thr Ser Val Asp Phe Leu Ala Pro Leu Lys Ile Leu 290 295 300 His Ile Arg Glu Ile Asp Ile Leu Leu Ser Ile Ala Gly Leu Gln Phe 305 310 315 320 Ser Thr Trp Thr Thr His Gln Thr Ala Leu Thr Ile Val Leu Ser Lys 325 330 335 Lys Tyr Asn Leu Ser Val Ala Lys Ile Gly Leu Cys Phe Leu Pro Ala 340 345 350 Gly Ile Ser Thr Leu Thr Ser Ile Ile Ser Ala Gly Arg Tyr Leu Asn 355 360 365 Trp Ser Tyr Arg Thr Arg Lys Val Lys Tyr Asn Arg Trp Ile Lys Glu 370 375 380 Gln Glu Leu Gln Leu Met Glu Lys Tyr Lys Gly Asp Lys Asn Lys Val 385 390 395 400 Ala Glu Leu Ile His Ser Asn Ser His Tyr Ala Phe Asn Leu Val Glu 405 410 415 Ala Arg Leu His Pro Ala Phe Val Thr Leu Leu Leu Ser Ser Ile Gly 420 425 430 Phe Thr Ala Phe Gly Trp Cys Ile Ser Val Lys Thr Pro Leu Ala Ala 435 440 445 Val Leu Cys Thr Ser Ala Phe Ala Ser Leu Phe Ser Asn Cys Ile Leu 450 455 460 Thr Phe Ser Thr Thr Leu Ile Val Asp Leu Phe Pro Ser Lys Ala Ser 465 470 475 480 Thr Ala Thr Gly Cys Leu Asn Leu Phe Arg Cys Leu Leu Ser Ala Ile 485 490 495 Phe Ile Ala Ala Leu Thr Lys Met Val Glu Lys Met Arg Tyr Gly Gly 500 505 510 Val Phe Thr Phe Leu Ser Ala Ile Thr Ser Ser Ser Ser Leu Leu Leu 515 520 525 Phe Tyr Leu Leu Lys Asn Gly Lys Gln Leu Ser Phe Asp Arg Ile Arg 530 535 540 Ala Asn Asp Lys Ser Ala Gly Arg Ser Val Gly Lys Asn Ser Glu Lys 545 550 555 560 Val Ser Thr <210> 123 <211> 542 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 123 Met Ala Gly Ala Thr Ser Ser Ile Ile Arg Glu Asn Asp Phe Glu Asp 1 5 10 15 Glu Leu Ala Glu Ser Met Gln Ser Tyr Asn Arg Glu Thr Ala Asp Lys 20 25 30 Leu Ala Leu Thr Arg Thr Glu Ser Val Lys Pro Glu Pro Glu Ile Thr 35 40 45 Ala Pro Pro His Ser Arg Phe Ser Arg Ser Phe Lys Thr Val Leu Ile 50 55 60 Ala Gln Cys Ala Phe Thr Gly Phe Phe Ser Thr Ile Ala Gly Ala Ile 65 70 75 80 Tyr Tyr Pro Val Leu Ser Val Ile Glu Arg Lys Phe Asp Ile Asp Glu 85 90 95 Glu Leu Val Asn Val Thr Val Val Val Tyr Phe Val Phe Gln Gly Leu 100 105 110 Ala Pro Thr Phe Met Gly Gly Phe Ala Asp Ser Leu Gly Arg Arg Pro 115 120 125 Val Val Leu Val Ala Ile Val Ile Tyr Phe Gly Ala Cys Ile Gly Leu 130 135 140 Ala Cys Ala Gln Thr Tyr Ala Gln Ile Ile Val Leu Arg Cys Leu Gln 145 150 155 160 Ala Ala Gly Ile Ser Pro Val Ile Ala Ile Asn Ser Gly Ile Met Gly 165 170 175 Asp Val Thr Thr Arg Ala Glu Arg Gly Gly Tyr Val Gly Tyr Val Ala 180 185 190 Gly Phe Gln Val Leu Gly Ser Ala Phe Gly Ala Leu Ile Gly Ala Gly 195 200 205 Leu Ser Ser Arg Trp Gly Trp Arg Ala Ile Phe Trp Phe Leu Ala Ile 210 215 220 Gly Ser Gly Ile Cys Phe Leu Ala Ser Phe Leu Ile Leu Pro Glu Thr 225 230 235 240 Lys Arg Asn Ile Ser Gly Asn Gly Ser Val Thr Pro Lys Ser Tyr Leu 245 250 255 Asn Arg Ala Pro Ile Leu Val Leu Pro Thr Val Arg Lys Ser Leu His 260 265 270 Leu Asp Asn Pro Asp Tyr Glu Thr Leu Glu Leu Pro Thr Gln Leu Asn 275 280 285 Leu Leu Ala Pro Phe Lys Ile Leu Lys Ala Tyr Glu Ile Cys Ile Leu 290 295 300 Met Leu Val Ala Gly Leu Gln Phe Ala Met Tyr Thr Thr His Leu Thr 305 310 315 320 Ala Leu Ser Thr Ala Leu Ser Lys Gln Tyr His Leu Thr Val Ala Lys 325 330 335 Val Gly Leu Cys Tyr Leu Pro Ser Gly Ile Cys Thr Leu Cys Ser Ile 340 345 350 Val Ile Ala Gly Arg Tyr Leu Asn Trp Asn Tyr Arg Arg Arg Leu Lys 355 360 365 Tyr Tyr Gln Asn Trp Leu Gly Lys Lys Arg Ser Lys Leu Leu Glu Glu 370 375 380 His Asp Asn Asp Leu Asn Leu Val Gln Arg Ile Ile Glu Asn Asp Pro 385 390 395 400 Lys Tyr Thr Phe Asn Ile Phe Lys Ala Arg Leu Gln Pro Ala Phe Val 405 410 415 Thr Leu Leu Leu Ser Ser Ser Gly Phe Cys Ala Tyr Gly Trp Cys Ile 420 425 430 Thr Val Lys Ala Pro Leu Ala Ala Val Leu Cys Met Ser Gly Phe Ala 435 440 445 Ser Leu Phe Ser Asn Cys Ile Leu Thr Phe Ser Thr Thr Leu Ile Val 450 455 460 Asp Leu Phe Pro Thr Lys Thr Ser Thr Ala Thr Gly Cys Leu Asn Leu 465 470 475 480 Phe Arg Cys Ile Leu Ser Ala Val Phe Ile Ala Ala Leu Ser Lys Met 485 490 495 Val Glu Lys Met Lys Phe Gly Gly Val Phe Thr Phe Leu Gly Ala Leu 500 505 510 Thr Ser Ser Ser Ser Ile Leu Leu Phe Ile Leu Leu Arg Lys Gly Lys 515 520 525 Glu Leu Ala Phe Lys Arg Lys Lys Gln Glu Leu Gly Val Asn 530 535 540 <210> 124 <211> 689 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 124 Met Gln Ala Gln Gly Ser Gln Ser Asn Val Gly Ser Leu Arg Ser Asn 1 5 10 15 Cys Ser Asp Asn Ser Leu Pro Asn Asn His Val Met Met His Cys Asp 20 25 30 Glu Ser Ser Gly Ser Pro His Ser Glu His Asn Asp Tyr Ser Tyr Glu 35 40 45 Lys Thr Asn Leu Glu Ser Thr Ala Ser Asn Ser Arg Glu His Arg Asp 50 55 60 Asn Gln Leu Ser Arg Leu Lys Ser Glu Glu Tyr Val Val Pro Lys Asn 65 70 75 80 Gln Arg Arg Gly Leu Leu Pro Gln Leu Ala Ile Ile Pro Glu Phe Lys 85 90 95 Asp Ala Arg Asp Tyr Pro Pro Met Met Lys Lys Met Ile Val Phe Leu 100 105 110 Ile Ala Phe Ser Ser Met Met Gly Pro Met Gly Thr Ser Ile Ile Phe 115 120 125 Pro Ala Ile Asn Ser Ile Thr Thr Glu Phe Lys Thr Ser Val Ile Met 130 135 140 Val Asn Val Ser Ile Gly Val Tyr Leu Leu Ser Leu Gly Val Phe Pro 145 150 155 160 Leu Trp Trp Ser Ser Leu Ser Glu Leu Glu Gly Arg Arg Thr Thr Tyr 165 170 175 Ile Thr Ser Phe Ala Leu Leu Phe Ala Phe Asn Ile Gly Ser Ala Leu 180 185 190 Ala Pro Asp Ile Asn Ser Phe Ile Ala Leu Arg Met Leu Cys Gly Ala 195 200 205 Ala Ser Ala Ser Val Gln Ser Val Gly Ala Gly Thr Val Ala Asp Leu 210 215 220 Tyr Ile Ser Glu Asp Arg Gly Lys Asn Leu Ser Tyr Tyr Tyr Leu Gly 225 230 235 240 Pro Leu Leu Ala Pro Leu Leu Ser Pro Ile Phe Gly Ser Leu Leu Val 245 250 255 Asn Arg Trp Pro Trp Arg Ser Thr Gln Trp Phe Met Val Ile Leu Ser 260 265 270 Gly Cys Asn Val Ile Leu Leu Thr Val Leu Leu Pro Glu Thr Leu Arg 275 280 285 Lys Gln Asp Ser Lys Gly Ala Ile Ala Gln Ile Leu Ala Glu Arg Arg 290 295 300 Ile Gln Val Asp Asn Asn Glu Arg Gly Glu Ile Gln Glu Asp Tyr Gln 305 310 315 320 Arg Gly Glu Asp Glu Thr Asp Arg Ile Glu Asn Gln Val Ala Thr Leu 325 330 335 Ser Thr Glu Lys His Asn Tyr Val Gly Glu Val Arg Asp Gln Asp Ser 340 345 350 Leu Asp Leu Glu Ser His Ser Ser Pro Asn Thr Tyr Asp Gly Arg Ala 355 360 365 Gly Glu Thr Gln Leu Gln Arg Ile Tyr Thr Glu Ala Ser Arg Ser Leu 370 375 380 Tyr Glu Tyr Gln Leu Asp Asp Ser Gly Ile Asp Ala Thr Thr Ala Gln 385 390 395 400 Val Thr Arg Ile Arg Ser Thr Asp Pro Lys Leu Ala Arg Ser Ile Arg 405 410 415 Glu Asn Ser Leu Arg Lys Leu Gln Thr Asn Leu Glu Glu Gln Val Lys 420 425 430 Lys Val Leu Ser Ser Asn Gly Gly Glu Ile Ala Pro Lys Gln Val Ser 435 440 445 Ala Val Arg Lys Val Trp Asp Thr Phe Phe Val Tyr Phe Ile Lys Pro 450 455 460 Leu Lys Ser Leu His Phe Leu Glu Tyr Pro Pro Val Ala Leu Ala Ile 465 470 475 480 Thr Phe Ser Ala Ile Ser Phe Ser Thr Val Tyr Phe Val Asn Met Thr 485 490 495 Val Glu Tyr Lys Tyr Ser Arg Pro Pro Tyr Asn Phe Lys Pro Leu Tyr 500 505 510 Ile Gly Leu Leu Tyr Ile Pro Asn Ser Val Thr Tyr Phe Phe Ala Ser 515 520 525 Ile Tyr Gly Gly Arg Trp Val Asp Met Leu Leu Lys Arg Tyr Lys Glu 530 535 540 Lys Tyr Gly Ile Leu Ala Pro Glu Ala Arg Ile Ser Trp Asn Val Val 545 550 555 560 Thr Ser Val Ile Ser Phe Pro Ile Ala Leu Leu Ile Phe Gly Trp Cys 565 570 575 Leu Asp Lys Lys Cys His Trp Val Thr Pro Leu Ile Gly Thr Ala Leu 580 585 590 Phe Gly Tyr Ala Ala Met Met Thr Ile Gly Ala Thr Leu Ser Tyr Leu 595 600 605 Val Asp Ser Leu Pro Gly Lys Gly Ala Thr Gly Val Ala Leu Asn Asn 610 615 620 Leu Ile Arg Gln Ile Leu Ala Ala Thr Ala Val Phe Val Thr Thr Pro 625 630 635 640 Met Leu Asn Gly Met Gly Thr Gly Trp Ala Phe Thr Met Leu Ala Phe 645 650 655 Ile Val Leu Gly Ala Ser Ser Val Leu Ile Ile Leu Lys Lys His Gly 660 665 670 Asp Tyr Trp Arg Glu Asn Tyr Asp Leu Gln Lys Leu Tyr Asp Lys Ile 675 680 685 Asp <210> 125 <211> 586 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 125 Met Ser Asp His Ser Pro Ile Ser Asn Lys Glu Asn His Leu Leu Pro 1 5 10 15 Ser Asp Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Asp Met His Ser Thr Gly Thr 20 25 30 Thr Gly Thr Thr Gly Val Glu Pro Val Asp Phe Thr Gly Glu Gly Ala 35 40 45 Lys Tyr Thr Thr Ala Thr Glu Gly Asn Gly Gly Ala Asp Leu Ala Ile 50 55 60 Gln Arg Thr Thr Thr Met Asn Ser Ala Ala Glu Ser Glu Val Asn Ile 65 70 75 80 Thr Arg Arg Leu Thr Lys Ile Leu Thr Gly Ser Val Asn Glu Pro Asp 85 90 95 Arg Val Glu Val Asp Tyr Thr Asn Cys Ala Pro Met Gly Gly Asp Arg 100 105 110 Pro Tyr Pro Pro Ser Leu Pro Ser Arg Asp Leu Tyr Glu Val Thr Phe 115 120 125 Asp Gly Pro Asn Asp Pro Leu His Pro Phe Asn Trp Pro Met Lys Lys 130 135 140 Lys Val Leu Leu Cys Leu Val Leu Cys Leu Asp Ser Ile Ala Ile Ala 145 150 155 160 Met Cys Ser Ser Ile Phe Ala Ser Ala Val Pro Gln Ile Cys Glu Ile 165 170 175 Tyr His Val Ile Glu Val Val Ala Ile Leu Gly Ile Thr Leu Phe Val 180 185 190 Leu Gly Phe Ala Ala Ser Pro Val Ile Tyr Ala Pro Leu Ser Glu Leu 195 200 205 Tyr Gly Arg Lys Gly Val Leu Val Leu Ser Ala Phe Gly Phe Ala Leu 210 215 220 Phe Gln Phe Ala Val Ala Thr Ala Glu Asn Leu Gln Thr Ile Phe Ile 225 230 235 240 Cys Arg Phe Phe Gly Gly Phe Ile Gly Ala Ala Pro Met Ala Val Val 245 250 255 Pro Ala Ala Phe Ala Asp Met Phe Asp Thr Asn Val Arg Gly Lys Ala 260 265 270 Ile Ala Leu Phe Ser Leu Gly Val Phe Val Gly Pro Ile Leu Ser Pro 275 280 285 Val Met Gly Ser Tyr Ile Ala Gln Arg Thr Thr Trp Arg Trp Leu Glu 290 295 300 Tyr Val Val Gly Cys Phe Ala Ser Ala Val Phe Val Ala Ile Val Leu 305 310 315 320 Phe Phe Glu Glu Thr His His Pro Thr Ile Leu Val Asn Lys Ala Lys 325 330 335 Gln Met Arg Lys Gln Ser Asn Asn Trp Gly Ile His Ala Ala His Glu 340 345 350 Asp Val Glu Leu Ser Ile Lys Asp Ile Val Gln Lys Thr Val Thr Arg 355 360 365 Pro Ile Ile Met Leu Phe Val Glu Pro Leu Leu Leu Phe Val Thr Ile 370 375 380 Tyr Asn Ser Phe Val Tyr Gly Ile Leu Tyr Leu Leu Leu Glu Ala Tyr 385 390 395 400 Pro Leu Val Phe Val Glu Gly Tyr Gly Phe Thr Glu Asn Gly Glu Leu 405 410 415 Pro Tyr Ile Ala Leu Ile Ile Gly Met Met Val Cys Ala Ala Phe Ile 420 425 430 Trp Tyr Met Asp Asn Asp Tyr Leu Lys Arg Cys Arg Ala Lys Gly Lys 435 440 445 Leu Val Pro Glu Ala Arg Leu Tyr Ala Met Val Ile Ala Gly Thr Val 450 455 460 Phe Pro Ile Gly Ile Leu Trp Phe Cys Trp Thr Gly Tyr Tyr Pro His 465 470 475 480 Lys Ile His Trp Met Val Pro Thr Val Gly Gly Ala Phe Ile Gly Phe 485 490 495 Gly Leu Met Gly Ile Phe Leu Pro Cys Leu Asn Tyr Ile Ile Glu Ser 500 505 510 Tyr Leu Leu Leu Ala Ala Ser Ala Val Ala Ala Asn Thr Phe Met Arg 515 520 525 Ser Ala Phe Gly Ala Cys Phe Pro Leu Phe Ala Gly Tyr Met Phe Arg 530 535 540 Gly Met Gly Ile Gly Trp Ala Gly Leu Leu Leu Gly Leu Phe Ala Ala 545 550 555 560 Ala Met Ile Pro Val Pro Leu Leu Phe Leu Lys Tyr Gly Glu Ser Ile 565 570 575 Arg Lys Lys Ser Lys Tyr Ala Tyr Ala Ala 580 585 <210> 126 <211> 614 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 126 Met Ser Asp Gln Glu Ser Val Val Ser Phe Asn Ser Gln Asn Thr Ser 1 5 10 15 Met Val Asp Val Glu Gly Gln Gln Pro Gln Gln Tyr Val Pro Ser Lys 20 25 30 Thr Asn Ser Arg Ala Asn Gln Leu Lys Leu Thr Lys Thr Glu Thr Val 35 40 45 Lys Ser Leu Gln Asp Leu Gly Val Thr Ser Ala Ala Pro Val Pro Asp 50 55 60 Ile Asn Ala Pro Gln Thr Ala Lys Asn Asn Ile Phe Pro Glu Glu Tyr 65 70 75 80 Thr Met Glu Thr Pro Ser Gly Leu Val Pro Val Ala Thr Leu Gln Ser 85 90 95 Met Gly Arg Thr Ala Ser Ala Leu Ser Arg Thr Arg Thr Lys Gln Leu 100 105 110 Asn Arg Thr Ala Thr Asn Ser Ser Ser Thr Gly Lys Glu Glu Met Glu 115 120 125 Glu Glu Glu Thr Glu Glu Arg Glu Asp Gln Ser Gly Glu Asn Glu Leu 130 135 140 Asp Pro Glu Ile Glu Phe Val Thr Phe Val Thr Gly Asp Pro Glu Asn 145 150 155 160 Pro His Asn Trp Pro Ser Trp Val Arg Trp Ser Tyr Thr Val Leu Leu 165 170 175 Ser Ile Leu Val Ile Cys Val Ala Tyr Gly Ser Ala Cys Ile Ser Gly 180 185 190 Gly Leu Gly Thr Val Glu Lys Lys Tyr His Val Gly Met Glu Ala Ala 195 200 205 Ile Leu Ser Cys Ser Leu Met Val Ile Gly Phe Ser Leu Gly Pro Leu 210 215 220 Ile Trp Ser Pro Val Ser Asp Leu Tyr Gly Arg Arg Val Ala Tyr Phe 225 230 235 240 Val Ser Met Gly Leu Tyr Val Ile Phe Asn Ile Pro Cys Ala Leu Ala 245 250 255 Pro Asn Leu Gly Cys Leu Leu Ala Cys Arg Phe Leu Cys Gly Val Trp 260 265 270 Ser Ser Ser Gly Leu Cys Leu Val Gly Gly Ser Ile Ala Asp Met Phe 275 280 285 Pro Ser Glu Thr Arg Gly Lys Ala Ile Ala Phe Phe Ala Phe Ala Pro 290 295 300 Tyr Val Gly Pro Val Val Gly Pro Leu Val Asn Gly Phe Ile Ser Val 305 310 315 320 Ser Thr Gly Arg Met Asp Leu Ile Phe Trp Val Asn Met Ala Phe Ala 325 330 335 Gly Val Met Trp Ile Ile Ser Ser Ala Ile Pro Glu Thr Tyr Ala Pro 340 345 350 Val Ile Leu Lys Arg Lys Ala Ala Arg Leu Arg Lys Glu Thr Gly Asn 355 360 365 Pro Lys Ile Met Thr Glu Gln Glu Ala Gln Gly Val Ser Met Ser Glu 370 375 380 Met Met Arg Ala Cys Leu Leu Arg Pro Leu Tyr Phe Ala Val Thr Glu 385 390 395 400 Pro Val Leu Val Ala Thr Cys Phe Tyr Val Cys Leu Ile Tyr Ser Leu 405 410 415 Leu Tyr Ala Phe Phe Phe Ala Phe Pro Val Ile Phe Gly Glu Leu Tyr 420 425 430 Gly Tyr Lys Asp Asn Leu Val Gly Leu Met Phe Ile Pro Ile Val Ile 435 440 445 Gly Ala Leu Trp Ala Leu Ala Thr Thr Phe Tyr Cys Glu Asn Lys Tyr 450 455 460 Leu Gln Ile Val Lys Gln Arg Lys Pro Thr Pro Glu Asp Arg Leu Leu 465 470 475 480 Gly Ala Lys Ile Gly Ala Pro Phe Ala Ala Ile Ala Leu Trp Ile Leu 485 490 495 Gly Ala Thr Ala Tyr Lys His Ile Ile Trp Val Gly Pro Ala Ser Ala 500 505 510 Gly Leu Ala Phe Gly Phe Gly Met Val Leu Ile Tyr Tyr Ser Leu Asn 515 520 525 Asn Tyr Ile Ile Asp Cys Tyr Val Gln Tyr Ala Ser Ser Ala Leu Ala 530 535 540 Thr Lys Val Phe Leu Arg Ser Ala Gly Gly Ala Ala Phe Pro Leu Phe 545 550 555 560 Thr Ile Gln Met Tyr His Lys Leu Asn Leu His Trp Gly Ser Trp Leu 565 570 575 Leu Ala Phe Ile Ser Thr Ala Met Ile Ala Leu Pro Phe Ala Phe Ser 580 585 590 Tyr Trp Gly Lys Gly Leu Arg His Lys Leu Ser Lys Lys Asp Tyr Ser 595 600 605 Ile Asp Ser Val Glu Met 610 <210> 127 <211> 622 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 127 Met Asn Arg Gln Glu Ser Ile Asn Ser Phe Asn Ser Asp Glu Thr Ser 1 5 10 15 Ser Leu Ser Asp Val Glu Ser Gln Gln Pro Gln Gln Tyr Ile Pro Ser 20 25 30 Glu Ser Gly Ser Lys Ser Asn Met Ala Pro Asn Gln Leu Lys Leu Thr 35 40 45 Arg Thr Glu Thr Val Lys Ser Leu Gln Asp Met Gly Val Ser Ser Lys 50 55 60 Ala Pro Val Pro Asp Val Asn Ala Pro Gln Ser Ser Lys Asn Lys Ile 65 70 75 80 Phe Pro Glu Glu Tyr Thr Leu Glu Thr Pro Thr Gly Leu Val Pro Val 85 90 95 Ala Thr Leu His Ser Ile Gly Arg Thr Ser Thr Ala Ile Ser Arg Thr 100 105 110 Arg Thr Arg Gln Ile Asp Gly Ala Ser Ser Pro Ser Ser Asn Glu Asp 115 120 125 Ala Leu Glu Ser Asp Asn Asn Glu Lys Gly Lys Glu Gly Asp Ser Ser 130 135 140 Gly Ala Asn Asp Glu Ala Pro Asp Leu Asp Pro Glu Ile Glu Phe Val 145 150 155 160 Thr Phe Val Thr Gly Asp Pro Glu Asn Pro His Asn Trp Pro Ala Trp 165 170 175 Ile Arg Trp Ser Tyr Thr Val Leu Leu Ser Ile Leu Val Ile Cys Val 180 185 190 Ala Tyr Gly Ser Ala Cys Ile Ser Gly Gly Leu Gly Thr Val Glu Lys 195 200 205 Lys Tyr His Val Gly Met Glu Ala Ala Ile Leu Ser Val Ser Leu Met 210 215 220 Val Ile Gly Phe Ser Leu Gly Pro Leu Ile Trp Ser Pro Val Ser Asp 225 230 235 240 Leu Tyr Gly Arg Arg Val Ala Tyr Phe Val Ser Met Gly Leu Tyr Val 245 250 255 Ile Phe Asn Ile Pro Cys Ala Leu Ala Pro Asn Leu Gly Ser Leu Leu 260 265 270 Ala Cys Arg Phe Leu Cys Gly Val Trp Ser Ser Ser Gly Leu Cys Leu 275 280 285 Val Gly Gly Ser Ile Ala Asp Met Phe Pro Ser Glu Thr Arg Gly Lys 290 295 300 Ala Ile Ala Phe Phe Ala Phe Ala Pro Tyr Val Gly Pro Val Val Gly 305 310 315 320 Pro Leu Val Asn Gly Phe Ile Ser Val Ser Thr Gly Arg Met Asp Leu 325 330 335 Ile Phe Trp Val Asn Met Ala Phe Ala Gly Val Met Trp Ile Ile Ser 340 345 350 Ser Ala Ile Pro Glu Thr Tyr Ala Pro Val Ile Leu Lys Arg Lys Ala 355 360 365 Ala Arg Leu Arg Lys Glu Thr Gly Asn Pro Lys Ile Met Thr Glu Gln 370 375 380 Glu Ala Gln Gly Val Ser Met Gly Glu Met Met Arg Ala Cys Leu Leu 385 390 395 400 Arg Pro Leu Tyr Phe Ser Val Thr Glu Pro Val Leu Val Ala Thr Cys 405 410 415 Phe Tyr Val Cys Leu Ile Tyr Ser Leu Leu Tyr Ala Phe Phe Phe Ala 420 425 430 Phe Pro Val Ile Phe Gly Glu Leu Tyr Gly Tyr Lys Asp Asn Leu Val 435 440 445 Gly Leu Met Phe Ile Pro Ile Val Ile Gly Ala Leu Trp Ala Leu Ala 450 455 460 Thr Thr Phe Tyr Cys Glu Asn Lys Tyr Leu Gln Ile Val Lys Gln Arg 465 470 475 480 Lys Pro Thr Pro Glu Asp Arg Leu Leu Gly Ala Lys Ile Gly Ala Pro 485 490 495 Phe Ala Ala Ile Ala Leu Trp Ile Leu Gly Ala Thr Ala Tyr Lys His 500 505 510 Ile Ile Trp Val Gly Pro Ala Ser Ala Gly Leu Ala Phe Gly Phe Gly 515 520 525 Met Val Leu Ile Tyr Tyr Ser Leu Asn Asn Tyr Ile Ile Asp Cys Tyr 530 535 540 Val Gln Tyr Ala Ser Ser Ala Leu Ala Thr Lys Val Phe Leu Arg Ser 545 550 555 560 Ala Gly Gly Ala Ala Phe Pro Leu Phe Thr Ile Gln Met Tyr His Lys 565 570 575 Leu Asn Leu His Trp Gly Ser Trp Leu Leu Ala Phe Ile Ser Thr Ala 580 585 590 Met Ile Ala Leu Pro Phe Ala Phe Ser Tyr Trp Gly Lys Gly Leu Arg 595 600 605 His Lys Leu Ser Lys Lys Asp Tyr Ser Ile Asp Ser Ile Glu 610 615 620 <210> 128 <211> 659 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 128 Met Pro Ser Ser Leu Thr Lys Thr Glu Ser Asn Ser Asp Pro Arg Thr 1 5 10 15 Asn Ile Gln Gln Val Pro Lys Ala Leu Asp Lys Asn Val Thr Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Leu Asp Ser Thr Ser Ser Ser Thr Gly Ser Ile Thr Glu Asp 35 40 45 Glu Lys Arg Ser Glu Pro Asn Ala Asp Ser Asn Asn Met Thr Gly Gly 50 55 60 Glu Pro Ile Asp Pro Arg Asp Leu Asp Trp Asp Gly Pro Asp Asp Pro 65 70 75 80 Asp Asn Pro His Asn Trp Ser Ser Leu Lys Lys Trp Tyr Thr Thr Met 85 90 95 Thr Ser Ala Phe Leu Cys Leu Val Val Thr Met Gly Ser Ser Leu Tyr 100 105 110 Val Ser Ser Val Pro Glu Leu Val Glu Arg Tyr His Val Ser Gln Thr 115 120 125 Leu Ala Leu Ala Gly Leu Thr Phe Tyr Leu Leu Gly Leu Ser Thr Val 130 135 140 Ile Gly Ala Pro Leu Ser Glu Val Phe Gly Arg Lys Pro Val Tyr Leu 145 150 155 160 Phe Ser Leu Pro Val Ser Met Leu Phe Thr Met Gly Val Gly Leu Ser 165 170 175 Asn Gly His Met Arg Ile Ile Leu Pro Leu Arg Phe Leu Ser Gly Val 180 185 190 Phe Ala Ser Pro Ala Leu Ser Val Gly Ser Gly Thr Ile Leu Asp Ile 195 200 205 Phe Asp Val Asp Gln Val Ser Val Ala Met Thr Tyr Phe Val Leu Ser 210 215 220 Pro Phe Leu Gly Pro Val Leu Ser Pro Ile Met Ala Gly Phe Ala Thr 225 230 235 240 Glu Ala Lys Gly Trp Arg Trp Ser Glu Trp Ile Gln Leu Ile Ala Gly 245 250 255 Gly Leu Ile Leu Pro Phe Ile Ala Leu Met Pro Glu Thr His Lys Gly 260 265 270 Ile Ile Leu Arg Lys Arg Ala Lys Lys Arg Asn Ile Ala Leu Lys Lys 275 280 285 Phe Ser Arg Glu Ala Gln Lys Glu Phe Leu Lys Thr Thr Val Thr Ile 290 295 300 Thr Ile Leu Arg Pro Leu Lys Met Leu Val Val Glu Pro Ile Val Phe 305 310 315 320 Val Phe Ser Val Tyr Val Ala Phe Ile Phe Ala Ile Leu Phe Gly Phe 325 330 335 Phe Glu Ala Tyr Ala Val Ile Tyr Arg Gly Val Tyr His Met Ser Met 340 345 350 Gly Ile Ser Gly Leu Pro Phe Ile Gly Ile Gly Val Gly Leu Trp Ile 355 360 365 Gly Ala Phe Phe Tyr Leu Tyr Ile Asp Arg Lys Tyr Leu Phe Pro Lys 370 375 380 Pro Pro Ala Gly Thr Gln Pro Leu Thr Glu Lys Glu Arg Thr Ser Lys 385 390 395 400 Arg Thr Thr Pro Tyr Arg Gly Ala Arg Asp Ala Glu Thr Gly Glu Leu 405 410 415 Leu Pro Val Val Pro Glu Lys Phe Leu Ile Ala Cys Lys Phe Gly Ser 420 425 430 Val Ala Leu Pro Ile Gly Leu Phe Trp Gln Ala Trp Thr Ala Arg Ser 435 440 445 Asp Val His Trp Met Ala Pro Val Ala Ala Gly Val Pro Phe Gly Phe 450 455 460 Gly Leu Ile Leu Ile Phe Phe Ser Val Leu Met Tyr Phe Ser Thr Cys 465 470 475 480 Tyr Pro Pro Leu Thr Val Ala Ser Cys Leu Ala Ala Asn Asn Leu Leu 485 490 495 Arg Tyr Val Met Ser Ser Val Phe Pro Leu Phe Thr Ile Gln Met Tyr 500 505 510 Thr Lys Met Lys Ile Lys Trp Ala Ser Thr Leu Phe Ala Leu Val Cys 515 520 525 Val Val Met Ile Pro Ile Pro Trp Val Phe Glu Lys Trp Gly Ser Lys 530 535 540 Leu Arg His Lys Ser Gln Phe Gly Tyr Ala Ala Met Glu Lys Glu Ala 545 550 555 560 Glu Thr Glu Gly Gly Ile Asp Asp Val Asn Ala Val Asp Gly Glu Leu 565 570 575 Asn Leu Thr Arg Met Thr Thr Leu Arg Thr Met Glu Thr Asp Pro Ser 580 585 590 Thr Arg Glu Lys Pro Gly Glu Arg Leu Ser Leu Arg Arg Thr His Thr 595 600 605 Gln Pro Val Pro Ala Ser Phe Asp Arg Glu Asp Gly Gln His Ala Gln 610 615 620 Asn Arg Asn Glu Pro Ile Ser Asn Ser Leu Tyr Ser Ala Ile Lys Asp 625 630 635 640 Asn Glu Asp Gly Tyr Ser Tyr Thr Glu Met Ala Thr Asp Ala Ser Ala 645 650 655 Arg Met Val <210> 129 <211> 586 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 129 Met Ser Arg Ser Asn Ser Ile Tyr Thr Glu Asp Ile Glu Met Tyr Pro 1 5 10 15 Thr His Asn Glu Gln His Leu Thr Arg Glu Tyr Thr Lys Pro Asp Gly 20 25 30 Gln Thr Lys Ser Glu Lys Leu Asn Phe Glu Gly Ala Tyr Ile Asn Ser 35 40 45 His Gly Thr Leu Ser Lys Thr Thr Thr Arg Glu Ile Glu Gly Asp Leu 50 55 60 Asp Ser Glu Thr Ser Ser His Ser Ser Asp Asp Lys Val Asp Pro Thr 65 70 75 80 Gln Gln Ile Thr Ala Glu Thr Lys Ala Pro Tyr Thr Leu Leu Ser Tyr 85 90 95 Gly Gln Lys Trp Gly Met Val Ala Ile Leu Thr Met Cys Gly Phe Trp 100 105 110 Ser Ser Leu Gly Ser Pro Ile Tyr Tyr Pro Ala Leu Arg Gln Leu Glu 115 120 125 Lys Gln Phe Asn Val Asp Glu Asn Met Val Asn Val Thr Val Val Val 130 135 140 Tyr Leu Leu Phe Gln Gly Ile Ser Pro Thr Val Ser Gly Gly Leu Ala 145 150 155 160 Asp Cys Phe Gly Arg Arg Pro Ile Ile Leu Ala Gly Met Leu Ile Tyr 165 170 175 Val Ile Ala Ser Ile Gly Leu Ala Cys Ala Pro Ser Tyr Gly Val Ile 180 185 190 Ile Phe Leu Arg Cys Ile Gln Ser Ile Gly Ile Ser Pro Thr Ile Ala 195 200 205 Ile Ser Ser Gly Val Val Gly Asp Phe Thr Leu Lys His Glu Arg Gly 210 215 220 Thr Phe Val Gly Ala Thr Ser Gly Phe Val Leu Leu Gly Gln Cys Phe 225 230 235 240 Gly Ser Leu Ile Gly Ala Val Leu Thr Ala Arg Trp Asp Trp Arg Ala 245 250 255 Ile Phe Trp Phe Leu Thr Ile Gly Cys Gly Ser Cys Phe Leu Ile Ala 260 265 270 Phe Leu Ile Leu Pro Glu Thr Lys Arg Thr Ile Ala Gly Asn Leu Ser 275 280 285 Ile Lys Pro Lys Arg Phe Ile Asn Arg Ala Pro Ile Phe Leu Leu Gly 290 295 300 Pro Val Arg Arg Arg Phe Lys Tyr Asp Asn Pro Asp Tyr Glu Thr Leu 305 310 315 320 Asp Pro Thr Ile Pro Lys Leu Asp Leu Ser Ser Ala Gly Lys Ile Leu 325 330 335 Val Leu Pro Glu Ile Ile Leu Ser Leu Phe Pro Ser Gly Leu Leu Phe 340 345 350 Ala Met Trp Thr Leu Met Leu Ser Ser Ile Ser Ser Gly Leu Ser Val 355 360 365 Ala Pro Tyr Asn Tyr His Leu Val Ile Ile Gly Val Cys Tyr Leu Pro 370 375 380 Gly Gly Ile Gly Gly Leu Met Gly Ser Phe Phe Thr Gly Arg Ile Ile 385 390 395 400 Asp Met Tyr Phe Lys Arg Lys Ile Lys Lys Phe Glu Gln Asp Lys Ala 405 410 415 Asn Gly Leu Ile Pro Gln Asp Ala Glu Ile Asn Met Phe Lys Val Arg 420 425 430 Leu Val Cys Leu Leu Pro Gln Asn Phe Leu Ala Val Val Ala Tyr Leu 435 440 445 Leu Phe Gly Trp Ser Ile Asp Lys Gly Trp Arg Ile Glu Ser Ile Leu 450 455 460 Ile Thr Ser Phe Val Cys Ser Tyr Cys Ala Met Ser Thr Leu Ser Thr 465 470 475 480 Ser Thr Thr Leu Leu Val Asp Leu Tyr Pro Thr Lys Ser Ser Thr Ala 485 490 495 Ser Ser Cys Phe Asn Phe Val Arg Cys Ser Leu Ser Thr Ile Phe Met 500 505 510 Gly Cys Phe Ala Lys Met Lys Ala Ala Met Thr Val Gly Gly Thr Phe 515 520 525 Thr Phe Leu Cys Ala Leu Val Phe Phe Phe Asn Phe Leu Met Phe Ile 530 535 540 Pro Met Lys Tyr Gly Met Lys Trp Arg Glu Asp Arg Leu Leu Lys Gln 545 550 555 560 Gln Arg Gln Ser Trp Leu Asn Thr Leu Ala Val Lys Ala Lys Lys Gly 565 570 575 Thr Lys Arg Asp Gln Asn Asp Asn His Asn 580 585 <210> 130 <211> 613 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 130 Met Lys Gly Glu Pro Lys Thr Tyr Ser Met Ser Asp Leu Ser Tyr Tyr 1 5 10 15 Gly Glu Lys Ala Gln Gln Gln Asn Glu Lys Gln Gln Lys Gln Tyr Val 20 25 30 Val Arg Arg Asn Ser Thr Gln Ser Thr Ser Lys Gln Asn Val Ser Val 35 40 45 Val Leu Glu Asp Asn Ala Ser Glu Ser Asn Glu Leu Pro Lys Gly Phe 50 55 60 Ile Leu Tyr Ala Ser Leu Ile Ala Leu Ala Leu Ser Leu Phe Leu Ala 65 70 75 80 Ala Leu Asp Ile Met Ile Val Ser Thr Ile Ile Glu Glu Val Ala Lys 85 90 95 Gln Phe Gly Ser Tyr Ser Glu Ile Gly Trp Leu Phe Thr Gly Tyr Ser 100 105 110 Leu Pro Asn Ala Leu Leu Ala Leu Ile Trp Gly Arg Ile Ala Thr Pro 115 120 125 Ile Gly Phe Lys Glu Thr Met Leu Phe Ala Ile Val Ile Phe Glu Ile 130 135 140 Gly Ser Leu Ile Ser Ala Leu Ala Asn Ser Met Ser Met Leu Ile Gly 145 150 155 160 Gly Arg Val Ile Ala Gly Val Gly Gly Cys Gly Ile Gln Ser Leu Ser 165 170 175 Phe Val Ile Gly Ser Thr Leu Val Glu Glu Ser Gln Arg Gly Ile Leu 180 185 190 Ile Ala Val Leu Ser Cys Ser Phe Ala Ile Ala Ser Val Val Gly Pro 195 200 205 Phe Leu Gly Gly Val Phe Thr Ser Ser Val Thr Trp Arg Trp Cys Phe 210 215 220 Tyr Val Asn Leu Pro Ile Gly Gly Leu Ala Phe Phe Leu Phe Leu Phe 225 230 235 240 Phe Tyr Asn Pro Gly Leu Ser Thr Phe Gln Glu Thr Met Asp Asn Ile 245 250 255 Arg Lys Phe Pro Ser Gln Phe Ile Glu Ile Val Arg Asn Val Ala Tyr 260 265 270 His Leu Leu Lys Ile Lys Gly Phe Ser Lys Leu Asn Gly Trp Arg Lys 275 280 285 Pro Phe Met Glu Leu Ile Phe Met Tyr Asp Ile Ile Glu Phe Val Phe 290 295 300 Cys Ser Ala Gly Phe Thr Cys Ile Leu Leu Ala Phe Thr Phe Gly Gly 305 310 315 320 Asn Arg Tyr Ala Trp Asn Ser Ala Ser Ile Ile Ile Leu Phe Ile Ile 325 330 335 Gly Ile Val Leu Val Val Leu Ala Gly Ile Tyr Asp Phe Leu Val Phe 340 345 350 Pro Lys Phe Asn Ile Val Lys Ala Thr Pro His Tyr Gln Pro Leu Met 355 360 365 Ser Trp Thr Asn Ile Lys Lys Pro Gly Ile Phe Thr Val Asn Ile Ala 370 375 380 Leu Phe Leu Thr Cys Ala Gly Tyr Ile Ser Gln Phe Thr Tyr Ile Val 385 390 395 400 Gln Tyr Phe Gln Leu Ile Tyr Asn Asp Ser Ala Trp Arg Ala Ala Val 405 410 415 His Leu Val Ala Cys Ile Ile Ser Thr Val Val Thr Ala Ile Leu Cys 420 425 430 Gly Ala Ile Thr Asp Lys Thr Arg Gln Ile Lys Pro Ile Ile Val Ile 435 440 445 Ser Ser Ile Phe Gly Val Val Gly Ala Gly Ile Leu Thr Leu Leu Asn 450 455 460 Asn Asn Ala Asn Asn Ser Ala His Ile Gly Leu Leu Ile Leu Pro Gly 465 470 475 480 Val Ala Phe Gly Gly Leu Ala Gln Ser Ser Met Leu Ala Ser Gln Ile 485 490 495 Gln Leu Asp Lys Lys Ser Pro Thr Phe Arg Ser Asp Phe Val Ser Ile 500 505 510 Thr Thr Phe Asn Thr Phe Cys Lys Asn Leu Gly Gln Ala Leu Gly Gly 515 520 525 Val Ile Ser Asn Thr Val Phe Ser Ala Ala Ala Ile Lys Lys Leu Thr 530 535 540 Lys Ala Asn Ile Gln Leu Pro Asp Gly Thr Thr Val Asp Asn Leu Val 545 550 555 560 Ile Tyr Arg Gln Thr Asn Phe Asp Gly Ser His Ser Lys Leu Gly Asn 565 570 575 Ile Ile Ser Glu Ser Leu Thr Asp Val Phe Tyr Met Ala Leu Gly Phe 580 585 590 Tyr Ala Leu Ser Leu Ile Phe Ala Val Phe Ala Ser Asn Lys Lys Val 595 600 605 Thr Ala Ser Leu Arg 610 <210> 131 <211> 543 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 131 Met Lys Ser Thr Leu Ser Leu Thr Leu Cys Val Ile Ser Leu Leu Leu 1 5 10 15 Thr Leu Phe Leu Ala Ala Leu Asp Ile Val Ile Val Val Thr Leu Tyr 20 25 30 Asp Thr Ile Gly Ile Lys Phe His Asp Phe Gly Asn Ile Gly Trp Leu 35 40 45 Val Thr Gly Tyr Ala Leu Ser Asn Ala Val Phe Met Leu Leu Trp Gly 50 55 60 Arg Leu Ala Glu Ile Leu Gly Thr Lys Glu Cys Leu Met Ile Ser Val 65 70 75 80 Ile Val Phe Glu Ile Gly Ser Leu Ile Ser Ala Leu Ser Asn Ser Met 85 90 95 Ala Thr Leu Ile Ser Gly Arg Val Val Ala Gly Phe Gly Gly Ser Gly 100 105 110 Ile Glu Ser Leu Ala Phe Val Val Gly Thr Ser Ile Val Arg Glu Asn 115 120 125 His Arg Gly Ile Met Ile Thr Ala Leu Ala Ile Ser Tyr Val Ile Ala 130 135 140 Glu Gly Val Gly Pro Phe Ile Gly Gly Ala Phe Asn Glu His Leu Ser 145 150 155 160 Trp Arg Trp Cys Phe Tyr Ile Asn Leu Pro Ile Gly Ala Phe Ala Phe 165 170 175 Ile Ile Leu Ala Phe Cys Asn Thr Ser Gly Glu Pro His Gln Lys Met 180 185 190 Trp Leu Pro Ser Lys Ile Lys Lys Ile Met Asn Tyr Asp Tyr Gly Glu 195 200 205 Leu Leu Lys Ala Ser Phe Trp Lys Asn Thr Phe Glu Val Leu Val Phe 210 215 220 Lys Leu Asp Met Val Gly Ile Ile Leu Ser Ser Ala Gly Phe Thr Leu 225 230 235 240 Leu Met Leu Gly Leu Ser Phe Gly Gly Asn Asn Phe Pro Trp Asn Ser 245 250 255 Gly Ile Ile Ile Cys Phe Phe Thr Val Gly Pro Ile Leu Leu Leu Leu 260 265 270 Phe Cys Ala Tyr Asp Phe His Phe Leu Ser Leu Ser Gly Leu His Tyr 275 280 285 Asp Asn Lys Arg Ile Lys Pro Leu Leu Thr Trp Asn Ile Ala Ser Asn 290 295 300 Cys Gly Ile Phe Thr Ser Ser Ile Thr Gly Phe Leu Ser Cys Phe Ala 305 310 315 320 Tyr Glu Leu Gln Ser Ala Tyr Leu Val Gln Leu Tyr Gln Leu Val Phe 325 330 335 Lys Lys Lys Pro Thr Leu Ala Ser Ile His Leu Trp Glu Leu Ser Ile 340 345 350 Pro Ala Met Ile Ala Thr Met Ala Ile Ala Tyr Leu Asn Ser Lys Tyr 355 360 365 Gly Ile Ile Lys Pro Ala Ile Val Phe Gly Val Leu Cys Gly Ile Val 370 375 380 Gly Ser Gly Leu Phe Thr Leu Ile Asn Gly Glu Leu Ser Gln Ser Ile 385 390 395 400 Gly Tyr Ser Ile Leu Pro Gly Ile Ala Phe Gly Ser Ile Phe Gln Ala 405 410 415 Thr Leu Leu Ser Ser Gln Val Gln Ile Thr Ser Asp Asp Pro Asp Phe 420 425 430 Gln Asn Lys Phe Ile Glu Val Thr Ala Phe Asn Ser Phe Ala Lys Ser 435 440 445 Leu Gly Phe Ala Phe Gly Gly Asn Met Gly Ala Met Ile Phe Thr Ala 450 455 460 Ser Leu Lys Asn Gln Met Arg Ser Ser Gln Leu Asn Ile Pro Gln Phe 465 470 475 480 Thr Ser Val Glu Thr Leu Leu Ala Tyr Ser Thr Glu His Tyr Asp Gly 485 490 495 Pro Gln Ser Ser Leu Ser Lys Phe Ile Asn Thr Ala Ile His Asp Val 500 505 510 Phe Tyr Cys Ala Leu Gly Cys Tyr Ala Leu Ser Phe Phe Phe Gly Ile 515 520 525 Phe Thr Ser Ser Lys Lys Thr Thr Ile Ser Ala Lys Lys Gln Gln 530 535 540 <210> 132 <211> 514 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 132 Met Val Ala Glu Phe Gln Ile Ala Ser Ala Gln Ser Ser Ala Leu Thr 1 5 10 15 Ser Thr Glu Glu Glu His Cys Ser Ile Asn Ser Asp Lys Ala Ala Lys 20 25 30 Leu Asp Leu Glu Leu Thr Ser Glu Arg Lys Asn Asp Gly Lys Gln Ser 35 40 45 His Glu Val Thr Phe Asn Glu Asp Ile Ala Asp Pro Glu Asp Ile Ala 50 55 60 Arg His Met Ser Thr Ala Arg Arg Tyr Tyr Ile Ser Ser Leu Ile Thr 65 70 75 80 Phe Thr Ser Met Val Ile Thr Met Ile Ser Ser Ser Trp Thr Leu Pro 85 90 95 Ser Thr His Ile Ile Glu His Phe His Ile Ser His Glu Val Ser Thr 100 105 110 Leu Gly Ile Thr Leu Tyr Val Phe Gly Leu Gly Ile Gly Pro Leu Phe 115 120 125 Leu Ser Pro Leu Ser Glu Leu Tyr Gly Arg Arg Ile Thr Phe Leu Tyr 130 135 140 Ala Leu Thr Leu Ser Ile Ile Trp Gln Cys Leu Thr Ile Trp Ser Lys 145 150 155 160 Thr Ile Thr Gly Val Met Phe Gly Arg Phe Leu Ser Gly Phe Phe Gly 165 170 175 Ser Ala Phe Leu Ser Val Ala Gly Gly Ala Ile Ala Asp Ile Phe Asp 180 185 190 Lys Asp Gln Ile Gly Ile Pro Met Ala Ile Tyr Thr Thr Ser Ala Phe 195 200 205 Leu Gly Pro Ser Leu Gly Pro Ile Ile Gly Gly Ala Leu Tyr His Gln 210 215 220 Ser Tyr Lys Trp Thr Phe Ile Thr Leu Leu Ile Thr Ser Gly Cys Cys 225 230 235 240 Leu Val Met Ile Ile Phe Thr Ile Pro Glu Thr Tyr Lys Pro Met Leu 245 250 255 Leu Ile Arg Lys Ala Lys Arg Leu Arg Lys Glu Lys Asn Asp Gln Arg 260 265 270 Tyr Tyr Ala Val Leu Glu Val Thr Arg Glu Gln Thr Ser Leu Leu Ser 275 280 285 Ala Ile Phe Leu Ser Thr Lys Arg Pro Phe Gly Leu Leu Leu Arg Asp 290 295 300 Arg Met Met Gly Val Leu Cys Phe Tyr Thr Gly Leu Glu Leu Ala Ile 305 310 315 320 Ile Tyr Leu Tyr Phe Val Ala Phe Pro Tyr Val Phe Lys Lys Leu Tyr 325 330 335 Asn Phe Gly Pro Met Glu Ile Ala Cys Ser Tyr Ile Gly Ile Met Val 340 345 350 Gly Met Ile Leu Ser Ala Pro Thr Cys Leu Leu Phe Gln Lys Thr Phe 355 360 365 Glu Trp Arg Val Lys Arg Asn Asn Gly Val Lys Thr Pro Glu Met Arg 370 375 380 Phe Glu Pro Leu Phe Tyr Gly Ala Phe Leu Thr Pro Val Gly Leu Phe 385 390 395 400 Ile Phe Ala Phe Thr Cys Tyr Lys His Val His Trp Ile Ala Pro Ile 405 410 415 Ile Gly Ser Ala Ile Phe Gly Ser Gly Val Tyr Phe Val Phe Thr Gly 420 425 430 Val Phe Ala Tyr Thr Val Asp Ala Tyr Arg Arg Tyr Ala Ala Ser Gly 435 440 445 Met Ala Cys Asn Thr Phe Val Arg Cys Ile Met Ala Gly Val Phe Pro 450 455 460 Leu Phe Gly Leu Gln Met Tyr Lys Ser Met Gly Val Asn Trp Ala Gly 465 470 475 480 Phe Leu Leu Ala Met Val Thr Val Ala Met Ile Pro Val Pro Phe Leu 485 490 495 Phe Thr Lys Tyr Gly Ala Arg Leu Arg Ala Lys Ser Pro Tyr Ala Trp 500 505 510 Asp Asp <210> 133 <211> 542 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 133 Met Gly Asn Gln Ser Leu Val Val Leu Thr Glu Ser Lys Gly Glu Tyr 1 5 10 15 Glu Asn Glu Thr Glu Leu Pro Val Lys Lys Ser Ser Arg Asp Asn Asn 20 25 30 Ile Gly Glu Ser Leu Thr Ala Thr Ala Phe Thr Gln Ser Glu Asp Glu 35 40 45 Met Val Asp Ser Asn Gln Lys Trp Gln Asn Pro Asn Tyr Phe Lys Tyr 50 55 60 Ala Trp Gln Glu Tyr Leu Phe Ile Phe Thr Cys Met Ile Ser Gln Leu 65 70 75 80 Leu Asn Gln Ala Gly Thr Thr Gln Thr Leu Ser Ile Met Asn Ile Leu 85 90 95 Ser Asp Ser Phe Gly Ser Glu Gly Asn Ser Lys Ser Trp Leu Met Ala 100 105 110 Ser Phe Pro Leu Val Ser Gly Ser Phe Ile Leu Ile Ser Gly Arg Leu 115 120 125 Gly Asp Ile Tyr Gly Leu Lys Lys Met Leu Leu Val Gly Tyr Val Leu 130 135 140 Val Ile Ile Trp Ser Leu Ile Cys Gly Ile Thr Lys Tyr Ser Gly Ser 145 150 155 160 Asp Thr Phe Phe Ile Ile Ser Arg Ala Phe Gln Gly Leu Gly Ile Ala 165 170 175 Phe Val Leu Pro Asn Val Leu Gly Ile Ile Gly Asn Ile Tyr Val Gly 180 185 190 Gly Thr Phe Arg Lys Asn Ile Val Ile Ser Phe Val Gly Ala Met Ala 195 200 205 Pro Ile Gly Ala Thr Leu Gly Cys Leu Phe Ala Gly Leu Ile Gly Thr 210 215 220 Glu Asp Pro Lys Gln Trp Pro Trp Ala Phe Tyr Ala Tyr Ser Ile Ala 225 230 235 240 Ala Phe Ile Asn Phe Val Leu Ser Ile Tyr Ala Ile Pro Ser Thr Ile 245 250 255 Pro Thr Asn Ile His His Phe Ser Met Asp Trp Ile Gly Ser Val Leu 260 265 270 Gly Val Ile Gly Leu Ile Leu Leu Asn Phe Val Trp Asn Gln Ala Pro 275 280 285 Ile Ser Gly Trp Asn Gln Ala Tyr Ile Ile Val Ile Leu Ile Ile Ser 290 295 300 Val Ile Phe Leu Val Val Phe Ile Ile Tyr Glu Ile Arg Phe Ala Lys 305 310 315 320 Thr Pro Leu Leu Pro Arg Ala Val Ile Lys Asp Arg His Met Ile Gln 325 330 335 Ile Met Leu Ala Leu Phe Phe Gly Trp Gly Ser Phe Gly Ile Phe Thr 340 345 350 Phe Tyr Tyr Phe Gln Phe Gln Leu Asn Ile Arg Gln Tyr Thr Ala Leu 355 360 365 Trp Ala Gly Gly Thr Tyr Phe Met Phe Leu Ile Trp Gly Ile Ile Ala 370 375 380 Ala Leu Leu Val Gly Phe Thr Ile Lys Asn Val Ser Pro Ser Val Phe 385 390 395 400 Leu Phe Phe Ser Met Val Ala Phe Asn Val Gly Ser Ile Met Ala Ser 405 410 415 Val Thr Pro Val His Glu Thr Tyr Phe Arg Thr Gln Leu Gly Thr Met 420 425 430 Ile Ile Leu Ser Phe Gly Met Asp Leu Ser Phe Pro Ala Ser Ser Ile 435 440 445 Ile Phe Ser Asp Asn Leu Pro Met Glu Tyr Gln Gly Met Ala Gly Ser 450 455 460 Leu Val Asn Thr Val Val Asn Tyr Ser Met Ser Leu Cys Leu Gly Met 465 470 475 480 Gly Ala Thr Val Glu Thr Gln Val Asn Ser Asp Gly Lys His Leu Leu 485 490 495 Lys Gly Tyr Arg Gly Ala Gln Tyr Leu Gly Ile Gly Leu Ala Ser Leu 500 505 510 Ala Cys Met Ile Ser Gly Leu Tyr Met Val Glu Ser Phe Ile Lys Gly 515 520 525 Arg Arg Ala Arg Ala Ala Ala Glu Tyr Asp Cys Thr Val Ala 530 535 540 <210> 134 <211> 615 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 134 Met Ser Ser Ser Val Val Gly Ala Ser Ser Asn Lys Lys Ser Gly Ile 1 5 10 15 Arg Gln Ser Cys Glu Ile Ile Glu Arg Glu Arg His Ser Asn Asp Asp 20 25 30 Thr Tyr Ser Met Thr Ser Thr Phe Phe Lys Leu Lys Glu Asn Glu Ile 35 40 45 Met Ser Ala Gln Phe Asp Ser Leu Lys Tyr Lys Ile Leu Leu Ile Ser 50 55 60 Thr Ala Phe Val Cys Gly Phe Gly Ile Ser Leu Asp Tyr Thr Leu Arg 65 70 75 80 Ser Thr Tyr Thr Gly Tyr Ala Thr Asn Ser Tyr Ser Glu His Ser Leu 85 90 95 Leu Ser Thr Val Gln Val Ile Asn Ala Val Val Ser Val Gly Ser Gln 100 105 110 Val Val Tyr Ser Arg Leu Ser Asp His Phe Gly Arg Leu Arg Leu Phe 115 120 125 Leu Val Ala Thr Ile Phe Tyr Ile Met Gly Thr Ile Ile Gln Ser Gln 130 135 140 Ala Thr Arg Leu Thr Met Tyr Ala Ala Gly Ser Val Phe Tyr Asn Cys 145 150 155 160 Gly Tyr Val Gly Thr Asn Leu Leu Leu Thr Leu Ile Leu Ser Asp Phe 165 170 175 Ser Ser Leu Lys Trp Arg Met Phe Tyr Gln Tyr Ala Ser Tyr Trp Pro 180 185 190 Tyr Ile Ile Ile Pro Trp Ile Ser Gly Asn Ile Ile Thr Ala Ala Asn 195 200 205 Pro Gln Lys Asn Trp Ser Trp Asn Ile Ala Met Trp Ala Phe Ile Tyr 210 215 220 Pro Leu Ser Thr Leu Pro Ile Ile Phe Leu Ile Leu Tyr Met Lys Tyr 225 230 235 240 Lys Ser Ser Lys Thr Ala Glu Trp Arg Ser Leu Lys Glu Gln Ala Arg 245 250 255 Lys Glu Arg Thr Gly Gly Leu Phe Glu Asn Leu Val Phe Leu Phe Trp 260 265 270 Lys Leu Asp Ile Val Gly Ile Leu Leu Ile Thr Val Ser Leu Gly Cys 275 280 285 Ile Leu Val Pro Leu Thr Leu Ala Asn Glu Thr Ser Gln Lys Trp His 290 295 300 Asn Ser Lys Ile Ile Ala Thr Leu Val Ser Gly Gly Cys Leu Phe Phe 305 310 315 320 Ile Phe Leu Tyr Trp Glu Ala Lys Phe Ala Lys Ser Pro Leu Leu Pro 325 330 335 Phe Lys Leu Leu Ser Asp Arg Gly Ile Trp Ala Pro Leu Gly Val Thr 340 345 350 Phe Phe Asn Phe Phe Thr Phe Phe Ile Ser Cys Asp Tyr Leu Tyr Pro 355 360 365 Val Leu Leu Val Ser Met Lys Glu Ser Ser Thr Ser Ala Ala Arg Ile 370 375 380 Val Asn Leu Pro Asp Phe Val Ala Ala Thr Ala Ser Pro Phe Tyr Ser 385 390 395 400 Leu Leu Val Ala Lys Thr Arg Lys Leu Lys Leu Ser Val Ile Gly Gly 405 410 415 Cys Ala Ala Trp Met Val Cys Met Gly Leu Phe Tyr Lys Tyr Arg Gly 420 425 430 Gly Ser Gly Ser His Glu Gly Val Ile Ala Ala Ser Val Ile Met Gly 435 440 445 Leu Ser Gly Leu Leu Cys Ser Asn Ser Val Ile Val Ile Leu Gln Ala 450 455 460 Met Thr Thr His Ser Arg Met Ala Val Ile Thr Gly Ile Gln Tyr Thr 465 470 475 480 Phe Ser Lys Leu Gly Ala Ala Ile Gly Ala Ser Val Ser Gly Ala Ile 485 490 495 Trp Thr Gln Thr Met Pro Asn Gln Leu Tyr Lys Asn Leu Gly Asn Asp 500 505 510 Thr Leu Ala Glu Ile Ala Tyr Ala Ser Pro Tyr Thr Phe Ile Ser Asp 515 520 525 Tyr Pro Trp Gly Ser Pro Glu Arg Asp Ala Val Val Glu Ser Tyr Arg 530 535 540 Tyr Val Gln Arg Ile Ile Met Thr Val Gly Leu Ala Cys Thr Val Pro 545 550 555 560 Phe Phe Thr Phe Thr Met Phe Met Arg Asn Pro Glu Leu Ile Asp Lys 565 570 575 Ala Thr His Glu Glu Phe Thr Glu Asp Gly Leu Val Val Leu Pro Asp 580 585 590 Glu Glu Asn Ile Phe Ser Gln Ile Lys Ala Leu Phe Arg His Asn Arg 595 600 605 Ser Asn Lys Lys Ser Gly Cys 610 615 <210> 135 <211> 586 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 135 Met Asp Lys Tyr Thr Asn Arg Asp His Pro Asp Tyr Ile Pro Gly Thr 1 5 10 15 Phe Asn Ile Tyr Ser Ser Gln Asn Leu Glu Asn Gly Ile Ile Tyr Glu 20 25 30 Ser Lys Leu Lys Lys Thr Ser Ser Gly Val Val Leu Ile Pro Gln Pro 35 40 45 Ser Tyr Ser Pro Asn Asp Pro Leu Asn Trp Ser Ser Trp Arg Lys Leu 50 55 60 Ala His Phe Gly Leu Met Ala Phe Ile Thr Ala Phe Thr Ala Ala Thr 65 70 75 80 Ser Asn Asp Ala Gly Ala Ala Gln Asp Ser Leu Asn Glu Ile Tyr Gly 85 90 95 Ile Ser Tyr Asp Ser Met Asn Thr Gly Ala Gly Val Leu Phe Leu Gly 100 105 110 Ile Gly Trp Ser Thr Leu Phe Leu Ala Pro Phe Ala Asn Leu Tyr Gly 115 120 125 Arg Lys Ile Thr Tyr Ile Val Cys Thr Thr Leu Gly Leu Phe Gly Ala 130 135 140 Leu Trp Phe Ala Leu Ala Lys Arg Thr Ser Asp Thr Ile Trp Ser Gln 145 150 155 160 Leu Phe Val Gly Ile Ser Glu Ser Cys Ala Glu Ala Gln Val Gln Leu 165 170 175 Ser Leu Ser Asp Ile Phe Phe Gln His Gln Leu Gly Ser Val Leu Thr 180 185 190 Val Tyr Ile Met Cys Thr Ser Ile Gly Thr Phe Leu Gly Pro Leu Ile 195 200 205 Ala Gly Tyr Ile Ser Ala Phe Thr Asn Phe Arg Trp Val Gly Trp Val 210 215 220 Ala Val Ile Ile Ser Gly Gly Leu Leu Ile Thr Ile Ile Phe Gly Cys 225 230 235 240 Glu Glu Thr Tyr Phe Asp Arg Gly Gln Tyr Met Thr Pro Leu Thr Ser 245 250 255 Cys Gln Ser Gly Tyr Glu Asp Gly Thr Thr Leu Gln Asn Ser Asp Asn 260 265 270 Thr Ala Val Ser Arg Arg Lys Arg His Leu Asp Ala Lys Leu Ser Thr 275 280 285 Pro Gly Ala Met Gly Glu Lys Gly Val Asp Leu Ser Glu Thr Ala Glu 290 295 300 Phe Glu Val Asn Asn Glu Glu Glu Val Thr Ile Pro Glu Thr Arg Glu 305 310 315 320 Leu Ile Asp Gly Ser Lys Glu His Leu Lys Pro Tyr Pro Lys Arg Val 325 330 335 Ala Ile Leu Thr Lys Ala Thr Asn Leu Lys Gly Tyr Gly Phe Lys Gln 340 345 350 Tyr Phe Lys Tyr Leu Lys Ile Asn Leu Arg Met Phe Leu Phe Pro Pro 355 360 365 Val Trp Leu Ser Gly Met Phe Trp Gly Ile Gln Asp Val Phe Leu Thr 370 375 380 Phe Tyr Leu Thr Thr Gln Glu Ser Ala Tyr Tyr Glu Pro Pro Trp Asn 385 390 395 400 Tyr Ser Asp Phe Gly Val Ala Ile Met Asn Val Pro Thr Leu Ile Gly 405 410 415 Ala Val Ile Gly Cys Ile Cys Ala Gly Ile Val Ser Asp Tyr Phe Val 420 425 430 Leu Trp Met Ala Arg His Asn Arg Gly Ile Leu Glu Ala Glu Phe Arg 435 440 445 Leu Tyr Phe Ser Ile Ala Thr Ala Ile Ile Gly Pro Ala Gly Leu Leu 450 455 460 Met Phe Gly Ile Gly Thr Ala Arg Gln Trp Pro Trp Gln Ala Ile Tyr 465 470 475 480 Val Gly Leu Gly Phe Val Gly Phe Ala Trp Gly Cys Ser Gly Asp Ile 485 490 495 Ala Met Ala Tyr Leu Met Asp Cys Tyr Pro Asp Met Val Leu Glu Gly 500 505 510 Met Val Cys Thr Ala Ile Ile Asn Asn Thr Ile Ser Cys Ile Phe Thr 515 520 525 Phe Thr Cys Ser Asp Trp Leu Ala Ala Ser Gly Thr Glu Asn Thr Tyr 530 535 540 Ile Ala Leu Ala Val Ile Asn Phe Gly Ile Thr Ala Phe Ala Leu Pro 545 550 555 560 Met Tyr Tyr Tyr Gly Lys Arg Ile Arg Leu Trp Thr Lys Arg Trp Tyr 565 570 575 Leu Gln Ser Val Asn Leu Arg Asp Gly Val 580 585 <210> 136 <211> 515 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 136 Met Ser Thr Ser Ser Ser Val Thr Gln Lys Asn Leu Asp Thr Asn Ala 1 5 10 15 Glu Ala Leu Lys Lys Glu Asp Lys Val Leu Ser Glu Phe Asp Ile Gln 20 25 30 Asp Glu Arg Pro Lys Ser Leu Leu Trp Glu Ser Ala Phe Val Gly Val 35 40 45 Leu Cys Ser Ala Gln Leu Met Thr Gln Ala Gly Leu Gly Gln Ser Leu 50 55 60 Ala Pro Leu His Ile Ile Gly Asn Ser Phe Gly Thr Thr Asn Ala Gly 65 70 75 80 Gln Leu Ser Trp Phe Ala Ser Ala Tyr Ser Leu Thr Val Gly Thr Phe 85 90 95 Ile Leu Ile Ala Gly Arg Leu Gly Asp Ile Phe Gly His Lys Lys Phe 100 105 110 Phe Val Leu Gly Phe Phe Trp Tyr Ala Leu Trp Ser Leu Leu Ala Gly 115 120 125 Phe Ser Val Tyr Ser Asn Gln Ile Phe Phe Asp Cys Cys Arg Ala Phe 130 135 140 Gln Gly Met Gly Pro Ala Phe Leu Leu Pro Asn Ala Ile Ala Ile Leu 145 150 155 160 Gly Arg Thr Tyr Lys Pro Gly Arg Arg Lys Asn Met Val Phe Ser Leu 165 170 175 Phe Gly Ala Ser Ala Pro Gly Gly Phe Phe Leu Gly Ala Val Phe Ser 180 185 190 Ser Met Leu Gly Gln Leu Ala Trp Trp Pro Trp Ala Tyr Trp Ile Met 195 200 205 Gly Ile Ala Cys Phe Val Leu Ala Val Ala Gly Tyr Phe Val Ile Pro 210 215 220 His Thr Pro Met Pro Ser Arg Asp Ala Ser Ser Phe Lys Leu Leu Glu 225 230 235 240 Arg Ile Asp Phe Ala Gly Ser Val Thr Gly Val Val Gly Leu Ile Leu 245 250 255 Phe Asn Phe Ala Trp Asn Gln Gly Pro Val Val Gly Trp Gln Thr Pro 260 265 270 Tyr Thr Tyr Ala Leu Leu Ile Val Gly Thr Phe Phe Leu Val Ile Phe 275 280 285 Ala Tyr Ile Glu Ser Arg Ala Ala Phe Pro Leu Leu Pro Phe Ala Ala 290 295 300 Leu Ser Ser Asp Thr Ala Phe Val Leu Ser Cys Ile Ala Ala Gly Trp 305 310 315 320 Ala Ser Phe Gly Ile Trp Ile Phe Tyr Thr Trp Gln Phe Met Glu Asp 325 330 335 Ser Arg Gly Gln Thr Pro Leu Leu Ser Ser Ala Gln Phe Ser Pro Val 340 345 350 Ala Ile Ser Gly Phe Cys Ala Ala Val Thr Thr Gly Phe Leu Leu Ser 355 360 365 His Thr Pro Pro Ser Thr Val Met Leu Phe Ala Met Thr Ala Phe Thr 370 375 380 Val Gly Thr Ile Leu Ile Ala Thr Ala Pro Val His Gln Thr Tyr Trp 385 390 395 400 Ala Gln Thr Phe Val Ser Ile Ile Val Met Pro Trp Gly Met Asp Met 405 410 415 Ser Phe Pro Ala Ala Thr Ile Met Leu Ser Asp Ser Met Pro His Glu 420 425 430 His Gln Gly Leu Ala Ala Ser Leu Val Asn Thr Val Val Asn Tyr Ser 435 440 445 Ile Ser Ile Gly Leu Gly Ile Ala Gly Thr Ile Glu Ser Arg Val Asn 450 455 460 Asp Gly Gly Ala Lys Pro Leu Lys Gly Tyr Arg Cys Ser Trp Tyr Met 465 470 475 480 Gly Ile Gly Leu Ser Gly Leu Gly Ile Phe Val Ala Ala Thr Tyr Ala 485 490 495 Trp Ser Thr Phe Met Lys Ser Lys Lys Arg Ile Ser Glu Lys Gln His 500 505 510 Phe Ile Glu 515 <210> 137 <211> 540 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 137 Met Phe Ser Ile Phe Lys Lys Lys Thr Ser Val Gln Gly Thr Asp Ser 1 5 10 15 Glu Ile Asp Glu Lys Ile Thr Val Lys Ala Lys Asp Lys Val Val Val 20 25 30 Ser Thr Glu Asp Glu Glu Val Thr Thr Ile Val Ser Ser Thr Lys Ser 35 40 45 Thr Gln Val Thr Asn Asp Ser Pro Trp Gln Asp Pro Thr Tyr Phe Ser 50 55 60 Ser Phe Gly Lys Glu Leu Met Phe Ile Ala Thr Cys Met Leu Ala Gln 65 70 75 80 Leu Leu Asn Gln Ala Gly Gln Thr His Ala Leu Cys Ile Met Asn Val 85 90 95 Leu Ser Lys Ser Phe Asn Ser Glu Ala Asn Asn Gln Ala Trp Leu Met 100 105 110 Ala Ser Phe Pro Leu Ala Ala Gly Ser Phe Ile Leu Ile Ser Gly Arg 115 120 125 Leu Gly Asp Ile Tyr Gly Leu Lys Lys Met Leu Ile Val Gly Tyr Val 130 135 140 Ile Val Ile Val Trp Ser Ile Ile Ser Gly Leu Ser Lys Tyr Ser Asn 145 150 155 160 Ser Asp Ala Phe Phe Ile Thr Ser Arg Ala Phe Gln Gly Val Gly Ile 165 170 175 Ala Phe Ile Leu Pro Asn Ile Met Gly Leu Val Gly His Val Tyr Lys 180 185 190 Val Gly Ser Phe Arg Lys Asn Ile Val Ile Ser Phe Ile Gly Ala Cys 195 200 205 Ala Pro Thr Gly Gly Met Phe Gly Gly Leu Phe Gly Gly Leu Ile Val 210 215 220 Thr Glu Asp Pro Asn Gln Trp Pro Trp Val Phe Tyr Ala Phe Gly Ile 225 230 235 240 Ala Thr Phe Leu Ser Leu Leu Met Ala Trp Tyr Ser Ile Pro Asn Asn 245 250 255 Val Pro Thr Asn Ile His Gly Leu Ser Met Asp Trp Thr Gly Ser Ala 260 265 270 Leu Ala Ile Ile Gly Leu Ile Leu Phe Asn Phe Val Trp Asn Gln Ala 275 280 285 Pro Ile Val Gly Trp Asp Lys Pro Tyr Ile Ile Val Leu Leu Ile Ile 290 295 300 Ser Val Ile Phe Leu Val Ala Phe Phe Val Tyr Glu Ser Lys Tyr Ala 305 310 315 320 Glu Val Pro Leu Leu Pro Arg Ala Met Thr Lys Asn Arg His Met Ile 325 330 335 Met Ile Leu Leu Ala Val Phe Leu Gly Trp Gly Ser Phe Gly Ile Trp 340 345 350 Thr Phe Tyr Tyr Val Ser Phe Gln Leu Asn Leu Arg His Tyr Ser Pro 355 360 365 Val Trp Thr Gly Gly Thr Tyr Phe Val Phe Val Ile Phe Gly Ser Met 370 375 380 Ala Ala Phe Phe Val Ala Phe Ser Ile Lys Arg Leu Gly Pro Ala Leu 385 390 395 400 Leu Leu Cys Phe Ser Leu Met Ala Phe Asp Ala Gly Ser Ile Met Phe 405 410 415 Ser Val Leu Pro Val Glu Gln Ser Tyr Trp Lys Leu Asn Phe Ala Met 420 425 430 Gln Ala Ile Leu Cys Phe Gly Met Asp Leu Ser Phe Pro Ala Ser Ser 435 440 445 Ile Ile Leu Ser Asp Gly Leu Pro Met Gln Tyr Gln Gly Met Ala Gly 450 455 460 Ser Leu Val Asn Thr Val Ile Asn Tyr Ser Ala Ser Leu Cys Leu Gly 465 470 475 480 Met Gly Gly Thr Val Glu His Gln Ile Asn Lys Ser Gly Asn Asp Leu 485 490 495 Leu Lys Gly Tyr Arg Ala Ala Val Tyr Leu Gly Val Gly Leu Ala Ser 500 505 510 Leu Gly Val Val Ile Ser Val Thr Tyr Met Leu Glu Asn Leu Trp Asn 515 520 525 Arg His Arg Lys Ser Glu Asp Arg Ser Leu Glu Ala 530 535 540 <210> 138 <211> 606 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 138 Met Leu Glu Thr Asp His Ser Arg Asn Asp Asn Leu Asp Asp Lys Ser 1 5 10 15 Thr Val Cys Tyr Ser Glu Lys Thr Asp Ser Asn Val Glu Lys Ser Thr 20 25 30 Thr Ser Gly Leu Arg Arg Ile Asp Ala Val Asn Lys Val Leu Ser Asp 35 40 45 Tyr Ser Ser Phe Thr Ala Phe Gly Val Thr Phe Ser Ser Leu Lys Thr 50 55 60 Ala Leu Leu Val Ala Leu Phe Leu Gln Gly Tyr Cys Thr Gly Leu Gly 65 70 75 80 Gly Gln Ile Ser Gln Ser Ile Gln Thr Tyr Ala Ala Asn Ser Phe Gly 85 90 95 Lys His Ser Gln Val Gly Ser Ile Asn Thr Val Lys Ser Ile Val Ala 100 105 110 Ser Val Val Ala Val Pro Tyr Ala Arg Ile Ser Asp Arg Phe Gly Arg 115 120 125 Ile Glu Cys Trp Ile Phe Ala Leu Val Leu Tyr Thr Ile Gly Glu Ile 130 135 140 Ile Ser Ala Ala Thr Pro Thr Phe Ser Gly Leu Phe Ala Gly Ile Val 145 150 155 160 Ile Gln Gln Phe Gly Tyr Ser Gly Phe Arg Leu Leu Ala Thr Ala Leu 165 170 175 Thr Gly Asp Leu Ser Gly Leu Arg Asp Arg Thr Phe Ala Met Asn Ile 180 185 190 Phe Leu Ile Pro Val Ile Ile Asn Thr Trp Val Ser Gly Asn Ile Val 195 200 205 Ser Ser Val Ala Gly Asn Val Ala Pro Tyr Lys Trp Arg Trp Gly Tyr 210 215 220 Gly Ile Phe Cys Ile Ile Val Pro Ile Ser Thr Leu Ile Leu Val Leu 225 230 235 240 Pro Tyr Val Tyr Ala Gln Tyr Ile Ser Trp Arg Ser Gly Lys Leu Pro 245 250 255 Pro Leu Lys Leu Lys Glu Lys Gly Gln Thr Leu Arg Gln Thr Leu Trp 260 265 270 Lys Phe Ala Asp Asp Ile Asn Leu Ile Gly Val Ile Leu Phe Thr Ala 275 280 285 Phe Leu Val Leu Val Leu Leu Pro Leu Thr Ile Ala Gly Gly Ala Thr 290 295 300 Ser Lys Trp Arg Glu Gly His Ile Ile Ala Met Ile Val Val Gly Gly 305 310 315 320 Cys Leu Gly Phe Ile Phe Leu Ile Trp Glu Leu Lys Phe Ala Lys Asn 325 330 335 Pro Phe Ile Pro Arg Val Tyr Leu Gly Asp Pro Thr Ile Tyr Val Ala 340 345 350 Leu Leu Met Glu Phe Val Trp Arg Leu Gly Leu Gln Ile Glu Leu Glu 355 360 365 Tyr Leu Val Thr Val Leu Met Val Ala Phe Gly Glu Ser Thr Leu Ser 370 375 380 Ala Gln Arg Ile Ala Gln Leu Tyr Asn Phe Leu Gln Ser Cys Thr Asn 385 390 395 400 Ile Val Val Gly Ile Met Leu His Phe Tyr Pro His Pro Lys Val Phe 405 410 415 Val Val Ala Gly Ser Leu Leu Gly Val Ile Gly Met Gly Leu Leu Tyr 420 425 430 Lys Tyr Arg Val Val Tyr Asp Gly Ile Ser Gly Leu Ile Gly Ala Glu 435 440 445 Ile Val Val Gly Ile Ala Gly Gly Met Ile Arg Phe Pro Met Trp Thr 450 455 460 Leu Val His Ala Ser Thr Thr His Asn Glu Met Ala Thr Val Thr Gly 465 470 475 480 Leu Leu Met Ser Val Tyr Gln Ile Gly Asp Ala Val Gly Ala Ser Ile 485 490 495 Ala Gly Ala Ile Trp Thr Gln Arg Leu Ala Lys Glu Leu Ile Gln Arg 500 505 510 Leu Gly Ser Ser Leu Gly Met Ala Ile Tyr Lys Ser Pro Leu Asn Tyr 515 520 525 Leu Lys Lys Tyr Pro Ile Gly Ser Glu Val Arg Val Gln Met Ile Glu 530 535 540 Ser Tyr Ser Lys Ile Gln Arg Leu Leu Ile Ile Val Ser Ile Ser Phe 545 550 555 560 Ala Ala Phe Asn Ala Val Leu Cys Phe Phe Leu Arg Gly Phe Thr Val 565 570 575 Asn Lys Lys Gln Ser Leu Ser Ala Glu Glu Arg Glu Lys Glu Lys Leu 580 585 590 Lys Ile Lys Gln Gln Ser Trp Leu Arg Arg Val Ile Gly Tyr 595 600 605 <210> 139 <211> 627 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 139 Met Glu Ser Val His Ser Arg Asp Pro Val Lys Glu Glu Lys Lys His 1 5 10 15 Val Phe Met Gly Met Glu His Glu Leu Asn Pro Glu Thr His Asn Asp 20 25 30 Ser Asn Ser Asp Ser Tyr Gly Leu Pro Gln Leu Ser Glu Lys Tyr Asn 35 40 45 Ala Leu Arg Gln Asn Arg Ser Leu Ile Ile Gln Gln Thr Glu Ile Ile 50 55 60 Gly Ser Ala Tyr Asn Lys Trp Tyr Leu Gln Ala Ile Leu Leu Leu Ser 65 70 75 80 Ala Phe Ile Cys Gly Tyr Gly Tyr Gly Leu Asp Gly Asn Ile Arg Tyr 85 90 95 Ile Tyr Thr Gly Tyr Ala Thr Ser Ser Tyr Ser Glu His Ser Leu Leu 100 105 110 Ser Thr Ile Asn Val Ile Asn Ala Val Val Ser Ala Ala Ser Gln Ile 115 120 125 Ile Tyr Ala Arg Leu Ser Asp Val Phe Gly Arg Leu Tyr Leu Phe Ile 130 135 140 Ser Ala Val Ile Leu Tyr Val Val Gly Thr Ile Ile Gln Ser Gln Ala 145 150 155 160 Tyr Asp Val Gln Arg Tyr Ala Ala Gly Ala Ile Phe Tyr Asn Ala Gly 165 170 175 Tyr Val Gly Val Ile Leu Ile Leu Leu Ile Ile Leu Ser Asp Phe Ser 180 185 190 Ser Leu Lys Trp Arg Leu Leu Tyr Gln Phe Val Pro Thr Trp Pro Phe 195 200 205 Ile Ile Asn Thr Trp Ile Ala Gly Asn Ile Thr Ser Arg Ala Asn Pro 210 215 220 Val Val Asn Trp Ser Trp Asp Val Gly Met Trp Ala Phe Ile Phe Pro 225 230 235 240 Leu Ser Cys Val Pro Ile Val Leu Cys Met Leu His Met Gln Trp Arg 245 250 255 Ala Arg Lys Thr Pro Glu Trp His Ala Leu Lys Gly Gln Lys Ser Tyr 260 265 270 Tyr Gln Glu His Gly Phe Ile Lys Ile Leu Lys Gln Leu Phe Trp Met 275 280 285 Leu Asp Val Val Gly Val Leu Leu Met Gly Cys Ser Leu Gly Cys Ile 290 295 300 Leu Val Pro Leu Thr Leu Ala Gly Gly Val Lys Thr Thr Trp Asn Asp 305 310 315 320 Ser Arg Leu Ile Gly Pro Phe Val Leu Gly Phe Val Leu Ile Pro Ile 325 330 335 Leu Trp Ile Trp Glu Tyr Arg Phe Ala Arg Asp Pro Ile Leu Pro Tyr 340 345 350 Arg Leu Val Lys Asp Arg Ala Val Trp Ser Ser Met Gly Ile Ser Phe 355 360 365 Leu Ile Asp Phe Ile Tyr Tyr Met Ala Ala Asp Tyr Leu Tyr Thr Val 370 375 380 Met Ile Val Ala Val Asn Glu Ser Val Lys Ser Ala Thr Arg Ile Ala 385 390 395 400 Thr Leu Ser Ser Phe Val Ser Thr Val Ala Ser Pro Phe Phe Ala Leu 405 410 415 Leu Val Thr Arg Cys Thr Arg Leu Lys Pro Phe Ile Met Phe Gly Cys 420 425 430 Ala Leu Trp Met Val Ala Met Gly Leu Leu Tyr His Phe Arg Gly Gly 435 440 445 Ser Gln Ser His Ser Gly Ile Ile Gly Ala Leu Cys Val Trp Gly Val 450 455 460 Gly Thr Thr Leu Phe Thr Tyr Pro Val Thr Val Ser Val Gln Ser Ala 465 470 475 480 Val Ser His Glu Asn Met Ala Thr Val Thr Ala Leu Asn Tyr Thr Leu 485 490 495 Tyr Arg Ile Gly Ser Ala Val Gly Ser Ala Val Ser Gly Ala Ile Trp 500 505 510 Thr Gln Thr Leu Tyr Lys Gln Ile Leu Lys Arg Met Gly Asp Val Ala 515 520 525 Leu Ala Thr Thr Ala Tyr Glu Ser Pro Tyr Thr Phe Ile Glu Thr Tyr 530 535 540 Thr Trp Gly Thr Pro Gln Arg Asn Ala Leu Met Asn Ala Tyr Lys Tyr 545 550 555 560 Val Gln Arg Leu Glu Thr Ile Val Ala Leu Val Phe Cys Val Pro Leu 565 570 575 Ile Ala Phe Ser Leu Cys Leu Arg Asp Pro Lys Leu Thr Asp Thr Val 580 585 590 Ala Val Glu Tyr Ile Glu Asp Gly Glu Tyr Val Asp Thr Lys Asp Asn 595 600 605 Asp Pro Ile Leu Asp Trp Phe Glu Lys Leu Pro Ser Lys Phe Thr Phe 610 615 620 Lys Arg Glu 625 <210> 140 <211> 620 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 140 Met Ile Glu Val Pro Glu Asp Asn Arg Ser Ser Gln Thr Lys Arg Lys 1 5 10 15 Asn Thr Glu Lys Asn Cys Asn Glu Leu Met Val Asp Glu Lys Met Asp 20 25 30 Asp Asp Ser Ser Pro Arg Asp Glu Met Lys Asp Lys Leu Lys Gly Thr 35 40 45 Lys Ser Leu Ile Ile Arg Lys Ser Glu Leu Met Ala Lys Lys Tyr Asp 50 55 60 Thr Trp Gln Leu Lys Ala Ile Phe Leu Phe Ser Ala Phe Ile Cys Thr 65 70 75 80 Phe Ala Tyr Gly Leu Asp Ser Ser Ile Arg Gly Thr Tyr Met Thr Tyr 85 90 95 Ala Met Asn Ser Tyr Ser Ala His Ser Leu Ile Ser Thr Val Ser Val 100 105 110 Ile Val Leu Met Ile Ser Ala Val Ser Gln Val Ile Phe Gly Gly Leu 115 120 125 Ser Asp Ile Phe Gly Arg Leu Thr Leu Phe Leu Val Ser Ile Val Leu 130 135 140 Tyr Ile Val Gly Thr Ile Ile Gln Ser Gln Ala Tyr Asp Val Gln Arg 145 150 155 160 Tyr Ala Ala Gly Ala Val Phe Tyr Tyr Val Gly Leu Val Gly Val Met 165 170 175 Leu Gln Val Val Leu Met Leu Ser Asp Asn Ser Ser Leu Lys Trp Arg 180 185 190 Leu Phe Tyr Thr Leu Ile Pro Ser Trp Pro Ser Ile Ile Thr Thr Trp 195 200 205 Val Ser Gly Ser Val Val Glu Ala Ala Asn Pro Leu Glu Asn Trp Ser 210 215 220 Trp Asn Ile Ala Met Trp Ala Phe Ile Phe Pro Leu Cys Cys Ile Pro 225 230 235 240 Leu Ile Leu Cys Met Leu His Met Arg Trp Lys Val Arg Asn Asp Val 245 250 255 Glu Trp Lys Glu Leu Gln Asp Glu Lys Ser Tyr Tyr Gln Thr His Gly 260 265 270 Leu Val Gln Met Leu Val Gln Leu Phe Trp Lys Leu Asp Val Val Gly 275 280 285 Val Leu Leu Phe Thr Ala Gly Val Gly Cys Ile Leu Val Pro Leu Thr 290 295 300 Leu Ala Gly Gly Val Ser Thr Asn Trp Arg Asn Ser Lys Ile Ile Gly 305 310 315 320 Pro Phe Val Leu Gly Phe Val Leu Val Pro Gly Phe Ile Tyr Trp Glu 325 330 335 Ser Arg Leu Ala Leu Val Pro Phe Ala Pro Phe Lys Leu Leu Lys Asp 340 345 350 Arg Gly Val Trp Ala Pro Leu Gly Ile Met Phe Phe Ile Cys Phe Val 355 360 365 Tyr Gln Met Ala Ala Gly Tyr Leu Tyr Thr Ile Leu Val Val Ala Val 370 375 380 Asp Glu Ser Ala Ser Ser Ala Thr Arg Ile Ile Asn Leu Tyr Ser Phe 385 390 395 400 Val Thr Ala Val Val Ala Pro Phe Leu Gly Leu Ile Val Thr Arg Ser 405 410 415 Ser Arg Leu Lys Ser Tyr Ile Ile Phe Gly Gly Ser Leu Tyr Phe Ile 420 425 430 Thr Met Gly Leu Phe Tyr Arg Tyr Arg Ser Gly Gln Asp Ala Asp Gly 435 440 445 Gly Ile Ile Ala Gly Met Val Ile Trp Gly Leu Ser Ser Cys Leu Phe 450 455 460 Asp Tyr Pro Thr Ile Val Ser Ile Gln Ser Val Thr Ser His Glu Asn 465 470 475 480 Met Ala Thr Val Thr Ala Leu Asn Tyr Thr Val Phe Arg Ile Gly Gly 485 490 495 Ala Val Ala Ala Ala Ile Ser Gly Ala Ile Trp Thr Gln Ser Leu Tyr 500 505 510 Pro Lys Leu Leu His Tyr Met Gly Asp Ala Asp Leu Ala Thr Ala Ala 515 520 525 Tyr Gly Ser Pro Leu Thr Phe Ile Leu Ser Asn Pro Trp Gly Thr Pro 530 535 540 Val Arg Ser Ala Met Val Glu Ala Tyr Arg His Val Gln Lys Tyr Glu 545 550 555 560 Val Ile Val Ala Leu Val Phe Ser Ala Pro Met Phe Leu Leu Thr Phe 565 570 575 Cys Val Arg Asp Pro Arg Leu Thr Glu Asp Phe Ala Gln Lys Leu Pro 580 585 590 Asp Arg Glu Tyr Val Gln Thr Lys Glu Asp Asp Pro Ile Asn Asp Trp 595 600 605 Ile Ala Lys Arg Phe Ala Lys Ala Leu Gly Arg Ser 610 615 620 <210> 141 <211> 458 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 141 Met Val Ala Asn Trp Val Leu Ala Leu Thr Arg Gln Phe Asp Pro Phe 1 5 10 15 Met Phe Met Met Val Met Gly Val Gly Ile Ser Ser Asn Ile Leu Tyr 20 25 30 Ser Phe Pro Tyr Pro Ala Arg Trp Leu Arg Ile Cys Ser Tyr Ile Met 35 40 45 Phe Ala Ile Ala Cys Leu Ile Phe Ile Ala Val Gln Ala Leu Gln Ile 50 55 60 Leu His Leu Ile Val Tyr Ile Lys Glu Lys Ser Phe Arg Glu Tyr Phe 65 70 75 80 Asn Asp Phe Phe Arg Asn Met Lys His Asn Leu Phe Trp Gly Thr Tyr 85 90 95 Pro Met Gly Leu Val Thr Ile Ile Asn Phe Leu Gly Ala Leu Ser Lys 100 105 110 Ala Asn Thr Thr Lys Ser Pro Thr Asn Ala Arg Asn Leu Met Ile Phe 115 120 125 Val Tyr Val Leu Trp Trp Tyr Asp Leu Ala Val Cys Leu Val Ile Ala 130 135 140 Trp Gly Ile Ser Phe Leu Ile Trp His Asp Tyr Tyr Pro Leu Glu Gly 145 150 155 160 Ile Gly Asn Tyr Pro Ser Tyr Asn Ile Lys Met Ala Ser Glu Asn Met 165 170 175 Lys Ser Val Leu Leu Leu Asp Ile Ile Pro Leu Val Val Val Ala Ser 180 185 190 Ser Cys Gly Thr Phe Thr Met Ser Glu Ile Phe Phe His Ala Phe Asn 195 200 205 Arg Asn Ile Gln Leu Ile Thr Leu Val Ile Cys Ala Leu Thr Trp Leu 210 215 220 His Ala Ile Ile Phe Val Phe Ile Leu Ile Ala Ile Tyr Phe Trp Ser 225 230 235 240 Leu Tyr Ile Asn Lys Ile Pro Pro Met Thr Gln Val Phe Thr Leu Phe 245 250 255 Leu Leu Leu Gly Pro Met Gly Gln Gly Ser Phe Gly Val Leu Leu Leu 260 265 270 Thr Asp Asn Ile Lys Lys Tyr Ala Gly Lys Tyr Tyr Pro Thr Asp Asn 275 280 285 Ile Thr Arg Glu Gln Glu Ile Leu Thr Ile Ala Val Pro Trp Cys Phe 290 295 300 Lys Ile Leu Gly Met Val Ser Ala Met Ala Leu Leu Ala Met Gly Tyr 305 310 315 320 Phe Phe Thr Val Ile Ser Val Val Ser Ile Leu Ser Tyr Tyr Asn Lys 325 330 335 Lys Glu Ile Glu Asn Glu Thr Gly Lys Val Lys Arg Val Tyr Thr Phe 340 345 350 His Lys Gly Phe Trp Gly Met Thr Phe Pro Met Gly Thr Met Ser Leu 355 360 365 Gly Asn Glu Glu Leu Tyr Val Gln Tyr Asn Gln Tyr Val Pro Leu Tyr 370 375 380 Ala Phe Arg Val Leu Gly Thr Ile Tyr Gly Gly Val Cys Val Cys Trp 385 390 395 400 Ser Ile Leu Cys Leu Leu Cys Thr Leu His Glu Tyr Ser Lys Lys Met 405 410 415 Leu His Ala Ala Arg Lys Ser Ser Leu Phe Ser Glu Ser Gly Thr Glu 420 425 430 Lys Thr Thr Val Ser Pro Tyr Asn Ser Ile Glu Ser Val Glu Glu Ser 435 440 445 Asn Ser Ala Leu Asp Phe Thr Arg Leu Ala 450 455 <210> 142 <211> 598 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 142 Met Ser Phe Gly Ser Lys Val Ser Arg Ala Leu Arg Phe Leu Glu Ile 1 5 10 15 Pro Val Lys Asp Arg Ala Ser Val Ser Phe Leu Lys Asn Pro Asp Leu 20 25 30 Gln Pro Ile Lys Ser Ala Asn Gln Thr Trp Gly Phe Trp Ser Asn Phe 35 40 45 Ala Tyr Trp Gly Val Met Ser Phe Ser Val Gly Thr Trp Met Ser Ala 50 55 60 Ser Ser Ala Leu Gly Val Gly Leu Ser Tyr Pro Glu Thr Ile Gly Thr 65 70 75 80 Phe Ile Val Gly Asp Val Leu Thr Ile Ile Phe Thr Leu Ala Asn Ser 85 90 95 Cys Pro Gly Tyr Asp Trp Lys Val Gly Phe Thr Leu Ala Gln Arg Phe 100 105 110 Val Phe Gly Ile Tyr Gly Ser Ala Phe Gly Ile Ile Ile Arg Ile Leu 115 120 125 Met Ser Ile Val Asn Tyr Gly Ser Asn Ala Trp Val Gly Gly Leu Cys 130 135 140 Ile Asn Met Ile Leu Asp Ser Trp Ser His His Tyr Leu His Leu Pro 145 150 155 160 Asn Thr Leu Ser Ser Lys Val Ala Met Thr Thr Lys Glu Leu Ile Gly 165 170 175 Phe Ile Ile Phe His Val Leu Thr Ala Phe Cys Tyr Leu Met Lys Pro 180 185 190 Tyr His Met Asn Tyr Ile Leu Ile Trp Ser Cys Val Ala Thr Phe Phe 195 200 205 Ser Met Leu Gly Met Val Ile Tyr Leu Ala Lys Gln Ala His Gly Val 210 215 220 Gly Glu Leu Phe Thr Ser Thr Lys Ser Thr Ala Thr Gly Ser Thr Lys 225 230 235 240 Ala Trp Ala Trp Val Tyr Met Ile Ser Tyr Trp Phe Gly Ser Val Ser 245 250 255 Pro Gly Ser Thr Asn Gln Ser Asp Tyr Ser Arg Phe Gly Ser Ser Asn 260 265 270 Trp Ala Ile Trp Ala Gly Thr Ile Cys Ala Leu Leu Ile Pro Thr Thr 275 280 285 Leu Ile Pro Val Phe Gly Val Ile Gly Ala Ser Thr Cys Asp Lys Leu 290 295 300 Tyr Gly Glu Gln Tyr Trp Met Pro Met Asp Ile Phe Asn His Trp Leu 305 310 315 320 Thr Thr Asn Tyr Ser Ala Gly Ala Arg Ala Gly Ala Phe Phe Cys Gly 325 330 335 Leu Ser Phe Val Leu Ser Gln Met Ser Tyr Thr Ile Ser Asn Cys Gly 340 345 350 Phe Ala Ser Gly Met Asp Leu Ala Gly Leu Leu Pro Lys Tyr Val Asp 355 360 365 Ile Lys Arg Gly Ala Leu Phe Ala Ala Cys Val Ser Trp Ala Cys Leu 370 375 380 Pro Trp Asn Phe Tyr Asn Ser Ser Ser Thr Phe Leu Thr Val Met Ser 385 390 395 400 Ser Phe Gly Val Val Met Thr Pro Ile Ile Ser Val Met Ile Cys Asp 405 410 415 Asn Phe Leu Ile Arg Lys Arg Gln Tyr Ser Ile Thr Asn Ala Phe Ile 420 425 430 Leu Lys Gly Glu Tyr Tyr Phe Thr Lys Gly Val Asn Trp Arg Ala Ile 435 440 445 Val Ala Trp Val Cys Gly Met Thr Pro Gly Leu Pro Gly Ile Ala Trp 450 455 460 Glu Val Asn Asn Asp Tyr Phe His Asn Thr Gly Ile Val Asn Phe Phe 465 470 475 480 Tyr Gly Asp Ser Phe Phe Ser Phe Leu Ile Ser Phe Phe Val Tyr Trp 485 490 495 Gly Leu Cys Leu Leu Phe Pro Phe Lys Ile Thr Val Lys His Asp Asp 500 505 510 Lys Asp Tyr Tyr Gly Ala Phe Thr Asp Glu Glu Ala Arg Lys Lys Gly 515 520 525 Met Val Pro Tyr Ser Glu Ile Ser Glu Glu Glu Ile Arg Ala Tyr Thr 530 535 540 Leu Gly Glu Gly Tyr Thr Thr Gly His Glu Tyr Arg Pro Glu Gly Ser 545 550 555 560 Asp Asp Glu Ile Pro Glu Leu Val Lys Thr Ser Ser Glu Asn Thr Asn 565 570 575 Glu Phe Glu Ile Val His His Lys Asn Asn Glu Lys Gln Ser Ser Thr 580 585 590 Ala Ser Glu Lys Ala Ala 595 <210> 143 <211> 579 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 143 Met Asn Arg Asp Asn Met Asp Thr Thr Lys Arg Lys Glu Asp His Thr 1 5 10 15 Lys His Thr Thr Asp Val Ile Glu Phe Tyr Glu Glu Gly Thr Ala Ala 20 25 30 Ser Ser Leu Asn Ile Ala Thr Glu Lys Ala Asn Ser Ser Pro Ser Ile 35 40 45 Leu Arg Arg Ile Ile Asn Arg Ala Ala Trp Leu Ser Lys Lys Val Asp 50 55 60 Ala Met Gly Val Glu Ser Thr Gly Ile Gln Arg Ile Ser Pro Tyr Glu 65 70 75 80 Arg Gly Thr Ser Lys Lys Gln Phe Leu His Val Ala Gly Leu Trp Leu 85 90 95 Ser Ala Thr Gly Gly Leu Ser Ser Met Ser Ser Phe Leu Leu Gly Pro 100 105 110 Leu Leu Phe Gly Leu Ser Phe Arg Glu Ser Val Ala Ser Ser Leu Ile 115 120 125 Ser Val Thr Ile Gly Cys Leu Ile Ala Ala Tyr Cys Ser Ile Met Gly 130 135 140 Pro Gln Ser Gly Cys Arg Gln Met Val Thr Ala Arg Tyr Leu Phe Gly 145 150 155 160 Trp Trp Phe Val Lys Leu Val Ala Leu Ala Ser Ile Ile Gly Val Met 165 170 175 Gly Trp Ser Val Val Asn Ser Val Val Gly Gly Glu Met Leu Ala Ala 180 185 190 Ile Ser Asn Asp Lys Val Pro Leu Trp Val Gly Ile Val Ile Val Thr 195 200 205 Val Cys Ser Phe Leu Val Ala Ile Phe Gly Ile Lys Gln Val Ile Lys 210 215 220 Val Glu Thr Tyr Leu Ser Val Pro Val Leu Thr Ala Phe Leu Leu Leu 225 230 235 240 Tyr Ile Ser Ser Ser Asp Lys Tyr Ser Phe Val Asn Ala Tyr Val Ser 245 250 255 Lys Gly Asn Leu Asp Ser Ser Thr Arg Lys Gly Asn Trp Met Ser Phe 260 265 270 Phe Ser Leu Cys Tyr Ser Ile Thr Ala Thr Trp Gly Ser Ile Thr Ala 275 280 285 Asp Tyr Tyr Ile Leu Phe Pro Glu Asp Thr Pro Tyr Ile Gln Ile Phe 290 295 300 Cys Leu Thr Phe Phe Gly Thr Phe Leu Pro Thr Cys Phe Val Gly Ile 305 310 315 320 Leu Gly Leu Leu Leu Ala Ser Val Ala Met Ser Tyr Lys Pro Trp Ser 325 330 335 Val Glu Tyr Asp Ser His Gly Met Gly Gly Leu Leu Trp Ala Gly Phe 340 345 350 Gln Arg Trp Asn Gly Phe Gly Lys Phe Cys Val Val Val Leu Val Phe 355 360 365 Ser Leu Val Ser Asn Asn Ile Ile Asn Thr Tyr Ser Ala Ala Phe Ser 370 375 380 Ile Gln Leu Ser Ser Val Phe Cys Ala Lys Ile Pro Arg Trp Phe Trp 385 390 395 400 Ser Ile Val Cys Thr Ile Ile Cys Leu Val Cys Ala Leu Ile Gly Arg 405 410 415 Asn His Phe Ser Thr Ile Leu Gly Asn Phe Leu Pro Met Ile Gly Tyr 420 425 430 Trp Ile Ser Met Tyr Phe Ile Leu Leu Phe Glu Glu Asn Leu Val Phe 435 440 445 Arg Arg Phe Phe Leu His Leu Tyr Thr Lys Glu Phe Pro Thr Val Thr 450 455 460 Gly Glu Ile Asn Gly Pro Glu Leu Val Gly Ser Ser Lys Glu Val Glu 465 470 475 480 Lys Asp Ala Val Thr Asn Ile His Leu Leu Lys Arg Lys His Lys Val 485 490 495 Thr Lys His Arg Tyr Asn Trp Asp Lys Trp Glu Asp Tyr Glu Val Leu 500 505 510 Thr His Gly Tyr Ala Ala Thr Phe Ala Phe Ile Val Gly Val Ala Gly 515 520 525 Val Val Val Gly Met Ala Gln Ala Tyr Trp Ile Gly Pro Ile Ala Ala 530 535 540 Lys Phe Gly Glu Tyr Gly Gly Asp Val Ala Met Trp Leu Ser Met Ala 545 550 555 560 Phe Ser Gly Val Val Tyr Pro Pro Cys Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Lys 565 570 575 Phe Gly Arg <210> 144 <211> 593 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 144 Met Tyr Ser Ile Val Lys Glu Ile Ile Val Asp Pro Tyr Lys Arg Leu 1 5 10 15 Lys Trp Gly Phe Ile Pro Val Lys Arg Gln Val Glu Asp Leu Pro Asp 20 25 30 Asp Leu Asn Ser Thr Glu Ile Val Thr Ile Ser Asn Ser Ile Gln Ser 35 40 45 His Glu Thr Ala Glu Asn Phe Ile Thr Thr Thr Ser Glu Lys Asp Gln 50 55 60 Leu His Phe Glu Thr Ser Ser Tyr Ser Glu His Lys Asp Asn Val Asn 65 70 75 80 Val Thr Arg Ser Tyr Glu Tyr Arg Asp Glu Ala Asp Arg Pro Trp Trp 85 90 95 Arg Phe Phe Asp Glu Gln Glu Tyr Arg Ile Asn Glu Lys Glu Arg Ser 100 105 110 His Asn Lys Trp Tyr Ser Trp Phe Lys Gln Gly Thr Ser Phe Lys Glu 115 120 125 Lys Lys Leu Leu Ile Lys Leu Asp Val Leu Leu Ala Phe Tyr Ser Cys 130 135 140 Ile Ala Tyr Trp Val Lys Tyr Leu Asp Thr Val Asn Ile Asn Asn Ala 145 150 155 160 Tyr Val Ser Gly Met Lys Glu Asp Leu Gly Phe Gln Gly Asn Asp Leu 165 170 175 Val His Thr Gln Val Met Tyr Thr Val Gly Asn Ile Ile Phe Gln Leu 180 185 190 Pro Phe Leu Ile Tyr Leu Asn Lys Leu Pro Leu Asn Tyr Val Leu Pro 195 200 205 Ser Leu Asp Leu Cys Trp Ser Leu Leu Thr Val Gly Ala Ala Tyr Val 210 215 220 Asn Ser Val Pro His Leu Lys Ala Ile Arg Phe Phe Ile Gly Ala Phe 225 230 235 240 Glu Ala Pro Ser Tyr Leu Ala Tyr Gln Tyr Leu Phe Gly Ser Phe Tyr 245 250 255 Lys His Asp Glu Met Val Arg Arg Ser Ala Phe Tyr Tyr Leu Gly Gln 260 265 270 Tyr Ile Gly Ile Leu Ser Ala Gly Gly Ile Gln Ser Ala Val Tyr Ser 275 280 285 Ser Leu Asn Gly Val Asn Gly Leu Glu Gly Trp Arg Trp Asn Phe Ile 290 295 300 Ile Asp Ala Ile Val Ser Val Val Val Gly Leu Ile Gly Phe Tyr Ser 305 310 315 320 Leu Pro Gly Asp Pro Tyr Asn Cys Tyr Ser Ile Phe Leu Thr Asp Asp 325 330 335 Glu Ile Arg Leu Ala Arg Lys Arg Leu Lys Glu Asn Gln Thr Gly Lys 340 345 350 Ser Asp Phe Glu Thr Lys Val Phe Asp Ile Lys Leu Trp Lys Thr Ile 355 360 365 Phe Ser Asp Trp Lys Ile Tyr Ile Leu Thr Leu Trp Asn Ile Phe Cys 370 375 380 Trp Asn Asp Ser Asn Val Ser Ser Gly Ala Tyr Leu Leu Trp Leu Lys 385 390 395 400 Ser Leu Lys Arg Tyr Ser Ile Pro Lys Leu Asn Gln Leu Ser Met Ile 405 410 415 Thr Pro Gly Leu Gly Met Val Tyr Leu Met Leu Thr Gly Ile Ile Ala 420 425 430 Asp Lys Leu His Ser Arg Trp Phe Ala Ile Ile Phe Thr Gln Val Phe 435 440 445 Asn Ile Ile Gly Asn Ser Ile Leu Ala Ala Trp Asp Val Ala Glu Gly 450 455 460 Ala Lys Trp Phe Ala Phe Met Leu Gln Cys Phe Gly Trp Ala Met Ala 465 470 475 480 Pro Val Leu Tyr Ser Trp Gln Asn Asp Ile Cys Arg Arg Asp Ala Gln 485 490 495 Thr Arg Ala Ile Thr Leu Val Thr Met Asn Ile Met Ala Gln Ser Ser 500 505 510 Thr Ala Trp Ile Ser Val Leu Val Trp Lys Thr Glu Glu Ala Pro Arg 515 520 525 Tyr Leu Lys Gly Phe Thr Phe Thr Ala Cys Ser Ala Phe Cys Leu Ser 530 535 540 Ile Trp Thr Phe Val Val Leu Tyr Phe Tyr Lys Arg Asp Glu Arg Asn 545 550 555 560 Asn Ala Lys Lys Asn Gly Ile Val Leu Tyr Asn Ser Lys His Gly Val 565 570 575 Glu Lys Pro Thr Ser Lys Asp Val Glu Thr Leu Ser Val Ser Asp Glu 580 585 590 Lys <210> 145 <211> 628 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 145 Met Asp Pro Gly Ile Ala Asn His Thr Leu Pro Glu Glu Phe Glu Glu 1 5 10 15 Val Val Val Pro Glu Met Leu Glu Lys Glu Val Gly Ala Lys Val Asp 20 25 30 Val Lys Pro Thr Leu Thr Thr Ser Ser Pro Ala Pro Ser Tyr Ile Glu 35 40 45 Leu Ile Asp Pro Gly Val His Asn Ile Glu Ile Tyr Ala Glu Met Tyr 50 55 60 Asn Arg Pro Ile Tyr Arg Val Ala Leu Phe Phe Ser Leu Phe Leu Ile 65 70 75 80 Ala Tyr Ala Tyr Gly Leu Asp Gly Asn Ile Arg Tyr Thr Phe Gln Ala 85 90 95 Tyr Ala Thr Ser Ser Tyr Ser Gln His Ser Leu Leu Ser Thr Val Asn 100 105 110 Cys Ile Lys Thr Val Ile Ala Ala Val Gly Gln Ile Phe Phe Ala Arg 115 120 125 Leu Ser Asp Ile Phe Gly Arg Phe Ser Ile Met Ile Val Ser Ile Ile 130 135 140 Phe Tyr Ser Met Gly Thr Ile Ile Glu Ser Gln Ala Val Asn Ile Thr 145 150 155 160 Arg Phe Ala Val Gly Gly Cys Phe Tyr Gln Leu Gly Leu Thr Gly Ile 165 170 175 Ile Leu Ile Leu Glu Val Ile Ala Ser Asp Phe Ser Asn Leu Asn Trp 180 185 190 Arg Leu Leu Ala Leu Phe Ile Pro Ala Leu Pro Phe Ile Ile Asn Thr 195 200 205 Trp Ile Ser Gly Asn Val Thr Ser Ala Ile Asp Ala Asn Trp Lys Trp 210 215 220 Gly Ile Gly Met Trp Ala Phe Ile Leu Pro Leu Ala Cys Ile Pro Leu 225 230 235 240 Gly Ile Cys Met Leu His Met Arg Tyr Leu Ala Arg Lys His Ala Lys 245 250 255 Asp Arg Leu Lys Pro Glu Phe Glu Ala Leu Asn Lys Leu Lys Trp Lys 260 265 270 Ser Phe Cys Ile Asp Ile Ala Phe Trp Lys Leu Asp Ile Ile Gly Met 275 280 285 Leu Leu Ile Thr Val Phe Phe Gly Cys Val Leu Val Pro Phe Thr Leu 290 295 300 Ala Gly Gly Leu Lys Glu Glu Trp Lys Thr Ala His Ile Ile Val Pro 305 310 315 320 Glu Val Ile Gly Trp Val Val Val Leu Pro Leu Tyr Met Leu Trp Glu 325 330 335 Ile Lys Tyr Ser Arg His Pro Leu Thr Pro Trp Asp Leu Ile Gln Asp 340 345 350 Arg Gly Ile Phe Phe Ala Leu Leu Ile Ala Phe Phe Ile Asn Phe Asn 355 360 365 Trp Tyr Met Gln Gly Asp Tyr Met Tyr Thr Val Leu Val Val Ala Val 370 375 380 His Glu Ser Ile Lys Ser Ala Thr Arg Ile Thr Ser Leu Tyr Ser Phe 385 390 395 400 Val Ser Val Ile Val Gly Thr Ile Leu Gly Phe Ile Leu Ile Lys Val 405 410 415 Arg Arg Thr Lys Pro Phe Ile Ile Phe Gly Ile Ser Cys Trp Ile Val 420 425 430 Ser Phe Gly Leu Leu Val His Tyr Arg Gly Asp Ser Gly Ala His Ser 435 440 445 Gly Ile Ile Gly Ser Leu Cys Leu Leu Gly Phe Gly Ala Gly Ser Phe 450 455 460 Thr Tyr Val Thr Gln Ala Ser Ile Gln Ala Ser Ala Lys Thr His Ala 465 470 475 480 Arg Met Ala Val Val Thr Ser Leu Tyr Leu Ala Thr Tyr Asn Ile Gly 485 490 495 Ser Ala Phe Gly Ser Ser Val Ser Gly Ala Val Trp Thr Asn Ile Leu 500 505 510 Pro Lys Glu Ile Ser Lys Arg Ile Ser Asp Pro Thr Leu Ala Ala Gln 515 520 525 Ala Tyr Gly Ser Pro Phe Thr Phe Ile Thr Thr Tyr Thr Trp Gly Thr 530 535 540 Pro Glu Arg Ile Ala Leu Val Met Ser Tyr Arg Tyr Val Gln Lys Ile 545 550 555 560 Leu Cys Ile Ile Gly Leu Val Phe Cys Phe Pro Leu Leu Gly Cys Ala 565 570 575 Phe Met Leu Arg Asn His Lys Leu Thr Asp Ser Ile Ala Leu Glu Gly 580 585 590 Asn Asp His Leu Glu Ser Lys Asn Thr Phe Glu Ile Glu Glu Lys Glu 595 600 605 Glu Ser Phe Leu Lys Asn Lys Phe Phe Thr His Phe Thr Ser Ser Lys 610 615 620 Asp Arg Lys Asp 625 <210> 146 <211> 572 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 146 Met Gly Ser Glu Pro Phe Gln Lys Lys Asn Leu Gly Leu Gln Ile Asn 1 5 10 15 Ser Gln Glu Ser Gly Thr Thr Arg Ser Thr Phe His Ser Leu Glu Asp 20 25 30 Leu Gly Asp Asp Val Ile Asn Glu Ser Trp Asp Gln Val Asn Gln Lys 35 40 45 Arg Ala Asn Ile Asp His Asp Val Phe His Glu His Pro Asp Ser Ser 50 55 60 Pro Ser Leu Ser Ala Gln Lys Ala Lys Thr Lys Glu Glu Glu Val Ala 65 70 75 80 Val Lys Ser Ser Asn Ser Gln Ser Arg Asp Pro Ser Pro Asp Thr Gln 85 90 95 Ala His Ile Pro Tyr Thr Tyr Phe Ser Lys Asp Gln Arg Leu Ile Ile 100 105 110 Phe Gly Ile Ile Ile Phe Ile Gly Phe Leu Gly Pro Met Ser Gly Asn 115 120 125 Ile Tyr Ile Pro Ala Leu Pro Leu Leu Gln Arg Glu Tyr Asp Val Ser 130 135 140 Ala Thr Thr Ile Asn Ala Thr Val Ser Val Phe Met Ala Val Phe Ser 145 150 155 160 Val Gly Pro Leu Phe Trp Gly Ala Leu Ala Asp Phe Gly Gly Arg Lys 165 170 175 Phe Leu Tyr Met Val Ser Leu Ser Leu Met Leu Ile Val Asn Ile Leu 180 185 190 Leu Ala Ala Val Pro Val Asn Ile Ala Ala Leu Phe Val Leu Arg Ile 195 200 205 Phe Gln Ala Phe Ala Ser Ser Ser Val Ile Ser Leu Gly Ala Gly Thr 210 215 220 Val Thr Asp Val Val Pro Pro Lys His Arg Gly Lys Ala Ile Ala Tyr 225 230 235 240 Phe Met Met Gly Pro Asn Met Gly Pro Ile Ile Ala Pro Ile Val Ala 245 250 255 Gly Leu Ile Leu Met Lys Gly Asn Tyr Trp Arg Trp Leu Phe Gly Phe 260 265 270 Thr Ser Ile Met Thr Gly Ile Ala Leu Ile Leu Val Thr Ala Leu Leu 275 280 285 Pro Glu Thr Leu Arg Cys Ile Val Gly Asn Gly Asp Pro Lys Trp Gly 290 295 300 Asp Lys Lys Asp Glu Arg Glu Asn Asn Glu Ser Pro Phe Phe Glu Gly 305 310 315 320 Asn Lys Ile Ser His Arg Arg Leu Phe Pro Asp Ile Gly Ile Arg Lys 325 330 335 Pro Val Asn Asn Asp Ala Phe Phe Gln Glu Asn Phe Pro Lys Pro Pro 340 345 350 Lys Ala Gly Leu Thr Leu Tyr Trp Lys Met Ile Lys Cys Pro Pro Ile 355 360 365 Ile Ile Thr Ser Val Ser Thr Ala Leu Leu Phe Ser Ser Tyr Tyr Ala 370 375 380 Phe Ser Val Thr Phe Ser Tyr Tyr Leu Glu His Asp Tyr Arg Phe Thr 385 390 395 400 Met Leu Glu Ile Gly Ala Ala Tyr Val Cys Pro Gly Val Ala Met Leu 405 410 415 Leu Gly Ser Gln Ser Gly Gly His Leu Ser Asp Tyr Leu Arg Ser Arg 420 425 430 Trp Ile Lys Ser His Pro Lys Lys Lys Phe Pro Ala Glu Phe Arg Leu 435 440 445 Leu Leu Asn Leu Ile Gly Ile Leu Leu Thr Ile Cys Gly Thr Ile Gly 450 455 460 Tyr Gly Trp Ala Ile Phe Phe His Tyr His Phe Val Val Leu Leu Val 465 470 475 480 Phe Ser Ala Leu Thr Ala Phe Gly Met Thr Trp Cys Ser Asn Thr Ser 485 490 495 Met Thr Tyr Leu Thr Glu Leu Phe Pro Lys Arg Ala Ala Gly Thr Val 500 505 510 Ala Val Ser Ser Phe Phe Arg Asn Val Gly Ala Ala Ile Ser Ser Ala 515 520 525 Ile Ile Leu Gln Leu Cys Asn Ala Met Gly Ile Gly Trp Cys Phe Thr 530 535 540 Gly Leu Gly Leu Cys Ser Ser Ile Ser Leu Ile Gly Ile Leu Tyr Leu 545 550 555 560 Leu Ile Phe Gln Arg Lys Tyr Thr Ala Lys Glu Phe 565 570 <210> 147 <211> 4434 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic YOR1_BY nucleotide sequence <400> 147 atgacgatta ccgtggggga tgcagtttcg gagacggagc tggaaaacaa aagtcaaaac 60 gtggtactat ctcccaaggc atctgcttct tcagacataa gcacagatgt tgataaggac 120 acatcgtctt cttgggatga caaatctttg ctgcctacag gtgaatatat tgtggacaga 180 aataagcccc aaacctactt gaatagcgat gatatcgaaa aagtgacaga atctgatatt 240 ttccctcaga aacgtctgtt ttcattcttg cactctaaga aaattccaga agtaccacaa 300 accgatgacg agaggaagat atatcctctg ttccatacaa atattatctc taacatgttt 360 ttttggtggg ttctacccat cctgcgagtt ggttataaga gaacgataca gccgaacgat 420 ctcttcaaaa tggatccgag gatgtctata gagacccttt atgacgactt tgaaaaaaac 480 atgatttact attttgagaa gacgaggaaa aaataccgta aaagacatcc agaagcgaca 540 gaagaagagg ttatggaaaa tgccaaacta cctaaacata cagttctgag agctttatta 600 ttcactttta agaaacagta cttcatgtcg atagtgtttg caattctcgc taattgtaca 660 tccggtttta accccatgat taccaagagg ctaattgagt ttgtcgaaga aaaggctatt 720 tttcatagca tgcatgttaa caaaggtatt ggttacgcta ttggtgcatg tttgatgatg 780 ttcgttaacg ggttgacgtt caaccatttc tttcatacat cccaactgac tggtgtgcaa 840 gctaagtcta ttcttactaa agctgccatg aagaaaatgt ttaatgcatc taattatgcg 900 agacattgtt ttcctaacgg taaagtgact tcttttgtaa caacagatct cgctagaatt 960 gaatttgcct tatcttttca gccgtttttg gctgggttcc ctgcaatttt ggctatttgc 1020 attgttttat tgatcgttaa ccttggaccc attgccttag ttgggattgg tatttttttc 1080 ggtgggtttt tcatatcctt atttgcattt aagttaattc tgggctttag aattgctgcg 1140 aacatcttca ctgatgctag agttaccatg atgagagaag tgctgaataa tataaaaatg 1200 attaaatatt atacgtggga ggatgcgtat gaaaaaaata ttcaagatat taggaccaaa 1260 gagatttcta aagttagaaa aatgcaacta tcaagaaatt tcttgattgc tatggccatg 1320 tctttgccta gtattgcttc attggtcact ttccttgcaa tgtacaaagt taataaagga 1380 ggcaggcaac ctggtaatat ttttgcctct ttatctttat ttcaggtctt gagtttgcaa 1440 atgtttttct tacctattgc tattggtact ggaattgaca tgatcattgg attgggccgt 1500 ttgcaaagct tattggaggc tccagaagat gatccaaatc agatgattga aatgaagcct 1560 tctcctggct ttgatccaaa attggcttta aaaatgacac attgctcatt tgagtgggaa 1620 gattatgaat taaacgacgc tattgaagaa gcaaaaggag aagctaaaga tgaaggtaaa 1680 aagaacaaaa aaaagcgtaa ggatacatgg ggtaagccat ctgcaagtac taataaggcg 1740 aaaagattgg acaatatgtt gaaagacaga gacggcccgg aagatttaga aaaaacttcg 1800 tttaggggtt tcaaggactt gaacttcgat attaaaaagg gcgaatttat tatgattacg 1860 ggacctattg gtactggtaa atcttcatta ttgaatgcga tggcaggatc aatgagaaaa 1920 actgatggta aggttgaagt caacggggac ttattaatgt gtggttatcc atggattcaa 1980 aatgcatctg taagagataa catcatattc ggttcaccat tcaataaaga aaagtatgat 2040 gaagtagttc gtgtttgctc tttgaaagct gatctggata ttttaccggc aggcgatatg 2100 accgaaattg gggaacgtgg tattacttta tctggtggtc aaaaggcacg tatcaattta 2160 gccaggtctg tttataagaa gaaggatatt tatctattcg acgatgtcct aagtgctgtc 2220 gattctcgtg ttggtaaaca catcatggat gaatgtctaa ccggaatgct tgctaataaa 2280 accagaattt tagcaacgca tcaattgtca ctgattgaga gagcttctag agtcatcgtt 2340 ttaggtactg atggccaagt cgatattggt actgttgatg agctaaaagc tcgtaatcaa 2400 actttgataa atcttttaca attctcttct caaaattcgg agaaagagga tgaagaacag 2460 gaagcggttg ttgccggtga attgggacaa ctaaaatatg aatcagaggt aaaggaattg 2520 actgaactga agaaaaaggc tacagaaatg tcacaaactg caaatagtgg taaaattgta 2580 gcggatggtc atactagtag taaagaagaa agagcagtca atagtatcag tctgaaaata 2640 taccgtgaat acattaaagc tgcagtaggt aagtggggtt ttatcgcact accgttgtat 2700 gcaattttag tcgttggaac cacattctgc tcactttttt cttccgtttg gttatcttac 2760 tggactgaga ataaattcaa aaacagacca cccagttttt atatgggtct ttactccttc 2820 tttgtgtttg ctgctttcat attcatgaat ggccagttca ccatactttg cgcaatgggt 2880 attatggcat cgaaatggtt aaatttgagg gctgtgaaaa gaattttaca cactccaatg 2940 tcatacatag ataccacacc tttgggacgt attctgaaca gattcacaaa agatacagat 3000 agcttagata atgagttaac cgaaagttta cggttgatga catctcaatt tgctaatatt 3060 gtaggtgttt gcgtcatgtg tattgtttac ttgccgtggt ttgctatcgc aattccgttt 3120 cttttggtca tctttgttct gattgctgat cattatcaga gttctggtag agaaattaaa 3180 agacttgaag ctgtgcaacg gtcttttgtt tacaataatt taaatgaagt tttgggtggg 3240 atggatacaa tcaaagcata ccgaagtcag gaacgatttt tggcgaaatc agattttttg 3300 atcaacaaga tgaatgaggc gggatacctt gtagttgtcc tgcaaagatg ggtaggtatt 3360 ttccttgata tggttgctat cgcatttgca ctaattatta cgttattgtg tgttacgaga 3420 gcctttccta tttccgcggc ttcagttggt gttttgttga cttatgtatt acaattgcct 3480 ggtctattaa ataccatttt aagggcaatg actcaaacag agaatgacat gaatagtgcc 3540 gaaagattgg taacatatgc aactgaacta ccactagagg catcctatag aaagcccgaa 3600 atgacacctc cagagtcatg gccctcaatg ggcgaaataa tttttgaaaa tgttgatttt 3660 gcctatagac ctggtttacc tatagtttta aaaaatctta acttgaatat caagagtggg 3720 gaaaaaattg gtatctgtgg tcgtacaggt gctggtaagt ccactattat gagtgccctt 3780 tacaggttga atgaattgac cgcaggtaaa attttaattg acaatgttga tataagtcag 3840 ctgggacttt tcgatttaag aagaaaatta gccatcattc cacaagatcc agtattattt 3900 aggggtacga ttcgcaagaa cttagatcca tttaatgagc gtacagatga cgaattatgg 3960 gatgcattgg tgagaggtgg tgctatcgcc aaggatgact tgccggaagt gaaattgcaa 4020 aaacctgatg aaaatggtac tcatggtaaa atgcataagt tccatttaga tcaagcagtg 4080 gaagaagagg gctccaattt ctccttaggt gagagacaac tattagcatt aacaagggca 4140 ttggtccgcc aatcaaaaat attgattttg gatgaggcta catcctcagt ggactacgaa 4200 acggatggca aaatccaaac acgtattgtt gaggaatttg gagattgtac aattttgtgt 4260 attgctcaca gactgaagac cattgtaaat tatgatcgta ttcttgtttt agagaagggt 4320 gaagtcgcag aattcgatac accatggacg ttgtttagtc aagaagatag tattttcaga 4380 agcatgtgtt ctagatctgg tattgtggaa aatgatttcg agaacagaag ttaa 4434 <210> 148 <211> 4434 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic YOR1-IS1 nucleotide sequence <400> 148 atgacgatta ccgtggggga tgcagtttcg gagacggagc tggaaaacaa aagtcaaaac 60 gtggtactat ctcccaaggc atctgcttct tcagacataa gcacagatgt tgataaagac 120 acatcgtctt cttgggatga caaatctttg ctgcctacag gtgaatatat tgtggacaga 180 aataagcccc aaacctactt gaatagcgat gatatcgaaa aagtgacaga atctgatatt 240 ttccctcaga aacgtctgtt ttcattcttg cactctaaga aaattccaga agtaccacaa 300 accgatgacg agaggaagat atatcctctg ttccatacaa atattatctc taacatgctt 360 ttttggtggg ttctacccat cctgcgagtt ggttataaga gaacgataca gccgaacgat 420 ctcttcaaaa tggatccgag gatgtctata gagacccttt atgacgactt tgaaaaaaac 480 atgatttact attttgagaa gacgaggaaa aaataccgta aaagacatcc agaagcgaca 540 gaagaagagg ttatggaaaa tgccaaacta cctaaacata cagttctgag agctttatta 600 ttcactttta agaaacagta cttcatgtcg atagtgtttg caattctcgc taattgtaca 660 tccggtttta accccatgat taccaagagg ctaattgagt ttgtcgaaga aaaggctatt 720 tttcatagca tgcatgttaa caaaggtatt ggttacgcta ttggtgcatg tttgatgatg 780 ttcgttaacg ggttgacgtt caatcatttc tttcatacat cccaactgac tggtgtgcaa 840 gctaagtcta ttcttactaa agctgccatg aagaaaatgt ttaatgcatc taattatgcg 900 agacattgtt ttcctaacgg taaagtgact tcttttgtaa caacagatct cgctagaatt 960 gaatttgcct tatcttttca gccgtttttg gctgggttcc ctgcaatttt ggctatttgc 1020 attgttttat tgatcgttaa ccttggaccc attgccttag ttgggattgg tatttttttc 1080 ggtgggtttt tcatatcctt atttgcattt aagttaattc tgggctttag aattgctgcg 1140 aacatcttca ctgatgctag agttaccatg atgagagaag tgctgaataa tataaaaatg 1200 attaaatatt atacgtggga ggatgcgtat gaaaaaaata ttcaagatat taggaccaaa 1260 gagatttcta aagttagaaa aatgaaacta tcaagaaatt tcttgattgc tatggccatg 1320 tctttgccta gtattgcttc attggtcact ttccttgcaa tgtacaaagt taataaagga 1380 ggcaggcaac ctggtaatat ttttgcctct ttatctttat ttcaggtctt gagtttgcaa 1440 atgtttttct tacctattgc tattggtact ggaattgaca tgatcattgg attgggccgt 1500 ttgcaaagct tattggaggc tccagaagat gatccaaatc agatgattga aatgaagccc 1560 tctcctggct ttgatccaaa attggctcta aaaatgacac attgctcatt tgagtgggaa 1620 gattatgaat taaacgacgc tattgaagaa gcaaaaggag aagctaaaga tgaaggtaaa 1680 aagaacaaaa aaaagcgtaa ggatacatgg ggtaagccat ctgcaagtac taataaggcg 1740 aaaagattgg acaatatgtt gaaagacaga gacggcccgg aagatttaga aaaaacttcg 1800 tttaggggtt tcaaggactt gaacttcgat attaaaaagg gcgaatttat tatgattacg 1860 ggacctattg gtactggtaa atcttcatta ttgaatgcga tggcaggatc aatgagaaaa 1920 attgatggta aggttgaagt caacggggac ttattaatgt gtggttatcc atggattcaa 1980 aatgcatctg taagagataa catcatattc ggttcaccat tcaataaaga aaagtatgat 2040 gaagtagttc gtgtttgctc tttgaaagct gatctggata ttttaccggc aggcgatatg 2100 accgaaattg gggaacgtgg tattacttta tctggtggtc aaaaggcacg tatcaattta 2160 gccaggtctg tttataagaa gaaggatatt tatgtattcg acgatgtcct aagtgctgtc 2220 gattctcgtg ttggtaaaca catcatggat gaatgtctaa ccggaatgct tgctaataaa 2280 accagaattt tagcaacgca tcagttgtca ctgattgaga gagcttctag agtcatcgtt 2340 ttaggtactg atggccaagt cgatattggt actgttgatg agctaaaagc tcgtaatcaa 2400 actttgataa atcttttaca attctcttct caaaattcgg agaaagagga tgaagaacag 2460 gaagcggttg tttccggtga attgggacaa ctaaaatatg aatcagaggt aaaggaattg 2520 actgaactga agaaaaaggc tacagaaatg tcacaaactg caaatagtgg taaaattgta 2580 gcggatggtc atactagtag taaagaagaa agagcagtca atagtatcag tctgaaaata 2640 taccgtgaat acattaaagc tgcagtaggt aagtggggtt ttatcgcact accgttgtat 2700 gcaattttag tcgttggaac cacattctgc tcactttttt cttccgtttg gttatcttac 2760 tggactgaga ataaattcaa aaacagacca cccagttttt atatgggtct ttactccttc 2820 tttgtgtttg ctgctttcat attcatgaat ggccagttca ccatactttg cgcaatgggt 2880 attatggcat cgaaatggtt aaatttgagg gctgtgaaaa gaattttaca cactccaatg 2940 tcatacatag ataccacacc tttgggacgt attctgaaca gattcacaaa agatacagat 3000 agcttagata atgagttaac cgaaagttta cggttgatga catctcaatt tgctaatatt 3060 gtaggtgttt gcgtcatgtg tattgtttac ttgccgtggt ttgctatcgc aattccgttt 3120 cttttggtca tctttgttct gattgctgat cattatcaga gttctggtag agaaattaaa 3180 agacttgaag ctgtgcaacg gtcttttgtt tacaataatt taaatgaagt tttgggtggg 3240 atggatacaa tcaaagcata ccgaagtcag gaacgatttt tggcgaaatc agattttttg 3300 atcaacaaga tgaatgaggc gggatacctt gtagttgtcc tgcaaagatg ggtaggtatt 3360 ttccttgata tggttgctat cgcatttgca ctaattatta cgttattgtg tgttacgaga 3420 gcctttccta tttccgcggc ttcagttggt gttttgttga cttatgtatt acaattgcct 3480 ggtctattaa ataccatttt aagggcaatg actcaaacag agaatgacat gaatagtgcc 3540 gaaagattgg taacatatgc aactgaacta ccactagagg catcctatag aaagcccgaa 3600 atgacacctc cagagtcatg gccctcaatg ggcgaaataa tttttgaaaa tgttgatttt 3660 gcctatagac ctggtttacc tatagtttta aaaaatctta acttgaatat caagagtggg 3720 gaaaaaattg gtatctgtgg tcgtacaggt gctggtaagt ccactattat gagtgccctt 3780 tacaggttga atgaattgac cgcaggtaaa attttaattg acaatgttga tataagtcag 3840 ctgggacttt tcgatttaag aagaaaatta gccatcattc cacaagatcc agtattattt 3900 aggggtacga ttcgcaagaa cttagatcca tttaatgagc gtacagatga cgaattatgg 3960 gatgcattgg tgagaggtgg tgctatcgcc aaggatgact tgccggaagt gaaattgcaa 4020 aaacctgatg aaaatggtac tcatggtaaa atgcataagt tccatttaga tcaagcagtg 4080 gaagaagagg gctccaattt ctccttaggt gagagacaac tattagcatt aacaagggca 4140 ttggtccgcc aatcaaaaat attgattttg gatgaggcta catcctcagt ggactacgaa 4200 acggatggca aaatccaaac acgtattgtt gaggaatttg gagattgtac aattttgtgt 4260 attgctcaca gactgaagac cattgtaaat tatgatcgta ttcttgtttt agagaagggt 4320 gaagtcgcag aattcgatac accatggacg ttgtttagtc aagaagatag tattttcaga 4380 agcatgtgtt ctagatctgg tattgtggaa aatgatttcg agaacagaag ttaa 4434 <210> 149 <211> 1675 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 149 gtcaaacgca tacctaccca gttagctcta tatatcaaaa cacctccaca tctccccttt 60 ttccaccctc tgccaccgtc ttccacccaa acgttgactc tgctctccgg cgtccggcgg 120 ctgctccggc gactgtggtg aagttacaaa tggataatgg acttgaaacg aagctactcc 180 gtcatgaaga agaagaggtc gaaggttctt tgacagagag ggtatggacc gaatccaaaa 240 agatatggag ggtcgcatta cccggtgtta tatcaagagt ttgcgcgttt ggaaccatcg 300 ttgtcactca atcattcgtc ggccatatta gcgaaatgga tcttgcaggt tacgcacttg 360 ttcagacact aagtgtccga ttcgtcaatg gaattcttct ggggatgtca agtgcaaccg 420 agacgctatg tggccaagca tttggggccg ggcaaaacca tatgatgggg atttacctgc 480 aacgatcttg gatcgttgat ctgatcactt taaccgtttt gctcccgatt ttcatcttcg 540 ggacacaagt atacaaacta cttggtgaag atgaggccat agctgagagt ggtggataca 600 tatcactttg gttcatcccg ttcatctata acttcgtctt tagcttgacc atacaaatgt 660 ttctacaagc acagttaaag aatatggtca ttgcgtggct ttctatcttt cagttcggca 720 tccacatccc gttgtcgtgg cttttggttt ataaattggg atatggggtg ccgggtgcca 780 tgatcgcgtt atcggcgtcg tcatggtttc ttgtgattgg agaatttatt tacatttttg 840 gtggttggtg tccttattct tggaaaggat ttacagttgc tgcatttaaa gacttgattc 900 ctgttgtgaa gctttcgata tcatctggtg ttatggtctg cttggagtta tggtacaacg 960 cggtgctggt cttgcttgct ggatacatgg caaatgctga agttgccatt tctgcctttt 1020 ccatatgctt gaacattaac gcatgggagt ttatgataag ccttggcttc ttaggcgctg 1080 catgtgtacg ggttgcaaat gaacttggaa gaggaaatgc taaagctgca aaattctcaa 1140 ttaaagtttt gttggggact tcaatcgcga taggaacatt tttctttgtt ctttgcttgg 1200 tgtttggcag aagaattgct tatttgttta caaatgatga acgagttgcg gatactgtat 1260 cagaactttc cgtattactt tcgttttctg tcttgctcaa cagcatttat cccgttctct 1320 caggtgtggc ggttggagca ggtttacaag gcattgtagc agttgttaac ctcgtttgct 1380 attacttgat cggtattcca acaggagcat tgcttggata tttgacaagt ctccaagtaa 1440 agggtatatg gattggaatg attggtggca tcgttgctca aacggttgcg ctcgtgtact 1500 tgacatggcg aacagattgg gatgatcagg tcaaaaggtc gttggaacgg ctcaatcggt 1560 tttatgtgaa aacctctgaa gagactgatg aaatttcgaa ctgatgatca tgttcatgtt 1620 catgtcaaat gattgaattt tcataaaaag tgtaacaagt ttttgtagta ttttt 1675 <210> 150 <211> 4419 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 150 atggaggaat acaactcaat gacgtcattc atcttcttat ctccatatcc acaaacacta 60 ctcttggctt ccattgatac cgtatttcta ctcatcctct ttgttttcgt catccaaaag 120 ctatattcaa agttcagatc acacaacaat ggcggatcca ccattaacga acctctaatc 180 gctaaaacct taggttctgt caaaatcaat ctctggttct atttgtcact tacagtttcc 240 gtgattctag cagttttagc cattgtttca tcagttttag gattcacaca gaacacgcag 300 actcaatgga agtcaatcga cggaatttgc tggttgattc aagcgatttc gtttatcgta 360 atcactgttg taatcattca cgagaagaga tttcaatcag taactcatcc gatttctgtt 420 cgtgtgttct ggatattcaa tttcatcgtc attgcactaa ttgcgttttc gagtatttct 480 cgtctggttt ccaacacttc atcatcaaaa tccgatgact tgatttcatc gatttcacta 540 ccgttttcag ctttcttgct aattgcatca gtaatcggat caactggaat cacaataaca 600 ccagaatcaa aacctgatga actggagaaa tcggtaaacg taagtggatg ggcatctgct 660 tcaattctat ccaaaacatt ctggttttgg atgaatccgt tgctaaaaaa gggctacaaa 720 accgtgttaa caatcgaaga tatcccgacg ctttcacccg aacaccgagc cgaacaattg 780 acactaatct tcgaacaaaa ctggcccaaa cctgaagaga actcgaacca tccggttcga 840 accaccctca ttcggtgttt ctggaaacaa actgcattca ctggcttctt agcgaccgcg 900 aagctttgtg tcgggtatgt cggaccgttg ttgatacaac ggttcgttga tttcacatca 960 ggaaagagga gttctccgta cgaaggatat tatttggtac tgattctcct cgtcgctaag 1020 tttatcgaag ctttaacgtc gcatcaattc aatttccact cgcagaagct cgggatgatg 1080 attagatcaa gtttgataac atgtttatac aaaaaggggt tgaaactctc gtgttcggct 1140 cgacaatcgc atggtgtagg tcaaatcgtg aactatatgg cggtcgatgc gcaacagttg 1200 tcggatatta tgtctcagtt gcacgcgatc tggctcatgc cggttcaagt gaccgtggcg 1260 atggtgattc tttatgctta tctcggtgca tcgacggcgg ttacattgat cgcggttttg 1320 gtgattctag tgttcgtcta tttgggtact aaactaaaca accggtacca gtttaacata 1380 atgtcgagtc gtgatttgcg gttgaaagcg atgaatgaga tgttgagtta catgagggtg 1440 attaagtttc aagcttggga agaacatttc aacgatcgga ttcagtcgtt tcgtgactcg 1500 gaatacggtt ggctttgtaa gttcatgtac tctatcggtt cgaacatgat catcttatgg 1560 tgcacacctt tgttaatctc cactgtcacg ttcgggagcg ggattttgct cggtgttaaa 1620 tttgacgcgg ggaccgtttt taccgcgact tcgttgttca agaacttgca agaaccgctt 1680 tggagttttc ctcaatcgat gatctcgctc tctcaagcga tgatctcgtt ggggcggttg 1740 gatgagtata tgatgagtaa tgagttggaa gagggttccg ttgaaagaca tgaaaacagc 1800 gacggtgaag gtaccgtcgc tgttgaggta caagacgggt cgttcagctg gcatgacgac 1860 ccgtcagaag gtgaaacgat aaaaaatata aactttgaag taaaaaaagg tgaactcgcg 1920 gtcattgttg ggacagttgg ttcaggaaag tcgtctttac ttgcatcggt tattggcgag 1980 atgcacaaaa cctctggtaa ggtgaaaatt ttcgggagca ccgcgtatgt tgcacaaacc 2040 tcatggatcc aaaacaagac gatacaagaa aacattttgt tcggtttgcc tatggataga 2100 cgtaagtaca agaatgtaat aagaacttgt tgtttggaga aagatttaga aatgatggaa 2160 ttcggagatc aaaccgagat cggggagcgt gggatcaatc ttagcggggg ccaaaagcag 2220 cggattcaac tcgcgcgagc agtttatcaa gattccgaca catatcttct cgatgatgtg 2280 tttagtgctg ttgatgctca tacgggttca ctaatattca aggaatgtgt taggggagtc 2340 cttagagaca agacgatctt acttgttacc catcaagtag acttcctcca tgacgtcgat 2400 cttatactcg tgatgcgcga tggaatgatc gttcaatcag gaaaatacga cgaactactt 2460 caatcaggac tcgatttcaa atcattagta tccgctcacg aatcctcaat gcaattagta 2520 caatcagaat caaccgaatc aaaagcccta acaaaatctc acagcaccaa ttccaacgaa 2580 cacaacgact acgagagtca aaaacctctc gaacgatcgc catcaagctc cattacagga 2640 acatcaaaat tgattgaaga tgaagaacga gaaacgggaa gagtgagcct acatgtctac 2700 aaagtgtacg taaccgaggc tttcggatgg ttcggtgcgg ttctggttgt gttgttatcg 2760 gttctatggc aagcggtgca aatggctagc gattactggt tatcttatga aacttcagca 2820 gatcgagctg cttcgtttga tccatcggtg tttatcggag tttatgcgat tattgcaggg 2880 attggttttg ttttgatctt tggaagaact gttttctcta tgtttctagg gcttgaaact 2940 gctcaaaggt tttttagtca gattcttcat agcatacttc atgctccaat gtcgtttttt 3000 gataccacac cttctggaag aattcttagt cgggcatcaa gtgatcaaac caacatcgac 3060 attcttcttc cgttcatgat gaatctaagt atcgctttgt acatgtcggt tattagcgtt 3120 atcatcataa cctgtcaata cgcttggcct acggtcttcc tactcgttcc actcggttgg 3180 ctcaatttct ggtatcgggg gtattacctt gcaacatctc gtgaaataac ccgacttgac 3240 tcgattacaa aagcacccgt tattcaccac ttctcagaga gcatctctgg ggttatgacg 3300 atccggtgtt ttagaaaaca agtcgagttt gttcaagaaa acgttgaccg cgttgacgga 3360 aatctacgga tggattttca taataatgca tcacaaggat ggttagggtt tcgtatggag 3420 tttcttggaa gtttgtttct ttgtgcctca actattttca tgatcatttt accgagcaac 3480 attattaaac ccgaggacgt tggattgtca ctctcatacg ggttatcact caatggtctg 3540 ttattttggg cgttatgcac gagttgtttc gttgaaaacc gaatggtttc ggttgagaga 3600 ataaaacaat ttactaatat accctcagaa gcagaatggg tgaagaaaga taaacctcca 3660 cctccaaatt ggcctactca tggcagattg gagctaaaaa atttgcaggt tagatatcgt 3720 ccaaacacgc ctcttgtgct aaaagggatc actttaaaca tcgaaggtgg tcaaaagatc 3780 ggtgttgttg gtagaacagg tggcgggaag tcaactttga tccaagtttt gtttcggctg 3840 gtggagccca ctggcggaag tattattatt gatggtattg atatatcgac actcgggtta 3900 catgatcttc ggtcccgatt tggtatcatt ccacaagaac cgatcctttt tgaaggaacc 3960 gttagaagta acattgaccc gattggtcaa cattctgatg atgagatttg gcggagtctc 4020 gaacgctgcc aactcagcga tgttgtcgct gcaaaacctg gaaaacttga ttccgcagtt 4080 gttgataatg gagataactg gagtgttgga caaagacaac tactttgttt aggaagggtg 4140 ttgttgaaac aaagcagatt attattcatg gatgaagcaa ctgcttctgt tgattcacaa 4200 acagattctg taattcagaa aatcattcga gaagattttg ctgactgtac aattgttagc 4260 attgctcata ggatacctac tgtcatggat tgtgatcgcg ttctagttat tgatgcagga 4320 tatgcaaaag aatttgatga accgtcacgt ttgattcaaa gaccctcact ttttggtgcg 4380 ttggttcagg aatacgcgaa tcgatcatcg ggcatatga 4419 <210> 151 <211> 4296 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 151 atggatggaa ctgatatata taaagcaact agtagtatac ggttaggtag tttacgagca 60 agtggaagaa catcaagtat aagatctgta agtgcttctg tatggaggaa ttctggaaat 120 gatgtttttt caagatcttc gcgtgaagaa gatgatgaag aagctcttaa atgggcttca 180 cttgagaagt taccgacgtt tgatcggttg aaaaagggtt tgttgtttgg atcaacggga 240 ccgtcgaacg aaattgatgt tgataatctt ggatttgatc agagaaagca tttgcttgat 300 agacttgtga aggttgctga tgaagataat gaaaagtttt tgttgaaact caggaacaga 360 attgacagag ttgggatcga tttaccaaca attgaagtca gatttgaaca tttgactgtg 420 gaggcagata ttaacacagg aagcagagct ttgccaagtt tcatcaattt tcacattgat 480 gcttttgagg ggctcttgag tatgttgaat ctgcttccaa attcaaagag gcatataact 540 atccttgatg atgttagtgg tgttattaaa cctagcagaa tgacattact attgggtcct 600 ccaagttctg gtaagacctc actattgtta gccttagctg ggaagctagc aaaggagctt 660 aagtgttcgg ggaaggtgac atacaacggc catgaattga acgagtttgt accggaaaga 720 acatccgctt atattagcca aaacgatgtt catatcggag aattgacagt cagagaaacc 780 ctagctttct cagctcgatg tcaaggggtt ggatcacgtt acgaaatgtt ggccgagtta 840 gcacgaaggg agaaaaatgc aaacatcaaa cccgatcctg atatcgatgt ctacatgaag 900 gctgcagcat cagcaggaca agaagctagt gtcgtcacag attatactct caagttactc 960 ggtttggaca tctgtgctga taccatggtt ggtgatcaaa tgatacgtgg tatttccggt 1020 ggtcaaaaga aacgtgtgac caccggtgaa atgattgtgg gaccctcaaa ggttcttctc 1080 atggacgaaa tatcaactgg tctagatagt tccacaactt tccaaatcgt gaaatcactt 1140 aagcagtttc ttcatattct tgaaggaact gctgttattt ctctcctcca acccgcaccc 1200 gaaacgtatg atctgtttga tgacatcatc cttttaaccg acgggaggat cgtttatcag 1260 ggcccacgtg aaaatgttct tgagtttttt gaatctatgg gatttaaatg ccctgatagg 1320 aaaggtgttg ctgatttctt gcaagaagtt acatcaaaga aagatcaaca acaatattgg 1380 atgagaagag atatgcctta tagatttgtg acatcaaaag aatttgcgga tgcatatcaa 1440 tcatttcatg ttggaagaaa attagcaaat gatttatcgt taccttatga taaaaccaaa 1500 agtcatcctg ctgcacttac aaccgaaaaa tacggtttag ataacaaagg attgttaaaa 1560 gcttgtacgg atagagagat attgctcatg aaaagaaact cttttgttta tatcttcaaa 1620 ttgttccaat tgacggtgat agggttcatc gctttgacgg tgttccttag aactgagatg 1680 catgaaagag ttccagaaga tggtgcgatt tacgtagggg ctcttttctt cggtgttgtt 1740 atgctcatgt ttaacgggat gtctgaaatc tcaatgacga ttgcgaagct tccagtgttt 1800 tataaacaaa gggatttctt gttttttcca tcgtgggcgt acgcgttacc atcatggatc 1860 atcaaaattc ccatttcgtt tcttgaagct gctgtttgga ccgttttgac ttattatact 1920 ataggatttg atcctaatgt gacaagattc ttgaagcatt atcttctgct tttccttgtg 1980 aaccaaatgg cttctgcatt atttcggttc attggtgcaa tgggtagaaa catgattgtt 2040 gcaaacactt ttggctcatt cgcacttttg ttagttttcg ctttgggtgg atttattctt 2100 gttagagatg atgtaaagaa gtggtggttg tggggatact ggtcatctcc tctcatgtac 2160 gccatgaatg gaattactgt gaacgagttt cttggtcatc aatggagaac tccatgggac 2220 aacactacac ttggaagatc aacaatcaca tctgtagggt tctttgcaga aagttattgg 2280 tattggatat cagttgcagc attagttgga ttcattcttg ttttcaacgc gtgttttgct 2340 ttatctctcg cttttctcaa cccttacggg aaatcacaag gtagtgtatc gaacgaagat 2400 gaaagtgata ctgttgaatt gacacccgta acacgtgatg gcaatcaaag caacaaaaag 2460 ggaatgattc ttccatttga accgcattcg attaccttca atgatgtcaa gtactcagtt 2520 gatatgccac aggaaatgaa agaacaaggt gtgactgaag atagattact gttacttaag 2580 ggtgtgagtg gagcttttag acccggtatt cttacagctc tcatgggtgt aagtggggcc 2640 ggaaaaacaa cattgatgga tgtgttagcg ggtcgaaaaa cgggtggata cattgaaggt 2700 gatgttaggg tttccgggta tcctaaaaaa caagaaacat ttgctcgggt ttctggatac 2760 tgtgagcaaa acgatatcca ctctcctcat gttaccatat acgagtcttt gctttactca 2820 gcttggttga ggttagccac agatgttgac gaaaaaaccc gaaagagttt tgttgatgag 2880 gttatggacc tggtggagtt gaacccgtta aaggatgcat tagttgggtt gccaggtgtc 2940 aatgggctct caactgaaca aagaaagagg ttaaccatag ccgtggaact tgttgccaac 3000 ccgtctatta tctttatgga tgagcccacc tcggggctag atgcacgtgc agctgctatt 3060 gtgatgagaa ctgttagaaa cactgtggac acgggacgaa ctgtcgtgtg caccattcat 3120 caacctagca ttgatatctt tgaagctttt gatgagttgt tcttgatgaa acgtggagga 3180 caagagttgt atgttggacc cgtgggtcgg cattcttgcg agctaatcaa gtattttgag 3240 gctataaatg gtgtaagcaa gattaaagaa ggatataatc ccgcaacatg gatgttggaa 3300 gtcagcactt ctgctcaaga aatggcttta ggggtcgatt ttaccgaaat ctacagaaac 3360 tccgatcttt acaggagaaa caaagcctta atcgccgaat tgagcgtgcc ccgacccgga 3420 acaaaagacc tctatttccc gacccaatac tcccaaccgt tcatcgttca atgcatcgct 3480 tgcctgtgga aacaacggaa gtcatactgg cggaatccgc cgtacacggc ggtccgattc 3540 gtcttcacca ccttcatcgc cgtcatattc ggtaccatgt tttgggatct cggcagcaaa 3600 aaatcgacga ctcgtgatct gacgaacgca atgggatcca tgtatgcagc ggttctgttt 3660 cttggaatcc aaaactcgat gtcggtgcaa ccagtggttg atgttgaacg caccgtcttt 3720 tatagagaac gagccgccgg aatgtattcc gcactaccat acgcctttgc tcagattcta 3780 gtcgaaatac cgtatattct ttcacaaaca ggtgtataca ctgtcatagt gtacgcgatg 3840 atcgggttcg actggacggt agctaaattc ttctggtact tgttctacca attttgttgc 3900 ttactctaca tgacatatta cggtatgatg accgtcgctc ttacaccaaa cgccaacatc 3960 gccgccatca ttgccgcctc attttacgga atcttcaatc tattctccgg tttcatcgtt 4020 ccacgaccca ggattccggt ctggtggagg tggtactact gggctaaccc attagcgtgg 4080 accctttacg gtatggctgt atcacagttc ggtgaatttg atgatgtgct cacgaataca 4140 aatcctccag agaccatcag acgttacttg gaccgctatt acgggttcaa acattctttc 4200 cttcctgcgg ttgcaggggt acatgtcggg ttggttatgt ttttcgggtt tatatttgcg 4260 tattgcattc ggtctttcaa tttccagaaa agataa 4296 <210> 152 <211> 4842 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 152 atgactttta agcccttagt ttcatattgt catcctgtgg aaaatggtgt ttgggcaaca 60 gcagttgaaa atgaatttgg gccttataca ccctgtgcaa cagattcttt ggttactgga 120 atttctcatt tggttctttt gggagcttgc atatacagga tatatgtcac aaaaaagaat 180 tttaaagtag aaaagtttaa attgaggtca aacatctaca actattggtt ggggttattg 240 gctttatact ctactgttga gcctttgtgt agattgataa tgggaatttc agcttttaat 300 gttgatggag agacttctct tgctccatat gagattatga ccttagttat taaggcactt 360 gcatggtgtt gtatgttggt catgatcgga ctcgaaacca gagtttatgt ttatgaagtt 420 cgttggtttg taaggtttgc agtcgtttat gcgttgcttg gtgatgcagt gttgctcaat 480 cttgtgcttt ctgtgagcaa atattacacg agatatgtgt tgtatctctt tgtcagtgag 540 atttccatac aggttctgtt tgggttatgc ttgcttgtct atcttcctac tttggatcct 600 tatccgggtt atactccaat acgggccgaa tctttggatg atgctgaata tgaagaactt 660 gcaggtggag aggaaatctg tcctgaaagg cgtacaaaca ttatttctag tattttcttc 720 tcttggatga atcccctcat ggttttggga tataaaagac ctcttacaga gaaggacata 780 tggaaactgg acacatggga tcagaccgaa acactacaca gcaaatttga aatatattgg 840 gcagaagaga tccgtaaacc taaaccatgg cttttaaggg ctttacatcg tagccttggt 900 ggaaggtttt ggtggggagg cttttggaag attggcaatg atctttctca gtttgttgga 960 ccgctgattt tgaaccagct attactgtct atgcaagaac gcggtcccgc taagatcggt 1020 tacatctatg cattctcaat tttcgtcgga gtggtacttg gtgtgctgtg tgaggctcaa 1080 tattttcaga atgtcatgcg tgttggttac cgccttcgtt caactctgat tgctgcagtc 1140 ttccggaaga ctttaaagct aactaacgag agtcgcagaa atattgcatc tgggaaaata 1200 actaacttga tgacaaccga ttctgaatca ctccagcaag taactcagtc acttcacact 1260 ttgtggtctg ctccttttcg tatcattatc tctttggttc ttctttacca acaattaggc 1320 gttgcttcaa tccttggtgc attattgcta gttttcatgt tccctataca gacttttgtt 1380 attagtagaa tgcaaaaaat gtccaaagaa ggattgcaga ggactgacaa gagaattggg 1440 ctcatgaatg aaatcttagc agccatggac actgtcaaat gctatgcttg ggagaatagt 1500 tttcaagaca aagtccagag tattcgatca gacgagttat catggtttcg gaaagtacaa 1560 atgctaggag cgttgaatac atttatatta aacagtattc cagtggtagt aattgtggtt 1620 tcatttgggt tgtttacttt acttggagga gaattgacac ctgctagagc cttcacgtca 1680 ctctctttgt ttgctgtact tcgttttcca cttttcatgc ttccaaatat gatcacacag 1740 gttgtaaatg caaatgtgtc tttgaaacgt ttggaagatt tacttttaga gagagacttc 1800 ttcttccaaa tccacctctt gaaccaggac ttccagctgt ctcaattaga aatggattct 1860 tttcatggga ttcaaagtca gataaaccaa cattgtcaaa tattaatttc agatatacaa 1920 acgggtagtt tggtggcgat tgttggaagt acaggagagg gaaaaacatc agttgtatct 1980 gctatgcttg gagaacttcc tccagttagt gatgcggaag ttgttattcg aggaacagtt 2040 gcttatgttc cacaagtctc atggattttc aatgcaacgg tacgcgacaa catattgttt 2100 ggatccccct ttgattctgc aaagtatgag aagacactag atgtaactgc actgcaccat 2160 gacctagaat tgcttccggg tggtgatctt actgagattg gtgaaagagg agtgaatatt 2220 agtggaggtc aaaaacaaag agtttccatg gctagagctg tatactctga ctcagatgta 2280 tatgtgtttg atgatccctt aagtgctctt gatgctcacg tgggcagaca ggtttttgaa 2340 aaatgtatca aagaagaatt aagaggaaaa acgcgagtac tagttacaaa tcagttgcat 2400 tttctttcac aagttgatag gatcctattg gttcatgaag gcatggtgaa agaggaggga 2460 tcttacgagg aactatcaca aaacggtgta ctttttcaga aattaatgga gaatgcagga 2520 aaaatggaag aatatgttga agaacaagaa gaatcaggag attcagattc gaagacatca 2580 acacctgtta ctaatggtga gttagttaaa gattctgcta aaaagaaaga aatcaaatct 2640 gttcttatca agcaagagga acgggaaacg ggtgttgtca gtttcaatgt tttgaagagg 2700 tataaagatg cattaggagg gtggtgggtt gttagtatac tgttcgggtg ttatgcagca 2760 acagaaactt taagaatact aagtagcaca tggttaagta tttggaccga tgaaagcact 2820 ccaaagatct acagcccgtt attctataat attatctatg cacttctatc acttggtcaa 2880 gttcttgtga cattgggaaa ctcttattgg ttaatcatgg cgagtcttta tgcagctaga 2940 aagttgcaca acgcgatgct taactccata ttaagggctc ctatggtctt ttttcacacc 3000 aacccacttg gacgtattat taatagattt gcaaaagatc ttggtgatat agatcgcaac 3060 gttgcgccat ttgtcaacat gtttttgggc caagtgtcac aacttttgtc aacctttgtt 3120 ctcattggat tattgagcac catgtctctt tgggccatct tgccactttt gttgcttttc 3180 tatgcagctt atttgtatta tcagagcact gcgcgcgagg taaagcgaat ggattccatc 3240 acaagatctc cggtgtacgc gcaatttggt gaagcattaa acggtctctc caccatccgt 3300 gcatacaaag cgtatgatcg tatggccaag attaacggga attcaatgga caacaacatc 3360 cggttcacat tagtcaacat gagcgcgaac cgttggctcg caatccgact agaaacggtt 3420 ggaggtctca tgatatggtt aaccgcaact ttcgcagtca tgcaaaacgg caaagcaaga 3480 aaccaagaag catttgcatc caccatgggt ctacttctaa gttatgcatt aaacatcaca 3540 agtttactga cagctgtcct tagactcgcg agtttagctg aaaatagttt aaacgcggtt 3600 gaacgcgttg gtacttatat tgaattgcct tctgaggctc cacctgtaat cgaagataac 3660 cgcccgccac ctggctggcc ttcatccgga tctataaagt ttgaagatgt tgttttgcgg 3720 tatcgacctg aactgccacc tgtcctccat ggtttgactt tttttattcc tccaagtgat 3780 aagattggaa ttgttggaag aactggtgct ggaaaatcta gcatgttaaa tgctttgttt 3840 aggattgttg aattggaaag aggaagaatt ataattgata attgtgatat ttcaaagttt 3900 gggttgaccg atcttcgcaa ggttcttggt attattcctc aagcacccgt tctcttctca 3960 gggactgtaa gattcaacct ggatcctttt aacgagcaca atgatccgga tctttgggaa 4020 tctttagaga gggcccactt aaaggatgtt atcaggagga atccattggg tttagatgct 4080 gaggtttcag aggctggaga gaatttcagt gttggacaaa gacagttatt aagtctttca 4140 cgtgcattac ttaggagatc aaagattctt gttcttgatg aagcaactgc tgctgttgat 4200 gttagaacag atgcacttat ccaaaagacc attcgtgaag aattcaagtc ttgtactatg 4260 attattattg ctcatcgtct taatactatt attgattgtg accgtattct tctcctcgat 4320 gccggtcagg ttgttgagta tgatgctccg gtaaaacttc tccaagacga acaaaccgca 4380 ttctcaaaaa tggttcaaag tacaggggct gcaaatgcac aatacttacg taacttagca 4440 tttggagcag aagaagagaa ggtggagaag gtgacggtta atggtgagaa gtggcggctt 4500 gcctccactc ggtgggcggc tgccgcccgg tttgcacttg cttctagcct cactccgtca 4560 caaaacgacc tcacgcagtt agaaaacgaa gatgataaca acatcttaaa gaaaacaaaa 4620 gatgcagttc tcacacttca aggtgttttg aaaggcgaac atgataaaga tattgaagag 4680 tcgcttgaac gggcccacgt cccgagggat agatggtggt cagctcttta caaagtagtc 4740 gaaggtcttt cggtgatgag caagttgggt cgtaacaagc tccagctatc agaatacggg 4800 gtaaatgacg aaccgattga ttgggaccat gttcagatgt aa 4842 <210> 153 <211> 4521 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <220> <221> misc_feature <222> (26)..(26) <223> n is a, c, g, or t <400> 153 atgttcttca acctctgttg tttgcngaaa acgacttcag gagcttcact tgtgcttcaa 60 tggctgacgt tcatcttcct ctctccatgc cctcaaagag cacttctatc tgccattgat 120 gtcatcttct tgttcaatat ccttttcgtt ttttgtctgc tcaaaagact ctattcaagg 180 ttcagttcga ccaacaatgg cgactttaac acatccgcca ttgatgaacc tctgatttct 240 aaatctagaa ctgttgtcaa taccaatctt tggttcaagt tatctctgct cgtgaccgcc 300 gttttaacag ttttgtcaat tgtttcttca attttggcat tcacacaaca tacccagatg 360 tcatggaagc tgataaatgg aatctcttgg ttgattcaag ctctatcttt ccttgtgatc 420 acagttttaa tcatccatga aaaaagattt caagctgcaa ctcatccatt aactcttcgt 480 gtattcttag tagtaaattt catcttcatt gctttgttag cttcttcggg tatcatccgg 540 ctagtttccg gtaccggaaa cacttcaatt ttgaaatccg gcgacataat ttcactcata 600 tctctaccgt tttcagcttt tttattgttt gtatccgtaa ccggatcaac cggaattata 660 gtgaccatag aatctgaacc acttaatggt aatgctaatg ctaatggtca cggtaaacta 720 tcagatgctt acgagttgaa caaatcttca aacgtgagcg catgggcgat cggcttcgat 780 cccatcaaag atatttggtt gtggatgaac ccattgttga agaaagggta taaaaaacga 840 cctctaaaac tcgaggacat cccgacactt tcacccgaac atcgggccga gaaaatgtca 900 aaactttttg aagaaaactg gccgaaacca ctcgagaatt ccaaacatcc ggttcgagtc 960 acgttaatcc gttgtttttg gaaacatatc gcgttcaccg cactcctcgc gatcataagg 1020 ctatgtgtta tgtatgtcgg gccattattg atccaacggt tcgttgactt cacttccgga 1080 agagatcatc accgtacgag gggtaactta cttgatactt tatccttttt gtcggctaaa 1140 ttcgttgaag ttttgtcatc ccaccagttc aatttcaact cccagaagct tggaatgttg 1200 atccgatcga cattgattac atcgctgtat aaaaaggggt tacggttatc gtgttcggct 1260 cgacaatcgc atggtgttgg acaaatagtt aactacatgg ctgttgatgc tcaacaactt 1320 ggtgatatga tgcttcaact tcatgctatt tggctcatgc cggttcaagt gacggttgcg 1380 ttaggtattc tttacgggta tctcggtgtg cccgcgttgg tagctttggt cgggatcatg 1440 gcggttttgt tgtatgtgat atttggtgct aaaagaaaca acaggtttca gtttagtata 1500 atgcaaaacc gcgatttaag gatgaaagca gttaatgaga tgcttaatta catgagggtg 1560 attaagttcc aagcatggga agaacacttc aacaagagga tacaagcgtt tcgcgagtct 1620 gaatacgggt ggcttacgaa attcatgttt tcaataggtg gaaacttgat tgtgttatgg 1680 agcgcgcctt tgttcgtctc gtcactcact tttggaagcg cgattctgct cgggatcccg 1740 ctggatgcag ccacggtgtt cactgccaca tcgttgttca agaacttgca agagccgatt 1800 cgcacgttcc cgcagtcaat gatctctctt tctcaggcca tgatatcact gggaagattg 1860 gacgctttca tgttgagtaa agagttggat gagcgggcgg ttgagaggcg tgagggttgc 1920 ggtgatggga ccgcggttga ggtcagcaac gggtctttta gctgggatga tgaagctgct 1980 gatggtgctg tagttaagaa tttgagtttt gagatcaaga aaggtgaact tgcagctatt 2040 gttgggaccg tggggtccgg taaatcgtcg cttctttcgt ccgttatagg cgagatgcac 2100 aaaatctccg gaaaggtgag ggtatgtggg agtactgcat atgttgcaca aacagcatgg 2160 attcaaaacg ggacgattca agagaacatt ttgtttggtt tgccaatgga tcgacagaaa 2220 tacaaggaag ttatcaaaac ctgttgtttg gagaaagatt tagaaatgat ggaatatgga 2280 gaccaaactg agatcggaga gcgcggaatt aatctcagtg gtggtcagaa gcaaaggatt 2340 caacttgcac gcgctgttta tcaagattgt gacatttatc ttcttgatga tgtttttagc 2400 gcggttgatg ctcacaccgg ttcagaaata ttcaaggaat gtgtaagggg ggctctacgg 2460 aacaaaacaa tcttactcgt cacacaccaa gttgatttcc tccataatgt cgatcaaatc 2520 ctagttatgc gcgatggaat gattgttcaa tcaggaaagt acgacgaact actagaatcc 2580 ggtatggatt tcaaagcttt agtttccgcg cacgaaacct ctatgcaact agttgaaatg 2640 gaacccacca catcagatca cacctctcct agacctcttc aaaaatcccc aagcttaaac 2700 cctagagaag aggcattaga acgatcaaaa tcaagttcta taatcggtac atcaaaacta 2760 attgaagaag aagagaggga aacaggaaga atcagtttag gtgtttataa ggtttatgtg 2820 accgaagctt tcggatggtg gggtgtgatt gttgttttaa tgttttcaat cttgtggcaa 2880 gggtcacaga tggcgagtga ttactggttg gcatatgaaa cttctgatga acacattttc 2940 aacccttcgt tgtttataca agtgtataca gctatagcgg gtctttcgtt gcttttggta 3000 tttggtagga ttatttcttc gacgttcctt gggcttaaaa cttcccagat attttttaac 3060 cagattcttc acagcatcct tcatgctcca atgtcgtttt ttgacactac accttctgga 3120 agaattctta gcagggcatc aagtgatcaa acaaacctcg atgtcttcct tccattcatg 3180 atgaacttga cggttgcgat gtacataaca gtgatcggta ttgtaatcat cacttgtcag 3240 tatgcttggc caactgtctt cctattaatt cctcttggtt ggctcaattt ttggtttcgg 3300 ggatactatc tggcaacatc ccgtgaaata actagactcg actcgattac aaaagcaccc 3360 gttattcacc atttttcgga gagcatctcg ggggttatga caattcggtg ttttaagaag 3420 caagacaggt ttgttgaaga aaatgttaac cgcgtgaacg caaacctgag aatggatttt 3480 cataataacg ggtctaacgg gtggttaggt ttccggttgg agtttcttgg aagtttattt 3540 ctatgtattt ccactgtgtt catgatcatt ttacctagca gcattgttaa accagaaaac 3600 gttggattat cactctcgta tggattgtca ctcaacggag tgctgttttg ggctttatat 3660 atgagctgtt ttgttgaaaa ccgaatggtt tcggttgaaa ggattaaaca attcattaga 3720 ataccgtcgg aagccgaatg ggtgaaaaaa gataatcttc caccatcaaa ctggcctgat 3780 catggaaatg tagagcttaa agatttgcag gttagatatc gtccaaatac gcctttagtg 3840 atcaaaggga ttactctaag tatcaatgga ggtgaaaaga tcggtgtggt tggtagaacc 3900 ggtggcggga aatcaacttt gatccaggtt ctgtttaggt tggtggagcc atctggcgga 3960 agtataacca ttgatgggat caacatctcg acccttggat tacatgatct aaggtcaaga 4020 tttgggatca ttcctcaaga accaattctt tttgaaggaa ctgttagaag caatattgac 4080 cccattggtc aacattctga tgaagagatc tggaggagtc ttgaacgatg ccaacttaat 4140 gatgttgtag ctgcaaaacc tggaaaactt gattctgcag ttgttgataa tggtgataat 4200 tggagtgttg gtcaaagaca acttctatgt ttgggaagag tgatgttgaa acacagtaaa 4260 ctgttgttca tggatgaagc aacagcttca gttgattcac aaacagatgc ggtgattcag 4320 aaaatcatac gcgaggagtt tgctgactgt accatcatta gcattgctca cagaatacct 4380 actgtcatgg actgtgatcg cgttctcgtc atcgatgctg gttacgcgaa agaatttgat 4440 aaaccgtcac ggttgattga gagaccttca ttatttgggg ctttggttca agagtatgca 4500 aaccggtctt ctggtctatg a 4521 <210> 154 <211> 4560 <212> DNA <213> Stevia rebaudiana <400> 154 atgacatctg attcattttg gatcacttct gtttcatgtt cttcaacctc tgttattgca 60 gaaaacgcat caggagcttc actcatactt caatggctga aattcatctt tctctctcca 120 tgccctcaaa gggtactttt atccgccatt gacgtcatct tcttattcat cctcttcgtt 180 ttcgctgttc aaaagctcta ttcaaaattc acctccagca aatccgccat taacgaacct 240 ctgattacta aaaacagatc tatcgtcaac accaatctct ggttcaaatc atctctggta 300 gtgacaaccg ttttaacggt tttgtcgatt gcttcttcag ttttggcatt cacacagaat 360 actcaggtac catggaaact gattaatgga ttctgttggt taattcaagc tttatctttc 420 cttgtaatca cggttttgat tatccatgaa aaaagatttc aagctgcaac tcatccatta 480 actcttcgtg tattcttgat agtgaatttc atcttcatcg ctctattggc ttcttcgggt 540 atcatccggt taacttccga tacccgaaac acttcatttt tcaaatccgg tgacataatt 600 tcgttactat ctctaccgtt ttcggttttc ttattggttg tatcgataac cggatcaacc 660 ggaatcttag tgattctaga ttctgaatca ccgaacatca gcagtagcag taatagtaat 720 agtaatggta atggtcatag taaagtatca gatgctgatg agttgaacat caactcatca 780 gaactgagcg gatgggcatc cgcttcgatc atttcaaaag tcttttggtt atggatcaac 840 ccgttgttga aaaaagggta cgaaacccct ttaaagctag aggacgtccc gacgctttca 900 cccgaccatc gcgcagaaaa aatgtcgaaa cgtttcaaag aaaactggcc taagcctcaa 960 gaaaactgta aacatcctgt tcgtgtcacg ttgattcgtt gtttctggaa agacgtcgcc 1020 ttcacagcgt ttctagcgat gatacgcttg tgtgtaatgt acgtcgggcc attgttgatc 1080 caacggtttg ttgattacac ttccgggaaa cgaacgtcac catacgaggg gtattatttg 1140 atatcagtcc ttttggtggc taaatttgtt gaagttttat catcccatca gttcaatttc 1200 cattcccaaa agcttggaat gttgatccga tcaacgttga ttacatcatt gtataaaaaa 1260 gggttacggt tatcgtgttc gggtcgacaa tcgcatggtg ttggacaaat agttaactac 1320 atgtctgttg atactcaaca acttggtgat atgatgtttc aattgcatgc tatttggtta 1380 atgccgcttc aagtgacgat tgcgttagtc attctctaca tgtaccttgg accgtcgagt 1440 ttagtagcat taatcgggat cttgttgatc atgttgtata ctattttggg tactaaaagg 1500 aacaataagt ttcaatatag tataatgcaa agtcgtgatt cgaggatgaa agcaactaat 1560 gagatgctta attacatgag ggtgattaag tttcaagcat gggaagaaca cttcaacaag 1620 aggatacaat cgtttcgcga gtctgaatac gggtggctta cgaaattcat gctctcaatc 1680 ggtggaaaca tgattgtgtt atggagcgcg ccattgttta cctctgtact cacctttgga 1740 agcgcgatat tgtttggagt cccgcttgat gcgggcaccg tgtttactgc tacctcgttg 1800 tttaagaact tgcaagagcc aattcgcacg ttccctcaat cgatgattca aatttctcag 1860 gctatgatct cattgggaag attggacgcg ttcatgttga ctaaagagtt ggatgacgag 1920 gcggttgaga ggcgcgaggg ttgcggtggt gggaccgcgg ttgaggtcag caacgggtct 1980 tttagctggg atgatgaagc tgctgatggt gctgtagtta agaatttgaa ttttgagatc 2040 aagaaaggtg aacttgcagc aattgttggg accgtggggt ccggtaaatc gtcgcttctt 2100 tcgtccgtta taggcgagat gcacaaaatc tccggaaagg tgagggtatg tggaagcact 2160 gcatatgttg cacaaacagc atggattcaa aatgggacga ttcaagaaaa cattttgttt 2220 ggtttaccaa tggatagaca gaaatacaaa gaagttatca agagctgctg tttggaaaaa 2280 gatatagaaa tgatggaatt cggagaccaa acagagatcg gagaacgtgg gattaatctc 2340 agtggtggtc agaagcaaag gattcaactt gcacgcgctg tttatcaaga ttgtgacatt 2400 tatcttcttg atgatgtttt tagcgcggtt gatgctcaca ctggttcaga tatattcaag 2460 gagtgtgtca gggggatcct tcgagacaag acaatcttac tcgtcacaca ccaagttgat 2520 ttccttcata atgtcgattt gatcttagtg atgcgagacg gggagattgt ccaatcagga 2580 aagtatgatg aactactaga atcgggttta gattttcaat cgttagtttc cgcccacgag 2640 aactctatgc aactagttga aatggaacca accacatcgg ataaaaactc ccgtaaagct 2700 cttaataaat ctcctagcat acatcctcaa gaagaagata agaaggttct agaaaaatcc 2760 ggatctagtt ctaacattgg aacatcaaag ttaatcaaag aagaggagag ggaaacagga 2820 agaatcggtt taggtgttta taaggtttat gtaaccgaag cgttcggatg gtggggtgtg 2880 cttattgtgt tgttgttttc agtcttgtgg caagcgacac agatggcaag tgattactgg 2940 ttgtcgtatg aaactgctga tgaacgcgcc gcctctttta atccttcgct atttatagaa 3000 gtttatgcag ctattgccgg tgtttctttc cttatggtgt ttagtagagt catttcttca 3060 acggtccttg ggcttcaaac ttgtcagatt ttctttaagc agattcttca tagcatgctt 3120 catgctccaa tgtcattttt cgacactaca ccttccggac gtgttcttag tagggcatca 3180 agtgatcaag caaacattga tcttctgctt ccatttatga cgagtatgac tcttacgatg 3240 tacatatcag tgattgccac tatcatcatc atttgtcagt acgcttggcc aacggtgttt 3300 ctactaattc ctcttggttg gctcaacttt tggtaccgcg gatactatct tgcagcatct 3360 cgtgaaatca cacggctcga ttcaattaca aaagcacccg ttattcacca tttctcggaa 3420 agcatcgcag gggtgatgac aattcggtgt tttaagaagc aagaaggctt tattcatgaa 3480 aaccttgatc gtgtgaacgg aaacttgaga atggatttcc acaactgggg agcgactgag 3540 tggttaggtt tccgtttgga gtttctcgga agcttattta tgtgtgtttc aactgtgttc 3600 atgatcatct tacctagtac cattgtcaaa ccagagaatg ttggattatc actctcatat 3660 gggttaacac tcaacgggat attgtttttt gctgtatata tgagttgtat ggtagaaaac 3720 agaatggttt ctgttgaaag gattaaacag ttctccaaaa taccatcaga agccgaatgg 3780 gttaaaaaag ataatcctcc accatcaaac tggcctaatc atggaaatgt agagctcaaa 3840 gatttgcagg ttagatatcg tccaaatacg cctttggtga tcaaagggat tactctaagt 3900 attaaaggag gtgaaaagat cggtgtggtt ggtagaaccg gtggcggtaa atcaactctg 3960 attcaagtta tgtttaggtt ggtggagcca tctggcggaa gtataaccgt tgatggtatc 4020 gatatcacaa ctctcggact acatgatctc agatcaagat tcgggatcat tcctcaagaa 4080 ccaatcctat ttgaaggcac cgtgagaagt aatattgacc ccattggtca acattctgat 4140 gaagaaatct ggaggagtct tgaacgatgc cagctttatg atgttgtatc tgcgaaacct 4200 ggtaaactag attctgcagt tgttgataat ggtgataact ggagtgtggg acaaagacaa 4260 cttctatgtt tgggaagagt gatgttgaaa cacagcaaac tgttgttcat ggatgaagca 4320 acagcttcag ttgattcaca aacagatgcg gtgattcaaa aaatcatacg cgaggatttt 4380 gctgactgta ccatcatcag cattgctcac agaataccaa ctgtcatgga ctgtgatcgc 4440 gttcttgtca tcgatgctgg ttacgcgaaa gaatttgata aaccttcacg gttgatagag 4500 agaccttcgt tgtttggtgc attggttcag gagtacgcaa acaggtcatc gggattatga 4560 <210> 155 <211> 567 <212> PRT <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 155 Met Ser Gly Val Asn Asn Thr Ser Ala Asn Glu Leu Ser Thr Thr Met 1 5 10 15 Ser Asn Ser Asn Ser Ala Val Gly Ala Pro Ser Val Lys Thr Glu His 20 25 30 Gly Asp Ser Lys Asn Ser Leu Asn Leu Asp Ala Asn Glu Pro Pro Ile 35 40 45 Asp Leu Pro Gln Lys Pro Leu Ser Ala Tyr Thr Thr Val Ala Ile Leu 50 55 60 Cys Leu Met Ile Ala Phe Gly Gly Phe Ile Phe Gly Trp Asp Thr Gly 65 70 75 80 Thr Ile Ser Gly Phe Val Asn Leu Ser Asp Phe Ile Arg Arg Phe Gly 85 90 95 Gln Lys Asn Asp Lys Gly Thr Tyr Tyr Leu Ser Lys Val Arg Met Gly 100 105 110 Leu Ile Val Ser Ile Phe Asn Ile Gly Cys Ala Ile Gly Gly Ile Val 115 120 125 Leu Ser Lys Val Gly Asp Ile Tyr Gly Arg Arg Ile Gly Leu Ile Thr 130 135 140 Val Thr Ala Ile Tyr Val Val Gly Ile Leu Ile Gln Ile Thr Ser Ile 145 150 155 160 Asn Lys Trp Tyr Gln Tyr Phe Ile Gly Arg Ile Ile Ser Gly Leu Gly 165 170 175 Val Gly Gly Ile Ala Val Leu Ser Pro Met Leu Ile Ser Glu Val Ala 180 185 190 Pro Lys His Ile Arg Gly Thr Leu Val Gln Leu Tyr Gln Leu Met Gly 195 200 205 Thr Met Gly Ile Phe Leu Gly Tyr Cys Thr Asn Tyr Gly Thr Lys Asn 210 215 220 Tyr His Asn Ala Thr Gln Trp Arg Val Gly Leu Gly Leu Cys Phe Ala 225 230 235 240 Trp Ala Thr Phe Met Val Ser Gly Met Met Phe Val Pro Glu Ser Pro 245 250 255 Arg Tyr Leu Ile Glu Val Gly Lys Asp Glu Glu Ala Lys Arg Ser Leu 260 265 270 Ser Lys Ser Asn Lys Val Ser Val Asp Asp Pro Ala Leu Leu Val Glu 275 280 285 Tyr Asp Thr Ile Lys Ala Gly Ile Glu Leu Glu Lys Leu Ala Gly Asn 290 295 300 Ala Ser Trp Ser Glu Leu Leu Ser Thr Lys Thr Lys Val Phe Gln Arg 305 310 315 320 Val Leu Met Gly Val Met Ile Gln Ser Leu Gln Gln Leu Thr Gly Asp 325 330 335 Asn Tyr Phe Phe Tyr Tyr Gly Thr Thr Ile Phe Lys Ser Val Gly Leu 340 345 350 Lys Asp Ser Phe Gln Thr Ser Ile Ile Ile Gly Val Val Asn Phe Phe 355 360 365 Ser Ser Phe Ile Ala Val Tyr Thr Ile Glu Arg Phe Gly Arg Arg Thr 370 375 380 Cys Leu Leu Trp Gly Ala Ala Ser Met Leu Cys Cys Phe Ala Val Phe 385 390 395 400 Ala Ser Val Gly Val Thr Lys Leu Trp Pro Gln Gly Ser Ser His Gln 405 410 415 Asp Ile Thr Ser Gln Gly Ala Gly Asn Cys Met Ile Val Phe Thr Met 420 425 430 Phe Phe Ile Phe Ser Phe Ala Thr Thr Trp Ala Gly Gly Cys Tyr Val 435 440 445 Ile Val Ser Glu Thr Phe Pro Leu Arg Val Lys Ser Arg Gly Met Ala 450 455 460 Ile Ala Thr Ala Ala Asn Trp Met Trp Gly Phe Leu Ile Ser Phe Phe 465 470 475 480 Thr Pro Phe Ile Thr Gly Ala Ile Asn Phe Tyr Tyr Gly Tyr Val Phe 485 490 495 Leu Gly Cys Leu Val Phe Ala Tyr Phe Tyr Val Phe Phe Phe Val Pro 500 505 510 Glu Thr Lys Gly Leu Thr Leu Glu Glu Val Asn Thr Met Trp Leu Glu 515 520 525 Gly Val Pro Ala Trp Lys Ser Ala Ser Trp Val Pro Pro Glu Arg Arg 530 535 540 Thr Ala Asp Tyr Asp Ala Asp Ala Ile Asp His Asp Asn Arg Pro Ile 545 550 555 560 Tyr Lys Arg Phe Phe Ser Ser 565 <210> 156 <211> 1527 <212> DNA <213> Escherichia coli <400> 156 gagatgacgt tggaggggca aggtcgcgct gattgctggg gcaacacgtg gagcggatcg 60 gggattgtct ttcttcagct cgctgatgat atgctgacgc caatgccgtt tggcctccga 120 ctaacgaaaa tcccgcattt ggacggctga tccgattggc acggcggacg gcgaatggcg 180 gagcagacgc tcgtccgggg gcaatgagat atgaaaaagc ctgaactcac cgcgacgtct 240 gtcgagaagt ttctgatcga aaagttcgac agcgtctccg acctgatgca gctctcggag 300 ggcgaagaat ctcgtgcttt cagcttcgat gtaggagggc gtggatatgt cctgcgggta 360 aatagctgcg ccgatggttt ctacaaagat cgttatgttt atcggcactt tgcatcggcc 420 gcgctcccga ttccggaagt gcttgacatt ggggaattca gcgagagcct gacctattgc 480 atctcccgcc gtgcacaggg tgtcacgttg caagacctgc ctgaaaccga actgcccgct 540 gttctgcagc cggtcgcgga ggccatggat gcgatcgctg cggccgatct tagccagacg 600 agcgggttcg gcccattcgg accgcaagga atcggtcaat acactacatg gcgtgatttc 660 atatgcgcga ttgctgatcc ccatgtgtat cactggcaaa ctgtgatgga cgacaccgtc 720 agtgcgtccg tcgcgcaggc tctcgatgag ctgatgcttt gggccgagga ctgccccgaa 780 gtccggcacc tcgtgcacgc ggatttcggc tccaacaatg tcctgacgga caatggccgc 840 ataacagcgg tcattgactg gagcgaggcg atgttcgggg attcccaata cgaggtcgcc 900 aacatcttct tctggaggcc gtggttggct tgtatggagc agcagacgcg ctacttcgag 960 cggaggcatc cggagcttgc aggatcgccg cggctccggg cgtatatgct ccgcattggt 1020 cttgaccaac tctatcagag cttggttgac ggcaatttcg atgatgcagc ttgggcgcag 1080 ggtcgatgcg acgcaatcgt ccgatccgga gccgggactg tcgggcgtac acaaatcgcc 1140 cgcagaagcg cggccgtctg gaccgatggc tgtgtagaag tactcgccga tagtggaaac 1200 cgacgcccca gcactcgtcc gagggcaaag gaatagagta gatgccgacc gaacaagagc 1260 tgatttcgag aacgcctcag ccagcaactc gcgcgagcct agcaaggcaa atgcgagaga 1320 acggccttac gcttggtggc acagttctcg tccacagttc gctaagctcg ctcggctggg 1380 tcgcgggagg gccggtcgca gtgattcagg cccttctgga ttgtgttggt ccccagggca 1440 cgattgtcat gcccacgcac tcgggtgatc tgactgatcc cgcagattgg agatcgccgc 1500 ccgtgcctgc cgattgggtg cagatct 1527 <210> 157 <211> 1422 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized UGT91D2e nucleotide sequence <400> 157 atggctacat ctgattctat tgttgatgac aggaagcagt tgcatgtggc tactttccct 60 tggcttgctt tcggtcatat actgccttac ctacaactat caaaactgat agctgaaaaa 120 ggacataaag tgtcattcct ttcaacaact agaaacattc aaagattatc ttcccacata 180 tcaccattga ttaacgtcgt tcaattgaca cttccaagag tacaggaatt accagaagat 240 gctgaagcta caacagatgt gcatcctgaa gatatccctt acttgaaaaa ggcatccgat 300 ggattacagc ctgaggtcac tagattcctt gagcaacaca gtccagattg gatcatatac 360 gactacactc actattggtt gccttcaatt gcagcatcac taggcatttc tagggcacat 420 ttcagtgtaa ccacaccttg ggccattgct tacatgggtc catccgctga tgctatgatt 480 aacggcagtg atggtagaac taccgttgaa gatttgacaa ccccaccaaa gtggtttcca 540 tttccaacta aagtctgttg gagaaaacac gacttagcaa gactggttcc atacaaggca 600 ccaggaatct cagacggcta tagaatgggt ttagtcctta aagggtctga ctgcctattg 660 tctaagtgtt accatgagtt tgggacacaa tggctaccac ttttggaaac attacaccaa 720 gttcctgtcg taccagttgg tctattacct ccagaaatcc ctggtgatga gaaggacgag 780 acttgggttt caatcaaaaa gtggttagac gggaagcaaa aaggctcagt ggtatatgtg 840 gcactgggtt ccgaagtttt agtatctcaa acagaagttg tggaacttgc cttaggtttg 900 gaactatctg gattgccatt tgtctgggcc tacagaaaac caaaaggccc tgcaaagtcc 960 gattcagttg aattgccaga cggctttgtc gagagaacta gagatagagg gttggtatgg 1020 acttcatggg ctccacaatt gagaatcctg agtcacgaat ctgtgtgcgg tttcctaaca 1080 cattgtggtt ctggttctat agttgaagga ctgatgtttg gtcatccact tatcatgttg 1140 ccaatctttg gtgaccagcc tttgaatgca cgtctgttag aagataaaca agttggaatt 1200 gaaatcccac gtaatgagga agatggatgt ttaaccaagg agtctgtggc cagatcatta 1260 cgttccgttg tcgttgaaaa ggaaggcgaa atctacaagg ccaatgcccg tgaactttca 1320 aagatctaca atgacacaaa agtagagaag gaatatgttt ctcaatttgt agattaccta 1380 gagaaaaacg ctagagccgt agctattgat catgaatcct aa 1422 <210> 158 <211> 2079 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Codon-optimized A. thaliana ATR1 nucleotide sequence <400> 158 atgacttctg cactttatgc ctccgatctt ttcaaacaat tgaaaagtat catgggaacg 60 gattctttgt ccgatgatgt tgtattagtt attgctacaa cttctctggc actggttgct 120 ggtttcgttg tcttattgtg gaaaaagacc acggcagatc gttccggcga gctaaagcca 180 ctaatgatcc ctaagtctct gatggcgaaa gatgaggatg atgacttaga tctaggttct 240 ggaaaaacga gagtctctat cttcttcggc acacaaaccg gaacagccga aggattcgct 300 aaagcacttt cagaagagat caaagcaaga tacgaaaagg cggctgtaaa agtaatcgat 360 ttggatgatt acgctgccga tgatgaccaa tatgaggaaa agttgaaaaa ggaaacattg 420 gctttctttt gtgtagccac gtatggtgat ggtgaaccaa ccgataacgc cgcaagattc 480 tacaagtggt ttactgaaga gaacgaaaga gatatcaagt tgcagcaact tgcttacggc 540 gtttttgcct taggtaacag acaatacgag cactttaaca agataggtat tgtcttagat 600 gaagagttat gcaaaaaggg tgcgaagaga ttgattgaag tcggtttagg agatgatgat 660 caatctatcg aggatgactt taatgcatgg aaggaatctt tgtggtctga attagataag 720 ttacttaagg acgaagatga taaatccgtt gccactccat acacagccgt cattccagaa 780 tatagagtag ttactcatga tccaagattc acaacacaga aatcaatgga aagtaatgtg 840 gctaatggta atactaccat cgatattcat catccatgta gagtagacgt tgcagttcaa 900 aaggaattgc acactcatga atcagacaga tcttgcatac atcttgaatt tgatatatca 960 cgtactggta tcacttacga aacaggtgat cacgtgggtg tctacgctga aaaccatgtt 1020 gaaattgtag aggaagctgg aaagttgttg ggccatagtt tagatcttgt tttctcaatt 1080 catgccgata aagaggatgg ctcaccacta gaaagtgcag tgcctccacc atttccagga 1140 ccatgcaccc taggtaccgg tttagctcgt tacgcggatc tgttaaatcc tccacgtaaa 1200 tcagctctag tggccttggc tgcgtacgcc acagaacctt ctgaggcaga aaaactgaaa 1260 catctaactt caccagatgg taaggatgaa tactcacaat ggatagtagc tagtcaacgt 1320 tctttactag aagttatggc tgctttccca tccgctaaac ctcctttggg tgttttcttc 1380 gccgcaatag cgcctagact gcaaccaaga tactattcaa tttcatcctc acctagactg 1440 gcaccatcaa gagttcatgt cacatccgct ttagtgtacg gtccaactcc tactggtaga 1500 atccataagg gcgtttgttc aacatggatg aaaaacgcgg ttccagcaga gaagtctcac 1560 gaatgttctg gtgctccaat ctttatcaga gcctccaact tcaaactgcc ttccaatcct 1620 tctactccta ttgtcatggt cggtcctggt acaggtcttg ctccattcag aggtttctta 1680 caagagagaa tggccttaaa ggaggatggt gaagagttgg gatcttcttt gttgtttttc 1740 ggctgtagaa acagacaaat ggatttcatc tacgaagatg aactgaataa ctttgtagat 1800 caaggagtta tttcagagtt gataatggct ttttctagag aaggtgctca gaaggagtac 1860 gtccaacaca aaatgatgga aaaggccgca caagtttggg acttaatcaa agaggaaggc 1920 tatctatatg tctgtggtga tgcaaagggt atggcaagag atgttcacag aacacttcat 1980 actatagtcc aggaacagga aggcgttagt tcttctgaag cggaagcaat tgtgaaaaag 2040 ttacaaacag agggaagata cttgagagat gtgtggtaa 2079

Claims (36)

  1. 트랜스포터 유전자, 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자 유전자, 또는 이 둘 모두인 적어도 하나의 유전자의 변형된 발현을 포함하는 적어도 하나의 스테비올 글리코시드를 합성할 수 있는 재조합 미생물.
  2. 제 1항에 있어서, 트랜스포터 유전자가 내인성 트랜스포터 유전자 또는 이종성 트랜스포터 유전자인 재조합 미생물.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 트랜스포터 유전자가 ABC 트랜스포터 또는 MFS 트랜스포터를 인코딩하는 재조합 미생물.
  4. 제 1항 내지 제 3항 중의 어느 한 항에 있어서, 내인성 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자가 PDR1, PDR3, PDR5, PDR8, PDR10, PDR11, PDR12, PDR15, PDR18, YOR1, AUS1, SNQ2, PDR12, STE6, THI73, NFT1, ADP1, FLR1, QDR1, QDR2, QDR3, DTR1, TPO1, TPO2, TPO4, TPO3, AQR1, AZR1, ENB1, SGE1, YHK8, GEX2, HOL1, ATR1, HXT11, ENB1, ARN1, ARN2, SSU1, THI7, TPN1, SEO1, SIT1 또는 DTR1인 재조합 미생물.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중의 어느 한 항에 있어서, 변형된 발현이 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자를 과다발현하거나 발현 감소시키는 것을 포함하는 재조합 미생물.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중의 어느 한 항에 있어서, 복수의 내인성 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자를 과다발현하거나 발현 감소시키는 것을 포함하는 재조합 미생물.
  7. 제 1항 내지 제 6항 중의 어느 한 항에 있어서, YOR1, SNQ2, PDR1 또는 FLR1을 과다발현하는 것을 포함하는 재조합 미생물.
  8. 제 6항에 있어서, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 내인성 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자를 과다발현하거나 발현 감소시키는 것을 포함하는 재조합 미생물.
  9. 제 6항에 있어서, 각 유전자 로커스를 파괴함으로써 PDR5, PDR10, PDR15 및 SNQ2 유전자의 발현을 감소시키는 것을 포함하는 재조합 미생물.
  10. 제 6항에 있어서, 각 유전자 로커스를 파괴함으로써 PDR1, PDR3, PDR5, PDR10, PDR15, SNQ2 및 TPO1 유전자의 발현을 감소시키는 것을 포함하는 재조합 미생물.
  11. 제 2항에 있어서, 이종성 트랜스포터가 스테비아 트랜스포터 유전자인 재조합 미생물.
  12. 제 1항 내지 제 11항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 사카로미케스강인 재조합 미생물.
  13. 제 1항 내지 제 12항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 아가리쿠스 (Agaricus), 아스퍼길루스 (Aspergillus), 바실루스 (Bacillus), 캔디다 (Candida), 코리네박테리움 (Corynebacterium), 에스체리치아 (Escherichia), 푸사리움/깁베렐라 (Fusarium / Gibberella), 클루이베로마이세스 (Kluyveromyces), 래티포루스 (Laetiporus), 렌티누스 (Lentinus), 파피아 (Phaffia), 파네로새테 (Phanerochaete), 피치아 (Pichia), 피스코미트렐라 (Physcomitrella), 로도투룰라 (Rhodoturula), 사카로마이세스 (Saccharomyces), 쉬조사카로마이세스 (Schizosaccharomyces), 스파셀로마 (Sphaceloma), 잔토필로마이세스 (Xanthophyllomyces) 및 야로위아 (Yarrowia) 속으로부터 선택되는 재조합 미생물.
  14. 제 1항 내지 제 13항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 사카로마이세스 세레비시애 (Saccharomyces cerevisiae), 쉬조사카로마이세스 폼베 (Schizosaccharomyces pombe), 야로위아 리폴리티카 (Yarrowia lipolytica), 캔디다 글라브라타 (Candida glabrata), 아쉬비아 고스시피 (Ashbya gossypii), 사이버린드네라 자디니 (Cyberlindnera jadinii), 피치아 파스토리스 (Pichia pastoris), 클루이베로마이세스 락티스 (Kluyveromyces lactis), 한세눌라 폴리모르파 (Hansenula polymorpha), 캔디다 보이디니 (Candida boidinii), 아르술라 아데니니보란스 (Arxula adeninivorans), 잔토필로마이세스 덴드로로우스 (Xanthophyllomyces dendrorhous) 또는 캔디다 알비칸스 (Candida albicans) 종으로부터 선택되는 재조합 미생물.
  15. 제 1항 내지 제 14항 중의 어느 한 항에 있어서, 미생물이 사카로마이세스 속으로부터 비롯되는 재조합 미생물.
  16. 제 1항 내지 제 15항 중의 어느 한 항에 있어서, 미생물이 사카로마이세스 세레비시애인 재조합 미생물.
  17. 제 1항 내지 제 16항 중의 어느 한 항에 있어서, 미생물이 외인성 핵산에 의해 인코딩되는 하기 유전자 중 하나 이상을 포함하는 재조합 미생물:
    (a) 수크로스 트랜스포터 및 수크로스 신타제를 인코딩하는 하나 이상의 재조합 유전자;
    (b) GGPPS 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (c) ent-코팔릴 디포스페이트 신타제 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (d) 카우렌 신타제 (KS) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (e) 카우렌 옥시다제 (KO) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (f) 스테비올 신타제 (KAH) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (g) 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR) 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 및 또한 적절한 조합의;
    (h) UGT85C2 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (i) UGT76G1 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (j) UGT74G1 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산;
    (k) UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산; 또는
    (l) EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산.
  18. 제 17항에 있어서, 수크로스 트랜스포터가 아라비돕시스 탈리아나 (Arabidopsis thaliana)로부터의 SUC1이며; 수크로스 신타제가 코페아 아라비카 (Coffea arabica), 아라비돕시스 탈리아나, 또는 스테비아 레바우디아나 ( Stevia rebaudiana)로부터의 SUC1이며; 카우렌 신타제가 A. 탈리아나로부터 비롯되며; 카우렌 옥시다제가 S. 레바우디아나로부터 비롯되는 재조합 미생물.
  19. 제 17항 또는 제 18항에 있어서, 외인성 핵산이 코돈 최적화된 것인 재조합 미생물.
  20. 제 19항에 있어서, 외인성 핵산이 사카로마이세스 세레비시애에서의 발현을 위해 코돈 최적화된 것인 재조합 미생물.
  21. 제 17항 내지 제 20항 중의 어느 한 항에 있어서, UGT85C2, UGT76G1 및 UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함하는 재조합 미생물.
  22. 제 17항 내지 제 20항 중의 어느 한 항에 있어서, UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, 및 UGT91D2 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함하는 재조합 미생물.
  23. 제 17항 내지 제 20항 중의 어느 한 항에 있어서, UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, 및 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함하는 재조합 미생물.
  24. 제 17항 내지 제 20항 중의 어느 한 항에 있어서, UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, UGT91D2 및 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 외인성 핵산을 포함하는 재조합 미생물.
  25. (a) GGPPS; ent-코팔릴 디포스페이트 신타제 (CDPS) 폴리펩티드; 카우렌 옥시다제 (KO) 폴리펩티드; 카우렌 신타제 (KS) 폴리펩티드; 스테비올 신타제 (KAH) 폴리펩티드; 사이토크롬 P450 리덕타제 (CPR) 폴리펩티드; 및 또한, 적절한 조합의 UGT85C2 폴리펩티드; UGT74G1 폴리펩티드; UGT76G1 폴리펩티드; UGT91D2 폴리펩티드; 또는 EUGT11 폴리펩티드를 인코딩하는 유전자의 유도성 발현 또는 항시성 발현을 포함하여 상기 유전자가 발현되는 조건하에 배양 배지에서 청구항 제 1항 내지 제 24항 중의 어느 한 항에 따른 재조합 미생물을 배양하는 단계;
    (b) 재조합 미생물에서 레바우디오시드를 포함하는 화합물 중 하나 이상을 합성하는 단계; 및
    (c) 레바우디오시드를 포함하는 화합물 중 하나 이상을 분리하는 단계를 포함하여, 레바우디오시드를 생성하는 방법.
  26. 제 25항에 있어서, 레바우디오시드가 레바우디오시드 A, 레바우디오시드 B, 레바우디오시드 D, 레바우디오시드 E, 또는 레바우디오시드 M이며,
    (a) 레바우디오시드 A는 UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1 및 UGT91D2를 발현하는 재조합 미생물에서 합성될 수 있으며;
    (b) 레바우디오시드 B는 UGT85C2, UGT76G1, 및 UGT91D2 또는 EUGT11을 발현하는 재조합 미생물에서 합성될 수 있으며;
    (c) 레바우디오시드 D는 UGT85C2, UGT76G1 UGT74G1, UGT91D2 및 EUGT11을 발현하는 재조합 미생물에서 합성될 수 있으며;
    (d) 레바우디오시드 E는 UGT85C2, UGT74G1, UGT91D2 및 EUGT11을 발현하는 재조합 미생물에서 합성될 수 있으며;
    (e) 레바우디오시드 M은 UGT85C2, UGT76G1, UGT74G1, UGT91D2 및 EUGT11을 발현하는 재조합 미생물에서 합성될 수 있는 방법.
  27. 제 25항 또는 제 26항에 있어서, 재조합 미생물이 YOR1, SNQ2, PDR1 또는 FLR1을 과다발현하는 방법.
  28. 제 25항 또는 제 26항에 있어서, 재조합 미생물이 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 내인성 트랜스포터 유전자 또는 전사 인자 유전자의 감소된 발현을 갖는 방법.
  29. 제 25항 내지 제 28항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 원핵 생물 또는 진핵 생물인 방법.
  30. 제 25항 내지 제 29항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 사카로미케스강인 방법.
  31. 제 25항 내지 제 30항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 아가리쿠스, 아스퍼길루스, 바실루스, 캔디다, 코리네박테리움, 에스체리치아, 푸사리움/깁베렐라, 클루이베로마이세스, 래티포루스, 렌티누스, 파피아, 파네로새테, 피치아, 피스코미트렐라, 로도투룰라, 사카로마이세스, 쉬조사카로마이세스, 스파셀로마, 잔토필로마이세스 및 야로위아 속으로부터 선택되는 방법.
  32. 제 25항 내지 제 31항 중의 어느 한 항에 있어서, 재조합 미생물이 사카로마이세스 세레비시애, 쉬조사카로마이세스 폼베, 야로위아 리폴리티카, 캔디다 글라브라타, 아쉬비아 고스시피, 사이버린드네라 자디니, 피치아 파스토리스, 클루이베로마이세스 락티스, 한세눌라 폴리모르파, 캔디다 보이디니, 아르술라 아데니니보란스, 잔토필로마이세스 덴드로로우스 또는 캔디다 알비칸스 종으로부터 선택되는 방법.
  33. 제 25항 내지 제 32항 중의 어느 한 항에 있어서, 미생물이 사카로마이세스 속으로부터 비롯되는 방법.
  34. 제 25항 내지 제 33항 중의 어느 한 항에 있어서, 미생물이 사카로마이세스 세레비시애인 방법.
  35. 제 25항 내지 제 34항 중의 어느 한 항에 있어서, 레바우디오시드가 약 500 mg/L 내지 약 3,000 mg/L의 농도로 생성되는 방법.
  36. 스테비올 글리코시드의 분비에 영향을 끼치는 방법으로서,
    (a) 제 1항 내지 제 24항 중의 어느 한 항에 따른 재조합 미생물을 사용하여 스테비올 글리코시드를 생성하는 단계로서, 적어도 하나의 재조합 유전자가 발현되는 단계,
    (b) 스테비올 글리코시드가 합성되는 조건하에 배지에서 단계 (a)의 재조합 미생물을 배양하고, 트랜스포터 유전자, 적어도 하나의 트랜스포터 유전자의 발현을 조절하는 전사 인자 유전자, 또는 이 둘 모두인 적어도 하나의 유전자를 발현시키는 단계,
    (c) 배양 단계 동안 생성된 스테비올 글리코시드를 분리하는 단계를 포함하는 방법.
KR1020157024717A 2013-02-11 2014-02-11 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 효율적인 생성 KR20150128705A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361763290P 2013-02-11 2013-02-11
US201361763308P 2013-02-11 2013-02-11
US61/763,290 2013-02-11
US61/763,308 2013-02-11
PCT/EP2014/052675 WO2014122328A1 (en) 2013-02-11 2014-02-11 Efficient production of steviol glycosides in recombinant hosts

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20150128705A true KR20150128705A (ko) 2015-11-18

Family

ID=50112893

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020157024717A KR20150128705A (ko) 2013-02-11 2014-02-11 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 효율적인 생성

Country Status (12)

Country Link
US (3) US10017804B2 (ko)
EP (1) EP2954061B1 (ko)
JP (2) JP6576247B2 (ko)
KR (1) KR20150128705A (ko)
CN (1) CN105189771B (ko)
AU (2) AU2014213918B2 (ko)
BR (1) BR112015019160A2 (ko)
CA (1) CA2900882A1 (ko)
MX (1) MX2015010098A (ko)
MY (1) MY184253A (ko)
SG (2) SG11201506127WA (ko)
WO (1) WO2014122328A1 (ko)

Families Citing this family (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9107436B2 (en) 2011-02-17 2015-08-18 Purecircle Sdn Bhd Glucosylated steviol glycoside as a flavor modifier
US10696706B2 (en) 2010-03-12 2020-06-30 Purecircle Usa Inc. Methods of preparing steviol glycosides and uses of the same
BR122021005304B1 (pt) 2010-06-02 2022-02-22 Evolva, Inc Hospedeiro recombinante que compreende genes recombinantes para produção de esteviol ou glicosídeo de esteviol, ácido nucleico, método para produzir esteviol, glicosídeo de esteviol ou composição de glicosídeo de esteviol e método para sintetizar esteviol ou glicosídeo de esteviol
US11690391B2 (en) 2011-02-17 2023-07-04 Purecircle Sdn Bhd Glucosylated steviol glycoside as a flavor modifier
US9771434B2 (en) 2011-06-23 2017-09-26 Purecircle Sdn Bhd Products from stevia rebaudiana
CN103732753B (zh) 2011-08-08 2018-03-30 埃沃尔瓦公司 甜菊醇糖苷类的重组生产
CN103974628B (zh) * 2012-05-22 2019-04-05 谱赛科有限责任公司 高纯度的甜菊醇糖苷
US9752174B2 (en) 2013-05-28 2017-09-05 Purecircle Sdn Bhd High-purity steviol glycosides
CA3171770A1 (en) 2013-02-06 2014-08-14 Evolva Sa Methods for improved production of rebaudioside d and rebaudioside m
DK3004366T3 (da) * 2013-05-31 2019-05-20 Dsm Ip Assets Bv Mikroorganismer til diterpenproduktion
US10952458B2 (en) 2013-06-07 2021-03-23 Purecircle Usa Inc Stevia extract containing selected steviol glycosides as flavor, salty and sweetness profile modifier
DK3003058T4 (da) 2013-06-07 2023-07-24 Purecircle Usa Inc Stevia-ekstrakt indeholdende udvalgte steviolglycosider som aroma-, salt- og sødmeprofilmodifikator
BR112016000745B1 (pt) * 2013-07-15 2021-01-05 Dsm Ip Assets B.V. processo para a preparação de rebaudiosídeo m
US10370418B2 (en) * 2014-05-20 2019-08-06 Lawrence Livermore National Security, Llc Engineered microorganisms having resistance to ionic liquids
MX2017001859A (es) 2014-08-11 2017-04-11 Evolva Sa Produccion de glicosidos de esteviol en hospederos recombinantes.
CN107072237B (zh) 2014-09-02 2021-12-14 谱赛科有限责任公司 甜菊提取物
SG11201701677UA (en) * 2014-09-09 2017-04-27 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
HUE045992T2 (hu) * 2014-10-03 2020-01-28 Conagen Inc Kalóriamentes édesítõszerek és szintézismódszereik
WO2016055578A1 (en) * 2014-10-08 2016-04-14 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycoside production
AU2015353735A1 (en) * 2014-11-24 2017-06-08 Cargill, Incorporated Glycoside compositions
MX2017008043A (es) 2014-12-17 2017-12-11 Cargill Inc Compuestos de glicósido de esteviol, composiciones para ingesta por vía oral o uso oral y metodo para mejorar la solubilidad del glicósido de esteviol.
CA2973674A1 (en) * 2015-01-30 2016-08-04 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
BR112017017207B1 (pt) * 2015-02-10 2022-10-18 Purecircle Usa Inc. Processo para produzir um glicosídeo terpenoide, composição de sabor, ingrediente alimentício, alimento, bebida ou outro produto consumível, cosmético e produto farmacêutico que compreende o dito glicosídeo terpenoide
US10604743B2 (en) 2015-03-16 2020-03-31 Dsm Ip Assets B.V. UDP-glycosyltransferases
US11344051B2 (en) 2015-04-03 2022-05-31 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycosides
BR112017025709B1 (pt) 2015-05-29 2024-03-05 Cargill, Incorporated Método para produzir glicosídeos de esteviol
CN107949632B (zh) 2015-05-29 2021-06-01 嘉吉公司 用于使用高pH生产甜菊醇糖苷的发酵方法和由此获得的组合物
CN107613786A (zh) 2015-05-29 2018-01-19 嘉吉公司 产生糖苷的热处理
CN105154348B (zh) * 2015-08-05 2018-05-04 大连理工大学 一种提高酿酒酵母对纤维素水解液抑制物耐受性的方法
CN107920548A (zh) 2015-08-06 2018-04-17 嘉吉公司 用于产生甜菊醇糖苷的发酵方法
WO2017025362A1 (en) * 2015-08-07 2017-02-16 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
WO2017025648A1 (en) * 2015-08-13 2017-02-16 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycoside transport
CA2993744A1 (en) 2015-08-13 2017-02-16 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycoside transport
ES2959560T3 (es) 2015-08-21 2024-02-27 Manus Bio Inc Aumento de la productividad de células hospedadoras de E. coli que expresan funcionalmente enzimas P450
US9765117B2 (en) 2015-08-24 2017-09-19 Romek Figa Peptides for treating cancer
EP3141610A1 (en) * 2015-09-12 2017-03-15 Jennewein Biotechnologie GmbH Production of human milk oligosaccharides in microbial hosts with engineered import / export
BR122020008481B1 (pt) 2015-10-26 2022-10-18 Purecircle Usa Inc Composição de glicosídeo de esteviol contendo rebaudiosídeo q glicosilado e rebaudiosídeo r glicosilado e método para melhorar o perfil de doçura de um adoçante de estévia
WO2017106577A1 (en) 2015-12-15 2017-06-22 Purecircle Usa Inc. Steviol glycoside compositions
CN109154010A (zh) 2016-03-11 2019-01-04 埃沃尔瓦公司 在重组宿主中生产甜菊醇糖苷
CA3020671A1 (en) 2016-04-13 2017-10-19 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
EP3458599A1 (en) 2016-05-16 2019-03-27 Evolva SA Production of steviol glycosides in recombinant hosts
WO2017218325A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Codexis, Inc. Engineered beta-glucosidases and glucosylation methods
US20190127772A1 (en) * 2016-06-15 2019-05-02 Codexis, Inc. Enzymatic glycosylation of steviol glycosides and other compounds with glucose-1-phosphate
EP3471559A4 (en) * 2016-06-17 2020-04-08 Cargill, Incorporated STEVIOL GLYCOSIDE COMPOSITIONS FOR ORAL USE OR USE
MX2019001631A (es) 2016-08-12 2019-08-05 Amyris Inc Glicosiltransferasa dependiente de uridina difosfato para la produccion de alta eficiencia de rebaudiosidos.
EP3535406A1 (en) 2016-11-07 2019-09-11 Evolva SA Production of steviol glycosides in recombinant hosts
CN108085262B (zh) * 2016-11-23 2022-08-05 中国科学院天津工业生物技术研究所 对萜类或含萜精油耐受性提高或萜类产量提高的重组宿主细胞、其产生方法及其用途
WO2018124141A1 (ja) 2016-12-27 2018-07-05 サントリーホールディングス株式会社 ステビオール配糖体ヘキソース転移酵素およびそれをコードする遺伝子
AU2018211953A1 (en) 2017-01-26 2019-08-15 Manus Bio, Inc. Metabolic engineering for microbial production of terpenoid products
EP3577229A4 (en) 2017-02-03 2020-12-23 Codexis, Inc. MANIPULATED GLYCOSYL TRANSFERASES AND METHOD FOR STEVIOL GLYCOSIDE GLUCOSYLATION
EP3611265A4 (en) 2017-04-12 2021-09-01 Suntory Holdings Limited RHAMNOSE SYNTHASE FROM STEVIA AND GEN
WO2018211032A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
JP2020530271A (ja) * 2017-06-30 2020-10-22 ピーティーティー グローバル ケミカル パブリック カンパニー リミテッド 安定化されたコピー数の機能性ｄｎａ配列を有する微生物及び関連方法
US11365417B2 (en) 2017-09-12 2022-06-21 Bio Capital Holdings, LLC Biological devices and methods of use thereof to produce steviol glycosides
WO2019099649A1 (en) * 2017-11-20 2019-05-23 Manus Bio, Inc. Microbial host cells for production of steviol glycosides
CN111566222A (zh) 2017-12-05 2020-08-21 埃沃尔瓦公司 在重组宿主中产生甜菊醇糖苷
CN108070602B (zh) * 2017-12-12 2020-11-06 山东隆科特酶制剂有限公司 一种减少及推迟芽孢杆菌芽孢生成的分子改造方法
US11608364B2 (en) 2018-04-30 2023-03-21 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycoside transport
KR101929158B1 (ko) * 2018-06-07 2018-12-13 씨제이제일제당 (주) 5'-크산틸산을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 5'-크산틸산의 제조방법
US20220106619A1 (en) * 2019-01-24 2022-04-07 Amyris, Inc. Abc transporters for the high efficiency production of rebaudiosides
CN112322648A (zh) * 2019-07-30 2021-02-05 上海市农业科学院 一种abc转运蛋白基因mrp1s及其制备方法和应用
WO2021076924A1 (en) * 2019-10-16 2021-04-22 Sweegen, Inc. Steviol glycoside formulations for food and beverages
CN110846363B (zh) * 2019-11-11 2023-02-17 天津大学 一锅法生产莱鲍迪苷d的方法
US20230183302A1 (en) * 2020-04-27 2023-06-15 Université Libre de Bruxelles Yeast strains for reducing contamination by lactic acid bacteria
CN114214378A (zh) * 2021-11-23 2022-03-22 安徽金禾实业股份有限公司 一种利用枯草芽孢杆菌发酵催化制备莱鲍迪苷m的方法
WO2023122801A2 (en) * 2021-12-24 2023-06-29 The Regents Of The University Of California Saponin production in yeast
CN114561310B (zh) * 2022-03-17 2022-12-02 江南大学 一种生产甜茶苷的酿酒酵母及其应用

Family Cites Families (142)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58149697A (ja) 1982-02-27 1983-09-06 Dainippon Ink & Chem Inc β−１，３グリコシルステビオシドの製造方法
JPS591408A (ja) 1982-06-28 1984-01-06 Fukue Ito ヘヤ−トニツクの製造方法
JPS59101408A (ja) 1982-12-02 1984-06-12 Junichi Iwamura 植物生長調整剤
US5484956A (en) 1990-01-22 1996-01-16 Dekalb Genetics Corporation Fertile transgenic Zea mays plant comprising heterologous DNA encoding Bacillus thuringiensis endotoxin
US6946587B1 (en) 1990-01-22 2005-09-20 Dekalb Genetics Corporation Method for preparing fertile transgenic corn plants
JPH03277275A (ja) 1990-03-28 1991-12-09 Dainippon Ink & Chem Inc 新規酵素及びその酵素を用いた配糖体の製造方法
US5204253A (en) 1990-05-29 1993-04-20 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method and apparatus for introducing biological substances into living cells
US5306862A (en) 1990-10-12 1994-04-26 Amoco Corporation Method and composition for increasing sterol accumulation in higher plants
US5460949A (en) 1990-11-15 1995-10-24 Amoco Corporation Method and composition for increasing the accumulation of squalene and specific sterols in yeast
US5712112A (en) 1992-11-04 1998-01-27 National Science Council Of R.O.C. Gene expression system comprising the promoter region of the alpha-amylase genes
WO1995002683A1 (en) 1993-07-15 1995-01-26 Neose Pharmaceuticals Method of synthesizing saccharide compositions
US7186891B1 (en) 1996-04-12 2007-03-06 University Of Kentucky, Research Foundation Plant cells and plants expressing chimeric isoprenoid synthases
JPH10117776A (ja) 1996-10-22 1998-05-12 Japan Tobacco Inc インディカイネの形質転換方法
CA2309791A1 (en) 1997-10-06 1999-04-15 The Centre National De Recherche Scientifique Plant fatty acid hydroxylase genes
US6255557B1 (en) 1998-03-31 2001-07-03 Her Majesty The Queen In Right Of Canada As Represented By The Ministerof Agriculture And Agri-Food Canada Stevia rebaudiana with altered steviol glycoside composition
US6806076B1 (en) 1998-04-14 2004-10-19 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing isoprenoid compounds by microorganisms and a method for screening compounds with antibiotic or weeding activity
TWI250210B (en) 1998-05-06 2006-03-01 Dsm Ip Assets Bv An isolated DNA sequence coding for an enzyme involved in the mevalonate pathway or the pathway from isopentenyl pyrophosphate to farnesyl pyrophosphate
EP0955363A3 (en) 1998-05-06 2004-01-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Dna sequences encoding enzymes involved in production of isoprenoids
AU4863099A (en) 1998-07-06 2000-01-24 Dcv, Inc. Doing Business As Bio-Technical Resources Method of vitamin production
EP2305825B1 (en) 1998-07-06 2015-01-14 DCV Inc. doing business as Bio-Technical Resourses Method of vitamin production
AR021636A1 (es) 1998-12-17 2002-07-31 Rubicon Forests Holdings Ltd Materiales y metodos para la modificacion del contenido, la composicion y el metabolismo de los isoprenoides
CA2352488A1 (en) 1998-12-23 2000-06-29 The Samuel Roberts Noble Foundation, Inc. Plant transformation process
JP2002541851A (ja) 1999-04-15 2002-12-10 カルジーン エルエルシー イソプレノイド合成に関与するタンパク質の核酸配列
NZ513993A (en) 1999-04-21 2001-09-28 Samuel Roberts Noble Found Inc Plant transformation process
DE60036477T2 (de) 1999-08-04 2008-06-12 Bacher, Adelbert, Prof. Dr.med. Dr.rer.nat. Isoprenoid biosynthese
AU6780700A (en) 1999-08-18 2001-03-13 Paradigm Genetics, Inc. Methods and apparatus for transformation of monocotyledenous plants using agrobacterium in combination with vacuum filtration
WO2001083769A2 (en) 2000-05-03 2001-11-08 The Salk Institute For Biological Studies Crystallization of 4-diphosphocytidyl-2-c-methylerythritol synthesis
DE10027821A1 (de) 2000-06-05 2001-12-06 Adelbert Bacher Der Mevalonat-unabhängige Isoprenoidbiosyntheseweg
US20030033626A1 (en) 2000-07-31 2003-02-13 Hahn Frederick M. Manipulation of genes of the mevalonate and isoprenoid pathways to create novel traits in transgenic organisms
EP1313867A2 (en) 2000-08-24 2003-05-28 The Scripps Research Institute Stress-regulated genes of plants, transgenic plants containing same, and methods of use
US6689601B2 (en) 2000-09-01 2004-02-10 E. I. Du Pont De Nemours And Company High growth methanotropic bacterial strain
US6660507B2 (en) 2000-09-01 2003-12-09 E. I. Du Pont De Nemours And Company Genes involved in isoprenoid compound production
US6818424B2 (en) 2000-09-01 2004-11-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Production of cyclic terpenoids
US7229784B2 (en) * 2000-09-19 2007-06-12 Microbia, Inc. Modulation of secondary metabolite production by zinc binuclear cluster proteins
WO2002026933A2 (en) 2000-09-29 2002-04-04 Cargill Incorporated Isoprenoid production
US6949362B2 (en) 2000-12-12 2005-09-27 E. I. Du Pont De Nemours And Company Rhodococcus cloning and expression vectors
WO2002059297A2 (en) 2001-01-25 2002-08-01 Evolva Biotech A/S A library of a collection of cells
US20050003474A1 (en) 2001-01-26 2005-01-06 Desouza Mervyn L. Carotenoid biosynthesis
US20040078846A1 (en) 2002-01-25 2004-04-22 Desouza Mervyn L. Carotenoid biosynthesis
DE10201458A1 (de) 2001-04-11 2002-10-17 Adelbert Bacher Intermediate und Enzyme des Mevalonat-unabhängigen Isoprenoidbiosyntheseweg
US7034140B2 (en) 2001-04-24 2006-04-25 E.I. Du Pont De Nemours And Company Genes involved in isoprenoid compound production
CA2449885A1 (en) 2001-06-06 2002-12-12 Roche Vitamins Ag Improved isoprenoid production
AU2002341541A1 (en) 2001-06-22 2003-03-03 Syngenta Participations Ag Abiotic stress responsive polynucleotides and polypeptides
NZ513755A (en) * 2001-08-24 2001-09-28 Ann Rachel Holmes Protein expression system in yeast comprising a vector encoding a heterologous membrane protein and its application in screening for drugs
US20040072311A1 (en) 2001-08-28 2004-04-15 Dicosimo Deana J. Production of cyclic terpenoids
US20040010815A1 (en) 2001-09-26 2004-01-15 Lange B. Markus Identification and characterization of plant genes
US7172886B2 (en) 2001-12-06 2007-02-06 The Regents Of The University Of California Biosynthesis of isopentenyl pyrophosphate
EP1544300B1 (en) 2002-08-20 2009-09-30 Suntory Holdings Limited Novel glycosyltransferase genes
CN100467593C (zh) 2002-09-27 2009-03-11 Dsmip资产公司 Sqs基因
US7098000B2 (en) 2003-06-04 2006-08-29 E. I. Du Pont De Nemoure And Company Method for production of C30-aldehyde carotenoids
US7422884B2 (en) 2003-06-12 2008-09-09 Dsm Ip Assetts B.V. Feedback-resistant mevalonate kinases
US7569389B2 (en) 2004-09-30 2009-08-04 Ceres, Inc. Nucleotide sequences and polypeptides encoded thereby useful for modifying plant characteristics
ES2379368T3 (es) 2004-05-21 2012-04-25 The Regents Of The University Of California Método para aumentar la producción de compuestos isoprenoides
AU2005321630A1 (en) 2004-07-02 2006-07-06 Metanomics Gmbh Process for the production of fine chemicals
US20060014264A1 (en) 2004-07-13 2006-01-19 Stowers Institute For Medical Research Cre/lox system with lox sites having an extended spacer region
JPWO2006016395A1 (ja) 2004-08-09 2008-05-01 国立大学法人東北大学 Ｕｄｐ−グルクロニル基転移酵素およびその遺伝子
CN101044243B (zh) 2004-08-19 2011-12-28 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 类异戊二烯的生产方法
US7923552B2 (en) 2004-10-18 2011-04-12 SGF Holdings, LLC High yield method of producing pure rebaudioside A
US8338155B2 (en) 2004-12-14 2012-12-25 Dsm Ip Assets B.V. Modified mevalonate kinase with reduced feedback inhibition
CA2598792A1 (en) 2005-03-02 2006-09-08 Metanomics Gmbh Process for the production of fine chemicals
WO2006096392A2 (en) 2005-03-04 2006-09-14 Diversa Corporation Enzymes involved in astaxanthin, carotenoid and isoprenoid biosynthetic pathways, genes encoding them and methods of making and using them
JP4284562B2 (ja) 2005-03-04 2009-06-24 独立行政法人産業技術総合研究所 Ｕｄｐ−キシロースの製造方法
US7989677B2 (en) 2005-08-17 2011-08-02 Nestec S. A. Nucleic acids and proteins associated with sucrose accumulation in coffee
US8293307B2 (en) 2005-10-11 2012-10-23 Purecircle Sdn Bhd Process for manufacturing a sweetener and use thereof
KR101374346B1 (ko) 2005-11-23 2014-03-14 더 코카콜라 컴파니 시간 특성 및/또는 향미 특성이 개선된 천연 고효능 감미료조성물, 그 제제 방법 및 용도
KR100784261B1 (ko) 2006-01-02 2007-12-11 한국과학기술원 탄저균의 포자외막 단백질을 이용한 목적단백질의 미생물표면발현방법
US7927851B2 (en) 2006-03-21 2011-04-19 Vineland Research And Innovation Centre Compositions having ent-kaurenoic acid 13-hydroxylase activity and methods for producing same
CA2644273A1 (en) 2006-04-05 2008-03-27 Metanomics Gmbh Process for the production of a fine chemical
US8114645B2 (en) 2006-05-19 2012-02-14 The Regents Of The University Of California Methods for increasing isoprenoid and isoprenoid precursor production by modulating fatty acid levels
JP5225986B2 (ja) 2006-06-19 2013-07-03 ジボダン エス エー 核酸、ポリペプチドおよびその利用
WO2008008256A2 (en) 2006-07-07 2008-01-17 The Regents Of The University Of California Methods for enhancing production of isoprenoid compounds by host cells
BRPI0716954A2 (pt) 2006-09-26 2013-10-29 Univ California Produção de isoprenóides e precursores de isoprenóides
US7741119B2 (en) 2006-09-28 2010-06-22 E. I. Du Pont De Nemours And Company Xylitol synthesis mutant of xylose-utilizing zymomonas for ethanol production
US7629156B2 (en) 2006-09-28 2009-12-08 E.I. Du Pont De Nemours And Company Ethanol production in fermentation of mixed sugars containing xylose
CN101200480B (zh) 2006-12-15 2011-03-30 成都华高药业有限公司 莱鲍迪甙a的提取方法
JP4915917B2 (ja) 2006-12-22 2012-04-11 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 ラクト−ｎ−ビオースｉ及びガラクト−ｎ−ビオースの製造方法
JP2008237110A (ja) 2007-03-27 2008-10-09 Institute Of Physical & Chemical Research ステビオール合成酵素遺伝子及びステビオールの製造方法
EP2152852A2 (en) 2007-05-17 2010-02-17 Tetravitae Bioscience, Inc. Methods and compositions for producing solvents
US20080292775A1 (en) 2007-05-22 2008-11-27 The Coca-Cola Company Delivery Systems for Natural High-Potency Sweetener Compositions, Methods for Their Formulation, and Uses
WO2009005704A1 (en) 2007-07-03 2009-01-08 The Regents Of The University Of California Methods of increasing isoprenoid or isoprenoid precursor production
JP2009034080A (ja) 2007-08-03 2009-02-19 Sanei Gen Ffi Inc 新規糖転移酵素、及びそれを利用した配糖体の製造
US7964232B2 (en) 2007-09-17 2011-06-21 Pepsico, Inc. Steviol glycoside isomers
DE112008002456T5 (de) 2007-09-21 2011-01-13 Basf Plant Science Gmbh Pflanzen mit erhöhtem Ertrag
US20110038957A1 (en) 2007-12-03 2011-02-17 Ann Fowler Novel nutraceutical compositions containing stevia extract or stevia extract constituents and uses thereof
WO2009086049A2 (en) 2007-12-27 2009-07-09 Mc Neil Nutritionals, Llc Synergistic sweetening compositions
CN102007214A (zh) 2008-02-20 2011-04-06 塞瑞斯公司 赋予植物提高的氮利用效率特性的核苷酸序列和相应的多肽
TWI475963B (zh) 2008-02-25 2015-03-11 Coca Cola Co 甜菊糖苷ａ衍生性產物以及製造彼的方法
CA2728285A1 (en) 2008-03-03 2009-09-11 Joule Unlimited, Inc. Engineered co2 fixing microorganisms producing carbon-based products of interest
WO2009140394A1 (en) 2008-05-13 2009-11-19 Cargill, Incorporated Separation of rebaudioside a from stevia glycosides using chromatography
WO2010021001A2 (en) 2008-08-19 2010-02-25 Kaushik Ramakrishnan S Process for preparing sweetener from stevia rebaudiana
PL2350110T3 (pl) 2008-10-03 2016-12-30 Nowe glikozydy stewiolowe
CN101720910B (zh) 2008-10-23 2012-07-25 大闽食品（漳州）有限公司 一种甜菊糖甙的制备方法
US8614085B2 (en) * 2009-02-27 2013-12-24 Butamax(Tm) Advanced Biofuels Llc Yeast with increased butanol tolerance involving a multidrug efflux pump gene
US20100297722A1 (en) 2009-05-20 2010-11-25 Board Of Trustees Of Southern Illinois University Transgenic moss producing terpenoids
RU2517602C2 (ru) 2009-06-08 2014-05-27 Йенневайн Биотехнологи Гмбх Синтез нмо
US9131718B2 (en) 2009-06-16 2015-09-15 Epc (Beijing) Natural Products Co., Ltd. Process for rebaudioside D
WO2011028671A1 (en) 2009-09-04 2011-03-10 Redpoint Bio Corporation Sweetness enhancers including rebaudioside a or d
CN102595932B (zh) 2009-09-22 2014-07-16 红点生物公司 莱苞迪苷c的新多晶型物及其制备和使用方法
JP5759998B2 (ja) 2009-10-15 2015-08-05 ピュアサークル スドゥン バハド 高純度のレバウジオシドｄとその適用
US8299224B2 (en) 2009-10-15 2012-10-30 Purecircle Sdn Bhd High-purity Rebaudioside D
US8703224B2 (en) 2009-11-04 2014-04-22 Pepsico, Inc. Method to improve water solubility of Rebaudioside D
SG181422A1 (en) 2009-11-10 2012-07-30 Massachusetts Inst Technology Microbial engineering for the production of chemical and pharmaceutical products from the isoprenoid pathway
CA2780527C (en) 2009-11-23 2020-12-01 E. I. Du Pont De Nemours And Company Sucrose transporter genes for increasing plant seed lipids
SG181601A1 (en) 2009-12-10 2012-07-30 Univ Minnesota Tal effector-mediated dna modification
WO2011090709A1 (en) 2009-12-28 2011-07-28 The Coca-Cola Company Sweetness enhancers, compositions thereof, and methods for use
KR101244315B1 (ko) 2010-10-19 2013-03-14 이화여자대학교 산학협력단 에탄올―저항성 효모 유전자 및 이의 용도
WO2011140329A1 (en) 2010-05-06 2011-11-10 Ceres, Inc. Transgenic plants having increased biomass
WO2011146833A1 (en) 2010-05-20 2011-11-24 Evolva Inc. Method of producing isoprenoid compounds in yeast
EP2575499A2 (en) 2010-05-31 2013-04-10 Vib Vzw The use of transporters to modulate flavor production by yeast
BR122021005304B1 (pt) 2010-06-02 2022-02-22 Evolva, Inc Hospedeiro recombinante que compreende genes recombinantes para produção de esteviol ou glicosídeo de esteviol, ácido nucleico, método para produzir esteviol, glicosídeo de esteviol ou composição de glicosídeo de esteviol e método para sintetizar esteviol ou glicosídeo de esteviol
US20120021111A1 (en) 2010-07-23 2012-01-26 Aexelon Therapeutics, Inc. Natural Low Caloric Sweetener Compositions for Use in Beverages, Foods and Pharmaceuticals, and Their Methods of Manufacture
US20120050021A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Ford Global Technologies, Llc Method and Apparatus for In-Vehicle Presence Detection and Driver Alerting
US20120083593A1 (en) 2010-10-01 2012-04-05 Shanghai Yongyou Bioscience Inc. Separation and Purification of Stevioside and Rebaudioside A
CA2819253A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Massachusetts Institute Of Technology Microbial production of natural sweeteners, diterpenoid steviol glycosides
KR20130014227A (ko) 2011-07-29 2013-02-07 한국생명공학연구원 신규한 α-글루코실 스테비오사이드 및 이의 제조 방법
CA2843549A1 (en) 2011-08-08 2013-02-14 Shriram RAGHAVAN Methods and materials for recombinant production of saffron compounds
CN103732753B (zh) 2011-08-08 2018-03-30 埃沃尔瓦公司 甜菊醇糖苷类的重组生产
SG11201401927PA (en) 2011-11-23 2014-09-26 Evolva Sa Methods and materials for enzymatic synthesis of mogroside compounds
CN103159808B (zh) 2011-12-09 2017-03-29 上海泓博智源医药股份有限公司 一种制备天然甜味剂的工艺方法
RU2599166C2 (ru) * 2011-12-19 2016-10-10 Дзе Кока-Кола Компани Способы очистки стевиоловых гликозидов и их применение
AU2013211605B2 (en) 2012-01-23 2017-04-06 Dsm Ip Assets B.V. Diterpene production
JP6251669B2 (ja) 2012-03-16 2017-12-20 サントリーホールディングス株式会社 ステビオール配糖体化酵素およびそれをコードする遺伝子
CN103974628B (zh) 2012-05-22 2019-04-05 谱赛科有限责任公司 高纯度的甜菊醇糖苷
CA2886893C (en) 2012-09-29 2019-05-07 Yong Wang Method for producing stevioside compounds by microorganism
WO2014086890A1 (en) 2012-12-05 2014-06-12 Evolva Sa Steviol glycoside compositions sensory properties
CA3171770A1 (en) 2013-02-06 2014-08-14 Evolva Sa Methods for improved production of rebaudioside d and rebaudioside m
CA2912347A1 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Dsm Ip Assets B.V. Extracellular diterpene production
DK3004366T3 (da) 2013-05-31 2019-05-20 Dsm Ip Assets Bv Mikroorganismer til diterpenproduktion
KR101559478B1 (ko) 2013-06-24 2015-10-13 한국생명공학연구원 효소전환법을 이용한 천연 고감미료의 제조방법
BR112016000745B1 (pt) 2013-07-15 2021-01-05 Dsm Ip Assets B.V. processo para a preparação de rebaudiosídeo m
WO2015011209A1 (en) 2013-07-23 2015-01-29 Dsm Ip Assets B.V. Diterpene production in yarrowia
MX2016000825A (es) 2013-07-31 2016-05-24 Dsm Ip Assets Bv Glicosidos de esteviol.
EP3536697A1 (en) 2013-07-31 2019-09-11 DSM IP Assets B.V. Recovery of steviol glycosides
AU2014297224A1 (en) 2013-08-02 2016-03-03 Suntory Holdings Limited Method for using hexenol glycosyl transferase
CN103397064B (zh) 2013-08-14 2015-04-15 苏州汉酶生物技术有限公司 一种酶法制备瑞鲍迪甙m的方法
EP3039132A2 (en) 2013-08-30 2016-07-06 Evolva SA A method for producing modified resveratrol
SG11201606673RA (en) 2014-03-07 2016-09-29 Evolva Sa Methods for recombinant production of saffron compounds
MX2017001859A (es) 2014-08-11 2017-04-11 Evolva Sa Produccion de glicosidos de esteviol en hospederos recombinantes.
SG11201701677UA (en) 2014-09-09 2017-04-27 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
CA2973674A1 (en) 2015-01-30 2016-08-04 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts
CN104845990A (zh) 2015-06-11 2015-08-19 山东大学 拟南芥糖基转移酶基因ugt73c7在提高植物抗病性中的应用
WO2017025362A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Evolva Sa Production of steviol glycosides in recombinant hosts

Also Published As

Publication number Publication date
AU2014213918B2 (en) 2017-11-09
JP2019162110A (ja) 2019-09-26
CN105189771B (zh) 2019-11-05
SG10201705993YA (en) 2017-08-30
AU2018200950A1 (en) 2018-03-01
SG11201506127WA (en) 2015-09-29
US11021727B2 (en) 2021-06-01
JP2016506743A (ja) 2016-03-07
JP6576247B2 (ja) 2019-09-18
WO2014122328A1 (en) 2014-08-14
US20220017932A1 (en) 2022-01-20
CA2900882A1 (en) 2014-08-14
US20150361476A1 (en) 2015-12-17
US20180371517A1 (en) 2018-12-27
US10017804B2 (en) 2018-07-10
BR112015019160A2 (pt) 2017-08-22
CN105189771A (zh) 2015-12-23
AU2014213918A1 (en) 2015-08-20
EP2954061B1 (en) 2023-11-22
WO2014122328A8 (en) 2015-09-17
MY184253A (en) 2021-03-29
MX2015010098A (es) 2016-04-19
EP2954061A1 (en) 2015-12-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2020273296B2 (en) Methods for improved production of rebaudioside D and rebaudioside M
KR20150128705A (ko) 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 효율적인 생성
US20240026409A1 (en) Production of steviol glycoside in recombinant hosts
KR101971818B1 (ko) 스테비올 글리코시드의 재조합 생산
KR102114493B1 (ko) 스테비올 글리코시드의 재조합 생산
US20220195477A1 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts
US20220154234A1 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts
US20210155966A1 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts
KR20170052647A (ko) 재조합 숙주에서 스테비올 글리코시드의 생성
US20210403970A1 (en) Production of Steviol Glycosides in Recombinant Hosts
US11396669B2 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts
WO2019110684A1 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts
WO2018211032A1 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts
AU2018200459A1 (en) Recombinant production of steviol glycosides
US20190048356A1 (en) Production of steviol glycosides in recombinant hosts

Legal Events

Date Code Title Description
WITB Written withdrawal of application