CN102595932B - 莱苞迪苷c的新多晶型物及其制备和使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明的实施方案包括一种制造并纯化莱苞迪苷C的方法。特别地，本发明涉及使用一个或多个结晶步骤对莱苞迪苷C组合物进行纯化以得到基本纯的莱苞迪苷C产物的方法。本发明公开了制得的莱苞迪苷C的多晶型物形式、基本纯的莱苞迪苷C组合物，及其用途。

Description

莱苞迪苷C的新多晶型物及其制备和使用方法

引言

本申请主张2009年9月22日提交的美国临时申请61/244,803号的优先权，通过参考以其完整形式将其内容并入本文中。

发明背景

已经对甜菊(Stevia)的甜的二萜糖苷进行了表征，并已经鉴定了甜菊醇(steviol)的八种甜的糖苷。这些糖苷在甜菊叶子中积聚，在叶子中它们可达到叶子重量的10～20％。基于干重，在甜菊的叶子中发现的四种主要糖苷的典型概括包括0.3％的杜克尔苷(dulcoside)、0.6％的莱苞迪苷C(rebaudioside)、3.8％的莱苞迪苷A和9.1％的甜菊苷。在甜菊内鉴定到的其他糖苷包括莱苞迪苷B、D和E；以及杜克尔苷A和B。在甜菊叶子中存在的四种主要二萜糖苷甜味剂中，仅有两种(甜菊苷和莱苞迪苷A)具有充分表征的物理和感官性质。已知甜菊苷比蔗糖甜110～270倍，莱苞迪苷A比蔗糖甜150～320倍，莱苞迪苷C比蔗糖甜40～60倍，且杜克尔苷A比蔗糖甜30倍。

在甜菊提取物中发现的二萜糖苷中，已知莱苞迪苷A具有的后味最少。许多人将这种后味描述为苦的和类似于甘草的味道，且其存在于所有目前的甜菊提取物中。

莱苞迪苷A已经在其与其他甜味剂如果糖、葡萄糖和蔗糖的混合物中在等同于3％(w/v-％)、5％(w/v-％)和7％(w/v-％)蔗糖的强度下进行了试验，以确定在这些混合物中协同作用的存在和程度(Schiffmann等，Brain Research Bulletin 38：105-120(1995))。根据结果，莱苞迪苷A在与果糖和葡萄糖的混合物中呈现相加效果，但在与蔗糖的混合物中在等同于3％(w/v-％)蔗糖的甜度强度下具有协同效应。在等同于5％(w/v-％)的甜度强度下，莱苞迪苷A在与果糖、葡萄糖和蔗糖的混合物中具有相加效果。在等同于7％(w/v-％)蔗糖的甜度强度下，莱苞迪苷A在与蔗糖的混合物中具有相加效果，但在与葡萄糖和果糖的混合物中具有抑制效果。事实上，在等同于7％(w/v-％)蔗糖水平的甜度强度下没有甜味剂组合具有协同效应。

美国专利4,612,942提出，当添加的二萜糖苷的量小于二萜糖苷在可经口消耗组合物中的甜味阈值水平时，二萜糖苷能够改变或提高滋味特征，如甜味。

先前报道的制造和纯化莱苞迪苷C的尝试需要大量的反应步骤或反复的纯化步骤。对于提供使用更少纯化步骤来制造莱苞迪苷C的简单、高效且经济的方法，存有需要。对于相当易溶、稳定并能够更好处理且共混的莱苞迪苷C晶型，也存在着需要。

发明概述

本发明涉及基本纯的多晶型物形式的莱苞迪苷C、对莱苞迪苷C进行纯化的方法、用于制备多晶型物形式的莱苞迪苷C的方法以及多晶型物形式莱苞迪苷C在提高碳水化合物甜味剂如蔗糖和果糖的甜味中的用途。

本发明的一个方面是提供不同多晶型物形式的莱苞迪苷C，尤其是I晶型莱苞迪苷C(如图2中所示)。还提供用于制备不同多晶型物形式的莱苞迪苷C的方法。

本发明的一个方面是提供包含一个或多个结晶步骤的用于纯化莱苞迪苷C的方法。优选地，这种纯化方法包括将甜菊提取物固体或粗莱苞迪苷C固体与包含有机溶剂的结晶溶液合并以形成粗莱苞迪苷C溶液并从粗莱苞迪苷C溶液中结晶具有以干重计至少约90％纯度的基本纯的莱苞迪苷C固体。优选地，结晶溶液包含甲醇、乙醇、异丙醇或其混合物。所述结晶溶液能够以例如约5重量％～约25重量％的量包含水。在所述纯化方法的结晶步骤中，能够将莱苞迪苷C多晶型晶体用作晶种。

本发明的一个方面是提供一种提高碳水化合物甜味剂的甜味的方法。该方法包括给对象施用碳水化合物甜味剂和有效量的一种或多种莱苞迪苷C多晶型物，尤其是I晶型莱苞迪苷C，其中所述有效量提供甜味增强效果而不展示任何异味。优选地，所述碳水化合物甜味剂是蔗糖、果糖或葡萄糖。在一个实施方案中，所述碳水化合物甜味剂和一种或多种莱苞迪苷C多晶型物在消耗品中施用。所述消耗品包括但不限于，食品、饮食补充剂、营养保健品(nutraceutical)、药物组合物、牙齿卫生组合物或化妆品。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物以约150μM～约600μM的浓度存在于消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物以约150μM～约350μM的浓度存在于消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物以约350μM～约600μM的浓度存在于消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物以约250μM～约350μM并优选约250μM或约300μM的浓度存在于消耗品中。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约5～12％(w/v-％)的蔗糖溶液。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约5～7％(w/v-％)的蔗糖溶液。在另一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约8～12％(w/v-％)的蔗糖溶液。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约5％(w/v-％)、约6％(w/v-％)、约7％(w/v-％)或约8％(w/v-％)的蔗糖溶液。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约9％(w/v-％)、约10％(w/v-％)、约11％(w/v-％)或约12％(w/v-％)的蔗糖溶液。

本发明的一个方面是提供消耗品，所述消耗品包含碳水化合物甜味剂和有效提高碳水化合物甜味剂的甜味而不展示异味的量的一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C。在一个实施方案中，本发明的消耗品含有约150μM～约600μM的一种或多种莱苞迪苷C多晶型物。在一个实施方案中，本发明的消耗品含有约150μM～约350μM、约250μM～约350μM并优选约250μM或约300μM的一种或多种莱苞迪苷C多晶型物。在一个实施方案中，本发明的消耗品含有约350μM～约600μM的一种或多种莱苞迪苷C多晶型物。在一个实施方案中，消耗品具有等同于约5～12％(w/v-％)的蔗糖溶液的甜度强度。在一个实施方案中，消耗品具有等同于约5～7％(w/v-％)的蔗糖溶液的甜度强度。在另一个实施方案中，消耗品具有等同于约8～12％(w/v-％)的蔗糖溶液的甜度强度。在一个实施方案中，本发明消耗品的甜度强度等同于约5％(w/v-％)、约6％(w/v-％)、约7％(w/v-％)、约8％(w/v-％)、约9％(w/v-％)、约10％(w/v-％)、约11％(w/v-％)或约12％(w/v-％)的蔗糖溶液。

本发明的另一个方面是提供一种降低消耗品中碳水化合物甜味剂的量的方法，所述方法包括向消耗品中添加一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C，并由此降低为展示给定的甜度水平所需的量的碳水化合物甜味剂。

在一个方面中，本发明提供一种桌面甜味剂组合物，其包含(i)至少一种碳水化合物甜味剂；(ii)一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C；以及(iii)任选的增量剂。理想地，所述一种或多种莱苞迪苷C多晶型物各自以有效地协同提高碳水化合物甜味剂甜度的量存在。

在另一个方面中，本发明提供一种桌面甜味剂组合物，其基本由(i)至少一种碳水化合物甜味剂；(ii)一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C；以及(iii)任选的增量剂构成，其中所述一种或多种莱苞迪苷C多晶型物各自以有效地协同提高碳水化合物甜味剂甜度的量存在。

在一个方面中，本发明提供一种制备桌面甜味剂组合物的方法，所述组合物包含(i)至少一种碳水化合物甜味剂；(ii)一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C；以及(iii)任选的增量剂。在一个实施方案中，以有效地协同提高碳水化合物甜味剂甜度的量包括所述一种或多种莱苞迪苷C多晶型物。在具体实施方案中，所述一种或多种莱苞迪苷C多晶型物各自独立地为约150μM～约600μM的浓度。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物在桌面甜味剂组合物中以约150μM～约350μM的浓度存在。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物在桌面甜味剂组合物中以约350μM～约600μM的浓度存在。在一个实施方案中，一种或多种莱苞迪苷C多晶型物在桌面甜味剂组合物中以约250μM～约350μM并优选约250μM或约300μM的浓度存在。

本发明的另一个方面是提供一种提高包含碳水化合物甜味剂的消耗品的甜度的方法，所述方法包括以有效提高消耗品的甜度的量向所述消耗品中添加一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约5～12％(w/v-％)的蔗糖溶液。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约5％(w/v-％)、约6％(w/v-％)、约7％(w/v-％)或约8％(w/v-％)的蔗糖溶液。在一个实施方案中，消耗品的甜度强度等同于约9％(w/v-％)、约10％(w/v-％)、约11％(w/v-％)或约12％(w/v-％)的蔗糖溶液。

在一个实施方案中，以获得约150μM～约600μM的浓度的量向消耗品中添加一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C。

本发明的其他实施方案和优势在下面的说明部分中阐述，且将根据所述说明进行扩展或可通过本发明的实践而了解。利用在权利要求书中特别点出的元素和组合可实现并获得本发明的实施方案和优势。

应理解，上面的概述和下面的详细说明两者都仅是示例性和说明性的且不限制所要求保护的本发明。

附图说明

图1是在散射强度对d-间距(d-spacing)的图上，对如实施例1中所述的无定形莱苞迪苷C(B2-原始粉末)、从甲醇/异丙醇中结晶的莱苞迪苷C(G1-MeOH/iPrOH)、从无水甲醇中结晶的莱苞迪苷C(D1-MeOH)、从无水乙醇中结晶的莱苞迪苷C(A1-EtOH)和从甲醇/异丙醇中重结晶的莱苞迪苷C(合并并从MeOH/iPrOH中重结晶的)进行比较的粉末x射线衍射扫描。

图2是在散射强度对d-间距的图上，I晶型莱苞迪苷C的粉末x射线衍射扫描。

发明详述

莱苞迪苷C(下文中也为“Reb c”)具有如下化学式：

其中R和R₁为葡萄糖且R₂为鼠李糖。通过本领域中已知的方法，能够制备Reb C，如通过美国专利No.4,361,697中所述的从甜叶菊(Stevia rebaudiana)植物材料中进行分离，所述专利通过参考以其完整的形式全部并入本文中。

Reb C可含有一个或多个不对称中心并可由此产生对映体、非对映体和其他立体异构形式。本发明意图包涵使用这样的可能形式、及其外消旋和拆分形式及其混合物的应用。鉴于本发明，可根据本领域技术人员已知的方法来分离各种对映体。本发明还计划包涵所有的互变异构体。

在本文中使用时，术语“立体异构体”是各种分子仅有原子的空间取向差别的所有异构体的通称。其包括具有一个以上手性中心的化合物的对映体和异构体，所述手性中心相互不是镜像(非对映体)。

术语“手性中心”是指连接了四个不同基团的碳原子。

术语“对映体”和“对映体的”是指不能叠加在其镜面图像上并因此是光学活性的分子，其中对映体使得在一个方向上旋转偏振光平面且其镜像化合物以相反方向旋转偏振光平面。

术语“外消旋”是指等份对映体的混合物且所述混合物是光学上无活性的。

术语“拆分”是指分子的两种对映体形式中的一种的分离或浓缩或贫化。

未指示数量的指称物是指一个或多个。

在本文中使用时，术语“甜度强度”是指通过个体、例如人所观察或体验到的甜味感觉的相对强度、或根据American Society forTesting Materials，Special Technical Publication-434：″Manual on SensoryTesting Methods，″ASTM International，West Conshohocken，PA(1996)中所述的程序，由试味者(taster)察觉的甜度程度或量，例如用于感觉评价的0(无)～8(非常强)的等级。

在本文中使用时，短语“甜味增强效果”是指Reb C的效果使得以超过相加的方式、即协同地加强甜调味剂的感官感知。

在本文中使用时，术语“异味”是指在消耗品中不是特征性或通常发现的味道的量或程度。例如，异味是增甜消耗品中消费者所不期望的味道，如苦味、甘草样味道、金属味、令人厌恶的味道、恶臭的味道、发涩的味道、甜味出现延迟和甜的后味逗留等。

在本文中使用时，短语“其固有甜度的检测阈值”是指在个体、例如人可感知Reb C多晶型物的甜度下时，Reb C多晶型物的浓度。

在本文中与测量的量一起使用时，“约”是指在所述测量的量中的正常变动，如同技术人员所预期的，使得测量和行事的小心水平与测量的目标和测量设备的精度相匹配。

在本文中使用时，术语“w/v-％”是指每100ml本发明的液体组合物中组分的重量(克)。

在本文中使用时，术语“干重”或“基于干燥的重量”是指在通过对固体组合物进行干燥将所有水含量除去之后所述组合物的重量。

在本文中使用时，术语“基本”或“基本纯的”是指Reb C组合物包括以干重计至少约90％的Reb C，在另一个实施方案中以干重计为约90％～约95％的Reb C，在还另一个实施方案中，以干重计为约99％～约100％的Reb C。

在本文中使用时，术语“结晶溶液”是指包含一种或多种有机溶剂的液体。有机溶剂的非限制性实例包括醇、酮和腈。在本文中使用时，醇是指连接至少一个羟基部分的任何直链、支链、或环状、取代或未取代的烷基、烯基或炔基基团。醇的非限制性实例包括乙醇、甲醇、异丙醇、1-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、叔丁醇和异丁醇。所述结晶溶液还能够含有水。

在本文中使用时，术语“浆料溶液”是指包含一种或多种有机溶剂的液体，其中基本纯的Reb C仅少量溶解。

在本文中使用时，术语“粗莱苞迪苷C固体”是指包括以干重计至少40％的Reb C的固体。

在本文中使用时，术语“甜菊提取物固体”是指从甜叶菊 叶子中提取的并包括以干重计约0.6％～约80％的Reb C的任何固体。

在本文中使用时，术语“晶型(crystalline form)”和“多晶型物(polymorph)”同义，并且是指在固体材料内分子在所有三维空间中以特定有序重复模式延伸存在的能力。

在本文中使用时，术语“晶种”是指能够生长成相同材料的大晶体的小片多晶材料。典型地，通过将晶种浸入相同材料的溶液中能够生长成大晶体。

在本文中使用时，术语“引晶”是指向相同材料的溶液添引晶以生长更大晶体的工艺，所述更大晶体的分子构成，如果不同于、则以类似于晶种分子构成的方式排列在所述更大晶体内。

在本文中使用时，术语“最小量”是指完全溶解溶质以形成均匀溶液所需要的溶剂的最小体积。

在本文中使用时，短语“协同提高甜度”是指Reb C或Reb C多晶型物与碳水化合物甜味剂在一起效果使得以超过相加方式提高甜滋味的感官感知。

除非有其他说明，否则短语“碳水化合物甜味剂”包括热量甜味剂如蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆(含有果糖和葡萄糖)、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖和糖醇如赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、山梨醇和肌醇。

本发明的示例性实施方案提供一种通过从包含有机溶剂的结晶溶液中结晶Reb C对Reb C进行纯化以制造基本纯的形式的Reb C的方法。本发明的其他示例性实施方案包括包含Reb C的一种或多种多晶型物的组合物。本发明另外的其他示例性实施方案包括制备Reb C的多晶型物形式的方法。下面对本发明的示例性实施方案进行详细说明并示于图1和2中。

对Reb C进行纯化的方法

Reb C(＞93％的HPLC纯度)能够作为莱苞迪苷A(“Reb A”)纯化的副产物商购得到且主要通过从甜菊提取物反复的分离和纯化循环而制得。包含Reb C的粗甜菊提取物也可商购获得。然而，这些甜菊提取物包含以干重计约40％～约95％、约60％～约85％或约70％～约85％的Reb A。在一个实施方案中，粗Reb C能够从甜菊植物中提取并通过结晶或重结晶进行纯化。主要的杂质包括其他甜菊醇糖苷如甜菊苷、Reb A、莱苞迪苷B(“Reb B”)和莱苞迪苷D(“Reb D”)。通过改变结晶溶液中水或有机溶剂的量能够将甜菊醇糖苷杂质除去。因此，纯化方法取决于存在于粗Reb C起始材料中的杂质。

本发明的一个方面涉及纯化Reb C的方法。在本发明的一个实施方案中，能够将Reb C起始材料与结晶溶液合并以形成粗Reb C溶液。在一个实施方案中，Reb C起始材料为甜菊提取物固体。在另一个实施方案中，Reb C起始材料为粗Reb C固体。在一个实施方案中，结晶溶液包含一种或多种有机溶剂。在另一个实施方案中，结晶溶液包含水和一种或多种有机溶剂的混合物。所述结晶溶液能够包含约5重量％～约25重量％量的水和一种或多种有机溶剂。或者，所述结晶溶液能够包含约15重量％～约20重量％量的水和一种或多种有机溶剂。

在另一个实施方案中，结晶溶液包含醇，如乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇或其混合物。在另一个实施方案中，结晶溶液包含无水乙醇。在另一个实施方案中，结晶溶液包含无水甲醇。在另一个实施方案中，结晶溶液包含异丙醇与甲醇的混合物。在本发明的该方面中，异丙醇与甲醇在结晶溶液中能够以约15份～约1份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并。在另一个实施方案中，异丙醇与甲醇在结晶溶液中能够以约10份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并。在另一个实施方案中，异丙醇与甲醇在结晶溶液中能够以约5份～约1份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并。在另一个实施方案中，异丙醇与甲醇在结晶溶液中能够以约2份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并。

在一个实施方案中，粗Reb C溶液以约30份～约1份Reb C起始材料对约1份结晶溶液的重量比包含结晶溶液和Reb C起始材料。在另一个示例性实施方案中，粗Reb C溶液以约20份～约1份Reb C起始材料对约1份结晶溶液的重量比包含结晶溶液和Reb C起始材料。在另一个实施方案中，粗Reb C溶液以约30份～约1份结晶溶液对约1份Reb C起始材料的重量比包含结晶溶液和Reb C起始材料。

在一个实施方案中，在大约室温下实施纯化Reb C的方法。室温为约20℃～约27℃。在一个实施方案中，在20℃下实施所述方法。在另一个实施方案中，所述方法还包括对粗Reb C溶液进行加热的步骤。在另一个实施方案中，加热粗Reb C溶液的步骤包括将粗Reb C溶液加热至约20℃～约70℃、约20℃～约60℃、约20℃～约40℃或约40℃～约60℃范围的温度。在另一个实施方案中，加热粗Reb C溶液的步骤包括将粗Reb C溶液加热至约回流的温度。加热粗Reb C溶液的步骤包括将粗Reb C溶液加热约0.25小时～约8小时。在另一个示例性实施方案中，其中对Reb C进行纯化的方法包括对粗Reb C溶液进行加热的步骤，所述方法还包括对粗Reb C溶液进行冷却的步骤。在一个实施方案中，对粗Reb C溶液进行冷却的步骤包括将粗Reb C溶液冷却至约4℃～约25℃的温度。对粗Reb C溶液进行冷却的步骤包括对粗Reb C溶液冷却约0.5小时～约24小时。

对Reb C纯化的方法还包括从粗Reb C溶液中结晶基本纯的Reb C以制造基本纯的Reb C晶体的步骤，所述Reb C晶体包含以干重计大于约95重量％、以干重计大于约97重量％、以干重计大于约98重量％或以干重计大于约99重量％的量的Reb C。在结晶步骤期间，能够对粗Reb C溶液进行搅拌或静置不搅拌。

在另一个实施方案中，基本纯的Reb C的结晶方法还可包括在合适温度下利用基本纯的Reb C种晶以足以促进结晶的量对粗Reb C溶液引晶的任选步骤。在具体实施方案中，能够将分离的I晶型Reb C晶体用于在合适温度下对粗Reb C溶液引晶以促进基本纯的I晶型Reb C晶体的结晶。足以促进结晶的基本纯的Reb C种晶的量占存在于粗RebC溶液中的Reb C的约0.0001～约1重量％。在另一个实施方案中，足以促进结晶的基本纯的Reb C种晶的量占存在于粗Reb C溶液中的RebC的约0.01～约1重量％。用于引晶步骤的合适温度包括约5℃～约30℃范围的温度。在一个实施方案中，用于引晶步骤的合适温度范围包括约10℃～约25℃、约15℃～约20℃、约5℃～约15℃、约15℃～约30℃、约10℃～约15℃或约15℃～约20℃。在一个实施方案中，用于引晶步骤的合适温度为室温。在一个实施方案中，用于引晶步骤的合适温度为20℃。在另一个实施方案中，用于引晶步骤的合适温度为25℃。

在另一个实施方案中，所述方法还包括对基本纯的Reb C晶体进行分离和洗涤的步骤。通过利用离心力的各种固-液分离技术，能够将基本纯的Reb C晶体与粗Reb C溶液分离，所述分离技术包括但不限于，垂直和水平穿孔篮式离心、固体碗式离心、倾析器式离心、剥离型离心、推动器型离心、Heinkel型离心、圆盘栈离心和旋风分离。另外，通过任何压力、真空或重力过滤法能够提高分离，包括但不限于，使用带、鼓、nutsche型、叶、板、Rosenmund型、sparkler型和袋式过滤器和压滤机。所述Reb C固-液分离设备能够连续、半连续或以间歇模式运行。也可以使用各种有机溶剂及其混合物能够将基本纯的Reb C晶体在分离设备上进行洗涤。可以使用任何数量的气体在分离设备上对基本纯的Reb C晶体进行部分或完全干燥以蒸发残余的液体溶剂，所述气体包括但不限于氮气或氩气。使用液体、气体或机械手段，通过溶解固体或保持固体形式，能够自动或手动地将基本纯的Reb C晶体从分离设备中取出。

在还另一个实施方案中，所述方法还包括对基本纯的Reb C晶体进行干燥的步骤。这类方法对本领域技术人员是已知的，包括但不限于，使用旋转真空干燥器、流化床干燥器、旋转隧道式干燥器、板式干燥器、盘架式干燥器、Nauta型干燥器、喷雾干燥器、闪蒸干燥器、微米干燥器、平盘式干燥器、高和低速桨式干燥器和微波干燥器。在示例性实施方案中，干燥步骤包括在约40℃～约60℃范围的温度下使用氮气或氩气吹扫对基本纯的Reb C晶体进行约5小时～约10小时的干燥以除去残余溶剂。

在还另一个实施方案中，其中粗Reb C溶液基本不含Reb A杂质，所述方法还包括在对基本纯的Reb C晶体进行干燥的步骤之前利用浆料溶液将基本纯的Reb C晶体成浆的步骤。在另一个实施方案中，其中粗Reb C溶液基本不含rebd杂质，所述方法还包括在对基本纯的RebC晶体进行干燥的步骤之前利用浆料溶液将基本纯的Reb C晶体成浆的步骤。所述浆料能够是包含固体和含有机溶剂的浆料溶液的混合物，其中所述固体包含基本纯的Reb C晶体且仅少量溶于浆料溶液中。在另一个实施方案中，所述基本纯的Reb C晶体和浆料溶液能够以约15份～约1份浆料溶液对约1份基本纯的Reb C晶体的重量比存在于浆料中。在一个实施方案中，所述浆料能够保持在室温下。在另一个实施方案中，成浆步骤包括将浆料加热至约20℃～约40℃的温度。所述基本纯的Reb C晶体能够成浆约0.5小时～约24小时。

在还另外的另一个实施方案中，所述方法还包括将基本纯的Reb C晶体从浆料的浆料溶液中分离并对基本纯的Reb C晶体进行洗涤的步骤，然后对基本纯的Reb C晶体进行干燥的步骤。

如果期望进一步纯化，可以重复本文中所述的对Reb C进行纯化的方法或可以使用替代纯化方法对基本纯的Reb C晶体进一步进行纯化。

在本发明的更具体实施方案中，对Reb C进行纯化的方法包括如下步骤：(a)供应甜菊提取物固体或粗Reb C固体，其中所述甜菊提取物固体含有以干重计至少0.6％的Reb C且所述粗Reb C固体含有以干重计至少40％的Reb C；(b)向步骤(a)的甜菊提取物固体或粗Reb C固体添加结晶溶液以制造粗Reb C溶液；(c)用分离的I晶型Reb C晶体对粗Reb C溶液引晶；(d)让粗Reb C溶液在室温下完全干燥；(e)回收在步骤(d)中形成的Reb C晶体；(f)向步骤(e)的Reb C晶体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以完全溶解所述晶体；(g)让步骤(f)的溶液在室温下完全干燥；和(h)回收在步骤(g)中形成的分离的I晶型Reb C结晶。在本发明的另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、2-丁醇、叔丁醇或其混合物。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含一种或多种醇和水。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含乙醇。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含甲醇。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含异丙醇。在另外的实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含甲醇和异丙醇两者。在还另外的实施方案中，存在于结晶溶液中的甲醇和异丙醇的重量比为约5份～约1份的异丙醇对约1份甲醇。在另一个实施方案中，存在于结晶溶液中的甲醇和异丙醇的重量比为约2份异丙醇对约1份甲醇。在另一个实施方案中，异丙醇和甲醇能够以约15份～约1份的异丙醇对约1份甲醇的重量比合并在结晶溶液中。在另一个实施方案中，异丙醇和甲醇能够以约10份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并在结晶溶液中。在另一个实施方案中，所述方法还包括用分离的I晶型Reb C晶体对步骤(f)的结晶溶液引晶。在一个实施方案中，在步骤(f)中溶解的Reb C晶体可以是包含下面的两种以上物质的晶体混合物：从无水乙醇中结晶的Reb C晶体、从无水甲醇中结晶的Reb C晶体和从甲醇/异丙醇中结晶的Reb C晶体。

在本发明还另一个具体实施方案中，对Reb C进行纯化的方法包括如下步骤：(a)供应甜菊提取物固体或粗Reb C固体，其中所述甜菊提取物含有以干重计至少0.6％的Reb C且所述粗Reb C固体含有以干重计至少40％的Reb C；(b)向步骤(a)的甜菊提取物固体或粗Reb C固体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以制造粗Reb C溶液；(c)用分离的I晶型Reb C晶体对步骤(b)的粗Reb C溶液引晶；(d)让粗Reb C溶液在室温下完全干燥和(e)回收在步骤(d)中形成的分离的I晶型Reb C晶体。在一个实施方案中，所述方法还包括对步骤(b)的粗Reb C溶液进行加热的步骤。在另一个实施方案中，所述方法还包括在加热步骤之后对步骤(b)的粗Reb C溶液进行冷却的步骤。在另一个实施方案中，对粗Reb C溶液进行搅拌。在还另一个实施方案中，所述方法还包括对分离的I晶型Reb C晶体进行分离和洗涤的步骤。在另一个实施方案中，所述方法还包括对分离的I晶型Reb C晶体进行干燥的步骤。在另一个实施方案中，所述粗Reb C固体基本不含Reb A杂质且所述方法还包括在浆料溶液中对分离的I晶型Reb C晶体进行成浆。在另一个实施方案中，所述粗Reb C固体基本不含Reb D杂质且所述方法还包括在浆料溶液中对分离的I晶型Reb C晶体进行成浆。在另一个实施方案中，将异丙醇与甲醇以约15份～约1份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并在步骤(b)结晶溶液中。在另一个实施方案中，将异丙醇与甲醇以约10份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并在步骤(b)结晶溶液中。

对Reb C和Reb C多晶型物进行结晶的方法

如本文中所述，能够从无水乙醇、无水甲醇和甲醇/异丙醇中结晶Reb C。使用本文中所述的方法结晶Reb C，导致形成至少一种新的RebC多晶型物(即分离的I晶型Reb C)。本领域中的普通技术人员应理解，本文中所述的结晶方法的结晶溶液和温度两者都会影响制得的基本纯的Reb C组合物的多晶型物。

本发明的一个方面是提供一种制备分离的I晶型Reb C的方法，所述方法包括：(a)供应基本纯的Reb C固体；(b)向步骤(a)基本纯的Reb C固体添加结晶溶液以完全溶解所述固体；(c)让步骤(b)的结晶溶液在室温下完全蒸发；(d)回收步骤(c)中形成的分离的Reb C晶体；(e)向步骤(d)的Reb C晶体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以完全溶解所述晶体；(f)让步骤(e)的溶液在室温下完全干燥；和(g)回收步骤(e)中形成的分离的I晶型Reb C晶体。在一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、2-丁醇、叔丁醇或其混合物。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含一种或多种醇和水。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含乙醇。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含甲醇。在另一个实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含异丙醇。在另外的实施方案中，步骤(b)的结晶溶液包含甲醇和异丙醇。在还另外的实施方案中，存在于结晶溶液中的甲醇和异丙醇的重量比为约5份～约1份异丙醇对约1份甲醇。在另一个实施方案中，存在于结晶溶液中的甲醇和异丙醇的重量比为约2份异丙醇对约1份甲醇。在另一个实施方案中，异丙醇与甲醇以约15份～约1份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并在结晶溶液中。在另一个实施方案中，异丙醇与甲醇以约10份异丙醇对约1份甲醇的重量比合并在结晶溶液中。在一个实施方案中，在步骤(e)中溶解的RebC晶体能够为包含两种以上如下物质的晶体的混合物：从无水乙醇中结晶的Reb C晶体、从无水甲醇中结晶的Reb C晶体和从甲醇/异丙醇中结晶的Reb C晶体。在另一个实施方案中，在步骤(e)中，首先将步骤(d)的Reb C晶体溶于最少量的甲醇中以制造Reb C/甲醇溶液，然后用异丙醇以1∶9的体积比进行稀释。在另一个实施方案中，所述方法还包括用分离的I晶型Reb C晶体对步骤(e)的结晶溶液引晶。

本发明的另一个方面提供了一种制备分离的I晶型Reb C的方法，所述方法包括：(a)供应基本纯的Reb C固体；(b)向步骤(a)的基本纯的Reb C固体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以完全溶解所述固体；(c)让步骤(b)的溶液在室温下完全干燥和(d)回收步骤(c)中形成的分离的I晶型Reb C晶体。在本发明的一个实施方案中，基本纯的Reb C固体和结晶溶液在步骤(b)中以约30份～约1份基本纯的Reb C对约1份结晶溶液的重量比合并。在本发明的另一个实施方案中，基本纯的Reb C固体和结晶溶液在步骤(b)中以约30份～约1份结晶溶液对约1份基本纯的Reb C的重量比合并。在另一个实施方案中，在步骤(b)中，首先将步骤(a)的Reb C固体溶于最少量的甲醇中以制造Reb C/甲醇溶液，然后用异丙醇以1∶9的体积比进行稀释。在另一个实施方案中，所述方法还包括用分离的I晶型Reb C晶体对步骤(b)的结晶溶液引晶。

将多晶型性定义为物质存在两种以上在晶格中具有不同分子排列和/或构型的结晶状态的能力。认为约30％的有机化合物展示多晶型性(Zell，等，Tetrahedron 56(36)：6603-16(2000))。多晶型性在药物、颜料和染料、甜味剂、爆炸物和农用化学品的配制中是重要的。多晶型性可引起物理性质如密度、熔点和溶解速率的变化。

通过利用本领域中技术人员熟知的技术——粉末x射线衍射(XRPD)对试样进行分析，鉴定了I晶型Reb C。图1和2是得自本文中所述结晶方法的基本纯的Reb C组合物的XRPD扫描。通过将散射强度对d-间距进行作图，产生了Reb C多晶型物的XRPD扫描图。通过使用Shimadzu XRD-6000 X射线粉末衍射仪，利用Cu Kα辐射进行XRPD，对试样进行分析。所述仪器配有长细聚焦X射线管。典型地，将管的电压和电流强度分别设定为40kV和40mA。将发散和散射狭缝设定为1°，并将接收狭缝设定为0.15mm。通过ShimadzuSC-1001闪烁检测器能够检测衍射辐射。能够使用以3°/分钟(0.4秒/0.02°步长)从2.5～40°2θ的θ-2θ连续扫描。可以分析硅标准品来核查仪器校准。使用XRD-6000 v.4.1采集数据并进行分析。

图1突出了如实施例1中所述的无定形Reb C(B2-原始粉末)、从甲醇/异丙醇中结晶的Reb C(G1-MeOH/iPrOH)、从无水甲醇中结晶的Reb C(D1-MeOH)、从乙醇中结晶的Reb C(A1-EtOH)和从甲醇/异丙醇中重结晶的Reb C(合并的并从MeOH/iPrOH中重结晶的)之间的结构差异。

图2显示了I晶型Reb C的代表性图形。在本发明的一个实施方案中，I晶型Reb C具有如图2中所示的在Cu Kα波长下的XRPD图形，并通过下面位置处的显著峰的d-间距距离来进一步表征：8.6、9.8、12.6、13.6、13.9、14.2、14.9、15.6、17.0、17.4、18.2、19.9、21.3、22.6、23.3、25.5、27.2、28.4、28.9和30.0。

如图1中所示，形成的多晶型物的类型可取决于诸如结晶溶液的组成、结晶步骤的温度和干燥/蒸发步骤期间的温度的因素。

本领域中的普通技术人员应理解，能够根据Reb C组合物的期望品质(即溶解速率等)改变本文中所述的Reb C组合物，以得到Reb C多晶型和无定形形式的期望混合物。本领域的普通技术人员还应理解，组合物的溶解速率在配制固体和液体消耗品组合物中可能是重要的，所述消耗品组合物的非限制性实例包括口香糖、烘烤物品和饮料。在一个实施方案中，基本纯的Reb C组合物能够包含约1～约100重量％的量的特定多晶型或无定形形式的Reb C。在具体实施方案中，基本纯的Reb C组合物包含约1～约100重量％的量的分离的I晶型Reb C。例如，基本纯的Reb C组合物包含大于约25重量％的量、更特别大于约50重量％的量、还更特别大于约75重量％的量、甚至还更特别大于约85重量％的量的分离的I晶型Reb C。也能够使用在这些范围内的合适量的Reb C多晶型或无定形形式。在另一个实施方案中，基本纯的Reb C组合物能够包含特定多晶型和/或无定形形式的Reb C的组合。

衍射仪

可用于表征本发明的Reb C多晶型物的X射线衍射仪能够由辐射源、用于选择波长的单色器、用于调节辐射束形状的狭缝、测角器和检测器构成。能够使用的衍射仪的非限制性实例包括ShimadzuXRD-6000(Shimadzu Scientific Instruments 7102 Riverwood Drive，Columbia，MD，21046 USA)、Rigaku Ultima IV(Rigaku，9009 New TrailsDrive，The Woodlands，Texas，USA 77381)和X′Pert PRO MPD衍射仪(PANalytical Inc.117 Flanders Road，Westborough，MA 01581 USA)。

检测器

当衍射仪没有配备内置检测器时，能够安装外部检测器以获取数据。能够使用的检测器的非限制性实例包括D/teX Ultra(Rigaku，9009New Trails Drive，The Woodlands，Texas，USA 77381)和X′Celerator检测系统(PANalytical Inc.117 Flanders Road，Westborough，MA 01581USA)。

软件

现有许多软件程序用于数据的收集和分析。可用于分析XRPD数据的软件的非限制性实例包括TREOR(Werner，P.-E.等，J.Appl.Cryst.18：365-370(1985))、Crystallographica Search-Match(Oxford CryosystemsLtd，3 Blenheim Office Park，Lower Road，Long Hanborough Oxford0X29 8LN，United Kingdom)、Jade(Jade，Materials Data，Inc.，1224Concannon Blvd.，Livermore，CA 94550，USA)和RayfleX(GE InspectionTechnologies，GmbH，Robert-Bosch-Str.3，50354 Huerth，Germany)。

Reb C多晶型物组合物

Reb C多晶型物能够与Reb A和/或杜克尔苷A组合用于消耗品如食品、药物、饮食补充剂、营养保健品、牙齿卫生组合物或其他产品中作为增甜剂，所述增甜剂保持了期望的甜度但含有更少量的碳水化合物甜味剂如蔗糖、葡萄糖和果糖。在一个实施方案中，本发明提供消耗品，其包含有效量的一种或多种Reb C多晶型物以及减少量的碳水化合物甜味剂，从而达到与单独使用传统量的碳水化合物甜味剂时相同水平的甜度。作为简单实例，普通的碳酸可乐类饮料每8盎司的一份饮料中可含有约20～30g的糖(例如果糖)和约100卡路里。本发明使得人们能够制备糖和热量含量显著减少而甜度水平相同的类似的可乐饮料。Reb C多晶型物提高了通过减少糖含量产生的甜味，由此相对于糖的水平产生提高的甜味，而不展示任何异味。

本发明合适的碳水化合物甜味剂包括但不限于，蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆(含有果糖和葡萄糖)、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖和糖醇如赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、山梨醇或肌醇。在本发明的一个实施方案中，所述碳水化合物甜味剂为蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆、木糖、阿拉伯糖或鼠李糖，优选蔗糖、果糖或葡萄糖。在该实施方案的一个方面中，所述碳水化合物甜味剂为蔗糖。在该实施方案的另一个方面中，所述碳水化合物甜味剂为葡萄糖。在该实施方案的另一个方面中，碳水化合物甜味剂为果糖。在另一个实施方案中，碳水化合物甜味剂为糖醇。

蔗糖，也称作餐桌糖或甘蔗糖，是葡萄糖和果糖的二糖。其系统名称为α-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-呋喃果糖。果糖和葡萄糖是单糖类糖。

在所述消耗品中，以有效提高碳水化合物甜味剂的甜度而不展示任何异味的量使用一种或多种Reb C多晶型物。能够使用提供期望的甜度增强程度的任意量的一种或多种Reb C多晶型物。在一个实施方案中，用于本发明中的一种或多种Reb C多晶型物的浓度为等同于、稍高于或低于其固有甜度的检测阈值。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约150μM～约600μM的浓度存在于本发明的消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约150μM～约350μM的浓度存在于本发明的消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约250μM～约350μM的浓度存在于本发明的消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约350μM～约600μM的浓度存在于本发明的消耗品中。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物在本发明的消耗品中的浓度为约150μM、约160μM、约170μM、约180μM、约190μM、约200μM、约210μM、约220μM、约230μM、约240μM、约250μM、约260μM、约270μM、约280μM、约290μM、约300μM、约310μM、约320μM、约330μM、约340μM或约350μM。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约360μM、约370μM、约380μM、约390μM、约400μM、约410μM、约420μM、约430μM、约440μM、约450μM、约460μM、约470μM、约480μM、约490μM、约500μM、约510μM、约520μM、约530μM、约540μM、约550μM、约560μM、约570μM、约580μM、约590μM或约600μM的浓度存在于本发明的消耗品中。可用于本发明消耗品中的一种或多种Reb C多晶型物的浓度包括约250μm～约300μm，且尤其是300μm。在一个实施方案中，在固体消耗品中一种或多种Reb C多晶型物与蔗糖之比大约为1∶150～1∶200。在一个实施方案中，本发明的消耗品对于每50g～100g碳水化合物甜味剂含有约0.1g～0.5g、优选约0.3g的一种或多种Reb C多晶型物。

分别于2009年5月18日和2009年7月17日提交的美国临时申请No.61/179,330和61/226,679涉及使用Reb C或其立体异构体以提高碳水化合物甜味剂的甜味。通过参考将美国临时申请61/179,330和61/226,679以其完整形式完整地并入本文中。Reb C多晶型物可类似地用于提高具有等同于约5～12％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度的消耗品的甜度。在本发明的该方面中，所述消耗品优选为具有等同于约5～12％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度的甜果汁或软饮料。可以通过与消耗品共混或与消耗品的组分共混，向具有等同于约5～12％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度的消耗品中添加一种或多种Reb C多晶型物。在一个实施方案中，向具有等同于约5％(w/v-％)、约6％(w/v-％)、约7％(w/v-％)或约8％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度的消耗品中添加一种或多种RebC多晶型物以提高消耗品的甜度。在一个实施方案中，向具有等同于约9％(w/v-％)、约10％(w/v-％)、约11％(w/v-％)或约12％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度的消耗品中添加一种或多种Reb C多晶型物以提高消耗品的甜度。在一个实施方案中，含有一种或多种Reb C多晶型物的本发明消耗品的甜度强度等同于约5～7％(w/v-％)的蔗糖溶液。在另一个实施方案中，含有一种或多种Reb C多晶型物的本发明消耗品的甜度强度等同于约8～12％(w/v-％)的蔗糖溶液。在一个实施方案中，含有一种或多种Reb C多晶型物的本发明消耗品的甜度强度等同于约5％(w/v-％)、约6％(w/v-％)、约7％(w/v-％)、约8％(w/v-％)、约9％(w/v-％)、约10％(w/v-％)、约11％(w/v-％)或约12％(w/v-％)的蔗糖溶液。

消耗品包括所有的食品、饮食补充剂、营养保健品、药物组合物、牙齿卫生组合物和化妆品。另外，碳水化合物甜味剂之外的一种或多种甜味剂也能够存在于本发明的消耗品中。碳水化合物甜味剂能够固有地存在于消耗品中(例如含水果的食品中)或向消耗品中添加碳水化合物甜味剂。

本文中所使用的短语“食品”包括但不限于，水果、蔬菜、果汁、肉制品如火腿、咸肉和香肠；蛋类产品、水果浓缩物、明胶和明胶样产品如果酱、果子冻、蜜饯等；奶类产品如冰淇淋、酸奶油和冰冻果子露；糖霜、包括糖蜜的糖浆；玉米、小麦、黑麦、大豆、燕麦、大米和大麦产品、坚果肉和坚果产品、蛋糕、饼干、糖食如糖果、橡皮糖、水果味硬糖、和巧克力、口香糖、薄荷糖、奶油、糖霜、冰淇淋、馅饼和面包、饮料如咖啡、茶、碳酸软饮品如和非碳酸软饮品、果汁和其他水果饮品、运动饮品如咖啡、茶、冰茶、可乐、酒精类饮料如啤酒、葡萄酒和白酒、以及优选地，用一种或多种Reb C多晶型物提高碳水化合物甜味剂的甜度的食品含有水平降低的碳水化合物甜味剂。例如，通过添加一种或多种Reb C多晶型物，能够生产具有与已知的碳酸软饮品相同甜度、但糖含量更低的改进的碳酸软饮品。

食品还包括调味品如药草、辛香料和调料、增味剂如谷氨酸单钠。食品还包括制备的包装产品如饮食甜味剂、液体甜味剂、颗粒状调味混合物，所述颗粒状调味混合物在用水复原时提供非碳酸饮品、速成布丁混合物、速溶咖啡和茶、咖啡增白剂、麦乳精混合物、宠物食品、家畜饲料、烟草和用于烘烤用途的材料如用于制备面包、饼干、蛋糕、薄饼和面圈等的粉末状烘烤混合物。食品还包括含有很少或不含蔗糖的节食或低卡路里食品和饮料。尤其优选的食品是含有一种或多种RebC多晶型物的碳酸饮料。下面以及在整个说明书中对根据本发明设想的食品的其他实例进行说明。

在另一个实施方案中，食品选自水果、蔬菜、果汁、肉制品如火腿、咸肉和香肠；蛋类产品、水果浓缩物、明胶和明胶样产品如果酱、果子冻、蜜饯等；奶类产品如冰淇淋、酸奶油和冰冻果子露；糖霜、包括糖蜜的糖浆；玉米、小麦、黑麦、大豆、燕麦、大米和大麦产品、坚果肉和坚果产品、蛋糕、饼干、糖食如糖果、橡皮糖、水果味硬糖、和巧克力、奶油、糖霜、冰淇淋、馅饼和面包。

在一个实施方案中，本发明涉及降低消耗品如食品或药物组合物中碳水化合物甜味剂的量而展示给定水平甜度的方法，其中所述方法包括减少碳水化合物甜味剂的量并添加有效保持消耗品给定甜度水平的量的一种或多种Reb C多晶型物。

在一个实施方案中，所述食品为包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物的饮料或饮品。期望具有甜味的合适饮料的实例包括但不限于，咖啡、茶如红茶、绿茶、发酵茶、半发酵茶、碳酸软饮品如和非碳酸软饮品、柠檬水、果汁和其他水果饮品、运动饮品如冰茶、可乐、酒精类饮料如啤酒、葡萄酒和白酒、以及在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约150μM～约600μM的浓度存在。在某些实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约150μM～约350μM的浓度存在。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约250μM～约350μM的浓度存在。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约350μM～约600μM的浓度存在。在一个实施方案中，一种或多种RebC多晶型物以约150μM、约160μM、约170μM、约180μM、约190μM、约200μM、约210μM、约220μM、约230μM、约240μM、约250μM、约260μM、约270μM、约280μM、约290μM、约300μM、约310μM、约320μM、约330μM、约340μM或约350μM的浓度存在于饮料或饮品中。在一个实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以约360μM、约370μM、约380μM、约390μM、约400μM、约410μM、约420μM、约430μM、约440μM、约450μM、约460μM、约470μM、约480μM、约490μM、约500μM、约510μM、约520μM、约530μM、约540μM、约550μM、约560μM、约570μM、约580μM、约590μM或约600μM的浓度存在于本发明的消耗品中。本发明的饮料或饮品中的一种或多种Reb C多晶型物的可用浓度为约250μM或约300μM，特别为300μM。在另一个实施方案中，所述饮料或饮品包含蔗糖和玉米糖浆，或其包含蔗糖和阿斯巴甜作为甜味剂。

本发明的一个实施方案涉及提高可乐饮料如或的甜味的方法，所述方法包括让对象服用可乐饮品，所述可乐饮品包含碳水化合物甜料甜味剂以及提高碳水化合物甜味剂的甜味而不展示任何异味的量的一种或多种Reb C多晶型物。在优选实施方案中，所述可乐饮料含有减少量的糖，但仍基本保持了最初水平的甜味。

可乐饮料通过将可乐浓缩物与碳酸水混合来制备。典型地，每250mL碳酸水中添加约50mL的可乐浓缩物。可乐浓缩物可通过将可乐调味剂、焦糖颜色和任选的咖啡因与水、一种或多种碳水化合物甜味剂、一种或多种Reb C多晶型物、以及一种或多种酸性组分进行混合而制备。

可乐调味剂是指天然或人造的调味剂。这类可乐调味剂可商够获得。商购的可乐调味剂可得自例如International Flavor and Fragrances，Dayton，NJ；Artificial #13573011和Natural #K3559549。商购的可乐调味剂也可得自Tastemaker，Cincinnati，OH，和Givaudan Roure，Clifton，NJ。

酸性组分是指向饮料贡献酸味并且添加其用以平衡滋味轮廓的成分。酸包括苹果酸、柠檬酸、磷酸或其组合。

例如，可通过将磷酸(75％，Rhone-Poulenc)、柠檬酸(无水，ADM，Decatur、Ill)、咖啡因(Mallinckrodt，Paris，KY)、焦糖色(DS400，Sethness，Chicago，IL)、可乐调味剂(SN018976，International Flavoes andFragrances，Dayton，NJ)、蔗糖、一种或多种Reb C多晶型物与水进行混合，来制备可乐浓缩物。使用磁力搅拌板对浓缩物进行共混，直至所有成分都溶解(30～40分钟)。将50mL浓缩物添加至250mL碳酸水中以完成可乐饮料的制备。50mL的可乐浓缩物典型地含有0.01～5mL的磷酸，优选约0.01～1mL；0.1～100g的蔗糖，优选约1～10g；每50g～100g的蔗糖约0.1～约0.5g的一种或多种Reb C多晶型物，优选约0.3g的一种或多种Reb C多晶型物；约0.001g～0.1g的柠檬酸，优选约0.005～0.1g；0.001～1g的咖啡因，优选约0.01～0.1g的咖啡因；0.01～5g的焦糖调味剂，优选约0.05～1g；0.001～约10mL的可乐调味剂，优选约0.01～约2mL。

在某些实施方案中，与现有技术的可乐饮料相比，改进的食品如可乐饮料，例如或含有减少量的糖。能够实施所述方法以使得保持可乐饮料的期望甜度所需要的糖量减少至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％，或约60％～约99％，或约20％～约50％。由此，在更具体的实施方案中，包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物的可乐饮料，含有的RebC多晶型物的量足以将保持饮料的期望甜度所需要的糖量减少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％、或约60％～约99％、或约30％～约70％。当然，在其他实施方案中，所需要的糖量会降至不同程度。

本发明的食品还包括动物食品，其包含碳水化合物甜味剂以及足以提高所述碳水化合物甜味剂的甜味而不展示任何异味的量的一种或多种Reb C多晶型物。动物食品在本领域中是熟知的，参见例如美国专利6,403,142，且其包括狗食、猫食、兔食等。动物食品还包括可用于饲养家畜如牛、野牛、猪、鸡等的食品。在另一个实施方案中，本发明的动物食品为固体低变应原性宠物食品，其包含含有蛋白质或蛋白质片段的组分，其中所述组分的全部都发生部分水解且还包含Reb C多晶型物。在特定实施方案中，一种或多种Reb C多晶型物以上面所述用于食品的量存在于动物食品中。

在一个实施方案中，消耗品为包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物的药物组合物。优选的组合物为包含一种或多种RebC多晶型物以及一种或多种药物学上可接受的赋形剂的药物组合物。这些药物组合物能够用于配制含有一种或多种活性剂的药物，所述活性药剂发挥甜度增强以外的生物作用。所述药物组合物优选还包含发挥生物作用的一种或多种活性剂。这样的活性剂包括具有味道增强以外的活性的药剂和生物剂。这样的活性剂在本领域内是熟知的。参见例如The Physician′s Desk Reference。可根据本领域中已知的程序，如在Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，Pa.，USA中所述，制备这样的组合物。在一个实施方案中，这样的活性剂包括支气管扩张药、减食欲药、抗组胺剂、营养补充剂、轻泻药、镇痛药、麻醉药、抗酸药、H₂-受体拮抗药、抗胆碱能药、抗腹泻药、缓和剂、镇咳药、止吐药、抗微生物剂、抗菌药、抗真菌剂、抗病毒药、祛痰药、消炎药、解热药及其混合物。在一个实施方案中，活性剂选自解热药和镇痛药如布洛芬、对乙酰氨基酚或阿司匹林；轻泻药如酚酞二辛基硫代琥珀酸钠；食欲抑制剂如安非他明、苯丙醇胺、盐酸苯丙醇胺或咖啡因；抗酸药如碳酸钙；平喘药如茶碱；抗利尿药如盐酸苯乙哌啶；抵抗肠胃气胀的活性剂如西甲硅油；偏头痛药剂如麦角胺；精神病药剂如氟哌啶醇；解痉挛药或镇静剂如苯巴比妥；抗多动症药如甲基多巴或哌醋甲酯；安定药如苯二氮、hydroxinmeprobramates或吩噻嗪；抗组胺药如阿司咪唑、马来酸氯苯那敏、马来酸吡纳明、琥珀酸多西拉敏、马来酸溴苯那敏、柠檬酸苯托沙敏、盐酸氯环利嗪、马来酸非尼拉敏、和酒石酸芬宁胺；解充血药如盐酸苯丙醇胺、盐酸苯肾上腺素、盐酸伪麻黄碱、硫酸伪麻黄碱、苯丙醇胺酒石酸氢盐和麻黄碱；β-受体阻滞剂如普萘洛尔；用于戒酒的药剂如双硫仑；镇咳药如苯佐卡因、右美沙芬、氢溴酸右美沙芬、那可汀、柠檬酸咳必清和盐酸氯苯达诺；氟补充剂如氟化钠；局部用抗生素如四环素或氯林可霉素；皮质类固醇补充剂如波尼松或波尼松龙；抵抗甲状腺肿形成的药剂如秋水仙碱或别嘌呤醇；抗癫痫药如苯妥英钠；抵抗脱水的药剂如电解质补充剂；消毒剂如氯化十六烷基吡啶；非甾体抗炎药如对乙酰氨基酚、布洛芬、萘普生、或其盐；胃肠活性药剂如洛哌丁胺和法莫替丁；各种生物碱如磷酸可待因、硫酸可待因或吗啡；微量元素补充剂如氯化钠、氯化锌、碳酸钙、氧化镁和其他碱金属盐和碱土金属盐；维生素；离子交换树脂如消胆胺；胆固醇抑制剂和降脂物质；抗心律失常药如N-乙酰普鲁卡因胺；和祛痰药如愈创木酚甘油醚。

具有特殊的不快味道的活性物质包括抗菌剂如环丙沙星、氧氟沙星和培氟沙星；抗癫痫药如唑尼沙胺；大环内酯抗生素如红霉素；β-内酰胺抗生素如青霉素和头孢菌素；精神活性物质如氯丙嗪；活性物质如斯尔比林；以及抵抗溃疡的活性药剂如西咪替丁。在另一个实施方案中，本发明的药物组合物包含选自甘氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-鸟氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、肌氨酸中的至少一种氨基酸及其混合物。

将本发明的药物组合物以适用于实现其预期目的的任何形式施用给对象。然而，优选地，所述组合物为能够含服或口服的组合物。或者，所述药物组合物可以为口或鼻喷雾剂。所述对象为任何动物如人，但并非打算对本发明进行如此限制。其他合适的动物包括犬科、猫科、狗、猫、家畜、马、牛、绵羊等。在本文中使用时，兽医组合物是指适用于非人动物的药物组合物。这样的兽医组合物在本领域内是已知的。

在另一个实施方案中，所述药物组合物是用于口服的液体剂型，包括药物学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性化合物之外，液体剂型还可含有本领域中通常使用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(特别是，棉籽、落花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯、及其混合物。除了活性化合物之外，悬浮液还可含有悬浮剂，如乙氧基化的异硬脂酰醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨聚糖酯、微晶纤维素、氢氧化铝氧化物(aluminummetahydroxide)、膨润土、琼脂和黄芪胶、及其混合物。

本发明的药物组合物可以是咀嚼片的形式。咀嚼片在本领域中是已知的。参见例如美国专利No.4,684,534和6,060,078，通过参考将它们各自以其完整的形式并入。任何种类的药物都能够包含在咀嚼片中，优选苦味的药物、天然植物提取物或其他有机化合物。更优选地，在核芯中可含有维生素如维生素A、维生素B、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素C、维生素E和维生素K；天然植物提取物如Sohgunjung-tang提取物、Sipchundaebo-tang提取物和刺五加(Eleutherococcus senticosus)提取物；有机化合物如茶苯海明、氯苯甲嗪、对乙酰氨基酚、阿司匹林、苯丙醇胺和氯化十六烷基吡啶；或胃肠药剂如干燥的氢氧化铝凝胶、多潘立酮、可溶性甘菊环、L-谷氨酰胺和水滑石。

本发明的药物组合物可以是口腔崩解的组合物。口腔崩解的片剂在本领域中是已知的。参见例如美国专利No.6,368,625和6,316,029，通过参考将它们各自以其完整的形式并入本文中。

本发明的药物组合物可以是鼻用组合物，其包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物。鼻喷雾剂在本领域中是已知的。参见例如美国专利No.6,187,332。向鼻喷雾剂中添加一种或多种Reb C多晶型物能够降低与鼻喷雾剂组合物相关的不快味道的体验。

本发明的药物组合物可以是固体剂型，其包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物以及水和/或唾液活化的泡腾颗粒，如具有可控泡腾速率的颗粒。所述泡腾组合物还可包含药物活性化合物。泡腾药物组合物在本领域内是已知的。参见例如美国专利No.6,649,186，通过参考以其完整的形式并入。所述泡腾组合物能够用于药学、兽医、园艺、家居、食品、烹饪、杀虫、农业、化妆、除草、工业、清洁、糖食和调味用途。掺有包含一种或多种Reb C多晶型物的泡腾组合物的制剂还能够包括一种或多种其他佐剂和/或活性成分，所述佐剂和/或活性成分能够从本领域中熟知的那些中选择，包括调味剂、稀释剂、颜料、粘合剂、填充剂、表面活性剂、崩解剂、稳定剂、压实介质和非泡腾崩解剂。

所述药物组合物可以是薄膜状或薄片状药物组合物。这样的薄膜状或薄片状药物组合物能够构造为例如快速崩解的施用形式，例如在1秒直至3分钟的时间内崩解的施用形式，或构造为缓慢崩解的施用形式，例如在3～15分钟的时间内崩解的施用形式。通过使用例如具有不同的崩解、或溶解特性的基体形成聚合物，能够将所示的崩解时间设定在上述范围内。由此，通过混合相应的聚合物组分，能够调节崩解时间。另外，崩解剂是已知的，其将水“抽入”基质中并使得基体能够从内部猛然打开。因此，本发明的某些实施方案包括起到调节崩解时间的目的的这类崩解剂。

用于薄膜状或薄片状药物组合物中的合适的聚合物包括纤维素衍生物、聚乙烯醇(例如MOWIOL^TM)、聚丙烯酸酯、聚乙烯基吡咯烷酮、纤维素醚如乙基纤维素、以及聚乙烯醇、聚氨酯、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸甲酯和上述聚合物的衍生物和共聚物。

在某些实施方案中，根据本发明的薄膜状或薄片状药物组合物的总厚度优选为5μm直至10mm，优选30μm～2mm，尤其优选0.1mm～1mm。药物制剂可以为圆形、卵形、椭圆形、三角形、四边形或多边形，但其也可具有任何发圆的形状。

在一个实施方案中，所述药物组合物可以是胶基制剂，在包围所述胶基制剂的包衣中包含所含有的药物或药剂、碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物。优选地，包衣占整个产品的至少50重量％。在芯被咀嚼时，药物或药剂释放入唾液中。例如，美国专利6,773,716公开了一种包含在包围胶基制剂的包衣中的合适药物或药剂，通过参考将所述专利以其完整形式并入本文中。已经发现，对于可能具有涩味或苦味的某些药物或药剂，通过向制剂中添加甜味增强剂，能够提供适口得多的包含药物的制剂。在这点上，即使处于例如粉末形式的药物可能是苦的或具有讨厌的味道，但是用作本发明包衣并包括增强试剂的基质将提供具有可接受的药物性质的产品。

本发明的药物组合物可以是气雾剂的形式。所述气雾剂组合物还可包含药物活性剂。气雾剂组合物在本领域内是已知的。参见例如美国专利No.5,011,678，通过参考以其完整的形式并入本文中。作为非限制性实例，根据本发明的气雾剂组合物能够包含药物有效量的药物活性物质、一种或多种碳水化合物甜味剂、一种或多种Reb C多晶型物以及生物相容性的推进剂，如(氢/氟)碳推进剂。

在本发明的一个实施方案中，药物组合物为营养组合物。具有不悦的味道的营养组合物的实例包括但不一定限于，用于治疗营养缺乏、创伤、手术、克隆病、肾脏疾病、高血压、肥胖症等的肠营养品，以促进运动性能、肌肉增强或一般健康或新陈代谢的先天性障碍如苯丙酮酸尿症。特别地，这样的营养制剂可含有具有苦味或金属味道或后味的一种或多种氨基酸。这样的氨基酸包括但不限于，选自亮氨酸、异亮氨酸、组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸的L异构体中的必需氨基酸。

在一个实施方案中，通过一种或多种Reb C多晶型物将本发明的药物组合物或营养组合物的甜味提高至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％、或约60％～约90％、或约20％～约50％。

在一个实施方案中，本发明的消耗品为牙齿卫生组合物，其包含碳水化合物甜味剂和足以提高所述碳水化合物甜味剂的甜味而不展示任何异味的量的一种或多种Reb C多晶型物。牙齿卫生组合物在本领域内是已知的且包括但并不一定限于，牙膏、漱口水、斑块冲洗液、牙线、牙痛减轻剂(例如ANBESOL^TM)等。在一个实施方案中，牙齿卫生组合物包含一种碳水化合物甜味剂。在另一个实施方案中，牙齿卫生组合物包含超过一种的碳水化合物甜味剂。在某些实施方案中，牙齿卫生组合物包含蔗糖和玉米糖浆，或其包含蔗糖和阿斯巴甜。

在另一个实施方案中，本发明的消耗品为化妆品，其包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物。例如，但不是限制性的，化妆品可以是面霜、口红、唇彩等。本发明的其他合适组合物包括润唇膏如或BURT′S润唇膏，还包含一种或多种Reb C多晶型物。

本发明还涉及包含上述一种或多种Reb C多晶型物的各种有用的消耗品。

在一个实施方案中，本发明涉及食品，其包含碳水化合物甜味剂和一种或多种Reb C多晶型物。优选地，所述食品为展示甜味(即本身含有碳水化合物甜味剂)和/或添加了碳水化合物甜味剂的食品。所述食品包含足以提高甜味而不展示异味的量的一种或多种Reb C多晶型物。具体的碳水化合物甜味剂已在上文描述。期望提高甜味的具体食品包括但不限于，蛋糕；饼干；糖食如糖果、橡皮糖和巧克力；奶油；糖霜；冰淇淋；馅饼；和面包。作为饮料的具体食品包括软饮品、果汁和其他水果饮品、运动饮品如咖啡、茶、冰茶、可乐、醇类饮料以及

在某些方面中，本发明提供使得能够制备消耗品如食品和药品的方法和组合物，所述消耗品保持期望的甜度但含有更少量的碳水化合物甜味剂例如糖，且在某些情况中含有更少的热量。

在一个方面中，本发明的食品包含桌面甜味剂组合物，其包含(i)至少一种碳水化合物甜味剂；(ii)一种或多种莱苞迪苷C多晶型物、尤其是I晶型莱苞迪苷C；以及(iii)任选的增量剂，其中所述一种或多种莱苞迪苷C多晶型物各自以有效地协同提高碳水化合物甜味剂甜度的量存在。

在一个实施方案中，每份量的本发明桌面甜味剂提供等同于5～12％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度。在一个实施方案中，每份量的本发明桌面甜味剂提供等同于8～12％(w/v-％)蔗糖溶液的甜度强度。

在一个实施方案中，本发明的桌面甜味剂不含增量剂。在一个实施方案中，本发明的桌面甜味剂包含增量剂。合适的增量剂包括麦芽糊精、聚葡萄糖、果糖低聚糖、纤维素和纤维素衍生物、异麦芽酮糖、麦芽糖、塔格糖、乳糖、菊糖、甘油、丙二醇、多元醇、木糖、核酮糖、甘露糖等。所使用的增量剂的量典型是为了用于精确递送的最少量。尤其合适的增量剂包括葡萄糖和麦芽糊精。

在一个实施方案中，本发明的桌面甜味剂组合物包含抗结块剂或流动剂。在本文中使用时，短语“抗结块剂”和“流动剂”是指防止、降低、抑制或遏制至少一个甜味剂分子与另一个甜味剂分子附着、粘接或接触的任何组合物。或者，抗结块剂可以指有助于内容物均匀性和均匀溶解的任何组合物。合适的抗结块剂包括酒石、硅酸钙(calciumcilicate)、二氧化硅、微晶纤维素和磷酸三钙的霜剂。在一个实施方案中，抗结块剂以桌面甜味剂组合物的约0.001～约3重量％的量存在于桌面甜味剂组合物中。

在一个实施方案中，本发明的桌面甜味剂组合物包含调味剂或香料。在本文中使用时，术语“调味剂”是指可添加至本发明的组合物中为食品提供期望滋味的任何食品级材料。合适的调味剂包括例如奶油、榛子、香草、巧克力、肉桂、山核桃、柠檬、酸橙、覆盆子、桃子、芒果、香兰素、黄油、奶油糖酱、茶、桔子、柑橘、焦糖、草莓、西瓜、泡泡糖、香瓜、番石榴、猕猴桃、木瓜、椰子、薄荷、留兰香及其组合。

在本文中使用时，术语“香料”是指例如当与食品混合时可用于产生期望香味的任何食品级挥发性物质。合适的香料包括例如香精油(柑橘油)、压榨油(桔子油)、蒸馏油(玫瑰油)、提取物(水果)、茴香脑(甘草、茴香籽、茴香烈酒、茴香)、茴香醚(茴香籽)、苯甲醛(杏仁糖、杏仁)、苯甲醇(杏仁糖、杏仁)、樟脑(樟属樟脑)、肉桂醛(肉桂)、柠檬醛(香茅油、柠檬油)、d-柠檬烯(桔子)、丁酸乙酯(菠萝)、丁香油酚(丁香油)、呋喃酮(草莓)、糠醛(焦糖)、芳樟醇(芫荽、玫瑰木)、薄荷醇(胡椒薄荷)、丁酸甲酯(苹果、菠萝)、水杨酸甲酯(冬青油)、橙花醛(桔子花)、橙花醚(桔子花)、丁酸戊酯(梨、杏)、戊酸戊酯(苹果、菠萝)、葫芦巴内酯(枫木糖浆、咖喱粉、胡芦巴)、草莓酮(草莓)、取代的吡嗪如2-乙氧基-3-异丙基吡嗪；2-甲氧基-3-仲丁基吡嗪；和2-甲氧基-3-甲基吡嗪(葫芦巴、小茴香和芫荽烘烤的种子)、崔柏酮(落叶松、普通的鼠尾草、Nootka柏树和苦艾)、麝香草酚(樟脑状)、三甲胺(鱼)、香兰素(香草)及其组合。本发明的优选香料组分包括香精油(柑橘油)、压榨油(桔子油)、蒸馏油(玫瑰油)、提取物(水果)、苯甲醛、d-柠檬烯、糠醛、薄荷醇、丁酸甲酯、丁酸戊酯、盐及其组合。所述香料可以在组合物中以任意量存在。优选地，香料组分以可察觉量的约2～约10倍的量存在。更优选地，香料组分以可察觉量的约2～约5倍的量存在。在本文中使用时，除非有其他说明，否则术语“可察觉量”是在食品中产生可察觉香味所需要的香料组分的量。

在一个实施方案中，本发明的桌面甜味剂组合物包含粘合剂。在本文中使用时，术语“粘合剂”是指适用于有助于压制和形成片剂的任何食品级材料。合适的粘合剂包括任何常规粘合剂，只要所述粘合剂基本不干扰食品的自混合或感器性质即可，例如微晶纤维素、黄耆树胶、明胶、亮氨酸、乳糖及其组合。粘合剂的存在量可以是全部组合物的约10～约15重量％。

本发明的桌面甜味剂组合物能够包装成多种不同的形式，例如粉末形式、粒状形式、小袋、包、片、丸、立方体、固体、液体、可溶解的增甜条和喷雾剂。

在一个实施方案中，桌面甜味剂包含单份用(份控制)的包，所述包含有甜味剂组合物制剂的干混物。干混制剂通常包含粉末或颗粒。桌面甜味剂包可具有任意大小，如约2.5×1.5英寸，并容纳具有等同于2茶匙颗粒糖(约8g)甜度的约1克本发明的甜味剂组合物。在一个实施方案中，干混桌面甜味剂制剂包含一种或多种Reb C多晶型物，其量各自独立地为桌面甜味剂组合物的约1％(w/w-％)～约10％(w/w-％)。

固体桌面甜味剂形式包括立方体和片剂。例如，常规的立方体等于颗粒糖标准立方体的尺寸，其约为2.2×2.2×2.2cm³且重约8克。在一个实施方案中，固体桌面甜味剂为片剂形式或本领域技术人员已知的任何其他形式。

在一个实施方案中，本发明的桌面甜味剂组合物为液体形式。在本发明的该方面中，将一种或多种Reb C多晶型物和至少一种碳水化合物甜味剂与液体载体合并。用于液体桌面甜味剂的载体的合适的非限制性实例包括水、醇、多元醇、溶于水的甘油基质或柠檬酸基质、及其混合物。

可以改变本文中所述的或本领域中已知的任何形式的桌面甜味剂组合物的甜度当量，以得到期望的甜度特点。例如，桌面甜味剂组合物能够包含与标准糖的当量相当的甜度。在另一个实施方案中，桌面甜味剂组合物能够包含高达糖当量100倍的甜度。在另一个实施方案中，桌面甜味剂组合物能够包含高达糖当量90倍、80倍、70倍、60倍、50倍、40倍、30倍、20倍、9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、倍和2倍的甜度。

在一个实施方案中，还能够配制桌面甜味剂组合物以用于目的应用，例如饮料、食品、药物、营养保健品、化妆品以及可以增甜的任何其他产品中。例如，能够将用于烘烤的桌面甜料组合物配制成具有附加的保护剂，如囊封剂。其他形式对于桌面甜味剂领域中的技术人员是易于明了的。

用于将粉末或颗粒甜味剂制剂制成包的常用方法包括流化床聚集法。用于制备桌面甜味剂组合物的其他方法对本领域普通技术人员是熟知的。

在一个方面中，本发明提供一种制备桌面甜味剂组合物的方法，所述组合物包括(i)至少一种碳水化合物甜味剂；(ii)一种或多种Reb C多晶型物；和(iii)任选的增量剂。在一个实施方案中，以有效地协同提高碳水化合物甜味剂的甜度的量包含所述一种或多种莱苞迪苷C多晶型物。

除非有其他说明，否则百分比(％)为重量比。

下面的实施例是本发明示例性的而不是限制性的化合物、组合物和方法。鉴于本公开内容，在临床治疗中通常遇到的且对本领域技术人员明显的各种条件和参数的适当修改和调适在本发明的主旨和范围内。

实施例1

按如下将Reb C(93.3％HPLC纯度；)的三个试样放入聚丙烯96-孔V型底板的各孔中：孔A1，5.8mg；孔D1，5.5mg；孔G1，5.4mg。向A1中添加无水乙醇(～300μL孔体积的75％)，向D1中添加无水甲醇(孔体积的75％)，并向G1中添加异丙醇(孔体积的50％)然后是无水甲醇(孔体积的25％)。将所述板轻柔搅动，直至三种孔中的材料完全溶解。将所述板在不覆盖的条件下放置，在室温下蒸发溶剂过夜。这在所有三种孔中产生了玻璃状、非结晶材料。使用与上述相同的方法再次将各个孔中的材料溶解。利用第二个空板覆盖含有溶解的Reb C试样的所述96孔V型底板以减慢蒸发速率并将其在室温下放置过夜。在各个孔中得到无色/白色结晶固体。将这种材料转移至与孔的位置相对应标记为A1、D1和G1的小瓶中。向标记为B2的第四个小瓶中添加5mg得自的初始Reb C试样。将四个小瓶送至XRD US(Cold Spring，NY)进行粉末X射线衍射分析。

将取自A1、D1和G1小瓶中的Reb C晶体试样合并并溶于最少量的甲醇中以制造Reb C/甲醇溶液。然后，以1∶9的体积比用异丙醇对Reb C/甲醇溶液进行稀释。使用Shimadzu XRD-6000 X射线粉末衍射仪，利用Cu Kα辐射，通过粉末衍射对甲醇/异丙醇重结晶的Reb C试样、得自的原始Reb C试样和在小瓶A1、D1和G1中送来的Reb C试样进行了分析。所述仪器配备有长细聚焦X射线管。将管的电压和电流强度分别设定为40kV和40mA。将发散和散射狭缝设定为1°，并将接收狭缝设定为0.3°。通过Shimadzu SC-1001闪烁检测器检测了衍射辐射。使用TREOR软件包，利用本领域中技术人员已知的方法对试样进行了分析。I晶型Reb C与甲醇/异丙醇重结晶的Reb C试样相对应并包含在如下d-间距值处的显著峰：8.6、9.8、12.6、13.6、13.9、14.2、14.9、15.6、17.0、17.4、18.2、19.9、21.3、22.6、23.3、25.5、27.2、28.4、28.9和30.0。图2描绘了与I晶型Reb C相关的所有明显的XRPD峰。图1对与I晶型Reb C(甲醇/异丙醇重结晶的Reb C试样)、得自的原始Reb C试样和在小瓶A1、D1和G1中送来的Reb C试样的XRPD谱图进行了比较。

实施例2

将粗甜菊提取物固体或粗Reb C固体(5g)、乙醇(95％，12.5mL)、甲醇(6mL)和水(2mL)合并并加热回流10分钟。将澄清的溶液冷却至22℃。用10mg 93～98％纯度的I晶型Reb C晶体给溶液引晶并将混合物在22℃下放置16小时。对制得的白色结晶产物进行过滤，用乙醇-甲醇(5mL，4∶1，v/v)混合物洗涤两次并在50℃的真空烘箱中减压(20mm)下干燥16～24小时以制得纯化的Reb C产物。通过HPLC对制得的Reb C产物的纯度进行评价。

实施例3

将粗甜菊提取物固体或粗Reb C固体(5g)、丙醇(95％，12.5mL)和甲醇(7.5mL)合并并加热回流10分钟。将澄清的溶液冷却至22℃。用10mg 93～98％纯度的I晶型Reb C向溶液引晶并将混合物在22℃下放置16小时。对制得的白色结晶产物进行过滤，用乙醇-甲醇(5mL，4∶1，v/v)混合物洗涤两次并在50℃的真空烘箱中减压(20mm)下干燥16～24小时以制得纯化的Reb C产物。通过HPLC对制得的Reb C产物的纯度进行评价。

现在已经完全描述了本发明，但是本领域的普通技术人员应理解，其能够在条件、配方和其他参数的广泛和等价的范围内实施而不影响本发明的范围或其任何实施方案。本文中引用的所有专利、公布的专利申请和出版物通过参考以其完整的形式完全并入。

Claims (48)

1.分离的I晶型莱苞迪苷C，其通过在Cu Kα波长1.54下的粉末X射线衍射确定的以下的显著峰的d-间距距离进行表征：8.6、9.8、12.6、13.6、13.9、14.2、14.9、15.6、17.0、17.4、18.2、19.9、21.3、22.6、23.3、25.5、27.2、28.4、28.9和30.0。

2.制备权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C的方法，所述方法包括：

(a)向基本纯的莱苞迪苷C固体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以完全溶解莱苞迪苷；

(b)让步骤(a)的溶液在室温下完全干燥；和

(c)回收在步骤(b)中形成的分离的I晶型莱苞迪苷C晶体。

3.权利要求2的方法，还包括以下前步骤：

(i)向基本纯的莱苞迪苷C固体添加结晶溶液以完全溶解所述固体；

(ii)让步骤(i)的结晶溶液在室温下完全蒸发；和

(iii)回收莱苞迪苷C晶体作为基本纯的莱苞迪苷C固体。

4.权利要求3的方法，其中步骤(i)的结晶溶液包含丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、2-丁醇、叔丁醇或其混合物。

5.权利要求4的方法，其中结晶溶液包含以5份～1份异丙醇对1份甲醇的重量比存在的甲醇和异丙醇。

6.权利要求2的方法，其中以30份～1份基本纯的莱苞迪苷C对1份结晶溶液的重量比将基本纯的莱苞迪苷C固体和结晶溶液合并。

7.对莱苞迪苷C进行纯化的方法，其包括以下步骤：

(a)向甜菊（Stevia）提取物固体或粗莱苞迪苷C固体添加结晶溶液以产生粗莱苞迪苷C溶液，其中所述甜菊提取物固体含有以干重计至少0.6%的莱苞迪苷C，且所述粗莱苞迪苷C固体含有以干重计至少40%的莱苞迪苷C；

(b)用权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C晶体对所述粗莱苞迪苷C溶液引晶；

(c)让所述粗莱苞迪苷C溶液在室温下完全干燥；

(d)回收在步骤(c)中形成的莱苞迪苷C晶体；

(e)向步骤(d)的莱苞迪苷C晶体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以完全溶解所述晶体；

(f)让步骤(e)的溶液在室温下完全干燥；和

(h)回收在步骤(f)中形成的分离的I晶型莱苞迪苷C晶体。

8.权利要求7的方法，其中结晶溶剂包含丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、2-丁醇、叔丁醇或其混合物。

9.权利要求8的方法，其中结晶溶剂包含以5份～1份异丙醇对1份甲醇的重量比存在的甲醇和异丙醇。

10.权利要求8的方法，其还包括用权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C晶体对步骤(e)的结晶溶液引晶。

11.对莱苞迪苷C进行纯化的方法，其包括以下步骤：

(a)向甜菊提取物固体或粗莱苞迪苷C固体添加包含甲醇和异丙醇的结晶溶液以制造粗莱苞迪苷C溶液，其中所述甜菊提取物固体含有以干重计至少0.6%的莱苞迪苷C，且所述粗莱苞迪苷C固体含有以干重计至少40%的莱苞迪苷C；

(b)用权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C晶体对所述粗莱苞迪苷C溶液引晶；

(c)让所述粗莱苞迪苷C溶液在室温下完全干燥；和

(d)回收在步骤(c)中形成的分离的I晶型莱苞迪苷C晶体。

12.权利要求7～11中任一项的方法，其还包括加热所述粗莱苞迪苷C溶液的步骤。

13.权利要求12的方法，其还包括冷却所述粗莱苞迪苷C溶液的步骤。

14.权利要求7～11中任一项的方法，其中所述粗莱苞迪苷C固体基本不含莱苞迪苷D杂质和/或莱苞迪苷A杂质，且所述方法还包括将分离的I晶型莱苞迪苷C晶体在浆料溶液中成浆。

15.提高碳水化合物甜味剂的甜味的方法，所述方法包括向对象施用碳水化合物甜味剂和有效提供甜味增强效果而不展示异味的量的权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C。

16.权利要求15的方法，其中碳水化合物甜味剂为蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆、木糖、阿拉伯糖或鼠李糖。

17.权利要求15的方法，其中碳水化合物甜味剂为糖醇。

18.权利要求17的方法，其中糖醇为赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、山梨醇或肌醇。

19.权利要求15～18中任一项的方法，其中碳水化合物甜味剂和分离的I晶型莱苞迪苷C在消耗品中施用。

20.权利要求19的方法，其中消耗品为食品、药物组合物、饮食补充剂、营养保健品、牙齿卫生组合物、桌面甜味剂或化妆品。

21.权利要求20的方法，其中食品为饮料或饮品。

22.权利要求15～18中任一项的方法，其中分离的I晶型莱苞迪苷C以150μM～600μM的浓度存在。

23.权利要求19的方法，其中消耗品具有等同于5～12%(w/v-%)蔗糖溶液的甜度强度。

24.消耗品，其包含碳水化合物甜味剂和有效提高所述碳水化合物甜味剂的甜味而不展示异味的量的权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C。

25.权利要求24的消耗品，其中分离的I晶型莱苞迪苷C以150μM～600μM的浓度存在。

26.权利要求24或25的消耗品，其中消耗品具有等同于5～12%(w/v-%)蔗糖溶液的甜度强度。

27.权利要求24或25的消耗品，其中碳水化合物甜味剂为蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆、木糖、阿拉伯糖或鼠李糖。

28.权利要求24或25的消耗品，其中碳水化合物甜味剂为糖醇。

29.权利要求28的消耗品，其中糖醇为赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、山梨醇或肌醇。

30.权利要求24或25的消耗品，其中消耗品为食品、药物组合物、饮食补充剂、营养保健品、牙齿卫生组合物、桌面甜味剂或化妆品。

31.权利要求30的消耗品，其中食品为饮料或饮品。

32.降低消耗品中碳水化合物甜味剂的量的方法，所述方法包括向消耗品添加权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C并减少为展示给定的甜度水平所需的量的碳水化合物甜味剂。

33.权利要求32的方法，其中碳水化合物甜味剂为蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆、木糖、阿拉伯糖或鼠李糖。

34.权利要求32的方法，其中碳水化合物甜味剂为糖醇。

35.权利要求34的方法，其中糖醇为赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、山梨醇或肌醇。

36.权利要求32～35中任一项的方法，其中消耗品为食品、药物组合物、饮食补充剂、营养保健品、牙齿卫生组合物、桌面甜味剂或化妆品。

37.权利要求36的方法，其中食品为饮料或饮品。

38.权利要求32～35中任一项的方法，其中分离的I晶型莱苞迪苷C以150μM～600μM的浓度存在。

39.权利要求32～35中任一项的方法，其中消耗品具有等同于5～12%(w/v-%)蔗糖溶液的甜度强度。

40.提高包含碳水化合物甜味剂的消耗品的甜度的方法，所述方法包括向消耗品添加有效提高消耗品的甜度的量的权利要求1的分离的I晶型莱苞迪苷C。

41.权利要求40的方法，其中消耗品具有等同于5～12%(w/v-%)蔗糖溶液的甜度强度。

42.权利要求40或41的方法，其中以获得150μM～600μM的浓度的量向消耗品添加分离的I晶型莱苞迪苷C。

43.权利要求40或41的方法，其中每50g～100g碳水化合物甜味剂被添加0.1g～0.5g分离的I晶型莱苞迪苷C。

44.权利要求40或41的方法，其中碳水化合物甜味剂为蔗糖、果糖、葡萄糖、高果糖玉米糖浆、木糖、阿拉伯糖或鼠李糖。

45.权利要求40或41的方法，其中碳水化合物甜味剂为糖醇。

46.权利要求45方法，其中糖醇为赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、山梨醇或肌醇。

47.权利要求40或41的方法，其中消耗品为食品、药物组合物、饮食补充剂、营养保健品、牙齿卫生组合物、桌面甜味剂或化妆品。

48.权利要求47的方法，其中食品为饮料或饮品。