JP2002348227A - マメ産出物 - Google Patents

マメ産出物

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Abstract

(57)【要約】 【課題】 トリプシン抑制作用を有し、微生物含有量が
減少されたマメ産出物を得る。 【解決手段】 トリプシン抑制作用を有し、微生物含有
量が減少されたマメ産出物と、このマメ産出物の汚染を
除去する方法と、マメ産出物を含む組成物と、マメ産出
物またはマメ産出物を含む組成物を皮膚、爪および髪に
局所投与することを特徴とする。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、マメ科植物の産出
物、マメ科植物の産出物を含む局所用の組成物およびそ
れらの製造と使用に関する。
【０００２】
【従来の技術】マメ科植物の実は、タンパク質、脂質お
よび炭化水素を多く含む。したがって、例えばダイズの
ようなマメ科植物の実およびマメ科植物の実を含む組成
物は、人間にとって非常に栄養があると考えられてい
る。マメ科植物の実はまた、タンパク質分解酵素（プロ
テアーゼ）の働きを抑制する化合物を含む。例えば、２
種類のタンパク質分解酵素抑制剤が１９４０年代初頭に
ダイズから分離された。Kunitz型トリプシン抑制剤（ダ
イズトリプシン抑制剤、ＳＴＩ）とBowman-Birkプロテ
アーゼ抑制剤（ＢＢＩ）である。例えば、BirkによるIn
t.J.Pept.Protein Res.２５：第１１３頁乃至第１３１
頁（１９８５年）およびKennedyによる Am.J.Clin.Neut
r.６８：第１４０６頁乃至第１４１２頁（１９９８年）
を参照してもよい。
【０００３】ＳＴＩは、化学量的に安定な錯体を形成す
ることによりトリプシンによるタンパク質分解作用を抑
制する。例えば、Liu,K.によるChemistry and Nutritio
nalvalue of soybean componentsのSoybeans, chemistr
y, technology and utilization中第３２頁乃至第３５
頁（Aspen publishers, Inc.,ガイサースバーグ、メリ
ーランド州、１９９９年）を参照してもよい。ＳＴＩは
２種類のジスルフィド架橋を持つ１８１のアミノ酸残基
からなり、ほぼ球形をなす。例えば、SongらによるJ.Mo
l.Biol.２７５：第３４７頁乃至第３６３頁（１９９８
年）を参照してもよい。
【０００４】ＢＢＩは、別々の活性部位において、プロ
テアーゼトリプシンとキモトリプシンを抑制する８ｋ−
Ｄａタンパク質である。例えば、BillingsらによるPro.
Natl.Acad.Sci.８９：第３１２０頁乃至第３１２４頁
（１９９２年）を参照してもよい。ＳＴＩとＢＢＩはダ
イズの種子の中にのみ発見され、他の部分には見つから
ない。例えば、BirkによるInt. J.Pept.Protein Res.２
５：第１１３頁乃至第１３１頁（１９８５年）を参照し
てもよい。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかし、元来の性質に
より、高濃度の微生物がダイズのようなマメ科植物の実
の外面に含まれる。したがって、汚染を除去する処理、
例えば加熱処理、有機／水溶液抽出処理、高シア精製処
理を、これらの微生物濃度を減らし、スキンケア用の投
与など人間が安全に使用できるようにするために用いて
もよい。しかし、出願人は、これらの処理はしばしばダ
イズ中の活性化合物を変性させ、化粧品および治療薬と
して皮膚、毛および爪に使用するために重要な生物学的
有効性を弱める（例えば、プロテアーゼ抑制作用を減少
させる）ことを発見した。さらに、このような処理はダ
イズ産出物を不安定にし、望ましくないにおいや色を生
じさせる。それゆえ、ダイズ産出物の生物学的利点を減
少させることなく、微生物濃度を減少させる手段の開発
が商業用に求められている。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明の目的は、微生物
含有量が減少され、かつプロテアーゼ抑制作用が維持さ
れるダイズ産出物（例えば、皮膚、毛、爪のケア組成物
の成分として使用できる）を提供することである。ま
た、本発明の別の目的は、このようなダイズ産出物を含
み、任意にその他の活性剤を含む皮膚、毛、爪のケア用
組成物を提供することである。
【０００７】本発明は、マメ科植物の生物学的に有用な
作用が維持され、かつ微生物含有量が減少されたマメ科
植物の産出物と、これらの産出物の製造手順と、これら
を化粧品用組成物中で使用することに関する。
【０００８】本発明は、トリプシン抑制作用を有し、微
生物含有量が減少されたマメ産出物と、このようなマメ
産出物の汚染を除去する方法と、このようなマメ産出物
を含む組成物を特徴とする。一つの実施の形態として、
マメ産出物はダイズ産出物である。
【０００９】本発明はまた、マメ産出物またはマメ産出
物を含む組成物を、皮膚、爪および髪の不調を防いだ
り、不調となった場合に処置したりするためだけでな
く、健康的な皮膚、爪および髪を保つために局所投与す
ることに関する。例えば、皮膚、髪および爪の弾力を整
える、皮膚、髪および爪を洗浄する、髪、爪の成長を遅
らせる、髪をストレートにしたり明るくしたりする、ア
クネを処置したり予防したりする、皮膚、髪および爪の
色調を整える、皮膚、髪および爪のきめを整える、皮膚
のしわを整える、皮膚、髪および爪に対する外部刺激を
処置する、皮膚、髪および爪を美しくすることが含まれ
るが、これらに限らない。
【００１０】また、本発明の他の特徴および利点が、発
明の詳細な説明と特許請求の範囲から明らかとなるであ
ろう。
【００１１】
【発明の実施の形態】本明細書の記載に基づいて、当業
者は本発明を最大限の範囲で利用することができると考
えられる。以下の詳細な実施の形態は単なる例示であ
り、いかなる場合においても開示された他の部分を限定
するものではないと解釈されるべきである。
【００１２】他に定義しない限り、本明細書で使用され
る技術用語、科学用語は本発明の当業者により通常理解
される意味と同様の意味を持つ。また、本明細書中で言
及されるあらゆる刊行物、出願特許、特許および他の参
考文献は、参照されることによって本出願の一部をな
す。本明細書中で使われるように、他に指定しない限
り、全ての「割合」は重量の割合を示す。
【００１３】本明細書中で使用されるように、「トリプ
シン抑制作用」とは、０．１％（ｗ／ｗ）濃度のマメ科
植物の産出物（legume product）（以下、マメ産出物と
称する）がプロテアーゼトリプシンの作用を抑制する能
力である。これは、以下に説明する実施例２の分析によ
り測定される。一つの実施の形態として、本発明による
マメ産出物は、少なくとも約１５％のトリプシン抑制作
用を有する。さらに別の実施の形態として、少なくとも
約２５％、例えば約５０％のトリプシン抑制作用を有す
る。
【００１４】本明細書中で使用されるように、「チオー
ル保持作用」とは、１％（ｗ／ｖ）濃度のマメ産出物が
チオールの煙誘発破壊を抑制する能力である。これは以
下に説明する実施例３の分析により測定される。一つの
実施の形態において、本発明のマメ産出物は少なくとも
約７５％のチオール保持作用を有する。さらに別の実施
の形態として、少なくとも約９０％、例えば約９５％の
チオール保持作用を有する。
【００１５】本明細書中で使用されるように、「微生物
含有量」とは、マメ産出物中に存在するバクテリア、真
菌および酵母菌の量を意味する。微生物含有量の測定方
法の例には、Patricia Cunniffにより編集された“Offi
cial Methods of Analysis of AOAC International”第
１６版第５改訂１９９９年（AOAC International）に記
載されるAOAC ９８６．２３法あるいは、United States
Pharmacopeial Convention, Incによる“Official Com
pendia of Standards, USP ２４ USP/NF １９”２００
０年（Board of Trustees, United States Pharmacopei
al Convention,Inc.）に記載されるＵＳＰ法があるがそ
れらに限らない。
【００１６】「不良微生物含有量」とは、マメ産出物中
に存在する人体に有害なバクテリア、真菌および酵母菌
の量を意味する。これらの菌には、例えば腸内細菌、大
腸菌、サルモネラ、好熱性胞子、バチルス、腸球菌、ブ
ドウ球菌、糞連鎖球菌およびSeymour S. Blockによる
“Disinfection, sterilization, preservation”第４
版第８８７頁乃至第８８８頁（１９９１年、Lea & Febi
ger, マルベーン、ペンシルベニア州）に記載されるも
のがあるこれらに限らない。
【００１７】本明細書中で使用されるように、「局所投
与」とは、例えば手または布、パフ、ローラーまたはス
プレーのような塗薬用具を用いて、皮膚の外面から直接
塗ったり広げたりすることを意味する。
【００１８】本明細書中で使用されるように、「化粧品
として許容できる」とは、この語句で示される産出物ま
たは化合物を組織（例えば皮膚）に接触させた際に、過
度の毒性、不適合性、不安定性、刺激、アレルギー反応
等が示されず適切であることを意味する。
【００１９】本明細書中で使用されるように、「局所担
体」とは、哺乳動物に局所投与するために適切な１つ以
上の融和性の固体または液体充填希釈剤である。局所担
体の例は、水、ワックス、オイル、皮膚軟化剤、乳化
剤、増粘剤、ゲル化剤およびそれらの混合物を含むがこ
れらに限らない。
【００２０】本明細書中で使用されるように、「弾力性
を調節する」とは、弾力性を高めたり、弾力性が損なわ
れるのを防いだり、あるいは皮膚、毛、爪がたるんだり
緩んだりするのを防いだり、処置したりすることを意味
する。皮膚の弾力性は、cutometerを用いて測定でき
る。J.Serup & G.JemecによるHandbook of Non-Invasiv
eMethods and the Skin第１４．３章（１９９５年）を
参照してもよい。皮膚の弾力性の損失は、多くの要因に
より引き起こされるであろう。例えば、老化、外部から
の刺激、皮膚、毛または爪に化粧品を投与することが含
まれるがこれらに限らない。
【００２１】本明細書中で使用されるように、「色調を
調節する」とは、皮膚、毛または爪の見た目を明るくし
たり暗くしたりする（例えば、着色された傷の色を明る
くしたり、青白い皮膚を黒くしたり、さらに／あるいは
皮膚の色を均等にしたりする）ことである。
【００２２】本明細書中で使用されるように、「爪の成
長を遅らせる」とは、爪の成長速度を減少させることを
意味する。
【００２３】本明細書中で使用されるように、「毛の成
長を遅らせること」とは、毛および／または毛軸の幅の
成長速度を減少させることを意味する。例えば、毛（例
えば腕、足または顔の毛）の見た目を減らすことを含む
がそれに限らない。
【００２４】本明細書中で使用されるように、「洗浄」
とは、皮膚、毛または爪の表面から、汚れおよび／また
は油を取り除くことを意味する。
【００２５】本明細書中で使用されるように、「きめを
整える」とは、皮膚、毛または爪の表面を滑らかにし、
表面上のこぶや裂け目を取り去ることを意味する。例え
ば、皮膚の見た目を滑らかで平らにすることが含まれる
がこれに限らない。
【００２６】本明細書中で使用されるように、「皮膚の
しわを整える」とは、皮膚のしわや細い線ができる工程
を防いだり、遅らせたり、抑えたり、元に戻したりする
ことを意味し、しわが現れるのを減らすことを含むがそ
れに限らない。
【００２７】本明細書中で使用されるように、「外部か
らの刺激を処置する」とは、皮膚、毛または爪に対する
外部からの刺激（aggression）による損傷を減少させた
り防いだりすることを意味する。外部からの刺激の例に
は、洗浄剤（例えば、界面活性剤を含む顔や毛の洗浄
剤）の使用、メイクアップ、髭剃り、刃物などを皮膚、
髪または爪に使用することにより生じる損傷、また紫外
線（例えば日光、または紫外線ランプや太陽シミュレー
タのような非自然光源による日光損傷）、オゾン、排気
ガス、環境汚染、塩素および塩素含有組成物、たばこの
煙により生じる環境による損傷である。皮膚、爪および
髪に対する外部刺激の作用は、脂質、炭水化物、ペプチ
ド、タンパク質、核酸、およびビタミンへの酸化損傷お
よび／または窒素化損傷と変異を含むがそれらに限らな
い。外部刺激の作用はまた、細胞の生存能力の損失、細
胞機能の損失または変質、遺伝子の変化および／または
タンパク質の発現を含むがそれらに限らない。
【００２８】本明細書中で使用されるように、「安全で
効果的な量」とは、正確に調整され、処置される状況下
において、明確な改善を引き起こすのに十分で、かつ深
刻な副作用を避けるのに十分低量な化合物または組成物
（例えばマメ産出物）の量を意味する。化合物または組
成物の安全で効果的な量は、使用者が処置される状況、
年齢、身体状況、また処置／予防が施される状況の厳し
さ、処置を施す期間、他の処置の性質、使用される化合
物または産出物／組成物の特性、使用される化粧品とし
て許容できる担体の特性等の要因により変化するであろ
う。
【００２９】マメ産出物 「マメ産出物（legume product）」とは、マメの果実か
ら抽出される物質を意味する。マメはマメ科植物であ
り、マメ科の植物はインゲンマメ、エンドウマメ、ヒラ
マメのような裂開する果実を持つ。マメ科植物として
は、例えば、ダイズ、ヒラマメ、エンドウマメ、落花生
があるがそれらに限らない。
【００３０】このマメ産出物は、マメの果実全体（例え
ばひいて粉末にしたマメの果実）を含んでもよいし、マ
メの果実の一部のみ（マメの抽出物）を含んでもよい。
また、マメ産出物は液体形態（例えばマメの果実と水の
混合物）でもよいし、固体形態（マメの果実の粉末）で
もよい。液体形態の場合、「マメ産出物」という用語
は、液体中に存在するマメから抽出された固体成分のこ
とを示す。
【００３１】本発明の組成物は、マメ産出物（例えばダ
イズ産出物）を安全で効果的な量含む。一つの実施の形
態として、組成物は約０．００１％乃至約５０％、例え
ば約１％乃至約３０％のマメ産出物（例えばダイズ産出
物）を含む。
【００３２】ダイズ産出物 「ダイズ産出物（soy product）」とは、ダイズから抽
出される物質を意味する。ダイズ産出物はダイズの一部
（例えば、低脂質ダイズの粉末または濾過された豆乳の
ようなダイズ抽出物）のみを含んでもよいし、ダイズ全
体（例えば、ダイズをひいた粉末）を含んでもよい。ダ
イズ産出物は、液体形態（例えば豆乳）でもよいし、固
体形態（例えばダイズ粉末または豆乳粉末）でもよい。
液体形態の場合、「ダイズ産出物」という用語は、液体
中に存在するダイズから抽出された固体成分のことを示
す。
【００３３】一つの実施の形態として、ダイズ産出物は
ダイズ粉末である。ダイズ粉末は乾燥ダイズをすりつぶ
して作ってもよい。一つ実施の形態として、ダイズ粉末
の粒子の平均サイズは、約１０マイクロメーターより小
さい、例えば１マイクロメーターより小さいサイズであ
る。一つの実施の形態として、ダイズ粉末は約１０％よ
り少ない、例えば約５％より少ない水分を含む。一つの
実施の形態として、ダイズ粉末は減圧下で凍結乾燥され
る。
【００３４】一つの実施の形態として、ダイズ産出物は
豆乳または豆乳粉末である。豆乳はダイズから抽出され
る固体と水の組み合わせであり、この混合物は、濾過に
より取り除かれるいくつか、またはすべての不溶性成分
を含む。豆乳粉末は、豆乳を脱水し、一つの実施の形態
として、減圧下で凍結乾燥またはスプレー乾燥させたも
のである。豆乳の製造方法には、以下の３つの方法があ
るが、それらに限らない。１つ目は、ダイズを水中に置
き水を吸わせ、膨らんだダイズをひいて粉末にし、さら
に水を加えて作ってもよい。この混合物を濾過し、あら
ゆる不溶性残留物を取り除いてもよい。２つ目は、ダイ
ズ粉末から調製してもよい。ダイズ粉末を（例えば少な
くとも１時間で）完全に水と混合し、その後濾過処理し
て不溶性残留物を取り除いてもよい。３つ目は、豆乳粉
末に水を加えることにより復元してもよい。一つの実施
の形態として、豆乳はダイズから抽出される固体を約１
重量％乃至約５０重量％（例えば約５重量％乃至約２０
重量％）含む。
【００３５】マメ産出物の殺菌処置 すでに論じたように、マメの果実の表面にはしばしば高
濃度の微生物が含まれる。よって、人間が使用する前
に、マメ産出物はこのような微生物を減らす、または除
去するための処置を施される必要がある。
【００３６】一つの実施の形態として、本発明のマメ産
出物の全微生物含有量は、１ｇ中約１０，０００コロニ
ーフォーミングユニット（ｃｆｕ）以下である。さらに
別の実施の形態として、本発明のマメ産出物の微生物含
有量は、１ｇ中約１，０００ｃｆｕ以下（例えば１ｇ中
約１００ｃｆｕ以下）である。
【００３７】一つの実施の形態として、本発明のマメ産
出物は、１ｇ中合計３００ｃｆｕ以下、例えば１ｇ中１
５０ｃｆｕ以下の不良微生物を含む。さらに別の実施の
形態として、本発明のマメ産出物は、少なくとも１ｇ
（例えば少なくとも１０ｇ）中にいかなる不良微生物も
検出しない。
【００３８】一つの実施の形態として、マメ産出物にガ
ンマ線照射を行う。さらに別の実施の形態として、マメ
産出物に約２ｋＧｙ乃至約３０ｋＧｙ、例えば約５ｋＧ
ｙ乃至約１０ｋＧｙのガンマ線照射を行う。出願人は、
この処置により、マメ産出物が生物学的作用（例えばセ
リンプロテアーゼ抑制作用）を維持しつつ、微生物含有
量を減少できることを予期せず発見した。出願人はま
た、マメ産出物にガンマ線照射処理することにより、マ
メ産出物が自然な色を維持し際立った悪臭が誘発されな
いなど、化粧品としての適性を維持することを発見し
た。
【００３９】また、マメ産出物のプロテアーゼ抑制作用
を維持できるような、その他の殺菌方法は、単独、また
はガンマ線照射と組み合わせて行われ、例えばＸ線、高
エネルギー電子光線、高エネルギープロトン光線、紫外
線放射、流体静力学圧にさらしたり、殺菌作用を有する
化学剤を添加したり、またそれらを組み合わせて行う方
法があるがそれらに限らない。微生物含有量削減のため
の方法が完全に列挙されたものが、Seymour S.Blockに
よる“Disinfection, sterilization, and preservatio
n”第４版、第８８７頁乃至第８８８頁（１９９１年、L
ea & Febiger,マルベルン、ペンシルベニア州）に記載
されている。
【００４０】出願人は、熱処理を伴う方法によりプロテ
アーゼ抑制作用がかなり損失する可能性があるため、使
用には注意が必要であることを発見した。例えば、出願
人は、豆乳を１００℃に１０分間加熱しただけで、豆乳
のトリプシン抑制作用が８６％（４℃に維持した場合）
から４６％に低下することを発見した。出願人はまた、
豆乳を加熱するとダイズ産出物の色または臭いを変化さ
せる可能性があることを発見した。
【００４１】局所用組成物 本発明において有用な局所用組成物は、皮膚に局所的に
投与するのに適した製剤を含む。一つの実施の形態とし
て、この組成物はダイズ産出物および化粧品として許容
できる局所用担体を含む。一つの実施の形態として、こ
の化粧品として許容できる局所用担体は、組成物の約５
０重量％乃至約９９．９９重量％（例えば組成物の約８
０重量％乃至９５重量％）存在する。
【００４２】この組成物は、様々な種類の製品タイプに
製造されてもよい。例えば、ローション、クリーム、ゲ
ル、スティック、スプレー、シェービングクリーム、軟
膏、洗浄用液体洗剤、固形洗剤、シャンプー、ペース
ト、粉末、ムース、布、パッチ、ネイルエナメル、傷用
包帯、粘着性包帯、ヒドロゲル、フィルムおよびファン
デーション、マスカラ、口紅のような化粧品を含むがこ
れらに限らない。これらの製品タイプは、化粧品として
許容できる様々なタイプの局所用担体を含んでもよい。
例えば、溶液、乳濁液（例えばマイクロ乳濁液、ナノ乳
濁液）、ゲル、固体およびリポソームを含むがこれらに
限らない。以下に示すものはこれらの担体を限定する例
ではなく、当業者によってその他の担体が調製され得
る。
【００４３】本発明において有用な局所用組成物は、溶
液として調製されてもよい。溶液は一般に水溶液（例え
ば、約５０％乃至約９９．９９％または約９０％乃至約
９９％の化粧品として許容できる水溶液）を含む。
【００４４】主題の発明において有用な局所用組成物
は、皮膚軟化剤を含む溶液として調製されてもよい。こ
の組成物は、好ましくは約２％乃至約５０％の皮膚軟化
剤を含む。本明細書で使用される「皮膚軟化剤」とは、
皮膚を保護すると共に、乾燥を防いだり緩和したりする
ための物質を意味する。様々な種類の好適な皮膚軟化剤
が知られており、本明細書中で使用されてもよい。Saga
rinによるCosmetics, Science and Technology,第２
版、第１巻、第３２頁乃至第４３頁（１９７２年）およ
びWenningerとMcEwenの編集によるthe International C
osmetic IngredientDictionary and Handbook版、第１
６５６頁乃至第１６６１頁、第１６２６頁、第１６５４
頁乃至第１６５５頁（The Cosmetic, Toiletry, and Fr
agrance Assoc.,ワシントンD.C.第７版１９９７年）
（以後この明細書では「ICI Handbook」と記載する）に
は、非常に多くの好適な物質の例が記載されている。
【００４５】ローションは、上記ような溶液から製造さ
れてもよい。ローションは一般に約１％乃至約２０％
（例えば約５％乃至約１０％）の皮膚軟化剤および約５
０％乃至約９０％（例えば約６０％乃至約８０％）の水
を含む。
【００４６】溶液から調製される別の製品タイプはクリ
ームである。クリームは一般に約５％乃至約５０％（約
１０％乃至約２０％）の皮膚軟化剤と、約４５％乃至約
８５％（約５０％乃至約７５％）の水を含む。
【００４７】溶液から調製されるさらに別の製品タイプ
には軟膏がある。軟膏は動物油、植物油または半固体の
炭化水素の単一基質を含んでもよい。軟膏は約２％乃至
約１０％の皮膚軟化剤と、約０．１％乃至約２％の増粘
剤を含んでもよい。本明細書において有用なさらに完全
な増粘剤は、SagarinによるCosmetics, Science andTec
hnology,第２版、第１巻、第７２頁乃至第７２頁（１９
７２年）およびICI Handbook第１６９３頁乃至第１６９
７頁に開示されている。
【００４８】本発明において有用な局所用組成物は、乳
濁液として調製されてもよい。担体が乳濁液の場合、約
１％乃至約１０％（例えば約２％乃至約５％）の担体が
乳化剤を含んでいる。乳化剤は非イオン性、アニオン性
またはカチオン性のいずれでもよい。好適な乳化剤は、
例えば米国特許第３，７５５，５６０号、同第４，４２
１，７６９号、McCutcheonによるDetergents and Emuls
ifiers, North American版第３１７頁乃至第３２４頁
（１９８６年）、ICI Handbook第１６７３頁乃至第１６
８６頁に開示されている。
【００４９】ローションとクリームは乳濁液として調製
されてもよい。一般に、ローションは約０．５％乃至約
５％の乳化剤を含む。また、クリームは約１％乃至約２
０％（例えば約５％乃至約１０％）の皮膚軟化剤と、約
２０％乃至約８０％（例えば約３０％乃至約７０％）の
水と、約１％乃至約１０％（例えば、約２％乃至約５
％）の乳化剤を含むであろう。
【００５０】例えば、ローションおよびクリームのよう
な水中油形（oil-in-water type）または油中水形（wat
er-in-oil type）の単相乳濁液のスキンケア製剤は、化
粧品技術においてよく知られており、主題の発明に有用
である。また、ウォーターインオイルインウォータータ
イプのものや、米国特許第４，２５４，１０５号および
同第４，９６０，７６４号に開示されているものような
多相乳濁組成物はまた主題の発明に有用である。一般
に、単相または多相乳濁液は、水、皮膚軟化剤、乳化剤
を基本成分として含んでいる。
【００５１】本発明の局所用組成物はまた、ゲル（例え
ば好適なゲル化剤を使用した水ゲル）として調製されて
もよい。水ゲルのための好適なゲル化剤は、天然ゴム、
アクリル酸、アクリル酸ポリマー、アクリル酸コポリマ
ーおよびセルロース誘導体（例えば、ヒドロキシメチル
セルロースおよびヒドロキシプロピルセルロース）を含
むがそれらに限らない。オイル（例えばミネラルオイ
ル）のための好適なゲル化剤は、ヒドロゲネートブチレ
ン／エチレン／スチレンコポリマーおよびヒドロゲネー
トエチレン／プロピレン／スチレンコポリマーを含むが
それらに限らない。ゲルは一般に、約０．１重量％乃至
約５重量％のゲル化剤を含む。
【００５２】また、本発明の局所用組成物は固体製剤
（例えば、ワックスベーススティック、固形洗剤組成
物、粉末または粉末を含む布）として調製されてもよ
い。
【００５３】また、本発明の組成物としてリポソーム製
剤も有用である。リポソームの例として、ユニラメラリ
ポソーム、マルチラメラリポソームおよびポーシラメラ
リポソームがあり、これらはリン脂質を含んでもよいし
含まなくてもよい。これらの組成物は、リン脂質、例え
ばジパルミトイルホスファチジルコリンとコレステロー
ルと水とがヘスペレチン第一結合することにより調製し
てもよい。これらはMezeiとGulasekharamによる“Lipos
omes-A Selective Drug Delivery System forthe Topic
al Route of Administration;Gel Dosage Form”, Phar
maceutics andPharmacology誌, 第３４巻（１９８２
年）、第４７３頁乃至第４７４頁に記載の方法、または
それらの改造法に基づいて調製されてもよい。リポソー
ム形成のために適切な組成物における表皮脂質は、リン
脂質に置換されてもよい。リポソーム製剤を製造するた
め、リポソーム試料が、上記担体（例えば、ゲルまたは
オイルインウォーター乳濁液）のうちの１つに含有させ
られてもよい。局所投与されるその他のリポソーム組成
物および薬学的使用法は、Mezei,M.による,“Liposomes
as a Skin Drug Delivery System”, Topics in Pharm
aceutical Sciences(D.D.BreimerおよびP.Speiser編
集）, Elsevier Science Publishers B.V., New York,
N.Y.,１９８５年第３４５頁乃至第３５８頁、ＰＣＴ特
許出願第ＷＯ９６／３１１９４号および米国特許出願第
５，２６０，０６５号に記載されている。
【００５４】主題の発明において有用な局所用組成物
は、前述の成分に加えて、それぞれの技術により確立さ
れた濃度で従来より皮膚、髪および爪に対して使用され
てきた様々な種類の付加的な油溶性物質、および／また
は水溶性物質を含んでもよい。
【００５５】付加的美容活性剤 一つの実施の形態として、局所用組成物は、マメ産出物
に加えてさらに別の美容活性剤を含む。「美容活性剤」
とは、皮膚、髪または爪に対して美容または治療効果を
もたらす化合物を意味し、例えば、ライト化剤、自己日
焼け剤のようなダーク化剤、抗アクネ剤、日光抑制剤、
抗菌剤、抗炎症剤、抗かび剤、抗寄生虫剤、外的鎮痛
剤、日焼け止め剤、光保護剤、酸化防止剤、表皮剥離
剤、洗剤／界面活性剤、モイスチャライザー、栄養剤、
ビタミン剤、エネルギーエンハンサー、抗発汗剤、収斂
剤、防臭剤、ヘアリムーバー、固化剤、抗硬化剤、およ
び髪、爪および／または皮膚調整剤である。
【００５６】一つの実施の形態として、上記試剤は、ヒ
ドロキシ酸、過酸化ベンゾイル、硫黄レゾルシノール、
アスコルビン酸、Ｄ−パンテノール、ヒドロキノン、オ
クチルメトキシシナメート、二酸化チタニウム、オクチ
ルサリシレート、ホモサレート、アボベンゾン、ポリフ
ェノール酸、カロテノイド、フリーラジカル捕捉剤、ス
ピントラップ、例えばレチノールおよびレチニルパルミ
テートのようなレチノイド、セラミド、ポリ不飽和脂肪
酸、必須脂肪酸、酵素、酵素抑制剤、無機物、例えばエ
ストロゲンのようなホルモン、例えばヒドロコルチゾン
のようなステロイド、２−ジメチルアミノエタノール、
塩化銅のような銅塩、Ｃｕ：Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓの
ような銅含有ペプチド、補酵素Ｑ１０、ＰＣＴ特許出願
第ＷＯ００／１５１８８号に開示されているようなペプ
チド、リポ酸、例えばプロリン、チロシンのようなアミ
ノ酸、ビタミン、ラクトバイオニック酸、アセチル補酵
素Ａ、ナイアシン、リボフラビン、チアミン、リボー
ス、例えばＮＡＤＨおよびＦＡＤＨ２のような電子輸送
体、例えばアロエベラのようなその他の植物抽出物、お
よびそれらの誘導体および混合物からなる群から選択さ
れるがそれらに限らない。美容活性剤は、一般に本発明
の組成物中に約０．００１重量％乃至約２０重量％、例
えば約０．０１重量％乃至約１０重量％、例えば約０．
１重量％乃至約５重量％存在する。
【００５７】ビタミンの例は、ビタミンＡ、例えばビタ
ミンＢ３、ビタミンＢ５、ビタミンＢ１２のようなビタ
ミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＫおよびビタミンＥお
よびそれらの誘導体を含むがそれらに限らない。
【００５８】ヒドロキシ酸の例は、グリコール酸、乳
酸、リンゴ酸、サリチル酸、クエン酸、酒石酸を含むが
これらに限らない。例えばヨーロッパ特許出願第２７
３，２０２号を参照してもよい。
【００５９】酸化防止剤の例は、スルフヒドリル化合物
のような水溶性酸化防止剤とそれらの誘導体（例えばメ
タ重亜硫酸ナトリウムおよびＮ−アセチル−システイ
ン）、リポ酸、ジヒドロリポ酸、レスベラトロール、ラ
クトフェリン、アスコルビン酸およびアスコルビン酸誘
導体（例えばアスコルビン酸パルミテートおよびアスコ
ルビン酸ポリペプチド）を含むがこれらに限らない。本
発明の組成物への使用に適した油溶性酸化防止剤は、ブ
チル化ヒドロキシトルエン、レチノイド（例えばレチノ
ール、レチニールパルミテート）、トコフェロール（例
えば酢酸トコフェロール）、トコトリエノールおよびユ
ビキノンを含むがこれらに限らない。本発明の組成物へ
の使用に適切な酸化防止剤を含む天然抽出物は、フラボ
ノイドとイソフラボノイドおよびそれらの誘導体（例え
ばゲニステインおよびジアドゼイン）を含む抽出物、レ
スベラトロール等を含む抽出物を含むがそれらに限らな
い。天然抽出物の例は、ブドウの種、緑茶、松の樹皮お
よびハチミツを含む。また、酸化防止剤の別の例は、IC
I Handbookの第１６１２頁乃至第１６１３頁に記載され
ているかもしれない。
【００６０】その他の物質 その他の様々な物質もまた、主題の発明の組成物中に有
効に存在してもよい。例えば、湿潤剤、タンパク質、ポ
リペプチド、防腐剤およびアルカリ剤がある。これらの
試剤の例が、ICI Handbookの第１６５０頁乃至第１６６
７頁に開示されている。本発明の組成物はまた、キレー
ト剤（例えばＥＤＴＡ）、防腐剤（例えばパラベン）を
含んでもよい。好適な防腐剤とキレート剤の例が、ICI
Handbookの第１６２６頁および第１６５４頁乃至第１６
５５頁に記載されている。さらに、本明細書において有
用な局所用組成物は、例えば染料、不透明化剤（例えば
二酸化チタニウム）、色素剤および香料のような従来の
化粧品補助剤を含んでもよい。
【００６１】ミネラルウォーター 豆乳のようなマメ産出物および本発明の組成物は、ミネ
ラルウォーターを用いて調製されてもよい。一つの実施
の形態として、ミネラルウォーターは少なくとも約２０
０ｍｇ／Ｌ（例えば約３００ｍｇ／Ｌ乃至約１０００ｍ
ｇ／Ｌ）の鉱化物を含む。一つの実施の形態として、ミ
ネラルウォーターは少なくとも約１０ｍｇ／Ｌのカルシ
ウムおよび／または少なくとも約５ｍｇ／Ｌのマグネシ
ウムを含む。
【００６２】上記のような組成物を含む本発明の組成物
および製剤は、当業者によく知られる手順により調製さ
れてもよい。
【００６３】実施例１：マメ産出物のガンマ線照射 出願人は、例えばガンマ線照射のようないかなる殺菌処
理を施される前の状態の豆乳粉末は高度の微生物含有量
を有し、微生物含有量は１ｇ中５０，０００ｃｆｕまで
の範囲であることを発見した。また、出願人は、この産
出物が検出可能な濃度の不良微生物、例えば糞連鎖球菌
を１ｇ中に２０，０００ｃｆｕレベルまで含むことを発
見した。
【００６４】出願人は、様々な量（例えば約１ｇ乃至約
２００ｋｇ）の豆乳粉末に対して、ガンマ線照射を１ｋ
Ｇｙ乃至１６ｋＧｙに変化させながら行った。微生物含
有量が１ｇ中約１００ｃｆｕ以下となるために必要なガ
ンマ線照射量は、約１０ｋＧｙであることが分かった。
糞連鎖球菌を１ログ減少させるのに必要な線量は、約３
ｋＧｙであると判断され、約５ｋＧｙの線量により豆乳
粉末のサンプル１０ｇ中の微生物含有量を検出できない
濃度まで着実に減少できることが分かった。しかし、マ
メ産出物に使用されるガンマ線照射量は、最終的には処
置されるマメ産出物の微生物含有量および大きさによっ
て決定されるであろう。
【００６５】実施例２：マメ産出物のトリプシン抑制作
用 蛍光カゼインペプチドのトリプシン誘発開裂の抑制を、
EnzChek（登録商標）プロテアーゼ分析用品一式を用い
て、製造者の使用説明書に基づいて測定した（EnzChek
（登録商標）プロテアーゼ分析用品一式産出物情報、１
９９９年３月１５日改訂、分子精査、ユージーン、オレ
ゴン州）。要約すると、まず、様々な種類のダイズ製剤
を１Ｘ消化バッファー（一式に付属）で希釈し、１Ｘ消
化バッファー中で溶解された１０００単位のトリプシン
（シグマ、セントルイス、ミズーリ州）と種々の濃度で
加温放置する。純セリンプロテアーゼ抑制剤（ダイズト
リプシン抑制剤、シグマ製、セントルイス、ミズーリ
州）をダイズ試剤を０．１％Ｗ／Ｖ，０．０１％Ｗ／Ｖ
および０．００１％Ｗ／Ｖに完全に制御するために使用
した。その後、ＢＯＤＩＰＹ蛍光カゼイン基質（一式に
付属）が供給された小型容器に０．２ｍｌの脱イオン水
を加えることにより、ＢＯＤＩＰＹ蛍光カゼイン１．０
ｍｇ／ｍｌ原料溶液を調製する。これを消化バッファー
中で最終的な作業濃度１０マイクログラム／ｍｌにす
る。トリプシンをテスト製剤とともに、またはなしで、
ＢＯＤＩＰＹ蛍光カゼイン基質と室温で一時間加温放置
した後、蛍光を（励起４８５ｎｍ／放出５３０ｎｍ）Sp
ectraMax（登録商標）Gemini microtiter plate reader
（Molecular Devices Corporation, サニーベイル、カ
リフォルニア州）により、Softmax（登録商標）Pro３.
０ software（Molecular Devices Corporation）を用い
て測定した。それぞれの実験を３回反復し、それを２回
繰り返した。
【００６６】この分析をダイズ産出物に対して７つの異
なる方法で実施した。実施例Ａはダイズをひいて粉末に
したものである（Sunlight Foods Corporation、タイペ
イ州、タイワン、R.O.C.）。実施例Ｂは実施例Ａのダイ
ズ粉末に対して約８ｋＧｙ乃至１５ｋＧｙのガンマ線照
射を行ったダイズ粉末である。実施例Ｃはダイズ粉末中
の油分を抽出して取り除いたダイズ粉末である（Centra
l Soya Company, Inc.製Soyafluff（登録商標）２００W
フォートウェイン、インディアナ州）。実施例Ｄは、
皮をむいたダイズと水とで作られたダイズ粉末を濾過
し、加熱して、スプレー乾燥（Devansoy Farms,キャロ
ル,アイオワ州）し、さらに約７ｋＧｙ乃至約９ｋＧｙ
のガンマ線照射を行ったものである。実施例Ｅは、ダイ
ズと水を混合して一晩中加熱し、１，３−ブチレングリ
コールを加えて作った豆乳粉末である（Ichimaru Pharc
os Co., Ltd製、Flavosterone SB、岐阜、日本）。実施
例Ｆは、ダイズと水を混合して一晩中加熱し、エタノー
ルを加えて作った豆乳粉末である（Ichimaru Pharcos C
o., Ltd製、Flavosterone SE、岐阜、日本）。実施例Ｇ
はダイズタンパク質抽出物（Laboratories Serobiologi
ques S.A.製Vegeseryl HGP LS ８５７２、プルノイ、フ
ランス）である。これらのダイズ産出物を、ダイズトリ
プシン抑制剤（ＳＴＩ）（Simga製）と比較した。
【００６７】様々なダイズ製剤による基質のトリプシン
開裂抑制率は、Microsoft Excel（登録商標）により計
算し、結果を表１に示す。
【表１】 表１に示すように、ＳＴＩはトリプシン誘発開裂を濃度
に応じて抑制することができる。実施例Ａはダイズ粉末
であり、同様にトリプシンの作用を著しく抑制した。さ
らに、ダイズ粉末にガンマ線照射を行う（すなわち実施
例Ｂ）と、ダイズ粉末中の微生物含有量は減少したが、
トリプシン抑制作用には予期せず著しい効果が見られな
かった。しかしながら、実施例Ｃ乃至実施例Ｇにおける
加熱および／または抽出処理は、ダイズ粉末のトリプシ
ン抑制作用を著しく減少させた。
【００６８】実施例３：マメ産出物のチオール保持作用 ダイズ粉末がチオールの煙誘発破壊を防ぐ能力を、標準
的な人体の真皮線維母細胞中（Clonetics、サンディエ
ゴ、カリフォルニア州）で評価した。主としてグルタチ
オンであるチオールは、内在細胞の酸化を防止する防御
系の一部である。グルタチオンは、酸化剤と酸化防止剤
のバランスを維持しながら、酸化還元緩衝液として働
く。グルタチオンはまた、例えばグルタチオンペルオキ
シダーゼ（過酸化物を還元する）、グルタチオン−Ｓ−
トランスフェラーゼ（解毒酵素の主基）のような様々な
酵素により反応を起こす好適な基質である。例えば、A.
MeisterによるCancer Res.５４：第１９６９頁乃至第１
９７５頁（１９９４年）を参照してもよい。
【００６９】グルタチオンを含む皮膚酸化防止剤（酵
素、非酵素を含む）は、紫外線やオゾンにさらされると
激減する。M.J.ConnorとL.A.WheelerによるPhotochem.P
hotobiol.４６：第２３９頁乃至第２４６頁（１９８７
年）およびR.M.TyrrellとM.PidouxによるPhotochem.Pho
tobiol.４７：第４０５頁乃至第４１２頁（１９８８
年）を参照してもよい。細胞培養モデルにおいて、細胞
間における低濃度グルタチオン（ＧＳＨ）は、紫外線照
射に対する高感度を引き起こす。システイン誘導体をラ
ットの皮膚に局所投与すると、紫外線照射により起こる
光損傷から保護できることがわかった。この効果はＧＳ
Ｈ合成の増加と関連があった。L.T.van den BroekeとG.
M.J.Beijersbergen van HenegouwenによるJ.Photochem.
Photobiol.Biol.２７：第６１頁乃至第６５頁（１９９
５年）、K.HanadaらによるJ.Invest.Dermatol.１０８：
第７２７頁乃至第７３０頁（１９９７年）、D.P.T.Stee
nvoordenらによるPhotochem Phtobiol.６７： 第６５１
頁乃至第６５６頁（１９９８年）を参照してもよい。し
たがって、グルタチオンは主要な内在性酸化防止剤であ
り、環境の刺激に高度に反応し、皮膚の色調としわを整
え、また外部刺激に対処する。
【００７０】この実験において、２４−ウェル フォー
マットトランスウェルインサート（Corning Costar、ケ
ンブリッジ、マサチューセッツ州）に植えつけた標準的
な新生児の真皮線維母細胞を、様々な濃度の豆乳粉末
（約５ｋＧｙのガンマ線照射を行った）を含む培地にお
いて、２４時間培養した。その後、プラシーボ（模造
品）またはタバコの煙（１本、BASIC Full Flavor １０
０'s cigarettes、フィリップモリス、リッチモンド、
バージニア州）に１０分間さらした。煙にさらす前に、
ダイズ産出物を含むインサートの上方の培地を取り除
き、細胞をDulbeccoによるPhosphate-Buffered Saline
（Life Technologies、ゲイサースバーグ、メリーラン
ド州）で３回洗浄した後、インサートの下方の培地のみ
において煙にさらした。煙にさらした直後に、この細胞
をさらに２４時間、前記培地で培養した。細胞を同様に
DulbeccoによるPhosphate-Buffered Salineで５回洗浄
し、６０μＭモノブロモビナン（分子プローブ、ユージ
ーン、オレゴン州、ＵＳＡ）をこの細胞に加え、３７℃
で３０分間培養した後に、蛍光を読み細胞間チオールを
測定した。チオール存在下でモノブロモビナンは蛍光を
発する。この蛍光はCytoFluor（登録商標）Fluorescenc
e Plate Reader（PerSeptive Biosystem、フラミンハ
ム、マサチューセッツ州、ＵＳＡ）を励起３６０ｎｍ放
出４６０ｎｍのフィルターと組み合わせて使用すること
により測定した。
【００７１】この実験の結果を表２に示す。
【表２】 これらの結果は、ガンマ線照射された豆乳粉末にはチオ
ールの煙誘発破壊に対する驚くほどの保護効果があるこ
とを示す（データは、３回の独立した実験による追試の
平均値±標準平均を示す）。
【００７２】本発明を、発明の詳細な説明に関連づけて
述べてきたが、前記記述は例示であり、特許請求の範囲
によって定義される発明の範囲を限定するものではない
と理解されるべきである。他の特徴、利点および改善も
また、特許請求の範囲内である。
【００７３】この発明の具体的な実施態様は次の通りで
ある。 （１）ダイズ産出物が１ｇ中約１５０ｃｆｕ以下の不良
微生物含有量を備えることを特徴とする請求項１記載の
組成物。 （２）ダイズ産出物が１ｇ中約１００ｃｆｕ以下の微生
物含有量を備えることを特徴とする請求項１記載の組成
物。 （３）ダイズ産出物が１ｇ中約１５０ｃｆｕ以下の不良
微生物含有量を備えることを特徴とする請求項２記載の
組成物。 （４）ダイズ産出物が１ｇ中約１０００ｃｆｕ以下の微
生物含有量を備えることを特徴とする請求項２記載の組
成物。 （５）ダイズ産出物１ｇ中に不良微生物の含有が検出さ
れないことを特徴とする請求項２記載の組成物。
【００７４】（６）ダイズ産出物が少なくとも約７５％
のチオール保持作用を備えることを特徴とする請求項１
記載の組成物。 （７）ダイズ産出物が少なくとも約７５％のチオール保
持作用を備えることを特徴とする請求項２記載の組成
物。 （８）ダイズ産出物が少なくとも約７５％のチオール保
持作用を備えることを特徴とする請求項３記載の組成
物。 （９）ダイズ産出物がガンマ線照射を受けたことを特徴
とする請求項１記載の組成物。 （１０）ダイズ産出物がガンマ線照射を受けたことを特
徴とする請求項２記載の組成物。
【００７５】（１１）ダイズ産出物が豆乳粉末であるこ
とを特徴とする請求項１記載の組成物。 （１２）ダイズ産出物がダイズ粉末であることを特徴と
する請求項１記載の組成物。 （１３）ダイズ産出物が豆乳粉末であることを特徴とす
る請求項２記載の組成物。 （１４）ダイズ産出物がダイズ粉末であることを特徴と
する請求項２記載の組成物。 （１５）ダイズ産出物が豆乳粉末であることを特徴とす
る請求項３記載の組成物。
【００７６】（１６）ダイズ産出物がダイズ粉末である
ことを特徴とする請求項３記載の組成物。 （１７）さらに、ビタミンＡ、ビタミンＢ３、ビタミン
Ｂ５、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＫ、ビタ
ミンＥおよびそれらの誘導体を含むことを特徴とする請
求項１記載の組成物。 （１８）さらに、ビタミンＡ、ビタミンＢ３、ビタミン
Ｂ５、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＫ、ビタ
ミンＥおよびそれらの誘導体を含むことを特徴とする請
求項２記載の組成物。 （１９）さらに、ビタミンＡ、ビタミンＢ３、ビタミン
Ｂ５、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＫ、ビタ
ミンＥおよびそれらの誘導体を含むことを特徴とする請
求項３記載の組成物。 （２０）さらに、２−ジメチルアミノエタノールを含む
ことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【００７７】（２１）さらに、２−ジメチルアミノエタ
ノールを含むことを特徴とする請求項２記載の組成物。 （２２）さらに、２−ジメチルアミノエタノールを含む
ことを特徴とする請求項３記載の組成物。 （２３）さらに、サリチル酸、乳酸、グリコール酸を含
むことを特徴とする請求項１記載の組成物。 （２４）さらに、サリチル酸、乳酸、グリコール酸を含
むことを特徴とする請求項２記載の組成物。 （２５）さらに、サリチル酸、乳酸、グリコール酸を含
むことを特徴とする請求項３記載の組成物。
【００７８】（２６）さらに、Ｎ−アセチル−システイ
ンを含むことを特徴とする請求項１記載の組成物。 （２７）さらに、Ｎ−アセチル−システインを含むこと
を特徴とする請求項２記載の組成物。 （２８）さらに、Ｎ−アセチル−システインを含むこと
を特徴とする請求項３記載の組成物。
【００７９】
【発明の効果】以上のように、この発明によれば、トリ
プシン抑制作用を有し、微生物含有量が減少されたマメ
産出物を得ることができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 598039367 Ｇｒａｎｄｖｉｅｗ Ｒｏａｄ，Ｓｋｉｌ ｌｍａｎ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ 08558, Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍ ｅｒｉｃａ (72)発明者 ジュ−チェン・リウ アメリカ合衆国、08502 ニュージャージ ー州、ベル・ミード、バークレー・アベニ ュー 268 (72)発明者 ミリ・セイバーグ アメリカ合衆国、08540 ニュージャージ ー州、プリンストン、ヘロンタウン・ロー ド 168 (72)発明者 クラウド・サリオウ アメリカ合衆国、07934 ニュージャージ ー州、グラッドストーン、ピーオー・ボッ クス・469、サウス・ストリート ５ (72)発明者 ジョナサン・ディー・ミラー アメリカ合衆国、08648 ニュージャージ ー州、ローレンスビル、タウン・コート・ ノース 4222 (72)発明者 ジェフリー・エム・ウー アメリカ合衆国、18976 ペンシルベニア 州、ワリントン、バターカップ・ブールバ ード 126 Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AC302 AC312 AC542 AC662 AD622 AD632 AD642 AD662 AD672 EE12 EE29

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 （ａ）少なくとも約１５％のトリプシン
    抑制作用と、１ｇ中約１，０００ｃｆｕ以下の微生物含
    有量とを備えたダイズ産出物と、 （ｂ）化粧品として許容できる局所用担体とを含む局所
    投与のための組成物。
  2. 【請求項２】 （ａ）少なくとも約５０％のトリプシン
    抑制作用と、１ｇ中約１０，０００ｃｆｕ以下の微生物
    含有量とを備えたダイズ産出物と、 （ｂ）化粧品として許容できる局所用担体とを含む局所
    投与のための組成物。
  3. 【請求項３】 （ａ）ガンマ線照射を受けたダイズ産出
    物と、 （ｂ）化粧品として許容できる局所用担体とを含む局所
    投与のための組成物。
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