CZ304886B6 - Prekurzory léčiv na bázi fosfonátových analogů nukleotidů a způsoby jejich výběru a přípravy - Google Patents

Prekurzory léčiv na bázi fosfonátových analogů nukleotidů a způsoby jejich výběru a přípravy Download PDF

Info

Publication number
CZ304886B6
CZ304886B6 CZ2003-413A CZ2003413A CZ304886B6 CZ 304886 B6 CZ304886 B6 CZ 304886B6 CZ 2003413 A CZ2003413 A CZ 2003413A CZ 304886 B6 CZ304886 B6 CZ 304886B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
formula
alkyl
diastereomer
diastereomers
amino
Prior art date
Application number
CZ2003-413A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2003413A3 (cs
Inventor
Mark W. Becker
Harlan H. Chapman
Tomas Cihlar
Eugene J. Eisenberg
Gong-Xin He
Michael R. Kernan
William A. Lee
Ernest J. Prisbe
John C. Rohloff
Mark L. Sparacino
Original Assignee
Gilead Sciences, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22821718&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ304886(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gilead Sciences, Inc. filed Critical Gilead Sciences, Inc.
Publication of CZ2003413A3 publication Critical patent/CZ2003413A3/cs
Publication of CZ304886B6 publication Critical patent/CZ304886B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/70—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving virus or bacteriophage
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/18—Testing for antimicrobial activity of a material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5011—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing antineoplastic activity

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)

Abstract

Nový způsob screeningu prekuzorů léčiv na bázi methoxyfosfonátových analogů nukleotidů pro identifikaci prekurzorů léčiv selektivně zacílených na požadované tkáně s protivirovou nebo protinádorovou aktivitou vedl k identifikaci nových směsí prekurzorů léčiv na bázi methoxyfosfonátového analogu nukleotidu a nových prekurzorů léčiv na bázi methoxyfosfonátového analogu nukleotidu pro retrovirovou nebo hepadnavirovou terapii. Kompozice těchto nových sloučenin ve farmaceuticky přijatelných excipientech pro jejich použití při terapii a profylaxi.

Description

Oblast techniky
Vynález se týká prekurzorů léčiv (prodrug) na bázi methoxyfosfonátových analogů nukleotidů. Zvláště se týká zlepšených způsobů přípravy a identifikace takových prekurzorů.
Dosavadní stav techniky
Je známo mnoho methoxyfosfonátových analogů nukleotidů. Tyto sloučeniny mají obecně strukturu A-OCH2P(O)(OR)2, kde A je zbytek analogu nukleosidu a R je nezávisle buď vodík nebo různé chránící nebo prekurzorové funkční skupiny. Viz US patenty 5 663 159, 5 977 061 a 5 798 34é, Oliyai et al., Pharmaceutical Research 16(11): 1687-1693 (1999), Stella et al., J. Med. Chem. 23(12):1275-1282 (1980), Aarons, L., Boddy, A. aPetrak, K. (1989) Novel Drug Delivery and Its Therapeutic Application (Prescott, L. F. a Nimmo, W. S. ed.), str. 121-126; Bundgaard, H. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) str. 70-74 a 79-92; Banerjee, P. K. a Amidon, G. L. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) str. 118-121; Notáři, R. E. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) str. 135-136; Stella, V. J. a Himmelstein, K. J. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) str. 177-198; Jones, G. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) str. 199-241; Connors, T. A. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) str. 291-316. Veškerá literatura a citace patentů jsou výslovně uvedeny literárním odkazem.
Prekurzory léčiv na bázi methoxyfosfonátových analogů nukleotidů, uvažovaných pro antivirovou nebo protinádorovou terapii, které jsou známy, byly tradičně vybírány pro jejich systemický účinek. Takové prekurzory léčiv byly například vybrány pro zvýšenou biologickou dostupnost, tj. schopnost být absorbovány ze zažívacího traktu a být rychle přetransformovány na vlastní léčivo, aby se zajistilo, že léčivo je k dispozici pro všechny tkáně. Nyní jsme však zjistili, žeje možné vybrat prekurzory léčiv, které se hromadí na terapeutických místech, jak je ilustrováno zde popsanými studiemi, kde se analogy obohacují v lokalizovaných ohniskách infekce HIV. Cílem tohoto vynálezu je, spolu s dalšími výhodami, dosáhnout nižší toxicity v okolních tkáních a vyšší účinnosti vlastního léčiva ve tkáních, které jsou cílem terapie vlastním účinným methoxyfosfonátovým analogem nukleotidu.
Podstata vynálezu
Předložený vynález je založen na výsledcích screeningu pro identifikaci methoxyfosfonátových analogů nukleotidů jako prekurzorů léčiv, které vykazují zvýšenou aktivitu v cílové tkáni, zahrnující:
(a) přípravu nejméně jednoho ze zmíněných prekurzorů léčiv;
(b) výběr nejméně jedné terapeutické cílové tkáně a nejméně jedné necílové tkáně;
(c) podávání prekurzoru léčiva cílové tkáni a zmíněné nejméně jedné necílové tkáni; a (d) stanovení relativní antivirové aktivity vykazované prekurzorem léčiva v tkáních podle kroku (c).
Zejména jsou cílovou tkání místa, kde se HIV aktivně replikuje a/nebo místa, která slouží jako zásobník HIV, a necílovou tkání je nezasažené (zdravé) zvíře. Neočekávaně jsme zjistili, že zvolení lymfoidní tkáně jako cílové tkáně pro praktickou aplikaci tohoto způsobu pro HIV vedlo k identifikaci prekurzorů léčiv, které zvyšují dodání účinné látky takovým tkáním.
- 1 CZ 304886 B6
Kromě toho jsme neočekávaně zjistili, že chiralita substituentů na atomu fosforu a/nebo amidátovém substituentu má vliv na obohacení pozorované při praktické aplikaci tohoto vynálezu. Dalším provedením podle předloženého vynálezu jsou diastereomemě obohacené sloučeniny podle tohoto vynálezu, které mají strukturu 3
B-B—och2—p-.uR r2 které jsou v podstatě prosté diastereomeru 4
B-E—OCH2—P -*R
kde
R1 je hydroxyl nebo -O-R16, kde Ri6 je nezávisle C]-Ci2 alkyl, C2-C]2 alkenyl, C2-C,2 alkynyl, aryl vybraný ze skupiny zahrnující fenyl, 2- a 3- pyrrolyl, 2- a 3-thienyl, 2- a 4-imidazolyl, 2, 4- a 5-oxazolyl, 3- a 4-isoxazolyl, 2-, 4- a 5-thiazolyl, 3-, 4- a 5-isothiazolyl, 3- a 4-pyrazolyl, 2-, 3- a 4—pyridinyl, 2-, 4- a 5-pyrimidinyl, aryl(C,-Ci2)alkyl, přičemž aryl nebo arylalkyl je substituován 1 až 3 substituenty vybranými zC,-Ci2 alkylamino, C,-Ci2 alkylamino(Ci-Ci2)alkyl, di(Ci-Ci2)alkylaminoalkyl, di(Ci-C12)alkylamino, hydroxyl, oxo, halo, amino, Ci-C12 alkylthio, C,-Ci2 alkoxy, Ci-C12 alkoxy(Ci-C]2)alkyl, aryloxy, aryloxy(Ci-Ci2)alkyl, aryl(CiC,2)alkoxy, aryl(C|—C]2)alkoxy(C|—C]2)alkyl, halo(Ci-Ci2)alkyl, nitro, nitro(Ci-C12)alkyl, azido, azido(Ci-Ci2)alkyl, C]-Ci2 alkylacyl, Ci-C,2 alkylacyl(Ci-Ci2)alkyl, karboxyl, nebo C]-Ci2 alkylacylamino skupin;
B je heterocyklická báze vzorce kde
R22 je nezávisle halogen, NH2, X nebo H, ale případně alespoň jeden R22 je X,
X je -<CH2)m(O)n(CH2)mN(R10)2, kde m je 0-2, n je 0-1, a
R10 je nezávisle H, alkyl C1-C15, alkenyl C2-Ci5,
Z je N nebo CH, za předpokladu, že heterocyklické jádro se liší do purinu o ne více než jeden Z;
-2CZ 304886 B6
R2 je zbytek aminokyseliny vybrané z alaninu, glycinu, fenylalaninu a alfa-aminomáselné kyseliny, vázaný na atom P přes aminoskupinu této aminokyseliny a mající každý karboxylový zbytek této aminokyseliny případně esterifikovaný C,-C]2 alkylem;
E je —(CH2)2—, -CH(CH3)CH2-, kde vazba na pravé straně je spojena s heterocyklickou bází; a jejich soli, volné báze, a solváty.
Diastereomery o struktuře 3 se označují jako (.Sý-isomery na fosforovém chirálním centru.
Přednostním provedením tohoto vynálezu jsou dále diastereomemě obohacené sloučeniny mající strukturu 5 a
16a (5a), které jsou v podstatě prosté diastereomeru 5b
(5b), kde
R5 je methyl nebo vodík;
Ri6 je nezávisle Ci-C]2 alkyl, C2-C12 alkenyl, C2-Ci2 alkynyl, aryl vybraný ze skupiny zahmují25 cí fenyl, 2- a 3-pyrrolyl, 2- a 3-thienyl, 2- a 4-imidazolyl, 2, 4- a 5-oxazolyl, 3- a 4-iso-3CZ 304886 B6 xazolyl, 2-, 4- a 5—thiazolyl, 3-, 4- a 5-isothiazolyl, 3- a 4-pyrazolyl, 2-, 3- a 4—pyridyl, 2-, 4a 5-pyrimidinyl, aryl(Ci-Ci2)alkyl, přičemž aryl nebo arylalkyl je substituován 1 až 3 substituenty vybranými z Ci-Cn alkylamino, C1-C12 alkylamino(C|-C|2)alkyl, di(Ci-Ci2)alkylaminoalkyl, di(Ci-Ci2)alkylamino, hydroxyl, oxo, halo, amino, C]—C12 alkylthio, C]-Ci2 alkoxy, Ci—C12 al5 koxy(C]-Ci2)alkyl, aryloxy, aryloxy(Ci-Ci2)alkyl, aryl(C|-Ci2)alkoxy, aryl(C|-Ci2)alkoxy(CiCi2)alkyl, halo(C|-Ci2)alkyl, nitro, nitro(Ci-C|2)alkyl, azido, azido(Ci-C12)alkyl, C\-Cn alkylacyl, Ci—C12 alkylacyl(Ci-Cl2)alkyl, karboxyl, nebo C1-C12 alkylacylamino skupin;
Ri6a je nezávisle C1—C12 alkyl;
R7 je boční řetězec aminokyseliny vybrané z alaninu, glycinu, fenylalaninu a alfaaminomáselné kyseliny;
R11 je amino, alkylamino, nebo dialkylamino skupina; a
R12 je amino nebo H; ajejich soli, volné báze a solváty.
Dále je předmětem předloženého vynálezu sloučenina o struktuře 6, 9-[(Rf-2-[[(5)-[[(5)-1(isopropoxykarbonyl)ethyl]amino]fenoxyfosfinyl]methoxy]propyl]adenin, zde také označovaná jako GS-7340
Jiným přednostním provedením tohoto vynálezu je fumarátová sůl struktury 6 (struktura 7), 925 [(7?)-2-[[(.S,)-[[(.S')-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl]amino]fenoxyfosnnyl]methoxy]propylJadenin fumarát (1:1), zde také označovaná jako GS-7340-2
-4CZ 304886 B6
Sloučeniny podle vynálezu jsou případně volitelně upravovány do kompozic (přípravků) obsahujících farmaceuticky přijatelné excipienty (pomocné látky). Takové kompozice se používají v účinných dávkách při terapii nebo profylaxi virových infekcí, zvláště HIV nebo hepadnavirových infekcí.
Podrobný popis vynálezu
Vlastní léčiva na bázi methoxyfosfonátových analogů nukleotidů pro použití při způsobu screeningu podle vynálezu jsou sloučeniny, které mají strukturu A-OCH2P(O)(OH)2, kde Aje zbytek analogu nukleosidu. Tyto sloučeniny jsou samy o sobě známy a nejsou součástí tohoto vynálezu. Mnohem specifičtěji, vlastní léčivé sloučeniny sestávají z heterocyklické baze B a aglykonu E, a mají obecně strukturu
Β —E—-OCH2 — P — OH
OH kde skupiny B a E jsou definovány výše. Příklady jsou popsány v US patentech 4 659 825,
808 716, 4 724 233, 5 142 051, 5 130 427, 5 650 510, 5 663 159, 5 302 585, 5 476 938,
696 263, 5 744 600, 5 688 778, 5 386 030, 5 733 896, 5 352 786 a 5 798 340 a Evropských patentech EP 821 690 a 654 037.
Prekurzory léčiv jsou kovalentně modifikované analogy vlastních léčivých methoxyfosfonátových analogů popsaných v předchozím odstavci. Obecně je atom fosforu ve vlastním léčivu přednostním místem pro modifikaci prekurzoru léčiva, ale jiná místa se nalézají v heterocyklické bázi B nebo v aglykonu E.
Zjistili jsme, že stereochemie prekurzorů léčiv je schopná ovlivňovat obohacování v cílových tkáních. Chirální místa (polohy) jsou na atomu fosforu a jsou také k nalezení vjeho substituentech. Například, aminokyselina může být v D nebo L formě a estery fosfonátů nebo estery aminokyselin mohou také obsahovat chirální centra. Chirální polohy se také nacházejí v té části molekuly, kterou tvoří analog nukleosidu, ale ty jsou již diktovány stereochemií vlastního léčiva. Například, (7?)-isomeru PMPA je dávaná přednost, protože je aktivnější než odpovídající (ó) isomer. Jak již bylo poznamenáno, odlišné chování stereoisomerů je dáno obohacením nebo přečištěním stereoisomeru (v případě většiny methoxyfosfonátových analogů nukleotidů to bude spíše diastereomer než enantiomer) prostého jiných stereoisomerů v dané chirální poloze, takže každá ve screeningu testovaná sloučenina je v podstatě homogenní. Za v podstatě homogenní nebo chirálně obohacenou považujeme takovou sloučeninu, kde požadovaný stereoisomer tvoří více než asi 60 % hmotn. sloučeniny, obvykle více než asi 80 % a s výhodou více než asi 95 %.
Skupiny E představují aglykony použité v methoxyfosfonátových analogách nukleotidů. Skupina E je s výhodou -CH(CH3)CH2- nebo -CH2CH2- Rovněž je výhodné, když postranní skupiny na chirálních centrech v aglykonu jsou v podstatě výlučně v konfiguraci (R).
Ri je prostřednictvím kyslíku vázaný substituent hydrolyzovatelný in vivo, o struktuře -ORió, kde Rió je nezávisle C]-C]2 alkyl, C2-C12 alkenyl, C2-Ci2 alkynyl, aryl vybraný ze skupiny zahrnující fenyl, 2- a 3-pyrrolyl, 2- a 3-thienyl, 2- a 4—imidazolyl, 2, 4- a 5-oxazolyl, 3- a 4-isoxazolyl, 2-, 4- a 5-thiazolyl, 3-, 4- a 5-isothiazolyl, 3- a 4-pyrazolyl, 2-, 3- a 4-pyridyl, 2-, 4- a 5pyrimidinyl, aryl(Ci-Ci2)alkyl, přičemž aryl nebo arylalkyl je substituován 1 až 3 substituenty
-5CZ 304886 B6 vybranými z Ci-C]2 alkylamino, C]-Ci2 alkylamino(Ci-C]2)alkyl, di(C]-Ci2)alkylaminoalkyl, di(Ci-Ci2)alkylamino, hydroxyl, oxo, halo, amino, Cj-Ci2 alkylthio, C1-C12 alkoxy, C]-C]2 alkoxy(C]-Ci2)alkyl, aryloxy, aryloxy(Ci-C]2)alkyl, aryl(Ci-Ci2)alkoxy, aryl(Ci-C]2)alkoxy(CiC12)alkyl, halo(Ci-C]2)alkyl, nitro, nitro(Ci-C]2)alkyl, azido, azido(Ci-Ci2)alkyl, Ci-C]2 alkylacyl, C1-C12 alkylacyl(C|-C|2)alkyl, karboxyl, nebo Ci-C]2 alkylacylamino skupin. S výhodou je R] aryloxy, běžně nesubstituovaný nebo para-substituovaný fenoxy.
Aryl a „O“ či „N“ substituce jsou definovány ve sloupci 16, řádek 42 až 58, US patentu 5 798 340.
Běžně jsou aminokyseliny přirozené aminokyseliny nebo l aminokyseliny. Vhodné specifické příklady jsou uvedeny v US patentu 5 798 340, například v Tabulce 4 v sloupcích 8 až 10.
Alkylem používaným podle předloženého vynálezu, pokud není stanoveno něco jiného, je normální, sekundární, terciární nebo cyklický uhlovodík. Pokud není stanoveno něco jiného, alkyl je Ci-Cj2. Příkladem jsou -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH2CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2CH2CH2CH2CH3, -(CH(CH3)CH2CH2CH3, -CH(CH2CH3)2, -C(CH3)2CH2CH3, -CH(CH3)CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)CH2CH3, -ch2ch2CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH2CH2CH3, -CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3), -C(CH3)2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH(CH3)2, -C(CH3)(CH2CH3)2, -CH(CH2CH3)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH(CH3)2, a -CH(CH3)C(CH3)3. Alkenyly a alkynyly jsou definovány stejným způsobem, ale obsahují alespoň jednu dvojnou resp, trojnou vazbu,
Tam, kde se uvádějí enolové nebo keto skupiny, jsou myšleny rovněž jejich tautomery.
Sloučeniny prekurzorů léčiv podle tohoto vynálezu jsou používány ve formě volných bází nebo různých solí vyjmenovaných v US patentu 5 798 34é a jsou upraveny pomocí farmaceuticky přijatelných excipientů nebo solvatačních ředidel pro použití jako farmaceutické výrobky také jak je uvedeno v US patentu 5 798 340. Tyto prekurzory léčiv mají protivirové a užitečné vlastnosti již zjištěné pro vlastní léčiva (viz US patent 5 798 340 a jiné citace vztahující se k methoxyfosfonátovým analogům nukleotidů). Rozumí se, že diastereomer o struktuře (4) je přinejmenším vhodný jako meziprodukt při chemické přípravě vlastního léčiva hydrolýzou in vitro, bez ohledu najeho relativně neselektivní charakter, jak bylo zjištěno studiemi podle tohoto vynálezu.
Vynález bude lépe pochopen na základě následujících příkladů.
Příklady uskutečnění vynálezu
Příklad la
Příprava PMEA z adeninu za použití isopropoxidu hořečnatého.
K suspenzi adeninu (16,8g, 0,124 mol) v dimethylformamidu (DMF) (41,9 ml) byl přidán ethylen karbonát (12,1 g, 0,137 mol) a hydroxid sodný (0,100 g, 0,0025 mmol). Směs byla přes noc zahřívána na 130 °C. Reakce byla zchlazena pod 50 °C a byl přidán toluen (62,1 ml). Suspenze byla dále chlazena na 5 °C po dobu 2 hodin, zfiltrována a promyta toluenem (2x). Vlhký pevný
-6CZ 304886 B6 produkt byl vysušen ve vakuu při 65 °C s výtěžkem 20,0 g (90%) 9-(2-hydroxyethyl)adeninu ve formě špinavě bílé pevné látky. T.t. 238 až 240 °C.
9-(2-hydroxyethyl)adenin (HEA) (20,0 g, 0,112 mol) byl suspendován v DMF (125 ml) a zahřát na 80 °C. Ke směsi byl přidán isopropoxid hořečnatý (11,2 g, 0,0784 mol) nebo alternativně tbutoxid hořečnatý a následně diethyl /r-toluensulfonyloxymethylfosfonát (66,0 g, 0,162 mol) po dobu jedné hodiny. Směs byla míchána při 80 °C po dobu 7 hodin. 30 ml těkavých látek bylo odstraněno vakuovou destilací a k reakční směsi bylo znovu přidáno 30 ml čerstvého DMF. Po zchlazení na teplotu místnosti byl přidán bromtrimethylsilan (69,6 g, 0,450 mol) a směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 6 hodin. Reakční směs byla zkoncentrována na hustou gumovitou látku. Tato gumovitá látka byla rozpuštěna v 360 ml vody, extrahována 120 ml dichlormethanu, upravena na pH 3,2 hydroxidem sodným a výsledná suspenze přes noc míchána při teplotě místnosti. Suspenze byla zchlazena na 4 °C po dobu jedné hodiny. Pevné produkty byly odděleny filtrací, promyty vodou (2x), a vysušeny ve vakuu při 56 °C s výtěžkem 20 g (65,4%) 9—[2— (fosfonomethoxy)ethyl]adeninu (PMEA) jako bílé pevné látky. T.t.: > 200 °C rozklad. 'HNMR (D2O) · 3,49 (t, 2H); 3,94 (t, 2H); 4,39 (t, 2H); 8,13 (s, IH); 8,22 (s, IH).
Příklad lb
Příprava PMPA z adeninu za použití /-butoxidu hořečnatého.
K suspenzi adeninu (40 g, 0,296 mol) v DMF (41,9 ml) byl přidán (7?)-propylen karbonát (34,5 g, 0,338 mol) a hydroxid sodný (0,480 g, 0,012 mol). Směs byla přes noc zahřívána na 130 °C. Reakční směs byla zchlazena na 100 °C a byl přidán toluen (138 ml) a následně kyselina methansulfonová (4,7 g, 0,049 mol), při čemž byla reakční teplota udržována mezi 100 až 110 °C. Byl přidán další toluen (114 ml), aby se vytvořil homogenní roztok. Roztok byl chlazen na 3 °C po dobu 7 hodin a pak udržován na 3 °C po dobu jedné hodiny. Výsledná pevná látka byla vysušena ve vakuu při 80 °C s výtěžkem 42,6 g (75%) (7?)-9-[2-(hydroxy)propyl]adeninu (HPA) ve formě špinavě bílé pevné látky. T.t.: 188 až 190 °C.
NHo
fl ^O^P(OEt)2
H Me
8o°c
(7ř)-9-[2-(hydroxy)propyl]adenin (HPA) (20,0 g, 0,104 mol) byl suspendován v DMF (44,5 ml) a zahřát na 65 °C. Ke směsi byl po dobu jedné hodiny přidáván t-butoxid hořečnatý (14,2 g, 0,083 mol), nebo alternativně isopropoxid hořečnatý, a následně /Moluensulfonyloxymethylfosfonát (66,0 g, 0,205 mol) po dobu dvou hodin, při čemž byla teplota udržována na 78 °C.
-7CZ 304886 B6
Směs byla při 75 °C míchána po dobu 4 hodin. Po zchlazení pod 5 °C byl přidán bromtrimethylsilan (73,9 g, 0,478 mol) a směs vyhřívána na 77 °C po 3 hodiny. Po skončení byla reakční směs zahřátá na 80 °C a těkavé látky byly odděleny destilací za atmosférického tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve vodě (120 ml) při 50 °C a pak extrahován ethylacetátem (101 ml). pH vodné fáze bylo nastaveno na pH 1,1 hydroxidem sodným, naočkováno autentickým (7?)-PMPA a pH vodné vrstvy bylo znovu nastaveno na pH 2,1 hydroxidem sodným. Výsledná suspenze byla přes noc míchána při teplotě místnosti. Suspenze byla chlazena na 4 °C po 3 hodiny. Pevný produkt byl oddělen filtrací, promyt vodou (60 ml) a vysušen ve vakuu při 50 °C s výtěžkem 18,9 g (63,5 %) surového (7?)-9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu (PMPA) ve formě špinavě bílé pevné látky.
Surový (/?)—9-[2—(fosfonomethoxy)propyl]adenin byl zahříván pod zpětným chladičem ve vodě (255 ml) až se veškeré pevné látky rozpustily. Roztok byl chlazen na teplotu místnosti po více než 4 hodiny. Výsledná suspenze byla chlazena na 4 °C po dobu tří hodin. Pevný produkt byl oddělen filtrací, promyt vodou (56 ml) a acetonem (56 ml), a vysušen ve vakuu při 50 °C s výtěžkem 15,0 g (50,4%) (7?)-9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu (PMPA) ve formě bílé pevné látky. T.t.: 278 až 280 °C.
Příklad 2
Příprava GS-7171 (III)
Schéma 1
SfV
SOCI,, O Et-,Ν
CH2C12
-8CZ 304886 B6
Do sklem vyloženého reaktoru byl nadávkován bezvodý PMPA, (I) (14,6 kg, 50,8 mol), fenol (9,6 kg, 102 mol), a l-methyl-2-pyrrolidinon (39 kg). Směs byla zahřátá na 85 °C a přidán triethylamin (6,3 kg, 62,3 mol). Pak byl po dobu 6 hodin přidáván roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (17,1 kg, 82,9 mol) v l-ethyl-2-pyrrolidinonu (1,6 kg) při 100 °C. Vyhřívání pokračovalo po dobu 16 hodin. Reakční směs byla zchlazena na 45 °C, byla přidána voda (29 kg) a zchlazena na 25 °C. Pevné produkty byly odděleny z reakční směsi odfiltrováním a propláchnuty vodou (15,3 kg). Spojený filtrát a promývací roztok byly zkoncentrovány na světlehnědou suspenzi za sníženého tlaku, byla přidána voda (24,6 kg) a nastaveno pH = 11 pomocí hydroxidu sodného (NaOH) (25% vodný roztok). Jemné částice byly odstraněny filtrací přes křemelinu (2 kg) a následovalo promytí vodou (4,4 kg). Spojený filtrát a promývací roztok byly extrahovány ethylacetátem (28 kg). Vodný roztok byl nastaven na pH = 3,1 pomocí kyseliny chlorovodíkové (HCl) (37% vodný roztok) (4 kg). Surová látka II byla oddělena filtrací a promytá methanolem (12,7 kg). Vlhký koláč surové látky II byl suspendován v methanolu (58 kg). Pevné produkty byly odděleny filtrací, promyty methanolem (8,5 kg) a vysušeny při sníženém tlaku s výtěžkem 9,33 kg látky II ve formě bílého prášku. ’H NMR (D2O) δ 1,2 (d, 3H), 3,45 (q, 2H), 3,7 (q, 2H), 4 (m, 2H), 4,2 (q, 2H), 4,35 (dd, 2H), 6,6 (d, 2H), 7 (t, 1H), 7,15 (t, 2H), 8,15 (s, 1H), 9,2 (s, 1H); l3P NMR (D2O) δ 15,0 (dekuplován).
GS-7171 (III) (schéma 1)
Do sklem vyloženého reaktoru byl nadávkován monofenyl PMPA, (II), (9,12 kg, 25,1 mol) a acetonitril (30,7 kg). Byl přidán thionylchlorid (6,57 kg, 56,7 mol) při teplotě pod 50 °C. Směs byla zahřívána při 75 °C až se rozpustily pevné látky. Reakční teplota byla zvýšena na 80 °C a těkavé látky (11,4 kg) byly získány destilací při atmosférickém tlaku pod dusíkem. Zbytek v reaktoru byl zchlazen na 25 °C, přidán dichlormethan (41 kg), a zchlazen na -29 °C. Po dobu 60 minut byl přidáván roztok (L)-alanin isopropyl esteru (7,1 kg, 54,4 mol) v dichlormethanu (36 kg) při -18 °C a poté následovalo přidávání trimethylaminu (7,66 kg, 75,7 mol) po dobu 30 minut při -18 až 11 °C. Reakční směs byla zahřátá na teplotu místnosti a pětkrát promyta roztokem dihydrogenfosfátu sodného (10% vodný roztok, 15,7 kg při každém promývání). Organický roztok byl vysušen bezvodým síranem sodným (18,2 kg), filtrován, promyt dichlormethanem (28 kg), a za sníženého tlaku zkoncentrován na olejovitou látku. K oleji byl přidán aceton (20 kg) a směs zkoncentrována za sníženého tlaku. K výslednému oleji byl přidán aceton (18,8 kg). Polovina roztoku produktu byla přečištěna chromatograficky přes lože 38 x 38 cm 22 kg silikagelu 0,25 mm, 0,062 mm až 0,038 mm (60, 230 a 400 mesh). Kolona byla eluována 480 kg acetonu. Přečištění bylo opakováno s druhou polovinou oleje pomocí čerstvého silikagelu a acetonu. Frakce obsahující čistý produkt byly zkoncentrovány za sníženého tlaku na olej. Koleji byl přidán acetonitril (19,6 kg) a směs zkoncentrována při sníženém tlaku. Byl přidán acetonitril (66,4 kg) a roztok chlazen po 16 hodin na 0 až -5 °C. Pevné látky byly odstraněny filtrací a filtrát zkoncentrován při sníženého tlaku na 5,6 kg III ve formě tmavého oleje: ’H NMR (CDC13) δ 1,1 (m, 12H), 3,7 (m, 1H), 4,0 (m, 5H), 4,2 (m, 1H), 5,0 (m, 1H), 6,2 (s, 2H), 7,05 (m, 5H), 8,0 (s, 1H), 8,25 (d, 1H); 13P NMR (CDC13) δ 21,0, 22,5 (dekuplován).
Alternativní způsob pro GS-7171 (III)
-9CZ 304886 B6
Schéma 2
SOC12
(bezvodý)
I
II
- 10CZ 304886 B6
Monofenyl PMPA (II).
Baňka s kulatým dnem se zpětným chladičem a přívodem dusíku byla umístěna do olejové lázně o teplotě 70 °C. Do baňky byl vložen bezvodý PMPA (I) (19,2 g, 67 mmol), A,A-dimethylformamid (0,29 g, 3,3 mmol) a tetramethylensulfon (40 ml). Po 4 hodiny byl přidáván thionylchlorid (14,2 g, 119 mmol). Vyhřívání bylo zvýšeno na 100 °C po stejnou dobu. Byl získán homogenní roztok. Během 5 minut byl k roztoku přidáván fenoxytrimethylsilan (11,7 g, 70 mmol). Vyhřívání na 100 °C na olejové lázni pokračovalo po další dvě hodiny. Reakční směs byla nalita do rychle míchaného acetonu (400 ml) při chlazení na 0 °C. Pevné produkty byly odděleny filtrací, vysušeny při sníženém tlaku a rozpuštěny v methanolu (75 ml). pH roztoku bylo nastaveno na 3,0 pomocí roztoku hydroxidu draselného (45% vodný roztok) při chlazení ve vodě s ledem. Získané pevné produkty byly odděleny filtrací, promyty methanolem a vysušeny při sníženém tlaku s výtěžkem 20,4 g II (schéma 2) ve formě bílého prášku.
GS-7171 (III).
Monofenyl PMPA (II) (3 g, 8,3 mmol), tetramethylensulfon (5 ml) a V,V-dimethylformamid byly smíseny v baňce s kulatým dnem v olejové lázni při teplotě 40 °C. Byl přidán thionylchlorid (1,96 g, 16,5 mmol). Po 20 minutách byl čistý roztok vyjmut z lázně, zředěn dichlormethan (10 ml) a přidán roztok (L)-alanin isopropyl esteru (5 g, 33 mmol) a diisopropylethylaminu (5,33 g, 41 mmol) v dichlormethanu (20 ml) při -10 °C. Reakční směs byla vyhřátá na teplotu místnosti a třikrát promyta roztokem dihydrogenfosfátu sodného (10% vodný roztok, 10 ml při každém promývání). Organický roztok byl vysušen nad bezvodým síranem sodným a zkoncentrován při sníženém tlaku na olej. Olej byl smísen s kyselinou fumarovou (0,77 g, 6,6 mmol) a acetonitrilem (40 ml) a vyhříván pod zpětným chladičem tak, aby byl získán homogenní roztok. Roztok byl zchlazen v ledové lázni a pevné látky odděleny filtrací. Pevná fumarátová sůl GS-7171 byla vysušena při sníženém tlaku s výtěžkem 3,7 g. Sůl (3,16 g, 5,3 mmol) byla suspendována v dichlormethanu (30 ml) a smísena s roztokem uhličitanu draselného (5 ml, 2,5M ve vodě) až se pevná látka rozpustila. Organická vrstva byla izolována, pak promyta vodou (5 ml), vysušena nad bezvodým síranem sodným a zkoncentrována při sníženém tlaku s výtěžkem 2,4 g III ve formě světlehnědé pěny.
Příklad 3
A. Separace diastereomerů šaržovou eluční chromatografií
Diastereomery GS-7171 (III) byly resolvovány šaržovou eluční chromatografií pomocí komerčně dostupného Chiralpaku AS, 20pm, 21 x 250 mm semi-preparativní HPLC kolonou s Chiralpakem AS, 20pm, s 21 x 50 mm předkolonou. Chiralpak® AS je plnicí materiál vyráběný firmou Daicel a prodávaný v Severní Americe společností Chiral Technologies, lne. (U. S. patenty 5 202 433, RE 35 919 5 434 298, 5 434 299, a 5 498 752). Chiralpak AS je chirální stacionární fáze (CSP) obsahující amylosetris[(ó)-a-methylbenzyl karbamát] na silikagelovém nosiči.
Diastereomemí směs GS-7171 byla rozpuštěna v mobilní fázi, a přibližně 1 g alikvotní podíly GS-7171 byly čerpány do chromatografíckého systému. Nežádoucí diastereomer, označovaný GS-7339, byl prvním větším širokým (po dobu přibližně 15 min) pikem, eluovaným z kolony. Po skončení eluce píku GS-7339 byla mobilní fáze okamžitě změněna na 100% methylalkohol, což způsobilo, že požadovaný diastereomer, označovaný GS-7340 (IV), byl z kolony eluován ve formě ostrého píku s čelem rozpouštědla, methylalkoholem. Methylalkohol byl použit pro zkrácení celkové doby cyklu (operace). Po první dvojici nastříknutí byly oba diastereomery získány jako jediné velké frakce obsahující jeden z přečištěných diastereomerů (>99,0% pro jednotlivý diastereomer). Rozpouštědla mobilní fáze byla odstraněna ve vakuu a přečištěný diastereomer byl získán ve formě drolivé pěny.
Asi 95 % výchozí hmotnosti GS-7171 bylo získáno ve formě dvou frakcí distereomerů
-11 CZ 304886 B6
Frakce GS-7340 představovala asi 50 % celkové získané hmotnosti. Chromatografické podmínky byly následující:
Mobilní fáze (počáteční) (konečná)
Průtok
Celková doba dělení Detekce Teplota Eluční profil
GS-7171 -acetonitrihisopropylalkohol (90:10)
100% methylalkohol ml/min asi 45 minut
UV při 275 nm teplota okolí
GS-7339 (diastereomer B)
GS-7340 (diastereomer A; (IV))
B. Separace diastereomerů GS-7171 SMB chromatografií
Obecný popis chromatografie se simulovaným pohyblivým ložem (simulated moving bed, SMB), viz Strube et al.: Organic Process Research and Development 2:305-319 (1998).
GS-7340 (IV)
GS-7171 (III), 2,8 kg, byl přečištěn chromatografií se simulovaným pohyblivým ložem pomocí náplně loží o velikosti více než 10 cm na 5 cm (Chiral Technologies lne., 20 mikron Chiralpak AS na silikagelu) (1,2 kg). Kolony byly eluovány 30% roztokem methanolu v acetonitrilu. Frakce s produktem byly zkoncentrovány na roztok sloučeniny IV v acetonitrilu (2,48 kg). Roztok přešel stáním na krystalickou hmotu nasáklou acetonitrilem. Krystalická hmota byla vysušena za sníženého tlaku na světlehnědý krystalický prášek, 1,301 kg IV, 98,7% diastereomerové čistoty: t.t. 117 až 120 °C; !H NMR (CDC13) δ 1,15 (m, 12H), 3,7 (t, 1H), 4,0 (m, 5H), 4,2 (dd, 1H), 5,0 (m, 1H), 6,05 (s, 2H), 7,1 (m, 5H), 8,0 (s, 1H), 8,2 (s, 1H); 31P NMR (CDC13) δ 21,0 (dekuplován).
C. Separace diastereomerů pomocí C18 HPLC v reverzní fázi
GS-7171 (III) byl chromatografován pomocí HPLC v reverzní fázi, aby se oddělily diastereomery podle tohoto souhrnného protokolu.
Chromatografická kolona: Phenomenex Luna™ Cl8(2), 5μηι, velikost pórů 10~8m (100 Á), (Phenomonex, Torrance CA), nebo ekvivalentní
Předkolona: Pellicular C18 (Alltech, Deerfield, IL), nebo ekvivalentní
Mobilní fáze: A - 0,02% (85%) H3PO4 ve směsi voda:acetonitril (95:5)
B - 0,02% (85%) H3PO4 ve směsi voda:acetonitril (50:50)
Gradient mobilní fáze:
Čas % mobilní fáze A % mobilní fáze B
0 100 0
5 100 0
7 70 30
32 70 30
40 0 100
50 0 100
Doba dělení: Zpoždění rovnováhy: Průtoková rychlost:
minut min při 100% mobilní fázi A 1,2 ml/min
- 12CZ 304886 B6
Teplota: Detekce: Roztok vzorku Retenční časy:
místnosti
UV při 260 nm mM pufru fosforečnanu sodného, pH 6 GS-7339, asi 25 minut GS-7340, asi 27 minut
D. Separace diastereomerů krystalizací
GS-7340 (IV).
Roztok GS-7171 (III) v acetonitrilu byl zkoncentrován za sníženého tlaku na jantarově žlutou pěnu (14,9 g). Pěna byla rozpuštěna v acetonitrilu (20 ml) a naočkována krystalem IV. Směs byla míchána přes noc, zchlazena na 5 °C a pevné produkty odděleny filtrací. Pevné produkty byly vysušeny na 2,3 g IV ve formě bílých krystalů, diastereomemí čistota 98% (31P NMR): 'H NMR (CDC13) δ 1,15 (m, 12 H), 3,7 (t, 1H), 3,95 (m, 2H), 4,05 (m, 2H), 4,2 (m, 2H), 5,0 (m, 1H), 6,4 (s, 2H), 7,1 (m, 5H), 8,0 (s, 1H), 8,2 (s, 1H); 31P NMR (CDC13) δ 19,5 (dekuplován). Rentgenová krystalografická analýza jednoho vybraného krystalu tohoto produktu poskytla tyto údaje:
Barva krystalu, vzhled Rozměry krystalu Soustava Typ mřížky Mřížkové parametry
Prostorová grupa Hodnota Z θνγρ
Fooo
XMoIQ bezbarvý, sloupečky
0,25 x 0,12 x 0,08 mm kosočtverečná primitivní a = 8,352 (1)· 10 10 m (8,352(1) Á) b = 15,574 (2) 10'10 m (15,574(2) Á) c = 18,253 (2) · 10’10 m (18,253(2) Á) d = 2374,2 (5) 10“3° m3 (2374,2(5) Á3) P2,2,2, (#19)
1,333 g/cm3
1008,00
1,60 cm 1
Příklad 4
Příprava fumarátové soli GS-7340
GS-7340-02 (V). (Schéma 1)
Do sklem vyloženého reaktoru byly nadávkovány GS-7340 (IV) (1,294 kg, 2,71 mol), kyselina fumarová (284 g, 2,44 mol), a acetonitril (24,6 kg). Směs byla zahřívána pod zpětným chladičem, až se pevné látky rozpustily, byla za horka přefiltrována a chlazena po dobu 16 hodin na 5 °C. Produkt byl oddělen filtrací, promyt acetonitrilem (9,2 kg), a vysušen s výtěžkem 1329 g (V) ve formě bílého prášku: t.t. 119,7 až 121,1 °C; [a]D 20 -41,7° (c 1,0, kyselina octová).
Příklad 5
Příprava GS-7120 (VI)
- 13CZ 304886 B6
Schéma 3
Do 5 1 baňky s kulatým dnem byl nadávkován monofenyl PMPA, (II), (200 g, 0,55 mol) a acetonitril (0,629 kg). Při teplotě pod 27 °C byl přidán thionylchlorid (0,144 kg, 1,21 mol). Směs byla zahřívána na 70 °C, až se rozpustily všechny pevné látky. Těkavé látky (0,45 1) byly odstraněny destilací pod dusíkem za atmosférického tlaku. Zbytek v baňce byl zchlazen na 25 °C, byl přidán dichlormethan (1,6 kg) a směs byla zchlazena na-20 °C. Po dobu 18 minut a při teplotě -20 až 10°C byl přidáván roztok ethylesteru kyseliny (L)-a-aminomáselné (0,144 kg, 1,1 mol) v dichlormethanu (1,33 kg), potom byl po dobu 15 minut a při teplotě -8 až -15 °C přidáván triethylamin (0,17 kg, 1,65 mol). Reakční směs byla ohřátá na teplotu místnosti, čtyřikrát promyta roztokem dihydrogenfosfátu sodného (10% vodný roztok, 0,3 1 při každém promytí). Organický roztok byl vysušen bezvodým síranem sodným (0,5 kg) a zfiltrován. Pevné produkty byly promyty dichlormethanem (0,6 kg) a spojený filtrát a vymývací roztok byly zkoncentrovány na olej při sníženém tlaku. Olej byl vyčištěn chromatograficky přes lože 15 x 13cm, 1,2 kg silikagelu 60, 230 až 400 mesh. Kolona byla gradientově eluována dichlormethanem a methanolem. Frakce obsahující produkt byly zkoncentrovány při sníženém tlaku a poskytly 211 g VI (Schéma 3) ve formě světlehnědé pěny.
Příklad 5a
Separace diastereoméru GS-7120 pomocí šaržové eluční chromatografie
Diastereomerní směs byla vyčištěna za podmínek popsaných pro GS-7171 v příkladu 3 A, vyjma následujícího:
Mobilní fáze (Počáteční) : GS-7120 - acetonitrikisopropylalkohol (98:2) (Konečná) : 100% methylalkohol
Eluční profil : GS—7341 (diastereomér B) : GS-7342 (diastereomér A)
Příklad 6
Separace diastereomeru GS-7120 krystalizací
Do 1 1 baňky s kulatým dnem byl nadávkován monofenyl PMPA, (II), (50 g, 0,137 mol) a acetonitril (0,2 1). Isotermicky při 10 °C byl přidán thionylchlorid (0,036 kg, 0,303 mol). Směs byla zahřívána pod zpětným chladičem až se rozpustily pevné látky. Těkavé látky (0,1 1) byly odstraněny destilací pod dusíkem za atmosférického tlaku. Zbytek v baňce byl zchlazen na 25 °C, přidán dichlormethan (0,2 kg), a směs byla zchlazena na -20 °C, Po dobu 30 minut a při teplotě -20 až -8 °C byl přidáván roztok ethylesteru kyseliny (L)-a-aminomáselné (0,036 kg, 0,275 mol) v dichlormethanu (0,67 kg), následovalo přidání triethylaminu (0,042 kg, 0,41 mol) po dobu 10 minut při až -6 °C. Reakční směs pak byla ohřátá na teplotu místnosti a čtyřikrát promyta rozto- 14CZ 304886 B6 kem dihydrogenfosfátu sodného (10% vodný roztok, 0,075 1 při každém promývání). Organický roztok byl vysušen bezvodým síranem sodným (0,1 kg) a zfiltrován. Pevné produkty byly promyty ethylacetátem (0,25 1) a spojený filtrát a promývací roztok byly zkoncentrovány na olej za sníženého tlaku. Olej byl zředěn ethylacetátem (0,25 1), naočkován, protřepáván přes noc, a zchlazen na -15 °C. Pevné produkty byly odděleny filtrací a vysušeny za sníženého tlaku s výtěžkem 17,7 g GS-7342 (Tabulka 5) ve formě světlehnědého prášku: ’H NMR (CDC13) δ 0,95 (t, 3H), 1,3 (m, 6H), 1,7 (m, 2H), 3,7 (m, 2H), 4,1 (m, 6H), 4,4 (dd, 1H), 5,8 (s, 2H), 7,1 (m, 5H), 8,0 (s, 1H), 8,4 (s, 1H); 31P NMR (CDC13) δ 21 (dekuplován).
Příklad 7
Separace diastereoméru GS-7097
Diastereomemí směs byla přečištěna za podmínek popsaných pro GS-7171 (příklad 3A vyjma následujícího:
Mobilní fáze (Počáteční) : GS-7120 - acetonitril‘.isopropylalkohol (95:5) (Konečná) : 100% methylalkohol
Eluční profil : GS-7115 (diastereomer B) : GS-7114 (diastereomer A)
Příklad 8
Alternativní postup pro přípravu GS-7097
GS-7097: Fenyl PMPA, ethyl-L-alanyl amidát.
Fenyl PMPA (15,0 g, 41,3 mmol), hydrochlorid ethylesterů F-alaninu (12,6 g, 83 mmol) a triethylamin (11,5 ml, 83 mmol) byly společně pod dusíkem smíseny na kaši v 500 ml pyridinu. Tato suspenze byla spojena s roztokem trifenylfosfinu (37,9 g, 145 mmol), Aldrithiolem 2 (2,2dipyridyl disulfid) (31,8 g, 145 mmol), a 120 ml pyridinu. Směs byla zahřívána po dobu 15 hodin na vnitřní teplotu 57 °C. Konečná reakční směs byla za vakua zkoncentrována na žlutou pastu, 100 g. Pasta byla přečištěna kolonovou chromatografií na 25 x 11 cm loži 1,1 kg silikagelu 60, 230 až 400 mesh. Kolona byla eluována 8 litry 2% methanolu v dichlormethanu s následným lineárním gradientem 26 litry eluentu až do finálního složení 13 % methanolu. Frakce obsahující čistý produkt byly zkoncentrovány a poskytly výtěžek 12,4 surového (5), 65% teorie. Podle 'H NMR byl tento materiál znečištěn asi 15 % (hmotn.) hydrochloridu triethylaminu. Znečištění bylo odstraněno rozpuštěním produktu v 350 ml ethylacetátu, extrakcí 20 ml vody, vysušením organického roztoku nad bezvodým síranem sodným, a zkoncentováním s výtěžkem 11,1 g čistého GS-7097 ve formě bílé pevné látky, 58% výtěžek. Tento postup byl také použit pro syntézu diastereomemí směsi GS-7003a a GS-7003b (fenylalanyl amidát) a směsi GS-7119 a GS-7335 (glycyl amidát). Tyto diastereomery se separují pomocí šaržového (vsádkového) elučního postupu jako v příkladech 3A, 6 a 7.
Příklad 9
In vitro studie diastereomérů prekurzoru léčiva
Tabulka 1 uvádí in vitro anti-HIV-1 aktivitu a cytotoxicitu v buňkách MT-2 a stabilitu v lidské plazmě a extraktech buněk MT-2 pro GS-7340 (volná báze) a tenofovir disoproxil fumarát (TDF). GS-7340 vykazuje lOnásobný nárůst protivirové aktivity oproti TDF a 200násobný nárůst ve stabilitě v plazmě. Dá se očekávat, že tato vyšší stabilita v plazmě bude mít za následek vyšší cirkulující hladinu GS-7340 než TDF po orálním podávání.
Tabulka 1. In vitro aktivita a stabilita
- 15CZ 304886 B6
HIV-1 aktivita Cytotoxicita Stabilita Ti/2 (min)
ICíOpM CCsOhM Lidská plasma Extrakt buněk MT-2 (P/MT-2)
GS 7340 0,005 >40 90,0 28,3 3,2
TDF 0,05 70 0,41 70,7 0,006
Tenofovir 5 6000 - - -
Aby bylo možno odhadnout relativní nitrobuněčný PMPA jako výsledek nitrobuněčného metabolismu TDF ve srovnání s tím, získaným z GS-7340, byly jak oba prekurzory léčiv tak i PMPA radioaktivně označeny a injektovány (spiked) do neporušené lidské plné (celkové) krve v ekvimolámích koncentracích. Po jedné hodině byly izolovány plazma, červené krvinky (RBCs) a mononukleámí buňky periferní krve (PBMCs) a analyzovány HPLC s radiometrickou detekcí. Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 2.
Po jedné hodině GS-7340 poskytuje ve srovnání s TDF, případně PMPA, 1 Okřát, resp. 30krát ío vyšší celkovou intracelulámí koncentraci PMPA v PBMCs. V plazmě je po jedné hodině 84% radioaktivity důsledkem neporušené GS-7340, zatímco po jedné hodině není detekován žádný
TDF. Protože v plazmě není detekován žádný neporušený TDF, je lOnásobný rozdíl po jedné hodině mezi TDF a GS-7340 minimálním rozdílem, který se dá očekávat in vivo. HPLC chromatogram pro všechny tři sloučeniny v PBMCs je uveden na obr. 1.
Tabulka 2
PMPA metabolity v plazmě, PBMC a RBC po 1 hodině inkubace prekurzorů PMPA nebo PMPA v lidské krvi
Sloučenina Matrice Celkový získaný C-14 Metabolity (% celkové plochy píku)
PMPA % PMPAp, % PMPApp, % Met. X. % Met. Y % GS 7340 %
GS-7340 43,0 1 - - 2 13 84
Plasma/FP 1,25 45 16 21 18
(60 gg - PBMC 12,6 8 - - 24 11 57
ekv.) RBC/FP
PMPA PMPAp PMPApp Mono-POC GS-4331
GS-4331 Plasma/FP 48,1 11 - - 89 -
(TDF) PBMC 0,133 50 25 18 7 -
(60 gg- ekv.) RBC/FP 10,5 93 7,0
PMPA PMPAp PMPApp
PMPA Plasma/FP 55,7 100 - -
(60 gg- PBMC 0,033 86 14 -
RBC/FP 3,72 74 10 16
ekv.)
-16CZ 304886 B6
Obrázek 1
HPLC/C-14 stopy v PBMC extraktech z lidské krve inkubované 1 h při 37 °C s TDF, GS-7340 nebo PMPA
800'
600400TDF/PBMC
TDF
200oL
PMPA nr-rfO*S
PMPAp PMPApp _ ___ _ 10 15 —i
800'
800400PMPA/PBMC
200ol=
PMPA “R
Met. X a Met Y (metabolity X a Y) jsou uvedeny v Tabulce 5. Malé písmeno „p“ značí fosforylaci. Tyto výsledky byly získány po 1 hodině v lidské krvi. Se vzrůstajícím časem se dá očekávat, že rozdíly in vitro porostou, protože 84 % GS-7340 je ještě v plazmě po jedné hodině nedotčeno. Protože neporušený GS-7340 je v plazmě přítomen po orálním podání, relativní klinická účinnost by se měla vztahovat k hodnotám IC50 pozorovaným in vitro.
V níže uvedené tabulce 3 jsou uvedeny hodnoty IC50 tenofoviru, TDF, GS-7340, některých nukleosidů a inhibitoru proteázy nelfínaviru. Jak je vidět, nelfinavir a GS-7340 jsou a 2 až 3 řádové hodnoty účinnější než všechny ostatní nukleotidy nebo nukleosidy.
Tabulka 3
In vitro anti-HTV-1 aktivity antiretrovirových sloučenin
Sloučenina IC50 (μΜ)
Adefovir (PMEA) 13,4 ±4,2’
Tenofovir (PMPA) 6,3 ± 3,3*
AZT 0,17 ±0,08’
3TC 1,8 ± 0,251
d4T 8 ±2,5*
Nelfinavir 0,006 ± 0,0021
TDF 0,05
GS 7340 0,005
1 A.S. Mulato a J. M. Cherrington, Antiviral Research 36, 91 (1997)
- 17CZ 304886 B6
Byly provedeny další studie in vitro anti-HIV-1 aktivity v buněčné kultuře (buněčné kultury) a CC5o oddělených diastereomerů podle tohoto vynálezu a výsledky jsou tabelovány dále v Tab. 4.
Tabulka 4
Účinek diastereomerů
Sloučenina Diastereomer IC50 (μΜ) Změna rýhování Aktivita A/B CC5o^M)
PMPA - 5 lx - 6000
Ala-methylester Směs 1:1 0,025 200x 20χ 80
GS-6957a A 0,0075 670χ
GS-6957b 0,15 33χ
Phe-methylester Směs 1:1 0,03 170χ 10x 60
GS-7003a A 0,01 500χ
GS-7003b B 0,1 50x
Gly-ethylester Směs 1:1 0,5 10x 20x
GS-7119 A 0,05 100x >100
GS-7335 B 1,0 5x
Ala-isopropyl Směs 1:1 0,01 500x 12x
GS-7340 A 0,005 1 000x 40
GS-7339 B 0,06 83χ >100
ABA-ethyl Směs 1:1 0,008 625 χ 7,5χ >100
GS-7342 A 0,004 1 250*
GS-7341 B 0,03 170x
Ala-ethyl Směs 1:1 0,02 250x 10x 60
GS-7114 A 0,005 1 000x
GS-7115 B 0,05 100x
Literatura týkající se testu: Arimilli, MN, et al., (1997) Synthesis, in vitro biological evaluation and oral bioavailability of 9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adenine (PMPA) prodrugs. Antiviral Chemistry and Chemotherapy 8(6):557-564.
„Phe-methylester“ je methylfenylalaninyl monoamidát, fenyl monoester tenofoviru;
„gly-methylester“je methylglycol monoamidát, fenyl monoester tenofoviru.
V každém výše uvedeném případě se předpokládá, že isomer A má stejnou absolutní stereochemii jako GS-7340(<S) a že isomer B má stejnou absolutní stereochemii jako GS-7339.
In vitro metabolismus a stabilita separovaných diastereomerů byly stanoveny v PLCE (karboxyesteráza z vepřových jater), extraktu MT-2 buněk a v lidské plazmě. Biologický vzorek uvedený dále, v množství 80 μί, byl přenesen do centrifugační zkumavky se šroubovacím uzávěrem a
- 18CZ 304886 B6 inkubován při 37 °C po dobu 5 minut. K biologickému vzorku byl přidán roztok obsahující 0,2 mg/ml testované sloučeniny ve vhodném pufru, 20 μί, a míchán. Z reakční směsi byl okamžitě odebrán vzorek, 20 μί, a smíchán s 60 μΐ methanolu, obsahujícího 0,015 mg/ml 2-hydroxymethylnaftalenu jako vnitřního standardu pro HPLC analýzu. Vzorek byl považován za vzorek po čas nula. Pak, v určitých časových okamžicích byly z reakční směsi odebírány vzorky, 20 μί, a smíchány s 60 μί methanolu obsahujícího vnitřní standard. Takto získaná směs byla centrifugována při 15 000 G pro dobu 5 min a supematant byl analyzován HPLC za níže popsaných podmínek.
Byly hodnoceny následující biologické vzorky.
(1) PLCE (karboxyesteráza z vepřových jater od společnosti Sigma, 160 μ/mg proteinu, 21 mg proteinu/ml) dvacetinásobně zředěná PBS (fysiologický roztok pufrovaný fosfátem).
(2) Extrakt MT-2 buněk byl připraven z MT-2 buněk podle publikovaného postupu [A. Pompon, I. Lefebvre, J.-L. Imbach, S. Kahn, a D. Farquhar, „Antiviral Chemistry & Chemotherapy“, 5:91-98 (1994)] vyjma toho, že jako medium byl použit níže popsaný pufr HEPES.
(3) Lidská plazma (smíšená normální lidská plazma od společnosti George King Biomedical Systems, lne.)
Při hodnocení byly použity tyto pufrovací systémy.
Ve studii pro PLCE byla testovaná sloučenina rozpuštěna v PBS. PBS (fysiologický roztok pufrovaný fosfátem, Sigma) obsahuje 0,01 M fosfátu, 0,0027 M chloridu draselného, a 0,137M chloridu sodného. pH 7,4 Při 37 °C.
Ve studii pro extrakty MT-2 buněk byla testovaná sloučenina rozpuštěna v pufru HEPES. Pufr HEPES obsahuje 0,010M HEPES, 0,05M chloridu draselného, 0,005M chloridu hořečnatého, a 0,005M ó/Z-dithiothreitolu. pH 7,4 Při 37 °C.
Ve studii pro lidskou plazmu byla testovaná sloučenina rozpuštěna v TBS. TBS (trojnásobně pufrovaný fyziologický roztok, Sigma) obsahuje 0,05M Tris, 0,0027M chloridu draselného a 0,138M chloridu sodného. pH 7,5 Při 37 °C.
HPLC analýza byla prováděna za těchto podmínek.
Kolona: Zorbax Rx-C8, ,6 x 250 mm, 5 μ (MAC-MOD Analytical, lne. Chadds Ford, PA)
Detekce: UV při 260 nm
Průtoková rychlost: 1,0 ml/min
Celková doba: 30 min
Nástřik: 20 μί
Teplota kolony: Teplota místnosti
Mobilní fáze A: 50 mM fosforečnanu draselného (pH 6,0)/CH3CN = 95/5 (v/v)
Mobilní fáze B: 50 mM fosforečnanu draselného (pH 6,0)/CH3CN = 50/50 (v/v)
Gradientová eluce: 0 min 25 min 30 min 100% mobilní fáze A 100% mobilní fáze B 100% mobilní fáze B
Výsledky jsou uvedeny níže v Tabulce 5 (kde jsou také uvedeny vybrané údaje IC50 z Tabulky 4).
- 19CZ 304886 B6
Tabulka 5
In vitro metabolizmus isomerů A a B monoamidátu PMPA při 37 °C
Čís. Struktura monoamidátu PMPA HIV IC50 (μΜ) PLCE Rychlost hydrolýzy a produkt MT—2 extrakt Rychlost hydrolýzy a produkt Stabilita .v lidské plasmě (HP)
1 A ϊ 9Η» VTJ^NH-CHCOOEt S OPh Isomer A GS7114 0.005 t,n = 2.9 min Met. X & PMPA t,„ = 2.9 min Met. X & PMPA t,e = 148 min Met. Y
2 A 9 <?«» k/V\NH-CHCOOEt £ OPh Isomer B GS7115 0.05 tM 8.0 min Met. X & PMPA tw = 150.6 min Met. X & PMPA tw β 495 min Met. Y
3 A 9 k/\.P\NH-CHCOOIPr ž OPh Isomer A GS7340 0.005 tw = 3.3 min Met. X & PMPA tw » 28.3 min Met. X & PMPA ty, = 90.0 min Met. Y
4 A „ 9 9H> ΚγΟ^Ρς-ΝΗ-ΟΗΟΟΟΙΡΓ 1 OPh Isomer B GS7339 0.0Ó tw« 10.1 min Met. X & PMPA tw> 1000 min t1/2 = 231 min Met. Y
5 A 9 . QH2ch3 k^A^Pr-NH-ÓHCOOEt £ OPh Isomer A GS7342 0.004 tw = 3.9 min Met.X tw » 49.2 min Met. X& PMPA tw = 103 min Met.Y
ó A 9 2H2CH3 \A^NH-CHCOOEt k OPh Isomer B GS7341 0.03 tw= 11.3 min Met.X tw> 1000 min tw 257 min Met.Y
7 A 9 9 <,O^P-OCH2OCOlPr i \ 9 GS4331 OCH2OCOlPr 0.05 tw< 0.14 min MonoPOC PMPA tw = 70.7 min monoPOC PMPA t^ = 0.41 min monoPOC PMPA
Met. X:
Met. Y:
A 9 ?13 <-O. Pš-NH-CHCOOH á OH □ 13
A 9 (?’ <j\A-nh-chcoor11 a OH
Příklad 10 ío Exponování plazmy a PBMC po orálním podání diastereomeru prekurzorů léčiva psům plemene beagle
Farmakokinetika GS 7340 byla studována u psů po orálním podání dávky 10 mg ekv./kg.
-20CZ 304886 B6
Přípravky
Prekurzory léčiv byly připraveny ve formě roztoků v 50 mM kyseliny citrónové během 0,5 h před dávkováním. Všechny sloučeniny použité v této studii byly syntetizovány společností Gilead Sciences. Byly použity tyto šarže (lots):
GSI Amidát aminokysliny AA ester diastereomer Čís. šarže
GS-7340-2 Alanin i-Propyl Isomer A 1504-187-19
GS-7339 Alanin i-Propyl Isomer B 1509-185-31
GS7114 Alanin Ethyl Isomer A 1509-181-26
GS7115 Alanin Ethyl Isomer B 1509-181-22
GS7119 Glycin Ethyl Isomer A 1428-163-28
GS7342 Kyselina a-aminomá- Ethyl Isomer A 1509-191-12
GS7341 selná Kyselina a-aminomáselná Ethyl Isomer B 1509-191-7
Podávání dávky a nabírání vzorků.
Fáze této studie se živými organismy byla provedena v souladu s doporučeními „Guide for the Care and Use of Laboratory Animals“ („Návod pro péči o laboratorní zvířata a jejich použití“) (National Institutes of Health publication 86-23) a byla schválena ústavním výborem pro péči o zvířata a jejich použití (Institutional Animal Care and Use Committee). Pro tyto studie byli použiti vyhladovělí psi plemene beagle (samci) (10 ± 2 kg). Každé léčivo bylo podáváno v jediné dávce pomocí orální žaludeční sondy (1,5 až 2 ml/kg). Dávkou bylo lOmval (10 mgekvivalentu) PMPA/kg. Pro PBMCs byly odebrány vzorky krve v 0 (před podáním dávky), 2, 8 a 24 h (po podání dávky). Pro plazmu byly odebrány vzorky krve v 0 (před podáním dávky), 5, 15, a 30 min, a 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12 a 24 h po podání dávky. Krev (1,0 ml) byla zpracována ihned na plazmu centrifugací při 2 000 ot/min po dobu 10 min. Vzorky plazmy byly zmrazený a udržovány při 70 °C až do analýzy.
Příprava mononukleámích buněk periferní krve (PBMC).
Plná krev (8 ml) odebraná v daných časových okamžicích byla smísena ve stejném poměru s íysiologickým roztokem pufrovaným fosfátem (PBS), navrstvena na 15 ml Ficoll-Paqueova roztoku (Pharmacia Biotech.) a centrifugována při 400 x g po dobu 40 min. Vrstva PBMC byla odstraněna a jedenkrát promyta PBS. Vytvořená peletka PMBC byla rekonstituována v 0,5 ml PBS, buňky byly znovu suspendovány, spočítány pomocí hemocytometru a udržovány při 70 °C až do analýzy. Počet buněk vynásobený středním objemem jedné buňky byl použit při výpočtu intracelulámích koncentracích. Uváděná hodnota 200 femtolitrů/buňka byla použita jako klidový objem PBMC (B. L. Robins, R. V. Srinivas, C. Kim, N. Bischofberger, a A. Fridland, Antimicrob. Agents Chemother. 42, 612 (1998)).
Stanovení PMPA a prekurzorů léčiva v plazmě a PBMCs.
Koncentrace PMPA ve vzorcích psí plazmy byla stanovena derivatizaci PMPA chloracetaldehydem za vzniku vysoce fluorescentního N',N6-ethenoadeninového derivátu (L. Naesens, J. Balzarini, a E. De Clercq, Clin. Chem. 38, 480 (1992)). Stručně, plazma (100 μΐ) byl smísena s 200 μΐ acetonitrilu, aby se vysrážel protein. Vzorky pak byly odpařeny do sucha za sníženého tlaku při teplotě místnosti. Vysušené vzorky byly rekonstituovány v 200 μΐ derivatizační směsi (0,34% chloracetaldehydu ve 100 mM octanu sodného, pH 4,5), promíchány a centrifugovány. Supematant byl pak přenesen do čisté zkumavky se šroubovacím uzávěrem a inkubován při 95 °C po
-21 CZ 304886 B6 dobu 40 min. Derivatizovaný vzorek byl pak odpařen do sucha a rekonstituován ve 100 μΐ vody pro analýzu HPLC.
Před tím, než mohl být pomocí HPLC stanoven nitrobuněčný PMPA, muselo být velké množství kadeninu se vztahujících ribonukleotidů, přítomné v extraktech PBMC, odstraněno pomocí selektivní oxidace. Byl použit modifikovaný postup podle Tanaky et al. (K. Tanaka, A. Yoshioka, S. Tanaka, a Y. Wataya, Anal. Biochem., 139, 35 (1984)). Stručně řečeno, vzorky PBMC byly smíseny v poměru 1:2 s methanolem a odpařeny do sucha za sníženého tlaku. Vysušené vzorky byly derivatizovány jak je popsáno při zkoušce plazmy. Derivatizované vzorky byly smíseny s 20 μΐ IM rhamnosy a 30 μΕ 0,1Μ jodistanu sodného a inkubovány při 37 °C po 5 min. Po inkubaci bylo přidáno 40 μΐ 4M methylaminu a 20 μΐ 0,5M inosinu. Po 30 min inkubaci při 37 °C byly vzorky odpařeny do sucha za sníženého tlaku a rekonstituovány ve vodě pro analýzu HPLC.
V žádném vzorku PBMC nebyl zjištěn nezměněný (intaktní) prekurzor léčiva. U vzorků plazmy, které potenciálně mohly obsahovat nezměněné prekurzory léčiva byly provedeny experimenty, aby se ověřilo, že během derivatizace nedošlo k další konverzi na PMPA. Standardy prekurzoru léčiva byly přidány k plazmě bez léčiva a derivatizovány jak bylo popsáno. V žádném vzorku plazmy nebyly přítomny detekovatelné hladiny PMPA a předpokládané % konverze bylo menší než 1%.
HPLC systém se skládal ze systému přívodu rozpouštědla P4000 s autoinjektorem AS3000 a fluorescenčním detektorem F2000 (Thermo Separation, San José, CA). Jako náplň kolony byl použit Inertsil ODS-2 (4,6 x 150 mm). Byly použity tyto mobilní fáze: A, 5% acetonitril v 25 mM fosforečnanu draselném jako pufru s 5 mM tetrabutylamonium bromidu (TBABr), pH 6.0; B, 60% acetonitril v 25 mM fosforečnanu draselném jako pufru s 5 mM TBABr, pH 6.0. Průtoková rychlost byla 2 ml/min a teplota kolony byla píckou pro kolonu udržována na 35 °C. Gradientový profil byl 90% A/10% B po 10 min pro PMPA a 65% A/35% B po 10 min pro prekurzor léčiva. Detekce byla provedena pomocí fluorescence s excitací při 236 nm a emisí při 420 nm, nástřik byl 10 μΐ. Data byla načtena a uložena pomocí laboratorního systému načítání dat (PeakPro, Beckman, Allendale, NJ).
Farmakokinetické výpočty.
Expozice PMPA a prekurzorů léčiva byly vyjádřeny pomocí ploch pod koncentračními křivkami v plazmě nebo PBMC od nuly do 24 hodin (AUC). Hodnoty AUC byly vypočteny pomocí lichoběžníkového pravidla.
Koncentrace plazmy a PBMC.
Výsledky této studie jsou uvedeny v obrázcích 2 a 3. Obrázek 2 ukazuje souhrnný časový průběh metabolismu GS 7340-2 při expozici v plazmě a PBMC po orálním podání čistých diastereoisomerů prekurzorů PMPA.
Obrázek 2
Koncentrace PMPA a prekurzoru v plazmě a PBMC po orálním podání GS 7340-2 psům při dávce 10 mval/kg (10 mg-ekv./kg)
-22CZ 304886 B6
Sloupkový diagram na obrázku 3 ukazuje AUC (0 až 24 h) pro tenofovir v psím PBMCs a plazmě po podání PMPA s.c., TDF a amidátového esteru prekurzorů léčiva. Všechny amidátové prekurzory léčiva vykazovaly vzrůst při expozici v PBMC. Například, GS 6340 dává ~21násobný nárůst při expozici v PBMC ve srovnání s PMPA s.c. a TDF; a 6,25násobný a l,29násobný pokles při expozici v plazmě.
Obrázek 3
Znázornění expozice tenofoviru v PBMC a plazmě po podání 10 mval/kg (10 mg-ekv./kg) u psů AUC (0-24 h) pro PMPA v PBMC a plazmě po orálním podání 10 mval/kg (10 mg-ekv./kg) prekurzoru PMPA psům
-23 CZ 304886 B6
Tyto údaje ukazují in vivo, že GS 7340 může být podáván orálně, minimalizuje expozici systému PMPA a velmi zvyšuje intracelulámí koncentraci PMPA v buňkách primárně odpovědných za replikaci HIV.
Tabulka 6
Expozice PMPA v PBMC a plazmě po orálním podání prekurzorů PMPA psům
GS# Moieta (část molekuly) PMPA AUC plazmě v PMPA PBMC AUC v Prekurzor v plazmě Poměr expozice PBMC/ plazma
Prů měr Směr. Odch. N Prům ěr Směr. Odch. N
GS-7114 Mono-Ala-Et-A 5,8 0,9 2 706 331 5 ANO 122
GS-7115 Mono-Ala-Et-B 6,6 1,5 2 284 94 5 ANO 43
GS-7340-2 Mono-Ala-iPr-A 5,0 1,1 2 805 222 5 ANO 161
GS-7339 Mono-Ala-iPr-A 6,4 1,3 2 200 57 5 ANO 31
GS-7119 Mono-Gly-Et-A 6,11 1,86 2 530 304 5 ANO 87
GS-7342 Mono-ABA-Et-A 4,6 1,2 2 1060 511 5 ANO 230
GS-7341 Mono-ABA-Et-B 5,8 13 2 199 86 5 ANO 34
Příklad 11
Biodistribuce GS-7340
Jako součást preklinické charakterizace GS-7340 byla stanovena jeho bio-distribuce ve psech. Distribuce GS-7340 (isopropyl alaninyl monoamidát, fenylmonoester tenofoviru) do tkání byla zjišťována po orálním podání psům plemene beagle. Dvěma samcům byl orálně nadávkován i4C=GS-7340 (8,85 mval (8,85 mg-ekvivalentu) PMPA/kg, 33,2 pCi/kg; označen byl uhlík 8 v alaninu) ve vodném roztoku (50 mM kyseliny citrónové, pH 2,2). Po dobu 24 hodin byly odebírány plazma a mononukleámí buňky periferní krve (PBMC). Moč a výkaly byly shromažďovány po dobu 24 hodin. Po 24 hodinách po podání dávky byla obě zvířata utracena a tkáň odebrána na analýzu. Celková radioaktivita ve tkáních byla stanovena oxidací a měřením pomocí kapalného scintilátoru.
Biodistribuce PMPA po 24 hodinách po jediné orální dávce radioaktivně značeného GS 7340 je uvedena v Tabulce 4 spolu s údaji z předchozí studie s TDF (GS-4331). V případě TDF je koncentrace prekurzorů léčiva v plazmě pod hranicí detekčního testu a hlavní sloučeninou zjištěnou v plazmě je vlastní léčivo. Hladiny PMPA v lymfatických tkáních, kostní dřeni, a kosterním svalu vzrostly po podání GS-7340 ÍOnásobně.
Akumulace v lymfatických tkáních je v souladu s údaji pozorovanými při analýzách PBMC, protože tyto tkáně se skládají hlavně z lymfocytů. Podobně, akumulace v kostní dřeni je pravděpodobně důsledkem vysokého procenta lymfocytů (70%) v této tkáni.
Tabulka 7
Distribuce radioaktivně značeného GS-7340 v exkrementech a tkáni psů (střední hodnota, N=2) po orálním podání dávky 10 mg-ekvivalentu PMPA/kg
-24CZ 304886 B6
Tkáň/Kapalina GS-4331 GS-7340 Poměr tkáňové konc. GS-7340 k GS-4331
% Dávky Konc. uval/g (pg- ekv./g) % Dávky Konc. gval/g (pg- ekv./g)
Játra 12,40 38,30 16,45 52,94 L4
Ledviny 4,58 87,90 3,78 80,21 0,9
Plíce 0,03 0,53 0,34 4,33 8,2
Iliakální lymfatické uzliny 0,00 0,51 0,01 5,42 10,6
Axilámí lymfatické uzliny 0,00 0,37 0,01 5,54 14,8
Tříselní lymfatické uzliny 0,00 0,28 0,00 4,12 15,0
Mezenterické lymfatické uzliny 0,00 1,20 0,04 6,88 5,7
Štítná žláza 0,00 0,30 0,00 4,78 15,8
Hypoíyza 0,00 0,23 0,00 1,80 7,8
Slinná žláza (L+P) 0,00 0,45 0,03 5,54 12,3
Nadledvinka 0,00 1,90 0,00 3,47 1,8
Slezina 0,00 0,63 0,17 8,13 12,8
Pankreas 0,00 0,57 0,01 3,51 6,2
Prostata 0,00 0,23 0,00 2,14 9,1
Varlata (L+P) 0,02 1,95 0,02 2,01 1,0
Kosterní sval 0,00 0,11 0,01 1,12 10,1
Srdce 0.03 0,46 0,15 1,97 4,3
Stehenní kost 0,00 0,08 0,00 0,28 3,5
Kostní dřeň 0,00 0,20 0,00 2,05 10,2
Kůže 0,00 0,13 0,00 0,95 7,2
Břišní tuk 0,00 0,16 0,00 0,90 5,8
Oko (L+P) 0,00 0,06 0,00 0,23 3,7
Mozek 0,00 <LOD 0,00 <LOD n.d.
Mozkomíšní kapalina 0,00 <LOD 0,00 0,00 n.d.
Mícha 0,00 <LOD 0,00 0,04 n.d.
Žaludek 0,11 1,92 0,26 2,68 1,4
Jejunum 1,34 3,01 0,79 4,16 1,4
Dvanáctemík 0,49 4,96 0,44 8,77 1,8
Ueum 0,01 0,50 0,16 4,61 9,2
Tlusté střevo 1,63 5,97 2,65 47,20 7,9
Žlučník 0,00 3,58 0,04 25,02 7,0
Žluč 0,00 9,63 0,22 40,48 4,2
Výkaly 40,96 n.d. 0,19 n.d. n.a.
Celkový obsah zažívacího traktu 5,61 n.d. 21,64 n.d. n.a.
Moč 23,72 n.d. 14,73 n.d. n.a.
Plasma po 24 h 0,00 0,20 0,00 0,20 1,0
Plasma po 0,25 h n.a. 3,68 n.a 3,48 0,9
PBMC* 0,00 n.d. 0,00 63,20 n.d.
Plná krev 0,00 0,85 0,16 0,20 0,2
Celkové znovuzískání 81,10 68,96
* Vypočteno při použití typického znovuzískání (recovery) celkově 15 x 106 buněk a středního objemu PBMC 0,2 pikolitru/buňku
n.s. = žádný vzorek (no sample), n.a. - nelze aplikovat (not applicable), n.d. - nebylo stanoveno (not determined).

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Směs prekurzorů léčiva na bázi methoxyfosfonátového analogu nukleotidu obsahující alespoň 60 % hmotn. diastereomeru vzorce 3
    B-E—och2—p-,l,R1 a do 40 % hmotn., včetně, diastereomeru vzorce 4
    B—E—och2—P-iR1 kde
    R1 je hydroxyl nebo -O-Ri6, kde R)6 je nezávisle C]-C12 alkyl, C2-Ci2 alkenyl, C2-Ci2 alkynyl, aryl vybraný ze skupiny zahrnující fenyl, 2- a 3-pyrrolyl, 2- a 3-thienyl, 2- a 4-imidazolyl, 2-, 4- a 5-oxazolyl, 3- a 4-isoxazolyl, 2-, 4- a 5-thiazolyl, 3-, 4- a 5-isothiazolyl, 3- a 4pyrazolyl, 2-, 3- a 4-pyridyl, 2-, 4- a 5-pyrimidinyl, aryl(C]-Ci2)alkyl, přičemž aryl nebo arylalkyl je substituován 1 až 3 substituenty vybranými z Ci-C)2 alkylamino, Ci-C]2-alkylamino(CiCi2)alkyl, di(Cj-C12)alkylaminoalkyl, di(Ci~Ci2)alkylamino, hydroxyl, oxo, halo, amino, C,-Ci2 alkylthio, C,-C]2 alkoxy, Ci-Ci2 alkoxy(Ci-C12)alkyl, aryloxy, aryloxy(Ci-Ci2)alkyl, aryl(C,Ci2)alkoxy, aryRCi-CnjalkoxyCQ-Ci^alkyl, halo(C)-Ci2)alkyl, nitro, nitro(Ci-C]2)alkyl, azido, azido(Cj-Ci2)alkyl, C,-Ci2 alkylacyl, Cj-Ci2 alkylacyl(Ci-Ci2)alkyl, karboxyl nebo Ci-Ci2 alkylacylamino skupin;
    B je heterocyklická báze vzorce ,Z kde
    R22 je nezávisle halogen, NH2, X nebo H, ale případně alespoň jeden R22 je X, X je -(CH2)m(O)n(CH2)mN(R10)2, kde m je 0 až 2, n je 0 až 1, a R10 je nezávisle H, alkyl Ci-C]5, alkenyl C2-Ci5,
    -26CL 304886 B6
    Z je N nebo CH, za předpokladu, že heterocyklické jádro se liší od purinu o ne více, než jeden Z;
    R2 je zbytek aminokyseliny vybrané z alaninu, glycinu, fenylalaninu a alfa-aminomáselné ky5 seliny, vázaný na atom P přes aminoskupinu této aminokyseliny a mající každý karboxylový zbytek této aminokyseliny případně esterifikovaný Ci-C]2 alkylem,
    E je —(CH2)2—, -CH(CH3)CH2-, kde vazba na pravé straně je spojena s heterocyklickou bází;
    10 nebo soli, volné báze, či solvátu těchto diastereomerů.
  2. 2. Směs podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 80 % hmotn. diastereomeru vzorce 3 a do 20 % hmotn., včetně, diastereomerů vzorce 4, s výhodou alespoň 95 % hmotn. diastereomerů vzorce 3 a do 5 % hmotn., včetně, diastereomerů vzorce 4.
  3. 3. Směs podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 60 % hmotn. diastereomeru vzorce 5 a
    16a (5a), a do 40 % hmotn., včetně, diastereomerů 5b (5b),
    25 kde
    -27CZ 304886 B6
    R5 je methyl nebo vodík;
    R16 je nezávisle Ci-C)2 alkyl, C2-Ci2 alkenyl, C2-C]2 alkynyl, aryl vybraný ze skupiny zahrnující fenyl, 2- a 3-pyrrolyl, 2- a 3-thienyl, 2- a 4-imidazolyl, 2-, 4- a 5-oxazolyl, 3- a 4-isoxazolyl, 2-, 4- a 5-thiazolyl, 3-, 4- a 5-isothiazolyl, 3- a 4-pyrazolyl, 2-, 3- a 4-pyridyl, 2-, 4- a 5-pyrimidinyl, aryl(Cj-C|2)alkyl, přičemž aryl nebo arylalkyl je substituován 1 až 3 substituenty vybranými z C,-Ci2 alkylamino, Ci-C,2 alkylamino(Ci-C)2)alkyl, di(C|-C|2)alkylaminoalkyl, di(Ci-Ci2)alkylamino, hydroxyl, oxo, halo, amino, C,-Ci2 alkylthio, Ci-C]2 alkoxy, C,-Ci2 alkoxy(C]-Ci2)alkyl, aryloxy, aryloxy(Ci-C]2)alkyl, aryl(Ci-C)2)alkoxy, arvl(C]-C|2)alkoxy(C|Ci2)alkyl, halo(Ci-Ci2)alkyl, nitro, nitro(Ci-C]2)alkyl, azido, azido(C,-Ci2)alkyl, C,-Ci2 alkylacyl, C]-Ci2 alkylacyl(Ci-Ci2)alkyl, karboxyl, nebo Cj-Cn alkylacylamino skupin;
    R16a je nezávisle C]-Ci2 alkyl,
    R7 je boční řetězec aminokyseliny vybrané z alaninu, glycinu, fenylalaninu a alfa-aminomáselné kyseliny;
    Ru je amino, alkylamino, nebo dialkylamino; a
    R]2 je amino nebo H;
    nebo soli, volné báze, či solvátu těchto diastereomerů.
  4. 4. Směs podle nároku 3, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 80 % hmotn. diastereomeru vzorce 5a a do 20 % hmotn., včetně, diastereomerů vzorce 5b, s výhodou alespoň 95 % hmotn. diastereomerů vzorce 5a a do 5 % hmotn., včetně, diastereomerů vzorce 5b.
  5. 5. Směs podle nároku 2, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 60 % hmotn. diastereomeru vzorce 6 a do 40 % hmotn., včetně, diastereomerů vzorce 6b
    -28CZ 304886 B6 co2h
    Ή (6b).
  6. 6. Směs podle nároku 5, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 80 % hmotn. diastereomeru vzorce 6 a do 20 % hmotn., včetně, diastereomeru vzorce 6b, s výhodou alespoň 95 %
    5 hmotn. diastereomeru vzorce 6 a do 5 % hmotn., včetně, diastereomeru vzorce 6b.
  7. 7. Směs podle nároku 2, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 60 % hmotn. diastereomeru vzorce 7
    -29CZ 304886 B6
  8. 8. Směs podle nároku 7, vyznačená tím, že obsahuje alespoň 80 % hmotn. diastereomeru vzorce 7 a do 20 % hmotn., včetně, diastereomeru vzorce 7b, s výhodou alespoň 95 % hmotn. diastereomeru vzorce 7 a do 5 % hmotn., včetně, diastereomeru vzorce 7b.
    5
  9. 9. 9-[(R)-2[[(S)[[(S)-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl]amino]fenoxyfosFmyl]methoxy]propyl]adenin vzorce 6 a jeho soli a solváty.
    ío 10. 9-[(R)-2[[(S)[[(S)-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl]amino]fenoxyfosfinyl]methoxy]propyl]adenin podle nároku 9 vzorce 6
    11. Fumarátová sůl 9-[(R)-2[[(S)[[(S)-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl]amino]fenoxyfosfinyl]methoxyjpropyl] adeninu podle nároku 9 vzorce 7
    12. Kompozice, vyznačená tím, že jako účinnou látku obsahuje sloučeninu nebo směs podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11 a farmaceutický účinný excipient.
    13. Kompozice podle nároku 12, vyznačená tím, že excipient je gel.
    14. Kompozice podle nároku 12, vyznačená tím, že je ve formě vhodné pro topické 5 podávání.
    15. Použití sloučenin nebo směsí podle nároků 1 až 11 k přípravě farmaceutických přípravků obsahujících tyto sloučeniny v terapeuticky nebo profylakticky protivirově účinném množství k dosažení proti virového terapeutického nebo profylaktického účinku u subjektu, který takovou terapii nebo profylaxi potřebuje.
  10. 10 16. Způsob přípravy 9-[(R)-2[[(S)[[(S)-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl]amino]fenoxyfosfinyl]methoxy]propyl]adeninu podle nároku 10 vzorce 6, vyznačený tím, že zahrnuje a) separaci diastereomerů GS-7171 vzorce provedením šaržové eluční chromatografie za získání látky vzorce 6, nebo
    b) separací diastereomerů GS-7171 jejich kontaktováním s Chiralpak AS za získání látky vzorce 6.
    17. Způsob podle nároku 16, vyznačený tím, že separace diastereomerů GS-7171 po20 stupem (b) se provede šaržovou eluční chromatografií.
CZ2003-413A 2000-07-21 2001-07-20 Prekurzory léčiv na bázi fosfonátových analogů nukleotidů a způsoby jejich výběru a přípravy CZ304886B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US22002100P 2000-07-21 2000-07-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2003413A3 CZ2003413A3 (cs) 2003-12-17
CZ304886B6 true CZ304886B6 (cs) 2015-01-07

Family

ID=22821718

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2013-310A CZ304734B6 (cs) 2000-07-21 2001-07-20 Způsob přípravy 9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu a 9-[2-(fosfonomethoxy)ethyl]adeninu
CZ2003-413A CZ304886B6 (cs) 2000-07-21 2001-07-20 Prekurzory léčiv na bázi fosfonátových analogů nukleotidů a způsoby jejich výběru a přípravy

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2013-310A CZ304734B6 (cs) 2000-07-21 2001-07-20 Způsob přípravy 9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu a 9-[2-(fosfonomethoxy)ethyl]adeninu

Country Status (37)

Country Link
US (10) US20040018150A1 (cs)
EP (3) EP3235823A1 (cs)
JP (4) JP4651264B2 (cs)
KR (2) KR100749160B1 (cs)
CN (2) CN1291994C (cs)
AP (1) AP1466A (cs)
AU (3) AU2001282941C1 (cs)
BE (1) BE2016C018I2 (cs)
BG (1) BG66037B1 (cs)
BR (1) BRPI0112646B8 (cs)
CA (3) CA2893174A1 (cs)
CY (2) CY2016008I1 (cs)
CZ (2) CZ304734B6 (cs)
DK (2) DK2682397T3 (cs)
EA (1) EA004926B1 (cs)
EE (1) EE05366B1 (cs)
ES (2) ES2627903T3 (cs)
FR (1) FR16C0013I2 (cs)
HK (1) HK1243711A1 (cs)
HR (2) HRP20030047B1 (cs)
HU (2) HU230960B1 (cs)
IL (1) IL153658A0 (cs)
IS (1) IS2985B (cs)
LT (2) LT2682397T (cs)
LU (1) LU93029I2 (cs)
MX (1) MXPA03000587A (cs)
NL (1) NL300803I2 (cs)
NO (6) NO336718B1 (cs)
NZ (3) NZ536942A (cs)
OA (1) OA12393A (cs)
PL (1) PL213214B1 (cs)
PT (2) PT1301519E (cs)
SI (2) SI2682397T1 (cs)
TR (1) TR200300055T2 (cs)
UA (1) UA75889C2 (cs)
WO (1) WO2002008241A2 (cs)
ZA (1) ZA200210271B (cs)

Families Citing this family (238)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ304734B6 (cs) 2000-07-21 2014-09-10 Gilead Sciences, Inc. Způsob přípravy 9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu a 9-[2-(fosfonomethoxy)ethyl]adeninu
MXPA04004621A (es) * 2001-11-14 2004-09-10 Biocryst Pharm Inc Nucleotidos, preparaciones de los mismos y su utilizacion como inhibidores de polimerasas virales de arn.
US7388002B2 (en) * 2001-11-14 2008-06-17 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
US20050239054A1 (en) * 2002-04-26 2005-10-27 Arimilli Murty N Method and compositions for identifying anti-HIV therapeutic compounds
US20040121316A1 (en) * 2002-04-26 2004-06-24 Gilead Sciences, Inc. Method and compositions for identifying anti-HIV therapeutic compounds
EP2223927B1 (en) 2002-05-13 2014-10-15 Metabasis Therapeutics, Inc. Salts of a phosphonic acid based prodrug of PMEA
AP2089A (en) 2003-01-14 2010-01-11 Gilead Sciences Inc Compositions and methods for combination antiviraltherapy
US20090247488A1 (en) * 2003-04-25 2009-10-01 Carina Cannizzaro Anti-inflammatory phosphonate compounds
US7470724B2 (en) * 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
WO2004096285A2 (en) * 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Anti-infective phosphonate conjugates
US20050261237A1 (en) * 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
US7429565B2 (en) 2003-04-25 2008-09-30 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonate analogs
US7407965B2 (en) * 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
CA2522845A1 (en) * 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Kinase inhibitor phosphonate conjugates
US7452901B2 (en) * 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
CN101410120A (zh) * 2003-04-25 2009-04-15 吉里德科学公司 抗炎的膦酸酯化合物
WO2004096287A2 (en) 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Inosine monophosphate dehydrogenase inhibitory phosphonate compounds
WO2005002626A2 (en) * 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
US7432261B2 (en) 2003-04-25 2008-10-07 Gilead Sciences, Inc. Anti-inflammatory phosphonate compounds
WO2005044308A1 (en) * 2003-10-24 2005-05-19 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs of antimetabolites
WO2005042772A1 (en) * 2003-10-24 2005-05-12 Gilead Sciences, Inc. Methods and compositions for identifying therapeutic compounds
WO2005044279A1 (en) 2003-10-24 2005-05-19 Gilead Sciences, Inc. Purine nucleoside phosphonate conjugates
US20070281907A1 (en) * 2003-12-22 2007-12-06 Watkins William J Kinase Inhibitor Phosphonate Conjugates
US20080287471A1 (en) * 2003-12-22 2008-11-20 Maria Fardis 4'-Substituted Carbovir And Abacavir-Derivatives As Well As Related Compounds With Hiv And Hcv Antiviral Activity
US20050153990A1 (en) * 2003-12-22 2005-07-14 Watkins William J. Phosphonate substituted kinase inhibitors
EP2204374B1 (en) * 2003-12-30 2012-06-13 Gilead Sciences, Inc. Nucleoside phosphonates and analogs thereof for the treatment of HPV-infections
JP2007518815A (ja) * 2004-01-21 2007-07-12 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 乳癌および原発性胆汁性肝硬変に関与するｍｍｔｖ様ウイルスを阻害するためのアデホビルまたはテノホビルの使用
US8432394B1 (en) 2004-05-14 2013-04-30 Nvidia Corporation Method and system for implementing clamped z value interpolation in a raster stage of a graphics pipeline
US8416242B1 (en) 2004-05-14 2013-04-09 Nvidia Corporation Method and system for interpolating level-of-detail in graphics processors
US7079156B1 (en) 2004-05-14 2006-07-18 Nvidia Corporation Method and system for implementing multiple high precision and low precision interpolators for a graphics pipeline
US8411105B1 (en) 2004-05-14 2013-04-02 Nvidia Corporation Method and system for computing pixel parameters
CN1964967B (zh) 2004-06-08 2014-04-16 症变治疗公司 路易斯酸介导的环状酯的合成
KR101233824B1 (ko) * 2004-07-27 2013-02-18 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Ｈｉｖ 억제제 화합물인 포스포네이트 유사체
WO2006110656A2 (en) * 2005-04-08 2006-10-19 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for the treatment of viral infections and other medical disorders
JP2008535862A (ja) 2005-04-08 2008-09-04 キメリクス，インコーポレイテッド ポックスウイルス感染の治療のための化合物、組成物および方法
CN100359315C (zh) * 2005-05-26 2008-01-02 林维宣 兽药残留能力验证样品及制备方法
TWI375560B (en) 2005-06-13 2012-11-01 Gilead Sciences Inc Composition comprising dry granulated emtricitabine and tenofovir df and method for making the same
TWI471145B (zh) 2005-06-13 2015-02-01 Bristol Myers Squibb & Gilead Sciences Llc 單一式藥學劑量型
US8076303B2 (en) 2005-12-13 2011-12-13 Spring Bank Pharmaceuticals, Inc. Nucleotide and oligonucleotide prodrugs
CN100396689C (zh) * 2006-03-07 2008-06-25 中国医学科学院医药生物技术研究所 一组具有抑制hiv-1/hbv病毒复制活性的替诺福韦单酯化合物
KR101424832B1 (ko) 2006-05-16 2014-08-06 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 악성 혈액 종양 치료 방법 및 악성 혈액 종양 치료용 조성물
WO2008007392A2 (en) 2006-07-12 2008-01-17 Matrix Laboratories Limited Process for the preparation of tenofovir
US20080261913A1 (en) * 2006-12-28 2008-10-23 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of liver disorders
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
AU2008302676B2 (en) * 2007-06-26 2013-02-28 University Of Wyoming Research Corporation D/B/A Western Research Institute Treatment and prevention systems for acid mine drainage and halogenated contaminants
US8441497B1 (en) * 2007-08-07 2013-05-14 Nvidia Corporation Interpolation of vertex attributes in a graphics processor
CN105055432A (zh) * 2008-01-25 2015-11-18 奇默里克斯公司 治疗病毒感染的方法
TWI444384B (zh) 2008-02-20 2014-07-11 Gilead Sciences Inc 核苷酸類似物及其在治療惡性腫瘤上的用途
CA2722165C (en) * 2008-04-25 2016-01-19 Cipla Limited Crystalline form of tenofovir disoproxil and a process for its preparation
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
ES2458358T3 (es) * 2008-07-02 2014-05-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compuestos y composiciones farmacéuticas para el tratamiento de infecciones víricas
ES2393962T3 (es) 2008-07-08 2013-01-03 Gilead Sciences, Inc. Sales de compuestos inhibidores del VIH.
SG172359A1 (en) 2008-12-23 2011-07-28 Pharmasset Inc Nucleoside phosphoramidates
MX2011006890A (es) 2008-12-23 2011-07-20 Pharmasset Inc Analogos de nucleosidos.
AR074977A1 (es) 2008-12-23 2011-03-02 Pharmasset Inc Sintesis de nucleosidos de purina
TWI598358B (zh) 2009-05-20 2017-09-11 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
US8614200B2 (en) 2009-07-21 2013-12-24 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for treating ocular conditions
TWI483950B (zh) 2009-09-21 2015-05-11 Gilead Sciences Inc 用於製備１’－取代碳核苷類似物之方法及中間物
ES2629165T3 (es) 2010-02-12 2017-08-07 Chimerix, Inc. Métodos de tratamiento de una infección vírica
PL3290428T3 (pl) 2010-03-31 2022-02-07 Gilead Pharmasset Llc Tabletka zawierająca krystaliczny (S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-diokso-3,4-dihydropirymidyn-1(2H)-ylo)-4-fluoro-3-hydroksy-4-metylotetrahydrofuran-2-ylo)metoksy)(fenoksy)fosforylo)amino)propanian izopropylu
DK2552930T3 (en) 2010-03-31 2015-12-07 Gilead Pharmasset Llc Crystalline (S) -isopropyl 2 - (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2,4-dioxo-3,4-DIHYDROPYRIMIDIN- 1- (2 H) -yl) - 4-fluoro-3-hydroxy-4-methyltetrahydrofuran-2-yl) methoxy) (phenoxy) phosphoryl) amino) propanoate
EP2552203B1 (en) 2010-04-01 2017-03-22 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
EP2563367A4 (en) 2010-04-26 2013-12-04 Chimerix Inc Methods of treating retroviral infections and related dosage regimes
KR20200052384A (ko) * 2010-07-19 2020-05-14 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 부분입체 이성질성으로 순수한 포스포라미데이트 전구약물의 제조 방법
EA025252B1 (ru) 2010-07-22 2016-12-30 Гайлид Сайэнсиз, Инк. Способы и соединения для лечения вирусных инфекций paramyxoviridae
AR084044A1 (es) 2010-11-30 2013-04-17 Pharmasset Inc Compuestos 2’-espiro-nucleosidos
CN104666315A (zh) 2010-12-10 2015-06-03 西格玛制药实验有限责任公司 口服活性核苷酸类似物或口服活性核苷酸类似物前药的高度稳定组合物
ZA201103820B (en) 2010-12-13 2012-01-25 Laurus Labs Private Ltd Process for the preparation of tenofovir
US9243025B2 (en) 2011-03-31 2016-01-26 Idenix Pharmaceuticals, Llc Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2012154698A2 (en) * 2011-05-06 2012-11-15 Mckenna Charles E Method to improve antiviral activity of nucleotide analogue drugs
EP2710019B1 (en) 2011-05-19 2017-05-03 Gilead Sciences, Inc. Processes and intermediates for preparing anti-hiv agents
AU2014271320B2 (en) * 2011-08-16 2017-02-23 Gilead Sciences, Inc. Tenofovir alafenamide hemifumarate
LT2744810T (lt) * 2011-08-16 2016-11-25 Gilead Sciences, Inc. Tenofoviro alafenamido hemifumaratas
AU2012308295B2 (en) 2011-09-16 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating HCV
ES2746859T3 (es) * 2014-04-11 2020-03-09 Gilead Sciences Inc Métodos para la preparación de análogos de nucleótidos antivirales
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
DK2794624T3 (da) 2011-12-22 2019-07-22 Geron Corp Guanin-analoger som telomerase-substrater og påvirkere af telomer-længde
AU2012327170A1 (en) 2012-02-03 2013-08-22 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds
AU2013204727A1 (en) 2012-02-03 2013-08-22 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds
CN107312039B (zh) * 2012-08-30 2019-06-25 江苏豪森药业集团有限公司 一种替诺福韦前药的制备方法
GB201215696D0 (en) * 2012-09-03 2012-10-17 Ithemba Pharmaceuticals Pty Ltd A process for the preparation of (R)-9-[2-(Phosphonometh-Oxy)propyl]adenine (PMPA)
AU2013340559B2 (en) * 2012-10-29 2018-03-15 Cipla Limited Antiviral phosphonate analogues and process for preparation thereof
CN102899327B (zh) * 2012-11-06 2014-06-11 清华大学深圳研究生院 一种抗病毒的小核酸及其温度敏感型凝胶制剂与应用
CN104918939B (zh) * 2012-11-16 2018-08-28 默沙东公司 人磷脂酰肌醇3-激酶δ的嘌呤抑制剂
CN103848869B (zh) * 2012-12-04 2016-12-21 上海医药工业研究院 制备替诺福韦的方法
CN103848868B (zh) * 2012-12-04 2017-04-12 蚌埠丰原涂山制药有限公司 制备替诺福韦的方法
PL2950786T3 (pl) 2013-01-31 2020-05-18 Gilead Pharmasset Llc Formulacja skojarzona dwóch związków przeciwwirusowych
CN104072539B (zh) * 2013-03-25 2017-03-29 安徽贝克联合制药有限公司 替诺福韦双(4‑乙酰氨基苯酚氧基)酯及其制备方法和其应用
CN104181221B (zh) * 2013-05-21 2017-02-01 成都先导药物开发有限公司 一种药物靶标捕获方法
WO2014195724A1 (en) 2013-06-07 2014-12-11 Cipla Limited An efficient process for separation of diastereomers of 9-[(r)-2-[[(r,s)-[[(s)-1-(isopropoxycarbonyl)ethyl]amino]-phenoxyphosphinyl] methoxy]propyl]adenine
PL3038601T3 (pl) 2013-08-27 2020-08-24 Gilead Pharmasset Llc Formulacja złożona dwóch związków przeciwwirusowych
WO2015040640A2 (en) * 2013-09-20 2015-03-26 Laurus Labs Private Limited An improved process for the preparation of tenofovir alafenamide or pharmaceutically acceptable salts thereof
EP2860185A1 (en) 2013-10-09 2015-04-15 Zentiva, k.s. An improved process for the preparation of Tenofovir disoproxil and pharmaceutically acceptable salts thereof
IN2013CH05455A (cs) * 2013-11-27 2015-08-07 Laurus Labs Private Ltd
ES2842123T3 (es) 2014-01-14 2021-07-12 Mylan Laboratories Ltd Purificación de tenofovir alafenamida y sus intermedios
TWI660965B (zh) * 2014-01-15 2019-06-01 美商基利科學股份有限公司 泰諾福韋之固體形式
CN104804042B (zh) * 2014-01-24 2018-01-19 齐鲁制药有限公司 核苷酸膦酸酯类化合物、其药物组合物、制备方法及用途
US9463194B2 (en) 2014-02-05 2016-10-11 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating patients co-infected with HIV and tuberculosis
CN106061984A (zh) 2014-02-13 2016-10-26 配体药物公司 前药化合物及其用途
WO2015127848A1 (zh) * 2014-02-27 2015-09-03 四川海思科制药有限公司 一种取代的氨基磷酸酯类衍生物、其制备方法及其应用
CN105001262B (zh) * 2014-04-18 2017-09-01 四川海思科制药有限公司 芳基取代的磷酰胺类衍生物及其在医学上的应用
WO2015161781A1 (zh) * 2014-04-21 2015-10-29 四川海思科制药有限公司 一种核苷类似物及其中间体的制备方法
CN105085571A (zh) * 2014-05-20 2015-11-25 四川海思科制药有限公司 替诺福韦艾拉酚胺复合物及其制备方法和用途
CN105518012B (zh) * 2014-06-25 2018-03-02 四川海思科制药有限公司 一种取代的氨基酸硫酯类化合物、其组合物及应用
CN106687118A (zh) 2014-07-02 2017-05-17 配体药物公司 前药化合物及其用途
HUE059067T2 (hu) 2014-09-15 2022-10-28 Univ California Nukleotid analógok
JP2017535520A (ja) * 2014-09-30 2017-11-30 ハンミ・ファイン・ケミカル・カンパニー・リミテッドＨａｎｍｉ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． 高純度の（ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニンの製造方法
KR101703257B1 (ko) 2014-09-30 2017-02-06 한미정밀화학주식회사 고순도의 (r)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌의 제조방법
KR101703258B1 (ko) 2014-12-30 2017-02-06 한미정밀화학주식회사 고순도의 (r)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌의 제조방법
US11311545B2 (en) 2014-10-09 2022-04-26 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Compositions and methods for the delivery of therapeutics
TWI740546B (zh) 2014-10-29 2021-09-21 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
CN105646584B (zh) * 2014-11-12 2018-09-28 四川海思科制药有限公司 替诺福韦艾拉酚胺富马酸盐晶型及其制备方法和用途
CN104558036A (zh) * 2014-12-11 2015-04-29 杭州和泽医药科技有限公司 一种替诺福韦艾拉酚胺半反丁烯二酸盐晶型及其制备方法
WO2016108205A1 (en) 2015-01-03 2016-07-07 Mylan Laboratories Limited Processes for the preparation of amorphous tenofovir alafenamide hemifumarate and a premix thereof
US20180148774A1 (en) * 2015-05-16 2018-05-31 Godx, Inc Point of need testing device and methods of use thereof
CN106188139B (zh) 2015-05-29 2020-02-18 江苏天士力帝益药业有限公司 替诺福韦单苄酯磷酸酰胺前药、其制备方法及应用
CZ2015384A3 (cs) 2015-06-05 2016-12-14 Zentiva, K.S. Pevné formy Tenofovir alafenamidu
HK1252631A1 (zh) 2015-06-17 2019-05-31 Gilead Sciences, Inc. 替诺福韦艾拉酚胺的共晶体，盐和固体形式
MX2017016806A (es) 2015-06-30 2018-05-07 Gilead Sciences Inc Formulaciones farmaceuticas que comprenden tenofovir y emtricitabina.
TWI639598B (zh) 2015-08-10 2018-11-01 美商默沙東藥廠 抗病毒β－胺基酸酯磷酸二醯胺化合物
TWI616452B (zh) * 2015-08-26 2018-03-01 Preparation method of nucleoside analog and intermediate thereof
TWI620754B (zh) * 2015-08-26 2018-04-11 Method for preparing amino phosphate derivative and preparation method thereof
TWI616453B (zh) * 2015-08-27 2018-03-01 Substituted amino acid thioester compounds, compositions and uses thereof
WO2017037608A1 (en) * 2015-08-28 2017-03-09 Laurus Labs Private Limited Solid forms of tenofovir alafenamide and salts thereof, processes for its preparation and pharmaceutical compositions thereof
SI3785717T1 (sl) 2015-09-16 2022-04-29 Gilead Sciences, Inc. Postopki za zdravljenje okužb s Coronaviridae
PE20181207A1 (es) 2015-11-09 2018-07-23 Gilead Sciences Inc Composiciones terapeuticas para el tratamiento del virus de inmunodeficiencia humana
CN106800573B (zh) * 2015-11-25 2020-03-10 四川海思科制药有限公司 一种核苷酸膦酸酯一水合物及其制备方法和在医药上的应用
WO2017100108A1 (en) 2015-12-10 2017-06-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral phosphodiamide prodrugs of tenofovir
CN106866737B (zh) * 2015-12-11 2020-11-20 南京圣和药物研发有限公司 膦酸衍生物及其应用
WO2017106069A1 (en) 2015-12-15 2017-06-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral oxime phosphoramide compounds
WO2017118928A1 (en) 2016-01-06 2017-07-13 Lupin Limited Process for the separation of diastereomers of tenofovir alafenamide
WO2017134089A1 (en) 2016-02-02 2017-08-10 Sandoz Ag Crystalline forms of tenofovir alafenamide monofumarate
WO2017133517A1 (zh) * 2016-02-03 2017-08-10 四川海思科制药有限公司 一种磷酰胺衍生物及制备方法和用途
WO2017148290A1 (zh) * 2016-03-01 2017-09-08 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的腺嘌呤化合物及其药物组合物
CN107179355B (zh) * 2016-03-11 2021-08-10 广东东阳光药业有限公司 一种分离检测替诺福韦艾拉酚胺及其有关物质的方法
CZ2016156A3 (cs) 2016-03-17 2017-09-27 Zentiva, K.S. Způsob přípravy diastereomerně čistého Tenofoviru Alafenamidu nebo jeho solí
CN107226826A (zh) * 2016-03-25 2017-10-03 江苏奥赛康药业股份有限公司 替诺福韦艾拉酚胺富马酸盐化合物及其药物组合物
WO2017211325A1 (zh) * 2016-06-05 2017-12-14 上海诚妙医药科技有限公司 富马酸替诺福韦艾拉酚胺盐的新晶型、制备方法及其用途
CN107698621A (zh) * 2016-06-20 2018-02-16 杭州和泽医药科技有限公司 一种腺嘌呤衍生物的膦酸酯前药及其在医药上的应用
WO2017221189A1 (en) * 2016-06-22 2017-12-28 Laurus Labs Limited An improved process for the preparation of tenofovir alafenamide or pharmaceutically acceptable salts thereof
PT3347352T (pt) 2016-08-19 2019-09-24 Gilead Sciences Inc Compostos terapêuticos úteis para o tratamento profilático ou terapêutico de uma infeção pelo vírus hiv
CN106317116A (zh) * 2016-08-19 2017-01-11 张红利 磷酰胺核苷类化合物及其药学上可接受的盐与应用、药物组合物
US10449208B2 (en) 2016-08-25 2019-10-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral prodrugs of tenofovir
CN106380484A (zh) * 2016-08-29 2017-02-08 杭州百诚医药科技股份有限公司 一种替诺福韦艾拉酚胺的新晶型及其制备方法
WO2018042331A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Combinations and uses and treatments thereof
WO2018051250A1 (en) 2016-09-14 2018-03-22 Viiv Healthcare Company Combination comprising tenofovir alafenamide, bictegravir and 3tc
WO2018080903A1 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral aryl-amide phosphodiamide compounds
CN106565785B (zh) * 2016-11-09 2019-11-12 周雨恬 一种具有抗hbv/hiv活性的核苷氨基磷酸酯类化合物及其盐和用途
CN108129514A (zh) * 2016-12-01 2018-06-08 北京美倍他药物研究有限公司 磷酸/膦酸衍生物的单一异构体及其医药用途
KR20190100249A (ko) 2016-12-22 2019-08-28 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 항바이러스 벤질-아민 포스포디아미드 화합물
KR20190100250A (ko) 2016-12-22 2019-08-28 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 테노포비르의 항바이러스 지방족 에스테르 전구약물
WO2018115046A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Sandoz Ag Crystalline solid forms of tenofovir alafenamide
TWI714820B (zh) 2017-01-31 2021-01-01 美商基利科學股份有限公司 替諾福韋艾拉酚胺(tenofovir alafenamide)之晶型
WO2018153977A1 (en) 2017-02-24 2018-08-30 Hexal Ag Stable composition of tenofovir alafenamide
US20190374557A1 (en) * 2017-02-28 2019-12-12 Alexandre Vasilievich Ivachtchenko Cyclobutyl (S)-2-[[[(R)-2-(6-aminopurin-9-yl)-1-methyl-ethoxy]methyl-phenoxy-phosphoryl]amino]-propanoates, and production process and application thereof
RU2659388C1 (ru) 2017-02-28 2018-07-02 Васильевич Иващенко Александр Нуклеотиды, включающие N-[(S)-1-циклобутоксикарбонил]фосфорамидатный фрагмент, их аналоги и их применение
CN106866739B (zh) * 2017-03-10 2018-11-02 华东师范大学 一种(r)-1-(6-氨基-9h-嘌呤-9-基)2-苯酯的制备方法
AU2018235754B2 (en) 2017-03-14 2021-04-08 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating feline coronavirus infections
US11191763B2 (en) 2017-03-20 2021-12-07 The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services HIV post-exposure prophylaxis
CN108794530A (zh) * 2017-04-26 2018-11-13 上海医药工业研究院 一种替诺福韦丙酚酰胺盐晶型及其制备方法和用途
CA3178212A1 (en) 2017-05-01 2018-11-08 Gilead Sciences, Inc. Crystalline forms of (s)-2-ethylbutyl 2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-7-yl)-5-cyano-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(phenoxy) phosphoryl)amino)propanoate
KR102379965B1 (ko) * 2017-05-19 2022-03-29 주식회사 종근당 테노포비르의 효율적인 제조방법
CN107266499B (zh) * 2017-06-05 2019-07-02 珠海优润医药科技有限公司 一种抗病毒化合物及其制备方法
WO2019003251A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Cipla Limited PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
CN111093627B (zh) 2017-07-11 2024-03-08 吉利德科学公司 用于治疗病毒感染的包含rna聚合酶抑制剂和环糊精的组合物
WO2019021319A1 (en) 2017-07-27 2019-01-31 Cipla Limited PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
PL3661937T3 (pl) 2017-08-01 2021-12-20 Gilead Sciences, Inc. Formy krystaliczne ((s)-((((2r,5r)-5-(6-amino-9h-puryn-9-ylo)-4-fluoro-2,5-dihydrofuran-2-ylo)oksy)metylo)(fenoksy)fosforylo)-l-alaninianu etylu (gs-9131) do leczenia zakażeń wirusowych
AR112412A1 (es) 2017-08-17 2019-10-23 Gilead Sciences Inc Formas de sal de colina de un inhibidor de la cápside del vih
CN107655987B (zh) * 2017-09-08 2020-11-03 厦门蔚扬药业有限公司 一种替诺福韦艾拉酚胺及其异构体的hplc检测方法
CN107522743A (zh) * 2017-09-30 2017-12-29 深圳科兴生物工程有限公司 一种半富马酸替诺福韦艾拉酚胺工业化连续生产方法
US20190151307A1 (en) 2017-10-24 2019-05-23 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating patients co-infected with a virus and tuberculosis
CN109942633B (zh) * 2017-12-20 2021-08-31 上海新礼泰药业有限公司 替诺福韦艾拉酚胺中间体的制备方法
CN109942632B (zh) * 2017-12-20 2021-08-31 上海博志研新药物研究有限公司 替诺福韦艾拉酚胺中间体的制备方法
WO2019130354A1 (en) 2017-12-30 2019-07-04 Cipla Limited Polymorphic forms of (9-[(r)-2-[[(s)-[[(s)-1- (isopropoxycarbonyl)ethyl]amino]phenoxy phosphinyl]methoxy]propyl] adenine and pharmaceutically acceptable salts thereof
CN111788196A (zh) 2018-01-09 2020-10-16 配体药物公司 缩醛化合物及其治疗用途
CA3088287A1 (en) * 2018-01-10 2019-07-18 Nucorion Pharmaceuticals, Inc. Phosphor(n)amidatacetal and phosph(on)atalcetal compounds
CA3126348A1 (en) * 2018-01-12 2020-07-18 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Antiviral prodrugs and formulations thereof
CN111836805B (zh) 2018-02-15 2023-07-14 吉利德科学公司 吡啶衍生物及其用于治疗hiv感染的用途
TWI823164B (zh) 2018-02-16 2023-11-21 美商基利科學股份有限公司 用於製備有療效化合物之方法及中間物
CN108101943B (zh) * 2018-02-28 2020-11-24 顾世海 一种替诺福韦前药或可药用盐及其在医药上的应用
CA3132832A1 (en) 2018-04-09 2019-10-17 Howard E. Gendelman Antiviral prodrugs and formulations thereof
CA3103522C (en) 2018-07-16 2023-11-21 Gilead Sciences, Inc. Capsid inhibitors for the treatment of hiv
US11826375B2 (en) 2018-07-19 2023-11-28 Merck Sharp & Dohme Llc Phosphinic amide prodrugs of tenofovir
JP7313438B2 (ja) 2018-09-19 2023-07-24 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｈｉｖの予防のためのインテグラーゼ阻害剤
MX2021011394A (es) 2019-03-22 2021-10-13 Gilead Sciences Inc Compuestos de carbamoilpiridona triciclica puenteada y su uso farmaceutico.
CN114206896B (zh) 2019-07-17 2024-12-17 纽科利制药公司 环状脱氧核糖核苷酸化合物
US20220257619A1 (en) 2019-07-18 2022-08-18 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
EP3999067A1 (en) 2019-07-19 2022-05-25 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Hiv pre-exposure prophylaxis
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
KR20220083673A (ko) 2019-08-22 2022-06-20 에모리 유니버시티 뉴클레오사이드 전구약물 및 이와 관련된 용도
AU2020350711A1 (en) * 2019-09-20 2022-04-14 Abbott Rapid Diagnostics International Unlimited Company Antibodies directed against tenofovir and derivatives thereof
CN114727999A (zh) 2019-11-26 2022-07-08 吉利德科学公司 用于预防hiv的衣壳抑制剂
CN118766947A (zh) 2020-01-27 2024-10-15 吉利德科学公司 用于治疗SARS CoV-2感染的方法
WO2021165995A1 (en) 2020-02-20 2021-08-26 Cipla Limited Novel salts and/or co-crystals of tenofovir alafenamide
CN118994170A (zh) 2020-03-12 2024-11-22 吉利德科学公司 制备1'-氰基核苷的方法
AU2021237718B2 (en) 2020-03-20 2023-09-21 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-C-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
WO2021202669A2 (en) 2020-04-01 2021-10-07 Reyoung Corporation Nucleoside and nucleotide conjugate compounds and uses thereof
JP7482250B2 (ja) 2020-04-06 2024-05-13 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド １’－シアノ置換カルバヌクレオシド類似体の吸入製剤
KR20210125298A (ko) 2020-04-08 2021-10-18 주식회사 파마코스텍 테노포비어 알라펜아미드 헤미타르트레이트의 신규한 제조방법
CN115605492B (zh) 2020-04-21 2025-09-16 配体制药股份有限公司 核苷酸前药化合物
CN115666570A (zh) 2020-05-29 2023-01-31 吉利德科学公司 瑞德西韦治疗方法
EP4172160A2 (en) 2020-06-24 2023-05-03 Gilead Sciences, Inc. 1'-cyano nucleoside analogs and uses thereof
CN115996925A (zh) 2020-06-25 2023-04-21 吉利德科学公司 用于治疗hiv的衣壳抑制剂
CN113970612B (zh) * 2020-07-22 2023-08-01 北京四环制药有限公司 一种高效液相色谱法测定丙酚替诺福韦有关物质的方法
LT4204421T (lt) 2020-08-27 2024-06-25 Gilead Sciences, Inc. Virusinių infekcijų gydymui skirti junginiai ir būdai
CN112336695B (zh) * 2020-09-28 2023-01-03 华北制药华坤河北生物技术有限公司 一种富马酸丙酚替诺福韦片剂及其制备方法和有关物质的检测方法
EP4660325A2 (en) 2020-11-11 2025-12-10 Gilead Sciences, Inc. Methods of identifying hiv patients sensitive to therapy with gp120 cd4 binding site-directed antibodies
US11667656B2 (en) 2021-01-27 2023-06-06 Apotex Inc. Crystalline forms of Tenofovir alafenamide
CN113075307B (zh) * 2021-03-08 2025-03-11 瑞阳制药股份有限公司 富马酸丙酚替诺福韦异构体的检测方法
CN113214322B (zh) * 2021-04-30 2022-10-25 山东立新制药有限公司 替诺福韦绿色环保的制备方法
WO2022251594A1 (en) * 2021-05-27 2022-12-01 Antios Therapeutics, Inc. Pharmacokinetics and dose-related improvments in subjects treated with phosphoramidate clevudine prodrugs
HUE072170T2 (hu) 2021-12-03 2025-10-28 Gilead Sciences Inc Terápiás vegyületek HIV-vírusfertõzésre
WO2023102523A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds for hiv virus infection
US12084467B2 (en) 2021-12-03 2024-09-10 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds for HIV virus infection
CN114369120A (zh) * 2022-01-28 2022-04-19 石家庄龙泽制药股份有限公司 一种丙酚替诺福韦关键中间体的制备方法
IL315102A (en) 2022-03-02 2024-10-01 Gilead Sciences Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF VIRAL INFECTIONS
TW202446773A (zh) 2022-04-06 2024-12-01 美商基利科學股份有限公司 橋聯三環胺甲醯基吡啶酮化合物及其用途
WO2024006982A1 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds useful for the prophylactic or therapeutic treatment of an hiv virus infection
KR20250052378A (ko) 2022-07-21 2025-04-18 안티바 바이오사이언시즈, 인크. Hpv 감염 및 hpv-유도 신생물의 치료를 위한 조성물 및 투여 형태
AU2023330037A1 (en) 2022-08-26 2025-03-06 Gilead Sciences, Inc. Dosing and scheduling regimen for broadly neutralizing antibodies
WO2024076915A1 (en) 2022-10-04 2024-04-11 Gilead Sciences, Inc. 4'-thionucleoside analogues and their pharmaceutical use
WO2024196814A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods for treatment of age-related macular degeneration
WO2024220624A1 (en) 2023-04-19 2024-10-24 Gilead Sciences, Inc. Dosing regimen of capsid inhibitor
TW202448483A (zh) 2023-05-31 2024-12-16 美商基利科學股份有限公司 用於ｈｉｖ之治療性化合物
WO2024249573A1 (en) 2023-05-31 2024-12-05 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of compounds useful in the treatment of hiv
WO2025029247A1 (en) 2023-07-28 2025-02-06 Gilead Sciences, Inc. Weekly regimen of lenacapavir for the treatment and prevention of hiv
WO2025042394A1 (en) 2023-08-23 2025-02-27 Gilead Sciences, Inc. Dosing regimen of hiv capsid inhibitor
US20250120989A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Gilead Sciences, Inc. Bridged tricyclic carbamoylpyridone compounds and uses thereof
TW202530227A (zh) 2023-10-11 2025-08-01 美商基利科學股份有限公司 橋聯三環胺甲醯基吡啶酮化合物及其用途
TW202530226A (zh) 2023-10-11 2025-08-01 美商基利科學股份有限公司 橋聯三環胺甲醯基吡啶酮化合物及其用途
US20250230163A1 (en) 2023-12-22 2025-07-17 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of hiv integrase inhibitors
US12357577B1 (en) 2024-02-02 2025-07-15 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations and uses thereof
US20250289822A1 (en) 2024-03-01 2025-09-18 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of hiv integrase inhibitors
US20250296932A1 (en) 2024-03-01 2025-09-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical compositions comprising hiv integrase inhibitors
US20250333424A1 (en) 2024-03-01 2025-10-30 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
EP4640214A1 (en) 2024-03-28 2025-10-29 Sanovel Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi A tablet comprising tenofovir alafenamide monofumarate
CN118652277A (zh) * 2024-08-19 2024-09-17 成都工业学院 一种用于治疗癌症疾病的化合物的制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0452935A1 (en) * 1990-04-20 1991-10-23 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Chiral 2-(phosphonomethoxy)propyl guanines as antiviral agents
EP0494370A1 (en) * 1990-11-29 1992-07-15 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Antiviral (phosphonomethoxy)methoxy purine/pyrimidine derivatives
WO1998004569A1 (en) * 1996-07-26 1998-02-05 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5874577A (en) * 1996-04-03 1999-02-23 Medichem Research, Inc. Method for the preparing 9-12-(Diethoxyphosphonomethoxy)ethyl!adenine and analogues thereof
US6043230A (en) * 1996-07-26 2000-03-28 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonomethoxy nucleotide analogs having increased oral bioavailability

Family Cites Families (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS233665B1 (en) 1983-01-06 1985-03-14 Antonin Holy Processing of isomere o-phosphonylmethylderivative of anantiomere racemic vicinal diene
CS263952B1 (en) 1985-04-25 1989-05-12 Holy Antonin Remedy with antiviral effect
CS263951B1 (en) 1985-04-25 1989-05-12 Antonin Holy 9-(phosponylmethoxyalkyl)adenines and method of their preparation
CS264222B1 (en) 1986-07-18 1989-06-13 Holy Antonin N-phosphonylmethoxyalkylderivatives of bases of pytimidine and purine and method of use them
US5650510A (en) 1986-11-18 1997-07-22 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Antiviral phosphonomethoxyalkylene purine and pyrimidine derivatives
US5057301A (en) 1988-04-06 1991-10-15 Neorx Corporation Modified cellular substrates used as linkers for increased cell retention of diagnostic and therapeutic agents
US5053215A (en) * 1988-05-26 1991-10-01 University Of Florida NMR-assayable ligand-labelled trifluorothymidine containing composition and method for diagnosis of HSV infection
US5744600A (en) 1988-11-14 1998-04-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Phosphonomethoxy carbocyclic nucleosides and nucleotides
US5688778A (en) 1989-05-15 1997-11-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Nucleoside analogs
JP2648516B2 (ja) 1989-07-27 1997-09-03 ダイセル化学工業株式会社 立体異性体の分離法
US5624898A (en) * 1989-12-05 1997-04-29 Ramsey Foundation Method for administering neurologic agents to the brain
JP2925753B2 (ja) 1990-02-23 1999-07-28 ダイセル化学工業株式会社 光学異性体の分離方法
US5302585A (en) 1990-04-20 1994-04-12 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Use of chiral 2-(phosphonomethoxy)propyl guanines as antiviral agents
SK280313B6 (sk) 1990-04-24 1999-11-08 �Stav Organick� Chemie A Biochemie Av �R N-(3-fluór-2-fosfonylmetoxypropyl)deriváty purínov
US5627165A (en) * 1990-06-13 1997-05-06 Drug Innovation & Design, Inc. Phosphorous prodrugs and therapeutic delivery systems using same
US5177064A (en) * 1990-07-13 1993-01-05 University Of Florida Targeted drug delivery via phosphonate derivatives
CS387190A3 (en) 1990-08-06 1992-03-18 Ustav Organicke Chemie A Bioch (2r)-2-/di(2-propyl)phosphonylmethoxy/-3-p-toluenesulfonyloxy -1- trimethylacetoxypropane and process for preparing thereof
CA2088363C (en) 1990-08-10 2002-05-28 Purushotham Vemishetti Process for the preparation of nucleotides
EP0481214B1 (en) * 1990-09-14 1998-06-24 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Prodrugs of phosphonates
US5827819A (en) * 1990-11-01 1998-10-27 Oregon Health Sciences University Covalent polar lipid conjugates with neurologically active compounds for targeting
CZ284678B6 (cs) 1991-05-20 1999-01-13 Ústav Organické Chemie A Biochemie Avčr Di(2-propyl)estery 1-fluor-2-fosfonomethoxy-3-p -toluensulfonyloxypropanů, způsob jejich přípravy a použití
US5498752A (en) 1991-08-22 1996-03-12 Daicel Chemical Industries, Ltd. Process for recovering optical isomers and solvent, process for using solvent by circulation and process for reusing optical isomers in optical resolution
JP3010816B2 (ja) 1991-08-22 2000-02-21 ダイセル化学工業株式会社 光学分割における光学異性体と溶媒との回収方法、溶媒の循環使用方法、および光学異性体の再利用方法
CZ287745B6 (cs) 1991-10-11 2001-01-17 Ústav organické chemie a biochemie AV ČR Acyklické fosfonomethoxyalkylsubstituované alkenylové a alkinylové deriváty purinu a pyrimidinu
US6057305A (en) 1992-08-05 2000-05-02 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Antiretroviral enantiomeric nucleotide analogs
IL106998A0 (en) * 1992-09-17 1993-12-28 Univ Florida Brain-enhanced delivery of neuroactive peptides by sequential metabolism
US6413949B1 (en) * 1995-06-07 2002-07-02 D-Pharm, Ltd. Prodrugs with enhanced penetration into cells
BR9407510A (pt) 1993-09-17 1997-01-07 Gilead Sciences Inc Análogos de nucleotideo
US5656745A (en) * 1993-09-17 1997-08-12 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5798340A (en) 1993-09-17 1998-08-25 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
KR100386685B1 (ko) * 1993-09-17 2003-12-31 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 뉴클레오타이드동족체류
GB9505025D0 (en) 1995-03-13 1995-05-03 Medical Res Council Chemical compounds
US5977061A (en) 1995-04-21 1999-11-02 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic N6 - substituted nucleotide analagues and their use
EP1323727A3 (en) * 1995-05-26 2003-09-10 Genta Incorporated Composition and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives
US5717095A (en) * 1995-12-29 1998-02-10 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
BR9612317A (pt) 1995-12-29 2000-10-31 Gilead Sciences Inc Análogos nucleotìdeos.
US5739314A (en) 1997-04-25 1998-04-14 Hybridon, Inc. Method for synthesizing 2'-O-substituted pyrimidine nucleosides
TR200200117T2 (tr) 1997-07-25 2002-06-21 Gilead Sciences, Inc. Nükleotid analog kompozisyonlar
AU756793B2 (en) 1997-07-25 2003-01-23 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analog composition and synthesis method
US5935946A (en) 1997-07-25 1999-08-10 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analog composition and synthesis method
WO1999030727A1 (en) * 1997-12-17 1999-06-24 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
ATE212661T1 (de) 1998-01-23 2002-02-15 Newbiotics Inc Durch enzymkatalyse erhaltene therapeutische substanzen.
US6169078B1 (en) * 1998-05-12 2001-01-02 University Of Florida Materials and methods for the intracellular delivery of substances
JP2002518521A (ja) * 1998-06-20 2002-06-25 ワシントン・ユニバーシティ 医用画像解析、診断および治療のための膜透過性ペプチド錯体
US6169879B1 (en) * 1998-09-16 2001-01-02 Webtv Networks, Inc. System and method of interconnecting and using components of home entertainment system
GB9821058D0 (en) † 1998-09-28 1998-11-18 Univ Cardiff Chemical compound
TWI230618B (en) * 1998-12-15 2005-04-11 Gilead Sciences Inc Pharmaceutical compositions of 9-[2-[[bis[(pivaloyloxy)methyl]phosphono]methoxy]ethyl]adenine and tablets or capsules containing the same
EP1150988B1 (en) † 1999-02-12 2003-05-28 Glaxo Group Limited Phosphoramidate, and mono-, di-, and tri-phosphate esters of (1r, cis)-4-(6-amino-9h-purin-9-yl)-2-cyclopentene-1-methanol as antiviral agents
CZ304734B6 (cs) * 2000-07-21 2014-09-10 Gilead Sciences, Inc. Způsob přípravy 9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu a 9-[2-(fosfonomethoxy)ethyl]adeninu
CA2425610A1 (en) * 2000-10-13 2002-04-18 University Of Lausanne Intracellular delivery of biological effectors by novel transporter peptide sequences
US20020119433A1 (en) * 2000-12-15 2002-08-29 Callender Thomas J. Process and system for creating and administering interview or test

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0452935A1 (en) * 1990-04-20 1991-10-23 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Chiral 2-(phosphonomethoxy)propyl guanines as antiviral agents
EP0494370A1 (en) * 1990-11-29 1992-07-15 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Antiviral (phosphonomethoxy)methoxy purine/pyrimidine derivatives
US5874577A (en) * 1996-04-03 1999-02-23 Medichem Research, Inc. Method for the preparing 9-12-(Diethoxyphosphonomethoxy)ethyl!adenine and analogues thereof
WO1998004569A1 (en) * 1996-07-26 1998-02-05 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US6043230A (en) * 1996-07-26 2000-03-28 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonomethoxy nucleotide analogs having increased oral bioavailability

Also Published As

Publication number Publication date
UA75889C2 (uk) 2006-06-15
HRP20160074A2 (hr) 2016-03-11
LU93029I2 (fr) 2016-06-14
AU2005225039B2 (en) 2008-09-25
JP2011140506A (ja) 2011-07-21
CN100402539C (zh) 2008-07-16
LTC1301519I2 (lt) 2023-02-27
NO2016006I1 (no) 2016-04-19
NO336718B1 (no) 2015-10-26
FR16C0013I1 (fr) 2016-05-27
CY2016008I2 (el) 2016-12-14
JP2010174033A (ja) 2010-08-12
IL153658A0 (en) 2003-07-06
HRP20030047A2 (en) 2007-08-31
NL300803I2 (cs) 2016-06-30
NO2023006I1 (no) 2023-02-03
FR16C0013I2 (fr) 2016-09-09
JP2009062383A (ja) 2009-03-26
PT2682397T (pt) 2017-05-31
JP5111551B2 (ja) 2013-01-09
CA2893174A1 (en) 2002-01-31
US20080227754A1 (en) 2008-09-18
EA200300188A1 (ru) 2003-06-26
SI1301519T1 (sl) 2015-07-31
PL213214B1 (pl) 2013-01-31
HUS1900027I1 (hu) 2021-03-29
EP1301519B2 (en) 2021-11-10
BG66037B1 (bg) 2010-11-30
SI2682397T1 (sl) 2017-08-31
NO20030270D0 (no) 2003-01-20
NZ536942A (en) 2006-03-31
KR100767432B1 (ko) 2007-10-17
CZ304734B6 (cs) 2014-09-10
DK2682397T3 (da) 2017-06-19
AU2005225039A1 (en) 2005-11-10
NZ535408A (en) 2006-09-29
AU8294101A (en) 2002-02-05
DK1301519T3 (en) 2015-05-26
US20050009043A1 (en) 2005-01-13
PL360490A1 (en) 2004-09-06
HRP20160074A8 (hr) 2016-07-29
AU2001282941B2 (en) 2006-04-27
CA2725819A1 (en) 2002-01-31
BE2016C018I2 (cs) 2020-08-20
BR0112646A (pt) 2003-06-24
HRP20160074B1 (hr) 2021-09-03
US20050124585A1 (en) 2005-06-09
JP5063554B2 (ja) 2012-10-31
ES2627903T3 (es) 2017-08-01
CN1443189A (zh) 2003-09-17
CN1291994C (zh) 2006-12-27
BG107572A (bg) 2003-11-28
AP1466A (en) 2005-09-22
US20030219727A1 (en) 2003-11-27
NO20150909L (no) 2003-03-20
BRPI0112646B1 (pt) 2017-10-17
ES2536972T5 (es) 2022-04-06
CA2416757C (en) 2011-02-15
US20040018150A1 (en) 2004-01-29
KR20030022295A (ko) 2003-03-15
CY1119411T1 (el) 2018-03-07
LTPA2016009I1 (lt) 2016-04-25
HUP0301307A2 (hu) 2003-09-29
EE05366B1 (et) 2010-12-15
KR20060105807A (ko) 2006-10-11
HK1054238A1 (en) 2003-11-21
MXPA03000587A (es) 2004-04-05
PT1301519E (pt) 2015-06-11
EP2682397A1 (en) 2014-01-08
US7390791B2 (en) 2008-06-24
AP2003002724A0 (en) 2003-06-30
NZ523438A (en) 2005-02-25
US20050159392A1 (en) 2005-07-21
EP1301519A2 (en) 2003-04-16
CA2725819C (en) 2015-09-22
JP2004504402A (ja) 2004-02-12
KR100749160B1 (ko) 2007-08-14
NO20120466L (no) 2003-03-20
HU230960B1 (hu) 2019-06-28
ES2536972T3 (es) 2015-06-01
US7803788B2 (en) 2010-09-28
HRP20030047B1 (hr) 2016-02-26
EA004926B1 (ru) 2004-10-28
AU2001282941C1 (en) 2016-12-22
EP2682397B1 (en) 2017-04-19
EP3235823A1 (en) 2017-10-25
ZA200210271B (en) 2003-12-31
US20020119443A1 (en) 2002-08-29
EE200300029A (et) 2004-10-15
OA12393A (en) 2006-04-18
JP4651264B2 (ja) 2011-03-16
TR200300055T2 (tr) 2004-12-21
US20050124584A1 (en) 2005-06-09
HUP0301307A3 (en) 2005-12-28
DK1301519T4 (da) 2021-12-20
NO20131717L (no) 2003-03-20
WO2002008241A2 (en) 2002-01-31
IS2985B (is) 2017-09-15
CN1706855A (zh) 2005-12-14
BRPI0112646B8 (pt) 2021-05-25
LT2682397T (lt) 2017-06-12
EP1301519B1 (en) 2015-02-25
US20060024659A1 (en) 2006-02-02
IS6689A (is) 2003-01-17
NO2016006I2 (no) 2016-04-19
NO20030270L (no) 2003-03-20
WO2002008241A3 (en) 2002-08-29
HUS000494I2 (hu) 2021-03-29
CA2416757A1 (en) 2002-01-31
CY2016008I1 (el) 2016-12-14
HK1243711A1 (en) 2018-07-20
CZ2003413A3 (cs) 2003-12-17
US20050124583A1 (en) 2005-06-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ304886B6 (cs) Prekurzory léčiv na bázi fosfonátových analogů nukleotidů a způsoby jejich výběru a přípravy
AU2001282941A1 (en) Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same
HK1054238B (en) Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same
HK1194074A (en) Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same
HK1194074B (en) Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same