CZ2016156A3

CZ2016156A3 - Způsob přípravy diastereomerně čistého Tenofoviru Alafenamidu nebo jeho solí

Info

Publication number: CZ2016156A3
Application number: CZ2016-156A
Authority: CZ
Inventors: tefko Martin Ĺ; Stanislav Man
Original assignee: Zentiva, K.S.
Priority date: 2016-03-17
Filing date: 2016-03-17
Publication date: 2017-09-27
Also published as: EP3430020B1; CN108779133A; WO2017157352A1; EP3430020A1

Description

Způsob přípravy diastereomerně čistého Tenofoviru Alafenamidu nebo jeho solí

Oblast techniky

Vynález se týká efektivního způsobu přípravy diastereomerně čistého Tenofovir Alafenamidu (TA) struktury la s absolutní konfiguraci (5) na atomu fosforu - 5_p-diastereoisomer.

Tenofovir Alafenamid (TA) S_p-diastereoisomer

1a

Tenofovir Alafenamid Fumarát vzorce 2 (TAF) je inhibitor reversní transkriptázy, který je v současné době v stadiu klinických studií jako proléčivo Tenofoviru 3 při léčbě infekce HIV a žloutenky typu B. V porovnání s doposud používaným pro léčivem, Tenofovir disoproxyl fumarátem vzorce 4, vykazuje TAF vyšší protivirovou aktivitu a lepší distribuci v lymfatickém systému.

HOOC-^-x

COOH

Tenofovir Disoproxyl Fumarát

Tenofovir Alafenamid Fumarát

OH

Tenofovir

Dosavadní stav techniky

Dosud nej výhodnější popsané metody přípravy Tenofovir Alafenamidu vzorce la jsou založené na reakci chloridového prekursoru (R? diastereoisomer vzorce 5a) s isopropyl Lalaninátem vzorce 6, jak v podobě volné báze, tak i v podobě příslušné soli s kyselinou chlorovodíkovou. Reakce probíhá stereospecificky, tzv. Sn2 mechanismem s inverzí konfigurace na chirálním atomu fosforu. Právě díky tomuto Sn2 mechanismu lze reakcí diastereomemě čistého intermediátu vzorce 5a (Rp diastereoisomeru) připravit diastereomemě čistý Tenofovir Alafenamid vzorce la, popřípadě jeho sůl. Stejně tak platí, že směs chloridů vzorce 5a a 5b o daném poměru diastereoisomerů poskytuje směs diastereomerů Tenofovir alafenamidu vzorce la a 1b o shodném poměru.

1a

Sp - diastereoisomer

5a

5b

1b

Rpdiastereoisomer

V literatuře jsou popsané v podstatě tři strategie přípravy diastereomemě čistého Tenofovir Alafenamidu vzorce la.

První strategie (WO 2014/195724) využívá proces štěpení diastereomerů vzorce la a 1b pomocí tvorby soli s chirální kyselinou (K). Jako nej vhodnější se ukázala být sůl s kyselinou vinnou. Takto vzniklé diastereoisomemí soli s kyselinou vinnou vzorce la*K a lb*K je možné následně odseparovat krystalizací, přičemž použití L- nebo D- vinné kyseliny vede, po uvolnění bází, k možnosti přípravy příslušného Sp (vzorce la) nebo Rp (vzorce 1b) diastereomerů TA. (Schéma 1). Mezi hlavní nevýhody popsaného procesu patří zejména ztráta 50% hmoty ve formě diastereomemí soli nechtěného isomeru vzorce lb*K. Ale taktéž časová náročnost a pracnost procesu, spojená s nutností přípravy příslušné soli, její krystalizace a následné uvolnění diastereomemě čisté volné báze TA vzorce la.

d.e.: 0-90 % směs Sp a Rp diastereoisomerů

L-tartaric acid

1a*K 1b*K

Sp - diastereoisomer Rp - diastereoisomer

L-tartaric acid krystalisace

1a*K

Sp - diastereoisomer d.e.: ~85 %

Schema 1. Proces přípravy TA vzorce la pomoci štěpení diastereoisomerní soli s kyselinou L-vinnou

Druhý postup (dle základního patentu WO0208241 a také WO2013052094) využívá přípravu diastereomemě čistého/obohaceného (d.e. > 80%) chloridu vzorce 5a. Reakce využívá PhPMPA vzorce 8 jako vstupní suroviny, která podléhá chloraci za vzniku chloridů vzorce 5a a 5b. Jejich zastoupení ve směsi je možné modifikovat úpravou reakěních podmínek, přiěemž je možné získat směs sd.e.: > 80%. Následná reakce takto obohacené směsi s isopropyl Lalaninátem 6 poskytne směs vzorce la a 1b s d.e.: > 80%. Diastereomemě čistý Tenofovir Alafenamid vzorce laje možné ze směsi získat krystalizací nebo chromatografícky (Schéma 2).

SOCI₂, Toluene

---------->

80°C, 48 - 96 h

5a 5b la 1b

d.e.: 80% d.e.: 80%

Schema 2. Využití diastereoselektivni chlorace při přípravě diastereomemě obohacené směsi la

Třetí alternativa počítá s využitím krystalizací indukované dynamické resoluce (CIDR) za podmínek uvedených v patentu WO2013052094 využívající reakci fenolu za katalytického účinku DBU. Takto je možné ve směsi obsahující isomery vzorce la a 1b (o složení la/lb 99:1 až 1:99) snížit zastoupení nechtěného isomeru vzorce 1b jeho převedením pomocí CIDR na požadovaný isomer la. Efektivita CIDR však není absolutní, což dává možnost přípravy jenom diastereomemě obohacené směsi o d.e.: ~ 85% (v případě že se vycházelo se směsi obsahující isomery v poměru la/lb 1:1). Diastereomemě čistý Tenofovir Alafenamid vzorce la je možné ze směsi získat krystalizaci nebo chromatograficky. (Schéma 3)

d.e.: 0-90 % směs Sp a Rp diastereoisomerů

1a

Sp - diastereoisomer

1b

Rp - diastereoisomer

1a

Sp - diastereoisomer d.e.: -85 %

Schéma 3. Příprava diastereomemě obohacené směsi la pomocí CIDR

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je vylepšený způsob výroby biologicky účinných fosforamidátových proléčiv, zejména TENOFOVIRU ALAFENAMIDU vzorce la. Tato nová syntetická strategie využívá snadné dostupnosti diastereoisomemě čistých fosforamidátových prekursorů vzorce 7 (kde X je odstupující skupina, jako: F, Cl, Br, I, OTs, OMs a podobně) jako klíčových intermediátů při průmyslové výrobě TENOFOVIRU ALAFENAMIDU vzorce la (Schéma 4).

X=CI. Rr. I. OTs. OMs

Schéma 4. Syntéza TENOFOVIR ALAFENAMIDU vzorce la s využitím reaktivního fosforamidátového prekurzoru 7.

Tento vynález je založen na překvapivém pozorování, že reaktivní fosforamidátový intermediát jako směs diastereoisomerů vzorce 7a a 7b má za vhodně zvolených reakčních podmínek (rozpouštědlo, pomocné rozpouštědlo, koncentrace, míchání, teplota, reakční čas, pomocné látky) tendenci krystalovat přímo z reakčního média, a to ve formě příslušné soli obohacené o Áp diastereomer 7a. Reakci spojenou s krystalizaci lze obecně provádět v jakémkoliv aprotickém rozpouštědle. S výhodou pak v esterech karboxylových kyselin (např. MeOAc, EtOAc, «PrOAc, zPrOAc, «BuOAc a dalších), substituovaných i nesubstituovaných alifatických nebo aromatických uhlovodících (např. cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,α-trifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril a dalších) nebo v různých polárních rozpouštědlech (např. sulfolan, acetonitril, propionitril a dalších).

V případě, že se při přípravě směsi solí vzorce 7a a 7b použije chloraění nebo obecně halogenaění činidlo (např. thionyl chlorid, dichloroxalát a další s případnou aktivací přídavkem DMF), vzniká nejprve suspenze směsi diastereomerů vzorce 7a a 7b v poměru ~ 1:1. Dalším zahříváním pak dochází k obohacování směsi o sůl diastereomerů 7a. Takto připravené soli jsou zbaveny veškerých těkavých složek obvykle destilací za sníženého tlaku (od halogenaěních činidel a rozpouštědla) nebo opakovaným částečným odpařením rozpouštědla (od halogenaěních činidel). Dalšími možnostmi izolace jsou filtrace nebo dekantace.

V průběhu reakce je důležité zabránit vzniku volných bází vzorce 5a a 5b, které snadno podléhají vedlejším, zejména kondenzačním reakcím. Vznik solí jako např. vznik chloridů lze podpořit zaváděním suchého plynného chlorovodíku nebo roztoku chlorovodíku ve vhodném rozpouštědle do reakční směsi. Další možností jak podpořit vznik solí je přídavek vody do reakční směsi (např. ve formě vlhkého rozpouštědla nebo vlhké vstupní suroviny jako PhPMPA), která pak reaguje s nadbytkem chloračního / halogenačního činidla za uvolnění dostatečného množství chlorovodíku / halogenovodíku.

Vznik solí je také neméně důležitý pro obohacení reakční směsi o požadovaný isomer vzorce 7a. Ke vzniku diastereomerů vzorce 7a z diastereomerů vzorce 7b (případně i opačně) dochází díky krystalizaci indukované dynamické resoluci (CIDR). Tento proces je zcela nezávislý na použitém chloraěním / halogenaěním činidle, protože může probíhat jako autokatalytický proces katalýzo váný solemi vzorce 7a a 7b. CIDR lze provést i bez přítomnosti chloračního / halogenačního činidla, kdy se nejprve směs solí diastereomerů vzorce 7a a 7b separuje z reakční směsi a následně podrobí CIDR. Autokatalický proces lze podpořit přídavkem zejména solí terciálních a kvartémích amoniových solí (např.

triethylamonium chlorid, benzyltrimethylamonium chlorid, cetylterimethylamonium bromid, pyridinium chlorid, 2,6-lutidin hydrochlorid a dalších) nebo volných bází (triethylamin (TEA), pyridin, 2,6-lutidin, ethyldiisopropylamin (EDIPA), l,8-Diazabicyklo[5.4.0]undec-7en (DBU), l,5-Diazabicyclo[4.3.0]non-5-ene (DBN), které jsou na soli převedeny in-situ. Množství báze v poměru k sloučenině vzorce 7 je 1:1 až 1 : 10 s výhodou pak 1,0 : 4,0 CIDR probíhá nejlépe za zvýšených teplot (nad 50°C) vaprotických rozpouštědlech, ve kterých jsou soli vzorce 7a a 7b omezeně rozpustné (0 mg/mL < rozpustnost <10 mg/mL). Vhodné jsou zejména estery karboxylových kyselin (např. MeOAc, EtOAc, «PrOAc, zPrOAc, hBuOAc a dalších) nebo alifatické a aromatické uhlovodíky, jak substituované, tak i nesubstituované (např. cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,αtrifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril a dalších). Rozpustnost lze pak dále upravit přídavkem tzv. pomocných rozpouštědel, kterými jsou obvykle polární aprotická rozpouštědla (např. sulfolan, dimethyl sulfon, acetonitril, propionitrile, l,3-dimethyl-2-imidazolidinon, N,N'dimethylpropylen močovina a dalších). Funkcí přídavku pomocných rozpouštědel je obvykle mírné zvýšení rozpustnosti solí vzorce 7a a 7b v reakční směsi a tím zkrácení doby potřebné pro posunutí rovnováhy ve prospěch diastereomeru 7a.

Naopak, pokud se chlorace / halogenace provádí v rozpouštědlech, ve kterých jsou soli vzorce 7a a 7b dobře rozpustné, nedochází ani po dlouho trvajícím zahřívaní (dny) k obohacení směsi o jeden s diastereomerů, a jejich poměr zůstává 1:1. Taková situace obvykle nastává v případě použití polárních rozpouštědel, jako jsou např. sulfolan, dimethyl sulfon, acetonitril, propionitrile, l,3-dimethyl-2-imidazolidinon, A^ř,V'-dimethylpropylenmočovinaapod.

V případě, že dojde ke krystalizaci reakční směsi (z důvodu ochlazení, zvýšení koncentrace, očkování krystaly nebo přídavku antirozpouštědla), je tato reakční směs obohacena o diastereomer vzorce 7a. Obohacení o diastereomer vzorce 7a se tak i za laboratorní teploty bez dalšího zahřívání ustaluje na hodnotách d.e. mezi 20 - 80 %. Jako příklad antirozpouštědla lze uvést např. MeOAc, EtOAc, wPrOAc, zPrOAc, «BuOAc, substituované i nesubstituované alifatické nebo aromatické uhlovodíky jako např. cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,α-trifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril a dalších).

V případě, že se suspenze obohacená o diastereomer vzorce 7a převede na roztok (zahřátím, naředěním, nebo přídavkem vhodného rozpouštědla), poměr diastereoisomerů se po krátkém čase (obvykle 1-20 min) ustálí na poměru vzorce 7a/7b ~ 1:1.

Následná reakce chloridu vzorce 7a (případně 7b) s nukleofilem (v tomto případě s isopropylL-alaninátem) probíhá stereospecificky tzv. Sn2 mechanismem s inverzí konfigurace na chirálním atomu fosforu. Právě díky tomuto Sn2 mechanismu je nutné připravit intermediát vzorce 7a s co nej vyšší diastereomemí čistotou, která se pak přenáší do finálního produktu tenofovir alafenamid (TA) vzorce la.

Takto připravený surový diastereomemě obohacený (d.e. < 70 %) Tenofovir alafenamid vzorce laje nutné v následujících krocích izolovat, a vyčistit tak, aby plnil požadavky na API kvalitu, což v tomto případě znamená dosáhnutí jak chemické, tak i optické čistoty (d.e. 99.7 %). Za tímto účelem je možné použít postupy popsané v úvodu, zejména pak:

• chirální chromatografie, • chromatografie (RP, SÍO2...) • krystalizace ve stadiu volné báze TA • převedení na sůl s chirální nebo achirální kyselinou a následné štěpení takto získané soli, atp.

Reakce diastereomemě obohaceného intermediátu vzorce 7a (d.e. < 70%) s isopropyl-Lalaninátom vzorce 6, poskytuje diastereomemě obohacený Tenofovir alafenamid vzorce la (d.e. < 70%), přičemž platí, že d.e. intermediátu vzorce 7a se při experimentálně správně provedené následné reakci (striktně bezvodé podmínky) přenáší do produktu vzorce la. Diastereomemě obohacený intermediát vzorce 7 reaguje se sloučeninou vzorce 6 v molámím poměru v rozmezí 1:1 až 1:5, ve výhodném provedení 1:2 až l:4.v molámím pornem v rozmezí 1:1 až 1:5, ve výhodném provedení 1:2 až 1:4.

Překvapivě bylo zjištěno, že isopropyl-L-alaninát vzorce 6 ve formě volné báze je stabilní za laboratorních podmínek (25°C) po dobu minimálně 1 měsíce. Použití vzorce 6 ve formě volné báze tak usnadňuje manipulaci (navažovaní) a taktéž isolaci produktu vzorce la. (Nedochází k zasolování reakční směsi, jak je tomu v případě použití příslušné soli isopropyl-L-alaninátu vzorce 6). Takto modifikovaným postupem je možné připravit ve vhodném rozpouštědle nebo směsi rozpouštědel a reakční teplotě -40 až +20°C, s výhodou pak -20 až 5°C, diastereomemě obohacený TA vzorce la ve výtěžku 80 % hmotn., chemické čistotě 75 % a optické čistotě d.e. 70 %. Vhodnými rozpouštědly pro zmíněnou reakci jsou zejména estery karboxylových kyselin (např. MeOAc, EtOAc, uPrOAc, zPrOAc, «BuOAc a další) nebo alifatické a aromatické uhlovodíky, jak substituované, tak i nesubstituované (např. cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,α-trifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril a další). Rozpustnost lze pak dále upravit přídavkem tzv. pomocných rozpouštědel, kterými jsou obvykle polární aprotická rozpouštědla (např. sulfolan, dimethyl sulfon, acetonitril, propionitrile, l,3-dimethyl-2-imidazolidinon, V,.V-dimethylpropylen močovina a další).

Nečekaně dobrých výsledků při isolaci a čištění bylo dosaženo použitím isopropyl acetátu (žPrOAc) jako rozpouštědla. Hlavní výhodou postupu využívajícího zPrOAc je přímá separace cílového Sp diastereoisomeru TA vzorce la pomocí krystalizace. Např. jedinou krystalizací surového Tenofovir alafenamidu báze vzorce la s HPLC čistotou 75 % a d.e. 70 % je možné získat materiál s HPLC čistotou 90 % a d.e. 96 % ve výtěžku 80 %. Následná krystalizace takto diastereomemě obohacené směsi umožňuje připravit produkt vzorce las HPLC čistotou 98 % , d.e. 99 % a výtěžku krystalizace 90 %. Finální rekrystalizace poskytuje TENOFOVIR ALAFENAMID bázi vzorce la v API kvalitě (tj. HPLC čistota 99.8 %, d.e. 99.7 % a výtěžku rekrystalizace 95 %).

Navíc bylo zjištěno, že provedení reakce Ph-PMPA vzorce 8 s SOCI2 v zPrOAc v přítomnosti 1 až 20 % sulfolanu (tetrahydrothiofen-l,l-dioxid) je možné získat intermediát vzorce 7 s přebytkem vzorce 7a ve výtěžku 95 % hmotn. a d.e. 70 % už po 24 h při teplotě 80 °C. Následná reakce vzorce 7a s 6 probíhá v zPrOAc velice efektivně při teplotách —20 až +5 °C. Nemísitelnost organického rozpouštědla, s výhodou zPrOAc, s vodou, umožňuje vodní zpracování reakční směsi, čím dochází k odstranění anorganických a polárních nečistot. Nespornou výhodou zPrOAc, jako rozpouštědla s vodou nemísitelného, je možnost organický podíl po extrakci zbavit vody pomocí azeotropické destilace a produkt je tak možné krystalizovat přímo z reakční směsi, tzv. „one-pot“ zpracování.

Vhodně zvolené uspořádání experimentu pak umožňuje při vodném zpracování reakční směsi převést vedlejší produkty reakce — PMPA , tak i nezreagovaný Ph-PMPA vzorce 8 do vodné fáze, zatímco produkt ve formě směsi isomeru vzorce la a 1b zůstává v organické vrstvě, která po odstranění zbytků vody azeotropickou destilací, představuje vstupní surovinu do dalšího technologického stupně, a to krystalizace.

Z technologického hlediska je pro proveditelnosti reakce v průmyslovém měřítku použití jednoho rozpouštědla v průběhu celé syntézy a krystalizace vysoce žádoucí. Navíc rozpouštědlo zPrOAc je považováno za „green solvent“ s povoleným vysokým limitem zbytkového obsahu ve finální API (5000 ppm). Tím, že celý proces využívá jednoho rozpouštědla bez těkavé příměsi, je možné toto lehce recyklovat, což je výhoda z pohledu průmyslové výroby.

Hlavní výhodou postupu uvedeného výše je oproti dříve známým postupům přímá separace cílového Sp diastereoisomeru vzorce la pomocí krystalizace. Tímto postupem je možné získat Sp diastereoisomer tenofovir alafenamidu vzorce la v dobrých celkových výtěžcích (>50 %) a API vyhovující optické čistotě (>99.7 % de) ze surové reakční směsi (schéma 5).

Schéma 5. Příprava diastereomerně čistého Tenofovir alafenamidu vzorce la „ZENTIVA “ postupem.

Příprava volné báze tenofoviru alafenamidu vzorce la

K suspenzi Ph-PMPA 8 (1.47g, 4,05 mmol) v iPrOAc (25 mL) byl přidán thionyl chlorid (0,7 mL, 10,11 mmol, 2,5 equiv) a reakční směs míchána při 80°C po dobu 2h. Následně byl přidán sulfolan (2,2 mL) a výsledná suspenze míchána při 80°C 24 - 72 h (dokud nebylo dosaženo d.e. 70 %). Po ochlazení na laboratorní teplotu byly těkavé složky oddestilovány za sníženého tlaku (45°C, 10 mbar). Získaná směs chloridů vzorce 7a/7b byla suspendována v zPrOAc (25 mL) a přidána v průběhu 1 h do ochlazeného (-20°C) roztoku žPr-L-Alaninu (2,65g, 20,23 mmol, 5 ekv.) v zPrOAc (15 mL). Reakce byla míchána lh při -20°C, následně po ohřátí pak lh při 20°C. Reakční směs byla promyta vodným roztokem NaH2PO4, vodným roztokem KHCO3, vodou a nasyceným roztokem NaCl a dále sušena nad Na2SO4. Výsledný roztok byl zkoncentrován na objem 15 mL, naočkován TA vzorce la a nechán krystalizovat při laboratorní teplotě. Produkt byl odsát na fritě, promyt studeným iPrOAc a sušen ve vakuové sušárně (40°C, 200 Pa) po dobu 8 h čímž se získalo 1,3 g (68 %). Tenofovir alafenamidu vzorce la ve formě bílého prášku (chemická čistota 95 %, d.e. 70 %).

Tenofovir alafenamid (chemická čistota 95 %, d.e. 70 %) byl rozpuštěn při 85°C v z'PrOAc (5 mL/mmol), ochlazen v průběhu 2h na 22°C a míchán při 22°C po dobu 2h. Produkt byl odsát na fritě, promyt studeným iPrOAc a sušen ve vakuové sušárně (40 °C, 200 Pa) po dobu 8 h čímž se získal Tenofovir alafenamidu ve výtěžku 92 % a d.e. 99,0 %.

Tenofovir alafenamid (d.e. 99.0 %) byl rozpuštěn při 85°C v z'PrOAc (5 mL/mmol), ochlazen v průběhu 2h na 22°C a míchán při 22°C po dobu 2h. Produkt byl odsán na fritě, promyt studeným iPrOAc a sušen ve vakuové sušárně (40°C, 200 Pa) po dobu 8h, čímž se získal Tenofovir alafenamid vzorce la ve výtěžku 95 % a d.e. 99,8 %.

Ή NMR (500 MHz, DMSO) δ = 8.12 (d, 7= 16.6 Hz, 2H), 7.29 (t, J= 7.9 Hz, 2H), 7.23 (s, 2H), 7.13 (t, J= 7 A Hz, 1H), 7.04 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 5.69 - 5.61 (m, 1H), 4.84 (hept, J= 6.3 Hz, 1H), 4.27 (dd, J = 14.4, 3.6 Hz, 1H), 4.14 (dd, 7= 14.4, 6.6 Hz, 1H), 3.97 - 3.90 (m, 1H), 3.90 - 3.81 (m, 2H), 3.76 (dd, 13.4, 9.8 Hz, 1H), 1.15 (d, J= 6.3 Hz, 6H), 1.12 (d, J= 7.1 Hz, 3H), 1.06 (d, J= 6.2 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, DMSO) δ = 172.92, 172.89, 155.99, 152.44, 150.26, 150.19, 149.80, 141.40, 129.50, 124.36, 120.57, 120.54, 118.39, 75.55, 75.45, 67.91, 64.75, 63.52, 49.07, 46.84, 21.45, 21.42, 20.34, 20.30, 16.66 ppm.

³¹P NMR (202 MHz, DMSO) δ = 22.11 ppm.

Příprava směsi solí vzorce 7a a 7b

Směs Ph-PMPA (1,45 g) s SOC1₂ (3 ekvivalenty) v rozpouštědle nebo kombinaci rozpouštědel (16 mL) byla zahřívána na 75°C. Po reakční době indikované v níže uvedené tabulce, byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Odparek poskytoval směs solí diastereomerů vzorce 7a a 7b jak je uvedené v tabulce níže (určeno pomocí HPLC po derivatizaci pyrrolidinem). Obsah Cl v produktu (obvykle v rozsahu 16 - 17 %) byl stanoven titračně.

rozpouštědlo	2h	Zastoupení 7a / 7b 1 d	2d
MeCN	50/50	49/51	49/51
Sulfolan	49/51	49/51	49/51
nBuCI	50/50	61/39	73/27
MeOAc	65/35	82/18	85/15
EtOAc	53/47	75/25	82/18
íPrOAc	50/50	76/24	86/14
«BuOAc	50/50	71/29	84/16
THF	64/36	81 /19	89/11
Me-THF	52/48	80/20	86/14
CHC1₃	69/31	64/36	80/20
Cyklohexan	51/49	68/32	81 /19
Toluen	52/48	72/28	80/20
Xyleny	51/49	60/40	74/26
Ph-CF₃	50/50	68/32	72/28
l,3-Dimethyl-2imidazolidinone	49/51	49/51	49/51
Dibasic ester	56/44	83 /17	87/13
žPrOAc / sulfolan 95/5	52/48	86/14	93/7
zPrOAc / MeCN 80/20	51/49	85/15	92/8

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob výroby diastereomemě obohaceného chloridu vzorce 7, jako intermediátu při syntéze Tenofovir alafenamidu vzorce la,

7 1a založený na reakci sloučeniny vzorce 8 (Ph-PMPA) s vhodným chloračním činidlem a ve vhodném rozpouštědle nebo směsi rozpouštědel.

nh₂

N N O k/RW^P-OPh

T 1 = OH
2. Způsob výroby podle nároku 1, vyznačující se tím, že je použito chlorační činidlo COCI2, SOCI2, PCI5, POCI3, případně v kombinaci se suchým plynným chlorovodíkem nebo roztokem chlorovodíku v aprotickém rozpouštědle.
3. Způsob výroby podle nároku 2, vyznačující se tím, že jako chlorační činidlo je použit SOC1₂.
4. Způsob výroby podle nároku 1, vyznačující se tím, že reakce je prováděna v polárních aprotických nebo nepolárních rozpouštědlech nebo jejich směsi.
5. Způsob výroby podle nároku 4, vyznačující se tím, že polární aprotická rozpouštědla jsou vybrána z kategorie esterů karboxylových kyselin, kterými jsouMeOAc, EtOAc, «PrOAc, zPrOAc, wBuOAc, a nepolární rozpouštědla jsou vybrána z kategorie substituovaných i nesubstituovaných alifatických nebo aromatických uhlovodíků, kterými jsou cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,α-trifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril.
6. Způsob výroby podle nároku 5, vyznačující se tím, že je použito polární aprotické rozpouštědlo z kategorie esterů karboxylových kyselin, kterými jsou MeOAc, EtOAc, nPrOAc, zPrOAc, «BuOAc.
7. Způsob výroby podle nároku 6, vyznačující se tím, že je použito rozpouštědlo EtOAc, nBuOAc nebo zPrOAc.
8. Způsob výroby podle nároku 7, vyznačující se tím, že je použito rozpouštědlo zPrOAc.
9. Způsob výroby podle nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že diastereomemí obohacení sloučeniny vzorce 7 je d.e. 1-100 % ve prospěch Rp diastereomerů vzorce 7a.

7 7a 7b

Rp-diastereomer Sp-diastereomer
10. Způsob výroby podle nároku 9, vyznačující se tím, že diastereomemí obohacení sloučeniny vzorce 7 je d.e. 1 - 100 % ve prospěch Rp diastereomerů vzorce 7a, s výhodou pak d.e. 60 - 80 % ve prospěch Rp diastereomerů vzorce 7a.
11. Způsob výroby podle nároku 1, vyznačující se tím, že směsné rozpouštědlo je složeno se směsi polárního aprotického nebo nepolárního rozpouštědla Sl, ve kterém je sloučenina vzorce 7 částečné rozpustná, tzn. žeO mg/ml < rozpustnost <10 mg/ml a polárního aprotické rozpouštědla S2, ve kterém je sloučenina vzorce 7 dobře rozpustná, tzn. že 10 > x mg / ml.
12. Způsob výroby podle nároku 11, vyznačující se tím, že rozpouštědlo Sl je polární aprotické volené ze skupiny esterů karboxylových kyselin, kterými jsou MeOAc, EtOAc, nPrOAc, zPrOAc, nBuOAc a dalších, nebo nepolární rozpouštědlo volené ze skupiny substituovaných i nesubstituováných alifatických nebo aromatických uhlovodíků jako je cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,α-trifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril.
13. Způsob výroby podle nároku 11, vyznačující se tím, že rozpouštědlo S2 je polární aprotické rozpouštědlo volené ze skupiny dimethyl sulfon, acetonitril, propionitrile, 1,3dimethyl-2-imidazolidinon, MY-dimethylpropylen močovina, s výhodou pak sulfolan.
14. Způsob výroby podle nároku 12, vyznačující se tím, že rozpouštědlo Slje zPrOAc.
15. Způsob výroby podle nároku 13, vyznačující se tím, že rozpouštědlo S2 je Sulfolan.
16. Způsob výroby podle nároků 11 až 15, vyznačující se tím, že poměr objemů rozpouštědel S2 ku S1 v rozmezí 0 < 51: S2 <1 s výhodou pak 0,01 < 52:51 <0,20.
17. Způsob výroby podle nároku 1, vyznačující se tím, že směsné rozpouštědlo je složeno ze směsi zPrOAc / sulfolan = 95 / 5 a reakce s SOC1₂ probíhá při 80 °C po dobu 48 hodin.
18. Způsob výroby sloučeniny vzorce la,

Tenofovir Alafenamid (TA) S_p - diastereoisomer

1a vyznačující se tím, že zahrnuje reakci diastereomemě obohacené soli chlorderivátu vzorce

7 se sloučeninou vzorce 6 v polárním aprotickém nebo nepolárním rozpouštědle, nebo jejich směsi

7a

7b

6 la 1b

Sp - diastereoisomer Rp diastereoisomer
19. Způsob výroby podle nároku 18, vyznačující se tím, že sloučenina vzorce 6 se použije ve formě báze nebo ve formě HC1 soli, s výhodou ve formě báze.
20. Způsob výroby podle nároku 18, vyznačující se tím, že polární aprotické rozpouštědlo je voleno z esterů karboxylových kyselin, kterými jsou MeOAc, EtOAc, nPrOAc, zPrOAc, nBuOAc, s výhodou zPrOAc.
21. Způsob výroby podle nároku 18, vyznačující se tím, že nepolární rozpouštědlo je voleno z kategorie substituovaných i nesubstituovaných alifatických nebo aromatických uhlovodíků, jako je cyklohexan, heptan, benzen, toluen, isomery xylenu, mesitylén, α,α,αtrifluortoluen, chlorbenzen, benzonitril.
22. Způsob výroby podle nároků 18 až 21, vyznačující se tím, že reakční teplota je v rozmezí -40 až +20°C, s výhodou pak -20 až 5 °C.
23. Způsob výroby podle nároků 18 až 22, vyznačující se tím, že diastereomerně obohacený intermediát vzorce 7 reaguje se sloučeninou vzorce 6 v molárním poměru v rozmezí 1:1 až 1:5, ve výhodném provedení 1:2 až 1:4.
24. Způsob výroby podle nároků 18 až 23, vyznačující se tím, že diastereomerně obohacený intermediát 7 reaguje se sloučeninami vzorce 6 v přítomnosti báze.
25. Způsob výroby podle nároků 24, vyznačující se tím, že báze je terciární amin.
26. Způsob výroby podle nároků 25, vyznačující se tím, že terciární amin je volen ze skupiny triethylamin-TEA, ethyldiisopropylamin-EDIPA, l,8-Diazabicyklo[5.4.0]undec-7en-DBU, l,5-Diazabicyclo[4.3.0]non-5-en-DBN, s výhodou je zvolen triethylamin-TEA.
27. Způsob výroby podle nároků 24 až 26, vyznačující se tím, že množství báze v poměru k sloučenině vzorce 7jel:lažl:10s výhodou pak 1,0 : 4,0.
28. Způsob výroby podle nároku 18, vyznačující se tím, že se produkt vzorce la izoluje krystalizaci z polárního aprotického rozpouštědla voleného ze skupiny esterů karboxylových kyselin, kterými jsou MeOAc, EtOAc, «PrOAc, zPrOAc, «BuOAc.
29. Způsob výroby podle nároku 28, vyznačující se tím, že je zvoleno rozpouštědlo zPrOAc.