CS202194A3

CS202194A3 - Ochranné zařízení ráfku pro řetězy na pneumatiky, jakož i řetěz na pneumatiky s takovýmto ochranným zařízením ráfku

Info

Publication number: CS202194A3
Application number: CZ942021A
Authority: CS
Inventors: Ellwangen Grimm Anton; Dalkingen Funk Nadine
Original assignee: Rud Ketten Rieger & Dietz Gmbh U. Co. Kg
Priority date: 1992-06-11
Filing date: 1993-06-07
Publication date: 1994-12-15
Also published as: FI980631A7; ES2080710T3; NO950758L; FI951414L; EP0801069A1; GR3019006T3; FI103973B; AP9300537A0; FI982790L; EP0747383A3; DE4345311C1; HUT69374A; GB9508496D0; ATE146180T1; SK278367B6; RU95112522A; EP0644887B1; NO951725L; FI982790A0; SE504220C2

Abstract

Vynález se týká ochranného zařízení (1) ráfku pro řetězy (4) na pneumatiky, řetězu (4) na pneumatiky s takovýmto ochranným zařízením (1) ráfku, jakož i ochranného prvku (20) ráfku pro použití v takovémto ochranném zařízení (1) ráfku. Ochranné zařízení (1) ráfku obsahuje dva navzájem komplementární, tvarovým provázáním vzájemně propojitelné ochranné prvky (20) ráfku, které jsou opatřeny hlavicí ((2) a dříkem (26), rozprostírajícím se od hlavice (22) v podélném směru (24) dříku. Ve spojeném a na řetězu (4) na pneumatiky namontovaném stavu dříky (26) procházejí skrze prvek (10) větve řetězu (4) na pneumatiky. Dříky (26) zabírají do sebe s tvarovým provázáním a jsou navzájem do sebe na dříku zapadnuty, jsou-li spojeny. Tím jsou oba ochranné prvky (20) ráfku jako vzájemně se zajišťující součásti ochranného zařízení (1) ráfku při použití chráněny tímto prvkem (10) větve.

Description

Způsob výroby kyseliny klavulancvé, její její soli Oblast techniky použití a

Vynález se týká způsobu výroby kyseliny klavulancvé, jejího použití a jejích solí, zejména farmaceuticky využitelných solí.

Dosavadní stav techniky

Kyselina klavulanová se obvykle připravuje fermentací mikroorganismu, který tuto kyselinu produkuje. Jde na-, příklad o různé mikroorganismy z čeledi Streptomyces, například kmeny S. clavuligerus NRRL 2585, S. jumoninesis NRRL 5741, S. katsurahamanus IFO 13716 a Streptomyces sp.

P 6621 FERM P2804, tak jak byly popsány například ve zveřejněné japonské patentové přihlášce č. Kokai 80-162993. Výsledné živné prostředí, obvykle vodné prostředí se běžným způsobem čistí a koncentruje, užívá se například filtrace a pak chromatografického čištění, například podle GB 1 508 977 a JP Kokai 80-62993, pak se vodný roztok extrahuje organickým rozpouštědlem, čímž se získá roztok surové kyseliny klavulanové v organickém rozpouštědle.

V GB 1 508 977 mimo jiné popisuje, že soli kyseliny klavulanové je možno připravit tak, že se klavulanátový anion ve zfiltrovaném živném prostředí absorbuje na aniontoměničovou pryskyřici, pak se eluce provádí elektrolytem, výsledný roztok se zbaví solí a nanese na další aniontoměničovou pryskyřici, z níž se eluce opět provádí elektrolytem, výsledný roztok se zbaví solí a rozpouštědlo se odstraní. Tímto způsobem je možno získat přijatelné výtěžky čisté látky, avšak použití pryskyřic znamená značné náklady a mimoto může představovat omezení při provádění postupu ve velkém měřítku. Bylo by tedy žádoucí navrhnout jiný postup bez použití velkého množství pryskyřic.

V britském patentovém spisu č. 1 543 553 je popsán způsob výroby kyseliny klavulanové a jejích solí přes vysrážení klavulanátu lithného. V GB patentovém spisu č.

578 739 se popisují různé soli kyseliny klavulanové s aminy jako látky, vhodné pro farmaceutické použití. EP č.

044 popisuje použití soli kyseliny klavulanové s terc.butylaminem pro přípravu kyseliny klavulanové a sůl je uváděna jako cenný meziprodukt. Uvedená sůl byla popsána v BE 862 211 jako vhodná složka farmaceutických prostředků. PT.94.908 popisuje použití solí kyseliny klavulanové s nižšími trialkylaminy a s dimethylaminem při čištění kyseliny klavulanové, postupuje se tak, že se připraví sůl kyseliny klavulanové s triethylaminem a tato sůl se pak převádí na silyldiester kyseliny klavulanové. EP 887 178A popisuje způsob čistění kyseliny klavulanové, při němž je možno použít organické aminy pro tvorbu solí s aminy, tyto soli jsou meziprodukty v průběhu čištění kyseliny klavulanové z nečistého prostředku.

Kyselinu klavulanovou je možno vyjádřit strukturním vzorcem I

H

co₂h

Podstata vynálezu

Vynález se týká použití soli kyseliny klavulanové s aminem obecného vzorce II

R³ (II) kde

3

R , R a R se volí podle následujících pravidel:

1) r1 znamená případně substituovanou cyklickou skupinu obecného vzorce

R - (CHR⁴) m kde m znamená nulu nebo celé číslo 1 až 5,

R znamená případně substituovaný alifatický uhlovodíkový kruhový systém o 3 až 8 atomech uhlíku, .

R znamena atom vodíku nebo alkyl, dále alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou, alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou nebo skupinu téhož obecného vzorce nebo svrchu,

R a R se volí z týchž skupin jako R nebo znamenají atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkyl,substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou, alkenyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou nebo alkyl nebo alkenyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou, s výjimkou cyklohexylaminu, nebo

3 o

2) R , R a R , stejné nebo různé se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkenyl, dále alkyl nebo alkenyl, substituovaný aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo aíkoxyskupinou nebo alkyl nebo alkenyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou s výjimkou terč.butylaminu, sek.butylaminu, N,N-dimethylethylaminu, 1,2-dimethylpropylaminu, neopentylaminu a 2-amino-3,3,dibethylbutanu a za předpokladu, že v případě, že aminem vzorce II je trimethylamin nebo triethylamin, vytvoří se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II reakcí kyseliny klavulanové nebo jejího labilního derivátu v roztoku v organickém rozpouštědle s aminem vzorce II nebo jeho labilním derivátem a sůl se pak izoluje z organického rozpouštědla jako oddělená fáze nebo v oddělené fázi, nebo

3) R¹ znamená případně substituovanou arylovou skupinu obecného vzorce

kde R⁴ znamená atom vodíku nebo jeden nebo větší počet substituentú a m znamená 0 nebo celé číslo 1 až 5,

3

R a R se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxy skupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou nebo skupiny téhož vzorce jako R¹4 za předpokladu, že v případě, že R je atom vodíku 2 3 a m = 0, pak R a R neznamenají současně methylové skupiny, s výjimkou benzylterc.butylaminu, nebo , 3

4) R a R a popřípadě R znamenají spolu s atomem dusíku zbytek případně substituovaného heterocyklic kého kruhového systému, obsahujícího uvedený dusíko vý atom v kruhu a popřípadě obsahujícího jeden nebo větší počet dalších heteroatomů v kruhu a v případě že R netvoří část kruhového systému, volí se nezávisle ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou, s výjimkou piperidinu, nebo

5) R^ znamená skupinu obecného vzorce

R'

-CH₂CH₂NH

CH₂CH₂4 5 kde R a R nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou a

3

R a R se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou a m znamená 0 nebo celé číslo 1 až 5, nebo β 1 2

6) jeden ze symbolů R a R znamená atom vodíku, nebo oba tyto symboly znamenají atomy vodíku a

R znamena zbytek aminokyseliny, v němž karboxylová skupina může být esterifikována nebo může být ve formě amidu, jako meziproduktu při výrobě kyseliny klavulanové nebo jejích farmaceuticky přijatelných solí a esterů.

Tam, kde jsou uváděny alkylové nebo substituované alkylové skupiny, obsahují tyto skupiny v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku, není-li uvedeno jinak. Vhodnými substituenty na aminoskupinách jsou alkylové skupiny.

Podle pravidla 1) jsou aminy vzorce II s výhodou odlišné od aminu, v němž R¹ znamená cykloalkylovou skupip 3 nu, m = 0 a R i R znamenají cykloalkylové skupiny nebo atomy vodíku nebo C H„ ., kde η = 1 až 7. n 2n+i

Podle pravidla 1) může být cyklická skupina R s výhodou nasycená, přičemž m s výhodou znamená 0. Skupina R může být monocyklická nebo polycyklická, přičemž každý kruh může obsahovat 5, 6, nebo 7 atomů uhlíku v kruhu, včetně atomů, společných dvěma kruhům v kondenzovaných nebo přemostěných kruhových systémech. Cyklická skupina ve významu R je s výhodou nesubstituovaná.

Amin obecného vzorce II může obsahovat dvě nebo větší počet cyklických skupin R¹ nebo kondenzovaný kruhový systém R^ nebo substituovaný kruhový systém R, který například obsahuje jeden nebo větší počet alkylových skupin, například methylových skupin jako substituenty. Symboly R a R jsou s výhodou odlišné od atomu vodíku, jeden z nich nebo oba mohou znamenat alkyl nebo substituovaný alkyl

Příkladem takových aminů mohou být cyklop.entylamin, cykloheptylamin, Ν,N-dimethylcyklohexylamin, dicyklohexylamin, adamantylamin, Ν,N-diethylcyklohexylamin, N-isopropylcyklohexylamin, N-methylcyklohexylamin, cyklopnopylamin, cyklobutylamin, norbornylamin a dehydroabietylamin.

Podle pravidla 2) je amin obecného vzorce II s výhodou odlišný od aminu, v němž R¹ znamená atom vodíku nebo ~ 2 3 skupinu ^kcie η = 1 az 7 a R aR rovněž znamenají atom vodíku nebo skupinu C H„ ., v níž η = 1 až 7.

n 2n+l

Podle pravidla 2) může R¹ znamenat alkyl nebo substituovaný alkyl obecného vzorce

5 6 kde R , R a R nezávisle znamenají alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou.

Vhodným významem pro R⁴, R⁵ a R⁶ je alkyl, a všechny uvedené symboly mohou znamenat alkyl nebo s výhodou dva z nich mohou znamenat ethyl. Příkladem takových aminů mohou být terč.oktylamin, to znamená 2-amino-2,4,4-trimethylpentan a terč.amylamin. Dva ze symbolů R⁴, R⁵nebo R mohou také znamenat alkyl a jeden z nich hydroxyalkyl, příkladem může být l-hydroxy-2-methyl-2-propylamin.

Podle pravidla 2) může také znamenat alkyl o 1 až 20 atomech uhlíku, například alkyl o 8 až 20 atomech uhlíku, dále alkenyl, hydroxyalkyl nebo aminoalkyl vždy o 1 až 20 atomech uhlíku.

Příkladem takových aminů mohou být tri-n-propylamin tri-n-oktylamin, tri-n-butylamin, dimethylamin, isopropylamin, di-n-hexylamin, di-n-butylamin, diethylamin, 2-aminoethanol, Ν,N-diethylethanolamin, Ν,N-dimethylethanolamin, ethanolamin, n-butylamin, n-hexylamin, n-oktadecylamin, N-ethylethanolamin, 1-hydroxyethylamin, diethanolamin, N,N-dimethylethanolamin, N-ethyldiethanolamin, 1,6-diaminohexan, triethanolamin, diisobutylamin, diisopropylamin, 2-methoxyethylamin, hydroxylamin, amoniak, methylamin, ethyl amin, n-propylamin, n-butylamin, n-pentylamin, n-hexylamin, n-heptylamin, n-oktylamin, n-nonylamin, n-decylamin, n-undecylamin, n-dodecylamin, n-prop-2-ylamin, n-but-2-ylamin, n-pent-2-ylamin, n-hex-2-ylamin, n-hept-2-ylamin, n-okt-2-ylamin, n-non-2-ylamin, n-dec-2-ylamin, n-undec-2-ylamin, n-dodec-2-ylamin, n-hex-3-ylamin, n-hept-3-ylamin, n-okt-3-ylamin, n-non-3-ylamin, n-dec-3-ylamin, n-undec-3-ylamin n-dodec-3-ylamin, n-okt-4-ylamin, n-non-4-ylamin, n-dec-4-ylamin, n-undec-4-ylamin, n-dodec-4-ylamin, n-non-5-ylamin n-undec-5-ylamin, n-dodec-5-ylamin a n-oktadecylamin.

Podle pravidla 3) má amin obecného vzorce II s vý2 3 hodou význam, odlišný od aminu, v němž R a R znamenají atomy vodíku nebo skupinu ^_ηΗ_2η+^, v níž η = 1 až 7, benzyl nebo substituovaný benzyl.

Podle pravidla 3) je vhodným významem pro skupiny 4

R alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, jako methyl, dále fenyl, popřípadě substituovaný fenyl, zbytek karboxylóvé nebo sulfonové kyseliny a deriváty těchto skupin, jako estery, na9 příklad alkylestery s alkylovou částí o 1 až 6 atomech uhlíku a amidy, nitroskupiny a atomy halogenu, například , 5 atom bromu. Vhodným významem pro m je 0, 1 nebo 2 a R β 2 3 může znamenat atom vodíku nebo methyl. R a R s výhodou znamenají atomy vodíku nebo jeden z těchto symbolů znamená atom vodíku a druhý aromatickou skupinu ve významu R¹.

Příkladem takových aminů mohou být 1-fenylethylamin, p-toluidin, kyselina p-aminobenzoová, p-bromanilin, ethyl-4-aminobenzát, tj. benzokain, benzylamin, difenylamin, p-methylaminobenzensulfonamid, m-nitroanilin, Ν,N'-dibenzylethylendiamin, tj. benzathin, difenylmethylamin, 4-methylbenzylamin a 4-fenylbutylamin.

Podle pravidla 4) může být kruhový systém aromatickiý nebo alifatický a monocyklický nebo polycyklický. Každý kruh v systému může obsahovat 5' nebo 6 atomů včetně atomů dusíku a atomů, které jsou společné dvěma kruhům. Vhodnými případnými substituenty na kruhu jsou alkylové skupiny, aminoskupiny, substituované aminoskupiny, oxoskupiny a atomy halogenu. V případě, že kruhový systém obsahuje kromě uvedeného atomu dusíku ještě další heteroatomy, jsou vhodnými heteroatomy atomy dusíku a kyslíku.

Příkladem takových aminů mohou být substituované piperidinové a případně substituované piperidinové deriváty, v nichž substituenty se volí ze skupiny alkyl, hydroxyalkyl, atom halogenu, aminoskupina, substituovaná aminoskupina a alkyl, substituovaný aminoskupinou. Specifickými příklady mohou být N-ethylpiperidin, 2,6-dimethylpiperidin, 2-methyl-N-hydroxypropylpiperidin, to znamená cyklomethycan, 4methylpiperazin, l-methyl-4-fenylpiperazin, N-ethylmorfolamin, hexamethylenimin, pyridin, 2-propylpyridin, 3-chlor-2-aminopyridin, morfolamin, 1,5-diazabicyklo/3,3,0/non-5-en, 1,4-diazabicyklo/2,2,2/oktan, pyrrolidon, chinuklidin a xanthinol.

5

Podle pravidla 5) mohou R a R znamenat atomy vodíku nebo může jeden z nich znamenat atom vodíku a druhý alkyl.

Příkladem takových aminů mohou být ethylendiamin, Ν,Ν-diethylethylendiamin, N,N^x-diisopropylethylendiamin a triethylentetramin.

Podle pravidla 6) může být aminokyselinou přírodně se vyskytující aminokyselina. Estery aminokyselin mohou být vytvořeny s alkylovými skupinami nebo substituovanými alkylovými skupinami, jako je benzyl.

Příkladem těchto aminů mohou být arginin, onnithin, histidin, lysin, benzylglycin, kyselina 3-amino-3-methylbutanová, L-ethyllysinát, L-methylhistidinát, methyl-N- -karbobenzyloxy-L-lysinát, methyl-L-fenylalanát, ethylglycylglycinát, ethyl-p-hydroxyfenylglycinát, ethyl-p-hydroxyfenylglycinát, ethylglycinát, ethyl-L-tyrosinát, p-methoxybenzyl-alfa-aminofenylacetát, n-butyl-alfa-aminofenylacetát, methyl arginát, benzylglycin, benzylfenylglycin, 1-nitrobenzylfenylglycin, n-butylfenylglycin, p-methoxybenzylfenylglycin, ethylfenylglycin, p-nitrobenzyl-p-hydroxyfenylglycin, p-nitrobenzylserin, n-butylserin, methylarginin, dimethylglutamát, p-nitrobenzyltyrosinát, p-nitrobenzylglycinát, benzylglycinát, p-nitrobenzyl-alfa-amino-p-hydroxyfenylacetát, p-nitrobenzyl-alfa-aminofenylacetát, ethyl-alfa-amino-p-hydroxyfenylacetát a ethyl-L-tyrosinát.

V případě, že amin obecného vzorce II obsahuje více než jeden atom dusíku, může kyselina klavulanová tvořit soli s jedním nebo větším počtem dusíkových atomů, vzniká například N,N^-diisopropylethylendiamindiklavulanát.

Ze svrchu uvedených aminů jsou výhodnými aminy fenylethylamin, terč.amylamin, terč.oktylamin, l-hydroxy-2-methyl-2-propylamin, cyklopentylamin, cykloheptylamin, 1-adamantanamin, N-ethylpiperidin, bT ,N'-diisopropylethylendiamin a N,N-dimethylcyklohexylamin.

Podstatu vynálezu tvoří rovněž způsob výroby a/nebo čištění kyseliny klavulanové nebo jejích farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů, tento postup spočívá v tom, že se

i) nedostatečně čistá kyselina klavulanová nebo její labilní derivát uvede v roztoku v organickém rozpouštědle do styku s aminem obecného vzorce II nebo jeho labilním derivátem, ii) sůl kyseliny klavulanové s aminem obecného vzorce II, která se tímto způsobem vytvoří se izoluje a iii) vzniklá sůl se převede na kyselinu klavulanovou nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester.

Při provádění způsobu podle vynálezu může být sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II užita k čištění kyseliny klavulanové v průběhu její výroby. Z tohoto důvodu může být tato sůl vytvořena v roztoku kyseliny klavulanové nebo jejího labilního derivátu s obsahem nečistot, sůl může být z roztoku izolována jako oddělená fáze, například jako pevná sraženina, takže zbývající nečistoty zůstávají v roztoku, pak se sůl převádí zpět na kyselinu klavulanovou nebo je možno vytvořit farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester této kyseliny.

Vhodné labilní deriváty kyseliny klavulanové zahrnují soli, například soli s alkalickými kovy, jako klavulanát lithný nebo sodný a také estery, například silylestery. Vhod nými labilními deriváty aminu vzorce II jsou soli, jako fosfalát, boritan, chlorid, chlorečnan, chloristan, bromid, toluensulfonát nebo alkanoáty, jako acetát nebo ethylhexanoát. Ve výhodném provedení se uvádí do styku s kyselinou klavulanovou, která má být čištěna, amin vzorce II jako takový v roztoku v organickém rozpouštědle.

Uvedený postup se s výhodou provádí v organickém rozpouštědle, které je s výhodou v podstatě bezvodé, například obsahuje méně než 6 g, například 0,25 až 0,5 g vody na litr, může však obsahovat určité množství vody jako rozpouštědlo pro kyselinu flavulanovou a pro amin vzorce II Vodu je možno odstranit běžným způsobem, například ostředěním. Voda může být v rozpouštědle rozpuštěná nebo může být přítomna ve formě kapiček jako oddělená fáze.

Roztok kyseliny klavulanové v organickém rozpouštědle je možno získat tak, že se extrahuje okyselený vodný roztok kyseliny klavulanové, například svrchu uvedené fermentační prostředí. V případě, že počátečním zdrojem kyseliny flavulanové je živné prostředí, získané fermentací produkčního mikroorganismu pro kyselinu klavulanovou, tak jak byly tyto mikroorganismy svrchu uvedeny, je možno postupovat tak, že se neextrahuje celé živné prostředí, nýbrž se před extrakcí alespoň z části odstraní z tohoto prostředí pevný podíl, například filtrací. Mimoto může být žádoucí takto získaný vodný roztok kyseliny klavulanové předem koncentrovat, tak, aby byl několikrát koncentrovanější než výchozí živné prostředí a obsahoval 10 až 100, například 10 až 40 nebo 10 až 25 g kyseliny klavulanové v 1 litru koncentrovaného roztoku.

Vhodným postupem pro tuto předběžnou koncentraci je například absorpce kyseliny klavulanové na aniontoměni13 čovou pryskyřici s následnou elucí kyseliny klavulanové vodnm roztokem elektrolytu, například chloridem sodným s případným odstraněním solí. Je také výhodné vodný roztok okyselit, okyselit je možno přímo živné prostředí nebo koncentrovaný vodný roztok před extrakcí rozpouštědlem, například na pH 1 až 3, vhodné rozmezí je pH 1,5 až 2,5. Je také výhodné extrakt organickým rozpouštědlem vysušit nebo zbavit vody před tvorbou soli s aminem vzorce II, například na méně než 6 g vody/litr. Extrakt se s výhodou provádí při teplotě 5 až 15 °C.

Vhodnými organickými rozpouštědly, v nichž je možno kyselinu klavulanovou za účelem jejího čištění uvádět do styku s aminem obecného vzorce II, jsou například uhlovodíková rozpouštědla, jako toluen a hexan, dále ethery, jako tetrahydrofuran, dioxan nebo diethylether, halogenovaná rozpouštědla, jako dichlormethan nebo chloroform, ketony, jako aceton a methylisobutylketon a také estery, jako ethylacetát. Rozpouštědla, obsahující karbonylovou skupinu, například sloučeniny obecného vzorce III p it q

R - C - R (III) kde

R znamená alkyl nebo alkoxyskupinu vždy o 1 až 5 atomech uhlíku a

R znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, mohou být příkladem podskupiny vhodných rozpouštědel, jde například o organické ketony nebo alkanoáty. Použít je možno také směs těchto rozpouštědel.

S výhodou se jako organické rozpouštědlo užije takové rozpouštědlo, které je možno přímo použít k extrakci okyselené vodné směsi, jde například o organické alkylalkanoáty, ketony a některé alifatické alkoholy nebo o směsi těchto rozpouštědel, jako jsou ethylacetát, methylacetát, propylacetát, n-butylacetát, methylethylketon, methylisobutylketon, tetrahydrofuran, butanol a směsi těchto rozpouštědel. Z uvedených látek jsou velmi vhodné methylisobutylketon, methylethylketon a ethylacetát. Vhodné směsi zahrnují například směs methylethylketonu a methylísobutylketonu nebo směs tetrahydrofuranu a methylisobutylketonu. Výhodným rozpouštědlem je ethylacetát.

Vhodným rozpouštědlem pro amin vzorce II může být některé z rozpouštědel, uvedených pro kyselinu klavulanovou nebo pro její extrakci, například aceton, ethylacetát, methylisobutylketon a methylethylketon.

Zvláště výhodné je použití ketonu, například acetonu v systému rozpouštědel vzhledem k tomu, že použití ketonu patrně brání tvorbě soli kyseliny klavulanové s aminem vzorce II ve formě oleje.

Pro přípravu soli kyseliny klavulanové se obvykle užívá ekvivalentní množství aminu vzorce II nebo malý přebytek, vztaženo na 1 mol kyseliny klavulanové. Roztoky kyseliny klavulanové a aminu vzorce II je například možno pomalu mísit za stálého míchání, výsledná směs se ještě určitou dobu míchá po zkončeném přidávání. Reakce mezi kyselinou klavulanovou nebo jejím labilním derivátem a aminem se provádí při teplotě nižší než je teplota místnosti, například 0 až 15, 0 až 10 nebo 0 až 5 °C. Vhodná koncentrace kyseliny klavulanové nebo jejího labilního derivátu v roztoku je alespoň 1,0 g na litr, například 1,0 až 4,0 g na litr. Může být výhodné dále zahustit extrakt v rozpouštědle na vyšší než uvedené koncentrace, například na koncentrace 20 g/litr.

Je také možno postupovat tak, že se amin vzorce II přivádí do proudu roztoku kyseliny klavulanové v rozpouštědle tak, že ke tvorbě soli dochází v tomto proudu, přičemž sůl zůstává v roztoku nebo se tvoří částice kapiček, které zůstávají v roztoku nebo v suspenzi. Amin je možno přivádět jako takový nebo v roztoku, například ve stejném organickém rozpouštědle, v němž je rozpuštěna kyselina klavulanová.

Požadovanou sůl kyseliny klavulanové s aminem obecného vzorce II je pak možno izolovat. Tímto způsobem je možno oddělit uvedenou sůl od většiny nečistot nebo ode všech nečistot. Izolaci je možno uskutečnit běžným způsobem, například odstředěním nebo filtrací.

Je také možno postupovat tak, že se sůl kyseliny klavulanové a aminu vzorce II izoluje z organického rozpouštědla, které je zcela nebo z části nemísitelné s vodou tak, že se toto rozpouštědlo uvede do styku s vodou, takže se sůl, která je v roztoku nebo v suspenzi z organického rozpouštědla extrahuje a vznikne roztok soli ve vodě. Vzhledem k tomu, že soli uvedeného typu jsou ve vodě dobře rozpustné, může být získaný vodný roztok velmi koncentrovaný, například 20 až 30 % hmotnostních.

Tímto způsobem zůstane převážná většina organických nečistot v roztoku v organickém rozpouštědle, kdežto kyselina klavulanová přechází ve formě své soli s aminem vzorce II v poměrně čistém stavu do vodného roztoku. Takto získaný vodný roztok kyseliny klavulanové je možno dále zpra16 covávat běžným způsobem, například různými čisticími postupy, nebo je možno kyselinu klavulanovou převést na farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester, jak bude dále podrobněji popsáno.

Je také možno postupovat tak, že se kyselina klavulanová a amin mísí v roztoku v prvním organickém rozpouš tědle, načež se vytvořená sůl vysráží z roztoku přidáním druhého organického rozpouštědla. Prvním rozpouštědlem je s výhodou organický ester, jako ethylacetát a druhým rozpouštědlem může být halogenované rozpouštědlo, jako chloroform, ether, jako diethylether, uhlovodík, jako toluen, alkohol, například ethanol nebo rozpouštědlo obecného vzor ce III, jako aceton nebo methylisobutylketon.

Některé ze svrchu uvedených solí kyseliny klavulanové jsou nové látky a tvoří rovněž součást podstaty vynálezu. Jde například o soli kyseliny klavulanové s fenylethylaminem, terč.amylaminem, l-hydroxy-2-methyl-2-propylaminem, cyklopentylaminem, cyklohexylaminem, 1-adamantanaminem, N-ethylpiperidinem, N,N-dimethylcyklohexylaminem a N,N^z-diisopropy1ethylendiaminem.

V jednom z možných provedení vynálezu je možno použít sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II ve formě solvátu v acetonu. Uvedené solváty mají v některých případech výhodnější stálost a čistotu ve srovnání s čistou solí kyseliny klavulanové a aminu. Solváty tohoto typu jsou zvláště vhodné také vzhledem k tomu, že je často možné je izolovat jako velmi čisté a stálé krystalické látky.

Solváty solí kyseliny klavulanové a aminu vzorce II s acetonem tvoří rovněž součást podstaty vynálezu. V průběhu izolace a/nebo sušení může být určité množství acetonu ztraceno vzhledem k nedostatečné síle solvatace, množství acetonu v produktu však není kritické.

Solváty uvedeného typu je možno vytvořit tak, že se kyselina klavulanová uvede do styku s aminem vzorce II v přítomnosti acetonu. Obvykle se postupuje tak, že se roztok s obsahem kyseliny klavulanové mísí s alespoň stejným objemem acetonu a aminem vzorce II při srážení soli.

Amin vzorce II je možno rozpustit v acetonu a získaný roztok mísit s roztokem kyseliny klavulanové v organickém rozpouštědle. Vhodné organické rozpouštědlo zahrnuje ethylacetát, tetrahydrofuran, methylethylketon, methylisobutyl-keton a směsi těchto rozpouštědel, výhodným rozpouštědlem je ethylacetát. Je také možno postupovat tak, že se vodný roztok soli kyseliny klavulanové s aminem vzorce II, získaný extrakcí vodou svrchu uvedeným způsobem mísí s acetonem za vzniku solvátu. S výhodou se mísí koncentrovaný vodný roztok soli s přebytkem acetonu za vzniku solvátu.

Překrystalování soli kyseliny klavulanové nebo solvátu s acetonem může být výhodné pro další snížení množství nečistot. Vhodným rozpouštědlem pro toto překrystalování je směs vody a acetonu. Překrystalování je možno uskutečnit obvyklým způsobem, například tak, že se sůl nebo solvát rozpustí ve vodě, přidá se malé množství acetonu, směs se zfiltruje a pak se přidá větší množství acetonu, popřípadě za míchání a/nebo chlazení, čímž se získá překrystalovaný výsledný produkt.

Podstatu vynálezu tvoří rovněž způsob výroby kyseliny klavulanové nebo jejího farmaceuticky přijatelného esteru nebo její farmaceuticky přijatelné soli, který spočívá v tom, že se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II převede na kyselinu klavulanovou nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester.

Farmaceuticky přijatelné soli a estery kyseliny klavulanové, které je možno připravit způsobem podle vynálezu zahrnují sloučeniny, popsané v GB 1 508 977 a 1 508 978.

Zvláště vhodnými solemi, přijatelnými z farmaceutického hlediska jsou soli s alkalickými kovy a s kovy alkalickch zemin, například soli sodné, draselné, vápenaté a hořečnaté. Z těchto solí jsou zvláště výhodné soli sodné a draselné a zejména soli draselné.

Vhodné estery zahrnují sloučeniny, které po rozště pění dávají vznik kyselině klavulanové nebo její soli, jde zejména o štěpení chemickými postupy, jako je hydrogenolýza nebo biologickými metodami.

Sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II je popřípadě ve formě solvátů s acetonem možno převést na kyselinu klavulanovou nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo estery například výměnou iontů v případě volné kyseliny nebo soli nebo esterifikaci.

Výměnu iontů je možno uskutečnit použitím iontoměničových pryskyřic, například tak, že se roztok soli nechá projít vrstvou kationtoměničové pryskyřice v sodné, drasel né nebo vápenaté formě. Vhodnou kationtoměničovou pryskyři cí je například Amberlit IR 120 a podobné materiály.

Výměnu iontů je možno uskutečnit také reakcí s pro tónovaným kationtem aminu a prekursorem soli, může jít o bázi, například uhličitan, hydrogenuhličitan nebo hydroxid farmaceuticky přijatelného alkalického kovu nebo kovu alka lických zemin nebo o sůl organické karboxylové kyseliny s farmaceuticky přijatelným kationtem, například alkalickým kovem nebo kovem alkalických zemin, jde například o sůl alkanové kyseliny obecného vzorce IV

R¹⁰

CO₂H (IV) kde rIO znamená alkylovou skupinu, obsahující například 1 až 20 atomů uhlíku, s výhodou 1 až 8 uhlíkových atomů. Příkladem vhodných solí mohou být acetáty, propionáty nebo ethylhexanoáty, výhodný je 2-ethylhexanoát draselný a 2-ethylhexanoát sodný. Typicky se postupuje tak, že se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II v roztoku uvede do reakce se solí alkalického kovu s kyselinou obecného vzorce IV v roztoku nebo v suspenzi ve vhodném rozpouštědle, například v organickém rozpouštědle, ve vodě nebo ve směsi vody a organického rozpouštědla, například isopropanolu.

Ve výhodném provedení se postupuje tak, že se mísí sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II a sůl prekursorové sloučeniny, načež se nechá krystalizovat vzniklá farmaceuticky přijatelná sůl. Reakci je možno provádět s výhodou při teplotě nižší než teplota místnosti, například 0 až 15 nebo 0 až 10 °C, s výhodou 0 až 0,5 °C. S výhodou se sůl kyseliny klavulanové s aminem vytvoří ve vodném roztoku ne bo může být vysrážená smísením vodného roztoku s přebytkem acetonu.

Esterifikaci je možno uskutečnit některým z následujících postupů:

a) sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II se uve de do reakce se sloučeninou obecného vzorce Q-R¹¹, kde Q znamená snadno odštěpitelnou skupinu a R¹¹znamená organickou skupinu,

b) sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II se uvede do reakce s alkoholem nebo thiolem v přítomnosti kondenzačního činidla, například karbodiimidu, nebo

c) sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II se uve de do reakce s diazosloučeninou.

Uvedené postupy zahrnují i ty postupy, při nichž se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II nejprve pře vede na kyselinu klavulanovou nebo na jinou sůl této kyseliny, která se pak převádí na požadovaný ester. Další podrobnosti esterifikace jsou uvedeny v GB 1 508 977 a 1 508 978, způsob podle vynálezu však dovoluje získat soli a estery kyseliny klavulanové snadnějším způsobem a v čist ší formě.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

V následující tabulce bylo použito téhož postupu, při němž byl amin míšen s kyselinou klavulanovou v tetrahydrof uranovém roztoku, pevná sůl byla získána rychlou krystalizací.

amin

D-(+)-alfa-fenylethylamin terč.oktylamin

1-hydroxy-2-methy1-2-propylamin cyklopentylamin cyklopentylamin

1-adamentanamin

N-ethylpiperidin

N,N-dimethylcyklohexylamin amoniak xanthinol triethyleňtetramín p-methoxybenzyl-alfa-aminofenylacetát forma soli krystalická pevná látka krystalická pevná látka krystalická sůl krystalická sůl krystalická sůl krystalická sůl krystalická sůl krystalická sůl krystalická sůl bílá pevná látka stálost soli stálá ; 70h, 20°C , 50% RH stálá >70 h, 20 °C, 50% RH

50% RH, 20 °C, tmavne po 72 h

50% RH, 20 °C, stálá 3 70 h.

50% RH, 20°C, tmavne po_z’70 h.

50% RH, 20 °C, stálá ? 90 h.

>70 h, 50% RH malé odbarvení hydroskopická bleděžlutá pevná látka obtížné stanovení pevná sůl bílá po 16 h.

suché atm., tep. místnosti, žlutá po 16 h., 50% RH, tep.místnosti amin forma soli stálost soli n-butyl-alfa- pevná sůl žlutá po 16 h.

-aminofenylacetát suché atm., tep.

místnosti, oranžová po 16 h.,

50% RH, tep.míst.

methylarginát pevná sůl bílá po 16 h.

suché atm., tep.místnosti, oranžová po 16 h., 50% RH, tep.míst.

Příklad 2

Při dále uvedených postupech byla vytvořena sůl klavulanové kyseliny s aminem v roztoku v prvním organickém rozpouštědle a pak byla z roztoku vysrážena ve formě pevné sraženiny přidáním druhého organického rozpouštědla.

2a. Terč.oktylamin

Zásobní roztok kyseliny klavulanové v ethylacetátu byl připraven tak, že obsahoval 28 g kyseliny v nečisté formě na 1 litr, kyselina byla získána extrakcí fermentačního prostředí S. clavuligerus ethylacetátem. Ke 46 ml roztoku bylo přidáno 0,84 g terč.oktylaminu. Po 10 minutách se směs zakalila a začaly se vylučovat jemné krystalky soli. K podílu tohoto roztoku byl přidán chloroform, čímž se vytvořily větší jehličky. K dalšímu podílu byl přidán aceton, čímž se opět vytvořily jehličkovíté krystalky, které však byly menší a tvořily se pomaleji než při použití chloroformu.

Ke zbytku roztoku bylo přidáno přibližně 20 ml chloroformu a pak objem toluenu, přibližně odpovídající celému počátečnímu objemu roztoku, čímž došlo k vysrážení velkého množství jehličkovitých krystalků.

2b. Dicyklohexylamin

Ke 46 ml zásobního roztoku z příkladu 2a bylo přidáno 1,18 g dicyklohexylaminu. Vytvořil se čirý roztok. K podílu tohoto roztoku byl přidán aceton, čímž vznikla jemná amorfní sraženina.

2c. Amoniak

K 500 ml zásobního roztoku z příkladu 2a byl přidán amoniak (21,1 ml, 2,5 M roztoku 2-ethylhexanoátu amonného v ethylacetátu, to znamená přibližně 1 ekvivalent). Pak bylo přidáno ještě 50 ml technického methylovaného ethanolu (IMS), čímž došlo téměř okamžitě k vysrážení jemných jehliček. V případě, že byl použit nečistý roztok kyseliny klavulanové, což bylo zřejmé ze zbarvení roztoku, zůstala v roztoku podstatná část barevných nečistot. Výtěžek byl 75 %.

2d. N,N-dimethylcyklohexylamin

K 500 ml zásobního roztoku z příkladu 2a bylo přidáno 6,7 ml Ν,Ν-dimethylcyklohexylaminu. Již na začátku přidávání se vytvořil olej. Pak bylo přidáno ještě 150 ml acetonu, čímž došlo k zakalení roztoku. K podílu tohoto zakaleného roztoku byl přidán diethylether, čímž došlo ke krystalizaci. K většině zbývajícího roztoku bylo přidáno 100 ml diethyletheru, čímž došlo k okamžité krystalizaci. Bylo získáno 13,4 g krystalků, které byly odfiltrovány a promyty acetonem.

2e. Terč.oktylamin

K 500 ml zásobního roztoku, připraveného podle příkladu 2a, bylo přidáno 6,7 g terč.oktylaminu. Roztok se stal mírně neprůhledný. Bylo přidáno 20 ml acetonu, čímž došlo k vyčeření roztoku. K podílu roztoku byl pak přidán diethylether, čímž došlo k okamžité krystalizaci. Ke zbývající většině roztoku bylo pak přidáno 55 ml diethyletheru, čímž se vytvořily krystalky. Tyto krystalky byly odfiltrovány a promyty acetonem. Bylo získáno 12,9 g produktu, což znamená výtěžek kyseliny klavulanové z roztoku 77 %.

2f. Benzathin

9,15 g benzathindiacetátu bylo mícháno s 10,15 ml 5N vodného roztoku hydroxidu sodného. Vodný roztok byl extrahován 55 ml ethylacetátu a extrakt byl přidán k 1,0 litru zásobního roztoku kyseliny klavulanové z příkladu 2a. Nejprve se vytvořil olej. Pak bylo přidáno 600 ml acetonu a vytvořily se krystalky (přidáno bylo také 10 ml diethyletheru ve formě zbytku z předběžného pokusu ve zkumavce). Pak bylo přidáno ještě 200 ml methylisobutylketonu a směs byla doplněna acetonem na objem 2 litry. Vytvořené krystalky byly odfiltrovány a promyty acetonem. Bylo získáno 11,5 g produktu, což znamená 59,1% výtěžek kyseliny klavulanové.

Příklad 3

Roztok kyseliny klavulanové v ethylacetátu s obsahem přibližně 20 mikrogramů uvedené látky v 1 ml byl zředěn stejným objemem acetonu. Pak byl v průběhu půl hodiny při teplotě 10 °C přidán ještě roztok 1,25 molárního ekvivalentu terč.oktylaminu v acetonu. Směs byla míchána ještě 1 hodinu, vysrážené krystalky byly odděleny, promyty acetonem a sušeny ve vakuu.

Poměrně rychle se vytvořila bílá sraženina. Celkový výtěžek s opravou na čistotu byl 76 %.

Příklad 4

0,012 M roztok benzylklavulanátu v THF byl katalyticky hydrogenován za vzniku roztoku kyseliny klavulanové v THF. Ke 100 ml tohoto roztoku bylo přidáno 25 ml, 0,012M roztoku 1-aminoadamantanu v THF při teplotě místnosti. Došl k rychlé krystalizaci. Roztok byl míchán 30 minut při teplo tě místnosti a pak 2 hodiny při teplotě 5 °C. Pak byl roztok zfiltrován a krystalky byly promyty a usušeny. Výtěžek byl 83 %, teplota tání soli byla 190 až 192 °C za rozkladu.

Příklad 5

Benzylklavulanát, čištěný chromatografií na Sephadexu byl v množství 20 g, 0,07 molu rozpuštěn ve 400 ml tetrahydrofuranu, destilovaného v přítomnosti hydridu vápníku a bylo přidáno 5,7 g 10% paladia na aktivním uhlí jako katalyzátor. Směs byla hydrogenována za míchání při teplotě místnosti a tlaku přibližně 0,1 MPa po dobu 20 až 30 minut. Stav reakce byl stanoven chromatografií na tenké vrstvě oxidu křemičitého při použití ethylacetátu, k vizualizaci byl použit trifenyltetrazoliumchlorid ve formě postřiku. Kyselina klavulanová má Rf 0,0, její benzylester 0,4.

Reakční směs byla zfiltrována a filtrační vrstva dobře promyta. Bylo získáno přibližně 500 ml filtrátu s obsahem kyseliny flavulanové, k filtrátu bylo za míchání přidáno 9,0 g, 0,07 molu 2-amino-2,4,4-trimethylpentanu v 50 ml bezvodého tetrahydrofuranu. V průběhu 1 minuty došlo ke krystalizací. Směs byla míchána ještě 0,5 hodiny při teplotě místnosti a pak 2 hodiny při teplotě 5 °C. Produkt byl odfiltrován, promyt 100 ml bezvodého tetrahydrofuranu a sušen 12 hodin ve vakuu, ve výtěžku 100 % bylo získáno 23,0 g výsledné soli s teplotou tání 160 a 170 °C za rozkladu.

Příklad 6

Postup byl prováděn obdobným způsobem jako v příkladu 5 při použití 0,9 g, 0,003 molu benzylklavulanátu, výsledný roztok kyseliny klavulanové byl zpracováván působením 0,22 g, 0,003 molu 2-amino-2-methylpropanu v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Ve výtěžku 73 % bylo získáno 0,6 g výsledné soli s teplotou tání 150 až 152 °C za rozkladu.

Příklad 7

Postup byl prováděn obdobným způsobem jako v příkladu 5 při použití 0,9 g, 0,003 molu benzylklavulanátu, výsledný roztok kyseliny klavulanové byl zpracován přidáním D(+) 1-methylbenzylaminu v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Směs byla uložena 2 dny při teplotě 5 °C, v průběhu této doby došlo k pomalé krystalizací. Po filtraci bylo ve výtěžku 62 % získáno 0,6 g výsledné soli s teplotou tání 125 °C za rozkladu.

27Příklad 8

Vodný roztok klavulanátu lithného se smísí s vodným roztokem alkylamoniumfosfátu. Vysrážený fosfát lithný se odfiltruje a sůl kyseliny klavulanové s aminem se vysráží přidáním acetonu. Bylo zjištěno, že je možno použít také klavulanát sodný, v tomto případě však bylo zapotřebí přidat ještě ethanol, aby došlo k vyloučení fosforečnanu sodného. Použít je možno také hydrochloridy aminu.

Uvedeným způsobem byl klavulanát lithný použit pro výrobu N-ethylpiperidinklavulanátu a klavulanát sodný byl použit pro výrobu N-ethylpiperidinklavulanátu.

Příklad 9

Nečistý roztok kyseliny klavulanové, surový extrakt fermentačního prostředí S. clavuligerus po předčištění na iontoměniči (500 ml, 21 mikrogramů/ml v ethylacetátu) byl smísen se 150 ml acetonu, načež byl postupně přidáván roztok 6,7 ml Ν,Ν-dimethylcyklohexylaminu ve 25 ml acetonu. Podíl roztoku byl oddělen a byl k němu přidán diethylether, Čímž došlo k okamžité krystalizací. K hlavnímu podílu byl přidán očkovací materiál, čímž došlo k rychlé krystalizací bílých destičkovitých krystalků, jejichž množství se ještě zvýšilo po přidání 110 ml etheru. Sůl kyseliny klavulanové s aminem byla odfiltrována, promyta 3 x 100 ml acetonu a usušena na vzduchu. Ve výtěžku 82 % bylo získáno 13,4 g soli,

64,9 % pfa (teoretická hodnota 61,0 %).

Příklad 10

Κ 500 ml nečistého roztoku kyseliny klavulanové s obsahem 21 mikrogramů/ml, tak jak byl užit v příkladu 9, mimoto obsahujícímu 20 ml acetonu bylo přidáno 7,6 g terc.oktylaminu, čímž došlo ke tvorbě mírného zákalu. Po přidání 55 ml diethyletheru došlo k vyloučení soli s aminem ve formě jemných jehličkovitých krystalků, které byly odfiltrovány a promyty acetonem. Ve výtěžku 77,2 % bylo získáno 12,9 g soli, 62,8 % pfa (teoretická hodnota 60,6 %) .

Příklad 11 litr nečistého roztoku kyseliny klavulanové, obsahujícího 10,14 mikrogramů/ml v ethylacetátu, získaného extrakcí fermentačního prostředí S, clavuligerus ethylacetátem a předčištěním na iontoměniči byl smísen se 600 ml acetonu, načež bylo přidáno 5,15 g benzathinu v 55 ml ethylacetátu. Jakmile bylo přidávání benzathinu téměř ukončeno, počaly se vytvářet krystalky. Pak bylo přidáno ještě 200 ml methylisobutylketonu k dovršení krystalizace. Krystalky byly odfiltrovány a promyty 3 x 100 ml acetonu. Ve výtěžku 67,0 % bylo získáno 11,5 g soli.

Příklad 12

Byl opakován způsob podle příkladu 11 při použití roztoku kyseliny klavulanové v ethylacetátu s nedostatečnou čistotou a s obsahem přibližně 1 % vody. K podílům tohoto roztoku s objemem 1 litru byl za míchání přidán přebytek ethylendiaminu, N,N-diethylethylendiaminu nebo N,N*-diisopropylethylendiaminu, přičemž množství každého aminu bylo v přebytku ve srovnání s množstvím, jehož bylo zapotřebí k vytvoření diaminové soli s kyselinou klavulanovou. Po určité době míchání se vysrážela sůl. Další podíl krystalků byl získán přidáním přebytku acetonu. Vysrážené soli byly odfiltrovány a promyty acetonem.

Krystalky každé z uvedených solí byly převedeny na klavulanát draselný rozpuštěním soli v co nejmenším množství vody s následným přidáním roztoku přebytku 2-ethylhexanoátu draselného v isopropylalkoholu. Po určité době míchání se vytvořila sraženina klavulanátu draselného, která byla odfiltrována, promyta isopropylalkoholem a usušena.

Příklad 13

Roztok 0,0046 molu kyseliny klavulanové ve 30 ml tetrahydrofuranu se zpracovává působením 1,0 ml 25% roztoku trimethylaminu v methanolu, přibližně 0,0042 molu, čímž vznikne žlutý roztok. Krystalizace se vyvolá naočkováním a stáním při teplotě místnosti. Krystalizace je rychlá, vznikají jemné jehličkovité krystalky, krystalizace je ukončena stáním přes noc při teplotě +4 °C. Produkt se odfiltruje, promyje se malým objemem přibližně 5 ml čerstvého rozpouštědla a suší ve vakuu. Ve výtěžku 75 % se získá 0,9 g produktu s teplotou tání vyšší než 310 °C, produkt pomalu hnědne nad uvedenou teplotou.

Analýza B 24641 pro ^ci],^Hi8^N2⁰5 vypočteno C 51,16, H 7,02, N 10,84 % nalezeno C 51,32, H 7,15, N 10,68 %

Analýza A 15230 : imidazol 77,2, 76,4 % (vypočteno 77,1 %, čistota přibližně 99,5 %) voda 1,18, 1,34 %.

Výsledná látka ve formě krémových jemných jehliček přijímá při stání na vzduchu v průběhu několika dnů vodu a pomalu se rozkládá a žloutne.

Příklad 14

Byly připraveny dva vzorky svrchu uvedené sloučeniny, pro každý z nich byl získán odlišný výsledek. V prvním případě byl získán středně vysoký výtěžek produktu s obsahem vody, který odpovídá obsahu vody v hemihydrátu, ve druhém případě byl v nízkém výtěžku získán bezvodý produkt.

14A Roztok 0,00346 molu kyseliny klavulanové ve 25 ml tetrahydrofuranu byl zpracováván přidáním 0,4 g, 0,00346 molu triethylaminu, smísením vznikl homogenní čirý roztok. Krystalizace byla vyvolána naočkováním a ukončena stáním přes noc při teplotě +4 °C. Produkt byl odfiltrován a usušen ve vakuu. Ve výtěžku 63 % bylo získáno 0,7 g velkých špinavebílých jehliček.

Analýza B 24639 pro ^C]_4^H24^N2°5 vypočteno C 56,05, H 8,00, N 9,33 % nalezeno C 54,74, H 7,95, N 8,94 % pro C₁₄H₂₄N₂0₅ . 1/2 H₂0 vypočteno C 56,36, H 8,14, N 9,05 %.

Analýza A 15220: imidazol 61,0, 61,1 % (vypočteno 64,4 %, čistota přibližně 95,0 %) voda 2,64 % (prohemihydrát vypočteno 12,91 %)

14B. Roztok 0,021 molu kyseliny klavulanové v 60 ml tetrahydrofuranu se zpracovává přidáním 2,1 g, 0,021 molu triethylaminu, smísením vznikne čirý roztok, který se naočkuje krystalky výsledné soli. Produkt počne krystalizovat při teplotě místnosti ve formě dlouhých jehliček, krystalizace je ukončena přes noc při teplotě +4 °C. Produkt se oddělí filtrací, na filtru se promyje přibližně 10 ml čerstvého rozpouštědla a 20 ml diethyletheru a pak se suší ve vakuu, čímž se ve výtěžku 27 % získá 1,7 g produktu ve formě špinavě bílých krystalků.

Analýza B 24676 pro ^ci4^H24^N2°5 vypočteno C 56,05, H 8,00, N 9,33 % nalezeno C 56,07, H 7,83, N 9,32 % vypočteno pro ^C]_4^H24^N2°5 ‘ ^{1,/2 H}2^{0: C 54}«³⁶> ^H 8,14, N 9,05 %

Analýza A 15268: imidazol 65,1, 65,1 % (vypočteno 66,3 %, čistota přibližně 98,2 %) voda 0,9 % /alfa/p⁴ = +47,0° (c = 0,2 % ve vodě).

Stejně jako sůl s trimethylaminem se tento produkt stáním na vzduchu v průběhu několika dnů rozkládá.

Uvedené dva příklady ilustrují tvorbu vysoce čistých solí kyseliny klavulanové z roztoků této kyseliny v organických rozpouštědlech.

Příklad 15

Oddělené vzorky trimethylaminklavulanátu a triethylaminklavulanátu z příkladů 13 a 14 se rozpustí v co nejmenším množství chladné vody. K roztokům se přidá koncentrovaný roztok 2-ethylhexanátu draselného v isopropanolu za míchání. Po delší době míchání se krystalky klavulanátu draselného vyloučí a mohou být odfiltrovány, promyty chladným isopropanolem a usušeny.

Příklad 16

Nečistý vodný roztok kyseliny klavulanové, získané z fermentačního prostředí S. clavuligerus předčištěním na iontoměniči, tak jak bylo svrchu obecně uvedeno a obsahující 17,1 g kyseliny na 1 litr byl okyselen na pH 2,0 kyselinou sírovou s koncentrací 25 % objemových a pak byl kontinuálně extrahován ethylacetátem. Ethylacetátový extrakt byl zchlazen na 2 °C, voda byla odstraněna odstředěním a pak vysušením síranem hořečnatým, načež byl extrakt zfiltrován na sloupci uhlíku CPG. V tomto stupni obsahoval ethylacetátový extrakt 6,02 g/litr kyseliny klavulanové a byl pak koncentrován odpařením na obsah 25,7 g/litr kyseliny klavulanové a při této koncentraci byl použit. Obsah vody v koncentrátu byl přibližně 0,26 % objemových.

7,8 ml terč.oktylaminu se smísí s 25 ml čerstvého ethylacetátu. Směs se pomalu přidá ke 2 litrům ethylacetátového extraktu s vyšším obsahem klavulanátu a pak se roztok zředí na obsah 23,0 g/litr čerstvým ethylacetátem za rychlého míchání. Suspenze se míchá ještě další hodinu při teplotě 5 °C. Terč.oktylaminklavulanát se pak oddělí filtrací a promyje se ethylacetátem. Sušení se provádí přes noc ve vakuu při teplotě 20 °C pod dusíkem. Získá se celkem 6,13 g produktu.

Příklad 17 g soli s aminem, získané v příkladu 16 bylo rozpuštěno v 97 ml isopropanolu. Vzhledem k tomu, že se produkt okamžitě nerozpustil, bylo nutno směs zahřát na 24 °C, aby došlo k úplnému rozpuštění. Pak bylo v průběhu 10 minut přidáno 14 ml, 1,5N roztoku 2-ethylhexanoátu draselného v isopropanolu. Suspenze byla míchána 1,5 hodin při teplotě 5 °C. Výsledný produkt, klavulanát draselný byl pak odfil33 trován, promyt malým množstvím isopropanolu a pak acetonu a byl sušen pres noc ve vakuu při teplotě 20 °C pod dusíkem Bylo získáno celkem 3,16 g produktu.

Příklad 18

Zfiltrované živné prostředí (RVF) po fermentaci S. clavuligerus, obsahující 2 g/litr kyseliny klavulanové bylo okyseleno na pH 1,6 přidáním kyseliny sírové s koncentrací 25 % objemových a pak byla směs kontinuálně extrahována ethylacetátem. Extrakt byl zchlazen na teplotu 3 °C a pak byl zbaven vody odstředěním a vysušením síranem hořec natým, načež se roztok nechal projít sloupcem uhlíku CPG. Takto zpracovaný extrakt byl pak zahuštěn odpařením na obsah kyseliny klavulanové přibližně 20 g/litr, obsah vody byl přibližně 0,06 % objemových.

13,5 ml terč.oktylaminu bylo smíseno se 43 ml čerstvého ethylacetátu. Směs byla pomalu přidána ke 400 ml ethylacetátového extraktu s vysokým obsahem kyseliny klavulanové 20 g/litr za rychlého míchání. Suspenze byla míchána ještě další hodinu při teplotě 5 °C. Pak byl terc.oktylaminklavulanát oddělen filtrací a promyt ethylacetátem. Konečné sušení bylo uskutečněno přes noc ve vakuu při teplotě 20 °C v dusíkové atmosféře. Tímto způsobem bylo získáno 12,44 g produktu.

Příklad 19 g soli s aminem, získané způsobem podle příkladu 18 bylo rozpuštěno ve 213 ml isopropanolu. Vzhledem kl tomu, že se produkt okamžitě nerozpustil, byla směs mírně zahřáta na 24 °C. Mimoto bylo pro snadnější rozpuštění přidáno 3,75 ml vody. Jakmile byl získán čirý roztok, bylo přidáno ještě 100 ml isopropanolu ke snížení obsahu vody před krystalizací. Pak bylo v průběhu 15 minut přidáno 30 ml 1,5 N roztoku 2-ethylhexanoátu draselného v isopropanolu. Vzniklá suspenze byla míchána 1,5 hodiny při teplotě 5 °C. Výsledný klavulanát draselný byl odfiltrován, promyt malým množstvím isopropanolu a pak acetonu a sušen přes noc ve vakuu pod dusíkem při teplotě 20 °C. Bylo získáno 7,29 g produktu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1 p ječen ze symbolů R a R znamená atom vodíku, nebo oba tyto symboly znamenají atomy vodíku a

R znamená zbytek aminokyseliny, v němž karboxvlová skupina může být esterif ikcvár.a nebe může být ve formě amidu, jako meziproduktu při výrobě kyseliny klavulanové nebo jejích farmaceuticky přijatelných solí a esterů.

1) r1 znamená případně substituovanou cyklickou skupinu obecného vzorce

R - (CHR⁴) m kde m znamená nulu nebo celé číslo 1 až 5,

R znamená případně substituovaný alifatický uhlovodíkový kruhový systém o 3 až 8 atomech uhlíku,

R znamená atom vodíku nebo alkyl, dále alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou, alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou nebo skupinu téhož obecného vzorce nebo R^ svrchu,

1. Použití soli kyseliny klavulanové s aminem obecného vzorce II kde

2 3 odlišný od aminu, v němž R a R znamenají atomy vodíku nebo skupinu C_n ^H2n+l’ ^v níž η = 1 až 7, benzyl nebo substituovaný benzyl.

2.Použití podle nároku 1, vyznačuj íc í se t í m , že se užije amin vzorce II podle pravidla 1, odlišný od aminu, v němž R^ znamená cykloalkylovou skupinu, 2 3 m = 0 a R a R znamenají cykloalkyl, atom vodíku nebo skupinu C H_o ., v níž η = 1 až 7.

n 2n+l

2 3

R a R se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou a m znamená 0 nebo celé číslo 1 až 5, nebo

2 3

R a R se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxy skupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou nebo skupiny téhož vzorce jako R^ za předpokladu, že v případě, že R je atom vodíku 2 3 a m = 0, pak R a R neznamenají současně methylové skupiny, s výjimkou benzyl~ero.butyla.minu, nebe

2) R , R a R , stejné nebo různé se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkenyl, dále alkyl nebo alkenyl, substituovaný aminoskupinou, hydrcxyskupinou nebo alkoxyskupinou nebo alkyl nebo alkenyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou s výjimkou terč.butylaminu, sek.butylaminu, N,N-dimethylethylaminu, 1,2-čimethylpropylaminu, neopentylaminu a 2-amino-3,3,dibethylbutanu a za předpokladu, že v případě, že aminem vzorce II je trimethylamin nebo triethylamin, vytvoří se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II reakcí kyseliny klavulanové nebo jejího labilního derivátu v roztoku v organickém rozpouštědle s aminem vzorce II nebo jeho labilním derivátem a sůl se pak izoluje z organického rozpouštědla jako oddělená fáze nebo v oddělené fázi, nebo

3. Použití podle nároku 2, vyznačuj íc í se t í m , že amin vzorce II obsahuje dvě nebo větší počet cyklických skupin R¹ nebo kondenzovaný kruhový systém R¹2 3 nebo substituovaný kruhový systém R, nebo mají R a R význam, odlišný od atomu vodíku.

3) R^ znamená případně substituovanou arylovou skupinu obecného vzorce kde R⁴ znamená atom vodíku nebo jeden nebo větší počet substituentů a m znamená 0 nebo celé číslo 1 až 5,

4 5 6 kde R , R a R nezávisle znamenají alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku, aminoalkyl, hydroxyalkyl nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou.

4. Použití podle nároku 2 nebo 3, vyznačující se tím, že se jako amin vzorce II užije cyklopentylamin, cykloheptylamin, Ν,Ν-dimethylcyklohexylamin, dicyklohexylamin, adamantylamin, N,N-diethylcyklohexylamin, N-isopropylcyklohexylamin, N-methylcyklohexylamin, cyklopropylamin, cyklobutylamin, norbornylamin a dehydroabietylamin.

4 5 kde R a R nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou a

4) R a R a popřípadě R znamenají spolu s atomem dusíku zbytek případně substituovaného heterocyklického kruhového systému, obsahujícího uvedený dusíkový atom v kruhu a popřípadě obsahujícího jeden nebo větší počet dalších heteroatomů v kruhu a v případě, „ 3 ze R netvoři cast kruhového systému, volí se nezávisle ze skupiny atom vodíku, alkyl, alkyl, substituovaný aminoskupinou nebo hydroxyskupinou nebo alkyl, substituovaný substituovanou aminoskupinou, s výjimkou piperidinu, nebo

5. Použití podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se užije amin vzorce II podle pravidla 2, odlišný od aminu, v němž R^ znamená atom vodíku nebo skupi2 3 nu C_nHg_n+1» ^v niž n=laž7aR aR znamenají atom vodíku nebo skupinu C ,, v nichž η = 1 až 7.

n 2n+i

5) r! znamená skupinu obecného vzorce

N<

CH₂CH₂NH

CH₂CH₂

6. Použití podle nároku 5, vyznačuj ící se t í m , že v aminu vzorce II R¹ znamená alkyl nebo substituovaný alkyl obecného vzorce

6)

7. Použití podle nároku 6, vyznačuj íc i se t í m , že se amin II volí ze skupiny tri-n-propylamin, tri-n-oktylamin, tri-n-butylamin, dimethylamin, isoprocylamin, di-n-hexylamin, di-n-butylamin, diethylamin, 2-aminoethanol, N,N-diethylethanolamin, Ν,Ν-dimethylethanolamin, ethanolamin, n-butylamin, n-hexylamin, n-oktadecylamin, N-ethylethanolamin, 1-hydroxyethylamin, diethanolamin, N,N-dimethylethanolaroin, N-ethyldiethanolamin, 1,6-diaminohexan, triethanolamin, diisobutylamin, diisopropylamin, 2-methoxyethylamin, hydroxylamin, amoniak, methylamin, ethylamin, n-propylamin, n-butylamin, n-pentylamin, n-hexylamin, n-heptylamin, n-oktylamin, n-nonylamin, n-decylamin, n-undecylamin, n-dodecylamin, n-prop-2-ylamin, n-but-2-ylamin, n-pent-2-ylamin, n-hex-2-ylamin, n-hept-2-ylamin, n-okt-2-ylamin, n-non-2-ylamin, n-dec-2yylamin, n-undec-2-ylamin, n-dodec-2-ylamin, n-hex-3-ylamin, n-hept-3-ylamin, n-okt-3-ylamin, n-non-3-ylamin, n-dec-3-ylamin, n-undec-3-ylamin, n-dodec-3-ylamin, n-okt-4-ylamin, n-non-4-ylamin, n-dec-4-ylamin, n-undec-4-ylamin, n-dodec-4-ylamin, n-non-5-ylamin, n-undec-5-ylamin, n-dodec-5-ylamin a n-oktadecylamin.

8. Použití podle nároku 1, vyznačuj íc í se tím, že se užije amin vzorce II podle pravidla 3,

9. Použití podle nároku 8, vyznačuj íc í se tím, že se amin II volí ze skupiny 1-fenylethylamin, p-toluidin, kyselina p-aminobenzoová, p-bromanilin, ethyl-4-aminobenzát, tj. benzokain, benzylamin, difenylamin, p-methylaminobenzensulfonamid, m-nitroanilin, N,N -dibenzylethylendiamin, tj. benzathin, difenylmethylamin, 4-methylbenzylamin a 4-fenylbutylamin.

10. Použití podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se užije amin vzorce II podle pravidla 4, který se volí ze substituovaných piperidinů a případně substituovaných piperidinů.

11. Použití podle nároku 10, vyznačuj íc í se t £ m , že se amin obecného vzorce II volí ze skupiny aminů N-ethylpiperidin, 2,6-dimethylpiperidin, 2-methyl-N-hydroxypropylpiperidin, to znamená cyklomethycan, 4methylpiperazin, l-methyl-4-fenylpiperazin, N-ethylmorfolamin, hexamethylenimin, pyridin, 2-propylpyridin, 3-chlor-2-aminopyridin, morfolamin, 1,5-diazabicyklo/3,3,0/non-5-en, l,4-diazabicyklo/2,2,2/oktan, pyrrolidon, chinuklidin a xanthinol.

12. Použití podle nároku 1, vyznačuj ιοί se tím, že se užije amin vzorce II podle pravidla 5 ze skupiny ethylendiamin, N ,ΓΪ-diethylethylendiamin, Ν,Ν'-diisopropylethylendiamin a triethylentetramin.

12 3

12 3 β

12 3

R , R a R se volí podle následujících pravidel:

13. Použití podle nároku 1, vyznačuj íc i se t í m , že se jako amin užije arginin, ornithin, histidin, lysin, benzylglycin, kyselina 3-amino-3-methylbutanová, L-ethyllysinát, L-methylhistidinát, methyl-M- -karbobenzyloxy-L-lysinát, methyl-L-fenylalanát, ethylglycylglycinát, ethyl-p-hydnoxyfenylglycinát, ethyl-p-hydroxyfenylglycinát, ethylglycinát, ethyl-L-tyrosinát, p-methoxybenzyl-alfa-aminofenylacetát, n-butyl-alfa-aminofenylacetát, methyl arginát, benzylglycin, benzylfenylglycin, 1-nitrobenzylfenylglycin, n-butylfenylglycin, p-methoxybenzylfenylglycin, ethylfenylglycin, p-nitrobenzyl-p-hydroxyfenylglycin, p-nitrobenzylserin, n-butylserin, methylarginin, dimethylglutamát, p-nitrobenzyltynosinát, p-nitrobenzylglycinát, benzylglycinát, p-nitrobenzyl-alf a-amino-p-hydroxyfenylacetát,' p-nitrobenzyl-alfa-aminofenylacetát, ethyl-alfa-amino-p-hydroxyfenylacetát a ethyl-L-tyrosinát.

14. Použití podle nároku 1,vyznačuj ící se t í m , že se amin vzorce II volí ze skupiny fenylethylamin, terč.amylamin, terč.oktylamin, l-hydroxy-2-methyl-2-propylamin, cyklopentylamin, cykloheptylamin, 1-adamantanamin, N-ethylpiperidin, N*,N^-diisopropylethylendiamin a N,N-dimethylcyklohexylamin.

15. Způsob výroby a/nebo čištění kyseliny klavulanové nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo farmaceuticky přijatelného esteru, vyznačující se t i ra , že se

i) nedostatečně čistá kyselina klavulanová nebo její labilní derivát uvede v roztoku v organickém rozpouštědle do styku s aminem obecného vzorce II neb: jeho labilním derivátem, ii) sůl kyseliny klavulanové s aminem obecného vzorce II, která se tímto způsobem vytvoří se izoluje a iii) vzniklá sůl se převede na kyselinu klavulanovou nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester

16. Sůl kyseliny klavulanové s fenylethylaminem, terč.amylaminem, l-hydroxy-2-methyl-2-propylaminem, cyklopentylaminem, cyklohexylaminem, 1-admantanaminem, N-ethylpiperidinem, Ν,Ν-dimethylcyklohexylaminem nebo N,N^z-diisopropylethylendiaminem.

17. Sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II podle nároku 16 ve formě solvátu s acetonem.

18. Způsob výroby kyseliny klavulanové nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo farmaceuticky přijatelného esteru, vyznačující se tím, že se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II převede na kyselinu klavulanovou nebo na farmaceuticky přijatelné soli nebo estery.

19. Způsob podle nároku 18, vyznačuj ίο í se tím, že se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II převádí na farmaceuticky přijatelnou sůl s alkalickm kovem nebo kovem alkalických zemin.

20. Způsob podle nároku 19, vyzná, čující se tím, že se sůl kyseliny klavulanové s aminem vzorce II převádí na klavulanát draselný.

21. Způsob podle nároku 19 nebo 20, vyznačující se tím,'že se farmaceuticky přijatelná sůl vytvoří reakcí protonovaného kationtu aminu s prekursorovou sloučeninou pro sůl.

22. Způsob podle nároku 21, vyznačuj íc i se t í m , že prekursorovou sloučeninou je sůl organické karboxylové kyseliny s farmaceuticky přijatelným kationtem, například kationtem alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin, například soli alkanové kyseliny obecného vzorce IV

R¹⁰ - CO₂H (IV) kde R¹⁰ znamená alkyl o 1 až 20 atomech uhlíku.

23. Způsob podle nároku 22, vyznačuj íc í se t í m , že se sloučenina obecného vzorce IV volí z 2-ethylhexanoátu draselného nebo sodného.