TR201802537T4 - HCV'nin tedavi edilmesine yönelik yöntemler. - Google Patents

HCV'nin tedavi edilmesine yönelik yöntemler. Download PDF

Info

Publication number
TR201802537T4
TR201802537T4 TR2018/02537T TR201802537T TR201802537T4 TR 201802537 T4 TR201802537 T4 TR 201802537T4 TR 2018/02537 T TR2018/02537 T TR 2018/02537T TR 201802537 T TR201802537 T TR 201802537T TR 201802537 T4 TR201802537 T4 TR 201802537T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
compound
hcv
added
mixture
combination
Prior art date
Application number
TR2018/02537T
Other languages
English (en)
Inventor
S Ray Adrian
j watkins William
O Link John
W Oldach David
e iv delaney William
Original Assignee
Gilead Pharmasset Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46970425&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TR201802537(T4) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gilead Pharmasset Llc filed Critical Gilead Pharmasset Llc
Publication of TR201802537T4 publication Critical patent/TR201802537T4/tr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A61K38/212—IFN-alpha
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Treating Waste Gases (AREA)
  • Exhaust Gas After Treatment (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Bu buluş, hepatit C virüs enfeksiyonunun tedavi edilmesine yönelik faydalı terapötik moleküllerin kombinasyonları ile ilgilidir. Mevcut buluş yöntemler, kullanımlar, dozlama rejimleri ve bileşimler ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME HCV'NIN TEDAVI EDILMESINE YÖNELIK YÖNTEMLER BULU SAHASI Bu bulus, hepatit C virüs enfeksiyonunun tedavi edilmesine yönelik terapötik moleküllerin kombinasyonlari ile ilgilidir.
BULUSUN ALT YAPISI Hepatit, dünya çapinda görülen bir hastaliktir. Hepatit genellikle viral niteliktedir, ancak karacigerin kronik bir inflamasyon durumu olarak düsünülmesi halinde baska bilinen, enfeksiyöz olmayan nedenler mevcuttur. Viral hepatit, hepatitin bilinen en yaygin formudur. A.B.D Hastalik Kontrol Merkezleri, A.B.D nüfusunun en az %1.8'inde kronik aktif enfeksiyon ile iliskili vakalarin çogunda, serolojik HCV enfeksiyonu bulgusunun oldugu tahmin etmistir. HCV, Flaviviridae familyasina ait bir pozitif iplikli RNA virüsüdür ve domuz kolerasi virüsü ve bovin viral diyare virüsünü içeren pestivirüsler ile en yakin iliskiye sahiptir.
HCV genomu, olgun viral proteinlerde (çekirdek, E1, E2, p7, N82, N83, NS4A, NS4B, NSSA, NSSB) hücresel ve iki viral proteinazlar ile birlikte ve post-translasyonel olarak bir tek iplikli, pozitif-sens RNAldir. Yapisal proteinlerin, E1 ve E2, bir viral lipid zarfina gömülü oldugu ve stabil heterodimerleri olusturdugu düsünülür. Yapisal çekirdek proteinin, nükleokapsidi olusturmak üzere viral RNA genom ile etkilesime girdigi düsünülür. N82 ila N85 olarak gösterilen yapisal olmayan proteinler, bir polimeraz, proteaz ve helikaz dahil protein isleme ve virüs replikasyonunda bulunan enzimatik fonksiyonlara sahip proteinleri içerir. HCV, bir tamamlayici negatif iplik RNA sablonunun üretimi ile çogalir.
HCV genetik olarak çesitli bir virüstür. Enfekte olan tek bir hastada birçok çesit virüs, nüfusu içerisinde HCV ayrica, tanimlanan en az 6 majör “genotip” (Genotip 1-6) ve çesitli alt türler (diger bir ifadeyle HCV Genotipi 1a ve 1b) olmak üzere genetik olarak çesitlidir. HCV genotipleri, genomik filogenetik analiz araciligiyla tanimlanir ve (belirli bir hastada) HCV RNA dizi-bazli tanisal analizler araciligiyla tani konur.
HCV ile temel enfeksiyon yolu kan maruziyetidir. Bir saglik problemi olarak HCV enfeksiyonunun büyüklügü, yüksek risk gruplari arasinda ki yayginlik ile gösterilir. Örnegin bazi arastirmalarda hemofili hastalarinin %60'i ila %90'ni ve bati ülkelerinde intravenöz ilaç bagimlilarinin %80'ninden fazlari kronik HCV enfeksiyonuna sahiptir. intravenöz ilaç bagimlilari için yayginlik, üzerinde çalisilan nüfusa bagli olarak yaklasik yeni HCV enfeksiyonlarinin orani, farmasötik ilerlemeler ve kan donörlerini taramak üzere kullanilan hassas serolojik ve RNA tespit analizlerinin yaygin kullanimi nedeniyle önemli derecede azaltilmistir, ancak yaslanan, kronolojik olarak enfekte olan insanlarin büyük bir toplulugu daha önceden belirlenmistir.
HCV enfeksiyonuna yönelik mevcut bir tedavi, mevcut tedavi kilavuzlari altinda, tedavi edilen HCV viral genotipine bagli, 24 ila 48 hastalik subkütanöz enjeksiyon ile haftalik sekilde uygulanan pegile interferon-a'dir (PEG-IFN d1a veya PEG-IFN dib). Genotip 1 HCV enfeksiyonu olan hastalarin %50'den daha fazlasinin 48 haftalik terapinin tamamlanmasi ile HCV viremini baskilamasi ön görülebilmesine ragmen bu hastalarin önemli bir orani viral tekrarlamaya sahip olacaktir. Buna uygun olarak bir Sürekli Virolojik Yanit (SVR, tedavinin birakilmasindan 24 hafta sonra HCV RNA negatifligi olarak tanimlanir ve 'iyilestirme' ile esdeger olarak düsünülür), tek basina PEG-IFN ile tedavi edilen Genotip 1 HCV enfeksiyonlarinin sadece %30-40'inda elde edilir. Ek olarak PEG-IFN + RBV ile tedavi, grip benzeri semptomlar, trombositopeni, anemi ve ciddi psikiyatrik yan etkileri içeren olumsuz bir durum profili ile iyi tolere edilmez.
Mevcut standart bakim ile tedavi standart alti iken birçok hasta, psikiyatrik bozukluklar, ileri evreli karaciger hastaligi ve madde bagimliligi dahil olmak üzere, HCV ile enfekte olmus nüfuslarda yaygin olan es zamanli hastaliklar nedeniyle tedaviye baslamaktan kesinlikle uzaktir.
Ribavirin, bir nükleosid analog antiviral ilaçtir. Ribavirin tipik olarak bir günde iki kez oral olarak (agizdan) alinir. Ribavirin için tem mekanizma bilinmez. Ancak ribavirin bir hücreye girdiginde bunun fosforlanmis oldugu; daha sonra bir inozin 5'-monofosfat dehidrojenaz (lMPDH) inhibitörü olarak hareket ettigi düsünülür. Ribavirin gibi lMPDH inhibitörleri, DNA ve RNA üretimi için gerekli olan bir nükleotid “yapi blogu” olan bir guaninin hücre içi sentezi ve depolamasini azaltir, böylelikle viral replikasyonu inhibe eder. IMPDH inhibitörleri ayrica hizli bir sekilde çogalan hücrelerin ve yüksek bir protein döngü oranina sahip hücrelerin yeniden üretimine müdahale eder. Ribavirin monoterapi ile tedavi, HCV RNA seviyelerinde üzerinde küçük bir etkiye sahiptir ancak serum alanin transferazda (ALT) bir azalma ile iliskilidir. Bu gözlem, ribavirinin bir antiviral ajan olarak hareket edemedigini ancak bunun yerine immün sistem fonksiyonunun bir modülatörü olarak hareket ettigini belirtir. Ribavirin sadece IFN ile kombinasyon halinde, HCV enfeksiyonuna yönelik kullanim için onaylanir.
PEG-IFN arti ribavirin kombinasyonu ile tedavi, terapinin sonlandirilmasinda viral tekrarin sikligindaki azalma nedeniyle genis ölçüde, tek basina PEG-IFN ile gözlenenlere göre SVR oranlarini gelistirir. HCV Genotip 1 enfeksiyonu olan PEG- arasinda degismektedir. Mevcut durumda PEG-IFN/ribavirin terapisi, kronik HCV enfeksiyonu için 'standart bakim' tedavisi olarak düsünülür. Ancak bununla birlikte standart bakimin, baslangiçta PEG-IFN/ribavirin ile kombinasyon halinde kullanilacak dogrudan etki eden antiviral ajanlarin onaylanmasi ile yakin gelecekte hizli bir sekilde degismesi beklenir.
Maalesef farkli HCV genotipleri, PEG-lFN/ribavirin terapisine farkli sekilde yanit verir; örnegin HCV genotip 1 terapiye, tip 2 ve 3'ten daha dirençlidir. Ek olarak HCV için mevcut birçok tedavi, istenmeyen yan etkiler üretir. Dolayisiyla yeni anti-viral terapileri için mevcut durumda bir ihtiyaç bulunur. Özellikle daha az istenmeyen yan etki üreten, bir HCV genotip araligina karsi daha etkili olan veya daha az komplike dozlama programina sahip olan, diger bir ifadeyle bir gün boyunca daha az kez ajan uygulamasi gerektiren yeni antiviral terapilere yönelik bir ihtiyaç mevcuttur. (burada Bilesik 6'ya karsilik gelir, bir HCV N85A polimeraz inhibitörü) genotip 1a ve 2b HCV ile enfekte olmus hastalarda antiviral aktiviteye sahip oldugunu belirtir. bilesik PSI-7851tin (burada Bilesik 107a karsilik gelir, bir HCV NSSB polimeraz inhibitörü) HCV replikasyonunun bir pan-genotipik inhibitörü oldugunu belirtir.
BULUSUN KISA AÇIKLAMASI Mevcut bulus, viral enfeksiyonlarin (örnegin HCV) tedavi edilmesi için faydali olan bilesimler ve terapötik yöntemlerde kullanimlarini saglar. Bulusa ait belirli bilesimler daha az istenmeyen yan etki üretir, bir HCV genotip araligina karsi daha etkili dir, direnç seçimi nedeniyle viral tepki potansiyelini azaltir ve mevcut durumda bulunan terapilerden daha az, kisaltilmis komplike dozlama programina sahiptir.
Buna uygun olarak bir düzenlemede bulus, sunlari içeren bir bilesim saglar: 1) Bilesik veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu.
Bir diger düzenlemede bulus, ayrica Bilesik 5'i veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içeren yukaridaki bilesimi saglar.
Diger düzenlemelerde yukarida tanimlanan sekilde bir bilesik bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir seyreltici veya tasiyici içerir. Yukaridaki bilesim, günlük bir kez uygulama için bir birim dozaj formu olarak formüle edilebilir ve/veya oral uygulama için, istege bagli olarak bir tablet olarak formüle edilebilir.
Bir diger düzenlemede bulus, medikal terapide kullanim için yukarida açiklanan bir bilesimi saglar.
Bir diger düzenlemede bulus, bir HCV enfeksiyonunun profilaktik veya terapötik tedavisinde kullanim için yukarida açiklanan bir bilesim saglar. Bir düzenlemede yukaridaki kullanima yönelik bilesim bir inteiferon ile uygulamaya yönelik degildir. Bir diger düzenlemede yukaridaki kullanima yönelik bilesim, ribavirin ile uygulamaya yöneliktir.
Bulusa göre bilesimler ve kullanimlar, “sinerjik” ve “sinerjistik” etkileri saglar, diger bir ifadeyle aktif bilesenler (iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi dahil) birlikte kullanildiginda elde edilen etki, bilesikler ayri olarak kullanilmasindan ortaya çikan etkilerin toplamindan daha büyüktür.
Genis bir HCV genotip araligi saglamalari nedeniyle ve mevcut HCV terapilerinden (diger bir ifadeyle interferon uygulamasini içeren tedaviler) daha az veya daha az ciddi yan etkilere neden olmalari nedeniyle bulusa göre bilesimler ve kullanimlari faydalidir.
Ek olarak bilesiklerin (örnegin Bilesikler 10 ve 6 ve Bilesikler 10, 5 ve 6) belirli kombinasyonlari, mevcut terapiler (örnegin HCV terapileri) ile elde edilenden önemli ölçüde daha yüksek olan bir Sürekli Virolojik Yanit (SVR) saglayabilir. Örnegin bilesiklerin bazi kombinasyonlar, en az yaklasik %70 veya en az yaklasik %80 olan bir SVR saglayabilir.
BULUSUN DETAYLI AÇIKLAMASI Tanimlar Aksi belirtilmedikçe burada kullanildigi üzere asagidaki terimler ve ifadelerin asagidaki anlamlara sahip olmasi tasarlanir. Belirli bir terim veya ifadenin spesifik olarak tanimlanmamasi, belirsizlik veya eksik netlik ile iliskilendirmemelidir ancak buradaki terimler bunlarin siradan anlami içerisinde kullanilir. Burada marka isimleri kullanildiginda basvuru sahipleri, ticari isim ürünü ve ticari isim ürününün aktif farmasötik bilesenlerini bagimsiz olarak içermesini tasarlar.
Burada kullanildigi üzere ”Kombinasyon Bilesikleri” terimi, Bilesik 10 ve Bilesik 6, ve, bulunmasi veya kullanilmasi halinde, Bilesik 1, Bilesik 2, Bilesik 3, Bilesik 4, Bilesik 5, 16lya refere eder.
Burada kullanildigi üzere Bilesik 1 asagidaki gibidir: imidazo[4,5-c]piridin veya 5H-imidazo[4,5-c]piridin, 5-[[6-[2,4- bis(trifluorometil)fenil]piridazin-3-il]metiI]-2-(2-flu0rofenil) olarak refere edilebilir.
Burada kullanildigi üzere Bilesik 2 asagidaki gibidir: metoksikinolin-4-il0ksi)-6-(sikl0pentyloksikarbonilamino)-5,16- clioksooctadekahidrosiklopropa[e]pirol0[1,2-a][1,4]diazasiklopentadesin-14a-il(2,6- diflurobenzil)fosfinik asit olarak refere edilebilir.
Burada kullanildigi üzere Bilesik 3 asagidaki gibidir: Burada kullanildigi üzere Bilesik 4 asagidaki gibidir: Burada kullanildigi üzere Bilesik 5 asagidaki gibidir: Burada kullanildigi üzere Bilesik 6 asagidaki gibidir: Burada kullanildigi üzere Bilesik 7 asagidaki gibidir: Burada kullanildigi üzere Bilesik 8 asagidaki gibidir: Burada kullanildigi üzere Bilesik 9 (P'de diastereomer) asagidaki gibidir: Bilesik 9 bakimindan referans, Bilesik 9”un üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US Burada kullanildigi üzere Bilesik 10 (S-izomer of Bilesik 9) asagidaki gibidir: Bilesik 10 bakimindan referans, Bilesik 10'nun üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak Burada kullanildigi üzere Bilesik 11 asagidaki gibidir: Bilesik 11 bakimindan referans, Bilesik 11lin üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US Burada kullanildigi üzere Bilesik 12 (P'de diastereomer) asagidaki gibidir: »( 12.
Bilesik 12 bakimindan referans, Bilesik 12'nin üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US asagidaki gibidir: > ( 13.
Bilesik 13 bakimindan referans, Bilesik 13lün üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US Burada kullanildigi üzere Bilesik 14 asagidaki gibidir: Bilesik 14 bakimindan referans, Bilesik 14'ün üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US 7,964,580'ye yapilir.
Burada kullanildigi üzere Bilesik 15 asagidaki gibidir: F 15.Bilesik 15 bakimindan referans, Bilesik 15'in üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US 7,964,580'ye yapilir.
Burada kullanildigi üzere Bilesik 16 asagidaki gibidir: Bilesik 16 bakimindan referans, Bilesik 16`nin üretimi ve saflastirmasi ile ilgili olarak US 7,429,572'ye yapilir.10 Ribavirin bakimindan referans, ribavirinin üretimi ve ayrica bunun ile ilgili adlandirmaya yönelik bir proses ile ilgili olarak EP O 093 401 B1'e yapilir. Burada kullanildigi üzere ribavirin suna refere edere: HO OH Ribavirin.
Ribavirin ayrica 1-ß-D-rib0furanosiI-1H-1,2,4-Triazol-3-karboksamid, 1-ß-D- (örnegin 100 mg ribavirin/mL formülasyonlarinda); NSC 163039; RAVANEX (BioPartners); REBETOL (Schering-Plough; Aesca; Bayer Schering Pharma; Essex; Pfizer; Trading Pharma; Zuellig Pharma); Ribamid; RIBAMIDIL (Biopharma, Russia): RIBASPHERE (Three Rivers Pharmaceuticals); Ribavarin; Ribavirina; Tribavirin; VILONA (Valeant Pharmaceuticals; lCN Pharmaceuticals); VIRAMID (ICN Pharmaceuticals ; Alfa Wassermann); VIRAZOLE (Valeant Pharmaceuticals); ve VIRIZADOLE (Uci-farma, Sao Bernardo do Campo, Sao Paulo, Brazil) olarak refere edilir. Ek olarak burada kullanildigi üzere ribavirin, taribavirin (VIRAMIDINE, ICN 3142) dahil ribavirin analoglarini içerir.
Co., Inc.), pegile rlFN-alfa 2a (PEGASYS, Hoffmann-La Roche Inc.), rIFN-alfa 2b (INTRON® A, Merck & Co., Inc.), rIFN-alfa 2a (Roferon®-A, Hoffmann-La Roche Inc.), interferon alfa (MULTIFERON® Viranative AB Corporation, CPC-18, Alfaferone, Alfanative, subalin), interferon alfacon-1 (Valeant), interferon alfa-n1 (WellferonTM, Glaxo Wellcome), interferon alfa-n13 (ALFERON®-Hemispherx Biopharma, Inc.), interferon-beta-1a (AVONEX® Biogen Idec, DL-8234 Daiichi Pharmaceutical Co. Ltd), interferon-omega (omega DUROS®, Alza Corporation, Intarcia Therapeutics, Inc.: Biomed 510, Intarcia Therapeutics, Inc.), albinterferon alfa-2b (ALBUFERON®, Human Genome Sciences, INC.), IFN alfa-2b XL, BLX-883 (LOCTERON®, Biolex BELEROFON®, Nautilus Biotech içerir. bilesimler veya yöntemler veya kullanimlar veya benzeri anlamina gelir. Kombinasyon terapisi ayrica bunlarla sinirli olmamak üzere asagidakiler dahil iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesiklerine ek olarak diger aktif bilesenleri içerebilir: ribavirin, bir interferon, bir alfa-glukosidaz 1 inhibitörü, bir hepatokoruyucu, bir Toll-benzeri reseptör (TLR)-7 agonisti, bir siklofilin inhibitörü, bir HCV viral girdi inhibitörü, bir HCV olgunlastirma inhibitörü, ve bir HCV IRES inhibitörü. bir alfa-glukosidaz 1 inhibitörü, bir hepatokoruyucu, bir TLR-7 agonist, bir siklofilin inhibitörü, bir HCV viral girdi inhibitörü, bir HCV olgunlastirma inhibitörü, ve bir HCV terapisinin bir bileseni anlamina gelir. dilbilgisel esdegerleri, bir hastaligin ilerlemesinin yavaslatilmasi veya durdurulmasi veya bir hastaligin en az bir semptomunun iyilestirilmesi, daha çok tercihen bir hastaligin birden fazla semptomunun iyilestirilmesi anlamina gelir. Örnegin bir HCV hastasi, HCV enfeksiyonu ile iliskili olabilen asagidaki semptomlarin bir tanesi veya tamaminda bir gelisme deneyimleyebilir: alanin aminotransferaz (ALT) seviyelerindeki artis, ates, bas agrisi, kas agrilari, sarilik, yorgunluk, istah kaybi, bulanti, kusma ve diyare. Bir hepatit C virüs enfeksiyonunun tedavisi, bir HCV ile enfekte olmus insanda HCV viral yükünün azaltilmasini içerebilir.
Burada açiklanan belirli bilesikler bir veya daha fazla kiral merkez içerir veya baska sekilde birçok stereoizomer olarak bulunabilir. Mevcut bulusun kapsami stereoizomerlerin karisimini ve ayrica saflastirilmis enantiyomerler veya enantiyomerik olarak/diastereomerik olarak zenginlestirilmis karisimlari içerir. Mevcut bulus kapsamina ayrica burada gösterilen formüller ile temsil edilen bilesiklerin ayri izomerleri ve ayrica bunlarin tamamen veya kismen dengelenmis herhangi bir karisimi dahil edilir. Mevcut bulus ayrica bir veya daha fazla kiral merkezin ters çevrildigi izomerleri ile karisimlar olarak burada gösterilen formül ile temsil edilen bilesiklerin ayri izomerlerini içerir. Burada kullanilan stereokimyasal tanimlar ve yazim biçimleri genellikle 8. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; ve Eliel, E. and Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley & Sons, Inc., New York adli isi takip eder.
Birçok organik bilesik optik olarak aktif formda bulunur, diger bir ifadeyle bunlar, düzlemsel ucaylanmis isik düzlemini döndürme kabiliyetine sahiptir. Optik olarak aktif bilesiklerin açiklanmasinda D ve L veya R ve 8 ön ekleri, bunun kiral merkezleri etrafinda molekülün mutlak konfigürasyonunu göstermek üzere kullanilir. d ve I veya (+) ve (-) ön ekleri, bilesigin sola döndügü anlamina gelen (-) veya I ile, bilesik araciligiyla düzlemSeI ucaylanmis isigin dönüs isaretini göstermek üzere kullanilir. (+) veya d ön ekini alan bir bilesik, saga dönmektedir.
Spesifik bir stereoizomer ayrica bir enantiyomer olarak refere edilir ve bu tür izomerlerin bir karisimi genellikle bir enantiyomerik karisim olarak adlandirilir.
Enantiyomerlerin bir 50:50 karisimi, bir rasemik karisim veya bir rasemat olarak refere edilir, bu kimyasal reaksiyon veya proseste herhangi bir stereoseçim veya stereo spesifiklik bulunmadiginda meydana gelebilir. “Rasemik karisim" ve “rasemat” terimleri, optik aktiviteden yoksun, iki enantiyomerik türün bir esmolar karisimina refere eder.
Kombinasyonlar Mevcut bulus, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesiklerinin kombinasyonlarini içerir.
Bilesik 1, Bilesik 2, Bilesik 3, Bilesik 5, Bilesik 6, Bilesik 7, ve Bilesik 10'nun iki yönlü (Kombinasyon 17), üç yönlü (Kombinasyonlar 32-55), dört yönlü (Kombinasyonlar 62- 91) ve bes yönlü (Kombinasyonlar 94-113) kombinasyonlarini gösteren Tablo I asagida Bilesik 15 ve Bilesik 16, V N85b polimerazin nükleosid inhibitörleridir ve Kombinasyon Bilesiklerinin kombinasyonlar çogunlukla Bilesik 4, Bilesik 9, Bilesik 10, Bilesik 11, Tablo I Kolon 6) sadece bir tanesini içerir.
TABLO I Kombinasyon 17 X X Bilesik 7 Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Kombinasyon Bilesimler Bilesik 1 Bilesik 2 Bilesik 3 Bilesik 10 Bilesik 5 Bilesik 6 Bilesik 7 Mevcut bulusun bir açisi, bir bilesim örnegin farmasötik bir bilesim içerir, bilesim Bilesik 6'yi içerir ve ayrica Bilesik 10'nu içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, bir bilesim örnegin farmasötik bir bilesim içerir, bilesim Bilesik ö'yi içerir ve ayrica Bilesik 5 ve Bilesik 10'nu içerir.
Tuzlar Kombinasyon Bilesikler ve diger aktif bilesenler bir tuz formunda olabilir. Tipik olarak ancak kesin olmamakla birlikte Kombinasyon Bilesikleri ve diger aktif bilesenlerin tuzlari farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlardir. “Farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlar” terimi içirisinde bulunan tuzlar, Kombinasyon Bilesikleri ve/veya diger aktif bilesenlerin toksik olmayan tuzlarina refere eder. Uygun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarin örnekleri inorganik asit ilave tuzlari örnegin klorid, bromid, sülfat, fosfat ve nitrat; organik asit ilave tuzlari örnegin asetat, galaktarat, propionat, süksinat, askorbat; aspartat ve glutamat gibi asidik amino asidi olan tuzlar; sodyum tuzu ve potasyum tuzu gibi alkali metal tuzlari; magnezyum tuzu ve kalsiyum tuzu gibi alkalin toprak metal tuzlari; amonyum tuzu; organik bazik tuzlar örnegin trimetilamin tuzu, trietilamin tuzu, piridin tuzu, pikolin tuzu, disiklohekzilamin tuzu, ve N,N`- dibenziletilendiamin tuzu; ve Iisin tuzu ve arjinin tuzu gibi bazik amino asidi olan tuzlari içerir. Tuzlar bazi durumlarda hidratlar veya etanol solvatlar olabilir.
Farmasötik Formülasyonlar Kombinasyon Bilesikleri ve/veya diger aktif bilesenler siradan pratige göre seçilebilen geleneksel tasiyicilar ve eksipiyanlar ile formüle edilebilir.
Tabletler tipik olarak eksipiyanlar, kaydiricilar, dolgu maddeleri, baglayicilar ve benzerini içerir. Aköz formülasyonlar steril formda hazirlanabilir ve oral uygulamadan baska dagitima yönelik tasarlandiginda izotonik olacaktir. Bütün formülasyonlar Farmasötik Eksipiyanlarin El Kitabinda(1986) belirtilenler gibi eksipiyanlari istege bagli olarak içerecektir. Eksipiyanlar askorbik asit ve diger antioksidanlari, selatlama ajanlari örnegin EDTA, karbohidratlar örnegin dekstrinler, hidroksialkilselüloz, hidroksiaIkilmetilselüloz, stearik asit ve benzerini içerir.
Formülasyonlarin pH degeri yaklasik olarak 3 ila yaklasik olarak 11 arasinda degisir, ama esas olarak yaklasik 7 ila 10'dur.
Bir aktif bilesenin tek basina uygulanmasi mümkün iken bu, farmasötik formülasyonlar olarak bir veya daha fazla aktif bileseni temsil etmek üzere tercih edilebilir. Hem veterinerlik alaninda hem de insan kullanimina yönelik bulusa ait formülasyonlar, istege bagli olarak diger terapötik bilesenler ve bir veya daha fazla kabul edilebilir tasiyici ile birlikte, en az bir aktif bileseni içerir. Tasiyici(lar) aliciya fizyolojik olarak zararsiz ve formülasyonun diger bilesenleri ile uyumlu olma durumunda “kabul edilebilir” olmalidir.
Formülasyonlar asagida belirtilen uygulama yollari için uygun olanlari içerir.
Formülasyonlar elverisli olarak birim dozaj formunda sunulabilir ve farmasi alaninda iyi bilinen yöntemlerin herhangi biri ile hazirlanabilir. Teknikler ve formülasyonlar genellikle Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, Pa.) içerisinde bulunur. Bu tür yöntemler bir veya daha fazla yardimci bileseni olusturan tasiyici ile bir aktif bilesenin bir araya getirilme adimini içerir. Genellikle formülasyonlar, bir veya daha fazla aktif bilesenin sivi tasiyicilar veya ince sekilde bölünmüs kati tasiyicilar veya her ikisi ile tek biçimli olarak ve yakin sekilde bir araya getirilmesi ve daha sonra gerekli olmasi halinde ürünün sekillendirilmesi ile hazirlanabilir.
Oral uygulama için uygun olan mevcut bulusa ait formülasyonlar, her biri bir aktif bilesenin önceden belirlenen bir miktarini içeren kapsüller, saseler veya tabletler gibi ayri birimler olarak; bir toz veya granüller olarak; bir aköz veya aköz olmayan sivi içerisinde bir solüsyon veya süspansiyon olarak veya bir su içinde yag sivi emülsiyonu veya bir yag içinde su sivi emülsiyonu olarak sunulabilir. Bir aktif bilesen ayrica bir bolus, elektuar veya macun olarak uygulanabilir.
Bir tablet sikistirma veya kaliplama, istege bagli olarak bir veya daha fazla yardimci bilesen ile yapilabilir. Sikistirilabilen tabletler, istege bagli olarak bir karistirici, kaydirici, inert seyreltici, koruyucu, yüzey aktif veya dagitici ajan ile karistirilmis, bir toz veya granüller gibi bir serbest akis formunda bir aktif bilesenin uygun bir makinede sikistirilmasi ile hazirlanabilir. Kalipli tabletler bir inert sivi seyreltici ile nemlendirilen toz hale getirilmis aktif bilesenin bir karisiminin uygun bir makinede kaliplanmasi ile yapilabilir. Tabletler istege bagli olarak kaplanabilir veya skorlanabilir ve istege bagli olarak aktif bilesenin yavas veya kontrollü salinimini saglamak amaciyla formüle edilebilir.
Göz veya diger dis dokulara, örnegin agiz ve deriye uygulamaya yönelik olarak, formülasyonlar tercihen örnegin %0075 ila 20 w/w (%06 w/w, %0.? w/w, vb. gibi tercihen %02 ila 15 w/w ve daha çok tercihen %05 ila %10'Iuk w/w bir miktarda aktif bilesenleri içeren bir topik merhem veya krem olarak uygulanir. Bir merhem halinde formüle edildiginde, aktif bilesenler bir parafinik veya bir suda eriyebilen merhem bazi ile kullanilabilir. Alternatif olarak, bir aktif bilesen bir su içinde yag merhem bazi ile bir krem halinde formüle edilebilir. istenmesi halinde, krem bazinin aköz fazi örnegin en az %30 w/w bir polihidrik alkol, diger bir ifadeyle propilen glikol, bütan 1,3-diol, mannitol, sorbitol, gliserol ve polietilen glikol (PEG 400 dahil) ve karisimlari gibi iki veya daha fazla hidroksil gruba sahip olan bir alkol içerebilir. Topikal formülasyonlar istenildigi gibi deri veya diger etkilenmis alanlar boyunca aktif bilesenin absorpsiyonunu veya penetrasyonunu arttiran bir bilesigi içerebilir. Bu tür dermal penetrasyon arttiricilarin örnekleri dimetil sülfoksit ve ilgili analoglari içerir.
Kombinasyon Bilesiklerine ve/veya diger aktif bilesenlere ait emülsiyonlarinin yagli fazi bilinen bir sekilde bilinen bilesenlerde olusturulabilir. Faz sadece bir emülsifiye edici (diger sekilde bir emülgent olarak bilir) içerebilirken istenen sekilde bir kati yag veya bir sivi yag ile veya bir kati yag veya sivi yag in her ikisi ile en az bir emülsifiye edicinin bir karisimini içerir. Tercihen, bir hidrofilik emülsifiye edici, bir stabilizör olarak hareket eden bir Iipofilik emülsifiye edici ile birlikte dahil edilir. Ayni zamanda hem bir sivi yag hem de bir kati yagi içermesi tercih edilir. Birlikte, stabilizörler ile veya bunlar olmaksizin emülsifiye ediciler, söz konusu emülsifiye edici vaksi yapar ve sivi yag ve kati yap ile birlikte vaks krem formülasyonlarinin yag ile dagitilmis fazini olusturan söz konusu emülsifiye edici merhem bazi yapar.
Bulusa ait formülasyonda kullanim için uygun olan emülgentler ve emülsiyon stabilizörler Tween® 60 (ICI Americas Inc.), Span 80, setostearil alkol, benzil alkol, miristil alkol, gliseril mono-stearat ve sodyum Iauril sülfat içerir.
Formülasyon için uygun sivi yaglar veya kati yaglarin seçimi istenilen kozmetik özelliklerin elde edilmesine dayanir. Krem tercihen tüpler veya diger kaplardan sizintiyi önlemek üzere uygun bir yogunluk ile bir yagli olmayan, Iekeleme olmayan ve yikanabilen ürün olmalidir. Düz veya dallanmis zincir, mono- veya dibazik alkil esterler örnegin izoadipat, izosetil stearat, hindistan cevizi yag asitlerinin propilen glikol diesteri, izopropil miristat, desil oleat, izopropil palmitat, bütil stearat, 2-etilheksil palmitat veya Crodamol CAP olarak bilinen dallanmis zincir esterlerin bir karisimi kullanilabilir, bunlarin son üç tanesi tercih edilen esterlerdir. Bunlar gerekli özelliklere bagli olarak tek basina veya kombinasyon halinde kullanilabilir. Alternatif olarak, beyaz yumusak parafin ve/veya sivi parafin veya diger mineral yaglar gibi yüksek erime noktali sivilar kullanilabilir.
Mevcut bulusa göre farmasötik formülasyonlar bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyicilar veya eksipiyanlar ve istege bagli olarak diger terapötik ajanlar ile birlikte açiklamanin bir veya daha fazla aktif bileseni içerir. Aktif bilesenleri içeren farmasötik formülasyonlar, tasarlanan uygulama yöntemi uygun olan herhangi bir formda olabilir. Oral kullanim için kullanildiginda örnegin tabletler, yuvarlak yassi haplar, pastiller, aköz veya yagli süspansiyonlar, dagitilabilen tozlar veya granüller, emülsiyonlar, sert veya yumusak kapsüller, suruplar veya eliksirler hazirlanabilir. Oral kullanim için tasarlanan bilesimler farmasötik bilesimlerin üretimi Için bu teknikte bilinen herhangi bir yönteme göre hazirlanabilir ve bu tür bilesimler, bir makul preparati saglamak üzere için tatlandirici ajanlar, lezzet verici ajanlar, renklendirici ajanlar ve koruyucu ajanlar dahil bir veya daha fazla ajani içerebilir. Tabletlerin üretimi için uygun olan toksik olmayan farmasötik olarak edilebilir edilebilen eksipiyan ile karisim halimde bir aktif bileseni içeren tabletler kabul edilebilirdir. Bu eksipiyanlar örnegin kalsiyum veya sodyum karbonat, Iaktoz monohidrat, kroskarmelloz sodyum, povidon, kalsiyum veya sodyum fosfat gibi ineit seyrelticiler; misir nisastasi veya aljinik asit gibi granüle edici veya ayirici ajanlar; selüloz, mikrokristalin selüloz, nisasta, jelatin veya akasya gibi baglama ajanlari; ve magnezyum stearat, stearik asit veya talk gibi kayganlastirici ajanlar olabilir. Tabletler gastrointestinal kanalda adsorpsiyon ve çözülmeyi geciktirmek üzer eve böylelikle daha uzun bir periyot boyunca uzun süreli bir etki saglamak üzere mikroenkapsülasyon dahil bilinen teknikler araciligiyla kaplanabilir veya kaplanmayabilir. Örnegin, tek basina veya bir vaks ile gliseril distearat veya gliseril monostearat gibi bir süre geciktirme materyali kullanilabilir.
Oral kullanima yönelik formülasyonlar, bir aktif bilesenin örnegin kalsiyum fosfat veya kaolin gibi bir inert kati seyreltici ile karistirildigi sert jelatin kapsülleri olarak veya bir aktif bilesenin yer fistigi yagi, sivi parafin veya zeytinyagi gibi bir su veya bir yag ortami ile karistirildigi yumusak jelatin kapsülleri olarak sunulabilir.
Bulusa ait aköz süspansiyonlar aköz süspansiyonlarin üretimi için uygun olan eksipiyanlar ile karisim halimde aktif materyalleri içerir. Bu tür eksipiyanlar sodyum karboksimetilselüloz, metilselüloz, hidroksipropil metilselüloz, sodyum alginat, polivinilpirrolidon, kitre zamki ve akasya zamki gibi bir süspanse edici ajan ve dogal olarak olusan fosfatid (örnegin, Iesitin) gibi dagitici veya islatma ajanlari, bir yag asidi (örnegin, polioksietilen stearat) ile bir alkilen oksidin bir yogunlasma ürünü, bir uzun zincir (örnegin, heptadekaetilenoksisetanol) alifatik alkol ile etilen oksidin bir yogunlasma ürünü, bir yag asidi ve bir heksitol anhidritten (örnegin, polioksietilen sorbitan monooleat) elde edilen bir kismi ester ile etilen oksidin bir yogunlasma ürününü içerir. Aköz süspansiyon ayni zamanda bir veya daha fazla koruyucu örnegin etil veya n-propil p-hidroksi-benzoat, bir veya daha fazla renklendirici ajan, bir veya daha fazla lezzet verici ajan ve bir veya daha fazla tatlandirici ajan örnegin sükroz veya sakarin içerebilir.
Yagli süspansiyonlar sivi parafin gibi bir mineral yagda veya yerfistigi yagi, zeytinyagi, susam yagi veya hindistan cevizi yagi gibi bir bitkisel yagda aktif bilesigin süspanse edilmesi ile formüle edilebilir. Oral süspansiyonlar balmumu, sert parafin veya setil alkol gibi bir koyulastirici ajani içerebilir. Örnegin yukarida belirtildigi gibi tatlandirici ajanlar, ve lezzet verici ajanlar bir lezzetli oral preparati saglamak üzere ilave edilebilir. Bu bilesimler askorbik asit gibi bir antioksidan ilavesi ile korunabilir.
Suyun ilavesi ile bir aköz süspansiyonun hazirlanmasi için uygun olan bulusa ait dagitici tozlar ve granüller bir dagitici veya islatma ajani, bir süspanse edici akan ve bir veya daha fazla koruyucu ile karisim halinde bir aktif bileseni saglar. Uygun dagitici veya islatma ajanlari ve süspanse edici ajanlar yukarida açiklananlar ile örneklendirilir.
Ayrica ek eksipiyanlar, örnegin tatlandirici, lezzet verici ve renklendirici ajanlar bulunabilir.
Bulusa ait farmasötik bilesimler ayni zamanda su içinde yag emülsiyonlari formunda olabilir. Yagli faz ayni zamanda zeytinyagi veya yer fistigi yagi gibi bir bitkisel yag, sivi parafin gibi bir mineral yag veya bunlarin bir karisimi olabilir. Uygun emülsifiye edici ajanlar dogal olarak olusan zamklar örnegin akasya zamki ve kitre zamkii dogal olarak olusan fosfatidler örnegin soya fasulyesi Iesitini, yag asitlerinden ve hekzitol anhidritlerden türetilen esterler veya kismi esterleri, örnegin sorbitan monooleat, etilen oksit ile bu kismi esterlerin yogunlasma ürünleri, örnegin polioksietilen sorbitan monooleat içerir. Emülsiyon ayni zamanda tatlandirici ve lezzet verici ajanlari içerebilir.
Suruplar ve eliksirler gliserol, sorbitol veya sükroz gibi tatlandirici ajanlar ile formüle edilebilir. Bu tür formülasyonlar ayrica bir yatistirici, bir koruyucu, bir lezzet verici veya bir renklendirici ajani içerebilir.
Bulusa ait farmasötik bilesimler örnegin bir steril enjekte edilebilen aköz veya yag içeren süspansiyon gibi steril enjekte edilebilir bir preparat formunda olabilir. Bu süspansiyon burada açiklanan uygun dagitma veya islatma ajanlari ve süspanse edici ajanlar kullanarak bilinen teknige formüle edilebilir. Steril enjekte edilebilir preparat, 1,3- bütane-diol içerisinde bir solüsyon gibi, toksik olmayan parenteral olarak kabul edilebilir bir seyreltici veya solvent içerisinde steril enjekte edilebilir bir solüsyon veya süspansiyon olabilir ve bir Iiyofilize edilmis toz gibi hazirlanabilir. Kullanilabilen kabul edilebilir araçlar ve solventler arasinda su, Ringer solüsyonu ve izotonik sodyum klorid solüsyon bulunur. Ilave olarak, steril sabit yaglar bir solvent veya süspanse edici ortam olarak uygun sekilde kullanilabilir. Bu amaçla, herhangi tatsiz sabitlenmis sivi yag sentetik mono- veya digliseridleri içererek kullanilabilir. Ilave olarak, oleik asit gibi yagli asitler enjekte edilebilenlerin hazirlanmasinda benzer bir sekilde kullanilabilir.
Tek bir dozaj formu üretmek üzere tasiyici materyal ile kombine edilebilen aktif bilesenin miktari, belirli uygulama modu ve tedavi edilen konakçiya bagli olarak degiskenlik gösterecektir. Örnegin, insanlara oral uygulamaya yönelik tasarlanan bir zaman salinimli formülasyon toplam bilesimlerin (agirlikzagirlik) yaklasik %5'i ila yaklasik %95'i arasinda degiskenlik gösterebilen tasiyici materyalin uygun ve elverisli bir miktari ile bilesik haline getirilen yaklasik olarak 1 ile 1000 mg aktif materyal içerebilir. Farmasötik bilesim uygulama için kolaylikla ölçülebilen miktarlari saglamak üzere hazirlanabilir. Örnegin, intravenöz infüzyon için tasarlanan bir aköz solüsyon yaklasik 30mL/saatlik bir oranda uygun bir hacim infüzyonu olusabilecek sekilde solüsyonun mililitre basina yaklasik 3 ila 500 ug aktif bilesen içerebilir.
Göze uygulama için uygun olan formülasyonlar bir aktif bilesenin özellikle aktif bilesene yönelik bir aköz solvent olmak üzere bir uygun tasiyicida çözüldügü veya süspanse edildigi göz damlalarini içerir. Bir aktif bilesen tercihen bu tür formülasyonlarda %05 ila konsantrasyonda bulunur.
Agizda topikal uygulama için uygun olan formülasyonlar, genellikle sukroz ve akasya veya kitre gibi bir lezzet verilmis bir bazda aktif bilesen içeren pastiller; jelatin ve gliserin veya sükroz veya akasya gibi bir inert bazda aktif bileseni içeren pastiller; uygun bir sivi tasiyicida aktif bileseni içeren gargaralari içerir.
Rektal uygulama için formülasyonlar örnegin kakao yagi veya bir salisilat içeren uygun bir baz ile bir supozituvar olarak sunulabilir.
Intrapulmoner veya nazal uygulama uygun olan formülasyonlar alveolar keseciklere ulasmak amaciyla agiz içinden inhalasyon yoluyla veya nazal geçitten hizli inhalasyon artislarda 0.1 ve 500 um arasinda bir araliktaki partikül boyutlari dahil) bir partikül boyutuna sahiptir. Uygun formülasyonlar aktif bilesenin aköz veya yagli solüsyonlarini içerir. Aerosol veya kuru toz uygulamasi için uygun olan formülasyonlar geleneksel yöntemlere göre hazirlanabilir ve burada açiklanan enfeksiyonlarin tedavisi veya profilaksisinde kullanilan simdiye kadarki bilesikler gibi diger terapötik ajanlar ile dagitilabilir.
Vajinal uygulama uygun olan formülasyonlar bir aktif bilesene ek olarak teknikte uygun oldugu bilinen bu tür tasiyicilari içeren ovüller, tamponlar, kremler, jeller, macunlar, köpükler veya sprey formülasyonlar olarak sunulabilir.
Parenteral uygulama için uygun formülasyonlar, anti-oksidanlar, tamponlar, bakteriostatlar ve formülasyonu tasarlanan alicinin kani ile izotonik hale getiren çözünen maddeleri içerebilen aköz ve aköz olmayan steril enjeksiyon solüsyonlari ve süspanse edici ajanlar ve kalinlastirici ajanlari içerebilen aköz ve aköz olmayan steril solüsyonlari içerir. Formülasyonlar örnegin kapali ampuller ve sisler gibi birim doz veya çoklu doz kaplarinda sunulabilir ve kullanimdan hemen önce, örnegin enjeksiyona yönelik su gibi sadece steril sivi tasiyicinin ilavesini gerektiren bir dondurarak kurutulan (Iiyofilize edilen) durumda saklanabilir. Dogaçlama enjeksiyon solüsyonlari ve süspansiyonlari daha önceden tarif edilen türde tabletleri, granülleri ve steril tozlardan hazirlanabilir. Tercih edilen birim dozaj formülasyonlari aktif bilesenin bir uygun fraksiyonu veya yukarida tarif edildigi gibi bir günlük dozu veya birim günlük alt dozunu içerenler olabilir. Özellikle yukarida açiklanan bilesenlere ek olarak Kombinasyon Bilesikleri ve/veya diger aktif bilesenlerin formülasyonlarinin, söz konusu formülasyonun türü göz önüne alindiginda teknikte klasik diger ajanlari içerebildigi, örnegin oral uygulama için uygun olanlarin lezzet verici ajanlari içerebildigi anlasilmalidir.
Kombinasyon Bilesikleri ve diger aktif bilesenler ayrica daha az siklikta dozlamaya olanak tanimak üzere veya bir aktif bilesenin farmakokinetik veya toksisite profilini gelistirmek üzere bir aktif bilesenin kontrollü salimini saglamak üzere formüle edilebilir.
Buna uygun olarak bulus ayrica sürekli veya kontrollü salim için formüle edilen iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigini içeren bilesimleri saglar.
Dozailar Bir aktif bilesigin etkili dozu en azindan tedavi edilen durumun yapisi, toksisite, bilesigin profilaktik olarak (düsük dozlarda) veya aktif bir hastaliga veya duruma karsi kullanilip kullanilmamasi, dagitim yöntemi ve farmasötik formülasyona baglidir ve klasik doz arttirma çalismalari kullanilarak hekim tarafindan belirlenebilir. Örnek yoluyla bulusa ait bilesimler (örnegim tabletler) etkili dozlari saglamak üzere formüle edilebilir. Örnegin Bilesik 1 veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu göre 40 mg içerebilir ve Bilesik 2, Bilesik 3, Bilesik 6, Bilesik 4, Bilesik 5, Bilesik 7, Bilesik 9, herhangi biri veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci olan bir insana günlük bir veya daha çok kez uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Bilesik 2 veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzuna göre bilesim, 25 mg ila 800 mg, 50 mg ila veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci bir insana günlük bir veya daha çok kez uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Bilesik 3, veya farmasötik olarak Bilesik 14, Bilesik 15 ve Bilesik 16'dan herhangi biri veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci bir insana günlük bir veya daha çok kez uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Bilesik 4, veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzuna göre Bilesik 6, Bilesik 5 ve Bilesik 7'den herhangi biri veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci bir insana günlük bir veya daha çok kez uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Bilesik 5, veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzuna göre Bilesik 14, Bilesik 15 ve Bilesik 16'dan herhangi biri veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci bir insana günlük bir veya daha çok kez uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Bilesik 6, veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzuna göre Bilesik 14, Bilesik 15 ve Bilesik 16ldan herhangi biri veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci bir insana günlük bir veya daha çok kez uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Bilesik 7, veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzuna göre veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde buna ihtiyaci olan bir insana günlük bir veya daha çok kez (örnegin bir günde dört kez) uygulanacak sekilde adapte edilebilir.
Bilesikler 9 ve 10, veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarina göre bilesim, günde olarak kabul edilebilir tuzlarina göre bilesim günde 1mg ila 1000m içerebilir (US ilaç-ilaç etkilesimlerini hesaba katacak sekilde ayarlanmasi gerekebilir. Örnegin Bilesik 1'in ilaç metabolizma sistemlerini etkiledigi görünmemesine ragmen Bilesik 2'nin, Bilesik 1,in maruziyetini yaklasik olarak 2-3X arttiran bir etkiye sahip oldugu görünür.
Bu nedenle Bilesik 1, Bilesik 2 ile kombine edildiginde Bilesik 1'in bir doz azalmasi (örnegin 2x-3x) beklenir. Bilesik 16 ile kombinasyon halinde Bilesik 2'nin Bilesik 6'nin maruziyetini yaklasik olarak 5x artiran etkiye sahip oldugu görünür. böylece Bilesik 16, Bilesik 2 ile dozlandiginda Bilesik 16'nin doz azalmasi (örnegin 3x-5x) beklenir. Bu nedenle Bilesik 2 ile birlikte uygulandiginda Bilesik 6'nin 10 mg'lik bir dozu 30 mg`lik bir doza yaklasir.
Iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi, tek veya çoklu dozajlar (örnegin günde iki veya 1200mg'lik miktarlarda Ribavirin ile birlikte uygulanabilir.
Bulusa ait Kombinasyonlarin Kullanimi Bulusun bu açisinin pratiginde Kombinasyon Bilesikleri, yukarida belirtilen dozajlarda kullanilabilir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, HCV enfeksiyonlarinin tedavi edilmesine yönelik bir yöntemde kullanim için Bilesik 10'nu içerir, burada Bilesik 10, Bilesik 6 ile kombinasyon halinde kullanilir.
Mevcut bulusun bir diger açisi HCV enfeksiyonlarinin tedavi edilmesine yönelik bir yöntemde kullanim için Bilesik 10'nu içerir, burada Bilesik 10, Bilesik 5 ve Bilesik 6 ile kombinasyon halinde kullanilir.
Uygulama Yollari ve Modlari daha fazlasi ve bir kombinasyon terapisinin herhangi bir diger bileseni, tedavi edilecek durum için uygun herhangi bir yol ile uygulanacak sekilde adapte edilebilir. Uygun yollar oral, rektal, nazal, topikal (bukkal ve sublingual dahil), vajinal ve parenteral (subkütanöz, intramüsküler, intravenöz, intradermal, intratekal ve epidural dahil) ve benzeri içerir. Tercih edilen yolun örnegin alicinin durumuna göre degiskenlik gösterebildigi kabul edilecektir.
Aktif bilesenler asagidaki gibi oldugunda sinerjik bir etki elde edilebilir: (1) birlikte formüle edilen (örnegin bir birimsel dozaj formunda) ve kombine edilmis bir formülasyonda es zamanli olarak uygulanan veya dagitilan; (2) ayri formülasyonlar olarak alternatif olarak veya paralel olarak dagitilan veya (3) baska diger rejim yoluyla.
Alternatif terapide dagitildiginda sinerjik bir etki, örnegin ayri tabletler, haplar veya kapsüller halinde ardisik sekilde veya ayri siringalarda farkli enjeksiyonlar yoluyla uygulandiginda veya dagitildiginda elde edilebilir. Genellikle alternatif terapi sirasinda her bir aktif bilesenin etkili bir dozaji, sirali olarak, diger bir ifadeyle seri olarak uygulanirken kombinasyon terapisinde iki veya daha fazla aktif bilesenin etkili dozajlari birlikte uygulanir.
Bir Kombinasyon Bilesigin bir veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi ile birlikte uygulanmasi genellikle bir veya daha fazla Kombinasyon Bilesiginin es zamanli veya sirali uygulanmasina refere eder, böylece iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesiginin terapötik olarak etkili miktarlari hastanin gövdesinde bulunur. Bazi durumlarda Kombinasyon Bilesikleri (örnegin iki, üç veya dört Kombinasyon Bilesigi) ayni sürede uygulamaya olanak tanimak üzere birlikte formüle edilecektir. Bazi durumlarda birlikte formüle edilen Kombinasyon Bilesikleri, bir veya daha fazla ek Kombinasyon Bilesigi ile birlikte uygulanabilir.
Birlikte uygulama ayrica bir veya daha fazla aktif bilesenin birim dozajlarinin uygulamasi, örnegin bir veya daha fazla diger aktif bilesenlerin saniyeler, dakikalar veya saatler içinde uygulanmasinda iki veya daha fazla kombinasyon Bilesiklerinin uygulanmasindan önce veya sonra Kombinasyon Bilesiklerinin birim dozajlarinin uygulanmasini içerir. Örnegin bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu, ilk olarak uygulanabilir akabinde saniyeler veya dakikalar içerisinde ikinci bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu uygulanir, akabinde saniyeler veya dakikalar içerisinde bir veya daha fazla diger aktif bilesenin bir birim dozu uygulanir. Alternatif olarak bir veya daha fazla diger aktif bilesenin bir birim dozu, ilk olarak uygulanabilir akabinde saniyeler veya dakikalar içerisinde bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu uygulanir, akabinde saniyeler veya dakikalar içerisinde ikinci bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu uygulanir. Bazi durumlarda bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozunun ilk olarak uygulanmasi istenebilir, akabinde saatlik bir periyod (örnegin 1-12 saat) sonrasinda ikinci bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu uygulanir, akabinde saatlik bir periyod (örnegin 1-12 saat) sonrasinda bir veya daha fazla diger aktif bilesenin bir birim dozu uygulanir. Diger durumlarda bir veya daha fazla diger aktif bilesenin bir birim dozunun ilk olarak uygulanmasi istenebilir, saatlik bir periyod (örnegin 1-12 saat) sonrasinda bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu uygulanir, akabinde saatlik bir periyod (örnegin 1-12 saat) sonrasinda ikinci bir Kombinasyon Bilesiginin bir birim dozu uygulanir. Iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi bir veya daha fazla ek aktif bilesen ile uygulandiginda Kombinasyon Bilesikleri, birbirinden saniyeler, dakikalar veya saatler (örnegin 1-12 saat) içerisinde biri digerinden sonra uygulanabilir ve bir veya daha fazla ek aktif bilesen, Kombinasyon Bilesiklerinin uygulanmasi öncesinde, sirasinda veya $0nrasinda uygulanabilir. Kombinasyon Bilesikleri birlikte formüle edildiginde bunlar es zamanli olarak veya bir veya daha fazla ek aktif bilesenin uygulanmasindan önce veya sonra uygulanabilir.
Aksi belirtilmedikçe kombinasyon terapisi, birlikte veya ayri ayri, sirali olarak veya es zamanli olarak ve birbirlerine yakin zamanda veya uzak zamanda uygulanan her bir aktif bilesen ile ayri dozaj formlari olarak uygulanabilir.
Tedavi süreci, örnegin yaklasik 12 hafta ila yaklasik 48 hafta, veya daha uzun örnegin yaklasik 12 hafta ila yaklasik 24 hafta uzayabilir.
Mevcut bulus, bunlarla sinirli olmamak üzere bulanti, kusma, istah kaybi, yorgunluk, sarilik, kusma, diyare, su kaybi, abdominal agri, karaciger sirozu dahil bir insandaki HCV enfeksiyonunun en az bir semptomunu iyilestirmek üzere terapötik olarak etkili bilesenlerin bir kombinasyonunu içerir. Ek olarak bazi HCV ile enfekte olmus bireylerde kombinasyon terapisinin kullanimi, enfekte olmus insanin gövdesinde HCV viral partiküllerin viral yükünü istatiksel olarak önemli bir miktarda azaltmak üzere etkilidir.
Viral yük, örnegin COBAS TaqMan HCV analizi (Roche Molecular Systems) kullanilarak plazma HCV RNA seviyelerinin ölçülmesi ile ölçülebilir. Tipik olarak mevcut bulusa göre Kombinasyon Bilesikleri ile tedavi edilen bir HCV ile enfekte olmus kisi, HCV enfeksiyonu ile iliskili semptomlarin bir tanesinde veya tümünde bir gelisme deneyimler.
Bir veya daha fazla Kombinasyon Bilesiginin Interferon olmamak üzere Ribavirin ile Kombinasyonlari Yukarida açiklandigi üzere mevcut bazi HCV tedavileri, interferon uygulanmasini içerir ancak bu tedavi tipik olarak istenmeyen yan etkiler olusturur. Bu nedenle interferon uygulanmasini gerektirmeyen etkili HCV tedavilerinin bulunmasi istenebilir.
Mevcut bulusun bir açisi, bir veya daha fazla interferon uygulanmadan iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin uygulanmasini içeren HCVinin tedavisine yönelik bilesimler, kullanimlar ve benzerini saglar. Bulusa ait bu açi, bir veya daha fazla interferon uygulamasi ile iliskili yan etkiler olmaksizin etkili HCV tedavisine olanak tanimasi nedeniyle özellikle faydali olabilir.
Mevcut bulusa ait bir düzenlemede istege bagli olarak bir veya daha fazla ek ajan ile ribavirin ve Kombinasyon Bilesikler veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarin kombine miktari, HCV enfeksiyonunu tedavi etmek üzere etkilidir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, bir veya daha fazla interferonun es zamanli uygulamasi olmadan, bir veya daha fazla Kombinasyon Bilesik veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirinin uygulanmasini içeren, bir insandaki HCV enfeksiyonunun bir veya daha fazla semptomunun iyilestirilmesine yönelik bir yöntemde kullanimi içerir.
Bu baglamda mevcut bulus, bir veya daha fazla interferonun dozlanmasina yönelik potansiyeli engellemez. Bunun yerine mevcut bulus, aslinda bir veya daha fazla interferonu Içeren bir diger terapi ile baglantili olarak kullanilabilir. Mevcut bulusun bir açisi, bir veya daha fazla interferon ihtiyaci olmaksizin HCV'nin etkili tedavisini içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, bir veya daha fazla interferon olmamak üzere iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesik veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin uygulanmasini içeren, HCV tanisi konulan bir insandaki viral yükün azaltilmasina yönelik bir yöntemde kullanimi içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ile baglantili sekilde esas olarak ribavirin uygulanmasindan olusan bir insan öznedeki HCV'nin tedavi edilmesine yönelik bir yöntemde kullanimi içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, bir veya daha fazla interferonun es zamanli uygulanmasi olmaksizin iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin uygulanmasini içeren, birlikte uygulanan oral antiviral ajanlara direnç ile HCV çeyrek türünün ortaya çikisinin azaltilmasina yönelik Benzer sekilde mevcut bulusun bir diger açisi. bir veya daha fazla interferon olmaksizin iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin içeren, bir insandaki HCV enfeksiyonunun bir veya daha fazla semptomunun iyilestirilmesine yönelik bir bilesimi, Örnegin farmasötik bir bilesimi içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, bir veya daha fazla interferon olmamak üzere iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin içeren HCV tanisi konmus bir insandaki viral yükün azaltilmasina yönelik bir bilesim içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ile baglantili sekilde esas olarak ribavirinden olusan bir insan öznedeki HCV'nin tedavi edilmesine yönelik bir bilesim içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, söz konusu bilesimin bir veya daha fazla interferon içermemesi sarti ile iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu içeren ribavirin bazli HCV terapisine yönelik bir bilesim içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, bir veya daha fazla interferon olmaksizin iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin içeren birlikte uygulanan oral antiviral ajanlara direnç ile HCV çeyrek türlerinin ortaya çikisinin azaltilmasina yönelik bir bilesim içerir.
Benzer sekilde mevcut bulusun bir diger açisi asagidakilerin kullanimini içerir: bir insanda HCV enfeksiyonunun bir veya daha fazla semptomunun iyilestirilmesine yönelik bir ilacin üretiminde, bir veya daha fazla interferon olmaksizin iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirinin kullanimi; ve ayrica HCV tanisi konulan bir insandaki viral yükün azaltilmasina yönelik ilacin üretiminde, bir veya daha fazla interferon olmaksizin iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirinin kullanimi; ve ayrica bir insan öznede HCV'nin tedavi edilmesine yönelik bir ilacin üretiminde iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ile baglantili olarak ribavirinin kullanimi, burada söz konusu kullanim bir veya daha fazla interferon kullanimini içermez; ve ayrica ribavirin bazli HCV terapisine yönelik bir ilacin üretiminde, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunun kullanimi, burada söz konusu kullanim, bir veya daha fazla interferonun uygulanmasini önler; ve ayrica birlikte uygulanan oral antiviral ajana direnç ile HCV çeyrek türlerin ortaya çikisin azaltilmasina yönelik bir ilacin üretiminde, bir veya daha fazla interferon olmaksizin, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirinin kullanimi.
Mevcut bulusun bir diger açisi, ribavirin ve iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu içeren bir kombinasyonu içerir, bu kombinasyon bir veya daha fazla interferonu büyük ölçüde içermez. Bir düzenlemede kombinasyon, birbirine yakin zamanda veya uzak zamanda birlikte veya ayri olarak, sirali olarak veya es zamanli olarak uygulanan her bir aktif bilesen ile ayri dozaj formlari olarak meydana gelebilir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, sunlari içeren bir kisi içerir: ribavirin, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi ve HCV'yi tedavi etme, viral yükünü azaltmak veya baslangicini veya ilerlemesini geciktirmek üzere bir tedavi rejimini ile ilgili talimat burada tedavi rejimi, bir veya daha fazla interferon uygulamasi olmaksizin iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi ve ribavirinin uygulanmasini içerir. Bir düzenlemede bu tür bir kit ayrica bir blister paketi gibi paketi içerebilir. Alternatif olarak bu tür bir kit, ayri olarak paketlenen farmasötikler olarak her bir bilesenin ayri reçetesini ve dozlamasini saglayabilir ancak HCV'yi tedavi etme, viral yükünü azaltmak veya baslangicini veya ilerlemesini geciktirmek üzere bir tedavi rejimi ile ilgili talimat ile kombine edildiginde bunun, mevcut bulus kapsami dahilinde olmasi tasarlanir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, asagidakileri içeren farmasötik bir bilesim içerir: ribavirin; iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici. Bir düzenlemede farmasötik bilesim bir birimsel dozaj formu olabilir.
Aksi belirtilmedikçe Ribavirin ile kombinasyon terapisi, uygulanan her bir aktif bilesen (Kombinasyon Bilesikleri dahil) ile ayri dozaj formlari olarak uygulanabilir, birlikte (örnegin bir birim dozaj formunda, bir tablet gibi) veya ayri olarak, sirali olarak veya es zamanli olarak ve birbirine yakin zamanda veya uzak zamanda uygulanabilir. Ayri ayri uygulanmasi halinde her bir bilesik, digerlerinin bu tür uygulanmasi ile ayni zamanda veya öncesinde veya sonrasinda digerleri ile uygulanabilir. Aktif bilesenler günlük olarak uygulanabilir. Bir düzenlemede aktif bilesenlerin bir günlük dozaj, ayri alt-dozlar, örnegin günde bir, iki, üç veya dört kez uygulanabilir. Avantajli olarak Kombinasyon Bilesikleri veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlari ve ribavirinin günlük dozaji günde bir kez uygulanabilir.
Mevcut bulus, bir veya daha fazla interferon olmamak üzere iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunun uygulanmasini içeren, HCV'nin tedavisine yönelik bilesimler, kullanimlar ve benzerini içermesine ragmen mevcut bulus, bir veya daha fazla interferonun insana dozlanmasina yönelik potansiyeli engellemez. Yine de mevcut bulus, aslinda bir veya daha fazla interferonu içeren bir diger belirtiye yönelik bir diger terapi ile baglantili olarak kullanilabilir.
Iki veya daha fazla K0mbinasyon Bilesigin Ribavirin ve interferon ile Kombinasyonlari Mevcut bulusun bir diger açisi, HCV'nin tedavisine yönelik iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ve ribavirin, ve bir veya daha fazla interferonun uygulanmasini içeren bilesimler, kullanimlar ve benzeri saglar. Daha fazla interferonun uygulanmasi, Kombinasyon Bilesikleri ve ribavirinin uygulanmasina göre geçici olabilir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu, ribavirin, ve bir veya daha fazla interferonun uygulanmasini içeren, bir insanda HCV enfeksiyonunun bir veya daha fazla semptomunun iyilestirilmesine yönelik bir yöntemde kullanimi içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, asagidakileri içeren HCV tanisi konulan bir insandaki viral yükünün azaltilmasina yönelik bir yöntemde kullanimi içerir: ribavirin ve bir veya daha fazla interferon ile birlikte iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu.
Mevcut bulusun bir diger açisi, ribavirin, ve bir veya daha fazla interferon ile birlikte iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunun uygulanmasini içeren ribavirin bazli HCV terapisi yönteminde kullanimi içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, asagidakileri içeren birlikte uygulanan oral antiviral ajana direnç ile HCV çeyrek türlerinin ortaya çikmasinin azaltilmasina yönelik bir yöntemde kullanimi içerir: ribavirin ve bir veya daha fazla interferon ile birlikte iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunun uygulanmasi.
Mevcut bulusun bir diger açisi, bir insanda HCV enfeksiyonunun bir veya daha fazla semptomunun iyilestirilmesine yönelik bir ilacin üretiminde, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ribavirin, ve bir veya daha fazla interferon kullanimini içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, HCV tanisi konulan bir insanda viral yükün azaltilmasina yönelik ilaç üretiminde, ribavirin ve bir veya daha fazla interferon ile birlikte iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunun kullanimini içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, bir insan öznedeki HCV'nin tedavi edilmesine yönelik bir ilacin üretiminde iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu ile baglantili olarak ribavirin kullanimini içerir, burada söz konusu kullanim bir veya daha fazla interferonun kullanimini içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, ribavirin bazli HCV terapisine yönelik bir ilacin Üretiminde iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilirtuzunun kullanimini içerir, burada söz konusu kullanim bir veya daha fazla interferonun uygulanmasini içerir. Mevcut bulusun bir diger açisi, birlikte uygulanan oral antiviral ajanlara direnç ile HCV çeyrek türlerinin ortaya çikisinin azaltilmasina yönelik bir ilacin üretiminde iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu, ribavirin, ve bir veya daha fazla interferon kullanimini içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, ribavirin ve iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu içeren bir kombinasyonu içerir, bu kombinasyon bir veya daha fazla interferonu içerir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, asagidakileri içeren bir kit içerir: ribavirin, iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi ve bir veya daha fazla interferon; ve HCV”yi tedavi etmek, viral yükünü azaltmak veya baslangicini veya ilerlemesini geciktirmek üzere bir tedavi rejimi ile ilgili talimatlar, burada tedavi rejimi iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi ve ribavirinin uygulanmasini ve bir veya daha fazla interferonun uygulanmasini içerir.
Bir düzenlemede bu tür bir kit ayrica bir blister paket gibi paketi içerebilir. Alternatif olarak bu tür bir kit, ayri olarak paketlenen farmasötikler olarak her bir bilesenin ayri reçetesini ve dozlamasini saglayabilir ancak HCV'yi tedavi etmek, viral yükünü azaltmak veya baslangicini veya ilerlemesini geciktirmek üzere bir tedavi rejimi ile ilgili talimat ile kombine edildiginde bunun, mevcut bulus kapsami dahilinde olmasi tasarlanir.
Mevcut bulusun bir diger açisi, asagidakileri içeren farmasötik bir bilesim içerir: iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuzu, ribavirin, ve bir veya daha fazla interferon; ve bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici. Bir düzenlemede farmasötik bilesim bir birimsel dozaj formu olabilir.
Aksi belirtilmedikçe Ribavirin ve bir veya daha fazla interferon ile kombinasyon terapisi, hastaya uygulanan bir veya daha fazla interferon ile ayri dozaj formlarinda uygulanabilir ve kombinasyon terapisinde (Kombinasyon Bilesikleri dahil) kullanilacak geri kalan aktif bilesenlerin her biri birlikte (örnegin bir birim dozaj formunda, bir tablet gibi) veya ayri olarak, sirali olarak veya es zamanli olarak ve birbirine yakin zamanda veya uzak zamanda uygulanabilir. Ayri ayri uygulanmasi halinde her bir aktif bilesik, digerlerinin bu tür uygulanmasi ile ayni zamanda veya öncesinde veya sonrasinda digerleri ile uygulanabilir. Aktif bilesenler günlük olarak uygulanabilir. Bir düzenlemede bir günlük dozaj ayri alt-dozlar, örnegin günde bir, iki, üç veya dört kez uygulanabilir. gk Teraükler D_ahil Kombinasyon Tera& Bir diger düzenlemede uygun kombinasyonlarin sinirlandirici olmayan örnekleri, HCV'nin tedavi edilmesine yönelik diger ilaçlarin yani sira HCV N83 proteaz inhibitörleri, alfa-glukosidaz 1 inhibitörleri, hepatokoruyucular, HCV NSSB polimerazin nükleosid veya nükleotid inhibitörleri, HCV NSSB polimerazin non-nükleosid inhibitörleri, HCV N85A inhibitörleri, TLR-7 agonistleri, siklofilin inhibitörleri, HCV IRES inhibitörleri, HCV girdi inhibitörleri, HCV olgunlastirma inhibitörleri, HCV düzenek inhibitörleri, HCV infektivite inhibitörleri ve farmakokinetik arttiricilar dahil bir veya daha fazla ek aktif bilesenler ile iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesiginin kombinasyonlarini içerir. Daha spesifik olarak mevcut bulusa ait iki veya daha fazla Kombinasyon Bilesigi, asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir veya daha fazla bilesik ile kombine edilebilir: (i) HCV N83 proteaz inhibitörleri, örnegin, boceprevir (SCH-, telaprevir (VX--2-[2- hekzadekahidrosiklopenta[c]sikl0propa[g][1,6]diazasiklotetradesin-12a- (ii) alfa-glukosidaz 1 inhibitörleri, örnegin, celgosivir (MX-3253), UT-231B, Miglitol; (iii) hepatokoruyucular, örnegin, emericasan (lDN-6556), ME-3738, silibilin, ve (iv) HCV NSSB polimerazin nükleosid veya nükleotid inhibitörleri, örnegin (v) HCV NSSB polimerazin non-nükleosid inhibitörleri, örnegin filibuvir (PF- (viii) siklofilin inhibitörleri, örnegin, DEBlO-025, SCY-635, ve NIM811; (ix) HCV IRES inhibitörleri, örnegin, MCI-067; (x) farmakokinetik arttiricilar, örnegin roksitromisin, BAS-100, SPl-452, PF- (xi) HCV girdi inhibitörleri (xii) HCV düzenek inhibitörleri; (xiii) HCV olgunlastirma inhibitörleri; (xiv) HCV infektivite inhibitörleri; ve (xv) HCV'nin tedavi edilmesine yönelik diger ilaçlar, örnegin timosin alfa 1 (Zadaxin), nitazoksanid (Alinea, NTZ), BIVN-, SENTETIK ÖRNEKLER Bilesikler 1, 2, 3, 6, 7 ve 8'in hazirlanmasina yönelik sentetik protokoller, literatürde bilinmektedir. Ek olarak Kombinasyon Bilesiklerinin her birinin hazirlanmasina yönelik bir sentetik protokol, asagidaki Örneklerde verilmektedir. kullanilarak hazirlanabilir. Bilesik 1 ayni zamanda asagidaki örnekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. Örnek 1: 5-({6-[2,4-bis(triflorometil)fenil]piridazin-3-iI}metiI)-2-(2-florofenil)-5H- imidazo[4,5-c]piridin 1.
Bilesik MW Miktar Moller Bilesik içinde çözünmüstür.
Esdegeder Bu solüsyona, 2,4- bis(triflorometil)fenilboronik asit105 ve bir 2N aköz Na2C03 solüsyonu eklenmistir.
Ortaya çikan bifazik karisima, Pd(PPh3)4 eklenmistir ve reaksiyon, 72 saat 80°C'de isitilmistir. Reaksiyon, oda sicakligina sogutulmustur ve Selit ile filtrelenmistir ve Selit, EtOAc ile yikanmistir. Filtrat vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, bilesigi ayristirmak üzere MeOH/CH2CI2 kullanilarak 69 SiOz üzerinde saflastirilmistir. Bu sekilde elde edilen bilesik, PPh3(O) ile kontamine edilmistir. Ürün, %1 adimlarinda %0 ila 5 MeOH/CH2C12 ile 1 mm Chromatotron plakasi üzerinde yeniden saflastirilmistir. Saf parçalar kombine edilmistir ve vakum ile konsantre edilmistir, akabinde 12 saat yüksek vakum ile kurutulmustur. Bilesik 1'in 11.8 mg`lik serbest bazi, PPh3 kontaminasyonu Ara ürün bilesigi 104 asagidaki sekilde hazirlanmistir. a. Bilesik 102'nin Hazirlanisi.
Trikloroizosiyanürik / IN asit / N 101 102 Bilesik MW Miktar mmoller Esdegerler CHCI3 içindeki ticari olarak temin edilebilir baslangiç materyali 101 solüsyonuna 60°C`de trikloroizosiyanürik asit (TCCA) eklenmistir. Akabinde solüsyon 1.5 saat karistirilmistir, sogutulmustur ve HiFIo-Selit ile filtrelenmistir. Filtrat, konsantre edilmistir ve vakum ile kurutulmustur. Verim, 5.037 9 bilesik 102'dir.
R' çekirdeHk 103 / i' F N NaOH.DMF \ i:) 102 104 Bilesik MW Miktar mmoller Esdegerler DMF (dimetilformamid) içindeki bilesik 103 solüsyonuna NaOH eklenmistir. Bilesik 102, DMF (20 mL) içinde çözünmüstür ve yavasça solüsyona eklenmistir. Reaksiyon 3 saat karistirilmistir, su ile seyreltilmistir ve EtOAc ile özütlenmistir. Organik katman, Na2804 ile kurutulmustur. Solvent uzaklastirilmistir ve ürün diklorometan ile rekristalize edilmistir. Verim, 5.7 9 bilesik 103'tür. yöntemler ve ara ürünler kullanilarak hazirlanabilir. Bilesik 2 ayni zamanda asagidaki Örnekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. Örnek 2:Bilesik 2'nin Hazirlanisi. 206 _› û/ Y o Nm. P O°C'ye sogutulmustur. Iyodotrimetilsilan (, hizli bir sekilde damlalar halinde eklenmistir, 10 dakika sonra 2,6-Iutidin ( eklenmistir. Reaksiyon karisimi yavasça oda sicakligina iIitilmistir ve 1 saat karistirilmistir, akabinde yeniden O°C'ye sogutulmustur ve 2,6-Iutidin (11.1 mL, 95.6 mmol) akabinde MeOH (24 mL) eklenmistir. Solüsyon, vakum ile konsantre edilmistir ve ham kalinti, %55 verim ile 12.68 9 Bilesik 2 elde etmek üzere HPLC ile saflastirilmistir. 1H NMR (, 6 42.4; LCMS Ara ürün bilesigi 206 asagidaki sekilde hazirlanmistir. 4» vi:'*3-.;..., f .
Q 1 “1.3- PS** 203 Bilesik içinde çözünmüstür ve O°C'ye sogutulmustur. Solüsyona N-metilmorfolin ( eklenmistir. O°C”de 10 dakika sonra damlatilarak i-bütilkloroformat ( eklenmistir. Ek 1 saat sonra, (1-amino-2-viniI-siklopropil)-(2,6-difloro-benzil)-fosfinik asit etil ester 202 ( içindeki bir solüsyon olarak yavasça eklenmistir.
Süspansiyon, oda sicakligina ilitilmistir ve 2 saat sonra HzO ( ve etilasetat ( ile özütlenmistir ve kombine organik katmanlar, HCI (1 N, ile yikanmistir. Asit yikamasi ve aköz yikama kombine edilmistir ve etilasetat ( ile geri özütlenmistir. Kombine organik katmanlar, tuzlu su ( ile yikanmistir, vakum ile konsantre edilmistir. LCMS (M + 1): 898.06. 0 n N H OQÇFT 203 _› 9 T 5: O Nm_ P dakika gazindan arindirilmistir. Solüsyon, 40°C'ye isitilmistir ve Grubb G1 katalizörü (2.95 9, 3.59 mmol) eklenmistir. Reaksiyon, 17 saat reflükse edilmistir, bunun üzerine tris-hidroksimetilfosfin ( ve HzO ( eklenmistir ve reaksiyon karisimi, 16 saat daha reflükse isitilmistir.
Reaksiyon karisimi, oda sicakligina sogutulmustur ve iki katman ayrilmistir. Organik katman HzO ( ile yikanmistir, MgSO4 üzerinde kurutulmustur ve konsantre edilmistir. Ham kalinti, %66 verimde 8.30 9 makrosiklik olefin : 870.09. alümina üzerinde rodyum (agirlikça %5 2.945 9, agirlikça %040) eklenmistir. Sistem bosaltilmistir ve Hz (1 atm, 3x) ile temizlenmistir. 3 saat sonra sisteme daha fazla alümina üzerinde rodyum (agirlikça %5 842 g, agirlikça %010) eklenmistir ve bosaltilmistir ve H2(1 atm, 3x) ile temizlenmistir. 1 saat daha sonra süspansiyon filtrelenmistir ve %88 ham verimde 6.49 9 indirgenmis makrosikl 205 saglayarak vakum ile konsantre edilmistir. LCMS (M + 1): 872.04. d. Bilesik 206'nin Hazirlanisi. çözünmüstür ve 8-klor0-2-(2-izopropilamino-tiyazoI-4-il)-7-metoksi-kin0lin-4- Karisim 6 saat 65°C'ye isitilmistir, akabinde etilasetat ( ile seyreltilmistir ve LiCl (5%, ile özütlenmistir ve kombine organik katmanlar, tuzlu su ( ile yikanmistir, N32804/MgSO4 üzerinde kurutulmustur ve vakum ile konsantre edilmistir. Ham kalinti, %58 verim ile 4.39 9 aminotiyazol 206 saglayarak silika-jel kromatografisi (etilasetat-metanol) ile saflastirilmistir. LCMS (M + 1): 985.28.
Ara ürün Bilesigi 201, asagidaki sekilde hazirlanabilir.
Boc/ OMe BOC/ OMe OMe 208 209 O NVÇOZII 210 X T 5 _› e. Bilesik 209'un Hazirlanisi.
Bilesik içinde eklenmistir. Reaksiyon karisimi bir gece oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon, EtOAc ( eklenmistir. Iki katman ayrilmistir ve aköz katman, EtOAc (2 x ile özütlenmistir. Kombine organik katmanlar, tuzlu su ( ile yikanmistir, N82804 ile kurutulmustur, filtrelenmistir ve kombi-flas ile saflastirilmistir.f. Bilesikler 210 ve 212'nin Hazirlanisi.
Bilesik ile muamele edilmistir ve 1 saat karistirilmistir. Reaksiyon karisimi konsantre edilmistir ve 20 dakika vakum ile kurutulmustur. Bilesik içinde çözünmüstür ve asit ve NMM (13.5 9, 131.5 mmol) eklenmistir. Reaksiyon karisimi bir gece oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon EtOAc (, NaHC03, tuzlu su ile yikanmistir, N82804 üzerinde kurutulmustur ve konsantre edilmistir. Ham ürün, %93 verim ile 15.1 g bilesik 212'yi elde etmek üzere kombi-flas ile saflastirilmistir. mmol) içinde 4 N HCI eklenmistir. Reaksiyon karisimi oda sicakliginda 2 saat karistirilmistir, konsantre edilmistir, 20 dakika vakum ile kurutulmustur ve akabinde CHsCN (50 mL) içinde çözünmüstür. HzO (50 mL) içinde doymus NaH003 eklenmistir ve 5 dakika karistirilmistir. THF (50mL) içindeki taze hazirlanmis siklopentilkloroformat eklenmistir. Reaksiyon 1 saat içerisinde tamamlanmistir. Solvent düsük basinç altinda uzaklastirilmistir ve kalinti, EtOAc ile seyreltilmistir. Karisim, 1 N HCI ile pH = 2 degerine getirilmistir ve iki katman ayrilmistir. Organik katmanlar tuzlu su ile etmek üzere konsantre edilmistir.
Ham ester ve akabinde MeOH (6 mL) ve LiOH (660 mg, 25.4 mmol) eklenmistir. Reaksiyon karisimi, 1 saat oda sicakliginda karistirilmistir ve EtOAc ile seyreltilmistir. Reaksiyon karisimi 1 N HCI ile pH 2 degerine asitlestirilmistir ve iki katman ayrilmistir. Aköz katman, EtOAc (2 x) ile özütlenmistir. Kombine organik katmanlar, tuzlu su ile yikanmistir, Na2804 ile kurutulmustur, konsantre edilmistir ve 3.09 9 asit 201'i elde etmek üzere vakum ile kurutulmustur. sekilde hazirlanabilir.
Mel) n. _ M” ' N a. DH_. _J 214 GH :is i. 8-kloro-4-hidroksi-Y-metoksikinolin-2-karboksilik asit 215'in Hazirlanisi. karisimi içindeki metil 8-kloro-4-hidr0ksi-7- LiOH (30.5 9, 0.725 mol) solüsyonu eklenmistir. LCMS analizi, karboksilik aside tam dönüsüm gösterdiginde karisim bir saat oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon, uçucularin uzaklastirilmasi ve solüsyonun pH degerinin aköz 6N HCI kullanilarak 6”ya ayarlanmasi ile çalisilmistir. Ortaya çikan sakizimsi kalinti filtrelenmistir ve beyaz bir kurutulmustur. El MS (miz) 253.9 [M+H]. j. 2-(2-diazo-1-okso)-8-kIoro-7-metoksikinolin-4-il izobütil karbonat 216'nin Hazirlanisi mol) ve i-Bütilkloroformat ( eklenmistir. LCMS analizi, istenen karisik anhidriti saglamak üzere reaksiyonun tamamlandigini gösterdiginde karisim 1 saat 0°C'de karistirilmistir. El MS (m/z) 454.0 [M+H]. Anhidritin reaksiyon karisimina, 0°C`de plastik huni ile dietil eter içindeki 1M diazometan ( solüsyonu eklenmistir. Bu karisim, 2 saat daha oda sicakligina iIitilarak karistirilmistir. LCMS ile karisimin analizi, reaksiyonun tamamlandigini göstermistir. Septum uzaklastirilmistir ve reaksiyon, solventin uzaklastirilmasindan önce 20 dakika daha karistirilmistir.
Kalinti, bir sonraki adima tasinan bilesik 216'yi saglamak üzere yüksek vakum ile daha da kurutulmustur. El MS (m/z) 377.9 [M+H]. k. 8-kloro-2-(2-(izopropilamino)tiyazoI-4-iI)-7-metoksikinolin-4-ol 207'nin Hazirlanisi.
O°C`de THF (-8-kl0r0-7-metoksikinolin-4-il HBr (23 mL, 0.201 mol) eklenmistir. LCMS analizi, reaksiyonun tamamlandigini gösterdiginde solüsyon, 40 dakika daha 0°C'de karistirilmistir. Reaksiyon, aköz katmanin pH degerinin 9'a ayarlanmasi için 0°C'de aköz 1N NaOH ( eklenerek çalisilmistir. Katmanlar ayrilmistir ve aköz katman EtOAc (2 x ile yikanmistir.
Kombine organik ekstraktlar, tuzlu su ile yikanmistir ve MgSO4 üzerinde kurutulmustur.
Solvent, 17.7 9 sari bir kati elde etmek üzere vakum ile uzaklastirilmistir. El Bir önceki reaksiyondan elde edilen bromoketon solüsyonu, i-propanol ( ve izopropilizoüre (9.4 9, 0.080 mol) içinde süspanse edilmistir. Reaksiyon karisimi 32 saat 72°Ctde isitilmistir. Reaksiyonun LCMS analizi, istenen ürüne tam dönüsüm oldugunu göstermistir. Reaksiyon, ürünün solüsyondan çöktürülmesine izin vermek üzere oda sicakliginda sogutulmustur. Reaksiyon filtre edilmeden önce 12 saat 0°C”ye sogutulmustur. Filtrat, eter ile yikanmistir ve turuncu bir kati olarak 8.03 9 bilesik 207'yi elde etmek üzere liyofilize edici üzerinde kurutulmustur. 1H NMR (: 6 yöntemler ve ara ürünler kullanilarak hazirlanabilir. Bilesik 3, asagidaki Örnekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. Örnek 3: Bilesik 3'ün Hazirlanisi 315 _› /_\ H 0 Bilesik içinde sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyonun tamamlanmasi üzerine "120 içinde 4 N HCI, O°C'de pH degeri 7'ye ayarlamak için eklenmistir. Karisim, EtOAc (2 x 400 ml) ile özütlenmistir. Kombine organik katman, tuzlu su ile yikanmistir, kurutulmustur (Na2804) ve sari bir kati olarak bilesik 3'ü (11 g, %93) elde etmek üzere vakum ile konsantre edilmistir. LC/MS = 6 7.95 (Ci, 014-004 (m, 2H) Ara ürün bilesik 315, asagidaki sekilde hazirlanmistir. .4 ;t_,Zri I._.l U; _ *'/h-.rLH tL.N / "KUA- 'i_i*Nu lu 1'i”- 'T'J * r' 14-- .:i i..i:i.. [bu .i-îz' Kuru, argon püskürtülmüs üç boyunlu yuvarlak tabanli balona ( 0°C'de anhidröz diklorometan ( eklenmistir. (DIKKAT: Argon kaynagi, igneden olamaz. Yalnizca uygun bir cam adaptör kullanin. Ikinci bir gaz verici, asiri basinç olusmasini önlemek için balona takilabilir.) Siklopenten-3-ol ( balona eklenmistir ve karisim, gaz yayilmasi durana kadar karistirilmistir. Akabinde 30 dakikalik bir süre içerisinde damlatilarak diiyodometan (22 mL, 242 mmol) eklenmistir.
Reaksiyon, oda sicakligina ilitilmistir ve pozitif argon akisi altinda bir gece karistirilmaya devam edilmistir, bu noktada TLC analizi, baslangiç alkolünün tamamen kayboldugunu göstermistir. Reaksiyon akabinde CH20|2 ile seyreltilmistir ve 2M HCI (beyaz çökelti, tamamen çözünmüs olmalidir) ile söndürülmüstür. Bifazik karisim, ayirici huniye dökülmüstür ve organik katman toplanmistir. Solvent, bilesik 301'i içeren 100 mL materyal kalana kadar düsük basinç altinda uzaklastirilmistir. b. Bilesik 302'nin Hazirlanisi.
Anhidröz diklorometan (, balona eklenmistir ve akabinde damlatilarak trietilamin (34 mL, 245 mmol) eklenmistir. Reaksiyon, pozitif nitrojen akisi altinda oda sicakliginda karistirilmaya devam etmistir, bu noktada balona parçalar halinde disüksinimidilkarbonat (40.7 9, 159 mmol) eklenmistir. TLC analizi, baslangiç materyalinin tamamen kayboldugunu gösterene kadar (2-3 gün) reaksiyon karistirilmistir. Tamamlanmasi üzerine reaksiyon karisimi, 1M HCI ( ile söndürülmüstür ve H20 ( ile yikanmistir. Istenen materyal, CH20|2 kullanilarak özütlenmistir ve kombine organik katmanlar, anhidröz MgSO4 kullanilarak kurutulmustur ve bir silika pedi içinden geçirilmistir. Solvent, düsük basinç ile uzaklastirilmistir ve ham materyal, bilesik 302'yi (22 g, 75%) saglamak üzere flas kromatografi (Rf = 0.33, 1:1 Hekz/EtOAc) kullanilarak saflastirilmistir: 1H NMR (, 0.48 (m, 1H), 0.40 (m, 1H). 54°" "' Im :1 - pr 5,.: P Q IJ ` _ Ali ` _i .'44 _› _.1 H _› es., 68.6g, 611.6 mmol), mekanik karistiricisi ve bir ekleme hunisi olan 2 L üç boyunlu yuvarlak tabanli bir balon içindeki anhidröz toluen ( içinde çözünmüstür.
Solüsyonun N2 altinda 0°C`ye sogutulmasindan sonra 300 mL toluen içindeki 4-Brom0- ekleme hunisi ile eklenmistir. Reaksiyon karisimi karistirilmistir ve bir gece (16 saat) oda sicakligina ilitilmistir. Karisim yavasça 2L 1M Na2C03 (aköz) içine dökülmüstür ve ürün, EtOAc (2L) ile özütlenmistir. Organik fazin, ve tuzlu su (1 L) ile yikanmasindan sonra kurutulmustur (MgSO4) ve 195.45 9 sari bir yagli brosilat ürünü elde etmek üzere konsantre edilmistir.
Diklorometan ( solüsyonuna yavasça dioksan ( içindeki 4.0 M HCl eklenmistir ve ortaya çikan solüsyon, 2 saat oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon karisimina eter (500mL) eklendikten sonra karisim 15 dakika karistirilmistir ve beyaz bir çökelti filtrasyon ile toplanmistir. Kati, atar ve hekzan ile yikanmistir ve akabinde iki adimda %94 verim ile bilesik 304'ün 381.8 mmol, 153.0 g HCI amin tuzunu elde etmek üzere bir gece vakum ile kurutulmustur. mmol) ve Hunig bazi ( solüsyonu, tek parça halinde yukaridaki asit karisimina eklenmistir. Reaksiyon karisimi, LCMS ile izlenerek 3 saat oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon karisimi, düsük basinç altinda diklorometani uzaklastirmak üzere konsantre edilmistir ve elde edilen beyaz kati filtrelenmistir. Kalan DMF solüsyonu, etil asetat (1L) ile seyreltilmistir, sirasiyla %3 LiCl (aköz) (3x650mL), NaHC03 (3x500mL) ve tuzlu su (500mL) ile yikanmistir. Ortaya çikan organik parça, kurutulmustur (MgSO4) ve bilesik 305'i (111g) elde etmek üzere konsantre edilmistir. e. Bilesik 306'nin Hazirlanisi. solüsyonuna HzO ( solüsyonu eklenmistir. Solüsyon, oda sicakliginda 4 saat karistirilmistir. Karisim, 3N HCl ile yaklasik 5.5 pH degerine asitlestirilerek bir buz banyosu içinde sogutulmustur, 10 dakika karistirilmistir ve ortaya çikan beyaz katilar, filtrasyon ile toplanmistir. Katilar, etmek üzere bir gece 40°C'de vakum altinda kurutulmustur. f. Bilesik 307'nin Hazirlanisi. mL, 432.8 mmol) eklenmistir. Karisimin oda sicakliginda 20 dakika karistirilmasindan bazi ( solüsyonu, tek parça halinde yukaridaki asit karisimina eklenmistir. Reaksiyon karisimi 3 saat oda sicakliginda karistirilmistir ve LCMS ile izlenmistir. Karisimin, diklorometani uzaklastirmak üzere düsük basinç altinda konsantre edilmesinden sonra, olusan katilar filtrelenmistir. Kalan DMF, etil asetat (600mL) ile seyreltilmistir ve sirasiyla %3 LiCI (aköz) (2x550mL), doymus NH4CI elde etmek üzere konsantre edilmistir.
Bilesik 307, oda sicakliginda dioksan ( içindeki 4N HCI içinde çözünmüstür ve 2 saat karistirilmistir. Akabinde vakum ile konsantre edilmistir ve kuruyana kadar diklorometan (2 x 200mL) ile buharlastirilmistir. Kalinti, EtOAc (600mL) ve doymus aköz NaHCOei (1L) içinde çözünmüstür. Iyice karistirilmistir. 10 dakika sonra bir parça 173.1 mmol) eklenmistir. Ortaya çikan karisimin 30 dakika daha karistirilmasindan sonra organik katman toplanmistir ve tuzlu su (500mL) ile yikanmistir, kurutulmustur üzere etil asetat/hekzan ile silika jel üzerinde flas kromatografi ile saflastirilmistir. 3“ 'Jak' w rxv-(rî/ "V" I ` _î l Yri)ý MW ,i 1d r i ` 1' l sonra katilar filtrelenmistir ve su ile yikanmistir. Ortaya çikan katilar, doymus NaHCOs solüsyonu (- ile tritüre edilmistir, filtrelenmistir, su ile yikanmistir ve koyu kahverengi bir kati olarak ~ 40 g (%61) ham 310'u elde etmek üzere vakum ile kurutulmustur. LC/MS = . 1-(2-Amino-3-kloro-4-hidroksi-feniI)-etanon içinde çözünmüstür. Sezyum karbonat (140 g, 430 mmol) ve akabinde bromoasetaldehit karistirilmistir. Oda sicakligina sogutulduktan sonra karisima EtOAc (1 L) ve "120 (1 L) eklenmistir. Organik katman, EtOAc (1 x 400 ml) ile özütlenmistir. Kombine organik katman, aköz %3 LiCI solüsyonu (2 x 1L), tuzlu su ile yikanmistir, kurutulmustur (Na2804) ve vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, beyaz bir kati olarak bilesik 311'i elde etmek üzere silika jel kromatografisi ile saflastirilmistir (39 g, %67). j. Bilesik 312'nin Hazirlanisi. mmol) karisimina yavasça -40°C`de fosfor oksiklorid (9.47 9, 61.8 mmol) eklenmistir.
Akabinde karisim 4 saat O°C'de karistirilmistir. Reaksiyonun tamamlanmasi üzerine karisima damlatilarak H20 (30 ml) eklenmistir. Karisim akabinde 0°C`de 15 dakika daha karistirilmistir. Karisim vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, EtOAc ile seyreltilmistir, doymus NaHCOs aköz solüsyonu ile yikanmistir. Organik katman kurutulmustur (Na2804) ve vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, CHzCIz içinde çözünmüstür, hekzanlar yavasça solüsyona eklenmistir ve sari bir kati çökmeye baslamistir. Ana sivida çok fazla ürün kalmayana kadar bilesik 312'yi (18 g, %85) elde etmek için daha fazla hekzan eklenmistir. 2-Izopropilamino-tiyazoI-4-karboksilik asit [6-asetiI-2-klor0-3-(2,2-dimetoksi-etoksi)- degisimi izlenirken iyice karistirilan karisima NaH (2.4 9, 61 mmol) eklenmistir.
Karisim, reflükse isitma sirasinda berrak bir solüsyon haline gelmistir. 3 saat reflükse edildikten sonra reaksiyon tamamlanmistir. Karisim oda sicakligina sogutulmustur.
H2O (3 hacim) içindeki ACOH (69.2 mmol) solüsyonu karisima eklenmistir. O°Cide 1 saat iyice çalkalandiktan sonra katilar filtrasyon ile toplanmistir. HZO ile durulanmistir. kurutulmustur. 65°C'de karistirilmistir. Reaksiyon oda sicakligina sogutulmustur ve EtOAc (600 ml) ve aköz %3 LICI (600 ml) solüsyonu karisima eklenmistir. Organik katman, aköz %3 LICI (1 x 600 ml), tuzlu su ile yikanmistir, kurutulmustur (Na2304) ve vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, sari bir kati olarak istenen metil esteri (23.6 9, %75) elde etmek üzere silika jel kromatografisi ile saflastirilmistir. LC/MS = 900.13(M*+1). solüsyona H20 (75 ml) içinde 1.4 N HCI eklenmistir. Karisim 1 saat 60°C'de karistirilmistir. Reaksiyonun tamamlanmasi üzerine karisim, solventleri uzaklastirmak üzere konsantre edilmistir, kalana setik asidi uzaklastirmak üzere toluen (x 2) ile buharlastirilmistir. Kalinti, C02 degisimi izlenirken EtOAc (500 ml) ve doymus NaHCOa aköz solüsyonu (karisimi nötralize etmek için yeterli) içinde çözünmüstür.
Organik katman tuzlu su ile yikanmistir, kurutulmustur (Na2804) ve vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, 1 saat yüksek vakum ile kurutulmustur ve bir sonraki adim için oldugu gibi kullanilmistir. Ham ürün, CH2CI2 (360 ml) içinde çözünmüstür, O°C'de eklenmistir. Akabinde buzlu asetik asit (0.47 9, 7.8 mmol) karisima damlatilarak eklenmistir. Reaksiyon 0°C`de 10 dakika içinde tamamlanmistir. Doymus NaHC03 aköz solüsyonu, reaksiyonu söndürmek için eklenmistir. 20 dakika daha karistirildiktan sonra organik katman tuzlu su ile yikanmistir, kurutulmustur (Na2804) ve vakum ile konsantre edilmistir. Kalinti, sari bir kati (12 g, %50) olarak istenen amin ürünü 315'i elde etmek üzere silika jel kromatografisi ile saflastirilmistir. LC/MS = 924.63(M*+1).
Bilesik 4, asagidaki Ömekte açiklandigi gibi hazirlanmistir. Örnek 4: Bilesik 4'ün Hazirlanisi.
Chralcel OD-H kolon ayirma Diastereomerik karisim 414, heptan ve izopropanol (%70: %30, 4.5 mL karisik solvent içinde 230 mg) içinde çözünmüstür ve asagidaki kosullar altinda kiral kolon ayirmaya tabi tutulmustur: Kolon: Chiralcel OD-H, 2 x 25 cm Solvent sistemi: %70 heptan ve% 30 izopropanol Akis orani: 6 mL/dakika. Çalisma basina yükleme hacmi: 2.5 mL Bilesik 4, 20 dakikalik bir retansiyon süresine sahiptir. 1H NMR (: 6 . Bilesik 4 akabinde X-isini kalite kristalleri için MTBE'den yeniden kristalize edilmistir.
Bilesik 4a 50 dakikalik bir retansiyon süresine sahiptir. 1H NMR (Z 6 Ara ürün diastereomerik karisim 414, asagidaki sekilde hazirlanmistir. a. Bilesik 402inin Hazirlanisi. açiklanan prosedürlere göre hazirlanmistir) solüsyonuna 30 dakikalik süre içerisinde bir damlatma hunisi kullanilarak 0°C'de damlatilarak asetil klorid (22 mL) eklenmistir ve akabinde 16 saat oda sicakliginda karistirilmistir. Karisim konsantre edilmistir, etil asetat ( içinde yeniden çözünmüstür, buzla sogutulan 2 N NaOH ile yikanmistir ve bir yag olarak ham metil eter 402'yi saglayarak kuruyana kadar konsantre edilmistir.
Metanol ( içindeki 0.5 M sodyum metoksit solüsyonu eklenmistir ve oda sicakliginda 16 saat karistirilmistir. Reaksiyon, dioksan ( içinde 4.0 N HCI solüsyonu ile söndürülmüstür. Karisim, ham bilesik 403'ü saglayarak akabinde konsantre edilmistir. 403 404 Toluen (, %50 KOH (su içinde, 85 g), takilan bir Dean-Stark tuzagi ile reflükse isitilmistir. 25 mL suyun toplanmasindan 1 saat sonra benzil klorid (33 g, 260 mmol) eklenmistir ve 16 saat karistirilarak reflükse edilmeye devam edilmistir. Akabinde karisim sogutulmustur ve etil asetat ( ile yikanmistir ve konsantre edilmistir. Kalinti, bir yag olarak metil eter 404'ü (22.0 9, üç adimda %89) saglayarak silika jel kolon kromatografisi (%20 EtOAc / hekzanlar) ile saflastirilmistir. 1H NMR (, 4.37 (m, 0 010` sm mso4 O-ÜOH -; asetik asi! ;' `i 404 405 Asetik asit ( solüsyonuna 3 M sülfürik asit (4.8 9 konsantre sülfürik asit ile 24 mL suyu karistirilmasi ile hazirlanmistir) eklenmistir ve 8 saat 70°C'de karistirilmistir. Karisim, 20 mL hacme konsantre edilmistir ve etil asetat ve buzla sogutulan 2N NaOH arasinda bölünmüstür. EtiI asetat katmani, konsantre edilmistir ve bir yag olarak bilesik 405'i (17.0 9, %80) saglayarak silika jel kolon kromatografisi (-%35 EtOAc/ hekzanlar) ile saflastirilmistir. MS = . e. Bilesik 406'nin Hazirlanisi.
My '1 J› 1 om 50 :9:: a ,i I_ 1 < _ 4 i i I_ U R), .. ii 405 406 DMSO ( solüsyonuna argon altinda oda sicakliginda damlatilarak asetik anhidrit (90 mL, 815 mmol) eklenmistir. Karisim oda sicakliginda 16 saat karistirilmistir ve akabinde karistirilarak buzlu su (1 L) içine bosaltilmistir. Buzun tamamen erimesinden sonra (30 dakika), etil asetat ( eklenmistir. Organik katman ayrilmistir. Bu özütleme prosesi, üç sefer tekrar edilmistir (. Organik ekstraktlar kombine edilmistir ve konsantre edilmistir. Kalinti, bir yag olarak bilesik 406'yi (39 g, %88) saglayarak silika jel kolon kromatografisi (%20 EtOAc / hekzanlar) ile saflastirilmistir. 1H NMR (, f. Bilesik 407'nin Hazirlanisi.
Bn/O ` :O: îO Br N/ "- BULI.TMSCI 408 407 Kuru, argon püskürtülen yuvarlak tabanli balona ( 7-bromo-pirol0[2,1- anhidröz THF ( eklenmistir ve reaksiyon karisimi 2 saat karistirilmistir. Balon, kuru buz/aseton banyosuna (-78°C) yerlestirilmistir ve BuLi ( damlatilarak O°C'ye sogutulmustur ve akabinde damlatilarak reaksiyon balonuna eklenmistir. - 78°C`de 1 saat karistirildiktan sonra balon 0°Clye ilitilmistir ve doymus NH4C| (5 mL), reaksiyonu söndürmek için eklenmistir. Organikler, EtOAc (3 x 10 mL) kullanilarak özütlenmistir ve kombine organik katmanlar, MgSO4 kullanilarak kurutulmustur.
Solvent, düsük basinç altinda uzaklastirilmistir ve ham materyal, flas kromatografisi (hekzan/EtOAc) kullanilarak saflastirilmistir. 560 mg (%90) bilesik 407, iki anomerin bir karisimi olarak izole edilmistir. LC/MS = I 6 407 408 0°C,de, akabinde 0.5 saat daha oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon 0°C`de NaHCOa ile Söndürülmüstür ve CH3C02Et ile seyreltilmistir. Organik faz ayrilmistir, tuzlu su ile yikanmistir, Na2804 üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve konsantre edilmistir. Kalinti, silika jel üzerinde kromatografi ile saflastirilmistir, izomerik bir karisim ayristirilmistir. MS = . mL, CH20I2 içinde 1M) eklenmistir. Reaksiyon karisimi 1 saat -78°C'de karistirilmistir.
Reaksiyon, damlatilarak TEA (2 mL) ve MeOH (5 mL) eklenmesi ile -78°C`de söndürülmüstür. Karisim, oda sicakligina ilimaya birakilmistir, buharlastirilmistir ve birkaç sefer MeOH ile buharlastirilmistir. Kalinti, NaH003 (10 mL H20 içinde 1 9) ile muamele edilmistir, konsantre edilmistir ve istenen ürün bilesigi 409'u (48 mg, %60) elde etmek üzere HPLC ile saflastirilmistir. 1H NMR (, 0.84 (3, 3H). MS = : 1H i. Bilesik 412tnin Hazirlanisi. ci-Fi>-ci `II/`Miz HC' >_O7i/:\ (P.
O 411 0 H ' TEA / CH2C|2 G 410 412 eklenmistir. Ortaya çikan berrak solüsyon 30 dakika -78°C'ye sogutulmustur.
Trietilamin ( 15 dakika içinde damlatilarak eklenmistir. Karisim akabinde oda sicakligina ilitilmistir. 16 saat sonra solvent, argon akimi ile uzaklastirilmistir. Kalinti yeniden MTBE (25 mL) içinde çözünmüstür ve çözünmeyen madde, argon altinda filtrasyon ile uzaklastirilmistir. Filtrat, argon akimi ile yogusturulmustur ve ham ürün 412, tekrar saflastirilmadan bir sonraki reaksiyon için kullanilmistir. 1H NMR (, .. Nmi :' P0(OMe)i Ö --i 409 413 Trimetil fosfat ( solüsyonuna 0°C`de N-metil imidazol ( içindeki bilesik 412 (2.5 9, 8.18 mmol) solüsyonu damlatilarak eklenmistir. Ortaya çikan karisim, 1.5 saat içinde oda sicakligina iIitiImistir. Karisim etil asetat ve su arasinda bölünmüstür. Etil asetat katmani konsantre edilmistir ve kalinti, fosforda 1:1 diastereomerik karisim olarak 1.15 9 (%59) of bilesik 413 saglayarak silika jel kromatografisi (etil asetat ila %10 etanol / etil asetat) ile saflastirilmistir. 1H NMR (, (5, 3H). 31P NMR (. 41 3 414 dimetilformamid dimetil asetal (41 iiL, 0.34 mmol, 1.1 es.) eklenmistir ve 1 saat oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon tamamlanmistir (LCMS ile). Karisim akabinde kuruyana kadar konsantre edilmistir. Kalintiya DCC (250 mg. 1.21 mmol, 4 es), asetonitril (5 mL) ve izobütirik asit (55 mg, 58 pL, 2 es.) eklenmistir. Karisim 48 saat oda sicakliginda karistirilmistir. Su ( 0°C`de eklenmistir ve karisim oda sicakliginda 64 saat karistirilmistir. Sodyum bikarbonat (500 mg) 0°C'de eklenmistir. Karisim 0.5 saat oda sicakliginda karistirilmistir ve filtrelenmistir. Filtrat konsantre edilmistir ve kalinti, fosforda 1:1 diastereomerik karisim olarak 144 mg (%73) bilesik 414'ü saglayarak silika jel kolon kromatografisi (%5 metanol / diklorometan) ile saflastirilmistir. 1H NMR (, 7.1-7.4 (m, 5H), , (12H), . M8 = Bilesik 5, asagidaki Ömekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. tetrahidrofuran-3-iloksi]metil}siklohekzil){[(1R)-4-metilsiklohekz-3-en-1- il]karbonil}amino]tiyofen-2-karboksilik asit 5. o "1 5” N“ " o, O 508 5 3-enkarb0niI)-(1-oksa-spiro[2.5]0kt-6-il)-amin0]-tiyofen-2-karboksilik asit metil potasyum tert-bütoksit (251 mg, 2.24 mmol) ile muamele edilmistir, kapatilmistir ve 16 saat 40°C'ye isitilmistir. Sogutulduktan sonra karisim, pH 3 olana kadar 2 M HCI ile muamele edilmistir, etil asetat ve su arasinda bölünmüstür ve ayrilmistir. Organik katman, %5 Iityum klorid solüsyonu, su ve tuzlu su ile yikanmistir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Filtrasyon ve konsantrasyondan sonra kalintii beyaz bir toz HPLC retansiyon süresi 4.22 dakika (%2-98 asetonitril: su ile %005 trifloroasetik asit).
Ara ürün bilesigi 508 asagidaki gibi hazirlanmistir. o o TiCI o ::â LiOH 501 502 503 a. Bilesik 502fnin Hazirlanisi. mmol) ve diizopropiletilamin (, -10°C'ye sogutulmustur ve akriloil klorid ( ile damlatilarak muamele edilmistir ve 2 saat karistirilmistir. 1M HCI (20 mL) eklenmistir ve organik katman sodyum bikarbonat ve su ile yikanmistir. Organik katman sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve konsantre edilmistir. Flas kromatografi (%, berrak bir yag olarak saglamistir.
Diklorometan (-4,4-dimetiI-2- titanyum tetraklorid ( ile muamele edilmistir.
Sari solüsyon 15 dakika karistirilmistir ve 5 dakika içinde damlatilarak izopren ( ile muamele edilmistir. 2 saat karistirildiktan sonra ek izopren ( parçasi eklenmistir ve reaksiyon karisimi 3.5 saat -10 ila O°C`de karistirilmistir. Reaksiyon karisimi amonyum klorid (doymus aköz) ile söndürülmüstür.
Su ve etil asetat:hekzan (1:1) eklenmistir. Organik katman ayrilmistir ve aköz katman yeniden etil asetat:hekzan (1:1) ile özütlenmistir. Kombine organik katmanlar, sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve konsantre edilmistir. Kalinti, berrak bir metilsiklohekz-S-enkarboksilat502lyi elde etmek üzere flas kromatografisi (%10-50 EtOAczHekz, 80 g kolonu) ile saflastirilmistir.
THF (10 mL), su (1 mL) ve metanol (1 mL) içindeki (R)-((S)-4,4-dimetiI-2- 50°C'ye iIitiImistir. 1 saat sonra reaksiyon karisimi 1M HCI ile muamele edilmistir.
Karisim, hekzanzTHF (10:1) ile özütlenmistir. sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve beyaz bir toz olarak 0.738 9 (nicel verim) (R)-4-metilsikl0hekz-3- enkarboksilik asit 503 elde etmek üzere konsantre edilmistir. 503 504 Toluenden buharlastirilarak azeotropik olarak kurutulan (R)-4-metilsikl0hekz-3- mmol) ile muamele edilmistir, diklorometan ( içinde süspanse edilmistir ve dimetilformamid (4 damla) ile muamele edilmistir. Reaksiyon karisimi 0°C'ye sogutulmustur ve oksalil klorid ( ile damlatilarak muamele edilmistir.
Reaksiyon karisimi, 2 saat karistirilarak ambiyant sicakliga iIitiImistir. Katilarin filtrelenmesinden sonra solüsyon konsantre edilmistir, hekzan ile muamele edilmistir ve bir sonraki adimda hemen kullanilan açik sari bir yag olarak (R)-4-metilsikl0hekz-3- enkarbonil klorid 504 elde etmek üzere yeniden konsantre edilmistir. d. Bilesik 506'nin Hazirlanisi. 0.66 mmol) ve potasyum fosfat tribazik (562 mg, 2.65 mmol), dikloroetan ( içinde süspanse edilmistir, bir kapak ile kapatilmistir ve 90°Ciye isitilmistir. 16 saat sonra reaksiyon karisimi sogutulmustur ve etil asetat ve su arasinda bölünmüstür.
Organik katman ayrilmistir ve aköz katman yeniden etil asetat ile özütlenmistir.
Kombine organik katmanlar, sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve konsantre edilmistir. Flas kromatografi (%10-40 EtOAczHekzan), bej bir köpük olarak iI)-((1R)-4-metiI-siklohekz-3-enkarboniI)-amino]-tiyofen-2-karb0ksilik asit metil ester 506 saglamistir. e. Bilesik 507'nin Hazirlanisi. 1 / OMe \\NO\S/ THF ( ile muamele edilmistir. Reaksiyon karisimi 45°C'ye isitilmistir ve 2 saat karistirilmistir. Etil asetat eklenmistir ve organik katman ayrilmistir, akabinde su, sodyum karbonat (doymus aköz), su ve tuzlu su ile yikanmistir. Organik katman, sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve beyaz bir köpük olarak 0.190 9 (%95 verim) istenen 5- (3,3-dimetiI-büt-1-iniI)-3-[((1R)-4-metiI-siklohekz-3-enkarbonil)-(4-okso-siklohekzil)- amino]-tiyofen-2-karboksilik asit metil ester 507'e konsantre edilmistir.
DMSO (, sodyum hidrit (21 mg, %60 yag solüsyonu, 0.53 mmol) ile muamele edilmistir ve 10 dakika ambiyant sicaklikta karistirilmistir. THF (1 mL + -3- asit metil ester 507, damlatilarak eklenmistir ve reaksiyon karisimi 45 dakika karistirilmistir. Turuncu solüsyon, pH degeri 3 olana kadar %5 sitrik asit ile muamele edilmistir ve su ve etil asetat arasinda bölünmüstür. Organik katman ayrilmistir ve aköz, yeniden etil asetat ile özütlenmistir. Kombine organikler, %5 LiCI, su ve tuzlu su ile yikanmistir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Filtrasyon ve amino]-tiyofen-2-karboksilik asit metil ester508 elde etmek üzere flas kromatografisi (%20-75 EtOAc:hekzan) ile saflastirilmistir. yöntemler ve ara ürünler kullanilarak hazirlanmistir. Bilesik 6 ayni zamanda asagidaki Örnekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. aza-spiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazoI-4-iI}-9H-floren-2-il)-1H-benzoimidazoI-Z-il]-2- aza-bisiklo[2.2.1]heptan-Z-karbonil}-2-metiI-propil)-karbamik asit metil ester 6'nin Hazirlanisi. 1 HCIDiOksarrv'DCM L O WS'NH I N 614 .. HNYO çözünmüstür ve dioksan (4M, 2 mL) içinde HCI eklenmistir ve oda sicakliginda karistirma devam ettirilmistir. 20 dakika sonra tüm uçucular, vakum ile uzaklastirilmistir. Ham materyal, tekrar saflastirilmadan bir sonraki adimda kullanilmistir. Ham materyal, DMF ( içinde çözünmüstür ve DIEA (53.4 mg, Metoksikarbonilamino-3-metil- bütirik asit ve DIEA (178 mg, 0.138 mmol) solüsyonu eklenmistir. Reaksiyon oda sicakliginda karistirilmistir. 20 dakika sonra reaksiyon EtOAc ile seyreltilmistir ve aköz bikarbonat solüsyon, aköz LiCI solüsyonu (%5), tuzlu su ile yikanmistir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur.
Solventlerin filtrasyonu ve vakum ile uzaklastirilmasi, bilesik 6'yi (76 mg) elde etmek üzere RP-HPLC (elüent: sy / MeCN w/ % ile saflastirilan ham materyali Ara ürün bilesigi 614, asagidaki sekilde hazirlanmistir.
CNB” 1. iicz. MeOH _fm (Eîtiflzln TFA. Nçtiz N90: C07H DCM + THFIHyolaseton Cb LiOH.
THF_ neon. Hp 1 Z 952 "Ghz N N .ico Me a. Bilesik 4-Metilen-pirolidin-1,2-dikarboksilik asit 1-benzil ester 2-metil ester 602'nin Hazirlanisi. sicakliginda MeOH (75 mL) içinde çözünmüstür ve HCI (dioksan içinde 4M, 75 mL) eklenmistir. Oda sicakliginda karistirma 4 saat devam ettirilmistir. Tüm uçucular, vakum ile uzaklastirilmistir ve bej rengi bir kati elde edilmistir. Ham materyal, metilen klorid ( eklenmistir. Karisim 0°C'ye sogutulmustur ve karistirilirken benzil kloroformat (8.26 9, 48.4 mmol) eklenmistir. 30 dakika sonra reaksiyon oda sicakligina iIitilmistir ve solüsyon, su ve aköz HCl (1M) ile yikanmistir. Solüsyon, sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Solventlerin filtrasyonu ve buharlastirilmasi. bilesik 602 (10.2 9) elde etmek üzere silika jel kromatografisi (elüent: EtOAc/hekzan) ile saflastirilmistir. LCMS- ESP: hesaplanan C15H17NO4: . b. Bilesikler 603 ve 604'ün bir karisiminin hazirlanisi.
Firinda kurutulan 3 boyunlu yuvarlak tabanli bir balon, bir nitrojen giris adaptörü ve 250 mL bir ekleme hunisi ile donatilmistir. Üçüncü boyun, bir septum ile kapatilmistir.
Balona, bir karistirma çubugu ile yükleme yapilmistir, diklorometan ( ve dietil çinko (hekzan içinde 1.0 M, bir buz banyosunda O°C1ye sogutulmustur. Ekleme hunisi diklorometan (40 mL) ve trifloroasetik asit (9.1 mL, 118 mmol) ile yüklenmistir. Dietil çinko solüsyonunun 0°Clye (yaklasik 25 dakika) sogutulmasindan sonra trifloroasetik asit solüsyonu, karistirilan reaksiyon karisimina dakika içinde damlatilarak eklenmistir. 20 dakika daha karistirildiktan sonra diiyodometan ( 4 dakika içinde yavasça eklenmistir. 20 dakika daha 29.4 mmol), bir kanül yardimiyla 30 mL diklorometan içine eklenmistir. 4-metilen- pirolidin-1,2-dikarb0ksilik asit 1-benzil ester 2-metil ester içeren balon akabinde 10 mL daha diklorometan ile durulanmistir ve bu solüsyon ayni zamanda kanül ile reaksiyon karisimina transfer edilmistir. Reaksiyon karisimi, oda sicakligina iIitiImistir ve 110 saat (yaklasik 5 gün) karistirilmistir, akabinde reaktifler, doymus aköz amonyum klorid (~ ile söndürülmüstür. Balon içerigi yavasça, doymus aköz sodyum bikarbonat ( içeren 2 L ayirma hunisine bosaltilmistir. Aköz faz, üç sefer 300 mL etil asetat ile özütlenmistir. Kombine organikler, magnezyum sülfat üzerinde kurutulmustur ve Bilesikler 603 ve 6047ün bir karisimini saglamak üzere konsantre edilmistir.
Alt parça b'den elde edilen ham materyal, içinde çözünmüstür, akabinde N-metilmorfolin-N-oksit (3.45 9, 29.4 mmol) ve ozmiyum tetroksit (su içinde agirlikça %4, 5 mL, 0.818 mmol) ile muamele edilmistir. Oda sicakliginda 7 saat karistirildiktan sonra reaktifler 1 M aköz sodyum tiyosülfat (~ içeren 1 L ayirma hunisine bosaltilmistir. Aköz faz, üç sefer 300 mL diklorometan ile özütlenmistir. Kombine organikler, magnezyum sülfat üzerinde kurutulmustur ve konsantre edilmistir. Ham kalinti, berrak bir yag olarak 5-aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarb0ksilik asit 5-benzil ester kromatografisi (%5 ila %45 EtOAc/hekzan) ile saflastirilmistir. 1H NMR (CDCI3) 6 7.36- d. 5-Aza-spiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilik asit 5-benzil ester 606'nin Hazirlanisi. içinde çözünmüstür. Aköz LiOH (35.5 mg, 0.84 mmol) solüsyonu eklenmistir ve oda sicakliginda karistirilmaya devam edilmistir. 3 saat sonra reaksiyon, reaksiyon aköz HCI (1M) ile nötralize edilmistir ve organik solvent vakum ile uzaklastirilmistir. Ham karisim, su ve EtOAc ile seyreltilmistir ve organik katman toplanmistir. Tüm uçucular, vakum ile uzaklastirilmistir ve ham asit (M*); Bulunan: . i PaiPPn-,LQS'M sm..
PucuPPnJ_ i2 5"-":-› deoksoflor . DioksanaO'Ç 3 saat ?r 2 N85(11'iii_.0 3 N-Coi-L SiklopropiHL) Pioiini 506, ÜlEA. DMF, MeCN !l r 1 .cm F . v 1 HBriHOAc 03/0_ 2. HATU. DlEA. DMF v<`~ 5" F F `CAN OH vCN 0 F igîeor» 010% DC" ° ” 2,515 Pd(PPhr,i, (1081.). iiu e. 2,7-Dibromo-9,9-difloro-9H-floren 608'in Hazirlanisi. içinde süspanse edilmistir ve EtOH (4 damla) eklenmistir. Karistirilan süspansiyon, 24 saat T = 90°C'de isitilmistir. (DIKKAT: hizli ve siddetli ekzotermler olusabileceginden yukarida belirtildigi gibi yüksek sicakliklarda deoksoflor kullanimina dikkat edilmelidir). Reaksiyon, oda sicakligina sogutulmustur ve sodyum bikarbonat içeren buz içine dökülmüstür. Olusan kati, filtrasyon ile toplanmistir. Ham materyal akabinde EtOAc içine alinmistir ve aköz HCI (1 M) ve tuzlu su ile yikanmistir.
Solüsyon, sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Solventlerin filtrasyonu ve buharlastirilmasi, 608 (3.2 9) elde etmek üzere silika jel kromatografisi (elüent: EtOAc/hekzan) ile saflastirilmis olan ham ürünü saglamistir. 19F-NMR: ö: -111.6 ppm. Materyalin, bir sonraki adimda kullanilmasindan önce EtOAc içinde bir solüsyon olarak kömüre tabi tutulmustur. difloro-9H-floren-2-iI)-2-okso-etil] ester 609iun Hazirlanisi. altinda dioksan (10 mL) içinde çözünmüstür. EtoksiviniI-tribütil kalay (376.4 mg, 1.04 mmol) eklenmistir. Karisim 85°C'de 140 dakika isitilmistir (yag banyosu). Reaksiyon oda sicakligina sogutulmustur. N;bromo süksinimid (177 mg, 1.0 mmol) akabinde su (2 mL) eklenmistir. Reaksiyon oda sicakliginda 3 saat karistirilmistir, akabinde dioksanin büyük bir kismi vakum ile uzaklastirilmistir. Ham reaksiyon karisimi, EtOAc ile seyreltilmistir ve su ile yikanmistir. Tüm uçucular, vakum ile uzaklastirilmistir. Toluen eklenmistir ve tüm uçucular, ikinci sefer vakum ile uzaklastirilmistir. Ham materyal, DMF / MeCN (2 mL, 1:1) içinde çözünmüstür. MeCN (2 mL) içindeki N-Cbz-4- siklopropil (L) prolin solüsyonu eklenmistir ve oda sicakliginda karistirma devam edilmistir. 14 saat sonra MeCN'nin büyük bir kismi vakum ile uzaklastirilmistir ve ham reaksiyon karisimi, EtOAc ile seyreltilmistir. Karisim, aköz HCl (1M), aköz LiCl solüsyonu (5%), tuzlu su ile yikanmistir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Solventlerin filtrasyonu ve buharlastirilmasi, bilesik 609 (176 mg) elde etmek üzere silika jel kromatografisi (elüent: EtOAc/hekzan) ile saflastirilan ham reaksiyon ürününü saglamistir. LCMS- ESP: hesaplanan C30H24BrF2N05: .
Spiro[2.4]heptan-S-karboksilik asit benzil ester 61 O'nun hazirlanisi. çözünmüstür. Amonyum asetat (226 mg. 2.93 mmol) eklenmistir ve reaksiyon, mikrodalga kosullari altinda 60 dakika 140°C`de karistirilmistir. Reaksiyon, oda sicakligina sogutulmustur ve tüm uçucular vakum ile uzaklastirilmistir. Ham materyal, bilesik 610(80.3 mg) elde etmek üzere silika jel kromatografisi (elüent: EtOAC / hekzan) ile saflastirilmistir. LCMS-ESI*: hesaplanan C30H24BrF2N302: ; spiro[2.4]heptan-5-karboniI}-2-metiI-propil)-karbamik asit metil ester 612'nin Hazirlanisi. çözünmüstür ve AcOH (%37, 2 mL) içinde HBr eklenmistir ve oda sicakliginda karistirma devam ettirilmistir. 180 dakika sonra süspansiyon hekzan ile seyreltilmistir ve kati, filtrasyon ile toplanmistir ve hekzan ile yikanmistir ve vakuma tabi tutulmustur.
Ham materyal, bir sonraki adimda tekrar saflastirilmadan kullanilmistir. Ham materyal, DMF ( eklenmistir. DMF (1 HATU ( solüsyonu eklenmistir.
Reaksiyon oda sicakliginda karistirilmistir. 50 dakika sonra reaksiton EtOAc ile seyreltilmistir ve aköz bikarbonat solüsyonu, aköz LiCI solüsyonu (5%), tuzlu su ile yikanmistir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Solventlerin filtrasyonu ve vakum ile uzaklastirilmasi, biraz saf olmayan bilesik 612 (878 mg) elde etmek üzere silika jel kromatografisi (elüent: EtOAc/ hekzan) ile saflastirilan ham materyali vermistir. LCMS- bisiklo[2.2.1]heptan-2-karboksilik asit tert-bütil ester 614'ün Hazirlanisi. dakika sonra ek boronat ester (61 mg, 0.14 mmol) eklenmistir ve isitma devam ettirilmistir. 3 saat sonra reaksiyon, oda sicakligina sogutulmustur. DME'nin büyük bir ki3mi vakum ile uzaklastirilmistir ve ham reaksiyon karisimi, EtOAc ile seyreltilmistir.
Karisim, tuzlu su ile yikanmistir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Solventlerin fitrasyonu ve buharlastirilmasi, bilesik 614 (878 mg) elde etmek üzere silika jel kromatografisi (elüent: EtOAc / hekzan) ile saflastirilan ham reaksiyon ürününü vermistir. LCMS-ESF: hesaplanan C47H51F2N705: .
Ara ürün bilesigi 613, asagidaki sekilde hazirlanabilir.
NH* ..16 HATUDMF _ H H EIOH .J HOOL . â-metilmorfolin i i 615 615 517 j. 3-(2-Amino-4-bromo-fenilkarbamoil)-2-aza-bisiklo[2.2.1]heptan-Z-karboksilik asit tert-bütil ester 617'nin Hazirlanisi. mL DMF içindeki 2-Aza-bisiklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilik asit 2-tert-bütil mmol, 2 es.) ve 4-metilmorfolin ( eklenmistir. Reaksiyon karisimi oda sicakliginda 1 saat karistirilmistir, akabinde konsantre edilmistir. Reaksiyon karisimi etil asetat ile seyreltilmistir ve seyreltilmis NaHCOa aköz solüsyonu ve tuzlu su ile yikanmistir. Organik katman konsantre edilmistir ve regioizomer 3-(2-Amin0-4-br0mo-fenilkarbamoil)-2-aza- bisiklo[2.2.1]heptan-2-karboksilik asit tert-bütil ester 617 karisimini elde etmek üzere flas kolon kromatografisi (silika jel, %20 ila 80 etil asetat/hekzan) ile saflastirilmistir. k. 3-(6-Bromo-1 H-benzoimidazol-2-il)-2-aza-bisiklo[2.2.1]heptan-2-karboksilik asit tert-bütil ester 618'in Hazirlanisi.
Yukaridaki regioizomer 3-(2-Amin0-4-bromo-fenilkarbamoiI)-2-aza-bisikl0[2.2.1]heptan- 2-karb0ksilik asit tert-büti/ester 617 karisimi, etanol içinde çözünmüstür ve bir gece kapali tüp içinde 130°C'ye isitilmistir ve 3 gün 170°C'de isitmaya devam edilmistir. LC- MS, istenen ürünü ve Boc klevaj edilmis ürünü (yaklasik 111 oran) sergilemistir. Karisim konsantre edilmistir ve HCL ile çözünmüstür. Di-tert-bütil dikarbonat (0.6 es.) eklenmistir ve reaksiyon bir gece oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon karisimi konsantre edilmistir ve turuncu bir köpük olarak 3-(6-Br0m0-1H-benzoimidazoI-Z-iI)-2- üzere flas kolon kromatografisi (silika jel, %20 ila 80 etil asetat/hekzan) ile saflastirilmistir. ve 2M potasyum karbonat aköz solüsyonu (3 es., karisimi, 4 saat Ar altinda 90°C'ye isitilmistir. Reaksiyon karisimi sogutulmustur ve etil asetat içinde seyreltilmistir ve doymus sodyum bikarbonat solüsyonu ile yikanmistir. Organik katman kurutulmustur (MgSO4), konsantre edilmistir ve 3-{6-[4-(4,4,5,5-Tetrametil- karboksilik asit tert-bütilester 613 (295 mg, verim 85%) elde etmek üzere flas kolon kromatografisi (silika jel, %20 ila 60 etil asetat/hekzan) ile saflastirilmistir. LCMS-ESl': Bilesik 7, US 7,429,572'de açiklananlara benzer sentetik yöntemler ve ara ürünler kullanilarak hazirlanabilir. Bilesik 7 ayni zamanda asagidaki Örnekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. Örnek 7:Bilesik ?inin Hazirlanisi. mol) süspansiyonuna TEA (2.3 kg, 16.5 mol) ve su (7 L) eklenir ve bu da berrak bir solüsyon saglar. Sicaklik yaklasik O°C'de tutularak karistirilan karisima yavasça izobütiril klorid (3 esdegerler) eklenir. HPLC, reaksiyonun temel olarak tamamlandigini (toplamda yaklasik 1.95 kg) gösterene kadar 1.2 akabinde 0.7 esdeger izobütil klorid eklenir. Reaksiyon karisimi, konsantre HCI ile yaklasik 6.4 pH degerine asitlestirilir ve organik faz, EtOAc (2 x 10 L) ile yikanir. Kombine ekstraktlar, su (1 x 15 L) ile yikanir.
Organik faz filtrelenir ve vakum ile konsantre edilir. Kalinti, IPA (yaklasik 20 kg) içinde çözünür ve heptan (14.2 kg) eklenir. Solüsyon, berrak bir solüsyon üretmek üzere yaklasik 74-75°C'ye isitilir, akabinde yaklasik 5L damitilarak uzaklastirilir. Ortaya çikan solüsyon yavasça oda sicakligina sogutulur. Bir çökelti, yaklasik42-43°C'de olusur.
Yavasça 5°C'ye sogutma devam ettirilir akabinde bir gece karistirilir. Ortaya çikan kati filtrelenir ve filtrat, IPA/heptan (1 :8) karisimi (13.4 kg) ile yikanir ve HPLC ile %99.45 Ara ürün bilesigi 706, asagidaki sekilde hazirlanabilir.
Sitidin _› 'iiiii'ii\ O 0 HO CH., 820 N BzO NjçN o bu( 810 [CH: - mr. 9, 0.452 mol) eklenir. Karisim, oda sicakliginda 20 saat karistirilmistir. DMF, vakum ile uzaklastirilmistir ve kalinti, dietil eter ile tritüre edilmistir. Ortaya çikan kati, vakumlu filtrasyon ile toplanmistir ve dietil eter (2 x ile yikanmistir. Ayrica oda sicakliginda vakum ile kurutma, N4 benzamid (140.6 g, 983%) saglamistir. Bu ve oda sicakliginda 1,3-diklor0-1,1,3,3-tetraizopropiI-disiloksan ( ile muamele edilmistir. Solüsyon, oda sicakliginda bir gece karistirilmistir. Karisim, neredeyse kuruyana kadar vakum ile konsantre edilmistir ve toluen (3 x ile buharlastirilmistir. Kalinti, EtOAc (1.8 L) ile muamele edilmistir ve HCI (2 x 200 mL, ile yikanmistir. Organik katman yikanmistir, kurutulmustur (Na2804), filtrelenmistir ve kuruyana kadar buharlastirilmistir. saflastirilmadan kullanilmistir. b. Bilesik 702”nin hazirlanisi.
Bilesik içinde çözünmüstür. Anhidröz DMSO ( eklenmistir ve ortaya çikan solüsyon, -20°C ve -15°C arasina sogutulmustur. Trifloroasetik anhidrit ( 45 dakika içerisinde damlatilarak eklenmistir ve solüsyon, 2 saat -20°C ve -15°C arasinda karistirilmistir, akabinde 20 dakika içinde anhidröz trietilamin ( eklenmistir. Keton 702 içeren ham reaksiyon, EtOAo ( içinde çözünmüstür ve ortaya çikan solüsyon, HzO (3 x ve solventler, adimli olarak hekzan içinde 520 (0-60%) gradyani ve akabinde adimli olarak hekzan içinde EtOAC (SO-100%) gradyani ile ayristirilarak silika jel kolonu üzerinde saflastirilan sari bir kati elde etmek üzere vakum ile uzaklastirilmistir. Bu sekilde elde edilen ham kati olarak 22 g reakte edilmemis baslangiç materyalini 701 elde etmek üzere petrol solvent, nemin çikarilmasi ile vakum altinda uzaklastirilmistir. Kalinti akabinde 2 saat daha vakum (yag pompasi) ile kurutulmustur. Nemin tamamen uzaklastirilmasi ile kalan köpük, argon altinda anhidröz dietil eter (1.03 L) içinde çözünmüstür. Ortaya çikan solüsyon, argon altinda -78°C'ye sogutulmustur ve bir ekleme hunisi ile damlatilarak MeLi (1.6 M, eklenmistir. Ekleme islemi tamamlandiktan sonra karisim, -78°C'de 2 saat karistirilmistir. Aköz 1 M NH4CI ( ile yikanmistir, kurutulmustur (Na2SO4) ve akabinde kahverengi bir köpük (~60 g, >100%) olarak kuruyana kadar konsantre edilmistir.
Kombine ham ürünler ( içinde çözünmüstür ve konsantre HOAc (23 mL, 0.402 mol) ile muamele edilmistir. Solüsyona TBAF ( eklenmistir. Solüsyon oda sicakliginda 0.75 saat karistirilmistir ve karisim silika jel (750 9) ile muamele edilmistir ve kuruyana kadar konsantre edilmistir.
Toz, CH20I2 içine doldurulan silika jel kolonu üzerine yerlestirilmistir. 1:7 EtOH- CH2C|2 ile ayristirma, silika jel (300 g) üzerinde pre-adsorbe edilen ve oldugu gibi kromatografiye tabi tutulan koyu mumsu bir katiyi saglamistir. Bilesik 703 (46.4 9, kuruyana kadar konsantre edilmistir. Ortaya çikan surup, anhidröz piridin içinde argon altinda çözünmüstür ve karistirilarak 0°C'ye sogutulmustur. Kahverengi solüsyon, 10 dakika içinde damlatilarak benzoil klorid (30mL, 0.250 mol) ile muamele edilmistir. Buz banyosu uzaklastirilmistir ve 1.5 saat karistirilmaya devam edilmistir, böylelikle TLC, baslangiç materyalinin kalmadigini göstermistir. Karisim, su (5 mL) eklenerek söndürülmüstür ve kuruyana kadar konsantre edilmistir. Kalinti, minimum miktarda CH2CI2 içinde çözünmüstür ve doymus NaHC03 (1 x ile yikanmistir. Organik faz kurutulmustur (Na2804) ve filtrelenmistir, kuruyana kadar konsantre edilmistir ve sari bir köpük olarak (48.5 9, %67) bilesik 704 elde etmek üzere adimli olarak EtOAc-hekzan (% 25-60) gradyani ile ayristirilarak silika jel üzerinde çözünmüstür ve -20°C'ye sogutulmustur. Yavasça DAST ( eklenmistir ve sogutma banyosu, ekleme islemi tamamlandiktan sonra uzaklastirilmistir. Karistirma 1 saat devam etmistir ve karisim, doymus NaHCOa ( içine bosaltilmistir ve gaz yayilmasi sona erene kadar yikanmistir. Organik katman kurutulmustur (N32804), konsantre edilmistir ve 1:1 EtOAc-hekzan ile ayristirilarak silika jel kromatografisi ile saflastirilmistir. Verim, beyaz bir kati olarak 1.22 9 (%163) . Anal. Hesaplanan f. Bilesik 706°nin Hazirlanisi. süspanse edilmistir ve bir gece oda sicakliginda karistirilmistir. Solvent, vakum ile uzaklastirilmistir, metanol (1 x 20 mL) ile buharlastirilmistir ve silika jel üzerine pre- adsorbe edilmistir. Beyaz toz, silika jel kolonu (CHCI3 içine doldurulan) üzerine yerlestirilmistir ve kolon, CHClg içinde %9 EtOH, akabinde %17 EtOH ve son olarak CHCIs içinde %25 EtOH ile ayristirilmistir. Ürünü içeren parçalarin konsantrasyonu, 0.4 um disk içinden filtrasyonu ve sudan Iiyofilizasyonu, bilesik 706'yi, 2.18 9 (76%) mL) içinde çözdürülerek ve pH degerinin 1 M HCI ile yaklasik 3.0 olarak ayarlanmasi ile hidroklorid tuzuna dönüstürülmüstür. Su, vakum ile uzaklastirilmistir ve kalinti, hidroklorid tuzu (71.0 mg) olarak Bilesik 7064yi elde etmek üzere aköz EtOH'den kristalize edilmistir. en : 6 1.29 (d, 3H, J :22.6 Hz, (5, . Anal. Hesaplanan Bilesik 8, USSN 12/632,194'te açiklananlara benzer sentetik yöntemler ve ara ürünler kullanilarak hazirlanmistir. Bilesik 8 ayni zamanda asagidaki Örnekte açiklandigi gibi hazirlanabilir. Örnek 8:4-amino-2-n-bütoksi-S-[3'-(pirolidin-1"-ilmetil)-benzil]-5,6,7,8- tetrahidropteridin-G-on 8'in Hazirlanisi (R = n-bütil) NI \ RW”. Ni H HT N'Aîüiîl Nickel (~2OO pL, HzO içinde sulu karisim) eklenmistir. Reaksiyon haznesi, H2 ile temizlenmistir ve akabinde 1.5 saat H2 atmosferi altinda karistirilmistir. Karisim, CH2CI2 ve MeOH (121) ile selit içinden filtrelenmistir. Filtrat, vakum ile konsantre edilmistir ve bir gece Iiyofilize edici üzerinde bekletilmistir. Bilesik 8'in serbest bazi, beyaz bir kati olarak elde edilmistir. 8'in HCI tuzunu elde etmek üzere, yukaridaki filtratin bir numunesi, 1.0 M HCI ile pH = 1-2'ye ayarlanmistir ve Iiyofilize edilmistir. 1H C22H31N602: .
Ara ürün bilesigi 807, asagidaki sekilde hazirlanmistir. . 31 [i s` \ N" ' mi] Fiil/î 71;.. N i_.i .5... . -ti. *Ps/I *i bili-`4 'C7 a. Bilesik 802inin Hazirlanisi. eklenmistir. Karisim, 1.5 saat O°C`ye ilitilarak karistirilmistir (LC/MS, baslangiç materyallerinin tükendigini göstermistir). Bilesik 802'yi içeren reaksiyon karisimi, tekrar N^cozEt 806 803 mmol) solüsyonuna Et3N (3.14 mmol, 22.5 mmol) akabinde metil bromoasetat ( damlatilarak eklenmistir. Reaksiyon karisimi, LC/MS, baslangiç materyallerinin tükendigini gösterene kadar yaklasik 2 saat karistirilmistir. Bilesik 803'ü içeren karisim, tekrar çalisma olmaksizin alinmistir.
Bilesik 803'ü içeren reaksiyon karisimi, 0°C`de bilesik 802'yi içeren reaksiyon karisimina eklenmistir. Reaksiyon karisimi, LC/MS, bilesik 802'nin tükendigini gösterene kadar yaklasik 45 dakika karistirilmistir. Doymus NH4CI (50 mL) solüsyonu eklenmistir. Katmanlar ayrilmistir ve aköz katman EtOAc (2 x 30 mL) ile özütlenmistir.
Kombine organik katmanlar, MgSO4 üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve vakum ile konsantre edilmistir. Silika jel kromatografisi ile saflastirma, 2.11 9 bilesik 804'ü saglamistir. 1H NMR (CDsOD, , 4.19 d. Etil-Na-[4-amino-2-metansülfonil-5-nitr0pirimidin-6-il],Nu-[3'-(pirolidin-1"- ilmetil)-benziI]-glisinat 805'in Hazirlanisi. i 15.1. mom; JL Nu .WOJ "gl lü sodyum tungstat dihidrat (792 mg, 2.40 mmol), asetik asit ( ve hidrojen peroksit ( eklenmistir. 3 saat sonra ek asetik asit ( eklenmistir. Reaksiyon, 16 saat 0°C7de muhafaza edilmistir. Doymus Na2803 (50 mL) solüsyonu, O°C'de dikkatli bir sekilde ve akabinde CH2CI2 (75 mL) eklenmistir. Katmanlar ayrilmistir ve aköz katman, CH20I2 (4 x 50 mL) ile özütlenmistir. KOmbine organik katmanlar, MgSO4 üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve tekrar saflastirilmadan kullanilan bilesik 805'i içeren bir materyal saglamak üzere vakum ile konsantre edilmistir. 9. Bilesik 807”nin Hazirlanisi. (R = n-bütil) H- ”Açtim R (3)` ::MU mmol) eklenmistir. Reaksiyon, 1 saat 100°C'de karistirilmistir. Reaksiyon karisimi, doymus NaHC03 (20 mL) ve CH2CI2 (30 mL) solüsyonuna bosaltilmistir. Katmanlar ayrilmistir ve aköz katman, CH2CI2 (30 mL) ile özütlenmistir. Kombine organik katmanlar MgSO4 üzerinde kurutulmustur ve vakum altinda konsantre edilmistir.
Saflastirma, bilesik 807lyi saglamak üzere silika jel kromatografisi (1 g substrat/1O g SIOz) (2-1 5% MeOH/CHzclz) ile yapilmistir. hidroksi-4-metiI-tetrahidro-furan-2-il-metoksi]-fenoksifosforilamino}-propiyonik Es anlamli: 5'-O-(Izopropil-L-alanat, fenil fosforamidiI)-2'-deoksi-2'-fl0r0-2'-C-metil-üridiri diastereomerik karisim.
L 3 boyunlu bir balon, mekanik bir karistirici, tuzlu su buz banyosu, dahili termometre ve nitrojen atmosferi ile donatilmistir. Balon, L-alanin izopropil ester hidroklorid (82.0 9, 0.490 mol) ve anhidröz diklorometan (0.80 L) ile yüklenmistir. Karistirilirken, fenil diklorofosfat (85.0 9, 0.40 mol) bir parça halinde eklenmistir ve karistirilmistir. Iç sicaklik -5 ila 5°C arasinda tutulurken, diklorometan ( N-metilimidazol (NMI, 250 9, 3.07 mol) solüsyonu, yarim saatlik bir süre içerisinde eklenmistir. Solüsyon, bu 0.307 mol) O°C`de bir parça halinde eklenmistir ve reaksiyon balonu, tuzlu su banyosunda yavasça ilitilmistir. 1 saat sonra iç sicaklik, -2°C,ye yükseltilmistir. 1 saat sonra TLC (HCL içinde %5 Metanol), nükloesidin %50'sinden fazlasinin tükendigini göstermistir. Banyo uzaklastirilmistir ve reaksiyon balonu, 1 saat sonra ambiyant sicakliga ulasmistir. 3 saat ve toplamda 5 saat sonra TLC, baslangiçtaki nükleosidin reaksiyonun 5 dakika karistirilmasi ile söndürülmüstür.
Reaksiyon karisimi 1N HCI ( akabinde doymus sodyum bikarbonat solüsyonu ( ile yikanmistir. Ayrilan organik katman, anhidröz sodyum sülfat (50 g) üzerinde kurutulmustur ve filtrelenmistir. Solüsyon, düsük basinç altinda ve visköz bir yag (170 9) olarak ham ürünü elde etmek üzere kuruyana kadar yüksek vakum altinda buharlastirilmistir. Ham ürünün NMR'Ieri (31P ve 1H) alinmistir. 31P-NMR, 3' izomer 5 varligi nedeniyle toplam fosfor entegrasyonunun yaklasik %1 oldugunu göstermistir.
Ham ürüne anhidröz piridin ( eklenmistir. Solvent, düsük basinç altinda ve yüksek vakum altinda buharlastirma ile ham karisimin su içerigini düsürmek üzere buharlastirilmistir. Ortaya çikan yag, anhidröz piridin (500 ml) içinde çözünmüstür ve akabinde fazla t-bütildimetilsilil klorid (9.0 9, 60 mM) eklenmistir. Reaksiyon ambiyant sicaklikta karistirilmistir. Reaksiyonun ilerlemesi, UPLC/MS ile izlenmistir. 3 saat sonra 3' safsizlik 5, algilanamamistir ve reaksiyon, metanol (50 mL) eklenerek söndürülmüstür.
Reaksiyon, düsük basinç altinda bir yaga buharlastirilmistir. Kalinti, etil asetat (1.5 L) içinde çözünmüstür ve 1N HCI ( akabinde doymus sodyum bikarbonat solüsyonu ( üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve soluk sari bir yag olarak ham ürünü vermek üzere düsük basinç altinda buharlastirilmistir.
Ham ürün, biraz diklorometan ile seyreltilmistir ve 100 psi'lik bir hava basincinda radyal bir sikistirma modülü içindeki 2.5 Kg silika jel kartusuna yüklenmistir. 60 psi'de ve 400mI/dakikalik bir akis oraninda gradyan pompanin kullanilmasi ile kartus, metilen klorid (4L) ile ve akabinde metil klorid (48 L) içindeki %1-4 metanol ile yikanmistir.
Yabanci maddelerin çogu (di-(izopropilalanil) fenil fosfat, 3',5'-bis fosforamidat, 3`- fosforamidat-S'-TBDMS katki maddesi (7)), ~%3 gradyan ile ayristirilmistir. Istenen ürün, %3 ve 4 metanol ile ayristirilmistir. Parçalari içeren ürün, iki parçaya ayrilmistir.
Ilki, az miktarda üst yabanci madde ve digeri saf ürünü verir. Parçalarin birinci seti, az miktarda daha az polar yabanci maddeleri (üst yabanci madde) örnegin 3',5'-bis fosforamidar ve di-alanilfenil fosfat ve daha çok Rp diastereomeri içerir ve ikinci kolon saflastirmasini gerektirir. (Ilgili terminoloji, üst ve alt, normal faz silika jel kromatografisi üzerinde ayristirmaya refere eder, burada “üst izomer”, birinci ayristirma izomeri anlamina gelir.) Parçalarin ikinci seti, büyük miktarda yabanci madde içermez, yalnizca kalan Rplyi ve çogunlukla Sp diastereomerlerini içerir. Akabinde iki kolonlu parçalar ile yeniden kombine edilmistir. Solvent, düsük basinç altinda buharlastirilmistir ve ortaya çikan beyaz köpük, 42 g saf olmayan parça (31P-NMR bazinda 4:1 üst ve alt izomer) ve 38 g saf parça (1 :3 üst ve alt izomer) elde etmek üzere 1 saat kurutulmustur g saf ürünü 4:1 oraninda saglamak üzere ayni sekilde kolona alinmistir. Iki ana parça, HCL içinde çözünmüstür, kombine edilmistir, düsük basinç altinda buharlastirilmistir ve beyaz bir köpük olarak, yaklasik 75-75°C erime sicakligi olan 48:51 diastereomerik orani olan 74 g (%457) saf ürünü (Bilesik 9) elde etmek üzere kurutulmustur (50° C., 0.2 mmHg, 24 saat).
Diastereomerik karisimin amorföz katisini üretmek üzere, 74 9 beyaz köpük, t-bütil metil eter ( içinde karistirilmistir, kismi bir solüsyon ve sakizimsi bir kati kalinti ile sonuçlanmistir. Karistirilirken heptanlar (75 mL) yavasça eklenmistir ve süspansiyon, sakizin büyük bir kismi beyaz bir katiya dönüstürülene kadar 1 saat mekanik olarak karistirilmistir. Kati, bir ispatula ile kazinmistir ve ortaya çikan sulu karisim filtrelenmistir. Kati, heptan (4x50mL) ile yikanmistir ve yaklasik 70-80°C'Iik genis bir erime noktasi araligi olan beyaz ve amorföz bir toz (64 g) elde etmek üzere vakum (50° C., 0.2mmHg, 24 saat) ile kurutulmustur. 1H ve 31P NMR, yapiya uymustur ve HPLC, ile %99.8'Iik bir saflik sergilemistir.
Bilesik 9'un bir kati karisimini elde etmeye yönelik alternatif bir yöntem.
Kromatografiden sonra kalinti, iki sefer diklorometan (5 mL/g) ile buharlastirilmistir ve eleginden geçirilmistir ve ayrica kalan diklorometan, tepe boslugu ile ölçüldügü üzere 400 ppm altina düsene kadar ayni kosullar altinda kurutulmustur. Ortaya çikan ince beyazimsi ila beyaz arasi bir amorföz toz, 53.7 ila 63.5°C'Iik bir cam geçis sicakligina sahiptir.
Bilesik 9'un Karakterizasyonu (izomerlerin karisimi): CH3, Rp/Sp). 530.2. Element Analizi: Hesaplanan % (Karl Fisher analizi ile bulundugu üzere %029 7.85; F, 3.62; P, 6.05. metanol içinde RfO.6) göstermistir. Karisim, ambiyant sicakliga sogutulmustur ve su (2 L) ile seyreltilmistir. 2 saat karistirildiktan sonra ortaya çikan çökelti, filtrasyon ile toplanmistir ve kati, su (5 L) ile durulanmistir ve 360 g (%88) elde etmek üzere 12 saat ambiyant sicaklikta atmosfer içinde kurutulmustur. Bu dibenzoilüridin ara ürünü, bunun tamamen taze hazirlanmis metanolik amonya (5.4L, yaklasik %25) içine 0°C'de eklenmesi ile bir sonraki adimda direkt olarak kullanilmistir. Bu sicaklik, 3 saat korunmustur ve akabinde 24 saat 15°C'ye ilitilmistir. TLC, reaksiyonun tamamlandigi göstermistir (HCL içinde %10 metanol içinde Rf 0.4). Reaksiyon karisimi Selit yatagi ile filtrelenmistir ve ham ürünü (216 11) elde etmek üzere düsük basinç altinda konsantre edilmistir. Ham ürün, ambiyant sicaklikta 3 saat etil asetat ( ile karistirilmistir.
Ortaya çikan kati, filtrasyon ile toplanmistir ve etil asetat ( ile yikanmistir. Kati, n ”5%” . 51-“ seferinde 50 mL toluen ile iki sefer azeotropik olarak kurutulmustur) solüsyonuna, oda sicakliginda fenildiklorofosfat ( eklenmistir. Karisim, -10°C'ye sogutulmustur ve akabinde 30 dakika içinde 30 mL diklorometan içindeki N- Metilimidazol ( solüsyonu eklenmistir. Ekleme islemi tamamlandiktan sonra karisim, 1 saat -10 ila -15°C arasinda karistirilmistir. Yukarida belirtilen karisima bir parça halinde 2'-deoksi-2'-floro-2'-C-metilüridin (10 9, 38.4 mmol) karistirilmistir ve akabinde yavasça 20°C'ye (6 saat) iIitiImistir. Karisim bu sicaklikta bir gece (15 saat) karistirilmistir ve akabinde 10 mL metanol ile söndürülmüstür.
Solvent, buharlastirilmistir ve kalinti, EtOAc ( içinde yeniden çözünmüstür.
EtOAc katmani, su ve tuzlu su (50 mL) ile yikanmistir. Organik katman Na2804 üzerinde kurutulmustur, filtrelenmistir ve konsantre edilmistir. Kalinti, beyaz bir köpük (22 g) elde etmek üzere 2 saat yüksek vakum altinda kurutulmustur.
Yukaridaki köpük, 33 mL HCI içinde çözünmüstür ve akabinde doymus bir solüsyon elde etmek üzere 65 mL izopropil eter eklenmistir. Solüsyon, küçük bir Selit pedi ile filtrelenmistir ve filtrat, ambiyant sicaklikta 72 saat Bilesik 10”un tohumlari ile karistirilmistir (yaklasik 22°C. - süspansiyonun O°C'ye sogutulmasi, ham ürünün yag haline gelmesine neden olacaktir). Beyaz kati filtrelenmistir, izopropil eter (20 mL) ile izomer karisimi) beyaz toz elde etmek üzere kurutulmustur. Yukaridaki kati, 23 mL HCL içinde süspanse edilmistir ve akabinde 3 saat reflükse edilmistir. Karisim oda sicakligina sogutulmustur ve 15 saat karistirilmistir. Beyaz kati filtrelenmistir, 4.5 mL soguk HCI ile yikanmistir ve Bilesik 10'u elde etmek üzere 45°C'de yüksek vakum ile tetrahidrofuran-3-ol (150 mg, 0.46 mmol), 0°C'de anhidröz piridin (2 ml) içinde çözünmüstür. Asetonitril ( içindeki 0.45 M IH-tetrazol solüsyonu ve akabinde bis (N,N-diizopr0pilamino) izopropilfosforamidit ( eklenmistir. Karisim, yavasça ambiyant sicakliga 3 saat içinde iIitiImistir. TLC, reaksiyonun tamamlandigini göstermistir. Reaksiyon, su ( eklenerek söndürülmüstür. Reaksiyon solüsyonu, düsük basinç altinda konsantre edilmistir ve akabinde kalinti, etil asetat (5 mL) ile tritüre edilmistir. Ortaya çikan beyaz çökelti, filtrasyon ile uzaklastirilmistir ve filtrat, düsük basinç altinda konsantre edilmistir.
Ortaya çikan ara ürün siklik fosfit kalinti, asetonitril (2 mL) içinde çözünmüstür ve akabinde ambiyant sicaklikta 5 saat t-bütil hidropetoksit (su içinde %70, ile muamele edilmistir. TLC, reaksiyonun tamamlandigini göstermistir. Reaksiyon solüsyonu, düsük basinç altinda konsantre edilmistir ve kalintii kolon kromatografisi (HLC içinde %0 ila 5 IPA gradyani kullanan Analogix) ile saflastirilmistir. Iki diastereomer (Bilesik 11 ve R-izomer at P) ayrilabilirdir. Her diastereomeri içeren parçalar, ayri olarak kombine edilmistir ve her biri beyaz kati olarak 20 ml olan diastereomer (kombine verim %20) elde etmek üzere düsük basinç altinda konsantre edilmistir.
Bilesik 11 31P_NiviR (: ö-6.49; 1H-NMR (, MS (ESI): m/z 432.4 [M+H]* R-izomer at P 31P_NMR (: 6 :-4.68: 1H -NMR (, MS (ESI): m/z 432.4 [M+H]+ Plde Bilesik 11 ve R-Izomere yönelik yapilar asagida gösterilmektedir. 1 \3' `3. ,I \;' a /k 11 Ä P'de Rýizomer yüklenmistir. Saf anhidröz etanol ( ve akabinde anhidröz K2C03 (28.91 9, 209.2 mmol) eklenmistir. Süspansiyon karistirilmistir ve 5.5 saat nitrojen altinda 75°C'de isitilmistir. Tüm baslangiç materyali, TLC testi ile bu süre zarfinda tükenmistir.
Karisim, oda sicakligina sogutulmustur ve kati filtrelenmistir. Filtrat, buzlu asetik asit (2.52 9) eklenerek pH~7'ye nötralize edilmistir ve düsük basinç altinda konsantre edilmistir. Kalinti, metanol içinde çözünmüstür ve silika jel (15 9) ile karistirilmistir. Ham ürün ve silika jelin kurutulan karisimi, bos bir kartusa transfer edilmistir ve beyaz bir köpük halinde kati ( elde etmek üzere kolon kromatografisi (Analogix ile ayrilmistir. Ikinci beyaz kati, kolondan (DCM içinde %10 MeOH, 1.44 9) izole edilmistir ve nükleosidin iki dimerinin karisimidir. Daha polar olan üçüncü beyaz kati, kolondan (DCM içinde %15 MeOH) toplanmistir ve bu, nükleosidin trimerlerinin bir karisimidir. Ürünün HPLC safligi %99.94'tür. yüklenmistir. Anhidröz tert-BuOH (4.5 L) eklenmistir ve solüsyon, ambiyant sicaklikta mekanik bir karistirici ile karistirilmistir. Potasyum tert-bütoksit (kati, 151.6 9, 1.35 mol), karistirilirken nitrojen akisi altinda parçalar halinde eklenmistir. Karisim, 30 dakika daha oda sicakliginda karistirilmistir. 5 L yuvarlak tabanli balona, oda Bromid solüsyonu, ambiyant sicaklikta 1 dakika içinde pürin baz süspansiyonuna eklenmistir. 5 L balon, bromidi tamamen reaksiyon karisimina transfer etmek üzere asetonitril (2x1 L) ile durulanmistir. Karisim, isitma mantosu ve kontrolörü ile 2 saat içerisinde kademeli olarak 50°C`ye isitilmistir ve 20 saat karistirilmistir. Reaksiyon, TLC beta (Rf 0.28, hekzan içinde %30 EtOAc) ile gözlendigi üzere neredeyse tamamlanmistir. Reaksiyon, bir süspansiyon olusturmak üzere doymus NH4CI ( eklenerek söndürülmüstür. Süspanse edilen kati, 2.5 L porselen Buchner hunisi içinde 3 cm Selit pedi içinden filtrasyon ile uzaklastirilmistir. Kati, toluen ( ile yikanmistir. Kombine filtrat, pH 7 (yaklasik olana kadar 6 N HCI solüsyonu eklenerek nötralize edilmistir. Karisim düsük basinç altinda konsantre edilmistir.
Karisimin hacmi, yaklasik üçte bir hacme düsürülmüstür ve ek olarak çöktürülen kati, benzer sekilde filtrasyon ile uzaklastirilmistir. Filtrat, yaklasik 800 mL'lik bir hacme konsantre edilmistir. Kalinti, bir ped kolonuna (6 L sinterlenmis cam Buchner hunisi içinde 1.6 kg flas derecesinde silika jel) yüklenmistir ve polar olmayan yabanci maddeleri uzaklastirmak için hekzan (6 L) içinde %10 etil asetat gradyani ile (vakum ile), az miktarda laktol (6 L) elde etmek üzere hekzan içinde %30 etil asetat ile ve akabinde ürünün ana miktarini ayristirmak üzere hekzan (4 L) içinde %40-45 etil asetat ile ayristirilmistir. Parçalari içeren ürün kombine edilmistir. düsük basinç altinda konsantre edilmistir ve beyaz bir köpük halinde kati (150.7 g, NMR ile ß/oi=14:1. 1H- etmek üzere vakum (0.2 mmHg, 24 saat, ambiyant sicaklik) altinda kurutulmustur.
Köpük formundaki ürün karisimi, ambiyant sicaklikta metanol ( içinde çözünmüstür. Bekletildikten sonra yavasça 2 saat içinde bir kati olusustur.
Süspansiyon, 17 saat -5°C'ye bir dondurucu içinde sogutulmustur. Ortaya çikan beyaz kati, filtrasyon ile toplanmistir ve soguk MeOH (-5° C ile yikanmistir. Kati, mükemmel bir derecesi (HPLC ile ß/oi 99.8:1) olan 110.5 g 6- ürününü elde etmek üzere vakum (0.2 mmHg, 24 saat, ambiyant sicaklik) ile kurutulmustur. Filtrat, kismen konsantre edilmistir (yaklasik ve akabinde 60°C'ye isitilarak daha fazla MeOH ( ile seyreltilmistir. Solüsyon ambiyant sicakliga sogutulmustur, tohumlanmistir ve -50°C'ye sogutulmustur. Ikinci ürün toplanmistir, yikanmistir ve benzer diastereomerik safligi olan beyaz bir kati (12.26 9) olarak daha fazla ürün elde etmek üzere benzer bir sekilde kurutulmustur. Ana sivi kuruyana kadar düsük basinç altinda (yaklasik 25 g) konsantre edilmistir. Kalinti, B ve d-izomer karisimidir. Bu, MeOH'den rekristalize edilen, yikanan ve yüksek saflikta ek 8.46 9 ürün elde etmek üzere benzer sekilde kurutulan 14.52 9 ürün elde etmek üzere otomatik silika jel kolon kromatografisine (Analogix, 240 g kartusu, hekzan içinde %40 ila 50 etil asetat) tabi tutulmustur. Üç katinin, benzer saflikta olduguna karar verilmistir ve bunlar, 131.2 9 beyaz kristalin ürününü (bromosekerden %55, Iaktolden %49) elde etmek üzere kombine edilmistir. arom.), , 5.00 (dd, 1H, C5'- 3hidr0ksi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi) (fenoksi)fosforilamino)propanoat sentezi solüsyona eklenmistir ve karisim, -5°C'ye sogutulmustur. N-Metil imidazol (7.7 mL, 97 mmol) akabinde -50°C'de kuru bir siringa ile hizli bir sekilde eklenmistir ve solüsyon, 1 parça halinde bir siseden eklenmistir ve kati, 20 dakika içinde yavasça çözünmüstür.
Reaksiyon sicakligi, 2 saat içerisinde oda sicakligina yükseltilmistir. 17 saat sonra reaksiyon tamamlanmamistir. Daha fazla reaktif yapilmistir (fosfattan (2.66 9), aminoesterden (2.60 9) ve N-Metil imidazolden ( ve -5°C'de reaksiyon karisimina eklenmistir. Reaksiyon, 2 saat daha oda sicakliginda karistirilmistir. TLC sonucuna bakildiginda reaksiyon neredeyse tamamlanmistir ve 70 mL diklorometan ile seyreltilmistir. HCI solüsyonu (1 N, 70 mL) eklenmistir. Aköz katman ayrilmistir ve diklorometan ile özütlenmistir. Organik katman, doymus NaHCO3, su, tuzlu su ile yikanmistir ve MgSO4 üzerinde kurutulmustur. Düsük basinç altinda solventin uzaklastirilmasindan sonra yapiskan kalinti, köpük formunda kati (4.16 9, 1.74 mmol, %73 verim) olarak ürünü elde etmek üzere bir 240 g kartus ve diklorometan içinde %0-8 2-PrOH gradyani kullanilarak otomatik kolon kromatografisi ile saflastirilmistir. HPLC safligi %97.4'tür. Ürünün NMR spektrumu, bunun, 1.2:1 oraninda iki diastereoizomerin bir karisimi oldugunu göstermistir. (9H, m, amino ester CHg'Ieri), . 31P-NMR (DMSO-dö ): 0=4.91 (bir izomer), 4.72 (diger izomer).
Alternatif bir saflastirma yöntemi, kromatografik ayirma islemini kolaylastirmak için minör 3' fosforamidat yan ürününün kimyasal olarak degistirilmesidir. Ham fosforamidat ürünü, anhidröz piridin (5 mL/g) içinde çözünür ve 3' izomer yabanci maddesinin serbest 5' primer hidroksili ile selektif olarak reakte olmak üzere ambiyant sicaklikta 0.5 molar esdegerinde t-bütildimetilsilil ile muamele edilir. Reaksiyonun ilerlemesi, LC/MS ile gözlenebilir. 3' izomeri, 5'-tBDMS-3'-fosforamidat derivesine dönüstürüldügünde reaksiyon, metanol (3 es.) ile söndürülür, düsük basinç altinda konsantre edilir, etil asetat ve %5 sitrik asit arasinda bölünür ve akabinde organik katman konsantre edilir.
Kalinti akabinde, daha yüksek yükleme ve daha hizli gradyan ile yapilabilecek kromatografiye tabi tutulur ve daha yüksek bir saflik elde edilir.
H "5 .Iç 2'-Deoksi-2'-floro-2'-C-metilüridin-5'-fenil metoksi-alanilfosfat Hazirlanisi 3 mL THF içinde çözünen fenil metoksialaninil fosforokloridat (1 9, 6.5 es.), oda sicakliginda iyice karistirilan 3 mL THF içindeki 2'-Deoksi-2'-floro-2'-C-metilüridin (0.15 9, 1 es.) ve N-metilimidazol (0.3 9, 8 es.) karisimina eklenmistir, akabinde reaksiyon bir gece karistirilmistir. Solvent düsük basinç ile uzaklastirilmistir. Ortaya çikan ham ürün, su/asetonitril gradyani elüzyon mobil fazi kullanilarak YMC 25x30x2 mm kolonu üzerinde prep-HPLC ile saflastirilan metanol içinde çözünmüstür. Asetonitril ve su, istenen ürünü (50.1 mg, 156%) elde etmek üzere düsük basin ile uzaklastirilmistir. 1H Sütununda rapor edilir. Anhidröz tetrahidrofuran (THF) içinde uygun fosforokloridat (6.5 esdeger) solüsyonu, oda sicakliginda iyice karistirilan anhidröz THF içindeki nükleosit (1 esdeger) ve N-metilimizadol (8 esdeger) karisimina eklenebilir ve reaksiyon karisimi bir gece karistirilmistir. Solvent, vakum ile uzaklastirilmistir ve ham ürün, istenen bilesigi elde etmek üzere kolon kromatografisi ve/veya preparatif ince katman kromatografisi ile saflastirilmistir.
HCS" alir '18 Sitidinden baslanarak (2'R)-2'-Deoksi-Z'-Floro-2'-C-Metilsitidinin Hazirlanisi karistirilmistir. DMF, vakum ile uzaklastirilmistir ve kalinti. dietil eter ile tritüre edilmistir.
Ortaya çikan kati, vakumlu filtrasyon ile toplanmistir ve dietil eter ( ile yikanmistir. Oda sicakliginda vakum altinda kurutma islemi N4 benzamid (140.6 g, içinde çözünmüstür ve oda sicakliginda 1,3-diklor0-1,1,3,3-tetraizopropiI-disiloksan ( ile muamele edilmistir. Solüsyon, bir gece oda sicakliginda karistirilmistir. Karisim, vakum ile neredeyse kuruyana kadar konsantre edilmistir ve toluen ( ile muamele edilmistir ve HCI ( ile yikanmistir. Organik katman yikanmistir, kurutulmustur (Na2804), filtrelenmistir ve kuruyana kadar buharlastirilmistir. Bilesik , beyaz bir köpük olarak izole edilmistir ve tekrar saflastirilmadan kullanilmistir.
Adim 2: Bilesik içinde çözünmüstür.
Anhidröz DMSO ( eklenmistir ve ortaya çikan solüsyon, -20°C ila - °C arasina sogutulmustur. Trifloroasetik anhidrit ( damlatilarak 45 dakika içinde eklenmistir ve solüsyon, 2 saat -20° C ila -15° C arasinda karistirilmistir, akabinde 20 dakika içinde anhidröz trietilamin ( eklenmistir. Keton 16-2 içeren ham reaksiyon, EtOAc ( içinde çözünmüstür ve ortaya çikan hekzan içinde adimli olarak Et20 (0-60%) gradyani ve akabinde hekzan içinde adimli olarak EtOAc (%50-100) gradyani ile ayristirilarak silika jel kolonu üzerinde saflastirilan sari bir kati elde etmek üzere vakum ile uzaklastirilmistir. Bu sekilde elde edilen ham keton (~192 9), beyaz bir kati olarak keton (138.91 9, sitidinden %575) ve sari bir kati olarak 22 g reakte edilmemis baslangiç materyalini 16-1 elde etmek üzere petrol eterden kristalize edilmistir. çözünmüstür ve solvent, nemin uzaklastirilmasi ile vakum ile uzaklastirilmistir. Kalinti, 2 saat daha vakum (yag pompasi) ile kurutulmustur. Nemin tamamen uzaklastirilmasi ile kalan köpük, argon altinda anhidröz dietil eter (1.03 L) içinde çözünmüstür. Ortaya çikan solüsyon, argon altinda -78°C'ye sogutulmustur ve ekleme hunisi ile damlatilarak MeLi (1.6 M, eklenmistir. Ekleme islemi tamamlandiktan sonra karisim -78°C,de 2 saat karistirilmistir. Aköz 1M NH4C| ( yavasça eklenmistir.
Oda sicakligina iIitiIdiktan sonra karisim, H20 ( ile yikanmistir, kurutulmustur kuruyana kadar konsantre edilmistir.
Kombine ham ürünler ( içinde çözünmüstür ve konsantre HOAc (23 mL, 0.402 mol) ile muamele edilmistir. Solüsyona TBAF ( eklenmistir. Solüsyon 0.75 saat oda sicakliginda karistirilmistir ve karisim silika jel (750 9) ile muamele edilmistir ve kuruyana kadar konsantre edilmistir.
Toz, CH2CI2 içine doldurulan silika jel kolonu üzerine yerlestirilmistir. 1:? EtOH- CH20I2 ile elüzyon, silika jel (300 g) üzerine pre-adsorbe edilen ve oldugu gibi kromatografiye tabi tutulan koyu renkli mumsu bir kati saglamistir. Bilesik 16-3 (US .47; N, 11.33. ile kuruyana kadar konsantre edilmistir. Ortaya çikan surup, argon altinda anhidröz piridin içinde çözünmüstür ve karistirilarak 0°C'ye sogutulmustur. Kahverengi solüsyon, dakika içinde damlatilarak benzoil klorid (30 mL, 0.250 mol) ile muamele edilmistir.
Buz banyosu uzaklastirilmistir ve karistirma 1.5 saat devam ettirilmistir, böylelikle TLC, hiçbir baslangiç materyalinin kalmadigini göstermistir. Karisim, su (5 mL) eklenerek söndürülmüstür ve kuruyana kadar konsantre edilmistir. Kalinti, minimum miktarda yikanmistir. Organik faz, kurutulmustur (N82804) ve filtrelenmistir, kuruyana kadar olarak bilesigi 16-4 elde etmek üzere adimli olarak EtOAc-hekzan (25-60%) gradyani ile ayristirilarak silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. 1H NMR (CDCI3)I 6 çözünmüstür ve -20°C'ye sogutulmustur. Yavasça DAST ( eklenmistir ve sogutma banyosu, ekleme islemi tamamlandiktan sonra uzaklastirilmistir.
Karistirma, 1 saat devam ettirilmistir ve karisim doymus NaHCOa ( içine bosaltilmistir ve gaz yayilmasi durana kadar yikanmistir. Organik faz kurutulmustur (Na2804), konsantre edilmistir ve 121 EtOAc-hekzan ile ayristirilarak silika jel kromatografisi ile saflastirilmistir. Verim, beyaz bir kati olarak 1.22 9 (%163) saf 16- 51tir (US I 6 150 mnL) içinde süspanse edilmistir ve oda sicakliginda bir gece karistirilmistir.
Solvent, vakum ile uzaklastirilmistir, metanol ( ile buharlastirilmistir ve silika jel üzerine pre-adsorbe edilmistir. Beyaz toz, silika jel kolonu (CHCIg içine doldurulan) üzerine yerlestirilmistir ve kolon, CHCl3 içinde %9 EtOH, akabinde %17 EtOH ve son olarak CHCI3 içinde %25 EtOH ile ayristirilmistir. Ürünü içeren parçalarin konsantrasyonu, 0.41 i.irn disk ile filtrasyon ve sudan Iiyofilizasyon, bilesik 16-6'yi (US degerine ayarlanarak hidroklorid tuzuna dönüstürülmüstür. Su, vakum ile uzaklastirilmistir ve kalinti, hidroklorid tuzu (71.0 mg) olarak 16-6'yi elde etmek üzere aköz EtOH'den kristalize edilmistir. en : 6 1.29 (d, Hz, H-6), . Anal.
N, 1423.
BIYOLOJIK ÖRNEKLER Analiz Protokolü Yüksek verimli replikon analizi (HTBS) H77 (genotip la) veya Conl (genotip 1b) HCV RNA ve Renilla lusiferaz raportörü barindiran replikon hücreleri, G-418 hariç 90 yi DMEM kültür ortaminda göz basina 1.6 x 103 hücre yogunlugunda 384 gözlü siyah plakalar içine tohumlanmistir. Bilesikler uL”lik bir toplam hacimde bir nihai %0.44 DMSO konsantrasyonu elde edilerek 12255 dilüsyonda hücrelere eklenmistir. Hücre plakalari, 3 gün %5 002 ile 37°C'de inkübe edilmistir, bundan sonra kültür ortami uzaklastirilmistir ve hücreler, replikasyon seviyesine yönelik bir markör olarak lusiferaz aktivitesine yönelik analiz edilmistir.
Lusiferaz ifadesi, Dual-Glo lusiferaz analiz reaktifleri (Promega, Madizon, WI) kullanilarak ölçülmüstür. Kisa bir sekilde 20 uL Dual-Glo lusiferaz tamponu, 10 dakika hücreleri parçalamak üzere eklenmistir ve daha sonra 20 uL'Iik seyreltilmis bir Dual-Glo Stop & Glo substrat (1:100) her bir göze eklenmistir. Lüminesans sinyali, 10 dakikalik inkübasyondan sonra bir Perkin Elmer Envision Plaka Okuyucusu üzerinde ölçülmüstür. Lusiferaz seviyeleri, muamele edilmis kontrollere göre yüzdelere dönüstürülmüstür (%100 olarak tanimlanmistir) ve verileri, XLFit4 yazilimi (IDBS, Emeryville, CA) kullanilarak genel aritmetik doz yanit denklemine y = a/(1+(x/b)c) uydurulmustur. E050 degerleri, ortaya çikan denklemlerden hesaplanmistir. Alternatif olarak antiviral aktivite, HCV N83 Proteaz IC50 Belirleme islemi ile analiz edilebilir. HCV N83 proteaz aktivitesi, bu tür analizin gerçeklestirilmesi ile ilgili olarak Taliani, Taliani M, Bianchi E, Narjes F, Fossatelli M, Urbani A, Steinkuhler C, et al. A continuous assay of hepatitis C virus protease based on resonance energy transfer depsipeptide rezonans enerji transfer (FRET) depsipeptid substrati (RET 81, Anaspec, San Jose, CA) kullanilarak izlenmistir.
DTT ile %40 gliserol tamponunda ZOuM izojenik N84A peptid kofaktör (Sigma, St.
Louis, M0) ile 10 dakika 37°C'de önceden inkübe edilmistir. Bilesikler DMSO içerisinde seri olarak 1:13 seyreltilmistir, 10 dakika enzim/kofaktör karisimi ile inkübe edilmistir ve reaksiyonlar, 2 uM RET S1 substrat (nihai konsantrasyon) ilavesi ile baslatilmistir.
Floresan artisi, bir Vict0r3 V floresan plaka okuyucu (Perkin Elmer, Waltham, MA) kullanilarak bir saat boyunca sürekli olarak ölçülmüstür. Baslangiçtaki hizlar. maksimal egim algoritmasi ile Workout kullanilarak her bir inhibitör konsantrasyonu için hesaplanmistir. Hiz verileri, islem görmemis kontrole (%100 olarak tanimlanmistir) göre yüzdelere dönüstürülmüstür ve lineer olmayan regresyon, %50 inhibitör konsantrasyonlarini (IC50 degerleri) hesaplamak üzere gerçeklesti rilmistir.
N83 Enzimatik Potansiyel: Saflastirilmis N83, NS4A peptidi ile kompleks hale getirilmistir ve daha sonra bilesiklerin seri dilüsyonlari (solvent olarak DMSO kullanilmistir) ile inkübe edilmistir. Reaksiyonlar, çift etiketlenmis substrat ilavesi ile baslatilmistir ve floresandaki ortaya çikan kinetik artis ölçülmüstür. Hiz verisinin lineer olmayan regresyonu, |C50 degerlerini hesaplamak üzere gerçeklestirilir. Aktivite baslangiçta genotip 1b proteazina karsi test edilir. genotip 1b'ye karsi elde edilen potansiyele bagli olarak ek genotipler (1a, 2a, 3) ve veya proteaz inhibitör direnç analizler boyunca bir kontrol olarak kullanilir. Örneklere ait Bilesikler, bu analizde degerlendirilmistir ve yaklasik 1 uM'den daha az leo degerine sahip oldugu bulunmustur.
Replikon PotansiveIi ve Sitotoksisite: Huh-Iuc hücreleri (Bartenschlager l389luc-ubi- dilüsyonlari (solvent olarak DMSO kullanilmistir) ile islem görmüstür. Replikon kopya numarasi, biyolüminesan araciligiyla ölçülür ve lineer olmayan regresyon, ECso degerlerini hesaplamak üzere gerçeklestirilir. Ayni ilaç dilüsyonlari ile isleme tabi tutulan paralel plakalar, Promega CellTIter-Glo hücre canlilik analizi kullanilarak sitotoksisite için analiz edilmistir. 1b replikonuna karsi elde edilen potansiyele bagli olarak bilesikler bir genotip la replikonu ve/veya D168Y veya A156T mutasyonlarini kodlayan inhibitör dirençli replikonlara karsi test edilebilir. BlLN-2061, tüm analizler boyunca bir kontrol olarak kullanilir. Örneklere ait Bilesikler bu analizde degerlendirilmistir ve yaklasik 5 uM*den daha az EC50 degerlerine sahip oldugu bulunmustur.
Serum proteinlerinin replikon potansiyelindeki etkisi Replikon analizleri a-asit glikoprotein (img/mL) veya insan serum albüminin (40mg/mL) fizyolojik konsantrasyonlari ile desteklenen normal hücre kültür ortaminda (DMEM + potansiyeldeki kat kaymasini belirlemek üzere normal ortamda ECso ile karsilastirilir.
Enzimatik Seçicilik: Domuz Pankreatik Elastaz, Insan Lökosit Elastaz, Proteaz 3 ve Katepsin D içeren memeli proteazlarin inhibisyonu, her bir enzim için ilgili substratlara yönelik Km'de ölçülür. Her enzim için IC50 degeri, seçiciligi hesaplamak üzere N83 1b proteaz ile elde edilen IC50 ile karsilastirilir.
MT-4 Hücre Sitotoksisitesi: MT4 hücreleri bes günlük bir periyotta bilesiklerin seri dilüsyonlari ile isleme tabi tutulur. Hücre yasayabilirligi Promega CellTiter-Glo analizi kullanilarak tedavi periyodunun sonunda ölçülür ve lineer olmayan regresyon CCso degerini hesaplamak üzere gerçeklestirilir.
ECsotde Hücreler ile Iliskili Bilesik Konsantrasvonu: Huh-Iuc kültürleri, ECso'ye esit olan konsantrasyonlarda bilesik ile inkübe edilir. Çoklu zaman noktalarinda (0-72 saat), hücreler soguk ortam ile 2X yikanir ve %85 asetonitril ile ekstrakte edilir; her bir noktasinda ortamin bir numunesi de ekstrakte edilir. Hücre ve ortam özütleri bilesiklerin her fraksiyondaki molar konsantrasyonlarini belirlemek üzere LC/MS/MS ile analiz Çözülebilirlik ve Stabilite: Çözülebilirlik %1'Iik bir toplam DMSO konsantrasyonu ile test ortam solüsyonlarinda (PBS, pH 100 uM'Iik bir nihai konsantrasyonda bilesigin hazirlanmasi ve 10mM DMSO stok solüsyonun bir alikuotunun alinmasi ile belirlenir. Test ortam solüsyonlari 1 saat boyunca çalkalama ile oda sicakliginda inkübe edilir. Solüsyonlar daha sonra santrifüj edilir ve geri kazanilan üst fazlar HPLC/UV üzerinde analiz edilir. Çözülebilirlik ayni konsantrasyonda DMSO'da saptanan miktara kiyasla tanimlanan test solüsyonunda saptanan bilesik miktarinin karsilastirilmasi ile hesaplanabilir. Ayrica 37°Clde test ortaminda 1 saatlik inkübasyon sonrasinda bilesiklerin stabilitesi belirlenir.
Soguk-korunmus Insan, Köpek ve Siçan Hepatositlerinde Stabilite: Her bir bilesik kadar inkübe edilir. Soguk korunmus hepatositler serumsuz inkübasyon ortaminda yeniden yapilandirilir. Süspansiyon 96-gözlü plakalara (50 uL/göz) transfer edilir.
Bilesikler inkübasyon ortaminda 2 pM”ye kadar seyreltilir ve daha sonra inkübasyonu baslatmak üzere hepatosit süspansiyonlarina eklenir. Numuneler, inkübasyonun suda %03 formik asitten olusan bir karisim ile söndürülebilir. Her bir numunedeki bilesik konsantrasyonu LC/MS/MS kullanilarak analiz edilir. Hepatosit süspansiyonunda bilesigin ortadan kaybolma yari ömrü bir monofazik üssel denklem ile konsantrasyon-zaman verisinin uydurulmasi ile belirlenir. Veri ayni zamanda intrinsik hepatik klirens ve/veya toplam hepatik klirensi temsil etmek üzere ölçeklendirilir.
Insan, Köpek ve Sicandan alinan Hepatik 89 Fraksivondaki Stabilite: Her bir bilesik edilir. Bilesikler inkübasyonu baslatmak üzere 89 süspansiyonuna eklenir. Numuneler, inkübasyonun baslatilmasindan 0,10,3O ve 60 dakika sonra alinir. Bilesigin her bir numunedeki konsantrasyonu LC/MS/MS kullanarak analiz edilir. 89 süspansiyonunda bilesigin ortadan kaybolma yari ömrü bir monofazik üssel denklem ile konsantrasyon- zaman verisinin uydurulmasi ile belirlenir.
Caco-2 Geçirgenligi: Ileri (A-iIa-B) ve geri (B-iIa-A) geçirgenligin her ikisi ölçülür. Caco- 2 mono katmanlari, 12-gözlü Costar Transwell® plakalarinda kollajen kapli, mikro gözenekli, polikarbonat membranlar üzerinde birlesmek üzere büyütülür. Bilesikler ileri geçirgenlik (A-iIa-B) için apikal tarafta dozajlanir ve geri geçirgenlik (B-iIa-A) için basolateral tarafta dozajlanir. Hücreler nemlendirilmis bir inkübatörde %5 002 ile 37°C'de inkübe edilir. inkübasyonun baslangicinda, inkübasyondan 1 saat veya 2 saat sonra bir 200-uL alikuot alici hazneden alinir ve taze analiz tamponu ile degistirilir.
Bilesigin her bir numunedeki konsantrasyonu LC/MS/MS ile belirlenir. Bariz geçirgenlik, Plazma Protein Baglanmasi: Plazma protein baglanmasi denge diyalizi ile ölçülür. Her bir bilesik, 2 pM'lik bir nihai konsantrasyonda bos plazmaya alkol ile katilir. Alkol katilan plazma ve fosfat tamponu bir 37°C'Iik su banyosunda yavas yavas döndürülen, düzenlenmis diyaliz hücrelerinin zit taraflarina yerlestirilir. inkübasyonun sonunda, plazma ve fosfat tampondaki bilesik konsantrasyonu belirlenir. Bagsiz yüzdesi asagidaki denklem kullanarak hesaplanir: Bagsiz %'si = 1000 C1. + C/ .
Burada Cf ve Cb serbesttir ve bagli konsantrasyonlar, sirasiyla pos-diyaliz tamponu ve plazma konsantrasyonunda belirlenmistir.
CYP450 Profilleme: Her bir bilesik NADPH varliginda ve yoklugunda CYP1A2, enzimlerinin her biri ile inkübe edilir. Seri numuneler inkübasyonun baslangicindan 5, , 30, 45 ve 60 sonra ve inkübasyonun baslangicinda inkübasyon karisimindan alinabilir. Bilesigin inkübasyon karisimindaki konsantrasyonu LC/MS/MS araciligiyla belirlenir. Her bir zaman noktasinda inkübasyon sonrasinda geri kalan bilesik yüzdesi inkübasyonun baslangicinda örneklendirme ile karsilastirilarak hesaplanir.
Sican. Köpek. Maymun ve Insan Plazmasindaki Stabilite: Bilesikler 37°Cide plazmada (siçan, köpek, maymun veya insan) 2 saate kadar inkübe edilir. Bilesikler 1 ve 10 ug/mL'Iik nihai konsantrasyonlarda plazmaya eklenir. Alikuotlar bilesigin majör metabolitler ve bilesiklerin konsantrasyonu LC/MS/MS araciligiyla ölçülür.
Biyolojik veriler (antiviral potansiyel [EC5o], bir Reni'li'alusiferaz (RLuc)-bazli HCV replikon raportör analiz - HCV 1b RLuc kullanilarak belirlenir).
Biyoloiik Örnek 7: Bilesik 10 ve Bilesik 6 Çapraz Direnci Bu çalisma, Bilesik 10 ve Bilesik 6'nin in vitro çapraz direnç profillerini belirlemek üzere gerçeklestirilmistir. signatür NSSB nükleosid HCV ilaç direnç mutasyonu 8282T veya en yaygin in vitro ve in vivo NSSA HCV ilaç direnç mutasyonlari tasiyan HCV mutant replikonlarinin bir paneli, Bilesik 10 veya Bilesik B'ya duyarliligin azalmasini saglayan mutasyonlar arasinda çapraz direncin olup olmadigini belirlemek üzere geçici replikon analizi vasitasiyla arastirilmistir. Bilesik 10'a düsük duyarlilik göstermeyen N85A mutantlari ve Bilesik 67ya tamamen duyarli kalan 8282T mutant replikonlari ile bu bilesikler arasinda herhangi bir çapraz direnç gözlenmemistir.
Materyaller ve Yöntemler Reaktifler Bilesikler Bilesik 6 ve Bilesik 10, Gilead Sciences, Inc. in Foster City, CA'da sentezlenmistir.
Hücre Hatlari Huh-Iunet, HCV replikasyonu için yüksek derecede izin verilebilir olan bir Huh-7 klonu, ReBLikon GmbH'den (Mainz, Almanya) elde edilmistir. Huh-Iunet hücreleri, %10 fötal bovin serumu serum (FBS; Hyclone, Logan, UT) ile desteklenen Dulbecco Modifiye Eagle Ortaminda (DMEM: GIBCO, Carlsbad, CA) muhafaza edilmistir. Hücreler, nemlendirilmis inkübatörlerde (%85 nemlilik) ve %5 CO2 atmosferi altinda 37°C”de muhafaza edilmistir.
PI-hRIuc, polio IRES'in asagi akim yönünde Renilla Iusiferaz geni ve EMCV IRES'in asagi akim yönünde genotip 1b (Con-1 sus) HCV yapisal olmayan genleri (NSS - NSSB) kodlayan bir bisistronik replikon, geçici transfeksiyon çalismalari için kullanilmistir. Plazmid pPI-hRIuc, bir genotip 1b (Con-1 sus) subgenomik replikonu kodlayan plazmid pFKI341 PI-Luc/N83-3'/ET'den üretilmistir ve ReBLikon'dan (Friebe (Invitrogen, Carlsbad, CA) ve primerler PV_RIuc_Top and 3'-RIuc(N0tI) kullanilarak PCR araciligiyla pF9 CMV hRIuc-neo FIexi(R)'den (Promega, Madizon. WI) çogaltilan PCR'dir. Bu iki primer asagidaki dizilere sahiptir ve sonraki klonlama islemi için restriksiyon alanlarini tasir: PV_RIuc_T0p: 5' ATC AGA CAA TTG TAT CAT AAT GGC TTC CAA GGT GTA CG 3` (SEQ ID NO:3); 3'-RIuc(NotI): 5' ACG TCA CTA TCT ACG CGG CCG CTT ACT GCT CGT TCT TCS' (alt çizili Notl alani) (SEQ ID No:4). T7 Promotörü, 5'UTR ve Polio Virüs IRES, primerler 5'-P7(Sbfl) ve PV_RIuc_Bottom kullanilarak plazmid pFKI341 PI-Luc/NSS-B'IET'den PCR ile çogaltilmistir. Bu iki primer asagidaki dizilere sahiptir ve sonraki klonlama islemi için restriksiyon alanlarini tasir: 5'- P7(Sbfl): 5' CAA GCT AAG CTG CCT GCA GG T 3' (alti çizili Sbfl alani) (SEQ ID NO:5); PV_RIuc_Bott0m: 5' CGT ACA CCT TGG AAG CCA TTA TGA TAC AAT TGT CTG AT (SEQ ID No:6). Yukaridaki iki reaksiyondan gelen sonraki PCR parçalari daha sonra örtüsen PCR ve primerler 5'- P7(Sbfl) ve 3'-Rluc(Notl) kullanilarak birlestirilmistir.
Tamamlanan P7-5'UTR-P0li0 Virüs IRES-thuc amplifikasyon ürünü, pCR2.1-TOPO'ya alt klonlanmistir. Ortaya çikan plazmid, Sbfl ve Notl ile parçalanmistir ve kesip çikarilan parça (P, T4 DNA Iigaz kullanilarak ayni enzimler ile parçalanan pFKI341 PI-Luc/N83-3'/ET,ye baglanmistir. Ortaya çikan vektör, pPI-thuc, plazmidin P75'UTR-POIio Virus IRES-thuc bölgesinin dogru oryantasyonu ve dizisini dogrulamak üzere dizilenmistir. hRIuc içeren GT 1a ve 2a replikonlari, daha önce açiklanmistir (Robinson M, Yang H, Sun SC, Peng B, Tian Y, Pagratis N, et al. Novel HCV Reporter Replicon Cell Lines Enable Efficient Antiviral Screening against Genotype 1a. Antimicrob Agents Chemother 2010.) PI-thuc replikonu, kimera yapisi içine bir omurga olarak kullanilmistir. Bunun yetersiz hale gelmesini saglayan NS5B'de bir dahili silme islemi yapilmistir. 1b-con-1 NS5A'nin son , genotipler 2b, 3a, 4a, 5a, ve öatdan (Genscript Inc. Piscataway NJ) NSSB dizileri ile çerçeve içinde sentezlenmistir.
Bu genotiplerine her biri biçin konsensüs NSSB dizileri, Avrupa HCV veri tabaninda saklanan dizilerin hizalanmasi ve bir konsensüsün çikarilmasi ile elde edilmistir.
NSSB'ye yönelik bu yeni konsensüs dizileri ve ayrica ayri klinik izolatlara (Herlihy et al., replikonlari olusturmak üzere kullanilmistir. Benzersiz bir Xhol alani, 5' ucunda kullanilmistir ve standart moleküler biyolojik teknikleri vasitasiyla direkt olarak 1b- hRLuc/NeoR NSSB vektöründe klonlamak üzere 3' ucunda benzersiz bir Asel alani kullanilmistir.
NSSB 8282T mutasyonlari, üreticinin talimatlarina (Stratagene, La Jolla, CA) göre QuikChange II XL mutajenezi kullanilarak replikon plazmidlerine eklenmistir.
Mutasyona ugrayan bütün replikon, 8282T mutasyonu varligini ve herhangi bir ikincil alan mutasyonlarinin yoklugunu dogrulamak üzere dizilenmistir.
NSSA mutant replikonlari, sirasiyla 5' ve 3' BsrGI ve EcoRI alani (Genscript, Piscataway, NJ) ile komsu olan istenen mutasyonu içeren NSSA'nin ilk 149 amino asidini kodlayan bir dizinin sentezlenmesi ile olusturulmustur. Sentezlenen parçalar daha sonra standart moleküler biyoloji teknikleri ile benzersiz BsrGl ve EcoRl restriksiyon alanlarinda klonlama islemini saglamak üzere modifiye edilen bir 1a Rluc replikon plazmidine klonlanmistir. Mutasyonlar DNA dizileme islemi ile dogrulanmistir.
Replikonlar, asagidaki enzimler kullanilarak lineer hale getirilmistir: Spe I (1b Pl-Rluc- bazli replikonlar), Hpa I (1a-RIuc-bazli replikonlar), ve XbaI/Hpal (2a Rluc replikonu).
Replikon RNAilar, bir RNAeasy kolonu (Qiagen: Valencia, CA) kullanilarak saflastirmayi takiben bir T7 Ribomax in vitro transkripsiyon kiti (Promega; Madizon, WI) kullanilarak replikon kodlayan plazmidlerden in vitro transkribe edilmistir.
Analizler Geçici Transfeksiyon Replikon Analizi Kullanilarak Ilaç Duyarliliginin Belirlenmesi kullanilarak Huh-lunet hücrelerine transfekte edilmistir. Kisaca hücreler tripsin ile isleme tabi tutulmustur ve PBS ile iki kez yikanmistir. 400 pL ve PBS içerisinde 4 x ayarlari kullanilarak elektroporasyona tabi tutulmustur. Hücreler, 40 mL'Iik önceden iIitiImis kültür ortamina transfer edilmistir ve daha sonra 96 gözlü veya 384 gözlü plakalarda tohumlanmistir. Bilesikler %100 DMSO içerisinde 3-kat seri olarak seyreltilmistir ve %O.5'Iik nihai bir konsantrasyon elde etmek üzere hücrelere eklenmistir. Hücreler, kültür ortami uzaklastirildiktan üç gün sonra isleme tabi tutulmustur, hücreler parçalanmistir ve Renilla Iusiferaz aktivitesinin miktari, ticari olarak temin edilebilir reaktifler (Promega) ve bir Victor veya Envision aleti (Perkin Elmer, Waltham, MA) kullanilarak belirlenmistir.
Veri Analizi Veriler, islem görmemis kontrollere (%100 olarak tanimlanmistir) göre yüzdelere dönüstürülmüstür ve EC50 degerleri, GraphPad Prism yazilimi veya Pipeline Pilot kullanilarak iki kopya veri setinin lineer olmayan regresyonu ile hesaplanmistir. Direnç kat degisiklikleri, dogal sus replikon E050 ila mutant orani olarak hesaplanmistir.
Sonuçlar SZ82T,te karsi Bilesik 10 ve Bilesik 6 Aktivitesi Bilesik 10 ile önceki in vitro direnç seçimi, çoklu genotiplerde (GT 1b, 1a ve 2a) primer mutasyon olarak NSSB'de 8282T'yi sürekli olarak tanimlamistir. NSSB 8282T mutasyonu daha sonra tam uzunlukta GT 1a, 1b, ve 2a replikonlarina ve bir GT1b omurgasinda klonlanan bir 2b, Ba, veya 421 NSSB dizisini içeren kimerik replikonlara eklenmistir. Bilesik 10, Bilesik 6, ve ribavirine (RBV) duyarlilik, bir geçici replikasyon araliginda siralanan tüm bes genotip boyunca ECso degerleri ile Bilesik 10'a karsi düsük bir duyarlilik göstermistir. 8282T'ye yönelik E050 degerindeki kat artisi, NSSB 8282T mutasyonu bulundugunda Bilesik 10'a karsi azalmis replikon duyarliligi gösteren karsilik gelen genotiplerden dogal susa kiyasla 2.4 ila 16.0 araliginda siralanmistir.
Dogal sus replikona yönelik olarak RBV için ECso degerleri, GT 2b'ye karsi en düsük E050 test edilen bes genotip boyunca benzerdir. Ilginç sekilde 8282T replikonlarina yönelik EC50 degerleri, tüm bes genotip için karsilik gelen dogal sustan RBV ile tedaviye 5- ila 10-kat daha duyarlidir. Bu mutasyonun Bilesik 6'ya olan duyarliligi degistirmedigi gösterilerek dogal sus ile 8282T replikonlari arasinda Bilesik 6 EC50 degerleri arasinda herhangi bir önemli farklilik gözlenmemistir. Sonuç olarak 8282T replikonu Bilesik 10'a düsük duyarlilik sunarken mutant replikonu, Bilesik 6'ya dogal sus duyarliligi ve dogal susa göre RBV ile inhibisyona artmis bir duyarlilik göstermistir. ve RBV antiviral aktivitesi Replikon Bilesik 10 RBV Bilesik 6 Replikon Bilesik 10 RBV Bilesik 6 E050 NMa Kat ECso HM&1 Kat ECso l'lIVIa Kat a EC50. iki veya daha fazla bagimsiz deneye yönelik ortalamayi gösterir. b Karsilik gelen dogal sustan kat degisimi NSSA Mutantlarina karsi Bilesik 10 ve Bilesik 6 Aktivitesi N85A ilaç direnci mutasyonlarinin Bilesik 10'a çapraz dirençli olup olmadigini belirlemek üzere NS5A mutant replikonlarinin bir paneli, hem Bilesik 6 hem de Bilesik 'a duyarlilik için analiz edilmistir. Yedi NSSA mutantinin tümü, 25- ila 3029-kat araliginda EC50 degerindeki bir artis ile Bilesik 6'ya düsük bir duyarlilik göstermistir.
Bunun aksine Bilesik 10'a veya bir RBV kontrolüne N85A mutantlari için EC50 degerinde herhangi bir önemli degisim gözlenmemistir.
Tablo 7.2 Genotip 1a'da NS5A Mutantlarina karsi Bilesik 10 veya Bilesik 6”nin In Vitro Aktivitesi Bilesik Ecso'de Kat Degisimi (DRM ECso/ 1a-H77 EC50) Sonuçlar Bu örnekte Bilesik 10 ve Bilesik 6'nin çapraz direnç profilleri, sirasiyla Bilesik 6 ve Bilesik 10'a düsük duyarlilik sunan NSSA ve NSSB”de bilinen direnç mutasyonlarini kodlayan geçici HCV replikonlari kullanilarak degerlendirilmistir. Dogal sus ve 8282T replikonlarindan ölçülen Bilesik 6 EC50 degerlerinde herhangi bir önemli farklilik bulunmazken NSSB 8282T replikonlari, Bilesik 10'a düsük duyarlilik kazandirmistir.
Karsilikli olarak Bilesik G'ya düsük duyarlilik sunan mutasyonlar, Bilesik 10 ”2 tedaviye duyarli kalmistir.
Genel olarak bu sonuçlar, Bilesik 10 ve Bilesik 6'ya yönelik direnç mutasyonlarinin çapraz direnç göstermedigini ve HCV tedavisine yönelik gelecek kombinasyon terapisinde bu bilesiklerin kullanimini destekledigini gösterir.
Biyoloiik Örnek 8: Kombinasyon Aktivitesi NSSA inhibitörü Bilesik 6, non-nükleosid inhibitörleri Bilesik 1 veya Bilesik 5, proteaz inhibitörü Bilesik 3, veya ribavirin (RBV) ile Bilesik 10'nun kombinasyon çalismasi, HCV inhibitörlerinin hücre bazli antiviral aktivitesinin degerlendirilmesine yönelik standart kalan bir in vitro replikon analizi için gösterilir. Bu sonuçlar, bilesik 10'nun Bilesik 6, Bilesik 1, Bilesik 5, veya Bilesik 3 ile kombine edildiginde ilave antiviral aktiviteye sahip oldugunu göstermistir. Ek olarak Bilesik 10, in vitro RBV ile kombinasyon halinde minör enerji göstermistir.
Materyaller ve Yöntemler Hücre Hatti ve Hücre Kültürü Bu çalismada kullanilan HCV genotip 1a replikon hücre hatti daha önce açiklanmistir (Robinson M, Yang H, Sun SC, Peng B, Tian Y, Pagratis N, et al. Novel HCV Reporter Replicon Cell Lines Enable Efficient Antiviral Screening against Genotype 1a.
Antimicrob Agents Chemother 2010). Hücreler, %10 FBS (HyCIone, Logan, UT, Cat# Cat# ile Dulbecco Modifiye Eagle Ortami (DMEM) içeren hücre kültüründe büyütülmüstür.
Replikon hücreler, HCV replikon kaybini önlemek üzere 0.5 mg/mL Genetisin (Invitrogen, Carlsbad, CA, Cat# 10131-035) içerisinde muhafaza edilmistir. Hücreler, konflüansa ulasilmadan her 3-4 gün öncesinde geçirilmistir.
EC50, CCso Belirlemeleri ve Kombinasyon Çalismalarina yönelik HCV Replikon Analizi Tüm bilesikler, %100 DMSO içinde saglanmistir. Bilesik seri dilüsyonlar %100 DMSIO içinde gerçeklestirilmistir. Tüm seri dilüsyonlar, bir Biomek FX Workstation kullanilarak 384-gözlü polipropilen plakalarda (Thermo Scientific, Hudson, NH, Cat#4341) gerçeklestirilmistir. EC50 ve CCso belirlemelerine yönelik olarak test bilesikleri, 384 gözlü plakalarin 3-20 kolonunda 1:3 dilüsyon olan on adimda seri olarak seyreltilmistir.
Kombinasyonal çalismalara yönelik olarak bir bilesik, dikey yöne dogru 1:2 dilüsyon olan yedi adimda seri olarak seyreltilen diger bilesik ile yatay yöne dogru 1:2 dilüsyon olan dokuz adimda seri olarak seyreltilmistir. Farkli ilaç konsantrasyonlari ve oranlarinin tanimlanmis bir seti elde edilir. Her bir ayri ilaç için E050 degeri, test edilen konsantrasyon araligi için orta nokta olarak seçilmistir. Tüm seri dilüsyonlar, ayni 384 gözlü plakada bilesik basina dört kopya halinde gerçeklestirilmistir. Her bir seri dilüsyon inhibitörü ITMN-191, HCV replikasyonunun %100 inhibisyonunun bir kontrolü olarak 23 kolona eklenirken 10 mM'de puromisin, %100 sitotoksisite kontrolü olarak 24 kolona eklenmistir.
Bir siyah polistiren 384 gözlü plakanin (Greiner Bio-one, Monroe, NC, Cat#781086, islem görmüs hücre kültürü) her bir gözüne, 2000 süspanse edilmis HCV replikon hücresi içeren 90 uL hücre kültür ortami (genetisin olmaksizin), bir Biotek uFIow Workstation ile eklenmistir. Hücre kültür plakalarina bilesik transferine yönelik olarak bilesik seri dilüsyon plakasindan 0.4 uL bilesik solüsyonu, bir Biomek FX Workstation üzerinde hücre kültür plakasina transfer edilmistir. Nihai analiz gözlerindeki DMSO edilmistir.
HCV replikon analizi, ayni gözden sitotoksisite ve anti-replikon aktivitesini degerlendirilebilen çok katli bir analizdir. Ilk olarak CC50 analizi gerçeklestirilmistir. 384 gözlü hücre kültüründeki ortam havalandirilmistir ve gözler, bir Biotek ELX405 plaka yikayicisi kullanilarak her biri 100 uL 1 X PBS ile dört kez yikanmistir. 1 X PBS içerisinde içeren 50 uL'lik bir solüsyon hacmi, bir Biotek uFIow Workstation ile plakanin her bir gözüne eklenmistir. Plaka, bir Perkin Elmer Envision Plaka Okuyucusu ile florsan sinyali (eksitasyon 490 nm, emisyon 520 nm) ölçülmeden önce oda sicakliginda 30 dakika inkübe edilmistir.
E050 analizi, CCso analizi olarak ayni gözlerde gerçeklestirilmistir. 384 gözlü hücre kültür plakasinda kalsein-PBS solüsyonu bir Biotek ELX405 plaka yikayicisi ile havalandirilmistir. Bir 20 pL Dual-Glo Iusiferaz tamponu (Promega, Madizon, WI, Cat#E298B) hacmi, bir Biotek pFIow Workstation ile plakanin her bir gözüne eklenmistir. Plaka, oda sicakliginda 10 dakika inkübe edilmistir. Dual-Glo Stop & Glo substrati (Promega, Madizon, WI, Cat#E313B) ve Dual-Glo Stop & Glo tamponu bir hacmi daha sonra bir Biotek pFIow Workstation ile plakanin her bir gözüne eklenmistir. Plaka daha sonra Iüminesan sinyali bir Perkin Elmer Envision Plaka Okuyucusu ile ölçülmeden önce 10 dakika oda sicakliginda inkübe edilmistir.
Veri Analizi Sitotoksisite etkisi, kalsein AM'nin floresan ürününe dönüsümü ile belirlenmistir.
Sitotoksisite yüzdesi denklem 1 ile hesaplanmistir: Sitctoksisite '-îii'si veya inhibisyon ?FL-'si = 100 T›' (1 4) i_ l ) burada XC, bilesik ile islem gören gözden gelen floresan sinyalidir; MB puromisin ile islem gören gözlerden gelen ortalama floresan sinyalidir; MD DMSO ile islem gören gözlerden gelen ortalama floresan sinyalidir. Anti-HCV aktivasyon aktivitesi, HCV replikonunun raportör renilla Iusiferazindan üretilen lüminesans sinyali ile belirlenmistir.
HCV replikonu üzerindeki inhibisyon yüzdesi, denklem 1 kullanilarak hesaplanmistir, burada Xc, bilesik ile islem gören gözden gelen lüminesans sinyalidir; MB ITMN-191ile islem gören gözlerden gelen ortalama lüminesans sinyalidir; MD DMSO ile islem gören gözlerden gelen ortalama lTMN-191 sinyalidir.
CC50 degerleri, hücre yasayabilirliginde %50'Iik bir azalmaya neden olan test bilesik konsantrasyonu olarak belirlenmistir. ECso degerleri, HCV replikasyonunda %507Iik bir azalmaya neden olan test bilesik konsantrasyonu olarak belirlenmistir. Hem CCso hem de E050 degerleri, deneysel verilerin denklem 2'ye lineer olmayan regresyon uydurulmasi ile Pipeline Pilot 5.0 yazilim paketi (Accelrys, San Diego, CA) kullanilarak elde edilmistir: burada y, bilesigin x konsantrasyonunda HCV replikonunun gözlenen inhibisyon konsantrasyonunda ön görülen yanittir; 0 orta seviyeli konsantrasyondur (CCso veya Kombinasyon çalismasi deneysel verileri, Prichard ve Shipman (Prichard MN, Aseltine KR, Shipman C, Jr. MacSynergyTM II, Version 1.0. University of Michigan, Ann Arbor, Michigan, 1993) tarafindan gelistirilen MacSynergy ll programi kullanilarak analiz edilmistir. Yazilim (MacSynergyT'V' Il, University of Michigan, Ml), ilaçlar (Bliss inhibisyonu hesaplar ve teorik ve gözlenen inhibisyon degerleri arasindaki istatiksel olarak önemli farkliliklarin miktarini belirler. Bu farkliliklarin üç boyutlu olarak çizilmesi, Z-düzlemindeki yükselmelerin antiviral sinerjiyi temsil ettigi ve çöküntülerin, bilesikler arasindaki antiviral antagonizmi temsil ettigi bir yüzey ile sonuçlanir. Yüzey sapmalarinin hesaplanan hacimleri % pM2 cinsinden ifade edilir. Prichard ve Shipman için kombinasyon etkileri asagidaki sekilde tanimlanir: . Güçlü sinerji: > %100 pM2 . Orta sinerji: > %50 ve s 100 iiM2 o Minör sinerji: > %25 ve S 50 pM2% . Toplanabilirlik: s %25 ve > -%25 pM2 . Minor antagonizm: s -%25 ve > -50 HM . Orta antagonizm: s -%50 ve > -100 iiM2 - Güçlü antagonizm: S -%100 iiM2 Her bir kombinasyon çalismasina yönelik olarak üç bagimsiz deney, her bir deneyde dört kopya halinde gerçeklestirilmistir.
Sonuçlar HCV Genotip 1a Replikon Analizinde Ayri Bilesiklerin Antiviral Aktivitesi ve Sitotoksisitesi Diger anti-HCV bilesikleri ile kombine edilen Bilesik 10'nun anti-HCV aktivitesi ve sitotoksisitesi, bir HCV genotip 1a replikonu tasiyan Huh-7 hücrelerinde test edilmistir.
Tüm bilesiklere yönelik E050 ve CCso degerleri asagidaki Tabloda Iistelenir.
Kombinasyon analizinde test edilen en yüksek konsantrasyonlara kadar tüm ayri bilesikle için gözlenen önemli herhangi bir sitotoksisite bulunmaz.
Tablo 8.1. HCV Genotip 1a Replikonuna karsi bu Çalismada kullanilan Bilesiklerin E050 V9 CCso Degerleri Sinif EC50a (nM) 0050a (nM) Bilesikler Bilesik 1 NSSB Non-nükleosid 18 >44400 Bilesik 5 NSSB Non-nükleosid 14 >44400 a Degerler, üç veya daha fazla bagimsiz deneye yönelik geometrik ortalamalardir Anti-HCV Ajanlarinin Diger Siniflari ile Kombinasyon halinde Bilesik 10'nun Antiviral Aktivitesi ve Sitotoksisitesi.
Diger anti-HCV bilesikleri ile kombinasyon halinde Bilesik 10'nun antiviral etkileri, HCV genotip 1a replikonu kullanilarak degerlendirilmistir. Sonuçlar, toplanabilirlikten önemli sapmalari gösteren yüzey grafiklerini saglayan, MacSynergy II kullanilarak analiz edilmistir. Ilave yüzeyden sapmalardan hesaplanan sinerji ve antagonizm hacimleri (%uMZ) asagidaki Tabloda kisaca açiklanir. %95 güven araliginda ortalama Sinerji ve antagonizm hacimleri, Bilesik 10, Bilesik 10'nun ilave etkilesiminin göstergesi olan Bilesik 6, Bilesik 1, Bilesik 5, ve Bilesik 3 ile kombine edildiginde %25 ile -25 iiM2 arasindadir. Ayrica Bilesik 10, minör bir sinerjistik etkilesim belirtilerek, RBV ile kombine edildiginde %25 ila 50 iiM2 araliginda bir sinerji hacmi gösterir. Bilesik 10 ile dogrudan etki eden antivirallerin kullanildigi kombinasyon çalismalarinda hücre yasayabilirligi, test edilen bilesik kombinasyonlarinin en yüksek konsantrasyonlarinda çalismalar, en yüksek kombine ilaç konsantrasyonlardan %85'ten daha büyük hücre yasayabilirligi göstermistir.
Tablo 8.2. Bilesik 10 ile Ilaç Kombinasyonlarina yönelik Ilaç Etkilesimleri ve Antagonizm ve Antiviral Sinerji Miktarinin Belirlenmesi Bilesik 10 ile Sinerji .
Antagonizm Kombinasyon Halinde Sinif Hacmi _ Etkilesim Kullanilan Bilesik (nMz)a nukleosid nukleosid N83 Proteaz Nükleosid Minör Analogu sinerji a Degerler, dört kopya halinde gerçeklestirilen üç bagimsiz deneyin ortalama ± standart sapmasini gösterir Tablo 8.3. Bilesik Kombinasyonlarindaki Sitotoksisitenin Miktarinin Belirlenmesi10 Bilesik 10'nun En Bilesik 10 ile __ Bilesik Kombinasyonlarinin Kombinasyon En Yüksek Konsantrasyonu (320 Halinde Konsantrasyonundaki nM) ile Kullanilan Kullanilan - __ Sitotoksisite (hücre büyümesi Bilesigin En Yuksek __ Bilesik uzerinde inhibisyon %'si) Konsantrasyonu Bilesik 6 0.16 nM 5.0 ± 5.0 Bilesik 1 120 nM 7.0 ± 4.6 Bilesik 5 64 nM 4.3 ± 2.9 Bilesik 3 240 nM 2.0 ± 3.5 a Degerler, dört kopya halinde gerçeklestirilen üç bagimsiz deneyin ortalama ± standart sapmasini gösterir Sonuçlar Antiviral Bilesik 10 aktivitesi, Bilesik 6, Bilesik 1, Bilesik 5, Bilesik 3, veya RBV ile kombinasyon halinde test edilmistir. Bilesik 10 Bilesik 6, Bilesik 1, Bilesik 5, veya Bilesik 3 ile kombinasyon halinde ilave antiviral aktivite ce RBV ile minör Sinerji göstermistir.
Kisaca bu bulgular, ayri ayri ilaçlarin herhangi birinin etkinligi azaltilmaksizin artmis viral baskilama elde etmek üzere Bilesik 10'nun Bilesik 6, Bilesik 1, Bilesik 5, Bilesik 3 veya RBV ile kombinasyon halinde kullanima potansiyelini destekler.
Mevcut bulusa ait spesifik düzenlemeler burada gösterilmesine ve detayli olarak açiklanmasina ragmen bulus bunlarla sinirli degildir. Yukaridaki detayli açiklamalar, mevcut bulusun örnegi olarak saglanir ve bulusa herhangi bir sinirlandirma olusturan sekilde yorumlanmamalidir.

Claims (3)

ISTEMLER
1. Bir bilesim olup, özelligi asagidakileri içermesidir: 1) bilesik 10 0 O 5 . veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu, ve 2) bilesik 6 7% dis veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu.
2. Istem 1'e göre bilesim olup, özelligi ayrica bilesik 5'i veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içermesidir.
3. istem 1 veya 2'ye göre bilesim olup, özelligi ayrica bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir seyreltici veya tasiyici içermesidir. . istem 3'e göre bilesim olup, özelligi günlük bir kez uygulama için bir birim dozaj formu olarak formüle edilir. . istem 3 veya 4'e göre bilesim olup, özelligi oral uygulamaya yönelik formüle edilmesi; istege bagli olarak bir tablet olarak formüle edilmesidir. . Istemler 1-5`ten herhangi birine göre bir bilesim olup, özelligi medikal terapide kullanima yönelik olmasidir. . Istemler 1-5'ten herhangi birine göre bir bilesim olup, özelligi bir HCV enfeksiyonunun profilaktik veya terapötik tedavisinde kullanima yönelik olmasidir. . istem Tye göre kullanima yönelik bir bilesim olup, özelligi bir interferon ile uygulamaya yönelik olmamasidir. . Istem 7'ye göre kullanima yönelik bilesim olup, özelligi ribavirin ile uygulamaya yönelik olmasidir.
TR2018/02537T 2011-09-16 2012-09-14 HCV'nin tedavi edilmesine yönelik yöntemler. TR201802537T4 (tr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161535885P 2011-09-16 2011-09-16
US201161561753P 2011-11-18 2011-11-18

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201802537T4 true TR201802537T4 (tr) 2018-03-21

Family

ID=46970425

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/02537T TR201802537T4 (tr) 2011-09-16 2012-09-14 HCV'nin tedavi edilmesine yönelik yöntemler.

Country Status (36)

Country Link
US (3) US9393256B2 (tr)
EP (1) EP2709613B2 (tr)
JP (2) JP6073897B2 (tr)
KR (2) KR101991298B1 (tr)
CN (2) CN104244945B (tr)
AP (1) AP2014007575A0 (tr)
AU (1) AU2012308295B2 (tr)
BR (1) BR112014006324B8 (tr)
CA (1) CA2840242C (tr)
CL (1) CL2014000630A1 (tr)
CO (1) CO6930366A2 (tr)
CR (1) CR20140177A (tr)
CY (1) CY1119896T1 (tr)
DE (2) DE202012013074U1 (tr)
DK (1) DK2709613T4 (tr)
EA (1) EA026667B9 (tr)
EC (1) ECSP14013312A (tr)
ES (1) ES2659216T5 (tr)
HK (1) HK1231378A1 (tr)
HR (1) HRP20180237T4 (tr)
HU (1) HUE036588T2 (tr)
IL (1) IL231515A (tr)
LT (1) LT2709613T (tr)
MD (1) MD4589C1 (tr)
ME (1) ME03009B (tr)
MX (2) MX336580B (tr)
NZ (1) NZ623396A (tr)
PE (1) PE20141056A1 (tr)
PL (1) PL2709613T5 (tr)
PT (1) PT2709613T (tr)
RS (1) RS56975B1 (tr)
SG (2) SG11201400664WA (tr)
SI (1) SI2709613T2 (tr)
TR (1) TR201802537T4 (tr)
UA (1) UA116087C2 (tr)
WO (1) WO2013040492A2 (tr)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2734052A1 (en) 2003-05-30 2005-01-13 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
AU2009333559B2 (en) 2008-12-09 2015-03-12 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptors
KR101546119B1 (ko) 2009-05-13 2015-08-20 길리애드 파마셋 엘엘씨 항바이러스 화합물
CA2773773C (en) 2009-09-21 2019-04-23 Gilead Sciences, Inc. Processes and intermediates for the preparation of 1'-substituted carba-nucleoside analogs
SG186830A1 (en) 2010-07-22 2013-02-28 Gilead Sciences Inc Methods and compounds for treating paramyxoviridae virus infections
TW201701876A (zh) 2010-12-20 2017-01-16 吉李德科學股份有限公司 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
CN104244945B (zh) 2011-09-16 2016-08-31 吉利德制药有限责任公司 用于治疗hcv的方法
AU2015100285B4 (en) * 2011-10-21 2015-06-11 Abbvie Ireland Unlimited Company Methods for treating HCV
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
AU2015200715A1 (en) * 2011-10-21 2015-03-05 Abbvie Ireland Unlimited Company Methods for treating HCV
CN104383541A (zh) * 2011-10-21 2015-03-04 艾伯维公司 用于治疗hcv的包含至少两种直接抗病毒剂和利巴韦林但无干扰素的方法
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
DK2583680T1 (da) 2011-10-21 2015-01-19 Abbvie Inc Mono (PSI-7977) eller kombinationsbehandling af DAA til anvendelse ved behandling af HCV
DK2950786T3 (da) 2013-01-31 2020-02-17 Gilead Pharmasset Llc Kombinationsformulering af to antivirale forbindelser
WO2014185995A1 (en) * 2013-05-16 2014-11-20 Gilead Pharmasset Llc Hepatitis c treatments with sofosbuvir
CN104211565A (zh) * 2013-05-31 2014-12-17 浙江九洲药业股份有限公司 一种抗丙型肝炎药物中间体的制备方法
ES2792503T3 (es) 2013-08-27 2020-11-11 Gilead Pharmasset Llc Formulación combinada de dos compuestos antivirales
TWI733652B (zh) 2014-07-11 2021-07-21 美商基利科學股份有限公司 用於治療ＨＩＶ之ｔｏｌｌ樣受體調節劑
CN104130302B (zh) * 2014-08-08 2017-02-15 乳源东阳光药业有限公司 一种核苷药物的晶型及其制备方法
EP3194401B1 (en) 2014-09-16 2020-10-21 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of a toll-like receptor modulator
TWI687432B (zh) 2014-10-29 2020-03-11 美商基利科學股份有限公司 絲狀病毒科病毒感染之治療
ES2892123T3 (es) * 2014-12-26 2022-02-02 Univ Emory Derivados antivíricos de N4-hidroxicitidina
CN106138080A (zh) * 2015-04-03 2016-11-23 南开大学 核苷类化合物在制备治疗丙型肝炎病毒(hcv)感染疾病药物的应用
CN106146585B (zh) * 2015-04-10 2019-05-28 正大天晴药业集团股份有限公司 氘修饰的脲苷衍生物
LT3785717T (lt) * 2015-09-16 2022-04-11 Gilead Sciences, Inc. Coronaviridae infekcijų gydymo būdai
CA3022119A1 (en) 2016-04-28 2017-11-02 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
WO2017195147A1 (en) * 2016-05-12 2017-11-16 Lupin Limited Process for the preparation of ledipasvir and intermediates thereof
CN105968040B (zh) * 2016-06-29 2019-02-05 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 一种雷迪帕韦中间体的制备方法
CN106432197B (zh) * 2016-09-07 2019-12-10 上海众强药业有限公司 一种雷迪帕韦中间体单对甲苯磺酸盐、其晶型及其制备方法
US10682368B2 (en) 2017-03-14 2020-06-16 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating feline coronavirus infections
AU2018262501B2 (en) 2017-05-01 2020-12-10 Gilead Sciences, Inc. Crystalline forms of (S) 2 ethylbutyl 2 (((S) (((2R,3S,4R,5R) 5 (4 aminopyrrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-7-yl)-5-cyano-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2 yl)methoxy)(phenoxy) phosphoryl)amino)propanoate
CN111093627B (zh) 2017-07-11 2024-03-08 吉利德科学公司 用于治疗病毒感染的包含rna聚合酶抑制剂和环糊精的组合物
CN107629099B (zh) * 2017-07-26 2020-05-26 江苏科本药业有限公司 一种索非布韦中间体的制备工艺
JP7299897B2 (ja) * 2017-09-21 2023-06-28 リボサイエンス リミティド ライアビリティ カンパニー Ｈｃｖのｒｎａ複製阻害剤としての４’－フルオロ－２’－メチル置換ヌクレオシド誘導体
GB2581936B (en) 2017-12-07 2021-02-10 Univ Emory N4-hydroxycytidine and derivatives and anti-viral uses related thereto
CN109651472B (zh) * 2018-12-29 2020-08-18 湖南千金湘江药业股份有限公司 合成索非布韦关键中间体的方法
CN110531023B (zh) * 2019-10-08 2024-06-14 安徽理工大学 一种薄层色谱分析仪
CN111990544A (zh) * 2019-10-16 2020-11-27 长沙绿叶生物科技有限公司 一种用于阻断和干扰非洲猪瘟病毒与猪的特异受体结合的生物饲料及其应用
TWI789695B (zh) 2020-01-27 2023-01-11 美商基利科學股份有限公司 治療sars cov-2感染之方法
TWI794742B (zh) 2020-02-18 2023-03-01 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
AU2021234308C1 (en) 2020-03-12 2024-02-22 Gilead Sciences, Inc. Methods of preparing 1'-cyano nucleosides
WO2021207049A1 (en) 2020-04-06 2021-10-14 Gilead Sciences, Inc. Inhalation formulations of 1'-cyano substituted carbanucleoside analogs
TW202203941A (zh) 2020-05-29 2022-02-01 美商基利科學股份有限公司 瑞德西韋之治療方法
CN115996928A (zh) 2020-06-24 2023-04-21 吉利德科学公司 1’-氰基核苷类似物及其用途
TW202233204A (zh) 2020-08-27 2022-09-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療病毒感染之化合物及方法
EP4323362A1 (en) 2021-04-16 2024-02-21 Gilead Sciences, Inc. Methods of preparing carbanucleosides using amides
WO2023167944A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Gilead Sciences, Inc. Compounds and methods for treatment of viral infections

Family Cites Families (327)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USRE29835E (en) 1971-06-01 1978-11-14 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-Triazole nucleosides
US3798209A (en) 1971-06-01 1974-03-19 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-triazole nucleosides
JPS5238939A (en) 1975-09-23 1977-03-25 Nippon Telegr & Teleph Corp <Ntt> Optical coupler
US4614719A (en) 1982-04-30 1986-09-30 Yamasa Shoyu Kabushiki Kaisha Process for producing ribavirin
US5223263A (en) 1988-07-07 1993-06-29 Vical, Inc. Liponucleotide-containing liposomes
US5194654A (en) 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
US5463092A (en) 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
US5026687A (en) 1990-01-03 1991-06-25 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Treatment of human retroviral infections with 2',3'-dideoxyinosine alone and in combination with other antiviral compounds
US5210015A (en) 1990-08-06 1993-05-11 Hoffman-La Roche Inc. Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase
WO1993000910A1 (en) 1991-07-12 1993-01-21 Vical, Inc. Antiviral liponucleosides: treatment of hepatitis b
US5538848A (en) 1994-11-16 1996-07-23 Applied Biosystems Division, Perkin-Elmer Corp. Method for detecting nucleic acid amplification using self-quenching fluorescence probe
US6391859B1 (en) 1995-01-27 2002-05-21 Emory University [5-Carboxamido or 5-fluoro]-[2′,3′-unsaturated or 3′-modified]-pyrimidine nucleosides
US5703058A (en) 1995-01-27 1997-12-30 Emory University Compositions containing 5-fluoro-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxycytidine or a mono-, di-, or triphosphate thereof and a second antiviral agent
DK0806956T3 (da) 1995-02-01 2003-01-06 Resprotect Gmbh Anvendelse af 5-substituerede nucleosider til hæmning af resistensdannelse ved cytostatikabehandling
GB9505025D0 (en) 1995-03-13 1995-05-03 Medical Res Council Chemical compounds
DE19514523A1 (de) 1995-04-12 1996-10-17 Schering Ag Neue Cytosin- und Cytidinderivate
US5858389A (en) 1996-08-28 1999-01-12 Shaker H. Elsherbini Squalene is an antiviral compound for treating hepatitis C virus carriers
IL129126A0 (en) 1996-10-16 2000-02-17 Icn Pharmaceuticals Monocyclic l-nucleosides analogs and uses thereof
ATE271063T1 (de) 1996-10-16 2004-07-15 Icn Pharmaceuticals Purin-l-nukleoside, deren analoga und verwendungen
US6509320B1 (en) 1996-10-16 2003-01-21 Icn Pharmaceuticals, Inc. Purine L-nucleosides, analogs and uses thereof
DE69801970T2 (de) 1997-09-21 2002-06-13 Schering Corp Kombinationstherapie zur Entfernung von nachweisbarer HCV-RNS in Patienten mit chronischer Hepatitis C-Infektion
US6201262B1 (en) 1997-10-07 2001-03-13 Cree, Inc. Group III nitride photonic devices on silicon carbide substrates with conductive buffer interlay structure
US6703374B1 (en) 1997-10-30 2004-03-09 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Nucleosides for imaging and treatment applications
DE69900841T2 (de) 1998-01-23 2002-10-02 Newbiotics Inc Durch enzymkatalyse erhaltene therapeutische substanzen.
US7462605B2 (en) 1998-01-23 2008-12-09 Celmed Oncology (Usa), Inc. Phosphoramidate compounds and methods of use
BR9908270A (pt) 1998-02-25 2004-06-29 Univ Emory 2-fluoro-nucleosìdeos, composições farmacêuticas e seus usos
US6787305B1 (en) 1998-03-13 2004-09-07 Invitrogen Corporation Compositions and methods for enhanced synthesis of nucleic acid molecules
CA2326535A1 (en) 1998-03-27 1999-10-07 Regents Of The University Of Minnesota Nucleosides with antiviral and anticancer activity
CZ300540B6 (cs) 1998-05-15 2009-06-10 Schering Corporation Farmaceutický prostredek obsahující ribavirin v kombinaci s interferonem alfa pro lécbu pacientu s chronickou infekcí hepatitidy C genotypu 1
PL192364B1 (pl) 1998-06-08 2006-10-31 Hoffmann La Roche Zastosowanie koniugatu PEG-IFN-α 2A w połączeniu z rybawiryną
GB9816358D0 (en) 1998-07-27 1998-09-23 Angeletti P Ist Richerche Bio Enzyme inhibitors
ES2579903T3 (es) 1998-08-10 2016-08-17 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Beta-L-2'-desoxi-nucleósidos para el tratamiento de la hepatitis B
GB9821058D0 (en) 1998-09-28 1998-11-18 Univ Cardiff Chemical compound
CA2354536A1 (en) 1998-12-18 2000-06-29 Schering Corporation Ribavirin-pegylated interferon alfa induction hcv combination therapy
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
CA2379988C (en) 1999-07-22 2010-10-19 Newbiotics, Inc. Enzyme catalyzed therapeutic activation
US7388370B2 (en) 2005-07-29 2008-06-17 Automotive Systems Laboratory Systems, Inc. Magnetic crash sensor
US6566365B1 (en) 1999-11-04 2003-05-20 Biochem Pharma Inc. Method for the treatment of Flaviviridea viral infection using nucleoside analogues
US6495677B1 (en) 2000-02-15 2002-12-17 Kanda S. Ramasamy Nucleoside compounds
KR20030005197A (ko) 2000-02-18 2003-01-17 샤이어 바이오켐 인코포레이티드 뉴클레오시드유도체를 이용한 플라비바이러스 감염의 치료또는 예방 방법
DE60136620D1 (de) 2000-04-13 2009-01-02 Pharmasset Inc 3 oder 2 hydroxymethyl substituierte nucleoside derivate und ihre verwendung zur behandlung von virusinfektionen
WO2001081359A1 (en) 2000-04-20 2001-11-01 Schering Corporation Ribavirin-interferon alfa combination therapy for eradicating detectable hcv-rna in patients having chronic hepatitis c infection
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
NZ547204A (en) 2000-05-26 2008-01-31 Idenix Cayman Ltd Methods and compositions for treating flaviviruses and pestiviruses
US6787526B1 (en) 2000-05-26 2004-09-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides
KR100854398B1 (ko) 2000-05-26 2008-08-26 이데닉스 (케이만) 리미티드 베타-ｌ-2'-데옥시-뉴클레오사이드를 이용한 델타형 간염바이러스 감염의 치료방법
MY141594A (en) 2000-06-15 2010-05-14 Novirio Pharmaceuticals Ltd 3'-PRODRUGS OF 2'-DEOXY-ß-L-NUCLEOSIDES
US6815542B2 (en) 2000-06-16 2004-11-09 Ribapharm, Inc. Nucleoside compounds and uses thereof
UA72612C2 (en) 2000-07-06 2005-03-15 Pyrido[2.3-d]pyrimidine and pyrimido[4.5-d]pyrimidine nucleoside analogues, prodrugs and method for inhibiting growth of neoplastic cells
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
JP4651264B2 (ja) 2000-07-21 2011-03-16 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ホスホネートヌクレオチドアナログのプロドラッグならびにこれを選択および作製するための方法。
AR039558A1 (es) 2000-08-21 2005-02-23 Inspire Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodo para el tratamiento de glaucoma o hipertension ocular
US20030008841A1 (en) 2000-08-30 2003-01-09 Rene Devos Anti-HCV nucleoside derivatives
CN1646141B (zh) 2000-10-18 2014-06-25 吉利德制药有限责任公司 用于治疗病毒感染和异常细胞增殖的修饰核苷类化合物
EP1326594A2 (en) 2000-10-18 2003-07-16 Schering Corporation Ribavirin-pegylated interferon alfa hcv combination therapy
AU2002232660A1 (en) 2000-12-15 2002-06-24 Pharmasset Ltd. Antiviral agents for treatment of flaviviridae infections
MXPA03006514A (es) 2001-01-22 2004-12-02 Merck & Co Inc Derivados de nucleosidos como inhibidores de polimerasa de acido ribonucleico viral dependiente de acido ribonucleico.
US7105499B2 (en) 2001-01-22 2006-09-12 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
GB0112617D0 (en) 2001-05-23 2001-07-18 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
EP1404694A1 (en) 2001-06-21 2004-04-07 Glaxo Group Limited Nucleoside compounds in hcv
US6909000B2 (en) 2001-07-11 2005-06-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Bridged bicyclic serine protease inhibitors
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
WO2003024461A1 (en) 2001-09-20 2003-03-27 Schering Corporation Hcv combination therapy
AU2002330154A1 (en) 2001-09-28 2003-04-07 Centre National De La Recherche Scientifique Methods and compositions for treating hepatitis c virus using 4'-modified nucleosides
WO2003037895A1 (en) 2001-11-02 2003-05-08 Glaxo Group Limited 4-(6-membered)-heteroaryl acyl pyrrolidine derivatives as hcv inhibitors
AU2002365234B2 (en) 2001-12-14 2009-01-29 Pharmasset Inc N4-acylcytosine nucleosides for treatment of viral infections
AU2002353165A1 (en) 2001-12-17 2003-06-30 Ribapharm Inc. Deazapurine nucleoside libraries and compounds
EP1458735A2 (en) 2001-12-21 2004-09-22 Micrologix Biotech, Inc. Anti-viral 7-deaza l-nucleosides
WO2003062256A1 (en) 2002-01-17 2003-07-31 Ribapharm Inc. 2'-beta-modified-6-substituted adenosine analogs and their use as antiviral agents
US6642204B2 (en) 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2474563C (en) 2002-02-13 2010-11-09 Merck & Co., Inc. Methods of inhibiting orthopoxvirus replication with nucleoside compounds
CA2477795A1 (en) 2002-02-28 2003-09-12 Kandasamy Sakthivel Nucleoside 5'-monophosphate mimics and their prodrugs
AU2003217863B9 (en) 2002-02-28 2009-10-29 Biota Scientific Management Pty Ltd Nucleotide mimics and their prodrugs
WO2003100017A2 (en) 2002-05-24 2003-12-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having modified nucleoside units
WO2003106477A1 (en) 2002-06-01 2003-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds that include carbocyclic nucleosides and their use in gene modulation
US7449488B2 (en) 2002-06-04 2008-11-11 Schering Corporation Pyrazolopyrimidines as protein kinase inhibitors
EP1515971A2 (en) 2002-06-17 2005-03-23 Merck & Co., Inc. Carbocyclic nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
AU2003269890A1 (en) 2002-06-21 2004-01-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
AU2003269892A1 (en) 2002-06-27 2004-01-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
WO2004002999A2 (en) 2002-06-28 2004-01-08 Idenix (Cayman) Limited Modified 2' and 3' -nucleoside produgs for treating flaviridae infections
PL374792A1 (en) 2002-06-28 2005-10-31 Idenix (Cayman) Limited 2' and 3'-nucleoside prodrugs for treating flaviviridae infections
AU2003248748A1 (en) 2002-06-28 2004-01-19 Idenix (Cayman) Limited 2'-c-methyl-3'-o-l-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections
US7608600B2 (en) 2002-06-28 2009-10-27 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections
EP1525186A1 (en) 2002-07-01 2005-04-27 Pharmacia &amp; Upjohn Company LLC Inhibitors of hcv ns5b polymerase
US6973905B2 (en) 2002-07-01 2005-12-13 Cinetic Automation Corporation Valve lash adjustment apparatus and method
BR0305426A (pt) 2002-07-01 2004-08-24 Upjohn Co Compostos inibidores de ns5b polimerase de hcv, bem como composição farmacêutica compreendendo os mesmos
AU2003269902A1 (en) 2002-07-16 2004-02-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
CA2493816A1 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Ptc Therapeutics, Inc. Use of nucleoside compounds for nonsense suppression and the treatment of genetic diseases
WO2004009020A2 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Merck & Co., Inc. Pyrrolopyrimidine thionucleoside analogs as antivirals
CN1671727A (zh) 2002-07-25 2005-09-21 麦克洛基克斯生物技术有限公司 抗病毒7－脱氮－d－核苷及其用途
TWI244393B (en) 2002-08-06 2005-12-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Crystalline and amorphous forms of beta-L-2'-deoxythymidine
WO2004014313A2 (en) 2002-08-12 2004-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Combination pharmaceutical agents as inhibitors of hcv replication
PT1572095E (pt) 2002-09-13 2015-10-13 Novartis Ag Β-l-2'-desoxinucleósidos para tratamento de estirpes resistentes de vhb
AU2003287160A1 (en) 2002-10-15 2004-05-04 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Substituted indoles and their use as hcv inhibitors
US20040229840A1 (en) 2002-10-29 2004-11-18 Balkrishen Bhat Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
JP4537315B2 (ja) 2002-11-01 2010-09-01 バイロファーマ・インコーポレイテッド ベンゾフラン化合物、組成物およびｃ型肝炎感染症および関連疾患の治療または予防方法
WO2004044136A2 (en) 2002-11-05 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2’-modified nucleosides for use in gene modulation
WO2004041889A2 (en) 2002-11-05 2004-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
KR20050088079A (ko) 2002-11-15 2005-09-01 이데닉스 (케이만) 리미티드 2'-분지형 뉴클레오시드 및 플라비비리다에 돌연변이
TWI332507B (en) 2002-11-19 2010-11-01 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
US7223785B2 (en) 2003-01-22 2007-05-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
WO2004080466A1 (en) 2003-03-07 2004-09-23 Ribapharm Inc. Cytidine analogs and methods of use
ES2386161T3 (es) 2003-04-16 2012-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Proceso para separar una mezcla de enantiómeros de éster alquílico usando una enzima
US7407965B2 (en) 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
US7470724B2 (en) 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
US7452901B2 (en) 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
US20050261237A1 (en) 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
WO2005002626A2 (en) 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
ATE490788T1 (de) 2003-04-25 2010-12-15 Gilead Sciences Inc Antivirale phosphonate analoge
EP1617848A2 (en) 2003-04-25 2006-01-25 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate conjugates
US20040259934A1 (en) 2003-05-01 2004-12-23 Olsen David B. Inhibiting Coronaviridae viral replication and treating Coronaviridae viral infection with nucleoside compounds
WO2005020884A2 (en) 2003-05-14 2005-03-10 Idenix (Cayman) Limited Nucleosides for treatment of infection by corona viruses, toga viruses and picorna viruses
US20040229839A1 (en) 2003-05-14 2004-11-18 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Substituted nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
CA2734052A1 (en) 2003-05-30 2005-01-13 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
PL1658302T3 (pl) 2003-07-25 2011-03-31 Idenix Pharmaceuticals Inc Analogi nukleozydów purynowych do leczenia chorób spowodowanych przez Flaviviridae obejmujących zapalenie wątroby typu C
MXPA06002198A (es) 2003-08-27 2007-08-14 Biota Scient Management Nucleosidos o nucleotidos triciclicos novedosos como agentes terapeuticos.
JP4685775B2 (ja) 2003-09-18 2011-05-18 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド セリンプロテアーゼ、とりわけｈｃｖｎｓ３−ｎｓ４ａプロテアーゼの阻害剤
JP5379347B2 (ja) 2003-09-18 2013-12-25 アイシス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド ４’−チオヌクレオシドおよびオリゴマー化合物
US20050148534A1 (en) 2003-09-22 2005-07-07 Castellino Angelo J. Small molecule compositions and methods for increasing drug efficiency using compositions thereof
CA2542588A1 (en) 2003-10-14 2005-04-28 Lyco Manufacturing, Inc. High speed food product peeling or cleaning machine and method
DE602004018363D1 (de) 2003-10-27 2009-01-22 Vertex Pharma Kombinationen für die hcv-behandlung
US7026339B2 (en) 2003-11-07 2006-04-11 Fan Yang Inhibitors of HCV NS5B polymerase
TW200528459A (en) 2004-01-06 2005-09-01 Achillion Pharmaceuticals Inc Azabenzofuran substituted thioureas; inhibitors of viral replication
AU2005216971A1 (en) 2004-02-25 2005-09-09 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Office Of Technology Transfer Methylation inhibitor compounds
JP5236286B2 (ja) 2004-05-07 2013-07-17 セレラ コーポレーション 肝線維症に関連する遺伝的多型、その検出方法および使用
US8394947B2 (en) 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
EP1765415A4 (en) 2004-06-03 2010-03-24 Isis Pharmaceuticals Inc OLIGOMERIC COMPOUNDS FACILITATING THE "RISC" LOAD
WO2005121634A1 (ja) 2004-06-08 2005-12-22 Tokyo Gas Co., Ltd. ガス吸着容器
WO2005123087A2 (en) 2004-06-15 2005-12-29 Merck & Co., Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
CA2571675A1 (en) 2004-06-23 2006-01-05 Idenix (Cayman) Limited 5-aza-7-deazapurine derivatives for treating infections with flaviviridae
US20070265222A1 (en) 2004-06-24 2007-11-15 Maccoss Malcolm Nucleoside Aryl Phosphoramidates for the Treatment of Rna-Dependent Rna Viral Infection
EP2348029A1 (en) 2004-07-21 2011-07-27 Pharmasset, Inc. Preparation of alkyl-substituted 2-deoxy-2-fluoro-d-ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
CN101023094B (zh) 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
ES2720618T3 (es) 2004-07-27 2019-07-23 Gilead Sciences Inc Análogos de fosfonato de compuestos de inhibidores de VIH
US7153848B2 (en) 2004-08-09 2006-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
US7348425B2 (en) 2004-08-09 2008-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
CA2577526A1 (en) 2004-08-23 2006-03-02 Joseph Armstrong Martin Antiviral 4'-azido-nucleosides
WO2006021340A1 (en) 2004-08-23 2006-03-02 F.Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
WO2006029081A2 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Neopharm, Inc. Nucleoside-lipid conjugates, their method of preparation and uses thereof
RU2433124C2 (ru) 2004-09-14 2011-11-10 Фармассет, Инк. Способ получения 2'-фтор-2'-алкилзамещенных или других замещенных рибофуранозилпиримидинов и пуринов и их производных
EP1804811A4 (en) 2004-09-24 2011-04-27 Idenix Cayman Ltd METHOD AND COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF FLAVIVERS, PESTIVERS AND HEPACIVIRES
AP2007003923A0 (en) 2004-09-30 2007-02-28 Tibotec Pharm Ltd Hcv inhibiting bi-cyclic pyrimidines
US20080280842A1 (en) 2004-10-21 2008-11-13 Merck & Co., Inc. Fluorinated Pyrrolo[2,3-D]Pyrimidine Nucleosides for the Treatment of Rna-Dependent Rna Viral Infection
WO2006050161A2 (en) 2004-10-29 2006-05-11 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic furopyrimidines and thienopyrimidines
US20060110724A1 (en) 2004-11-19 2006-05-25 Burkhardt William Iii Quantitative real-time assay for noroviruses and enteroviruses with built in quality control standard
EP1674104A1 (en) 2004-12-24 2006-06-28 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Uridine derivatives as antiviral drugs against a flaviviridae, especially HCV
WO2006093801A1 (en) 2005-02-25 2006-09-08 Abbott Laboratories Thiadiazine derivatives useful as anti-infective agents
EA200701849A1 (ru) 2005-02-28 2008-02-28 Дженелабс Текнолоджис, Инк. Пролекарственные соединения трициклических нуклеозидов, фармацевтическая композиция на их основе и способ лечения и/или ингибирования вирусной инфекции у млекопитающего
AU2006226322B2 (en) 2005-03-25 2012-03-29 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Heterobicylic inhibitors of HCV
TW200720285A (en) 2005-04-25 2007-06-01 Genelabs Tech Inc Nucleoside compounds for treating viral infections
WO2006121820A1 (en) 2005-05-05 2006-11-16 Valeant Research & Development Phosphoramidate prodrugs for treatment of viral infection
AR056347A1 (es) 2005-05-12 2007-10-03 Tibotec Pharm Ltd Uso de compuestos de pteridina para fabricar medicamentos y composiciones farmaceuticas
US20060276405A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods for treating hepatitis C
US8143288B2 (en) 2005-06-06 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
US20060293752A1 (en) 2005-06-27 2006-12-28 Missoum Moumene Intervertebral disc prosthesis and associated methods
BRPI0613962A2 (pt) 2005-07-25 2009-03-24 Intermune Inc inibidores macrocìclicos inovadores de replicação de vìrus da hepatite c
US7666834B2 (en) 2005-07-29 2010-02-23 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
AR054882A1 (es) 2005-07-29 2007-07-25 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
WO2007014925A1 (en) 2005-07-29 2007-02-08 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
AR055105A1 (es) 2005-07-29 2007-08-08 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
CN101287472B (zh) 2005-08-15 2011-10-12 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒的4'-取代前核苷酸的氨基磷酸酯类化合物
CA2623522C (en) 2005-09-26 2015-12-08 Pharmasset, Inc. Modified 4'-nucleosides as antiviral agents
WO2007056170A2 (en) 2005-11-02 2007-05-18 Bayer Healthcare Ag Pyrrolo[2,1-f] [1,2,4] triazin-4-ylamines igf-1r kinase inhibitors for the treatment of cancer and other hyperproliferative diseases
RU2422454C2 (ru) 2005-12-09 2011-06-27 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антивирусные нуклеозиды
RU2008128452A (ru) 2005-12-12 2010-01-20 Дженелабс Текнолоджис, Инк. (Us) Соединения n-(6-членных арил)-амидов, фармацевтическая композиция с противовирусной активностью на их основе, способ лечения или профилактики вирусной инфекции с их помощью и способ их получения
EP1979349B1 (en) 2005-12-21 2010-07-28 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
AU2006330924B2 (en) 2005-12-21 2012-03-15 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
WO2007095269A2 (en) 2006-02-14 2007-08-23 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
CA2640672A1 (en) 2006-02-17 2007-08-23 Pfizer Limited 3 -deazapurine derivatives as tlr7 modulators
US8895531B2 (en) 2006-03-23 2014-11-25 Rfs Pharma Llc 2′-fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents
ES2343914T3 (es) 2006-05-25 2010-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Inhibidores de ns5b de hcv de indolobenzazepina condensada con ciclopropilo.
US7521442B2 (en) 2006-05-25 2009-04-21 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl fused indolobenzazepine HCV NS5B inhibitors
MX2009000235A (es) 2006-07-07 2009-01-23 Gilead Sciences Inc Compuesto de piridazina novedoso y uso del mismo.
US8338593B2 (en) 2006-07-07 2012-12-25 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptor 7
EP2043658B1 (en) 2006-07-07 2012-04-25 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphinate compounds
EP3696171A1 (en) 2006-07-07 2020-08-19 Gilead Sciences, Inc. Modulators of pharmacokinetic properties of therapeutics
US7659270B2 (en) 2006-08-11 2010-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7759495B2 (en) 2006-08-11 2010-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8303944B2 (en) 2006-08-11 2012-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2666098C (en) 2006-10-10 2012-09-25 Steven D. Axt Preparation of nucleosides ribofuranosyl pyrimidines
PL216525B1 (pl) 2006-10-17 2014-04-30 Ct Badań Molekularnych I Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano] nukleozydy oraz sposób wytwarzania 5'-O-[(N-acylo)amidofosforano]-,5'-O-[(N-acylo)amidotiofosforano]-, 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano]nukleozydów
AU2007338899A1 (en) 2006-12-20 2008-07-03 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Nucleoside cyclic phosphoramidates for the treatment of RNA-dependent RNA viral infection
US20080261913A1 (en) 2006-12-28 2008-10-23 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of liver disorders
EP2124555B1 (en) 2007-01-05 2015-07-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
WO2008137126A2 (en) * 2007-05-04 2008-11-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Combination therapy for the treatment of hcv infection
US7741347B2 (en) 2007-05-17 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
GB0709791D0 (en) 2007-05-22 2007-06-27 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
WO2008156094A1 (ja) 2007-06-19 2008-12-24 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. ピリダジノン誘導体及びそれらを有効成分とするｐｄｅ阻害剤
EA024359B1 (ru) 2007-06-29 2016-09-30 Джилид Сайэнс, Инк. Пуриновые производные и их применение в качестве модуляторов толл-подобного рецептора 7
TW200914013A (en) 2007-06-29 2009-04-01 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
AP2874A (en) 2007-06-29 2014-03-31 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
UA99466C2 (en) 2007-07-06 2012-08-27 Гилиад Сайенсиз, Инк. Crystalline pyridazine compound
CN101108870A (zh) 2007-08-03 2008-01-23 冷一欣 核苷磷酸酯类化合物及制备方法和应用
US7728027B2 (en) 2007-08-08 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company Process for synthesizing compounds useful for treating hepatitis C
US8629171B2 (en) 2007-08-08 2014-01-14 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline form of methyl ((1S)-1-((25)-2-(5-(4'-(2-((25)-1((2S)-2-((methoxycarbonyl)amino)-3-methylbutanoyl)-2-pyrrolidinyl)-1H-imidazol-2-yl)-1-pyrrolidinyl)carbonyl)-2-methylpropyl)carbamate dihydrochloride salt
WO2009038663A1 (en) 2007-09-14 2009-03-26 Schering Corporation Method of treating hepatitis c patients
JO2778B1 (en) 2007-10-16 2014-03-15 ايساي انك Certain vehicles, installations and methods
DE102007052070A1 (de) 2007-10-30 2009-05-07 Tiefenbacher Pharmachemikalien Alfred E. Tiefenbacher Gmbh & Co. Kg Candesartancilexetil
JP5238939B2 (ja) 2007-11-07 2013-07-17 三菱化学株式会社 長繊維強化複合樹脂組成物および成形品
CA2710958A1 (en) 2008-01-11 2009-07-16 Antaria Limited Visibly transparent uv photoprotective compositions
WO2009102318A1 (en) 2008-02-12 2009-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US8147818B2 (en) 2008-02-13 2012-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
SI2242752T1 (sl) 2008-02-13 2013-03-29 Bristol-Myers Squibb Company Imidazolil bifnil imidazoli kot hepatitis c virusni inhibitorji
US7704992B2 (en) 2008-02-13 2010-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8227431B2 (en) 2008-03-17 2012-07-24 Hetero Drugs Limited Nucleoside derivatives
WO2009142822A2 (en) 2008-03-26 2009-11-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 2-f modified rna interference agents
AP2010005416A0 (en) 2008-04-15 2010-10-31 Intermune Inc Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication.
EP3042660A3 (en) 2008-04-15 2016-10-26 RFS Pharma, LLC. Nucleoside derivatives for treatment of caliciviridae infections, including norovirus infections
PT2280973E (pt) 2008-04-23 2013-02-04 Gilead Sciences Inc Análogos de carba-nucleósido para tratamento antiviral
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
AU2009269772A1 (en) 2008-07-10 2010-01-14 Prosidion Limited Piperidinyl GPCR agonists
US7906655B2 (en) 2008-08-07 2011-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7921612B2 (en) 2008-08-31 2011-04-12 United Construction Products, Inc. Method and device for supporting a structure
US8383094B2 (en) 2008-10-01 2013-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
DE102008057284A1 (de) 2008-11-14 2010-05-20 Ratiopharm Gmbh Tabletten enthaltend Lenalidomid und Adhäsionsverstärker
WO2010062821A1 (en) 2008-11-28 2010-06-03 Glaxosmithkline Llc Anti-viral compounds, compositions, and methods of use
AU2009322393B2 (en) 2008-12-03 2017-02-02 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of HCV NS5A
BRPI0922364A2 (pt) 2008-12-03 2017-08-29 Presidio Pharmaceuticals Inc Composto, composição farmacêutica e uso de um composto
AU2009333559B2 (en) 2008-12-09 2015-03-12 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptors
EA201100851A1 (ru) 2008-12-23 2012-04-30 Фармассет, Инк. Аналоги нуклеозидов
CL2009002206A1 (es) 2008-12-23 2011-08-26 Gilead Pharmasset Llc Compuestos derivados de pirrolo -(2-3-d]-pirimidin-7(6h)-tetrahidrofuran-2-il fosfonamidato, composicion farmaceutica; y su uso en el tratamiento de enfermedades virales.
NZ593648A (en) 2008-12-23 2013-09-27 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
RU2011127079A (ru) 2009-01-07 2013-02-20 Сайнексис, Инк. Комбинация производного циклоспорина и нуклеозидов для лечения инфекции вирусом гепатита с
PE20120013A1 (es) 2009-01-09 2012-02-02 Univ Cardiff Fosforamidato derivados de guanosina compuestos nucleosidos para tratamiento de infecciones virales
WO2010091413A1 (en) 2009-02-09 2010-08-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked dibenzimidazole derivatives
TWI438200B (zh) 2009-02-17 2014-05-21 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
WO2010096462A1 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc Linked diimidazole derivatives
CA2753313A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
WO2010094977A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Arrow Therapeutics Limited Novel biphenyl compounds useful for the treatment of hepatitis c
SG174146A1 (en) 2009-02-27 2011-10-28 Enanta Pharm Inc Hepatitis c virus inhibitors
KR20110128947A (ko) 2009-03-20 2011-11-30 앨리오스 바이오파마 인크. 치환된 뉴클레오시드 및 뉴클레오티드 유사체
EP2410843A4 (en) 2009-03-27 2012-08-08 Presidio Pharmaceuticals Inc FUSIONED CORE INHIBITORS OF HEPATITIS C
SG10201402969QA (en) 2009-03-27 2014-09-26 Merck Sharp & Dohme Inhibitors of hepatitis c virus replication
WO2010111673A1 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Substituted bicyclic hcv inhibitors
TWI476190B (zh) 2009-03-30 2015-03-11 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
DE102009015702A1 (de) 2009-03-31 2010-10-07 Ratiopharm Gmbh Tabletten enthaltend Dapoxetin und Trockenverarbeitungsverfahren zu deren Herstellung
TW201038559A (en) 2009-04-09 2010-11-01 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C virus inhibitors
US8143414B2 (en) 2009-04-13 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
MX2011010905A (es) 2009-04-15 2011-11-01 Abbott Lab Compuestos antivirales.
US8436036B2 (en) 2009-04-24 2013-05-07 Janssen R&D Ireland Diaryl ethers
WO2010132538A1 (en) 2009-05-12 2010-11-18 Schering Corporation Fused tricyclic aryl compounds useful for the treatment of viral diseases
KR101546119B1 (ko) * 2009-05-13 2015-08-20 길리애드 파마셋 엘엘씨 항바이러스 화합물
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
AU2010253791A1 (en) 2009-05-29 2011-11-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral compounds composed of three linked Aryl moieties to treat diseases such as Hepatitis C
US8138215B2 (en) 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8211928B2 (en) 2009-05-29 2012-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8772505B2 (en) 2009-05-29 2014-07-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral compounds composed of three aligned aryl moieties to treat diseases such as hepatitis C
RS52854B (en) 2009-06-11 2013-12-31 Abbvie Bahamas Limited INHIBITOR OF PATITIS C VIRUSA
US8221737B2 (en) 2009-06-16 2012-07-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
WO2010148006A1 (en) 2009-06-16 2010-12-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2011004276A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Pfizer Limited Hepatitis c virus inhibitors
JP5542910B2 (ja) 2009-07-13 2014-07-09 株式会社メニコン 広範囲の抗菌活性を有するコーティング剤としてのキトサンヒドロゲル誘導体
EP2454254A2 (en) 2009-07-16 2012-05-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Benzimidazole analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2467144A1 (en) 2009-07-24 2012-06-27 ViroLogik GmbH Combination of proteasome inhibitors and anti-hepatitis medication for treating hepatitis
US8623899B2 (en) 2009-08-07 2014-01-07 Janssen Research & Development Ireland Bis-benzimidazole derivatives as hepatitis C virus inhibitors
CA2768637A1 (en) 2009-08-07 2011-02-10 Tibotec Pharmaceuticals Phenyl ethynyl derivatives as hepatitis c virus inhibitors
FR2949465B1 (fr) 2009-09-01 2011-08-12 Pf Medicament Derives chromones, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques
AU2010291215A1 (en) 2009-09-03 2012-02-23 Janssen Sciences Ireland Uc Bis-benzimidazole derivatives
SG178952A1 (en) 2009-09-04 2012-04-27 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
EP2475256A4 (en) 2009-09-11 2013-06-05 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
EP2475254A4 (en) 2009-09-11 2013-05-22 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
PE20160217A1 (es) 2009-09-21 2016-05-18 Gilead Sciences Inc Analogos de carba-nucleosidos sustituidos con 2'-fluoro antivirales
US8415374B2 (en) 2009-10-12 2013-04-09 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of hepatitis C virus inhibitors
WO2011050146A1 (en) 2009-10-23 2011-04-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
UA108211C2 (uk) 2009-11-04 2015-04-10 Янссен Рід Айрленд Бензімідазолімідазольні похідні
CN102055717B (zh) 2009-11-09 2014-08-13 华为技术有限公司 快速播放的方法、终端及服务器
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
AU2010324871A1 (en) 2009-11-25 2012-06-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
US20110137633A1 (en) 2009-12-03 2011-06-09 Abbott Laboratories Anti-viral compounds and methods of identifying the same
WO2011081918A1 (en) 2009-12-14 2011-07-07 Enanta Pharmaceuticals, Inc Hepatitis c virus inhibitors
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20120116404A (ko) * 2009-12-18 2012-10-22 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 Ｈｃｖ 병용 요법
US20110152246A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
MY159958A (en) 2009-12-18 2017-02-15 Idenix Pharmaceuticals Inc 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
AU2010341537A1 (en) 2009-12-22 2012-08-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused Tricyclic Compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
KR20120130173A (ko) 2009-12-24 2012-11-29 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 플라비바이러스 감염을 치료 또는 예방하기 위한 유사체들
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP5868872B2 (ja) * 2010-01-15 2016-02-24 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド フラビウイルス科ウイルスのインヒビター
WO2011091446A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
SG183526A1 (en) 2010-03-09 2012-09-27 Merck Sharp & Dohme Fused tricyclic silyl compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
BR112012024884A2 (pt) 2010-03-31 2016-10-18 Gilead Pharmasset Llc síntese estereosseletiva de ativos contendo fósforo
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
EP2609923B1 (en) 2010-03-31 2017-05-24 Gilead Pharmasset LLC Process for the crystallisation of (s)-isopropyl 2-(((s)-(perfluorophenoxy)(phenoxy)phosphoryl)amino)propanoate
WO2011128280A1 (en) 2010-04-13 2011-10-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Prediction of early virological response in hcv treatment
WO2011146401A1 (en) 2010-05-17 2011-11-24 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
TW201201815A (en) 2010-05-28 2012-01-16 Gilead Sciences Inc 1'-substituted-carba-nucleoside prodrugs for antiviral treatment
UY33445A (es) 2010-06-10 2012-01-31 Gilead Sciences Inc Un régimen de dosificación, métodos para tratar el virus de la hepatitis c, composición farmacéutica, compuesta, compuestos anti-hcv y kit
BR112013001267A2 (pt) 2010-07-19 2016-05-17 Gilead Sciences Inc métodos para a preparação de pró-fármacos de fosforamidato diasteromericamente puro
CA2809261A1 (en) 2010-08-26 2012-03-01 Rfs Pharma, Llc Potent and selective inhibitors of hepatitis c virus
SG188223A1 (en) 2010-09-20 2013-04-30 Gilead Sciences Inc 2' -fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
JP2013538831A (ja) 2010-09-29 2013-10-17 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｃ型肝炎ウィルス感染治療のための四環式インドール誘導体
WO2012048421A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
US20120107278A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 Pharmasset, Inc. Abbreviated hcv therapy for hcv infected patients with il28b c/c genotype
AR083711A1 (es) 2010-11-17 2013-03-20 Gilead Sciences Inc Compuestos heterociclicos utiles en el tratamiento de la hepatitis c
AR084044A1 (es) 2010-11-30 2013-04-17 Pharmasset Inc Compuestos 2’-espiro-nucleosidos
TW201701876A (zh) * 2010-12-20 2017-01-16 吉李德科學股份有限公司 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
WO2012087976A2 (en) 2010-12-21 2012-06-28 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
WO2012130862A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Selection of hcv treatment
US8655250B2 (en) 2011-03-31 2014-02-18 Xerox Corporation Apparatus and method for marking material fix level control in a printing apparatus
JP2014520772A (ja) 2011-06-30 2014-08-25 ステラ・アンパルトセルスカブ Ｈｃｖ併用療法
CN104244945B (zh) 2011-09-16 2016-08-31 吉利德制药有限责任公司 用于治疗hcv的方法
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
DK2583680T1 (da) 2011-10-21 2015-01-19 Abbvie Inc Mono (PSI-7977) eller kombinationsbehandling af DAA til anvendelse ved behandling af HCV
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
CN104383541A (zh) † 2011-10-21 2015-03-04 艾伯维公司 用于治疗hcv的包含至少两种直接抗病毒剂和利巴韦林但无干扰素的方法
WO2013066748A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Gilead Pharmasset Llc Methods and compositions for treating hepatitis c virus
US20130109647A1 (en) 2011-10-31 2013-05-02 Gilead Pharmasset Llc Methods and compositions for treating hepatitis c virus
RS54207B1 (en) 2011-11-16 2015-12-31 Gilead Pharmasset Llc CONDENSED IMIDAZOLYLIMIDAZOLES AS ANTIVIRAL COMPOUNDS
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
CN104039319B (zh) 2011-11-29 2017-12-29 吉利德制药有限责任公司 用于治疗hcv的组合物和方法
MX2014008008A (es) 2011-12-29 2014-08-21 Abbvie Inc Composiciones solidas que comprenden un inhibidor del virus de la hepatitis c.
US20150087045A1 (en) 2012-01-13 2015-03-26 Gilead Pharmassset Llc Crystal structure of hcv polymerase complexes and methods of use
US8969588B2 (en) 2012-06-05 2015-03-03 Gilead Pharmasset Llc Solid forms of an antiviral compound
US9056860B2 (en) 2012-06-05 2015-06-16 Gilead Pharmasset Llc Synthesis of antiviral compound
DK2950786T3 (da) 2013-01-31 2020-02-17 Gilead Pharmasset Llc Kombinationsformulering af to antivirale forbindelser
TW201446286A (zh) 2013-01-31 2014-12-16 Gilead Pharmasset Llc 抗病毒化合物之固態分散調製劑
US20140249101A1 (en) 2013-03-04 2014-09-04 Gilead Pharmasset Llc Methods for treating hepatitis c virus infection
WO2014185995A1 (en) 2013-05-16 2014-11-20 Gilead Pharmasset Llc Hepatitis c treatments with sofosbuvir

Also Published As

Publication number Publication date
CN104244945B (zh) 2016-08-31
BR112014006324B1 (pt) 2018-12-26
DE202012013382U1 (de) 2016-08-23
SG11201400664WA (en) 2014-04-28
AP2014007575A0 (en) 2012-04-30
ES2659216T5 (es) 2021-06-09
EA026667B9 (ru) 2017-07-31
EP2709613A2 (en) 2014-03-26
SI2709613T2 (sl) 2020-12-31
AU2012308295B2 (en) 2017-10-26
DK2709613T3 (en) 2018-02-26
CN104244945A (zh) 2014-12-24
ES2659216T3 (es) 2018-03-14
KR20140096029A (ko) 2014-08-04
US10456414B2 (en) 2019-10-29
US20160354425A1 (en) 2016-12-08
CL2014000630A1 (es) 2014-11-07
CY1119896T1 (el) 2018-06-27
KR101991298B1 (ko) 2019-06-21
MX336580B (es) 2016-01-22
MX2014003145A (es) 2014-04-30
JP2014526516A (ja) 2014-10-06
KR20190075142A (ko) 2019-06-28
PE20141056A1 (es) 2014-09-05
RS56975B1 (sr) 2018-05-31
CA2840242C (en) 2019-03-26
MD4589B1 (ro) 2018-08-31
CA2840242A1 (en) 2013-03-21
BR112014006324A2 (pt) 2016-06-07
PL2709613T5 (pl) 2020-12-14
JP6073897B2 (ja) 2017-02-01
DE202012013074U1 (de) 2014-10-29
EP2709613B2 (en) 2020-08-12
HRP20180237T1 (hr) 2018-03-09
AU2012308295A1 (en) 2014-04-17
HK1231378A1 (zh) 2017-12-22
US20170189439A1 (en) 2017-07-06
CO6930366A2 (es) 2014-04-28
WO2013040492A3 (en) 2013-07-25
JP6220994B2 (ja) 2017-10-25
CN106166160A (zh) 2016-11-30
DE202012013074U8 (de) 2015-02-19
SI2709613T1 (en) 2018-01-31
US20130243726A1 (en) 2013-09-19
IL231515A (en) 2017-05-29
PT2709613T (pt) 2018-02-16
MX354958B (es) 2018-03-27
JP2017057230A (ja) 2017-03-23
BR112014006324B8 (pt) 2019-02-12
LT2709613T (lt) 2018-02-12
PL2709613T3 (pl) 2018-05-30
WO2013040492A2 (en) 2013-03-21
MD20140035A2 (ro) 2014-08-31
HUE036588T2 (hu) 2018-07-30
EP2709613B1 (en) 2017-11-29
DK2709613T4 (da) 2020-11-16
CR20140177A (es) 2014-08-18
ECSP14013312A (es) 2014-06-30
UA116087C2 (uk) 2018-02-12
NZ720391A (en) 2017-10-27
US9393256B2 (en) 2016-07-19
MD4589C1 (ro) 2019-03-31
SG10201602044WA (en) 2016-04-28
NZ623396A (en) 2016-07-29
IL231515A0 (en) 2014-04-30
ME03009B (me) 2018-10-20
EA201490588A1 (ru) 2015-01-30
HRP20180237T4 (hr) 2020-12-11
EA026667B1 (ru) 2017-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TR201802537T4 (tr) HCV&#39;nin tedavi edilmesine yönelik yöntemler.
JP6162206B2 (ja) Ｈｃｖを処置するための組合せ
ES2801380T3 (es) Compuestos de 4,6-diamino-pirido [3,2-d] pirimidina y su utilización como moduladores de receptor de tipo toll
EP2984097B1 (en) Highly active nucleoside derivative for the treatment of hcv
AU2011349844A1 (en) Combinations for treating HCV
NZ720391B2 (en) Methods for treating HCV