SK752003A3 - Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus - Google Patents
Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus Download PDFInfo
- Publication number
- SK752003A3 SK752003A3 SK75-2003A SK752003A SK752003A3 SK 752003 A3 SK752003 A3 SK 752003A3 SK 752003 A SK752003 A SK 752003A SK 752003 A3 SK752003 A3 SK 752003A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- mmol
- solution
- conhch
- alkyl
- prodrugs
- Prior art date
Links
- 0 CC(C)(*)C(C(N(CC1(C2)SCCCS1)[C@@]2O)=O)NC(C(*)c1ccccc1)=O Chemical compound CC(C)(*)C(C(N(CC1(C2)SCCCS1)[C@@]2O)=O)NC(C(*)c1ccccc1)=O 0.000 description 24
- YULMNMJFAZWLLN-UHFFFAOYSA-N C=C1CCCCC1 Chemical compound C=C1CCCCC1 YULMNMJFAZWLLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KPXKHIURAUYKDK-UHFFFAOYSA-O CC(C)(C)OC(NC(C1CCCCC1)C(N(CC1OC(C)(C)CC11)C1C([NH2+]C(CC1CC1)C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccc[s]1)=O)=O)=O)=O)=O)=O Chemical compound CC(C)(C)OC(NC(C1CCCCC1)C(N(CC1OC(C)(C)CC11)C1C([NH2+]C(CC1CC1)C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccc[s]1)=O)=O)=O)=O)=O)=O KPXKHIURAUYKDK-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- DMKHQIIGQNCUGL-LSDHHAIUSA-N CC(C)(C)[C@H](NC(OCC1CC1)=O)[NH+](CN(C1)[C@H](C=O)OC11SCCCS1)[O-] Chemical compound CC(C)(C)[C@H](NC(OCC1CC1)=O)[NH+](CN(C1)[C@H](C=O)OC11SCCCS1)[O-] DMKHQIIGQNCUGL-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- XWOAZQWSGOKOCP-UHFFFAOYSA-O CC(C)C(C)(C)C(CC1C(NC(CC2CCC2)C(C([NH3+])=O)=O)=O)CN1C(C(C(C)(C)C)NC(NC1(CC(C2)C3)CC3CC2C1)=O)=O Chemical compound CC(C)C(C)(C)C(CC1C(NC(CC2CCC2)C(C([NH3+])=O)=O)=O)CN1C(C(C(C)(C)C)NC(NC1(CC(C2)C3)CC3CC2C1)=O)=O XWOAZQWSGOKOCP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- ZYAXZDLQPOHQSB-ZMXXURFWSA-N CC(CC(C(C(NCC(N[C@H](C(O)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)N)/[O]=C/C(C1)NCC11SCCCS1 Chemical compound CC(CC(C(C(NCC(N[C@H](C(O)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)N)/[O]=C/C(C1)NCC11SCCCS1 ZYAXZDLQPOHQSB-ZMXXURFWSA-N 0.000 description 1
- XVAIDCNLVLTVFM-UHFFFAOYSA-N CC(Nc(cc1)ccc1OC)=O Chemical compound CC(Nc(cc1)ccc1OC)=O XVAIDCNLVLTVFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZWKNOLYQBMWOO-UHFFFAOYSA-N CCCC(C(/C=[O]/NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)N Chemical compound CCCC(C(/C=[O]/NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)N ZZWKNOLYQBMWOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZLTUEVVUGMXMG-UHFFFAOYSA-N CCCC(C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)N Chemical compound CCCC(C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)N RZLTUEVVUGMXMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYJPDPNVSDBWTJ-RVOMYMBGSA-N CCCC(C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)NC([C@H](CC(C)(C)C1)N1C([C@H](C(C)c1ccccc1)NC(OCC(C)C)=O)=O)=O Chemical compound CCCC(C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)NC([C@H](CC(C)(C)C1)N1C([C@H](C(C)c1ccccc1)NC(OCC(C)C)=O)=O)=O WYJPDPNVSDBWTJ-RVOMYMBGSA-N 0.000 description 1
- FSTCPSDKWJPAGW-UTOMKPLKSA-N CCCC(C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)NC([C@H](CCC1)N1C(C(C1(C)CCCCC1)NC(OC(C)C(C)C)=O)=O)=O Chemical compound CCCC(C(C(NCC(NC(C(N(C)C)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)NC([C@H](CCC1)N1C(C(C1(C)CCCCC1)NC(OC(C)C(C)C)=O)=O)=O FSTCPSDKWJPAGW-UTOMKPLKSA-N 0.000 description 1
- ZEFVWAPEGWLOTG-ZRDVPGIMSA-N CCCC(C(C(NCC(NC(C(N=C)=O)c1ccccc1)O)=O)=O)NC([C@H](C[C@H](CNC(c(cc1)ccc1Oc1ccccc1)=O)C1)N1C([C@H](C1CCCCC1)NC(c(cccc1)c1C(O)=O)=O)=O)=O Chemical compound CCCC(C(C(NCC(NC(C(N=C)=O)c1ccccc1)O)=O)=O)NC([C@H](C[C@H](CNC(c(cc1)ccc1Oc1ccccc1)=O)C1)N1C([C@H](C1CCCCC1)NC(c(cccc1)c1C(O)=O)=O)=O)=O ZEFVWAPEGWLOTG-ZRDVPGIMSA-N 0.000 description 1
- NMVABRPPWRHZRW-TVPLGVNVSA-N CCCC(C(C(NCC(N[C@H](C(N)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)NC(C(C1)NCC11SCCCS1)=O Chemical compound CCCC(C(C(NCC(N[C@H](C(N)=O)c1ccccc1)=O)=O)=O)NC(C(C1)NCC11SCCCS1)=O NMVABRPPWRHZRW-TVPLGVNVSA-N 0.000 description 1
- PCRATYNRYOEFFS-UHFFFAOYSA-N CCCCC(C(C=O)=O)N Chemical compound CCCCC(C(C=O)=O)N PCRATYNRYOEFFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWIKUYPGULPYKR-UHFFFAOYSA-N CN(CC1(C2)SCCS1)C2C=O Chemical compound CN(CC1(C2)SCCS1)C2C=O NWIKUYPGULPYKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFNGJTVQOLABQH-UHFFFAOYSA-N COC(C(c1ccccc1)NC(CN)=O)=O Chemical compound COC(C(c1ccccc1)NC(CN)=O)=O HFNGJTVQOLABQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N c1ccccc1 Chemical compound c1ccccc1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Virology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Description
Vynález sa týka nových inhibítorov proteázy vírusu hepatitídy C (HCV), farmaceutických prípravkov, ktoré obsahujú jeden alebo viaceré takéto inhibítory, spôsobov prípravy takýchto inhibítorov a spôsobov použitia takýchto inhibítorov na liečenie hepatitídy C a príbuzných porúch. Tento vynález konkrétne opisuje nové, makrocyklické zlúčeniny ako inhibítory HCV NS3/NS4a serín-proteázy.
Doterajší stav techniky
Vírus hepatitídy C (HCV) je (+)-orientovaný jednopraméňový RNA vírus, ktorý sa považuje za hlavnú príčinu non-A, non-B hepatitídy (NANBH), zvlášť pri NANBH spojenej s krvou (BB-NANBH) (pozri medzinárodná patentová prihláška č. WO 89/04669 a európska patentová prihláška č. EP 381216). NANBH sa má rozlišovať od iných typov vírusmi vyvolaných chorôb pečene, ako napríklad vírusovej hepatitídy A (HAV), vírusovej hepatitídy B (HBV), vírusovej delta hepatitídy (HDV), cytomegalovírusu (CMV) a vírusu Epsteina-Barrovej (EBV), ako aj od iných foriem chorôb pečene, ako je napríklad alkoholizmus a primárna biliárna (žlčová) cirhóza.
Nedávno bola zistená, klonovaná a exprimovaná (pozri napríklad US patent č. 5,712,145) HCV proteáza potrebná pre vývoj polypeptidov pri vírusovej replikácii. Tento približne 3000 aminokyselinový polyproteín obsahuje od zakončenia aminoskupinou po zakončenie karboxyskupinou nukleokapsidový proteín (C), obalové proteíny (E1 a E2) a viaceré neštrukturálne proteíny (NS1,2, 3, 4a, 5a a 5b). NS3 je približne 68 kda proteín, kódovaný pomocou približne 1893 nukleotidov HCV genómu a má dve odlišné domény: (a) serín-proteázovú doménu pozostávajúcu z približne 200 N-koncových aminokyselín; a (b) RNA-závislú ATP-ázovú doménu na C-zakončení proteínu. NS3 proteáza sa považuje za člena chymotrypsínovej rodiny vzhľadom na podobnosti proteínovej sekvencie, celkovú trojrozmernú štruktúru a mechanizmus katalýzy. Inými chymotrypsínu podobnými enzýmami sú elastáza,
-2faktor Xa, trombín, trypsín, plazmán, urokináza, tPA a PSA. HCV NS3 serínproteáza je zodpovedná za proteolýzu polypeptidov (polyproteínov) na NS3/NS4a, NS4a/NS4b, NS4b/NS5a a NS5a/NS5b spojeniach a je teda zodpovedná za generovanie štyroch vírusových proteínov počas vírusovej replikácie. To urobilo z HCV NS3 serín-proteázy atraktívny cieľ antivírusovej chemoterapie.
Zistilo sa, že NS4a proteín, približne 6 kda polypeptid, je ko-faktorom pre činnosť serín-proteázy NS3. Autoštiepenie NS3/NS4a spojenia pomocou NS3/NS4a serín-proteázy nastáva intramolekulárne (t.j. c/s), kým iné štiepne miesta reagujú intermolekulárne (t.j. trans).
Analýza prirodzených štiepnych miest HCV proteázy odhalila prítomnosť cysteínu na P1 a serínu na Pľ, a že tieto zvyšky sa prísne zachovávajú v NS4a/NS4b, NS4b/NS5a a NS5a/NS5b spojeniach. NS3/NS4a spojenie obsahuje treonín na P1 a serín na Pľ. Cys -> Thr substitúcia na NS3/NS4a je postulovaná ako podmienka skôr cis než trans pôsobenia na tomto spojení. Pozri napríklad Pizzi a spol. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 91: 888 - 892, Failla a spol. (1996) Folding & Design 1: 35 - 42. N53/NS4a štiepne miesto je tiež tolerantnejšie k mutagenéze než iné miesta. Pozri napríklad Kollykhalov a spol. (1994) J. Virol. 68: 7525 - 7533. Tiež sa zistilo, že na účinné štiepenie sú požadované kyselinové zvyšky v oblasti smerom k štiepnemu miestu. Pozri napríklad Komoda a spol. (1994) J. Virol. 68: 7351 -7357.
Inhibítory HCV proteázy, ktoré boli doteraz opísané, zahrnujú antioxidanty (pozri medzinárodná patentová prihláška č. WO 98/14181), určité peptidy a peptidové analógy (pozri medzinárodná patentová prihláška č. WO 98/17679, Landro a spol. (1997) Biochem. 36: 9340 - 9348, Ingallinella a spol. (1998) Biochem. 37: 8906 - 8914, Llinas-Brunet a spol. (1998) Bioorg. Med. Chem. Lett. 8: 1713 - 1718), inhibítory založené na 70-aminokyselinovom polypeptide „eglin c“ (Martin a spol. (1998) Biochem. 37: 11459 - 11468, inhibítorom príbuzné látky vybrané z ľudského pankreatického sekrečného trypsínového inhibítora (hPSTI-C3) a súborov miniteliesok (MBip) (Dimasi a spol. (1997) J. Virol. 71: 7461 - 7469), CVhE2 (kamelizovaný proťrlátkový fragment variabilnej domény) (Martin a spol. (1997) Protein Eng. 10: 607 - 614), a a1-antichymotrypsín (ACT) (Elzouki a spol.) (1997) J. Hepat. 27: 42 - 28). Nedávno bol opísaný ribozým určený na selektívnu
-3deštrukciu RNA vírusu hepatitídy C (pozri BioWorld Today 9 (217): 4 (10. novembra 1998)).
Uvádzame tiež odkazy na PCT prihlášky č. WO 98/17679, zverejnená 30. apríla, 1998 (Vertex Pharmaceuticals Incorporated); WO 98/22496, zverejnená 28. mája, 1998 (F. Hoffmann-La Roche AG); a WO 99/07734, zverejnená 18. februára,1999 (Boehringer Ingelheim Canada Ltd.).
HCV bol priradený k cirhóze pečene a k vyvolaniu hepatocelulárneho karcinómu. Prognóza pre pacientov trpiacich HCV infekciou je v súčasnosti zlá. HCV infekcia sa ťažšie lieči než iné formy hepatitídy v dôsledku nedostatku imunity alebo remisie spojenej s HCV infekciou. Súčasné údaje indikujú menej než 50%-nú mieru prežitia štyri roky po diagnóze cirhózy. Pacienti, u ktorých bol diagnostikovaný lokalizovaný operovateľný hepatocelulárny karcinóm, majú päťročnú mieru prežitia 10 až 30 %, zatiaľ čo tí, ktorí majú lokalizovaný neoperovateľný hepatocelulárny karcinóm, majú päťročnú mieru prežitia menej než 1 %.
Uvádzame odkaz A. Marchetti a spol., Synlett, S1, 1000 - 1002 (1999), ktorý opisuje syntézu bicyklických analógov inhibítora HCV NS3 proteázy. Tam opísaná zlúčenina má vzorec:
AcHN ‘OH
COOH
Uvádzame tiež odkaz na W. Han a spol., Bioorganic & Medicinal Chem. Lett, (2000) 10, 711 - 713, ktorý opisuje prípravu určitých α-ketoamidov, a-ketoesterov a α-diketónov obsahujúcich alylové a etylové funkčné skupiny.
Uvádzame tiež odkaz na WO 00/09558 (patriaci: Boehringer Ingelheim Limited; zverejnený 24. februára, 2000), ktorý opisuje peptidové deriváty vzorca:
kde rôzne prvky sú definované v uvedenom dokumente. Ilustračná zlúčenina tejto série je:
Uvádzame tiež odkaz na WO 00/09543 (patriaci:
Boehringer Ingelheim
Limited; zverejnený 24. februára, 2000), ktorý opisuje peptidové deriváty vzorca:
o
-5kde rôzne prvky sú definované v uvedenom dokumente. Ilustračná zlúčenina tejto série je:
Súčasné terapie hepatitídy C zahrnujú interferón-α (INFa) a kombinovanú terapiu s ribavirínom a interferónom. Pozri napríklad Beremguor a spol. (1998) Proc. Assoc. Am. Physicians 110(2): 98 - 112. Tieto terapie trpia nízkou trvalou mierou odozvy a častými vedľajšími účinkami. Pozri napríklad Hoofnagle a spol. (1997) N. Engl. J. Med. 336: 347. V súčasnosti nie je dostupná žiadna vakcína pre HCV infekciu.
US patentové prihlášky v konaní, sériové č. 60/194,607, podaná 5. apríla, 2000, a sériové č. 60/198,204, podaná 19. apríla, 2000, sériové č. 60/220,110, podaná 21. júla, 2000, sériové č. 60/220,109, podaná 21. júla, 2000, sériové č. 60/220,107, podaná 21. júla, 2000, sériové č. 60/254,869, podaná 12. decembra, 2000, a sériové č. 60/220,101, podaná 21. júla, 2000, opisujú rôzne typy peptidov a/alebo iných zlúčenín ako inhibítory NS-3 serín-proteázy vírusu hepatitídy C.
Existuje potreba nového liečenia a terapií pre HCV infekciu. Preto je cieľom tohto vynálezu poskytnúť zlúčeniny užitočné na liečenie alebo na prevenciu alebo na zlepšenie jedného alebo viacerých symptómov hepatitídy C.
Ďalším cieľom vynálezu je poskytnutie spôsobu liečenia alebo prevencie alebo zlepšenia jedného alebo viacerých symptómov hepatitídy C.
Ešte ďalším cieľom tohto vynálezu je poskytnutie spôsobu modulovania
-6činnosti šerí n-proteáz, zvlášť HCV NS3/NS4a serín-proteázy, použitím zlúčeniny poskytovanej v tomto vynáleze.
Iným cieľom vynálezu je poskytnutie spôsobu modulovania úpravy HCV polypeptidu použitím zlúčeniny poskytovanej v tomto vynáleze.
Podstata vynálezu
Vo svojich mnohých uskutočneniach tento vynález poskytuje novú triedu makrocyklických inhibítorov HCV proteázy, farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú jednu alebo viaceré tieto zlúčeniny, spôsoby prípravy farmaceutických prípravkov obsahujúcich jednu alebo viaceré takéto zlúčeniny, a spôsoby liečenia, prevencie alebo zlepšenia jedného alebo viacerých symptómov hepatitídy C. Poskytujú sa tiež spôsoby modulovania interakcie HCV polypeptidu s HCV proteázou. Medzi zlúčeninami poskytovanými v tomto dokumente sú výhodné zlúčeniny, ktoré inhibujú činnosť HCV NS3/NS4a serín-proteázy.
Podstatou vynálezu sú peptidové zlúčeniny, vrátane enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov týchto zlúčenín, a farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov týchto zlúčenín alebo týchto prekurzorov, pričom tieto zlúčeniny majú všeobecný vzorec I
(i) kde
Y je vybraný zo skupiny substituentov pozostávajúcej z nasledujúcich skupín: alkyl, alkyl-aryl, heteroalkyl, heteroaryl, aryl-heteroaryl, alkyl-heteroaryl, cykloalkyl, alkyloxyskupina, alkyl-aryloxyskupina, aryloxyskupina, heteroaryloxyskupina, heterocykloalkyloxyskupina, cykloalkyloxyskupina, alkylaminoskupina, arylamino
-Ί skupina, alkyl-arylaminoskupina, arylaminoskupina, heteroarylaminoskupina, cykloalkylaminoskupina a heterocykloalkylaminoskupina, s výhradou, že Y môže byť voliteľne substituovaný s X11 alebo X12;
X11 je alkyl, alkenyl, alkinyl, cykloalkyl, cykloalkyl-alkyl, heterocyklyl, heterocyklylalkyl, aryl, alkylaryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylheteroaryl alebo heteroarylalkyl, s výhradou, že X11 môže byť okrem toho voliteľne substituovaný s X12;
X12 je hydroxyl, alkoxyskupina, aryloxyskupina, tioskupina, alkyltioskupina, aryltioskupina, aminoskupina, alkylaminoskupina, arylaminoskupina, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, alkylsulfónamidoskupina, arylsulfónamidoskupina, karboxyskupina, karbalkoxyskupina, karboxamidoskupina, alkoxykarbonylaminoskupina, alkoxykarbonyloxyskupina, alkylureidoskupina, arylureidoskupina, halogén, kyanoskupina alebo nitroskupina, s výhradou, že tento alkyl, alkoxyskupina a aryl môže byť okrem toho voliteľne substituovaný so skupinami nezávisle vybranými z X12;
R1 je COR5 alebo B(OR)2, kde R5 je H, OH, OR8, NR9R10, CF3, C2F5, C3F7, CF2R6, R6 alebo COR7, kde R7 je H, OH, OR8, CHR9R10 alebo NR9R10, kde R6, R8, R9 a R10 sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, cykloalkyl, arylalkyl, heteroarylalkyl, [CH(R1 )]PCOOR11, [CH(R1 )]PCONR12R13, [CH(R1’)]pSO2R11, [CH(R1’)]PCOR11, [CH(R1’)]PCH(OH)-R11, CH(R1’)CONHCH(R2’)COOR11, CH(R1’)CONHCH(R2')CONR12R13, CH(R1,)CONHCH(R2')R', CH(R1’)CONHCH(R2')CONHCH(R3')COOR11, CH(R1 )CONHCH(R2)CONHCH(R3)CONR12R13, CH(R1’)CONHCH(R2’)CONHCH(R3’)CONHCH(R4')COOR11, CH(R1')CONHCH(R2’)CONHCH(R3')CONHCH(R4')CONR12R13, CH(R1’)CONHCH(R2’)CONHCH(R3')CONHCH(R4')CONHCH(R5')COOR11 a CH(R1’)CONHCH(R2’)CONHCH(R3')CONHCH(R4’)CONHCH(R5')CONR12R13, kde R1’, R2', R3', R4', R5', R11, R12, R13, a R' sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, cykloalkyl, alkyl-aryl, alkyl-heteroaryl, aryl-alkyl a heteroaralkyl;
Z je vybraný z O, N, CH alebo CR;
W môže byť prítomný alebo neprítomný, a ak W je prítomný, W je vybraný z C=O, C=S, C(=N-CN) alebo SO2;
Q môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď Q je prítomný, Q je CH, N, P, (CH2)P, (CHR)pi (CRR')p, O, NR, S alebo SO2; a keď Q je neprítomný, M môže byť prítomný alebo neprítomný; keď Q a M sú neprítomné, A je priamo naviazaný na L;
-8A je Ο, CH2, (CHR)p, (CHR-CHR')P, (CRR')P> NR, S, S02 alebo väzba;
E je CH, N, CR alebo dvojitá väzba smerom na A, L alebo G;
G môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď G je prítomný, G je (CH2)P, (CHR)P alebo (CRR')P; a keď G je neprítomný, J je prítomný a E je priamo pripojený na uhlíkový atóm vo všeobecnom vzorci I, kde G je naviazaný;
J môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď J je prítomný, J je (CH2)P, (CHR)P alebo (CRR')P, SO2, NH, NR alebo O; a keď J je neprítomný, G je prítomný a E je priamo naviazaný na N znázornený vo všeobecnom vzorci I ako naviazaný na J;
L môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď L je prítomný, L je CH, CR, O, S alebo NR; a keď L je neprítomný, potom M môže byť prítomný alebo neprítomný; a ak M je prítomný, pričom L je neprítomný, potom M je priamo a nezávisle naviazaný na E, a J je priamo a nezávisle naviazaný na E;
M môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď M je prítomný, M je O, NR, S, SO2, (CH2)p, (CHR)P, (CHR-CHR')p alebo (CRR’)P;
p je číslo od 0 do 6; a
R, R', R2, R3 a R4 sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H; Ci-C-ioaikyl; C2C10alkenyl; C3-C8cykloalkyl; C3-C8heterocykloalkyl, alkoxyskupina, aryloxyskupina, alkyltioskupina, aryltioskupina, aminoskupina, amidoskupina, ester, karboxylová kyselina, karbamát, močovina, ketón, aldehyd, kyanoskupina, nitroskupina, halogén; (cykloalkyl)aíkyl a (heterocykloalkyl)alkyl, kde tento cykloalkyl je z troch až ôsmich uhlíkových atómov, a od nula do šesť atómov kyslíka, dusíka, síry alebo fosforu, a tento alkyl je z jedného až šiestich uhlíkových atómov; aryl; heteroaryl; alkyl-aryl; a alkyl-heteroaryl;
kde tento alkyl, heteroalkyl, alkenyl, heteroalkenyl, aryl, heteroaryl, cykloalkyl a heterocykloalkyl môže byť voliteľne a Chemicky vhodne substituovaný, pričom tento pojem substituovaný zodpovedá voliteľnej a chemicky vhodnej substitúcii s jednou alebo viacerými skupinami vybranými zo skupiny zahrnujúcej: alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, aralkyl, cykloalkyl, heterocyklus, halogén, hydroxyl, tioskupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, alkyltioskupina, aryltioskupina, aminoskupina, amidoskupina, ester, karboxylová kyselina, karbamát, močovina, ketón, aldehyd, kyanoskupina, nitroskupina, sulfónamidoskupina, sulfoxid, sulfón, sulfonylmočovina, hydrazid a hydroxamát;
-9ďalej kde táto jednotka N-C-G-E-L-J-N znamená päťčlennú alebo šesťčlennú cyklickú kruhovú štruktúru s výhradou, že keď táto jednotka N-C-G-E-L-J-N znamená päťčlennú cyklickú kruhovú štruktúru alebo keď bicyklická kruhová štruktúra vo všeobecnom vzorci I obsahujúca N, C, G, E, L, J, N, A, Q, a M znamená päťčlennú cyklickú kruhovú štruktúru, potom táto päťčlenná cyklická kruhová štruktúra nemá karbonylovú skupinu ako časť cyklického kruhu.
Medzi vyššie uvedenými definíciami rôznych zoskupení vo všeobecnom vzorci I, výhodné skupiny pre rôzne zoskupenia sú nasledujúce:
Výhodnou definíciou R1 je COR5, pričom R5 je H, OH, COOR8 alebo CONR9R10, kde R8, R9 a R10 sú určené vyššie. Výhodnejším zoskupením pre R1 je COCONR9R10, kde R9 je H; a R10 je H, R14, [CH(R1')]POOR11, [CH(R1’)]PCONR12R13, [CH(R1')]PSO2R11, [CH(R1')]pSO2NR12R13, [CH(R1’)]PCOR11, CH(R1’)CONHCH(R2’)COOR11, CH(R1')C0NHCH(R2')C0NR12R13 alebo CH(R1,)CONHCH(R2’)(R'), kde R14 je H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, cykloalkyl, alkyl-aryl, alkyl-heteroaryl, aryl-alkyl, alkenyl, alkinyl alebo heteroaralkyl.
Medzi vyššie uvedenými R10, výhodné skupiny pre R10 sú: H, R14, CH(R1 )COOR11, CH(R1 )CH(R1 )CHOR11, CH(R1’)CONR12R13, CH(R1’)CH(R1’)CONR12R13,
CH(R1’)CH(R1’)SO2R11, CH(R1’)CH(RI)SO2NR12R13, CH(R1’)CH(R1’)COR11, CH(R1’)CONHCH(R2')COOR11, CH(R1')CONHCH(R2’)CONR12R13 alebo CH(R1’)CONHCH(R2)(R'), kde R1 je H alebo alkyl, a R2 je fenyl, substituovaný fenyl, heteroatómom substituovaný fenyl, tiofenyl, cykloalkyl, piperidyl alebo pyridyl.
Výhodnejšie skupiny sú: R1 je H, R11 je H, metyl, etyl, alyl, terc-butyl, benzyl, a-metylbenzyl, α,α-dimetylbenzyl, 1-metylcyklopropyl alebo 1-metylcyklopentyl; pre
R' je hydroxymetyl alebo CH2CONR12R13, kde
NR12R13 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej:
/-NH2, NHMe, NH-n-Pr, |-N(Me)OMe,
Me Me Me Me
HN^OH ΗΝ-^θ
- 10/-X ι-Ό K} f-O
Me
kde U6 je H, OH alebo CH2OH;
R14 je výhodne vybraný zo skupiny zahrnujúcej: H, Me, Et, n-propyl, metoxy, cyklopropyl, n-butyl, 1 -but-3-inyl, benzyl, α-metylbenzyl, fenetyl, alyl, 1-but-3-enyl, OMe, cyklopropylmetyl;
a R2 je výhodne nezávisle vybraný zo skupiny zahrnujúcej:
kde
U1 a U2 môžu byť rovnaké alebo rôzne a sú vybrané zo skupín: H, F, CH2COOH, CH2COOMe, CH2CONH2, CH2CONHMe, CH2CONMe2, azido, amino, hydroxyl, substituovaná aminoskupina, substituovaný hydroxyl;
»5 A
U a U môžu byť rovnaké alebo rôzne a sú vybrané z O a S;
U5 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej: alkylsulfonyl, arylsulfonyl, heteroalkylsulfonyl, heteroarylsulfonyl, alkylkarbonyl, arylkarbonyl, heteroalkylkarbonyl, heteroarylkarbonyl, alkoxykarbonyl, aryloxykarbonyl, heteroaryloxykarbonyl, alkylaminokarbonyl, arylaminokarbonyl, heteroarylaminokarbonyl a ich kombinácie.
-11 Výhodné zoskupenia pre R2 sú:
«A/VWV
Výhodné zoskupenia pre R3 sú:
*ww
ΛΛΛΛι
ch3
«VWb
V*V>.
S COOEt
*vwv
»vwv
• ΛΛΛΛ,
S COOH
ΛΛΛΛ
ch3
«ww
COOH
*ww
o
-13*ww
ΑΛΛΑ
<νννυ
γ20 kde R31 = OH alebo O-alkyl;
Y19 je vybraný z nasledujúcich skupín:
a Y20 je vybraný z nasledujúcich skupín:
COOH
NHMs .W x,
V ch3 h3
NHAc
- 14Najvýhodnejšie zoskupenia pre R3 sú:
ΑΑΛΛ»
CH *vwv
ΛΛΛΛ-
<VWV
Niektoré iné výhodné skupiny sú: pre Z to je N, pre R4 to je H a pre W to je C=O.
Ďalšie zoskupenie Z-C-R3 vo všeobecnom vzorci I, pričom R4 je neprítomný, môže byť predstavované nasledujúcimi štruktúrami:
<WWr
Výhodné zoskupenia pre Y sú:
H s
Y14~N^Ä γ13 CHaW ch3 cHa^^ry
1-2
-v
HOOC^^Y^^y
CH3 ch3
HOOC^Ay CH3 <pH7 CaHy^y
COOH h=sA/ H°°c£>£y
0-2 Λ
CHaCH3
HOOC;X^Z>V
HOOC^ oV HOOC^v ch3
Hooc'xy
HaCOOC^y
HOOC^/
kde
Y11 je vybraný z H, COOH, COOEt, OMe, Ph, OPh, NHMe, NHAc, NHPh, CH(Me)2,
1-triazolyl, 1-imidazolyl a NHCH2COOH;
Y12 je vybraný z H, COOH, COOMe, OMe, F, Cl alebo Br;
Y13 je vybraný z nasledujúcich skupín:
CbzHN
Y14 je vybraný z MeSO2, Ac, Boe, iBoc, Cbz alebo Alloc;
Y15 a Y16 sú nezávisle vybrané z alkylu, arylu, heteroalkylu a heteroarylu;
Y17 je CF3, NO2, CONH2i OH, COOCH3, OCH3, OC6H5, C6H5, COC6H5( NH2 alebo COOH; a
-20Y18 je COOCH3> NO2, N(CH3)2, F, OCH31 CH2COOH, COOH, SO2NH2 alebo NHCOCH3.
Y môže výhodnejšie znamenať:
H
MeJ / CF3
H Me^Nxy Me-η X CCI3
COOH
Y17 = CF3, NO2i CONH2, OH, NH2 alebo COOH;
Y18=F, COOH,
Ešte výhodnejšie zoskupenia pre Y sú:
Me MeA^-°y
H3CSO2HN,vxJ\i
Me
Me^Cky Me
Ako je uvedené vo všeobecnom vzorci I, jednotka:
znamená cyklickú kruhovú štruktúru, ktorou môže byť päťčlenná alebo šesťčlenná kruhová štruktúra. Keď tento cyklický kruh znamená päťčlenný kruh, je požiadavkou tohto vynálezu, aby tento päťčlenný cyklický kruh neobsahoval karbonylovú skupinu ako časť cyklickej kruhovej štruktúry. Výhodne je tento päť členný kruh štruktúra:
kde R a R' sú určené vyššie. Výhodnou reprezentáciou tejto päťčlennej cyklickej kruhovej štruktúry je:
kde R20 je vybraný z nasledujúcich skupín:
vLk Λμ. vVh * H k H 0 O '
Ďalej, tento päťčlenný kruh spolu s jeho susednými dvoma exocyklíckými karbonylmi, môže byť reprezentovaný nasledujúcou štruktúrou:
v tomto prípade R21 a R22 môžu byť rovnaké alebo rôzne a sú nezávisle vybrané z nasledujúcich skupín:
ο
vo všeobecnom vzorci I môže byť predstavovaná nasledujúcimi štruktúrami b a c:
V skupine c sú G a J nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: (CH2)P> (CHR)p, (CHR-CHR')p a (CRR')P; A a M sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: O, S, SO2, NR, (CH2)P, (CHR)P, (CHR-CHR’)p a (CRR')P; a Q je CH2i CHR, CRR', NH, NR, O, S, SO2, NR, (CH2)P, (CHR)P a (CRR')P.
Výhodné definície pre c sú:
Keď cyklická kruhová štruktúra je zobrazená ako:
jej najvýhodnejšie ilustrácie sú nasledujúce:
Niektoré z ešte výhodnejších zoskupení pre jednotku:
uvedenú vyššie sú:
Me
O
O
Ak to nie je určené inak, všetky technické a vedecké pojmy používané v tomto dokumente majú rovnaký význam, ako sa bežne chápe odborníkmi v oblasti, ku ktorej tento vynález patrí. Teda napríklad pojem alkyl (vrátane alkylových podielov alkoxyskupiny) označuje monovalentnú skupinu odvodenú od priameho alebo rozvetveného reťazca nasýteného uhľovodíka odstránením jedného atómu, ktorý má od 1 do 8 uhlíkových atómov, výhodne od 1 do 6;
aryl - znamená karbocyklickú skupinu, ktorá má od 6 do 14 uhlíkových atómov a má najmenej jeden benzenoidný kruh, pričom sa všetky dostupné substituovateľné aromatické uhlíkové atómy karbocyklickej skupiny považujú ako možné body pripojenia. Výhodné arylové skupiny zahrnujú fenyl, 1-naftyl, 2-naftyl a indanyl, a zvlášť fenyl a substituovaný fenyl;
aralkyl - znamená skupinu, ktorá obsahujú arylovú skupinu naviazanú cez nižší alkyl;
alkylaryl - znamená skupinu, ktorá obsahuje nižší alkyl naviazaný cez arylovú skupinu;
cykloalkyl - znamená nasýtený karbocyklický kruh, ktorý má od 3 do 8 uhlíkových atómov, výhodne 5 alebo 6, voliteľne substituovaný.
heterocyklus - znamená, okrem heteroarylovej skupiny definovanej nižšie, nasýtené a nenasýtené cyklické organické skupiny, ,ktoré majú najmenej jeden O, S a/alebo N atóm prerušujúci karbocyklickú kruhovú štruktúru, ktorá pozostáva z jedného kruhu alebo dvoch kondenzovaných kruhov, kde každý kruh je 5-, 6- alebo
-337-členný a môže alebo nemusí mať dvojité väzby, ktoré sú bez delokalizovaných pí elektrónov, pričom kruhová štruktúra má od 2 do 8, výhodne od 3 do 6 uhlíkových atómov, napríklad 2- alebo 3-piperidinyl, 2- alebo 3-piperazinyl, 2- alebo 3-morfolinyl alebo 2- alebo 3-tiomorfolinyl;
halogén - znamená fluór, chlór, bróm a jód;
heteroaryl - znamená cyklickú organickú skupinu, ktorá má najmenej jeden O, S a/alebo N atóm prerušujúci karbocyklickú kruhovú štruktúru, a ktorá má dostatočný počet delokalizovaných pí elektrónov, aby poskytli aromatický charakter, pričom aromatická heterocyklylová skupina má od 2 do 14, výhodne 4 alebo 5 uhlíkových atómov, napríklad, 2-, 3- alebo 4-pyridyl, 2- alebo 3-furyl, 2- alebo 3tienyl, 2-, 4- alebo 5-tiazolyl, 2- alebo 4-imidazolyl, 2-, 4- alebo 5-pyrimidinyl, 2pyrazínyl alebo 3- alebo 4-pyridazinyl, atď.
Výhodné heteroarylové skupiny sú 2-, 3- a 4-pyridyl; takéto heteroarylové skupiny môžu tiež byť voliteľne substituované. Okrem toho, ak to nie je inak konkrétne určené, ako je uvedené vyššie, pojem substituovaný alebo nesubstituovaný alebo „voliteľne substituovaný označuje takúto skupinu, ktorá je voliteľne a chemicky primerane substituovaná skupinou patriacou k R12 alebo R13; V tomto dokumente sa používa pojem prekurzor tak, že znamená zlúčeniny, ktoré sú prekurzormi liečiva, ktoré po podaní pacientovi, uvoľňujú liečivo in vivo prostredníctvom určitých chemických alebo fyziologických procesov (napríklad sa prekurzor po uvedení na fyziologické pH alebo pomocou pôsobenia enzýmu konvertuje na požadovanú liečivovú formu).
Vynález tiež zahrnuje tautoméry, rotaméry, enantioméry a iné optické izoméry, ako aj prekurzory, zlúčenín všeobecného vzorca I, ako aj ich farmaceutický prijateľné soli, solváty a deriváty.
Ďalším rysom tohto vynálezu sú farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú ako aktívnu zložku zlúčeninu všeobecného vzorca I (alebo jej soľ, solvát alebo izomér) spolu s farmaceutickým prijateľným nosičom alebo excipientom.
Vynález tiež poskytuje spôsob prípravy zlúčenín všeobecného vzorca I, ako aj spôsoby liečenia chorôb, ako sú napríklad HCV, AIDS (Syndróm získanej imunitnej nedostatočnosti) a podobných porúch. Tieto spôsoby liečenia zahrnujú podávanie pacientovi trpiacemu takouto chorobou alebo chorobami terapeuticky
-34účinného množstva zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo farmaceutického prostriedku obsahujúceho zlúčeninu všeobecného vzorca I.
Vynález tiež opisuje použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I na výrobu liekov na liečenie HCV, AIDS a podobných porúch.
Vynález tiež opisuje spôsob liečenia s vírusom hepatitídy C spojenej poruchy, ktorý zahrnuje podávanie účinného množstva jednej alebo viacerých zlúčenín podľa tohto vynálezu.
Vynález tiež opisuje spôsob modulovania aktivity proteázy vírusu hepatitídy C (HCV), ktorý zahrnuje kontaktovanie HCV proteázy s jednou alebo viacerými zlúčeninami podľa tohto vynálezu.
Vynález tiež opisuje spôsob liečenia, prevencie alebo zoslabenia jedného alebo viacerých symptómov hepatitídy C, ktorý zahrnuje podávanie účinného množstva jednej alebo viacerých zlúčenín podľa tohto vynálezu. HCV proteáza je NS3 alebo NS4a proteáza. Zlúčeniny podľa tohto vynálezu inhibujú takúto proteázu. Modulujú tiež úpravu polypeptidu vírusu hepatitídy C (HCV).
V jednom uskutočnení tento vynález opisuje zlúčeniny všeobecného vzorca I ako inhibítory HCV proteázy, zvlášť HCV NS3/NS4a serín-proteázy alebo ich farmaceutický prijateľné deriváty, kde rôzne definície sú uvedené vyššie.
Reprezentatívne zlúčeniny podľa tohto vynálezu, ktoré vykazujú vynikajúcu inhibičnú aktivitu k HCV proteáze sú uvedené nižšie v Tabuľkách 1 až 5 spolu s ich aktivitou (nanomolárne rozsahy Ki* hodnôt, nmol/l). Viaceré tieto zlúčeniny, ako aj ďalšie zlúčeniny, sú ďalej opísané v časti Patentové nároky.
Tabuľka 1 - Zlúčeniny a výsledky HCV proteázovej priebežnej skúšky
| Zlúčenina z príkladu č. | Ki* rozsah |
| 1 | C |
| 2 | C |
| 3 | C |
| 4 | C |
| 5 | C |
| 6 | C |
| 7 | C |
| 8 | C |
| 9 | C |
| 10 | C |
| 11 | C |
| 12 | C |
| 13 | C |
| 14 | C |
| 15 | C |
| 16 | C |
| 17 | C |
| 18 | C |
| 19 | C |
| 20 | C |
| 21 | C |
| 22 | C |
| 23 | C |
| 24 | C |
| 25 | C |
| 26 | C |
| 27 | C |
| 28 | C |
| 29 | C |
| 30 | C |
| 31 | C |
| 32 | C |
| 33 | c |
| 34 | c |
| 35 | c |
| 36 | C |
| 37 | C |
| 38 | C |
| 39 | C |
| 40 | C |
| 41 | C |
| 42 | C |
| 43 | C |
| 44 | C |
| 45 | C |
| 46 | C |
| 47 | C |
| 48 | C |
| 49 | C |
| 50 | C |
| 51 | C |
| 52 | C |
| 53 | C |
| 54 | C |
| 55 | C |
| 56 | c |
| 57 | c |
| 58 | c |
| 59 | c |
| 60 | c |
| 61 | c |
| 62 | c |
| 63 | c |
| 64 | c |
| 65 | c |
| 66 | C |
| 67 | C |
| 68 | B |
| 69 | c |
| 70 | C |
| 71 | B |
| 72 | C |
| 73 | B |
| 74 | C |
| 75 | C |
| 76 | A |
| 77 | B |
| 78 | A |
| 79 | C |
| 80 | A |
| 81 | C |
| 82 | A |
| 83 | B |
| 84 | C |
| 85 | C |
| 86 | B |
| 87 | B |
| 88 | A |
| 89 | B |
| 90 | C |
| 91 | C |
| 92 | C |
| 93 | C |
| 94 | C |
| 95 | C |
| 96 | C |
| 97 | C |
| 98 | B |
| 99 | B |
| 100 | A |
| 101 | A |
| 102 | C |
| 103 | C |
| 104 | C |
| 105 | C |
| 106 | C |
| 107 | B |
| 108 | A· |
| 109 | A |
| 110 | A |
| 111 | A |
| 112 | A |
| 113 | B |
| 114 | A |
| 115 | B |
| 116 | A |
| 117 | A |
| 118 | A |
| 119 | A |
| 120 | A |
| 121 | B |
| 122 | B |
| 123 | A |
| 124 | B |
| 125 | B |
| 126 | B |
| 127 | A |
| 128 | A |
| 129 | A |
| 130 | B |
| 131 | A |
| 132 | A |
| 133 | A |
| 134 | B |
| 135 | A |
| 136 | A |
| 137 | A |
| 138 | A |
| 139 | A |
| 140 | B |
| 141 | A |
| 142 | A |
| 143 | B |
| 144 | B |
| 145 | C |
| 146 | A |
| 147 | A |
| 148 | B |
| 149 | A |
| 150 | A |
| 151 | A |
| 152 | A |
| 153 | A |
| 154 | A |
| 155 | B |
| 156 | B |
| 157 | B |
| 158 | C |
| 159 | B |
| 160 | A |
| 161 | A |
| 162 | A |
| 163 | C |
| 164 | A |
| 165 | C |
| 166 | B |
| 167 | A |
| 168 | C |
| 169 | B |
| 170 | B |
| 171 | A |
| 172 | A |
| 173 | A |
| 174 | A |
| 175 | A |
| 176 | B |
| 177 | B |
| 178 | A |
| 179 | A |
| 180 | B |
| 181 | A |
| 182 | B |
| 183 | A |
| 184 | A |
| 185 | A |
| 186 | A |
| 187 | A |
| 188 | A |
| 189 | B |
| 190 | B |
| 191 | B |
| 192 | A |
| 193 | A |
| 194 | B |
| 195 | A |
| 196 | B |
| 197 | A |
| 198 | A |
| 199 | A |
| 200 | A |
| 201 | B |
| 202 | A |
| 203 | B |
| 204 | B |
| 205 | B |
| 206 | B |
| 207 | B |
| 208 | A |
| 209 | A |
| 210 | A |
| 211 | A |
| 212 | A |
| 213 | B |
| 214 | B |
| 215 | B |
| 216 | B |
| 217 | C |
| 218 | A |
| 219 | A |
| 220 | A |
| 221 | A |
| 222 | A |
| 223 | B |
| 224 | C |
| 225 | C |
| 226 | A |
| 227 | A |
| 228 | C |
| 229 | A |
| 230 | A |
| 231 | A |
| 232 | C |
| 233 | C |
| 234 | C |
| 235 | C |
| 236 | B |
| 237 | C |
| 238 | A |
| 239 | C |
| 240 | A |
| 241 | C |
| 242 | B |
| 243 | C |
| 244 | B |
| 245 | C |
| 246 | B |
| 247 | A |
| 248 | A |
| 249 | C |
| 250 | C |
| 251 | B |
| 252 | C |
| 253 | C |
| 254 | B |
| 255 | B |
| 256 | A |
| 257 | C |
| 258 | A |
| 259 | A |
| 260 | C |
| 261 | C |
| 262 | A |
| 263 | B |
| 264 | B |
| 265 | C |
| 266 | B |
| 267 | A |
| 268 | C |
| 269 | A |
| 270 | C |
| 271 | A |
| 272 | C |
| 273 | C |
| 274 | C |
| 275 | C |
| 276 | A |
| 277 | B |
| 278 | A |
| 279 | B |
| 280 | A |
| 281 | C |
| 282 | C |
| 283 | C |
| 284 | C |
| 285 | C |
| 286 | C |
| 287 | C |
| 288 | B |
| 289 | B |
| 290 | C |
| 291 | C |
| 292 | C |
| 293 | C |
| 294 | C |
| 295 | C |
| 296 | B |
| 297 | C |
| 298 | C |
| 299 | B |
| 300 | B |
| 301 | C |
| 302 | C |
| 303 | B |
| 304 | C |
| 305 | C |
| 306 | C |
| 307 | B |
| 308 | B |
| 309 | C |
| 310 | C |
| 311 | C |
| 312 | C |
| 313 | B |
| 314 | A |
| 315 | B |
| 316 | B |
| 317 | A |
| 318 | A |
| 319 | A |
| 320 | A |
| 321 | C |
| 322 | C |
| 323 | C |
| 324 | C |
| 325 | A |
| 326 | A |
| 327 | C |
| 328 | B |
| 329 | B |
| 330 | A |
| 331 | A |
| 332 | A |
| 333 | B |
| 334 | B |
| 335 | B |
| 336 | A |
| 337 | A |
| 338 | C |
| 339 | A |
| 340 | C |
| 341 | C |
| 342 | C |
| 343 | A |
| 344 | C |
| 345 | C |
| 346 | C |
| 347 | B |
| 348 | B |
| 349 | C |
| 350 | C |
| 351 | C |
| 352 | C |
| 353 | C |
| 354 | C |
| 355 | C |
| 356 | A |
| 357 | A |
| 358 | C |
| 359 | A |
| 360 | B |
| 361 | B |
| 362 | C |
HCV priebežná skúška Ki* rozsahu:
Kategória A = 1 až 100 nmol/l; Kategória B = 101 až 1000 nmol/l; Kategória
C > 1000 nmol/l.
-47Niektoré z typov zlúčenín podľa tohto vynálezu a spôsobov syntézy rôznych typov zlúčenín podľa tohto vynálezu všeobecného vzorca I sú uvedené nižšie, potom schematicky opísané, nasledované ilustračnými príkladmi.
(R = terc-butyl, X = NH2) (R = izobutyl, X = NH2) (R = terc-butyl, X = OH) (R = trichlóretyl, X = OH)
(X = o’bu) (x = OH)
(X = OH) (X = O'Bu) (X = NH2) (X = NHMe) (X = NMe2)
Me
(X = ΝΗ2) (X = NMe2) (X = NHMe) (X = OH)
(X = O‘Bu) (X = OH) (X=NH2) (X=NMe2)
(R = ŕerc-butyl) (R = izobutyl) (X = O.‘Bu) (X = OH) (X = NH2) (X = NMe2) (X = NMeOMe)
(X = Me, Y = CH2Me) (X = OAc,Y=Me)
Me V-Me
Me
Me
h>c^>h
HjC-.KH
^CyCH,
VyCH,
°γΜ<
%
α°
CH,
H>C CH,
cr
CH,
VyCH,
h-Vch,
-60°ya
V
Η,Ο^
.NH
H,c ° Hŕ!
CH.
F h^ch.
H>c^
OS aya
Η,<\-ΝΗ h><Ah,
KďT
CH,
HjCyH3
Hŕ-T^ H,C CH,
V CH,
V o οΎψ ^rVA’ d ‘ “ W
V h3c 'ch,
H,C CH,
cr
HjC^CHa
<γ°
Ν
| κι | |
| ch, ο /—f PÁ Λ'γΛγ Η s | γΆπ. °ό |
ο ο
ο
ch3
V závislosti od ich štruktúry, zlúčeniny podľa tohto vynálezu môžu tvoriť farmaceutický prijateľné soli s organickými alebo anorganickými kyselinami alebo organickými alebo anorganickými zásadami. Príkladmi vhodných kyselín pre takúto tvorbu solí sú kyseliny: chlorovodíková, sírová, fosforečná, octová, citrónová, malónová, salicylová, jablčná, fumárová, jantárová, askorbová, maleínová, metánsulfónová a iné minerálne a karboxylové kyseliny známe odborníkom v tejto oblasti. Pre tvorbu solí so zásadami sú vhodnými zásadami napríklad NaOH, KOH, NH4OH, tetraalkylamónium-hydroxid a podobne.
V ďalšom uskutočnení tento vynález poskytuje farmaceutické prostriedky obsahujúce peptidy podľa tohto vynálezu ako aktívnu zložku. Farmaceutické prostriedky všeobecne okrem toho zahrnujú farmaceutický prijateľný nosič, zrieďovadlo, excipient alebo nosič (spolu označované v tomto dokumente ako nosičové materiály). Pre svoju HCV inhibičnú aktivitu majú takéto farmaceutické prostriedky využitie pri liečení hepatitídy C a príbuzných porúch.
V ešte ďalšom uskutočnení tento vynález opisuje spôsoby prípravy farmaceutických prostriedkov obsahujúcich zlúčeniny podľa tohto vynálezu ako aktívnu zložku. Vo farmaceutických prostriedkoch a spôsoboch podľa tohto vynálezu sa aktívne zložky budú typicky podávať v zmesi s vhodnými nosičovými materiálmi vhodne vybranými s ohľadom na ich zamýšľanú formu podávania, t.j. orálne tablety, kapsuly (plnené tuhou látkou, plnené polotuhou látkou alebo plnené kvapalnou látkou), prášky na prípravu roztoku, orálne gély, elixíry, dispergovateľné granuly, sirupy, suspenzie a podobne v zhode s konvenčnou farmaceutickou praxou. Napríklad, na orálne podávanie vo forme tabliet alebo kapsúl, aktívna liečivá zložka môže byť spojená s orálne netoxickým farmaceutický prijateľným inertným nosičom, ako je napríklad laktóza, škrob, sacharóza, celulóza, stearan horečnatý, fosforečnan vápenatý, síran vápenatý, mastenec, manitol, etylalkohol (kvapalné formy) a podobne. Naviac, keď sa to požaduje alebo je to potrebné, môžu do zmesi byť začlenené vhodné spojivá, lubrikanty, dezintegračné činidlá a farbiace činidlá. Prášky a tablety môžu obsahovať od asi 5 do asi 95 percent kompozície podľa tohto vynálezu. Vhodné spojivá zahrnujú škrob, želatínu, prírodné cukry, obilné sladidlá, prírodné a syntetické gumy, ako napríklad arabská guma, alginát sodný, karboxymetylcelulózu, polyetylénglykol a vosky. Medzi lubrikantami pre použitie v týchto dávkových formách môžu byť zmienené: kyselina boritá, benzoan sodný, octan sodný, chlorid sodný a podobne. Dezintegranty zahrnujú škrob, metylcelulózu, guarovú gumu a podobne.
Ak je to vhodné, môžu byť tiež zahrnuté sladidlá a príchuťové činidlá. Niektoré z pojmov zmienených vyššie, menovite dezintegranty, zrieďovadlá, lubrikanty, spojivá a podobne, sú diskutované podrobnejšie nižšie.
Okrem toho, kompozície podľa tohto vynálezu môžu byť upravené vo forme s trvalým uvoľňovaním, čím sa poskytne uvoľňovanie s riadenou rýchlosťou jednej alebo viacerých zložiek alebo aktívnych zložiek, čím sa optimalizuje terapeutický účinok, t.j. HCV inhibičná aktivita a podobne. Vhodné dávkové formy pre trvalé uvoľňovanie zahrnujú vrstevnaté tablety, ktoré obsahujú vrstvy s rôznou dezintegračnou rýchlosťou alebo polymérne matrice s riadenou rýchlosťou impregnované aktívnymi zložkami a vytvarované do tabletovej formy alebo kapsuly, ktoré obsahujú takéto impregnované alebo zapuzdrené pórovité polymérne matrice.
Prípravky v kvapalnej forme zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie. Ako príklad môže byť zmienená voda alebo roztoky voda-propylénglykol pre parenterálne injekcie alebo prídavok sladidiel a príchutí pre orálne roztoky, suspenzie a emulzie. Prípravky v kvapalnej forme môžu tiež zahrnovať roztoky pre intranazálne podávanie.
Aerosólové prípravky vhodné na inhaláciu môžu zahrnovať roztoky a tuhé látky v práškovej forme, ktoré môžu byť v kombinácii s farmaceutický prijateľným nosičom, ako napríklad inertný stlačený plyn, napríklad dusík.
Na prípravu čapíkov sa nízkotopiace sa vosky, ako napríklad zmes glyceridov mastných kyselín, ako napríklad kakaové maslo, najprv roztopí a aktívna zložka sa v nej disperguje homogénne pomocou premiešavania alebo podobného zmiešania. Roztopená homogénna zmes sa potom vyleje do vhodne veľkej formy,
-85nechá sa ochladiť a tým stuhne.
Uvažované sú tiež prípravky v tuhej forme, ktoré sú zamýšľané na konverziu krátko pred použitím na prípravok v kvapalnej forme, buď pre orálne alebo parenterálne podávanie. Takéto kvapalné formy zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie.
Zlúčeniny podľa tohto vynálezu môžu tiež byť podávateľné transdermálne.
Transdermálne prípravky môžu mať formu krémov, lotiónov, aerosólov a/alebo emulzií a môžu byť zahrnuté v matrici transdermálnej náplasti alebo rezervoárového typu, ako je konvenčné v tejto oblasti pre tieto účely.
Výhodne sa táto zlúčenina podáva orálne, intravenózne alebo subkutánne.
Výhodne je farmaceutický prípravok v jednotkovej dávkovej forme. V takejto forme sa prípravok rozdelí na primerane veľké jednotkové dávky, ktoré obsahujú príslušné množstvá aktívnej zložky, napríklad účinné množstvo na dosiahnutie požadovaného účelu.
Množstvo aktívnej kompozície podľa tohto vynálezu v jednotkovej dávke prípravku môže byť všeobecne menené alebo adjustované od asi 1,0 miligramu do asi 1000 miligramov, výhodne od asi 1,0 do asi 950 miligramov, výhodnejšie od asi 1,0 do asi 500 miligramov a typicky od asi 1 do asi 250 miligramov, podľa konkrétnej aplikácie. Aktuálna použitá dávka môže byť menená v závislosti od pacientovho veku, pohlavia, hmotnosti a rozsahu stavu, ktorý sa lieči. Takéto techniky sú známe odborníkom v tejto oblasti techniky.
Všeobecne, orálne dávkové formy pre ľudí, ktoré obsahujú aktívne zložky môžu byť podávané 1 alebo 2 krát za deň. Množstvo a frekvencia podávania budú regulované podľa posúdenia ošetrujúceho lekára. Všeobecne odporúčaný denný dávkový režim pre orálne podávanie môže byť v rozsahu od asi 1,0 miligramu do asi 1000 miligramov za deň v jednej alebo rozdelenej dávke.
Niektoré užitočné pojmy sú opísané nižšie:
Kapsula označuje špeciálny kontajner alebo obal vyrobený z metylcelulózy, polyvinylalkoholov alebo denaturovaných želatín alebo škrobu, ktorý má uchovávať alebo obsahovať kompozíciu obsahujúcu aktívne zložky. Kapsuly s tvrdou škrupinou sa typicky vyrábajú zo zmesí želatín z bravčových kostí a koží s relatívne vysokou silou gélovania. Kapsula samotná môže obsahovať malé množstvá farbív,
-86činidiel proti priehľadnosti, plastifikátory a konzervačné látky.
Tableta označuje stlačenú alebo lisovanú tuhú dávkovú formu, ktorá obsahuje aktívne zložky s vhodnými zrieďovadlami. Tableta môže byť pripravená pomocou stlačenia zmesí alebo granuláciou uskutočnenou pomocou granulácie za vlhka, suchej granulácie alebo pomocou zhutnenia.
Orálny gél označuje aktívne zložky dispergované alebo solubilizované v hydrofilnej polotuhej matrici.
Prášok pre rekonštitúciu označuje práškové zmesi, ktoré obsahujú aktívne zložky a vhodné zrieďovadlá, ktoré môžu byť suspendované vo vode alebo šťave.
Zrieďovadlo označuje substancie, ktoré obvykle tvoria hlavný podiel kompozície alebo dávkovej formy. Vhodné zrieďovadlá zahrnujú cukry, ako je napríklad laktóza, sacharóza, manitol a sorbitol; škroby získané z obilia, kukurice, ryže a zemiakov; a celulózy, ako je napríklad mikrokryštalická celulóza. Množstvo zrieďovadlá v prípravku môže byť v rozsahu od asi 10 do asi 90 % hmotnostných z celkového prípravku, výhodne od asi 25 do asi 75 %, výhodnejšie od asi 30 do asi 60 % hmotnostných, ešte výhodnejšie od asi 12 do asi 60 %.
Dezintegrant označuje materiály pridané do prípravku, aby pomohli rozdeliť ho na časti (dezintegrovať) a uvoľniť liečivá. Vhodné dezintegranty zahrnujú škroby; rozpustné v studenej vode modifikované škroby ako napríklad sodná soľ karboxymetylškrobu; prírodné a syntetické gumy, ako napríklad svetojánsky chlieb, karayová guma, guarová guma, tragantová guma a agar; celulózové deriváty ako napríklad metylcelulóza a sodná soľ karboxymetylcelulózy; mikrokryštalické celulózy a zosieťované mikrokryštalické celulózy, ako napríklad sodná soľ kroskarmelózy; algináty, ako napríklad kyselina algínová a alginát sodný; hlinky, ako napríklad bentonity; a šumivé zmesi. Množstvo dezintegrantu v prípravku môže byť v rozsahu od asi 2 do asi 15 % hmotnostných z prípravku, výhodnejšie od asi 4 do asi 10 % hmotnostných.
Spojivo označuje látky, ktoré viažu alebo „lepia prášky spolu a robia ich kohéznymi tvoriac granuly, teda slúžia v prípravku ako adhezívum. Spojivá zvyšujú kohezívnu silu už prítomnú v zrieďovadle alebo činidle tvoriacom základnú hmotu. Vhodné spojivá zahrnujú cukry, ako je napríklad sacharóza; škroby získané z obilia, kukurice, ryže a zemiakov; prírodné gumy, ako napríklad arabská guma, želatína a
-87tragantová guma; deriváty z morských rias, ako je napríklad kyselina algínová, alginát sodný a alginát amónno-vápenatý; celulózové materiály, ako napríklad metylcelulóza a sodná soľ karboxymetylcelulózy a hydroxypropylmetylcelulózy; polyvinylpyrolidón; a anorganické látky, ako napríklad kremičitan horečnatohlinitý. Množstvo spojiva v prípravku môže byť v rozsahu od asi 2 do asi 20 % hmotnostných z prípravku, výhodnejšie od asi 3 do asi 10 % hmotnostných, ešte výhodnejšie od asi 3 do asi 6 % hmotnostných.
Lubrikant označuje látku pridanú do dávkovej formy, aby to umožnilo uvoľniť tablety, granuly atď., po tom ako sa zlisujú z formy alebo matrice pomocou zníženia trenia alebo odierania. Vhodné lubrikanty zahrnujú stearáty kovov, ako napríklad stearan horečnatý, stearan vápenatý alebo stearan draselný; kyselina steárová; vosky s vysokou teplotou topenia; a vo vode rozpustné lubrikanty, ako napríklad chlorid sodný, benzoan sodný, octan sodný, olean sodný, polyetylénglykoly a d'lleucín. Lubrikanty sa obvykle pridávajú v poslednom kroku pred lisovaním, pretože musia byť prítomné na povrchoch granúl a medzi nimi a súčasťami tabletovacieho lisu. Množstvo lubrikantu v prípravku môže byť v rozsahu od asi 0,2 do asi 5 % hmotnostných z prípravku, výhodne od asi 0,5 do asi 2 %, výhodnejšie od asi 0,3 do asi 1,5 % hmotnostných.
Klzná látka je materiál, ktorý chráni pred zhlukovaním a zlepšuje charakteristiky tečenia granulátov, takže tok je jemnejší a rovnomernejší. Vhodné klzné látky zahrnujú oxid kremičitý a mastenec. Množstvo klznej látky v prípravku môže byť v rozsahu od asi 0,1 % do asi 5 % hmotnostných z celkového prípravku, výhodne od asi 0,5 do asi 2 % hmotnostných.
Farbiace činidlá - excipienty, ktoré poskytujú zafarbenie prípravku alebo dávkovej formy. Takéto excipienty môžu zahrnovať potravinárske farbivá a potravinárske farbivá adsorbované na vhodný adsorbent, ako je napríklad hlinka alebo oxid hlinitý. Množstvo farbiaceho činidla sa môže meniť od asi 0,1 do asi 5 % hmotnostných prípravku, výhodne od asi 0,1 do asi 1%.
Biologická dostupnosť označuje rýchlosť a rozsah, v ktorom sa aktívna liečivá zložka alebo terapeutická skupina absorbuje do systemického obehu z podávanej dávkovej formy v porovnaní so štandardom alebo kontrolnou vzorkou.
Konvenčné spôsoby prípravy tabliet sú známe. Takéto spôsoby zahrnujú
-88suché spôsoby, ako napríklad priame lisovanie a lisovanie granulátov vyrobených pomocou zhutňovania alebo spôsobov za vlhka alebo iných špeciálnych postupov.
Konvenčné spôsoby výroby iných foriem podávania, ako sú napríklad kapsuly, čapíky a podobne, sú tiež známe.
Ďalšie uskutočnenie tohto vynálezu opisuje použitie farmaceutických prostriedkov opísaných vyššie na liečenie chorôb, ako sú napríklad hepatitída C a podobne. Tieto spôsoby zahrnujú podávanie terapeuticky účinného množstva farmaceutických prípravkov podľa tohto vynálezu pacientovi, ktorý má takúto chorobu alebo choroby a potrebuje takéto liečenie.
V ešte ďalšom uskutočnení môže byť zlúčenina podľa tohto vynálezu použitá na liečenie HCV v imunoterapii ľudí alebo v kombinovanej terapii (napríklad, duálna kombinácia, trojitá kombinácia, atď.) ako napríklad v kombinácii s antivírusovými a/alebo imunomodulačnými činidlami.
Príklady takýchto antivírusových a/alebo imunomodulačných činidiel zahrnujú Ribavirín (od Schering-Plough Corporation, Madison, New Jersey) a LevovirinTM (od ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, California), VP 50406™ (od Viropharma, Incorporated, Exton, Pennsylvania), ISIS 14803™ (od ISIS Pharmaceuticals, Carlsbad, California), Heptazyme™ (od Ribozyme Pharmaceuticals, Boulder, Colorado), VX 497™ (od Vertex Pharmaceuticals, Cambridge, Massachusetts), Thymosin™ (od SciClone Pharmaceuticals, San Mateo, California), Maxamine™ (Maxim Pharmaceuticals, San Diego, California), mykofenolát mofetilu (od Hoffman-LaRoche, Nutley, New Jersey), interferón (ako napríklad, interferon-alfa, PEG-interferón alfa konjugáty) a podobne. PEG interferón alfa konjugáty sú interferón alfa molekuly kovalentne pripojené na PEG molekulu. Ilustračné PEG-interferón alfa konjugáty zahrnujú interferón alfa-2a (Roferon™, od Hoffman La-Roche, Nutley, New Jersey) vo forme pegylovaného interferónu alfa-2a (napríklad ako sa predáva pod obchodným menom Pegasys™), interferón alfa-2b (Intron™ od Schering-Plough Corporation) vo forme pegylovaného interferónu alfa-2b (napríklad ako sa predáva pod obchodným menom PEG-Intron™), interferón alfa-2c (Berofor Alfa™ od Boehringer Ingelheim, Ingelheim, Germany) alebo všeobecný interferón, ako je definovaný pomocou určenia všeobecnej sekvencie prírodné sa vyskytujúcich interferónov alfa
-89(Infergen™ od Amgen, Thousand Oaks, California).
Ako je uvedené, vynález zahrnuje tiež tautoméry, rotaméry, enantioméry a iné stereoizoméry zlúčenín podľa vynálezu. Ako odborník v tejto oblasti rozpozná, niektoré zo zlúčenín podľa tohto vynálezu môžu existovať vo vhodných izomérnych formách. Takéto variácie sa považujú za súčasť rozsahu tohto vynálezu.
Ďalšie uskutočnenie tohto vynálezu opisuje spôsob výroby zlúčenín opísaných v tomto dokumente. Tieto zlúčeniny môžu byť pripravené pomocou viacerých techník známych v tejto oblasti. Reprezentatívne ilustračné postupy sú uvedené v nasledujúcich reakčných schémach. Treba rozumieť, že kým nasledujúce ilustračné schémy opisujú prípravu niekoľkých reprezentatívnych zlúčenín podľa tohto vynálezu, vhodná substitúcia prírodnej a neprírodnej aminokyseliny povedie k tvorbe požadovaných zlúčenín založených na takejto substitúcii. Takéto variácie sú považované za súčasť rozsahu tohto vynálezu.
Skratky, ktoré sa používajú v opisoch schém, príprav a nasledujúcich príkladov, sú:
THF: tetrahydrofurán
DMF: A/,/V-dimetylformamid
EtOAc: etylacetát
AcOH: kyselina octová
HOOBt: 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazín-4(3/-/)-ón
EDCI: 1- (3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid, hydrochlorid
NMM: A/-metylmorfolín
ADDP: 1 ,ľ-(azodikarbonyl)dipiperidín
DEAD: dietylazodikarboxylát
MeOH: metanol
EtOH: etanol
Et2O: dietyléter
DMSO: dimetylsulfoxid
HOBt: A/-hydroxybenzotriazol
PyBrOP: bróm-ŕr/s-pyrolidínfosfónium-hexafluórfosfát
DCM: dichlórmetán
DCC: 1,3-dicyklohexylkarbodiimid
-90TEMPO: 2,2,6,6-tetrametyl-l-piperidinyloxy voľný radikál
| Phg: | fenylglycín |
| Chg: | cyklohexylglycín |
| Bn: | benzyl |
| Bzl: | benzyl |
| Et: | etyl |
| Ph: | fenyl |
| iBoc: | izobutoxykarbonyl |
| iPr: | izopropyl |
ťBu alebo Bul: íerc-butyl
| Boe: | ŕerc-butyloxykarbonyl |
| Cbz: | benzyloxykarbonyl |
| Cp: | cyklopentyldienyl |
| Ts: | p-toluénsulfonyl |
| Me: | metyl |
| HATU: | 0-(7-azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetrametylurónium-hexafluórfosfát |
| DMAP: | 4-/V,/V-dimetylaminopyridín |
| Bop: | benzotriazol-1-yl-oxy-tris(dimetylamino)hexafluórfosfát |
Všeobecné schémy prípravy:
Nasledujúce schémy opisujú spôsoby syntézy medziproduktových stavebných blokov:
Schéma 1
HO FbN-Phg-COCBu
,4NHa doxán 7mn
-91 Schéma 2
Schéma 3
COOMe
NaOCI
NaBr ? TEMPO
¢3.1)
COOMe
1. TMSI (3 ekv.) 30 min
2. Boc2O (4 ekv.)/ (i-Pr^NEt (3.1 ekv.)/ THF, 20 min
-92CO OH
Schéma 4 η
U
HCI- H^ ¢3.5)
n= 2:4.5
HCI· n= 1:4.3 n= 2:4.7
HOOBt EDCI NMM t HOOBt COOBu EĎčľ NMM n= 1:3.8 n= 2:3.4 /-BuOCOCI + H-Chg-OH
DMr
Iboc-Chg-OH (4.9 b
Moffattova oxidácia
Iboc-Chg
n= 1:4.4 n= 2:4.8
OBu‘
Schéma 5
-93Schéma 6
OCH2Ph
IBocOhg-OH (6.0) ~~ ηοοβΓ* edci, NMM
OCH2Ph (6-0
NaOCI NaBr TEMPO (6.3)
OCH2Ph
Schéma 7
(2-3)
HOOBt
CONMe2 EDCI
NMM
(7-2)
CONMe2
Iboc'Chg'
Moffattova oxidácia
(7-3) o
_SH SH
CONMe2 BF3'Et2O
Schéma 8
BOP. NMM
CH3ONHCH3HCI n'°'ch3 ch3
LÍAIH4
(CH3)2C(OH)CN
Et3N
OH
BocHN
AcCI, CH3OH
OH cih3n
R
COOCH3
| 1. B0C2O 2. LiOH, | OH BocHN ^/^COOH R | NH4CI, EDCI . HOOBt |
| thf/h2o |
BocHN
4M HCI/Dioxán
OH
CIH3N
CONH2
R
-95Schéma 9
kde R =
Schéma 10
O
PtK.N. A
Y oc2h; Ph
1. aq HCI, Et2O — - »-
2. Boc2O
I.KOt-Bu,
BocHN
LiOH,
THF/H2O
(Boc)2O
DMAP
Et3N
CH3CN
CO2tBu
Boe
CHCI3
NaOH(50%)
Et3NBnCI
| CI^CI •Sz* A | CF3CO2H | α^,α * z |
| ^N'z^CO2tBu 1 | ch2ci2 | ^n^co2h |
| Boe | H -CF3C02H |
HCI
MeOH
| ci^ci sz· | BocHNx/CO2H |
| Q, + x N^CO2Me H · HCI | Ó |
HATU iPr2NEt
DMF
BocHN
-96Schéma 11
BF3 . Me2O / CH2CI2
H2- 10% Pd /C
Schéma 12
LiN(SiMe3)2
Mel.THF -78°—· -20°C
BOc
a) LiEt3BH
b) Et3SiH, BF3 OEt2
KOH
MeOH, H2O 40gC, 16h
-97Schéma 13
B0C2O
BocNH^/^SMe mcpba
Et3N, CH2CI2
O tBocN bK—s~Me u
O
4M HCI dioxán
O
HCI.H2N^/^g_f4e n
O
Schéma 14
CH3C6H4SO2CI
DMAP/báza BocN—
Bocz
4M HCI dioxán hci.h2n^^x<^· (Boc)2NH
Cs2CO3
Lil acetón
| Schéma 15 | ||
| 0 0 U H | + C^OH | DCC, DMAP |
| CH2CI2 |
H2i 10% Pd/C vod. 10% HCI, izopropanol
O'
HCI.H2I
-98Schéma 16
cnch2co2ch3 ch3co2h, ch2ci2
Ph
HCI.H2N^CONMe2
I.HOOBt, EDCI NMM. DMF
2.4N HCI, dioxán
Schéma 17
O
Ο
Schéma 18
nBu4NOH (BocJaO \z
\/
Jonesovo činidlo
-100Schéma 19
BocHhL co2H
H2 345 kPa (50 psi)
Rh na C, 7 dní
Schéma 20 >rOH cf3
Et3N, CH3CN
Λ/,Ν-disukcínimidylkarbonát
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príprava medziproduktov
Preparatívny Príklad 1
Krok A: Zlúčenina (1.09)
(1.09)
Do premiešavaného roztoku Zlúčeniny (1.08) (3,00 g, 12,0 mmol (S.L. Harbeson a spol. J. Med. Chem. 37 č. 18 (1994) 2918 - 2929) v DMF (15 ml) a CH2CI2 (15 ml) pri -20 °C bol pridaný HOOBt (1,97 g, 12,0 mmol), /V-metylmorfolín (4,0 ml, 36,0 mmol) a EDCI (2,79 g, 14,5 mmol) a premiešaval sa počas 10 minút, po čom nasledoval prídavok HCI.H2N-Gly-OBn (2,56 g, 13,0 mmol). Výsledný roztok
- 101 sa premiešaval pri -20 °C počas 2 hodín, udržiaval sa zmrazený počas noci a potom sa skoncentroval do sucha, nasledovalo zriedenie s EtOAc (150 ml). EtOAc roztok sa potom premyl dvakrát nasýteným roztokom NaHCO3, H2O, roztokom 5% H3PO4, soľankou, vysušil sa nad Na2SO4, prefiltroval a skoncentroval do sucha, čím poskytol zlúčeninu (1.09) (4,5 g, 94%). LRMS m/z MH+ = 395,1.
Krok B: Zlúčenina (1.1)
OH
Roztok Zlúčeniny (1.09) (7,00 g, 17,8 mmol) v absolútnom etanole (300 ml) sa premiešaval pri laboratórnej teplote pod vodíkovou atmosférou v prítomnosti PdC (300 mg, 10%). Postup reakcie sa monitoroval pomocou TLC. Po 2 hodinách sa zmes prefiltrovala cez vrstvu Celíte a výsledný roztok sa skoncentroval za vákua, čím poskytol Zlúčeninu (1.1) (5,40 g, kvantitatívne). LRMS m/z MH+= 305,1.
Preparatívny Príklad 2 Krok A: Zlúčenina (1.3)
COOBu*
COOBu1
(1-2) (1-3)
Zmes Zlúčeniny (1.1) z preparatívneho Príkladu 1, Krok B, uvedeného vyššie (1 ekv.), Zlúčeniny (1.2) (od Novabiochem, Katalógové č. 04-12-5147) (1.03 ekv.), HOOBt (1,03 ekv.), /V-metylmorfolínu (2,2 ekv.) a dimetylformamidu (70 ml/g) sa premiešaval pri -20 °C. Pridal sa EDCI (1,04 ekv.) a reakčná zmes sa
- 102premiesavala počas 48 hodín. Reakčná zmes sa vyliala do vodného roztoku 5% KH2PO4 a extrahovala sa etylacetátom (2x). Spojené organické fázy sa premyli so studeným 5% vodným roztokom K2CO3, potom 5% vodným roztokom KH2PO4, potom soľankou a organická vrstva sa vysušila nad bezvodým MgSO4. Zmes sa prefiltrovala, potom sa odparila a filtrát sa vysušil za vákua, zvyšok sa rozotrel so zmesou Et2O-hexán a prefiltroval, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (1.3) (86%-ný výťažok), C25H39N3O7 (493,60), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 =
494,3.
Krok B: Zlúčenina (1.4)
BocHN
COOBu1
Zlúčenina (1.3) z preparatívneho Príkladu 2, Krok A (3,0 g) sa opracovala roztokom 4 mol/l HCI/dioxán (36 ml) a premiešavala sa pri laboratórnej teplote počas 7 minút Zmes sa vyliala do 1,5 I studeného (5 °C) hexánu a premiešavala sa, potom sa nechala ochladiť počas 0,5 hodiny. Zmes sa odsaním prefiltrovala v suchej atmosfére a oddelená tuhá látka sa ďalej vysušila, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (1.4) (2,3 g, 88%-ný výťažok), C2oH3iN305.HCI, H1 NMR (DMSO-de/NaOD) δ 7,38 (m, 5H), 5,25 (m, 1H), 4,3 - 4,1 (m, 1H), 3,8 (m, 2H), 3,4 -
3,3 (m, prekrytý s D2O), 1,7 -1,1 (m, 4H), 1,35 (s, 9H), 0,83 (m, 3H).
Preparatívny Príklad 3
Zlúčenina (1.5)
BocHN
Zlúčenina (1.3) z preparatívneho Príkladu 2, Krok A, sa opracovala v podstate rovnakým spôsobom ako v preparatívnom Príklade 7, Krok A uvedenom
- 103nižšie, čím sa poskytla Zlúčenina (1.5).
Preparatívny Príklad 4
Zlúčenina (1.6)
Zlúčenina (1.5) z preparatívneho Príkladu 3 sa opracovala v podstate rovnakým spôsobom ako v preparatívnom Príklade 2, Krok B, čím sa poskytla Zlúčenina (1.6).
Preparatívny Príklad 5 Krok A: Zlúčenina (2.09)
ch3
I ά
(2.09)
Do roztoku dimetylamínu, hydrochloridu (1,61 g, 19,7 mmol), A/-Boc-fenylglycínu, Zlúčeniny (2.08) (4,50 g, 17,9 mmol, Bachem Co. # A-2225), HOOBt (3,07 g, 18,8 mmol) a EDCI (4,12 g, 21,5 mmol) v bezvodom DMF (200 ml) a CH2CI2 (150 ml) pri -20 °C bol pridaný NMM (5,90 ml, 53,7 mmol). Po premiešavaní pri tejto teplote počas 30 minút sa reakčná zmes udržiavala v mrazničke počas noci (18 hodín). Potom sa ponechala zahriať na laboratórnu teplotu a pridal sa EtOAc (450 ml), soľanka (100 ml) a 5% H3PO4 (100 ml). Po oddelení vrstiev sa organická vrstva premyla roztokom 5% H3PO4 (100 ml), nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2x 150 ml), vodou (150 ml) a soľankou (150 ml), vysušila sa (MgSO4), prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla Zlúčenina (2.09) (4,86 g) ako biela tuhá látka, ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.
-104Krok B: Zlúčenina (2.1)
(2.09)
Zlúčenina (2.09) z preparatívneho Príkladu 5, Krok A (4,70 g, surová), sa rozpustila v 4 mol/l HCI (60 ml, 240 mmol) a výsledný roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote. Postup reakcie sa monitoroval pomocou TLC. Po 4 hodinách sa roztok skoncentroval za vákua, čím sa poskytla Zlúčenina (2.1) ako biela tuhá látka, ktorá sa použila v nasledujúcej reakcii bez ďalšieho čistenia. LRMS m/z MH+ = 179,0.
Preparatívny Príklad 6 Krok A: Zlúčenina (2.2)
BocHN
CONMe,
BocHN
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A. nahradením fenylglycín-A/,A/-dimetylamidu, hydrochloridu, namiesto fenylglycín-ŕercbutylesteru, hydrochloridu, sa pripravila Zlúčenina (2.2), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 =465,3.
Krok B: Zlúčenina (2.3)
(2.2)
(2.3)
- 105Zlúčenina (2.2) z Kroku A (1,85 g) reagovala s roztokom 4 mol/l HCI v dioxáne (50 ml) pri laboratórnej teplote počas 1 hodiny. Zmes sa odparila za vákua vo vodnom kúpeli pri 20 °C, rozotrela sa s izopropyléterom, prefiltrovala sa a vysušila, čím sa poskytla Zlúčenina (2.3) (1,57 g, 98%-ný výťažok),
C18H28N4O4.HCI, hmotnostná spektrum (FAB) M+1 = 365,3
Preparatívny Príklad 7 Krok A: Zlúčenina (2.4)
BocHN
CONMe2
Roztok Zlúčeniny (2.2) z preparatívneho Príkladu 5, Krok A (2,0 g), v dichlórmetáne (60 ml) sa opracoval dimetylsulfoxidom (3,0 ml) a kyselinou 2,2dichlóroctovou (0,70 ml). Premiešavaná zmes sa ochladila na 5 °C a potom sa pridal roztok 1 mol/l dicyklohexylkarbodiimidu v dichlórmetáne (8,5 ml). Studený kúpeľ sa odstránil a zmes sa premiešavala počas 22 hodín. Potom sa pridal 2propanol (0,5 ml) a zmes sa premiešavala počas ďalšej 1 hodiny. Zmes sa prefiltrovala, potom sa premyla ľadovostudeným roztokom 0,1 mol/l NaOH (50 ml), potom ľadovostudeným roztokom 0,1 mol/l HCI (50 ml), potom 5% vodným roztokom KH2PO4, potom nasýtenou soľankou. Organický roztok sa vysušil nad bezvodým síranom horečnatým, potom sa prefiltroval. Filtrát sa odparil a chromatografoval na silikagéli, eluovaním etylacetátom, čím sa poskytla Zlúčenina (2.3) (1,87 g, 94%-ný výťažok), C23H34N4O6, hmotnostná spektrum (FAB) M+1 =
463,3.
Krok B: Zlúčenina (2.5)
BocHN
H
CONMe2
HCI·
H2N
H
CONMe2
(2.4) (2.5)
- 106 V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok B, sa pripravila Zlúčenina (2.5).
Preparatívny Príklad 8 Krok A: Zlúčenina (3.1) £>H
Á Cbz'' COOMe (3-01) ο
COOMe
V banke sa spojili /V-Cbz-hydroxyprolín-metylesteru (dostupný od Bachem Biosciences, Incorporated, King of Prussia, Pennsylvania), Zlúčenina (3.01) (3,0 g), toluén (30 ml) a etylacetát (30 ml). Zmes sa prudko premiešavala a potom sa pridal roztok NaBr/voda (1,28 g/5 ml). Do zmesi bol pridaný 2,2,6,6-tetrametyl-1piperidinyloxy voľný radikál (TEMPO, 17 mg, od Aldrich Chemicals, Milwaukee, Wisconsin). Premiešavaná zmes sa ochladila na 5 °C a potom bol pridaný pripravený roztok oxidantu [komerčne dostupné bielidlo, Clorox(R); (18 ml), NaHCO3 (2, 75 g) a voda do 40 ml] po kvapkách počas 0,5 hodiny. Do zmesi bol pridaný 2propanol (0,2 ml). Organická vrstva sa oddelila a vodná vrstva sa extrahovala etylacetátom. Organické extrakty sa spojili, premyli 2% roztokom tiosíranu sodného, potom nasýtenou soľankou. Organický roztok sa vysušil nad bezvodým MgSO4, prefiltroval a filtrát sa odparil za vákua, čím sa poskytla bledo žltá guma vhodná pre nasledujúce reakcie (2,9 g, 97%-ný výťažok), Ο14Η15ΝΟ5 (277,28), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 278, 1.
Krok B: Zlúčenina (3.2)
(3-1) (3.2)
- 107Zlúčenina (3.1) z Kroku A vyššie (7,8 g) sa rozpustila v dichlórmetáne (100 ml) a ochladila sa na 15 °C. Do tejto zmesi sa najprv pridal 1,3-propánditiol (3,1 ml), nasledoval čerstvo destilovaný fluorid boritý-éterát (3,7 ml). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 18 hodín. Počas prudkého premiešavania sa opatrne pridal roztok K2CO3 vo vode (2 g/30 ml), nasledovaný nasýteným NaHCO3 (10 ml). Organická vrstva sa oddelila od vodnej vrstvy (pH asi 7,4), premyla sa vodou (10 ml), potom soľankou. Organický roztok sa vysušil nad bezvodým MgSO4l prefiltroval a odparila za vákua. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, eluovaním toluénom, potom s gradientom hexán-Et2O (2:3 až 0:1), čím sa poskytol hnedý olej (7,0 g, 68%-ný výťažok), Ci7H2iNO4S2 (367,48), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 =
368,1.
Krok C: Zlúčenina (3.3)
(3-2)
CO OMe
Roztok Zlúčeniny (3.2) z Kroku B uvedeného vyššie (45 g) v acetonitrile (800 ml) pri 20 °C sa opracoval čerstvo destilovaným jódtrimetylsilánom (53 ml) naraz. Reakčná zmes sa premiešavala počas 30 minút, potom sa vyliala do čerstvo pripraveného roztoku di-terc-butyldikarbonátu (107 g), etyléteru (150 ml) a diizopropyletylamínu (66,5 ml). Zmes sa premiešavala ešte počas 30 minút, potom sa premyla hexánom (2x 500 ml). K spodnej acetonitrilovej vrstve sa pridal etylacetát (1000 ml) a potom sa vrstva premyla vodným roztokom 10% KH2PO4 (2x 700 ml) a soľankou.
Filtrát sa odparil za vákua v 25 °C vodnom kúpeli, rozpustil sa v čerstvom etylacetáte (1000 ml) a premyl sa postupne roztokmi 0,1 mol/l HCI, 0,1 mol/l NaOH, 10% vodným roztokom KH2PO4 a soľankou. Organický roztok sa vysušil nad bezvodým MgSO41 prefiltroval a odparil za vákua. Zvyšok (66 g) sa chromatografoval na silikagéli (2 kg), eluovaním hexánom (2 I), potom zmesou Et2O/hexán (55:45,2 I), potom Et2O (2 I), čím sa poskytla oranžová guma, ktorá
-108pomaly kryštalizovala pri státí (28 g, 69%-ný výťažok), C14H23NO4S2 (333,46), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 334, 1.
Krok D: Zlúčenina (3.4) ri o
Roztok Zlúčeniny (3.3) z Kroku C uvedeného vyššie (11 g) v dioxáne (150 ml) pri 20 °C sa opracoval vodným roztokom 1 mol/l LiOH (47 ml) a premiešaval sa počas 30 hodín. Zmes sa skoncentrovala za vákua v 30 °C vodnom kúpeli na polovičný objem. Zvyšok sa zriedil vodou (300 ml), extrahoval s Et2<D (2x 200 ml). Vodná vrstva sa okyslila na pH asi 4 s 12 mol/l HCI (3 až 4 ml), extrahovala sa etylacetátom a premyla sa soľankou. Organický roztok sa vysušil nad bezvodým MgSO4, prefiltroval a odparil za vákua, čím sa poskytla Zlúčenina (3.4) (8,1 g, 78%), C13H2iNO4S2 (319,44), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 320,1.
Krok E: Zlúčenina (3.5)
Do roztoku Zlúčeniny (3.3) z Kroku C uvedeného vyššie (1 g) v dioxáne (5 ml) bol pridaný 4 mol/l HCI-dioxánový roztok (50 ml). Zmes sa prudko premiešavala počas 1 hodiny. Zmes sa odparila za vákua v 25 °C vodnom kúpeli. Zvyšok sa rozotrel s Et2O a prefiltroval, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (0,76 g, 93%-ný výťažok), C9HÍ5NO2S2.HCI (269,81), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 234,0.
-109 Preparatívny Príklad 9 Krok A: Zlúčenina (3.6)
ΓΊ
COOMe (3-6)
Podľa v podstate rovnakého postupu z preparatívneho Príkladu 8, Krok B, nahradením etánditiolu za propánditiol sa získala zlúčenina (3.6).
Krok B: Zlúčenina (3.7)
ΓΊ
Podľa v podstate rovnakého postupu z preparatívneho Príkladu 8, Krok C, nahradením zlúčeniny (3.6) za zlúčeninu (3.2) sa získala zlúčenina (3.7).
Krok C: Zlúčenina (3.8)
>
Podľa v podstate rovnakého postupu z preparatívneho Príkladu 8, Krok D, nahradením zlúčeniny (3.7) za zlúčeninu (3.3) sa získala zlúčenina (3.8).
-110Krok D: Zlúčenina (3.9)
ΓΊ
ΓΊ
Podľa v podstate rovnakého postupu z preparatívneho Príkladu 8, Krok E, nahradením zlúčeniny (3.7) za zlúčeninu (3.3) sa získala zlúčenina (3.9).
Preparatívny Príklad 10 Krok A: Zlúčenina (4.1)
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A, bola pripravená Zlúčenina (4.1) C33H48N4O9S2 (708,89).
Krok B: Zlúčenina (4.2)
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok B, bola pripravená Zlúčenina (4.2), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 609,3.
-111 Krok C: Zlúčenina (4.3)
ΓΊ
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A, bola pripravená Zlúčenina (4.3), C41H61N5O10S2 (708,89), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 709,3.
Krok D: Zlúčenina (4.4)
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 7, Krok A, bola pripravená Zlúčenina (4.4).
Preparatívny Príklad 11
-112V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A, bola pripravená Zlúčenina (4.5).
Krok B: Zlúčenina (4.6)
ΓΊ ΓΊ
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok B, bola pripravená Zlúčenina (4.6).
Krok C: Zlúčenina (4.7)
Zlúčenina (4.9) z preparatívneho Príkladu 12, reagovala so Zlúčeninou (4.6) z Kroku B uvedeného vyššie, v podstate rovnakým spôsobom ako v preparatívnom Príklade 2, Krok A, čím sa poskytla Zlúčenina (4.7).
Krok D: Zlúčenina (4.8)
-113-
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 7, Krok A, bola pripravená Zlúčenina (4.8).
Preparatívny Príklad 12
Zlúčenina (4.9) í-BuOCOCI + H-Chg-OH --->- Iboc-Chg—OH (4.01) (4.02) (4.9)
Roztok L-cyklohexylglycínu (4.02) (1,0 ekv.), dimetylformamidu (20 ml/g), a diizopropyletylamínu (1,1 ekv.) pri 5 °C sa opracoval izobutylchlórmravčanom (4.01) (1,1 ekv.). Studený kúpeľ sa odstránil a zmes sa premiešavala počas 6 hodín.
Reakčná zmes sa vyliala do 5% vodného roztoku KH2PO4 a extrahovala sa etylacetátom (2x). Spojené organické fázy sa premyli studeným 5% vodným roztokom K2CO3, potom 5% vodným roztokom KH2PO41 potom soľankou a organické fázy sa vysušili nad bezvodým MgSO4. Zmes sa prefiltrovala, filtrát sa odparil za vákua, zvyšok sa chromatografoval, ak to bolo potrebné alebo sa zvyšok rozotrel so zmesou Et2O-hexán a prefiltroval, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (4.9), C13H23NO4 (257,33).
Preparatívny Príklad 13
Zlúčenina (13.1) /-BuOCOCI + H-Thr(Bzl)-OH —lboc-Thr(Bzl)-OH (4.01) (13.02) (13.1)
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 12, nahradením L-O-benzyltreonínu (13.02) (Wang a spol., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, (1997) č. 5, 621 - 624,) za L-cyklohexylglycín (4.02) bola pripravená Zlúčenina (13.1), Ci6H23NO5 (309,36), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 310,2.
Preparatívny Príklad 14
-114-
Zlúčenina (4.8) z preparatívneho Príkladu 11, Krok D (1,0 g), reagovala s roztokom bezvodá kyselina trifluóroctová-dichlórmetán (1:1, 50 ml) počas 2 hodín. Roztok sa zriedil xylénom (100 ml) a odparil sa za vákua. Zvyšok sa rozotrel s Et20, a prefiltroval, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto odseku (5.1) (0,9 g), C37H53N5O9S2 (775,98), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 =776,5.
Krok B: Zlúčenina (5.2)
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A, Zlúčenina (5.1) reagovala s amoniakom (0,5 mol/l 1,4-dioxánový roztok), čím sa získala zlúčenina z názvu tohto odseku (5.2) C37H54N6O8S2 (774,99), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 775,4.
Preparatívny Príklad 15
Zmes Zlúčeniny (5.1) z preparatívneho Príkladu 14, Krok A (0,15 g), N,Ndimetylamínu (0,12 ml 2 mol/l THF roztoku), dimetylformamidu (10 ml) a PyBrOP
-115kopulačného činidla (0,11 g), sa ochladila na 5 °C, potom sa pridal diizopropyletylamín (DIEA alebo DIPEA, 0,12 ml). Zmes sa premiešavala za studená počas 1 min., potom sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 6 hodín. Reakčná zmes sa vyliala do studeného vodného roztoku 5% H3PO4 (50 ml) a extrahovala sa etylacetátom (2x). Spojené organické fázy sa premyli studeným 5% vodným roztokom K2CO3> potom 5% vodným roztokom KH2PO4, potom soľankou. Organický roztok sa vysušil nad bezvodým MgSO4, prefiltroval sa a odparila za vákua. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, eluovaním so zmesou MeOH-CH2Cl2, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (5.3), C39H58N6O8S2 (803,05), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 =803,5.
Preparatívny Príklad 16
Krok A: Zlúčenina (6.2)
OCH2Ph
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A, Zlúčenina (6.1) hydroxyprolín benzylester, hydrochlorid, reagoval so Zlúčeninou (4.9) z preparatívneho Príkladu 12, čím sa získala zlúčenina z názvu tohto odseku (6.2), C25H36N2O6 (460,56), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 461,2.
Krok B: Zlúčenina (6.3)
OCH2Ph
OCH2Ph
V podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 8, bola pripravená Zlúčenina (6.3), C25H34N2O6 (458,55), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 459,2.
-116Krok C: Zlúčenina (6.4)
Zmes Zlúčeniny (6.3) z Kroku B (1 g), 10%-né Pd/C (0,05 g) a EtOH (100 ml) sa premiešavala pod 101,3 kPa (1 atm.) H2 počas 6 hodín. Zmes sa prefiltrovala a odparila do sucha za vákua, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (6.4) (0,77 g), C18H28N2O6 (368,42), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 369, 2.
Preparatívny Príklad 17
Krok A: Zlúčenina (7.1)
Zlúčenina (6.4) z preparatívneho Príkladu 16, Krok C, reagovala so Zlúčeninou (2.3) z preparatívneho Príkladu 6, Krok B, v podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 2, Krok A, čím sa poskytla Zlúčenina (7.1), C36H54N6O9 (714,85), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 715,9.
Krok B: Zlúčenina (7.2)
-117Zlúčenina (7.1) reagovala v podstate rovnakým spôsobom ako preparatívny Príklad 7, Krok A, čím sa poskytla Zlúčenina (7.2), C36H52N6O9 (712,83), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 = 713,5.
Krok C: Zlúčenina (7.3)
Iboc-Chg
(7.3)
Zlúčenina (7.2) z Kroku B uvedeného vyššie, reagovala v podstate rovnakým spôsobom ako Preparatívny Príklad 8, Krok B, s 1,4-butánditiolom, čím sa získala zlúčenina z názvu tohto príkladu (7.3), C40H60N6O8S2 (817,07), hmotnostné spektrum (FAB) M+1 =817,5.
Použitím vyššie uvedených postupov boli pripravené zlúčeniny uvedené v pripojenej Tabuľke 2. Ako všeobecná poznámka ku všetkým Tabuľkám, ktoré sú tu pripojené, ako aj k Príkladom a Schémam v tomto opise vynálezu, ktorýkoľvek dusíkový atóm na otvorenom konci s nenaplnenou valenciou v chemických štruktúrach v Príkladoch a Tabuľkách označuje NH alebo v prípade koncového dusíka, -NH2, Podobne kyslíkový atóm na otvorenom konci s nenaplnenou valenciou v chemických štruktúrach v Príkladoch a Tabuľkách označuje -OH.
Syntéza v tuhej fáze:
Všeobecný postup kopulačných reakcií v tuhej fáze
Syntéza sa robila v reakčnej nádobe, ktorá bola zložená z polypropylénovej kazety striekačky vybavenej pri dne s polypropylénovou fritou. Fmoc-chránené aminokyseliny sa kopulovali podľa štandardnej techniky v tuhej fáze. Každá reakčná nádoba sa naplnila s 100 mg východiskovej Fmoc-Sieber živice (približne 0,03 mmol). Živica sa premyla 2 ml podielmi DMF (2 krát). Fmoc-ochranná skupina sa odstránila pomocou opracovania s 2 ml 2% (obj.) roztoku piperidínu v DMF počas 20 minút. Živica sá premyla 2 ml podielmi DMF (4 krát). Kopulácia sa robila v DMF
-118(2 ml), použitím 0,1 mmol Fmoc-aminokyseliny, 0,1 mmol HATU [O-(7- azabenzotriazol-l-ylj-I.I.S.S-tetrametyluróniumhexafluórfosfát] a 0,2 mmol DIPEA (N,Ndiizopropyletylamín). Po trepaní počas 2 hodín sa reakčná nádoba vysušila a živica sa premyla 2 ml podielmi DMF (4 krát). Kopulačný cyklus sa opakoval s nasledujúcou Fmoc-aminokyselinou alebo zakončovacou skupinou.
Všeobecný postup pre Dess-Martinovú oxidáciu v tuhej fáze
Syntéza sa viedla v reakčnej nádobe, ktorá bola zostavená z polypropylénovej kazety striekačky vybavenej pri dne s polypropylénovou fritou. Hydroxy-zlúčenina naviazaná na živicu (približne 0,03 mmol) sa opracovala roztokom 0,12 mmol Dess-Martinovho perjodičnanu a 0,12 mmol terc-BuOH v 2 ml DCM počas 4 hodín. Živica sa premyla 2 ml podielmi 20% (obj.) roztoku iPrOH v DCM, THF, a 50% (obj.) roztokom THF vo vode (4 krát), THF (4 krát) a DCM (4 krát).
Preparatívny Príklad 18
Príprava /V-Fmoc-2',3'-dimetoxyfenylglycínu, Zlúčenina (901)
CHO
(901A)
(901B·)
C901C)
-119Do roztoku kyanidu draselného (1,465 g, 22,5 mmol) a uhličitanu amónneho (5,045 g, 52,5 mmol) vo vode (15 ml) bol pridaný roztok 2,3-dimetoxybenzaldehydu 901A (2,5 g, 15 mmol) v etanole (15 ml). Reakčná zmes sa zahrievala pri 40 °C počas 24 hodín. Objem roztoku sa zmenšil ňa 10 ml odparením za zníženého tlaku. Pridala sa koncentrovaná kyselina chlorovodíková (15 ml) a zlúčenina 901B sa získala ako biela zrazenina. Zlúčenina 901B sa izolovala pomocou filtrácie (2,2 g,
9,3 mmol). Zlúčenina 901B sa rozpustila v 10% (hmotn.) vodnom roztoku hydroxidu sodného (15 ml) a výsledný roztok sa zahrieval pod refluxom počas 24 hodín. Pridala sa koncentrovaná kyselina chlorovodíková a pH sa upravilo na neutrálne (pH 7). Výsledný roztok obsahujúci zlúčeninu 901C sa odparil za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustil vo vodnom roztoku 5% hmotnostných hydrogenuhličitanu sodného (150 ml).
Roztok sa ochladil na 0 °C v ľadovom kúpeli a pridali sa 1,4-dioxán (30 ml) a roztok 9-fluorenylmetylsukcínimidyl-karbonát (2,7 g, 8 mmol) v 1,4-dioxáne (30 ml) pri 0 °C. Reakčná zmes sa ponechala zahriať na laboratórnu teplotu a premiešavala sa pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. 1,4-dioxán sa odparil za zníženého tlaku. Vodný roztok sa premyl dietyléterom. Pridala sa koncentrovaná kyselina chlorovodíková a pH sa upravilo na kyslé (pH 1). Pridal sa etylacetát, organická vrstva sa premyla vodou a soľankou. Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparilo za zníženého tlaku, čím sa poskytla požadovaná zlúčenina 901 ako biela penovitá tuhá látka (3,44 g, 7,9 mmol). MS (LCMS Elektrosprej) 434,1 MH+.
Preparatívny Príklad 19 Zlúčenina (801)
(801D) (801)
-120 Do roztoku N-Frnoc-fenylalanínu 801A (5 g, 12,9 mmol) v bezvodom DCM (22 ml) ochladenom na -30 °C v kúpeli suchý ľad-acetón bol postupne pridaný Nmetylpyrolidín (1,96 ml, 16,1 mmol) a metylchlórmravčan (1,2 ml, 15,5 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri -30 °C počas 1 hodiny a pridal sa roztok N,Odimetylhydroxylamínu, hydrochloridu, (1,51 g, 15,5 mol) a N-metylpyrolidínu (1,96 ml, 16,1 mmol) v bezvodom DCM (8 ml). Reakčná zmes sa ponechala zahriať na laboratórnu teplotu a premiešavala sa pri laboratórnej teplote počas noci. Pridal sa toluén a organická vrstva sa premyla zriedenou kyselinou chlorovodíkovou, vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a soľankou. Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparilo za zníženého tlaku, čím sa poskytla zlúčenina 801B (4 g, 9,29 mmol).
Do roztoku Red-AI (6,28 ml, 21,4 mmol) v bezvodom toluéne (8 ml) ochladenom na -20 °C v kúpeli suchý ľad-acetón bol pridaný roztok Zlúčeniny 801B (4 g, 9,29 mmol) v bezvodom toluéne (12 ml). Reakčná zmes sa premiešavala pri -20 °C počas 1,5 hodiny. Organická vrstva sa premyla zriedenou kyselinou chlorovodíkovou, vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a soľankou. Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparilo za zníženého tlaku a surový produkt 801C bol použitý v nasledujúcej reakcii bez ďalšieho čistenia.
Do roztoku Zlúčeniny 801C (približne 9,29 mmol) v hexáne (15 ml) bol pridaný postupne roztok kyanidu draselného (24 mg, 0,37 mmol) a tetrabutylamóniumjodid (34 mg, 0,092 mmol) vo vode (4 ml) a acetónkyanohydrín (1,27 ml, 13,9 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. Pridal sa etylacetát a organická vrstva sa premyla vodou a soľankou. Organická vrstva sa vysušila nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparilo za zníženého tlaku, čím sa poskytla zlúčenina 801D (2,4 g, 6,03 mmol).
Do roztoku Zlúčeniny 801D (2,4 g, 6,03 mmol) v 1,4-dioxáne (11 ml) bola pridaná koncentrovaná kyselina chlorovodíková (11 ml). Reakčná zmes sa zahrievala na 80 °C počas 3 hodín. Pridal sa etylacetát (25 ml) a voda (25 ml). Organická vrstva sa premyla soľankou a vysušila sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparilo za zníženého tlaku, čím sa poskytla požadovaná zlúčenina 801 ako biela penovitá tuhá látka (2 g, 4,8 mmol). MS (LCMS- 121 Elektrosprej) 418,1 MH+.
Schéma 8
- 122Príklad (301 J)
Schéma 8 - Zlúčenina (301 J)
(301 J)
Na živicu naviazané zlúčeniny 301 B, 301 C, 301 D, 301 E, 301F a 301G boli pripraveného podľa všeobecného postupu pre kopulačné reakcie v tuhej fáze, pričom sa začalo s 100 mg Fmoc-Sieber živice (0,03 mmol). Na živicu naviazaná zlúčenina 301G sa oxidovala na živicou viazanú zlúčeninu 301H podľa všeobecného postupu pre Dess-Martinovú oxidáciu v tuhej fáze. Na živicu naviazaná zlúčenina 301H sa opracovala so 4 ml roztoku 2% objemové TFA v DCM počas 5 minút. Filtrát bol pridaný do 1 ml AcOH a roztok sa skoncentroval pomocou vákuovej centrifugácie, čím sa poskytla zlúčenina 301J (0,0069 g, 29%-ný výťažok). MS (LCMS Elektrosprej) 771,2 MH+.
Použitím techniky syntézy v tuhej fáze uvedenej vyššie a nasledujúcich zoskupení pre rôzne funkčné skupiny v zlúčenine všeobecného vzorca 1, boli pripravené zlúčeniny v Tabuľke 3:
-W-:
O
Y-W-:
- 123-
-124-
- 125-
Η
- 126 VNV
-R3:
*w»
'VV' oh3 *V\A *VOH o
- 127-R2:
*w*
- 128 -R1:
R5
| -R5; | o ^R7 |
| -R7: | 1 R9 |
| -R9: | *VV* 1 H |
-R1’:
-R2’:
rvV* *W*
- 129-
- 130Tabuľka 3 - Zlúčeniny pripravené pomocou Syntézy v tuhej fáze
- 131 -
-132-
| Vzorec | Ki* trieda |
| B | |
| x | B |
| x | C |
| x | C |
| £ -#vw° | C |
| *r | C |
| y. Γ V^VťÝ5w~~ | C |
-133-
-134-
- 135-
| Vzorec | Ki* trieda |
| HO P í | C |
| HO r | C |
| x r | C |
| ΗΟ^^θ XaxXx | C |
| P | C |
| c | |
| P cH^· | B |
-136-
| Vzorec | Ki* trieda |
| C | |
| B | |
| C | |
| 9 ? | C |
| P | C |
| e. ? | C |
| P | C |
-137-
| Vzorec | Ki* trieda |
| Ä ? « ° I ° c'x?° | C |
| Z p T “ ! U Λ0 | C |
| (íj H B JL>ť* H P—' | C |
| c | |
| zw# | c |
| c | |
| c |
-138-
| Vzorec | Ki* trieda |
| C | |
| C | |
| C\ » η O κ 7~ X\ vXô' H5 0 T / 0 ‘ | C |
| íXsVXx/X' & Y °/-° | C |
| OH 70 | C |
| HO 0a/?Χ-/··ΓΚ’ ^γΧ Ί <^° <Γμ° | C |
| NH, j 0 r> X 1 μΑΥυατ %v j γ »γ.° | C |
- 139-
| Vzorec | Ki* trieda |
| P | B |
| B | |
| P | B |
| C | |
| P | C |
| P X^ÝťwA0 | C |
| C |
-140-
| Vzorec | Ki* trieda | |
| P | C | |
| I J r fl e o o L o | ||
| P | C | |
| < ΥΊ LÄ- | ||
| O Q L | o R t 0 Ί 0 6 | |
| F=\ | C | |
| 9 | ||
| B Γ) O | ||
| 0 0 | X O* \ w3««< | |
| i | C | |
| -/w | x | |
| C | ||
| \ | B | |
| 4^ | y>g° | |
| r 4> óh | C | |
| νγΙγΜγ1 |
-141 -
| Vzorec | Ki* trieda |
| \ | B |
| C | |
| J | B |
| x | |
| </ | B |
| z | |
| jC O rC | |
| / | C |
| P | A |
| a β P | A |
| ©^Υγ$ΛΓΛ |
-142-
| Vzorec | Ki* trieda |
| A | |
| B | |
| F | A |
| P WAp^Tgf^· | B |
| / . K | B |
| x ηΗί^Λ | B |
| C |
-143-
| Vzorec | Ki* trieda |
| í- | B |
| B | |
| . V ’íWW*' | B |
| B | |
| C | |
| + 1 V^lC,I >Q | B |
| oW<J | B |
- 144-
| Vzorec | Ki* trieda |
| p | B |
| P | B |
| p | B |
| P | B |
| ?O c/^r^ŕ© | C |
| O^rŽo | C |
| P, | A |
-145-
| Vzorec | Ki* trieda |
| P | B |
| P | B |
| B | |
| Q | B |
| < | |
| ^A\X> | B |
| / J | B |
| P | B |
- 146-
- 147-
| Vzorec | Ki* trieda |
| P | B |
| P | B |
| B | |
| Po | B |
| C | |
| B | |
| . ? | B |
- 148-
| Vzorec | Ki* trieda |
| B | |
| B | |
| P^ | B |
| B | |
| θ^Ρ | C |
| C | |
| ζλ^Χο | C |
-149-
| Vzorec | Ki* trieda |
| P | A |
| p | CO |
| P | A |
| P | A |
| c^WÝzgco | |
| P | B |
| P | A |
| • jujuJ | A |
| oW^o |
- 150-
| Vzorec | Ki* trieda |
| P | A |
| P | A |
| B | |
| p | B |
| í | A |
| P o’^Vwp | A |
| P C??A\y | B |
-151 -
| Vzorec | Ki* trieda |
| P | B |
| P | C |
| P | B |
| cWvJ? | B |
| P | B |
| P | B |
| oW^ | |
| cPPVx^c^ | C |
-152-
| Vzorec | Ki* trieda |
| . f | C |
| C | |
| AŕX | C |
| zOO~\V/laP qY’Y^O | B |
| zWťuM) ^Jj H 0 \ 0 cf'ť Q | B |
| B | |
| B |
-153-
| Vzorec | Ki* trieda |
| X . | A |
| B | |
| X oWô^Y | C |
| X o./ | C |
| B | |
| B | |
| B |
- 154 -
-155-
-156-
-157-
-158-
- 159-
- 160-
-161 -
-162-
o r r c ·
-163ŕ r. r r ' - r
-164-
-165-
| Vzorec | Ki* trieda |
| o | B |
| 0^0 (p | C |
| vO HO | |
| 1 JL? | B |
| ^y-4> c L © © &- | |
| <~Ό Γ) Wi< xľr ' ’ | B |
| CpujiSL | C |
| ^CvoX. Cr | C |
| <rO Q | C |
| 33 | C |
-166-
| Vzorec | Ki* trieda |
| B i | |
| γΟ HO | c |
| <~o ..Q ν-4> B L· <> ° | c |
| ίθΧ> >--Χ ο L ο ° ΧΤ ° | c |
| ofO φ ^yóYn^V 'V | c |
| X ο X | c |
| ofO Q | c |
-167-
| Vzorec | Ki* trieda |
| o Vo | C |
| V- | C |
| Α-γ« P | C |
| Vv1^' Y. o | C |
| 'Vy | C |
| V | C |
| C |
- 168-
- 169-
- 170-
| Vzorec | Ki* trieda |
| B | |
| C | |
| B | |
| B | |
| B | |
| B | |
| C |
-171 -
| Vzorec | Ki* trieda |
| C | |
| (P) ‘Ή- Αχ O o -j 0 0 | C |
| aÄwaaí^ o β J ä o | C |
| Q Λ+ ‘A“ Ρ’Υ/'ίΆγ^τ^Ά'· o O -Z* 0 o | C |
| ^^Ργ1 iAÄí'P' try 0 0 J o o | C |
| vXAvA H g 0 b? 0 O | B |
| X A 0 | C |
- 172-
| Vzorec | Ki* trieda |
| 0 o J 0 | C I |
| 0 0 4 0 0 | c |
| B | |
| >U&WrW o 0 (. 0 - 0 | C |
| ΛΧΡφνΧ | B |
| ΑΑθ°γΛΑν 0 o O 0 | C |
| ΑΡχΧ· | C |
- 173-
| Vzorec | Ki* trieda |
| C | |
| C | |
| B | |
| +<4 0 J 0 0 | B |
| -+v>4 | C |
| C | |
| C |
-174 -
| Vzorec | Ki* trieda | |
| Y r-H | .Q | C |
| WiW O J 0 | Y | |
| ----- / |
Ďalšie zlúčeniny, ktoré boli pripravené a ich rozsahy aktivity (Ki*) sú dané v pripojených Tabuľkách 4 a 5. Postup použitý na prípravu zlúčenín v Tabuľkách 4 a 5 je uvedený nižšie.
I) Syntéza medziproduktov pre zlúčeniny v Tabuľkách 4 a 5
Príklad 1
Syntéza 4,4-dimetyl-prolín-metylesteru (H-Pro(4,4-diMe)-OMe)
Krok 1
Syntéza terc-butyl-/V-terc-butoxykarbonyl-4-metyl-L-pyroglutamátu (Boc-PyroGlu(4metyl)-O-terc-Bu)
Do roztoku ŕerc-butyl-A/-terc-butoxykarbonyl-pyroglutamátu (11,5 g, 40 mmol) v THF (200 ml) premiešavaného pri -78 °C, bol pridaný roztok 1 mol/l hexametyldisilazidu lítneho v THF (42 ml, 42 mmol) po kvapkách počas 5 minút. Po 30 minútach sa pridal metyljodid (3,11 ml, 50 mmol). Po ďalších 2 hodinách pri -78 °C sa chladiaci kúpeľ odstránil a pridal sa na 50% nasýtený vodný roztok chloridu
- 175amónneho (200 ml). Roztok sa premiešaval počas 20 minút, potom sa extrahoval éterom (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli soľankou (200 ml), vysušili sa (Na2SO4), prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatogratoval so zmesou 1:1 etylacetát/hexány, čím sa poskytol Boc-PyroGlu(4-metyl)-O-ferc-Bu (10,6 gramov, 35,4 mmol, 88%) ako zmes izomérov (2:1 cis ku trans).
Krok 2
Syntéza ferc-butyl-/V-ŕerc-butoxykarbonyl-4I4-dimetyl-L-pyroglutamátu (Boc-PyroGI u (4,4-d i m etyl j-O-terc-B u)
Do roztoku ŕerc-butyl-A/-terc-butoxykarbonyl-4-metyl-L-pyroglutamátu (1,2 g, 4,0 mmol) v tetrahydrofuráne (20ml) premiešavaného pri -78 °C bol pridaný roztok 1 mol/l hexametyldisilazidu lítia v tetrahydrofuráne (4,4 ml, 4,4 mmol) po kvapkách počas 5 minút. Po 30 minútach sa pridal metyljodid (0,33 ml, 5,2 mmol). Po ďalších 3 hodinách pri -78 °C sa chladiaci kúpeľ odstránil a pridal sa na 50% nasýtený vodný roztok chloridu amónneho (40 ml). Roztok sa premiešaval počas 20 minút, potom sa extrahoval éterom (2x 50 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodou (2x 25 ml), nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2x 25 ml), soľankou (50 ml), vysušili sa (Na2SO4), prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol BocPyroGlu-(4,4-dimetyl)-O-terc-Bu (0,673 g, 54%).
Krok 3
Syntéza ŕerc-butyl-/\/-terc-butoxykarbonyl-4,4-dimetylprolínu (Boc-Pro-(4,4-dimetyl)O-terc-Bu)
N
- 176 Modifikácia známeho postupu: Pedregal, C.; Ezquerra, J.; Escribano, A.;
Carreno, M.C.; Garcia Ruano, J.L. Tetrahedron Letters 1994, 35 (13), 2053 - 2056).
Do roztoku ferc-butyl-A/-ŕerc-butoxykarbonyl-4,4-dimetylpyroglutamátu (2,0 mmol) v tetrahydrofuráne (5 ml) premiešavaného pri -78 °C bol pridaný roztok 1 mol/l trietylbórhydridu lítneho v tetrahydrofuráne (2,4 ml, 2,4 mmol) po kvapkách počas 5 minút. Po 30 minútach sa chladiaci kúpeľ odstránil a pridal sa nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (5 ml). Reakčná zmes sa ponorila do kúpeľa ľad/voda a pridal sa 30%-ný vodný roztok peroxidu vodíka (10 kvapiek). Roztok sa premiešaval počas 20 minút pri 0 °C, potom sa reakčná zmes skoncentrovala za vákua, čím sa odstránil tetrahydrofurán. Vodný roztok sa zriedil vodou (10 ml) a extrahoval sa dichlórmetánom (3x 40 ml). Organické vrstvy sa vysušili (Na2SO4), prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (20 ml) a trietylsiláne (310 μΙ, 2,0 mmol), potom sa ochladil na -78 °C a pridal sa fluorid boritý-dietyléterát (270 μΙ, 2,13 mmol) po kvapkách. Premiešavanie pokračovalo počas 30 minút, vtedy sa pridal ďalší trietylsilán (310 μΙ, 2,0 mmol) a fluorid boritý-dietyléterat (270 μΙ, 2,13 mmol). Po premiešavaní pri -78 °C počas ďalších dvoch hodín sa chladiaci kúpeľ odstránil a pridal sa nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (4 ml). Po 5 minútach sa zmes extrahovala dichlórmetánom (3x 40 ml). Organické vrstvy sa vysušili (Na2SO4), prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol Boc-Pro(4,4-dimetyl)-0-terc-Bu.
Krok 4: Syntéza 4,4-dimetylprolínu (Η-Pro (4,4-dimetyl)-OH)
Roztok terc-butyl-/V-terc-butoxykarbonyl-4,4-dimetylprolínu v dichlórmetáne (5 ml) a kyselina trifluóroctová (5ml) sa premiešavali pri laboratórnej teplote počas piatich hodín. Roztok sa skoncentroval, vysušil sa za vysokého vákua a zobral sa do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
-177 Krok 5
Syntéza A/-ferc-butoxykarbonyl-4,4-dimetylprolínu (Boc-Pro-(4,4dimetyl)-OH)
Do roztoku 4,4-dimetylprolínu, trifluóroctovej soli (1,5 mmol) v dioxáne (7 ml), acetonitrilu (12 ml) a diizopropyletylamínu (700 μΙ, 4 mmol) bol pridaný roztok di-terc-butyl-dikarbonátu (475 mg, 2,18 mmol) v acetonitrile (5 ml). Po premiešavaní počas 12 hodín pri laboratórnej teplote sa roztok skoncentroval za vákua, rozpustil sa v nasýtenom vodnom roztoku hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a premyl dietyléterom (3x 40 ml). Vodná vrstva sa okyslila na pH = 3 s kyselinou citrónovou, potom sa extrahovala dichlórmetánom (3x 40 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili nad síranom sodným, prefiltrovali a skoncentrovali.
Krok 6
Syntéza 4,4-dimetylprolín-metylesteru, hydrochloridová soľ (HCI.HPro(4,4-dimetyl)OMe)
Do roztoku Boc-Pro-(4,4-diMe)-OH (0,5 g, 2,06 mmol) v bezvodom metanole (8 ml) bol pridaný po kvapkách tionylchlorid (448 μΙ, 6,18 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala počas šiestich hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa skoncentrovala na amorfnú tuhú látku (377 mg, 95%).
Príklad 2
Všeobecný postup syntézy N-terc-butoxykarbonyl-4-alkyl-4-metyl-prolinu
- 178 /Me
Zlúčeniny, kde R skupinou je alyl a benzyl, boli syntetizované podľa krokov 1 až 4 uvedených nižšie:
Krok 1
Syntéza ŕerc-butyl-A/-íerc-butoxykarbonyl-4-alkyl-4-metyl-L-pyroglutamátu
R Μθ
Do roztoku íerc-butyl-/V-ŕerc-butoxykarbonyl-4-metyl-L-pyroglutamátu (10,2 g, mmol) (pozri Príklad 1, krok 1) v tetrahydrofuráne (170 ml) premiešavaného pri 78 °C, bol pridaný roztok 1 mol/l hexametyldisilazidu lítia v tetrahydrofuráne (37,5 ml, 37,5 mmol) po kvapkách počas 5 minút. Po 40 minútach sa pridal alkylhalogenid (61,4 mmol). Po ďalších 3 hodinách pri -78 °C sa chladiaci kúpeľ odstránil a pridal sa na 50% nasýtený vodný roztok chloridu amónneho (200 ml). Roztok sa premiešaval počas 20 minút, potom sa extrahoval éterom (2x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa zriedili hexánmi (150 ml) a premyli nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml), vodou (2x 100 ml) a soľankou (100 ml), vysušili sa (Na2SO4), prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval použitím zmesi 20% etylacetátu v hexánoch, čím sa poskytol čistý terc-buiy\-N-tercbutoxykarbonyl-4-alkyl-4-metyl-L-pyroglutamát.
Krok 2: Syntéza terc-butyl-A/-terc-butoxykarbonyl-4-alkyl-4-metylprolínu
-179-
Modifikácia známeho postupu: Pedregal, C.; Ezquerra, J.; Escribano, A.; Carreno, M.C.; Garcia Ruano, J. L. Tetrahedron Letters (1994) 35 (13), 2053 2056).
Do roztoku terc-butyl-A/-terc-butoxykarbonyl-4-alkyl-4-metylpyroglutamátu (16,6 mmol) v tetrahydrofuráne (40 ml) premiešavaného pri -78 °C bol pridaný roztok 1 mol/l trietylbórhydridu lítneho v tetrahydrofuráne (20 ml, 20 mmol) po kvapkách počas 10 minút. Po 120 minútach sa chladiaci kúpeľ ponechal zahriať sa na -25 °C, potom sa pridal nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (40 ml). Reakčná zmes sa ponorila do kúpeľa ľad/voda a pridal sa 30%-ný vodný roztok peroxidu vodíka (4 ml). Roztok sa premiešaval počas 10 minút pri 0 °C, potom sa reakčná zmes skoncentrovala za vákua, čím sa odstránil tetrahydrofurán. Vodný roztok sa zriedil vodou (300 ml) a extrahoval sa dichlórmetánom (3x 200 ml). Organické vrstvy sa vysušili (síranom sodným), prefiitrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (100 ml) a trietylsiláne (2,6 ml, mmol), potom sa ochladil na -78 °C a po kvapkách sa pridal fluorid boritý-dietyléterát (2,2 ml, mmol). Premiešavanie pokračovalo počas 1 hodiny, potom sa pridal ďalší trietylsilán (2,6 ml, mmol) a fluorid boritý-dietyléterát (2,2 ml, mmol). Po premiešavaní pri -78 °C počas ďalších 4 hodín sa chladiaci kúpeľ odstránil a pridal sa nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (30 ml) a voda (150 ml). Po 5 minútach sa zmes extrahovala dichlórmetánom (3x 200 ml). Organické vrstvy sa vysušili (Na2SO4), prefiitrovali a skoncentrovali.
Krok 3: Syntéza 4-alkyl-4-metylprolínu r Me
- 180 Roztok ŕerc-butyl-/V-ŕerc-butoxykarbonyl-4-alkyl-4-metylprolínu v dichlórmetáne (5 ml) a kyseline trifluóroctovej (5 ml) sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 5 hodín. Pridal sa toluén a roztok sa skoncentroval a potom sa vysušil za vysokého vákua.
Krok 4: Syntéza /V-terc-butoxykarbonyl-4-alkyl-4-metyprolínu
Do roztoku 4-alkyl-4-metylprolínu, trifluóroctová soľ, (1,5 mmol) v dioxáne (7 ml), acetonitrile (12 ml) a diizopropyletylamíne (700 μΙ, 4 mmol) bol pridaný roztok di-terc-butyl-dikarbonátu (475 mg, 2,18 mmol) v acetonitrile (5 ml). Po premiešavaní počas 12 hodín pri laboratórnej teplote sa roztok skoncentroval za vákua, rozpustil v nasýtenom vodnom roztoku hydrogénuhličitanu sodného (50 ml) a premyl dietyléterom (3x 40 ml). Vodná vrstva sa okyslila na pH = 3 s roztokom 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej, potom sa extrahovala dichlórmetánom (3x 40 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili (Na2SC>4), prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie použitím zmesi 1:1 etylacetát/hexány s roztokom 1% kyseliny octovej.
Príklad 3
Syntéza /V-terc-butoxykarbonyl-4-propyl-4-metylprolínu
Roztok /V-ŕerc-butoxykarbonyl-4-alyl-4-metylprolínu (400 mg, 1,48 mmol) (pozri Príklad 2 Krok 4) a 10%-né Pd na uhlíku (400 mg) v metanole (20 ml) sa
- 181 hydrogenoval pri 345 kPa (50 psi) počas 4 hodín. Zmes sa prefiltrovala a skoncentrovala.
Príklad 4
Syntéza Boc-4-cyklohexylprolínu
Roztok komerčne dostupného Boc-4-fenylprolínu (750 mg) a 5%-né Rh na uhlíku (750 mg) v metanole (15 ml) sa hydrogenoval pri 345 kPa (50 psi) počas 24 hodín. Zmes sa prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytlo 730 mg produktu.
Príklad 5
Príprava kyseliny fluorenylmetoxykarbonyl-Pro-(4-spirocyklopentán)-karboxylovej
Krok 1: Syntéza Boc-pyroglutamát-(4-alyl) terc-butylesteru
Do ochladeného (-78 °C) roztoku komerčne dostupného /V-Boc-tertbutylpyroglutamátu (10 g, 35,1 mmol) v THF (175 ml) bol pridaný hexametyldisilazid sodný (36,8 ml, 36,8 mmol) počas piatich minút. Premiešavanie pokračovalo počas tridsiatich minút. Do prvého roztoku sa po kvapkách pridal roztok alylbromidu (6,1
- 182ml, 70,2 mmol) v THF (39 ml). Po dvoch hodinách pri -78 °C sa reakcia zastavila pomalým pridaním nasýteného roztoku chloridu amónneho (50 ml). Reakčná zmes sa potom zriedila etylacetátom a vrstvy sa oddelili. Organická vrstva sa vysušila nad
I síranom sodným a skoncentrovala. Rýchla kolónová chromatografia, uskutočnená so zmesou 2:8 etylacetát:hexány poskytla produkt (6 g, 53%). NMR δ ppm (CDCh): 5,7 (m, 1H), 5,1 (dd, 2H), 4,4 (m, 1H), 2,6 (m, 2H), 2,4 (m, 1H), 1,8 - 2,2 (m, 1H),
1,45 (s, 9H),1,4 (s, 9H).
Krok 2: Syntéza /\/-Boc-pyroglutamát-(4,4-dialyl) ŕerc-butylesteru
A/-Boc-pyroglutamát-(4-alyl)-ŕerc-butylester získaný v Kroku 1 uvedenom vyššie (2,68 g, 8,24 mmol) sa podrobil druhej alkylácii s alylbromidom za podobných podmienok. Rýchla chromatografia so zmesou 15:85 etylacetát:hexány poskytla 2,13 g produkt (71 %) ako číry olej.
Krok 3: Syntéza Boc-Pro-(4,4-dialyl) ŕerc-butylesteru
Časť a: Do ochladeného (-78 °C) roztoku Boc-PyroGlu-(4,4-dialyl)-ŕercbutylesteru (2,13 g, 5,83 mmol) v tetrahydrofuráne (14 ml) bol pridaný trietylbórhydrid lítny (roztok 1 mol/l v tetrahydrofuráne, 7,29 ml, 7,29 mmol) počas piatich minút. Po dvoch hodinách pri -78 °C sa reakčná zmes zahriala na 0 °C a reakcia sa zastavila pomalým pridaním nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a 30% peroxidu vodíka (20 kvapiek). Premiešavanie pokračovalo počas 20 minút. Tetrahydrofurán sa odstránil za zníženého tlaku a zostávajúci hustý biely
- 183 zbytok sa zriedil vodou (80 ml) a extrahoval sa tri krát dichlórmetánom. Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala a použila sa do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
Časť b): Do produktu získaného v časti (a) v dichlórmetáne (14 ml) bol pridaný trietylsilán (931 μΙ, 5,83 mmol) nasledovaný fluoridom boritým-dietyléterátom (776 μΙ, 6,12 mmol). Po tridsiatich minútach sa pridal ďalší trietylsilán (931 μΙ, 5,83 mmol) a fluorid boritý-dietyléterát (776 μΙ, 6,12 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala pri -78 °C počas troch hodín, potom sa reakcia zastavila pomalým pridaním nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a vody. Reakčná zmes sa extrahovala dichlórmetánom a organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala. Rýchla kolónová chromatograf i a so zmesou 15% etylacetátu v hexánoch poskytla 1,07 g bezfarebného oleja (57%).
NMR δ ppm (CDCI3): 5,7 - 5,8 (m, 2H), 5,1 (m, 4H), 4,1 - 4,2 (2dd’s, 1H rotaméry),
3,5 - 3,3 (dd, 1H) a 3,2 (dd, 1H) rotaméry, 2,2 - 2,0 (m, 5H), 1,7 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,43 (s, 9H).
Krok 4: Syntéza Boc-Pro-4-spirocyklopentén)-terc-butylesteru
Do Boc-Pro-(4,4-dialyl)-ferc-butylesteru (1,07 g, 3,31 mmol) v dichlórmetáne (66 ml) bol pridaný 5% chlorid bis(tricyklohexylfosfín)benzylidén-ruteničitý (Grubbsov katalyzátor) a zmes sa zahrievala pod refluxom počas 1,5 hodiny. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa čistil pomocou rýchlej kolónovej chromatografie so zmesou 15% etylacetátu v hexánoch. Získal sa žltý olej (0,57 g, 53%). NMR δ ppm(CDCI3): 5,56 (široký s, 2H), 4,2 a 4,1 (t, 1H, rotaméry),
3,2 - 3,5 (m, 2H), 2,2 - 2,5 (m, 5H), 1,9 (dd, 1H) 1,47 a1,46 (2s's, 9H, rotaméry),
1,45 a 1,44 (2s's, 9H, rotaméry).
-184-
Krok 5: Syntéza Boc-Pro-(4-spirocyklopentán)-terc-butylesteru
Roztok Boc-Pro-(4-spirocyklopentén)-ferc-butylesteru (1,12 g) v metanole (18 ml), voda (4 ml) a kyselina octová (4 ml) sa umiestnili v Parrovej trepačke a hydrogenoval sa počas troch hodín pri 241 kPa (35 psi) v prítomnosti 10%-ného paládia na uhlíku (300 mg). Katalyzátor sa odfiltroval a filtrát sa skoncentroval na bezfarebný olej (1,26 g). NMR δ ppm (CDCI3): 4,1 a 4,2 (t, 1H, rotaméry, 3,4 (d, 1H), 3,2 (d, 1H), 2,1 (m, 1H), 1,9 (m, 1H), 1,6-1,7 (m, 10H), 1,5 (3s's, 18H, rotaméry).
Krok 6: Syntéza Fmoc-Pro-(4-spirocyklopentán)-karboxylovej kyseliny
Boc-Pro-(4-spirocyklopentán)-terc-butylester (1,26,3,9 mmol) sa opracoval dichlórmetánom (10 ml) a kyselinou trifluóroctovou (15 ml) počas troch hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala a získaný žltý olej sa rozpustil vo vode (6 ml). Fluorenylmetyl-sukcinylkarbonát (1,45 g, 4,3 mmol) rozpustený v dioxáne (6 ml) bol pridaný po častiach, nasledoval prídavok uhličitanu draselného (2,16 g, 15,6 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala počas 18 hodín a skoncentrovala sa. Zostávajúci zbytok sa zriedil nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a premyl dietyléterom (3x 10 ml). Vodná vrstva sa potom okyslila na pH hodnotu asi 1 roztokom 1 mol/l hydrogensiričitanu sodného a extrahovala sa etylacetátom. Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala na béžovú penu (1,3 g, 100%).
-185Príklad 6
Syntéza Boc-Pro-(4t-NH-(Fmoc))-OH
Krok 1: Syntéza benzylesteru Na-terc-butoxykarbonyl-c/s-4-chlór-L-prolínu
Zmes komerčne dostupného A/-terc-butoxykarbonyl-ŕrans-4-hydroxy-prolínu (8,79 g, 38 mmol), uhličitanu draselného (13,0 g, 94 mmol), benzylbromidu (4,5 ml, 38 mmol) a dimetylformamidu (150 ml) sa premiešavala počas 18 hodín. Prídavok etylacetátu (100 ml) bol nasledovaný filtráciou. Biely mútny filtrát sa vyčíril pomocou prídavku 1 mol/l HCI (100 ml). Vrstvy sa oddelili a vodná vrstva sa extrahovala ďalším etylacetátom (2x 100 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodou (2x 50 ml), vysušili (síranom sodným), prefiitrovali a skoncentrovali. Do surového benzylesteru sa pridal toluén a roztok sa prefiltroval a znova skoncentroval. Pridal sa dichlórmetán (70 ml) a chlorid uhličitý (70 ml), nasledoval trifenylfosfín (21,11 g, 80 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala počas 10 hodín, reakcia sa zastavila etanolom (7 ml) a zmes sa premiešavala počas 5 ďalších hodín. Roztok sa skoncentroval na približne 100 ml, potom sa pridal dichlórmetán (40 ml) nasledovaný prídavkom éteru (200 ml) za premiešavania. Roztok sa ochladil počas 4 hodín, prefiltroval a skoncentroval, čím poskytol žlto-hnedý olej, ktorý sa čistil pomocou rýchlej chromatografie použitím zmesi éter/hexán/dichlórmetán 2:2:1, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto odseku (9,13 g, 26,9 mmol, 71 %) ako biela tuhá látka.
- 186Krok 2: Syntéza benzvlesteru N“-ferc-butoxykarbonyl-ŕrans-4-azido-L-prolínu
Roztok benzylesteru N<x-terc-butoxykarbonyl-c/s-4-chlór-L-prolínu, (9,0 g,
26,5 mmol) a azidu sodného (7,36 g, 113 mmol) v dimetylformamide (270 ml) sa zahrieval pri 75 °C počas 2 dní. Pridala sa voda (100 ml) a reakčná zmes sa extrahovala etylacetátom (3x 100 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodou (3x 50 ml), vysušili (síranom sodným), prefiltrovali a skoncentrovali. Tento olej sa čistil pomocou rýchlej chromatografie použitím zmesi etylacetát/hexány 1:1, čím poskytol zlúčeninu z názvu tohto odseku (8,59 g, 24,8 mmol, 94%).
Krok 3: Syntéza Boc-Pro-(4t-NH(Fmoc))-OH
Zmes benzylesteru /V-a-terc-butoxykarbonyl-ŕrans^-azido-L-prolínu, (8,59 g, 24,8 mmol) a 10% paládia na uhlíku (900 mg) v etanole (500 ml) sa hydrogenovala pri 345 kPa (50 psi) počas 14 hodín použitím Parrovej hydrogenačnej aparatúry. Zmes sa prefiltrovala, skoncentrovala, rozpustila v metanole (60 ml), prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol bezfarebný olej. Tento olej sa rozpustil vo vode (53 ml), ktorá obsahovala uhličitan sodný (5,31 g, 50, 1 mmol) a pridal sa roztok fluorenylmetyl-sukcinyl-karbonátu (8,37 g, 29,8 mmol) v dioxáne (60 ml) počas 40 minút. Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 17 hodín, potom sa skoncentrovala, čím sa odstránil
-187dioxán a zriedila sa vodou (200 ml). Roztok sa premyl éterom (3x 100 ml). Hodnota pH vodného roztoku sa upravila na 2 prídavkom kyseliny citrónovej (pozor! penenie!) a vody (100 ml). Zmes sa extrahovala dichlórmetánom (400 ml, 100 ml, 100 ml) a spojené organické vrstvy sa vysušili (síranom sodným), prefiltrovali sa a skoncentrovali, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu.
Príklad 7
Syntéza A/-ŕerc-butoxykarbonyl-4-frans-(A/-fluorenylmetyloxykarbonyl-aminometyl)-Lprolínu (Boc-Pro(4t-MeNHFmoc)-OH)
Krok 1
Syntéza benzylesteru terc-butoxykarbonyl-c/s-4-hydroxy-L-prolínu (Boc-Pro(4-c/sOH)-OBn)
OH
Do zmesi c/s-hydroxy-L-prolínu (5 g, 38,1 mmol) v benzéne (45 ml) a benzylalkoholu (45 ml) bol pridaný monohydrát kyseliny p-toluénsulfónovej (7,6 g, 40,0 mmol). Reakčná zmes sa zahrievala pri 125 °C počas 20 hodín, pričom sa voda (2 ml) odstránila použitím Dean-Starkovho odlučovača. Roztok sa prefiltroval kým bol ešte horúci, a potom sa pridal éter (150 ml). Roztok sa ponechal ochladiť počas troch hodín pri laboratórnej teplote, potom tri hodiny pri 4 °C. výsledná tuhá
- 188 látka sa oddelila, premyla éterom (100 ml) a vysušila za vákua počas 1 hodiny, čím sa poskytlo 13,5 gramov bielej tuhej látky. Táto tuhá látka sa rozpustila v dioxáne (40 ml) a diizopropyletylamíne (7, 6 ml), a potom sa pridal di-ŕerc-butyl-dikarbonát (10 g, 45,8 mmol) počas 5 minút za použitia ľadového kúpeľa na udržanie konštantnej reakčnej teploty. Po 10 hodinách pri laboratórnej teplote sa reakčná zmes vyliala do studenej vody (200 ml) a extrahovala sa etylacetátom (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodou (3x 100ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (50 ml), vysušili sa (síranom sodným), prefiltrovala a skoncentrovali. Surový produkt sa čistil pomocou rýchlej chromatografie použitím zmesi 40 až 60% etylacetátu v hexánoch, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (10,04 g, 31,24 mmol, 82%).
Krok 2
Syntéza benzylesteru A/-ferc-butoxykarbonyl-c/s-4-metylsulfonyloxy-L-prolínu (BocPro (4-c/s-OMs)-OBn)
O O
Do roztoku Boc-Pro (4-c/s-OH)-OBn (8,45 g, 26,3 mmol) v pyridíne (65 ml) pri 0 °C bol pridaný metánsulfonylchlorid (3,4 ml, 44 mmol) po kvapkách počas 7 minút. Reakčná zmes sa ponechala zahriať sa na laboratórnu teplotu počas 2 hodín, potom sa premiešavala počas noci. Roztok 10% vody v pyridíne (20 ml) bol pridaný počas 15 minút a reakčná zmes sa skoncentrovala. Zvyšok sa rozpustila vo vode a extrahoval sa etylacetátom (2x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodou (2x 50 ml) nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (50 ml), vysušili sa (síranom sodným), prefiltrovali a skoncentrovali. Výsledný zbytok sa rozpustil v toluéne (100
-189ml) a skoncentroval sa, čím sa odstránili stopy pyridínu. Zvyšok sa vysušil za vákua počas 30 minút, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (10,7 g, 102%), potom sa použila v nasledujúcom kroku bez čistenia.
Krok 3
Benzylester /V-terc-butoxykarbonyl-trans-4R-kyano-L-prolínu (Boc-Pro(4-ŕra/is-CN)OBn)
CN
Roztok Boc-Pro-(4-c/s-OMs)-OBn (10,7 g, 26,3 mmol) a tetrabutylamóniumkyanidu (15,0 g, 56 mmol) v dimetylformamide (100 ml) sa zahrievala v olejovom kúpeli pri 55 °C počas 28 hodín. Po ochladení sa pridala voda (150 ml) a zmes sa extrahovala etylacetátom (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodou (3x 100 ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (100 ml), vysušili sa (síranom sodným), prefiltrovali a skoncentrovali. Výsledný zbytok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie (1:1 éter/hexány) a potom sa rekryštalizoval zo zmesi etylacetát/hexány, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (2,40 g, 7,26 mmol, 28%).
Krok 4 /V-terc-Butoxykarbonyl-4-ŕrans-/V-fluorenylmetyloxykarbonyl-aminometyl)-L-prolín (Boc-Pro(4t-MeNHFmoc)-OH)
O
-190 Zmes zlúčeniny z Kroku 3 uvedeného vyššie (2,31 g, 7 mmol), vody (10 ml), metanolu (85 ml) a 10% paládia na uhlíku (700 mg) sa hydrogenovala pri 345 kPa (50 psi) počas 11 hodín použitím Parrovho hydrogenačného prístroja. Zmes sa prefiltrovala a skoncentrovala. Ku zvyšku sa pridali voda (15 ml) a uhličitan sodný (1,5 g, 14,2 mmol). Roztok fluorenylmetylsukcinylkarbonátu (2,36 g, 7,0 mmol) v dioxáne (17 ml) sa pridal počas 5 minút a premiešavanie pokračovalo počas 28 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua na 15 ml objem a pridala sa voda (100 ml). Roztok sa premyl éterom (3x 75 ml). Hodnota pH vodného roztoku sa upravila na 2 prídavkom kyseliny citrónovej (približne 20 g, pozor! penenie!) a vody (100 ml). Zmes sa extrahovala dichlórmetánom (4x 100 ml), a spojené organické vrstvy sa vysušili (síranom sodným), prefiltrovali a skoncentrovali. Surový produkt obsahoval veľa nečistôt, čo vyžadovalo tri kroky čistenia. Surový produkt sa rozpustil v dichlórmetáne (50 ml) a kyseline trifluóroctovej (50 ml) a premiešaval sa počas 5 hodín pred tým, ako sa skoncentroval. Zvyšok sa čistil pomocou preparatívnej HPLC na obrátených fázach. Čistý 4-(/Vfluorenylmetyloxykarbonyl-aminometyl)prolín, trifluóracetátová soľ (1,887 g, 3,93 mmol), sa rozpustil v dioxáne (10 ml), acetonitrile (20 ml) a diizopropyletylamíne (1,4 ml, 8 mmol).
Do reakčnej zmesi bol pridaný roztok di-terc-butyldikarbonátu (1,1 g, 5 mmol) v dioxáne (5 ml). Po premiešavaní počas 18 hodín sa pH roztoku upravilo na 2 prídavkom kyseliny citrónovej (pozor! penenie!) a vody (100 ml). Zmes sa extrahovala etylacetátom (3x 150 ml) a spojené organické vrstvy sa premyli nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (100 ml), vysušili sa (síranom sodným), prefiltrovali a skoncentrovali. Surový produkt sa rozpustil v nasýtenom vodnom roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a premyl éterom (3x 75 ml). Vodná vrstva sa upravila na pH = 3 prídavkom kyseliny citrónovej, potom sa extrahovala dichlórmetánom (4x 100 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili (síranom sodným), prefiltrovali a skoncentrovali sa na zlúčeninu z názvu tohto príkladu (1,373 g, 2,94 mmol, 42%).
Príklad 8
Syntéza 3,4-izopropylidénprolinolu
- 191 Krok 1: Cyklopropanačná reakcia (Tetrahedron Lett. 1993, 34 (16) 2691 a 2695)
Do premiešavaného roztoku izopropyltrifenyl-fosfóniumjodidu (4,14 g, 9,58 mmol) v tetrahydrofuráne (60 ml) pri 0 °C sa pridalo n-butyllítium (1,6 mol/l v hexánoch, 5,64 ml, 9,02 mmol) počas 5 minút Po 30 minútach sa pridal roztok enamidu ((5F?,7S)-5-fenyl-5,6,7,7a-tetrahydro-6-oxapyrolizín-3-ónu) (1,206 gramov, 6,0 mmol) (syntézu východiskového enamidového materiálu pozri v J. Org. Chem. 1999, 64 (2), 547) v tetrahydrofuráne (40 ml) počas 10 minút. Po ďalších 10 minútach sa chladiaci kúpeľ odstránil a reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 4 hodín. Reakčná zmes sa vyliala do vody (400 ml) a extrahovala sa dietyléterom (400 ml) a etylacetátom (2x 400 ml). Spojené organické extrakty sa vysušili síranom sodným, prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol požadovaný surový produkt. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie eluovaním so zmesou 3:5:2 etylacetát/hexány/dichlórmetán, čím sa poskytol čistý cyklopropanovaný produkt (750 mg, 3,08 mmol, 51%).
Krok 2: Syntéza 3,4-izopropylidénprolinolu P[3,4-(diMe-cyklopropyl)]-alkoholu) (J.
-192 Zmes produktu získaného v kroku 1 uvedenom vyššie (1,23 gramov, 5,06 mmol) a hydridu hlinitolítneho (1,0 mol/l v THF, 15 ml, 15 mmol) sa zahrievala pod refluxom počas 5 hodín. Po ochladení na 0 °C sa zostávajúci hydrid hlinitý pozorne odstránil pridaním po kvapkách nasýteného vodného roztoku síranu sodného (1,5 ml) počas 15 minút. Zmes sa zriedila etylacetátom (40 ml) a potom sa prefiltrovala cez Celíte. Filtrát sa vysušil síranom sodným, prefiltroval a skoncentroval, čím sa poskytol surový /V-benzyl-aminoalkohol (1,25 gramov), ktorý sa preniesol do ďalšieho kroku bez ďalšieho čistenia. Roztok surového A/-benzyl-aminoalkoholu (1,25 gramov, 5,06 mmol) v zmesi 1:1 kyselina octová/etylacetát (30 ml) s 10%-né Pd/C (1 gram) sa hydrogenoval pri 345 kPa (50 psi) počas 16 hodín použitím Parrovho hydrogenačného prístroja. Reakčná zmes sa prefiltrovala, čím sa odstránil na uhlíku založený katalyzátor a filtrát sa skoncentroval. Zvyšok sa rozpustil vo vode (30 ml) a pH sa upravilo na hodnotu 13 roztokom 50% NaOH. Zmes sa extrahovala éterom (3x 60 ml). Spojené extrakty sa vysušili síranom sodným, prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol surový aminoalkohol (485 mg, 3,43 mmol). Tento materiál sa zobral do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
Príklad 9
Syntéza kyseliny iBoc-G(Chx)-Pro(3,4-izopropylidén)-karboxylovej .OH
Krok 1: Syntéza izobutyloxykarbonyl-cyklohexylglycínu (Boc-G(Chx)-OH)
.OH
-193Do roztoku komerčne dostupného cyklohexylglycínu, hydrochloridu (15 g,
77,4 mmol), v acetonitrile (320 ml) a vode (320 ml) bol pridaný uhličitan draselný. Do číreho roztoku sa pridal izobutylchlórmravčan (11,1 ml, 85,1 mmol) počas 15 minút a reakčná zmes sa premiešavala počas 17 hodín. Acetonitril sa odstránil za zníženého tlaku a zostávajúca vodná vrstva sa extrahovala dvakrát éterom (100 ml). Vodná vrstva sa potom okyslila na pH 1 roztokom 6 mol/l kyseliny chlorovodíkovej a extrahovala sa dichlórmetánom (3x 300 ml). Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytlo 18,64 g (94%) produktu ako biela tuhá látka.
Krok 2
Syntéza izobutyloxykarbonyl-cyklohexylglycyl-3,4-izopropylidénprolínu (Chx)-P[3,4-diMe-cyklopropyl)]-OH)
a) Kopulačný krok
Jonesova
--*oxidácia
Do roztoku iBoc-G(Chx)-OH (890 mg, 3,45 mmol) v acetonitrile (20 ml) bol pridaný HATU (1,33 g, 3,5mmol), HOAt (476 mg, 3,5 gramov) a potom diizopropyletylamín (2,5 ml, 14 mmol). Po 2 minútach sa pridal 3,4-izopropylidénprolinol (485 mg, 3,43 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala počas noci. Prídavok nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného bol nasledovaný extrakciou éterom a etylacetátom. Spojené organické vrstvy sa vysušili, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie eluovaním zmesou 1:1 etylacetát/hexány, čím sa poskytol čistý dipeptid alkoholu iBoc-G(Chx)-3,4-izopropylidénprolinolu (870 mg, 2,3 mmol, 67%).
b) Jonesov oxidačný krok
Do roztoku dipeptidu alkoholu iBoc-G(Chx)-3,4-izopropylidénprolinolu (100
-194mg, 0,26 mmol) v acetóne (2 ml) premiešavaného pri 0 °C sa pridalo Jonesovo činidlo (300 μΙ) po kvapkách počas 5 minút. [Jonesovo činidlo: Pripravilo sa z oxidu chrómového (13,4 g) a koncentrovanej kyseliny sírovej (11,5 ml) zriedených vodou na celkový objem 50 ml.] Po premiešavaní pri 0 °C počas 3 hodín sa pridal izopropanol (500 μΙ) a premiešavanie pokračovalo počas ďalších 10 minút. Reakčná zmes sa zriedila vodou (20 ml) a extrahovala sa etylacetátom (3x 70 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili, prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol dipeptid iBoc-G(Chx)-3,4-izopropylidénprolín (100 mg, 0,25 mmol, 96%).
Príklad 10
Syntéza /\/-Cbz-3,4-metanoprolínu
Krok 1: Syntéza /V-benzyl-3,4-metanoprolinolu
Zmes benzylidénového východiskového materiálu (J. Org. Chem. 1999, 64 (2), 547) (4,6 gramov, 21,4 mmol) a hydridu hlinitolítneho (1,0 mol/l v THF, 64 ml, 64 mmol) sa zahrievala pod refluxom počas 5 hodín. Po ochladení na 0 °C sa zostávajúci hydrid hlinitý pozorne odstránil prídavkom nasýteného vodného roztoku síranu sodného (5 ml) po kvapkách počas 15 minút. Zmes sa zriedila etylacetátom (200 ml) a potom sa prefiltrovala cez Celíte. Filtrát sa vysušil síranom sodným, prefiltroval a skoncentroval, čím poskytol surový A/-benzyl-aminoalkohol (3,45 gramov), ktorý sa preniesol do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
-195 Krok 2: Syntéza /V-benzyloxykarbonyl-3,4-metanoprolinolu (CBz-P(3,4-CH2)-ol)
Roztok surového /V-benzylaminoalkoholu (3 gramov, 14,76 mmol) v metanole (120 ml) a koncentrovaná HCI (1,5 ml) s 10%-né Pd/C (300 mg) sa hydrogenoval pri 345 kPa (50 psi) počas 16 hodín. Reakčná zmes sa prefiltrovala, čím sa odstránil na uhlíku založený katalyzátor a filtrát sa skoncentroval. Zvyšok sa rozpustil v zmesi voda/dioxán (100 ml) a pridal sa diizopropyletylamín (3,2 ml). Pridal sa benzyl-chlórmravčan (2,76 ml, 16,2 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala počas noci. Reakčná zmes sa skoncentrovala, rozpustila v roztoku 1 mol/l HCI (100 ml) a extrahovala sa etylacetátom (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili síranom horečnatým, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie použitím zmesi 1:3 etylacetát/hexány, čím sa poskytol Ä/-Cbz-3,4-metanoprolinol (2,4 g).
Krok 3: Syntéza A/-benzyloxykarbonyl-3,4-metanoprolínu (CBz-P(3,4-CH2)-OH)
Do roztoku /\/-Cbz-3,4-metanoprolinolu (2,2 g, 8,90 mmol) v acetóne (68 ml) premiešavaného pri 0 °C sa pridalo Jonesovo činidlo (6,6 ml) po kvapkách počas 5 minút. [Jonesovo činidlo: Pripravilo sa z oxidu chrómového (13,4 g) a koncentrovanej kyseliny sírovej (11,5 ml) zriedených vodou na celkový objem 50 ml.] Po premiešavaní pri 0 °C počas 3 hodín sa pridal izopropanol (11 ml) a premiešavanie pokračovalo počas ďalších 10 minút. Reakčná zmes sa zriedila vodou (400 ml) a extrahovala sa etylacetátom (3x 500 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili nad síranom horečnatým, prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol
-196 /V-Cbz-3,4-metanopiOlín (2,25 g, 96%).
Príklad 11
I
Syntéza Boc-(6S-karboetoxymetano)prolínu
Syntéza zlúčeniny z názvu tohto príkladu sa uskutočnila podľa publikovaného postupu: Marinozzi, M.; Nataini, B.; Ni, M.H.; Costantino, G.; Peliicciari R. IL Farmaco (1995) 50 (5), 327 - 331.
Príklad 12
Syntéza kyseliny Boc-3-morfolínkarboxylovej
Boe u
Syntéza zlúčeniny z názvu tohto príkladu bola uskutočnená podľa publikovaného postupu: Kogami Y., Okawa, K. Bull. Chem. Soc. Jpn. (1987) 60, 2963 - 2965.
Príklad 13
Syntéza A/-terc-butoxykarbonyl-2-aza-3S-hydroxykarbonyl[2.2.2]-bicyklooktánu
- 197Roztok surového 2-aza-2-(1 -fenyletyl)-3S-metoxykarbonyl-[2.2.2]bicyklookt5-énu (10 mmol) (Tetrahedron (1992) 48 (44) 9707 - 9718) a 10%-né Pd na uhlíku (1 g) v metanole (30 ml) sa okyslil roztokom 12 mol/l HCI, potom sa hydrogenoval pri 345 kPa (50 psi) počas 16 hodín použitím Parrovho hydrogenačného prístroja. Reakčná zmes sa prefiltrovala, čím sa odstránil na uhlíku založený katalyzátor a filtrát sa skoncentroval. Zvyšok sa rozpustil v koncentrovanej HCI a premiešaval sa počas noci. Roztok sa skoncentroval a znova rozpustil v acetonitrile (50 ml). Pridali sa diizopropyletylamín (3,5 ml) a di-terc-butyldikarbonát (1 g). Reakčná zmes sa premiešavala počas 24 hodín a potom sa skoncentrovala. Zvyšok sa rozpustil v CH2CI2 a vodnom roztoku 5% kyseliny sírovej. Reakčná zmes sa extrahovala s CH2CI2 a spojené organické vrstvy sa skoncentrovali. Zvyšok sa rozpustil v na 10% nasýtenom roztoku hydrogenuhličitanu sodného, premyl sa dietyléterom (2x) a okyslil s vodným roztokom 5% kyseliny sírovej. Vodná vrstva sa extrahovala etylacetátom (2x). Spojené etylacetátové vrstvy sa vysušili, prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol /V-terc-butoxykarbonyl-2-aza-3S-hydroxykarbonyl[2.2.2]-bicyklooktán (650 mg).
Príklad 14
Syntéza izobutyloxykarbonyl-cyklohexylglycyl-4,4-dimetylprolínu (Boc-G(Chx)-P(4,4dimetyl)-OH)
Krok 1: Syntéza iBoc-G(Chx)-P(4, 4-dimetyl)-OMe
-198 Do roztoku iBoc-G(Chx)-OH (Príklad 9, Krok 1) (377 mg, 1,95 mmol) v acetonitrile (7 ml) bol pridaný postupne HCI.HN-Pro(4,4-dimetyl)OMe (Príklad 1, krok 6) (377 mg, 1,95 mmol), /V-hydroxybenzotriazol (239 mg, 1,75 mmol), TBTU (845 mg, 2,63 mmol) a diizopropyletylamín (1,35 ml, 7,8 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 18 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa rozpustil v etylacetáte. Organická vrstva sa premyla dvakrát s 10 ml podielmi nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, roztokom 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej a soľankou. Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala na bielu tuhú látku (612 mg, 79%).
Krok 2: Syntéza Boc-G(Chx)-P(4,4-dimetyl)-OH
Metylester získaný v Kroku 1 uvedenom vyššie (612 mg, 1,54 mmol) v metanole (6 ml) sa saponifikoval v prítomnosti roztoku 2 mol/l hydroxidu lítneho (1,16 ml) počas troch hodín. Metanol sa odstránil za zníženého tlaku a zostávajúci zbytok sa zriedil etylacetátom a okyslil na pH = 2 roztokom 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej. Vrstvy sa oddelili a organická vrstva sa premyla vodou a soľankou, vysušila sa nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala.
Príklad 15
Syntéza L-fenylglycín-dimetylamidu
-199 Krok 1: Syntéza /V-benzyloxykarbonyl-L-fenylglycín-dimetylamidu (CBz- Phg-NMe2)
/V-benzyloxykarbonyl-L-fenylglycín (25g, 88 mmol) sa rozpustil v THF (800 ml) a ochladil sa na -10 °C. Pridali sa /V-metylmorfolín (9,7 ml, 88 mmol) a izobutylchlórmravčan (11,4 ml, 88,0 mmol) a zmes sa ponechala premiešavať sa počas 1 minúty. Pridal sa dimetylamín (100 ml, 2 mol/l v THF) a reakčná zmes sa ponechala zahriať na laboratórnu teplotu. Zmes sa prefiltrovala a filtrát sa skoncentroval za vákua, čím sa poskytol /V-benzyloxykarbonyl-L-fenylglycín-dimetylamid (32,5 g) ako žltý olej.
Krok 2: Syntéza L-fenylglycín-dimetylamidu (H-Phg-NMe2) /V-benzyloxykarbonyl-L-fenylglycín-dimetylamid (32,5 g) získaný vyššie sa rozpustil v metanole (750 ml) a pridalo sa 10%-né paládium na aktívnom uhlí (3,3 g). Táto zmes sa hydrogenovala v Parrovom prístroji pod tlakom 241 kPa (35 psi) vodíka počas 2 hodín. Reakčná zmes sa prefiltrovala a rozpúšťadlo sa odstránilo za vákua a zvyšok sa rekryštalizoval zo zmesi metanol-hexány, čím sa poskytol fenylglycín-dimetylamid (26 g) ako špinavobiela tuhá látka. Hodnota ee tohto materiálu bola určená ako > 99% pomocou HPLC analýzy 2,3,4,6-tetra-O-acetylglukopyranozyltioizokyanátový derivát.
Príklad 16
Syntéza (1 -metylcyklohexyl)glycínu
-200-
Krok 1: 1-Metyl-1-hydroxymetylcyklohexán
s*
Do roztoku 1-metyl-1-hydroxykarbonylcyklohexánu (10 g, 70 mmol) v tetrahydrofuráne (300 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok diboránu 1 mol/l v tetrahydrofuráne (200 ml, 200 mmol) počas 90 minút. Chladiaci kúpeľ sa odstránil a reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas dvoch dní. Zostávajúci borán sa odstránil pomalým pridaním nasýteného hydrogensíranu sodného (10 ml) počas 90 minút za chladenia. Pridal sa ďalší nasýtený hydrogensíran sodný (200 ml) a po 20 minútach premiešavania sa vodná vrstva odstránila. Organická vrstva sa premyla vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušila sa, prefiltrovala a skoncentrovala. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie použitím zmesi 20% dietyléteru v hexánoch, čím sa poskytol 1-metyl-1-hydroxymetylcyklohexán (6,17 g, 48 mmol, 69%).
Krok 2:1-Metylcyklohexylkarboxaldehyd
*»
Do roztoku 1-metyl-1-hydroxymetylcyklohexánu (6,17 g, 48 mmol) a trietylamínu (20,1 ml, 144 mmol) v dichlórmetáne (150 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok
-201 komplexu pyridín-oxid sírový (22,9 g, 144 mmol) v dimetylsulfoxide (150 ml) počas 15 minút. Chladiaci kúpeľ sa ponechal zahriať na laboratórnu teplotu počas dvoch hodín, vtedy sa reakčná zmes vyliala do soľanky s ľadom (400 ml). Vrstvy sa oddelili a vodná vrstva sa extrahovala dichlórmetánom (200 ml). Spojené organické vrstvy sa zriedili hexánmi (600 ml) a premyli roztokom 1 mol/l HCI (2x 150 ml), nasýteným chloridom sodným (2x 100 ml), vysušili sa, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie, čím sa poskytol 1-metylcyklohexylkarboxaldehyd (1,77 g, 13,8 mmol, 29%).
Krok 3: Syntéza /V-formyl-A/-glykozyl-1-metylcyklohexyl-terc-butylamidu
Syntéza 2,3,4-tri-O-pivaloyl-D-arabinozylamínu bola uskutočnená podľa publikovaného postupu (Kunz. H.; Pfrengle, W.; Ruck, K.; Wilfried, S. Synthesis (1991) 1039- 1042).
Do roztoku 1-metylcyklohexylkarboxaldehydu (1,17 g, 8,34 mmol), 2,3,4-triO-pivaloyl-D-arabinozylamínu (8,3 g, 20,7 mmol), kyseliny mravčej (850 μΙ, 22,2 mmol) a ferc-butylizokyanidu (2,4 ml, 21,2 mmol) v tetrahydrofuráne (170 ml) pri -30 °C bol pridaný roztok 0,5 mol/l chloridu zinočnatého v tetrahydrofuráne (41 ml, 20,57 mmol). Roztok sa premiešaval pri -20 °C počas 3 dní, potom sa skoncentroval. Zvyšok sa zriedil s CH2CI2 (500 ml), premyl nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (2x 500 ml), vodou (500 ml). Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol číry olej. Rýchla chromatografia (20% etylacetátu v hexánoch) poskytla čistý produkt (4,3 g, 6,6 mmol, 33%)
Krok 4: Syntéza (l-metylcyklohexyl)glycínu
-202-
Roztok produktu získaný v Kroku 3 vyššie (4,3 g, 6,6 mmol) v dichlórmetáne (30 ml) a nasýtený bezvodý metanolový roztok HCI (30 ml) sa premiešavali počas noci. Roztok sa skoncentroval a zvyšok sa rozpustil vo vode (100 ml) a premyl sa pentánom (2x 100 ml). Vodná vrstva sa skoncentrovala a zvyšok sa rozpustil v roztoku 6 mol/l HCI (50 ml) a zahrieval sa pod refluxom počas 30 hodín. Roztok sa skoncentroval, čím sa poskytol surový (l-metylcyklohexyl)glycín, hydrochlorid, (790 mg, 3,82 mmol, 58%).
Príklad 17
Syntéza (4,4-dimetylcyklohexyl)glycínu
Krok 1: Syntéza 4,4-dimetylcyklohexanónu
O
O
Zmes 4,4-dimetylcyklohex-2-én-1-ónu (12 ml, 91,2 mmol) a 10%-né Pd na uhlíku, Degussa typ, (2 g) sa hydrogenovala pri 275 kPa (40 psi) počas 18 hodín. Zmes sa prefiltrovala a skoncentrovala (1H NMR ukázalo zmes ketónu a alkoholu v pomere 5:3). Zmes sa rozpustila v acetóne (400 ml) a ochladila na 0 °C. Pridalo
-203sa Jonesovo činidlo (40 ml) počas 30 minút a chladiaci kúpeľ sa odstránil. Po 2 dňoch sa prebytok acetónu odparil a výsledný zbytok sa rozpustil vo vode a dietyléteri. Éterová vrstva sa premyla vodou, kým nebola bezfarebná, vysušila sa, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol 4,4-dimetylcyklohexanón (7,4 g,
58,6 mmol, 64%).
Krok 2: Syntéza metyl-enol-éteru 4,4-dimetylcyklohexylkarboxaldehydu
OMe
O
Do roztoku metoxymetyl-trifenylfosfóniumchloridu (8,6 g) v tetrahydrofuráne (125 ml) pri 0 °C sa pridalo /V-butyllítium (roztok 1,6 mol/l v hexánoch, 14,3 ml) počas 10 minút. Po 30 minútach sa reakčná zmes ochladila na -78 °C a pridal sa roztok 4,4-dimetylcyklohexanón (2,45 g, 19,1 mmol) v tetrahydrofuráne (50 ml) počas 20 minút. Po 1 hodine sa chladiaci kúpeľ odstránil a reakčná zmes sa zahriala pomaly na 0 °C. Reakčná zmes sa zriedila nasýteným roztokom chloridu amónneho (50 ml), etylacetátom (100 ml) a hexánmi (100 ml). Organická vrstva sa premyla vodou a soľankou, vysušila sa, prefiltrovala a skoncentrovala. Zvyšok sa premiešaval s hexánmi (70 ml) počas 10 minút a prefiltroval. Filtrát sa skoncentroval a chromatografoval použitím zmesi 25% etylacetátu v hexánoch, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto odseku (1,925 g, 12,5 mmol, 65%).
Krok 3: 4,4-Dimetylcyklohexylkarboxaldehyd
OMe
H.
Roztok metyl-enol-éteru 4,4-dimetylcyklohexylkarboxaldehydu (1,925 g,
12,5 mmol) (Krok II uvedený vyššie), tetrahydrofuránu (100 ml) ä 6 mol/l HCI (20
-204- ml) sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 4 hodín. Reakčná zmes sa zriedila hexánmi, dietyléterom, soľankou a vodou. Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol 4,4-dimetylcyklohexylkarboxaldehyd (1,0 g, 7,1 mmol, 57%).
Krok 4: Syntéza A/-formyl-/V-glykozyl-4, 4-dimetylcyklohexyl-terc-butylamidu
ÔPiv
ZnCI2, kyselina mravčia terc-butylizokyanát tetrahydrofurán
Do roztoku 4,4-dimetylcyklohexylkarboxaldehydu (1,17 g, 8,34 mmol),
2,3,4-tri-O-pivaloyl-a-D-arabinozylamínu (3,43 g, 8,55 mmol), kyseliny mravčej (350 μΙ, 9,17 mmol) a ŕerc-butylizokyanidu (990 μΙ, 8,76 mmol) v THF (70 ml) pri -30 °C bol pridaný 0,5 mol/l chlorid zinočnatý v tetrahydrofuráne (17 ml, 8,5 mmol). Roztok sa premiešaval pri -20 °C počas 2 dní, potom sa skoncentroval. Zvyšok sa zriedil dichlórmetánom (200 ml), premyl nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2x 200 ml) a vodou (200 ml). Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol číry olej. Rýchla chromatografia (20% etylacetátu v hexánoch) poskytla čistý produkt (2,1 g, 3,3 mmol, 39%)
Krok 5: Syntéza (4,4-dimetylcyklohexyl)glycínu
OPiv
-205Roztok Ugi produktu získaný v Kroku 4 uvedenom vyššie (2,1 g, 3,3 mmol) v dichlórmetáne (20 ml) a nasýtený bezvodý metanolový roztok HCI (20 ml) sa premiešavali počas noci. Roztok sa skoncentroval a zvyšok sa rozpustil vo vode (100 ml) a premyl pentánom (2x 100 ml). Vodná vrstva sa skoncentrovala a zvyšok sa rozpustil v roztoku 6 mol/l HCI (40 ml) a zahrieval sa pod refluxom počas 30 hodín. Roztok sa skoncentroval, čím sa poskytol surový (l-metylcyklohexyl)glycín, hydrochlorid, (300 mg, 1,36 mmol, 41%).
Príklad 18
Syntéza Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OH
Krok 1: Príprava Boc-norvalinolu
Do roztoku Boc-norvalínu (25,0 g, 0,115 mol) v tetrahydrofuráne (461 ml) ochladeného na 0 °C, bol pridaný komplex borán/tetrahydrofurán (461 ml roztok 1,0 mol/l v tetrahydrofuráne) po kvapkách. Po 1 hodine pri 0 °C sa roztok zahrial na laboratórnu teplotu počas doby 1,5 hodiny. TLC ukázala, že reakcia bola úplná. Na zastavenie reakcie sa pridal metanol. Roztok sa skoncentroval, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (22,56 g, 96%) ako penovitý sirup. TLC produktov ukázala dostatočnú čistotu. Rf = 0,34 (zmes 40% etylacetátu v hexáne).
Krok 2: Príprava Boc-norvalinalu
CI2CHCO2H, EDC
-----------►
Boc-HN toluén , DMSO
Boc-HN'
-206Do Boc-norvalinolu (7,77 g, 38 mmol), v bezvodom dimetylsulfoxide (153 ml) a toluéne (153 ml) bol pridaný EDC (73,32 g, 382 mmol). Po ochladení roztoku na 0 °C bola pridaná kyselina dichlóroctová (15,8 ml, 191 mmol) po kvapkách. Keď bolo pridávanie dokončené, reakčná zmes sa premiešaval počas 15 minút. Roztok sa ponechal zahriať sa na laboratórnu teplotu počas 2 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala, čím sa odstránil toluén, potom sa rozpustila v etylacetáte. Roztok sa premyl postupne s roztokom 1 mol/l hydrogensíranu sodného, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a soľankou, vysušil sa nad síranom sodným, prefiltroval a skoncentroval, čím sa poskytol surový Boc-norvalinal, ktorý sa použil priamo v nasledujúcom kroku. TLC Rf = 0,84 (roztok 40% etylacetátu v hexáne).
Krok 3: Syntéza Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OEt
CNCH2CQ2Et, pyridín
TFA, dichlórmetán
Do roztoku surového Boc-norvalinalu (4,18 g, 20,77 mmol) v dichlórmetáne (83 ml) bol pridaný etylizokyanoacetát (2,72 ml, 24,93 mmol) a pyridín (6,72 ml, 83,09 mmol). Po ochladení roztoku na 0 °C sa pridala po kvapkách kyselina trifluóroctová (4,15 ml, 41,54 mmol). Po premiešavaní počas 1 hodiny sa roztok premiešaval pri laboratórnej teplote počas 18 hodinách, pričom sa rozpúšťadlo nechalo z reakčnej zmesi v nezakrytej nádobe odpariť za laboratórnych podmienok. Reakčná zmes sa skoncentrovala, potom sa rozpustila v etylacetáte. Roztok sa premyl postupne roztokom 1 mol/l hydrogensíranu sodného, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a soľankou, vysušil sa nad síranom sodným, prefiltroval a potom sa skoncentroval. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie eluovaním so zmesou 20% až 40% etylacetátu v hexáne, čím sa poskytlo 2,8 g zlúčenina z názvu tohto príkladu ako žltý sirup. Hmotnostná spektrometria nízkeho rozlíšenia potvrdila prítomnosť požadovaného produktu (MH+ 333).
Krok 4: Syntéza Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OH
-207-
Ziskaný produkt (Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OEt) (1,52 g, 4,70 mmol) sa rozpustil v etanole (23 ml), saponifikoval sa roztokom 1 mol/l hydroxidu lítneho (18,81 ml) počas dvoch hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa okyslila na pH asi 2 s ionomeničovou živicou Dowex 50 WX8, premiešavala sa počas 20 minút a potom sa prefiltrovala. Živica sa dobre premyla etanolom a vodou a spojené filtráty sa skoncentrovali na biela penu (0,48 g, 33%).
Príklad 19
Syntéza (2ŕ?,3S,4S,5S)-ŕerc-butyl-A/-CBz-3-amino-2-hvdroxy-4,5-metylénhexanoátu
Do roztoku terc-butyl-dietylfosfonoacetátu (4,7 ml, 20 mmol) rozpusteného v THF (50 ml) pri -78 °C bol pridaný roztok 1,6 mol/l n-butyl-lítia v hexánoch (12,4 ml). Po 30 minútach sa pridal (1S,2S)-2-metylcyklopropylkarboxaldehyd (1 g, 12 mmol) (Barrett, A.G.M.; Doubleday, W.W.; Kasdorf, K.; Tustin, G.J., J. Org. Chem. (1996) 61, 3280) v dietyléteri (100 ml) počas 10 minút. Reakčná zmes sa zahriala na 0 °C počas 2 hodín a na 6 °C počas 12 hodín. Reakcia sa zastavila nasýteným chloridom amónnym (20 ml) a organická vrstva sa oddelila, premyla 50 ml soľanky a vysušila sa nad síranom sodným, prefiltrovala sa a skoncentrovala, čím poskytla
-208-
3,5 g číreho oleja. Rýchla chromatografia (roztok 20% etylacetátu v hexánoch) poskytla čistý nenasýtený ŕerc-butylester (1,4 g).
Krok 2
Do roztoku benzylkarbamátu (3,55 g, 23,5 mmol) v n-propanole (24 ml) bol pridaný roztok hydroxidu sodného (900 mg, 22,7 mmol) vo vode (48 ml), nasledovaný terc-butylchlórnanom (2,57 ml, 22,7 mmol). Po 15 minútach sa reakčná zmes ochladila na 0 °C a pridal sa (DHQ^PHAL (350 mg, 0,45 mmol) v npropanole (24 ml), nasledovaný nenasýteným terc-butylesterom (1,4 g) z vyššie v npropanole (48 ml). Nakoniec sa pridal osmian draselný (110 mg, 0,30 mmol) vo vode (2 ml) a v roztoku sa veľmi rýchlo vyvinula tmavozelená farba, ktorá pretrvala počas 4 hodín. Po 6 hodinách sa pridal nasýtený roztok síranu sodného (50 ml) a zmes sa extrahovala etylacetátom (2x 50 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli soľankou (30 ml), vysušili sa nad síranom sodným, prefiltrovali a skoncentrovali sa. Rýchla chromatografia so zmesou 20% etylacetátu v hexánoch poskytla požadovaný CBz chránený amino-terc-butylester ako bielu tuhú látku (316 mg).
Krok 3
Zmes CBz chráneného amino-terc-butylesteru (316 mg, 0,9 mmol) a 32 mg
10% paládia na uhlíku v 9 ml metanolu sa hydrogenovala počas 8 hodín. Zmes sa
-209prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol voľný amín ako číry olej (195 mg).
Príklad 20
Syntéza 1 R,2-dimetyl-propyl-chlórmravčanu
Do komerčne dostupného 2R-hydroxy-3-metylbutánu (410 mg, 4,65 mmol) bol pridaný roztok 20% fosgénu v toluéne (1 ml, 2 mmol). Roztok sa premiešaval počas 6 hodín, čím sa generoval chlórmravčan (2 mmol), ktorý reagoval priamo a bezprostredne s požadovaným amínom. S-izomér bol syntetizovaný pomocou rovnakého postupu.
II) Reprezentatívna syntéza HCV inhibítorov v roztokovej fáze
Príklad 21
Syntéza iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-dimetyl)-Leu(CO)-Gly-Phg-dimetylamidu v roztokovej fáze
Krok 1: Syntéza terc-butyloxykarbonyl-leucinalu (Boc-Leu-CHO) dichlórmetán
S dimetylsulfoxid
Βοο-ΗΝχΙχ-χ'ΟΗ Pyridfn · SO3 Boc-HN
O
Do roztoku komerčne dostupného (Advanced Chem Tech) Boc-L-leucinolu (0,78 g, 3,6 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (17,5 ml) bol pridaný trietylamín (2
-210ml, 14,36 mmol) a zmes sa ochladila na 0 °C. Pridal sa dimetylsulfoxid (17,5 ml) nasledovaný komplexom pyridín-oxid sírový (2,3 g, 14,36 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala počas dvoch hodín. TLC zmesou 1:1 etylacetát:hexány potvrdila ukončenie reakcie. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa zriedil etylacetátom. Etylacetátová vrstva sa premyla roztokom 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej (2x 75 ml), nasledoval nasýtený roztok hydrogenuhličitanu sodného (2x 75 ml) a soľankou (75 ml). Organická vrstva sa vysušila (síranom sodným), prefiltrovala a skoncentrovala, čím poskytla 775 mg produktu.
Krok 2
Syntéza etylesteru Boc-2-hydroxy-3-amino-5-metylhexanoylglycínu (Boc-Leu(CHOH)-Gly-OEt)
kyselina trifluóroctová pyridin, CNCH2CO2Et
-------------------------.---------------->dichlórmetán
Do roztoku Boc-Leucín-aldehydu (0,77 g, 3,59 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (24 ml) bol pridaný bezvodý pyridin (1,16 ml, 14,36 mmol) a etylizokyanoacetát (0,4 ml, 4,66 mmol). Reakčná zmes sa ochladila na 0 °C a pridala sa kyselina trifluóroctová (0,55 ml, 7/18 mmol) počas dvoch minút. Reakčná zmes sa uzavrela a premiešavala sa pri 4 °C počas štyroch dní a pri laboratórnej teplote počas jedného dňa. Reakčná zmes sa zriedila dichlórmetánom (350 ml) a premyla sa dvakrát 75 ml podielmi roztoku 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a soľankou. Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala. Získaný zvyšok sa podrobil rýchlej chromatograf i i na silikagélovej kolóne 5 cm x 15 cm (2“ x 6“) použitím zmesi 10% etylacetátu v hexánoch (800 ml), po čom nasledovala zmes 1:1 etylacetát v hexánoch (800 ml). Frakcie zodpovedajúce produktu boli spojené a skoncentrovali sa, čím sa poskytlo 980 mg (79%) produktu.
Krok 3: Syntéza Boc-Leu-(CHOH)-Gly-OH
-211 -
Do roztoku Boc-Leu-(CHOH)-Gly-Oet (0,98 g, 2,83 mmol) v etanole (11,3 ml) bol pridaný roztok 2 mol/l hydroxidu lítneho (4,25 ml) a reakčná zmes sa premiešavala počas piatich hodín pri laboratórnej teplote. Etanol sa odstránil za zníženého tlaku a vodná vrstva sa zriedila etylacetátom. Organická vrstva sa premyla roztokom 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej, potom soľankou, vysušila sa, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytlo 775 mg (86%) produktu ako biela tuhá látka.
Krok 4: Syntéza Boc-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-dimetylamidu
Do roztoku Boc-Leu-(CHOH)-Gly-OH (0,37 g, 1,18 mmol) v acetonitrile (23 ml) bol pridaný postupne fenylglycín-dimetylamid (získaný v Príklade 15, Krok 2), EDC (0,34 g, 1,76 mmol), /V-hydroxybenztriazol (HOBt) (0,18 g, 1,18 mmol) a diizopropyletylamín (DIEA) (0,82 ml, 4,7 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala počas 18 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa zriedil etylacetátom a premyl sa postupne s dvoma 75 ml podielmi roztoku 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a soľankou. Organická vrstva sa potom vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala. Surový produkt sa podrobil rýchlej chromatografii na silikagélovej kolóne 5 cm x 15 cm (2 x 6) použitím zmesi 4:1 etylacetát:hexány (700 ml), po čom nasledoval etylacetát (1000 ml) a 10% metanol v dichlórmetáne (600 ml). Frakcie zodpovedajúce produktu sa spojili a skoncentrovali, čím sa poskytlo 445 mg (80%) bielej tuhej látky.
-212Krok 5: Syntéza H-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-dimetylamidu, trifluóracetátová soľ
kyselina trifluóroctová dichlórmetán
Do roztoku Boc-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-dimetylamidu (70 mg, 0,146 mmol) v dichlórmetáne (1 ml) bola pridaná kyselina trifluóroctová (1 ml) a reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 1 hodiny. Reakčná zmes sa skoncentrovala a vzala sa do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
Krok 6: Syntéza iBoc-G(Chx)-Pro(4, 4-dimetyl)-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-dimetylamidu
Do roztoku ÍBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)-OH (Príklad 14, krok 2) (53 mg, 0,148 mmol) v acetonitrile (3 ml) bol pridaný postupne TFA.2HN-Leu(CHOH)Gly-PhgNMe2 (61 mg, 0,148 mmol), /V-hydroxybenztriazol (HOBt) (23 mg, 0,148 mmol), TBTU (71,5 mg, 0,222 mmol a diizopropyletyl-amín (103 I, 0,593 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 18 hodín a skoncentrovala sa. Zostávajúci zbytok sa rozpustil v etylacetáte a premyl roztokom 1 mol/l kyseliny chlorovodíkovej (2x 5 ml), nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (2x 5 ml) a soľankou (2x 5 ml). Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a
-213skoncentrovala. Produkt (100 mg) sa zobral do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
Krok 7: Syntéza iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-dimetyl)-Leu-(CO)-Gly-Phg-dimetylamidu
Dess
Do roztoku iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-dimetyl)-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-dimetylamidu (30 mg, 0,04 mmol) v dichlórmetáne (1 ml) bolo pridané komerčne dostupné Dess-Martinovo činidlo (Omega Chemical Company Inc.) (67,8 mg, 0,16 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 90 minút. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa premiešaval v roztoku 5% tiosíranu sodného. Potom sa zriedil dichlórmetánom a vrstvy sa oddelili. Organická vrstva sa premyla tiosíranom sodným (4x 3 ml), nasledovala voda a soľanka. Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala. Surový produkt sa rozpustil v hexánoch a izopropylalkohole a podrobil sa HPLC čisteniu použitím normálnej fázy Kromasil 5, silikagélová kolóna (Phenomenex, 250 x 21,20 mm, 100 angstrômov veľkosť pórov, 5 pm gélové častice), eluovaním 30 minútovým gradientom od 0 do 25% izopropylalkoholu v hexánoch (25 ml/minútu). Frakcie zodpovedajúce produktu sa spojili a skoncentrovali. Lyofilizácia zvody poskytla 6,7 mg bieleho prášku. Hmotnostné spektrum s nízkym rozlíšením potvrdilo požadovanú hmotnosť (MH+ = 741,4).
-214-
III) Syntézy v tuhej fáze
Syntéza v tuhej fáze je užitočná na výrobu malých množstiev niektorých zlúčenín podľa tohto vynálezu. Ako pri konvenčnej syntéze peptidov v tuhej fáze, 1 reaktory pre syntézu v tuhej fáze peptidyl-ketoamidov sú zahrnujú reaktorovú nádobu s najmenej jedným povrchom priepustným pre rozpúšťadlo a rozpustené činidlá, ale nepriepustný pre syntéznu živicu zvolenej zrnitosti. Takéto reaktory zahrnujú sklenné reakčné nádoby so sintrovou sklennou fritou, polypropylénové skúmavky alebo kolóny s fritami alebo Kans™ reaktor vyrobený firmou Irori Inc., San Diego CA. Zvolený typ reaktora závisí od objemu potrebnej živicovej tuhej fázy, môžu sa použiť rôzne typy rektorov pre rôzne stupne syntézy. Nasledujúce postupy budú uvádzané v nasledujúcich príkladoch:
Postup A: Kopulačná reakcia
K živici suspendovanej v N-metylpyrolidíne (NMP) (10 až 15 ml/gram živice) sa pridala Fmoc-aminokyselina (2 ekv.), HOAt (2 ekv.), HATU (2 ekv.) a diizopropyletylamín (4 ekv.). Zmes sa nechala reagovať počas 4 až 48 hodín. Reaktanty sa odsali a živica sa premyla postupne dimetylformamidom, dichlórmetánom, metanolom, dichlórmetánom a dietyléterom (použije sa 10 až 15 ml rozpúšťadla/gram živice). Živica sa potom vysušila za vákua.
Postup B: Fmoc deprotekcia
Fmoc-chránená živica sa opracovala roztokom 20% piperidínu vdimetylformamide (10 ml činidla/g živice) počas 30 minút. Činidlá sa odsali a živica sa premyla postupne dimetylformamidom, dichlórmetánom, metanolom, dichlórmetánom a dietyléterom (10 ml rozpúšťadla/gram živice).
Postup C: Boe deprotekcia
Boc-chránená živica sa opracovala s 1:1 zmesou dichlórmetánu a kyseliny trifluóroctovej počas 20 až 60 minút (10 ml rozpúšťadla/gram živice). Činidlá sa odsali a živica sa premyla postupne dichlórmetánom, dimetylformamidom, roztokom 5% diizopropyletylamínu v dimetylformamide, dimetylformamidom, dichlórmetánom a dimetylformamidom (10 ml rozpúšťadla/gram živice).
-215Postup D: Semikarbazónová hydrolýza
Živica sa suspendovala v štiepnom koktajte (10 ml/g živice) pozostávajúcom z kyseliny trifluóroctovej: kyseliny pyrohroznovej: dichlórmetánu: vody 9:2:2:1 počas 2 hodín. Reaktanty sa odsali a postup sa opakoval ešte tri krát. Živica sa premyla postupne dichlórmetánom, vodou a dichlórmetánom a vysušila sa za vákua.
Postup E: HF štiepenie
Vysušená peptid-nVal(CO)-G-O-PAM živica (50 mg) sa umiestnila v HF nádobe obsahujúcej malé miešadlo. Pridal sa anizol (10% celkového objemu) ako zachytávač. V prítomnosti aminokyselín kyseliny glutámovej a cysteínu sa tiež pridali tioanizol (10%) a 1,2-etánditiol (0,2%). HF nádob a sa potom zapojila do HF prístroja (ImmunoDynamics) a systém sa premýval dusíkom počas piatich minút. Potom sa schladil na -70 °C s kúpeľom suchý ľad/izopropanol. Po 20 minútach sa HF destiloval na požadovaný objem (10 ml HF/g živice). Reakcia sa nechala pokračovať počas jeden a pol hodiny pri 0 °C. Dopracovanie pozostávalo z odstránenia všetkého HF použitím dusíka. Potom sa do živice pridal dichlórmetán a zmes sa premiešavala počas piatich minút. Po tom nasledoval prídavok 20% kyseliny octovej vo vode (4 ml). Po premiešavaní počas 20 minút sa živica prefiltrovala použitím lievika s fritou a dichlórmetán sa odstránil za zníženého tlaku. Zostávajúci zbytok a zmes sa premyli hexánmi (2x), čím sa odstránil zachytávač. Medzitým sa živica navlhčila 1 ml metanolu. Vodná vrstva (20% HOAc) sa pridala späť k živici a zmes sa pretrepávala počas piatich minút a potom sa prefiltrovala. Metanol sa odstránil za zníženého tlaku a vodná vrstva sa lyofilizovala. Peptid sa potom rozpustil v 10 až 25% metanole (obsahujúcom 0,1% kyseliny trifluóroctovej) a čistil sa pomocou HPLC na obrátených fázach.
Príklad 22
Reprezentatívna syntéza Hep C inhibítorov v tuhej fáze: (iBoc-G(Chx)-P(4tNHSO2Ph)-nV-(CO)-G-G(Ph)-NH2)
-216-
Krok 1: Syntéza Fmoc-nV-(dpsc)-Gly-OH
A) Syntéza alyl-izokyanoacetátu (kroky a až b uvedené nižšie)
a) Syntéza draselnej soli kyseliny izokyanooctovej
Etyl-izokyanoacetát (96,6 ml, 0,88 mol) sa pridal po kvapkách do studeného roztoku etanolu (1,5 I) a hydroxidu draselného (59,52 g, 1,0 mol). Reakčná zmes sa pomaly zahriala na laboratórnu teplotu. Po dvoch hodinách sa vyzrážaný produkt prefiltroval cez sklenný lievik a premyl sa viacerými podielmi studeného etanolu. Takto získaná draselná soľ kyseliny izokyanooctovej sa vysušila za vákua na zlatohnedú tuhú látku (99,92 g, 91,8%).
b) Syntéza alyl-izokyanoacetátu CNXz\r K + ------CNx-^Oallyl
Do produktu z časti a) (99,92 g, 0,81 mol) rozpusteného v acetonitrile (810 ml) bol pridaný alylbromid (92 ml,1,05 mol). Po zahrievaní pod refluxom počas štyroch hodín sa získal tmavohnedý roztok. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa rozpustil v éteri (1,5 I) a premyl tri krát vodou (500 ml). Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala na tmavohnedý sirup. Surový produkt sa čistil pomocou vákuovej destilácie pri 0,93 kPa (7 mm Hg) (98
-217°C) na číry olej (78,92 g, 78%). NMR δ ppm (CDCI3): 5,9 (m, 1H), 5,3 (m, 2H), 4,7 (d,2H), 4,25 (s, 2H).
B) Syntéza 9-fluorenylmetoxykarbonyl-norvalinalu (kroky a až c uvedené nižšie)
a) Syntéza 9-fluorenylmetoxykarbonyl-1-norvalín metylesteru (Fmoc-nValOMe)
Do studeného roztoku komerčne dostupného Fmoc-norvalínu (25 g, 73,75 mmol) v bezvodom metanole (469 ml) bol pridaný tionylchlorid (53,76 ml, 737,5 mmol) počas jednej hodiny. TLC s etylacetátom urobená o hodinu neskôr potvrdila ukončenie reakcie (Rf = 0,85). Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa rozpustil v etylacetáte. Organická vrstva sa premyla niekoľkými 200 ml podielmi nasýteného hydrogenuhličitanu sodného, po čom nasledovala soľanka. Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala, čím sa poskytol FmocnorVal-OMe) ako biela tuhá látka (26,03 g) v kvantitatívnom výťažku. NMR δ ppm (CD3OD): 7,7 (m, 2H), 7,6 (m, 2H), 7,4 (m, 2H), 7,3 (m, 2H), 4,3 (m, 2H), 4,1 (m, 2H), 3,7 (s, 3H), 1,7 (m, 1H), 1,6 (m, 1H), 1,4 (m, 2H), 0,95 (t, 3H).
b) Syntéza 9-fluorenylmetoxykarbonyl-norvalinolu (Fmoc-nValinol)
K Fmoc-nVal-OMe (26,03 g, 73,75 mmol) v tetrahydrofuráne (123 ml) a metanolu (246 ml) bol pridaný chlorid vápenatý (16,37 g, 147,49 mmol). Reakčná zmes sa ochladila na 0 °C a pridal sa hydrid boritosodný (11,16 g, 294,98 mmol) v niekoľkých dávkach. Do získanej hustej pasty sa pridal metanol (500 ml) a reakčná zmes sa ponechala premiešavať pri laboratórnej teplote počas 90 minút. TLC so zmesou 2:3 etylacetáthexány potvrdila ukončenie reakcie (Rf = 0,25).
-218Reakcia sa zastavila pomalým prídavkom vody (100 ml) pri 0 °C. Metanol sa odstránil za zníženého tlaku a zostávajúca vodná fáza sa zriedila etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou (3x 500 ml), nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (3x 500 ml) a soľankou (500 ml). Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala na bielu tuhú látku (21,70 g, 90,5%). NMR δ ppm (CD3OD): 7,8 (m, 2H), 7,7 (m, 2H), 7,4 (m, 2H), 7,3 (m, 2H), 4,3-4,5 (m, 2H), 4,2 (m, 1H), 3,6 (s, 1H), 3,5 (s, 2H), 1,5 (m, 1H), 1,3-1,4 (m, 3H), 0,99 (m, 3H).
c) Syntéza 9-fluorenylmetoxykarbonyl-norvalinalu (Fmoc-nVal-CHO)
O
Do roztoku Fmoc-norValinolu (21,70 g, 66,77 mmol) v dichlórmetáne (668 ml) bol pridaný trietylamín (37,23 ml, 267 mmol) a roztok sa ochladil na 0 °C. Do studeného roztoku sa pridala suspenzia komplexu pyridín-oxid sírový (42,51 g, 267 mmol) v dimetylsulfoxide (96 ml). Po jednej hodine TLC so zmesou 2:3 etylacetát:hexány potvrdila ukončenie reakcie. Dichlórmetán sa odstránil za zníženého tlaku a zostávajúci zbytok sa rozpustil v etylacetáte a premyl sa vodou (2x 50 ml), roztokom 1 mol/l nasýteného hydrogensíranu sodného (2x 50 ml), nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2x 50 ml) a soľankou (50 ml). Organická vrstva sa skoncentrovala, čím sa poskytla biela tuhá látka. Predpokladal sa teoretický výťažok (21,57 g) a látka sa zobrala do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia.
C) Syntéza difenylmetyl-semikarbazidu (dpsc), trifluóracetátová soľ (kroky a až b uvedené nižšie)
a) Syntéza Boc-semikarbazid-4-yl-difenylmetánu
-219Do roztoku karbonyldiimidazolu (16,2 g, 0,10 mole) v dimetylformamide (225 ml) bol pridaný roztok terc-butylkarbazatu (terc-Boc-hydrazidu) (13,2 g, 0,100 mol) v dimetylformamide (225 ml) po kvapkách počas 30 minút. Potom sa pridal difenylmetylamín (18,3 g, 0,10 mol) počas 30 minút. Reakčná zmes sa ponechala premiešavať pri laboratórnej teplote počas jednej hodiny. Pridala sa voda (10 ml) a zmes sa skoncentrovala na asi 150 ml za zníženého tlaku. Tento roztok sa vylial do vody (500 ml) a extrahoval sa etylacetátom (400 ml). Etylacetátová fáza sa premyla dva krát po 75 ml roztoku 1 mol/l HCI, vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a chloridu sodného a vysušila sa síranom horečnatým. Zmes sa prefiltrovala a roztok sa skoncentroval, čím poskytol 29,5 g (85%-ný výťažok) bielej peny. Tento materiál by sa mohol čistiť pomocou rekryštalizácie zo zmesi etylacetát/hexán, ale bol dosť čistý na to, aby sa použil priamo v nasledujúcom kroku: t.t. 142 až 143 °C. 1H NMR (CDCI3) δ 1,45 (s, 9H), 6,10 (dd, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,67 (široký s, 1H), 7,21 - 7,31 (m, 10H). Analýza vypočítaná pre C19H23N3O3: C, 66,84; H, 6,79; N, 12,31, Nájdené: C, 66,46; H, 6,75; N; 12,90.
b) Syntéza difenylmetyl-semikarbazidu (dpsc), trifluóracetátová soľ
Roztok Boc-semikarbazid-4-yl-difenylmetánu (3,43 g, 10 mmol) v dichlórmetáne (12,5 ml) sa opracoval 12,5 ml kyseliny trifluóroctovej pri laboratórnej teplote a premiešaval sa počas 30 min. Roztok sa pridal po kvapkách do 75 ml éteru a výsledná tuhá látka (2,7 g, 80%) sa oddelila pomocou filtrácie, t.t. 182 až 184 °C. 1HNMR (CD3OD) δ 6,05 (s, 1H), 7,21 - 7,35 (m, 10H). 13C NMR (CD3OD) δ 57,6, 118,3 (q, CF3), 126,7, 127,9, 141,6, 156,9, 160,9 (q, CF3CO2H).
D) Syntéza Fmoc-nVal-(CHOH)-Gly-O-alylu
-220-
alylizokyanoacetát pyridín, kyselina trifluóroctová dichlórmetán
Do roztoku Fmoc-nVal-CHO (Krok IB) (5,47 g, 16,90 mmol) v dichlórmetáne (170 ml) bol pridaný alylizokyanoacetát (Krok IA) (2,46 ml, 20,28 mmol) a pyridín (5,47 ml, 67,61 mmol). Reakčná zmes sa ochladila na 0 °C a po kvapkách sa pridala kyselina trifluóroctová (3,38 ml, 33,80 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri 0 °C počas 1 hodiny a potom pri laboratórnej teplote počas 48 hodín. TLC urobená v etylacetáte potvrdila ukončenie reakcie. Reakčná zmes sa skoncentrovala a podrobila rýchlej chromatografii použitím 20% až 70% etylacetátu v hexánoch. Frakcie, ktoré obsahujú požadovaný produkt sa spojili a skoncentrovali na bielu penu (6,88 g, 87,3%). TLC so zmesou 50:50 etylacetátu vykázala jednu škvrnu (Rf = 0,37). NMR δ ppm (CD3OD): 7,8 (m, 2H), 7,65 (m, 2H), 7,4 (m, 2H), 7,3 (m, 2H), 5,9 (m, 1 H), 5,1 - 5,4 (m, 2H), 4,55 - 4,65 (m, 2H), 4,3 - 4,4 (m, 2H), 4,15 4,25 (m, 1 H), 4,01 (s, 1 H), 3,9 - 4,0 (m, 3H), 1,5-1,6 (m, 2H), 1,35 - 1,45 (m, 3H), 0,9 (m, 3H).
E) Syntéza Fmoc-nVal-(CO)-Gly-O-alylu
EDC, kyselina dichlóroctová dimetylsulfoxid, toluén
Fmoc-HN
Do roztoku Fmoc-nVal-(CHOH)-Gly-O-alylu (Krok D) (5,01 g, 10,77 mmol) v dimetylsulfoxide (100 ml) a toluéne (100 ml) bol pridaný EDC (20,6 g, 107,7 mmol). Reakčná zmes sa ochladila na 0 °C a po kvapkách sa pridala kyselina dichlóroctová (4,44 ml, 53,83 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala počas 15 minút pri 0 °C a 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Po ochladení späť na 0 °C sa pridala voda (70 ml) a toluén sa odstránil za zníženého tlaku. Zostávajúci zbytok sa zriedil etylacetátom a premyl viac krát nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, po ktorom
-221 nasledoval roztok 1 mol/l hydrogensíranu sodného a soľanka. Organická vrstva sa vysušila nad síranom sodným, prefiltrovala a skoncentrovala. Predpokladal sa teoretický výťažok 4,99 g a reakčná zmes sa zobrala do nasledujúceho kroku bez ďalšieho čistenia. TLC v zmesi 50:50 etylacetát vykázala jednu škvrnu (Rf = 0,73).
F) Syntéza Fmoc-nVa!-(dpsc)-Gly-O-alyl
Fmoc-HN
Do roztoku Fmoc-nVal-(CO)-Gly-O-alylu (Krok E) (4,99 g, 10,75 mmol) v etanole (130 ml) a vode (42 ml) bol pridaný postupne difenylmetyl-semikarbazid (dpsc), trifluóracetátová soľ (Krok IC) (7,6 g, 21,5 mmol) a octan sodný.3H2O (1,76 g, 12,9 mmol). Reakčná zmes sa zahrievala pod refluxom počas 90 minút. Ukončenie reakcie potvrdila TLC robená v zmesi 1:1 etylacetát:hexán. Etanol sa odstránil za zníženého tlaku a zostávajúci zbytok sa rozpustil v etylacetáte a premyl roztokom 1 mol/l hydrogensíranu sodného (2x 10 ml), nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2x 10 ml), nasledovaný soľankou (10 ml). Organická vrstva sa vysušila, prefiltrovala a skoncentrovala. Výsledný zbytok sa čistil pomocou rýchlej chromatografie v zmesi 20% až 50% etylacetátu v hexánoch, čím sa poskytla biela tuhá látka (5,76 g, 78%). TLC v zmesi 50:50 etylacetáthexány vykázala dve škvrny (cis a trans izomérov) s Rf = 0,42 a 0,5.
-222Do roztoku Fmoc-nVal-(dpsc)-Gly-O-alylu (Krok IG) (4,53 g, 6,59 mmol) v tetrahydrofuráne (300 ml) bol pridaný dimedón (4,62 g, 32,97 mmol) nasledovaný katalyzátorom tetrakis-(trifenylfosfínom) paládia(O) (0,76 g, 0,66 mmol). Ukončenie reakcie potvrdila TLC po 90 minútach použitím zmesi 9:1 dichlórmetán:metanol. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zostávajúci zbytok sa rozpustil v etylacetáte a premyl tri krát s 50 ml podielmi 0,1 mol/l dihydrogenfosforečnanu draselného. Organická vrstva sa potom opracovala s 50 ml hydrogensiričitanu sodného a dvojfázový systém sa premiešaval počas 15 minút. Fázy sa oddelili a postup sa opakoval ešte dvakrát. Organická vrstva sa vysušila a skoncentrovala a podrobila sa rýchlej chromatografii so zmesou 20% až 100% etylacetátu v hexánoch. Po tom nasledoval roztok 9:1 dichlórmetán:metanol. Frakcie zodpovedajúce čistému produktu sa spojili a skoncentrovali, čím sa získala biela tuhá látka (3,99 g, 94%). TLC so zmesou 9:1 dichlórmetán:metanol vykázala dve škvrny (cis a trans izomérov). NMR δ ppm (CD3OD): 7,75 (m, 2H), 7,6 (m, 3H), 7,2 - 7,4 (m, 14H), 6,1 -
6,2 (m, 1 H), 4,25 - 4,4 (m, 2H), 4,1 - 4,2 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 1,6-1,8 (m, 2H), 1,3 - 1,5 (m, 2H), 0,95 (t, 3H).
Krok 2: Syntéza H-Phg-MBHA živice
Komerčne dostupná MBHA živica (2,6 g, 1,12 mmol/g, 2,91 mmol) sa preniesla do 250 ml reakčnej nádoby s fritou vybavenej so vstupom dusíka. Potom sa dôkladne premyla s 30 ml podielmi dichlórmetánu, metanolu, dimetylformamidu a dichlórmetánu a kopulovala sa počas 18 hodín na komerčne dostupný Fmoc-PhgOH (2,17 g, 5,82 mmol) podľa Postupu A s 99,82%-nou účinnosťou. Živica sa potom podrobila Fmoc deprotekcii podľa postupu B. Kvalitatívna ninhydrínová skúška na malom alikvotnom podiele poskytla tmavo modrú živicu a roztok, čo indikovalo úspešnú reakciu.
-223Krok 3: Syntéza H-nVal-(dpsc)-Gly-Pha-MBHA živice
Živica získaná v Kroku II (2,6 g, 0,8 mmol/g, 2,91 mmol) reagovala s FmocnVal-(dpsc)-Gly-O-alylom (Krok IG) (5,82 mmol, 3,77 g) podľa Postupu A. Po 18 hodinách, kvantitatívna ninhydrínová analýza ukázala 99,91 %-nú kopulačnú účinnosť. Živica sa podrobila Fmoc deprotekcii podľa postupu B. Kvalitatívna ninhydrínová skúška na malom alikvotnom podiele poskytla tmavo modrú živicu a roztok, čo indukuje úspešnú reakciu.
Krok 4: Syntéza Boc-Pro(4t-NHFmoc)-nVal(dpsc)-Gly-Pha-MBHA živice
Zlúčenina H-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA živice (Krok 3 vyššie) (600 mg, 0,8 mmol/g, 0,67 mmol) sa preniesla do fritovej polypropylénovej skúmavky a kopulovala sa na Boc-Pro(4t-NHFmoc)-OH (Príklad 6, Krok 3) (610 mg, 1,34 mmol) podľa postupu A. Po 18 hodinách kvantitatívna ninhydrínová analýza ukázala 99,96%-nú kopulačnú účinnosť.
Krok 5: Syntéza Boc-Pro(4t-NH)-nVal(dpsc)-Gly-Pha-MBHA živice
-224-
NH-MBHA živica
Živica z predchádzajúceho kroku (Boc-Pro(4t-NHFmoc)-nVal(dpsc)-GlyPhg-MBHA živica) sa podrobila Fmoc deprotekcii podľa postupu B. Kvalitatívna ninhydrínová skúška na malom alikvotnom podiele poskytla tmavo modrú živicu a roztok, čo indikuje úspešnú reakciu.
Krok 6: Syntéza Boc-Pro(4t-NHSO2Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA živice
NH-MBHA živica
K živici získanej z predchádzajúceho kroku (Boc-Pro(4t-NH2)-nVal (dpsc)Gly-Phg-MBHA živica) (0,2 g, 0,22 mmol) v suspenzii v NMP (2 ml) bol pridaný 2,4,6-kolidín (0,24 ml, 1,79 mmol) a benzénsulfonylchlorid a reakčná zmes sa pretrepávala počas 18 hodín. Rozpúšťadlo sa odsalo a živica sa premyla pozorne s 2 ml podielmi dichlórmetánu, metanolu, dimetylformamidu a dichlórmetánu. Kvalitatívna ninhydrínová analýza vykázala bezfarebné perličky roztok, čo indikuje úspešnú reakciu.
Krok 7: Syntéza Fmoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phq-MBHA živice
- 225 -
H A Ν'ΆχΝΗ-ΜΒΗΑ živica
Živica získaná v predchádzajúcom kroku (Boc-Pro(4t-NHSO2Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA živica) sa podrobila Boe deprotekcii postupom podľa postupu C. Fmoc-G(Chx) (0,17 g, 0,45 mmol) sa potom kopuloval podľa postupu A. Po 18 hodinách kvalitatívna ninhydrínová analýza vykázala bezfarebné perličky a kvantitatívna ninhydrínová analýza ukázala 99,79%-nú kopulačnú účinnosť.
Krok 8: Syntéza Boc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phq-MBHA živice
Živica získaná v predchádzajúcom kroku (Fmoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA živica) sa podrobila Fmoc deprotekcii podľa postupu B. Ninhydrínová skúška na malom alikvotnom podiele poskytla tmavo modrú živicu a roztok, čo indikuje úspešnú reakciu. K živici (0,2 g, 0,22 mmol) suspendovanej v 2 ml NMP bol pridaný izobutylchlórmravčan (0,12 ml, 0,90 mmol), potom nasledoval diizopropyletylamín (0,31 ml, 1,79 mmol), a reakčná zmes sa pretrepávala počas 18
-226hodín pri laboratórnej teplote. Kvalitatívna ninhydrínová analýza vykázala bezfarebné perličky a roztok, čo indikuje úspešnú reakciu.
Krok 9: Syntéza iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)-nVal(CO)-Gly-Pha-MBHA živice
NH-MBHA živica
Zlúčenina z predchádzajúceho kroku (iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA živice) (200 mg) sa podrobila semikarbazónovej hydrolýze Postupom D.
Krok 10: Syntéza iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)-nVal(CO)-GlyPha-NH2
Živica z predchádzajúceho kroku (iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO2Bn)nVal(CO)-Gly-Phg-MBHA živica) (100 mg) sa podrobila HF štiepnym podmienkam (Postup E), čím sa poskytol požadovaný surový produkt. Tento materiál sa čistil
-227pomocou HPLC použitím 2,2 x 25 cm kolóny s obrátenými fázami, ktorá obsahovala C-18 náplň s gólovými časticami veľkosti 10 pm s 300 angstrómovou veľkosťou pórov, eluovaním gradientom použitím 20 až 50% acetonitrilu vo vode. Analytická HPLC použitím kolóny 4,6 x 250 mm s obrátenými fázami, ktorá obsahovala C-18 náplň s gólovými časticami veľkosti 5 pm s 300 angstrómovou veľkosťou pórov, eluovaním gradientom použitím 25 až 75% acetonitrilu (obsahujúceho 0,1% kyseliny trifluóroctovej) vykázala jeden pík v čase 13,5 minút. Hmotnostné spektrum s nízkym rozlíšením potvrdilo požadovanú hmotnosť (MH+ 826,4).
IV. Ďalšie zlúčeniny pripravené pomocou syntézy v roztokovej fáze
Reprezentatívne postupy na prípravu ďalších zlúčenín podľa tohto vynálezu sú uvedené nižšie a zlúčeniny pripravené pomocou týchto postupov sú uvedené v Tabuľke 5.
Príklad 23: Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXIII ch3xxch3
Premiešavaný roztok ketimínu XXIIIa (50 g, 187,1 mmol) pod N2 v suchom THF (400 ml) sa ochladil na -78 °C a opracovala s roztok 1 mol/lom K-lBuO (220 ml, 1,15 ekviv.) v THF. Reakčná zmes sa zahriala na 0 °C a premiešavala sa počas 1
-228hodiny a opracovala sa brómmetyl-cyklobutánom (28 ml, 249 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 48 hodín a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa rozpustil v Et2O (300 ml) a opracoval vodným roztokom HCI (2 mol/l, 300 ml). Výsledný roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 5 hodín a extrahoval sa Et2O (1 I). Vodná vrstva sa alkalizovala na pH asi 12 až 14 s roztokom NaOH (50%-ný vodný roztok) a extrahovala sa CH2CI2 (3x 300 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali, čím sa poskytol čistý amín (XXIIIb, 18 g) ako bezfarebný olej.
Krok 2
(XXIIIb)
Roztok amínu XXIIIb (18 g, 105,2 mmol) pri 0 °C v CH2CI2 (350 ml) sa opracoval di-terc-butyldikarbonátom (23 g, 105,4 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 12 hodín. Po ukončení reakcie (TLC) sa reakčná zmes skoncentrovala za vákua a zvyšok sa rozpustil v zmesi THF/H2O (200 ml, 1:1) a opracovala s LiOH.H2O (6,5 g,158,5 mmol) a premiešavala pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala a zásaditá vodná vrstva sa extrahovala s Et2O. Vodná vrstva sa okyslila koncentrovanou HCI na pH asi 1 až 2 a extrahovala sa s CH2CI2. Spojené organické vrstvy sa vysušili (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali za vákua, čím sa poskytla zlúčeninu XXIIIc ako bezfarebný viskózny olej, ktorý sa použil pre nasledujúci krok bez ďalšieho čistenia.
Krok 3
( XXlllc )
( XXIIId )
-229Roztok kyseliny XXIIle. (15,0 g, 62 mmol) v CH2CI2 (250 ml) sa opracoval BOP činidlom (41,1 g, 93 mmol), A/-metylmorfolínom (27 ml), /V,O-dimetylhydroxylamínom, hydrochloridom, (9,07 g, 93 mmol) a premiešaval sa počas noci pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zriedila vodným roztokom 1 mol/l HCI (250 ml) a vrstvy sa oddelili a vodná vrstva sa extrahovala s CH2CI2 (3x 300 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali za vákua a čistili sa pomocou chromatografie (SiO2, EtOAc/hexán 2:3), čím sa poskytol amid XXIIId (15,0 g) ako bezfarebná tuhá látka.
Krok 4
BocHN
(XXIIId *)
( XXIIle)
Roztok amidu XXIIId (15 g, 52,1 mmol) v suchom THF (200 ml) sa opracoval po kvapkách s roztokom LiAIH4 (1 mol/l, 93 ml, 93 mmol) pri 0 °C. Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 1 hodiny a reakcia sa pozorne zastavila pri 0 °C roztokom KHSO4 (10%-ný vodný roztok) a zmes sa premiešavala počas 0,5 hodiny. Reakčná zmes sa zriedila vodným roztokom HCI (1 mol/l, 150 ml) a extrahovala sa CH2CI2 (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli vodným roztokom HCI (1 mol/l), nasýteným NaHCOs, soľankou a vysušili sa (MgSO4). Zmes sa prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla zlúčenina XXIIle ako viskózny bezfarebný olej (14 g).
Krok 5
( XXIIle )
(XXIIIf)
-230Roztok aldehydu XXIIIe (14 g, 61,6 mmol) v CH2CI2 (50 ml) sa opracoval Et3N (10,73 ml, 74,4 mmol) a acetón-kyanohydrínom (10,86 g, 127,57 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua a zriedila vodným roztokom HCI (1 mol/l, 200 ml) a extrahovala sa do CH2CI2 (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli H2O, soľankou, vysušili sa (MgSO4), prefiltrovali, skoncentrovali sa za vákua a čistili sa pomocou chromatografie (SiO2, EtOAc/hexán 1:4), čím sa poskytla zlúčenina XXIIIf (10,3 g) ako bezfarebná kvapalina.
OH
Krok 6
BocHN
(.XXIIIg)
Metanol nasýtený s HCľ pripravený prebublávaním plynného HCI cez CH3OH (700 ml) pri 0 °C sa opracoval kyanohydrínom XXIIIf a zahrieval sa pod refluxom počas 24 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla zlúčenina XXIIIg, ktorá sa použila v nasledujúcom kroku bez čistenia.
* Alternatívne sa môže tiež použiť 6 mol/l HCI pripravený prídavkom AcCI do suchého metanolu.
Krok 7
(XXIIIg')
BocHN
(XXIllh)
Roztok amínu, hydrochloridu, XXIIIg v CH2CI2 (200 ml) sa opracoval Et3N (45,0 ml, 315 mmol) a Boc2O (45,7g, 209 mmol) pri -78 °C. Reakčná zmes sa potom premiešavala pri laboratórnej teplote počas noci a zriedila sa s HCI (2 mol/l,
-231 200 ml) a extrahovala sa do CH2CI2. Spojené organické vrstvy sa vysušili (MgSOú prefiltrovali, skoncentrovali za vákua a čistili sa pomocou chromatografie (EtOAc/hexán 1:4), čím sa poskytol hydroxyesterXXIIIh.
Krok 8
BocHN
Roztok metylesteru XXIIlh (3g, 10,5 mmol) v THF/H2O (1:1) sa opracoval LÍOH.H2O (645 mg, 15,75 mmol) a premiešavala sa pri laboratórnej teplote počas 2 hodín. Reakčná zmes sa okyslila s vodným roztokom HCI (1 mol/l, 15 ml) a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa vysušil za vákua.
Roztok kyseliny v CH2CI2 (50 ml) a DMF (25 ml) sa opracoval NH4CI (2,94 g, 55,5 mmol), EDCI (3,15 g, 16,5 mmol), HOOBt (2,69 g, 16,5 mmol) a NMM (4,4 g, 44 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 3 dní. Rozpúšťadlá sa odstránili za vákua a zvyšok sa zriedil vodným roztokom HCI (250 ml) a extrahoval sa s CH2CI2. Spojené organické vrstvy sa premyli vodným nasýteným roztokom NaHCO3, vysušili (MgSO4), prefiltrovali sa a skoncentrovali za vákua, čím sa získala zlúčenina XXIIIi, ktorá sa použila bez úpravy v nasledujúcich krokoch.
(Alternatívne sa zlúčenina XXIIIi môže tiež získať priamo pomocou reakcie XXIIIf (4,5 g, 17,7 mmol) s vodným roztokom H2O2 (10 ml), LiOH. H2O (820 mg, 20,8 mmol) pri 0 °C v 50 ml CH3OH počas 0,5 hodiny)
(XXIIIi )
NH2 (XXIIIj)
-232Roztok XXlIli získaný v predchádzajúcom kroku sa rozpustil v 4 mol/l HCI v dioxáne a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 2 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua, čím sa poskytol XXIIIj ako tuhá látka, ktorá sa použila bez
| ďalšieho čistenia. | ||
| Krok 10 | CHa^CHs | |
| O ΒοοΗΝ^^Λθπ i + O | CH3^CH3 H2CI 0 | 0vcH3 |
| r *? H BocHN^Á>o 0 Ô | ||
| (XXIIIk') | (xxmi) | (xxmm) |
| Aminoester XXIIII | bola pripravený | podľa spôsobu R. Zhang a J.S |
Madalengoitia (J. Org. Chem. 1999, 64, 330) s výnimkou, že Boe skupina sa odštiepila pomocou reakcie Boc-chránenej aminokyseliny s metanolickým roztokom HCI.
Roztok komerčnej aminokyseliny Boc-Chg-OH, XXIIIk (Senn chemicals, 6,64 g, 24,1 mmol) a amín hydrochloridu XXIIII (4,5 g, 22 mmol) v CH2CI2 (100 ml) pri 0 °C sa opracoval BOP činidlom a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 15 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua, potom sa zriedila vodným roztokom 1 mol/l HCI a extrahovala sa do EtOAc (3x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli nasýteným roztokom NaHCO3 (200 ml), vysušili (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali za vákua a chromatografovali (S1O2, EtOAc/hexán 3:7), čím sa získala zlúčenina XXIIIm (6,0 g) ako bezfarebná tuhá látka.
Krok 11
CH3^CH3
BocHN^A>0
CH5^/CH3 /V OH
Qvá
BocHN^A>0 0
(XXIIIm') (XXlIIn )
-233Roztok metylesteru XXIIIm (4,0 g, 9,79 mmol) v THF/H2O (1:1) sa opracoval LÍOH.H2O (401 mg, 9,79 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Reakčná zmes sa okyslila vodným roztokom HCI a skoncentrovala sa za vákua, čím sa získala voľná kyselina.
Roztok kyseliny (1,5 g; 3,74 mmol) v DMF/CH2CI2 (1:1, 50 ml) sa opracoval amínom XXIIIj (772 mg, 3,74 mmol), EDCI (1,07 g, 5,61 mmol), HOOBt (959 mg, 5,61 mmol) a NMM (2,15 ml, 14,96 mmol) pri -10 °C. Reakčná zmes sa premiešavala pri 0 °C počas 48 hodín a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa zriedil vodným roztokom 1 mol/l HCI a extrahoval sa CH2CI2. Spojené organické vrstvy sa extrahovali vodným roztokom NaHCO3, vodným roztokom HCI, soľankou, vysušili sa (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali za vákua, čím sa získala zlúčenina XXIIIn (2,08 g) ako hnedo zafarbená tuhá látka.
Krok12
CH3^/CH3
BocHN^A-θ θ \ O ό ( XXIII)
Roztok amidu XXIIIn (2,08 g, 3,79 mmol) v toluéne a DMSO (1:1 20 ml) pri 0 °C sa opracoval EDCI (7,24 g, 37,9 mmol) a kyselinou dichlóroctovou (2,42 g, 19,9 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 4 hodín. Reakčná zmes sa zriedila s CH2CI2, premyla nasýteným roztokom NaHCO3 a soľankou. Organická vrstva sa vysušila (MgSO4), prefiltrovala, skoncentrovala za vákua a čistila sa pomocou chromatografie (SiO2, acetón/hexány 3:7), čím sa poskytla zlúčenina XXIII ako bezfarebná tuhá látka.
Príklad 24
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXIV
-234Krok 1
O
ΒοοΗΝ^Λθπ chí7h?H3 (XXIVa)
(χχιν) ch3x/ch3 % » •i* +
och3 (ΧΧΠΊ1) ch3^ch3
och3
BocHN. X. θ (xXTVb)
XXIVa (Fluka, 5,0 g 21,6 mmol) v suchom CH2CI2/DMF (50 ml, 1:1) sa ochladila na 0 °C a opracovala s amínom XXIIII (5,3 g, 25,7 mmol), NMM (6,5 g, 64,8 mmol) a BOP činidlom (11,6 g, 25,7 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 24 hodín, zriedila sa vodným roztokom HCI (1 mol/l) a extrahovala sa CH2CI2. Spojené organické premyli HCI (vodný roztok 1 mol/l), nasýteným vysušili sa (MgSO4), prefiitrovali a skoncentrovali chromatografie (S1O2, acetón/hexán 1:5), čím sa bezfarebná tuhá látka.
Roztok Boc-ŕerc-Lue roztokom NaHCO3, za vákua a čistili sa vrstvy sa soľankou, pomocou poskytla zlúčenina XXIVb ako
Krok 2
| CH3x^CH3 | ch3^ch3 |
| Ού00”3 | H H 0ύ' |
| BocHN^yo 0 | °CHÍh3H3 |
| CH3^H3 | |
| . (XXIVb) | (XXIVc) |
-235Roztok metylesteru XXIVb (4,0 g, 10,46 mmol) sa rozpustil v HCI (4 mol/l roztok v dioxáne) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua, čím sa získal amín, hydrochloridová soľ, použitý v nasledujúcom kroku.
Roztok amínu, hydrochloridová soľ, (397 mg, 1,24 mmol) v CH2CI2 (10 ml) sa ochladil na -78 °C a opracovala s terc-butyl-izokyanátom (250 mg, 2,5 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas noci. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua a zvyšok sa zriedil vodným roztokom HCI (1 mol/l) a extrahoval sa s CH2CI2. Spojené organické vrstvy sa premyli vodným roztokom HCI (1 mol/l), nasýteným roztokom NaHCO3 a soľankou. Organické vrstvy sa vysušili, prefiltrovali a skoncentrovali za vákua a zvyšok sa čistil pomocou chromatografie (SiO2, acetón/hexán 1:4), čím sa poskytla zlúčenina XXIVc ako bezfarebná tuhá látka.
Krok 3
CH3^CH3
(XXIVc) (XXIVd)
Roztok metylesteru XXIVc (381 mg, 1,0 mmol) v THF/H2O (1:1, 5 ml) sa opracoval LiOH.H2O (62 mg, 1,5 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Reakčná zmes sa okyslila vodným roztokom HCI a skoncentrovala sa za vákua, čím sa získala voľná kyselina.
Roztok kyseliny (254,9 mg, 0,69 mmol) v DMF/CH2CI2 (1:1, 5,0 ml) sa opracoval amínom XXIIIj (169 mg, 0,763 mmol), EDCI (199 mg, 1,04 mmol), HOOBt (169,5 mg, 1,04 mmol) a NMM (280 mg, 2,77 mmol) pri -20 °C. Reakčná zmes sa premiešavala pri -20 °C počas 48 hodín a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa zriedil vodným roztokom 1 mol/l HCI a extrahoval sa s EtOAc. Spojené organické vrstvy sa extrahovali vodným roztokom NaHCO3, vodným roztokom HCI, soľankou,
-236vysušili sa (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali za vákua, čím sa získala zlúčenina XXIVd (470 mg) ako hnedo zafarbená tuhá látka.
Krok 4
(XXIVd)
Roztok amidu XXIVd (470 mg, 0,9 mmol) v toluéne a DMSO (1:1,20 ml) pri 0 °C sa opracoval EDCI (1,72 g, 9,0 mmol) a kyselinou dichlóroctovou (0,37 ml, 4,5 mmol) a premiešaval sa pri 0 °C počas 4 hodín. Reakčná zmes sa zriedila s CH2CI2 a premyla sa s nasýteným roztokom NaHCO3 a soľankou. Organická vrstva sa vysušila (MgSO4), prefiltrovala, skoncentrovala sa za vákua a čistila pomocou chromatografie (SiO2, acetón/hexány 3:7), čím sa poskytla zlúčenina XXIV ako bezfarebná tuhá látka.
Príklad 25
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXV
ch3.
CH3
ΎΎ CH3 °CH3T.cH3
Cn3
(xxv)
Krok 1
FmocHN'^^ O
FmocHN'^Y'
O
(XXVa) (XXVb) (XXVc)
-237Roztok Fmoc-glycínu (Bachem, 2,0 g, 6,87 mmol) v CH2CI2 (20 ml) sa opracoval 2-fenyl-2-propanolom (Aldrich, 3,36 g, 24,7 mmol), DCC (roztok 1 mol/l CH2CI2, 8,24 ml), DMAP (167 mg, 1,37 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua a zriedila s Et2O (100 ml). Tuhá látka, ktorá sa oddelila, sa odfiltrovala a filtrát sa premyl nasýteným roztokom NaHCO3. Organická vrstva sa vysušila (MgSO4), prefiltrovala, skoncentrovala za vákua a čistila sa pomocou chromatografie (S1O2, EtOAc/hexán 1:5), čím sa poskytol ester XXVc (1,1 g) ako bezfarebná viskózna kvapalina.
Krok 2
FmocHNx~xpx
O CH3 “ (XXVc')
Roztok XXVc v CH2CI2 (16,0 ml) sa opracoval piperidínom (4,0 ml) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 0,5 hodiny. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua a čistila sa pomocou chromatografie (SiO2, acetón/hexány 1:10 až 1:1), čím sa poskytol amín XXVd (420 mg) ako bezfarebná kvapalina.
Krok 3
(XXIVc)
(XXVe)
Roztok metylesteru XXIVc (381 mg, 1,0 mmol) v THF/H2O (1:1, 5 ml) sa opracoval LÍOH.H2O (62 mg, 1,5 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Reakčná zmes sa okyslila vodným roztokom HCI a skoncentrovala sa za vákua, čím sa získala voľná kyselina.
-238Roztok kyseliny (2,0 g, 5,5 mmol) v DMF/CH2CI2 (1:1,40,0 ml) pri -10 °C sa opracoval amínom XXIIIg (1,51 g, 6,8 mmol), EDCI (1,57 g, 8,25 mmol), HOOBt (1,41 g, 8,25 mmol) a NMM (2,5 g, 24,7 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri 0 °C počas 48 hodín a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa zriedil vodným roztokom 1 mol/l HCI (100 ml) a extrahoval sa CH2CI2 (3x 100 ml). Spojené organické vrstvy sa extrahovali vodným roztokom NaHCO31 vodným roztokom HCI, soľankou, vysušili sa (MgSO4), prefiltrovali, skoncentroval sa za vákua, čim sa získala zlúčenina XXVe (3,17 g) ako hnedo zafarbená tuhá látka použitá ďalej bez čistenia.
Krok 4
CH3><CH3
(XXVe')
(XXVf)
Roztok metylesteru XXVe (2,5 g, 4,66 mmol) v THF/H2O/CH3OH (1:1:1, 60 ml) sa opracoval a LiOH.H2O (200 mg, 4,87 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 4 hodín. Reakčná zmes sa okyslila vodným roztokom HCI a skoncentrovala sa za vákua, čím sa získala voľná kyselina.
Roztok kyseliny (200,0 mg, 0,38 mmol) v DMF/CH2CI2 (1:1, 6,0 ml) pri -10 °C sa opracoval amínom XXVd (78 mg, 0,4 mmol), EDCI (105 mg, 0,55 mmol), HOOBt (95 mg, 0,55 mmol) a NMM (150 mg, 1,48 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri 0 °C počas 48 hodín a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa zriedil vodným roztokom 1 mol/l HCI (30 ml) a extrahoval s CH2CI2 (3x 30 ml). Spojené organické vrstvy sa extrahovali vodným roztokom NaHCO3 (2x 30 ml), vodným roztokom HCI, soľankou (30 ml), vysušili sa (MgSO4), prefiltrovali, skoncentrovali sa za vákua, čím sa získala zlúčenina XXVf (240 mg) ako hnedo zafarbená tuhá látka.
-239Krok 5
( XXVf) cH3X/CH3
(xxv)
Roztok XXVf (240 mg, 0,28 mmol) v CH2CI2 (10 ml) sa opracoval DessMartinovým činidlom (Omega, 242 mg, 0,56 mmol) a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 2 hodín. Po tom ako oxidácia bola úplná (TLC, acetón/hexán1:4) reakčná zmes sa zriedila nasýteným roztokom NaHCO3 (20 ml) a Na2S2O3 (10%-ný vodný roztok, 20 ml). Reakčná zmes sa premiešavala počas 30 minút a extrahovala sa s CH2CI2 (3x 30 ml). Spojené organické vrstvy sa extrahovali nasýteným roztokom NaHCO3, soľankou, vysušili sa (MgSO4), prefiltrovali, skoncentrovali sa za vákua a čistili sa pomocou chromatografie (S1O2, acetón/hexány 1:5), čím sa poskytla zlúčenina XXV (122 mg) ako bezfarebná tuhá látka.
Príklad 26
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXVI
(xxvi)
-240Krok 1
Q^CO2H ^P^CO2tBu
Boe θ00 ( XXVIa) (XXVIb)
Do premiešavaného roztoku /V-Boc-3,4-dehydroprolínu XXVIa (5,0 g, 23,5 mmol), di-terc-butyldikarbonátu (7,5 g, 34,4mmol) a 4-/V,A/-dimetylaminopyridínu (0,40 g, 3,33 mmol) v acetonitrile (100 ml) pri laboratórnej teplote bol pridaný trietylamín (5,0 ml, 35,6 mmol). Výsledný roztok sa premiešaval pri tejto teplote počas 18 hodín pred tým, ako sa skoncentroval za vákua. Tmavohnedý zbytok sa čistil pomocou rýchlej kolónovej chromatografie eluovaním zmesou 10 až 25 % EtOAc/hexán, čím sa poskytol produkt XXVIb ako bledo žltý olej (5,29 g, 84%).
Krok 2
O^CI
CC^tBu
Boe
C XXVIb) ^Ň^CO2tBu
Boe (XXVIcb
Do premiešavaného roztoku dehydroprolínu XXVIb (10,1 g, 37,4 mmol), benzyltrietylchloridu amónneho (1,60 g, 7,02mmol) v chloroforme (120 ml) pri laboratórnej teplote bol pridaný vodný roztok 50% hydroxidu sodného (120 g). Po prudkom premiešavaní pri tejto teplote počas 24 hodín sa čierna zmes zriedila s CH2CI2 (200 ml) a dietyléterom (600 ml). Po tom, ako sa vrstvy oddelili, sa vodný roztok extrahoval s CH2CI2/EÍ2O (1:2, 3x 600 ml). Organický roztok sa vysušil (MgSO4) a skoncentroval. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej kolónovej chromatografie použitím zmesi 5 až 20% EtOAc/hexán, čím sa poskytlo 9,34 g (71 %) zlúčeniny XXVIc ako špinavo biela tuhá látka.
-241 -
| Krok 3 ci^ci | Cl^ci |
| ^/^CO2tBu 1 Boe | * Q-co2h CF3CO2H H |
| C XXVIe') | (XXVld') |
Roztok XXVIe (9,34 g, 26,5 mmol) v CH2CI2 (25 ml) a CF3CO2H (50 ml) sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 4,5 hodiny pred tým, ako sa skoncentroval za vákua, čím poskytol hnedý zbytok, ktorý sa použil v Kroku 4 bez ďalšieho čistenia.
Krok 4 c,vc' / \ cf3co2h
An>^C02H
H ( XXJIld )
CC^Me
C ΧΧΙ11Θ ) 'HCI
Komerčná koncentrovaná kyselina chlorovodíková (4,5 ml) sa pridala do roztoku zvyšku z Kroku 3 v metanole (70 ml) a výsledná zmes sa zahrial na 65 °C v olejovom kúpeli. Po 18 hodinách sa zmes skoncentrovala za vákua, čím sa poskytol hnedý olej XXVIe, ktorý sa použila v Kroku 5 bez ďalšieho čistenia.
Krok 5
CO2Me
H - HCI ( XXVIe)
BocHN^C02H ô ( XXVlf)
CO2Me
BocHN^/^θ
(XXVIg)
Do premiešavaného roztoku prolín-metylesteru XXVIe z Kroku 4, komerčného /V-Boc-cyklohexylglycínu XXVlf (10,2 g, 40,0 mmol) a [O-(7-aza-242benzotriazol-1 -yl)-1,1,3,3-tetrametyluróniumhexafluórfosfátu] (HATU) (16,0 g, 42,1 mmol) v DMF (200 ml) pri O °C bol pridaný diizopropyletylamín (18,0 ml, 104 mmol). Po tom ako sa ponechala zahriať sa na laboratórnu teplotu spolu s ľadovým kúpeľom počas noci (18 hodín), sa reakčná zmes zriedila s EtOAc (600 ml), 5% H3PO4 (150 ml) a soľankou (150 ml). Organický roztok sa premyl roztokom 5% H3PO4 (150 ml), nasýteným NaHCO3 (2x 200 ml) pred tým, ako sa vysušil (MgSO4), prefiltroval a skoncentroval za vákua. Zvyšok sa čistil pomocou rýchlej kolónovej chromatografie použitím zmesi 5 až 20% EtOAc/hexán, čím sa poskytlo 3,84 g (32%, tri kroky) zlúčeniny XXVIg ako špinavo biela tuhá látka.
Krok 6 ci^ci ^/^•CO2Me
BocHN^/k0 clvcl
Q^CO2H
BocHN^Áq
(XXVIg) (XXVIh)
Roztok metylesteru XXVIg (5,87g, 13,1 mmol) a LiOH (1,65 g, 39,3 mmol) v zmesi THF/MeOH/H2O (1:1:1, 90 ml) sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 4 hodín. Metanol a THF sa odstránili za zníženého tlaku. Vodný roztok sa okyslil na pH asi 2 použitím vodného roztoku 1 mol/l HCI (50 ml) a nasýtil sa tuhým chloridom sodným pred tým, ako sa extrahovala s EtOAc (3x 150 ml). Organické roztoky sa spojili, vysušili (MgSO4), prefiltrovali a skoncentrovali za vákua, čím sa poskytla biela tuhá látka XXVIh (5,8 g, kvantitatívne).
Krok 7
| Clvci | Cl^ci |
| OH N CO2H NH2 ΒοοΗΝ^Αθ HCI T Y _ | ŕ--=1 |_| OH S.YyV'2 ----- BocHN^ko 0 X. O |
| Ó | Ó |
| ( XXVIh') (XXIIIj) | (xxvn) |
-243Požadovaný produkt XXIIIi bol pripravený podľa postupu z Príkladu 23, Krok
11.
Krok 8
(XXVli)
(XXVQ
Požadovaný produkt XXVI bola pripravený podľa postupu v
Krok 12.
Príklade 23,
Príklad 27
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXVII
Cxxvila)
Požadovaný produkt XXVIIa bol pripravený podľa postupu v Príklade 23,
Krok 9.
-244Krok2
CxXVIIa) f XXVIIb)
Požadovaný produkt XXVIIb bol pripravený podľa postupu v Príklade 24, Krok 2.
Krok 3
( XXVIIb ) ('xxvn')
Požadovaný produkt XXVII bol pripravený podľa postupu v Príklade 23,
Krok 12.
Príklad 28
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXVIII
( XXVIII)
Krok 1
| -245- | |
| 0 BocHNyXOH | OH H2NxJ^.OMe ----- .HdTj |
| V ( XXVIIla) | ( XXVIIIb) |
Medziprodukt XXVIIIb bol pripravený podľa postupu v Príklade 23, Kroky 3 až 6.
Krok 2
| Me^Me | MeKzMe |
| í I + ^Υ,ΟΜβ Β-ΗΝ^Αθ ° HCITJ | r\ H _ QvA ΒοοΗΝ^Αθ 0 \ ° |
| MeYMe Me v | Me^Me Me |
| (XXVIIIc) ( XXVIIIb) | (xXVIIld ) |
Kyselina z príkladu 24, Krok 2 (XXVIIIc) (0,7g), reagovala s produktom z Kroku 1 uvedeného vyššie (0,436 g), HATU (0,934 g) a DIPEA (1,64 ml) skôr opísaným spôsobom v Príklade 9, Krok 2a, čím sa poskytlo 0,66 g požadovaného produktu XXVIIId.
Krok 3
| Me^Me | Me^Me |
| A H WA°Me | |
| N II | II BocHN^A0 ° \-2 | BocnryV L· |
| Ä 'Z MeJ.Me Me | Me<?Me Me |
| (xxviiiď) | C XXVIIIe) |
Produkt z Kroku 2 (0,5 g) reagoval s Dess-Martinovým činidlom (1 g) skôr opísaným spôsobom ž Príkladu 20, Krok 7: Čistenie pomocou rýchlej kolónovej chromatografie (40% EtOAc, hexán, silikagél) poskytli 0,35 g produktu XXVIIIe.
-246Hmotnostné spektrum (LCMS) 522 (M+H+).
Krok 4
(XXVlIIe) Cxxviiií)
K produktu z Kroku 4 (0,3 g) bol pridaný roztok 1/1 H2O/MeOH (20 ml) a NaHCO3 ako tuhá látka (242 mg, 5 ekviv.). Po tom, ako sa premiešaval počas 18 hodín pri laboratórnej teplote, sa reakčná zmes zriedila s EtOAc a vrstvy sa oddelili. Vodná vrstva sa okyslila na pH 2 roztokom 1,0 mol/l HCI a extrahovala sa s EtOAc. EtOAc vrstva sa premyla soľankou, potom sa vysušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala sa za vákua, čím sa poskytol produkt XXVIIIf ako biely prášok (0,26 g). Hmotnostné spektrum (LCMS) 508 (M+H+).
C XXVIIIf )
(XXVIIl)
Produkt z Kroku 5 (0,15 g) sa rozpustil v CH2CI2 a reagoval s HATU (0,137g), NH4CI (0,08 g, 5 ekviv.) a DIPEA (0,53 ml). Po 2 hodinách pri laboratórnej teplote sa reakčná zmes zriedila s EtOAc, premyla roztokom 10% kyseliny citrónovej, potom nasýteným roztokom NaHCO3. Vrstva EtOAc sa premyla soľankou, potom sa vysušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla surová zmes. Čistenie pomocou rýchlej kolónovej chromatografie
-247(30%-ný acetón, hexán, silikagél) poskytlo požadovaný produkt XXVIII (0,096 g). Hmotnostné spektrum (LCMS) 507 (M+H+).
Príklad 29
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXIX
(XXIXa)
Do 0 °C roztok východiskového aldehydu (4,0 g) v CH2CI2 (75 ml) bola pridaná kyselina octová (2,0 ekviv., 2,15 ml), nasledoval metylizokyanoacetát (1,1 ekviv., 1,9 ml). Reakčná zmes sa potom postupne zahriala na laboratórnu teplotu. Po 18 hodinách (počas noci) sa reakčná zmes zriedila s EtOAc a premyla nasýteným roztokom NaHCO3. Vrstva EtOAc sa premyla soľankou, potom sa vysušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla surová zmes. Čistenie pomocou rýchlej kolónovej chromatografie (30 až 40% EtOAc, hexán, silikagél) poskytlo produkt XXIXa (4,5 g).
Krok2
(XXIXa)
(XXIXb)
-248Do 0 °C roztoku XXIXa (4,4 g) v THF (100 ml) sa pridalo 26 ml (2,2 ekviv.) roztoku 1,0 mol/l LiOH. Reakčná zmes sa premiešavala pri tejto teplote počas 2 hodín, potom sa zahriala na laboratórnu teplotu. Po 2 hodinách sa reakčná zmes okyslila na pH 2 roztokom 1,0 mol/l HCI roztok. Pridal sa EtOAc a vrstvy sa oddelili. EtOAc vrstva sa premyla soľankou, potom sa vysušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytol produkt XXIXb (3,7 g).
Krok 3
< XXIXb) θ')
Kyselina XXIXb reagovala s amínom z príkladu 15 skôr opísaným spôsobom v Príklade.21, Krok 4: Výsledný medziprodukt sa potom opracoval HCI skôr opísaným spôsobom z Príkladu 23, Krok 9, čím sa poskytol produkt XXIXc.
Krok 4
XXVIllc
XXIXc
-249-
(XXIXd)
Kyselina XXVIllc (2,43 g) sa rozpustila v CH2CI2 a reagovala s amínom XXIXc (2,47g), HATU (2,5 g) a DIPEA (5,8 ml) skôr opísaným spôsobom z Príkladu 9, Krok 2a, čím sa poskytol po čistení pomocou rýchlej kolónovej chromatografie (4% MeOH, CH2CI2, silikagél) požadovaný produkt XXIXd (4,35 g). Hmotnostné spektrum (LCMS) 727 (M+H+).
Krok 5
(xxix)
Produkt z Kroku 4 (4,2 g) reagoval s Dess-Martinovým činidlom (6,4 g) skôr opísaným spôsobom z Preparatívneho Príkladu 20, Krok 7. Čistenie pomocou rýchlej kolónovej chromatografie (100% EtOAc, silikagél) poskytlo 3 g konečného produktu XXIX. Hmotnostné spektrum (LCMS) 725 (M+H+).
Príklad 30
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXX
-250Krok 1
Alkohol 2-(trifluórmetyl)propán-2-ol (1,28 g) reagoval s /V,N-disukcinimidylkarbonátom (3,84 g) a Et3N (4,2 ml) v suchom CH3CN (50 ml) počas 18 hodín. Zmes sa zriedila s EtOAc (200 ml) a prefiltrovala. Filtrát sa premyl s NaHCO3, soľankou, potom sa vysušil nad MgSO4, prefiltroval a skoncentroval za vákua, čím sa poskytla surová zmes. Čistenie pomocou rýchlej kolónovej chromatografie (50% EtOAc, hexán, silikagél) poskytlo požadovaný produkt XXXa (0,3 g).
Krok 2
(XXXb)
-251 Produkt z príkladu 29 (0,3 g) sa opracoval 100 ml roztoku 4,0 mol/l HCI v dioxáne. Po 1 hodine sa pridalo 200 ml EÍ2O a výsledná zrazenina sa odfiltrovala a vysušila za vákua, čím sa poskytol produkt XXXb (0,27 g) ako biely prášok. Hmotnostné spektrum (LCMS) 625 (M-HCI +H+).,
Krok 3
(XXXa) (XXXb)
Do roztoku XXXb (0,05 g) v CH2CI2 (5 ml) pri laboratórnej teplote bol pridaný DIPEA (0,040 ml) XXXa (1,5 ekviv., 0,030 g), nasledovaný 1 kryštálom DMAP. Po 30 minútach sa reakčná zmes zriedila s EtOAc (20 ml) a premyla roztokom 1,5 mol/l HCI, potom NaHCO3, potom soľankou. EtOAc vrstva sa vysušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla surová zmes. Čistenie pomocou preparatívnej chromatografie (40%-ný acetón, hexán, silikagél) poskytlo požadovaný produkt XXX (0,044 g). Hmotnostné spektrum (LCMS) 779 (M+H+).
Príklad 31
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXXI
-252-
(XXXI)
Krok 1
(XXXb)
Do roztoku XXXb (0,05 g) v CH2CI2 (5 ml) pri laboratórnej teplote bol pridaný DIPEA (0,040 ml) a terc-butylizokyanát (1,2 ekviv., 0,01 ml). Po 18 hodinách sa reakčná zmes zriedila s EtOAc (20 ml) a premyla roztokom 1,5 mol/l HCI, NaHCO3 a soľankou. EtOAc vrstva sa vysušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala za vákua, čím sa poskytla surová zmes. Čistenie pomocou preparatívnej chromatografie (100% EtOAc, silikagél) poskytlo konečný produkt XXXI (0,021 g). Hmotnostné spektrum (LCMS) 724 (M+H+).
Príklad 32
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXXII
-253ο
Krok 1
CXXXIla)
Produkt z príkladu 28 sa opracoval skôr opísaným spôsobom z
Preparatívneho Príkladu 30, Krok 2, čím sa poskytol produkt XXXIIa. Hmotnostné spektrum (LCMS) 407 (M-HCI +H+).
Krok 2
(XXXIIa)
-254Amín XXXIIa reagoval s XXXa skôr opísaným spôsobom z Preparatívneho Príkladu 30, Krok 3, čím sa poskytol požadovaný produkt XXXII. Hmotnostné spektrum (LCMS) 508 (M+H+).
Príklad 33
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXXIII
V s *
(XXXIII)
Krok 1
(XXXIIa)
Cxxxih)
Amín XXIla reagoval s terc-butylizokyanátom skôr opísaným spôsobom z Príkladu 31, Krok 1, čím sa poskytol produkt XXXIII. Hmotnostné spektrum (LCMS) 561 (M+H+).
Príklad 34
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXXIV
(XXXIV)
-255Krok 1
, ms 4A°
Do zmesi esteru (6,0 g) a molekulového
dichlórmetáne (35 ml) sa pridal pyrolidín (5,7 ml, 66,36 mmol). Výsledná hnedá suspenzia sa premiešavala pri laboratórnej teplote pod N2 počas 24 hodín, prefiltrovala a premyla bezvodým CH3CN. Spojené filtráty sa skoncentrovali, čím sa poskytol požadovaný produkt.
Nal, K2CO3
Do roztoku produktu z predchádzajúceho kroku v CH3CN (35 ml) bol pridaný bezvodý K2CO3, metalylchlorid (2,77 g, 30,5 mmol), Nal (1,07 g, 6,7 mmol). Výsledná suspenzia sa premiešavala pri okolitej teplote pod N2 počas 24 hodín. Pridalo sa 50 ml ľadovo studenej vody, nasledoval roztok 2 mol/l KHSO4 kým pH nebolo 1. Pridal sa EtOAc (100 ml) a zmes sa premiešavala počas 0,75 hodiny. Spojené organické vrstvy sa oddelili a premyli soľankou, vysušila sa nad MgSO4, a odparili, čím sa poskytol požadovaný produkt.
Krok 3
1N LiOH/dioxán
OH
-256Produkt z predchádzajúceho kroku (2,7 g, 8,16 mmol) sa rozpustil v dioxáne (20 ml) a opracoval s čerstvo pripraveným roztokom 1 mol/l LiOH (9 ml). Reakčná zmes sa premiešavala pri okolitej teplote pod N2 počas 20 hodín. Reakčná zmes sa rozpustila v EtOAc a premyla H2O. Spojené vodné fázy sa ochladili na 0 °C a okyslili na pH 1,65 použitím roztoku 1 mol/l HCI. Mútna zmes sa extrahovala s EtOAc (2x 100 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli soľankou, vysušili nad MgSO4, skoncentrovali sa, čím sa poskytla požadovaná kyselina (3,40 g).
Krok 4
Do suspenzie NaBH(OAc)3 (3,93 g, 18,5 mmol) v CH2CI2 (55 ml) bol pridaný roztok produktu z predchádzajúceho kroku v bezvodom CH2CI2 (20 ml) a kyselina octová (2 ml). Suspenzia sa premiešavala pri okolitej teplote počas 20 hodín. Do suspenzie sa pridala ľadovo studená voda (100 ml) a zmes sa premiešavala počas 1/2 hodiny. Organická vrstva sa oddelila, prefiltrovala, vysušila a odparila, čím sa poskytol požadovaný produkt.
CH2N2 / Et2o / MeOH
Roztok produktu z predchádzajúceho kroku (1,9 g) v MeOH (40 ml) sa opracoval prebytkom roztoku CH2N2/Et2O a premiešaval sa počas noci. Reakčná
-257zmes sa skoncentrovala do sucha, čím sa poskytol surový zbytok. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, eluovaním gradientom EtOAc/hexán, čím sa poskytlo 1,07 g čistého požadovaného produktu.
Krok 6
Roztok produktu z predchádzajúceho kroku (1,36 g) v bezvodom CH2CI2 (40 ml) sa opracoval BF3.Me2O (0,7 ml). Reakčná zmes sa premiešavala pri okolitej teplote počas 20 hodín a reakcia sa zastavila nasýteným roztokom NaHCO3 (30 ml) za premiešavania počas 1/2 hodiny. Organická vrstva sa oddelila a spojené organické vrstvy sa premyli soľankou, vysušili sa nad MgSO4, skoncentrovali sa, čím sa poskytol surový zbytok. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli eluovaním gradientom EtOAc/hexán, čím sa poskytlo 0,88 g požadovanej zlúčeniny.
Krok 7
Do roztoku produktu (0,92 g) z predchádzajúceho kroku v MeOH (30 ml) bolo pridané 10%-né Pd/C (0,16 g) pri laboratórnej teplote a produkt sa hydrogenoval pri okolitej teplote pod tlakom 101,3 kPa (1 atm.). Reakčná zmes sa premiešavala počas 4 hodín a skoncentrovala sa do sucha, čím sa poskytla požadovaná zlúčenina.
-258Krok 8
O
BocHNx<A.oh
HATU
DIPEA,
CH2CI2
Požadovaný produkt bol pripravený podľa postupu z Príkladu 23, Krok 10.
Krok 9
Požadovaný kyselinový produkt bol pripravený podľa postupu v Príklade 24, Krok 3.
( XXXIV )
Požadovaný produkt XXXIV bol pripravený podľa postupu v Príklade 24, Kroky 4 až 5.
-259Príkläd 35
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXXV
Krok 1
+ (EtO)2-P-CH2CO2Et ------>- ys
Roztok trietylfosfonátu (44,8 g) v THF (30 ml) pri 0 °C sa opracoval roztokom 1 mol/l (200 ml) bis(trimetylsilylamidu) sodného v THF. Výsledná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 0,5 hodiny a potom sa ochladila na 0 °C. Po kvapkách sa pridal roztok 1,4-cyklohexándión-etylén-ketalu (15,6 g) v THF (50 ml) a výsledný roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 18 hodín. Reakčná zmes sa potom ochladila na 0 °C, opracovala sa studeným vodným roztokom kyseliny citrónovej a zmes sa extrahovala s EtOAc. Extrakt sa premyl nasýteným vodným roztokom NaHCO3, potom soľankou; potom sa vysušil nad bezvodým Na2SO4, prefiltroval a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, eluovaním gradientom CH2CI2/EtOAc, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (21 g), 92%-ný výťažok.
Hmotnostné spektrum (FAB) 227,3 (M+H+).
Krok 2
-260Produkt z predchádzajúceho kroku (20 g) sa rozpustil v EtOH (150 ml) a opracoval s 10%-né Pd/C pod 101,3 kPa (1 atm) vodíka počas 3 dní. Zmes sa prefiltrovala filtrát sa odparil, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (20,3 g), 100%-ný výťažok. Hmotnostné spektrum (FAB) 229,2 (M+H+).
Krok 3
Produkt z predchádzajúceho kroku (20 g) sa rozpustil v MeOH (150 ml) a opracovala roztokom LiOH (3,6 g) vo vode (50 ml). Zmes sa premiešavala počas 18 hodín a skoncentrovala sa za vákua. Zvyšok sa rozpustil v studenej vode (100 ml), roztok sa okyslil na pH 2 až 3 s roztokom 5 mol/l HCI a výsledná zmes sa extrahovala s EtOAc. Extrakt sa vysušil nad bezvodým Na2SO4, prefiltroval a filtrát sa odparil, čím poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (17,1 g), 97%-ný výťažok. Hmotnostné spektrum (FAB) 201,2 (M+H+).
Krok 4
1. Produkt z predchádzajúceho kroku (3,0 g) sa rozpustil v Et2O (150 ml), opracoval sa s Et3N (2,1 ml) a roztok sa ochladil na -78 °C. Po kvapkách sa pridal pivaloylchlorid (1,85 ml) a po 0,25 hodine ďalšieho premiešavania sa reakčná zmes ponechala zahriať na 0 °C počas 0,75 hodiny a potom sa ochladila znova na -78 °C, čím sa poskytol roztok zmiešaného anhydridu pre reakciu z časti 2.
2. Roztok (S)-4-benzyl-2-oxazolidinónu (2,66 g) v THF (22 ml) sa ochladil na -78 °C, a po kvapkách sa pridal roztok 1,6 mol/l (9,38 ml) n-butyllítia v hexáne. Po ďalšej 0,33 hodine premiešavania pri tejto teplote sa roztok preniesol pomocou
-261 - kanyly do studeného roztoku časť 1. Zmes sa premiešavala pri -78 °C, potom sa zahriala na 0 °C a premiešavala sa pri tejto teplote počas 0,5 hodiny. Organická vrstva sa oddelila, vodná vrstva sa extrahovala s Et2O, spojené organické fázy sa premyli soľankou, vysušili sa nad bežvodým Na2SO4, prefiltroval sa a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli eluovaním gradientom hexán/EtOAc (9:1), čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (5,0 g), 93%ný výťažok. Hmotnostné spektrum (FAB) 360,4(M+H+).
Krok 5
Produkt z predchádzajúceho kroku (2,7 g) sa rozpustil v THF (25 ml), ochladil sa na -78 °C, preniesol sa pomocou kanyly do roztoku 0,5 mol/l draselnej soli bis(trimetylsilyl)amidu v toluéne (16,5 ml) v THF (25 ml) pri -78 °C a výsledný roztok sa premiešaval pri -78 °C počas 0,75 hodiny. Do tohto roztoku bol pridaný pomocou kanyly roztok trisylazidu (3,01 g) v THF (25 ml) vopred ochladeného na -78 °C. Po 1,5 minúte sa reakcia zastavila s kyselinou octovou (1,99 ml), reakčná zmes sa zahriala na laboratórnu teplotu a potom sa premiešavala počas 16 hodín. Reakčná zmes sa zriedila s EtOAc (300 ml) a premyla sa vodným roztokom 5% NaCI. Vodná fáza sa extrahovala s EtOAc, spojené organické fázy sa premyli nasýteným vodným roztokom NaHCO3, potom soľankou; potom sa vysušili nad bežvodým Na2SO4, prefiltrovali a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli eluovaním EtOAc/hexán (1:3), čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (2,65 g), 88%-ný výťažok.
Krok 6
-262Produkt z predchádzajúceho kroku (11,4 g) sa rozpustil v 95% roztoku kyseliny mravčej (70 ml) a zahrieval sa pri 70 °C 0,5 hodiny za premiešavania. Roztok sa odparil za vákua a zvyšok sa rozpustil v EtOAc. Roztok sa premyla nasýteným vodným roztokom NaHCO3, potom soľankou; potom sa vysušil nad bezvodým Na2SO4, prefiltroval a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (8,2 g).
Krok 7
Produkt z predchádzajúceho kroku (8,2 g) sa rozpustil v CH2CI2 (16 ml) a opracovala dietylaminosulfid-trifluoridom (DAST, 7,00 ml) pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Reakčná zmes sa vyliala na zmes ľad/voda (200 ml) a extrahovala sa s CH2CI2i Extrakt sa premyl nasýteným vodným roztokom NaHCO3> potom soľankou; potom sa vysušil nad bezvodým Na2SO4, prefiltroval a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, eluovaním zmesou EtOAc/hexán (15:85), čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (4,5 g), 52%-ný výťažok.
Krok 8
Produkt z predchádzajúceho kroku (3,7 g) sa rozpustil v zmesi THF (150 ml) a vody (48 ml), ochladenej na 0 °C, opracovala s roztokom 30% H2O2 (3,95 ml), a potom s LiOH.H2O (0,86 g). Zmes sa premiešavala počas 1 hodiny pri 0 °C, potom sa reakcia zastavila roztokom Na2SO3 (5,6 g) vo vode (30 ml), nasledoval roztok 0,5 mol/l NaHCO3 (100 ml). Zmes sa skoncentrovala za vákua na 1/2 objem,
-263zriedila sa vodou (na 500 ml) a extrahovala sa s CH2CI2 (4x 200 ml). Vodná fáza sa okyslila na pH 1 až 2 roztokom 5 mol/l HCI a extrahovala sa s EtOAc (4x 200 ml). Extrakt sa premyl soľankou, potom sa vysušil nad bezvodým Na2SO4, prefiltroval a filtrát sa odparil, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto odseku (1,95 g), 91%-ný výťažok, ktorá sa použila priamo v nasledujúcom kroku.
Krok 9
ΌΗ
OMe
Produkt z predchádzajúceho príkladu (2,6 g) sa rozpustil v Et2O (50 ml) a opracoval sa po kvapkách roztokom CH2N2 v Et2O, kým roztok nezostal žltý. Roztok sa premiešaval počas 18 hodín, potom sa odparil za vákua, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (2,8), ktorá sa použila priamo v nasledujúcom kroku.
Krok 10 o
OMe o
OMe
Produkt z predchádzajúceho kroku (1,95 g) sa rozpustil v MeOH (150 ml), opracoval sa kyselinou mravčou (1,7 ml), potom sa opracoval 10%-né Pd/C (3,3 g, Degussa typ E101) pod 101,3 kPa (1 atm) vodíka počas 1,5 hodiny. Zmes sa prefiltrovala a filtrát sa odparil, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu (2,1 g) ako soľ s kyselinou mravčou, ktorá sa použila priamo v nasledujúcom kroku.
-264-
Krok 11
Produkt z predchádzajúceho kroku (2,1 g) sa rozpustil v 1,4-dioxáne (100 ml) a pridal sa di-terc-butyl-dikarbonát (1,9 g), nasledoval diizopropyletylamín (2,9 ml). Roztok sa premiešaval počas 18 hodín a skoncentroval sa za vákua. Zvyšok sa opracoval vodným roztokom 5% KH2PO4 a zmes sa extrahovala s EtOAc. Extrakt sa premyl soľankou, potom sa vysušil nad bezvodým MgSO4, prefiltroval a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli, eluovaním gradientom CH2CI2/Et2O, čím sa poskytla zlúčenina tohto odseku (2,5 g), 99%-ný výťažok. Hmotnostné spektrum (FAB) 307,9 (M+H+).
Krok 12
OH
Produkt z predchádzajúceho kroku (2,5 g) sa rozpustil v 1,4-dioxáne (35 ml), opracovala vodným roztokom 1 mol/l LiOH (17 ml) a premiešaval sa počas 2 hodín. Reakcia sa zastavila zmesou ľad/voda (125 ml), zmes sa okyslila na pH 3 až 4 s 3 mol/l HCI a extrahovala sa s EtOAc. Extrakt sa vysušil nad bezvodým MgSO4, prefiltroval a filtrát sa odparil, čím sa poskytla zlúčenina tohto odseku (2,3 g), 96%ný výťažok. Hmotnostné spektrum (FAB) 294,0 (M+H+).
Krok 13
-265-
Požadovaný produkt bol pripravený podľa postupu z Príkladu 23, Krok 10.
Krok 14
Me^Me
Požadovaný kyselinový produkt bol pripravený podľa postupu z 24u XXIV,
Krok 3.
(xxxv)
-266Požadovaný kyselinový produkt bol pripravený podľa postupu z Príkladu 24, Krok 4.
Príklad 36
Príprava zlúčenín všeobecného vzorca XXXVI a XXXVIII
Zlúčeniny všeobecného vzorca XXXVI a XXXVIíl boli pripravené podľa schémy uvedenej nižšie a použitím preparatívneho Príkladu 11 až 15 diskutovaných vyššie.
HATU, DIPEA
CH2CI2
O
Bu
TsOH, MeOH, H2O (XXXVI) (XXXVlO (XXXVIa) ako preparativny príklad 15
Zlúčenina všeobecného vzorca
XXXVI b bola pripravená zo zlúčeniny všeobecného vzorca XXXVIa podľa známych postupov:
-267-
( XXXVI a)
10% Pd/C
TsOH, MeOH, H2O
CXXXVIb)
Do roztoku Zlúčeniny XXXVIa (6,58 g, 22 mmol) v 100 ml MeOH sa pridalo 10%-né Pd/C (0,8 g) a kyselina p-toluénsulfónová (4,2 g). Reakčná zmes sa podrobila hydrogenácii pri laboratórnej teplote počas noci. Reakčná zmes sa prefiltrovala cez Celíte a premyla prebytkom MeOH. Spojené filtráty sa skoncentrovali za vákua, čím sa poskytla zlúčenina z názvu tohto príkladu XXXVIb ako guma. Konverzia XXXVIb na XXXVI a XXXVII sa robila podľa postupu, ako je uvedené na schéme uvedenej vyššie a podľa preparatívnych príkladov 11 až 15.
Príklad 38
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca XXXVIII
Zlúčenina všeobecného vzorca XXXVIII bola pripravená použitím nasledujúcej schémy a podľa preparatívnych Príkladov 11 až 15 diskutovaných skôr.
-268-
Príklad 39
Syntéza zlúčeniny všeobecného vzorca XXXIX ch3^ch3
CH3AACH3 J ch3 j ( XXXIX ) >° on— ~7\
Krok 1
CbzHN___/Cl
0^*0 (XXXIXa)
CbzHN^ cr o |\ (XXXIXb)
Roztok sulfonylchloridu XXXIXa pripraveného podľa postupu z H. Mcklwain (J. Chem. Soc 1941, 75) bol pridaný po kvapkách do zmesi 1,1 ekviv. tercbutylmetylamínu a trietylamínu pri -78 °C a premiešaval sa pri laboratórnej teplote počas 2 hodín. Reakčná zmes sa skoncentrovala za vákua a čistila sa pomocou chromatografie (SiO2, hexán/acetón 4:1), čím sa poskytol sulfónamid XXXIXb ako bezfarebný olej.
Krok 2
I
CbzHN^x-^
(XXXIXb) (XXXIXc)
-269Roztok Cbz-chráneného amínu XXXIXb sa rozpustil v metanole a opracoval roztokom 5% molových Pd/C (5% hmotnostných) a hydrogenoval sa pri 414 kPa (60 psi). Reakčná zmes sa prefiltrovala cez vrstvu Celíte a skoncentrovala sa za vákua, čím sa získal voľný amin XXXIXc, ktorý tuhol pri státí.
Krok 3
CH3^H3 (XXXIXd )
o NHydroxy-sulfónamid XXXIxd sa syntetizoval podobne, ako je postup Syntézy XXVf s výnimkou nahradenia amínu XXVd s XXXIXc. Surová reakčná zmes sa priamo použila pre nasledujúcu reakciu.
Krok 4
o N— ch3x/ch3
H H I a °CH€^ (xxxix)
Hydroxyamid XXXIXd sa oxidoval na zlúčeninu XXXIX použitím Dess Martinovho činidla podľa postupu Syntézy XXV (krok 5). Surová zmes sa čistila pomocou chromatografie (SiO2, acetón/hexán 3:7), čím sa získala zlúčenina XXXIX ako bezfarebná tuhá látka.
-270Skúška HCV Proteázovej inhibičnej aktivity
Spektrofotometrická skúška: Spektrofotometrická skúška HCV serínproteázy sa uskutočňovala so zlúčeninami podľa tohto vynálezu podľa postupu opísaného v R. Zhang a spol., Analytical Biochemistry, 270 (1999) 268 - 275, ktorého zistenia sú včlenené v tomto dokumente ako odkaz. Skúška založená na proteolýze chromogenického esterového substrátu je vhodná na kontinuálne monitorovanie aktivity HCV NS3 proteázy. Substráty boli odvodené z P strany NS5A-NS5B spojovacej sekvencie (Ac-DTEDWX(Nva), kde X = A alebo P), ktorého C-terminálne karboxylové skupiny boli esterifikované jedným zo štyroch rôznych chromofórových alkoholov (3- alebo 4-nitrofenol, 7-hydroxy-4-metyl-kumarín alebo 4-fenylazofenol). Nižšie sú uvedené syntéza, charakterizácia a aplikácia týchto nových spektrofotometrických esterových substrátov pre účinné sledovanie a podrobné kinetické hodnotenie inhibítorov HCV NS3 proteázy.
Materiály a postupy
Materiály
Chemické činidlá pre pufre pre skúšku boli získané od Sigma Chemical Company (St. Louis, Missouri). Činidlá pre peptidovú syntézu boli od Aldrich Chemicals, Novabiochem (San Diego, Kalifornia), Applied Biosystems (Foster City, Kalifornia) a Perseptive Biosystems (Framingham, Massachusetts). Peptidy boli syntetizované ručne alebo na automatizovanom syntetizátore ABI model 431A (od Applied Biosystems). UV-VIS Spektrometer model LAMBDA 12 bol od Perkin Elmer (Norwalk, Connecticut) a 96-kalíškové UV platne boli získané od Corning (Corning, New York). Predhrievači blok bol od USA Scientific (Ocala, Florida) a trepačka 96kalíškových platní bola od Labline Instruments (Melrose Park, lllinois). Spectramax Plus čítač mikrotitračných platní s monochromátorom bol získaný od Molecular Devices (Sunnyvale, Kalifornia).
Príprava enzýmu
Rekombinantná heterodimerická HCV NS3/NS4A proteáza (kmeň 1a) bola pripravená použitím skôr publikovaných postupov (D.L. Sali a spol., Biochemistry,
-271 37 (1998) 3392 - 3401). Koncentrácie proteínov sa určovali pomocou Biorad farbivovej metódy použitím štandardov rekombinantnej HCV proteázy vopred kvantifikovaných pomocou analýzy aminokyselín. Pred začatím skúšky sa pufer na uschovanie enzýmu (50 mmol/l fosfátu sodného pH 8,0, 300 mmol/l NaCI, 10% glycerolu, 0,05% laurylmaltozidu a 10 mmol/l DTT) vymenil za skúšobný pufer (25 mmol/l MOPS pH 6,5, 300 mmol/l NaCI, 10% glycerolu, 0,05% laurylmaltozidu, 5 μΓποΙ/Ι EDTA a 5 μΐηοΙ/Ι DTT) použitím Biorad Bio-Spin P-6 plnenej kolóny.
Syntéza substrátu a čistenie
Syntéza substrátov sa robila tak, ako je uvedené v R. Zhang a spol., (ibid.) a začala sa zakotvením Fmoc-Nva-OH na 2-chlórtrityl-chloridovú živicu použitím a štandardného postupu (K. Barlos a spol., Int. J. Pept. Proteín Res., 37 (1991), 513 520). Peptidy boli potom zostavené, použitím Fmoc chémie, buď manuálne alebo na automatickom syntetizátore peptidov ABI model 431. /V-acetylované a úplne chránené peptidové fragmenty boli štiepené zo živice buď pomocou roztoku 10% kyseliny octovej (HOAc) a 10% trifluóretanolu (TFE) v dichlórmetáne (DCM) počas 30 minút alebo pomocou 2% roztoku kyseliny trifluóroctovej (TFA) v DCM počas 10 minút. Spojené filtráty a DCM premývacie roztoky sa odparili azeotropicky (alebo sa opakovane extrahovali pomocou vodného roztoku Na2CO3), čím sa odstránila kyselina použitá pri štiepení. DCM fáza sa vysušila nad Na2SO4 a odparila sa.
Esterové substráty sa zostavili použitím štandardných kopulačných postupov kyselina-alkohol (K. Holmber a spol., Acta Chem. Scand., B33 (1979) 410 - 412). Peptidové fragmenty sa rozpustili v bezvodom pyridíne (30 - 60 mg/ml), do ktorého bolo pridané 10 molových ekvivalentov chromofóru a katalytické množstvo (0,1 ekv.) kyseliny para-toluénsulfónovej (pTSA). Na začatie kopulačnej reakcie sa pridal dicyklohexyl-karbodiimid (DCC, 3 ekv.). Tvorba produktu sa monitorovala pomocou HPLC a zistilo sa, že je úplná po 12 až 72 hodinách reakcia pri laboratórnej teplote. Pyridínové rozpúšťadlo sa odparilo za vákua a ďalej sa odstránilo pomocou azeotropického odparovania s toluénom. Peptid-ester sa deprotektoval s roztokom 95% TFA v DCM počas dvoch hodín a extrahoval sa tri krát s bezvodým etyléterom, čím sa odstránil prebytok chromofóru. Deprotektovaný substrát sa čistil pomocou HPLC s obrátenými fázami na C3 alebo C8 kolóne s
-272gradientom 30% až 60% acetonitrilu (použitím šiestich objemov kolóny). Celkový výťažok po HPLC čistení bol približne 20 až 30%. Molekulová hmotnosť sa potvrdila hmotnostnou spektroskopiou s ionizáciou pomocou elektrickej iskry. Substráty boli uskladnené v suchej práškovej forme s vysušovadlom.
Spektrá substrátov a produktov
Spektrá substrátov a zodpovedajúce chromofórové produkty sa získali v pH
6,5 skúškovom pufri. Extinkčné koeficienty boli určené pri optimálnej mimopíkovej vlnovej dĺžke v 1 cm kyvetách (340 nm pre 3-Np a HMC, 370 nm pre PAP a 400 nm pre 4-Np) použitím postupných zriedení. Optimálna mimopíková vlnová dĺžka bola definovaná ako vlnová dĺžka, pri ktorej sa získal maximálny trakčný rozdiel v absorbancii medzi substrátom a produktom (produkt OD-substrát OD)/substrát OD).
Proteázová skúška
HCV proteázové skúšky sa uskutočňovali pri 30 °C použitím 200 μΙ reakčnej zmesi v 96-kalíškovej mikrotitračnej platni. Podmienky skúškového pufra (25 mmol/l MOPS pH 6,5, 300 mmol/l NaCl, 10% glycerolu, 0,05% laurylmaltozidu, 5 gmol/l EDTA a 5 μηΊοΙ/Ι DTT) boli optimalizované pre NS3/NS4A heterodimér (D.L. Sali a spol., ibid.)). Typicky bolo do kalíškov umiestnené 150 μΙ zmesí pufra, substrátu a inhibítora (konečná koncentrácia DMSO 4% objemové) a ponechali sa na predinkubovanie pri 30 °C počas približne 3 minút. Potom sa päťdesiat μΙ vopred zahriatej proteázy (12 nmol/l, 30 °C) v skúškovom pufri použilo na začatie reakcie (konečný objem 200 μΙ). Platne sa monitorovali počas doby skúšky (60 minút) z hľadiska zmeny absorbancie pri príslušnej vlnovej dĺžke (340 nm pre 3-Np a HMC, 370 nm pre PAP, a 400 nm pre 4-Np) použitím čítača mikrotitračných platní Spectromax Plus vybaveného s monochromátorom (prijateľné výsledky môžu byť získané s čítačom platní, ktorý používa filtre). Proteolytické štiepenie esterovej väzby medzi Nva a chromofórom sa monitorovalo pri príslušnej vlnovej dĺžke oproti blanku bez enzýmu, ako kontrolnej vzorky pre neenzymatickú hydrolýzu. Hodnotenie kinetických parametrov substrátu sa uskutočnilo pre 30-násobný rozsah
-273koncentrácie substrátu (asi 6 až 200 μηηοΙ/Ι). Počiatočné rýchlosti boli určené použitím lineárnej regresie a kinetické konštanty boli získané preložením údajov Michaelis-Mentenovou rovnicou použitím nelineárnej regresnej analýzy (Mac Curve Fit 1.1, K. Raner). Prevrátené hodnoty (kkat) boli vypočítané za predpokladu, že enzým bol úplne aktívny.
Hodnotenie inhibítorov a inaktivátorov
Konštanty inhibície (Ki*) pre konkurenčné inhibítory Ac-D-(D-Gla)-1-l-(Cha)C-OH (27), Ac-DTEDVVA(Nva)-OH a Ac-DTEDVVP(Nva)-OH boli určené experimentálne pri konštantných koncentráciách enzýmu a substrátu nakreslením závislosti Vo/Vj vs. koncentrácia inhibítora ([l]0) podľa preformulovanej MichaelisMentenovej rovnice pre kinetiku konkurenčnej inhibície:
Vq/Ví = 1 + [l]0/(Ki* (1 + [S]o/Km)) kde v0 je neinhibovaná počiatočná rýchlosť, v, je počiatočná rýchlosť v prítomnosti inhibítora pri danej koncentrácii inhibítora ([l]o) a [S]o je použitá koncentrácia substrátu. Výsledné údaje sa spracovali použitím lineárnej regresie a výsledná smernica
1/ (Ki* (1 +[S]o/Km) bola použitá na výpočet hodnoty Ki*.
Získané Ki* hodnoty pre rôzne zlúčeniny podľa tohto vynálezu sú dané v skôr zmienených Tabuľkách, kde zlúčeniny boli usporiadané v poradí rozsahov Ki* hodnoty. Z týchto výsledkov testov by malo byť odborníkom v tejto oblasti zrejmé, že zlúčeniny podľa tohto vynálezu majú vynikajúce použitie ako NS3-serínproteázové inhibítory.
Hoci tento vynález bol doteraz opísaný v spojení so špecifickými uskutočneniami uvedenými vyššie, jeho mnohé alternatívy, modifikácie a iné variácie budú zrejme odborníkom v tejto oblasti. Všetky takéto alternatívy, modifikácie a variácie sú uvažované ako spadajúce do ducha a rámca tohto vynálezu.
-274Tabuľka 2
| Príklad č. | Vzorec | Molekulová hmotnosť |
| 1 | o · ΪΧ-JL.J. .V sf | 691,7853 |
| 2 | í. o C-» | 627,744 |
| 3 | VA | 754,8883 |
| 4 | -ΑζΑ“ t 0 CH, | 527,6259 |
| 5 | x eAA { Y 7 ~ >0 0 t «*> | 698,7799 |
-275-
| 6 | O '·-<>-· Ô < | 631,7352 |
| 7 | CH. O ^-N λ.-·ν 0 s C*, | 381,476 |
| 8 | -<XX Z-O-N o H>C o“ O J | 540,6626 |
| 9 | -Λ.. n>c O CH | 498,5813 |
| 10 | °s o | 633,7482 |
| 11 | o '«*> | 641,7249 |
-276-
| 12 | -Q-*, o ο». | 641,7249 |
| 13 | jr | 683,8061 |
| 14 | * ?γ w /~° . v | 637,7802 |
| 15 | -Y v ry /-0 *»c | 637,7802 |
| 16 | 637,7802 | |
| 17 | ,? Γ v e Ύ o 'c»S | 625,7690 |
-277-
| 18 | KJ | 613,6707 |
| 19 | Μ | 613,6707 |
| 20 | . ·ΛΚ< > HO | 627,6978 |
| 21 | >Ό | 609,726 |
| 22 | -¼.. v é MC | 609,726 |
| 23 | ~P 0 | 609,726 |
-278-
| 24 | ' ΗΟ | 611,742 |
| 25 | Ύ|| 8 βΑΑ^γ~νΑζ> β Ν Μ J | 600,7183 |
| 26 | Cj P A Ν J | 554,7361 |
| 27 | ΧΥο κ,=\>, JT Η S Hŕ | 478,5937 |
| 28 | xox? cAh N $ v | 546,7132 |
| 29 | H)C^,yCM1 o iM? Ύ N í MX | 562,7562 |
-279-
| 30 | 0 CTÓLvA-» <A< N $ M,- | 699,8519 |
| 31 | O N J | 643,7435 |
| 32 | vWp Ύ N J | 509,6077 |
| 33 | mh. T> X5-, >-. ' ’ X-v. | 637,7802 |
| 34 | ^¾. X •r-Y | 637,7802 |
| 35 | . V Y~C °s H.C | 579,6995 |
-280-
| 36 | ,8¾. H>c θ' ν_ζ/ | 537,6619 |
| 37 | ,:8¾.. γ Xk, ΟΗ | 539,6342 |
| 38 | ,¾¾ Υ CH | 597,7149 |
| 39 | Ck^N ° <Μ>\___/ ° ch, | 493,6055 |
| 40 | ο<^Ν ° 8Í5Y>5 | 632,8044 |
| 41 | (Χ°γ° Η I 8¾ Η $ Η,C | 747,8965 |
-281 -
| 42 | •χΎΫρ «Λ Γ Y— H $ v | 523,6348 |
| 43 | Ογ^γχΑο^™· r*W\ ° / 0 X>-^*y=o L, X | 598,7024 |
| 44 | Ο^γ^γ_Α.^ „Y ’ í £γ° °s | 578,712 |
| 45 | 0 ô Uy*XY>4 O^N 0 | 495,6214 |
| 46 | ch. / ηΎΧ· ‘h.c'^'ch, | 627,7878 |
| 47 | r* Η^ΛΑ'ητ0^^ H T | 541,6501 |
| O |
-282-
| 48 | 'ii o δ | 543,666 |
| 49 | . Λ Χ'ΛΧ <ζ-4χχ-“γ° 0 0 δ | 501,5847 |
| 50 | C-2 ρ''γκΧγΧχΧο^χ^'>’· °ν 0 X | 656,7394 |
| 51 | χ-< /’y’vV^'“^’0' | 578,712 |
| 52 | Q^PriV^“' X ° ζ O | 725,8901 |
| 53 | Ύ. <*> Λ | 584,6782 |
-283-
| 54 | Υ/ζ> ° Υ° y-os C . θ' : | 538,6467 |
| 55 | y Χ> χΑ ΊΧό | 685,8248 |
| 56 | 527,6695 | |
| 57 | £ m**v*-*’v J ° oľyyr^·-·'I V CK) | 810,9557 |
| 58 | CH V.Ó VA ο %-Ν ^°rýó. ο | 552,6737 |
| 59 | . Α νΛ 0 | 592,7391 |
-284-
| 60 | AA? c< X N $ KC | 534,702 |
| 61 | o** •SC^/^-O c λ | 653,8232 |
| 62 | .-KáS/.-y-’JO Οχ. | 696,892 |
| 63 | 0 ° CČk | 606,7662 |
| 64 | °Y“ os »<s55X-*0^ oXi *S<= | 643,7435 |
| 65 | aAAÄ C N OS r Ά ’Ocý' | 742,8771 |
-285-
| 66 | Oi, «Μ C /Ί © © -ŕ Η-γ. / a J J 1 | 747,8965 |
| 67 | P-C^SP'Pí''^ó ΊΓ O p | 747,8965 |
| 68 | n p o% o ]f ΓΛ Y* ’ ‘Ó’ | 761,9236 |
| 69 | n P °s ° f~~\ p “ '0 | 747,8965 |
| 70 | o P OS © Pp /“Ά PS ° 0 | 733,913 |
| 71 | 0 A Γ1.1Ό j ’S'^T'o «ifl 1 S fl ° oA/y’^vy^*· ‘ : ’ô | 746,9118 |
| 72 | o P γ r\ Γ’ κΑΟ < o o “ Π I 1 u n ° o^N-xYk'iXí'NY^M' ’ “Ô | 646,7935 |
| 73 | Q P 'Ύ^ο'^Ά'Ύ (n S • ’O | 746,9118 |
-286-
| 74 | 0-^ x x% | 668,8782 |
| 75 | CH o Hb r . $7 h,c>] o ·\-ν | 628,8129 |
| 76 | X; ,ΧΑ < | 760,9792 |
| 77 | -P c /4 « °\ec· ?y r o Mo MX^S C x% | 818,0723 |
| 78 | Λ η> ·νΓ· ~ X 0 *»c' η O w | 761,9640 |
| 79 | Q P ^ÄArY ? t s -Ay^Q | 844,0702 |
-287-
| 80 | η θ ος e PS . · °o | 753,9443 |
| 81 | Q P O j—k ©S os | 844,0702 |
| 82 | ’ Ό | 753,9443 |
| 83 | o P * Γ\ • Ó | 747,8965 |
| 84 | .o P. • ‘0 | 804,0049 |
| 85 | • 0 | 879,2858 |
| 86 | ^Λ%3νΛ ” 'Ô | 823,1774 |
-288-
| 87 | 832,0994 | |
| 88 | -Λ .-Y7 W | 775,9911 |
| 89 | *- ° Λ^Α-γ-γΑ ‘ ‘ó | 725,8901 |
| 90 | A/01· z r JX η«<η p V-N y% | 698,9483 |
| 91 | OH o Mo r -y Η,ί<^ O %^-N W | 642,84 |
| 92 | O ·Ε'1'’*^ΑΗ·Αζ-*νγ' | S -s °° *ye>s | 853,0995 |
-289-
| 93 | ο P ο ο·, e ''γ''* γΛ 5*ι Α «, | 789,9778 |
| 94 | φ ΟΧο Ο ολΗΧ](ΛΝ-^Χ~γ40 ° ό | 809,9682 |
| 95 | ,0 e>YZ^ť^»<ZJ*'K*'j [ h Τ' βΑΧ» ° • ό | 878,8583 |
| 96 | 0 <Wy? Λ r 0 βΑ/γΧ-^-''>Χ | 772,006 |
| 97 | 0 ° ^Ίτ /—\ Γ* >'εγΛ'β'^··<γΗγ ι ? Γ* ~· ° οΑ-.χΛ.-^-νΑο • ό | 761,9672 |
| 98 | 1Γ1 Γη r - · .ΜΑ-γ^ | 728,85 |
| 99 | Ck 0 ρχ. ,/^xqP c | 828,0239 |
-290-
| 100 | r . U | 789,0334 |
| 101 | *> v-'4?' r . y-N | 775,0063 |
| 102 | Ck v AT’ ó .U | 886,1102 |
| 103 | 0 o i*** F*\ °’> \ ° czxA>= · οΑ^γ^.'^'γ^ο • ó | 880,8306 |
| 104 | O • ό | 790,7047 |
| 105 | Λϊφ^2.Χγ^γ. ’ Ο | 855,0718 |
| 106 | ο, Λ. *1=Υ°”> ’^Ύ^Τ Ý ? β Γ - · ό | 821,0543 |
-291 -
| 107 | ο c>s •'‘γΑ/γγ Γ ΰ ΰ U ° Λζγ'.^γ'γ'1“ • ”0 | 685,7812 |
| 108 | ο ?** ο ΑΑ^» « ‘ '0 | 891,8973 |
| 109 | 0 Γ~\^ °*· H.y—A.'YY 7 Ο ~· ° οΑ.ΑγΛ,-y yk0 • ·0 | 775,0063 |
| 110 | <Χ15^Ρλ ° οΑΛΛ-ατ Ά 0 °ό | 785,0452 |
| 111 | Vv ο Γ\1Τ Α r . Α »SC*A ο <>-* | 789,0334 |
| 112 | ,. rÄ A 0 | 803,0605 |
| 113 | “Y Q aX>, x A<g 0 | 862,4689 |
-292-
| 114 I | /AL 1 Ο Jr* ο 0 | 884,1323 |
| 115 | 'Ό, Ο Ο ’ος | 889,3584 |
| 116 | 9 γ γ\* Γ· «λ/”. Y ' *ό | 887,1794 |
| 117 | ° γ} Γ1 | 831,071 |
| 118 | ο γΡ &· ύΑΎϊΑ Γ ο γ». ·,Μ/νγΑ ° ‘ό | 830,0863 |
| 119 | 'TyfeAvgľ | 858,1405 |
| 120 | r 0 ‘''‘•c, | 874,1399 |
| 121 | ΑΑ JAA 0 | 904,1227 |
-293-
| 122 | Τ' | 929,195 |
| 123 | • ’ó | 873,0867 |
| 124 | • '0 | 872,1019 |
| 125 | --zy.; • ’Ó | 900,1561 |
| 126 | αΛ^?Λ x. • AV-^y-'r· • Ό | 860,11 |
| 127 | o^ 0 (γ} ľ' p ° 9 • ’ó | 804,0016 |
| 128 | aľx/Pz r ° Αν^Ύν0 • O | 803,0169 |
| 129 | í? Q AT* ?*> kA0AAfY 2 j V ’ Ό | 831,071 |
-294-
| 130 | S I ΓΛ* ΐ'' f· S 8 ι*“' °s ° ’ ’ό | 806,0612 |
| 131 | 'Wr “'•^'οΑ,Αγ^^-Ζ Α 0 Ο, Ο·. ° οΑΑγ\,-^γ*γ^ο ’ό | 749,9528 |
| 132 | Μ,ίΎ^οΑ·^γ'Ζ <Α ο “> ° 0Α·ΑγΑ.^γ“γΛο • ‘ό | 748,9681 |
| 133 | ^□..Ο S Γ f\-’ «. > ° ο’Α^ΑπΑ,^γ*γ4,β ’ό | 777,0223 |
| 134 | <aa^Vs ° °ό | 842,1382 |
| 135 | ΟΛ^φ^Λ | 786,0299 |
| 136 | OA^Vi -r ° οΑ'-γΑ^'-γ^, • Ο | 813,0994 |
| 137 | <\Α%£?Λ • oAAA-'Vy^» ° Ό | 829,0988 |
-295-
| 138 | €λ0Α^’φ·’Λ« ° Α ΑΑ·^γ Y^° • 6ó | 788,0022 |
| 139 | Cl s t r· ΧΑΛγ s o •'-'A-0·· ‘ Y | 815,0717 |
| 140 | ^A^PX‘ =-· · ,α/ΥύΥ • ó | 846,1265 |
| 141 | —’^ΆτΎ r s r 0 ο^κΥ-ζγΥ0 • ‘0 | 790,0181 |
| 142 | •'^Αγ-’φ' <^ľ* γ·0*· ° oA Υ-γγ • ô | 817,0876 |
| 143 | γΑζγγ r ° Y> ° οΑΎύ'Α 0 °Ó | 833,087 |
| 144 | Υχ q x ·Y ” Aä 0 o\ | 911,2017 |
-296-
| 145 | 0 * -χΥΡλ β «*ι | 931,1921 I |
| 146 | 4 0 \ ° β “» V ft V | 844,1106 |
| 147 | <>> | 788,0022 |
| 148 | ^7^~λ ° 0 Τ** | 815,0717 |
| 149 | ’Ó | 817,0876 |
| 150 | ’Ο | 831,1147 |
| 151 | •ο | 819,0599 |
-297-
| 152 | 833,0870 | |
| 153 | Λ'γγ». > s · ’Ó | 829,0988 |
| 154 | s S ’ | 845,0981 |
| 155 | «ŕ^*· r-X , -9 y^· 0 Y ..<-Γ °s | 816,0784 |
| 156 | “.k’ · -9 QWyÝ'M'S o / \ ° \ » » v k r° “^os | 773,0125 |
| 157 | “‘yľ’ Q^vyV·^^'»* yn · v ·< | 787,0396 |
| 158 | 9 0 / * o L 0 o «,« <*. | 850,0959 |
-298-
| 159 I | 9 •Cn» ° \° r ‘'V | 807,03 |
| 160 | ? o r-\ ZCL/&S °Γ^Α> 0 o o < | 821,0571 |
| 161 | 3 Y** CH r° | 793,9876 |
| 162 | : -9 0) Γ1Γ ΥΐΓ”— YH k r° | 759,9701 |
| 163 | x 0 ο^ΥΧΑί? V ° k .r °*» | 767,9714 |
| 164 | X. .0 íCw · V k x H.C—\ CM» | 711,8630 |
-299-
| 165 | -3” 0 r\o '°S X 0 | 712,8506 |
| 166 | Ä v> yrO’^ •Λ o %5-á | 712,8506 |
| 167 | -R y/v** X -Jr\ M.C* X O %-·* | 817,0876 |
| 168 | Ä •'S γΓ4- - “ •Λ » «% | 817,0876 |
| 169 | r .'U HX^S 0 w> | 817,0876 |
| 170 | Λ -M h,c^X e <j>—* Ύί% | 817,0876 |
-300-
| 171 | m^ÄosO ° i rv k, o 0Λ^γ\^γ·»γΑβ '0 | 777,0223 |
| 172 | r· • ‘Ó | 777,0223 |
| 173 | A 'M | 801,0882 |
| 174 | Y’ ‘‘'f'0'’ ΑΑ». A.-SA-'y’y4·· ‘0 | 919,9515 |
| 175 | ΊΖΊο · οΑ.ΊΑ.'-γ’νΑο '0 | 919,9515 |
| 176 | o ηΡ Γ* εΛ^γχ<:ϊΥί^’χιΥ ι π Τ” JX. ’ οΑ-ν^^γ“'/’» · ·ό | 892,8821 |
| 177 | „ΑΑ>= ° .Α'^Α.^γ'-ν4». “ · *ό | 892,8821 |
-301 -
| 178 | £> *. Υ'Υ Xj f^·' ’ “0 | 818,0723 |
| 179 | .,οφο., O Q O | 761,964 |
| 180 | • Ό | 789,0334 |
| 181 | • 0 . | 789,0334 |
| 182 | -YA.O .=s ÍTVr/ r- S o í'*’», • ό | 820,0883 |
| 183 | γΑ-γγ f 0 r > ° A^jA/yÝ»» ° ° Π | 763,9799 |
| 184 | O o.. Λ Ύ· L. o Α.-γγ-^γ Ύ° • Ό | 791,0494 |
| 185 | -ôr’^Λτψ Λ “Ύ’ >= °s ° ΑγνγΑ • ‘0 | 791,0494 |
-302-
| 186 | 0 M»c>z's»oz'^H- CH, | £o,O t /-V1 P '’ιΓ***'*Γ y © ‘’οΑ.Α,Α O | Ύ-Γ·· ‘0 | 791,0494 |
| 187 | »sO,. | 809,0674 | ||
| <****! < 9. | ||||
| ό | .Α/γνγ'Α • “Ó | |||
| 188 | •SCÄ | 809,0674 | ||
| •s^xAA | yZ^-sX \ ° | •s-.^os | 1 | |
| ô | • 0 | |||
| 189 | o | 823,0945 | ||
| Ύ'Κ''/ f p | «ŕ^os | |||
| 0 ΆΧ | ||||
| [ 0 | O | ’o | ||
| 190 | 823,0945 | |||
| .'SWr. | ||||
| k.=^An> | Y*''/ T 0 | *SC'N^ f | ||
| 'Ô | e 0 | ΎΧ ”0 | ||
| 191 | »C | o 1 r~\~a | 865,1758 | |
| '^*χΗχτ < © | ||||
| (Ai | ô -íK. [f | '^X | ||
| Q | e | ’ή | ||
| >s=y | ||||
| CM, | ||||
| 192 | V | o... | 865,1758 | |
| ►s^X | t 9 | 'S'0’· | ||
| Φ | o -íX _χΧ>1 β 1Γ o | χγο | ||
| =y | ô | |||
| <A |
-303-
| 193 | ° Q ό Ya? r ΛΑ ° KjC > C yA5. 0 ’yA V | 817,0876 |
| 194 | •Λ X ·'“ w H>C | 817,0876 |
| 195 | r. ° A-óc Pp | 1606,121 |
| 196 | /¼¾ A | 1606,121 |
| 197 | γ^·& A,? r ó “Λ | 1638,12 |
| 198 | Α^’Α -¼ | 1638,12 |
-304-
| 199 | O | f\· 9% ·. ’Ó | 775,0063 |
| 200 | »S=^Ío<, o I rK~* O*, -γ· ‘0 | 775,0063 |
| 201 | •Q . | 763,887 |
| 202 | A^-V ° Ό - | 707,7786 |
| 203 | r*j—t « 0 ηρ f*s ^τγ* ’ r Ό | 734,848 |
| 204 | Xý& 'y \ »1 | 774,9659 |
| 205 | Ά . .0 Q^nV^'Vi? y* cx, .SC-C c*» | 800,0139 |
-305-
| 206 | v, . .Q ^***\—4 © L o 0 Y- 0 k _r° ►S-“\ | 687,7971 |
| 207 | -K O l e c y ° k A* Oh | 714,8666 |
| 208 | -^o R I Γ \ * °*» s A 0 .AYA-vy< O 0 ‘0 | 853,0774 |
| 209 | AAj- | 853,0774 |
| 210 | ’S'-ľ-CH, \ ~) o Γ /-V1 í”· Ô Wnrg- | 811,0398 |
| 211 | K.-.ÄCH, O o 1 rV1 í*> ho^aaVo γ ô ·χχΛύ^· | 811,0398 |
| 212 | H,sJ1ch, ’C) o | r-\-* ľ’· ΆΛγ C o -γ·*· o ° Cy | 811,0398 |
-306-
| 213 | «. « /S >. | 817,0876 |
| 214 | 817,0876 | |
| 215 | σγ^ΑΛ^ | 835,1057 |
| 216 | o-o, .. 'Vt; o v* ^¼¾ | 630,8288 |
| 217 | OH o. rÁ v A ΥΛ5 | 616,8018 |
| 218 | CA p) A-aAíX χρ·Α · Λ | 742,9208 |
| 219 | ζΑ p A χ χ χ r· r-S'YÝSr^-'V*'^ ° v O^N CK> Λ | 744,9367 |
-307-
| 220 | 735,9694 | |
| 221 | \~Y > o •‘y’· •ό ·λγη£· | 853,0774 |
| 222 | ‘'í-'“'» *C~^ .-°s ^ο-ΜγΦγ o k ° ΑΥ'-'Υ'Λ ° Ό | 809,0862 |
| 223 | o'’ o -Jt· Wq | 749,9965 |
| 224 | O-Ch, >% 0, Hb ►Q y* r m HcTA O ASý. c*. | 612,7703 |
| 225 | OH π>\ c Ho CH. Á °x ' 0 Η,ση 0 γ-Ν yývš %C^H_pCH, W, | 598,7432 |
| 226 | HC F** C' 0 ey Λ | 758,9638 |
-308-
| 227 | 'V 0 /Y I 11Γ 0 Υ ° 0 | 684,8401 |
| 228 | Ο CK Η Γ< X) γ-Η· Ο Λ .CZ χχό Ο. | 758,9638 |
| 229 | JH .►—( °s r ΌΓΟ | 758,9638 |
| 230 | 0 1 Γ \ 5 ?<* ΧΑγΟ P 0 Λ - ΛΑΛνη Ο · ·0 | 795,0404 |
| 231 | jv-ľX ζΡ 1ΛΧΤ f 1 | 795,0404 |
| 232 | ζζ \—. ο ο CO-sAr^o^ XA°U° °<γχΝ Λ | 624,7815 |
| 233 | ο )—1 ο ο αΧΧ'Υ'“ ί° υ ° X | 610,7544 |
-309-
| 234 | c [I J r—> c o cx CYv A^A AA KO ÍVV H h ° CJ ° =yH Λ | 770,9749 |
| 235 | C-CH, r A o v*N <X> | 612,7703 |
| 236 | aa 0 S0 °yN Y K'^0 «I- CM, | 722,8369 |
| 237 | OH c Ao h,cJ <yN CK Η··\ l 7L O / (D HjC O yW> X=Th^ <x> | 598,7432 |
| 238 | O Aw? 7 o -γ· e °ó | 795,0592 |
| 239 | Λ A h,c-^ o o A~ L—( °S Ύ Λ-Α °s | 758,9638 |
| 240 | ‘ Ό | 839,0414 |
-310-
| 241 | 9 Γ, p o L o o o7 · y | 729,8375 |
| 242 | ,-Lo , Ά V-V“· „ ° | 756,0443 |
| 243 | A A' / V-On Μ·\ o r\ δ. Vt H.cíy-CH. 0 Ο^Λ 0 ΎΝγΛό --^-¾ | 701,9518 |
| 244 | -C -A. o He w M - \-O\ o · 0 *»-—o %**** OA o | 734,0159 |
| 245 | «.'νΛ· 99 ·% ox rS Α- . JA TÁX ŕ ' Ό | 715,9789 |
| 246 | A xr A ch, o AA | 715,9789 |
-311 -
| 247 | pH* XXCH. C / 0 -¼¾ | 741,9951 |
| 248 | e Q Ώ • Ό | 821,0786 |
| 249 | ~ e-°-> . 'X ΗΓ) O <^--N Aýó V-εΑνΑ | 626,7974 |
| 250 | rw OH X Y-AA yX\X | 612,7703 |
| 251 | «. ϊυΓτΥ » sSx ° s ° V x | 698,8672 |
| 252 | ►S\£ y-cM, ÁX Ογ* x | 674,842 |
-312-
| 253 | y-os o . o o °<yN i X | 584,7162 |
| 254 | 0 Xo X o qjr° x% | 735,9694 |
| 255 | 0 CX) 4/¾ H.=^) O X“ YVM C>S | 772,9909 |
| 256 | x θ qMxa \-*4 0 L 0 © V 0 u *SC | 776,9383 |
| 257 | A x ° V Χφγχ CH, | 626,7974 |
| 258 | X .9. -l c L © ô y- ° \ x° •'X | 835,0189 |
-313-
| 259 | P) - 0 ο ©S q 1 ο ο *S= °s ©S | 835,0189 |
| 260 | V Aw> <*> | 612,7703 |
| 261 | ŕ^o'K^v9 ť’i “’Ύ“’ °S ° γ-ηΆ ‘ó | 686,856 |
| 262 | VÄ.S ,°S o Γ CK ^Αγ Y f* a 0 οΑ'Χ,Α'-γΎο Ό | 686,856 |
| 263 | vÄ>, ,“ e Γ r~~\ n i jí y j mx% ^o< V>-Z^o*Si *Yy <J L L, ° A^A-y·--^0 • ’Ó | 686,856 |
| 264 | V-Xios Z°S 0 1 !\ f*' vx^A-γγ / o 0 οΧΑγΑ—ΥΥ^0 • ’ό | 686,856 |
| 265 | Q - sY-· Y ^os Λ | 742,9236 |
| 266 | Y os ° • Ó | 738,9325 |
-314-
| 267 | Αγ—ΧΥγΧ β ». ° oAAjA.^y“yLo 'Ο | 738,9325 |
| 268 | Ύ». X. | 817,0444 |
| 269 | Ο<. ;·ψ. Χ> .''γ^'οΑ'Υ’γ > ο ». οΑ,ΑγΑ^^γΛ^Λ,, • ’ό | 738,9325 |
| 270 | J-Γ Γ~\ ο γ\ ο ο HjC^I Ο ΎΝ ° xU~ ***< °S CM» | 772,9909 |
| 271 | rf Y AVÝ J i ?Y • ‘0 | 795,0592 |
| 272 | v A 0 <W Y Y ^OS X | 758,9638 |
| 273 | ;Y> YY° ’ Y X | 810,9966 |
-315-
| 274 | Oí, ο-01» r Υ ΎΎ\5 ο> | 610,7544 I |
| 275 | CH °Η ,Υ LsAÁ CH> | 596,7273 |
| 276 | 0 ΖΟ\ χ, Υ* 'Ι „? Ύ ΎΎύ> | 756,9479 |
| 277 | V-01· CX η—'·· Λ ,Χ° νΧΑ vxrXfk °Λ | 756,9479 |
| 278 | Ύο ATV .U ο Ύ-* χ% | 744,9799 |
| 279 | ° ‘9- c ν Y *s X *SC ΟΊ | 698,8672 |
-316-
| 280 | K I 19- V'cr- í γ. ° v 0^ · ' x | 698,8672 |
| 281 | YO * 0 λ | 709,8471 |
| 282 | v 8 r H.Y'CHí | 598,7432 |
| 283 | •scJ? o &* (T^) °y Y X | 810,9966 |
| 284 | v.f' c . .0 Y Y X ►ςε^εχ, | 758,9638 |
| 285 | n (Χψγ^Α.^“ k»c>L^L o L o M |T 0 Ί °γΝ ^<>s x | 742,9236 |
-317-
| 286 | ŕA. 0 c x | 817,0444 |
| 287 | ŕA H · · r.SVYV'^-rY'rC: ó’“· X. | 817,0444 |
| 288 | c p\ . v^ X Ar· Vró c*S | 759,9526 |
| 289 | v/’ r\ 0 |T IT^ A. o \ 0 Η,<Τγ^Ο ΟγΚ <A H,C | 494,6367 |
| 290 | A ·% o a, y'». .U 0 ·ί^-Η νΑή -.•v/) | 719,9263 |
| 291 | H,e'£* Λ O r~~\ 0 0 1 ° \ e Ογ A, Λ | 731,9380 |
-318-
| 292 | XX *·'>. c X Γ 'c> .U e | 677,8887 |
| 293 | q 0 o c Γ> ϊιΓγγΧ'°’’ γ H X | 612,7703 |
| 294 | -A q v X x. | 612,7703 |
| 295 | Xx x | 716,9261 |
| 296 | X Q Y X Η,σ^-οι, | 717,9109 |
| 297 | XjuXx ΧΥΧ^Αχι °·γ* H.C'^CX, | 950,0884 |
-319-
| 298 | JH g X Y?O XXXs cx. | 729,9221 |
| 299 | Χύ1·“ °yN X Ä | 578,7120 |
| 300 | X O 9 X ‘í^‘ | 564,6849 |
| 301 | X Q °γΝ X | 703,8838 |
| 302 | c/X x. | 553,7021 |
| 303 | X . Q ch.Qvv^^'^'0’ £Α^ο° V %Z x | 703,8838 |
-320-
| 304 | Ο<γΝ <*> Λ | 552,7173 |
| 305 | °γΝ ν\ | 523,6756 |
| 306 | 'Α χ^χ- ΊΧ V °γΝ X | 731,9783 |
| 307 | X# °ΥΝ X £Χ° ’ CH, | 509,6485 |
| 308 | χΧ ο·γΑ ^CH, X | 508,6638 |
| 309 | Ογκ r° η,<Α&\ | 731,9783 |
-321 -
| 310 | cyN X | 667,8503 |
| 311 | ΟγΝ CH, X | 667,8503 |
| 312 | HX 0 °Λ \ V-T =*> | 567,7292 |
| 313 | X · A ?> ϊ ηΧΑχΑ-'Υ'0’’ $Υ» 0 < 0 °γ A x | 724,9054 |
| 314 | Y A N eY >SC>^·0 Λ | 724,9054 |
| 315 | Ά Q ,ογχΧ γΧΑ ° S0 O^H °S x° **G G>S | 762,9736 |
-322-
| 316 | π °Γ~\ 0 0 T F· sΎ= ° s ° °γΝ A X | 764,9896 |
| 317 | .ej· f=\ y, ° ° S a £° S0 V A Λ | 764,9896 |
| 318 | 'A· Y A | 764,9896 |
| 319 | A «Α o ϊτυΛ’ y M,c o$ | 908,0734 |
| 320 | X . .A ϊγ. ° y· 0^- V I Ά | 724,9054 |
| 321 | ;Ά' C^N CH, ' CH, | 508,6638 |
-323-
| 322 | Vy» ΖΔ o ch. os^ACy“'“· v Ύ ch> CH, | 522,6909 |
| 323 | A B ch, ^¥x7í^Nxrriz’N’'cH, kc. ’ íl 11 1 >< o L o h,c o > °yN CM, | 522,6909 |
| 324 | A · I? < A'kA/A O< X 7^ TÍ N i í£>A ’ γ ~ 0^ „N X. °Y C*S x | 731,9380 |
| 325 | ΟΛ Λ» z“H N—/ 'CH, o f 3 c V>t θ 0 yj 0 °y ΆΛ S.e^> Λ _Tíh • CH, 0—(--CH, CH, | 744,9367 |
| 326 | χγ *Sc**|i&0 O^y *SC M,C*i » CH. | 727,9102 |
| 327 | o Y A x | 567,7292 |
-324-
| 328 | °<γ-Ν CH, r Η,σ ‘CH, | 584,8029 |
| 329 | o °Y x | 726,9214 |
| 330 | <Ύ X r ^C^QS | 726,9214 |
| 331 | Q £>Ý% ° S 0 °γ Y x | 726,9214 |
| 332 | P) ° S0 °yN Y X ’ CH, | 740,9484 |
| 333 | 0 Λ*» V—n CM, UV) *>cx_^x Y i°r c YXX H.=XCH> \h | 688,8284 |
-325-
| 334 | Vy“, A ° ° y f ΎΎΪ ^c>·· A.0 A 0 ►s= V° 11 «>C CH, | 564,6849 |
| 335 | H.CyCH, °yN V V CH, | 550,6578 |
| 336 | .χ>: <*» Wb o | 820,9918 s~ · |
| 337 | Ύ 0 O^N CH* *SAz° H.C CM, | 710,8784 |
| 338 | Ον* 0 \=/ AA H,= CH, CM» | 746,9089 |
| 339 | <y V >= OS | 710,8784 |
-326-
| 340 | . -η. ο \=/ s κ-γΛο ο ί 5 ►sc^c'A, «· | 590,6823 |
| 341 | Τ . .ο ΑΑΑαΑ· °υ Α Α | 716,9261 |
| 342 | ο > /AaAv01 ° \ ° X | 539,6750 |
| 343 | y/* /ΑΑ ο /Α ο V-A ο V ° XÍÁ | 772,9473 |
| 344 | X“· a A b r ťrx ‘i t y Ύχό ε, CH,”* \)--£*CH> CH, | 731,938 |
| 345 | HO jλ γΛ b r fy. Y s y bXÁŕ-. CH, | 731,938 |
-327-
| 346 | HO x X) y A 0 p 'cVo C«i | 731,938 |
| 347 | μ-.χ AA °yN Χς H.^0 H,C 'o, | 546,7132 |
| 348 | NC VC»S m,c>yAo ° \ 0 0 °yK Sh, H.yo H.C CH, | 606,7662 |
| 349 | K,C VCH XyÝxY” X’ y CyN > H.Cy0 H>C CH, | 578,712 |
| 350 | v/4 °yN CH, | 564,7722 |
| 351 | Vy^ °<Y'N Xh, <*, | 548,7291 |
-328-
| 352 | ^α.1 y °<%y ^·<>ς CH, | 562,7562 |
| 353 | •ν' Α ° y*· γ x =x> | 642,8432 |
| 354 | χγ cyN CH, · CH, | 536,718 |
| 355 | °YN ^CH, ”> CH, | 574,7673 |
| 356 | x** O XAYX O <0 CH, 0 o^f, CH, °y“ x | 726,9214 |
| 357 | K · X Y > V V ch, | 726,9214 |
-329-
| 358 | <γ· v *>= os | 580,7279 |
| 359 | ° L «γ c · V >S« CH, | 639,799 |
| 360 | Ύ· «Μ* °γΝ Y > CH, | 538,6902 |
| 361 | °yN Y cm, | 562,7562 |
| 362 | κγκ, ŕXy °y* y » os | 566,7444 |
-330Tabuľka 4
| Vzorec | Meno | Ki* rozsah |
| X 0^0 N CH, N /^Hj Τγ .ΙΧγ.-'γ·'!'*'·u J o | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHiBoc)nV-(C0)-G-G (Ph)-Am | A |
| OO u · -(5 | (2-CO2)PhCO-G(Chx)-P(4t- MeNHC0Ph(3-0pH)-nV- (C0)-G-G(Ph)Am | A |
| cv° ΟΊ XN H Ύ*^ \ 0 O ° Αη ΑΥ/γγ», u “ °ô | iBoc-G(Chx)-P(4t- NHSO2Ph)-nV(CO)-G- G(Ph)-Am | A |
| p. <J · “Q | iBoc-G(Chx)-P(4t- MočovinaPh)-nV-(CO)G- G(Ph)-Am | A |
| ch. o r—<* ch. '~YA9/í ; O | iBoc-G(Chx)-P(4t- MeNHCOPh)-nV-(CO)-G- G(Ph)-Am | A |
-331 -
| 2 ΪΜ· ]H‘ u · 'Ô | iBoc-G(Chx)-P(4t- MeNHS02Ph)-nV-(C0)-G- G(Ph)-Am | A |
| φ-’Ό J ľ*' S ./—\ jh‘ Hi:Aa ii ? h i u . .φ | iBoc-G(Chx)-P(4t- MeNHC0Ph-(3-0Ph))-nV- (CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| 2. N fí!SS^> 0 i k* ?M i 0A0M° γΑ«ΎΎ<», O | (2-CO2)PhCOG(chx)-P(4t- MočovinaPh)-nV-(CO)G- G(ph)-Am | C |
| ”ŕW γγ U o -0 | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO24Me)Ph)-nV(C0)-G-G(Ph)Am | B |
| A XJ 0 0 Q | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2(3CI)Ph)nV-(C0)-G-G(Ph)Am | B |
| YXV O A ° rS ΑΑΑγΑ u . .0 | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2(4NHAc)Ph)-nV-(C0)-GG(Ph)-Am | A |
-332-
| Ύ>· u · ô | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2(3,4-diCI)Ph)-nV-(CO)-GG(Ph)-Am | B |
| CO r· H CM, 0 j—Z CM, „A^-A-O J .1 0 X οΧγ-ΑγΧ.·, O 0 ° x Q. | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-1 -Np)-nV-(CO)- G-G(Ph)-Am | B |
| 0 Q) λΜ-'Ύ^Λ. ° Ό | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2- 2-Np)-nV-(C0)-G-G(Ph)- Am | B |
| xy λΧ/ι í ό MrXX 0 | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2(4CI)Ph)-nV-(C0)-G-G(Ph)Am | B |
| 0 CH Y^”9 jA j? · 'ô | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO25(2,3-dihydrobenzofurán))nV-(CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| ch» CM. 0 /—9 CM. ^yX'?A s rS AAJ—γΎ*--. 0J *o | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2- 6(4-OMe)kurmarínB)-nV- (CO)-G-G(Ph)-AmB | B |
-333-
| „Cm, Y .Α·ν·Ά?'Α .a u 0 *o | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-Ph(4-OMe))-nV- (CO)-G-G(Ph)-Am | A |
| a Ô 1 0 ’ô | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-Ph(4-CI))nV(CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| Φ “«^0 ° Ω ^X'V'r ““ ° · “O | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-Ph(4-CI))nV(CO)-G-G(Ph)-Am | C |
| Φ Y .Λγ/Χ J; ° Ó —yX”· O | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-Ph(4-Ac))-nV- (CO)-G-G(Ph)Am | B |
| H.C^ X.O *^p.o J» | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-Ph(4-Ac))-nV- (CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| f· -o,ΎΚλ. u · ‘0 | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2- Ph(4-0Me))-nV-(C0)-G- G(Ph)-Am | B |
-334-
| Cv cri r χπ' T ηΛΥΥΎΛ N λ Υ<ΚΗ, ”0 | iBoc-V-P(4t-NHSO2-Ph)- Nv-(CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| -^jžA.w.. u · ‘Ο | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO21Np)-nV-Am(C0)-G-G(Ph)Am | B |
| Η,£χχ»γ-Η-ςί Λ ° A Α.Χ,λ.^ύ,., u · -o | iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2- 8-chinolín)-nV-(CO)-G- G(Ph)-Am | B |
| Λ °Y° OAO«° yk kJ o Ό | (2,5-diF-6-CO2)PhCO- G(Chx)-P(4t-NH-iBoc)-nV- (CO)-G-G(Ph)-Am | A |
| Oy c't ..F .-w ° f—( CH. ΛΑγγ j ., i'-*'! ΑΛ/νΎ^ U ° °ô | (2,5-diF-6-CO2)PhCO- G(Chx)-P(4t-NHSO2-Ph)nV-(CO)-G-G(Ph)-Am | A |
| ηΛ Y 'Ýy^2'ä^ M ° °ô | (3,4-diCI-6-CO2)PhCO- G(Chx)-P(4t-NH-iB0C)-nV- (CO)-G-GPh)-Am | A |
-335-
| 9 Ο^^ΟΜ u ° “Ο | (3,4-diCI-6-CO2)PhCO- G(Chx)-P(4t-MočovinaPh)nV-(CO)-G-G(Ph)-Am | A |
| ςτ γχ. ‘ Ο | iBoc-G(Chx)-P(4t- Močovina-(3-CI)Ph)nV(CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| ϊ Xyrt”x Αοη° |Υη οΑΑ)|ΑΝ^γγΑΗΗι u ’ ’Ó | (3,4-diCI-6- CO2)PhCOG(Chx)-P(4t- NHS02-Ph)-nV-(C0)-G- G(Ph)-Am | A |
| 0 ΑυΧά^Χ- ’ό C 0 | iBoc-G(Chx)-P(3,4-iPr)-nV- (CO)-G-G(Ph)-OH | A |
| CH, Ο ο < 0 0 <Λ | iBoc-G(Chx)-P(4t-Chx)-nV- (CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| OS ο ο l^o 04 | iBoc-G(Chx)-P(4-diMe)-nV- (CO)-G-G(Ph)-Am | A |
-336-
| CH, | iBoc-G(Chx)-P(4-Bn,4-Me)nV-(CO)G-G(Ph)-Am | B |
| .02 . .0 w, | iBoc-G(Chx)-P(4spirocyklopentán)-nV-(CO)G-G(Ph)-OH | A |
| • 'Ó | iBoc-G(Chx)-2- Azabicyklo[2.2.2]oktán-3- CO-nV-(CO)-G-G(Ph)-Am | B |
| χόγ^jvSY^ 0 0 L 0 0 | iPrOCO-G(Chx)-P(4-O-terc- Bu)-nV-(CO)-G-G(Ph)-OH, | A |
| CH, 0 0 L 0 0 o$ | Neopentoxy-(CO)-G(Chx)- P(4-O-terc-Bu)-nV-(CO)-G- G(Ph)OH | B |
| CH, 0 O <0 0 | Neopentoxy-(CO)-G(Chx)- P(OH)-nV-(CO)-G- G(Ph)OH | B |
| W> | Etoxy(CO)G(Chx)-P(OH)nV-(CO)-G-G(Ph)-OH | B |
-337-
| P *Vn 0 0 (H AVrM X X. °(5 X ° χ | iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)- nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| ľp 0 ,Λγγίβ-χΧγζ, ’Ô í ° ’ | iBoc-G(Chx)-P(3,4-iPr)-nV- (C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| °S 9 V- N 0 0 CH, W< | iBoc-G(Chx)-P(4spirocyklopentán)-nV-(CO)G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| O, | iBoc-G(Chx)-P(4c-Me, 4t- Pr)-nV-(CO)-G-G(Ph)- N(Me)2 | A |
| r* u f °\ ° Xl a ' 0 'Χ/Λ 1 J H,C O1j<£ 0 \ / | iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)nV-(CO)-G-G(Ph)-OMe | A |
| Γ’ f ^b° V XžM | iBoc-G(Chx)-P(4spirocyklopentán)-nV-(CO)G-G(Ph)-OMe | A |
| Ό | iBoc-G(Chx)-P(3t-Me)-nV- (C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| XX o <γ <γ 0 CH, CH, | iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)nV-(CO)-S(Me)-G(Ph)-OH | A |
-338-
| Wj ο ο J ®κσ7 0 °s | iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)nV-(CO)-S-G(Ph)OH | B |
| sTA · =9 Η,νχ^'\^Γγγ\'ίψ1'7γεΗ > ο ° |> ° cAos ° CH. | iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)nV-(CO)-G(Ac)-G(Ph)-OH | C |
| /V-Me-G(Chx)-P(4,4-diMe)- Nv-(C0)-G-G(Ph)C02H | C | |
| 0 0^0 ΟΗ, | iBoc-G(tBu)-P(4,4-diMe)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| OS ο ο ο CH, | iBoc-G(Chx)-P(3,4-(diMe- cyklopropyl))-G((S,S)-Mecyklopropyl)-(CO)-G-G(Ph)- N(Me) | A |
| 0 0^0 f | iBoc-G(Chx)-P(6S-CEM)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| CH, | iBoc-G(tBu)-P(4,4-diMe)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
-339-
| VPVíVAY ch, L C J ο o Y | iBoc-G(Chx)-P(6R-CEM)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| CHj OOOO A OH, 0 | iBoc-G(tBu)-P(4,4-diMe)-1 (C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| Ο» | ((R)-l-Me-iBoc)-G(Chx)- P(4,4-diMe)-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A |
| ° ° ° °q | iBoc-G(Chx)-P(5-c/t-Me)nV-(C0)G-G(Ph)-C02H | A |
| 1 0 0 0 0 Á | iBoc-G(Chx)-P(5-c/s-Ph)nV-(C0)G-G(Ph)-C02H | B |
| iBoc-G(4,4-diMeChx)- P(4,4-díMe)-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| 1 0 0 0 0 | iBoc-G(1 -MeChx)-P(4,4diMe)-nV(CO)-GG(Ph)N(Me)2 | A |
| iBoc-G(Chx)-P(3,4-CH2)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
-340-
| ΧΥκ,· Η,C Η-ς /r—* 0 CHj | iBoc-Chg-Pip-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | C |
| 1 ° 0 j 0 0 “Λ | iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)-1- (C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| 0 0 0 0 1 0 | iBoc-G(tBu)-P(4,4-diMe)-1- (C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| οοο 0φΙ | iBoc-G (tBu)-P(5-c/t-Me)- nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| ((R)-l-Me-iBoc)-G(tBu)- P(4,4-diMe)-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| (S)-1 -MeiBoc-G(Chx)- P(4,4-diMe)-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| iBoc-G(tBu)-P(4-c/s-Me)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
-341 -
| iBooG(Chx)-P(4-c/s-Me)- nV-(CO)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| iBoc-G(tBu)-P(5-c/s-Me)nV-(CO)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| 0°Υ° 0 | iBoc-G(Chx)-P(5-c/s-Me)- nV-(CO)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| 0 0 \ 0 0 | iBoc-G(Chx)-P(t-3Ph)-nV- (CO)-G-G(Ph)-N(Me)2 | B |
| 0 ο 0 0 | iBoc-allo(lle)-P(4,4-diMe)- nV-(CO)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| 1 0 0 1 0 0 | iBoc-G(Chx)-Pip(4morfolíno)-nV-(CO)-GG(Ph)-N(Me)2 | A |
| iBoc-G(1-MeChx)-P[3, 4(diMe-cyklopropyl)]-nV(CO)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| iBoc-G(1-MeChx)-P[3, 4(diMe-cyklopropyl)]-L(CO)G-G (Ph)N(Me)2 | A |
- 342-
| y ° | iBoc-G(tBu)-P[3,4-(diMecyklopropyl)]-L(CO)-GG(Ph)N(Me)2 ' | A |
| iBoc-erytro-D,L-F(beta-Me)- P(4,4-diMe)-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A | |
| ΧχΑ | ((R)-1-Me)-iBoc-G(1- MeChx)-P[3,4-(diMecyklopropyl)]-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A |
| O O O 0 OS | iBoc-G(tBu)-P[3,4-(diMe- cyklopropyl)]-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A |
| χΑΛ 0 0 ) 0 0 «ΤΙ | iBoc-G(tBu)-P[3,4-(diMecyklopropyl)]-1 -(CO)-GG(Ph)-N(Me)2 | A |
| „M Q f ΎΧϊ i? 1? T Γ’ 0 0^0 | iBoc-G(tBu)-P(3,4-CH2)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| .Χφλ^Α L, 0 0^0 CH, | iBoc-G(Chx)-P(3,4-CH2)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
-343-
| ° 0 Q CH, O 0 O 0 <8 | iBoc-G(tBu)-P(3,4-CH2)nV-(C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
| pjA°t3 í íi^ CHj Q 0 O O | ((R)-l-Me)-iBoc-G(tBu)- P(3,4-CH2)-nV-(CO)-G- G(Ph)-N(Me)2 | A |
| CH, 0 0^0 OS | ((R)-1-Me)-iBoc-G(1- MeChx)-P(3,4-CH2)-Nv- (C0)-G-G(Ph)-N(Me)2 | A |
Tabuľka 5
| Štruktúrny vzorec | Molekulová hmotnosť | Ki* rozsah |
| x AxSr ',γν ]’ y os Y Hc cn, | 507 | B |
| Y Y V' OyN · Ύ° | 481 | B |
| J \t C -A YY H» CH, rr Y rf HiC>Cá s < s ''x* n ch3 0=s ch3 | 473 | C |
-344-
| ”ŕxCHj h * ?rtj Η,Ο'^γ'^Ο ° \ ° o »Y x'*/ 1 H Mŕ N Ί | Hŕ^CH, | 586 | B |
| Y' γ | 497 | C |
| ΎΎΑγ· 0 4- | 483 | C |
| γγΧ° γ 1 0 χ|χ | 481 | C |
| K*C>/CM1 ,Υλ·' Ο^Ν h’cX | 479 | B |
| HjCXCH’ °γΝ A Η,ϊ^χΟ | 507 | A |
| M,cyCH> o^yxV' Ύ HjC^° H 3C~l ’ CM, | 521 | A |
-345-
| jr\ CH, <u° j HjC^^CHj | 612 | A |
| H1CYCM’ a^nV”· Hic'>xo HC'Í 1 CH> | 533 | A |
| v/· HaC<X HjC*· ’ CHj | 569 | A |
| Y x | 557 | B |
| λαΑ· x> | 521 | C |
| Ολ^τψ· Y Y | 555 | A |
-346-
| ^νΛν YVsA° S° A °γ | 497 | C |
| X | 569 | B |
| x | 533 | B |
| χΎ x | 519 | C |
| 621 | B | |
| X ýy Η,σΤ-CH, | 392 | C |
-347-
| H C CH, K‘CV 0γγγ“Η· ď V | 418 | C |
| ©s w f Oí, | 509 | B |
| °γΝ “ x° | 493 | C |
| Ä · <1W Ογ-Ν X” | 507 | B |
| a | 567 | A |
| Hŕ^CH, o^Ý· Hjc/^cT CHj | 519 | B |
-348-
| y °γΝ “ x° | 519 | B |
| γ «ŕ Y CH> | 535 | B |
| ry“· ŕ\ 0 ?H> iY** |T 1 m>c>AA>„ ° X.° H,C Y ° >—CH. 1 H,C ‘ ’ °<γ-Ν CH, | 523 | C |
| K,cyCHí ΖΔ o / JLxNHj CH» K Y Π U γΝ ľx° HlC CH, | 493 | B |
| H C CH . Ύ 1 cy-á' Y Á ľx° KJC CM, | 547 | B |
| ►SCY yy Y Hy° °s | 519 | A |
-349-
| αΑ V Η>Άχ° | 505 | C | |
| Vy“’ γ\ | Ο | 494 | B |
| ŕr | |||
| ΟγΝ ΗΡ | s° CH> | ||
| Ηρν=Η, /'«. Γ\ | Ο | 480 | B |
| ΑΑ | ťr | ||
| °γΝ >\<γΝ | 1 »> | ||
| Hpy«S | 0 | 466 | C |
| ΗΓ<Α ο h3c^ Ο^Ν Α CH, | <. o CH} | ||
| Α | 493 | B | |
| V VyO | ŕ | ||
| 0 s-Z’^S·*''**^ | 505 | B | |
| L As © V r° «, | N 0 |
-350-
| o&Yr •Ζ | 491 | B |
| ηΎη> Ý ^γ» CH, | 541 | B |
| Γ\ CH, Tx'lj ^YlJ41 CH, Y | 478 | C |
| Οχγ^'φ1 X | 555 | B |
| X | 554 | B |
| ...χ=·. ίΆΨ- H,= Ά» ° 0 °«yN H>c~^° η,οΎ CH, | 465 | C |
-351 -
| yC C A-z’k ίΎ ϊ» L A. A. o qy Y, | O rY^ Y ° CKj | 520 | A |
| Ύ· X' Y σ | Y | 558 | A |
| L X X o Y Y H>= 04, | o jy x 0 | 532 | A |
| Hŕ^ 11 i n L JL o Ογ' c | o \ ° | 547 | B |
| γ c^y «γ σ° | A | 547 | B |
| Y Ý cy y° 04, | A | 553 | A |
-352-
| Y ΟγΝ CH, σ | 520 | B |
| Ja v x | 521 | A |
| J γγΧ ' | 543 | C |
| Q^rjr Y | 569 | B |
| cjnv CH, | 507 | B |
| cyN CH, | 522 | B |
-353-
| /Χύ' J ΟγΝ CH, | 606 | C |
| H C CH, *v Κ^0Η>^ H,C^O CH, | 493 | B |
| HAy«, ,Ϋψ·' Y H,c.y CH, | 467 | C |
| X °γ-Ν H>c>ro H’Xh, | 507 | B |
| X# Y CH· p- | 572 | A |
| CgAA | 718 | C |
-354-
| . X . t | 547 | Α |
| V . ° X | ϊ | |
| ογΊχ | 666 | Β |
| c? | 540 | C |
| Ύ’ X | 554 | Β |
| 0γΝ 1 ΎΝ | 540 | Β |
| X ο ν °γΝ ' X | 632 | Β |
-355-
| Y σ | 580 | B |
| οΑγ v Y | 552 | A |
| cr | 592 | A |
| oÝY V CfS | 518 | A |
| QyN ΥΑ ' π?- ος | 506 | A |
| Vy“> Xý v σ | 532 | A |
-356-
| Υ | 581 | Β |
| 566 | C | |
| V | 599 | Β |
| oJchY 9^' | 553 | Β |
| ΥϋΗ1' | 568 | Β |
| <Υα·'1Φ Υ | 566 | Α |
-357-
| 566 | A | |
| X _ Ä _ | 644 | A |
| Άν | 543 | C |
| 574 | A | |
| v x | ||
| X | 534 | C |
| oXý Ύ | 549 | B |
-358-
| 562 | A | |
| Oyk · A | ||
| A | 662 | A |
| ojlvW e<Y“ x | 563 | B |
| X Ύ | 518 | B |
| Y | 492 | B |
| oJAý A | 533 | A |
| n^os s4xx SyN <*> HiC CH, | 510 | C |
-359-
| Λ/3 ,/τ X | 504 | A |
| ΗΑ/Η· cAx Y Δ | 530 | B |
| Vy01* cAÝr °γΗ V | 516 | B |
| x* | 574 | B |
| Xx x | 561 | B |
| αχΧ •V -7 | 533 | B |
| Χχ | 493 | C |
-360-
| ΟΧ v Y | 546 | A |
| cAi Y | 561 | A |
| H,CV°S | 505 | B |
| Xý Y Y | 490 | B |
| «Λ CH, C° » (,Χ’γΜ. γΑΟΑ Y ογ ch, H,C^_Ze H,=Y „ CH, | 539 | C |
| PA'' Y | 532 | A |
| BStyCH, κ^Ι,χΜ*' Hŕ-K° H,C CH, | 561 | A |
-361 -
| 573 | A | |
| X X | ||
| λΧ | 567 | A |
| Qi^Y | 581 | A |
| V Δ o εγ,Ν X | 608 | A |
| Y | 587 | B |
| A | 561 | B |
| 581 | A |
-362-
| J | 573 | A |
| A | 624 | A |
| 547 | A | |
| oJq J | ||
| y. | 583 | A |
| V X' | ||
| 545 | B | |
| X | ||
| A. o* l 0 J θ | 609 | C |
-363-
| p'ft | 549 | C |
| Y | 575 | C |
| Y cr | 613 | A |
| x | 573 | A |
| oJXy X | 561 | A |
| c3SaV <7 | 625 | A |
-364-
| A t | 666 | C |
| s | ||
| x | 588 | A |
| αχ° cy | 599 | A |
| Y x | 573 | A |
| ογ · 'φ' χ· | 587 | A |
| e ,, Y x | 615 | A |
-365-
| ΎΗ’ XÄ ο CM, N jf 1 Π •e><A ο < S M’e ΤΓ^° v £γ° °Λ CH, | 535 | Β |
| ηα/·*» oAÝ' ΟγΝ Χ° <*» | 561 | Α |
| αΥΥ V Α° Ο> | 531 | Α |
| V ΥΓ | 651 | Α |
| Υ γ | 506 | Α |
| Χν Trý·-· Ή | 520 | Α |
-366-
| θ' | 546 | A |
| γγγ-Λ0 n °Ô | 602 | A |
| H>C^L JL 0 0 V] 0 J Ογ-Ν “> JV> x F | 549 | B |
| HA/”1 % | 587 | A |
| ^AA°° v γ v KC T % | 561 | A |
| x | 517 | B |
-367-
| H.cyCHj °γΝ X | 491 | B |
| H*X”* X. | 533 | B |
| h e CHi KjCv ii. o H C CH> ’ Η,ε·^//5*0 ° /-7 Ο«γ-Ν °χ | 507 | A |
| ur | 598 | A |
| x xT | 535 | A |
| X/ V x | 561 | A |
-368-
| Ον,ΟΙ | 633 | A |
| °γ-Ν Ο | ||
| χχ H.C ° H,C CH, | 497 | C |
| &Ύα °<γ-Ν X | 607 | A |
| αγΧχΥ V YY | 574 | B |
| oXy o>^ - *' J Y | 518 | B |
| ΟγΥΧ Y | 580 | C |
-369-
| Λ.. i. | 544 | B |
| v ό | ||
| ΥγΧ ’ X-F Y X' | 562 | A |
| •γ·'* y | 561 | A |
| HA v cr | 587 | A |
| M'cyCH· :::4ΥΧ y x | 533 | A |
| M,YM· ΧΥΥ' °y <X 'ch, | 559 | A |
-370-
| HlCy,CH, cYY °γΝ fV HjC ° H,C^T CH, | 557 | C |
| v Ý x | 535 | A |
| νγ*· YÝ <5y« fT h.=-7<O H,C CH, | 535 | B |
| Y | 547 | A |
| X x | 546 | A |
-371 -
| v r\ ° cy | 546 | B |
| «y· | 523 | B |
| Ύ“· ο^τχΥ'· Ύ 0*^ “ŕ-4. ŕ-Kc.£· w,c c 1 | 663 | C |
| ..Y | 637 | C |
| Μ C CH , M »c v * ZX 0 ch, tt ::‘>V*oT Y k Y H,C | 521 | B |
| H C CM1 mjC . > ' ' 0 | 573 | B |
-372-
| H,cxeH‘ A H,C | 559 | A |
| HŕYCMl CH. K Af Z=AJ kj A HjC | 533 | A |
| M>C^/Chl c$rá' O^N V7 A CH, | 573 | B |
| M C CH. H,cy 1 h,=-t<O HjC CH, | 595 | B |
| cA^ F *F*F H,c'xx’° H jC*A 1 CH, | 575 | A |
| h,cvch. /· A .H,C CH, | 560 | B |
-373-
| H>cVCril / A. ch, n ηΓ i n H>5L X ‘Ako h,cXX° ä~f γ·· F F ^~T\ H,C CH, | 534 | C |
| , AxxXa yjyo i o s o °yN X | 727 | A |
| x Xy^o oko' o OyN x | 727 | A. |
| s ° xa ° °ó | 753 | C |
| lí 1 *| ? 0 0 A | 753 | B |
| CH ?*. •WxH, .Ak-O, XaaX f? v -f °Α«Ύ“λιαΛ· ° ’Ó | 745 | A |
-374-
| CH, ° Γ \ 1 Ρ> Λ γ0' «ΛΑΑ-νΑ, ’ Ό | 745 | Α |
| 04, r Γ1 ° ι γ\ I γ°^ ηΛαΛυ Λ ° ΑΛγ^Υγ γΑ ° Ό | 759 | C |
| ύ%ύ • ’ό | 759 | Β |
| Ä” k | 669 | Β |
| 669 | Α | |
| Α γ | 554 | C |
-375-
| 0 pÝyAAvL AA° CH> V | 610 | B |
| Α0’· (0 Ó^ULmXr ch, ί ΤΓ π *1Γ cm, 0 A0 «<γ« V ŕyO θ’. | 711 | A |
| QyN X | 713 | A |
| >ψ%0 k° 0 lV Ao | 713 | A |
| J^AA^A QyN k A° | 732 | A |
| Aa^-ÍA XM Y α y« x X | 733 | A |
-376-
| k | 733 | A |
| Y V “ Ύ | 737 | A |
| Xä-A A‘ v Y =>, | 667 | A |
| x· 0 A ° y 0 KcAch CH, | 612 | C |
| YY, ΥψΧ ch, o Γ ΓΆ ' P* ΧίΑτγΥ r o Sr0*· * Yw, 0 Ό | 745 | C |
| Υοχ φ, ch o Γ r~\ I ch A'ATy’Q'/* 0 οΑΑ7γγ%Λο 0 °ó | 745 | C |
-377-
| haSch, ΥψΧ ΧΑΛΧχ γ | 745 | C |
| CH. f* ΗγΧοη, XL-os WX Y °ΛΛ/'νζυαΑ0 ° °ô | 759 | C |
| CH HŕScH, xww γ ° Λγ/γγ*0 ° °ô | 759 | C |
| CH. Ά Ä X χχχ | 759 | C |
| XX Ä-X Y Y PÁ | 668 | C |
| 0¼^1 | 636 | B |
-378-
| >γ% 0 < 0 0 CyN k X0 | 733 | Α |
| X^Ao0 S 0 0 0γΝ X x° | 767 | Β |
| HXCHj 0 . wxXx *XZ% ° XJ5 ° vK, Hŕ | 626 | Β ť |
| ^Λ-jSa χΧχ 0 | 715 | c |
| ^γΑΑ?Λ ^ΪΧ \° 0 | 715 | A |
| Xv’/XA-11' χΥ0τ 0 | 699 | B |
| ° | 725 | A |
-379-
| X, ď | 781 | B |
| w3C H C ίΗ· \ w*cxJ2ch. » ^Ay? J o *γ> ,λν^ | 743 | B |
| VCH, Os.^ y yaa/? 7 ’^íXXA | 743 | C |
| H.= , ' ° οΧ-γΧγτΧο ° 0 | 743 | A |
| Vos t*. \ Αγο, / ~ $aM? A 0 ΧΎρ 0 °Ó | 757 | B |
| Λ-os H- F' \ Ύ®. 1 .os :ΎΧ·9 a y ° AnYyaAo ’ Ό | 757 | C |
| . X Hŕ^ĽCHj ? -OS íW/? Λ ύ ° ° Π | 757 | B |
-380-
| U-Ä-A Wyv ' 0 1 0 φ ' | 715 | Α |
| 1 0 γ ' | 715 | Α |
| «ΑΛ'< Xj0 τ | 701 | C |
| J-v ο ο τ 1 (ΧκΑαΑ,Υ ΥϊΎ 1° δ | 701 | Α |
| 713 | Α | |
| αά Ά | 739 | Α |
| >Τ'γΧΥ ° | 741 | C |
-381 -
| 715 | C | |
| XyY | 837 | B |
| aS | 751 | A |
| • LkYľ1' Y-γ -b y | 725 | C |
| 711 | C | |
| 737 | A | |
| pYi kAjAo0 S° ° OyN x° | 775 | A |
-382-
| Α-νΥΥ γ 0 8 4- | 729 | Α |
| ΥγΟγίγΑθ Ο Ιο ο 1 Οφ ' | 729 | Α |
| ΧυΥΥλΑ '4Υ°ΥΚΥ^ί0 ° γ ° ‘ γ 1 | 715 | Α |
| Γ | 775 | Α |
| A^VyíÝy Y ό | 739 | Α |
| -3' ό | 713 | Α |
| χ4’ Χγ Υ Ύ ° )-0S H.C | 719 | Α |
-383-
| ^X Q Α 0 X; Hŕ | 719 | A |
| Y* H>csL X. ô 1 ο .η Η,ί/ηγ^'ο η Η? ο, ΆΑ <*> °'Χ Hŕ | 719 | A |
| qÄ-A^1' Y a | 773 | A |
| X” ‘ · · 9 -= .k-SrΝ Y° ?c><Ao 0 η 0 HjC-^CK, CM, 0 h.C-'X.m, | 727 | A |
| 'ý· . .Q Kŕ^C° X ck, O^-N CH, Mŕ CH, | 727 | A |
| K,ex Q 'ΧΑ. 0 y 0 -A,. m,c ηρ o | <c c> Cy* CM« H.C^-0 h.: ch, | 727 | A |
-384-
| 1Y | 787 | A |
| X Y | 809 | C |
| 709 | A | |
| Am y Ύ v x° | 769 | B |
| X o ,x qJYíY·'' Qy*N HA/' HCl ' CH, | 723 | C |
| Ύ^<λ5.γ y A · V* Y | 713 | A |
-385-
| S í 1 v Y | 723 | A |
| y | 723 | B |
| O o | v X | 771 | C |
| „ΖυχλΧ y·-7 V 7 V“ ‘X | 741 | A |
| .%,<*» P) /Ä ° 0 T[ °S Yy^-o 0 ''ot, 0 V n-SY V=T «n | 725 | A |
| \j0 | 745 | A |
| __1^γ'γΑχΧ' | 716 | A |
-386-
| V | 733 | A |
| Χγ 1 \χ ’Ύ | 713 | A |
| ο.,ΟγΧγ X Αγ'1'· -. Y σ | 753 | A |
| Y“ Ύο.. | 726 | A |
| Y’ k· Ύ | 712 | A |
| •vysMÁ't'''»· x Y · χ· | 771 | B |
-387-
| - | 804 | A |
| γ· Ύ | 726 | A |
| XX γ- σ | 746 | A |
| ν σ- | 752 | A |
| Τ'1* X •f θ’. | 741 | A |
| χ Q ο-, »***ΐ ΙΓ n i W, Αά s ° γ·>« “’ι γ Η c °Ί | 727 | A |
| >ΑΑ ° S ° C^Ai CH, κ,ς^,ο °S | 699 | A |
-388-
| S0 y* . σ’ | 739 | A |
| χ · -Q-. -, ^y'yš' ’γγ'· · V Ύ Λ Υ X | 712 | A |
| X · -Q- Ύ V Ύ” θ'. | 698 | A |
| ΛαΛ χγ. · s * Ο» X | 757 | B |
| y- »s | 790 | A |
| X · -QY T T | 712 | A |
| _Ύ y- 0 | 732 | A |
-389-
| σ- | 738 | Α |
| X ,Α <ί <Αγ0° y ° | 869 | Α |
| qÄwÄ1- χΎ ’ | 785 | Α |
| qÄW^ χΎ ’ | 785 | Α |
| Qx|WraA χι | 785 | Α |
| X’ | 785 | Α |
| t^sA X' | 781 | Α |
-390-
| YY | 780 | A |
| Ύ . ο 0 η Ο<Α0 Ο ο ο ΜΧ-<0 t^C CH, | 697 | C |
| Q PpXA W»o‘ 1 CyN X Hŕ CH, | 671 | C |
| α|χχ^·' YY | 780 | A |
| οΑ-χ^· v Ύ | 884 | A |
| ^3 p r,c^Í ’ c>S | 855 | A |
-391 -
| M o\CH> p. .Ύ°° γ <γΝ Y :·χ° CH, | 757 | B |
| X « «Q °γΝ Ch, | 741 | B |
| VXW· 0 η ΟγψψΧΧΑ <γ« Ύ nŕsy-0 HC*T | 779 | B |
| ΟγΝ I Ύ° | 725 | A |
| >χ | 787 | A |
| <γΓ ° k χ° | 785 | A |
| alWr^r cys k χ° | 737 | A |
-392-
| X | 737 | Α |
| X | 739 | Α |
| Y χ· | 855 | Α |
| Ογ -J x | 826 | Α |
| ΑγΧ Γ | 857 | Α |
| οΑφΑ y | 826 | Α |
| ο^γ'ήΧ^ Υ | 765 | Α |
-393-
| Y X' | 792 | A |
| 799 | A | |
| Qt. a Y x1 | 784 | A |
| SX Ύ »; c». | 750 | A |
| >? Q y/Y \ľf cV Μ·-χ° Άη, | 771 | A |
| A [A \__r o o Sp ch, h,c 7 n j I) i Y CA Y «>·, | 771 | A |
| Υ», x' N|C C”, | 536 | C |
-394-
| ° A ° 'γ A, ;x° H f O., | 508 | B |
| “9' ΛΛ 0 / V. .n ÍL c. CH, TI ^”> m-c< í ä i E Η.ε^Ύ^0 j o.»Y ‘ H1C 5^ 1 HC^CH, | 601 | C |
| H,CyCH, f—\ 0 Ĺ JL -Oh ch- tr 3< iŕÝ-J <, t O^-^N CH, %° Y «/' η HjC'^'CH, | 587 | B |
| M * CH. Μ>-γ ‘ ..äá·1 γ H.Cx^° h ,e -n > CH, | 494 | C |
| YvAA | 512 | C |
| XhrÄy Ά | 538 | C |
| 4γλ\ χγΑ° 1 ' 0 ZJX | 538 | C |
-395-
| γγΑχ Y | 522 | C |
| ΑΧ | 496 | C |
| xi γχ ν X > CH, | 522 | C |
| Υγ ΥυΑ’ 1 | 540 | C |
| ΧΧ Χ> | 598 | C |
| A/1 γχ γΝ Η.=>^-Ο Η,εΤ ’ CH, | 480 | C |
-396-
| H.cyn, sAY N A HjC^-0 H.C-Y 1 CH, | 508 | B |
| cX'Ä'· 04, | 548 | C |
| H’CYCH1 oM ky-N h.c^T 1 CH> | 534 | B |
| m ~ CHa Hr-xy ’ ýXrÄC“· oyl V H,C^O | 584 | C |
| H C CH, YXt'tV· H.C'?I ’ CH, | 570 | B |
| Y\xľY Y x* | 558 | C |
-397-
-398-
| Hŕy CH. o5Wr ’ «, | 520 | B |
| ojx <yN 11 x° | 534 | C |
| oM <yx U x° | 520 | B |
| H * CM. H’-y 1 r\ ° /V ^ν*ζ^1Τ*^Ύ/*^ϊΓ* XcH1 | 550 | C |
| Ο^,Ν Η,ϊ «ŕ^X° H,C< CH, | ||
| 536 | C | |
| HjC h3c O H,c*nT CH, | ||
| H,c yCH, CHj VY CHj η,ο^Ι xk. O l 0 | 538 | C |
| Hŕ' τ' '° uPr-cx. a^N ŕ CH, H <· 0 ηλΊ 1 CHj | ||
| Χγν'γΓ >< | 568 | B |
-399-
| Xt . v | 582 | C |
| oXy ' x | 570 | C |
| q/Xt Y x | 584 | C |
| °s | 418 | c |
| 01, -Ä», | 554 | c |
| H,cy ?”> f if íY^111 Η,ε0Ά> 0 < ° QsyN P* ľx° MJC cw3 | 508 | c |
| H,cy η0Α o k 0 CyZ IZ” H,c CH, | 494 | B |
-400-
| yyóx •y A CH, | 562 | C |
| Η,γπ, φγ ľx H>C CH, | 548 | A |
| H>cxCH> °TN H,C O H.C^I 1 CH, | 520 | C |
| k,Y*, c<íyxV °y-N H.C ° ΗΧ*ΠΓ 1 CH, | 506 | C |
| / l H 1» ΑγΧ. ° y γ ch, VY H,' Oí, | 540 | C |
| Η,γΗ> cýrW“· y S> “.y ’ CH, | 562 | C |
-401 -
| HjCxCM’ °V Ίι He^o 1 CH, | 548 | B |
| .XyAx ΟγΝ H,C^O H‘C. CH, | 480 | C |
| H’C^CK’ ΑύΑγ ΟγΝ H,C^O H.C CH, | 466 | C |
| H C H3CN/ ’ XX 0 ογΝ r ΗύΟ_γ0 CK, | 568 | C |
| HicsyCH* Η,0<γΟ CH, | 554 | B |
| °γ·Ν h.c-T CH, | 508 | B |
-402-
| /X /τ*ά· X Η,- | CH, | 482 | C |
| m^SYcV'“· H.C'^Y^'O Χη, C^N ΗΑ>ΑΟ Η,ΧΓ CH, | 496 | C |
| HjCyCH1 .* k. Γ V iT ΙΠ 0 c Hj 0 ch,0 ΟγχΝ H>c>ro HX*n CMj | 522 | C |
| 3x v | 535 | C |
| γ Λ· Y | 539 | B |
| V v X HXr° | 563 | B |
-403-
| HŕyCH> F~\ ° ΧγΚ ° X ° 0,1 v X, X* r C«» | 567 | C |
| 0 | 561 | C |
| CH, P’ YAL-ch, XL-ch, kí o 1 r-\ I o; χλΛυ ľ o 0 | 567 | C |
| n-> °Á haXch, ALoá ľ ľ ^(Λ/γX r o ° AtAAx^·^ 0 | 581 | c |
| 495 | c | |
| GyN x° | 654 | B |
-404-
| xc· · v A CH, | 549 | C |
| CH, hiAL-CH, hŕ-sk-CH, X 0 | 567 | C |
| CH 9^ «· οΛ/γΥ^ o | 581 | C |
| OyN kr x° | 654 | C |
| xSCA0 <γΝΗ CH, Y° HC CH | 626 | B |
| wx 0γΝ 11 X | 654 | A |
| yVX y i Y | 535 | C |
-405-
| C^N 1 X | 535 | B |
| Yr j°° y | 523 | C |
| γγγΥ Y | 523 | C |
| 0$^ QyN CM> ^Sz0 HjX OS | 561 | B |
| YYJv 0 Φ | 511 | C |
| y yX \° | 537 | C |
| Υψ-Α-ο- | 654 | B |
-406-
| ι 0γΝ X | 654 | A |
| Η “ Οί, ry v ο„°Υ «.c-sA. η,Αοι, | 626 | B |
| V ooY * ] | 652 | B |
| ►S=X H.= Y^O =γ« °S X Η,ι/ΐ OS | 525 | C |
| V> ^γχΑ- £γ-Ν °S CM. | 539 | C |
| z~A θ SS-M φ ΟγΝ CH> CH. | 549 | C |
-407-
| ΟγΝ * χ° | 641 | Β |
| 630 | C | |
| ΟγΝ k χ° | 653 | Β |
| ^ιψ’Υ'υ ΟγΝ χι | 653 | Β |
| οτγ ° | 553 | C |
| X°TYV Υ 0 | 655 ; | C |
| χΎ^° Υ | 629 | C |
-408-
| χγΛ” S ° Ύ | 539 | C |
| χΥΓ» 1 | 521 | C |
| υύ^ ΎΎΧ·· Ý | 521 | C |
| γγΑ>° γ Ό | 547 | c |
| Υα ό | 547 | c |
| ° h^JL HAJ*’ jYX (ο <5yN OH, ’ =«> | 590 | B |
| Vy*' ty* Y | 590 | B |
-409-
| ΟγΝ X | 641 | B |
| Ktľ’ \ πΑΧοί, O ° f r—i pi :αΜυ9Λ 0 A 0 | 565 | C |
| H,C V-CH, H.CÄH, ) CH, ch, o I f—\ r r > 5 AAA''^ 0 | 579 | C |
| 644 | C | |
| 0 Φ | 587 | C |
| OyN A x° | 654 | B |
-410-
| Y Ό x | 716 | B |
| . x° | 668 | B |
| \ o ^ľ5 x 5 5^ | 670 | A |
| x aŽtXcO oj 1 x° | 666 | C |
| AX-QQ QyN 11 x1 | 666 | C |
| λΜΛ) Y X’ | 630 | B |
-411 -
| °γΝ 1 χ° | 531 | C |
| γγΑ W ° Υ | 563 | C |
| ΥύΫτ^ >fVyV Ϋ 1 ° Φ 1 | 537 | C |
| γχ ÔvsAM> OS CH> | 575 | B |
| οι, »*Ύ s ° Ί ° ΟγΝ CH. Ch, | 591 | B |
| ν-χ A y Ααο ° X) ° ‘<γ« S | 586 | C |
-412-
| AXjO ν <y os Y CH, | 586 | C |
| A y AJ CH, N 1Γ ΊΓ Π γχ ° \ ° cy ch, Yh, | 585 | B |
| Ύ Χ-Ϊ O *γο’ V cy os Y CH, | 563 | B |
| Y Y Δ Hp^.0 HZ/T ch, | 547 | B |
| Y ,jW£A Άζ>. 0^0 ►scy-o <y H,C>Y5 H.ďT °S | 519 | C |
| t\^NH H.CyO H>c CH | 640 | B |
-413-
| Ay X | 546 | B |
| χγΑτ-Χο χγ | 646 | B |
| M c Cm, Ύ 1 CH. 7Γ>Τ TI N - γ,τ V O-^H CHj H.S^O | 594 | C |
| A ° ° :?ýv V cy< c>S ΑχΟ h/:‘T CH, | 592 | B |
| χχ ÔyJLY gAM v ^N CH, η,<Ι CH> | 533 | C |
| Ay OyN X\ X | 545 | C |
-414-
| k ό | 659 | Β |
| X | 609 | Α |
| ΟγΝ k χ° | 635 | Β |
| Α'Λ^-αΓ ΟγΝ 11 Ó X | 685 | Β |
| χύ χγ | 519 | C |
| <γ* k X | 621 | Β |
-415-
| Η/γςΗ> ÄAV“· v | 521 | Β |
| V £τ° <Λ | 547 | Β |
| Α/*> <γ« χ 1 >. | 573 | Β |
| VV CH> <γΝ «> | 609 | Β |
| °γΝ x X | 547 | Β |
| Δί-ΛΎ. ΟγΝ 11 χ° | 719 | Β |
-416-
| ΟγΝ “ x° | 719 | C |
| ΟγΝ χ° | 653 | B |
| 597 | B | |
| QyN X | 697 | A |
| X | 619 | B |
| γ °ΥΝ k x | 651 | C |
-417-
| x° | 592 | B |
| ' OS | 587 | C |
| M>cy“> X* 1 Of, | 563 | B |
| x | 589 | C |
| ;iJy j'·'''^' <«Y Y X° . | 621 | C |
| χγ xT | 519 | C |
-418-
| X | 597 | B |
| X” XW Ύ °s V HjC-n | 549 | C |
| c' M HC-T °s | 535 | C |
| Λ/*· r. /í-i o χ^ΛΎν’^0*' ^<Α0 0 \ 0 QyN CM, V *S=i CM, | 521 | B |
| y/X- ΟγΝ CH, •ľX °s | 519 | C |
| X x° | 689 | C |
-419-
| X | 611 | C |
| JAXô γ X | 600 | C |
| ΟγπΥ γ ' Υ | 595 | B |
| ΗΎΗ1 ΪΔ ο CM, Ν''1'ΧΧΖ'Ν'Ά[Υ '^^SCH; ^>Χο0 S ° 0¾ CM> ο'5-ch, H,C | 541 | C |
| M,cyCH’ ^rxX“· ΟγΝ CM1 Η·'-γ° H>: CH, | 549 | B |
| %j/- *% X“ | 593 | C |
-420-
| Y oAAX ΟγΝ “ χ° | 680 | B |
| x' | 559 | C |
| x | 559 | C |
| qJôX v -· X | 573 | B |
| 644 | C | |
| yvsa° Ý A 1 | 537 | C |
-421 -
| v'AVx Y X’ | 627 | C |
| qJtWr- Y X | 609 | B |
| 'L °° k °K ΧΎ | 664 | B |
| ,ΜΑ QyH >s x° | 650 | C |
| οχψχγ QyN k x1 | 661 | B |
| Λτγ^ Y x | 571 | C |
-422-
| ΑΧ o 1 | 661 I | B |
| X Os ^A0 M <yw A x° | 607 | B |
| ΧφΑο χΎ | 625 | C |
| H C CH, x °^p-H CH, H,C O K.cAh, | 575 | B |
| m C CH , Ο$ηΛ ľX H»C CM, | 575 | B |
| ’ CN» | 575 | B |
-423-
-424-
| χΥ χ. γ «ŕ v ►**· Oij | 549 | C |
| XX xY | 587 | C |
| Τ^ϊ'γχ x | 547 | C |
| χχΧ Y x | 547 | B |
| X | 573 | C |
| x | 573 | C |
-425-
| Y X | 607 | C |
| Y X | 595 | B |
| Y 1 Y’ | 581 | B |
| 609 | B | |
| γχ | 629 | C |
| 1 ^yVy^ Axy xA.» Y · V | 694 | C |
-426-
| Y ľ | rCX | 605 | C |
| y | 579 | C | |
| Οφ | χ^ | ||
| 1 | |||
| 627 | C | ||
| 1 —> γ ξ | * kfc. · • | | ||
| 563 | C | ||
| φκΥ X | |||
| Hŕ->L· Js. o \ | 0 | ||
| T“% | |||
| Y * x | OS | ||
| os | |||
| Y | 571 | C | |
| o/S 7' | χ^ | ||
| 572 | B | ||
| οφ | V. o | ||
| Y | Φ | ||
| X |
-427-
| , X | o | 551 | C |
| χ | 609 | C | |
| ΟΥπ | O | ||
| Υ Υ | r | ||
| y | 593 | B | |
| ΟγΥ | v- | ||
| Υ ί | Ί | ||
| X | 593 | C | |
| Υ ' | Ί | ||
| 613 | C | ||
| \_Υλ k|Y' | a l. o | ||
| 0 | |||
| X | 593 | B | |
| QxxY | |||
| Y Y | 0 |
-428-
| T Y | 581 | C |
| e=s“ CH, | 571 | B |
| y t 9yvYA WA S° Ύνη CH, | 577 | C |
| ArAÁ >yA° y 0 ô | 615 | C |
| íY ^τΎΑέ*'^01· \/\TAo ° ί ° Q. -N A Y °s Hŕkx-0 V 'ch, | 571 | C |
| HA^CH, f \ θ ΥΥγγΧ^ΟΙ; ΟγΜ γ YN A A<o HP CH, | 571 | C |
-429-
| A, α&Α . ^04, H.C 'ch, | 545 | C |
| ΑγΝ ku, H>Sz° Y 04, | 633 | C |
| •syo., cAA V Y v «ŕ k, | 585 | B |
| ΚγθΛ, oAA v H Λ Υ ; V CH, | 587 | B |
| oAÁa* <γΗ k, 1^04, | 647 | B |
| XvW^v | 512 | C |
-430-
| /Ĺ1 ο Q <ψΝ H.C κσι CH, | 575 | C |
| i vWp Αγχ.' 1 ΟρΑ | 658 | C |
| , $yvV^ ΛγγγΥ0 χ° ° \°γ Ο ' | 621 | C |
| $γΜγΓ<^ ζΑ°γ>ήΑοΟ <]° 0 | 565 | C |
| /·» γγΥ”· ν Ύ-'’1 | 572 | A |
| Ογ- Α «Γ^χ° «ŕ OS | 587 | A |
-431 -
| ’Xch, ΥΥΥ ν Υ . °*· | 587 I | Β |
| Υ | 509 | C |
| Χ /‘t f.ÓYVSr“'·''^ χν γ V ν X» γ, | 533 | C |
| Y Á :χ ΗΓ CH, | 587 | B |
| 0 | 644 | C |
| V ¥ | 594 | B |
-432 -
| Y χ. v | 695 | B |
| “'Or | 650 | B |
| o^ťr^ γ·Ν X, ΗΑγΝγ°1’ CM, CH, | 600 | B |
| VyOS γΝ Ym, TX Hf CH,01· | 628 | A |
| oXttV—· ογ X N H.C | 556 | B |
| <$Ý~ C | 674 | B |
-433-
| s° x *ŕ 04) | 579 | C |
| Ay Y’ * Y ·; cn | 637 | C |
| . '\'i:' í'< ? Ύ b Y •f c«s | 671 | c |
| Jy x | 583 | c |
| Hŕy°^ cJfA^ Y 1 O CH os | 587 | B |
| Jx x° | 601 | B |
-434-
| v- | 623 | B |
| A CX ^Α,Αο0 S ° V S ”ŕ CH, | 621 | A |
| C?r Ύγ?Ό ' | 645 | C |
| VXC^ ζφτψ— v X F | 664 | B |
| A-OS f\ qWxX“· v X | 573 | C |
| αγχγ— | 559 | C |
-435-
| Xjí | 847 | B |
| «.'y-CH, “YF | 651 | B |
| γ|τΎ Z | 547 | C |
| í | 561 | B |
| v Y | 561 | B |
| oAzV Y x | 546 | C |
-436-
| cpxO Y 1 Y | 545 | C |
| A | 633 | B |
| Y γ· | 681 | C |
| x | 561 | C |
| HŕyC«> Q^WlYv X Ό | 598 | B |
| Ar ΥϊΥ· 7 | 583 | C |
-437-
| Av-rS-“' X | 567 | C |
| ko | 539 | C |
| x | 519 | C |
| X\ YyyV^·· -‘X°YA0° M,= CM, O y**- ^CK. | 708 | B |
| .j knV-'YY pt o 1 o o · Y ° Y | 649 | C |
| »ŕv=. ySY0 S0 °yN Y ΗΓχ° Mŕ CH, | 561 | B |
-438-
| HŕyCH, Xy | 461 | C |
| v | 531 | C |
| ΟχΥήα^ x | 606 | A |
| MyíY kY «y Y | 606 | A |
| Oí|ya^ y | 592 | A |
| γ|γ αχ k | 666 | C |
| cr | 626 | B |
-439-
| Ύ 6 | 640 | B |
| γ- k | 654 | B |
| Y ^CH. y | 698 | B |
| CX, yvySr | 654 | B |
| Αχ oxm- | 758 | C |
| H.C eu * \XCHI X Xx. JL -N^ ^>^^CM. HjC CM, Y*Y 1 Η£^γΎ0 ® X. 0 Y LCMi F | 638 | A |
-440-
| 7 | 683 | Β |
| τ | 593 | Α |
| x | 621 | Α |
| Z | 607 | Β |
| Χφτγ^ σ | 627 | Β |
| 'γ-ΕΗ, hjC-yXo ° S ° Υ Υ=Η, Ό | 586 | Α |
-441 -
| ΟγΝ Ο, CH, | 534 | B |
| Hŕv°S οφήΧ“ γ H.c^y h,trl CH, | 560 | C |
| x | 621 | A |
| Ai— Cy-N S: h, .>x Mŕ crfj | 616 | B |
| ^A°S φΧ™ γ Y σ | 572 | A |
| xJyAj.0 2»,° γ H’SA Ηχτη CH, | 547 | C |
-442-
| Y TÍ CH, | 561 | C |
| Hic vm, γ H>Sz° M,<Yf C*, | 521 | C |
| Yýa xY | 620 | B |
| Y x | 578 | B |
| n^CH, V Y, •Yl Y | 560 | A |
| H>=V°S οχγ— y y x HjC | 620 | A |
-443 -
| cr | 618 | B |
| C? | 632 | B |
| 662 | B | |
| 592 | B | |
| On ΦγΆ'νζ^ Z | 590 | B |
| s | 690 | B |
-444-
| 7' | 609 | Β |
| Ά | 749 | Β |
| Kŕ^CH, Cíp* Υη, Ότ | 648 | Α |
| ►SCyCH, ΑΤΑ Ά | 783 | Β |
| Α ΑϊΛ Ά | 783 | Β |
| οΑ V χ· | 634 | C |
-445-
| ογγγ Y' χ· | 648 | C |
| αγγγ Y k X | 634 | C |
| οχχτγ γ X | 649 | C |
| Οφτγ—0 Υ X | 629 | C |
| οδγγΥΑ Υ . X' | 657 | C |
| OyCI ΟγΝ k· χ° | 614 | A |
-446-
| ojjX Q^N A X° | 702 | B |
| ΒγΒΓ 9x° | 702 | A |
| ΗΎ’ AY U S:h. Ύ γ H,C CH, | 675 | B |
| f v γ\γγ Y A Ύ H>C CH, | 647 | B |
| HŕyCH, Y'' V \h. a*f c^ ! zNs ' Hŕ^CH, | 568 | C |
| Hry, CH, βγΝ A Y Hŕ 04, | 619 | C |
-447-
| oóCnX· | 482 | C |
| Oy—.Á, · X · | 576 | C |
| aX X* | 617 | B |
| Οχγτγ'' Y | 651 | C |
| “^-1 · XV'V^ ° l | 637 | C |
| X | 684 | B |
| Ύγ- . 'fe | 685 | B |
-448-
| 698 | B | |
| 1 | 605 | B |
| ΧχΧγ | 620 | B |
| ^γ X | 672 | C |
| γ|ΥΥ υ σ | 620 | B |
| ν y | 594 | B |
| QX0xV^ Y cr | 606 | B |
-449-
| 9^! X V . | 580 | C I |
| cpY Y Y | 532 | B |
| y· CT | 572 | B |
| cA'Y Y Or | 738 | A |
| Αγ x1 | 718 | B |
| γΛ x | 664 | B |
| °ν α αΧ'ψ'^ ΟγΝ A x° | 614 | B |
-450-
| ^γ· X | 624 | B |
| Y x | 558 | B |
| σ | 633 | B |
| -v- ? ο/γ-1 °<γΜ ^CH, ’SOZ | 770 | C |
| - o ΤΧλ ch> °v HfX° H,c CH> | 535 | C |
| XX“ oj“ M | 533 | C |
-451 -
| cA οΥΥ' L '· °Ύ GM, | 677 | C |
| Hjcn CH, | 563 | B |
| ΟγίψΧ QyN V CH, | 651 | A |
| ΧγΧ <yN X. X V CH, | 634 | A |
| # ο£Χ ·*< -·< | 706 | C |
| Y OyN Sch. Ί3γ | 757 | A |
-452-
| A | 662 | A |
| Y H V ck, | 660 | A |
| ctya oA'Ä Y< x1 | 648 | A |
| c,xcl ΟγγγΫγ^ ys ° A X | 648 | C |
| 4h x ; | 668 | B |
| OyrA Ύ X | 618 | A |
-453-
| a/3 v x | 660 | B |
| v Y | 601 | B |
| 673 | B | |
| Y x | 662 | A |
| x..... x | 602 | A |
| «ŕ^CH, O^ÝYt. Ογ* Y A° H,C CH, | 681 | A |
-454-
| q η i JĽ -k O L o 0 Oij γ “ Ύ Hŕ CM> | 681 I | C |
| v05*· 0% £γν v ° Y Ύ H,C CH, | 655 | C |
| Vy1 cAjfW Ύ0 V CH, | 689 | B |
| *γ n γνvSr'^VcX o y. ô o cm, Y Y HY Hŕ CH, | 660 | A |
| 538 | C | |
| 4ý A | 764 | A |
-455-
| /A 0 x- WÝXy’ x Y X y x | 816 | C |
| XXa. y x X x | 780 | B |
| «ŕy^S ° <° | 560 | C |
| A........ X | 602 | C |
| y V H>= CK, | 625 | B |
| Η^ν<Χ, Ch ^vV-V'A ---° ''“O 0 O CH, QyN h V Hŕ CH, | 685 | B |
-456-
| οίχ Ύ | 587 | Α |
| 587 | Α | |
| Υ -CC | 601 | Α |
| “V £ | 625 | Β |
| y. | 601 | Α |
| ΆΑ. - γ X | ||
| Χχ σ’ | 627 | Β |
-457-
| 'Χγ %y- Y F | 679 | A |
| °x | 628 | A |
| x | ||
| Opp Y Y’ | 587 | A |
| X A> | 641 | A |
| CpXX Oy A, Y V CH, | 659 | A |
| <=yH A KC 04, | 674 | A |
-458-
| γ v > x | 615 | B |
| Y C&Yo x° | 641 | B |
| Y oMx oy! x° | 641 | B |
| 4x Y | 627 | A |
| 4x x | 665 | A |
| Yý· Y | 614 | A |
-459-
| ΟγΝ Y H>C OS | 737 | B |
| ^OS OyO*X ° A Ύ Y Y° «,= 04, | 666 | A |
| X/*, γΧγγ'Ύ^ :ÄA“ γ f yN V Y V 04, | 660 | A |
| αγγ— X | 591 | C |
| Ύ X° | 615 | C |
| H^OS θγΥγΊγ γ “ TY | 754 | B |
-460-
| y A Λ, | 577 | C |
| ŕ\ n YYvVnrk \Ζ^Ζ^ο ° > 0 0 ŕ^S y k kJ* H>C_,0 VCH, | 694 | A |
| qyy? ΟγΝ x° | 702 | A |
| C^V-ΎΚ X | 701 | A |
| Hŕy> y Y Y H,C CH, | 546 | B |
| *y> ^°-7< V °S | 520 | B |
-461 -
| Vy/“» χγχ <γ v σ | 546 | B |
| γΝ Υ ¥ch, | 723 | B |
| VyaS cM^ γ Υ. ΗΧ V CH, | 675 | A |
| //¾ | 771 | B |
| XX 0 //Υ | 847 | C |
| -if | 641 | A |
-462-
| x | 613 | A |
| oyxy Y | 651 | C |
| X” | 700 | A |
| X CH yA° < o °γΝ x | 569 | A |
| #& Xr | 756 | B |
| oY <yN Xh, | 786 | A |
-463-
| í | 669 | B |
| x | 601 | A |
| ísy- ' · x | 601 | B |
| Ck^CI ^ίΥΧο QyN X | 683 | A |
| o|xXa© | 673 | A |
| n^y-CH, γΝ X-. V V CH, | 680 | A |
-464-
| οΥΥ χΎ | 602 | A |
| QxZrÝYÝ •ky- 9 X | 735 | A |
| Υχγ x | 743 | A |
| Υγ χ· | 655 | B |
| a^rxW γ v ΗΎ V CH, | 692 | A |
| K · “9 CM j ]Υ Jjf Μ,ο-ΧΥΧ^θ ° í ° Y 0,1 H,C,N H,C CH, | 639 | A |
-465-
| 0 OvvX'X'' v ΑΧ H,C os | 639 | A |
| γ X X' | 675 | A |
| qXý Y <x | 621 | A |
| X ° “9 ογΧγ^ Ο,γΝ x° | 668 | A |
| x o oQ Χ\γΝ^ΑγΝ At/ Y x° | 642 | A |
| V x | 654 | A |
-466-
| X jrx γ U X | 601 | C |
| -A6*1 .ΥγΟ ηλι 1 A 1 u ° η ° O 0 QyN ch, X <X> | 663 | B |
| °Y xN | 641 | A |
| οφχΥϊΥ y Y x | 702 | A |
| γ· Y X | 701 | A |
| ><-..... 1¾¾. x | 588 | B |
-467-
| Ο$υίΥγ· Υ X“ | 638 | A |
| OWX. ίγ Y, x | 630 | A |
| x° | 697 | A |
| Aý Y CC | 621 | A |
| Ύ” Τ' | 608 | B |
| ΛΥ Y X“ | 682 | A |
-468-
| Ύ L oko .Ach, Y Η,γ° Hŕ CH, | 667 | B |
| Ä 0 HcAbc ° *S ° y« 9. Y Oí, | 520 | B |
| *Vy», YkAq ° X. 0 OHŕ CM, YN X Ä/ Hŕ CM, | 645 | B |
| A y A'A'A kA]Ao ° 0 ΗρΎ cyN os Ύ Hŕ CH, | 669 | C |
| H C &Í, 1 y oay A H,C CH, | 575 | A |
| Aa n<Y H,C CH, | 709 | B |
-469-
| Αχ cAx Y v V ca, | 652 | B |
| χ Πχ- CH, | 714 | A |
| γ «γ» °S r Hfi | 561 | B |
| Ύ βγ C*S y Y | 561 | B |
| M.C GL ^c\/ * <A cyN F f X° Hŕ CH, | 685 | B |
| Η3(γΟΗ3 Q0ľX ΟγΝΗ x° h3c ch3 | 580 | A |
-470-
| h3c^ch3 ΟγΝΗ <x. | 606 | A |
| 1 H3C^,CH3 /~\ h j? h 9 HiCCH3 N lT ΥΥΝχ/^Ν/Υ^ι hXxx u h u OyNH . h3c J h3c-T ch3 | 653 | A |
| h3c^/ch3 h3cCH3CXNyXN'An^YY H3cA^A0° k) O ίχ NH CH3 α° ch3 | 667 | A |
-471 -
Claims (22)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Peptidové zlúčeniny, vrátane ich enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, ich farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov alebo ich prekurzorov, všeobecného vzorca I kdeY je vybraný zo skupiny zahrnujúcej: alkyl, alkyl-aryl, heteroalkyl, heteroaryl, arylheteroaryl, alkyl-heteroaryl, cykloalkyl, alkyloxy, alkylaryloxy, aryloxy, heteroaryl-oxy, heterocykloalkyloxy, cykloalkyloxy, alkylamino, arylamino, alkylarylamino, arylamino, heteroarylamino, cykloalkylamino a heterocykloalkylamino, s výhradou, že Y môže byť voliteľne substituovaný s X11 alebo X12;X11 je alkyl, alkenyl, alkinyl, cykloalkyl, cykloalkyl-alkyl, heterocyklyl, heterocyklylalkyl, aryl, alkylaryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylheteroaryl alebo heteroarylalkyl, s výhradou, že X11 môže byť okrem toho volifeľne substituovaný s X12;X12 je hydroxyl, alkoxyskupina, aryloxyskupina, tioskupina, alkyltioskupina, aryltioskupina, aminoskupina, alkylaminoskupina, arylaminoskupina, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, alkylsulfónamidoskupina, arylsulfónamidoskupina, karboxyskupina, karbalkoxyskupina, karboxamidoskupina, alkoxykarbonylaminoskupina, alkoxykarbonyloxyskupina, alkylureidoskupina, arylureidoskupina, halogén, kyanoskupina alebo nitroskupina, s výhradou, že tento alkyl, alkoxyskupina a aryl môže byť ďalej voliteľne substituovaný so skupinami nezávisle vybranými z X ;R1 je COR5 alebo B(OR)2, kde R5 je H, OH, OR8, NR9R10, CF3, C2F5, C3F7, CF2R6, R6 alebo COR7, kde R7 je H, OH, OR8, CHR9R10 alebo NR9R10, kde R6, R8, R9 a R10 sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, cykloalkyl, arylalkyl, heteroarylalkyl, [CH(R1')]PCOOR11, [CH(R1’)]PCONR12R13,-472[CH(R1')]pS02R11, [CH(R1 )]PCOR11, [CH(R1')]PCH(OH)R11, CH(Rr)CONHCH(R2')COOR11, CH(R1’)CONHCH(R2')CONR12R13, CH(R1’)CONHCH(R2’)R,i CH(R1')CONHCH(R2’)CONHCH(R3')COOR11, CH(R1’)CONHCH(R2')CONHCH(R3')CONR12R13, CH(R1 )CONHCH(R2)CONHCH(R3)CONHCH(R4)COOR11, CH(R1’)CONHCH(R2')CONHCH(R3')CONHCH(R4')CONR12R13, CH(R1')CONHCH(R2')CONHCH(R3')CONHCH(R4’)CONHCH(R5')COOR11 a CH(R1')CONHCH(R2')CONHCH(R3’)CONHCH(R4')CONHCH(R5')CONR12R13, kde R1', R2, R3', R4', R5', R11, R12, R13, a R' sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, cykloalkyl, alkyl-aryl, alkyl-heteroaryl, aryl-alkyl a heteroaralkyl;Z je vybraný z O, N, CH alebo CR;W môže byť prítomný alebo neprítomný, a ak W je prítomný, W je vybraný z C=O, C=S, C(=N-CN) alebo SO2;Q môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď Q je prítomný, Q je CH, N, P, (CH2)P, (CHR)p, (CRR')p, O, NR, S alebo SO2; a keď Q je neprítomný, M môže byť prítomný alebo neprítomný; keď Q a M sú neprítomné, A je priamo naviazaný na L;A je O, CH2, (CHR)p, (CHR-CHR')P, (CRR')P, NR, S, SO2 alebo väzba;E je CH, N, CR alebo dvojitá väzba smerom na A, L alebo G;G môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď G je prítomný, G je (CH2)P, (CHR)P alebo (CRR')P; a keď G je neprítomný, J je prítomný a E je priamo pripojený na uhlíkový atóm vo všeobecnom vzorci I, kde G je naviazaný;J môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď J je prítomný, J je (CH2)P, (CHR)P alebo (CRR')P, SO2, NH, NR alebo O; a keď J je neprítomný, G je prítomný a E je priamo naviazaný na N uvedený vo všeobecnom vzorci I ako naviazaný na J;L môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď L je prítomný, L je CH, CR, O, S alebo NR; a keď L je neprítomný, potom M môže byť prítomný alebo neprítomný; a ak M je prítomný pričom L je neprítomný, potom M je priamo a nezávisle naviazaný na E, a J je priamo a nezávisle naviazaný na E;M môže byť prítomný alebo neprítomný, a keď M je prítomný, M je O, NR, S, SO2, (CH2)p, (CHR)p, (CHR-CHR')p alebo (CRR')P;p je číslo od 0 do 6; aR, R', R2, R3 a R4 sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H; Ci-CiOalkyl; C2-C10alkenyl; C3-Cecykloalkyl; Cs-Csheterocýkloalkyl, alkoxy, aryloxy, alkyltio,-473aryltio, amino, amido, ester, karboxylovú kyselinu, karbamát, močovinu, ketón, aldehyd, kyano, nitro, halogén; (cykloalkyl)alkyl a (heterocykloalkyl)alkyl, kde tento cykloalkyl je z troch až ôsmich uhlíkových atómov, a od nula do šesť atómov kyslíka, dusíka, síry alebo fosforu, a tento alkyl je z jedného až šiestich uhlíkových atómov; aryl; heteroaryl; alkyl-aryl; a alkyl-heteroaryl;kde tento alkyl, heteroalkyl, alkenyl, heteroalkenyl, aryl, heteroaryl, cykloalkyl a heterocykloalkyl môže byť voliteľne a chemicky vhodne substituovaný, pričom tento pojem substituovaný zodpovedá voliteľnej a chemicky vhodnej substitúcii s jednou alebo viacerými skupinami vybranými zo skupiny zahrnujúcej: alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, aralkyl, cykloalkyl, heterocyklus, halogén, hydroxyl, tio, alkoxy, aryloxy, alkyltio, aryltio, amino, amido, ester, karboxylovú kyselinu, karbamát, močovinu, ketón, aldehyd, kyano, nitro, sulfónamido, sulfoxid, sulfón, sulfonylmočovinu, hydrazid a hydroxamát;ďalej kde táto jednotka N-C-G-E-L-J-N znamená päťčlennú alebo šesťčlennú cyklickú kruhovú štruktúru s výhradou, že keď táto jednotka N-C-G-E-L-J-N znamená päťčlennú cyklickú kruhovú štruktúru alebo keď bicyklická kruhová štruktúra vo všeobecnom vzorci I obsahujúca N, C, G, E, L, J, N, A, Q, a M znamená päťčlennú cyklickú kruhovú štruktúru, potom táto päťčlenná cyklická kruhová štruktúra nemá karbonylovú skupinu ako časť cyklického kruhu.
- 2. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 1, kde R1 je COR5, a R5 je H, OH, COOR8, CONR9R10.
- 3. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 2, kde R1 je COCONR9R10 a R9 je H, R10 je H, R14, [CH(R1 )]PCOOR11, [CH(R1’)]PCONR12R13, [CH(R1’)]PSO2R11, [CH(R1’)]pSO2NR12R13, [CH(R1’)]PCOR11, CH(R1’)CONHCH(R2')COOR11, CH(R1’)CONHCH(R2’)CONR12R13 alebo CH(R1’)CONHCH(R2)(R'), kde R14 je H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, cykloalkyl, alkyl-aryl, alkyl-heteroaryl, aryl-alkyl, alkenyl, alkinyl alebo heteroaralkyl.
- 4. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 3, kde R10 je H, R14, CH(R1 )COOR11, CH(R1 )CH(R1 )COOR11, CH(R1’)CONR12R13, CH(R1’)CH(R1,)CONR12R13, CH(R1)-474-CH(R1’)SO2R11, CH(R1')CH(R1’)SO2NR12R13, CH(R1’)CH(R1’)COR11, CH(R1')CONHCH(R2')COOR11, CH(R1’)CONHCH(R2')CONR12R13 alebo CH(Rr)CONHCH(R2')(R,)I kde R1 je H alebo alkyl a R2 je fenyl, substituovaný fenyl, heteroatómom substituovaný fenyl, tiofenyl, cykloalkyl, piperidyl alebo pyridyl.
- 5. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 4, kde R1 je H.
- 6. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 5, kdeR11 je H, metyl, etyl, alyl, terc-butyl, benzyl, a-metylbenzyl, α,α-dimetylbenzyl, 1metylcyklopropyl alebo 1-metyl-cyklopentyl;R'je hydroxymetyl alebo CH2CONR12R13;R2 je nezávisle vybraný zo skupiny zahrnujúcej: kdeU1 a U2 môžu byť rovnaké alebo rôzne a sú vybrané zo skupiny zahrnujúcej: H, F, CH2COOH, CH2COOMe, CH2CONH2, CH2CONHMe, CH2CONMe2) azido, amino, hydroxyl, substituovanú aminoskupinu, substituovaný hydroxyl;U3 a U4 môžu byť rovnaké alebo rôzne a sú vybrané z O a S;U5 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej: alkylsulfonyl, arylsulfonyl, heteroalkylsulfonyl, heteroarylsulfonyl, alkylkarbonyl, arylkarbonyl, heteroalkylkarbonyl, heteroarylkarbonyl, alkoxykarbonyl, aryloxykarbonyl, heteroaryloxykarbonyl, alkylaminokarbonyl, arylaminokarbonyl, heteroarylaminokarbonyl alebo ich kombinácia;a NR12R13 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej:/- nh2, |-NHMe,-NH-n-Pr,- N(Me)OMe,-475\/ΗΝMe Me /-YMeMe Me ηνΎ-οη XMe MePN Me Ή.-O Y /_O K>6 kde U6 je H, OH alebo CH2OH, aR14 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej: H, Me, Et, n-propyl, metoxyskupinu, cyklopropyl, n-butyl, 1 -but-3-inyl, benzyl, α-metylbenzyl, fenetyl, alyl, 1-but-3-enyl,OMe, cyklopropylmetyl.
- 7. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 2, kde R2 je vybraný zo skupiny substituentov pozostávajúcej z nasledujúcich skupín:-476-ΑΛΑ/* kde R3 je vybraný zo skupiny podľa nároku7, zlúčeniny
- 8. Peptidové zahrnujúcej:CH3^CH3 chYh= \ΛΛΛ<CHA h3<Tsch>n/wv aaaa.•wvvΜΊΛΑ.-477-ΊΛΛΛ,ΑΑΔ/V *ww sCOOH «WVS, *WW ch3COOHΎΆΛCOOHΑΛΛΑ»AAAA kde R31 = OH alebo O-alkyl;Y19 je vybraný z nasledujúcich skupín:oΆ^00Η y6H5 y s-478and Y20 je vybraný z nasledujúcich skupín:JUO JL «· Vxh3Λ -^\Ai(CH3)3NHAc
- 9. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 8, kde R3 je vybraný zo skupiny substituentov pozostávajúcej z nasledujúcich skupín:*vww-479skupín:
- 10. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 9, kde Z je N a R4 je H.
- 11. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 10, kde W je C=O.
- 12. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 11, kde Y je vybraný z nasledujúcich-480- γ1^Νγ\ γ13
CH3'sx-z>j» CH/Ί / 3 ch3 CHxY/ ch3 1-2 ch3 hooc<A, ch3 COOH 0-2 HOOCA<A <?3H7 c3h<Y/ CHiCH3 ηοοο'^Ύ/ HOOCy^ v 0-Z COOH H00Aíy QH3 ΗΟΟΟ-Α.» H3X.CH3 £CH3 HOOC^^X/ QH3 h3c>L HaC^y HOOC^y Hooc^X^'y ch3HOOC'Y’-481 --482--483-Y11 je vybraný z H, COOH, COOEt, OMe, Ph, OPh, NHMe, NHAc, NHPh, CH(Me)2,1-triazolyl, 1 -imidazolyl a NHCH2COOH;Y12 je vybraný z H, COOH, COOMe, OMe, F, Cl alebo Br;Y13 je vybraný z nasledujúcich skupín:CbzHNY14 je vybraný z MeSO2, Ac, Boe, iBoc, Cbz alebo Alloc;Y15 a Y16 sú nezávisle vybrané z alkyl, aryl, heteroalkyl a heteroaryl;Y17 je CF3, NO2, CONH2, OH, COOCH3, OCH3, OC6H5, C6H5, COC6H5, NH2 aleboCOOH; aY18 je COOCH3, NO2j N(CH3)2, F, OCH3, CH2COOH, COOH, SO2NH2 aleboNHCOCH3.-484- - 13. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 12, kde Y je vybraný zo skupiny zahrnujúcej:Me-η /CF3HHŕOOcXXz HOOCyHOOC^^^COOHH3COOC-485-COOH kdeY17 = CF3, NO2i CONH2, OH, NH2 alebo COOH;Y18 = F, COOH.
- 14. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 13, kde Y je vybraný zo skupiny zahrnujúcej:„ Me H3CSO2HN_A,MeXMeZ ΧΥ MeXMe TMe-486-
- 15. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde L a M sú neprítomné, a J je priamo naviazaný na E.
- 16. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde L, J a M sú neprítomné a E je priamo naviazaný na N.
- 17. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde G a M sú neprítomné.
- 18. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde zoskupenie:a-487-
- 19. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 18, kde štruktúra a je vybraná z nasledujúcich štruktúr:
- 20. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 18, kde štruktúra a je:kde R20 je vybraný z nasledujúcich štruktúr:
- 21. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 18, kde štruktúra a je:-488- kde R21 a R22 môžu byť rovnaké alebo rôzne a sú nezávisle vybrané z nasledujúcich štruktúr:-489-
- 22. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 18, kde štruktúra a je vybraná z nasledujúcich štruktúr:o-49023. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde:kde Q môže byť prítomný alebo neprítomný, a ak Q je neprítomný, M je priamo naviazaný na A.-491 25. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde:c kde G a J sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: (CH2)P, (CHR)P, (CHRCHR')P a (CRR')P; A a M sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej: O, S, SO2, NR, (CH2)P, (CHR)P, (CHR-CHR’)p a (CRR’)P; a Q je CH2, CHR, CRR', NH, NR, O, S, SO2, NR, (CH2)p, (CHR)p a (CRR')P.26.Peptidové zlúčeniny podľa nároku 25, kde štruktúra c je vybraná z nasledujúcich štruktúr:-492--49327. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 14, kde:-494-28. Peptidové zlúčeniny podľa nároku 27, kde:je vybraná z nasledujúcich štruktúr:-495-29. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci ako aktívnu zložku peptidovú zlúčeninu podľa nároku 1.sa t ý m, že obsahuje30. Farmaceutický prípravok podľa nároku 29 na použitie na liečenie porúch spojených s HCV.31. Farmaceutický prípravok podľa nároku 29, vyznačujúci sa t ý m, že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič.32. Farmaceutický prípravok podľa nároku 31, vyznačujúci sa t ý m, že obsahuje antivírusovú látku.33. Farmaceutický prípravok podľa nároku 32, vyznačujúci sa t ý m, že obsahuje interferón.-496-34. Farmaceutický prípravok podľa nároku 33, vyznačujúci sa tým, že antivírusovou látkou je ribavirín a interferónom je α-interferón alebo pegylovaný interferón.35. Použitie farmaceutického prípravku obsahujúceho peptidovú zlúčeninu podľa nároku 1 na liečenie porúch spojených s HCV.36. Použitie podľa nároku 35, kde farmaceutický prípravok je na orálne alebo subkutánne podanie.37. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1 na výrobu lieku na liečenie porúch spojených s HCV.38. Spôsob prípravy farmaceutického prípravku na liečenie porúch spojených s HCV, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje zmiešanie peptidovej zlúčeniny podľa nároku 1 a farmaceutický prijateľného nosiča.39. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov alebo ich prekurzorov, ktorá je vybraná zo skupiny zahrnujúcej nasledujúce zlúčeniny:R (R = terc-butyl, X = NH2) (R = izobutyl, X = NH2) (R = terc-butyl, X = OH) (R = trichlóretyl, X = OH)-497- (X = o'bu) (X = OH) (X = OH) (X = O*Bu) (X = NH2) (X = NHMe) (X = ΝΜβ2) (X = NH2) (X = NMe2) (X = NHMe) (X = OH)A °γ Yy ΝΜθ2 °μΫμ0 ° \° H O Me [>°ô °\>xz-498- (X = O'Bu) (X = OH) (X = NH2) (X = NMe2) (X = O'Bu) (X = OH) (X = NH2) (X = NMe2) (X = NMeOMe) (R = íerc-butyl) (R = izobutyl) (X = Me, Y = CH2Me) (X=OAc, Y = Me) oo-499--500--501 --502-VyCH,-503--504-VyO(ΛHX CH,-505-H.C ~-506--507--508--509-HaCyCH,HX CHJV-510- σCH.-511 -HC ruO-.NH CH,Y v-512--513--514--515 --516--517--518--519--520-XΟγΟ-521 --522-Ο1>-523--524-ΟCH,-525--526--527-Ο ο-528-- 529--530--531 -- 532-40. Farmaceutický prípravok na liečenie porúch spojených s HCV, vyznačujúci sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo jednej alebo viacerých peptidových zlúčenín podľa nároku 39 a farmaceutický prijateľný nosič.41. Farmaceutický prípravok podľa nároku 40, vyznačujúci sa tým, že obsahuje antivírusovú látku.42. Farmaceutický prípravok podľa nároku 41, vyznačujúci sa tým, že obsahuje interferón alebo PEG-interferón alfa konjugát.43. Farmaceutický prípravok podľa nároku 42, vyznačujúci sa tým, že antivírusovou látkou je ribavirín a interferónom je a-interferón.44. Použitie peptidovej zlúčeniny podľa nároku 39 na výrobu lieku na liečenie s vírusom hepatitídy C spojených porúch.45. Spôsob modulovania aktivity proteázy vírusu hepatitídy C (HCV), vyznačujúci sa tým, že zahrnuje kontaktovanie HCV proteázy s jednou alebo viacerými peptidovými zlúčeninami podľa nároku 39.46. Použitie peptidovej zlúčeniny podľa nároku 39 na liečenie, prevenciu alebo zoslabenie jedného alebo viacerých symptómov hepatitídy C.-533-47. Spôsob podľa nároku 45, vyznačujúci sa tým, že HCV proteázou je NS3/NS4a proteáza.48. Spôsob podľa nároku 47, v y z n a č u j ú c i sa tým, že zlúčenina alebo zlúčeniny inhibujú HCV NS3/NS4a proteázu.49. Spôsob modulovania úpravy polypeptidu vírusu hepatitídy C (HCV), vyznačujúci sa tým, že zahrnuje kontaktovanie zmesi obsahujúcej HCV polypeptid za podmienok, za ktorých sa polypeptid upravuje jednou alebo viacerými peptidovými zlúčeninami podľa nároku 39..50. Peptidové zlúčenina podľa nároku 8, kde R3 je:51. Peptidové zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov alebo ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:52. Peptidové zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov alebo ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:-534-53. Peptidové zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:54. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:55. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane ich enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:-535-56. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibíčnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:57. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibíčnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:58. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibíčnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:-536-59. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:60. Peptidová zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu k HCV proteáze podľa nároku 1, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov zlúčenín, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá má nasledujúci vzorec:-537-61. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo aktívnej zložky, ktorou je peptidová zlúčenina, vrátane jej enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, a jej farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktorá je vybraná z nasledujúcich zlúčenín:H N-538--539Me62. Farmaceutický prípravok podľa nároku 61, vyznačujúci sa tým, že obsahuje antivírusovú látku.63. Farmaceutický prípravok podľa nároku 62, vyznačujúci sa tým, že obsahuje interferón alebo PEG-interferón alfa konjugát.64. Farmaceutický prípravok podľa nároku 63, vyznačujúci sa t ý m, že antivírusovou látkou je ribavirín a interferónom je a-interferón.65. Použitie peptidových zlúčenín vrátane ich enantiomérov, stereoizomérov, rotamérov, tautomérov, racemátov a prekurzorov, ich farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov a ich prekurzorov, ktoré sú vybrané zo skupiny zahrnujúcej nasledujúce zlúčeniny:-540--541 - na výrobu lieku na liečenie porúch spojených s HCV.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US22010800P | 2000-07-21 | 2000-07-21 | |
| PCT/US2001/022678 WO2002008244A2 (en) | 2000-07-21 | 2001-07-19 | Peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK752003A3 true SK752003A3 (en) | 2003-08-05 |
| SK288064B6 SK288064B6 (sk) | 2013-04-03 |
Family
ID=22822095
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK75-2003A SK288064B6 (sk) | 2000-07-21 | 2001-07-19 | Peptide compounds, pharmaceutical compositions comprising them and their use |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US7012066B2 (sk) |
| EP (1) | EP1385870B1 (sk) |
| JP (3) | JP4298289B2 (sk) |
| KR (2) | KR100904788B1 (sk) |
| CN (3) | CN102206247B (sk) |
| AR (2) | AR033985A1 (sk) |
| AT (1) | ATE461207T1 (sk) |
| AU (2) | AU2001276988B2 (sk) |
| BR (1) | BR0112540A (sk) |
| CA (1) | CA2410662C (sk) |
| CY (2) | CY1112267T1 (sk) |
| CZ (1) | CZ303213B6 (sk) |
| DE (2) | DE60141608D1 (sk) |
| DK (1) | DK1385870T3 (sk) |
| EC (1) | ECSP034438A (sk) |
| ES (1) | ES2341534T3 (sk) |
| HK (1) | HK1058047A1 (sk) |
| HU (1) | HU229997B1 (sk) |
| IL (2) | IL153670A0 (sk) |
| LU (1) | LU91910I2 (sk) |
| MX (1) | MXPA03000627A (sk) |
| MY (2) | MY143322A (sk) |
| NO (2) | NO332329B1 (sk) |
| NZ (1) | NZ523782A (sk) |
| PL (1) | PL206255B1 (sk) |
| PT (1) | PT1385870E (sk) |
| RU (2) | RU2355700C9 (sk) |
| SI (1) | SI1385870T1 (sk) |
| SK (1) | SK288064B6 (sk) |
| TW (1) | TWI324611B (sk) |
| WO (1) | WO2002008244A2 (sk) |
| ZA (1) | ZA200210312B (sk) |
Families Citing this family (265)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2169880T3 (es) | 1996-10-18 | 2002-07-16 | Vertex Pharma | Inhibidores de proteasas de serina, particularmente de la proteasa ns3 del virus de la hepatitis c. |
| US6608027B1 (en) | 1999-04-06 | 2003-08-19 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd | Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus |
| PE20011350A1 (es) | 2000-05-19 | 2002-01-15 | Vertex Pharma | PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE) |
| US7244721B2 (en) * | 2000-07-21 | 2007-07-17 | Schering Corporation | Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus |
| BR0112540A (pt) * | 2000-07-21 | 2003-06-24 | Schering Corp | Peptìdios como inibidores da ns-3-serina protease do vìrus da hepatite c |
| SV2003000617A (es) | 2000-08-31 | 2003-01-13 | Lilly Co Eli | Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m |
| EP1317448B2 (en) | 2000-09-15 | 2011-05-04 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
| US6660731B2 (en) | 2000-09-15 | 2003-12-09 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
| GB2367816A (en) * | 2000-10-09 | 2002-04-17 | Bayer Ag | Urea- and thiourea-containing derivatives of beta-amino acids |
| ES2324594T3 (es) * | 2000-12-12 | 2009-08-11 | Schering Corporation | Diaril peptidicos utilizados como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c. |
| JP4455056B2 (ja) | 2001-07-11 | 2010-04-21 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 架橋二環式セリンプロテアーゼ阻害剤 |
| AU2002348414B2 (en) * | 2001-10-24 | 2009-10-01 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of serine protease, particularly hepatitis C virus NS3-NS4A protease, incorporating a fused ring system |
| PE20030857A1 (es) | 2002-01-23 | 2003-10-25 | Schering Corp | Compuestos como inhibidores de la proteasa serina ns3 del virus de la hepatitis c |
| US7119072B2 (en) | 2002-01-30 | 2006-10-10 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. | Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus |
| US6642204B2 (en) | 2002-02-01 | 2003-11-04 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Hepatitis C inhibitor tri-peptides |
| US7091184B2 (en) | 2002-02-01 | 2006-08-15 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Hepatitis C inhibitor tri-peptides |
| PL373399A1 (en) | 2002-04-11 | 2005-08-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease |
| MY140680A (en) | 2002-05-20 | 2010-01-15 | Bristol Myers Squibb Co | Hepatitis c virus inhibitors |
| US20050075279A1 (en) | 2002-10-25 | 2005-04-07 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus |
| JP2006526011A (ja) | 2003-04-11 | 2006-11-16 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | セリンプロテアーゼ（特に、ｈｃｖｎｓ３−ｎｓ４ａプロテアーゼ）のインヒビター |
| AU2011203054B2 (en) * | 2003-04-11 | 2012-04-26 | Vertex Pharmaceuticals, Incorporated | Inhibitors of Serine Proteases, Particularly HCV NS3-NS4A Protease |
| CL2004001161A1 (es) | 2003-05-21 | 2005-04-08 | Boehringer Ingelheim Int | Compuestos describe compuestos derivados de quinolina; composicion farmaceutica; y su uso para tratar una enfermedad causada por el virus de la hepatitis c. |
| MXPA05013751A (es) * | 2003-06-17 | 2006-03-08 | Schering Corp | Procedimiento e intermediarios para la preparacion de 3-(amino)-3-ciclobutilmetil-2-hidroxi-propionamida o sus sales. |
| US7309717B2 (en) * | 2003-06-17 | 2007-12-18 | Schering Corporation | Process and intermediates for the preparation of (1R,2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3,1,0]hexane-2-carboxylates or salts thereof |
| AR044694A1 (es) * | 2003-06-17 | 2005-09-21 | Schering Corp | Proceso y compuestos intermedios para la preparacion de (1r, 2s,5s) - 3 azabiciclo [3,1,0] hexano-2- carboxamida, n- [3- amino-1- (ciclobutilmetil) - 2, 3 - dioxopropil] -3- [ (2s) - 2 - [[ [ 1,1- dimetiletil] amino] carbonilamino] -3,3-dimetil -1- oxobutil]-6,6 dimetilo |
| KR20060052836A (ko) | 2003-07-18 | 2006-05-19 | 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 세린 프로테아제, 특히 ｈｃｖ ｎｓ3-ｎｓ4ａ 프로테아제의억제제 |
| EP1664090A2 (en) * | 2003-08-26 | 2006-06-07 | Schering Corporation | Novel peptidomimetic ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus |
| TWI359147B (en) | 2003-09-05 | 2012-03-01 | Vertex Pharma | Inhibitors of serine proteases, particularly hcv n |
| US20050119189A1 (en) * | 2003-09-18 | 2005-06-02 | Cottrell Kevin M. | Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease |
| AR046166A1 (es) * | 2003-09-26 | 2005-11-30 | Schering Corp | Inhibidores macrociclicos de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c |
| TW200528472A (en) * | 2003-10-10 | 2005-09-01 | Vertex Pharma | Inhibitors of serine proteases, particularly HCV ns3-ns4a protease |
| US7491794B2 (en) * | 2003-10-14 | 2009-02-17 | Intermune, Inc. | Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication |
| US7494660B2 (en) | 2003-10-27 | 2009-02-24 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | HCV NS3-NS4A protease resistance mutants |
| US8187874B2 (en) | 2003-10-27 | 2012-05-29 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Drug discovery method |
| EP1944042A1 (en) | 2003-10-27 | 2008-07-16 | Vertex Pharmceuticals Incorporated | Combinations for HCV treatment |
| CA2546290A1 (en) | 2003-11-20 | 2005-06-09 | Schering Corporation | Depeptidized inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease |
| RU2006124594A (ru) * | 2003-12-11 | 2008-01-27 | Шеринг Корпорейшн (US) | Ингибиторы сериновой протеазы ns3/ns4а вируса гепатита с |
| WO2005070955A1 (en) | 2004-01-21 | 2005-08-04 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus |
| CA2552317C (en) * | 2004-01-30 | 2013-12-10 | Medivir Ab | Hcv ns-3 serine protease inhibitors |
| AU2005212257A1 (en) * | 2004-02-04 | 2005-08-25 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease |
| US20070049593A1 (en) | 2004-02-24 | 2007-03-01 | Japan Tobacco Inc. | Tetracyclic fused heterocyclic compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor |
| WO2005080399A1 (ja) | 2004-02-24 | 2005-09-01 | Japan Tobacco Inc. | ４環縮合複素環化合物及びそのｈｃｖポリメラーゼ阻害剤としての利用 |
| ATE434621T1 (de) * | 2004-02-27 | 2009-07-15 | Schering Corp | Neue verbindungen als inhibitoren der ns3- serinprotease des hepatitis-c-virus |
| JP2007525512A (ja) * | 2004-02-27 | 2007-09-06 | シェーリング コーポレイション | Ｃ型肝炎ウイルスｎｓ３セリンプロテアーゼのインヒビターとしての３，４−（シクロペンチル）−縮合プロリン化合物 |
| JP4745327B2 (ja) | 2004-02-27 | 2011-08-10 | シェーリング コーポレイション | Ｃ型肝炎ウイルスｎｓ３プロテアーゼのインヒビター |
| RU2006134005A (ru) * | 2004-02-27 | 2008-04-10 | Шеринг Корпорейшн (US) | Новые соединения, действующие как ингибиторы сериновой протеазы ns3 вируса гепатита с |
| US7635694B2 (en) | 2004-02-27 | 2009-12-22 | Schering Corporation | Cyclobutenedione-containing compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease |
| CA2557495C (en) * | 2004-02-27 | 2014-04-15 | Schering Corporation | Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease |
| WO2005085197A1 (en) * | 2004-02-27 | 2005-09-15 | Schering Corporation | Cyclobutenedione groups-containing compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease |
| CA2557304C (en) | 2004-02-27 | 2013-08-06 | Schering Corporation | Ketoamides with cyclic p4's as inhibitors of ns3 serine protease of hepatitis c virus |
| US7816326B2 (en) * | 2004-02-27 | 2010-10-19 | Schering Corporation | Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease |
| EP1725548B1 (en) * | 2004-03-12 | 2015-01-14 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Processes and intermediates for the preparation of aspartic acetal caspase inhibitors |
| AR049635A1 (es) * | 2004-05-06 | 2006-08-23 | Schering Corp | (1r,2s,5s)-n-((1s)-3-amino-1-(ciclobutilmetil)-2,3-dioxopropil)-3-((2s)-2-((((1,1-dimetiletil)amino)carbonil)amino)-3,3-dimetil-1-oxobutil)-6,6-dimetil-3-azabiciclo(3.1.0)hexan-2-carboxamida como inhibidor de la ns3/ns4a serina proteasa del virus de la hepatitis c |
| MXPA06013404A (es) * | 2004-05-20 | 2007-01-23 | Schering Corp | Prolinas sustituidas como inhibidores de serina proteasa ns3 de virus de hepatitis c. |
| UY29016A1 (es) | 2004-07-20 | 2006-02-24 | Boehringer Ingelheim Int | Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c |
| WO2006007708A1 (en) | 2004-07-20 | 2006-01-26 | Boehringer Engelheim International Gmbh | Hepatitis c inhibitor peptide analogs |
| WO2006026352A1 (en) | 2004-08-27 | 2006-03-09 | Schering Corporation | Acylsulfonamide compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease |
| US7196161B2 (en) * | 2004-10-01 | 2007-03-27 | Scynexis Inc. | 3-ether and 3-thioether substituted cyclosporin derivatives for the treatment and prevention of hepatitis C infection |
| KR101309409B1 (ko) * | 2004-10-01 | 2013-09-23 | 싸이넥시스, 인크. | Ｃ형 간염 바이러스 감염의 치료 및 예방을 위한 ３-에테르및 ３-티오에테르 치환된 시클로스포린 유도체 |
| EP1804821A4 (en) | 2004-10-01 | 2009-07-15 | Vertex Pharma | INHIBITION OF HCV NS3-NS4A PROTEASE |
| US7659263B2 (en) | 2004-11-12 | 2010-02-09 | Japan Tobacco Inc. | Thienopyrrole compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor |
| GB0426661D0 (en) * | 2004-12-06 | 2005-01-05 | Isis Innovation | Pyrrolidine compounds |
| US20060276406A1 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Methods of treating hepatitis C virus |
| US20060276407A1 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Methods of treating hepatitis C virus |
| US20060276405A1 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Methods for treating hepatitis C |
| EP1891089B1 (en) * | 2005-06-02 | 2014-11-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | HCV protease inhibitors in combination with food |
| WO2006130607A2 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Controlled-release formulation useful for treating disorders associated with hepatitis c virus |
| US20060275366A1 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Controlled-release formulation |
| CN101212970B (zh) | 2005-06-02 | 2010-07-21 | 先灵公司 | Hcv蛋白酶抑制剂与表面活性剂的组合物 |
| WO2006130687A2 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Liver/plasma concentration ratio for dosing hepatitis c virus protease inhibitor |
| WO2006130626A2 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Schering Corporation | Method for modulating activity of hcv protease through use of a novel hcv protease inhibitor to reduce duration of treatment period |
| US7608592B2 (en) * | 2005-06-30 | 2009-10-27 | Virobay, Inc. | HCV inhibitors |
| TWI449711B (zh) * | 2005-06-30 | 2014-08-21 | Virobay Inc | Ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）抑制劑 |
| US20110104109A1 (en) * | 2005-07-13 | 2011-05-05 | Frank Bennett | Tetracyclic indole derivatives and their use for treating or preventing viral infections |
| EP2305697A3 (en) | 2005-07-25 | 2011-07-27 | Intermune, Inc. | Macrocyclic inhibitors of Hepatitis C virus replication |
| ME01318B (me) | 2005-07-29 | 2013-12-20 | Tibotec Pharm Ltd | Makrociklički inhibitori virusa hepatitisa C |
| RU2436787C2 (ru) | 2005-07-29 | 2011-12-20 | Тиботек Фармасьютикалз Лтд. | Макроциклические ингибиторы вируса гепатита с |
| JP2009505966A (ja) * | 2005-08-02 | 2009-02-12 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | セリンプロテアーゼのインヒビター |
| US8399615B2 (en) | 2005-08-19 | 2013-03-19 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Processes and intermediates |
| WO2007022459A2 (en) | 2005-08-19 | 2007-02-22 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Processes and intermediates |
| AR055395A1 (es) | 2005-08-26 | 2007-08-22 | Vertex Pharma | Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c |
| US7964624B1 (en) | 2005-08-26 | 2011-06-21 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of serine proteases |
| CA2623864C (en) * | 2005-09-30 | 2014-12-16 | Scynexis, Inc. | Arylalkyl and heteroarylalkyl derivatives of cyclosporine a for the treatment and prevention of viral infection |
| EP1933859A2 (en) * | 2005-09-30 | 2008-06-25 | Scynexis, Inc. | Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hepatitis c infection |
| NZ568135A (en) * | 2005-10-11 | 2011-06-30 | Array Biopharma Inc | Macrocyclic compounds and methods for inhibiting hepatitis C viral replication |
| JP5249771B2 (ja) | 2005-11-03 | 2013-07-31 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | キナーゼインヒビターとして有用なアミノピリミジン |
| US7705138B2 (en) | 2005-11-11 | 2010-04-27 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Hepatitis C virus variants |
| EP2392588A3 (en) | 2005-11-11 | 2012-03-07 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Hepatitis C virus variants |
| AR056805A1 (es) * | 2005-11-14 | 2007-10-24 | Schering Corp | Un proceso para oxidacion para la preparcion de n- (3- amino-1- ( ciclobutilmetil) -2,3- dioxopropil ) -3-(n-(( ter-butilamino) carbonil )-3- metil- l- valil) -6,6- dimetil-3- azabiciclo (3.1.0) hexano -2- carboxamida y compuestos ralacionados |
| ES2432047T3 (es) * | 2005-12-22 | 2013-11-29 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Procedimiento de preparación de compuestos 6,6-dimetil-3-azabiciclo-[3,1,0]-hexano y sales enantioméricas de los mismos |
| UA96283C2 (uk) | 2005-12-23 | 2011-10-25 | Зіланд Фарма А/С | Модифіковані міметики лізину |
| US7816348B2 (en) | 2006-02-03 | 2010-10-19 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Viral polymerase inhibitors |
| AR059429A1 (es) * | 2006-02-09 | 2008-04-09 | Schering Corp | Combinaciones que involucran el (los) inhibidor(es) de la protesa hcv y metodos de tratamiento relacionados al (los) mismo (s) |
| CL2007000361A1 (es) * | 2006-02-09 | 2008-01-25 | Wyeth Corp | Combinacion que comprende un inhibidor de la arn polimerasa del virus de la hepatitis c (vhc) y un inhibidor de la proteasa del vhc; composicion farmaceutica que la comprende; y uso de la combinacion para tratar trastornos asociados con vhc. |
| JP5436864B2 (ja) | 2006-02-27 | 2014-03-05 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | Ｖｘ−９５０を含む共結晶体およびそれを含む医薬組成物 |
| CA2644389A1 (en) * | 2006-03-03 | 2007-09-20 | Schering Corporation | Pharmaceutical combinations of hcv-protease and -ires inhibitors |
| CN101460166B (zh) * | 2006-03-06 | 2014-11-19 | Abbvie公司 | 用于治疗c型肝炎病毒的利托那韦组合物及其用途 |
| CA2646229A1 (en) | 2006-03-16 | 2007-09-27 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Deuterated hepatitis c protease inhibitors |
| US20080045530A1 (en) * | 2006-04-11 | 2008-02-21 | Trixi Brandl | Organic Compounds and Their Uses |
| NZ571826A (en) * | 2006-04-11 | 2012-01-12 | Novartis Ag | HCV/HIV inhibitors and their uses |
| KR20080104366A (ko) * | 2006-04-11 | 2008-12-02 | 노파르티스 아게 | Ｈｃｖ 억제제 |
| US8017612B2 (en) | 2006-04-18 | 2011-09-13 | Japan Tobacco Inc. | Piperazine compound and use thereof as a HCV polymerase inhibitor |
| CN101495095B (zh) * | 2006-04-28 | 2013-05-29 | 默沙东公司 | 通过受控的沉淀来沉淀和分离6,6-二甲基-3-氮杂-双环[3.1.0]己烷-酰胺化合物的方法和含有其的药学制剂 |
| US8420122B2 (en) | 2006-04-28 | 2013-04-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Process for the precipitation and isolation of 6,6-dimethyl-3-aza-bicyclo [3.1.0] hexane-amide compounds by controlled precipitation and pharmaceutical formulations containing same |
| WO2007127380A2 (en) * | 2006-04-28 | 2007-11-08 | Schering Corporation | Process for the precipitation and isolation of 6,6-dimethyl-3-aza-bicyclo [3.1.0] hexane-amide compounds by controlled precipitation and pharmaceutical formulations containing same |
| ES2361635T3 (es) | 2006-05-19 | 2011-06-20 | Scynexis, Inc. | Ciclosporinas para el tratamiento y prevención de trastornos oculares. |
| CN101443348A (zh) * | 2006-05-23 | 2009-05-27 | Irm责任有限公司 | 作为通道活化蛋白酶抑制剂的化合物和组合物 |
| CA2651762A1 (en) | 2006-05-23 | 2007-11-29 | Irm Llc | Compounds and compositions as channel activating protease inhibitors |
| EP2027761A1 (fr) * | 2006-06-02 | 2009-02-25 | Claude Annie Perrichon | Gestion des electrons actifs |
| RU2008152171A (ru) * | 2006-07-05 | 2010-08-10 | Интермьюн, Инк. (Us) | Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с |
| EP2049474B1 (en) | 2006-07-11 | 2015-11-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis c virus inhibitors |
| EP1886685A1 (en) | 2006-08-11 | 2008-02-13 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition |
| RU2009109355A (ru) | 2006-08-17 | 2010-09-27 | БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) | Ингибиторы вырусной полимеразы |
| BRPI0715714A2 (pt) * | 2006-08-25 | 2014-03-11 | Wyeth Corp | Métodos para diminuir a frequência de emergência de uma infecção viral de hepatite c resistente ao tratamento, para atrasar a emergência de uma infecção viral de hepatite c resistente ao tratamento, para diminuir o nível de resistência de uma infecção viral de hepatite c resistente ao tratamento, para diminuir a emergência de uma infecção viral de hepatite c resistente a hcv-796, para identificar um indivíduo com uma probabilidade diminuída de responder a uma terapia viral anti-hepatite c, para monitorar, diagnosticar ou prognosticar a infecção viral de hepatite c resistente ao tratamento em um paciente, para monitorar o curso de tratamento de uma infecção viral de hepatite c em um paciente, para prognosticar o desenvolvimento de um ainfecção viral de hepatite c resistente ao tratamento em um paciente, para monitorar a infecção viral de hepatite c em um paciente e para diagnosticar o desenvolvimento de uma infecção viral de hepatite ao tratamento em um paciente |
| CA2663159A1 (en) * | 2006-09-13 | 2008-03-20 | Novartis Ag | Organic compounds and their uses |
| US8343477B2 (en) | 2006-11-01 | 2013-01-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Inhibitors of hepatitis C virus |
| US7772180B2 (en) | 2006-11-09 | 2010-08-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US7763584B2 (en) | 2006-11-16 | 2010-07-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US8003604B2 (en) | 2006-11-16 | 2011-08-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US7888464B2 (en) | 2006-11-16 | 2011-02-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| WO2008069917A2 (en) | 2006-11-20 | 2008-06-12 | Scynexis, Inc. | Novel cyclic peptides |
| JP2010510245A (ja) * | 2006-11-21 | 2010-04-02 | スミスクライン ビーチャム コーポレーション | 抗ウイルス化合物 |
| WO2008064218A2 (en) * | 2006-11-21 | 2008-05-29 | Smithkline Beecham Corporation | Amido anti-viral compounds |
| JP2010512317A (ja) * | 2006-12-07 | 2010-04-22 | シェーリング コーポレイション | ｐＨ感受性マトリクス処方物 |
| CN101610999A (zh) * | 2006-12-15 | 2009-12-23 | 先灵公司 | α-酮酰胺的亚硫酸氢盐纯化方法 |
| EP2121605B1 (en) * | 2006-12-20 | 2013-11-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Process for preparing (1r,2s,5s)-n-[(1s)-3-amino-1-(cyclobutylmethyl)-2,3-dioxopropyl]-3-[(2s)-2-[[[(1,1-dimethylethyl)amino]-carbonyl]amino]-3,3-dimethyl-1-oxobutyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide |
| US20080188545A1 (en) | 2006-12-21 | 2008-08-07 | Alimardanov Asaf R | Synthesis of pyrrolidine compounds |
| CN101631773A (zh) | 2006-12-22 | 2010-01-20 | 先灵公司 | 治疗或预防hcv和相关病毒感染的4,5-环化吲哚衍生物 |
| CN101611002A (zh) * | 2006-12-22 | 2009-12-23 | 先灵公司 | 用于治疗或预防hcv和相关病毒感染的4,5-环化吲哚衍生物 |
| CN101611025A (zh) | 2006-12-22 | 2009-12-23 | 先灵公司 | 5,6-环化的吲哚衍生物及其使用方法 |
| US20080161254A1 (en) * | 2007-01-03 | 2008-07-03 | Virobay, Inc. | Hcv inhibitors |
| CA2677487A1 (en) | 2007-02-09 | 2008-08-14 | Irm Llc | Compounds and compositions as channel activating protease inhibitors |
| JP2010519330A (ja) | 2007-02-27 | 2010-06-03 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 共結晶体およびそれを含む医薬組成物 |
| JP2010519329A (ja) | 2007-02-27 | 2010-06-03 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | セリンプロテアーゼ阻害剤 |
| CA2681624A1 (en) * | 2007-03-23 | 2009-01-15 | Schering Corporation | P1-nonepimerizable ketoamide inhibitors of hcv ns3 protease |
| AP2009005053A0 (en) * | 2007-05-03 | 2009-12-31 | Intermune Inc | Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication |
| ATE548044T1 (de) | 2007-05-04 | 2012-03-15 | Vertex Pharma | Kombinationstherapie zur behandlung von hiv- infektionen |
| KR20100027134A (ko) * | 2007-05-10 | 2010-03-10 | 인터뮨, 인크. | Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 펩티드 억제제 |
| WO2009018657A1 (en) | 2007-08-03 | 2009-02-12 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Viral polymerase inhibitors |
| MX2010002318A (es) * | 2007-08-29 | 2010-03-22 | Schering Corp | Derivados azaindol 2,3-sustituidos para tratar infecciones virales. |
| AU2008295476B2 (en) * | 2007-08-29 | 2013-08-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 2, 3-Substituted Indole Derivatives for treating viral infections |
| ES2447543T3 (es) | 2007-08-29 | 2014-03-12 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Derivados de indol sustituidos y métodos de utilización de los mismos |
| NZ583699A (en) | 2007-08-30 | 2012-04-27 | Vertex Pharma | Co-crystals of vx-950 (telaprevir) other components and pharmaceutical compositions comprising the same |
| SI2061513T1 (sl) * | 2007-09-14 | 2011-11-30 | Schering Corp | Postopek zdravljenja pacientov s hepatitisom c |
| CN104016970A (zh) * | 2007-10-10 | 2014-09-03 | 诺华股份有限公司 | 螺环吡咯烷类与其对抗hcv和hiv感染的应用 |
| US8419332B2 (en) * | 2007-10-19 | 2013-04-16 | Atlas Bolt & Screw Company Llc | Non-dimpling fastener |
| CA2705587A1 (en) * | 2007-11-16 | 2009-05-22 | Schering Corporation | 3-aminosulfonyl substituted indole derivatives and methods of use thereof |
| US8765757B2 (en) * | 2007-11-16 | 2014-07-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 3-heterocyclic substituted indole derivatives and methods of use thereof |
| US20110092716A1 (en) * | 2007-11-28 | 2011-04-21 | Kwok Daw-Long | Dehydrohalogenation process for the preparation of intermediates useful in providing 6,6-dimethyl-3-azabicyclo-[3.1.0]- hexane compounds |
| WO2009076747A1 (en) | 2007-12-19 | 2009-06-25 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Viral polymerase inhibitors |
| US8202996B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-06-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide |
| CN102089274B (zh) * | 2007-12-21 | 2014-09-10 | 默沙东公司 | 合成3-氨基-3-环丁基甲基-2-羟基丙酰胺或其盐的方法 |
| WO2009099596A2 (en) | 2008-02-04 | 2009-08-13 | Idenix Pharamaceuticals, Inc. | Macrocyclic serine protease inhibitors |
| AU2009249443A1 (en) * | 2008-04-15 | 2009-11-26 | Intermune, Inc. | Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus replication |
| US8163921B2 (en) | 2008-04-16 | 2012-04-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US7964560B2 (en) | 2008-05-29 | 2011-06-21 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| WO2009148923A1 (en) | 2008-05-29 | 2009-12-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis c virus inhibitors |
| US20090306033A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Keqiang Li | Novel cyclic peptides |
| JP5820722B2 (ja) * | 2008-06-06 | 2015-11-24 | スシネキス インク | シクロスポリン類似体及びｈｃｖ感染の治療におけるその使用 |
| JP5580814B2 (ja) * | 2008-06-13 | 2014-08-27 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション | ３環式インドール誘導体およびその使用方法 |
| WO2010008828A2 (en) | 2008-06-24 | 2010-01-21 | Codexis, Inc. | Biocatalytic processes for the preparation of substantially stereomerically pure fused bicyclic proline compounds |
| US8188137B2 (en) | 2008-08-15 | 2012-05-29 | Avila Therapeutics, Inc. | HCV protease inhibitors and uses thereof |
| WO2010022126A1 (en) | 2008-08-20 | 2010-02-25 | Schering Corporation | Azo-substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections |
| EP2331511A1 (en) | 2008-08-20 | 2011-06-15 | Schering Corporation | Ethynyl-substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections |
| AU2009282567B2 (en) | 2008-08-20 | 2014-10-02 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections |
| CA2734489C (en) | 2008-08-20 | 2016-11-08 | Southern Research Institute | Ethenyl-substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections |
| US8207341B2 (en) | 2008-09-04 | 2012-06-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Process or synthesizing substituted isoquinolines |
| US8563505B2 (en) | 2008-09-29 | 2013-10-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US8044087B2 (en) | 2008-09-29 | 2011-10-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| JP2012505897A (ja) * | 2008-10-15 | 2012-03-08 | インターミューン・インコーポレーテッド | 治療用抗ウイルス性ペプチド |
| US8283310B2 (en) | 2008-12-15 | 2012-10-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| JP5780969B2 (ja) * | 2008-12-31 | 2015-09-16 | サイネクシス，インコーポレーテッド | シクロスポリンａの誘導体 |
| CN102271699A (zh) | 2009-01-07 | 2011-12-07 | 西尼克斯公司 | 用于治疗hcv和hiv感染的环孢菌素衍生物 |
| GB0900914D0 (en) | 2009-01-20 | 2009-03-04 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Antiviral agents |
| US8102720B2 (en) * | 2009-02-02 | 2012-01-24 | Qualcomm Incorporated | System and method of pulse generation |
| AR075584A1 (es) * | 2009-02-27 | 2011-04-20 | Intermune Inc | COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO. |
| JP5690286B2 (ja) | 2009-03-04 | 2015-03-25 | イデニク プハルマセウティカルス，インコーポレイテッド | ホスホチオフェン及びホスホチアゾールｈｃｖポリメラーゼ阻害剤 |
| CA2758072A1 (en) | 2009-04-08 | 2010-10-14 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Macrocyclic serine protease inhibitors |
| US20110182850A1 (en) * | 2009-04-10 | 2011-07-28 | Trixi Brandl | Organic compounds and their uses |
| US8512690B2 (en) | 2009-04-10 | 2013-08-20 | Novartis Ag | Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors |
| WO2010138889A1 (en) | 2009-05-28 | 2010-12-02 | Concert Pharmaceuticals, Inc. | Peptides for the treatment of hcv infections |
| AU2010253791A1 (en) | 2009-05-29 | 2011-11-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Antiviral compounds composed of three linked Aryl moieties to treat diseases such as Hepatitis C |
| WO2010151488A1 (en) | 2009-06-23 | 2010-12-29 | Gilead Sciences, Inc. | Combination of boceprevir with 5- ( { 6- [2, 4- bis (trifluoromethyl) phenyl] pyridazin-3 -yl } methyl) -2- (2 -fluorophenyl) -5h- imidazo [4, 5-c] pyridine for the treatment of hcv |
| AR077688A1 (es) | 2009-08-04 | 2011-09-14 | Takeda Pharmaceutical | Compuestos heterociclicos, utiles en el tratamiento de cancer |
| CA2769652A1 (en) | 2009-08-05 | 2011-02-10 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Macrocyclic serine protease inhibitors useful against viral infections, particularly hcv |
| WO2011031904A1 (en) | 2009-09-11 | 2011-03-17 | Enanta Pharmaceuticals, Inc | Hepatitis c virus inhibitors |
| KR20130026410A (en) * | 2009-09-28 | 2013-03-13 | Intermune Inc | Cyclic peptide inhibitors of hepatitis c virus replication |
| TW201116540A (en) * | 2009-10-01 | 2011-05-16 | Intermune Inc | Therapeutic antiviral peptides |
| US20110117055A1 (en) | 2009-11-19 | 2011-05-19 | Macdonald James E | Methods of Treating Hepatitis C Virus with Oxoacetamide Compounds |
| EP2503881B1 (en) | 2009-11-25 | 2015-05-13 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases |
| WO2011075615A1 (en) | 2009-12-18 | 2011-06-23 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors |
| US20130156731A1 (en) | 2009-12-22 | 2013-06-20 | Kevin X. Chen | Fused tricyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseas |
| WO2011103441A1 (en) | 2010-02-18 | 2011-08-25 | Schering Corporation | Substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections |
| MX2012009927A (es) * | 2010-02-25 | 2012-10-05 | Vereniging Voor Christelijk Hoger Onderwijs Wetenschappelijk Onderzoek En Patientenzorg | Proceso para la preparacion de alfa-aciloxibeta-formamida amidas. |
| ES2558554T3 (es) | 2010-03-09 | 2016-02-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Compuestos de sililo tricíclicos condensados y métodos de uso de los mismos para el tratamiento de enfermedades víricas |
| AU2011286276A1 (en) | 2010-07-26 | 2013-01-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted biphenylene compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| EP2621279B1 (en) | 2010-09-29 | 2018-04-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Fused tetracycle derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| AR085352A1 (es) | 2011-02-10 | 2013-09-25 | Idenix Pharmaceuticals Inc | Inhibidores macrociclicos de serina proteasa, sus composiciones farmaceuticas y su uso para tratar infecciones por hcv |
| WO2012107589A1 (en) | 2011-02-11 | 2012-08-16 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections |
| US20120252721A1 (en) | 2011-03-31 | 2012-10-04 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor |
| CA2832459A1 (en) | 2011-04-13 | 2012-10-18 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 2'-substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| WO2012142075A1 (en) | 2011-04-13 | 2012-10-18 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 2'-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| US8957203B2 (en) | 2011-05-05 | 2015-02-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US8691757B2 (en) | 2011-06-15 | 2014-04-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| WO2013033901A1 (en) | 2011-09-08 | 2013-03-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Heterocyclic-substituted benzofuran derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| WO2013033899A1 (en) | 2011-09-08 | 2013-03-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted benzofuran compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| WO2013033900A1 (en) | 2011-09-08 | 2013-03-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| US20140378416A1 (en) | 2011-09-14 | 2014-12-25 | Michael P. Dwyer | Silyl-containing heterocyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases |
| CN103826627B (zh) | 2011-10-21 | 2016-02-24 | 艾伯维公司 | 包含至少两种直接抗病毒剂和利巴韦林的组合物在制备治疗hcv的药物中的用途 |
| US8492386B2 (en) | 2011-10-21 | 2013-07-23 | Abbvie Inc. | Methods for treating HCV |
| US8466159B2 (en) | 2011-10-21 | 2013-06-18 | Abbvie Inc. | Methods for treating HCV |
| SG2014011670A (en) | 2011-10-21 | 2014-10-30 | Abbvie Inc | Combination treatment (eg. with abt-072 or abt -333) of daas for use in treating hcv |
| WO2013072327A1 (en) | 2011-11-14 | 2013-05-23 | Sanofi | Use of boceprevir and related compounds in atherosclerosis, heart failure, renal diseases, liver diseases or inflammatory diseases |
| AR091192A1 (es) * | 2012-05-30 | 2015-01-21 | Chemo Iberica Sa | Procedimiento multicomponente para la preparacion de compuestos biciclicos |
| CN103508918B (zh) * | 2012-06-18 | 2015-09-09 | 上海医药工业研究院 | 带有环丁基的α-羟基β-氨基酯类化合物及其制备方法 |
| WO2014053533A1 (en) | 2012-10-05 | 2014-04-10 | Sanofi | Use of substituted 3-heteroaroylamino-propionic acid derivatives as pharmaceuticals for prevention/treatment of atrial fibrillation |
| WO2014061034A1 (en) * | 2012-10-18 | 2014-04-24 | Msn Laboratories Limited | Process for preparation of boceprevir and intermediates thereof |
| EA025560B1 (ru) | 2012-10-19 | 2017-01-30 | Бристол-Майерс Сквибб Компани | Ингибиторы вируса гепатита с |
| AU2013340559B2 (en) | 2012-10-29 | 2018-03-15 | Cipla Limited | Antiviral phosphonate analogues and process for preparation thereof |
| US9643999B2 (en) | 2012-11-02 | 2017-05-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US9334279B2 (en) | 2012-11-02 | 2016-05-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| EP2914613B1 (en) | 2012-11-02 | 2017-11-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis c virus inhibitors |
| WO2014070974A1 (en) | 2012-11-05 | 2014-05-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis c virus inhibitors |
| WO2014083575A2 (en) | 2012-11-29 | 2014-06-05 | Mylan Laboratories Ltd | Improved process for the preparation of boceprevir intermediate |
| CN103936652B (zh) * | 2013-01-18 | 2016-07-06 | 上海医药工业研究院 | 抗丙肝药物Boceprevir的中间体IV及其制备方法和应用 |
| CN103936627B (zh) * | 2013-01-18 | 2016-08-31 | 上海医药工业研究院 | 抗丙肝药物Boceprevir的中间体Ⅶ及其制备方法和应用 |
| CN103936818B (zh) * | 2013-01-18 | 2017-09-29 | 上海医药工业研究院 | 抗丙肝药物Boceprevir的中间体Ⅰ及其制备方法和应用 |
| EP2964664B1 (en) | 2013-03-07 | 2017-01-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis c virus inhibitors |
| AR095426A1 (es) * | 2013-03-14 | 2015-10-14 | Onyx Therapeutics Inc | Inhibidores tripeptídicos de la epoxicetona proteasa |
| DK2970225T3 (en) | 2013-03-14 | 2018-09-24 | Onyx Therapeutics Inc | DIPEPTIDE AND TRIPEPTIDE AS EPOXY-KETONE PROTEASE INHIBITORS |
| EP2805705B1 (en) | 2013-05-23 | 2016-11-09 | IP Gesellschaft für Management mbH | Packaging with one or more administration units comprising a sodium salt of (R)-3-[6-amino-pyridin-3-yl]-2-(1-cyclohexyl-1 H-imidazol-4-yl)-propionic acid |
| CN103387510B (zh) * | 2013-08-08 | 2015-09-09 | 苏州永健生物医药有限公司 | 一种β-氨基-alpha-羟基环丁基丁酰胺盐酸盐的合成方法 |
| US20160229866A1 (en) | 2013-09-20 | 2016-08-11 | Idenix Pharmaceuticals Inc. | Hepatitis c virus inhibitors |
| US10035760B2 (en) * | 2013-10-24 | 2018-07-31 | Viiv Healthcare Uk (No. 5) Limited | Inhibitors of human immunodeficiency virus replication |
| US10167298B2 (en) | 2013-10-30 | 2019-01-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Pseudopolymorphs of an HCV NS5A inhibitor and uses thereof |
| EP2899207A1 (en) | 2014-01-28 | 2015-07-29 | Amikana.Biologics | New method for testing HCV protease inhibition |
| US20170135990A1 (en) | 2014-03-05 | 2017-05-18 | Idenix Pharmaceuticals Llc | Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection |
| US20170066779A1 (en) | 2014-03-05 | 2017-03-09 | Idenix Pharmaceuticals Llc | Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof |
| CN106810485A (zh) * | 2015-11-27 | 2017-06-09 | 上海现代制药股份有限公司 | 一种手性联苯吡咯烷酮的制备方法及其中间体 |
| EA201892448A1 (ru) | 2016-04-28 | 2019-06-28 | Эмори Юниверсити | Алкинсодержащие нуклеотидные и нуклеозидные терапевтические композиции и связанные с ними способы применения |
| JP7164521B2 (ja) * | 2016-06-21 | 2022-11-01 | オリオン・オフサルモロジー・エルエルシー | 炭素環式プロリンアミド誘導体 |
| FI3472149T3 (fi) * | 2016-06-21 | 2023-11-09 | Orion Ophthalmology LLC | Heterosyklisiä prolinamidijohdannaisia |
| KR102512201B1 (ko) * | 2016-06-21 | 2023-03-20 | 오리온 옵탈몰로지 엘엘씨 | 지방족 프롤린아미드 유도체 |
| WO2018073110A1 (en) | 2016-10-20 | 2018-04-26 | Basf Se | Quinoline compounds as fungicides |
| US20190359589A1 (en) | 2017-01-23 | 2019-11-28 | Basf Se | Fungicidal pyridine compounds |
| EP3606914A1 (en) | 2017-04-06 | 2020-02-12 | Basf Se | Pyridine compounds |
| CN110709096B (zh) | 2017-05-05 | 2023-10-31 | 泽兰德制药公司 | 细胞间隙连接通讯调节剂及其在糖尿病性眼病治疗中的应用 |
| US20220106308A1 (en) | 2019-02-19 | 2022-04-07 | Univerza V Ljubljani | Antibacterials based on monocyclic fragments coupled to aminopiperidine naphthyridine scaffold |
| US20230218644A1 (en) | 2020-04-16 | 2023-07-13 | Som Innovation Biotech, S.A. | Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus |
| KR20230069090A (ko) * | 2020-07-20 | 2023-05-18 | 이난타 파마슈티칼스, 인코포레이티드 | 항바이러스제로서의 기능화된 펩타이드 |
| US11351149B2 (en) | 2020-09-03 | 2022-06-07 | Pfizer Inc. | Nitrile-containing antiviral compounds |
| US12083099B2 (en) | 2020-10-28 | 2024-09-10 | Accencio LLC | Methods of treating symptoms of coronavirus infection with viral protease inhibitors |
| MX2023005983A (es) | 2020-11-23 | 2023-08-15 | Enanta Pharm Inc | Nuevos agentes antivirales derivados de la espiropirrolidina. |
| CN115698012B (zh) | 2021-04-16 | 2023-06-16 | 福建广生中霖生物科技有限公司 | 环修饰的脯氨酸短肽化合物及其应用 |
| US11970502B2 (en) | 2021-05-04 | 2024-04-30 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Macrocyclic antiviral agents |
| IL309732A (en) | 2021-07-09 | 2024-02-01 | Aligos Therapeutics Inc | Antiviral compounds |
| WO2023043816A1 (en) | 2021-09-17 | 2023-03-23 | Aligos Therapeutics, Inc. | Anti-viral compounds for treating coronavirus, picornavirus, and norovirus infections |
| US11919910B2 (en) | 2021-11-12 | 2024-03-05 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Spiropyrrolidine derived antiviral agents |
| WO2023086352A1 (en) | 2021-11-12 | 2023-05-19 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Novel spiropyrrolidine derived antiviral agents |
| WO2023086350A1 (en) | 2021-11-12 | 2023-05-19 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Alkyne-containing antiviral agents |
| US11993600B2 (en) | 2021-12-08 | 2024-05-28 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Saturated spirocyclics as antiviral agents |
| CN114133350B (zh) * | 2021-12-16 | 2023-05-23 | 浙江乐普药业股份有限公司 | 一种抗新冠药物Paxlovid中间体的制备方法 |
| WO2023149981A1 (en) * | 2022-02-07 | 2023-08-10 | Purdue Research Foundation | Compounds for the treatment of sars |
| CN114736151B (zh) * | 2022-04-13 | 2023-04-21 | 湖南复瑞生物医药技术有限责任公司 | 一种帕罗韦德关键中间体制备方法及化合物的结构式 |
| CN115160205B (zh) * | 2022-07-08 | 2024-06-07 | 上海皓鸿生物医药科技有限公司 | 一种制备(s)-1-(叔丁氧羰基)-2,5-二氢-1h-吡咯-2-羧酸及盐的方法 |
Family Cites Families (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU177134B (en) * | 1977-07-18 | 1981-07-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for preparing angiotensin ii analogues containing alpha-hydroxy-acid in position 1 with angiotensin ii antagonist activity |
| DE2936099A1 (de) * | 1979-09-06 | 1981-04-02 | Victor Dipl.- Chem. 8000 München Brantl | Pharmakologisch aktive peptide |
| JPS5781447A (en) * | 1980-11-11 | 1982-05-21 | Toyo Jozo Co Ltd | Human chorionic gonadotropic hormone c-terminal fragment |
| EP0124317B1 (en) * | 1983-04-27 | 1990-04-11 | Ici Americas Inc. | Proline derivatives |
| ZA86746B (en) | 1985-02-04 | 1986-09-24 | Merrell Dow Pharma | Novel peptidase inhibitors |
| US5496927A (en) * | 1985-02-04 | 1996-03-05 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Peptidase inhibitors |
| CN1049686C (zh) | 1987-11-18 | 2000-02-23 | 希龙股份有限公司 | 非ａ和非ｂ肝炎病毒的诊断及疫苗 |
| ZA897514B (en) | 1988-10-07 | 1990-06-27 | Merrell Dow Pharma | Novel peptidase inhibitors |
| EP0381216B1 (en) | 1989-02-01 | 1995-12-27 | Asahi Glass Company Ltd. | Hydrochlorofluorocarbon azeotropic or azeotropic-like mixture |
| US5359138A (en) * | 1989-04-15 | 1994-10-25 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Poststatin and related compounds or salts thereof |
| WO1990012805A1 (en) | 1989-04-15 | 1990-11-01 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Postostatin and related compound thereof, or their salts |
| DE69133617D1 (de) | 1990-04-04 | 2009-07-23 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Protease von Hepatitis C Virus |
| JP2804817B2 (ja) | 1990-04-13 | 1998-09-30 | 財団法人微生物化学研究会 | ３―アミノ―２―オキソ脂肪酸誘導体の製造法 |
| JPH04149166A (ja) | 1990-10-12 | 1992-05-22 | Nippon Kayaku Co Ltd | 新規ケト酸アミド誘導体 |
| AU667463B2 (en) | 1990-12-28 | 1996-03-28 | Cortex Pharmaceuticals, Inc. | Use of calpain inhibitors in the inhibition and treatment of neurodegeneration |
| FR2686086A1 (fr) * | 1992-01-15 | 1993-07-16 | Adir | Nouveaux derives de peptides et de pseudopeptides therapeutiquement actifs dans la cascade de coagulation sanguine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
| WO1993015193A1 (en) * | 1992-01-31 | 1993-08-05 | Abbott Laboratories | Mammalian expression systems for hcv proteins |
| EP0650368A1 (en) | 1992-06-24 | 1995-05-03 | Cortex Pharmaceuticals, Inc. | Use of calpain inhibitors in the inhibition and treatment of medical conditions associated with increased calpain activity |
| US5514694A (en) * | 1992-09-21 | 1996-05-07 | Georgia Tech Research Corp | Peptidyl ketoamides |
| US5414018A (en) * | 1993-09-24 | 1995-05-09 | G. D. Searle & Co. | Alkylaminoalkyl-terminated sulfide/sulfonyl-containing propargyl amino-diol compounds for treatment of hypertension |
| US5843450A (en) * | 1994-02-14 | 1998-12-01 | Abbott Laboratories | Hepatitis GB Virus synthetic peptides and uses thereof |
| IT1272179B (it) * | 1994-02-23 | 1997-06-16 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Metodologia per riprodurre in vitro l'attivita' proteolitica della proteasi ns3 del virus hcv. |
| US6285380B1 (en) * | 1994-08-02 | 2001-09-04 | New York University | Method and system for scripting interactive animated actors |
| US5843752A (en) * | 1995-05-12 | 1998-12-01 | Schering Corporation | Soluble active hepatitis C virus protease |
| US5919765A (en) | 1995-06-07 | 1999-07-06 | Cor Therapeutics, Inc. | Inhibitors of factor XA |
| GB9517022D0 (en) | 1995-08-19 | 1995-10-25 | Glaxo Group Ltd | Medicaments |
| US5763576A (en) * | 1995-10-06 | 1998-06-09 | Georgia Tech Research Corp. | Tetrapeptide α-ketoamides |
| IL120310A (en) | 1996-03-01 | 2002-02-10 | Akzo Nobel Nv | Serine protease inhibitors and pharmaceuticals containing them |
| US5633388A (en) * | 1996-03-29 | 1997-05-27 | Viropharma Incorporated | Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C |
| US5736576A (en) * | 1996-06-04 | 1998-04-07 | Octamer, Inc. | Method of treating malignant tumors with thyroxine analogues having no significant hormonal activity |
| WO1998007734A1 (en) | 1996-08-21 | 1998-02-26 | Hybridon, Inc. | Oligonucleotide prodrugs |
| IT1285158B1 (it) | 1996-09-17 | 1998-06-03 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Polipeptidi solubili con l'attivita' di serino-proteasi di ns3 del virus dell'epatite c, e procedimento per la loro preparazione e il |
| EP0929636B1 (en) | 1996-09-24 | 2002-12-04 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergents containing proteolytic enzyme, peptide aldehyde and a source of boric acid |
| US5922757A (en) | 1996-09-30 | 1999-07-13 | The Regents Of The University Of California | Treatment and prevention of hepatic disorders |
| ES2169880T3 (es) * | 1996-10-18 | 2002-07-16 | Vertex Pharma | Inhibidores de proteasas de serina, particularmente de la proteasa ns3 del virus de la hepatitis c. |
| GB9623908D0 (en) | 1996-11-18 | 1997-01-08 | Hoffmann La Roche | Amino acid derivatives |
| WO1998029435A1 (en) | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. | Peptidomimetic inhibitors of the human cytomegalovirus protease |
| WO1998037180A2 (en) | 1997-02-22 | 1998-08-27 | Abbott Laboratories | Hcv fusion protease and polynucleotide encoding same |
| IL134233A0 (en) * | 1997-08-11 | 2001-04-30 | Boehringer Ingelheim Ca Ltd | Hepatitis c inhibitor peptide analogues |
| EP1003775B1 (en) | 1997-08-11 | 2005-03-16 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. | Hepatitis c inhibitor peptides |
| GB9809664D0 (en) | 1998-05-06 | 1998-07-01 | Hoffmann La Roche | a-Ketoamide derivatives |
| GB9812523D0 (en) | 1998-06-10 | 1998-08-05 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Peptide inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease |
| US6576613B1 (en) * | 1998-07-24 | 2003-06-10 | Corvas International, Inc. | Title inhibitors of urokinase |
| AR022061A1 (es) * | 1998-08-10 | 2002-09-04 | Boehringer Ingelheim Ca Ltd | Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos. |
| US6323180B1 (en) | 1998-08-10 | 2001-11-27 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd | Hepatitis C inhibitor tri-peptides |
| JP2000256396A (ja) | 1999-03-03 | 2000-09-19 | Dainippon Pharmaceut Co Ltd | 複素環式化合物およびその中間体ならびにエラスターゼ阻害剤 |
| UA74546C2 (en) * | 1999-04-06 | 2006-01-16 | Boehringer Ingelheim Ca Ltd | Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition |
| WO2001040262A1 (en) * | 1999-12-03 | 2001-06-07 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Alpha-ketoamide inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease |
| ES2240446T3 (es) * | 2000-04-03 | 2005-10-16 | Vertex Pharma | Inhibidores de serina proteasas, particularmente la proteasa ns3 del virus de la hepatitis c. |
| BR0112540A (pt) * | 2000-07-21 | 2003-06-24 | Schering Corp | Peptìdios como inibidores da ns-3-serina protease do vìrus da hepatite c |
| AR029851A1 (es) * | 2000-07-21 | 2003-07-16 | Dendreon Corp | Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c |
| US7244721B2 (en) | 2000-07-21 | 2007-07-17 | Schering Corporation | Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus |
| SV2003000617A (es) | 2000-08-31 | 2003-01-13 | Lilly Co Eli | Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m |
-
2001
- 2001-07-19 BR BR0112540-0A patent/BR0112540A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 RU RU2003105217/04A patent/RU2355700C9/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 IL IL15367001A patent/IL153670A0/xx unknown
- 2001-07-19 CZ CZ20030151A patent/CZ303213B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 US US09/908,955 patent/US7012066B2/en not_active Ceased
- 2001-07-19 DE DE60141608T patent/DE60141608D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-19 EP EP01954764A patent/EP1385870B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-19 PT PT01954764T patent/PT1385870E/pt unknown
- 2001-07-19 MX MXPA03000627A patent/MXPA03000627A/es active IP Right Grant
- 2001-07-19 MY MYPI20064737A patent/MY143322A/en unknown
- 2001-07-19 NZ NZ523782A patent/NZ523782A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 DK DK01954764.5T patent/DK1385870T3/da active
- 2001-07-19 AU AU2001276988A patent/AU2001276988B2/en not_active Ceased
- 2001-07-19 HU HU0401730A patent/HU229997B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 WO PCT/US2001/022678 patent/WO2002008244A2/en active IP Right Grant
- 2001-07-19 ES ES01954764T patent/ES2341534T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-19 KR KR1020037000784A patent/KR100904788B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 CA CA2410662A patent/CA2410662C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-19 AU AU7698801A patent/AU7698801A/xx active Pending
- 2001-07-19 PL PL366063A patent/PL206255B1/pl unknown
- 2001-07-19 CN CN2011100651916A patent/CN102206247B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-19 SK SK75-2003A patent/SK288064B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 MY MYPI20013436A patent/MY139078A/en unknown
- 2001-07-19 CN CNA018131115A patent/CN1498224A/zh active Pending
- 2001-07-19 JP JP2002514149A patent/JP4298289B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-19 CN CN2011102287110A patent/CN102372764A/zh active Pending
- 2001-07-19 KR KR1020097002011A patent/KR100939155B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 AT AT01954764T patent/ATE461207T1/de active
- 2001-07-19 SI SI200130967T patent/SI1385870T1/sl unknown
- 2001-07-20 AR ARP010103450A patent/AR033985A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-07-20 TW TW090117804A patent/TWI324611B/zh not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-12-19 ZA ZA200210312A patent/ZA200210312B/en unknown
- 2002-12-25 IL IL153670A patent/IL153670A/en active Protection Beyond IP Right Term
-
2003
- 2003-01-20 NO NO20030272A patent/NO332329B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-01-20 EC EC2003004438A patent/ECSP034438A/es unknown
-
2004
- 2004-02-06 HK HK04100762.2A patent/HK1058047A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-09-30 US US11/241,656 patent/US20060205672A1/en not_active Abandoned
-
2008
- 2008-06-30 RU RU2008126266/04A patent/RU2008126266A/ru not_active Application Discontinuation
- 2008-10-27 JP JP2008275159A patent/JP2009051860A/ja active Pending
- 2008-11-19 AR ARP080105033A patent/AR069373A2/es unknown
-
2010
- 2010-06-16 CY CY20101100554T patent/CY1112267T1/el unknown
- 2010-12-20 US US12/973,020 patent/US20110117057A1/en not_active Abandoned
-
2011
- 2011-04-22 US US13/068,159 patent/USRE43298E1/en not_active Expired - Lifetime
- 2011-12-02 LU LU91910C patent/LU91910I2/fr unknown
- 2011-12-16 CY CY2011020C patent/CY2011020I2/el unknown
-
2012
- 2012-01-13 DE DE201212000004 patent/DE122012000004I1/de active Pending
- 2012-11-05 JP JP2012243691A patent/JP5775505B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-02-12 NO NO2013003C patent/NO2013003I2/no unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK752003A3 (en) | Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus | |
| JP4563033B2 (ja) | Ｃ型肝炎ウイルスのｎｓ３−セリンプロテアーゼ阻害剤としての新規ペプチド | |
| JP4748912B2 (ja) | アルキルおよびアリールアラニンｐ２部分を含むｃ型肝炎ウイルスに対する大員環ｎｓ３−セリンプロテアーゼ阻害剤 | |
| SK742003A3 (en) | Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus | |
| AU2001276988A1 (en) | Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus | |
| SK14192002A3 (sk) | Makrocyklické zlúčeniny, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie | |
| ES2344890T3 (es) | Nuevos peptidos como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TC4A | Change of owner's name |
Owner name: MERCK SHARP & DOHME CORP., RAHWAY, NJ, US Effective date: 20121108 |
|
| SPCF | Filing of an spc |
Free format text: PRODUCT NAME: BOCEPREVIR; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/111/704/001 20110718 Spc suppl protection certif: 2-2013 Filing date: 20130328 |
|
| SPCG | Grant of an spc |
Free format text: PRODUCT NAME: BOCEPREVIR; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/11/704/001 20110718 Spc suppl protection certif: 134 2-2013 Filing date: 20130328 Extension date: 20260718 |
|
| SPCM | Change of validity term of an spc as amended by art. 17 (2) of ec reg. no. 1610/96 and art. 18 of ec reg. no. 469/2009 |
Free format text: FIRST REGISTRATION NO/DATE: EU/1/11/704/001 20110718 Spc suppl protection certif: 134 2-2013 Filing date: 20130328 Extension date: 20260720 |
|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20170719 |