KR100939155B1

KR100939155B1 - Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3-세린 프로테아제 억제제로서의신규한 펩티드

Info

Publication number: KR100939155B1
Application number: KR1020097002011A
Authority: KR
Inventors: 아닐 케이. 삭세나; 비요르 무필 기리자발라반; 레이몬드 지. 러비; 에드윈 이. 자오; 프랭크 베넷; 진핑 엘. 맥코믹; 하이얀 왕; 러셀 이. 파이크; 스테판 엘. 보겐; 틴-야우 찬; 위-청 류; 쟈오닝 쥬; 에프. 죠지 은조로게; 아쇼크 아라사판; 테잘 엔. 파레크; 아쉬트 케이. 갱굴리; 케빈 엑스. 첸; 스리칸쓰 벤카트라만; 헨리 에이. 바카로; 패트릭 에이. 핀토
Original assignee: 쉐링 코포레이션; 덴드레온 코포레이션
Priority date: 2000-07-21
Filing date: 2001-07-19
Publication date: 2010-01-28
Also published as: US20030216325A1; JP4298289B2; ECSP034438A; CZ2003151A3; EP1385870B1; USRE43298E1; WO2002008244A2; ZA200210312B; CY2011020I1; CZ303213B6; MY143322A; SK752003A3; CN102206247B; CN1498224A; HK1058047A1; KR20090030330A; CY1112267T1; CN102206247A; JP5775505B2; NO20030272D0

Abstract

본 발명은 HCV 프로테아제 억제 활성을 지니는 신규한 화합물, 및 이러한 화합물의 제조 방법에 관한 것이다. 또 다른 양태에서는, 본 발명이 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 이를 HCV 프로테아제와 연관된 질환을 치료하는데 사용하는 방법에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스(HCV)의 NS3-세린 프로테아제 억제제, 이러한 억제제를 함유하는 약제학적 조성물

Description

Ｃ형 간염 바이러스의 ＮＳ3-세린 프로테아제 억제제로서의 신규한 펩티드{Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus}

본 발명은 신규한 C형 간염 바이러스("HCV") 프로테아제 억제제, 이러한 억제제를 하나 이상 함유하는 약제학적 조성물, 상기 억제제의 제조 방법, 및 상기 억제제를 C형 간염 및 관련 질환을 치료하는데 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 특히, HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제의 억제제로서의 신규한 펩티드 화합물에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스(HCV)는 비-A형, 비-B형 간염(NANBH), 특히 혈액-관련 NANBH(BB-NANBH)의 주요 유발제로서 밀접한 영향을 끼친 (+)-센스 단일 가닥 RNA 바이러스이다[참조: 국제공개공보 WO 89/04669 및 EP 381 216]. NANBH는 기타 형태의 간 질환, 예를 들면, 알코올 중독증 및 1차적인 담즙성 간경변증 뿐만 아니라, 기타 유형의 바이러스-유도된 간 질환, 예를 들면, A형 간염 바이러스(HAV), B형 간염 바이러스(HBV), 델타 간염 바이러스(HDV), 사이토메갈로바이러스(CMV) 및 엡슈타인-바르(Epstein-Barr) 바이러스(EBV) 유도된 간 질환과도 구별되어야 한다.

최근에, 폴리펩티드 프로세싱과 바이러스성 복제에 필요한 HCV 프로테아제를 동정, 클로닝 및 발현하였다[예를 들면, 미국 특허 제5,712,145호 참조]. 이러한 대략 3000개 아미노산의 폴리단백질은 아미노 말단에서부터 카복시 말단까지, 뉴클레오캡시드 단백질(nucleocapsid protein)(C), 엔벨로프 단백질(envelope protein)(E1 및 E2) 및 몇몇 비-구조 단백질(NS1, 2, 3, 4a, 5a 및 5b)를 함유한다. NS3은 대략 68kda 단백질이고, HCV 게놈의 대략 1893개 뉴클레오티드에 의해 암호화되며, 다음 2가지의 독특한 도메인을 갖는다: (a) 대략 200개의 N-말단 아미노산으로 이루어진 세린 프로테아제 도메인; 및 (b) 상기 단백질의 C-말단에서의 RNA-의존적 ATPase 도메인. NS3 프로테아제는 키모트립신 계열의 구성원으로 간주되는데, 이는 단백질 서열, 전반적인 3차원 구조 및 촉매 작용 기전이 유사하기 때문이다. 기타 키모트립신-유사 효소는 엘라스타제, 인자 Xa, 트롬빈, 트립신, 플라스민, 유로키나제, tPA 및 PSA이다. HCV NS3 세린 프로테아제는 NS3/NS4a, NS4a/NS4b, NS4b/NS5a 및 NS5a/NS5b 연결부에서의 상기 폴리펩티드(폴리단백질)의 단백질 분해에 관여하기 때문에, 바이러스 복제 동안 4가지 바이러스성 단백질을 생성시키는 것과 관계가 있다. 이로써, HCV NS3 세린 프로테아제가 항바이러스 화학요법시 관심을 끄는 표적이 되었다.

대략 6kda 폴리펩티드인 NS4a 단백질이, NS3의 세린 프로테아제 활성에 대한 조인자인 것으로 밝혀졌다. NS3/NS4a 세린 프로테아제에 의한 NS3/NS4a 연결부의 자가절단은 분자내에서(즉, 시스) 일어나는 반면, 기타 절단 부위는 분자간으로 (즉, 트랜스) 프로세싱된다.

HCV 프로테아제에 대한 천연 절단 부위를 분석한 결과, P1에서는 시스테인이 존재하고 P1'에서는 세린이 존재하며, 이들 잔기는 NS4a/NS4b, NS4b/NS5a 및 NS5a/NS5b 연결부 내에 엄격하게 보존되어 있는 것으로 밝혀졌다. NS3/NS4a 연결부는 P1에서의 트레오닌 및 P1'에서의 세린을 함유한다. NS3/NS4a에서 Cys→Thr 치환은 상기 연결부에서 트랜스 프로세싱 보다는 시스 프로세싱을 필요로 하기 때문에 고려된 것이다[참조: 예를 들면, Pizzi et al.(1994) Proc. Natl. Acad. Sci(USA) 91:888-892, Failla et al. (1996) Folding & Design 1:35-42]. NS3/NS4a 절단 부위는 또한, 다른 부위 보다 돌연변이 발생을 보다 잘 허용한다[참조: Kollykhalov et al. (1994) J. Virol. 68:7525-7533]. 상기 절단 부위의 영역 상단부 내의 산성 잔기가 효율적인 절단에 필요한 것으로 또한 밝혀졌다[참조: Komoda et al. (1994) J. Virol. 68:7351-7357].

보고된 바 있는 HCV 프로테아제의 억제제로는 산화방지제[참조: 국제공개공보 WO 98/14181], 특정 펩티드 및 펩티드 동족체[참조: 국제공개공보 WO 98/17679; Landro et al. (1997) Biochem. 36:9340-9348, Ingallinella et al. (1998) Biochem. 37:8906-8914, Llinas-Brunet et al. (1998) Bioorg. Med. Chem. Lett. 8:1713-1718], 70개 아미노산 폴리펩티드 에글린 c 기준한 억제제[참조: Martin et al. (1998) Biochem. 37:11459-11468], 사람 췌장 분비성 트립신 억제제(hPSTI-C3) 및 미니바디 레퍼토리(minibody repertoires)(MBip) 중에서 선택된 억제제 친화물 [참조: Dimasi et al. (1997) J. Virol. 71:7461-7469], cV_HE2["낙타 적응화(camelized)" 가변 도메인 항체 단편][참조: Martin et al. (1997) Protein Eng. 10:607-614] 및 α1-안티키모트립신(ACT)[참조: Elzouki et al. (1997) J. Hepat. 27:42-28]이 있다. C형 간염 바이러스 RNA를 선택적으로 파괴시키도록 고안된 리보자임이 최근에 보고되었다[참조: BioWorld Today 9(217):4(November 10, 1998)].

또한, PCT 공개공보 WO 98/17679(1998. 4. 30자로 공개됨)(Vertex Pharmaceuticals Incorporated); WO 98/22496(1998. 5. 28자로 공개됨)(F. Hoffmann-La Roche AG); 및 WO 99/07734(1999. 2. 18자로 공개됨)(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)를 참조할 수 있다.

HCV는 간경변증과, 간세포 암종의 유도에 밀접한 영향을 끼친다. 현재에는, HCV 감염에 걸린 환자를 예측하기가 매우 어렵다. HCV 감염은 기타 형태의 간염 보다 치료하기가 더욱 어려운데, 이는 HCV 감염와 연관된 면역성 또는 병의 차도가 없기 때문이다. 현 데이터는, 간경변증으로 진단받은 지 4년 후의 생존율은 50% 미만이라는 것을 지시해준다. 절제 가능한 국재된 간세포 암종이 있는 것으로 진단된 환자의 5년 후 생존율은 10 내지 30%인 반면, 절제 가능하지 않은 국재된 간세포 암종이 있는 것으로 진단된 환자의 5년 후 생존율은 1% 미만이다.

HCV NS3 프로테아제의 억제제의 비사이클릭 동족체의 합성에 관해 기재되어 있는 문헌[A. Marchetti et al, Synlett, S1, 1000-1002(1999)]를 참조할 수 있다. 상기 문헌에 기재되어 있는 화합물은 다음 식을 갖는다:

또한, 알릴 및 에틸 작용기를 함유하는 특정한 α-케토아미드, α-케토에스테르 및 α-디케톤의 제조 방법이 기재되어 있는 문헌[W. Han et al., Bioorganic & Medicinal Chem. Lett, (2000) 10, 711-713]을 참조할 수 있다.

또한, 다음 식의 펩티드 유도체가 기재되어 있는 WO 00/09558(양수인: Boehringer Ingelheim Limited; 2000. 2. 24자로 공개됨)를 참조할 수 있다:

[상기식에서, 각종 요소들은 상기 문헌에 정의되어 있다]. 이러한 시리즈의 화합물의 예는 다음과 같다:

또한, 다음 식의 펩티드 유도체가 기재되어 있는 WO 00/09543(양수인: Boehringer Ingelheim Limited; 2000. 2. 24자로 공개됨)를 참조할 수 있다:

C형 간염에 대한 현 치료법으로는 인터페론-α(INF_α), 및 리바비린(ribavirin)과 인터페론(interferon)의 조합 치료법이 있다[참조: Beremguer et al. (1998) Proc. Assoc. Am. Physicians 110(2):98-112]. 이들 치료법은 반응 지속율이 낮고 부작용을 자주 일으킨다[참조: Hoofnagle et al. (1997) N. Engl. J. Med. 336:347]. 현재, HCV 감염에 이용될 수 있는 백신은 전혀 없다.

현재 계류중인 미국 특허원 제60/194,607호(2000. 4. 5자로 출원됨); 제60/198,204호(2000. 4. 19자로 출원됨); 제60/220,110호(2000. 7. 21자로 출원됨); 제60/220,109호(2000. 7. 21자로 출원됨); 제60/220,107호(2000. 7. 21자로 출원됨); 제60/254,869호(2000. 12. 12자로 출원됨); 및 제60/220,101호(2000. 7. 21자로 출원됨)에는 C형 간염 바이러스의 NS3-세린 프로테아제 억제제로서의 각종 유형의 펩티드 및/또는 기타 화합물이 기재되어 있다.

HCV 감염에 대한 새로운 치료제와 치료법이 필요하다. 따라서, 본 발명의 목적은 C형 간염의 한 가지 이상의 증상을 치료, 예방 또는 경감시키는데 유용한 화합물을 제공하는 것이다.

본 발명의 추가의 목적은 C형 간염의 한 가지 이상의 증상을 치료, 예방 또는 경감시키는 방법을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 추가의 목적은 본원에 제공된 화합물을 사용하여, 세린 프로테아제, 특히 HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제의 활성을 조정하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 본원에 제공된 화합물을 사용하여, HCV 폴리펩티드의 프로세싱을 조정하는 방법을 제공하는 것이다.

많은 양태에 있어서, 본 발명은 HCV 프로테아제의 신규한 부류의 억제제, 상기 화합물을 하나 이상 함유하는 약제학적 조성물, 상기 화합물을 하나 이상 포함하는 약제학적 제형의 제조 방법, 및 C형 간염의 한 가지 이상의 증상을 치료, 예방 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 또한, HCV 폴리펩티드와 HCV 프로테아제의 상호작용을 조정하는 방법이 제공된다. 본원에 제공된 화합물 중에서, HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제 활성을 억제시키는 화합물이 바람직하다. 본원에는 다 음 화학식 I의 화합물, 및 이러한 화합물의 에난티오머, 입체 이성체, 로타머(rotamer), 토토머(tautomer), 라세메이트 및 프로드럭(prodrug), 및 상기 화합물 또는 프로드럭의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 기재되어 있다:

[화학식 I]

상기식에서,

Y는 알킬, 알킬-아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 아릴-헤테로아릴, 알킬-헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬옥시, 알킬-아릴옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클로알킬옥시, 사이클로알킬옥시, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬-아릴아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 사이클로알킬아미노 및 헤테로사이클로알킬아미노로 이루어진 그룹 중에서 선택되는데, 단 Y는 X¹¹ 또는 X¹²에 의해 임의로 치환될 수 있고;

X¹¹은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬, 아릴, 알킬아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 알킬헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬인데, 단 X¹¹은 X¹²에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있으며;

X¹²는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 알킬설폰아미도, 아릴설폰아미도, 카복시, 카브알콕시, 카복스아미도, 알콕시카보닐아미노, 알콕시카보닐옥시, 알킬우레이도, 아릴우레이도, 할로겐, 시아노 또는 니트로인데, 단 상기 알킬, 알콕시 및 아릴은 X¹² 중에서 독립적으로 선택된 잔기에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있고;

R¹은 COR⁵ 또는 B(OR)₂이며, R⁵는 H, OH, OR⁸, NR⁹R¹⁰, CF₃, C₂F₅, C₃F₇, CF₂R⁶, R⁶, 또는 COR⁷이고, R⁷은 H, OH, OR⁸, CHR⁹R¹⁰ 또는 NR⁹R¹⁰이며, R⁶, R⁸, R⁹ 및 R¹⁰은 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 사이클로알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, [CH(R^1')]_pCOOR¹¹, [CH(R^1')]_pCONR¹²R¹³, [CH(R^1')]_pSO₂R¹¹, [CH(R^1')]_pCOR¹¹, [CH(R^1')]_pCH(OH)R¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2') CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')R', CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')COOR¹¹, CH(R^1') CONHCH(R^2') CONHCH(R^3')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3') CONHCH(R^4')CONHCH(R^5')COOR¹¹, 및 CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4') CONHCH(R^5')CONR¹²R¹³으로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되며, R^1', R^2', R^3', R^4', R^5', R¹¹, R¹², R¹³ 및 R'는 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬-아릴, 알킬-헤테로아릴, 아릴-알킬 및 헤테로아르알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고;

Z는 O, N, CH 또는 CR 중에서 선택되며;

W는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, W가 존재하는 경우, W는 C=O, C=S, C(=N-CN) 또는 SO₂ 중에서 선택되며;

Q는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, Q가 존재하는 경우, Q는 CH, N, P, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CRR')_p, O, NR, S 또는 SO₂이며, Q가 부재하는 경우, M은 또한 존재하거나 또는 부재할 수 있으며; Q와 M이 부재하는 경우, A는 L에 직접 연결되고;

A는 O, CH₂, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p, (CRR')_p, NR, S, SO₂ 또는 결합이며;

E는 CH, N 또는 CR, 또는 A, L 또는 G에 대한 이중 결합이고;

G는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, G가 존재하는 경우, G는 (CH₂)_p, (CHR)_p, 또는 (CRR')_p이며, G가 부재하는 경우, J는 존재하며 E는 G에 연결된 바와 같은 화학식 I 내의 탄소 원자에 직접적으로 연결되고;

J는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, J가 존재하는 경우, J는 (CH₂)_p, (CHR)_p, (CRR')_p, SO₂, NH, NR 또는 O이며, J가 부재하는 경우, G는 존재하며 E는 J 에 연결된 바와 같은 화학식 I 내에 제시된 N에 직접적으로 연결되고;

L은 존재하거나 또는 부재할 수 있고, L이 존재하는 경우, L은 CH, CR, O, S 또는 NR이고, L이 부재하는 경우, M은 존재하거나 또는 부재할 수 있으며, L이 부재하면서 M이 존재하는 경우, M은 E에 직접 및 독립적으로 연결되며, J는 E에 직접 및 독립적으로 연결되고;

M은 존재하거나 또는 부재할 수 있고, M이 존재하는 경우, M은 O, NR, S, SO₂, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p, 또는 (CRR')_p이며;

p는 0 내지 6의 수이고;

R, R', R², R³ 및 R⁴는 H; C₁-C₁₀ 알킬; C₂-C₁₀ 알케닐; C₃-C₈ 사이클로알킬; C₃-C₈ 헤테로사이클로알킬, 알콕시, 아릴옥시, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 아미도, 에스테르, 카복실산, 카바메이트, 우레아, 케톤, 알데히드, 시아노, 니트로, 할로겐; (사이클로알킬)알킬 및 (헤테로사이클로알킬)알킬[여기서, 상기 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자, 0 내지 6개의 산소, 질소, 황 또는 인 원자로 만들어지고, 상기 알킬은 탄소수 1 내지 6이다]; 아릴; 헤테로아릴; 알킬-아릴; 및 알킬-헤테로아릴로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되는데,

상기 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 헤테로알케닐, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬 잔기는 임의로 화학적으로 적합하게 치환될 수 있으며, 상기 용어 "치환된"이란 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 할로겐, 하이드록시, 티오, 알콕시, 아릴옥시, 알킬티오, 아 릴티오, 아미노, 아미도, 에스테르, 카복실산, 카바메이트, 우레아, 케톤, 알데히드, 시아노, 니트로, 설폰아미도, 설폭사이드, 설폰, 설포닐 우레아, 하이드라지드 및 하이드록사메이트로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 잔기에 의해 임의로 화학적으로 적합하게 치환되는 것을 지칭하고;

추가로, 상기 단위 N-C-G-E-L-J-N은 5원 또는 6원 사이클릭 환 구조를 나타내는데, 단 상기 단위 N-C-G-E-L-J-N이 5원 사이클릭 환 구조를 나타내는 경우, 또는 N, C, G, E, L, J, N, A, Q 및 M을 포함하는 화학식 I 내의 비사이클릭 환 구조가 5원 사이클릭 환 구조를 나타내는 경우, 이러한 5원 사이클릭 환 구조에는 사이클릭 환의 일부로서의 카보닐 그룹이 결여되어 있다.

화학식 I의 각종 잔기에 대한 상기 언급된 정의 중에서, 각종 잔기에 대한 바람직한 그룹은 다음과 같다:

R¹에 대한 바람직한 정의는 COR⁵이고, R⁵는 H, OH, COOR⁸ 또는 CONR⁹R¹⁰이며, R⁸, R⁹ 및 R¹⁰은 상기 정의한 바와 같다. R¹에 대한 또한 바람직한 잔기는 COCONR⁹R¹⁰이며, R⁹는 H이고, R¹⁰은 H, R¹⁴, [CH(R^1')]_pCOOR¹¹, [CH(R^1')]_pCONR¹²R¹³, [CH(R^1')]_pSO₂R¹¹, [CH(R^1')]_pSO₂NR¹²R¹³, [CH(R^1')]_pCOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONR¹²R¹³ 또는 CH(R^1')CONHCH(R^2')(R')이며, R¹⁴는 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬-아릴, 아릴-헤테로아릴, 아릴-알킬, 알케닐, 알키닐 또는 헤테로아르알킬이다.

R¹⁰에 대한 상기 정의 중에서, R¹⁰에 대한 바람직한 잔기는 H, R¹⁴, CH(R^1')COOR¹¹, CH(R^1')CH(R^1')COOR¹¹, CH(R^1')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CH(R^1')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CH(R^1')SO₂R¹¹, CH(R^1')CH(R^1')SO₂NR¹²R¹³, CH(R^1')CH(R^1')COR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONR¹²R¹³ 또는 CH(R^1')CONHCH(R^2')(R')이고, R^1'은 H 또는 알킬이며, R^2'는 페닐, 치환된 페닐, 헤테로 원자-치환된 페닐, 티오페닐, 사이클로알킬, 피페리딜 또는 피리딜이다.

보다 바람직한 잔기는 다음과 같다: R^1'는 H이고; R¹¹은 H, 메틸, 에틸, 알릴, 3급-부틸, 벤질, α-메틸벤질, α,α-디메틸벤질, 1-메틸사이클로프로필 또는 1-메틸사이클로펜틸이며; R'는 하이드록시메틸 또는 CH₂CONR¹²R¹³이고, NR¹²R¹³은

로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;

U⁶은 H, OH 또는 CH₂OH이고;

R¹⁴는 바람직하게는, H, Me, Et, n-프로필, 메톡시, 사이클로프로필, n-부틸, 1-부트-3-인일, 벤질, α-메틸벤질, 펜에틸, 알릴, 1-부트-3-에닐, OMe, 사이클로프로필메틸로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;

R^2'는 바람직하게는,

으로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고;

U¹ 및 U²는 동일하거나 상이할 수 있고, H, F, CH₂COOH, CH₂COOMe, CH₂CONH₂, CH₂CONHMe, CH₂CONMe₂, 아지도, 아미노, 하이드록실, 치환된 아미노, 치환된 하이드록실 중에서 선택되며;

U³ 및 U⁴는 동일하거나 상이할 수 있고, O 및 S 중에서 선택되며;

U⁵는 알킬 설포닐, 아릴 설포닐, 헤테로알킬 설포닐, 헤테로아릴 설포닐, 알킬 카보닐, 아릴 카보닐, 헤테로알킬 카보닐, 헤테로아릴 카보닐, 알콕시카보닐, 아릴옥시카보닐, 헤테로아릴옥시카보닐, 알킬아미노카보닐, 아릴아미노카보닐, 헤테로아릴아미노카보닐 또는 이들의 조합물로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.

R²에 대한 바람직한 잔기는 다음과 같다:

R³에 대한 바람직한 잔기는 다음과 같다:

상기식에서,

R³¹은 =OH 또는 O-알킬이고;

Y¹⁹는 다음 잔기

중에서 선택되고;

Y²⁰은 다음 잔기 중에서 선택된다:

R³에 대한 가장 바람직한 잔기는 다음과 같다:

몇몇 기타 바람직한 잔기는 다음과 같다: Z는 N이고; R⁴는 H이며; W는 C=O이다. 추가로, R⁴가 부재하는 경우, 화학식 I 중의 잔기 Z-C-R³은 다음 구조로써 나타낼 수 있다:

Y에 대한 바람직한 잔기는 다음과 같다:

상기식에서,

Y¹¹은 H, COOH, COOEt, OMe, Ph, OPh, NHMe, NHAc, NHPh, CH(Me)₂, 1-트리아졸릴, 1-이미다졸릴 및 NHCH₂COOH 중에서 선택되고;

Y¹²는 H, COOH, COOMe, OMe, F, Cl 또는 Br 중에서 선택되며;

Y¹³은 다음 잔기

중에서 선택되고;

Y¹⁴는 MeSO₂, Ac, Boc, iBoc, Cbz 또는 Alloc 중에서 선택되며;

Y¹⁵ 및 Y¹⁶은 알킬, 아릴, 헤테로알킬 및 헤테로아릴 중에서 독립적으로 선택되고;

Y¹⁷은 CF₃, NO₂, CONH₂, OH, COOCH₃, OCH₃, OC₆H₅, C₆H₅, COC₆H₅, NH₂ 또는 COOH이며;

Y¹⁸은 COOCH₃, NO₂, N(CH₃)₂, F, OCH₃, CH₂COOH, COOH, SO₂NH₂ 또는 NHCOCH₃이고;

Y는 보다 바람직하게는, 다음으로써 나타낼 수 있고;

Y¹⁷은 CF₃, NO₂, CONH₂, OH, NH₂ 또는 COOH이며;

Y¹⁸은 F, COOH이다.

Y에 대한 보다 바람직한 잔기는 다음과 같다:

화학식 I에 제시된 바와 같이, 다음 단위는 5원 또는 6원 환 구조일 수 있는 사이클릭 환 구조를 나타낸다:

이러한 사이클릭 환이 5원 환을 나타내는 경우, 이러한 5원 사이클릭 환이 사이클릭 환 구조의 일부로서 카보닐 그룹을 함유하지 않는 것이 본 발명의 필수 사항이다. 바람직하게는, 상기 5원 환은 다음 구조이다:

상기식에서, R 및 R'는 상기 정의한 바와 같다.

상기 5원 사이클릭 환 구조에 대한 바람직한 것은 다음 구조이다:

상기식에서, R²⁰은 다음 잔기들 중에서 선택된다:

더우기, 상기 5원 환은 이의 인접한 2개의 엑소사이클릭 카보닐과 함께, 다음과 같이 나타낼 수 있다:

상기식에서, R²¹ 및 R²²는 동일하거나 상이할 수 있고, 다음 잔기들 중에서 독립적으로 선택된다:

5원 환 구조

에 대한 몇몇 바람직한 예는 다음과 같다:

추가로, 화학식 I 중의 단위

는 다음 구조 b 및 c로써 나타낼 수 있다:

b에 대한 바람직한 정의는 다음과 같다:

c에서, G 및 J는 (CH₂)_p, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p 및 (CRR')_p로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고; A 및 M은 O, S, SO₂, NR, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p 및 (CRR')_p로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되며; Q는 CH₂, CHR, CRR', NH, NR, O, S, SO₂, NR, (CH₂)_p, (CHR)_p 및 (CRR')_p이다.

c에 대한 바람직한 정의는 다음과 같다:

상기 사이클릭 환 구조가

로서 제시되는 경우, 이의 가장 바람직한 예시는 다음과 같다:

다음에 제시된 단위

에 대한 바람직한 몇몇 잔기는 다음과 같다:

달리 언급되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 따라서, 예를 들면, 용어 알킬(알콕시의 알킬 부분 포함)은 1 내지 8개, 바람직하게는 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는, 단일 원자를 제거함으로써 직쇄 또는 측쇄 포화 탄화수소로부터 유도된 1가 그룹을 지칭한다.

아릴은 6 내지 14개의 탄소 원자와 하나 이상의 벤제노이드 환을 갖는 카보사이클릭 그룹을 나타내는데, 이러한 카보사이클릭 그룹의 모든 이용 가능하고 치환 가능한 방향족 탄소 원자가 가능한 접촉점으로서 고려된다. 바람직한 아릴 그룹으로는 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸 및 인다닐이 있으며, 특히 페닐 및 치환된 페닐이 바람직하다.

아르알킬은 저급 알킬을 통하여 연결된 아릴 그룹을 함유하는 잔기를 나타낸다.

알킬아릴은 아릴 그룹을 통하여 연결된 저급 알킬을 함유하는 잔기를 나타낸다.

사이클로알킬은 3 내지 8개, 바람직하게는 5 또는 6개의 탄소 원자를 갖는, 임의로 치환된 포화 카보사이클릭 환을 나타낸다.

헤테로사이클릭은 다음에 정의된 헤테로아릴 그룹 이외에도, 1개의 환 또는 2개의 융합 환으로 이루어진 카보사이클릭 환 구조를 차단하는 1개 이상의 O, S 및/또는 N 원자를 갖는 포화 및 불포화 사이클릭 유기 그룹을 나타내는데, 상기 각 환은 5-, 6- 또는 7-원이고, 비국소 pi 전자가 결여된 이중 결합을 가지거나 가지지 않을 수 있으며, 상기 환 구조는 2 내지 8개, 바람직하게는 3 내지 6개의 탄소 원자를 가지며, 예를 들면, 2- 또는 3-피페리디닐, 2- 또는 3-피페라지닐, 2- 또는 3-모르폴리닐, 또는 2- 또는 3-티오모르폴리닐이다.

할로겐은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 나타낸다.

헤테로아릴은 카보사이클릭 환 구조를 차단하는 1개 이상의 O, S 및/또는 N을 갖고 방향족 특징을 제공하기에 충분한 수의 비국소 pi 전자를 갖는 사이클릭 유기 그룹을 나타내는데, 방향족 헤테로사이클릴 그룹은 2 내지 14개, 바람직하게는 4 또는 5개의 탄소 원자를 가지며, 예를 들면, 2-, 3- 또는 4-피리딜, 2- 또는 3-푸릴, 2- 또는 3-티에닐, 2-, 4- 또는 5-티아졸릴, 2- 또는 4-이미다졸릴, 2-, 4- 또는 5-피리미디닐, 2-피라지닐, 또는 3- 또는 4-피리다지닐 등이다. 바람직한 헤테로아릴 그룹은 2-, 3- 및 4-피리딜이고; 이러한 헤테로아릴 그룹은 임의로 치환될 수도 있다. 추가로, 달리 정의되지 않는 한, 상기 언급된 바와 같은 용어 "치환되거나 치환되지 않은" 또는 "임의로 치환된"이란 대상 잔기가 R¹² 또는 R¹³에 속하는 잔기에 의해 임의로 화학적으로 적합하게 치환되는 것을 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같은 "프로드럭"은 환자에게 투여된 후, 몇몇 화학적 또는 생리적 과정을 통하여 생체내에서 약물을 방출시키는 약물 전구체 화합물을 의미한다(예를 들어, 생리학적 pH로 될 때 또는 효소 작용을 통하여 프로드럭은 목적하는 약물 형태로 전환된다).

또한, 본 발명에는 화학식 I의 화합물의 토토머, 로타머, 에난티오머 및 기타 광학 이성체, 및 프로드럭 뿐만 아니라 이들의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및 유도체가 포함된다.

본 발명의 추가의 양태는 활성 성분으로서 화학식 I의 화합물(또는 이의 염, 용매화물 또는 이성체)을 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 함께 함유하는 약제학적 조성물이다.

본 발명은 또한, 화학식 I의 화합물의 제조 방법, 및 질환, 예를 들면, HCV, AIDS(후천성 면역 결핍증) 및 관련 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 이러한 치료 방법은 상기 질환에 걸린 환자에게 치료학적 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 이러한 화학식 I의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다.

또한, HCV, AIDS 및 관련 질환 치료용 약제를 제조하기 위한, 화학식 I의 화합물의 용도가 제공된다.

또한, 본원에는 하나 이상의 본 발명의 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함하여, C형 간염 바이러스 관련 질환을 치료하는 방법이 기재되어 있다.

또한, 본원에는 C형 간염 바이러스(HCV) 프로테아제를 하나 이상의 본 발명 의 화합물과 접촉시키는 것을 포함하여, HCV 프로테아제의 활성을 조정하는 방법이 기재되어 있다.

또한, 본원에는 하나 이상의 본 발명의 화합물의 유효량을 투여하는 것을 포함하여, C형 간염의 한 가지 이상의 증상을 치료, 예방 또는 경감시키는 방법이 기재되어 있다. HCV 프로테아제는 NS3 또는 NS4a 프로테아제이다. 본 발명의 화합물은 이러한 프로테아제를 억제한다. 이들은 또한, C형 간염 바이러스(HCV) 폴리펩티드의 프로세싱을 조정한다.

본 발명에 따르는 화합물 또는 이를 포함하는 약제학적 조성물은 C형 간염의 한 가지 이상의 증상을 치료, 예방 또는 경감시키는 데 유용하다.

한 양태에서는, 본 발명이 HCV 프로테아제, 특히 HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제의 억제제로서의 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 유도체[여기서, 각종 정의들은 상기 제시된 바와 같다]에 관한 것이다.

탁월한 HCV 프로테아제 억제 활성을 나타내는 본 발명의 대표적인 화합물이 이들의 활성[K_i* 값(나노몰, nM)]과 함께 다음 표 1 내지 5에 열거되어 있다. 몇몇 화합물 뿐만 아니라 부가의 화합물이 본 청구의 범위에 추가로 기재되어 있다.

[표 1]

화합물 및 HCV 프로테아제 연속 검정 결과

HCV 연속 검정 Ki* 범위:

카테고리 A = 1-100nM; 카테고리 B = 101-1,000nM; 카테고리 C > 1000nM.

본 발명의 화합물 유형 및 각종 유형의 본 발명의 화학식 I의 화합물을 합성하는 방법 몇몇이 다음에 열거되어 있고, 반응식으로 제시된 다음, 실시예에 예시되어 있다.

구조에 따라서, 본 발명의 화합물은 유기 또는 무기 산, 또는 유기 또는 무기 염기와 약제학적으로 허용되는 염을 형성할 수 있다. 이러한 염 형성에 적합한 산의 예는 염산, 황산, 인산, 아세트산, 시트르산, 말론산, 살리실산, 말산, 푸마르산, 석신산, 아스코르브산, 말레산, 메탄설폰산, 및 당업자에게 널리 공지된 기타 무기산 및 카복실산이다. 염기와의 염 형성에 적합한 염기는 예를 들면, NaOH, KOH, NH₄OH, 테트라알킬암모늄 하이드록사이드 등이다.

또 다른 양태에서는, 본 발명이 활성 성분으로서 본 발명의 펩티드를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 이러한 약제학적 조성물은 일반적으로, 약제학적으로 허용되는 담체 희석제, 부형제 또는 담체(집합적으로 본원에서 담체 물질로서 지칭됨)를 추가로 포함한다. 이들의 HCV 억제 활성으로 인해, 상기 약제학적 조성물은 C형 간염 및 관련 질환을 치료하는데 유용하다.

또 다른 양태에서는, 본 발명이 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 제조 방법을 제공한다. 본 발명의 약제학적 조성물 및 방법에서는, 활성 성분이 전형적으로, 의도된 투여형, 즉 경구용 정제, 캅셀제(고형 충진되거나, 반고형 충진되거나 또는 액상 충진됨), 구성용 산제, 경구용 젤, 엘릭서제, 분산성 과립제, 시럽, 현탁제 등에 대해 적합하게 선택되고 통상적인 약제학적 실시에 일관되게, 적합한 담체 물질과 함께 투여될 것이다. 예를 들면, 정제 또는 캅셀제 형태의 경구 투여형에서는, 활성 약물 성분을, 모든 경구용 비독성의 약제학적으로 허용되는 불활성 담체, 예를 들면, 락토즈, 전분, 슈크로즈, 셀룰로즈, 마그네슘 스테아레이트, 인산이칼슘, 황산칼슘, 탈크, 만니톨, 에틸 알코올(액상형) 등과 조합할 수 있다. 더우기, 필요에 따라, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 착색제를 상기 혼합물에 혼입할 수도 있다. 산제 및 정제는 본 발명의 조성물을 약 5 내지 약 95% 포함할 수 있다. 적합한 결합제로는 전분, 젤라틴, 천연 당, 옥수수 감미제, 천연 및 합성 검, 예를 들면, 아카시아 검, 나트륨 알기네이트, 카복시메틸셀룰로즈, 폴리에틸렌 글리콜 및 왁스가 있다. 이들 투여형에 사용하기 위한 윤활제로는, 붕산, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 염화나트륨 등이 언급될 수 있다. 붕해제로는 전분, 메틸셀룰로즈, 구아 검 등이 있다.

감미제, 향미제 및 방부제가 경우에 따라 포함될 수도 있다. 상기 언급된 용어 중 몇몇, 즉 붕해제, 희석제, 윤활제, 결합제 등이 다음에 보다 상세히 논의된다.

추가로, 본 발명의 조성물은 치료 효과, 즉 HCV 억제 활성 등을 최적화하기 위해 하나 이상의 상기 성분 또는 활성 성분을 속도 제어 방출시키도록 지속 방출 형태로 제형화시킬 수 있다. 지속 방출시키는데 적합한 투여형에는 각종 붕해율을 나타내는 층 또는 활성 성분이 함침된 제어 방출 중합체성 매트릭스를 함유하는 층 형성된 정제, 및 상기 함침되거나 캡슐화된 다공성 중합체성 매트릭스를 함유하는 정제형 또는 캅셀제가 포함된다.

액상 형 제제로는 용제, 현탁제 및 유제가 있다. 한 예로서, 비경구 주사용수 또는 물-프로필렌 글리콜 용액, 또는 경구용 용제, 현탁제 및 유제를 위한 감미제 및 유백화제의 부가물이 언급될 수 있다. 액상 형 제제에는 또한 비내 투여용 용제가 포함될 수 있다.

흡입용으로 적합한 에어로졸 제제로는 불활성 압착 기체(예: 질소)와 같은 약제학적으로 허용되는 담체와 조합될 수 있는, 분말 형태의 고형물 및 용제가 포함될 수 있다.

좌제를 제조하기 위해서는, 지방산 글리세라이드, 예를 들면, 코코아 버터의 혼합물과 같은 저융점 왁스를 먼저 용융시키고, 이 안에 활성 성분을 교반시키거나 유사하게 혼합시킴으로써 균질하게 분산시킨다. 이어서, 이와 같이 용융된 균질한 혼합물을 통상적인 크기의 주형에 따라 붓고, 냉각시킴으로써 고형화시킨다.

또한, 사용 직전에 경구 또는 비경구 투여용 액상 형 제제로 전환되도록 의도된 고형 제제가 포함된다. 이러한 액상 형으로는 용제, 현탁제 및 유제가 있다.

본 발명의 화합물은 또한 경피적으로 전달될 수 있다. 이러한 경피용 조성물은 크림, 로션, 에어로졸 및/또는 유제의 형태를 취할 수 있으며 이러한 목적을 위해 당해 분야에 통상적인 바와 같은 매트릭스 또는 저장기 유형의 경피용 패치에 포함될 수 있다.

바람직하게는, 당해 화합물을 경구, 정맥내 또는 피하 투여한다.

바람직하게는, 당해 약제학적 제제가 단위 투여형으로 존재한다. 이러한 형태에서는, 상기 제제가 적당한 양의 활성 성분, 예를 들면, 목적하는 바를 달성하 기에 유효한 양을 함유하는, 적합한 크기의 단위 용량으로 작게 나누어진다.

단위 용량 제제 내의 본 발명의 활성 조성물의 양은 특정 적용 분야에 따라서, 일반적으로 약 1.0mg 내지 약 1,000mg, 바람직하게는 약 1.0mg 내지 약 950mg, 보다 바람직하게는 약 1.0mg 내지 약 500mg, 전형적으로 약 1 내지 약 250mg으로 다양하거나 조정할 수 있다. 이용된 실제적인 투여량은 환자의 연령, 성별, 체중 및 치료하고자 하는 질환의 중증도에 따라서 결정될 수 있다. 이러한 기술은 당업자에게 널리 공지되어 있다.

일반적으로, 활성 성분을 함유하는 사람 경구 투여형은 1일 1 또는 2회 투여할 수 있다. 투여량 및 투여 횟수는 담당의의 판단에 따라서 조절될 것이다. 경구 투여의 경우에 전형적으로 권장되는 1일 투여량 섭생은 약 1.0mg/일 내지 약 1,000mg/일을 단일 용량으로 투여하거나 수 회분으로 나누어 투여하는 것이다.

몇몇 유용한 용어는 다음에 기재되어 있다:

캅셀제는 활성 성분을 포함하는 조성물을 보유 또는 함유하기 위한, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐 알코올, 또는 변성 젤라틴 또는 전분으로 만든 특수 용기 또는 봉입물을 지칭한다. 경질 쉘(shell) 캅셀제는 전형적으로, 비교적 높은 겔 강도 뼈와 돼지고기 피부 젤라틴의 블렌드로 만든다. 캅셀제 자체는 소량의 염료, 유백화제, 가소제 및 방부제를 함유할 수 있다.

정제는 활성 성분을 적합한 희석제와 함께 함유하는 압착 또는 성형된 고형의 투여형을 지칭한다. 정제는 습식 과립화, 건식 과립화 또는 조밀화에 의해 수득된 혼합물 또는 과립화물을 압착시킴으로써 제조할 수 있다.

경구용 젤은 친수성 반고형 매트릭스 내에 분산 또는 가용화된 활성 성분을 지칭한다.

구성용 산제는 물 또는 쥬스에 현탁될 수 있는 적합한 희석제와 활성 성분을 함유하는 분말 블렌드를 지칭한다.

희석제는 조성물 또는 투여형의 주요 부분을 통상적으로 구성하는 물질을 지칭한다. 적합한 희석제로는 당, 예를 들면, 락토즈, 슈크로즈, 만니톨 및 솔비톨; 밀, 옥수수, 벼 및 감자로부터 유도된 전분; 및 셀룰로즈, 예를 들면, 미세결정성 셀룰로즈가 있다. 당해 조성물 중의 희석제의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 10 내지 90%, 바람직하게는 약 25 내지 약 75%, 더욱 바람직하게는 약 30 내지 약 60%, 더욱 더 바람직하게는 약 12 내지 약 60%의 범위일 수 있다.

붕해제는 약제를 파괴 분리(붕해)시켜 이를 방출시키는 것을 도와주기 위해 해당 조성물에 부가된 물질을 지칭한다. 적합한 붕해제로는 전분; "냉수 가용성" 개질된 전분, 예를 들면, 나트륨 카복시메틸 전분; 천연 및 합성 검, 예를 들면, 로커스트 빈(locust bean), 카라야, 구아, 트라가칸드 및 한천; 셀룰로즈 유도체, 예를 들면, 메틸셀룰로즈 및 나트륨 카복시메틸셀룰로즈; 미세결정성 셀룰로즈 및 가교결합된 미세결정성 셀룰로즈, 예를 들면, 나트륨 크로스카멜로즈; 알기네이트, 예를 들면, 알긴산 및 나트륨 알기네이트; 점토, 예를 들면, 벤토나이트; 및 비등성 혼합물이 있다. 당해 조성물 내의 붕해제의 양은 이러한 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 2 내지 약 15중량%, 더욱 바람직하게는 약 4 내지 약 10중량%의 범위일 수 있다.

결합제는 분말을 함께 결합 또는 "접착"시키고, 과립을 형성시킴으로써 이들을 접착성이 되게 하므로, 제형 내에서 "접착제"로서 작용하도록 하는 물질을 지칭한다. 결합제는 희석제 또는 벌크제에서 이미 이용 가능한 접착 강도를 부가한다. 적합한 결합제로는 당, 예를 들면, 슈크로즈; 밀, 옥수수, 벼 및 감자로부터 유도된 전분; 천연 검, 예를 들면, 아카시아, 젤라틴 및 트라가칸드; 해초의 유도체, 예를 들면, 알긴산, 나트륨 알기네이트 및 암모늄 칼슘 알기네이트; 셀룰로즈성 물질, 예를 들면, 메틸셀룰로즈 및 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및 하이드록시프로필메틸셀룰로즈; 폴리비닐피롤리돈; 및 무기물, 예를 들면, 마그네슘 알루미늄 실리케이트가 있다. 당해 조성물 중의 결합제의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 2 내지 약 20중량%, 바람직하게는 약 3 내지 약 10중량%, 더욱 바람직하게는 약 3 내지 약 6중량%의 범위일 수 있다.

윤활제는 정제, 과립제 등을 압착시킨 후, 마찰이나 마모를 감소시킴으로써 상기 제형을 주형 또는 다이로부터 방출시키도록 해주기 위해, 해당 투여형에 부가된 물질을 지칭한다. 적합한 윤활제로는 금속성 스테아레이트, 예를 들면, 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트 또는 칼륨 스테아레이트; 스테아르산; 고융점 왁스; 및 수용성 윤활제, 예를 들면, 염화나트륨, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 나트륨 올레에이트, 폴리에틸렌 글리콜 및 d'l-루이신이 있다. 윤활제는 통상적으로, 압착전 가장 마지막 단계에 가하는데, 이는 이들이 과립 표면 상에 존재해야 하고, 과립과 정제 압착부 사이에 존재해야 하기 때문이다. 당해 조성물 중의 윤활제의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0.2 내지 약 5중량%, 바 람직하게는 약 0.5 내지 약 2중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.3 내지 약 1.5중량%의 범위일 수 있다.

활탁제는 케이킹을 방지하고 과립화물의 유동 특징을 개선시켜, 유동이 평활하고 균일하게 되도록 해주는 물질을 지칭한다. 적합한 활탁제로는 이산화규소 및 탈크가 있다. 당해 조성물 중의 활탁제의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0.1 내지 약 5중량%, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 2중량%의 범위일 수 있다.

착색제는 해당 조성물 또는 투여형을 착색시키는 부형제이다. 이러한 부형제에는 식품 등급의 색소, 및 점토 또는 산화알루미늄과 같은 적합한 흡착제 상에 흡착된 식품 등급의 색소가 포함될 수 있다. 이러한 착색제의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0.1 내지 약 5중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 1중량%의 범위일 수 있다.

생체내 이용 효율은 표준물 또는 대조군과 비교해서, 활성 약물 성분 또는 치료학적 잔기가, 투여된 투여형으로부터 전신 순환계 내로 흡수되는 속도 및 정도를 지칭한다.

정제를 제조하는 통상적인 방법이 공지되어 있다. 적합한 방법에는 건식 방법, 예를 들면, 직접적인 압착법 및 조밀화에 의해 생성된 과립물을 압착시키는 방법, 또는 습식 방법 또는 기타 특수 과정이 포함된다. 기타 투여형, 예를 들면, 캅셀제, 좌제 등을 제조하는 통상적인 방법이 또한 널리 공지되어 있다.

본 발명의 또 다른 양태는 C형 간염 등과 같은 질환을 치료하기 위한, 상기 언급된 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 상기 방법은 본 발명의 약제학적 조성물의 치료학적 유효량을 상기 질환(들)에 걸려 본 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함한다.

또 다른 양태에서는, 본 발명의 화합물은 단일 치료법 양상 또는 조합 치료법 양상(예: 이중 조합, 삼중 조합 등), 예를 들면, 항바이러스제 및/또는 면역조정제와 조합하여 사람에게서 HCV를 치료하는데 사용할 수 있다. 이러한 항바이러스제 및/또는 면역조정제의 예에는 리바비린(Ribavirin)(공급원: Schering-Plough Corporation, Madison, New Jersey) 및 레보비린(Levovirin™)(공급원: ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, California), VP 50406™(공급원: Viropharma, Incorporated, Exton, Pennsylvania), ISIS 14803™(공급원: ISIS Pharmaceuticals, Carlsbad, Calfornia), 헵타짐(Heptazyme™)(공급원: Ribozyme Pharmaceuticals, Boulder, Colorado), VX 497™(공급원: Vertex Pharmaceuticals, Cambridge, Massachusetts), 티모신(Thymosin™)(공급원: SciClone Pharmaceuticals, San Mateo, California), 맥사민(Maxamine™)(공급원: Maxim Pharmaceuticals, San Diego, California), 미코페놀레이트 모페틸(mycophenolate mofetil)(공급원: Hoffman-LaRoche, Nutley, New Jersey), 인터페론(예를 들면, 인터페론-알파, PEG-인터페론 알파 접합체) 등이 포함된다. "PEG-인터페론 알파 접합체"는 PEG 분자에 공유적으로 부착된 인터페론 알파 분자이다. PEG 인터페론 알파 접합체의 예로는 페길화(pegylated) 인터페론 알파-2a(예를 들면, Pegasys™란 상표명으로 시판중임) 형태의 인터페론 알파-2a(Roferon™)(공급원: Hoffman-LaRoche, Nutley, New Jersey), 페길화 인터페론 알파-2b(예를 들면, PEG-Intron™ 란 상표명으로 시판중임) 형태의 인터페론 알파-2b(Intron™)(공급원: Schering-Plough Corporation), 인터페론 알파-2c(Berofor Alpha™)(공급원: Boehringer Ingelheim, Ingelheim, Germany) 또는 천연 인터페론 알파의 컨센서스 서열의 결정에 의해 규정된 바와 같은 컨센서스 인터페론(Infergen™)(공급원: Amgen, Thousand Oaks, California)이 있다.

앞서 언급된 바와 같이, 본 발명은 또한, 당해 화합물의 토토머, 로타머, 에난티오머 및 기타 입체이성체를 포함한다. 따라서, 당업자에게 공지된 바와 같이, 본 발명의 화합물 중의 몇몇은 적합한 이성체 형태로 존재할 수 있다. 이러한 변이물도 본 발명의 범주 내에 속하는 것으로 고려된다.

본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 화합물의 제조 방법에 관한 것이다. 상기 화합물은 당해 분야에 공지된 몇몇 기술에 의해 제조할 수 있다. 대표적 방법의 예가 다음 반응식에 제시되어 있다. 다음의 예시적 반응식에는 본 발명의 몇 가지 대표적인 화합물의 제조 방법이 기재되어 있긴 하지만, 천연 아미노산과 천연이 아닌 아미노산 둘 다의 적합한 어떠한 치환도, 이러한 치환에 근거하여 목적하는 화합물을 형성할 수 있다는 것을 인지해야 한다. 이러한 변이물도 본 발명의 범주 내에 속하는 것으로 고려된다.

다음 반응식, 제조 실시예 및 실시예에 관한 기재에 사용된 약어는 다음과 같다:

THF: 테트라하이드로푸란

DMF: N,N-디메틸포름아미드

EtOAc: 에틸 아세테이트

AcOH: 아세트산

HOOBt: 3-하이드록시-1,2,3-벤조트리아진-4(3H)-온

EDCl: 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드

NMM: N-메틸모르폴린

ADDP: 1,1'-(아조디카보빌)디피페리딘

DEAD: 디에틸아조디카복실레이트

MeOH: 메탄올

EtOH: 에탄올

Et₂O: 디에틸 에테르

DMSO: 디메틸 설폭사이드

HOBt: N-하이드록시벤조트리아졸

PyBrOP: 브로모-트리스-피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트

DCM: 디클로로메탄

DCC: 디사이클로헥실카보디이미드

TEMPO: 2,2,6,6-테트라메틸-1-피페리디닐옥시

Phg: 페닐글리신

Chg: 사이클로헥실글리신

Bn: 벤질

Bzl: 벤질

Et: 에틸

Ph: 페닐

iBoc: 이소부톡시카보닐

iPr: 이소프로필

^tBu 또는 Bu^t: 3급-부틸

Boc: 3급-부틸옥시카보닐

Cbz: 벤질옥시카보닐

Cp: 사이클로펜틸디에닐

Ts: p-톨루엔설포닐

Me: 메틸

HATU: O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트

DMAP: 4-N,N-디메틸아미노피리딘

Bop: 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스(디메틸아미노)헥사플루오로포스페이트.

일반적인 제조 반응식:

다음 반응식에는 중간체 빌딩 블록의 합성 방법이 기재되어 있다:

중간체의 제조:

제조 실시예 1:

단계 1: 화합물(1.1)

-20℃에서 DMF(15ml) 및 CH₂Cl₂(15ml) 중의 화합물(1.08)(3.00g, 12.0mmol)[참조: S.L. Harbeson et al., J. Med. Chem. 37 No. 18(1994) 2918-2929]의 교반된 용액에 HOOBt(1.97g, 12.0mmol), N-메틸 모르폴린(4.0ml, 36.0mmol) 및 EDCl(2.79g, 14.5mmol)을 가하고, 10분 동안 교반시킨 다음, HCl·H₂N-Gly-OBn(2.56g, 13.0mmol)을 가한다. 이로써 생성된 용액을 -20℃에서 2시간 동안 교반시킨 다음, 냉장고에서 밤새 유지시키고, 건조 농축시킨 후, EtOAc(150ml)로 희석시킨다. 이어서, 상기 EtOAc 용액을 포화 NaHCO₃, H₂O, 5%-H₃PO₄, 염수로 2회 세척하고, Na₂SO₄ 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음 건조 농축시켜 화합물(1.09)(4.5g, 94%)을 수득한다. LRMS m/z MH⁺=395.1.

단계 B: 화합물(1.1)

무수 에탄올(300ml) 중의 화합물(1.09)(7.00g, 17.8mmol)의 용액을 Pd- C(300mg, 10%)의 존재하 수소 대기 하에 실온에서 교반시킨다. 반응 진행 과정을 tlc로 모니터한다. 2시간 후, 상기 혼합물을 셀라이트 패드를 통하여 여과시키고, 이로써 생성된 용액을 진공하에 농축시켜 화합물(1.1)(5.40g, 정량적)을 수득한다. LRMS m/z MH⁺=305.1.

제조 실시예 2

단계 A: 화합물(1.3)

상기 제조 실시예 1, 단계 B로부터의 화합물(1.1)(1당량), 화합물(1.2)(공급원: Novabiochem, Catalog No. 04-12-5147)(1.03당량), HOOBt(1.03당량), N-메틸모르폴린(2.2당량) 및 디메틸포름아미드(70ml/g)의 혼합물을 -20℃에서 교반시킨다. EDCl(1.04당량)을 가하고, 반응물을 48시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 5% 수성 KH₂PO₄에 따라 붓고 에틸 아세테이트로 추출한다(2x). 합한 유기물을 찬 5% 수성 K₂CO₃로 세척한 다음, 5% 수성 KH₂PO₄로 세척한 후 염수로 세척하고, 유기 층을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시킨다. 혼합물을 여과시킨 다음, 증발시키고, 여액을 진공 하에 건조시키며, 잔사를 Et₂O-헥산으로 연마하고 여과시켜 표제 화합물을 수득한 다(1.3)(86% 수율).

C₂₅H₃₉N₃O₇(493.60), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=494.3.

단계 B: 화합물(1.4)

제조 실시예 2, 단계 A로부터의 화합물(1.3)(3.0g)을 4N HCl/디옥산(36ml)으로 처리하고, 실온에서 7분 동안 교반시킨다. 이 혼합물을 1.5L의 찬(5℃) 헥산에 따라 붓고, 교반시킨 다음, 0.5시간 동안 차게 놓아둔다. 이 혼합물을 건조 대기 하에 흡인-여과시키고, 수집된 고체를 추가로 건조시켜 표제 화합물(1.4)(2.3g, 88% 수율)을 수득한다:

제조 실시예 3

화합물(1.5)

제조 실시예 2, 단계 A로부터의 화합물(1.3)을 본질적으로 다음 제조 실시예 7, 단계 A에서와 동일한 방식으로 처리하여 화합물(1.5)을 수득한다.

제조 실시예 4

화합물(1.6)

제조 실시예 3으로부터의 화합물(1.5)을 본질적으로 제조 실시예 2, 단계 B에서와 동일한 방식으로 처리하여 화합물(1.6)을 수득한다.

제조 실시예 5

단계 A: 화합물(2.09)

-20℃에서 무수 DMF(200ml) 및 CH₂Cl₂(150ml) 중의 디메틸아민 하이드로클로라이드(1.61g, 19.7mmol), N-Boc-페닐글리신, 화합물(2.08)(4.50g, 17.9mmol, Bachem Co. #A-2225), HOOBt(3.07g, 18.8mmol) 및 EDCl(4.12g, 21.5mmol)의 용액에 NMM(5.90ml, 53.7mmol)을 가한다. 이 온도에서 30분 동안 교반시킨 후, 반응 혼합물을 냉동고에서 밤새(18시간) 유지시킨다. 이어서, 이를 실온으로 가온시키고, EtOAc(450ml), 염수(100ml) 및 5% H₃PO₄(100ml)을 가한다. 층을 분리시킨 후, 유기 용액을 5% H₃PO₄(100ml), 포화 중탄산나트륨 수용액(2 X 150ml), 물(150ml) 및 염 수(150ml)로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공하에 농축시켜 화합물(2.09)(4.86g)을 백색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제없이 사용한다.

단계 B: 화합물(2.1)

제조 실시예 5, 단계 A로부터의 화합물(2.09)(4.70g, 조)을 4N HCl(60ml, 240mmol)에 용해시키고, 이로써 생성된 용액을 실온에서 교반시킨다. 이 반응의 진행 과정을 TLC로 모니터한다. 4시간 후, 상기 용액을 진공하에 농축시켜 백색 고체로서 화합물(2.1)을 수득하고, 이를 추가의 정제없이 다음 단계에 사용한다. LRMS m/z MH⁺=179.0.

제조 실시예 6

단계 A: 화합물(2.2)

제조 실시예 2, 단계 A와 본질적으로 동일한 방식으로, 페닐글리신 t-부틸 에스테르 하이드로클로라이드 대신 페닐글리신 N,N-디메틸아미드 하이드로클로라이 드를 사용하여, 화합물(2.2)을 제조한다: 질량 스펙트럼 (FAB) M+1=465.3.

단계 B: 화합물(2.3)

단계 A로부터의 화합물(2.2)(1.85g)을 실온에서 1시간 동안 4N HCl/디옥산(50ml)과 반응시킨다. 이 혼합물을 20℃ 수욕에서 진공 하에 증발시키고, 이소프로필 에테르 하에 연마하며, 여과시킨 다음 건조시켜 화합물(2.3)(1.57g, 98% 수율)을 수득한다: C₁₈H₂₈N₄O₄·HCl, 질량 스펙트럼(FAB) M+1=365.3.

제조 실시예 7

단계 A: 화합물(2.4)

디클로로메탄(60ml) 중의 제조 실시예 5, 단계 A로부터의 화합물(2.2)(2.0g)의 용액을 디메틸설폭사이드(3.0ml) 및 2,2-디클로로아세트산(0.70ml)으로 처리한다. 교반된 혼합물을 5℃로 냉각시킨 다음, 1M 디사이클로헥실카보디이미드/디클로로메탄 용액(8.5ml)을 가한다. 찬 욕을 꺼내고, 혼합물을 22시간 동안 교반시킨다. 이어서, 2-프로판올(0.5ml)을 가하고, 1시간 더 교반시킨다. 이 혼합물을 여 과시킨 다음, 빙냉 0.1N NaOH(50ml), 빙냉 0.1N HCl(50ml), 5% 수성 KH₂PO₄, 및 포화 염수로 세척한다. 유기 용액을 무수 황산마그네슘 상으로 건조시킨 다음 여과시킨다. 여액을 증발시키고, 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 화합물(2.3)(1.87g, 94% 수율)을 수득한다: C₂₃H₃₄N₄O₆, 질량 스펙트럼(FAB) M+1=463.3.

단계 B: 화합물(2.5)

제조 실시예 2, 단계 B와 본질적으로 동일한 방식으로, 화합물(2.5)을 제조한다.

제조 실시예 8

단계 A: 화합물(3.1)

플라스크에서, N-Cbz-하이드록시프롤린 메틸 에스테르(공급원: Bachem Biosciences, Incorporated, King of Prussia, Pennsylvania), 화합물(3.01)(3.0g), 톨루엔(30ml) 및 에틸 아세테이트(30ml)를 합한다. 이 혼합물을 격렬하게 교반시킨 다음, NaBr/물(1.28g/5ml)의 용액을 가한다. 이에, 2,2,6,6-테 트라메틸-1-피페리디닐옥시 자유 라디칼(TEMPO, 17mg; 공급원: Aldrich Chemicals, Milwaukee, Wisconsin)를 가한다. 이러한 교반된 혼합물을 5℃로 냉각시킨 다음, 제조된 산화제 용액[시판용 표백제, Clorox®(18ml), NaHCO₃(2.75g), 및 40ml를 구성하기 위한 물]을 0.5시간에 걸쳐 적가한다. 이에 2-프로판올(0.2ml)을 가한다. 유기 층을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 2% 나트륨 티오설페이트로 세척한 다음, 포화 염수로 세척한다. 유기 용액을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음, 여액을 진공 하에 증발시켜 후속 반응에 적합한 담황색 검(2.9g, 97% 수율)을 수득한다: C₁₄H₁₅NO₅(277.28), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=278.1.

단계 B: 화합물(3.2)

상기 단계 A로부터의 화합물(3.1)(7.8g)을 디클로로메탄(100ml)에 용해시키고, 15℃로 냉각시킨다. 이 혼합물에 먼저, 1,3-프로판디티올(3.1ml)을 가한 다음, 신선하게 증류된 삼불화붕소 에테레이트(3.7ml)를 가한다. 이 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시킨다. 격렬하게 교반시키는 동안, K₂CO₃/물(2g/30ml) 용액을 조심스럽게 가한 다음, 포화 NaHCO₃(10ml)를 가한다. 유기 층을 수성 층(pH 약 7.4)으로부터 분리시키고, 물(10ml)로 세척한 다음 염수로 세척한다. 유기 용액을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며, 진공 하에 증발시킨다. 잔사를 톨루엔으로 용출시킨 다음, 헥산-Et₂O 구배(2:3 내지 0:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 갈색 오일(7.0g, 68% 수율)을 수득한다: C₁₇H₂₁NO₄S₂(367.48), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=368.1.

단계 C: 화합물(3.3)

20℃에서 아세토니트릴(800ml) 중의 상기 단계 B로부터의 화합물(3.2)(45g)의 용액을 신선하게 증류된 요오도트리메틸실란(53ml)으로 한번에 처리한다. 이 반응물을 30분 동안 교반시킨 다음, 신선하게 제조된, 디-t-부틸디카보네이트(107g), 에틸 에테르(150ml) 및 디이소프로필에틸아민(66.5ml)의 용액에 따라 붓는다. 이 혼합물을 30분 동안 교반시킨 다음, 헥산으로 세척한다(2 x 500ml). 에틸 아세테이트(1000ml)를 하부 아세토니트릴 층에 가한 다음, 이 층을 10% 수성 KH₂PO₄(2 x 700ml) 및 염수로 세척한다. 여액을 25℃ 수욕에서 진공 하에 증발시키고, 신선한 에틸 아세테이트(1000ml)에 흡수시키며, 0.1N HCl, 0.1N NaOH, 10% 수성 KH₂PO₄ 및 염수로 연속해서 세척한다. 유기 용액을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 진공 하에 증발시킨다. 잔사(66g)를 헥산(2L)으로 용출시킨 다 음, Et₂O/헥산(55:45, 2L)으로 용출시킨 후 Et₂O(2L)로 용출시키면서 실리카 겔(2kg) 상에서 크로마토그래피하여 유기 검을 수득하는데, 이는 정치시 서서히 결정화된다(28g, 69% 수율): C₁₄H₂₃NO₄S₂(333.46), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=334.1.

단계 D: 화합물(3.4)

20℃에서 디옥산(150ml) 중의 상기 단계 C로부터의 화합물(3.3)(11g)의 용액을 1N 수성 LiOH(47ml)로 처리하고 30시간 동안 교반시킨다. 이 혼합물을 30℃ 수욕에서 진공 하에 농축시켜 용적을 절반으로 한다. 나머지를 물(300ml)로 희석시키고, Et₂O(2 x 200ml)로 추출한다. 12N HCl(3-4ml)를 사용하여 수성 층을 pH 약 4로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하며, 염수로 세척한다. 유기 용액을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며 진공 하에 증발시켜 화합물(3.4)(8.1g, 78%)을 수득한다: C₁₃H₂₁NO₄S₂(319.44), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=320.1.

단계 E: 화합물(3.5)

디옥산(5ml) 중의 상기 단계 C로부터의 화합물(3.3)(1g)의 용액에 4N HCl-디 옥산 용액(50ml)을 가한다. 이 혼합물을 1시간 동안 격렬하게 교반시킨다. 혼합물을 25℃ 수욕에서 진공 하에 증발시킨다. 잔사를 Et₂O로 연마하고, 여과시켜 표제 화합물(0.76g, 93% 수율)을 수득한다: C₉H₁₅NO₂S₂·HCl(269.81), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=234.0.

제조 실시예 9

단계 A: 화합물(3.6)

프로판 디티올을 에탄 디티올로 대체하면서, 본질적으로 제조 실시예 8, 단계 B와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(3.6)을 수득한다.

단계 B: 화합물(3.7)

화합물(3.2)을 화합물(3.6)로 대체하면서, 본질적으로 제조 실시예 8, 단계 C와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(3.7)을 수득한다.

단계 C: 화합물(3.8)

화합물(3.3)을 화합물(3.7)로 대체하면서, 본질적으로 제조 실시예 8, 단계 D와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(3.8)을 수득한다.

단계 D: 화합물(3.9)

화합물(3.3)을 화합물(3.7)로 대체하면서, 본질적으로 제조 실시예 8, 단계 E와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(3.9)을 수득한다.

제조 실시예 10

단계 A: 화합물(4.1)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.1)을 제조한다: C₃₃H₄₈N₄O₉S₂(708.89).

단계 B: 화합물(4.2)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 B와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.2)을 제조한다: 질량 스펙트럼(FAB) M+1=609.3.

단계 C: 화합물(4.3)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.3)을 제조한다: C₄₁H₆₁N₅O₁₀S₂(708.89), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=709.3.

단계 D: 화합물(4.4)

본질적으로 제조 실시예 7, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.4)을 제조한다.

제조 실시예 11

단계 A: 화합물(4.5)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.5)을 제조한다.

단계 B: 화합물(4.6)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 B와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.6)을 제조한다.

단계 C: 화합물(4.7)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 제조 실시예 12로부터의 화합물(4.9)을 상기 단계 B로부터의 화합물(4.6)과 반응시켜 화합물(4.7)을 제조한다.

단계 D: 화합물(4.8)

본질적으로 제조 실시예 7, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(4.8)을 제조한다.

제조 실시예 12

화합물(4.9)

5℃에서 L-사이클로헥실글리신(4.02)(1.0당량), 디메틸포름아미드(20ml/g) 및 디이소프로필에틸아민(1.1당량)의 용액을 이소부틸 클로로포르메이트(4.01)(1.1당량)으로 처리한다. 냉욕을 꺼내고 이를 6시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 5% 수성 KH₂PO₄에 따라 붓고 에틸 아세테이트로 추출한다(2x). 합한 유기물을 찬 5% 수성 K₂CO₃로 세척한 다음, 5% 수성 KH₂PO₄로 세척한 후 염수로 세척하고, 유기 층을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시킨다. 혼합물을 여과시킨 다음, 여액을 진공 하에 증발시키며, 잔사를 필요한 경우 크로마토그래피하거나 또는 Et₂O-헥산으로 연마하고 여과시켜 표제 화합물(4.9)을 수득한다: C₁₃H₂₃NO₄(257.33).

제조 실시예 13

화합물(13.1)

L-사이클로헥실글리신(4.02)을 L-O-벤질트레오닌(13.02)[참조: Wang et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, (1997) No. 5, 621-624]으로 대체하면서, 본질적으로 제조 실시예 12와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(13.1)을 제조한다: C₁₆H₂₃NO₅(309.36), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=310.2.

제조 실시예 14

제조 실시예 11, 단계 D로부터의 화합물(4.8)(1.0g)을 무수 트리플루오로아세트산-디클로로메탄(1:1, 50ml)의 용액과 2시간 동안 반응시킨다. 이 용액을 크실렌(100ml)으로 희석시키고 진공 하에 증발시킨다. 잔사를 Et₂O로 연마하고, 여과시켜 표제 화합물(5.1)(0.9g)을 수득한다: C₃₇H₅₃N₅O₉S₂(775.98), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=776.5.

단계 B: 화합물(5.2)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일하게 수행하여, 화합물(5.1)을 암모니아(0.5M, 1,4-디옥산 용액)와 반응시켜 표제 화합물(5.2)을 수득한다: C₃₇H₅₄N₆O₈S₂(774.99), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=775.4.

제조 실시예 15

제조 실시예 14, 단계 A로부터의 화합물(5.1)(0.15g), N,N-디메틸아민(2M THF 용액 0.12ml), 디메틸포름아미드(10ml) 및 PyBrOP 커플링 시약(0.11g)의 혼합물을 5℃로 냉각시킨 다음, 디이소프로필에틸아민(DIEA 또는 DIPEA, 0.12ml)을 가한다. 이 혼합물을 1분 동안 차게 교반시킨 다음, 실온에서 6시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 찬 5% 수성 H₃PO₄(50ml)에 따라 붓고 에틸 아세테이트로 추출한다(2x). 합한 유기물을 찬 5% 수성 K₂CO₃로 세척한 다음, 5% 수성 KH₂PO₄로 세척한 후 염수로 세척한다. 유기 용액을 무수 MgSO₄ 상으로 건조키고, 여과시킨 다음, 진공 하에 증발시킨다. 잔사를 MeOH-CH₂Cl₂로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물(5.3)을 수득한다: C₃₉H₅₈N₆O₈S₂(803.05), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=803.5.

제조 실시예 16

단계 A: 화합물(6.2)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(6.1) 하이드록시프롤린 벤질 에스테르 하이드로클로라이드를 제조 실시예 12로부터의 화합물(4.9)과 반응시켜 표제 화합물(6.2)을 수득한다: C₂₅H₃₆N₂O₆(460.56), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=461.2.

단계 B: 화합물(6.3)

본질적으로 제조 실시예 8과 동일한 과정을 수행하여, 화합물(6.3)을 제조한다: C₂₅H₃₄N₂O₆(458.55), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=459.2.

단계 C: 화합물(6.4)

단계 B로부터의 화합물(6.3)(1g), 10% Pd/C(0.05g) 및 EtOH(100ml)의 혼합물 을 1기압 H₂ 하에 6시간 동안 교반시킨다. 이 혼합물을 여과시키고, 진공 하에 건조 증발시켜 표제 화합물(6.4)(0.77g)을 수득한다: C₁₈H₂₈N₂O₆(368.42), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=369.2.

제조 실시예 17

단계 A: 화합물(7.1)

본질적으로 제조 실시예 2, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 제조 실시예 16, 단계 C로부터의 화합물(6.4)을 제조 실시예 6, 단계 B로부터의 화합물(2.3)과 반응시켜 화합물(7.1)을 수득한다: C₃₆H₅₄N₆O₉(714.85), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=715.9.

단계 B: 화합물(7.2)

본질적으로 제조 실시예 7, 단계 A와 동일한 과정을 수행하여, 화합물(7.1) 을 반응시켜 화합물(7.2)을 수득한다: C₃₆H₅₂N₆O₉(712.83), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=713.5.

단계 C: 화합물(7.3)

본질적으로 제조 실시예 8, 단계 B와 동일한 과정을 수행하여, 상기 단계 B로부터의 화합물(7.2)을 1,4-부탄디티올과 반응시켜 표제 화합물(7.3)을 수득한다: C₄₀H₆₀N₆O₈S₂(817.07), 질량 스펙트럼(FAB) M+1=817.5.

상기 언급된 과정을 사용하여, 부착된 표 2의 화합물을 제조한다. 본원에 부착된 모든 표 뿐만 아니라 본원 명세서의 실시예 및 반응식에 일반적으로 인지되는 바와 같이, 실시예 및 표 중의 화학 구조식 내에서 채워지지 않은 원자가를 나타내는 모든 개방-말단 질소 원자는 NH를 지칭하거나, 또는 말단 질소의 경우에는, -NH₂를 지칭한다. 유사하게, 실시예 및 표 중의 화학 구조식 내에서 채워지지 않은 원자가를 나타내는 모든 개방-말단 산소 원자는 -OH를 지칭한다.

고체 상 합성:

고체 상 커플링 반응에 대한 일반적인 과정:

바닥에 폴리프로필렌 프릿(frit)이 장착된 폴리프로필렌 주사기 카트리지로부터 작제된 반응 용기 내에서 본 합성을 수행한다. Fmoc-보호된 아미노산을 표준 고체 상 기술 하에 커플링시킨다. 각 반응 용기에 출발 Fmoc-시버(Sieber) 수지 100mg(대략 0.03mmol)을 부하한다. 이 수지를 DMF 2ml 분획으로 세척한다(2회). DMF 중의 피페리딘의 20% v/v 용액 2ml로 20분 동안 처리함으로써 상기 Fmoc 보호 그룹을 제거한다. 이 수지를 DMF 2ml 분획으로 세척한다(4회). Fmoc-아미노산 0.1mmol, HATU[O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트] 0.1mmol 및 DIPEA(N,N-디이소프로필에틸아민) 0.2mmol을 사용하여, 커플링을 DMF(2ml)에서 수행한다. 2시간 동안 진탕시킨 후, 반응 용기를 탈수시키고, 수지를 DMF 2ml 분획으로 세척한다(4회). 그 다음 Fmoc-아미노산 또는 캡핑 그룹을 사용하여 커플링 주기를 반복한다.

고체 상 데스-마틴 산화 반응에 대한 일반적인 과정:

바닥에 폴리프로필렌 프릿이 장착된 폴리프로필렌 주사기 카트리지로부터 제작된 반응 용기 내에서 본 합성을 수행한다. 수지-결합된 하이드록시 화합물(대략 0.03mmol)을 DCM 2ml 중의 데스-마틴 퍼요오디난 0.12mmol 및 t-BuOH 0.12mmol 용액으로 4시간 동안 처리한다. 수지를 DCM, THF 중의 iPrOH의 20% v/v 용액 2ml 분획, 수중 THF의 50% v/v 용액(4회), THF의 50% v/v 용액(4회) 및 DCM 50% v/v 용액(4회)으로 세척한다.

제조 실시예 18

N-Fmoc-2',3'-디메톡시페닐글리신[화합물(901)]의 제조

수(15ml) 중의 시안화칼륨(1.465g, 22.5mmol) 및 탄산암모늄(5.045g, 52.5mmol)의 용액에 에탄올(15ml) 중의 2,3-디메톡시벤즈알데히드 901A(2.5g, 15mmol)의 용액을 가한다. 반응 혼합물을 40℃에서 24시간 동안 가열한다. 이 용액을 감압 하에 증발시킴으로써 이의 용적을 10ml로 감소시킨다. 진한 염산(15ml)을 가하고, 화합물 901B를 백색 침전물로서 수득한다. 화합물을 901B를 여과시켜 분리한다(2.2g, 9.3mmol). 화합물 901B를 10% w/w 수성 수산화나트륨 용액(15ml)에 용해시키고, 이로써 생성된 용액을 환류 하에 24시간 동안 가열한다. 진한 염산을 가하고, pH를 중성(pH 7)으로 조정한다. 이로써 생성된, 화합물 901C를 함유하는 용액을 감압 하에 증발시킨다. 잔사를 5% w/w 중탄산나트륨 수용액(150ml)에 용해시킨다. 이 용액을 빙욕에서 0℃로 냉각시키고 1,4-디옥산(30ml) 및 1,4-디옥 산(30ml) 중의 9-플루오레닐메틸 석신이미딜 카보네이트(2.7g, 8mmol)의 용액을 0℃에서 가한다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 실온에서 24시간 동안 교반시킨다. 1,4-디옥산을 감압 하에 증발시킨다. 수용액을 디에틸 에테르로 세척한다. 진한 염산을 가하고, pH를 산성(pH 1)으로 조정한다. 에틸 아세테이트를 가하고, 유기 층을 물 및 염수로 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨다. 용매를 감압하에 증발시켜 목적하는 화합물 901을 백색 발포성 고체로서 수득한다(3.44g, 7.9mmol). MS(LCMS-전자 분무) 434.1 MH⁺.

제조 실시예 19

화합물(801)

드라이 아이스-아세톤 욕에서 -30℃로 냉각된 무수 DCM(22ml) 중의 N-Fmoc-페닐알라닌 801A(5g, 12.9mmol)의 용액에 N-메틸피롤리딘(1.96ml, 16.1mmol) 및 메틸 클로로포르메이트(1.2ml, 15.5mmol)를 순차적으로 가한다. 이 반응 혼합물을 -30℃에서 1시간 동안 교반시키고, 무수 DCM(8ml) 중의 N,O-디메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(1.51g, 15.5mol) 및 N-메틸피롤리딘(1.96ml, 16.1mmol)의 용액을 가한다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 실온에서 밤새 교반시킨다. 톨루엔을 가하고, 유기 층을 묽은 염산, 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상으로 건조시킨다. 용매를 감압 하에 증발시켜 화합물 801B(4g, 9.29mmol)을 수득한다.

드라이 아이스-아세톤 욕에서 -20℃로 냉각된 무수 톨루엔(8ml) 중의 Red-Al(6.28ml, 21.4mmol)의 용액에 무수 톨루엔(12ml) 중의 화합물 801B(4g, 9.29mmol)의 용액을 가한다. 이 반응 혼합물을 -20℃에서 1.5시간 동안 교반시킨다. 유기 층을 묽은 염산, 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상으로 건조시킨다. 용매를 감압 하에 증발시키고 조 생성물 801C를 추가의 정제 없이 다음 반응에 사용한다.

헥산(15ml) 중의 화합물 801C(대략 9.29mmol)의 용액에 수(4ml) 중의 시안화칼륨(24mg, 0.37mmol) 및 테트라부틸암모늄 요오다이드(34mg, 0.092mmol)의 용액, 및 아세톤 시아노하이드린(1.27ml, 13.9mmol)을 순차적으로 가한다. 이 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반시킨다. 에틸 아세테이트를 가하고, 유기 층을 물 및 염수로 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상으로 건조시킨다. 용매를 감압 하에 증발시켜 화합물 801D(2.4g, 6.03mmol)을 수득한다.

1,4-디옥산(11ml) 중의 화합물 801D(2.4g, 6.03mmol)의 용액에 진한 염산(11ml)을 가한다. 이 반응 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열한다. 에틸 아세테이트(25ml) 및 물(25ml)을 가한다. 유기 층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트 륨 상으로 건조시킨다. 용매를 감압 하에 증발시켜 목적하는 화합물 801을 백색 발포성 고체(2g, 4.8mmol)로서 수득한다. MS(LCMS-전자 분무) 418.1 MH⁺.

[반응식 8]

실시예(301J):

반응식 8: 화합물(301J)

Fmoc-시버 수지 100mg(0.03mmol)으로 출발한 고체 상 커플링 반응에 대한 일반적인 과정에 따라서, 수지 결합된 화합물 301B, 301C, 301D, 301E, 301F 및 301G를 제조한다. 수지 결합된 화합물 301G를 고체 상 데스-마틴 산화 반응에 대한 일반적인 과정에 따라서, 수지 결합된 화합물 301H로 산화시킨다. 수지 결합된 화합물 301H를 DCM 중의 TFA 2% v/v 용액 4ml로 5분 동안 처리한다. 여액을 AcOH 1ml에 가하고, 용액을 진공 원심분리시킴으로써 농축시켜 화합물 301J(0.0069g, 29% 수율)를 제공한다. MS(LCMS-전자 분무) 771.2 MH⁺.

상기 언급된 고체 상 합성 기술을 사용하고, 화학식 1의 화합물 내의 각종 작용기에 대한 다음 잔기를 사용하여, 표 3 내의 화합물을 제조한다:

[표 3]

고체 상 합성에 의해 제조된 화합물

제조된 부가의 화합물 및 이들의 활성(Ki*) 범위는 첨부된 표 4 및 5에 제시되어 있다. 표 4 및 5의 화합물을 제조하기 위해 사용된 과정이 다음에 요약되어 있다.

I) 표 4 및 5 중의 화합물에 대한 중간체의 합성

실시예 I: 4,4-디메틸 프롤린 메틸 에스테르(H-Pro(4,4-디Me)-OMe)의 합성

단계 1: 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-메틸-L-피로글루타메이트(Boc-PyroGlu(4-메틸)-OtBu)의 합성:

-78℃에서 교반하면서, THF(200ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-피로글루타메이트(11.5g, 40mmol)의 용액에 THF 중의 리튬 헥사메틸디실라지드의 1M 용액(42ml, 42mmol)을 5분에 걸쳐 적가한다. 30분 후, 메틸요오다이드(3.11ml, 50mmol)를 가한다. -78℃에서 2시간 후, 냉각 욕을 꺼내고, 50% 포화 수성 염화암모늄(200ml)을 가한다. 이 용액을 20분 동안 교반시킨 다음, 에테르로 추출한다(3 x 200ml). 합한 유기 층을 염수(200ml)로 세척하고, 건조시키며(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 1:1 에틸 아세테이트/헥산으로 크로마토그래피하여 Boc-PyroGlu(4-메틸)-OtBu(10.6g, 35.4mmol, 88%)를 이성체의 혼합물(2:1 시스 대 트랜스)로서 수득한다.

단계 2: 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4,4-디메틸-L-피로글루타메이트(Boc-PyroGlu(4,4-디메틸)-OtBu)의 합성:

-78℃에서 교반하면서, 테트라하이드로푸란(20ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-메틸-L-피로글루타메이트(1.2g, 4.0mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란 중의 리튬 헥사메틸디실라지드의 1M 용액(4.4ml, 4.4mmol)을 5분에 걸쳐 적가한다. 30분 후, 메틸요오다이드(0.33ml, 5.2mmol)를 가한다. -78℃에서 3시간 후, 냉각 욕을 꺼내고, 50% 포화 수성 염화암모늄(40ml)을 가한다. 이 용액을 20분 동안 교반시킨 다음, 에테르로 추출한다(2 x 50ml). 합한 유기 층을 물(2 x 25ml), 포화 중탄산나트륨(2 x 25ml), 염수(50ml)로 세척하고, 건조시키며(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시켜 Boc-PyroGlu(4,4-디메틸)-OtBu(0.673g, 54%)를 수득한다.

단계 3: 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4,4-디메틸프롤린(Boc-Pro(4,4-디메틸)-OtBu)의 합성:

공지된 과정의 변형법[참조: Pedregal, C.; Ezquerra, J.; Escribano, A.; Carreno, M.C.; Garcia Ruano, J.L. Tetrahedron Letters 1994, 35(13), 2053- 2056].

-78℃에서 교반하면서, 테트라하이드로푸란(5ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4,4-디메틸피로글루타메이트(2.0mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란 중의 리튬 트리에틸보로하이드라이드의 1M 용액(2.4ml, 2.4mmol)을 5분에 걸쳐 적가한다. 30분 후, 냉각 욕을 꺼내고, 포화 수성 중탄산나트륨(5ml)을 가한다. 이 반응 혼합물을 빙수 욕에 침지시키고, 30% 수성 과산화수소(10방울)를 가한다. 용액을 0℃에서 20분 동안 교반시킨 다음, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 테트라하이드로푸란을 제거한다. 수용액을 물(10ml)로 희석시키고, 디클로로메탄으로 추출한다(3 x 40ml). 유기 층을 건조시키며(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 디클로로메탄(20ml) 및 트리에틸실란(310㎕, 2.0mmol)에 용해시킨 다음, -78℃로 냉각시키고, 삼불화붕소 디에틸에테레이트(270㎕, 2.13mmol)을 적가한다. 교반을 30분 동안 지속시키고, 이때 부가의 트리에틸실란(310㎕, 2.0mmol) 및 삼불화붕소 디에틸에테레이트(270㎕, 2.13mmol)를 가한다. -78℃에서 2시간 더 교반시킨 후, 냉각 욕을 꺼내고 포화 수성 중탄산나트륨(4ml)을 가한다. 5분 후, 상기 혼합물을 디클로로메탄(3 x 40ml)으로 추출한다. 유기 층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시켜 Boc-Pro(4,4-디메틸)-OtBu를 수득한다.

단계 4: 4,4-디메틸프롤린(H-Pro(4,4-디메틸)-OH)의 합성:

디클로로메탄(5ml) 및 트리플루오로아세트산(5ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4,4-디메틸프롤린의 용액을 실온에서 5시간 동안 교반시킨다. 이 용액을 농축시키고, 고 진공 하에 건조시킨 다음, 추가의 정제없이 다음 단계에 취한다.

단계 5: N-3급-부톡시카보닐 4,4-디메틸프롤린(Boc-Pro(4,4-디메틸)-OH)의 합성:

디옥산(7ml), 아세토니트릴(12ml) 및 디이소프로필에틸아민(700㎕, 4mmol) 중의 4,4-디메틸프롤린 트리플루오로아세트산 염(1.5mmol)의 용액에 아세토니트릴(5ml) 중의 디-3급-부틸-디카보네이트(475mg, 2.18mmol)의 용액을 가한다. 실온에서 12시간 동안 교반시킨 후, 상기 용액을 진공 하에 농축시키고, 포화 수성 중탄산나트륨(50ml)에 용해시키며, 디에틸 에테르로 세척한다(3 x 40ml). 수성 층을 시트르산을 이용하여 pH 3으로 산성화한 다음, 디클로로메탄으로 추출한다(3 x 40ml). 합한 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨 다.

단계 6: 4,4-디메틸프롤린 메틸 에스테르 하이드로클로라이드 염(HCl·H-Pro(4,4-디메틸)-OMe)의 합성:

무수 메탄올(8ml) 중의 Boc-Pro(4,4-diMe)-OH(0.5g, 2.06mmol)의 용액에 티오닐클로라이드(448ℓ, 6.18mmol)를 적가하고, 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 무수 고체로 농축시킨다(377mg, 95%).

실시예 II: N-3급 부톡시카보닐-4-알킬-4-메틸 프롤린의 합성에 대한 일반적인 과정:

R 그룹이 알킬 및 벤질인 화합물을 다음 단계 1 내지 4에 따라서 합성한다:

단계 1: 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-알킬-4-메틸-L-피로글루타메이트의 합성:

-78℃에서 교반하면서, 테트라하이드로푸란(170ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-메틸-L-피로글루타메이트(10.2g, mmol)(실시예 I, 단계 1 참조)의 용액에 테트라하이드로푸란 중의 리튬 헥사메틸디실라지드의 1M 용액(37.5ml, 37.5mmol)을 5분에 걸쳐 적가한다. 40분 후, 알킬 할라이드(61.4mmol)를 가한다. -78℃에서 3시간 후, 냉각 욕을 꺼내고, 50% 포화 수성 염화암모늄(200ml)을 가한다. 이 용액을 20분 동안 교반시킨 다음, 에테르로 추출한다(2 x 200ml). 합한 유기 층을 헥산(150ml)으로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨(100ml), 물(2 x 100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 건조시키며(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 헥산 중의 20% 에틸 아세테이트를 사용하여 섬광 크로마토그래피하여 순수한 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-알킬-4-메틸-L-피로글루타메이트를 수득한다.

단계 2: 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-알킬-4-메틸프롤린의 합성:

공지된 과정의 변형법[참조: Pedregal, C.; Ezquerra, J.; Escribano, A.; Carreno, M.C.; Garcia Ruano, J.L. Tetrahedron Letters 1994, 35(13), 2053-2056].

-78℃에서 교반하면서, 테트라하이드로푸란(40ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-알킬-4-메틸피로글루타메이트(16.6mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란 중의 리튬 트리에틸보로하이드라이드의 1M 용액(20ml, 20mmol)을 10분에 걸쳐 적가한다. 120분 후, 냉각 욕을 -25℃로 가온시키고, 이때 포화 수성 중탄산나트륨(40ml)을 가한다. 이 반응 혼합물을 빙수 욕에 침지시키고, 30% 수성 과산화수소(4ml)를 가한다. 용액을 0℃에서 10분 동안 교반시킨 다음, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 테트라하이드로푸란을 제거한다. 수용액을 물(300ml)로 희석시키고, 디클로로메탄으로 추출한다(3 x 200ml). 유기 층을 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 디클로로메탄(100ml) 및 트리에틸실란(2.6ml, mmol)에 용해시킨 다음, -78℃로 냉각시키고, 삼불화붕소 디에틸에테레이트(2.2ml, mmol)을 적가한다. 교반을 1시간 동안 지속시키고, 이때 부가의 트리에틸실란(2.6ml, mmol) 및 삼불화붕소 디에틸에테레이트(2.2ml, mmol)를 가한다. -78℃에서 4시간 더 교반시킨 후, 냉각 욕을 꺼내고 포화 수성 중탄산나트륨(30ml) 및 물(150ml)을 가한다. 5분 후, 상기 혼합물을 디클로로메탄(3 x 200ml)으로 추출한다. 유기 층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시킨다.

단계 3: 4-알킬-4-메틸프롤린의 합성:

디클로로메탄(5ml) 및 트리플루오로아세트산(5ml) 중의 3급-부틸 N-3급-부톡시카보닐-4-알킬-4-메틸프롤린의 용액을 실온에서 5시간 동안 교반시킨다. 톨루엔을 가하고, 이 용액을 농축시키고, 고 진공 하에 건조시킨다.

단계 4: N-3급-부톡시카보닐 4-알킬-4-메틸프롤린의 합성:

디옥산(7ml), 아세토니트릴(12ml) 및 디이소프로필에틸아민(700㎕, 4mmol) 중의 4-알킬-4-메틸프롤린 트리플루오로아세트산 염(1.5mmol)의 용액에 아세토니트릴(5ml) 중의 디-3급-부틸-디카보네이트(475mg, 2.18mmol)의 용액을 가한다. 실온에서 12시간 동안 교반시킨 후, 상기 용액을 진공 하에 농축시키고, 포화 수성 중탄산나트륨(50ml)에 용해시키며, 디에틸 에테르로 세척한다(3 x 40ml). 수성 층을 1N 염산을 이용하여 pH 3으로 산성화한 다음, 디클로로메탄으로 추출한다(3 x 40ml). 합한 유기 층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 1% 아세트산과 함께 1:1 에틸 아세테이트/헥산을 사용하여 섬광 크로마토그래피함으로써 정제한다.

실시예 III: N-3급-부톡시카보닐 4-프로필-4-메틸프롤린의 합성:

메탄올(20ml) 중의 N-3급부톡시카보닐-4-알릴-4-메틸프롤린(400mg, 1.48mmol)(실시예 II, 단계 4 참조) 및 탄소상 10% Pd의 용액을 50psi에서 4시간 동안 수소화시킨다. 이 혼합물을 여과시킨 다음 농축시킨다.

실시예 IV: Boc-4-사이클로헥실프롤린의 합성:

메탄올(15ml) 중의 시판용 Boc-4-페닐프롤린(750mg) 및 탄소상 5% Rh(750mg)의 용액을 50psi에서 24시간 동안 수소화시킨다. 이 혼합물을 여과시킨 다음 농축시켜 생성물 730mg을 수득한다.

실시예 V: 플루오레닐메톡시카보닐-Pro(4-스피로사이클로펜탄)카복실산의 제조:

단계 1: Boc-피로글루탐산(4-알릴)-3급-부틸에스테르의 합성:

THF(175ml) 중의 시판용 N-Boc-3급-부틸 피로글루타메이트(10g, 35.1mmol)의 냉각된(-78℃) 용액에 리튬 헥사메틸디실라지드(36.8ml, 36.8mmol)를 5분에 걸쳐 가한다. 30분 동안 교반을 지속시킨다. THF(39ml) 중의 알릴 브로마이드(6.1ml, 70.2mmol)의 용액을 제1 용액에 적가한다. -78℃에서 2시간 후, 포화 염화암모늄(50ml) 용액을 서서히 가함으로써 상기 반응물을 급냉시킨다. 이어서, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 층을 분리시킨다. 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시킨 다음 농축시킨다. 2:8 에틸 아세테이트:헥산으로 섬광 칼럼 크로마토그래피를 수행하여, 생성물(6g, 53%)을 수득한다:

단계 2: N-Boc-피로글루탐산(4,4-디알릴)-3급-부틸에스테르의 합성

상기 단계 1에서 수득된 N-Boc-피로글루탐산(4-알릴)-3급-부틸 에스테르(2.68g, 8.24mmol)을 대상으로 하여, 유사한 조건 하에서 알릴 브로마이드로 제2 알킬화 반응시킨다. 15:85 에틸 아세테이트:헥산으로 섬광 크로마토그래피하여 생성물 2.13g(71%)을 청정한 오일로서 제공한다.

단계 3: Boc-Pro(4,4-디알릴)-3급-부틸에스테르의 합성:

파트 a: 테트라하이드로푸란(14ml) 중의 Boc-PyroGlu(4,4-디알릴)-3급-부틸에스테르(2.13g, 5.83mmol)의 냉각된(-78℃) 용액에 리튬 트리에틸보로하이드라이드(테트라하이드로푸란 중의 1M, 7.29ml, 7.29mmol)를 5분에 걸쳐 가한다. -78℃에서 2시간 후, 반응물을 0℃로 가온시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(20ml) 및 30% 과산화수소(20방울)를 서서히 가함으로써 상기 반응물을 급냉시킨다. 교반을 20분 동안 지속시킨다. 테트라하이드로푸란을 감압 하에 제거하고, 나머지 짙은 백색 잔사를 물(80ml)로 희석시키며, 디클로로메탄으로 3회 추출한다. 유기 층을 건조시키며, 여과시킨 다음 농축시키고, 이를 추가의 정제없이 다음 단계에 취한다.

파트 b: 디클로로메탄(14ml) 중의 파트 (a)에서 수득된 생성물에 트리에틸실란(931㎕, 5.83mmol)을 가한 다음, 삼불화붕소 디에틸에테레이트(776㎕, 6.12mmol)을 가한다. 30분 후, 부가의 트리에틸실란(931㎕, 5.83mmol) 및 삼불화붕소 디에틸에테레이트(776㎕, 6.12mmol)를 가하고, 반응물을 -78℃에서 3시간 더 교반시키며, 포화 중탄산나트륨 용액 및 물을 서서히 가함으로써 상기 반응물을 급냉시킨다. 상기 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하고, 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 헥산 중 15% 에틸 아세테이트에서 섬광 칼럼 크로마토그래피하여 무색 오일을 1.07(57%) 수득한다:

단계 4: Boc-Pro(4-스피로사이클로펜텐)-3급-부틸에스테르의 합성:

디클로로메탄(66ml) 중의 Boc-Pro(4,4-디알릴)-3급-부틸에스테르(1.07g, 3.31mmol)에 5% 비스(트리사이클로헥실포스핀)벤질리덴 루테늄 IV 디클로라이드(Grubbs 촉매)를 가하고, 이 혼합물을 환류 하에 1.5시간 동안 가열한다. 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 헥산 중의 15% 에틸아세테이트로 섬광 칼럼 크로마토그래피함으로써 정제한다. 황색 오일을 수득한다(0.57g, 53%):

단계 5: Boc-Pro(4-스피로사이클로펜탄)-3급-부틸에스테르의 합성:

메탄올(18ml), 물(4ml) 및 아세트산(4ml) 중의 Boc-Pro(4-스피로사이클로펜텐)-3급-부틸에스테르(1.12g)의 용액을 파르(Parr) 진탕기 속에 놓아두고, 탄소 상 10% 팔라듐(300mg)의 존재 하에 35psi에서 3시간 동안 수소화 반응시킨다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 무색 오일로 농축시킨다(1.26g):

단계 6: Fmoc-Pro(4-스피로사이클로펜탄)-카복실산의 합성:

Boc-Pro(4-스피로사이클로펜탄)-3급-부틸에스테르(1.26g, 3.9mmol)를 디클로로메탄(10ml) 및 트리플루오로아세트산(15ml)로 3시간 동안 처리한다. 반응 혼합물을 농축시키고, 수득된 황색 오일을 물(6ml)에 용해시킨다. 디옥산(6ml)에 용해된 플루오레닐메틸 석시닐 카보네이트(1.45g, 4.3mmol)를 나누어 적가한 다음, 탄산칼륨(2.16g, 15.6mmol)을 가한다. 반응물을 18시간 동안 교반시킨 다음 농축시 킨다. 나머지 잔사를 포화 중탄산나트륨 용액(10ml)으로 희석시키며, 디에틸 에테르(3 x 10ml)로 세척한다. 이어서, 1N 중황산나트륨 용액을 이용하여 수성 층을 pH 약 1로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 베이지색 발포체(1.3g, 100%)를 수득한다.

실시예 VI: Boc-Pro(4t-NH(Fmoc))-OH의 합성:

단계 1: N ^α -3급-부톡시카보닐-시스-4-클로로-L-프롤린 벤질 에스테르의 합성:

시판용 N-3급-부톡시카보닐-트랜스-4-하이드록시-프롤린(8.79g, 38mmol), 탄산칼륨(13.0g, 94mmol), 벤질 브로마이드(4.5ml, 38mmol) 및 디메틸포름아미드(150ml)의 혼합물을 18시간 동안 교반시킨다. 에틸 아세테이트(100ml)를 가한 후 여과시킨다. 1M HCl(100ml)을 가함으로써, 상기 백색의 혼탁한 여액을 청정하게 한다. 층을 분리시키고, 수성 층을 부가의 에틸 아세테이트(2 x 100ml)로 추출 한다. 합한 유기 층을 물(2 x 50ml)로 세척하고, 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 톨루엔을 조 벤질 에스테르에 가하고, 용액을 여과시킨 다음 재농축시킨다. 디클로로메탄(70ml) 및 사염화탄소(70ml)를 가한 다음, 트리페닐포스핀(21.11g, 80mmol)을 가한다. 반응 혼합물을 10시간 동안 교반시키고, 에탄올(7ml)로 급냉시킨 다음 5시간 더 교반시킨다. 상기 용액을 대략 100ml로 농축시킨 다음, 디클로로메탄(40ml)을 가한 후, 에테르(200ml)를 교반시키면서 가한다. 상기 용액을 4시간 동안 냉각시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 황갈색 오일을 수득하고, 이를 에테르/헥산/디클로로메탄 2:2:1을 사용하여 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 표제 화합물(9.13g, 26.9mmol, 71%)을 백색 고체로서 수득한다.

단계 2: N ^α -3급-부톡시카보닐-트랜스-4-아지도-L-프롤린 벤질 에스테르의 합성:

디메틸포름아미드(270ml) 중의 N^α-3급-부톡시카보닐-시스-4-클로로-L-프롤린 벤질 에스테르(9.0g, 26.5mmol) 및 나트륨 아지드(7.36g, 113mmol)의 용액을 75℃에서 2일 동안 가열한다. 물(100ml)을 가하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출한다(3 x 100ml). 합한 유기 층을 물(3 x 50ml)로 세척하고, 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 상기 오일을 에틸 아세테이트/헥산 1:1 을 사용하여 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 표제 화합물(8.59g, 24.8mmol, 94%)을 수득한다.

단계 3: Boc-Pro(4t-NH(Fmoc))-OH의 합성:

에탄올(500ml) 중의 N^α-3급-부톡시카보닐-트랜스-4-아지도-L-프롤린 벤질 에스테르(8.59g, 24.8mmol) 및 탄소상 10% 팔라듐(900mg)의 혼합물을 파르 수소화 장치를 사용하여 50psi에서 14시간 동안 수소화 반응시킨다. 이 혼합물을 여과시키고, 농축시키며, 메탄올(60ml)에 용해시키고, 재여과시키며 농축시켜 무색 오일을 수득한다. 이 오일을 탄산나트륨(5.31g, 50.1mmol)을 함유하는 물(53ml)에 용해시키고, 디옥산(60ml) 중의 플루오레닐메틸 석시닐 카보네이트(8.37g, 29.8mmol)의 용액을 40분에 걸쳐 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 17시간 동안 교반시킨 다음, 농축시켜 디옥산을 제거하고, 물(200ml)로 희석시킨다. 이 용액을 에테르(3 x 100ml)로 세척한다. 시트르산(경고! 발포성!)과 물(100ml)을 가함으로써, 상기 수용액의 pH를 2로 조정한다. 이 혼합물을 디클로로메탄(400ml, 100ml, 100ml)로 추출하고, 합한 유기 층을 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시켜 표제 화 합물을 수득한다.

실시예 VII: N-t-부톡시카보닐-4-트랜스-(N-플루오레닐메틸옥시카보닐 아미노메틸)-L-프롤린(Boc-Pro(4t-MeNHFmoc)-OH)의 합성:

단계 1: 3급-부톡시카보닐 시스-4-하이드록시-L-프롤린 벤질 에스테르(Boc-Pro(4-시스-OH)-OBn)의 합성:

벤젠(45ml) 및 벤질 알코올(45ml) 중의 시스-하이드록시-L-프롤린(5g, 38.1mmol)의 혼합물에 p-톨루엔설폰산 모노하이드레이트(7.6g, 40.0mmol)를 가한다. 딘-스타크(Dean-Stark) 트랩을 사용하여 물을 제거하는 동안, 상기 반응 혼합물을 125℃에서 20시간 동안 가열한다. 상기 용액을 뜨겁게 유지시키면서 여과시킨 다음, 에테르(150ml)를 가한다. 이 용액을 실온에서 3시간 동안 냉각시킨 다음 4℃에서 3시간 동안 냉각시킨다. 이로써 생성된 고체를 수집하고, 에테르(100ml) 로 세척하며, 진공 하에 1시간 동안 건조시켜 백색 고체를 13.5g 수득한다. 이 고체를 디옥산(40ml) 및 디이소프로필에틸아민(7.6ml)에 용해시킨 다음, 디-3급-부틸-디카보네이트(10g, 45.8mmol)을 5분에 걸쳐 가하는 동안, 빙욕을 사용하여 일정한 반응 온도를 유지시킨다. 실온에서 10시간 후, 반응 혼합물을 찬물(200ml)에 따라 붓고, 에틸 아세테이트로 추출한다(3 x 200ml). 합한 유기 층을 물(3 x 100ml) 및 포화 수성 염화나트륨(50ml)으로 세척하고, 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 이러한 조 생성물을 헥산 중의 40 내지 60% 에틸 아세테이트를 사용하여 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 표제 화합물(10.04g, 31.24mmol, 82%)을 수득한다.

단계 2: N-t-부톡시카보닐 시스-4-메실옥시-L-프롤린 벤질 에스테르(Boc-Pro(4-시스-OMs)-OBn)의 합성:

0℃에서 피리딘(65ml) 중의 Boc-Pro(4-시스-OH)-OBn(8.45g, 26.3mmol)의 용액에 메탄설포닐 클로라이드(3.4ml, 44mmol)을 7분에 걸쳐 적가한다. 반응 혼합물을 2시간에 걸쳐 실온으로 가온시킨 다음, 밤새 교반시킨다. 피리딘(20ml) 중의 10% 수용액을 15분에 걸쳐 가하고, 반응 혼합물을 농축시킨다. 잔사를 물에 용해 시키고, 에틸 아세테이트로 추출한다(2 x 200ml). 합한 유기 층을 물(2 x 50ml), 포화 수성 중탄산나트륨(50ml) 및 포화 수성 염화나트륨(50ml)로 세척하고, 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 생성된 잔사를 톨루엔(100ml)에 용해시키고 농축시켜 미량의 피리딘을 제거한다. 잔사를 진공 하에 30분 동안 건조시켜 표제 화합물(10.7g, 102%)을 수득한 다음, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용한다.

단계 3: N-t-부톡시카보닐 트랜스-4R-시아노-L-프롤린 벤질 에스테르(Boc-Pro(4-트랜스-CN)-OBn):

디메틸포름아미드(100ml) 중의 Boc-Pro(4-시스-OMs)-OBn(10.7g, 26.3mmol) 및 테트라부틸암모늄 시아나이드(15.0g, 56mmol)의 용액을 55℃ 하 오일 욕 속에서 28시간 동안 가열한다. 냉각 후, 물(150ml)을 가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 200ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 물(3 x 100ml) 및 포화 수성 염화나트륨(100ml)으로 세척하고, 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 생성된 잔사를 섬광 크로마토그래피(1:1 에테르/헥산)함으로써 정제한 다음 에틸 아세테이트/헥산으로부터 재결정화하여 표제 화합물(2.40g, 7.26mmol, 28%)을 제공한다.

단계 4: N-t-부톡시카보닐-4-트랜스-(N-플루오레닐메틸옥시카보닐 아미노메틸)-L-프롤린(Boc-Pro(4t-MeNHFmoc)-OH):

상기 단계 3의 화합물(2.31g, 7mmol), 물(10ml), 메탄올(85ml) 및 탄소 상 10% 팔라듐(700mg)의 혼합물을, 파르 수소화 장치를 사용하여 50psi에서 11시간 동안 수소화 반응시킨다. 이 혼합물을 여과시킨 다음 농축시킨다. 물(15ml) 및 탄산나트륨(1.5g, 14.2mmol)을 상기 잔사에 가한다. 디옥산(17ml) 중의 플루오레닐메틸 석시닐 카보네이트(2.36g, 7.0mmol)의 용액을 5분에 걸쳐 가하고, 교반을 실온에서 28시간 동안 지속시킨다. 반응물을 진공 하에 15ml 용적으로 농축시키고, 물(100ml)을 가한다. 상기 용액을 에테르(3 x 75ml)로 세척한다. 시트르산(대략 20g, 경고! 발포성!)과 물(100ml)을 가함으로써, 상기 수용액의 pH를 2로 조정한다. 이 혼합물을 디클로로메탄(4 x 100ml)로 추출하고, 합한 유기 층을 건조시키며(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 조 생성물은 3단계 정제를 필요로 하는 대부분의 불순물을 함유하고 있다. 이러한 조 생성물을 디클로로메탄(50ml) 및 트리플루오로아세트산(50ml)에 용해시키고, 5시간 동안 교반시킨 후, 농축시킨다. 잔사를 조제적 역상 HPLC함으로써 정제한다. 순수한 4-(N-플루오레닐메틸옥시카보 닐 아미노메틸)프롤린 트리플루오로아세테이트 염(1.887g, 3.93mmol)을 디옥산(10ml), 아세토니트릴(20ml) 및 디이소프로필에틸아민(1.4ml, 8mmol)에 용해시킨다. 이러한 반응 혼합물에 디옥산(5ml) 중의 디-3급-부틸디카보네이트(1.1g, 5mmol)의 용액을 가한다. 18시간 동안 교반시킨 후, 시트르산(경고: 발포성!) 및 물(100ml)을 가함으로써 상기 용액의 pH를 2로 조정한다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 150ml)로 추출하고, 합한 유기 층을 포화 수성 염화나트륨(100ml)으로 세척하며, 건조시키고(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시킨다. 조 생성물을 포화 수성 중탄산나트륨(100ml)에 용해시키고, 에테르로 세척한다(3 x 75ml). 시트르산을 가함으로써 수성 층을 pH 3으로 조정한 다음, 디클로로메탄으로 추출한다(4 x 100ml). 합한 유기 층을 건조시키고(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시켜 표제 화합물(1.373g, 2.94mmol, 42%)을 수득한다.

실시예 VIII: 3,4-이소프로필리덴프롤리노의 합성:

단계 1: 사이클로프로판화 반응[참조: Tetrahedron Lett. 1993, 34(16), 2691 and 2695]:

0℃에서 테트라하이드로푸란(60ml) 중의 이소프로필트리페닐-포스포늄 요오다이드(4.14g, 9.58mmol)의 교반 용액에 n-부틸리튬(헥산 중의 1.6M, 5.64ml, 9.02mmol)을 5분에 걸쳐 가한다. 30분 후, 테트라하이드로푸란(40ml) 중의 엔아미드[(5R,7S)-5-페닐-5,6,7,7a-테트라하이드로-6-옥사피롤리진-3-온](1.206g, 6.0mmol)[엔아미드 출발 물질의 합성에 대해서는 문헌(J. Org. Chem. 1999, 64(2), 547)을 참조할 수 있다]의 용액을 10분에 걸쳐 가한다. 10분이 더 지난 후, 냉각 욕을 꺼내고, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시킨다. 반응물을 물(400ml)에 따라 붓고, 디에틸 에테르(400ml) 및 에틸 아세테이트(2 x 400ml)로 추출한다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시킨 다음, 농축시켜 목적하는 조 생성물을 수득한다. 잔사를 3:5:2 에틸 아세테이트/헥산/메틸렌 클로라이드로 용출시키면서 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 순수한 사이클로프로판화 생성물(750mg, 3.08mmol, 51%)을 수득한다.

단계 2: 3,4-이소프로필리덴프롤리노 P[3,4-(diMe-사이클로프로필)]-알코올)의 합성[참조: J. Org. Chem. (1999) 64(2), 330]:

상기 단계 1에서 수득된 생성물(1.23g, 5.06mmol)과 리튬 수소화알루미늄(THF 중의 1.0M, 15ml, 15mmol)의 혼합물을 환류 하에 5시간 동안 가열한다. 0℃로 냉각시킨 후, 포화 수성 황산나트륨(1.5ml)을 15분에 걸쳐 적가함으로써, 나머지 수소화알루미늄을 조심스럽게 급냉시킨다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(40ml)로 희석시킨 다음, 셀라이트를 통해 여과시킨다. 여액을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키며 농축시켜 조 N-벤질 아미노알코올(1.25g)을 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 취한다. 1:1 아세트산/에틸 아세테이트(30ml) 중의 조 N-벤질 아미노알코올(1.25g, 5.06mmol)의 용액을 10% Pd/C(1g)과 함께, 파르 수소화 장치를 사용하여 50psi에서 16시간 동안 수소화 반응시킨다. 반응 혼합물을 여과시켜 상기 탄소계 촉매를 제거하고, 여액을 농축시킨다. 잔사를 물(30ml)에 용해시키고, 50% NaOH를 사용하여 pH를 13으로 조정한다. 혼합물을 에테르(3 x 60ml)로 추출한다. 합한 추출물을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키며 농축시켜 조 아미노알코올(485mg, 3.43mmol)을 수득한다. 이 물질을 추가의 정제 없이 다음 단계에 취한다.

실시예 IX: iBoc-G(Chx)-Pro(3,4-이소프로필리덴)-카복실산의 합성:

단계 1: 이소부틸옥시카보닐-사이클로헥실글리신(iBoc-G(Chx)-OH)의 합성:

아세토니트릴(320ml) 및 물(320ml) 중의 시판용 사이클로헥실글리신 하이드로클로라이드(15g, 77.4mmol)의 용액에 탄산칼륨을 가한다. 이소부틸클로로포르메이트(11.1ml, 85.1mmol)을 상기 청정한 용액에 15분에 걸쳐 가하고, 반응물을 17시간 동안 교반시킨다. 아세토니트릴을 감압 하에 제거하고, 나머지 수성 층을 에테르(100ml)로 2회 추출한다. 이어서, 6N 염산을 사용하여 수성 층을 pH 1로 산성화시키고, 디클로로메탄으로 추출한다(3 x 300ml). 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 생성물 18.64g(94%)을 백색 고체로서 수득한다.

단계 2: 이소부틸옥시카보닐-사이클로헥실글리실-3,4-이소프로필리덴프롤린(iBoc-G(Chx)-P[3,4-(diMe-사이클로프로필)]-OH)의 합성:

a) 커플링 단계

아세토니트릴(20ml) 중의 iBoc-G(Chx)-OH(890mg, 3.45mmol)의 용액에 HATU(1.33g, 3.5mmol)을 가하고, HOAt(476mg, 3.5g)을 가한 다음, 디이소프로필에틸아민(2.5ml, 14mmol)을 가한다. 2분 후, 3,4-이소프로필리덴프롤리놀(485mg, 3.43mmol)을 가하고, 반응 혼합물을 밤새 교반시킨다. 포화 수성 중탄산나트륨을 가한 다음, 에테르 및 에틸 아세테이트로 추출한다. 합한 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 1:1 에틸 아세테이트/헥산으로 용출시키면서 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 순수한 디펩티드 알코올 iBoc-G(Chx)-3,4-이소프로필리덴프롤리놀(870mg, 2.3mmol, 67%)을 수득한다.

b) 존스(Jones) 산화 단계

0℃에서 교반시키면서 아세톤(2ml) 중의 디펩티드 알코올 iBoc-G(Chx)-3,4-이소프로필리덴프롤리놀(100mg, 0.26mmol)의 용액에 존스 시약(300㎕)을 5분에 걸쳐 적가한다[존스 시약: 총 용적이 50ml가 되도록 물로 희석된 진한 황산(11.5ml) 및 삼산화크롬(13.4g)으로부터 제조됨]. 0℃에서 3시간 동안 교반시킨 후, 이소프로판올(500㎕)을 가하고, 교반을 10분 더 지속시킨다. 반응 혼합물을 물(20ml)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(3 x 70ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 건조시키고, 여과시키며, 농축시켜 디펩티드 iBoc-G(Chx)-3,4-이소프로필리덴프롤린(100mg, 0.25mmol, 96%)을 수득한다.

실시예 X: N-Cbz-3,4-메타노프롤린의 합성:

단계 1: N-벤질-3,4-메타노프롤리놀의 합성:

벤질리덴 출발 물질[참조: J. Org. Chem. 1999, 64(2), 547](4.6g, 21.4mmol)과 리튬 수소화알루미늄(THF 중의 1.0M, 64ml, 64mmol)의 혼합물을 환류 하에 5시간 동안 가열한다. 0℃로 냉각시킨 후, 포화 수성 황산나트륨(5ml)을 15분에 걸쳐 적가함으로써, 나머지 수소화알루미늄을 조심스럽게 급냉시킨다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(200ml)로 희석시킨 다음, 셀라이트를 통해 여과시킨다. 여액을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키며 농축시켜 조 N-벤질 아미노알코올(3.45g)을 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 취한다.

단계 2: N-벤질옥시카보닐-3,4-메타노프롤리놀(CBz-P(3,4-CH2)-올)의 합성:

메탄올(120ml) 및 진한 HCl(1.5ml) 중의 조 N-벤질 아미노알코올(3g, 14.76mmol)의 용액을 10% Pd/C(300mg)과 함께, 50psi에서 16시간 동안 수소화 반응시킨다. 반응 혼합물을 여과시켜 상기 탄소계 촉매를 제거하고, 여액을 농축시킨다. 잔사를 물/디옥산(100ml)에 용해시키고, 디이소프로필에틸아민(3.2ml)을 가한다. 벤질 클로로포르메이트(2.76ml, 16.2mmol)를 가하고, 반응물을 밤새 교반시킨다. 반응 혼합물을 농축시키고, 1M HCl(100ml)에 용해시키며, 에틸 아세테이트(3 x 200ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 1:3 에틸 아세테이트/헥산을 사용하여 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 N-Cbz-3,4-메타노프롤리놀(2.4g)을 수득한다.

단계 3: N-벤질옥시카보닐-3,4-메타노프롤린(CBz-P(3,4-CH2)-OH)의 합성:

0℃에서 교반시키면서 아세톤(68ml) 중의 N-CBz-3,4-메타노프롤리놀(2.2g, 8.90mmol)의 용액에 존스 시약(6.6ml)을 5분에 걸쳐 적가한다[존스 시약: 총 용적이 50ml가 되도록 물로 희석된 진한 황산(11.5ml) 및 삼산화크롬(13.4g)으로부터 제조됨]. 0℃에서 3시간 동안 교반시킨 후, 이소프로판올(11ml)을 가하고, 교반을 10분 더 지속시킨다. 반응 혼합물을 물(400ml)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(3 x 500ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상으로 건조시키고, 여과시키며, 농축시켜 N-Cbz-3,4-메타노프롤린(2.25g, 96%)을 수득한다.

실시예 XI: Boc-(6S-카보에톡시메타노)프롤린의 합성:

공개된 과정[참조: Marinozzi, M.; Nataini, B.; Ni, M.H.; Costantino, G.; Pellicciari R. IL Farmaco (1995) 50(5), 327-331]에 따라서, 표제 화합물의 합성을 수행한다.

실시예 XII: Boc-3-모르폴린 카복실산의 합성:

공개된 과정[참조: Kogami Y., Okawa, K. Bull. Chem. Soc. Jpn. (1987) 60, 2963-2965]에 따라서, 표제 화합물의 합성을 수행한다.

실시예 XIII: N-3급-부톡시카보닐 2-아자-3S-하이드록시카보닐-[2,2,2]-비사이클로옥탄의 합성:

메탄올(30ml) 중의 조 2-아자-2-(1-페닐에틸)-3S-메톡시카보닐-[2,2,2]-비사이클로옥트-5-엔(10mmol)[참조: Tetrahedron (1992) 48(44) 9707-9718] 및 탄소 상 10% Pd(1g)의 용액을 12N HCl로 산성화시킨 다음, 파르 수소화 장치를 사용하여 50psi에서 16시간 동안 수소화 반응시킨다. 반응 혼합물을 여과시켜 상기 탄소계 촉매를 제거하고, 여액을 농축시킨다. 잔사를 진한 HCl에 용해시키고, 밤새 교반시킨다. 용액을 농축시키고, 아세토니트릴(50ml)에 재용해시킨다. 디이소프로필에틸아민(3.5ml) 및 디-3급-부틸디카보네이트(1g)를 가한다. 반응 혼합물을 24시간 동안 교반시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 CH₂Cl₂ 및 5% 수성 황산에 용해시킨다. 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시킨다. 잔사를 10% 포화 중탄산나트륨에 용해시키고, 디에틸 에테르로 추출하며(2x), 5% 수성 황산을 사용하여 산성화시킨다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출한다(2x). 합한 에틸 아세테이트 층을 건조 여과시킨 다음 농축시켜 N-3급-부톡시카보닐 2-아자-3S-하이드록시카보닐-[2,2,2]-비사이클로옥탄(650mg)을 수득한다.

실시예 XIV: 이소부틸옥시카보닐-사이클로헥실글리실-4,4-디메틸 프롤린(iBoc-G(Chx)-P(4,4-디메틸)-OH)의 합성:

단계 1: iBoc-G(Chx)-P(4,4-디메틸)-OMe의 합성:

아세토니트릴(7ml) 중의 iBoc-G(Chx)-OH(실시예 IX, 단계 1)(377mg, 1.95mmol)의 용액에 HCl·HN-Pro(4,4-디메틸)-OMe(실시예 I, 단계 6)(377mg, 1.95mmol), N-하이드록시벤조트리아졸(239mg, 1.75mmol), TBTU(845mg, 2.63mmol) 및 디이소프로필에틸아민(1.35ml, 7.8mmol)을 연속해서 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 유기 층을 포화 중탄산나트륨 용액, 1N 염산 용액 및 염수 10ml 분획으로 2회 세척한다. 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 백색 고체(612mg, 79%)를 수득한다.

단계 2: iBoc-G(Chx)-P(4,4-디메틸)-OH의 합성:

메탄올(6ml) 중의 상기 단계 1에서 수득된 메틸 에스테르(612mg, 1.54mmol)을 2M 수산화리튬(1.16ml)의 존재 하에 3시간 동안 비누화한다. 메탄올을 감압 하에 제거하고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트로 희석시키며 1N 염산을 사용하여 pH 2로 산성화시킨다. 층을 분리시키고, 유기 층을 물 및 염수로 세척하며, 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다.

실시예 XV: L-페닐글리신 디메틸아미드의 합성

단계 1: N-벤질옥시카보닐-L-페닐글리신 디메틸아미드(CBz-Phg-NMe2)의 합성

N-벤질옥시카보닐-L-페닐글리신(25g, 88mmol)을 THF(800ml)에 용해시키고, -10℃로 냉각시킨다. N-메틸모르폴린(9.7ml, 88mmol) 및 이소부틸클로로포르메이트(11.4ml, 88.0mmol)을 가하고, 혼합물을 1분 동안 교반시킨다. 디메틸아민(100ml, THF 중의 2M)을 가하고, 반응물을 실온으로 가온시킨다. 이 혼합물을 여과시키고 여액을 진공 하에 농축시켜 N-벤질옥시카보닐-L-페닐글리신 디메틸아미드(32.5g)을 황색 오일로서 수득한다.

단계 2: L-페닐글리신 디메틸아미드(H-Phg-NMe2)의 합성

상기 수득된 N-벤질옥시카보닐-L-페닐글리신 디메틸아미드(32.5g)를 메탄올(750ml)에 용해시키고, 활성화 탄소 상 10% 팔라듐(3.3g)을 가한다. 이 혼합물을 파르 장치 상에서 35psi 수소 하에 2시간 동안 수소화 반응시킨다. 이 반응 혼합물을 여과시키고, 용매를 진공 하에 제거하며, 잔사를 메탄올-헥산으로부터 재결정화시켜 페닐글리신 디메틸아미드(26g)를 회색 고체로서 수득한다. 이 물질의 ee는 2,3,4,6-테트라-O-아세틸글루코피라노실티오이소시아네이트 유도체를 HPLC 분석한 결과 >99%인 것으로 결정되었다.

실시예 XVI: (1-메틸사이클로헥실) 글리신의 합성:

단계 1: 1-메틸-1-하이드록시메틸사이클로헥산

0℃에서 테트라하이드로푸란(300ml) 중의 1-메틸-1-하이드록시카보닐사이클로헥산(10g, 70mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란 주의 1M 디보란(200ml, 200mmol)을 90분에 걸쳐 가한다. 냉각 욕을 꺼내고, 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반시킨다. 포화 중황산나트륨(10ml)을 90분에 걸쳐 냉각시키면서 서서히 가함으로써, 상기 나머지 보란을 급냉시킨다. 부가의 포화 중황산나트륨(200ml)을 가하고, 20분 동안 교반시킨 후, 수성 층을 제거한다. 유기 층을 물 및 포화 염화나트륨으로 세척하며, 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 헥산 중의 20% 디에틸 에테르를 사용하여 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 1-메틸-1-하이드록시메틸사이클로헥산(6.17g, 48mmol, 69%)을 수득한다.

단계 2: 1-메틸사이클로헥실카복스알데히드

0℃에서 디클로로메탄(150ml) 중의 1-메틸-1-하이드록시메틸사이클로헥산 (6.17g, 48mmol) 및 트리에틸아민(20.1ml, 144mmol)의 용액에 디메틸설폭사이드(150ml) 중의 피리딘 삼산화황 복합체(22.9g, 144mmol)의 용액을 15분에 걸쳐 가한다. 냉각 욕을 2시간에 걸쳐 실온으로 가온시키는데, 이때 반응 혼합물을 얼음과 함께 염수(400ml)에 따라 붓는다. 층을 분리시키고, 수성 층을 디클로로메탄(200ml)으로 추출한다. 합한 유기 층을 헥산(600ml)으로 희석시키고, 1M HCl(2 x 150ml), 포화 염화나트륨(2 x 100ml)로 세척하며, 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 섬광 크로마트그래피함으로써 정제하여 1-메틸사이클로헥실카복스알데히드(1.77g, 13.8mmol, 29%)를 수득한다.

단계 3: N-포밀-N-글리코실-1-메틸사이클로헥실-3급-부틸아미드의 합성:

공개된 과정[참조: Kunz. H.; Pfrengle, W.; Ruck, K.; Wilfried, S. Synthesis (1991) 1039-1042]에 따라서, 2,3,4-트리-O-피발로일- -D-아라비노실아 민의 합성을 수행한다.

-30℃에서 테트라하이드로푸란(170ml) 중의 1-메틸사이클로헥실카복스알데히드(1.17g, 8.34mmol), 2,3,4-트리-O-피발로일- -D-아라비노실아민(8.3g, 20.7mmol), 포름산(850㎕, 22.2mmol) 및 3급-부틸이소시아니드(2.4ml, 21.2mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란 중의 0.5M 염화아연(41ml, 20.57mmol)을 가한다. 이 용액을 -20℃에서 3일 동안 교반시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 CH₂Cl₂(500ml)로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨(2 x 500ml) 및 물(500ml)로 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 청정한 오일을 수득한다. 섬광 크로마토그래피(헥산 중의 20% 에틸 아세테이트)하여 순수한 생성물(4.3g, 6.6mmol, 33%)을 제공한다.

단계 4: (1-메틸사이클로헥실)글리신의 합성:

디클로로메탄(30ml) 및 포화 무수 메탄올성 HCl(30ml) 중의 상기 단계 3에서 수득된 생성물(4.3g, 6.6mmol)의 용액을 밤새 교반시킨다. 이 용액을 농축시키고, 잔사를 물(100ml)에 용해시키며, 펜탄(2 x 100ml)으로 세척한다. 수성 층을 농축시키고, 잔사를 6N HCl(50ml)에 용해시키며 환류 하에 30시간 동안 가열한다. 이 용액을 농축시켜 조 (1-메틸사이클로헥실)글리신 하이드로클로라이드(790mg, 3.82mmol, 58%)를 수득한다.

실시예 XVII: (4,4-디메틸사이클로헥실)글리신의 합성:

단계 1: 4,4-디메틸사이클로헥산온의 합성:

4,4-디메틸사이클로헥스-2-엔-1-온(12ml, 91.2mmol)과 탄소 상의 데구사(Degussa) 유형 10% Pd(2g)의 혼합물을 40psi에서 18시간 동안 수소화 반응시킨다. 이 혼합물을 여과시키고, 농축시킨다[¹H NMR은 케톤과 알코올의 5:3 비율의 혼합물을 나타내었다]. 상기 혼합물을 아세톤(400ml)에 용해시키고 0℃로 냉각시킨다. 존스 시약(40ml)을 30분에 걸쳐 가하고, 냉각 욕을 꺼낸다. 2일 후, 과량의 아세톤을 증발시키고, 생성된 잔사를 물 및 디에틸 에테르에 용해시킨다. 에테르 층을 무색이 될 때까지 물로 세척하고, 건조시키며, 여과시킨 다음 농축시켜 4,4-디메틸사이클로헥산온(7.4g, 58.6mmol, 64%)을 수득한다.

단계 2: 4,4-디메틸사이클로헥실카복스알데히드의 메틸 에놀 에테르의 합성:

0℃에서 테트라하이드로푸란(125ml) 중의 메톡시메틸 트리페닐포스포늄 클로라이드(8.6g)의 용액에 n-부틸리튬(헥산 중의 1.6M, 14.3ml)을 10분에 걸쳐 가한다. 30분 후, 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 테트라하이드로푸란(50ml) 중의 4,4-디메틸사이클로헥산온(2.45g, 19.1mmol)의 용액을 20분에 걸쳐 가한다. 1시간 후, 냉각 욕을 꺼내고, 반응물을 0℃로 서서히 가온시킨다. 반응물을 포화 염화암모늄(50ml), 에틸 아세테이트(100ml) 및 헥산(100ml)으로 희석시킨다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 건조 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 헥산(70ml)과 함께 10분 동안 교반시킨 다음 여과시킨다. 여액을 농축시키고, 헥산 중의 25% 에틸 아세테이트를 사용하여 크로마토그래피하여 표제 화합물(1.925g, 12.5mmol, 65%)을 수득한다.

단계 3: 4,4-디메틸사이클로헥실카복스알데히드:

4,4-디메틸사이클로헥실카복스알데히드의 메틸 에놀 에테르(1.925g, 12.5mmol)(상기 단계 2), 테트라하이드로푸란(100ml) 및 6M HCl(20ml)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 헥산, 디에틸 에테르, 염수 및 물로 희석시킨다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 4,4-디메틸사이클로헥실카복스알데히드(1.0g, 7.1mmol, 57%)를 수득한다.

단계 4: N-포밀-N-글리코실-4,4-디메틸사이클로헥실-3급-부틸아미드의 합성:

-30℃에서 THF(70ml) 중의 4,4-디메틸사이클로헥실카복스알데히드(1.17g, 8.34mmol), 2,3,4-트리-O-피발로일-α-D-아라비노실아민(3.43g, 8.55mmol), 포름산(350㎕, 9.17mmol) 및 3급-부틸이소시아니드(990㎕, 8.76mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란 중의 0.5M 염화아연(17ml, 8.5mmol)을 가한다. 이 용액을 -20℃에서 2일 동안 교반시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 디클로로메탄(200ml)으로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨(2 x 200ml) 및 물(200ml)로 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 청정한 오일을 수득한다. 섬광 크로마토그래피(헥산 중의 20% 에틸 아세테이트)하여 순수한 생성물(2.1g, 3.3mmol, 39%)을 제공한다.

단계 5: (4,4-디메틸사이클로헥실)글리신의 합성:

디클로로메탄(20ml) 및 포화 무수 메탄올성 HCl(20ml) 중의 상기 단계 4에서 수득된 Ugi 생성물(2.1g, 3.3mmol)의 용액을 밤새 교반시킨다. 이 용액을 농축시키고, 잔사를 물(100ml)에 용해시키며, 펜탄(2 x 100ml)으로 세척한다. 수성 층을 농축시키고, 잔사를 6N HCl(40ml)에 용해시키며 환류 하에 30시간 동안 가열한다. 이 용액을 농축시켜 조 (1-메틸사이클로헥실)글리신 하이드로클로라이드(300mg, 1.36mmol, 41%)를 수득한다.

실시예 XVIII: Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OH의 합성:

단계 1: Boc-노르발리놀의 제조:

0℃로 냉각된, 테트라하이드로푸란(461ml) 중의 Boc-노르발린(25.0g, 0.115mol)의 용액에 보란/테트라하이드로푸란 착물(테트라하이드로푸란 중의 1.0M 용액 461ml)을 적가한다. 0℃에서 1시간 후, 상기 용액을 1.5시간에 걸쳐 실온으로 가온시킨다. TLC는 상기 반응이 완료되었다는 것을 지시해준다. 메탄올을 가하여 상기 반응물을 급냉시킨다. 상기 용액을 농축시켜 표제 화합물(22.56g, 96%)을 발포성 시럽으로서 수득한다. 이 생성물의 TLC는 만족할 만한 순도를 지시하였다. R_f=0.34(40% 에틸 아세테이트/헥산).

단계 2: Boc-노르발리날의 제조:

무수 디메틸설폭사이드(153ml) 및 톨루엔(153ml) 중의 Boc-노르발리놀(7.77g, 38mmol)에 EDC(73.32g, 382mmol)를 가한다. 이 용액을 0℃로 냉각시킨 후, 디클로로아세트산(15.8ml, 191mmol)을 적가한다. 부가를 완료한 후, 반응물을 15분 동안 교반시킨다. 상기 용액을 2시간에 걸쳐 실온으로 가온시킨다. 반응 혼합물을 농축시켜 톨루엔을 제거한 다음, 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 이 용액을 1N 중황산나트륨, 포화 중탄산나트륨 및 염수로 연속해서 세척하고, 황산나트륨 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음 농축시켜 조 Boc-노르발리날을 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용한다. TLC R_f=0.84(40% 에틸 아세테이트/헥산).

단계 3: Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OEt의 합성:

디클로로메탄(83ml) 중의 조 Boc-노르발리날(4.18g, 20.77mmol)의 용액에 에틸이소시아노아세테이트(2.72ml, 24.93mmol) 및 피리딘(6.72ml, 83.09mmol)을 가한다. 이 용액을 0℃로 냉각시킨 후, 트리플루오로아세트산(4.15ml, 41.54mmol)을 적가한다. 1시간 동안 교반시킨 후, 이 용액을 실온에서 18시간 동안 교반시키고, 이 동안에 뚜껑을 덮지 않은 용기 내의 반응 혼합물로부터 용매를 주위 조건 하에 증발시킨다. 반응 혼합물을 농축시킨 다음, 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 이 용액을 1N 중황산나트륨, 포화 중탄산나트륨 및 염수로 연속해서 세척하고, 황산나트륨 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음 농축시킨다. 잔사를 20 내지 40% 에틸 아세테이트/헥산으로 용출시키면서 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 표제 화합물 2.8g을 황색 시럽으로서 수득한다. 저 분해 질량 분광학은 목적하는 생성물이 존재한다는 것을 확인시켜 주었다(MH⁺ 333).

단계 4: Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OH의 합성:

에탄올(23ml)에 용해된, 수득된 생성물(Boc-nVal-(CHOH)-Gly-OEt)(1.52g, 4.70mmol)을 실온에서 2시간 동안 1N 수산화리튬(18.81ml)으로 비누화시킨다. 반응 혼합물을 도웩스(Dowex®) 50 WX8 이온 교환 수지를 사용하여 pH 약 2로 산성화시키고, 20분 동안 교반시킨 다음 여과시킨다. 이 수지를 에탄올 및 물로 잘 세척하고, 합한 여액을 농축시켜 백색 발포체(0.48g, 33%)를 수득한다.

실시예 XVIV: (2R,3S,4S,5S)-3급-부틸 N-CBz-3-아미노-2-하이드록시-4,5-메틸렌-헥사노에이트의 합성:

단계 1:

-78℃에서 THF(50ml)에 용해된 3급-부틸 디에틸포스포노아세테이트(4.7ml, 20mmol)의 용액에 헥산 중의 1.6M n-부틸 리튬(12.4ml)을 가한다. 30분 후, 디에틸 에테르(100ml) 중의 (1S,2S)-2-메틸사이클로프로필카복스알데히드(1g, 12mmol)[참조: Barrett, A.G.M.; Doubleday, W.W.; Kasdorf, K.; Tustin, G.J., J.Org. Chem.(1996) 61, 3280]을 10분에 걸쳐 가한다. 이 반응물을 2시간 동안 0℃로 가온시킨 다음 12시간 동안 6℃로 가온시킨다. 이 반응물을 포화 염화암모 늄(20ml)으로 급냉시키고, 유기 층을 분리시키며, 염수 50ml로 세척한 다음, 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 청정한 오일을 3.5g 수득한다. 섬광 크로마토그래피(헥산 중의 20% 에틸 아세테이트)하여 순수한 불포화 3급-부틸 에스테르(1.4g)을 수득한다.

단계 2:

n-프로판올(24ml) 중의 벤질 카바메이트(3.55g, 23.5mmol)의 용액에 수(48ml) 중의 수산화나트륨(900mg, 22.7mmol)의 용액을 가한 다음, 3급-부틸하이포클로라이트(2.57ml, 22.7mmol)를 가한다. 15분 후, 반응물을 0℃로 냉각시키고, (DHQ)₂PHAL(350mg, 0.45mmol)을 n-프로판올(24ml)에 가한 다음, n-프로판올(48ml) 중의 상기로부터의 불포화 3급-부틸 에스테르(1.4g)를 가한다. 최종적으로, 수(2ml) 중의 칼륨 오스메이트(110mg, 0.30mmol)을 가하면, 이 용액은 매우 신속하게 암녹색으로 되었는데 이는 4시간 동안 지속되었다. 6시간 후, 포화 황산나트륨(50ml)을 가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 50ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 염수(30ml)로 세척하고, 황산나트륨 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음 농축시킨다. 헥산 중의 20% 에틸 아세테이트로 섬광 크로마토그래피하여 목적하는 CBz 보호된 아미노 3급-부틸 에스테르를 백색 고체(316mg)로서 수득한다.

단계 3:

메탄올 9ml 중의 탄소상 10% 팔라듐 32mg 및 CBz 보호된 아미노 3급-부틸 에스테르(316mg, 0.9mmol)의 혼합물을 8시간 동안 수소화 반응시킨다. 이 혼합물을 여과시키고 농축시켜 자유 아민을 청정한 오일(195mg)로서 수득한다.

실시예 XX: 1R,2-디메틸프로필 클로로포르메이트의 합성:

시판용 2R-하이드록시-3-메틸부탄(410mg, 4.65mmol)에 톨루엔 중의 20% 포스겐(1ml, 2mmol)의 용액을 가한다. 이 용액을 6시간 동안 교반시켜 클로로포르메이트(2mmol)를 생성시키고, 이를 목적하는 아민과 직접적으로 즉시 반응시킨다. S-이성체를 동일한 과정으로 합성한다.

II) HCV 억제제의 대표적인 용액 상 합성

실시예 XXI: iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-디메틸)-Leu-(CO)-Gly-Phg-디메틸아미드의 용액 상 합성:

단계 1: 3급-부틸옥시카보닐-루이시날(Boc-Leu-CHO)의 합성:

무수 디클로로메탄(17.5ml) 중의 시판용(Advanced Chem Tech) Boc-L-루이시놀(0.78g, 3.6mmol)의 용액에 트리에틸 아민(2ml, 14.36mmol)을 가하고, 혼합물을 0℃로 냉각시킨다. 디메틸 설폭사이드(17.5ml)를 가한 다음, 삼산화황 피리딘 복합체(2.3g, 14.36mmol)를 가하고, 반응물을 2시간 동안 교반시킨다. 1:1 에틸 아세테이트:헥산 중의 TLC는 반응이 완료되었다는 것을 확인시켜 주었다. 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 이 에틸 아세테이트 층을 1M 염산(2 x 75ml)으로 세척한 다음, 포화 중탄산나트륨 용액(2 x 75ml) 및 염수(75ml)로 세척한다. 유기 층을 건조시키고(황산나트륨), 여과시킨 다음 농축시켜 생성물을 775mg 수득한다.

단계 2: Boc-2-하이드록시-3-아미노-5-메틸 헥사노일-글리신 에틸 에스테르(Boc-Leu-(CHOH)-Gly-OEt)의 합성:

무수 디클로로메탄(24ml) 중의 Boc-루이신 알데히드(0.77g, 3.59mmol)의 용액에 무수 피리딘(1.16ml, 14.36mmol) 및 에틸이소시아노아세테이트(0.4ml, 4.66mmol)를 가한다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 트리플루오로아세트산(0.55ml, 7/18mmol)을 2분에 걸쳐 가한다. 반응 혼합물을 캡핑하고, 4℃에서 4일 동안 교반시킨 다음 실온에서 1일 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(350ml)으로 희석시키고, 1M 염산, 포화 중탄산나트륨 및 염수 각각 75ml 분획으로 2회 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음, 농축시킨다. 수득된 잔사를 헥산 중의 10% 에틸 아세테이트(800ml)를 사용한 다음 헥산 중의 1:1 에틸 아세테이트(800ml)를 사용하여 2" x 6" 실리카 겔 칼럼 상으로 섬광 크로마토그래피한다. 생성물에 상응하는 분획을 모으고 농축시켜 생성물을 980mg(79%) 수득한다.

단계 3: Boc-Leu-(CHOH)-Gly-OH의 합성:

에탄올(11.3ml) 중의 Boc-Leu-(CHOH)-Gly-Oet(0.98g, 2.83mmol)의 용액에 2M 수산화리튬(4.25ml)을 가하고, 반응물을 실온에서 5시간 동안 교반시킨다. 에탄올을 감압 하에 제거하고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 유기 층을 1M 염산으로 세척한 다음, 염수로 세척하고, 건조시키며, 여과시킨 다음 농축시켜 생성물 775mg(86%)을 백색 고체로서 수득한다.

단계 4: Boc-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-디메틸아미드의 합성:

아세토니트릴(23ml) 중의 Boc-Leu-(CHOH)-Gly-OH(0.37g, 1.18mmol)의 용액에 페닐글리신 디메틸아미드(실시예 XV, 단계 2에서 수득됨), EDC(0.34g, 1.76mmol), N-하이드록시벤조트리아졸(HOBt)(0.18g, 1.18mmol) 및 디이소프로필에틸아민(DIEA)(0.82ml, 4.7mmol)을 연속해서 가하고, 이 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트로 희석시키며, 1M 염산, 포화 중탄산나트륨 및 염수 각각 75ml 분획으로 2회 연속해서 세척한다. 이어서, 유기 층을 건조 여과시킨 다음 농축시킨다. 조 생성물을 대상으로 하여, 4:1 에틸 아세테이트:헥산(700ml)을 사용한 다음 디클로로메탄 중의 10% 메탄올(600ml) 및 에틸 아세테이트(1000ml)를 사용하여 2" x 6" 실리카 겔 칼럼 상으로 섬광 크로마토그래피한다. 생성물에 상응하는 분획을 모으고 농축시켜 백색 고체를 445mg(80%) 수득한다.

단계 5: H-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-디메틸아미드 트리플루오로아세테이트 염의 합성:

디클로로메탄(1ml) 중의 Boc-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-디메틸아미드(70mg, 0.146mmol)의 용액에 트리플루오로아세트산(1ml)을 가하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 농축시키고, 이를 추가의 정제없이 다음 단계에 취한다.

단계 6: iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-디메틸)-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-디메틸아미드의 합성:

아세토니트릴(3ml) 중의 iBoc-G(Chx)-P(4,4-diMe)-OH(실시예 XIV, 단계 2)(53mg, 0.148mmol)의 용액에 TFA·2HN-Leu(CHOH)-Gly-Phg-NMe2(61mg, 0.148mmol), N-하이드록시벤조트리아졸(HOBt)(23mg, 0.148mmol), TBTU(71.5mg, 0.222mmol) 및 디이소프로필에틸 아민(103ℓ, 0.593mmol)을 연속해서 가한다. 이 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반시킨 다음 농축시킨다. 나머지 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시키며, 1M 염산(2 x 5ml), 포화 중탄산나트륨 용액(2 x 5ml) 및 염수(2 x 5ml)로 세척한다. 이어서, 유기 층을 건조 여과시킨 다음 농축시킨다. 생성물(100mg)을 추가의 정제없이 다음 단계에 취한다.

단계 7: iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-디메틸)-Leu-(CO)-Gly-Phg-디메틸아미드의 합성:

디클로로메탄(1ml) 중의 iBoc-G(Chx)-Pro(4,4-디메틸)-Leu-(CHOH)-Gly-Phg-디메틸아미드(30mg, 0.04mmol)의 용액에 시판용 데스-마틴 시약(Omega Chemical Company Inc.)(67.8mg, 0.16mmol)을 가하고, 반응물을 실온에서 90분 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 5% 나트륨 티오설페이트에서 교반시킨다. 이어서, 이를 디클로로메탄으로 희석시키고, 층을 분리시킨다. 유기 층을 나트륨 티오설페이트(4 x 3ml)로 세척한 다음, 물 및 염수로 세척한다. 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 조 생성물을 헥산 및 이소프로필 알코올에 용해시키고, 헥산 중의 0 내지 25% 이소프로필 알코올 로 이루어진 30분 구배(25ml/분)로 용출시키면서 정상 상 Kromasil 5 실리카 칼럼(Phenomenex, 250 x 21.20mm, 100Å 공극 크기, 5㎛ 겔 입자)을 사용하여 HPLC 정제한다. 생성물에 상응하는 분획을 모으고 농축시킨다. 물로부터 동결 건조시켜 백색 분말을 6.7mg 수득한다. 저 분해 질량 스펙트럼은 목적하는 질량을 확인시켜 주었다(MH⁺=741.4).

III) 고체 상 합성:

고체 상 합성은 소량의 본 발명의 특정 화합물을 제조하는데 유용하다. 통상적인 펩티드 고체 상 합성법을 사용하는 바와 같이, 펩티딜 케토아미드의 고체 상 합성용 반응기는 용매와 용해된 시약에 대해서는 투과성이지만, 선택된 메쉬 크기의 합성 수지에 대해서는 투과성인 아닌 하나 이상의 표면을 갖는 반응기 용기로 구성된다. 이러한 반응기에는 소결된 유리 프릿, 폴리프로필렌 튜브 또는 프릿이 있는 칼럼이 장착된 유리 고체 상 반응 용기, 또는 칸스(Kans™; 제조원: Irori Inc., San Diego CA) 반응기가 포함된다. 선택된 반응기 유형은 필요한 고체 상 수지의 용적에 좌우되며, 상이한 반응기 유형은 상이한 합성 단계에 사용될 수도 있다. 다음 과정이 후속 실시예에서 참조될 것이다:

과정 A: 커플링 반응: N-메틸피롤리딘(NMP)에 현탁된 수지(10-15ml/g 수지)에 Fmoc-아미노산(2당량), HOAt(2당량), HATU(2당량) 및 디이소프로필에틸아민(4당량)을 가한다. 이 혼합물을 4 내지 48시간 동안 반응시켜 둔다. 반응물을 탈수시키고, 수지를 디메틸포름아미드, 디클로로메탄, 메탄올, 디클로로메탄 및 디에틸 에테르로 연속해서 세척한다(10-15ml 용매/g 수지를 사용함). 이어서, 상기 수지를 진공 하에 건조시킨다.

과정 B: Fmoc 탈보호: Fmoc 보호된 수지를 디메틸포름아미드 중의 20% 피페리딘(10ml 시약/g 수지)으로 30분 동안 처리한다. 이 시약을 탈수시키고, 수지를 디메틸포름아미드, 디클로로메탄, 메탄올, 디클로로메탄 및 디에틸 에테르로 연속해서 세척한다(10ml 용매/g 수지를 사용함).

과정 C: Boc 탈보호: Boc-보호된 수지를 디클로로메탄과 트리플루오로아세트산의 1:1 혼합물로 20 내지 60분 동안 처리한다(10ml 용매/g 수지). 이 시약을 탈수시키고, 수지를 디클로로메탄, 디메틸포름아미드, 디메틸포름아미드 중의 5% 디이소프로필에틸아민, 디메틸포름아미드, 디클로로메탄 및 디메틸포름아미드로 연속해서 세척한다(10ml 용매/g 수지).

과정 D: 세미카바존 가수분해: 수지를 트리플루오로아세트산:피루브산:디클로로메탄:물 9:2:2:1로 이루어진 절단 칵테일(10ml/g 수지)에 2시간 동안 현탁시킨다. 반응물을 탈수시키고, 상기 과정을 3회 이상 반복한다. 상기 수지를 디클로로메탄, 물 및 디클로로메탄으로 연속해서 세척하고, 진공 하에 건조시킨다.

과정 E: HF 절단: 건조된 펩티드-nVal(CO)-G-O-PAM 수지(50mg)를 작은 교반 봉을 함유하는 HF 용기 속에 놓아둔다. 아니솔(총 용적의 10%)을 스캐빈저로서 가한다. 글루탐산 및 시스테인 아미노산의 존재 하에, 티오아니솔(10%) 및 1,2-에탄디티올(0.2%)을 또한 가한다. 이어서, HF 용기를 HF 장치(Immuno Dynamics)에 접속시키고, 상기 시스템을 질소로 5분 동안 플러쉬시킨다. 이어서, 드라이 아이스/ 이소프로판올 욕을 이용하여 -70℃로 냉각시킨다. 20분 후, HF를 목적하는 용적(10ml HF/g 수지)이 되도록 증류시킨다. 상기 반응을 0℃에서 1시간 30분 동안 진행시키도록 한다. 질소를 사용하여 모든 HF를 제거함으로써 후처리한다. 이어서, 디클로로메탄을 상기 수지에 가하고, 혼합물을 5분 동안 교반시킨다. 이어서, 수(4ml) 중의 20% 아세트산을 가한다. 20분 동안 교반시킨 후, 상기 수지를 프릿화 깔대기를 사용하여 여과시키고, 디클로로메탄을 감압 하에 제거한다. 나머지 잔사 및 혼합물을 헥산으로 세척하여(2x) 스캐빈저를 제거한다. 그러는 동안, 수지를 메탄올 1ml에 침지시킨다. 수성 층(20% HOAc)을 상기 수지에 다시 가하고, 혼합물을 5분 동안 진탕시킨 다음 여과시킨다. 메탄올을 감압 하에 제거하고, 수성 층을 동결건조시킨다. 이어서, 펩티드를 10 내지 25% 메탄올(0.1% 트리플루오로아세트산을 함유함)에 용해시키고, 역상 HPLC함으로써 정제한다.

실시예 XXII: C형 간염 억제제(iBoc-G(Chx)-P(4t-NHSO2Ph)-nV-(CO)-G-G(Ph)-NH2)의 대표적인 고체 상 합성:

단계 1: Fmoc-nV-(dpsc)-Gly-OH의 합성:

A) 알릴 이소시아노아세테이트의 합성(다음 단계 a-b):

a) 이소시아노아세트산 칼륨 염의 합성:

에틸 이소시아노아세테이트(96.6ml, 0.88mol)를 에탄올(1.5L) 및 수산화칼륨(59.52g, 1.0mol)의 냉각된 용액에 적가한다. 이 반응물을 실온으로 서서히 가온시킨다. 2시간 후, 침전된 생성물을 유리 깔대기 상에서 여과시키고, 냉각된 에탄올 수 분획으로 세척한다. 이로써 수득된 이소시아노아세트산의 칼륨 염을 진공 하에 건조시켜 황금빛 갈색 고체(99.92g, 91.8%)를 수득한다.

b) 알릴 이소시아노아세테이트의 합성:

아세토니트릴(810ml)에 용해된 파트 a의 생성물(99.92g, 0.81mol)에 알릴 브로마이드(92ml, 1.05mol)를 가한다. 4시간 동안 환류 가열한 후, 암갈색 용액을 수득한다. 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 에테르(1.5L)에 용해시키고, 물(500ml)로 3회 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시키며 농축시켜 암갈색 시럽을 수득한다. 조 생성물을 7mmHg(98C)에서 진공 증류시킴으로써 정제하여 청정한 오일(78.92g, 78%)을 수득한다:

B) 9-플루오레닐메톡시카보닐-노르발리날의 합성(다음 단계 a-c):

a) 9-플루오레닐메톡시카보닐-L-노르발린 메틸 에스테르(Fmoc-nVal-OMe)의 합성:

무수 메탄올(469ml) 중의 시판용 Fmoc-노르발린(25g, 73.75mmol)의 냉각된 용액에 티오닐 클로라이드(53.76ml, 737.5mmol)을 1시간에 걸쳐 가한다. 1시간 후에 취한 에틸 아세테이트 중의 TLC는 반응이 완료되었다는 것을 확인시켜 주었다(R_f=0.85). 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 유기 층을 포화 중탄산나트륨에 이어 염수 200ml 분획으로 여러 번 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시켜 Fmoc-norVal-OMe를 백색 고체(26.03g)로서 정량적 수율로 수득한다:

b) 9-플루오레닐메톡시카보닐-노르발리놀(Fmoc-n발리놀)의 합성:

테트라하이드로푸란(123ml) 및 메탄올(246ml) 중의 Fmoc-nVal-OMe(26.03g, 73.75mmol)에 염화칼슘(16.37g, 147.49mmol)을 가한다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 수소화붕소 나트륨(11.16g, 294.98mmol)을 여러 배치로 가한다. 수득된 진한 페이스트에, 메탄올(500ml)을 가하고, 반응물을 실온에서 90분 동안 교반시켜 둔다. 2:3 에틸 아세테이트:헥산 중의 TLC는 반응이 완료되었다는 것을 확인시켜 주었다(R_f=0.25). 0℃에서 물(100ml)을 서서히 가함으로써 상기 반응물을 급냉시킨다. 메탄올을 감압 하에 제거하고, 나머지 수성 상을 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 유기 층을 물(3 x 500ml), 포화 중탄산나트륨(3 x 500ml) 및 염수(500ml)로 세척한다. 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시키며 농축시켜 백색 고체(21.70g, 90.5%)를 수득한다:

c) 9-플루오레닐메톡시카보닐-노르발리날(Fmoc-nVal-CHO)의 합성:

디클로로메탄(668ml) 중의 Fmoc-노르발리놀(21.70g, 66.77mmol)의 용액에 트리에틸아민(37.23ml, 267mmol)을 가하고, 이 용액을 0℃로 냉각시킨다. 디메틸설폭사이드(96ml) 중의 피리딘 삼산화황 복합체(42.51g, 267mmol)의 현탁액을 상기 냉각 용액에 가한다. 1시간 후, 2:3 에틸 아세테이트:헥산 중의 TLC는 반응이 완료되었다는 것을 확인시켜 주었다. 디클로로메탄을 감압 하에 제거하고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시키며, 물(2 x 50ml), 1N 포화 중황산나트륨(2 x 50ml), 포화 중탄산나트륨(2 x 50ml) 및 염수(50ml)로 세척한다. 유기 층을 농축 시켜 백색 고체를 수득한다. 이론적 수득량(21.57g)이 추정되었고, 이 반응물을 추가의 정제 없이 다음 단계에 취한다.

C) 디페닐메틸 세미카바지드(dpsc) 트리플루오로아세테이트 염의 합성(다음 단계 a-b):

a) Boc-세미카바지드-4-일 디페닐메탄의 합성

디메틸포름아미드(225ml) 중의 카보닐디이미다졸(16.2g, 0.10mole)의 용액에 디메틸포름아미드(225ml) 중의 t-부틸 카바제이트(13.2g, 0.100mol)의 용액을 30분에 걸쳐 적가한다. 이어서, 디페닐메틸아민(18.3g, 0.10mol)을 30분에 걸쳐 가한다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반시켜 둔다. 물(10ml)을 가하고, 혼합물을 감압 하에 약 150ml가 되도록 농축시킨다. 이 용액을 물(500ml)에 따라 붓고, 에틸 아세테이트(400ml)로 추출한다. 에틸 아세테이트 상을 1N HCl, 물, 포화 중탄산나트륨 용액 및 염화나트륨 각각 75ml로 2회 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시킨다. 이 혼합물을 여과시키고, 용액을 농축시켜 백색 발포체를 29.5g(85% 수율) 수득한다. 이 물질을 에틸 아세테이트/헥산으로부터 재결정화함으로써 정제할 수 있지만, 이는 다음 단계에 직접 사용할 정도로 충분히 순수하다: 융점 142-143℃:

b) 디페닐메틸 세미카바지드(dpsc) 트리플루오로아세테이트 염의 합성

디클로로메탄(12.5ml) 중의 Boc-세미카바지드-4-일 디페닐메탄(3.43g, 10mmol)의 용액을 실온에서 트리플루오로아세트산 12.5ml로 처리하고, 30분 동안 교반시킨다. 이 용액을 에테르 75ml에 적가하고, 생성된 고체(2.7g, 80%)를 여과시켜 수집한다. 융점 182-184℃:

D) Fmoc-nVal-(CHOH)-Gly-O알릴의 합성:

디클로로메탄(170ml) 중의 Fmoc-nVal-CHO(단계 IB)(5.47g, 16.90mmol)의 용액에 알릴 이소시아노아세테이트(단계 IA)(2.46ml, 20.28mmol) 및 피리딘(5.47ml, 67.61mmol)을 가한다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 트리플루오로아세트산(3.38ml, 33.80mmol)을 적가한다. 이 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반시킨 다음, 실온에서 48시간 동안 교반시킨다. 에틸 아세테이트에서 취한 TLC는 반응이 완료되었다는 것을 확인시켜 주었다. 이 반응 혼합물을 농축시키고, 헥산 중의 20% 내지 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 섬광 크로마토그래피한다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 모으고 농축시켜 백색 발포체(6.88g, 87.3%)를 수득한다. 50:50 에틸 아세테이트 중의 TLC는 1개 스폿을 나타낸다(R_f=0.37):

E) Fmoc-nVal-(CO)-Gly-O알릴의 합성:

디메틸설폭사이드(100ml) 및 톨루엔(100ml) 중의 Fmoc-nVal-(CHOH)-Gly-O알릴(단계 D)(5.01g, 10.77mmol)의 용액에 EDC(20.6g, 107.7mmol)을 가한다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 디클로로아세트산(4.44ml, 53.83mmol)을 적가한다. 반응물을 0℃에서 15분 동안 교반시킨 다음 실온에서 1시간 동안 교반시킨다. 0℃로 다시 냉각시킨 후, 물(70ml)을 가하고, 톨루엔을 감압 하에 제거한다. 나머지 잔사를 에틸 아세테이트로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨 용액에 이어서 1N 중황산나트륨 및 염수로 수회 세척한다. 유기 층을 황산나트륨 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 농축시킨다. 이론적 수득량은 4.99g인 것으로 추정되고, 이 반응물을 추가의 정제 없이 다음 단계에 취한다. 50:50 에틸 아세테이트 중의 TLC는 1개 스폿을 나타낸다(R_f=0.73).

F) Fmoc-nVal-(dpsc)-Gly-O알릴의 합성:

에탄올(130ml) 및 물(42ml) 중의 Fmoc-nVal-(CO)-Gly-O알릴(단계 E)(4.99g, 10.75mmol)의 용액에 디페닐메틸 세미카바지드(dpsc) 트리플루오로아세테이트 염(단계 IC)(7.6g, 21.5mmol) 및 나트륨 아세테이트·3H₂O(1.76g, 12.9mmol)을 연속해서 가한다. 이 반응 혼합물을 환류 하에 90분 동안 가열한다. 1:1 에틸 아세테이트:헥산에서 취한 TLC로써 반응의 완료를 확인하였다. 에탄올을 감압 하에 제거하고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시키며, 1N 중황산나트륨(2 x 10ml), 포화 중탄산나트륨(2 x 10ml)에 이어 염수(10ml)로 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음, 농축시킨다. 생성된 잔사를 헥산 중의 20 내지 50% 에틸 아세테이트로 섬광 크로마토그래피함으로써 정제하여 백색 고체(5.76g, 78%)를 수득한다. 50:50 에틸 아세테이트:헥산 중의 TLC는 2개 스폿(시스 및 트랜스 이성체)을 나타낸다(R_f=0.42 및 0.5).

G) Fmoc-nVal-(dpsc)-Gly-OH의 합성:

테트라하이드로푸란(300ml) 중의 Fmoc-nVal-(dpsc)-Gly-O알릴(단계 IF)(4.53g, 6.59mmol)의 용액에 디메돈(4.62g, 32.97mmol)을 가한 다음, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(O) 촉매(0.76g, 0.66mmol)을 가한다. 9:1 디클로로메탄:메탄올을 사용한지 90분 후에 TLC에 의해 반응의 완료를 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 나머지 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시키며, 0.1M 중인산칼륨 50ml 분획으로 3회 세척한다. 이어서, 유기 층을 중아황산나트륨 50ml로 처리하고, 2상 시스템을 15분 동안 교반시킨다. 상을 분리시키고, 이 과정을 2회 더 반복한다. 유기 층을 건조시키고, 농축시키며, 헥산 중의 20 내지 100% 에틸 아세테이트를 사용하여 섬광 크로마토그래피한다. 이어서, 9:1 디클로로메탄:메탄올 용액을 사용한다. 순수한 생성물에 상응하는 분획을 모으고 농축시켜 백색 고체(3.99g, 94%)를 수득한다. 9:1 디클로로메탄:메탄올 중의 TLC는 2개의 스폿(시스 및 트랜스 이성체)를 나타내었다:

단계 2: H-Phg-MBHA 수지의 합성:

시판용 MBHA 수지(2.6g, 1.12mmol/g, 2.91mmol)를 질소 유입구가 장착된 250ml 프릿형 고체 상 반응 용기에 옮긴다. 이어서, 이를 디클로로메탄, 메탄올, 디메틸포름아미드 및 디클로로메탄 30ml 분획으로 철저히 세척하고, 99.82% 효율로 과정 A에 따라서 시판용 Fmoc-Phg-OH(2.17g, 5.82mmol)에 18시간에 걸쳐 커플링시킨다. 이어서, 상기 수지를 과정 B에 따라서 Fmoc 탈보호시킨다. 작은 분취량 상에서의 정성적 닌하이드린 검정 결과, 암청색 수지와 용액을 수득하였는데, 이는 성공적인 반응을 지시해준다.

단계 3: H-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성:

단계 II에서 수득된 수지(2.6g, 0.8mmol/g, 2.91mmol)를 과정 A에 따라서 Fmoc-nVal-(dpsc)-Gly-O알릴(단계 IG)(5.82mmol, 3.77g)과 반응시킨다. 18시간 후, 정량적 닌하이드린 분석은 99.91% 커플링 효율을 지시하였다. 상기 수지를 대상으로 하여, 과정 B에 따라서 Fmoc 탈보호시켰다. 작은 분취량 상에서의 정성적 닌하이드린 검정 결과, 암청색 수지와 용액을 수득하였는데, 이는 성공적인 반응을 지시해준다.

단계 4: Boc-Pro(4t-NHFmoc)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성:

화합물 H-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지(상기 단계 3)(600mg, 0.8mmol/g, 0.67mmol)을 프릿형 폴리프로필렌 튜브에 옮기고, 이를 과정 A에 따라서 Boc-Pro(4t-NHFmoc)-OH(실시예 VI, 단계 3)(610mg, 1.34mmol)에 커플링시킨다. 18시간 후, 정량적 닌하이드린 분석은 99.96% 커플링 효율을 지시하였다.

단계 5: Boc-Pro(4t-NH ₂ )-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성:

전 단계로부터의 수지(Boc-Pro(4t-NHFmoc)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지)를 과정 B에 따라서 Fmoc 탈보호시킨다. 작은 분취량 상에서의 정성적 닌하이드린 검정 결과, 암청색 수지와 용액을 수득하였는데, 이는 성공적인 반응을 지시해준다.

단계 6: Boc-Pro(4t-NHSO ₂ Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성:

NMP(2ml)에 현탁된 전 단계로부터 수득된 수지(Boc-Pro(4t-NH₂)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지)(0.2g, 0.22mmol)에 2,4,6-콜리딘(0.24ml, 1.79mmol) 및 벤젠설포닐 클로라이드를 가하고, 반응물을 18시간 동안 진탕시킨다. 용매를 탈수시키고, 수지를 디클로로메탄, 메탄올, 디메틸포름아미드 및 디클로로메탄 2ml 분획으로 철저히 세척한다. 정성적 닌하이드린 분석은 무색 비드와 용액을 나타냈는데, 이는 성공적인 반응을 지시해준다.

단계 7: Fmoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO ₂ Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성

전 단계에서 수득된 수지(Boc-Pro(4t-NHSO₂Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지)를 대상으로 하여, 과정 C에 따라서 Boc 탈보호 과정을 수행한다. 이어서, Fmoc-G(Chx)(0.17g, 0.45mmol)을 과정 A에 따라서 커플링시킨다. 18시간 후, 정성적 닌하이드린 분석은 무색 비드를 나타내고, 정량적 닌하이드린 분석은 99.79% 커플링 효율을 나타내었다.

단계 8: iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO ₂ Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성

전 단계에서 수득된 수지(Fmoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO₂Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지)를 대상으로 하여, 과정 B에 따라서 Fmoc 탈보호를 수행한다. 작은 분취량 상에서의 닌하이드린 검정 결과, 암청색 수지와 용액을 수득하였는데, 이는 성공적인 반응을 지시해준다. 2ml NMP에 현탁된 상기 수지(0.2g, 0.22mmol)에 이소부틸클로로포르메이트(0.12ml, 0.90mmol)을 가한 다음, 디이소프로필에틸아민(0.31ml, 1.79mmol)을 가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 진탕시킨다. 정성적 닌하이드린 분석은 무색 비드와 용액을 나타냈는데, 이는 성공적인 반응을 지시해준다.

단계 9: iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO ₂ Bn)-nVal(CO)-Gly-Phg-MBHA 수지의 합성:

전 단계의 화합물(iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO₂Bn)-nVal(dpsc)-Gly-Phg-MBHA 수지)(200mg)을 대상으로 하여, 세미카바존 가수분해 과정 D를 수행한다.

단계 10: iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO ₂ Bn)-nVal(CO)-Gly-Phg-NH ₂ 의 합성:

전 단계의 수지(iBoc-G(Chx)-Pro(4t-NHSO₂Bn)-nVal(CO)-Gly-Phg-MBHA 수지)(100mg)를 대상으로 하여, HF 절단 조건(과정 E)을 적용하여 목적하는 조 생성물을 수득한다. 이 물질을 수중 20 내지 50% 아세토니트릴을 이용한 구배로 용출시키면서, 공극 크기가 300Å인 10마이크론 크기 겔 입자로 구성된 C-18 수지를 함유하는 2.2 x 25cm 역상 칼럼을 사용하여 HPLC함으로써 정제한다. 25 내지 75% 아세토니트릴(0.1% 트리플루오로아세트산을 함유함)로 용출시키면서, 공극 크기가 300Å인 5마이크론 크기 겔 입자로 구성된 C-18 수지를 함유하는 4.6 x 250mm 역상 칼럼을 사용한 분석 HPLC 결과, 13.5분에서 1개의 피크를 나타내었다. 저 분해 질량 스펙트럼은 목적하는 질량을 확인시켜 주었다(MH⁺=826.4).

IV. 용액 상 합성에 의해 제조된 부가의 화합물:

부가의 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 대표적인 과정이 다음에 제시되어 있고, 이러한 과정에 의해 제조된 화합물이 표 5에 열거되어 있다.

실시예 XXII: 식 XXIII의 화합물의 제조:

단계 1:

무수 THF(400ml) 중의 N₂ 하에 케트이민 XXIIIa(50g, 187.1mmol)의 교반된 용액을 -78℃로 냉각시키고, 이를 THF 중의 K-^tBuO(220ml, 1.15당량)의 1M 용액으로 처리한다. 반응 혼합물을 0℃로 가온시키고, 1시간 동안 교반시킨 다음, 브로모메틸 사이클로부탄(28ml, 249mmol)으로 처리한다. 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반시키고, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 Et₂O(300ml)에 용해시키고, 수성 HCl(2M, 300ml)로 처리한다. 생성된 용액을 실온에서 5시간 동안 교반시키고 Et₂O(1L)로 추출한다. 수성 층을 NaOH(50% 수성)을 이용하여 pH 약 12 내지 14로 염기성화시키고, CH₂Cl₂(3 x 300ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 건조시키 고(MgSO₄), 여과시키며, 농축시켜 순수한 아민(XXIIIb, 18g)을 무색 오일로서 수득한다.

단계 2:

CH₂Cl₂(350ml) 중의 0℃에서 아민 XXIIIb(18g, 105.2mmol)의 용액을 디-3급-부틸디카보네이트(23g, 105.4mmol)로 처리하고, 실온에서 12시간 동안 교반시킨다. 반응을 완료한 후(TLC), 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔사를 THF/H₂O(200ml, 1:1)에 용해시키며, LiOH·H₂O(6.5g, 158.5mmol)로 처리한 다음, 실온에서 3시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 농축시키고, 염기성 수성 층을 Et₂O로 추출한다. 수성 층을 진한 HCl를 이용하여 pH 약 1 내지 2로 산성화시키고, CH₂Cl₂로 추출한다. 합한 유기 층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시키며 진공 하에 농축시켜 XXIIIc를 무색 점성 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용한다.

단계 3:

CH₂Cl₂(250ml) 중의 산 XXIIIc(15.0g, 62mmol)의 용액을 BOP 시약(41.1g, 93mmol), N-메틸 모르폴린(27ml), N,O-디메틸 하이드록실아민 하이드로클로라이드(9.07g, 93mmol)로 처리하고 실온에서 밤새 교반시킨다. 반응 혼합물을 1N 수성 HCl(250ml)로 희석시키고, 층을 분리시키며 수성 층을 CH₂Cl₂(3 x 300ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고 크로마토그래피(SiO₂, EtOAc/Hex 2:3)함으로써 정제하여 아미드 XXIIId(15.0g)을 무색 고체로서 수득한다.

단계 4:

무수 THF(200ml) 중의 아미드 XXIIId(15g, 52.1mmol)의 용액을 0℃에서 LiAlH₄(1M, 93ml, 93mmol)의 용액으로 적가 처리한다. 반응 혼합물을 실온에서 1시 간 동안 교반시키고, 0℃에서 KHSO₄(10% 수성) 용액으로 조심스럽게 급냉시킨 다음, 0.5시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 수성 HCl(1M, 150ml)로 희석시키고, CH₂Cl₂(3 x 200ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 HCl(1M), 포화 NaHCO₃, 염수로 세척하고, 건조시킨다(MgSO₄). 혼합물을 여과시키고, 진공 하에 농축시켜 XXIIIe를 점성의 무색 오일(14g)로서 수득한다.

단계 5:

CH₂Cl₂(50ml) 중의 알데히드 XXIIIe(14g, 61.6mmol)의 용액을 Et₃N(10.73ml, 74.4mmol) 및 아세톤 시아노하이드린(10.86g, 127.57mmol)으로 처리하고, 실온에서 24시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 수성 HCl(1M, 200ml)로 희석시키며, CH₂Cl₂(3 x 200ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 H₂O, 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고 크로마토그래피(SiO₂, EtOAc/Hex 1:4)함으로써 정제하여 XXIIIf(10.3g)을 무색 액체로서 수득한다.

단계 6:

HCl 기체를 0℃에서 CH₃OH(700ml) 내로 버블링함으로써 제조된, HCl(AcCl을 무수 메탄올에 부가함으로써 제조된 대체 6M HCl을 사용할 수도 있다)로 포화된 메탄올을 시아노하이드린 XXIIIf로 처리하고, 24시간 동안 환류 가열한다. 이 반응물을 진공 하에 농축시켜 XXIIIg를 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용한다.

단계 7:

CH₂Cl₂(200ml) 중의 아민 하이드로클로라이드 XXIIIg의 용액을 -78℃에서 Et₃N(45.0ml, 315mmol) 및 Boc₂O(45.7g, 209mmol)으로 처리한다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시키고, HCl(2M, 200ml)로 희석시키며, CH₂Cl₂로 추출한다. 합한 유기 층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고 크로마토그래 피(EtOAc/Hex 1:4)함으로써 정제하여 하이드록시 에스테르 XXIIIh를 수득한다.

단계 8:

THF/H₂O(1:1) 중의 메틸 에스테르 XXIIIh(3g, 10.5mmol)의 용액을 LiOH·H₂O(645mg, 15.75mmol)로 처리하고 실온에서 2시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 수성 HCl(1M, 15ml)로 산성화시키고, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 진공 하에 건조시킨다.

CH₂Cl₂(50ml) 및 DMF(25ml) 중의 산의 용액을 NH₄Cl(2.94g, 55.5mmol), EDCl(3.15g, 16.5mmol), HOOBt(2.69g, 16.5mmol) 및 NMM(4.4g, 44mmol)로 처리한다. 반응 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반시킨다. 용매를 진공 하에 제거하고 잔사를 수성 HCl(250ml)로 희석시키며, CH₂Cl₂로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 포화 NaHCO₃로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공하에 농축시켜 XXIIIi를 수득하고, 이를 그 자체로서 다음 단계에 사용한다. (또 다른 한편으론, XXIIIf(4.5g, 17.7mmol)을 0℃에서 CH₃OH 50ml 중에서 0.5시간 동안 수성 H₂O₂(10ml), LiOH·H₂O(820mg, 20.8mmol)과 반응시킴으로써, XXIIIi를 직접적으로 수득할 수도 있다).

단계 9:

전 단계에서 수득된 XXIIIi의 용액을 디옥산 중의 4N HCl에 용해시키고 실온에서 2시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 XXIIIj를 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제없이 사용한다.

단계 10:

Boc-보호된 아미노산을 메탄올성 HCl과 반응시킴으로써 Boc 그룹을 절단하는 것을 제외하고는, 문헌[참조: R. Zhang and J.S. Madalengoitia(J. Org. Chem. 1999, 64, 330)]의 방법을 수행하여 아미노 에스테르 XXIIIl을 제조한다.

0℃에서 CH₂Cl₂(100ml) 중의 시판용 아미노산 Boc-Chg-OH, XXIIIk(Senn chemicals, 6.64g, 24.1mmol) 및 아민 하이드로클로라이드 XXIIIl(4.5g, 22mmol)의 용액을 BOP 시약으로 처리하고 실온에서 15시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 다음, 이를 수성 1M HCl로 희석시키고, EtOAc(3 x 200ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 포화 NaHCO₃(200ml)로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, EtOAc/Hex 3:7)하여 XXIIIm(6.0g)을 무색 고체로서 수득한다.

단계 11:

THF/H₂O(1:1) 중의 메틸 에스테르 XXIIIm(4.0g, 9.79mmol)의 용액을 LiOH·H₂O(401mg, 9.79mmol)로 처리하고 실온에서 3시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 수성 HCl로 산성화시키고, 진공 하에 농축시켜 자유 산을 수득한다.

-10℃에서 DMF/CH₂Cl₂(1:1 50ml) 중의 산(1.5g, 3.74mmol)의 용액을 아민 XXIIIj(772mg, 3.74mmol), EDCl(1.07g, 5.61mmol), HOOBt(959mg, 5.61mmol) 및 NMM(2.15ml, 14.96mmol)로 처리한다. 반응 혼합물을 0℃에서 48시간 동안 교반시 킨 다음, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 수성 1M HCl로 희석시키며, CH₂Cl₂로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃, 수성 HCl, 염수로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공하에 농축시켜 XXIIIn(2.08g)를 갈색 고체로서 수득한다.

단계 12:

0℃에서 톨루엔 및 DMSO(1:1 20ml) 중의 아미드 XXIIIn(2.08g, 3.79mmol)의 용액을 EDCl(7.24g, 37.9mmol) 및 디클로로아세트산(2.42g, 19.9mmol)으로 처리하고, 실온에서 4시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석시키고, 포화 NaHCO₃ 및 염수로 세척한다. 유기 층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 3:7)하여 XXIII을 무색 고체로서 수득한다.

실시예 XXIV: 식 XXIV의 화합물의 제조:

단계 1:

무수 CH₂Cl₂/DMF(50ml, 1:1) 중의 Boc-3급-Leu XXIVa(Fluka, 5.0g, 21.6mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고 아민 XXIIIl(5.3g, 25.7mmol), NMM(6.5g, 64.8mmol) 및 BOP 시약(11.6g, 25.7mmol)으로 처리한다. 이 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반시키고, 수성 HCl(1M)으로 희석시키며 CH₂Cl₂로 추출한다. 합한 유기 층을 HCl(수성, 1M), 포화 NaHCO₃, 염수로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 1:5)함으로써 정제하여 XXIVb를 무색 고체로서 수득한다.

단계 2:

메틸 에스테르 XXIVb(4.0g, 10.46mmol)의 용액을 HCl(4M 용액, 디옥산)에 용해시키고, 실온에서 3시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 아민 하이드로클로라이드 염을 수득하고, 이를 다음 단계에 사용한다.

CH₂Cl₂(10ml) 중의 아민 하이드로클로라이드 염(397mg, 1.24mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시키고, 3급-부틸 이소시아네이트(250mg, 2.5mmol)로 처리한 다음, 실온에서 밤새 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔사를 수성 HCl(1M)로 희석시키고, CH₂Cl₂로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 HCl(1M), 포화 NaHCO₃ 및 염수로 세척한다. 유기 층을 건조시키고, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키며, 잔사를 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 1:4)함으로써 정제하여 XXIVc를 무색 고체로서 수득한다.

단계 3:

THF/H₂O(1:1, 5ml) 중의 메틸 에스테르 XXIVc(381mg, 1.0mmol)의 용액을 LiOH·H₂O(62mg, 1.5mmol)로 처리하고 실온에서 3시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 수성 HCl로 산성화시키고, 진공 하에 농축시켜 자유 산을 수득한다.

-20℃에서 DMF/CH₂Cl₂(1:1, 5.0ml) 중의 산(254.9mg, 0.69mmol)의 용액을 아민 XXIIIj(159mg, 0.763mmol), EDCl(199mg, 1.04mmol), HOOBt(169.5mg, 1.04mmol) 및 NMM(280mg, 2.77mmol)로 처리한다. 반응 혼합물을 -20℃에서 48시간 동안 교반시킨 다음, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 수성 1M HCl로 희석시키며, EtOAc로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃, 수성 HCl, 염수로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공하에 농축시켜 XXIVd(470mg)를 갈색 고체로서 수득한다.

단계 4:

0℃에서 톨루엔 및 DMSO(1:1 20ml) 중의 아미드 XXIVd(470mg, 0.9mmol)의 용액을 EDCl(1.72g, 9.0mmol) 및 디클로로아세트산(0.37ml, 4.5mmol)으로 처리하고, 실온에서 4시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석시키고, 포화 NaHCO₃ 및 염수로 세척한다. 유기 층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 3:7)함으로써 정제하여 XXIV을 무색 고체로서 수득한다.

실시예 XXV: 식 XXV의 화합물의 제조:

단계 1:

CH₂Cl₂(20ml) 중의 Fmoc-글리신(Bachem, 2.0g, 6.87mmol)의 용액을 2-페닐-2-프로판올(Aldrich, 3.36g, 24.7mmol), DCC(1M 용액 CH₂Cl₂, 8.24ml), DMAP(167mg, 1.37mmol)로 처리하고, 실온에서 24시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, Et₂O(100ml)로 희석시킨다. 분리시킨 고체를 여과시키고, 여액을 포화 NaHCO₃로 세척한다. 유기 층을 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 1:5)함으로써 정제하여 에스테르 XXVc(1.1g)를 무색의 점성 액체로서 수득한다.

단계 2:

CH₂Cl₂(16.0ml) 중의 XXVc의 용액을 피페리딘(4.0ml)으로 처리하고, 실온에서 0.5시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 1:10 내지 1:1)함으로써 정제하여 아민 XXVd(420mg)를 무색 액체로서 수득한다.

단계 3:

-10℃에서 DMF/CH₂Cl₂(1:1, 40.0ml) 중의 산(2.0g, 5.5mmol)의 용액을 아민 XXIIIg(1.51g, 6.8mmol), EDCl(1.57g, 8.25mmol), HOOBt(1.41g, 8.25mmol) 및 NMM(2.5g, 24.7mmol)로 처리한다. 반응 혼합물을 0℃에서 48시간 동안 교반시킨 다음, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 수성 1M HCl(100ml)로 희석시키며, CH₂Cl₂(3 x 100ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃, 수성 HCl, 염수로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공하에 농축시켜 XXVe(3.17g)를 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용한다.

단계 4:

THF/H₂O/CH₃OH(1:1:1, 60ml) 중의 메틸 에스테르 XXVe(2.5g, 4.66mmol)의 용액을 LiOH·H₂O(200mg, 4.87mmol)로 처리하고 실온에서 4시간 동안 교반시킨다. 이 반응 혼합물을 수성 HCl로 산성화시키고, 진공 하에 농축시켜 자유 산을 수득한다.

-10℃에서 DMF/CH₂Cl₂(1:1, 6.0ml) 중의 산(200.0mg, 0.38mmol)의 용액을 아민 XXVd(78mg, 0.4mmol), EDCl(105mg, 0.55mmol), HOOBt(95mg, 0.55mmol) 및 NMM(150mg, 1.48mmol)로 처리한다. 반응 혼합물을 0℃에서 48시간 동안 교반시킨 다음, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 수성 1M HCl(30ml)로 희석시키며, CH₂Cl₂(3 x 30ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃(2 x 30ml), 수성 HCl, 염수(30ml)로 세척하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공하에 농축시켜 XXVf(240mg)를 갈색 고체로서 수득한다.

단계 5:

CH₂Cl₂(10ml) 중의 XXVf(240mg, 0.28mmol)의 용액을 데스-마틴 시약(Omega, 242mg, 0.56mmol)으로 처리하고 실온에서 2시간 동안 교반시킨다. 산화 반응을 완료한 후(TLC, 아세톤/헥산 1:4), 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃(20ml) 및 Na₂S₂O₃(10% 수용액, 20ml)로 희석시킨다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반시키고 CH₂Cl₂(3 x 30ml)로 추출한다. 합한 유기 층을 포화 NaHCO₃, 염수로 추출하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 1:5)함으로써 정제하여 XXV(122mg)를 무색 고체로서 수득한다.

실시예 XXVI: 식 XXVI의 화합물의 제조:

단계 1:

실온에서 아세토니트릴(100ml) 중의 N-Boc-3,4-데하이드로프롤린 XXVIa(5.0g, 23.5mmol), 디-3급-부틸 디카보네이트(7.5g, 34.4mmol) 및 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.40g, 3.33mmol)의 교반된 용액에 트리에틸아민(5.0ml, 35.6mmol)을 가한다. 생성된 용액을 이 온도에서 18시간 동안 교반시킨 다음 진공 하에 농축시킨다. 암갈색 잔사를 10 내지 25% EtOAc/헥산으로 용출시키면서 섬광 칼럼 크로마토그래피함으로써 정제하여 생성물 XXVIb를 담황색 오일(5.29g, 84%)로서 수득한다.

단계 2:

실온에서 클로로포름(120ml) 중의 데하이드로프롤린 XXVIb(10.1g, 37.4mmol), 벤질트리에틸암모늄 클로라이드(1.60g, 7.02mmol)의 교반된 용액에 50% 수성 수산화나트륨(120g)을 가한다. 이 온도에서 24시간 동안 격렬하게 교반시킨 후, 블랙 혼합물을 CH₂Cl₂(200ml) 및 디에틸 에테르(600ml)로 희석시킨다. 층을 분리시킨 후, 수용액을 CH₂Cl₂/Et₂O(1:2, 3 x 600ml)로 추출한다. 유기 층을 건조시키고(MgSO₄) 농축시킨다. 잔사를 5 내지 20% EtOAc/헥산을 사용하면서 섬광 칼럼 크로마토그래피함으로써 정제하여 XXVIc 9.34g(71%)를 회색 고체로서 수득한다.

단계 3:

CH₂Cl₂(25ml) 및 CF₃CO₂H(50ml) 중의 XXVIc(9.34g, 26.5mmol)의 용액을 실온에서 4.5시간 동안 교반시킨 후, 이를 진공 하에 농축시켜 갈색 잔사를 수득하고, 이를 추가의 정제없이 단계 4에 사용한다.

단계 4:

시판용의 진한 염산(4.5ml)을 메탄올(70ml) 중의 단계 3으로부터의 잔사 용액에 가하고, 생성된 혼합물을 오일 욕 속에서 65℃로 가온시킨다. 18시간 후, 상기 혼합물을 진공 하에 농축시켜 갈색 오일 XXVIe를 수득하고, 이를 추가의 정제없이 단계 5에 사용한다.

단계 5:

0℃에서 DMF(200ml) 중의 단계 4로부터의 프롤린 메틸 에스테르 XXVIe, 시판용 N-Boc-사이클로헥실글리신 XXVIf(10.2g, 40.0mmol) 및 [O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트](HATU)(16.0g, 42.1mmol)의 교반된 용액에 디이소프로필에틸아민(18.0ml, 104mmol)을 가한다. 오일 욕과 함께 실온으로 밤새 가온시킨 후(18시간), 반응 혼합물을 EtOAc(600ml), 5% H₃PO₄(150ml) 및 염수(150ml)로 희석시킨다. 유기 용액을 5% H₃PO₄(150ml), 포화 NaHCO₃(2 x 200ml)로 세척한 후, 이를 건조시키고(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 5 내지 20% EtOAc/헥산을 사용하면서 섬광 칼럼 크로마토그래피함으로써 정제하여 XXVIg 3.84g(32%, 3단계)를 회색 고체로서 수득한다.

단계 6:

THF/MeOH/H₂O(1:1:1, 90ml) 중의 메틸 에스테르 XXVIg(5.87g, 13.1mmol) 및 LiOH(1.65g, 39.3mmol)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반시킨다. 메탄올과 THF를 감압 하에 제거한다. 수용액을 1N HCl 수용액(50ml)을 사용하여 pH 약 2로 산성화시키고, 고체 염화나트륨으로 포화시킨 후, EtOAc(3 x 150ml)로 추출한다. 유기 용액을 합하고, 건조시키며(MgSO₄), 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 백색 고체 XXVIh(5.8g, 정량적)를 수득한다.

단계 7:

실시예 XXIII, 단계 11의 과정에 따라서, 목적 생성물 XXIIIi를 제조한다.

단계 8:

실시예 XXIII, 단계 12의 과정에 따라서, 목적 생성물 XXVI를 제조한다.

실시예 XXVII: 식 XXVII의 화합물의 제조:

단계 1:

실시예 XXIII, 단계 9의 과정에 따라서, 목적 생성물 XXVIIa를 제조한다.

단계 2:

실시예 XXIV, 단계 2의 과정에 따라서, 목적 생성물 XXVIIb를 제조한다.

단계 3:

실시예 XXIII, 단계 12의 과정에 따라서, 목적 생성물 XXVII를 제조한다.

실시예 XXVIII: 식 XXVIII의 화합물의 제조:

단계 1:

실시예 XXIII, 단계 3 내지 6의 과정에 따라서, 중간체 XXVIIIb를 제조한다.

단계 2:

앞서 실시예 IX, 단계 2a에 기재된 방식으로, 실시예 XXIV, 단계 2로부터의 산(XXVIIIc)(0.7g)을 상기 단계 1로부터의 생성물(0.436g), HATU(0.934g) 및 DIPEA(1.64ml)와 반응시켜 목적 생성물 XXVIIId를 0.66g 수득한다.

단계 3:

앞서 실시예 XX, 단계 7에 기재된 방식으로, 단계 2의 생성물(0.5g)을 데스-마틴 시약(1g)과 반응시킨다. 섬광 칼럼 크로마토그래피(40% EtOAc, 헥산, 실리카)함으로써 정제하여 생성물 XXVIIIe를 0.35g 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 522(M+H⁺).

단계 4:

단계 4의 생성물(0.3g)을 1/1 H₂O/MeOH 용액(20ml) 및 NaHCO₃ 고체(242mg, 5당량)에 가한다. 실온에서 18시간 동안 교반시킨 후, 반응물을 EtOAc로 희석시키고, 층을 분리시킨다. 수성 층을 HCl 1.0N으로 pH 2로 산성화시키고, EtOAc로 추출한다. EtOAc 층을 염수로 세척한 다음, MgSO₄로 건조시키며, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 생성물 XXVIIIf를 백색 분말(0.26g)로서 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 508(M+H⁺).

단계 5:

단계 5의 생성물(0.15g)을 CH₂Cl₂에 용해시키고, HATU(0.137g), NH₄Cl(0.08g, 5당량) 및 DIPEA(0.53ml)와 반응시킨다. 실온에서 2시간 후, 반응물을 EtOAc로 희석시키고, 10% 시트르산 용액으로 세척한 다음, 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척한다. EtOAc 층을 염수로 세척한 다음, MgSO₄ 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 조 혼합물을 수득한다. 섬광 칼럼 크로마토그래피(30% 아세톤, 헥산, 실리카)함으로써 정제하여 목적 생성물 XXVIII(0.096g)을 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 507(M+H⁺).

실시예 XXIX: 식 XXIX의 화합물의 제조:

단계 1:

CH₂Cl₂(75ml) 중의 출발 알데히드(4.0g)의 0℃ 용액에 아세트산(2.0당량, 2.15ml)을 가한 다음, 메틸이소시아노아세테이트(1.1당량, 1.9ml)를 가한다. 이어서, 상기 반응물을 점차적으로 실온으로 가온시킨다. 18시간 후(밤새), 반응물을 EtOAc로 희석시키고, 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척한다. EtOAc 층을 염수로 세척한 다음, MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 조 혼합물을 수득한다. 섬광 칼럼 크로마토그래피(30 내지 40% EtOAc, 헥산, 실리카)함으로써 정제하여 생성물 XXIXa(4.5g)을 수득한다.

단계 2:

THF(100ml) 중의 XXIXa(4.4g)의 0℃ 용액에 1.0N LiOH 용액 26ml(2.2당량)를 가한다. 반응물을 이 온도에서 2시간 동안 교반시킨 다음, 실온으로 가온시킨다. 2시간 후, 반응 혼합물을 1.0N HCl 용액으로 pH 2로 산성화시킨다. EtOAc를 가하고, 층을 분리시킨다. EtOAc 층을 염수로 세척한 다음, MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 생성물 XXIXb(3.7g)을 수득한다.

단계 3:

앞서 실시예 XXI, 단계 4에 기재된 방식으로, 산 XXIXb를 실시예 XV로부터의 아민과 반응시킨다. 이로써 생성된 중간체를 앞서 실시예 XXIII, 단계 9에 기재된 방식으로 HCl로 처리하여 생성물 XXIXc를 수득한다.

단계 4:

산 XXVIIIc(2.43g)을 CH₂Cl₂에 용해시키고, 앞서 실시예 IX, 단계 2a에 기재된 방식으로, 아민 XXIXc(2.47g), HATU(2.5g) 및 DIPEA(5.8ml)와 반응시키고, 이를섬광 칼럼 크로마토그래피(4% MeOH, CH₂Cl₂, 실리카)함으로써 정제하여 목적 생성물 XXIXd(4.35g)을 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 727(M+H⁺).

단계 5:

앞서 실시예 XX, 단계 7에 기재된 방식으로, 단계 4의 생성물(4.2g)을 데스-마틴 시약(6.4g)과 반응시킨다. 섬광 칼럼 크로마토그래피(100% EtOAc, 실리카)함으로써 정제하여 최종 생성물 XXIX를 3g 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 725(M+H⁺).

실시예 XXX: 식 XXX의 화합물의 제조:

단계 1:

알코올 2-(트리플루오로메틸)프로판-2-올(1.28g)을 무수 CH₃CN(50ml) 중의 N,N-디석시이미니딜 카보네이트(3.84g) 및 Et₃N(4.2ml)과 18시간 동안 반응시킨다. 이 혼합물을 EtOAc(200ml)로 희석시킨 다음 여과시킨다. 여액을 NaHCO₃, 염수로 세척한 다음 MgSO₄ 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 조 혼합물을 수득한다. 섬광 칼럼 크로마토그래피(50% EtOAc, 헥산, 실리카)함으로써 정제하여 목적 생성물 XXXa(0.3g)를 수득한다.

단계 2:

실시예 XXIX로부터의 생성물(0.3g)을 디옥산 중의 4.0N HCl 100ml로 처리한다. 1시간 후, Et₂O 200ml을 가하고, 이로써 생성된 침전물을 여과 제거하고, 진공 하에 건조시켜 생성물 XXXb(0.27g)을 백색 분말로서 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 625(M-HCl + H⁺).

단계 3:

CH₂Cl₂(5ml) 중의 XXXb(0.05g)의 실온 용액에 DIPEA(0.040ml), XXXa(1.5당량, 0.030g)을 가한 다음, DMAP 1개 결정을 가한다. 30분 후, 반응물을 EtOAc(20ml)로 희석시키고, HCl 1.5N, NaHCO₃ 및 염수로 세척한다. EtOAc 층을 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 조 혼합물을 수득한다. 조제적 크로마토그래피(40% 아세톤, 헥산, 실리카)함으로써 정제하여 목적 생성물 XXX(0.044g)을 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 779(M+H⁺).

실시예 XXXI: 식 XXXI의 화합물의 제조:

단계 1:

CH₂Cl₂(5ml) 중의 XXXb(0.05g)의 실온 용액에 DIPEA(0.040ml) 및 3급-부틸이소시아네이트(1.2당량, 0.01ml)을 가한다. 18시간 후, 반응물을 EtOAc(20ml)로 희석시키고, HCl 1.5N, NaHCO₃ 및 염수로 세척한다. EtOAc 층을 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시킨 다음 진공 하에 농축시켜 조 혼합물을 수득한다. 조제적 크로마토 그래피(100% EtOAc, 실리카)함으로써 정제하여 최종 생성물 XXXI(0.021g)을 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 724(M+H⁺).

실시예 XXXII: 식 XXXII의 화합물의 제조:

단계 1:

앞서 실시예 XXX, 단계 2에 기재된 방식으로, 실시예 XXVIII로부터의 생성물을 처리하여 생성물 XXXIIa를 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 407(M-HCl + H⁺).

단계 2:

앞서 실시예 XXX, 단계 3에 기재된 방식으로, 아민 XXXIIa를 XXXa와 반응시켜 목적 생성물 XXXII를 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 508(M+H⁺).

실시예 XXXIII: 식 XXXIII의 화합물의 제조:

단계 1:

앞서 실시예 XXXI, 단계 1에 기재된 방식으로, 아민 XXXIIa를 3급-부틸이소시아네이트와 반응시켜 생성물 XXXIII를 수득한다. 질량 스펙트럼(LCMS) 561(M+H⁺).

실시예 XXXIV: 식 XXXIV의 화합물의 제조:

단계 1:

무수 메틸렌 클로라이드(35ml) 중의 에스테르(6.0g)와 분자체(5.2g)의 혼합물에 피롤리딘(5.7ml, 66.36mmol)을 가한다. 이로써 생성된 갈색 슬러리를 N₂ 하에 실온에서 24시간 동안 교반시키고, 여과시키며, 무수 CH₃CN으로 세척한다. 합한 영액을 농축시켜 목적 생성물을 수득한다.

단계 2:

CH₃CN(35ml) 중의 전 단계로부터의 생성물의 용액에 무수 K₂CO₃, 메탈릴 클로라이드(2.77g, 30.5mmol), NaI(1.07g, 6.7mmol)을 가한다. 이로써 생성된 슬러리를 N₂ 하의 주위 온도에서 24시간 동안 교반시킨다. 빙수 50ml을 가한 다음, pH 1이 될 때까지 2N KHSO₄ 용액을 가한다. EtOAc(100ml)을 가하고, 이 혼합물을 0.75 시간 동안 교반시킨다. 합한 유기 층을 수집하고, 염수로 세척하며, MgSO₄ 상으로 건조시키고, 증발시켜 목적 생성물을 수득한다.

단계 3:

전 단계로부터의 생성물(2.7g, 8.16mmol)을 디옥산(20ml)에 용해시키고, 신선하게 제조된 1N LiOH(9ml)로 처리한다. 이 반응 혼합물을 N₂ 하의 주위 온도에서 20시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 EtOAc에 흡수시키고 H₂O로 세척한다. 합한 수성 상을 0℃로 냉각시키고, 1N HCl을 사용하여 pH 1.65로 산성화시킨다. 혼탁한 혼합물을 EtOAc로 추출한다(2 x 100ml). 합한 유기 층을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상으로 건조시키며 농축시켜 목적하는 산(3.40g)을 수득한다.

단계 4:

CH₂Cl₂(55ml) 중의 NaBH(OAc)₃(3.93g, 18.5mmol)의 현탁액에 무수 CH₂Cl₂(20ml) 및 아세트산(2ml) 중의 앞서 단계로부터의 생성물 용액을 가한다. 슬러리를 주위 온도에서 20시간 동안 교반시킨다. 빙수(100ml)를 상기 슬러리에 가하고 1/2시간 동안 교반시킨다. 유기 층을 분리시키고, 여과시키며, 건조시킨 다음 증발시켜 목적 생성물을 수득한다.

단계 5:

MeOH(40ml) 중의 앞서 단계로부터의 생성물(1.9g) 용액에 과량의 CH₂N₂/Et₂O 용액으로 처리하고 밤새 교반시킨다. 반응 혼합물을 건조 농축시켜 조 잔사를 수득한다. 이 잔사를 EtOAc/헥산 구배로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 순수한 목적 생성물을 1.07g 수득한다.

단계 6:

무수 CH₂Cl₂(40ml) 중의 앞서 단계로부터의 생성물(1.36g)의 용액에 BF₃·Me₂O(0.7ml)로 처리한다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반시키고, 포화 NaHCO₃(30ml)로 급냉시키며 1/2 시간 동안 교반시킨다. 유기 층을 분리시키고, 합한 유기 층을 염수로 세척하며, MgSO₄ 상으로 건조시키며, 농축시켜 조 잔사를 수득한다. 이 잔사를 EtOAc/헥산 구배로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 목적 생성물을 0.88g 수득한다.

단계 7:

MeOH(30ml) 중의 앞서 단계로부터의 생성물(0.92g)의 용액에 10% Pd/C(0.16g)을 실온에서 가하고, 1기압 하의 주위 온도에서 수소화 반응시킨다. 이 반응 혼합물을 4시간 동안 교반시키고 건조 농축시켜 목적 화합물을 수득한다.

단계 8:

실시예 XXIII, 단계 10의 과정에 따라서, 목적 생성물을 제조한다.

단계 9:

실시예 XXIV, 단계 3의 과정에 따라서, 목적하는 산 생성물을 제조한다.

단계 10:

실시예 XXIX, 단계 4-5의 과정에 따라서, 목적 생성물 XXXIV을 제조한다.

실시예 XXXV: 식 XXXV의 화합물의 제조:

단계 1:

0℃에서 THF(30ml) 중의 트리에틸 포스포네이트(44.8g)의 용액을 THF 중의 나트륨 비스(트리메틸실릴아미드)의 1M 용액(200ml)으로 처리한다. 이로써 생성된 혼합물을 RT에서 0.5시간 동안 교반시킨 다음, 0℃로 냉각시킨다. THF(50ml) 중의 1,4-사이클로헥산디온 에틸렌 케탈(15.6g)의 용액을 적가하고, 이로써 생성된 용액을 RT에서 18시간 동안 교반시킨다. 이어서, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 찬 수성 시트르산으로 처리한 다음, 혼합물을 EtOAc로 추출한다. 추출물을 포화 수성 NaHCO₃로 세척한 다음 염수로 세척하고; 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키며, 여과시키고, 여액을 농축시킨다. 잔사를 CH₂Cl₂/EtOAc의 구배로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물(21g)을 92% 수율로 수득한다. 질량 스펙트럼(FAB) 227.3(M+H⁺).

단계 2:

앞서 단계로부터의 생성물(20g)을 EtOH(150ml)에 용해시키고, 1수소 기압 하에 10% Pd/C로 3일 동안 처리한다. 혼합물을 여과시키고, 여액을 증발시켜 표제 화합물(20.3g)을 100% 수율로 수득한다. 질량 스펙트럼(FAB) 229.2(M+H⁺).

단계 3:

앞서 단계로부터의 생성물(20g)을 MeOH(150ml)에 용해시키고, 수(50ml) 중의 LiOH(3.6g)의 용액으로 처리한다. 이 혼합물을 18시간 동안 교반시키고, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 찬물(100ml)에 용해시키고, 용액을 5N HCl로 pH 2-3으로 산성화시키고, 이로써 생성된 혼합물을 EtOAc로 추출한다. 추출물을 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며, 여액을 증발시켜 표제 화합물(17.1g)을 97% 수율로 수득한다. 질량 스펙트럼(FAB) 201.2(M+H⁺).

단계 4:

1. 앞서 단계로부터의 생성물(3.0g)을 Et₂O(150ml)에 용해시키고, Et₃N(2.1ml)로 처리한 다음, 이 용액을 -78℃로 냉각시킨다. 피발로일 클로라이드(1.85ml)를 적가하고, 0.25시간 동안 더 교반시킨 후, 반응물을 0.75시간에 걸쳐 0℃로 가온시킨 다음, -78℃로 재냉각시켜 파트 2에서 반응용으로 사용하기 위한 혼합 무수물 용액을 수득한다.

2. THF(22ml) 중의 (S)-4-벤질-2-옥사졸리딘온(2.66g)의 용액을 -78℃로 냉각시키고, 헥산 중의 n-부틸리튬의 1.6M 용액(9.38ml)을 적가한다. 이 온도에서 0.33시간 더 교반시킨 후, 이 용액을 캐뉼라를 통하여 파트 1의 찬 용액에 옮긴다. 혼합물을 -78℃에서 교반시킨 다음, 0℃로 가온시키고, 이 온도에서 0.5시간 동안 교반시킨다. 유기 층을 분리시키고, 수성 층을 Et₂O로 추출하며, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키며, 여과시킨 다음, 여액을 증발시킨다. 잔사를 헥산/EtOAc(9:1) 구배로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물(5.0g)을 93% 수율로 수득한다. 질량 스펙트럼(FAB) 360.4(M+H⁺).

단계 5:

앞서 단계로부터의 생성물(2.7g)을 THF(25ml)에 용해시키고, -78℃로 냉각시키며, 캐뉼라를 통해 -78℃에서 THF(25ml) 중의 0.5M 칼륨 비스(트리메틸실릴)아미드/톨루엔(16.5ml)의 용액에 옮키고, 이로써 생성된 용액을 -78℃에서 0.75시간 동안 교반시킨다. 이 용액에 캐뉼라를 통하여, -78℃로 예비 냉각된 THF(25ml) 중의 트리실 아지드(3.01g)의 용액을 가한다. 1.5분 후, 반응물을 아세트산(1.99ml)으로 급냉시키고, 반응물을 RT로 가온시킨 다음, 16시간 동안 교반시킨다. 반응물을 EtOAc(300ml)로 희석시키고, 5% 수성 NaCl로 세척한다. 수성 상을 EtOAc로 추출하고, 합한 유기 상을 포화 수성 NaHCO₃로 세척한 다음 염수로 세척하며, 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며 여액을 농축시킨다. 잔사를 EtOAc/헥산(1:3)으로 용출시키면서 실리카 겔 상에 크로마토그래피하여 표제 화합물(2.65g)을 88% 수율로 수득한다.

단계 6:

앞서 단계의 생성물(11.4g)을 95% 포름산(70ml)에 용해시키고, 교반시키면서 70℃에서 0.5시간 동안 가열한다. 이 용액을 진공 하에 증발시키고, 잔사를 EtOAc에 흡수시킨다. 이 용액을 포화 수성 NaHCO₃로 세척한 다음, 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며 여액을 증발시킨다. 잔사를 실리카 겔 상에 크로마토그래피하여 표제 화합물(8.2g)을 수득한다.

단계 7:

앞서 단계의 생성물(8.2g)을 CH₂Cl₂(16ml)에 용해시키고, RT에서 디에틸아미노설퍼 트리플루오라이드(DAST, 7.00ml)으로 3시간 동안 처리한다. 이 반응물을 빙수(200cc)에 따라 붓고, CH₂Cl₂로 추출한다. 추출물을 포화 수성 NaHCO₃로 세척한 다음 염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며 여액을 증발시킨다. 잔사를 EtOAc/헥산(15:85)으로 용출시키면서 실리카 겔 상에 크로마토그래피하여 표제 화합물(4.5g)을 52% 수율로 수득한다.

단계 8:

앞서 단계의 생성물(3.7g)을 THF(150ml)와 물(48ml)의 혼합물에 용해시키고, 0℃로 냉각시키며, 30% H₂O₂(3.95ml)로 처리한 다음 LiOH·H₂O(0.86g)으로 처리한다. 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시킨 다음, 수(30ml) 중의 Na₂SO₃(5.6g) 의 용액으로 급냉시킨 후, 0.5N NaHCO₃(100ml) 용액으로 급냉시킨다. 이 혼합물을 진공 하에 농축시켜 1/2 용적으로 만들고, 물로 희석시키며(500ml가 되도록 함), CH₂Cl₂(4 x 200ml)로 추출한다. 수성 상을 5N HCl로 pH 1-2로 산성화시키고, EtOAc(4 x 200ml)로 추출한다. 이 추출물을 염수로 세척한 다음, 무수 Na₂SO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며, 여액을 증발시켜 표제 화합물(1.95g)을 91% 수율로 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용한다.

단계 9:

앞서 실시예의 생성물(2.6g)을 Et₂O(50ml)에 용해시키고, 이 용액이 황색을 유지할 때까지 Et₂O 중의 CH₂N₂의 용액으로 적가 처리한다. 이 용액을 18시간 동안 교반시키고, 진공 하에 증발시켜 표제 화합물(2.8g)을 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용한다.

단계 10:

앞서 단계의 생성물(1.95g)을 MeOH(150ml)에 용해시키고, 포름산(1.7ml)으로 처리한 다음, 1수소 기압 하에서 10% Pd/C(3.3g, Degussa 유형 E101)으로 1.5시간 동안 처리한다. 이 혼합물을 여과시키고, 여액을 증발시켜 표제 화합물(2.1g)을 포름산 염으로서 수득하는데, 이를 다음 단계에 직접 사용한다.

단계 11:

앞서 단계의 생성물(2.1g)을 1,4-디옥산(100ml)에 용해시키고, 디-3급-부틸 디카보네이트(1.9g)을 가한 다음, 디이소프로필에틸아민(2.9ml)을 가한다. 이 용액을 18시간 동안 교반시키고, 진공 하에 농축시킨다. 잔사를 수성 5% KH₂PO₄로 처리하고, 혼합물을 EtOAc로 추출한다. 추출물을 염수로 세척한 다음, 무수 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며, 여액을 증발시킨다. 잔사를 CH₂Cl₂/Et₂O의 구배로 용출시키면서 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물(2.5g)을 99% 수율로 수득한다. 질량 스펙트럼(FAB) 307.9(M+H⁺).

단계 12:

앞서 단계의 생성물(2.5g)을 1,4-디옥산(35ml)에 용해시키고, 수성 1M LiOH(17ml)으로 세척하며, 2시간 동안 교반시킨다. 이 혼합물을 빙수(125cc)로 급냉시키고, 혼합물을 3N HCl로 pH 3-4로 산성화시키며, EtOAc로 추출한다. 이 추출물을 무수 MgSO₄ 상으로 건조시키고, 여과시키며, 여액을 증발시켜 표제 화합물(2.3g)을 96% 수율로 수득한다. 질량 스펙트럼(FAB) 294.0(M+H⁺).

단계 13:

단계 14:

단계 15:

실시예 XXIX, 단계 4의 과정에 따라서, 목적하는 산 생성물을 제조한다.

실시예 XXXVI: 식 XXXVI 및 XXXVIII의 화합물의 제조:

다음 반응식에 따라서, 상기 논의된 제조 실시예 11 내지 15를 활용하여, 식 XXXVI 및 XXXVIII의 화합물을 제조한다:

공지된 과정에 의해 다음과 같은 식 XXXVIa의 화합물로부터 식 XXXVIb의 화합물을 제조한다:

MeOH 100ml 중의 화합물 XXXVIa(6.58g, 22mmol)의 용액에 10% Pd/C(0.8g) 및 p-톨루엔 설폰산(4.2g)을 가한다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 수소화 반응시킨 다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 과량의 MeOH로 세척한다. 합한 여액을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물 XXXVIb를 검상 물질로서 수득한다. 상기 반응식에 제시된 바와 같은 경로를 수행하고, 제조 실시예 11 내지 15에 따라서, XXXVIb를 XXXVI 및 XXXVII로 전환시킨다.

실시예 XXXVIII: 식 XXXVIII의 화합물의 제조:

다음 반응식을 이용하고, 앞서 논의된 제조 실시예 11 내지 15에 따라서, 식 XXXVIII의 화합물을 제조한다:

실시예 XXXIX: 식 XXXIX의 화합물의 합성:

단계 1:

문헌[참조: H. Mcklwain(J. Chem. Soc 1941, 75)]의 과정에 의해 제조된 설포닐 클로라이드 XXXIXa의 용액을 -78℃에서 t-부틸메틸아민 및 트리에틸아민의 1.1당량의 혼합물에 적가하고, 실온에서 2시간 동안 교반시킨다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, Hex/아세톤 4:1)함으로써 정제하여 설폰아미드 XXXIXb를 무색 오일로서 수득한다.

단계 2:

Cbz-보호된 아민 XXXIXb의 용액을 메탄올에 용해시키고, Pd/C(5%w/w) 5몰%로 처리한 다음 60psi에서 수소화반응시킨다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 플러그를 통해 여과시키고, 진공 하에 농축시켜 자유 아민 XXXIXc를 수득하는데, 이는 정치시 고형화된다.

단계 3:

아민 XXVd를 XXXIXc로 대체하는 것을 제외하고는, XXVf의 합성에 대한 과정과 유사하게, 하이드록시 설폰아미드 XXXIXd를 합성한다. 이러한 조 반응 혼합물을 다음 반응에 직접 사용한다.

단계 4:

XXV의 합성 과정(단계 5)을 수행하면서 데스-마틴 시약을 사용하여, 하이드록시 아민 XXXIXd를 화합물 XXXIX로 산화시킨다. 이러한 조 혼합물을 크로마토그래피(SiO₂, 아세톤/헥산 3:7)함으로써 정제하여 XXXIX를 무색 고체로서 수득한다.

HCV 프로테아제 억제 활성에 대한 검정:

분광측정 검정:

본 발명의 화합물을 대상으로 하여, 문헌[참조: R. Zhang et al., Analytical Biochemistry, 270(1999) 268-275; 이의 전문이 본원에 참조문헌으로써 삽입됨]에 기재된 과정에 의해 HCV 세린 프로테아제에 대한 분광측정 검정을 수행한다. 색소생성성 에스테르 기질의 단백질 분해에 기초한 상기 검정이 HCV NS3 프로테아제 활성을 지속적으로 모니터하는데 적합하다. 상기 기질은 NS5A-NS5B 연결 서열[Ac-DTEDVVX(Nva)(여기서, X는 A 또는 P이다)]의 P 측면으로부터 유도되는데, 이의 C-말단 카복실 그룹은 4가지 상이한 발색성 알코올(3- 또는 4-니트로페놀, 7-하이드록시-4-메틸-쿠마린 또는 4-페닐아조페놀) 중의 하나로 에스테르된다. 다음에는, 이들 신규한 분광측정 에스테르 기질의 합성, 성상 확인 및 이를 고출력 스크리닝에 적용하는 것과, HCV NS3 프로테아제 억제제의 상세한 역학 평가 내용이 제시되어 있다.

재료 및 방법:

재료: 검정 관련 완충액에 대한 화학 시약은 공급처[Sigma Chemical Company(St. Louis, Missouri)]로부터 수득한다. 펩티드 합성용 시약은 공급처[Aldrich Chemicals, Novabiochem(San Diego, California), Applied Biosystems(Foster City, California) 및 Perseptive Biosystems(Framingham, Massachusetts)]로부터 수득한다. 펩티드는 수동으로 합성하거나 자동화 ABI 모델 431A 합성기[공급처: Applied Biosystems] 상에서 합성한다. UV/VIS 분광계 모델 LAMBDA 12는 공급처[Perkin Elmer(Norwalk, Connecticut)]로부터 구입하고, 96-웰 UV 판은 공급처[Corning(Corning, New York)]로부터 수득한다. 예비가온 블럭(prewarming block)은 공급처[USA Scientific(Ocala, Florida)]로부터 수득하고, 96-웰 판 진동기는 공급처[Labline Instruments(Melrose Park, Illinois)]로부터 수득한다. 모노크로미터(monochrometer)가 장착된 Spectramax Plus 미세역가판 판독기는 공급처[Molecular Devices(Sunnyvale, California)]로부터 수득한다.

효소 제조:

문헌[참조: D.L. Sali et al., Biochemistry, 37(1998) 3392-3401]에 공개된 과정을 사용하여, 재조합 헤테로 이량체성 HCV NS3/NS4A 프로테아제(균주 1a)를 제조한다. 아미노산 분석에 의해 미리 정량화된 재조합 HCV 프로테아제 표준물을 사용하여 바이오래드(Biorad) 염료 방법에 의해, 단백질 농도를 결정한다. 검정을 개시하기에 앞서, 바이오래드 Bio-Spin P-6 예비패킹된 칼럼을 활용하여, 효소 저장 완충액(50mM 인산나트륨 pH 8.0, 300mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% 라우릴 말토시드 및 10mM DTT)을 검정용 완충액(25mM MOPS pH 6.5, 300mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% 라우릴 말토시드, 5μM EDTA 및 5μM DTT)로 교환한다.

기질 합성 및 정제:

기질 합성을 문헌[참조: R. Zhang et al.(ibid)]에 보고된 바와 같이 수행하고, 표준 프로토콜[참조: K. Barlos et al., Int. J. Pept. Protein Res., 37(1991), 513-520]을 사용하여 Fmoc-Nva-OH가 2-클로로트리틸 클로라이드 수지를 향하게 함으로써 상기 합성을 개시한다. 연속해서, Fmoc 화학을 이용하여 수동으로 또는 자동화 ABI 모델 431 펩티드 합성기 상에서 상기 펩티드를 어셈블리한다. N-아세틸화 및 완전히 보호된 펩티드 단편을, 30분 동안 디클로로메탄(DCM) 중의 10% 아세트산(HOAc) 및 10% 트리플루오로에탄올(TFE)에 의해, 또는 10분 동안 DCM 중의 2% 트리플루오로아세트산(TFA)에 의해 상기 수지로부터 절단한다. 합한 여액과 DCM 세척물을 공비 증발시켜(또는 Na₂CO₃ 수용액에 의해 반복적으로 추출시켜) 절단에 사용된 산을 제거한다. DCM 상을 Na₂SO₄으로 건조시킨 다음 증발시킨다.

상기 에스테르 기질을 표준 산-알코올 커플링 과정[참조: K. Holmber et al., Acta Chem. Scand., B33(1979) 410-412]을 사용하여 어셈블리한다. 펩티드 단편을 무수 피리딘(30 내지 60mg/ml)에 용해시키고, 이에 10몰 당량의 발색단 및 촉매량(0.1당량)의 파라-톨루엔설폰산(pTSA)을 가한다. 디사이클로헥실카보디이미드(DCC, 3당량)를 가하여 커플링 반응을 개시시킨다. 생성물 형성을 HPLC로 모니터한 결과, 실온에서 12 내지 72시간 내에 반응이 완료된 것으로 밝혀졌다. 피리딘 용매를 진공하에 증발시키고, 톨루엔으로 공비 증발시켜 추가로 제거한다. 상기 펩티드 에스테르를 2시간 동안 DCM 중의 95% TFA로 탈보호시키고, 무수 에틸 에테르로 3회 추출하여 과량의 발색단을 제거한다. 이와 같이 탈보호된 기질을, 30% 내지 60% 아세토니트릴 구배(6개의 칼럼 용적을 이용함)를 이용하여 C3 또는 C8 칼럼 상에서 역상 HPLC함으로써 정제한다. HPLC 정제 후의 전체 수율은 대략 20 내지 30%이다. 분자량은 전자분무 이온화 질량 분광법으로 확인하였다. 상기 기질을 건조 작용하에 무수 분말 형태로 저장한다.

기질 및 생성물의 스펙트럼:

기질 및 상응하는 발색단 생성물의 스펙트럼을 pH 6.5 검정용 완충액에서 수득한다. 다중 희석물을 사용하여 1cm 큐벳에서의 최적의 오프-피크(optimal off- peak) 파장(3-Np 및 HMC의 경우에는 340nm이고, PAP의 경우에는 370nm이며, 4-Np의 경우에는 400nm이다)에서 감광 계수(extinction coefficient)를 결정한다. 최적의 오프-피크 파장은 기질과 생성물 간의 최대 흡광도 분별차를 가져다 주는 파장으로서 정의된다[(생성물 OD - 기질 OD)/기질 OD].

프로테아제 검정:

96-웰 미세역가판에서 200㎕ 반응 혼합물을 사용하여 30℃에서 HCV 프로테아제 검정을 수행한다. 검정용 완충액 조건(25mM MOPS pH 6.5, 300mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% 라우릴 말토시드, 5μM EDTA 및 5μM DTT)을 NS3/NS4A 헤테로 이량체에 대해 최적화시킨다[참조: D.L.Sali et al., ibid]. 전형적으로, 완충액, 기질 및 억제제의 150㎕ 혼합물을 웰에 놓아두고(DMSO의 최종 농도 4% v/v), 30℃에서 대략 3분 동안 예비항온배양한다. 이어서, 검정용 완충액 중의 예비가온된 프로테아제 50㎕(12nM, 30℃)를 사용하여 상기 반응을 개시한다(최종 용적 200㎕). 상기 판을 대상으로 하여 일정한 검정 기간(60분)에 걸쳐, 모노크로미터가 장착된 Spectromax Plus 미세역가판 판독기를 사용하여 적당한 파장(3-Np 및 HMC의 경우에는 340nm이고, PAP의 경우에는 370nm이며, 4-Np의 경우에는 400nm이다)에서의 흡광도 변화에 대해 모니터한다[컷오프 필터(cutoff filter)를 활용하는 판 판독기를 이용하여, 허용되는 수준의 결과를 수득할 수 있다]. Nva와 발색단 간의 에스테르 연결을 단백질 분해적으로 절단하는 것은, 비-효소적 가수분해에 대한 대조군으로서 효소가 전혀 없는 블랭크에 대한 적당한 파장에서 모니터한다. 30배 기질 농도 범위(약 6 내지 200μM)에 걸쳐, 기질 역학 파라미터를 평가한다. 선형 회귀를 이 용하여 초기 속도를 결정하고, 비-선형 회귀 분석(Mac Curve Fit 1.1, K. Raner)을 이용하여 미카엘리스-멘텐(Michaelis-Menten) 방정식에 해당 데이터를 고정시킴으로써 역학 상수를 수득한다. 해당 효소가 완전히 활성이라는 전제하에 턴오버(turnover) 수(k_cat)를 계산한다.

억제제 및 불활성화제의 평가:

경쟁적 억제 역학에 대한 재배열된 미카엘리스-멘텐 방정식: v_o/v_i = 1 + [I]_o/(K_i*(1 + [S]_o/K_m))[여기서, v_o는 억제되지 않은 초기 속도이고, v_i는 소정의 억제제 농도 ([I]_o)의 억제제의 존재 하 초기 속도이며, [S]_o는 사용된 기질 농도이다]에 따라서 v_o/v_i 대 억제제 농도([I]_o)를 플롯팅함으로써, 경쟁적 억제제 Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27), Ac-DTEDVVA(Nva)-OH 및 Ac-DTEDVVP(Nva)-OH에 대한 억제 상수(K_i*)를, 고정된 농도의 효소 및 기질에서 실험적으로 결정한다. 이로써 생성된 데이터를, 선형 회귀를 이용하여 고정시키고, 생성 기울기 1/(K_i*(1 + [S]_o/K_m))를 사용하여 K_i* 값을 계산한다.

본 발명의 각종 화합물에 대해 수득된 K_i* 값이 전술된 표에 제시되어 있고, 여기서는 화합물이 K_i* 값 범위 순서로 배열되었다. 이들 시험 결과로부터, 당업자는 본 발명의 화합물이 NS3-세린 프로테아제 억제제로서 탁월한 효능을 지니고 있음을 명백히 알 수 있을 것이다.

본 발명이 상기 제시된 특정 양태와 연계해서 기재되긴 하였지만, 본 발명의 많은 대체 방안, 변형 및 기타 변화가 당업자에게 명백할 것이다. 이러한 대체 방안, 변형 및 변화 역시 본 발명의 요지 및 범위 내에 속한다.

[표 2]

[표 4]

[표 5]

]

Claims

활성 성분으로서 다음 화학식 I의 화합물을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물.

화학식 I

상기식에서,

Y는 알킬, 알킬-아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 아릴-헤테로아릴, 알킬-헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬옥시, 알킬-아릴옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클로알킬옥시, 사이클로알킬옥시, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬-아릴아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 사이클로알킬아미노 및 헤테로사이클로알킬아미노로 이루어진 그룹 중에서 선택되는데, 단, Y는 X¹¹ 또는 X¹²에 의해 임의로 치환될 수 있고;

X¹¹은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬, 아릴, 알킬아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 알킬헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬인데, 단, X¹¹은 X¹²에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있으며;

X¹²는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 알킬설폰아미도, 아릴설폰아미도, 카복시, 카브알콕시, 카복스아미도, 알콕시카보닐아미노, 알콕시카보닐옥시, 알킬우레이도, 아릴우레이도, 할로겐, 시아노 또는 니트로인데, 단, 상기 알킬, 알콕시 및 아릴은 X¹² 중에서 독립적으로 선택된 잔기에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있고;

R¹은 COR⁵이며, R⁵는 CF₃, C₂F₅, C₃F₇, CF₂R⁶ 또는 R⁶이며, R⁶, R⁸, R⁹ 및 R¹⁰은 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, [CH(R^1')]_pCOOR¹¹, [CH(R^1')]_pCONR¹²R¹³, [CH(R^1')]_pSO₂R¹¹, [CH(R^1')]_pCOR¹¹, [CH(R^1')]_pCH(OH)R¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')R', CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONHCH(R^5')COOR¹¹, 및 CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONHCH(R^5')CONR¹²R¹³으로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되며, R^1', R^2', R^3', R^4', R^5', R¹¹, R¹² 및 R¹³은 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬-아릴, 알킬-헤테로아릴, 아릴-알킬 및 헤테로아르알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고;

Z는 O, N, CH 또는 CR 중에서 선택되며;

W는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, W가 존재하는 경우, W는 C=O, C=S, C(=N-CN) 또는 SO₂ 중에서 선택되며;

Q는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, Q가 존재하는 경우, Q는 CH, N, P, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CRR')_p, O, NR, S 또는 SO₂이며; Q가 부재하는 경우, M은 또한 존재하거나 또는 부재할 수 있으며; Q와 M이 부재하는 경우, A는 L에 직접 연결되고;

A는 O, CH₂, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p, (CRR')_p, NR, S 또는 SO₂이며;

E는 CH, N 또는 CR, 또는 A 또는 L에 대한 이중 결합이고;

G는 부재하고, E는, G가 연결된 바와 같은 화학식 I 내의 탄소 원자에 직접적으로 연결되고;

J는 존재하고, J는 (CH₂)_p, (CHR)_p, (CRR')_p, SO₂, NH, NR 또는 O이며;

L은 존재하고, L은 CH, CR, O, S 또는 NR이고;

M은 존재하거나 또는 부재할 수 있고, M이 존재하는 경우, M은 O, NR, S, SO₂, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p, 또는 (CRR')_p이며;

p는 0 내지 6의 수이고;

R, R', R², R³ 및 R⁴는 H; C₁-C₁₀ 알킬; C₂-C₁₀ 알케닐; C₃-C₈ 사이클로알킬; C₃-C₈ 헤테로사이클로알킬, 알콕시, 아릴옥시, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 아미도, 에스테르, 카복실산, 카바메이트, 우레아, 케톤, 알데히드, 시아노, 니트로, 할로겐; (사이클로알킬)알킬 및 (헤테로사이클로알킬)알킬[여기서, 상기 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자, 0 내지 6개의 산소, 질소, 황 또는 인 원자로 만들어지고, 상기 알킬은 탄소수 1 내지 6이다]; 아릴; 헤테로아릴; 알킬-아릴; 및 알킬-헤테로아릴로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되는데,

상기 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 헤테로알케닐, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬 잔기는 임의로 화학적으로 적합하게 치환될 수 있으며, 상기 용어 "치환된"이란 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 할로겐, 하이드록시, 티오, 알콕시, 아릴옥시, 알킬티오, 아릴티오, 아미도, 에스테르, 카복실산, 카바메이트, 우레아, 케톤, 알데히드, 시아노, 니트로, 설폰아미도, 설폭사이드, 설폰, 설포닐 우레아, 하이드라지드 및 하이드록사메이트로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 잔기에 의해 임의로 및 화학적으로 적합하게 치환되는 것을 지칭하고;

추가로, 상기 단위 N, C, E, L, J, N, A, Q 및 M을 포함하는 화학식 I 내의 비사이클릭 환 구조는 비사이클릭 환 구조를 나타내며;

달리 정의하지 않는 한, 알콕시의 알킬 부위를 포함하여, 상술한 용어 알킬은, 탄소수 1 내지 8의 직쇄 또는 측쇄의 포화된 탄화수소로부터 단일 원자를 제거함으로써 기원하는 1가 그룹을 말하고; 아릴은, 6 내지 14개의 탄소 원자와 하나 이상의 벤제노이드 환을 갖는 카보사이클릭 그룹을 나타내며; 아르알킬은 C₁-C₈ 알킬을 통하여 연결된 아릴 그룹을 함유하는 잔기를 나타내고; 알킬아릴은 아릴 그룹을 통하여 연결된 C₁-C₈ 알킬을 함유하는 잔기를 나타내며; 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자를 갖는, 임의로 치환된 포화 카보사이클릭 환을 나타내고; 헤테로사이클릭은 헤테로아릴 그룹 이외에도, 1개의 환 또는 2개의 융합 환으로 이루어진 카보사이클릭 환 구조를 차단하는 O, S 및 N 원자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 원자를 갖는 포화 및 불포화 사이클릭 유기 그룹을 나타내는데, 상기 각 환은 5-, 6- 또는 7-원이고, 비국소 pi 전자가 결여된 이중 결합을 가지거나 가지지 않을 수 있으며, 상기 환 구조는 2 내지 8개의 탄소 원자를 가지며; 할로겐은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 나타내고; 헤테로아릴은 카보사이클릭 환 구조를 차단하는 O, S 및 N 원자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 원자를 갖고 방향족 특징을 제공하기에 충분한 수의 비국소 pi 전자를 갖는 사이클릭 유기 그룹을 나타내는데, 방향족 헤테로사이클릴 그룹은 2 내지 14개의 탄소 원자를 가지며, 달리 상세히 정의되지 않는 한, 용어 "치환되거나 치환되지 않은" 또는 "임의로 치환된"이란 대상 잔기가 R¹² 또는 R¹³에 속하는 잔기에 의해 임의로 및 화학적으로 적합하게 치환되는 것을 지칭한다.
제1항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제2항에 있어서, 항바이러스제를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
제3항에 있어서, 인터페론을 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 상기 항바이러스제가 리바비린이고, 상기 인터페론이 α-인터페론 또는 페길화 인터페론인 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, 경구 또는 피하 투여용 약제학적 조성물.
치료학적 유효량의 다음에 열거된 구조식들 중에서 선택된 하나 이상의 화합물과 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:

.
제7항에 있어서, 항바이러스제를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
제8항에 있어서, 인터페론 또는 PEG-인터페론 알파 접합체를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
제9항에 있어서, 상기 항바이러스제가 리바비린이고, 상기 인터페론이 α-인터페론인 약제학적 조성물.
활성 성분으로서 다음에 열거된 구조식들 중에서 선택된 하나 이상의 화합물을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:

.
활성 성분으로서 하기 구조식의 화합물들로부터 선택되는 화합물, 당해 화합물의 에난티오머, 입체이성체, 로타머, 토토머 및 라세메이트, 및 당해 화합물의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:

.
제12항에 있어서, 항바이러스제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제13항에 있어서, 인터페론 또는 PEG-인터페론 알파 접합체(conjugate)를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제14항에 있어서, 항바이러스제가 리바비린이고 인터페론이 α-인터페론인 약제학적 조성물.
제12항에 있어서, 화합물이 하기 구조식의 화합물들로부터 선택되는 약제학적 조성물:

.
제16항에 있어서, 항바이러스제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제17항에 있어서, 인터페론 또는 페길화된 인터페론 알파 접합체를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제18항에 있어서, 항바이러스제가 리바비린이고 인터페론이 알파-인터페론인 약제학적 조성물.
활성 성분으로서, 다음 화학식 I의 화합물, 당해 화합물의 에난티오머, 입체이성체, 로타머, 토토머 및 라세메이트, 및 당해 화합물의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물과, 인터페론을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:

화학식 I

상기식에서,

Y는 알킬, 알킬-아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 아릴-헤테로아릴, 알킬-헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬옥시, 알킬-아릴옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클로알킬옥시, 사이클로알킬옥시, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬-아릴아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 사이클로알킬아미노 및 헤테로사이클로알킬아미노로 이루어진 그룹 중에서 선택되는데, 단, Y는 X¹¹ 또는 X¹²에 의해 임의로 치환될 수 있고;

X¹¹은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬, 아릴, 알킬아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 알킬헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬인데, 단, X¹¹은 X¹²에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있으며;

X¹²는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 알킬설폰아미도, 아릴설폰아미도, 카복시, 카브알콕시, 카복스아미도, 알콕시카보닐아미노, 알콕시카보닐옥시, 알킬우레이도, 아릴우레이도, 할로겐, 시아노 또는 니트로인데, 단, 상기 알킬, 알콕시 및 아릴은 X¹² 중에서 독립적으로 선택된 잔기에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있고;

R¹은 COR⁵이며, R⁵는 CF₃, C₂F₅, C₃F₇, CF₂R⁶ 또는 R⁶이며, R⁶, R⁸, R⁹ 및 R¹⁰은 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬, [CH(R^1')]_pCOOR¹¹, [CH(R^1')]_pCONR¹²R¹³, [CH(R^1')]_pSO₂R¹¹, [CH(R^1')]_pCOR¹¹, [CH(R^1')]_pCH(OH)R¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')R', CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')COOR¹¹, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONR¹²R¹³, CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONHCH(R^5')COOR¹¹, 및 CH(R^1')CONHCH(R^2')CONHCH(R^3')CONHCH(R^4')CONHCH(R^5')CONR¹²R¹³으로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되며, R^1', R^2', R^3', R^4', R^5', R¹¹, R¹² 및 R¹³은 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬-아릴, 알킬-헤테로아릴, 아릴-알킬 및 헤테로아르알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고;

Z는 O, N, CH 또는 CR 중에서 선택되며;

W는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, W가 존재하는 경우, W는 C=O, C=S, C(=N-CN) 또는 SO₂ 중에서 선택되며;

Q는 존재하거나 또는 부재할 수 있고, Q가 존재하는 경우, Q는 CH, N, P, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CRR')_p, O, NR, S 또는 SO₂이며; Q가 부재하는 경우, M은 또한 존재하거나 또는 부재할 수 있으며; Q와 M이 부재하는 경우, A는 L에 직접 연결되고;

A는 O, CH₂, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p, (CRR')_p, NR, S 또는 SO₂이며;

E는 CH, N 또는 CR, 또는 A 또는 L에 대한 이중 결합이고;

G는 부재하고, E는, G가 연결된 바와 같은 화학식 I 내의 탄소 원자에 직접적으로 연결되고;

J는 존재하고, J는 (CH₂)_p, (CHR)_p, (CRR')_p, SO₂, NH, NR 또는 O이며;

L은 존재하고, L은 CH, CR, O, S 또는 NR이고;

M은 존재하거나 또는 부재할 수 있고, M이 존재하는 경우, M은 O, NR, S, SO₂, (CH₂)_p, (CHR)_p, (CHR-CHR')_p, 또는 (CRR')_p이며;

p는 0 내지 6의 수이고;

R, R', R², R³ 및 R⁴는 H; C₁-C₁₀ 알킬; C₂-C₁₀ 알케닐; C₃-C₈ 사이클로알킬; C₃-C₈ 헤테로사이클로알킬, 알콕시, 아릴옥시, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 아미도, 에스테르, 카복실산, 카바메이트, 우레아, 케톤, 알데히드, 시아노, 니트로, 할로겐; (사이클로알킬)알킬 및 (헤테로사이클로알킬)알킬[여기서, 상기 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자, 0 내지 6개의 산소, 질소, 황 또는 인 원자로 만들어지고, 상기 알킬은 탄소수 1 내지 6이다]; 아릴; 헤테로아릴; 알킬-아릴; 및 알킬-헤테로아릴로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되는데,

상기 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 헤테로알케닐, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬 잔기는 임의로 화학적으로 적합하게 치환될 수 있으며, 상기 용어 "치환된"이란 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 할로겐, 하이드록시, 티오, 알콕시, 아릴옥시, 알킬티오, 아릴티오, 아미도, 에스테르, 카복실산, 카바메이트, 우레아, 케톤, 알데히드, 시아노, 니트로, 설폰아미도, 설폭사이드, 설폰, 설포닐 우레아, 하이드라지드 및 하이드록사메이트로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 잔기에 의해 임의로 및 화학적으로 적합하게 치환되는 것을 지칭하고;

추가로, 상기 단위 N, C, E, L, J, N, A, Q 및 M을 포함하는 화학식 I 내의 비사이클릭 환 구조는 비사이클릭 환 구조를 나타내며;

달리 정의하지 않는 한, 알콕시의 알킬 부위를 포함하여, 상술한 용어 알킬은, 탄소수 1 내지 8의 직쇄 또는 측쇄의 포화된 탄화수소로부터 단일 원자를 제거함으로써 기원하는 1가 그룹을 말하고; 아릴은, 6 내지 14개의 탄소 원자와 하나 이상의 벤제노이드 환을 갖는 카보사이클릭 그룹을 나타내며; 아르알킬은 C₁-C₈ 알킬을 통하여 연결된 아릴 그룹을 함유하는 잔기를 나타내고; 알킬아릴은 아릴 그룹을 통하여 연결된 C₁-C₈ 알킬을 함유하는 잔기를 나타내며; 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자를 갖는, 임의로 치환된 포화 카보사이클릭 환을 나타내고; 헤테로사이클릭은 헤테로아릴 그룹 이외에도, 1개의 환 또는 2개의 융합 환으로 이루어진 카보사이클릭 환 구조를 차단하는 O, S 및 N 원자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 원자를 갖는 포화 및 불포화 사이클릭 유기 그룹을 나타내는데, 상기 각 환은 5-, 6- 또는 7-원이고, 비국소 pi 전자가 결여된 이중 결합을 가지거나 가지지 않을 수 있으며, 상기 환 구조는 2 내지 8개의 탄소 원자를 가지며; 할로겐은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 나타내고; 헤테로아릴은 카보사이클릭 환 구조를 차단하는 O, S 및 N 원자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 원자를 갖고 방향족 특징을 제공하기에 충분한 수의 비국소 pi 전자를 갖는 사이클릭 유기 그룹을 나타내는데, 방향족 헤테로사이클릴 그룹은 2 내지 14개의 탄소 원자를 가지며, 달리 상세히 정의되지 않는 한, 용어 "치환되거나 치환되지 않은" 또는 "임의로 치환된"이란 대상 잔기가 R¹² 또는 R¹³에 속하는 잔기에 의해 임의로 및 화학적으로 적합하게 치환되는 것을 지칭한다.
제20항에 있어서, 인터페론이 알파-인터페론 또는 페길화된 인터페론인 약제 학적 조성물.
제21항에 있어서, 경구 또는 피하 투여용 약제학적 조성물.
활성 성분으로서, 다음에 열거된 구조식들 중에서 선택된 화합물, 당해 화합물의 에난티오머, 입체이성체, 로타머, 토토머 및 라세메이트, 및 당해 화합물의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물과, 인터페론을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:
제23항에 있어서, 인터페론이 알파-인터페론 또는 페길화된 인터페론인 약제학적 조성물.
제24항에 있어서, 경구 또는 피하 투여용 약제학적 조성물.
제12항에 있어서, 인터페론을 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제26항에 있어서, 인터페론이 알파-인터페론 또는 페길화된 인터페론인 약제학적 조성물.
제27항에 있어서, 경구 또는 피하 투여용 약제학적 조성물.
제20항에 있어서, 항바이러스제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
활성 성분으로서, 하기 구조식들 중에서 선택된 화합물 및 상기 화합물의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물과, 인터페론을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:

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제16항에 있어서, 인터페론을 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
활성 성분으로서, 하기 구조식들 중에서 선택된 화합물 및 당해 화합물의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물과, 인터페론을 포함하는, C형 간염 바이러스 치료용 약제학적 조성물:

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