JPH05213941A

JPH05213941A - 双環式ヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、それらの製造方法及び中間体類

Info

Publication number: JPH05213941A
Application number: JP4304419A
Authority: JP
Inventors: Christian Leumann; ロイマンクリスチャン
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1991-10-17
Filing date: 1992-10-19
Publication date: 1993-08-24
Also published as: DE59208572D1; US5319080A; ES2103918T3; EP0538194A1; US5393878A; MX9205988A; CA2080640A1; EP0538194B1

Abstract

(57)【要約】【目的】双環式フラノ−ス骨格を有するヌクレオシド
及びオリゴヌクレオチドを得ること。【構成】式（Ｉ）：【化６１】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、互いに独立して、水素又は保
護基であり；Ｂはプリン若しくはピリミジン基又はその
類似体である）で示される化合物のラセマート又はエナ
ンチオマーの形での化合物、その製造方法、該化合物の
同一若しくは異なるモノマー単位又は他のヌクレオシド
のモノマー単位を含むオリゴヌクレオチド、並びにウイ
ルス感染又は遺伝子起因の疾患の検出のための診断薬と
しての該オリゴヌクレオチドの用途。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、ビシクロ［３．３．０］−８−
オキサオクタン骨格を有するヌクレオシド、アノメリッ
ク脱離基を、チミン、アデニン、プリン又はシトシン系
列からのヌクレイン塩基により置換することによるそれ
らの製造方法；ビシクロ［３．３．０］−１，３，５−
トリヒドロキシ−８−オキサオクタン及び中間体として
のそれの保護された誘導体；それらのヌクレオシドを有
するヌクレオチド；並びに分子中に同一又は異なるヌク
レオシド単位を有するオリゴヌクレオチドの製造のため
のヌクレオシドの用途に関する。

【０００２】抗ウイルス活性成分として、そして核酸と
の相互作用の能力及びそれが結果として起こす生物学的
活性のために、ヌクレオシド及びオリゴヌクレオチドは
広く興味が持たれている。例えば、E.Uhlmanら、Chemic
al Reviews Vol.90,p543〜584(1990）を参照されたい。
新規な物性を有するヌクレオシドを提供するために、又
はヌクレアーゼに対する相互作用及び安定性を向上させ
るために、ヌクレオシドの糖基、例えばフラノースは種
々の方法で誘導体化される。例えば、V.E.Marquez ら、
Medicinal Research Reviews Vol.6,p1 〜40(1986)を参
照されたい。双環式フラノース誘導体はこの目的のため
にはまだ開示されていない。

【０００３】本発明は、式（Ｉ）：

【０００４】

【化１４】

【０００５】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、互いに独立し
て、水素又は保護基であり；Ｂはプリン若しくはピリミ
ジン基又はその類似体である）で示される化合物のラセ
マート又はエナンチオマーの形での化合物に関する。

【０００６】保護基及びそのような保護基を有するヒド
ロキシル基の誘導体化の方法は、糖化学において一般的
に知られている。そのような保護基の例は、直鎖若しく
は分岐鎖の、Ｃ₁ −Ｃ₈ アルキル、特にＣ₁ −Ｃ₄ アル
キル、例えばメチル、エチル、ｎ−及びｉ−プロピル、
又はｎ−、ｉ−及びｔ−ブチル；Ｃ₇ −Ｃ₁₂アラルキ
ル、例えばベンジル、メチルベンジル、ジメチルベンジ
ル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、ブロモベ
ンジル；ジフェニルメチル、ジ（メチルフェニル）メチ
ル、ジ（ジメチルフェニル）メチル、ジ（メトキシフェ
ニル）メチル、ジ（ジメトキシフェニル）メチル、トリ
チル、トリ（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチル
フェニル）メチル、トリ（メトキシフェニル）メチル、
トリ（ジメトキシフェニル）メチル；トリフェニルシリ
ル、アルキルジフェニルシリル、ジアルキルフェニルシ
リル及びアルキル部分に１ないし２０個、好適には１な
いし１２個、特に好適には１ないし８個の炭素原子を有
するトリアルキルシリル、例えばトリメチルシリル、ト
リエチルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、ｉ−プロ
ピルジメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−
ブチルジフェニルシリル、ｎ−オクチルジメチルシリ
ル、（１、１、２、２−テトラメチルエチル）ジメチル
シリル；Ｃ₂ −Ｃ₁₂アシル、特にＣ₂ −Ｃ₈ アシル、例
えばアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイ
ル、ヘキサノイル、ベンゾイル、メチルベンゾイル、メ
トキシベンゾイル、クロロベンゾイル及びブロモベンゾ
イル；Ｒ₃−ＳＯ₂ −（式中、Ｒ₃ は、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アル
キル、特にＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、Ｃ₅ シクロアルキル又
はＣ₆ シクロアルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ₁ −Ｃ
₁₂アルキルフェニル、及び特にＣ₁ −Ｃ₄ アルキルフェ
ニル、又はＣ₁ −Ｃ₁₂アルキルベンジル及び特にＣ₁ −
Ｃ₄ アルキルベンジル又はハロフェニル又はハロベンジ
ル、例えばメチル−、エチル−、ブチル−、フェニル
−、ベンジル−、ｐ−ブロモ−、ｐ−メトキシ−及びｐ
−メチル−フェニルスルホニル；Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ
カルボニル、好適にはＣ₁ −Ｃ₈ アルコキシカルボニ
ル、例えばメトキシ−、エトキシ−、ｎ−若しくはｉ−
プロポキシ−、又はｎ−、ｉ−若しくはｔ−ブトキシカ
ルボニル、又はフェニルオキシカルボニル、ベンジルオ
キシカルボニル、メチル−、若しくはメトキシ−、又は
クロロフェニルオキシカルボニル若しくは−ベンジルオ
キシカルボニルである。式（Ｉ）のＲ₁ 及びＲ₂ は、同
一又は異なる保護基であり得、一般に同一の保護基が好
適である。

【０００７】好適な実施態様において、式（Ｉ）の化合
物は、Ｒ₁ 及びＲ₂ が、互いに独立して、直鎖若しくは
分岐鎖の、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、Ｃ₇ −Ｃ₁₂アラルキ
ル、アルキル部分に１ないし１２個の炭素原子を有する
トリアルキルシリル、Ｃ₂ −Ｃ₈ アシル、Ｒ₃ −ＳＯ₂
−（式中、Ｒ₃ はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、フェニル、ベン
ジル、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルフェニル、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキ
ルベンジル又はハロフェニル若しくはハロベンジルであ
る）であるか、又はＲ¹ 及びＲ² がＣ₁ −Ｃ₈ アルコキ
シカルボニル、フェノキシカルボニル又はベンジルオキ
シカルボニルであるそれらである。

【０００８】特に好適な実施態様において、Ｒ₁ 及びＲ
₂ はメチル、エチル、ｎ−若しくはｉ−プロピル、ｎ
−、ｉ−若しくはｔ−ブチル；ベンジル、メチルベンジ
ル、ジメチルベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシ
ベンジル、ブロモベンジル；ジフェニルメチル、ジ（メ
チルフェニル）メチル、ジ（ジメチルフェニル）メチ
ル、ジ（メトキシフェニル）メチル、ジ（ジメトキシフ
ェニル）メチル、トリチル、トリ（メチルフェニル）メ
チル、トリ（ジメチルフェニル）メチル、トリ（メトキ
シフェニル）メチル、トリ（ジメトキシフェニル）メチ
ル；トリメチルシリル、トリエチルシリル、トリ−ｎ−
プロピルシリル、ｉ−プロピルジメチルシリル、ｔ−ブ
チルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、ｎ
−オクチルジメチルシリル、（１、１、２、２−テトラ
メチルエチル）ジメチルシリル；アセチル、プロパノイ
ル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ベンゾ
イル、メチルベンゾイル、メトキシベンゾイル、クロロ
ベンゾイル又はブロモベンゾイル；メチル−、エチル
−、プロピル−ブチル−、フェニル−、ベンジル−、ｐ
−ブロモ−、ｐ−メトキシ−若しくはｐ−メチル−フェ
ニルスルホニル；メトキシ−、エトキシ−、ｎ−若しく
はｉ−プロポキシ−、又はｎ−、ｉ−若しくはｔ−ブト
キシカルボニル、若しくはフェニルオキシカルボニル、
ベンジルオキシカルボニル、メチル−、若しくはメトキ
シ−、若しくはクロロフェニルオキシカルボニル又は−
ベンジルオキシカルボニルである。

【０００９】Ｂがプリン基又はそれの類似体の場合に
は、該基は式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、
（IIｄ）又は（IIｅ）：

【００１０】

【化１５】

【００１１】（式中、Ｒ₄ は水素、クロロ、ブロモ又は
ＯＨであり；Ｒ₅ 、Ｒ₆ 及びＲ₇ は、互いに独立して、
水素、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、１
ないし１２個の炭素原子を有するＮＨＯ−アルキル、フ
ルオロ、クロロ、ブロモ、１ないし１２個の炭素原子を
有する、アルキル又はヒドロキシアルキル又はアミノア
ルキルアルコキシ又はアルキルチオ（該ヒドロシキル及
び該アミノは非置換又は保護基により置換されている）
であるか、又はＲ₅ 、Ｒ₆ 及びＲ₇ はフェニル、ベンジ
ル、１ないし２０個の炭素原子を有する第一級アミノ又
は２ないし３０個の炭素原子を有する第二級アミノであ
り；Ｒ₁₁は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）で示さ
れる基である。

【００１２】適切な保護基は上述されている。好適な保
護基はＣ₁ −Ｃ₈ アシル、例えばアセチル、プロピオニ
ル、ブチリル及びベンゾイルである。Ｒ₁₁は好適には水
素又はメチルである。

【００１３】第一級アミノは好適には１ないし１２個、
特に好適には１ないし６個の炭素原子を有し、そして第
二級アミノは好適には２ないし１２個、特に好適には２
ないし６個の炭素原子を有する。

【００１４】アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒ
ドロキシアルキル及びアミノアルキルのいくつかの例
は、好適には１ないし６個の炭素原子を有し、例えばメ
チル、エチル、及びプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキ
シル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシ
ル及びデシルの異性体類、同様に相当するアルコキシ、
アルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル
基である。アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒド
ロキシアルキル及びアミノアルキルは、特に好適には、
１ないし４個の炭素原子を有する。好適なアルキル、ア
ルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミ
ノアルキルは、メチル、エチル、ｎ−及びｉ−プロピ
ル、ｎ−、ｉ−及びｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、
メチルチオ、及びエチルチオ、アミノメチル、アミノエ
チル、ヒドロキシメチル及びヒドロキシエチルである。

【００１５】第一級アミノ及び第二級アミノは、例えば
式Ｒ₈ Ｒ₉ Ｎ（式中、Ｒ₈ は、水素又は独立してＲ₉ の
意味を有し、Ｒ₉ はＣ₁ −Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀ア
ミノアルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀ヒドロキシアルキル、好適に
はＣ₁ −Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₁−Ｃ₁₂アミノアルキル、Ｃ₁
−Ｃ₁₂ヒドロキシアルキル、及び特に好適にはＣ₁−Ｃ
₆ アルキル、Ｃ₁ −Ｃ₆ アミノアルキル又はＣ₁ −Ｃ₆
ヒドロキシアルキル；カルボキシアルキル又はカルボア
ルコキシアルキル（該カルボアルコキシは２ないし８個
の炭素原子を有し、該アルキルは１ないし６個、好適に
は１ないし４個の炭素原子を有する）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀アル
ケニル、好適にはＣ₂ −Ｃ₁₂アルケニル、及び特に好適
にはＣ₂ −Ｃ₆ アルケニル；フェニル、モノ−若しくは
ジ（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル−又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）
フェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ（Ｃ₁ −Ｃ₄ ア
ルキル−又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）ベンジル；又は
１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ
₁ −Ｃ₆ アルキルであるか、又はＲ₈ 及びＲ₉ は、一緒
になって、テトラ−若しくはペンタメチレン、３−オキ
サ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ₁₀−ＣＨ₂ Ｃ
Ｈ₂ −又は−ＣＨ₂ＣＨ₂ −ＮＲ₁₀−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −
（式中、Ｒ₁₀は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）で
示される基である。アミノアルキルの該アミノは一個若
しくは二個のＣ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ ヒドロ
キシアルキルで置換されていてもよい。ヒドロキシアル
キルの該ヒドロキシル基はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルでエーテ
ル化されていてもよい。

【００１６】アルキルの例は上述されている。アミノア
ルキルの例はアミノメチル、アミノエチル、１−アミノ
プロプ−２−イル若しくは−３−イル、１−アミノブト
−２−イル若しくは−３−イル若しくは−４−イル、Ｎ
−メチル−若しくはＮ，Ｎ−ジメチル−又はＮ−エチル
−若しくはＮ，Ｎ−ジエチル−若しくはＮ−２−ヒドロ
キシエチル−又はＮ，Ｎ−ジヒドロキシエチルアミノメ
チル、又は−アミノエチル若しくは−アミノプロピル若
しくは−アミノブチルである。ヒドロキシルアルキルの
例はヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエト−２−イ
ル、１−ヒドロキシプロプ−２−若しくは−３−イル、
１−ヒドロキシブト−２−イル、−３−イル若しくは−
４−イルである。カルボキシアルキルの例はカルボキシ
メチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル及びカ
ルボキシブチル、そしてカルボアルコキシアルキルの例
はメチル又はエチルでエステル化されたそれらのカルボ
アルコキシである。アルケンの例はアリル、ブト−１−
エン−３−イル又は−４−イル、ペント−３−若しくは
４−エン−１−イル又は−２−イル、ヘキセ−３−若し
くは−４−若しくは５−エン−１−イル又は−２−イル
である。アルキル−及びアルコキシフェニル又は−ベン
ジルの例はメチルフェニル、ジメチルフェニル、エチル
フェニル、ジエチルフェニル、メチルベンジル、ジメチ
ルベンジル、エチルベンジル、ジエチルベンジル、メト
キシフェニル、ジメトキシフェニル、エトキシフェニ
ル、ジエトキシフェニル、メトキシベンジル、ジメトキ
シベンジル、エトキシベンジル又はジエトキシベンジル
である。アルキルが好適に２ないし４個の炭素原子を有
するイミダゾリルアルキルの例は、１，２−、１，３−
若しくは１，４−イミダゾリルエチル又は−ｎ−プロピ
ル若しくは−ｎ−ブチルである。

【００１７】第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例
はメチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、アリ
ル−、モノ若しくはジ（１−ヒドロキシエト−２−イ
ル）−、フェニル−及びベンジル−、アセチル−、及び
ベンゾイル−アミノである。

【００１８】好適な実施態様において、Ｒ₄ は水素であ
る。他の好適な実施態様において、Ｒ₇ は水素である。
他の好適な実施態様において、Ｒ₅ 及びＲ₆ は、互いに
独立して、水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＯＨ、Ｓ
Ｈ、ＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジ
メチルアミノ、ベンゾイルアミノ、メトキシ、エトキシ
及びメチルチオである。

【００１９】プリン系列からの類似体のいくつかの例
は、プリンの他に、アデニン、Ｎ−メチルアデニン、Ｎ
−ベンジルアデニン、２−メチルアデニン、２−メチル
チオアデニン、２−アミノアデニン、３−カルバアデニ
ン、７−カルバアデニン、１−カルバアデニン、６−ヒ
ドロキシプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２−
アミノ−６−メチルチオプリン、２−アミノ−６−ヒド
ロキシプリン、３−カルバ−６−クロロプリン、グアニ
ン、２−メチルグアニンである。特に好適には、アデニ
ン、２−アミノアデニン及びグアニンである。

【００２０】式（Ｉ）のＢが、ピリミジン類似体の基で
ある場合には、それらは、好適には式（III)、(IIIａ）
又は(IIIｂ）：

【００２１】

【化１６】

【００２２】（式中、Ｒ₁₁は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキ
ルであり；Ｒ₁₂及びＲ₁₃は、互いに独立して、好適の意
味も含めてＲ₅ と同義であり；式(IIIｂ）のＮＨ₂ 基の
該水素はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル又はベンゾイルにより置換
されていてもよい）或は式（III)、(IIIａ）及び(III
ｂ）の該基のジヒドロ誘導体である。Ｒ₁₂は、好適には
水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシア
ルキル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＮＨ₂ 、ベンゾイ
ルアミノ、モノ若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノ
であり；Ｒ₁₃は、好適には水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又
はＣ₁ −Ｃ₆ アルコキシ又はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアル
キル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＮＨ₂ 、ベンゾイル
アミノ、モノ若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノで
ある）で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基で
ある。

【００２３】Ｒ₁₁は、好適には水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アル
キルである。Ｒ₁₂は、好適には水素、フルオロ、クロ
ロ、ブロモ、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 又は
Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルである。Ｒ₁₃は、好適には水素、Ｃ
₁ −Ｃ₄ アルキル、特に好適にはメチル、又はＮＨ₂ 、
ＮＨＣＨ₃ 若しくはＮ（ＣＨ₃ ）₂ である。

【００２４】ピリミジン類似体のいくつかの例はウラシ
ル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５−ク
ロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラシ
ル、プソイドウラシル、１−メチルプソイドウラシル、
５−メチルウラシル、３−メチルシトシン及び５−メチ
ルシトシンである。

【００２５】好適な実施態様において、式（Ｉ）の化合
物は式（IV）：

【００２６】

【化１７】

【００２７】（式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ 及びＢは好適の意味も
含めて上述と同義である）で示される化合物のα−又は
β−アノマーである。

【００２８】特に好適な実施態様において、式（IV）の
化合物は式（IVａ）：

【００２９】

【化１８】

【００３０】（式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ 及びＢは好適の意味も
含めて上述と同義である）で示されるβ−アノマーであ
る。

【００３１】さらに、本発明は式（Ｖ）：

【００３２】

【化１９】

【００３３】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は同一又は異なる保
護基であり；Ｘは脱離基である）で示されるラセマート
又はエナンチオマーの形の化合物を、プリン、プリン類
似体又はピリミジン類似体と反応させて、場合によりそ
れに続いて保護基を脱離させることを特徴とする式
（Ｉ）の化合物の製造方法を提供する。

【００３４】保護基はすでに記述されている。脱離基は
糖化学において一般的に知られている。それらは、例え
ばハロゲン、特にフルオロ、クロロ、ブロモ若しくはヨ
ード、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルコキシ、好適にはＣ₁ −Ｃ₄ アル
コキシ、特にメトキシ、若しくはエトキシ、Ｃ₁ −Ｃ₈
アシルオキシ、例えばアセチルオキシ、プロピオニルオ
キシ、ブチリルオキシ；モノ−若しくはジ−若しくはト
リクロロアセチルオキシ又は−フルオロアセチルオキ
シ、ベンゾイルオキシ及びクロロベンゾイルオキシ、又
はＲ₁₆−ＳＯ₃ （式中、Ｒ₁₆はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル若し
くはＣ₁ −Ｃ₆ ハロアルキル、又はフェニル若しくはベ
ンジルであり、そのそれぞれは非置換又は１ないし３個
のハロゲン（フルオロ、クロロ及びブロモ）、Ｃ₁ −Ｃ
₄ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシにより置換されて
いる）であり得る。ハロアルキルの例はモノ−若しくは
ジ−若しくはトリクロロメチル又は−フルオロメチル、
１，１，１−トリクロロ−若しくは−トリフルオロメチ
ル及びペンタフルオロエチルである。置換フェニル及び
ベンジルの例はメチル−、ジメチル−、メトキシ−、ジ
メトキシ−、モノ−若しくはジクロロ−又はモノ−若し
くはジブロモ−又はモノ−若しくはジフルオロフェニル
又は−ベンジルである。該保護基及び該脱離基は同一で
あり得、特にアシル基の場合にそうである。

【００３５】反応は−２０℃ないし１５０℃、好適には
０℃ないし１００℃の温度で行なうことができる。

【００３６】一般的に、非プロトン溶媒が好適に用いら
れ、より好適には、極性溶媒も又用いられる。それ自身
で、又は少なくとも二つの溶媒の混合物の形で用いるこ
とのできる溶媒の例は、エーテル類（ジブチルエーテ
ル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチレングリ
コールジメチルエーテル、エチレングリコールジメチル
エーテル又はエチレングリコールジエチルエーテル、ジ
エチレングリコールジエチルエーテル、トリエチレング
リコールジメチルエーテル）、ハロゲン化炭化水素類
（メチレンクロライド、クロロホルム、１，２−ジクロ
ロエタン、１，１，１−トリクロロエタン、１，１，
２，２−テトラクロロエタン）、カルボキシラート類及
びラクトン類（エチルアセタート、メチルプロピオ
ナート、エチルベンゾアート、２−メトキシエチルア
セタート、γ−ブチロラクトン、δ−バレロラクトン、
ピバロラクトン）、カルボンアミド類及びラクタム類
（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルホ
ルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、テトラメ
チルウレア、ヘキサメチルホスホルトリアミド、γ−ブ
チロラクタム、ε−カプロラクタム、Ｎ−メチルピロリ
ドン、Ｎ−アセチルピロリドン、Ｎ−メチルカプロラク
タム）、スルホキサイド類（ジメチルスルホキサイ
ド）、スルホン類（ジメチルスルホン、ジエチルスルホ
ン、トリメチレンスルホン、テトラメチレンスルホ
ン）、第三級アミン類（トリエチルアミン、Ｎ−メチル
ピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン）、ベンゼン又は置
換ベンゼン類（クロロベンゼン、ｏ−ジクロロベンゼ
ン、１，２，４−トリクロロベンゼン、ニトロベンゼ
ン、トルエン、キシレン）のような芳香族炭化水素類、
ニトリル類（アセトニトリル、プロピオニトリル、ベン
ゾニトリル、フェニルアセトニトリル）、同様に脂肪族
又は環式脂肪族炭化水素類（ペンタン、石油エーテル、
ヘキサン、シクロヘキサン及びメチルシクロヘキサン）
である。

【００３７】好適な溶媒はハロゲン化脂肪族炭化水素
類、芳香族炭化水素類、エーテル類及びニトリル類、例
えばメチレンクロライド、クロロホルム、ベンゼン、ト
ルエン、アセトニトリル、ジエチルエーテル、ジブチル
エーテル、テトラヒドロフラン及びジオキサンである。

【００３８】この反応は、好適には反応性のＮＨ基を活
性化する試薬の存在下に行なわれる。そのような試薬
は、例えば無機塩基（ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｎａ₂ ＣＯ
₃ 、Ｋ₂ＣＯ₃ 、ＮａＨＣＯ₃ 及びＫＨＣＯ₃ 、並びに
アルカリ金属アルコラート類、例えばＮａＯＣＨ₃ 又は
ＮａＯＣ₄ Ｈ₉ ）、又はＮ，Ｏ−シリル化カルボキサミ
ド類［Ｎ，Ｏ−ビス−（トリメチルシリル）アセトアミ
ド］、ジシラザン類（ヘキサメチルジシラザン）、クロ
ロシラン類（トリメチルクロロシラン）及びシリルトリ
フルオロメタンスルホナート類（トリメチルシリルトリ
フルオロメタンスルホナート）であり、これらは、それ
ら自身又は混合物又はルイス酸、例えばＢＦ₃ 、ＳｂＦ
₃ 、ＳｂＣｌ₅ 、ＴｉＣｌ₄ 若しくはＳｎＣｌ₄ と一緒
の形態で用いることができる。さらに、例えばアルカリ
金属ハイドライド又はリチウムアルキル化合物（例え
ば、ＬｉＨ、ＮａＨ、ＫＨ、ＬｉＣＨ₃ 又はＬｉＣ₄ Ｈ
₉ ）の助けをかりて反応性のＮＨ基をメタラート化する
ことができる。

【００３９】詳細には、反応は塩基Ｂを溶媒中に導入
し、活性化試薬を加え、次いで混合物を式（Ｖ）で示さ
れる化合物と共に処理し、そのうえで反応が完成するよ
うに進行させる方法で行なうことができる。式（Ｉ）の
化合物を単離するために、反応混合物をそれ自身公知の
方法で処理し、純粋な異性体、特にα−及びβ−アノマ
ーの分離のためにクロマトグラフィーを用いることがで
きる。このエナンチオマー、例えば式（IV）のそれら
は、式（Ｖ）で示される適切なエナンチオマーを用いる
ことにより得ることができる。一般的に、この反応はα
−及びβ−アノマーの混合物を与える。

【００４０】本発明は、さらに、新規な式（Ｖ）で示さ
れる化合物及びＲ₁₄及びＲ₁₅が水素であり、ＸがＯＨで
あるそれの前駆体にも関する。従って、本発明は、さら
に式（Ｖ）又は（Ｖａ）：

【００４１】

【化２０】

【００４２】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は同一又は異なる保
護基であり；Ｘは脱離基である）で示されるラセマート
又はそれのエナンチオマーの形の化合物にも関する。保
護基及び脱離基は上述されている。好適な脱離基はＣＨ
₃ Ｃ（Ｏ）Ｏである。

【００４３】好適な実施態様において、式（Ｖ）及び
（Ｖａ）で示される化合物は式（VI）及び（VIａ）：

【００４４】

【化２１】

【００４５】（式中、Ｒ₁₄、Ｒ₁₅及びＸは前記と同義で
ある）で示されるエナンチオマーである。

【００４６】本発明は、さらに、例えば式（Ｖ）、（Ｖ
ａ）、（VI）及び（VIａ）を製造することができる下記
の新規な方法を提供する。

【００４７】（±）シス−２，３−（２´，２´−イソ
プロピルジオキソリル）シクロペンタン−１−オン：

【００４８】

【化２２】

【００４９】（式（Ａ）で示され、F.G.CocuらによりHe
lv.Chim.Acta 55,2838(1972)に記載されている）を、室
温、テトラヒドロフランのような溶媒中、約２当量のア
ザビシクロアルケン類（例えば、１，５，７−トリアザ
ビシクロ［４．４．０］デセ−５−エン）と、β−アル
コキシカルボニルエチルホスホナート（例えば、ジエチ
ル−β−エトキシカルボニルエチルホスホナート）とを
反応させて、（±）シス−２，３−（２´，２´−イソ
プロピルジオキソリル）シクロペント−５−エン、例え
ば式（Ｂ）で示される化合物を得る。

【００５０】

【化２３】

【００５１】次いで、シクロペンテン誘導体を、例えば
過酸又はＨ₂ Ｏ₂ を用いて、好都合には、室温又は氷冷
下、溶媒としてハロゲン化炭化水素中でエポキシ化す
る。この工程において、大抵は、シクロペンテン誘導体
の相当する（±）−エキソエポキサイド、例えば式
（Ｃ）の化合物が生成し、これは容易に分離し得るエン
ドエポキサイドの少量のみを含んでいる。

【００５２】

【化２４】

【００５３】この（±）−エキソエポキサイドをさらに
エポキサイド基の同時的水素化と組合せてカルボキシラ
ート基の水素化により直接に反応させて、ラセマートを
得ることができる。もう一つの方法として、このエキソ
エポキサイドのラセマートを、水素化の前に（＋）及び
（−）エナンチオマーに分離することができる。この方
法で、ヌクレオシドラセマートばかりでなく天然系列の
（−）エナンチオマ−及び非天然系列の（＋）エナンチ
オマ−を得ることができる。この水素化はそれ自体公知
の方法で、例えばＬｉＨ、ＮａＨ、ＡｌＨ₃ 、ＢＨ₃ 、
ＬｉＢＨ₃ 、ＬｉＡｌＨ₄ 、ジ−ｎ−ブチルアルミニウ
ムヒドリドなどを用いて又は水素を用いて触媒的に行な
われる。

【００５４】このラセマートを、水相中でブタ肝臓エス
テラーゼ（ＥＣ．３．１．１．１）の存在下、水酸化ア
ルカリ金属、例えばＮａＯＨを用いてカルボキシラート
の部分加水分解により、簡単に、高収量で分割できる。
これは式（Ｄ）のカルボン酸又はそれのアルカリ金属塩
とカルボキシラート、例えば式（Ｅ）のエステル（該エ
ステルは有機溶媒、例えばジエチルエーテルでの抽出に
より容易に分離できる）との混合物を与える。

【００５５】

【化２５】

【００５６】式（Ｆ）の（−）エナンチオマー類（３
Ｓ，４Ｒ，５Ｓ配置）及び式（Ｇ）の（＋）エナンチオ
マー類（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ配置）又はそれのラセマート
類（それらは、水素化で得られる）を、特定の酸化剤、
例えば１，１，１−トリアセチルオキシ−１，１−ジヒ
ドロ−１，２−ベンズイオドキソール−３（１Ｈ）−オ
ン（Dess-Martin reagent ）で酸化して、式（Ｈ）若し
くは（Ｊ）又はラセマート（これらは、水の存在下に水
性の酸又は酸性イオン交換樹脂での加水分解及び環化反
応により式（Ｖ）又は（VIａ）で示される化合物を与え
る）を得た。

【００５７】

【化２６】

【００５８】糖化学おいて一般的に知られている方法を
用いて、式（Ｖａ）及び（VIａ）の化合物を、まず脱離
基Ｘによりアノメリックヒドロキシル基を置き換え、次
いで保護基Ｒ₁₄及びＲ₁₅を導入することにより、式
（Ｖ）及び（VI）の化合物に変換することができる。脱
離基及び保護基が、同一ならば、それらの基を一工程で
導入することができる。式（Ｖ）及び（VI）の化合物
は、例えばクロマトグラフィーの方法によりα−及びβ
−異性体に分離することができる。塩基Ｂとの反応は再
びα−及びβ−形を与えるので、この分離を式（Ｉ）又
は（Ｖ）の化合物でのみ行なうのが好都合である。分離
されやすさは保護基をはずし、そして他の保護基を導入
することにより増大する。

【００５９】式（Ｉ）、（IV）又は（Ｖ）の化合物をさ
らに反応させるまえに、又は製薬学的活性成分としてそ
れらの使用の目的のために、式（Ｉ）、（IV）又は（IV
ａ）の化合物を、公知の方法でＲ₁ Ｒ₂ が水素である化
合物を与えるように脱保護基される。それらの化合物を
用いて、核酸との相互作用のために価値ある生物学的活
性を有し、製薬学的活性成分又は診断薬として用いるこ
とのできる、オリゴヌクレオチド類を構成することがで
きる。

【００６０】本発明は、さらに、式（Ｉ）の化合物の同
一若しくは異なるモノマー単位又は他のヌクレオシドの
モノマー単位を含むオリゴヌクレオチド（該オリゴヌク
レオチドは、２ないし２００個のモノマー単位を含む）
の製造のための、ラセマート又はエナンチオマーの形の
式（Ｉ）の化合物の用途に関する。該オリゴヌクレオチ
ドは、好適には、２ないし２００個、特に好適には２な
いし５０個、特別に好適には２ないし２０個のモノマー
単位を有する。式（Ｉ）の化合物の同一若しくは異なる
モノマー単位が好適であり、式（Ｉ）の化合物の同一モ
ノマー単位が特に好適である。

【００６１】本発明は、さらに、式（VII)：

【００６２】

【化２７】

【００６３】（式中、Ｂはプリン若しくはピリミジン基
又はそれの類似体であり；ｎは２ないし２００の数であ
り；Ｙはヌクレオチドの架橋基である）で示されるオリ
ゴヌクレオチドに関する。式（Ｉ）の化合物に対して上
述した好適の意味及び例はＢに適用される。好適な架橋
基は天然のオリゴヌクレオチドにみることのできる−Ｐ
（Ｏ）Ｏ^- −である。他の架橋基の例は−Ｐ（Ｏ）Ｓ^-
−、−Ｐ（Ｓ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｏ）Ｒ₁₇−、−Ｐ（Ｏ）
ＯＲ₁₈−、−Ｐ（Ｏ）ＮＲ₁₉Ｒ₂₀−、−ＣＯ−又は−Ｃ
ＯＮ（Ｒ₁₈）₂ −（式中、Ｒ₁₇は水素又はＣ₁ −Ｃ₆ ア
ルキルであり；Ｒ₁₈はＣ₁ −Ｃ₆ アルキルであり；Ｒ₁₉
及びＲ₂₀は、互いに独立して、Ｒ₁₇の意味を有する）で
ある。式（VII)において、ｎは２ないし１００、特に好
適には２ないし５０、特別に好適には２ないし２０の数
である。

【００６４】好適な実施態様において、オリゴヌクレオ
チドは本発明の式(VIIａ）：

【００６５】

【化２８】

【００６６】（式中、Ｂ、Ｙ及びｎは好適の意味も含め
て前記と同義である）で示されるオリゴヌクレオチドで
ある。

【００６７】特に好適な実施態様において、オリゴヌク
レオチドは本発明の式(VIIｂ）：

【００６８】

【化２９】

【００６９】（式中、Ｂ、Ｙ及びｎは好適の意味も含め
て前記と同義である）で示されるオリゴヌクレオチドで
ある。式(VIIｂ）の特に好適なオリゴヌクレオチドはＢ
が９−アデニルであり、ｎが１０であるか；又はＢがシ
トシルであり、ｎが６であるか；又はＢがチミジルであ
り、ｎが１０であるものである。

【００７０】本発明のオリゴヌクレオチドは、それ自身
公知の方法、自動化でき、手順操作方法とともに商業的
に入手できるＤＮＡ合成装置での種々の方法で製造でき
る。架橋基−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −、例えばホスホラストリエ
ステルの場合、ホスホファイトトリエステル工程又はＨ
−ホスホナート工程が、使用でき、それらは当業者によ
く知られている。ホスファイトトリエステル工程の場
合、例えば手順は、Ｒ₁及びＲ₂ がそれぞれ水素である
式（Ｉ）のヌクレオシドを、そのラセマート又はエナン
チオマーの型で、保護基試薬、例えば４，４´−ジメト
キシトリフェニルメチルトリフルオロメチルスルホナー
ト（ＤＴＭトリフラートと略す）と反応させて、式
（Ｋ）：

【００７１】

【化３０】

【００７２】で示されるヌクレオシドを得、そして式
（Ｋ）の化合物を、固体担体、例えばリンカー、例えば
コハク酸無水物の助けをかりて、長鎖アルキルアミノを
含む調節された孔を有するガラス（ＣＰＧ）に結合す
る。別の工程において、式（Ｋ）の化合物のヒドロキシ
ル基を、誘導体化し、例えばホスホルアミダイト、例え
ば［Ｒ´Ｏ（ｉ−プロピル₂ Ｎ）］ＰＣｌを用いて式
（Ｌ）：

【００７３】

【化３１】

【００７４】（式中、Ｒ´は、例えばアリル又はβ−シ
アノエチルである）で示される化合物を得る。

【００７５】保護基が担体に結合された材料から分離さ
れた後、生成物は−Ｎ（ｉ−Ｃ₃ Ｈ₇ ）₂ を脱離し、式
（Ｌ）の化合物に結合し、存在し得る遊離ヒドロキシル
基はキャップされ、生成したホスファイトを、次いで酸
化してホスファートを得る。ダイマーが脱保護基された
後、化合物（Ｌ）との反応サイクルは、オリゴマーが所
望のモノマー単位の数を持つまで繰り返され、生成物を
担体から分離する。

【００７６】本発明によるＲ₁ 及びＲ₂ がそれぞれ水素
である式（Ｉ）の化合物は、抗ウイルス及び抗増殖作用
を有し、したがって医薬として用いることができる。本
発明のオリゴヌクレオチドはヌクレアーゼ類（例えば、
酵素類）による分解に対して増大した安定性を有する。
核酸、特に二重鎖核酸との良好な相補的対形成が安定な
三重らせんと共に、さらに観察される。本発明のヌクレ
オチドは、したがって、核酸の不活性化のためのアンチ
センス手法に特に適切である（EP-A-0266099、WO 87/07
300 及びWO 89/08 146参照）。これらは、例えば核酸レ
ベル（例えば、遺伝子）で生物活性のタンパク質を欠く
ことによる感染及び疾患の治療に用いることができる。
本発明のヌクレオチドは、又診断薬として適切であり、
一重又は二重鎖核酸レベルでの選択的相互作用によりウ
イルス感染又は遺伝子で決められる疾患の検出の遺伝子
探針として用いることができる。ヌクレアーゼに対する
増大した安定性のために、診断的適用が特に試験管内だ
けでなく生体内（例えば、組織試料、血漿及び血清）に
おいて可能である。このような積極的な適用が、例えば
WO 91/06 556に記載されている。

【００７７】本発明は、さらに、ウイルス感染又は遺伝
子に起因する疾患の検出のための診断薬として、本発明
のオリゴヌクレオチドの用途に関する。

【００７８】本発明は、さらにまた、体中のヌクオチド
の配列の不活性化により、ヒトを含む温血動物の疾患の
治療のための治療方法の用途のための式（Ｉ）、（IV）
若しくは（VIａ）のヌクレオシド、又は式（VII)、(VII
ａ）若しくは(VIIｂ）のオリゴヌクレオチドに関する。
約７０Ｋｇの体重の温血動物に投与するときに使用され
る投薬量は、例えば一日当たり０．０１ないし１０００
ｍｇであり得る。投与方法は、製薬学的製剤の形で、好
適には非経口的に、例えば静脈内又は腹腔内に投与され
る。

【００７９】本発明は、さらに純粋な活性成分として、
又は他の活性成分、製薬学的担体、好適には意味のある
量で、又は場合により付加物と一緒に、式（Ｉ）、（I
V）若しくは（VIａ）のヌクレオシド又は式（VII)、(VI
Iａ）若しくは(VIIｂ）のオリゴヌクレオチドの有効量
を含む製薬学的製剤に関する。

【００８０】本発明の薬学的に活性なオリゴヌクレオシ
ド及びオリゴヌクレオチドは、非経口的又は注入溶液で
投与し得る製剤の形で使用され得る。そのような溶液は
好適には等張水溶液又は懸濁液であり、例えば純粋な活
性成分又は担体、例えばマンニトールを一緒に含む凍結
乾燥製剤の場合にはそれらを使用前に調製できる。製薬
学的製剤は消毒することができ、及び／又は付加物、例
えば防腐剤、安定剤、湿潤剤、及び／又は乳化剤、溶解
剤、浸透圧を調整するための塩類及び／又は緩衝剤を含
むことができる。さらに、場合により、薬学的活性成
分、例えば抗菌剤を含むことができる製薬学的製剤は、
それ自体公知の方法、例えば従来の溶解又は凍結乾燥法
により製造でき、約０．１ないし９０％、特に約０．５
％ないし約３０％、例えば１％ないし５％の活性成分を
含む。

【００８１】

【実施例】以下の実施例は本発明を説明している。 ¹Ｈ
ＮＭＲスペクトルは以下の環式化合物の炭素原子の番号
に基づいている。

【００８２】

【化３２】

【００８３】Ａ）中間体の合成実施例Ａ１

【化３３】

【００８４】塩化メチレン２０mlに溶解したトリエチル
ホスホノアセタ−ト１. ４ml（７mmo l ）及び化合物
（１）１. ０ｇ（６. ４mmol）の溶液を、窒素雰囲気下
室温で、１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］
デカ−５−エン１. ８７ｇ（１３. ５mmol）を塩化メチ
レン２０mlに溶解した溶液に加えた。３時間後、反応混
合物を塩化メチレン７０mlで希釈し、飽和食塩水及び水
の１００mlづつで洗浄し、水層を塩化メチレン１００ml
で２回抽出した。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、
濾過し、減圧下に濃縮した。得られた油状物質を、シリ
カゲルを担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：ヘキ
サン：酢酸エチル（３：１））に付した。溶媒を減圧下
に留去し、油状残渣を高真空で一夜乾燥して、化合物
（２）１. ３ｇ（９０％）を無色油状物質として得た。

【００８５】¹HNMR (400MHz, CDCl₃): 1.27(t, J=7.5,
H₃C-CH₂); 1.36及び1.38(2s, 2CH₃C); 2.48[dd, J=1.0,
J=17.8, HC(6)] 及び2.59[dd, J=5.4, J=17.8, HC
(6)]; 3.17[d, J=16.3, H₂-C(2)]; 3.22[d, J=16.3, H₂
C(2)]; 4.15[q, J=7.15, H₃C-CH₂ ]; 4.75[t, J=5.5, HC
(5)]; 5.07[d, J=5.7, HC(4)]; 5.61[br. s, HC(7)] 。

【００８６】実施例Ａ２

【化３４】

【００８７】塩化メチレン１００mlに溶解した３−クロ
ロ過安息香酸１１. ５ｇ（３６. ５５mmol）の溶液を、
塩化メチレン２００mlに溶解した化合物（２）４. １３
ｇ（１８. ２７mmol）の溶液に０°Ｃで１０分を要して
加えた。１０分後、氷浴を除き、反応混合物を室温で４
日間撹拌した。１M の炭酸水素ナトリウム水溶液２００
mlを加えて反応を停止して有機層を分離し、水層を塩化
メチレン１５０mlで２回抽出した。有機層を合せ、Ｎａ
₂ ＳＯ₄ で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮した。得られ
た油状物質を、シリカゲルを担体をするクロマトグラフ
ィー（溶離剤：ヘキサン：酢酸エチル（４：１））に付
した。溶媒を留去し、生成物を高真空で一夜乾燥して、
標記化合物３. ３９ｇ（７６％）を無色油状物質として
得た。

【００８８】¹HNMR (400MHz, CDCl₃): 1.28(t, J=7.14,
H ₃C-CH₂); 1.31 及び1.46(2s, H₃C-CH₂); 1.99[dt, J_t
=2.1, J_d=15.4, HC(6)]; 2.28[dd, J=6.0, J=15.4, HC
(6)];2.69[d, J=16.2, HC(2)]; 3.08[d, J=16.2、 HC
(2)]; 3.59[br. s, HC(7)]; 4.18[q, J=7.14, H₃C-C
H₂ ]; 4.56[m(三重線様）, HC(5)]; 4.65[d, J=6.0, HC
(4)]。

【００８９】実施例Ａ３

【化３５】

【００９０】０. １Ｍリン酸緩衝液５００ml中の化合物
（３）１０. １ｇ（４１. ３mmol）及びブタ肝臓エステ
ラーゼ［ＥＣ３. １. １. １；（FLUKA AG Buchs）］
１. １ml（タンパク質１１mg）懸濁液に、激しく撹拌し
ながら、ｐＨを常に７. ７５に保つようにして、１M の
ＮａＯＨ溶液を加えた。１M のＮａＯＨ溶液２０ml（２
０mmol）を加えた後、２N のＮａＯＨ溶液を用いてｐＨ
を９. ０とし、加水分解されていないエステルをエチル
エーテル２５０mlで４回抽出した。次いで、１Ｍ塩酸溶
液で水層のｐＨを２. ０とし、塩化ナトリウムで飽和
し、塩化メチレンの２５０m l づつで６回抽出した。有
機層をＮａ₂ ＳＯ₄ で乾燥して濾過し、溶媒を減圧下に
留去し、高真空で乾燥して標記の化合物４. ７ｇ（５３
％）を無色油状物質として得た。

【００９１】¹HNMR (200MHz, C₆D₆): 要点、1.10及び1.
36(2s, H₃C-C); 1.71[dt, J_t=1, J_d=7.5, HC(6)]; 1.89
[dd, J=3, J=7.5, HC(6)]; 2.45 及び3.00[2d, J=16.5,
HC(2)]; 3.07[br, s, HC(7)]; 4.24[dt, J=1, J=3, HC
(5)]; 4.63[d, J=3, HC(4)]。

【００９２】実施例Ａ４

【化３６】

【００９３】窒素雰囲気下、ジエチルエーテル６０mlに
ＬｉＡｌＨ₄ ４. ２ｇ（１１０. ７mmol）を懸濁し、−
３０°Ｃに冷却し、ジエチルエーテル８０ml及び塩化メ
チレン２０mlの混合溶媒に溶解した化合物（４）４. ７
ｇ（２１. ９mmol）を、２０分を要して加えた。添加完
了後、冷却浴を除き、反応混合物を還流温度で６時間撹
拌した。次いで、水２０ml及び２M のＮａＯＨ溶液１０
mlを室温で加え、反応混合物をセライトを助剤として濾
過し、白色のアルミン酸塩残渣を塩化メチレン４００ml
で洗浄した。濾液を合せ、減圧下に濃縮した。残渣を、
シリカゲルを担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：
ヘキサン：酢酸エチル（１：２））に付した。高真空下
に濃縮及び乾燥した後、標記化合物３. ７ｇ（８４％）
を固化し得る油状物質（７２％ＥＥ）として得た。ラセ
ミ体をヘキサン（生成物１ｇ当たり８０ml）から選択的
に結晶化して、標記化合物２. ７ｇ（６１％）を、実質
的に純粋なエナンチオマーの型（９７％ＥＥ）で母液中
に濃縮した。

【００９４】¹HNMR (400MHz, C₆D₆): 1.17及び1.39[2s,
H₃C-C]; 1.54-1.59[m, 1H]; 1.71-1.90[m, 10H の5H];
2.01-2.10[m, 1H]; 3.59 及び3.81[br. 2s, HC(1)];
4.24[dd, J=1.4, J=5.5, HC(4)]; 4.68[t, J=5.3, HC
(5)]; [α]_D ²⁵=-47.0(c=1.0、メタノール）。

【００９５】実施例Ａ５

【化３７】

【００９６】１，１，１−トリス（アセチルオキシ）−
１，１−ジヒドロ−１，２−ベンツイオドキソール−３
（１Ｈ）−オン［デスマーチン試薬（Dess-Martin reag
ent）］７. １８ｇ（１６. ９３mmol）を塩化メチレン
６８mlに導入（０. ２５Ｍ溶液）し、アルゴン雰囲気下
室温で、化合物（５）２. ７４ｇ（１３. ５５mmol）の
塩化メチレン５４ml溶液（０. ２５Ｍ溶液）を５分を要
して加えた。乳白色の反応溶液を２時間撹拌した後、Ｎ
ａ₂ Ｓ₂ Ｏ₃ の２０％水溶液５０ml、ＮａＨＣＯ₃ 飽和
水溶液１５０ml及びジエチルエーテル１５０mlからなる
混合溶媒に注加した。混合物を１０分間撹拌してから、
有機層を分離した。水層をジエチルエーテル３００mlで
３回抽出した。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濾
過し、減圧下に濃縮した。残渣を少量の酢酸エチルにと
り、シリカゲル層により濾過し、酢酸エチルで溶離し
た。球付き管で高真空蒸留（０. ０２６bar 、７２−７
５°Ｃ）を行い、標記化合物１．７８ｇ（６６％）を無
色油状物質として得た。

【００９７】¹HNMR (300MHz, C₆D₆): 1.09及び1.33[2s,
H₃C-C]; 1.51-1.62[m, 2H]; 1.70-1.77[m, 1H]; 1.85-
1.98[m, 1H]; 2.23[dd, J=0.9、 J=18.0、 HC(2)]; 2.55
[dd,J=1.0, J=18.0, HC(2)]; 2.70[br. s, OH]; 4.18[d
d, J=1.3, J=5.5, HC(4)]; 4.52[t, J=5.2, HC(5)]; 9.
33[t, J=1.0, CHO] 。

【００９８】実施例Ａ６

【化３８】

【００９９】ａ）水４０mlに溶解した化合物（６）１.
６４ｇ（８. １９mmol）及びアンバーライトＩＲ−１２
０イオン交換樹脂３. ３ｇを５５°Ｃで９０分間撹拌し
た。この溶液を濾過し、イオン交換樹脂を少量の水で洗
浄した。濾液のｐＨをＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液で８. ０
とし、溶媒を２mlの容量まで減圧濃縮した。残渣をピリ
ジン２０mlにとり、蒸発乾固した。黄色油状物質として
得られた化合物（７ａ）を、工程ｂに直接使用した。ｂ）この黄色油状物質をピリジン２５mlに溶解し、０°
Ｃで、酢酸無水物５.４m l （５７. １３mmol）及び４
−ジメチルアミノピリジン２５０mg（２. ０５mmol）を
加えた。反応混合物を、室温で、３時間撹拌した後、再
び０°Ｃに冷却し、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液１００mlを
加えて反応を停止した。この混合物を塩化メチレン１５
０mlで３回抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ₄ で乾
燥してから濾過し、減圧下に濃縮乾固した。黄褐色の油
状物質を、シリカゲルを担体とするクロマトグラフィー
（溶離剤：ヘキサン：酢酸エチル（２：１））に付し
た。溶媒を留出し、高真空下に２日間乾燥して、標記化
合物（７ｂ）２. １９ｇ（９３％）を、微量の酢酸エチ
ルエステルを含む淡黄色油状物質として得た。

【０１００】¹HNMR (400MHz, CDCl₃): 6.40[d, J=5.0,
0.5H, HC(1)]; 6.34[dd, J=2.2, J=5.3, 0.5H, HC(1)];
5.10-5.05[m, 0.5H, HC(5)]; 5.03-4.97[m, 0.5H, HC
(5)];4.79[d, J=5.3, 0.5H, HC(4)]; 4.73[d, J=5.8,
0.5H, HC(4)]; 2.67-1.73［集合したシグナル，15H ，
その中の 2.09, 2.08, 2.063, 2.061, 2.05, 2.04 の6
s, H₃C-CO] 。

【０１０１】Ｂ）ヌクレオシドの合成実施例Ｂ１

【化３９】

【０１０２】アルゴン雰囲気下、チミン１. ２５ｇ
（９. ９１mmol）をアセトニトリル１００mlに懸濁し、
０°Ｃで、ヘキサメチルジシラザン１. ６５ml（７. ９
１mmol）、トリメチルクロロシラザン１. ０ml（７. ８
９mmol）及びＳｎＣｌ₄ １. ３９ｇ（１１. ８３mmol）
を順次加えた。この懸濁液に、アセトニトリル２０mlに
溶解した化合物（７ｂ）２. ８３ｇ（９. ８９mmol）の
溶液を５分を要して加え、氷浴を除いた。透明になった
溶液を、室温で３５分、５０°Ｃで３５分間撹拌した。
室温に冷却後、反応液をＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液３００
mlに注加し、酢酸エチル３００mlで２回抽出した。有機
層を綿を用いて濾過し、溶媒を減圧下に留去した。高真
空で乾燥して得られる褐色の泡状物質を、シリカゲルを
担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン：酢
酸エチルの（１：３））に付し、褐色泡状物を得た。溶
媒を減圧下に留去し、生成物を高真空下に乾燥して標記
化合物２. ５５ｇ（７３％）（アノマー混合物α：β＝
１：２）を、無色泡状物質として得た。

【０１０３】¹HNMR (200MHz, CDCl₃): 8.57[br, s, 1H,
HN]; 7.31, 7.28[2s, 1H, HC(6)];6.30-6.18[m, 1H, H
C(1´)]; 5.19-5.00[m, 1H, HC(5 ´)]; 4.91[d=5.0,
0.4H, HC(4´)]; 4.63[d, J=6, 0.6H, HC(4 ´)]; 2.96
[dd, J=15.0, 0.6H, HC (2´)]; 2.79[dd, J=7, J=15,
0.4H, HC(2´)]; 2.55-1.50 ［集合したシグナル14H,そ
の中の2.13, 2.09, 2.05, 1.95の4s, H₃C ］。

【０１０４】実施例Ｂ２

【化４０】

【０１０５】Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセト
アミド３. １ml（１２. ５mmol）を、Ｎ−４−ベンゾイ
ルシトシン１. ３４５ｇ（６. ２５mmol）のアセトニト
リル５０ml懸濁液に室温で加えた。４５分後、反応混合
物に、アセトニトリル２５mlに溶解した化合物（７ｂ）
１. ４３１ｇ（５mmol）及び四塩化スズ１. ９１ml（１
６. ２mmo l ）を順次加えた。反応混合物は均質系とな
った。反応混合物を室温で５０分間撹拌した後、塩化メ
チレン２００mlにとり、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液２００
mlで２回、ＮａＣｌ飽和水溶液２００mlで２回抽出し
た。水層を、さらに塩化メチレン２００mlで２回抽出し
た。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮し、残渣
をシリカゲルによるクロマトグラフィー（溶離剤：塩化
メチレン：メタノール（３０：１））に付した。このよ
うにして得られた留分にペンタン４００mlを加えて沈殿
させ、高真空（ＨＶ）で一夜乾燥して標記化合物１. ９
９ｇ（９０％）を淡褐色の粉末の形で、約１：１のアノ
マー混合物として得た。

【０１０６】¹HNMR (400MHz, CDCl₃):要点、8.71[br.
s, 1H, HN]; 8.14, 7.97[2d, J=7.5,1H, HC(6)]; 6.25-
6.21[m, 1H, HC(1´)]; 5.16[dt, J_d =6.9, J_t=5.9, 0.
5H,HC(5´)]; 5.08[dt, J_d=9.8, J_t=5.8, 0.5H, HC(5
´)]; 5.07[d, J=5.8, 0.5H,HC(4 ´)]; 4.78[d, J=5.
7, 0.5H, HC(4 ´)]; 3.33[dd, J=5.5, J=14.9, 0.5H,
HC(2´)]; 2.89[dd, J=6.6, J=15.2, 0.5H, HC(2´)];
2.72[dd, J=3.8, J=15.2, 0.5H, HC(2´)]; 2.13, 2.1
2, 2.08, 1.95[4s, 6H, CH₃CO] 。

【０１０７】実施例Ｂ３

【化４１】

【０１０８】Ｎ−６−ベンゾイルアデニン３．８６ｇ
（１６．１mmol）を、アセトニトリル２０m にl 懸濁
し、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド
５．８６ml（３２．３mmol）を加えた。室温で３０分間
撹拌した後、この反応溶液に、アセトニトリル１５mlに
溶解した化合物（７ｂ）２．３１ｇ（８．１mmol）、次
いでトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート
２００μｌを加え、均質な混合物とした。２時間還流
後、室温まで放冷し、３時間撹拌した。濃褐色の反応溶
液を、ＮａＣｌ飽和水溶液１００ml及びＮａＨＣＯ₃ 飽
和水溶液１００mlの混合溶媒に注加し、塩化メチレン２
００mlで２回抽出した。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄ で乾
燥して濃縮した。残渣を少量の酢酸エチルに溶解し、濾
過し、濾液を、シリカゲルを担体とするクロマトグラフ
ィー（溶離剤：酢酸エチル）に付した。生成物を含む画
分を集め、溶媒を留去して残渣を高真空下に１時間乾燥
して、標記化合物２．９４ｇ（７８％）を淡黄色の泡状
物質として得た。この生成物は、α：β＝３：２のアノ
マー混合物であった。

【０１０９】¹HNMR (400MHz, CDCl₃):要点、8.79, 8.7
8, 8.25, 8.24[4s, 2H, HC(2,8)]; 6.54[dd, J=3.5, J=
6.7, 0.6H, HC(1´)]; 6.48[dd, J=5.8, J=9.0, 0.4H,
HC(1´)]; 5.17[dt, J_d=8.4, J_t=5.8, 0.6H, HC(5
´)]; 5.05[dt, J_d=9.7, J_t=6.2,0.4H, HC(5 ´)]; 4.9
8[d, J=5.3, 0.6H, HC(4 ´)]; 4.77[d, J=5.4, 0.4H,
HC(4 ´)]; 3.32[dd, J=3.5, J=15.0, 0.6H, HC(2´)];
3.14[dd, J=5.8, J=14.6, 0.4H, HC(2´)]; 2.91[dd,
J=6.8, J=15.1, 0.6H, HC(2´)]; 2.84[dd, J=8.9, J=1
4.6, 0.4H, HC(2´)]; 2.13, 2.11, 2.04, 1.94[4s, 6
H, CH₃CO] 。

【０１１０】実施例Ｂ３ａ

【化４２】

【０１１１】アルゴン雰囲気下、Ｎ₂ −イソブチロイル
グアニン４. ６９ｇ（２１. ２mmol）を無水アセトニト
リル１５０mlに懸濁し、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミド１９ml（７６. ３mmol）を加えた。室
温で１時間、４０°Ｃで３０分間撹拌した後、均質な混
合物に、無水アセトニトリル１５mlに溶解した化合物
（７ｂ）３. ０３ｇ（１０. ６mmol）、次いでトリメチ
ルシリルトリフルオロメタンスルホナート４. ２ml
（５. ２ｇ、２３. ３mmol）を加えた。室温で１６時
間、４０°Ｃで６時間反応させた後、反応液を濃縮し、
生成した油状物質を塩化メチレン２５０mlにとり、この
溶液をＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液２５０mlで２回抽出し
た。この水層を、塩化メチレン２５０mlで３回再抽出し
た。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮し、褐色
の泡状物質を得た。この残渣を、最初にシリカゲル６０
の３００ｇ、次の２回は２５０ｇを担体としてクロマト
グラフィー（溶離剤：塩化メチレン：メタノール（３
９：１））に付し、ジアステレオマーの反応生成物を分
離した。標記化合物２. １３ｇ（４５％）をα：β＝
８：５のアノマー混合物及び標記化合物の異性体である
Ｎ７ヌクレオシド１. ７５ｇ（３７％）を、α：β＝
３：２のアノマー混合物として得た。

【０１１２】標記化合物の¹HNMR (400MHz, CDCl₃): 1.2
3-1.28[m, 6H, H₃C （イソブチリル）]; 1.82-2.03, 2.
18-2.28, 2.31-2.41[m, 4H, HC(6´), HC(7 ´)]; 1.9
8, 2.06[2s, 2.3H, 2H₃CCO]; 2.04, 2.10[2s, 2.7H, 2H
₃CCO]; 2.45[dd, J=9.1, J=14.6, 0.55H, HC(2 ´)];
2.70, 2.71 [七重線，J=6.9, 1H、 HC(イソブチリル）];
2.81[dd, J=7.0, J=15.2, 0.45H, HC(2´)]; 3.03[dd,
J=5.7, J=14.6, 0.55H,HC(2 ´)]; 3.10[dd, J=3.2, J=
15.2, 0.45H, HC(2 ´)]; 4.68[d, J=5.6, 0.45H, HC(4
´)]; 4.90[d, J=5.2, 0.55H, HC(4´)]; 4.98-5.03[m,
0.45H, HC(5´)]; 4,10-5.15[m, 0.55H, HC(5´)]; 6.
20[dd, J=5.7, J=9.0, 0.55H, HC(1´)]; 6.26[dd, J=
3.2, J=6.9, 0.45H, HC(1´)]; 7.86[s, 0.55H, HC
(8)]; 7.90[s0.45H, HC(8)]; 8.87[br. s, 0.45H, HN
(1)]; 8.93[br. s, 0.55H, HN(1)] ; 2.15, 2.20[br. 2
s 1H, HN(2)]。

【０１１３】実施例Ｂ４

【化４３】

【０１１４】化合物（８）２. ３０ｇ（６. ５３mmol）
を、テトラヒドロフラン、メタノール及び水の５：４：
１混合溶媒２６０mlに溶解し、０°Ｃで、２N ＮａＯＨ
溶液２６ml（５２mmol）を加えた。同温度で、７５分間
撹拌後、ＮＨ₄ Ｃｌの３. ５ｇ（６５. ４mmol）を加
え、溶液が透明になるまで撹拌を続けた。溶媒を減圧下
に留去し、残渣をメタノール２００mlにとり、シリカゲ
ル８ｇに吸着させ、シリカゲルによるクロマトグラフィ
ー（溶離剤：塩化メチレン：メタノール（５：１））に
付した。溶媒を減圧下に留去して得られた無色の泡状物
質を少量のメタノールに溶解し、ペンタン１００mlを加
え、混合物を減圧下に濃縮乾固した。高真空で一夜乾燥
して、脱アセチル化した生成物１. ６５ｇ（９４％）を
無色粉末として得た。この粉末を、僅かに加熱してピリ
ジン３３mlに溶解し、アルゴン雰囲気下０°Ｃで、ｔ−
ブチルジメチルシリルトリフラート１. ８４ｇ（８. ０
１mmol）を加えた。同温度で４５分間撹拌後、透明な反
応液にＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液１００mlを加え、酢酸エ
チル１５０mlで３回抽出した。溶媒を留去し、得られた
無色の泡状物質を高真空下に短時間乾燥し、シリカゲル
によるクロマトグラフィーを行い、（溶離剤：５％アセ
トンを含むジエチルエーテル）に付し、標記化合物の二
種類のアノマー、（１１ａ）：６５５mg（２８％）及び
（１１ｂ）：１. ４７ｇ（６２％）を得た。

【０１１５】（１１ａ）の¹HNMR (400MHz, CDCl₃) : 要
点、7.37[s, 1H, HC(6)]; 6.05[dd,J=2.5, J=7.8, 1H,
HC(1 ´)]; 4.45[d, J=4.6, 1H, HC(4 ´)]; 4.15[dd,
J=4.2, J=8.6, 1H, HC(5 ´)]; 2.61[dd, J=7.9, J=14.
7, 1H, HC(2´)]; 2.49[d,J=14.5, 1H, HC(2´)]; 1.89
[s, 3H, H₃C-C(5)]; 0.91[s, 9H, H₃CC]; 0.10, 0.09,
[2s, 6H, H₃C-Si] 。（１１ｂ）の ¹HNMR (400MHz, CDCl₃)：要点、7.66[s,
1H, HC(6)]; 6.39[dd,J=4.9, J=9.3, 1H, HC(1 ´)];
4.19[m, 1H, HC(5´)]; 4.08[d, J=6.0, 1H, HC(4
´)]; 3.18[br. s, 1H, OH]; 2.67[dd, J=5.0, J=13.6,
1H, HC(2 ´)]; 1.92[s, 3H, H₃C-C(5)]; 0.91[s, 9H,
H₃C-C]; 0.11, 0.09[2s, 6H, H₃C-Si] 。

【０１１６】実施例Ｂ４ａ

【化４４】

【０１１７】実施例Ｂ３の標記化合物１. １３ｇ（２.
５３mmol）を、テトラヒドロフラン、メタノール及び水
の５：４：１混合溶媒２５０mlに溶解し、２°Ｃで、２
N ＮａＯＨ溶液２５ml（５０mmol）を加えた。同温度で
２５分間撹拌後、塩化アンモニウム４ｇ（７５mmol）を
加え、溶液が透明になるまで撹拌を続けた。溶媒を留去
し、白色の残渣を高真空下に短時間乾燥し、次いでシリ
カゲル６０の１５０ｇを担体とするクロマトグラフィー
（溶離剤：塩化メチレン：メタノール（１０：１））に
付し、アノマーを分離した。単一物を含む画分を集め、
混合物を含む画分は、再度シリカゲル６０によるクロマ
トグラフィーを行なって分離した。このようにして、よ
り無極性のβ−アノマー４２７mg（４７％）及びより極
性のα−アノマー２５４mg（２８％）、総計６８１mg
（７５％）を得た。

【０１１８】α−アノマーの ¹HNMR (400MHz, CD₃OD :
1.25[d, J=6.8, 6H, H₃C（イソブチリル）]; 1.69-1.8
0, 2.02-2.11[2m, 4H, HC(6´),HC(7´)]; 2.65[dd, J=
7.2,J=14.4, 1H, HC(2´)]; 2.73-3.17[m, 2H, HC(2
´), HC(イソブチリル）]; 4.11-4.16[m, 1H, HC(5
´)]; 4.34[d, J=5.2, HC(4 ´)]; 6.42[dd, J=2.8, J=
7.1,1H, HC(1 ´)]; 8.38[s, 1H, HC(8)]。

【０１１９】β−アノマーの ¹HNMR (400MHz, CD₃OD):
1.22[d, J=6.9, 6H, H₃C（イソブチル）]; 1.65-1.72,
1.86-1.97, 2.06-2.15[3m, 4H, HC(6 ´), HC(7 ´)];
2.50[dd, J=9.7, J=13.2, 1H, HC(2´)]; 2.57[dd, J=
5.4, J=13.3, 1H, HC(2´)];2.72 [七重線, J=6.9, 1H,
HC(イソブチリル)]; 4.09-4.13[m, 2H, HC(4 ´), HC
(5 ´)]; 6.32[dd, J=5.4, J=9.6, 1H, HC(1 ´)]; 8.3
[s, 1H, HC(8)] 。

【０１２０】実施例Ｂ５

【化４５】

【０１２１】化合物（９）１. ９９ｇ（４. ５mmol）
を、テトラヒドロフラン、メタノール及び水の５：４：
１混合溶媒４００mlに溶解し、０°Ｃで、２N ＮａＯＨ
水溶液４０mlを加えた。０°Ｃで２０分間撹拌後、塩化
アンモニウム６ｇ（１１２mmol）を加え、反応混合物を
濃縮した。残渣を、シリカゲルによるクロマトグラフィ
ー（溶離剤：塩化メチレン：メタノール（１０：１））
に付した。生成物を含む画分を集めて濃縮し、得られた
残渣１. ３５ｇをピリジン２６mlに溶解し、０°Ｃで、
ｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナ
ート１. １１ml（４. ８６mmol）を加えた。３０分後、
反応混合物をＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液２００mlにとり、
酢酸エチル２００mlで３回抽出した。有機層を合せ、Ｍ
ｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮した。残渣を、シリカゲルを担
体とするクロマトグラフィー（溶離剤：酢酸エチル）に
付した。一夜乾燥後、溶出順序に従って、化合物（１２
ｂ）の８６５mg（４１％）を無色の結晶性物質として、
化合物（１２ａ）の６７７mg（３２％）を無色の泡状物
質として得た。

【０１２２】（１２ａ）の ¹HNMR (400MHz, CDCl₃): 要
点、7.95[d, J=7.4, 1H, HC(6)]; 6.06[dd, J=3.0, J=
5.7, 1H, HC(1´)]; 4.53[d, J=4.6, 1H, HC(4 ´)];
4.16[dd, J=4.0, J=8.5, 1H, HC(5 ´)]; 2.67-2.65[m,
2H, HC(2 ´)]。（１２ｂ）の ¹HNMR (400MHz, CDCl₃)：要点、8.59[d,
J=7.5, 1H, HC(6)]; 6.47[dd, J=5.4, J=8.5, 1H, HC(1
´)]; 4.24[d, J=5.4, 1H, HC(4 ´)]; 4.24-4.16[m, 1
H, HC(5 ´)]; 3.10[dd, J=5.4, J=14.0, 1H, HC(2
´)]; 1.77(dd, J=8.5, J=14.0, 1H, H-C(2 ´)]。

【０１２３】実施例Ｂ６

【化４６】

【０１２４】化合物（１０）３. ３６ｇ（７. ２４mmo
l）を、テトラヒドロフラン、メタノール及び水の５：
４：１混合溶媒２８９mlに溶解し、０°Ｃで、２N Ｎａ
ＯＨ溶液２８．９mlを加えた。３０分間撹拌後、反応混
合物に塩化アンモニウム３．６ｇ（６７mmol）を加え
て、氷浴を除いた。均質な溶液が生成してから、反応混
合物を濃縮した。残渣をメタノール５０mlに溶解し、シ
リカゲル５ｇに吸着させ、シリカゲルを担体とするクロ
マトグラフィー（溶離剤：塩化メチレン：メタノール
（９：１））に付した。短時間乾燥後、脱アセチル化体
１. ９８ｇを得た。次いで、この生成物をピリジン２０
mlに溶解し、０°Ｃで、ｔ−ブチルジメチルシリルトリ
フルオロメタンスルホナート１. ４３ml（６. ２４mmo
l）を加えた。３０分反応した後、反応混合物をＮａＨ
ＣＯ₃ 水溶液１００mlに注加し、エーテル２００mlで２
回抽出した。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮
した。粗生成物２．３ｇを、シリカゲルを担体とするク
ロマトグラフィー（溶離剤：水で飽和したジエチルエー
テル：アセトン（８３：１７））に付した。異性体（１
３ａ）が最初に、次いで異性体（１３ｂ）が溶出した。
単一の化合物を含む画分を集めて濃縮し、混合物を含む
画分は、繰り返し同様のクロマトグラフィーに付した。
このようにして、一夜乾燥後、化合物（１３ａ）１. ４
５２ｇ（５７％）及び化合物（１３ｂ）０. ８６４ｇ
（３３％）を、何れも白色泡状物質として得た。

【０１２５】（１３ａ）の ¹HNMR (400MHz, CDCl₃)：要
点、8.79, 8.07[2s, 2H, HC(2,8)];6.34[dd, J=3.8, J=
7.3, 1H, HC(1´)]; 4.39,[d, J=4.8, 1H, HC(4´)];
4.18[dt, J_d=6.1, J_t=4.8, 1H, HC(5 ´)]; 2.92-2.82
[m, 2H, HC(2 ´)]; 0.92[s,9H, 3CH₃-C]; 0.107, 0.10
2[2s, 6H, 2CH₃-Si]。

【０１２６】（１３ｂ）の ¹HNMR (400MHz, CDCl₃)：要
点、8.79, 8.47[2s, 2H, HC(2,8)];6.57[dd, J=5.3, J=
9.0, 1H, HC(1´)]; 4.23-4.18[m, 2H, HC(4 ´, 5
´)];3.07[br. s, 1H, OH]; 2.84[dd, J=5.4, J=13.5,
1H, HC(2 ´)]; 2.37[dd, J=9.1, J=13.6, 1H, HC(2
´)]; 0.88[s, 9H, 2CH₃-C]; 0.10, 0.06[2s, 6H, 2CH₃
-Si]。

【０１２７】実施例Ｂ７

【化４７】

【０１２８】フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡ
Ｆ）・３Ｈ₂ Ｏの１. ７６ｇ（５.５８mmol）を、室温
にて化合物（１１ｂ）１. ０７ｇ（２. ８０mmol）のテ
トラヒドロフラン２０ml溶液に加え、４日間放置した。
反応混合物をシリカゲル１０ｇに吸着させ、シリカゲル
を担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレ
ン：メタノール（６：１））に付した。生成物を結晶化
（メタノール及びエチルエーテルの４：１混合溶媒、及
びペンタンとの等温蒸留）して、標記化合物５２１mg
（６９％）を無色結晶として得た。

【０１２９】¹HNMR (400MHz, D₂O) ：要点、7.67[s, 1
H, HC(6)]; 6.24[dd, J=5.2, J=10.1, HC(1´)]; 4.19
[dt, J_t=5.6, J_d=9.4, 1H, HC(5 ´)]; 4.09[d, J=5.3,
1H, HC(4 ´)]; 2.49[dd, J=5.2, J=1.41, 1H, HC(2
´)]; 2.15[dd, J=10.2, J=14.1,1H, HC(2 ´)]; 1.89
[s, 3H, H₃C-C(5)] 。

【０１３０】実施例Ｂ８

【化４８】

【０１３１】実施例Ｂ７の方法に準じて、化合物（１１
ａ）６３８mg（１. ６７mmol）を用い、シリカゲルを担
体とするクロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレン：
メタノール（６：１））に付した。結晶化（メタノール
及びエチルエーテルの４：１混合溶媒、及びペンタンと
の等温蒸留）して、標記化合物３４５mg（７７％）を無
色結晶として得た。

【０１３２】¹HNMR (300MHz, D₂O) ：要点、7.69[s, 1
H, HC(6)]; 6.15[dd, J=4.3, J=7.0,1H, HC(1 ´)]; 4.
37[d, J=5.3, 1H, HC(4 ´)]; 4.17-4.10[m, 1H, HC(5
´)]; 2.57[dd, J=7.0, J=14.7, 1H, HC(2´)]; 2.38[d
d, J=4.3, J=14.7, 1H, HC(2´)]; 1.84[s, 3H, H₃C-C
(5)] 。

【０１３３】実施例Ｂ９

【化４９】

【０１３４】化合物（１２ｂ）９９２mg（２. ７７mmo
l）をテトラヒドロフラン２７mlに溶解し、この溶液に
フッ化テトラブチルアンモニウム１. ７５ｇ（５. ５mm
ol）を加え、室温で８４時間反応させた。反応混合物を
濃縮し、残渣をシリカゲルによるクロマトグラフィー
（溶離剤：塩化メチレン：メタノール（１０：１））に
付した。生成物を含む画分を合せ、濃縮した。残渣６７
０mgを、６０°Ｃの水６mlに懸濁し、懸濁液を室温に数
時間放置して析出した結晶を濾取した。標記化合物の細
かい白色針状晶を、高真空下、４０°Ｃで数時間乾燥
し、標記化合物４８８mg（６６％）を得た。

【０１３５】¹HNMR (400MHz, d₆-DMSO) ：要点、8.59
[d, J=7.5, 1H, HC(6)]; 6.18[dd, J=5.3, J=9.2, 1H,
HC(1´)]; 4.01-3.95[m, 2H, HC(4 ´, 5 ´)]; 2.54-
2.49[m,HC(2 ´)+溶媒]; 1.82[dd, J=9.2, J=13.3, 1H,
HC(2 ´)]。

【０１３６】実施例Ｂ１０

【化５０】

【０１３７】実施例Ｂ９の方法に準じて、化合物（１２
ａ）８０６mg（２. ２５mmol）を用いた。シリカゲルを
担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレ
ン：メタノール（１０：１））に付し、メタノール、エ
ーテル及びペンタンの混合溶媒から結晶化させ、標記化
合物３９８mg（６５％）を星型状の白色針状晶として得
た。

【０１３８】¹HNMR (400MHz, d₆-DMSO) ：要点、8.26
[d, J=7.4, 1H, HC(6)]; 6.14[dd, J=2.9, J=7.0, 1H,
HC(1´)]; 4.37[d, J=5.2, 1H, HC(4 ´)]; 3.96[dt, J
_d=11.2, J_t=5.9, 1H, HC(5´)]; 2.51-2.46[m, HC″´
+ 溶媒]; 2.23[dd, J=2.9, J=14.1, 1H, HC(2 ´)]。

【０１３９】実施例Ｂ１１

【化５１】

【０１４０】化合物（１３ｂ）８５２mg（１．７２mmo
l）をテトラヒドロフラン２０mlに溶解し、この溶液に
フッ化テトラブチルアンモニウム三水和物６５１mg
（２．１mmol）を加えた。５０°Ｃで１２時間反応させ
た後、塩化アンモニウム５００mg（９．３mmol）を加
え、さらに３０分後に反応混合物を濃縮した。残渣をシ
リカゲルを担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：塩
化メチレン：メタノール（９：１））に付した。生成物
を含む画分（不純物として、テトラブチルアンモニウム
塩を含む）を濃縮し、残渣を水１０mlから結晶させた。
標記化合物５３０mg（８１％）を、高真空で１５時間乾
燥した後、無色針状晶として得た。

【０１４１】¹HNMR (300MHz, CD₃OD) : 8.73, 8.71[2s,
2H, HC(2,8)]; 8.09[br, d, 2H, H- 芳香環]; 7.70-7.
54[m, 3H, H-芳香環]; 6.58[dd, J=5.0, J=9.0, 1H, HC
(1´)]; 4.22-4.10[m, 2H, HC(4 ´, 5 ´)]; 2.72[dd,
J=9.0, J=13.0, 1H, HC(2´)]; 2.66[dd, J=5.0, J=1
3.0, 1H, HC(2´)]; 2.20-1.65[m, 4H, HC(6 ´,7
´)]。

【０１４２】実施例Ｂ１２

【化５２】

【０１４３】化合物（１５ｂ）１. １７ｇ（３. ２７mm
ol）をルチジン２４ml及び塩化メチレン２４mlの混合溶
媒に懸濁し、この懸濁液に４，４’−ジメトキシトリフ
ェニルメチルトリフルオロメタンスルホナート（ＤＭＴ
トリフラート）２. ２２ｇ（４. ９１mmol）を加えた。
この溶液を４時間撹拌して、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液に
注加し、塩化メチレン２５０mlで３回抽出した。有機層
をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濾過して、溶媒を減圧下に留去
した。ルチジンを高真空（ＨＶ）下に留去した。次い
で、得られた褐色の泡状残渣を、シリカゲルを担体とす
るクロマトグラフィー（溶離剤：トリエチルアミン：酢
酸エチル（１：９９））に付した。標記化合物１. ９６
ｇ（９１％）を、実質的に無色泡状物質として得た。

【０１４４】¹HNMR (400MHz, CDCl₃) ：要点、8.75[d,
J=7.5, 1H, HC(6)]; 6.85[dd, J=2.0, J=8.9, 4H, H-芳
香環（トリチル）]; 6.33[dd, J=5.6, J=8.1, 1H, HC(1
´)]; 3.98-3.91[m, 1H, HC(5 ´)]; 3.80[s, 6H, OC
H₃]; 3.69[d, J=6.4, 1H, HC(4´)]; 3.04[dd, J=5.6,
J=14.1, 1H, HC(2´)]。

【０１４５】実施例Ｂ１３

【化５３】

【０１４６】実施例Ｂ１２の方法に準じて、化合物（１
４ｂ）４４２mg（４．６５mmol）を用いて、シリカゲル
を担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン：
酢酸エチル（１：９））及び結晶化（溶媒：酢酸エチル
及びペンタンの混合溶媒）を行い、標記化合物７３６mg
（７８％）を得た。

【０１４７】¹HNMR (200MHz, CDCl₃) ：要点、7.78[d,
J=1.0, 1H, HC(6)]; 6.38[d, J=9.0, 4H, H-芳香環（ト
リチル）]; 6.29[dd, J=5.0, J=10.0, 1H, HC(1 ´)];
3.99-3.87[m, 1H, HC(5 ´)]; 3.76[s, 6H, OCH₃]; 3.7
2[d, J=6.0, 1H, HC(4´)];2.58[dd, J=5.0, J=13.0, 1
H, HC(2´)]; 1.75[d, J=1.0, 3H, H₃C-C(5)]。

【０１４８】実施例Ｂ１４

【化５４】

【０１４９】化合物（１６ｂ）５０５mg（１. ３２mmo
l）をピリジン１０mlに溶解し、この溶液にＤＭＴトリ
フラート１. １９８ｇ（２. ６４mmol）を加え、３０分
後にさらにＤＭＴトリフラート２. ０ｇ（４. ４mmol）
を加えた。合計で３時間反応させた後、反応混合物を酢
酸エチル１００mlにとり、ＮａＨＣＯ₃ 飽和溶液１００
mlで３回抽出した。水層を、毎回、酢酸エチル１００ml
で再度抽出した。有機層を合せて濃縮し、残渣をシリカ
ゲルを担体とするクロマトグラフィーに付した。最初
に、非極性の副生成物を酢酸エチルで溶出し、次いで塩
化メチレン及びメタノールの９：１混合溶媒で、所望の
標記化合物を溶出した。濃縮し、高真空下に一夜乾燥し
て、標記化合物７７０mg（８５％）を淡黄色泡状物質と
して得た。

【０１５０】¹HNMR (200MHz, CDCl₃) ：要点、8.80, 8.
51[2s, 2H, HC(2,8)]; 6.81[br. d,4H, H- 芳香環（ト
リチル）]; 6.41[dd, J=4.0, J=9.0, 1H, HC(1´)]; 4.
92[dt, J_d=10.0, J_t=5.0, 1H, HC(5´)]; 3.76[s, 6H,
OCH₃]; 3.69[d, J=5.0, 1H,HC(4´)]; 2.79[dd, J=4.0,
J=14.0, 1H, HC(2´)]; 2.35[dd, J=9.0, J=14.0,1H,
HC(2´)]。

【０１５１】実施例Ｂ１４ａ

【化５５】

【０１５２】実施例４ａの化合物（β−異性体）２２１
mg（６０８μmol ）を無水ピリジン２mlに溶解し、この
溶液にＤＭＴトリフラート４１３mg（９１２μmol ）を
撹拌下に加えた。２時間後及び４時間後に、それぞれＤ
ＭＴトリフラート１３７mg（３０４μmol ）をさらに加
えた。６. ５時間後、反応混合物を塩化メチレン２０ml
にとり、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液１５ml、１０％クエン
酸水溶液１５ml及びＮａＨＣＯ3 飽和水溶液１５mlで順
次抽出した。水層の各々を、塩化メチレン１０mlで再抽
出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮し
た。得られた黄色泡状物質に、シリカゲル６０（４０
ｇ）を用いたクロマトグラフィー（溶離剤：トリエチル
アミン２％を含む塩化メチレン：メタノール（２０：
１））に付した。次いで、室温でジエチルエーテル１２
０mlを用いて沈殿を析出させ、標記化合物３１３mg（７
７％）を白色粉末として得た。

【０１５３】¹HNMR (400MHz, CDCl₃) :1.10-1.25, 1.68
-1.70[2m, 9H, H₃C （イソブチリル）、 HC(6´、7´)];
2.20[dd, J=8.5, J=13.0, 1H, HC(2´)]; 2.81-2.88[m,
1H,HC （イソブチリル) ]; 3.69, 3.70[2s, 6H, H₃C-O
(DMT)]; 3.88-3.90[m, 2H,HC(4´.5´)]; 4.40[br. s,
1H, HO-C(3´)]; 6.02-6.06[m, 1H, HC(1 ´)]; 6.73[d
d, J=7.6, J=8.9, 4H, H- 芳香環]; 7.11[t, J=7.3, 1
H, H-芳香環]; 7.16-7.20[m, 2H, H-芳香環 ]; 7.33-7.
36[m, 4H, H- 芳香環]; 7.46[d, J=7.3, 2H,H-芳香環];
8.16[s, 1H, HC(8)]; 10.9[br. s, 1H, HN(2)]; 12.3
[br. s, 1H, HN(1)] 。

【０１５４】実施例Ｂ１５

【化５６】

【０１５５】アルゴン雰囲気下、化合物（１７）３９５
mg（０. ６mmol）をテトラヒドロフラン５mlに溶解し、
この溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４１０
μｌ（１. ２mmol）及び２−シアノエチルＮ，Ｎ−ジイ
ソプロピルクロロホスホルアミダイト２７０μｌ（１.
２mmol）を加えた。反応混合物を２時間撹拌してから、
酢酸エチル５０mlを加え、混合物をＮａＨＣＯ₃ 飽和水
溶液２０mlで２回抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥
し、濾過した。溶媒を減圧下に留去して、得られた黄色
泡状物質を高真空下に乾燥し、シリカゲルを担体とする
クロマトグラフィー（溶離剤：１．５％のトリエチルア
ミンを含むヘキサン：酢酸エチル（１：２））に付し
た。得られた黄色泡状物質を、塩化メチレン及びペンタ
ンの混合溶媒から２回再沈殿し、標記化合物３７４mg
（７３％）を無色粉末として得た。

【０１５６】¹HNMR (400MHz, CDCl₃) ：要点、8.75[d,
J=7.4, 1H, HC(6)]; 6.86[dd, J=1.9, J=8.6, 4H, H-芳
香環（トリチル）]; 6.21-6.15[m, 1H, HC(1´)]; 3.8
2, 3.81[2s, 6H, OCH₃] : 2.63[t, J=6.4, 1H, -H₂C-C
N]; 2.55[q, J=6.2, 1H, -H₂C-CN]; 1.15-1.11[m, 12H,
CH(CH₃)₂]。

【０１５７】実施例Ｂ１６

【化５７】

【０１５８】実施例Ｂ１５の方法に準じて、化合物（１
８）１０８mg（０. １８９mmol）を用いて、シリカゲル
を担体とするクロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン：
酢酸エチル：トリエチルアミン（２０：１０：４））に
付し、標記化合物９１mg（６２％）を白色泡状物質とし
て得た。

【０１５９】¹HNMR (200MHz, CDCl₃) ：要点、7.79, 7.
78[2d, J=1.0, 1H, HC(6)]; 6.82[br, d, J=8.0, H- 芳
香環（トリチル）]; 6.33-6.20[m, 1H, HC(1´)]; 3.7
8, 3.77[2s, 6H, OCH₃]; 2.62, 2.56[2t, J=7.0, 2H, -
H₂C-CN]; 1.73, 1.68[2d, J=1.0, H₃C-C(5)]; 1.19-1.0
9[m, 12H, CH(CH₃)₂]。

【０１６０】実施例Ｂ１７

【化５８】

【０１６１】実施例Ｂ１５の方法に準じて、化合物（１
８）２００mg（０. ３５mmol）を、塩化メチレン中でア
リルオキシクロロ−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノホス
フィトと反応させ、シリカゲルを担体とするクロマトグ
ラフィー（溶離剤：ヘキサン：酢酸エチル（１：２））
に付し、標記化合物２３６mg（８９％）を、無色泡状物
質として得た。

【０１６２】¹HNMR (200MHz, CDCl₃) ：要点、7.82[br.
s, 1H, HC(6)]; 6.83[d, J=9.0, 4H, H- 芳香環（トリ
チル）]; 6.43-6.22[m, 1H, HC(1´)]; 5.99-5.75, 5.3
1-5.05[2m, 3H,アリルH]; 3.79, 3.78[2s, 6H, OCH₃];
1.73, 1.71[2d, J=1.0, H₃C-C(5)]; 1.25-1.05[m, 12H,
CH(CH₃)₂]。

【０１６３】実施例Ｂ１８

【化５９】

【０１６４】化合物（１９）３４１mg（０. ５mmol）を
塩化メチレン４mlに溶解し、この溶液に、室温で、エチ
ルジイソプロピルアミン３４２μｌ（２. ０mmol）及び
２−シアノエチルＮ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホ
ルアミダイト２２３μｌ（１. ０mmol）を順次加えた。
１時間後、反応混合物を酢酸エチル５０mlにとり、Ｎａ
ＨＣＯ₃ 溶液５０mlで２回抽出した。有機層を綿を用い
て濾過し、濃縮した。残渣を、シリカゲルを担体とする
クロマトグラフィー（溶離剤：酢酸エチル）に付した。
生成物を高真空で一夜乾燥し、標記化合物３４８mg（７
９％）を、淡黄色泡状物質として得た。

【０１６５】¹HNMR (200MHz, CDCl₃) ：要点、8.82, 8.
81, 8.51, 8,50[4s, 2H, HC(2 ´,8´)]; 6.82[m（二重
線様）, 4H, H-芳香環（トリチル）]; 6.49-6.35[m, 1
H, HC(1´)]; 3.75, 3.74[2s, 6H, 20CH₃]; 2.61, 2.58
[2t, J=6.0, CH₂-CN]; 1.23-1.10[m, 12H, CH(CH₃)₂]
。

【０１６６】実施例Ｂ１８ａ

【化６０】

【０１６７】アルゴン雰囲気下、実施例Ｂ１４ａの標記
化合物７１９mg（１. ０８mmol）を無水テトラヒドロフ
ラン１０mlに溶解し、この溶液に、エチルジイソプロピ
ルアミン７５０μｌ（４. ３２mmol）及び２−シアノエ
チルＮ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホルアミダイト
４９０μｌ（２. １６mmol）を順次加えた。反応混合物
を、室温で３時間撹拌後、酢酸エチル２５mlにとり、混
合物をＮａＨＣＯ₃ 溶液２０mlで抽出した。水層を酢酸
エチル１５mlで再抽出した。有機層を合せ、ＭｇＳＯ₄
で乾燥し、濃縮した。褐色の残渣を、シリカゲル２０ｇ
を用いて濾過し、酢酸エチルで溶離した。標記化合物８
８０mg（９４％）を、実質的に無色の泡状物質として得
た。

【０１６８】¹HNMR (400MHz, CDCl₃) : 1.09-1.15[m, 1
2H, H₃C （イソプロピル）]; 1.21-1.24[m, 6H, H₃C
（イソブチリル）]; 1.42-1.58, 1.82-1.95[2m, 4H, HC
(6´,7´)]; 2.04[dd, J=8.8, J=13.8, 0.4H, HC(2
´)]; 2.12[dd, J=9.1, J=14.14, 0.6H, HC(2 ´)]; 2.
52-2.59[m, 1H, H₃C（イソブチリル）]; 2.62-2.71[m,
2H,H₂C-CN)]; 3.08[dd, J=5.3, 15.2, 0.6H, HC(2´)];
3.17-3.21[m, 0.4H, HC(2´)]; 3.48[d, J=6.1, 0.4H,
HC(4 ´)]; 3.50-3.61[m, 2H, NCH(CH₃)₂]; 3.62-3.69
[m, 1H, HC(5´)]; 3.79, 3.79[2s, H₃C-O(DMT)]; 3.81
-3.89[m, 2H, H₂CO]; 3.92[dd, J=2.9, J=6.0, 0.6H, H
C(4 ´)]; 6.05[dd, J=5.2, J=8.7, 0.4H, HC(1 ´)];
6.17[dd, J=5.4, J=9.0, 0.6H, HC(1 ´)]; 6.80-7.00
[m, 4H, H-,芳香環]; 7.18-7.23[m, 1H, H-芳香環]; 7.
27-7.31[m, 2H, H-芳香環]; 7.39-7.44[m, 4H, H-芳香
環]; 7.51-7.55[5m, 13H, H-芳香環]; 8.14[s, 0.6H, H
C(8)]; 8.18[s, 0.4H, HC(8)]; 8.97[s, 0.6H, HN(2)];
9.20[s, 0.4H, HN(2)]; 11.95[br, s, 1H, HN(1)]。

【０１６９】Ｃ）オリゴヌクレオチドの合成実施例Ｃ１−Ｃ１０：固相法ヌクレオシドの合成トリチル化ヌクレオシド（１７）、（１８）及び（１
９）を、常法により、コハク酸リンカーによって、長鎖
状アルキルアミノ−ＣＰＧＳＩＧＭＡ（商標）に結合
した。［Oligonucleotide synthesis a practical appr
oach M. J. Gait;IRL Press 1984 (Oxford-Washington
DC)］。担体の荷重密度２０−３０μmol/ｇを得た（ト
リチルアッセイ）。

【０１７０】オリゴヌクレオチド合成オリゴヌクレオチド合成は、製造業者［Owners Manual
Gene Assembler（商標）Plus］の標準操作手順に準拠し
て、ＤＮＡ合成装置［Pharmacia LKB Gene Assembler
（商標）Plus］を用いて行なった。以下のように、合成
サイクル工程を改良した：

【０１７１】脱トリチル化工程：４５−６０秒カップリング工程：１５−２０当量のホスホルアミダイ
ト（アセトニトリル中、０．１Ｍ）１８０当量のテトラゾール、６分トリチルアッセイに基づいて、通常、各工程で９７％以
上のカップリング収率が得られた。シアノエトキシ−ホ
スホルアミダイトの場合、配列物から常法により保護基
をはずし、担体から脱離させた［Oligonucleotide synt
hesis a practical approach M. J. Gait; IRL Press 1
984 (Oxford-Washington DC)］。アリルオキシ−ホスホ
ルアミダイトの場合、脱保護基及び担体物質からの脱離
は、Y. Hayakawa, S. Wakabayashi, H. Kato and R. No
yori; J. Am. Chem. Soc., 112,1691(1990)の記載に準
じた。

【０１７２】オリゴヌクレオチド配列の精製オリゴヌクレオチドは、系１のＨＰＬＣによって分離さ
れ、脱塩後、比較のために系２のＨＰＬＣに注入した。系１：プレカラム：Nucleogen 保護カラム、３０ｘ４.
０mm、ＩＤ（Macherey Nagel）；カラム：Nucleogen ＤＥＡＥ６０−７、１２５ｘ４. ０
mm（MachereyNagel ）Ａ：２０ｍＭＫＨ₂ ＰＯ₄ （Ｈ₂ Ｏ/ ＣＨ₃ ＣＮ
（４：１）中）、ｐＨ６．０Ｂ：１Ｍ（緩衝液Ａ中）ＫＣｌ、ｐＨ６. ０流速：１ml/ 分系２：プレカラム：Ｒｐ−８ Newguard 、１５ｘ３. ２
mm、７μm （BrownleeLabs）；カラム：Aquapore Ｒｐ−３００、２２０ｘ４. ６mm、
７μm（Brownlee Labs ）Ａ：０．１Ｍ酢酸トリエチルアンモニウム（ＴＥＡＯＡ
ｃ）（水中）、ｐＨ７. ０Ｂ：１ＭＴＥＡＯＡｃ（Ｈ₂ Ｏ/ ＣＨ₃ ＣＮ（４：
１）中）、ｐＨ７. ０流速：１ml/ 分検出は、ＵＶ分光計により２６０nmで測定した。

【０１７３】実施例Ｃ１６個のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドは、化
合物（１７）及び（２０）から合成した。

【０１７４】実施例Ｃ２１０個のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドは、
化合物（１８）及び（２２）から合成した。

【０１７５】実施例Ｃ３１０個のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドは、
化合物（１９）及び（２３）から合成した。

【０１７６】実施例Ｃ４６個のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドは、実
施例Ｂ１４ａ及び１８ａに記載の化合物から合成した。

【０１７７】実施例Ｃ５５’−ＧＧＡＴＧＧＧＡＧ−３’配列の９個のモノマー
単位を有するオリゴヌクレオチドは、実施例Ｂ１４ａ及
び１８ａに記載の化合物、並びに化合物（２２）及び
（２３）から合成した。

【０１７８】実施例Ｃ６５’−ＣＴＣＣＣＡＴＣＣ−３’配列の９個のモノマー
単位を有するオリゴヌクレオチドは、化合物（１７）、
（２０）、（２２）及び（２３）から合成した。

【０１７９】実施例Ｃ７５’−ＣＴＣＧＴＡＣＣ* ＣＴＴＣＣＧＧＴＣＣ−３’
配列の１８個のモノマー単位を有するキメラのオリゴヌ
クレオチドは、化合物（２０）、天然の２’−デオキシ
リボヌクレオシドの通常の２’−シアノエチルジイソプ
ロピルアミノホスホルアミダイト単位及び適当にヌクレ
オシドで修飾した固相［Pharmacia （商標）製］を用い
て合成した。* Ｃは化合物（２０）のヌクレオシドの位
置を示す。

【０１８０】実施例Ｃ８５’−ＣＴＣＧＴＡＣＣ* ＡＴＴＣＣＧＧＴＣＣ−３’
配列の１８個のモノマー単位を有するキメラのオリゴヌ
クレオチドは、化合物（２３）、天然の２’−デオキシ
リボヌクレオシドの通常の２’−シアノエチルジイソプ
ロピルアミノホスホルアミダイト単位及び適当にヌクレ
オシドで修飾した固相［Pharmacia （商標）製］を用い
て合成した、* Ａは化合物（２３）のヌクレオシドの位
置を示す。

【０１８１】実施例Ｃ９５’−ＣＴＣＧＴＡＣＣ* ＴＴＴＣＣＧＧＴＣＣ−３’
配列の１８個のモノマー単位を有するキメラのオリゴヌ
クレオチドは、化合物（２２）、天然の２’−デオキシ
リボヌクレオシドの通常の２’−シアノエチルジイソプ
ロピルアミノホスホルアミダイト単位及び適当にヌクレ
オシドで修飾した固相［Pharmacia （商標）製］を用い
て合成した、* Ｔは化合物（２２）のヌクレオシドの位
置を示す。

【０１８２】実施例Ｃ１０５’−ＣＧＡＣＴＡＴＧＣＡＡ* Ｃ* Ｃ* Ｃ* Ｃ−３’
配列の１８個のモノマー単位を有するキメラのオリゴヌ
クレオチドは、化合物（２０）、天然の２’−デオキシ
リボヌクレオシドの通常の２’−シアノエチルジイソプ
ロピルアミノホスホルアミダイト単位及び適当にヌクレ
オシドで修飾した固相［Pharmacia （商標）製］を用い
て合成した、* Ｃは化合物（２２）のヌクレオシドの位
置を示す。

【０１８３】オリゴヌクレオチドの分離実施例系１系２Ｃ１１４分３１分２３分で３０−４５％Ｂ４０分で０−２０％ＢＣ２３１分２１分４０分で２０−５０％Ｂ３０分で１５−２２％ＢＣ３* −− ２１．７分３０分で１０−１７％ＢＣ４** ７．７分で５５％Ｂ同じＣ５* −− ９．０分３０分で１７−２０％ＢＣ６* １３．２分２３．６分３０分で４２−５２％Ｂ３５分で０−３５％ＢＣ７２６．５分８．６分３０分で４０−１００％Ｂ２０分で２５−３５％ＢＣ８２５．８分８．４分３０分で４０−１００％Ｂ２０分で２５−４５％ＢＣ９２６．０分８．４分３０分で４０−１００％Ｂ２０分で２５−３５％ＢＣ１０２０．１分４２．０分２５分で６０−８５％Ｂ５０分で０−２５％Ｂ * ）系２による分取用分離。 **）分離系：カラム：ＭｏｎｏＱＨＲ５／５［Pharmaci
a （商標）］Ａ：０. ０１ＭＮａＯＨ^* 水溶液Ｂ：０. ０１ＭＮａＯＨ、１ＭＮａＣｌ水溶液流速：１ml/ 分検出：２６０nm。

【０１８４】Ｄ）用途例実施例Ｄ１実施例Ｃ２及びＣ３に記載のオリゴヌクレオチドとポリ
ヌクレオチドとの相互作用実施例Ｃ２及びＣ３に記載のオリゴヌクレオチドと、天
然のデオキシリボヌクレオシド及びリボヌクレオシド
の、対応する塩基相補性オリゴマー及びポリマーとの相
互作用は、ＵＶ融合曲線を記録し、それより計算される
Ｔm 値によって特徴づけた。この標準方法は、例えば、
L. A. Marky らによってBiopolymers, 26,1601(1987)
に記載されている。実施例Ｃ２及びＣ３に記載のオリゴ
ヌクレオチド、並びに対応する塩基相補性の天然のオリ
ゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド（表１参照、ｃ＝
４５μＭ）の、１０ｍＭトリス塩酸溶液（０．１５M Ｎ
ａＣｌを含み、ｐＨ＝７．０）を調製し、２６０ｎｍに
おける吸光度の変化を、温度（０ないし７０°Ｃ）の関
数として記録した。Ｔm 値は、得られた融合曲線から計
算した（表１参照）。

【０１８５】

【表１】

【０１８６】実施例Ｄ２実施例Ｃ２記載のオリゴヌクレオチドの酵素加水分解実施例Ｃ２記載のデカヌクレオチド又は標準としての天
然オリゴマーｄＴ−１０の０．１５ＯＤ²⁶⁰ 単位を、特
定の緩衝液Ａ、Ｂ又はＣの１００μｌ中で、各々一定量
の特定の酵素と共に３７°Ｃで培養した。一定の時間が
経過した後、反応を中止し、反応混合物をＨＰＬＣによ
りクロマトグラフ的に分離した。分解生成物を２６０ｎ
ｍにおけるピーク面積の積分により定量した。表２に、
オリゴヌクレオチドの全量に対する全分解生成物の全量
の百分率を示した。緩衝液Ａ（ヘビ毒ＰＤＥ）：０．１Ｍトリス−ＨＣｌ、
ｐＨ８．５。緩衝液Ｂ（ヌクレアーゼＳ１）：３３ｍＭ酢酸ナトリウ
ム、５０ｍＭＮａＣｌ、０．０３ｍＭＺｎＳＯ4 、ｐＨ
４．５。緩衝液Ｃ（ウシひ臓ＰＤＥ）：０．１Ｍ酢酸アンモニウ
ム、ｐＨ６．６。結果を、次の表２にまとめた。

【０１８７】

【表２】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｄ 473/18 473/34 487/04 １４０ 7019−4Ｃ１４６ 7019−4Ｃ 519/00 ３０１ 8415−4Ｃ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）：【化１】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、互いに独立して、水素又は保
護基であり；Ｂはプリン若しくはピリミジン基又はその
類似体である）で示される化合物のラセマート又はエナ
ンチオマーの形の化合物。
【請求項２】Ｒ₁ 及びＲ₂ がそれぞれ水素である請求
項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、互いに独立して、直鎖
若しくは分岐鎖の、Ｃ₁ −Ｃ₈ アルキル、Ｃ₇ −Ｃ₁₂ア
ラルキル、アルキル部分に１ないし２０個の炭素原子を
有する、トリフェニルシリルアルキルジフェニルシリ
ル、ジアルキルフェニルシリル又はトリアルキルシリ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アシル、Ｒ₃ −ＳＯ₂ −（式中、Ｒ₃ は
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₅ シクロアルキル若しくはＣ₆
シクロアルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アル
キルフェニル、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキルベンジル、又はハロ
フェニル若しくはハロベンジルである）であるか、又は
Ｒ₁及びＲ₂ がＣ₁ −Ｃ₁₂アルコキシカルボニル、フェ
ニルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、メ
チル−、メトキシ−若しくはクロロフェニルカルボニル
又は−ベンジルオキシカルボニルである請求項１記載の
式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、互いに独立して、直鎖
若しくは分岐鎖の、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、Ｃ₇ −Ｃ₁₂ア
ラルキル、アルキル部分に１ないし１２個の炭素原子を
有するトリアルキルシリル、Ｃ₂ −Ｃ₈ アシル、Ｒ₃ −
ＳＯ₂ −（式中、Ｒ₃ はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、フェニ
ル、ベンジル、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルフェニル、Ｃ₁ −Ｃ
₄ アルキルベンジル、又はハロフェニル若しくはハロベ
ンジルである）であるか、又はＲ₁ 及びＲ₂ がＣ₁ −Ｃ
₈ アルコキシカルボニル、フェノキシカルボニル又はベ
ンジルオキシカルボニルである請求項３記載の式（Ｉ）
の化合物。
【請求項５】Ｒ₁ 及びＲ₂ が同一の保護基である請求
項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】Ｒ₁ 及びＲ₂ がメチル、エチル、ｎ−若
しくはｉ−プロピル、又はｎ−、ｉ−若しくはｔ−ブチ
ル；ベンジル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、メ
トキシベンジル、ジメトキシベンジル、ブロモベンジ
ル；ジフェニルメチル、ジ（メチルフェニル）メチル、
ジ（ジメチルフェニル）メチル、ジ（メトキシフェニ
ル）メチル、ジ（ジメトキシフェニル）メチル、トリチ
ル、トリ（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフ
ェニル）メチル、トリ（メトキシフェニル）メチル、ト
リ（ジメトキシフェニル）メチル；トリメチルシリル、
トリエチルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、ｉ−プ
ロピルジメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ
−ブチルジフェニルシリル、ｎ−オクチルジメチルシリ
ル、（１、１、２、２−テトラメチルエチル）ジメチル
シリル；アセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタ
ノイル、ヘキサノイル、ベンゾイル、メチルベンゾイ
ル、メトキシベンゾイル、クロロベンゾイル又はブロモ
ベンゾイル；メチル−、エチル−、プロピル−、ブチル
−、フェニル−、ベンジル−、ｐ−ブロモ−、ｐ−メト
キシ−又はｐ−メチルフェニルスルホニル；メトキシ
−、エトキシ−、ｎ−又はｉ−プロポキシ−、又はｎ
−、ｉ−若しくはｔ−ブトキシカルボニル、又はフェニ
ルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、メチ
ル−、メトキシ−、若しくはクロロフェニルオキシカル
ボニル又は−ベンジルオキシカルボニルである請求項１
記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項７】プリン基又はその類似体としてのＢが式
（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（IIｄ）又は
（IIｅ）：【化２】（式中、Ｒ₄ は水素、クロロ、ブロモ又はＯＨであり；
Ｒ₅ 、Ｒ₆ 及びＲ₇ は、互いに独立して、水素、ＯＨ、
ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、１ないし１２個
の炭素原子を有するＮＨＯ−アルキル、フルオロ、クロ
ロ、ブロモ、１ないし１２個の炭素原子を有する、アル
キル又はヒドロキシアルキル又はアミノアルキル又はア
ルコキシ又はアルキルチオ（該ヒドロシキル及び該アミ
ノは、非置換又は１個の保護基により置換されている）
であるか、又はＲ₅ 、Ｒ₆ 及びＲ₇はフェニル、ベンジ
ル、１ないし２０個の炭素原子を有する第一級アミノ又
は２ないし３０個の炭素原子を有する第二級アミノであ
り；Ｒ₁₁は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）で示さ
れる基である請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項８】ヒドロキシル及びアミノのための保護基
がＣ₁ −Ｃ₈ アシルである請求項７記載の式（Ｉ）の化
合物。
【請求項９】第一級アミノが１ないし１０個の炭素原
子を有し、第二アミノが２ないし１２個の炭素原子を有
する請求項７記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１０】第一級アミノ及び第二級アミノが式Ｒ
₈ Ｒ₉ Ｎ（式中、Ｒ₈ は水素又は独立してＲ₉ の意味を
有し、Ｒ₉ はＣ₁ −Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀アミノア
ルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀ヒドロキシアルキル；カルボキシア
ルキル又はカルボアルコキシアルキル（該カルボアルコ
キシは２ないし８個の炭素原子を有し、該アルキルは１
ないし６個、好適には１ないし４個の炭素原子を有す
る）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀アルケニル；フェニル、モノ−若しく
はジ（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル−又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキ
シ）フェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ（Ｃ₁ −Ｃ
₄ アルキル−又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）ベンジル；又
は１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−
Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルであるか、又はＲ₈ 及びＲ₉ は、一
緒になって、テトラ−若しくはペンタメチレン、３−オ
キサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ₁₀−ＣＨ₂
ＣＨ₂ −又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ₁₀−ＣＨ₂ＣＨ₂ −
（式中、Ｒ₁₀は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）で
あり、該アミノアルキルの該アミノは非置換であるか、
又は一個若しくは二個のＣ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −
Ｃ₄ ヒドロキシアルキルで置換されており、該ヒドロキ
シアルキルの該ヒドロキシルは遊離であるか、又はＣ₁
−Ｃ₄ アルキルでエーテル化されてる）で示される基で
ある請求項７記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１１】第一級アミノ及び第二級アミノがメチ
ル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、アリル−、
モノ−若しくはジ（ヒドロキシエチ−２−イル）−、フ
ェニル−又はベンジル−、アセチル−又はベンゾイルア
ミノである請求項９記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１２】式（II）、（IIｂ）、（IIｃ）、（II
ｄ）又は（IIｅ）のＲ₄ が水素である請求項７記載の式
（Ｉ）の化合物。
【請求項１３】式（IIｄ）のＲ₇ が水素である請求項
７記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１４】式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（II
ｃ）、（IIｄ）又は（IIｅ）のＲ₅ 及びＲ₆ が、互いに
独立して、水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＯＨ、Ｓ
Ｈ、ＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジ
メチルアミノ、ベンゾイルアミノ、メトキシ、エトキシ
又はメチルアミノである請求項７記載の式（Ｉ）の化合
物。
【請求項１５】Ｂがアデニン、Ｎ−メチルアデニン、
Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−メチルアデニン、２−メ
チルチオアデニン、２−アミノアデニン、３−カルバア
デニン、７−カルバアデニン、１−カルバアデニン、６
−ヒドロキシプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、
２−アミノ−６−メチルチオプリン、２−アミノ−６−
ヒドロキシプリン、３−カルバ−６−クロロプリン、グ
アニン、２−メチルグアニンよりなる系列からのプリン
基又はプリン類似体の基である請求項１記載の式（Ｉ）
の化合物。
【請求項１６】ピリミジン類似体の基としての式
（Ｉ）のＢが式（III)、(IIIａ）又は(IIIｂ）：【化３】（式中、Ｒ₁₁は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり；Ｒ
₁₂及びＲ₁₃は、互いに独立して、水素、ＯＨ、ＳＨ、Ｎ
Ｈ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、炭素数１ないし１２個を
有するＮＨＯ−アルキル、フルオロ、クロロ、ブロモ、
炭素数１ないし１２個を有する、アルキル又はヒドロキ
シアルキル又はアミノアルキル又はアルコキシ又はアル
キルチオ（該ヒドロキシル及び該アミノは非置換又は保
護基により置換されている）であるか、又はＲ₁₂及びＲ
₁₃はフェニル、ベンジル、１ないし２０個の炭素原子を
有する第一級アミノ又は２ないし３０個の炭素原子を有
する第二級アミノであり；式(IIIｂ）のアミノの水素原
子は非置換であるか、或はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、ベンゾ
イル又はベンジルにより置換されている）で示されるウ
ラシル、チミン又はシトシンの基、あるいは式（III)、
(IIIa)又は(IIIb)で示されるこれらの基のジヒドロ誘導
体である請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１７】Ｒ₁₂が水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又は
Ｃ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアルキル、フルオロ、クロロ、ブ
ロモ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ、モノ−若しくはジ−
Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである請求項１６記載の式
（Ｉ）の化合物。
【請求項１８】Ｒ₁₃が水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又は
Ｃ₁ −Ｃ₆ アルコキシ又はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアルキ
ル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルア
ミノ、モノ−若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノで
ある請求項１６記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項１９】Ｒ₁₂が水素、フルオロ、クロロ、ブロ
モ、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 又はＣ₁ −Ｃ
₄ アルキルである請求項１７記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項２０】Ｒ₁₃が水素、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、Ｎ
Ｈ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 又はＮ（ＣＨ₃ ）₂ である請求項１８
記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項２１】ピリミジン類似体の基としてのＢがウ
ラシル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５
−クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラ
シル、プソイドウラシル、１−メチルプソイドウラシ
ル、５−メチルウラシル、３−メチルシトシン又は５−
メチルシトシンから誘導される請求項１記載の式（Ｉ）
の化合物。
【請求項２２】式（IV）：【化４】（式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ 及びＢは請求項１と同義である）で
示されるα−又はβ−アノマーである請求項１記載の式
（Ｉ）の化合物。
【請求項２３】式（IVａ）：【化５】（式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ 及びＢは請求項１と同義である）で
示されるβ−アノマーである請求項２２記載の式（Ｉ）
の化合物。
【請求項２４】請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の製
造方法であって、式（Ｖ）：【化６】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は同一又は異なる保護基であり；
Ｘは脱離基である）で示される化合物のラセマート又は
エナンチオマーの形の化合物を、プリン、プリン類似体
又はピリミジン類似体と反応させて、場合により、それ
に続いて保護基を脱離させることを特徴とする方法。
【請求項２５】脱離基がハロゲン、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルコ
キシ、Ｃ₁ −Ｃ₈ アシルオキシ又はＲ₁₆−ＳＯ₃ （式
中、Ｒ₁₆はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル若しくはＣ₁ −Ｃ₆ ハロ
アルキル、又はフェニル若しくはベンジルであり、その
それぞれは、非置換又は１ないし３個のハロゲン、Ｃ₁
−Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシにより置換さ
れている）である請求項２４記載の式（Ｉ）の方法。
【請求項２６】式（Ｖ）又は（Ｖａ）：【化７】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は同一又は異なる保護基であり；
Ｘは脱離基である）で示される化合物のラセマート又は
エナンチオマーの形の化合物。
【請求項２７】脱離基がハロゲン、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルコ
キシ、Ｃ₁ −Ｃ₈ アシルオキシ又はＲ₁₆−ＳＯ₃ （式
中、Ｒ₁₆は、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル若しくはＣ₁−Ｃ₆ ハ
ロアルキル、又はフェニル若しくはベンジルであり、そ
のそれぞれは、非置換であるか、又は１ないし３個のハ
ロゲン、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ
で置換されている）である請求項２６記載の式（Ｖ）又
は（Ｖａ）の化合物。
【請求項２８】脱離基がＣＨ₃ ＣＯ（Ｏ）Ｏである請
求項２６記載の式（Ｖ）又は（Ｖａ）の化合物。
【請求項２９】式（VI）又は（VIａ）：【化８】（式中、Ｒ₁₄、Ｒ₁₅及びＸは請求項２４と同義である）
で示される化合物のエナンチオマーの形の化合物である
請求項２６記載の式（Ｖ）又は（Ｖａ）の化合物。
【請求項３０】式（Ｉ）の化合物の同一若しくは異な
るモノマー単位又は他のヌクレオシドのモノマー単位を
含むオリゴヌクレオチド（該オリゴヌクレオチドは、２
ないし２００個のモノマー単位を含む）の製造のため
の、ラセマート又はエナンチオマーの形の請求項１の式
（Ｉ）の化合物の用途。
【請求項３１】２ないし２００個のモノマー単位を有
するオリゴヌクレオチドの製造のための請求項３０記載
の用途。
【請求項３２】２ないし５０個のモノマー単位を有す
るオリゴヌクレオチドの製造のための請求項３０記載の
用途。
【請求項３３】２ないし２０個のモノマー単位を有す
るオリゴヌクレオチドの製造のための請求項３０記載の
用途。
【請求項３４】式（Ｉ）の化合物の同一若しくは異な
るモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドの製造のた
めの請求項３０記載の用途。
【請求項３５】式（VII)：【化９】（式中、Ｂはプリン若しくはピリミジン基又はその類似
体であり；ｎは２ないし２００の数であり；Ｙはヌクレ
オチドの架橋基である）で示されるオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項３６】架橋基が−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −、−Ｐ
（Ｏ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｓ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｏ）Ｒ₁₇−、
−Ｐ（Ｏ）ＯＲ₁₈−、−Ｐ（Ｏ）ＮＲ₁₉Ｒ₂₀−、−ＣＯ
−又は−ＣＯＮ（Ｒ₁₈）₂ −（式中、Ｒ₁₇は水素又はＣ
₁ −Ｃ₆ アルキルであり、Ｒ₁₈はＣ₁ −Ｃ₆ アルキルで
あり；Ｒ₁₉及びＲ₂₀は、互いに独立して、Ｒ₁₇の意味を
有する）である請求項３５記載の式（VII)のオリゴヌク
レオチド。
【請求項３７】架橋基が−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −である請求
項３５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項３８】ｎが２ないし１００の数である請求項
３５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項３９】ｎが２ないし５０の数である請求項３
５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項４０】ｎが２ないし２０の数である請求項３
５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項４１】プリン基又はその類似体としてのＢが
式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（IIｄ）又
は（IIｅ）：【化１０】（式中、Ｒ₄ は水素、クロロ、ブロモ又はＯＨであり；
Ｒ₅ 、Ｒ₆ 及びＲ₇ は、互いに独立して、水素、ＯＨ、
ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、炭素数１ないし
１２個を有するＮＨＯ−アルキル、フルオロ、クロロ、
ブロモ、１ないし１２個の炭素原子を有する、アルキル
又はヒドロキシアルキル又はアミノアルキル又はアルコ
キシ又はアルキルチオ（該ヒドロシキル及び該アミノ
は、非置換又は保護基により置換されている）である
か、又はＲ₅ 、Ｒ₆ 及びＲ₇ はフェニル、ベンジル、１
ないし２０個の炭素原子を有する第一級アミノ又は２な
いし３０個の炭素原子を有する第二級アミノであり；Ｒ
₁₁は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）で示される基
である請求項３５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項４２】ヒドロキシル及びアミノの保護基がＣ
₁ −Ｃ₈ アシルである請求項４１記載の式（VII)のオリ
ゴヌクレオチド。
【請求項４３】第一級アミノが１ないし１２個の炭素
原子を有し、第二級アミノが２ないし１２個の炭素原子
を有する請求項４１記載の式（VII)のオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項４４】第一級アミノ及び第二級アミノが式Ｒ
₈ Ｒ₉ Ｎ（式中、Ｒ₈ は水素又は独立してＲ₉ の意味を
有し、Ｒ₉ はＣ₁ −Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀アミノア
ルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀ヒドロキシアルキル；カルボキシア
ルキル又はカルボアルコキシアルキル（該カルボアルコ
キシは炭素数２ないし８個を有し、該アルキルは１ない
し６個、好適には１ないし４個の炭素原子を有する）；
Ｃ₂ −Ｃ₂₀アルケニル；フェニル、モノ−若しくはジ
（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル−又はＣ₁−Ｃ₄ アルコキシ）フ
ェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ（Ｃ₁ −Ｃ₄ アル
キル−又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）ベンジル；又は１，
２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ₁ −
Ｃ₆ アルキルであるか、又はＲ₈ 及びＲ₉ は、一緒にな
って、テトラ−若しくはペンタメチレン、３−オキサ−
１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ₁₀−ＣＨ₂ ＣＨ₂
−又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ₁₀−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −（式
中、Ｒ₁₀は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）であ
り、該アミノアルキルの該アミノは非置換であるか、又
は一個若しくは二個の、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −
Ｃ₄ ヒドロキシアルキルで置換されており、該ヒドロキ
シアルキルの該ヒドロキシルは遊離であるか、又はＣ₁
−Ｃ₄ アルキルでエーテル化されてる）で示される基で
ある請求項４１記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項４５】該第一級アミノ及び該第二級アミノが
メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、アリル
−、モノ−若しくはジ（ヒドロキシエチ−２−イル）
−、フェニル−、又はベンジル−、アセチル−又はベン
ゾイルアミノである請求項４４記載の式（VII)のオリゴ
ヌクレオチド。
【請求項４６】式（II）、（IIｂ）、（IIｃ）、（II
ｄ）又は（IIｅ）のＲ₄ が水素である請求項４１記載の
式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項４７】式（IIｄ）のＲ₇ が水素である請求項
４１記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項４８】式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（II
ｃ）、（IIｄ）又は（IIｅ）のＲ₅ 及びＲ₆ が、互いに
独立して、水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＯＨ、Ｓ
Ｈ、ＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジ
メチルアミノ、ベンゾイルアミノ、メトキシ、エトキシ
又はメチルチオである請求項４１記載の式（VII)のオリ
ゴヌクレオチド。
【請求項４９】Ｂがアデニン、Ｎ−メチルアデニン、
Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−メチルアデニン、２−メ
チルチオアデニン、２−アミノアデニン、３−カルバア
デニン、７−カルバアデニン、１−カルバアデニン、６
−ヒドロキシプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、
２−アミノ−６−メチルチオプリン、２−アミノ−６−
ヒドロキシプリン、３−カルバ−６−クロロプリン、グ
アニン、２−メチルグアニンよりなる系列からのプリン
基又はプリン類似体の基である請求項４１記載の式（VI
I)のオリゴヌクレオチド。
【請求項５０】ピリミジン類似体の基としての式（VI
I)のＢが式（III)、(IIIａ）又は(IIIｂ）：【化１１】（式中、Ｒ₁₁は水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり；Ｒ
₁₂及びＲ₁₃は、互いに独立して、水素、ＯＨ、ＳＨ、Ｎ
Ｈ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、１ないし１２個の炭素原
子を有するＮＨＯ−アルキル、フルオロ、クロロ、ブロ
モ、アルキル又はヒドロキシアルキル又は１ないし１２
個の炭素原子を有する、アミノアルキル又はアルコキシ
又はアルキルチオ（該ヒドロキシル及び該アミノは非置
換又は保護基により置換されている）であるか、又はＲ
₁₂及びＲ₁₃はフェニル、ベンジル、１ないし２０個の炭
素原子を有する第一級アミノ又は２ないし３０個の炭素
原子を有する第二級アミノであり；式(IIIｂ）の該アミ
ノの該水素原子は非置換であるか、或はＣ₁ −Ｃ₆ アル
キル、ベンゾイル又はベンジルにより置換されている）
で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基、あるい
は式(III) 、(IIIa)若しくは(IIIb)のジヒドロ誘導体で
ある請求項３５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項５１】Ｒ₁₂が水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル、又
はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアルキル、フルオロ、クロロ、
ブロモ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ、モノ−若しくはジ
−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである請求項５０記載の式
（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項５２】Ｒ₁₃が水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又は
Ｃ₁ −Ｃ₆ アルコキシ又はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアルキ
ル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルア
ミノ、モノ−若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノで
ある請求項５１記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項５３】Ｒ₁₂が水素、フルオロ、クロロ、ブロ
モ、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 又はＣ₁ −Ｃ
₄ アルキルである請求項５１記載の式（VII)のオリゴヌ
クレオチド。
【請求項５４】Ｒ₁₃が水素、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、Ｎ
Ｈ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 又はＮ（ＣＨ₃ ）₂ である請求項５２
記載の式（VII)のオリゴヌクレオチド。
【請求項５５】ピリミジン類似体の基としてのＢがウ
ラシル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５
−クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラ
シル、プソイドウラシル、１−メチルプソイドウラシ
ル、５−メチルウラシル、３−メチルシトシン又は５−
メチルシトシンから誘導される請求項５０記載の式（VI
I)のオリゴヌクレオチド。
【請求項５６】式(VIIａ）：【化１２】（式中、Ｂ、Ｙ及びｎは請求項３５と同義である）で示
される請求項３５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項５７】式(VIIｂ）：【化１３】（式中、Ｂ、Ｙ及びｎは請求項３５と同義である）で示
される請求項３５記載の式（VII)のオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項５８】Ｂが９−アデニルであり、ｎが１０で
ある請求項５７記載の式(VIIｂ）のオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項５９】Ｂがシトシルであり、ｎが６である請
求項５７記載の式(VIIｂ）のオリゴヌクレオチド。
【請求項６０】Ｂがチミジルであり、ｎが１０である
請求項５７記載の式(VIIｂ）のオリゴヌクレオチド。
【請求項６１】ウイルス感染又は遺伝子起因の疾患の
検出のための診断薬としての式（VII)、(VIIａ）又は(V
IIｂ）のオリゴヌクレオチドの用途。
【請求項６２】体中のヌクレオチド配列の不活性化に
よる、ヒトを含む温血動物の疾患の治療のための治療方
法に使用する式（Ｉ）、（IV）若しくは（IVａ）のヌク
レオシド、又は式（VII)、(VIIａ）若しくは(VIIｂ）の
オリゴヌクレオチドの用途。
【請求項６３】純粋な活性成分として、又は他の活性
成分、薬学的担体、及び場合により付加物と共に、式
（Ｉ）、（IV）若しくは（IVａ）のヌクレオシド、又は
式（VII)、(VIIａ）若しくは(VIIｂ）のオリゴヌクレオ
チドの有効量を含む薬学的製剤。