JPH04321622A - 長期徐放型マイクロカプセル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は生理活性ペプチドを含有
する長期徐放型マイクロカプセルに関する。

【０００２】

【従来の技術】一般に、マイクロカプセルの放出性を制
御する目的として、旧来から行われていた方法は、加水
分解速度を変化させる方法（　Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌ
ｓ　　Ｖｏｌ．５、２３７−２４０（１９８４年））、
および水溶性化合物をマイクロカプセルのマトリックス
中に添加して、薬物放出の水路を作る方法などがあるが
、前者は長期放出性を短縮することにつながるし、後者
では初期バーストのみを増加させ、０次に近い連続した
放出性は期待できないことがある（　Ｃｈｅｍ．　Ｐｈ
ａｒｍ．　Ｂｕｌｌ．　Ｖｏｌ．３６（４）１５０２−
１５０７（１９８８年））。また、後者の場合、初期薬
物血中濃度の増加に伴う副作用の発現が危惧される。さ
らに、ＰＬＧＡの乳酸／グリコール酸の重合比率を減少
させて、この放出停止期を改良する方法（特開昭５７−
１５０６０９）があるが、これは重合物の分解速度を高
める方法で、当然のことながら放出の持続期間が低下し
、長期間の連続的放出には限界がある。

【０００３】長期間の投与を必要とする薬物については
、種々の剤型が提唱されている。その中でも、特開昭５
７−１１８５１２号公報には、鉱物油、植物油などのコ
アセルベーション剤を用いた相分離法によるマイクロカ
プセル化が開示されている。特開昭６０−１００５１６
号公報、特開昭６２−２０１８１６号公報および特開昭
６３−４１４１６号公報には、水中乾燥法によるマイク
ロカプセルの調製法が開示されており、これらの方法に
よると、マイクロカプセル中に薬物を効率よく取り込ま
せることができ初期放出の少ない良好なマイクロカプセ
ルが得られるとされている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】マイクロカプセル剤と
して薬物を生体に投与する場合、生体本来の機能との相
互作用に依存する要素が高いマイクロカプセル剤に対す
る要望は多面的であり、またこと医薬品に関するもので
あるので、これら多面的な要件をできるだけ満足しうる
マイクロカプセルの提供が求められている。分解型高分
子重合物を用いた水溶性薬物のマイクロカプセルについ
てはすでにいくつもの報告があるが、水溶性薬物、特に
比較的分子量の高い生理活性ペプチドにおいては、封入
された薬物は高分子重合物中の拡散が低いため、重合物
の分解、膨潤が進行するまで、初期に放出されない期間
が生じたり、また逆にその調製方法によっては初期の大
きなバーストを避けることが出来ず、医薬品としての実
用上の困難を生じる場合が多い。特に、長期間徐放型製
剤においては、安全でより確実な効果を得るために、よ
り確実性の高い定常的な薬物の放出が重要な課題である
がこれらの要件を十分満足するマイクロカプセルは知ら
れていない。

【０００５】

【課題を解決するための手段】このような事情に鑑み、
本発明者らは、生理活性ペプチドの長期間にわたる徐放
性製剤を開発する目的で、鋭意研究を行った結果、特定
分子量範囲のポリ乳酸、あるいは乳酸／グリコール酸比
率が１００／０〜８０／２０の乳酸−グリコール酸を適
宜選択すること、また特定濃度の生理活性ペプチドを含
有する内水相液とするＷ／Ｏエマルションを用いること
によってマイクロカプセル化すると、より長期間の連続
的な優れた放出性を有するマイクロカプセルを得ること
ができることを見いだし、これに基づいてさらに研究し
た結果、本発明を完成した。すなわち本発明は、生理活
性ポリペプチドを約２０〜７０重量％含有する内水相液
と、乳酸／グリコール酸の組成比が８０／２０〜１００
／０で重量平均分子量が７，０００〜３０，０００であ
るコポリマーないしホモポリマーを放出制御物質として
含有してなる油相液でＷ／Ｏエマルションを調製後、こ
れをマイクロカプセル化工程に付して調製される、２カ
月以上にわたってポリペプチドをゼロ次放出する長期徐
放型マイクロカプセルを提供するものである。

【０００６】本発明で用いられる生理活性ペプチドとし
ては、２個以上のアミノ酸残基によって構成されるもの
で、分子量約２００〜１００，０００のものがあげられ
る。該ペプチドの具体例としては、たとえば黄体形成ホ
ルモン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）およびその類縁物質
が挙げられ、このような類縁物質としてはたとえばＬＨ
−ＲＨ活性を有するポリペプチド［米国特許第３，８５
３，８３７号、同第４，００８，２０９号、同第３，９
７２，８５９号、同第４，２３４，５７１号、英国特許
第１，４２３，０８３号、プロシーディングス・オブ・
ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス（　Ｐ
ｒｏｃ．　　Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　Ｕ．Ｓ
．Ａ．）第７８巻、第６５０９〜６５１２頁（１９８１
年）参照］、あるいはＬＨ−ＲＨ拮抗物質（米国特許第
４，０８６，２１９号、同第４，１２４，５７７号、同
第４，２５３，９９７号、同第４，３１７，８１５号参
照）が例示される。さらに、本発明において対象とする
生理活性ポリペプチドとしては、プロラクチン、副腎皮
質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、メラノサイト刺激ホルモ
ン（ＭＳＨ）、甲状腺ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）
その塩およびその誘導体（特開昭５０−１２１２７３号
、特開昭５２−１１６４６５号公報参照）、甲状腺刺激
ホルモン（ＴＳＨ）、　黄体形成ホルモン（ＬＨ）、　
卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、バソプレシン、バソプレ
シン誘導体（デスモプレシンなど）、オキシトシン、カ
ルシトニン、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）およびその誘
導体（特開昭６２−２８７９９号公報参照）、グルカゴ
ン、ガストリン、バソアクティブインテスチナルペプタ
イド（ＶＩＰ）、リポコルチン、バソコルチン、心房性
ナトリウム利尿ホルモン（ＡＮＰ）、エンドセリン、セ
クレチン、パンクレオザイミン、コレシストキニン、ア
ンジオテンシン、ヒト胎盤ラクトーゲン、ヒト絨毛性ゴ
ナドトロピン（ＨＣＧ）、エンケファリン、エンケファ
リン誘導体［米国特許第４，３８２，９２３号、ヨーロ
ッパ特許出願公開第３１５６７号公報参照］、エンドル
フィン、キョウトルフィン、インスリン、ソマトスタチ
ン、ソマトスタチン誘導体（米国特許第４，０８７，３
９０号、同第４，０９３，５７４号、同第４，１００，
１１７号、同第４，２５３，９９８号参照）、成長ホル
モン、および各種細胞増殖・分化因子［たとえばインス
リン様増殖因子（ＩＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、
繊維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（
ＰＤＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、肝細胞増殖因子
（ＨＧＦ）、トランスフォーム増殖因子（ＴＧＦ−β）
、骨誘導因子（ＢＭＦ）、血管新生因子、血管新生阻害
因子、フィブロネクチン、ラミニンなど］、インターフ
ェロン（α型、β型、γ型）、インターロイキン（Ｉ、
ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ）、タフトシン
、サイモポイエチン、サイモシン、サイモスチムリン、
胸腺液性因子（ＴＨＦ）、血中胸腺因子（ＦＴＳ）、お
よびその誘導体（米国特許第４，２２９，４３８号参照
）、およびその他の胸腺因子［プロシーディングス・オ
ブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス（
Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　Ｕ．Ｓ
．Ａ．）第７８巻、第１１６２〜１１６６頁（１９８１
年）参照］、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、コロニー形成刺
激因子（ＣＳＦ）、モチリン、エリスロポイエチン（Ｅ
ＰＯ）、デイノルフィン、ボムベシン、ニュウロテンシ
ン、セルレイン、ブラディキニン、ウロキナーゼ、プロ
ウロキナーゼ、組織性プラスミノーゲン活性因子（ｔ−
ＰＡ）、およびその誘導体（“Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
　Ｐｅｐｔｉｄｅｓａｎｄ　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”，　Ｃ
ｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔ
ｏｒｙ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ，　６９−７４頁、１９８
９年参照）、ストレプトキナーゼ、アスパラキナーゼ、
カリクレイン、サブスタンスＰ、血液凝固因子の第ＶＩ
ＩＩ因子、第ＩＸ因子、塩化リゾチーム、ポリミキシン
Ｂ、コリスチン、グラミシジン、バシドラシンなどが挙
げられる。とりわけ生理活性ポリペプチドとしては、水
溶性で分子量１，０００以上のＬＨＲＨ類似物質（例、
（ｐｙｒ）Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−
Ｄ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＰｒｏＮＨＣ２Ｈ５で表
わされるＴＡＰ−１４４，（ｐｙｒ）Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−
Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐ
ｒｏ−ＧｌｙＮＨＣ２Ｈ５で表わされるＬＨ−ＲＨアン
タゴニストなど）のマイクロカプセルにおいて有利に長
期間の連続的な徐放性が得られる。

【０００７】これらの生理活性ペプチドの使用量は、そ
の種類、所望の薬理効果および効果の持続期間などによ
って大きく異なるが、マイクロカプセルの投与量として
約０．０１ｍｇないし５ｇ、より好ましくは０．１ｍｇ
ないし２ｇから選ばれ、マイクロカプセル中の濃度とし
ては、薬物の物理化学的性質によるが約０．０１％ない
し約５０％（Ｗ／Ｗ）、より好ましくは０．１％ないし
３０％（Ｗ／Ｗ）から選ばれる。

【０００８】マイクロカプセルを調製する際の内水相液
中の薬物濃度としては水溶解性などの物理化学的性質に
よるが、約２０％ないし７０％（Ｗ／Ｗ）から選ばれる
が、好ましくは２５〜６５％（Ｗ／Ｗ）、より好ましく
は３５〜６０％（Ｗ／Ｗ）である。このように、内水相
液中の薬物濃度を特定範囲にすることも、本発明の特徴
の一つである。

【０００９】放出制御物質として用いる高分子重合物と
しては、分子内に酸性残基を有し、水に難溶または不溶
で、生体適合性のある乳酸／グリコール酸のコポリマー
ないしホモポリマーが挙げられ、これらの組成比は必要
とする徐放期間などの目的に応じて１００／０〜８０／
２０、好ましくは１００／０〜９０／１０の範囲で選択
することにより適宜用いることができる。とりわけ、乳
酸／グリコール酸が１００／０のホモポリマーが好まし
く用いられる。乳酸としてはＬ−、Ｄ−およびＤＬ−体
を用いることができ、とりわけＤＬ−乳酸のモノマーま
たはオリゴマーを重合させて得られるコポリマーまたは
ホモポリマーが有利に利用される。ＤＬ−乳酸／グリコ
ール酸からなるコポリマーないしホモポリマーは、例え
ば無触媒下重合して得られる実質的に触媒を含まないポ
リマーが有利に使用される（特開昭６１−２８５２１５
号公報参照）。またポリマーの分散度（重量平均分子量
と数平均分子量の比）が１．５〜３．０、とりわけ１．
５〜２．５のものが好ましい。なお、本明細書でいう重
量平均分子量および分散度は、ゲル浸透クロマトグラフ
ィーで測定された値を意味する。

【００１０】本発明のマイクロカプセルの連続的な徐放
期間の長さに及ぼす要因の一つとしてはポリマーの分子
量および乳酸／グリコール酸の組成比が大きく影響し、
例えば３カ月以上の連続的な０次放出を示すマイクロカ
プセルを製造する場合、乳酸／グリコール酸の組成比が
１００／０の場合はポリマーの分子量が７，０００〜２
５，０００、９０／１０の場合は分子量が７，０００〜
３０，０００また８０／２０の場合は分子量が１２，０
００〜３０，０００のものが有利に使用できる。マイク
ロカプセル調製の際の油層中の高分子重合物の濃度は、
約０．５ないし９０％（Ｗ／Ｗ）、さらに好ましくは約
２ないし６０％（Ｗ／Ｗ）から選ばれる。

【００１１】上記高分子重合物を含む溶液（油相）は、
高分子重合物を有機溶媒中に溶解したものが用いられる
。 該溶媒としては、沸点が約１２０℃以下で、かつ水と混
和しない性質のもので、高分子重合物を溶解するもので
あればよく、たとえばハロゲン化アルカン（例、ジクロ
ロメタン、クロロホルム、クロロエタン、ジクロロメタ
ン、トリクロロエタン、四塩化炭素など）、酢酸エチル
、エチルエーテル、ベンゼン、トルエンなどが挙げられ
、これらは２種以上混合して用いてもよい。

【００１２】本発明のマイクロカプセルにおいては封入
する薬物それ自身が薬物保持物質として働き、初期放出
の少ない良好なマイクロカプセルが調製できるので、薬
物保持物質を特に添加する必要はないが、場合によって
は添加してもよい。ここで、薬物保持物質としては、温
度やイオンの添加によって内水相の粘度が増大したり、
固化したりする化合物、あるいは陽電荷を有する塩基性
の残基を持つ物質で、高分子重合体と相互作用を持ちＷ
／Ｏエマルションの粘度を増大する化合物をいう。該薬
物保持物質の例としては、ゼラチン、寒天、アルギン酸
、ポリビニールアルコールあるいはアルギニン、リジン
などの塩基性アミノ酸、塩基性アミノ酸を含むポリペプ
チド、Ｎ−メチルグルカミンなどの有機塩基、および天
然あるいは合成の塩基性高分子が挙げられる。これらの
化合物は、１種類でもよく、また２種以上を混合しても
使用され、その使用する量は化合物の種類によって異な
るが、内水相中での濃度が約０．０５％ないし９０％（
Ｗ／Ｗ）となる量、さらに好ましくは約０．１％ないし
８０％（Ｗ／Ｗ）となる量から選ばれる。

【００１３】本発明の徐放型マイクロカプセルは、例え
ば以下のような方法によって製造される。まず、水に生
理活性ペプチドを前記の濃度になる量溶解し、これに必
要であれば前記のゼラチン、あるいは塩基性アミノ酸な
どの薬物保持物質を前記の濃度になる量加えて溶解もし
くは懸濁し、内水相液とする。これらの内水相液中には
、生理活性ペプチドの安定性、溶解性を保つための　ｐ
Ｈ調整剤として、炭酸、酢酸、シュウ酸、クエン酸、リ
ン酸、塩酸、水酸化ナトリウム、アルギニン、リジンお
よびそれらの塩などを添加してもよい。また、さらに生
理活性ペプチドの安定化剤として、アルブミン、ゼラチ
ン、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム、デ
キストリン、亜硫酸水素ナトリウム、ポリエチレングリ
コールなどのポリオール化合物などを、あるいは保存剤
として、一般に用いられるパラオキシ安息香酸エステル
類（メチルパラベン、プロピルパラベンなど）、ベンジ
ルアルコール、クロロブタノール、チメロサールなどを
添加してもよい。

【００１４】このようにして得られた内水相液を、高分
子重合物を含む溶液（油相）中に加え、ついで乳化操作
を行い、Ｗ／Ｏ型乳化物をつくる。該乳化操作は、公知
の分散法が用いられ、たとえば、断続振とう法、プロペ
ラ型攪はん機あるいはタービン型攪はん機などのミキサ
ーによる方法、コロイドミル法、ホモジナイザー法、超
音波照射法などが挙げられる。

【００１５】ついで、このようにして調製されたＷ／Ｏ
型エマルションをマイクロカプセル化工程に付するが、
該工程としては水中乾燥法あるいは相分離法が適用でき
る。水中乾燥法によりマイクロカプセルを製する場合は
、該Ｗ／Ｏエマルションをさらに第３相目の水相中に加
え、Ｗ／Ｏ／Ｗ型の３相エマルションを形成させた後、
油相中の溶媒を蒸発させ、マイクロカプセルを調製する
。

【００１６】上記外相の水相中に乳化剤を加えてもよく
、その例としては、一般に安定なＯ／Ｗ型エマルション
を形成するものであればいずれでもよいが、たとえば、
アニオン界面活性剤（オレイン酸ナトリウム、ステアリ
ン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウムなど）、非イ
オン性界面活性剤（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪
酸エステル［Ｔｗｅｅｎ　８０、Ｔｗｅｅｎ　６０、ア
トラスパウダー社］、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導
体［ＨＣＯ−６０、ＨＣＯ−５０、日光ケミカルズ］な
ど）、あるいはポリビニールピロリドン、ポリビニール
アルコール、カルボキシメチルセルロース、レシチン、
ゼラチンなどが挙げられ、これらの中の１種類か、いく
つかを組み合わせて使用してもよい。使用の際の濃度は
、約０．０１％から２０％の範囲から適宜選択でき、よ
り好ましくは約０．０５％から１０％の範囲で用いられ
る。

【００１７】油相の溶媒の蒸発には、通常用いられる方
法が採用される。該方法としては、プロペラ型攪はん機
、あるいはマグネチックスターラーなどで攪はんしなが
ら徐々に減圧して行うか、ロータリーエバポレーターな
どを用いて、真空度を調節しながら行う。この場合、高
分子重合物の固化がある程度進行した時点で、溶媒の脱
着をより完全にする目的で、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション
を徐々に加温して行うと所要時間を短縮することができ
る。

【００１８】このようにして得られたマイクロカプセル
は遠心分離あるいは濾過して分取した後、マイクロカプ
セルの表面に付着している遊離の生理活性ペプチド、薬
物保持物質、乳化剤などを、蒸留水で数回繰り返し洗浄
した後、再び、蒸留水などに分散して凍結乾燥する。必
要であれば加温し、減圧下でマイクロカプセル中の水分
および有機溶媒の脱離をより完全に行う。

【００１９】相分離法によりマイクロカプセルを製する
場合は、該Ｗ／Ｏエマルションに攪はん下、コアセルベ
ーション剤を徐々に加え、高分子重合物を析出、固化さ
せる。コアセルベーション剤としては、高分子重合物の
溶剤に混和する高分子系、鉱物油系または、植物油系の
化合物で、カプセル化用重合体を溶解しないものであれ
ばよく、例えば、シリコン油、ゴマ油、大豆油、コーン
油、綿実油、ココナツ油、アマニ油、鉱物油、ｎ−ヘキ
サン、ｎ−ヘプタンなどが挙げられる。これらは２種以
上混合して用いてもよい。

【００２０】このようにして得られたマイクロカプセル
は、濾過して分取した後、ヘプタン等により繰り返し洗
浄し、コアセルベーション剤を除去する。さらに、水中
乾燥法と同様の方法で遊離薬物の除去、溶媒の脱離を行
う。洗浄中の粒子同志の凝集を防ぐために、凝集防止剤
を加えてもよい。

【００２１】本発明の長期徐放型マイクロカプセルは、
上記水中乾燥法により製造することによって、とりわけ
安定な連続的長期間の徐放性を得ることができる。

【００２２】本発明のマイクロカプセルの投与のための
製剤としては、注射剤、埋め込み剤、直腸、子宮などの
経粘膜投与剤などが挙げられる。

【００２３】上記で得られたマイクロカプセルは、必要
であれば軽く粉砕した後、篩過して、大きすぎるマイク
ロカプセル部分を除去する。マイクロカプセルの粒子径
は、平均径として約０．５〜１０００μｍの範囲が挙げ
られ、より好ましくは約２〜５００μｍの範囲にあるこ
とが望まれる。懸濁注射剤として使用する場合には、そ
の分散性、通針性を満足させる範囲であればよく、たと
えば、約２ないし１００μｍの範囲にあることが望まし
い。

【００２４】また、特に本発明のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジ
ョンを経た水中乾燥法によって製造されたマイクロカプ
セルは、製造工程中でマイクロカプセル同志の凝集が少
なく、任意の粒子径の、球形状のよく整ったマイクロカ
プセルを得ることができること、また、油相中の溶媒の
除去工程の制御が容易で、それによって、薬物放出速度
を左右するマイクロカプセルの表面構造を調節すること
ができることなど多くの長所を有している。

【００２５】本発明の方法によって製造されたマイクロ
カプセルは、そのまま筋肉内、皮下、血管、臓器、ある
いは関節腔、腫瘍などの病巣に容易に注射剤および埋め
込み剤として投与することができる。また、その他種々
の製剤に成形して投与することもでき、そのような製剤
を製造する際の原料物質としても使用され得る。たとえ
ば、本発明のマイクロカプセルを注射剤とするには、本
発明のマイクロカプセルを分散剤（例、Ｔｗｅｅｎ　８
０、ＨＣＯ−６０、カルボキシメチルセルロース、アル
ギン酸ナトリウムなど）、保存剤（例、メチルパラベン
、プロピルパラベンなど）、等張化剤（例、塩化ナトリ
ウム、マンニトール、ソルビトール、ブドウ糖など）な
どと共に水性懸濁剤とするかゴマ油、コーン油などの植
物油と共に分散して油性懸濁剤とし、実際に使用できる
徐放性注射剤とする。さらに、上記のマイクロカプセル
からなる徐放性注射剤は、懸濁剤として、上記の組成以
外に、賦形剤（たとえば、マンニトール、ソルビトール
、ラクトース、ブドウ糖など）を加えて、再分散した後
、凍結乾燥もしくは噴霧乾燥して固型化　し、使用時に
、注射用蒸留水あるいは適当な分散媒を加えると、より
安定した徐放性注射剤が得られる。

【００２６】本発明の徐放性製剤の投与量は、主薬であ
る生理活性ペプチドの種類と含量、剤形、薬物放出の持
続時間、投与対象動物［例、温血哺乳動物（例、マウス
、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ヒト）
］、投与目的により種々異なるが、該主薬の有効量であ
ればよい。たとえば、上記温血哺乳動物に１回あたり投
与量として、マイクロカプセルの重量が好ましくは約０
．１ｍｇないし　１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましく
は約０．２ｍｇないし５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲から適
宜選ぶことができる。このようにして、通常の一回投与
量より多い有効量の生理活性ペプチドおよび生体適合性
のある高分子重合物よりなり、長期間にわたって薬物を
持続的に放出可能なマイクロカプセルとして調製された
医薬品組成物が得られる。

【００２７】本発明により製造された徐放性製剤は、た
とえば次の特徴を有する。 （１）　　種々の投与剤形で生理活性ペプチドの長期に
わたるより連続的な良好な徐放性が得られ、特に注射剤
においては期待される治療を行うのに、長期間投与が必
要な場合、毎日投与するかわりに、３ケ月間に一回、あ
るいは６ケ月に一回の注射で、所望の薬理効果が安定し
て得られ、従来の徐放性製剤に比較して、より長期にわ
たる徐放性が得られる。 （２）　　生体内分離型高分子重合物を用い注射剤とし
て投与する場合、一般の懸濁注射剤と全く同様に容易に
皮下、筋肉内、臓器および病巣に投与でき、埋め込み時
の外科手術がいっさい不用で、また、薬物を放出した後
の基剤についても手術による取り出しを必要としない。

【００２８】

【作用および実施例】以下に参考例および実施例を挙げ
て、本発明をさらに具体的に説明する。

【００２９】参考例１ 温度計、コンデンサー、窒素導入管を備えた四頸フラス
コに８５％ＤＬ−乳酸水溶液１６０ｇを取り、反応液中
に窒素導入管を開口し、窒素気流下、内温、内圧をそれ
ぞれ１０５℃、３５０ｍｍＨｇから１５０℃、３０ｍｍ
Ｈｇまで６時間かけて減圧加熱を行い、留出水を除去し
た。さらに３〜５ｍｍＨｇ，１７５℃で９０時間減圧加
熱を行った後、室温まで冷却して、ほとんど無色の塊状
重合体９８ｇを得た。この重合体をテトラヒドロフラン
に溶解し、市販の標準分子量ポリスチレンを用いてゲル
浸透クロマトグラフィーにより重量平均分子量および分
散度を求めたところ、それぞれ１７，２００および１．
８９であった。

【００３０】実施例１ ＴＡＰ−１４４　　４００ｍｇを０．５ｍｌの蒸留水に
溶解し水相液とし、ポリ−ＤＬ−乳酸［　Ｌｏｔ．　８
７０８１８；重量平均分子量１８０００（マイクロカプ
セルＬｏｔ．２４４、２４５）およびＬｏｔ．８８０６
２２；重量平均分子量１８２００，分散度１．７６（マ
イクロカプセル　　Ｌｏｔ．２４８）］４ｇをジクロロ
メタン７．５ｍｌに溶解した液に加え、小型ホモジナイ
ザー（ポリトロン　　キネマチカ社製、スイス）で約６
０秒間混合し、Ｗ／Ｏ型エマルションを得た。このエマ
ルションを１５℃に冷却して、　あらかじめ１５℃に冷
却した０．２５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）水溶
液１０００ｍｌ中に注入し小型ホモジナイザーを使用し
てＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションとした。この後、Ｗ／Ｏ／
Ｗ型エマルション液を攪はんしながらジクロロメタンの
揮散によって内部のＷ／Ｏ型エマルションを固化させた
後、遠心分離機で捕集した。これを再び蒸留水に分散し
、さらに遠心分離を行い遊離した薬物および分散剤など
を洗浄した。捕集されたマイクロカプセルは凍結乾燥に
よって脱溶媒および脱水をより完全とした後、粉末とし
て得られた。上記の方法で得られたマイクロカプセル（
Ｌｏｔ．２４４、２４５、２４８）は９％の薬物仕込の
処方であったが、その封入率はいずれも１００％以上で
あった。

【００３１】これらの得られたマイクロカプセルをラッ
ト（ｎ＝５）皮下に投与し、　経時的に皮下に残存する
ＴＡＰ−１４４を定量し、ｉｎ　ｖｉｖｏの薬物放出性
を測定した。 　結果を表１に示す。

【表１】　　ｉｎ　ｖｉｖｏ　放出性 ─────────────────────────
───　　　　　　　　　　　　　　　　　　皮　下　
残　存　薬　物　量　（％）　　　Ｌｏｔ　　　　　　
１日　　　　２週　　　　４週　　　　８週　　　　１
４週───────────────────────
─────　　　２４４　　　　　１０２．２　　　　
８９．０　　　　７０．２　　　　４４．０　　　　　
９．５　　　２４５　　　　　１０５．９　　　　８２
．４　　　　６９．４　　　　５２．１　　　　　９．
８　　　２４８　　　　　１０４．１　　　　７５．４
　　　　７２．８　　　　４３．７　　　　１１．６─
─────────────────────────
──これらのマイクロカプセルは初期のバーストがなく
、１４週すなわち３ケ月以上にわたって、ほぼ再現性良
く、連続的にＴＡＰ−１４４を放出しているのが示唆さ
れた。

【００３２】実施例２ 実施例１と同様にＴＡＰ−１４４　　４００ｍｇを０．
５ｍｌの蒸留水に溶解し水相液とし、重量平均分子量　
　８４００のポリ−ＤＬ−乳酸（Ｌｏｔ．８７０３０４
、マイクロカプセル　　Ｌｏｔ．３１２）４ｇをジクロ
ロメタン５ｍｌに溶解した液を油相として、上記と同様
にして、Ｗ／Ｏ型エマルションとした。このエマルショ
ンを１３℃に冷却し、　あらかじめ１５℃にした０．２
５％ポリビニルアルコール　（ＰＶＡ）水溶液１０００
ｍｌ中に注入し、上記と同様にしてＷ／Ｏ／Ｗ型エマル
ションをより経てマイクロカプセルを調製した。薬物の
封入率は１０９％であった。さらに同様に、ＴＡＰ−１
４４　　５５０ｍｇを１ｍｌの蒸留水に溶解し、これを
３種類の重量平均分子量のポリ−ＤＬ−乳酸（Ｌｏｔ．
８９０７１７；分子量：１４１００：分散度２．００、
マイクロカプセルＬｏｔ．４０２；Ｌｏｔ．８９０７２
０；分子量：１７２００：分散度１．８９、マイクロカ
プセル　　Ｌｏｔ．４０５；Ｌｏｔ．８９０７２１；分
子量：１７５００：分散度１．８７、マイクロカプセル
　　Ｌｏｔ．　　４０６）４ｇをそれぞれジクロロメタ
ン７．５ｍｌに溶解した溶液に加え、同様にしてＷ／Ｏ
型エマルションを得た。このそれぞれのエマルションを
あらかじめ１５℃（前者）および１８℃（後２者）にし
た０．２５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）水溶液１
０００ｍｌ中に注入し、以下、同様にしてマイクロカプ
セルを得た。薬物の封入率はそれぞれ、１０１％、１１
３％、１０３％と良好であった。

【００３３】上記のそれぞれのマイクロカプセルのｉｎ
　ｖｉｖｏの薬物放出性を実施例１と同様にして測定し
た。その結果を表２に示す。

【表２】 ─────────────────────────
──────　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　皮　　下　　残　　存　　率　　（％）　　
Ｌｏｔ　　　　ｎ　　　　１日　　　　１週　　　　２
週　　　　８週　　　　１２週　　　１４週─────
─────────────────────────
─　　３１２　　　　５　　　　８６．３　　　　８２
．２　　　　４１．２　　　　　９．８　　　　−　　
　　　−　　４０２　　　　３　　　　９８．０　　　
　７８．２　　　　６４．９　　　　３８．４　　　　
２０．０　　　−　　４０５　　　　５　　　　８８．
８　　　　７９．４　　　　５２．２　　　　３３．８
　　　　−　　　　　２１．３　　４０６　　　　５　
　　　８５．５　　　　８６．２　　　　５６．７　　
　　３８．８　　　　−　　　　　２３．１─────
─────────────────────────
─薬物の放出は小さな初期放出の後、いずれも少なくと
も２ケ月以上にわたる連続的な長期放出性を示し、放出
期間は使用した高分子重合物の加水分解速度に依存して
いた。

【００３４】実施例３ ＴＡＰ−１４４　　４００ｍｇを０．５ｍｌの蒸留水に
溶解しこれを水相液とし、ＤＬ−乳酸／グリコール酸の
比率が９０／１０のポリ乳酸−グリコール酸［Ｌｏｔ．
８７０３２０（重量平均分子量：１９０００）、マイク
ロカプセル　　Ｌｏｔ．３１５；Ｌｏｔ．８９１０２０
（重量平均分子量：１３８００）、マイクロカプセル　
　Ｌｏｔ．４１０］４ｇをジクロロメタン７．５ｍｌに
溶解した液を油相として実施例１と同様にしてマイクロ
カプセルを得た。マイクロカプセルＬｏｔ．４１０では
ＴＡＰ−１４４５５０ｍｇを蒸留水１ｍｌに溶解したも
のを内水相液とし、Ｗ／Ｏエマルションおよび外水相の
温度は、１５および１８℃とした。この方法で得られた
これらのマイクロカプセル中の薬物封入率は１０６およ
び１００％であった。

【００３５】これらのマイクロカプセルを前記同様の方
法でラット皮下に投与し、そのｉｎｖｉｖｏ　放出性を
評価した結果、表３に示すように２ケ月以上の連続した
長期間徐放性マイクロカプセルが得られていることを示
唆している。

【表３】　　ｉｎ　ｖｉｖｏ　放出性　（ｎ＝５）──
─────────────────────────
──────　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　皮　　下　　残　　存　　率　　（％）　　
Ｌｏｔ　　　　１日　　　　１週　　　　２週　　　　
４週　　　　６週　　　　８週　　　　１０週────
─────────────────────────
────　　３１５　　　　７７．４　　　　７６．０
　　　　５９．２　　　　５１．６　　　　４１．１　
　　　２５．８　　　　−　　４１０　　　　９３．５
　　　　８８．３　　　　６４．１　　　　５２．５　
　　　３３．１　　　　３２．７　　　　１５．４──
─────────────────────────
──────

【００３６】実施例４ ＴＲＨ（遊離体）２８０ｍｇを０．２５ｍｌの蒸留水に
溶解しこれを水相液とし、実施例２の重量平均分子量１
７２００（分散度１．８９）のポリ−ＤＬ−乳酸（Ｌｏ
ｔ．８９０７２０）４ｇをジククロメタン６ｍｌに溶解
した液を油相液とし、Ｗ／Ｏエマルション、外水相液の
温度１５℃として実施例１と同様にしてマイクロカプセ
ルを得た。この方法で得られたマイクロカプセル（Ｒ１
０３）の薬物封入率は８５．８％であった。

【００３７】得られたマイクロカプセルの薬物放出速度
は表４に示すとおり約３ケ月にわたって連続的な長期放
出性を示した。

【表４】 ─────────────────────────
─　　　　　　　　　　　　　　　　　　　皮　下　残
　存　率　（％）　　　　Ｌｏｔ　　　　１日　　　　
２週　　　　４週　　　　８週　　　　１２週────
──────────────────────　　　
Ｒ１０３　　　　９８．３　　　　８０．０　　　　６
１．８　　　　３０．６　　　　　６．７──────
────────────────────

【００３８】

【発明の効果】本発明のマイクロカプセルは、連続的に
２カ月以上の長期間に渡って生理活性ペプチドを放出す
る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】生理活性ポリペプチドを約２０〜７０重量
   ％含有してなる内水相液と、乳酸／グリコール酸の組成
   比が８０／２０〜１００／０で重量平均分子量が７，０
   ００　〜３０，０００であるコポリマーないしホモポリ
   マーを放出制御物質として含有　してなる油相液とから
   調製されたＷ／Ｏエマルションをマイクロカプセル化し
   て調製される、２カ月以上にわたってポリペプチドをゼ
   ロ次放出する長期徐放型マイクロカプセル。