JPH03135992A - 結晶２―Ｏ―α―Ｄ―グルコピラノシル―Ｌ―アスコルビン酸とその製造方法並びに用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、新規物質である結晶２−０−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とその製造方法並びに
用途に関する。

［従来の技術］ Ｌ−アスコルビン酸は、 式ＥＴ】： で示される化学構造を有しており、ヒト、サル、モルモ
ットにとっては、生体内で合成できず、必須栄養素ビタ
ミンＣとなっている。

Ｌ−アスコルビン酸は、生体内で、例えば、生体結合組
織の主成分であるコラーゲンの合成に必要なプロリンや
リジンのヒドロキシル化反応に関与し、また、例えば、
チトクロームＣのＦｅ”＋１を還元してＦｅ０にするな
どの酸化還元反応に関与し、更には、白血球増加による
免疫増強作用に関与するなどが知られており、生体の健
康維持、増進に重要な役割をなしている。壊血病は、Ｌ
−アスコルビン酸の欠乏症として古くから知られ、皮膚
の虚弱化、点状出血、斑状出血、歯肉や骨髄上出血など
を呈する。これを予防し、［１１！を維持するために、
Ｌ−アスコルビン酸の推奨１日所要量（ＲＤＡ）が定め
られ、それによれば我国では、成人男子６０■ｇ、成人
女子５０ｍｇとされている。

し−アスコルビン酸の用途は、単に必須栄養素としての
ビタミンＣ強化剤にとどまらず、その化学構造、生理作
用から、例えば、酸味剤、還元剤、酸化防止剤、漂白剤
、安定剤などとして各種化学反応基材、飲食物などに、
また、ウィルス性疾患、１１［性疾患、悪性腫瘍など感
受性疾患の予防剤、治療剤すなわち抗感受性疾患剤に、
更には、還元剤、紫外線吸収剤、メラニン生成抑制剤な
どの美肌剤、色白剤などとして化粧品にまで及び、その
範囲は極めて広い。

Ｌ−アスコルビン酸の最大の欠点は、それが直接還元性
を示すため、極めて不安定で、酸化分解を受は易（、容
易にその生理活性を失うことである。

し−アスコルビン酸を安定化させる方法として、Ｌ−ア
スコルビン酸の糖誘導体が提案されている。

例えば、先に本発明者等が、「ビタミン」第４３巻、第
２０５乃至２０９頁（１９７１年）、「ビタミン」第４
７巻、第２５９乃至２６７頁（１９７３年）および特公
昭４８−３８１５８号公報で、生化学的手法によるＬ−
アスコルビン酸グルコシドの合成法を開示している。

しかしながら、これらのアスコルビン酸グルコシドは、
いずれも同様の方法で調製され、得られたアスコルビン
酸については、例えば、該公報第２調第１４乃至１６行
で、「得た誘導体はアスコルビン酸の６番の炭素の第１
アルコール基がエーテル結合によりグルコシドを形成し
たもの」と記載され、また、その生成がマルトースから
α−グルコシル基の糖転移反応であること、更には、直
接還元性を示す性質を有するなどから、その化学構造が
、式［１１１： で示されるものであると考えられ、その安定化の程度に
ついても、該公報実施例１の表の結果から明らかなよう
に、Ｌ−アスコルビン酸よりは優れているものの、なお
不安定であり、未だ実用化されるに至っていない。

また、石川等が特公昭５８−５９２０号公報で、有機化
学的手法によるＬ−アスコルビン酸ｗ！窮導体の合成法
を開示している。

しかしながら、このアスコルビン酸糖誘導体は、該公報
第７欄第６行乃至第８１！４第１１行で、２．３−ジー
０−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−Ｌ−アスコルビン
酸など２１種類ものβ−Ｄ−グルコピラノシル型のＬ−
アスコルビン酸糖誘導体を掲げて説明していることから
も明らかなように、すべてのＤ−グルコースがβ結合し
ているＬ−アスコルビン酸糖誘導体である。

また、教本等が特開昭５８−１９８４９８号公報で有機
化学的手法によるＬ−アスコルビン酸ｍ誘導体の合成法
を開示しているが、これもβ−グルコシル型のＬ−アス
コルビン酸糖誘導体である。

また、これらβ−Ｄ−グルコピラノシル型のＬ−アスコ
ルビン酸糖誘導体について、本発明者等が検討したとこ
ろ、生体、とりわけ、ヒトにおいて、生理活性を充分発
揮させることの困難なことが判明した。更に、その有機
化学的手法による合成法は、反応が複雑で収率も低く、
それ故に、経済性が劣り、加えて、その誘導体の無毒性
、安全性を確保する上において、相当の困難が伴う欠点
のあることも判明した。

叙上のように、従来知られているＬ−アスコルビン酸糖
誘導体の提案は、安定性、安全性、生理活性、経済性な
どの点で、いずれも不充分であり、その実現を見るに至
っていない。

そこで、本発明者等は、従来のＬ−アスコルビン酸糖誇
導体の欠点を解消するために生化学的手法による糖転移
反応を利用し、新しいＬ−アスコルビン酸糖誘導体を目
脂して鋭意研究を続けてきた。

その結果、先に特許出願した特願平１−１２７０７２号
明細書に記載したように、直接還元性を示ざず、安定性
に優れ、しかも生体内で容易に加水分解され、生理活性
の点でも申し分のない新規物質、α−グリコシルーＬ−
アスコルビン酸、とりわけ、２−〇−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アルコルビン酸を見出し、更に、その製
造方法並びに飲食物、抗感受性疾患剤、化粧品などへの
用途を確立した。

併せて、この２−′０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸は、Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコ
シル糖化合物とを経口摂取することにより、生体内で生
成され、代謝される物質であって、本来、生体物質であ
って、安全性の上からも理想的なＬ−アスコルビン酸の
新規糖誘導体であることも見い出した。

しかしながら、この２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の水溶液を濃縮、粉末化して得ら
れる粉末は、吸湿性の強い非晶質粉末であって、大気中
で容易に吸湿し、潮解、固結を起こし易い欠点を有して
いることが判明した。

［発明が解決しようとする課題］ 先願の２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸の欠点を解消するためのものであって、とりわ
け、大気中で実質的に非吸湿性であり、固結を起こさず
、流動性良好な粉末の実現が望まれる。

［課題を解決するための手段］ 本発明は、この２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸の欠点を解消し、大気中で実質的に非
吸湿性の２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸固体の実現を目脂して鋭意研究した。

その結果、新規物質である結晶２−０−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を見い出し、加えて、
それが大気中で実質的に非吸湿性であり、潮解、固結を
起こざず、流動性良好で安定な無水型の結晶粉末となる
ことを見い出し、その工業的製造方法、並びに、この結
晶２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸を含有せしめることを特徴とする飲食物、抗感受性
疾患剤、化粧品などの製造方法を確立して本発明を完成
した。

本発明において、２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸はその製法を問わず、生化学的手法
による製法であっても、有機化学的手法による製法であ
ってもよい。

しかし、一般的には、安全性、経済性の上から、Ｌ−ア
スコルビン酸とα−グルコシル糖化合物とを含有する溶
液に糖転移酵素または糖転移酵素とグルコアミラーゼと
を作用きせる生化学的手法により生成させるのが望まし
い。

本明細書でいう直接還元性を示とないとは、Ｌ−アスコ
ルビン酸の場合とは違って、そのままで、２゜６−ジク
ａルフエノールインドフエノールを還元脱色しないこと
を意味する。

本明細書でいうＬ−アスコルビン酸とは、特に不都合が
生じない限り、遊離のＬ−アスコルビン酸のみならず、
Ｌ−アスコルビン酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ
土類金属塩などのＬ−アスコルビン酸塩、または、それ
らの混合物を意味する。従って、本発明の糖転移反応に
用いるＬ−アスコルビン酸としては、通常、遊離のＬ−
アスコルビン酸だけでなく、必要に応じて、Ｌ−アスコ
ルビン酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸カルシウムな
どが適宜用いられる。

また、同様に、本明細書でいうα−グリコシルーＬ−ア
スコルビン酸、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸などについても、特に不都合が生じな
い限り、遊離の酸のみならず、それらの塩をも意味する
。

本発明で用いるα−グルコシル糖化合物は、同時に用い
る糖転移酵素によってＬ−アスコルビン酸にα−Ｄ−グ
ルコシル残基を等モル以上結合したα−グリコシルーＬ
−アスコルビン酸を生成で伊るものであればよく、例え
ば、マルトース、マルトトリオース、マルトテトラオー
ス、マルトペンタオース、マルトヘキサオース、マルト
ヘプタオース、マルトオクタオースなどのマルトオリゴ
糖、デキストリン、シクロデキストリン、アミロースな
どの澱粉部分加水分解物、更には、液化澱粉、糊化澱粉
、溶性澱粉などが適宜選択できる。

従って、α−グリコシルーＬ−アスコルビン酸の生成を
容易にするためには、糖転移酵素に好適なα−グルコシ
ル糖化合物が選ばれる。

例えば、糖転移酵素として、α−グルコシダーゼ（Ｅ　
Ｃ３，２，１，２０）を用いる際には、マルトース、マ
ルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオ
ース、マルトヘキサオース、マルトヘプタオース、マル
トオクタオースなどのマルトオリゴ糖、または、ＤＥ約
５乃至６０のデキストリン、澱粉部分加水分解物などが
好適であり、シクロマルトデキストリン・グルカノトラ
ンスフェラーゼ（Ｅ　Ｃ２，４，１，１９）を用いる際
には、シクロデキストリンまたはＤＥ１未満の澱粉糊化
物からＤＥ約６０のデキストリンまでの澱粉部分加水分
解物などが好適であり、α−アミラーゼ（Ｅ　Ｃ３，２
，１，１）を用いる際には、ＤＥ１未満の糊化澱粉から
ＤＥ約３０のデキストリンまでの澱粉部分加水分解物な
どが好適である。

反応時のＬ−アスコルビン酸の濃度は、通常、ｌＷ／Ｖ
％以上、望ましくは、約２乃至３０Ｗ／Ｖ％含有してお
ればよく、α−グルコシル糖化合物の濃度は、Ｌ−アス
コルビン酸に対して、通常、約０．５乃至３０倍の範囲
が好適である。

本発明に用いる糖転移酵素は、Ｌ−アスコルビン酸とこ
の酵素に好適なα−グルコシル糖化合物とを含有する溶
液に作用させる時、Ｌ−アスコルビン酸を分解せずに、
Ｌ−アスコルビン酸の２位の炭素のアルコール基にａ−
グルコシル基を１乃至数憤転移してα−グリコシルーＬ
−アスコルビン酸を生成するものであればよい。

例えば、α−グルコシダーゼは、マウスの腎臓、ラット
の腸粘膜、イヌ、ブタの小腸など動物由来の酵素、コメ
種子、トウモロコシ種子など植物由来の酵素、更には、
ムコール（Ｍｕｃｏｒ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃ
ｉｌｌｉｕｍ）属などに属するカビ、またはサツカロミ
セス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　）属などに属する
酵母などの微生物を栄養培地で培養し得られる培養物由
来の酵素が、シクロマルトデキストリン・グルカノトラ
ンスフェラーゼは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）Ｊｉ
ｌＥ−クレブシーラ（に１ｅｂｓｉｅｌｌａ）属などに
属する細菌培養物由来の酵素が、α−アミラーゼは、バ
チルス属などに属する細菌培養物由来の酵素などが適宜
選択できる。

これらの糖転移酵素は、前記の条件を満足しざえすれば
、必ずしも精製して使用する必要はなく、通常は、粗酵
素で本発明の目的を達成することができる。必要ならば
、公知の各種方法で精製して使用してもよい。また、市
販の糖転移酵素を利用することもできる。反応時のＰｌ
（と温度は、糖転移酵素が作用してα−グリコシルーし
−アスコルビン酸が生成すればよく、通常、ＰＨ３乃至
９、温度約２０乃至８０℃から選ばれる。使用酵素量と
反応時間とは、密接な関係があり、通常は、経済性の点
から約３乃至８０１１間で反応を終了するように酵素量
が選ばれる。

また、固定化された糖転移酵素をバッチ式で繰り返し、
または連続式で反応に利用することも有利に実施できる
。

また、反応中にＬ−アスコルビン酸が酸化分解を受は易
いので、できるだけ嫌気または還元状態で遮光下に維持
するのが望ましく、必要ならば、チオ尿素、亜硫酸塩な
どを共存させて反応きせることも有利に実施できる。

また、必要ならば、糖転移反応能を有する微生物の増殖
中に、Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコシル糖化合物と
を共存させて、その目的物質を生成きせることも有利に
実施できる。

通常、本発明の反応方法は、Ｌ−アスコルビン酸とα−
グルコシル糖化合物とを含有する１ｌｌｖ液に糖転移酵
素または糖転移酵素とグルコアミラーゼとを作用きせる
。

グルコアミラーゼとしては、微生物、植物など各種起源
のものが利用できる。通常、アスペルギルス（Ａｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ）属、リゾーブス（Ｒｈ　１ｚｏｐｕｓ
　）属に属する微生物起源の市販のグルコアミラーゼが
有利に利用できる。

２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸を生成きせるに際して、糖転移酵素とグルコアミラー
ゼとを同時に作用きせることもできる。一般的には、糖
転移反応の効率を高めるため、予め、糖転移酵素を作用
させて、Ｌ−アスコルビン酸にグルコシル残基を等モル
以上転移させたα−グリコシルーＬ−アスコルビン酸を
生成せしめ、次いでグルコアミラーゼを作用させて２−
〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を
ＷＭ生成きせるのが望ましい。また、グルコアミラーゼ
とともにβ−アミラーゼ（ＥＣ３，２゜１．２）を併用
することも随意である。

糖転移酵素の作用により生成するα−グリコシルーＬ−
アスコルビン酸について述べると、Ｌ−アスコルビン酸
の２位の炭素のアルコール基にα−Ｄ−グルコシル基が
結合し、その結合数は、１乃至７個程度のグルコシル基
がα−１，４結合しており、その個々の物質としては、
例えば、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸、２−０−α−Ｄ−マルトシルーＬ−アスコ
ルビン酸、２−０−α−Ｄ−マルトトリオシルーＬ−ア
スコルビン酸、２−０−α−Ｄ−マルトテトラオシルー
Ｌ−アスコルビン酸、２−０−α−Ｄ−マルトペンタオ
シル−し一アスコルビ〉酸、２−０−α−Ｄ−マルトヘ
キサオシルーＬ−アスコルビン酸、２−０−α−Ｄ−マ
ルトヘプタオシルーＬ−アスコルビン酸などである。α
−グルコシダーゼによって生成きせる場合（は、通常、
２−ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
＊ｆ！けを生成きせるごとができるし、必要により、２
−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
に、２−〇−α−Ｄ−マルトシルーＬ−アスコルビン酸
、２−０−α−Ｄ−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸などを混在して生成させることもで診る。

シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラー
ゼやα−アミラーゼによって生成きせる場合には、一般
に、α−グルコシダーゼの場合よりもα−Ｄ−グルコシ
ル基の結合数の大きいものまで混在生成させることがで
き、使用するα−グルコシル糖化合物によっても変動す
るが、一般的には、シクロマルトデキストリン・グルカ
ノトランスフェラーゼの場合には、α−Ｄ−グルコシル
基の数が１乃至７程度まで分布し、α−アミラーゼの場
合には、これよりその分布がやや狭い程度である。

このようにして糖転移酵素により生成せしめたα−グリ
コシルーＬ−アスコルビン酸の混合物から２−０−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を
採取するためには、分子量分画法、イオン交換クロマト
グラフィー、カラムクロマトグラフィーなどの精製方法
の１種若しくは２種以上を組合せて行えばよい。

しかし、一般的には、糖転移酵素により生成せしめたα
−グリコシルーＬ−アスコルビン酸の混合物に、更に、
グルコアミラーゼ（Ｅ　Ｃ３，２，１，３）を作用させ
、２−０−α−Ｄ−マルトシルーＬ−アスコルビン酸以
上の高分子物を加水分解し、２−〇−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を蓄積生成させるのが望
ましい。

以上述べたように、各種方法により生成せしめた２−０
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有
溶液は、通常、２−０−α−Ｄ−グルコビラノシルーＬ
−アスコルビン酸のみならず、未反応のＬ−アスコルビ
ン酸、Ｄ−グルコース、α−グルコシル糖化合物などを
含有している。

これから、精製された２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を製造する場合には、
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸と未反応のＬ−アスコルビン酸、Ｄ−グルコース、α
−グルコシル糖化合物など夾雑物との分子量、親和性な
どの違いを利用する分離手段、例えば、膜分離、カラム
クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、ゲ
ル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフ
ィーなどの方法で分離精製すれば、高純度の製品を得る
ことも容易に達成することができる。

この際、分隔されるＬ−アスコルビン酸、α−グルコシ
ル糖化合物などを、再度、糖転移反応の原料として用い
ることも有利に実施できる。また、糖転移反応終了後、
クロマトグラフィーなどの分離手段にかけるまでの間に
、必要ならば、例えば、反応液を加熱して生じる不溶物
を濾過して除去したり、活性炭などで処理し、て反応液
中の蛋白性物質、着色物質などを吸着除去したり、陽イ
オン交換樹脂（Ｈ型）で脱ミネラルしたり、陰イオン交
換樹脂（ＯＨ型）に吸着させ、アニオン若しくは塩類溶
液などで脱着処理するなどの精製法を組合せて利用する
ことも随意である。

次に、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸から結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸の製造方法について述べる。本発明
で使用する晶出用２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸は、２−０−α−〇−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸の過飽和溶液であって、結晶
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸が析出すればよ＜、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方法は問わない。

通常、過゛飽和度が、１．０５乃至１．５程度で、具体
的に述べれば、純度７５％以上の２−〇−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を、望ましくは、濃
度約６５乃至９５Ｗ／Ｗ％水溶液とし、その溶液温度は
、溶液が凍結せず、また、製造工程上熱損失の比較的少
ない０乃至９５℃の範囲が望ましい。溶液の過飽和度、
粘度を調整するために、例えば、メタノール、エタノー
ル、アセトンなどを共存させることも随意である。また
、晶出方法は、通常２０乃至６０℃の比較的高温の過飽
和２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸を助晶缶にとり、これに種晶を望ましくは、０．１
乃至１０Ｗ／Ｗ％共存せしめて、ゆっくり撹拌しつつ徐
冷し、晶出を促してマスキットにすればよい。このよう
に、本発明の結晶２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸は、過飽和２−０−α−Ｄ−グルコ
ビラノシルーＬ−アスコルビン酸溶液に結晶２−０−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を種晶と
して加えることにより容易に晶出させることができる。

晶出したマスキットから結晶２−０−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を製造する方法は、結晶
２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸が採取できればよく、例えば、分室方法、ブロック粉
砕方法、流動造粒方法、噴バ乾燥方法などの公知方法を
利用すればよい。

例えば分蜜方法は、通常、マスキットをバスケット型遠
心分離機にかけ、結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸と母液（ｆｌ）とを分離する方
法で、必要により、該結晶に少量の冷水をスプレーして
洗浄することも容易であり、より高純度の非吸湿性結晶
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸を製造するのに好適である。また、母液を精製、濃縮
して、同様にマスキットとし、２番晶、更には３番晶な
どを採取して結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸の増収を図ることも有利に実施でき
る。

他の３つの方法は、蜜を分離しないので、得られる結晶
粉末に２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸に純度の向上は見られないが、製品収量の多い
特長を有している。従って、本製品の場合には、通常、
結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸とともに、蜜成分として、例えば、Ｌ−アスコル
ビン酸、２−〇−α−Ｄ−マルトシルーＬ−アスコルビ
ン酸以上の高分子α−グリコシルーＬ−アスコルビン酸
、グルコース、α−グルコシル糖化物などが含まれる。

噴霧乾燥の場合には、通常、濃度７０乃至８５ｖ／す％
晶出率２５乃至６０Ｖ／Ｖ％程度のマスキットを高圧ポ
ンプでノズルから噴霧し、結晶粉末が溶融しない温度、
例えば、６０乃至１００℃の熱風で乾燥し、次いで３０
乃至６０℃の温風で約１乃至２０時間熟成すれば非吸湿
性または難吸湿性の結晶粉末が容易に製造できる。また
、ブロック粉砕方法は、通常、水分５乃至１５Ｗ／Ｗ％
、晶出率１０乃至６０１Ｊ／Ｗ％程度のマスキットを０
．５乃至５日間静置して全体をブロック上に晶出固化さ
せ、これを粉砕または切削などの方法によって破砕し乾
燥すれば、非吸湿性または難吸湿性の結晶粉末が容易に
製造できる。また、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸溶液を、水分５Ｖ／Ｗ％未満に加
熱、濃縮して溶融状態とした過飽和２−０−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸溶液とし、この過
飽和溶液に種晶を結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸の融点以下の温度で混捏し、こ
れを各種形状、例えば粉体、顆粒、棒状、板状、立方体
などに成形して、非吸湿性または難吸湿性の結晶固体を
得ることも随意である。このようにして得られる結晶２
−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
は、その純度、晶出率によって多少変動するものの、実
質的に非吸湿性また難吸湿性であり、流動性であり、固
着の懸念もなく、その優れた特長は次の通りである。

（１）直接還元性を示ざす、営わめて安定である。

Ｌ−アスコルビン酸とは違って、メイラード反応を起こ
しにくい。従って、アミノ酸、ペプチド、蛋白質、脂質
、糖質、生理活性物質などと共存しても無用の反応を起
きず、むしろ、これら物質を安定化する。

（２）加水分解を受けてＬ−アスコルビン酸を生成し、
Ｌ−アスコルビン酸と同様の還元作用、抗酸化作用を示
す０ （３）体内の酵素により、し−アスコルビン酸とＤ−グ
ルコースとに容易に加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸
本来の生理活性を示す。また、ビタミンＥ１ビタミンＰ
などとの併用により、その生理活性を増強することがで
きる。

（４）Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコシル糖化合物な
どとを経口摂取することにより、生体内で生成され、代
謝きれる物質であることから、その安全性は極めて高い
。

（５）実質的に非吸湿性、難吸湿性であるにもかかわら
ず、水に対して大きな溶解速度、溶解度を有しており、
粉末、顆粒、錠剤などのビタミン剤、サンドクリーム、
チョコレート、チューインガム、即席ジュース、即席調
味料などの飲食物のビタミンＣ強化剤、呈味改善剤、酸
味剤、安定剤などとして有利に利用できる。

（６）実質的に非吸湿性または難吸湿性であり、固結し
ないことから流動性であり、その取扱いは容易で非晶質
の場合と比較して、その包装、輸送、貯蔵に要する物的
、人的経費が大幅に削減できる。

これらの特長から、結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸は安全性の高い天然型のビタ
ミンＣ強化剤としてばかりでなく、単独で、または他の
１種若しくは２種以上の成分と併用して、呈味改善剤、
酸味剤、安定剤、品質改良剤、抗酸化剤、ウィルス性疾
患、細菌性疾患、循環器疾患、悪性腫瘍など感受性疾患
の予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物、
嗜好物、飼料、餌料、杭感受性疾患剤、美肌剤、色白剤
など化粧品、更には、プラスチック製品などに配合して
、望ましくは０．０Ｏ１１Ｊ／Ｖ％以上配合して、有利
に利用することができる。この際、結晶２−０−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに、し
−アスコルビン酸、ビタミンＥ１ルチン、α−グリコジ
ル　ルチン、ヘスベリジンなどのビタミンＰなどから選
ばれる１種若しくは２種以上と併用することも有利に実
施できる。

また結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸は、酸味、塩から味、渋味、旨味、苦味など
の呈味を有する各種物質ともよく調和し、耐酸性、耐熱
性も大きいので、普通一般の飲食物、嗜好物、例えば、
醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、フ
リカケ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉
末すし酢、中華の素、天つゆ、麺つゆ、ソース、ケチャ
ツプ、焼肉のタレ、カレールウ、シチューの素、スープ
の素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テー
ブルシュガー、コーヒーシュガーなどの各種調味料、せ
んべい、あられ、おこし、カリントウ、求肥、絣類、ま
んじゅう、ういろう、あん類、羊莫、水羊備、錦玉、ゼ
リー、カステラ、飴玉などの各種和菓子、パン、ビスケ
ット、クラッカー、クツキー、パイ、プリン、シューク
リーム、ワツフル、スポンジケーキ、ドーナツ、チョコ
レート、チューインガム、キャラメル、キャンデーなど
の各種洋菓子、アイスクリーム、シャーベットなどの氷
菓、果実のシロップ漬、水蜜などのシロップ類、バター
クリーム、カスタードクリーム、フラワーペースト、ビ
ーナツツペースト、フラーペーストなどのスプレッド、
ペースト類、ジャム、マーマレード、シロップ漬、糖果
などの果実、野菜の加工食品類、パン類、麺類、米飯類
、人造間などの穀類加工食品類、サラダオイル、マーガ
リンなどの油脂食品類、福神漬、べったら涜、千枚漬、
らっきょう漬などの漬物類、たくあん漬の素、白菜漬の
素などの漬物の索類、ハム、ソーセージなどの畜肉製品
類、魚肉ハム、魚肉ソーセージ、カマポコ、チクワ、パ
ンペンなどの魚肉製品、ウニ、イカの塩辛、酢コンブ、
ききするめ、ふぐのみりん干しなどの各種珍味類、のり
、山菜、するめ、小魚、貝などで製造されるつくだ魚類
、煮豆、ポテトサラダ、コンブ巻、天ぷらなどのそう菜
食品、錦糸卵、乳飲料、パター、チーズなどの卵、乳製
品、魚肉、畜肉、果実、野菜などのビン詰、缶詰類、合
成酒、増醸酒、果実酒、洋酒などの酒類、コーヒー、コ
コア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料など
の清涼飲料水、プリンミックス、ホットケーキミックス
、即席ジュース、即席コーヒー、即席しるこ、即席スー
プなど即席飲食品などに、ビタミンＣ強化剤、呈味改善
剤、酸味剤、品質改良剤、安定剤、抗酸化剤などの目的
で有利に利用することができる。また、家畜、家禽、蜜
蜂、蚕、魚などの飼育動物のための飼料、餌料などにビ
タミンＣ強化剤、呈味改善剤、抗酸化剤、嗜好性向上な
どの目的で配合して利用することも好都合である。

その他、タバコ、トローチ、肝油ドロップ、複合ビタミ
ン剤、口中清涼剤、口中香錠、うがい薬、経管栄養剤、
内服薬、注射剤、線面みがき、口紅、アイシャドウ、乳
液、化粧水、クリーム、ファウンデーション、日焼は止
め、洗顔石鹸、シャンプー　リンスなど各種固状、ペー
スト状、液状の嗜好物、感受性疾患の予防剤、治療剤す
なわち抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品な
どに配合して利用することも有利に実施でき、更には、
紫外線吸収剤、劣化防止剤などとしてプラスチック製品
などに配合して利用することも、α−グリコシド加水分
解酵素の測定用基質などに利用することも有利に実施で
きる。

また、本発明でいう感受性疾患とは、結晶２−〇−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸またはその
溶解溶液によって予防され、若しくは治療される疾患で
あり、それが、例えばウィルス性疾患、細菌性疾患、外
傷性疾患、リューマチ、免疫疾患、アレルギー疾患、糖
尿病、白内障、循環器疾患、悪性ｌ［ｇ！ｉなどであっ
てもよい。２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の感受性疾患予防剤、治療剤は、その目的
に応じてその形状を自由に選択できる。例えば、噴震剤
、点眼剤、点轟剤、うがい剤、注射剤などの液剤、軟膏
、はっぷ剤、クリームのようなペースト剤、粉剤、顆粒
、カプセル剤、錠剤などの固剤なとである。製剤に当た
っては、必要に応じて、他の成分、例えば、治療剤、生
理活性物質、抗生物質、補助剤、増量剤、安定剤、着色
剤、着香剤などの１１１若しくは２種以上と併用するこ
とも随意である。

投与量は、含量、投与経路、投与頻度などによって適宜
調節することができる。通常、２−〇−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸として、成人１日当り
、約０．００１乃至１００ｇの範囲が好適である。

また、化粧品の場合も、大体、前述の予防剤、治療剤に
準じて利用することができる。

本発明の結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸を含有せしめる方法としては、それらの
製品が完成するまでの工程で、例えば、混和、混捏、溶
解、溶融、浸漬、浸透、散布、塗布、被贋、＋１１１．
注入、晶出、同化など公知の方法が適宜遷ばれる。

また、本発明の結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸は、実質的に無水であり、また、
完全無水にすることも軽く熱風乾燥するだけで達成でき
るので、非水系での化学反応用原料としても好都合であ
る。従って、結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸から非水系での公知の反応により、
極めて容易に、例えば、エーテル訪導体、エステル誘導
体などが製造できる。これら誘導体は、その特性に応じ
て、例えば、界面活性剤、乳化剤、安定剤または親油性
ビタミンＣなどとして有利に利用できる。

また、本発明の結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸が、遊離の酸の場合には、必要に
より、これを水酸化金属、炭酸金属などの水溶液と反応
させて、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸の塩、例えば、ナトリウム塩、カルシウム塩
、マグネシム塩、鉄塩、銅塩、亜鉛塩などにして、ｐＨ
調整するとともにビタミンＣ作用とミネラルとを併せ持
つ物質を調製し、これを栄養強化剤、化学薬品などとし
て利用することも有利に実施できる。

以下、本発明の結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の代表例を実験を用いて詳細に説
明する。

実　験　１　結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸の調製 デキストリン（ＤＥ約６）９重量部を水１５重量部に加
熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコルビン酸３重量
部を加え、ｐＨ５，５，６０℃に維持しつつ、これにシ
クロマルトデキストリン・グルカノトランスンスフエラ
ーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をデキストリ
ングラム当り４００単位加えて２４時間反応させな。反
応液を高速液体クロマトグラフィー（島津製作所製、Ｌ
Ｃ−６Ａｔ　カラム、ＹＭＣＡＱ３０３０ＤＳ：溶ａｌ
ｌ、０．１Ｍ　ＫＨ２ＰＯ４−Ｈ３ＰＯ４（ｐＨ２，０
）　ｉ流速、０，５醜Ｌ／ｓｉｎ；検出０日本分光工業
（株）　ＭＩＩＬＴ−３４０）　テ分析シタトコロ、Ｌ
−アスコルビン酸が９．５分の位置に現れたのに対し、
新たに生成したα−Ｄ−グルコシル−Ｌ−アスコルビン
酸が１１．２分、α−Ｄ−マルトシルーＬ−アスコルビ
ン酸が１５．７分、α−Ｄ−マルトトリオシルーＬ−ア
スコルビン酸が２０．６分、α−Ｄ−マルトテトラオシ
ルーＬ−アスコルビン酸が２４゜９分、α−Ｄ−マルト
ペンタオシル−Ｌ−アスコルビン酸が２８．１分、α−
Ｄ−マルトヘキサオシルーＬ−アスコルビン酸が３２．
１分およびα−Ｄ−マルトヘプタオシルーＬ−アスコル
ビン酸が３８゜６分の位置に現れた。Ｌ−アスコルビン
酸の約６０％がこれらα−グリコシルーＬ−アスコルビ
ン酸へ変換していた。本反応液をＵＦ膜で濾過して酵素
を回収、除去した後、５５℃、ＰＨ５，０に調整し、こ
れにグルコアミラーゼ（Ｅ　Ｃ３，２，１，３、生化学
工業株式会社販売）をデキストリングラム当り１０単位
加えて、２４時間反応させた。反応液を高速液体クロマ
トグラフィーで分析したところ、α−Ｄ−マルトシルー
Ｌ−アスコルビン酸以上の高分子α−グリコシルーＬ−
アスコルビン酸は加水分解され、２−０−α−Ｄ−グル
コビラノシルーＬ−アスコルビン酸に変換していた。

本反応液を加熱して酵素を失活きせ、活性炭で脱色濾過
し、ａｗＲを約５０１／ｌ／％に濃縮した。

このａ縮液を、特開昭５８−２３７９９号公報に開示き
れているカラムクロマトグラフィーの方法に準じて、強
酸性カチオン交換樹脂（東京有機化学工業製造、商品名
Ｘ　Ｔ−１０１６、Ｎａ”型）を充填したカラムを用い
てカラムクロマトグラフィーを行ない、このｉ容出液の
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸高含有画分（純度約９４％）を採取し、これをカチオ
ン交換樹脂（Ｈ’型）で脱ミネラルして精製し、濃度約
８０ｖ／Ｗ％に濃縮し、ガラス製容器に入れ、２０乃至
３５℃に約１カ月間保ったところ、結晶が析出した。

この結晶を種晶として、前記２−０−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分の精製、濃縮
液に加え、ゆっくり撹拌しながら助晶し、得られるマス
キットを分蜜し、結晶に少量の冷水をスプレーして、洗
浄し、高純度の結晶を得、この結晶を水に溶解し、再結
晶化きせ、より高純度（純度９９，９％以上）の結晶を
採取した。

実験２ 結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノ シル−Ｌ−アスコルビン酸の理化学 的性質 実験１の方法で再結晶させて得た結晶の理化学的性質を
調べたところ、従来全く知られていない無水型の結晶２
−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
であることを見出した。

以下、本発明の結晶の諸性質について述べる。

（１）元素分析 Ｃ＋ｚＨｔｓＯｔｔとして 理論値Ｃ＝４２．６％　Ｈ＝５．３６％実測値Ｃ＝４２
．４％　Ｈ＝５．３７％Ｎ＜０．０１％ （２）分子量 質量分析装置１（日立製作所要、Ｍ−８０Ｂ）を月いて
ＦＤマススペクトルを測定した結果、（Ｍ＋Ｈ）”（Ｃ
Ｉ２Ｈ１８０１１ＭＷ＝３３８）として３３９がｕｍき
れた。

（３）融点 １５８．５乃至１５９．５℃ （４）融解熱 ｇ当り２７．２ｋｃａｌの吸熱を示す。

（５）比旋光度 ［α］２０＝　＋　１８９．６°（Ｈ２Ｏ，ｐＨ１，９
８）［α］”＝　＋２４６．３’　（Ｈ２Ｏ、ＰＩ（７
，１０）（６）紫外線吸収スペクトル 濃度５０μＭに溶解した溶液の紫外線吸収スペクトルを
測定した。ｐＨ２，０でのスペクトルを第１図に、ｐ）
１７．０でのスペクトルを第２図に示す。

λｍａｘ＝２３８ｎｗ＋ｓ　ｔ　＝０．９３ｘｌＯ’　
（ｐ）１２．０）λ會ａｘ＝２６０ｎｍ、　ｔ　＝１．
５０ｘｌＯ’　　（ｐＨ７，ｏ）（７）赤外線吸収スペ
クトル ＫＢｒ錠剤法で測定した。本結晶の赤外線吸収スペクト
ルを、第３図に示し、対照の非晶質物の赤外線吸収スペ
クトルを第４図に示す。

（８）溶解度 ２５℃で水１００ｇに１２５ｇ溶ける。

（９）溶剤に対する溶解性 水、０．ＩＮ−カセイソーダ、０．１Ｎ−酢酸に易溶。

メタノール、エタノールに微溶。エーテル、ベンゼン、
りａａ示ルム、酢酸エチルに不溶。

（１０）解離定数 ｐＫａ＝３．０ この値を、ゼイ・ゼルノウ（Ｊ、Ｊｅｒｎｏｗ）等、テ
トラヘドロン（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　）第３５巻、
第１４８３乃至１４８６頁（１９７９年）の第１表およ
びバオーウエン・ルー（Ｐａｏ−Ｗａｎ　Ｌｕ）等、ジ
ャーナル・アグリカルチュラル・フード・ケミストリー
（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　
ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）第３２巻、第２１乃至２
８頁（１９８４年）の第２表に示される各種アスコルビ
ン酸誘導体の解離定数（ｐＫａ）を参照すると、本結晶
の場合には、そのアスコルビン酸部分の２位のアルコー
ル基がα−Ｄ−グルコシル結合に関与し、３位のアルコ
ール基は遊離のままであると判断される。

（１１）メチル化分析 前述のバオーウエン・ルー（Ｐａｏ−ＩＪｅｎ　Ｌｕ）
等の文献に記載されているＬ−アスコルビン酸をジアゾ
メタンによりメチル化して主に３−〇−メチルーＬ−ア
スコルビン酸を生成するメチル化反応の方法により、本
結晶物質をメチル化し、次いで、得られるメチル化物を
加水分解して分析したところ、主として、３−０−メチ
ル−Ｌ−アスコルビン酸とＤ−グルコースとを生成した
。

（１２）物性、物質の色 無色透明な結晶。微結晶は白色粉末で酸味を有し、臭は
ない。吸湿性はなく、潮解しない。また、１３０℃、２
時間の条件で乾燥減量を測定すると０．５Ｗ／Ｗ％未満
である。

過飽和水溶液から晶出中の結晶例を顕微鏡写真で第５図
に示す。

（１３）呈色反応 直接還元性を示ざず、２．６−シクロルフエノールイン
ドフエノールを還元脱色しない。

２．４−ジニトロフェニルヒドラジン反応を示ざない。

アントロン硫酸反応で緑色を呈する。

（１４）構成成分 α−グルコシダーゼ作用またはＩＮ−塩酸、１００℃、
５分間処理により加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸と
Ｄ−グルコースとをモル比で１：ｌ生成する。

（１５）粉末Ｘ線回折 結晶粉末の粉末Ｘ線回折装置（理学電機株式会社製造、
商品名ガイガーフレックスＲＡＤ−ＪＩＢ、ＣｕＫα線
使用）による主な回折角（２θ）は、１０．３°、１４
．８°、１６．２°、１８．４°、２４．５°である。

（１６）単結晶Ｘ線解析 過飽和水溶液から晶出した単結晶をＸ線回折法で解析し
たところ、本結晶は斜方晶形で、空間群がＰ２１２１２
１であり、格子定数がａ　＝１１．９２９Ａ１ｂ　＝２
４．３５１Ａ、　ｃ　＝４．８６４Ａで、α＝β；γ＝
９０°であった。

これらの結晶から、本結晶の化学構造は、Ｌ−アスコル
ビン酸の２位のアルコール基がＤ−グルコースの１位の
アルコール基との間でα−グルコシル結合していること
が明らかである。

本結晶の０ＲＴＥＰ図を第６図に示す。

以上の事実から、本結晶は、 式１１１： ラノシルーＬ−アスコルビン酸である。

従って、α−グリコシルーＬ−アスコルビン酸は、 式■： ＣＨ２−○ト■ ＣＨ２−ＯＨ 選ばれる整数 で示される化学構造でＬ−アスコルビン酸にα−Ｄ−グ
ルコース残基が等モル以上結合しているものと判断きれ
る。

で示される新規な結晶２−０−α−Ｄ−グルコビ実　９
３　　結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の溶解溶 液の安定性 実９１の方法で：Ａ製した結晶２−〇−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と、特公昭４８−３８
１５８号公報で開示されている８−０−α−Ｄ−グルコ
シル−Ｌ−アスコルビン酸およびＬ−アスコルビン酸と
の水溶液中での安定性を比較した。すなわち、それぞれ
の試料を濃度７０　ｕ　Ｍ　、　ｐＨ７，０またはｐ）
１２．０に調整して吸光光度計用セルに採り、これを４
５℃に維持して経時的に吸光光度計によりＰＨ７，０の
場合２Ｂ０ｎｍで、ＰＨ２，０の場合２４５ｎｍで吸光
度を測定し、その残存率（％）を測定し比較した。

結果は表に示す。

（注）　２ＧＡＳＡは、本発明の結晶２−０−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を意味し、６Ｇ
ＡｓＡは、対照の６−〇−α−Ｄ−グルコシルーＬ−ア
スコルビン酸を、ＡｓＡは、対照のＬ−アスコルビン酸
を意味する。

表の結果からも明らかなように、結晶２−〇−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の溶解溶液は、
６−０−α−Ｄ−グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ
−アスコルビン酸のいずれの場合とも違って、極めて安
定である。

実　験　４急性毒性テスト ７周令のｄｄ系マウスを使用して、実験１の方法で調製
した結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸標品を経口投与して急性毒性テストをしたと
ころ、５ｇまで死亡例は見られず、これ以上の投与は困
難であった。

従って、本物質の毒性は極めて低い。

以下、本発明の実施例として、結晶２−〇−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造例を実施例
Ａで、その用途例を実施例Ｂで述べる。

実施例　Ａ−１ 結晶２−〇−α−Ｄ−グルコピ ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸 α−シクロデキストリン９重量部を水２０重量部に加熱
溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコルビン１１３重量
部を加え、ｐ）１５．５．６５℃に維持しつつ、これに
、シクロマルトデキストリンーグールカノトランスフエ
ラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をα−シク
ロデキストリングラム当り１００単位加えて４００時間
反応せた。反応液を高速液体クロマトグラフィーで分析
したところ、Ｌ−アスコルビン酸の約５０％が実験１の
場合と同様にα−グリコシルーＬ−アスコルビン酸へ変
換していた。

本反応液を加熱して酵素を失活させた後、５５℃、ＰＨ
４，５に調整し、これにグルコアミラーゼ・をα−シク
ロデキストリングラム当り５０単位加えて、２４時間反
応させた。反応液を高速液体クロマトグラフィーで分析
したところ、α−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸以上
の高分子α−グリコシルーＬ−アスコルビン酸は、加水
分解され、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸に変換していた。

本反応液を加熱して酵素を失活させ、活性炭で脱色濾過
し、濾液をカチオン交換樹脂（Ｈ”型）のカラムにかけ
脱ミネラルし、次いで、アニオン交換樹脂（ＯＨ−型）
のカラムにかけアニオンを樹脂に吸着させ、水洗後、０
．５Ｎ−塩酸溶液で溶出し、更に、ゲル濾過クロマトグ
ラフィー（東ソー社製造、ＨＷ−４０使用）にかけ、２
−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
の高含有画分を採取し、減圧濃縮して、濃度約７３Ｗ／
Ｗ％とし、これを助晶缶にとり、結晶２−０−α−Ｄ−
グルコピラノシル−し−アスコルビン酸を種晶として１
’Ｊ／’！％加えて４０℃とし、ゆっくり撹拌しつつ徐
冷して２日間を要して２５℃まで下げ、バスケット型遠
心分離機で分蜜し、結晶を少量のエタノール水でスプレ
ーし洗浄して結晶を採取した。純度約９９％の結晶２−
〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を
原料のＬ−アスコルビン酸に対して収率的３５ν／Ｖ％
で得た。

本品の理化学的性質は、融点、比旋光度などの点で若干
具なるものの、本質的に実９１の方法で得た結晶と同一
である。

本品は、実質的に吸湿性を示ざず、取扱い容易であり、
また、直接還元性を示ざす、安定性、生理活性も充分で
、ビタミンＣ強化剤としてばかりでな（、呈味改善剤、
酸味剤、安定剤、品質改良剤、抗酸化剤、生理活性剤、
紫外線吸収剤、医薬原料、化学品などとして飲食物、抗
感受性疾患剤、化粧品、試薬などに有利に利用できる。

実施例　Ａ−２結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸 デキストリン（ＤＥ約６）３０重量部を水４０重量部に
加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコルビン酸７重
量部を加え、ＰＨ５，６，６０℃に維持しつつ、これに
、シクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラ
ーゼをデキストリングラム当り２５０単位加えて、４０
０時間反応せた。反応液を、実施例Ａ−１と同様に高速
液体クロマトグラフィーで分析したところ、Ｌ−アスコ
ルビン酸の約６５％が、実験１の場合と同様に、α−グ
リコシルーＬ−アスコルビン酸に変換していた。

本反応液をＯＦ膜で濾過して酵素を回収除去した後、５
０℃、ｐＨ５，０に調整し、これにグルコアミラーゼを
デキストリングラム当り１００単位加えて８時間反応さ
せた。反応液を高速液体クロマトグラフィーで分析した
ところ、α−Ｄ−マルトシルーＬ−アスコルビン酸以上
の高分子α−グリコシルーＬ−アスコルビン酸は、加水
分解され、２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸に変換していた。

本反応液を加熱して酵素を失活きせ、活性炭で脱色濾過
し、濾液を濃縮し、次いで、実験１に示すカラムクロマ
トグラフィーの方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂
（ダウケミカル社製造、商品名ダウエククス　５０ＷＸ
４、Ｃａ−型）を充填したカラムを用いてカラムクロマ
トグラフィーを行ない、この溶出液の２−〇−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採
取し、これをカチオン交換樹脂（Ｈ”型）で脱ミネラル
して精製し、減圧濃縮して、濃度的７７１Ｊ／Ｗ％とし
、これを助晶缶にとり、種晶２Ｖ／ＩＪ％加えて、４５
℃とし、ゆっりＩ７撹拌しつつ、徐冷して２日間を要し
て２８℃まで下げ、以下、実施例１と同様に分蜜して純
度約９８％の結晶２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸を原料のＬ−アスコルビン酸に対し
て収率的４５１Ｊ／ＩＪ％で得た。

本品は、実施例Ａ−１の場合と同様に実質的に吸湿性を
示きず、取扱い容易であり、また、直接還元性を示ざず
、安定性、生理活性も充分で、ビタミンＣ強化剤として
ばかりでなく、呈味改善剤、酸味剤、保湿剤、安定剤、
品質改良剤、１ｉｔＷ１化剤、生理活性剤、紫外線吸収
剤、医薬原料、化学品などとして、飲食物、抗感受性疾
患剤、化粧品などに有利に利用できる。

実施例　Ａ−３結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸 実施例Ａ−２の方法に従って、シクロマルトデ午ストリ
ン啼グルカノトランスフェラーゼとグルコアミラーゼと
を作用させて２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸含有反応液を調製し、これを加熱して酵
素を失活き廿、活性炭で脱色濾過し、濾液をカチオン交
換樹脂（Ｈ＋型）で脱ミネラルし、次いで、実験１に示
すカラムクロマトグラフィーの方法に準じて、強酸性カ
チオン交換樹脂（Ｈ”型）を充填しなカラムを用いてカ
ラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−０
−α−Ｄ−グルコビラノシルーＬ−アスコルビン酸の高
含有画分を採取し、これを濃度的９０Ｗ／ＩＪ％に濃縮
して助晶缶にとり、種晶約２Ｖ／Ｗ％加えて５０℃とし
、ゆっくり撹拌しながら３０分間保ワた後、バラ、トに
とり、２５℃で３日間静置して晶出固化させ、次いでバ
ットから取り出し切削型粉砕機で粉砕し、乾燥して純度
約９５％の結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸を原料のＬ−アスコルビン酸に対して
収率的７０Ｗ／ＩＪ％で得た。

本品は、実施例Ａ−１の場合と同様に、実質的に吸湿性
を示きず、取扱い容易であり、また、直接還元性を示ざ
す、安定性、生理活性も充分で、ビタミンＣ強化剤とし
てばかりでなく、呈味改善剤、酸味剤、安定剤、品質改
良剤、抗酸化剤、生理活性剤、紫外線吸収剤、医薬原料
、化学品などとして、飲食物、抗感受性疾患剤、化粧品
、試薬などに有利に利用できる。

実施例　Ａ−４結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸 実施例Ａ−３の方法で調製した２−０−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を濃度的８
０Ｖ／Ｖ％に濃縮して助晶缶にとり、種晶約２Ｗ／Ｗ％
を加えて５０℃からゆっくり撹拌しつつ徐冷し、晶出率
約３５％のマスキットを得、これを高圧ポンプにて１５
０ｋｇ／ｃｍ２の圧にて１．５■口径ノズルより乾燥塔
上より噴震した。

これと同時に８５℃の熱風を乾燥塔の上部より送風して
底部に設けた移送金網コンベア上に捕集し、コンベアの
下より４０℃の温風を送りつつ移動金網コンベア上に捕
集した結晶粉末を乾燥塔外に徐々に移動させ、約３０分
を要して取り出した。

この取り出した結晶粉末を熟成塔に充填して１０時間熟
成きせ、結晶化と乾燥を完了させ、純度約９５％の結晶
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸を原料のＬ−アスコルビン酸に対して収率的７０１Ｊ
／Ｗ％で得た。

本品は、実施例１の場合と同様に、実質的に吸湿性を示
ざす、取扱い容易であり、また、直接還元性を示ざす、
安定性、生理活性も充分で、ビタミンＣ強化剤としてば
かりでなく、呈味改善剤、酸味剤、安定剤、品質改良剤
、抗酸化剤、生理活性剤、紫外線吸収剤、医薬原料、化
学品などとして、飲食物、杭感受性疾患剤、化粧品など
に有利に利用できる。

実施例Ａ−５結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸 （１）α−グルコシダーゼ標品の調製 マルトース４１Ｊ／Ｖ％、リン酸１カリウム０．１１Ｊ
／Ｖ％、硝酸アンモニウム０．１Ｖ／Ｖ％、硫酸マグネ
シウム０゜０５Ｖ／Ｖ％、塩化力ＩＪ　’７　ム０．０
５Ｖ／Ｖ％、ポリヘプトン０．２１Ｊ／Ｖ％、炭酸カル
シウムＨ１／Ｖ％（別に乾熱滅菌して植菌時に無菌的に
添加）および水からなる液体培地にムコール　ジャバニ
カス（ＭｕｃｏｒＪａｖａｎｉｃｕｓ）　ＩＦＯ４５７
０を温度３０℃で４４時間振盪培養した。培養終了後、
菌糸体を採取し、固定化α−グルコシダーゼ標品とした
。

（２）結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の製造 マルトース（林原株式会社　登録商標サンマルト）４０
重量部を水７０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、
これにＬ−アスコルビン酸１０重量部と（１）の方法で
調製した固定化α−グルコシダーゼ標品をマルトースグ
ラム当り１０単位加え、遮光下、ＰＨ５，５，５０℃で
３時間反応ざぜな。

ここでいう活性１単位とは、１．３５ｍＭ　Ｅ　Ｄ　Ｔ
　Ａを含む０．１Ｍ酢酸塩緩衝液（ｐＨ６，０）７５０
　ｕ　Ｌ　１：　４Ｗ／Ｖ％マルトース２５０　ｕ　Ｌ
の混液に、適当に希釈した酵素液１００μＬを加え、３
７℃で３０分間反応させた後、沸騰水に３分間保って反
応を停止させ、これを遠心分離し、その上清２０μＬを
採り、これに発色試薬（グルコースオキシダーゼ法、和
光純薬社製、商品名グルコースＢテスト）　１ｍＬを加
えて、３７℃に２０分間保って発色させ、次いで５０５
ｎ−における吸光度を測定する条件で、３７℃、１分間
に１μｍｏｌｅのグルコースを遊離する酵素量をいう。

この反応液を濾過し、固定化α−グルコシダーゼを回収
し、再利用に回した。得られる濾液を実施例Ａ−２の方
法に従って、活性炭で脱色、強酸性交換樹脂を充填した
カラムによるカラムクロマトグラフィーを行ない２−０
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有画分を採取し、次いで、カチオン交換樹脂で精製し、
以後、実施例Ａ−３の方法に従って、濃度約９０Ｗ／Ｉ
Ｊ％に減圧濃縮して助晶缶にとり、種晶を加えて助晶し
、バットで晶出固化させ、これを切削型粉砕機で粉砕し
、乾燥して純度的８８％の結晶２−０−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を原料のＬ−アスコル
ビン酸に対して収率的２０Ｖ／ＩＪ％で得た。

氷晶は、実施例Ａ−１の場合と比較すると、その性質は
やや劣るものの実質的に吸湿性を示ざず、取扱い容易で
あり、また、直接還元性を示ざず、安定性、生理活性も
充分でビタミンＣ強化剤としてばかりでなく、呈味改善
剤、酸味剤、安定剤、品質改良剤、抗酸化剤、生理活性
剤、紫外線吸収剤、医薬原料、化学品などとして飲食物
、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１チューインガム ガムベース２５重量部及び実施例Ａ−２の方法で得た結
晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸２０重量部とを６０℃でミキサーにより混練し、次
いで、無水結晶マルチトール（林原商事株式会社販売、
登録商標マビット）５０重量部、リン酸カルシウム１．
５重量部及びＺ−メントールβ−シクロデキストリン包
接化合物０゜１重量部を混合し、最後に調味料少量を混
合して充分に混練し、ロール加工、裁断してチューイン
ガムを得た。氷晶は、ビタミンＣを強化したチューイン
ガムであフて、しかも低麟蝕性、低カロリーである。

実施例　Ｂ−２求肥 モチ米澱粉１重量部に水１．２重量部を混合し、加熱糊
化しつつ、これに砂糖１，５重量部、結晶性β−マルト
ース（林原株式会社製造、ｖ！ｔｉｍ標サンマルト）０
．７重量部及び実施例Ａ−５の方法で得た結晶２−０−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸０．１
重量部を混和し、以後、常法に従フて、成形、包装して
求肥を製造した。

氷晶は、ビタミンＣを強化した求肥で、老化が抑制きれ
日持よく、口当り、風味良好なきびだんζ風和菓子であ
る。

実施例　Ｂ−３混合甘味料 はちみつ１００重量部、異性化糖５０重量部、黒砂糖２
重量部及び実施例Ａ−３の方法で得た高純度結晶２−０
−α−Ｄ−グルコピラノシル−し−アスコルビン酸１重
量部を混合して混合甘味料を得た。

氷晶は、ビタミンＣを強化した甘味料で、健康食品とし
て好適である。

実施例　Ｂ−４チョコレート カカオペースト４０重量部、カカオバター１０重量部、
無水結晶マルチトール５０重量部及び実施例Ａ−２の方
法で得た結晶２−〇−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸１重量部を混合してレファイナーに通し
て粒度を下げた後、コンチエに入れて５０℃で二昼夜練
り上げる。この間にレシチン０．５重量部を添加して充
分に分散させた。次いで温度調節器で３１℃に調節し、
バターの固まる直前に型に流し込み、膜動機でアワ抜き
を行った後、１０℃の冷却トンネルを２０分間で通過ぎ
せて固化させた。これを型抜きして包装し製品を得た。

氷晶は、吸湿性がなく、色、光沢共に良（、内部組織も
良好であり、口中でなめらかに溶け、上品な甘味とまろ
やかな風味を有する。また、氷晶は、ビタミンＣを強化
したチョコレートであって、低カロリー、低鵬蝕性であ
る。

実施例　Ｂ−５サンドクリーム 結晶性α−マルトース（林原株式会社製造、ＵＳ商標フ
ァイントース）　１，２００重量部、ショートニングｔ
、ｏｏｏ重量部、実施例Ａ−４の方法で得た結晶２−０
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸１０
重量部、レシチン１重量部、レモンオイル１重量部、バ
ニラオイル１重量部を常法により混和してサンドクリー
ムを製造した。

氷晶は、ビタミンＣを強化したサンドクリームで、口当
り、溶は具合、風味とも良好である。

実施例　Ｂ−６錠剤 実施例Ａ−１の方法で得た結晶２−０−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸２０重量部に結晶性β
−マルトース１３重量部、コーンスターｆ４重量部、ル
チン１重量部及びリボフラビン０．５重量部を均一に混
合した後、常法に従って打錠して、−錠１５０ｍｇの錠
剤を製造した。

氷晶は、ビタミンＣ１ビタミンＰ１ビタミンＢ２の複合
ビタミン剤で、安定性もよ（、飲み易い錠剤である。

実施例　Ｂ−７カプセル剤 酢酸カルシウム・−水塩１０重量部、Ｌ−乳酸マグネシ
ウム・三水塩５０重量部、マルトース５７重量部、実施
例Ａ−２の方法で得た結晶２−〇−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビンＷ２０重量部及びエイコサペ
ンタエン酸２０％含有７−シクロデキストリン包接化合
物１２重量部を均一に混合し、顆粒成形機にかけて顆粒
とした後、常法に従って、ゼラチンカプセルに封入して
、−カプセル１５０■ｇ人のカプセル剤を製造した。

氷晶は、血中コレステロール低下剤、免疫賦活剤、美肌
剤などとして、感受性疾患の予防剤、治療剤、健康増進
用食品などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−８軟膏 酢酸ナトリウム・三水４１量部、ＤＬ−乳酸カルシウム
４！！ｉ量部をグリセリン１０重量部と均一に混合し、
この混合物を、ワセリン５０重量部、木ロウｌＯ重量部
、ラノリン１０重量部、ゴマ油１４゜５重量部、実施例
Ａ−５の方法で得た結晶２−〇−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸１重量部及びハツカ油０．５
重量部の混合物に加えて、更に均一に混和して軟膏を製
造した。

氷晶は、日焼は止め、美肌剤、色白剤などとして、更に
は外傷、火傷の治癒促進剤などとして有利に利用できる
。

実施例　Ｂ−９注射剤 実験１の方法で再結晶させて得た結晶２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を水に溶解、中
和し、常法に従って、精製濾過してパイロゲンフリーと
し、この溶液を２０ｍＬ容アンジアン２−〇−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸５００１ｇにな
るように分注し、封入して注射剤を製造した。

本注射剤は、単体で、または、他のビタミン、ミネラル
などと混合して筋肉内又は静脈内に投与できる。また、
氷晶は、低温貯蔵の必要もなく、安定な製剤である。

氷晶は、ビタミンＣ補給としてだけでな（、加水分解き
れ抗酸化剤として活性酸素の除去、過酸化脂質の生成抑
制などの効果を発揮し、ウィルス性疾患、細菌性疾患、
外傷性疾患、リューマチ、免疫疾患、アレルギー疾患、
糖尿病、白内障、循環器疾患、悪性ａｍなど各種疾患の
予防剤、治療剤に有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１０注射剤 塩化ナトリウム６重量部、塩化カリウム０．３重量部、
塩化カルシウム０．２重量部、乳酸ナトリウム３．１重
量部、マルトース４８重量部及び実施例Ａ−１の方法で
ｌ！！な結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビンｌｔ！２重量部を水１，０００重量部に溶
解し、常法に従って、精製濾過してパイロゲンフリーと
し、この溶液を滅菌したプラスチック容器に２５０糺ず
つ充填して注射剤を製造した。

氷晶は、ビタミンＣ補給としてだけでなく、カロリー補
給、ミネラル補給剤としても利用され、更には、加水分
解され、抗酸化剤として活性酸素の除去、過酸化脂質の
生成抑制などの効果を発揮し、病中、病後の治療促進、
回復促進、更には、ウィルス性疾患、細菌性疾患、外傷
性疾患、リューマチ、免疫疾患、アレルギー疾患、糖尿
病、白内障、循環器疾患、悪性腫瘍など各種疾患の予防
剤、治療剤などに有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１１経管栄養剤 結晶性α−マルトース２０重量部、グリシン１．１重量
部、グルタミン酸ナトリウム０．１８重量部、食塩１．
２重量部、クエンｗ１１重量部、乳酸カルシウム０．４
重量部、炭酸マグネシウム０．１重量部、実施例Ａ−３
の方法で得た結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−
し−アスコルビン酸０．１重量部、チアミン０．０１１
量部及びリボフラビン０．０１重量部からなる配合物を
調製する。この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製
小袋に充填し、ヒートシールして経営栄養剤を調製した
。

本経管栄養剤は、−袋を約３００乃至５００ｍＬの水に
溶解し、経営方法により鼻腔、胃、腸などへの経口的又
は非経口的栄養補給液としても有利に利用で伊る。

実施例　Ｂ−１２浴用剤 ＤＬ−乳酸ナトリウム２１重量部、ピルビン酸ナトリウ
ム８重量部、実施例Ａ−５の方法で得た結晶２−０−α
−Ｄ−グルコピラノシル−し−アスコルビン酸５重量部
及びエタノール４０重量部を、精製水２６重量部及び着
色料、香料の適量と混合し、浴用剤を製造した。

本品は、美肌剤、色白剤として好適であり、入浴用の湯
に１００乃至１０　、０００倍に希釈して利用すればよ
い。本品は、入浴用の湯の場合と同様に、洗顔用水、化
粧水などに希釈して利用することも有利に実施できる。

実施例　Ｂ−１３乳液 ポリオキシエチレンベヘニルエーテル０．５重量部、テ
トラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール１重量
部、親油型モノステアリン酸グリセリン１重量部、ピル
ビン酸０．５重量部、ベヘニルアルコール０．５重量部
、アボガド油１重量部、実施例Ａ−４の方法で得た結晶
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸１重量部、ビタミンＥ及び防腐剤の適量を、常法に従
って加熱溶解し、これにＬ−乳酸ナトリウム１重量部、
１．３−ブチレングリコール５重量部、カルボキシビニ
ルポリマー０．１重量部及び精製水８５．３重量部を加
え、ホモゾナイザーにかけ乳化し、更に香料の適量を加
えて撹拌混合し乳液を製造した。

本品は、日焼は止め、美肌剤、色白剤などとして有利に
利用できる。

実施例　Ｂ−１４クリーム モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２！量
部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５重量部、
実施例Ａ−３の方法で得た結晶２−〇−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸２重量部、流動パラフ
ィンＩＭ量部、トリオクタン酸グリセリル１０重量部及
び防腐剤の適量を、常法に従って加熱溶解し、これにＬ
−乳酸２重量部、１．３−ブチレングリコール５重量部
及び精製水６６重量部を加え、ホモゲナイぜ−にかけ乳
化し、更に香料の適量を加えて撹拌混合しクリームを製
造した。

本品は、日焼は止め、美肌剤、色白剤などとして有利に
利用できる。

〔発明の効果］ 本文で述べたごとく、本発明の新規物質結晶２−〇−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、実質
的に吸湿性を示さず、潮解、固着もな（取扱い容易で、
また、直接還元性を示きず、安定性に優れ、しかも、生
体内で容易に加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸本来の
抗酸化性、生理活性を発揮する。その上、２−０−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸が、生体内
で生成され、代謝される物質でもあることが判明したこ
とより、その安全性も極めて高い物質である。

また、結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸が、Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコシル
糖化合物とを含有する溶液に糖転移酵素または糖転移酵
素とグルコアミラーゼとを作用きせ生成せしめた２−０
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有
溶液を精製、ｖＡ縮して過飽和液とし、この過飽和液か
ら容易に晶出しうろことを見い出したことにより、この
結晶の製造方法は、経済性に優れ、その工業的実施も容
易である。

更に、この実質的に吸湿性を示ざす、取扱い容易な結晶
２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−し−アスコルビン
酸は、安定性、生理活性も充分で、ビタミンＣ強化剤と
してばかりでなく、安定剤、品質改良剤、抗酸化剤、生
理活性剤、紫外線吸収剤、医薬原料、化学品などとして
、飲料、加工食品、嗜好物などの飲食物、感受性疾患の
予防剤、治療剤、更には美肌剤、色白剤など化粧品など
に含有せしめて有利に利用できる。従って、本発明の結
晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸は広範な用途を有し、これら産業界に与える工業的
意義は極めて大きい。

第６図は、結晶２−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸の０ＲＴＥＰ図を示す。

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
   スコルビン酸。
2. （２）ＣｕＫα線使用による粉末Ｘ線回折法で、主な回
   折角（２θ）が、１０．３°、１４．８°、１６．２°
   、１８．４°、２４．５°である特許請求の範囲第（１
   ）項記載の結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
   −アスコルビン酸。
3. （３）２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
   ルビン酸の過飽和溶液から結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
   ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を析出せしめ、これを
   採取することを特徴とする結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
   ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方法。
4. （４）２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
   ルビン酸の過飽和溶液が、Ｌ−アスコルビン酸とα−グ
   ルコシル糖化合物とを含有する溶液に糖転移酵素または
   糖転移酵素とグルコアミラーゼとを作用させ生成せしめ
   た２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
   ン酸含有溶液を精製、濃縮したものであることを特徴と
   する特許請求の範囲第（３）項記載の結晶２−Ｏ−α−
   Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方法
   。
5. （５）結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
   スコルビン酸を含有せしめることを特徴とする飲食物の
   製造方法。
6. （６）結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
   スコルビン酸を有効成分として含有せしめることを特徴
   とする抗感受性疾患剤の製造方法。
7. （７）結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
   スコルビン酸を有効成分として含有せしめることを特徴
   とする化粧品の製造方法。