JP4949580B2 - 乳酸菌の配合物並びに感染症および炎症の予防および／または処置のためのその使用 - Google Patents

乳酸菌の配合物並びに感染症および炎症の予防および／または処置のためのその使用 Download PDF

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Description

【０００１】
本発明は、乳酸菌の配合物、並びに細菌、ウイルスまたはかびに起因する、特に口、膣、尿道、鼻、目および耳内での感染症および炎症の予防および／または処置用の食品添加物、衛生用品または医薬品を製造するためのその使用に関する。
【０００２】
乳酸菌はブドウ糖の発酵により乳酸を生産するグラム陽性菌である。Streptococcus thermophilusもまた、慣例によりこの定義に含まれる。
【０００３】
H2O2を生産する乳酸菌の菌株は、体の開口部内および粘膜上の菌叢のレギュレーターとして働き得ることが良く知られている。H2O2生産性乳酸菌は、E. coli、N. gonorrhoea、G. vaginalis、C. trachomatis、U. urealyticumおよびB. biviusに拮抗し得ることが示されてきた。しかし、医療業務で使われるとき、これらの細菌には限られた利点しかなかった。このことは、上記の微生物の感染(例えば、膣炎)の処置を目的とする、乳酸菌をベースとする製剤(例えば、ペッサリ−)が、自分たちの患者を抗生物質または化学療法剤で処置することの方を好む医師たちから高い関心を得ていなかったという事実からうかがえる。
【０００４】
発明者の知る限りでは、アルギニン利用性乳酸菌には、体の開口部内および粘膜上での抗菌または叢調節作用はないとされてきた。
【０００５】
驚くべきことに、此度、H2O2生産性乳酸菌の活性が、１またはそれ以上のアルギニン利用能のある乳酸菌の菌株の付加により、顕著に上昇することが分った。アルギニンは生物体液中にみられる様々な小ペプチドの一部を構成し、また遊離アルギニンとしても生じる。多くの細菌種がそれ(アルギニン)を自身の栄養摂取と増殖に利用する。それゆえに、アルギニン利用性乳酸菌は、他の、病原性または病原性の可能性のある細菌から顕著な量のアルギニンを奪い、そのことは、それらの増殖を停止させるには十分ではないにしても、乳酸菌が生産するH2O2の作用をより受けやすくさせる。
【０００６】
それゆえに、本発明は、(a)H2O2生産性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第１成分、および(b)アルギニン利用性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第２成分、を含む乳酸菌の配合物を提供する。
【０００７】
成分(a)中の乳酸菌の菌株は、好ましくはLactobacillus crispatus、Lactobacillus salivariusおよびLactobacillus caseiの種の菌株群からなる群から選択され、一方成分(b)中の乳酸菌の菌株は、Lactobacillus brevis、Lactobacillus gasseriおよびLactobacillus fermentumの種の菌株群からなる群から選択される。より詳しくは、成分(b)中の乳酸菌の菌株は、DSM、Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH、Braunschweig、Germanyに、1998年2月6日付で、ブタペスト条約のもと受託番号DSM11988で寄託されているLactobacillus brevis CD2、またはその変異株または誘導体である。
【０００８】
成分(a)中の細菌数の、成分(b)中の細菌数に対する比は、好ましくは1 : 100から100 : 1までであり、とりわけ1 : 5から5 : 1までであり、最も好ましい比は1 : 1である。
【０００９】
本発明の配合物は、成分(a)の細菌1 x 102個から5 x 1011個まで、および成分(b)の細菌1 x 102個から5 x 1011個まで、好ましくは成分(a)の細菌1 x 109個および成分(b)の細菌3 x 109個、を含む単位用量形態で投与できる。
【００１０】
本発明の配合物は、錠剤、口内錠剤、菓子、チユーインガム、ゼラチンカプセル、ペッサリー、坐薬および極小の浣腸剤、同様に、ペレット、歯科用クリームおよびゲル、義歯粉、うがい薬、歯磨き粉、スプレー、懸濁液並びに軟膏の形態でも投与できる。
【００１１】
本発明の他の実施態様によると、該配合物は、Lactobacillus acidophilus、Lactobacillus buchneri、Lactobacillus casei、Lactobacillus catenaforme、Lactobacillus cellobiosus、Lactobacillus crispatus、Lactobacillus curvatus、 Lactobacillus delbrueckii、Lactobacillus jensenii、Lactobacillus leichmannii、Lactobacillus minutus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus salivarius、Lactobacillus brevis、Lactobacillus gasseri、Lactobacillus fermentum、Bifidobacterium adolescentis、Bifidobacterium angulatum、Bifidobacterium bifidum、Bifidobacterium breve、Bifidobacterium catenulatum、 Bifidobacterium dentium、Bifidobacterium eriksonii、Bifidobacterium infantis、Bifidobacterium longum、Bifidobacterium plantarumおよびStreptococcus thermophilusからなる群から選択される乳酸菌の少なくとも１つの他菌株を付加的に含む。
【００１２】
本発明の配合物はまた、ビタミン類、第四アンモニウム塩基類、無機塩類、抗酸化剤および抗歯垢剤も含み得る。
【００１３】
本発明はまた、特に口、膣、尿道、鼻、目および耳内での、細菌、ウイルスまたはかびに起因する感染症および炎症の予防および／または治療用の食品添加物、衛生用品または医薬製剤の製造を目的とする、(a)H2O2生産性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第１成分、および(b)アルギニン利用性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第２成分、を含む乳酸菌の配合物の使用にも関する。これらの感染症および炎症は、歯肉炎、歯周病、医薬品および／または天然物質に起因する粘膜炎および口内炎、ベーチェット症候群、口腔の角化症(diakeratosis)、 舌炎、咽喉痛、唾液腺炎、唾石症、天疱瘡、平扁苔癬、シェーグレン症候群、膣疾患、膣炎、尿道炎、前立腺炎、直腸炎、耳炎、結膜炎、鼻炎、副鼻腔炎、白板症、アフタ、ヘルペス疱疹、口腔内のHelicobacter pilori感染、を含む。
【００１４】
本発明の配合物はまた、消口臭剤、抗炎症剤、抗齲歯剤および／または抗歯垢剤として、口腔の処置に役立てるためにも使用できる。
【００１５】
以下の実施例は、本発明の様々な態様をより詳細に説明するのに役立つが、いかなる点においても本発明を限定するように解釈されるべきでない。
【００１６】
実施例１
H202生産性乳酸菌(成分A);アルギニン利用性乳酸菌(成分B);および特に比が１：１の両菌株の配合物(配合物AB)の、潜在的に病原性のある細菌の増殖に対する阻害効果を評価した。
【００１７】
概略すると、酸性のpHはそれ自体が細菌の増殖を阻害するので、調べる乳酸菌の培養物を、最初に中性のpHに合わせた。該懸濁液を滅菌濾過し、濾過液を吸収紙の多数のディスクを浸すのに使用した(ディスク１枚当り30μlの濾過液)。それらのディスクを、30μlの蒸留水で浸しただけの対照のディスクとともに、0.1mlのGardnerella vaginalis(膣疾患を引き起こす菌株で、実験室で単離したもの)を植菌した選択増殖培地プレート上に置いた。24時間、37℃でのインキュベーションの後、ディスクの周りのハローの直径をミリメートル単位で計測することで、病原菌の増殖阻害を評価した。
【００１８】
２組目の試験は、歯垢および齲歯の原因物質であるStreptococcus mutansを標的病原菌として用いて行った。
【００１９】
H202生産菌としてのこの細菌の特性分析は、H202生産性の細菌コロニーを青い着色によって明らかにする、古典的なベンジジンペルオキシダーゼ反応によって行った。アルギニンデヒドロラーゼの活性は、乳酸菌がアルギニンを利用する能力を評価することで測定した[M. C. Manca de Nadra, Milchwissenschaft, 37 (1982) pp. 669-670]。
乳酸菌はAmerican Type Culture Collection (ATCC)、Rockville、USAから入手した。
【００２０】
【表１】
Figure 0004949580
【００２１】
【表２】
Figure 0004949580
【００２２】
実施例２
以下の成分組成の口内錠剤を調製した。
【表３】
Figure 0004949580
【００２３】
これらの錠剤を、評価に先立つ週の間、歯の掃除をしたりガムを噛んだりしないように指示された4人の志願者に投与した。被験者は、１週間、１日３錠を食後に摂取し、錠剤を口の中で溶かした。歯の歯垢指数および歯肉の歯垢指数の両者について、臨床評価を行った。
【００２４】
歯の歯垢について、６本の歯(右上第１大臼歯；左上中切歯；左上第１小臼歯；左下第１大臼歯；右下中切歯；右下第１小臼歯)に次のスコアシステムを用いた。
0-全く歯垢無し
1-可視の歯垢無し
2-可視の歯垢
3-非常に明らかな歯垢
【００２５】
次のスコアシステムを、上記の６本の歯の縁を用いて歯肉の歯垢を評価するのに採用した。
0-炎症無し
1-僅かな炎症
2-触ると出血をともなう中程度の炎症
3-自然出血の傾向をともなう顕著な炎症
【００２６】
４人の志願者の６本の歯について得られた結果の組み合わせデータは以下の通りである。
【表４】
Figure 0004949580
【００２７】
実施例３
臨床的におよび組織学的に再発性アフタ潰瘍と診断された4人の被験者を、10日間、実施例２に記した成分の口内錠剤1日6錠で処置した。
【００２８】
処置したすべての患者は10日間の過程の終わりに潰瘍の完治を示し、以降１か月の間、彼らの誰も新たな潰瘍を生じなかった。
【００２９】
細菌配合物ABの風味と外観を改善するために、習慣的に行われ当業者に周知なように、適切な着色料並びにサッカリン、ミント油およびキシリトールのような甘味料を加え得る。
【００３０】
配合物ABは、ペレット、菓子、チユーインガム、ゼラチンカプセル、歯科用クリームおよびゲル、義歯粉、うがい薬、歯磨き粉、錠剤、ペッサリ−、坐薬、スプレー、懸濁液および極小の浣腸剤の形態で投与できる。
【００３１】
実施例４
練り歯磨きの製造
【表５】
Figure 0004949580
【表６】
Figure 0004949580
【００３２】
すりつぶして50メッシュのふるいを通したリン酸カルシウム２水和物にグリセロールを加えた。混合物を水和させ、濃い一様のペーストを得た。香料(1%のペパーミント油)は、この段階で加えた。
【００３３】
カルボキシメチルセルロースナトリウムを一晩中、水中で水和した(純水中4.6%の濃度)。
サッカリンナトリウム溶液を、得られた濃いゲルに加えた。
【００３４】
重合体のゲルを、すでにグリセロールで水和したリン酸カルシウムが入っている乳鉢に注ぎ、内容物を激しく攪拌した。
【００３５】
約28％のラウリル硫酸ナトリウムの純水溶液を、別に調製した。
該ラウリル硫酸ナトリウム溶液を、濃い第二リン酸カルシウムのペーストに加えた。
【００３６】
得られた流動学的に優れた特性を有する濃い一様のペーストを数分間攪拌し、次いでローラーを有する精製機を通して精製した。こうして、ミントの心地よい芳香を有する雪白色の一様なペーストを得た。
【００３７】
38.5 gの凍結乾燥した乳酸菌(L. salivarius + L. brevis、 1 : 1; 1010 CFU/g)を50メッシュのふるいに通し、少量を上記の練り歯磨きベースの残り(770 g)に加えた。得られた一様なペーストは僅かな淡い茶色と、ミントの香りを有した。
【００３８】
実施例５
速放性の膣錠剤の調製
沸騰性の層に包まれた膣錠剤を、湿式造粒で調製した。該錠剤はそれぞれ重量が2100mgであり、活性物質として乳酸菌の配合物各100mgを含有した。
各膣錠剤は以下の組成を有した。
【表７】
Figure 0004949580

Claims (6)

  1. (a)H2O2生産性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第１成分、および(b)アルギニン利用性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第２成分、を含む乳酸菌の配合物であって、成分(a)が、ラクトバシラス・クリスパタス（Lactobacillus crispatus）、ラクトバシラス・サリバリウス（Lactobacillus salivarius）およびラクトバシラス・カゼイ（Lactobacillus casei）の種の菌株群からなる群から選択され、かつ、成分(b)が、DSM（Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH、Braunschweig、Germany）に、1998年2月6日付で、ブタペスト条約のもと受託番号DSM11988で寄託されているラクトバシラス・ブレビスＣＤ２（Lactobacillus brevis CD2）である配合物の、口、膣、尿道、鼻、目および耳での、細菌に起因する感染症および炎症の予防または治療用の食品添加物の製造のための使用。
  2. (a)H2O2生産性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第１成分、および(b)アルギニン利用性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第２成分、を含む乳酸菌の配合物であって、成分(a)が、ラクトバシラス・クリスパタス（Lactobacillus crispatus）、ラクトバシラス・サリバリウス（Lactobacillus salivarius）およびラクトバシラス・カゼイ（Lactobacillus casei）の種の菌株群からなる群から選択され、かつ、成分(b)が、DSM（Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH、Braunschweig、Germany）に、1998年2月6日付で、ブタペスト条約のもと受託番号DSM11988で寄託されているラクトバシラス・ブレビスＣＤ２（Lactobacillus brevis CD2）である配合物の、口、膣、尿道、鼻、目および耳での、細菌に起因する感染症および炎症の予防または治療用の衛生用品の製造のための使用。
  3. (a)H2O2生産性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第１成分、および(b)アルギニン利用性乳酸菌の少なくとも１菌株からなる第２成分、を含む乳酸菌の配合物であって、成分(a)が、ラクトバシラス・クリスパタス（Lactobacillus crispatus）、ラクトバシラス・サリバリウス（Lactobacillus salivarius）およびラクトバシラス・カゼイ（Lactobacillus casei）の種の菌株群からなる群から選択され、かつ、成分(b)が、DSM（Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH、Braunschweig、Germany）に、1998年2月6日付で、ブタペスト条約のもと受託番号DSM11988で寄託されているラクトバシラス・ブレビスＣＤ２（Lactobacillus brevis CD2）である配合物の、口、膣、尿道、鼻、目および耳での、細菌に起因する感染症および炎症の予防または治療用の医薬製剤の製造のための使用。
  4. 該感染症および該炎症が、歯肉炎、歯周病、再発性アフタ潰瘍を含む、請求項１−３のいずれかに記載の使用。
  5. 消臭剤、抗炎症剤、抗齲歯剤および／または抗歯垢剤としての、口腔の処置のための、請求項１−３のいずれかに記載の使用。
  6. 消臭剤としての、口腔の処置のための、請求項２に記載の使用。
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