BRPI0011799B1 - composição de bactéria de ácido láctico e seu uso para a prevenção e/ou tratamento de infecções e condições inflamatórias - Google Patents
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Abstract
patente de invenção: "combinação de bactéria de ácido láctico e seu uso para a prevenção e/ou tratamento de infecções e condições inflamatórias". a presente invenção divulga uma combinação de bactéria de ácido láctico , compreendendo: (a) um primeiro componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico produtora de h~ 2~o~ 2~; e (b) um segundo componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico que utiliza arginina. a divulgação refere-se também ao uso dessa combinação para produção de um suplemento alimentar, um produto de higiene ou uma preparação farmacêutica para a prevenção e/ou tratamento de infecções e condições inflamatórias provocadas por bactérias, vírus ou fungos, especialmente na boca, vagina, uretra, nariz, olhos e ouvidos.
Description
Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSIÇÃO DE BACTÉRIA DE ÁCIDO LÁCTICO E SEU USO PARA A PREVENÇÃO E/OU TRATAMENTO DE INFECÇÕES E CONDIÇÕES INFLAMATÓRIAS". A presente invenção refere-se a uma combinação de bactéria de ácido láctico e seu uso para produção de um suplemento alimentar, um produto de higiene ou uma preparação farmacêutica, para a prevenção e/ou tratamento de infecções e condições inflamatórias provocadas pela bactéria, vírus ou fungos, especialmente na boca, vagina, uretra, nariz, olhos e ouvidos.
As bactérias de ácido láctico são bactérias Gram-positivas que produzem ácido láctico pela fermentação da glicose. O Estreptococcus thermophilus é também incluído nessa definição por convenção. É bem-conhecido que as cepas da bactéria de ácido láctico que produzem H2O2 podem atuar como reguladores da flora bacteriana em cavidades do corpo e nas membranas mucosas. Foi demonstrado que as bactérias de ácido láctico produtoras de H2O2 podem antagonizar E. coli, N. gonorrhoea, G. vaginalis, C. trachomatis, U. urealyticum e B. bivius. Entretanto, essas bactérias são apenas de benefício limitado quando usadas na prática médica. Isso pode ser observado a partir do fato de que as preparações baseadas em bactérias de ácido láctico (por exemplo, pessários vaginais), idealizados para o tratamento de infecções causadas pelos microorganismos acima (por exemplo, vaginite), não são bem-consideradas pelos médicos, que preferem tratar seus pacientes com antibióticos ou agentes quimioterapêuticos.
Dentro do melhor conhecimento do inventor, nenhuma ação antibacteriana ou reguladora da flora nas cavidades do corpo e nas membranas mucosas foi atribuída à bactéria de ácido láctico que utiliza arginina.
Foi agora surpreendentemente descoberto que a atividade da bactéria de ácido láctico produtora de H2O2 é consideravelmente potenciada pela adição de uma ou mais cepas de bactéria de ácido láctico que são capazes de utilizar a arginina. A arginina forma parte de diversos pequenos peptídios encontrados em fluidos biológicos e também ocorre como arginina livre. Diversas espécies de bactérias utilizam a arginina para sua própria nutrição e crescimento. As bactérias de ácido que utilizam a arginina podem, portanto, privar outras bactérias patogênicas ou potencialmente patogênicas de uma certa quantidade de arginina, que, embora não suficiente para terminar o seu crescimento, torna as mesmas mais suscetíveis à ação de H2O2 produzida pela bactéria de ácido láctico.
Portanto, a presente invenção fornece uma combinação de bactéria de ácido láctico compreendendo: (a) um primeiro componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico produtora de H202; e (b) um segundo componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico que utiliza arginina. A cepa da bactéria de ácido láctico no componente (a) é preferencialmente escolhida de um grupo que consiste em cepas das espécies Lactobacillus críspatus, Lactobacillus salivarius e Lactobacillus casei, enquanto a cepa da bactéria de ácido láctico no componente (b) é escolhida do grupo que consiste em espécies Lactobacillus brevis, Lactobacillus gasseri e Lactobacillus fermentum. Mais especialmente, a cepa da bactéria de ácido láctico no componente (b) é a cepa Lactobacillus brevis CD2, depositada no DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Alemanha, em 6 de fevereiro de 1998, com protocolo de acesso No. DSM 11988 conforme o Tratado de Budapest, ou mutantes derivados da mesma. A proporção do número de bactérias no componente (a) em relação ao número de bactérias no componente (b) é preferencialmente de 1:100 a 100:1 e mais preferencialmente de 1:5 a 5:1, sendo mais preferido de 1:1. A combinação pode ser administrada na forma de dosagem única, compreendendo de 1 x 102 a 5 x 1011 bactérias do componente (a) e de 1 x 102 a 5 x 1011 bactérias do componente (b), preferencial mente de 1 x 109 bactérias do componente (a) e 3 x 109 bactérias do componente (b). A combinação pode também ser administrada na forma de com- primidos, comprimidos para serem chupados, doces, goma de mascar, cápsulas de gelatina, pessários, supositórios e microenemas, assim como grânulos, cremes dentais e géis, pós de dentadura, agentes de lavagem de boca, dentifrícios, sprays, suspensões e pomadas.
De acordo com outra modalidade da invenção, a combinação adicionalmente compreende pelo menos uma outra cepa de bactéria de ácido láctico, escolhida de um grupo que consiste em: Lactobacillus acidophi-lus, Lactobacillus buchnerí, Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme, Lactobacilluscellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus leichmannii, Lactobacillus minutus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus salivarus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus fermentum, Bifidobacte-rium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Bifídobacterium bifídum, Bifí-dobacterium breve, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium eriksonii, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium plantarum e Streptococcus thermophilus. A combinação pode também compreender vitaminas, bases de amônio quaternário, sais minerais, antioxidantes e agentes antiplaca. A invenção também se refere ao uso de uma combinação de bactéria de ácido láctico, compreendendo: (a) um primeiro componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico produtora de H2O2; e (b) um segundo componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico que utiliza arginina, para produção de um suplemento alimentar, um produto de higiene ou uma preparação farmacêutica para a prevenção e/ou tratamento de infecções e condições inflamatórias provocadas por bactérias, vírus ou fungos, especialmente na boca, vagina, uretra, nariz, olhos e ouvidos. Essas infecções e condições inflamatórias incluem gengivite, perio-dontite, mucosite e estomatite, provocada por drogas e/ou agentes físicos, síndrome de Behcet, diaceratose da cavi- dade oral, glossite, feridas de garganta, sialadenite, sialolí-tiase, pênfigo, Lichen planus, síndrome de Sjõgren, vagino-se, vaginite, uretrite, prostatite, protite, otite, conjuntivite, ri-nite, sinusite, leucoplaquia, aftas, herpes e infecções causadas por He/icobacter pilori na cavidade oral. A combinação pode também ser usada para vantajosamente tratar a cavidade oral com um desodorante oral, agente antiinflamatório, an-ticárie e/ou anti-placa.
Os exemplos seguintes servem para ilustrar em maiores detalhes os diversos aspectos da invenção, mas não devem ser considerados como limitativos da mesma.
Exemplo 1 Foi avaliado o efeito inibidor da bactéria de ácido láctico produtora de H2O2 (componente A), bactéria de ácido láctico que utiliza arginina (componente B), e da combinação de duas cepas, especificamente na proporção de 1:1 (combinação AB), em relação ao crescimento de bactéria potencialmente patogênica.
Resumidamente, a cultura da bactéria de ácido láctico a ser testada foi primeiro ajustada em um pH neutro, pelo fato de que um pH ací-dico, por si só, inibe o crescimento bacteriano. A suspensão foi submetida à filtração estéril e o filtrado foi usado para impregnar um número de discos de papel absorvente (30 μΙ de filtrado por disco). Os discos foram colocados sobre uma placa de meio de crescimento seletivo que foi inoculado com 0,1 ml de Gardnerella vaginalis (uma cepa que provoca vaginose e que foi isolada em laboratório) junto com um disco de controle, que foi impregnado apenas com 30 μΙ de água destilada. Após incubação por 24 horas a 37°C, a inibição do crescimento dos patógenos foi avaliada mediante medição do diâmetro do halo em volta do disco em milímetros.
Foi realizada uma segunda série de testes com Streptococcus mutans como patógeno alvo, essa espécie sendo o agente causador de placas dentárias e cáries. A caracterização da bactéria como produtora de H202 foi feita por meio de uma reação clássica de benzidina peroxidase, que revela as colônias de bactérias produtoras de H2O2 através de uma coloração azul. A atividade da arginina desidrolase foi determinada para avaliar a capacidade da bactéria de ácido láctico de utilizar arginina (M.C. Manca de Nadra, Milchwissenschaft, 37 (1982), páginas 669-670). A bactéria de ácido láctico foi obtida da American Type Collecti-on (ATCC), Rockville, USA.
Exemplo 2 Foram preparados comprimidos para chupar com a seguinte composição unitária: Esses comprimidos foram administrados em quatro voluntários, que foram avisados para não limpar os dentes ou utilizar goma de mascar na semana anterior. As pessoas tomaram esses comprimidos durante um dia por uma semana, após as refeições, deixando os comprimidos se dissolverem na boca. As avaliações clínicas foram realizadas quanto ao índice de placa dentária e quanto ao índice de placa gengival.
Para a placa dentária o seguinte sistema de avaliação foi usado em seis dentes (primeiro molar superior à direita; inciso superior central à esquerda; primeiro premolar superior à esquerda; primeiro molar inferior à esquerda; inciso inferior central à direita; primeiro premolar inferior à direita): 0 - absolutamente nenhuma placa 1 - nenhuma placa visível 2 - placa visível 3 - diversas placas óbvias O seguinte sistema de avaliação foi adotado para avaliar a placa gengival, usando a margem dos seis dentes mencionados acima: 0 - nenhuma inflamação 1 - pequena inflamação 2 - inflamação moderada, com sangramento ao ser contatada 3 - inflamação acentuada, com tendência de sangramento espontâneo.
Os dados combinados obtidos para os seis dentes dos quatro voluntários, foram como segue: Pessoa índice de placa dental índice de placa gengival 0 7 dias 0 7 dias N°. 1 8 2 7 1 N°. 2 9 3 10 3 N°. 3 15 5 6 2 N°. 4 15 7 8 3 Exemplo 3 Quatro pessoas com um diagnóstico clínico e histológico de úlceras de aftas recidivas foram tratados durante dez dias com seis comprimidos de chupar por dia, cuja composição é fornecida no Exemplo 2.
Todos os pacientes tratados mostraram uma cura completa das úlceras ao final do décimo dia e nenhum deles teve novas úlceras durante o mês seguinte.
Para aperfeiçoar o sabor e o aspecto da combinação bacteriana AB, adequados agentes de coloração e adoçantes, tal como sacarina, óleo de hortelã e xilitol podem ser adicionados, como é usual e bem conhecido para os versados na técnica. A combinação AB pode ser administrada na forma de péletes, balas, goma de mascar, cápsulas de gelatina, cremes dentais e géis, pós de dentaduras, agentes de lavagem de boca, dentifrícios, comprimidos, pessá-rios, supositórios, sprays, suspensões e microenemas.
Exemplo 4 O glicerol foi adicionado ao fosfato de cálcio diidratado, que foi moído e passado através de uma peneira de malha 50. A mistura foi deixada se submeter à hidratação, proporcionando uma pasta homogênea densa. O aromatizante (1% de óleo de hortelã) foi adicionado nesse ponto. A carboximetilcelulose de sódio foi hidratada em água durante a noite (concentração de 4,6% em água purificada). A solução de sacarina de sódio foi adicionada ao gel espesso resultante. O gel de polímero foi derramado em uma massa já contendo o fosfato de cálcio que já havia sido hidratado com glicerol e os componentes foram vigorosamente misturados.
Uma solução de aproximadamente 28% de sulfato de lauril sódio em água purificada, foi preparada separadamente. A solução de sulfato de lauril sódio foi depois adicionada à pasta de fosfato de dicálcio espessa. A pasta homogênea espessa resultante, que apresenta boas propriedades reológicas, foi misturada por poucos minutos e depois refinada mediante passagem da mesma através de um refinador com rolos. Isso pro- porcionou uma pasta homogênea na forma de neve, com um agradável aroma de hortelã. 38,5 g da bactéria de ácido láctico liofilizada (L salivarius + L. brevis, 1:1; 1010 CFU/g) foram passados através de uma peneira de malha 50 e adicionados em pequenas porções ao restante (770 g) da pasta de dente básica acima. A pasta homogênea resultante apresentou uma cor ligeiramente marrom claro e um odor de hortelã.
Exemplo 5 Preoaracão de Comprimidos Vaqinais de Liberação Rápida Comprimidos vaginais revestidos com uma camada efervescente foram preparados por granulação a úmido. Os comprimidos pesavam 2100 mg cada um e continham 100 mg da combinação de bactéria de ácido láctico como substância ativa.
Cada comprimido vaginal apresentava a seguinte composição: REIVINDICAÇÕES
Claims (17)
1. Composição de bactéria de ácido láctico, caracterizada pelo fato de que compreende: (a) um primeiro componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico produtora de H2O2; e (b) um segundo componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico que utiliza arginina, em que o componente (a) é selecionado do grupo consistindo em cepas das espécies Lactobacillus crispatus, Lactobacil-lus salivarius e Lactobacillus casei, e o componente (b) é a cepa Lactobacillus brevis CD2, depositada no DSM -Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Alemanha, em 6 de fevereiro de 1998, com protocolo de acesso No. DSM 11988 conforme o Tratado de Budapest; e veículo farmaceuticamente aceitável.
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a proporção do número de bactérias no componente (a) em relação ao número de bactérias no componente (b) é de 1:100 a 100:1.
3. Composição de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que a dita proporção é de 1:5 a 5:1.
4. Composição de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a dita proporção é de 1:1.
5. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que em unidades de dosagem unitária compreendendo de 1 x 102 a 5 x 1011 bactérias do componente (a) e de 1 x 102 a 5 x 1011 bactérias do componente (b).
6. Composição de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que compreende 1 x 109 bactérias do componente (a) e 3 x 109 bactérias do componente (b).
7. Composição de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizada pelo fato de que está na forma de comprimidos, comprimidos de chu- par, balas, goma de mascar, cápsulas de gelatina, pessários, supositórios e microenemas.
8. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que está na forma de comprimidos, cremes dentais e géis, pós de dentaduras, agentes de lavagem de boca, dentifrícios, sprays, suspensões e pomadas.
9. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que compreende ainda vitaminas, bases de amônio quaternário, sais minerais, antioxidantes e agentes antiplaca.
10. Uso de uma combinação de bactéria de ácido láctico, compreendendo: (a) um primeiro componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico produtora de H2O2; e (b) um segundo componente consistindo em pelo menos uma cepa de bactéria de ácido láctico que utiliza arginina, em que 0 componente (a) é selecionado do grupo consistindo em cepas das espécies Lactobacillus crispatus, Lactobacil-lus salivarius e Lactobacillus casei, e o componente (b) é a cepa Lactobacillus brevis CD2, depositada no DSM -Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Alemanha, em 6 de fevereiro de 1998, com protocolo de acesso No. DSM 11988 conforme 0 Tratado de Budapest, o referido uso sendo caracterizado pelo fato de ser para produção de um suplemento alimentar, um produto de higiene ou uma preparação farmacêutica com atividade inibitória no crescimento dos patógenos para prevenção e/ou tratamento de infecções e condições inflamatórias provocadas por bactérias, vírus ou fungos, especialmente na boca, vagina, uretra, nariz, olhos e ouvidos.
11. Uso de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que as infecções e condições inflamatórias incluem gengivite, perio-dontite, mucosite e estomatite, provocadas por drogas e/ou agentes físicos, síndrome de Behcet, diaceratose da cavidade oral, glossite, feridas de garganta, sialadenite, sialolitiase, pênfigo, Lichen planus, síndrome de Sjõgren, vaginose, vaginite, uretrite, prostatite, protite, otite, conjuntivite, rinite, sinusi-te, leucoplaquia, aftas, herpes e infecções causadas por Helicobacter pilori na cavidade oral.
12. Uso de acordo com a reivindicação 10 ou 11, caracterizado pelo fato de ser para o tratamento da cavidade oral como um agente antiin-flamatório, anticárie e/ou antiplaca.
13. Uso de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de ser para o tratamento da cavidade oral como um desodorante.
14. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o componente (a) é Lactobacillus crispatus.
15. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o componente (a) é Lactobacillus salivarius.
16. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o componente (a) é Lactobacillus salivarius e o componente (b) ainda compreende o Lactobacillus fermentum.
17. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 16, caracterizada pelo fato de que a proporção do número de bactérias no componente (a) em relação ao número de bactérias do componente (b) é de 1:1.
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