CZ293163B6 - Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu - Google Patents
Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ293163B6 CZ293163B6 CZ19952057A CZ205795A CZ293163B6 CZ 293163 B6 CZ293163 B6 CZ 293163B6 CZ 19952057 A CZ19952057 A CZ 19952057A CZ 205795 A CZ205795 A CZ 205795A CZ 293163 B6 CZ293163 B6 CZ 293163B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- amylase
- alpha
- gly
- mutant
- leu
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2411—Amylases
- C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
- C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
- C12N15/75—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for Bacillus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Treatments For Attaching Organic Compounds To Fibrous Goods (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Bakery Products And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Mutanta alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzoru alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+15 nebo M+197 v alfa-amyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina, použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gln nebo Glu. Popsáno je rovněž použití uvedené mutanty, kódová DNA pro tuto mutantu, příslušný vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu s obsahem uvedené mutanty.ŕ
Description
Oblast techniky
Vynález se týká nové mutanty alfa-amylázy s řetězcem aminokyselin, který je odlišný od přírodního řetězce. V řetězci této alfa-amylázy jsou některé aminokyseliny nahrazeny jinými aminokyselinami, zvláště jsou nahrazeny oxidovatelné aminokyseliny, takže alfa-amyláza je stálá proti oxidaci. Vynález se rovněž týká kódové DNA pro tuto mutantu, vektoru s jejím obsahem, hostitelských buněk, čisticího prostředku a také prostředku, kteiý mutantu obsahuje a je vhodný pro rozklad škrobu.
Dosavadní stav techniky
Alfa-amyláza (alfa-l,4-glukan^l-glukanhydroláza, EC3.2.1) hydrolyzuje vnitřní alfa-1,4glukosidové vazby ve škrobu převážně náhodným způsobem za vzniku maltodextrinu s nižší molekulovou hmotností. Alfa-amylázy jsou komerčně důležité enzymy, které se používají v počátečních stupních zpracování škrobu, při výrobě alkoholu, jako čisticí složky ve smáčecích a v textilním průmyslu. Alfa-amylázy jsou produkovány širokou škálou mikroorganismů včetně čeledi Bacillus a Aspergillus, přičemž většina běžných amyláz je produkována bakteriemi, jako B. licheniformis, B. amyloliquefaciens, B. subtillis nebo B. stearothermophylus. V posledních létech byly výhodné enzymy pro komerční využití získávány z B. licheniformis vzhledem ke své tepelné stálosti a ke své účinnosti, zvláště při neutrálním a mírně alkalickém pH.
Již dříve byly prokázány pokusy použít rekombinantní techniky DNA ke zjištění, které ze zbytků aminokyselin jsou důležité pro katalytickou účinnost amyláz a/nebo ke zjištění vlivu modifikace některých aminokyselin v různých amylázách, jak bylo popsáno v publikacích Vihinen M. a další, 1990, J. Biochem., 107:267-272, Holm L. a další, 1990, Protein Engineering 3:181-191, Takase K. a další, 1992, Biochemical et Biophysica Acta, 1120-281-288, Matsui I. a další, 1992, Febs Letters, sv. 310, č. 3, str. 216-218, další zkoušky byly zaměřeny na to, které zbytky jsou důležité pro tepelnou stálost enzymu (Suzuki Y. a další, 1989, J. Biol. Chem., 264:18933-18938. V jedné skupině pokusů byly zaváděny mutace v místě různých histidinových zbytků v amyláze B. Licheniformis vzhledem k tomu, že bylo známo, že tato amyláza je tepelně stálejší ve srovnání s jinými amylázami čeledi Bacillus, přičemž obsahuje větší počet těchto histidinových zbytků. Z tohoto důvodu se předpokládalo, že náhradou histidinových zbytků by bylo možno ovlivnit tepelnou stálost enzymů (Declerck N. a další, 1990, J. Biol. Chem., 265:15481-15488, RF 2 665 178 Al a Joyet P. a další, 1992, Bio/Technology, 10:1579-1583.
Bylo prokázáno, že alfa-amyláza je inaktivována peroxidem vodíku a dalšími oxidačními činidly při pH v rozmezí 4 a 10,5, jak bude dále popsáno v příkladové části. Při komerčním využití mohou být alfa-amylázy používány za velmi různých podmínek při vysokém i nízkém pH v závislosti na účelu použití. Tyto enzymy mohou být například použity pro zkapalnění škrobu, tento postup se obvykle s výhodou provádí při nízkém pH, s výhodou nižším než 5,5. Na druhé straně je možno tyto enzymy využít v prostředcích na mytí nádobí nebo v pracích prostředcích, které často obsahují oxidační činidla, například látky pro bělení nebo perkyseliny, které se využívají v daleko alkaličtějším prostředí.
Aby bylo možno měnit profil stálosti nebo účinnosti amyláz za různých podmínek bylo zjištěno, že při selektivní náhradě, substituci nebo vypuštění oxidovatelných aminokyselin, jako methioninu, tryptophanu, tyrosinu, histidinu nebo cisteinu je možno dosáhnout varianty enzymu s poněkud odlišnými vlastnostmi ve srovnání s původním enzymem. Vzhledem k tomu, že běžné komerčně dostupné amylázy jsou za určitých podmínek nestálé, bylo by zapotřebí amylázy s pozměněnou stálostí a/nebo účinností. Tato pozměněná stálost v přítomnosti oxidačních činidel,
-1 CZ 293163 B6 za tepla nebo při odlišném pH může být dosaženo při zachování enzymatické účinnosti ve srovnání s přírodním nebo původním enzymem. Pozměněnou vlastností v důsledku těchto mutací může být změna stálostí proti oxidaci za udržení stálosti za tepla nebo obráceně. Mimoto může být dosaženo náhradou různých aminokyselin za oxidovatelné aminokyseliny nebo vypuštěním jedné nebo většího počtu oxidovatelných aminokyselin změny enzymatické účinnosti při pH, které je odlišné od optimálního pH pro původní enzym. Jinak vyjádřeno, může mít mutovaný enzym také změněnou účinnost při určitém pH, což může přispět k oxidativní stálosti enzymu.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří mutanta alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzorů alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+15 nebo M+197 v alfa-amyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu. V jednom z výhodných provedení vynálezu vzniká mutanta náhradou jednoho nebo většího počtu methioninových zbytků v původní alfa-amyláze jiným zbytky aminokyselin.
V dalším možném provedení obsahuje mutanta substituci jednoho nebo většího počtu tryptofanových zbytků, popřípadě v kombinaci se substitucí jednoho nebo většího počtu methioninových zbytků v původní alfa-amyláze. Obecně je takovou mutantu možno získat in vitro modifikací řetězce DNA pro původní enzym, kterým může být přírodní nebo rekombinantní enzym, takže při použití pozměněného kódového řetězce dochází k náhradě nebo vypuštění jednoho nebo většího počtu zbytků aminokyselin v původním řetězci enzymu.
K substituci nebo vypuštění jedné nebo většího počtu aminokyselin s výhodou dochází v místě zbytků methioninu, tryptofanu, cysteinu, histidinu nebo tyrosinu v původním řetězci, nejvýhodněji jsou nahrazeny methioninové zbytky.
V případě, že se požaduje zvýšená stálost proti oxidaci, je možno k náhradě použít zbytek neoxidovatelné aminokyseliny, jako alaninu, argininu, glycinu, kyseliny sparagové, lysinu, fenylalaninu, prolinu, threoninu nebo valinu nebo jiný zbytek oxidovatelné aminokyseliny, jako cysteinu, methioninu, tryptofanu, tyrosinu nebo histidinu, přičemž tyto aminokyseliny jsou uvedeny od nejsnadněji oxidovatelné k hůře oxidovatelným kyselinám. V případě, že má být změněna stálost za teplaje možno nahradit jakýkoliv z dalších dvaceti přírodně se vyskytujících zbytků, je například možno nahradit cystein methioninem.
Výhodné mutanty zahrnují substituci methioninového zbytku, který odpovídá jakémukoliv zbytku této aminokyseliny v alfa-amyláze B. licheniformis (+8,+15,+197,+256,+304,+366 a+438). Nejvýhodnějším methioninovým zbytkem pro náhradu je zbytek v poloze +197 nebo +15 v tomto enzymu. Výhodným zbytkem pro náhradu methioninu v poloze +197 je alanin A, threoninT nebo cystein C. Výhodným zbytkem pro náhradu methioninu v poloze +15 je threonin T, sůl kyseliny aspargové D, valin V, i když je možno využít i další zbytky aminokyselin. výhodnými mutantami jsou M197T a M15L.
Vynález se rovněž týká mutant, v nichž je nahrazen některý z tryptofanových zbytků v alfa-amyláze B. licheniformis, jak je zřejmé z obr. 2. Výhodným nahrazením tryptofanovým zbytkem je zbytek v poloze +138 tohoto enzymu. Náhradu zbytku tryptofanu je možno uskutečnit jako takovou nebo v kombinaci s náhradou jiných oxidovatelných zbytků aminokyselin. Zvláště může být výhodné nahradit alespoň jeden zbytek tryptofanu a alespoň jeden zbytek methioninu, může jít o dvojnásobnou mutantu v polohách +138 a +197.
Mutanty alfa-amylázy podle vynálezu mají obvykle pozměněnou oxidativní stálost v přítomnosti peroxidu vodíku a dalších oxidačních činidel, jako jsou bělicí prostředky nebo perkyseliny a také mírnější oxidační činidla, jako chlormain T. Mutované enzymy se zvýšenou stálostí proti oxidaci
-2CZ 293163 B6 budou mít delší životnost při skladování a bude možno je lépe využít spolu s bělícími prostředky, perboritany, peruhličitany nebo perkyselinami v čisticích prostředcích. Podobně může být tato vlastnost využita obráceně při průmyslových postupech, v nichž je zapotřebí rychle dosáhnout vymizení enzymatického účinku. U mutovaných enzymů podle vynálezu může také být dosaženo účinnosti v širším rozmezí pH, přičemž některé mutanty, jako M15L jsou stálé při nízkém pH při zkapalnění škrobu a jiné mutanty, jako M197T jsou stálé při vyšším pH, běžném v čisticích prostředcích.
Mutanty podle vynálezu mohou také mít změněnou stálost za tepla, přičemž může jít o stálost při vysokých i nízkých teplotách. Je zřejmé, že jakékoliv změna vlastností mutant ve smyslu zvýšení nebo snížení oproti původnímu enzymu může být žádoucí vzhledem ke konečnému využití mutanty.
Kromě zpracování škrobu a použití při čištění je možno použít amylázy podle vynálezu k jakémukoliv obvyklému účelu, například v textilním a potravinářském průmyslu a podobně. Některé varianty enzymů, například mutanta M197C, které jsou snadno inaktivovány oxidací by mohly být využity při postupech, při nichž je žádoucí zcela odstranit účinnost amylázy na konci postupu, jak tomu je při výrobě zmrazených potravin.
Výhodné mutanty alfa-amyláz podle vynálezu je možno odvodit od některých kmenů čeledi Bacillus, například B. licheniformis, B. amyloliquefaciens a B. stearothermophilus a zvláště Bacillus licheniformis.
Vynález se týká rovněž nové formy alfa-amylázy, běžně produkované B. licheniformis. Tato nová forma, označovaná jako A4 obsahuje čtyři přídatné alaninové zbytky na N-zakončení, jak je zřejmé z obr. 4b. Deriváty mutanty A4 rovněž spadají do rozsahu vynálezu. Derivátem formy A4 je taková forma alfa-amylázy A4, která obsahuje ještě jednu nebo větší počet dalších mutací, jako substituce, náhrada nebo vypuštění jedné nebo většího počtu oxidovatelných aminokyselin.
Vynález se rovněž týká smáčedel ve formě kapaliny, gelu nebo granulátu s obsahem svrchu uvedených mutant alfa-amylázy. Zvláště výhodná jsou smáčedla, obsahující mutantu v poloze +197 jako takovou, popřípadě v kombinaci s dalšími enzymy, jako jsou endoglykosidázy, celulázy, proteázy, lipázy nebo jiné amylázy. Mimoto mohou tyto prostředky podle vynálezu obsahovat mutanty alfa-amylázy s více než jednou specifickou mutací v řetězci.
Vynález se týká také prostředků, využitelných při zpracování škrobu, zvláště při jeho zkapalnění. Tyto prostředky podle vynálezu s výhodou obsahují mutanty alfa-amylázy se substitucí nebo vypuštěním zbytků v poloze Ml 5. Mimoto mohou tyto prostředky obsahovat ještě další složky známého typu, jako antioxidační činidla, vápník, ionty a podobně.
Vynález se rovněž týká způsobu použití popsané alfa-amylázy pro zkapalnění škrobu, zvláště suspenzí granulovaného škrobu, pocházejícího z mletí za vlhka nebo za sucha. V prvním stupni degradace škrobu se suspenze škrobu obvykle gelatinizuje působením tepla při poměrně vysoké teplotě až 110°C. Pak dochází ke zkapalnění škrobu a dextrinizaci při použití alfa-amyláz. Podmínky zkapalnění již byly popsány v patentových přihláškách US 07 785 624 a 07 785 623 a také v patentovém spisu US 5 180 669. Obvykle se postupuje tak, že se
a) k suspenzi granulovaného škrobu přidá účinné množství mutanty alfa-amylázy,
b) popřípadě se k suspenzi přidá účinné množství antioxidačního činidla a
c) suspenze se nechá reagovat do zkapalnění škrobu.
Vynález se rovněž týká kódové DNA pro mutantu alfa-amylázy podle vynálezu včetně formy A4 a jejich mutant a vektoru pro expresi s obsahem této DNA, jakož i hostitelských buněk, transformovaných takovým vektorem.
-3CZ 293163 B6
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 je znázorněn řetězec DNA genu pro alfa-amylázu zB. licheniformis (NCIB8061), řetězec č. 31 a také řetězec odvozeného produktu translace, tak jak byl popsán v publikaci Gray G. a další, 1986, J. Bacter., 166:635-643.
Na obr. 2 je znázorněn řetězec aminokyselin úplného enzymu alfa-amylázy z B. licheniformis (NCIB8061), jde o řetězec č. 32.
Na obr. 3 je znázorněno srovnání primárních struktur alfa-amyláz z čeledi Bacillus. Amyláza B. licheniformis (Am-lich.), řetězec č. 33, byla popsána v Gray G. a další, 1986, J. Bact., 166:635-643, amyláza z B. amyloliquefaciens (Am-amylo), řetězec č. 34, byla popsána vTakkinen K. a další, 1983, J. Biol. Chem. 258:1007-1013 a amyláza zB. stearothermophilus (Am-stearo), řetězec č. 35, byla popsána v Ihara H. a další, 1985, J. Biochem. 98:96-103.
Na obr. 4a je znázorněn řetězec aminokyselin úplné varianty alfa-amylázy M197Tm řetězec č. 36.
Na obr. 4b je znázorněn řetězec aminokyselin pro formu A4 alfa-amylázy z B. licheniformis NCIB8061, řetězec č. 37, číslování od N-zakončení, počínaje čtyřmi přídatnými zbytky alaninu.
Na obr. 5 je znázorněn plazmid pA4BL, kde BLAA znamená gen pro alfa-amylázu z B. licheniformis, Pstl až Sstl, AmpR znamená gen pro odolnost proti ampicilinu z plazmidu pBR322 a CAT znamená gen pro odolnost proti chloramfenikolu z pC194.
Na obr. 6 je znázorněno spojení signálního řetězce a úplné bílkoviny pro B. lichenisormis v pA4BL (řetězec č. 40) a B. licheniformis v pBLapr (řetězec č. 41).
Na obr. 7a je znázorněna inaktivace některých alfa-amyláz, jako SpezymeRAA20 a M197L (forma A4) působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 5,0 a 25 °C.
Na obr. 7b je znázorněna inaktivace alfa-amyláz SpezymeR AA20, M197L působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 10,0 a 25 °C.
Na obr. 7c je znázorněna inaktivace některých alfa-amyláz, SpezymeR AA20, M15L působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 5,0 a 25 °C.
Na obr. 8 je schematicky znázorněna produkce kazety pro mutantu M197X.
Na obr. 9 j e znázorněna exprese varianty Μ197X.
Na obr. 10 je znázorněna tepelná stálost varianty M197X při pH 5,0 v přítomnosti 5 mM CaCl2 při teplotě 95 °C po dobu 5 minut.
Na obr. 11a a 11b je znázorněna inaktivace některých amyláz ve smáčedle stálost v prostředku CascadeR, běžně dodávaném produktu při teplotě 65 °C v přítomnosti nebo nepřítomnosti škrobu, na obr. 11b jde o stálost prostředku SunlightR, který se běžně dodává, při teplotě 65 °C v přítomnosti nebo nepřítomnosti škrobu.
Na obr. 12 je schematicky znázorněna produkce kazety pro mutantu Μ15X.
Na obr. 13 je znázorněna exprese varianty Ml 5X.
Na obr. 14 je znázorněna specifická účinnost varianty M15X na rozpustný škrob.
-4CZ 293163 B6
Na obr. 15 je znázorněna tepelná stálost varianty M15X při teplotě 90 °C a pH 5,0 v přítomnosti 5 mM CaCl2 po dobu 5 minut.
Na obr. 16 je znázorněna specifická účinnost na škrob a rozpustný substrát při pH 5,5 pro varianty Ml5 jako funkce účinnosti přírodního enzymu z B. licheniformis v procentech.
Na obr. 17 je znázorněna inaktivace alfa-amylázy AA20 z B. licheniformis v množství 0,65 mg/ml působením chloraminu-T při pH 8,0 ve srovnání s variantou M197A (1,7 mg/ml) a variantou M197L (1,7 mg/ml).
Na obr. 18 je znázorněna inaktivace alfa-amylázy AA20 z B. licheniformis (0,22 mg/ml) působením chloraminu-T při pH 4,0 ve srovnání s variantou M197A (4,3 mg/ml) a M197L (0,53 mg/ml).
Na obr. 19 je znázorněna reakce alfa-amylázy AA20 z B. licheniformis (0,75 mg/ml) působením chloraminu-T při pH 5,0 ve srovnání s dvojnásobnými variantami M197T/W138F (0,64 mg/ml) a M197T/W138Y (0,80 mg/ml).
Amylázy, použité při zkapalnění škrobu mohou patrně podléhat inaktivaci působením určitých složek v suspenzi škrobu, jak již bylo uvedeno v patentových přihláškách US 07 785 624 a 07 785 623 a v patentovém spisu US 5 180 669 z 19. ledna 1993. Mimoto může při použití amylázy ve smáčedlech s obsahem oxidačních činidel, jako bělicích prostředků nebo perkyselin dojít k částečné nebo úplné inaktivaci amylázy. vynález je proto zaměřen na změnu citlivosti amyláz na oxidaci. Mutované enzymy podle vynálezu mohou také mít změněnou účinnost při různém pH a/nebo změněnou stálost při určitých teplotách, což může souviset se zvýšenou oxidativní stálostí enzymu při nízkém nebo vysokém pH.
Použitá alfa-amyláza zahrnuje přírodně se vyskytující i rekombinantní amylázy. Výhodnými amylázami jsou enzymy, odvozené od B. licheniformis nebo B. stearothermophilus včetně formy A4 alfa-amylázy z B. licheniformis, může však jít také o alfa-amylázy z hub, například z čeledi Aspergillus, jako A. oryzae a A. niger.
Rekombinantní alfa-amyláza je enzym, v němž byl kódový řetězec DNA pro přírodní alfa-amylázu modifikován za vzniku mutované DNA, která v kódovém řetězci zahrnuje substituci, přidání nebo vypuštění jedné nebo většího počtu aminokyselin v řetězci enzymu. Vhodné postupy pro modifikaci budou dále uvedeny a jsou také známy z patentových spisů US 4 760 025 a 5 185 258.
Mezi řetězci téměř všech endoamyláz, u nichž byl až dosud řetězec analyzován, byly nalezeny homologie, přičemž šlo o řetězce enzymů rostlin, savců a bakterií podle Nakajima R. T. a další,
1986, Appl. Microbiol. Biotechnol., 23:355-360, Rogers J. C., 1985, Biochem. Biophys. Res. Commun., 128:470-476. Jak je zřejmé z obr. 3, existují čtyři oblasti zvláště vysoké homologie u určitých amyláz čeledi Bacillus, tyto oblasti jsou v řetězcích podrženy. Mimoto byly analyzovány i vztahy mezi endoamylázami z čeledi Bacillus podle Feng D. F. a Boolittle R. F.,
1987, J. Molec. Evol., 35:351-360. Relativní homologie řetězce mezi B. stearothermophilus aamylázou B licheniformis je přibližně 66% podle publikace Holm L. a další, 1990, Protein Engineering, 3(3), str. 181-191. Homologie řetězce amyláz B. licheniformis aB. amyloliquefaciens je přibližně 81 % podle téže publikace. I když je homologie řetězce důležitá, uznává se obecně, že homologie struktury je při srovnání amyláz i jiných enzymů rovněž důležitý. Předpokládá se například strukturní homologie mezi amylázami hub a amylázami bakterií (Bacillus), takže amylázy hub jsou v rozsahu vynálezu rovněž zahrnuty.
Mutanta alfa-amylázy má řetězec aminokyselin, který je odvozen od řetězce známé amylázy. Tato známá amyláza zahrnuje přírodně se vyskytující i rekombinantní enzymy, jak již bylo
-5CZ 293163 B6 uvedeno. Řetězec mutanty je odvozen od původního řetězce substitucí, vypuštěním nebo přidáním jedné nebo většího počtu aminokyselin. Tyto modifikace se provádějí spíše v kódovém řetězci DNA než ve vlastním řetězci enzymu. Vhodné postupy pro modifikaci kódové DNA budou dále uvedeny a jsou popsány také v patentových spisech US 4 760 025 a 5 185 258.
Pro substituci nebo deleci jsou vhodné specifické zbytky v polohách M197, M15 a W138 amylázy Bacillus licheniformis, jde o polohy, v nichž se nacházejí zbytky methioninu, histidinu, tryptofanu, cysteinu a tyrosinu. Poloha aminokyseliny (+197) odpovídá poloze v úplném řetězci, znázorněném na obr. 2. vynález však není omezen na mutace této specifické alfa-amylázy, avšak zahrnuje také mutace v dalších amylázách, které obsahují zbytky aminokyselin v polohách, ekvivalentních zbytkům v alfa-amyláze B. licheniformis. Zbytek aminokyseliny v původní alfa-amyláze je ekvivalentní zbytku v amyláze B. licheniformis v tom případě, že je homologní (to znamená odpovídající poloze v primární nebo terciární struktuře) nebo je analogický specifickému zbytku nebo části v uvedeném enzymu (to znamená, že má tutéž nebo podobnou funkční schopnost chemické nebo strukturní reakce nebo interakce).
Aby bylo možno stanovit homologii k primární struktuře, srovnává se řetězec aminokyselin určité alfa-amylázy přímo s primárním řetězcem alfa-amylázy z B. licheniformis, zvláště pokud jde o zbytky, o nichž je známo, že jsou neměnné pro všechny alfa-amylázy se známým řetězcem, jak je zřejmé z obr. 3. Je také možno stanovit ekvivalentní zbytky v terciární struktuře. Byla již uvedena krystalová struktura pro pankreatickou alfa-amylázu vepře v publikaci Buisson G. A další, 1987, EMBO J., 6:3909-3916, Taka-amylázy A z Aspergillus oryzae podle Matsuura Y. a další, 1984, J. Biochem., (Tokyo), 95:697-702 a kyselé alfa-amylázy z A. niger podle Boel E. a další, 1990, Biochemistry, 29:6244-6249, přičemž první dvě z uvedených struktur jsou si podobné. Prozatím neexistují publikované struktury alfa-amyláz čeledi Bacillus, přestože se uvádí, že jde pravděpodobně o běžné supersekundámí struktury glukanáz podle MacGregor E. A. a Svensson B., 1989, Biochem. J., 259:145-152, struktura pro enzym B. stearothermophilus byla modelována podle struktury pro Taka-amylázu A podle Holm L. a další, 1990, Protein Engineering 3:181-191. Čtyři vysoce konzervované oblasti, znázornění na obr. 3 obsahují řadu zbytků, které jsou pravděpodobně součástí účinného místa podle Matsuura Y. a další, 1984,
J. Biochem., (Tokyo), 95:697-702, Buisson G. a další, 1987, EMBO J., 6:3909-3916, Vihinen M. a další, 1990, J. Biochem., 107:267 až 272, jde podle číslování v B. lichenoformis o zbytky včetně Hisl05, Arg229, Asp231, His235, Glu261 a Asp328.
Vektor pro expresi je konstrukce, která obsahuje řetězec DNA, operativně vázaný na vhodné řídicí řetězce, schopné zajistit expresi uložené DNA ve vhodném hostiteli. Tyto řídicí řetězce mohou zahrnovat promotor pro transkripci, popřípadě operátor pro řízení této transkripce, kódový řetězec pro vhodné místo vazby mRNA na ribosom a řetězce, které řídí ukončení transkripce a translace. Výhodným promotorem je promotor aprE z B. subtillis. Vektorem může být plazmid, část fágu nebo jednoduše potenciální část, vhodná pro uložení do genomu. Po transformaci ve vhodném hostiteli může dojít k replikaci vektoru a kjeho funkci nezávisle na genomu hostitele nebo může dojít k integraci do genomu. V průběhu přihlášky jsou pojmy plazmid a vektor někdy užity střídavě vzhledem k tomu, že v současné době je plazmid nejběžnější užívanou formou vektoru. Vynález však zahrnuje i použití jiných forem vektorů, jejichž funkce je ekvivalentní a které jsou v oboru známé.
Hostitelské kmeny nebo buňky, použitelné podle vynálezu jsou prokaryotické nebo eukaryotické a zahrnují transformovatelné mikroorganismy, u nichž je možno dosáhnout exprese alfa-amylázy. Specificky jsou vhodné kmeny určitých rodů nebo čeledí, jako Bacillus. S výhodou se užije kmenů Bacillus, negativních z hlediska produkce alfa-amylázy (gen byl odstraněn a/nebo kmenů, z nichž byl odstraněn gen pro alfa-amylázu i proteázu, například Bacillus subtilis BG2473 (deltaamyE, delta apr.deltanpr). Transformace nebo transfekce rekombinantním vektorem vede ke schopnosti transformovaných hostitelských buněk replikovat vektor, obsahující kód pro alfa-amylázu nebo její mutanty nebo vzniká schopnost exprese požadované alfa-amylázy.
-6CZ 293163 B6
Mutanty enzymu podle vynálezu jsou v průběhu fermentace s výhodou vylučovány do živného prostředí. K. dosažení této sekrece je možno použít jakýkoliv vhodný signální řetězec, například signální peptid aprE.
Řada mutant alfa-amylázy podle vynálezu je použitelná jako složka čisticích prostředků, zvláště prostředků pro mytí nádobí a zejména těch, které obsahují známé oxidační látky. Mutanty alfa-amyláz podle vynálezu je možno použít v práškových, kapalných nebo gelových čisticích prostředcích známých typů o pH 6,5 až 12,0. Je také možno připravit granuláty například podle patentových přihlášek US 07 429 881, 07 533 721 a 07 957 973. Tyto čisticí prostředky mohou ještě obsahovat další enzymy, jako známé proteázy, lipázy, celulázy, endoglykosidázy nebo další amylázy a také další pomocné látky, stabilizátory a podobně, tak jak jsou v oboru známé. Tyto enzymy mohou být přítomny jako složka granulátů nebo jiných směsí běžným způsobem. Mimoto je možno použít k uvedeným nebo dalším účelům větší počet mutant současně, například mutovaný enzym se změnami v poloze +15 a +197 může mít zvýšený účinek v čisticím prostředku, stejně je možno použít také mutanty se změnou v polohách +197 a +138.
Jak již bylo svrchu uvedeno, je možno použít mutanty alfa-amylázy podle vynálezu také při zkapalnění škrobu. Zkapalnění škrobu, zvláště granulovaného škrobu v suspenzi se typicky provádí při pH blízkém neutrální hodnoty při vyšších teplotách. Jak je popsáno v patentových přihláškách US 07 788 624 a 07 785 623 a v patentovém spisu US 5 180 669 je pravděpodobné, že při typickém postupu může být přítomno také oxidační činidlo nebo inaktivační činidlo, které může ovlivnit účinnost enzymu. Z tohoto důvodu je možno přidávat ještě antioxidační činidlo k ochraně enzymu. V závislosti na podmínkách při výhodném provedení postupu pro zkapalnění škrobu podle svrchu uvedených patentových přihlášek a patentového spisu, při němž se užívá zejména nízkého pH vysoké teploty a potenciálně oxidačních podmínek, jsou výhodnými mutantami podle vynálezu pro toto použití mutanty, které mají změněnou účinnost při použitém pH, to znamená účinnost při pH nižším než 6 a s výhodou nižším než 5,5 a/nebo se změněnou tepelnou stálostí, například při teplotě 90 až 110 °C a/nebo mutanty se zvýšenou stálostí pří oxidaci.
Vynález tedy navrhuje zlepšený způsob zkapalnění škrobu, při němž se k suspenzi granulovaného škrobu po mletí za vlhka za sucha při pH 4 až 6 přidává účinné množství mutanty alfaamylázy podle vynálezu a popřípadě ještě účinné množství antioxidačního činidla nebo jiné pomocné látky a suspenze se nechá reagovat při vhodné teplotě po dobu, dostatečnou pro zkapalnění škrobu.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu. Použité zkratky aminokyselin, složené ze tří písmen, nebo také tvořené jedním písmenem, jsou uvedeny podle Dále J. W., Molecular Genetics of Bacteria, John Wiley and Sons, (1991) Appendix B.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Substituce za methioninové zbytky v alfa-amyláze B. licheniformis
Gen pro alfa-amylázu, tak jak je znázorněn na obr. 1, byl klonován z B. licheniformis NCIB8061, který byl získán z veřejné sbírky kultur National Collection of Industrial Bacteria, Aberdeen, Skotsko (Gray G. a další, 1986, J. Bacteriology 166:635-643). Fragment 1,72 kb Pstl-SStl, který je kódem pro poslední tři zbytky signálního řetězce byl spolu s úplnou bílkovinou a oblastí terminátoru subklonován vM13MP18. Mezi místa Bell a Sstl byl přidán syntetický terminátor při použití syntetické oligonukleotidové kazety
-7CZ 293163 B6
Bell Sáti
5’ GATCAAAACATAAAAAACCGGCCTTGGCCCCGCCGGTTTTTTATTATTTTTGAGCT 3'
3' TTTTGTATTTTTTGGCCGGAACCGGGGCGGCCAAAAAATAATAAAAAC 5’ řetězec č. 1
Kazeta je konstruována tak, že obsahuje terminátor transkripce pro subtilisin B. amyloliquefaciens, popsaný v publikaci Wells a další, 1983, Nucleic Acid Research 11:7911-7925.
Při cílené tvorbě mutací působením oligonukleotidů bylo využito v podstatě postupu podle publikace Zoller M. a další, Meth. Enzymol. 100:468-500. Byly použity 5-fosforylované oligonukleotidové primery k zavedení požadovaných mutací do matrice M13 DNA s jednoduchým řetězcem, pro substituci každého ze sedmi methioninových zbytků v alfa-amyláze B-licheniformis byly použity nukleotidy uvedené v tabulce I. Každý mutagenní oligonukleotid složil rovněž k zavedení místa působení restrikční endonukleázy pro tuto mutaci.
Tabulka I
Mutagenní oligonukleotidy pro náhradu methioninových zbytků v alfa-amyláze B. licheniformis
MBA
5'-7 GGG ACG CTG CCG CAG TAC TTT GAA TGG T-3’
Sc&It řetězec
č. 2
M15L
5’-TG ATG CAG TAC TTT GAA TGG TAC CTG CCC AAT GA-3’
Scal-r
Kpnl+ řetězec
M197L
5* -GAT TAT TTG TTG TAT GCC GAT ATC GAC TAT GAC CAT-3’ fccoRV+ řetězec
M256A
5’-CG GGG AAG GAG CCC TTT ACG GTA GCT-3' řetězec
M304L
5’-GC GGC TAT GAC TTA AGG AAA TTG C-3*
AXI1I+ řetězec
M366A
5’—C TAC GGG GAT CCA TAC
NsiIt
GGG ACG Á-3' řetězec
M366Y
5*-C TAC GGG GAT TAC TAC
GGG ACC AAG GGA GAC TCC C-3’ StyT+ řetězec
M43BA * -CC GGT GGG GCC AAG CGG CCC TAT GTT GGC CGG CAA A-3 ’ áxil* řetězec
Tabulka uvádí základní změny, zavedené při použití oligonukleotidu.
Změny kodonů jsou uvedeny například u prvního nukleotidu jako M8A, což znamená, že methionin M v poloze +8 byl nahrazen alaninem A.
-8CZ 293163 B6
Podtržené úseky řetězce označují místo působení restrikční endonukleázy, zavedené oligonukleotidem.
K transfekci buněk E. coli mutL byl užit heteroduplex podle Kramer a další, 1984, Cell 38:879 a po čištění plaků byly získány klony analyzovány restrikční analýzou RF1. Pozitivní klony byly potvrzeny analýzou řetězce podle Sanger a další, 1977, Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 74:5463-5467 a fragmenty Pstl-Sstl pro každý subklonovaný řetězec byly dále klonovány ve vektoru E. coli, plazmidu pA4BL.
Plazmid pA4BL
Způsobem, popsaným v patentové přihlášce US 860 468 (Power a další), se zavede tiché místo Pstl v místě kodonu +1, což je první aminokyselina po místu odštěpení signálního řetězce v genu aprE z plazmidu pS168—1 (Stáhl M. L. a Ferrari E., 1984, J. Bacter., 158:411-418. Promotor aprE a oblast signálního peptidu pak byly klonovány při použití plazmidu pJHlOl (Ferrari F. A. a další, 1983, J. Bacter., 154:1513-1515) jako fragment HindlII-Pstl, subklonování bylo uskutečněno v plazmidu JMI02, odvozeném od plazmidu pUC18 (Ferrari E. a Hoch J. A., 1989, Bacillus, ed. C. R. Harwood, Plenům Pub., str. 57 až 72. Přidáním fragmentu Pstl-Sstl z alfa-amylázy B. Licheniformis vznikl plazmid pA4BL, znázorněný na obr. 5, který obsahuje výsledný spojení aprE signálního řetězce peptidu-amylázy, jak je znázorněno na obr. 6.
Transformace B. subtilis
Plazmid pA4BL je schopen replikace v E. coli a integrace do chromosomu B. sublitis. Plazmidy s obsahem různých variant byly užity k transformaci B. sublitis (Anagnostopoulos, C. a Spizizen J., 1961, J. Bacter, 81:741-746) a k integraci do chromosomu vmiste aprE při použití mechanismu Cambellova typu (Young M., 1984, J. Gen. Microbiol., 130:1613-1621). Bacillus sublitis, kmen BG2473 je derivát 1168 bez řetězce pro amylázu (daltaamyE) a bez řetězce pro dvě proteázy (deltaapr, deltanpr) podle publikace Stáhl M. L., a Ferrari E., J. Bacter., 158:411-418 a patentový spis US 5 264 366. Po transformaci byla mutace sacU32(Hy) podle publikace Henner D. J. a další, 1988, J. Bacter., 170:296-300 zavedena transdukcí, zprostředkovanou PBS-1 podle publikace Hoch J. A., 1983, 154, 1513-1515.
Analýza N-zakončení amylázy po expresi z pA4BL v B. sublitis prokázala, že je možno zjistit čtyři alaninové zbytky navíc na N-zakončení vylučované amylázy (forma A4). Tyto zbytky navíc neměly žádný významnější nežádoucí vliv na účinnost nebo na tepelnou stálost formy A4 a v některých případech mohou zvyšovat účinnost. V následujících pokusech byl získán z velmi podobné konstrukce na obr. 6 správný typ amylázy zB. licheniformis a také varianta M197T. Postup byl prováděn tak, že 5'-zakončení konstrukce A4 bylo subklonováno při použití fragmentu EcoRI-SstlI z plazmidu pA4BL, jak je znázorněn na obr. 5 a M13BM20 (Boehringer Mannheim) k získání matrice pro kódový řetězec mutagenního oligonukleotidu
5'-CAT CAG CGT CCC ATT AAG ATT TGC AGC CTG CGC AGA CAT GTT
GCT-3' řetězec č. 10
Tímto primerem byly odstraněny kodony pro čtyři přebytečné zbytky alaninu na N-zakončení, správná forma byla ověřena nepřítomností místa působení Pstl. Fragment EcoRI-SstlI byl pak subklonován zpět ve vektoru pA4BL, znázorněném na obr. 5, čímž byl získán plazmid pBLapr. Substituce M197T pak mohla být vyjmuta ve formě fragmentu SstlI-Sstl z plazmidu pA4BL (M197T) a uložena do komplementárního plazmidu za vzniku plazmidu pBLapr (M197T). Analýzou N-zakončení amylázy po expresi pBLAapr v B. subtilis bylo možno prokázat, že jde o totéž N-zakončení, které je možno prokázat u alfa-amylázy B. licheniformis.
-9CZ 293163 B6
Příklad 2
Citlivost variant methioninového typu na citlivost k oxidaci
Alfa-amyláza B- licheniformis, například běžně dodávaný prostředek SpezymeR AA20 (Genencor Intemational, lne.), je rychle inaktivována v přítomnosti peroxidu vodíku, jak je zřejmé z obr. 7. Bylo dosaženo exprese různých methioninových variant v třepacích kulturách B. sublitis a surové supematanty byly čištěny pomocí gradientu síranu amonného. Amyláza byla srážena ze supematantu, nasyceného síranem amonným na 20 % tak, že obsah síranu amonného byl zvýšen na 70 %, načež byl enzym znovu uveden do suspenze. Varianty pak byly vystaveny působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 5,0 a teplotě 25 °C. varianty v šesti polohách, v nichž se v alfa-amyláze B. licheniformis nacházejí zbytky methioninu, byly ještě stále citlivé k oxidaci peroxidem, avšak při substituci v poloze+197 (M197L) vznikala odolnost proti oxidaci peroxidem, jak je zřejmé z obr. 7. Následující analýza, jejíž provedení bude dále popsáno, prokázala, že i když určitá varianta podléhá oxidaci při pH 5,0 a 25 °C, může mít změněné, a to i zlepšené vlastnosti za odlišných podmínek, například lepší zkapalnění škrobu.
Příklad 3
Konstrukce všech uskutečnitelných variant v poloze 197
Všechny varianty Ml97 (M197X) byly získány ve formě A4 tvorbou mutací pomocí kazety, jak je zřejmé z br. 8.
1) Cílená tvorba mutace (přes extensi primeru v M13) byla užita k získání M197A při použití mutagenního oligonukleotidu
M197A
5'-GAT TAT TTG GCG TAT GCC GAT ATC GAC TAT GAC CAT-3' ECORV+
Clalřetězec č. 11 který byl také uložen do místa EcoRV (kodony 200-201) k náhradě místa působení Clal (kodony 201-202).
2) Primer LAAM12 z tabulky II byl užit k tvorbě dalšího tichého místa působení restrikčního enzymu BstBI v rozmezí kodonů 186-188.
3) Výsledná varianta M197A (BstBI+, EcoRV+) pak byla subklonována ve formě fragmentu Pstl-Sstl v plazmidu pA4BL a výsledný plazmid byl rozštěpen enzymy BstBI a EcoRV a velký fragment s obsahem vektoru byl izolován z agarózového gelu pomocí elektroeluce.
4) Syntetické primery LAAM14-30 z tabulky II, byly vždy navázány na velký komplementární společný primer LAAM13 z tabulky II. Výsledné kazety obsahovaly kódy pro všechny zbývající přírodně se vyskytující aminokyseliny v poloze +197 a byly jednotlivě navázány na uvedený fragment vektoru.
-10CZ 293163 B6
Tabulka II
Syntetické oligonukleotidy, užité pro tvorbu mutací pomocí kazet ke tvorbě variant Ml97X
LAAM12
GG GAA GTT TCG AAT GAA AAC G řetězec
LAAM13
Xi97bs řetězec (EcoRV) £TC GGC ATA TG CAT ATA ATC ATA GTT GCC GTT TTC ATT (BstBl)
LAAM14
1197 řetězec (BstBl) CG AAT GAA-AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG ATC TAT GCC GA£ (EcoRV·)
LAAM15
F19 7 θ t — CC (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TTC TAT GCC GAC (EcoRV-)
LAAM16
V’. 37 řetězec (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GTT TAT GCC GAC (EcoRV·)
LAAM17
S^S7 ·* * (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AGC TAT GCC
LAAM18
ΡΛ97 řetezec (BstBD CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG CCT TAT GCC GAC (EcoRV-l
LAAM19
T197 w * (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG ACA TAT GCC <Ía^c^V·
LAAM20
Y197 řetězec (Bst9l) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TAC TAT GCC GAQ (EcoRV-)
č. | 12 |
č. | 13 |
v c. | 14 |
ě. | 15 |
č. 1 | 16 |
)c | 17 |
č. ) | 18 |
č. ) | 19 |
č. | 20 |
LAAM21
LAAM22
1AAM23
LAAM24
LAAM25
LAAM26
LAAM27
LAAM28 H197 řetězec č. 21 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG CAC TAT GCC GA£ (EcoRV-)
G197 řetězec ě· 22 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GGC TAT GCC GA£ (EcoRV-) (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG CAA TAT GCC ’ 23
N197 rct^ZGC C· 24 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AAC TAT GCC GA£ (EcoRV-J (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AAA TAT GCC ’ 25
0197 řetězec č. 26 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GAT TAT GCC GA£ (EcoRV·)
E1S7 řetězec ě. 27 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GAA TAT GCC GA£ (EcoRV-)
C197 řetězec ě. 28 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TGT TAT GCC GA£ lEcoRV-)
LAAM29 W197 řetězec č« 29 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TGG TAT GCC GA£ lEcoRV-)
LAAM30 R197 řetězec č. 30 (BstB!) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AGA TAT GCC GA£ (EcoRV-)
Kazety byly vytvořeny tak, aby při vazbě bylo odstraněno místo působení EcoRV, to znamená, že plazmidy z transformovaných bakterií E. coli byly sledovány na ztrátu tohoto místa. Mimoto obsahoval řetězec kazet posun rámce a kód pro místi působení Ncil, to znamená transformované bakterie bylo možno prokázat existencí jediného místa působení Nsil, nebylo tedy možno počítat 10 s expresí účinné amylázy.
Po potvrzení positivních řetězců analýzou restrikčních míst byla provedena analýza řetězce a transformace B. subtilis pro expresi v třepacích lahvích, jak je znázorněno na obr. 9. Pak byla specifická účinnost některých mutant M197X stanovena při použití rozpustného substrátu. Údaje, 15 získané při následujících postupech jsou shrnuty v tabulce III.
-11 CZ 293163 B6
Zkouška s rozpustným substrátem
Byla provedena zkouška s použitím zkušebního balíčku Magazyme (Aust.) Ptyl. Ltd. až do konečného bodu. Každá lahvička substrátu, kterým byl p-nitrofenylmaltoheptaosid, BPNPG7, byla rozpuštěna v 10 ml sterilní vody a pak bylo provedeno ředění 1 až 4x pufrem pro provedení zkoušky, který obsahoval 50 mM maleátu o pH 6,7 s 5 mM chloridu vápenatého a 0,002 % prostředku Tween 20. Zkoušky byly provedeny přidáním 10 mikrolitrů amylázy k 792 mikrolitrům substrátu v kyvetě při 25 °C. Rychlost hydrolýzy byla měřena jako rychlost změny absorbance při 410 nm po 75 sekundách. Zkouška probíhala lineárně až do rychlosti 0,4 jednotek/minuta.
Koncentrace bílkoviny amylázy byla měřena s použitím standardní zkoušky Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories) podle publikace Bradford M., 1976, Anal. Biochem., 72:248 při použití standardů se sérovým albuminem skotu.
Zkouška hydrolýzy škrobu
Byl užit standardní pokus pro zkoušku účinnosti alfa-amylázy SpezymeR AA20. Tato zkouška je podrobně popsána v příkladu 1 patentové přihlášky US 07 785 624. Nativní škrob vytváří modré zbarvení v přítomnosti jodu, avšak po hydrolýze na kratší molekulu dextrinu se roztok již nebarví. Jako substrát byl použit rozpustný Lintnerův škrob v množství 5 g/1 ve fosfátovém pufru o pH 6,2, který obsahuje 42,5 g/1 dihydrogenfosforečnanu draselného a 3,16 g/1 hydroxidu sodného. Vzorek se přidává ve 25 mM chloridu vápenatém a účinnost se měří jako čas do negativního jodového testu při inkubaci při teplotě 30 °C. Účinnost se zaznamenává jako jednotky zkapalnění na gram nebo ml (LU), tyto jednotky je možno vypočítat podle vzorce.
570
LU/ml nebo LU/g =-------x D,
Vxt kde
LU je jednotka zkapalnění,
V je objem vzorku (v tomto případě 5 ml), t je doba dextrinizace v minutách,
D je faktor zředění = objem ředění/ml nebo g přidaného enzymu.
Tabulka III
Alfa-amyláza specifická účinnost v rozpustný substrát % hodnota AA20 škrob
SpezymeK AA20 | 100 | 100 |
forma A4 | 105 | 115 |
M15L (forma A4) | 93 | 94 |
M15L | 85 | 103 |
M197T (forma A4) | 75 | 83 |
M197T | 62 | 81 |
M197A (forma A4) | 88 | 89 |
M197C | 85 | 85 |
M197L (forma A4) | 51 | 17 |
-12CZ 293163 B6
Příklad 4
Charakterizace varianty Ml 5L
Varianta M15L, získaná podle předchozích příkladů nevykazovala zvýšenou účinnost amylázy (tabulka III) a stále ještě byla inaktivována peroxidem vodíku, jak je zřejmé z obr. 7. Tato varianta však byla účinnější při zkapalnění škrobu, zvláště při nízkém pH, jak je zřejmé z tabulky IV.
ío Zkapalnění škrobu bylo typicky prováděno v zařízení hydroheater Μ 103-M, opatřeným za mísící komorou spirálou s obsahem 2,5 litrů a terminálním zpětným tlakovým ventilem. Škrob byl přiváděn čerpadlem Myono a pára byla přiváděna pod tlakem 1,05 MPa, pak byl tlak snížen na 0,63 až 0,7 MPa. Teplotní sondy byly uloženy těsně před zpětný ventil. Suspenze škrobu byla získávána mletím kukuřice za vlhka a byla užívána dva dny. Škrob byl zředěn na požadovaný obsah pevných látek deionizovanou vodou a pH škrobu bylo upravováno 2% hydroxidem sodným nebo nasyceným uhličitanem sodným. Dále jsou uvedeny typické podmínky zkapalnění:
škrob vápník pH alfa-amyláza až 35 % pevného podílu až 50 ppm (přidáno 30 ppm) 5,0 až 6,0 až 14 LU/g suchého škrobu.
Suspenze škrobu byla přiváděna přibližně rychlostí 350 ml/min. Teplota byla udržována v rozmezí 105 až 107 °C. Vzorky škrobu byly přeneseny do druhého stupně zkapalnění s teplotou 25 95 °C a tam udržovány 90 minut.
Stupeň zkapalnění škrobu byl měřen okamžitě po ukončení druhého stupně zkapalnění stanovením dextrosového ekvivalentu DE ve vzorku a zkouškou na přítomnost surového škrobu, tyto zkoušky byly prováděny podle publikace Standard Analytical Methods of the Member 30 Companies of the Com Refmers Association, lne., 6. vydání. V případě, že se škrob zpracovává za svrchu uvedených podmínek při pH 6,0, získá se zkapalněný škrob s hodnotou DE přibližně 10, zcela bez obsahu surového škrobu. Výsledky zkoušek na zkapalnění škrobu při použití mutant podle vynálezu jsou shrnuty v tabulce IV
Vysvětí ivky k tabulce IV:
x průměr ze tří pokusů “ průměr ze dvou pokusů
Tabulka IV
Účinnost variant N15L (forma A4) a M15L na zkapalnění škrobu pH DE po 90 minutách
SpezameR AA20 | 5,9 | 9,9 |
M15L (forma A4) | 5,9 | 10,4 |
SpezymeR AA20 | 5,2 | 1,0 |
M15L (forma A4) | 5,2 | 2,2 |
SpezymeR AA20 | 5,9 | 9,3* |
M15L | 5,9 | 11,3X |
SpezymeR AA20 | 5,5 | 3,25“ |
M15L | 5,5 | 6,7“ |
SpezymeR AA20 | 5,2 | 0,7“ |
M15L | 5,2 | 3,65“ |
-13CZ 293163 B6
Příklad 5
Konstrukce variant M15X
Způsobem, který byl popsán v příkladě 3 byly vyrobeny všechny varianty Ml5 (M15X) nativního B. licheniformis tvorbou mutací pomocí kazet, jak je zřejmé z obr. 12.
1) Cílená mutace (extensí M13 pomocí primeru) byla užita k zavedení jediného restrikčního místa v sousedství kodonu Ml5 k usnadnění uložení kazety pro tvorbu mutace. Specificky bylo uloženo místo působení BstBl v místě kodonů 11 až 13 a místo působení Mscl v oblasti kodonů 18 až 20 při použití následujících dvou oligonukleotidů
M15XBstBl 5'-G ATG CAG TAT TTC GAA CTGG TAT A-3'
BstBl řetězec č.48
MlSXMscl 5’ -TG CCC AAT GAT GGC CAA CAT TGG AAG-3'
Mscl řetězec č.49
2) Pak byl zkonstruován vektor pro tvorbu mutace M15X pomocí kazety subklonováním fragmentu Sfil-SstlI z mutagenizované amylázy (BstBl +, Mscl +), v plazmidu pBLapr. Výsledný plazmid pak byl rozštěpen enzymem BstBl a Mscl a velký fragment vektoru byl izolován na polyakrylamidovém gelu elektroelucí.
3) Kazety pro tvorbu mutace byly tvořeny jako v případě variant M197X. Syntetické oligomery, z nichž každý je kódem pro substituci v místě kodonu 15, byly navázány na společný základní primer. Po navázání kazety na vektor bylo místi Mscl rozrušeno tak, aby pozitivně transformované organismy bylo možno odlišit podle ztráty tohoto místa. Základní primer obsahuje jediné místo působení SnaBl, takže je možno transformanty prokázat také průkazem tohoto místa. Tento základní primer obsahuje také posun rámce, takže mutanty, pozměněné pouze tímto primerem nebudou produkovat amylázu vzhledem k tomu, že exprese není možná.
Syntetické kazety jsou uvedeny v tabulce V a obecný postup tvorby mutace pomocí kazet je znázorněn na obr. 12.
-14CZ 293163 B6
Tabulka V
Syntetické oligonukleotidy, užité pro tvorbu mutací pomocí kazet k získání variant M15X
MÍSA | (BstBl) | c | GAA | TCG | TA7 | gcx | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 50 |
Mi SR | (BetBl) | c | GAA | TCG | TAT | CGC | ccc | AAT | GAC | CG | (Hscl) | řetězec | č. | 51 |
H1SN | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | AAT | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 52 |
M1SD | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | GAT | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 53 |
Ml Srí | (BBtSl) | c | CAA | TGG | TAT | CAC | ccc | AAT | CAC | GC | (Mscl) | řetězec | č. | 54 |
M1SK | (Bit31) | c | GAA | TGG | TAT | AAA | ccc | AAT | GAC | GG | (HSCl) | řetězec | č. | 55 |
MIS? | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | CCG | ccc | AAT | GAC | GG | (Mscl) | řetězec | č. | 56 |
MISS | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | TCT | ccc | AAT | GAC | CG | (Mscl) | řetězec | č. | 57 |
MÍST | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAC | ACT | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 58 |
Ml 5 V | (BstBl) | c | GAA | TCG | TAT | GTT | ccc | AAT | CAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 59 |
M15C | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | TGT | ccc | AAT | CAC | GG | (Mscl) | řetězec | č. | 60 |
M15Q | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | CAA | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 61 |
MISE | (BstBl) | c | CAA | TGG | TAT | GAA | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 62 |
M15G | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | ssi | ccc | AAT | GAC | GG | (HBC1) | řetězec | č. | 63 |
M15I | (BstBl) | c | CAA | TCG | TAT | ATT | ccc | AAT | GAC | GG | (Mscl) | řetězec | č. | 64 |
M15F | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | TTT | ccc | AAT | CAC | GC | (Hscl) | řetězec | č. | 65 |
M15W | (BstBl) | c | CAA | TGG | TAC | TCC | ccc | AAT | GAC | GG | (Hscl) | řetězec | č. | 66 |
MISÍ | (BstBl) | c | GAA | TGG | TAT | TAT | ccc | AAT | GAC | GC | (Hscl) | řetězec | č. | 67 |
M15X | (Mscl) CC | GTC | ATT | CGG | ACT | ACG | TAC | CAT | T | (BstBl) | řetězec | č. | 68 |
(základní řetězec)
Podtržené části označují změny kodonů v poloze zbytku aminokyseliny 15.
V některých případech byly provedeny konzervativní substituce, aby nevzniklo nové místo působení některého z restrikčních enzymů.
Příklad 6
Zkapalnění škrobu za laboratorních podmínek při použití variant Ml 5X is
Jedenáct variant alfa-amylázy se substituvemi v místě Ml5, získanými podle příkladu 5, bylo zkoumáno na účinnost ve srovnání s běžně dodávaným enzymem SpezymeR AA20 (Genecor Intemational, lne.), zkapalnění bylo prováděno při pH 5,5 v systému, který obsahoval spirálu z nerezové oceli (průměr přibližně 7 mm, objem přibližně 350 ml), opatřenou mísícím prvkem 20 s délkou 17,5 cm, přibližně 30 cm od začátku, tlak na zpětném tlakovém ventilu na druhém konci byl přibližně 2,1 MPa. Spirála svých konců byla ponořena do lázně směsi glycerolu a vody, opatřené termostaticky řízenými topnými prvky, které v lázni udržovaly teplotu 105 až 106 °C.
Suspenze škrobu s obsahem enzymu byla za míchání přiváděna do reakční spirály pístem, 25 poháněný odměmým čerpadlem rychlostí přibližně 70 ml/min. Na druhém konci spirály byl škrob odebírán a přenesen do druhého stupně, kde byl zahříván 90 minut na 95 °C. Po této době byla stanovena hodnota DE pro zkapalněný škrob stejně jako v příkladu 4. Výsledky jsou znázorněny na obr. 16.
-15CZ 293163 B6
Příklad Ί
Charakteristika variant M197X
Jak je zřejmé z obr. 9, varianty M197X (forma A4) měly po expresi různou účinnost amylázy, měřeno na rozpustném substrátu. Amylázy byly ze supematantu částečně čištěny srážením dvěma objemy ethanolu a pak byly znovu uvedeny do suspenze. Pak byly varianty sledovány na tepelnou stálost (obr. 10) tak, že byly zahřívány 5 minut na 95 °C v 10 mM acetátovém pufru o pH 5,0 v přítomnosti 5 mM chloridu vápenatého. Po inkubaci si enzym A4 divokého typu uchoval 28 % své činnosti. V případě variant M197W a M197P nebylo již možno ze supematantu izolovat účinnou bílkovinu. Při analýze řetězce bylo prokázáno, že varianta M197H obsahuje druhou mutaci N190K. Varianta M197L byla zkoumána odděleně a bylo prokázáno, že jde o nejméně tepelně stálou variantu. Je pravděpodobné, že existuje velká korelace mezi expresí amylázy a její tepelnou stálostí. Amyláza zB. licheniformis je poněkud omezena, pokud jde o zbytky, které je možno zařadit do polohy 197 tak, aby byla zachována nebo zvýšena stálost za tepla. Cystein a threonin jsou výhodnými zbytky za těchto podmínek pro maximální tepelnou stálost, zatímco v případě alaninu a izoleucinu je stálost průměrná. Další substituce v poloze +197 však mají za následek snížení tepelné stálosti, což může být vhodné pro jiné použití. Mimoto je možno získat substitucemi v poloze +197 další vhodné vlastnosti, například účinnost při odlišném pH nebo změny stálosti proti oxidaci. Například varianta Ml97C je snadno inaktivována oxidací vzduchem, avšak má zvýšenou tepelnou stálost. Na druhé straně si ve srovnání s variantou Ml97L udržují varianty M197T a M197A nejen vysokou tepelnou stálost (obr. 10), však také vysokou účinnost (tabulka III), a to při zachování odolnosti proti působení peroxidu při pH 5 až 10, jak je zřejmé z obr. 7.
Příklad 8
Stálost a účinnost v čisticích prostředcích
Stálost varianty M197T (forma A4), M197T a M197A (forma A4) byla měřena v prostředcích pro myčky nádobí ADD. Ke dvěma běžně dodávaným prostředkům typu ADD, tato CascadeR (procter and Ganble, Ltd.) a SunlightR (Unilever) byly přidány 2 ppm prostředku SavinaseR, jde o proteázu běžného typu, užívanou v ADD (Novo Industries) a byla sledována inaktivace variant amylázy a prostředku TermamylR, což je tepelně stálá alfa-amyláza (Novo Nordisk, A/S) při teplotě 65 °C. Koncentrace prostředku ADD byla v obou případech ekvivalentní prostředkům, užívaným při máčení, bylo užito 14 g produktu na 1 litr vody. Jak je zřejmé z obr. 1 la a 1 lb, byly obě formy variant M197T daleko stálejší než TermamylR a než M197A (forma A4), které byly inaktivovány již před provedením první zkoušky. Tato zlepšená stálost byla pozorována v přítomnosti i nepřítomnosti škrobu, výsledky byly stanoveny tak, že amylázy byly přidány k 5 ml ADD s přídavkem SavinaseR, předehřátým ve zkumavce a po promíchání byla stanovena účinnost jako funkce času při použití rozpustného substrátu. Zkumavka „+ škrob“ měla nanesený lnoucí škrob ze špaget na svých stěnách (140 °C, 60 minut). Výsledky jsou znázorněny na obr. 1 la a 1 lb.
Příklad 9
Charakterizace variant M15X
Všechny varianty M15X byly propagovány v Bacillus subtilis a byla sledována úroveň exprese, jak je znázorněno na obr. 13. Amyláza byla izolována a částečně čištěna 20 až 70% síranem amonným. Specifická účinnost variant na rozpustný substrát byla stanovena jako v příkladu 3 aje znázorněna na obr. 14. Řada amyláz typu M15X má specifickou účinnost vyšší než
-16CZ 293163 B6
SpezymeR AA20. Tepelná stálost laboratorním způsobem byla stanovena zahříváním amylázy na 5 minut na 90 °C v 50 mM acetátovém pufru o pH 5 v přítomnosti 5 mM chloridu vápenatého, výsledek je znázorněn na obr. 15. Většina variant měla v tomto případě stejnou účinnost jako SpezymeR AA20. Ty varianty, které byly při tomto pokusu dostatečně stálé, to znamená, že si uchovaly alespoň 60 % stálosti SpezymeR AA20, byly dále zkoušeny na specifickou účinnost při zkapalnění škrobu při pH 5,5. Nejzajímavější mutanty jsou znázorněny na obr. 16. varianty M15D, N a T spolu s variantou L měly lepší účinnost než SpezymeR AA20 při zkapalnění při pH 5,5 a měly také zvýšenou specifickou účinnost při použití v rozpustném substrátu a při hydrolýze škrobu.
Obecně bylo zjištěno, že substitucí methioninu v poloze 15 je možno získat varianty se zvýšenou účinností při zkapalnění škrobu při nízkém pH a/nebo se zvýšenou specifickou účinností.
Příklad 10
Citlivost tryptofanu k oxidaci
Chloramin-T je sodná sůl N-chlor-p-toluensulfonimidu. Jde o selektivní oxidační činidlo, které oxiduje methionin na methioninsulfoxid při neutrálním nebo alkalickém pH. Při kyselém pH modifikuje chloramin T jak methionin, tak tryptofan, jak bylo popsáno v Schechter Y., Burstein Y. a Patchomik A., 1975, Biochemistry 14, 20, 4497-4503. Na obr. 17 je znázorněna inaktivace alfa-amylázy B. licheníformis chloraminem T při pH 8,0 (AA20 = 0,65 mg/ml, M197A= 1,7 mg/ml, M197L= 1,7 mg/ml). Údaje prokazují, že v případě záměny methioninu v poloze 197 za leucin nebo alanin je možno zabránit inaktivaci alfa-amylázy. Obráceně, jak je zřejmé z obr. 18, při pH 4,0 inaktivace M197A a M197L sice probíhá, avšak je zapotřebí většího počtu ekvivalentů chloraminuT, jak je zřejmé z obr. 18 (AA20 = 0,22 mg/ml,
M197A = 4,3 mg/ml, M197L = 0,53 mg/ml, 200 mM octanu sodného, pH 4,0). To znamená, že tryptofanový zbytek se rovněž účastní inaktivace chloraminem T. Mimoto analýza řetězce aminokyselin ukazuje, že se tryptofan v poloze 138 oxiduje chloraminem T, údaje nejsou uvedeny. Aby to bylo možno prokázat, byla provedena cílená mutace tryptofanového zbytku v poloze 138.
Příprava dvojité mutanty alfa-amylázy W138 a M197
Některé varianty W138 (F, Y a A) byly provedeny jako dvojí mutanty s M197, vyrobeným podle příkladu 3. Dvojí mutanty byly získány způsobem podle příkladů 1 a 3. Obvykle byly připraveny jednoduché negativní řetězce DNA z klonu M13MP18 kódového řetězce v oblasti Pstl-Sstl mutanty M197T alfa-amylázy B. licheníformis. Cílená mutace byla vytvořena při použití dále uvedených primerů způsobem podle publikace Zoller M. a další, 1983 až na to, že T4 gen 32 pro bílkovinu a T4-polymeráza byly nahrazeny Klenowovým fragmentem, všechny primery obsahovaly jediné místo působení enzymu a požadovanou mutaci, aby bylo možno identifikovat klony se správnou mutací.
Typtofan 138-fenylalanin
133 134 135 136 137 138 133 140 141 142 143 CAC CTA ATT AAA CCT TTC ACA CAT TTT CAT TTT
Hind III
Tryptofan 138 - tyrosin
133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 CAC CTA ATT AAA GCT TAC ACA CAT TTT CAT TTT
Hind III řetězec č. 42 řetězec č. 43
-17CZ 293163 B6
Tryptofan 138-alanin-tento primer rovněž zavádí jediné místo působení enzymu před a za polohou 138
127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142
C CGC CTA ATT TCC CGA CAA CAC CTA ATT AAA CCC GCA ACA CAT TTT CAT BapS I
143 144 145 146 147 ttt ccc cgc cgc ac řetězec č. 44
XfilA Z
Mutanty byly identifikovány analýzou míst působení restrikčních enzymů a mutanty W138F a W138A byl vypuštěn nukleotid mezi místy působení BspEI a Xmal, avšak zbytek řetězce genu byl správný. Fragment 1,37 kb SstlI/Sstl s obsahem mutací W138X a M197T byl přenesen z M13MP18 do vektoru pro expresi pBLapr, čímž byl získán plazmid pBLapr (W138F, M197T) a plazmid pBLapr (W138Y, M197T). Fragment s obsahem jediného místa působení BspEI a Xmal byl klonován v plazmidu pBLapr (BspEI, Xmal, M197T) vzhledem k tomu, že je vhodné klonovat kazety s obsahem jiných aminokyselin v poloze 138.
Jediné mutace v poloze 138
Způsobem, uvedeným v předchozích příkladech byly získány jednoduché mutace v poloze W138, atoF, Y, L, HaC.
Fragment 1,24 kb Asp718-Sstl s obsahem mutace M197T v plazmidu pBLapr (W138X, M197T) z příkladu 7 byl nahrazen fragmentem divokého typu smethioninem v poloze 197, čímž byly získány plazmidy pBLapr (W138F), pBLapr (W138Y) a pBLapr (BspEI, Xmal).
Mutanty W138L, W138H a W138C byly získány vazbou syntetických kazet do vektoru ppBLapr (BspEI, Xmal) při použití následující primerů:
Tryptofan 138 - leucin
CC GGA GAA CAC CTA | ATT | AAA | GCC | CTA | ACA | CAT | TTT | CAT | TTT c | |
řetězec | č. 45 | |||||||||
Tryptofan 138 — histidin | ||||||||||
CC GGA GAA CAC CTA | ATT | AAA | GCC | CAC | ACA | CAT | TTT | CAT | TTT c | |
řetězec | Č. 46 | |||||||||
Tryptofan 138 - cystein | ||||||||||
CC GGA GAA CAC CTA | ATT AAA | GCC | TGC | ACA | CAT | TTT | CAT | TTT c | ||
řetězec | č. 47 |
Reakce dvojitých mutant M197T/W138F a M197T/W138Y schloraminem T byly srovnány s reakcí enzymu divokého typu (AA20 = 0,75 mg/ml, M197T/W13 8F = 0,64 mg/ml, M197T/W138Y = 0,60 mg/ml, 50 mM octanu sodného, pH 5,0). Výsledky, znázorněné na obr. 19 ukazují, že mutace v tryptofanu 138 způsobila vyšší odolnost varianty proti působení chloraminu T.
-18CZ 293163 B6
Informace o řetězcích
1) Obecné informace:
i) přihlašovatel: Genencor Intemational, lne.
ii) oblast vynálezu: Mutanta alfa-amylázy iii) počet řetězců: 68 iv) adresa pro korespondenci:
A - adresát: Genencor Intemational, lne.
B - ulice: 180 Kimball Way
C - město: South San Francisco
D - stát: CA
E-země: USA
F-ZIP: 94080
v) forma, odečitatelná počítačem:
A - prostředí: Floppy disk
B - počítač: IBM, PC-kompatibilní
C - operační systém: PC-DOS/MS-DOS
D - software: Patentln Release 1,0, Verse 1,25 vi) údaje o přihlášce:
A - číslo:
B - datum podání:
C - klasifikace:
viii) zástupce:
A - jméno: Hom Margaret A.
B - registrační číslo: 33 401
C - číslo spisu: GC220-2 ix) telekomunikační spojení:
A-telefon: (415) 742-7536
B - telefax: (415) 742-7217
2) Informace pro řetězec č. 1:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 56 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. I
GATCAAAACA TAAAAACCG GCCTTGGCCC CGCCGGTTTT TTATTATTTT
TGAGCT
-19CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 2:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 29 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. 2
TGGGACGCTG GCGCAGTACT TTGAATTGGT
2) Informace pro řetězec č. 3:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 34 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. 3
TGATGCAGTA CTTTGAATGG TACCTGCCCA ATGA 34
2) Informace pro řetězec č. 4:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 36 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. 4
GATTATTTGT TGTATGCCGA TATCGACTAT GACCAT 36
2) Informace pro řetězec č. 5:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 26 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu)
-20CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 5
CGGGGAAGGA GGCCTTTACG GTAGCT
2) Informace pro řetězec č. 6:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 6
GCGGCTATGA CTTAAGGAAA TTGC
2) Informace pro řetězec č. 7:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 23 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 7
CTACGGGAT GCATACGGGA CGA
2) Informace pro řetězec č. 8:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 35 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 8
CTACGGGGAT TACTACGGGA CCAAGGGAGA CTCCC
2) Informace pro řetězec č. 9:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 36 párů bází
-21 CZ 293163 B6
Β - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 9
CCGGTGGGGC CAAGCGGGCC TATGTTGGCC GGCAAA 36
2) Informace pro řetězec č. 10:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 45 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 10
CATCAGCGTC CCATTAAGAT TTGCAGCCTG CGCAGACATG TTGCT 45
2) Informace pro řetězec č. 11:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 36 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 11
GATTATTTGG CGTATGCCGA TATCGACTAT GACCAT 36
2) Informace pro řetězec č. 12:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 21 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 12
GGGAAGTTTC GAATGAAAAC G 21
-22CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 13:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 38 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 13
GTCGGCATAT GCATATAATC ATAGTTGCCG TTTTCATT
2) Informace pro řetězec č. 14:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 14
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA TCTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 15:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 15
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT TCTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 16:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární
-23CZ 293163 B6 i i) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 16
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG TTTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 17:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: Č. 17
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA GCTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 18:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 18
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGC CTTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 19:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 19
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA CATATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 20:
-24CZ 293163 B6
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 20
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT ACTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 21:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 21
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGC ACTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 22:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 22
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG GCTATGCCGA C 41
2) Informace pro řetězec č. 23:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 23
-25CZ 293163 B6
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGC AATATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 24:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce č. 24
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA ACTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 25:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 25
GCAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA AATATGCCGA C 41
2) Informace pro řetězec č. 26:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 26
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG ATTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 27:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární
-26CZ 293163 B6 ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 27
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG AATATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 28:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 28
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT GTATTGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 29:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 29
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT GGTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 30:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 30
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA GATATGCCGA C 41
-27CL 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 31:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 1 968 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) o
xi) popis řetězce: č. 31
AGCTTGAAGA AGTGAAGAAG CAGAGAGGCT ATTGAATAAA TGAGTAGAAA GCGCCATATC 60
GGCGCTTTTC TTTTGGAAGA AAATATAGGG AAAATGGTAC TTGTTAAAAA TTCGGAATAT 120
TTATACAACA TCATATGTTT CACATTGAAA GGGGAGGAGA ATCATGAAAC AACAAAAACG 180
GCTTTACGCC CGATTGCTGA CGCTGTTATT TGCGCTCATC TTCTTGCTGC CTCATTCTGC 240
AGCAGCGGCG GCAAATCTTA ATGGGACGCT GATGCAGTAT TTTGAATGGT ACATGCCCAA 300
TGACGGCCAA CATTGGAAGC GTTTGCAAAA CGACTCGGCA TATTTGGCTG AACACGGTAT 360
TACTGCCGTC TGGATTCCCC CGGCATATAA GGGAACGAGC CAAGCGGATG TGGGCTACGG 420
TGCTTACGAC CTTTATGATT TAGGGGAGTT TCATCAAAAA GGGACGGTTC GGACAAAGTA 480
CGGCACAAAA GGAGAGCTGC AATCTGCGAT CAAAAGTCTT CATTCCCGCG ACATTAACGT 540
TTACGGGGAT GTGGTCATCA ACCACAAAGG CGGCGCTGAT GCGACCGAAG ATGTAACCGC 600
GGTTGAAGTC GATCCCGCTG ACCGCAACCG CGTAATTTCA GGAGAACACC TAATTAAAGC 660
CTGGACACAT TTTCATTTTC CGGGGCGCGG CAGCACATAC AGCGATTTTA AATGGCATTG 720
GTACCA7TTT GACGGAACCG ATTGGGACGA GTCCCGAAAG CTGAACCGCA TCTATAAGTT 780
-28CZ 293163 B6
TCAAGGAAAG | GCTTGGGATr | GGGAAGTTTC | CAATGAAAAC | GGCAACtATG | ATTATTTGAT | 840 |
GTATGCCGAC | ATCGATTATG | ACCATCCTGA | TGTCGCAGCA | GAAATTAAGA | GATGGGGCAC | 900 |
TTGGTATGCC | AATGAACTGC | AATTGGACGG | TTZCCGfCTT | GATGCTGTCA | AACACATTAA | 960 |
ATTTTCTTTT | TTGCGGGATT | GGGTTAATCA | TGTCAGGGAA | AAAACGGGGA | AGGAAATGTT | 1020 |
TACGGTAGCT | GAATATTGGC | AGAATGACTT | GGGCGCGCTG | GAAAACTATT | TGAACAAAAC | 1080 |
AAATTTTAAT | CATTCAGTGT | TTGACGTGCC | GCTTCAT-AT | CAGTTCGATG | CTGCATCGAC | 1140 |
ACAGGGAGGC | GGCTATGATA | TGAGGAAATT | GCTGAACGGT | ACGGTCGTTT | CCAAGCATCC | 1200 |
GTTGAAATCG | GTTACATTTG | TCGATAACCA | TGATACACAG | CCGGGGCAAT | CGCTTGAGTC | 1260 |
GACTGTCCAA | ACATGGTTTA | ACCCGCTTGC | TTACGC7TTT | ATTCTCACAA | GGGAATCTGG | 1320 |
ATACCCTCAG | GTTTTCTACG | GGGATATGTA | CGGGACGAAA | GGAGACTCCC | AGCGCGAAAT | 1380 |
TCCTGCCTTG | AAACACAAAA | TTGAACCGAT | CTTAAAAGCG | AGAAAACAGT | atgcgtacgg | 1440 |
AGCACAGCAT | GATTATTTCG | ACCACCATGA | CATTGTCGGC | TGGACAAGGG | AAGGCGACAG | 1500 |
CTCGGTTGCA | AATTCAGGTT | TGGCGGCATT | AATAACAGAC | GGACCCGGTG | GGGCAAAGCG | 1560 |
AATGTATGTC | GGCCGGCAAA | ACGCCGGTGA | GACATGGCAT | GACATTACCG | GAAACCGTTC | 1620 |
GGAGCCGGTT | GTCATCAATT | CGGAAGGCTG | GGGAGAGTTT | CACGTAAACG | GCGGGTCGGT | 1680 |
TTCAATTTAT | GTTCAAAGAT | AGAAGAGCAG | AGAGGACGGA | TTTCCTGAAG | GAAATCCGTT | 1740 |
TTTTTATTTT | GCCCGTCTTA | TAAATTTCTT | TGATTACATT | TTATAATTAA | TTTTAACAAA | 1800 |
GTGTCATCAG | CCCTCAGGAA | GGACTTGCTG | ACAGTTTGAA | TCGCATAGGT | AAGGCGGGGA | 1860 |
TGAAATGGCA | ACGTTATCTG | ATGTAGCAAA | GAAAGCAAAT | GTGTCGAAAA | TGACGGTATC | 1920 |
GCGGGTGATC | AATCATCCTG | AGACTGTGAC | GGATGAATTG | AAAAAGCT | 1968 |
2) Informace pro řetězec č. 32:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 483 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý ío D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina
-29CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 32
Ala | Asn | Leu | Asn | Gly | Thr | Leu | Met | Gin | Tyr | Phe | Clu | Trp | Tyr | Met | Pro |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||||
Asn | Asp | Gly | Gin | His | Trp | Lys | Arg | Leu | Gin | Asn | Asp | Ser | Ala | Tyr | Leu |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||
Ala | Glu | His | Gly | Ile | Thr | Ala | Val | Trp | Ile | Pro | Pro | Ala | Tyr | Lys | Gly |
35 | 40 | 45 | |||||||||||||
Thr | Ser | Gin | Ala | Asp | Val | Gly | Tyr | Gly | Ala | Tyr | Asp | Leu | Tyr | Asp | Leu |
50 | 55 | 60 | |||||||||||||
Gly | Glu | Phe | His | Gin | Lys | Gly | Thr | Val | Arg | Thr | Lys | Tyr | Gly | Thr | Lys |
65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
Gly | Glu | Leu | Gin | Ser | Ala | Ile | Lys | Ser | Leu | His | Ser | Arg | Asp | Ile | Asn |
85 | 90 | 95 | |||||||||||||
Val | Tyr | Gly | Asp | Val | Val | Ile | Asn | His | Lys | Gly | Gly | Ala | Asp | Ala | Thr |
100 | 105 | 110 | |||||||||||||
Glu | Asp | Val | Thr | Ala | Val | Glu | Val | Asp | Pro | Ala | Asp | Arg | Asn | Arg | Val |
115 | 120 | 125 | |||||||||||||
Ile | Ser | Gly | Glu | His | Leu | Ile | Lys | Ala | Trp | Thr | His | Phe | His | Phe | Pro |
130 | 135 | 140 | |||||||||||||
Gly | Arg | Gly | Ser | Thr | Tyr | Ser | Asp | Phe | Lys | Trp | His | Trp | Tyr | His | Phe |
145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
Asp | Gly | Thr | Asp | Trp | Asp | Glu | Ser | Arg | Lys | Leu | Asn | Arg | Ile | Tyr | Lys |
165 | 170 | 175 | |||||||||||||
Phe | Gin | Gly | Lys | Ala | Trp | Asp | Trp | Glu | Val | Ser | Asn | Glu | Asn | Gly | Asn |
180 | 185 | 190 | |||||||||||||
Tyr | Asp | Tyr | Leu | Met | Tyr | Ala | Asn | Ile | Asp | Tyr | Asp | His | Pro | Asp | Val |
195 | 200 | 205 | |||||||||||||
Ala | Ala | Glu | Ile | Lys | Arg | Trp | Gly | Thr | Trp | Tyr | Ala | Αβη | Glu | Leu | Gin |
210 | 215 | 220 | |||||||||||||
Leu | Asp | Gly | Phe | Arg | Leu | Asp | Ala | Val | Lys | His | Ile | Lys | Phe | Ser | Phe |
225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
Leu | Arg | Asp | Trp | Val | Asn | His | Val | Arg | Glu | Lys | Thr | Gly | Lys | Glu | Met |
245 | 250 | 255 | |||||||||||||
Phe | Thr | val | Ala | Glu | Tyr | Trp | Gin | Asn | Asp | Leu | Gly | Ala | Leu | Glu | Asn |
260 | 265 | 270 | |||||||||||||
Tyr | Leu | Asn | Lys | Thr | Asn | Phe | Asn | His | Ser | val | Phe | Asp | Val | Pro | Leu |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
His | Tyr | Gin | Phe | HÍ6 | Ala | Ala | ser | Thr | Gin | Cly | Gly | Gly | Tyr | Asp | Met |
290 | 295 | 300 | |||||||||||||
Arg | Lys | Leu | Leu | Asn | Cly | Thr | Val | Val | Ser | Lys | His | Pro | Leu | Lys | Ser |
305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
Val | Thr | Phe | Val | Asp | Asn | His | Asp | Thr | Gin | Pro | Gly | Gin Ser Leu Glu | |||
325 | 330 | 335 | |||||||||||||
Ser | Thr | Val | Gin | Thr | Trp | Phe | Lys | Pro | Leu | Ala | Tyr | Ala Phe Ile Leu |
340 345 350
-30CZ 293163 B6
Thr Arg Glu | Ser | Gly Tyr | Pro | Gin Val Phe Tyr Gly Asp | Met | Tyr | Gly | ||||||||
355 | 360 | 365 | |||||||||||||
Thr | Lys | Gly | Asp | Ser | Gin | Arg | Glu | Ile | Pro | Ala | Leu | Lys | His | Lys | Ile |
370 | 375 | 380 | |||||||||||||
Glu | Pro | Ile | Leu | Lys | Ala | Arg | Lys | Gin | Tyr | Ala | Tyr | Gly | Ala | Gin | His |
385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
Asp | Tyr | Phe | Asp | His | His | Asp | Ile | Val | Gly | Trp | Thr | Arg | Glu | Gly | Asp |
405 | 410 | 415 | |||||||||||||
Ser | Ser | Val | Ala | Asn | Ser | Gly | Leu | Ala | Ala | Leu | Ile | Thr | Asp | Gly | Pro |
420 | 425 | 430 | |||||||||||||
Gly | Gly | Ala | Lys | Arg | Het | Tyr | Val | Gly | Arg | Gin | Asn | Ala | Gly | Glu | Thr |
435 | 440 | 445 | |||||||||||||
Trp | His | Asp | Ile | Thr | Gly | Asn | Arg | Ser | Glu | Pro | Val | Val | Ile | Asn | Ser |
450 | 455 | 460 | |||||||||||||
Glu | Gly | Trp | Gly | Glu | Phe | His | Val | Asn | Gly | Gly | Ser | Val | Ser | Ile | Tyr |
465 | 470 | 475 | 480 | ||||||||||||
Val | Gin | Arg |
2) Informace pro řetězec č. 33:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 511 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 33
Met | Lys | Gin | Gin | Lys | Arg | Leu | Tyr | Ala | Arg | Leu | Leu | Thr | Leu | Leu | Phe |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||||
Ala | Leu | Ile | Phe | Leu | Leu | Pro | His | Ser | Ala | Ala | Ala | Ala | Ala | Asn | Leu |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||
Asn | Gly | Thr | Leu | Met | Gin | Tyr | Phe | Glu | Trp | Tyr | Met | Pro | Asn | Asp | Gly |
35 | 40 | 45 | |||||||||||||
His | Trp | Lys | Arg | Leu | Gin | Asn | Asp | Ser | Ala | Tyr | Leu | Ala | Glu | His | Gly |
50 | 55 | 60 | |||||||||||||
Xle | Thr | Ala | Val | Trp | Ile | Pro | Pro | Ala | Tyr | Lys | Gly | Thr | Ser | Gin | Ala |
65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
Asp | Val | Cly | Tyr | cly | Ala | Tyr | Asp | Leu | Tyr | Asp | Leu | Gly | Glu | Phe | His |
85 | 90 | 95 | |||||||||||||
Gin | Lys | Gly | Thr | Val | Arg | Thr | Lys | Tyr | Gly | Thr | Lys | Gly | Glu | Leu | Gin |
-31 CZ 293163 B6
100 105 110
Ser Ala | Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile | Asn Val 125 | Tyr Gly | Asp | |||||||||||
115 | 120 | ||||||||||||||
Val | Val | Ile | Asn | His | Lys | Gly | Gly | Ala | Asp | Ala | Thr | Glu | Asp | Val | Thr |
130 | 135 | 140 | |||||||||||||
Ala | Val | Glu | Val | Asp | Pro | Ala | Asp | Arg | Asn | Arg | Val | Ile | Ser | Gly | Glu |
145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
His | Leu | Ile | Lys | Ala | Trp | Thr | His | Phe | His | Phe | Pro | Gly | Arg | Gly | Ser |
165 | 170 | 175 | |||||||||||||
Thr | Tyr | Ser | Asp | Phe | Lys | Trp | His | Trp | Tyr | His | Phe | Asp | Gly | Thr | Asp |
180 | 185 | 19C | |||||||||||||
Trp | Asp | Glu | Ser | Arg | Lys | Leu | Asn | Arg | Ile | Tyr | Lys | Phe | Gin | Gly | Lys |
195 | 200 | 205 | |||||||||||||
Ala | Trp | Asp | Trp | Glu | Val | Ser | Asn | Glu | Asn | Gly | Asn | Tyr | Asp | Tyr | Leu |
210 | 215 | 220 | |||||||||||||
Met | Tyr | Ala | Asp | Ile | Asp | Tyr | Asp | His | Pro | Aso | Val | Ala | Ala | Glu | Ile |
225 | 23C | 235 | 240 | ||||||||||||
Lys | Arg | Trp | Gly | Thr | Trp | Tyr | Ala | Asn | Glu | Leu | Gin | Leu | Asp | Gly | Phe |
245 | 250 | 255 | |||||||||||||
Arg | Leu | Asp | Ala | Val | Lys | His | Ile | Lys | Phe | Ser | Phe | Leu | Arg | Asp | Trp |
260 | 265 | 270 | |||||||||||||
val | Asn | His | Val | Arg | Clu | Lys | Thr | Gly | Lys | Glu | Met | Phe | Thr | Val | Ala |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
Glu | Tyr | Trp | Gin | Asn | Asp | Leu | Gly | Ala | Leu | Glu | Asn | Tyr | Leu | Asn | Lys |
290 | 295 | 300 | |||||||||||||
Thr | Asn | Phe | Asn | His | ser | Val | Phe | Asp | Val | Pro | Leu | His | Tyr | Gin | Phe |
305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
His | Ala | Ala | Ser | Thr | Gin | Gly | Cly | Gly | Tyr | Asp | Met | Arg | Lye | Leu | Leu |
325 | 330 | 335 | |||||||||||||
Asn | Gly | Thr | Val | Val | Ser | Lys | His | Pro | Leu | Lys | Ser | Val | Thr | Phe | Val |
340 | 345 | 350 | |||||||||||||
Asp | Asn | His | Asp | Thr | Gin | Pro | Gly | Gin | Ser | Leu | Glu | Ser | Thr | val | Gin |
355 | 360 | 365 | |||||||||||||
Thr | Trp | Phe | Lys | Pro | Leu | Ala | Tyr | Ala | Phe | Ile | Leu | Thr | Arg | Glu | Ser |
370 | 375 | 380 | |||||||||||||
cly | Tyr | Pro | Gin | Val | Phe | Tyr | Gly Asp | Met | Tyr | Gly | Thr | Lys | cly | Asp | |
385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
Ser | Gin | Arg | Glu | Ile | Pro | Ala | Leu | Lys | His | Lys | Ile | Glu | Pro | Ile | Leu |
405 | 410 | 415 | |||||||||||||
Lys | Ala | Arg | Lys | Gin | Tyr | Ala | Tyr | Gly | Ala | Gin | His | Asp | Tyr | Phe | Asp |
420 | 425 | 430 | |||||||||||||
His | His | Asp | Ile | Val | Gly | Trp | Thr | Arg | Glu | Gly | Asp | Ser | Ser | Val | Ala |
435 | 440 | 445 | |||||||||||||
Asn | Ser | Gly | Leu | Ala | Ala | Leu | Ile | Thr | Asp Gly | Pro | Gly | Gly | Ala | Lys | |
450 | 455 | 460 |
-32CZ 293163 B6
Arg 465 | Met Tyr | Val Gly | Arg Gin Asn Ala Gly Glu | Thr | Trp | His | Asp | Ile 460 | |||||||
470 | 475 | ||||||||||||||
Thr | Gly | Asn | Arg | Ser | Glu | Pro | Val | Val | Ile | Asn | Ser | Clu | Gly | Trp | Gly |
485 | 490 | 495 | |||||||||||||
Glu | Phe | His | Val | Asn | Gly | Gly | Ser | Val | Ser | Ile | Tyr | Val | Gin | Arg | |
500 | 505 | 510 |
2) Informace pro řetězec č. 34:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 520 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 34
Met Arg 1 | Gly | Arg | Gly S | Asn Met | Ile Gin Lys 10 | Arg | Lys | Arg | Thr | val 15 | Ser | ||||
Phe | Arg | Leu | Val | Leu | Met | Cys | Thr | Leu | Leu | Phe | Val | Ser | Leu | Pro | Ile |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||
Thr | Lys | Thr | Ser | Ala | Val | Asn | Gly | Thr | Leu | Met | Gin | Tyr | Phe | Glu | Trp |
35 | 40 | 45 | |||||||||||||
Tyr | Thr | Pro | Asn | Asp | Gly | Gin | His | Trp | Lys | Arg | Leu | Gin | Asn | Asp | Ala |
50 | 55 | 60 | |||||||||||||
Glu | His | Leu | Ser | Asp | Zle | Gly | Ile | Thr | Ala | Val | Trp | Ile | Pro | Pro | Ala |
65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
Tyr | Lys | Gly | Leu | Ser | Gin | Ser | Asp | Asn | Gly | Tyr | Gly | Pro | Tyr | Asp | Leu |
85 | 90 | 95 | |||||||||||||
Tyr | Asp | Leu | Gly | Glu | Phe | Gin | Gin | Lys | Gly | Thr | Val | Arg | Thr | Lys | Tyr |
100 | 105 | 110 | |||||||||||||
Gly | Thr | Lys | Ser | Glu | Leu | Gin | Asp | Ala | Ile | Gly | Ser | Leu | His | Ser | Arg |
115 | 120 | 125 | |||||||||||||
Asn | Val | Gin | Val | Tyr | Gly | Asp | Val | Val | Leu | Asn | His | Lys | Ala | Gly | Ala |
130 | 135 | 140 |
-33CZ 293163 B6
Asp Ala Thr Glu Asp Val | Thr Ala Val | Glu Val Asn Pro Ala Asn Ara | |||||||||||||
145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
Asn | Gin | Glu | Thr | Ser | Glu | Glu | Tyr | Gin | Ile | Lys | Ala | Trp | Thr | Asp | Phe |
165 | 170 | 175 | |||||||||||||
Arg | Phe | Pro | Gly | Arg | Gly | Asn | Thr | Tyr | Ser | Asp | Phe | Lys | Trp | His | Trp |
180 | 185 | 190 | |||||||||||||
Tyr | His | Phe | Asp Gly | Ala | Asp | Tru | Asp | Glu | Ser | Arg | Lys | Ile | Ser | Arg | |
195 | 200 | 205 | |||||||||||||
Ile | Phe | Lys | Phe | Arg | Gly | Glu | Gly | Lys | Ala | Trp | Asd | Trp | Glu | Val | Ser |
210 | 215 | 220 | |||||||||||||
Ser | Glu | Asn | Gly | Asn | Tyr | Asp | Tyr | Leu | Met | Tyr | Ala | Asp | Val | Asp | Tyr |
225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
Asp | His | Pro | Asp | Val | Val | Ala | Glu | Thr | Lys | Lys | Trp | Gly | Zle | Trp | Tyr |
245 | 2S0 | 255 | |||||||||||||
Ala | Asn | Glu | Leu | Ser | Leu | Asp | Gly | Phe | Arg | Ile | Asp | Ala | Ala | Lys | His |
260 | 265 | 270 | |||||||||||||
Ile | Lys | Phe | Ser | Phe | Leu | Arg | ASp | Trp | Val | Gin | Ala | Val | Arg | Gin | Ala |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
Thr | Gly | Lys | Glu | Met | Phe | Thr | Val | Ala | Glu | Tyr | Trp | Gin | Asn | Asn | Ala |
290 | 295 | 300 | |||||||||||||
Gly | Lys | Leu | Glu | Asn | Tyr | Leu | Asn | Lys | Thr | Ser | Phe | Asn | Gin | Ser | Val |
305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
Phe | Asp | val | Pro | Leu | His | Phe | Asn | Leu | Gin | Ala | Ala | Ser | Ser | Gin | Gly |
325 | 330 | 335 | |||||||||||||
Gly | Gly | Tyr | Asp | Met | Arg | Arg | Leu | Leu | Asp | Gly | Thr | Val | Val | Ser | Arg |
340 | 345 | 350 | |||||||||||||
His | Pro | Glu | Lys | Ala | Val | Thr | Phe | Val | Glu | Asn | His | Asp | Thr | Gin | Pro |
355 | 360 | 365 | |||||||||||||
Gly | Gin | Ser | Leu | Glu | Ser | Thr | Val | Gin | Thr | Trp | Phe | Lys | Pro | Leu | Ala |
370 | 375 | 380 | |||||||||||||
Tyr | Ala | Phe | Ile | Leu | Thr | Arg | Glu | Ser | Gly | Tyr | Pro | Gin | Val | Phe | Tyr |
385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
Gly | Asp | Met | Tyr | Gly | Thr | Lys | Gly | Thr | Ser | Pro | Lys-Glu | Ile | Pro | Ser | |
405 | 410 | 415 | |||||||||||||
Leu | Lys | Asp | Asn | Ile | Glu | Pro | Ile | Leu | Lys | Ala | Arg | Lye | Glu | Tyr | Ala |
420 | 425 | 430 | |||||||||||||
Tyr | Gly | Pro | Gin | Hifi | Asp Tyr | Ile | Asp | His | Pro | Asp | Val | Ile | Gly | Trp | |
435 | 440 | 445 | |||||||||||||
Thr | Arg | Glu | Gly Asp | Ser | Ser | Ala | Ala | Lys | Ser | Gly | Leu | Ala | Ala | Leu | |
450 | 455 | 460 | |||||||||||||
11· | Thr | Asp | Gly Pro Gly | Gly | Ser | Lye | Arg | Met | Tyr | Ala | Gly | Leu | Lys | ||
465 | 470 | 475 | 480 |
-34CZ 293163 B6
Asn | Ala | Cly | Glu | Thr 485 | Trp Tyr | Asp | Xle |
Val | Lys | Ile | Civ 500 | Ser | Asp Cly | Trp | Gly 505 |
Ser | Val | Ser 515 | Ile | Tyr | Val Gin | Lys 520 |
Thr cly Asn Arg Ser
490
Glu Phe His Val Asn
510
Asp Thr
495
Asp Cly
Informace pro řetězec č. 35:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 548 aminokyselin B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 35
Informace pro řetězec č. 35:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 548 aminokyselin B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 35
Val 1 | Leu | Thr | Phe | His 5 | Arg | Ile | Ile |
Ala | Phe | Leu | Leu 20 | Thr | Ala | Ser | Leu |
Lya | Ala | Ala 35 | Ala | Pro | Phe | Asn | Gly 40 |
Tyr | Leu 50 | Pro | Asp | Asp | Gly | Thr 55 | Leu |
Asn 65 | Asn | Leu | Ser | Ser | Leu 70 | Gly | Ile |
Tyr | Lys | Gly | Thr | Ser 85 | Arg | Ser | Asp |
Tyr | Asp | Leu | Gly 100 | Glu | Phe | Asn | Gin |
Gly | Thr | Lys 115 | Ala | Gin | Tyr | Leu | Gin 120 |
Gly | Met 130 | Gin | Val | Tyr | Ala | Asp 135 | Val |
Asp 145 | Gly | Thr | Glu | Trp | Val 150 | Asp | Ala |
Asn | Gin | Clu | Ile | Ser 165 | Gly | Thr | Tyr |
Asp | Phe | Pro | Gly 180 | Arg | Gly | Asn | Thr |
Arg | Lys 10 | Gly | Trp | Met | Phe | Leu 15 | Leu |
Phe 25 | Cys | Pro | Thr | Gly | Arg 30 | His | Ala |
Thr | Met | Met | Gin | Tyr 45 | Phe | Glu | Trp |
Trp | Thr | Lys | Val 60 | Ala | Asn | Glu | Ala |
Thr | Ala | Leu 75 | Ser | Leu | Pro | Pro | Ala 80 |
Val | Gly 90 | Tyr | Gly | Val | Tyr | Asp 95 | Leu |
Lys 105 | Gly | Thr | Val | Arg | Thr 110 | Lya | Tyr |
Ala | Ile | Gin | Ala | Ala 125 | His | Ala | Ala |
Val | Phe | Asp | His 140 | Ly6 | Gly | Gly | Ala |
Val | Clu | Val 155 | Asn | Pro | Ser | Asp | Arg 160 |
Gin | Ile 170 | Gin | Ala | Trp | Thr | Lys 175 | Phe |
Tyr 185 | Ser | Ser | Phe | Lys | Trp 190 | Arg | Trp |
-35CZ 293163 B6
Tyr | His | Phe 195 | Asp | Gly | Val | Asp | Trp 200 | Asp | Glu | Ser | Arg | Lys 205 | Leu | Ser | Arg |
Ile | Tyr 210 | Lys | Phe | Arg | Gly | Ile 215 | Gly | Lys | Ala | Trp | Asp 220 | Trp | Glu | Val | Asp |
Thr | Glu | Asn | Gly | Asn | Tvr | Asp | Tyr | Leu | Met | Tyr | Ala | Asp | Leu | Asp | Met |
225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
Asp | His | Pro | Glu | val 245 | Val | Thr | clu | Leu | Lvs 250 | Asn | Trp | Gly | Lye | Trp 255 | Tyr |
Val | Asn | Thr Thr Asn 260 | Ile | Asp Gly | Phe Arg Leu Asp Gly Leu Lys His | ||||||||||
265 | 270 | ||||||||||||||
Ile | Lys | Phe | Ser | Phe | Phe | Pro | Asp | Trp | Leu | Ser | Tyr | Val | Arg | Ser | Gin |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
Thr | Glv 290 | Lys | Pro | Leu | Phe | Thr 295 | Val | Gly | Glu | Tyr | Trp 300 | Ser | Tyr | Asp | Ile |
Asn 305 | Lys | Leu | His | Asn | Tyr 310 | Ile | Thr | Lys | Thr | Asn 315 | Gly | Thr | Met | Ser | Leu 320 |
Phe | Asp | Ala | Pro | Leu 325 | His | Asn | Lys | Phe | Tyr 330 | Thr | Ala | Ser | Lys | Ser 335 | Gly |
Gly | Ala | Phe | Asp 340 | Met | Arg | Thr | Leu | Met 345 | Thr | Asn | Thr | Leu | Met 350 | Lys | Asp |
Gin | Pro | Thr | Leu | Ala | Val | Thr | Phe | val | Asp | Asn | His | Asp | Thr | Asn | Pro |
355 | 360 | 365 | |||||||||||||
Ala | Lys 370 | Arg | Cys | Ser | His | Gly 375 | Arg | Pro | Trp | Phe | Lys 380 | Pro | l>eu | Ala | Tyr |
Ala 385 | Phe | Ile | Leu | Thr | Arg 390 | Gin | Glu | Gly | Tyr | Pro 395 | Cys | Val | Phe | Tyr | Gly 400 |
Asp | Tyr | Tyr | Gly | Ile 405 | Pro | Gin | Tyr | Asn | Ile 410 | Pro | Ser | Leu | Lys | Ser 415 | Lys |
Ile | Asp | Pro | Leu | Leu | Ile | Ala | Arg | Arg | Asp | Tyr | Ala | Tyr | Gly | Thr | Gin |
420 | 425 | 430 | |||||||||||||
His | Asp | Tyr 435 | Leu | Asp | His | Ser | Asp 440 | Ile | Ile | Gly | Trp | Thr 445 | Arg | Glu | Gly |
Val | Thr 450 | Glu | Lys | Pro | Gly | Ser 455 | Gly | Leu | Ala | Ala | Leu 460 | Ile | Thr | Asp | Gly |
Ala 465 | Oly | Arg | Ser | Lys | Trp 470 | Met | Tyr | Val | Gly | Lye 475 | Gin | His | Ala | Gly | Lys 480 |
Val | Phe | Tyr | Asp | Leu | Thr | Gly | Asn | Arg | Ser | Asp | Thr | Val | Thr | Ile | Asn |
485 | 490 | 495 | |||||||||||||
Ser | Asp | Gly | Trp | Gly | Glu | Phe | Lys | Val | Asn | Gly | Gly | Ser | Val | Ser | Val |
500 | 505 | 510 | |||||||||||||
Trp | Val | Pro | Arg | Lys | Thr | Thr | Val | Ser | Thr | Ile | Ala | Arg | Pro | Ile | Thr |
515 | 520 | 525 | |||||||||||||
Thr | Arg | Pro | Trp | Thr | Gly | Glu | Phe | Val | Arg | Trp | His | Glu | Pro | Arg | Leu |
530 | 535 | 540 |
Val Ala Trp Pro
545
-36CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 36:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 483 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 36
Ala 1 | Asn | Leu | Asn | Gly Thr Leu Met Gin Tyr | Phe Glu | Trp | Tyr | Her 15 | Pro | ||||||
5 | 10 | ||||||||||||||
Asn | Asp | Gly | Gin | His | Trp | Lys | Arg | Leu | Gin | Asn | Asp | Ser | Ala | Tyr | Leu |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||
Ala | Glu | His | Gly | Ile | Thr | Ala | Val | Trp | Ile | Pro | Pro | Ala | Tyr | Lys | Gly |
35 | 40 | 45 | |||||||||||||
Thr | Ser | Gin | Ala | Asp | Val | Gly | Tyr | Gly | Ala | Tyr | Asp | Leu | Tyr | Asp | Leu |
50 | 55 | 60 | |||||||||||||
Gly | Glu | Phe | His | Gin | Lys | Gly | Thr | Val | Arg | Thr | Lys | Tyr | Gly | Thr | Lys |
65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
Gly | Glu | Leu | Gin | Ser | Ala | Ile | Lys | Ser | Leu | His | Ser | Arg | Asp | Ile | Asn |
85 | 90 | 95 |
Val
Glu Ile
Gly
145
Asp
Phe
Tyr
Ala Leu
225
Tyr Gly Asp Val | Val Ile Asn | His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr | ||||||||||||
100 | 105 | 110 | ||||||||||||
Asp | Val | Thr | Ala | Val | Glu | Val | Asp | Pro | Ala | Asp | Arg | Asn | Arg | Val |
115 | 120 | 12S | ||||||||||||
Ser | Gly | Glu | His | Leu | Ile | Lys | Ala | Trp | Thr | His | Phe | His | Phe | Pro |
130 | 135 | 140 | ||||||||||||
Arg | Gly | Ser | Thr | Tyr | Ser | Asp | Phe | Lys | Trp | His | Trp | Tyr | His | Phe |
15D | 155 | 160 | ||||||||||||
Gly | Thr | Asp | Trp | Asp | Glu | Ser | Arg | Lys | Leu | Asn | Arg | Ile | Tyr | Lys |
165 | 170 | 175 | ||||||||||||
Gin | Gly | Lys | Ala | Trp | Asp | Trp | Glu | Val | Ser | Asn | Glu | Asn | Gly | Asn |
180 | 185 | 190 | ||||||||||||
Asp | Tyr | Leu | Thr | Tyr | Ala | Asp | Ile | Asp | Tyr | Asp | His | Pro | Asp | Val |
195 | 200 | 205 | ||||||||||||
Ala | Glu | Ile | Lys | Arg | Trp Gly | Thr | Trp | Tyr | Ala | Asn | Glu | Leu | Gin | |
210 | 215 | 220 | ||||||||||||
Asp | Gly | Phe | Arg | Leu | Asp | Ala | Val | Lys | His | Ile | Lys | Phe | Ser | Phe |
230 | 235 | 240 |
-37CZ 293163 B6
Leu Arg Asp Trp Val | Asn | His | Val Arg | Glu Lys Thr Gly 250 | Lys | Glu 255 | Her | ||||||||
245 | |||||||||||||||
Phe | Thr | Val | Ala | Glu | Tyr | Trp | Gin | Asn | Asp | Leu | Gly | Ala | Leu | Glu | Asn |
260 | 265 | 270 | |||||||||||||
Tyr | Leu | Asn | Lys | Thr | Asn | Phe | Asn | His | Ser | Val | Phe | Aso | Val | Pro | Leu |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
His | Tyr | Gin | Phe | His | Ala | Ala | Ser | Thr | Gin | Gly | Gly | Gly | Tyr | Asp | Met |
290 | 295 | 300 | |||||||||||||
Arg | Lys | Leu | Leu | Asn | Gly | Thr | Val | Val | Ser | Lve | His | Pra | Leu | Lys | Ser |
305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
Val | Thr | Phe | Val | Asp | Asn | His | Asp | Thr | Gin | Pro | Gly | Gin | Ser | Leu | Glu |
325 | 330 | 335 | |||||||||||||
Ser | Thr | Val | Gin | Thr | Trp | Phe | Lys | Pro | Leu | Ala | Tyr | Ala | Phe | Ile | Leu |
340 | 345 | 350 | |||||||||||||
Thr | Arg | Glu | Ser | Gly | Tyr | Pro | Gin | Val | Phe | Tyr | Gly | Asp | Met | Tyr | Gly |
355 | 360 | 365 | |||||||||||||
Thr | Lys | Gly | Asp | Ser | Gin | Arg | Glu | Ile | Pro | Ala | Leu | Lys | His | Lys | Ile |
370 | 375 | 380 | |||||||||||||
Glu | Prc | Ile | Leu | Lys | Ala | Arg | Lys | Gin | Tyr | Ala | Tyr | Gly | Ala | Gin | His |
385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
Asp | Tvx | Phe | Asp | His | His | Asp | Ile | Val | Gly | Trp | Thr | Arg | Glu | Gly | Asp |
405 | 410 | 415 | |||||||||||||
Ser | Ser | Val | Ala | Asn | Ser | Gly | Leu | Ala | Ala | Leu | Ile | Thr | Asp | Gly | Pro |
420 | 425 | 430 | |||||||||||||
Gly | Gly | Ala | Lys | Arg | Met | Tyr | Val | Gly | Arg | Gin | Asn | Ala | Gly | Glu | Thr |
435 | 440 | 445 | |||||||||||||
Trp | His | Asp | Ile | Thr | Gly | Asn | Arg | Ser | Glu | Pro | Val | Val | Ile | Asn | Ser |
4S0 | 455 | 460 | |||||||||||||
Glu | Gly Trp Gly | Glu | Phe | His | Val | Asn | Gly | Gly | Ser | Val | Ser | Ile | Tyr |
465 | 470 | 475 | 480 |
Val Gin Arg |
2) Informace pro řetězec č. 37:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 487 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární io ii) typ molekuly: bílkovina
-38CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 37
Ala 1 | Ala | Ala | Ala Ala 5 | Asn Leu Asn Gly | Thr Leu Met Gin 10 | Tyr | Phe 15 | Glu | |||||||
Trp | Tyr | Meo | Pro | Asn | Asp | Gly | Gin | His | Trp | Lys | Arg | Leu | Gin | Asn | Asp |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||
Ser | Ala | Tyr | Leu | Ala | Glu | His | Gly | Ile | Thr | Ala | Val | Ile | Pro | Pro | |
35 | 40 | 45 | |||||||||||||
Ala | Tyr | Lys | Gly | Thr | Ser | Gin | Ala | Asp | Val | Gly | Tvr | Gly | Ala | Ty | Asp |
50 | 55 | 60 | |||||||||||||
Leu | Tyr | Asp | Leu | Gly | Glu | Phe | His | Gin | Lys | Gly | Thr | Val | Arg | Th* | Lys |
63 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
Tyr | Gly | Thr | Lys | Glv | Glu | Leu | Gin | Ser | Ala | Ile | Lys | Ser | Leu | His | ser |
B5* | 90 | 95 | |||||||||||||
g | Asp | Ile | Asn | Val | Tyr | Gly | Asp | Val | Val | Ile | Asn | His | Lys | Gly | Gly |
100 | 105 | 110 | |||||||||||||
Ala | Asp | Ala | Thr | Glu | Asp | Val | Thr | Ala | Val | Glu | Val | Asn | Pro | Ala | Asp |
115 | 120 | 12*5 | |||||||||||||
Arg | Asn | Arg | Val | Ile | Ser | Gly | Glu | His | Leu | Ile | Lys | Ala | Trp | Thr | His |
130 | 135 | 140 | |||||||||||||
Phe | His | Phe | Pro | Gly | Arg | Gly | Ser | Thr | Tyr | Ser | Asp | Phe | Lys | Trp | His |
145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
Trp | Tyr | His | Phe | Asp | Gly' Thr | Asp | Trp | Asp | Glu | Ser | Arg | Lys | Leu | Asn | |
165 | 170 | 175 | |||||||||||||
Arg | Ile | Tyr | Lvs | Phe | Glr. | Gly | Lys | Ala | Trp | Asp | Trp | Glu | Val | Ser | Asn |
180 | 185 | 190 | |||||||||||||
Glu | Asn | Gly | Asn | Tyr | Asp | Tyr | Leu | Het | Tyr | Ala | Asp | Ile | Asp | Tyr | Asp |
195 | 200 | 205 | |||||||||||||
Eíe | Pro | Asp | Val | Ala | Ala | Glu | Ile | Lys | Arg | Trp | Glv | Thr | Trp | Tyr | Ala |
210 | 215 | 220 | |||||||||||||
Asn | Glu | Leu | Gin | Leu | Asp | Gly | Phe | Arg | Leu | Asp | Ala | Val | Lys | His | Ile |
225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
Lys | Phe | Ser | Phe | Leu | Arg | Asp | Trp | Val | Asn | His | Val | Arg | Glu | Lys | Thr |
245 | 250 | 255 |
Gly Lys | Glu | Met Phe 260 | Thr | Val | Ala | Glu 265 | Tyr | Trp | Gin Asn | Asp 270 | Leu Gly | ||||
Ala | Leu | Glu | Asn | Tyr | Leu | Asn | Lys | Thr | Asn | Phe | Asn | His | Ser | Val | Phe |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
Asp | Val | Pro | Leu | His | Tyr | Gin | Phe | His | Ala | Ala | Ser | Thr | Gin | Gly | Gly |
290 | 295 | 300 | |||||||||||||
Gly 305 | Tyr | Asp | Met | Arg | Lys 310 | Leu | Leu | Asn | Gly | Thr 315 | Val | Val | Ser | Lys | His 320 |
Pro | Leu | Lys | Ser | Val | Thr | Phe | Val | Asp | Asn | His | Asp | Thr | Gin | Pro | Gly |
325 | 330 | 335 | |||||||||||||
Gin | ser | Leu | Glu | Ser | Thr | Val | Gin | Thr | Trp | Phe | Lys | Pro | Leu | Ala | Tyr |
340 | 345 | 350 |
-39CZ 293163 B6
Ala Phe Zle Leu Thr | Arg Glu | Ser Gly Tyr Pro Gin Val Phe | Tyr Gly | ||||||||||||
355 | 360 | 365 | |||||||||||||
ASD | Met | Tyr | Gly | Thr | Lys | Gly | Asp | Ser | Gin | Arg | Glu | Ile | Pro | Ala | Leu |
370 | 375 | 380 | |||||||||||||
Lve | His | Lys | Zle | Glu | Pro | Ile | Leu | Lys | Ala | Arg | Lys | Gin | Tyr | Ala | Tyr |
385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
Gly | Ala | Gin | His | ASp | Tyr | Phe | Asp | His | His | Asp | Zle | Val | Gly | Trp | Thr |
405 | 410 | 415 | |||||||||||||
Arg | Glu | Gly | Asp | Ser | Ser | Val | Ala | Asn | ser | Gly | Leu | Ala | Ala | Leu | Zle |
420 | 425 | 430 | |||||||||||||
Thr | Asp | Gly | Pro | Gly | Gly | Ala | Lvs | Arg | Met | Tyr | Val | Gly | Arg | Gin | Asn |
435 | 4*40 | 445 | |||||||||||||
Ala | Gly | Glu | Thr | Trp | His | Asp | Ile | Thr | Gly | Asn | Arg | Ser | Glu | Pro | Val |
4S0 | 455 | 460 | |||||||||||||
Val | Zle | Asn | Ser | Glu | Gly | Trp | Gly | Glu | Phe | His | Val | Asn | Gly | Gly | Ser |
465 | 470 | 475 | 480 |
Val | Ser Zle Tyr Val Gin Arg 485 |
2) Informace pro řetězec č. 38:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 32 aminokyselin B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 38
Met | Lys Gin | Gin | Lys Arg Leu | Thr | Ala | Arg | Leu | Leu | Thr | Leu | Leu | Phe |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Ala | Leu Ile | Phe | Leu Leu Pro | His | Ser | Ala | Ala | Ala | Ala | Ala | Asn | Leu |
20 | 25 | 30 |
2) Informace pro řetězec č. 39:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 33 aminokyselin B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina
xi) popis řetězce: č. 39
Met 1 | Arg | ser Lys | Thr 5 | Leu | Trp | Zle | Ser | Leu 10 | Leu | Phe | Ala | Leu | Thr 15 | Leu |
Ile | Phe | Thr Met 20 | Ala | Phe | ser | Asn | Met 25 | Ser | Ala | Gin | Ala | Ala 30 | Gly | Lys |
Ser
2) Informace pro řetězec č. 40:
i) charakteristika řetězce: A - 35 aminokyselin
B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 40
Met 1 | Arg Ser Lys Thr 5 | Leu Trp | Ile Ser Leu 10 | Leu | Phe | Ala | Leu | Thr 15 | Leu | ||||||
Ile | Phe | Thr | Met | Ala | Phe | Ser | Asn | Met | Ser | Ala | Gin | Ala | Ala | Ala | Ala |
20 | 25 | 30 |
Ala Ala Asn
2) Informace pro řetězec č. 41:
i) charakteristika řetězce: A - 32 aminokyselin
B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 41
Met 1 | Arg | Ser | Lys | Thr 5 | Leu | Trp | Zle | Ser | Leu 10 | Leu | Phe | Ala | Leu | Thr 15 | Leu |
Ile | Phe | Thr | Met 20 | Ala | Phe | Ser | Asn | Met 25 | Ser | Ala | Gin | Ala | Ala 30 | Asn | Leu |
-41 CŽ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 42:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 33 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 42
CACCTAATTA AAGCTTTCAC ACATTTTCAT TTT
2) Informace pro řetězec č. 43:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 33 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 43
CACCTAATTA AAGCTTACAC ACATTTTCAT TTT
2) Informace pro řetězec č. 44:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 66 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 44
CCGCGTAATT TCCGGAGAAC ACCTAATTAA AGCCGCAACA CATTTTCATT TTCCCGGGCG CGGCAG 66
2) Informace pro řetězec č. 45:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 42 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární
-42CZ 293163 B6 i i) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 45
CCGGAGAACA CCTAATTAAA GCCCTAACAC ATTTTCATTT TC
2) Informace pro řetězec č. 46:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 42 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 46
CCGGAGAACA CCTAATTAAA GCCCACACAC ATTTTCATTT TC
2) Informace pro řetězec č. 47:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 42 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 47
CCGGAGAACA CCTAATTAAA GCCTGCACAC ATTTTCATTT TC 42
2) Informace pro řetězec č. 48:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 48
GATGCAGTAT TTCGAACTGG TATA
-43CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 49:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 26 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 49
TGCCCAATGA TGGCCAACAT TGGAAG
2) Informace pro řetězec č. 50:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 50
CGAATGGTAT GCTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 51:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 51
CGAATGGTAT CGCCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 52:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu)
-44CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 52
CGAATGGTAT AATCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 53:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 53
CGAATGGTAT GATCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 54:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 54
CGAATGGTAT CACCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 55:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 55
CGAATGGTAT AAACCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 56:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
-45CZ 293163 B6
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 56
CGAATGGTAT CCGCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 57:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 57
CGAATGGTAT TCTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 58:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 58
CGAATGGTAC ACTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 59:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 59
CGAATGGTAT GTTCCCAATG ACGG 24
-46CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 60:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 60
CGAATGGTAT TGTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 61:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 61
CGAATGGTAT CAACCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 62:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 62
CGAATGGTAT GAACCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 63:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu)
-47CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 63
CGAATGGTAT GGTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 64
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 64
CGAATGGTAT ATTCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 65:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 65
CGAATGGTAT TTTCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 66:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 66
CGAATGGTAC TGCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 67:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
-48CZ 293163 B6
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 67
CGAATGGTAT TATCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 68:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 68
CCGTCATTGG GACTACGTAC CATT
Claims (22)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Mutanta alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzoru alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+l 5 nebo M+197 v alfa-amyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina, použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu.
- 2. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 1, v níž zbytkem oxidovatelné aminokyseliny v prekurzoru alfa-amylázy, vypuštěným nebo nahrazeným zbytkem přírodní aminokyseliny s výjimkou Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu je zbytek methioninu v poloze +8, +15,+197, +256, +304, +366 nebo +438 v alfa-amyláze Bacillus licheniformis.
- 3. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 2, v níž se vypuštěný nebo nahrazený zbytek methioninu nachází v poloze+197 v alfa-amyláze B. licheniformis.
- 4. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 3, v níž je methionin v poloze+197 v alfa-amyláze B. licheniformis nahrazen zbytkem aminokyseliny ze skupiny alanin, threonin nebo cystein.
- 5. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 4, M197T.
- 6. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 2, v níž je vypuštěn nebo nahrazen zbytek M+15 v alfa-amyláze B. licheniformis.
- 7. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 6, v níž je zbytek methioninu v poloze+15 v alfaamyláze B. licheniformis nahrazen zbytkem aminokyseliny ze skupiny threonin, aspartát a valin.-49CZ 293163 B6
- 8. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 1, v níž jsou nahraženy alespoň dva zbytky aminokyselin v prekurzorů alfa-amylázy v polohách, ekvivalentních +15,+138 nebo +197 v alfa-amyláze B. licheniformis.
- 9. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 1, v níž se prekurzor volí z kmenů ze skupiny B. licheniformis, B. stearothermiphylus a B. amyloliquefaciens.
- 10. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 9, pro níž je prekurzorem alfa-amyláza B. licheniformis.
- 11. Kódová DNA pro mutantu alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzorů alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+15 nebo M+197 v alfaamyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina, použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu.
- 12. Vektor pro expresi, obsahující kódovou DNA podle nároku 11.
- 13. Hostitelské buňky, transformované vektorem pro expresi podle nároku 12.
- 14. Čisticí prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje mutantu alfa-amylázy podle nároku 1.
- 15. Čisticí prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahuje mutantu alfa-amylázy podle nároku 1, v poloze, ekvivalentní poloze Ml97 v alfa-amyláze B. licheniformis.
- 16. Čisticí prostředek podle nároku 15,vyznačující se tím, že prostředek je ve formě kapaliny, gelu nebo granulátu.
- 17. Čisticí prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že navíc obsahuje ještě alespoň jeden další enzym ze skupiny proteáza, lipáza, celulóza nebo jiná amyláza.
- 18. Prostředek pro zkapalnění škrobu, vyznačující se tím, že obsahuje mutantu alfa-amylázy podle nároku 1.
- 19. Prostředek pro zkapalnění škrobu podle nároku 18, vyznačující se tím, že obsažená alfa-amyláza podle nároku 1 obsahuje mutaci v poloze, ekvivalentní poloze Ml5 v alfa-amyláze B. licheniformis.
- 20. Způsob zkapalnění suspenze granulovaného škrobu, získaného mletím za vlhka nebo za sucha při pH až méně než 6, vyznačující se tím, že sea) k suspenzi přidá účinné množství mutanty alfa-amylázy podle nároku 1,b) popřípadě se k suspenzi přidá účinné množství antioxidačního činidla ac) suspenze se nechá reagovat do zkapalnění škrobu.
- 21. Způsob podle nároku 20 pro zkapalnění suspenze granulovaného škrobu, získaného mletím za vlhka nebo za sucha při pH 4 až méně než 6, vyznačující se tím, že sea) k suspenzi přidá účinné množství alfa-amylázy podle nároku 8,b) popřípadě se k suspenzi přidá účinné množství antioxidačního činidla ac) suspenze se nechá reagovat do zkapalnění škrobu.
- 22 výkresů-50CZ 293163 B6
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US1639593A | 1993-02-11 | 1993-02-11 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ205795A3 CZ205795A3 (en) | 1995-12-13 |
CZ293163B6 true CZ293163B6 (cs) | 2004-02-18 |
Family
ID=21776903
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ19952057A CZ293163B6 (cs) | 1993-02-11 | 1994-02-10 | Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US6297037B1 (cs) |
EP (2) | EP0689589B2 (cs) |
JP (1) | JPH08506491A (cs) |
KR (1) | KR100322793B1 (cs) |
CN (1) | CN1104499C (cs) |
AT (2) | ATE239075T1 (cs) |
AU (1) | AU682863C (cs) |
BR (1) | BR9405720A (cs) |
CA (1) | CA2155831C (cs) |
CZ (1) | CZ293163B6 (cs) |
DE (2) | DE69415659T3 (cs) |
DK (2) | DK0689589T4 (cs) |
ES (2) | ES2126743T5 (cs) |
FI (2) | FI119694B (cs) |
HU (1) | HU219675B (cs) |
NO (1) | NO307187B1 (cs) |
NZ (1) | NZ262623A (cs) |
PL (1) | PL310326A1 (cs) |
PT (1) | PT867504E (cs) |
WO (1) | WO1994018314A1 (cs) |
Families Citing this family (716)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE69434635D1 (en) | 1993-10-08 | 2006-04-27 | Novo Nordisk As | Amylasevarianten |
EP0722490B2 (en) * | 1993-10-08 | 2013-10-23 | Novozymes A/S | Amylase variants |
US5830837A (en) * | 1994-11-22 | 1998-11-03 | Novo Nordisk A/S | Amylase variants |
TW268980B (cs) * | 1994-02-02 | 1996-01-21 | Novo Nordisk As | |
TW255887B (en) * | 1994-05-25 | 1995-09-01 | Lilly Co Eli | Synthesis of benzoquinolinones |
DE69534369T2 (de) * | 1994-06-17 | 2006-03-09 | Genencor International, Inc., Palo Alto | Von der alpha-amylase aus b. licheniformis abgeleitete amylolytische enzyme mit verbesserten eigenschaften |
CN1158637A (zh) * | 1994-08-11 | 1997-09-03 | 金内克国际公司 | 改进的清洁组合物 |
CN101117629B (zh) * | 1995-02-03 | 2014-06-11 | 诺维信公司 | 淀粉酶变体 |
US6440716B1 (en) | 1995-02-03 | 2002-08-27 | Novozymes A/S | α-amylase mutants |
US6093562A (en) * | 1996-02-05 | 2000-07-25 | Novo Nordisk A/S | Amylase variants |
AU4483496A (en) * | 1995-02-03 | 1996-08-21 | Novo Nordisk A/S | A method of designing alpha-amylase mutants with predetermined properties |
US7115409B1 (en) | 1995-02-03 | 2006-10-03 | Novozymes A/S | α-amylase mutants |
AR000862A1 (es) * | 1995-02-03 | 1997-08-06 | Novozymes As | Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del |
JPH11502562A (ja) * | 1995-03-24 | 1999-03-02 | ジェネンコア インターナショナル インコーポレーテッド | アミラーゼを含有する改善された洗濯洗剤組成物 |
EP0736597A1 (en) * | 1995-04-03 | 1996-10-09 | The Procter & Gamble Company | Soaker compositions |
US5922083A (en) * | 1995-04-03 | 1999-07-13 | Procter & Gamble Company | Detergent composition comprising a mutant amylase enzyme and oxygen bleaching agent |
US5736499A (en) * | 1995-06-06 | 1998-04-07 | Genencor International, Inc. | Mutant A-amylase |
CA2227752C (en) * | 1995-07-24 | 2003-12-30 | Procter & Gamble Far East Inc. | Dingy fabric clean-up with amylase enzyme in detergent compositions |
AR003020A1 (es) * | 1995-07-24 | 1998-05-27 | Procter & Gamble | Composicion detergente que comprende una amilasa de estabilidad oxidativa aumentada y un sistema surfactante especifico. |
CN1214721A (zh) * | 1995-07-24 | 1999-04-21 | 普罗格特-甘布尔公司 | 含有特殊的淀粉酶和直链烷基苯磺酸盐表面活性剂的洗涤剂组合物 |
EP0756000A1 (en) * | 1995-07-24 | 1997-01-29 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising specific amylase and linear alkyl benzene sulfonate surfactant |
WO1997004054A1 (en) * | 1995-07-24 | 1997-02-06 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising a specific amylase and a protease |
DE19605688A1 (de) * | 1996-02-16 | 1997-08-21 | Henkel Kgaa | Übergangsmetallkomplexe als Aktivatoren für Persauerstoffverbindungen |
CA2247501A1 (en) * | 1996-03-07 | 1997-09-12 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising improved amylases |
EP0798371A1 (en) * | 1996-03-29 | 1997-10-01 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising specific amylase and alkyl poly glucoside surfactants |
US6046149A (en) * | 1996-04-17 | 2000-04-04 | Procter & Gamble Company | Detergent compositions |
AU2692897A (en) * | 1996-04-30 | 1997-11-19 | Novo Nordisk A/S | Alpha-amylase mutants |
JP2974786B2 (ja) | 1996-05-03 | 1999-11-10 | ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー | 改善された汚れ分散性を有するポリアミン重合体を含む洗剤組成物 |
US6211134B1 (en) * | 1996-05-14 | 2001-04-03 | Genecor International, Inc. | Mutant α-amylase |
US5763385A (en) * | 1996-05-14 | 1998-06-09 | Genencor International, Inc. | Modified α-amylases having altered calcium binding properties |
US6197070B1 (en) | 1996-05-15 | 2001-03-06 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising alpha combination of α-amylases for malodor stripping |
US5958739A (en) * | 1996-06-06 | 1999-09-28 | Genencor International Inc. | Mutant α-amylase |
BR9609755A (pt) * | 1996-06-19 | 1999-01-26 | Procter & Gamble | Composições detergentes compreendendo uma amilase específica e uma protease |
CZ34499A3 (cs) * | 1996-08-01 | 2000-01-12 | The Procter & Gamble Company | Použití specifického enzymu amylázy v pracím čistícím prostředku |
DE19649375A1 (de) | 1996-11-29 | 1998-06-04 | Henkel Kgaa | Acetonitril-Derivate als Bleichaktivatoren in Reinigungsmitteln |
US6194370B1 (en) | 1996-12-31 | 2001-02-27 | The Procter & Gamble Company | Cost effective stain and soil removal aqueous heavy duty liquid laundry detergent compositions |
EP0958342B1 (en) | 1996-12-31 | 2003-07-09 | The Procter & Gamble Company | Thickened, highly aqueous liquid detergent compositions |
DE19700327A1 (de) * | 1997-01-08 | 1998-07-09 | Henkel Kgaa | Protease- und amylasehaltiges Waschmittel |
US6486113B1 (en) * | 1997-03-31 | 2002-11-26 | Kao Corporation | Mutant α-amylases |
DE19732751A1 (de) | 1997-07-30 | 1999-02-04 | Henkel Kgaa | Neue Beta-Glucanase aus Bacillus |
DE19732749A1 (de) | 1997-07-30 | 1999-02-04 | Henkel Kgaa | Glucanasehaltiges Waschmittel |
DE19732750A1 (de) | 1997-07-30 | 1999-02-04 | Henkel Kgaa | Glucanasehaltiges Reinigungsmittel für harte Oberflächen |
US6080568A (en) * | 1997-08-19 | 2000-06-27 | Genencor International, Inc. | Mutant α-amylase comprising modification at residues corresponding to A210, H405 and/or T412 in Bacillus licheniformis |
EP1023439B1 (en) | 1997-10-13 | 2009-02-18 | Novozymes A/S | alpha-AMYLASE MUTANTS |
CA2845178A1 (en) | 1997-10-30 | 1999-05-14 | Novozymes A/S | .alpha.-amylase mutants |
DE19819187A1 (de) * | 1998-04-30 | 1999-11-11 | Henkel Kgaa | Festes maschinelles Geschirrspülmittel mit Phosphat und kristallinen schichtförmigen Silikaten |
DE19824687A1 (de) * | 1998-06-03 | 1999-12-09 | Henkel Kgaa | Amylase und Acetonitril-Derivate enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel |
DE19824705A1 (de) | 1998-06-03 | 1999-12-09 | Henkel Kgaa | Amylase und Protease enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel |
EP2261359B1 (en) | 1998-06-10 | 2014-08-20 | Novozymes A/S | Mannanases |
DE19850100A1 (de) | 1998-10-29 | 2000-05-04 | Henkel Kgaa | Polymer-Granulate durch Wirbelschichtgranulation |
DE69943346D1 (de) | 1998-12-18 | 2011-05-19 | Novozymes As | Subtilase Enzyme der I-S1- und I-S2-Untergruppen mit einem zusätzlichen Aminosäurerest in einer aktiven Schleifenregion |
DE19908051A1 (de) | 1999-02-25 | 2000-08-31 | Henkel Kgaa | Verfahren zur Herstellung compoundierter Acetonitril-Derivate |
US6410295B1 (en) | 1999-03-30 | 2002-06-25 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants |
DK1165762T3 (da) * | 1999-03-30 | 2007-09-03 | Novozymes As | Alpha-amylase varianter |
EP2011864B1 (en) | 1999-03-31 | 2014-12-31 | Novozymes A/S | Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same |
JP4750284B2 (ja) | 1999-03-31 | 2011-08-17 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | アルカリα−アミラーゼ活性を有するポリペプチド及びそれらをコードする核酸 |
AU4393100A (en) | 1999-05-20 | 2000-12-12 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additionalamino acid residue between positions 125 and 126 |
DE60040149D1 (de) | 1999-05-20 | 2008-10-16 | Novozymes As | Subtilase-enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit wenigstens einem zusätzlichen aminosäurerest zwischen positionen 126 und 127 |
ATE408676T1 (de) | 1999-05-20 | 2008-10-15 | Novozymes As | Subtilase enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit mindestens einer zusätzlichen aminosäure zwischen position 132 und 133 |
ATE408678T1 (de) | 1999-05-20 | 2008-10-15 | Novozymes As | Subtilase enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit mindestens einer zusätzlichen aminosäure zwischen position 129 und 130 |
ATE408679T1 (de) | 1999-05-20 | 2008-10-15 | Novozymes As | Subtilase enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit mindestens einer zusätzlichen aminosäure zwischen position 127 und 128 |
ATE408680T1 (de) | 1999-05-20 | 2008-10-15 | Novozymes As | Subtilase enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit mindestens einer zusätzlichen aminosäure zwischen position 128 und 129 |
EP1067181A1 (en) * | 1999-06-10 | 2001-01-10 | Rijksuniversiteit te Groningen | Enzyme selection |
NZ517409A (en) | 1999-08-31 | 2004-05-28 | Novozymes As | RP-II properties with amino acid substitutions used in detergent compositions and additives |
WO2001023274A1 (en) | 1999-09-30 | 2001-04-05 | The Procter & Gamble Company | Detergent package with means to mask amine malodours |
MXPA02003744A (es) * | 1999-10-15 | 2002-08-30 | Procter & Gamble | Composicion enzimatica liquida para limpieza. |
AU2099301A (en) * | 1999-12-23 | 2001-07-09 | Genencor International, Inc. | Method for obtaining proteins having improved functional characteristics |
JP5571274B2 (ja) | 2000-03-08 | 2014-08-13 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 改変された特性を有する変異体 |
WO2001096537A2 (en) * | 2000-06-14 | 2001-12-20 | Novozymes A/S | Pre-oxidized alpha-amylase |
DZ3349A1 (fr) | 2000-07-28 | 2002-02-07 | Henkel Kgaa | Nouvelle enzyme amylolytique issue de bacillus sp. a 7-7 (dsm 12368) ainsi que produits de lavage et nettoyage contenant ledit enzyme amylolytique |
US20020155574A1 (en) * | 2000-08-01 | 2002-10-24 | Novozymes A/S | Alpha-amylase mutants with altered properties |
WO2002010355A2 (en) | 2000-08-01 | 2002-02-07 | Novozymes A/S | Alpha-amylase mutants with altered stability |
AU2001279614B2 (en) | 2000-08-21 | 2006-08-17 | Novozymes A/S | Subtilase enzymes |
EP1975229A3 (en) | 2000-10-13 | 2009-03-18 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variant with altered properties |
ATE505537T1 (de) | 2000-10-13 | 2011-04-15 | Novozymes As | Subtilase varianten |
DE10058645A1 (de) | 2000-11-25 | 2002-05-29 | Clariant Gmbh | Verwendung von cyclischen Zuckerketonen als Katalysatoren für Persauerstoffverbindungen |
WO2002044350A2 (de) | 2000-11-28 | 2002-06-06 | Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien | Cyclodextrin-glucanotransferase (cg tase) aus bicillus agaradherens (dsm 9948) sowie wasch- und reinigungsmittel mit dieser neuen cyclodextrin-glucanotransferase |
DE10102248A1 (de) | 2001-01-19 | 2002-07-25 | Clariant Gmbh | Verwendung von Übergangsmetallkomplexen mit Oxim-Liganden als Bleichkatalysatoren |
US7659102B2 (en) | 2001-02-21 | 2010-02-09 | Verenium Corporation | Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
WO2002068597A2 (en) | 2001-02-21 | 2002-09-06 | Diversa Corporation | Enzymes having alpha amylase activity and methods of use thereof |
DE60234523D1 (de) | 2001-05-15 | 2010-01-07 | Novozymes As | Alpha-amylasevariante mit veränderten eigenschaften |
EP2298868B1 (en) | 2001-06-26 | 2015-01-07 | Novozymes A/S | Polypeptides having cellobiohydrolase I activity and polynucleotides encoding same |
DK200101090A (da) | 2001-07-12 | 2001-08-16 | Novozymes As | Subtilase variants |
US7153820B2 (en) | 2001-08-13 | 2006-12-26 | Ecolab Inc. | Solid detergent composition and method for solidifying a detergent composition |
US20030134396A1 (en) * | 2001-12-19 | 2003-07-17 | Shetty Jayarama K. | Process for hydrolyzing starch without pH adjustment |
DE10163748A1 (de) | 2001-12-21 | 2003-07-17 | Henkel Kgaa | Neue Glykosylhydrolasen |
JP2005520546A (ja) | 2002-03-27 | 2005-07-14 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | フィラメントコーティングを有する粒体 |
DK1520012T3 (da) | 2002-07-01 | 2009-04-27 | Novozymes As | Monopropylenglycol tilsat til fermenteringsmedium |
ATE494368T1 (de) | 2002-10-01 | 2011-01-15 | Novozymes As | Polypeptide der gh-61-familie |
WO2004042006A2 (en) | 2002-10-31 | 2004-05-21 | Diversa Corporation | Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
TWI319007B (en) | 2002-11-06 | 2010-01-01 | Novozymes As | Subtilase variants |
ATE438711T1 (de) | 2002-12-20 | 2009-08-15 | Novozymes As | Polypeptide mit cellobiohydrolase ii-aktivität und dafür kodierende polynucleotide |
EP1590455B1 (en) | 2003-01-27 | 2010-03-17 | Novozymes A/S | Stabilization of granules |
EP1597344A2 (en) | 2003-02-18 | 2005-11-23 | Novozymes A/S | Detergent compositions |
EP1597363B1 (en) * | 2003-02-26 | 2015-07-15 | Danisco US Inc. | Amylases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same |
EP2500423B1 (en) * | 2003-02-26 | 2015-06-17 | Danisco US Inc. | Amylases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same |
EP1507845B1 (en) | 2003-02-28 | 2007-01-03 | The Procter & Gamble Company | Foam-generating kit containing a foam-generating dispenser and a composition containing a high level of surfactant |
CA2517920C (en) * | 2003-03-10 | 2012-12-18 | Broin And Associates, Inc. | Method for producing ethanol using raw starch |
US20050233030A1 (en) | 2004-03-10 | 2005-10-20 | Broin And Associates, Inc. | Methods and systems for producing ethanol using raw starch and fractionation |
WO2004081022A2 (en) | 2003-03-10 | 2004-09-23 | Genencor International Inc. | Grain compositions containing pre-biotic isomalto-oligosaccharides and methods of making and using same |
ES2393058T3 (es) | 2003-05-02 | 2012-12-18 | Novozymes Inc. | Variantes de beta-glucosidasa |
CA2538349C (en) | 2003-06-25 | 2014-08-12 | Novozymes A/S | Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same |
CN103088001A (zh) | 2003-08-25 | 2013-05-08 | 诺维信股份有限公司 | 糖苷水解酶的变体 |
CN1867668A (zh) | 2003-10-10 | 2006-11-22 | 诺维信公司 | 蛋白酶变体 |
CN1871344A (zh) | 2003-10-23 | 2006-11-29 | 诺和酶股份有限公司 | 在洗涤剂中具有改善稳定性的蛋白酶 |
US7244605B2 (en) | 2003-10-28 | 2007-07-17 | Novozymes, Inc. | Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same |
EP1716224B1 (de) | 2003-12-13 | 2009-06-03 | Henkel AG & Co. KGaA | Mehrkomponenten-thin-to-thick-system |
WO2005066339A2 (en) | 2004-01-06 | 2005-07-21 | Novozymes A/S | Polypeptides of alicyclobacillus sp. |
ES2469874T3 (es) | 2004-01-30 | 2014-06-20 | Novozymes Inc | Polip�ptidos con actividad de mejora celulol�tica y polinucle�tidos que los codifican |
CN102250861A (zh) | 2004-02-13 | 2011-11-23 | 诺维信公司 | 蛋白酶变体 |
US20050239181A1 (en) * | 2004-03-10 | 2005-10-27 | Broin And Associates, Inc. | Continuous process for producing ethanol using raw starch |
US7148404B2 (en) | 2004-05-04 | 2006-12-12 | Novozymes A/S | Antimicrobial polypeptides |
MXPA06014649A (es) | 2004-06-21 | 2007-03-12 | Novozymes As | Proteasas. |
DK1781790T3 (en) | 2004-07-05 | 2016-01-18 | Novozymes As | ALFA-amylase variants WITH CHANGED PROPERTIES |
WO2006017294A1 (en) * | 2004-07-13 | 2006-02-16 | Novozymes North America, Inc | Liquefaction process |
ATE533843T1 (de) | 2004-09-21 | 2011-12-15 | Novozymes As | Subtilasen |
DK1794296T3 (da) | 2004-09-21 | 2012-07-30 | Novozymes As | Subtilaser |
ATE499439T1 (de) | 2004-09-21 | 2011-03-15 | Novozymes As | Subtilasen |
EP2302042A3 (en) | 2004-09-30 | 2011-08-10 | Novozymes A/S | Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same |
DE102004047776B4 (de) | 2004-10-01 | 2018-05-09 | Basf Se | Gegen Di- und/oder Multimerisierung stabilisierte Alpha-Amylase-Varianten, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung |
DE102004047777B4 (de) * | 2004-10-01 | 2018-05-09 | Basf Se | Alpha-Amylase-Varianten mit erhöhter Lösungsmittelstabilität, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung |
EP1700904A1 (en) | 2005-03-11 | 2006-09-13 | Unilever N.V. | Liquid detergent composition |
EP1700907A1 (en) | 2005-03-11 | 2006-09-13 | Unilever N.V. | Liquid bleaching composition |
ATE447013T1 (de) | 2005-04-27 | 2009-11-15 | Novozymes Inc | Polypeptide mit endoglucanase-aktivtät und dafür codierende polynukleotide |
US20070037267A1 (en) * | 2005-05-02 | 2007-02-15 | Broin And Associates, Inc. | Methods and systems for producing ethanol using raw starch and fractionation |
WO2007006305A1 (en) | 2005-07-08 | 2007-01-18 | Novozymes A/S | Subtilase variants |
ATE503010T1 (de) | 2005-08-16 | 2011-04-15 | Novozymes As | Polypeptide von stammbakterien sp p203 |
EP1920053B1 (en) | 2005-08-16 | 2011-10-26 | Novozymes A/S | Subtilases |
EP1941023B1 (en) | 2005-09-30 | 2017-04-05 | Novozymes Inc. | Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material |
DK1934342T3 (en) | 2005-09-30 | 2015-03-23 | Novozymes As | Immobilization of enzymes |
US7919289B2 (en) * | 2005-10-10 | 2011-04-05 | Poet Research, Inc. | Methods and systems for producing ethanol using raw starch and selecting plant material |
WO2007098756A1 (en) | 2006-03-02 | 2007-09-07 | Novozymes A/S | High capacity encapsulation process |
EP1998793A1 (en) | 2006-03-22 | 2008-12-10 | Novozymes A/S | Use of polypeptides having antimicrobial activity |
EP2383330A1 (en) | 2006-03-31 | 2011-11-02 | Novozymes A/S | A stabilized liquid enzyme composition |
US7968318B2 (en) * | 2006-06-06 | 2011-06-28 | Genencor International, Inc. | Process for conversion of granular starch to ethanol |
US8546106B2 (en) | 2006-07-21 | 2013-10-01 | Novozymes, Inc. | Methods of increasing secretion of polypeptides having biological activity |
US20080019956A1 (en) * | 2006-07-24 | 2008-01-24 | Manoj Kumar | Enzymatic prevention and control of biofilm |
US8383097B2 (en) | 2006-08-11 | 2013-02-26 | Novozymes Biologicals, Inc | Bacteria cultures and compositions comprising bacteria cultures |
WO2008040818A1 (en) | 2006-10-06 | 2008-04-10 | Novozymes A/S | Detergent compositions and the use of enzyme combinations therein |
US8541236B2 (en) * | 2006-12-08 | 2013-09-24 | University Of Washington | Mutant apolipoprotein A-1 polypeptide with increased resistance to oxidation and reactive carbonyls |
US20080299622A1 (en) * | 2007-02-07 | 2008-12-04 | Paulson Bradley A | Starch Hydrolysis Using Phytase with an Alpha Amylase |
US8093200B2 (en) | 2007-02-15 | 2012-01-10 | Ecolab Usa Inc. | Fast dissolving solid detergent |
US20080293607A1 (en) * | 2007-03-09 | 2008-11-27 | Jones Brian E | Alkaliphilic Bacillus Species alpha-Amylase Variants, Compositions Comprising alpha-Amylase Variants, And Methods of Use |
CA2681328C (en) | 2007-03-14 | 2015-10-06 | Danisco Us Inc. | Production of ethanol from barley and ddgs containing reduced beta-glucan and phytic acid |
CA2680370C (en) | 2007-03-23 | 2017-03-14 | Sarah Mchatton | Preventing and reducing biofilm formation and planktonic proliferation |
BRPI0809096A2 (pt) | 2007-03-23 | 2014-09-09 | Danisco Us Inc Genecor Division | Produção aumentada de amilase através da adição n-terminal à proteína amilase madura |
DE102007016139A1 (de) | 2007-03-30 | 2008-10-02 | Jenabios Gmbh | Verfahren zur regioselektiven Oxygenierung von N-Heterozyklen |
MX2009011319A (es) * | 2007-04-20 | 2009-12-11 | Enzon Pharmaceuticals Inc | Adenosina desaminasa recombinante estable. |
US8894898B2 (en) | 2007-10-18 | 2014-11-25 | Ecolab Usa Inc. | Pressed, waxy, solid cleaning compositions and methods of making them |
US7618801B2 (en) | 2007-10-30 | 2009-11-17 | Danison US Inc. | Streptomyces protease |
NZ584434A (en) | 2007-11-05 | 2011-12-22 | Danisco Us Inc | VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES |
US8206966B2 (en) | 2007-11-05 | 2012-06-26 | Danisco Us Inc. | Alpha-amylase variants with altered properties |
DE102007053615A1 (de) | 2007-11-08 | 2009-05-14 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Verbesserung der Duftwirkung von Riechstoff-Estern |
JP5427789B2 (ja) * | 2007-12-20 | 2014-02-26 | ダニスコ・ユーエス・インク | バイオフィルムの酵素的予防及び制御 |
DK2245130T3 (da) | 2008-02-04 | 2021-01-18 | Danisco Us Inc | Ts23 -alpha-amylasevarianter med ændrede egenskaber |
US20090215127A1 (en) * | 2008-02-06 | 2009-08-27 | Danisco Us Inc., Genencor Division | ph Adjustment Free System For Producing Fermentable Sugars and Alcohol |
US8066818B2 (en) | 2008-02-08 | 2011-11-29 | The Procter & Gamble Company | Water-soluble pouch |
US20090209447A1 (en) * | 2008-02-15 | 2009-08-20 | Michelle Meek | Cleaning compositions |
CN102112602A (zh) * | 2008-02-29 | 2011-06-29 | 宝洁公司 | 包含脂肪酶的洗涤剂组合物 |
WO2009107091A2 (en) * | 2008-02-29 | 2009-09-03 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition comprising lipase |
MX2010009652A (es) | 2008-03-11 | 2010-09-30 | Danisco Us Inc | Glucoamilasa y fitasa de buttiauxella durante la sacarificacion. |
EP2100947A1 (en) | 2008-03-14 | 2009-09-16 | The Procter and Gamble Company | Automatic dishwashing detergent composition |
US20090233830A1 (en) | 2008-03-14 | 2009-09-17 | Penny Sue Dirr | Automatic detergent dishwashing composition |
US9090887B2 (en) * | 2008-06-06 | 2015-07-28 | Danisco Us Inc. | Variant alpha-amylases from Bacillus subtilis and methods of use, thereof |
PL2447361T3 (pl) | 2008-06-06 | 2015-03-31 | Danisco Us Inc | Warianty alfa-amylazy (AMYS) z Geobacillus stearothermophilus o poprawionych właściwościach |
EP2149786A1 (en) | 2008-08-01 | 2010-02-03 | Unilever PLC | Improvements relating to detergent analysis |
ES1076140Y (es) | 2008-09-12 | 2012-05-08 | Unilever Nv | Dispensador y pretratador para liquidos viscosos |
EP2166076A1 (en) | 2008-09-23 | 2010-03-24 | The Procter & Gamble Company | Cleaning composition |
EP2166073A1 (en) | 2008-09-23 | 2010-03-24 | The Procter & Gamble Company | Cleaning composition |
EP2166075A1 (en) | 2008-09-23 | 2010-03-24 | The Procter and Gamble Company | Cleaning composition |
WO2010036515A1 (en) | 2008-09-25 | 2010-04-01 | Danisco Us Inc. | Alpha-amylase blends and methods for using said blends |
US20100125046A1 (en) | 2008-11-20 | 2010-05-20 | Denome Frank William | Cleaning products |
WO2010059413A2 (en) | 2008-11-20 | 2010-05-27 | Novozymes, Inc. | Polypeptides having amylolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same |
CN102300986A (zh) | 2008-12-04 | 2011-12-28 | 诺维信股份有限公司 | 具有纤维素分解增强活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸 |
EP2376527A1 (en) | 2008-12-12 | 2011-10-19 | Novozymes Inc. | Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same |
EP2202290A1 (en) | 2008-12-23 | 2010-06-30 | Unilever PLC | A flowable laundry composition and packaging therefor |
EP2213723A1 (en) | 2009-01-30 | 2010-08-04 | Novozymes A/S | Isomaltose for fungus fermentation |
EP2216393B1 (en) | 2009-02-09 | 2024-04-24 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition |
WO2010097436A1 (en) | 2009-02-27 | 2010-09-02 | Novozymes A/S | Mutant cells having reduced expression of metallopeptidase, suitable for recombinant polypeptide production |
US9068206B1 (en) | 2009-03-03 | 2015-06-30 | Poet Research, Inc. | System for treatment of biomass to facilitate the production of ethanol |
WO2010102060A2 (en) * | 2009-03-03 | 2010-09-10 | Poet Research, Inc. | System for pre-treatment of biomass for the production of ethanol |
HUE025623T2 (en) | 2009-03-03 | 2016-04-28 | Poet Res Inc | A method of fermenting biomass for ethanol production |
US8450094B1 (en) | 2009-03-03 | 2013-05-28 | Poet Research, Inc. | System for management of yeast to facilitate the production of ethanol |
US8852912B2 (en) | 2009-04-01 | 2014-10-07 | Danisco Us Inc. | Compositions and methods comprising alpha-amylase variants with altered properties |
EP2451914A1 (en) | 2009-07-09 | 2012-05-16 | The Procter & Gamble Company | A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte |
BR112012000520A2 (pt) | 2009-07-09 | 2016-02-16 | Procter & Gamble | composição catalítica detergente para lavagem de roupa que compreende teores relativamente baixos de eletrólito solúvel em água |
PL2292725T5 (pl) | 2009-08-13 | 2022-11-07 | The Procter And Gamble Company | Sposób prania tkanin w niskiej temperaturze |
EP3269804B1 (en) | 2009-09-17 | 2020-11-11 | Novozymes, Inc. | Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same |
JP6204018B2 (ja) | 2009-09-25 | 2017-09-27 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | プロテアーゼ変異体の使用 |
EP2480650B1 (en) | 2009-09-25 | 2017-03-22 | Novozymes A/S | Subtilase variants |
MX2012003473A (es) | 2009-09-29 | 2012-05-22 | Novozymes Inc | Polipeptidos que tienen actividad celulitica mejorada y polinucleotidos que codifican para los mismos. |
US8586827B2 (en) | 2009-09-30 | 2013-11-19 | Novozymes, Inc. | Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same |
US8586829B2 (en) | 2009-09-30 | 2013-11-19 | Novozymes A/S | Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same |
MX2012006616A (es) | 2009-12-09 | 2012-06-21 | Procter & Gamble | Productos para el cuidado de las telas y el hogar. |
ES2548772T3 (es) | 2009-12-10 | 2015-10-20 | The Procter & Gamble Company | Producto para lavavajillas y uso del mismo |
ES2423580T5 (es) | 2009-12-10 | 2021-06-17 | Procter & Gamble | Método y uso de una composición para lavado de vajillas |
ES2422593T3 (es) | 2009-12-10 | 2013-09-12 | Procter & Gamble | Método y uso de una composición para lavavajillas |
ES2399311T5 (es) | 2009-12-10 | 2020-06-19 | Procter & Gamble | Composición detergente |
WO2011076897A1 (en) | 2009-12-22 | 2011-06-30 | Novozymes A/S | Use of amylase variants at low temperature |
EP2501792A2 (en) | 2009-12-29 | 2012-09-26 | Novozymes A/S | Gh61 polypeptides having detergency enhancing effect |
CN102918149A (zh) | 2010-01-04 | 2013-02-06 | 诺维信公司 | α-淀粉酶 |
CN102869759B (zh) | 2010-02-10 | 2015-07-15 | 诺维信公司 | 在螯合剂存在下具有高稳定性的变体和包含变体的组合物 |
EP2357220A1 (en) | 2010-02-10 | 2011-08-17 | The Procter & Gamble Company | Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent |
WO2011100667A1 (en) | 2010-02-14 | 2011-08-18 | Ls9, Inc. | Surfactant and cleaning compositions comprising microbially produced branched fatty alcohols |
CN102858968B (zh) | 2010-02-25 | 2015-07-01 | 诺维信公司 | 溶菌酶的变体及编码该变体的多核苷酸 |
ES2401126T3 (es) | 2010-02-25 | 2013-04-17 | The Procter & Gamble Company | Composición detergente |
DK2552934T3 (en) | 2010-03-30 | 2015-09-28 | Novozymes As | Krystalmetabolit-extraction |
ES2579217T3 (es) | 2010-04-23 | 2016-08-08 | The Procter & Gamble Company | Partícula |
EP2380478A1 (en) | 2010-04-23 | 2011-10-26 | The Procter & Gamble Company | Automatic dishwashing product |
ES2533368T3 (es) | 2010-04-23 | 2015-04-09 | The Procter & Gamble Company | Producto para lavavajillas |
ES2565192T3 (es) | 2010-04-23 | 2016-04-01 | The Procter & Gamble Company | Método para perfumar |
EP2380961B1 (en) | 2010-04-23 | 2018-05-23 | The Procter and Gamble Company | Detergent composition |
EP2383329A1 (en) | 2010-04-23 | 2011-11-02 | The Procter & Gamble Company | Particle |
BR112012024674B1 (pt) | 2010-04-26 | 2019-07-02 | Novozymes A/S | Grânulo, e, composição de detergente granular |
BR112012028466B1 (pt) | 2010-05-06 | 2020-03-17 | The Procter & Gamble Company | Composição de produtos com variantes de protease e método para tratar e/ou limpar uma superfície |
EP2420558B1 (en) | 2010-08-17 | 2017-08-02 | The Procter & Gamble Company | Stable sustainable hand dish-washing detergents |
CA2806265C (en) | 2010-08-17 | 2016-10-18 | The Procter & Gamble Company | Method for hand washing dishes having long lasting suds |
WO2012027226A1 (en) | 2010-08-24 | 2012-03-01 | Danisco Us Inc. | A food product comprising a low temperature rice protein concentrate |
MX2011008654A (es) | 2010-08-24 | 2012-02-23 | Corn Products Int Inc | Produccion de isomaltooligosacaridos y usos para los mismos. |
MX2013002248A (es) | 2010-08-30 | 2013-05-09 | Novozymes As | Lavado con remojado concentrado. |
RU2013114297A (ru) | 2010-08-30 | 2014-10-10 | Новозимс А/С | Стирка с двумя замачиваниями |
WO2012035103A1 (en) | 2010-09-16 | 2012-03-22 | Novozymes A/S | Lysozymes |
GB201015672D0 (en) | 2010-09-20 | 2010-10-27 | Unilever Plc | Improvements relating to fabric treatment compositions comprising targeted benefit agents |
CN103282489B (zh) | 2010-09-30 | 2016-12-14 | 诺维信股份有限公司 | 具有纤维素分解增强活性的多肽变体及其编码多核苷酸 |
MX2013003237A (es) | 2010-09-30 | 2013-05-30 | Novozymes Inc | Variantes de polipeptidos que tienen actividad potenciadora celulolitica y polinucleotidos que codifican a los mismos. |
DK177132B1 (da) | 2010-11-05 | 2012-01-30 | Respekt Danmark As | Maskinopvask |
WO2012068509A1 (en) | 2010-11-18 | 2012-05-24 | Novozymes, Inc. | Chimeric polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same |
ES2656049T3 (es) | 2011-01-31 | 2018-02-22 | Novozymes A/S | Uso de glucosa tostada para la producción fermentativa de taxtomina |
CN107815817A (zh) | 2011-02-15 | 2018-03-20 | 诺维信生物股份有限公司 | 清洁机器及清洁方法中的气味的减轻 |
WO2012110562A2 (en) | 2011-02-16 | 2012-08-23 | Novozymes A/S | Detergent compositions comprising metalloproteases |
CN103502418A (zh) | 2011-02-16 | 2014-01-08 | 诺维信公司 | 包含金属蛋白酶的去污剂组合物 |
MX2013009177A (es) | 2011-02-16 | 2013-08-29 | Novozymes As | Composiciones detergentes que comprenden metaloproteasas de m7 o m35. |
CN103384678B (zh) | 2011-02-23 | 2017-01-18 | 诺维信股份有限公司 | 具有纤维素水解增强活性的多肽及其编码多核苷酸 |
WO2012135659A2 (en) | 2011-03-31 | 2012-10-04 | Novozymes A/S | Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material |
MX2013011827A (es) | 2011-04-29 | 2014-01-08 | Novozymes Inc | Metodos para mejorar la degradacion o conversion de material celulosico. |
WO2012151480A2 (en) | 2011-05-05 | 2012-11-08 | The Procter & Gamble Company | Compositions and methods comprising serine protease variants |
CA2834865C (en) | 2011-05-05 | 2021-03-09 | Danisco Us Inc. | Compositions and methods comprising serine protease variants |
WO2012160498A2 (en) | 2011-05-20 | 2012-11-29 | Ecolab Usa Inc. | Acid formulations for use in a system for warewashing |
US20120291818A1 (en) | 2011-05-20 | 2012-11-22 | Ecolab Usa Inc. | Non-phosphate detergents and non-phosphoric acids in an alternating alkali/acid system for warewashing |
US20140371435A9 (en) | 2011-06-03 | 2014-12-18 | Eduardo Torres | Laundry Care Compositions Containing Thiophene Azo Dyes |
EP2721137B1 (en) | 2011-06-20 | 2017-11-01 | Novozymes A/S | Particulate composition |
EP2537918A1 (en) | 2011-06-20 | 2012-12-26 | The Procter & Gamble Company | Consumer products with lipase comprising coated particles |
WO2012175708A2 (en) | 2011-06-24 | 2012-12-27 | Novozymes A/S | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same |
DK3543333T3 (da) | 2011-06-30 | 2022-02-14 | Novozymes As | Fremgangsmåde til screening af alfa-amylaser |
KR20140056237A (ko) * | 2011-06-30 | 2014-05-09 | 노보자임스 에이/에스 | 알파-아밀라제 변이체 |
BR112013033816A2 (pt) | 2011-07-01 | 2017-02-14 | Novozymes A / S | composição de detergente líquido sem boro |
US9085750B2 (en) | 2011-07-01 | 2015-07-21 | Novozymes A/S | Stabilized subtilisin composition |
WO2013007594A1 (en) | 2011-07-12 | 2013-01-17 | Novozymes A/S | Storage-stable enzyme granules |
EP2551335A1 (en) | 2011-07-25 | 2013-01-30 | The Procter & Gamble Company | Enzyme stabilized liquid detergent composition |
MX2014001594A (es) | 2011-08-15 | 2014-04-25 | Novozymes As | Polipeptidos que tienen actividad de celulasa y polinucleotidos que los codifican. |
CN103764822B (zh) | 2011-08-19 | 2016-11-23 | 诺维信公司 | 具有蛋白酶活性的多肽 |
EP2751266B1 (en) | 2011-09-22 | 2017-03-29 | Novozymes A/S | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same |
JP2014528241A (ja) | 2011-09-29 | 2014-10-27 | ダニスコ・ユーエス・インク | 高濃度デンプン粒の液化及び糖化 |
PL2584028T3 (pl) | 2011-10-19 | 2017-10-31 | Procter & Gamble | Cząstka |
CA2855451A1 (en) | 2011-11-21 | 2013-08-15 | Novozymes, Inc. | Gh61 polypeptide variants and polynucleotides encoding same |
ES2631605T3 (es) | 2011-11-25 | 2017-09-01 | Novozymes A/S | Polipéptidos con actividad de lisozima y polinucleótidos que codifican los mismos |
JP2015500006A (ja) | 2011-11-25 | 2015-01-05 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | サブチラーゼ変異体およびこれをコードするポリヌクレオチド |
JP6014163B2 (ja) | 2011-12-13 | 2016-10-25 | エコラボ ユーエスエー インコーポレイティド | 濃縮物品洗浄組成物及び方法 |
EP2791330B1 (en) | 2011-12-16 | 2017-07-26 | Novozymes, Inc. | Polypeptides having laccase activity and polynucleotides encoding same |
CN104011204A (zh) | 2011-12-20 | 2014-08-27 | 诺维信公司 | 枯草杆菌酶变体和编码它们的多核苷酸 |
EP2607468A1 (en) | 2011-12-20 | 2013-06-26 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent compositions comprising subtilase variants |
BR112014015705A8 (pt) | 2011-12-28 | 2017-07-04 | Novozymes A / S | polipeptídeo isolado, composição, polinucleotídeo isolado,, construção de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira, métodos para produzir um polipeptídeo, para melhorar o valor nutritivo de uma ração parar animais e para o tratamento de proteínas, planta transgênica, parte de planta ou célula vegetal, uso de pelo menos um polipeptídeo, aditivo de ração para animal, ração para animais, e, composição detergente |
CN111187676A (zh) | 2011-12-29 | 2020-05-22 | 诺维信公司 | 具有脂肪酶变体的洗涤剂组合物 |
AU2013213601B8 (en) | 2012-01-26 | 2018-01-18 | Novozymes A/S | Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents |
DK2623586T3 (da) | 2012-02-03 | 2017-11-13 | Procter & Gamble | Sammensætninger og fremgangsmåder til overfladebehandling med lipaser |
US10093911B2 (en) | 2012-02-17 | 2018-10-09 | Novozymes A/S | Subtilisin variants and polynucleotides encoding same |
EP2628785B1 (en) | 2012-02-17 | 2016-05-18 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent compositions comprising subtilase variants |
US20150064773A1 (en) | 2012-03-07 | 2015-03-05 | Novozymes A/S | Detergent Composition and Substitution of Optical Brighteners in Detergent Composition |
US10087401B2 (en) | 2012-03-16 | 2018-10-02 | Monosol, Llc | Water soluble compositions incorporating enzymes, and method of making same |
CA2867714A1 (en) | 2012-03-19 | 2013-09-26 | The Procter & Gamble Company | Laundry care compositions containing dyes |
US20150111259A1 (en) | 2012-03-28 | 2015-04-23 | Danisco Us Inc. | Method for Making High Maltose Syrup |
US20150152458A1 (en) | 2012-03-28 | 2015-06-04 | Danisco Us Inc. | Low temperature method for making high glucose syrup |
CN104204183A (zh) | 2012-03-29 | 2014-12-10 | 诺维信公司 | 酶用于制备水溶性膜的用途 |
WO2013148207A2 (en) | 2012-03-30 | 2013-10-03 | Danisco Us Inc. | Direct starch to fermentable sugar |
US9315831B2 (en) | 2012-03-30 | 2016-04-19 | Danisco Us Inc. | Direct starch to fermentable sugar as feedstock for the production of isoprene, isoprenoid precursor molecules, and/or isoprenoids |
WO2013149858A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Novozymes A/S | Lipase variants and polynucleotides encoding same |
US9394092B2 (en) | 2012-04-16 | 2016-07-19 | Monosol, Llc | Powdered pouch and method of making same |
CA2868308A1 (en) | 2012-04-27 | 2013-10-31 | Novozymes, Inc. | Gh61 polypeptide variants and polynucleotides encoding same |
WO2013167581A1 (en) | 2012-05-07 | 2013-11-14 | Novozymes A/S | Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same |
CN104302753A (zh) | 2012-05-16 | 2015-01-21 | 诺维信公司 | 包括脂肪酶的组合物及其使用方法 |
EP2674475A1 (en) | 2012-06-11 | 2013-12-18 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition |
WO2013189802A1 (en) | 2012-06-19 | 2013-12-27 | Novozymes A/S | Enzymatic reduction of hydroperoxides |
AU2013279440B2 (en) | 2012-06-20 | 2016-10-06 | Novozymes A/S | Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents |
MX2015000312A (es) | 2012-07-12 | 2015-04-10 | Novozymes As | Polipeptidos que tienen actividad lipasa y polinucleotidos que los codifican. |
TR201909592T4 (tr) | 2012-08-16 | 2019-07-22 | Novozymes As | Tekstili endoglukanazla işlemden geçirmek için usul. |
EP2888361A1 (en) | 2012-08-22 | 2015-07-01 | Novozymes A/S | Metalloprotease from exiguobacterium |
US9315791B2 (en) | 2012-08-22 | 2016-04-19 | Novozymes A/S | Metalloproteases from alicyclobacillus |
BR112015003726A2 (pt) | 2012-08-22 | 2019-09-24 | Novozymes As | composição detergente, uso de uma composição e de um polipeptídeo, e, método para remoção de uma nódoa de uma superfície. |
US9745543B2 (en) | 2012-09-10 | 2017-08-29 | Ecolab Usa Inc. | Stable liquid manual dishwashing compositions containing enzymes |
JP6514107B2 (ja) | 2012-12-07 | 2019-05-15 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 細菌の付着防止 |
EP3321353A1 (en) | 2012-12-11 | 2018-05-16 | Danisco US Inc. | Yeast host cells epxressing a glucoamylase from aspergillus fumigatus and methods of use thereof |
CN102965359B (zh) * | 2012-12-12 | 2014-07-09 | 江南大学 | 一种耐酸性淀粉酶突变体及其制备方法和应用 |
WO2014090940A1 (en) | 2012-12-14 | 2014-06-19 | Novozymes A/S | Removal of skin-derived body soils |
MX2015007802A (es) | 2012-12-20 | 2015-09-04 | Procter & Gamble | Composiciones de detergente con blanqueador recubierto con silicato. |
CN104869841A (zh) | 2012-12-21 | 2015-08-26 | 诺维信公司 | 具有蛋白酶活性的多肽和编码它的多核苷酸 |
WO2014106593A1 (en) | 2013-01-03 | 2014-07-10 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same |
EP2964740B1 (en) | 2013-03-05 | 2017-10-04 | The Procter and Gamble Company | Mixed sugar-based amide surfactant compositions |
US20160024440A1 (en) | 2013-03-14 | 2016-01-28 | Novozymes A/S | Enzyme and Inhibitor Containing Water-Soluble Films |
US9631164B2 (en) | 2013-03-21 | 2017-04-25 | Novozymes A/S | Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same |
MX2015013672A (es) | 2013-03-28 | 2016-02-16 | Procter & Gamble | Composiciones de limpieza que contiene una polieteramina, un polimero para el desprendimiento de la suciedad y una carboximetilcelulosa. |
EP3569611A1 (en) | 2013-04-23 | 2019-11-20 | Novozymes A/S | Liquid automatic dish washing detergent compositions with stabilised subtilisin |
WO2014177709A1 (en) | 2013-05-03 | 2014-11-06 | Novozymes A/S | Microencapsulation of detergent enzymes |
CN105209612A (zh) | 2013-05-14 | 2015-12-30 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物 |
US20160083703A1 (en) | 2013-05-17 | 2016-03-24 | Novozymes A/S | Polypeptides having alpha amylase activity |
JP6077177B2 (ja) | 2013-05-28 | 2017-02-08 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー | フォトクロミック染料を含む表面処理組成物 |
EP3110833B1 (en) | 2013-05-29 | 2020-01-08 | Danisco US Inc. | Novel metalloproteases |
EP3004341B1 (en) | 2013-05-29 | 2017-08-30 | Danisco US Inc. | Novel metalloproteases |
JP6367930B2 (ja) | 2013-05-29 | 2018-08-01 | ダニスコ・ユーエス・インク | 新規メタロプロテアーゼ |
US20160160202A1 (en) | 2013-05-29 | 2016-06-09 | Danisco Us Inc. | Novel metalloproteases |
WO2014191170A1 (en) | 2013-05-30 | 2014-12-04 | Novozymes A/S | Particulate enzyme composition |
EP3786269A1 (en) | 2013-06-06 | 2021-03-03 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same |
AU2014280111B2 (en) | 2013-06-12 | 2018-04-05 | Earth Alive Clean Technologies Inc. | Dust suppressant |
US20160145596A1 (en) | 2013-06-27 | 2016-05-26 | Novozymes A/S | Subtilase Variants and Polynucleotides Encoding Same |
FI3013956T3 (fi) | 2013-06-27 | 2023-05-23 | Novozymes As | Subtilaasivariantteja ja niitä koodittavia polynukleotideja |
JP2016523098A (ja) | 2013-07-04 | 2016-08-08 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 再付着防止効果を有するポリペプチドおよびそれをコードするポリヌクレオチド |
EP3611260A1 (en) | 2013-07-29 | 2020-02-19 | Novozymes A/S | Protease variants and polynucleotides encoding same |
EP3339436B1 (en) | 2013-07-29 | 2021-03-31 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent composition comprising protease variants |
WO2015014803A1 (en) | 2013-07-29 | 2015-02-05 | Novozymes A/S | Protease variants and polynucleotides encoding same |
US9834682B2 (en) | 2013-09-18 | 2017-12-05 | Milliken & Company | Laundry care composition comprising carboxylate dye |
CN105555935A (zh) | 2013-09-18 | 2016-05-04 | 宝洁公司 | 包含羧化物染料的衣物洗涤护理组合物 |
CA2920901A1 (en) | 2013-09-18 | 2015-03-26 | The Procter & Gamble Company | Laundry care compositions containing thiophene azo carboxylate dyes |
WO2015042086A1 (en) | 2013-09-18 | 2015-03-26 | The Procter & Gamble Company | Laundry care composition comprising carboxylate dye |
WO2015049370A1 (en) | 2013-10-03 | 2015-04-09 | Novozymes A/S | Detergent composition and use of detergent composition |
EP2857487A1 (en) | 2013-10-07 | 2015-04-08 | WeylChem Switzerland AG | Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes |
EP2857485A1 (en) | 2013-10-07 | 2015-04-08 | WeylChem Switzerland AG | Multi-compartment pouch comprising alkanolamine-free cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes |
EP2857486A1 (en) | 2013-10-07 | 2015-04-08 | WeylChem Switzerland AG | Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes |
ES2723948T3 (es) | 2013-12-13 | 2019-09-04 | Danisco Us Inc | Serina proteasas procedentes de especies de Bacillus |
EP3553173B1 (en) | 2013-12-13 | 2021-05-19 | Danisco US Inc. | Serine proteases of the bacillus gibsonii-clade |
US10005850B2 (en) | 2013-12-16 | 2018-06-26 | E I Du Pont De Nemours And Company | Use of poly alpha-1,3-glucan ethers as viscosity modifiers |
CN106029700B (zh) | 2013-12-18 | 2019-04-12 | 纳幕尔杜邦公司 | 阳离子聚α-1,3-葡聚糖醚 |
WO2015091989A1 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | Novozymes A/S | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same |
CN103834606A (zh) * | 2014-01-16 | 2014-06-04 | 北京中科星冠生物技术有限责任公司 | 一种表达耐酸高温α-淀粉酶基因突变体的工程菌株 |
EP3097173B1 (en) | 2014-01-22 | 2020-12-23 | The Procter and Gamble Company | Fabric treatment composition |
EP3097172A1 (en) | 2014-01-22 | 2016-11-30 | The Procter & Gamble Company | Method of treating textile fabrics |
EP3097174A1 (en) | 2014-01-22 | 2016-11-30 | The Procter & Gamble Company | Method of treating textile fabrics |
EP3097175B1 (en) | 2014-01-22 | 2018-10-17 | The Procter and Gamble Company | Fabric treatment composition |
CA2841024C (en) | 2014-01-30 | 2017-03-07 | The Procter & Gamble Company | Unit dose article |
CN105992796A (zh) | 2014-02-14 | 2016-10-05 | 纳幕尔杜邦公司 | 用于粘度调节的聚-α-1,3-1,6-葡聚糖 |
EP3110778A1 (en) | 2014-02-25 | 2017-01-04 | The Procter & Gamble Company | A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof |
WO2015130653A1 (en) | 2014-02-25 | 2015-09-03 | The Procter & Gamble Company | A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof |
US20160333292A1 (en) | 2014-03-05 | 2016-11-17 | Novozymes A/S | Compositions and Methods for Improving Properties of Cellulosic Textile Materials with Xyloglucan Endotransglycosylase |
US20160348035A1 (en) | 2014-03-05 | 2016-12-01 | Novozymes A/S | Compositions and Methods for Improving Properties of Non-Cellulosic Textile Materials with Xyloglucan Endotransglycosylase |
JP2017515921A (ja) | 2014-03-11 | 2017-06-15 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーE.I.Du Pont De Nemours And Company | 酸化されたポリα−1,3−グルカン |
US20170096653A1 (en) | 2014-03-21 | 2017-04-06 | Danisco Us Inc. | Serine proteases of bacillus species |
EP3122848A1 (en) | 2014-03-27 | 2017-02-01 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions containing a polyetheramine |
EP3122850A1 (en) | 2014-03-27 | 2017-02-01 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions containing a polyetheramine |
JP6275864B2 (ja) | 2014-03-27 | 2018-02-07 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー | ポリエーテルアミンを含有する洗浄組成物 |
EP2924105A1 (en) | 2014-03-28 | 2015-09-30 | The Procter and Gamble Company | Water soluble unit dose article |
EP2924107A1 (en) | 2014-03-28 | 2015-09-30 | The Procter and Gamble Company | Water soluble unit dose article |
WO2015150457A1 (en) | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Novozymes A/S | Polypeptides having alpha amylase activity |
CN112899086A (zh) | 2014-04-11 | 2021-06-04 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物 |
EP3140384B1 (en) | 2014-05-06 | 2024-02-14 | Milliken & Company | Laundry care compositions |
EP3149178B1 (en) | 2014-05-27 | 2020-07-15 | Novozymes A/S | Lipase variants and polynucleotides encoding same |
WO2015181118A1 (en) | 2014-05-27 | 2015-12-03 | Novozymes A/S | Methods for producing lipases |
WO2015187757A1 (en) | 2014-06-06 | 2015-12-10 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition comprising polyalkyleneimine polymers |
US20170121696A1 (en) * | 2014-06-12 | 2017-05-04 | Novozymes A/S | Oxidation stable alpha-amylase variants |
WO2015189371A1 (en) | 2014-06-12 | 2015-12-17 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same |
EP3155083B1 (en) | 2014-06-12 | 2021-08-11 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants |
EP3919599A1 (en) | 2014-06-19 | 2021-12-08 | Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. | Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds |
US9714403B2 (en) | 2014-06-19 | 2017-07-25 | E I Du Pont De Nemours And Company | Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds |
US20170121646A1 (en) | 2014-07-03 | 2017-05-04 | Novozymes A/S | Improved Stabilization of Non-Protease Enzyme |
CN116240202A (zh) | 2014-07-04 | 2023-06-09 | 诺维信公司 | 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸 |
EP3164486B1 (en) | 2014-07-04 | 2020-05-13 | Novozymes A/S | Subtilase variants and polynucleotides encoding same |
US9617502B2 (en) | 2014-09-15 | 2017-04-11 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions containing salts of polyetheramines and polymeric acid |
BR112017005767A2 (pt) | 2014-09-25 | 2017-12-12 | Procter & Gamble | composições de limpeza contendo uma polieteramina |
US20160090552A1 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions containing a polyetheramine and an anionic soil release polymer |
US9388368B2 (en) | 2014-09-26 | 2016-07-12 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions containing a polyetheramine |
JP6720150B2 (ja) | 2014-10-03 | 2020-07-08 | モノソル リミテッド ライアビリティ カンパニー | 分解性材料及びそれから作製されるパッケージング |
US20170233710A1 (en) | 2014-10-17 | 2017-08-17 | Danisco Us Inc. | Serine proteases of bacillus species |
EP3550017B1 (en) | 2014-10-27 | 2021-07-14 | Danisco US Inc. | Serine proteases |
EP3212781B1 (en) | 2014-10-27 | 2019-09-18 | Danisco US Inc. | Serine proteases |
WO2016069557A1 (en) | 2014-10-27 | 2016-05-06 | Danisco Us Inc. | Serine proteases of bacillus species |
EP3212662B1 (en) | 2014-10-27 | 2020-04-08 | Danisco US Inc. | Serine proteases |
EP3212783B1 (en) | 2014-10-27 | 2024-06-26 | Danisco US Inc. | Serine proteases |
EP3256563A1 (en) | 2014-11-17 | 2017-12-20 | The Procter and Gamble Company | Benefit agent delivery compositions |
WO2016079110A2 (en) | 2014-11-19 | 2016-05-26 | Novozymes A/S | Use of enzyme for cleaning |
WO2016079305A1 (en) | 2014-11-20 | 2016-05-26 | Novozymes A/S | Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same |
WO2016087617A1 (en) | 2014-12-04 | 2016-06-09 | Novozymes A/S | Subtilase variants and polynucleotides encoding same |
CN107002054A (zh) | 2014-12-05 | 2017-08-01 | 诺维信公司 | 脂肪酶变体以及编码它们的多核苷酸 |
EP3234121A1 (en) | 2014-12-15 | 2017-10-25 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent composition comprising subtilase variants |
WO2016096996A1 (en) | 2014-12-16 | 2016-06-23 | Novozymes A/S | Polypeptides having n-acetyl glucosamine oxidase activity |
EP3034592A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-22 | The Procter and Gamble Company | Method of automatic dishwashing |
EP3034590A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-22 | The Procter and Gamble Company | Method of automatic dishwashing |
EP3034596B2 (en) | 2014-12-17 | 2021-11-10 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition |
EP3034589A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-22 | The Procter and Gamble Company | Detergent composition |
EP3034588B1 (en) | 2014-12-17 | 2019-04-24 | The Procter and Gamble Company | Detergent composition |
EP3034597A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-22 | The Procter and Gamble Company | Detergent composition |
EP3034591A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-22 | The Procter and Gamble Company | Method of automatic dishwashing |
EP3741849A3 (en) | 2014-12-19 | 2021-03-17 | Novozymes A/S | Protease variants and polynucleotides encoding same |
CN107109388A (zh) | 2014-12-19 | 2017-08-29 | 诺维信公司 | 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸 |
WO2016106011A1 (en) | 2014-12-23 | 2016-06-30 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Enzymatically produced cellulose |
EP3075832B1 (en) | 2015-03-30 | 2021-04-14 | Dalli-Werke GmbH & Co. KG | Manganese-amino acid compounds in cleaning compositions |
CN107636134A (zh) | 2015-04-10 | 2018-01-26 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物 |
CN107567489A (zh) | 2015-04-10 | 2018-01-09 | 诺维信公司 | 衣物洗涤方法,dna酶和洗涤剂组合物的用途 |
DK3088505T3 (da) | 2015-04-29 | 2020-08-03 | Procter & Gamble | Fremgangsmåde til behandling af et tekstilstof |
CN107820515A (zh) | 2015-04-29 | 2018-03-20 | 宝洁公司 | 洗涤剂组合物 |
EP3088504B1 (en) | 2015-04-29 | 2021-07-21 | The Procter & Gamble Company | Method of treating a fabric |
CN107667166B (zh) | 2015-04-29 | 2021-01-15 | 宝洁公司 | 处理织物的方法 |
ES2683568T3 (es) | 2015-04-29 | 2018-09-26 | The Procter & Gamble Company | Método para tratar un tejido |
CN107532007B (zh) | 2015-05-04 | 2020-06-30 | 美利肯公司 | 在洗衣护理组合物中作为上蓝剂的隐色三苯甲烷着色剂 |
AR104783A1 (es) | 2015-05-08 | 2017-08-16 | Novozymes As | VARIANTES DE a-AMILASA Y POLINUCLEÓTIDOS QUE LAS CODIFICAN |
EP3294882B1 (en) | 2015-05-08 | 2021-07-07 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same |
EP3872174B1 (en) | 2015-05-13 | 2023-03-01 | Danisco US Inc. | Aprl-clade protease variants and uses thereof |
CN107835853B (zh) | 2015-05-19 | 2021-04-20 | 诺维信公司 | 气味减少 |
EP3287513A1 (en) | 2015-06-04 | 2018-02-28 | The Procter & Gamble Company | Hand dishwashing liquid detergent composition |
EP3284811B1 (en) | 2015-06-04 | 2018-12-12 | The Procter & Gamble Company | Hand dishwashing liquid detergent composition |
EP3101107B1 (en) | 2015-06-05 | 2019-04-24 | The Procter and Gamble Company | Compacted liquid laundry detergent composition |
EP3101103B1 (en) | 2015-06-05 | 2019-04-24 | The Procter and Gamble Company | Compacted liquid laundry detergent composition |
ES2666186T3 (es) | 2015-06-05 | 2018-05-03 | The Procter & Gamble Company | Composición detergente líquida compactada para lavado de ropa |
EP3101102B2 (en) | 2015-06-05 | 2023-12-13 | The Procter & Gamble Company | Compacted liquid laundry detergent composition |
WO2016201040A1 (en) | 2015-06-09 | 2016-12-15 | Danisco Us Inc. | Water-triggered enzyme suspension |
WO2016201069A1 (en) | 2015-06-09 | 2016-12-15 | Danisco Us Inc | Low-density enzyme-containing particles |
ES2962329T3 (es) | 2015-06-09 | 2024-03-18 | Danisco Us Inc | Encapsulados de estallido osmótico |
WO2016202739A1 (en) | 2015-06-16 | 2016-12-22 | Novozymes A/S | Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same |
CN107922095A (zh) | 2015-06-17 | 2018-04-17 | 诺维信公司 | 容器 |
CN107849549B (zh) | 2015-06-17 | 2024-04-05 | 丹尼斯科美国公司 | 吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶 |
EP3106508B1 (en) | 2015-06-18 | 2019-11-20 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent composition comprising subtilase variants |
EP3872175A1 (en) | 2015-06-18 | 2021-09-01 | Novozymes A/S | Subtilase variants and polynucleotides encoding same |
WO2016135351A1 (en) | 2015-06-30 | 2016-09-01 | Novozymes A/S | Laundry detergent composition, method for washing and use of composition |
US10920203B2 (en) | 2015-07-01 | 2021-02-16 | Novozymes A/S | Methods of reducing odor |
US10822598B2 (en) | 2015-07-06 | 2020-11-03 | Novozymes A/S | Lipase variants and polynucleotides encoding same |
WO2017046232A1 (en) | 2015-09-17 | 2017-03-23 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Detergent compositions comprising polypeptides having xanthan degrading activity |
CA2991114A1 (en) | 2015-09-17 | 2017-03-23 | Novozymes A/S | Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same |
CN108350441B (zh) | 2015-10-07 | 2022-09-27 | 诺维信公司 | 多肽 |
JP2018531783A (ja) | 2015-10-14 | 2018-11-01 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 水濾過膜の洗浄 |
US10479981B2 (en) | 2015-10-14 | 2019-11-19 | Novozymes A/S | DNase variants |
WO2017064253A1 (en) | 2015-10-14 | 2017-04-20 | Novozymes A/S | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same |
EP3371307A1 (en) | 2015-11-05 | 2018-09-12 | Danisco US Inc. | Paenibacillus and bacillus spp. mannanases |
WO2017079751A1 (en) | 2015-11-05 | 2017-05-11 | Danisco Us Inc | Paenibacillus sp. mannanases |
JP7045313B2 (ja) | 2015-11-13 | 2022-03-31 | ニュートリション・アンド・バイオサイエンシーズ・ユーエスエー・フォー,インコーポレイテッド | 洗濯ケアおよび織物ケアにおいて使用するためのグルカン繊維組成物 |
JP2019504932A (ja) | 2015-11-13 | 2019-02-21 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーE.I.Du Pont De Nemours And Company | 洗濯ケアおよび織物ケアにおいて使用するためのグルカン繊維組成物 |
US10876074B2 (en) | 2015-11-13 | 2020-12-29 | Dupont Industrial Biosciences Usa, Llc | Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care |
EP3380608A1 (en) | 2015-11-24 | 2018-10-03 | Novozymes A/S | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same |
EP3173467A1 (en) | 2015-11-26 | 2017-05-31 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions comprising enzymes |
EP3384019B1 (en) | 2015-12-01 | 2020-06-24 | Novozymes A/S | Methods for producing lipases |
EP3387125B1 (en) | 2015-12-07 | 2022-10-12 | Henkel AG & Co. KGaA | Dishwashing compositions comprising polypeptides having beta-glucanase activity and uses thereof |
JP2018536418A (ja) | 2015-12-09 | 2018-12-13 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアBasf Se | 脱離条件下で発酵固体からタンパク質を精製する方法 |
WO2017106676A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | Danisco Us Inc | Polypeptides with endoglucanase activity and uses thereof |
US20190002819A1 (en) | 2015-12-28 | 2019-01-03 | Novozymes Bioag A/S | Heat priming of bacterial spores |
WO2017114891A1 (en) | 2015-12-30 | 2017-07-06 | Novozymes A/S | Enzyme variants and polynucleotides encoding the same |
MX2018008051A (es) | 2016-01-29 | 2018-08-23 | Novozymes As | Variantes de beta-glucanasa y polinucleotidos que las codifican. |
BR112018069220A2 (pt) | 2016-03-23 | 2019-01-22 | Novozymes As | uso de polipeptídeo que tem atividade de dnase para tratamento de tecidos |
CN114480035A (zh) | 2016-04-08 | 2022-05-13 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物及其用途 |
MX2018013139A (es) | 2016-04-29 | 2019-02-13 | Novozymes As | Composiciones detergentes y sus usos. |
EP3452585A1 (en) | 2016-05-03 | 2019-03-13 | Danisco US Inc. | Protease variants and uses thereof |
EP3452497B1 (en) | 2016-05-03 | 2021-02-17 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding the same |
BR112018072586A2 (pt) | 2016-05-05 | 2019-02-19 | Danisco Us Inc | variantes de protease e usos das mesmas |
EP3455352A1 (en) | 2016-05-09 | 2019-03-20 | Novozymes A/S | Variant polypeptides with improved performance and use of the same |
WO2017205337A1 (en) | 2016-05-23 | 2017-11-30 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Baking process and a method thereof |
US20190218479A1 (en) | 2016-05-31 | 2019-07-18 | Novozymes A/S | Stabilized Liquid Peroxide Compositions |
CN109477112A (zh) | 2016-05-31 | 2019-03-15 | 丹尼斯科美国公司 | 蛋白酶变体及其用途 |
EP3464582A1 (en) | 2016-06-03 | 2019-04-10 | Novozymes A/S | Subtilase variants and polynucleotides encoding same |
BR112018075933A2 (pt) | 2016-06-17 | 2019-10-01 | Danisco Us Inc | variantes de protease e usos das mesmas |
EP3257931A1 (en) | 2016-06-17 | 2017-12-20 | The Procter and Gamble Company | Detergent composition |
CN114381342A (zh) | 2016-06-23 | 2022-04-22 | 诺维信公司 | 酶的用途、组合物以及用于去除污垢的方法 |
WO2018002261A1 (en) | 2016-07-01 | 2018-01-04 | Novozymes A/S | Detergent compositions |
EP3481949B1 (en) | 2016-07-05 | 2021-06-09 | Novozymes A/S | Pectate lyase variants and polynucleotides encoding same |
WO2018007573A1 (en) | 2016-07-08 | 2018-01-11 | Novozymes A/S | Detergent compositions with galactanase |
WO2018011276A1 (en) | 2016-07-13 | 2018-01-18 | The Procter & Gamble Company | Bacillus cibi dnase variants and uses thereof |
MX2019000621A (es) | 2016-07-14 | 2019-08-01 | Basf Se | Medio de fermentacion que comprende agente quelante. |
WO2018015295A1 (en) | 2016-07-18 | 2018-01-25 | Novozymes A/S | Lipase variants, polynucleotides encoding same and the use thereof |
PL3284805T3 (pl) | 2016-08-17 | 2020-07-13 | The Procter & Gamble Company | Kompozycja czyszcząca zawierająca enzymy |
KR102483218B1 (ko) | 2016-08-24 | 2023-01-02 | 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 | 크산탄 리아제 변이체 i을 포함하는 세제 조성물 |
CN109844110B (zh) | 2016-08-24 | 2023-06-06 | 诺维信公司 | 黄原胶裂解酶变体以及编码它们的多核苷酸 |
EP3504313A1 (en) | 2016-08-24 | 2019-07-03 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent composition comprising gh9 endoglucanase variants i |
WO2018037062A1 (en) | 2016-08-24 | 2018-03-01 | Novozymes A/S | Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same |
US20190284647A1 (en) | 2016-09-29 | 2019-09-19 | Novozymes A/S | Spore Containing Granule |
WO2018060216A1 (en) | 2016-09-29 | 2018-04-05 | Novozymes A/S | Use of enzyme for washing, method for washing and warewashing composition |
WO2018077938A1 (en) | 2016-10-25 | 2018-05-03 | Novozymes A/S | Detergent compositions |
US20180119070A1 (en) | 2016-11-01 | 2018-05-03 | The Procter & Gamble Company | Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions, packaging, kits and methods thereof |
CN110072986B (zh) | 2016-11-01 | 2023-04-04 | 诺维信公司 | 多核心颗粒 |
WO2018085310A1 (en) | 2016-11-01 | 2018-05-11 | The Procter & Gamble Company | Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions |
US10851329B2 (en) | 2016-11-01 | 2020-12-01 | Milliken & Company | Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions |
US20180119056A1 (en) | 2016-11-03 | 2018-05-03 | Milliken & Company | Leuco Triphenylmethane Colorants As Bluing Agents in Laundry Care Compositions |
EP3535365A2 (en) | 2016-11-07 | 2019-09-11 | Danisco US Inc. | Laundry detergent composition |
US20190292494A1 (en) | 2016-12-01 | 2019-09-26 | Basf Se | Stabilization of enzymes in compositions |
US10550443B2 (en) | 2016-12-02 | 2020-02-04 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions including enzymes |
MX2019006422A (es) | 2016-12-02 | 2019-08-01 | Procter & Gamble | Composiciones de limpieza que incluyen enzimas. |
CA3044415C (en) | 2016-12-02 | 2022-06-07 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions including enzymes |
EP3551740B1 (en) | 2016-12-12 | 2021-08-11 | Novozymes A/S | Use of polypeptides |
WO2018118917A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-28 | Danisco Us Inc. | Protease variants and uses thereof |
EP4212622A3 (en) | 2016-12-21 | 2023-11-29 | Danisco US Inc. | Bacillus gibsonii-clade serine proteases |
ES2965826T3 (es) | 2017-02-01 | 2024-04-17 | Procter & Gamble | Composiciones limpiadoras que comprenden variantes de amilasa |
KR102375732B1 (ko) | 2017-02-24 | 2022-03-16 | 다니스코 유에스 인크. | 바실러스 리체니포르미스에서 단백질 생산을 증가시키기 위한 조성물 및 방법 |
EP3583210B1 (en) | 2017-03-15 | 2021-07-07 | Danisco US Inc. | Trypsin-like serine proteases and uses thereof |
US20200040283A1 (en) | 2017-03-31 | 2020-02-06 | Danisco Us Inc | Delayed release enzyme formulations for bleach-containing detergents |
EP3601551A1 (en) | 2017-03-31 | 2020-02-05 | Novozymes A/S | Polypeptides having rnase activity |
US20210095268A1 (en) | 2017-03-31 | 2021-04-01 | Danisco Us Inc | Alpha-amylase combinatorial variants |
WO2018177936A1 (en) | 2017-03-31 | 2018-10-04 | Novozymes A/S | Polypeptides having dnase activity |
EP3601550A1 (en) | 2017-03-31 | 2020-02-05 | Novozymes A/S | Polypeptides having dnase activity |
EP3606936B1 (en) | 2017-04-03 | 2021-10-20 | Novozymes A/S | Recovery process |
CN114480034A (zh) | 2017-04-04 | 2022-05-13 | 诺维信公司 | 糖基水解酶 |
US20200109352A1 (en) | 2017-04-04 | 2020-04-09 | Novozymes A/S | Polypeptide compositions and uses thereof |
WO2018185150A1 (en) | 2017-04-04 | 2018-10-11 | Novozymes A/S | Polypeptides |
EP3385362A1 (en) | 2017-04-05 | 2018-10-10 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent compositions comprising fungal mannanases |
DK3385361T3 (da) | 2017-04-05 | 2019-06-03 | Ab Enzymes Gmbh | Detergentsammensætninger omfattende bakterielle mannanaser |
US10968416B2 (en) | 2017-04-06 | 2021-04-06 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
CN110709499A (zh) | 2017-04-06 | 2020-01-17 | 诺维信公司 | 清洁组合物及其用途 |
EP3607043A1 (en) | 2017-04-06 | 2020-02-12 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
US20200032170A1 (en) | 2017-04-06 | 2020-01-30 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
BR112019020960A2 (pt) | 2017-04-06 | 2020-05-05 | Novozymes As | composições de limpeza e seus usos |
US20200190437A1 (en) | 2017-04-06 | 2020-06-18 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
CN110651042A (zh) | 2017-04-06 | 2020-01-03 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物及其用途 |
WO2018184818A1 (en) | 2017-04-06 | 2018-10-11 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
CN110651038A (zh) | 2017-05-05 | 2020-01-03 | 诺维信公司 | 包含脂肪酶和亚硫酸盐的组合物 |
EP3622063A1 (en) | 2017-05-08 | 2020-03-18 | Novozymes A/S | Mannanase variants and polynucleotides encoding same |
EP3401385A1 (en) | 2017-05-08 | 2018-11-14 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain |
EP3622064A1 (en) | 2017-05-08 | 2020-03-18 | Novozymes A/S | Mannanase variants and polynucleotides encoding same |
WO2018206535A1 (en) | 2017-05-08 | 2018-11-15 | Novozymes A/S | Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same |
WO2018224544A1 (en) | 2017-06-08 | 2018-12-13 | Novozymes A/S | Compositions comprising polypeptides having cellulase activity and amylase activity, and uses thereof in cleaning and detergent compositions |
EP3415592A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-19 | The Procter & Gamble Company | Water-soluble unit dose article comprising a solid laundry detergent composition |
CN111108183A (zh) | 2017-06-30 | 2020-05-05 | 诺维信公司 | 酶浆液组合物 |
JP2020527339A (ja) | 2017-06-30 | 2020-09-10 | ダニスコ・ユーエス・インク | 低凝集の酵素含有粒子 |
CN111032856A (zh) | 2017-08-07 | 2020-04-17 | 诺维信公司 | 基于pH的FCA控制的用途 |
RU2020111041A (ru) | 2017-08-18 | 2021-09-20 | ДАНИСКО ЮЭс ИНК | Варианты альфа-амилаз |
WO2019040412A1 (en) | 2017-08-23 | 2019-02-28 | Danisco Us Inc | METHODS AND COMPOSITIONS FOR EFFICIENT GENETIC MODIFICATION OF BACILLUS LICHENIFORMIS STRAINS |
EP3673057A1 (en) | 2017-08-24 | 2020-07-01 | Novozymes A/S | Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same |
WO2019038058A1 (en) | 2017-08-24 | 2019-02-28 | Novozymes A/S | GH9 ENDOGLUCANASE VARIANTS AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING SUCH VARIANTS |
US20210130744A1 (en) | 2017-08-24 | 2021-05-06 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Detergent composition comprising xanthan lyase variants ii |
US11624059B2 (en) | 2017-08-24 | 2023-04-11 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Detergent compositions comprising GH9 endoglucanase variants II |
JP7218985B2 (ja) | 2017-09-13 | 2023-02-07 | ダニスコ・ユーエス・インク | バチルス属(Bacillus)におけるタンパク質産生の増加のための改変5’-非翻訳領域(UTR)配列 |
BR112020005558A2 (pt) | 2017-09-20 | 2020-10-27 | Novozymes A/S | uso de enzimas para melhorar a absorção de água e/ou o grau de brancura |
US11414814B2 (en) | 2017-09-22 | 2022-08-16 | Novozymes A/S | Polypeptides |
JP7317811B2 (ja) | 2017-09-27 | 2023-07-31 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | リパーゼ変異体及びかかるリパーゼ変異体を含むマイクロカプセル組成物 |
EP3461892A3 (en) | 2017-09-27 | 2019-06-12 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising lipases |
EP3692147A1 (en) | 2017-10-02 | 2020-08-12 | Novozymes A/S | Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same |
WO2019068715A1 (en) | 2017-10-02 | 2019-04-11 | Novozymes A/S | POLYPEPTIDES HAVING MANNANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THESE POLYPEPTIDES |
TWI715878B (zh) | 2017-10-12 | 2021-01-11 | 美商美力肯及公司 | 隱色著色劑及組成物 |
CA3074613A1 (en) | 2017-10-12 | 2019-04-18 | The Procter & Gamble Company | Leuco colorants in combination with a second whitening agent as bluing agents in laundry care compositions |
WO2019075148A1 (en) | 2017-10-12 | 2019-04-18 | The Procter & Gamble Company | LEUCO-COLORANTS AS AZURING AGENTS IN LAUNDRY CARE COMPOSITIONS |
US10717950B2 (en) | 2017-10-12 | 2020-07-21 | The Procter & Gamble Company | Leuco colorants as bluing agents in laundry care composition |
WO2019076800A1 (en) | 2017-10-16 | 2019-04-25 | Novozymes A/S | CLEANING COMPOSITIONS AND USES THEREOF |
US20200318037A1 (en) | 2017-10-16 | 2020-10-08 | Novozymes A/S | Low dusting granules |
EP3697881A1 (en) | 2017-10-16 | 2020-08-26 | Novozymes A/S | Low dusting granules |
US11866748B2 (en) | 2017-10-24 | 2024-01-09 | Novozymes A/S | Compositions comprising polypeptides having mannanase activity |
US20230416706A1 (en) | 2017-10-27 | 2023-12-28 | Novozymes A/S | Dnase Variants |
CN111247245A (zh) | 2017-10-27 | 2020-06-05 | 宝洁公司 | 包含多肽变体的洗涤剂组合物 |
WO2019086530A1 (en) | 2017-11-01 | 2019-05-09 | Novozymes A/S | Polypeptides and compositions comprising such polypeptides |
DE102017125559A1 (de) | 2017-11-01 | 2019-05-02 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Reinigungszusammensetzungen, die dispersine ii enthalten |
CN111479919A (zh) | 2017-11-01 | 2020-07-31 | 诺维信公司 | 多肽以及包含此类多肽的组合物 |
WO2019086532A1 (en) | 2017-11-01 | 2019-05-09 | Novozymes A/S | Methods for cleaning medical devices |
US11053392B2 (en) | 2017-11-01 | 2021-07-06 | Milliken & Company | Leuco compounds, colorant compounds, and compositions containing the same |
DE102017125558A1 (de) | 2017-11-01 | 2019-05-02 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Reinigungszusammensetzungen, die dispersine i enthalten |
DE102017125560A1 (de) | 2017-11-01 | 2019-05-02 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Reinigungszusammensetzungen, die dispersine iii enthalten |
EP3703661A1 (en) | 2017-11-02 | 2020-09-09 | Danisco US Inc. | Freezing point depressed solid matrix compositions for melt granulation of enzymes |
CN111315879A (zh) | 2017-11-09 | 2020-06-19 | 巴斯夫欧洲公司 | 包含有机白色颜料的酶颗粒涂层 |
EP3717643A1 (en) | 2017-11-29 | 2020-10-07 | Danisco US Inc. | Subtilisin variants having improved stability |
EP3720954A1 (en) | 2017-12-04 | 2020-10-14 | Novozymes A/S | Lipase variants and polynucleotides encoding same |
CA3086202A1 (en) | 2017-12-21 | 2019-06-27 | Danisco Us Inc. | Enzyme-containing, hot-melt granules comprising a thermotolerant desiccant |
WO2019135868A1 (en) | 2018-01-03 | 2019-07-11 | Danisco Us Inc | Mutant and genetically modified bacillus cells and methods thereof for increased protein production |
US20200359656A1 (en) | 2018-02-08 | 2020-11-19 | Danisco Us Inc. | Thermally-resistant wax matrix particles for enzyme encapsulation |
WO2019154954A1 (en) | 2018-02-08 | 2019-08-15 | Novozymes A/S | Lipase variants and compositions thereof |
EP3749761A1 (en) | 2018-02-08 | 2020-12-16 | Novozymes A/S | Lipases, lipase variants and compositions thereof |
WO2019162000A1 (en) | 2018-02-23 | 2019-08-29 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants |
US20190264139A1 (en) | 2018-02-28 | 2019-08-29 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions |
JP2021512986A (ja) | 2018-02-28 | 2021-05-20 | ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーThe Procter & Gamble Company | 洗浄方法 |
WO2019175240A1 (en) | 2018-03-13 | 2019-09-19 | Novozymes A/S | Microencapsulation using amino sugar oligomers |
EP3768835A1 (en) | 2018-03-23 | 2021-01-27 | Novozymes A/S | Subtilase variants and compositions comprising same |
WO2019185726A1 (en) | 2018-03-29 | 2019-10-03 | Novozymes A/S | Mannanase variants and polynucleotides encoding same |
WO2019201793A1 (en) | 2018-04-17 | 2019-10-24 | Novozymes A/S | Polypeptides comprising carbohydrate binding activity in detergent compositions and their use in reducing wrinkles in textile or fabric. |
CN112204137B (zh) | 2018-04-19 | 2024-05-14 | 诺维信公司 | 稳定化的纤维素酶变体 |
US11661592B2 (en) | 2018-04-19 | 2023-05-30 | Novozymes A/S | Stabilized endoglucanase variants |
CN112368375A (zh) | 2018-04-26 | 2021-02-12 | 巴斯夫欧洲公司 | 脂肪酶 |
WO2019211143A1 (en) | 2018-05-03 | 2019-11-07 | Basf Se | Amylase enzymes |
WO2019238761A1 (en) | 2018-06-15 | 2019-12-19 | Basf Se | Water soluble multilayer films containing wash active chemicals and enzymes |
WO2019245705A1 (en) | 2018-06-19 | 2019-12-26 | Danisco Us Inc | Subtilisin variants |
US20210214703A1 (en) | 2018-06-19 | 2021-07-15 | Danisco Us Inc | Subtilisin variants |
WO2020002604A1 (en) | 2018-06-28 | 2020-01-02 | Novozymes A/S | Detergent compositions and uses thereof |
EP3814489A1 (en) | 2018-06-29 | 2021-05-05 | Novozymes A/S | Subtilase variants and compositions comprising same |
WO2020002608A1 (en) | 2018-06-29 | 2020-01-02 | Novozymes A/S | Detergent compositions and uses thereof |
US12012573B2 (en) | 2018-07-02 | 2024-06-18 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
US20210301223A1 (en) | 2018-07-03 | 2021-09-30 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
WO2020008024A1 (en) | 2018-07-06 | 2020-01-09 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
WO2020008043A1 (en) | 2018-07-06 | 2020-01-09 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
WO2020028443A1 (en) | 2018-07-31 | 2020-02-06 | Danisco Us Inc | Variant alpha-amylases having amino acid substitutions that lower the pka of the general acid |
US20210189295A1 (en) | 2018-08-30 | 2021-06-24 | Danisco Us Inc | Enzyme-containing granules |
CN113166682A (zh) | 2018-09-27 | 2021-07-23 | 丹尼斯科美国公司 | 用于医疗器械清洁的组合物 |
US20210340466A1 (en) | 2018-10-01 | 2021-11-04 | Novozymes A/S | Detergent compositions and uses thereof |
WO2020070209A1 (en) | 2018-10-02 | 2020-04-09 | Novozymes A/S | Cleaning composition |
WO2020070009A1 (en) | 2018-10-02 | 2020-04-09 | Novozymes A/S | Endonuclease 1 ribonucleases for cleaning |
EP3861094A1 (en) | 2018-10-02 | 2021-08-11 | Novozymes A/S | Cleaning composition |
WO2020070014A1 (en) | 2018-10-02 | 2020-04-09 | Novozymes A/S | Cleaning composition comprising anionic surfactant and a polypeptide having rnase activity |
WO2020070249A1 (en) | 2018-10-03 | 2020-04-09 | Novozymes A/S | Cleaning compositions |
EP3861008A1 (en) | 2018-10-03 | 2021-08-11 | Novozymes A/S | Polypeptides having alpha-mannan degrading activity and polynucleotides encoding same |
EP3677676A1 (en) | 2019-01-03 | 2020-07-08 | Basf Se | Compounds stabilizing amylases in liquids |
EP3861114A1 (en) | 2018-10-05 | 2021-08-11 | Basf Se | Compounds stabilizing amylases in liquids |
WO2020074545A1 (en) | 2018-10-11 | 2020-04-16 | Novozymes A/S | Cleaning compositions and uses thereof |
CA3116128A1 (en) | 2018-10-12 | 2020-04-16 | Danisco Us Inc | Alpha-amylases with mutations that improve stability in the presence of chelants |
EP3647398B1 (en) | 2018-10-31 | 2024-05-15 | Henkel AG & Co. KGaA | Cleaning compositions containing dispersins v |
EP3647397A1 (en) | 2018-10-31 | 2020-05-06 | Henkel AG & Co. KGaA | Cleaning compositions containing dispersins iv |
US20230028935A1 (en) | 2018-11-28 | 2023-01-26 | Danisco Us Inc | Subtilisin variants having improved stability |
EP3891277A1 (en) | 2018-12-03 | 2021-10-13 | Novozymes A/S | Powder detergent compositions |
CN113302270A (zh) | 2018-12-03 | 2021-08-24 | 诺维信公司 | 低pH粉末洗涤剂组合物 |
EP3898919A1 (en) | 2018-12-21 | 2021-10-27 | Novozymes A/S | Detergent pouch comprising metalloproteases |
US11959111B2 (en) | 2018-12-21 | 2024-04-16 | Novozymes A/S | Polypeptides having peptidoglycan degrading activity and polynucleotides encoding same |
CN114127256A (zh) | 2019-02-20 | 2022-03-01 | 巴斯夫欧洲公司 | 用确定成分培养基和微量元素补料的芽孢杆菌工业发酵工艺 |
US20220186177A1 (en) | 2019-02-20 | 2022-06-16 | Basf Se | Industrial fermentation process for bacillus using defined medium and magnesium feed |
EP3702452A1 (en) | 2019-03-01 | 2020-09-02 | Novozymes A/S | Detergent compositions comprising two proteases |
AU2020242303A1 (en) | 2019-03-21 | 2021-06-24 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same |
US20220170001A1 (en) | 2019-03-25 | 2022-06-02 | Basf Se | Amylase Enzymes |
US20220162576A1 (en) | 2019-03-25 | 2022-05-26 | Basf Se | Amylase enzymes |
EP3947619A1 (en) | 2019-04-03 | 2022-02-09 | Novozymes A/S | Polypeptides having beta-glucanase activity, polynucleotides encoding same and uses thereof in cleaning and detergent compositions |
WO2020207944A1 (en) | 2019-04-10 | 2020-10-15 | Novozymes A/S | Polypeptide variants |
BR112021020439A2 (pt) | 2019-04-12 | 2022-05-24 | Novozymes As | Variantes estabilizadas de glicosídeo hidrolase |
WO2020229480A1 (en) | 2019-05-14 | 2020-11-19 | Basf Se | Compounds stabilizing hydrolases in liquids |
CN114174504A (zh) | 2019-05-24 | 2022-03-11 | 丹尼斯科美国公司 | 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法 |
EP3980517A1 (en) | 2019-06-06 | 2022-04-13 | Danisco US Inc. | Methods and compositions for cleaning |
US20220275355A1 (en) | 2019-06-13 | 2022-09-01 | Basf Se | Method of Recovering a Protein from Fermentation Broth Using a Divalent Cation |
WO2020264552A1 (en) | 2019-06-24 | 2020-12-30 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions comprising amylase variants |
JP2022538360A (ja) | 2019-07-01 | 2022-09-01 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 酵素を安定化するためのペプチドアセタール |
EP3994255A1 (en) | 2019-07-02 | 2022-05-11 | Novozymes A/S | Lipase variants and compositions thereof |
CN114096677A (zh) | 2019-07-05 | 2022-02-25 | 巴斯夫欧洲公司 | 使用补料分批预培养的微生物细胞工业发酵方法 |
US20220403298A1 (en) | 2019-07-12 | 2022-12-22 | Novozymes A/S | Enzymatic emulsions for detergents |
US11891588B2 (en) | 2019-07-31 | 2024-02-06 | Ecolab Usa Inc. | Personal protective equipment free delimer compositions o |
WO2021030267A1 (en) | 2019-08-14 | 2021-02-18 | Danisco Us Inc | Compositions and methods for increased protein production in bacillus licheniformis |
MX2022002182A (es) | 2019-08-22 | 2022-03-11 | Basf Se | Variantes de amilasa. |
CN114555769A (zh) | 2019-08-27 | 2022-05-27 | 诺维信公司 | 包含脂肪酶的组合物 |
US20220325204A1 (en) | 2019-08-27 | 2022-10-13 | Novozymes A/S | Detergent composition |
WO2021053127A1 (en) | 2019-09-19 | 2021-03-25 | Novozymes A/S | Detergent composition |
WO2021064068A1 (en) | 2019-10-03 | 2021-04-08 | Novozymes A/S | Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains |
BR112022006082A2 (pt) | 2019-10-18 | 2022-06-21 | Basf Se | Preparação enzimática, formulação de detergente, e, uso de pelo menos um diol |
CN112680433B (zh) * | 2019-10-18 | 2022-08-02 | 清华大学 | 一种利用嗜盐细菌生产并分泌蛋白的方法 |
WO2021080948A2 (en) | 2019-10-24 | 2021-04-29 | Danisco Us Inc | Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases |
CN115335503A (zh) | 2019-11-11 | 2022-11-11 | 丹尼斯科美国公司 | 用于增强芽孢杆菌属细胞中蛋白质产生的组合物和方法 |
WO2021105330A1 (en) | 2019-11-29 | 2021-06-03 | Basf Se | Compositions and polymers useful for such compositions |
WO2021115912A1 (en) | 2019-12-09 | 2021-06-17 | Basf Se | Formulations comprising a hydrophobically modified polyethyleneimine and one or more enzymes |
EP3835396A1 (en) | 2019-12-09 | 2021-06-16 | The Procter & Gamble Company | A detergent composition comprising a polymer |
EP4077656A2 (en) | 2019-12-20 | 2022-10-26 | Novozymes A/S | Polypeptides having proteolytic activity and use thereof |
WO2021122120A2 (en) | 2019-12-20 | 2021-06-24 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Cleaning compositions comprising dispersins viii |
CN114929848A (zh) | 2019-12-20 | 2022-08-19 | 诺维信公司 | 稳定的液体无硼酶组合物 |
AU2020404593A1 (en) | 2019-12-20 | 2022-08-18 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Cleaning compositions comprising dispersins VI |
CN114829564A (zh) | 2019-12-20 | 2022-07-29 | 汉高股份有限及两合公司 | 包含分散蛋白和糖酶的清洁组合物 |
US20230340442A1 (en) | 2020-01-15 | 2023-10-26 | Danisco Us Inc. | Compositions and methods for enhanced protein production in bacillus licheniformis |
US20230407208A1 (en) | 2020-01-29 | 2023-12-21 | Conopco, Inc., D/B/A Unilever | Laundry detergent product |
WO2021152120A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Novozymes A/S | Mannanase variants and polynucleotides encoding same |
EP4097227A1 (en) | 2020-01-31 | 2022-12-07 | Novozymes A/S | Mannanase variants and polynucleotides encoding same |
EP3892708A1 (en) | 2020-04-06 | 2021-10-13 | Henkel AG & Co. KGaA | Cleaning compositions comprising dispersin variants |
CN115210371A (zh) | 2020-04-08 | 2022-10-18 | 诺维信公司 | 碳水化合物结合模块变体 |
WO2021214059A1 (en) | 2020-04-21 | 2021-10-28 | Novozymes A/S | Cleaning compositions comprising polypeptides having fructan degrading activity |
EP3907271A1 (en) | 2020-05-07 | 2021-11-10 | Novozymes A/S | Cleaning composition, use and method of cleaning |
EP4158011A1 (en) | 2020-05-26 | 2023-04-05 | Novozymes A/S | Subtilase variants and compositions comprising same |
EP4172298A1 (en) | 2020-06-24 | 2023-05-03 | Novozymes A/S | Use of cellulases for removing dust mite from textile |
EP3936593A1 (en) | 2020-07-08 | 2022-01-12 | Henkel AG & Co. KGaA | Cleaning compositions and uses thereof |
WO2022008732A1 (en) | 2020-07-10 | 2022-01-13 | Basf Se | Enhancing the activity of antimicrobial preservatives |
CN116057158A (zh) | 2020-07-27 | 2023-05-02 | 联合利华知识产权控股有限公司 | 酶和表面活性剂用于抑制微生物的用途 |
CN116323889A (zh) | 2020-08-25 | 2023-06-23 | 诺维信公司 | 家族44木葡聚糖酶变体 |
US20240034960A1 (en) | 2020-08-27 | 2024-02-01 | Danisco Us Inc | Enzymes and enzyme compositions for cleaning |
WO2022043563A1 (en) | 2020-08-28 | 2022-03-03 | Novozymes A/S | Polyester degrading protease variants |
US20230354850A1 (en) | 2020-09-15 | 2023-11-09 | Novozymes A/S | Animal feed comprising insects or insect meal |
JP2023544111A (ja) | 2020-09-22 | 2023-10-20 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 第二の酵素を含む、プロテアーゼとプロテアーゼ阻害薬との改善された組合せ |
WO2022063698A1 (en) | 2020-09-22 | 2022-03-31 | Basf Se | Liquid composition comprising peptide aldehyde |
WO2022074037A2 (en) | 2020-10-07 | 2022-04-14 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants |
EP4232539A2 (en) | 2020-10-20 | 2023-08-30 | Novozymes A/S | Use of polypeptides having dnase activity |
EP4237498A1 (en) | 2020-10-27 | 2023-09-06 | Milliken & Company | Compositions comprising leuco compounds and colorants |
US20230399588A1 (en) | 2020-10-28 | 2023-12-14 | Novozymes A/S | Use of lipoxygenase |
US20240035005A1 (en) | 2020-10-29 | 2024-02-01 | Novozymes A/S | Lipase variants and compositions comprising such lipase variants |
CN116670261A (zh) | 2020-11-13 | 2023-08-29 | 诺维信公司 | 包含脂肪酶的洗涤剂组合物 |
WO2022106400A1 (en) | 2020-11-18 | 2022-05-27 | Novozymes A/S | Combination of immunochemically different proteases |
WO2022106404A1 (en) | 2020-11-18 | 2022-05-27 | Novozymes A/S | Combination of proteases |
EP4006131A1 (en) | 2020-11-30 | 2022-06-01 | The Procter & Gamble Company | Method of laundering fabric |
EP4015629A1 (en) | 2020-12-18 | 2022-06-22 | Basf Se | Polymer mixtures for increasing stability and performance of hydrolase-containing detergents |
EP4032966A1 (en) | 2021-01-22 | 2022-07-27 | Novozymes A/S | Liquid enzyme composition with sulfite scavenger |
EP4284905A1 (en) | 2021-01-28 | 2023-12-06 | Novozymes A/S | Lipase with low malodor generation |
US20240117275A1 (en) | 2021-01-29 | 2024-04-11 | Danisco Us Inc. | Compositions for cleaning and methods related thereto |
EP4039806A1 (en) | 2021-02-04 | 2022-08-10 | Henkel AG & Co. KGaA | Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants with im-proved stability |
WO2022171872A1 (en) | 2021-02-12 | 2022-08-18 | Novozymes A/S | Stabilized biological detergents |
WO2022171780A2 (en) | 2021-02-12 | 2022-08-18 | Novozymes A/S | Alpha-amylase variants |
CN116897160A (zh) | 2021-02-22 | 2023-10-17 | 丹尼斯科美国公司 | 在色素缺陷型芽孢杆菌属细胞中产生目的蛋白的方法和组合物 |
KR20230147071A (ko) | 2021-02-22 | 2023-10-20 | 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 | 아밀라제 변이체 |
EP4047088A1 (en) | 2021-02-22 | 2022-08-24 | Basf Se | Amylase variants |
WO2022189521A1 (en) | 2021-03-12 | 2022-09-15 | Novozymes A/S | Polypeptide variants |
WO2022194673A1 (en) | 2021-03-15 | 2022-09-22 | Novozymes A/S | Dnase variants |
EP4060036A1 (en) | 2021-03-15 | 2022-09-21 | Novozymes A/S | Polypeptide variants |
AU2022237386A1 (en) | 2021-03-15 | 2023-10-05 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for biological sample processing |
WO2022199418A1 (en) | 2021-03-26 | 2022-09-29 | Novozymes A/S | Detergent composition with reduced polymer content |
EP4086330A1 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-09 | The Procter & Gamble Company | Surface treatment |
EP4359518A1 (en) | 2021-06-23 | 2024-05-01 | Novozymes A/S | Alpha-amylase polypeptides |
EP4363565A1 (en) | 2021-06-30 | 2024-05-08 | Danisco US Inc. | Variant lipases and uses thereof |
EP4123007A1 (en) | 2021-07-19 | 2023-01-25 | The Procter & Gamble Company | Fabric treatment using bacterial spores |
EP4123006A1 (en) | 2021-07-19 | 2023-01-25 | The Procter & Gamble Company | Composition comprising spores and pro-perfume materials |
CA3228918A1 (en) | 2021-08-10 | 2023-02-16 | Nippon Shokubai Co., Ltd. | Polyalkylene-oxide-containing compound |
CN117881772A (zh) | 2021-08-20 | 2024-04-12 | 丹尼斯科美国公司 | 编码新型核酸酶的多核苷酸、其组合物及其从蛋白质制剂中消除dna的方法 |
WO2023034486A2 (en) | 2021-09-03 | 2023-03-09 | Danisco Us Inc. | Laundry compositions for cleaning |
WO2023039270A2 (en) | 2021-09-13 | 2023-03-16 | Danisco Us Inc. | Bioactive-containing granules |
CA3241094A1 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-22 | Jonathan LASSILA | Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases |
WO2023114939A2 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-22 | Danisco Us Inc. | Subtilisin variants and methods of use |
WO2023114936A2 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-22 | Danisco Us Inc. | Subtilisin variants and methods of use |
WO2023117915A1 (en) | 2021-12-21 | 2023-06-29 | Basf Se | Inbound chemical product with environmental attributes |
WO2023116569A1 (en) | 2021-12-21 | 2023-06-29 | Novozymes A/S | Composition comprising a lipase and a booster |
EP4206309A1 (en) | 2021-12-30 | 2023-07-05 | Novozymes A/S | Protein particles with improved whiteness |
EP4234664A1 (en) | 2022-02-24 | 2023-08-30 | Evonik Operations GmbH | Composition comprising glucolipids and enzymes |
WO2023165507A1 (en) | 2022-03-02 | 2023-09-07 | Novozymes A/S | Use of xyloglucanase for improvement of sustainability of detergents |
WO2023165950A1 (en) | 2022-03-04 | 2023-09-07 | Novozymes A/S | Dnase variants and compositions |
WO2023187051A1 (en) | 2022-03-30 | 2023-10-05 | Basf Se | Process for the production of a tertiary amine surfactant |
WO2023187044A1 (en) | 2022-03-30 | 2023-10-05 | Basf Se | Process for the production of a surfactant |
WO2023194204A1 (en) | 2022-04-08 | 2023-10-12 | Novozymes A/S | Hexosaminidase variants and compositions |
WO2023225459A2 (en) | 2022-05-14 | 2023-11-23 | Novozymes A/S | Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections |
EP4279571A1 (en) | 2022-05-19 | 2023-11-22 | The Procter & Gamble Company | Laundry composition comprising spores |
WO2023233025A1 (en) | 2022-06-03 | 2023-12-07 | Unilever Ip Holdings B.V. | Liquid detergent product |
WO2023250301A1 (en) | 2022-06-21 | 2023-12-28 | Danisco Us Inc. | Methods and compositions for cleaning comprising a polypeptide having thermolysin activity |
WO2023247348A1 (en) | 2022-06-21 | 2023-12-28 | Novozymes A/S | Mannanase variants and polynucleotides encoding same |
WO2023247664A2 (en) | 2022-06-24 | 2023-12-28 | Novozymes A/S | Lipase variants and compositions comprising such lipase variants |
WO2024012894A1 (en) | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Basf Se | Alkanolamine formates for enzyme stabilization in liquid formulations |
EP4321604A1 (en) | 2022-08-08 | 2024-02-14 | The Procter & Gamble Company | A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester |
WO2024033136A1 (en) | 2022-08-11 | 2024-02-15 | Basf Se | Amylase variants |
WO2024033135A2 (en) | 2022-08-11 | 2024-02-15 | Basf Se | Amylase variants |
WO2024094803A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
WO2024094732A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Basf Se | Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions |
WO2024094800A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
WO2024094735A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Basf Se | Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions |
WO2024094733A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Basf Se | Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions |
WO2024094802A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
WO2024119298A1 (en) | 2022-12-05 | 2024-06-13 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition comprising a polyalkylenecarbonate compound |
WO2024121070A1 (en) | 2022-12-05 | 2024-06-13 | Novozymes A/S | Protease variants and polynucleotides encoding same |
WO2024121057A1 (en) | 2022-12-05 | 2024-06-13 | Novozymes A/S | A composition for removing body grime |
EP4386074A1 (en) | 2022-12-16 | 2024-06-19 | The Procter & Gamble Company | Fabric and home care composition |
Family Cites Families (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR676456A (fr) * | 1929-06-10 | 1930-02-24 | Matières premières pour l'obtention de matières plastiques, de revêtements, de liants, etc., et procédés pour la fabrication de ces matières | |
US4284722A (en) | 1978-08-16 | 1981-08-18 | Cpc International Inc. | Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same |
US4261868A (en) | 1979-08-08 | 1981-04-14 | Lever Brothers Company | Stabilized enzymatic liquid detergent composition containing a polyalkanolamine and a boron compound |
US4493893A (en) | 1981-01-15 | 1985-01-15 | Cpc International Inc. | Process for cloning the gene coding for a thermostable alpha-amylase into Escherichia coli and Bacillus subtilis |
US4760025A (en) | 1984-05-29 | 1988-07-26 | Genencor, Inc. | Modified enzymes and methods for making same |
IE81141B1 (en) | 1983-06-24 | 2000-04-05 | Genencor Int | Procaryotic carbonyl hydrolases |
GB8321923D0 (en) | 1983-08-15 | 1983-09-14 | Unilever Plc | Machine-dishwashing compositions |
US5346823A (en) * | 1984-05-29 | 1994-09-13 | Genencor, Inc. | Subtilisin modifications to enhance oxidative stability |
US4732973A (en) * | 1984-06-14 | 1988-03-22 | Chiron Corporation | Active site modified protease α-1-antitrypsin inhibitors |
US4634551A (en) | 1985-06-03 | 1987-01-06 | Procter & Gamble Company | Bleaching compounds and compositions comprising fatty peroxyacids salts thereof and precursors therefor having amide moieties in the fatty chain |
US4752585A (en) * | 1985-12-17 | 1988-06-21 | Cetus Corporation | Oxidation-resistant muteins |
US4863626A (en) * | 1985-08-21 | 1989-09-05 | The Clorox Company | Encapsulated enzyme in dry bleach composition |
EP0285123A3 (en) * | 1987-04-03 | 1989-02-01 | Stabra AG | A method for complete mutagenesis of nucleic acids |
US5118623A (en) * | 1988-05-27 | 1992-06-02 | Solvay Enzymes, Inc. | Bleach stable enzymes |
GB8900496D0 (en) | 1989-01-10 | 1989-03-08 | Procter & Gamble | Liquid detergent composition containing enzyme and enzyme stabilization system |
DD301645A9 (de) | 1989-06-29 | 1993-05-13 | Gist Brocades Nv | Mutantenenzym mit verminderter stabilitaet unter grosstechnischen bedingungen |
EP0410498B1 (en) * | 1989-06-29 | 1998-06-03 | Genencor International, Inc. | Mutant microbial alpha-amylases with increased thermal, acid and/or alkaline stability |
DK97190D0 (da) * | 1990-04-19 | 1990-04-19 | Novo Nordisk As | Oxidationsstabile detergentenzymer |
DK271490D0 (da) | 1990-11-14 | 1990-11-14 | Novo Nordisk As | Detergentkomposition |
AU9103791A (en) * | 1990-12-21 | 1992-07-22 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Oxidation resistant variants of parathyroid hormone |
FR2676456A1 (fr) | 1991-05-13 | 1992-11-20 | Agronomique Inst Nat Rech | Variants thermostables de l'alpha-amylase de bacillus licheniformis, leur procede de preparation et leur utilisation. |
US5322778A (en) * | 1991-10-31 | 1994-06-21 | Genencor International, Inc. | Liquefaction of granular starch slurries using an antioxidant with alpha amylase |
KR100294361B1 (ko) * | 1992-07-23 | 2001-09-17 | 피아 스타르 | 돌연변이체알파-아밀라제,세정제,접시세척제,및액화제 |
-
1994
- 1994-02-10 ES ES94909609T patent/ES2126743T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 DK DK94909609T patent/DK0689589T4/da active
- 1994-02-10 DE DE69415659T patent/DE69415659T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 WO PCT/US1994/001553 patent/WO1994018314A1/en active Application Filing
- 1994-02-10 BR BR9405720A patent/BR9405720A/pt not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 AT AT98109967T patent/ATE239075T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 CA CA002155831A patent/CA2155831C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 JP JP6518371A patent/JPH08506491A/ja active Pending
- 1994-02-10 KR KR1019950703350A patent/KR100322793B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 CZ CZ19952057A patent/CZ293163B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 AU AU62392/94A patent/AU682863C/en not_active Expired
- 1994-02-10 NZ NZ262623A patent/NZ262623A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 EP EP94909609A patent/EP0689589B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 US US08/194,664 patent/US6297037B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 ES ES98109967T patent/ES2198617T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 AT AT94909609T patent/ATE175235T1/de active
- 1994-02-10 PL PL94310326A patent/PL310326A1/xx unknown
- 1994-02-10 EP EP98109967A patent/EP0867504B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 DE DE69432610T patent/DE69432610T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 HU HU9502364A patent/HU219675B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 PT PT98109967T patent/PT867504E/pt unknown
- 1994-02-10 DK DK98109967.4T patent/DK0867504T4/da active
- 1994-02-10 CN CN94191138A patent/CN1104499C/zh not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-06-06 US US08/468,698 patent/US5849549A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-06 US US08/468,220 patent/US5824532A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 FI FI953797A patent/FI119694B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-08-10 NO NO953147A patent/NO307187B1/no not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-01-07 FI FI20080005A patent/FI122574B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ293163B6 (cs) | Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu | |
AU718509B2 (en) | An improved laundry detergent composition comprising amylase | |
AU686007B2 (en) | An improved cleaning composition | |
US20080026976A1 (en) | Highly productive alpha-amylases | |
EP1065277B2 (en) | Mutant alpha-amylases | |
JP4417532B2 (ja) | 変異α−アミラーゼ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
MK4A | Patent expired |
Effective date: 20140210 |