CZ293163B6 - Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu - Google Patents

Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu Download PDF

Info

Publication number
CZ293163B6
CZ293163B6 CZ19952057A CZ205795A CZ293163B6 CZ 293163 B6 CZ293163 B6 CZ 293163B6 CZ 19952057 A CZ19952057 A CZ 19952057A CZ 205795 A CZ205795 A CZ 205795A CZ 293163 B6 CZ293163 B6 CZ 293163B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amylase
alpha
gly
mutant
leu
Prior art date
Application number
CZ19952057A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ205795A3 (en
Inventor
Richard L. Antrim
Christopher C. Barnet
Colin Mitchinson
Scott D. Power
Carol A. Requadt
Leif P. Solheim
Original Assignee
Genencor International, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=21776903&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ293163(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Genencor International, Inc. filed Critical Genencor International, Inc.
Publication of CZ205795A3 publication Critical patent/CZ205795A3/cs
Publication of CZ293163B6 publication Critical patent/CZ293163B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
    • C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • C12N15/75—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase

Abstract

Mutanta alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzoru alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+15 nebo M+197 v alfa-amyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina, použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gln nebo Glu. Popsáno je rovněž použití uvedené mutanty, kódová DNA pro tuto mutantu, příslušný vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu s obsahem uvedené mutanty.ŕ

Description

Oblast techniky
Vynález se týká nové mutanty alfa-amylázy s řetězcem aminokyselin, který je odlišný od přírodního řetězce. V řetězci této alfa-amylázy jsou některé aminokyseliny nahrazeny jinými aminokyselinami, zvláště jsou nahrazeny oxidovatelné aminokyseliny, takže alfa-amyláza je stálá proti oxidaci. Vynález se rovněž týká kódové DNA pro tuto mutantu, vektoru s jejím obsahem, hostitelských buněk, čisticího prostředku a také prostředku, kteiý mutantu obsahuje a je vhodný pro rozklad škrobu.
Dosavadní stav techniky
Alfa-amyláza (alfa-l,4-glukan^l-glukanhydroláza, EC3.2.1) hydrolyzuje vnitřní alfa-1,4glukosidové vazby ve škrobu převážně náhodným způsobem za vzniku maltodextrinu s nižší molekulovou hmotností. Alfa-amylázy jsou komerčně důležité enzymy, které se používají v počátečních stupních zpracování škrobu, při výrobě alkoholu, jako čisticí složky ve smáčecích a v textilním průmyslu. Alfa-amylázy jsou produkovány širokou škálou mikroorganismů včetně čeledi Bacillus a Aspergillus, přičemž většina běžných amyláz je produkována bakteriemi, jako B. licheniformis, B. amyloliquefaciens, B. subtillis nebo B. stearothermophylus. V posledních létech byly výhodné enzymy pro komerční využití získávány z B. licheniformis vzhledem ke své tepelné stálosti a ke své účinnosti, zvláště při neutrálním a mírně alkalickém pH.
Již dříve byly prokázány pokusy použít rekombinantní techniky DNA ke zjištění, které ze zbytků aminokyselin jsou důležité pro katalytickou účinnost amyláz a/nebo ke zjištění vlivu modifikace některých aminokyselin v různých amylázách, jak bylo popsáno v publikacích Vihinen M. a další, 1990, J. Biochem., 107:267-272, Holm L. a další, 1990, Protein Engineering 3:181-191, Takase K. a další, 1992, Biochemical et Biophysica Acta, 1120-281-288, Matsui I. a další, 1992, Febs Letters, sv. 310, č. 3, str. 216-218, další zkoušky byly zaměřeny na to, které zbytky jsou důležité pro tepelnou stálost enzymu (Suzuki Y. a další, 1989, J. Biol. Chem., 264:18933-18938. V jedné skupině pokusů byly zaváděny mutace v místě různých histidinových zbytků v amyláze B. Licheniformis vzhledem k tomu, že bylo známo, že tato amyláza je tepelně stálejší ve srovnání s jinými amylázami čeledi Bacillus, přičemž obsahuje větší počet těchto histidinových zbytků. Z tohoto důvodu se předpokládalo, že náhradou histidinových zbytků by bylo možno ovlivnit tepelnou stálost enzymů (Declerck N. a další, 1990, J. Biol. Chem., 265:15481-15488, RF 2 665 178 Al a Joyet P. a další, 1992, Bio/Technology, 10:1579-1583.
Bylo prokázáno, že alfa-amyláza je inaktivována peroxidem vodíku a dalšími oxidačními činidly při pH v rozmezí 4 a 10,5, jak bude dále popsáno v příkladové části. Při komerčním využití mohou být alfa-amylázy používány za velmi různých podmínek při vysokém i nízkém pH v závislosti na účelu použití. Tyto enzymy mohou být například použity pro zkapalnění škrobu, tento postup se obvykle s výhodou provádí při nízkém pH, s výhodou nižším než 5,5. Na druhé straně je možno tyto enzymy využít v prostředcích na mytí nádobí nebo v pracích prostředcích, které často obsahují oxidační činidla, například látky pro bělení nebo perkyseliny, které se využívají v daleko alkaličtějším prostředí.
Aby bylo možno měnit profil stálosti nebo účinnosti amyláz za různých podmínek bylo zjištěno, že při selektivní náhradě, substituci nebo vypuštění oxidovatelných aminokyselin, jako methioninu, tryptophanu, tyrosinu, histidinu nebo cisteinu je možno dosáhnout varianty enzymu s poněkud odlišnými vlastnostmi ve srovnání s původním enzymem. Vzhledem k tomu, že běžné komerčně dostupné amylázy jsou za určitých podmínek nestálé, bylo by zapotřebí amylázy s pozměněnou stálostí a/nebo účinností. Tato pozměněná stálost v přítomnosti oxidačních činidel,
-1 CZ 293163 B6 za tepla nebo při odlišném pH může být dosaženo při zachování enzymatické účinnosti ve srovnání s přírodním nebo původním enzymem. Pozměněnou vlastností v důsledku těchto mutací může být změna stálostí proti oxidaci za udržení stálosti za tepla nebo obráceně. Mimoto může být dosaženo náhradou různých aminokyselin za oxidovatelné aminokyseliny nebo vypuštěním jedné nebo většího počtu oxidovatelných aminokyselin změny enzymatické účinnosti při pH, které je odlišné od optimálního pH pro původní enzym. Jinak vyjádřeno, může mít mutovaný enzym také změněnou účinnost při určitém pH, což může přispět k oxidativní stálosti enzymu.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří mutanta alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzorů alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+15 nebo M+197 v alfa-amyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu. V jednom z výhodných provedení vynálezu vzniká mutanta náhradou jednoho nebo většího počtu methioninových zbytků v původní alfa-amyláze jiným zbytky aminokyselin.
V dalším možném provedení obsahuje mutanta substituci jednoho nebo většího počtu tryptofanových zbytků, popřípadě v kombinaci se substitucí jednoho nebo většího počtu methioninových zbytků v původní alfa-amyláze. Obecně je takovou mutantu možno získat in vitro modifikací řetězce DNA pro původní enzym, kterým může být přírodní nebo rekombinantní enzym, takže při použití pozměněného kódového řetězce dochází k náhradě nebo vypuštění jednoho nebo většího počtu zbytků aminokyselin v původním řetězci enzymu.
K substituci nebo vypuštění jedné nebo většího počtu aminokyselin s výhodou dochází v místě zbytků methioninu, tryptofanu, cysteinu, histidinu nebo tyrosinu v původním řetězci, nejvýhodněji jsou nahrazeny methioninové zbytky.
V případě, že se požaduje zvýšená stálost proti oxidaci, je možno k náhradě použít zbytek neoxidovatelné aminokyseliny, jako alaninu, argininu, glycinu, kyseliny sparagové, lysinu, fenylalaninu, prolinu, threoninu nebo valinu nebo jiný zbytek oxidovatelné aminokyseliny, jako cysteinu, methioninu, tryptofanu, tyrosinu nebo histidinu, přičemž tyto aminokyseliny jsou uvedeny od nejsnadněji oxidovatelné k hůře oxidovatelným kyselinám. V případě, že má být změněna stálost za teplaje možno nahradit jakýkoliv z dalších dvaceti přírodně se vyskytujících zbytků, je například možno nahradit cystein methioninem.
Výhodné mutanty zahrnují substituci methioninového zbytku, který odpovídá jakémukoliv zbytku této aminokyseliny v alfa-amyláze B. licheniformis (+8,+15,+197,+256,+304,+366 a+438). Nejvýhodnějším methioninovým zbytkem pro náhradu je zbytek v poloze +197 nebo +15 v tomto enzymu. Výhodným zbytkem pro náhradu methioninu v poloze +197 je alanin A, threoninT nebo cystein C. Výhodným zbytkem pro náhradu methioninu v poloze +15 je threonin T, sůl kyseliny aspargové D, valin V, i když je možno využít i další zbytky aminokyselin. výhodnými mutantami jsou M197T a M15L.
Vynález se rovněž týká mutant, v nichž je nahrazen některý z tryptofanových zbytků v alfa-amyláze B. licheniformis, jak je zřejmé z obr. 2. Výhodným nahrazením tryptofanovým zbytkem je zbytek v poloze +138 tohoto enzymu. Náhradu zbytku tryptofanu je možno uskutečnit jako takovou nebo v kombinaci s náhradou jiných oxidovatelných zbytků aminokyselin. Zvláště může být výhodné nahradit alespoň jeden zbytek tryptofanu a alespoň jeden zbytek methioninu, může jít o dvojnásobnou mutantu v polohách +138 a +197.
Mutanty alfa-amylázy podle vynálezu mají obvykle pozměněnou oxidativní stálost v přítomnosti peroxidu vodíku a dalších oxidačních činidel, jako jsou bělicí prostředky nebo perkyseliny a také mírnější oxidační činidla, jako chlormain T. Mutované enzymy se zvýšenou stálostí proti oxidaci
-2CZ 293163 B6 budou mít delší životnost při skladování a bude možno je lépe využít spolu s bělícími prostředky, perboritany, peruhličitany nebo perkyselinami v čisticích prostředcích. Podobně může být tato vlastnost využita obráceně při průmyslových postupech, v nichž je zapotřebí rychle dosáhnout vymizení enzymatického účinku. U mutovaných enzymů podle vynálezu může také být dosaženo účinnosti v širším rozmezí pH, přičemž některé mutanty, jako M15L jsou stálé při nízkém pH při zkapalnění škrobu a jiné mutanty, jako M197T jsou stálé při vyšším pH, běžném v čisticích prostředcích.
Mutanty podle vynálezu mohou také mít změněnou stálost za tepla, přičemž může jít o stálost při vysokých i nízkých teplotách. Je zřejmé, že jakékoliv změna vlastností mutant ve smyslu zvýšení nebo snížení oproti původnímu enzymu může být žádoucí vzhledem ke konečnému využití mutanty.
Kromě zpracování škrobu a použití při čištění je možno použít amylázy podle vynálezu k jakémukoliv obvyklému účelu, například v textilním a potravinářském průmyslu a podobně. Některé varianty enzymů, například mutanta M197C, které jsou snadno inaktivovány oxidací by mohly být využity při postupech, při nichž je žádoucí zcela odstranit účinnost amylázy na konci postupu, jak tomu je při výrobě zmrazených potravin.
Výhodné mutanty alfa-amyláz podle vynálezu je možno odvodit od některých kmenů čeledi Bacillus, například B. licheniformis, B. amyloliquefaciens a B. stearothermophilus a zvláště Bacillus licheniformis.
Vynález se týká rovněž nové formy alfa-amylázy, běžně produkované B. licheniformis. Tato nová forma, označovaná jako A4 obsahuje čtyři přídatné alaninové zbytky na N-zakončení, jak je zřejmé z obr. 4b. Deriváty mutanty A4 rovněž spadají do rozsahu vynálezu. Derivátem formy A4 je taková forma alfa-amylázy A4, která obsahuje ještě jednu nebo větší počet dalších mutací, jako substituce, náhrada nebo vypuštění jedné nebo většího počtu oxidovatelných aminokyselin.
Vynález se rovněž týká smáčedel ve formě kapaliny, gelu nebo granulátu s obsahem svrchu uvedených mutant alfa-amylázy. Zvláště výhodná jsou smáčedla, obsahující mutantu v poloze +197 jako takovou, popřípadě v kombinaci s dalšími enzymy, jako jsou endoglykosidázy, celulázy, proteázy, lipázy nebo jiné amylázy. Mimoto mohou tyto prostředky podle vynálezu obsahovat mutanty alfa-amylázy s více než jednou specifickou mutací v řetězci.
Vynález se týká také prostředků, využitelných při zpracování škrobu, zvláště při jeho zkapalnění. Tyto prostředky podle vynálezu s výhodou obsahují mutanty alfa-amylázy se substitucí nebo vypuštěním zbytků v poloze Ml 5. Mimoto mohou tyto prostředky obsahovat ještě další složky známého typu, jako antioxidační činidla, vápník, ionty a podobně.
Vynález se rovněž týká způsobu použití popsané alfa-amylázy pro zkapalnění škrobu, zvláště suspenzí granulovaného škrobu, pocházejícího z mletí za vlhka nebo za sucha. V prvním stupni degradace škrobu se suspenze škrobu obvykle gelatinizuje působením tepla při poměrně vysoké teplotě až 110°C. Pak dochází ke zkapalnění škrobu a dextrinizaci při použití alfa-amyláz. Podmínky zkapalnění již byly popsány v patentových přihláškách US 07 785 624 a 07 785 623 a také v patentovém spisu US 5 180 669. Obvykle se postupuje tak, že se
a) k suspenzi granulovaného škrobu přidá účinné množství mutanty alfa-amylázy,
b) popřípadě se k suspenzi přidá účinné množství antioxidačního činidla a
c) suspenze se nechá reagovat do zkapalnění škrobu.
Vynález se rovněž týká kódové DNA pro mutantu alfa-amylázy podle vynálezu včetně formy A4 a jejich mutant a vektoru pro expresi s obsahem této DNA, jakož i hostitelských buněk, transformovaných takovým vektorem.
-3CZ 293163 B6
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 je znázorněn řetězec DNA genu pro alfa-amylázu zB. licheniformis (NCIB8061), řetězec č. 31 a také řetězec odvozeného produktu translace, tak jak byl popsán v publikaci Gray G. a další, 1986, J. Bacter., 166:635-643.
Na obr. 2 je znázorněn řetězec aminokyselin úplného enzymu alfa-amylázy z B. licheniformis (NCIB8061), jde o řetězec č. 32.
Na obr. 3 je znázorněno srovnání primárních struktur alfa-amyláz z čeledi Bacillus. Amyláza B. licheniformis (Am-lich.), řetězec č. 33, byla popsána v Gray G. a další, 1986, J. Bact., 166:635-643, amyláza z B. amyloliquefaciens (Am-amylo), řetězec č. 34, byla popsána vTakkinen K. a další, 1983, J. Biol. Chem. 258:1007-1013 a amyláza zB. stearothermophilus (Am-stearo), řetězec č. 35, byla popsána v Ihara H. a další, 1985, J. Biochem. 98:96-103.
Na obr. 4a je znázorněn řetězec aminokyselin úplné varianty alfa-amylázy M197Tm řetězec č. 36.
Na obr. 4b je znázorněn řetězec aminokyselin pro formu A4 alfa-amylázy z B. licheniformis NCIB8061, řetězec č. 37, číslování od N-zakončení, počínaje čtyřmi přídatnými zbytky alaninu.
Na obr. 5 je znázorněn plazmid pA4BL, kde BLAA znamená gen pro alfa-amylázu z B. licheniformis, Pstl až Sstl, AmpR znamená gen pro odolnost proti ampicilinu z plazmidu pBR322 a CAT znamená gen pro odolnost proti chloramfenikolu z pC194.
Na obr. 6 je znázorněno spojení signálního řetězce a úplné bílkoviny pro B. lichenisormis v pA4BL (řetězec č. 40) a B. licheniformis v pBLapr (řetězec č. 41).
Na obr. 7a je znázorněna inaktivace některých alfa-amyláz, jako SpezymeRAA20 a M197L (forma A4) působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 5,0 a 25 °C.
Na obr. 7b je znázorněna inaktivace alfa-amyláz SpezymeR AA20, M197L působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 10,0 a 25 °C.
Na obr. 7c je znázorněna inaktivace některých alfa-amyláz, SpezymeR AA20, M15L působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 5,0 a 25 °C.
Na obr. 8 je schematicky znázorněna produkce kazety pro mutantu M197X.
Na obr. 9 j e znázorněna exprese varianty Μ197X.
Na obr. 10 je znázorněna tepelná stálost varianty M197X při pH 5,0 v přítomnosti 5 mM CaCl2 při teplotě 95 °C po dobu 5 minut.
Na obr. 11a a 11b je znázorněna inaktivace některých amyláz ve smáčedle stálost v prostředku CascadeR, běžně dodávaném produktu při teplotě 65 °C v přítomnosti nebo nepřítomnosti škrobu, na obr. 11b jde o stálost prostředku SunlightR, který se běžně dodává, při teplotě 65 °C v přítomnosti nebo nepřítomnosti škrobu.
Na obr. 12 je schematicky znázorněna produkce kazety pro mutantu Μ15X.
Na obr. 13 je znázorněna exprese varianty Ml 5X.
Na obr. 14 je znázorněna specifická účinnost varianty M15X na rozpustný škrob.
-4CZ 293163 B6
Na obr. 15 je znázorněna tepelná stálost varianty M15X při teplotě 90 °C a pH 5,0 v přítomnosti 5 mM CaCl2 po dobu 5 minut.
Na obr. 16 je znázorněna specifická účinnost na škrob a rozpustný substrát při pH 5,5 pro varianty Ml5 jako funkce účinnosti přírodního enzymu z B. licheniformis v procentech.
Na obr. 17 je znázorněna inaktivace alfa-amylázy AA20 z B. licheniformis v množství 0,65 mg/ml působením chloraminu-T při pH 8,0 ve srovnání s variantou M197A (1,7 mg/ml) a variantou M197L (1,7 mg/ml).
Na obr. 18 je znázorněna inaktivace alfa-amylázy AA20 z B. licheniformis (0,22 mg/ml) působením chloraminu-T při pH 4,0 ve srovnání s variantou M197A (4,3 mg/ml) a M197L (0,53 mg/ml).
Na obr. 19 je znázorněna reakce alfa-amylázy AA20 z B. licheniformis (0,75 mg/ml) působením chloraminu-T při pH 5,0 ve srovnání s dvojnásobnými variantami M197T/W138F (0,64 mg/ml) a M197T/W138Y (0,80 mg/ml).
Amylázy, použité při zkapalnění škrobu mohou patrně podléhat inaktivaci působením určitých složek v suspenzi škrobu, jak již bylo uvedeno v patentových přihláškách US 07 785 624 a 07 785 623 a v patentovém spisu US 5 180 669 z 19. ledna 1993. Mimoto může při použití amylázy ve smáčedlech s obsahem oxidačních činidel, jako bělicích prostředků nebo perkyselin dojít k částečné nebo úplné inaktivaci amylázy. vynález je proto zaměřen na změnu citlivosti amyláz na oxidaci. Mutované enzymy podle vynálezu mohou také mít změněnou účinnost při různém pH a/nebo změněnou stálost při určitých teplotách, což může souviset se zvýšenou oxidativní stálostí enzymu při nízkém nebo vysokém pH.
Použitá alfa-amyláza zahrnuje přírodně se vyskytující i rekombinantní amylázy. Výhodnými amylázami jsou enzymy, odvozené od B. licheniformis nebo B. stearothermophilus včetně formy A4 alfa-amylázy z B. licheniformis, může však jít také o alfa-amylázy z hub, například z čeledi Aspergillus, jako A. oryzae a A. niger.
Rekombinantní alfa-amyláza je enzym, v němž byl kódový řetězec DNA pro přírodní alfa-amylázu modifikován za vzniku mutované DNA, která v kódovém řetězci zahrnuje substituci, přidání nebo vypuštění jedné nebo většího počtu aminokyselin v řetězci enzymu. Vhodné postupy pro modifikaci budou dále uvedeny a jsou také známy z patentových spisů US 4 760 025 a 5 185 258.
Mezi řetězci téměř všech endoamyláz, u nichž byl až dosud řetězec analyzován, byly nalezeny homologie, přičemž šlo o řetězce enzymů rostlin, savců a bakterií podle Nakajima R. T. a další,
1986, Appl. Microbiol. Biotechnol., 23:355-360, Rogers J. C., 1985, Biochem. Biophys. Res. Commun., 128:470-476. Jak je zřejmé z obr. 3, existují čtyři oblasti zvláště vysoké homologie u určitých amyláz čeledi Bacillus, tyto oblasti jsou v řetězcích podrženy. Mimoto byly analyzovány i vztahy mezi endoamylázami z čeledi Bacillus podle Feng D. F. a Boolittle R. F.,
1987, J. Molec. Evol., 35:351-360. Relativní homologie řetězce mezi B. stearothermophilus aamylázou B licheniformis je přibližně 66% podle publikace Holm L. a další, 1990, Protein Engineering, 3(3), str. 181-191. Homologie řetězce amyláz B. licheniformis aB. amyloliquefaciens je přibližně 81 % podle téže publikace. I když je homologie řetězce důležitá, uznává se obecně, že homologie struktury je při srovnání amyláz i jiných enzymů rovněž důležitý. Předpokládá se například strukturní homologie mezi amylázami hub a amylázami bakterií (Bacillus), takže amylázy hub jsou v rozsahu vynálezu rovněž zahrnuty.
Mutanta alfa-amylázy má řetězec aminokyselin, který je odvozen od řetězce známé amylázy. Tato známá amyláza zahrnuje přírodně se vyskytující i rekombinantní enzymy, jak již bylo
-5CZ 293163 B6 uvedeno. Řetězec mutanty je odvozen od původního řetězce substitucí, vypuštěním nebo přidáním jedné nebo většího počtu aminokyselin. Tyto modifikace se provádějí spíše v kódovém řetězci DNA než ve vlastním řetězci enzymu. Vhodné postupy pro modifikaci kódové DNA budou dále uvedeny a jsou popsány také v patentových spisech US 4 760 025 a 5 185 258.
Pro substituci nebo deleci jsou vhodné specifické zbytky v polohách M197, M15 a W138 amylázy Bacillus licheniformis, jde o polohy, v nichž se nacházejí zbytky methioninu, histidinu, tryptofanu, cysteinu a tyrosinu. Poloha aminokyseliny (+197) odpovídá poloze v úplném řetězci, znázorněném na obr. 2. vynález však není omezen na mutace této specifické alfa-amylázy, avšak zahrnuje také mutace v dalších amylázách, které obsahují zbytky aminokyselin v polohách, ekvivalentních zbytkům v alfa-amyláze B. licheniformis. Zbytek aminokyseliny v původní alfa-amyláze je ekvivalentní zbytku v amyláze B. licheniformis v tom případě, že je homologní (to znamená odpovídající poloze v primární nebo terciární struktuře) nebo je analogický specifickému zbytku nebo části v uvedeném enzymu (to znamená, že má tutéž nebo podobnou funkční schopnost chemické nebo strukturní reakce nebo interakce).
Aby bylo možno stanovit homologii k primární struktuře, srovnává se řetězec aminokyselin určité alfa-amylázy přímo s primárním řetězcem alfa-amylázy z B. licheniformis, zvláště pokud jde o zbytky, o nichž je známo, že jsou neměnné pro všechny alfa-amylázy se známým řetězcem, jak je zřejmé z obr. 3. Je také možno stanovit ekvivalentní zbytky v terciární struktuře. Byla již uvedena krystalová struktura pro pankreatickou alfa-amylázu vepře v publikaci Buisson G. A další, 1987, EMBO J., 6:3909-3916, Taka-amylázy A z Aspergillus oryzae podle Matsuura Y. a další, 1984, J. Biochem., (Tokyo), 95:697-702 a kyselé alfa-amylázy z A. niger podle Boel E. a další, 1990, Biochemistry, 29:6244-6249, přičemž první dvě z uvedených struktur jsou si podobné. Prozatím neexistují publikované struktury alfa-amyláz čeledi Bacillus, přestože se uvádí, že jde pravděpodobně o běžné supersekundámí struktury glukanáz podle MacGregor E. A. a Svensson B., 1989, Biochem. J., 259:145-152, struktura pro enzym B. stearothermophilus byla modelována podle struktury pro Taka-amylázu A podle Holm L. a další, 1990, Protein Engineering 3:181-191. Čtyři vysoce konzervované oblasti, znázornění na obr. 3 obsahují řadu zbytků, které jsou pravděpodobně součástí účinného místa podle Matsuura Y. a další, 1984,
J. Biochem., (Tokyo), 95:697-702, Buisson G. a další, 1987, EMBO J., 6:3909-3916, Vihinen M. a další, 1990, J. Biochem., 107:267 až 272, jde podle číslování v B. lichenoformis o zbytky včetně Hisl05, Arg229, Asp231, His235, Glu261 a Asp328.
Vektor pro expresi je konstrukce, která obsahuje řetězec DNA, operativně vázaný na vhodné řídicí řetězce, schopné zajistit expresi uložené DNA ve vhodném hostiteli. Tyto řídicí řetězce mohou zahrnovat promotor pro transkripci, popřípadě operátor pro řízení této transkripce, kódový řetězec pro vhodné místo vazby mRNA na ribosom a řetězce, které řídí ukončení transkripce a translace. Výhodným promotorem je promotor aprE z B. subtillis. Vektorem může být plazmid, část fágu nebo jednoduše potenciální část, vhodná pro uložení do genomu. Po transformaci ve vhodném hostiteli může dojít k replikaci vektoru a kjeho funkci nezávisle na genomu hostitele nebo může dojít k integraci do genomu. V průběhu přihlášky jsou pojmy plazmid a vektor někdy užity střídavě vzhledem k tomu, že v současné době je plazmid nejběžnější užívanou formou vektoru. Vynález však zahrnuje i použití jiných forem vektorů, jejichž funkce je ekvivalentní a které jsou v oboru známé.
Hostitelské kmeny nebo buňky, použitelné podle vynálezu jsou prokaryotické nebo eukaryotické a zahrnují transformovatelné mikroorganismy, u nichž je možno dosáhnout exprese alfa-amylázy. Specificky jsou vhodné kmeny určitých rodů nebo čeledí, jako Bacillus. S výhodou se užije kmenů Bacillus, negativních z hlediska produkce alfa-amylázy (gen byl odstraněn a/nebo kmenů, z nichž byl odstraněn gen pro alfa-amylázu i proteázu, například Bacillus subtilis BG2473 (deltaamyE, delta apr.deltanpr). Transformace nebo transfekce rekombinantním vektorem vede ke schopnosti transformovaných hostitelských buněk replikovat vektor, obsahující kód pro alfa-amylázu nebo její mutanty nebo vzniká schopnost exprese požadované alfa-amylázy.
-6CZ 293163 B6
Mutanty enzymu podle vynálezu jsou v průběhu fermentace s výhodou vylučovány do živného prostředí. K. dosažení této sekrece je možno použít jakýkoliv vhodný signální řetězec, například signální peptid aprE.
Řada mutant alfa-amylázy podle vynálezu je použitelná jako složka čisticích prostředků, zvláště prostředků pro mytí nádobí a zejména těch, které obsahují známé oxidační látky. Mutanty alfa-amyláz podle vynálezu je možno použít v práškových, kapalných nebo gelových čisticích prostředcích známých typů o pH 6,5 až 12,0. Je také možno připravit granuláty například podle patentových přihlášek US 07 429 881, 07 533 721 a 07 957 973. Tyto čisticí prostředky mohou ještě obsahovat další enzymy, jako známé proteázy, lipázy, celulázy, endoglykosidázy nebo další amylázy a také další pomocné látky, stabilizátory a podobně, tak jak jsou v oboru známé. Tyto enzymy mohou být přítomny jako složka granulátů nebo jiných směsí běžným způsobem. Mimoto je možno použít k uvedeným nebo dalším účelům větší počet mutant současně, například mutovaný enzym se změnami v poloze +15 a +197 může mít zvýšený účinek v čisticím prostředku, stejně je možno použít také mutanty se změnou v polohách +197 a +138.
Jak již bylo svrchu uvedeno, je možno použít mutanty alfa-amylázy podle vynálezu také při zkapalnění škrobu. Zkapalnění škrobu, zvláště granulovaného škrobu v suspenzi se typicky provádí při pH blízkém neutrální hodnoty při vyšších teplotách. Jak je popsáno v patentových přihláškách US 07 788 624 a 07 785 623 a v patentovém spisu US 5 180 669 je pravděpodobné, že při typickém postupu může být přítomno také oxidační činidlo nebo inaktivační činidlo, které může ovlivnit účinnost enzymu. Z tohoto důvodu je možno přidávat ještě antioxidační činidlo k ochraně enzymu. V závislosti na podmínkách při výhodném provedení postupu pro zkapalnění škrobu podle svrchu uvedených patentových přihlášek a patentového spisu, při němž se užívá zejména nízkého pH vysoké teploty a potenciálně oxidačních podmínek, jsou výhodnými mutantami podle vynálezu pro toto použití mutanty, které mají změněnou účinnost při použitém pH, to znamená účinnost při pH nižším než 6 a s výhodou nižším než 5,5 a/nebo se změněnou tepelnou stálostí, například při teplotě 90 až 110 °C a/nebo mutanty se zvýšenou stálostí pří oxidaci.
Vynález tedy navrhuje zlepšený způsob zkapalnění škrobu, při němž se k suspenzi granulovaného škrobu po mletí za vlhka za sucha při pH 4 až 6 přidává účinné množství mutanty alfaamylázy podle vynálezu a popřípadě ještě účinné množství antioxidačního činidla nebo jiné pomocné látky a suspenze se nechá reagovat při vhodné teplotě po dobu, dostatečnou pro zkapalnění škrobu.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu. Použité zkratky aminokyselin, složené ze tří písmen, nebo také tvořené jedním písmenem, jsou uvedeny podle Dále J. W., Molecular Genetics of Bacteria, John Wiley and Sons, (1991) Appendix B.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Substituce za methioninové zbytky v alfa-amyláze B. licheniformis
Gen pro alfa-amylázu, tak jak je znázorněn na obr. 1, byl klonován z B. licheniformis NCIB8061, který byl získán z veřejné sbírky kultur National Collection of Industrial Bacteria, Aberdeen, Skotsko (Gray G. a další, 1986, J. Bacteriology 166:635-643). Fragment 1,72 kb Pstl-SStl, který je kódem pro poslední tři zbytky signálního řetězce byl spolu s úplnou bílkovinou a oblastí terminátoru subklonován vM13MP18. Mezi místa Bell a Sstl byl přidán syntetický terminátor při použití syntetické oligonukleotidové kazety
-7CZ 293163 B6
Bell Sáti
5’ GATCAAAACATAAAAAACCGGCCTTGGCCCCGCCGGTTTTTTATTATTTTTGAGCT 3'
3' TTTTGTATTTTTTGGCCGGAACCGGGGCGGCCAAAAAATAATAAAAAC 5’ řetězec č. 1
Kazeta je konstruována tak, že obsahuje terminátor transkripce pro subtilisin B. amyloliquefaciens, popsaný v publikaci Wells a další, 1983, Nucleic Acid Research 11:7911-7925.
Při cílené tvorbě mutací působením oligonukleotidů bylo využito v podstatě postupu podle publikace Zoller M. a další, Meth. Enzymol. 100:468-500. Byly použity 5-fosforylované oligonukleotidové primery k zavedení požadovaných mutací do matrice M13 DNA s jednoduchým řetězcem, pro substituci každého ze sedmi methioninových zbytků v alfa-amyláze B-licheniformis byly použity nukleotidy uvedené v tabulce I. Každý mutagenní oligonukleotid složil rovněž k zavedení místa působení restrikční endonukleázy pro tuto mutaci.
Tabulka I
Mutagenní oligonukleotidy pro náhradu methioninových zbytků v alfa-amyláze B. licheniformis
MBA
5'-7 GGG ACG CTG CCG CAG TAC TTT GAA TGG T-3’
Sc&It řetězec
č. 2
M15L
5’-TG ATG CAG TAC TTT GAA TGG TAC CTG CCC AAT GA-3’
Scal-r
Kpnl+ řetězec
M197L
5* -GAT TAT TTG TTG TAT GCC GAT ATC GAC TAT GAC CAT-3’ fccoRV+ řetězec
M256A
5’-CG GGG AAG GAG CCC TTT ACG GTA GCT-3' řetězec
M304L
5’-GC GGC TAT GAC TTA AGG AAA TTG C-3*
AXI1I+ řetězec
M366A
5’—C TAC GGG GAT CCA TAC
NsiIt
GGG ACG Á-3' řetězec
M366Y
5*-C TAC GGG GAT TAC TAC
GGG ACC AAG GGA GAC TCC C-3’ StyT+ řetězec
M43BA * -CC GGT GGG GCC AAG CGG CCC TAT GTT GGC CGG CAA A-3 ’ áxil* řetězec
Tabulka uvádí základní změny, zavedené při použití oligonukleotidu.
Změny kodonů jsou uvedeny například u prvního nukleotidu jako M8A, což znamená, že methionin M v poloze +8 byl nahrazen alaninem A.
-8CZ 293163 B6
Podtržené úseky řetězce označují místo působení restrikční endonukleázy, zavedené oligonukleotidem.
K transfekci buněk E. coli mutL byl užit heteroduplex podle Kramer a další, 1984, Cell 38:879 a po čištění plaků byly získány klony analyzovány restrikční analýzou RF1. Pozitivní klony byly potvrzeny analýzou řetězce podle Sanger a další, 1977, Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 74:5463-5467 a fragmenty Pstl-Sstl pro každý subklonovaný řetězec byly dále klonovány ve vektoru E. coli, plazmidu pA4BL.
Plazmid pA4BL
Způsobem, popsaným v patentové přihlášce US 860 468 (Power a další), se zavede tiché místo Pstl v místě kodonu +1, což je první aminokyselina po místu odštěpení signálního řetězce v genu aprE z plazmidu pS168—1 (Stáhl M. L. a Ferrari E., 1984, J. Bacter., 158:411-418. Promotor aprE a oblast signálního peptidu pak byly klonovány při použití plazmidu pJHlOl (Ferrari F. A. a další, 1983, J. Bacter., 154:1513-1515) jako fragment HindlII-Pstl, subklonování bylo uskutečněno v plazmidu JMI02, odvozeném od plazmidu pUC18 (Ferrari E. a Hoch J. A., 1989, Bacillus, ed. C. R. Harwood, Plenům Pub., str. 57 až 72. Přidáním fragmentu Pstl-Sstl z alfa-amylázy B. Licheniformis vznikl plazmid pA4BL, znázorněný na obr. 5, který obsahuje výsledný spojení aprE signálního řetězce peptidu-amylázy, jak je znázorněno na obr. 6.
Transformace B. subtilis
Plazmid pA4BL je schopen replikace v E. coli a integrace do chromosomu B. sublitis. Plazmidy s obsahem různých variant byly užity k transformaci B. sublitis (Anagnostopoulos, C. a Spizizen J., 1961, J. Bacter, 81:741-746) a k integraci do chromosomu vmiste aprE při použití mechanismu Cambellova typu (Young M., 1984, J. Gen. Microbiol., 130:1613-1621). Bacillus sublitis, kmen BG2473 je derivát 1168 bez řetězce pro amylázu (daltaamyE) a bez řetězce pro dvě proteázy (deltaapr, deltanpr) podle publikace Stáhl M. L., a Ferrari E., J. Bacter., 158:411-418 a patentový spis US 5 264 366. Po transformaci byla mutace sacU32(Hy) podle publikace Henner D. J. a další, 1988, J. Bacter., 170:296-300 zavedena transdukcí, zprostředkovanou PBS-1 podle publikace Hoch J. A., 1983, 154, 1513-1515.
Analýza N-zakončení amylázy po expresi z pA4BL v B. sublitis prokázala, že je možno zjistit čtyři alaninové zbytky navíc na N-zakončení vylučované amylázy (forma A4). Tyto zbytky navíc neměly žádný významnější nežádoucí vliv na účinnost nebo na tepelnou stálost formy A4 a v některých případech mohou zvyšovat účinnost. V následujících pokusech byl získán z velmi podobné konstrukce na obr. 6 správný typ amylázy zB. licheniformis a také varianta M197T. Postup byl prováděn tak, že 5'-zakončení konstrukce A4 bylo subklonováno při použití fragmentu EcoRI-SstlI z plazmidu pA4BL, jak je znázorněn na obr. 5 a M13BM20 (Boehringer Mannheim) k získání matrice pro kódový řetězec mutagenního oligonukleotidu
5'-CAT CAG CGT CCC ATT AAG ATT TGC AGC CTG CGC AGA CAT GTT
GCT-3' řetězec č. 10
Tímto primerem byly odstraněny kodony pro čtyři přebytečné zbytky alaninu na N-zakončení, správná forma byla ověřena nepřítomností místa působení Pstl. Fragment EcoRI-SstlI byl pak subklonován zpět ve vektoru pA4BL, znázorněném na obr. 5, čímž byl získán plazmid pBLapr. Substituce M197T pak mohla být vyjmuta ve formě fragmentu SstlI-Sstl z plazmidu pA4BL (M197T) a uložena do komplementárního plazmidu za vzniku plazmidu pBLapr (M197T). Analýzou N-zakončení amylázy po expresi pBLAapr v B. subtilis bylo možno prokázat, že jde o totéž N-zakončení, které je možno prokázat u alfa-amylázy B. licheniformis.
-9CZ 293163 B6
Příklad 2
Citlivost variant methioninového typu na citlivost k oxidaci
Alfa-amyláza B- licheniformis, například běžně dodávaný prostředek SpezymeR AA20 (Genencor Intemational, lne.), je rychle inaktivována v přítomnosti peroxidu vodíku, jak je zřejmé z obr. 7. Bylo dosaženo exprese různých methioninových variant v třepacích kulturách B. sublitis a surové supematanty byly čištěny pomocí gradientu síranu amonného. Amyláza byla srážena ze supematantu, nasyceného síranem amonným na 20 % tak, že obsah síranu amonného byl zvýšen na 70 %, načež byl enzym znovu uveden do suspenze. Varianty pak byly vystaveny působením 0,88 M peroxidu vodíku při pH 5,0 a teplotě 25 °C. varianty v šesti polohách, v nichž se v alfa-amyláze B. licheniformis nacházejí zbytky methioninu, byly ještě stále citlivé k oxidaci peroxidem, avšak při substituci v poloze+197 (M197L) vznikala odolnost proti oxidaci peroxidem, jak je zřejmé z obr. 7. Následující analýza, jejíž provedení bude dále popsáno, prokázala, že i když určitá varianta podléhá oxidaci při pH 5,0 a 25 °C, může mít změněné, a to i zlepšené vlastnosti za odlišných podmínek, například lepší zkapalnění škrobu.
Příklad 3
Konstrukce všech uskutečnitelných variant v poloze 197
Všechny varianty Ml97 (M197X) byly získány ve formě A4 tvorbou mutací pomocí kazety, jak je zřejmé z br. 8.
1) Cílená tvorba mutace (přes extensi primeru v M13) byla užita k získání M197A při použití mutagenního oligonukleotidu
M197A
5'-GAT TAT TTG GCG TAT GCC GAT ATC GAC TAT GAC CAT-3' ECORV+
Clalřetězec č. 11 který byl také uložen do místa EcoRV (kodony 200-201) k náhradě místa působení Clal (kodony 201-202).
2) Primer LAAM12 z tabulky II byl užit k tvorbě dalšího tichého místa působení restrikčního enzymu BstBI v rozmezí kodonů 186-188.
3) Výsledná varianta M197A (BstBI+, EcoRV+) pak byla subklonována ve formě fragmentu Pstl-Sstl v plazmidu pA4BL a výsledný plazmid byl rozštěpen enzymy BstBI a EcoRV a velký fragment s obsahem vektoru byl izolován z agarózového gelu pomocí elektroeluce.
4) Syntetické primery LAAM14-30 z tabulky II, byly vždy navázány na velký komplementární společný primer LAAM13 z tabulky II. Výsledné kazety obsahovaly kódy pro všechny zbývající přírodně se vyskytující aminokyseliny v poloze +197 a byly jednotlivě navázány na uvedený fragment vektoru.
-10CZ 293163 B6
Tabulka II
Syntetické oligonukleotidy, užité pro tvorbu mutací pomocí kazet ke tvorbě variant Ml97X
LAAM12
GG GAA GTT TCG AAT GAA AAC G řetězec
LAAM13
Xi97bs řetězec (EcoRV) £TC GGC ATA TG CAT ATA ATC ATA GTT GCC GTT TTC ATT (BstBl)
LAAM14
1197 řetězec (BstBl) CG AAT GAA-AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG ATC TAT GCC GA£ (EcoRV·)
LAAM15
F19 7 θ t — CC (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TTC TAT GCC GAC (EcoRV-)
LAAM16
V’. 37 řetězec (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GTT TAT GCC GAC (EcoRV·)
LAAM17
S^S7 ·* * (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AGC TAT GCC
LAAM18
ΡΛ97 řetezec (BstBD CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG CCT TAT GCC GAC (EcoRV-l
LAAM19
T197 w * (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG ACA TAT GCC <Ía^c^V·
LAAM20
Y197 řetězec (Bst9l) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TAC TAT GCC GAQ (EcoRV-)
č. 12
č. 13
v c. 14
ě. 15
č. 1 16
)c 17
č. ) 18
č. ) 19
č. 20
LAAM21
LAAM22
1AAM23
LAAM24
LAAM25
LAAM26
LAAM27
LAAM28 H197 řetězec č. 21 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG CAC TAT GCC GA£ (EcoRV-)
G197 řetězec ě· 22 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GGC TAT GCC GA£ (EcoRV-) (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG CAA TAT GCC ’ 23
N197 rct^ZGC C· 24 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AAC TAT GCC GA£ (EcoRV-J (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AAA TAT GCC ’ 25
0197 řetězec č. 26 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GAT TAT GCC GA£ (EcoRV·)
E1S7 řetězec ě. 27 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG GAA TAT GCC GA£ (EcoRV-)
C197 řetězec ě. 28 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TGT TAT GCC GA£ lEcoRV-)
LAAM29 W197 řetězec č« 29 (BstBl) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG TGG TAT GCC GA£ lEcoRV-)
LAAM30 R197 řetězec č. 30 (BstB!) CG AAT GAA AAC GGC AAC TAT GAT TAT TTG AGA TAT GCC GA£ (EcoRV-)
Kazety byly vytvořeny tak, aby při vazbě bylo odstraněno místo působení EcoRV, to znamená, že plazmidy z transformovaných bakterií E. coli byly sledovány na ztrátu tohoto místa. Mimoto obsahoval řetězec kazet posun rámce a kód pro místi působení Ncil, to znamená transformované bakterie bylo možno prokázat existencí jediného místa působení Nsil, nebylo tedy možno počítat 10 s expresí účinné amylázy.
Po potvrzení positivních řetězců analýzou restrikčních míst byla provedena analýza řetězce a transformace B. subtilis pro expresi v třepacích lahvích, jak je znázorněno na obr. 9. Pak byla specifická účinnost některých mutant M197X stanovena při použití rozpustného substrátu. Údaje, 15 získané při následujících postupech jsou shrnuty v tabulce III.
-11 CZ 293163 B6
Zkouška s rozpustným substrátem
Byla provedena zkouška s použitím zkušebního balíčku Magazyme (Aust.) Ptyl. Ltd. až do konečného bodu. Každá lahvička substrátu, kterým byl p-nitrofenylmaltoheptaosid, BPNPG7, byla rozpuštěna v 10 ml sterilní vody a pak bylo provedeno ředění 1 až 4x pufrem pro provedení zkoušky, který obsahoval 50 mM maleátu o pH 6,7 s 5 mM chloridu vápenatého a 0,002 % prostředku Tween 20. Zkoušky byly provedeny přidáním 10 mikrolitrů amylázy k 792 mikrolitrům substrátu v kyvetě při 25 °C. Rychlost hydrolýzy byla měřena jako rychlost změny absorbance při 410 nm po 75 sekundách. Zkouška probíhala lineárně až do rychlosti 0,4 jednotek/minuta.
Koncentrace bílkoviny amylázy byla měřena s použitím standardní zkoušky Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories) podle publikace Bradford M., 1976, Anal. Biochem., 72:248 při použití standardů se sérovým albuminem skotu.
Zkouška hydrolýzy škrobu
Byl užit standardní pokus pro zkoušku účinnosti alfa-amylázy SpezymeR AA20. Tato zkouška je podrobně popsána v příkladu 1 patentové přihlášky US 07 785 624. Nativní škrob vytváří modré zbarvení v přítomnosti jodu, avšak po hydrolýze na kratší molekulu dextrinu se roztok již nebarví. Jako substrát byl použit rozpustný Lintnerův škrob v množství 5 g/1 ve fosfátovém pufru o pH 6,2, který obsahuje 42,5 g/1 dihydrogenfosforečnanu draselného a 3,16 g/1 hydroxidu sodného. Vzorek se přidává ve 25 mM chloridu vápenatém a účinnost se měří jako čas do negativního jodového testu při inkubaci při teplotě 30 °C. Účinnost se zaznamenává jako jednotky zkapalnění na gram nebo ml (LU), tyto jednotky je možno vypočítat podle vzorce.
570
LU/ml nebo LU/g =-------x D,
Vxt kde
LU je jednotka zkapalnění,
V je objem vzorku (v tomto případě 5 ml), t je doba dextrinizace v minutách,
D je faktor zředění = objem ředění/ml nebo g přidaného enzymu.
Tabulka III
Alfa-amyláza specifická účinnost v rozpustný substrát % hodnota AA20 škrob
SpezymeK AA20 100 100
forma A4 105 115
M15L (forma A4) 93 94
M15L 85 103
M197T (forma A4) 75 83
M197T 62 81
M197A (forma A4) 88 89
M197C 85 85
M197L (forma A4) 51 17
-12CZ 293163 B6
Příklad 4
Charakterizace varianty Ml 5L
Varianta M15L, získaná podle předchozích příkladů nevykazovala zvýšenou účinnost amylázy (tabulka III) a stále ještě byla inaktivována peroxidem vodíku, jak je zřejmé z obr. 7. Tato varianta však byla účinnější při zkapalnění škrobu, zvláště při nízkém pH, jak je zřejmé z tabulky IV.
ío Zkapalnění škrobu bylo typicky prováděno v zařízení hydroheater Μ 103-M, opatřeným za mísící komorou spirálou s obsahem 2,5 litrů a terminálním zpětným tlakovým ventilem. Škrob byl přiváděn čerpadlem Myono a pára byla přiváděna pod tlakem 1,05 MPa, pak byl tlak snížen na 0,63 až 0,7 MPa. Teplotní sondy byly uloženy těsně před zpětný ventil. Suspenze škrobu byla získávána mletím kukuřice za vlhka a byla užívána dva dny. Škrob byl zředěn na požadovaný obsah pevných látek deionizovanou vodou a pH škrobu bylo upravováno 2% hydroxidem sodným nebo nasyceným uhličitanem sodným. Dále jsou uvedeny typické podmínky zkapalnění:
škrob vápník pH alfa-amyláza až 35 % pevného podílu až 50 ppm (přidáno 30 ppm) 5,0 až 6,0 až 14 LU/g suchého škrobu.
Suspenze škrobu byla přiváděna přibližně rychlostí 350 ml/min. Teplota byla udržována v rozmezí 105 až 107 °C. Vzorky škrobu byly přeneseny do druhého stupně zkapalnění s teplotou 25 95 °C a tam udržovány 90 minut.
Stupeň zkapalnění škrobu byl měřen okamžitě po ukončení druhého stupně zkapalnění stanovením dextrosového ekvivalentu DE ve vzorku a zkouškou na přítomnost surového škrobu, tyto zkoušky byly prováděny podle publikace Standard Analytical Methods of the Member 30 Companies of the Com Refmers Association, lne., 6. vydání. V případě, že se škrob zpracovává za svrchu uvedených podmínek při pH 6,0, získá se zkapalněný škrob s hodnotou DE přibližně 10, zcela bez obsahu surového škrobu. Výsledky zkoušek na zkapalnění škrobu při použití mutant podle vynálezu jsou shrnuty v tabulce IV
Vysvětí ivky k tabulce IV:
x průměr ze tří pokusů “ průměr ze dvou pokusů
Tabulka IV
Účinnost variant N15L (forma A4) a M15L na zkapalnění škrobu pH DE po 90 minutách
SpezameR AA20 5,9 9,9
M15L (forma A4) 5,9 10,4
SpezymeR AA20 5,2 1,0
M15L (forma A4) 5,2 2,2
SpezymeR AA20 5,9 9,3*
M15L 5,9 11,3X
SpezymeR AA20 5,5 3,25“
M15L 5,5 6,7“
SpezymeR AA20 5,2 0,7“
M15L 5,2 3,65“
-13CZ 293163 B6
Příklad 5
Konstrukce variant M15X
Způsobem, který byl popsán v příkladě 3 byly vyrobeny všechny varianty Ml5 (M15X) nativního B. licheniformis tvorbou mutací pomocí kazet, jak je zřejmé z obr. 12.
1) Cílená mutace (extensí M13 pomocí primeru) byla užita k zavedení jediného restrikčního místa v sousedství kodonu Ml5 k usnadnění uložení kazety pro tvorbu mutace. Specificky bylo uloženo místo působení BstBl v místě kodonů 11 až 13 a místo působení Mscl v oblasti kodonů 18 až 20 při použití následujících dvou oligonukleotidů
M15XBstBl 5'-G ATG CAG TAT TTC GAA CTGG TAT A-3'
BstBl řetězec č.48
MlSXMscl 5’ -TG CCC AAT GAT GGC CAA CAT TGG AAG-3'
Mscl řetězec č.49
2) Pak byl zkonstruován vektor pro tvorbu mutace M15X pomocí kazety subklonováním fragmentu Sfil-SstlI z mutagenizované amylázy (BstBl +, Mscl +), v plazmidu pBLapr. Výsledný plazmid pak byl rozštěpen enzymem BstBl a Mscl a velký fragment vektoru byl izolován na polyakrylamidovém gelu elektroelucí.
3) Kazety pro tvorbu mutace byly tvořeny jako v případě variant M197X. Syntetické oligomery, z nichž každý je kódem pro substituci v místě kodonu 15, byly navázány na společný základní primer. Po navázání kazety na vektor bylo místi Mscl rozrušeno tak, aby pozitivně transformované organismy bylo možno odlišit podle ztráty tohoto místa. Základní primer obsahuje jediné místo působení SnaBl, takže je možno transformanty prokázat také průkazem tohoto místa. Tento základní primer obsahuje také posun rámce, takže mutanty, pozměněné pouze tímto primerem nebudou produkovat amylázu vzhledem k tomu, že exprese není možná.
Syntetické kazety jsou uvedeny v tabulce V a obecný postup tvorby mutace pomocí kazet je znázorněn na obr. 12.
-14CZ 293163 B6
Tabulka V
Syntetické oligonukleotidy, užité pro tvorbu mutací pomocí kazet k získání variant M15X
MÍSA (BstBl) c GAA TCG TA7 gcx ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 50
Mi SR (BetBl) c GAA TCG TAT CGC ccc AAT GAC CG (Hscl) řetězec č. 51
H1SN (BstBl) c GAA TGG TAT AAT ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 52
M1SD (BstBl) c GAA TGG TAT GAT ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 53
Ml Srí (BBtSl) c CAA TGG TAT CAC ccc AAT CAC GC (Mscl) řetězec č. 54
M1SK (Bit31) c GAA TGG TAT AAA ccc AAT GAC GG (HSCl) řetězec č. 55
MIS? (BstBl) c GAA TGG TAT CCG ccc AAT GAC GG (Mscl) řetězec č. 56
MISS (BstBl) c GAA TGG TAT TCT ccc AAT GAC CG (Mscl) řetězec č. 57
MÍST (BstBl) c GAA TGG TAC ACT ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 58
Ml 5 V (BstBl) c GAA TCG TAT GTT ccc AAT CAC GG (Hscl) řetězec č. 59
M15C (BstBl) c GAA TGG TAT TGT ccc AAT CAC GG (Mscl) řetězec č. 60
M15Q (BstBl) c GAA TGG TAT CAA ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 61
MISE (BstBl) c CAA TGG TAT GAA ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 62
M15G (BstBl) c GAA TGG TAT ssi ccc AAT GAC GG (HBC1) řetězec č. 63
M15I (BstBl) c CAA TCG TAT ATT ccc AAT GAC GG (Mscl) řetězec č. 64
M15F (BstBl) c GAA TGG TAT TTT ccc AAT CAC GC (Hscl) řetězec č. 65
M15W (BstBl) c CAA TGG TAC TCC ccc AAT GAC GG (Hscl) řetězec č. 66
MISÍ (BstBl) c GAA TGG TAT TAT ccc AAT GAC GC (Hscl) řetězec č. 67
M15X (Mscl) CC GTC ATT CGG ACT ACG TAC CAT T (BstBl) řetězec č. 68
(základní řetězec)
Podtržené části označují změny kodonů v poloze zbytku aminokyseliny 15.
V některých případech byly provedeny konzervativní substituce, aby nevzniklo nové místo působení některého z restrikčních enzymů.
Příklad 6
Zkapalnění škrobu za laboratorních podmínek při použití variant Ml 5X is
Jedenáct variant alfa-amylázy se substituvemi v místě Ml5, získanými podle příkladu 5, bylo zkoumáno na účinnost ve srovnání s běžně dodávaným enzymem SpezymeR AA20 (Genecor Intemational, lne.), zkapalnění bylo prováděno při pH 5,5 v systému, který obsahoval spirálu z nerezové oceli (průměr přibližně 7 mm, objem přibližně 350 ml), opatřenou mísícím prvkem 20 s délkou 17,5 cm, přibližně 30 cm od začátku, tlak na zpětném tlakovém ventilu na druhém konci byl přibližně 2,1 MPa. Spirála svých konců byla ponořena do lázně směsi glycerolu a vody, opatřené termostaticky řízenými topnými prvky, které v lázni udržovaly teplotu 105 až 106 °C.
Suspenze škrobu s obsahem enzymu byla za míchání přiváděna do reakční spirály pístem, 25 poháněný odměmým čerpadlem rychlostí přibližně 70 ml/min. Na druhém konci spirály byl škrob odebírán a přenesen do druhého stupně, kde byl zahříván 90 minut na 95 °C. Po této době byla stanovena hodnota DE pro zkapalněný škrob stejně jako v příkladu 4. Výsledky jsou znázorněny na obr. 16.
-15CZ 293163 B6
Příklad Ί
Charakteristika variant M197X
Jak je zřejmé z obr. 9, varianty M197X (forma A4) měly po expresi různou účinnost amylázy, měřeno na rozpustném substrátu. Amylázy byly ze supematantu částečně čištěny srážením dvěma objemy ethanolu a pak byly znovu uvedeny do suspenze. Pak byly varianty sledovány na tepelnou stálost (obr. 10) tak, že byly zahřívány 5 minut na 95 °C v 10 mM acetátovém pufru o pH 5,0 v přítomnosti 5 mM chloridu vápenatého. Po inkubaci si enzym A4 divokého typu uchoval 28 % své činnosti. V případě variant M197W a M197P nebylo již možno ze supematantu izolovat účinnou bílkovinu. Při analýze řetězce bylo prokázáno, že varianta M197H obsahuje druhou mutaci N190K. Varianta M197L byla zkoumána odděleně a bylo prokázáno, že jde o nejméně tepelně stálou variantu. Je pravděpodobné, že existuje velká korelace mezi expresí amylázy a její tepelnou stálostí. Amyláza zB. licheniformis je poněkud omezena, pokud jde o zbytky, které je možno zařadit do polohy 197 tak, aby byla zachována nebo zvýšena stálost za tepla. Cystein a threonin jsou výhodnými zbytky za těchto podmínek pro maximální tepelnou stálost, zatímco v případě alaninu a izoleucinu je stálost průměrná. Další substituce v poloze +197 však mají za následek snížení tepelné stálosti, což může být vhodné pro jiné použití. Mimoto je možno získat substitucemi v poloze +197 další vhodné vlastnosti, například účinnost při odlišném pH nebo změny stálosti proti oxidaci. Například varianta Ml97C je snadno inaktivována oxidací vzduchem, avšak má zvýšenou tepelnou stálost. Na druhé straně si ve srovnání s variantou Ml97L udržují varianty M197T a M197A nejen vysokou tepelnou stálost (obr. 10), však také vysokou účinnost (tabulka III), a to při zachování odolnosti proti působení peroxidu při pH 5 až 10, jak je zřejmé z obr. 7.
Příklad 8
Stálost a účinnost v čisticích prostředcích
Stálost varianty M197T (forma A4), M197T a M197A (forma A4) byla měřena v prostředcích pro myčky nádobí ADD. Ke dvěma běžně dodávaným prostředkům typu ADD, tato CascadeR (procter and Ganble, Ltd.) a SunlightR (Unilever) byly přidány 2 ppm prostředku SavinaseR, jde o proteázu běžného typu, užívanou v ADD (Novo Industries) a byla sledována inaktivace variant amylázy a prostředku TermamylR, což je tepelně stálá alfa-amyláza (Novo Nordisk, A/S) při teplotě 65 °C. Koncentrace prostředku ADD byla v obou případech ekvivalentní prostředkům, užívaným při máčení, bylo užito 14 g produktu na 1 litr vody. Jak je zřejmé z obr. 1 la a 1 lb, byly obě formy variant M197T daleko stálejší než TermamylR a než M197A (forma A4), které byly inaktivovány již před provedením první zkoušky. Tato zlepšená stálost byla pozorována v přítomnosti i nepřítomnosti škrobu, výsledky byly stanoveny tak, že amylázy byly přidány k 5 ml ADD s přídavkem SavinaseR, předehřátým ve zkumavce a po promíchání byla stanovena účinnost jako funkce času při použití rozpustného substrátu. Zkumavka „+ škrob“ měla nanesený lnoucí škrob ze špaget na svých stěnách (140 °C, 60 minut). Výsledky jsou znázorněny na obr. 1 la a 1 lb.
Příklad 9
Charakterizace variant M15X
Všechny varianty M15X byly propagovány v Bacillus subtilis a byla sledována úroveň exprese, jak je znázorněno na obr. 13. Amyláza byla izolována a částečně čištěna 20 až 70% síranem amonným. Specifická účinnost variant na rozpustný substrát byla stanovena jako v příkladu 3 aje znázorněna na obr. 14. Řada amyláz typu M15X má specifickou účinnost vyšší než
-16CZ 293163 B6
SpezymeR AA20. Tepelná stálost laboratorním způsobem byla stanovena zahříváním amylázy na 5 minut na 90 °C v 50 mM acetátovém pufru o pH 5 v přítomnosti 5 mM chloridu vápenatého, výsledek je znázorněn na obr. 15. Většina variant měla v tomto případě stejnou účinnost jako SpezymeR AA20. Ty varianty, které byly při tomto pokusu dostatečně stálé, to znamená, že si uchovaly alespoň 60 % stálosti SpezymeR AA20, byly dále zkoušeny na specifickou účinnost při zkapalnění škrobu při pH 5,5. Nejzajímavější mutanty jsou znázorněny na obr. 16. varianty M15D, N a T spolu s variantou L měly lepší účinnost než SpezymeR AA20 při zkapalnění při pH 5,5 a měly také zvýšenou specifickou účinnost při použití v rozpustném substrátu a při hydrolýze škrobu.
Obecně bylo zjištěno, že substitucí methioninu v poloze 15 je možno získat varianty se zvýšenou účinností při zkapalnění škrobu při nízkém pH a/nebo se zvýšenou specifickou účinností.
Příklad 10
Citlivost tryptofanu k oxidaci
Chloramin-T je sodná sůl N-chlor-p-toluensulfonimidu. Jde o selektivní oxidační činidlo, které oxiduje methionin na methioninsulfoxid při neutrálním nebo alkalickém pH. Při kyselém pH modifikuje chloramin T jak methionin, tak tryptofan, jak bylo popsáno v Schechter Y., Burstein Y. a Patchomik A., 1975, Biochemistry 14, 20, 4497-4503. Na obr. 17 je znázorněna inaktivace alfa-amylázy B. licheníformis chloraminem T při pH 8,0 (AA20 = 0,65 mg/ml, M197A= 1,7 mg/ml, M197L= 1,7 mg/ml). Údaje prokazují, že v případě záměny methioninu v poloze 197 za leucin nebo alanin je možno zabránit inaktivaci alfa-amylázy. Obráceně, jak je zřejmé z obr. 18, při pH 4,0 inaktivace M197A a M197L sice probíhá, avšak je zapotřebí většího počtu ekvivalentů chloraminuT, jak je zřejmé z obr. 18 (AA20 = 0,22 mg/ml,
M197A = 4,3 mg/ml, M197L = 0,53 mg/ml, 200 mM octanu sodného, pH 4,0). To znamená, že tryptofanový zbytek se rovněž účastní inaktivace chloraminem T. Mimoto analýza řetězce aminokyselin ukazuje, že se tryptofan v poloze 138 oxiduje chloraminem T, údaje nejsou uvedeny. Aby to bylo možno prokázat, byla provedena cílená mutace tryptofanového zbytku v poloze 138.
Příprava dvojité mutanty alfa-amylázy W138 a M197
Některé varianty W138 (F, Y a A) byly provedeny jako dvojí mutanty s M197, vyrobeným podle příkladu 3. Dvojí mutanty byly získány způsobem podle příkladů 1 a 3. Obvykle byly připraveny jednoduché negativní řetězce DNA z klonu M13MP18 kódového řetězce v oblasti Pstl-Sstl mutanty M197T alfa-amylázy B. licheníformis. Cílená mutace byla vytvořena při použití dále uvedených primerů způsobem podle publikace Zoller M. a další, 1983 až na to, že T4 gen 32 pro bílkovinu a T4-polymeráza byly nahrazeny Klenowovým fragmentem, všechny primery obsahovaly jediné místo působení enzymu a požadovanou mutaci, aby bylo možno identifikovat klony se správnou mutací.
Typtofan 138-fenylalanin
133 134 135 136 137 138 133 140 141 142 143 CAC CTA ATT AAA CCT TTC ACA CAT TTT CAT TTT
Hind III
Tryptofan 138 - tyrosin
133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 CAC CTA ATT AAA GCT TAC ACA CAT TTT CAT TTT
Hind III řetězec č. 42 řetězec č. 43
-17CZ 293163 B6
Tryptofan 138-alanin-tento primer rovněž zavádí jediné místo působení enzymu před a za polohou 138
127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142
C CGC CTA ATT TCC CGA CAA CAC CTA ATT AAA CCC GCA ACA CAT TTT CAT BapS I
143 144 145 146 147 ttt ccc cgc cgc ac řetězec č. 44
XfilA Z
Mutanty byly identifikovány analýzou míst působení restrikčních enzymů a mutanty W138F a W138A byl vypuštěn nukleotid mezi místy působení BspEI a Xmal, avšak zbytek řetězce genu byl správný. Fragment 1,37 kb SstlI/Sstl s obsahem mutací W138X a M197T byl přenesen z M13MP18 do vektoru pro expresi pBLapr, čímž byl získán plazmid pBLapr (W138F, M197T) a plazmid pBLapr (W138Y, M197T). Fragment s obsahem jediného místa působení BspEI a Xmal byl klonován v plazmidu pBLapr (BspEI, Xmal, M197T) vzhledem k tomu, že je vhodné klonovat kazety s obsahem jiných aminokyselin v poloze 138.
Jediné mutace v poloze 138
Způsobem, uvedeným v předchozích příkladech byly získány jednoduché mutace v poloze W138, atoF, Y, L, HaC.
Fragment 1,24 kb Asp718-Sstl s obsahem mutace M197T v plazmidu pBLapr (W138X, M197T) z příkladu 7 byl nahrazen fragmentem divokého typu smethioninem v poloze 197, čímž byly získány plazmidy pBLapr (W138F), pBLapr (W138Y) a pBLapr (BspEI, Xmal).
Mutanty W138L, W138H a W138C byly získány vazbou syntetických kazet do vektoru ppBLapr (BspEI, Xmal) při použití následující primerů:
Tryptofan 138 - leucin
CC GGA GAA CAC CTA ATT AAA GCC CTA ACA CAT TTT CAT TTT c
řetězec č. 45
Tryptofan 138 — histidin
CC GGA GAA CAC CTA ATT AAA GCC CAC ACA CAT TTT CAT TTT c
řetězec Č. 46
Tryptofan 138 - cystein
CC GGA GAA CAC CTA ATT AAA GCC TGC ACA CAT TTT CAT TTT c
řetězec č. 47
Reakce dvojitých mutant M197T/W138F a M197T/W138Y schloraminem T byly srovnány s reakcí enzymu divokého typu (AA20 = 0,75 mg/ml, M197T/W13 8F = 0,64 mg/ml, M197T/W138Y = 0,60 mg/ml, 50 mM octanu sodného, pH 5,0). Výsledky, znázorněné na obr. 19 ukazují, že mutace v tryptofanu 138 způsobila vyšší odolnost varianty proti působení chloraminu T.
-18CZ 293163 B6
Informace o řetězcích
1) Obecné informace:
i) přihlašovatel: Genencor Intemational, lne.
ii) oblast vynálezu: Mutanta alfa-amylázy iii) počet řetězců: 68 iv) adresa pro korespondenci:
A - adresát: Genencor Intemational, lne.
B - ulice: 180 Kimball Way
C - město: South San Francisco
D - stát: CA
E-země: USA
F-ZIP: 94080
v) forma, odečitatelná počítačem:
A - prostředí: Floppy disk
B - počítač: IBM, PC-kompatibilní
C - operační systém: PC-DOS/MS-DOS
D - software: Patentln Release 1,0, Verse 1,25 vi) údaje o přihlášce:
A - číslo:
B - datum podání:
C - klasifikace:
viii) zástupce:
A - jméno: Hom Margaret A.
B - registrační číslo: 33 401
C - číslo spisu: GC220-2 ix) telekomunikační spojení:
A-telefon: (415) 742-7536
B - telefax: (415) 742-7217
2) Informace pro řetězec č. 1:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 56 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. I
GATCAAAACA TAAAAACCG GCCTTGGCCC CGCCGGTTTT TTATTATTTT
TGAGCT
-19CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 2:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 29 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. 2
TGGGACGCTG GCGCAGTACT TTGAATTGGT
2) Informace pro řetězec č. 3:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 34 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. 3
TGATGCAGTA CTTTGAATGG TACCTGCCCA ATGA 34
2) Informace pro řetězec č. 4:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 36 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: řetězec č. 4
GATTATTTGT TGTATGCCGA TATCGACTAT GACCAT 36
2) Informace pro řetězec č. 5:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 26 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu)
-20CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 5
CGGGGAAGGA GGCCTTTACG GTAGCT
2) Informace pro řetězec č. 6:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 6
GCGGCTATGA CTTAAGGAAA TTGC
2) Informace pro řetězec č. 7:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 23 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 7
CTACGGGAT GCATACGGGA CGA
2) Informace pro řetězec č. 8:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 35 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 8
CTACGGGGAT TACTACGGGA CCAAGGGAGA CTCCC
2) Informace pro řetězec č. 9:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 36 párů bází
-21 CZ 293163 B6
Β - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 9
CCGGTGGGGC CAAGCGGGCC TATGTTGGCC GGCAAA 36
2) Informace pro řetězec č. 10:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 45 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 10
CATCAGCGTC CCATTAAGAT TTGCAGCCTG CGCAGACATG TTGCT 45
2) Informace pro řetězec č. 11:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 36 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 11
GATTATTTGG CGTATGCCGA TATCGACTAT GACCAT 36
2) Informace pro řetězec č. 12:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 21 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 12
GGGAAGTTTC GAATGAAAAC G 21
-22CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 13:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 38 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 13
GTCGGCATAT GCATATAATC ATAGTTGCCG TTTTCATT
2) Informace pro řetězec č. 14:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 14
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA TCTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 15:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 15
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT TCTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 16:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární
-23CZ 293163 B6 i i) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 16
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG TTTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 17:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: Č. 17
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA GCTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 18:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 18
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGC CTTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 19:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 19
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA CATATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 20:
-24CZ 293163 B6
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 20
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT ACTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 21:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 21
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGC ACTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 22:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 22
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG GCTATGCCGA C 41
2) Informace pro řetězec č. 23:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 23
-25CZ 293163 B6
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGC AATATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 24:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce č. 24
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA ACTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 25:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 25
GCAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA AATATGCCGA C 41
2) Informace pro řetězec č. 26:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 26
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG ATTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 27:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární
-26CZ 293163 B6 ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 27
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGG AATATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 28:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 28
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT GTATTGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 29:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 41 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 29
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGT GGTATGCCGA C
2) Informace pro řetězec č. 30:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 41 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 30
CGAATGAAAA CGGCAACTAT GATTATTTGA GATATGCCGA C 41
-27CL 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 31:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 1 968 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) o
xi) popis řetězce: č. 31
AGCTTGAAGA AGTGAAGAAG CAGAGAGGCT ATTGAATAAA TGAGTAGAAA GCGCCATATC 60
GGCGCTTTTC TTTTGGAAGA AAATATAGGG AAAATGGTAC TTGTTAAAAA TTCGGAATAT 120
TTATACAACA TCATATGTTT CACATTGAAA GGGGAGGAGA ATCATGAAAC AACAAAAACG 180
GCTTTACGCC CGATTGCTGA CGCTGTTATT TGCGCTCATC TTCTTGCTGC CTCATTCTGC 240
AGCAGCGGCG GCAAATCTTA ATGGGACGCT GATGCAGTAT TTTGAATGGT ACATGCCCAA 300
TGACGGCCAA CATTGGAAGC GTTTGCAAAA CGACTCGGCA TATTTGGCTG AACACGGTAT 360
TACTGCCGTC TGGATTCCCC CGGCATATAA GGGAACGAGC CAAGCGGATG TGGGCTACGG 420
TGCTTACGAC CTTTATGATT TAGGGGAGTT TCATCAAAAA GGGACGGTTC GGACAAAGTA 480
CGGCACAAAA GGAGAGCTGC AATCTGCGAT CAAAAGTCTT CATTCCCGCG ACATTAACGT 540
TTACGGGGAT GTGGTCATCA ACCACAAAGG CGGCGCTGAT GCGACCGAAG ATGTAACCGC 600
GGTTGAAGTC GATCCCGCTG ACCGCAACCG CGTAATTTCA GGAGAACACC TAATTAAAGC 660
CTGGACACAT TTTCATTTTC CGGGGCGCGG CAGCACATAC AGCGATTTTA AATGGCATTG 720
GTACCA7TTT GACGGAACCG ATTGGGACGA GTCCCGAAAG CTGAACCGCA TCTATAAGTT 780
-28CZ 293163 B6
TCAAGGAAAG GCTTGGGATr GGGAAGTTTC CAATGAAAAC GGCAACtATG ATTATTTGAT 840
GTATGCCGAC ATCGATTATG ACCATCCTGA TGTCGCAGCA GAAATTAAGA GATGGGGCAC 900
TTGGTATGCC AATGAACTGC AATTGGACGG TTZCCGfCTT GATGCTGTCA AACACATTAA 960
ATTTTCTTTT TTGCGGGATT GGGTTAATCA TGTCAGGGAA AAAACGGGGA AGGAAATGTT 1020
TACGGTAGCT GAATATTGGC AGAATGACTT GGGCGCGCTG GAAAACTATT TGAACAAAAC 1080
AAATTTTAAT CATTCAGTGT TTGACGTGCC GCTTCAT-AT CAGTTCGATG CTGCATCGAC 1140
ACAGGGAGGC GGCTATGATA TGAGGAAATT GCTGAACGGT ACGGTCGTTT CCAAGCATCC 1200
GTTGAAATCG GTTACATTTG TCGATAACCA TGATACACAG CCGGGGCAAT CGCTTGAGTC 1260
GACTGTCCAA ACATGGTTTA ACCCGCTTGC TTACGC7TTT ATTCTCACAA GGGAATCTGG 1320
ATACCCTCAG GTTTTCTACG GGGATATGTA CGGGACGAAA GGAGACTCCC AGCGCGAAAT 1380
TCCTGCCTTG AAACACAAAA TTGAACCGAT CTTAAAAGCG AGAAAACAGT atgcgtacgg 1440
AGCACAGCAT GATTATTTCG ACCACCATGA CATTGTCGGC TGGACAAGGG AAGGCGACAG 1500
CTCGGTTGCA AATTCAGGTT TGGCGGCATT AATAACAGAC GGACCCGGTG GGGCAAAGCG 1560
AATGTATGTC GGCCGGCAAA ACGCCGGTGA GACATGGCAT GACATTACCG GAAACCGTTC 1620
GGAGCCGGTT GTCATCAATT CGGAAGGCTG GGGAGAGTTT CACGTAAACG GCGGGTCGGT 1680
TTCAATTTAT GTTCAAAGAT AGAAGAGCAG AGAGGACGGA TTTCCTGAAG GAAATCCGTT 1740
TTTTTATTTT GCCCGTCTTA TAAATTTCTT TGATTACATT TTATAATTAA TTTTAACAAA 1800
GTGTCATCAG CCCTCAGGAA GGACTTGCTG ACAGTTTGAA TCGCATAGGT AAGGCGGGGA 1860
TGAAATGGCA ACGTTATCTG ATGTAGCAAA GAAAGCAAAT GTGTCGAAAA TGACGGTATC 1920
GCGGGTGATC AATCATCCTG AGACTGTGAC GGATGAATTG AAAAAGCT 1968
2) Informace pro řetězec č. 32:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 483 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý ío D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina
-29CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 32
Ala Asn Leu Asn Gly Thr Leu Met Gin Tyr Phe Clu Trp Tyr Met Pro
1 5 10 15
Asn Asp Gly Gin His Trp Lys Arg Leu Gin Asn Asp Ser Ala Tyr Leu
20 25 30
Ala Glu His Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
35 40 45
Thr Ser Gin Ala Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
50 55 60
Gly Glu Phe His Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
65 70 75 80
Gly Glu Leu Gin Ser Ala Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile Asn
85 90 95
Val Tyr Gly Asp Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr
100 105 110
Glu Asp Val Thr Ala Val Glu Val Asp Pro Ala Asp Arg Asn Arg Val
115 120 125
Ile Ser Gly Glu His Leu Ile Lys Ala Trp Thr His Phe His Phe Pro
130 135 140
Gly Arg Gly Ser Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe
145 150 155 160
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
165 170 175
Phe Gin Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn Glu Asn Gly Asn
180 185 190
Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asn Ile Asp Tyr Asp His Pro Asp Val
195 200 205
Ala Ala Glu Ile Lys Arg Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Αβη Glu Leu Gin
210 215 220
Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe
225 230 235 240
Leu Arg Asp Trp Val Asn His Val Arg Glu Lys Thr Gly Lys Glu Met
245 250 255
Phe Thr val Ala Glu Tyr Trp Gin Asn Asp Leu Gly Ala Leu Glu Asn
260 265 270
Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Phe Asn His Ser val Phe Asp Val Pro Leu
275 280 285
His Tyr Gin Phe HÍ6 Ala Ala ser Thr Gin Cly Gly Gly Tyr Asp Met
290 295 300
Arg Lys Leu Leu Asn Cly Thr Val Val Ser Lys His Pro Leu Lys Ser
305 310 315 320
Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gin Pro Gly Gin Ser Leu Glu
325 330 335
Ser Thr Val Gin Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu
340 345 350
-30CZ 293163 B6
Thr Arg Glu Ser Gly Tyr Pro Gin Val Phe Tyr Gly Asp Met Tyr Gly
355 360 365
Thr Lys Gly Asp Ser Gin Arg Glu Ile Pro Ala Leu Lys His Lys Ile
370 375 380
Glu Pro Ile Leu Lys Ala Arg Lys Gin Tyr Ala Tyr Gly Ala Gin His
385 390 395 400
Asp Tyr Phe Asp His His Asp Ile Val Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp
405 410 415
Ser Ser Val Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro
420 425 430
Gly Gly Ala Lys Arg Het Tyr Val Gly Arg Gin Asn Ala Gly Glu Thr
435 440 445
Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser
450 455 460
Glu Gly Trp Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr
465 470 475 480
Val Gin Arg
2) Informace pro řetězec č. 33:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 511 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 33
Met Lys Gin Gin Lys Arg Leu Tyr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala Ala Ala Asn Leu
20 25 30
Asn Gly Thr Leu Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr Met Pro Asn Asp Gly
35 40 45
His Trp Lys Arg Leu Gin Asn Asp Ser Ala Tyr Leu Ala Glu His Gly
50 55 60
Xle Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gin Ala
65 70 75 80
Asp Val Cly Tyr cly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe His
85 90 95
Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Gly Glu Leu Gin
-31 CZ 293163 B6
100 105 110
Ser Ala Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile Asn Val 125 Tyr Gly Asp
115 120
Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr Glu Asp Val Thr
130 135 140
Ala Val Glu Val Asp Pro Ala Asp Arg Asn Arg Val Ile Ser Gly Glu
145 150 155 160
His Leu Ile Lys Ala Trp Thr His Phe His Phe Pro Gly Arg Gly Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp
180 185 19C
Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Gin Gly Lys
195 200 205
Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu
210 215 220
Met Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp His Pro Aso Val Ala Ala Glu Ile
225 23C 235 240
Lys Arg Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Gin Leu Asp Gly Phe
245 250 255
Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe Leu Arg Asp Trp
260 265 270
val Asn His Val Arg Clu Lys Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val Ala
275 280 285
Glu Tyr Trp Gin Asn Asp Leu Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys
290 295 300
Thr Asn Phe Asn His ser Val Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Gin Phe
305 310 315 320
His Ala Ala Ser Thr Gin Gly Cly Gly Tyr Asp Met Arg Lye Leu Leu
325 330 335
Asn Gly Thr Val Val Ser Lys His Pro Leu Lys Ser Val Thr Phe Val
340 345 350
Asp Asn His Asp Thr Gin Pro Gly Gin Ser Leu Glu Ser Thr val Gin
355 360 365
Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Glu Ser
370 375 380
cly Tyr Pro Gin Val Phe Tyr Gly Asp Met Tyr Gly Thr Lys cly Asp
385 390 395 400
Ser Gin Arg Glu Ile Pro Ala Leu Lys His Lys Ile Glu Pro Ile Leu
405 410 415
Lys Ala Arg Lys Gin Tyr Ala Tyr Gly Ala Gin His Asp Tyr Phe Asp
420 425 430
His His Asp Ile Val Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Ser Val Ala
435 440 445
Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ala Lys
450 455 460
-32CZ 293163 B6
Arg 465 Met Tyr Val Gly Arg Gin Asn Ala Gly Glu Thr Trp His Asp Ile 460
470 475
Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser Clu Gly Trp Gly
485 490 495
Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gin Arg
500 505 510
2) Informace pro řetězec č. 34:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 520 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 34
Met Arg 1 Gly Arg Gly S Asn Met Ile Gin Lys 10 Arg Lys Arg Thr val 15 Ser
Phe Arg Leu Val Leu Met Cys Thr Leu Leu Phe Val Ser Leu Pro Ile
20 25 30
Thr Lys Thr Ser Ala Val Asn Gly Thr Leu Met Gin Tyr Phe Glu Trp
35 40 45
Tyr Thr Pro Asn Asp Gly Gin His Trp Lys Arg Leu Gin Asn Asp Ala
50 55 60
Glu His Leu Ser Asp Zle Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala
65 70 75 80
Tyr Lys Gly Leu Ser Gin Ser Asp Asn Gly Tyr Gly Pro Tyr Asp Leu
85 90 95
Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Gin Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Ser Glu Leu Gin Asp Ala Ile Gly Ser Leu His Ser Arg
115 120 125
Asn Val Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Leu Asn His Lys Ala Gly Ala
130 135 140
-33CZ 293163 B6
Asp Ala Thr Glu Asp Val Thr Ala Val Glu Val Asn Pro Ala Asn Ara
145 150 155 160
Asn Gin Glu Thr Ser Glu Glu Tyr Gin Ile Lys Ala Trp Thr Asp Phe
165 170 175
Arg Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp
180 185 190
Tyr His Phe Asp Gly Ala Asp Tru Asp Glu Ser Arg Lys Ile Ser Arg
195 200 205
Ile Phe Lys Phe Arg Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asd Trp Glu Val Ser
210 215 220
Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Tyr
225 230 235 240
Asp His Pro Asp Val Val Ala Glu Thr Lys Lys Trp Gly Zle Trp Tyr
245 2S0 255
Ala Asn Glu Leu Ser Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala Lys His
260 265 270
Ile Lys Phe Ser Phe Leu Arg ASp Trp Val Gin Ala Val Arg Gin Ala
275 280 285
Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val Ala Glu Tyr Trp Gin Asn Asn Ala
290 295 300
Gly Lys Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Ser Phe Asn Gin Ser Val
305 310 315 320
Phe Asp val Pro Leu His Phe Asn Leu Gin Ala Ala Ser Ser Gin Gly
325 330 335
Gly Gly Tyr Asp Met Arg Arg Leu Leu Asp Gly Thr Val Val Ser Arg
340 345 350
His Pro Glu Lys Ala Val Thr Phe Val Glu Asn His Asp Thr Gin Pro
355 360 365
Gly Gin Ser Leu Glu Ser Thr Val Gin Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala
370 375 380
Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Glu Ser Gly Tyr Pro Gin Val Phe Tyr
385 390 395 400
Gly Asp Met Tyr Gly Thr Lys Gly Thr Ser Pro Lys-Glu Ile Pro Ser
405 410 415
Leu Lys Asp Asn Ile Glu Pro Ile Leu Lys Ala Arg Lye Glu Tyr Ala
420 425 430
Tyr Gly Pro Gin Hifi Asp Tyr Ile Asp His Pro Asp Val Ile Gly Trp
435 440 445
Thr Arg Glu Gly Asp Ser Ser Ala Ala Lys Ser Gly Leu Ala Ala Leu
450 455 460
11· Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ser Lye Arg Met Tyr Ala Gly Leu Lys
465 470 475 480
-34CZ 293163 B6
Asn Ala Cly Glu Thr 485 Trp Tyr Asp Xle
Val Lys Ile Civ 500 Ser Asp Cly Trp Gly 505
Ser Val Ser 515 Ile Tyr Val Gin Lys 520
Thr cly Asn Arg Ser
490
Glu Phe His Val Asn
510
Asp Thr
495
Asp Cly
Informace pro řetězec č. 35:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 548 aminokyselin B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 35
Informace pro řetězec č. 35:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 548 aminokyselin B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 35
Val 1 Leu Thr Phe His 5 Arg Ile Ile
Ala Phe Leu Leu 20 Thr Ala Ser Leu
Lya Ala Ala 35 Ala Pro Phe Asn Gly 40
Tyr Leu 50 Pro Asp Asp Gly Thr 55 Leu
Asn 65 Asn Leu Ser Ser Leu 70 Gly Ile
Tyr Lys Gly Thr Ser 85 Arg Ser Asp
Tyr Asp Leu Gly 100 Glu Phe Asn Gin
Gly Thr Lys 115 Ala Gin Tyr Leu Gin 120
Gly Met 130 Gin Val Tyr Ala Asp 135 Val
Asp 145 Gly Thr Glu Trp Val 150 Asp Ala
Asn Gin Clu Ile Ser 165 Gly Thr Tyr
Asp Phe Pro Gly 180 Arg Gly Asn Thr
Arg Lys 10 Gly Trp Met Phe Leu 15 Leu
Phe 25 Cys Pro Thr Gly Arg 30 His Ala
Thr Met Met Gin Tyr 45 Phe Glu Trp
Trp Thr Lys Val 60 Ala Asn Glu Ala
Thr Ala Leu 75 Ser Leu Pro Pro Ala 80
Val Gly 90 Tyr Gly Val Tyr Asp 95 Leu
Lys 105 Gly Thr Val Arg Thr 110 Lya Tyr
Ala Ile Gin Ala Ala 125 His Ala Ala
Val Phe Asp His 140 Ly6 Gly Gly Ala
Val Clu Val 155 Asn Pro Ser Asp Arg 160
Gin Ile 170 Gin Ala Trp Thr Lys 175 Phe
Tyr 185 Ser Ser Phe Lys Trp 190 Arg Trp
-35CZ 293163 B6
Tyr His Phe 195 Asp Gly Val Asp Trp 200 Asp Glu Ser Arg Lys 205 Leu Ser Arg
Ile Tyr 210 Lys Phe Arg Gly Ile 215 Gly Lys Ala Trp Asp 220 Trp Glu Val Asp
Thr Glu Asn Gly Asn Tvr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met
225 230 235 240
Asp His Pro Glu val 245 Val Thr clu Leu Lvs 250 Asn Trp Gly Lye Trp 255 Tyr
Val Asn Thr Thr Asn 260 Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Gly Leu Lys His
265 270
Ile Lys Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Ser Gin
275 280 285
Thr Glv 290 Lys Pro Leu Phe Thr 295 Val Gly Glu Tyr Trp 300 Ser Tyr Asp Ile
Asn 305 Lys Leu His Asn Tyr 310 Ile Thr Lys Thr Asn 315 Gly Thr Met Ser Leu 320
Phe Asp Ala Pro Leu 325 His Asn Lys Phe Tyr 330 Thr Ala Ser Lys Ser 335 Gly
Gly Ala Phe Asp 340 Met Arg Thr Leu Met 345 Thr Asn Thr Leu Met 350 Lys Asp
Gin Pro Thr Leu Ala Val Thr Phe val Asp Asn His Asp Thr Asn Pro
355 360 365
Ala Lys 370 Arg Cys Ser His Gly 375 Arg Pro Trp Phe Lys 380 Pro l>eu Ala Tyr
Ala 385 Phe Ile Leu Thr Arg 390 Gin Glu Gly Tyr Pro 395 Cys Val Phe Tyr Gly 400
Asp Tyr Tyr Gly Ile 405 Pro Gin Tyr Asn Ile 410 Pro Ser Leu Lys Ser 415 Lys
Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gin
420 425 430
His Asp Tyr 435 Leu Asp His Ser Asp 440 Ile Ile Gly Trp Thr 445 Arg Glu Gly
Val Thr 450 Glu Lys Pro Gly Ser 455 Gly Leu Ala Ala Leu 460 Ile Thr Asp Gly
Ala 465 Oly Arg Ser Lys Trp 470 Met Tyr Val Gly Lye 475 Gin His Ala Gly Lys 480
Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn
485 490 495
Ser Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Val
500 505 510
Trp Val Pro Arg Lys Thr Thr Val Ser Thr Ile Ala Arg Pro Ile Thr
515 520 525
Thr Arg Pro Trp Thr Gly Glu Phe Val Arg Trp His Glu Pro Arg Leu
530 535 540
Val Ala Trp Pro
545
-36CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 36:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 483 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 36
Ala 1 Asn Leu Asn Gly Thr Leu Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr Her 15 Pro
5 10
Asn Asp Gly Gin His Trp Lys Arg Leu Gin Asn Asp Ser Ala Tyr Leu
20 25 30
Ala Glu His Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
35 40 45
Thr Ser Gin Ala Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
50 55 60
Gly Glu Phe His Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
65 70 75 80
Gly Glu Leu Gin Ser Ala Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile Asn
85 90 95
Val
Glu Ile
Gly
145
Asp
Phe
Tyr
Ala Leu
225
Tyr Gly Asp Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr
100 105 110
Asp Val Thr Ala Val Glu Val Asp Pro Ala Asp Arg Asn Arg Val
115 120 12S
Ser Gly Glu His Leu Ile Lys Ala Trp Thr His Phe His Phe Pro
130 135 140
Arg Gly Ser Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe
15D 155 160
Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
165 170 175
Gin Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn Glu Asn Gly Asn
180 185 190
Asp Tyr Leu Thr Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp His Pro Asp Val
195 200 205
Ala Glu Ile Lys Arg Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Gin
210 215 220
Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe
230 235 240
-37CZ 293163 B6
Leu Arg Asp Trp Val Asn His Val Arg Glu Lys Thr Gly 250 Lys Glu 255 Her
245
Phe Thr Val Ala Glu Tyr Trp Gin Asn Asp Leu Gly Ala Leu Glu Asn
260 265 270
Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Phe Asn His Ser Val Phe Aso Val Pro Leu
275 280 285
His Tyr Gin Phe His Ala Ala Ser Thr Gin Gly Gly Gly Tyr Asp Met
290 295 300
Arg Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Ser Lve His Pra Leu Lys Ser
305 310 315 320
Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gin Pro Gly Gin Ser Leu Glu
325 330 335
Ser Thr Val Gin Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu
340 345 350
Thr Arg Glu Ser Gly Tyr Pro Gin Val Phe Tyr Gly Asp Met Tyr Gly
355 360 365
Thr Lys Gly Asp Ser Gin Arg Glu Ile Pro Ala Leu Lys His Lys Ile
370 375 380
Glu Prc Ile Leu Lys Ala Arg Lys Gin Tyr Ala Tyr Gly Ala Gin His
385 390 395 400
Asp Tvx Phe Asp His His Asp Ile Val Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp
405 410 415
Ser Ser Val Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro
420 425 430
Gly Gly Ala Lys Arg Met Tyr Val Gly Arg Gin Asn Ala Gly Glu Thr
435 440 445
Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser
4S0 455 460
Glu Gly Trp Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr
465 470 475 480
Val Gin Arg
2) Informace pro řetězec č. 37:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 487 aminokyselin
B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární io ii) typ molekuly: bílkovina
-38CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 37
Ala 1 Ala Ala Ala Ala 5 Asn Leu Asn Gly Thr Leu Met Gin 10 Tyr Phe 15 Glu
Trp Tyr Meo Pro Asn Asp Gly Gin His Trp Lys Arg Leu Gin Asn Asp
20 25 30
Ser Ala Tyr Leu Ala Glu His Gly Ile Thr Ala Val Ile Pro Pro
35 40 45
Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gin Ala Asp Val Gly Tvr Gly Ala Ty Asp
50 55 60
Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe His Gin Lys Gly Thr Val Arg Th* Lys
63 70 75 80
Tyr Gly Thr Lys Glv Glu Leu Gin Ser Ala Ile Lys Ser Leu His ser
B5* 90 95
g Asp Ile Asn Val Tyr Gly Asp Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly
100 105 110
Ala Asp Ala Thr Glu Asp Val Thr Ala Val Glu Val Asn Pro Ala Asp
115 120 12*5
Arg Asn Arg Val Ile Ser Gly Glu His Leu Ile Lys Ala Trp Thr His
130 135 140
Phe His Phe Pro Gly Arg Gly Ser Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His
145 150 155 160
Trp Tyr His Phe Asp Gly' Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn
165 170 175
Arg Ile Tyr Lvs Phe Glr. Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn
180 185 190
Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Het Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp
195 200 205
Eíe Pro Asp Val Ala Ala Glu Ile Lys Arg Trp Glv Thr Trp Tyr Ala
210 215 220
Asn Glu Leu Gin Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile
225 230 235 240
Lys Phe Ser Phe Leu Arg Asp Trp Val Asn His Val Arg Glu Lys Thr
245 250 255
Gly Lys Glu Met Phe 260 Thr Val Ala Glu 265 Tyr Trp Gin Asn Asp 270 Leu Gly
Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Phe Asn His Ser Val Phe
275 280 285
Asp Val Pro Leu His Tyr Gin Phe His Ala Ala Ser Thr Gin Gly Gly
290 295 300
Gly 305 Tyr Asp Met Arg Lys 310 Leu Leu Asn Gly Thr 315 Val Val Ser Lys His 320
Pro Leu Lys Ser Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gin Pro Gly
325 330 335
Gin ser Leu Glu Ser Thr Val Gin Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr
340 345 350
-39CZ 293163 B6
Ala Phe Zle Leu Thr Arg Glu Ser Gly Tyr Pro Gin Val Phe Tyr Gly
355 360 365
ASD Met Tyr Gly Thr Lys Gly Asp Ser Gin Arg Glu Ile Pro Ala Leu
370 375 380
Lve His Lys Zle Glu Pro Ile Leu Lys Ala Arg Lys Gin Tyr Ala Tyr
385 390 395 400
Gly Ala Gin His ASp Tyr Phe Asp His His Asp Zle Val Gly Trp Thr
405 410 415
Arg Glu Gly Asp Ser Ser Val Ala Asn ser Gly Leu Ala Ala Leu Zle
420 425 430
Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ala Lvs Arg Met Tyr Val Gly Arg Gin Asn
435 4*40 445
Ala Gly Glu Thr Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val
4S0 455 460
Val Zle Asn Ser Glu Gly Trp Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser
465 470 475 480
Val Ser Zle Tyr Val Gin Arg 485
2) Informace pro řetězec č. 38:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 32 aminokyselin B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 38
Met Lys Gin Gin Lys Arg Leu Thr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala Ala Ala Asn Leu
20 25 30
2) Informace pro řetězec č. 39:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 33 aminokyselin B - typ: aminokyselina
C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina
xi) popis řetězce: č. 39
Met 1 Arg ser Lys Thr 5 Leu Trp Zle Ser Leu 10 Leu Phe Ala Leu Thr 15 Leu
Ile Phe Thr Met 20 Ala Phe ser Asn Met 25 Ser Ala Gin Ala Ala 30 Gly Lys
Ser
2) Informace pro řetězec č. 40:
i) charakteristika řetězce: A - 35 aminokyselin
B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 40
Met 1 Arg Ser Lys Thr 5 Leu Trp Ile Ser Leu 10 Leu Phe Ala Leu Thr 15 Leu
Ile Phe Thr Met Ala Phe Ser Asn Met Ser Ala Gin Ala Ala Ala Ala
20 25 30
Ala Ala Asn
2) Informace pro řetězec č. 41:
i) charakteristika řetězce: A - 32 aminokyselin
B - typ: aminokyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: bílkovina xi) popis řetězce: č. 41
Met 1 Arg Ser Lys Thr 5 Leu Trp Zle Ser Leu 10 Leu Phe Ala Leu Thr 15 Leu
Ile Phe Thr Met 20 Ala Phe Ser Asn Met 25 Ser Ala Gin Ala Ala 30 Asn Leu
-41 CŽ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 42:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 33 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 42
CACCTAATTA AAGCTTTCAC ACATTTTCAT TTT
2) Informace pro řetězec č. 43:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 33 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 43
CACCTAATTA AAGCTTACAC ACATTTTCAT TTT
2) Informace pro řetězec č. 44:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 66 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 44
CCGCGTAATT TCCGGAGAAC ACCTAATTAA AGCCGCAACA CATTTTCATT TTCCCGGGCG CGGCAG 66
2) Informace pro řetězec č. 45:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 42 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární
-42CZ 293163 B6 i i) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 45
CCGGAGAACA CCTAATTAAA GCCCTAACAC ATTTTCATTT TC
2) Informace pro řetězec č. 46:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 42 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 46
CCGGAGAACA CCTAATTAAA GCCCACACAC ATTTTCATTT TC
2) Informace pro řetězec č. 47:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 42 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 47
CCGGAGAACA CCTAATTAAA GCCTGCACAC ATTTTCATTT TC 42
2) Informace pro řetězec č. 48:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 48
GATGCAGTAT TTCGAACTGG TATA
-43CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 49:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 26 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 49
TGCCCAATGA TGGCCAACAT TGGAAG
2) Informace pro řetězec č. 50:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 50
CGAATGGTAT GCTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 51:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 51
CGAATGGTAT CGCCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 52:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D-topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu)
-44CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 52
CGAATGGTAT AATCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 53:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 53
CGAATGGTAT GATCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 54:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 54
CGAATGGTAT CACCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 55:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 55
CGAATGGTAT AAACCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 56:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
-45CZ 293163 B6
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 56
CGAATGGTAT CCGCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 57:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 57
CGAATGGTAT TCTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 58:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 58
CGAATGGTAC ACTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 59:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 59
CGAATGGTAT GTTCCCAATG ACGG 24
-46CZ 293163 B6
2) Informace pro řetězec č. 60:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 60
CGAATGGTAT TGTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 61:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 61
CGAATGGTAT CAACCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 62:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 62
CGAATGGTAT GAACCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 63:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu)
-47CZ 293163 B6 xi) popis řetězce: č. 63
CGAATGGTAT GGTCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 64
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 64
CGAATGGTAT ATTCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 65:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 65
CGAATGGTAT TTTCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 66:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 66
CGAATGGTAC TGCCCAATG ACGG
2) Informace pro řetězec č. 67:
i) charakteristika řetězce:
A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina
-48CZ 293163 B6
C - typ řetězce: jednoduchý
D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 67
CGAATGGTAT TATCCCAATG ACGG 24
2) Informace pro řetězec č. 68:
i) charakteristika řetězce: A - délka: 24 párů bází
B - typ: nukleová kyselina C - typ řetězce: jednoduchý D - topologie: lineární ii) typ molekuly: DNA (genomu) xi) popis řetězce: č. 68
CCGTCATTGG GACTACGTAC CATT

Claims (22)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Mutanta alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzoru alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+l 5 nebo M+197 v alfa-amyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina, použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu.
  2. 2. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 1, v níž zbytkem oxidovatelné aminokyseliny v prekurzoru alfa-amylázy, vypuštěným nebo nahrazeným zbytkem přírodní aminokyseliny s výjimkou Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu je zbytek methioninu v poloze +8, +15,+197, +256, +304, +366 nebo +438 v alfa-amyláze Bacillus licheniformis.
  3. 3. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 2, v níž se vypuštěný nebo nahrazený zbytek methioninu nachází v poloze+197 v alfa-amyláze B. licheniformis.
  4. 4. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 3, v níž je methionin v poloze+197 v alfa-amyláze B. licheniformis nahrazen zbytkem aminokyseliny ze skupiny alanin, threonin nebo cystein.
  5. 5. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 4, M197T.
  6. 6. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 2, v níž je vypuštěn nebo nahrazen zbytek M+15 v alfa-amyláze B. licheniformis.
  7. 7. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 6, v níž je zbytek methioninu v poloze+15 v alfaamyláze B. licheniformis nahrazen zbytkem aminokyseliny ze skupiny threonin, aspartát a valin.
    -49CZ 293163 B6
  8. 8. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 1, v níž jsou nahraženy alespoň dva zbytky aminokyselin v prekurzorů alfa-amylázy v polohách, ekvivalentních +15,+138 nebo +197 v alfa-amyláze B. licheniformis.
  9. 9. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 1, v níž se prekurzor volí z kmenů ze skupiny B. licheniformis, B. stearothermiphylus a B. amyloliquefaciens.
  10. 10. Mutanta alfa-amylázy podle nároku 9, pro níž je prekurzorem alfa-amyláza B. licheniformis.
  11. 11. Kódová DNA pro mutantu alfa-amylázy, která je produktem exprese mutovaného kódového řetězce DNA pro alfa-amylázu, odvozeného od prekurzorů alfa-amylázy z čeledi Bacillus vypuštěním nebo náhradou aminokyseliny v poloze, ekvivalentní poloze M+15 nebo M+197 v alfaamyláze B. licheniformis přírodní aminokyselinou za předpokladu, že aminokyselina, použitá k náhradě uvedených aminokyselin je odlišná od aminokyseliny Leu, Ile, Asn, Ser, Gin nebo Glu.
  12. 12. Vektor pro expresi, obsahující kódovou DNA podle nároku 11.
  13. 13. Hostitelské buňky, transformované vektorem pro expresi podle nároku 12.
  14. 14. Čisticí prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje mutantu alfa-amylázy podle nároku 1.
  15. 15. Čisticí prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že obsahuje mutantu alfa-amylázy podle nároku 1, v poloze, ekvivalentní poloze Ml97 v alfa-amyláze B. licheniformis.
  16. 16. Čisticí prostředek podle nároku 15,vyznačující se tím, že prostředek je ve formě kapaliny, gelu nebo granulátu.
  17. 17. Čisticí prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že navíc obsahuje ještě alespoň jeden další enzym ze skupiny proteáza, lipáza, celulóza nebo jiná amyláza.
  18. 18. Prostředek pro zkapalnění škrobu, vyznačující se tím, že obsahuje mutantu alfa-amylázy podle nároku 1.
  19. 19. Prostředek pro zkapalnění škrobu podle nároku 18, vyznačující se tím, že obsažená alfa-amyláza podle nároku 1 obsahuje mutaci v poloze, ekvivalentní poloze Ml5 v alfa-amyláze B. licheniformis.
  20. 20. Způsob zkapalnění suspenze granulovaného škrobu, získaného mletím za vlhka nebo za sucha při pH až méně než 6, vyznačující se tím, že se
    a) k suspenzi přidá účinné množství mutanty alfa-amylázy podle nároku 1,
    b) popřípadě se k suspenzi přidá účinné množství antioxidačního činidla a
    c) suspenze se nechá reagovat do zkapalnění škrobu.
  21. 21. Způsob podle nároku 20 pro zkapalnění suspenze granulovaného škrobu, získaného mletím za vlhka nebo za sucha při pH 4 až méně než 6, vyznačující se tím, že se
    a) k suspenzi přidá účinné množství alfa-amylázy podle nároku 8,
    b) popřípadě se k suspenzi přidá účinné množství antioxidačního činidla a
    c) suspenze se nechá reagovat do zkapalnění škrobu.
  22. 22 výkresů
    -50CZ 293163 B6
CZ19952057A 1993-02-11 1994-02-10 Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu CZ293163B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1639593A 1993-02-11 1993-02-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ205795A3 CZ205795A3 (en) 1995-12-13
CZ293163B6 true CZ293163B6 (cs) 2004-02-18

Family

ID=21776903

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19952057A CZ293163B6 (cs) 1993-02-11 1994-02-10 Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu

Country Status (20)

Country Link
US (3) US6297037B1 (cs)
EP (2) EP0867504B2 (cs)
JP (1) JPH08506491A (cs)
KR (1) KR100322793B1 (cs)
CN (1) CN1104499C (cs)
AT (2) ATE239075T1 (cs)
AU (1) AU682863C (cs)
BR (1) BR9405720A (cs)
CA (1) CA2155831C (cs)
CZ (1) CZ293163B6 (cs)
DE (2) DE69415659T3 (cs)
DK (2) DK0689589T4 (cs)
ES (2) ES2198617T5 (cs)
FI (2) FI119694B (cs)
HU (1) HU219675B (cs)
NO (1) NO307187B1 (cs)
NZ (1) NZ262623A (cs)
PL (1) PL310326A1 (cs)
PT (1) PT867504E (cs)
WO (1) WO1994018314A1 (cs)

Families Citing this family (705)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1707624A3 (en) 1993-10-08 2007-01-03 Novozymes A/S Amylase variants
WO1995010603A1 (en) * 1993-10-08 1995-04-20 Novo Nordisk A/S Amylase variants
US5830837A (en) * 1994-11-22 1998-11-03 Novo Nordisk A/S Amylase variants
TW268980B (cs) * 1994-02-02 1996-01-21 Novo Nordisk As
TW255887B (en) * 1994-05-25 1995-09-01 Lilly Co Eli Synthesis of benzoquinolinones
ATE301719T1 (de) * 1994-06-17 2005-08-15 Genencor Int Von der alpha-amylase aus b. licheniformis abgeleitete amylolytische enzyme mit verbesserten eigenschaften
PL318209A1 (en) * 1994-08-11 1997-05-26 Genencor Int Improved cleaning composition
US6093562A (en) 1996-02-05 2000-07-25 Novo Nordisk A/S Amylase variants
ES2329528T3 (es) * 1995-02-03 2009-11-26 Novozymes A/S Metodo para diseñar mutantes alfa-amilasa con propiedades determinadas.
US7115409B1 (en) 1995-02-03 2006-10-03 Novozymes A/S α-amylase mutants
AR000862A1 (es) 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
US6440716B1 (en) 1995-02-03 2002-08-27 Novozymes A/S α-amylase mutants
CN101381712A (zh) * 1995-02-03 2009-03-11 诺维信公司 淀粉酶变体
WO1996030481A1 (en) * 1995-03-24 1996-10-03 Genencor International, Inc. An improved laundry detergent composition comprising amylase
EP0736597A1 (en) * 1995-04-03 1996-10-09 The Procter & Gamble Company Soaker compositions
US5922083A (en) * 1995-04-03 1999-07-13 Procter & Gamble Company Detergent composition comprising a mutant amylase enzyme and oxygen bleaching agent
US5736499A (en) * 1995-06-06 1998-04-07 Genencor International, Inc. Mutant A-amylase
EP0756000A1 (en) * 1995-07-24 1997-01-29 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising specific amylase and linear alkyl benzene sulfonate surfactant
WO1997004054A1 (en) * 1995-07-24 1997-02-06 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising a specific amylase and a protease
AR003020A1 (es) * 1995-07-24 1998-05-27 Procter & Gamble Composicion detergente que comprende una amilasa de estabilidad oxidativa aumentada y un sistema surfactante especifico.
CA2227616A1 (en) * 1995-07-24 1997-02-06 Pramod, Kakumanu Detergent compositions comprising specific amylase and linear alkyl benzene sulfonate surfactant
US6140293A (en) * 1996-06-19 2000-10-31 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising a specific amylase and a protease
BR9609721A (pt) * 1995-07-24 1999-02-23 Procter & Gamble Limpeza de tecidos encardidos com a enzima amilase em composições detergentes
DE19605688A1 (de) * 1996-02-16 1997-08-21 Henkel Kgaa Übergangsmetallkomplexe als Aktivatoren für Persauerstoffverbindungen
CA2247501A1 (en) * 1996-03-07 1997-09-12 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising improved amylases
EP0798371A1 (en) * 1996-03-29 1997-10-01 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising specific amylase and alkyl poly glucoside surfactants
US6046149A (en) * 1996-04-17 2000-04-04 Procter & Gamble Company Detergent compositions
BR9708887B1 (pt) 1996-04-30 2014-10-29 Novozymes As "variante de uma alfa-amilase, uso da mesma, construção de dna, vetor de expressão recombinante, célula de bactéria ou fungo, aditivo e composição detergente".
EP0927240A1 (en) 1996-05-03 1999-07-07 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising polyamine polymers with improved soil dispersancy
US5763385A (en) * 1996-05-14 1998-06-09 Genencor International, Inc. Modified α-amylases having altered calcium binding properties
US6211134B1 (en) * 1996-05-14 2001-04-03 Genecor International, Inc. Mutant α-amylase
US6197070B1 (en) 1996-05-15 2001-03-06 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising alpha combination of α-amylases for malodor stripping
US5958739A (en) * 1996-06-06 1999-09-28 Genencor International Inc. Mutant α-amylase
WO1998005748A1 (en) * 1996-08-01 1998-02-12 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising improved amylase for dingy fabric clean-up
DE19649375A1 (de) 1996-11-29 1998-06-04 Henkel Kgaa Acetonitril-Derivate als Bleichaktivatoren in Reinigungsmitteln
WO1998029526A1 (en) 1996-12-31 1998-07-09 The Procter & Gamble Company Thickened, highly aqueous, low cost liquid detergent compositions with aromatic surfactants
ATE244750T1 (de) 1996-12-31 2003-07-15 Procter & Gamble Verdickte flüssigwaschmittel mit hohem wassergehalt
DE19700327A1 (de) * 1997-01-08 1998-07-09 Henkel Kgaa Protease- und amylasehaltiges Waschmittel
US6486113B1 (en) 1997-03-31 2002-11-26 Kao Corporation Mutant α-amylases
DE19732750A1 (de) 1997-07-30 1999-02-04 Henkel Kgaa Glucanasehaltiges Reinigungsmittel für harte Oberflächen
DE19732751A1 (de) 1997-07-30 1999-02-04 Henkel Kgaa Neue Beta-Glucanase aus Bacillus
DE19732749A1 (de) 1997-07-30 1999-02-04 Henkel Kgaa Glucanasehaltiges Waschmittel
US6080568A (en) * 1997-08-19 2000-06-27 Genencor International, Inc. Mutant α-amylase comprising modification at residues corresponding to A210, H405 and/or T412 in Bacillus licheniformis
ATE423192T1 (de) 1997-10-13 2009-03-15 Novozymes As Mutanten der alpha-amylase
US6204232B1 (en) 1997-10-30 2001-03-20 Novo Nordisk A/S α-amlase mutants
DE19819187A1 (de) * 1998-04-30 1999-11-11 Henkel Kgaa Festes maschinelles Geschirrspülmittel mit Phosphat und kristallinen schichtförmigen Silikaten
DE19824687A1 (de) * 1998-06-03 1999-12-09 Henkel Kgaa Amylase und Acetonitril-Derivate enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel
DE19824705A1 (de) 1998-06-03 1999-12-09 Henkel Kgaa Amylase und Protease enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel
AU755850B2 (en) 1998-06-10 2002-12-19 Novozymes A/S Novel mannanases
DE19850100A1 (de) 1998-10-29 2000-05-04 Henkel Kgaa Polymer-Granulate durch Wirbelschichtgranulation
EP1803817B1 (en) 1998-12-18 2011-04-06 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the I-S1 and I-S2 sub-groups having an additional amino acid residue in an active site loop region
DE19908051A1 (de) 1999-02-25 2000-08-31 Henkel Kgaa Verfahren zur Herstellung compoundierter Acetonitril-Derivate
ES2496568T3 (es) 1999-03-30 2014-09-19 Novozymes A/S Variantes de alfa-amilasa
US6410295B1 (en) 1999-03-30 2002-06-25 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
ATE422538T1 (de) 1999-03-31 2009-02-15 Novozymes As Polypeptide mit alkaliner alpha-amylase-aktivität und für diese kodierende nukleinsäuren
ES2532606T3 (es) 1999-03-31 2015-03-30 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de alfa-amilasa alcalina y ácidos nucleicos que los codifican
DE60040285D1 (de) 1999-05-20 2008-10-30 Novozymes As Subtilase enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit mindestens einer zusätzlichen aminosäure zwischen position 127 und 128
EP1183340B1 (en) 1999-05-20 2008-09-03 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 126 and 127
AU4393100A (en) 1999-05-20 2000-12-12 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additionalamino acid residue between positions 125 and 126
WO2000071687A1 (en) 1999-05-20 2000-11-30 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 129 and 130
DE60040282D1 (de) 1999-05-20 2008-10-30 Novozymes As SUBTILASE ENZYME DER I-S1 UND I-S2 UNTERGRUPPEN MIT MINDESTENS EINER ZUSäTZLICHEN AMINOSäURE ZWISCHEN POSITION 132 UND 133
WO2000071690A1 (en) 1999-05-20 2000-11-30 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 128 and 129
EP1067181A1 (en) * 1999-06-10 2001-01-10 Rijksuniversiteit te Groningen Enzyme selection
EP2206786A1 (en) 1999-08-31 2010-07-14 Novozymes A/S Novel proteases and variants thereof
AU7744000A (en) 1999-09-30 2001-04-30 Procter & Gamble Company, The Detergent package with means to mask amine malodours
JP2003512509A (ja) * 1999-10-15 2003-04-02 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 酵素液体クリーニング組成物
WO2001047956A2 (en) * 1999-12-23 2001-07-05 Genencor International, Inc. Method for obtaining proteins having improved functional characteristics
CN101532001A (zh) 2000-03-08 2009-09-16 诺维信公司 具有改变的特性的变体
AU2001273880A1 (en) * 2000-06-14 2001-12-24 Novozymes A/S Pre-oxidized alpha-amylase
DE50107849D1 (de) 2000-07-28 2005-12-01 Henkel Kgaa Neues amylolytisches enzym aus bacillus sp. a 7-7 (dsm 12368) sowie wasch- und reinigungsmittel mit diesem neuen amylolytischen enzym
US20020155574A1 (en) * 2000-08-01 2002-10-24 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
EP1370648A2 (en) 2000-08-01 2003-12-17 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
WO2002016547A2 (en) 2000-08-21 2002-02-28 Novozymes A/S Subtilase enzymes
EP1975229A3 (en) 2000-10-13 2009-03-18 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
EP1326966B2 (en) 2000-10-13 2015-03-18 Novozymes A/S Subtilase variants
DE10058645A1 (de) 2000-11-25 2002-05-29 Clariant Gmbh Verwendung von cyclischen Zuckerketonen als Katalysatoren für Persauerstoffverbindungen
AU2002233186A1 (en) 2000-11-28 2002-06-11 Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien Cyclodextrin glucanotransferase (cgtase), obtained from bacillus agaradherens (dsm 9948) and detergents and cleaning agents containing said novel cyclodextrin glucanotransferase
DE10102248A1 (de) 2001-01-19 2002-07-25 Clariant Gmbh Verwendung von Übergangsmetallkomplexen mit Oxim-Liganden als Bleichkatalysatoren
US7659102B2 (en) 2001-02-21 2010-02-09 Verenium Corporation Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2438205C (en) 2001-02-21 2015-11-03 Diversa Corporation Enzymes having alpha amylase activity and methods of use thereof
WO2002092797A2 (en) 2001-05-15 2002-11-21 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
WO2003000941A2 (en) 2001-06-26 2003-01-03 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase i activity and polynucleotides encoding same
DK200101090A (da) 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
US7153820B2 (en) 2001-08-13 2006-12-26 Ecolab Inc. Solid detergent composition and method for solidifying a detergent composition
US20030134396A1 (en) * 2001-12-19 2003-07-17 Shetty Jayarama K. Process for hydrolyzing starch without pH adjustment
DE10163748A1 (de) 2001-12-21 2003-07-17 Henkel Kgaa Neue Glykosylhydrolasen
AU2003214037A1 (en) 2002-03-27 2003-10-08 Novozymes A/S Granules with filamentous coatings
CN100529066C (zh) 2002-07-01 2009-08-19 诺维信公司 在发酵过程中加入单丙二醇
DE60335640D1 (de) 2002-10-01 2011-02-17 Novozymes As Polypeptide der gh-61-familie
US7741092B2 (en) 2002-10-31 2010-06-22 Verenium Corporation Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
TWI319007B (en) 2002-11-06 2010-01-01 Novozymes As Subtilase variants
EP1578964B2 (en) 2002-12-20 2013-09-04 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase ii activity and polynucleotides encoding same
DE602004026032D1 (de) 2003-01-27 2010-04-29 Novozymes As Enzymstabilisierung
US20060205628A1 (en) 2003-02-18 2006-09-14 Novozymes A/S Detergent compositions
EP2500423B1 (en) * 2003-02-26 2015-06-17 Danisco US Inc. Amylases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
WO2004078960A1 (en) * 2003-02-26 2004-09-16 Genencor International, Inc. Amylases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
KR20050106051A (ko) 2003-02-28 2005-11-08 더 프록터 앤드 갬블 캄파니 거품 발생용 분배기 및 고수준의 계면활성제를 함유하는조성물을 포함하는 거품 발생 키트
MXPA05009353A (es) 2003-03-10 2005-11-04 Genencor Int Composiciones de grano que contienen isomalto-oligosacaridos pre-bioticos y metodos para la elaboracion y uso de las mismas.
MXPA05009553A (es) * 2003-03-10 2006-03-17 Broin And Associates Inc Metodo para producir etanol utilizando almidon como materia prima.
US20050233030A1 (en) 2004-03-10 2005-10-20 Broin And Associates, Inc. Methods and systems for producing ethanol using raw starch and fractionation
EP1622921B1 (en) 2003-05-02 2010-06-16 Novozymes Inc. Variants of beta-glucosidases
AU2004252572B2 (en) 2003-06-25 2011-09-08 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polypeptides encoding same
EP2377931B1 (en) 2003-08-25 2013-05-08 Novozymes Inc. Variants of glycoside hydrolases
EP1673451B1 (en) 2003-10-10 2010-12-15 Novozymes A/S Protease variants
CN102994486A (zh) 2003-10-23 2013-03-27 诺维信公司 在洗涤剂中具有改善稳定性的蛋白酶
ES2437198T3 (es) 2003-10-28 2014-01-09 Novozymes Inc. Polipéptidos con actividad de beta-glucosidasa y polinucleótidos aislados que codifican los polipéptidos
JP2007514025A (ja) 2003-12-13 2007-05-31 ヘンケル・コマンディットゲゼルシャフト・アウフ・アクチエン 多成分シン・トゥ・シィック系
WO2005066339A2 (en) 2004-01-06 2005-07-21 Novozymes A/S Polypeptides of alicyclobacillus sp.
CN1980953B (zh) 2004-01-30 2014-12-24 诺维信股份有限公司 具有分解纤维增强活性的多肽及其编码多核苷酸
CN102250861A (zh) 2004-02-13 2011-11-23 诺维信公司 蛋白酶变体
US20050239181A1 (en) * 2004-03-10 2005-10-27 Broin And Associates, Inc. Continuous process for producing ethanol using raw starch
US7148404B2 (en) 2004-05-04 2006-12-12 Novozymes A/S Antimicrobial polypeptides
JP5623691B2 (ja) 2004-06-21 2014-11-12 ノボザイムスアクティーゼルスカブ プロテアーゼ
EP3620523A3 (en) 2004-07-05 2020-08-19 Novozymes A/S Alpha-amylase variants with altered properties
WO2006017294A1 (en) * 2004-07-13 2006-02-16 Novozymes North America, Inc Liquefaction process
EP2261329A3 (en) 2004-09-21 2011-01-19 Novozymes A/S Subtilases
US7741095B2 (en) 2004-09-21 2010-06-22 Novozymes A/S Subtilases
US7811979B2 (en) 2004-09-21 2010-10-12 Novozymes A/S Subtilases
EP2302042A3 (en) 2004-09-30 2011-08-10 Novozymes A/S Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
DE102004047777B4 (de) 2004-10-01 2018-05-09 Basf Se Alpha-Amylase-Varianten mit erhöhter Lösungsmittelstabilität, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung
DE102004047776B4 (de) 2004-10-01 2018-05-09 Basf Se Gegen Di- und/oder Multimerisierung stabilisierte Alpha-Amylase-Varianten, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung
EP1700904A1 (en) 2005-03-11 2006-09-13 Unilever N.V. Liquid detergent composition
EP1700907A1 (en) 2005-03-11 2006-09-13 Unilever N.V. Liquid bleaching composition
BRPI0610031A2 (pt) 2005-04-27 2010-05-18 Novozymes Inc polipeptìdeo isolado, polinucleotìdeo isolado, construção de ácido nucleico, célula hospedeira recombinante, métodos para produzir o polipeptìdeo e para produzir um mutante de uma célula precursora, célula mutante, métodos para produzir uma proteìna, e para produzir um polinucleotìdeo, polinucleotìdeo, mutante, composição detergente, e, método para degradar biomassa contendo celulose e hemi-celulose
US20070037267A1 (en) * 2005-05-02 2007-02-15 Broin And Associates, Inc. Methods and systems for producing ethanol using raw starch and fractionation
EP2385112B1 (en) 2005-07-08 2016-11-30 Novozymes A/S Subtilase variants
US8119387B2 (en) 2005-08-16 2012-02-21 Novozymes A/S Polypeptides of strain Bacillus sp. P203
ATE530642T1 (de) 2005-08-16 2011-11-15 Novozymes As Subtilasen
EP1934342B1 (en) 2005-09-30 2014-12-10 Novozymes A/S Immobilization of enzymes
EP1941023B1 (en) 2005-09-30 2017-04-05 Novozymes Inc. Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
US7919289B2 (en) 2005-10-10 2011-04-05 Poet Research, Inc. Methods and systems for producing ethanol using raw starch and selecting plant material
WO2007098756A1 (en) 2006-03-02 2007-09-07 Novozymes A/S High capacity encapsulation process
WO2007107573A1 (en) 2006-03-22 2007-09-27 Novozymes A/S Use of polypeptides having antimicrobial activity
WO2007113241A1 (en) 2006-03-31 2007-10-11 Novozymes A/S A stabilized liquid enzyme composition
US7968318B2 (en) * 2006-06-06 2011-06-28 Genencor International, Inc. Process for conversion of granular starch to ethanol
ES2538360T3 (es) 2006-07-21 2015-06-19 Novozymes, Inc. Métodos para aumentar la secreción de polipéptidos que tienen actividad biológica
US20080019956A1 (en) * 2006-07-24 2008-01-24 Manoj Kumar Enzymatic prevention and control of biofilm
CA2660645C (en) 2006-08-11 2016-04-05 Novozymes Biologicals, Inc. Bacillus cultures for use in washing, cleaning, stain removal, or degrading waste materials
JP5497440B2 (ja) 2006-10-06 2014-05-21 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 洗剤組成物及び当該組成物における酵素の組み合わせ使用
US8541236B2 (en) * 2006-12-08 2013-09-24 University Of Washington Mutant apolipoprotein A-1 polypeptide with increased resistance to oxidation and reactive carbonyls
US20080299622A1 (en) * 2007-02-07 2008-12-04 Paulson Bradley A Starch Hydrolysis Using Phytase with an Alpha Amylase
US8093200B2 (en) 2007-02-15 2012-01-10 Ecolab Usa Inc. Fast dissolving solid detergent
WO2008112459A2 (en) 2007-03-09 2008-09-18 Danisco Us Inc., Genencor Division Alkaliphilic bacillus species a-amylase variants, compositions comprising a-amylase variants, and methods of use
US8399224B2 (en) 2007-03-14 2013-03-19 Danisco Us Inc. Production of ethanol from barley and DDGS containing reduced beta-glucan and phytic acid
US20080233093A1 (en) 2007-03-23 2008-09-25 Novozymes Biologicals, Inc. Preventing and Reducing Biofilm Formation and Planktonic Proliferation
DK2132316T3 (da) * 2007-03-23 2015-06-22 Danisco Us Inc Forøget amylaseproduktion ved n-terminal addition til modent amylaseprotein
DE102007016139A1 (de) 2007-03-30 2008-10-02 Jenabios Gmbh Verfahren zur regioselektiven Oxygenierung von N-Heterozyklen
EP2147116B1 (en) * 2007-04-20 2016-03-02 Sigma-Tau Rare Disease Ltd Stable recombinant adenosine deaminase
AU2008313267B2 (en) 2007-10-18 2013-09-19 Ecolab Inc. Pressed, waxy, solid cleaning compositions and methods of making them
US7618801B2 (en) 2007-10-30 2009-11-17 Danison US Inc. Streptomyces protease
US7541026B2 (en) 2007-11-05 2009-06-02 Danisco Us Inc., Genencor Division Alpha-amylase variants with altered properties
JP5520828B2 (ja) 2007-11-05 2014-06-11 ダニスコ・ユーエス・インク 改変される特徴を有するバシルス種（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）ＴＳ‐２３アルファ‐アミラーゼ変異体
DE102007053615A1 (de) 2007-11-08 2009-05-14 Henkel Ag & Co. Kgaa Verbesserung der Duftwirkung von Riechstoff-Estern
NZ585453A (en) * 2007-12-20 2011-12-22 Danisco Us Inc A composition comprising a perhydrolase enzyme an a removal enzyme mixture
RU2526516C2 (ru) 2008-02-04 2014-08-20 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Варианты альфа-амилазы ts-23 с измененными свойствами
BRPI0907709A2 (pt) * 2008-02-06 2017-08-22 Danisco Us Inc Sistema isento de ajuste de ph para a produção de açúcares fermentáveis e álcool
US8066818B2 (en) 2008-02-08 2011-11-29 The Procter & Gamble Company Water-soluble pouch
US20090209447A1 (en) 2008-02-15 2009-08-20 Michelle Meek Cleaning compositions
US20090217463A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Philip Frank Souter Detergent composition comprising lipase
US20090217464A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Philip Frank Souter Detergent composition comprising lipase
MX2010009652A (es) 2008-03-11 2010-09-30 Danisco Us Inc Glucoamilasa y fitasa de buttiauxella durante la sacarificacion.
US20090233830A1 (en) * 2008-03-14 2009-09-17 Penny Sue Dirr Automatic detergent dishwashing composition
EP2100947A1 (en) 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
BRPI0913402B1 (pt) 2008-06-06 2019-07-02 Danisco Us Inc. Alfa amilases (amys) variantes de geobacillus stearothermophilus com propriedades melhoradas
US9090887B2 (en) * 2008-06-06 2015-07-28 Danisco Us Inc. Variant alpha-amylases from Bacillus subtilis and methods of use, thereof
EP2149786A1 (en) 2008-08-01 2010-02-03 Unilever PLC Improvements relating to detergent analysis
DE212009000119U1 (de) 2008-09-12 2011-12-30 Unilever N.V. Spender und Vorbehandlungsmittel für viskose Flüssigkeiten
EP2166073A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166075A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
EP2166076A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
BRPI0920891B1 (pt) 2008-09-25 2023-01-10 Danisco Us Inc Mistura de alfa-amilase e método para produção de um açúcar fermentável
US20100125046A1 (en) 2008-11-20 2010-05-20 Denome Frank William Cleaning products
ES2526867T3 (es) 2008-11-20 2015-01-16 Novozymes Inc. Polipéptido que tiene actividad potenciadora amilolítica y polinucleótidos que codifican el mismo
CA2745760A1 (en) 2008-12-04 2010-06-10 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US20110296557A1 (en) 2008-12-12 2011-12-01 Novozymes, Inc. Polypeptides Having Lipase Activity And Polynucleotides Encoding Same
EP2202290A1 (en) 2008-12-23 2010-06-30 Unilever PLC A flowable laundry composition and packaging therefor
EP2213723A1 (en) 2009-01-30 2010-08-04 Novozymes A/S Isomaltose for fungus fermentation
EP3998328A1 (en) 2009-02-09 2022-05-18 The Procter & Gamble Company Detergent composition
WO2010097436A1 (en) 2009-02-27 2010-09-02 Novozymes A/S Mutant cells having reduced expression of metallopeptidase, suitable for recombinant polypeptide production
US9068206B1 (en) 2009-03-03 2015-06-30 Poet Research, Inc. System for treatment of biomass to facilitate the production of ethanol
US8450094B1 (en) 2009-03-03 2013-05-28 Poet Research, Inc. System for management of yeast to facilitate the production of ethanol
EP2403954B1 (en) 2009-03-03 2015-04-22 POET Research, Inc. Method for fermentation of biomass for the production of ethanol
US20100233771A1 (en) * 2009-03-03 2010-09-16 Mcdonald William F System for pre-treatment of biomass for the production of ethanol
MX2011010041A (es) 2009-04-01 2011-11-18 Danisco Us Inc Composiciones y metodos que comprenden variantes de alfa-amilasa con propiedades alteradas.
BR112012000531A2 (pt) 2009-07-09 2019-09-24 Procter & Gamble composição detergente para lavagem de roupas catalítica que compreende teores relativamente baixos de eletrólito solúvel em água
EP2451915A1 (en) 2009-07-09 2012-05-16 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
EP2292725B2 (en) 2009-08-13 2022-08-24 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabrics at low temperature
WO2011035027A2 (en) 2009-09-17 2011-03-24 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
RU2639534C2 (ru) 2009-09-25 2017-12-21 Новозимс А/С Применение вариантов протеазы
JP5947213B2 (ja) 2009-09-25 2016-07-06 ノボザイムス アクティーゼルスカブ プロテアーゼ変異体の使用
ES2560805T3 (es) 2009-09-29 2016-02-22 Novozymes Inc. Polipéptidos con actividad mejoradora celulolítica y polinucleótidos que los codifican
CN102666846A (zh) 2009-09-30 2012-09-12 诺维信公司 具有纤维素分解增强活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2977382A3 (en) 2009-09-30 2016-05-11 Novozymes Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
EP3434764A3 (en) 2009-12-09 2019-04-03 The Procter & Gamble Company Fabric and home care products
ES2423580T5 (es) 2009-12-10 2021-06-17 Procter & Gamble Método y uso de una composición para lavado de vajillas
EP2333041B1 (en) 2009-12-10 2013-05-15 The Procter & Gamble Company Method and use of a dishwasher composition
ES2548772T3 (es) 2009-12-10 2015-10-20 The Procter & Gamble Company Producto para lavavajillas y uso del mismo
ES2399311T5 (es) 2009-12-10 2020-06-19 Procter & Gamble Composición detergente
WO2011076897A1 (en) 2009-12-22 2011-06-30 Novozymes A/S Use of amylase variants at low temperature
EP2501792A2 (en) 2009-12-29 2012-09-26 Novozymes A/S Gh61 polypeptides having detergency enhancing effect
CN102884183B (zh) 2010-01-04 2015-09-16 诺维信公司 趋于钙耗竭和酸性pH的α-淀粉酶的稳定化
CN113186178A (zh) 2010-02-10 2021-07-30 诺维信公司 在螯合剂存在下具有高稳定性的变体和包含变体的组合物
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
US8859259B2 (en) 2010-02-14 2014-10-14 Ls9, Inc. Surfactant and cleaning compositions comprising microbially produced branched fatty alcohols
US8865637B2 (en) 2010-02-25 2014-10-21 Novozymes Als Variants of a lysozyme and polynucleotides encoding same
PL2361964T3 (pl) 2010-02-25 2013-05-31 Procter & Gamble Kompozycja detergentu
CN102822191B (zh) 2010-03-30 2015-06-10 诺维信公司 晶体代谢物回收
EP2380481B1 (en) 2010-04-23 2014-12-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing product
ES2579217T3 (es) 2010-04-23 2016-08-08 The Procter & Gamble Company Partícula
PL2380963T3 (pl) 2010-04-23 2016-07-29 Procter & Gamble Sposób perfumowania
PL2380961T3 (pl) 2010-04-23 2018-10-31 The Procter & Gamble Company Kompozycja detergentu
EP2380478A1 (en) 2010-04-23 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing product
EP2383329A1 (en) 2010-04-23 2011-11-02 The Procter & Gamble Company Particle
CN102906251B (zh) 2010-04-26 2016-11-16 诺维信公司 酶颗粒剂
DK2566960T3 (da) 2010-05-06 2017-05-22 Procter & Gamble Forbrugerprodukter med proteasevarianter
PL2420558T3 (pl) 2010-08-17 2017-12-29 The Procter And Gamble Company Stabilne, trwałe detergenty do ręcznego zmywania naczyń
MX337039B (es) 2010-08-17 2016-02-09 Procter & Gamble Metodo para el lavado de vajilla a mano con espuma de duracion prolongada.
MX2011008654A (es) 2010-08-24 2012-02-23 Corn Products Int Inc Produccion de isomaltooligosacaridos y usos para los mismos.
CN103068264A (zh) 2010-08-24 2013-04-24 丹尼斯科美国公司 包含低温大米蛋白浓缩物的食品产品
KR20130102537A (ko) 2010-08-30 2013-09-17 노보자임스 에이/에스 두 번 불림 세탁
EP2611898A1 (en) 2010-08-30 2013-07-10 Novozymes A/S A concentrated soak wash
US20130266554A1 (en) 2010-09-16 2013-10-10 Novozymes A/S Lysozymes
GB201015672D0 (en) 2010-09-20 2010-10-27 Unilever Plc Improvements relating to fabric treatment compositions comprising targeted benefit agents
ES2599613T3 (es) 2010-09-30 2017-02-02 Novozymes, Inc. Variantes de polipéptidos que tienen actividad de mejora celulolítica y polinucleótidos que codifican los mismos
CN103282489B (zh) 2010-09-30 2016-12-14 诺维信股份有限公司 具有纤维素分解增强活性的多肽变体及其编码多核苷酸
DK177132B1 (da) 2010-11-05 2012-01-30 Respekt Danmark As Maskinopvask
WO2012068509A1 (en) 2010-11-18 2012-05-24 Novozymes, Inc. Chimeric polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
ES2656049T3 (es) 2011-01-31 2018-02-22 Novozymes A/S Uso de glucosa tostada para la producción fermentativa de taxtomina
EP2675891B1 (en) 2011-02-15 2018-06-20 Novozymes Biologicals, Inc. Mitigation of odor in cleaning machines and cleaning processes
US20140038876A1 (en) 2011-02-16 2014-02-06 Novozymes A/S Detergent Compositions Comprising Mettaloproteases
MX2013009176A (es) 2011-02-16 2013-08-29 Novozymes As Composiciones detergentes que comprenden metaloproteasas.
WO2012110562A2 (en) 2011-02-16 2012-08-23 Novozymes A/S Detergent compositions comprising metalloproteases
EP2678352B1 (en) 2011-02-23 2017-12-06 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2012135659A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novozymes A/S Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
BR112013027463A2 (pt) 2011-04-29 2017-09-26 Novozymes Inc métodos para degradar ou converter, e para fermentar um material celulóliso, para produzir um produto de fermentação, e para limpar ou lavar uma superfície dura ou roupa suja, e, composição de detergente
AR086281A1 (es) 2011-05-05 2013-12-04 Danisco Us Inc Composiciones y metodos que comprenden variantes de serina proteasas
MX357386B (es) 2011-05-05 2018-07-06 Procter & Gamble Composiciones y metodos que comprenden variantes de proteasa serina.
BR112013028007A2 (pt) 2011-05-20 2017-01-10 Ecolab Usa Inc detergentes não-fosfato e ácidos não-fosfóricos em um sistema alternado alcalinidade/acidez para a lavagem de louça
US8758520B2 (en) 2011-05-20 2014-06-24 Ecolab Usa Inc. Acid formulations for use in a system for warewashing
US20140371435A9 (en) 2011-06-03 2014-12-18 Eduardo Torres Laundry Care Compositions Containing Thiophene Azo Dyes
US10829721B2 (en) 2011-06-20 2020-11-10 Novozymes A/S Particulate composition
EP2537918A1 (en) 2011-06-20 2012-12-26 The Procter & Gamble Company Consumer products with lipase comprising coated particles
CN103620029B (zh) 2011-06-24 2017-06-09 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
US20140206026A1 (en) 2011-06-30 2014-07-24 Novozymes A/S Method for Screening Alpha-Amylases
JP6204352B2 (ja) 2011-06-30 2017-09-27 ノボザイムス アクティーゼルスカブ α−アミラーゼ変異体
KR101956895B1 (ko) 2011-07-01 2019-03-12 노보자임스 에이/에스 안정화된 서브틸리신 조성물
US20140228274A1 (en) 2011-07-01 2014-08-14 Novozymes A/S Liquid Detergent Composition
EP2732018B1 (en) 2011-07-12 2017-01-04 Novozymes A/S Storage-stable enzyme granules
EP2551335A1 (en) 2011-07-25 2013-01-30 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilized liquid detergent composition
WO2013024021A1 (en) 2011-08-15 2013-02-21 Novozymes A/S Polypeptides having cellulase activity and polynucleotides encoding same
US20140295027A1 (en) 2011-08-19 2014-10-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Protease Activity
ES2628190T3 (es) 2011-09-22 2017-08-02 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de proteasa y polinucleótidos que codifican los mismos
EP2761013A1 (en) 2011-09-29 2014-08-06 Danisco US Inc. Liquefaction and saccharification of granular starch at high concentration
ES2633292T3 (es) 2011-10-19 2017-09-20 The Procter & Gamble Company Partícula
EP2802651B1 (en) 2011-11-21 2017-03-08 Novozymes, Inc. Gh61 polypeptide variants and polynucleotides encoding same
CN107090445A (zh) 2011-11-25 2017-08-25 诺维信公司 具有溶菌酶活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸
WO2013076269A1 (en) 2011-11-25 2013-05-30 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
WO2013088266A1 (en) 2011-12-13 2013-06-20 Ecolab Usa Inc. Concentrated warewashing compositions and methods
EP3272862A1 (en) 2011-12-16 2018-01-24 Novozymes, Inc. Polypeptides having laccase activity and polynucleotides encoding same
MX2014007446A (es) 2011-12-20 2014-08-01 Novozymes As Variantes de subtilasa y polinucleotidos que las codifican.
EP2607468A1 (en) 2011-12-20 2013-06-26 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
CN104024408B (zh) 2011-12-28 2019-04-19 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽
CN110777016A (zh) 2011-12-29 2020-02-11 诺维信公司 具有脂肪酶变体的洗涤剂组合物
EP2807254B1 (en) 2012-01-26 2017-08-02 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
MX353896B (es) 2012-02-03 2018-02-01 Procter & Gamble Composiciones y metodos para el tratamiento de superficies con lipasas.
EP2628785B1 (en) 2012-02-17 2016-05-18 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
CN104114698A (zh) 2012-02-17 2014-10-22 诺维信公司 枯草杆菌蛋白酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP2823026A1 (en) 2012-03-07 2015-01-14 Novozymes A/S Detergent composition and substitution of optical brighteners in detergent compositions
US10087401B2 (en) 2012-03-16 2018-10-02 Monosol, Llc Water soluble compositions incorporating enzymes, and method of making same
CA2867361C (en) 2012-03-19 2017-07-25 Milliken & Company Carboxylate dyes
WO2013148663A1 (en) 2012-03-28 2013-10-03 Danisco Us Inc. Low temperature method for making high glucose syrup
EP2831259A1 (en) 2012-03-28 2015-02-04 Danisco US Inc. Method for making high maltose syrup
US20150291922A1 (en) 2012-03-29 2015-10-15 Novozymes A/S Use of Enzymes For Preparing Water Soluble Films
US20150152457A1 (en) 2012-03-30 2015-06-04 Danisco Us Inc. Direct starch to fermentable sugar
US9315831B2 (en) 2012-03-30 2016-04-19 Danisco Us Inc. Direct starch to fermentable sugar as feedstock for the production of isoprene, isoprenoid precursor molecules, and/or isoprenoids
WO2013149858A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
US9394092B2 (en) 2012-04-16 2016-07-19 Monosol, Llc Powdered pouch and method of making same
CN113234695A (zh) 2012-04-27 2021-08-10 诺维信股份有限公司 Gh61多肽变体以及编码其的多核苷酸
AR090971A1 (es) 2012-05-07 2014-12-17 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de degradacion de xantano y polinucleotidos que los codifican
JP2015525248A (ja) 2012-05-16 2015-09-03 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リパーゼを含む組成物およびその使用方法
EP2674475A1 (en) 2012-06-11 2013-12-18 The Procter & Gamble Company Detergent composition
EP2861749A1 (en) 2012-06-19 2015-04-22 Novozymes Bioag A/S Enzymatic reduction of hydroperoxides
MX364390B (es) 2012-06-20 2019-04-25 Novozymes As Uso de polipeptidos que tienen actividad proteasa en alimentos para animales y detergentes.
CN104471048B (zh) 2012-07-12 2018-11-16 诺维信公司 具有脂肪酶活性的多肽及编码它的多核苷酸
BR112015001046B1 (pt) 2012-08-16 2022-06-14 Novozymes A/S Método para tratar um produto têxtil
MX2015002211A (es) 2012-08-22 2015-05-08 Novozymes As Metaloproteasa de exiguobacterium.
EP2888358A1 (en) 2012-08-22 2015-07-01 Novozymes A/S Detergent compositions comprising metalloproteases
EP2888360B1 (en) 2012-08-22 2017-10-25 Novozymes A/S Metalloproteases from alicyclobacillus sp.
US9745543B2 (en) 2012-09-10 2017-08-29 Ecolab Usa Inc. Stable liquid manual dishwashing compositions containing enzymes
EP3556836A1 (en) 2012-12-07 2019-10-23 Novozymes A/S Preventing adhesion of bacteria
CA2893270C (en) 2012-12-11 2024-01-02 Danisco Us Inc. Trichoderma reesei host cells expressing a glucoamylase from aspergillus fumigatus and methods of use thereof
CN102965359B (zh) * 2012-12-12 2014-07-09 江南大学 一种耐酸性淀粉酶突变体及其制备方法和应用
WO2014090940A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Novozymes A/S Removal of skin-derived body soils
US20140179585A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 The Procter & Gamble Company Detergent composition with silicate coated bleach
ES2655032T3 (es) 2012-12-21 2018-02-16 Novozymes A/S Polipéptidos que poseen actividad proteasa y polinucleótidos que los codifican
EP3321360A3 (en) 2013-01-03 2018-06-06 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
JP6251296B2 (ja) 2013-03-05 2017-12-20 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 混合糖組成物
US20160024440A1 (en) 2013-03-14 2016-01-28 Novozymes A/S Enzyme and Inhibitor Containing Water-Soluble Films
MX360759B (es) 2013-03-21 2018-11-15 Novozymes As Polipeptidos con actividades lipasa y polinucleotidos que los codifican.
AU2014241193B2 (en) 2013-03-28 2016-10-20 The Procter And Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
CN105164147B (zh) 2013-04-23 2020-03-03 诺维信公司 具有稳定的枯草杆菌蛋白酶的液体自动餐具清洗洗涤剂组合物
EP3461881A1 (en) 2013-05-03 2019-04-03 Novozymes A/S Microencapsulation of detergent enzymes
CN105209612A (zh) 2013-05-14 2015-12-30 诺维信公司 洗涤剂组合物
EP2997143A1 (en) 2013-05-17 2016-03-23 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
EP3699256A1 (en) 2013-05-28 2020-08-26 The Procter & Gamble Company Surface treatment compositions comprising photochromic dyes
CN105492603B (zh) 2013-05-29 2022-06-03 丹尼斯科美国公司 新型金属蛋白酶
JP6367930B2 (ja) 2013-05-29 2018-08-01 ダニスコ・ユーエス・インク 新規メタロプロテアーゼ
WO2014194032A1 (en) 2013-05-29 2014-12-04 Danisco Us Inc. Novel metalloproteases
EP3260538B1 (en) 2013-05-29 2021-04-14 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3004313A1 (en) 2013-05-30 2016-04-13 Novozymes A/S Particulate enzyme composition
EP3786269A1 (en) 2013-06-06 2021-03-03 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2014198840A1 (en) 2013-06-12 2014-12-18 Earth Alive Clean Technologies Inc. Dust suppressant
EP3013955A1 (en) 2013-06-27 2016-05-04 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
WO2014207227A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US20160152925A1 (en) 2013-07-04 2016-06-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Anti-Redeposition Effect and Polynucleotides Encoding Same
EP2832853A1 (en) 2013-07-29 2015-02-04 Henkel AG&Co. KGAA Detergent composition comprising protease variants
CN117904081A (zh) 2013-07-29 2024-04-19 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
EP3027747B1 (en) 2013-07-29 2018-02-07 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
CN105555935A (zh) 2013-09-18 2016-05-04 宝洁公司 包含羧化物染料的衣物洗涤护理组合物
CN105555936A (zh) 2013-09-18 2016-05-04 宝洁公司 包含羧化物染料的衣物洗涤护理组合物
US9834682B2 (en) 2013-09-18 2017-12-05 Milliken & Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
JP6185182B2 (ja) 2013-09-18 2017-08-23 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー チオフェンアゾカルボキシレート染料を含有する洗濯ケア組成物
WO2015049370A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Novozymes A/S Detergent composition and use of detergent composition
EP2857487A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857486A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857485A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising alkanolamine-free cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
ES2723948T3 (es) 2013-12-13 2019-09-04 Danisco Us Inc Serina proteasas procedentes de especies de Bacillus
CN106029881B (zh) 2013-12-13 2023-01-10 丹尼斯科美国公司 吉氏芽孢杆菌-进化枝的丝氨酸蛋白酶
KR20160099629A (ko) 2013-12-16 2016-08-22 이 아이 듀폰 디 네모아 앤드 캄파니 점도 조절제로서의 폴리 알파-1,3-글루칸 에테르의 사용
US9957334B2 (en) 2013-12-18 2018-05-01 E I Du Pont De Nemours And Company Cationic poly alpha-1,3-glucan ethers
EP3453757B1 (en) 2013-12-20 2020-06-17 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
CN103834606A (zh) * 2014-01-16 2014-06-04 北京中科星冠生物技术有限责任公司 一种表达耐酸高温α-淀粉酶基因突变体的工程菌株
EP3097172A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
EP3097175B1 (en) 2014-01-22 2018-10-17 The Procter and Gamble Company Fabric treatment composition
EP3097174A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
WO2015112339A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Fabric treatment composition
CA2841024C (en) 2014-01-30 2017-03-07 The Procter & Gamble Company Unit dose article
EP3105256A1 (en) 2014-02-14 2016-12-21 E. I. du Pont de Nemours and Company Poly-alpha-1,3-1,6-glucans for viscosity modification
US9994497B2 (en) 2014-02-25 2018-06-12 The Procter & Gamble Company Process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
US10752562B2 (en) 2014-02-25 2020-08-25 The Procter & Gamble Company Process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
EP3114272A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Novozymes A/S Compositions and methods for improving properties of cellulosic textile materials with xyloglucan endotransglycosylase
WO2015134729A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Novozymes A/S Compositions and methods for improving properties of non-cellulosic textile materials with xyloglucan endotransglycosylase
CN106132997A (zh) 2014-03-11 2016-11-16 纳幕尔杜邦公司 作为洗涤剂助洗剂的氧化的聚α‑1，3‑葡聚糖
JP6585698B2 (ja) 2014-03-21 2019-10-02 ダニスコ・ユーエス・インク バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種のセリンプロテアーゼ
EP3122850A1 (en) 2014-03-27 2017-02-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
WO2015148890A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
JP6275864B2 (ja) 2014-03-27 2018-02-07 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー ポリエーテルアミンを含有する洗浄組成物
EP2924108A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP2924105A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
US20170015950A1 (en) 2014-04-01 2017-01-19 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
US10131863B2 (en) 2014-04-11 2018-11-20 Novozymes A/S Detergent composition
EP3140384B1 (en) 2014-05-06 2024-02-14 Milliken & Company Laundry care compositions
EP3760713A3 (en) 2014-05-27 2021-03-31 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
CN106459937A (zh) 2014-05-27 2017-02-22 诺维信公司 用于产生脂肪酶的方法
EP3152288A1 (en) 2014-06-06 2017-04-12 The Procter & Gamble Company Detergent composition comprising polyalkyleneimine polymers
US20170121695A1 (en) 2014-06-12 2017-05-04 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CN113528489A (zh) 2014-06-12 2021-10-22 诺维信公司 α-淀粉酶变体
CN106661563A (zh) * 2014-06-12 2017-05-10 诺维信公司 氧化稳定的α‑淀粉酶变体
EP3158043B1 (en) 2014-06-19 2021-03-10 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
US9714403B2 (en) 2014-06-19 2017-07-25 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
CN106471110A (zh) 2014-07-03 2017-03-01 诺维信公司 改进的非蛋白酶类酶稳定化
CN106661566A (zh) 2014-07-04 2017-05-10 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP3739029A1 (en) 2014-07-04 2020-11-18 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US9617502B2 (en) 2014-09-15 2017-04-11 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing salts of polyetheramines and polymeric acid
US9487739B2 (en) 2014-09-25 2016-11-08 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
US20160090552A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing a polyetheramine and an anionic soil release polymer
US9388368B2 (en) 2014-09-26 2016-07-12 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
CN107108919A (zh) 2014-10-03 2017-08-29 蒙诺苏尔有限公司 可降解材料和由可降解材料制造的包装
DK3207129T3 (da) 2014-10-17 2020-02-24 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus-arten
EP3212782B1 (en) 2014-10-27 2019-04-17 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069552A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases
US20170335306A1 (en) 2014-10-27 2017-11-23 Danisco Us Inc. Serine proteases
CN107148472A (zh) 2014-10-27 2017-09-08 丹尼斯科美国公司 芽孢杆菌属物种的丝氨酸蛋白酶
EP3212783A1 (en) 2014-10-27 2017-09-06 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016081437A1 (en) 2014-11-17 2016-05-26 The Procter & Gamble Company Benefit agent delivery compositions
WO2016079110A2 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Novozymes A/S Use of enzyme for cleaning
US10287562B2 (en) 2014-11-20 2019-05-14 Novoszymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
EP3227444B1 (en) 2014-12-04 2020-02-12 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
MX2017007103A (es) 2014-12-05 2017-08-24 Novozymes As Variantes de lipasa y polinucleotidos que las codifican.
EP3234121A1 (en) 2014-12-15 2017-10-25 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
US20180000076A1 (en) 2014-12-16 2018-01-04 Novozymes A/S Polypeptides Having N-Acetyl Glucosamine Oxidase Activity
EP3034591A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
PL3034588T3 (pl) 2014-12-17 2019-09-30 The Procter And Gamble Company Kompozycja detergentu
EP3034596B2 (en) 2014-12-17 2021-11-10 The Procter & Gamble Company Detergent composition
EP3034597A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034589A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034590A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
EP3034592A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
CN107002061A (zh) 2014-12-19 2017-08-01 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
US10400230B2 (en) 2014-12-19 2019-09-03 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
AU2015369965B2 (en) 2014-12-23 2020-01-30 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Enzymatically produced cellulose
EP3075832B1 (en) 2015-03-30 2021-04-14 Dalli-Werke GmbH & Co. KG Manganese-amino acid compounds in cleaning compositions
CN107567489A (zh) 2015-04-10 2018-01-09 诺维信公司 衣物洗涤方法，dna酶和洗涤剂组合物的用途
EP3280800A1 (en) 2015-04-10 2018-02-14 Novozymes A/S Detergent composition
CN107624127A (zh) 2015-04-29 2018-01-23 宝洁公司 处理织物的方法
CN107548415A (zh) 2015-04-29 2018-01-05 宝洁公司 洗涤织物的方法
DK3088502T3 (en) 2015-04-29 2018-08-13 Procter & Gamble PROCEDURE FOR TREATING A TEXTILE SUBSTANCE
DK3088503T3 (en) 2015-04-29 2018-08-20 Procter & Gamble PROCEDURE FOR TREATING A TEXTILE SUBSTANCE
DK3088506T3 (en) 2015-04-29 2018-08-13 Procter & Gamble detergent
JP6866302B2 (ja) 2015-05-04 2021-04-28 ミリケン・アンド・カンパニーＭｉｌｌｉｋｅｎ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ ランドリーケア組成物中の青味剤としてのロイコトリフェニルメタン色素
AR104783A1 (es) 2015-05-08 2017-08-16 Novozymes As VARIANTES DE a-AMILASA Y POLINUCLEÓTIDOS QUE LAS CODIFICAN
EP3964575A3 (en) 2015-05-08 2022-09-28 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP4219704A3 (en) 2015-05-13 2023-08-23 Danisco US Inc Aprl-clade protease variants and uses thereof
WO2016184944A1 (en) 2015-05-19 2016-11-24 Novozymes A/S Odor reduction
EP3287513A1 (en) 2015-06-04 2018-02-28 The Procter & Gamble Company Hand dishwashing liquid detergent composition
ES2670044T3 (es) 2015-06-04 2018-05-29 The Procter & Gamble Company Composición detergente líquida para lavado de vajillas a mano
EP3101102B2 (en) 2015-06-05 2023-12-13 The Procter & Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101100B1 (en) 2015-06-05 2018-02-07 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101107B1 (en) 2015-06-05 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101103B1 (en) 2015-06-05 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
WO2016201040A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc. Water-triggered enzyme suspension
WO2016201069A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc Low-density enzyme-containing particles
WO2016201044A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc Osmotic burst encapsulates
WO2016202739A1 (en) 2015-06-16 2016-12-22 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
CN107922095A (zh) 2015-06-17 2018-04-17 诺维信公司 容器
WO2016205755A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
EP3106508B1 (en) 2015-06-18 2019-11-20 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
US11162089B2 (en) 2015-06-18 2021-11-02 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
WO2016135351A1 (en) 2015-06-30 2016-09-01 Novozymes A/S Laundry detergent composition, method for washing and use of composition
CA2987160C (en) 2015-07-01 2022-12-13 Novozymes A/S Methods of reducing odor
CN107969136B (zh) 2015-07-06 2021-12-21 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码它们的多核苷酸
ES2794837T3 (es) 2015-09-17 2020-11-19 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones detergentes que comprenden polipéptidos que tienen actividad degradante de xantano
CN108350443B (zh) 2015-09-17 2022-06-28 诺维信公司 具有黄原胶降解活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
WO2017060493A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Novozymes A/S Polypeptides
BR112018007474A2 (pt) 2015-10-14 2018-10-30 Novozymes A/S ?limpeza de membranas de filtração de água?
CN108291215A (zh) 2015-10-14 2018-07-17 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
EP4324919A2 (en) 2015-10-14 2024-02-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
CN109072208A (zh) 2015-11-05 2018-12-21 丹尼斯科美国公司 类芽孢杆菌属物种甘露聚糖酶
CN108603183B (zh) 2015-11-05 2023-11-03 丹尼斯科美国公司 类芽孢杆菌属物种和芽孢杆菌属物种甘露聚糖酶
EP3374488B1 (en) 2015-11-13 2020-10-14 DuPont Industrial Biosciences USA, LLC Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
US10844324B2 (en) 2015-11-13 2020-11-24 Dupont Industrial Biosciences Usa, Llc Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
US10822574B2 (en) 2015-11-13 2020-11-03 Dupont Industrial Biosciences Usa, Llc Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
EP3380608A1 (en) 2015-11-24 2018-10-03 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
EP3173467A1 (en) 2015-11-26 2017-05-31 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising enzymes
WO2017093318A1 (en) 2015-12-01 2017-06-08 Novozymes A/S Methods for producing lipases
PL3387125T3 (pl) 2015-12-07 2023-01-09 Henkel Ag & Co. Kgaa Kompozycje do mycia naczyń zawierające polipeptydy posiadające aktywność beta-glukanazy oraz ich zastosowania
CA3005292A1 (en) 2015-12-09 2017-06-15 Basf Se Method of purifying a protein from fermentation solids under desorbing conditions
BR112018012020A2 (pt) 2015-12-18 2018-12-04 Danisco Us Inc polipeptídeos com atividade de endoglucanase e usos dos mesmos
US20190002819A1 (en) 2015-12-28 2019-01-03 Novozymes Bioag A/S Heat priming of bacterial spores
WO2017114891A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Novozymes A/S Enzyme variants and polynucleotides encoding the same
JP2019504625A (ja) 2016-01-29 2019-02-21 ノボザイムス アクティーゼルスカブ β−グルカナーゼ変異体およびこれをコードするポリヌクレオチド
BR112018069220A2 (pt) 2016-03-23 2019-01-22 Novozymes As uso de polipeptídeo que tem atividade de dnase para tratamento de tecidos
WO2017174769A2 (en) 2016-04-08 2017-10-12 Novozymes A/S Detergent compositions and uses of the same
WO2017186943A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
CN109415421B (zh) 2016-05-03 2023-02-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体以及编码它们的多核苷酸
WO2017192692A1 (en) 2016-05-03 2017-11-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
US20190136218A1 (en) 2016-05-05 2019-05-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
CN109312319B (zh) 2016-05-09 2023-05-16 诺维信公司 具有改善的性能的变体多肽及其用途
WO2017205337A1 (en) 2016-05-23 2017-11-30 Dupont Nutrition Biosciences Aps Baking process and a method thereof
JP2019523645A (ja) 2016-05-31 2019-08-29 ダニスコ・ユーエス・インク プロテアーゼ変異体およびその使用
WO2017210188A1 (en) 2016-05-31 2017-12-07 Novozymes A/S Stabilized liquid peroxide compositions
CA3024276A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3257931A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 The Procter and Gamble Company Detergent composition
CA3027745A1 (en) 2016-06-17 2017-12-21 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
US11001787B2 (en) 2016-06-23 2021-05-11 Novozymes A/S Use of enzymes, composition and method for removing soil
WO2018002261A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Novozymes A/S Detergent compositions
WO2018007435A1 (en) 2016-07-05 2018-01-11 Novozymes A/S Pectate lyase variants and polynucleotides encoding same
WO2018007573A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Novozymes A/S Detergent compositions with galactanase
WO2018011276A1 (en) 2016-07-13 2018-01-18 The Procter & Gamble Company Bacillus cibi dnase variants and uses thereof
MX2019000621A (es) 2016-07-14 2019-08-01 Basf Se Medio de fermentacion que comprende agente quelante.
EP4357453A2 (en) 2016-07-18 2024-04-24 Novozymes A/S Lipase variants, polynucleotides encoding same and the use thereof
PL3284805T3 (pl) 2016-08-17 2020-07-13 The Procter & Gamble Company Kompozycja czyszcząca zawierająca enzymy
CA3032248A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
EP3504331A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising xanthan lyase variants i
WO2018037062A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018037065A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising gh9 endoglucanase variants i
WO2018060216A1 (en) 2016-09-29 2018-04-05 Novozymes A/S Use of enzyme for washing, method for washing and warewashing composition
US20190284647A1 (en) 2016-09-29 2019-09-19 Novozymes A/S Spore Containing Granule
EP3532592A1 (en) 2016-10-25 2019-09-04 Novozymes A/S Detergent compositions
WO2018085390A1 (en) 2016-11-01 2018-05-11 Milliken & Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
CA3038855A1 (en) 2016-11-01 2018-05-11 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
JP6790257B2 (ja) 2016-11-01 2020-11-25 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケア組成物における青味剤としてのロイコ着色剤、その包装、キット及び方法
EP3535377B1 (en) 2016-11-01 2022-02-09 Novozymes A/S Multi-core granules
US20180119056A1 (en) 2016-11-03 2018-05-03 Milliken & Company Leuco Triphenylmethane Colorants As Bluing Agents in Laundry Care Compositions
US20190264138A1 (en) 2016-11-07 2019-08-29 Danisco Us Inc. Laundry detergent composition
RU2019120191A (ru) 2016-12-01 2021-01-11 Басф Се Стабилизация ферментов в композициях
CN110088261B (zh) 2016-12-02 2022-05-06 宝洁公司 包含酶的清洁组合物
US10550443B2 (en) 2016-12-02 2020-02-04 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
CA3044420C (en) 2016-12-02 2022-03-22 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
WO2018108865A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Novozymes A/S Use of polypeptides
CN110312795A (zh) 2016-12-21 2019-10-08 丹尼斯科美国公司 蛋白酶变体及其用途
CN110312794B (zh) 2016-12-21 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶
CA3051426C (en) 2017-02-01 2023-10-17 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants
US11866713B2 (en) 2017-02-24 2024-01-09 Danisco Us Inc. Compositions and methods for increased protein production in bacillus licheniformis
EP3583210B1 (en) 2017-03-15 2021-07-07 Danisco US Inc. Trypsin-like serine proteases and uses thereof
CN110662836B (zh) 2017-03-31 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶组合变体
WO2018177938A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
WO2018177936A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
CN110651039A (zh) 2017-03-31 2020-01-03 诺维信公司 具有rna酶活性的多肽
US20200040283A1 (en) 2017-03-31 2020-02-06 Danisco Us Inc Delayed release enzyme formulations for bleach-containing detergents
BR112019020772A2 (pt) 2017-04-03 2020-04-28 Novozymes As processo de recuperação
WO2018185150A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Novozymes A/S Polypeptides
CN110651029B (zh) 2017-04-04 2022-02-15 诺维信公司 糖基水解酶
US20200109352A1 (en) 2017-04-04 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptide compositions and uses thereof
ES2728758T3 (es) 2017-04-05 2019-10-28 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones de detergente que comprenden mananasas bacterianas
EP3385362A1 (en) 2017-04-05 2018-10-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising fungal mannanases
CA3058520A1 (en) 2017-04-06 2018-10-11 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
WO2018184818A1 (en) 2017-04-06 2018-10-11 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3607043A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3607044A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
BR112019020960A2 (pt) 2017-04-06 2020-05-05 Novozymes As composições de limpeza e seus usos
EP3478811B1 (en) 2017-04-06 2019-10-16 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3607042A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
US10968416B2 (en) 2017-04-06 2021-04-06 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2018202846A1 (en) 2017-05-05 2018-11-08 Novozymes A/S Compositions comprising lipase and sulfite
CA3058092A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
EP3401385A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain
CA3058095A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018224544A1 (en) 2017-06-08 2018-12-13 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having cellulase activity and amylase activity, and uses thereof in cleaning and detergent compositions
EP3415592A1 (en) 2017-06-15 2018-12-19 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose article comprising a solid laundry detergent composition
EP3645692A1 (en) 2017-06-30 2020-05-06 Novozymes A/S Enzyme slurry composition
WO2019006077A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Danisco Us Inc PARTICLES CONTAINING LOW AGGLOMERATION ENZYME
CN111032856A (zh) 2017-08-07 2020-04-17 诺维信公司 基于pH的FCA控制的用途
CN111212906B (zh) 2017-08-18 2024-02-02 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶变体
EP3655537A1 (en) 2017-08-23 2020-05-27 Danisco US Inc. Methods and compositions for efficient genetic modifications of bacillus licheniformis strains
EP3673058A1 (en) 2017-08-24 2020-07-01 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
WO2019038060A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Henkel Ag & Co. Kgaa DETERGENT COMPOSITION COMPRISING XANTHANE LYASE II VARIANTS
WO2019038059A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Henkel Ag & Co. Kgaa DETERGENT COMPOSITIONS COMPRISING GH9 ENDOGLUCANASE VARIANTS II
WO2019038057A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novozymes A/S VARIANTS OF XANTHANE LYASE AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THE SAME
CN111094576A (zh) 2017-09-13 2020-05-01 丹尼斯科美国公司 用于增加芽胞杆菌属中蛋白质产生的经修饰的5′-非翻译区(utr)序列
CN111247235A (zh) 2017-09-20 2020-06-05 诺维信公司 酶改善吸水性和/或白度的用途
US11414814B2 (en) 2017-09-22 2022-08-16 Novozymes A/S Polypeptides
CN111108195A (zh) 2017-09-27 2020-05-05 宝洁公司 包含脂肪酶的洗涤剂组合物
US11332725B2 (en) 2017-09-27 2022-05-17 Novozymes A/S Lipase variants and microcapsule compositions comprising such lipase variants
US11732221B2 (en) 2017-10-02 2023-08-22 Novozymes A/S Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same
WO2019068713A1 (en) 2017-10-02 2019-04-11 Novozymes A/S POLYPEPTIDES HAVING MANNANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THESE POLYPEPTIDES
MX2020003103A (es) 2017-10-12 2020-07-28 Procter & Gamble Colorantes leuco como agentes de azulado en composicion para el cuidado de la ropa.
BR112020006988A2 (pt) 2017-10-12 2020-10-06 The Procter & Gamble Company colorantes leucos em combinação com um segundo agente branqueador como agentes de azulamento em composições para cuidado na lavagem de roupas
WO2019075148A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 The Procter & Gamble Company LEUCO-COLORANTS AS AZURING AGENTS IN LAUNDRY CARE COMPOSITIONS
TWI715878B (zh) 2017-10-12 2021-01-11 美商美力肯及公司 隱色著色劑及組成物
US20200318037A1 (en) 2017-10-16 2020-10-08 Novozymes A/S Low dusting granules
CN111448302A (zh) 2017-10-16 2020-07-24 诺维信公司 低粉化颗粒
WO2019076800A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 Novozymes A/S CLEANING COMPOSITIONS AND USES THEREOF
EP3701001A1 (en) 2017-10-24 2020-09-02 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having mannanase activity
HUE057471T2 (hu) 2017-10-27 2022-05-28 Procter & Gamble Polipeptid-variánsokat tartalmazó mosószerkészítmények
EP3701016A1 (en) 2017-10-27 2020-09-02 Novozymes A/S Dnase variants
EP3704193A1 (en) 2017-11-01 2020-09-09 Milliken & Company Leuco compounds, colorant compounds, and compositions containing the same
CN111527190A (zh) 2017-11-01 2020-08-11 诺维信公司 多肽以及包含此类多肽的组合物
DE102017125558A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine i enthalten
WO2019086532A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Novozymes A/S Methods for cleaning medical devices
CN111479919A (zh) 2017-11-01 2020-07-31 诺维信公司 多肽以及包含此类多肽的组合物
DE102017125559A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine ii enthalten
DE102017125560A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine iii enthalten
WO2019089898A1 (en) 2017-11-02 2019-05-09 Danisco Us Inc Freezing point depressed solid matrix compositions for melt granulation of enzymes
EP3707255A1 (en) 2017-11-09 2020-09-16 Basf Se Coatings of enzyme particles comprising organic white pigments
EP3717643A1 (en) 2017-11-29 2020-10-07 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
US11725197B2 (en) 2017-12-04 2023-08-15 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
MX2020006518A (es) 2017-12-21 2020-10-28 Danisco Us Inc Gránulos de fusión en caliente, que contienen enzimas, que comprenden un desecante termotolerante.
EP3735478B1 (en) 2018-01-03 2023-08-16 Danisco US Inc. Mutant and genetically modified bacillus cells and methods thereof for increased protein production
MX2020008302A (es) 2018-02-08 2020-10-14 Danisco Us Inc Partículas de matriz de cera térmicamente resistentes para encapsulación de enzimas.
EP3749761A1 (en) 2018-02-08 2020-12-16 Novozymes A/S Lipases, lipase variants and compositions thereof
US20210071156A1 (en) 2018-02-08 2021-03-11 Novozymes A/S Lipase Variants and Compositions Thereof
EP3755793A1 (en) 2018-02-23 2020-12-30 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants
US20190264140A1 (en) 2018-02-28 2019-08-29 The Procter & Gamble Company Methods of cleaning
CN111801409A (zh) 2018-02-28 2020-10-20 宝洁公司 清洁组合物
CN111770788B (zh) 2018-03-13 2023-07-25 诺维信公司 使用氨基糖低聚物进行微囊化
WO2019180111A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
WO2019185726A1 (en) 2018-03-29 2019-10-03 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
CN112262207B (zh) 2018-04-17 2024-01-23 诺维信公司 洗涤剂组合物中包含碳水化合物结合活性的多肽及其在减少纺织品或织物中的褶皱的用途
CN112272701A (zh) 2018-04-19 2021-01-26 诺维信公司 稳定化的纤维素酶变体
EP3781680A1 (en) 2018-04-19 2021-02-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
CN112368375A (zh) 2018-04-26 2021-02-12 巴斯夫欧洲公司 脂肪酶
WO2019211143A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Basf Se Amylase enzymes
WO2019238761A1 (en) 2018-06-15 2019-12-19 Basf Se Water soluble multilayer films containing wash active chemicals and enzymes
US20210214703A1 (en) 2018-06-19 2021-07-15 Danisco Us Inc Subtilisin variants
WO2019245705A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
EP3814472A1 (en) 2018-06-28 2021-05-05 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3814473A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3814489A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
WO2020007863A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020007875A1 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
US20210253981A1 (en) 2018-07-06 2021-08-19 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020008024A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
MX2021001213A (es) 2018-07-31 2021-08-24 Danisco Us Inc Variantes de alfa-amilasas que tienen sustituciones de aminoácidos que bajan el pka del ácido general.
EP3844255A1 (en) 2018-08-30 2021-07-07 Danisco US Inc. Enzyme-containing granules
CN113166682A (zh) 2018-09-27 2021-07-23 丹尼斯科美国公司 用于医疗器械清洁的组合物
US20210340466A1 (en) 2018-10-01 2021-11-04 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
WO2020070209A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition
CN112969775A (zh) 2018-10-02 2021-06-15 诺维信公司 清洁组合物
WO2020070014A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition comprising anionic surfactant and a polypeptide having rnase activity
WO2020070009A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Endonuclease 1 ribonucleases for cleaning
WO2020070249A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning compositions
WO2020070199A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-mannan degrading activity and polynucleotides encoding same
EP3677676A1 (en) 2019-01-03 2020-07-08 Basf Se Compounds stabilizing amylases in liquids
CN112805377A (zh) 2018-10-05 2021-05-14 巴斯夫欧洲公司 在液体中稳定淀粉酶的化合物
CN112996894A (zh) 2018-10-11 2021-06-18 诺维信公司 清洁组合物及其用途
BR112021006967A2 (pt) 2018-10-12 2021-07-13 Danisco Us Inc. alfa-amilases com mutações que melhoram a estabilidade na presença de quelantes
EP3647397A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins iv
EP3647398A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins v
EP3887515A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2020114968A1 (en) 2018-12-03 2020-06-11 Novozymes A/S Powder detergent compositions
CN113302270A (zh) 2018-12-03 2021-08-24 诺维信公司 低pH粉末洗涤剂组合物
WO2020127775A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novozymes A/S Detergent pouch comprising metalloproteases
CN113366103A (zh) 2018-12-21 2021-09-07 诺维信公司 具有肽聚糖降解活性的多肽以及编码其的多核苷酸
CN114096676A (zh) 2019-02-20 2022-02-25 巴斯夫欧洲公司 用确定成分培养基和镁补料的芽孢杆菌工业发酵工艺
MX2021010109A (es) 2019-02-20 2021-09-21 Basf Se Proceso de fermentacion industrial para bacillus mediante el uso de un medio definido y una alimentacion de oligoelementos.
EP3702452A1 (en) 2019-03-01 2020-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions comprising two proteases
EP3942032A1 (en) 2019-03-21 2022-01-26 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP3947664A2 (en) 2019-03-25 2022-02-09 Basf Se Amylase enzymes
US20220162576A1 (en) 2019-03-25 2022-05-26 Basf Se Amylase enzymes
US20220169953A1 (en) 2019-04-03 2022-06-02 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucanase activity, polynucleotides encoding same and uses thereof in cleaning and detergent compositions
WO2020207944A1 (en) 2019-04-10 2020-10-15 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20220186151A1 (en) 2019-04-12 2022-06-16 Novozymes A/S Stabilized glycoside hydrolase variants
WO2020229480A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Basf Se Compounds stabilizing hydrolases in liquids
CN114174504A (zh) 2019-05-24 2022-03-11 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
EP3980517A1 (en) 2019-06-06 2022-04-13 Danisco US Inc. Methods and compositions for cleaning
EP3983425A1 (en) 2019-06-13 2022-04-20 Basf Se Method of recovering a protein from fermentation broth using a divalent cation
EP3986996A1 (en) 2019-06-24 2022-04-27 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants
JP2022538360A (ja) 2019-07-01 2022-09-01 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 酵素を安定化するためのペプチドアセタール
EP3994255A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
WO2021004830A1 (en) 2019-07-05 2021-01-14 Basf Se Industrial fermentation process for microbial cells using a fed-batch pre-culture
EP3997202A1 (en) 2019-07-12 2022-05-18 Novozymes A/S Enzymatic emulsions for detergents
US11891588B2 (en) 2019-07-31 2024-02-06 Ecolab Usa Inc. Personal protective equipment free delimer compositions o
EP4031560A1 (en) 2019-08-14 2022-07-27 Danisco US Inc Compositions and methods for increased protein production in bacillus licheniformis
US20220267748A1 (en) 2019-08-22 2022-08-25 Basf Se Amylase variants
WO2021037878A1 (en) 2019-08-27 2021-03-04 Novozymes A/S Composition comprising a lipase
CN114787329A (zh) 2019-08-27 2022-07-22 诺维信公司 洗涤剂组合物
EP4031644A1 (en) 2019-09-19 2022-07-27 Novozymes A/S Detergent composition
US20220340843A1 (en) 2019-10-03 2022-10-27 Novozymes A/S Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains
BR112022006082A2 (pt) 2019-10-18 2022-06-21 Basf Se Preparação enzimática, formulação de detergente, e, uso de pelo menos um diol
CN112680433B (zh) * 2019-10-18 2022-08-02 清华大学 一种利用嗜盐细菌生产并分泌蛋白的方法
WO2021080948A2 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Danisco Us Inc Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases
WO2021096857A1 (en) 2019-11-11 2021-05-20 Danisco Us Inc Compositions and methods for enhanced protein production in bacillus cells
WO2021105336A1 (en) 2019-11-29 2021-06-03 Basf Se Compositions comprising polymer and enzyme
WO2021115912A1 (en) 2019-12-09 2021-06-17 Basf Se Formulations comprising a hydrophobically modified polyethyleneimine and one or more enzymes
EP3835396A1 (en) 2019-12-09 2021-06-16 The Procter & Gamble Company A detergent composition comprising a polymer
WO2021122120A2 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning compositions comprising dispersins viii
WO2021122118A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning compositions comprising dispersins vi
AU2020410142A1 (en) 2019-12-20 2022-08-18 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning composition coprising a dispersin and a carbohydrase
CN114929848A (zh) 2019-12-20 2022-08-19 诺维信公司 稳定的液体无硼酶组合物
US20220411773A1 (en) 2019-12-20 2022-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
US20230340442A1 (en) 2020-01-15 2023-10-26 Danisco Us Inc. Compositions and methods for enhanced protein production in bacillus licheniformis
BR112022015120A2 (pt) 2020-01-29 2022-12-13 Unilever Ip Holdings B V Recipiente plástico transparente e processo de fabricação de recipiente plástico transparente
WO2021152123A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
EP4097226A1 (en) 2020-01-31 2022-12-07 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
EP3892708A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions comprising dispersin variants
EP4133066A1 (en) 2020-04-08 2023-02-15 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants
US20230167384A1 (en) 2020-04-21 2023-06-01 Novozymes A/S Cleaning compositions comprising polypeptides having fructan degrading activity
EP3907271A1 (en) 2020-05-07 2021-11-10 Novozymes A/S Cleaning composition, use and method of cleaning
US20230212548A1 (en) 2020-05-26 2023-07-06 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
EP4172298A1 (en) 2020-06-24 2023-05-03 Novozymes A/S Use of cellulases for removing dust mite from textile
EP3936593A1 (en) 2020-07-08 2022-01-12 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions and uses thereof
WO2022008732A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Basf Se Enhancing the activity of antimicrobial preservatives
EP4189051B1 (en) 2020-07-27 2024-02-28 Unilever IP Holdings B.V. Use of an enzyme and surfactant for inhibiting microorganisms
WO2022043321A2 (en) 2020-08-25 2022-03-03 Novozymes A/S Variants of a family 44 xyloglucanase
EP4204553A1 (en) 2020-08-27 2023-07-05 Danisco US Inc. Enzymes and enzyme compositions for cleaning
MX2023002095A (es) 2020-08-28 2023-03-15 Novozymes As Variantes de proteasa con solubilidad mejorada.
WO2022058322A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Novozymes A/S Animal feed comprising insects or insect meal
EP4217367A1 (en) 2020-09-22 2023-08-02 Basf Se Liquid composition comprising peptide aldehyde
BR112023005128A2 (pt) 2020-09-22 2023-04-25 Basf Se Composição, composição de detergente, método para prover uma composição de detergente com estabilidade e/ou desempenho de lavagem melhorados, e, uso de uma composição
CN116507725A (zh) 2020-10-07 2023-07-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体
WO2022084303A2 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Novozymes A/S Use of polypeptides having dnase activity
EP4237498A1 (en) 2020-10-27 2023-09-06 Milliken & Company Compositions comprising leuco compounds and colorants
EP4237525A1 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Novozymes A/S Use of lipoxygenase
BR112023008326A2 (pt) 2020-10-29 2023-12-12 Novozymes As Variantes de lipase e composições compreendendo tais variantes de lipase
CN116670261A (zh) 2020-11-13 2023-08-29 诺维信公司 包含脂肪酶的洗涤剂组合物
WO2022106400A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of immunochemically different proteases
WO2022106404A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of proteases
EP4006131A1 (en) 2020-11-30 2022-06-01 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric
EP4015629A1 (en) 2020-12-18 2022-06-22 Basf Se Polymer mixtures for increasing stability and performance of hydrolase-containing detergents
EP4032966A1 (en) 2021-01-22 2022-07-27 Novozymes A/S Liquid enzyme composition with sulfite scavenger
WO2022162043A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Novozymes A/S Lipase with low malodor generation
US20240117275A1 (en) 2021-01-29 2024-04-11 Danisco Us Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
EP4039806A1 (en) 2021-02-04 2022-08-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants with im-proved stability
EP4291625A1 (en) 2021-02-12 2023-12-20 Novozymes A/S Stabilized biological detergents
CN116829709A (zh) 2021-02-12 2023-09-29 诺维信公司 α-淀粉酶变体
JP2024508766A (ja) 2021-02-22 2024-02-28 ベーアーエスエフ・エスエー アミラーゼバリアント
WO2022178432A1 (en) 2021-02-22 2022-08-25 Danisco Us Inc. Methods and compositions for producing proteins of interest in pigment deficient bacillus cells
EP4047088A1 (en) 2021-02-22 2022-08-24 Basf Se Amylase variants
EP4305146A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Novozymes A/S Polypeptide variants
WO2022197634A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for biological sample processing
US20240060061A1 (en) 2021-03-15 2024-02-22 Novozymes A/S Dnase variants
EP4060036A1 (en) 2021-03-15 2022-09-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
EP4314222A1 (en) 2021-03-26 2024-02-07 Novozymes A/S Detergent composition with reduced polymer content
EP4086330A1 (en) 2021-05-06 2022-11-09 The Procter & Gamble Company Surface treatment
EP4359518A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
CN117616120A (zh) 2021-06-30 2024-02-27 丹尼斯科美国公司 变体脂肪酶及其用途
EP4123007A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Fabric treatment using bacterial spores
EP4123006A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and pro-perfume materials
WO2023023644A1 (en) 2021-08-20 2023-02-23 Danisco Us Inc. Polynucleotides encoding novel nucleases, compositions thereof and methods thereof for eliminating dna from protein preparations
CN117916354A (zh) 2021-09-03 2024-04-19 丹尼斯科美国公司 用于清洁的衣物洗涤组合物
WO2023039270A2 (en) 2021-09-13 2023-03-16 Danisco Us Inc. Bioactive-containing granules
WO2023114939A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023114988A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases
WO2023114936A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023116569A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 Novozymes A/S Composition comprising a lipase and a booster
WO2023117980A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 Basf Se Environmental attributes for plastic additives
EP4206309A1 (en) 2021-12-30 2023-07-05 Novozymes A/S Protein particles with improved whiteness
EP4234664A1 (en) 2022-02-24 2023-08-30 Evonik Operations GmbH Composition comprising glucolipids and enzymes
WO2023165507A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Novozymes A/S Use of xyloglucanase for improvement of sustainability of detergents
WO2023165950A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Novozymes A/S Dnase variants and compositions
WO2023187051A1 (en) 2022-03-30 2023-10-05 Basf Se Process for the production of a tertiary amine surfactant
WO2023187044A1 (en) 2022-03-30 2023-10-05 Basf Se Process for the production of a surfactant
WO2023194204A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Novozymes A/S Hexosaminidase variants and compositions
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
EP4279571A1 (en) 2022-05-19 2023-11-22 The Procter & Gamble Company Laundry composition comprising spores
WO2023233026A1 (en) 2022-06-03 2023-12-07 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry detergent product
WO2023247348A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2023250301A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Danisco Us Inc. Methods and compositions for cleaning comprising a polypeptide having thermolysin activity
WO2023247664A2 (en) 2022-06-24 2023-12-28 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising such lipase variants
WO2024012894A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Basf Se Alkanolamine formates for enzyme stabilization in liquid formulations
EP4321604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester
WO2024033136A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Amylase variants
WO2024033135A2 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Amylase variants

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR676456A (fr) * 1929-06-10 1930-02-24 Matières premières pour l'obtention de matières plastiques, de revêtements, de liants, etc., et procédés pour la fabrication de ces matières
US4284722A (en) 1978-08-16 1981-08-18 Cpc International Inc. Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same
US4261868A (en) 1979-08-08 1981-04-14 Lever Brothers Company Stabilized enzymatic liquid detergent composition containing a polyalkanolamine and a boron compound
US4493893A (en) 1981-01-15 1985-01-15 Cpc International Inc. Process for cloning the gene coding for a thermostable alpha-amylase into Escherichia coli and Bacillus subtilis
IE81141B1 (en) 1983-06-24 2000-04-05 Genencor Int Procaryotic carbonyl hydrolases
US4760025A (en) 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
GB8321923D0 (en) 1983-08-15 1983-09-14 Unilever Plc Machine-dishwashing compositions
US5346823A (en) * 1984-05-29 1994-09-13 Genencor, Inc. Subtilisin modifications to enhance oxidative stability
US4732973A (en) * 1984-06-14 1988-03-22 Chiron Corporation Active site modified protease α-1-antitrypsin inhibitors
US4634551A (en) 1985-06-03 1987-01-06 Procter & Gamble Company Bleaching compounds and compositions comprising fatty peroxyacids salts thereof and precursors therefor having amide moieties in the fatty chain
US4752585A (en) * 1985-12-17 1988-06-21 Cetus Corporation Oxidation-resistant muteins
US4863626A (en) * 1985-08-21 1989-09-05 The Clorox Company Encapsulated enzyme in dry bleach composition
EP0285123A3 (en) * 1987-04-03 1989-02-01 Stabra AG A method for complete mutagenesis of nucleic acids
US5118623A (en) * 1988-05-27 1992-06-02 Solvay Enzymes, Inc. Bleach stable enzymes
GB8900496D0 (en) 1989-01-10 1989-03-08 Procter & Gamble Liquid detergent composition containing enzyme and enzyme stabilization system
DE69028010T2 (de) 1989-06-29 1996-12-05 Gist Brocades Nv Mutiertes Enzym mit reduzierter Stabilität unter industriellen Anwendungsbedingungen
BR9006818A (pt) 1989-06-29 1991-08-06 Gist Brocades Nv Amilases microbianas mutantes com maior estabilidade termica,acida e/ou alcalina
DK97190D0 (da) * 1990-04-19 1990-04-19 Novo Nordisk As Oxidationsstabile detergentenzymer
DK271490D0 (da) 1990-11-14 1990-11-14 Novo Nordisk As Detergentkomposition
WO1992011286A1 (en) * 1990-12-21 1992-07-09 Allelix Biopharmaceuticals Inc. Oxidation resistant variants of parathyroid hormone
FR2676456A1 (fr) 1991-05-13 1992-11-20 Agronomique Inst Nat Rech Variants thermostables de l'alpha-amylase de bacillus licheniformis, leur procede de preparation et leur utilisation.
US5322778A (en) * 1991-10-31 1994-06-21 Genencor International, Inc. Liquefaction of granular starch slurries using an antioxidant with alpha amylase
ES2334590T3 (es) * 1992-07-23 2010-03-12 Novozymes A/S Alfa-amilasa mutante, detergente y agente de lavado de vajilla.

Also Published As

Publication number Publication date
FI20080005A (fi) 2008-01-07
AU6239294A (en) 1994-08-29
DE69415659T3 (de) 2010-05-12
EP0689589A1 (en) 1996-01-03
KR960701197A (ko) 1996-02-24
CN1118172A (zh) 1996-03-06
CA2155831A1 (en) 1994-08-18
EP0867504A1 (en) 1998-09-30
US5824532A (en) 1998-10-20
NO953147D0 (no) 1995-08-10
EP0867504B1 (en) 2003-05-02
ES2198617T5 (es) 2011-11-03
DE69432610T2 (de) 2004-04-01
ES2126743T5 (es) 2010-02-05
ATE239075T1 (de) 2003-05-15
DE69415659T2 (de) 1999-06-17
BR9405720A (pt) 1995-11-28
HUT72920A (en) 1996-06-28
DK0867504T4 (da) 2011-08-29
PT867504E (pt) 2003-08-29
US6297037B1 (en) 2001-10-02
FI953797A0 (fi) 1995-08-10
FI953797A (fi) 1995-08-10
NO953147L (no) 1995-09-28
NO307187B1 (no) 2000-02-21
CA2155831C (en) 2009-11-10
AU682863C (en) 2003-05-08
ES2126743T3 (es) 1999-04-01
HU9502364D0 (en) 1995-10-30
DK0867504T3 (da) 2003-08-25
ES2198617T3 (es) 2004-02-01
JPH08506491A (ja) 1996-07-16
PL310326A1 (en) 1995-12-11
KR100322793B1 (ko) 2002-06-20
CZ205795A3 (en) 1995-12-13
AU682863B2 (en) 1997-10-23
US5849549A (en) 1998-12-15
DK0689589T3 (da) 1999-08-30
EP0689589B1 (en) 1998-12-30
DE69432610T3 (de) 2012-04-12
HU219675B (hu) 2001-06-28
DE69415659D1 (de) 1999-02-11
FI119694B (fi) 2009-02-13
CN1104499C (zh) 2003-04-02
ATE175235T1 (de) 1999-01-15
FI122574B (fi) 2012-03-30
EP0689589B2 (en) 2009-09-02
EP0867504B2 (en) 2011-05-18
DE69432610D1 (de) 2003-06-05
NZ262623A (en) 1998-03-25
DK0689589T4 (da) 2010-01-04
WO1994018314A1 (en) 1994-08-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ293163B6 (cs) Mutanta alfa-amylázy, její použití, kódová DNA pro tuto mutantu, vektor pro expresi, hostitelské buňky, čisticí prostředek a prostředek pro zkapalnění škrobu
AU718509B2 (en) An improved laundry detergent composition comprising amylase
AU686007B2 (en) An improved cleaning composition
US20080026976A1 (en) Highly productive alpha-amylases
EP1065277B2 (en) Mutant alpha-amylases
JP4417532B2 (ja) 変異α−アミラーゼ

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20140210