CN1545382A - 加工人参的方法和加工过的人参提取物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及加工人参的方法和加工过的人参提取物的用途。更具体地,本发明涉及加工过的人参的提取物,其提高人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为10-45是由于通过将人参与下列草药混合而起到的协同作用:诸如五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬,和通过在70-120℃的温度加热含人参和前述草药成分的混合物加工人参的方法。
Description
【技术领域】
本发明涉及加工人参的方法及所加工过的人参的提取物的用途。更具体地,本发明涉及加工过的人参的提取物或加工过的人参的皂苷部分的提取物,其改善人参糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为10-45是由于通过将人参与下列草药混合而起到的协同作用:诸如五味子(Schizandrae Fructus)、山楂(Crataegi Fructus)、山茱萸(Corni Fructus)、木瓜(ChaenomelisFructus)、乌梅(Mume Fructus)、香橙(Citrus junos)、枳壳(Aurantii Fructus)、苹果、石榴和柠檬,和通过在70-120℃的温度加热含人参和前述草药成分的混合物加工人参的方法。
【背景技术】
人参是一种全球有名的强壮剂。因而,进行了大量的研究以便鉴别和描述其成分的特征以及所述成分的药理作用。这些研究揭示了人参具有多种治疗作用诸如预防衰老和动脉硬化;改善高脂血症、糖尿病、高血压、脑功能和肝功能;抗氧化;抗紧张(antistress);增强免疫反应;增进抗血栓形成作用;保护脑神经元;抗癌作用,等。近来,已报道红参含少量的Rg3,一种具有多种作用诸如舒张血管[J.Nat.Prod.63,1702(2000)]、抑制血小板凝集[Biol.Pharm.Bull.21,79(1998),Korean J.Ginseng Sci.21,132(1997)]、保护脑神经元[J.Neuroscience Res.53,426(1998),Neuro Report 9,226(1998)]的人参糖苷,同时人参糖苷Rg3、Rg5、Rh2和Rhl具有抗癌活性[Jpn.J.cancer Res.87,357(1996),J.cancer Res.Clin.Oncol.120,24(1993),Anticancer Res.17,1067(1997),CancerLetters 150,41(2000),Dietary Anticarcinogenesis andAntimutagenesis 274(2000)]。
为长期贮藏的目的,通常将鲜人参加工成白参和红参。已报道红参含微量人参糖苷诸如Rg3、Rg5、Rk1、Rh2和Rh1以及在鲜人参或白参中所不含的麦芽酚,因此赋予红参增进治疗作用。还发明了一种能够从鲜人参或白参制备红参提取物的设备(Korea Unexamined PatentPublication No.10-2001-19628)。另外,还有主要集中于通过增加在红参中所含少量的前述人参糖苷来增进药物作用的研究。
近来已经揭示“晒参”(sun ginseng),一种经过新方法加工的人参类型,其中将人参在120-180℃温度热处理,该温度明显高于在制造红参时所用温度,因此增加通常在常规红参中所含少量的重要的药物成分并产生新的成分,能增进存在的药物作用[J.NaturalProducts 63,1702,2000,Korea Patent No.192678]。然而,这种方法有几个缺点:需要特殊的设备诸如高压加热器和要求在比那些常规使用的温度高的温度高热处理因而导致人参的碳化,特别是在大量生产的时候。
【发明概述】
因此,本发明的目的是提供用于加工人参的新方法,其中所加工的人参的提取物能够明显增加有更加增进的药物作用的人参糖苷含量。在本发明中,发明人使人参与其他重要的草药混合,并将所得混合物在70-120℃加热,最终获得加工过的人参提取物,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率增加到10-45,优选为20-45,因此大幅度升高所加工过的人参的提取物的药物作用。例如,如此获得的按照本发明制备的加工过的人参提取物显示,与其他常规的人参的提取物相比血管舒张率增高约65-97倍。此外,在本发明中,将人参与选自下列至少一种草药混合:五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬,并在70-120℃的温度热处理,导致将基于原人参二醇(protopanaxadiol)皂苷转化成人参糖苷诸如Rg3、Rg5、Rk1,同时将基于原人参三醇(protopanaxatriol)皂苷转化成人参糖苷诸如Rg2、F4、Rh1等。
本发明的另一个目的是提供加工过的人参的皂苷部分的提取物和其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率增加到10-45,优选为20-45,伴随更加增进的药物作用的加工过的人参的皂苷部分的提取物。
本发明的再一个目的是提供含有前述所加工的人参的浓缩或稀释的提取物的补充健康饮料。
本发明的再一个目的是提供以片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂形式的含有前述所加工的人参的提取物的补充保健食品或药物。
【附图的简要说明】
本发明的前述各方面和其他特征将在下面的说明中结合附图解释,其中:
图1显示本发明加工过的人参的皂苷部分和常规人参的皂苷部分的薄层色谱(PG:Comp.Ex.4;GC:Ex.21;GS:Ex.22;RG:Comp.Ex.5;RGS:Ex.28);
图2显示本发明加工过的人参的皂苷部分和常规人参的皂苷部分的薄层色谱(1:Comp.Ex.4;2:Ex.22;3:Ex.21;4:Ex.23;5:Ex.24;6:Ex.25;7:Ex.26;8:Ex.27;9:Comp.Ex.5;10:Ex.28);
图3显示用白参加五味子或白参加山楂加工的人参的皂苷部分的高效液相色谱结果(PG-Q:Comp.Ex.4;GC-1:Ex.21;GS-1:Ex.22);和
图4显示按照本发明所加工的人参的皂苷部分、常规人参的皂苷部分和人参糖苷Rg3舒张血管的比较结果。
【发明的公开】
本发明涉及加工过的人参提取物或其皂苷部分的提取物,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为10-45。
本发明还涉及用于加工人参的新方法,其中将人参与选自下列至少一种草药混合:五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬的果实(Fructus),并将所得混合物在70-120℃的温度热处理。
本发明还涉及以多种形式制备的药物或保健食品,所述药物或保健食品含所加工的人参的前述提取物或其皂苷部分提取物作为活性成分,这基于下面的结果:所加工的人参或其皂苷部分提取物在治疗以及预防心血管病、勃起功能障碍、脑神经元和相关疾病、抗癌等方面是有效的。
本发明如下文所阐明进行更详细的描述。
在本发明中,对于使用的100份人参,关于选自下列组中至少一种,酸性天然草药的用量是10-1000份,所述组由五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬组成。在4-10倍重量于上述混合物重量的水存在下,将所选择的草药和人参混合并加热1-6小时,冷却到室温,过滤,浓缩并最终制备成提取物或粉末的形式。更具体地,在这个步骤中所使用的水量比上面的混合物在起初提取阶段时的水量高7-10倍。
加热的过程在70-120℃的温度,优选在所述成分的沸点进行。另外,使用工业用常规设备足以在没有进一步的必要的精密设备的情况下进行大规模商业生产。
加热过程所要求的时间为1-6小时,优选3-5小时。如果加热过程长于6小时,很可能将人参糖苷Rg3和Rg5分解,同时在提取物的总产出率方面将没有明显的变化。
如此获得的加工过的人参提取物可直接用于满足本发明的目的,然而,提取可进一步包括蒸发水的步骤,其后在乙醇或甲醇存在下加热提取1-3小时。引入醇提取过程将使获得更满意的结果变成可能,特别是当将其应用于为提高皂苷提取的产出率而设计的方法的时候。
如此获得的加工过的人参提取物通常含有源自草药和人参的无药物作用的杂质。因而,如此获得的加工过的人参的提取物可通过使用下面的步骤进一步纯化,包括:
通过使用二氯甲烷提取;
通过使用水饱和丁醇提取上述提取物的水相几次并合并丁醇提取物;
以水洗涤丁醇提取物;
浓缩上述丁醇提取物;且
将上述浓缩的丁醇提取物溶解在甲醇中。
上述步骤可增加目的皂苷部分提取物的纯度,从而可将这种纯化的皂苷部分提取物用于制造要求更高纯度皂苷的产品。
在本发明中所用人参的实例是鲜人参、白参、须人参(hairy rootginseng)、红参、人参(Panax ginseng)叶、西洋参、三七或Panaxjaponicus。
本发明中所用草药的实例是产生酸性性质的那些草药,诸如五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬。可将选自上述草药组中的至少一种作为混合处方与人参一起使用。
在上述的草药当中,五味子含多种木酚素且因而在以下方面显示作用:预防肝损伤、修复肝损伤、使肝功能正常化、加速胆汁酸的分泌,并还可用作主要与肺、肝和肾有关的抗菌剂、抗氧化剂、消化剂。另外,它还在缓解疲劳、缓解压力、缓解视疲劳和促进认知能力方面显示作用。
山楂具有帮助胃液分泌、抗菌活性的作用并延长抗高血压活性,因而可以用作健胃药以及治疗肠道疾病的制剂。另外,山楂还有扩张冠状动脉和降低胆固醇的作用,并因此用作促进血液循环药。
已知山茱萸具有诸如利尿、暂时性缓解高血压、抗菌活性、抗组胺活性的作用,并因此用作营养滋补剂、收敛剂和止血剂。
香橙用作香料同时枳壳是用作食物原料或草药的芳香健胃药。香橙和枳壳的果实含大量植物有机酸并因此可用作醋的代用品或除去鱼腥气的香料。
在上述草药中,乌梅具有抗菌活性、促进胃液分泌、促进精力恢复和止渴的作用,并因此用作收敛剂、镇咳祛痰剂、解热剂和驱虫剂。
在上述草药中,木瓜有助于身体新陈代谢并促进胃液的分泌。
在上述草药中,苹果富含维生素和矿物质,特别是纤维素,并因此是对肠道病症有效的制剂和镇静剂。
在上述草药中,已知石榴为滋补剂并有效预防高血压和动脉硬化。另外,石榴显示对腹泻、痢疾、胃痛、白带的治疗作用,也用作驱虫剂。
柠檬含大量维生素C并因此有助于缓解疲劳和保持健康皮肤。
如上面所述,本发明的特征在于,由于通过热提取由人参和至少一种下列草药组成的混合物导致的协同作用,将人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率改善到10-45,所述草药选自由五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬所组成的组。与单味人参的常规提取物不同,在本发明中加工过的人参的提取物在治疗和预防高血压、动脉硬化、血栓形成、勃起功能障碍、脑中风、记忆障碍、发挥抗癌活性和减轻抗癌药的副作用方面展示优良的药物作用。
此外,本发明还涉及药物和保健食品,包括作为活性成分的根据本发明制备的加工过的人参提取物或其皂苷部分提取物,且可通过常规制备工艺制造各种含加工过的人参提取物的药物、保健食品和其他食品添加剂。例如,通过使用常规添加剂诸如乳化剂、滑润剂、黏合剂、甜味剂、芳香剂可将上述药物制备成下列形式用于口服给药,所述药物形式包括片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、液体等,以及将上述药物制备成注射剂。
用在本发明中的用于制备加工过的人参提取物的人参和草药一直用作药物和食谱食品,且热处理不产生有害物质。因此,可安全服用加工过的人参的提取物或其皂苷部分的提取物。
成人优选每天服用2-4次,按照本发明每单剂量提取过的人参提取物或其皂苷部分提取物约100-1000mg。
当将提取过的人参提取物或其皂苷部分提取物用作食品添加剂,可将它们加入到饮料、片、颗粒、丸、香口胶和糖果形式的食品中。
如前所述,可将所加工过的人参提取物以多种制剂形式给药,并在促进勃起功能障碍、血液循环、缓解疲劳、高血压、动脉硬化的治疗、血栓形成的治疗、脑中风的治疗、增进脑功能方面显示作用,并且还显示抗癌活性和减轻抗癌药的副作用。
下面的实施例意在说明本发明,不过,不应该认为它们限制所附权利要求定义的本发明的范围。
【实施例】
实施例1
将2.5kg白参、1.5kg五味子和40L水在提取槽中混合在一起,并煮沸4小时(内部温度为120℃)。在蒸发除去20L水后,将所得混合物加入48L乙醇,煮沸2小时,冷却至室温并过滤(第一滤液)。
将所得残余物加入18L水和48L乙醇,加热沸腾3小时,冷却并过滤(第二滤液)。将第一和第二滤液合并所得的混合物浓缩直至其三分之一体积,喷雾干燥从而最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例2
将2.5kg白参和1.5kg山楂如实施例1中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例3
将50g须人参、30g五味子与700mL水混合并煮沸4小时。将所得混合物冷却至室温并过滤。然后将所得滤液真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物。
实施例4
将20g红参、15g五味子与300mL水混合并煮沸3小时。将所得混合物冷却至室温并过滤。然后将所得滤液真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物。
实施例5
将25g切碎的鲜人参、20g山楂与200mL水混合并煮沸4小时。将所得混合物冷却至室温并过滤。然后将所得滤液真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物。
实施例6
通过与实施例3中相同的方法用20g白参、25g木瓜与400mL水获得加工过的人参提取物。
实施例7
通过与实施例3中相同的方法用20g白参、15g乌梅果实与300mL水获得加工过的人参提取物。
实施例8
通过与实施例3中相同的方法用15g白参、15g香橙与200mL水获得加工过的人参提取物。
实施例9
通过与实施例3中相同的方法用15g红参、20g枳壳与300mL水获得加工过的人参提取物。
实施例10
相应地将20g西洋参和20g山茱萸;20g Panax japonicus和20g山楂;15g三七、20g干人参叶和15g五味子与350mL水混合,并煮沸4小时,其后通过蒸发将水蒸馏。然后,以400mL乙醇加入该混合物,并加热回馏2小时,且冷却至室温。将所得的混合物过滤,且将所得滤液真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物。
实施例11
将10g白参和10g山楂与200mL水混合,并煮沸1小时。在蒸发100mL水后,将保留的混合物煮沸3小时并通过蒸发除去剩余的水。然后,以400mL甲醇加入该混合物,并加热回馏1小时。将该混合物冷却,过滤,从而最终获得加工过的人参提取物。
实施例12
将10g白参和10g五味子如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例13
将10g白参和10g山茱萸如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例14
将10g白参和10g木瓜如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例15
将10g白参和10g乌梅果实如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例16
将10g白参和10g香橙如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例17
将10g白参和10g枳壳如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例18
将10g红参和10g五味子如实施例11中同样加工,最终获得加工过的人参提取物的粉末。
实施例19
将50g从实施例1获得的加工过的人参提取物溶解在350mL水中,然后用350mL二氯甲烷提取2次。用350mL水饱和的丁醇提取水层3次,并将所得提取物合并在一起。然后,将合并的提取物用350mL水洗涤。将丁醇层真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例20
将50g从实施例2获得的加工过的人参提取物溶解在350mL水中,然后用350mL二氯甲烷提取2次。用350mL水饱和的丁醇提取水层3次,并将所得提取物合并在一起。然后,将合并的提取物用350mL水洗涤。将丁醇层真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例21
将5.1g从实施例11获得的加工过的人参提取物溶解在50mL水中,然后用50mL二氯甲烷提取2次。用50mL水饱和的丁醇提取水层3次,并将所得提取物合并在一起。然后,将合并的提取物用50mL水洗涤。将丁醇层真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例22
将5.4g从实施例12获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例23
将5g从实施例13获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例24
将5.5g从实施例14获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例25
将4.8g从实施例15获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例26
将4.9g从实施例16获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例27
将5.1g从实施例17获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例28
将5.2g从实施例18获得的加工过的人参提取物按照与实施例21中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物皂苷部分。
实施例29
将15g白参、5g山楂和5g五味子与250mL水混合,并煮沸5小时。将该混合物冷却至室温并过滤。将滤液真空浓缩从而最终获得加工过的人参提取物。
实施例30
将15g白参、4g山茱萸、3g山楂和3g五味子按照与实施例29中相同方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物。
参照实施例1:片剂制备
将从实施例1获得的500g加工过的人参提取物粉末、196g结晶纤维素和4g硬脂酸镁彻底混合,根据常规制片方法制造700mg片剂。
参照实施例2:片剂制备
将从实施例2获得的500g加工过的人参提取物粉末、196g结晶纤维素和4g硬脂酸镁彻底混合,根据常规制片方法制造700mg片剂。
参照实施例3:硬胶囊剂制备
将从实施例1获得的100g加工过的人参提取物粉末、95g结晶纤维素和5g二氧化硅(SiO2)彻底混合,根据常规方法制造400mg硬胶囊剂。
参照实施例4:软胶囊剂制备
将从实施例1获得的200g加工过的人参提取物粉末、280g豆油、15g卵磷脂和5g黄蜡彻底混合,根据常规方法制造500mg软胶囊剂。
参照实施例5:颗粒剂制备
将从实施例2获得的500g加工过的人参提取物粉末、196g玉米淀粉、4g硬脂酸镁彻底混合,根据常规方法制造颗粒剂。
参照实施例6:丸剂制备
将从实施例2获得的300g加工过的人参提取物粉末、100g玉米淀粉、50g结晶纤维素和150g蜂蜜彻底混合,根据常规方法制造100mg丸剂。
参照实施例7:液体制备
将从实施例1获得的100g加工过的人参提取物粉末、20g浓缩红参提取物(人参皂苷140mg/g)、100g冬虫夏草、50g枣浓缩物(brix55)、2g维生素B1盐酸盐、1g维生素B2、2g维生素B6盐酸盐、200g糖溶解在纯水中至终末体积2L,最终制成液体制剂。
参照实施例8:饮料制备
将从实施例1获得的10g加工过的人参提取物粉末、1g柠檬酸、1g阿拉伯胶、5g糖溶解在纯水中至终末体积100mL。将上述混合物在95℃灭菌15秒钟,并冷却从而最终制成饮料。
对比实施例1
通过分别用2kg红参、5kg白参、5kg五味子和5kg山楂按照与实施例3中相同方法获得提取物粉末。
对比实施例2
将10g白参与200mL水混合并煮沸1小时。在蒸发100mL水后,将所得混合物煮沸3小时并通过蒸馏除去保留的水。然后,将该混合物加400mL甲醇并加热回流1小时,冷却,过滤从而最终获得加工过的人参提取物。
对比实施例3
将10g红参按照在对比实施例2中相同的方法加工,从而最终获得红参提取物。
对比实施例4
将3.4g从对比实施例2中获得的加工过的人参提取物溶解在50mL水中,然后用50mL二氯甲烷提取2次。用50mL水饱和丁醇提取水层3次,并将所得提取物合并在一起。然后,将所合并的提取物用50mL水洗涤。将丁醇层真空干燥,从而最终获得加工过的人参提取物的皂苷部分。
对比实施例5
将3.4g从对比实施例3中获得的加工过的红参提取物按照对比实施例4中相同的方法加工,从而最终获得加工过的人参提取物的皂苷部分。
对比实施例6:晒参的制备(Korean Pat.No.192678)
将加有5g白参和5mL水的40mL无菌容器放置在高压灭菌器中并在120℃加热2小时。收集5g加工过的人参,然后用100mL甲醇相应地提取3次。将所获提取物浓缩,悬浮在水中,然后用100mL乙醚相应地提取3次。将残余的水相用100mL丁醇相应地提取3次。将丁醇馏分浓缩,从而最终获得晒参提取物的皂苷部分。
对比实施例7:晒参的制备(Korean Pat.No.192678)
将加有5g白参和5mL水的40mL无菌容器放置在高压灭菌器中并在130℃加热2小时。收集5g加工过的人参,然后用100mL甲醇相应地提取3次。将所获提取物浓缩,悬浮在水中,然后用100mL乙醚相应地提取3次。将残余的水相用100mL丁醇相应地提取3次。将丁醇馏分浓缩,从而最终获得晒参提取物的皂苷部分。
对比实施例8:
通过用100mL甲醇加热回流3小时相应地将5g红参提取3次。将提取物浓缩,悬浮在水中,然后用100mL乙醚相应地提取3次。将水相用100mL丁醇相应地提取3次。将提取物合并,浓缩,从而最终获得红参提取物的皂苷部分。
参照对比实施例1
将350g白参提取物粉末、从对比实施例1中获得的210g五味子提取物、136g结晶纤维素和4g硬脂酸镁彻底混合,按照常规制片方法制造700mg片剂。
参照对比实施例2
将350g白参提取物粉末、从对比实施例1中获得的210g山楂提取物、136g结晶纤维素和4g硬脂酸镁彻底混合,按照常规制片方法制造700mg片剂。
参照对比实施例3
将从对比实施例1中获得的350g红参提取物粉末、246g结晶纤维素、100g玉米淀粉和4g硬脂酸镁彻底混合,按照常规制片方法制造700mg片剂。
实验实施例1
将从实施例21-28和对比实施例4-5中获得的皂苷部分提取物用薄层色谱(展开溶剂;氯仿∶甲醇∶水=15∶10∶2.5/彩色显影剂;在用10%硫酸喷雾后加热)(图1和2)。高效液相色谱(HPLC)优选使用Capcell pak MG C18(4.6×250mm),在203nm检测。通过使用溶剂(A)10%乙腈/水和(B)90%乙腈/水梯度洗脱实施分离,结果显示于图3。
如图1和2所显示,在对比实施例4和5中人参糖苷没有改变。不过,大多数人参糖苷变成在实施例21-28中有较少极性的糖苷。
如图3所显示,在对比实施例4(如PG-Q所示)中大多数人参糖苷变成在实施例21和22中的Rg3、Rg5、Rk1、Rf2、Rh1和F4(GS-1:实施例22,GC-1:实施例21)。峰1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13相应代表Rg1、Re、Rb 1、Rc、Rb2、Rd、Rg2、Rh1、F4、(20S)-Rg3、(20R)-Rg3、Rk1、Rg5。
将从实施例19-28和对比实施例4-7获得的皂苷部分提取物通过HPLC分析,且根据每个成分的峰值相关面积分析人参糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率,结果显示于下面表1中。
【表1】
皂苷部分提取物峰值相关面积比较
样品 | Rg3 | Rg5 | Rb1 | Rb2 | Rc | Rd | (Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd) |
Ex.19 | 27.35 | 29.90 | 0.12 | 1.01 | 0.14 | 0.11 | 41.48 |
Ex.20 | 28.84 | 31.31 | 0.10 | 1.20 | 0.17 | 0.10 | 38.31 |
Ex.21 | 24.40 | 26.43 | 0.61 | 0.71 | 2.27 | 0.61 | 12.10 |
Ex.22 | 25.63 | 28.63 | 0.22 | 1.61 | 0.30 | 0.20 | 23.28 |
Ex.23 | 26.12 | 28.94 | 0.28 | 1.48 | 0.40 | 0.34 | 22.02 |
Ex.24 | 27.63 | 29.80 | 1.22 | 1.50 | 1.54 | 1047 | 10.02 |
Ex.25 | 24.32 | 27.36 | 0.52 | 0.64 | 2.15 | 0.52 | 13.49 |
Ex.26 | 25.84 | 28.64 | 0.24 | 1.12 | 0.34 | 0.28 | 27.51 |
Ex.27 | 24.77 | 27.04 | 0.31 | 1.00 | 0.83 | 0.41 | 20.31 |
Ex.28 | 26.44 | 29.20 | 0.20 | 0.74 | 0.22 | 0.28 | 38.63 |
Comp.Ex.4 | 3.82 | 4.42 | 19.22 | 11.17 | 17.09 | 10.55 | 0.14 |
Comp.Ex.6 | 24.12 | 11.35 | 10.46 | 7.74 | 10.66 | 5.58 | 1.03 |
Comp.Ex.7 | 21.00 | 16.17 | 4.06 | 3.44 | 3.98 | 3.82 | 2.43 |
Comp.Ex.8 | 1.05 | 1.05 | 30.11 | 9.69 | 12.45 | 1.76 | 0.03 |
如上述表1所显示,按照本发明制备的加工过的人参提取物人参糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率范围为10-45,这远高于在对比实施例6和7中获得的那些皂苷,其中的比率范围为1.03-2.43。此外,尽管通过使用与实施例21和22相同草药获得在实施例19和20中制备的加工过的人参皂苷,在实施例19和20中制备的加工过的人参皂苷的人参糖苷(ginsenoside)(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率与在实施例21和22中获得的比率相比得到很大的增加,即使因为批量过程较大规模上也是如此。
实验实施例2:改善勃起功能障碍作用
将40名45-60岁勃起功能障碍的男性分成5组以致每组由8名男性组成。给他们服用在上述参照实施例1和2、参照对比实施例1、2和3制备的药物30天,每天3次,每次2片。给药的作用显示于表2中。
【表2】
加工过的人参提取物对改善勃起功能障碍的作用
分类 | 参照实施例1 | 参照实施例2 | 参照对比实施例1 | 参照对比实施例2 | 参照对比实施例3 |
显著改善 | 4男性 | 4男性 | 0男性 | 0男性 | 1男性 |
改善 | 2男性 | 2男性 | 1男性 | 1男性 | 2男性 |
小改善 | 1男性 | 1男性 | 1男性 | 1男性 | 1男性 |
无变化 | 1男性 | 1男性 | 6男性 | 6男性 | 4男性 |
患者总数 | 8男性 | 8男性 | 8男性 | 8男性 | 8男性 |
有效率(%) | 87.5 | 87.5 | 25 | 25 | 50 |
如表2所显示,施用了根据本发明如参照实施例1和2中获得的加工过的人参提取物的男性显示勃起功能障碍的改善为87.5%,同时在参照对比实施例1和2中获得的提取物无明显作用。还已知红参提取物(参照对比实施例3)有改善勃起功能障碍的治疗作用,不过,根据本发明制备的加工过的人参提取物在改善勃起功能障碍方面比常规人参提取物显示更好的作用。
实验实施例3:改善外周血循环作用
将40名45-60岁伴随轻微神经病症的男性糖尿病患者分成5组,使每组由8名男患者组成。给他们施用6片在上述参照实施例1和2、参照对比实施例1和2中制备的制剂,并相应在给药前、给药后的45和90分钟用激光多普勒血流仪(Laser Doppler Flowmetry)测量每个受试者右足的血流。安慰剂组给予通过用相同数量玉米淀粉制备的片剂。给药的作用显示于表3中。
【表3】
加工过的人参提取物改善血液循环的作用(单位:血流mL/min/100g细织)
分类 | 给药前 | 给药后45分钟 | 给药后90分钟 |
参照实施例1 | 4.1±1.5 | 5.5±1.8 | 6.2±2.0 |
参照实施例2 | 4.1±1.4 | 5.8±1.7 | 6.9±1.9 |
参照对比实施例1 | 4.0±1.6 | 4.2±1.5 | 4.6±1.6 |
参照对比实施例2 | 4.2±1.6 | 4.5±1.6 | 5.0±1.7 |
安慰剂组 | 4.2±1.5 | 4.1±1.4 | 4.3±1.6 |
如表3所显示,在实施例1和2的受试者中的血液循环分别明显增加51.2%和68.2%,同时在参照对比实施例1和2中的血液循环的增加相应只有15%和19%,因而说明根据本发明制备的加工过的人参提取物在促进血液循环方面的较好的作用。
实验实施例4:血管舒张作用比较
从SD大鼠分离胸主动脉并切割成2-3mm宽的环,极度小心以保持内皮完整。将动脉制备物悬于在有机浴中的线钩之间,所述有机浴含20ml Krebs’碳酸氢盐缓冲液(mM:NaCl,118;KCl,4.7;CaCl2,2.5;NaHCO3,25;MgSO4,1.2;KH2PO4,1.2;和葡萄糖,11.0),用气体混合物(95%O2,5%CO2)吹泡并于37℃保持。在2克的静止拉力下将动脉制备物进行平衡60分钟。用力移位换能器(Grass FT03,GrassIns.,Quincy,MA,USA)测量等张收缩反应,并显示在图表记录器上(Multicorder MC 6625,Hugo Sachs Electronic,March,Germany)。将动脉制备物用苯肾上腺素(PE,300nM)极限下预收缩。在收缩稳定后,加入乙酰胆碱(1μM)以确定内皮存在。然后,将动脉制备物洗涤3次45分钟,并以PE再激发。在PE后,反应达到稳定高度,全部化合物(1μM-1mM)累积加入到组织浴中。所用样品为在实施例21和22中和对比实施例4中获得的皂苷部分提取物。
如在图4所显示,根据本发明加工过的人参的皂苷部分提取物的血管舒张作用比对比实施例4中的高。例如,在实施例21(以黑圈表示)和实施例22(以空圈表示)中加工过的人参的皂苷部分提取物的血管舒张作用相应高于对比实施例4(以黑三角表示)的皂苷部分提取物的作用65倍和97倍。根据本发明制备的加工过的人参显示比在Korean专利第192678号和J.of Nature Products 63,1702,2000中公开的加工过的人参更好的药物作用。
实验实施例5:对高血压的作用
将患高血压的45-60岁的21名男性分成10人和11人的2组。一组给予在参照实施例2中制备的片剂30天,每次服用2片,每天3次;同时另一组给予在参照对比实施例2中制备的片剂,并测量血压。血压的测量结果显示于表4中。
【表4】
加工过的人参的降血压作用
患者 | 参照实施例2(服药前->服药后)(mmHg) | 变化(mmHg) | 患者 | 参照对比实施例2(服药前->服药后)(mmHg) | 变化(mmHg) |
1 | 148->120 | -28 | 12 | 160->162 | +2 |
2 | 150->128 | -22 | 13 | 170->170 | 0 |
3 | 178->150 | -28 | 14 | 166->164 | -2 |
4 | 160->146 | -14 | 15 | 158->143 | -15 |
5 | 162->130 | -32 | 16 | 156->154 | -2 |
6 | 154->126 | -28 | 17 | 150->148 | -2 |
7 | 158->130 | -28 | 18 | 160->143 | -17 |
8 | 166->146 | -20 | 19 | 172->170 | -2 |
9 | 180->144 | -36 | 20 | 160->164 | +4 |
10 | 170->168 | -2 | 21 | 154->160 | +6 |
11 | 158->140 | -18 |
如在表4中所显示,当对他们用药一个月的时候根据本发明的加工过的人参提取物降低90.9%高血压患者的收缩压,且导致的血压减少量为-14~-36mmHg,然而给予山楂提取物和常规人参提取物的混合物的患者显示只有20%的血压下降,同时剩余的80%没有显著改变,因而说明本发明加工过的人参提取物在降低收缩压方面的优越性。
实验实施例6:抗血小板凝集的作用
将从健康男性的鳃样静脉采集的血液(15%柠檬酸-柠檬酸盐-葡萄糖用作抗凝剂)于120×g离心15分钟以分离血浆。将所获血浆在500×g离心10分钟以获得血小板。将血小板悬浮为200百万个血小板/mL以获得洗涤血小板。加工过的人参提取物对由胶原诱导的血小板凝集的作用按与人参研究杂志(Journal of Ginseng Research)(vol.21,132,1997)相一致的方法测量,结果显示于表5中。
【表5】
加工过的人参提取物对胶原诱导的血小板凝集的抑制作用
组别 | IC50(μg/mL) |
实施例21 | 11.5±1.2 |
实施例22 | 9.4±1.4 |
对比实施例4 | 492.0±14.4 |
如表5所示,比较了50%抑制浓度(IC50),在对血小板凝集抑制作用方面,本发明的加工过的人参提取物显示比常规人参提取物(对比实施例4)的效能相应地高52倍和42倍,因而期望其成为治疗高血压、动脉硬化、脑中风等的强的候选者。
实验实施例7:对减轻抗癌药副作用的作用
测定本发明的加工过的人参提取物的皂苷部分对减轻由施用抗癌药顺铂导致的副作用,特别是降低肾功能方面的作用。将30只重约200g的SD大鼠分成5组使每组由6只大鼠组成,除对照组注射盐水之外,腹膜内注射5mg/kg/mL顺铂溶液。分别地,将在实施例22和对比实施例4中获得的300mg/kg皂苷部分提取物在顺铂给药前72、48、24、12小时腹膜内注射(治疗前组),在顺铂给药后12、24、48、72小时同样腹膜内注射(治疗后组)。在第4天,从鼠采集血液并制备血清。
用血尿素氮(BUN)检测试剂盒测定肾毒性指标血尿素氮。将0.02mL由0.1mL最初的尿素酶浓缩物和20mL缓冲溶液组成的混合物,加与从上述鼠血液制备的血清和0.02mL尿素标准溶液,在37℃培养15分钟,加2mL显影试剂,在37℃培养5分钟,于570nm测定光学密度。
用肌酐检测试剂盒测定肾毒性指标肌酐。
将0.5mL从上述鼠制备的血清加4mL钨酸盐溶液,剧烈振荡,然后在1500×g离心10分钟。回收上清液,与3mL肌酐标准溶液(对照组加3mL蒸馏水)、1mL苦味酸盐溶液和0.5mL 1.4M NaOH溶液混合,且彻底混合。15分钟后,于515测定nm测定光学密度。
【表6】
皂苷部分提取物对改善由抗癌药引起肾脏毒性的作用
组别 | 尿素氮(mg/dL) | 肌酐(mg/dL) |
对照组 | 21.1±2.3 | 0.51±0.14 |
顺铂治疗组 | 98.5±2.5 | 3.45±0.40 |
实施例22治疗前组 | 75.4±2.4 | 1.58±0.20 |
实施例22治疗后组 | 20.5±2.6 | 0.64±0.18 |
对比实施例4治疗后组 | 78.6±2.4 | 2.48±0.31 |
如表6中所示,实施例22中获得的皂苷部分提取物治疗后组显示尿素氮和肌酐值恢复到接近正常状态。
实验实施例8:测定脑神经元保护作用
为研究本发明加工过的人参的皂苷部分对治疗和预防脑中风的作用,用与J.Neurosci.Res.53,426(1998)中一致的方法测定皂苷部分对过度谷氨酸盐引起脑神经元死亡的作用,结果显示于表7中。
【表7】
皂苷部分对过度谷氨酸盐引起脑神经元死亡的保护作用
组别 | 浓度(μg/mL) | 细胞活力(%) |
对照组 | - | 100 |
谷氨酸盐治疗组 | - | 0 |
实施例20 | 0.008 | 48.4±3.8 |
0.08 | 72.8±2.8 | |
0.8 | 45.2±5.1 | |
对比实施例4 | 0.05 | 30.4±3.6 |
0.5 | 46.8±3.4 | |
5.0 | 70.6±2.8 | |
50.0 | 30.5±2.7 |
如表7中所示,实施例20中获得的皂苷部分提取物与对比实施例4中的提取物比较,在对抗由谷氨酸盐引起的神经毒性方面显示更好的预防作用。
实验实施例9:抗肿瘤活性
将人癌细胞接种于小牛血清培养基并培养48小时,然后在96孔培养物次代培养1天。用加工过的人参提取物处理48小时后,将培养物加MTT溶液并形成不溶的formazine。离心后,将沉淀加二甲亚砜溶解formazine并在570nm用自动平板读数器测定光学密度。计算50%细胞存活的浓度,结果显示在表8中。
【表8】
加工过的人参的皂苷部分提取物对人癌细胞生长的抑制作用(MTT法)
组别 | SK-Hep-1 | Chang Liver | Hela |
实施例21 | 8.9 | 16.8 | 7.2 |
实施例22 | 8.1 | 14.4 | 6.6 |
对比实施例4 | 65.8 | 115.6 | 64.5 |
单位:50%抑制浓度(IC50:μg/mL) |
如表8所示,本发明加工过的人参皂苷部分提取物(实施例21和22)与白参常规提取物相比(对比实施例4)显示更强抗癌活性。
实验实施例10:改善脑功能的比较
将20名患有记忆损失病症的61-70岁的老年人(男性和女性各10人)分成2组,每组中男性和女性人数相等,相应给予在参照实施例2、参照对比实施例2中制备的片剂3个月,每次2片,每天2次。通过调查表观察记忆改善的程度,结果显示于表9中。
在表9中,当将“改善”和“显著改善”合并作为有效,参照实施例2中本发明加工过的人参提取物与常规人参提取物的30%的有效率相比显示80%的有效率,因而说明本发明加工过的人参提取物通过改善记忆损失病症在改善脑功能方面的优越性。
【表9】
脑功能改善水平
组别 | 参照实施例2(人数) | 参照对比实施例2(人数) |
显著改善 | 5 | 1 |
改善 | 3 | 2 |
无变化 | 2 | 7 |
总计 | 10 | 10 |
实验实施例11:毒性实验
将加工过的人参提取物的毒性实验进行如下。将在实施例1和2中获得的加工过的人参提取物溶解在0.2%土温80溶液中,以每千克体重5g提取物对体重约20g的ICR小鼠经口给药(每组20只小鼠)。观察小鼠7天,未观察到小鼠死亡。
【工业实用性】
如前所述,在本发明中所使用的方法,其中将人参与至少一种选自由诸如五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬组成的组中的草药混合并在水中煮沸,能够产生比单纯人参提取物或在人参和草药单独加工后将人参提取物和一种或多种草药简单混合更有效力的协同药物作用。这是因为在本发明中制备的加工过的人参提取物中含大量在白参中不含且红参中含少量的诸如Rg3、Rg5、Rk1等的人参糖苷,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为10-45。在本发明中制备的加工过的人参提取物显示作为对改善勃起功能障碍、血液循环、缓解疲劳、高血压、动脉硬化、血栓形成、脑功能、脑中风的预防和治疗剂,和作为健康补充食品或药物性癌症辅助治疗剂的实用性。本发明中制备的加工过的人参提取物能够以诸如液体、片剂、颗粒剂、丸剂、硬胶囊剂或软胶囊剂的形式方便地制造和施用。
Claims (13)
1.加工过的人参提取物,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为10-45。
2.权利要求1的加工过的人参提取物,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为20-45。
3.加工过的人参皂苷部分提取物,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为10-45。
4.权利要求3的加工过的人参皂苷部分提取物,其中人参糖苷(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd)的比率为20-45。
5.通过热提取加工人参的方法,包括以下步骤:
(i)加4-10倍重量的水到所获混合物中,该混合物由100份人参和10-1000份至少一种选自下组的草药所组成,所述组由五味子、山楂、山茱萸、木瓜、乌梅、香橙、枳壳、苹果、石榴和柠檬组成,并且在70-120℃加热1-6小时;
(ii)冷却所述混合物至室温,并进行过滤所述混合物;和
(iii)浓缩所述滤液以制备成浸膏或粉末形式。
6.权利要求5的加工人参的方法,其中所述方法进一步在步骤(i)之后含热提取步骤,其中将所述水蒸发,并在乙醇或甲醇存在下将保留的混合物加热1-3小时。
7.权利要求5或6中任何一项的加工人参的方法,其中所述人参选自由白参、鲜人参、须参、红参、人参叶、西洋参、三七和Panaxjaponicus组成的组。
8.含权利要求1加工过的人参提取物或所述人参的皂苷部分提取物作为活性成分的药物组合物。
9.权利要求8的药物组合物,其中所述药物组合物在改善血液循环、勃起功能障碍、高血压、动脉硬化、抗血栓形成、脑功能、缓解疲劳和治疗及预防脑中风方面是有效的。
10.权利要求8的药物组合物,其中所述药物组合物在预防和/或治疗癌症和减轻抗癌药的副作用方面是有效的。
11.权利要求8、9或10中任何一项的药物组合物,其中将所述药物组合物制备成选自由液体制剂、片剂、颗粒剂、丸剂、硬胶囊剂或软胶囊剂组成的组中的形式。
12.含权利要求1加工过的人参提取物或所述人参的皂苷部分提取物作为活性成分的食品添加剂。
13.含权利要求1加工过的人参提取物或所述人参的皂苷部分提取物作为活性成分的健康辅助食品。
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