发明的技术内容:
本发明提供了一种从人参根中获得二醇型人参皂苷F2含量较高的人参皂苷粗提物的方法。即为可直接由人参根与五味子煎煮获得较高二醇型人参皂苷F2含量的方法。
本发明所说的人参根,为人参干燥根,亦为人参炮制加工品。其种类达20多种,归纳起来有四大类:即白参(生晒参),红参,糖参,和近年来开发出来的新品种’活性参’。
本发明以人参根和五味子为起始材料,将人参根和五味子分别加工成粉末,在盛有人参根粉末的容器中加入氯仿、石油醚或乙醚有机溶剂,加入量超过粉末的体积,在50℃~80℃的范围内加热1.5~4小时,倾出有机溶剂;在上述容器中加入五味子粉末,使其与人参根粉末的质量比为1~3∶1;再加入水,加入量一般以水的质量是人参根与五味子粉末的总质量的10~20倍为宜,搅拌,使粉末混合均匀,加热,水溶液保持微沸状态1.5~4小时,将水溶液倒出;再加水加热2~4次,每次加入的水质量相同,且水溶液保持微沸状态1.5~4小时后再倒出;将几次倒出的水溶液合并,过滤,浓缩,使水溶液的体积减少2/3~4/5后,缓慢加入乙醇溶液,使乙醇在溶液中的体积含量占60%~85%,静置12~24小时,滤去沉淀,低压回收乙醇,得到二醇型人参皂苷F2含量很高的人参皂苷粗提物;
本发明提供了一种从人参根中获得二醇型人参皂苷F2含量较高的人参皂苷粗提物的方法。用该方法从人参根中获得的二醇型人参皂苷F2含量较高的人参皂苷粗提物,利用高压液相色谱,以不同浓度的标准品二醇型人参皂苷F2为外标物绘制工作曲线,通过色谱峰面积来测定总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量。测得总皂苷中F2的最高含量为:9.35mg。各实施例得到的总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量表明,本发明方法简便、高效、易于操作,且成本低廉,可满足医药、食品领域的开发和利用,开发价值极大。
具体实施方式
实施例1
(1)样品制备
70mL乙醚中加入5克红参粉末,在50℃下进行脱脂反应1.5小时,倾出乙醚后与5克五味子粉末加入到100mL水溶液中搅拌加热,保持微沸1.5小时,倾出水液,再加入100mL水溶液加热,保持微沸1.5小时,合并两次水液,过滤,加热使水液浓缩到100mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液体积的60%,静置20小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%的甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2的人参皂苷粗提物。可将其作为测定样品.
(2)F2的测量方法
精密称取一定量的二醇型人参皂苷F2标准品置于10mL容量瓶中,加甲醇定容。用微量注射器精密移取F2标准溶液80μL,100μL,120μL,140μL,160μl,分别置于10mL容量瓶中,加甲醇定容。
本发明选用的高压液相色谱条件:选用蒸发光检测器,用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂,(A)乙腈(B)0.3%冰醋酸水溶液为流动相,漂移管温度90℃,气体流速2.2L/min,进样量10.0μL,52分钟梯度洗脱,梯度变化:(A)20%~60%(B)80%~40%。将不同浓度的F2标准品与其相应色谱峰面积作标准工作曲线,然后根据标准曲线测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量。
测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:3.38mg
实施例2
60mL石油醚中加入5克白参干燥根粉末,在60℃下进行脱脂反应2.5小时,倾出石油醚后与8克五味子粉末加入到150mL水溶液中搅拌加热,保持微沸2小时,倾出水液,再重复两次,合并三次的水液,过滤,加热使水液浓缩到180mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的75%,静置16小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。其作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:0.86mg
实施例3
50mL氯仿中加入5克红参粉末,在60℃下进行脱脂反应3小时,倾出氯仿后与8克五味子粉末加入到260mL水溶液中搅拌加热,保持微沸3小时,倾出水液,再重复三次,合并四次的水液,过滤,加热使水液浓缩到208mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的80%,静置18小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:5.76mg
实施例4
50mL乙醚中加入5克糖参干燥根粉末,在65℃下进行脱脂反应4小时,倾出乙醚后与10克五味子粉末加入到250mL水溶液中搅拌加热,保持微沸2小时,倾出水液,再重复两次,合并三次的水液,过滤,加热使水液浓缩到250mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的85%,静置20小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:0.92mg
实施例5
60mL氯仿中加入5克红参粉末,在70℃下进行脱脂反应3小时,倾出氯仿后与11克五味子粉末加入到300mL水溶液中搅拌加热,保持微沸2.5小时,倾出水液,再重复三次,合并四次的水液,过滤,加热使水液浓缩到320mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的80%,静置24小时,过滤,低压(0.09kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:7.62mg
实施例6
55mL乙醚中加入5克糖参干燥根粉末,在75℃下进行脱脂反应2小时,倾出乙醚后与15克五味子粉末加入到200mL水溶液中搅拌加热,保持微沸2小时,倾出水液,再重复一次,合并二次的水液,过滤,加热使水液浓缩到150mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的70%,静置24小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:1.05mg
实施例7
65mL石油醚中加入5克红参粉末,在80℃下进行脱脂反应3小时,倾出石油醚后与15克五味子粉末加入到400mL水溶液中搅拌加热,保持微沸4小时,倾出水液,再重复二次,合并三次的水液,过滤,加热使水液浓缩到320mL,缓慢加乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的75%,静置15小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:9.35mg
实施例8
70mL石油醚中加入5克活性参粉末,在65℃下进行脱脂反应2小时,倾出石油醚后与5克五味子粉末加入到120mL水溶液中搅拌加热,保持微沸2小时,倾出水液,再重复一次,合并二次的水液,过滤,加热使水液浓缩到100mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的70%,静置12小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:2.03mg
实施例9
60mL乙醚中加入5克活性参粉末,在50℃下进行脱脂反应1.5小时,倾出乙醚后与10克五味子粉末加入到200mL水溶液中搅拌加热,保持微沸1.5小时,倾出水液,再重复二次,合并三次的水液,过滤,加热使水液浓缩到250mL,缓慢加入乙醇溶液,最终乙醇的体积占溶液总体积的60%,静置24小时,过滤,低压(0.08kPa)回收乙醇,残渣以70%甲醇(甲醇∶水)溶解,移入25mL的容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,可得含有二醇型人参皂苷F2人参皂苷粗提物。作为测定样品,二醇型人参皂苷F2含量的测定方法同实施例1。测得总皂苷中二醇型人参皂苷F2的含量为:3.47mg。