CN101993438B - 一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物制备领域，具体涉及一种从知母中制备芒果苷和知母总皂苷的方法，主要步骤包括水或稀醇提取、浓缩、醇沉、过滤、蒸干，重结晶。本发明方法所涉及的分离过程具有简便、经济、可靠的特点。
Description
技术领域
本发明属于药物制备领域，涉及药材有效成分的提取制备方法，具体涉及一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法。
背景技术
知母为百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloiides Bge)的干燥根茎。味苦、甘，性寒，入肺、胃、肾经，具有清热泻火，生津润燥等功效，主治烦热，消渴。药理研究表明知母有解热、降糖、利胆、抗血小板凝聚等作用。其皂苷成分、芒果苷有降糖作用，临床上用的玉液汤、白虎人参汤、糖渴清、林牌糖尿胶囊、糖血宁等治疗糖尿病汤剂或方剂中知母常作为君药使用，通过相关资料分析，知母总皂苷对-葡萄糖苷酶活性半数抑制作用剂量约为芒果苷的10倍，而芒果苷在知母总皂苷中约占10％。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法，采用该方法可以有效的从知母中分离出知母总皂苷和芒果苷，并且在这一前提下，使分离过程简便、经济、可靠。为使这本发明目的能够顺利实现，本发明采用了如下技术方案：
一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法，其步骤包括：
a、用水或醇提取知母药材饮片或粗粉，浓缩所得提取液，对经浓缩后的提取液进行醇沉，得滤液部分和沉淀部分；
b、对滤液部分进行浓缩，然后用正丁醇萃取，得到第一萃取液；
c、沉淀部分加碱液碱化，搅拌一小时，离心，上清液用稀酸中和，减压浓缩后用正丁醇萃取，得到第二萃取液；
d、合并第一萃取液和第二萃取液，浓缩至干，得知母粗总皂甙粉；
e、用少量低级醇加热溶解知母粗总皂甙粉，放置、析晶，得芒果苷结晶和母液；
f、浓缩结晶母液至干得到知母总皂苷。
本技术方案所述的知母药材可以是知母饮片，或知母粗粉。
因为知母总皂苷易溶于低级醇，而芒果苷在低级醇中的溶解度较低，特别是在温度较低的时候，基于这一点，本发明所述醇沉是向该浓缩后提取液中加入低级醇，使低级醇的含量在加入低级醇的提纯液中所占的质量百分比达到60％～75％。低级醇优选为甲醇或乙醇。
由于芒果苷含酸性酚羟基，利用碱液对沉淀部分进行处理，即可将该部分内的少量残留的芒果苷以成盐的形式溶于水液，达到充分利用有效成份的效果，为提取全面，进一步提高知母总皂苷及芒果苷的产量，本发明对沉淀部分的处理步骤中的碱液为质量百分比浓度为1％～5％的氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸氢钠中的一种。
本发明是用质量百分比浓度为40％～70％的低级醇或水作为提取剂对知母药材进行提取，所述a步骤中的浓缩后提取液的比重1.1～1.3，
考虑到知母总皂苷及芒果苷的极性高，根据相似相溶原理，本发明选用正丁醇进行萃取。
本发明方法还包括对e步骤所述芒果苷结晶的重结晶，以进一步提高芒果苷的纯度。
综上，本发明利用了知母总皂苷及芒果苷在某些溶剂中表现的溶解度并不一致的特点，对两者进行了有效分离，该分离方法虽然所有操作均为本领域一般性操作，但却得到了很好的分离效果，并得到了高纯度的芒果苷，从而使本发明方法具备了成本低，简便，易于扩大化生产的特点，另外，本发明还在工艺流程上加入了对沉淀部分处理步骤，提高了产品的得率。
具体实施方式
实施例1
下面对本发明做进一步说明：
取1kg知母饮片，用10立升水回流提取，共提取3次，每次1.5小时，合并3次水提液，过滤，滤液减压浓缩至比重为1.1～1.3，加酒精调节使其含酒精65％～70％，放置24小时，沉淀，过滤，得到滤液部分和沉淀部分，滤液部分减压浓缩得浓缩液；
沉淀部分用2％氢氧化钠于60℃～70℃水浴搅拌1小时，放置，过滤，碱性滤液用稀盐酸调pH至7后，减压浓缩与前述浓缩液合并，得合并液；
合并液用正丁醇萃取3次，每次用正丁醇300ml，合并正丁醇萃取液，用少量水反洗一次；
所得正丁醇层减压浓缩至干，得到知母粗总皂苷粉；
用100ml甲醇加热溶解知母粗总皂苷粉，然后放置24小时，析晶，过滤，结晶用少量甲醇洗一次，结晶用少量甲醇再重结晶一次，得到淡黄色芒果苷纯品7.1g，得率0.71％；
甲醇母液蒸干，得类白色粉32.5g知母总皂苷，得率3.25％。
实施例2
取1kg知母粗粉，用10立升70％乙醇回流提取，共提取3次，每次1.5小时，合并3次稀乙醇提取液，过滤，滤液减压浓缩至比重为1.1～1.3，加酒精调节使含酒精65％～70％，放置24小时，沉淀，过滤，得到滤液部分和沉淀部分，滤液部分减压浓缩得浓缩液；
沉淀用2％氢氧化钠于60℃～70℃水浴搅拌1小时，放置，过滤，碱性滤液用稀盐酸调pH至7后，减压浓缩与前述浓缩液合并，得合并液；
合并液用正丁醇萃取3次，每次用正丁醇300ml，合并正丁醇萃取液，用少量水反洗一次；
所得正丁醇层减压回收至干，得到知母粗总皂苷粉；
用100ml甲醇加热溶解，放置24小时，析晶，过滤，结晶用少量甲醇洗一次，结晶用少量甲醇再重结晶一次，得到淡黄色芒果苷纯品7.8g，得率0.78％；
甲醇母液蒸干，得类白色粉37g知母总皂苷，得率3.7％。
为便于比较实施例1及实施例2中芒果苷在整个知母的提取率，需要测出芒果苷在整个知母中的所含比例，芒果苷含量的测定可以采用如下方法进行：(该方法参考药物分析分析杂志，2007，27(9)：1478上描述的方法)
1.测试条件
高效液相色谱仪：Agilent 1100，Elite-ODS色谱柱(4.0mm×150mm，5μm)
流动相：MeOH-0.1％磷酸液(27∶73v/v)
流速：1.0ml/min
检测波长：316nm
柱温：室温
进样体积：10μl
2.知母样品液制备
取知母干燥药材粉(80目)1g，精密称定1.0508g，加甲醇适量，加热回流1小时，冷却，滤过，滤渣用甲醇洗涤3次，甲醇滤液定量至100ml量瓶中，摇匀，经0.45μm微孔滤膜，作为供试品液。
芒果苷样品经70℃减压干燥6小时后称量，芒果苷对照品配成42.8μg/ml的溶液。
经测定知母药材中芒果苷含量为1.28％，所得样品芒果苷纯度分别为96％和97％，其从药材中提取得率为55.5％和66.4％。
应当理解，在阅读了本实用新型的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本实用新型作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (4)
1.一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法，其特征在于该方法步骤包括：
a、用水或质量百分比浓度为40%～70%的低级醇提取知母饮片或知母粗粉，所述低级醇为甲醇或乙醇；浓缩所得提取液，对经浓缩后的提取液进行醇沉，过滤，得滤液部分和沉淀部分；
b、对滤液部分进行浓缩，然后用正丁醇萃取，得到第一萃取液；
c、沉淀部分加碱液碱化，搅拌一小时，离心，上清液用稀酸中和，减压浓缩后，用正丁醇萃取，得到第二萃取液；
d、合并第一萃取液和第二萃取液浓缩至干，得到知母粗总皂甙粉；
e、用少量低级醇加热溶解知母粗总皂苷粉，放置、析晶，得芒果苷结晶和母液；所述低级醇为甲醇或乙醇；
f、浓缩结晶母液至干得到知母总皂苷。
2.根据权利要求1所述的一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法，其特征在于a步骤中的浓缩后提取液的比重1.1～1.3。
3.根据权利要求1所述的一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法，其特征在于所述醇沉是向该浓缩后提取液中加入低级醇，使低级醇的含量在加入低级醇的提纯液中所占的质量百分比达到60%～75%，所述低级醇为甲醇或乙醇。
4.根据权利要求1所述的一种从知母中提取芒果苷和知母总皂苷的方法，其特征在于对沉淀部分的处理步骤中的碱液为质量百分比为1%～5%的氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸氢钠中的一种。
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