CN102357209A - 一种竹笋黄酮和鞣质的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种采用碱液提取竹笋黄酮和鞣质的方法,该方法包括以下步骤:(1)竹笋预处理;(2)加碱液提取;(3)调pH值,醇沉;(4)浓缩干燥。本发明采用碱提醇沉除杂提取竹笋中黄酮和鞣质,较普通方法提取率高,节约酒精,纯度高。
Description
技术领域
本发明涉及一种竹笋黄酮和鞣质的提取方法,具体涉及一种利用碱提,醇沉除杂,提取竹笋黄酮和鞣质的方法。
背景技术
竹笋质润味美素有“寒土山珍”、“素食第一品”之称,深受人们喜爱。中国人食用竹笋的历史悠久。同时竹笋的食疗保健作用也被历代医家所推崇。如药王孙思邈在《千金方》中指出:“竹笋性味甘寒无毒,主消渴、利水道,益气力、可久食。”;伟大医药学家李时珍在其本草巨著《本草纲目》中记载竹笋有“化热、消痰、爽胃”之功;清代著名医家王孟英的《随息居饮食谱》中说:“笋,甘凉、舒郁、降浊升清,开膈消痰,味冠素食。”;现代中医认为竹笋味甘、微寒,无毒。具有清热化痰、益气和胃、治消渴、利水道、利膈爽胃等功效,用于食欲不振、脘腹痞满、大便秘结、痰涎壅滞等。现代药理研究证明竹笋具有抗氧化、抗糖尿病、保肝、调节胃肠道功能、抗贫血、抗肿瘤等作用。而竹笋黄酮和鞣质则是其抗氧化、抗糖尿病、保肝的主要成分,因此竹笋产品加工时应充分考虑竹笋黄酮和鞣质的提取。
竹笋黄酮和鞣质结构中含有羟基,极性较大能在乙醇和热水溶解。故目前黄酮类和鞣质的提取主要有醇提和热水提取。同时黄酮类和鞣质具有酚羟基结构显酸性,与碱性物质反应能形成水溶性盐。故采用碱水提取竹笋中黄酮类和鞣质是可行的方法。竹笋采用碱水提取后,能除去竹笋中脂溶性成分和和碱性脂溶性物质,提取液中主要为酸性成分和水溶性成分。将提取液调为酸性并加入乙醇则能除去水溶性杂质。因而通过碱提醇沉则能制得纯度较高的竹笋黄酮和鞣质。
发明内容
本发明就是为了解决上述问题,选用合适的方法制备竹笋黄酮和鞣质。该方法充分利用竹笋黄酮和鞣质的结构特性,工艺科学可控,易于实施,反应液中黄酮和鞣质含量高。
本发明还在于提供竹笋黄酮和鞣质的初步分离处理方法。利用醇沉除去提取液中的水溶性杂质(粘液质等)。
本发明的具体制备工艺如下:
1、将竹笋(鲜笋或干笋)切片,干燥至含水量在15%以下,粉碎,过筛(10目以下)。
2、将竹笋粉末加入到提取罐中,加入4-10倍量pH值为8-14的碱液,加热提取1-3次,滤过,滤液浓缩规定体积。
3、在浓缩液中加入酸液调节pH值至中性,加入乙醇至含醇量为10-80%,充分搅拌,静置12-24小时,滤过。
4、滤液减压回收酒精至无醇味,并浓缩至规定的相对密度,干燥,即得。
5、本发明提取过程中可利用超声或微波辅助,提高提取效率。
本发明与现有技术比较具有以下优点:
1、提取溶剂的优势:竹笋中含有大量的粗纤维,体积较大,提取时应加入大量溶剂确保提取效果。醇提需消耗大量的乙醇,提高生产加工成本;水提虽然成本低但黄酮类和鞣质在水中溶解度不大,提取效果差。而碱水提取所用碱廉价易得,适合工业生产,且碱水提取充分利用竹笋黄酮和鞣质的酸性,提取率高。
2、除杂优势:采用乙醇提取其提取液中脂溶性杂质较多,如采用水沉法处理会使竹笋黄酮和鞣质损失严重;利用碱水提取,其提取液中主要为酸性物质和水溶性物质,碱性杂质较少,调节pH值后醇沉则将水溶性的大分子杂质和酸性醇不溶性成分除去,得到的产品纯度较高;水提醇沉不仅提取效果差,而且产品中碱性杂质较碱水提取多。
具体实施方式
实例1应用氢氧化钠溶液提取竹笋黄酮和鞣质
1、竹笋预处理:竹笋(鲜笋去壳),切片,于60℃中干燥至含水至7%以下,粉碎过10目筛,备用。
2、碱液提取:取10kg竹笋粉,置于提取罐中,加入8倍量0.2%氢氧化钠溶液提取1.5小时,滤过,滤渣加6倍量0.2%氢氧化钠溶液继续提取1小时,合并滤液,滤液浓缩至规定体积。
3、调pH值,醇沉:在浓缩液中加入稀盐酸至中性,将乙醇缓缓加入到浓缩液中并搅拌,至含醇量达70%,静置12小时,滤过。
4、浓缩干燥:滤液浓缩至无醇味,并浓缩至规定的相对密度,干燥,即得。
氢氧化钠为强碱,用0.2%的氢氧化钠溶液提取竹笋,黄酮类和鞣质能很快形成钠盐溶于水中,提取效率高。所的竹笋黄酮和鞣质提取物可加入适量的添加剂和水制成饮料或口服液,亦可加入适宜的辅料制成相应的固体产品。
实例2应用碳酸钠溶液提取竹笋黄酮和鞣质
1、竹笋预处理:竹笋(鲜笋去壳)切片,于60℃中干燥至含水至7%以下,粉碎过10目筛,备用。
2、碱液提取:取10kg竹笋粉,置于提取罐中,加入8倍量5%碳酸钠溶液提取2小时,滤过,滤渣加6倍量5%碳酸钠溶液继续提取1.5小时,合并滤液,滤液浓缩至规定体积。
3、调pH值,醇沉:在浓缩液中加入稀盐酸至中性,将乙醇缓缓加入到浓缩液中并搅拌,至含醇量达70%,静置12小时,滤过。
4、浓缩干燥:滤液浓缩至无醇味,并浓缩至规定的相对密度,干燥,即得。
碳酸钠具有弱碱性,用5%的碳酸钠溶液提取竹笋,黄酮类和鞣质形成钠盐的时间较长,故提取时间相应延长。但碳酸钠使用安全方便,无环境污染,适合工业化生产。所得竹笋黄酮和鞣质提取物可加入适量的添加剂和水制成饮料或口服液,亦可加入适宜的辅料制成相应的固体产品。
实验研究
1主要仪器高速中药粉碎机、减压干燥箱、水浴锅、旋转蒸发器、紫外、可见光分光光度计、电子天平。
2试剂与材料芦丁标准品(购于中国药品生物制品鉴定所);鲜青皮竹Bambusatextilis McClure春笋,产于广东广宁。
3标准曲线的制备取五氧化二磷干燥12小时的芦丁标准品约5mg,精密称定,置50mL容量瓶中,加60%乙醇使溶解并定容至刻度,摇匀,得0.1mg/mL芦丁标准品溶液。
分别精密吸取上述标准品溶液0、1、2、3、4、5mL置于6只具塞刻度试管中,各加60%乙醇至5mL,加入质量浓度0.05g/mL的NaNO2溶液0.3mL,摇匀,静置6min;加入质量浓度0.1g/mL的Al(NO3)3溶液0.3mL,摇匀,静置6min;加入1mol/L NaOH溶液4mL;加入蒸馏水0.4mL;加入蒸馏水0.4mL摇匀,静置20min。于波长510nm处用比色法测定各管溶液吸光度;以吸光度(Y)为纵坐标,芦丁标准溶液质量浓度(X)为横坐标,绘制标准曲线,得标准回归方程为:Y=27.189X+0.215,R2=0.9994。
4样品溶液的制备:取新鲜竹笋,去壳,切碎,于60℃中干燥,粉碎,过10目筛。称取竹笋粉末100g9份,分别按下列方法提取:
4.1取其中3份分别加入到具塞的锥形瓶中,并加入100mL60%乙醇,密塞,称定重量,超声处理30分钟,放冷,用60%乙醇补足失重,摇匀,滤过,滤液作为竹笋样品溶液I。
4.2取另三份分别加8倍量0.2%氢氧化钠溶液回流提取1.5小时,滤过,滤渣加6倍量0.2%氢氧化钠溶液继续提取1小时,滤过,合并滤液,浓缩至规定体积,加入稀盐酸调节pH值至中性,并加乙醇至含醇量为70%,放置12小时,滤过,滤液浓缩至近干,加入60%乙醇100mL使溶解作为供试品溶液II。
4.3剩余三份分别加8倍量5%碳酸钠溶液回流提取2小时,滤过,滤渣加6倍量5%碳酸钠溶液继续提取1.5小时,滤过,合并滤液,浓缩至规定体积,加入稀盐酸调节pH值至中性,并加乙醇至含醇量为70%,放置12小时,滤过,滤液浓缩至近干,加入60%乙醇100mL使溶解作为供试品溶液III。
5测定方法取供试品溶液I、II、III按3“标准曲线的制备”规定的方法测定吸收值,按回归方程计算总黄酮的含量,结果见表1。
表1不同碱液对竹笋黄酮提取率的影响(n=3)
6讨论
结果显示供试品I中总黄酮含量略高于供试品II和供试品III,供试品I是直接测定的,是竹笋中总黄酮的真实含量,而供试品II和III测定的是转移出的提取液的含量。表明采用碱液提取效果好,其转移率高。同时用碳酸钠作为提取液总黄酮含量略低于氢氧化钠。但碳酸钠比氢氧化钠安全性高,环境污染小。故两种提取各具有优势,可根据实际情况使用。
Claims (4)
1.一种竹笋黄酮和鞣质的提取方法,其特征在于包括下列步骤:
(1)竹笋预处理:将竹笋(鲜笋或干笋)切片,干燥至含水量在15%以下,粉碎,过筛;
(2)加碱液提取:将预处理后的竹笋加入到提取罐中,并加4-20倍量的碱液,加热提取1-3次,滤过,合并滤液,滤液浓缩至规定体积;
(3)调节pH值、醇沉:在浓缩液中加入适量的酸水至pH值为5。并加乙醇至含醇量为10-80%,静置12-24小时,滤过;
(4)浓缩干燥:滤液减压回收酒精至无醇味,并浓缩至规定的相对密度,干燥,即得。
2.所加入的碱包括:氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸氢钾等。
3.所加入的酸包括:盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、醋酸等。
4.碱液提取过程包括加热以及超声、微波等方法。
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