CN105473006A - 人参提取物的制造方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种以较高浓度含有Rg3、着色减少且颜色稳定性优异的人参提取物的制造方法。本发明的人参提取物的制造方法包括下述步骤(1)～(3)：(1)将人参在水中以95～100℃加热提取0.5～50小时的步骤；(2)对(1)中所获得的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物而获得粗人参提取物的步骤；以及(3)使用填充有大孔树脂的吸附柱对(2)中所获得的粗人参提取物进行精制的步骤。

Description

人参提取物的制造方法
技术领域
本发明涉及一种人参提取物的制造方法、着色减少方法及颜色稳定化方法。
背景技术
人参(高丽参，Panaxginseng)是自古以来已知的药用植物。作为药效成分，已知有人参皂苷，迄今为止，从人参分离出50种以上的人参皂苷。作为人参或人参皂苷的效果，除众所周知的强健作用以外，近年来，发现有抗肿瘤作用、抗动脉硬化/抗高血压作用、抗压力作用、免疫调节作用、抗炎/抗过敏作用、抗糖尿病作用、对中枢神经的作用、提升记忆或学习、保护神经、释放或引入神经传导物质的作用等涉及多方面的效果(非专利文献1、2)。进一步，最近发现人参的提取物具有促进CGRP(calcitoningene-relatedpeptide，降钙素基因相关肽)的应答性的作用(专利文献1)。
人参中所包含的人参皂苷主要为人参皂苷Rb1或Rb2，几乎不包含人参皂苷Rg3。已知在将人参进行蒸制并进行干燥而成的红参中包含少量人参皂苷Rg3。
报告有人参皂苷Rg3可用于血液循环的改善、勃起障碍的改善、疲劳恢复、高血压、动脉硬化、抗血栓、脑中风的治疗及预防、脑功能改善，另外，具有血管松弛作用、血小板凝集抑制作用、脑神经细胞保护作用、抗癌作用(专利文献2～4)。
为提升这些人参皂苷Rg3的含量，尝试了如下方法：用水或有机溶剂对人参进行提取后，使用酸将其提取物水解，且使用大孔树脂(macroporousresin)吸附水解溶液的方法(专利文献2)；向人参中添加醋进行加热提取的方法(专利文献3)；或在高温下对人参进行加热处理的方法(专利文献5)。
[专利文献1]日本专利特开2012-116763号公报
[专利文献2]日本专利特表2009-500432号公报
[专利文献3]日本专利特表2007-520418号公报
[专利文献4]日本专利特表2006-502082号公报
[专利文献5]日本专利特表平11-501322号公报
[非专利文献1]食品与营养研究进展(AdvancesinFoodandNutritionResearch)，2009，55:1-99
[非专利文献2]植物化学分析(PhytochemicalAnalysis)，2008，19:2-16
发明内容
本发明涉及如下内容。
1)一种人参提取物的制造方法，其包括下述步骤(1)～(3)：
(1)将人参在水中以95～100℃加热提取0.5～50小时的步骤；
(2)对(1)中所获得的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物而获得粗人参提取物的步骤；以及
(3)使用填充有大孔树脂的吸附柱对(2)中所获得的粗人参提取物进行精制的步骤。
2)一种人参提取物，其是通过1)的制造方法而得到的。
3)一种人参提取物的着色减少方法，其特征在于：对人参的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物后，使用填充有大孔树脂的吸附柱进行精制。
4)一种人参提取物的颜色稳定化方法，其特征在于：对人参的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物后，使用填充有大孔树脂的吸附柱进行精制。
具体实施方式
上述通过加热将人参水解的方法就处理的简便化方面而言是优选的，但是存在反应效率较低或所得到的处理液发生着色的忧虑，存在改良的余地。
本发明是提供一种以较高的浓度含有Rg3、着色减少且颜色稳定性优异的人参提取物的制造方法。
本发明者们对将人参进行热水提取而得到的人参提取物的制备方法进行了研究，结果发现：通过对加热提取物进行乙醇处理，之后使用填充有树脂的吸附柱进行精制，能够减少着色并提升颜色稳定性，进一步能够以较高的浓度含有Rg3，从而完成了本发明。
根据本发明的制造方法，可以得到着色减少，并且颜色稳定性优异且以较高的浓度含有Rg3的人参提取物。
在本说明书中，人参是指五加科竹节参属的高丽参(Panaxginseng)。
另外，人参有将新鲜根直接干燥而成的生晒参、除去周皮或细根并进行干燥而成的白参、蒸制后进行干燥而成的红参等种类，在本发明中，可使用任一种。尤其是红参由于在蒸制步骤中进行丙二酰基人参皂苷的脱丙二酰化，并且包含人参皂苷Rg2的20位的糖脱离而成的人参皂苷Rg3，所以优选。
上述人参可使用任意的部位、例如全株、叶、茎、芽、花、花蕾、根、根茎、假球茎、球茎、块茎、种子等或它们的组合，优选为使用根茎，最优选为使用细根。上述部位可直接进行加热提取，或也可以在经过粉碎、切断或干燥后进行加热提取。
(1)加热提取
本步骤是对上述人参添加水，进行加热提取而获得加热提取物的步骤。
作为提取方法，并无特别限制，可使用已知的方法、例如分批搅拌式、连续流通式或索氏提取器等的提取器具进行。在加热处理时可以使用蒸馏水、离子交换水等。另外，在想要缩短提取时间的情形下，优选边搅拌边提取。
为了防止所得到的加热提取物的氧化，可以并用煮沸脱气或通入氮气等惰性气体而去除溶存氧的方法，即可以并用在所谓的非氧化性氛围下进行提取的方法。
作为水的使用量，相对于1g人参(干燥质量换算)，优选为1mL以上，更优选为5mL以上，且优选为100mL以下，更优选为50mL以下。另外，优选为1～100mL，更优选为5～20mL。
从产生Rg3的观点而言，加热温度为95℃以上且100℃以下，另外，为95～100℃。优选为100℃。
另外，从提升处理的观点而言，上述加热时间为0.5小时以上，优选为1小时以上，更优选为15小时以上，且为50小时以下，优选为30小时以下。另外，为0.5～50小时、优选为1～50小时、更优选为15～30小时的范围。
(2)乙醇处理
本步骤是向(1)中所获得的加热提取物中添加乙醇，通过过滤等去除沉淀物而获得粗人参提取物的步骤。在该步骤中，可以在不减少提取中的Rg3的量的前提下去除着色成分。
在本步骤中，从去除着色成分的观点而言，以乙醇浓度成为60体积％以上、优选为70体积％以上、95体积％以下、优选为90体积％以下的方式添加乙醇。另外，以成为60～95体积％、优选为70～90体积％的范围的方式添加乙醇。
作为乙醇的使用量，相对于人参(干燥质量换算)1g，优选为5mL以上，更优选为10mL以上，且优选为200mL以下，更优选为100mL以下。另外，优选为5～200mL，更优选为10～100mL。
从提升处理的观点而言，处理温度为0℃以上，优选为10℃以上，且为40℃以下，优选为30℃以下。另外，为0～40℃、更优选为10～30℃的范围或室温。
另外，从提升处理的观点而言，处理时间为30分钟以上，优选为1小时以上，且为20小时以下，优选为5小时以下。另外，为1～20小时、优选为1～5小时的范围。
乙醇处理后去除了沉淀物的溶液可以在减压下去除乙醇，制成粗人参提取物。
(3)吸附柱处理
本步骤是使用填充有大孔树脂的吸附柱对(2)中所获得的粗人参提取物进行精制的步骤。
具体而言，可以使上述粗人参提取物通过上述吸附柱，吸附疏水性成分，接着使优选为10～50体积％的乙醇通过，去除柱中的非吸附物质(糖类、有机酸类等)，然后使用优选为30～80％的乙醇使疏水性成分溶出，回收其溶出物，获得人参提取物。
在使粗人参提取物通过吸附柱之前，可以添加水与乙醇、甲醇、异丙醇的混合溶剂等溶剂。
作为填充的大孔树脂，可以使用日本专利特表2009-500432号公报所记载的物质，具体而言，可列举：亲水性乙烯基聚合物树脂(东曹公司制造的ToyopearlHW40)、苯乙烯-二乙烯苯树脂(三菱化学公司制造的SepabeadsSP-850)、凝胶型合成树脂(三菱化学公司制造的DiaionHP-20)。
对于吸附于树脂的吸附物，除了使用乙醇以外，例如也可以用甲醇、异丙醇等溶出液溶出而回收。
作为溶出液的使用量，相对于1g人参(干燥质量换算)，优选为1mL以上，更优选为5mL以上，且优选为100mL以下，更优选为50mL以下。另外，优选为1～100mL，更优选为5～50mL。
如下述实施例所示，经过上述步骤的人参提取物着色减少(试验例1)且具有优异的颜色稳定性(试验例2)。
另外，所得到的人参提取物中的由下述式所表示的Rg3的含量，以干燥时残留的残量(即，固形物成分的量)计，优选为1质量％以上，更优选为3质量％以上，且优选为20质量％以下，更优选为10质量％以下。另外，优选为1～20质量％，更优选为3～10质量％。
可将如此获得的人参提取物直接使用或制成用适当溶剂稀释而成的稀释液，或者制成浓缩或干燥粉末，或制备为膏状。另外，也可以是进行冷冻干燥，而在使用时，使用通常用于提取的溶剂、例如水、乙醇、丙二醇、丁二醇、水-乙醇混合液、水-丙二醇混合液、水-丁二醇混合液等溶剂进行稀释而使用。另外，也可以使其内含于脂质体等的囊胞或微胶囊等中而使用。
关在上述实施方式，本发明进一步揭示以下方式，但本发明并不限定于这些实施方式。
＜1＞一种人参提取物的制造方法，其包括下述步骤(1)～(3)：
(1)将人参在水中以95～100℃加热提取0.5～50小时的步骤；
(2)对(1)中所得到的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物而得到粗人参提取物的步骤；以及
(3)使用填充有大孔树脂的吸附柱对(2)中所获得的粗人参提取物进行精制的步骤。
＜2＞一种人参提取物的着色减少方法，其特征在于：对人参的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物后，使用填充有大孔树脂的吸附柱进行精制。
＜3＞一种人参提取物的颜色稳定化方法，其特征在于：对人参的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物后，使用填充有大孔树脂的吸附柱进行精制。
＜4＞在上述＜2＞或＜3＞中，人参的加热提取物是通过在水中以95～100℃加热提取0.5～30小时的步骤而得到的。
＜5＞在上述＜1＞或＜4＞中，作为加热提取步骤中的水的使用量，相对于人参(干燥质量换算)1g，优选为1mL以上，更优选为5mL以上，且优选为100mL以下，更优选为50mL以下，另外，优选为1～100mL，更优选为5～20mL。
＜6＞在上述＜1＞、＜4＞或＜5＞中，加热提取步骤中的加热温度优选为100℃。
＜7＞在上述＜1＞、＜4＞～＜6＞中，加热提取步骤中的加热时间优选为1小时以上，更优选为15小时以上，且为50小时以下，优选为30小时以下，另外，为优选为1～50小时、更优选为15～30小时的范围。
＜8＞在上述＜1＞～＜7＞中，在乙醇处理步骤中，以乙醇浓度成为60体积％以上、优选为70体积％以上、95体积％以下、优选为90体积％以下、另外，成为60～95体积％、优选为70～90体积％的范围的方式添加乙醇。
＜9＞在上述＜1＞～＜8＞中，作为乙醇处理步骤中的乙醇的使用量，相对于人参(干燥质量换算)1g，优选为5mL以上，更优选为10mL以上，且优选为200mL以下，更优选为100mL以下，另外，优选为5～200mL，更优选为10～100mL。
＜10＞在上述＜1＞～＜9＞中，乙醇处理步骤中的处理温度为0℃以上，优选为10℃以上，且为40℃以下，优选为30℃以下，另外，为0～40℃、更优选为10～30℃的范围或室温。
＜11＞在上述＜1＞～＜10＞中，乙醇处理步骤中的处理时间为30分钟以上，优选为1小时以上，且为20小时以下，优选为5小时以下，另外，为1～20小时、优选为1～5小时的范围。
＜12＞在上述＜1＞～＜11＞中，在吸附柱处理步骤中，使在乙醇处理步骤中所得到的粗人参提取物通过吸附柱，吸附疏水性成分，接着使优选为10～50体积％的乙醇通过，去除管柱中的非吸附物质(糖类、有机酸类等)，然后通过优选为30～80％的乙醇使疏水性成分溶出，回收其溶出物。
＜13＞一种人参提取物，其是通过如上述＜1＞、＜5＞～＜12＞的制造方法而得到的。
＜14＞在上述＜13＞中，Rg3含量以干燥时残留的残量(即，固形物成分的量)计，优选为1质量％以上，更优选为3质量％以上，且优选为20质量％以下，更优选为10质量％以下，另外，优选为1～20质量％，更优选为3～10质量％。
[实施例]
试验例1：利用乙醇处理及吸附柱处理得到的着色减少效果
(1)提取处理
将红参(自新和物产取得)20g粉碎，添加离子交换水200mL，用中药煎煮器(EK-SA10型)以100℃进行热水提取30小时后，添加下述表1中的各个溶剂，放置1小时后进行过滤，获得处理液1～3。
[表1]
添加溶剂 着色度 着色减少率(％) Rg3量(mg)
处理液1 乙醇800mL 0.08 39.8 16.40
处理液2 乙醇500mL、水300mL 0.075 43.6 13.54
处理液3 水800mL 0.133 - 6.08
所得到的各个处理液的着色度是使用HITACHI分光光度计(型号U-2001型)，向玻璃槽中滴加试样而进行测定。分析时的分光光度计的测定波长设定为450nm。
着色减少率是根据“着色减少率(％)＝1－(处理液的吸光度/处理液3的吸光度)×100”而求出的。
Rg3量是基于下述表2的条件，通过HPLC(highperformanceliquidchromatography，高效液相色谱法)定量的值。
[表2]
HPLC条件
分钟 A B
0 65 35
2 65 35
6 50 50
11 50 50
A：0.01％TFA/H2O
B：CH3CN
Poroshell1202.7μm3.0*75
UV(210nm)检测
1mL/min40℃
注入10μL
根据上述表1可知，用乙醇或乙醇水溶液对人参的加热提取物进行处理所得的处理液1、2，相对于未进行乙醇处理的处理液3，粗人参提取物中的Rg3量没有减少，但着色得到了减少。
(2)柱的吸附处理
在200mL上述处理液1中添加水200mL，使其通过填充有DiaionHP-20(三菱化学公司制造)的吸附柱。接着，用40体积％乙醇0.6L进行清洗，最后用60体积％乙醇1L进行回收，将60体积％乙醇组分进行干燥而得到表3的实施例1的固形物成分1.45g。
在200mL上述处理液2中添加乙醇60mL以及水140mL，使其通过填充有DiaionHP-20(三菱化学公司制造)的吸附柱。接着，用40体积％乙醇0.6L进行清洗，最后用60体积％乙醇1L进行回收，将60体积％乙醇组分进行干燥而得到表3的实施例2的固形物成分1.90g。
另外，在上述处理液1、2的各自10mL中，混合活性碳(Carbolafin(JapanEnviroChemicals公司制造))100mg，在室温下搅拌1小时后，进行过滤，获得表3的比较例1、2的人参提取物。
另外，在200mL上述处理液3中添加乙醇140mL以及水60mL，使其通过填充有DiaionHP-20(三菱化学公司制造)的吸附柱。接着，用40体积％乙醇0.6L进行清洗，最后用60体积％乙醇1L进行回收，将60体积％乙醇组分进行干燥而得到表3的比较例3的固形物成分1.98g。
利用与上述相同的方法，对所得到的各提取物测定着色度及Rg3量以及着色减少率(着色减少率(％)＝1－(处理前的吸光度/处理后的吸光度)×100)，将其结果示于下述表3中。
[表3]
根据上述表3的结果可知，进行了吸附柱处理的实施例1、2的人参提取物与吸附柱处理前的提取物相比，着色得到了减少。另外，进行了活性碳处理的比较例1、2虽然减少了着色，但人参提取物中的Rg3量大幅减少。另外，未进行乙醇处理的比较例3的着色未得到减少。
试验例2：颜色稳定性
利用与上述相同的方法，测定利用与上述实施例1相同的方法所得到的人参提取物A、以及利用与上述比较例1相同的方法所得到的人参提取物B的着色度、以及在60℃下放置1个月后的着色度，将其结果示于下述表4中。
[表4]
根据上述表4的结果可知，相对于未进行吸附柱处理的人参提取物B，进行了乙醇提取处理及吸附柱处理的人参提取物A的颜色稳定性得到了提高。
试验例3：提取条件的研究
将红参(自新和物产取得)100g粉碎，添加离子交换水850mL，在下述表5所示的条件下进行提取。在粗提取液中添加乙醇3400mL后，进行过滤，除去溶剂而得到提取物。对各个提取物求出将提取物进行干燥时残留的残量即固形物成分的量(固形物成分)每1g中的Rg3量(Rg3的定量与试验例1所示的方法相同)。将结果一并示于表5中。
[表5]
根据表5确认到，人参提取优选在超过90℃的温度条件下进行，最优选为以100℃进行30小时。

Claims (5)

1.一种人参提取物的制造方法，其特征在于：
包括下述步骤(1)～(3)：
(1)将人参在水中以95～100℃加热提取0.5～50小时的步骤；
(2)对(1)中所获得的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物而获得粗人参提取物的步骤；以及
(3)使用填充有大孔树脂的吸附柱对(2)中所获得的粗人参提取物进行精制的步骤。
2.如权利要求1所述的方法，其中，
加热提取时间为15～30小时。
3.一种人参提取物，其是通过权利要求1或2所述的制造方法而得到的。
4.一种人参提取物的着色减少方法，其特征在于：
对人参的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物后，使用填充有大孔树脂的吸附柱进行精制。
5.一种人参提取物的颜色稳定化方法，其特征在于：
对人参的加热提取物以乙醇浓度成为60～90体积％的方式添加乙醇，去除沉淀物后，使用填充有大孔树脂的吸附柱进行精制。
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