BR112020009818A2 - inibidores kras g12c - Google Patents

inibidores kras g12c Download PDF

Info

Publication number
BR112020009818A2
BR112020009818A2 BR112020009818-3A BR112020009818A BR112020009818A2 BR 112020009818 A2 BR112020009818 A2 BR 112020009818A2 BR 112020009818 A BR112020009818 A BR 112020009818A BR 112020009818 A2 BR112020009818 A2 BR 112020009818A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
compound according
alkyl
mmol
fact
optionally substituted
Prior art date
Application number
BR112020009818-3A
Other languages
English (en)
Inventor
James F. Blake
Pavel Savechenkov
Guy P.A. Vigers
Christopher Ronald Smith
Martha E. Rodriguez
Laurence E. Burgess
Mark Joseph Chicarelli
James Gail Christensen
Adam Cook
Jay Bradford Fell
John P. Fischer
Matthew Arnold Marx
Macedonio J. Mejia
Original Assignee
Mirati Therapeutics, Inc.
Array Biopharma Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Mirati Therapeutics, Inc., Array Biopharma Inc. filed Critical Mirati Therapeutics, Inc.
Publication of BR112020009818A2 publication Critical patent/BR112020009818A2/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/08—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

A presente invenção se refere a compostos que inibem KRas G12C. Em particular, a presente invenção se refere a compostos que inibem irreversivelmente a atividade de KRas G12C, composições farmacêuticas compreendendo os compostos e métodos de uso para os mesmos.

Description

INIBIDORES DE KRAS G12C
CAMPO DA INVENÇÃO
[0001] A presente invenção se refere a compostos que inibem KRas G12C. Em particular, a presente invenção se refere a compostos que inibem irreversivelmente a atividade de KRas G12C, composições farmacêuticas compreendendo os compostos e métodos de uso para os mesmos.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[0002] O Homólogo de Oncogene Viral de Sarcoma de Rato Kirsten 2 (“KRas”) é uma pequena GTPase e um membro da família Ras de oncogenes. KRas serve a um comutador molecular ciclando entre estados inativo (ligado a PIB) e ativo (ligado a GTP) para transduzir sinais celulares a montante recebidos de múltiplas tirosina cinases para efetores a jusante para regular uma ampla variedade de processos, incluindo proliferação celular (por exemplo, ver Alamgeer et al., (2013) Current Opin Pharmcol. 13:394-401).
[0003] O papel de KRas ativado em malignidade foi observado há mais de trinta anos (por exemplo, ver Santos et al., (1984) Science 223:661-664). A expressão aberrante de KRas é responsável por até 20% de todos os cânceres e mutações Kras oncogênicas que estabilizam a ligação de GTP e levam à ativação constitutiva de KRas e sinalização a jusante foi reportada em 25 a 30% dos adenocarcinomas de pulmão. (por exemplo, ver Samatar e Poulikakos (2014) Nat Rev Drug Disc 13(12): 928-942 doi: 10.1038/nrd428). Substituições de nucleotídeo único que resultam em mutações missense em códons 12 e 13 da sequência de aminoácido primária de KRas compreendem aproximadamente 40% destas mutações condutoras de KRas em adenocarcinoma de pulmão, com uma transversão G12C sendo a mutação de ativação mais comum (por exemplo, Dogan et al., (2012) Clin Cancer Res 18(22):6169-6177, publicado online em 26 de setembro de 2012. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-11-3265).
[0004] O papel bem conhecido de KRAs na malignidade e na descoberta destas frequentes mutações em KRas em vários tipos de tumores fizeram o KRas um alvo altamente atraente da indústria farmacêutica para terapia de câncer. Não obstante trinta anos de esforços de descoberta em grande escala para desenvolver inibidores de KRas para tratar câncer, nenhum inibidor de KRas demonstrou segurança e/ou eficácia suficientes para obter aprovação regulatória (por exemplo, ver McCormick (2015) Clin Cancer Res. 21 (8):1797-1801).
[0005] Apesar de muitos esforços fracassados para atingir KRas, compostos que inibem atividade de KRas ainda são altamente desejáveis e estão sob investigação, incluindo aqueles que interrompem efetores, tal como fatores de troca de nucleotídeo guanina (por exemplo, ver Sun et al., (2012) Agnew Chem Int Ed Engl. 51(25):6140-6143 doi: 10.1002/anie201201358), assim como têm como alvo KRas G12C (por exemplo, ver Ostrem et al., (2013) Nature 503:548- 551). Claramente, permanece um interesse e esforço contínuos para desenvolver inibidores de KRas, particularmente inibidores de ativação de mutantes de KRas, incluindo KRas G12C.
[0006] Assim, é necessário desenvolver novos inibidores de KRas G12C que demonstrem eficácia, estabilidade e/ou segurança suficientes para tratar câncer mediado por KRas G12C. Os compostos e as composições da presente invenção superam vantajosamente uma ou mais das deficiências anteriores, fornecendo inibidores de KRas G12C seletivos.
SUMARIO DA INVENÇÃO
[0007] Em um aspecto da invenção, são fornecidos compostos que inibem atividade de KRas G12C. Em certas modalidades, os compostos são representados pela fórmula (I):
Fórmula (I)
[0008] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que:
[0010] X é um ane de 4-12 membros saturado ou parcialmente saturado monoclico, em ponte ou espirocíclico, em que o anel saturado ou parcialmente saturado monocíclico é opcionalmente substituído por um ou mais R8;
[0011] Y é uma ligação, O, S ou NR5;
[0012] R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p ou –SO2C(RA) C(RB)p;
[0013] R2 é hidrogênio, alquil, hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, -Z-NR5R10, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril, ou heteroarilalquil, em que cada um de Z, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril e heteroarilalquil podem ser, opcionalmente, substituídos por um ou mais R9;
[0014] Z é C1 - C4 alquileno;
[0015] cada R3 é independentemente C1 - C3 alquil, oxo, haloalquil;
[0016] L é uma ligação, -C(O)- ou C1 - C3 alquileno;
[0017] R4 é hidrogênio, cicloalquil, heterociclil, aril, aralquil ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterocociclil, aril, aralquil e heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7;
[0018] cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil;
[0019] R6 é cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, aril, ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterococlil, aril, ou heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R7;
[0020] cada R7 é independentemente halogênio, hidroxil, C1 - C6 alquil, cicloalquil, alcóxi, haloalquil, amino, ciano, heteroalquil, hidroxialquil ou Q- haloalquil, em que Q é O ou S;
[0021] R8 é oxo, C1 - C3-alquil, C2 - C4 alquinil, heteroalquil, ciano, -C(O)OR5, - C(O)N(R5)2, -N(R5)2, em que o C1 - C3 alquil pode ser opcionalmente substituído por ciano, halogêneo, -OR5, -N(R5)2 ou heteroaril
[0022] cada R9 é independentemente hidrogênio, oxo, acil, hidroxil, hidroxialquil, ciano, halogêneo, C1 - C6 alquil, aralquil, haloalquil, heteroalquil, cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, alcóxi, dialquilaminil, dialquilamidoalquil ou dialquilaminilalquil, em que o C1 - C6 alquil pode ser opcionalmente substituído por cicloalquil;
[0023] cada R10 é independentemente hidrogênio, acil, C1 - C3-alquil, heteroalquil ou hidroxialquil;
[0024] RA é ausente, hidrogênio ou C1 - C3 alquil;
[0025] cada RB é independentemente hidrogênio, C1 - C3 alquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil ou heterociclilalquil;
[0026] m é zero ou um inteiro entre 1 e 2;
[0027] p é um ou dois; e em que,
[0028] quando é uma ligação tripla, então, RA está ausente, RB está presente e p é igual a um,
[0029] ou quando é uma ligação dupla, então, RA está presente, RB está presente e p é igual a dois, ou RA, RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados, formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado opcionalmente substituído por um ou mais grupos R7.
[0030] Também estão incluídos compostos de Fórmula I tendo a Fórmula I-A: Fórmula I-A
[0031] em que R1, R3, R4, R5, R10, L e m são como definidos para a Fórmula I, R11 é hidrogênio, C1 - C3-alquil ou hidroxialquil e o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula I.
[0032] Também estão incluídos compostos de Fórmula I tendo a Fórmula I-B:
Fórmula I-B
[0033] em que R1, R3, R4, L e m são como definidos para a Fórmula I, R2 é heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R 9, onde R9 é como definido para Fórmula I, e o anel de piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula I.
[0034] Em certas modalidades, os compostos são representados pela Fórmula (II): Fórmula (II)
[0035] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
[0036] em que:
[0037] X é um ane de 4-12 membros saturado ou parcialmente saturado monoclico, em ponte ou espirocíclico, em que o anel saturado ou parcialmente saturado monocíclico é opcionalmente substituído por um ou mais R8;
[0038] Y é uma ligação, O, S ou NR5;
[0039] R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p ou –SO2C(RA) C(RB)p;
[0040] R2 é hidrogênio, alquil, hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, -Z-NR5R10, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril, ou heteroarilalquil, em que cada um de Z, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril e heteroarilalquil podem ser, opcionalmente, substituídos por um ou mais R9;
[0041] cada Z é C1 - C4 alquileno;
[0042] cada R3 é independentemente C1 - C3 alquil, oxo, haloalquil, hidroxil ou halogênio;
[0043] L é uma ligação, -C(O)- ou C1 - C3 alquileno;
[0044] R4 é hidrogênio, cicloalquil, heterociclil, aril, aralquil ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterocociclil, aril, aralquil e heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8;
[0045] cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil;
[0046] R6 é cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, aril, ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterococlil, aril, ou heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R7;
[0047] cada R7 é independentemente halogênio, hidroxil, C1 - C6 alquil, cicloalquil, alcóxi, haloalquil, amino, ciano, heteroalquil, hidroxialquil ou Q- haloalquil, em que Q é O ou S;
[0048] R8 é oxo, C1 - C3-alquil, C2 - C4 alquinil, heteroalquil, ciano, -C(O)OR5, - C(O)N(R5)2, -N(R5)2, em que o C1 - C3 alquil pode ser opcionalmente substituído por ciano, halogêneo, -OR5, -N(R5)2 ou heteroaril;
[0049] cada R9 é independentemente hidrogênio, oxo, acil, hidroxil, hidroxialquil, ciano, halogêneo, C1 - C6 alquil, aralquil, haloalquil, heteroalquil, cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, alcóxi, dialquilaminil, dialquilamidoalquil ou dialquilaminilalquil, em que o C1 - C6 alquil pode ser opcionalmente substituído por cicloalquil;
[0050] cada R10 é independentemente hidrogênio, acil, C1 - C3-alquil, heteroalquil ou hidroxialquil;
[0051] R11 é haloalquil;
[0052] RA é ausente, hidrogênio, deutério, ciano, halogêneo, C1 - C-3 alquil, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2 ou hidroxialquil;
[0053] cada RB é, independentemente, hidrogênio, deutério, ciano, C1 - C3- alquil, hidroxialquil, heteroalquil, C1 - C3 alcóxi, halogêneo, haloalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3-alquil, -CH2-NHC(O)C1 - C3 alquil, heteroaril, heteroarilalquil, dialquilaminilalquil, ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e C1 - C3-alquil, em que o heteroaril ou a porção heteroaril do heteroarilalquil é opcionalmente substituída por um ou mais R7;
[0054] ou quando é uma ligação dupla e p é de dois, um de RB é hidrogênio e RA e RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo;
[0055] m é zero ou um inteiro entre 1 e 2;
[0056] p é um ou dois; e em que,
[0057] quando é uma ligação tripla, então RA está ausente, p é igual a um e RB é hidroxialquil,
[0058] ou quando é uma ligação dupla, então RA está presente, RB está presente e p é igual a dois, em que quando RA é hidrogênio ou C1 - C3 alquil,
pelo menos um RB é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, hidroxialquil, heteroalquil, heteroaril, heteroarilalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3- alquil, -CH2-NHC(O)C1 - C3 alquil ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxil, alcóxi ou C1 - C3 alquil; ou quando cada RB é hidrogênio, então, RA é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, -C(O)N(R5)2, hidroxialquil ou heteroalquil.
[0059] Também estão incluídos compostos de Fórmula II tendo a Fórmula II-A: Fórmula II-A
[0060] em que R1, R3, R4, R5, R10, L e m são como definidos para a Fórmula II, R11 é hidrogênio, C1 - C3-alquil ou hidroxialquil e o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula II.
[0061] Também estão incluídos compostos de Fórmula II tendo a Fórmula II-B:
Fórmula II-B
[0062] em que R1, R3, R4, R8, L e m são como definidos para a Fórmula II, R2 é heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9 e o anel de piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula II.
[0063] Em outro aspecto da invenção, composições farmacêuticas são proporcionadas compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0064] Em ainda outro aspecto da invenção, métodos para inibir atividade de KRas G12C em uma célula, compreendendo contatar a célula com um composto de Fórmula I, Fórmula IA, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II- B. Em uma modalidade, o contato é in vitro. Em uma modalidade, o contato é in vivo.
[0065] Também é aqui fornecido um método para inibir proliferação de célula, in vitro ou in vivo, o método compreendendo contatar uma célula com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, Fórmula IA, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo, conforme aqui definido.
[0066] Também são fornecidos métodos para tratar câncer em um paciente compreendendo administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica da presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo.
[0067] Também é aqui fornecido um método para tratar uma doença ou um distúrbio associado a KRas G12C em um paciente em necessidade de tal tratamento, o método compreendendo administrar ao paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-a ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo, como aqui definido.
[0068] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo conforme definido aqui para uso em terapia.
[0069] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo conforme definido aqui para uso no tratamento de câncer.
[0070] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso na inibição de Kras G12C.
[0071] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo conforme definido aqui para uso no tratamento de uma doença ou um distúrbio associado a Kras G12C.
[0072] Também é aqui fornecido o uso de um composto de Fórmula I, Fórmula I- A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido aqui na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer.
[0073] Também é aqui fornecido um uso de um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido aqui na fabricação de um medicamento para a inibição de atividade de Kras G12C.
[0074] Também é aqui fornecido o uso de um composto de Fórmula I, Fórmula I- A, Fórmula 1-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido aqui na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou um distúrbio associado a Kras G12C.
[0075] Também é fornecido aqui um método para tratar câncer num paciente em necessidade do mesmo, o método compreendendo (a) determinar que o câncer está associado com uma mutação de KRas G12C (por exemplo, um câncer associado aKRas G12C); e (b) administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I- B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou uma composição farmacêutica do mesmo.
[0076] É também aqui proporcionado um processo para preparar um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0077] É também aqui proporcionado um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo obtido por um processo para preparar o composto como definido aqui.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[0078] A presente invenção se refere a inibidores de KRas G12C. Em particular, a presente invenção se refere a compostos que inibem irreversivelmente a atividade de KRas G12C, composições farmacêuticas compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos e métodos de uso para os mesmos.
DEFINIÇÕES
[0079] A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos aqui utilizados têm o mesmo significado que é comumente entendido por um versado na técnica à qual esta invenção pertence. Todas as patentes, pedidos de patentes e publicações aqui mencionadas são incorporadas por referência.
[0080] Como usado aqui, “KRas G12C” se refere a uma forma mutante de uma proteína KRas de mamífero que contém uma substituição de aminoácido de uma cisteína por uma glicina na posição de aminoácido 12. A atribuição de códon de aminoácido e posições de resíduo para KRas humano é baseada na sequência de aminoácido identificada por UniProtKB/Swiss-Prot P01116: Variante p.Gly12Cys.
[0081] Como usado aqui, um “inibidor de KRas G12C” se refere a compostos da presente invenção que são representados pelas fórmulas (I) como aqui descrito. Estes compostos são capazes de modular ou inibir negativamente toda ou uma porção da atividade enzimática de KRas G12C. Os inibidores de KRas G12C da presente invenção interagem e ligam irreversivelmente a KRas G12C, formando um aduto covalente com a cadeia lateral sulfidrila do resíduo de cisteína na posição 12, resultando na inibição da atividade enzimática de KRas G12C.
[0082] Uma “doença ou distúrbio associado a KRas G12C”, conforme aqui usado, se refere a doenças ou distúrbios associados ou mediados por ou tendo uma mutação de KRas G12C. Um exemplo não limitativo de uma doença ou um distúrbio associado a KRas G12C é um câncer associado a KRas G12C.
[0083] Conforme usado aqui, o termo “sujeito”, “indivíduo” ou “paciente”, usado de forma intercambiável, se refere a qualquer animal, incluindo mamíferos, tal como camundongos, ratos, outros roedores, coelhos, cães, gatos, suínos, bovinos, ovinos, cavalos, primatas e humanos. Em algumas modalidades, o paciente é um humano. Em algumas modalidades, o sujeito experimentou e/ou exibiu pelo menos um sintoma da doença ou do distúrbio a ser tratado e/ou prevenido. Em algumas modalidades, o sujeito foi identificado ou diagnosticado como tendo um câncer tendo uma mutação de KRas G12C (por exemplo, conforme determinado usando um ensaio ou kit aprovado por agência reguladora, por exemplo, ensaio ou kit aprovado pela FDA). Em algumas modalidades, o sujeito tem um tumor que é positivo para uma mutação de KRas G12C (por exemplo, conforme determinado usando um ensaio ou kit aprovado por agência reguladora). O sujeito pode ser um sujeito com tumor(es) que é/são positivo(s) para uma mutação de KRas G12C (por exemplo, identificado como positivo usando um ensaio ou kit aprovado por agência, por exemplo, ensaio ou kit aprovado pela FDA). O sujeito pode ser um sujeito cujos tumores têm uma mutação de KRas G12C (por exemplo, quando o tumor é identificado como tal usando um kit ou ensaio aprovado por agência reguladora, por exemplo, kit ou ensaio aprovado pela FDA). Em algumas modalidades, o sujeito é suspeito de ter um câncer associado ao gene de KRas G12C. Em algumas modalidades, o sujeito tem um registro clínico indicando que o sujeito tem um tumor que tem uma mutação de KRas G12C (e, opcionalmente, o registro clínico indica que o sujeito deve ser tratado com qualquer das composições aqui fornecidas).
[0084] Em algumas modalidades de qualquer dos métodos ou usos descritos aqui, um ensaio é usado para determinar se o paciente tem mutação de KRas G12C usando uma amostra (por exemplo, uma amostra biológica ou uma amostra de biópsia (por exemplo, uma amostra de biópsia embebida em parafina) de um paciente (por exemplo, um paciente suspeito de ter um câncer associado a KRas G12C, um paciente tendo um ou mais sintomas de um câncer associado a KRas G12C e/ou um paciente que tenha um risco aumentado de desenvolver um câncer associado a KRas G12C) pode incluir, por exemplo, sequenciamento de próxima geração, imuno-histoquímica, microscopia de fluorescência, análise FISH de separação, Southern blotting, Western blotting,
análise FACS, Northern blotting e amplificação baseada em PCR (por exemplo, RT-PCR e RT-PCR em tempo real quantitativa). Como é bem conhecido na técnica, os ensaios são tipicamente realizados, por exemplo, com pelo menos uma sonda de ácido nucleico marcada ou pelo menos um anticorpo marcado ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
[0085] O termo “agência reguladora” é uma agência de um país para a aprovação do uso médico de agentes farmacêuticos no país. Por exemplo, um exemplo não limitativo de uma agência reguladora é a U.S. Food and Drug Administration (FDA).
[0086] O termo “amino” se refere a –NH2;
[0087] O termo “acilo” se refere a -C(O)CH3.
[0088] O termo “alquil”, conforme aqui empregado, se refere a grupos alifáticos de cadeia linear e ramificada tendo 1 a 12 átomos de carbono, 1-8 átomos de carbono 1-6 átomos de carbono ou 1-3 átomos de carbono que são opcionalmente substituídos por um, dois ou três substituintes. Exemplos de grupos alquila incluem, sem limitação, metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila e hexila.
[0089] O termo “haloalquil” se refere a uma cadeia alquil na qual um ou mais hidrogênios foram substituídos por um halogêneo. Exemplos de haloalquilas são trifluorometil, difluorometil e fluorometil.
[0090] O termo “haloalquiloxi” se refere a -O-haloalquil.
[0091] Um grupo “alquileno” é um grupo alquila, como definido acima, que está posicionado entre e serve para conectar dois outros grupos químicos. Grupos alquileno exemplares incluem, sem limitação, metileno, etileno, propileno e butileno.
[0092] O termo “alcóxi” se refere a –OC1 - C6 alquil.
[0093] O termo “cicloalquil”, conforme aqui empregado, inclui grupos de hidrocarbonetos cíclicos saturados e parcialmente insaturados tendo 3 a 12 carbonos, por exemplo, 3 a 8 carbonos, e como um exemplo adicional 3 a 6 carbonos, em que o grupo cicloalquila é adicionalmente opcionalmente substituído. Exemplos de grupos cicloalquila incluem, sem limitação, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclopentenila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, ciclo-heptila e ciclo-octila.
[0094] O termo “heteroalquil” se refere a um grupo alquila, conforme definido acima, em que um ou mais átomos de carbono na cadeia são substituídos por um heteroátomo selecionado do grupo que consiste em O, S e N.
[0095] Conforme usado aqui, o termo “hidroxialquil” se refere a –alquil-OH.
[0096] O termo “di-hidroxialquil” se refere a um grupo alquila como definido aqui, em que dois átomos de carbono são substituídos cada um por um grupo hidroxila.
[0097] O termo “alquilaminil” se refere a -NRx-alquil, em que Rx é hidrogênio. Em uma modalidade, Rx é hidrogênio.
[0098] O termo “dialquilaminil” se refere a –N(Ry)2, em que cada Ry é C1 - C3 alquil.
[0099] O termo “alquilaminilalquil” se refere a alquil-NRx-alquil, em que Rx é hidrogênio. Em uma modalidade, Rx é hidrogênio.
[00100] O termo “dialquilaminilalquil” se refere a –alquil-N(Ry)2, em que cada Ry é C1 - C4 alquil, em que o alquil da -–alquil-N(Ry)2 pode ser opcionalmente substituído por hidróxi ou hidroxialquil.
[00101] Um grupo “arila” é uma fração aromática C6-C14 compreendendo um a três anéis aromáticos, que é opcionalmente substituído. Como uma modalidade, o grupo arila é um grupo C6-C10 arila. Exemplos de grupos arila incluem, sem limitação, fenila, naftila, antracenila, fluorenila e di- hidrobenzofuranila.
[00102] Um grupo “aralquila” ou “arilalquila” compreende um grupo arila covalentemente ligado a um grupo alquila, qualquer dos quais pode ser independentemente opcionalmente substituído ou não substituído. Um exemplo de um grupo aralquila é (C1-C6)alquil(C6-C10)aril incluindo, sem limitação, benzila, fenetila e naftilmetila. Um exemplo de um aralquil substituído é em que o grupo alquila é substituído por hidroxialquila.
[00103] Um grupo “heterociclil” ou “heterocíclico” é uma estrutura de anel tendo de cerca de 3 a cerca de 12 átomos, por exemplo, 4 a 8 átomos, em que um ou mais átomos são selecionados do grupo que consiste em N, O e S, o restante dos átomos de anel sendo carbono. O heterociclil pode ser um sistema de anel monocíclico, um bicíclico, um espirocíclico ou em ponte. O grupo heterocíclico é opcionalmente substituído por R7 no carbono ou nitrogênio em uma ou mais posições, em que R7 é como foi definido para a Fórmula I. O grupo heterocíclico é também, independentemente, opcionalmente substituído no nitrogênio por alquil, aril, aralquil, alquilcarbonil, alquilsulfonil, arilcarbonil, arilsulfonil, alcoxicarbonil, aralcoxicarbonil ou no enxofre por oxo ou alquil inferior. Exemplos de grupos heterocíclicos incluem, sem limitação, epóxi, azetidinila, aziridinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, pirrolidinila, pirrolidinonila, piperidinila, piperazinila, imidazolidinila, tiazolidinila, ditianila, tritianila, oxazolidinila, oxazolidinonila, deca-hidroquinolinila, piperidonila, 4- piperidinonila, tiomorfolinila, tiomorfolinila 1,1 dióido, morfolinila, oxazepanila, azabiciclo-hexanos, azabiciclo-heptanos e oxa azabiociclo-heptanos. Excluídos especificamente do escopo deste termo são os compostos tendo átomos de O e/ou S anulares adjacentes.
[00104] O termo “heterociclilalquil” se refere a um grupo heterociclil como aqui definido, ligado à porção restante da molécula via um ligante de alquila, em que o ligante de alquila do heterociclilalquil pode ser opcionalmente substituído por hidróxi ou hidroxialquil.
[00105] Como aqui utilizado, o termo “heteroaril” se refere a grupos tendo 5 a 14 átomos de anel, preferencialmente 5, 6, 9 ou 10 átomos de anel; tendo 6, 10 ou 14 π elétrons compartilhados em uma matriz cíclica; e tendo, além de átomos de carbono, de um a três heteroátomos por anel selecionados do grupo que consiste em N, O e S. Exemplos de grupos heteroarila incluem acridinila, azocinila, benzimidazolila, benzofuranila, benzotiofuranila, benzotiofenila, benzoxazolila, benzotiazolila, benzotriazolil, benzotetrazolila, benzoisoxazolila, benzoisotiazolila, benzimidazolinila, carbazolila, 4aH-carbazolila, carbolinila, cromanila, cromenila, cinnolinila, furanila, furazanila, imidazolinila, imidazolila, 1H-indidazolila, indolenila, indolinila, indolizinila, isoindolila, isoquinolinila, isotiazolila, isoxazolila, metilenodioxifenila, naftiridinila, octa-hidroisoquinolinila, oxadiazolila, 1,2,3-oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila, 1,3,4- oxadiazolila, oxazolidinila, oxazolila, oxazolidinila, pirimidinila, fenantridinila, fenantrolinila, fenazinila, fenotiazinila, fenoxati-inila, fenoxazinila, ftalazinila, piperonila, pteridinila, purinila, piranila, pirazinila, pirazolidinila, pirazolinila, pirazolila, piridazinila, pirido-oxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinila, piridila, pirimidinila, pirrolinila, 2H-pirrolila, pirrolila, quinazolinila, quinolinila, 4H- quinolizinila, quinoxalinila, quinuclidinila, tetra-hidroisoquinolinila, tetrahidroquinolinila, tetrazolila, 6H-1,2,5-tiadiazinila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,4- tiadiazolila, 1,2,5-tiadiazolila, 1,3,4-tiadiazolila, tiantrenila, tiazolila, tienila, tienotiazolila, tieno-oxazolila, tienoimidazolila, tiofenila, triazinila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila, 1,2,5-triazolila, 1,3,4-triazolla e xantenila.
[00106] Um grupo “heteroarilalquila” compreende um grupo heteroarila covalentemente ligado a um grupo alquila, em que o radical está no grupo alquila, qualquer um dos quais é independentemente opcionalmente substituído ou não substituído. Exemplos de grupos heteroarilalquila incluem um grupo heteroarila com 5, 6, 9 ou 10 átomos de anel ligados a um grupo C1 - C6 alquila. Exemplos de grupos heteroaralquila incluem piridilmetila, piridiletila, pirrolilmetila, pirroliletila, imidazolilmetila, imidazoliletila, tiazolilmetila, tiazoliletila, benzimidazolilmetila, benzimidazoliletila quinazolinilmetila, benzolinil metil, quinolinilmetil, benzofuranilmetil, indoliniletil isoquinolinilmetil, isoinodilmetil, cinolinilmetil e benzotiofeniletil. Excluídos especificamente do escopo deste termo são os compostos tendo átomos de O e/ou S anulares adjacentes.
[00107] Como aqui utilizado, “uma quantidade eficaz” de um composto é uma quantidade que é suficiente para modular ou inibir negativamente a atividade de KRas G12C. Essa quantidade pode ser administrada como uma dosagem única ou pode ser administrada de acordo com um regime, pelo qual ela é eficaz.
[00108] Como aqui utilizado, uma “quantidade terapeuticamente eficaz” de um composto é uma quantidade que é suficiente para melhorar, ou de alguma maneira reduzir, um sintoma ou parar ou reverter a progressão de uma condição, ou modular ou inibir negativamente a atividade de KRas G12C. Essa quantidade pode ser administrada como uma dosagem única ou pode ser administrada de acordo com um regime, pelo qual ela é eficaz.
[00109] Como aqui utilizado, tratamento significa qualquer maneira pela qual os sintomas ou a patologia de uma condição, um distúrbio ou uma doença sejam melhorados ou de outra forma beneficamente alterados. O tratamento também abrange qualquer uso farmacêutico das composições deste documento.
[00110] Como aqui utilizado, a melhoria dos sintomas de um distúrbio particular pela administração de uma composição farmacêutica particular se refere a qualquer diminuição, seja permanente ou temporária, duradoura ou transiente que possa ser atribuída ou associada à administração da composição.
COMPOSTOS
[00111] Em um aspecto da invenção, são fornecidos compostos representados pela fórmula (I): Fórmula (I)
[00112] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que:
[00113] X é um ane de 4-12 membros saturado ou parcialmente saturado monoclico, em ponte ou espirocíclico, em que o anel saturado ou parcialmente saturado monocíclico é opcionalmente substituído por um ou mais R8;
[00114] Y é uma ligação, O, S ou NR5;
[00115] R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p ou –SO2C(RA) C(RB)p;
[00116] R2 é hidrogênio, alquil, hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, -Z-NR5R10, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril, ou heteroarilalquil, em que cada um de Z, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril e heteroarilalquil podem ser, opcionalmente, substituídos por um ou mais R9;
[00117] Z é C1 - C4 alquileno;
[00118] cada R3 é independentemente C1 - C3 alquil, oxo, haloalquil;
[00119] L é uma ligação, -C(O)- ou C1 - C3 alquileno;
[00120] R4 é hidrogênio, cicloalquil, heterociclil, aril, aralquil ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterocociclil, aril, aralquil e heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7;
[00121] cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil;
[00122] R6 é cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, aril, ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterococlil, aril, ou heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R7;
[00123] cada R7 é independentemente halogênio, hidroxil, C1 - C6 alquil, cicloalquil, alcóxi, haloalquil, amino, ciano, heteroalquil, hidroxialquil ou Q- haloalquil, em que Q é O ou S;
[00124] R8 é oxo, C1 - C3-alquil, C2 - C4 alquinil, heteroalquil, ciano, - C(O)OR5, -C(O)N(R5)2, -N(R5)2, em que o C1 - C3 alquil pode ser opcionalmente substituído por ciano, halogêneo, -OR5, -N(R5)2 ou heteroaril;
[00125] cada R9 é independentemente hidrogênio, oxo, acil, hidroxil, hidroxialquil, ciano, halogêneo, C1 - C6 alquil, aralquil, haloalquil, heteroalquil, cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, alcóxi, dialquilaminil, dialquilamidoalquil ou dialquilaminilalquil, em que o C1 - C6 alquil pode ser opcionalmente substituído por cicloalquil;
[00126] cada R10 é independentemente hidrogênio, acil, C1 - C3-alquil, heteroalquil ou hidroxialquil;
[00127] RA é ausente, hidrogênio ou C1 - C3 alquil;
[00128] cada RB é independentemente hidrogênio, C1 - C3 alquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil ou heterociclilalquil;
[0100] m é zero ou um inteiro entre 1 e 2;
[0101] p é um ou dois; e em que,
[0102] quando é uma ligação tripla, então, RA está ausente, RB está presente e p é igual a um;
[0103] ou quando é uma ligação dupla, então, RA está presente, RB está presente e p é igual a dois, ou RA, RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados, formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado opcionalmente substituído por um ou mais grupos R7.
[0104] Em certas modalidades, R1-X é:
[0105] em que R1 é definido para a Fórmula I e o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula I. Em certas modalidades, R8 é C1 - C3 alquil em que o alquil é opcionalmente substituído por ciano ou OR5, ou -C(O)N(R5)2, em que cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil.
[0106] Em modalidades particulares, RR1 é -C(O)C(RA) C(RB)p em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula I. Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação tripla e RA está ausente, p é um e RB é C1 - C3 alquil. Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é hidrogênio ou C1 - C3alquil, p é dois e cada RB é, independentemente, hidrogênio, C1 - C3alquil, dialquilaminilalquil ou heterociclilalquil. Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) =C(RB)p, em que RA é hidrogênio ou C1 - C3alquil, p é dois, um dos referidos RB é hidrogênio, C1 - C3alquil, dialquilaminilalquil ou heterociclilalquil e o outro RB é hidrogênio ou C1 - C3alquil. Numa modalidade, R1 é -C(O)CH=CH2.
[0107] Numa modalidade, Y é O ou NR5 e R2 é selecionado do grupo consistindo em alquil, hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, heterociclil, heterociclilalquil e heteroaril. Numa modalidade, Y é O e R2 é hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, ou dialquilaminilalquil, em que o alquilaminilalquil ou dialquilaminilalquil é opcionalmente substituído por um ou mais R9. Em uma modalidade, o alquilaminilalquil ou dialquilaminilalquil opcionalmente substituído é selecionado independentemente de metilaminilpropan-2-il, dimetilaminiletil, metiletilaminiletil, dimetilaminilpropanil, dimetilaminilpropan-2-il, dimetilaminilbutanil, dimetilaminilbutan-2-il, 2- dimetilaminilpropil, ou dietilaminiletil. Numa modalidade, Y é O ou NR 5 e R2 é um heterociclil ou heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R 9. Exemplos não limitativos de um ou mais R9, quando R2 é heterociclil ou heterociclilalquil incluem C1 - C3-alquil, acil, oxo, ciano, alcóxi, cicloalquil, cicloalquilmetil, halogêneo e hidroxil. Exemplos não limitativos de R2 heterociclis opcionalmente substituídos por um ou mais R9 incluem azetidinil, azetidinil C1 - C3alquil-substituído (por exemplo, metilazetidinil), azetidinil substituído por halo (por exemplo, difluoroazetidinil), tetra-hidropirano, pirrolidinil, pirrolidinil C1 - C3- alquil substituído (por exemplo, metilpirrolidinil, dimetilpirrolidinil e isopropilpirrolidinil), cicloalquilalquilpirrolidinil, hidroxipirrolindinil, pirrolidinil halo- substituído (por exemplo, fluoropirrolidinil e difluoropirrolidinil), metoxietilpirrolidinil, (N-metil)metoxipirrolidinil, piperazinil, dimetilaminilpirrolidinil, morfolinil, metilmorfolinil, 1,4-oxazepanil, piperdinil, piperidinil C1 - C3 alquil substituído (por exemplo, metilpiperidinil), acilpiperdinil, cianopiperidinil,
cicloalquilpiperdinil, halopiperidinil (por exemplo, fluoropiperidinil), di- halopiperidinil (por exemplo, difluoropiperidinil), alcoxipiperidinil, pirrolidonil, piperidonil, tiomorfolinil-1,1-dióido, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanil, oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il e azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il.
[0108] Numa modalidade, Y é O e R2 é heteroarilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9. Numa modalidade, a porção heteroaril do heteroarilalquil é piridinil.
[0109] Numa modalidade, Y é O e R2 é -ZR5R10. Numa modalidade, R5 é C1 - C3 alquil e R10 é independentemente selecionado de acil, hidroxialquil ou alcóxi.
[0110] Numa modalidade, Y é uma ligação e R2 é hidrogênio, heterociclil ou aril, em que os referidos heterociclil e aril são opcionalmente substituídos por um ou mais R9.
[0111] Numa modalidade, Y é uma ligação e R2 é hidrogênio.
[0112] Numa modalidade, Y é uma ligação e R2 é heterociclil opcionalmente substituído por um ou mais R9. Numa modalidade, Y é uma ligação e R2 é heterociclil opcionalmente substituído por metil, halogênio ou dimetilamino. Exemplos não limitativos de R2 heterociclis incluem azetidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil e pirrolidinil.
[0113] Numa modalidade, Y é uma ligação e R2 é aril opcionalmente substituído por um ou mais R9. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por heterociclilalquil.
[0114] Em certas outras modalidades, quando X é um anel monocíclico, R 4 é aril. Numa modalidade, R4 é selecionada do grupo que consiste em fenil e naftil e é opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7. Exemplos de substituintes R7 incluem halogêneo, hidroxil, C1 - C6 alquil (por exemplo, C1 - C3 alquil), cicloalquil, haloalquil, Q-haloalquil, amino, ciano, hidroxialquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, hidroxil, trifluorometoxi, hidroxil, fluoro, cloro, isopropil, ciclopropil e trifluorometiltio. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um a três grupos R 7 independentemente selecionados de hidroxil, flúor e cloro. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por hidroxil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por Q-haloalquil e hidroxil ou flúor.
[0115] Numa modalidade, R4 é aril em que aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil. Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R7 independentemente selecionados de hidroxil, halogênio, C1 - C3 alquil, amino e haloalquil. Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um a três substituintes R7 independentemente selecionados de difluorometil, metil, hidroxil, amino, fluoro e cloro.
[0116] Numa modalidade, o aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais halogêneos. Em uma modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil e trifluorometil ou C1 - C3 alquil. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil.
[0117] Numa modalidade, R4 é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, R4 é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil, alcóxi e amino. Em uma modalidade, R4 é indolil, indazolil, quinolinil, isoquinolinil, piridinil ou benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, R4 é indoli, indazolil, quinolinil, isoquinolinil, piridinil ou benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil, alcóxi e amino.
[0118] Em ainda outras modalidades, R4 é heteroaril, opcionalmente um indolil ou um indazolil, cada um dos quais pode ser substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, R4 é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R7 selecionados independentemente do grupo consistindo em halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indazolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de alcóxi, haloalquil e C1 - C6 alquil. Em outras modalidades, o R4 heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada qual opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é um quinolinil ou isoquinolinil, cada um, opcionalmente, substituído por um ou mais R7 independentemente selecionado de amino, hidroxil, C1 - C3 alquil e hidroxil. Numa modalidade, o R4 heteroaril é um quinolinil ou isoquinolinil, cada um, opcionalmente substituído por R7 selecionado de hidroxil e amino. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é um piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de C1 - C3, halogêneo e haloalquil. Em outras modalidades, o R4 heteroaril é benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R7, tal como hidroxil, um ou dois C1 - C3-alquil, ou hidroxil e um ou dois C1 - C3 alquil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou mais R 7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de hidroxil e C1 - C3alquil.
[0119] Numa modalidade, em que X é um anel monocíclico, R4 é aralquil. Em certas modalidades, o aralquil é benzil. Em outras modalidades, o alquil do grupo benzila é opcionalmente substituído por hidroxialquil.
[0120] Numa modalidade, L é uma ligação.
[0121] Numa modalidade, m é um e R3 é C1 - C3 alquil.
[0122] Numa modalidade, m é um e R3 é oxo.
[0123] Numa modalidade, R8 é heteroalquil, C2 - C4 alquinil ou C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por -OR5, ciano ou heteroaril. Numa modalidade, R8 é metil, cianometil, metoximetil, hidroximetil. Numa modalidade, R8 é metil. Numa modalidade, R8 é cianometil. Numa modalidade, R8 é hidroximetil.
[0124] Em uma modalidade, a Fórmula I inclui compostos tendo a Fórmula I-A:
[0125] em que R1, R3, R4, R5, R10, L e m são como definidos para a Fórmula I, R11 é hidrogênio, metil ou hidroxialquil e o anel piperidinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula I. Em uma modalidade, L é uma ligação. Numa modalidade, R 4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7. Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, cada R7 é selecionado independentemente de hidroxil, amino, halogêneo, C1 - C3-alquil, haloalquil, Q- haloalquil, cicloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, R5 e R10 são cada um C1 - C3 alquil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R 7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, hidroxil, trifluorometoxi, hidroxil, fluoro, cloro, isopropil, ciclopropil e trifluorometiltio.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um a três grupos R 7 independentemente selecionados de hidroxil, flúor e cloro.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por hidroxil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por Q-haloalquil e hidroxil ou flúor.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil.
Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R 7 independentemente selecionados de hidroxil, halogênio, C1 - C3 alquil, amino e haloalquil.
Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um a três substituintes R7 independentemente selecionados de difluorometil, metil, hidroxil, amino, fluoro e cloro.
Numa modalidade, o aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais halogêneos.
Em uma modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil e trifluorometil ou C1 - C3alquil.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil.
Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é indazolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de alcóxi, haloalquil e C1 - C6 alquil. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7 independentemente selecionados de amino, hidroxil, C1 - C3alquil e hidroxil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é um piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R 7 selecionados independentemente de C1 - C3, halogêneo e haloalquil. Numa modalidade, o R4 heteroaril é benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R7, tal como hidroxil, um ou dois C1 - C3-alquil, ou hidroxil e um ou dois C1 - C3 alquil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de hidroxil e C1 - C3alquil. Numa modalidade, R11 é metil. Numa modalidade, o anel piperidinil não é substituído. Numa modalidade, o anel piperidinil é substituído por R8. Numa modalidade, R8 é C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por ciano ou hidroxil. Numa modalidade, R8 é metil, cianometil ou hidroximetil. Numa modalidade, R8 é metil. Numa modalidade, R8 é cianometil. Numa modalidade, R8 é hidroximetil. Em outra modalidade, R5 e R10 são cada um C1 - C3 alquilo, R11 é metil, R8 é metil, cianometil ou hidroximetil, L é uma ligação e R4 é aril ou heteroaril, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7.
[0126] Em uma modalidade, a Fórmula I inclui compostos tendo a Fórmula I-B:
Fórmula I-B e R1, R3, R4, R9, L e m são como definidos para a Fórmula I, R2 é heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9 e o anel piperidinil é opcionalmente substituído por R8, onde R8 é como definido para a Fórmula I.
Numa modalidade, a porção heterociclil do R2 heterociclilalquil é um sistema de anel monocíclico, biclico ou em ponte tendo um ou dois heteroátomos de anel independentemente selecionados de N e O.
Em uma modalidade, R2 heterociclil é pirrolidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, 1,4-oxazepanil, tiomorfolinil-1,1-dióxido, 3- azabiciclo[3.1.0]hexanil, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il e azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il, opcionalmente substituído por um ou mais R9. Em uma modalidade cada R9 é selecionado de acil, oxo, halogêneo, ciano, C1 - C3 alquil, alcóxi, hidroxialquil, heteroalquil, heterociclil, cicloalquil, aralquil ou dialquilamidoalquil.
Numa modalidade, L é uma ligação.
Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7. Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, cada R7 é selecionado independentemente de hidroxil, amino, halogêneo, C1 - C3-alquil, haloalquil, Q-haloalquil, cicloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R 7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q- haloalquil e hidroxil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, 2,2,2- trifluoroetil, hidroxil, trifluorometoxi, hidroxil, fluoro, cloro, isopropil, ciclopropil e trifluorometiltio.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um a três grupos R7 independentemente selecionados de hidroxil, flúor e cloro.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por hidroxil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por Q-haloalquil e hidroxil ou flúor.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R 7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil.
Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R7 independentemente selecionados de hidroxil, halogênio, C1 - C3 alquil, amino e haloalquil.
Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um a três substituintes R7 independentemente selecionados de difluorometil, metil, hidroxil, amino, fluoro e cloro.
Numa modalidade, o aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais halogêneos.
Em uma modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil e trifluorometil ou C1 - C3alquil.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil.
Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é indazolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de alcóxi, haloalquil e C1 - C6 alquil.
Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7 independentemente selecionados de amino, hidroxil, C1 - C3 alquil e hidroxil.
Em uma modalidade, o R4 heteroaril é um piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de C1 - C3, halogêneo e haloalquil. Numa modalidade, o R4 heteroaril é benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R7, tal como hidroxil, um ou dois C1 - C3-alquil, ou hidroxil e um ou dois C1 - C3 alquil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de hidroxil e C1 - C3 alquil. Numa modalidade, R11 é metil. Numa modalidade, o anel piperidinil não é substituído. Numa modalidade, o anel piperidinil é substituído por R8. Numa modalidade, o anel piperidinil não é substituído. Numa modalidade, o anel piperidinil é substituído por R8. Numa modalidade, R8 é C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por ciano, hidroxil ou metóxi. Numa modalidade, R8 é metil, cianometil, hidroximetil ou metoximetil.
[0127] Numa modalidade, X é um sistema de anel em ponte saturado. Exemplos não limitativos de sistemas de anel em ponte incluem diazabiciclo-heptanos e diazabiciclo-octanos. Em certas modalidades, quando X é um sistema de anel em ponte saturado, R1 é -C(O)CH=CH2. Numa modalidade, o sistema de anel em ponte é substituído por um ou dois grupos selecionados independentemente de R8, em que R8 é como definido para a Fórmula I. Numa modalidade, o sistema de anel em ponte é não substituído. Numa modalidade, o sistema de anel em ponte é diazabiciclo[3.2.1]octan-8-il ou diazabiciclo[3.2.1]octan-3-il.
[0128] Numa modalidade, R1-X é:
[0129] em que A e B são um sistema de anel espirocíclico, em que A e B são os mesmos ou diferentes e, independentemente, representam um sistema de anel saturado de 4-6 membros, em que os anéis são opcionalmente substituídos por um ou mais R8, em que R8 é como definido para a Fórmula I. Em certas modalidades, R1 é -C(O)CH=CH2. Em certas modalidades, os anéis A e B não são substituídos.
[0130] Numa modalidade, o sistema de anel espirocíclico não é substituído. Exemplos não limitativos de sistemas de anel espirocíclico incluem: , , , , ,
,e .
[0131] Em certas modalidades, quando A e B representam um sistema de anel espiroclico, R1 é -C(O)CH=CH2.
[0132] Em uma modalidade de Fórmula I, R2 é selecionado do grupo consistindo em hidroxialquil, dialquilaminilalquil, heterociclil e heterociclilalquil, em que cada um do heterociclil ou heterociclilalquil são, independentemente, opcionalmente substituídos por R9. Em outra modalidade, R2 é heterociclil e heterociclilalquil, em que cada um do heterociclil ou heterociclilalquil é, independentemente, opcionalmente substituído por um ou mais R9. Em certas modalidades, R2 é dialquilaminilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9. Exemplos não limitativos incluem dimetilaminiletil, dimetilaminilpropanil, dimetilaminilpropan-2- il, dimetilaminilbutanil, dimetilaminilbutan-2-il, 2-dimetilaminilpropanol ou dietilaminiletil.
[0133] Numa modalidade, Y é O e R2 é selecionado do grupo consistindo em hidroxialquil, dialquilaminilalquil, heterociclil, heterociclilalquil e -ZR5R10, em que R5 e R10 são como definidos para a Fórmula I.
[0134] Em uma modalidade, Y é O e R2 é selecionado do grupo consistindo em hidroxialquil, dialquilaminilalquil, heterociclil e heterociclilalquil, em que cada um do heterociclil ou heterociclilalquil são, independentemente, opcionalmente substituídos por R9. Em outra modalidade, R2 é heterociclil e heterociclilalquil, em que cada um do heterociclil ou heterociclilalquil é, independentemente, opcionalmente substituído por um ou mais R9. Exemplos não limitativos de R9 incluem acil, oxo, halogêneo, ciano, C1 - C6 alquil, alcóxi, hidroxialquil,
heteroalquil, cicloalquil, aralquil ou dialquilamidoalquil. Em certas modalidades, R2 é dialquilaminilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9. Exemplos não limitativos incluem dimetilaminiletil, dimetilaminilpropanil, dimetilaminilpropan-2-il, dimetilaminilbutanil, dimetilaminilbutan-2-il, 2- dimetilaminilpropanol ou dietilaminiletil.
[0135] Numa modalidade de Fórmula I, R4 é aril opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7. Numa modalidade, R4 é fenil ou naftil opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7. Numa modalidade, R4 é fenil ou naftil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, R4 é fenil ou naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R 7 selecionados independentemente de halogênio, hidroxil, C1 - C3alquil, cicloalquil, alcóxi, haloalquil ou Q-haloalquil, em que Q é O ou S. Numa modalidade, R4 é fenil ou naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R 7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, hidroxil, trifluorometoxi, hidroxil, flúor, cloro, isopropil, ciclopropil e metiltio.
[0136] Numa modalidade, R4 é isoquinolinil que é opcionalmente substituído por amino. Numa modalidade, R4 é aralquil. Em certas modalidades, o aralquil é benzil. Numa modalidade, o aralquil é benzil, em que a porção alquil é substituída por hidroxil ou hidroxialquil.
[0137] Exemplos não limitativos de compostos de Fórmula (I), Fórmula I-A e Fórmula I-B são selecionados do grupo que consiste em:
e
[0138] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[0139] Exemplos não limitativos adicionais de compostos de Fórmula (I), Fórmula I-A e Fórmula I-B são selecionados do grupo que consiste em:
e
[0140] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[0141] Em um aspecto da invenção, são fornecidos compostos representados pela fórmula (II):
Fórmula (II)
[0142] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
[0143] em que:
[0144] X é um ane de 4-12 membros saturado ou parcialmente saturado monoclico, em ponte ou espirocíclico, em que o anel saturado ou parcialmente saturado monocíclico é opcionalmente substituído por um ou mais R8;
[0145] Y é uma ligação, O, S ou NR5;
[0146] R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p ou –SO2C(RA) C(RB)p;
[0147] R2 é hidrogênio, alquil, hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, -Z-NR5R10, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril, ou heteroarilalquil, em que cada um de Z, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril e heteroarilalquil podem ser, opcionalmente, substituídos por um ou mais R9;
[0148] cada Z é C1 - C4 alquileno;
[0149] cada R3 é independentemente C1 - C3 alquil, oxo, haloalquil, hidroxil ou halogênio;
[0150] L é uma ligação, -C(O)- ou C1 - C3 alquileno;
[0151] R4 é hidrogênio, cicloalquil, heterociclil, aril, aralquil ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterocociclil, aril, aralquil e heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8;
[0152] cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil;
[0153] R6 é cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, aril, ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterococlil, aril, ou heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R7;
[0154] cada R7 é independentemente halogênio, hidroxil, C1 - C6 alquil, cicloalquil, alcóxi, haloalquil, amino, ciano, heteroalquil, hidroxialquil ou Q- haloalquil, em que Q é O ou S;
[0155] R8 é oxo, C1 - C3-alquil, C2 - C4 alquinil, heteroalquil, ciano, -C(O)OR5, - C(O)N(R5)2, -N(R5)2, em que o C1 - C3 alquil pode ser opcionalmente substituído por ciano, halogêneo, -OR5, -N(R5)2 ou heteroaril;
[0156] cada R9 é independentemente hidrogênio, oxo, acil, hidroxil, hidroxialquil, ciano, halogêneo, C1 - C6 alquil, aralquil, haloalquil, heteroalquil, cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, alcóxi, dialquilaminil, dialquilamidoalquil ou dialquilaminilalquil, em que o C1 - C6 alquil pode ser opcionalmente substituído por cicloalquil;
[0157] cada R10 é independentemente hidrogênio, acil, C1 - C3-alquil, heteroalquil ou hidroxialquil;
[0158] R11 é haloalquil;
[0159] RA é ausente, hidrogênio, deutério, ciano, halogêneo, C1 - C-3 alquil, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2 ou hidroxialquil;
[0160] cada RB é, independentemente, hidrogênio, deutério, ciano, C1 - C3- alquil, hidroxialquil, heteroalquil, C1 - C3 alcóxi, halogêneo, haloalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3-alquil, -CH2-NHC(O)C1 - C3 alquil, heteroaril, heteroarilalquil, dialquilaminilalquil, ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e C1 - C3-alquil, em que o heteroaril ou a porção heteroaril do heteroarilalquil é opcionalmente substituída por um ou mais R7;
[0161] ou quando é uma ligação dupla e p é de dois, um de RB é hidrogênio e RA e RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 4-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo;
[0162] m é zero ou um inteiro entre 1 e 2;
[0163] p é um ou dois; e em que,
[0164] quando é uma ligação tripla, então RA está ausente, p é igual a um e RB é hidroxialquil,
[0165] ou quando é uma ligação dupla, então RA está presente, RB está presente e p é igual a dois, em que quando RA é hidrogênio ou C1 - C3 alquil, pelo menos um RB é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, hidroxialquil, heteroalquil, heteroaril, heteroarilalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3- alquil, -CH2-NHC(O)C1 - C3 alquil ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxil, alcóxi e C1 - C3 alquil; ou quando cada RB é hidrogênio, então, RA é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, -C(O)N(R5)2, hidroxialquil ou heteroalquil.
[0166] Em certas modalidades, R1-X é:
[0167] em que R1 é como definido para a Fórmula II e o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula II. Em certas modalidades, R8 é C1 - C3 alquil em que o alquil é opcionalmente substituído por ciano ou OR5, ou -C(O)N(R5)2, em que cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil.
[0168] Em modalidades particulares, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula II. Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação tripla e RA está ausente, p é um e RB é hidroxialquil.
[0169] Em uma modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é hidrogênio ou C1 - C3 alquil, p é dois e pelo menos um RB é deutério, ciano, C1 - C3 alquil, hidroxialquil, heteroalquil, C1 - C3 alcóxi, halogêneo, haloalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3 alquil, - CH2NHC(O)C1 - C3 alquil, heteroaril, heteroarilalquil, dialquilaminilalquil ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e
C1 - C3 alquil, em que o heteroaril ou a porção heteroaril do heteroarilalquil é opcionalmente substituída por um ou mais R7. Numa modalidade, quando é uma ligação dupla, a ligação dupla está na configuração E. Numa modalidade, a ligação dupla está na configuração Z.
[0170] Em certas modalidades, um RB é heterociclilalquil substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi ou C1 - C3 alquil e o outro RB é hidrogênio. Numa modalidade, a porção heterociclil do heterociclilalquil é azetidinil substituída por um halogêneo. Em certas modalidades, o halogêneo é flúor. Numa modalidade, a porção heterociclil do heterociclilalquil é pirrolidinil substituído por um ou mais halogêneos. Em certas modalidades, o pirrolidinil substituído por halogênio é fluoropirrolidinil ou difluoropirrolidinil.
[0171] Em certas modalidades, um RB é halogêneo e o outro RB é hidrogênio. Numa modalidade, o halogêneo é cloro.
[0172] Em certas modalidades, um RB é haloalquil e o outro de RB é hidrogênio. Numa modalidade, o haloalquil é clorometil, fluorometil, difluorometil ou trifluorometil.
[0173] Em certas modalidades, um RB é heteroalquil e o outro RB é hidrogênio. Numa modalidade, o heteroalquil é metoximetil.
[0174] Em certas modalidades, um RB é -ZNR5R11, em que Z é metileno, R5 é metil e R11 é trifluorometil ou 2,2,2-trifluoroetil e o outro RB é hidrogênio.
[0175] Em certas modalidades, um RB é hidroxialquil e o outro RB é hidrogênio.
[0176] Em certas modalidades, um RB é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais R7 e o outro RB é hidrogênio. Em uma modalidade, o heteroaril é pirrolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil ou triazinil, cada um substituído por um ou mais R7.
[0177] Em certas modalidades, um RB é heteroarilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R7 e o outro RB é hidrogênio. Numa modalidade, a porção heteroaril do heteroarilalquil é pirrolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil ou triazinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, os um ou mais R7 é C1 - C3 alquil.
[0178] Em certas modalidades, um RB é -C(O)N(R5)2 e o outro RB é hidrogênio. Numa modalidade, cada R5 é hidrogênio. Numa modalidade, cada R5 é C1 - C3 alquil.
[0179] Em certas modalidades, um RB é -NHC(O)alquil C1 - C3 ou - CH2NHC(O)C1 - C3 alquil e o outro RB é hidrogênio. Numa modalidade, o C1 - C3 alquil é metil.
[0180] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que RA é deutério, ciano, halogêneo, C1 - C-3 alquil, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2, ou hidroxialquil, p é dois, cada RB é hidrogênio. Numa modalidade, RA é halogêneo. Numa modalidade, o halogêneo é flúor ou cloro. Numa modalidade, R A é haloalquil. Numa modalidade, o haloalquil é trifluorometil. Numa modalidade, RA é ciano. Numa modalidade, RA é heteroalquil. Numa modalidade, o heteroalquil é metóxi. Numa modalidade, RA é hidroxialquil.
[0181] Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é deutério, p é dois e pelo menos um RB é deutério.
[0182] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e p é de dois, um de RB é hidrogênio e RA e um de RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo;
[0183] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e p é dois, um RB é hidrogênio, o segundo RB é dialquilaminilalquil e RA é halogêneo.
[0184] Numa modalidade, Y é O ou NR5 e R2 é um heterociclil ou heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9. Exemplos não limitativos de um ou mais R9, quando R2 é heterociclil ou heterociclilalquil incluem C1 - C3-alquil, acil, oxo, ciano, alcóxi, cicloalquil, cicloalquilmetil, halogêneo e hidroxil. Exemplos não limitativos de R2 heterociclis opcionalmente substituídos por um ou mais R9 incluem azetidinil, azetidinil C1 - C3alquil substituído (por exemplo, metilazetidinil), azetidinil substituído por halo (por exemplo, difluoroazetidinil), tetra-hidropirano, pirrolidinil, pirrolidinil C1 - C3-alquil substituído (por exemplo, metilpirrolidinil, dimetilpirrolidinil e isopropilpirrolidinil), cicloalquilalquilpirrolidinil, hidroxipirrolindinil, pirrolidinil halo-substituído (por exemplo, fluoropirrolidinil e difluoropirrolidinil), N-metil pirrolidinil halo-substituído (por exemplo, N-metilfluoropirrolidinil e N-metildifluoropirrolidinil), metoxietilpirrolidinil, N-metilpirrolidinil alcóxi-substituído (por exemplo, (N- metil)metoxipirrolidinil), piperazinil, dimetilaminilpirrolidinil, morfolinil, metilmorfolinil, 1,4-oxazepanil, piperdinil, piperidinil C1 - C3 alquil substituído (por exemplo, metilpiperidinil), acilpiperdinil, cianopiperidinil, cicloalquilpiperdinil, halopiperidinil (por exemplo, fluoropiperidinil), di-halopiperidinil (por exemplo, difluoropiperidinil), alcoxipiperidinil, pirrolidonil, piperidonil, tiomorfolinil-1,1- dióido, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanil, oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il e azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il.
[0185] Numa modalidade, a porção heterociclil do heterociclilalquil é N- metilpirrolidinil. Numa modalidade, a porção heterociclil do heterociclilalquil é 3,3-difluoro-1-metilpirrolidinil.
[0186] Em certas outras modalidades, R4 é aril. Numa modalidade, R4 é selecionada do grupo que consiste em fenil e naftil e é opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7. Exemplos de substituintes R7 incluem halogêneo, hidroxil, C1 - C6 alquil (por exemplo, C1 - C3 alquil), cicloalquil, haloalquil, Q- haloalquil, amino, ciano, hidroxialquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R 7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q- haloalquil e hidroxil. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, hidroxil, fluoro e cloro. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um a três grupos R7 independentemente selecionados de metil, hidroxil, trifluorometil, flúor e cloro. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por hidroxil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por trifluorometil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil.
[0187] Numa modalidade, R4 é aril em que aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil. Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R7 independentemente selecionados de hidroxil, halogênio, C1 - C3 alquil, amino e haloalquil. Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um a três substituintes R7 independentemente selecionados de difluorometil, metil, hidroxil, amino, fluoro e cloro. Numa modalidade, o naftil substituído é 8- cloronaftil ou 8-metilnaftil.
[0188] Numa modalidade, o aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais halogêneos. Em uma modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil e trifluorometil ou C1 - C3alquil. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil.
[0189] Numa modalidade, R4 é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, R4 é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais R7 ou R8 selecionados independentemente de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil, alcóxi e amino. Em uma modalidade, R4 é indolil, indazolil, quinolinil, isoquinolinil, piridinil ou benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, R4 é indoli, indazolil, quinolinil, isoquinolinil, piridinil ou benzo[d]tiazolil, opcionalmente substituído por um ou mais R7 ou R8 selecionados independentemente de oxo, halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil, alcóxi e amino.
[0190] Em ainda outras modalidades, R4 é heteroaril, opcionalmente um indolil ou um indazolil, cada um dos quais pode ser substituído por um ou mais R 6, R7 ou R8. Numa modalidade, R4 é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R7 ou R8 selecionados independentemente do grupo consistindo em halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indazolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 ou R8 independentemente selecionados de oxo, trifluorometil, alcóxi, haloalquil e C1 - C6 alquil. Em outras modalidades, o R4 heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada qual opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é um quinolinil ou isoquinolinil, cada um, opcionalmente, substituído por um ou mais R7 independentemente selecionado de amino, hidroxil, C1 - C3 alquil e hidroxil. Numa modalidade, o R4 heteroaril é um quinolinil ou isoquinolinil, cada um, opcionalmente substituído por R 7 selecionado de hidroxil e amino. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é um piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, o R4 heteroaril é piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de C1 - C3, halogêneo e haloalquil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de hidroxil, trifluorometil e C1 - C3alquil.
[0191] Numa modalidade, L é uma ligação.
[0192] Numa modalidade, m é zero.
[0193] Numa modalidade, R8 é heteroalquil, C2 - C4 alquinil ou C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por -OR5, ciano ou heteroaril. Numa modalidade, R8 é metil, cianometil, metoximetil, hidroximetil. Numa modalidade, R8 é metil. Numa modalidade, R8 é cianometil. Numa modalidade, R8 é hidroximetil.
[0194] Em uma modalidade, a Fórmula I inclui compostos tendo a Fórmula II-A:
[0195] em que R1, R3, R4, R5, R10, L e m são como definidos para a Fórmula II, R11 é hidrogênio, metil ou hidroxialquil e o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula II.
[0196] Em modalidades particulares, RR1 é -C(O)C(RA) C(RB)p em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula II. Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação tripla e RA está ausente, p é um e RB é hidroxialquil.
[0197] Em uma modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é hidrogênio ou C1 - C3 alquil, p é dois e pelo menos um RB é deutério, ciano, C1 - C3 alquil, hidroxialquil, heteroalquil, C1 - C3 alcóxi, halogêneo, haloalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3 alquil, - CH2NHC(O)C1 - C3 alquil, heteroaril, heteroarilalquil ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e C1 - C3 alquil, em que o heteroaril ou a porção heteroaril do heteroarilalquil é opcionalmente substituída por um ou mais R7.
[0198] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que RA é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2, ou hidroxialquil, p é dois e cada RB é hidrogênio. Numa modalidade, RA é halogêneo. Numa modalidade, o halogêneo é flúor ou cloro. Numa modalidade, RA é haloalquil. Numa modalidade, o haloalquil é trifluorometil. Numa modalidade, R A é ciano. Numa modalidade, RA é heteroalquil. Numa modalidade, o heteroalquil é metoximetil. Numa modalidade, RA é hidroxialquil.
[0199] Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é deutério, p é dois e pelo menos um RB é deutério.
[0200] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e p é de dois, um de RB é hidrogênio e RA e um de RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo;
[0201] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e p é dois, um RB é hidrogênio, o segundo RB é dialquilaminilalquil e RA é halogêneo.
[0202] Numa modalidade, L é uma ligação.
Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R 6, R7 ou R8. Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, cada R7 ou R8 é selecionado independentemente de oxo, hidroxil, amino, halogêneo, C1 - C3-alquil, haloalquil, Q-haloalquil, cicloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, R5 e R10 são cada um C1 - C3 alquil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R 7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, hidroxil, trifluorometoxi, hidroxil, fluoro, cloro, isopropil, ciclopropil e trifluorometiltio.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um a três grupos R 7 independentemente selecionados de hidroxil, flúor e cloro.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por hidroxil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil.
Numa modalidade, o aril é fenil substituído por Q-haloalquil e hidroxil ou flúor.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R 7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil.
Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R7 independentemente selecionados de hidroxil, halogênio, C1 - C3 alquil, amino e haloalquil.
Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um a três substituintes R7 ou R8 independentemente selecionados de difluorometil, metil, hidroxil, amino, fluoro e cloro.
Numa modalidade, o aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais halogêneos.
Em uma modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil e trifluorometil ou C1 - C3alquil.
Numa modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é indazolil opcionalmente substituído por um ou dois R 7 ou R8 independentemente selecionados de oxo, alcóxi, haloalquil e C1 - C6 alquil. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R 7. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7 independentemente selecionados de amino, hidroxil, C1 - C3alquil e hidroxil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é um piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R 6, R7 ou R8. Numa modalidade, o R4 heteroaril é piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de C1 - C3, halogêneo e haloalquil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de hidroxil e C1 - C3alquil. Numa modalidade, R11 é metil. Numa modalidade, o anel piperazinil não é substituído. Numa modalidade, o anel piperazinil é substituído por R8. Numa modalidade, R8 é C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por ciano ou hidroxil. Numa modalidade, R8 é metil, cianometil ou hidroximetil. Numa modalidade, R8 é metil. Numa modalidade, R8 é cianometil. Numa modalidade, R8 é hidroximetil. Em outra modalidade, R5 e R10 são cada um C1 - C3 alquilo, R11 é metil, R8 é metil, cianometil ou hidroximetil, L é uma ligação e R4 é aril ou heteroaril, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7.
[0203] Em uma modalidade, a Fórmula I inclui compostos tendo a Fórmula II-B:
Fórmula II-B
[0204] em que R1, R3, R4, L e m são como definidos para a Fórmula II, R2 é heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9, em que R9 é como definido pela Fórmula (II) e o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R8 é como definido para a Fórmula II.
[0205] Em modalidades particulares, RR1 é -C(O)C(RA) C(RB)p em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula II. Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação tripla e RA está ausente, p é um e RB é hidroxialquil.
[0206] Em uma modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é hidrogênio ou C1 - C3 alquil, p é dois e pelo menos um RB é deutério, ciano, C1 - C3 alquil, hidroxialquil, heteroalquil, C1 - C3 alcóxi, halogêneo, haloalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3 alquil, - CH2NHC(O)C1 - C3 alquil, heteroaril, heteroarilalquil ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e C1 - C3 alquil, em que o heteroaril ou a porção heteroaril do heteroarilalquil é opcionalmente substituída por um ou mais R7.
[0207] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que RA é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2, ou hidroxialquil, p é dois e cada RB é hidrogênio. Numa modalidade, RA é halogêneo. Numa modalidade, o halogêneo é flúor ou cloro. Numa modalidade, RA é haloalquil. Numa modalidade, o haloalquil é trifluorometil. Numa modalidade, R A é ciano. Numa modalidade, RA é heteroalquil. Numa modalidade, o heteroalquil é metoximetil. Numa modalidade, RA é hidroxialquil.
[0208] Numa modalidade, R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e RA é deutério, p é dois e pelo menos um RB é deutério.
[0209] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e p é de dois, um de RB é hidrogênio e RA e um de RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo;
[0210] Em uma modalidade, R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p, em que é uma ligação dupla e p é dois, um RB é hidrogênio, o segundo RB é dialquilaminilalquil e RA é halogêneo.
[0211] Numa modalidade, a porção heterociclil do R2 heterociclilalquil é um sistema de anel monocíclico biclico ou em ponte tendo um ou dois heteroátomos de anel independentemente selecionados de N e O. Numa modalidade, R 2 heterociclil é azetidinil, metilazetidinil, etilazetidinil, isopropilazetidinil, difluoroazetidinil, ciclopropilazetidinil, tetra-hidropiranilazetidinil, tetra- hidropirano, pirrolidinil, metilpirrolidinil, diemetilpirrolidinil, isopropilpirrolidinil, cicloalquilalquilpirrolidinil, hidroxipirrolinidinil, fluoropirrolidinil, difluoropirrolidinil, (N-metil)fluoropirrolidinil, (N-metil)difluoropirrolidinil, metoxietilpirrolidinil, N- metilpirrolidinil alcoxi-substituído (por exemplo, (N-metil)metoxipirrolidinil), piperazinil, dimetilaminilpirrolidinil, pirrolidinona, metilpirrolidinona, morfolinil, metilmorfolinil, etilmorfolinil, isopropilmorfolinil, oxetanil, 1,4-oxazepanil,
piperidinil, metilpiperidinil, acilpiperidinil, cianopiperidinil, cicloalquilpiperidinil, halopiperidinil, di-halopiperdinil, fluoropiperidinil, difluoropiperidinil, alcoxipiperidinil, pirrolidonil, piperidinonil, tetra-hidropirrolizinil, tiomorfolinil-1,1- dióxido, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanil, oxa-5-azabiciclo[2,2]heptan-5-il ou azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il, opcionalmente substituído por um ou mais R9. Em uma modalidade cada R9 é selecionado de acil, oxo, halogêneo, ciano, C1 - C3 alquil, alcóxi, hidroxialquil, heteroalquil, cicloalquil, aralquil, heterociclil ou dialquilamidoalquil. Numa modalidade, L é uma ligação. Numa modalidade, a porção heterociclil do R2 heterociclilalquil é (N-metil)difluoropirrolidinil, incluindo 3,3-difluoro-1-metilpirrolidinil. Numa modalidade, a porção heterociclil do R2 heterociclilalquil é N-metilpirrolidinil.
[0212] Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, R4 é aril ou heteroaril, cada um dos quais é opcionalmente substituído por um ou mais R7. Numa modalidade, cada R7 é selecionado independentemente de hidroxil, amino, halogêneo, C1 - C3-alquil, haloalquil, Q-haloalquil, cicloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R 7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de metil, trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, hidroxil, trifluorometoxi, hidroxil, fluoro, cloro, isopropil, ciclopropil e trifluorometiltio. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por um a três grupos R 7 independentemente selecionados de hidroxil, flúor e cloro. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por hidroxil e C1 - C3 alquil ou dois C1 - C3 alquil. Numa modalidade, o aril é fenil substituído por Q-haloalquil e hidroxil ou flúor. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R 7 independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por um ou mais grupos R7 selecionados independentemente de halogênio, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil e hidroxil. Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um ou mais substituintes R 7 independentemente selecionados de hidroxil, halogênio, C1 - C3 alquil, amino e haloalquil. Numa modalidade, R4 é naftil opcionalmente substituído por um a três substituintes R7 independentemente selecionados de difluorometil, metil, hidroxil, amino, fluoro e cloro. Numa modalidade, o aril é naftil opcionalmente substituído por um ou mais halogêneos. Em uma modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil e trifluorometil ou C1 - C3alquil. Numa modalidade, o aril é naftil substituído por hidroxil. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é indazolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de alcóxi, haloalquil e C1 - C6 alquil.
[0213] Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R 6, R7 ou R8. Numa modalidade, R4 é heteroaril, em que o heteroaril é quinolinil ou isoquinolinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8 independentemente selecionados de oxo, amino, hidroxil, C1 - C3 alquil e hidroxil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é um piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, o R4 heteroaril é piridinil opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de C1 - C3, halogêneo e haloalquil. Em uma modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8. Numa modalidade, o R4 heteroaril é indolil opcionalmente substituído por um ou dois R7 independentemente selecionados de hidroxil e C1 - C3 alquil. Numa modalidade, R11 é metil. Numa modalidade, o anel piperazinil não é substituído. Numa modalidade, o anel piperazinil de Fórmula II-B é substituído por R8. Numa modalidade, R8 é C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por ciano, hidroxil ou metóxi. Numa modalidade, R8 é metil, cianometil, hidroximetil ou metoximetil.
[0214] Exemplos não limitativos de compostos de Fórmula (II), Fórmula II-A e Fórmula II-B são selecionados do grupo que consiste em: , , , , , , , , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, ,
, , ,
, , ,
, ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, ,
, , , , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, ,
,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , , e .
[0215] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
[0216] Numa modalidade, os compostos de Fórmula I incluem sais de ácido trifluoroacético dos compostos acima. Os compostos de Fórmula (I), Fórmula I- A, Fórmula I-B, Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B podem ser formulados em composições farmacêuticas.
COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS
[0217] Em outro aspecto, a invenção fornece composições farmacêuticas compreendendo um inibidor de KRas G12C de acordo com a invenção e um transportador, excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável. Os compostos da invenção podem ser formulados por qualquer método bem conhecido na técnica e podem ser preparados para administração por qualquer rota incluindo, sem limitação, parenteral, oral, sublingual, transdérmica, tópica, intranasal, intratraqueal ou intraretal. Em certas modalidades, os compostos da invenção são administrados intravenosamente em um ambiente hospitalar. Numa modalidade, a administração pode ser pela rota oral.
[0218] As características do transportador dependerão da rota de administração. Como aqui utilizado, o termo “farmaceuticamente aceitável” significa um material não tóxico que é compatível com um sistema biológico, tal como uma célula, cultura de célula, tecido ou organismo, e que não interfere na eficácia da atividade biológica do(s) ingrediente(s) ativo(s). Assim, as composições de acordo com a invenção podem conter, além do inibidor, diluentes, enchimento, sais, tampões, estabilizadores, solubilizadores e outros materiais bem conhecidos na técnica. A preparação de formulações farmaceuticamente aceitáveis é descrita em, por exemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ª Edição, ed. A. Gennaro, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1990.
[0219] Como aqui utilizado, o termo sal farmaceuticamente aceitável se refere a sais que retêm a atividade biológica desejada dos compostos acima identificados e exibem efeitos toxicológicos indesejados mínimos ou nulos. Exemplos de tais sais incluem, mas não se limitando a, sais de adição de ácido formados com ácidos inorgânicos (por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico e similares) e sais formados com ácidos orgânicos, tal como ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido tânico, ácido pamoico, ácido algínico, ácido poliglutâmico, ácido naftalenossulfônico, ácido naftalenodissulfônico e ácido poligalacturônico. Os compostos também podem ser administrados como sais quaternários farmaceuticamente aceitáveis conhecidos pelos especialistas na técnica, que incluem especificamente o sal de amônio quaternário da fórmula --NR+Z-, em que R é hidrogênio, alquil ou benzil e Z é um contraíon, incluindo cloreto, brometo, iodeto, -O-alquil, toluenossulfonato, metilsulfonato, sulfonato, fosfato ou carboxilato (tal como benzoato, succinato, acetato, glicolato, maleato, malato, citrato, tartarato, ascorbato, benzoato, cinamoato, mandeloato, benziloato e difenilacetato).
[0220] O composto ativo é incluído no transportador ou diluente farmaceuticamente aceitável em uma quantidade suficiente para fornecer a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz sem causar efeitos tóxicos sérios no paciente tratado. Em uma modalidade, uma dose do composto ativo para todas as condições mencionadas acima está na faixa de cerca de 0,01 a 300 mg/kg, por exemplo, 0,1 a 100 mg/kg por dia e como um exemplo adicional 0,5 a cerca de 25 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia. Uma dosagem tópica típica variará de 0,01 a 3% peso/peso em um transportador adequado. A faixa de dosagem eficaz dos derivados farmaceuticamente aceitáveis pode ser calculada com base no peso do composto parental a ser distribuído. Se o derivado exibir atividade em si, a dosagem eficaz pode ser estimada como acima usando o peso do derivado ou por outros meios conhecidos dos versados na técnica.
[0221] As composições farmacêuticas compreendendo compostos da presente invenção podem ser utilizadas nos métodos de uso aqui descritos.
MÉTODOS DE USO
[0222] Em ainda outro aspecto, a invenção fornece métodos para inibir atividade de KRas G12C em uma célula compreendendo contatar a célula na qual a inibição de atividade de KRas G12C é desejada com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo ou composições farmacêuticas contendo o composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma modalidade, o contato é in vitro. Em uma modalidade, o contato é in vivo.
[0223] Como aqui utilizado, o termo “contatar” se refere à união em ponte juntas de frações indicadas em um sistema in vitro ou em um sistema in vivo. Por exemplo, “contatar” um KRas G12C com um composto aqui fornecido inclui a administração de um composto aqui fornecido a um indivíduo ou paciente, tal como um humano, tendo KRas G12C, bem como, por exemplo, a introdução de um composto aqui fornecido em uma amostra contendo uma preparação celular ou purificada contendo o KRas G12C.
[0224] Em uma modalidade, uma célula na qual a inibição da atividade de KRas G12C é desejada é contatada com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B, para modular negativamente a atividade de KRas G12C. Em outras modalidades, uma quantidade terapeuticamente eficaz de sal farmaceuticamente aceitável ou composições farmacêuticas contendo o composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II- B, pode ser usada.
[0225] Ao modular negativamente a atividade de KRas G12C, os métodos aqui descritos são projetados para inibir proliferação celular indesejada resultante da atividade de KRas G12C intensificada dentro da célula. As células podem ser contatadas em uma dose única ou em doses múltiplas, de acordo com um regime de tratamento particular para efetuar a modulação negativa desejada de KRas G12C. O grau de modificação covalente de KRas G12C pode ser monitorado in vitro usando métodos bem conhecidos, incluindo aqueles descritos no Exemplo A abaixo. Além disso, a atividade inibidora de compostos exemplares nas células pode ser monitorada, por exemplo, medindo a inibição da atividade de KRas G12C da quantidade de ERK fosfilada, incluindo aquelas descritas no Exemplo B abaixo, para avaliar a eficácia de tratamento e dosagens pode ser ajustada em conformidade pelo médico assistente.
[0226] Em outro aspecto, métodos para tratar câncer em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao referido paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), Fórmula II- A ou Fórmula II-B, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo ou composições farmacêuticas compreendendo o composto ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo são fornecidos.
[0227] As composições e os métodos fornecidos aqui podem ser usados para o tramento de um câncer associado a KRas G12C em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao referido paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II- A ou Fórmula II-B, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo ou composições farmacêuticas compreendendo o composto ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo são fornecidos. Numa modalidade, o câncer associado a KRas G12C é câncer de pulmão.
[0228] As composições e métodos aqui fornecidos podem ser utilizados para o tratamento de uma ampla variedade de cânceres, incluindo tumores tais como pulmão, próstata, mama, cérebro, pele, carcinomas cervicais, carcinomas testiculares, etc. Mais particularmente, cânceres que podem ser tratados pelas composições e métodos da invenção incluem, mas sem limitação, tumores de tipos tais como carcinomas astrocíticos, mamário, cervical, colorretal, endometrial, esofágico, gástrico, cabeça e pescoço, hepatocelular, laríngeo, pulmonar, oral, ovariano, da próstata e tireoide e sarcomas. Mais especificamente, estes compostos podem ser usados para tratar: Cardíaco: sarcoma (angiossarcoma, fibrossarcoma, rabdomiossarcoma, lipossarcoma), mixoma, rabdomioma, fibroma, lipoma e teratoma; Pulmão: carcinoma broncogênico (célula escamosa, célula pequena indiferenciada, célula grande indiferenciada, adenocarcinoma), carcinoma alveolar (bronquiolar), adenoma brônquico, sarcoma, linfoma, hamartoma condromatoso, mesotelioma; Gastrointestinal: esôfago (carcinoma de célula escamosa, adenocarcinoma, leiomiossarcoma, linfoma), estômago (carcinoma, linfoma, leiomiossarcoma), pâncreas (adenocarcinoma ductal, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, tumores carcinoides, vipoma), intestino delgado (adenocarcinoma, linfoma, tumores carcinoides, sarcoma de Kaposi, leiomioma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, fibroma), intestino grosso (adenocarcinoma, adenoma tubular, adenoma viloso, hamartoma, leiomioma); Trato genitourinário: rim
(adenocarcinoma, tumor de Wilm (nefroblastoma), linfoma, leucemia), bexiga e uretra (carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula transicional, adenocarcinoma), próstata (adenocarcinoma, sarcoma), testículo (seminoma, teratoma, carcinoma embrionário, teratocarcinoma, coriocarcinoma, sarcoma, carcinoma de célula intersticial, fibroma, fibroadenoma, tumores adenomatoides, lipoma); Fígado: hepatoma (carcinoma hepatocelular), colangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiossarcoma, adenoma hepatocelular, hemangioma; Trato biliar: carcinoma da vesícula biliar, carcinoma ampular, colangiocarcinoma; Osso: sarcoma osteogênico (osteossarcoma), fibrossarcoma, histiocitoma fibroso maligno, condrossarcoma, sarcoma de Ewing, linfoma maligno (sarcoma de célula reticular), mieloma múltiplo, cordoma de tumor de célula gigante maligno, osteocronofroma (exostoses osteocartilaginosas), condroma benigno, condroblastoma, condromixofibroma, osteoma osteoide e tumores de células gigantes; Sistema nervoso: crânio (osteoma, hemangioma, granuloma, xantoma, osteíte deformante), meninges (meningioma, meningiossarcoma, gliomatose), cérebro (astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma (pinealoma), glioblastoma multiforme, oligodendromioma, schwanoma, retinoblastoma, tumores congênitos), neurofibroma da coluna espinhal, meningioma, glioma, sarcoma); Ginecológico: útero (carcinoma endometrial), cérvix (carcinoma cervical, displasia cervical pré-tumor), ovários (carcionoma ovariano) (cistadenocarcinoma seroso, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinoma não classificado), tumores de células granulosa-tecais, tumores de células Sertoli-Leydig, disgerminoma, teratoma maligno), vulva (carcinoma de célula escamosa, carcinoma intraepitelila, adenocarcinoma, fibrossarcomma, melanoma) vagina (carcinoma de células claras, carcinoma de célula escamosa, sarcoma botroide (rabdomiossarcoma embrionário), trompas de falópio (carcinoma); Hematológico: sangue (leucemia mieloide (aguda e crônica), leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crônica, doenças mieloproliferativas, mieloma múltiplo, síndrome mielodisplásica), doença de Hodgkin, linfoma não Hodgkin (linfoma maligno); Pele: melanoma maligno,
carcinoma basocelular, carcinoma de célula escamosa, sarcoma de Kaposi, nevos displásicos moles, lipoma, angioma, dermatofibroma, queloides, psoríase e glândulas Adrenais: neuroblastoma. Em certas modalidades, o câncer é câncer de pulmão de célula não pequena.
[0229] A concentração e a rota de administração ao paciente variarão dependendo do câncer a ser tratado. Os compostos, sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e as composições farmacêuticas compreendendo esses compostos e sais também podem ser coadministrados com outros compostos antineoplásicos, por exemplo, quimioterapia, ou utilizados em combinação com outros tratamentos, tal como radiação ou intervenção cirúrgica, seja como um adjuvante antes da cirurgia ou pós-operativamente.
[0230] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo conforme definido aqui para uso em terapia.
[0231] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo conforme definido aqui para uso no tratamento de câncer.
[0232] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso na inibição de Kras G12C.
[0233] Também é aqui fornecido um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo conforme definido aqui para uso no tratamento de uma doença ou um distúrbio associado a Kras G12C.
[0234] Também é aqui fornecido o uso de um composto de Fórmula I, Fórmula I- A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido aqui na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer.
[0235] Também é aqui fornecido um uso de um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido aqui na fabricação de um medicamento para a inibição de atividade de Kras G12C.
[0236] Também é aqui fornecido o uso de um composto de Fórmula I, Fórmula I- A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido aqui na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou um distúrbio associado a Kras G12C.
[0237] Também é fornecido aqui um método para tratar câncer num paciente em necessidade do mesmo, o método compreendendo (a) determinar que o câncer está associado com uma mutação de KRas G12C (por exemplo, um câncer associado aKRas G12C) (por exemplo, como determinado usando um ensaio ou kit aprovado por agência, por exemplo, aprovado pela FDA; e (b) administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, Fórmula I-A, Fórmula I-B, Fórmula II, Fórmula II-A ou Fórmula II-B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou uma composição farmacêutica do mesmo.
[0238] Um especialista na técnica reconhecerá que, ambos os experimentos in vivo e in vitro, utilizando modelos de células e/ou animais adequados, conhecidos e geralmente aceitos, são preditivos da capacidade de um composto de teste para tratar ou prevenir um dado distúrbio.
[0239] Um especialista na técnica reconhecerá ainda que experimentos clínicos humanos, incluindo primeiro em humanos, experimentos de variação e eficácia de dose, em pacientes saudáveis e/ou aqueles que sofrem de um dado distúrbio, podem ser concluídos de acordo com métodos bem conhecidos na clínica e na técnica médica.
ESQUEMAS DE REAÇÃO E EXEMPLOS
[0240] Os compostos da presente invenção podem ser preparados de reagentes disponíveis comercialmente usando os métodos sintéticos e esquemas de reação aqui descritos, ou usando outros reagentes e métodos convencionais bem conhecidos dos especialistas na técnica.
[0241] Por exemplo, compostos da presente invenção podem ser preparados de acordo com os Esquemas de Reação Gerais I e II.
ESQUEMAS DE REAÇÃO GERAIS ESQUEMA I
[0242] Compostos de Fórmula I em que L e Y são ligações, R2 é hidrogênio e R4 é aril ou heteroaril podem ser preparados de acordo com o Esquema I. Na etapa A, uma di-hidropiridopirimidina apropriadamente funcionalizada (1) está acoplada a um heterociclo contendo uma especie amina nucleofílica, com a outra ligada a um grupo protetor para fornecer o composto (2). Este acoplamento prossegue em um solvente, tal como diclorometano, na presença de uma base, tal como trietilamina ou base de Hunig. Na etapa B, o grupo Boc do composto (2) é removido usando condições conhecidas na técnica, por exemplo, com ácido trifluoroacético em um solvente, tal como diclorometano, para fornecer o composto (3). Na etapa C, o substituinte R4 é introduzido com um acoplamento de paládio, usando um sistema de aril ou heteroaril funcionalizado adequado, por exemplo, um aril triflato, na presença de um catalisador de paládio, tal como Pd2DBA3/Xantphos em um solvente, tal como tolueno, com uma base tal como terc-butóxido de sódio para fornecer o composto (4). Na etapa D, o grupo protector do composto X de anel (4) é removido, por exemplo, hidrogenólise por Pd/C na presença de H2 num solvente polar, tal como EtOH/THF, para fornecer o composto (5). Na etapa final, E, R1 é introduzido para proporcionar um composto de Fórmula I, por exemplo, tratando com um cloreto de ácido tendo a fórmula Cl-C(O)C(RA) C(RB)p ou Cl-SO2-C(RA) C(RB)p ou um anidrido tendo a fórmula C(RB)p C(RA)C(O)OC(O)C(RA) C(RB)p, em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula I. Por exemplo, no caso em que R1 é um grupo de acriloila, esta reação prossegue, por exemplo, em um solvente tal como cloreto de metileno na presença de cloreto de acriloíla ou um anidrido de acriloíla e uma base tal como base de Hunig. Em alguns casos, as espécies R4 também conterão um grupo protetor, que pode ser removido numa etapa subsequente na sequência sintética.
[0243] Os compostos (1), (2), (3), (4) e (5) como mostrado e descrito acima para o Esquema I são úteis como intermediários na preparação de compostos de Fórmula I e são fornecidos como aspectos adicionais da invenção.
ESQUEMA II
[0244] Compostos de Fórmula I em que L é uma ligação, –Y-R2 é diferente de hidrogénio e R4 é aril ou heteroaril podem ser preparados de acordo com o Esquema II. Na etapa A, uma di-hidropiridopirimidina adequadamente funcionalizada (6) é acoplada a um heterociclo contendo uma espécie de amina nucleofílica, com a outra ligada a um grupo protetor para fornecer o composto (7). Este acoplamento prossegue em um solvente, tal como diclorometano, na presença de uma base, tal como trietilamina ou base de Hunig. Na etapa B, o substituinte –Y-R2 é introduzido por substituição do cloro por um nucleófilo, por exemplo, (S)-1-(dimetilamino-propan-2-ol em um solvente polar, tal como dioxano para fornecer o composto (8). Na etapa C, o grupo Boc é removido usando condições conhecidas na técnica, por exemplo, com ácido trifluoroacético em um solvente, tal como diclorometano, para fornecer composto (9). Na etapa D, o substituinte R4 é introduzido com um acoplamento de paládio, usando um sistema de aril ou heteroaril funcionalizado adequado, por exemplo, um aril triflato, na presença de um catalisador de paládio, tal como
Pd2DBA3/BINAP em um solvente, tal como tolueno, com uma base tal como terc- butóxido de sódio para fornecer o composto (10). Na etapa E, o grupo protetor do anel X é removido, por exemplo, hidrogenólise por Pd/C na presença de H 2 num solvente polar, tal como EtOH/THF, para fornecer o composto (11). Na etapa F, R1 é introduzido para proporcionar um composto de Fórmula I, por exemplo, tratando com um cloreto de ácido tendo a fórmula Cl-C(O)C(RA) C(RB)p ou Cl-SO2-C(RA) C(RB)p ou um anidrido tendo a fórmula C(RB)p C(RA)C(O)OC(O)C(RA) C(RB)p, em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula I. Por exemplo, no caso em que R1 é um grupo de acriloila, esta reação prossegue, por exemplo, em um solvente tal como cloreto de metileno na presença de cloreto de acriloíla anidrido de acriloíla e uma base tal como base de Hunig. Em alguns casos, as espécies R4 e R2 também conterão grupos protetores, que podem ser removidos numa etapa subsequente na sequência sintética.
[0245] Os compostos (6), (7), (8), (9), (10) e (11) como mostrado e descrito acima para o Esquema 2 são úteis como intermediários na preparação de compostos de Fórmula I, Fórmula I-A ou Fórmula I-B e são fornecidos como aspectos adicionais da invenção.
[0246] Por conseguinte, também é proporcionado um processo para preparar um composto de Fórmula I, compreendendo:
[0247] (a) para um composto de Fórmula I em que Y é uma ligação e R 2 é hidrogênio, reagir um composto de fórmula 5
[0248] em que X, R3 e R4 são como definidos para a Fórmula I, com um cloreto de ácido tendo a fórmula Cl–C(O)C(RA) C(RB)p ou Cl–SO2C(RA) C(RB)p ou um anidrido tendo a fórmula C(RB)p C(RA)C(O)OC(O)C(RA) C(RB)p, em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula I na presença de uma base; ou
[0249] (b) para um composto de Fórmula I em que L é uma ligação e –Y-R2 é diferente de hidrogênio, reagir um composto de fórmula (11)
[0250] em que L é uma ligação, –Y-R2 é diferente de hidrogênio e X, R3 e R4 são como definidos para a Fórmula I, com um cloreto de ácido tendo a fórmula Cl– C(O)C(RA) C(RB)p ou Cl–SO2C(RA) C(RB)p ou um anidrido tendo a fórmula C(RB)p C(RA)C(O)OC(O)C(RA) C(RB)p, em que RA, RB e p são como definidos para a Fórmula I na presença de uma base; e
[0251] opcionalmente formando um sal do mesmo.
[0252] Os compostos da presente invenção podem ter um ou mais centros quirais e podem ser sintetizados como misturas estereoisoméricas, isômeros de constituição idênticos que diferem na disposição de seus átomos no espaço. Os compostos podem ser usados como misturas ou os componentes/isômeros individuais podem ser separados usando reagentes disponíveis comercialmente e métodos convencionais para isolamento de estereoisômeros e enantiômeros bem conhecidos dos especialistas na técnica, por exemplo, usando colunas HPLC cromatográficas quirais CHIRALPAK® (Sigma-Aldrich) ou CHIRALCEL® (Diacel Corp), de acordo com as instruções do fabricante. Alternativamente, compostos da presente invenção podem ser sintetizados usando reagentes quirais opticamente puros e intermediários para preparar isômeros ou enantiômeros individuais. A menos que indicado em contrário, todas as formas quirais (enantioméricas e diastereoméricas) e racêmicas estão dentro do escopo da invenção. A menos que indicado em contrário, sempre que o relatório descritivo, incluindo as reivindicações, se referir a compostos da invenção, o termo “composto” será entendido como abrangendo todas as formas quirais (enantioméricas e diastereoméricas) e racêmicas.
[0253] Os Exemplos a seguir se destinam a ilustrar ainda mais certas modalidades da invenção e não pretendem limitar o escopo da invenção.
Intermediário 1 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato
[0254] 3-hidroxinaftalen-1-il trifluorometanossulfonato (13,101 g, 44,831 mmol) foi dissolvido em diclorometano (100 mL) e agitado a 0°C. A esta solução foi adicionado cloro(metóxi)metano (3,7456 ml, 49,315 mmol) e base de Hunig (11,745 ml, 67,247 mmol). A reação foi agitada a 0°C por 4 h. A reação foi particionada com HCl 1M e lavada com bicarbonato de sódio saturado. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio e concentradas sob vácuo. O material concentrado foi carregado em uma coluna de sílica gel RediSep® gold de 120 g com diclorometano e purificado por cromatografia de fase normal (CombiFlash®, 0% -20% de acetato de etila/hexanos como oeluente) para dar 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato (11,785 g, 35,045 mmol, 78,171% de rendimento).
Intermediário 2 2-bromo-7-(metoximetoxi)naftaleno
[0255] A uma solução de 7-bromonaftalen-2-ol (2,0 g, 9,0 mmol) em dimetil acetamida (40 mL) foi adicionado cloro(metoxi)metano (1,4 g, 18 mmol) e carbonato de césio (5,8 g, 18 mmol) e a mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A reação foi diluída com água e a camada aquosa lavada com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas sobre sulfato de magnésio e concentradas sob vácuo. O material bruto foi purificado por cromatografia de fase normal usando 5-50% de acetato de etila/hexanos como o eluente para dar 2-bromo-7- (metoximetoxi)naftaleno (1,0 g, 3,7 mmol, 42% de rendimento).
Intermediário 3 2-bromo-1-fluoro-3-(metoximetil)benzeno
[0256] A uma solução agitada de 2-bromo-3-fluorofenol (1.422 mg, 7,445 mmol) em 22 mL de tetra-hidrofurano à temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado NaH (327,6 mg, 8,190 mmol) puro como um sólido em porções. Após 15 minutos, uma solução havia se formado. Cloro(metoxi)metano (678,6 µL, 8,934 mmol) foi adicionado por seringa. Após agitação por 2 horas, a reação foi extinta com solução saturada de cloreto de amônio e, então, repartida entre acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram isoladas, lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas. O produto bruto foi carregado em um mínimo de diclorometano em uma coluna RediSep® de 40 gramas pré-umidificada com hexanos e eluído com um gradiente de acetato de etila/hexanos (0% a 20% de acetato de etila). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas para fornecer o produto como um óleo transparente (1,45 g, 83%).
Intermediário 4
2-bromo-1-fluoro-4-(metoximetoxi)benzeno
[0257] A uma solução agitada de 3-bromo-4-fluorofenol (327 mg, 1,71 mmol) em 5,1 mL de tetra-hidrofurano à temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado NaH (75,3 mg, 1,88 mmol) puro como um sólido em porções. Após 15 minutos, uma solução havia se formado. Cloro(metoxi)metano (156 µL, 2,05 mmol) foi adicionado por seringa. Após agitação por 2 horas, a reação foi extinta com solução saturada de cloreto de amônio e, então, repartida entre acetato de etila e água. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas. O produto bruto foi carregado em um mínimo de diclorometano em uma coluna RediSep® de 24 gramas pré- umidificada com hexanos e eluído com um gradiente de acetato de etila/hexanos (0% a 20% de acetato de etila). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas para fornecer o produto como um óleo transparente (120 mg, 29,8%).
Intermediário 5 4-bromo-5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol
[0258] A uma solução de 4-bromo-5-metil-1H-indazol (0,7 g, 3,3 mmol) em dimetil acetamida (30 mL), resfriada até 0 °C foi adicionado NaH (0,19 g, 4,6 mmol) em porções e a mistura de reação foi purgada com nitrogênio. A reação foi agitada por 20 minutos e, então, (2-(clorometoxi)etil)trimetilsilano (0,83 g, 5,0 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada por 2 horas enquanto aquecendo até a temperatura ambiente. A reação foi extinta por derramamento em água e a camada aquosa foi extraída para acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas sobre MgSO 4 e concentradas sob vácuo. O material bruto foi purificado por cromatografia usando 10-50% de acetato de etila/hexanos como o eluente para dar 4-bromo- 5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol (0,87 g, 79%).
Intermediário 6 (R)-1-(pirrolidin-1-il)propan-2-ol
[0259] Num tubo selado, óxido de R-(+)-propileno (3,69 mL, 52,7 mmol) foi resfriado até -78°C e, então, aspergido com dimetil amina anidra por alguns minutos. A mistura de reação foi aquecida até 70°C por 16 horas. A reação foi resfriada e concentrada in vacuo por 20 minutos para proporcionar (R)-1- (pirrolidin-1-il)propan-2-ol (5,35 g, 41,4 mmol, 98,2% de rendimento).
Intermediário 7
(R)-1-morfolinopropan-2-ol
[0260] Num tubo selado, óxido de R-(+)-propileno (2,111 mL, 30,13 mmol) e morfolina (1,490 mL, 17,22 mmol) foram aquecidos até 70°C por 20 horas. A reação foi resfriada e concentrada in vacuo para proporcionar (R)-1- morfolinopropan-2-ol (2,47 g, 17,01 mmol, 98,80% de rendimento).
Intermediário 8 (R)-1-(dimetilamino)butan-2-ol
[0261] Num tubo selado, óxido de R-(+)-propileno (4,00 g, 55,5 mmol) e dimetilamina (1,00 g, 22,2 mmol) foram aquecidos até 65°C por 18 horas. A reação foi resfriada e concentrada in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-12% de MeOH em DCM) para fornecer (R)-1- (dimetilamino)butan-2-ol (1,38 g, 11,8 mmol, 53,1% de rendimento).
Intermediário 9 (R)-1-((R)-3-metoxipirrolidin-1-il)propan-2-ol
[0262] Em um tubo selado, cloridrato de (R)-3-metoxipirrolidina (1,00 g, 7,27 mmol), TEA (2,03 mL, 14,5 mmol) e óxido de R-(+)-Propileno (1,27 mL, 18,2 mmol) foram aquecidos até 65°C por 18 horas. A reação foi resfriada e concentrada in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-12% de MeOH em DCM) para fornecer (R)-1-((R)-3-metoxipirrolidin-1-il)propan-2-ol (775 mg, 4,87 mmol, 67,0% de rendimento).
Intermediário 10 (R)-1-((S)-3-metoxipirrolidin-1-il)propan-2-ol
[0263] Em um tubo selado, cloridrato de (S)-3-metoxipirrolidina (1,00 g, 7,27 mmol), TEA (2,03 mL, 14,5 mmol) e óxido de R-(+)-Propileno (1,27 mL, 18,2 mmol) foram aquecidos até 65°C por 18 horas. A reação foi resfriada e concentrada in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-12% de MeOH em DCM) para fornecer (R)-1-((S)-3-metoxipirrolidin-1-il)propan-2-ol (781 mg, 4,90 mmol, 67,5% de rendimento) Intermediário 11 (R)-1-((S)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-1-il)propan-2-ol
[0264] Em um tubo selado, óxido de R-(+)-Propileno (0,609 mL, 8,69 mmol) e (S)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidina (1,00 g, 4,97 mmol) foram aquecidos até 70°C por 20 horas. A reação foi resfriada e concentrada in vacuo para fornecer (R)-1-((S)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-1-il)propan-2-ol (1,29 g, 4,20 mmol, 84,6% de produção).
Intermediário 12 terc-butil 2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina-1-carboxilato
[0265] A uma suspensão de cloreto de lítio (246 mg, 5,81 mmol) e Boro-hidreto de Lítio (126 mg, 5,81 mmol) em etanol (9 mL), a 0°C sob nitrogênio, uma solução de 1-(terc-butil) 2-metil 4-metilpiperazina-1,2-dicarboxilato (750 mg, 2,90 mmol) em THF seco (6 mL) foi adicionada em gotas. A reação foi agitada durante a noite formando um precipitado branco. O precipitado foi filtrado e lavado com etanol. O filtrado combinado e os extratos orgânicos foram concentrados para fornecer um resíduo branco que foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia com MeOH a 10% isocrático em DCM com 0,2% de NH 4OH para fornecer terc-butil 2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina-1-carboxilato (104 mg, 0,452 mmol, 15,6% de rendimento).
Intermediário 13 (S)-2-(2-metilpiperidin-1-il)etan-1-ol
[0266] Uma mistura de (S)-2-metilpiperidina (100 mg, 1,01 mmol), 2-bromoetanol (78 μL, 139 mg, 1,11 mmol, 1,1 eq.), iodeto de sódio (151 mg, 1 eq.), carbonato de potássio (418 mg, 3 eq.) e acetonitrila (1 mL) em um frasco de 4 mL foi purgada com nitrogênio, selada e agitada à temperatura ambiente por 2 dias. A mistura de reação foi particionada entre éter dietílico (15 mL) e água (2 mL). A camada de éter foi lavada com salmoura (2 mL), acidificada com TFA e seca sob alto vácuo por 2 dias. O resíduo foi lavado com éter (3 mL), diluído com água (0,5 mL) e basificado com NaOH 10M (0,2 mL). As camadas foram separadas e a camada superior foi cuidadosamente seca sobre NaOH. A solução de éter foi evaporada sob nitrogênio para produzir (S)-2-(2-metilpiperidin-1-il)etan-1-ol (100 mg, 0,698 mmol, 69,24% de rendimento) como óleo incolor.
Intermediário 14 (R)-2-(2-metilpiperidin-1-il)etan-1-ol
[0267] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 13, utilizando (R)- 2-metilpiperidina (99 mg, 1 mmol) no lugar de (S)-2-metilpiperidina.
Intermediário 15 (S)-2-(3-metoxipiperidin-1-il)etan-1-ol
[0268] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 13, utilizando (S)- 3-metoxipiperidina (173 mg, 1,50 mmol) no lugar de (S)-2-metilpiperidina.
Intermediário 16
(R)-2-(3-metoxipiperidin-1-il)etan-1-ol
[0269] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 13, usando R-3- metoxipiperidina (173 mg, 1,50 mmol) no lugar de (S)-2-metilpiperidina.
Intermediário 17 3-(1,4-oxazepan-4-il)propan-1-ol
[0270] A um frasco foi adicionada homomorfolina (0,250 g, 2,472 mmol), Acetonitrila (4,943 mL, 2,472 mmol) e 3-Bromo-1-propanol (0,2459 mL, 2,719 mmol). Foi adicionado carbonato de potássio (0,6832 g, 4,943 mmol) e a mistura foi aquecida até 50°C e agitada por 6 horas. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com DCM, filtrada e os sólidos coletados foram lavados com DCM. O filtrado foi concentrado in vacuo e o óleo bruto foi purificado por meio de cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 12g Isco RediSep Gold, 10-20% de MeOH/DCM com 0,2% de NH4OH) para proporcionar 3-(1,4- oxazepan-4-il)propan-1-ol (0,272 g, 1,708 mmol) como um óleo incolor.
Intermediário 18 3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propan-1-ol
[0271] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 17, utilizando (1S,4S)-2-Oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano (0,250 g, 2,522 mmol) no lugar de homomorfolina.
Intermediário 19
2-(4-metoxipiperidin-1-il)etan-1-ol
[0272] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 13, usando 4- metoxipiperidina (173 mg, 1,50 mmol) no lugar de (S)-2-metilpiperidina.
Intermediário 20 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)etan-1-ol
[0273] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 13, utilizando cloridrato de 4,4-difluoropiperidina (173 mg, 1,50 mmol) no lugar de (S)-2- metilpiperidina.
Intermediário 21 (S)-2-(3-fluoropiperidin-1-il)etan-1-ol
[0274] Sintetizado de acordo com o método do Intermediário 13, utilizando cloridrato de S-3-fluoropiperidina (209 mg, 1,50 mmol) no lugar de (S)-2- metilpiperidina.
Intermediário 22 benzil 4-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(metilsulfinil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato
[0275] Etapa A: terc-butil 4-hidroxi-2-(metiltio)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato: A uma solução agitada de 1-terc-butil 4-etil 3-oxopiperidina- 1,4-dicarboxilato (50,0 g, 184 mmol, 1,00 eq ) em MeOH (1,00 L) a 25°C sob nitrogênio foi adicionado NaOMe (49,8 g, 921 mmol, 5,00 eq) seguido por 2- metilisotioureia (62,4 g, 331 mmol, 1,80 eq, H2SO4) como um sólido. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 16 horas. A mistura de reação foi ajustada para pH 5 com HCl (2 M) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para remover MeOH. O resíduo foi suspenso em 300 mL de acetato de etila e 300 mL de água e agitado rapidamente. A suspensão foi filtrada e o sólido branco foi coletado. O filtrado foi separado e a camada orgânica foi lavada com água (1 × 300 mL) e salmoura (1 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram isoladas, secas sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para fornecer terc-butil 4- hidroxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 138 mmol, 75,4% de rendimento, 81,0% de pureza) como um sólido branco que é usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 298,2 [M+H]+.
[0276] Etapa B: terc-butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma suspensão agitada de terc-butil 4-hidroxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 171 mmol, 1,00 eq) em DCM (500 mL) a 0°C foi adicionado DIEA (44,3 g, 343 mmol, 59,9 mL, 2,00 eq), seguido por anidrido trifluorometanossulfônico (72,6 g, 257 mmol, 42,4 mL, 1,50 eq) sob nitrogênio. Imediatamente uma solução marrom se formou. Após agitação a 25°C por 16 horas, a reação foi concentrada para dar um óleo marrom. O óleo marrom foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1:0 a 10:1) para fornecer terc- butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (46,0 g, 107 mmol, 62,4% de rendimento) como um sólido amarelo ESI MS m/z 430,2 [M+H]+.
[0277] Etapa C: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução agitada de terc- butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (46,0 g, 107 mmol, 1,00 eq) em DMF ( 500 mL) foi adicionado DIEA (27,7 g, 214 mmol, 37,4 mL, 2,00 eq) seguido por benzil piperazina-1-carboxilato (25,9 g, 117 mmol, 22,7 mL, 1,10 eq). A reação foi aquecida a 100°C por 1 hora sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi derramada em acetato de etila (300 mL), lavada com H2O (300 mL x 3) e salmoura (200 mL), seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1:0 a 5:1) para dar terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 96,9 mmol, 90,5% de rendimento, 92,0% de pureza) como um sólido branco ESI MS m/z 500,3 [M+H]+.
[0278] Etapa D: Benzil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido [3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (25,0 g, 50,0 mmol, 1,00 eq) em DCM (50,0 mL) foi adicionado TFA (85,6 g, 750 mmol, 55,6 mL, 15,0 eq). Depois de se agitar a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 300 mL de acetato de etila e 300 mL de água e agitado rapidamente. A mistura foi ajustada para pH 8 com Na2CO3. A camada orgânica foi lavada com água (1 x 300 mL) e salmoura (1 x 200 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar benzil 4-(2- metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il) piperazina-1-carboxilato (19,0 g, 46,6 mmol, 93,2% de rendimento, 98,0% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 400.2 [M+H]+.
[0279] Etapa E: Benzil 4-[7-(3-benzilóxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 3-benzilóxi-1- bromo-naftaleno (16,3 g, 52,1 mmol, 1,30 eq), benzil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (16,0 g, 40,1 mmol, 1,00 eq), Cs2CO3 (32,6 g, 100 mmol, 2,50 eq), Pd2(dba)3 (5,50 g, 6,01 mmol, 0,15 eq) e 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (RuPhos) (3,74 g, 8,01 mmol, 0,20 eq) em dioxano (300 mL) foi desgaseificado e purgado com nitrogênio 3 vezes. A mistura foi agitada a 85°C por 5 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi extinta adicionando água (200 mL) a 0°C e extraída com acetato de etila (3 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 150 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 10/1 a 5/1) para fornecer 4-[7-(3-benzilóxi-1- naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (16,0 g, 22,8 mmol, 56,9% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 632.5 [M+H]+.
[0280] Etapa F: Benzil 4-[7-(3-benzilóxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução agitada de 4- [7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (8,00 g, 12,7 mmol, 1,00 eq) em DCM (200 mL) foi adicionado m-CPBA (2,73 g, 12,7 mmol, 80,0% de pureza, 1,00 eq) a 0°C sob nitrogênio. Depois de se agitar a 0°C por 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio, a mistura de reação foi extinta adicionando Na2S2O3 (10,0 mL) a 0°C,
diluída com água (100 mL) e extraída com DCM (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 1/0 a 10/1) para fornecer 4-[7-(3-benzilóxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (3,50 g, 4,92 mmol, 38,8% de rendimento, 91,0% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 648,5 [M+H]+.
Intermediário 23 (R)-1-(4-(2-hidroxipropil)piperazin-1-il)etan-1-ona
[0281] Etapa A: 1-[4-[(2R)-2-hidroxipropil]piperazin-1-il]etanona: (2R)-2- metiloxirano (1,00 g, 17,2 mmol, 1,20 mL, 1,00 eq) e 1,00 eq) e 1-piperazina-1- iletanona (8,00 g, 62,4 mmol, 3,62 eq) foram absorvidos em um tubo de micro- ondas. O tubo vedado foi aquecido a 150°C por 1 hora sob micro-ondas. A mistura foi dissolvida em DCM (80,0 mL), adicionado (Boc)2O (3,62 eq, 13,6 g) e agitada a 20°C por 1 hora. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (DCM/MeOH 100/1 a 10/1) para dar 1-[4-[(2R)-2-hidroxipropil]piperazin-1- il]etanona (3,80 g, 13,5 mmol, 78,2% de rendimento, 66,0% de pureza) como um óleo amarelo.
Intermediário 24
1-(benziloxi)-3-bromo-5-ciclopropilbenzeno
[0282] Etapa A: 1-benzilóxi-3,5-dibromo-benzeno: A uma mistura de 3,5- dibromofenol (1,50 g, 5,95 mmol, 1,00 eq) e K2CO3 (2,47 g, 17,9 mmol, 3,00 eq) em MeCN (30,0 mL) foi adicionado brometo de benzila (1,07 g, 6,25 mmol, 742 µL, 1,05 eq), a mistura de reação foi agitada a 80°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1:1 para dar 1-benzilóxi-3,5- dibromobenzeno (1,60 g, 4,68 mmol, 78,6% de rendimento) como óleo incolor.
[0283] Etapa B: 1-benzilóxi-3-bromo-5-ciclopropilbenzeno: A uma mistura de 1- benzilóxi-3,5-dibromobenzeno (1,20 g, 3,51 mmol, 1,00 eq) e ácido ciclopropilborônico (392 mg, 4,56 mmol, 1,30 eq) em H2O (4,00 mL) e dioxano (20,0 mL) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (513 mg, 702 µmol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (2,29 g, 7,02 mmol, 2,00 eq). A mistura de reacção foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. A mistura de reação foi adicionada à água (20 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1:1 para dar 1-benzilóxi-3- bromo-5-ciclopropil-benzeno (270 mg, 890 µmol, 25,4% de rendimento) como óleo incolor.
Intermediário 25 4-(2-(3-morfolinopropóxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato
[0284] Etapa A: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-(3- morfolinopropóxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma mistura de 3-morfolinopropan-1-ol (5,46 g, 37,6 mmol, 2,00 eq) em THF (100 mL) foi adicionado NaH (2,26 g, 56,4 mmol, 60,0% de pureza, 3,00 eq) em porções a 0°C. Depois a mistura ser agitada a 0°C por 0,5 hora, uma solução de terc- butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfonil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (10,0 g, 18,8 mmol, 1,00 eq) em THF (100 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a 0°C por 1,5 horas sob N 2. A mistura foi derramada em NH4Cl aquoso (300 mL) e extraída com DCM (2 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 50:1 a 10:1) para dar terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-(3-morfolinopropósi)-6,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (7,70 g, 12,8 mmol, 67,8% de rendimento, 98,8% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 597,4 [M+H]+.
[0285] Etapa B: Benzil 4-[2-(3-morfolinopropóxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-(3-morfolinopropóxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (7,70 g, 12,9 mmol, 1,00 eq) em DCM (80,0 mL) foi adicionado TFA (119 g, 1,04 mol, 76,9 mL, 80,6 eq) e a mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada, então, diluída com DCM (100 mL) e ajustada até pH 8 com NaOH aquoso. A camada orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar benzil 4-[2-(3- morfolinopropóxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (6,00 g, 11,2 mmol, 86,9% de rendimento, 92,8% de pureza) como óleo amarelo. ESI MS m/z 497,4 [M+H]+.
Intermediário 26
4-(benzilóxi)-2-bromo-1-fluorobenzeno
[0286] A uma solução de 3-bromo-4-fluorofenol (4,00 g, 20,9 mmol, 1,00 eq) e K2CO3 (8,68 g, 62,8 mmol, 3,00 eq) em ACN (80,0 mL) foi adicionado brometo de benzila (3,65 g, 21,4 mmol, 2,54 mL, 1,02 eq) e a mistura de reação foi agitada a 60°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter de petróleo:acetato de etila; gradiente de 1:0 a 10:1) para dar 4-benzilóxi-2-bromo-1-fluoro-benzeno (5,02 g, 17,0 mmol, 81,0% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como sólido branco.
Intermediário 27 2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etan-1-ol
[0287] Etapa A: terc-butil 3-fluoropirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 3-hidroxipirrolidina-1-carboxilato (10,0 g, 53,4 mmol, 1,00 eq) em DCM (150,00 mL) foi adicionado trifluoreto de dietilaminoenxofre (DAST) (12,9 g, 80,1 mmol, 10,6 mL, 1,50 eq) a -40°C sob uma atmosfera de nitrogênio. Após agitar a -40°C por 2 horas, a mistura foi aquecida até 20°C e agitada por 16 horas. A mistura foi derramada em bicarbonato de sódio aquoso a 5% (200 mL) e extraída com diclorometano (2 x 100 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100:1 a 5:1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 3-fluoropirrolidina-1-carboxilato (4,30 g, 22,7 mmol, 42,6% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ = 5,27 (t, J = 3,6 Hz, 0,5H), 5,13 (t, J = 3,6 Hz, 0,5H), 3,77 - 3,38 (m, 4H), 2,26 - 2,15 (m, 1H), 2,08 - 1,85 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
[0288] Etapa B: 3-fluoropirrolidina: A uma solução de terc-butil 3-fluoropirrolidina- 1-carboxilato (4,30 g, 22,7 mmol, 1,00 eq) em DCM (50,00 ml) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 35,0 mL, 6,16 eq) gota a gota a 0°C. A mistura foi aquecida até 20°C e agitada por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi triturado com éter di-isopropílico (20 mL) e o precipitado foi filtrado e seco sob vácuo para fornecer 3-fluoropirrolidina (2,70 g, 21,5 mmol, 94,6% de rendimento, HCl) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ = 5,51 (t, J = 3,6 Hz, 0,5H), 5,38 (t, J=3,6 Hz, 1H), 3,66 - 3,27 (m, 5H), 2,45 - 2,12 (m, 2H).
[0289] Etapa C: metil 2-(3-fluoropirrolidin-1-il)acetato: Uma suspensão de 3- fluoropirrolidina (2,70 g, 21,5 mmol, 1,00 eq, HCl) em DCM (27,00 mL) foi resfriada até 0°C. Trietilamina (5,44 g, 53,8 mmol, 7,45 mL, 2,50 eq) e metil 2- bromoacetato (3,62 g, 23,7 mmol, 2,23 mL, 1,10 eq) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 20°C por 16 h. A mistura de reação foi diluída com CH2Cl2 (100 mL) e água (50 mL). A camada orgânica foi lavada com solução aquosa de ácido cítrico a 5% (1 x 50 mL). A camada de água foi basificada por solução aquosa saturada de carbonato de sódio (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas in vacuo para dar metil 2-(3-fluoropirrolidin-1- il)acetato (2,20 g, 13,7 mmol, 63,5% de rendimento). 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ = 5,22 - 5,02 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,35 (s, 2H), 3,07 - 2,93 (m, 1H), 2,91 - 2,77 (m, 2H), 2,67 (dt, J = 5,2, 8,4 Hz, 1H), 2,21 - 1,93 (m, 2H).
[0290] Etapa D: 2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etanol: A uma solução de LiAlH4 (706 mg, 18,6 mmol, 1,50 eq) em THF (20 mL) foi adicionada uma solução de metil 2- (3-fluoropirrolidin-1-il)acetato (2,00 g, 12,4 mmol, 1,00 eq) em THF (10 mL) gota a gota a 0°C. A mistura foi aquecida até 20°C e agitada por 3 horas. A mistura foi extinta com solução aquosa saturada de sulfato de sódio (1 mL). A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel usando 5% de MeOH em DMC. As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 2-(3-fluoropirrolidin-1- il)etanol (1,20 g, 9,01 mmol, 72,6% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ = 5,28 - 5,05 (m, 1H), 3,68 - 3,61 (m, 2H), 2,99 - 2,73 (m, 4H), 2,72 - 2,67 (m, 2H), 2,58 - 2,45 (m, 1H), 2,28 - 1,97 (m, 2H).
Intermediário 28 1-(terc-butil) 3-metil piperazina-1,3-dicarboxilato
[0291] Etapa A: metil piperazina-2-carboxilato: A uma mistura de 1-terc-butil 2- metil-piperazina-1,2-dicarboxilato (5,0 g, 22,6 mmol, 1,00 eq) em MeOH (50,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4,0 M, 134 mL). A mistura de reação foi desgaseificada e purgada com nitrogênio 3 vezes e a mistura foi agitada a 25°C por 12 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até secura para dar metil piperazina-2- carboxilato (4,89 g, 2HCl, bruto) como um sólido branco, que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[0292] Etapa B: 1-(terc-butil) 3-metil piperazina-1,3-dicarboxilato: A uma solução de metil piperazina-2-carboxilato (4,30 g, bruto) e TEA (8,02 g, 79,2 mmol, 11,0 mL) em MeOH (50,0 mL) foi adicionado dicarbonato de di-terc-butil (4,32 g, 19,8 mmol, 4,55 mL). Após agitação a 25°C por 12 horas, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 1:0 a 20:1) para dar 1-(terc- butil) 3-metil piperazina-1,3-dicarboxilato (4,80 g, 19,7 mmol, duas etapas, 99,0%) como um óleo incolor.1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 4,10 - 3,85 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,71 - 3,65 (m, 1H), 3,47 - 3,38 (m, 1H), 3,10 - 2,98 (m, 2H), 2,78 - 2,66 (m, 1H), 2,17 (s, 1H), 1,46 (s, 9H).
Intermediário 29 4-bromonaftalen-2-ol
[0293] Etapa A: 2,4-dibromonaftalen-1-amina: A uma solução de Br2 (246 g, 1,54 mol, 79,3 mL, 2,18 eq) em AcOH (750 mL) foi adicionada uma solução de naftalen-1-amina (101 g, 705 mmol, 99,0 mL, 1,00 eq) em AcOH (500 mL) à temperatura ambiente e a reação foi agitada a 70°C por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e filtrada. A torta de filtro foi lavada com AcOH (300 mL), então, adicionada a 20% aquoso de NaOH (1,2 L). A mistura foi agitada por 20 min. e filtrada. O sólido isolado foi lavado com água (1 L) e seco sob vácuo para proporcionar 2,4-dibromonaftalen-1-amina (200 g, 664 mmol, 94,2% de rendimento) como sólido cinza. ESI MS m/z 301. 9 [M+H]+.
[0294] Etapa B: 4-bromo-1-diazônio-naftalen-2-olato: A uma solução de 2,4- dibromonaftalen-1-amina (60,0 g, 199 mmol, 1,00 eq) em AcOH (900 mL) e ácido propiônico (150 mL) foi adicionado NaNO2 (16,5 g, 239 mmol, 13,0 ml, 1,20 eq) em porções a 5-8°C ao longo de 30 min. e, então, a mistura de reação foi agitada a 5-8°C por 30 min. A mistura de reação foi derramada em água gelada (4.000 mL) e o sólido resultante foi coletado e lavado com água (2 x 50 mL) para fornecer 4-bromo-1-diazônio-naftalen-2-olato (150 g, úmido bruto) como um sólido cinza que foi usado diretamente na próxima etapa. 1H NMR (400 MHz,
CDCl3) δ 8,12 - 8,10 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,62 - 7,58 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,37 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,31 - 7,29 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H).
[0295] Etapa C: 4-bromonaftalen-2-ol: A uma solução de 4-bromo-1-diazônio- naftalen-2-olato (100 g, 402 mmol, 1,00 eq) em EtOH (2,00 L) foi adicionado em porções NaBH4 (30,4 g, 803 mmol, 2,00 eq) a 13-15°C ao longo de 1 h e a mistura de reação foi agitada a 15-18°C por 3 horas. A reação foi filtrada e concentrada até secura. O resíduo foi dissolvido em DCM (1.000 mL) e lavado com água (500 mL × 2). A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel, eluindo com éter dietílico/acetato de etila (60:1 a 10:1). O produto isolado foi ainda purificado por HPLC de fase reversa para fornecer 4-bromonaftalen-2-ol (40,0 g, 139 mmol, 17,3% de rendimento, 77,4% de pureza) como um sólido cinza. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,07 – 8,05 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,60 – 7,58 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,36 (m, 3H), 7,07 (s, 1H).
[0296] Etapa D: 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno: Uma mistura de 4- bromonaftalen-2-ol (30,0 g, 134 mmol, 1,00 eq), brometo de benzila (25,3 g, 148 mmol, 17,6 mL, 1,10 eq) e K2CO3 (55,7 g, 403 mmol, 3,00 eq) em MeCN (500 mL) foi aquecida a 80°C por 1 h. A mistura de reação foi filtrada e concentrada até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel, eluindo com éter dietílico/acetato de etila (100:1 a 60:1) para fornecer 3- benzilóxi-1-bromo-naftaleno (40,0 g, 128 mmol, 95% de rendimento) como óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,19 – 8,17 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,75 – 7,32 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,64 - 7,63 (d, J=2,4 Hz,1H), 7,52 – 7,37 (m, 7H), 7,23 – 7,21 (d, J=2,0 Hz,1H), 5,2 (s, 2H).
Intermediário 30
3-metoxinaftalen-1-il trifluorometanossulfonato
[0297] Etapa A: 3-metoxinaftalen-1-ol : A uma solução de naftaleno-1,3-diol (3,00 g, 18,7 mmol, 1,00 eq) em MeOH (60,0 mL) foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 60,0 mL, 12,8 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 60 horas. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila=10:1 a 5:1) para dar 3-metoxinaftalen-1-ol (2,10 g, 12,1 mmol, 64,4% de rendimento) como um sólido marrom. 1H NMR (400 MHz, CDCl3-d6) δ = 8,10 - 8,08 (d, J=8,4 Hz, 1H).7,73 - 7,71 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,47 - 7,45(m, 1H), 7,38 - 7,35(m, 1H), 6,80 - 6,79 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,56 - 6,55 (d, J=2,4 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H).
[0298] Etapa B: (3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato: A uma solução de 3-metoxinaftalen-1-ol (2,10 g, 12,0 mmol, 1,00 eq) em DCM (40,0 mL) foi adicionado DIEA (7,79 g, 60,3 mmol), 10,5 mL, 5,00 eq) e anidrido trifluorometanossulfônico (5,10 g, 18,1 mmol, 2,98 mL, 1,50 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi diluída com DCM (30 mL) e água (10 mL) e extraída com DCM (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila=20:1 a 10:1) para dar (3-metóxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (3,00 g, 8,52 mmol, 70,7% de rendimento, 87,0% de pureza) como um óleo marrom. ESI MS m/z 307,1 [M+H]+.
Intermediário 31 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina
[0299] Etapa A: 7-benzil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol: A EtOH (600 mL) foi adicionado Na (5,56 g, 241 mmol, 5,73 mL, 2,40 eq) em porções. A mistura de reação foi agitada por 1 hora. À mistura foi adicionado 1-benzil-3-oxo- piperidina-4-carboxilato (30,0 g, 100 mmol, 1,00 eq, HCl) e ureia (14,5 g, 242 mmol, 13,0 mL, 2,40 eq). A mistura de reação foi agitada a 75°C por 36 horas e, então, o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água (50 mL) e acidificado com HCl (120 mL, 2M). Um sólido branco precipitou da solução e foi coletado por filtração. A torta de filtro foi seca sob vácuo para fornecer 7- benzil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol (22,0 g, 83,8 mmol, 83,2% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,97 (br s, 1H), 10,66 (br s, 1H), 7,55 - 6,95 (m, 5H), 3,81 - 3,50 (m, 2H), 3,26 - 2,91 (m, 2H), 2,77 - 2,58 (m, 2H), 2,34 - 2,09 (m, 2H).
[0300] Etapa B: 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: A uma solução de DIEA (30,1 g, 233 mmol, 40,7 mL, 3,00 eq) em POCl3 (330 g, 2,15 mol, 200 mL) foi adicionado 7-benzil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 2,4-diol (20,0 g, 77,7 mmol, 1,00 eq). A mistura de reação foi agitada a 110°C por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (400 mL) e derramado em NaHCO3 saturado (200 mL). A mistura foi extraída com DCM (2 × 400 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico: DCM=10:1 a 0:1) para dar 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina (7,70 g, 26,2 mmol, 33,7% de rendimento) como um óleo marrom. 1HNMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 – 7,28 (m, 5H), 3,73 (s, 2H), 3,66 (br s, 2H), 2,84 (br s, 4H) Intermediário 32 terc-butil4-(4-((benzilóxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-(metilsulfonil)-5,6-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(8H)-carboxilato
[0301] Etapa A: terc-butil4-hidróxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução agitada de 1-terc-butil 4-etil-- oxopiperidina-1,4-dicarboxilato (44,0 g, 162 mmol, 1,00 eq) em MeOH (1,00 mL) a 25°C sob nitrogênio foi adicionada uma solução de NaOMe (35,0 g, 649 mmol, 4,00 eq) em MeOH (600 mL) por seringa seguida de 2-metilisotioureia (61,1 g, 324 mmol, 2,00 eq, H2SO4). Após agitação a 25°C por 16 horas, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover MeOH. O resíduo foi suspenso em 500 ml de acetato de etila e 500 ml de água e agitado rapidamente. A mistura de reação foi ajustada para pH 5 com HCl (2 M). O precipitado foi filtrado e o sólido branco foi lavado com acetato de etila e seco sob vácuo para dar terc-butil-4-hidróxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (33,0 g, 103 mmol, 63,8% de rendimento, 93,2% de pureza) como um sólido branco, o qual foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 4,19 (s, 2 H), 3,49 (br s, 2 H), 2,46 (s, 3 H), 2,35 (br t, J = 5,2 Hz, 2 H), 1,42 (s, 9 H).
[0302] Etapa B: terc-butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfonilóxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma suspensão agitada de terc-butil 4-hidróxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (15,0 g, 50,4 mmol, 1,00 eq) em DCM (200 mL) foi adicionado DIEA (26,1 g, 202 mmol, 35,2 mL, 4,00 eq) a 0°C sob nitrogênio e seguido por anidrido trifluorometanossulfônico (28,5 g, 101 mmol, 16,6 mL, 2,00 eq) por seringa. Imediatamente uma solução marrom se formou. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura de reação foi purificada por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo / Acetato de etila = 1:0 a 10:1) para dar terc-butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfonilóxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato (16,7 g, 35,7 mmol, 70,9% de rendimento, 91,9% de pureza) como um sólido branco. ESI MS m/z 374,0 [M+H]+.
[0303] Etapa C: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução agitada de terc- butil2-metilsulfanil-4-(trifluorometil sulfonilóxo)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (16,7 g, 38,9 mmol, 1,00 eq) em DMF (100 mL) foi adicionado DIEA (10,0 g, 77,9 mmol, 2,00 eq) e benzil piperazina-1-carboxilato (9,41 g, 42,8 mmol, 1,10 eq). A reação foi aquecida até 100°C e agitada por 1 hora sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi diluída com água (150 mL) e a mistura de reação foi ajustada para pH 5 com HCl (2 M) e extraída com DCM (3 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO3 saturado (3 × 150 mL), salmoura (3 × 150 mL) e H2O (3 × 150 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (18,1 g, 36,2 mmol, 93,0% de rendimento, 94,1% de pureza) como um sólido amarelo, que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 500,1 [M+H]+.
[0304] Etapa D: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfonil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução agitada de terc- butil4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (14,4 g, 28,9 mmol, 1,00 eq) em DCM (150 mL) a 0°C sob nitrogênio foi adicionado ácido meta-cloroperoxibenzoico (17,4 g, 101 mmol, 3,50 eq) como um sólido. Depois de se agitar a 0°C por 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio, a mistura de reação foi diluída com água (300 mL)
e a mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO 3 aquoso saturado e extraída com DCM (3 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 200 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10:1 a 1:2) para dar terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfonil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (11,0 g, 19,7 mmol, 68,6% de rendimento, 95,4% de pureza) como um sólido branco. ESI MS m/z 532,1 [M+H]+ .
Intermediário 33 terc-butil (1-bromoisoquinolin-3-il)carbamato
[0305] Etapa A: Uma mistura de 1-bromoisoquinolin-3-amina (400 mg, 1,79 mmol, 1,00 eq) e terc-butoxicarbonilo terc-butil carbonato (3,91 g, 17,9 mmol, 4,12 mL, 10,0 eq) foi agitada a 70°C por 16 horas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter dietílico/acetato de etila = 5:1) para dar terc- butil N-(1-bromo-3-isoquinolil) carbamato (400 mg, 1,24 mmol, 69,2% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 322,1, 324,1 [M+H]+.
Intermediário 34 3-metóxi-6-metilnaftalen-1-il trifluorometanossulfonato
[0306] Etapa A: 3-metoxinaftalen-1-ol: A uma solução de naftaleno-1,3-diol (40,0 g, 250 mmol, 1,00 eq) em MeOH (800 mL) foi adicionado HCl (4 M, 750 mL, 12,0 eq, 4 M em MeOH) a 0°C. A mistura foi aquecida até 18°C e agitada por 30 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 1/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 3- metoxinaftalen-1-ol (17,7 g, 96,5 mmol, 38,6% de rendimento, 95% de pureza) como um óleo vermelho. 1H NMR (400MHz, Clorofórmio-d) δ = 8,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 1,2, 6,8, 8,0 Hz, 1H), 7,38 (ddd, J=1,2, 6,8, 8,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,76 (br s, 1H), 6,62 (d, J=2,4 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H).
[0307] Etapa B: terc-butil-[(3-metóxi-1-naftil)oxi]-dimetil-silano: A uma solução de 3-metoxinaftalen-1-ol (20,0 g, 115 mmol, 1,00 eq) e imidazol (23,5 g, 344 mmol, 3,00 eq) em THF (400 mL) foi adicionado TBSCl (26,0 g, 172 mmol, 21,1 mL, 1,50 eq) gota a gota a 0°C. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 16 horas. A mistura foi diluída com éter de petróleo (600 mL) e acetato de etila (200 mL) e, então, lavada com água (1 × 200 mL) e salmoura (1 × 200 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 10/1). terc-butil-[(3-metóxi-1-naftil)oxi]- dimetil-silano (28,0 g, 97,1 mmol, 84,6% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, Clorofórmio-d) δ = 8,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,35 (dt, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,24 (dt, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 1,02 (s, 9H), 0,23 (s, 6H).
[0308] Etapa C: terc-butil-[[3-metóxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)-1-naftil]oxi]-dimetil-silano e terc-butil((3-metóxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)naftalen-1-il)oxi)dimetilsilano: Uma mistura de terc-butil-[(3- metóxi-1-naftil)oxi]-dimetil-silano (26,0 g, 90,1 mmol, 1,00 eq), 4,4,5,5-tetrametil-
2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (45,8 g, 180 mmol, 2,00 eq), (1Z, 5Z)-ciclo-octa-1,5-dieno; 2,4-dimetil- BLAHbiciclo[1.1.0]butano (2,39 g, 3,61 mmol, 0,04 eq) e 4-terc-butil-2-(4-terc- butil-2-piridil)piridina (1,45 g, 5,41 mmol, 0,06 eq) em hexano (500 mL) foi agitado a 100°C sob atmosfera de nitrogênio por 16 horas. A mistura foi diluída com água (500 mL) e acetato de etila (1.000 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 500 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 10/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar uma mistura de terc-butil-[[3- metóxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-naftil]oxi]-dimetil-silano e terc-butil((3-metóxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-1- il)oxi)dimetilsilano (38,0 g, 85,3 mmol, 94,6% de rendimento, 93% de pureza) como um óleo amarelo claro. ESI MS m/z 415,5 [M+H]+
[0309] Etapa D: 8-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-6-metóxi-naftalen-2-ol: A uma solução da mistura (36,0 g, 86,9 mmol, 1,00 eq) de terc-butil-[[3-metóxi-6- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-naftil]oxi]-dimetil-silano e terc- butil((3-metóxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3, 2-dioxaborolan-2-il)naftalen-1- il)oxi)dimetilsilano em acetona (400 mL) foi adicionada uma solução de Oxona (58,7 g, 95,6 mmol, 1,10 eq) em H2O (400 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura foi extinta com solução aquosa de tiossulfato de sódio a 5% (50 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 300 mL). Os extratos foram combinados e lavados com água (1 × 200 mL), salmoura (1 × 200 mL), secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 200/1 a 20/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 8-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-6-metóxi-naftalen- 2-ol (9,00 g, 28,4 mmol, 32,7% de rendimento, 96% de pureza) como um óleo incolor e 5-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-7-metóxi-naftalen-2-ol (9,00 g, 29,0 mmol,
rendimento de 33,4%, pureza de 98%) como um sólido branco. ESI MS m/z 305,2 [M+H]+
[0310] Etapa E: [5-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-7-metóxi-2-naftil] trifluorometanossulfonato: A uma solução de 5-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-7- metóxi-naftaleno 2-ol (11,0 g, 36,1 mmol, 1,00 eq) e DIEA (14,0 g, 108 mmol, 18,9 mL, 3,00 eq) em DCM (150 mL) foram adicionados Tf2O (12,2 g, 43,4 mmol, 7,15 mL, 1,20 eq) gota a gota a -40°C. A mistura foi agitada por 1 hora. A mistura foi diluída com diclorometano (200 mL) e lavada com água (1 × 200 mL) e salmoura (1 × 200 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 10/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar [5-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-7-metóxi-2-naftil] trifluorometanossulfonato (13,0 g, 29,8 mmol, 82,4% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. ESI MS m/z 436,9 [M+H]+
[0311] Etapa F: terc-butil-[(3-metoxi-6-metil-1-naftil)oxi]-dimetil-silano: A uma solução de [5-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-7-metóxi-2- naftil]trifluorometanossulfonato (12,5 g, 28,6 mmol, 1,00 eq) e K2CO3 (11,9 g, 85,9 mmol, 3,00 eq) em dioxano (160 mL) foi adicionado Pd(PPh3)4 (3,31 g, 2,86 mmol, 0,10 eq) e trimetilboroxina (14,4 g, 57,3 mmol, 16,0 mL, 2,00 eq) sob atmosfera de nitrogênio. A reação foi aquecida até 100°C por 16 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (200 mL) e, então, lavada com água (1 × 200 mL) e salmoura (1 × 200 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 5/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil-[(3-metoxi-6-metil-1-naftil) oxi]-dimetil-silano (8,00 g, 24,6 mmol, 85,9% de rendimento, 93% de pureza) como um óleo incolor como sólido vermelho. ESI MS m/z 303,2 [M+H]+
[0312] Etapa G: 3-metoxi-6-metil-naftalen-1-ol: A uma solução de terc-butil-[(3- metóxi-6-metil-1-naftil)oxi]-dimetil-silano (8,00 g, 26,5 mmol, 1,00 eq) em THF (100 mL) foi adicionado TBAF (10,4 g, 39,7 mmol, 1,50 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 3 horas. A mistura foi diluída com água (100 mL) e acetato de etila (200 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 100 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 50/1 a 5/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 3-metoxi-6-metil-naftalen-1-ol (4,70 g, 25,0 mmol, 94,4% de rendimento) como um sólido vermelho. ESI MS m/z 188,4 [M+H]+
[0313] Etapa H: 3-metóxi-6-metil-1-naftil trifluorometanossulfonato: A uma solução de 3-metoxi-6-metil-naftalen-1-ol (4,70 g, 25,0 mmol, 1,00 eq) e DIEA (9,68 g, 74,9 mmol, 13,1 mL, 3,00 eq) em DCM (3,00 mL) foi adicionado Tf2O (8,45 g, 30,0 mmol, 4,94 mL, 1,20 eq) gota a gota a -40°C. A mistura foi agitada por 1 hora. A mistura foi diluída com diclorometano (200 mL) e lavada com água (1 × 200 mL) e salmoura (1 × 200 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 10/1). 3-metóxi-6-metil-1-naftil trifluorometanossulfonato (7,70 g, 24,0 mmol, 96,2% de rendimento, 99,9% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. ESI MS m/z 320,7 [M+H]+.
[0314] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com a preparação para o Intermediário 3, usando o fenol apropriado em lugar de 2- bromo-3-fluorofenol.
Nº de Estrutura Nome intermediário
Intermediário 2-bromo-4-(metoximetoxi)-1- 35 (trifluorometoxi)benzeno
Intermediário 2-bromo-4-(metoximetoxi)-1- 36 (trifluorometil)benzeno
Intermediário 2-bromo-1-(metoximetoxi)-4- 37 (trifluorometoxi)benzeno
Intermediário 2-bromo-4-fluoro-3- 38 (metoximetoxi)-1- metilbenzeno
Intermediário 1-bromo-3-(metoximetoxi)-5- 39 (trifluorometoxi)benzeno
Intermediário 2-bromo-1-metoxi-4- 40 (metoximetoxi)benzeno
Intermediário 2-bromo-1-(metoximetoxi)-3- 41 metilbenzeno
Intermediário 2-bromo-4-(metoximetoxi)-1- 42 metilbenzeno
Intermediário 1-bromo-4-(metoximetoxi)-2- 43 (trifluorometoxi)benzeno Intermediário 44 2-bromo-3-fluoro-1-(metoximetoxi)-4-metilbenzeno
[0315] Etapa 1: 3-fluoro-4-metilfenol (1,016 g, 8,055 mmol) foi colocado em Cs2 (3,9 mL, 64,44 mmol) e foi resfriado até 0oC. Br2 (0,4150 mL, 8,055 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. Na 2S2O2 10% foi adicionado e a mistura foi extraída com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas, secas e filtradas para fornecer 2-bromo-3-fluoro-4-metilfenol (1,389 g, 6,775 mmol, 84,10% de rendimento) que foi usado diretamente na próxima etapa.
[0316] Etapa 2: 2-bromo-3-fluoro-1-(metoximetoxi)-4-metilbenzeno foi preparado de acordo com o procedimento para o Intermediário 8 usando 2-bromo-3-fluoro- 4-metilfenol no lugar de 2-bromo-3-fluorofenol.
Intermediário 45
2-bromo-1-isopropoxi-4-(metoximetoxi)benzeno
[0317] Etapa 1: 4-isopropoxifenol (1,00 g, 6,57 mmol) e TEA (1,83 mL, 13,1 mmol) foram colocados em DCM (25 mL). Cloreto de acetil (7,56 mL, 7,56 mmol) foi adicionado em gotas e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM. A camada orgânica foi seca, filtrada e concentrada para fornecer acetato de 4- isopropoxifenil (1,24 g, 6,38 mmol, 97,2% de rendimento) que foi diretamente na próxima etapa.
[0318] Etapa 2: Acetato de 4-isopropoxifenil (1,24 g, 6,585 mmol) foi colocado em ACN (20 mL) e N-bromossuccinimida (1,173 g, 6,590 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada por 18 horas. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com éter. As camadas orgânicas foram combinadas, secas e concentradas para fornecer acetato de 3-bromo-4-isopropoxifenil (1,584 g, 5,800 mmol, 88,00% de rendimento) que foi diretamente na próxima etapa.
[0319] Etapa 3: acetato de 3-bromo-4-isopropoxifenil (500 mg, 1,83 mmol) foi colocado em MeOH (7 mL). Uma solução de KOH (111 mg, 1,98 mmol) em água (2 mL) foi adicionada à mistura e foi agitada por 1 h à temperatura ambiente. A mistura de reação foi ajustada para pH 3 pela adição de HCl 1N. A mistura foi extraída com DCM. Os extratos foram combinados, secos, filtrados e concentrados para fornecer 3-bromo-4-isopropoxifenol bruto que foi usado diretamente na reação seguinte.
[0320] Etapa 4: 2-bromo-1-isopropoxi-4-(metoximetoxi)benzeno foi preparado de acordo com o procedimento para o Intermediário 8 usando 3-bromo-4- isopropoxifenol em vez de 2-bromo-3-fluorofenol Intermediário 46
1-bromo-3-cloro-2-isopropil-5-(metoximetoxi)benzeno
[0321] Etapa 1: 1-bromo-3-cloro-2-isopropil-5-metoxibenzeno (952 mg, 3,61 mmol) foi colocado em DCM (3 mL) e foi resfriado até 0oC. BBr3 (9,030 µL, 9,03 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 0oC por 2 h. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-20% de EtOAc em hexano) para fornecer 3-bromo-5-cloro-4-isopropilfenol (575 mg, 2,30 mmol, 63,8% de rendimento)
[0322] Etapa 2: 1-bromo-3-cloro-2-isopropil-5-(metoximetoxi)benzeno foi preparado de acordo com o procedimento para o Intermediário 8 usando 3- bromo-5-cloro-4-isopropilfenol no lugar de 2- Intermediário 47 1-iodo-3-(metoximetoxi)naftaleno
[0323] A uma solução de 4-iodonaftalen-2-ol (0,80 g, 3,0 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionada N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (1,1 mL, 5,9 mmol) e cloro(metóxi)metano (0,29 g, 3,6 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas, com cloro(metoxi)metano adicional (0,15 g) sendo adicionado após 2 horas. A reação foi lavada com salmoura e concentrada in vacuo. O material foi purificado por cromatografia usando um gradiente de 0 a
10% de EtOAc/hexanos como o eluente para dar 1-iodo-3- (metoximetóxi)naftaleno (0,80 g, 2,5 mmol, 86% de rendimento).
Intermediário 48 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno
[0324] Etapa A: 2,4-dibromonaftalen-1-amina: A uma solução de Br2 (246 g, 1,54 mol, 79,3 mL, 2,18 eq) em AcOH (750 mL) foi adicionada uma solução de naftalen-1-amina (101 g, 705 mmol, 99,0 mL) em AcOH (500 mL) à temperatura ambiente e a reação agitada a 70°C por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada Ácido propiônico até a temperatura ambiente e filtrada. A torta de filtro foi lavada com AcOH (300 mL). O sólido foi em seguida suspenso em 20% aquoso de NaOH (1,2 L). A mistura foi agitada por 20 minutos e filtrada. O sólido foi lavado com água (1 L) e seco sob vácuo para dar 2,4-dibromonaftalen-1-amina (200 g, 664 mmol, 94,2% de rendimento) como sólido cinza. ES+APCI MS m/z 301,9 [M+H]+.
[0325] Etapa B: 4-bromo-1-diazônio-naftalen-2-olato: A uma solução de 2,4- dibromonaftalen-1-amina (60,0 g, 199 mmol) em AcOH (900 mL) e ácido propiônico (150 mL) foi adicionado NaNO2 (16,5 g, 239 mmol, 13,0 ml) em porções a 5-8°C durante 30 minutos e a mistura de reação foi agitada a 5-8°C por 30 minutos. A mistura de reação foi vertida em água gelada (4.000 mL), a pasta oi filtrada e o sólido lavado com água (2 x 50 mL) para dar 4-bromo-1- diazônio-naftalen-2-olato (150 g, bruto úmido) que foi usado em bruto na próxima etapa imediatamente. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,12 - 8,10 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,62 - 7,58 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,37 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,31 - 7,29 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H).
Duas etapas 17,3%
[0326] Etapa C: 4-bromonaftalen-2-ol: A uma solução de 4-bromo-1-diazônio- naftalen-2-olato (100 g, 402 mmol) em EtOH (2,00 L) foi adicionado NaBH 4 em porções (30,4 g, 803 mmol) a 13-15°C durante 1 hora e a reação agitada a 15- 18°C por 3 horas. A reação foi filtrada e concentrada até secura. O resíduo foi dissolvido em DCM (1.000 mL) e lavado com água (500 mL × 2). Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4 e concentrados até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia eluindo com éter de petróleo/EtOAc (60/1 → 10/1) e o material foi repurificado por HPLC de fase reversa para dar 4-bromonaftalen-2-ol (40,0 g, 139 mmol, 17,3% de rendimento, 77,4% de pureza) como um sólido cinza. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,07 – 8,05 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,60 – 7,58 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,36 (m, 3H), 7,07 (s, 1H).
[0327] Etapa D: 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno: Uma mistura de 4- bromonaftalen-2-ol (30,0 g, 134 mmol), BnBr (25,3 g, 148 mmol, 17,6 mL) e K2CO3 (55,7 g , 403 mmol) em MeCN (500 mL) foram aquecidos a 80°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada até secura. O resíduo foi purificado por coluna de sílica gel eluindo com PE/EA (100/1 a 60/1) para dar 3- benzilóxi-1-bromo-naftaleno (40,0 g, 128 mmol, 95% de rendimento). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,19 – 8,17 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,75 – 7,32 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,64 - 7,63 (d, J=2,4 Hz,1H), 7,52 – 7,37 (m, 7H), 7,23 – 7,21 (d, J=2,0 Hz,1H), 5,2 (s, 2H).
Intermediário 49 benzil 4-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(metilsulfinil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato
[0328] Etapa A: terc-butil 4-hidroxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução de 1-terc-butil-4-etil 3-oxopiperidina- 1,4-dicarboxilato (50,0 g, 184 mmol) em MeOH (1,00 L) sob nitrogênio foi adicionado NaOMe (49,8 g, 921 mmol) e 2-metilisotioureia (62,4 g, 331 mmol, H2SO4). A mistura de reação foi agitada a 25°C por 16 horas. Foi adicionado HCl (2 M) à mistura de reação até pH ~5 e, então, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em 300 mL de acetato de etila e 300 mL de água. A suspensão foi filtrada. A fase orgânica foi lavada com água (1 x 300 mL), salmoura (1 x 200 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar terc-butil 4-hidróxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (51,0 g, 138 mmol, rendimento de 75,4%, 81,0% de pureza) que foi usado diretamente na próxima reação. ES+APCI MS m/z 298,2 [M+H]+.
[0329] Etapa B: 2-terc-butil-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-hidroxi-2- metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 171 mmol) em DCM (500 mL) foi adicionado DIEA (44,3 g, 343 mmol, 59,9 ml) e Tf 2O (72,6 g, 257 mmol, 42,4 ml), sequencialmente, a 0°C sob nitrogênio. A mistura de reação foi aquecida até 25°C e agitada por 16 horas. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo purificado por cromatografia de coluna eluindo com EtOAc/Petróleo 0 → 10% para dar terc-butil 2-metilsulfanil-4- (trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4 -d]pirimidina-7-carboxilato (46,0 g, 107 mmol, 62,4% de rendimento). ES+APCI MS m/z 430,2 [M+H]+.
[0330] Etapa C: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2- metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (46,0 g, 107 mmol em DMF (500 mL) foi adicionado DIEA (27,7 g, 214 mmol, 37,4 mL) e benzil piperazina-1-carboxilato (25,9 g, 117 mmol, 22,7 mL). A reação foi aquecida até 100°C por uma hora sob atmosfera de N 2. A mistura de reação foi derramada em acetato de etila (300 mL). A mistura foi lavada com H2O (300 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (200 mL), seca sobre Na2SO4 anidro, concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 0 → 20% EtOAc/Petróleo como eluente para dar terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil -6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 96,9 mmol, 90,5% de rendimento, 92,0% de pureza) ES+APCI MS m/z 500,3 [M+H]+.
[0331] Etapa D: Benzil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (25,0 g, 50 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado TFA (85,6 g, 750 mmol, 55,6 mL). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em 300 mL de acetato de etila e 300 mL de água e Na2CO3 adicionado até pH ~8. A camada orgânica foi lavada com água (1 x 300 mL), salmoura (1 x 200 mL) e seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar benzil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato. O produto foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 400,2 [M+H]+.
[0332] Etapa E: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d] pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 3-benziloxi- 1-bromo-naftaleno (16,3 g, 52,1 mmol), benzil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato de etilo (16,0 g, 40,1 mmol), Cs2CO3 (32,6 g, 100 mmol), Pd2(dba)3 (5,50 g, 6,01 mmol) e Ruphos (3,74 g, 8,01 mmol) em dioxano (300 mL) foi desgaseificada com N2 3 vezes e a mistura agitada a 85°C por 5 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de água (200 mL) a 0°C e extraída com EtOAc (3 × 200 mL).
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 150 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna eluindo com 10 →20% de MeOH/DCM para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (16,0 g, 22,8 mmol, 56,9% de rendimento, 90,0% de pureza ES+APCI MS m/z 632,5 [M+H]+.
[0333] Etapa F: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-[7- (3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (8,00 g, 12,7 mmol) em DCM (200 mL) foi adicionado m-CPBA (2,73 g, 12,7 mmol, 80,0% de pureza) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi agitada por duas horas sob 0°C. A mistura de reação foi extinta por adição de Na2S2O3 (10 mL) a 0°C e, em seguida, diluída com água (100 mL) e extraída com DCM (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna eluindo com 0 →10% de MeOH/DCM para dar benzil 4- [7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (3,50 g, 4,92 mmol, 38,8% de rendimento, 91,0% de pureza) ES+APCI MS m/z 648,5 [M+H]+.
Intermediário 50 terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfonil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato
[0334] Etapa A: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonil-1-il)-2-metilsulfonil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução agitada de terc-butyl4- (4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (14,4 g, 28,9 mmol) em DCM (150 mL) foi adicionado m-CPBA sólido (17,4 g, 101 mmol) a 0°C sob nitrogênio. Depois de agitar a 0°C por 2 horas, a mistura de reação foi diluída com água (300 ml) e basificada com solução aquosa saturada de NaHCO3 até pH ~8 e, então, extraída com DCM (3 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, éter de petróleo/acetato de etila 10/1 até 1/2) para dar terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfonil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (11,0 g, 19,7 mmol, 68,6% de rendimento, 95,4% de pureza). ES+APCI MS m/z 532,1 [M+H]+.
Intermediário 51 4-bromo-5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol
[0335] Etapa A: 4-bromo-5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol: A uma mistura de 4-bromo-5-metil-1H-indazol (3 g, 14,2 mmol) e 3,4-di-hidro-2H-pirano (2,39 g, 28,4 mmol, 2,60 mL) em DCM (30 mL) foi adicionado TsOH*H2O (270 mg, 1,42 mmol) e a mistura agitada a 15°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna usando 5→20& EtOAc/Éter de Petróleo como eluente para dar 4-bromo- 5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (4 g, 13,6 mmol, 95,3% de rendimento) como sólido branco. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,01 (s, 1H), 7,47 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,25 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,70 (dd, J=2,8, 9,2 Hz, 1H), 4,05 - 3,96 (m, 1H), 3,79 - 3,70 (m, 1H), 2,66 - 2,44 (m, 4H), 2,25 - 2,04 (m, 2H), 1,84 - 1,56 (m, 3H).
Intermediário 52 4-bromo-5-metoxi-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-indazol
[0336] 4-bromo-5-metoxi-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-indazol foi preparado em seguida ao Intermediário 51 usando 4-bromo-5-metoxi-1H-indazol em lugar de 4-bromo-5-metil-1H-indazol na Etapa A. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,00 (s, 1H), 7,53 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,16 (d, J=9,2 Hz, 1H), 5,70 (dd, J=2,8, 9,2
Hz, 1H), 4,04 - 3,98 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 2,55 - 2,49 (m, 1H), 2,23 - 2,05 (m, 2H), 1,83 - 1,69 (m, 3H).
Intermediário 53 3-(benziloxi)-1-bromo-2-metilnaftaleno 84,3% 63,2% 43,5% Pd2(dba)3, t-BuBrethphos KBr, 2-butanona, PEG 200 i-Bu3Al, toluneo, 100°C 95,5% 64,1% 91,3% 31,0%
[0337] Etapa A: etil 2-metil-3-oxo-4-fenil-butanoato. A um frasco de três gargalos de 250 mL seco foi adicionado etil 3-oxo-4-fenil-butanoato (4,00 g, 19,4 mmol.), THF (50,0 mL), hidreto de sódio (931 mg, 23,3 mmol) e a reação foi agitada por 0,5 hora a 0°C. Uma solução de iodeto de metila (3,03 g, 21,3) foi a seguir adicionada gota a gota. Após a adição estar completa, a mistura de reação foi aquecida até 20°C e agitada por duas horas a 20 °C. A mistura de reação foi extinta por adição de água (10,0 mL) a 20C e, então, diluída com acetato de etila (20,0 mL) e as camadas separadas. A camada aquosa foi a seguir extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30,0 mL), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila 20:1 a 10:1) para dar etil 2-metil-3-oxo-4-fenil-butanoato (3,60 g, 16,3 mmol, 84,3% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 7,38 - 7,28 (m, 3H), 7,25 - 7,19 (m, 2H), 4,22 - 4,15 (m, 2H), 3,87 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 3,65 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 1,34 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,30 - 1,26 (m, 3H).
[0338] Etapa B : 2-metilnaftaleno-1,3-diol. Uma solução de etil 2-metil-3-oxo-4- fenil butanoato (3,60 g, 16,3 mmol) em ácido sulfúrico concentrado (19,9 g, 203 mmol) foi agitada a 15°C por 12 horas. A mistura de reação foi derramada em água gelada (30,0 mL) e o sólido resultante coletado por filtração e seco sob vácuo para proporcionar 2-metilnaftaleno-1,3-diol (1,80 g, 10,3 mmol, 63,2% de rendimento) como um sólido vermelho. 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 - 7,54 (m, 1H), 7,41 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,36 - 7,31 (m, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,29 - 4,20 (s, 2H), 2,41 - 2,24 (s, 3H).
[0339] Etapa C : 3-metoxi-2-metil-naftalen-1-ol. 2-metilnaftaleno-1,3-diol (1,70 g, 9,76 mmol) foi adicionado a HCl/MeOH (2 M, 35,0 mL) e a mistura resultante foi agitada a 30°C por 3 dias. A reação foi concentrada in vacuo e o resíduo purificado por Prep-TLC (Éter de petróleo : Acetato de etila 1:1) para dar 3- metoxi-2-metil-naftalen-1-ol (800 mg, 4,25 mmol, 43,5% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 8,02 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,44 - 7,38 (m, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,14 (s, 1H), 3,94 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).
[0340] Etapa D : (3-metoxi-2-metil-1-naftil)trifluorometanossulfonato. A uma mistura de 3-metoxi-2-metil-naftalen-1-ol (800 mg, 4,25 mmol) e piridina (504 mg, 6,38 mmol) em DCM (10,0 mL) foi adicionado anidrido trifluoroacético (1,44 g, 5,10 mmol) gota a gota a 0°C sob atmosfera de N2. A mistura foi aquecida até 20°C e agitada por um adicional de 5 horas. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo purificado por Prep-TLC (Éter de petróleo : Acetato de etila 1:1) para dar (3-metoxi-2-metil-1-naftil)trifluorometanossulfonato (1,30 g, 4,06 mmol, 95,5% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,79 - 7,74 (m, 1H), 7,52 - 7,43 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 3,99 (s, 3H), 2,42 (s, 3H)
[0341] Etapa E: 1-bromo-3-metoxi-2-metil-naftaleno : Em um tubo selado foi adicionado (3-metoxi-2-metil-1-naftil)trifluorometanossulfonato (466 mg, 1,45 mmol), t-Bu-Brettphos (154 mg, 290 umol), brometo de potássio (259 mg, 2,17 mmol), PEG-200 (175 mg), 2-butanona (157 mg, 2,17 mmol) e Pd2(dba)3 (133 mg, 145 umol) em tolueno (10,0 mL) e a mistura desgaseificada com N2 por 5 minutos. Em seguida, tri-isobutilalumínio (431 mg, 2,17 mmol) foi adicionado gota a gota a 20°C. A mistura foi aquecida até 100°C por 24 horas. A mistura de reação foi derramada em água (30,0 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (30,0 mL), secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados in vacuo para dar um resíduo que foi pré-purificado por cromatografia de coluna (Éter de petróleo:Acetato de etila 10:1) e, então, por Prep-TLC (Éter de petróleo : Acetato de etila 10:1) para dar 1-bromo-3-metoxi-2-metil-naftaleno (700 mg, 2,79 mmol, 64,1% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 8,26 - 8,17 (m, 1H), 7,73 - 7,69 (m, 1H), 7,47 - 7,40 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 3,98 - 3,95 (m, 3H), 2,56 (s, 3H).
[0342] Etapa F: 4-bromo-3-metil-naftalen-2-ol: A uma solução de 1-bromo-3- metoxi-2-metil-naftaleno (580 mg, 2,31 mmol) e iodeto de tetrabutilamônio (2,13 g, 5,78 mmol) ) em DCM (11,0 mL) resfriada até -78°C foi adicionada uma solução de BCl3 (1M, 5,78 mL) gota a gota durante um período de 10 minutos, enquanto sob N2. A mistura de reação foi aquecida até 0°C e agitada por 2 horas à temperatura ambiente. Em seguida, o solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi purificado por Prep-TLC (Éter de petróleo : Acetato de etila 5:1) para dar 4-bromo-3-metil-naftalen-2-ol (500 mg, 2,11 mmol, 91,3% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 8,26 - 8,15 (m, 1H), 7,63 (dd, J = 3,6, 6,0 Hz, 1H), 7,45 - 7,38 (m, 2H), 7,11 (s, 1H), 5,09 (s, 1H), 2,60 (s, 3H), 1,56 (s, 3H).
[0343] Etapa G: 3-benziloxi-1-bromo-2-metil-naftaleno. A uma mistura de 4- bromo-3-metil-naftalen-2-ol (265 mg, 1,12 mmol) e brometo de benzila (201 mg, 1,18 mmol) em acetonitrila (3,00 mL) foi adicionado carbonato de potássio (310 mg, 2,24 mmol) em uma porção a 20°C sob N2. A mistura foi em seguida agitada a 60°C por duas horas. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo purificado por Prep-TLC (Éter de petróleo : Acetato de etila 5:1) para dar o 3-benziloxi-1- bromo-2-metil-naftaleno (250 mg, 695 umol, 31,0% de rendimento, 91,0% de pureza) como um sólido branco. ES+APCI MS m/z 327,0, 329,0 [M+H]+.
Intermediário 54 terc-butil-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato
[0344] Etapa A: (4-bromo-2-naftil) 2,2-dimetilpropanoato. A uma solução de 4- bromonaftalen-2-ol (10 g, 44,8 mmol) e TEA (9,07 g, 89,7 mmol) em DCM (200 mL) foi adicionado cloreto de 2,2-dimetilpropanoil (8,11 g, 67,2 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 10 min. A mistura de reação foi extinta por adição de água (50 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura (30 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EA = 1:0 a 100:1) para dar (4-bromo-2-naftil) 2,2-dimetilpropanoato (9 g, 29,3 mmol, 65,4% de rendimento) como um óleo vermelho. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d)  = 8,22 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,83 - 7,77 (m, 1H), 7,63 - 7,49 (m, 4H), 1,41 (s, 9H).
Intermediário 55 terc-butil 4-(2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato.
33,7% 83,2% 90,1% toluneo, 110°C, 3 h 55,6% 54,9%
[0345] Etapa A: 7-benzil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol. A EtOH (600 mL) foi adicionado Na (5,56 g, 241 mmol) em porções e a mistura agitada por 1 hora. A esta solução foi adicionado etil 1-benzil-3-oxo-piperidina-4- carboxilato (30,0 g, 100 mmol) e ureia (14,5 g, 242 mmol) e a mistura de reação foi agitada a 75°C por 36 horas. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo dissolvido em água (50 mL) e acidificado por adição de HCl (120 mL, 2M), em cujo ponto um sólido precipitou. O sólido foi filtrado e a torta de filtro seca sob vácuo para dar 7-benzil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol (22,0 g, 83,8 mmol). 1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 10,97 (br s, 1H), 10,66 (br s, 1H),
7,55 - 6,95 (m, 5H), 3,81 - 3,50 (m, 2H), 3,26 - 2,91 (m, 2H), 2,77 - 2,58 (m, 2H), 2,34 - 2,09 (m, 2H).
[0346] Etapa B: 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de DIEA (30,1 g, 233 mmol) em POCl3 (330 g, 2,15 mol) foi adicionado 7-benzil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d] pirimidina-2,4-diol (20,0 g, 77,7 mmol) e a mistura de reação agitada a 110°C por 5 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (400 mL) e derramando em NaHCO3 (200 mL) e as camadas separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 400 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 mL), secos sobre Na2SO4 e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/DCM = 10/1 a 0/1) para dar 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (7,70 g, 26,2 mmol). 1HNMR (300MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,28 (m, 5H), 3,73 (s, 2H), 3,66 (br s, 2H), 2,84 (br s, 4H).
[0347] Etapa C: terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il) piperazina-1-carboxilato. A uma solução de 7-benzil-2,4-dicloro- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (17,3 g, 58,8 mmol) em DMSO (200 mL) foi adicionado DIEA (19,0 g, 147 mmol) e terc-butil piperazina-1-carboxilato (11,5 g, 61,7 mmol) e a mistura agitada a 55°C por 10 horas. A mistura de reação foi derramada em acetato de etila (200 mL) e lavada com água (3x200 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (200 mL), secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por trituração de MTBE (200 mL) para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il) piperazina-1-carboxilato (24 g, 52,9 mmol). ES+APCI MS m/z 444,2 [M+H]+.
[0348] Etapa D: terc-Butil 4-[7-benzil-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de 3- morfolinopropan-1-ol (11,8 g, 81,1 mmol), terc- butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-
hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazina-1-carboxilato (18 g, 40,5 mmol), BINAP (5,05 g, 8,11 mmol), t-BuONa (9,74 g, 101 mmol) e Pd2(dba)3 (3,71 g, 4,05 mmol) em tolueno (300 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes e a mistura agitada a 110°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi derramada em H2O (200 mL) e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3x300 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (200 mL), secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 5/1) para dar terc- Butil 4-[7-benzil-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] piperazina-1- carboxilato (14 g, 22,5 mmol). ES+APCI MS m/z 553,4 [M+H]+.
[0349] Etapa E: terc-butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il] piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[7-benzil- 2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (14 g, 25,3 mmol) em MeOH (1 L) foi adicionado Pd/C seco (3 g, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 10 horas. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado in vacuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1TFA)/acetonitrila] para dar terc- butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il] piperazina-1-carboxilato (6,5 g, 13,9 mmol). ES+APCI MS m/z 463,4 [M+H]+.
Intermediário 56
[0350] Naftalen-1-il trifluorometanossulfonato. alfa-naftol (4 g, 27,74 mmol) foi dissolvido em DCM (200 mL) em um frasco de 3 gargalos. A reação foi resfriada a 10°C num banho de água. N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (4,846 ml, 27,74 mmol) e anidrido trifluorometanossulfônico (4,668 ml, 27,74 mmol) foram adicionados gota a gota à solução. A reação foi agitada a 10°C por 2 horas. A TLC (25% de EtOAc, UV vis) mostrou reação completa. Os orgânicos foram com água (2X) e salmoura (2X). Os orgânicos foram secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi purificado utilizando cromatografia de fase normal no CombiFlash (0% -12% EtOAc:Hexanos). Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas in vacuo para dar naftalen-1-il trifluorometanossulfonato (6,77 g, 24,51 mmol, 88,34% de rendimento).
Intermediário 57 Tert-butil (S)-2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina-1-carboxilato
[0351] A uma solução de (S)-1-Boc-2-hidroximetilpiperazina (1,0 g, 4,62 mmol) em DCE (92,47 ml, 4,624 mmol) foi adicionado formaldeído (3,474 ml, 46,24 mmol) (37% em água) seguido de sódio triacetoxiboro-hidreto (4,9 g, 23,12 mmol). A mistura foi agitada vigorosamente à temperatura ambiente por 2,5 horas. A mistura foi tratada com bicarbonato de sódio saturado (30 mL), agitada por 10 min., então, extraída com DCM (3 x 10 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. ES+APCI MS m/z 231,1 [M+H]+.
Intermediário 58
Terc-butil (R)-2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina-1-carboxilato
[0352] O composto do título foi preparado como no Intermediário 57, usando terc- butil (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato) no lugar de (S)-1-Boc-2- hidroximetilpiperazina. ES+APCI MS m/z 231,1 [M+H]+ Intermediário 59 1-bromo-3-cloro-2-fluoro-5-(metoximetoxi)benzeno
[0353] A um frasco de fundo redondo foi adicionado THF (8,87 ml, 4,44 mmol) seguido de hidreto de sódio, dispersão a 60% em óleo mineral (0,213 g, 5,32 mmol). A mistura foi resfriada até 0°C, então, 3-bromo-5-cloro-4-fluorofenol (1,0 g, 4,44 mmol) foi adicionado em porções. Depois que o borbulhamento cessou, a mistura escura resultante foi agitada a 0°C por 30 min. Então, clorometil metil éter (0,421 ml, 5,54 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida até a temperatura ambiente, onde ela foi agitada por 2 horas. Foi adicionada uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio e a mistura foi extraída com DCM. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O material bruto foi cromatografado (0-15% EtOAc em hexanos) para fornecer produto como óleo transparente.
Intermediário 60 4-bromo-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil)indazol
[0354] Etapa A: 4-bromo-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil)indazol: A uma solução de 4-bromo-5-(trifluorometil)-1H-indazol (500 mg, 1,89 mmol, 1 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado 3,4-di-hidro-2H-pirano (476 mg, 5,66 mmol, 517 uL, 3 eq) e TsOH H2O (35,9 mg, 188 umol, 0,1 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA=10:1 a 1:1) para dar 4-bromo-1-tetra-hidropiran-2-il-5- (trifluorometil)indazol (480 mg, 1,37 mmol, 72,9% de rendimento) como óleo amarelo.1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,20 (s, 1H), 7,69 - 7,63 (m, 2H), 5,70 (dd, J=2,8, 8,8 Hz, 1H), 4,05 - 3,96 (m, 1H), 3,79 - 3,70 (m, 1H), 2,56 - 2,50 (m, 1H), 2,27 - 2,04 (m, 2H), 1,80 - 1,74 (m, 2H), 1,60 - 1,54 (m, 1H).
Intermediário 61
[0355] 8-bromo-6-(metoximetoxi)quinolina: Uma suspensão agitada de 8- bromoquinolin-6-ol (1,00 g, 4,46 mmol) em DCM (20 mL) foi resfriada até 0 oC e di-isopropiletilamina (1,2 mL, 6,7 mmol, 1,5 eq.) foi adicionada seguida por cloro(metóxi)metano (0,41 mL, 5,4 mmol, 1,2 eq.) gota a gota e a mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente durante a noite. Amônia aquosa concentrada (0,5 mL, ~5 mmol) foi a seguir adicionada e a mistura resultante foi agitada por 1 hora à temperatura ambiente. A mistura foi evaporada in vacuo e cromatografada em sílica gel, Redisep 40g, usando 20% EtOAc/hexano como eluente para dar um pó incolor (0,52 g, 44%). ES+APCI MS m/z 268,0, [M+H] +.
Intermediário 62 Tolueno, TEA Duas etapas 55,7% 86,7%
[0356] A uma solução de but-3-enonitrila (80,0 g, 1,19 mol, 96,4 mL, 1,00 eq) em terc-butanol (130 mL) e éter de petróleo (480 mL) foi adicionada uma solução de Br2 (191 g, 1,19 mol , 61,5 mL, 1,00 eq) em terc-butanol (130 mL). A mistura foi agitada a 10°C por 4 horas. A mistura foi usada na próxima etapa sem qualquer tratamento.
[0357] À mistura acima (274 mL) foi adicionada uma solução de N,N’- dibenziletano-1,2-diamina (160 g, 445 mmol, 157 mL, 2 HOAc) e Et 3N (178 g, 1,76 mol, 245 mL) em tolueno (300 mL). Depois de ser agitada a 110°C por 2 horas, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1) para dar 2-(1,4-dibenzilpiperazin-2-il)acetonitrila (75,0 g, 246 mmol, duas etapas 55,7% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 306.
[0358] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,37 - 7,23 (m, 10H), 3,80 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,60 - 3,42 (m, 3H), 3,06 - 2,96 (m, 1H), 2,95 - 2,83 (m, 1H), 2,69 - 2,53 (m, 4H), 2,52 - 2.35 (m, 3H).
[0359] A uma solução de 2-(1,4-dibenzilpiperazin-2-il)acetonitrila (160 g, 524 mmol, 1,00 eq) em dicloroetano (1,50 L) foi adicionado cloridrato de 1-cloroetil carbono (300 g, 2,10 mol, 4,00 eq) a 15°C. Após agitada a 85°C por 48 h, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi, então, absorvido em metanol (1,50 L) e aquecido até refluxo por 1 hora. A mistura foi concentrada. O sólido foi tratado com metil terc-butil éter (1,00 L), 2-piperazin-2-ilacetonitrila (Intermediário 62, 90,0 g, 454 mmol, 86,7% de rendimento, 2HCl) foi obtido como um sólido branco e usado para a próxima etapa sem purificação adicional.
[0360] 1H NMR (400MIIz, DMSO-d6) δ = 10,19 (br s, 2H), 4,01 - 3,73 (m, 1H), 3,69 - 3,41 (m, 4H), 3,32 (dt, J = 2,8, 13,2 Hz, 1H), 3,27 - 3,10 (m, 3H).
Intermediário 63 1h rendimento: 64% HCl-Dioxano DMA, 60°C, 12hrs rt, 4hrs Duas etapas rendimento: rendimento: 95% 72%
[0361] A uma solução de terc-butil (3R)-3-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (80,0 g, 370 mmol, 1,0 eq) em Acetato de etila (1.400 mL) foi adicionado NaHCO3 (93,2 g, 1,11 mol, 43,2 mL, 3,0 eq), H2O (700 mL) e carbonocloridato de benzila (82,0 g, 481 mmol, 68,4 ml, 1,30 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. Após conclusão, a fase orgânica foi separada, lavada com água (500 mL x 2), seca sobre Na2SO4 e filtrada. O solvente foi removido sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 40/1 a 1/1). O produto 1-benzil 4-terc-butil (2R)-2-
(hidroximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato (85,0 g, 235 mmol, 64% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M-99]: 251.
[0362] A uma solução de 1-benzil 4-terc-butil (2R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4- dicarboxilato (20,0 g, 57,1 mmol, 1,0 eq) em 2-Metiltetra-hidrofuran (240 mL) foi adicionado TEA (17,3 g, 171,23 mmol, 23,8 mL, 3,0 eq) e cloreto de metanossulfonila (7,74 g, 67,6 mmol, 5,23 mL, 1,18 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de 150 mL de H 2O 150 a 20°C. A mistura de reação foi extraída com Acetato de etila (300 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com H2O (100 mL), secas sobre Na2SO4 e filtradas. O solvente foi removido sob vácuo. 1-benzil 4-terc-butil (2R)-2- (metilsulfoniloximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato (22,0 g, em bruto) foi obtido como um óleo amarelo. O produto bruto foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[0363] A uma solução de 1-benzil 4-terc-butil (2R)-2- (metilsulfoniloximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato (22,0 g, 51,3 mmol) em DMA (150 mL) foi adicionado NaCN (10,4 g, 211 mmol). A mistura foi agitada a 60°C por 12 horas. O solvente foi removido sob vácuo para dar um resíduo de óleo. O resíduo foi diluído com H2O (40,0 mL) e extraído com Acetato de etila (50,0 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (80,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 40/1 a 5:1) O produto 1-benzil-4-terc-butil (2S)- 2-(cianometil)piperazina-1,4-dicarboxilato (18,5 g, 46,4 mmol duas etapas 72% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 360.
[0364] A uma solução de 1-benzil 4-terc-butil (2S)-2-(cianometil)piperazina-1,4- dicarboxilato (18,5 g, 43,3 mmol, 1,00 eq) em dioxano (40,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 54,1 mL, 5,0 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Então à mistura de reação foi adicionado NaHCO3 até pH> 7 e concentrada sob pressão reduzida para remover dioxano. O resíduo foi diluído com H2O (50,0 mL) e extraído com Acetato de etila (50,0 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (20,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto benzil (2S)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 63, 11,5 g, 91,8% de pureza, 95% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 260.
[0365] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,37 - 7,31 (m, 5H), 5,14 (s, 2H), 4,49 (br, s, 1H), 3,93 (br, s, 1H), 3,07 - 2,81 (m, 5H), 2,78 - 2,54 (m, 2H).
Intermediário 64 Cs2CO3, tolueno 110°C, 12 hrs Duas etapas 30%
[0366] Uma mistura de terc-butil 2-metilsulfanil-4 -(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3,81 g, 8,87 mmol, 1,0 eq), benzil(2S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 63, 2,30 g, 8,87 mmol, 1,0 eq), DIEA (3,44 g, 26,6 mmol, 4,63 mL, 3,0 eq) em DMF (20,0 mL) foi degaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 100°C por 1 hora sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3/1 a 1:1) para dar terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-
pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3,6 g, 6,16 mmol, 69% de rendimento, 92,2% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 539.
[0367] Uma mistura de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5Hpirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (6,0 g, 11,1 mmol, 1,0 eq), TFA (30,8 g, 270 mmol, 20,0 mL, 24,3 eq) em DCM (20,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 20°C por 1 hora sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO 3 (500 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 300 mL) e a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e filtrada. O solvente foi removido sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (4,8 g, bruto) como um sólido amarelo que foi utilizado para a próxima etapa sem purificação adicional.
[0368] Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (4,8 g), 1-bromonaftaleno (3,8 g, 18,35 mmol, 2,55 mL), Pd2(dba)3 (1,0 g, 1,09 mmol), RuPhos (1,02 g, 2,19 mmol) e Cs2CO3 (12,0 g, 36,8 mmol) em tolueno (30,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 100°C por 12 horas sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada. O solvente orgânico foi removido sob vácuo para dar um resíduo de óleo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=5/1 a 3:1) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,2 g, 3,31 mmol, 85,3% de pureza, rendimento de duas etapas 30%) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 565.
[0369] Uma mistura de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,8 g, 3,97 mmol, 1,0 eq), m-CPBA (1,05 g, 5,16 mmol, 1,3 eq) em DCM (4,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 0°C por 1 hora sob atmosfera de N2. Após conclusão, a reação é extinta adicionando solução saturada de Na2SO3 (50 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 10 mL). A camada orgânica combinada foi seca com Na 2SO4 e filtrada. O solvente foi removido para dar um resíduo de óleo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel (SiO2, Metanol/Acetato de etila=1/20 a 1:10) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 1,5 g, 2,35 mmol, 59% de rendimento, 90,8% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
581.
Intermediário 65 t-BuONa, tolueno 0°C, 0,5 hora 0°C, 0,5 15°C, 2 87% hora 51% horas 70%
[0370] A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato (24,3 g, 45,0 mmol, 1,0 eq) em Acetato de etila (480 mL) foi adicionado m-CPBA (8,69 g, 42,8 mmol, 85% de pureza, 0,95 e) em porções a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (50,0 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 300 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. A mistura foi neutralizada com solução saturada de bicarbonato de sódio,
concentrada sob vácuo para remover MeCN e extraída com acetato de etila (3 ×
1.000 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin- 1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (22,8 g, 39,3 mmol, 87% de rendimento, 95,8% de pureza) como um sólido amarelo.
[0371] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,37 - 7,23 (m, 5H), 5,12 (s, 2H), 4,75 - 4,41 (m, 3H), 4,17 - 4,05 (m, 2H), 3,86 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,81 - 3,62 (m, 1H), 3,46 - 3,18 (m, 3H), 3,10 (d, J = 3,6, 12,0 Hz, 1H), 2,81 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 2,77 - 2,56 (m, 4H), 1,42 (s, 9H).
[0372] A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (5,0 g, 9,01 mmol, 1,0 eq) e [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (1,82 g, 15,8 mmol, 1,88 mL, 1,75 eq) em tolueno (50,0 mL) foi adicionado t-BuONa (1,73 g, 18,0 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura foi adicionada água fria (50,0 mL) e extraída com acetato de etila (5 × 50,0 mL). A camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE : EA = 10:1 - EA : MeOH = 5:1) para dar terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,80 g, 4,62 mmol, 51,0% de rendimento) como um sólido amarelo.
[0373] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,44 - 7,35 (m, 5H), 5,21 (s, 2H), 4,73 - 4,54 (m, 2H), 4,44 - 4,33 (m, 2H), 4,22 - 4,10 (m, 2H), 3,41 - 3,93 (m, 1H), 3,82 (br d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,39 - 3,22 (m, 3H), 3,11 (br t, J = 7,8 Hz, 1H), 2,99 (d, J = 3,6, 12,8 Hz, 1H), 2,90 - 2,56 (m, 5H), 2,49 (s, 3H), 2,35 - 2,25 (m, 1H), 2,07 - 2,02 (m, 1H), 1,91 - 1,76 (m, 3H), 1,50 (s, 9H).
[0374] A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-
pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,40 g, 3,96 mmol, 1,0 eq) em DCM (8,0 mL) foi adicionado TFA (13,9 g, 122 mmol, 9,0 mL, 30,7 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura foi concentrada. Ao resíduo foi adicionado NaHCO3 aquoso saturado (20,0 ml) e extraído com DCM (5 x 10,0 ml). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il] metóxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido [3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 65, 1,40 g, 2,77 mmol, 70% de rendimento) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 506.
Intermediário 66 0,5 h 0,5 h Duas etapas 85% 0,5 h t-BuONa, tolueno, 0°C, 10 min.
[0375] Etapa A: A uma solução de 7-benzil-4-cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina (20,0 g, 65,4 mmol, 1 eq) em DCE (200 mL) foi adicionado 1-cloroetil carbonocloridrato (28,1 g, 196 mmol, 3 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 30 minutos e 70°C por 15 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH (200 mL) e agitado a 70°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi triturado com metil terc-butil éter (60 mL). O precipitado foi coletado por filtração,
lavado com metil terc-butil éter (20 mL) e seco sob vávuo para dar 4-cloro-2- metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (17,2 g, bruto, HCl) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[0376] 1H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ = 4,35 (s, 2H), 3,60 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,05 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,55 (s, 3H).
[0377] Etapa B: A uma solução de 4-cloro-2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido [3,4-d]pirimidina (16,5 g, bruto, HCl) e TEA (20,0 g, 196 mmol, 27,3 mL) em THF (400 mL) foi adicionado cloridrato de benzila (16,7 g, 98,1 mmol, 13,9 mL) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (80 mL) e a camada orgânica foi separada. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 80/1 a 5/1) para dar benzil 4-cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido [3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (19,6 g, 50,4 mmol, duas etapas 86% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo amarelo.
[0378] 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,37 (s, 5H), 5,18 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 3,877 (d, J = 8,0, 2H), 2,80 (br s, 2H), 2,54 (s, 3H).
[0379] Etapa C: A uma solução de benzil 4-cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (21,5 g, 55,3 mmol, 1,00 eq) em DMF (400 mL) foi adicionado DIEA (35,7 g, 277 mmol, 48,2 mL, 5,00 eq) e 2-[(2S)- piperazin-2-il]acetonitrila (6,92 g, 55,3 mmol, 1,00 eq). Depois de agitada a 80°C por 2 horas, (Boc)2O (60,4 g, 277 mmol, 63,5 mL, 5,00 eq) foi adicionado à mistura acima e agitado a 80°C por outras 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (800 mL) e extraída com EtOAc (2 × 400 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (300 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 10/1 a 1/1) para dar benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil) piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato (24,3 g, 43,0 mmol, 78% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo.
[0380] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,29 (m, 5H), 5,18 (s, 2H), 4,76 - 4,54 (m, 2H), 4,46 (br d, J = 18,4 Hz, 1H), 4,08 - 3,69 (m, 4H), 3,53 - 3,35 (m, 1H), 3,34 - 3,03 (m, 2H), 3,03 - 2,89 (m, 1H), 2,81 - 2,55 (m, 4H), 2,50 (s, 3H), 1,51 (s, 9H).
[0381] Etapa D: A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato (24,3 g, 45,1 mmol, 1 eq) em EtOAc (480 mL) foi adicionado m- CPBA (8,70 g, 42,9 mmol, 85% de pureza, 0,95 eq) em poção a 0ºC. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (800 mL). O pH foi ajustado para 8 com NaHCO3 e a camada orgânica foi separada. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 400 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EtOAc/MeOH 100/1 a 10/1) para dar benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (20,9 g, 36,4 mmol, 81% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 555.
[0382] Etapa E: A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil) piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato (20,9 g, 37,6 mmol, 1 eq) e [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (8,67 g, 75,3 mmol, 8,94 mL, 2 eq) em tolueno (400 mL) foi adicionado t-BuONa (7,23 g, 75,3 mmol, 2 eq) a 0°C. Depois de agitada a 0°C por 10 minutos, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (200 mL) e extraído com EtOAc (2 × 400 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água
(0,1% FA)/acetonitrila]. A mistura foi neutralizada com solução saturada de bicarbonato de sódio, concentrada sob vácuo para remover MeCN e extraída com EtOAc (2 × 1.000 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (13,5 g, 20,5 mmol, 54% de rendimento, 92% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 606.
[0383] Etapa F: Para uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil) piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3,50 g, 5,78 mmol, 1 eq) em MeOH (60,0 mL) foi adicionado NH3/MeOH (60,0 ml), Pd/C (1,00 g, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 4 horas. Mediante conclusão, o catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 2,33 g, 4,55 mmol, 79% de rendimento, 92% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[0384] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 4,58 (br s, 1H), 4,34 (dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,11 (dd, J = 6,8, 10,8 Hz, 1H), 4,08 - 3,88 (m, 4H), 3,84 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,25 - 3,03 (m, 4H), 3,01 - 2,88 (m, 2H), 2,82 - 2,51 (m, 5H), 2,47 (s, 3H), 2,27 (dt, J = 7,2, 9,2 Hz, 1H), 2,11 - 1,97 (m, 1H), 1,92 - 1,75 (m, 3H), 1,50 (s, 9H).
Intermediário 67 terc-butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato
[0385] Etapa A: terc-butil 4-hidroxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução agitada de 1-terc-butil 4-etil 3- oxopiperidina-1,4-dicarboxilato (50,0 g, 184 mmol, 1,00 eq ) em MeOH (1,00 L) a 25°C sob nitrogênio foi adicionado NaOMe (49,8 g, 921 mmol, 5,00 eq) seguido por 2-metilisotioureia (62,4 g, 331 mmol, 1,80 eq, H2SO4) como um sólido. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 16 horas. A mistura de reação foi acidificada com HCl (2 M) até pH~5 e, então, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para remover MeOH. O resíduo foi suspenso em 300 mL de acetato de etila e 300 mL de água e agitado rapidamente. A suspensão foi filtrada e o sólido branco foi coletado. O filtrado foi separado e os orgânicos lavados com água (1 × 300 mL) e salmoura (1 × 200 mL). Os orgânicos foram isoladas, secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados até um sólido branco. terc-butil 4-hidroxi- 2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 138 mmol, 75,4% de rendimento, 81% de pureza) foi obtido como um sólido branco e usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [M+1]: 298.
[0386] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 4,33 (s, 2H), 3,61 ( t, J=5,6 Hz, 2H), 2,68 - 2,49 (m, 5H), 1,50 (s, 9H).
[0387] Etapa B: terc-butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma suspensão agitada de terc-butil 4-hidroxi-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (51,0 g, 171 mmol, 1,00 eq) em DCM (500 mL) a 0°C foi adicionado DIEA (44,3 g, 343 mmol, 59,9 mL, 2,00 eq), seguido por Tf2O (72,6 g, 257 mmol, 42,4 mL, 1,50 eq) sob nitrogênio. Imediatamente uma solução marrom se formou. Após agitação a 25°C por 16 horas, a reação foi concentrada para dar um óleo marrom. O óleo marrom foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 10/1). O composto do título terc-butyl 2- metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi) -6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (46,0 g, 107 mmol, 62% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [M+1]: 430.
Intermediário 68 terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato
[0388] Etapa A: terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]- 2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. Uma mistura de terc-buil 2-metilsulfanil-4 -(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (3,81 g, 8,87 mmol, 1,0 eq), benzil(2S)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 63, 2,30 g, 8,87 mmol, 1,0 eq), DIEA (3,44 g, 26,6 mmol, 4,63 mL, 3,0 eq) em DMF (20,0 mL) foi degaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 100°C por 1 hora sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3/1 a 1:1) para dar o composto título terc-butil 4-[(3S)- 4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3,6 g, 6,16 mmol, 69% de rendimento, 92,2% de pureza) como um sólido amarelo.
Intermediário 69
3,5 h 1-bromo-8-metilnaftaleno
[0389] Etapa A: 1-bromo-8-metil-naftaleno. A uma solução de 1,8- dibromonaftaleno (1 g, 3,50 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) foi adicionado MeLi (1,6 M em éter dietílico, 2,62 mL, 1,2 eq) a 0°C gota a gota. Após agitar por 30 minutos a 0°C, foi adicionado gota a gota iodometano (3,38 g, 23,8 mmol, 1,48 mL, 6,81 eq). A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por outras 3 horas. A mistura de reação foi extinta com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 45% - 70%, 28 MIN ; 40% min.). O composto título 1-bromo-8-metil-naftaleno (340 mg, 1,49 mmol, 43% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo após liofilização.
[0390] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 (dd, J = 0,8, 7,2 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 0,8, 8,0 Hz, 1H), 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,30 - 7,22 (m, 2H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,05 (s, 3H).
Intermediário 70 Nitreto de isoamila 1-bromo-8-cloronaftaleno
[0391] Etapa A: 1H-nafto[1,8-de][1,2,3]triazina. A uma solução de naftaleno-1,8- diamina (100 g, 632 mmol, 1 eq) em AcOH (200 mL) e EtOH (1000 mL) foi adicionado nitrito de isoamila (72,6 g, 619 mmol, 83,4 mL, 0,98 eq) gota a gota durante um período de 2 h, com temperatura controlada entre 18 e 21°C em banho de água fria. Após a adição, a suspensão vermelha resultante foi agitada a 25°C por 16 horas. O sólido foi coletado por filtração, lavado com etanol (2 x 500 mL) e seco sob vácuo. O composto 1H-nafto[1,8-de][1,2,3]triazina (84 g, 496 mmol, 79% de rendimento) foi obtido como um sólido cristalino vermelho e usado diretamente na próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 170.
[0392] Etapa B: 8-cloronaftalen-1-amina. A uma solução de 1H-nafto [1,8- de][1,2,3]triazina (84 g, 496 mmol, 1 eq) em HCl (1,5 L) foi adicionado Cu (2,10 g, 33,1 mmol, 234 uL, 0,0665 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura resultante foi diluída com água (500 mL) e aquecida a 85°C por 30 min. A solução aquosa quase transparente resultante foi filtrada, resfriada, basificada com amônia aquosa (até azul para tornassol) e a solução foi extraída com acetato de éter (2 × 1.000 mL). Os extratos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 200/1 a 5/1). Composto 8-cloronaftalen-1-amina (57 g, 259 mmol, 52% de rendimento, 81% de pureza) foi obtido como um sólido vermelho. LCMS [ESI, M+1]: 178.
[0393] Etapa C: 1-bromo-8-cloro-naftaleno. A uma solução de 8-cloronaftalen-1- amina (57 g, 320 mmol, 1 eq) e TsOH•H2O (219 g, 1,16 mol, 3,6 eq) em MeCN (1.000 mL) foi adicionada uma solução de NaNO2 (39,8 g, 577 mmol, 1,8 eq) e CuBr (138 g, 963 mmol, 29,3 mL, 3 eq) em H2O (120 mL) a -5°C, em seguida, a mistura de reação foi agitada a 25°C por 12 horas. À mistura de reação foi adicionada solução de Na2SO3 saturada (100 mL) e agitada por 15 min., em seguida extraída com acetato de etila (1.000 mLx3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (500 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo). O composto título 1-bromo-8-cloro-naftaleno (56 g, 229 mmol, 72% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido branco.
[0394] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,93 (dd, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 1,2, 8,4, 1H), 7,79 (dd, J = 1,2, 8,4, 1H), 7,67 (dd, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 (t, J = 8,0 Hz, 1H).
Intermediário 71 HCl-dioxano dioxano 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
[0395] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (0,5 g, 791 umol, 1 eq) em dioxano (5 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 5,00 mL, 25,3 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar um produto impuro (500 mg, bruto, HCl) como um sólido marrom. 60 mg do produto impuro foram purificados por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (0,04% de NH3•H2O + 10mM NH4HCO3) - ACN]; B%: 50% - 80%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-
metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (19,3 mg, 36,1 umol, 34% de purificação rendimento, 99,2% de pureza) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]:532.
[0396] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 1,6, 8,0 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 0,8, 7,2 Hz, 1H), 7,44 (dt, J = 3,6, 7,6 Hz, 1H), 7,36 - 7,29 (m, 1H), 7,22 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 4,46 - 4,34 (m, 2H), 4,15 (td, J=6,4, 10,6 Hz, 1H), 4,04 (br d, J=12,4 Hz, 0,5H), 3,95 - 3,79 (m, 2H), 3,74 (br d, J=12,8 Hz, 0,5H), 3,63 - 3,48 (m, 1H), 3,40 - 2,99 (m, 7H), 2,98 - 2,80 (m, 2H), 2,73 - 2,61 (m, 1H), 2,60 - 2,49 (m, 3H), 2,47 (d, J=2,4 Hz, 3H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,10 - 1,99 (m, 1H), 1,82 - 1,68 (m, 3H).
Intermediário 72 1,5 h Cs2CO3, tolueno 90°C, 12h, 32% 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
[0397] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (1,22 g, 1,98 mmol, 1,0 eq), 1-bromo-2,3-dimetil-benzeno (1,10 g, 5,93 mmol, 802 uL, 3,0 eq), Cs2CO3 (1,93 g, 5,93 mmol, 3 eq), RuPhos (185 mg, 396 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (181 mg, 198 umol, 0,1 eq) em tolueno (8 mL) foi degaseificada e, então, aquecida até 90°C por 12 horas sob N 2. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água
(20 mL) e extraído com EtOAc (3 × 30 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas coletadas foram neutralizadas com bicarbonato de sódio aquoso saturado e concentradas sob vácuo para remover MeCN e, então, extraídas com EtOAc (3 × 50 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (380 mg, 623 umol, 32% de rendimento, 100 % de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 610.
[0398] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhada em MeOH (20 mL) a -70°C por 30 minutos. Uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (380 mg, 623 umol, 1,0 eq) foi adicionada a solução acima seguida por Pd/C (200 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A reação foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, o catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado para dar o composto título 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, 459 umol, 74% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo.
[0399] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,11 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 7,2, 9,6 Hz, 1H), 4,02 – 3,95 (m, 3H), 3,84 – 3,78 (m, 1H), 3,31 – 3,19 (m, 1H), 3,17 – 3,04 (m, 5H), 3,04 – 2,95 (m, 1H), 2,89 (dd, J = 9,2, 11,6 Hz, 1H), 2,76 – 2,62 (m, 3H), 2,58 – 2,50 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,29 - 2,23 (m, 4H), 2,12 - 2,00 (m, 1H), 1,89 - 1,76 (m, 3H).
Intermediário 73
[0400] terc-butil(2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato
[0401] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2- metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (1,60 g, 3,96 mmol, 1,0 eq), 1-bromo-2,3-dimetil-benzeno (1,61 g, 8,70 mmol, 1,18 mL, 2,20 eq), Pd2(dba)3 (362 mg, 395 umol, 0,10 eq), RuPhos (369 mg, 791 umol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (3,87 g, 11,9 mmol, 3,0 eq) em tolueno (8,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e, então, a mistura foi agitada a 90°C por 12 h sob pressão de N2. O solvente orgânico foi lavado com água (20,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 30,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (80,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila=3 : 1 para Acetato de etila : Metanol = 10 : 1). Composto terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (900 mg, 1,59 mmol, 40% de rendimento, 90% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 509.
[0402] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,11 (t, J = 15,6 Hz, 1H), 6,95(d, J = 8,0 Hz,2H), 4,63 (br s, 1H), 4,10 – 3,93 (m, 4H), 3,89 (br d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,27 (dd, J = 3,6 Hz, J = 13,6 Hz, 1H),3,24 – 3,05 (m, 3H), 3,05 – 2,95 (m, 1H), 2,89 – 2,67 (m, 4H), 2,52 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,52 (s, 9H).
[0403] Etapa B: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 983 umol, 1,0 eq), ácido 3-clorobenzenocarboperoxoico (200 mg, 983 umol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi lavado com água (10,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila=3 : 1 para Acetato de etila : Metanol = 10 : 1). Composto terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7- (2,3-dimetilfenil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (450 mg, 793 umol, 81% de rendimento, 93% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:525.
[0404] Etapa C: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,52 mmol, 1,0 eq), [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (369 mg, 3,20 mmol, 380 uL, 2,10 eq), t-BuONa (293 mg, 3,05 mmol, 2,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N2. A reação foi extinta com água (20,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (3 x 30,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (80,0 mL), secos com Na 2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila=5: 1 para Diclorometano: Metanol=10:1). Composto título terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4- [7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (740 mg, 1,22 mmol, 80% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 576.
[0405] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,10 (t, J = 15,2 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,61 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8 Hz, J = 9,6 Hz,1H), 4,13 – 4,00 (m, 4H), 3,89 (br d, J = 12,4 Hz 1H), 3,27 – 3,13 (m, 3H), 3,13 – 2,95 (m, 3H), 2,87 – 2,65 (m, 5H), 2,49 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,09 – 2,06 (m, 1H), 2,06 – 2,04 (m, 1H), 1,93 – 1,62 (m, 4H), 1,51 (s, 9H).
EXEMPLO 1 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
Cloreto de acriloíla
[0406] Etapa A: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Em 2 mL de dimetil acetamida foram combinados terc-butil 4-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (1,0 g, 3,7 mmol), trietilamina (1,0 mL, 7,4 mmol) e benzil 1- piperazinocarboxilato (0,86 mL, 4,4 mmol). O vaso de reação foi selado e a mistura de reação foi aquecida até 90ºC com agitação. Após 5 horas, a reação foi diluída com salmoura e extraída com metil t-butil éter. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com cloreto de amônio saturado e salmoura, secas sobre MgSO4 e concentradas sob pressão reduzida até um óleo espesso. O óleo foi cromatografado (RediSep®, 24 g) eluindo com acetato de etila/Hexanos 1:1 para dar terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-5,8- di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (1,3 g, 2,9 mmol, 77% de rendimento). ES+APCI MS m/z 454,2 [M+H]+.
[0407] Etapa B: Benzil 4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-
il)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (1,58 g, 3,484 mmol) em diclorometano (11,61 mL, 3,484 mmol) foi adicionado ácido trifluoroacético (2,668 mL, 34,84 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi absorvido em diclorometano. A solução foi lavada com sequencialmente com NaOH 1M e salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 24G Isco RediSep® Gold, 10 a 20% de metanol/diclorometano) para proporcionar o produto (1,1 g, 89%) como uma espuma esbranquiçada. ES+APCI MS m/z 354,2 [M+H] +.
[0408] Etapa C: benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A um frasco foi adicionado tris (dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (0,0069 g, 0,0075 mmol), racêmico-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1’-binonaftil (0,0096 g, 0,015 mmol) e tolueno (0,62) mL, 0,19 mmol). Argônio foi borbulhado através da mistura por 5 minutos e, então, o frasco foi tapado e a mistura foi aquecida até 100°C por 15 minutos. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e, então, foi adicionado terc- butóxido de sódio (0,036 g, 0,37 mmol), seguido de 1-bromo-3- (metoximetoxi)naftaleno (0,050 g, 0,19 mmol) e benzil 4-(5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,13 g, 0,37 mmol). O frasco foi tapado e a mistura foi aquecida até 100°C por 20 horas. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com diclorometano e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 12G Isco RediSep®, 10-50% acetato de etila/diclorometano) para produzir o produto (0,062 g, 61%) como uma espuma esbranquiçada. ES+APCI MS m/z 540,3 [M+H]+.
[0409] Etapa D: 7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina: A uma solução de benzil 4-(7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,061 g, 0,11 mmol) em etanol (1,1 mL, 0,11 mmol) e tetra-hidrofurano (1,1 mL, 0,11 mmol) foi adicionado paládio (0,024 g, 0,011 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O). Uma atmosfera de H2 foi introduzida no vaso de reação por vácuo, e, então, a mistura de reação foi mantida sob uma atmosfera de H2. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas, então, diluída com metanol e filtrada através de papel GF/F. O filtrado incolor foi concentrado sob vácuo com tolueno para fornecer uma espuma esbranquiçada (0,048 g, 105%) que foi usada diretamente na próxima etapa. ES+APCI MS m/z 406,2 [M+H]+ .
[0410] Etapa E: 1-(4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma suspensão de 7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-yl)-4-(piperazin-1-yl)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (0,046 g, 0,11 mmol) em diclorometano (1,1 mL, 0,11 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de acriloíla (1,2 mL, 0,12 mmol) (solução 0,1 M recém-preparada em diclorometano) seguida de trietilamina (0,032 mL, 0,23 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi concentrada e o produto foi purificado por cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 12G Isco RediSep®, acetato de etila) para proporcionar o produto (0,042 g, 79%) como uma espuma sólida esbranquiçada. ES+APCI MS m/z 460,2 [M+H]+ .
[0411] Etapa F: 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d] pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-(4-(7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (0,034 g, 0,074 mmol) em acetato de etila (0,74 mL, 0,074 mmol) foi adicionado ácido clorídrico (solução 5 a 6 N em 2-propanol (0,44 mL, 2,2 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 5 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (10 mL), filtrada através de um filtro de polipropileno e o sólido coletado foi lavado com acetato de etila e hexanos para fornecer o produto como o sal de HCl. O material impuro foi tratado com 1 mL de hidróxido de amônio/metanol para extinguir o ácido e a mistura foi concentrada.
O resíduo foi dissolvido em 10% de metanol/diclorometano e purificado por cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 12G Isco RediSep®, 2 a 5% de metanol/acetato de etila) para proporcionar o produto (0,008 g, 25%) como um sólido esbranquiçado. ES+APCI MS m/z 416,2 [M+H]+ .
[0412] 1H NMR (CD3OD, 400 MHz)  8,49 (s, 1H), 8,07 (app d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,61 (app d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 6,80 (m, 3H), 6,23 (dd, J = 16,8, 1,6 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 10,6, 2,0 Hz, 1H), 4,22 (br s, 2H), 3,80 (app t, J = 4,7 Hz, 4H), 3,63 (br s, 4H), 3,35 (br s, 2H), 3,03 (br s, 2H).
EXEMPLO 2 1-(4-(7-(7-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0413] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, usando 2-bromo-7- (metoximetoxi)naftaleno no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 416,1 [M+H]+ .
EXEMPLO 3
1-(4-(7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0414] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, usando 1- iodonaftaleno no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 400,2 [M+H]+ .
EXEMPLO 4 1-(4-(7-(2-fluoro-6-hidroxifenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0415] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, usando 2-bromo-1- fluoro-3-(metoximetil)benzeno no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 384,2 [M+H]+ .
EXEMPLO 5 1-(4-(7-(2-fluoro-5-hidroxifenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0416] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, usando 2-bromo-1- fluoro-4-(metoximetoxi)benzeno no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 384,2 [M+H]+ .
EXEMPLO 6 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0417] Etapas A-C: benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, Etapas A-C, usando terc-butil 4-cloro-6- metil-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato no lugar de 4-cloro- 5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato na Etapa A. ES+APCI MS m/z 430,2 [M+H]+ .
[0418] Etapa D1: benzil 4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,05 g, 0,09 mmol) em isopropanol (10 mL) foi adicionado cloreto de hidrogênio (5-6M em isopropanol) (0,02 mL, 0,09 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada sob vácuo e o concentrado foi particionado entre acetato de etila e água para converter o material para a base livre. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO 4 e concentradas sob vácuo para dar benzil 4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra-
hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,005 g, 0,010 mmol, 11% de rendimento). ES+APCI MS m/z 510,3 [M+H]+ .
[0419] Etapa D2: 4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-ol: Preparado de acordo com o método do Exemplo 1, Etapa D.
[0420] Etapa E: 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Preparado de acordo com o método do Exemplo 1, Etapa E.
EXEMPLO 7 1-(4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0421] Etapas A-D: benzil 4-(7-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol- 4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido [3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Sintetizado de acordo com o Esquema Geral 1, Etapas A-C, usando 4-bromo-5- metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol no lugar de 1-bromo-3- (metoximetoxi)naftaleno na Etapa C
[0422] Etapa D1: benzil 4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-(7-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,16 g, 0,26 mmol) em diclorometano (10 mL) foi adicionado ácido 2,2,2-trifluoroacético (0,89 g, 7,8 mmol) seguido por anisol (0,028 g, 0,26 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas à temperatura ambiente. A reação foi concentrada sob vácuo e o material concentrado foi absorvido em acetato de etila e lavado com salmoura básica. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4 e concentradas sob vácuo. O material bruto foi cromatografado usando 0 a 10% de metanol/diclorometano como o eluente para dar benzil 4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato (0,05 g, 38%). ES+APCI MS m/z 484,2 [M+H]+ .
[0423] Etapa D2: 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina: Preparado de acordo com o método do Exemplo 1, Etapa D.
[0424] Etapa E: 1-(4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Preparado de acordo com o método do Exemplo 1, Etapa E.
EXEMPLO 8 (S)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
Dioxanos hunig Cloreto de acriloíla
[0425] Etapa A: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Benzil 1-piperazinacarboxilato (1,268 mL, 6,575 mmol) e terc-Butil 2,4-dicloro-5,6-di-hidropirido[3 4-d]pirimidina- 7(8H)-carboxilato (2 g, 6,575 mmol) foram dissolvidos em dimetil acetamida (10 mL) e tratados com N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (3,445 mL, 19,73 mmol). A mistura de reação foi agitada a 85°C por 2 horas. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada. O concentrado foi purificado por cromatografia (CombiFlash®, 0% -50% acetato de etila:Hexanos como o eluente para fornecer o produto (2,69 g, 83%). ES+APCI MS m/z 488,2, 490,2 [M+H]+ .
[0426] Etapa B: terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-((1- (dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-
hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (235 mg, 0,482 mmol) e (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol (497 mg, 4,82 mmol) foram adicionados a dioxano (0,5 mL) e aquecido até 100°C por 3 dias. A reação foi concentrada e o resíduo resultante foi purificado por sílica gel (Biotage Isolera, 0-12% de metanol em diclorometano) para fornecer terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1- il)-2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (200 mg, 0,361 mmol, 74,9% de rendimento). ES+APCI MS m/z 555,3 [M+H]+ .
[0427] Etapa C: benzil (S)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de (S)-4- (4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (200 mg, 0,3606 mmol) em diclorometano (1.202 µL, 0,3606 mmol) foi adicionado ácido trifluoroacético (828,3 µL, 10,82 mmol ) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi absorvido em diclorometano. A solução foi lavada com NaOH 1M seguido por salmoura e, então, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 24G Isco RediSep®Gold, 10 a 20% de metanol/diclorometano) para proporcionar o produto como uma espuma esbranquiçada (0,135 g, 83%). ES+APCI MS m/z 455,2 [M+H]+.
[0428] Etapa D: benzil (S)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: A um frasco foi adicionado tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (21,8 mg, 0,0238 mmol), racêmico-2,2'- Bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil (30,4 mg, 0,0488 mmol) e tolueno (991 µL, 0,297 mmol). Argônio foi borbulhado através da mistura por 5 minutos e, então, o frasco foi tapado e a mistura foi aquecida até 100°C por 15 minutos. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e foi adicionado terc-butóxido de sódio (57,2 mg, 0,595 mmol) seguido de 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato (100 mg, 0,297 mmol) e benzil (S)-4-(2-((1- (dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido [3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (135 mg, 0,297 mmol). O frasco foi tapado e a mistura foi aquecida até 100°C por 18 horas. A mistura foi resfriada e concentrada. O material bruto foi purificado por sílica gel (Biotage Isolera, 0-11% de metanol/diclorometano para fornecer benzil (S)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2- il)oxi)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato (68 mg, 0,106 mmol, 35,7% de rendimento). ES+APCI MS m/z 641,3 [M+H]+.
[0429] Etapa E: (S)-2-((7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-4-(piperazin-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropan-1-amina: A uma solução de benzil (S)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7- (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (68 mg, 0,11 mmol) em etanol (1,061 mL, 0,11 mmol) e tetra-hidrofurano (1.061 mL, 0,11 mmol) foi adicionado Paládio (113 mg, 0,053 mmol) (Degussa Type, 10% em peso, 50% de H2O). Uma atmosfera de H2 foi introduzida por vácuo e, em seguida, o vaso de reação foi mantido sob uma atmosfera de H2. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura foi diluída com metanol e filtrada através de papel GF/F. O filtrado incolor foi concentrado para fornecer (S)-2-((7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-4- (piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N- dimetilpropan-1-amina (54 mg, 100% de rendimento) que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação. ES+APCI MS m/z 507,3 [M+H]+.
[0430] Etapa F: (S)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma suspensão de (S)-2-((7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropan-1-amina (54 mg, 0,11 mmol) em diclorometano (1.066 µL, 0,11 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de acriloíla (1.279 µL, 0,13 mmol) (solução 0,1 M recém-preparada em DCM) seguida de trietilamina (30 µL 0,21 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos. A mistura foi concentrada e o produto foi purificado por cromatografia de coluna (Biotage Isolera, 12G Isco RediSep®, 0- 15% de metanol/diclorometano) para proporcionar (S)-1-(4-(2-((1- (dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (51 mg, 0,091 mmol, 85% de rendimento). ES+APCI MS m/z 561,3 [M+H]+.
[0431] Etapa G: 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: (S)-1-(4-(2- ((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (51 mg, 0,091 mmol) foi adicionado a um frasco contendo 350 µL de metanol e algumas gotas de tetra-hidrofurano e o frasco de reação foi tapado. Foi adicionado HCl (379 µL, 2,3 mmol) (aquoso 6M) com agitação e a mistura foi aquecida até 55°C por 3 horas. A reação foi resfriada e concentrada sob vácuo. Foi adicionada uma solução saturada de bicarbonato e a reação foi extraída com 10% de metanol em diclorometano. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (Biotage Isolera, 4-20% de metanol em diclorometano com cloreto de amônio concentrado a 1%) para fornecer o produto do título (25,3 mg, 54%). ES+APCI MS m/z 517,2 [M+H] +.
[0432] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,90 (d, 1H, J=8,314Hz), 7,54 (d, 1H, J=8,021), 7.34 (m, 1H), 7,24 (m, 1H). 6,72 (m, 1H), 6,56-6,48 (m, 2H), 6,32 (dd, 1H, J=16,726, 1,858), 5,73 (dd, 1H, J=10,368, 1,858), 5,45 (m, 1H), 4,09-3,94 (m, 2H), 3,63 (bs, 2H), 3,47 (bs, 2H), 3,31 (m, 4H), 3,16 (bs, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,60 (bs, 2H), 2,45 (m, 1H), 2,43 (s, 6H), 1,31 (d, 3H, J=6,162 Hz) EXEMPLO 9
1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0433] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2- (dimetilamino)etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 503,2 [M+H]+.
EXEMPLO 10 1-(4-(2-(3-(dimetilamino)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0434] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- (dimetilamino)propan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+.
EXEMPLO 11
1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0435] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- (dimetilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+.
EXEMPLO 12 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0436] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- metipiperazina no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 514,3 [M+H]+.
EXEMPLO 13
1-(4-(2-(3-(dimetilamino)pirrolidin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0437] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando N,N- dimetilpirrolidin-3-amina no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 528,3 [M+H]+.
EXEMPLO 14 (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- metilpiperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
[0438] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil (S)-2- metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1-carboxilato na Etapa A e usando 2-(dimetilamino)etan-1-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+ .
EXEMPLO 15
(R)-1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)-2-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0439] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil (R)-2- metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1-carboxilato na Etapa A e 2-(dimetilamino)etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+ .
EXEMPLO 16 1-(6-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-il)prop-2-en-1-ona
[0440] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil 2,6- diazaespiro[3.3]heptano-2-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1- carboxilato na Etapa A e usando 2-(dimetilamino)etan-1-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 515,3 [M+H]+ .
EXEMPLO 17
1-(4-(2-(4-(dimetilamino)piperidin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0441] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando N,N- dimetilpirrolidin-4-amina no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 580,3 [M+H]+.
EXEMPLO 18 1-(6-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3.3]heptan-2-il)prop-2-en-1-ona
[0442] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil 2,6- diazaespiro[3.3]heptano-2-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1- carboxilato na Etapa A e usando 1-(dimetilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 19
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0443] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- (dimetilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+.
EXEMPLO 20 1-(6-(2-(3-(dimetilamino)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-il)prop-2-en-1-ona
[0444] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil 2,6- diazaespiro[3.3]heptano-2-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1- carboxilato na Etapa A e usando 3-(dimetilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 21
1-(4-(2-((4-(dimetilamino)butan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0445] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 4- (dimetilamino)butan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 531,3 [M+H]+.
EXEMPLO 22 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0446] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- metilpiperidin-4-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 23
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-3-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0447] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- metilpirrolidin-3-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 515,3 [M+H]+.
EXEMPLO 24 1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0448] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- (dimetilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B, usando 1-bromo naftaleno no lugar de 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D e eliminando a etapa G. ES+APCI MS m/z 501,3 [M + H]+.
EXEMPLO 25
1-(4-(2-(3-(dimetilamino)propoxi)-7-(1-feniletil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0449] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- (dimetilamino)propan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B, usando (1-bromoetil)benzeno no lugar de 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D e eliminando a etapa G. ES+APCI MS m/z 559,3 [M+H]+.
EXEMPLO 26 1-(4-(2-(4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0450] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando acetato de 2-(piperazin-1-il)etila no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. Após a Etapa D, a seguinte reação de saponificação foi realizada: Benzil 4-(2- (4-(2-acetoxietil)piperazin-1-il)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato foi absorvido em THF (5 mL) e adicionou-se LiOH 2 M (1 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas. NH4Cl saturado foi adicionado e a reação foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas e o resíduo resultante foi purificado por sílica gel (Biotage Isolera Gold, eluindo com 0-10% de MeOH em DCM) para fornecer benzil 4-(2-(4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato. O restante da síntese prosseguiu como no Exemplo 8, etapa E. ES+APCI MS m/z 544,3 [M+H]+.
EXEMPLO 27 1-((S)-4-(2-(((R)-1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1- ona
[0451] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil (S)-3- metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1-carboxilato na Etapa A e usando (R)-1-(dimetilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 531,3 [M+H]+.
EXEMPLO 28
(S)-1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0452] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil (S)-3- metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1-carboxilato na Etapa A e usando 2-(dimetilamino)etan-1-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,2 [M+H]+.
EXEMPLO 29 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-morfolinoetoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona
[0453] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2- morfolinoetan-3-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 545,2 [M+H]+.
EXEMPLO 30
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-morfolino-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-eno-1-ona
[0454] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando morfolina no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 501,3 [M+H]+.
EXEMPLO 31 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(pirrolidin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0455] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando pirrolidina no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 485,2 [M+H]+.
EXEMPLO 32
(R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0456] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- (pirrolidin-1-il)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 543,4 [M+H]+.
EXEMPLO 33 1-(4-(2-(2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato.
[0457] Etapa A: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4- il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-benzil-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 463,12 µmol, 1,00 eq) e 2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etanol (166 mg, 926 µmol, 2,00 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado NaOBu-t (133 mg, 1,39 mmol, 3,00 eq), BINAP (57,7 mg, 92,6 µmol, 0,20 eq), Pd2(dba)3 (42,4 mg, 46,3 µmol, 0,10 eq). A mistura de reacção foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com DCM (3 x 10 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash reversa (40% de MeCN em água (0,1% de TFA) para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)- 2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 301 µmol, 65,1% de rendimento) como um sólido marrom. ESI MS m/z 763,5 [M+H]+ .
[0458] Etapa B: 4-[2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol: A uma solução de benzil 4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (190 mg, 249 µmol, 1,00 eq) em MeOH (10,0 mL) foi adicionado Pd/C (100 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 40°C por 4 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 4-[2-[2-(1,1-dioxo-1,4- tiazinan-4-il)etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7- il]naftalen-2-ol (90,0 mg, 167 µmol, 67,1% de rendimento) como um sólido marrom. ESI MS m/z 539,4 [M+H]+ .
[0459] Etapa C: 1-[4-[2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftaleno-2-ol (90,0 mg, 167 µmol, 1,00 eq) e DIEA (64,8 mg, 501 µmol, 87,5 µL, 3,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2- enoil prop-2-enoato (19,0 mg, 150 µmol, 0,90 eq) a -40°C. A mistura de reação foi agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura de reação foi extinta com 1 mL de MeOH e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna HPLC preparativa: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (0,1% TFA) -ACN]; B%: 12%-42%, 11 min. para dar 1-[4-[2-[2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etoxi]-7-(3- hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-
en-1-ona trifluoroacetato (32,6 mg, 50,2 µmol, 30,0% de rendimento, 91,3% de pureza) como um sólido marrom. ESI MS m/z 593,5 [M+H]+ .
EXEMPLO 34 1-(4-(2-(3-(1,1-dioxidotiomorfolino)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato
[0460] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 33, usando 3-(1,1- dioxo-1,4-tiazinan-4-il)propan-1-ol no lugar de 2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4- il)etanol na Etapa A. ESI MS m/z 607,5 [M+H]+ .
EXEMPLO 35 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(4-morfolinobutoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato
[0461] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 33, usando 4- morfolinobutan-1-ol no lugar de 2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4-il)etanol na Etapa A. ESI MS m/z 573,4 [M+H]+ .
EXEMPLO 36 (R)-1-(4-(2-((1-(4-acetilpiperazin-1-il)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0462] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 33, usando 1-[4-[(2R)- 2-hidroxipropil]piperazin-1-il]etanona no lugar de 2-(1,1-dioxo-1,4-tiazinan-4- il)etanol na Etapa A. ESI MS m/z 600,6 [M+H]+ .
EXEMPLO 37 1-(4-(2-(2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0463] Etapa A: benzil 4-[2-[2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoxi]-7-(3-benziloxi-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 1-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]etanona (277 mg, 1,61 mmol, 2,60 eq) em THF (8,00 mL) foi adicionado NaH (49,4 mg, 1,23 mmol, 60% de pureza, 2,00 eq) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 15 minutos. À mistura foi adicionado benzil-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 618 µmol, 1,00 eq)
em THF (2,00 mL). A mistura de reação foi agitada a 0°C por 20 minutos. A mistura de reação foi extinta com NH4Cl saturado (6 mL) e água (6 mL). A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil 4-[2-[2-(4-acetilpiperazin-1- il)etoxi]-7-(3-benziloxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (450 mg, 534 µmol, 86,5% de rendimento, 89,7% de pureza) como um sólido marrom. ESI MS m/z 756,3 [M+H]+ .
[0464] Etapa B: 1-[4-[2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]etil]piperazin-1-il]etanona: A uma solução de benzil 4-[2-[2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoxi]-7-(3-benziloxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 264 µmol, 1,00 eq) em THF (10,0 mL) adicionou-se Pd/C (100 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 40°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com THF (3 × 5 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 1-[4-[2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]etil]piperazin-1-il]etanona (80,0 mg, 150 µmol, 56,9% de rendimento) como um sólido marrom.
[0465] Etapa C: 1-[4-[2-[2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]etil]piperazin-1-il]etanona (80,0 mg, 150 µmol, 1,00 eq) e DIEA (58,3 mg, 451 µmol, 78,8 µL, 3,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (14,2 mg, 113 µmol, 0,75 eq) a 40°C por 0,5 h. A mistura de reação foi extinta com MeOH (1 mL) e diluída por DCM (20 mL) a seguir lavada com água (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. A mistura de reação foi purificada por HPLC preparativa: Phenomenex Gemini
150*25mm*, 10 µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 30%-55%, 10 min. para dar 1-[4-[2-[2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoxi]-7-(3- hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (13,8 mg, 23,3 µmol, 15,5% de rendimento, 98,7% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 586,3 [M+H]+ .
EXEMPLO 38 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-(piperidin-1-il)propoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0466] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 37, usando 3-(1- piperidil)propan-1-ol no lugar de 1-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]etanona na Etapa A. ESI MS m/z 557,5 [M+H]+ .
EXEMPLO 39 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-(pirrolidin-1-il)propoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0467] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 37, usando 3-pirrolidin- 1-ilpropan-1-ol no lugar de 1-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]etanona na Etapa A. ESI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 40 1-(4-(2-(4-(dimetilamino)butoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0468] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 37, usando 4- (dimetilamino)butan-1-ol no lugar de 1-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]etanona na Etapa A. ESI MS m/z 531,4 [M+H]+.
EXEMPLO 41 1-(4-(7-(3-ciclopropil-5-hidroxifenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato
[0469] Etapa A: 4-[7-(3-benziloxi-5-ciclopropil-fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de benzil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 805 µmol, 1,00 eq) e 1-benziloxi-3-bromo-5- ciclopropil-benzeno (268 mg, 886 µmol, 1,10 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (RuPhos) (75,2 mg, 161 µmol, 0,20 eq), Pd2(dba)3 (111 mg, 121 µmol, 0,15 eq) e Cs2CO3 (656 mg, 2,01 mmol, 2,50 eq). A mistura de reacção foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. A mistura foi adicionada à água (15 mL) e extraída com DCM (2 × 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3: 1 para Diclorometano: Metanol = 10: 1) para dar 4- [7-(3-benziloxi-5-ciclopropil-fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (170 mg, 230 µmol, 28,5% de rendimento, 97,2% de pureza) como óleo marrom. ESI MS m/z 719,6 [M+H]+ .
[0470] Etapa B: 3-ciclopropil-5-[2-(3-morfolinopropoxi)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]fenol A uma mistura de benzil 4-[7-(3- benziloxi-5-ciclopropil-fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (150 mg, 209 µmol, 1,00 eq) em MeOH (10,0 mL) foi adicionado Pd/C (150 mg, 10% de pureza) e CH3COOH (25,1 mg, 417,3 µmol, 23,9 µL, 2,00 eq). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 Psi) a 40°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada através de Celite® e o filtrado foi concentrado. O produto 3-ciclopropil-5-[2-(3-morfolinopropoxi)-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]fenol diacetato (80,0 mg, 130 µmol, 62,4% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. ESI MS m/z 495,2 [M+H]+ .
[0471] Etapa C: 1-[4-[7-(3-ciclopropil-5-hidroxi-fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona A uma mistura de 3-ciclopropil-5-[2-(3-morfolinopropoxi)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5 H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]fenol diacetato (80,0 mg, 130 µmol, 1,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado DIEA (168 mg, 1,30 mmol, 227 µL, 10,0 eq) e prop-2-
enoil prop-2-enoato (13,1 mg, 104 µmol, 0,80 eq) a -78°C, a mistura de reação foi agitada a -78°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta com MeOH (2 eq, 10 mg), então, concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Instrumento: GX-K; Coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; Condições: água (0,1% TFA)-ACN; Início B: 8; Final B: 38; Tempo de Gradiente (min.): 11; 100% B Tempo de Retenção (min.): 2; Taxa de Fluxo (mL/min.): 25). O produto isolado foi concentrado por liofilização. O produto 1-[4-[7-(3- ciclopropil-5-hidroxi-fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona trifluoroacetato (21,5 mg, 31,1 µmol, 23,9% de rendimento, 95,8% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. ESI MS m/z 549,5 [M+H]+ .
EXEMPLO 42 1-(4-(7-(2-fluoro-5-hidroxifenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona
[0472] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 41, usando 4- (benziloxi)-2-bromo-1-fluorobenzeno no lugar de 1-benziloxi-3-bromo-5- ciclopropil-benzeno na Etapa A. ESI MS m/z 527,4 [M+H]+ .
EXEMPLO 43
1-(4-(7-(3-hidroxi-6-metilnaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0473] Etapa A: 4-[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 1,01 mmol, 1,00 eq), (3-metoxi-6-metil-1- naftil)trifluorometanossulfonato (483 mg, 1,51 mmol, 1,50 eq), Cs2CO3 (820 mg, 2,52 mmol, 2,50 eq), 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (RuPhos) (93,9 mg, 201,3 µmol, 0,20 eq) e Pd2(dba)3 (92,2 mg, 100 µmol, 0,10 eq) em tolueno (3,00 mL) foi agitado a 90°C por 10 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (50,0 mL). O precipitado foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de fase reversa sobre sílica gel (0,1% TFA água/acetonitrila). As frações desejadas foram combinadas e basificadas com bicarbonato de sódio aquoso saturado (2,00 mL), depois concentradas sob vácuo. O resíduo foi extraído com acetato de etila (2 × 100 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (1 × 100 mL), secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob vácuo para dar 4-[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400. mg, 599 µmol, 59,4% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 667,6 [M+H]+ .
[0474] Etapa B: 4-[3-[[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina: A uma solução de 4-[7-(3- metoxi-6-metil-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (370 mg, 554 µmol, 1,00 eq) em MeOH (10,0 mL) foi adicionado Pd-C (100 mg, 10% pureza) e AcOH (66,6 mg, 1,11 mmol, 2,00 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 40°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada em vácuo para fornecer 4-[3-[[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina (295 mg, 553 µmol, 99,8% de rendimento) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação. ESI MS m/z 533,6 [M+H]+
[0475] Etapa C: 1-[4-[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de prop-2-enoil prop-2-enoato (56,8 mg, 450 µmol, 0,80 eq) e DIEA (727 mg, 5,63 mmol, 983 µL, 10,0 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionada uma solução de 4-[3-[[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina (300 mg, 563 µmol, 1,00 eq) DCM (1,00 mL) a - 40°C sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (50 mL) a -40°C, diluída com água (10,0 mL), extraída com DCM (10,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 1-[4-[7-(3-metoxi-6-metil-1- naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 1-il]prop-2-en-1-ona (270 mg, 460 µmol, 81,7% de rendimento) ESI MS m/z 587,6 [M+H]+.
[0476] Etapa D: 1-[4-[7-(3-hidroxi-6-metil-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[7-(3-metoxi-6-metil-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (100 mg, 170 µmol, 1,00 eq) em DCM (3,00 mL) foi adicionado BBr3 (213 mg, 852 umol, 82,1 µL, 5,00 eq) a -78°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura foi resfriada até -78°C e diluída com DCM (20,0 mL), extinta por adição de solução saturada de bicarbonato de sódio (5,00 mL) e agitada a -78°C por 10 minutos, depois, aquecida até 0°C. A mistura foi extraída com DCM (2 x 15,0 mL), lavada com salmoura (1 × 20,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50 mm*, 10 µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 27%-57%, 12 min.) para fornecer 1-[4-[7-(3-hidroxi-6-metil-1-naftil)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (11,0 mg, 18,6 µmol, 10,9% de rendimento, 97,0% de pureza) como um sólido marrom. ESI MS m/z 573,6 [M+H]+.
EXEMPLO 44 1-(4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0477] Etapa A: benzil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: Uma mistura de benzil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 1,01 mmol, 1,00 eq), 2-[(4-bromo-5-metil-indazol-1-il)metoxi]etil-trimetilsilano (448 mg, 1,31 mmol, 1,30 eq), Cs2CO3 (822 mg, 2,53 mmol, 2,50 eq), Pd2(dba)3 (138 mg, 151 µmol, 0,15 eq) e 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (RuPhos) (94,3 mg, 202 µmol, 0,20 eq) em tolueno (20,0 mL) foi desgaseificado e purgado com nitrogênio 3 vezes e agitado a 90°C por 10 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 50,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (TFA 0,1% água/acetonitrila) para fornecer benzil 4-[7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (420 mg, 554 µmol, 54,9% de rendimento) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 757,6 [M+H]+.
[0478] Etapa B: terc-butil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de benzil 4-[7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (370 mg, 488 µmol, 1,00 eq) em MeOH (10,0 mL) foi adicionada trietilamina (98,9 mg, 977 µmol, 135 µL, 2,00 eq), Pd/C (100 mg, 10% de pureza) e terc-butoxicarbonil terc- butil carbonato (213 mg, 977 µmol, 224 µL, 2,00 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 40°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 1:0 a 10:1) para fornecer terc-butil 4-[7-[5-metil-1- (2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (340 mg, 470 µmol, 96,2% de rendimento) como óleo marrom. ESI MS m/z 723,5 [M+H]+.
[0479] Etapa C: 4-[3-[[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi] propil]morfolina trifuoroacetato: A uma solução de terc-butil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (150 mg, 207 µmol, 1,00 eq) em DCM (500 µL) foi adicionado TFA
(354 mg, 3,11 mmol, 230 µL, 15,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada em vácuo para fornecer 4-[3-[[7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oxi]propil]morfolina trifluoroacetato (125 mg, 206 µmol, 99,3% de rendimento) como um óleo marrom e usado diretamente na próxima etapa sem purificação. ESI MS m/z 493,4 [M+H]+.
[0480] Etapa D 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de 4-[3-[[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina trifluroacetato (120 mg, 197 µmol, 1,00 eq, TFA) e DIEA (255 mg, 1,98 mmol, 345 µL, 10,0 eq) em diclorometano (2,00 mL) foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (19,9 mg, 158 µmol, 0,80 eq) diclorometano (1,00 mL) a -40°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (50,0 mL) a -40°C, diluída com água (10,0 mL), extraída com diclorometano (10,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*, 10 µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 30%-60%, 10 min.) para fornecer 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (19,0 mg, 34,4 µmol, 17,4% de rendimento, 99,0% de pureza) como um sólido branco. ESI MS m/z 547,5 [M+H]+.
EXEMPLO 45
1-((1R,5S)-3-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octan-8- il)prop-2-en-1-ona
[0481] Etapa A: terc-butil 3-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato: A uma mistura de 7- benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (920 mg, 3,13 mmol, 1,00 eq) e terc-butil 3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (677 mg, 3,19 mmol, 1,02 eq) em DMSO (18,0 mL) foi adicionado DIEA (1,21 g, 9,39 mmol, 1,64 mL, 3,00 eq). A mistura de reação foi agitada a 60°C por 1 hora. A mistura foi diluída com extraída com EtOAc (3 × 20 ml), lavada com água (10 mL), HCl 1 N (5 mL), NaHCO3 (15 mL) e salmoura (15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 3-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3,8- diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (1,30 g, 2,41 mmol, 76,9% de rendimento, 87,0% de pureza) como um óleo marrom que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 470,2 [M+H]+.
[0482] Etapa B: terc-butil 3-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato: A uma solução de 1-(dimetilamino)propan-2-ol (857 mg, 8,31 mmol, 942 µL, 3,00 eq) em THF (40,0 ml) foi adicionado NaH (222 mg, 5,54 mmol, 60,0% de pureza, 2,00 eq) a 15°C sob N2. Após agitação a 15°C por 0,5 hora, terc-butil 3-(7-benzil- 2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-
8-carboxilato (1,30 g, 2,77 mmol, 1,00 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 100°C por 12 horas em um tubo selado. A reação foi extinta lentamente com água (3 mL) e depois concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (DCM/MeOH 60:1 a 10:1) para dar terc-butil 3-[7-benzil- 2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8- diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (700 mg, 1,07 mmol, 38,8% de rendimento, 82,4% de pureza) como um óleo amarelo.
[0483] Etapa C: terc-butil 3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato: A uma solução de terc-butil 3-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (700 mg, 1,30 mmol, 1,00 eq) em MeOH (30,0 mL) foi adicionado Pd/C (200 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio 4 vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (50 psi) a 40°C por 12 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (DCM/MeOH 50:1 a 5:1) para dar terc-butil 3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano- 8-carboxilato (500 mg, 952 µmol, 73,2% de rendimento, 85,0% de pureza) como um óleo amarelo.
[0484] Etapa D: terc-butil 3-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato: Pd2(dba)3 (84,1 mg, 91,8 µmol, 0,10 eq) foi adicionado a uma solução de terc-butil 3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (410 mg, 918 µmol, 1,00 eq), 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (293 mg, 936 µmol, 1,02 eq), 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (Ruphos) (85,7 mg, 184 µmol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (897 mg, 2,75 mmol, 3,00 eq) em dioxano (9,00 mL). A mistura de reação foi agitada a 100°C por 7 horas sob atmosfera de N 2 e, em seguida, concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (5 mL) e extraído com
DCM (2 × 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (DCM/MeOH 100:1 a 20:1) para dar terc-butil 3-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8- diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (317 mg, 441 µmol, 48,1% de rendimento, 94,5% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 679,2 [M+H]+.
[0485] Etapa E: terc-butil 3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato: A uma solução de terc-butil 3-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8- diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (340 mg, 501 µmol, 1,00 eq) em MeOH (6,80 mL) foi adicionado Pd/C (120 mg). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio 4 vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 40°C por 1,5 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar terc- butil 3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato (210 mg, 316 µmol, 63,1% de rendimento, 88,6% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 589,3 [M+H]+. Etapa F: 4-[4-(3,8-diazabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-2-[2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol trifluoroacetato: A uma solução de terc-butil 3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato (180 mg, 306 µmol, 1,00 eq) em DCM (230 µL) foi adicionado TFA (349 mg, 3,06 mmol, 226 µL, 10,0 eq). A mistura de reação foi agitada a 18°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-[4-(3,8- diazabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (528 mg, bruto) como um óleo vermelho que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI MS m/z 489,2 [M+H]+.
[0486] Etapa G: 1-[3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octan-8-il]prop-2-en- 1-ona: A uma solução de 4-[4-(3,8-diazabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-2-[2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2- ol trifluoroacetato (149 mg, 306 µmol, 1,00 eq) e DIEA (1,36 g, 10,5 mmol, 1,84 mL, 34,5 eq) em DCM (1,50 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2 -enoato (30,9 mg, 245 µmol, 0,80 eq) gota a gota a -50°C. A mistura foi agitada a -40 e, então, -20°C por 30 minutos. A reação foi extinta com MeOH (19,6 mg) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (DCM/MeOH 7:1) para dar 1-[3-[2-[2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octan-8-il]prop-2-en-1-ona (18,9 mg, 32,8 µmol, 10,7% de rendimento, 94,3% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 46 1-((1R,5S)-8-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octan-3- il)prop-2-en-1-ona
[0487] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 4, usando terc-butil (1R,5S)-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxilato no lugar de terc-butil 3,8- diazabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxilato na Etapa A. ESI MS m/z 543,4 [M+H]+.
EXEMPLO 47 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-8-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0488] Etapa A: etil 2-(benzilamino)propanoato: A uma solução de 2- bromopropanoato de etila (30,0 g, 165 mmol, 21,6 mL, 1,00 eq), BnNH2 (23,1 g, 215 mmol, 23,6 mL, 1,30 eq) em MeCN (600 mL) foi adicionado K 2CO3 (45,8 g, 331 mmol, 2,00 eq). A mistura foi agitada a 80°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com DCM (300 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila=10:1 a 4:1) para dar 2-(benzilamino)propanoato de etila (34,0 g, 163 mmol, 98,4% de rendimento, 99,4% de pureza) um óleo incolor.
[0489] Etapa B: etil 4-[benzil-(2-etoxi-1-metil-2-oxo-etil)amino]butanoato: A uma solução de etil 2-(benzilamino)propanoato (31,0 g, 150 mmol, 1,00 eq) e etil 4- bromobutanoato (87,5 g, 449 mmol, 64,4 mL, 3,00 eq) em MeCN (600 mL) e água (60,0 mL) e Cs2CO3 (97,5 g, 299,12 mmol, 2,00 eq) e KI (4,97 g, 29,9 mmol, 0,20 eq). A mistura de reação foi agitada a 80-90°C por 40 horas. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com DCM (2 x 100 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (300 mL) e lavado com salmoura (80 mL), seco sobre Na2SO4 e concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila = 1:0 a 20:1) para dar etil 4-[benzil-(2-etoxi-1-metil-2-oxo-etil)amino]butanoato (28,0 g, 87,1 mmol, 58,3% de rendimento) como um óleo amarelo.
[0490] Etapa C: etil 1-benzil-2-metil-3-oxo-piperidina-4-carboxilato: A uma solução de etil 4-[benzil-(2-etoxi-1-metil-2-oxo-etil)amino]butanoato (28,0 g, 87,1 mmol, 1,00 eq) em THF (600 mL) foi adicionado tBuOK (19,6 g, 174 mmol, 2,00 eq). A mistura de reação foi agitada a 18°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com água (100 mL) e extraída com MTBE (3 × 300 mL) e DCM (2 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila=100:1 a 20:1) para dar etil 1-benzil-2-metil-3-oxo-piperidina-4-carboxilato (20,0 g, 58,8 mmol, 67,5% de rendimento, 81,0% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 276,0 [M+H]+ .
[0491] Etapa D: 7-benzil-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol: A EtOH (400 mL) foi adicionado Na (3,76 g, 163 mmol, 3,88 mL, 2,50 eq). A mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. À mistura foi adicionado etil 1-benzil-2-metil-3-oxo-piperidina-4-carboxilato (18,0 g, 65,4 mmol, 1,00 eq) e UREA (9,82 g, 163 mmol, 8,77 mL, 2,50 eq) e a mistura de reação foi agitada a 80°C por 80 horas. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água (100 mL) e lavado com MTBE (3 x 50 mL). A fase aquosa foi ajustada para pH 6-7 com HCl (15 mL, 12 M). A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com água (30 mL) e seca em vácuo para dar 7-benzil-8-metil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol (12,0 g, 44,2 mmol, 67,7% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido marrom. ESI MS m/z 272,0 [M+H]+ .
[0492] Etapa E: benzil-2,4-dicloro-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: Uma mistura de 7-benzil-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol
(5,00 g, 18,4 mmol, 1,00 eq) em POCl3 (305 g, 1,99 mol, 185 mL, 108 eq) foi aquecida até 110°C por 12 horas. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (500 mL) e derramado em NaHCO3 saturado (200 mL), embora mantendo o pH maior que 7. A camada orgânica foi lavada com salmoura (50 mL), seca sobre Na2SO4. A solução foi filtrada através de uma almofada de sílica gel e a torta filtrada foi lavada com DCM (3 x 400 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo para dar 7- benzil-2,4-dicloro-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (4,50 g, 14,6 mmol, 79,2% rendimento) como um óleo marrom.
[0493] Etapa F: 4-(7-benzil-2-cloro-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il) piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 7-benzil-2,4-dicloro-8-metil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (3,00 g, 9,73 mmol, 1,00 eq) e DIEA (2,52 g, 19,5 mmol, 3,40 mL, 2,00 eq) em dioxano (60,0 mL) foi adicionado terc-butil piperazina-1-carboxilato (1,90 g, 10,2 mmol, 1,05 eq). A mistura de reação foi agitada a 60°C por 12 horas. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila = 2:1) para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (3,30 g, 7,15 mmol, 73,5% de rendimento, 99,3% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 458,1 [M+H]+ .
[0494] Etapa G: terc-butil-4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 2- (dimetilamino)etanol (583 mg, 6,54 mmol, 655 µL, 3,00 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado Pd(OAc)2 (48,9 mg, 218 µmol, 0,10 eq), terc-butil-4-(7-benzil-2- cloro-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (1,00 g, 2,18 mmol, 1,00 eq), Cs2CO3 (2,13 g, 6,54 mmol, 3,00 eq) e BINAP (272 mg, 436 µmol, 0,20 eq). A mistura de reação foi agitada a 110°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água (10 mL) e extraído com DCM (3 × 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila = 5:1 a 2:1, então, DCM:MeOH = 50:1 a 5:1) para dar terc-butil-4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (900 mg, 1,76 mmol, 80,8% de rendimento) como um sólido marrom. ESI MS m/z 511,2 [M+H]+ .
[0495] Etapa H: terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato : A uma solução de 4-[7- benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,57 mmol, 1,00 eq) em MeOH (20,0 mL) foi adicionado Pd/C (100 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (50 psi) a 40°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com MeOH (3 x 200 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (450 mg, 1,07 mmol, 68,2% de rendimento) como óleo marrom que foi utilizado na próxima etpa sem purificação adicional. ESI MS m/z 421,3 [M+H]+ .
[0496] Etapa I: terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8- metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (380 mg, 904 µmol, 1,00 eq) e 3- benziloxi-1-bromo-naftaleno (311 mg, 994 µmol, 1,10 eq) em dioxano (8,00 mL), Cs2CO3 (883 mg, 2,71 mmol, 3,00 eq) e 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di- isopropoxibifenil (RuPhos) (84,3 mg, 181 µmol, 0,20 eq) e Pd 2(dba)3 (82,7 mg, 90,4 µmol, 0,10 eq) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada a 90°C por 12 h sob N2. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi particionado entre DCM (50 mL) e água (20 mL). A mistura de reação foi extraída com DCM (50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter dietílico:acetato de etila = 5:1, então, DCM:MeOH = 100:1 a 5:1), seguido pela purificação do produto isolado por TLC preparativa (DCM: MeOH=10:1) para dar terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1- naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 306 µmol, 33,9% de rendimento) como um sólido marrom. ESI MS m/z 653,4 [M+H]+.
[0497] Etapa J: 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol bis-trifluoroacetato: A uma solução de 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-8-metil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 177 µmol, 1,00 eq) em DCM (130,00 µL) foi adicionado TFA (202 mg, 1,78 mmol, 132 µL, 10,00 eq). A mistura de reação foi agitada a 20°C por 1 hora. O solvente foi removido sob vácuo para fornecer 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol bis-trifluoroacetato (175,00 mg) como um óleo marrom que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[0498] Etapa K: 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-8-metil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-8-metil-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol bis-trifluoroacetato (97,4 mg, 141 µmol, 1,00 eq) em DCM (500,00 µL) foi adicionado DIEA (222 mg, 1,72 mmol, 300 µL, 12,2 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (14,2 mg, 113 µmol, 0,80 eq) a -40°C. A mistura de reação foi agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura de reação foi extinta com uma gota de MeOH e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (DCM:MeOH = 10:1) e depois por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 15%-45%, 13 min.) para dar 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-8-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-
1-ona (10,7 mg, 20,7 µmol, três etapas 6,8% de rendimento) como um óleo marrom. ESI MS m/z 517,2 [M+H]+.
EXEMPLO 48 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-6-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato.
[0499] Etapa A: etil 4-[benzil-(2-etoxi-2-oxo-etil)amino]pentanoato: Uma solução de etil 4-oxopentanoato (47,0 g, 326 mmol, 46,5 mL, 1,50 eq), etil 2-(benzilamino) acetato (42,0 g, 217,3 mmol, 1,00 eq) e AcOH (13,0 g, 217 mmol, 12,4 mL, 1,00 eq) em DCM (800 mL) foram agitados a 12-18°C por 30 min. e depois resfriados a 0-5°C, NaBH(OAc)3 (138 g, 652 mmol, 3,00 eq) foi adicionado em porções. A mistura foi aquecida até 10-18°C e agitada por 16 horas. A mistura de reação foi extinta com água (1.000 mL) e extraída com DCM (2 × 500 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas até secura. O resíduo foi purificado por coluna de sílica gel eluindo com éter dietílico/acetato de etila (60:1 a 40:1) para fornecer etil 4-[benzil-(2-etoxi-2-oxo-etil)amino]pentanoato (42,0 g, 91,5 mmol, 42,1% de rendimento, 70% de pureza) como óleo incolor. ESI MS m/z 322,2 [M+H]+.
[0500] Etapa B: etil 1-benzil-2-metil-5-oxo-piperidina-4-carboxilato: Uma solução de etil 4-[benzil-(2-etoxi-2-oxo-etil)amino]pentanoato (37,00 g, 115,12 mmol, 1,00 eq) e t-BuOK (16,8 g, 150 mmol, 1,30 eq) em tolueno (30,0 mL) foi agitada a 25°C por 5 horas. A reação foi extinta com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secos e concentrados até secura para fornecer etil 1-benzil-2-metil-5-oxo-piperidina-4- carboxilato (14,6 g, 53,0 mmol, 46% de rendimento) como óleo amarelo que foi usado diretamente no próxima etapa.
[0501] Etapa C: 7-benzil-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol: Na (3,05 g, 133 mmol, 3,14 mL, 2,50 eq) foi dissolvido em EtOH (280 mL) e, em seguida, etil 1-benzil-2-metil-5-oxo-piperidina-4-carboxilato (14,6 g, 53,0 mmol, 1,00 eq) e ureia (7,96 g, 133 mmol, 7,11 mL , 2,50 eq) foram adicionados. A mistura de reação foi aquecida até refluxo (78°C) por 16 h sob N 2. A mistura de reação foi concentrada até secura. O resíduo foi dissolvido em água (100 mL), lavado com MTBE (100 mL). O pH da fase de água foi ajustado para pH 6-7 com HCl 6N (2 mL). O sólido resultante foi coletado por filtração e seco sob vácuo a 60°C para fornecer 7-benzil-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4- diol (5,00 g, 17,1 mmol, 32,3% de rendimento, 93% de pureza) como sólido amarelo claro.
[0502] Etapa D: 7-benzil-2,4-dicloro-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina: POCl3 (49,5 g, 323 mmol, 30,0 mL, 58,4 eq) e 7-benzil-6-metil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2,4-diol (1,50 g, 5,53 mmol, 1,00 eq) foram aquecidos a 100°C sob refluxo por 12 horas. A reação foi concentrada até secura para remover POCl3. O resíduo foi dissolvido em DCM (40 mL) e lavado com NaHCO3 aquoso saturado/Na2CO3 aquoso satruado (1/1, 60 mL). A mistura foi filtrada e as camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 7-benzil-2,4-dicloro-6-metil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (2,08 g, bruto) como um sólido marrom que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 307,9, 309,9 [M+H]+.
[0503] Etapa E: 4-(7-benzil-2-cloro-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de 7-benzil-2,4-dicloro-6-metil-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (2,50 g, 8,11 mmol, 1,00 eq) e terc-butil piperazina-1-carboxilato (1,54 g, 8,27 mmol, 1,02 eq) em dioxano (50,0 mL) foi adicionado DIEA (3,14 g, 24,3 mmol, 4,25 mL, 3,00 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 20 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (20 mL) e extraído com DCM (2 × 80 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por sistema de cromatografia flash automatizado (éter dietílico/acetato de etila 50:1 a 2:1) para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6-metil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (2,59 g, 5,29 mmol, 65,2% de rendimento, 93,5% de pureza) como um sólido amarelo.
[0504] Etapa F: terc-butil 4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 2- (dimetilamino)etanol (701 mg, 7,86 mmol, 788 µL, 3,00 eq) em THF (45,0 mL) foi adicionado NaH (210 mg, 5,24 mmol, 60,0% de pureza, 2,00 eq) a 15°C sob N2. Após agitação a 15°C por 0,5 hora, terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6-metil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (1,20 g, 2,62 mmol, 1,00 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 110°C por 18 horas num tubo selado. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre Al2O3 (DCM/MeOH 100:1 a 10:1) para dar terc- butil 4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,38 g, 2,36 mmol, 90,3% de rendimento, 87,5% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 511,3 [M+H]+.
[0505] Etapa G: terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 4- [7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,50 g, 2,94 mmol, 1,00 eq) em MeOH (80,0 mL) foi adicionado Pd/C (450 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio 4 vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (50 psi) a 40°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (DCM/MeOH 40/1 a 10/1) para dar terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil- 5,6,7,8-[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,15 g, 2,46 mmol, 83,7% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo amarelo.
[0506] Etapa H: terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6- metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Pd2(dba)3 (109 mg, 119 µmol, 0,10 eq) foi adicionado a uma solução de terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 1,19 mmol, 1,00 eq), 3-benziloxi-1-bromo- naftaleno (410 mg, 1,31 mmol, 1,10 eq), 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di- isopropoxibifenil (RuPhos) (111 mg, 238 µmol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (1,16 g, 3,57 mmol, 3,00 eq) em dioxano (10,0 mL). A mistura de reação foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (5 mL) e extraído com DCM (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre Al 2O3 (DCM/MeOH 100/1 a 10/1) e por TLC preparativa (DCM/MeOH 5:1) para dar terc-butil 4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (309 mg, 453 µmol, 38,1% de rendimento, 95,8% de pureza) como um óleo amarelo.
[0507] Etapa I: terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6-metil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (340 mg, 521 µmol, 1,00 eq) em MeOH (6,80 mL) foi adicionado Pd/C (120 mg) sob N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio 4 vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 40°C por 1,5 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3- hidroxi-1-naftil)-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-
carboxilato (210 mg, 312 µmol, 59,8% de rendimento, 83,5% de pureza) como um sólido rosa que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 563,3 [M+H]+.
[0508] Etapa J: 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol trifluoroacetato: A uma solução de terc- butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6-metil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 320 µmol, 1,00 eq) em DCM (240 µL) foi adicionado TFA (365 mg, 3,20 mmol, 237 µL, 10,0 eq). A mistura foi agitada a 18°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol trifluoroacetato (273 mg) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. Etapa K: 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6-metil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4- [2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-metil-4-piperazina-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol trifluoroacetato (148 mg, 320 µmol, 1,00 eq) e DIEA (494 mg, 3,83 mmol, 668 µL, 12,0 eq) em DCM (500 µL) foram adicionados prop- 2-enoil prop-2-enoato (32,3 mg, 256 µmol, 0,80 eq) gota a gota a -50°C. A mistura foi agitada a -40 a -20°C por 30 minutos. A reação foi extinta com MeOH (20,5 mg) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 8%-38%, 13 min.) para dar 1-[4-[2-[2- (dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6-metil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona trifluoroacetato (73,7 mg, 113 µmol, 35,2% de rendimento, 96,3% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 517,3 [M+H]+.
EXEMPLO 49
1-(4-(2-(2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0509] Etapa A: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonil-1-il)-2-[2-(3-fluoropirrolidin-1- il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato: Uma mistura de 2- (3-fluoropirrolidin-1-il)etanol (401 mg, 3,01 mmol, 1,60 eq), terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-metilsulfonil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (1,00 g, 1,88 mmol, 1,00 eq), Cs2CO3 (1,84 g, 5,64 mmol, 3,00 eq), Pd(OAc)2 (42,2 mg, 188 µmol, 0,10 eq) e BINAP (234 mg, 376 µmol, 0,20 eq) em tolueno (50,00 mL) foi agitado a 110°C por 3 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 10:1 a 100:1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 4-(4- benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (1,20 g, 1,07 mmol, 56,8% de rendimento, 52% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 585,3 [M+H]+.
[0510] Etapa B: benzil 4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)-2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (1,20 g, 2,05 mmol, 1,00 eq) em DCM (10,00 mL) foi adicionado TFA (3,51 g, 30,8 mmol, 2,28 mL, 15,00 eq) a 0°C. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 16 horas. A mistura foi diluída com água (100 mL) e a solução foi extraída com acetato de etila (2 × 100 mL). A camada aquosa foi basificada com solução aquosa saturada de carbonato de sódio (50 mL) e depois extraída com acetato de etila (2 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 100 mL), secas sobre sulfato de sódio e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para fornecer benzil 4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,65 mmol, 80,4% de rendimento) como uma goma amarela. ESI MS m/z 485,3 [M+H]+.
[0511] Etapa C: benzil 4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (750 mg, 1,55 mmol, 1,00 eq), (3-metoxi- 1-naftil) trifluorometanossulfonato (949 mg, 3,10 mmol, 2,00 eq), 2-diciclo- hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (RuPhos) (144,66 mg, 310,00 µmol, 0,20 eq), Pd2(dba)3 (141,94 mg, 155,00 µmol, 0,10 eq) e Cs2CO3 (1,52 g, 4,65 mmol , 3,00 eq) em tolueno (70,00 mL) foi agitado a 110°C por 16 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo e depois diluída com acetato de etila (100 mL) e água (100 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 100 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 10:1 a acetato de etila/metanol 10:1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar benzil 4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1- il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (700 mg, 961 µmol, 62,0% de rendimento, 88% de pureza) como um sólido marrom. ESI MS m/z 641,3 [M+H]+.
[0512] Etapa D: 2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina : Uma mistura de 4-[2-[2-(3- fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (700,00 mg, 1,09 mmol, 1,00 eq) em MeOH foi hidrogenado (15 psi) a 40°C com Pd/C seco ( 140 mg) como um catalisador por 4 horas. O catalisador foi filtrado através de uma camada de Celite® e o filtrado foi concentrado sob vácuo para fornecer 2-[2-(3- fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-4-piperazina-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (500 mg, 987 µmol, 90,6% de rendimento) como um sólido marrom.
[0513] Etapa E: 1-[4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de 2-[2-(3-fluoropyrrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (500 mg, 987 µmol, 1,00 eq) e DIEA (255 mg, 1,97 mmol, 345 µL, 2,00 eq) em diclorometano (8 mL) foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (124 mg, 987 µmol, 1,00 eq) em diclorometano (2 mL) a -40°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 1 hora. A mistura foi diluída com água (20 mL) e diclorometano (30 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 30 mL), seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (diclorometano/metanol 100/1 a 10/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 1-[4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3- metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (450 mg, 714 µmol, 72,4% de rendimento, 89% de pureza) como sólido amarelo. ESI MS m/z 561,2 [M+H]+.
[0514] Etapa F: 1-[4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (400 mg, 713 ol, 1,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado BBr3 (1,30 g, 5,19 mmol, 500 mL, 7,27 eq) a - 70°C sob atmosfera de nitrogenio. A mistura foi aquecida a 0°C e agitada por 1 hora. A mistura foi diluída com diclorometano (20 mL) e depois extinta com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 10 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 18%-48%, 12 min.) As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 1-[4-[2-[2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (40,0 mg, 63,7 µmol, 8,92% de rendimento, 87% de pureza) era um sólido amarelo. ESI MS m/z 547,3 [M+H]+.
EXEMPLO 50 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(hidroximetil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0515] Etapa A: 1-terc-butil 2-metil4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1,2-dicarboxilato: A uma solução de 7-benzil-2,4- dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d] pirimidina (2,00 g, 6,80 mmol, 1,00 eq) em DMSO (40,0 mL) foi adicionado DIEA (1,76 g, 13,6 mmol, 2,38 mL, 2,00 eq) e 1- terc-butil 2-metilpiperazina-1,2-dicarboxilato (1,74 g, 7,14 mmol, 1,05 eq). A mistura foi agitada a 55°C por 16 horas. A mistura foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter dietílico/acetato de etila = 1:0 a 3:1) para dar 1-terc-butil-2-metil-4-(7- benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,2-
dicarboxilato (3,10 g, 5,70 mmol, 83,8% de rendimento, 92,3% de pureza) como um semissólido amarelo. ESI MS m/z 502,2 [M+H]+.
[0516] Etapa B: 1-terc-butil 2-metil4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato: Uma mistura de 1-terc-butil 2-metil-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1,2-dicarboxilato (3,00 g, 5,98 mmol, 1,00 eq), 2- (dimetilamino) etanol (1,07 g, 12,0 mmol, 1,20 mL, 2,00 eq), Cs2CO3 (4,87 g, 15,0 mmol, 2,50 eq), Pd(OAc)2 (201 mg, 897 µmol, 0,15 eq) e BINAP (744 mg, 1,20 mmol, 0,20 eq) em tolueno (60,0 mL) foram desgaseificados e purgados com nitrogênio 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 110°C por 3 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 50 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 1:0 a 5:1) para dar 1-terc-butil-2-metil-4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (3,10 g, 4,45 mmol, 80,4% de rendimento, 86,0% de pureza) como um óleo preto. ESI MS m/z 555,3 [M+H]+.
[0517] Etapa C: 1-terc-butil 2-metil4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato: A uma solução de 1- terc-butil 2-metil-4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (2,33 g, 4,20 mmol, 1,00 eq) em MeOH (50,0 mL) foi adicionado Pd/C (233 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (50 psi) a 40°C por 36 horas. A mistura de reação foi filtrada e a fase orgânica foi concentrada até secura para dar 1-terc-butil-2- metil4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1,2-dicarboxilato (1,50 g, bruto) como um óleo incolor, o qual foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[0518] Etapa D: 1-terc-butil2-metil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2- dicarboxilato: Uma mistura de 1-terc-butil-2-metil4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (1,50 g, bruto), 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (1,49 g, 4,76 mmol, 1,30 eq), Cs2CO3 (2,98 g, 9,15 mmol, 2,50 eq), Pd2(dba)3 (503 mg, 549 µmol, 0,15 eq) e 2-diciclo- hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenil (RuPhos) (342 mg, 732 µmol, 0,20 eq) em dioxano (100 mL) foi desgaseificada e purgada com nitrogênio 3 vezes e a mistura foi agitada a 85°C por 5 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi extinta adicionando água (50 mL) a 0°C e extraída com DCM (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 150 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 10:1 a 5:1) para dar 1-terc-butil2 metil-4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (1,72 g, 2,25 mmol, 53,5% de rendimento, 91% pureza) como um amarelo. ESI MS m/z 697,3 [M+H]+.
[0519] Etapa E: metil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-2-carboxilato: A uma solução de 1- terc-butil 2-metil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (1,32 g, 1,89 mmol, 1,00 eq) em DCM (20,0 mL) foi adicionado TFA (4,31 g, 37,8 mmol, 2,80 mL, 20,0 eq) a 0°C e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 25°C. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O resíduo foi dissolvido em DCM (50 mL) e H2O (20 mL) e a mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)- 2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-2- carboxilato (1,12 g, 1,87 mmol, 69,6% de rendimento, 70% de pureza) como um óleo marrom, que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ESI MS m/z 597,4 [M+H]+.
[0520] Etapa F: [4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]metanol: Uma mistura de metil-4-[7- (3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetil amino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-2-carboxilato (400 mg, 0,670 mmol) em THF (5,00 mL) foi adicionado LiAlH4 (102 mg, 2,68 mmol, 4,00 eq) a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada e purgada com nitrogênio 3 vezes e agitada a 0°C por 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi extinta por adição de Na2SO4 10 H2O (0,5 g) a 0°C e, em seguida, diluída com DCM (50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram filtradas, secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para dar [4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]metanol (280 mg, 0,493 mmol, 73,6% de rendimento) como um semissólido amarelo, que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ESI MS m/z 569,3 [M+H]+.
[0521] Etapa G: 2-[[7-(3-benziloxi-1-naftil)-4-[3-[[terc- butil(dimetil)silil]oximetil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina: A uma solução agitada de [4-[7-(3-benziloxi-1- naftil)-2-[2-(dimetil amino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]metanol (250 mg, 440 µmol, 1,00 eq) e NaH (176 mg, 4,40 mmol, 60,0% de pureza, 10,0 eq) em THF (10,0 mL) foi adicionado cloreto de terc- butildimetilsilil (232 mg, 1,54 mmol, 189 µL, 3,50 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi extinta por adição de água (25 mL) a 0°C e extraída com DCM (3 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 30 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, DCM/MeOH = 10:1) para dar 2- [[7-(3-benziloxi-1-naftil)-4-[3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]piperazin-1-il]-6,8-di-
hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (128 mg, 180 µmol, 40,9% de rendimento, 96,0% de pureza) como um semissólido incolor. ESI MS m/z 683,3 [M+H]+.
[0522] Etapa H: 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona; A uma solução de 2-[[7-(3-benziloxi-1-naftil)-4-[3-[[terc- butil(dimetil)silil]oximetil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (128 mg, 187 µmol, 1,00 eq) e trietilamina (47,4 mg, 469 µmol, 65,0 µL, 2,50 eq) em DCM (5,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil-prop- 2-enoato (35,5 mg, 281 µmol, 1,50 eq) gota a gota a -40°C e agitado por 30 minutos. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, DCM/MeOH = 10:1) para dar 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (92,0 mg, 101 µmol, 54,0% de rendimento, 81,0% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 737,3 [M+H]+.
[0523] Etapa I: 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(hidroximetil)piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: Uma mistura de 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (92,0 mg, 125 µmol, 1,00 eq) em DCM (8,00 mL) foi adicionado BBr 3 (17,0 mg, 67,8 µmol, 6,53 L, 10,0 eq). A mistura foi agitada a -40°C por 30 minutos sob uma atmosfera de nitrogênio e depois concentrada a 25°C sob pressão reduzida até a secura. Ao resíduo foi adicionado NaHCO 3 saturado aquoso (0,5 ml). A solução foi ajustada para pH 7 a 0°C e depois foi adicionado MeOH (2,0 mL). A solução foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (0,1% TFA) - ACN]; B%: 15% - 45%, 11 min.). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob pressão reduzida para remover MeCN e liofilizadas para dar 1-[4-[2-[2-
(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-2-(hidroximetil)piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (6,30 mg, 11,2 µmol, 9,00% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 533,2 [M+H]+.
EXEMPLO 51 1-acriloil-4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-N,N-dimetilpiperazina-2-carboxamida
[0524] Etapa A: Ácido 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]]-1-terc-butoxicarbonil-piperazina-2- carboxílico: A uma solução de 1-terc-butil-2-metil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2- dicarboxilato (300 mg, 431 µmol, 1,00 eq) em THF (4,00 mL) e H2O (1,00 mL) foi adicionado NaOH (68,9 mg, 1,72 mmol, 4,00 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e a mistura de reação foi ajustada para pH 6 com HCl (6 M) e, então, extraída com DCM (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura para dar ácido 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-terc-butoxicarbonil-piperazina-2- carboxílico (310 mg, bruto) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ESI MS m/z 683,3 [M+H]+.
[0525] Etapa B: terc-butil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(dimetilcarbamoil)piperazina-1- carboxilato Uma mistura de ácido 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-terc- butoxicarbonil-piperazina-2-carboxílico (310 mg, bruto) e DIEA (352 mg, 2,72 mmol, 476 µL) em DCM (10,0 mL) foi adicionada em porções a HATU (259 mg, 681 µmol) a 0°C. Após agitação por 30 minutos, foi adicionada N- metilmetanamina (130 mg, 1,59 mmol, 146 µL, HCl) em uma porção. A mistura de reação foi desgaseificada e purgada com nitrogênio 3 vezes. Após agitação a 25°C por 12 horas sob uma atmosfera de nitrogênio, a mistura de reação foi diluída com água (50 mL) a 0°C e extraída com DCM (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram ajustadas até pH 6 com HCl (1 M), lavadas com salmoura (3 × 50 ml) e água (3 x 50 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura para dar terc-butil4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-2-(dimetilcarbamoil)piperazina-1-carboxilato (345 mg, 428 µmol, duas etapas, 94,2% de rendimento, 88,0% de pureza) como um semissólido amarelo. ESI MS m/z 710,3 [M+H]+.
[0526] Etapa C: terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(dimetilcarbamoil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(dimetilcarbamoil)piperazina-1- carboxilato (345 mg, 486 µmol, 1,00 eq) em MeOH (5,00 mL) foi adicionado Pd/C (80,0 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (15 psi) a 25°C por 8 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida até secura para dar terc-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(dimetilcarbamoil)piperazina-
1-carboxilato (197 mg, bruto) como um sólido marrom, que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ESI MS m/z 620,3 [M+H]+.
[0527] Etapa D: 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-N,N-dimetil-piperazina-2-carboxamida: Uma mistura de ter-butil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(dimetilcarbamoil)piperazina-1-carboxilato (197 mg, bruto) em DCM (5,00 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 1,61 mL) a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada e purgada com nitrogênio 3 vezes e agitada a 25°C por 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (HCl a 0,05%) - ACN]; B%: 10% - 30%, 7,8 min.). A fase de água coletada foi liofilizada até secura para dar 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-N,N-dimetil-piperazina-2- carboxamida (90,0 mg, 171 µmol, 53,1% de rendimento, 99,0% de pureza) como um sólido marrom. ESI MS m/z 520,2 [M+H]+.
[0528] Etapa E: 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-N,N-dimetil-1-prop-2-enoil-piperazina-2-carboxamida: A uma solução de 4-[2-[2-(dimetilamino) etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil))-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-N, N-dimetil-piperazina-2-carboxamida (70,0 mg, 135 µmol, 1,00 eq) em DMAC (500 µL) foi adicionada trietilamina (40,9 mg, 404 µmol, 56,0 µL, 3,00 eq) a 0°C e, então, foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (2,55 mg, 20,2 µmol, 0,15 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi filtrada e a fase orgânica coletada foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*, 10 µ; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 15% - 45 12 min.). A fase de água coletada foi liofilizada para dar 4-[2-[2-(dimetilamino) etoxi]-7-(3- hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-N,N-dimetil-1-prop-2-
enoil-piperazina-2-carboxamida (10,0 mg, 16,5 µmol, 12,2% de rendimento, 94,6% de pureza) como um semissólido amarelo. ESI MS m/z 574,2 [M+H]+.
EXEMPLO 52 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4 -il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0529] Etapa A: terc-butil 4-[7-benzil-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 2-(1- piperidil)etanol (872 mg, 6,75 mmol, 899 µL, 3,00 eq) em tolueno (40,0 mL) foi adicionado Pd(OAc)2 (50,5 mg, 225 µmol, 0,10 eq), Cs2CO3 (2,20 g, 6,75 mmol, 3,00 eq), BINAP (280 mg, 450 µmol, 0,20 eq) e terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (1,00 g, 2,25 mmol, 1,00 eq). A mistura foi agitada a 110°C por 12 horas sob N2 e em seguida concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (10,0 mL), extraído com acetato de etila (3 × 20 ml), lavado com salmoura (1 × 50 ml), seco sobre Na 2SO4, filtrado e concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 10:1) para dar terc-butil-4-[7-benzil-2-[2-(1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (700 mg, 1,30 mmol, 58,0% de rendimento) como um sólido vermelho. ESI MS m/z 537,3 [M+H]+.
[0530] Etapa B: terc-butil 4-[2-[2-(1-piperidil)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de terc-butil 4-[7-benzil-
2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (600 mg, 1,12 mmol, 1,00 eq) em MeOH (50,0 mL) foi adicionado Pd/C (67,2 mg, 10%). A mistura foi agitada a 40°C por 24 horas a 50 psi sob H 2. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar 4-[2-[2-(1-piperidil)etoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il] piperazina-1-carboxilato (500 mg, bruto) como um óleo marrom e usado na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 447,3 [M+H]+.
[0531] Etapa C: terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 4- [2-[2-(1-piperidil)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (250 mg) e (3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (343 mg, 1,12 mmol) em tolueno (6,00 mL) foi adicionado 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6’-di- isopropoxibifenil (Ruphos) (52,3 mg, 112 nmol), Pd2(dba)3 (32,19 mg, 55,98 µmol) e Cs2CO3 (548 mg, 1,68 mmol). Depois de agitar a 110°C por 72 horas sob N2, a mistura foi concentrada sob vácuo, diluída com água (20,0 mL), extraída com acetato de etila (3 x 30,0 mL), lavada com salmoura (1 × 50,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 10:1) para dar terc-butil-4-[7- (3-metoxi-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 232 µmoL, duas etapas, 41,5% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 603,3 [M+H]+.
[0532] Etapa D: 7-(3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: Uma mistura de terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1- naftil)-2-[2-(1-piperidil) etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 199 µmol, 1,00 eq) e TFA (340 mg, 2,99 mmol, 221 µL, 15,0 eq) em DCM (1,00 mL) foi agitado a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 7-(3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il- 2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina bis-trifluoroacetato
(145 mg, bruto) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI MS m/z 503,3 [M+H]+.
[0533] Etapa E: 1-[4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 7-(3- metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina bis-trifluoroacetato (145 mg, bruto) e Et3N (221 mg, 2,18 mmol, 303 µL) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (25,0 mg, 198 µmol) a -78°C. Após agitação a 0°C por 0,5 h, a mistura foi extinta com MeOH e concentrada sob vácuo. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 10:1) para dar 1-[4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[2-(1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en- 1-ona (90,0 mg, 162 µmol, duas etapas 81,5% de rendimento) um sólido amarelo. ESI MS m/z 557,3 [M+H]+.
[0534] Etapa F: 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido [3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4- [7-(3-metoxi-1-naftil) -2-[2-( 1-piperidil) etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (90,0 mg, 162 µmol, 1,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado BBr3 (405 mg, 1,62 mmol, 156 mL, 10,0 eq) a - 78°C. Após agitação a 0°C por 1 h, a mistura foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio a -78°C e agitada a 0°C por 0,5 h. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL), lavada com salmoura (1 × 40,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini 150*25mm*, 10 µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 10 min.) para dar 1-[4- [7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (6,19 mg, 10,8 µmol, 6,71% de rendimento, 95% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 543,2 [M+H]+.
EXEMPLO 53
1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-(hidroximetil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0535] Etapa A: 1-terc-butil 3-metil 4-(7-benzil-2-cloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3- dicarboxilato: Uma mistura de 7- benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (3,00 g, 10,2 mmol, 1,00 eq), 1-terc-butil-3 piperazina-1,3-dicarboxilato (2,62 g, 10,7 mmol, 1,05 eq), DIEA (3,30 g, 25,5 mmol, 4,45 mL, 2,50 eq) em DMSO (50,0 mL) foi desgaseificada e purgada com nitrogênio 3 vezes. A mistura foi agitada a 100°C por 12 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi diluída com DCM (200 mL), lavada com salmoura (3 × 50 ml), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10:1 a 3:1) para dar 1-terc-butil 3-metil 4-(7-benzil-2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1,3-dicarboxilato (2,10 g, 3,81 mmol, 37,4% de rendimento, 91,0% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 502,1 [M+H]+.
[0536] Etapa B: 1-terc-butil 3-metil4-(7-benzil-2-(2-(dimetilamino)etoxi) -5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato: uma mistura de 1-terc-butil 3-metil 4-(7-benzil-2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1,3-dicarboxilato (2,10 g, 4,17 mmol, 1,00 eq), 2- (dimetilamino)etanol (929 mg, 10,4 mmol, 1,04 mL, 2,50 eq), Pd(OAc)2 (140 mg, 625 ol, 0,15 eq), BINAP (519 mg, 833 ol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (3,39 g, 10,4 mmol, 2,50 eq) em tolueno (60,0 mL) foi desgaseificada e purgada com nitrogênio por
3 vezes. A mistura foi agitada a 110°C por 3 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, DCM/MeOH = 30:1 a 10:1) para dar 1-terc-butil-3-metil-4-(7-benzil-2-(2- (dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3- dicarboxilato (1,30 g, 1,67 mmol, 40,0% de rendimento, 71,4% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 555,3 [M+H]+.
[0537] Etapa C: 1-terc-butil 3-metil 4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi) -5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato: a uma solução de 1- terc-butil 3-metil 4-(7-benzil-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato (1,30 g, 2,34 mmol, 1,00 eq) em MeOH (15,0 mL) foi adicionado Pd/C (300 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio várias vezes. A mistura foi agitada sob hidrogênio (50 psi) a 45°C por 48 horas. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar 1-terc-butil 3-metil 4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato (780 mg, bruto) como um óleo incolor, que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[0538] Etapa D: 1-terc-butil 3-metil 4-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2- (dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3- dicarboxilato: Uma mistura de 1-terc-butil 3-metil 4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato (780 mg, bruto), 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (684 mg, 2,18 mmol), Pd2(dba)3 (231 mg, 252 µmol), Cs2CO3 (1,37 g, 4,20 mmol) e 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di- isopropoxibifenil (RuPhos) (157 mg, 336 µmol) em dioxano (20,0 mL) foi desgaseificado e purgado com nitrogênio 3 vezes. A mistura foi agitada a 85°C por 5 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 10:1 a 5:1) para dar 1-terc-butil 3-
metil 4-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato (750 mg, 1,02 mmol, duas etapas) 43,6% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,10 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,58 - 7,31 (m, 8H), 7,00 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,75 (br s, 1H), 4,45 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,42 - 4,34 (m, 1H), 4,34 - 4,28 (m, 1H), 4,15 (br s,, 2H), 4,13 - 3,91 (m, 1H), 3,85 - 3,70 (m, 5H), 3,49 - 3,33 (m, 2H), 3,31 - 3,07 (m, 2H), 2,99 (br s, 1H), 2,83 - 2,68 (m, 3H), 2,35(s, 6H), 1,48 (s, 9H).
[0539] Etapa E: 1-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazina-2-carboxilato: A uma solução de 1-terc-butil 3-metil 4-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,3-dicarboxilato (200 mg, 287 µmol, 1,00 eq) em DCM (5,00 mL) foi adicionado TFA (770 mg, 6,75 mmol, 500 µL, 23,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O resíduo foi dissolvido em DCM (100 mL) e água (50 mL) e a solução foi ajustada para pH 8 com solução saturada de Na 2CO3 aquosa e depois extraído com DCM (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 50 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 1-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2- (dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-2- carboxilato (171 mg, 263 µmol, 91,6% de rendimento, 91,7% pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 597,2 [M+H]+.
[0540] Etapa F: (1-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-2-il)metanol: A uma mistura de 1-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-2-carboxilato (171 mg, 287 µmol, 1,00 eq) em THF (5,00 mL) foi adicionado LiAlH4 (65,3 mg, 1,72 mmol 6,00 eq)
a 0°C. Após agitação durante 2 horas a 25°C, a mistura de reação foi extinta por adição de água (30 mL) a 0°C e extraída com DCM (3 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 30 mL). A fase orgânica recolhida foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar (1-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il) piperazin-2-il)metanol (160 mg, 281 µmol, 98,2% de rendimento, 100% de pureza) como um semissólido incolor. ESI MS m/z 569,2 [M+H]+.
[0541] Etapa G: 2 -((7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-4-(2-(((terc-butildimetilsilil) oxi)metil) piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N- dimetiletanamina: A uma mistura de (1-(7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-2)-(2- (dimetil amino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il) metanol (160 mg, 281 µmol, 1,00 eq) em THF (5,00 mL) foi adicionado NaH (94,0 mg, 2,35 mmol, 60,0% de pureza, 8,00 eq) a 0°C. Após agitação por 30 minutos, foi adicionado gota a gota cloreto de terc-butildimetilsilil (133 mg, 881 µmol, 108 µL, 3,00 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 6 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar 2-((7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-4-(2-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)piperazin-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetiletanamina (133 mg, 165 µmol, 56,1% de rendimento, 84,6% de pureza) como leve sólido amarelo, que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 683,2 [M+H]+.
[0542] Etapa H: 1-(4-(7-(3-(benziloxi)naftaleno-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-(((terc- butildimetilsilil)oxi)metil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: 1 A uma solução de 2- ((7-(3-(benziloxi)naftalen-1-il)-4-(2-(((terc-butil dimetilsilil)oxi)metil)piperazin-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetiletanamina (133 mg, 165 µmol, 1,00 eq) e TEA (39,4 mg, 389 µmol, 54,0 µL, 2,00 eq) em DCM (3,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (31,9 mg, 253 µmol, 1,30 eq) a -
40°C. Após agitação a -40°C por 2 horas, a mistura de reação foi extinta com MeOH (1 M) e concentrada sob pressão reduzida para dar 1-(4-(7-(3- (benziloxi)naftaleno-1-il)-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona (140 mg, bruto) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 737,2 [M+H]+.
[0543] Etapa I: 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-(hidroximetil)piperazin-1-il)prop-2-en-1- ona: A uma solução de 1-(4-(7-(3-(3-(benziloxi)naftalen-1-il) )-2-(2- (dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-(((terc- butildimetilsilil)oxi)metil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (140 mg, bruto) em DCM (5,00 mL) foi adicionado BBr3 (476 mg, 1,90 mmol, 183 mL) a -40°C. Após agitação durante 2 horas a -40°C sob uma atmosfera de nitrogênio, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida até secura. Água (0,5 mL) e MeOH (2,5 mL) foram adicionados e a solução resultante foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (10 mM H 4HCO3)-ACN]; B %: 27% - 57%, 11 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3, 4-d]pirimidin-4-il)-3-(hidroximetil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (4,32 mg, 7,94 µmol, 4,18% de rendimento, 97,9% de pureza) como um sólido branco. ESI MS m/z 533,4 [M+H]+.
EXEMPLO 54
1-[4-[7-(3-amino-1-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0544] Etapa A: terc-butil 4-hidroxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato: A uma solução de Na (4,24 g, 184 mmol, 4,37 mL, 2,50 eq) em EtOH (400 mL) foi adicionado 1-terc-butil 4-etil 3-oxopiperidina-1,4-dicarboxilato (20,0 g, 73,7 mmol, 1,00 eq) e metanimidamida de ácido acético (11,5 g, 111 mmol, 1,50 eq) sob N2. A mistura foi agitada a 70°C por 5 horas. A mistura de reação foi ajustada para pH 7 com HCl (1 N), extraída com DCM (3 x 200 mL), lavada com salmoura (1 x 400 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar terc-butil 4-hidroxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (16,0 g, 63,7 mmol, 86,4% de rendimento) como um sólido marrom. ESI MS m/z 274,0 [M+H]+.
[0545] Etapa B: terc-butil 4-(4-benziloxicarbonil-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-hidroxi-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (16,0 g, 63,7 mmol, 1,00 eq) em DMF (4,00 mL) foi adicionado DBU (29,1 g, 191 mmol, 28,8 mL, 3,00 eq) e benzotriazol-1- il-oxitripirrolidinofosfônio hexafluorofosfato (PYBOP) (39,8 g, 76,4 mmol, 1,20 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Bemzil piperazina-1-carboxilato (21,0 g, 95,5 mmol, 18,5 mL, 1,50 eq) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a 25°C por 16 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (500 mL) e lavada com água (3 × 400 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, éter dietílico/acetato de etila = 1:1) para dar terc-butil 4-(4-benziloxicarbonil-1-il)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,00 g, 4,41 mmol, rendimento de 6,93%) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 454,3 [M+H]+.
[0546] Etapa C: Uma mistura de terc-butil 4-(4-benziloxicarbonilpiperazin-1-il)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (1,20 g, 2,65 mmol, 1,00 eq) e TFA (4,53 g, 39,7 mmol, 2,94 mL, 15,0 eq) em DCM (2,00 mL) foi agitada a
25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O material concentrado foi ajustado para pH 8 com NaHCO3 aquoso saturado e, então, extraído com acetato de etila (3 x 30,0 mL), lavado com salmoura (1 x 100 mL), seco sobre Na2SO4, filtrado e concentrado sob vácuo para dar benizl 4-(5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (800 mg, 2,26 mmol, 85,4% de rendimento) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 354,3 [M+H]+.
[0547] Etapa D: benzil 4-[7-[3-(terc-butoxicarbonilamino)-1-isoquinolil]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc- butil N-(1-bromo-3-isoquinolil)carbamato (330 mg, 1,02 mmol, 1,00 eq), DIEA (264 mg, 2,04 mmol, 357 µL, 2,00 eq) e benzil 4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (541 mg, 1,53 mmol, 1,50 eq) em DMSO (3,00 mL) foi agitada a 80°C por 10 horas. A mistura foi diluída com água (5.00 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 20 mL). Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna de fase reversa (TFA, 0,1%) para dar benzil 4-[7-[3-(terc- butoxicarbonilamino)-1-isoquinolil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 665 µmol, 65,2% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 596,3 [M+H]+.
[0548] Etapa E: terc-butil N-[1-(4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il)-3-isoquinolil]carbamato: Uma mistura de benizl 4-[7-[3-(terc- butoxicarbonilamino)-1-isoquinolil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (240 mg, 403 ol, 1,00 eq), KOH (36,2 mg, 645 µmol, 1,60 eq) em H2O (2,40 mL) e álcool n-butílico (2,40 mL) foi agitada a 100°C por 12 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (3 x 5,00 mL), lavada com salmoura (1 × 10,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar terc-butil N-[1-(4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7- il)-3-isoquinolil]carbamato (150 mg, 325 µmol, 80,7% de rendimento) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 462,3 [M+H]+.
[0549] Etapa F: 1-(4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7- il)isoquinolin-3-amina trifluoroacetato: Uma solução de terc-butil N-[1-(4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il)-3-isoquinolil]carbamato (150 mg, 325 µmol, 1,00 eq) e TFA (556 mg, 4,87 mmol, 361 µL, 15,0 eq) em DCM (360 µL) foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 1-(4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il)isoquinolin- 3-amina trifluoroacetato (154,52 mg, bruto) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[0550] Etapa G: 1-[4-[7-(3-amino-1-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-(4-piperazin- 1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il)isoquinolin-3-amina (150 mg, bruto) e Et3N (319 mg, 3,15 mmol, 437 uL) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2- enoil prop-2-enoato (31,8 mg, 252 ol) a - 40°C, depois agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura foi extinta pela adição de MeOH (20,22 mg, 630,96 µmol) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini 150*25mm*, 10 µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 26% -56%, 10 min.) para dar 1-[4-[7-(3-amino-1- isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2 -en-1- ona (35,4 mg, 82,5 µmol, 26,2% de rendimento, 96,8% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 416,3 [M+H]+.
EXEMPLO 55
1-(4-(2-(2-(dimetilamino)-3-hidroxipropoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0551] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2- (dimetilamino)propano-1,3-diol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 533,3 [M+H]+.
EXEMPLO 56 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-morfolinopropan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0552] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- morfolinopropan-2-ol noo lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 559,3 [M+H]+.
EXEMPLO 57 (S)-5-(((4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina -2-il)oxi)metil)pirrolidin-2-ona
[0553] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (S)-5- (hidroximetil) pirrolidin-2-ona em lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 58 (R)-5-(((4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina -2-il)oxi)metil)pirrolidin-2-ona
[0554] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-5- (hidroximetil) pirrolidin-2-ona em lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,2 [M+H]+.
EXEMPLO 59 N-(2-((4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)etil)acetamida
[0555] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando N-(2- hidroxietil) acetamida em lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+.
EXEMPLO 60 (R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)butan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0556] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- (dimetilamino)butan-2-ol em lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 545,3 [M+H]+.
EXEMPLO 61 (S)-6-(((4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-2-il)oxi)metil)piperidin-2-ona
[0557] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, utilizando 6- (hidroximetil)piperidin-2-ona em lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e o produto foi separado por cromatografia quiral. Ao pico 2 foi dada a estereoquímica (S) e isto não foi confirmado. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 62
(R)-6-(((4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-2-il)oxi)metil)piperidin-2-ona
[0558] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, utilizando 6- (hidroximetil) piperidin-2-ona em lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e separados por cromatografia quiral. Ao pico 1 foi atribuída a estereoquímica (R), mas esta estereoquímica não foi confirmada. ES+APCI MS m/z 543,2 [M+H]+.
EXEMPLO 63 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2 -(((R)-1-((R)-3-metoxipirrolidin-1-il) propan-2- il)oxi)-)5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0559] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1-((R)-3- metoxipirrolidin-1-il)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 64
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((R)-1-((S)-3-metoxipirrolidin-1-il) propan-2- il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0560] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1-((S)-3- metoxipirrolidin-1-il)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 65 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((R)-1-((S)-3-hidroxipirrolidin-1-il)propan-2- il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0561] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1-((S)-3- ((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-1-il)propan-2-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 559,3 [M+H]+.
EXEMPLO 66
(S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-3-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0562] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (S)-1- metilpiperidin-3-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 67 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-3-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0563] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- metilpiperidin-3-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 68
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0564] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- iodonaftaleno no lugar de (3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 501,3 [M+H]+.
EXEMPLO 69 1-(4-(7-(isoquinolin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0565] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, usando 4- bromoisoquinolina no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 401,2 [M+H]+.
EXEMPLO 70
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(metilamino)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0566] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1- (metilamino)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 503,3 [M+H]+.
EXEMPLO 71 1-(4-(7-(2-hidroxi-1-feniletil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2- en-1-ona
[0567] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 1, usando 2-((terc- butildimetilsilil)oxi)-1-feniletil metanossulfonato no lugar de 1-bromo-3- (metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 394,2 [M+H]+.
EXEMPLO 72
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0568] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (1- metilpiperidin-3-il)metanol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 73 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0569] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2- (dimetilamino)propan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,2 [M+H]+.
EXEMPLO 74
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona
[0570] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 559,3 [M+H]+.
EXEMPLO 75 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(piperidin-1-il)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0571] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- (piperidin-1-il)propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 557,3 [M+H]+.
EXEMPLO 76
(R)-1-(4-(7-(3-cloro-5-hidroxi-2-isopropilfenil)-2-((1-(dimetilamino)propan-2- il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0572] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1-bromo-3- cloro-2-isopropil-5-(metoximetoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 545,3 [M+H]+.
EXEMPLO 77 1-(4-(2-(2-((1S,4R)-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0573] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-((1S,4R)- 2-azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il)etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan- 2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 555,2 [M+H]+.
EXEMPLO 78
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(5-hidroxi-2- (trifluorometoxi)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0574] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-bromo-4- (metoximetoxi)-1-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 551,2 [M+H]+.
EXEMPLO 79 (R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(5-hidroxi-2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0575] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-bromo-4- (metoximetoxi)-1-(trifluorometil) benzeno no lugar de (3-(metoximetoxi)naftalen- 1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 535,2 [M+H]+.
EXEMPLO 80
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((4-metilpiperazin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0576] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (4- metilpiperazin-2-il)metanol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 544,3 [M+H]+.
EXEMPLO 81 1-(2-((4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)etil)piperidina-4-carbonitrila
[0577] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 1-(2- hidroxietil)piperidina-4-carbonitrila no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 568,2 [M+H]+.
EXEMPLO 82
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-(4-metilpiperazin-1-il)propoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0578] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, 3-(4-metilpiperazin- 1-il)propan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 572,4 [M+H]+.
EXEMPLO 83 1-(4-(2-(2-((2-hidroxietil)(metil)amino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0579] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-((2-((terc- butildimetilsilil)oxi)etil)(metil)amino)etan-1-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 533,3 [M+H]+.
EXEMPLO 84
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(2-fluoro-6-hidroxi-3-metilfenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0580] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-bromo-3- fluoro-1-(metoximetoxi)-4-metilbenzeno no lugar de (3-(metoximetoxi)naftalen-1- il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 499,3 [M+H]+.
EXEMPLO 85 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(pirrolidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0581] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-(pirrolidin- 1-il)etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,2 [M+H]+.
EXEMPLO 86
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(2-hidroxi-5- (trifluorometoxi)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0582] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-bromo-1- (metoximetoxi)-4-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 551,2 [M+H]+.
EXEMPLO 87 (R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-fluoro-2-hidroxi-6-metilfenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0583] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-bromo-4- fluoro-3-(metoximetoxi)-1-metilbenzeno no lugar de (3-(metoximetoxi)naftalen-1- il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 499,2 [M+H]+.
EXEMPLO 88
(S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(2-metilpiperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0584] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (S)-2-(2- metilpiperidin-1-il) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B ES+APCI MS m/z 557,2 [M+H]+.
EXEMPLO 89 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0585] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (1- metilpirrolidin-3-il)metanol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 90
1-(4-(7-(5-hidroxi-2-(trifluorometoxi)fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0586] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e usando 2-bromo-4-(metoximetoxi)-1-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 593,2 [M+H]+.
EXEMPLO 91 (R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxi-5- (trifluorometoxi)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0587] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3-bromo-1- (metoximetoxi)-5-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 551,2 [M+H]+.
EXEMPLO 92 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(4-metilpiperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0588] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-(4- metilpiperidin-1-il) etan-1-ol na Etapa B: ES+APCI MS m/z 55,2 [M+H]+.
EXEMPLO 93 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((4-morfolinobutan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0589] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 4- morfolinobutan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 94
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(5-hidroxi-2-metoxifenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0590] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3-bromo-1- (metoximetoxi)-4-metoxibenzeno no lugar de (3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 497,2 [M+H]+.
EXEMPLO 95 (R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(2-hidroxi-6-metilfenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0591] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, utilizando 2-bromo- 1-(metoximetoxi)-3-metilbenzeno no lugar de (3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 481,2 [M+H]+.
EXEMPLO 96
1-(4-(7-(5-hidroxi-2-isopropoxifenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il) prop-2-en-1-ona
[0592] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e usando 2-bromo-4-(metoximetoxi)-1-(isopropoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na etapa D. ES+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
EXEMPLO 97 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(2-metilpiperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0593] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-2-(2- metilpiperidin-1-il) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 557,3 EXEMPLO 98
(S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(3-metoxipiperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0594] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (S)-2-(3- metoxipiperidin-1-il) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 557,3 [M+H]+.
EXEMPLO 99 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(3-metoxipiperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0595] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-2-(3- metoxipiperidin-1-il) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 557,3 [M+H]+.
EXEMPLO 100
1-(4-(2-((1-ciclopropilpiperidin-4-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0596] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (1- ciclopropilpiperidin-4-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 555,3 [M+H]+.
EXEMPLO 101 1-(4-(2-(3-(1,4-oxazepan-4-il)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0597] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (3-(1,4- oxazepan-4-il) propan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 102
1-(4-(2-(3-(1,4-oxazepan-4-il)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0598] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2- (dietilamino) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 531,3 [M+H]+.
EXEMPLO 103 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(2-metoxietil)pirrolidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0599] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, (1-(2-metoxietil) pirrolidin-3-il) metanol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 104
1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi))-7-(3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0600] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3-((1S,4S)- 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propan-1-ol no lugar de (S)-1- (dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 105 1-(4-(7-(5-hidroxi-2-metilfenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona
[0601] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e usando 2-bromo-4-(metoximetoxi)-1-metilbenzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na Etapa D. ES+APCI MS m/z 523,3 [M+H]+.
EXEMPLO 106
1-(4-(7-(4-hidroxi-2-(trifluorometoxi)fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-i)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0602] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e usando 2-bromo-5-(metoximetoxi)-1-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na Etapa D. ES+APCI MS m/z 593,2 [M+H]+.
EXEMPLO 107 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-((2-metoxietil)(metil)amino)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0603] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-((2- metoxietil)(metil)amino)etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 547,3 [M+H]+.
EXEMPLO 108
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(4-metoxipiperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0604] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-(4- metoxipiperidin-1-il)etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 109 1-(4-(2-(2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0605] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2-(4,4- difluoropiperidin-1-il) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 579,2 [M+H]+.
EXEMPLO 110
(R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0606] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-(1- metilpirrolidin-3-il) metanol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 111 (S)-1-(4-(2-(2-(3-fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0607] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (S)-2-(3- fluoropiperidin-1-il) etan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 561,3 [M+H]+.
EXEMPLO 112
1-(4-(7-(3-(difluorometil)naftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0608] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B e usando 1-bromo-3-(difluorometil)naftaleno (0,129 g, 0,503 mmol) no lugar de (3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na Etapa D. ES+APCI MS m/z 593,2 [M+H]+.
EXEMPLO 113 4-(4-acriloilpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-7,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-6(5H)-ona
[0609] Etapa A: terc-butil 4-(6-fluoropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: A uma solução de 4-cloro-6-fluoropirido[3,4-d]pirimidina (1,07 g, 5,83 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionada N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (2,09 mL, 11,7 mmol) seguida de terc-butil piperazina-1-carboxilato (1,19 g, 6,41 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e concentrada in vacuo para fornecer terc-butil 4-(6-fluoropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato, o qual foi utilizado diretamente na próxima etapa (1,8 g, 92,6%) ES+APCI MS m/z 334,1 [M+H]+.
[0610] Etapa B: terc-butil 4-(6-(benziloxi)pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: A uma solução de fenilmetanol (0,65 g, 6,0 mmol) em DMA (10 mL) foi adicionado hidreto de sódio (0,24 g, 6,0 mmol) em porções enquanto desgaseificando com nitrogênio e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos à temperatura ambiente. À reação foi adicionado terc-butil 4-(6-fluoropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (1,0 g, 3,0 mmol) como um sólido e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi derramada em água (300 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO 4 e concentrada in vacuo. O material bruto foi cromatografado usando um gradiente de 0 a 100% de acetato de etila/DCM como o eluente para dar terc-butil 4-(6- (benziloxi)pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,4 g, 0,95 mmol, 32% de rendimento). ES+APCI MS m/z 422,2 [M+H]+ .
[0611] Etapa C: terc-butil 4-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-(6-(benziloxi)pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,40 g, 0,95 mmol) em etanol a 95% (30 mL) purgado com nitrogênio foi adicionado Pd/C (0,10 g, 0,95 mmol). A reação foi evacuada com vácuo e preenchida com hidrogênio três vezes. Após o terceiro preenchimento, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas. A reação foi novamente desgaseificada com nitrogênio, a pasta filtrada através de Celite® e o filtrado foi concentrado in vacuo para dar terc-butil 4-(6- oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,4 g, 126%). ES+APCI MS m/z 334,4 [M+H]+ .
[0612] Etapa D: 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 4-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (0,28 g, 0,84 mmol) em dioxanos (4 mL) em um tubo selado foi adicionado fosfato de potássio (0,36 g, 1,7 mmol), N1,N2-dimetiletano-1,2- diamina (0,074 g, 0,84 mmol) e 1-iodo-3-(metoximetoxi)naftaleno (0,53 g, 1,7 mmol). A reação aspergida com argônio por 20 minutos, seguida pela adição de iodeto de cobre(I) (0,16 g, 0,84 mmol). O vaso de reação selado e aquecido a 100 °C durante a noite. A reação foi diluída com água e a camada aquosa extraída com acetato de etila (2 x 150 mL). Os orgânicos foram lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O material foi cromatografado usando um gradiente de 0 a 100% de acetato de etila/DCM como o eluente para dar terc-butil 4-(7-(3-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-6-oxo- 5,67,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,30 g, 0,58 mmol, 69% de rendimento) ES+APCI MS m/z 520,2 [M+H]+ .
[0613] Etapa E: 7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-4-(piperazin-1-il)-7,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-6(5H)-ona : A uma solução de terc-butil 4-(7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,30 g, 0,58 mmol) em metanol (10 mL) foi adicionado cloreto de hidrogênio aquoso (0,38 mL, 2,3 mmol) e a reação foi agitada durante a noite a 50oC. A reação foi concentrada in vacuo para dar 7-(3-hidroxinaftalen- 1-il)-4-(piperazin-1-il)-7,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-6(5H)-ona como o sal bis HCl (0,26 g, 100%). ES+APCI MS m/z 376,1 [M+H]+ .
[0614] Etapa F: 4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-7,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidin-6(5H)-ona : A uma past de 7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-4- (piperazin-1-il)-7,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-6(5H)-ona dicloridrato (0,26 g, 0,58 mmol) em uma solução 1:1 de DCM/acetonitrila (10 mL) foi adicionada N- etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,45 g, 3,5 mmol) e cloreto de acriloíla (0,052 g, 0,58 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e o material purificado por HPLC preparativa reversa (usando um gradiente de 5 a 95% de ACN/água) para dar 4-(4-acrililpiperazin-1- il)-7-(3-hidroxinaftalen-1- il)-7,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-6(5H)-ona (0,038 g, 0,088 mmol, 15% de rendimento). ES+APCI MS m/z 430,2 [M+H]+ .
EXEMPLO 114 4-(6-acriloil-2,6-diazaspiro [3.3]heptan-2-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-7,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidin-6(5H)-ona
[0615] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, utilizando terc-butil 2,6-diazaspiro[3.3]heptano-2-carboxilato cloridrato (305 mg, 1,54 mmol) no lugar de terc-butil piperazina-1-carboxilato (1,19 g, 6,41 mmol) na Etapa B. ES+APCI MS m/z 442,2 [M+H]+ EXEMPLO 115
1-((S)-4-(2-(((R)-1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1- ona
[0616] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando benzil (S)-3- metilpiperazina-1-carboxilato (1,155 g, 4,931 mmol) no lugar de Benzil 1- piperazinocarboxilato na etapa A. ES+APCI MS m/z 531,3 [M+H]+.
EXEMPLO 116 (S)-1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0617] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (S)-3- metilpiperazina-1-carboxilato de benzila (1,155 g, 4,931 mmol) no lugar de Benzil 1-piperazinocarboxilato na etapa A. Além disso, usando 2-(dimetilamino)etanol- 1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+.
EXEMPLO 117
1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-morfolinoetoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona
[0618] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 2- morfolinoetan-1-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 545,2 [M+H]+.
EXEMPLO 118 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-morfolino-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-eno-1-ona
[0619] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando morfolina no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 501,3 [M+H]+.
EXEMPLO 119 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(pirrolidin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0620] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando pirrolidina no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 485,2 [M+H]+.
EXEMPLO 120 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0621] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando (R)-1- (pirrolidin-1-il) propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 543,4 [M+H]+.
EXEMPLO 121 4-(4-acriloilpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,7-di- hidropirido[3,4-d]pirimidin-8(5H)-ona
[0622] Etapa A: Terc-butil 2,4-dicloro-8-oxo-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato. A um frasco de fundo redondo foi adicionado terc-Butil 2,4- dicloro-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(8H)-carboxilato (1,0 g, 3,29 mmol) e
EtOAc (16,4 mL). Foi adicionada uma solução de periodato de sódio (2,11 g, 9,86 mmol) em água (16,4 mL). Foi adicionado cloreto de rutênio (III) (0,102 g, 0,493 mmol) e a mistura foi agitada frouxamente tampada e vigorosamente agitada por 6 h à temperatura ambiente. A mistura foi particionada entre água e EtOAc e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída adicionalmente com EtOAc (2 x 20 mL) e os extratos combinados foram lavados com salmoura e secados sobre Na2SO4, filtrados e concentrados. O produto bruto foi purificado via cromatografia de coluna (10-30% de EtOAc/hexanos, carregamento com CH2Cl2) para render 0,864 g (82%) do produto como um sólido esbranquiçado.
[0623] Etapa B: Terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-cloro-8-oxo- 5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato. A uma solução de terc-butil- 2,4-dicloro-8-oxo-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,400 g, 1,26 mmol) em CH2Cl2 (5,0 mL) foi adicionado N,N-di-isopropiletilamina (0,325 g, 2,51 mmol) seguido de benzil 1-piperazinacarboxilato (0,255 mL, 1,32 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 1,5 h. A mistura de reação foi diluída com CH2Cl2 (10 mL) e lavada com uma solução 0,5 M de KHSO4 (5 mL), seguida por uma solução aquosa saturada de NaHCO 3 e salmoura. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto foi sonicado em 10 mL de MTBE e o sólido resultante foi isolado por filtração a vácuo. O sólido foi seco in vacuo para fornecer 0,507 g (80%) do produto desejado como um sólido esbranquiçado que foi usado diretamente na próxima etapa. ES+APCI MS m/z 502,1[M+H]+.
[0624] Etapa C: 4-(2-cloro-8-oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato. Uma solução de terc-butil 4-(4- ((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-cloro-8-oxo-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,255 g, 0,5080 mmol) em CH2Cl2 (1,0 mL) foi resfriada até 0°C. Ácido trifluoroacético (0,3890 mL, 5,080 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida até à temperatura ambiente. Após 1 hora, a mistura foi diluída com CH2Cl2 e adicionada a uma salmoura de mistura (10 mL) e NaOH aquoso 3,0 M (1,7 mL, 5,080 mmol). As camadas foram combinadas e ajustadas até pH 8 com solução aquosa saturada de NaHCO3. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com 2x10 mL de CH 2Cl2. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 filtradas e concentradas sob vácuo. O composto do título (0,223 g, quant.) foi obtido como uma espuma amarela/laranja. ES+APCI MS m/z 402,1[M+H]+.
[0625] Etapa D: Benzil 4-(2-(3-morfolinopropoxi)-8-oxo-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A um frasco foi adicionada N-hidroxipropanilmorfolina (0,687 g, 4,73 mmol) e benzil 4-(2-cloro- 8-oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,190 g, 0,473 mmol) seguido por dioxano (1,6 mL). Carbonato de césio (0,462 g, 1,42 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 65°C por 15 horas. A mistura foi diluída com CHCl3 e filtrada e o sólido foi lavado com CHCl3 adicional. O filtrado foi concentrado in vacuo e foi purificado por cromatografia de coluna (2-10% de MeOH/DCM com 1% de NH4OH) para render 0,061 g (25%) do produto desejado como um óleo espesso, incolor. ES+APCI MS m/z 511,2[M+H]+.
[0626] Etapa E: Benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-8-oxo-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. A um frasco foi adicionado benzil 4-(2-(3-morfolinopropoxi)-8-oxo- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,060 g, 0,12 mmol), N,N’-Dimetiletilenodiamina (0,010 g, 0,12 mmol) e 1-iodo-3- (metoximetoxi)naftaleno (0,074 g, 0,24 mmol) seguido de dioxano (0,78 mL) e fosfato de potássio tribásico (0,050 g, 0,24 mmol). A reação foi purgada com Ar borbulhante por 10 min., depois foi adicionado Iodeto de cobre (I) (0,022 g, 0,12 mmol) e o frasco foi selado. A mistura foi aquecida até 110°C e agitada por 16 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com água e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados. A mistura foi purificada via cromatografia de coluna (2-8% de MeOH/DCM) para render 0,062 g (76%) do produto como uma espuma castanha. ES+APCI MS m/z 697,3[M+H]+.
[0627] Etapa F: 7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-4- (piperazin-1-il)-6,7-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-8(5H)-ona. A uma solução de benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-8-oxo-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,062 g, 0,089 mmol) em EtOH (0,44 mL) e THF (0,44 mL) foi adicionado Paládio em Carbono (0,038 g, 0,018 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e, então, uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida via vácuo seguida de pressão de balão. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1,5 h, então, aquecida até 45°C e agitada por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e filtrada através de um filtro de náilon. O filtrado foi concentrado in vacuo, fornecendo uma espuma castanho claro (0,052 g) que foi seca durante a noite e ressubmetida às mesmas condições de reação acima. Após agitar à temperatura ambiente por 5 h, foi adicionado Pd/C adicional (0,050 g) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por outros 2 h. A mistura foi diluída com EtOAc e filtrada através de um filtro de náilon. O sólido foi lavado com EtOAc e MeOH e o filtrado foi concentrado in vacuo fornecendo 0,029 g (58%) do produto desejado como uma espuma castanha clara. ES+APCI MS m/z 563,3[M+H]+.
[0628] Etapa G: 4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,7-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-8(5H)-ona. A uma solução de 7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-4-(piperazin-1-il)-6,7-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-8(5H)-ona (0,028 g, 0,050 mmol) em CH2Cl2 (0,50 mL) a -78°C foi adicionada trietilamina (0,014 mL, 0,100 mmol). Cloreto de acriloíla (0,55 ml, 0,055 mmol, CH2Cl2 0,1M recém-preparada) foi adicionado e a reação foi, então, agitada por 0,5 h. A mistura foi diluída com CHCl3 e foi adicionada uma solução aquosa saturada de NH4Cl. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com CHCl3 (2 x 10 mL). Os extratos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados. O produto bruto foi purificado via cromatografia de coluna (4-6% de MeOH/DCM) para proporcionar 0,018 g (59%) para fornecer o composto do título como uma espuma esbranquiçada sólida. ES+APCI MS m/z 617,3[M+H]+.
[0629] Etapa H: 4-(4-acrililpiperazin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,7-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-8(5H)-ona. A uma solução de 4-(4-acriloilpiperazin-1-il)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,7-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-8(5H)-ona (0,018 g, 0,0292 mmol) em 1/1 de MeOH/THF (0,6 mL) foi adicionado HCl (0,0486 mL, 0,292 mmol, 6 N Aquoso). A mistura foi agitada a 35°C por 7 horas. A mistura foi diluída com salmoura e ajustada para pH 8 com uma solução aquosa saturada de NaHCO3. A mistura foi extraída com 10% de IPA/CHCl3 (2 x 10 mL) e CHCl3 (10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas. O material bruto foi purificado via cromatografia de coluna (6-10% de MeOH/DCM) para render 0,012 g (71%) do produto como um sólido esbranquiçado. ES+APCI MS m/z 573,3[M+H]+.
EXEMPLO 122 (R,E)-4-(dimetilamino)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)but-2-en-1-ona bis-trifluoroacetato
Etapa F HCl 6N em iPrOH (Como pelo Exemplo 8, Etapa A-E) Etapa G
[0630] Etapas A-E: (R)-2-((7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-4-(piperazin-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropan-1-amina foi sintetizada de acordo com o método do Exemplo 8, Etapa A até Etapa E, usando (R)-1-(dimetilamino) propan-2-ol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B.
[0631] Etapa F: (R)-4-(2-((1-(Dimetilamino)propan-2-il)oxi)-4-(piperazin-1-il)-5,8- di-hidropirido[3,4-d]dicloridrato de pirimidin-7(6H)-il)naftalen-2-ol: A uma solução de (R)-2-((7-(3-(metoxi-metoxi)naftalen-1-il)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropan-1-amina (75 mg, 0,15 mmol) em DCM (2,9 mL) foi adicionado HCl 6N em iPrOH (247 µl, 1,5 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi concentrada até secura para fornecer (R)-4-(2-((1-(Dimetilamino)propan-2- il)oxi)-4-(piperazin-1-il)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-il)naftalen-2-ol dicloridrato que foi usado diretamente na etapa seguinte. ES+APCI MS m/z 463,2 [M+H]+ .
[0632] Etapa G: (R, E)-4-(Dimetilamino)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2- il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)but-2-en-1-ona bis-trifluoroacetato: Uma solução de (R)-4-(2-((1- (Dimetilamino)propan-2-il)oxi)-4-(piperazin-1-il)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-il)naftalen-2-ol dicloridrato (7 mg, 0,01 mmol), HATU (6,2 mg, 0,02 mmol), (2E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (2,1 mg, 0,02 mmol), DIEA (6,9, 0,04 mmol) em DCM (131 µl) foram agitados à temperatura ambiente por 1 h. O resíduo foi filtrado e o filtrado foi carregado diretamente em uma HPLC prep Gilson C18 eluindo com 5-95% de acetonitrila/água com 0,1% de aditivo de TFA. As frações contendo o produto desejado foram concentradas para fornecer (R,E)-4-(Dimetilamino)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)but-2-en-1-ona bis-trifluoroacetato. ES+APCI MS m/z 574,2 [M+H]+.
Exemplo 123 1-(4-(2-(2-hidroxi-3-morfolinopropoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0633] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8, usando 3- morfolinopropano-1,2-diol no lugar de (S)-1-(dimetilamino) propan-2-ol na Etapa B. ES + APCI MS m/z 575,2 [M+H]+.
EXEMPLO 124
(R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(4-fluoro-3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0634] Etapa A: Benzil (R)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (221 mg, 0,345 mmol) foi colocado em ACN (2 mL) e a mistura foi resfriada a 0°C. Foi adicionado SelectFluor (183 mg, 0,517 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de fase reversa (5-95% ACN:água com 0,1% de TFA) para fornecer benzil (R)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(4-fluoro-3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato trifluoroacetato (48 mg 0,0729 mmol, 21,1% de rendimento).
[0635] Etapa B: (R)-1-(4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(4-fluoro-3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona foi preparado seguindo o Exemplo 33, Etapas D-F usando (R)- 4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(4-fluoro-3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato trifluoroacetato no lugar de 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. ES+APCI MS m/z 535,2 [M+H]+.
EXEMPLO 125 (R)-1-(4-(7-(4-cloro-3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
[0636] Etapa A: Benzil (R)-4-(2-((1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (83 mg, 0,130 mmol) e NCS (21,6 mg, 0,162 mmol) foram colocados em ACN (2 mL) e agitados à temperatura ambiente por 3 horas. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM (3x15 mL). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de fase reversa (5-95% de ACN:água com 0,1% de TFA) para fornecer benzil (R)-4-(7-(4-cloro-3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1- (dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato trifluoroacetato (17 mg 0,0252 mmol, 19,4% de rendimento).
[0637] Etapa B: (R)-1-(4-(7-(4-cloro-3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1- (dimetilamino)propan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona foi preparado seguindo o Exemplo 33, Etapas D-F usando (R)-4-(7-(4-cloro-3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-(dimetilamino) propan-2-il)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato trifluoroacetato no lugar de benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-
il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato e usando THF como o solvente na Etapa D. ES+APCI MS m/z 551,2 [M+H]+.
EXEMPLO 126 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato
[0638] Etapa A: benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(2-(piridin-2- il)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma pasta de benzil 4-(2-cloro-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 0,35 mmol) em dioxano em um micro-ondas foi adicionado N-etil-N-isopropilpropan-2amina (0,45 g, 3,5 mmol ), Cs2CO3 (0,34 g, 1,0 mmol) e 2-(piridin-2-il)etan-1-ol (0,43 g, 3,5 mmol) e a reação aquecida a 15 °C por 1 h no micro-ondas. A reação foi diluída com EtOAc e lavada com água, salmoura, seca sobre MgSO 4 e concentrada in vacuo. O material foi cromatografado usando um gradiente de 0 a 100% de EtOAc/DCM como o eluente para dar benzil 4-(7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,16 g, 0,24 mmol, 70% de rendimento).
[0639] Etapa B: 4-(4-(piperazin-1-il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-yl)naftalen-2-ol: Para o benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1- il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato sólido (0,12 g, 0,18 mmol) foi adicionado MeOH (20 mL). A solução foi desgaseificada com nitrogênio por 5 minutos, seguida pela adição de Pd/C (0,058 g, 0,54 mmol). O recipiente de reação foi evacuado e reenchido por vácuo com H2. Este procedimento foi realizado três vezes e, após o terceiro renchimento, a pasta foi deixada agitar sob uma atmosfera de hidrogênio por 1 h. A reação foi novamente desgaseificada com nitrogênio por 5 minutos. A pasta foi depois filtrada através de Celite® e o Celite® foi lavado com MeOH (100 mL). Os extratos orgânicos combinados foram concentrados e tratados com 10 mL de TFA/DCM 1:1 por 2 horas. A reação foi novamente concentrada in vacuo para dar 4-(4-(piperazin-1-il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-il)naftalen-2-ol (0,096 g, 0,20 mmol, 110% de rendimento).
[0640] Etapa C: 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-(4-(piperazin-1-il)-2-(2-(piridin-2)-il)etoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-il)naftalen-2-ol (0,096 g, 0,20 mmol) em DCM foi adicionado à Base de Hunig (0,17 mL, 0,99 mmol) e cloreto de acriloíla (0,018 g, 0,20 mmol) e a reação foi agitada por 30 minutos à temperatura ambiente. A reação foi concentrada in vacuo e o material bruto foi purificado por HPLC preparativa reversa para dar 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(2-(piridin-2-il)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona trifluoroacetato (0,0057 g, 0,011 mmol, 5,3% de rendimento). ES+APCI MS m/z 537,2 [M+H]+ .
EXEMPLO 127 (S)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-4- (piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina
Base de Hunig, DMA
[0641] Etapa A: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2,4- dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (8 g, 26,30 mmol) em DMA (263,0 ml, 26,30 mmol) foi adicionado benzil piperazina-1-carboxilato (5,793 g, 26,30 mmol) e N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (4,721 ml, 26,30 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 2 horas. TLC (20% de EtOAc/DCM), visualização UV, mostrou conclusão da reação. A reação foi a seguir derramada em água e extraída em DCM. Os orgânicos foram depois lavados com água (2x), salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi carregado em uma coluna 220g RegiSep e cromatografado na CombiFlash (0%-10%, EtOAc:DCM). Todas as frações contendo produto desejado foram combinadas e concentradas para dar terc-butil 4-(4- ((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato (9,768 g, 20,02 mmol, 76,11% de rendimento) como uma espuma branca. ES+APCI MS m/z 488,2 [M+H]+.
[0642] Etapa B: 4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato. terc-butil-4-(4-((benziloxi)carbonil)piperazin-1-il)-2- cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (9,768 g, 20,02 mmol) foi dissolvido em diclorometano (200,2 ml, 20,02 mmol) e tratado com ácido 2,2,2-trifluoroacético (15,33 ml, 200,2 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas. Após conclusão, a reação foi concentrada in vacuo e absorvida em EtOAc e os orgânicos foram lavados com NaOH 1M (2X), salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. benzil 4-(2-cloro- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (7,406 g, 19,09 mmol, 95,39% de rendimento) foi usado bruto na próxima reação. ES+APCI MS m/z 388,2 [M+H]+.
Pd2(dba)3, BINAP, Tolueno, Terc butóxido de sódio
[0643] Etapa C: benzil 4-(2-cloro-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Ao benzil 4-(2-cloro- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato, BINAP (0,275 g, 0,442 mmol) e Pd2(dba)3 (0,203 g, 0,221 mmol) sob argônio foi adicionado tolueno (221 ml, 11,1 mmol) e a reação borbulhada com Ar por 10 minutos seguida por aquecimento a 100°C por 10 minutos. A reação foi, então, resfriada até a temperatura ambiente e benzil 4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (4,29 g, 11,1 mmol) e Terc-Butóxido de Sódio (2,13 g, 22,1 mmol) foram adicionados à solução escura como sólidos. Finalmente, foi adicionado 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato (7,44 g, 22,1 mmol) foi adicionado (como o óleo) e a reação foi aquecida até 100°C por 1 hora. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O concentrado foi dissolvido com EtOAc e lavado com água e salmoura. Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O resíduo foi, então, carregado no CombiFlash e cromatografado usando 0% -> 50% Hexano:EtOAc como eluente. As frações que continham produto limpo foram combinadas e concentradas in vacuo para proporcionar 4-(2-cloro-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (2,6 g, 4,53 mmol, 40,9% de rendimento). ES+APCI MS m/z 574,2 [M+H]+.
Dioxano, Base de Hunig Cs2CO3
[0644] Etapa D: benzil (S)-4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1- metilpirrolidin-2-il) metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Em um tubo de micro-ondas benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (300 mg, 0,523 mmol) foi dissolvido em Dioxano (6532 µl, 0,523 mmol) e tratado com carbonato de césio (511 mg, 1,57 mmol), base de
Hunig (913 µl, 5,23 mmol) e N-Metil-L-prolinol (421 mg, 3,66 mmol). O tubo foi, então, tapado e submetido a micro-ondas a 170°C por 3 horas. A reação foi filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi concentrado in vacuo e o resíduo carregado em uma coluna de 12g RegiSep de ouro e cromatografado na CombiFlash (0%-15%, DCM:MeOH). Todas as frações contendo o produto limpo foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar benzil (S)-4-(7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metóxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (220 mg, 0,337 mmol, 64,5% de rendimento). ES+APCI MS m/z 653,3 [M+H]+.
[0645] Etapa E: (S)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina: Uma solução de benzil (S)-4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (220 mg, 0,337 mmol) em EtOH (3370 µl, 0,337 mmol) e THF (3370 µl, 0,337 mmol) foi purgado com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado Paládio sobre carbono (179 mg, 0,0843 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por mais 5 min. A solução foi, então, agitada sob H2, introduzida via vácuo, seguida de pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente durante a noite. LC/MS mostrou conclusão da reação. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo e (S)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-4-(piperazin-1-il)-
5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (91 mg, 0,175 mmol, 52,1% de rendimento) foi levado adiante como o bruto. ES+APCI MS m/z 519,3 [M+H]+.
DCM, Base de Hunig
[0646] Etapa F: (S)-1-(4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8 -tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1- ona: A uma suspensão de (S)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidina (92 mg, 0,18 mmol) em diclorometano (1774 µl, 0,18 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de acriloíla (1774 µl, 0,18 mmol) seguido por base de Hunig (62 µl, 0,35 mmol). A reação foi, então, agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi, então, concentrada e carregada em uma coluna 4g RegiSep de ouro cromatografada no CombiFlash (0%-15%, DCM:MeOH). Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas in vacuo para dar (S)-1-(4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1- metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 1-il)prop-2-en-1-ona (74 mg, 0,13 mmol, 73% de rendimento). ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
[0647] Etapa G: (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-
ona: (S)-1-(4-(7-(3-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1- ona (74 mg, 0,13 mmol) foi dissolvida em metanol (4307 µl, 0,13 mmol) e tratada com cloreto de hidrogênio (1077 µl, 6,5 mmol) (aq). A reação foi agitada a 55°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada em vácuo e foi ressuspensa em 1,5 mL de MeOH. A suspensão foi carregada no Gilson (HPLC preparativa), que foi eluída com 5-->95% ACN/0,1% de TFA em água/0,1% de TFA. Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e liofilizadas durante a noite para dar (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona (26 mg, 0,049 mmol, 38% de rendimento). ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 128 1-(4-(2-(3-(dimetilamino)azetidin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0648] Etapa A: benzil 4-(2-(3-(dimetilamino)azetidin-1-il)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-
il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 1,7 em dioxano foi adicionado cloridrato de N,N-dimetilazetidin-3-amina (0,24 g, 1,7 mmol) e N-etil-N-isopropilpropan-2- amina (0,45 g, 3,5 mmol) e a reação foi aquecida até 80°C por 72 horas. A reação foi concentrada in vacuo e o resíduo cromatografado usando 0-->20% de MeOH/DCM como eluente para dar benzil 4-(2-(3-(dimetilamino) azetidin-1-il)-7- (3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,25 g, 105%). ES+APCI MS m/z 638,3 [M+H]+.
[0649] 1-(4-(2-(3-(dimetilamino)azetidin-1-il)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona foi feita de acordo com o Exemplo 127 usando benzil 4-(2-(3-(dimetilamino)azetidin-1-il)-7- (3)-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato no lugar de (S)-4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2- ((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato na etapa E. ES+APCI MS m/z 514,2 [M+H]+.
EXEMPLO 129 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0650] Etapa A: terc-butil (2R)-2-[(1R)-1-hidroxietil]pirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura de BH3-Me2S (10 M, 549 ul) e (3aS)-1-metil-3,3-difenil-3a,4,5,6-tetra- hidropirrolo[1,2-c][1,3,2]oxazaborol (1,00 M, 844 uL) em THF (10 mL) foi agitado a 15°C por 1 hora. À mistura foi adicionada uma solução de terc-butil (2R)-2- acetilpirrolidina-1-carboxilato (0,90 g, 4,22 mmol) em THF (10 mL) e a mistura agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi extinta por adição de metanol (2,00 mL) e a reação concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/éter acetato = 50/1 - 5/1) para dar terc-butil (2R)- 2-[(1R)-1-hidroxietil]pirrolidina-1-carboxilato (0,60 g, 2,79 mmol, 66,0% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ = 5,18 (br s, 1H), 3,73 (dt, J = 4,8, 8,0 Hz, 1H), 3,70 - 3,43 (m, 2H), 3,28 (td, J = 6,64, 10,8 Hz, 1H), 1,96 (qd, J = 7,2, 12,8 Hz, 1H), 1,89 - 1,68 (m, 2H), 1,62 (br s, J = 6,4 Hz, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,15 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
[0651] Etapa B: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-terc- butoxicarbonilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,70 g, 1,08 mmol) e terc-butil (2R)-2-[(1R)-1-hidroxietil]pirrolidina-1-carboxilato (349 mg, 1,62 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado t-BuONa (312 mg, 3,24 mmol) e a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura foi diluída com água (10 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3 x 10 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/éter acetato = 3/1) para dar 4-[7-
(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,35 g, 412 umol, 38,1% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 799,4 [M+H]+.
[0652] Etapa C: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(22R)-pirrolidin-2- il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-terc - butoxicarbonilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (0,30 g, 375 umol) e TFA (642 mg, 5,63 mmol, 417 uL) em diclorometano (0,42 mL) foram agitados a 10°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)- pirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (305 mg) LCMS [M+1]: ES+APCI MS m/z 699,2 [M+H]+.
[0653] Etapa D: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin- 2-il]etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-pirrolidin-2-il]etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,30 g, bruto), formaldeído (210 mg, 1,85 mmol, 192 uL, 37% de água) e AcOH (22,16 mg, 369 umol, 21,1 uL) em metanol (3,00 mL) foi agitada a 15°C por 0,5 hora. À mistura foi adicionado NaBH3CN (58,0 mg, 923 umol) e a mistura agitada a 15°C por 48 horas. A mistura foi extinta por adição de H2O (5 mL) a 0°C e a camada aquosa foi extraída com éter acetato (3 × 10 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (15,0 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,10%)/acetonitrila] para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (0,10 g, 126 umol) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 713,4 [M+H]+.
[0654] Etapa E: 4-[2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol: Amônia foi borbulhada em metanol (3 mL) a -78°C por 30 minutos. Benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)- 1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (0,09 g, 126 umol) e Pd/C a 10% seco (0,10 g) foram adicionados em seguida e a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora sob H2 (15 psi). A reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 4-[2- [(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (0,04 g, bruto) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 489,2 [M+H]+.
[0655] Etapa F: 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (0,04 g) e Et3N (124 mg, 1,23 mmol, 171 uL) em DCM (2,00 mL) a -40°C foi adicionado prop-2-enoil prop- 2-enoato (7,23 mg, 57,3 umol) e a reação foi agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura foi extinta por adição de metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25* 10um; fase móvel: [água (ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 10%-37% em 10 minutos) para dar 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (9,13 mg, 15,5 umol) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 543,4 [M+H] +.
EXEMPLO 130 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((S)-1-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
[0656] 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((S)-1-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)etoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona foi preparado seguindo o Exemplo 129 usando (3aR)-1-metil-3,3-difenil- 3a, 4,5,6- tetra-hidro-pirrolo [1,2-c] [1,3,2] oxazaborol no lugar (3aS)-1-metil-3,3-difenil-3a, 4,5,6-tetra-hidropirrolo[1,2-c][1,3,2]oxazaborol na Etapa a, embora também usando terc-butil (2 S)-2-acetilpirrolidina-1-carboxilato no lugar de terc-butil (2R)- 2-acetilpirrolidina-1-carboxilato na Etapa A. ES+APCI MS m/z 543,4 [M+H]+.
EXEMPLO 131 1-[4-[2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0657] Etapa A: (2R)-1-[etil(metil)amino]propan-2-ol: (2R)-2-metiloxirano (540 mg, 9,31 mmol, 651 uL) foi adicionado a N-metiletanamina (500 mg , 8,46 mmol, 725 uL) em MeOH (10 mL). A solução resultante foi agitada a 80°C por 3 horas em um tubo selado. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar (2R)-[etil (metil)amino]propan-2-ol (260 mg, bruto) como um óleo amarelo claro que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[0658] Etapa B: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1- metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de (2R)-1-[etil(metil)amino]propan-2-ol (217 mg, 1,85 mmol) em tolueno (20 mL) foi adicionado benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 617 umol), Pd2(dba)3 (56,6 mg, 61,8 umol), BINAP (76,9 mg, 124 umol) e NaOtBu (178 mg, 1,85 mmol) e a mistura desgaseificada com N2 por 15 minutos e, em seguida, aquecida até 90°C por 16 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1- naftil)-2-[(1R)-2-[etil(metil)amino] -1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (110 mg, 153 umol, 24,8% de rendimento, 97,5% de pureza). ES+APCI MS m/z 701,4 [M+H]+.
[0659] Etapa C: 4-[2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol: A uma solução de benzil 4-[7- (3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 143 umol) em MeOH (3,00 mL) foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 143 uL), seguido por Pd(OH)2/C (50 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 4 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para dar 4-[2- [(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (76,0 mg, 125 umol, 87,5% de rendimento, 90,3% de pureza, 2 HCl) que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ES+APCI MS m/z 477,2 [M+H]+.
[0660] Etapa D: 1-[4-[2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (70 mg, 127 umol, 2 HCl) e DIEA (98,8 mg, 764 umol, 133 uL) em DCM (1,50 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (12,9 mg, 102 umol) gota a gota a -50°C. A mistura foi agitada a - 40 a -20°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi extinguida por adição de MeOH (17,0 mg) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (1 mL) e extraído com DCM (3 × 6 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 48%-78%, 10min ) para dar 1-[4-[2-[(1R)-2- [etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (9,23 mg, 17,2 umol, 13,5% de rendimento, 98,7% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 531,3 [M+H]+.
EXEMPLO 132 1-[4-[2-[(1-ciclo-hexilpirrolidin-3-il)metoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0661] Etapa A: 1-ciclo-hexilpirrolidina-3-carboxilato: A uma solução de metil pirrolidina-3-carboxilato (1,00 g, 6,04 mmol, HCl) e DIEA (780 mg, 6,04 mmol, 1,05 mL) foi adicionada ciclo-hexanona (652 mg, 6,64 mmol, 686 µL) e HOAc (725 mg, 12,1 mmol, 691 µL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 0,5 h. À mistura de reação foi adicionado NaBH(OAc)3 (3,84 g, 18,12 mmol) em porções a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0 a 15°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de água (5 mL) e os orgânicos concentrados sob vácuo. A camada aquosa foi extraída com DCM (10 mL x 2) e o pH ajustado com NaHCO3 sat (10 mL) e Na2CO3 (2 mL) até pH>8. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi triturado com MTBE/Éter de Petróleo (1:3, 20 mL) e o filtrado concentrado sob vácuo para dar metil 1-ciclo-hexilpirrolidina-3- carboxilato (1,00 g, 4,73 mmol, 78,4% de rendimento) como óleo marrom. ES+APCI MS m/z 212,2 [M+H]+.
[0662] Etapa B: (1-ciclo-hexilpirrolidin-3-il)metanol: A uma solução de metil 1- ciclo-hexilpirrolidina-3-carboxilato (1,00 g, 4,73 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado LiAlH4 (413 mg, 10,9 mmol) a -10°C. A mistura de reação foi agitada a -10°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de Na 2SO4 saturado (2 mL) e a mistura filtrada e a torta de filtro lavada com THF (3 x 50 mL). As orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo para dar: (1-ciclo- hexilpirrolidin-3-il)metanol (800 mg, 4,36 mmol, 92,3% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 3,71 (dd, J = 4,1, 10,0 Hz, 1H), 3,53 (dd, J=4,4, 10,0 Hz, 1H), 2,90 (dt, J=4,4, 8,8 Hz, 1H), 2,74 (dd, J = 3,2, 8,8 Hz, 1H), 2,53 (dd, J = 6,8, 8,8 Hz, 1H), 2,36 - 2,24 (m, 2H), 2,04 - 1,93 (m, 2H), 1,90 (br s, 2H), 1,78 - 1,64 (m, 3H), 1,61 - 1,52 (m, 1H), 1,33 - 1,12 (m, 5H)
[0663] 1-[4-[2-[(1-ciclo-hexilpirrolidin-3-il)metoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 131 usando (1-ciclo-hexilpirrolidin-3-il)metanol no lugar de (2R)-1-[etil(metil)amino ]propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 597,4 [M+H]+.
EXEMPLO 133 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropilamino)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona
[0664] Etapa A: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropilamino)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma solução de 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 617 umol) e 3-morfolinopropan-1-amina (534 mg, 3,70 mmol, 540 uL) em DMSO (4,00 mL) foi aquecido até 100°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (4 mL) e extraída com EtOAc (3 × 20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em Al2O3, eluindo com Acetato de Etila/Éter de Petróleo (20→100%) para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-(3- morfolinopropilamino)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (245 mg, 320 umol, 51,8% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 728,6 [M+H]+.
[0665] 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropilamino)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparado seguindo o Exemplo 131 usando 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropilamino)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato no lugar de 4- [7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-2-[(metil) amino]-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato na Etapa C. ES+APCI MS m/z 558,6 [M+H]+.
EXEMPLO 134 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(piperidin-3-ilmetoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
[0666] Etapa A: terc-butil (3R)-3-(hidroximetil)piperidina-1-carboxilato: TEA (1,76 g, 17,4 mmol, 2,42 mL) foi adicionado a uma solução de [(3R)-3-piperidil]metanol (1,0 g, 8,68 mmol) em THF (25,0 mL), seguido pela adição de uma solução de Boc2O (1,89 g, 8,68 mmol, 1,99 mL) em THF (5 mL) a 15°C.
A mistura foi agitada a 15°C por 12 horas.
O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo dissolvido em acetato de etila (50 ml) e H2O (30 mL). A solução foi acidificada com HCl (6 M) até pH~6 e as camadas separadas.
Os orgânicos foram lavados com salmoura (3 × 50 mL) e os orgânicos combinados concentrados até secura para dar terc-butil (3R)-3-(hidroximetil)piperidina-1-carboxilato (1,68 g, 7,80 mmol, 89,9% de rendimento, 100% de pureza) como cristais incolores. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,73 (br s, 2H), 3,51 (br d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,05 (br s, 2H), 1,83 - 1,71 (m, 2H), 1,62 (br s, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,44 - 1,37 (m, 1H), 1,35 - 1,22 (m, 1H).
[0667] Etapa B: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-terc-butoxicarbonil-3- piperidil]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (3R)-3-(hidroximetil)piperidina-1-carboxilato (332 mg, 1,54 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado t-BuONa (223 mg, 2,32 mmol). Solução de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 772 umol) em THF (5 mL) foi a seguir adicionada e a mistura agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia de coluna eluindo com Éter de petróleo/Acetato de Etila (10/1 a 3/1) para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-terc-butoxicarbonil-3- piperidil]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (510 mg, 628 umol, 81,4% de rendimento, 98,4% de pureza) como um sólido branco. ES+APCI MS m/z 799,4 [M+H]+.
[0668] Etapa C: terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]piperidina-1-carboxilato: Uma solução de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-terc-butoxicarbonil-3- piperidil]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (250 mg, 313 umol) em MeOH (5 mL) foi purificado com NH 3 (10%, p/p) e, em seguida, foi adicionado 10% de Pd/C (50 mg). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e a mistura agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura para dar terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]piperidina-1-carboxilato (126 mg, 211 umol, 67,4% de rendimento, 96,2% de pureza) como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 575,5 [M+H]+.
[0669] Etapa D: terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoil piperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]piperidina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin- 1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]piperidina-1-carboxilato (126 mg, 219 umol) e TEA (33,3 mg, 329 umol, 45,8 uL) em DCM (5,0 mL) foi adicionado prop-2-enoilprop-2-enoato (24,9 mg, 197 umol) gota a gota a -40°C e a reação agitada por 30 minutos a -40°C. A mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (0,5 mL) e concentrada até secura. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (50 mL) e H2O (20 mL). A solução resultante foi acidificada com HCl (1 M) até pH~6 e as camadas separadas. Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para dar terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoil piperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]piperidina-1-carboxilato (120 mg, 172 umol, 78,5% de rendimento, 90,2% de pureza) como um óleo amarelo, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 629,6 [M+H]+.
[0670] Etapa E: 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-3-piperidil]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]piperidina-1-carboxilato (120 mg, 191 umol) em DCM (3,0 mL) foi adicionado TFA (326 mg, 2,86 mmol, 212 uL) a 0°C. A mistura foi agitada a 15°C por 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi basificada com NH3 (30% em água, três gotas) e concentrada até secura. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 5% - 35%, 10 min.) para dar 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-3-piperidil]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (24,5 mg, 38,9 umol, 20,4% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 529,4 [M+H]+.
EXEMPLO 135 1-[4-[2-[3-(4-acetilpiperazin-1-il)propoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0671] Etapa A: 1-[4-(3-hidroxipropil)piperazin-1-il]etanona: A uma solução de 1- piperazin-1-iletanona (2,00 g, 15,6 mmol) e K2CO3 (4,31 g, 31,2 mmol) em CH3CN (50,0 mL) foi adicionado 3-bromopropan-1-ol (3,25 g, 23,4 mmol). A mistura foi agitada a 80°C por 5 horas. O sólido foi filtrado e o filtrado foi evaporado para dar 1-[4-(3-hidroxipropil)piperazin-1-il]etanona (2,00 g, 10,7 mmol, 68,8% de rendimento) como um óleo incolor.
[0672] 1-[4-[2-[3-(4-acetilpiperazin-1-il) propoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 131 usando 1-[4-(3-hidroxipropil)piperazin-1-il] etanona no lugar de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil- etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato na Etapa C. ES+APCI MS m/z 600,3 [M+H]+.
EXEMPLO 136 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[2-(3-metoxipirrolidin-1-il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0673] Etapa A: 2-(3-metoxipirrolidin-1-il)etanol: A uma solução de 3- metoxipirrolidina (450 mg, 3,27 mmol, HCl) e 2-bromoetanol (408 mg, 3,27 mmol) em CH3CN (10 mL) foi adicionado K2CO3 (1,36 g, 9,81 mmol). A mistura foi agitada a 80°C por 3 horas. O sólido foi filtrado e o filtrado foi evaporado para dar 2-(3-metoxipirrolidin-1-il)etanol (450 mg, 3,10 mmol, 94,8% de rendimento) como um óleo incolor.
[0674] Etapa B: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(3-metoxipirrolidin-1- il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 771 umol), 2-(3- metoxipirrolidin-1-il)etanol (224 mg, 1,54 mmol) e t-BuONa (222 mg, 2,32 mmol) em tolueno (10 mL) foram agitados a 20°C por 1 hora sob atmosfera de N 2. A mistura foi resfriada até 0°C e foi adicionado HCl (2M) até pH~7. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 0→10% de MeOH/DCM como eluente para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(3-metoxipirrolidin-1-ilo))etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (110 mg, 147,9 umol, 19,1% de rendimento) ES+APCI MS m/z 729,2 [M+H]+.
[0675] 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[2-(3-metoxipirrolidin-1-il)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 131 usando benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(3- metoxipirrolidin-1-il)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato no lugar de benzil 4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-2- [etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato na Etapa C. ES+APCI MS m/z 559,3 [M+H]+.
EXEMPLO 137 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[3-(3-metoxipirrolidin-1-il)propoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0676] Etapa A: (3-metoxipirrolidin-1-il)propan-1-ol: A uma solução de 3- metoxipirrolidina (500 mg, 3,63 mmol, HCl) e 3-bromopropan-1-ol (505 mg, 3,63 mmol) em CH3CN (10 mL) foi adicionado K2CO3 (1,51 g, 10,9 mmol). A mistura foi agitada a 20°C por 5 horas. O sólido foi filtrado e o filtrado foi evaporado para dar 3-(3-metoxipirrolidin-1-il)propan-1-ol (540 mg, 3,39 mmol, 93,3% de rendimento).
[0677] 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[3-(3-metoxipirrolidin-1-il)propoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 131 usando (3-metoxipirrolidin-1-il) propan-1-ol no lugar de (2R)-1-[etil(metil)amino]propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 138 1-[4-[2-[2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0678] Etapa A: 2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etanol: A uma solução de 3,3- difluoroazetidina （500 mg, 3,86 mmol , HCl) e 2-bromoetanol (482 mg, 3,86 mmol, 274 uL) em CH3CN (10 mL) foi adicionado K2CO3 (1,60 g, 11,5 mmol) e a reação agitada a 80°C por 16 horas. A reação foi filtrada e o filtrado evaporado para dar 2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etanol (300 mg, 2,19 mmol, 56,7% de rendimento).
[0679] 1-[4-[2-[2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 131, usando 2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etanol) no lugar de (2R)-1-[etil(metil)amino]propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 551,4 [M+H]+.
EXEMPLO 139 1-[4-[2-[2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0680] Etapa A: Metil 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)acetato: A uma suspensão de metil 2-bromoacetato (1,17 g, 7,67 mmol, 723 uL) em DCM (10 mL) resfriada até 0°C foi adicionado TEA (1,76 g, 17,4 mmol, 2,42 mL) e 3,3-difluoropirrolidina (1,00 g, 6,97 mmol, HCl) e a mistura de reação agitada a 20°C por 16 horas.A reação foi filtrada e o filtrado foi evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna com 0,5% --> 20% de MeOH/DCM como eluente para dar metil 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)acetato (580 mg, 3,24 mmol, 46,4% de rendimento). 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,73 (s, 3H), 3,38 (s, 2H), 3,11 (t, J = 13,6 Hz, 2H), 2,92 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,36-2,26 (m, 2H).
[0681] Etapa B: 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)etanol: A uma solução de LiAlH4 (184 mg, 4,86 mmol) em THF (5,0 mL) foi adicionada uma solução de metil 2-(3,3- difluoropirrolidin-1-il)acetato (580 mg, 3,24 mmol) em THF (5,0 mL) gota a gota a 0°C. A mistura foi aquecida até 20°C e agitada por 3 horas. A mistura foi extinta por adição de solução aquosa saturada de sulfato de sódio (1,50 mL). A reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-(3,3-difluoropirrolidin- 1-il)etanol (330 mg, 2,18 mmol, 67,4% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,64 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 2,97 (t, J = 13,2 Hz, 2H), 2,82 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,68 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 2,49 (br, s, 1H), 2,34-2,24 (m, 2H).
[0682] 1-[4-[2-[2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 131 usando 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)etanol no lugar de (2R)-1-[etil(metil)amino]propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 565,3 [M+H]+.
EXEMPLO 140 2-[3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidin-1-il]-N,N-dimetil-acetamida
[0683] Etapa A: metil 1-[2-(dimetilamino)-2-oxo-etil]pirrolidina-3-carboxilato: Uma solução de metil pirrolidina-3-carboxilato (1,00 g, 6,04 mmol, HCl) e NaHCO3 (1,01 g, 12,1 mmol, 470 uL) em ACN (200,0 mL) foi agitada a 10°C por 5 minutos. Uma solução de 2-bromo-N,N-dimetil-acetamida (1,00 g, 6,04 mmol) em ACN (5,00 mL) foi a seguir adicionada a 10°C e a reação agitada a 10°C por 6 horas, seguida por e agitação a 50°C por 2 horas. A mistura foi filtrada e os sólidos lavados com DCM (3 × 15 ml). O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna usando 0→10% de MeOH/DCM como eluente para dar metil 1-[2-(dimetilamino)-2-oxo-etil]pirrolidina-3-carboxilato (480 mg 2,02 mmol, 33,4% de rendimento).
[0684] Etapa B: 2-[3-(hidroximetil) pirrolidin-1-il]-N,N-dimetil-acetamida: A uma solução de metil 1-[2-(dimetilamino)-2-oxo-etil]pirrolidina-3-carboxilato (500 mg, 2,33 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado LiAlH4 (203 mg, 5,36 mmol) a -60°C e a mistura de reação agitada a -60°C por 10 minutos. A mistura de reacção foi temperada pela adição de Na2SO4 saturado (0,4 mL) e e a pasta foi filtrada. A torta de filtro foi lavada com THF (3 x 50 mL) e o filtrado concentrado sob vácuo para dar 2-[3-(hidroximetil) pirrolidin-1-il]-N,N-dimetil-acetamida (400 mg, 2,15 mmol, 92,2% de rendimento) como um óleo marrom. ES+APCI MS m/z 187,1 [M+H]+.
[0685] Etapa C: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[1-[2-(dimetilamino)-2-oxo- etil]pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-
carboxilato: Uma mistura de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 772 umol), 2-[3-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]-N,N-dimetil-acetamida (216 mg, 1,16 mmol) e NaOBu-t (148 mg, 1,54 mmol) em tolueno (10 mL) foi agitada a 15°C por 15 minutos. A mistura de reação foi purificada diretamente por cromatografia de sílica gel usando 20→100% de EtOAc/Éter de petróleo para dar benzil 4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[[1-[2-(dimetilamino)-2-oxo-etil]pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (310 mg, 395 umol, 51,1% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 770,4 [M+H]+.
[0686] 2-[3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidin-1-il]-N,N-dimetil-acetamida foi preparada seguindo o Exemplo 131 usando 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[1-[2- (dimetilamino)-2-oxo-etil]pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato no lugar de 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2- [(1R)-2-[etil(metil)amino]-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato na etapa C. ES+APCI MS m/z 600,3 [M+H]+.
EXEMPLO 141 1-[4-[2-[[1-(2-hidroxietil)pirrolidin-3-il]metoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0687] Etapa A: metil pirrolidina-3-carboxilato: A uma solução de 1-(terc-butil) 3- metilpirrolidina-1,3-dicarboxilato (10,0 g, 43,6 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 109 mL) a 0°C e agitado a 0°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar metil pirrolidina-3-carboxilato (7,00 g, HCl bruto) como óleo marrom. 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 3,77 (s, 3H), 3,56 - 3,53 (m, 2H), 3,41 - 3,37 (m, 3H), 2,40 - 2,24 (m, 2H).
[0688] Etapa B: metil 1-(2-benziloxietil)pirrolidina-3-carboxilato: uma solução de metil pirrolidina-3-carboxilato (3,0 g, 18,1 mmol, HCl), Cs2CO3 (17,7 g, 54,3 mmol) e KI (301 mg, 1,81 mmol) em MeCN (60 mL) foram agitados a 15°C por 5 min. Em seguida, uma solução de 2-bromoetoximetilbenzeno (4,67 g, 21,7 mmol, 3,43 mL) em ACN (15 mL) foi adicionada à mistura a 15°C e agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi em seguida aquecida a 50°C e agitada a 50°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro lavada com DCM (3 x 30 mL) e o filtrado concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex luna C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 10ACN%-40ACN%, 30min. 40% min.) para dar metil 1-(2- benziloxietil)pirrolidina-3-carboxilato (1,48 g, 5,06 mmol, 27,9% de rendimento, 90,0% de pureza) como óleo marrom. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,36 - 7,28 (m, 5H), 4,56 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,61 - 3,58 (t, J=6,0 Hz, 2H), 3,02 – 3,00 (m, 2H), 2,78 - 2,67 (m, 4H), 2,58 - 2,49 (m, 1H), 2,11 - 2,08 (m, 2H)
[0689] Etapa C: (1-(2-(benziloxi)etil)pirrolidin-3-il)metanol: à solução de metil 1- (2-benziloxietil)pirrolidina-3-carboxilato (1,38 g, 5,24 mmol) em THF (27 mL) foi adicionado LiAlH4 (457 mg, 12 mmol) a -10°C e agitado à temperatura de -10°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta por Na2SO4 saturado (1 mL) e filtrada, a torta de filtro foi lavada com THF (5 × 30 mL), o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar (1-(2-(benziloxi)eti)pirrolidin-3-il)metanol (1,30 g, 3,31 mmol, 63,3% de rendimento, 60,0% de pureza) como óleo marrom. ES+APCI MS m/z 236,1 [M+H]+.
[0690] 1-[4-[2-[[1-(2-hidroxietil)pirrolidin-3-il]metoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 136 usando (1-(2-(benziloxi) etil) pirrolidin-3-il)metanol no lugar de 2-(3-metoxipirrolidin-1-il) etanol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 559,3 [M+H]+.
EXEMPLO 142 1-[4-[2-(2-hidroxietoxi)-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona
[0691] 1-[4-[2-(2-hidroxietoxi)-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 136 usando 2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietanol no lugar de 2-(3- metoxipirrolidin-1-il) etanol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 476,2 [m+H]+.
EXEMPLO 143
1-[4-[2-(2,3-di-hidroxipropoxi)-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0692] 1-[4-[2-(2,3-di-hidroxipropoxi)-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 136 usando (2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metanol no lugar de 2-(3- metoxipirrolidin-1)-il)etanol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 506,3 [M+H]+.
EXEMPLO 144 (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0693] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato: A uma pasta de NaH (2,38 g, 59,6 mmol, 60% de pureza) em THF (50 mL) foi adicionada uma solução de terc-butil (2S)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (10 g, 49,69 mmol) em THF (50 mL) a 0°C e a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora.
Bromometilbenzeno (12,8 g, 74,5 mmol, 8,85 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C e a mistura foi agitada a 10°C por 16 horas. A mistura foi extinta por adição de solução aquosa saturada de cloreto de amônia (20 mL) e depois diluída com acetato de etila (200 mL) e água (100 mL). A camada orgânica separada foi lavada com água (100 mL) e salmoura (100 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 5/1) para dar terc-butil (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato (8,2), 8,2 g, 28,06 mmol, 56,5% de rendimento, 99,7% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 192,1 [M+H-Boc]+.
[0694] Etapa B: (2S)-2-(benziloximetil) pirrolidina: A uma solução de terc-butil (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato (8,2 g, 28,14 mmol) em CH2Cl2 (28 mL) foi adicionado TFA (43,1 g, 378 mmol, 28,0 mL) gota a gota a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com diclorometano (100 mL) e depois lavado com hidróxido de sódio aquoso 1M (10 mL) até a camada aquosa atingir pH ~ 10. A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (2 × 20 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo para dar (2S)- 2-(benziloximetil)pirrolidina (4 g, 20,9 mmol, 74,3% de rendimento) APCI MS m/z 192,2 [M+H]+.
[0695] Etapa C: (2S)-2-(benziloximetil)-1-(2-metoxietil) pirrolidina: Uma mistura de 1-bromo-2-metoxi-etano (0,9 g, 6,48 mmol, 608 uL), (2S)-2- (benziloximetil)pirrolidina (1,24 g, 6,48 mmol) e K2CO3 (2,68 g, 19,4 mmol) em CH3CN (20 mL) foi agitada a 15°C por 1 hora e, em seguida, a 78°C por 12 horas.
A mistura foi diluída com acetato de etila (50 mL) e água (50 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 50 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (acetato de etila/diclorometano/metanol 1/1/0 a 10/10/2) para dar (2S)-2-(benziloximetil)-1-(2-metoxietil)pirrolidina (900 mg, 3,61 mmol, 55,7% de rendimento) como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 250,2 [M+H]+.
[0696] Etapa D: (S)-(1-(2-metoxietil) pirrolidin-2-il)metanol: A uma solução de (2S)-2-(benziloximetil)-1-(2-metoxietil)pirrolidina (900 mg, 3,61 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado 10% Pd/C (721.88 pmol) e a pasta agitada sob H2 (50 psi) a 10°C por 16 horas. A reação foi filtrada e o filtrado concentrado sob vácuo para dar (S)-(1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metanol (450 mg, 2,83 mmol, 78,30% de rendimento).
[0697] Etapa E: Benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2- metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de [(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2- il]metanol (245 mg 1,54 mmol), benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 772 umol) e t-BuONa (223 mg, 2,32 mmol) em THF (5 mL) foi agitada a 20°C por 0,5 hora sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi derramada em H2O (30 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3x30 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (30 mL), secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 300/1 a 10:1) para dar Benzil 4-[7- (3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (260 mg, 349 umol, 45,3% de rendimento). ES+APCI MS m/z 743,4 [M+H]+.
[0698] Etapa F: terc-Butil 4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2- metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato : A uma solução de 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (240 mg, 323 umol) e (Boc)2O (141 mg, 646 umol, 148 uL) em MeOH (150 mL) foi adicionado 10% Pd/C (100 mg) sob atmosfera de N2. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H23 vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 PSI) a 40°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para obter terc-Butil 4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2- metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (215 mg, bruto). ES+APCI MS m/z 619,1 [M+H]+.
[0699] Etapa G: 4-[2-[[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5 H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol: A uma solução de terc-
butil 4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (215 mg, 347 umol) em DCM (500 uL) foi adicionado TFA (594 mg, 5,21 mmol, 385 uL) e a mistura agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-[2- [[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (219 mg, 346 umol). ES+APCI MS m/z 519,4 [M+H]+.
[0700] Etapa H: 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona: A uma mistura de 4-[2-[[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (219 mg, 346 umol) e DIEA (447 mg, 3,46 mmol, 603 uL) em diclorometano (4,00 mL) resfriada até -40°C foi adicionada uma solução de prop-2-enoil-prop-2-enoato (34,9 mg, 276,92 umol) em diclorometano (1,00 mL) sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. A reação foi extinta por adição de NaHCO3 saturado (2,00 mL) e a mistura derramada em água gelada (20 mL) e extraída com diclorometano (20 mLx2). Os orgânico combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo.O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 32%-62%, 12 min.) para dar 1-[4- [7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (27 mg, 46,7 umol). ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
EXEMPLO 145 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0701] Etapa A: Benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-terc- butoxicarbonilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (2S)-2-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato (1,24 g, 6,17 mmol) e benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2 g, 3,09 mmol) em THF (50 mL) foi adicionado t-BuONa (890 mg, 9,26 mmol) e a reação agitada a 15°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi derramada em H2O (100 mL) e extraída com acetato de etila (3X100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 1:1) para dar Benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,62 g, 2,02 mmol, 65,5% de rendimento). ES+APCI MS m/z 785,6 [M+H]+.
[0702] Etapa B: (2S)-2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em MeOH (50 mL) a 15°C por 30 minutos. A esta solução foi adicionado benzil 4-[7- (3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-terc-butoxicarbonil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,6 g, 2,04 mmol) seguido por 10% de Pd/C seco (500 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 1 hora. A mistura foi, então, filtrada e o filtrado concentrado sob vácuo para dar terc-butil (2S)-2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (1,00 g, 1,78 mmol). ES+APCI MS m/z 561,5 [M+H]+.
[0703] Etapa C: terc-butil (2S)-2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-[4-(2,2,2- trifluoroacetil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(3- hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil] pirrolidina-1-carboxilato (800 mg , 1,43 mmol) 2 em DCM (5,00 mL) a 0°C foi adicionado TFAA (599 mg, 2,85 mmol) e DIEA (737 mg, 5,71 mmol) e a reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi derramada em H2O (50 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL×3). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (30 mL), secos sobre Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados sob vácuo para dar terc-butil (2S)-2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-[4- (2,2,2-trifluoroacetil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (1,5 g, bruto). ES+APCI MS m/z 657,5 [M+H]+.
[0704] Etapa D: 2,2,2-trifluoro-1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]etanona: A uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-[4-(2,2,2- trifluoroacetil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (300 mg, bruto) em DCM (500 µL) foi adicionado TFA (521 mg, 4,57 mmol, 338 uL) e a mistura agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2,2,2-trifluoro-1-[4-[7-(3- hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]etanona (306 mg). ES+APCI MS m/z 557,3 [M+H]+.
[0705] Etapa E: 2,2,2-trifluoro-1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 1-il]etanona: A uma solução de acetona (132 mg, 2,28 mmol, 167 uL) e 2,2,2- trifluoro-1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]etanona (306 mg, bruto, TFA) em MeOH (5,00 mL) foi adicionado AcOH (54,8 mg, 912 umol, 52,2 uL) e NaBH 3CN (115 mg, 1,83 mmol) e a mistura agitada a 15°C por 16 horas. A mistura de reação foi diluída com H2O (20 mL) e extraída com with acetato de etila (20 mL ×3). Os orgânicos combinados foram lavados comsalmoura (10mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para dar 2,2,2-trifluoro- 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-isoproilpyrrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]etanona (300 mg, bruto). ES+APCI MS m/z 599,5 [M+H]+.
[0706] Etapa F: 4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il] naftalen-2-ol: A uma solução de 2,2,2- trifluoro-1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]etanona (300 mg, bruto) em MeOH (10 mL) foi adicionado K2CO3 (346 mg, 2,51 mmol) e a mistura agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para dar 4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H - pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (250 mg). ES+APCI MS m/z 503,3 [M+H]+.
[0707] Etapa G: 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H -pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona: A uma mistura de 4-[2-[[((2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1- il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il] naftalen-2-ol (250 mg, bruto) e DIEA
(643 mg, 4,97 mmol, 866 uL) em DCM (5,00 mL) resfriada até - 40°C foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (50,2 mg, 398 umol) em DCM (1 mL) sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. A reação foi extinta por adição de NaHCO3 saturado (2,00 mL). A mistura foi derramada em água gelada (20 mL) e extraída com DCM (20 mL×2). Os orgânico combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo.O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 52%-78%, 12min.). 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 1-il]prop-2-en-1-ona (10 mg, 17,6 umol). ES+APCI MS m/z 557,3 [M+H]+.
EXEMPLO 146 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0708] Etapa A: benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-terc- butoxicarbonilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H -pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato
(0,50 g, 772 umol), terc-butil (3R)-3-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato (311 mg, 1,54 mmol) e t-BuONa (223 mg, 2,32 mmol) em THF (10 mL) foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura foi diluída com água (10 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3 × 20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com cloreto de sódio saturado (1 × 30 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1) para dar benzil 4-[7-(3-benziloxi-1- naftil)-2-[[(2R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,40 g, 499 umol). ES+APCI MS m/z 785,2 [M+H]+.
[0709] Etapa B: terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil] pirrolidina-1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em metanol (10 mL) a -78°C por 30 minutos. Benzil 4-[7-(3-benziloxi- 1-naftil)-2-[[(3R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,25 g, 319 umol) e 10% de Pd/C (0,10 g) foram adicionados à mistura e agitados a 10°C por 1 hora sob H 2 (15 psi). A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar terc-butil (3R)- 3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H -pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (0,17 g, 303 umol). ES+APCI MS m/z 561,3 [M+H]+.
[0710] Etapa C: terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2- enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oximetil]pirrolidina- 1-carboxilato: A uma solução de terc- butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1- carboxilato (0,17 g, 303 umol) e Et3N (153 mg, 1,52 mmol, 211 uL) em diclorometano (4,00 mL) resfriada até -40°C foi adicionado prop-2-enoil prop-2- enoato (26,8 mg, 212 umol) e a mistura agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura foi extinta por adição de metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = para dar terc-butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8- dihidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (0,12 g, 189 umol). ES+APCI MS m/z 615,5 [M+H]+.
[0711] Etapa D: 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: Uma mistura de terc- butil (3R)-3-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (0,10 g, 163 umol) e TFA (278 mg, 2,44 mmol, 181 uL) em diclorometano (0,20 mL) foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura foi extinta por adição de NH3•H2O e o pH ajustado até o pH = 7. A mistura foi purificada por HPLC-prep (coluna: Venusil XBP C8 150*25*10um; fase móvel: [água (ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 15%-45%, 10 min.) para dar 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (22,8 mg, 42,9 umol). ES+APCI MS m/z 515,4 [M+H]+.
EXEMPLO 147 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[0712] Etapa A: (Z) e (E)-4-bromobut-2-enoenitrila: A uma solução de but-3- enoenitrila (98 g, 1,46 mol, 118 mL) em terc-butanol (150 mL) e éter de petróleo (575 ml) foi adicionada uma solução de Br2 (233 g, 1,46 mol, 75,3 mL) em terc- butanol (150 mL) a 15°C e a reação foi agitada por 30 minutos. À reação foi em seguida adicionada uma solução de etanol de etóxido de sódio (100 g, 0,6 mol, 850 mL). A mistura de reação foi agitada por 2 horas a 15°C. A reação foi a seguir filtrada e o filtrado concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 2→20% de acetato de etila/éter de petróleo como eluente para dar uma mistura de (Z) e (E)-4-bromobut-2-enoenitrila (141 g, E/Z = 2,5/1 , bruto) como um óleo ligeiramente amarelo. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d,) (E), δ = 6,79 (td, J = 7,2, 16,0 Hz, 1H), 5,63 (d, J = 16,0 Hz, 1H),
4,00 (dd, J = 1,2, 6,8 Hz, 2H); (Z), δ = 6,66 (td, J = 8,0, 10,8 Hz, 1H), 5,44 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 0,8, 8,0 Hz, 2H).
[0713] Etapa B: 2-(1,4-dibenzilpiperazin-2-il)acetonitrila: A uma mistura de N,N’- dibenziletano-1,2-diamina (115 g, 480 mmol, 113 mL) e TEA (97,0 g, 959 mmol, 133 mL) em tolueno (1 L) foi adicionado 4-bromobuteno 2-enonitrila (70 g, bruto) gota a gota a 0°C e a reação foi agitada a 15°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 5→50% de EtOAc/Éter de Petróleo como eluente para dar 2-(1,4-dibenzilpiperazin-2-il)acetonitrila (82 g, 240 mmol, duas etapas, 37% de rendimento, 89,3% de pureza) como um semissólido ligeiramente amarelo. ES+APCI MS m/z 306,3 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,40 - 7,23 (m, 10H), 3,85 - 3,76 (m, 1H), 3,54 - 3,44 (m, 3H), 3,07 - 2,96 (m, 1H), 2,94 - 2,84 (m, 1H), 2,68 - 2,35 (m, 7H).
[0714] Etapa C: 2-piperazin-2-ilacetonitrila: A uma solução de 2-(1,4- dibenzilpiperazin-2-il)acetonitrila (164 g, 536 mmol) em DCE (1.500 mL) foi adicionado cloridrato de 1-cloroetil (306 g, 2,14 mol) gota a gota a 0°C. Após adição, a mistura de reação foi aquecida a 85°C por aproximadamente 48 horas. O dicloroetano foi evaporado e o resíduo foi absorvido em MeOH (1.500 mL) e aquecido até 70°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e os sólidos triturados com MTBE (3X3 L) e os sólidos secos sob pressão reduzida para dar 2-piperazin-2-ilacetonitrila. O produto bruto foi purificado por recristalização com Etanol e água (8:1, v:v) para dar 2-piperazin-
2-ilacetonitrila como um sólido esbranquiçado (53 g, 428 mmol, 40,0% de rendimento, 96,4% de pureza, 2 HCl). ES+APCI MS m/z 126,2 [M+H] +. 1H NMR (400MHz, D2O) δ = 4,01 - 3,96 (m, 1H), 3,81 - 3,67 (m, 3H), 3,46 - 3,27 (m, 3H), 3,09 (d, J = 6,0 HZ, 2H).
[0715] Etapa D: 2-[4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il]acetonitrila: A uma mistura de 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina (1,2 g, 4,08 mmol) e 2-piperazin-2-ilacetonitrila (808 mg, 4,08 mmol, 2HCl) em dioxano (24 mL) foi adicionado DIEA (2,64 g, 20,4 mmol, 3,55 mL). A mistura de reação foi agitada a 50°C por 3 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e a camada aquosa extraída com EtOAc (3 × 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar 2-[4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il]acetonitrila (1,56 g, 4,07 mmol, 100% de rendimento) como um sólido marrom.
[0716] Etapa E: terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A 2-[4-(7-benzil-2-cloro- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il]acetonitrila (1,56 g, 4,07 mmol) foi adicionado (Boc)2O (9,50 g, 43,5 mmol, 10 mL) e a mistura foi aquecida até 50°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi purificada por cromatografia de sílica gel usando 10→50% de EtOAc/Éter de Petróleo como eluente para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,2 g, 2,44 mmol, 59,9% de rendimento, 98,3% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 483,3 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,39 - 7,27 (m, 5H), 4,59 (br s, 1H), 4,06 (br d, J = 13,6 Hz, 2H), 3,90 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,74 - 3,49 (m, 4H), 3,29 (dd, J = 4,0, 13,6 Hz, 1H), 3,18 (br s, 1H), 3,10 - 3,00 (m, 1H), 2,85 - 2,55 (m, 6H), 1,53 - 1,45 (m, 9H).
[0717] Etapa F: terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (655,74 mg, 5,69 mmol, 676 uLin THF (25 mL) foi adicionado NaH (182 mg, 4,55 mmol, 60% de pureza) a 0°C e a mistura de reação foi agitada a 0°C por 0,5 h. À mistura foi adicionado terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,1 g, 2,28 mmol) e a mistura de reação agitada a 70°C por 12 horas num tubo selado sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta pela adição de NH4Cl saturado (20 mL) e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (10 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo para dar terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,1 g, 1,86 mmol, 81,7% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 562,4 [M+H]+.
[0718] Etapa G: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Amônia foi borbulhada em MeOH (30 mL) por 5 minutos.
A esta solução foi adicionado terc- butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (950 mg, 1,69 mmol) e 10% de Pd/C (200 mg). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes e a mistura agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 9 horas.
Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob vácuo.
O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 15%- 40%, 30;58% min) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 830 umol, 49,1% de rendimento, 97,8% de pureza) foi obtido como óleo marrom.
ES+APCI MS m/z 472,4 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ = 4,59 (br s, 1H), 4,43 - 4,28 (m, 1H), 4,18 - 4,09 (m, 1H), 4,07 - 3,90 (m, 4H), 3,88 - 3,78 (m, 1H), 3,21 (br dd, J = 3,2, 13,6 Hz, 2H), 3,16 - 3,05 (m, 2H), 3,03 - 2,90 (m, 2H), 2,82 - 2,55 (m, 4H), 2,48 (s, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,91 - 1,62 (m, 4H), 1,51 (s, 9H).
[0719] Etapa H: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[((S)-1-metilpirrolidina)-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (150 mg, 318 umol), 1-bromonaftaleno (98,8 mg, 477 umol, 66,3 uL), Cs2CO3 (311 mg, 954 umol) e RuPhos (29,7 mg, 63,6 umol) em tolueno (3 mL) foram adicionados Pd2(dba)3 (29,1 mg, 31,8 umol) e a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 3 vezes.
A mistura de reação foi agitada a 100°C por 12 horas.
A mistura foi particionada entre água (10 mL) e EtOAc (20 mL) e as camadas foram separadas.
A camada aquosa foi extraída posteriormente com EtOAc (3 × 20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL), secos sobre Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado por flash reversa para dar erc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (70 mg, 111 umol, 35% de rendimento, 95,0% de pureza) como sólido marrom.
ES+APCI MS m/z 598,6 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,21 - 8,20 (m, 1H), 7,87 - 7,85 (m, 1H), 7,61 - 7,59 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,51 - 7,49 (m, 2H), 7,45 - 7,41 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,15 - 7,13 (d, J=7,2 Hz, 1H), 4,63 (br s, 1H), 4,46 (br s, 1H), 4,33 - 4,28 (m, 4H), 4,10 - 4,07 (m, 2H), 3,97 - 3,94 (br d, J=11,6 Hz, 1H), 3,46 (br s, 1H), 3,31 - 3,27 (br d, J=14,0 Hz, 1H), 3,07 - 3,01 (m, 2H), 2,77 (br s, 3H), 2,55 (br s, 3H), 2,35 (br s, 1H), 1,82 (br s, 7H), 1,52 (s, 9H).
[0720] Etapa I: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de terc- butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (60 mg, 100 umol) em DCM (0,1 mL) foi adicionado TFA (154 mg, 1,35 mmol, 0,1 mL) a 15°C e agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (50 mg) como um óleo marrom.
[0721] Etapa J: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (50 mg, 81,8 umol, TFA) e DIEA (106 mg, 817 umol, 142 uL) em DCM (0,2 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (11,3 mg, 89,9 umol) a 0°C e a reação agitada a 0-15°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água (ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 15%-45%, 10,5min) para dar 2-[4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (9,16 mg, 15,1 umol, 18,5% de rendimento, 98,7% de pureza, Formato) como óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 552,5 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,45 (br s, 1H), 8,22 - 8,19 (m, 1H), 7,87 - 7,85 (m, 1H), 7,62 - 7,60 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,51 - 7,49 (m,
2H), 7,45 - 7,43 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,15 - 7,13 (d, J=7,2 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,42 - 6,38 (m, 1H), 5,84 - 5,82 (br d, J=10,8 Hz, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,78 - 4,53 (br dd, J=6,8, 11,6 Hz, 2H), 4,42 - 4,40 (m, 1H), 4,27 (br s, 2H), 4,21 - 4,18 (br d, J=14,0 Hz, 1H), 4,12-3,78 (br d, J=12,8 Hz, 2H), 3,68 - 3,07 (m, 7H), 3,05 - 2,84 (m, 3H), 2,77 (d, J=1,6 Hz, 3H), 2,71 - 2,64 (m, 1H), 2,26 - 2,17 (m, 1H), 2,11 - 2,03 (m, 1H), 2,02 - 1,88 (m, 2H).
EXEMPLO 148 2-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[0722] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 424 umol), 4-bromo-5-metil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol (188 mg, 636 umol), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol) e Cs2CO3 (414 mg, 1,27 mmol) em tolueno (6 mL) foi adicionado Pd 2(dba)3 (38,8 mg, 42,4 umol) e a reação agitada a 100°C por 12 horas sob N 2. Mediante conclusão, a mistura foi purificada diretamente por cromatografia de sílica gel
(PE: EtOAc = 3:1 a 0:1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 149 umol, 35,1% de rendimento, 85,0% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 686,6 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,33 - 7,29 (m, 2H), 5,70 (dd, J = 2,4, 9,2 Hz, 1H), 4,62 (br s, 1H), 4,39 (br s, 1H), 4,34 - 4,28 (m, 2H), 4,20 - 4,14 (m, 1H), 4,05 (br d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,91 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,81 - 3,72 (m, 1H), 3,53 (br t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,27 (br d, J = 10,8 Hz, 2H), 3,10 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,06 - 2,96 (m, 1H), 2,90 - 2,65 (m, 5H), 2,59 (br d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,35 - 2,26 (m, 1H), 2,23 - 2,15 (m, 1H), 2,11 (br s, 2H), 1,90 - 1,65 (m, 7H), 1,54 (s, 9H).
[0723] Etapa B: 2-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (150 mg, 219 umol) em DCM (0,2 mL) foi adicionado TFA (616 mg, 5,40 mmol, 0,4 mL) e a mistura de reação foi agitada a 15°C por 12 horas. Mediante conclusão, o solvente foi removido sob vácuo para dar 2-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi ]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (159 mg, 218 umol, 99,6% de rendimento, 2TFA) como um óleo vermelho.
[0724] Etapa C: 2-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[7-(5 -metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (159 mg, 218 umol, 2TFA) e DIEA (366 mg, 2,83 mmol, 493 uL) em DCM (4 mL) a -40°C foi adicionado prop-2-eniol prop-2-enoato (24,7 mg, 196 umol) e a mistura de reação foi agitada a -20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de água (2 mL) e a camada aquosa foi separada e extraída com DCM (2 × 10 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de sílica gel (DCM: MeOH = 50:1 a 5:1) seguida de purificação por HPCL prep reversa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água(ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 4%-34% durante 10 minutos) para dar 2-[4-[7-(5- metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (1,77 mg, 3,10 umol). ES+APCI MS m/z 556,5 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,00 (s, 1H), 7,18 (br s, 1H), 7,16 - 7,11 (m, 1H), 6,52 (br s, 1H), 6,37 - 6,21 (m, 1H), 5,75 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,99 (br s, 1H), 4,67 (br dd, J = 6,4, 11,6 Hz, 1H), 4,34 (br dd, J = 3,9, 11,6 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 4,11 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,94 (br s, 1H), 3,57 - 3,40 (m, 4H), 3,29 (br d, J = 13,8 Hz, 1H), 3,19 (br s, 1H), 3,02 (br dd, J=12,4, 19,7 Hz, 2H), 2,87 (br dd, J=8,4, 16,4 Hz, 2H), 2,76 - 2,58 (m, 6H), 2,35 (s, 3H), 2,22 - 2,10 (m, 1H), 2,01 (br d, J=8,4 Hz, 1H), 1,89 (br s, 2H).
EXEMPLO 149
2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila
[0725] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- [5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (130 mg, 276 umol), 2-[[4-bromo-5-(trifluorometil) indazol-1-il] metoxi]etil-trimetilsilano (120 mg, 303 umol), Pd2(dba)3 (50,5 mg, 55,1 umol)), Ruphos (51,5 mg, 110 pmol), Cs2CO3 (225 mg, 689 umol) em tolueno (3,00 mL) foi desgaseificada com N2 e, em seguida, aquecida até 90°C durante 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por TLC-prep (EtOAc/MeOH 8/1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 169 umol, 61,4% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 786,3 [M+H]+.
[0726] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1- (2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol- 4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 178 umol) em DCM (3,00 mL) foi adicionada 2,6-dimetilpiridina (229 mg, 2,14 mmol) e TMSOTf (238 mg, 1,07 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a 15°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi extinta por adição de MeOH (0,5 mL) e concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, bruto) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 686,6 [M+H]+.
[0727] Etapa C: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1- (2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4- il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (122 mg, 178 umol) e DIEA (138 mg, 1,07 mmol, 186 uL) em DCM (3,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (18,0 mg, 143 umol) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1,5 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (0,5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC-prep (EA/MeOH 10/1) e HPLC-prep (coluna: Boston pH-lex 150*25 10um; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 39 %-69%, 10min.) para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4- il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (54,0 mg 43,8 umol). ES+APCI MS m/z 740,6 [M+H]+.
[0728] Etapa D: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1H- indazol-4-il]-6, 8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin- 2-il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- [5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (20 mg, 27,0 umol) em DCM (60 uL) foi adicionado TFA (30,8 mg, 270 umol). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A reação não estava completa, assim foi adicionado TFA adicional (30,8 mg) e a reação agitada a 20°C por 0,5 hora adicional. Mediante conclusão, o pH da mistura foi ajustado para 8 por adição de NaHCO3 aquoso saturado (1 mL) e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 5 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (3 mL), secos sobre Na2SO4 e concentrados sob vácuo. O resíduo foi diluído com MeOH (0,5 mL) e NH3·H2O (0,5 mL) adicionado e a mistura agitada a 20°C por 0,5 hora. A mistura foi purificada por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água(ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 15% - 45%, 10,5 min.) para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-
(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop- 2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (2,68 mg, 3,99 umol) como um sólido branco. ES+APCI MS m/z 610,5 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 (s, 1H), 7,68 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,45 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,45 - 6,35 (m, 1H), 5,84 (br d, J=11,2 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,71 - 4,60 (m, 1H), 4,42 - 4,27 (m, 3H), 4,17 (br d, J=11,2 Hz, 1H), 4,01 (br d, J=12,4 Hz, 2H), 3,78 - 3,31 (m, 5H), 3,23 - 3,03 (m, 2H), 3,02 - 2,75 (m, 4H), 2,71 (s, 3H), 2,66 - 2,57 (m, 1H), 2,27 - 2,12 (m, 1H), 2,10 - 2,03 (m, 3H). ES+APCI MS m/z 610,1 [M+H]+.
EXEMPLO 150 2-(1-acriloíl-4-(2-((R)-1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0729] Etapa A: terc-Butil 4-[7-benzil-2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (500 mg, 1,04 mmol), (2R)-1-(dimetilamino) propan-2-ol (214 mg, 2,07 mmol e terc-butóxido de sódio (298 mg, 3,11 mmol) em tolueno (20 mL) foi adicionado BINAP (129 mg, 207 umol) e Pd2(dba)3 (94,8 mg, 104 umol) e a mistura foi espargida com nitrogênio seguido de agitação a 90°C por 5 h. A mistura foi diluída com acetato de etila (100 mL) e água (100 mL) e a camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash de fase reversa [água (água Ácido Fórmico a 0,1%)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução aquosa saturada de carbonato de sódio (5 mL) e extraídas com 10% de MeOH/DCM (2 × 50 mL). Os orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob vácuo para dar terc-Butil 4-[7-benzil-2- [(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (300 mg, 480 umol) ES+APCI MS m/z 550,4 [M+H]+.
[0730] Etapa B: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-[7-benzil-2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,1 g, 2,00 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionada uma solução de NH3 (792 mg, 46,5 mmol) em MeOH (3,96 g, 123,56 mmol, 5 mL), seguida por 10% de Pd/C (500 mg). A mistura foi agitada a 40°C por 12 h sob H 2 (15 psi). A reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida até secura para dar terc- butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (756 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 460,3 [M+H]+.
[0731] Etapa C: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de (4-bromo-2-naftil)2,2- dimetilpropanoato(304 mg, 990 pmol), terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (350 mg, 761 umol), [2-(2-aminoetil)fenil]-cloro- paládio, diciclo-hexil-[2-(2,4,6-triisopropilfenil)fenil]fosfano (84,4 mg, 114 umol) e Cs2CO3 (620 mg, 1,90 mmol em tolueno (10 mL) foi purgada com N2 3 vezes e a mistura agitada a 70°C por 16 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi derramada em H2O (50 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (30 mL), secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados sob vácuo para dar um resíduo.
O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila] para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]7-[3- (2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 303 umol). ES+APCI MS m/z 686,4 [M+H]+.
[0732] Etapa D: [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1- metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil] -6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 306 umol) em diclorometano (300 µL) foi adicionado TFA (523 mg, 4,59 mmol, 340 µL) e a mistura foi agitada a 15°C por 2 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6, 8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (214 mg, 305 umol). ES+APCI MS m/z 586,4 [M+H]+.
[0733] Etapa E: [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato: A uma mistura de [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2- [(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]2- naftil] 2,2-dimetilpropanoato (214 mg, 305 umol, TFA) e DIEA (395 mg, 3,06 mmol, 532 uL) em diclorometano (5,00 mL) resfriada até -40°C foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (38,6 mg, 305 umol) em diclorometano (1,00 mL) sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi aquecida até 0°C e agitada por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar um resíduo.O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido trifluoroacético a 0,1%)\acetonitrila] para dar [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil- piperazin-1-il]-2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (100 mg, 156 umol). ES+APCI MS m/z 640,7 [M+H]+.
[0734] Etapa F: 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1- il]-2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (90 mg, 141 umol) em THF (500 uL) resfriada até 0°C foi adicionado NaOH (2 M, 281,34 uL) e a mistura agitada a 15°C por 16 horas. O pH da mistura foi ajustado para 7 por adição de uma solução a 20% de ácido fórmico. A solução aquosa foi a seguir extraída com diclorometano (3 × 10 mL). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (ácido fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 7%-37%, 10 min.) para dar 2-[4-[2-[(1R-2-(dimetilamino)-1- metil-etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (5 mg, 8,82 umol, 6,27% de rendimento, 98% de pureza) ES+APCI MS m/z 556,3 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 8,54 (br s, 0,6 H), 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,30 - 7,21 (m, 1H), 6,91 - 6,72 (m, 3H), 6,29 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 5,48 (br s, 1H), 5,26 - 4,96 (m, 1H), 4,57 (br s, 1H), 4,24 - 4,09 (m, 4H), 3,74 - 3,54 (m, 1H), 3,48 (m, 2H), 3,22 (m, 2H), 3,10 - 2,86 (m, 5H), 2,78 (br d, J = 14,4 Hz, 1H), 2,53 (br s, 6H), 1,37 (dd, J = 2,0, 6,4 Hz, 3H).
EXEMPLO 151 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-1-(dimetilamino)propan-2-il)oxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0735] (2-(1-acriloíl-4-(2-((R)-1-(dimetilaminopropan-2-il)oxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila foi preparado seguindo o Exemplo 150 usando 1-bromonaftaleno no lugar de (4- bromo-2-naftil) 2,2-dimetilpropanoato na Etapa C e omitindo a Etapa F. ES+APCI MS m/z 540,3 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 8,51 (s, 1H), 8,26 - 8,19 (m, 1H), 7,90 - 7,84 (m, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 - 7,47 (m, 2H), 7,46 - 7,39 (m, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 6,82 (br s, 1H), 6,30 (br d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,62-5,53 (m, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,70 - 4,39 (m, 1H), 4,26 - 4,11 (m, 4H), 3,94 - 3,59 (m, 1H), 3,48 - 3,34 (m, 2H), 3,28-3,18 (m, 3H), 3,13 - 2,92 (s, 5H), 2,79 - 2,61 (s, 6H), 1,48 (dd, J = 2,0, 6,0 Hz, 3H).
EXEMPLO 152 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[0736] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il -indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)- 4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,50 g, 1,09 mmol), 4-bromo-5-metil-1- tetra-hidropiran-2-il-indazol (482 mg, 1,63 mmol), t-BuONa (314 mg, 3,26 mmol) e [2-(2-aminoetil)fenil]-cloro-paládio; diciclo-hexil-[2-(2,4,6-tri- isopropilfenil)fenil]fosfano (80,4 mg, 109 umol) em tolueno (30 mL) foi agitada a 70°C por 10 horas.
A mistura foi diluída com água (10 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3 × 20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com solução de cloreto de sódio saturada (30 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo.
O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico, 0,1%.)/acetonitrila] para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- [(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4- il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,40 g, 522 umol, 48,0% de rendimento) como um sólido amarelo.
ES+APCI MS m/z 674,3 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,03 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,31 - 7,27 (m, 2H), 5,68 (dd, J = 2,4, 9,6 Hz, 1H), 5,31 (br s, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,28 (s, 2H), 4,08 - 3,94 (m, 3H), 3,86 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,79 - 3,71 (m, 1H), 3,52 (br t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,24 (br d, J = 12,8 Hz, 2H), 3,04 - 2,91 (m, 1H), 2,87 - 2,67 (m, 5H), 2,65 - 2,47 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,32 (br s, 6H), 2,17 (br d, J = 4,0 Hz, 1H), 2,09 (br s, 1H), 1,77 (br t, J = 10,8 Hz, 3H), 1,52 (s, 9H), 1,36 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
[0737] Etapa B: 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,38 g, 564 umol) em diclorometano (10 mL) foi adicionado TMSOTf (752 mg, 3,38 mmol) e 2,6- dimetilpiridina (725 mg, 6,77 mmol) a 0°C e a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura foi extinta por adição de metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa [água (Ácido Fórmico, 0,1%)/acetonitrila]. As frações coletadas foram combinadas e o pH ajustado pH > 7 por adição de solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa extraída com diclorometano/metanol (10/1) (3 × 10 mL). Os extratos foram lavados com solução de cloreto de sódio saturada (10 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo para dar 2-[4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,30 g, bruto) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 574,1 [M+H]+.
[0738] Etapa C: 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-
1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,20 g, bruto) e TEA (176mg, 1,74 mmol, 243 uL) em diclorometano (1,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil-prop- 2-enoato (44,0 mg, 349 umol) a 0°C. e a reação foi agitada a 0°C por 0,5 h. A mistura foi extinta por adição de metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (Ácido Fórmico, 0,1%)/acetonitrila]. As frações coletadas foram combinadas e o pH ajustado para pH > 7 por adição de solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa extraída com diclorometano/metanol (10/1) (3 × 5,00 mL). Os extratos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio (1 × 10 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo para dar 2-[4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,10 g, 127 umol, duas etapas 36,6% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 628,6 [M+H]+.
[0739] Etapa D: 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin- 2-il]acetonitrila: Uma mistura de 2-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7- (5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (40 mg, 63,7 umol) e TsOH (1,10 mg, 6,37 umol) em acetonitrila (3 mL) foi agitada a 90°C por 1 hora. A mistura foi extinta por adição de bicarbonato de sódio saturado (2 mL) a 0°C e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = 5/1). As frações desejadas coletadas foram concentradas sob vácuo para dar sólido branco. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 35%-65%, 3 min.) e (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (Ácido Fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 15%-45%, 10 min.). As frações desejadas foram reunidas e liofilizadas para dar 2-[4-[2- [(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (2,99 mg, 5,50 umol). ES+APCI MS m/z 544,5 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,36 (br s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,29 (br s, 1H), 7,24 - 7,20 (m, 1H), 6,62 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 6,47 - 6,24 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,50 (br s, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,60 (br s, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,12 (br d, J = 14,4 Hz, 1H), 3,99 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,55 (br t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,42 - 3,29 (m, 1H), 3,10 (br s, 1H), 3,00 - 2,68 (m, 7H), 2,49 (s, 6H), 2,43 (s, 3H), 1,39 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
EXEMPLO 153 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila
[0740] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 2- (cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 773 umol) e 3 - [(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propan-1-ol (219 mg, 1,39 mmol) em tolueno (10 mL) foi adicionado tBuONa (111 mg, 1,16 mmol) sob N 2. A mistura de reação foi agitada a 18°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi purificada por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc= 3:1 a 0:1 e depois EA: MeOH=50:1 a 10:1) seguida por cromatografia flash reversa (50% a 90% MeCN em água, condição de base) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 156 umol, 20,5% de rendimento, 97,9% de pureza) como um sólido marrom. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,19 - 8,12 (m, 1H), 7,83 - 7,77 (m, 1H), 7,55 - 7,43 (m, 2H), 7,29 (d, J=1,6 Hz, 1H), 6,84 (d, J=2,0 Hz, 1H), 4,64 (br s, 1H), 4,42 - 4,35 (m, 3H), 4,26 (br d, J=5,2 Hz, 2H), 4,12 - 4,03 (m, 3H), 3,96 (br d, J=12,8 Hz, 1H), 3,62 (dd, J=1,6, 7,6 Hz, 1H), 3,50 (br s, 2H), 3,31 (br d, J=13,6 Hz, 3H), 3,11 - 2,97 (m, 2H), 2,94 (br d, J=8,8 Hz, 1H), 2,89 - 2,69 (m, 5H), 2,54 (br d, J=9,8 Hz, 1H), 2,00 - 1,92 (m, 2H), 1,90 - 1,83 (m, 1H), 1,73 (br d, J=10,0 Hz, 1H), 1,53 (s, 9H), 1,41 (s, 9H)
[0741] Etapa B: 4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil] 2,2-dimetilpropanoato: Uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3- (2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-
azabiciclo[2.2.1]heptano-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 162 umol) em TFA (370 mg, 3,24 mmol, 240 uL) foi agitada a 18°C por 1 hora. Mediante conclusão, o solvente foi removido sob vácuo para dar 4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil]2,2-dimetilpropanoato (140 mg, 161 umol, 99,5% de rendimento, 2TFA) como óleo marrom.
[0742] Etapa C: [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[3-[(1 S,4S)- 2-oxa-5 azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato: A uma solução de [4-[4-[3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (140 mg, 161 umol) e DIEA (167 mg, 1,29 mmol, 225 uL) em DCM (2 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (30,5 mg, 242 umol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 18°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de água (5 mL) e a camada aquosa foi extraída com DCM (3 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash reversa (Condição Base, MeCN/NH3•H2O em água: 50% a 80%) para dar [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil] 2,2-dimetilpropanoato (60 mg, 86,5 umol, 53,6% de rendimento). 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,22 - 8,13 (m, 1H), 7,84 - 7,78 (m, 1H), 7,56 - 7,45 (m, 2H), 7,31 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,86 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,62 (br s, 1H),
6,47 - 6,37 (m, 1H), 5,92 - 5,79 (m, 1H), 5,24 - 4,88 (m, 1H), 4,75 (br s, 1H), 4,45 - 4,36 (m, 3H), 4,31 - 4,20 (m, 2H), 4,15 (br d, J=13,6 Hz, 1H), 4,10 - 4,01 (m, 2H), 3,64 (dd, J=1,6, 7,6 Hz, 2H), 3,51 (br s, 2H), 3,38 (br s, 2H), 3,14 (br s, 1H), 3,08 - 2,73 (m, 7H), 2,56 (br d, J=10,0 Hz, 1H), 2,03 - 1,93 (m, 2H), 1,88 (br d, J=9,6 Hz, 1H), 1,78 - 1,70 (m, 1H), 1,61 (s, 9H), 1,43 (s, 9H).
[0743] Etapa D: 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo [2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2- enoil-piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (60 mg, 86,5 umol) em THF (0,5 mL) foi adicionado NaOH (2 M, 600 uL). A mistura de reação foi agitada a 18°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi acidificada por adição de 4 gotas de HCOOH (20% em água) e a camada aquosa foi extraída com DCM (5 × 8 mL). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (Ácido Fórmico a 0,225%)- ACN]; B%: 10%-40%, 10 min.) para dar 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)- 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (19,8 mg, 28,3 umol, 32,8% de rendimento, 93,8 % de pureza, sal de Ácido Fórmico) foi obtido como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 610,5 [M+H]+ .
EXEMPLO 154
2-[4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[0744] Etapa A: terc-butil2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: À solução de terc-butil 2- (cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (3 g, 7,42 mmol), 1-bromonaftaleno (3,07 g, 14,8 mmol, 2,06 mL) e Cs2CO3 (7,25 g, 22,2 mmol) em tolueno (60 mL) foi adicionado XPhos palladacycle gen 3 (628 mg, 742 pmol) sob atmosfera de N2 e a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 diversas vezes. A mistura foi aquecida até 70°C e agitada a 70°C por 10 horas. A mistura resultante foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com EtOAc (3 × 20 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 50:1 a 3:1) para dar terc-butil2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (3,55 g, 6,02 mmol, 81,2% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo marrom. ES+APCI MS m/z 531,4 [M+H]+.
[0745] Etapa B: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1 carboxilato: À solução de terc-butil 2- (cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (2,95 g, 5,56 mmol) em DCM (60 mL) foi adicionado m-CPBA (1,13 g, 5,56 mmol, 85,0% de pureza) a 0°C e agitado a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de Na2S2O3 saturado (20 mL) a 0°C e as camadas foram separadas, e a camada aquosa diluída com água (20 mL) e extraída com EtOAc (60 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (Ácido Fórmico a 0,1%) = 100%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (1,7 g, 2,80 mmol, 50,3% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido marrom. . ES+APCI MS m/z 574,4 [M+H]+.
[0746] Etapa C: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptano-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (300 mg, 549 umol,) e 3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-
il]propan-1-ol (160 mg, 1,02 mmol) em tolueno (6 mL) foi adicionado tBuONa (79,1 mg, 823 umol). A mistura de reação foi agitada a 18°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi purificada por cromatografia de sílica gel (PE:EA= 3:1 a 0:1 e depois EA:MeOH=50:1 a 10:1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 249 umol, 45,3% de rendimento, 79,6% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 640,5 [M+H]+.
[0747] Etapa D: 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo [2.2.1]heptan- 5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: Uma mistura de reação de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2- oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 313 umol) em TFA (770 mg, 6,75 mmol, 500 uL) foi agitado a 18 por 1 hora. Mediante conclusão, o solvente foi removido sob vácuo para dar 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (271 mg, bruto) como um óleo marrom.
[0748] Etapa E: 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propox]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (271 mg, 502 umol) e DIEA (323 mg, 2,50 mmol, 0,435 mL) em DCM (6 mL) foi adicionado prop-2-enoil-prop-2-enoato (60 mg, 476 umol) a 0°C e a mistura de reação foi agitada a 18°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de uma gota de água e purificada por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc=3:1 a 0:1) e depois HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 33%-63%, 12min.) para dar 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (23,8 mg, 40,0 umol, rendimento de 7,97%) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 594,5 [M+H]+.
EXEMPLO 155 (S)-1-(4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0749] Etapa A: terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (4,15 g, 36,0 mmol, 4,28 mL) em THF (100 mL) foi adicionado NaH (2,16 g, 54,06 mmol, 60% de pureza) em porções a 0°C. Após a mistura ter sido agitada a 0°C por 1 hora, uma solução de terc-butil4-(7- benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin -4-il)piperazina-1-carboxilato (8,0 g, 18,02 mmol) em THF (60 mL) foi adicionada e a mistura foi agitada a 70°C por 11 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi derramada em NH 4Cl aquoso (160 mL) e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 100 mL). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=3/1 para Acetato de etila/Metanol=10:1) para dar terc- butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (4,9 g, 8,70 mmol, 48,3% de rendimento, 92,8% de pureza) como um sólido cinza. ES+APCI MS m/z 523,2 [M+H]+
[0750] Etapa B: terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de terc- butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,20 g, 4,21 mmol) em MeOH (30 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (700 mg, 10% de pureza) e a mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes e a reação foi agitada a 40°C por 12 horas sob H2 (15 psi). Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado concentrado para dar terc-butil 4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazina-1-carboxilato (1,80 g, 4,02 mmol, 95,6% de rendimento, 96,7% de pureza) como sólido preto. ES+APCI MS m/z 433,1 [M+H]+.
[0751] Etapa C: terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-metil-1- tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de terc-butil 4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (200 mg, 462 umol) e 4-bromo-5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il- indazol (204 mg, 694 umol) em tolueno (4 mL) foi adicionado Pd 2(dba)3 (63,5 mg, 69,4 umol), RuPhos (43,2 mg, 92,5 umol) e Cs2CO3 (301 mg, 925 umol) e a mistura agitada a 110°C por 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi particionada entre água (10 mL) e EtOAc e as camadas separadas. A camada aquosa foi, posteriormente, extraída com EtOAc (2 × 10 mL) e os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=5/1 para Acetato de etila/MeOH=10/1) para dar terc-butil 4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (240 mg, 310 umol, 67,1% de rendimento, 83,6% de pureza) como um óleo marrom. ES+APCI MS m/z 647,6 [M+H]+.
[0752] Etapa D: 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: A uma mistura de terc- butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il- indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (240 mg, 371 umol) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (1,54 g, 13,5 mmol, 1 mL) e a mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (250 mg, 309 umol, 83,4% de rendimento, 85,5% de pureza, 2TFA) como um sólido marrom que foi usado para a próxima etapa sem mais purificação. ES+APCI MS m/z 463,4 [M+H]+.
[0753] Etapa E: 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona: A uma mistura de 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (250 mg, 362 umol, 2TFA) em DCM (2 mL) foi adicionado DIEA (702 mg, 5,43 mmol, 946 uL) e a mistura resfriada até -50°C. Prop-2-enoil prop-2-enoato (36,5 mg, 289 umol) foi adicionado em porções à reação a -50°C e a mistura agitada a -50°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (1 mL) e a mistura concentrada. O resíduo foi absorvido em DCM (10 mL) e os orgânicos lavados com H2O (2 × 8 mL). Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por HPLC-prep ((Instrumento: gx-l; Coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; Condição: água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN; Início B: 32; Fim B:
62; Tempo de Gradiente (min.): 12; 100%B Tempo de Retenção (min.): 2; Taxa de Fluxo (ml/min.): 25) para dar 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona (48,6 mg, 92,9 umol, 25,7% de rendimento, 98,7% de pureza) como sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 517,5 [M+H]+.
EXEMPLO 156 (S)-1-(4-(2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
[0754] (S)-1-(4-(2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5-(trifluorometil)-1H-indazol- 4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 155 usando 4-bromo-1-tetra-hidropiran-2-il- 5-(trifluorometil)indazol (Intermediário 60) no lugar de 4-bromo-5-metil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol na Etapa C. ES+APCI MS m/z 571,4 [M+H]+.
EXEMPLO 157 (S)-1-(4-(7-(5-metoxi-1H-indazol-4-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0755] (S)-1-(4-(7-(5-metoxi-1H-indazol-4-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 155 usando 4-bromo-5-metoxi-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol no lugar de 4-bromo-5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol na Etapa C. ES+APCI MS m/z 533,4 [M+H]+.
EXEMPLO 158 1-[4-[7-(2-isopropilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0756] Etapa A: terc-butil 4-[7-(2-isopropilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: terc- butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 462 umol), 1-bromo-2-isopropil- benzeno (120 mg, 601 umol), Cs2CO3 (452 mg, 1,39 mmol) e XPHOS PALLADACYCLE GEN 3 (78,3 mg, 92,5 umol) em tolueno (4,00 mL) foram desgaseificados com N2 e, em seguida, aquecidos até 100°C por 10 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica gel eluída com
EtOAc/MeOH= 50/1 a 5/1 para dar terc-butil 4-[7-(2-isopropilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (84,6 mg, 134 umol, 28,9% de rendimento, 87,0% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 551,2 [M+H]+.
[0757] 1-[4-[7-(2-isopropilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 155 usando terc-butil 4-[7-(2-isopropilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato no lugar de terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5- metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato na Etapa D. ES+APCI MS m/z 505,6 [M+H]+.
EXEMPLO 159 (S)-1-(4-(2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0758] (S)-1-(4-(2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 155 usando 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 4-bromo-5-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol na Etapa C. ES+APCI MS m/z 531,5 [M+H]+.
EXEMPLO 160
1-(4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-(3-(piperidin-1-il)propoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0759] Etapa A: Benzil 4-[2-metilsulfanil-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (3,15 g, 7,88 mmol), 2- [(4-bromo-5-metil-indazol-1-il)metoxi]etil-trimetil-silano (3,50 g, 10,2 mmol), Cs2CO3 (6,42 g, 19,70 mmol), Pd2(dba)3 (1,08 g, 1,18 mmol) e Ruphos (735 mg, 1,58 mmol) em tolueno (50 mL) foi desgaseificada e com N2 3 vezes e a mistura agitada a 90°C por 10 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de água (100 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob reduzida.O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 1→33% de EtOAc/Éter de petróleo para dar benzil 4-[2-metilsulfanil-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (2,30 g, 2,93 mmol, 37,1% de rendimento). ES+APCI MS m/z 660,3 [M+H]+.
[0760] Etapa B: benzil 4-[2-metilsulfinil-7-[5-metil-1-(2-trimetilsilil etoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução agitada de benzil 4-[2-metilsulfanil-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (2,30 g, 3,49 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado m-CPBA (601 mg, 3,49 mmol)) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 1 hora sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de Na2S2O3 (10 mL) a 0°C e, em seguida, diluída com água (100 mL) e a camada aquosa extraída com DCM (200 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (200 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna utilizando 1→10% de MeOH/DCM como eluente para dar benzil 4-[2-metilsulf inil-7-[5- metil-1-(2-trimetilsilil etoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,00 g, 2,84 mmol, 81,4% de rendimento). ES+APCI MS m/z 676,3 [M+H]+.
[0761] Etapa C: benzil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-[3-(1- piperidil) propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma mistura de 4-[2-metilsulfinil-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 739 umol) e 3-(1-piperidil)propan-1-ol (211 mg, 1,48 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado t-BuONa (213 mg, 2,22 mmol)
em porções e a mistura agitada a 20°C por 1 hora sob atmosfera de N2. A mistura foi resfriada até 0°C e HCl(2M) foi adicionado até o pH~7. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa usando água 5→95% 0,5% TFA/água/acetonitrila como eluente para dar benzil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-[3-(1- piperidil)propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (300 mg, 385. umol, 52,1% de rendimento). ES+APCI MS m/z 755,4 [M+H]+.
[0762] Etapa D: 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)-2-(3-(piperidin-1- il)propoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina: A uma solução de benzil 4- [7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-2-[3-(1-piperidil) propoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 397 umol) em MeOH (20 mL) foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 1,99 mL) e Pd(OH)2 (200 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado para dar 7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)-2-(3-(piperidin-1-il)propoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (250 mg, 360 umol, 90,7% de rendimento).
[0763] Etapa E: 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[3-(1-piperidilpropoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)-2-(3-(piperidin-1-il)propoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (250 mg, 360 umol, 2HCl) e DIEA (465 mg, 3,60 mmol, 629 uL) em DCM (8,00 mL) foi adicionada uma solução de prop- 2-enoil prop-2-enoato (36,3 mg, 288 umol) em DCM (2,00 mL) a - 40°C sob atmosfera de nitrogênio e a reação agitada por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 (500 uL) a -40°C e, em seguida, diluída com água (10 mL) e a camada aquosa foi extraída com DCM (10 ml). Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH 1/0 a 5/1) e posteriormente purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225% de Ácido Fórmico)-ACN]; B%: 8%- 28%, 10min.) para dar 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[3-(1-piperidil) propoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (16,0 mg, 29,1 umol, 8,07% de rendimento). ES+APCI MS m/z 545,3 [M+H]+.
EXEMPLO 161 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[(1-metilpirrolidin-3-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0764] 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[(1-metilpirrolidin-3-il)metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparado seguindo o Exemplo 160 usando (1-metilpirrolidin-3-il)metanol no lugar de 3-(1- piperidil)propan-1-ol na ES+APCI MS m/z 517,4 [M+H]+.
EXEMPLO 162
1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0765] Etapa A: benzil 4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de (2R)-1-(dimetilamino)propan-2-ol (183 mg, 1,78 mmol) (8,00 mL), benzil 4-[2-metilsulfinil-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 592 umol) e NaOtBu (114 mg, 1,18 mmol) em tolueno foi agitada a 15°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre Al2O3 (Éter de Petróleo/Acetato de Etila 10/1 a 0/1) para dar benzil 4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 352 umol). 1H NMR (400 MHz, clorofórmio- d) δ = 8,08 (s, 1H), 7,46 - 7,39 (m, 5H), 7,38 - 7,33 (m, 2H), 5,76 (s, 2H), 5,43 - 5,33 (m, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,35 (s, 2H), 3,72 - 3,67 (m, 4H), 3,64 - 3,56 (m, 4H), 3,55 - 3,47 (m, 4H), 2,87 - 2,80 (m, 2H), 2,74 (dd, J=6,8, 12,8 Hz, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,47 - 2,40 (m, 1H), 2,36 (s, 6H), 1,42 (d, J=6,4 Hz, 3H), 0,98 - 0,92 (m, 2H), 0,00 (s, 9H).
[0766] Etapa B: terc-butil 4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[5-metil-1- (2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)- 1-metil-etoxi]-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 280 umol) e (Boc)2O (122 mg, 559 umol, 129 uL) em MeOH (6,00 mL) foi adicionado 10% Pd/C (80 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora e 35°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado concentrado sob vácuo para dar uma mistura de terc-butil 4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[5-metil- 1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato e (2R)-N,N-dimetil-2-[[7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]propan-1-amina como uma mistura (110 mg). ES+APCI MS m/z 681,3 [M+H]+.
[0767] Etapa C: (2R)-N,N-dimetil-2-[[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propan-1-amina: (2R)-N,N-dimetil- 2-[[7-(5-metil-1H-indazol)-4-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]propan-1-amina (TFA) e [4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-5-metil-indazol-
1-il]metanol. Uma solução de 110 mg de mistura de terc-butil 4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato e (2R)-N,N-dimetil- 2-[[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propan-1-amina em TFA (3,08 g, 27,0 mmol) foi agitada a 30°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar 260 mg de mistura de (2R)-N,N-dimetil-2-[[7-(5-metil-1H-indazol- 4-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oxi]propan-1- amina e [4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-5-metil-indazol-1-il]metanol. ES+APCI MS m/z 451,3 [M+H]+.
[0768] Etapa D: 1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona: A uma solução de 260 mg de mistura de (2R)-N,N-dimetil-2-[[7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propan- 1-amina e [4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-5-metil-indazol-1-il]metanol em DCM (1,00 mL), resfriada até -50°C foi adicionado DIEA (594 mg, 4,59 mmol) seguido de prop-2- enoil prop-2-enoato (18,0 mg, 143 umol) gota a gota e a mistura foi agitada entre -50°C a -40°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar 100 mg de mistura de 1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil- etoxi]-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona e 1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-
[1-(hidroximetil)-5-metil-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona. ES+APCI MS m/z 505,4 [M+H]+.
[0769] Etapa E: 1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona: Uma mistura de 100 mg de 1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7- (5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona e 1-[4-[2-[(1R)-2-(dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-[1- (hidroximetil)-5-metil-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona em THF (22 mL) e água (550 uL) foi adicionado NaOH (44,8 mg, 1,12 mmol) e a mistura foi agitada a 10°C por 3 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (1 mL) e extraído com DCM (3 × 5 mL). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (Ácido Fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 10%-40%, 12 min.) para dar 1-[4-[2-[(1R)-2- (dimetilamino)-1-metil-etoxi]-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (16,2 mg, 29,2 umol, 99,0% de pureza, Sal de Ácido Fórmico) como um sólido esbranquiçado. ES+APCI MS m/z 505.2 [M+H]+.
EXEMPLO 163 1-(4-(2-(2-(dietilamino)etoxi)-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0770] Etapa A: benzil 4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de 4-[2-metilsulfinil-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 739 umol) e 2-(dietilamino)etanol (173 mg, 1,48 mmol, 197 uL) em THF (10 mL) foi adicionado t-BuONa (213 mg, 2,22 mmol) e a mistura agitada a 20°C por 1 hora sob atmosfera de N2. A mistura foi resfriada até 0°C e foi adicionado HCl (2 M) até pH~7. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 0→10% de MeOH/DCM como eluente para dar material impuro que foi posteriormente purificado por cromatografia de fase reversa para dar benzil 4-[2- [2-(dietilamino)etoxi]-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (220 mg, 295 umol, 39,9% de rendimento). ES+APCI MS m/z 729,3 [M+H]+.
[0771] Etapa B: N,N-dietil-2-[[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]etanamina: A uma solução de benzil 4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 164 umol) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd(OH)2 (99,4 mg, 10% de pureza) e HCl/MeOH (4 M, 823,05 uL) sob N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada in vacuo para dar N,N-dietil-2-[[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]- 4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]etanamina (105 mg, 157,24 umol). ES+APCI MS m/z 595,4 [M+H]+.
[0772] Etapa C: 1-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de N,N-dietil-2-[[7-[5-metil-1-(2- trimetilsilil etoximetil)indazol-4-il]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]etanamina (105 mg, 158 umol, 2 HCl) e DIEA (204 mg, 1,58 mmol, 276 uL) em DCM (8 mL) a -40°C foi adicionada uma solução de prop-2- enoil prop-2-enoato (15,9 mg, 126,4 umol) em DCM (2 mL) sob atmosfera de nitrogênio e a reação agitada por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 (500 uL) a - 40°C e, em seguida, diluída com água (10 mL). A camada aquosa foi extraída com DCM (10 ml), seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 0→20% de MeOH/DCM como eluente para dar 1-[4-[2-[2- (dietilamino)etoxi]-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (60,0 mg, 71,2 umol, 45,0% de rendimento). ES+APCI MS m/z 649,3 [M+H]+.
[0773] Etapa D: 1-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (50 mg, 77,0 umol) em DCM (500 µL) foi adicionado TFA (175 mg, 1,54 mmol, 114 uL). A mistura foi agitada a 15°C por 16 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)- ACN]; B%: 32%-62%, 12min.) para dar 1-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-(5-metil- 1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (16,0 mg, 30,2 umol, 39,2% de rendimento). ES+APCI MS m/z 519,3 [M+H]+.
EXEMPLO 164 1-(4-(7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-(2-(piperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)etanona
[0774] Etapa A: benzil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoxi metil)indazol-4-il]-2-[2-(1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-[2-metilsulfinil-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 739 umol) e 2-(1-piperidil) etanol (191 mg, 1,48 mmol, 197 uL) em tolueno (20 mL) foi adicionado t-BuONa (213 mg, 2,22 mmol). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora sob atmosfera de N2. A mistura foi resfriada até 0°C e foi adicionado HCl (2 M) até pH~7. A mistura foi filtrada e o filtrado concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando 0→10% de MeOH/DCM como eluente para dar benzil 4-[7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoxi metil)indazol-4-il]-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 404 umol, 54,7% de rendimento). ES+APCI MS m/z 741,4 [M+H]+.
[0775] Etapa B: 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-2-[2-(1-piperidil)etoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: Uma solução de benzil 4-[7-[5-metil-1-(2- trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (250 mg, 337 umol) em TFA (10 mL) foi agitada a 80°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-
6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (200 mg, 283 umol, 84,1% de rendimento). ES+APCI MS m/z 477,3 [M+H]+.
[0776] Etapa C: 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de 7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-piperazin-1-il-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina (200 mg, 283 umol, 2TFA) e DIEA (366 mg, 2,84 mmol, 495 uL) em DCM (8 mL) a - 40°C foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (28,6 mg, 227 umol) DCM (2 mL) sob atmosfera de nitrogênio e a reação agitada por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 (500 uL) a - 40°C e, em seguida, diluída com água (10 mL) e DCM (10 ml). A camada orgânica separada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 30% - 60%, 12min.). 1-[4-[7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-2-[2-(1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en- 1-ona (6,00 mg, 11,1 umol, 3,94% de rendimento, 99,0% de pureza). ES+APCI MS m/z 531,4 [M+H]+.
EXEMPLO 165 1-[4-[7-(2-fluoro-3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
50,1% 49,7% 67,2% Pd/C(úmido), H2, 15 psi Duas etapas, 24,9% Tolueno, 110°C, 5h, 57,2% Duas etapas, 65,5% , 2,5 h 17,9%
[0777] Etapa A: 3-metoxinaftalen-1-ol: A uma solução de naftaleno-1,3-diol (20 g, 125 mmol) em MeOH (150 mL) foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 250 mL) a 0°C. A mistura foi aquecida até 18°C e agitada por 36 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 1/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 3-metoxinaftalen-1-ol (11 g, 62,5 mmol, 50,1% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo claro. ES+APCI MS m/z 175,1 [M+H]+.
[0778] Etapa B: 4-bromo-3-metoxi-naftalen-1-ol: A uma solução de 3- metoxinaftalen-1-ol (0,50 g, 2,87 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada uma solução de NBS (562 mg, 3,16 mmol) em THF (3,00 mL) a 0°C. Depois de agitar a 0°C por 2 horas, a mistura foi concentrada sob vácuo, diluída com H2O (5 mL), extraída com diclorometano (3 × 10 mL). Os extratos combinados foram lavados com cloreto de sódio saturado (1 × 20 mL), secos sobre Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1) para dar 4-bromo-3-metoxi- naftalen-1-ol (0,43 g, 1,43 mmol, 49,7% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 253 [M+H]+.
[0779] Etapa C: 4-bromo-2-fluoro-3-metoxi-naftalen-1-ol: Para uma solução de 4- bromo-3-metoxi-naftalen-1-ol (4,00 g, 15,8 mmol) em acetonitrila (20 mL) foi adicionada uma solução de 1-(clorometil)-4-fluoro-1,4- diazoniabiciclo[2.2.2]octano; ditetrafluoroborato (6,72 g, 19,0 mmol) em acetonitrila (20 mL) a -40°C. Após agitação a -40°C por 1 hora e 10°C por 3 horas, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/éter acetato = 3/1) para dar 4- bromo-2-fluoro-3-metoxi-naftalen-1-ol (4,00 g, 10,6 mmol, 67,2% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 271,0 [M+H]+.
[0780] Etapa D: 2-fluoro-3-metoxi-naftalen-1-ol: Uma mistura de 4-bromo-2- fluoro-3-metoxi-naftalen-1-ol (2,00 g, 7,38 mmol) e 10% de Pd/C (0,01 g) em acetato de etila (20 mL) foi agitada a 10°C por 1 hora sob H2 a 15 psi. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar 2-fluoro-3-metoxi-naftalen-1-ol (1,60 g, bruto) como óleo amarelo e usada na próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 193,0 [M+H]+.
[0781] Etapa E: (2-fluoro-3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato: A uma solução de 2-fluoro-3-metoxi-naftalen-1-ol (1,60 g, bruto) e TEA (1,85 g, 18,3 mmol, 2,55 mL) em diclorometano (30 mL) foi adicionado trifluorometilsulfonil trifluorometanossulfonato (2,35 g, 8,33 mmol, 1,37 mL) a -78°C por 1 hora. A mistura foi extinta com cloreto de amônio saturado (30 mL), extraída com acetato de etila (3 × 20 mL), lavada com cloreto de sódio saturado (1 x 50 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/éter acetato = 3/1) para dar (2- fluoro-3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (1,10 g, 2,07 mmol, duas etapas 24,9% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 324,9 [M+H]+.
[0782] Etapa F: terc-butil 4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (0,40 g, 865 umol), (2-fluoro-3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (561 mg, 1,73 mmol), RuPhos (80,7 mg, 173 umol), Pd2(dba)3 (79,2 mg, 86,5 umol) e t-BuONa (249 mg, 2,59 mmol) em tolueno (10 mL) foi agitada a 110°C por 5 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (10 mL), extraída com éter acetato (3 x 10 mL). Os extratos foram lavados com cloreto de sódio saturado (1 × 20 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash de fase reversa [água (Ácido Fórmico a 0,1%)/acetonitrila] para dar terc-butil 4-[7-(2- fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,35 g, 495 umol, 57,2% de rendimento) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 637,1 [M+H]+.
[0783] Etapa G: 4-[3-[[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina: Uma mistura de terc-butil 4-[7- (2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,40 g, 628. umol) e TFA (1,07 g, 9,42 mmol, 698 uL) em diclorometano (0,70 mL) foi agitado a 10°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-[3-[[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)- 4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina
(0,41 g, bruto, TFA) como um óleo amarelo e usada na próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 537,5 [M+H]+.
[0784] Etapa H: 1-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[3-[[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina (0,41 g, bruto, sal de TFA) e TEA (635 mg, 6,27 mmol, 873 uL) em diclorometano (5,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop- 2-enoato (79,1 mg, 627 umol) a -40°C. Após agitação a -40°C por 0,5 h, a mistura foi extinta com metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = 10/1) para dar 1-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (0,25 g, 411 umol, 65,5% de rendimento) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 591,0 [M+H] +.
[0785] Etapa I: 1-[4-[7-(2-fluoro-3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (0,20 g, 339 umol) em diclorometano (4,00 mL) foi adicionado BBr3 (424 mg, 1,69 mmol, 163 uL) a - 78°C por 0,5 hora e agitada a 0°C por 2 horas. A mistura foi extinta com bicarbonato de sódio saturado (5 mL) a -78°C e agitada a 0°C por 0,5 h. A mistura foi extraída com diclorometano (3 × 10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (Ácido Fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 13%-45%, 7min.) para dar 1-[4-[7-(2-fluoro-3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (35,2 mg, 60,8 umol, 17,9% de rendimento, 99,4% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 577,0[M+H]+.
EXEMPLO 166
1-[4-[7-(6-hidroxi-2-metil-1,3-benzotiazol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona TIPSCl, imidazol 73,9% 84,4% 57,6% CuI, 1,10- fenantrolina Reagente de Lawesson Tolueno, refluxo, 71,7% 59,7% 2h, 54,1% Tolueno, Cs2DO3 85°C, 16h 50,7% 59,2% -50- -20 °C, 0,5 h 30,2%
[0786] Etapa A: 4-tri-isopropilsililoxianilina: A uma solução de 4-aminofenol (5,00 g, 45,8 mmol, 7,14 mL) em DCM (50,0 mL) foi adicionado imidazol (4,06 g, 59,6 mmol). Foi adicionado TIPSCl (13,3 g, 68,7 mmol, 14,7 mL) à mistura gota a gota. A mistura foi agitada a 15°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por sistema de cromatografia flash automatizado (PE/EA 100/1 a 01/03) para dar 4-tri-isopropilsililoxianilina (9,46 g, 33,9 mmol, 73,9% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo preto.
[0787] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 6,74 - 6,71 (m, 1H), 6,71 - 6,69 (m, 1H), 6,60 - 6,58 (m, 1H), 6,58 - 6,55 (m, 1H), 3,66 - 2,98 (m, 2H), 1,28 - 1,16 (m, 3H), 1,11 - 1,06 (m, 18H)
[0788] Etapa B: 2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi-anilina: A uma solução de 4-tri- isopropilsililoxianilina (7,30 g, 27,5 mmol) em DCM (73,0 mL) e MeOH (73,0 mL) foi adicionado Br2 (11,0 g, 68,8 mmol, 3,55 mL) em DCM (5 mL) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 15°C por 5 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com solução de sulfito de sódio (60 mL) e extraída com DCM (3 × 200 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA 50/1 a 1/1) para dar 2,6-dibromo-4- tri-isopropilsililoxi-anilina (10,8 g, 23,2 mmol, 84,4% de rendimento, 90,8% de pureza) como um óleo marrom. ES+APCI MS m/z 423,9[M+H]+.
[0789] Etapa C: N-(2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi-fenil)acetamida: A uma solução de 2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi-anilina (10,4 g, 24,6 mmol) e CH3COOH (52 mL) foi adicionado anidrido acético (10,9 g, 107 mmol, 10 mL). A mistura de reação foi agitada a 90°C por 1 hora. Mediante conclusão, água (100 mL) e DCM (200 mL) foram adicionados e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM (100 mL × 2). Os extratos combinados foram lavados com 5% Na2CO3 (80 mL), lavados com salmoura (100 mL), secos sobre Na2SO4 e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA 50/1 a 1:1) para dar N-(2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi-
fenil)acetamida (7,32 g, 14,2 mmol, 57,6% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido marrom.
[0790] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,16 (s, 1H), 7,11 (s, 2H), 2,21 (s, 3H), 1,28 - 1,24 (m, 3H), 1,12 - 1,09 (m, 18H).
[0791] Etapa D: N-(2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi-fenil)tioacetamida: A uma solução de N-(2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi-fenil)acetamida (7,22 g, 15,5 mmol) em tolueno (116 mL) foi adicionado LAWESSON'S REAGENT (3,14 g, 7,76 mmol). A mistura foi aquecida até 110°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA 100/1 a 1/1) N-(2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi- fenil)tioacetamida (5,41 g, 8,40 mmol, 54,1% de rendimento, 74,7% pureza) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 481,9[M+H]+.
[0792] Etapa E: 4-bromo-2-metil-1,3-benzotiazol-6-ol: CuI (94,2 mg, 494 umol) foi adicionado a uma solução de N-(2,6-dibromo-4-tri-isopropilsililoxi- fenil)tioacetamida (2,38 g, 4,94 mmol), 1,10-fenantrolina (134 mg, 741 pmol) e Cs2CO3 (4,83 g, 14,8 mmol) em DME (48,0 mL). Então, a mistura de reação foi agitada a 80°C por 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA 50/1 a 0/1) para dar 4-bromo-2-metil-1,3-benzotiazol-6-ol (1,33 g, 3,54 mmol, 71,7% de rendimento, 65,0% de pureza) como um óleo marrom.
[0793] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,33 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,14 (d, J=2,4 Hz, 1H), 3,40 - 3,33 (m, 1H), 2,72 (s, 3H).
[0794] Etapa F: 6-benziloxi-4-bromo-2-metil-1,3-benzotiazol: A uma mistura de 4-bromo-2-metil-1,3-benzotiazol-6-ol (1,28 g, 5,24 mmol) e K2CO3 (2,17 g, 15,72 mmol) em ACN (26,0 mL) foi adicionado BnBr (988 mg, 5,76 mmol, 685 uL). A mistura de reação foi agitada a 45°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE/EA 200/1 a 10/1) para dar 6-benziloxi-4-bromo-2- metil-1,3-benzotiazol (1,10 g, 3,13 mmol, 59,7% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 336,2 [M+H]+.
[0795] Etapa G: benzil 4-[7-(6-benziloxi-2-metil-1,3-benzotiazol-4-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: Benzil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 805 umol), 6-benziloxi-4- bromo-2-metil-1,3-benzotiazol (323 mg, 967 umol), RuPhos (75,2 mg, 161 umol), Cs2CO3 (787 mg, 2,42 mmol) e Pd2(dba)3 (73,8 mg, 80,6 umol) em tolueno (16 mL) agitando a 85°C por 16 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em Al2O3 (PE/EA 10/1 a 0/1) para dar benzil 4-[7-(6- benziloxi-2-metil-1,3-benzotiazol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (340 mg, 408 umol, 50,7% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 750,5[M+H]+.
[0796] Etapa H: 2-metil-4-[2-(3-morfolinopropoxi)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-1,3-benzotiazol-6-ol: A uma solução de benzil 4-[7- (6-benziloxi-2-metil-1,3-benzotiazol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (160 mg, 213 umol) em MeOH (4 mL) foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 533 uL), seguido de Pd(OH)2/C (80 mg, 533 umol) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 8 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para dar 2- metil-4-[2-(3-morfolinopropoxi)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il]-1,3-benzothiazol-6-ol (110 mg, 126 umol, 59,2% de rendimento, 68,7% de pureza, 2 HCl) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ES+APCI MS m/z 526,2[M+H]+.
[0797] Etapa I: 1-[4-[7-(6-hidroxi-2-metil-1,3-benzotiazol-4-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona: A uma solução de 2-metil-4-[2-(3-morfolinopropoxi)-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-1,3-benzotiazol-6-ol (110 mg, 184 umol, 2 HCl) e DIEA (143 mg, 1,10 mmol, 193 uL) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (18,5 mg, 147 umol) gota a gota a -50°C. A mistura foi agitada a -40 - -20°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi temperada por MeOH (0,5 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (2 mL) e extraído com DCM (3 × 6 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em Al2O3 (DCM/MeOH 20/1 a 10/1), HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)- ACN]; B%: 21%-51%, 12min.) para dar 1-[4-[7-(6-hidroxi-2-metil-1,3-benzotiazol- 4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona (32,4 mg, 55,4 umol, 30,2% de rendimento, 99,1% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 580,4[M+H]+.
EXEMPLO 167 1-(4-(7-(5-hidroxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
18,6% 45,6% 86,3% 36,8% -78 a 0°C 29,1% Duas etapas, 39,2%
[0798] Etapa A: 2-bromo-4-metoxianilina: A -10°C, a uma solução de 4- metoxianilina (100 g, 812 mmol) em THF (3 L) foi adicionada N- bromossuccinimida (152 g, 853 mmol) em três porções e a mistura foi agitada à mesma temperatura por 30 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna. (éter de petróleo/acetato de etila 15/1) para dar 2-bromo-4-metoxianilina como óleo vermelho (30,58 g, rendimento de 18,6%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7,01 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,74-6,70 (m, 2H), 3,85-3,74 (m, 2H), 3,73 (s, 3H).
[0799] Etapa B: 1-(2-amino-3-bromo-5-metoxifenil)-2-cloropropan-1-ona: A uma solução a 0°C de 2-bromo-4-metoxi-anilina (15,0 g, 74,2 mmol) em 1,1- dicloroetano (220 mL) foi adicionado tricloreto de boro (1,00 M, 89,1 mL), 2-
cloropropanenitrila (9,97 g, 111 mmol) e tetracloreto de titânio (16,9 g, 89,1 mmol). A mistura foi aquecida a 85°C por 24 horas. A mistura foi derramada em gelo e ácido clorídrico (20%, 300 mL) a 0°C, concentrada e o resíduo foi refluxado por 0,5 hora. Esta mistura foi basificada a 0°C com hidróxido de sódio (aquoso saturado, 120 mL) até atingir pH 4 e depois extraída com acetato de etila (300 mL × 2). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (200 mL), secos com sulfato de sódio anidro e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (éter de petróleo/acetato de etila/diclorometano 50/1/1), para dar 1-(2-amino-3-bromo-5- metoxifenil)-2-cloropropan-1-ona como sólido amarelo (18,7 g, 86,3% de rendimento). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7,37 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 6,60 (brs, 2H), 5,25 (q, J = 6,4 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 1,74 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
[0800] Etapa C: 7-bromo-5-metoxi-2-metil-1H-indol: A uma solução de 1-(2- amino-3-bromo-5-metoxi-fenil)-2-cloro-propan-1-ona (18,7 g, 64,1 mmol) em dioxano (500 mL) e H2O (50 mL) foi adicionado NaBH4 (2,67 g, 70,5 mmol) e esta mistura foi agitada a 100°C por 15 horas. A mistura foi resfriada, diluída com ácido clorídrico (aq., 0,10 M, 100 mL) e extraída com diclorometano (300 mL × 2). Os orgânicos foram lavados com salmoura (200 mL), secos com sulfato de sódio anidro e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (éter de petróleo/acetato de etila 25/1) para dar 7- bromo-5-metoxi-2-metil-1H-indol como sólido amarelo (7,01 g, 45,6% de rendimento). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7,91 (brs, 1H), 7,03-6,91 (m, 2H), 6,23 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,46 (s, 3H).
[0801] Etapa D: terc-butil 4-(7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: A uma mistura de terc-butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (275 mg, 594 umol) e 7- bromo-5-metoxi-2-metil-1H-indol (130 mg, 540 umol) em 2-metil-2-butanol (15,0 mL) foi adicionado tBuONa (104 mg, 1,08 mmol) e aduto metil-t-butil éter de cloro (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)[2-(2-aminoetilfenil)]paládio (II) (44,1 mg, 54,0 umol). Esta mistura agitada a 90°C por 8 horas sob uma atmosfera de N2. A mistura foi filtrada, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC-prep (diclorometano/metanol 10/1), para dar terc- butil 4-(7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato como um óleo amarelo (131 mg, 36,8% de rendimento). ES+APCI MS m/z 622,4[M+H]+.
[0802] Etapa E: 4-[3-[[7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oxi]propil]morfolina: A uma solução a 0°C de terc-butil 4-[7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (131 mg, 211 umol) em diclorometano (10 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (2,00 mL) gota a gota e a reação agitada a 15°C por 3 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. (126 mg de produto bruto). ES+APCI MS m/z 522,4[M+H]+.
[0803] Etapa F: 1-(4-(7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução a -60°C de 4-[3-[[7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-4-piperazin-1-il- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina (74 mg, 116 umol, sal de ácido trifluoroacético) em diclorometano (5 mL) foi adicionada di- isopropiletilamina (45,1 mg, 349 umol, 60,8 µL) e a mistura foi agitada à mesma temperatura por 10 min. A mistura foi extinta com ácido cítrico (aq., 1,00 mL), extraída com diclorometano (10 mL × 2), lavada com salmoura (15 mL), seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC-prep para dar 1-(4-(7-(5-metoxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop- 2-en-1-ona como um sólido amarelo (31 mg, 39,2% de rendimento). ES+APCI MS m/z 576,4[M+H]+.
[0804] Etapa G: 1-(4-(7-(5-hidroxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução a -78°C de 1-[4-[7-(5-metoxi-2-metil)-1H-indol-7-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (26 mg, 45,2 umol) em diclorometano (5 mL) foi adicionado tribrometo de boro (56,6 mg, 226 umol, 21,8 uL). A reação foi deixada aquecer até 0°C e agitada por 12 horas. A mistura foi neutralizada com NaHCO 3 (aq., 3 mL) e extraída com diclorometano (5 mL x 2), lavada com salmoura (10 mL), seca com sulfato de sódio anidro, concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep para dar 1-(4-(7-(5-hidroxi-2-metil-1H-indol-7-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop- 2-en-1-ona como um sólido amarelo (8,16 mg, 29,1% de rendimento, 90,3% de pureza). ES+APCI MS m/z 562,5[M+H]+.
EXEMPLO 168 1-(3-(hidroximetil)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
74,8% 44,7% Tolueno, 110°C, 3h 60,0% 66,1% Tolueno, 60°C, 24h 18,8% 68,1% HF/piridina 69,6% 12,7%
[0805] Etapa A: terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil 3-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (3,50 g, 16,2 mmol) em THF (30 mL) foi adicionado NaH (3,24 g, 80,9 mmol, 60,0% de pureza) a 0°C. Após agitação por 30 minutos, TBDPSCl (6,67 g, 24,3 mmol, 6,23 mL) foi adicionado em uma porção. A mistura foi aquecida até 10°C e agitada por 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de água a 0°C e depois extraída com DCM (200 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila 1/0 a 1/2) para dar terc-butil 3-[[terc-butil (difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato (6,34 g, 12,1 mmol, 74,8% de rendimento, 86,8% de pureza) como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z455,3[M+H]+.
[0806] Etapa B: terc-butil4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1-carboxilato (7,25 g, 13,9 mmol), 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (3,89 g, 13,2 mmol) e DIEA (4,27 g, 33,0 mmol, 5,77 mL) em DMSO (60 mL) foi agitada a 55°C por 24 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (300 mL) e lavada com salmoura (3 × 150 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila 1/0 a 3/1) para dar terc-butyl4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3 -[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato (4,50 g, 5,91 mmol, 44,7% de rendimento, 93,5% de pureza) como sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 721,3[M+H]+.
[0807] Etapa C: terc-butil4-[7-benzil-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato: Uma mistura de terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin 4-il)-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato (2,00 g, 2,81 mmol), 3-morfolinopropan-1-ol (815 mg, 5,62 mmol), Pd(OAc)2 (94,6 mg, 422 umol), BINAP (350 mg, 562 umol) e t-BuONa (674 mg, 7,03 mmol) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi aquecida até 110°C e agitada por 3 horas sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, DCM/MeOH 70/1 to 20/1) para dar terc-butyl4-[7-benzil-2-(3-morfolinopropoxi)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1-carboxilato (1,50 g, 1,69 mmol, 60,0% de rendimento, 92,3% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 821,4[M+H]+.
[0808] Etapa D: terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-[7-benzil-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato (1,50 g, 1,83 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado Pd-C (10%, 1,5 g) sob atmosfera de N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 50°C por 24 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar terc-butil 3 -[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (988 mg, 1,21 mmol, 66,1% de rendimento, 89,5% de pureza) como um óleo incolor, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 731,5[M+H]+.
[0809] Etapa E: terc-butil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato: Uma mistura de terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (731 mg, 1,00 mmol), 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (783 mg, 2,50 mmol), [2-(2-aminofenil)fenil]paládio(1+); diciclo-hexil-[2-(2,4,6-tri- isopropilfenil)fenil]fosfano; metanossulfonato (169 mg, 200 umol), Cs2CO3 (815 mg, 2,50 mmol) em tolueno (15 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 60°C por 24 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura e purificada por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 70/1 a 30/1) para dar terc- butyl4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1-carboxilato (250 mg, 188 umol, 18,8% de rendimento, 72,3% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 963,4[M+H]+.
[0810] Etapa F: terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)- 2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc- butil(difenil)silil]oxilmetil]oximetil]piperazina-1-carboxilato (250 mg, 188 pmol) em MeOH (3 mL) foi adicionado 10% Pd/C (0,25 g) sob atmosfera de N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 50°C por 3 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura para dar terc-butil 3-[[terc-butil(difenil) silil]oximetil]-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (180 mg, 128 umol, 68,1% de rendimento, 62,0% de pureza) como um sólido amarelo escuro, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 873,4[M+H]+.
[0811] Etapa G: 4-[4-[2-(hidroximetil)piperazin-1-il]-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol: Uma mistura de terc-butil 3- [[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (130 mg, 149 umol), hidrofluoreto de piridina (123 mg, 744 umol, 112 uL, 60,0% de pureza) em THF (1,5 mL) foi agitada a 25°C por 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (condições de TFA; MeCN em H2O; 0 ~ 30%, taxa de fluxo; 40 mL/min.). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para dar 4-[4-[2-(hidroximetil)piperazin-1-il]-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (84 mg, 104 umol, rendimento de 69,6%, pureza de 94,1%, 2TFA) como um semissólido amarelo. ES+APCI MS m/z 535,3 [M+H]+.
[0812] Etapa H: 1-[3-(hidroximetil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-
en-1-ona: A uma mistura de 4-[4-[2-(hidroximetil)piperazin-1-il]-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il] naftalen-2-ol (84,0 mg, 114 umol, 2TFA), DIEA (36,9 mg, 285 umol, 49,8 uL) em DCM (3 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (8,63 mg, 68,44 umol) gota a gota a -40°C e depois agitada a -40°C por 0,5 hora sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (0,5 mL) e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Venusil XBP C8 150 * 25 * 10 um; fase móvel: [água (Ácido Fórmico a 0,225%)-ACN]; B%: 10% - 40%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas até secura para dar 1-[3-(hidroximetil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (9,75 mg, 14,5 umol, 12,7% de rendimento, 94,4% de pureza, Sal de Ácido Fórmico) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 589,3[M+H]+.
EXEMPLO 169 1-[3-(hidroximetil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
[0813] Etapa A: terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato: A uma mistura de terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazil-piperazina-1- carboxilato (495 mg, 694 umol), [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (160 mg, 1,39 mmol, 165 uL) e terc-butóxido de sódio (200 mg, 2,08 mmol) em tolueno (25 mL) foi adicionado BINAP (86,5 mg, 139 umol) e Pd 2(dba)3 (63,6 mg, 69,5 umol). A mistura foi borbulhada com atmosfera de nitrogênio e agitada a 80°C por 6 h. A mistura de reação foi diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 × 30 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 30/1 a 1: 1) para dar terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc- butil(difenil)silil]oxilmetil]piperazina-1-carboxilato (207 mg, 262 umol, 37,7% de rendimento) como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ =7,62 - 7,53 (m, 4H), 7,43 - 7,28 (m, 11H), 4,42 - 4,29 (m, 1H), 4,26 - 3,87 (m, 4H), 3,81 (br d, J = 13,2 Hz, 2H), 3,75 – 3,60 (m, 4H), 3,44 (dd, J = 1,6, 17,2 Hz, 1H), 3,24 - 3,04 (m, 3H), 2,96 (br s, 1H), 2,75 (br s, 3H), 2,49 (s, 3H), 2,43 - 2,28 (m, 2H), 2,10 - 1,96 (m, 2H), 1,91 - 1,80 (m, 1H), 1,80 - 1,67 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,02 - 0,89 (m, 9H).
[0814] Etapa B: terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em metanol (30 mL) a -40°C por 30 minutos. A uma solução de terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1- carboxilato (530 mg, 670 umol) na mistura acima foi adicionado 10% Pd/C seco (0,30 g) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada a 40°C por 10 horas sob 15 psi de H 2. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar terc- butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (394 mg, 427 umol, 63,8% de rendimento) como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,57 (br t, J = 6,0 Hz, 4H), 7,43 - 7,33 (m, 6H), 4,43 (br dd, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 4,32 - 4,00 (m, 4H), 3,99 - 3,89 (m, 2H), 3,88 - 3,65 (m, 4H), 3,27 - 2,89 (m, 6H), 2,81 (br d, J = 8,4 Hz, 2H), 2,56 - 2,50 (m, 3H), 2,42 (br d, J = 16,8 Hz, 2H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 1,88 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 1,79 (br d, J = 5,2 Hz, 2H), 1,43 (s, 9H), 0,95 (br s, 9H).
[0815] Etapa C: terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc-butil(difenil)silil] oximetil]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 3-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,16 g, 228 umol), 3- benziloxi-1-bromo-naftaleno (143 mg, 457 umol), [2-(2-aminoetil)fenil]-cloro- paládio; diciclo-hexil-[2-(2,4,6-tri-isopropilfenil)fenil]fosfano (16,9 mg, 22,8 umol) e t-BuONa (43,9 mg, 457 umol) em tolueno (4 mL) foi agitada a 70°C por 12 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (5,00 mL) e extraída com éter acetato (3 × 10 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com cloreto de sódio saturado (10 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico, 0,1%.)/acetonitrila] para dar terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1-carboxilato (0,15 g, 157 umol, 68,9% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 933,1[M+H]+.
[0816] Etapa D: terc-butil 3-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-4-[7-(3-hidroxi-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em metanol (10 mL) a -78°C por 30 minutos. terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]piperazina-1-carboxilato (0,10 g, 107 umol) e 10% Pd/C seco (0,01 g) foi adicionado e a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora sob 15 psi de H2. A pasta foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado concentrado sob vácuo para dar terc-butil 3-[[terc-butil(difenil) silil]oximetil]-4-[7- (3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,09 g, bruto) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 843,0 [M+H]+.
[0817] Etapa E: 4-[4-[2-(hidroximetil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol: Uma mistura de terc-butil 3 -[[terc-butil(difenil)silil]oxilmetil]-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (0,04 g, bruto) e piridina; hidrofluoreto (118 mg, 712 umol, 106 uL) em diclorometano (2 mL) foi agitada a 0°C por 1 hora e agitada a 10°C por 12 horas. O pH da mistura foi ajustado para pH > 7 por adição de solução de bicarbonato de sódio saturada (3,00 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = 5/1) para dar 4-[4-[2-(hidroximetil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (0,04 g, bruto) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 505.2 [M+H]+.
[0818] Etapa F: 1-[3-(hidroximetil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[4-[2-(hidroximetil)piperazin-1-il]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7- il]naftalen-2-ol (0,02 g, bruto) e TEA (40,1 mg, 396 umol, 55,17 uL) em diclorometano (2 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (999 ug, 7,93 umol) a -40°C, depois a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura foi extinta por adição de metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = 5/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (NH4HCO3 10mM)-ACN]; B%: 38%-68%, 3min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 1-[3-(hidroximetil)-4-[7-(3- hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (1,08 mg, 1,73 umol). ES+APCI MS m/z 559,5 [M+H]+.
EXEMPLO 170 2-(1-acriloil-4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 110°C, 3h 67,9% 1-(terc-butil) 2-metil 4-(7-benzil-2-(2- 93,8% (dimetilamino)etóxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1,2-dicarboxilato 77,8% Dioxano, 85°c, 5h Duas etapas 72,5% DCM, -78-0 °C, 2,5 h 37,1% 3,07% 61,0%
[0819] Etapa A: 1-(terc-butil)2-metil4-(7-benzil-2-cloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,2-dicarboxilato: A uma solução de 7- benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (5,00 g, 17,0 mmol) e 1- terc-2-metilpiperazina-1,2-dicarboxilato de butila (4,24 g, 17,3 mmol) em DMSO (80 mL) foi adicionado DIEA (5,49 g, 42,5 mmol, 7,42 mL). Depois de se agitar a 55°C por 12 horas, a mistura foi diluída com acetato de etila (100 mL), lavada com salmoura (3 × 150 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE/EA = 3/1) para dar 1-terc-butil 2-metil-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1,2-dicarboxilato (8,00 g, 15,9 mmol, 93,8% de rendimento) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 502,1[M+H]+.
[0820] Etapa B: 1-(terc-butil) 2-metil 4-(7-benzil-2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1,2-dicarboxilato: Uma mistura de 1-(terc-butil-2-metil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1,2-dicarboxilato (8,00 g, 15,9 mmol), 2-(dimetilamino)etanol (2,84 g, 31,9 mmol, 3,19 mL), Cs2CO3 (13,0 g, 39,8 mmol), Pd(OAc)2 (537 mg, 2,39 mmol) e BINAP (1,98 g, 3,19 mmol) em tolueno (30 mL) foram agitados a 110°C por 3 horas sob nitrogênio. A mistura foi diluída com água (30 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 50 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 x 100 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (TFA 0,1%) para dar 1-terc- butil 2-metil-4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (6,00 g, 10,8 mmol, 67,9% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 555,3[M+H]+.
[0821] Etapa C: 1-terc-butil 2-metil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato: Uma mistura de 1- terc-butil 2-metil 4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (6,00 g, 10,8 mmol) e 10% Pd/C (600 mg, 10,8 mmol) em MeOH (100 mL) foi agitada a 40°C por 12 horas sob H2 a 50 psi. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 1-terc- butil 2-metil-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (4,50 g, bruto) foi obtido como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 465,3[M+H]+.
[0822] Etapa D: 1-terc-butil 2-metil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2- dicarboxilato: Uma mistura de 1-[terc-butil 2-metil 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (2,90 g, 6,24 mmol), 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (2,54 g, 8,12 mmol), Pd2(dba)3 (857 mg, 936 umol), RuPhos (728 mg, 1,56 mmol) e Cs2CO3 (5,08 g, 15,6 mmol) em 1,4-dioxano (150 mL) foi agitada a 85°C por 5 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (100 mL), extraída com DCM (1 x 200 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 x 300 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (TFA, 0,1%) para dar 1-[terc-butil 2-metil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2-dicarboxilato (3,50 g, 5,02 mmol, duas etapas 72,5% de rendimento) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 697,3 [M+H]+.
[0823] Etapa E: terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi] -6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 1-[terc-butil 2-metil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1,2- dicarboxilato (1,00 g, 1,44 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado LiAlH4 (219 mg, 5,76 mmol) em porções a -60°C. Após agitar por 2 horas, a mistura foi extinta com solução saturada de sulfato de sódio (0,3 mL), filtrada e a torta de filtro lavada com DCM (100 mL). O filtrado combinado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d] pirimidin-4-il]-2-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (750 mg, 1,12 mmol, 77,8% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 669,3 [M+H]+.
[0824] Etapa F: 2-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: Uma mistura de terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (100 mg, 149 umol), TBAI (11,1 mg, 29,9 umol), 1-p-tolilsulfonil)imidazol (79,9 mg, 359 umol), NaCN (0,12 g, 2,45 mmol) e TEA (37,8 mg, 374 umol, 51,8 uL) em DMF foi agitada a 155°C por 6 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo, diluída com água (1 x 5 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 10 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 20 ml), secos sobre Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna de HPLC-prep: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50%-70%, 28 MIN.) para dar 2-[4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (160 mg, 277 umol, 37,1% de rendimento) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 578,5[M+H]+.
[0825] Etapa G: 2-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila : A uma solução de 2-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60 mg, 104 umol) e DIEA (67,1 mg, 519 umol, 90,7 µL) em DCM (2 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (13,1 mg, 104 umol) a 0°C. Após agitado a 10°C por 4 horas, a mistura foi extinta com MeOH (0,1 mL), depois concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH 10/1) para dar 2- [4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (40,0 mg, 63,3 umol, 61,0% de rendimento) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 632,3[M+H] +.
[0826] Etapa H: 2-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (30 mg, 47,5 umol) em DCM (2 mL) foi adicionado BBR3 (35,7 mg, 142 umol, 13,7 uL) a -78°C sob 0,5 h. A mistura foi aquecida até 0°C e agitada por 2 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo e, em seguida, extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio a -78 - 0°C. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna (Al2O3, DCM/MeOH = 5/1), em seguida, adicionalmente purificada por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 30%-60%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (810 ug, 1,46 umol, 3,07% de rendimento, 97,5% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 542,5 [M+H]+.
EXEMPLO 171 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(2-hidroxietil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
79,6% 69,0% THF, refluxo 82,9% 79,5% Duas etapas 35% Cs2CO3, tolueno, 86,0% 110°C, 3h 2,5 h 83,8% Quatro etapas, 30,7% 1) lutidina, TMSOTf, DCM, -40°C, 2 h Tolueno, 65°C, 10h, 63,2% 41,6% 18,5%
[0827] Etapa A: Etil 2-(3-oxopiperazin-2-il)acetato: A uma solução de dietil (E)- but-2-enedioato (30,2 g, 175 mmol, 28,8 mL) em i-PrOH (300 mL) foi adicionado etano-1,2-diamina (11,0 g, 183 mmol, 12,2 mL). Após agitar a 25°C por 12 horas, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até secura. O sólido branco bruto foi lavado com MTBE (500 mL) e seco sob vácuo para dar etil 2-(3- oxopiperazin-2-il)acetato (26,0 g, 140 mmol, 79,6% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ = 6,55 (br s, 1H), 4,15 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 3,80 - 3,72 (m, 1H), 3,47 (dt, J = 4,8, 11,2 Hz,
1H), 3,36 - 3,22 (m, 1H), 3,18 - 3,08 (m, 1H), 3,07 - 2,95 (m, 2H), 2,76 - 2,70 (m, 1H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[0828] Etapa B: Etil 2-[1-[(4-metoxifenil)metil]-3-oxo-piperazin-2-il]acetato: A uma mistura de 2-(3-oxopiperazin-2-il)acetato (23,6 g, 127 mmol) em metanol (400 mL) foi adicionado 4-metoxibenzaldeído (18,9 g, 139 mmol, 16,9 mL) e CH3COOH (15,2 g, 253 mmol, 14,5 mL) a 0°C. Após agitar a 0°C por 1 hora, a mistura de reação foi resfriada até -10°C. NaBH3CN (23,9 g, 380 mmol) foi adicionado à mistura em porções e a mistura de reação foi aquecida até 15°C e agitada por outras 11 horas. A reação foi extinta por adição de água (400 ML) e extraída com DCM (2 × 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi redissolvido com acetato de etila (300 mL), depois lavado com solução de HCl 0,5 M (2 × 200 mL). A fase aquosa foi ajustada para pH 7 ~ 8 com Na2CO3 sólido, depois extraído com DCM (2 x 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar 2-[1-[(4-metoxifenil)metil]-3-oxo- piperazin-2-il]acetato (27,2 g, 87,6 mmol, 69,0% de rendimento, 98,5% de pureza) como óleo incolor. ES+APCI MS m/z 307,1 [M+H]+.
[0829] Etapa C: 2-[1-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etanol: A uma mistura de etil 2-[1-[(4-metoxifenil) metil]-3-oxo-piperazin-2-il]acetato (27,2 g, 88,8 mmol) em THF (500 mL) foi adicionado LiAlH4 (10,1 g, 266 mmol) em porções a 0°C. Após agitar a 0°C por 1 hora, a mistura de reação foi aquecida até 70°C e agitada por 11 horas. Após conclusão, a reação foi extinta com Na 2SO4 sat. aquoso (40 mL), filtrada e em seguida concentrada. O produto 2-[1-[(4- metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etanol (20 g, bruto) foi obtido como óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 251,1 [M+H]+.
[0830] Etapa D: terc-butil-[2-[1-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etoxi]-difenil- silano: A uma mistura de 2-[1-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etanol (20 g, bruto) em THF (300 mL) foi adicionado NaH (15,9 g, 399 mmol, 60% de pureza)
a 0°C em porções, depois uma solução de TBDPSCl (65,9 g, 239 mmol, 61,6 mL) em THF (100 mL) foi adicionada. A mistura foi aquecida até 15°C e agitada por um adicional de 12 horas. Após conclusão, a reação foi derramada em solução de NH4Cl (300 mL) e extraída com DCM (2 x 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila 3/1 para Diclorometano/Metanol 10/1) para dar terc-butil [2-[1- [(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etoxi]-difenil-silano (29,5 g, 59,9 mmol, duas etapas 35%, 99,2% de pureza) como um óleo amarelo. ES+APCI MS m/z 489,4[M+H]+.
[0831] Eetapa E: terc-butil 3-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]-4-[(4- metoxifenil)metil]piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de terc-butil-[2-[1-[(4- metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etoxi]-difenil-silano (11,0 g, 22,5 mmol) em MeOH (200 mL) foi adicionado TEA (6,83 g, 67,5 mmol, 9,36 mL) e (Boc) 2O (9,82 g, 45,0 mmol, 10,3 mL). Após agitação a 15°C por 3 horas, a reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila 1/0 a 5/1) para dar terc-butil 3-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]-4-[(4-metoxifenil)metil]piperazina-1-carboxilato (11,0 g, 18,7 mmol, 82,9% de rendimento, 100% de pureza) como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 589,4 [M+H]+.
[0832] Etapa F: terc-butil 3-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]piperazina-1- carboxilato: A uma mistura de terc-butil 3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]-4-[(4- metoxifenil)metil]piperazina-1-carboxilato (9,00 g, 15,3 mmol) em MeOH (150 mL) foi adicionado 10% Pd/C (849 umol). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 40 °C por 18 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de um tampão de Celite e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila 10/1 a 3:1) para dar terc-butil 3-[2-[terc-butil(difenil) silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (5,80 g,
12,2 mmol, 79,5% de rendimento, 98,2% de pureza) como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 469,4 [M+H]+.
[0833] Etapa G: 2-[4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 1-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etoxi-terc-butil-difenil-silano: Uma mistura de 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (4,00 g, 13,6 mmol), terc-butil-[2-[1-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etoxi]-difenil-silano (6,98 g, 14,3 mmol) e DIEA (4,39 g, 34,0 mmol, 5,93 mL) em DMSO (80 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e a mistura foi aquecida até a temperatura de 55°C e agitada por 12 horas sob atmosfera de N 2. A mistura de reação foi diluída com água (300 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila 1/0 a 3/1) para dar t2-[4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-2-il]etoxi-terc- butil-difenil-silano (9,00 g, 11,7 mmol, 86,0% de rendimento, 97,0% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 746,4[M+H]+.
[0834] Etapa H: 2-[[7-benzil-4-[3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]-4-[(4- metoxifenil)metil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]- N,N-dimetil-etanamina: Uma mistura de 2-(dimetilamino)etanol (2,39 g, 26,8 mmol, 2,69 mL), 2-[4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 1-[(4-metoxifenil) metil]piperazin-2-il]etoxi-terc-butil-difenil-silano (8,00 g, 10,7 mmol), Pd(OAc)2 (361 mg, 1,61 mmol), BINAP (1,34 g, 2,14 mmol) e Cs2CO3 (8,73 g, 26,8 mmol) em tolueno (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N 2 por 3 vezes. A mistura foi aquecida até 110°C e agitada por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH 50/1 a 10/1) para dar 2-[[7-benzil-4-[3-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]-4-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-
pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (6,50 g, bruto) como um semissólido amarelo. ES+APCI MS m/z 799,4 [M+H]+.
[0835] Etapa I: 2-[4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]etanol: 2-[4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]etanol: Uma solução de 2-[[7- benzil-4-[3-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]-4-[(4-metoxifenil)metil]piperazin-1-il] - 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oxi]-N,N-dimetil-etanamina (6,50 g, bruto) em TFA (80 mL) foi agitada a 80°C por 12 horas. A mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida até secura e o resíduo foi redissolvido em DCM (300 mL) e lavado com água (200 mL). A fase aquosa foi coletada e basificada com NaHCO3 saturado aquoso até pH ~ 8 e, em seguida, extraída com DCM (3 x 200 mL). A fase orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar 2-[4-[7-benzil-2-[2-(dimetil amino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]etanol (3,00 g, bruto) como um semissólido amarelo, o qual foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional.
[0836] Etapa J: 2-[[7-benzil-4-[3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1-il]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina: A uma solução de 2-[4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]etanol (3,0 g, bruto) em THF (40 mL) foi adicionado NaH (1,36 g, 34,1 mmol, 60,0% de pureza) a 0°C. Após agitação por 30 minutos, TBDPSCl (2,81 g, 10,2 mmol, 2,63 mL) foi adicionado por porções. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por outras 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de água (30 mL) a 0°C e extraída para acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura para dar 2-[[7-benzil-4-[3-[2-[terc--butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1- il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (6,00 g,
bruto) como um óleo amarelo, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 679,4 [M+H]+.
[0837] Etapa K: terc-butil4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1- carboxilato: Uma mistura de 2-[[7-benzil-4-[3-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (6,0 g, bruto), Boc2O (18,5 g, 84,8 mmol, 19,5 mL) em MeOH (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi aquecida até 80°C e agitada por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH 1/0 a 10/1) para dar terc-butil4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-piperazina-1- carboxilato (3,10 g, 3,28 mmol, quatro etapas 30,7% de rendimento, 82,2% de pureza) como um semissólido. ES+APCI MS m/z 779,4 [M+H]+.
[0838] Etapa L: terc-butil2-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]-4-[2-[2- (dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (3,10 g, 3,28 mmol, 82,2% de pureza) em MeOH (60 mL) foi adicionado Pd-C (10%, 2 g) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 50°C por 36 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura para dar terc-butil2-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,20 g, 2,75 mmol, 83,8% de rendimento, 86,0% de pureza) como um sólido amarelo, que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. ES+APCI MS m/z 689,4 [M+H]+.
[0839] Etapa M: terc-butil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil2-[2- [terc-butil(difenil)silil]oxietil]-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,85 g, 2,69 mmol), 3- benziloxi-1-bromo-naftaleno (1,09 g, 3,49 mmol), Cs2CO3 (2,19 g, 6,71 mmol), [2-(2-aminofenil)fenil]paládio(1+); diciclo-hexil-[2-(2,4,6-tri- isopropilfenil)fenil]fosfano; metanossulfonato (341 mg, 403 umol) em tolueno (40 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e a mistura foi agitada a 65°C por 10 horas sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH 1/0 a 20/1) para dar terc-butyl4- [7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (1,85 g, 1,69 mmol, 63,2% de rendimento, 84,3% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 922,5 [M+H]+.
[0840] Etapa N: 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de terc-butil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc- (difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 543 umol), 2,6-lutidina (700 mg, 6,51 mmol, 759 uL) em DCM (10 mL) foi adicionado TMSOTf (724 mg, 3,26 mmol, 588 uL). Após agitar a 40°C por 2 horas sob atmosfera de N2, a mistura de reação foi resfriada até -40°C e foi adicionado em porções prop-2-enoil-prop- 2-enoato (137 mg, 1,09 mmol). A mistura de reação foi aquecida até 25°C e agitada por outras 12 horas sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura da reação foi purificada diretamente por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH 30/1 a 10/1) para dar 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc-
butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona (256 mg, 226 umol, 41,6% de rendimento, 77,2% de pureza) como um semissólido. ES+APCI MS m/z 875,5 [M+H]+.
[0841] Etapa O: 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetil amino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona (133 mg, 152 umol) em DCM (5,00 mL) foi adicionado BBr 3 (571 mg, 2,28 mmol, 220 uL) gota a gota a -40°C. A mistura de reação foi aquecida até 0°C e agitada por 3 horas. A mistura de foi concentrada sob pressão reduzida até secura. O material bruto foi lavado com MTBE (25 mL) e o sólido foi coletado. O sólido foi lavado com solução saturada de NaHCO 3 (0,5 mL) até pH ~ 8, a 0°C, em seguida, dissolvido em MeOH (3 mL). A mistura foi purificada diretamente por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (Ácido Fórmico 0,225%)-ACN]; B%: 15% - 39%, 10 min.) para dar 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (16,7 mg, 28,2 umol, 18,5% de rendimento, 99,9% de pureza, Sal de Ácido Fórmico) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 547,3 [M+H]+.
EXEMPLO 172 1-(4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-(2-hidroxietil)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
43,9% Ca2CO3, tolueno, 61,9% 110°C, 3 h, 53,3% TMSOTI, lutidina tolueno, 65°C, 70,3% 24 H, 49,7% 17,4% 83,6%
[0842] Etapa A: terc-butil4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (3,04 g, 10,3 mmol), terc-butil3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (5,08 g, 10,8 mmol), DIEA (3,34 g, 25,8 mmol, 4,51 mL) em DMSO (60 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi aquecida até 55°C e agitada por 16 horas sob uma atmosfera de N 2. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de Petróleo/Acetato de Etila 1/0 a 3/1) para dar terc-butil4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-[2- [terc-butil(difenil)silil]oxietil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (3,50 g, 4,53 mmol, 43,9% de rendimento, 94,0% de pureza) como um semissólido amarelo. ES+APCI MS m/z 726,4 [M+H]+.
[0843] Etapa B: terc-butil 4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1- carboxilato: Uma mistura de 2-(dimetilamino)etanol (1,07 g, 12,1 mmol, 1,21 mL), terc-butil4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxiletil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (3,50 g, 4,82 mmol), Pd(OAc)2 (162 mg, 723 umol), BINAP (600 mg, 964 umol) e Cs2CO3 (3,92 g, 12,1 mmol) em tolueno (40 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi aquecida até 110°C com agitação por 3 horas sob atmosfera de N 2. Após resfriar até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 1/0 a 10/1) para dar terc-butil 4-[7- benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[2- [terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (2,30 g, 2,57 mmol, 53,3% 87,0% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 779,5 [M+H]+.
[0844] Etapa C: terc-butil 3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]-4-[2-[2- (dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de 4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]oxietil]piperazina- 1-carboxilato (2,30 g, 2,95 mmol) em MeOH (40 mL) foi adicionado Pd-C (10%, 1,5 g) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. Depois de agitar sob H2 (50 psi) a 50°C por 36 horas, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar terc-butil 3-[2- [terc-butil(difenil)silil]oxietil]-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,58 g, 1,83 mmol,
61,9% de rendimento, 79,6% de pureza) como um óleo incolor que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 689,4 [M+H]+.
[0845] Etapa D: terc-butil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 3-[2- [terc-butil(difenil)silil]oxietil]-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,48 g, 2,15 mmol), 3 benziloxi-1-bromo-naftaleno (875 mg, 2,80 mmol), Cs2CO3 (1,75 g, 5,38 mmol), [2-(2-aminofenil)fenil]paládio(1+); diciclo-hexil-[2-(2,4,6-tri- isopropilfenil)fenil]fosfano; metanossulfonato (273 mg, 323 umol) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 65°C por 24 horas sob atmosfera de N 2. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, DCM/MeOH = 1/0 a 20/1) para dar terc- butil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]piperazina-1- carboxilato (1,20 g, 1,07 mmol, 49,7% de rendimento, 82,0% de pureza) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 921,4 [M+H]+.
[0846] Etapa E: 2-[[7-(3-benziloxi-1-naftil)-4-[2-[2-[terc-butil (difenil)silil]oxietil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oxi]- N,N-dimetil-etanamina: Uma mistura de terc-butil4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-3-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 326 umol) e 2,6-lutidina (419 mg, 3,91 mmol, 455 uL) em DCM (10 mL) foi adicionado TMSOTf (434 mg, 1,95 mmol, 353 uL) em porções a 0°C. A mistura foi aquecida até 10°C e agitada por 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi purificada diretamente por cromatografia de coluna (Al2O3, DCM/MeOH 1/0 a 50/1) para dar 2-[[7-(3- benziloxi-1-naftil)-4-[2-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-
5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (210 mg, 229 umol, 70,3% de rendimento, 89,5% de pureza) como um semissólido amarelo. ES+APCI MS m/z 821,5 [M+H]+.
[0847] Etapa F: 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-3-[2-[terc-butil(difenil)silil] oxietil]piperazin- 1-il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de 2-[[7-(3-benziloxi-1-naftil)-4-[2-[2-[terc- butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina (210 mg, 256 umol) e DIEA (49,6 mg, 384 umol, 67,0 uL) em DCM (10 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (33,9 mg, 269 umol) em porções a -40°C sob atmosfera de nitrogênio. Depois de agitar por 30 minutos à mesma temperatura, a mistura da reação foi purificada diretamente por cromatografia de coluna (Al2O3, DCM/MeOH 1/0 a 50/1) para dar 1-[4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (221 mg, 214 umol, 83,6% de rendimento, 84,7% de pureza) como um semissólido amarelo claro. ES+APCI MS m/z 875,4 [M+H]+.
[0848] Etapa G: 1-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-3-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: Uma mistura de 1-[4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-3-[2-[terc-butil(difenil)silil]oxietil]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona (221 mg, 253 umol) em DCM (10 mL) foi adicionado BBr3 (949 mg, 3,79 mmol, 365 uL) a -40°C. A mistura foi agitada a 0°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura. O produto em bruto foi lavado com MTBE (25 mL), solução saturada de NaHCO3 (0,5 mL) até pH ~ 8, a 0°C e dissolvido em MeOH (3 mL). A solução resultante foi purificada por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (Ácido Fórmico 0,225%) - ACN]; B%: 11% - 41%, 10 min.) para dar 1 -[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (26,7 mg, 44,0 umol, 17,4% de rendimento, 97,8% de pureza, sal de Ácido Fórmico) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 547,3 [M+H]+.
EXEMPLO 173 1-(4-(7-(3-hidroxi-2-metilnaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona tBuONa, tolueno, 56,8% -78 a 0°C, 13,1% Duas etapas 82,8%
[0849] 1-(4-(7-(3-hidroxi-2-metilnaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona foi preparada de acordo com o procedimento para o Exemplo 165 1-[4-[7-(2-fluoro-3-hidroxi- 1-naftil)-2-(3-morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona usando (3-metoxi-2-metil-1-naftil) trifluorometanossulfonato no lugar de (2-fluoro-3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato na etapa F para dar o produto desejado 1-(4-(7-(3- hidroxi-2-metilnaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona como um sólido amarelo (10,4 mg, 13,1% de rendimento, 98,1% de pureza). ES+APCI MS m/z 573,5 [M+H]+.
EXEMPLO 174 (R)-1-(4-(2-((5,5-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona 28,1% 98,6% 99,4% 84,9% 28,7%
[0850] Etapa A: terc-butil (5R)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-pirrolidina-1- carboxilato: A uma solução de (2R)-1-terc-butoxicarbonil-5,5-dimetil-pirrolidina- 2-carboxico (500 mg, 2,06 mmol) em THF anidro (4 mL) foi adicionado BH3-Me2S (2 M, 1,23 mL) gota a gota a 15°C. A reação foi aquecida a 50°C por 5 minutos. Após resfriamento num banho de gelo, foi adicionado à mistura Metanol (20 mL). A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida a 25°C. terc-Butil
(5R)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-pirrolidina-1-carboxilato (400 mg, 1,74 mmol, 84,9% de rendimento) foi obtido como um sólido branco.
[0851] 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 3,97 - 3,81 (m, 1H), 3,62 (dd, J = 3,6, 10,8 Hz, 1H), 3,45 - 3,33 (m, 1H), 2,02 - 1,79 (m, 3H), 1,79 - 1,67 (m, 1H), 1,49 - 1,41 (m, 12H), 1,32 (s, 3H).
[0852] Etapa B: Benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-terc-butoxicarbonil- 5,5-dimetil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (5R)-5-(hidroximetil)-2,2- dimetil-pirrolidina-1-carboxilato (212 mg, 926 umol) e benzil 4-[7-(3-benziloxi-1- naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (300 mg, 463 umol) em THF (10 mL) foi adicionado t-BuONa (133 mg, 1,39 mmol). Depois de agitar a 15°C por 1 hora, a mistura de reação foi derramada em H2O (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo. Composto benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1- terc-butoxicarbonil-5,5-dimetil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (110 mg, 129 umol, 28,1% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 813,5 [M+H]+.
[0853] Etapa C: terc-butil (5R)-5-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]-2,2-dimetil-pirrolidina-1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em MeOH (30 mL) a -40°C por 30 minutos. A uma solução de benzil 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-terc-butoxicarbonil-5,5-dimetil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (200 mg, 246 umol) em acima a mistura (NH3/MeOH) foi adicionado Pd-C (10%, 100 mg) seco sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado para dar o produto terc- butil (5R)-5-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6, 8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oximetil]-2,2-dimetil-pirrolidina-1-carboxilato (150 mg, 244 umol, 99,4% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido amarelo e usado diretamente na próxima etapa sem purificação. ES+APCI MS m/z 589,3 [M+H]+.
[0854] Etapa D: terc-butil (5R)-5-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2- enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]-2,2-dimetil- pirrolidina-1-carboxilato: A uma mistura de terc-butil (5R)-5-[[7-(3-hidroxi-1- naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]-2,2- dimetil-pirrolidina-1-carboxilato (130 mg, 221 umol) e DIEA (285 mg, 2,21 mmol, 385 uL) em diclorometano (3 mL) foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (22,3 mg, 176 umol) em diclorometano (1 mL) a -40°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. A reação foi extinta por adição de solução aquosa de NaHCO3 (2 mL) saturada. Em seguida, a mistura foi derramada em água (20 mL) e extraída com diclorometano (20 mL × 2). Os orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, diclorometano/metanol = 1/0 a 10/1). terc-Butil (5R)-5 -[[7-(3-hidroxi-1- naftil)-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]-2,2-dimetil-pirrolidina-1-carboxilato (140 mg, 217 umol, 98,6% de rendimento) como um óleo marrom. ES+APCI MS m/z 643,6 [M+H]+.
[0855] Etapa E: 1-[4-[2-[[(2R)-5,5-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-hidroxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5 H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de terc-butil (5R)-5-[[7-(3-hidroxi-1-naftil)-4-(4-prop-2- enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]-2,2-dimetil- pirrolidina-1-carboxilato (120 mg, 187 umol) em diclorometano (200 uL) foi adicionado TFA (212 mg, 1,87 mmol, 138 uL). A mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo, depois diluída com diclorometano (5 mL) e ajustada para PH=7 pela adição solução aquosa de NaHCO3 saturada. A mistura foi extraída com diclorometano (10 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45% -75%, 12 min.). 1-[4-[2-[[(2R)-5,5-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3- hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (30 mg, 53,6 umol, 28,7% de rendimento, 97% de pureza) foi obtida como sólido amarelo por liofilização. ES+APCI MS m/z 543,5 [M+H]+.
EXEMPLO 175 (S)-1-(4-(7-(3-hidroxi-2-metilnaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona t-BuONa, tolueno, 90°C, 3h, 23,6% 0,5 h 2,5 h
[0856] (S)-1-(4-(7-(3-hidroxi-2-metilnaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona foi sintetizada de acordo com o procedimento para o Exemplo 165 usando terc-butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato no lugar de terc-butil 4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-(3- morfolinopropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato e (2-fluoro-3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato no lugar de (3- metoxi-2-metil-1-naftil) trifluorometanossulfonato na Etapa F para dar 1-[4-[7-(3- hidroxi-2-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (10,2 mg, 17,3 umol, 21,4% de rendimento, 100% de pureza, Sal de Ácido Fórmico) como um sólido branco. ES+APCI MS m/z 543,4 [M+H]+.
EXEMPLO 176 2-[(2S)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
SOCl2, Imidazol HCl/Dioxano 88,0% 99,0% 95,6% 27,2% DIEA, Dioxano, 48,0% 60,1% 50°C, 12 h, 100% Tolueno, 70°C, 4 99,9% 27,6% hrs, 67,3% Duas etapas, 10,1%
[0857] Etapa A: terc-butil (3aR)-1-oxo-3a,4,6,7-tetra-hidro-3H-oxathiazol[3,4- a]pirazina-5-carboxilato: A uma solução de imidazol (15,7 g, 231 mmol) em DCM (100 mL) foi adicionado SOCl2 (8,25 g, 69,4 mmol, 5,03 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. À mistura foi adicionado terc-butil (3R)-3- (hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (5 g, 23,1 mmol) em DCM (100 mL) a - 70°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por NH4Cl saturado (100 mL) e separada, a camada aquosa foi extraída com DCM (40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil (3aR)-1-oxo-3a,4,6,7-tetra-hidro- 3H-oxatiazolo [3,4-a]pirazina-5-carboxilato (5,8 g 22,1 mmol, 95,6% de rendimento) como um sólido marrom.
[0858] Etapa B: terc-butil (3aR)-1,1-dioxo-3a,4,6,7-tetra-hidro-3H-oxatiazolo[3,4- a]pirazina-5-carboxilato: A uma solução de terc-butil (3aR)-1-oxo-3a,4,6,7-tetra- hidro-3H-oxatiazolo [3,4-a] pirazina-5-carboxilato (7,5 g, 28,6 mmol) em MeCN (225 mL) foi adicionado NaIO4 (7,95 g, 37,2 mmol, 2,06 ml) em água (75 mL) seguida de RuCl3.H2O (129 mg, 572 umol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com NH4Cl saturado (10 mL) e extraída com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc = 3:1 a 1:1) para dar terc-butil (3aR)-1,1-dioxo-3a,4,6,7-tetra-hidro-3H-oxatiazol[3,4- a]pirazina-5-carboxilato (7 g, 25,2 mmol, 88,0% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 4,64 (dd, J=6,4, 8,0 Hz, 1H), 4,36 - 3,94 (m, 3H), 3,64 (ddt, J=3,6, 6,0, 9,2 Hz, 1H), 3,46 (br d, J=11,6 Hz, 1H), 3,13 (br s, 1H), 2,96 (dt, J=3,2, 11,2 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H)
[0859] Etapa C: terc-butil (3S)-3-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (3aR)-1,1-dioxo-3a,4,6,7-tetra-hidro-3H-oxatiazolo[3,4- a]pirazina-5-carboxilato (5 g, 18,0 mmol) em DMF (100 mL) foi adicionado KCN (1,04 g, 16,0 mmol, 684,94 uL). A mistura de reação foi aquecida até 50°C por 16 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por HCl (2 M, 50 mL) e agitada a 15°C por 1 h. A mistura foi basificada por NaOH (40%, 10 mL) e extraída com EtOAc (3 × 100 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc=3:1 a 0:1 e EtOAc: MeOH=100:1 a 10:1) para dar terc-butil (3S)-3- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,1 g, 4,88 mmol, 27,2% de rendimento)
como um óleo marrom.1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 4,05 - 3,71 (m, 2H), 3,08 - 2,88 (m, 3H), 2,84 - 2,62 (m, 2H), 2,56 - 2,37 (m, 2H), 1,47 (s, 9H).
[0860] Etapa D: 2-[(2S)-piperazin-2-il]acetonitrila: Uma mistura de reação de terc-butil (3S)-3-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (850 mg, 3,77 mmol) e HCl/dioxano (4 M, 20 mL) foi agitada a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, o solvente foi removido sob vácuo para dar 2-[(2S)-piperazin-2-il]acetonitrila (740 mg, 3,74 mmol, 99,0% de rendimento, 2HCl) como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 4,04 - 3,90 (m, 1H), 3,81 - 3,70 (m, 2H), 3,69 - 3,61 (m, 2H), 3,53 - 3,36 (m, 2H), 3,13 (d, J=6,4 Hz, 2H).
[0861] Etapa E: 2-[(2S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazin-2-il]acetonitrila: A uma mistura de 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina (1,3 g, 4,42 mmol) e 2-[(2S)-piperazin-2-il]acetonitrila (1,17 g, 5,91 mmol, 2HCl) em dioxano (25 mL) foi adicionado DIEA (2,86 g, 22,1 mmol, 3,85 mL). A mistura de reação foi agitada a 50°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com EtOAc (3 × 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar 2- [(2S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il]acetonitrila (1,69 g, 4,41 mmol, 100% de rendimento) como um sólido marrom.
[0862] Etapa F: terc-butil (2S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de reação de 2-[(2S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il]acetonitrila (1,69 g, 4,41 mmol) e (Boc)2O (10,3 g, 47,2 mmol, 10,8 mL) foi aquecida até 50°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi purificada por cromatografia de sílica gel (PE: EtOA=10:1 a 1:1) para dar terc-butil (2S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-
2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,1 g, 2,12 mmol, 48,0% de rendimento, 93% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 483,4 [M+H]+.
[0863] Etapa G: terc-butil (2S)-4-[7-benzil-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 2-(dimetilamino)etanol (415 mg, 4,66 mmol, 468 uL) em THF (20 mL) foi adicionado NaH (149 mg, 3,73 mmol, 60% de pureza) 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 0,5 h. À mistura foi adicionado terc-butil (2S)-4-(7- benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (900 mg, 1,86 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C por 12 horas em tubo selado sob N 2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por água (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram tratadas com carvão ativado e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil (2S)-4-[7-benzil- 2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,12 mmol, 60,1% de rendimento) como um sólido marrom.
[0864] Etapa H: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em MeOH (20 mL) por 5 min. À solução foi adicionado terc-butil (2S)-4-[7-benzil- 2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,12 mmol) e 10% Pd/C (200 mg). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 16 horas. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com MeOH (3 × 30 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex luna(2) C18 250*50 10u; fase móvel: [água (Ácido Fórmico a 0,225%)-ACN]; B%:%-%, 30MIN.; 60% min.) para dar terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-
4-il]piperazina-1-carboxilato (167 mg, 331 umol, 29,6% de rendimento, 88,3% de pureza) como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 446,3 [M+H]+.
[0865] Etapa I: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[3- (2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [2-(dimetilamino)etoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (180 mg, 404 umol), (4-bromo -2-naftil) 2,2-dimetilpropanoato (248 mg, 808 pmol) e Cs2CO3 (395 mg, 1,21 mmol) em tolueno (6 mL) foi adicionado XPHOS Palladacycle Gen 3 (34,20 mg, 40,4 umol). A mistura de reação foi agitada a 70°C por 4 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi purificada por cromatografia de sílica gel (PE:EA= 5:1 a 0:1 e depois EA:MeOH=50:1 a 10:1) para dar terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[2- (dimetilamino)etoxi]-7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 272 umol, 67,3% de rendimento, 91,3% de pureza) como um sólido marrom. ES+APCI MS m/z 672,0 [M+H]+.
[0866] Etapa J: [4-[4 -[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[2-(dimetilamino)etoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2-dimetilpropanoato: A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 298 umol) em DCM (0,3 mL) foi adicionado TFA (420 mg, 3,68 mmol, 273 uL). A mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2-dimetilpropanoato (238 mg, 298 umol, 99,9% de rendimento, 2TFA) como um óleo marrom.
[0867] Etapa K: [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2-
dimetilpropanoato: A uma solução de [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2- [2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (238 mg, 298 umol, 2TFA) e DIEA (308 mg, 2,38 mmol, 415 uL) em DCM (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (56,3 mg, 446 umol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com uma gota de água. A mistura (foi purificada por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc=1:1 a 0:1, então, EtOAc:MeOH=50:1 a 3:1) para dar [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil- piperazin-1-il]-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7- il]-2-naftil]2,2-dimetilpropanoato (300 mg, bruto) como um óleo marrom. ES+APCI MS m/z 626,4 [M+H]+.
[0868] Etapa L: 2-[(2S)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[2- (dimetilamino)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (300 mg, 479 umol) em THF (3 mL) foi adicionado NaOH (2 M, 3 mL) em água. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 8 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi acidificada por 0,5 mL de ácido fórmico (20% em água) até PH=7 e extraída com DCM (5 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo.
[0869] O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (Ácido Fórmico 0,225%)-ACN]; B%: 25%-49%, 10 min.) para dar 2-[(2S)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (18,3 mg, 30,2 umol, duas etapas, 10,1% de rendimento, 96,7% de pureza, Sal de Ácido Fórmico) como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 542,5 [M+H]+.
EXEMPLO 177
2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, r.t.,0,5 r.t.. 0,5hh 1,5 h
[0870] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]- 7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 549 umol) e [(3R)- 1-metilpirrolidin-3-il]metanol (126 mg, 1,10 mmol) em tolueno (6 mL) foi adicionado t-BuONa (79,1 mg, 823 umol) a 18°C e a mistura de reação agitada a 18°C por 0,5 hora. À mistura foi, em seguida, adicionado EtOAc (20 mL) e água (15 mL), em seguida, extraída com EtOAc (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa
(ACN/Água (0,1% de Ácido Fórmico) = 42%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4- [2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 331 umol, 60,4% de rendimento, 99,0% de pureza) como sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 598,3[M+H]+.
[0871] Etapa B: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 334 umol) e TFA (763 (6,69 mmol, 495 uL) foi agitada a 18°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (250 mg, bruto, 2TFA) como óleo marrom.
[0872] Etapa C: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (250 mg, 344 umol, 2TFA) e DIEA (356 mg, 2,76 mmol, 480 uL) em DCM (5 mL) foi adicionado prop- 2-enoil prop-2-enoato (65,2 mg, 517 umol) a 0°C e a mistura foi agitada a 18°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi extinta com água (3 mL) e depois extraída com DCM (3 × 6 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (NH4HCO3 10mM)-ACN];B%: 30%-60%, 3min.) para dar 2-[4-[2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (9,98 mg, 17,0 umol, 4,94% de rendimento, 94,1% de rendimento) como sólido branco. ES+APCI MS m/z 552,5[M+H]+.
EXEMPLO 178 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 79,1% 38,7% 61,9%
2. MeOH, Cs2CO3, tolueno, refluxo, 1,5h, 70°C, 4 h, 49,5% 63,7% t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5h, 55,5% Três etapas 5,8%
[0873] Etapa A: 7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- ol: Uma suspensão de MeOH (1.000 mL) e Na (22,0 g, 957 mmol, 22,7 mL) foi agitada por 30 min. A esta mistura foi adicionado etil 1-benzil-3-oxo-piperidina- 4-carboxilato (50 g, 191 mmol e 2-metilisotioureia (47,9 g, 344 mmol, 0,5 H2SO4)
a 15°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 30 horas. A mistura de reação foi acidificada por HCl (2 M) (300 mL) até pH=6 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em 200 mL de água e agitado rapidamente. A suspensão foi filtrada e o sólido branco coletado e lavado com acetato de etila. 7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol (68 g, 151 mmol, 79,1% de rendimento, 64,0% de pureza) foi obtido como um sólido branco.
[0874] Etapa B: 7-benzil-4-cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina: A uma solução de 7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-ol (50 g, 174 mmol) em CHCl3 (1000 ml) foi adicionado POCl3 (166 g, 1,08 mol, 100 mL) e a mistura foi agitada a 80°C por 13 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EtOAc (500 mL) e basificado usando Na2CO3 saturado (800 mL) até PH=7. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 400 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EA de 100:1 a 80:1) para dar 7-benzil-4-cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (21,7 g, 67,4 mmol, 38,7% de rendimento, 95,0% de pureza) como óleo marrom. ES+APCI MS m/z 306,1[M+H]+.
[0875] Etapa C: terc-butil 4-(7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 7- benzil-4-cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (2,6 g, 8,50 mmol) e 2-piperazin-2-ilacetonitrila (1,68 g, 8,50 mmol, 2HCl) em DMSO (52 mL) foi adicionado DIEA (5,49 g, 42,5 mmol, 7,40 mL). A mistura foi aquecida até 80°C e agitada a 80°C por 6 horas. À mistura foi adicionado (Boc) 2O (18,5 g, 85,0 mmol, 19,5 mL) e a mistura foi agitada a 80°C por 1 hora. Foi adicionada água (150 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 200 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (200 mL), seca com NaSO4 anidro, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EA de 10:1 a 0:1) para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,74 g, 5,26 mmol, 61,9% de rendimento, 95,0% de pureza) como sólido marrom. ES+APCI MS m/z 495,4[M+H]+.
[0876] Etapa D: terc-butil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 4-(7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,51 g, 5,07 mmol) e DIEA (1,97 g, 15,2 mmol, 2,65 mL) em DCE (50 mL) foi adicionado 1-cloroetil carbonocloridrato (1,81 g, 12,7 mmol) a 0°C e a mistura agitada a 15°C por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH (50 mL) e a mistura de reação foi agitada a 70°C por 1,5 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN];B%: 23%-48%, 30; 50% min.) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (1,13 g, 2,51 mmol, 49,5% de rendimento, 90,0% de pureza) como sólido rosa. ES+APCI MS m/z 405,3[M+H]+.
[0877] Etapa E: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (730 mg, 1,80 mmol), (4- bromo-2-naftil) 2,2-dimetilpropanoato (832 mg, 2,71 mmol) e Cs2CO3 (1,76 g, 5,41 mmol) em tolueno (18 mL) foi adicionado [2-(2-aminofenil)fenil] paládio(1+); diciclohexil-[2-(2,4,6-tri-isopropilfenil)fenil]fosfano-metanossulfonato (153 mg, 180 pmol), a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura de reação foi agitada a 70°C por 4 horas. Mediante conclusão, foi adicionada água (20 mL) à mistura. A mistura resultante foi extraída com EtOAc (4 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (40 mL), secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EP: AcOEt desde 30:1 a 0:1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (740 mg, 1,15 mmol, 63% de rendimento, 98,0% de pureza) como sólido marrom. ES+APCI MS m/z 631,5[M+H]+.
[0878] Etapa F: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1- naftil]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (100 mg, 158 umol) em DCM (2 mL) foi adicionado m-CPBA (32,2 mg, 158 umol, 85,0% de pureza) a 0°C e a mistura agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por Na2S2O3 saturado (4 mL) a 0°C e separada, então, diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EA de 10:1 a 0:1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (90 mg, 125 umol, 79,0% de rendimento, 90,0% de pureza) como sólido marrom. ES+APCI MS m/z 647,5[M+H]+.
[0879] Etapa G: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3- (2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (560 mg, 866 umol), [(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metanol (199 mg, 1,73 mmol) em tolueno (10 mL) foi adicionado t-BuONa (125 mg, 1,30 mmol) a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura foi particionada entre EtOAc (20 mL) e água (15 mL) e separada. Então, a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa para dar terc-butil 2-(cianometil)- 4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (340 mg, 481 umol, 55,5% de rendimento, 98,7% de pureza) como óleo marrom. ES+APCI MS m/z 698,4[M+H]+.
[0880] Etapa H: [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2- dimetilpropanoato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 201 umol) em DCM (0,2 mL) foi adicionado TFA (229 mg, 2,01 mmol, 148 uL) a 15°C e a mistura foi agitada a 15°C por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (170 mg, bruto, 2TFA) como óleo marrom.
[0881] Etapa I: [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2- dimetilpropanoato: A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (170 mg, 206 umol, 2TFA) e DIEA (213 mg, 1,65 mmol, 287 uL) em DCM (0,3 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (38,9 mg, 309 umol) a 0°C e esta mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por água (0,5 mL), depois concentrada sob vácuo. O resíduo (DCM: MeOH=10:1) foi purificado por cromatografia de sílica gel (de PE: EtOAc=2:1 a EtOAc: MeOH=0:1) para dar [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-
naftil]2,2-dimetilpropanoato (170 mg, 182 umol, 88,7% de rendimento, 70,0% de pureza) como óleo marrom. ES+APCI MS m/z 652,6[M+H]+.
[0882] Etapa J: 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1- il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]- 2-naftil]2,2-dimetilpropanoato (170 mg, 261 umol) em THF (1,5 mL) foi adicionado NaOH (2 M, 1,5 mL) e a reação foi agitada a 15°C por 6 horas. A mistura de reação foi neutralizada por HCOOH (20%, 0,1 mL) até PH=7. A mistura resultante foi extraída com DCM (3 × 5 mL), as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% Ácido Fórmico)- ACN];B%:12%-39%, 10 min.) para dar 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (6,88 mg, 11,6 umol, 4,44% de rendimento, 95,6% de pureza) como sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 568,5[M+H]+.
EXEMPLO 179 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila r.t., 1,5 h t-BuONa, tolueno, 15°C, 0,5h, 31,7% 0 °C-r.t., 0,5 h
[0883] Etapa A: [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol: À solução de terc-butil (3R)- 3-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (1 g, 4,97 mmol) em THF (40 mL) foi adicionado LiAlH4 (377 mg, 9,94 mmol) a 0°C, em seguida, a mistura foi aquecida até 70°C e agitada a 70°C por 4 horas. A mistura de reação foi extinta por Na 2SO4 saturado (3 mL) e filtrada, a torta de filtro foi lavada com THF (5 × 20 mL). A fase orgânica combinada foi concentrada sob vácuo para dar [(3R)-1-metilpirrolidin- 3-il]metanol (820 mg, bruto) como óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio- d) δ = 3,66 - 3,62 (dd, J=4,8, 10,0 Hz, 1H), 3,53 - 3,49 (dd, J=5,6, 10,0 Hz, 1H), 3,35 - 3,18 (m, 1H), 2,77 - 2,68 (m, 1H), 2,59 - 2,53 (m, 1H), 2,52 - 2,45 (m, 1H), 2,40 - 2,33 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,31 - 2,26 (m, 1H), 2,04 - 1,93 (m, 1H), 1,69 - 1,59 (m, 1H)
[0884] Etapa B: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: À solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 773 umol) e [(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metanol (178 mg, 1,55 mmol) em tolueno (10 mL) foi adicionado t-BuONa (111 mg, 1,16 mmol) e esta mistura foi agitada a 15°C por 0,5 hora. À mistura foi adicionado acetato de etila (20 mL) e água (15 mL), em seguida, extraída com acetato de etila (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase inversa (ACN/água (0,1% Ácido Fórmico) = 42%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 245 umol, 31,7% de rendimento, 95,0% de pureza) como sólido marrom. ES+APCI MS m/z 698,6[M+H]+.
[0885] Etapa C: [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5Hpirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato: Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 258 umol) e TFA (588 mg, 5,16 mmol, 382 uL) foi agitada a 20°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil] 2,2-dimetilpropanoato (200 mg, bruto, 2TFA) como um óleo marrom.
[0886] Etapa D: [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[((3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato: À solução de [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (200 mg, 242 umol, 2TFA) e DIEA (470 mg, 3,63 mmol, 633 uL) em DCM (0,6 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (30,5 mg, 242 umol) a 0°C e a reação agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EA=2:1 ~ 0:1 a DCM: MeOH=50:1~1:1) para dar [4-[4-[3-(cianometil)-4- prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-
pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (630 mg, bruto) como óleo marrom. ES+APCI MS m/z 652,6[M+H]+.
[0887] Etapa E: 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1- il]-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]- 2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (630 mg, 966 umol) em THF (3 mL) foi adicionado NaOH (2 M, 3 mL) a 18°C e a mistura agitada a 18°C por 2 horas. A mistura de reação foi neutralizada por HCOOH (20%, 0,5 mL) até PH=7. A mistura resultante foi extraída com DCM (3 × 5 mL), as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (NH4HCO3 10mM)-ACN];B%: 35%-65%, 3min.) para dar 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (9,4 mg, 15,8 umol, 1,64% de rendimento, 95,5% de pureza) como sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 568,5[M+H]+.
EXEMPLO 180 4-(3-(4-(piperazin-1-il)-7-(5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-iloxi)propil)morfolina
69,4% Tolueno, 90°C, 12 hrs, 51,7% DCM, -50 °C, 0,5hr Duas etapas, 23%
[0888] Etapa A. 2-[[4-bromo-5-(trifluorometil) indazol-1-il] metoxi]etil-trimetil- silano: A uma solução de 4-bromo-5-(trifluorometil)-1H-indazol (650 mg, 2,45 mmol, 1 eq) em DMF (30 mL) foi adicionado NaH (117,71 mg, 2,94 mmol, 60% de pureza, 1,2 eq) a 0°C. Após ser agitada a 0°C por 1 hora, uma solução de 2- (clorometoxi) etiltrimetil-silano (531,56 mg, 3,19 mmol, 564,29 uL, 1,3 eq) em DMF (10 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura foi aquecida até 15°C e agitada por 2 horas. A mistura foi extinta com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (50,0 mL), diluída com água (100,0 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 100,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10:1). 2-[[4- bromo-5-(trifluorometil)indazol-1-il]metoxi]etil-trimetil-silano (680 mg, 1,70 mmol, 69,44% de rendimento, 99,0% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. ES+APCI MS m/z 395,0[M+H]+.
[0889] Etapa B. terc-butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-7-[5-(trifluorometil)-1-(2- trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 2-[[4-bromo-5-(trifluorometil)indazol-
1-il]metoxi]etil-trimetil-silano (444,35 mg, 1,12 mmol, 1,3 eq), 4-[2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato de terc-butil (400 mg, 864,71 umol, 1 eq), RuPhos (80,70 mg, 172,94 umol, 0,2 eq), Pd2(dba)3 (118,77 mg, 129,71 umol, 0,15 eq) e Cs2CO3 (845,21 mg, 2,59 mmol, 3 eq) em tolueno (40 mL) foi desgaseificada e purgada com N 2 3 vezes e a mistura foi agitada a 90°C por 12 h sob nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover tolueno. O resíduo foi diluído com água 100 mL e extraído com acetato de etila 300 mL (100 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água 300 mL (100 mL x 3), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM: CH3OH = 30:1 a 20:1). terc-butil 4-[2-(3-morfolinopropoxi)-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 446,87 umol, 51,68% de rendimento, 86,8% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 773,3[M+H]+.
[0890] Etapa C. 4-[3-[[4-piperazin-1-il-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2-il] oxi]propil]morfolina : A uma solução de terc- butil-4-[2-(3-morfolinopropoxi)-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5Hpirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 111,72 umol, 1 eq) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (254,77 mg, 2,23 mmol, 165,43 uL, 20 eq) a 25°C. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada in vacuo. 4-[3-[[4-piperazin-1-il-7- [5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2-il] oxi]propil]morfolina (200 mg, bruto, TFA) foi obtido como um óleo de cor marrom. O produto bruto foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.ES+APCI MS m/z 547,5[M+H]+.
[0891] Etapa D. 1-[4-[2-(3-morfolinopropoxi)-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 4-[3-[[4-piperazin-1-il-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]propil]morfolina (200 mg, TFA) e DIEA (600 mg, 4,64 mmol, 808,63 uL) em DCM (2 mL) foi adicionado gota a gota prop- 2-enoil-prop-2-enoato (13 mg, 103,08 umol) a -50°C. A mistura foi agitada a - 50°C por 30 min. A mistura foi extinta com água e extraída com acetato de etila (50 mL), a camada orgânica foi lavada com água (1 × 20 mL) e salmoura (1 × 20 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna de HPLC-prep (condição FA): Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225%FA)-ACN];B%: 15%-36%, 10 min.]. 1-[4-[2-(3-morfolinopropoxi)-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol- 4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (18,26 mg, 28,12 mmol, duas etapas 23%, 99,6% de pureza, FA) foi obtido como um sólido amarelo. ES+APCI MS m/z 601,4[M+H]+.
EXEMPLO 181 1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en- 1-ona t-BuONa, THF, 0°C, 1 hora, 40°C, 12 42% horas, 35% 15°C, 2 horas -40°C, 0,5 hora, duas etapas 28%
[0892] Etapa A. benzil 4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il)propoxi)-7-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 3- ((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propan-1-ol (107 mg, 681 umol) em THF (2 mL) foi adicionado t-BuONa (98,1 mg, 1,02 mmol) seguido de benzil 4- [2-metilsulfinil-7-[5-metil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 340 umol). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura foi derramada em água (10 mL) e extraída com DCM (2x10 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,1% TFA) - ACN]; B%: 25%-55%, 12min.) para dar benzil 4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (110 mg, 143 umol, 42,0% de rendimento) foi obtido como sólido amarelo. 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,08 - 8,01 (m, 1H), 7,45 - 7,43 (m, 4H), 7,37 - 7,31 (m, 3H), 5,76 (s, 2H), 5,24 (s, 2H), 4,76 - 4,63 (m, 1H), 4,60 - 4,45 (m, 3H), 4,42 (s, 2H), 4,36 - 4,24 (m, 1H), 3,96 - 3,83 (m, 2H), 3,79 - 3,65 (m, 8H), 3,64 - 3,53 (m, 6H), 3,12 - 2,92 (m, 1H), 2,90 – 2,77 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,44 - 2,41 (m, 1H), 2,36 - 2,12 (m, 3H), 0,98 - 0,93 (m, 2H), 0,01 - -0,03 (m, 9H)
[0893] Etapa B. terc-butil 4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il)propoxi)-7-(5-metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(5)-metil-1-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato (90 mg, 117 umol) e BOC2O (51,1 mg, 234,1 umol, 53,8 uL) em MeOH (2 mL) foi adicionado Pd/C (10%, 50 mg) sob uma atmosfera de N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 12 horas. A mistura foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por TLC-prep (SiO2, DCM/MeOH = 10 : 1) para dar terc-butil 4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il)propoxi)-7-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (30 mg, 40,8 umol). ES+APCI MS m/z 735,6[M+H]+.
[0894] Etapa C. (1S,4S)-5-(3-((7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)propil)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptano: A uma solução de terc-butil 4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (30 mg, 40,8 umol) em DCM (0,5 mL) foi adicionado TFA (770 mg, 6,75 mmol) gota a gota. A mistura foi agitada a 15°C por 2 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar (1S,4S)-5-(3-((7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)propil)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptano (30 mg, bruto). ES+APCI MS m/z 505,5[M+H]+.
[0895] Etapa D. 1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il)propoxi)-7-(5-metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução de (1S,4S)-5-(3-((7-(5-metil-1H- indazol-4-il)-4-(piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oxi)propil)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano (20 mg, 39,6 umol, 1 eq) e DIEA
(30,7 mg, 238 umol, 41,4 uL, 6 eq) em DCM (2 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (4,00 mg, 31,7 umol, 0,8 eq) a -50°C. A mistura foi agitada a -40 - -20°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35%-65%, 12min.). O produto 1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(5- metil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona (6,48 mg, 11,2 umol, duas etapas, 28,3% de rendimento, 96,8% de pureza) foi obtido como sólido branco. ES+APCI MS m/z 559,5[M+H]+.
EXEMPLO 182 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Tolueno, 70°C, 99,3% 1h, 29,5% Duas etapas 37,2%
[0896] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (190 mg, 403 umol), (4-bromo-2-naftil) 2,2- dimetilpropanoato (248 mg, 806 umol) e Cs2CO3 (394 mg, 1,21 mmol) em tolueno (5 mL) foi adicionado XPHOS Palladacycle Gen 3 (34,1 mg, 40,29 umol) e a mistura de reação agitada a 70°C por 4 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi purificada por cromatografia de sílica gel (PE: EA=3:1 a 0:1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (95 mg, 118 umol). ES+APCI MS m/z 698,4 [M+H]+.
[0897] Etapa B: [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (40 mg, 57,3 umol) em DCM (0,1 mL) foi adicionado TFA (154 mg, 1,35 mmol) a 15°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, o solvente foi removido sob vácuo para dar [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (47 mg, 56,9 umol).
[0898] Etapa C: [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato. A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (47 mg, 56,9 umol) e DIEA (58,9 mg, 455 umol) em DCM (1 mL) foi adicionad prop-2-enoil prop-2-enoato (10,8 mg, 85,4 umol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de uma gota de água. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc=3:1 a EtOAc: MeOH=3:1) para dar [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazina-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2- dimetilpropanoato (130 mg, bruto). ES+APCI MS m/z 652,5 [M+H]+.
[0899] Etapa D: 2-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de [4-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1- il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]- 2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (250 mg, 384 umol) em THF (1,5 mL) foi adicionado NaOH (2 M, 1,5 mL) em água. A mistura de reação foi agitada a 15°C por 9 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi acidificada por adição de duas gotas de ácido fórmico (20% em água) para atingir um pH=7 e a camada aquosa foi extraída com DCM (5 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225%FA)-ACN]; B%: 20%-47%, 10min.) para dar 2-[4-[7-(3-hidroxi-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (13,1 mg, 21,2 umol). ES+APCI MS m/z 568,5 [M+H]+.
EXEMPLO 183 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
20 °C, 0,25 h 1,5 h 77,7% 14,7%
[0900] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 549 umol) e [(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metanol (126 mg, 1,10 mmol, 130 uL) em tolueno (6,00 mL) foi adicionado t-BuONa (105 mg, 1,10 mmol). A mistura foi agitada a 20°C por 0,25 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EA/MeOH 50/1 a 10/1) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 427 umol). ES+APCI MS m/z 598,6 [M+H]+.
[0901] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (270 mg, 452 umol) em DCM (330 uL) foi adicionado TFA (515 mg, 4,52 mmol). A mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora e concentrada sob vácuo. Então, TFA (334 uL) foi adicionado. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (400 mg, bruto). ES+APCI MS m/z 498,4 [M+H]+.
[0902] Etapa C: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (276 mg, 451 umol) e DIEA (1,46 g, 11,3 mmol) em DCM (4,00 mL) foi adicionado prop-2-enoyl prop- 2-enoato (51,2 mg, 406 umol) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (0,5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 12min.) para dar 2-[4-[2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (37,1 mg, 66,3 umol). ES+APCI MS m/z 552,4 [M+H]+.
EXEMPLO 184 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-hidroxipropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona
[0903] 1-[4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-(3-hidroxipropoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-il]prop-2-en-1-ona foi preparada seguindo o Exemplo 136 usando 3-[terc-butil (dimetil) silil]oxipropan-1-ol no lugar de 2-(3- metoxipirrolidin-1-il)etanol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 490,3 [M+H]+.
EXEMPLO 185 1-(4-(2-(3-((1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona
[0904] Etapa A: 3-((1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propan-1-ol: A um frasco foi adicionado (1R,4R)-2-Oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano sal de HCl (0,250 g, 2,522 mmol), CH3CN (5,04 mL) e 3-Bromo-1-propanol (0,274 mL, 3,026 mmol). Então, K2CO3 (1,05 g, 7,57 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida até 50°C quando ela é agitada por 16 horas. A mistura foi, então, resfriada até a temperatura ambiente, diluída com CH2Cl2 e filtrada e o sólido foi lavado com CH2Cl2. O filtrado foi, em seguida, concentrada e o óleo bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (5% de MeOH/DCM com 0,2% de NH4OH) para dar o produto como um óleo incolor.
[0905] Etapa B: 1-(4-(2-(3-((1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 127 usando o procedimento a seguir no lugar daquele delineado na Etapa D. A um frasco foi adicionado 3-((1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il)propan-1-ol (0,171 g, 1,09 mmol) e benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,125 g, 0,218 mmol) seguido por dioxano (0,435 mL). Em seguida, Cs2CO3 (0,213 g, 0,653 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida até 100°C por 15 horas. A reação foi diluída com CH2Cl2, filtrada e o sólido residual foi lavado com CH2Cl2. O filtrado foi, em seguida, seco sobre Na2SO4, filtrado e concentrado. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna (4% de MeOH/DCM com 0,2% de NH4OH) para dar o produto como uma espuma amarela. ES+APCI MS m/z 571,2 [M+H]+.
EXEMPLO 186 Benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3-(morfolinometil)fenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato
[0906] Benzil 4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3-(morfolinometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 127, usando o procedimento a seguir no lugar daquele delineado na Etapa D. A uma solução de benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftaleno-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,150 g, 0,261 mmol) e pinacol éster cloridrato de ácido 3-(4-morfolinometil)-fenilborônico (0,266 g, 0,784 mmol) em dioxano (2,61 mL) foi adicionado Na2CO3 (0,523 mL, 1,0452 mmol, 2,0 M Aq). A mistura foi desgaseificada por borbulhamento de argônio por 5 min. Em seguida, foi adicionado Tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,030 g, 0,026 mmol) e a mistura foi aquecida a 95°C onde ele foi agitado por 7 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e depois diluída com CH2Cl2 e filtrada. O sólido foi lavado com CH2Cl2. O filtrado foi, em seguida, seco sobre Na2SO4, filtrado e concentrado. O resíduo em bruto foi purificado por cromatografia de coluna (30- 50% de EtOAc/DCM) para dar o produto como uma espuma amarela. ES+APCI MS m/z 591,3 [M+H]+.
EXEMPLO 187 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0907] (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando N-metil-D-prolinol no lugar de N-metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 529,3 [M+H]+.
EXEMPLO 188 (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0908] (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando N-metil-L-prolinol no lugar de (3S)-(1-metil-pirrolidin-3-il)-metanol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 529,2 [M+H]+.
EXEMPLO 189 1-(4-(2-((1-benzilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0909] 1-(4-(2-((1-benzilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando (1-Benzilpirrolidin-3- il)metanol no lugar de N-metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 605,3 [M+H]+.
EXEMPLO 190 1-(4-(2-((1-ciclopropilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0910] 1-(4-(2-((1-ciclopropilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando (1-ciclopropil-3- pirrolidinil)metanol no lugar de N-metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 555,3 [M+H]+.
EXEMPLO 191 1-((2S,6R)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6-dimetilpiperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0911] Etapa A: Benzil 4-((3S,5R)-4-(terc-butoxicarbonil)-3,5-dimetilpiperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Uma suspensão de benzil 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (500 mg, 1,48 mmol), terc-butil cis-2,6-dimetilpiperazina-1-carboxilato (349 mg, 1,63 mmol) e DIEA (0,26 mL) em N,N-dimetilacetamida (1 mL) foi agitada à r.t. durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (15 mL) e NaHCO 3 1M (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com 2 M de Na2CO3 e salmoura (2 ml cada), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em coluna de 24g Redisep de sílica gel usando 20 a 50% de EtOAc em hexano como eluente para dar um sólido incolor (0,440 g, 58%). ES+APCI MS m/z 516,2 [M+H]+.
[0912] Etapa B: Benzil 4-((3S,5R)-4-(terc-butoxicarbonil)-3,5-dimetilpiperazin-1- il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-((3S,5R)-4-(terc-butoxicarbonil)-3,5-dimetilpiperazin-1-
il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (400 mg, 0,775 mmol), 3-morfolinopropan-1-ol (400 mg, 2,33 mmol, 5 eq.), carbonato de césio (1,26 g, 3,88 mmol, 5 eq.) e dioxano (3 mL) em um frasco de 4 mL foi purgada com nitrogênio. O frasco foi tampado e a mistura agitada a 110 oC por 20 h, depois a 120oC durante a noite. A reação foi resfriada, diluída com EtOAc (10 mL), filtrada através de Celite e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica, Redisep 40g, utilizando 2 a 10% de MeOH/DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido amorfo amarelo claro (272 mg, 56%).
[0913] Etapa C: terc-butil (2S,6R)-2,6-dimetil-4-(2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-((3S,5R)-4-(terc-butoxicarbonil)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (272 mg, 0,095 mmol), paládio sobre carbono (50 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O), EtOH (5 mL) e THF (5 mL) foi purgada com hidrogênio e agitada sob atmosfera de H2 (balão de borracha) por 3 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOH (3 mL), filtrada através de Celite e o celite lavado com EtOH (2 x 2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo e secos sob alto vácuo durante 2 dias para dar uma espuma esbranquiçada (205 mg, 96%). ES+APCI MS m/z 491,3 [M+H]+.
[0914] Etapa D: terc-butil (2S,6R)-4-(7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6- dimetilpiperazina-1-carboxilato: A uma suspensão agitada de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (19 mg, 0,020 mmol) em tolueno desgaseificado seco (0,5 mL) a temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado (+/-)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftil (24 mg, 0,038 mmol). A mistura foi, então, aquecida até 100°C por 15 minutos. A mistura escura resultante foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionado t-butóxido de sódio sólido (39 mg, 0,41 mmol), seguido de uma solução de 3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato (82 mg, 0,25 mmol) e terc- butil (2S,6R)-2,6-dimetil-4-(2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (100 mg, 0,20 mmol) em tolueno seco desgaseificado (0,5 mL). O balão foi fechado e aquecido com agitação até 100°C por 30 min. A mistura de reação foi resfriada e dividida entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL). A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica, Redisep 40g, utilizando 4% de MeOH + 0,1% NH4OH em DCM como eluente para dar um sólido incolor (87 mg, 63%). ES+APCI MS m/z 684,3 [M+H] +.
[0915] Etapa E: 1-((2S,6R)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6-dimetilpiperazin-1-il)prop-2-en- 1-ona: Terc-butil (2S,6R)-4-(7-(3-(metoximetoxi)naftaleno)1-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,6- dimetilpiperazina-1-carboxilato (87 mg, 0,129 mmol) foi dissolvido em TFA/DCM 1M. A mistura de reação ficou marrom-avermelhada, depois vermelha escura.
LCMS indicou desproteção não seletiva de Boc e MOM. Depois de agitar 30 min. à temperatura ambiente, foi adicionado 0,2 mL de TFA adicional e a mistura de reação foi deixada à temperatura ambiente por outros 30 min. A mistura bifásica resultante foi evaporada in vacuo, dividida entre água (5 mL) e DCM (10 mL) + NEt3 (0,5 mL) e a camada orgânica separada. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica, Redisep 40g, utilizando 6% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar outro resíduo que foi repurificado em fase inversa, C18, 5-95% de MeCN-H2O +0,1% de TFA para dar o produto assumido ser o bis-sal com TFA (1,35 mg, 1,3%). ES+APCI MS m/z 587,3 [M+H]+.
EXEMPLO 192 (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-3-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0916] (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-3-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando 3-Piperidinometanol, 1-metil-,(3R)- no lugar de N-metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 193 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0917] 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando (4-metil-2- morfolinil)metanol no lugar de N-metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 545,3 [M+H]+.
EXEMPLO 194 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0918] 1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando 4-Metil-3- (hidroximetil)morfolina no lugar de N-Metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 545,2 [M+H]+.
EXEMPLO 195
(R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0919] (R)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando (R)-(1-Metilpiperidin- 2-il)metanol no lugar de N-Metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 196 (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0920] (S)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando (S)-(1-metilpiperidin- 2-il) metanol no lugar de N-Metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 543,2 [M+H]+.
EXEMPLO 197 (S)-1-(4-(2-((1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0921] (S)-1-(4-(2-((1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando [(2S)-1-etil-2- pirrolidinil] metanol no lugar de N-Metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 198 (S,E)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)but-2-en-1-ona
[0922] S,E)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)but-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando cloreto de trans-
Crotonil no lugar de Cloreto de Acriloíla na Etapa F. ES+APCI MS m/z 543,2 [M+H]+.
EXEMPLO 199 (S,E)-4-(dimetilamino)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)but-2-en-1- ona
[0923] (S,E)-4-(dimetilamino)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)but-2-en-1- ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando o procedimento a seguir no lugar da etapa F. 7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-4-(piperazin-1-il)-4a,5,6,7,8,8a-hexa- hidropirido[3,4-d]pirimidina (150 mg, 0,288 mmol) foi dissolvido em DCM (5 mL) e tratado com ácido (2E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (74,4 mg, 0,576 mmol) e base de Hunig (252 µl, 1,44 mmol). A esta mistura foi adicionado EDC (55,2 mg, 0,288 mmol) e HOBT (38,9 mg, 0,288 mmol) puro como pós. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora e aquecida até 35°C por um adicional de 3 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e purificada no CombiFlash (0%-15% de DCM/MeOH com modificador de NH4OH a 1%). Todas as frações contendo produto desejado limpo foram combinadas e concentradas in vacuo para dar (E)-4-(dimetilamino)-1-(4-(7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-4a,5,6,7,8,8a-
hexa-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)but-2-en-1-ona (105 mg, 0,166 mmol, 57,7% de rendimento). O produto seguiu o resto do Exemplo 127 de acordo para dar (S,E)-4-(dimetilamino)-1-(4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-((1- metilpirrolidin-2)-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 1-il)but-2-en-1-ona (14,8 mg, 0,025 mmol, 15,2% de rendimento). ES+APCI MS m/z 586,3[M+H]+.
EXEMPLO 200 (S)-1-(4-(2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0924] (S)-1-(4-(2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando naftalen-1-il trifluorometanossulfonato no lugar de 3-(metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na Etapa C e não executando a etapa F. ES+APCI MS m/z 513,3 [M+H]+.
EXEMPLO 201 1-((R)-2-metil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0925] 1-((R)-2-metil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando (R)-benzil 2- metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1-carboxilato na Etapa A e usando naftalen-1-il trifluorometanossulfonato no lugar de 3- (metoximetoxi)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato na Etapa C e não executando a etapa F. ES+APCI MS m/z 527,3 [M+H] +.
EXEMPLO 202 1-((S)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0926] 1-((S)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1- ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando benzil (S)- 3-metilpiperazina-1-carboxilato de benzila no lugar de piperazina-1-carboxilato na Etapa A. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 203 1-((S)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0927] 1-((S)-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metilpiperazin-1-il)prop-2-en-1- ona. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 127 usando benzil (S)- 3-metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de benzil piperazina-1-carboxilato na Etapa A e usando N-Metil-D-prolinol no lugar de N-Metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 543,3 [M+H]+.
EXEMPLO 204 1-(4-(2-((1-ciclopropilpiperidin-4-il)amino)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina -4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0928] Etapa A: Benzil 4-(2-((1-ciclopropilpiperidin-4-il) amino)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (75 mg, 0,13 mmol), 1-ciclopropilpiperidin-4-amina (55 mg, 0,39 mmol) e dioxano (0,5 mL) foi aquecida a 120 oC por 36h. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (10 mL) e água (3 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo e o resíduo cromatografado em sílica, Redisep 24g, utilizando 6 a 10% de MeOH em DCM + 0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (43 mg, 49%). ES+APCI MS m/z 678,3 [M+H]+.
[0929] Etapa B: 1-(4-(2-((1-ciclopropilpiperidin-4-il)amino)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Uma mistura de benzil 4-(2-((1- ciclopropilpiperidin-4-il)amino)-7-(3-(metoximetoxi)-naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (43 mg, 0,063 mmol), paládio em carbono (20 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O), EtOH
(1,5 mL) e THF (1,5 mL) foi purgada com hidrogênio e agitada sob atmosfera de H2 (balão de borracha) por 3 horas. A mistura foi diluída com EtOH (3 mL), filtrada através de Celite e a celite lavada com EtOH (2 x 2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL) e resfriado em banho de gelo-sal com agitação. Trietilamina (0,03 mL) foi adicionada em seguida de uma só vez, seguida de cloreto de acriloíla (10 μL). Após 1 min. a -5oC, a reação foi extinta com NH4OH (0,05 mL) e evaporada in vacuo. O resíduo foi agitado 5 min. com DCM (5 mL), filtrado e cromatografado em sílica gel, Redisep 12g, usando 6 a 20% de MeOH em DCM + 0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (22 mg, 48%). ES+APCI MS m/z 598,3 [M+H]+.
[0930] Etapa C: 1-(4-(2-((1-ciclopropilpiperidin-4-il)amino)-7-(3-hidroxinaftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona : A uma solução agitada de 1-(4-(2-((1-ciclopropilpiperidin-4-il)amino)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (22 mg, 0,037 mmol) em uma mistura de MeOH e THF 1:1 (3 mL) foi adicionado HCl aquoso 6M (0,3 mL, 34 eq.) de uma só vez e a solução resultante foi aquecida com agitação a 50oC por 1,5 horas. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (15 mL) e 0,5 M de Na2CO3 (10 mL) e a camada orgânica separada. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (3 mL), secos sobre Na 2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica, Redisep 12 g,
utilizando 8-10% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (15 mg, 74%). ES+APCI MS m/z 554,3 [M+H]+.
EXEMPLO 205 1-(4-(7-(6-hidroxiquinolin-8-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-il) prop-2-en-1-ona
[0931] Etapa A: Benzil 4-(7-(6-(metoximetoxi) quinolin-8-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: A uma suspensão agitada de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (17 mg, 0,019 mmol) em tolueno seco desgaseificado (0,5 mL) sob nitrogênio à temperatura ambiente foi adicionado (+/-)-2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftil (24 mg, 0,038 mmol) e a mistura foi aquecida até 100°C por 15 minutos. A mistura escura foi resfriada até a temperatura ambiente e t-butóxido de sódio sólido (36 mg, 0,38 mmol) foi, então, adicionado seguido por uma solução de 8-bromo-6- (metoximetoxi)quinolina (61 mg, 0,23 mmol) e benzil 4-(2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (94 mg, 0,19 mmol) em tolueno seco desgaseificado (0,5 mL). O balão foi fechado e aquecido até 100°C por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (15 mL) e água (5 mL) e as camadas orgânicas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel, 24 g Redisep, usando 4 a 10% de MeOH em diclorometano (+ 0,2% de NH4OH) como eluente para dar um sólido amarelo (28 mg, 22%). ES+APCI MS m/z 684,3 [M+H]+.
[0932] Etapa B: 1-(4-(7-(6-(metoximetoxi)quinolin-8-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Uma mistura de benzil 4-(7-(6-(metoximetoxi)quinolin-8-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (28 mg, 0,095 mmol), Pd/C (15 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50 % H2O), EtOH (2 mL) e THF (2 mL) foi purgada com hidrogênio e agitada sob atmosfera de H2 (balão de borracha) por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOH (3 mL), filtrada através de Celite e a celite foi lavada com EtOH (2 x 2 mL) e os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O sólido resultante foi dissolvido em DCM (5 mL) e resfriado num banho de gelo-sal com agitação. Trietilamina (0,04 mL, 3 eq.) foi, então, adicionada de uma só vez, seguida de cloreto de acriloíla (16 μL, 2 eq.). Após 1 min. a -5oC, a reação foi extinta com NH4OH (0,05 mL) e evaporada in vacuo. A mistura foi filtrada através de um tampão de algodão, cromatografada em sílica gel, Redisep 12g, utilizando 6 a 10% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar outro resíduo que foi repurificado em fase inversa, C18, 5 a 95% MeCN, +0,1% de HCO 2H para dar o produto que foi assumido ser o sal bis-formato como um sólido amarelo (12 mg, 42%). ES+APCI MS m/z 604,2 [M+H]+.
[0933] Etapa C: 1-(4-(7-(6-hidroxiquinolin-8-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução agitada de 1-(4-(7-(6-(metoximetoxi)quinolin-8-il)-2-(3- morfolinopropoxi))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona (12 mg, 0,017 mmol) em uma mistura de MeOH e THF 1:1 (1 mL) foi adicionado HCl aquoso 6M (0,1 mL, 35 eq.) de uma só vez e a solução foi aquecida com agitação a 50oC por 1,5 h. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (15 mL) e tampão Na-fosfato 0,5 M com pH 8 (5 mL) e as camadas separadas. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (1 mL), secos sobre NaSO4 e evaporados in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica, Redisep 12 g, utilizando 7-10% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar um resíduo que foi repurificado por cromatografia de fase inversa, C18, 5 a 95% de MeOH 0,1 % TFA) para dar produto como o sal tris TFA como um sólido incolor (4,87 mg, 31%). ES+APCI MS m/z 560,3 [M+H]+.
EXEMPLO 206 1-(4-(2-(3-(3-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
3-(3- azabiciclo[3.1.0]hexan-3- il)propano-1-ol
[0934] Etapa A: 3-(3-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)propan-1-ol. Uma mistura de cloridrato de 3-azabiciclo[3.1.0]hexano (200 mg, 1,67 mmol), 3-bromopropan-1- ol (166 μL, 1,84 mmol, 1,1 eq.), K2CO3 (0,69 g, 5,02 mmol, 3 eq.), Nal (251 mg, 1,67 mmol, 1 eq.) e acetonitrila (2 mL) num frasco de 4 mL foi enxaguada com N2. O frasco foi tampado e agitado à temperatura ambiente por 2 dias. A mistura foi diluída com água (2 mL) e extraída com éter (15 mL). A solução de éter foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e decantada para um frasco em forma de pera e ácido trifluoroacético (128 mL, 1 eq) adicionado e a mistura foi concentrada até ~5 mL. A camada etérica superior foi decantada e descartada, o líquido oleoso residual foi seco sob vácuo durante a noite. O líquido oleoso foi diluído com água (0,5 mL) e depois éter (10 mL) foi adicionado com agitação seguido por NaOH a 50% (0,2 mL, 2,5 mmol, 2 eq.). As camadas foram separadas, a solução orgânica foi seca em KOH e cuidadosamente concentrada sob nitrogênio para render 3-(3-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il)propan-1-ol em bruto como óleo incolor. Usado no estágio seguinte sem purificação adicional.
[0935] Etapa B: Benzil 4-(2-(3-(3-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il)propoxi)-7-(3- (metoximetoxi)-naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (75 mg, 0,13 mmol), 3-(3-azabiciclo[3.1.0]hexan-3- il)propan-1-ol bruto (55 mg, 0,39 mmol, 3 eq.), Cs2CO3 (213 mg, 0,65 mmol, 5 eq.) e dioxano (0,5 mL) em um frasco de 1,7 mL foi purgada com nitrogênio. O frasco foi tampado e agitado a 120oC durante o fim de semana. A mistura de reação foi resfriada, dividida entre EtOAc (15 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na 2SO4, evaporada in vacuo e o resíduo cromatografado sobre sílica gel, 24g Redisep, usando 4 a 10% de MeOH +1% de NH4OH como eluente para dar o produto. ES+APCI MS m/z 679,3 [M+H]+.
[0936] Etapa C: 1-(4-(2-(3-(3-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)propoxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Uma mistura de benzil 4-(2-(3-(3- azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)propoxi)-7-(3-(metoximetoxi)-naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (49 mg, 0,072 mmol), paládio em carbono (12 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O), EtOH (1,5 mL) e THF (1,5 mL) foi purgada com hidrogênio e agitada sob atmosfera de H2 (balão de borracha) por 3 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOH (3 mL), filtrada através de Celite e o celite lavado com EtOH (2 x 2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O sólido incolor resultante foi dissolvido em DCM (5 mL), resfriado em um banho de gelo-sal com agitação e trietilamina (0,04 mL, 3 eq.) foi adicionada de uma só vez seguida pela adição de cloreto de acriloíla (16 μL, 2 eq.). Após 1 min. a -5oC, a reação foi extinta com NH4OH (0,05 mL) e evaporada in vacuo. O produto bruto foi dissolvido em DCM (5 mL), filtrado através de um tampão de algodão e cromatografado em sílica gel, Redisep 12g, utilizando 6 a 10% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (30 mg, 69%). ES+APCI MS m/z 599,3 [M+H]+.
[0937] Etapa D: 1-(4-(2-(3-(3-azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il)propoxi)-7-(3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona: A uma solução agitada de 1-(4-(2-(3-(3)- azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)propoxi)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (30 mg, 0,050 mmol) em uma mistura de MeOH e THF 1:1 (3 mL) foi adicionado HCl aquoso 6M (0,3 mL, 36 eq.) e a solução foi aquecida com agitação a 50°C por 1,5 h. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (20 mL) e Na2CO3 0,5 M (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica, Redisep 12 g, utilizando 6% de MeOH em
DCM 0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (20,62 mg, 74%). ES+APCI MS m/z 555,4 [M+H]+.
EXEMPLO 207 (R)-1-(4-(2-(2-(3-fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0938] Etapa A: (R)-2-(3-fluoropiperidin-1-il)etan-1-ol. Uma mistura de cloridrato de R-3-fluoropiperidina (209 mg, 1,50 mmol), 2-bromoetan-1-ol (117 μL, 1,65 mmol, 1,1 eq.), K2CO3 (0,62 g, 4,5 mmol, 3 eq.), iodeto de sódio (225 mg, 1,5 mmol, 1 eq.) e acetonitrila (2 mL) num frasco de 4 mL foi lavada com N2. O frasco foi tampado e agitado à temperatura ambiente por 2 dias. A suspensão resultante foi diluída com água (2 mL) e extraída com éter (15 mL). A solução de éter foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e decantada para um frasco em forma de pera e ácido trifluoroacético (115 mL, 1 eq) foi adicionado e a mistura foi concentrada até ~5 mL. A camada etérea superior foi decantada, o líquido oleoso residual foi seco sob vácuo durante a noite. O líquido oleoso foi diluído com água (0,5 mL) e éter (10 mL) com agitação seguido por adição de NaOH a 50% (0,2 mL, 2,5 mmol, 2 eq.). As camadas foram separadas, a solução orgânica foi seca sobre KOH, filtrada e cuidadosamente concentrada sob nitrogênio para render aminoálcool bruto como um óleo incolor (120 mg, 54%).
[0939] Etapa B: Benzil (R)-4-(2-(2-(3-fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (75 mg, 0,13 mmol), (R)-2-(3-fluoropiperidin-1-il)etan- 1-ol bruto (58 mg, 0,39 mmol), Cs2CO3 (213 mg, 0,65 mmol) e dioxano (0,5 mL) em um frasco de 1,7 mL foi purgada com nitrogênio. O frasco foi tampado e agitado a 110oC por 48 horas. A mistura de reação foi resfriada, diluída com EtOAc (1 mL), filtrada através de Celite e a celite lavada com EtOAc (2 x 2 mL) e os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica, Redisep 24g, utilizando 6% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (30 mg, 34%). ES+APCI MS m/z 685,4 [M+H]+.
[0940] Etapa C : (R)-1-(4-(2-(2-(3-fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Uma mistura de benzil (R)-4-(2-(2-(2-(3- fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3-(metoximetoxi)-naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (30 mg, 0,044 mmol),
paládio em carbono (10 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O), EtOH (1,5 mL) e THF (1,5 mL) foi purgada com hidrogênio e agitada sob atmosfera de H2 (balão de borracha) por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOH (3 mL), filtrada através de Celite e o celite lavado com EtOH (2 x 2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (3 mL) e resfriado num banho de gelo-sal com agitação. Trietilamina (0,02 mL, 3 eq.) foi a seguir adicionada de uma só vez seguida pela adição de cloreto de acriloíla (7 μL, 2 eq.). Após 1 min. a -10°C a reação foi extinta com NH4OH (0,03 mL) e evaporada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL), filtrado e cromatografado em sílica gel, Redisep 12g, utilizando 6 a 10% de MeOH em DCM + 0,2% de NH4OH em DCM como eluente para dar um sólido incolor (22 mg, 83 %) ES+APCI MS m/z 605,3 [M+H]+.
[0941] Etapa D: (R)-1-(4-(2-(2-(3-fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: A uma solução agitada de (R)-1-(4-(2-(2-(3-fluoropiperidin-1-il)etoxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-il)prop-2-en-1-ona (22 mg, 0,036 mmol) em uma mistura de MeOH e THF 1:1 (3 mL) foi adicionado HCl aquoso 6M (0,3 mL) e a solução foi aquecida com agitação a 50oC por 1,5 h. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (20 mL) e Na 2CO3 0,5 M (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel, 12 g Redisep, utilizando 6% de MeOH em DCM +0,2% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (16,86 mg, 83%). ES+APCI MS m/z 561,2 [M+H]+.
EXEMPLO 208 1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-difluoropirrolidin-1-il)propoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0942] Etapa A: 3-((3R,4S)-3,4-difluoropirrolidin-1-il)propan-1-ol. Uma mistura de cloridrato de (3R,4S)-3,4-difluoropirrolidina (200 mg, 1,39 mmol), 3- bromopropan-1-ol (126 μL, 1,39 mmol, 1,0 eq.), carbonato de potássio (577 mg, 4,18 mmol, 3 eq.), iodeto de sódio (209 mg, 1,39 mmol, 1 eq.) e acetonitrila (2 mL) num frasco de 7 ml foi purgada com N2. O frasco foi tampado e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 dias. A mistura foi diluída com água (2 mL) e extraída com éter (15 mL). A solução de éter foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e decantada para um frasco em forma de pera. Ácido trifluoroacético (107 μL, 1 eq) foi a seguir adicionado e a mistura foi evaporada e seca in vacuo. O resíduo foi diluído com água (0,5 mL) e lavado com éter (5 mL). À camada aquosa foi adicionado éter dietílico (15 mL) seguido por NaOH 10M (0,2 mL, 5 mmol) e a mistura foi agitada por 1 hora. A camada orgânica foi separada e seca sobre KOH sólido, filtrada através de um tampão de algodão e evaporada sob N2 para dar um óleo incolor (80 mg, 35%) que foi utilizado em bruto na reação seguinte.
[0943] Etapa B: Benzil 4-(2-(3 -((3R,4S)-3,4-difluoropirrolidin-1-il)propoxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(2-cloro-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (75 mg, 0,13 mmol), 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)etan- 1-ol bruto (65 mg, 0,39 mmol), carbonato de césio (213 mg, 0,65 mmol, 5 eq.) e dioxano (0,5 mL) em um frasco de 1,7 mL foi purgada com nitrogênio. O frasco foi tampado e agitado a 110oC durante o fim de semana. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e dividida entre EtOAc (15 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica, Redisep 24g, utilizando 3% de MeOH em DCM como eluente para dar um sólido incolor (46 mg, 50%). ES+APCI MS m/z 703,3 [M+H]+.
[0944] Etapa C: 1-(4-(2-(3 -((3R,4S)-3,4-difluoropirrolidin-1-il)propoxi)-7-(3- (metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona: Uma mistura de benzil 4-(2-(3-((3R,4S)-3,4- difluoropirrolidin-1-il)propoxi)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (46 mg, 0,065 mmol), paládio em carbono (15 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O), EtOH (1 mL) e THF (1 mL) foi purgado com hidrogênio e agitado sob atmosfera de H2 (balão de borracha) por 3 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOH (3 mL), filtrada através de Celite e o celite lavado com EtOH (2 x 2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (3 mL) e resfriado num banho de gelo-sal com agitação. Trietilamina (0,02 mL) foi adicionada a seguir seguida por adição de cloreto de acriloíla (7 μL, 2 eq.). Após 1 min. a -10°C a reação foi extinta com NH4OH (0,03 mL) e evaporada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (3 mL), filtrado e purificado por cromatografia em sílica gel, Redisep 12g, utilizando 5% de MeOH em DCM como eluente para dar um sólido incolor (29 mg, 71 %) ES+APCI MS m/z 623,3 [M+H]+.
[0945] Etapa D: 1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-difluoropirrolidin-1-il)propoxi)-7-(3- hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona: A uma solução agitada de 1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4- difluoropirrolidin-1-il)propoxi)-7-(3-(metoximetoxi)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona (29 mg, 0,047 mmol) em uma mistura de MeOH e THF 1:1 (2 mL) foi adicionado HCl aquoso 6M (0,2 mL) e a solução foi aquecida com agitação a 50oC por 1,5 h. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (15 mL) e 0,5 M de Na2CO3 (10 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura (3 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica, Redisep 12 g, utilizando 5% de MeOH em DCM como eluente para dar um sólido incolor (12,87 mg, 48%). ES+APCI MS m/z 579,2 [M+H]+.
EXEMPLO 209 1-(4-(7-(5-metil-1H-indol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0946] Etapa A: 4-bromo-5-metil-1-(tri-isopropilsilil)-1H-indol: Uma solução de 4- bromo-5-metil-1H-indol (100 mg, 0,476 mmol) em THF seco (2 mL) sob nitrogênio foi resfriada com agitação num banho de gelo-sal. Foi adicionado hidreto de sódio (23 mg a 60% em óleo, 0,57 mg, 1,2 eq.) e a mistura foi agitada por 30 min. a -5oC, então, 1 h à temperatura ambiente (evolução de gás cessou). Clorotri-isopropilsilano (0,10 mL, 0,48 mmol, 1 eq.) foi a seguir adicionado e a mistura de reação foi agitada à r.t. por 2 horas. A reação foi dividida entre EtOAc (15 mL) e água (10 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água (5 mL), salmoura (5 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O resíduo foi purificado em sílica gel usando hexanos como eluente para dar produto. (107 mg, 63%).
Reação de Buchwald
[0947] Etapa B: Benzil 4-(7-(5-metil-1-(triisopropilsilil)-1H-indol-4-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: Uma mistura agitada de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (17 mg, 0,019 mmol) e (+/-)-2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftil (24 mg, 0,038 mmol) em tolueno desgaseificado seco (0,5 mL) sob nitrogênio foi aquecida até 100°C por 15 minutos. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionado t-butóxido de sódio sólido (37 mg, 0,38 mmol) seguido pela adição de uma solução de 4-bromo-5-metil-1-(tri-isopropilsilil)-1H-indol (90 mg, 0,25 mmol) e benzil 4-(2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato (94 mg, 0,19 mmol) em tolueno desgaseificado seco (0,5 mL). O frasco de reação foi fechado e aquecido até 100°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, dividida entre EtOAc (15 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica gel, Redisep 24g, usando 3 a 5% de MeOH em diclorometano como eluente para dar um sólido amarelo claro (28 mg, 19%). ES+APCI MS m/z 782,3 [M]+.
[0948] Etapa C: 1-(4-(7-(5-metil-1H-indol-4-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona: Uma mistura de benzil 4-(7-(5-metil-1-(tri-isopropilsilil)-1H-indol-4-il)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (46 mg, 0,065 mmol), paládio em carbono (35 mg, Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) em EtOH (1 mL) e THF (1 mL) foi purgada com hidrogênio e agitada sob atmosfera de H2 (balão de borracha) durante a noite.
A mistura de reação foi diluída com dioxano (3 mL), filtrada através de celite e a celite lavada com dioxano (2 x 2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo e secos sob alto vácuo. O resíduo foi dissolvido em THF (1 mL) sob N2, em seguida, 1M de fluoreto de tetra-n-butilamônio em THF (0,07 mL, 2 eq.) foi adicionado com agitação e a solução agitada a 0°C por 15 minutos. A mistura de reação foi dividida entre éter (15 mL) e água (5 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água (3 mL), salmoura (3 ml), seca sobre Na2SO4 e evaporada sob atmosfera de nitrogênio. O produto bruto foi dissolvido em DCM (3 mL) e resfriado num banho de gelo seco de gelo- sal (-20oC) com agitação. Trietilamina (10 μL, 2 eq.) foi adicionada em seguida, seguida de cloreto de acriloíla (2 μL, 0,75 eq.). Após 10 min. a -20oC, a reação foi extinta com NH4OH (0,03 mL) e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel usando 5% de MeOH/DCM + 0,1% de NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (3,69 mg, 19%). ES+APCI MS m/z 546,3 [M+H]+.
EXEMPLO 210 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0949] Etapa A: terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (6H)-carboxilato: terc-butil 2,4-dicloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (8,00 g, 26,3 mmol), base de Hunig (22,9 ml, 132 mmol) e dicloridrato de 2-(piperazin-2-il)acetonitrila (5,21 g, 26,3 mmol) foram colocados em DMA (75 mL) e agitados à temperatura ambiente por 20 minutos. Foi adicionada água à reação e a mistura foi extraída com EtOAc (3x100 mL). Os extratos foram combinados e lavados com água (3 x 50 mL), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados para fornecer material bruto que foi usado como estava. ES+APCI MS m/z 393,3 [M+H]+.
[0950] Etapa B: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)- 2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: terc-butil 2-cloro-4- (3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (10,5 g, 26,7 mmol) e TEA (5,6 ml, 40,1 mmol) foram colocados em THF (100 ml) e resfriados até 0°C. Foi adicionado benzil carbonocloridrato (5,7 ml, 40,1 mmol) e a reação foi agitada a 0°C por 30 minutos. Foi adicionada água à reação e a mistura foi extraída com DCM (3 x 50 mL) e os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo foi purificado por sílica gel (0-60% EtOAc em hexano como eluente) para fornecer terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-
carboxilato (12,9 g, 24,5 mmol, 92% de rendimento). ES+APCI MS m/z 527,1 [M+H]+.
Dioxano
[0951] Etapa C: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)- 2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Em um tubo selado terc-butil 4-(4-((benziloxi) carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (1,50 g, 2,85 mmol) foi dissolvido em dioxano (1,42 ml, 2,85 mmol) e tratado com carbonato de césio moído (1,85 g, 5,69 mmol) e (2S)-1-etil-2- pirrolidinil]metanol (1,64 g, 14,2 mmol). O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C por 24 h. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionada água. A mistura foi extraída com DCM (3x 25 mL) e os orgânicos combinados concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por sílica gel (0-12% de MeOH em DCM com 0,2% de NH4OH como eluente) para dar terc-butil 4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il-terc-butil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (831 mg, 1,37 mmol, 48% de rendimento). ES+APCI MS m/z 606,2 [M+H] +.
[0952] Etapa D: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: terc-butil 4- (4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (831 mg, 1,37 mmol) foi colocado em DCM (15 mL) e TFA (2.114 µL, 27,4 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada à r.t. por 1 h. A reação foi concentrada. Foi adicionado bicarbonato saturado e a mistura foi extraída com DCM (3x25 mL). Os extratos foram combinados, secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (665 mg, 1,32 mmol, 96% de rendimento) que foi usado como estava. ES+APCI MS m/z 506,2 [M+H] +.
[0953] Etapa E: benzil 2-(cianometil)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: A um frasco foi adicionado carbonato de césio (103 mg, 0,316 mmol), benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (80 mg, 0,158 mmol), Rhuphos Pd G3 (13,2 mg, 0,016 mmol), 1-bromo-2-(trifluorometil) benzeno (53,4 mg, 0,237 mmol) e 1,4-dioxano (1.582 µL, 0,158 mmol) e o frasco foi desgaseificado com Ar, selado depois aquecido até 70°C por 24 horas. Água e NH4Cl saturado foram adicionados à reação e a mistura foi extraída com DCM. A camada orgânica concentrada in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-12% de MeOH em DCM com 0,2% de NH4OH como eluente) para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-
(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (20,5 mg, 0,032 mmol, 20% de rendimento). ES+APCI MS m/z 650,3 [M+H]+.
[0954] Etapa F: 2-(4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi-7-(2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (20,5 mg, 0,032 mmol) em EtOH (316 µL, 0,0316 mmol) e THF (316 µL, 0,032 mmol) foi adicionado paládio (16,8 mg, 0,008 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O) e, em seguida, uma atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguida de pressão de balão e foi agitada por 2 horas. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para proporcionar o produto desejado que foi utilizado como estava. ES+APCI MS m/z 516,2 [M+H]+.
[0955] Etapa G: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-
il)acetonitrila: 2-(4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (16,3 mg, 0,032 mmol) e trietilamina (13,2 µL, 0,095 mmol) foram colocados em CH2Cl2 (316 µL, 0,032 mmol) e resfriados até 0°C. Foi adicionado cloreto de acriloíla (632 µL, 0,063 mmol) (solução 0,1 M recém-preparada em DCM) e a reação foi agitada por 1 hora a 0°C. A mistura foi concentrada e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia de fase reversa (0-50% de ACN: água com TFA a 0,1%) para fornecer o produto desejado (18,9 mg, 0,027 mmol, 87% de rendimento). ES+APCI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 211 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometoxi)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0956] Sintetizado de acordo com o Exemplo 210, Etapas E-G utilizando 1- bromo-2-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 586,3 [M+H]+.
Exemplo 212 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(4-(trifluorometil)piridin-3-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0957] Sintetizado de acordo com Exemplo 210, Etapas E-Gutilizando 3-bromo- 4-(trifluorometil)piridina no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 213 1-(4-(7-(5-hidroxi-2,3-dimetilfenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona oxona
[0958] Etapa A: 3-bromo-4,5-dimetilfenol: Em um tubo de DPPE selado (0,431 g, 1,08 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,73 g, 13,5 mmol), (1,5- Ciclo-octadieno)-eta5-indenil)irídio(I) (0,449 g, 1,08 mmol) e 1-bromo-2,3- dimetilbenzeno (1,00 g, 5,40 mmol) foram colocados em ciclo-hexano (6 mL) e foram aquecidos até 100°C por 50 h. A reação foi concentrada para baixo e elevada em acetona (5 mL) e oxazona (3,32 g, 5,40 mmol) foi adicionada e agitada por 10 min. A reação foi extinta com NaHSO3 saturado e foi extraída com DCM (3x20 ml). Os extractos foram lavados com salmoura, água e concentrados. O resíduo foi passado através de um tampão de sílica eluindo com DCM para fornecer 3-bromo-4,5-dimetilfenol (238 mg, 1,18 mmol, 22% de rendimento).
[0959] Etapa B: 1-bromo-5-(metoximetoxi)-2,3-dimetilbenzeno : Foi preparado de acordo com a preparação para o Intermediário 3 usando o 3-bromo-4,5- dimetilfenol no lugar de 2-bromo-3-fluorofenol.
[0960] Etapa C: 1-(4-(7-(5-hidroxi-2,3-dimetilfenil)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperzin-1-il)prop-2-en-1-ona 2,2,2- trifluoroacetato: foi preparado de acordo com o Exemplo 1 Etapas C-F usando Intermediário 25 no lugar de benzil 4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato e 1-bromo-5-(metoximetoxi)-2,3-dimetilbenzeno no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 537,3 [M+H]+.
EXEMPLO 214 1-(4-(7-(5-hidroxi-2-((trifluorometil) tio)fenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona Ácido triflico
[0961] Etapa A: 3-bromo-4-((trifluorometil)tio)fenol: Em um tubo selado 3- bromofenol (575 mg, 3,32 mmol) e N,4-dimetil-N- (trifluorometil)benzenossulfonamida (1.010 mg, 3,99 mmol)) foram colocados em DCE seco (6 mL). Adicionou-se lentamente ácido tríflico (295 µL, 3,32 mmol) e a reação foi, então, aquecida até 80°C por 18 horas. A reação foi resfriada e o solvente foi removido sob vácuo e o resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-20% EtOAc em hexanos) para fornecer 3-bromo-4-((trifluorometil)tio)fenol (650 mg, 2,38 mmol, 72% de rendimento)
[0962] Etapa B: (2-bromo-4-(metoximetoxi)fenil) (trifluorometil)sulfano: Foi preparado de acordo com a preparação para Intermediário 3 usando o 3-bromo- 4-((trifluorometil)tio)fenol no lugar de 2-bromo-3 -fluorofenol.
[0963] Etapa C: 1-(4-(7-(5-hidroxi-2-((trifluorometil)tio)fenil)-2-(3- morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop- 2-en-1-ona: Sintetizado de acordo com o Exemplo 1 Etapa C-F usando Intermediário 25 no lugar de benzil 4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato e (2-bromo-4- (metoximetoxi)fenil)(trifluorometil)sulfano no lugar de 1-bromo-3- (metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 609,2 [M+H]+.
EXEMPLO 215 (R)-1-(4-(2-(2-hidroxi-3-morfolinopropoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0964] O composto do título foi obtido por resolução quiral SFC do Exemplo 123 utilizando uma coluna Phenomenex OZ-H (4,6 mm x 250 mm, 5u) e eluindo com 40-60% de MeOH:IPA:DEA (80:20:1) a 4 mL/min. A coleta do primeiro pico de eluição forneceu o composto desejado onde a estereoquímica foi arbitrariamente atribuída. ES+APCI MS m/z 575,2 [M+H]+.
EXEMPLO 216 (S)-1-(4-(2-(2-hidroxi-3-morfolinopropoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0965] O composto do título foi obtido por resolução quiral SFC do Exemplo 123 utilizando uma coluna Phenomenex OZ-H (4,6 mm x 250 mm, 5u) e eluindo com 40-60% de MeOH:IPA:DEA (80:20:1) a 4 mL/min. A coleta do segundo pico de eluição forneceu o composto desejado onde a estereoquímica foi arbitrariamente atribuída. ES+APCI MS m/z 575,2 [M+H]+.
EXEMPLO 217 1-(4-(2-((1-hidroxi-3-morfolinopropan-2-il)oxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0966] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 8 usando 3- morfolinopropano-1,2-diol no lugar de (S)-1-(dimetilamino)propan-2-ol na Etapa B. ES+APCI MS m/z 575,2 [M+H]+.
EXEMPLO 218 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0967] Etapa A: benzil 4-(2-(((2S,4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1)-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Em um frasco selado, uma solução de benzil 4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 0,27 mmol) em dioxano (2712 µL, 0,27 mmol) foi espargida com argônio e (2S,4R)-4-{[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (270 mg, 0,81 mmol), Cs2CO3 (265 mg, 0,81 mmol), Rhuphos Pd G3 (22,7 mg, 0,027 mmol) foi adicionado sequencialmente sob argônio e espargido por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 2 h. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados e concentrados e o resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-40% de EtOAc em hexanos) para fornecer benzil 4-(2-((((2S,4R)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (113 mg, 0,13 mmol, 49% de rendimento).
[0968] Etapa B: terc-butil (2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(((4-(3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil) pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de 4-(2-((((2S, 4R)-1-(terc-butoxicarbonil)--((terc-butildimetilsilil)oxi) pirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (113 mg, 0,133 mmol) em EtOH (1,3 mL, 0,133 mmol) e THF (1,3 mL, 0,133 mmol) foi adicionado paládio (70,9 mg, 0,033 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e, em seguida, uma atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguida por pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi, então, diluída com MeOH e THF 1: 1 e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para fornecer o produto bruto que foi usado como estava.
[0969] Etapa C: terc-butil (2S,4R)-2-(((4-(4-acrilil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi) pirrolidina-1-carboxilato: terc-butil (2S,4R)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-2-(((4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidina-1-carboxilato (95 mg, 0,13 mmol) e trietilamina (56 µL, 0,40 mmol) foram colocados em CH2Cl2 (1331 µL, 0,13 mmol) e resfriados até 0°C. Cloreto de acriloíla (2.661 µL, 0,27 mmol) (solução 0,1M recém-preparada em DCM) foi adicionado e a reação foi agitada por 30 min. a 0°C. Foi adicionada água à reação e a mistura foi extraída com DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados e concentrados para fornecer material bruto que foi usado como estava.
[0970] Etapa D: 2-(1-acriloil-4-(2-((2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. terc-butil (2S,4R)-2-(((4-(4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il))- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)pirrolidina-1-carboxilato (92 mg, 0,12 mmol) foi colocado em DCM (3 mL) e TFA (92 µL, 1,2 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. Adicionou-se bicarbonato saturado à reação e a mistura foi extraída com DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados, secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados para dar o material bruto que foi usado como estava.
[0971] Etapa E: 2-(1-acriloil-4-(2-((2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftaleno)1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (80 mg, 0,12 mmol), formaldeído (45,0 µL, 0,60 mmol) e Na(OAc)3BH (50,8 mg, 0,24 mmol) foram colocados em THF (2 mL) e agitados por 2 h. Foi adicionado bicarbonato saturado e a mistura foi extraída com 10% MeOH em DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados, secos com sulfato de sódio e concentrados para fornecer material bruto que foi usado como estava.
[0972] Etapa F: 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila 2,2,2-trifluoroacetato: 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (81 mg, 0,119 mmol) foi colocado em DCM (5 mL) e HCl (594 µL, 2,38 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada por 1 h. A reação foi concentrada e o material foi purificado por cromatografia de fase reversa (0-50% ACN: água com 0,1% TFA) para fornecer 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (38,9 mg, 0,057 mmol, 48% de rendimento). ES+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 219 1-(4-(2-((1,4-dimetilpiperazin-2-il)metoxi)-7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0973] Composto do título foi preparado como no Exemplo 127, usando (1,4- Dimetil-2-piperazinil)metanol no lugar de N-metil-L-prolinol na Etapa D. ES+APCI MS m/z 558,3 [M+H]+.
EXEMPLO 220 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0974] Etapa A: benzil 4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc 4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (4,00 g, 7,59 mmol) em DCM (25,3 ml, 7,59 mmol) foi adicionado ácido trifluoroacético (17,4 ml, 227,7 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi concentrada até um óleo espesso. Adicionou-se bicarbonato saturado lentamente e a mistura foi extraída com 10% MeOH em DCM (3x 50 mL). Os extratos foram combinados, secos com sulfato de sódio e concentrados para proporcionar o produto desejado (3,24 g, 7,6 mmol, 100% de rendimento) que foi utilizado como estava. ES+APCI MS m/z 506,2 [M]+.
[0975] Etapa B: benzil 4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A um frasco de fundo redondo foi adicionado carbonato de césio (8,01 g, 24,6 mmol), benzil 4-(2-cloro- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (3,5 g, 8,2 mmol), 1-bromonaftaleno (4,6 ml, 32,8 mmol) e RuPhos Pd G3 (1,0 g, 1,23 mmol). Após evacuar o frasco, 1,4-dioxano (82,0 ml, 8,20 mmol) foi adicionado através de um septo sob fluxo de argônio. Argônio foi borbulhado através da mistura por 5 minutos e, então, a mistura foi aquecida até 70°C durante a noite. A reação foi resfriada e foi adicionada água e extraída com acetato de etila e os orgânicos foram concentrados in vacuo. Os sólidos amarelos foram dissolvidos em DCM mínimo e purificados por cromatografia de sílica (25-60% EtOAc em hexanos) para fornecer benzil 4-(2-cloro-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (2,0 g, 3,6 mmol, 44,1% de rendimento). ES+APCI MS m/z 553,2 [M]+.
1,4-Dioxano
[0976] Etapa C: benzil 4-(2-(((2S,4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-fluoropirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: Num frasco benzil 4-(2-cloro-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (120 mg, 0,22 mmol) foi dissolvido em dioxano (108 µL 0,217 mmol) e tratado com carbonato de césio (141 mg, 0,434 mmol) e (2S,4R)-1-(terc- Butoxicarbonil)-4-fluoro-2-hidroximetilpirrolidina (47,6 mg, 0,217 mmol). O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C por 12 horas. A reação foi filtrada através de papel GF/F e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica (0-6% MeOH em DCM). ES+APCI MS m/z 736,3 [M+H]+.
[0977] Etapa D: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoropirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: A uma solução de benzil 4-(2-(((2S,4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- fluoropirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (125 mg, 0,170 mmol) em DCM (170 µL, 0,170 mmol) foi adicionado ácido trifluoroacético (195 µL, 2,55 mmol) e a reação agitada à RT por 2 h. Os orgânicos foram lavados com bicarbonato de sódio e a camada aquosa foi extraída de novo com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas e utilizadas sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 636,3 [M+H]+.
[0978] Etapa E: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Para uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-((((2S,4R)-))-4- fluoropirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (105 mg, 0,1652 mmol) em DCE (3.303 µL, 0,1652 mmol) foi adicionado formaldeído (124,1 µL, 1,652 mmol) (37% em água) seguido por triacetoxiboro-hidreto de sódio (175,0 mg, 0,8258 mmol). A mistura foi agitada vigorosamente à RT por 2,5 h. A mistura foi tratada com bicarbonato de sódio saturado (30 mL), agitada por 10 min., então, extraída com DCM (3 x 10 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas e usadas como estavam na próxima reação. ES+APCI MS m/z 650,3 [M+H]+.
[0979] Etapa F: 2-(4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,78-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma solução de 2-(cianometil) benzil benzil 2-(2-(((2S,4R)-4- fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (85 mg, 0,13 mmol) em EtOH (1308 µL, 0,13 mmol) e THF (1308 µL, 0,13 mmol) foi adicionado paládio (70 mg, 0,033 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O) e, em seguida, um atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguida de pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para fornecer 2-(4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. ES+APCI MS m/z 516,3 [M+H]+.
[0980] Etapa G: 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-(4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (65 mg, 0,126 mmol) em DCM (1261 µL, 0,126 mmol) a 0°C foi adicionado cloreto de acriloíla (2521 µL, 0,252 mmol) (solução 0,1M recém- preparada em DCM) seguido de trietilamina (35,1 µL, 0,252 mmol). A reação foi, então, agitada a 0°C por 45 minutos. A reação foi concentrada e purificada por cromatografia de fase reversa (0-50% CAN:água com 0,1% de TFA) para fornecer o composto do título. ES+APCI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 221 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4S)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0981] Sintetizado de acordo com o método do Exemplo 220, Etapa C-G, usando terc-butil (2S,4S)-4-fluoro-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato no lugar de terc-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-(hidroximetilpirrolidina-1-carboxilato na Etapa C. ES+APCI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 222 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4S)-4-metoxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0982] Composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 220 (Etapas C-G), usando terc-butil (2S,4S)-2-(hidroximetil)-4-metoxipirrolidina-1-carboxilato de (2S,4R)-1-(terc-Butoxicarbonil)-4-fluoro-2-hidroximetilpirrolidina na Etapa C. ES+APCI MS m/z 582,3 [M+H]+.
EXEMPLO 223
2-(1-acriloil-4-(2-((S)-4-metilpiperazin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0983] Etapas AF: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-4-metilpiperazin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 220 (Etapas C-G), usando terc-butil (S)-2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina 1-carboxilato no lugar de (2S,4R)- 1-(terc-Butoxicarbonil)-4-fluoro-2-hidroximetilpirrolidina na Etapa C. ES+APCI MS m/z 567,3 [M+H]+.
EXEMPLO 224 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-4-metilpiperazin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0984] O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 220 (Etapas C- G), usando terc-butil (R)-2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina-1-carboxilato no lugar de terc-butil (S)-2-(hidroximetil)-4-metilpiperazina-1-carboxilato na Etapa C. ES+APCI MS m/z 567,3 [M+H]+.
Exemplo 225 2-(1-acriloíl-4-(7-(5-fluoro-2-(trifluorometoxi)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0985] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 2-bromo-4-fluoro-1-(trifluorometoxi)benzeno no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na etapa E. ES+APCI MS m/z 604,3 [M+H]+.
EXEMPLO 226 2-(1-acriloíl-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0986] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usaindo 3-bromo-2-(trifluorometil)piridina no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 227 2-(1-acriloil-4-(7-(2-fluorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0987] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G usando 1-bromo-2-fluorobenzeno no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E. ES+APCI MS m/z 520,3 [M+H]+.
EXEMPLO 228 2-(1-acriloil-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0988] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 1-bromo-2,3-dimetilbenzeno no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil) benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 530,3 [M+H]+.
EXEMPLO 229 2-(1-acriloil-4-(7-(2-clorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0989] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 1-bromo-2-clorobenzeno no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E. ES+APCI MS m/z 536,2 [M]+.
EXEMPLO 230 2-(1-acriloíl-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0990] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 1-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 231 2-(1-acriloil-4-(2-(3-hidroxipropoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
1,4-Dioxano
[0991] Etapa A: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(3-hidroxipropoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: O composto do título foi preparado como no Exemplo 220 Etapa C, usando propano-1,3-diol no lugar de (2S,4R)-1-(terc-Butoxicarbonil)-4-fluoro-2-hidroximetilpirrolidina. ES+APCI MS m/z 593,3 [M+H]+.
Trietilamina, DCM
[0992] Etapa B: benzil 4-(2-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)propoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato: A um frasco foi adicionado benzil 2-(cianometil)-4-(2-(3- hidroxipropoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (77,6 mg, 0,131 mmol), que foi dissolvido em DCM
(655 µL, 0,131 mmol). A mistura foi resfriada até 0°C e depois foi adicionada trietilamina (36,5 µL, 0,262 mmol), seguida de 4-(dimetilamino)-piridina (4,80 mg, 0,04 mmol). Em seguida, foi adicionado cloreto de terc-butildimetilsilil (29,6 mg, 0,196 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite enquanto aquecendo até a temperatura ambiente. A mistura de reação foi derramada em uma solução saturada de salmoura (5 ml) e a mistura extraída duas vezes com EtOAc (10 mL). As fases orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O produto de reação bruto foi utilizado como estava. ES+APCI MS m/z 707,4 [M+H]+.
[0993] Etapa C: 2-(4-(2-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)propoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil 4-(2-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)propoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (106 mg, 0,150 mmol) em EtOH (1499 µL, 0,150 mmol) e THF (1,499 mL, 0,150 mmol) foi adicionado paládio (79,8 mg, 0,0375 mmol) (tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O) e depois uma atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguida de pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado até um sólido incolor que foi utilizado sem purificação adicional. ES+APCI MS m/z 573,3 [M+H]+.
[0994] Etapa D: 2-(1-acriloil-4-(2-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)propoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-(4-(2-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)propoxi)-7-(naftaleno)1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (75 mg, 0,131 mmol) em DCM (1.309 µL, 0,131 mmol) a -78°C foi adicionado cloreto de acriloíla (2.619 µL, 0,262 mmol) (solução 0,1 M recém-preparada em DCM) seguido de trietilamina (36,5 µL, 0,262 mmol). A reação foi, então, agitada a 0°C por 30 minutos. A reação foi concentrada e usada em bruto na reação seguinte. ES+APCI MS m/z 627,4 [M+H]+.
[0995] Etapa E: 2-(1-acriloil-4-(2-(3-hidroxipropoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-(1- acriloil-4-(2-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)propoxi)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (90 mg, 0,14 mmol) em DCM (1.436 µL, 0,14 mmol) foi adicionado ácido clorídrico (4,0 M em 1,4- dioxano) (359 µL, 1,4 mmol) a 0°C. A reação foi agitada por 30 min., em cujo ponto ela foi extinta com bicarbonato de sódio saturado e extraída com 10% IPA em CHCl3 (3x15 ml). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas e o resíduo foi purificado por cromatografia de fase reversa (0-95% ACN: H2O com 0,1TFA). ES+APCI MS m/z 513,2 [M+H]+.
[0996] EXEMPLO 232 1-(4-(7-(3-cloro-2-fluoro-5-hidroxifenil)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[0997] O composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 1 Etapa C- F usando Intermediário 25 no lugar de benzil 4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato e 1-bromo-3-cloro-2-fluoro-5- (metoximetoxi)benzeno no lugar de 1-bromo-3-(metoximetoxi)naftaleno na Etapa C. ES+APCI MS m/z 561,2 [M]+.
EXEMPLO 233 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0998] 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Este composto foi preparado seguindo o Exemplo 147 usando (S)-(1-etilpirrolidin-2-il)metanol no lugar de N-metil-L-prolinol no lugar de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 234 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[0999] Etapa A: 1-Benzil 4-(terc-butil) (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4- dicarboxilato: A uma solução bifásica agitada de (R)-1-Boc-3-
hidroximetilpiperazina (5,00 g, 23,1 mmol) e NaHCO3 (5,83 g, 69,4 mmol) em acetato de etila (46,2 ml) e água (46,2 ml) a 0°C foi adicionado cloroformato de benzila (4,95 ml, 34,7 mmol) gota a gota. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (50,0 mL) e a camada orgânica foi separada, seca (Na 2SO4) e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash eluindo com gradiente de 10- 50% de EtOAc/hexanos para proporcionar o composto do título (7,62 g, 21,7 mmol, 94,1%). ESI MS m/z 251,1 [M-Boc+H]+.
[01000] Etapa B. 1_Benzil 4-(terc-butil) (R)-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato (1,69 g, 4,83 mmol) e trietilamina (1,01 ml, 7,25 mmol) em CH2Cl2 (32,2 ml) a 0°C foi adicionado gota a gota MsCl (0,561 mL, 7,25 mmol) puro e a mistura resultante foi agitada à RT por 10 min. A mistura de reação foi derramada em um funil separador, diluída com acetato de etila, em seguida lavada sequencialmente com HCl 1N, água, NaHCO3 (sat.) e salmoura para dar o composto do título (1,9 g, ~100%, usado como material em bruto na próxima etapa). ESI MS m/z 329,1 [M-Boc+H]+.
[01001] Etapa C. 1-Benzil 4-(terc-butil) (S)-2-(cianometil)piperazina-1,4- dicarboxilato: Uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato (2,10 g, 4,90 mmol), cianeto de sódio (0,480 g, 9,80 mmol) em DMA (49,0 ml) foi aquecida a 55°C por 1 dia. A reação foi seguida por HPLC (método de 15 min.). A mistura foi particionada entre EtOAc/salmoura e a camada orgânica foi lavada com salmoura (3x), seca sobre MgSO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com gradiente de 0-100% EtOAc/hexanos para dar o composto do título (1,40 g, 3,90 mmol, 79,5%). Camadas aquosas foram basificadas e descartadas em corrente de despejo de cianeto. ESI MS m/z 260,1 [M-Boc+H]+.
[01002] Etapa D. Benzil Cloridrato de (S)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato: 1-Benzil 4-(terc-butil) (S)-2-(cianometil)piperazina-1,4-dicarboxilato (5,32 g, 14,8 mmol) foi colocado em CH2Cl2 (25 mL) e HCl (4,0 N em dioxano, 18,5 ml, 74,0 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1d. A mistura de reação foi concentrada para proporcionar o composto do título (4,3 g, 99%). ESI MS m/z 260,1 [M+H]+.
[01003] Etapa E. terc-Butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,01 g, 3,89 mmol), terc-butil 2,4-dicloro-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(8H)-carboxilato (1,18 g, 3,89 mmol) e DIEA (1,36 ml, 7,79 mmol) em DMSO (19,5 ml) foi aquecida a 50 por 1 dia. A mistura de reação foi particionada entre acetato de etila e salmoura e os orgânicos separados. A fase orgânica foi lavada com salmoura (3x), seca sobre MgSO4 e concentrada para dar o composto do título (1,63 g, 3,09 mmol, 79,4%). ESI MS m/z 527,2 [M+H]+.
[01004] Etapa F. terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Em frasco de fundo redondo de parede pesada de 250 mL com tampa de rosca de PTFE foi adicionada uma solução de terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2- cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (1,64 g, 3,11 mmol) em dioxano (31,1 ml) e a mistura foi espargida com argônio. À mistura foi adicionado sequencialmente (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol (1,08 g, 9,34 mmol), Cs2CO3 (3,04 g, 9,34 mmol) e catalisador Ruphos-Pd Gen3 (0,260 g, 0,311 mmol) sob argônio e espargido por 5 min adicionais. A mistura de reação foi tampada e aquecida até 100°C por 1 dia. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e os orgânicos lavados com salmoura (2x). A camada orgânica foi seca sobre MgSO4 e concentrada para dar um resíduo que foi purificado por cromatografia flash eluindo com 0-20% (MeOH + 2% NH4OH) em DCM para dar o composto do título (1,42 g, 2,34 mmol, 75,3%) ESI MS m/z 606,3 [M+H]+.
[01005] Etapa G. sal bis-trifluoroacetato de Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma solução de terc-butil 4-((S)-4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (38 mg, 0,063 mmol) em CH2Cl2 (627 ul) e TFA (242 ul, 3,1 mmol) foi agitada à temperatura ambiente por um dia. A mistura de reação foi concentrada e usada como sal bis- TFA na reação seguinte (46 mg, 0,063 mmol, 100%). ESI MS m/z 506,3 [M+H]+.
[01006] Etapa H. Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma suspensão de sal bistrifluoroacetato benzil (S)-2-(cianometil)- 4-(2-(((S)-1))metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (46 mg, 0,063 mmol), 1-bromonaftaleno (39,3 mg, 0,190 mmol) e C2CO3 (61,9 mg, 0,190 mmol) em dioxano (633 ul) foi espargida com argônio por 5 min. A esta mistura foi adicionado Ruphos Pd Gen 3 (5,29 mg, 0,006 mmol) e a suspensão resultante foi espargida por 1 minuto adicional com argônio. O frasco foi tampado e aquecido a 100°C por 2 h. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e água e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 5% MeOH/1% NH4OH/CH2Cl2 isocrática para proporcionar o composto do título (31,9 mg, 0,050 mmol, 79,8%). ESI MS m/z 632,3 [M+H]+.
[01007] Etapa I. 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2)-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-
carboxilato (31 mg, 0,049 mmol) em metanol (981 µl) e THF (981 µl) espargida com nitrogênio foi adicionado Pd/C (10,4 mg, 0,00491 mmol) e a mistura foi agitada sob atmosfera de pressão de balão de H2 por 1 dia. A mistura de reação foi filtrada através de um filtro de seringa de PTFE (25 mm) e o filtrado foi concentrado para proporcionar o composto do título (23,4 mg, 0,047 mmol, 95,8%). ESI MS m/z 498,3 [M+H]+.
[01008] Etapa J. 2-((S)-1-Acriloil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2)-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (23,4 mg, 0,047 mmol) em CH2Cl2 (470 µl) foi adicionado DIEA (41,1 µl, 0,235 mmol), em seguida cloreto de acriloíla (12 µl, 0,141 mmol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 15 minutos. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e K2CO3 2N e salmoura. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 5% MeOH/1% NH4OH em CH2Cl2 para proporcionar o composto do título (19,2 mg, 0,035 mmol, 74,0%). ESI MS m/z 552,3 [M+H]+.
EXEMPLO 235 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[01009] Etapa A. 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (25 mg, 0,0502 mmol) do Exemplo 234 Etapa I, ácido (2E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (13,0 mg, 0,100 mmol), DIEA (43,9 µl, 0,251 mmol) em CH2Cl2 (502 µl) foi adicionado HATU (28,7 mg, 0,0754 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e salmoura. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por C18-preparativa eluindo com 5-95% ACN/H2O + 0,1% TFA. As frações desejadas foram particionadas entre EA/2M K2CO3. A aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4 e concentradas para dar o composto do título (19,0 mg, 0,031 mmol, 62,1%). ESI MS m/z 609,4 [M+H]+.
EXEMPLO 236 2-((S)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(E-4-(piperidin-1-il)but-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila
[01010] Etapa A. 2-((S)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(E-4-(piperidin-1-il)but-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila foi preparado de acordo com o Exemplo 235 usando sal HCl de ácido (2E)-4-(1-piperidinil)-2-butenoico para proporcionar o composto do título (30 mg, 0,046 mmol, 92,0%). ESI MS m/z 649,3 [M+H]+.
EXEMPLO 237 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 2,2,2- trifluoroacetato
[01011] Sintetizado de acordo com o Exemplo 234 usando 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno no lugar de 1-bromonaftaleno. ES+APCI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 238
2-(1-acriloil-4-(7-(6-metil-1H-indazol-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01012] Etapa A: 7-bromo-6-metil-2-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-2H-indazol. Uma solução de 7-bromo-6-metil-1H-indazol (200 mg, 0,948 mmol) em tetra- hidrofurano (2 ml, 0,948 mmol) foi resfriada com agitação em um banho de gelo. Hidreto de sódio (45,5 mg, 1,14 mmol) foi adicionado em porções à mistura e a reação foi agitada a 0°C por 1 hora. (2-(clorometoxi)etil)trimetilsilano (0,201 ml, 1,14 mmol) foi a seguir adicionado e a reação agitada por 2 horas enquanto aquecendo até a temperatura ambiente. A mistura foi dividida entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água (2 x 10 mL), salmoura (10 mL), seca sobre Na 2SO4 e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica gel usando 20 a 40% EtOAc/hexanos como eluente para dar 7-bromo-6-metil-2-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-2H-indazol (46 mg, 14%) juntamente com isômero 7- bromo-6-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-indazol (214 mg, 66%). ES+APCI MS m/z 341,1 [M]+.
[01013] Etapa B: Benzil 2-(cianometil)-4-(7-(6-metil-2-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-2H-indazol-7-il)-2-(((S))-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (50 mg, 0,099 mmol), 7-bromo-6-metil-2-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-2H-indazol (46 mg, 0,13 mmol), Cs2CO3 (97 mg, 0,30 mmol)), Ruphos Pd G3 (83 mg, 0,099 mmol) e dioxano (1 mL) foi purgada com nitrogênio e agitada a 70°C por 6 horas. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e dividida entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água (5 mL), salmoura (5 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada sob vácuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica gel, Redisep 24g, usando 2 a 20% MeOH/DCM como eluente para dar um sólido incolor (50 mg, 66%). ES+APCI MS m/z 766,4 [M]+.
[01014] Etapa C: Benzil 2-(cianometil)-4-(7-(6-metil-1H-indazol-7-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: benzil 2-(cianometil)-4-(7-(6-metil-2-((2- (trimetilsilil)))etoxi)metil)-2H-indazol-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato puro (10 mg, 0,0131 mmol) (10 mg, 0,0131 mmol) foi dissolvido em ácido trifluoroacético (1 ml, 13,1 mmol) e a solução amarela-marrom foi agitada à temperatura ambiente por 1,5 horas. A mistura de reação foi derramada em acetato de etila (20 mL) e os orgânicos lavados cuidadosamente com 2 M Na2CO3 (10 mL, 20 mmol), água
(2 x 3 mL), salmoura (5 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo para dar um sólido amarelado (8 mg, 96%). ES+APCI MS m/z 636,3 [M+H]+.
[01015] Etapa D: 2-(1-acriloil-4-(7-(6-metil-1H-indazol-7-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Uma mistura agitada de benzil 2-(cianometil)-4-(7-(6-metil-1H- indazol-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (16 mg, 0,02517 mmol), metanol (1,5 ml, 0,02517 mmol), tetra-hidrofurano (1,815 mg, 0,02517 mmol) e paládio em carvão (10 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada e agitada sob atmosfera de hidrogênio por 1 hora. A mistura foi filtrada através de Celite (2 mL) e a Celite foi lavada com THF (3 x 3 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados em vácuo até ~ 0,5 mL, dissolvidos em DCM (5 mL), resfriados até -30°C com agitação num banho de EtOH-H2O-CO2. Trietilamina (0,02 mL, 5 eq.) foi a seguir adicionada seguida por cloreto de acriloíla (0,006134 mL, 0,07550 mmol) e a mistura de reação foi agitada 1 min. a -30oC. A reação foi extinta com NH4OH (0,03 mL) e concentrada in vacuo. O resíduo foi dividido entre NaHCO 3 1M (3 mL) e EtOAc (15 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água (3mL), salmoura (3 mL), seca sobre Na 2SO4 e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica gel, Redisep 12 g, utilizando 10 a 20% MeOH/DCM +0,2% NH4OH como eluente para dar um sólido incolor (5,96 mg, 43%). ES+APCI MS m/z 556,3 [M+H]+.
EXEMPLO 239
2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-4-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01016] Sintetizado de acordo com Exemplo 210, Etapas E-G usando 4- Bromo-3-(trifluorometil)piridina bromidrato no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 240 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(2,2,2-trifluoroetil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01017] Sintetizado de acordo com Exemplo 210, Etapas E-G usando 1- bromo-2-(2,2,2-trifluoroetil)benzeno no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 584,3 [M+H]+.
EXEMPLO 241 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-2- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato
1,4-Dioxano
[01018] Etapa A: Num frasco, benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (100 mg, 0,198 mmol) foi dissolvido em dioxano (98,9 µl, 0,198 mmol) e tratado com carbonato de césio (129 mg, 0,396 mmol) e 2-Fluoro-3- (trifluorometil)piridina (163 mg, 0,989 mmol) O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C por 12 h. A reação foi filtrada através de papel GF/F e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica (0-12% MeOH em DCM).
[01019] Etapa B: Sintetizado de acordo com Exemplo 210, Etapas F-G usando benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-2-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato no lugar de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato na Etapa F. ES+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 242
2-(1-(but-2-inoil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila T3P, Trietilamina, DMA
[01020] A 0°C, a um RBF de 25 mL contendo N,N-dimetilformamida (603 µL, 0,06 mmol) foi adicionado 2-(4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (30 mg, 0,06 mmol) e trietilamina (12,2 mg, 0,12 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido 2-Butinoico (6,08 mg, 0,07 mmol) foi adicionado em uma porção. Em seguida, foi adicionado anidrido cíclico do ácido 1-Propanofosfônico (26,9 µl, 0,09 mmol) à mistura agitada. A reação foi deixada agitar por 2 h a 0°C. Foi adicionada água e a reação extraída com EtOAc (2x 25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com LiCl saturado, NaCl e água (10 mL cada lavagem). Secas e concentradas até um sólido que foi purificado por HPLC prep de fase reversa (5-95% ACN: H2O, com 0,1% de TFA) para fornecer o composto do título.
EXEMPLO 243 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila
Cs2CO3, tolueno, t-BuONa, tolueno, 90°C, 7h, 43,3% 79,8% 15°C, 0,5h, 64% TMSOTf, lutidina 50,8% 44,2% 19,8%
[01021] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2- (cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (1,05 g, 2,60 mmol), 2-[[4-bromo-5- (trifluorometil)indazol-1-il]metoxi]etil-trimetil -silano (1,13 g, 2,86 mmol), RuPhos (484 mg, 1,04 mmol) e Cs2CO3 (2,11 g, 6,49 mmol) em tolueno (20 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (475 mg, 519 umol) sob atmosfera de N2, a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi aquecida até 90°C e agitada a 90°C por 7 horas. A mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com EtOAc (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EA de 30:1 a 4:1) e, então, por coluna flash de fase reversa (ACN: 100%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-[5-(trifluorometil)-1- (2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (850 mg, 1,12 mmol, 43,3% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 719,5 [M+H]+.
[01022] Etapa B: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 2- (cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-[5-(trifluorometil)-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (850 mg, 1,18 mmol) em DCM (17 mL) foi adicionado m-CPBA (240 mg, 1,18 mmol, 85,0% de pureza) a 0°C e agitado a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por Na2S2O3 saturado (15 mL) a 0°C e separada, então, diluída com água (10 mL) e extraída com EtOAc (30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 80%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil- 7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (730 mg, 944 umol, 79,8% rendimento, 95,0% de pureza) como sólido amarelo. ESI MS m/z 735,5 [M+H]+.
[01023] Etapa C: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil))indazol-4-il]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[5-(trifluorometil)-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 408 umol) e [(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (94,0 mg, 816 umol) em tolueno (6 mL) foi adicionado t-BuONa (58,8 mg, 612 umol) a 15°C e agitado a 15°C por 0,5 hora. À mistura foi adicionado EtOAc (15 mL) e água (5 mL), em seguida, extraída com EtOAc (3 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 54%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4- il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (216 mg, 261 umol, 64,0% de rendimento, 95,0% de pureza) como sólido marrom. ESI MS m/z 786,6[M+H]+.
[01024] Etapa D: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de terc-butil 2- (cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (190 mg, 242 umol) e 2,6-dimetilpiridina (311 mg, 2,90 mmol, 338 uL) em DCM (4 mL) foi adicionado TMSOTf (645 mg, 2,90 mmol, 524 uL) a 0°C e agitado a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por MeOH (1 mL), depois concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 40%). 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (85 mg, 123 umol, 50,8% de rendimento, 99,0% de pureza) foi obtido como um sólido branco. ESI MS m/z 686,5 [M+H]+.
[01025] Etapa E: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila A uma solução de 2-[4- [2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2- trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (85,0 mg, 124 umol), DIEA (96,1 mg, 744 umol, 130 uL) em DCM (2 mL) foi adicionado prop-2-enoil-prop-2-enoato (23,4 mg, 186 umol) a 0°C e a mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por água (2 mL). A mistura resultante foi extraída com DCM (3 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo O resíduo foi purificado por coluna flash de fase inversa (ACN/Água (0,1% FA) = 48%) para dar 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (45 mg, 54,7 umol, 44,2% de rendimento, 90,0% de pureza) como sólido branco. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,16 (s, 1H), 7,71 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,45 - 6,36 (m, 1H), 5,84 (br d, J=10,4 Hz, 1H), 5,76 (s, 2H), 5,12 (s, 1H), 4,44 - 4,28 (m, 3H), 4,21 - 4,08 (m, 2H), 3,98 (br d, J=12,0 Hz, 1H), 3,63 - 3,54 (m, 2H), 3,48 - 3,39 (m, 2H), 3,32 (br s, 1H), 3,10 (br s, 2H), 2,99 - 2,86 (m, 2H), 2,80 (br s, 2H), 2,73 - 2,58 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,28 (br s, 1H), 2,05 (br s, 1H), 1,77 (br s, 4H), 0,94 - 0,88 (m, 2H), -0,04 (s, 9H).
[01026] Etapa F: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6, 8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop- 2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila A uma solução de 2-[4-[2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4- il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (45 mg, 60,8 umol) em DCM (0,15 mL) foi adicionado TFA (208 mg, 1,82 mmol, 135 uL) e a mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi basificada por NaHCO3 saturado (2 mL) até pH=8. A mistura resultante foi extraída com DCM: MeOH (10:1) (3 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 10%-40%, 10,5 min.) para dar 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1H- indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin- 2-il]acetonitrila (8,2 mg, 12,0 umol, 19,8% de rendimento, 96,2% de pureza, FA) como óleo amarelo. ESI MS m/z 610,4 [M+H]+.
EXEMPLO 244 2-[4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12h, 54,0% 6,21% Duas etapas
[01027] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2- il)metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 445 umol), 8-bromoisoquinolina (185 mg, 891 umol), RuPhos (41,6 mg, 89,1 umol) e Cs2CO3 (435 mg, 1,34 mmol) em tolueno (4,5 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (40,8 mg, 44,5 umol) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 12 horas. A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com EtOAc (3 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 20%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (160 mg, 240 umol, 54,0% de rendimento, 90,0% de pureza) como sólido marrom. ESI MS m/z 599,4 [M+H]+.
[01028] Etapa B: 2-[4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: Uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (190 mg, 317 umol) e TFA (724 6,35 mmol, 470 uL) foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(8-isoquinolil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, bruto, 2TFA) como um óleo marrom.
[01029] Etapa C: 2-[4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, 316 umol, 2TFA) e DIEA (409 mg, 3,17 mmol, 551 uL) em DCM (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (47,9 mg, 380 umol) a 0°C, então, a mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Foi adicionada água (5 mL) à mistura. A mistura resultante foi extraída com DCM (3 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225%FA)-ACN]; B%: 1%-20%, 10min.) para dar 2-[4-[7-(8-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (12,5 mg, 19,7 umol, 6,23% de rendimento, 94,5% de pureza, FA) como sólido amarelo. ESI MS m/z 553,2 [M+H]+.
EXEMPLO 245 2-[4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 1,DIEA,-Dioxano 4,5 h -78-40 °C, 24,5 h Duas etapas, 29,4% 85,6% Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12 h, 72,1% DDQ, dioxano 71,2% Duas etapas, 35,6% 14,2%
[01030] Etapa A: (7-metil-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato: A uma solução de 7-metiltetralin-1-ona (2,00 g, 12,5 mmol) e DIPEA (4,84 g, 37,5 mmol, 6,52 mL) em DCM (30 mL) foi adicionado Tf2O (5,28 g, 18,7 mmol, 3,09 mL) gota a gota a -5°C. A mistura foi agitada a 20°C por 3 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EA 1/0 a 100/1) para dar (7-metil-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (1,53 g, 4,45 mmol, 35,6% de rendimento, 85,0 % de pureza) como um óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,17 (s, 1H), 7,11 - 7,05 (m, 2H), 6,01 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 2,83 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 2,50 (dt, J = 4,8, 8,0 Hz, 2H), 2,36 (s, 3H).
[01031] Etapa B: (7-metil-1-naftil)trifluorometanossulfonato: Uma mistura de (7-metil-3,4-di-hidronaftalen-1-il)trifluoro metanossulfonato (1,40 g, 4,79 mmol) e DDQ (2,17 g, 9,58 mmol) em dioxano (28 mL) foi agitada a 105°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EA 1/0 a 100/1) para dar ((7- metil-1-naftiyl) trifluorometanossulfonato (1,10 g, 3,41 mmol, 71,2% de rendimento, 90,0 % de pureza) como um óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,87 - 7,79 (m, 3H), 7,49 - 7,38 (m, 3H), 2,59 (s, 3H).
[01032] Etapa C: terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 7-benzil- 2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (10 g, 34,0 mmol), 2-piperazin- 2-ilacetonitrila (10,1 g, 51,0 mmol, 2 HCl) e DIEA (17,6 g, 136 mmol, 23,7 mL) em dioxano (100 mL) foi agitada a 50°C por 2 horas. Boc2O (14,8 g, 68,0 mmol, 15,6 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada a 50°C por 2 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi diluído com acetato de etila (500 mL). A camada orgânica separada foi lavada com água (1 × 300 mL), salmoura (1 × 200 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi triturado com acetato de etila (100 mL). O precipitado foi filtrado e a torta filtrada foi lavado com acetato de etila (50 mL) e seca sob vácuo para dar um sólido cinza. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 100/1 a 1/2). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar sólido e depois combinadas com o sólido acima para dar terc-butil 4-(7-benzil-2- cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d] pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-
carboxilato (15 g, 29,10 mmol, 85,6% de rendimento, 93,7% de pureza) como sólido amarelo. ESI MS m/z 483,1 [M+H]+.
[01033] Etapa D: 4-[7-benzil-2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (1,19 g, 10,4 mmol, 1,23 mL, 2,5 eq) em THF (30,0 mL) foi adicionado NaH (331 mg, 8,28 mmol, 60% de pureza em óleo mineral, 2,00 eq) a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 h. terc-Butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,00 g, 4,14 mmol, 1,00 eq) foi adicionado à mistura e a mistura foi agitada a 80°C por 4 horas. A mistura foi derramada em água gelada (100 mL) e extraiu-se com éter acetato (3 × 150 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio (1 x 200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 4-[7- benzil-2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,86 g, bruto) como um óleo preto que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI MS m/z 562,3 [M+H]+.
[01034] Etapa E: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4 -il]piperazina-1-carboxilato: NH3 foi borbulhado em metanol (70,0 mL) a -78°C por 30 minutos. terc-Butil-4-[7-benzil- 2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d] pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,00 g, bruto) e Pd/C (0,20 g, 10% de pureza) foram adicionados à mistura. A mistura foi agitada a 40°C por 24 horas sob H2 a 15 psi. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitrila]. As frações desejadas foram ajustadas até pH > 7 por solução saturada de bicarbonato de sódio (5,00 mL) e a camada aquosa extraída com éter acetato (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 2- (cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi] -5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,40 g, 845 umol, duas etapas 29,4% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 472,2 [M+H]+.
[01035] Etapa F: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato: Uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi]-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (185 mg, 392 umol), (7-metil-1-naftil) trifluorometanossulfonato (159 mg, 549 umol), Pd2(dba)3 (35,9 mg, 39,2 umol), RuPhos (36,6 mg, 78,5 umol) e Cs2CO3 (320 mg, 981 umol) em tolueno (30 mL) foram desgaseificados com N2 e, então, aquecidos até 90°C por 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de NH3•H2O)/acetonitrila] para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-metil-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 283 umol, 72,1% de rendimento, 96,1% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 612,6 [M+H]+.
[01036] Etapa G: 2-[4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: Uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (180 mg, 294 umol) em TFA (671 mg, 5,88 mmol, 436 uL) foi agitada a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão a mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,37 g, bruto, TFA) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[01037] Etapa H: 2-[4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma solução de 2-[4-[7-(7-metil-1)-naftil)-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-2- il]acetonitrila (189 mg, bruto, TFA) e DIEA (976 mg, 7,55 mmol, 1,32 mL) em DCM (4 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (38,1 mg, 302 umol) em gotas a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a reação foi extinta com MeOH (0,5 mL), diluída com água (1 mL) e extraída com DCM (3 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 15% - 45%, 10,5 min.) para dar 2-[4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (13,2 mg, 21,3 umol, duas etapas 14,2% de rendimento, 98,4% de pureza, FA) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 566,5 [M+H]+.
EXEMPLO 246 2-[4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila.
[01038] Sintetizado de acordo com o método para o Exemplo 147 usando 1-bromo-4-fluoronaftaleno no lugar de 1-bromonaftaleno na etapa H. ESI MS m/z 570,5 [M+H]+.
EXEMPLO 247 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(quinolin-8-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01039] Sintetizado de acordo com o método para o Exemplo 147 usando 8-bromoquinolina no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI MS m/z 553,2 [M+H]+.
EXEMPLO 248 (S)-1-(4-(7-(5-isopropil-1H-indazol-4-il)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
THF, -70 °C, 2,5 h 79,2% 30,4% 83,5% 27,8% 18,2% t-BuONa, tolueno, 98,6% 90°C, 12h, 29,8% 13,6%
[01040] Etapa A: 2-(2-bromo-4-fluoro-fenil) propan-2-ol: A uma solução de 1-(2-bromo-4-fluoro-fenil)etanona (10 g, 46,1 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado MeMgBr (em éter) (3 M, 46,08 mL) a -50°C. A mistura foi aquecida até 0°C e agitada por 3 horas. A mistura foi extinta com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (10 mL) a -50°C. A mistura foi aquecida até 15°C e foi, então, diluída com acetato de etila (500 mL). A camada orgânica separada foi lavada com água (1 × 500 mL) e salmoura (1 × 500 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo para dar 2-(2-bromo-4-fluoro- fenil)propano- 2-ol (10 g, 36,5 mmol, 79,2% de rendimento, 85% de pureza) como um óleo incolor.
[01041] Etapa B: 2-bromo-4-fluoro-1-isopropil-benzeno: A uma solução de 2-(2-bromo-4-fluoro-fenil) propan-2-ol (9 g, 38,6 mmol) em diclorometano (100 mL) foi adicionado Et3SiH (8,98 g, 77,2 mmol, 12,3 mL) e TFA (65,1 g, 571 mmol,
42,3 mL). A mistura foi agitada a 15°C por 1 hora e, então, aquecida até 50°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e, então diluída com acetato de etila (100 mL). O pH da camada aquosa foi ajustado para pH = 7 por adição de solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (50 mL x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 100/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo. Foi obtido 2- bromo-4-fluoro-1-isopropil-benzeno (7 g, 32,2 mmol, 83,5% de rendimento) como óleo incolor. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,36-7,27 (m, 2H), 7,09 - 7,02 (m, 1H), 3,46-3,31 (m, 1H), 1,28 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
[01042] Etapa C: 2-bromo-6-fluoro-3-isopropil-benzaldeído: A uma mistura de 2-bromo-4-fluoro-1-isopropil-benzeno (7 g, 32,2 mmol em THF (100 mL) foi adicionada LDA (2 M em tolueno, 24,2 mL) a -70°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada por 0,5 hora e, então, foi adicionado DMF (7,07 g, 96,7 mmol, 7,44 mL). A mistura foi agitada a -70°C por 2 horas. A reação foi extinta com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE\EA = 1\0 a 10\1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 2-bromo-6-fluoro-3- isopropil-benzaldeído (2,4 g, 9,79 mmol, 30,4% de rendimento) como um óleo amarelo. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,41 (s, 1H), 7,48 (dd, J = 5,6, 8,8 Hz, 1H), 7,13(t, J = 9,2, 1H), 3,57 - 3,46 (m, 1H), 1,26 (d, J = 7,2 Hz, 6H).
[01043] Etapa D: 4-bromo-5-isopropil-1H-indazol: 2-bromo-6-fluoro-3- isopropil-benzaldeído (2,4 g, 9,79 mmol) em DMSO (3 mL) foi adicionado N2H4•H2O (15,4 g, 302 mmol, 15 mL, 98% de pureza) e a mistura foi aquecida até 110°C e agitada por 16 horas. A mistura de reação foi derramada em H2O (10 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 mL), seca sobre Na2SO4 anidro e concentrada sob vácuo para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 5/1) para dar 4-bromo-5-isopropil-1H-indazol (650 mg, 2,72 mmol, 27,8% de rendimento) como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,24 (br s, 1H), 8,08 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,56 (td, J = 6,8, 13,6 Hz, 1H), 1,29 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
[01044] Etapa E: 4-bromo-5-isopropil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol: A uma solução de 3,4-di-hidro-2H-pirano (457 mg, 5,44 mmol, 497 uL, 2 eq) em diclorometano (15 mL) foi adicionado TsOH•H2O (51,7 mg, 271 umol) e 4-bromo- 5-isopropil-1H-indazol (650 mg, 2,72 mmol). A mistura foi agitada a 20°C por 3 horas. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 5/1) e ainda purificado por flash de fase inversa [água (ácido fórmico 0,1%)/acetonitrila] para dar 4-bromo- 5-isopropil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (170 mg, 494 umol, 18,2% de rendimento, 94% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 323,0 [M+H]+.
[01045] Etapa F: terc-butil 4-[7-(5-isopropil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4- il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de 4-bromo-5-isopropil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol (136 mg, 420 umol), terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 323 umol), RuPhos (15,1 mg, 32,4 umol), RuPhos-Pd-G2 (25,1 mg, 32,4 umol) e t-BuONa (77,7 mg, 809 umol) em tolueno (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes e a mistura foi agitada a 90°C por 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (10 mL),
secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM/MeOH = 100/1 a 10/1) e as frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 4-[7-(5-isopropil-1-tetra-hidropirano)-2-il-indazol-4-il)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina -4- il]piperazina-1-carboxilato (70 mg, 96,5 umol, 29,8% de rendimento, 93% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 675,3 [M+H]+.
[01046] Etapa G: 7-(5-isopropil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: A uma solução de terc-butil 4-[7-(5-isopropil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (40 mg , 59,3 umol) em diclorometano (100 uL) foi adicionado TFA (101 mg, 889 umol, 65,8 uL). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 7-(5-isopropil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (42 mg, 58,4 umol, 98,6% de rendimento, 2 TFA) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte diretamente sem purificação. ESI MS m/z 491,4 [M+H] +.
[01047] Etapa H: 1-[4-[7-(5-isopropil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona: A uma mistura de 7-(5-isopropil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (42 mg, 58,4 umol) e DIEA (75,5 mg, 584 umol, 102 uL) em diclorometano (2 mL) foi adicionada uma solução de prop-2-enoil prop-2-enoato (7,37 mg, 58,4 umol, 1 eq) em diclorometano (1 mL) a -40°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. A reação foi extinta adicionando solução aquosa de NaHCO3 (2 mL) saturada. Em seguida, a mistura foi derramada em água (20 mL) e extraída com diclorometano (20 mL × 2). Os orgânico combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água
(0,225% FA) - ACN]; B%: 5% - 38%, 10 min.) para dar 1-[4-[7-(5-isopropil-1H- indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (4,5 mg, 7,93 umol, 13,6% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 545,2 [M+H]+.
EXEMPLO 249 1-[4-[7-(2-fluoro-3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona t-BuONa, tolueno, 110°C, 3h, 11,8% -40 °C, 0,5h -78 – 0 °C, 2,5 h Duas etapas, 44,1% 1,63%
[01048] Etapa A: terc-butil 4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: Uma mistura de terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il])metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,50 g, 1,16 mmol), (2-fluoro-3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (562 mg, 1,73 mmol), RuPhos (108 mg, 231 umol), Pd2(dba)3 (106 mg, 116 umol) e t-BuONa (333 mg, 3,47 mmol) em tolueno (7 mL) foi agitada a 110°C por 3 horas sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi resfriada e o pH da camada aquosa ajustado para 7 por adição de solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa extraída com éter acetato (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, diclorometano/metanol = 10/1) e a mistura foi concentrada para dar terc-butil 4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (0,20 g, 274 umol, 11,8% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 607,0 [M+H]+.
[01049] Etapa B: 7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il] metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: Uma mistura terc- butil 4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 330 umol) e TFA (564 mg, 4,94 mmol, 366 uL) em diclorometano (0,4 mL) foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 7-(2-fluoro-3-metoxi-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (205 mg, bruto) como um óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI MS m/z 507,0 [M+H]+.
[01050] Etapa C: 1-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (0,20 g, bruto) e TEA (399 mg, 3,95 mmol, 549 uL) em diclorometano (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (49,8 mg, 394 umol) a -40°C, então, agitada a -40°C por 0,5 h. A mistura foi extinta com metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água
(0,1% TFA)/acetonitrila]. O pH da camada aquosa foi para 7 por adição de solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa extraída com diclorometano/metanol (10/1) (3 × 10mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com cloreto de sódio saturado (1 × 5 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 1-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (0,10 g, 174 umol, 44,1% de rendimento) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 561,5 [M+H]+.
[01051] Etapa D: 1-[4-[7-(2-fluoro-3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona: A uma solução de 1-[4-[7-(2-fluoro)-3-metoxi-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (0,10 g, 174 umol) em diclorometano (3 mL) foi adicionado BBr3 (223 mg, 892 umol, 85,9 uL) a -78°C. A mistura foi agitada a - 78°C por 0,5 h e 0°C por 2 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo, diluída com diclorometano (3 mL) e água e o pH da camada aquosa foi ajustado para > 7 por adição de solução saturada de bicarbonato de sódio a -78 - 0°C. A camada aquosa foi a seguir extraída com diclorometano (3 x 5,00 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = 10/1) e a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)- ACN]; B%: 30% - 60%, 3 min.) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (FA 0,225%)-ACN]; B%: 20% - 50%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 1-[4-[7-(2-fluoro-3- hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (1,59 mg, 2,91 umol, 1,63% de rendimento, 100% de pureza, FA) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 547,2[M+H]+.
EXEMPLO 250
1-[4-[7-(5-cloro-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
93,77%
Cs2CO3, dioxano, 100°C, 12 h, 66,26%
Duas etapas, 27,3%
Etapa A: 4-bromo-5-cloro-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol: A uma solução de 4- bromo-5-cloro-1H-indazol (100 mg, 432,0 umol) em DCM (3 mL) foi adicionado TsOH H2O (8,22 mg, 43,2 umol) e 3,4-di-hidro-2H-pirano (72,7 mg, 864 umol, 79,0 uL). A mistura foi agitada a 20°C por 2 horas.
A reação foi lavada com água (20 mL) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (20 mL x 2). Os orgânicos combinados foram secos com Na2SO4 e o solvente removido sob vácuo.
O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10:1) para dar 4-bromo-5-cloro-1-tetra-hidropiran-2-il- indazol (270 mg, 810 umol, 93,8% de rendimento) como um sólido branco.
ESI MS m/z 547,2[M+H]+.
[01052] Etapa B: terc-butil-4-[7-(5-cloro-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (123 mg, 284,4 umol), 4-bromo-5-cloro-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (135 mg, 427 umol), Pd2(dba)3 (26,0 mg, 28,4 umol), RuPhos (20,0 mg, 42,9 umol) e Cs2CO3 (278 mg, 853 umol) em dioxano (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 e, em seguida, a mistura foi agitada a 100°C por 12 horas sob atmosfera de N2. A reação foi extinta por adição de água (20 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). Os orgânicos combinados foram secos com Na2SO4 e o solvente foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/MeOH=10/1) para dar terc-butil- 4-[7-(5-cloro-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol -4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (130,0 mg, 188,4 umol, 66,3% de rendimento) como um sólido branco. ESI MS m/z 668,2[M+H]+.
[01053] Etapa C: 7-(5-cloro-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina: A uma solução de terc-butil 4-[7-(5-cloro-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (50,0 mg, 74,9 umol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (1,95 mL). A mistura foi agitada a 20oC por 1 h. O solvente orgânico foi removido sob vácuo para dar 7-(5-cloro-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4- piperazina-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (40,0 mg, bruto, 2TFA) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ESI MS m/z 483,4[M+H]+.
[01054] Etapa D: 1-[4-[7-(5-cloro-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona: A uma solução de 7-(5-cloro-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-
il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (40,0 mg, 2TFA) e DIEA (50 mg, 387 umol, 67,4 µL) em DCM (3 mL) foi adicionado anidrido acrílico gota a gota (9,0 mg, 71,4 umol) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a -70°C por 15 min. A reação foi extinta por adição de água (10 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 e o solvente removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 10%-37%, 10 min.) e liofilizado para dar 1-[4-[7-(5-cloro-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 1-il]prop-2-en-1-ona (11,9 mg, 20,8 umol, duas etapas 27,3%, 100% ee) como um sólido amarelo. ESI MS m/z 537,2 [M+H]+.
EXEMPLO 251 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01055] Etapa A: benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-2-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-
(cianometil)piperazina-1-carboxilato. Em um tubo de micro-ondas, benzil 4-(2- cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 0,326 mmol) foi dissolvido em dioxano (181 µl, 0,362 mmol) e tratado com carbonato de césio (236 mg, 0,723 mmol) e (S)-terc-butil 2-(hidroximetil)-2-metilpirrolidina-1-carboxilato (389 mg, 1,81 mmol). O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C por 2 horas. LC/MS mostrou conclusão da reação. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi concentrado in vacuo e cromatografado no CombiFlash (0%-10% DCM:MeOH). Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas para dar benzil 4-(2- (((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (264 mg, 0,361 mmol, 99,7% de rendimento). ES+APCI MS m/z 732,4 [M+H]+.
[01056] Etapa B: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-2-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-2-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (264 mg, 0,361 mmol) foi dissolvido em diclorometano (3607 µl, 0,361 mmol) e tratado com TFA (556 µl, 7,21 mmol). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. LC/MS mostrou conclusão da reação. A reação foi concentrada in vacuo e tratada com bicarb saturado. A camada aquosa foi extraída com DCM (2X) e os orgânicos combinados secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)- 2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (210 mg, 0,332 mmol, 92,2% de rendimento). ES+APCI MS m/z 632,3 [M+H]+.
[01057] Etapa C: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. benzil 2-(cianometil)-4-(2-((S)-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (105 mg, 0,1662 mmol) foi dissolvido em ácido fórmico (94,05 µl, 2,493 mmol) e tratado com Formaldeído (1868 µl, 24,93 mmol). A mistura de reação foi agitada a 85°C por 1 hora. LC/MS mostrou conclusão da reação. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e tratada com bicarb saturado e a mistura foi extraída com DCM (2X) e os orgânicos combinados e secos sobre Na2SO4. Os orgânicos combinados foram concentrados sob vácuo e cromatografados no CombiFlash (0%-10% DCM:MeOH). Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1)-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (75 mg, 0,11161 mmol, 69,88% de rendimento). ES+APCI MS m/z 646,4 [M+H]+.
[01058] Etapa D: 2-(4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (117 mg, 0,181 mmol) em EtOH (1812 µl, 0,181 mmol) e THF (1.812 µl, 0,181 mmol) foi purgada com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado Paládio (96,4 mg, 0,0453 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H 2O), e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 min. A solução foi, então, agitada sob atmosfera de H2 por 1 hora. LC/MS mostrou o produto desejado limpo. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-(4-(2- (((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6),7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (88 mg, 0,172 mmol, 94,9% de rendimento). ES+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01059] Etapa E: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. A uma suspensão de 2-(4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (88 mg, 0,17 mmol) em diclorometano (1720 µl, 0,17 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Aciloil (14 µl, 0,17 mmol) seguido por base de Hunig (60 µl, 0,34 mmol). A reação foi, então, agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. LC/MS mostrou conclusão da reação. A mistura de reação foi concentrada in vacuo. O concentrado foi ressuspenso numa mistura
60:40 de ACN:H2O e purificado na Gilson (HPLC-prep) usando 5-->95% ACN/0,1% de TFA em água/0,1% de TFA como eluente. As frações contendo o produto foram combinadas e basificadas livres com bicarb saturado e os orgânicos extraídos com DCM. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo para dar 2-(1-acriloíl-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (14 mg, 0,025 mmol, 14% de rendimento). ES+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 252 terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato
0,5 h 20 °C, 0,5h 50,7% Duas etapas, 6,58% HCl/dioxano Acetona, Pd/C 0 – 15 °C, 0,5 h 100% 77,3%
[01060] Etapa A: (S)-pirrolidin-2-ilmetanol: Para uma solução de (S)-terc- butil 2-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato (2 g, 9,94 mmol) em CH2Cl2 (40 mL) foi adicionado HCl (4 M em dioxano, 49,69 mL) a 0°C sob uma atmosfera de nitrogênio. Após agitação a 15°C por 30 min., a mistura foi concentrada sob vácuo. Foi obtido (S)-pirrolidin-2-ilmetanol (1,37 g, 9,96 mmol, 100% de rendimento, HCl) como um sólido amarelo.
[01061] Etapa B: [(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il] metanol: Uma mistura de [(2S)-pirrolidin-2-il]metanol (750 mg, 7,41 mmol, 724 uL) e acetona (4,31 g, 74,2 mmol, 5,46 mL) em MeOH (20 mL) foi hidrogenada sob H2 (30 psi) com Pd/C (100 mg, 7,41 mmol, 10% de pureza) a 15°C por 3 horas. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo. Foi obtido [(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metanol (0,821 g, 5,73 mmol, 77,3% de rendimento) como um óleo amarelo. 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 3,54 (dd, J = 4,0, 10,8 Hz, 1H), 3,40 - 3,35 (m, 1H), 2,99 - 2,86 (m, 3H), 2,60 - 2,50 (m, 1H), 1,94 - 1,82 (m, 1H), 1,82 - 1,66 (m, 3H), 1,15 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,08 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
[01062] Etapa C: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato: A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-
naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 549 umol) e [(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metanol (157 mg, 1,10 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado t-BuONa (158 mg, 1,65 mmol). Após agitação a 20°C por 0,5 hora, a mistura de reação foi neutralizada com HCl (1 M) até pH = 7, mantendo a temperatura da solução a 0°C e, em seguida, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de TFA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (200 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (174 mg, 278 umol, 50,7% de rendimento, 100% de pureza) como um óleo amarelo. ESI MS m/z 626,2 [M+H]+.
[01063] Etapa D: 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila: A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (174 mg, 278 umol) em CH2Cl2 (5 mL) foi adicionado TFA (7,70 g, 67,5 mmol, 5,00 mL) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. Após agitação a 15°C por 0,5 h, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (178 mg, bruto, TFA) foi obtido como um óleo amarelo. ESI MS m/z 526,1 [M+H]+.
[01064] Etapa E: 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila: A uma mistura de 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (178 mg, em bruto, sal de TFA) e DIEA (360 mg, 2,78 mmol, 485 uL) em CH 2Cl2 (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (28,1 mg, 223 umol) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 (5 mL) a 0°C, e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 50 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 27% - 54%, 10 min.). 2-[4-[2-[[(2S)-1- isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (11,7 mg, 18,3 umol, duas etapas, 6,58% de rendimento, 97,9% de pureza, FA) foi obtido como um sólido marrom. ESI MS m/z 580,2 [M+H]+.
EXEMPLO 253 2-(1-acriloil-4-(7-(7-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila DDQ, dioxano 25 -105 °C, 5,5 h 78,5% 63,4%
[01065] Etapa A: (7-cloro-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato: A uma mistura de 7-clorotetralina-1-ona (2 g, 11,1 mmol, 1 eq) e DIEA (4,29 g, 33,2 mmol, 5,79 mL) em DCM (35 mL) foi adicionado Tf2O (4,69 g, 16,6 mmol, 2,74 mL) numa só porção a 0°C sob N 2. A mistura foi agitada a 25°C por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 200/1 a 50/1). (7-cloro-3,4-di-hidronaftalen-1-il)
trifluorometanossulfonato (2,25 g, 7,02 mmol, 63,4% de rendimento, 97,6% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,32 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,24 (dd, J = 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,10 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 2,88 - 2,80 (m, 2H), 2,53 (dt, J = 4,8, 8,0 Hz, 2H).
[01066] Etapa B: (7-cloro-1-naftil) trifluorometanossulfonat: A uma mistura de (7-cloro-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (1,57 g, 5,02 mmol) em dioxano (35 mL) foi adicionado DDQ (2,28 g, 10,0 mmol) numa só porção sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 30 min., depois aquecida até 105°C e agitada por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover 1,4-dioxano. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 200/1 a 50/1). (7-cloro-1- naftil) trifluorometanossulfonato (1,24 g, 3,94 mmol, 78,5% de rendimento, 98,7% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,05 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,87 - 7,83 (m, 2H), 7,57 - 7,47 (m, 3H).
[01067] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E- G, usando (7-cloro-1-naftil) trifluorometanossulfonato no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 586,1 [M+H]+.
EXEMPLO 254 2-[4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[01068] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 1-bromo-5-fluoronaftaleno no lugar de 1-bromo-2- (trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil-prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 255 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] -1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Dioxano, refluxo, 105°C, 12h, 92,3% 75,1%
[01069] Etapa A: (7-metoxi-3,4-di-hidronaftalen-1- il)trifluorometanossulfonato: À solução de 7-metoxitetralin-1-ona (1 g, 5,67 mmol) e DIEA (2,20 g, 17,0 mmol, 2,97 mL) em DCM (15 mL) foi adicionado Tf2O (2,40 g, 8,51 mmol, 1,40 mL) gota a gota, em seguida a mistura foi agitada a 20°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 100:1) para dar (7-metoxi- 3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato de (7-metoxi-3,4-di- hidronaftalen-1-il) (1,7 g, 5,24 mmol, 92,3% de rendimento, 95,0% de pureza) como óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,06 (d, J=8,4 Hz, 1H),
6,75 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 6,66 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,04 - 2,96 (m, 2H), 2,68 (t, J=8,4 Hz, 2H).
[01070] Etapa 2: (7-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato: Uma mistura de (7-metoxi-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (1,7 g, 5,51 mmol) e DDQ (2,50 g, 11,0 mmol) em dioxano (30 mL) foiagitada a 105°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 50:1) para dar (7-metoxi-1- naftil) trifluorometanossulfonato (1,41 g, 4,14 mmol, 75,1% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo incolor. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,84 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,78 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,65 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,24 - 7,21 (m, 2H), 7,15 (d, J=2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H).
[01071] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando (7-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato no lugar de 1-bromo- 2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2- enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 582,4 [M+H] +.
EXEMPLO 256 1-(2-(metoximetil)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[01072] Etapa A: benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(metoximetil)piperazin- 1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Uma solução de terc-butil 2-(metoximetil)piperazina-1-carboxilato (0,715 g, 3,10 mmol) em N,N-dimetilacetamida (3 ml) foi resfriada em um banho de gelo com agitação e benzil 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato sólido (1,00 g, 2,96 mmol) foi adicionado em pequenas porções, seguido por DIPEA (0,57 mL, 3,25 mmol, 1,1 eq.). A solução resultante foi deixada aquecer até r.t. durante 1 hora e depois dividida entre água (15 mL) e MTBE (50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (2 x 10 mL), salmoura (10 mL), seca sobre Na 2SO4 e evaporada in vacuo para dar um sólido amarelo (1,54 g, 98%). ES+APCI MS m/z 532,3, [M+H]+.
[01073] Etapa B: 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(metoximetil)piperazin-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3- (metoximetil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (6H)- carboxilato bruto (500 mg, 0,940 mmol), (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol (216 mg, 1,88 mmol), Cs2CO3 (612 mg, 1,88 mmol) e dioxano (0,5 mL) foi lavada com nitrogênio. O frasco foi tampado e agitado a 120°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada, dividida entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL), a camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 ml cada), seca sobre Na 2SO4 e evaporada in vacuo. O composto foi purificado por cromatografia de sílica gel, Redisep 40 g, eluindo com 4 a 10% de MeOH/DCM + 0,2% de NH4OH, para dar um sólido amarelo (197 mg, 34%). ES+APCI MS m/z 611,4 [M+H]+.
[01074] Etapa C: 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(metoximetil)piperazin-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (197 mg, 0,323 mmol), metanol (10 mL) e paládio em carbono (10 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada e agitada sob atmosfera de hidrogênio (balão) por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada através de Celite (2 mL), lavada com MeOH (3 x 3 mL), evaporada in vacuo e seca por evaporação com tolueno in vacuo e sob alto vácuo para dar um sólido incolor (150 mg, 98%). ES+APCI MS m/z 477,2 [M+H]+.
[01075] Etapa D: terc-butil 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido-[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 0,315 mmol), Cs2CO3 (308 mg, 0,944 mmol), dioxano (1 mL), 1-iodonaftaleno (0,0689 ml, 0,472 mmol) e metanossulfonato(2- diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2-amino-1,1'-bifenil-2-il)paládio (II) (26,3 mg, 0,0315 mmol) (RuPhos-Pd-G3) foi purgada com nitrogênio, o frasco foi tampado e agitado a 70°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada,
dividida entre EtOAc (15 mL) e água (5 mL), a camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 ml cada), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O composto foi purificado por cromatografia de sílica gel, Redisep 40 g, utilizando 4 a 10% MeOH +0,5% NH4OH como eluente para dar um sólido incolor, 131 mg. ES+APCI MS m/z 603,3 [M+H]+.
[01076] Etapa E: 1-(2-(metoximetil)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2- en-1-ona. Terc-butil 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (130 mg, 0,2157 mmol) foi dissolvido em ácido trifluoroacético 1M em DCM e a solução resultante foi deixada em r.t. por 1 h. A mistura de reação foi dividida entre 2 M Na2CO3 (5 mL) e DCM (15 mL) e a camada orgânica foi evaporada in vacuo. O resíduo sólido foi dissolvido em DCM (5 mL), resfriado em banho de gelo de EtOH-CO-2 com agitação a -30°C e trietilamina (0,09 ml, 0,64 mmol) foi adicionado, seguido por cloreto de acriloíla (0,035 ml, 0,43 mmol). Após 1 minuto a -30°C a mistura de reação foi extinta com NH4OH (0,05 mL) e evaporada in vacuo e seca sob alto vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL), filtrado através de um tampão de algodão e purificado por cromatografia de sílica gel, Redisep 40 g, eluindo com 5 a 10% de MeOH/DCM +0,25% de NH4OH para dar um sólido incolor (19,6 mg, 16%). ES+APCI MS m/z 557,3, [M+H]+.
EXEMPLO 257
2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Dioxano,
[01077] Etapa A: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Em um frasco de fundo cônico, uma solução de benzil 4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 0,326 mmol) em dioxano (3616 µl, 0,326 mmol) foi espargida com Argônio por 5 minutos. (S)-(1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metanol (168 mg, 1,08 mmol), Cs2CO3 (353 mg, 1,08 mmol), Rhuphos Pd G3 (30,2 mg, 0,0362 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por 5 minutos adicionais. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 1 hora. LC/MS mostrou conclusão da reação. Foi adicionado EtOAc e lavado com salmoura (2x). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi purificado por cromatografia flash eluindo com 0-20% DCM/MeOH + 2% NH4OH. Todas as frações contendo produto limpo desejado foram combinadas e concentradas para dar benzil 2- (cianometil)-4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (90 mg, 0,134 mmol, 37,0% de rendimento). ES+APCI MS m/z 672,4 [M+H]+.
[01078] Etapa B: 2-(4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido)[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Uma solução de benizl 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (90 mg, 0,13 mmol) em EtOH (1.340 µl, 0,13 mmol) e THF (1340 µl, 0,13 mmol) foi purgada com N2 por 5 min. A esta solução foi adicionado Paládio (36 mg, 0,033 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução foi, então, agitada sob H2 introduzido via vácuo seguido de pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente por 1 hora. LC/MS mostrou produto desejado. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-(4-(2-(((S)-1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6),7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (71 mg, 0,13 mmol, 99% de rendimento). ES+APCI MS m/z 538,3 [M+H]+.
[01079] Etapa C: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-(4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (71 mg, 0,132 mmol) em diclorometano (1.320 µl, 0,132 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Acriloíla (10,7 µl, 0,132 mmol) seguido por base de Hunig (46,1 µl, 0,264 mmol). A reação foi, então, agitada à temperatura ambiente por 1 hora. LC/MS mostrou conclusão da reação. A mistura de reação foi concentrada in vacuo. O concentrado foi ressuspenso numa mistura 60:40 de ACN:H2O e purificado na Gilson (HPLC-prep) eluindo com 5--> 95% de ACN/0,1% de TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e basificadas livres com bicarb saturado e os orgânicos extraídos com DCM. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo para dar 2-(1-acriloil-4-(2-(((S)-1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1)-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (15,7 mg, 0,0265 mmol, 20,1% de rendimento). ES+APCI MS m/z 592,4[M+H]+.
EXEMPLO 258 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[01080] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E- G, usando 1-bromoisoquinolina no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 553,3 [M+H]+.
EXEMPLO 259 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 88,1%
[01081] Etapa A: (6-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato: A uma solução de 6-fluoronaftalen-1-ol (0,10 g, 617 umol) e DIEA (159 mg, 1,23 mmol, 215 uL) em diclorometano (3 mL) foi adicionado trifluorometilsulfonil trifluorometanossulfonato (191 mg, 678 umol, 112 uL) a 0°C. Após agitada a 0°C por 1 hora, a mistura foi diluída com água (5 mL) e extraída com diclorometano (3 × 5 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 5 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1) para dar (6-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (0,17 g, 543 umol, 88,1% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, cloroórmio-d) δ = 8,10 (dd, J = 5,2, 8,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,58 - 7,50 (m, 2H), 7,48 - 7,40 (m, 2H).
[01082] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 1(6-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato no lugar de 1-bromo- 2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2- enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 260 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[01083] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 4-bromoisoquinolina no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla ESI MS m/z 553,1 [M+H]+.
EXEMPLO 261 2-[1-(2-metilprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
[01084] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E- G, usando 1-bromonaftaleno em 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando cloreto de 2-metil-prop-2-enoil no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 566,4 [M+H]+.
EXEMPLO 262 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[01085] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 5-bromoisoquinolina no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla ESI MS m/z 553,4 [M+H]+.
EXEMPLO 263 2-[1-[(E)-but-2-enoil] -4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
[01086] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 1-bromonaftaleno no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E ecloreto de (E)-but-2-enoil no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G ESI MS m/z 566,4 [M+H]+.
EXEMPLO 264 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[01087] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 5-bromoquinolina no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando cloreto prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G. ESI MS m/z 553,4 [M+H]+.
EXEMPLO 265 2-(1-acriloil-4-(7-(3-metil-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01088] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 210, Etapas E-G usando 1-bromo-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1- bromonaftaleno na Etapa E ES+APCI MS m/z 584,3 [M+H]+.
EXEMPLO 266 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01089] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 147, Etapas F-J, utilizando (S)-(1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metanol no lugar de (S)- (1-metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 596,3 [M+H]+.
EXEMPLO 267 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01090] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 234, utilizando (R)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2- il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 552,3 [M+H]+.
EXEMPLO 268 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-metoxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01091] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 220, (Etapas G-C), usando terc-butil (2S,4R)-2-(hidroximetil)-4-metoxipirrolidina-1- carboxilato no lugar de (2S, 4R)-1-(terc-Butoxicarbonil)-4-fluoro-2- hidroximetilpirrolidina na Etapa C. ES+APCI MS m/z 582,3 [M+H]+.
EXEMPLO 269
2-(1-acriloil-4-(2-(2-(dimetilamino)-2-metilpropoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01092] O composto do título foi sintetizado seguindo o Exemplo 147 usando 2-Dimetilamino-2-metil-1-propanol no lugar de (S)-(1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 554,4 [M+H]+.
EXEMPLO 270 2-(1-acriloíl-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01093] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 147, Etapas F-J, utilizando (R)-N-Boc-2-hidroximetilmorfolina no lugar de (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 271
2-(1-acriloil-4-(2-((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01094] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 147, Etapas F-J, utilizando (S)-N-Boc-2-hidroximetilmorfolina no lugar de (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 272 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01095] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 147, Etapas F-J, utilizando terc-butil (R)-3-(hidroximetil)morfolino-4-carboxilato no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 273
2-(1-acriloil-4-(2-((R)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01096] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 147, Etapas F-J, utilizando terc-butil (S)-3-(hidroximetil) morfolino-4-carboxilato no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa F. ES+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 274 2-((S)-1-acriloíl-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01097] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 234, Etapas G-J utilizando (R)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol no lugar de (S)-(1- metilpirrolidin-2-il) metanol na Etapa F e 1 -bromo-3-fluoro-2- (trifluorometil)benzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H ES+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 275 2-(1-acriloíl-4-(7-(2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01098] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 210, Etapas E-G usando 2-bromo-1-fluoro-3-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1- bromonaftaleno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 276 2-(1-acriloíl-4-(7-(4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01099] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 210, Etapas E-G, usando 1-bromo-4-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1- bromonaftaleno na Etapa E. ES+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 277
2-(1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01100] Composto do título foi sintetizado de acordo com o Exemplo 210, Etapas E-G, usando 1-bromo-3-cloro-2-(trifluorometil)benzeno por 1- bromonaftaleno na Etapa E e THF no lugar de EtOH/THF na Etapa F. ES+APCI MS m/z 604,3 [M+H]+.
EXEMPLO 278 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(quinolin-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01101] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210 Etapas E-G, usando 4-bromoquinolina no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
EXEMPLO 279
2-(1-acriloil-4-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01102] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210, usando N,N-dimetil-etanolamina no lugar de (2S)-1-Etil-2-pirrolidinil]metanol na etapa C e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
EXEMPLO 280 2-(4-(2-(3-((1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1- acriloilpiperazin-2-il)acetonitrila
[01103] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210, usando 3-((1R, 4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propan-1-ol no lugar de (2S)-1- Etil-2-pirrolidinil]metanol na etapa C e também usando prop-2-enoil prop-2- enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
EXEMPLO 281
2-(1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01104] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210, usando (R)-(1-metilpirrolidin-3-il)metanol no lugar de (2S)-1Etil-2-pirrolidinil]metanol na etapa C e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
Exemplo 282 2-(1-(3-metilbut-2-enoil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01105] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210, usando 1-bromonaftaleno no lugar de 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno na etapa E e cloreto de 3-metilbut-2-enoil no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
Exemplo 283
2-(1-acriloíl-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01106] O composto do título foi preparado como no Exemplo 210, usando (2R)-1-Etil-2-pirrolidinil]metanol no lugar de (2S)-1-Etil-2-pirrolidinil]metanol na etapa C e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
EXEMPLO 284 2-(1-acriloil-4-(2-(2-(dietilamino)etoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01107] Composto do título foi preparado como no Exemplo 210, usando N,N-dietil-etanolamina no lugar de (2S)-1-Etil-2-pirrolidinil]metanol na etapa C e também usando prop-2-enoil prop-2-enoato no lugar de cloreto de acriloíla na etapa G.
EXEMPLO 285 terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato 0,5 h 20 °C, 0,5 h 50,7% Duas etapas 6,58% HCl/dioxano Acetona, Pd/C 0,5 h 77,3%
[01108] Etapa 1: (S)-pirrolidin-2-ilmetanol. A uma solução de (S)-terc-butil 2-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato (2 g, 9,94 mmol, 1 eq) em CH2Cl2 (40 mL) foi adicionado HCl (4 M em dioxano, 49,69 mL, 20 eq) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. Após agitação a 15°C por 30 min., a mistura foi concentrada sob vácuo. Composto (S)-pirrolidin-2-ilmetanol (1,37 g, 9,96 mmol, 100% de rendimento, HCl) foi obtido como um sólido amarelo.
[01109] Etapa 2: [(2S)-isopropilpirrolidin-2-il]metanol. Uma mistura de [(2S)-pirrolidin-2-il]metanol (750 mg, 7,41 mmol, 724 uL, 1 eq) e acetona (4,31 g, 74,2 mmol, 5,46 mL, 10 eq) em MeOH (20 mL) foi hidrogenada sob H2 (30 psi)
com Pd/C (100 mg, 7,41 mmol, 10% de pureza, 1 eq) como catalisador a 15°C por 3 horas. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo. Composto [(2S)-1- isopropilpirrolidin-2-il]metanol (0,821 g, 5,73 mmol, 77,3% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo.
[01110] 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 3,54 (dd, J = 4,0, 10,8 Hz, 1H), 3,40 - 3,35 (m, 1H), 2,99 - 2,86 (m, 3H), 2,60 - 2,50 (m, 1H), 1,94 - 1,82 (m, 1H), 1,82 - 1,66 (m, 3H), 1,15 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,08 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
[01111] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 549 umol, 1 eq) e [(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metanol (157 mg, 1,10 mmol, 2 eq) em THF (5 mL) foram adicionados t-BuONa (158 mg, 1,65 mmol, 3 eq). Depois de agitada a 20°C por 0,5 hora, a mistura de reação foi neutralizada com HCl (1 mol/L) até pH = 7 a 0°C e, então, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de TFA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (200 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (174 mg, 278 umol, 50,7% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 626.
[01112] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (174 mg, 278 umol, 1 eq) em CH2Cl2 (5 mL) foi adicionado TFA (7,70 g, 67,5 mmol,
5,00 mL, 243 eq) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. Após agitação a 15°C por 0,5 h, a mistura foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[4-[2-[[(2S)-1- isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (178 mg, bruto, TFA) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[01113] Etapa C: 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (178 mg, bruto, TFA) e DIEA (360 mg, 2,78 mmol, 485 uL) em CH 2Cl2 (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (28,1 mg, 223 umol) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 (5 mL) a 0°C, e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 50 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 27% - 54%, 10 min.). Composto do título 2-[4- [2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (11,7 mg, 18,3 umol, duas etapas: 6,58% de rendimento, 97,9% de pureza, FA) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 580.
[01114] 1H NMR (400MHz, Ácido acético-d4) δ = 8,28 - 8,19 (m, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,91 - 7,83 (m, 1H), 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,94 - 6,71 (m, 1H), 6,38 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,87 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,15 (br s, 1H), 4,92 - 4,54 (m, 4H), 4,42 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,34 (br s, 2H), 4,13 (br s, 2H), 3,95 (br s, 1H), 3,85 - 3,21 (m, 7H), 3,20 - 2,84 (m, 3H), 2,42 - 2,25 (m, 1H), 2,24 - 2,07 (m, 3H), 1,43 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,39 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
EXEMPLO 286 2-(1-acriloil-4-(7-(7-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila DDQ, dioxano 25 – 105 °C, 5,5 h 78,5% 63,4% 99,8% Cs2CO3, Tolueno, 110°C, 5h, 74,6% 17,8%
[01115] Etapa 1: (7-cloro-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato. A uma mistura de 7-clorotetralin-1-ona (2 g, 11,1 mmol, 1 eq) e DIEA (4,29 g, 33,2 mmol, 5,79 mL, 3 eq) em DCM (35 mL) foi adicionado Tf2O (4,69 g , 16,6 mmol, 2,74 mL, 1,5 eq) em uma porção, a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 200/1 a 50/1). O composto (7-cloro-3,4-di-
hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (2,25 g, 7,02 mmol, 63,4% de rendimento, 97,6% de pureza) foi obtido como um óleo incolor.
[01116] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,32 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,24 (dd, J = 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,10 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 2,88 - 2,80 (m, 2H), 2,53 (dt, J = 4,8, 8,0 Hz, 2H).
[01117] Etapa 2: (7-cloro-1-naftil) trifluorometanossulfonato. A uma mistura de (7-cloro-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (1,57 g, 5,02 mmol, 1 eq) em dioxano (35 mL) foi adicionado DDQ (2,28 g, 10,0 mmol, 2 eq) em uma porção sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 30 min., depois aquecida até 105°C e agitada por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover 1,4-dioxano. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 200/1 a 50/1). Composto (7-cloro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (1,24 g, 3,94 mmol, 78,5% de rendimento, 98,7% de pureza) foi obtido como um óleo incolor.
[01118] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,05 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,87 - 7,83 (m, 2H), 7,57 - 7,47 (m, 3H).
[01119] Etapa A: terc-butil 4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2- il)metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 424 umol, 1 eq) e (7-cloro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (264 mg, 848 umol, 2 eq) em tolueno (20 mL) foi adicionado Pd 2(dba)3 (38,8 mg, 42,4 umol, 0,1 eq), Ruphos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,2 eq) e Cs 2 CO3 (414 mg, 1,27 mmol, 3 eq) sob N2. A mistura foi aquecida até 110°C e agitada por 5 horas. A mistura foi diluída com água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 15,0 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 20,0 mL), secos sobre Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% TFA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (1 × 30 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto terc-butil 4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 316 umol, 74,6% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 632.
[01120] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,20 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,48 - 7,38 (m, 2H), 7,18 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,63 (br s, 1H), 4,43 (br dd, J = 4,8, 10,3 Hz, 1H), 4,29 - 4,16 (m, 3H), 4,09 - 3,89 (m, 2H), 3,42 (br s, 1H), 3,35 – 3,20 (m, 3H), 3,17 - 2,65 (m, 7H), 2,52 (s, 3H), 2,33 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 2,14 - 2,06 (m, 1H), 1,88 - 1,71 (m, 4H).
[01121] Etapa B: 2-[4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil 4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (200 mg, 316 umol, 1 eq) em DCM (2,5 mL) foi adicionado TFA (541 mg, 4,75 mmol, 351 uL, 15 eq) em uma porção, a 0°C sob N 2. Depois a mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. Composto 2-[4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (204 mg, 316 umol, 99,8% de rendimento, TFA) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 532.
[01122] Etapa C: 2-[4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (204 mg, 316 umol, 1 eq, TFA) e TEA (160 mg, 1,58 mmol, 220 uL, 5 eq) em DCM (1,5 mL) foi adicionado prop-2-enoil-prop-2-enoato (39,8 mg, 316 umol, 1 eq) em uma porção a 0°C. Depois de agitada a 25°C durante 1 h, a mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 (1 mL) a 0°C, depois diluída com água (2 mL) e extraída com DCM (5 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (5 mL x 1), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150 × 30 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 30% - 54%, 10 min.). Composto do título 2-[4-[7-(7-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (36,0 mg, 56,1 umol, 17,8% de rendimento, 98,7% de pureza, FA) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 586.
[01123] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,42 (br s, 1H), 8,19 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,47 - 7,41 (m, 2H), 7,19 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,61 (br s, 1H), 6,40 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,91 - 4,75 (m, 2H), 4,48 (td, J = 4,4, 12,0 Hz, 1H), 4,23 (br s, 3H), 4,07 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,82 - 3,58 (m, 2H), 3,56 - 3,08 (m, 6H), 3,08 - 2,92 (m, 2H), 2,89 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 2,85 - 2,70 (m, 2H), 2,28 (qd, J = 8,4, 12,5 Hz, 1H), 2,22 - 2,11 (m, 1H), 2,11 - 1,94 (m, 2H).
EXEMPLO 287 2-[4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
64,54% Duas etapas 40%
[01124] Etapa A:terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2- il)metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 424 umol, 1,30 eq) e 1-bromo-5-fluoro-naftaleno (73,4 mg, 326 umol, 1,0 eq) em tolueno (5,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (319 mg, 979 umol, 3,0 eq), Pd2(dba)3 (29,9 mg, 32,6umol, 0,10 eq) e Ruphos (22,8 mg, 48,9 umol, 0,15 eq). A mistura foi agitada a 110°C por 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover tolueno. O resíduo foi diluído com H2O (10,0 mL) e extraído com acetato de etila (10,0 mL * 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (10,0 mL) e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico 0,100%)/acetonitrila]. Composto terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(5-fluoro-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 211 umol, 64,5% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[01125] Etapa B: 2-[4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (130 mg, 211 umol, 1,0 eq) em DCM (2.0 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,0 mmol, 2,00 mL, 128 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. Composto 2- [4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo. O produto bruto foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 517.
[01126] Etapa C: 2-[4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (300 mg, TFA) em DCM (3,0 mL) Et3N (200 mg, 1,98 mmol, 275 uL) e prop-2-enoil-prop-2-enoato (40,0 mg, 317 umol) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 2 h. A reação foi lavada com água (10,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (20,0 mL*3). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo.O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225%FA)-ACN]; B%: 26%-53%, 10 min.) e liofilização. Composto do título 2-[4-[7-(5-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (48,4 mg, 82,6 umol, duas etapas 40,0% de rendimento, FA) foi obtido como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01127] 1H NMR (400 MHz, CDCl3)  = 8,41 (s, 1H), 7,91 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,38-7,32 (m, 1H), 7,13- 7,07 (m, 2H), 6,54-6,52 (m, 1H), 6,33 (m, 1H), 5,76 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,10- 4,98 (br, 4H), 4,74-4,69 (m, 1H), 4,41-4,36 (m, 1H), 4,16 (m, 3H), 3,99 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,61-3,60 (m, 1H), 3,14-3,29 (m, 4H), 3,11 (br, 2H), 2,92-2,85 (m,
1H), 2,78 (s, 3H), 2,74-2,67 (m, 2H), 2,21-2,16 (m, 1H), 2,09-2,04 (m, 1H), 1,98- 1,91 (m, 2H).
EXEMPLO 288 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] -1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12 h, 35,7% Duas etapas, 11,2% Dioxano, 92,3% refluxo, 105°C, 12 h, 75,1%
[01128] Etapa 1: (7-metoxi-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato. À solução de 7-metoxitetralina-1-ona (1 g, 5,67 mmol, 1 eq), DIEA (2,20 g, 17,0 mmol, 2,97 mL, 3 eq) em DCM (15 mL) foi adicionado Tf2O (2,40 g, 8,51 mmol, 1,40 mL, 1,5 eq), gota a gota, em seguida a mistura foi agitada a 20°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 100:1) para dar (7-metoxi-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato de (7- metoxi-3,4-di-hidronaftalen-1-il) (1,7 g, 5,24 mmol, 92,3% de rendimento, 95,0% de pureza) como óleo amarelo.
[01129] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,06 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,75 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 6,66 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,04 - 2,96 (m, 2H), 2,68 (t, J=8,4 Hz, 2H).
[01130] Etapa 2: (7-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato. Uma mistura de (7-metoxi-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (1,7 g, 5,51 mmol, 1 eq) e DDQ (2,50 g, 11,0 mmol, 2 eq) em dioxano (30 mL) foi agitada a 105°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 50:1) para dar (7-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (1,41 g, 4,14 mmol, 75,1% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo incolor.
[01131] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,84 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,78 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,65 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,24 - 7,21 (m, 2H), 7,15 (d, J=2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H).
[01132] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. À solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2- il)metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 200 mg, 424 umol, 1 eq), (7-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (260 mg, 848 umol, 2 eq), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,2 eq), Cs2CO3 (414 mg, 1,27 mmol, 3 eq) em tolueno (6 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (38,8 mg, 42,4 umol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 12 horas. Foi adicionada água (5 mL) à mistura. A mistura resultante foi diluída com EtOAc (5 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 34%) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-metox-1- naftiyl)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 151 umol, 35,7% de rendimento, 95,0% de pureza) como sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 628.
[01133] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,69 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,63 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,17 (dd, J=2,4, 9,2 Hz, 1H), 7,09 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,03 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,96 (dd, J=2,4, 8,8 Hz, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,52 - 4,30 (m, 3H), 4,20 (ddd, J=3,2, 6,8, 10,4 Hz, 1H), 4,02 (br d, J=13,6 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,87 (br d, J=13,2 Hz, 1H), 3,76 - 3,68 (m, 1H), 3,55 - 3,43 (m, 1H), 3,25 (br dd, J=3,6, 13,6 Hz, 2H), 3,12 (br t, J=7,6 Hz, 1H), 3,05 - 2,94 (m, 1H), 2,92 - 2,77 (m, 3H), 2,76 - 2,65 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,35 - 2,26 (m, 1H), 2,14 - 2,06 (m, 1H), 1,92 - 1,74 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[01134] Etapa B: 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (100 mg, 159 umol, 1 eq) e TFA (363 mg, 3,19 mmol, 236 uL, 20 eq) foi agitada a 18°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, bruto, 2TFA) como óleo castanho.
[01135] Etapa C: 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. À solução de 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, 159 umol, 1 eq, 2TFA), DIEA (205 mg, 1,59 mmol, 276 uL, 10 eq) em DCM (2,5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (24,0 mg, 190 umol, 1,2 eq) a 0°C e agitada a 18°C por 1 hora. Foi adicionada água (5 mL) à mistura. A mistura resultante foi extraída com DCM (3 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45%-75%, 10min.) para dar o composto do título 2-[4-[7-(7-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (10,6 mg, 17,8 umol, duas etapas: 11,2% de rendimento, 97,6% de pureza) como sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01136] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,63 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,17 (dd, J=2,4, 8,8 Hz, 1H), 7,09 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,03 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,97 (dd, J=2,4, 8,8 Hz, 1H), 6,57 (br d, J=10,4 Hz, 1H), 6,43 - 6,36 (m, 1H), 5,83 (br d, J=10,8 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,52 - 4,31 (m, 3H), 4,25 - 4,15 (m, 1H), 4,08 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,96 (br s, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,72 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,54 (br d, J=5,6 Hz, 2H), 3,30 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,22 - 2,95 (m, 3H), 2,93 (d, J=8,4 Hz, 1H), 2,86 (br d, J=4,8 Hz, 2H), 2,79 - 2,65 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,36 - 2,26 (m, 1H), 2,16 - 2,02 (m, 1H), 1,91 - 1,67 (m, 4H).
EXEMPLO 289 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
54,9% 15 °C, 1 h Duas etapas 20,9%
[01137] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin -2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 424 umol, 1,00 eq), 1-bromoisoquinolina (132 mg, 636 umol, 1,50 eq) e DIEA (109 mg, 848 umol, 148 uL, 2,00 eq) em DMSO (4,00 mL) foi agitada a 110°C por 3 horas. A mistura foi diluída com água (5,00 mL), extraída com acetato de etila (3 × 5,00 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas e ajustadas para pH > 7 com solução saturada de bicarbonato de sódio (6,00 mL) e extraídas com acetato de etila (3 x 20,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,15 g, 233 umol, 54,9% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
599.
[01138] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,17 - 8,11 (m, 2H), 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,57 - 7,51 (m, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,69 - 4,55 (m, 3H), 4,42 - 4,35 (m, 1H), 4,15 - 4,01 (m, 3H), 3,96 - 3,81 (m, 2H), 3,57 (ddd, J = 4,0, 8,0, 16,8 Hz, 1H), 3,27 (dd, J = 4,0, 13,6 Hz, 1H), 3,18 - 3,16 (m, 1H), 3,16 - 2,95 (m, 3H), 2,91 - 2,73 (m, 3H), 2,70 - 2,62 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,07 - 2,01 (m, 1H), 1,91 - 1,73 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[01139] Etapa B: 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,15 g, 250,53 umol, 1,00 eq) e TFA (428 mg, 3,76 mmol, 278 uL, 15,0 eq) em diclorometano (0,40 mL) foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin -2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (153 mg, bruto, TFA) como um óleo preto e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 499.
[01140] Etapa C: 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin - 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (153 mg, bruto, TFA) e TEA (253 mg, 2,50 mmol, 348 uL) em diclorometano (4,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (31,5 mg, 250 umol) a 0°C, depois agitado a 15°C por 1 hora. A mistura foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio (1,00 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna HPLC-prep: (Phenomenex Synergi C18 150*25* 10um; fase móvel: [água (0,225%, FA) - ACN]; B%: 10% - 24%, 7 min.) e (coluna : Phenomenex Synergi C18 150*25* 10um; fase móvel: [água (0,225%, FA) - ACN]; B%: 10% - 24%, 7 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[4-[7-(1-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (31,2 mg, 52,1 umol, duas etapas 20,9 de rendimento, FA) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 553.
[01141] 1H NMR (400MHz, acético) δ = 8,44 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,04 - 7,95 (m, 2H), 7,89 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,82 (br t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,91 - 6,69 (m, 1H), 6,37 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,87 (br d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,10 (br s, 2H), 4,78 (br s, 3H), 4,53 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,32 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,13 (br s, 3H), 3,90 (br s, 2H), 3,79 - 3,40 (m, 3H), 3,26 (br s, 3H), 3,12 (br s, 3H), 3,07 - 2,84 (m, 2H), 2,45 - 2,34 (m, 1H), 2,23 - 2,09 (m, 3H).
EXEMPLO 290 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 110°C, 3h, 75,8% 88,1% Duas etapas, 42,8%
[01142] Inserir: (6-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato. A uma solução de 6-fluoronftalen-1-ol (0,10 g, 617 umol, 1,00 eq) e DIEA (159 mg, 1,23 mmol, 215 uL, 2,00 eq) em diclorometano (3,00 mL) foi adicionado trifluorometilsulfonil trifluorometanossulfonato (191 mg, 678 umol, 112 uL, 1,10 eq) a 0°C. Após agitação a 0°C por 1 hora, a mistura foi diluída com água (5,00 mL) e extraída com diclorometano (3 × 5,00 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 5,00 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1) para dar (6-fluoro-1- naftil)trifluorometanossulfonato (0,17 g, 543 umol, 88,1% de rendimento) como um óleo incolor.
[01143] 1H NMR (400MHz, cloroórmio-d) δ = 8,10 (dd, J = 5,2, 8,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,58 - 7,50 (m, 2H), 7,48 - 7,40 (m, 2H).
[01144] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin -2- il)metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 424 umol, 1,00 eq), (6-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (150 mg, 509 umol, 1,20 eq), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,20 eq), Pd 2(dba)3 (38,8 mg, 42,4 umol, 0,10 eq) e Cs2CO3 (415 mg, 1,27 mmol, 3,00 eq) em tolueno (2,00 mL) foi agitada a 110°C por 3 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (5,00 mL), extraída com acetato de etila (3 × 5,00 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas e ajustadas pH > 7 com solução saturada de bicarbonato de sódio (5,00 mL) e, em seguida, extraídas com acetato de etila (3 × 20,0 mL), as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-
2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 322 umol, 75,8% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[01145] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 (dd, J = 5,6, 9,2 Hz, 1H), 7,57 - 7,52 (m, 1H), 7,48 - 7,42 (m, 2H), 7,29 – 7,24 (m, 1H) 7,10 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,62 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,31 - 4,22 (m, 2H), 4,14 - 4,00 (m, 3H), 3,95 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,44 (br s, 1H), 3,35 - 3,25 (m, 2H), 3,23 - 2,90 (m, 4H), 2,86 - 2,63 (m, 4H), 2,49 (s, 3H), 2,33 - 2,24 (m, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H) 1,89 - 1,74 (m, 3H), 1,53 (s, 9H).
[01146] Etapa B: 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (0,20 g, 322 umol, 1,00 eq) e TFA (556 mg, 4,87 mmol, 361 uL, 15,0 eq) em diclorometano (0,40 mL) foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (205 mg, bruto, TFA) como um óleo preto e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01147] Etapa C: 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (205 mg, bruto, TFA) e TEA (328 mg, 3,24 mmol, 451 uL) em diclorometano (4,00 mL) prop-2-enoil prop-2-enoato (40,9 mg, 324 umol) a 0°C, depois agitada a 15°C por 1 hora. A mistura foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio (1,00 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel:
[água (0,225%, FA)-ACN]; B%: 17%-44%, 9min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[4-[7-(6-fluoro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (85,6 mg, 139 umol, 42,8% de rendimento, FA) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01148] 1H NMR (400MHz, acético) δ = 8,28 (dd, J = 5,6, 9,2 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 - 7,45 (m, 2H), 7,31 (dt, J = 2,4, 8,8 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,94 - 6,68 (m, 1H), 6,38 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,87 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,16 (br s, 1H), 4,84 (br s, 2H), 4,74 - 4,54 (m, 1H), 4,42 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,33 (br s, 2H), 4,25 - 4,08 (m, 1H), 3,92 (br s, 2H), 3,81 - 3,47 (m, 3H), 3,46 - 3,16 (m, 4H), 3,11 (br s, 3H), 3,08 - 2,87 (m, 3H), 2,46 - 2,32 (m, 1H), 2,25 - 2,11 (m, 3H).
EXEMPLO 291 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
0,5 h Cs2CO3, tolueno, 110°C, 3h, 85,9% Duas etapas 17,3%
[01149] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin -2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,15 g, 318 umol, 1,00 eq), 4-bromoisoquinolina (99,3 mg, 477 umol, 1,50 eq), RuPhos (29,7 mg, 63,6 umol, 0,20 eq), Pd 2(dba)3 (29,1 mg, 31,8 umol, 0,10 eq) e Cs2CO3 (311 mg, 954 umol, 3,00 eq) em tolueno (5,00 mL) foi agitada a 110°C por 3 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (6,00 mL), extraída com acetato de etila (3 × 5,00 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas e ajustadas para pH > 7 com solução saturada de bicarbonato de sódio (5,00 mL) e extraídas com acetato de etila (3 x 20,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (0,17 g , 273 umol, 85,9% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 599.
[01150] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,03 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,73 (dt, J = 1,2, 7,2 Hz, 1H), 7,67 - 7,60 (m, 1H), 4,63 (br s, 1H), 4,44 - 4,31 (m, 3H), 4,15 - 4,03 (m, 2H), 3,95 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,59 - 3,49 (m, 1H), 3,40 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,34 - 3,19 (m, 2H), 3,18 - 2,93 (m, 4H), 2,90 - 2,79 (m, 2H), 2,77 - 2,66 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,35 - 2,24 (m, 1H), 2,10 - 2,02 (m, 1H), 1,92 - 1,79 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[01151] Etapa B: 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,15 g, 251 umol, 1,00 eq) e TFA (428 mg, 3,76 mmol, 278 uL, 15,0 eq) em diclorometano (0,30 mL) foi agitada a 15°C por 0,5 h. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (153 mg, bruto, TFA) como um óleo preto e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 499.
[01152] Etapa C: 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (153 mg, em bruto, de TFA) e Et3N (254 mg, 2,51 mmol, 349 uL) em diclorometano (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (31,6 mg, 251 umol) a -40°C. Após agitada a 15°C por 1 hora, a mistura foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 1/1) e HPLC-prep (coluna: ODS Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225%, FA) - ACN]; B%: 12%-36%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[4-[7-(4-isoquinolil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin -2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-
prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (28,3 g, 43,4 umol, duas etapas 17,3% de rendimento, FA) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 553.
[01153] 1H NMR (400MHz, acético) δ = 9,45 (s, 1H), 8,51 - 8,36 (m, 3H), 8,17 (br t, J = 8,0 Hz, 1H), 8,03 - 7,97 (m, 1H), 6,92 - 6,67 (m, 1H), 6,37 (br d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,87 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,14 (br s, 1H), 4,82 (br s, 2H), 4,66 - 4,48 (m, 3H), 4,40 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,22 - 3,80 (m, 3H), 3,79 - 3,49 (m, 4H), 3,32 - 3,09 (m, 7H), 3,07 - 2,88 (m, 2H), 2,47 - 2,36 (m, 1H), 2,24 - 2,11 (m, 3H).
EXEMPLO 292 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2,Co3, tolueno, 90°C, 12h, 81,0% Duas etapas 32,2%
[01154] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi] - 5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 424 umol, 1,00 eq), 5-bromoisoquinolina (115 mg, 551 umol, 1,30 eq), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,20 eq), Cs2CO3 (415 mg, 1,27 mmol, 3,00 eq) e Pd2(dba)3 (38,8 mg, 42,4 umol, 0,10 eq) em tolueno (6,00 mL) foram desgasificados e, então, aquecidos até 90°C por 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila] para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(5- isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (217 mg, 344 umol, 81,0% rendimento, 94,8% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 599.
[01155] Etapa B: 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (217 mg, 362 umol, 1.00 eq) em TFA (620 mg, 5,44 mmol, 403 uL, 15,0 eq) foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (222 mg, bruto, TFA) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 499.
[01156] Etapa C: 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (222 mg, 362 umol, TFA) e TEA (367 mg, 3,62 mmol, 504 uL) em DCM (4,50 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (45,7 mg, 362 umol) gota a gota a 0°C.
A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a reação foi extinta por MeOH (0,5 mL), diluída com água (2 mL) e extraída com EtOAc (2 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25* 10um; fase móvel: [água (FA 0,225%) - ACN]; B%: 4% - 20%, 8 min.) e liofilizado para dar o composto do título 2-[4-[7-(5-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (73,0 mg, 117 umol, duas etapas 32,2% de rendimento, 95,6% de pureza, FA) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:553.
[01157] 1H NMR (400MHz, Acético) δ = 9,71 (s, 1H), 8,69 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,91 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,97 - 6,68 (m, 1H), 6,38 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,87 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,15 (br s, 1H), 4,81 (br d, J = 4,4 Hz, 2H), 4,67 - 4,51 (m, 1H), 4,49 - 4,31 (m, 3H), 4,28 - 4,04 (m, 1H), 3,91 (br s, 2H), 3,78 - 3,64 (m, 1H), 3,63 - 3,37 (m, 4H), 3,36 - 3,20 (m, 1H), 3,11 (br s, 5H), 3,08 - 2,86 (m, 2H), 2,46 - 2,33 (m, 1H), 2,24 - 2,10 (m, 3H).
EXEMPLO 293 2-[1-[(E)-but-2-enoil]-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
Pd2(dba)3, Cs2CO3, Tolueno 20 °C, 0,5 h 90°C, 12hrs, 55% Duas etapas 18%
[01158] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 212 umol, 1,0 eq), Pd2(dba)3 (19,4 mg, 21,2 umol, 0,10 eq), RuPhos (14,8 mg, 31,8 umol, 0,15 eq) e Cs2CO3 (207 mg, 636 umol, 3,0 eq) em tolueno (3,0 mL) foi adicionado gota a gota 1-bromonaftaleno (65,9 mg, 318 umol, 44,2 uL, 1,5 eq). A mistura de reação foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e a mistura foi agitada a 110°C por 4 horas sob atmosfera de N 2. A reação foi lavada com água (20,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo.O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% de FA em água, 0-80% de MeCN). Composto terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (80,0 mg, 116 umol, 54,6% de rendimento) foi obtido como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[01159] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-
hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (80,0 mg, 134 umol, 1,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,0 mmol, 2,0 mL, 202 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 30 min. sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto bruto 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (110 mg, bruto, 2TFA) foi obtido como um óleo amarelo e foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:498.
[01160] Etapa C: 2-[1-[(E)-but-2-enoil]-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (110 mg, 152 umol, 2TFA) em DCM (2,00 mL) foi adicionado DIEA (100 mg, 774 umol, 135 uL) e cloreto de (E)-but-2-enoil (35,0 mg, 335 umol, 32,1 uL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A reação foi extinta com água (10,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na 2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo.O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225%FA)-ACN]; B%: 20%-50%, 10 min.) e liofilização. Composto do título 2-[1-[(E)-but-2-enoil]- 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (13,3 mg, 23,4 umol, 99,7% de pureza, FA) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01161] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d)  8,37 (s, 1H), 8,14-8,13 (m, 1H), 7,80-7,78 (m, 1H), 7,54 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,46-7,42 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,07 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,95-6,90 (m, 1H), 6,22 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 5,05-4,91 (br, 1H), 4,67-4,63 (m, 1H), 4,37-4,32(m, 1H), 4,24-4,20 (m, 2H), 4,12 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,51-3,49 (m, 1H), 3,39-3,29 (m, 2H), 3,18- 3,12 (m, 7H), 2,90-2,76 (m, 2H), 2,71 (s, 3H), 2,65-2,58 (m, 1H), 2,18-2,12 (m, 1H), 2,00-1,95 (m, 1H), 1,90-1,86 (m, 5H).
EXEMPLO 294 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, Tolueno 90°C, 12h, 74,4% Duas etapas 23,9%
[01162] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(5-quinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. 2-(cianometil)-4-[2-[(1-metilpirrolidin-2-il)metoxi] - 5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 424 umol, 1,00 eq), 5-bromoquinolina (115 mg, 551 umol, 1,30 eq), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,20 eq), Cs2CO3 (415 mg, 1,27 mmol, 3,00 eq) e Pd2(dba)3 (38,8 mg, 42,4 umol, 0,10 eq) em tolueno (6,00 mL) foram desgasificados e, então, aquecidos até 90°C por 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água
(0,1% FA)/acetonitrila] para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 315 umol, 74,4% rendimento, 94,4% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 599.
[01163] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 334 umol, 1,00 eq) em TFA (571 mg, 5,01 mmol, 371 uL, 15,0 eq) foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (204 mg, bruto, TFA) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 499.
[01164] Eetapa C: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5- quinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (204 mg, 333 umol, 1,00 eq, TFA) e TEA (337 mg, 3,33 mmol, 463 uL) em DCM (4,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (42,0 mg, 333 umol) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a reação foi extinta com MeOH (0,5 mL), diluída com água (2 mL) e extraída com EtOAc (2 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por prep-TLC (DCM/MeOH 8/1) e HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225%FA)-ACN]; B%: 7% -34%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5-quinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (49,1 mg, 79,5 umol, duas etapas
23,9% de rendimento, 96,9% pureza, FA) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:553.
[01165] 1H NMR (400MHz, Acético) δ = 9,22 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 9,15 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,96 - 7,90 (m, 1H), 7,50 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,98 - 6,71 (m, 1H), 6,37 (br d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,88 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,15 (br s, 1H), 4,81 (br s, 2H), 4,77 - 4,52 (m, 1H), 4,50 - 4,33 (m, 3H), 4,14 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,91 (br s, 2H), 3,79 - 3,66 (m, 1H), 3,65 - 3,32 (m, 4H), 3,12 (br s, 6H), 3,05 (br d, J = 16,8 Hz, 2H), 2,46 - 2,34 (m, 1H), 2,23 - 2,09 (m, 3H).
EXEMPLO 295 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
15 °C, 0,5 h tolueno, 100°C, 3 h, 84,8% Duas etapas 13,4%
[01166] Etapa A: [2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin -2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 0,15 g, 318 umol, 1,00 eq), 4-bromoquinolina (99,3 mg, 477 umol, 1,50 eq), RuPhos (29,7 mg, 63,6 umol, 0,20 eq), Pd2(dba)3 (29,1 mg, 31,8 umol, 0,10 eq) e Cs2CO3 (311 mg, 954 umol, 3,00 eq) em tolueno (5 mL) foi agitada a 100°C por 3 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (5,00 mL), extraída com acetato de etila (3 × 5,00 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas e ajustadas para pH > 7 com bicarbonato de sódio saturado (5,00 mL) e extraídas com acetato de etila (3 x 20,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (0,17 g, 269 umol, 84,8% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 599.
[01167] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,77 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 8,0, 16,0 Hz, 2H), 7,70 (dt, J = 1,2, 7,2 Hz, 1H), 7,56 - 7,50 (m, 1H), 6,92 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,62 (br s, 1H), 4,44 - 4,33 (m, 3H), 4,15 - 4,04 (m, 2H), 3,95 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,74 - 3,64 (m, 1H), 3,46 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,37 - 3,21 (m, 2H), 3,18 - 2,93 (m, 4H), 2,93 - 2,79 (m, 2H), 2,72 (br dd, J = 6,0, 16,8 Hz, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,36 - 2,26 (m, 1H), 2,13 - 2,06 (m, 1H), 1,93 - 1,79 (m, 3H), 1,53 (s, 9H).
[01168] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin -2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (165 mg, 276 umol, 1,00 eq) e TFA (471 mg, 4,13 mmol, 306 uL, 15,0 eq) em diclorometano (0,30 mL) foi agitada a 15°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (168 mg, bruto, TFA) como um óleo preto e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 499.
[01169] Etapa C: 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4- quinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (168 mg, bruto, de TFA) e Et3N (277 mg, 2,74 mmol, 382 uL) em diclorometano (3,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (34,6 mg, 274,22 umol) a -40°C. Após agitação a 15°C por 1 hora, a mistura foi extinta com bicarbonato de sódio saturado (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 1/1) e HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225%, FA) - ACN]; B%: 1% - 21%, 7 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-quinolil)-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 295, 23,4 mg, 39,6 umol, duas etapas 13,4% de rendimento, 93,6% pureza, FA) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 553.
[01170] Condição SFC: Coluna OD-3S_3_40_3 ML: Chiralcel OD-3 100 × 4,6 mm I.D., 3 um, fase móvel: 40% de metanol (0,05% de DEA) em CO 2, taca de fluxo: 3 mL/min., comprimento de onda: 220 nm.
[01171] 1H NMR (400MHz, acético) δ = 8,65 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,99 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,77 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,74 (dd, J = 10,8, 16,8 Hz, 1H), 6,32 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,85 (dd, J = 1,2, 10,8 Hz, 1H), 5,01 (br s, 1H), 4,85 - 4,74 (m, 2H), 4,42 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 4,35 - 4,19 (m, 3H), 4,16 - 3,76 (m, 4H), 3,66 (br d, J = 14,0 Hz, 2H), 3,51 - 3,40 (m, 1H), 3,39 - 3,16 (m, 4H), 3,13 (s, 3H), 3,07 - 2,90 (m, 2H), 2,49 - 2,39 (m, 1H), 2,26 - 2,17 (m, 3H).
EXEMPLO 296 2-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5 hora, 96% 0°C, 0,5 hora, duas etapas 20%
[01172] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (150 mg, 266 umol, 1,0 eq) e 2-(dimetilamino)etanol (47,4 mg, 531 umol, 53,3 uL, 2,0 eq) em tolueno (1,0 mL) foi adicionado t-BuONa (51,1 mg, 531 umol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (10 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0 - 40% MeCN). A fração pretendida foi coletada e ajustada com NaHCO3 saturado aquoso até um pH ~ 7, então, concentrada sob vácuo. O líquido restante foi extraído com EA (10 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (150 mg, 254 umol, 95,8% de rendimento) foi obtido como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 590.
[01173] Etapa B: 2-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2-
(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (150 mg, 254 umol, 1,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado TFA (29,0 mg, 254 umol, 18,8 uL, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. Ao resíduo foi adicionado NaHCO3 aquoso saturado (5 mL) e extraído com DCM (10 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar 2-[4-[2-[2- (dimetilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, bruto) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 490.
[01174] Etapa C: A uma solução de 2-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (125 mg, 255 umol, 1,0 eq) e DIEA (198 mg, 1,53 mmol, 267 uL, 6,0 eq) em DCM (1,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (32,2 mg, 255 umol, 1,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC- prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 10%-40%, 10 min.). Então, concentrado e liofilizado. O produto 2-[4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 296, 30,7 mg, 51,8 umol, 20,3% de rendimento, 99,5% de pureza, FA) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 544.
[01175] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,45 (br s, 1H), 7,67 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,71 - 6,49 (m, 1H), 6,47 - 6,29 (m, 1H), 5,82 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,07 - 4,97 (m, 1H), 4,54 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 4,12 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 4,07 (s, 2H), 3,98 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,40 - 3,30 (m, 2H), 3,22 - 3,09 (m, 4H), 3,05 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,92 (dd, J = 8,0, 16,8 Hz, 1H), 2,86 - 2,81 (m, 1H), 2,79 - 2,70 (m, 2H), 2,56 (s, 6H).
EXEMPLO 297 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5h, 55% 0 – 20 °C, 0,5 h Duas etapas 25%
[01176] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[3-[(1R,4R)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 2- (cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 354 umol, 1,0 eq) e 3-[(1R,4R)- 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propano-1-ol (Intermediário 18, 111 mg, 708 umol, 2,0 eq) em tolueno (3,0 mL) foi adicionado t-BuONa (68,1 mg, 708 umol, 2,0 eq) a 0°C, a reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10 mL), então, extraída com EA (2 x 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa (C18, 60% MeCN em água), o produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado até pH~8, então, concentrado, extraído com EA (2 ×10,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- [3-[(1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo [2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (130 mg, 197 umol, 55,7% de rendimento, 99,8% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 658.
[01177] Etapa B: 2-[4-[2-[3-[(1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[3- [(1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (70,0 mg, 106 umol, 1,0 eq) em DCM (0,5 mL) foi adicionado TFA (770 mg, 6,75 mmol, 0,5 mL, 63,5 eq). A mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 2-[4-[2-[3-[(1R,4R)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (83,0 mg, bruto, 2TFA) como óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 558.
[01178] Etapa C: 2-[4-[2-[3-[(1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[2-[3-[(2R,4R)-2- oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (83,0 mg, 106 umol, 1,0 eq, 2TFA) em DCM (1,0 mL) foi adicionado DIEA (81,9 mg, 634 umol, 110 uL, 6,0 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (13,3 mg, 106 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (0,5 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC- prep ((Instrumento: ACSWH-GX-G; Coluna: Phenomenex Gemini
150*25mm*10um; Condição: água (0,225% FA)-ACN; Início B: 12; Fim B: 42; Tempo de Gradiente (min.): 10,5; 100%B Tempo de Retenção (min.): 2; Taxa de Fluxo (ml/min.): 2), o produto obtido foi concentrado e depois sob liofilização. O produto 2-[4-[2-[3-[(1R,4R)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 297, 17,6 mg, 26,3 umol, duas etapas rendimento 24,9% de rendimento, 98,1% de pureza, FA) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 612.
[01179] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,69 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,31 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,72 - 6,52 (m 1H), 6,40 (d, J = 16,4 Hz,1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,16 - 5,02 (m, 1H), 4,58 - 4,51 (m, 1H), 4,38 (br t, J = 5,8 Hz, 2H), 4,21 (br d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 4H), 3,99 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,74 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,42 - 3,29 (m, 2H), 3,27 - 3,04 (m, 6H), 3,04 - 2,61 (m, 6H), 2,28 - 2,07 (m, 3H), 2,04 - 1,92 (m, 1H).
EXEMPLO 298 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila refluxo t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5h, 38% 0 – 20 °C, 0,5 h Duas etapas 14%
[01180] Etapa A: [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol. A uma solução de terc-butil (3R)-3-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato de terc- butil (2,0 g, 9,94 mmol, 1,0 eq) em THF (30,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (754 mg, 19,9 mmol, 2,0 eq) em porções a 0°C. Após adição, a reação foi agitada a 70°C por 3 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com Na2SO4 saturado aquoso (2,4 mL), então, extraída com Acetato de etila (100 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 e filtrada. O solvente foi removido sob vácuo para dar [(3R)- 1-metilpirrolidin-3-il]metanol (1,0 g, bruto) como óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[01181] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 3,64 (dd, J = 4,8, 10,0 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 5,6, 10,0 Hz, 1H), 2,78 - 2,67 (m, 1H), 2,60 - 2,45 (m, 2H), 2,42 - 2,23 (m, 5H), 2,08 - 1,91 (m, 1H), 1,72 - 1,57 (m, 1H).
[01182] Etapa B: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2- metilsulfinil-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 177 umol, 1,0 eq) e [(3R)-1-metilpirrolidin-3-
il]metanol (61,2 mg, 531 umol, 3,0 eq) em tolueno (1,0 mL) foi adicionado t- BuONa (34,0 mg, 354 umol, 2,0 eq) a 0°C, a reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL), em seguida, extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 50% MeCN em água). terc-butil 2- (cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (40,0 mg, 63,4 umol, 35,8% de rendimento, 97,6% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[01183] Etapa C: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (40,0 mg, 64,9 umol, 1,0 eq) em DCM (0,5 mL) foi adicionado TFA (770 mg, 6,75 mmol, 500 uL, 104 eq). A mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (48,0 mg, bruto, 2TFA) como óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01184] Etapa D: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (48,0 mg, 64,6 umol, 1,0 eq, 2TFA) em DCM (1,0 mL) foi adicionado DIEA (25,0 mg, 194 umol, 33,7 uL, 3,0 eq) e prop-2-enoil prop-2- enoato (8,14 mg, 64,6 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com metanol
(0,5 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-prep ((Instrumento: ACSWH-GX-M; Coluna: Gemini 150*25 5u; Condição: água (0,04% NH3H2O)- ACN; Início B: 60; Final B: 81; Tempo de gradiente (min.): 10; 100%B Tempo de Retenção (min.): 3; Taxa de Fluxo (ml/min.): 25), o produto obtido foi concentrado e depois sob liofilização para dar 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila (5,48 mg, 9,26 umol, 14,4% de rendimento, 96,3% de pureza) como sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01185] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,54 - 6,44 (m, 1H), 6,32 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,75 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,12 - 4,92 (m, 1H), 4,13 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 4,07 - 3,97 (m, 3H), 3,92 - 3,84 (m, 1H), 3,62 - 3,42 (m, 1H), 3,31 - 3,22 (m, 1H), 3,16 - 2,95 (m, 3H), 2,89 - 2,49 (m, 7H), 2,47 - 2,35 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,05 - 1,92 (m, 1H), 1,57 - 1,46 (m, 2H).
EXEMPLO 299 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
DCM 0 °C, t-BuONa, tolueno, Cs2CO3, tolueno, 0,5 hora 0°C, 20 min. 78% 100°C, 12 horas, 84% 38% 0 °C, 0,5 h Duas etapas, 6,4%
[01186] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (3,70 g, 9,15 mmol, 1,0 eq), Pd2(dba)3 (1,26 g, 1,37 mmol, 0,15 eq), RuPhos (854 mg, 1,83 mmol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (7,45 g, 22,9 mmol, 2,50 eq) em tolueno (74,0 mL) foi adicionado 1-bromo-2-(trifluorometil)benzeno (4,12 g, 18,3 mmol, 2,49 mL, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 100°C por 12 horas. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (100 mL) e extraída com Acetato de etila (100 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-90% MeCN). O produto terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (1,90 g, 3,46 mmol, 37,8% de rendimento) foi obtido como sólido amarelo.
[01187] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,57 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 7,11 Hz, 1H), 4,67 - 4,55 (m, 1H), 4,03 (t, J = 13,6 Hz, 2H), 3,88 (br t, J = 12,0 Hz, 1H), 3,68 - 3,47 (m, 1H), 3,30 - 3,08 (m, 4H), 3,95 - 3,02 (m, 2H), 3,63 - 3,2 (m, 4H), 12,4 - 2,82 (m, 1H), 2,94 - 2,69 (m, 4H), 2,02 - 2,51 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[01188] Etapa B: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (1,50 g, 2,46 mmol, 1,0 eq) em DCM (15,0 mL) foi adicionado m- CPBA (593 mg, 2,75 mmol, 1,12 eq, 80% de pureza) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura foi adicionado Na 2S2O3 aquoso saturado (30,0 mL) e extraído com acetato de etila (30,0 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-90% MeCN) para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,16 g, 2,05 mmol, 83,6% de rendimento) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:565.
[01189] Etapa C:terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- metilsulfinil-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 354 umol, 1,0 eq) em tolueno (3,0 mL) foi adicionado [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (81,6 mg, 708,4 umol, 2,0 eq) e t- BuONa (68,1 mg, 708 umol, 2,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 20 min. Após conclusão, a reação foi extinta com água (10,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (15 mL × 3). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (50,0 mL), seca com Na2SO4 e filtrada. O solvente foi, então, removido sob vácuo.O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-80% MeCN). Composto terc-butil (2S)-2-(cianometil)- 4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (170 mg, 275 umol, 77,7% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:616.
[01190] 1H NMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) 8.08 (s, 1H), 7,61 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,25 - 7,19 (m, 1H), 5,02 - 4,78 (m, 1H), 4,58 - 4,43 (m, 2H), 4,17 (br t, J = 12,5 Hz, 1H), 4,08 - 3,86 (m, 5H), 3,64 - 3,51 (m, 1H), 3,23 (br dd, J = 3,8, 13,8 Hz, 1H), 3,11 - 3,01 (m, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,84 - 2,58 (m, 4H), 2,31 - 2,03 (m, 2H), 2,02 - 1,94 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 1H).
[01191] Etapa D: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (170 mg, 276 umol, 1,0 eq) em DCM (1,50 mL) foi adicionado TFA (2,31 g, 20,3 mmol, 1,50 mL, 73,4 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 15 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto bruto 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (240 mg, bruto, 2TFA) foi obtido como um óleo amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01192] Etapa E: 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (240 mg, 2TFA) em DCM (3,0 mL) foi adicionado prop- 2-enoil prop-2-enoato (40,0 mg, 317 umol) e DIEA (130 mg, 1,01 mmol, 175 uL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min. A reação foi extinta com água (20,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (20,0 mL×3). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na 2SO4 e filtrados. O solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150×25mm×10um; fase móvel: [água
(hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 3 min.). Composto 2- [4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 299, 10,2 mg, 16,8 umol, 94,3% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01193] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,68 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,40 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,85 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 4,66 - 4,39 (m, 1H), 4,20 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,13 - 3,95 (m, 4H), 3,70 - 3,55 (m, 2H), 3,45-3,20 (m, 2H), 3,16 - 2,99 (m, 3H), 2,98 - 2,91 (m, 4H),2,85 - 2,70 (m, 4H), 2,33 - 2,14 (m, 2H), 2,10 - 2,01 (m, 2H).
EXEMPLO 300 2-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
1-BuONa, tolueno 0°C, 0,5h, 82,3% Duas etapas 25,0%
[01194] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (200 mg, 354 umol, 1,0 eq) e 2-(dietilamino)etanol (83,0 mg, 708 umol, 93,9 uL, 2,0 eq) em tolueno (3,0 mL) foi adicionado t-BuONa (68,1 mg, 708 umol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com Acetato de etila (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0 - 40% MeCN). O produto terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (180 mg, 291 umol, 82,3% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 618.
[01195] Etapa B: 2-(4-(2-(2-(dietilamino)etoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-(2-(2-(dietilamino)etoxi)-7-(2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (180 mg, 291 umol, 1,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado TFA (33,2 mg, 291 umol, 21,6 uL, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora.
Após conclusão, à mistura de reação foi adicionado acetato de etila (10,0 mL,) e ajustada com solução saturada de NaHCO3 até pH > 7. A mistura foi extraída com acetato de etila (30 ml x 3) e a camada orgânica foi seca com Na 2SO4 e filtrada. O solvente foi removido sob vácuo. O produto 2-(4-(2-(2- (dietilamino)etoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (150 mg, bruto) foi obtido como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 518.
[01196] Etapa C: 2-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto) em DCM (3,0 mL) foi adicionado DIEA (129 mg, 1,0 mmol, 174 uL) e prop-2-enoil prop-2-enoato (44,1 mg, 0,35 mmol). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de metanol (10,0 mL) a 20°C. À mistura de reação, foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com DCM (10,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (NH3H2O a 0,04%)-ACN]; B%: 65%-83%, 10 min.). O produto 2-[4-[2-[2-(dietilamino)etoxi]- 7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 300, 41,6 mg, 72,7 umol, 100% de pureza, duas etapas rendimento de 25,0%) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 572.
[01197] 1H NMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,68 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,32 - 7,28 (m, 1H), 6,70 - 6,49 (m, 1H), 6,39 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,82 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,08 (br, s, 1H), 4,39 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,14 - 4,00 (m, 3H), 4,02 - 3,84 (m, 1H), 3,32 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,24 - 3,16 (m, 1H), 3,15 - 3,04 (m, 2H), 2,96 - 2,88 (m, 4H), 2,87 - 2,70 (m, 1H), 2,68 - 2,61 (m, 4H), 1,89 (br s, 3H), 1,07 (t, J = 7,0 Hz, 6H).
EXEMPLO 301
2-[4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
95,9% HCl/dioxano Dioxano, 25°C, Duas etapas, 68.0% 1h, 74,2% t-BuONa, tolueno, 39,9% 25°C, 0,25h, Cs2CO3, dioxano, 85°C, 5h, 40,1% 43,0% HCl dioxano Formaldeído (37% em água) Dioxano 0- 25°C, 2h, 93,5% 49,6% 68,0% 17,8%
[01198] Etapa A: terc-butil (S)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-pirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de ácido (2S)-1-terc -butoxicarbonil-5,5-dimetil- pirrolidina-2-carboxílico (400 mg, 1,64 mmol, 1,00 eq) em THF anidro (7,00 mL) foi adicionado BH3•Me2S (10 M, 493 uL, 3,00 eq) gota a gota a 25°C. A reação foi aquecida a 50°C por 5 minutos. Mediante conclusão, depois de resfriada por um banho de gelo, a mistura foi extinta com Metanol (10 mL). A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar terc-butil (5S)-5-(hidroximetil)-2,2- dimetil-pirrolidina-1-carboxilato (360 mg, 1,57 mmol, 95,9%) como um óleo incolor que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[01199] Etapa B: terc-butil 4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução agitada de terc-butil 2-metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (20 g, 46,5 mmol, 1,00 eq) em DMF (300 mL) foi adicionado DIEA (18,1 g, 139 mmol, 24,3 mL, 3 eq) e 2-piperazin-2-ilacetonitrila (10,2 g, 51,2 mmol, 495 uL, 1,10 eq, 2 HCl). A reação foi aquecida até 100°C e agitada por 1 hora sob atmosfera de N2. terc-butil 4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]- 2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (18,8 g, bruto) foi obtido e usado para a próxima etapa diretamente sem retrabalho e purificação.
[01200] Etapa C: terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (18,8 g, bruto) em DMF (200 mL) foi adicionado DIEA (12,0 g, 92,9 mmol, 16,2 mL) e cloridrato de benzil carbono (11,9 g, 69,7 mmol, 9,91 mL). A mistura foi agitada a 50°C por 1 hora. A mistura de reação foi diluída com água (300 mL) e extraída com acetato de etila (200 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 30/1 a 3/1). terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato (20 g, 31,6 mmol, duas etapas, 38% de rendimento, 85% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:539.
[01201] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,40 - 7,36 (m, 5H), 5,21 - 5,15 (m, 2H), 4,73 - 4,55 (m, 2H), 4,39 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 3,97 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,90 - 3,69 (m, 2H), 3,41 - 3,16 (m, 3H), 3,00 (dt, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,86 - 2,53 (m, 5H), 2,51 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).
[01202] Etapa D: benzil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc- butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (11 g, 20,4 mmol, 1,00 eq) em dioxano (100 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 102 mL, 20 eq). Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi dissolvido em 300 mL de acetato de etila e 300 mL de água e agitado rapidamente. Então, solução aquosa de Na 2CO3 saturada foi adicionada até o pH~9. Os orgânicos foram lavados com água (1 × 300 mL) e salmoura (1 × 200 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. benzil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (8,2 g, 15,2 mmol, 74,2% de rendimento, 81% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]:439.
[01203] Etapa E: Benzil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de benzil 2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (5,07 g, 11,6 mmol, 1,1 eq), 1-bromonaftaleno (2,83 g, 13,7 mmol, 1,90 mL, 1,3 eq), Cs2CO3 (8,57 g, 26,3 mmol, 2,50 eq), Pd2(dba)3 (1,45 g, 1,58 mmol, 0,15 eq) e RuPhos (982 mg, 2,11 mmol, 0,20 eq) em dioxano (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 85°C por 5 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (200 mL) e extraída com acetato de etila (200 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 2/1). Benzil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (3,6 g, 4,65 mmol, 40,1% de rendimento, 73% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:565.
[01204] Etapa F: benzil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução agitada de 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfanil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (3,1 g, 5,49 mmol, 1 eq) em metiltetra- hidrofurano (50 mL) a 0°C sob nitrogênio foi adicionado m-CPBA (1,18 g, 5,49 mmol, 80% de pureza, 1 eq) puro como um sólido. Após agitada a 0°C por 1 hora sob atmosfera de N2, a mistura de reação foi extinta por adição de 10% Na2S2O3 (100 mL), solução aquosa a 0°C e, então, diluída com água (200 ml) e extraída com acetato de etila (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/Metanol = 100/1 a 10/1) e ainda purificado por flash de fase inversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. As frações desejadas foram ajustadas pH = 7 por adição de solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (100 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar benzil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulf inil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,3 g, 2,19 mmol, 39,9% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:581.
[01205] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 - 8,13 (m, 1H), 7,92 - 7,83 (m, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,48 (m, 2H), 7,45 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,41 - 7,32 (m, 5H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,70 (br s, 1H), 4,54 - 4,36 (m, 2H), 4,34 - 4,17 (m, 2H), 4,12 - 4,04 (m, 1H), 3,58 - 3,17 (m, 5H), 3,01 (m, 2H), 2,93 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,90 - 2,79 (m, 1H), 2,77 - 2,65 (m, 1H).
[01206] Etapa G: A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil- 7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (430 mg, 741 umol, 1,00 eq) e terc-butil (5S)-5-(hidroximetil)-2,2-dimetil- pirrolidina-1-carboxilato (340 mg, 1,48 mmol, 2,00 eq) em tolueno (8,00 mL) foi adicionado t-BuONa (142 mg, 1,48 mmol, 2,00 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 0,25 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila] para dar benzil 4-[2-[[(2S)-1-terc-butoxicarbonil-5,5-dimetil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 318 umol, 43,0% rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 746.
[01207] Etapa H: benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-5,5-dimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de 4-[2-[[(2S)-1-terc-butoxicarbonil-5,5-dimetil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 268 umol, 1,00 eq) em dioxano (4,00 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 4,00 mL, 59,7 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-5,5-dimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (180 mg, 251 umol, 93,5% de rendimento, 95,0% de pureza, HCl) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[01208] Etapa I: benzil 2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5- trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-5,5-dimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (180 mg, 264 umol, 1,00 eq, HCl) e formaldeído (107 mg, 1,32 mmol, 98,2 uL, 5,00 eq, 37% em água) em MeOH (3,00 mL) foi adicionado CH3 COOH
(31,7 mg, 528 umol, 30,2 uL, 2,00 eq) e NaBH3CN (66,3 mg, 1,06 mmol, 4,00 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com HCl 1 M (0,2 mL), diluída com água (1 mL) e extraída com EtOAc (3 × 6 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila] para dar benzil 2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5- trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (96,0 mg, 131 umol, 49,6% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo.
[01209] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,23 - 8,17 (m, 1H), 7,89 - 7,83 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 - 7,47 (m, 2H), 7,46 - 7,42 (m, 1H), 7,42 - 7,33 (m, 5H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,27 - 5,16 (m, 2H), 4,70 (br s, 1H), 4,41 (dd, J = 4,4, 10,4 Hz, 1H), 4,34 - 4,22 (m, 2H), 4,20 - 4,01 (m, 3H), 3,95 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,40 - 3,21 (m, 3H), 3,13 - 2,91 (m, 2H), 2,91 - 2,69 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,13 - 1,96 (m, 1H), 1,75 - 1,54 (m, 5H), 1,15 (s, 3H), 0,92 (s, 3H).
[01210] Etapa J: 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5-trimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em MeOH (6,00 mL) por 3 minutos a - 40°C. Uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,10 g, 152 umol, 1,00 eq) em MeOH (6,00 mL) foi adicionada à solução de NH3 e Pd/C (0,05 g, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A reação foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, o catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (63,0 mg, 103 umol, 68,0% de rendimento, 86,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[01211] Etapa K: 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5-trimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5-trimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (75,0 mg, 143 umol, 1,00 eq) e TEA (72,2 mg, 713 umol, 99,3 uL, 5,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (18,0 mg, 143 umol, 1,00 eq) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a reação foi extinta com MeOH (0,5 mL), diluída com água (2 mL) e extraída com EtOAc (2 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por prep- TLC (EtOAc/MeOH 9/1) e HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 60% - 90%, 12 min.) e liofilizado para dar 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[[(2S)-1,5,5- trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 301, 14,7 mg , 25,3 umol, 17,8% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:580.
[01212] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,25 - 8,17 (m, 1H), 7,90 - 7,83 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 - 7,48 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,45 - 6,36 (m, 1H), 5,84 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,10 (br s, 1H), 4,44 (br s, 1H), 4,34 - 4,19 (m, 2H), 4,17 - 3,80 (m, 4H), 3,79 - 3,21 (m,4H), 3,19 - 2,63(m, 6H), 2,34 (br s, 3H), 2,15 - 2,03 (m, 1H), 1,69 (br s, 3H), 1,16 (br s, 3H), 0,94 (s, 3H).
EXEMPLO 302
2-[4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-2-piperidil]acetonitrila HCl dioxano, dioxano Cs2CO3, Tolueno, 90°C, 16h, 66,5% 99,2% Duas etapas 4,29%
[01213] Inserir: (7-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato. A uma solução de 7-fluoronftalen-1-ol (250 mg, 1,54 mmol, 1 eq) e DIEA (598 mg, 4,63 mmol, 806 uL, 3 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado Tf2O (652 mg , 2,31 mmol, 382 uL, 1,5 eq) gota a gota a -5°C. A mistura foi agitada a 20°C por 3 horas. Depois disso, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 10/1). (7-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (450 mg, 1,53 mmol, 99,2% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
[01214] 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 8,08 (dd, J = 5,6, 9,2 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 - 7,39 (m, 4H).
[01215] Etapa A: terc-Butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (182 mg, 386 umol, 1 eq), (7-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (227 mg, 772 umol, 2 eq), Pd2(dba)3 (35,3 mg, 38,6 umol, 0,1 eq), RuPhos (36,0 mg, 77,2 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (377 mg, 1,16 mmol, 3 eq) em tolueno (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 90°C por 16 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi extinta com H2O (30 mL) e, em seguida, a mistura foi diluída com acetato de etila (20 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (1 × 100 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. terc-Butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (158 mg, 257 umol, 66,5% de rendimento, 100% de pureza) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[01216] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,92 - 7,79 (m, 2H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,40 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,30 – 7,25 (m, 1H), 7,19 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,63 (br d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,40 (br dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,24 (br s, 2H), 4,20 - 4,00 (m, 4H), 3,95 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,52 - 3,37 (m, 1H), 3,36 - 3,16 (m, 3H), 3,15 - 2,63 (m, 6H), 2,50 (s, 3H), 2,36 - 2,22 (m, 1H), 2,12 - 2,05 (m, 1H), 1,92 - 1,70 (m, 3H), 1,53 (s, 9H).
[01217] Etapa B: 2-[4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-
carboxilato (100 mg, 162 umol, 1 eq) em dioxano (10 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M 1,62 mL, 40 eq) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Depois disso, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, bruto, HCl) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01218] Etapa C: 2-[4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-2- piperidil]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (100 mg, bruto, HCl) e DIEA (234 mg, 1,81 mmol, 315 uL) em DMF (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (18,3 mg, 145 umol) a 0°C. Depois de agitada a 25°C por 1 h, a mistura de reação foi extinta por solução saturada de NaHCO3 (5 mL) e, então, extraída com acetato de etila (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 50 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Acetato de etila/MeOH = 50/1 a 1/1). O líquido coletado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 12% - 42%, 10 min.) e (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 55% - 85%, 12 min.) 2-[4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-2- piperidil]acetonitrila (EXEMPLO 302, 4,23 mg, 7,19 umol, duas etapas 4,29% de rendimento, 96,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01219] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,93 - 7,77 (m, 2H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,40 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,25 (m, 1H), 7,19 (d, J=7,3 Hz, 1H), 6,59 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 6,41 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J =
10,4 Hz, 1H), 5,23 - 4,52 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 4,8, 10,6 Hz, 1H), 4,24 (br s, 2H), 4,21 - 4,11 (m, 2H), 4,03 (br d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,86 - 3,04 (m, 6H), 3,03 - 2,58 (m, 5H), 2,49 (s, 3H), 2,37 - 2,23 (m, 1H), 2,16 - 1,98 (m, 1H), 1,91 - 1,69 (m, 3H).
EXEMPLO 303 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 0°C, 1 hora 20°C, 2 86% horas 63% 0°C, 0,5 hora 11%
[01220] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[2-(1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de 2-(1-piperidil)etanol (89,0 mg, 689 umol, 91,5 uL, 2,0 eq) em tolueno (2,0 mL) foi adicionado t-BuONa (66,2 mg, 689 umol, 2,0 eq) a 0°C. Em seguida, à mistura foi adicionado benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-
naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 344 umol, 1,0 eq), a mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (10 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA=10:1 - EA:MeOH=20:1) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(1- naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 296 umol , 86% de rendimento, 95,7% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
646.
[01221] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado MeOH (10,0 mL) a -78°C por 30 minutos. Então benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7- (1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 279 umol, 1,0 eq) e Pd/C (100 mg, 10,0% de pureza) foi adicionado ao líquido acima sob atmosfera de N2. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 Psi) a 20°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada com Celite e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0 - 40% MeCN) para dar 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)- 2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (90,0 mg, 176 umol, 63% de rendimento) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[01222] Etapa C: 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (90,0 mg, 176 umol, 1,0 eq) e DIEA (136 mg, 1,06 mmol, 184 uL, 6,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado prop-2-enoyl prop-2-enoato (22,2 mg, 176 umol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (20,0 mg) e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)- ACN]; B%: 60% - 90%, 12min.) para dar 2-[4-[7-(1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 303, 11,2 mg, 19,7 umol, 11% de rendimento, 99,5% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01223] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,24 - 8,19 (m, 1H), 7,89 - 7,84 (m, 1H), 7,62 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,70 - 6,53 (m, 1H), 6,41 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,19 - 5,01 (m, 1H), 4,47 (br t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,33 - 4,21 (m, 2H), 4,12 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 4,06 - 3,98 (m, 1H), 3,55 - 3,45 (m, 1H), 3,43 - 3,24 (m, 2H), 3,22 - 3,09 (m, 1H), 3,04 - 2,72 (m, 6H), 2,68 - 2,42 (m, 4H), 1,61 - 1,56 (m, 6H), 1,50 - 1,40 (m, 2H).
EXEMPLO 304 2-[4-[2-[[(2R)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
78,0% t-BuONa, tolueno, 25°C, 0,5h, 68% 31,7% Duas etapas 52,3%
[01224] [(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol. Uma mistura de [(2R)-pirrolidin-2-il]metanol (0,70 g, 6,92 mmol, 673 uL, 1,00 eq), 2- bromoetoxi-terc-butil-dimetil-silano (1,66 g, 6,92 mmol, 1,00 eq) e K2CO3 (4,78 g, 34,6 mmol, 5,00 eq) em acetonitrila (70,0 mL) foi refluxada a 83°C por 12 horas. Então, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com metanol. As camadas orgânicas foram concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (acetato de etila/metanol = 50/1 a 1/1). O composto [(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil) silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol (1,40 g, 5,40 mmol, 78,0% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um óleo incolor.
[01225] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,68 (dd, J = 5,2, 6,4 Hz, 2H), 3,57 (dd, J = 3,6, 10,8 Hz, 1H), 3,42 - 3,25 (m, 1H), 3,23 - 2,96 (m, 2H), 2,95 - 2,82 (m, 1H), 2,72 - 2,61 (m, 1H), 2,48 (td, J = 5,2, 12,8 Hz, 1H), 2,40 - 2,27 (m, 1H), 1,90 - 1,77 (m, 1H), 1,77 - 1,62 (m, 3H), 0,83 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
[01226] Etapa A: benzil 4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-
pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 861 umol, 1 eq) e [(2R)-1-[2- [terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol (447 mg, 1,72 mmol, 2 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t-BuONa (248 mg, 2,58 mmol, 3 eq) em uma porção a 25°C e a mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura foi acidificada com solução de HCl 1 M até pH = 8 e a mistura diluída com acetato de etila (100 mL) e água (10 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 50 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (acetato de etila/metanol 100/1 a 10/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar benzil 4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (480 mg, 582 umol, 68% rendimento, 94,1% de pureza) como um sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 776.
[01227] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,28 - 8,11 (m, 1H), 7,95 - 7,77 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 - 7,29 (m, 8H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,29 - 5,15 (m, 2H), 4,70 (br s, 1H), 4,41 - 3,88 (m, 7H), 3,83 - 3,68 (m, 2H), 3,57 - 2,69 (m, 12H), 2,67 - 2,49 (m, 1H), 2,37 (q, J = 8,4 Hz, 1H), 2,03 - 1,93 (m, 1H), 1,83 - 1,74 (m, 3H), 1,00 - 0,79 (m, 9H), 0,13 -0,01 (m, 6H).
[01228] Etapa B: 2-[4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil (dimetil) silil]oxietil]pirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em metanol (60,0 mL) a -78°C por 30 minutos. Benzil 4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (0,20 g, 258 umol, 1,00 eq) e Pd/C (0,10 g, 10,0% pureza) foi adicionado à mistura. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora sob H2 a 15 psi. Então, a mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2R)-1-[2-
[terc-butil(dimetil) silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,15 g, bruto) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:
642.
[01229] Etapa C: 2-[4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil (dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,15 g, bruto) e Et3N (236 mg, 2,34 mmol, 325 uL) em diclorometano (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2- enoato (29,5 mg, 234 umol) a 0°C. Depois de agitada a 20°C por 1 hora, a mistura foi extinta com solução de bicarbonato de sódio saturada (0,50 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 10/01) para dar 2-[4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,10 g, 135 umol, duas etapas 52,3% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 696.
[01230] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,25 - 8,18 (m, 1H), 7,90 - 7,82 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,43 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,59 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 6,40 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,22 - 4,94 (m, 1H), 4,36 (td, J = 3,6, 10,4 Hz, 1H), 4,31 - 4,20 (m, 2H), 4,15 - 4,05 (m, 2H), 4,04 - 3,97 (m, 1H), 3,75 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,63 (br s, 1H), 3,46 (br s, 1H), 3,35 (br d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,21 - 3,15 (m, 1H), 3,08 - 2,99 (m, 2H), 2,99 - 2,92 (m, 2H), 2,63 - 2,54 (m, 1H), 2,42 - 2,33 (m, 1H), 2,04 - 1,95 (m, 1H), 1,84 - 1,73 (m, 3H), 1,66 (br s, 4H), 0,88 (s, 9H), 0,05 (s, 6H).
[01231] Etapa D: 2-[4-[2-[[(2R)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. Uma mistura de 2-[4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,09 g, 129 umol, 1 eq) e TBAF (1,00 M em THF, 1,29 mL, 10 eq) em THF (0,10 mL) foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (FA, 0,1%)/acetonitrila], cromatografia de coluna (Al2O3,metanol/acetato de etila = 1/3) e HPLC-prep (coluna: Boston pH-lex 150*25 10um; fase móvel: [água (0,10% TFA) - ACN]; B%: 22% - 52%, 10 min. e coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 47% - 77%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[4-[2- [[(2R)-1-(2-hidroxietil) pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (23,9 mg, 41,0 umol, 31,7% de rendimento, 99,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01232] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,25 - 8,18 (m, 1H), 7,89 - 7,83 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,43 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,44 - 6,35 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,10 – 4,50 (m, 1H), 4,38 - 4,24 (m, 3H), 4,22 - 4,09 (m, 2H), 4,00 (br d, J = 11,5 Hz, 2H), 3,73 - 3,57 (m, 2H), 3,45 (br s, 1H), 3,36 (br d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,23 - 2,77 (m, 9H), 2,62 (td, J=3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,38 - 2,26 (m, 1H), 2,05 - 1,99 (m, 1H), 1,90 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 305
3-(4-((S)-4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(8H)-il)isonicotinonitrila Cs2CO3, tolueno, 100°C, 3 hrs, 34%
[01233] Etapa A: benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-ciano-3-piridil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 791 umol, 1,0 eq) e 3-bromopiridina-4-carbonitrila (289 mg, 1,58 mmol, 2,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (516 mg, 1,58 mmol, 2,0 eq), Pd2(dba)3 (72,4 mg, 79,1 umol, 0,1 eq) e RuPhos (73,8 mg, 158 umol, 0,2 eq), a mistura de reação foi agitada a 100°C por 3 horas sob N2. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (15 mL), então, extraída com EA (2 x 15,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al 2O3 de base, Éter de petróleo/Acetato de etila=5/1 para Eter de petróleo/Acetato de etila/Metanol=5/1/0,1) para dar benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-ciano-3-piridil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina -4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 266 umol, 34% de rendimento, 80,9% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 608.
[01234] Etapa B: 3-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]piridina-4- carbonitrila. A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-ciano-3-piridil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (170 mg, 226 umol, 1,0 eq) em MeOH (5,0 mL) foi adicionado NH3•MeOH (49,4 ug, 49,4umol, 5,0 mL) e Pd/C (150 mg, 10% de pureza), a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 Psi) a 20°C por 1 hora. Após conclusão, a reação foi filtrada através de uma Celite e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa (C18, 30% de MeCN em água), o produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso até pH~8 e, então, concentrada até que nenhum solvente permanecesse, ao sólido foi, então, adicionado DCM (10,0 mL) e agitado a 20°C por 0,5 h, o sólido foi filtrado e o filtrado concentrado para dar 3-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2-il] metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il] piridina-4- carbonitrila (35,0 mg, 73,9 umol, 33% de rendimento, 100% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 474.
[01235] Etapa C: 3-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]piridina-4- carbonitrila. A uma mistura de 3-[4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il] piridina-4- carbonitrila (35,0 mg, 73,9 umol, 1,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado DIEA (28,7 mg, 222 umol, 38,6 uL, 3,0 eq) e prop-2-enoil-prop-2-enoato (9,32 mg, 73,9 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (0,5 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-prep ((Instrumento: ACSWH-GX-M; Coluna: Gemini 150*25 5u; Condição: água (0,04% de NH3•H2O)-ACN; Início B: 32; Final B: 56; Tempo de Gradiente (min.): 10; Tempo de Retenção 100%B (min.): 3; Taxa de fluxo (ml/min.): 100), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. O produto 3-[4-[3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]piridina-4- carbonitrila (EXEMPLO 305, 13,0 mg, 24,5 umol, 33% de rendimento, 99,3% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 528.
[01236] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,52 (s, 1H), 8,33 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 6,69 - 6,53 (m, 1H), 6,42 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,85 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 5,19 - 5,01 (m, 1H), 4,48 - 4,36 (m, 3H), 4,27 - 4,08 (m, 2H), 4,07 - 3,81 (m, 3H), 3,78 - 3,33 (m, 3H), 3,23 - 2,99 (m, 3H), 2,97 - 2,83 (m, 2H), 2,81 - 2,61 (m, 2H), 2,52 (s, 3H), 2,40 - 2,27 (m, 1H), 2,16 - 1,99 (m, 1H), 1,95 - 1,76 (m, 3H).
EXEMPLO 306 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01237] Etapa A: [(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il] metanol. A uma solução de terc-butil 2-metil (2S,4R)-4-fluoropirrolidina-1,2-dicarboxilato (5,0 g, 20,2 mmol, 1,0 eq) em THF (100 mL) foi adicionado LiAlH4 (1,53 g, 40,4 mmol, 2,0 eq) em porções a 0°C. Depois de a mistura de reação ser agitada a 0°C por 1 hora sob N2, a mistura de reação foi aquecida até 70°C e agitada a 70°C por 2 horas sob N2. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com Na 2SO4 aquoso saturado (4,5 mL), em seguida, filtrada, o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 de base, Éter de petróleo/Acetato de etila=5/1 para Éter de petróleo/Acetato de etila/Metanol=3/1/0,1) para dar [(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (1,5 g, 11,3 mmol, 56% de rendimento) como óleo amarelo.
[01238] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 5,24 - 4,97 (m, 1H), 3,73 (dd, J = 3,2, 11,2 Hz, 1H), 3,61 - 3,40 (m, 2H), 2,86 - 2,74 (m, 1H), 2,69 (ddd, J = 0,8, 2,8, 12,0 Hz, 1H), 2,61 (dd, J = 2,4, 12,0 Hz, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,18 - 1,98 (m, 2H).
[01239] Etapa B: (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[2- metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (Intermediário 64, 800 mg, 1,38 mmol, 1,0 eq) e [(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metanol (367 mg, 2,76 mmol, 2,0 eq) em tolueno (15,0 mL) foi adicionado t-BuONa (265 mg, 2,76 mmol, 2,0 eq) a 0°C, a reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (30 mL), em seguida, extraída com EA (2 x 15 mL), a camada orgânica combinada foi lavada com salmoura saturada (1 × 30 mL), depois seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=5/1 para Éter de petróleo/Acetato de etila/Metanol=3/1/0,1) para dar (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (720 mg, 997 umol, 72% de rendimento, 90,0% de pureza) como sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 650.
[01240] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (670 mg, 1,03 mmol, 1,0 eq) em MeOH (15,0 mL) foi adicionado NH3•MeOH (1,03 mmol, 15,0 mL, 1,0 eq) e Pd/C (400 mg, 10% de pureza), a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 Psi) a 20°C por 1 hora. Após conclusão, a reação foi filtrada através de uma Celite e o filtrado foi concentrado para dar 2- [(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidina-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (260 mg, 478 umol, 46% de rendimento, 94,9% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:
516.
[01241] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-
piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (260 mg, 504 umol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado DIEA (196 mg, 1,51 mmol, 263 uL, 3,0 eq) e prop-2-enoil prop-2- enoato (63,6 mg, 504 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (5 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-prep ((Instrumento: ACSWH- GX-H; Coluna: Gemini 150*25 5u; Condição: água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN; Início B: 42; Fim B: 72; Tempo de Gradiente (min.): 12; 100%B Tempo de Retenção (min.): 1,8; Taxa de fluxo (ml/min.): 25), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. O produto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 306, 65,6 mg, 115 umol, 23% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01242] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,27 - 8,17 (m, 1H), 7,92 - 7,84 (m, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 2H), 7,45 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,68 - 6,56 (m, 1H), 6,42 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,86 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,30 - 4,99 (m, 2H), 4,45 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,35 - 4,21 (m, 3H), 4,15 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 4,03 (br d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,70 - 2,72 (m, 11H), 2,68 - 2,56 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,41 - 2,27 (m, 1H), 2,10 - 1,90 (m, 1H).
EXEMPLO 307
2-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 16 h, 55% Duas etapas 17%
[01243] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 300 mg, 636 umol, 1,00 eq), 1- bromo-2-fluoro-3-metoxi-benzeno (261 mg, 1,27 mmol, 2,00 eq), Pd2(dba)3 (117 mg, 127 umol, 0,20 eq), RuPhos (89,1 mg, 191 umol, 0,30 eq) e Cs2CO3 (622 mg, 1,91 mmol, 3,00 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 16 horas sob atmosfera de N2. À mistura de reação foi adicionado H2O (200 mL) e acetato de etila (250 mL). A fase orgânica separada foi lavada com salmoura (1 × 200 mL),
seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (100 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (210 mg, 353 umol, 55,4% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido amarelo fraco. LCMS [ESI, M+1]: 596.
[01244] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,00 (dt, J = 1,6, 8,4 Hz, 1H), 6,74 - 6,56 (m, 2H), 4,61 (br s, 1H), 4,44 - 4,34 (m, 1H), 4,28 - 4,10 (m, 3H), 4,01 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 3,90 (s, 4H), 3,56 - 3,40 (m, 1H), 3,25 (br dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 2H), 3,12 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,98 (dt, J = 2,8, 12,4 Hz, 1H), 2,89 - 2,63 (m, 5H), 2,50 (s, 3H), 2,35 - 2,26 (m, 1H), 2,21 - 2,06 (m, 3H), 1,90 - 1,68 (m, 3H), 1,60 - 1,42 (m, 9H).
[01245] Etapa B: 2-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (100 mg, 168 umol, 1,00 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (1,63 g , 14,3 mmol, 1,06 mL, 85,0 eq) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 25°C por 1 h e, então, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[4-[7- (2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (210 mg, bruto, TFA) foi obtida como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 496.
[01246] Etapa C: 2-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (102 mg, TFA bruto) e DIEA (216 mg, 1,67 mmol, 291 uL) em DCM (3 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (16,9 mg, 134 umol) a 0°C. Depois de agitar a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi extinta com solução de NaHCO3 saturada (5 mL) a 0°C e, então, extraída com CH2Cl2 (2 × 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 50 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 38% - 68%, 12 min.). 2-[4-[7-(2-fluoro-3-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 307, 7,47 mg, 13,6 umol, two steps 17% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 550.
[01247] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,07 - 6,95 (m, 1H), 6,74 - 6,51 (m, 3H), 6,45 - 6,34 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,6 Hz, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,38 (dd, J = 4,8, 10,5 Hz, 1H), 4,31 - 4,12 (m, 3H), 4,07 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 4,03 - 3,82 (m, 5H), 3,68 - 3,44 (m, 2H), 3,39 - 3,21 (m, 2H), 3,10 (br t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,95 - 2,61 (m, 5H), 2,48 (s, 3H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,13 - 1,99 (m, 1H), 1,92 - 1,62 (m, 3H).
EXEMPLO 308
2-(1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 99,4% 90°C, 16h, 43,6% 0 – 25 °C, 0,5 h 17,8%
[01248] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 300 mg, 636 umol, 1 eq), 1-bromo- 3-fluoro-2-metoxi-benzeno (261 mg, 1,27 mmol, 2 eq), Pd 2(dba)3 (117 mg, 127 umol, 0,2 eq), RuPhos (89,1 mg, 191 umol, 0,3 eq) e Cs2CO3 (622 mg, 1,91 mmol, 3 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 16 horas sob atmosfera de N 2. À mistura da reação, foram adicionados H2O (200 mL) e acetato de etila (250 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (200 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas, neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (1 × 100 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto terc- butil 2-(cianometil)-4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-
il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (170 mg, 277 umol, 43,6% de rendimento, 97,1% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 596.
[01249] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 6,96 (dt, J = 6,0, 8,0 Hz, 1H), 6,83 - 6,69 (m, 1H), 6,83 - 6,68 (m, 1H), 4,60 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,31 - 4,14 (m, 3H), 4,04 (br d, J = 13,6 Hz, 2H), 3,94 (d, J = 0,8 Hz, 4H), 3,62 - 3,47 (m, 1H), 3,26 (br dd, J = 4,0, 13,6 Hz, 2H), 3,12 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,99 (dt, J = 2,8, 12,0 Hz, 1H), 2,88 - 2,64 (m, 5H), 2,50 (s, 3H), 2,36 - 2,24 (m, 1H), 2,22 - 2,07 (m, 2H), 1,94 - 1,64 (m, 3H), 1,56 - 1,46 (m, 9H).
[01250] Etapa B: 2-[4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (170 mg, 285 umol, 1 eq) em DCM (2,50 mL) foi adicionado TFA (651 mg, 5,71 mmol, 423 uL, 20 eq) em uma porção a 0°C sob N 2. Após agitada a 25°C por 2 horas, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. Composto 2-[4-[7-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (173 mg, 284 umol, 99,4% de rendimento, TFA) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 496.
[01251] Etapa C: 2-[4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (173 mg, 284 umol, 1 eq, TFA) e prop-2-enoil prop-2-enoato (35,8 mg , 284 umol, 1 eq) em DCM (3 mL) foi adicionado TEA (144 mg, 1,42 mmol, 198 uL, 5 eq) em porção, a 0°C sob N2. Depois de agitada a 25°C por 0,5 hora,
a mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 saturado (1,5 mL) a 0°C e, então, diluída com água (2 mL) e extraída com DCM (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (15 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 para MeOH/EA = 1/2). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob pressão reduzida. Então, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150 × 25mm × 10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 48% - 78%, 12 min.). Composto do título 2-[4-[7-(3-fluoro-2-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 308, 28,2 mg, 50,4 umol, 17,8% de rendimento, 98,1% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 550.
[01252] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 6,97 (dt, J = 6,0, 8,4 Hz, 1H), 6,83 - 6,76 (m, 1H), 6,72 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,57 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 6,40 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,56 (br s, 1H), 4,39 (br dd, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 4,30 - 4,18 (m, 2H), 4,18 - 4,06 (m, 2H), 4,04 - 3,96 (m, 1H), 3,95 (d, J = 0,8 Hz, 3H), 3,73 - 3,46 (m, 2H), 3,38 - 3,22 (m, 2H), 3,16 - 2,99 (m, 2H), 2,96 - 2,59 (m, 5H), 2,50 (s, 3H), 2,36 - 2,22 (m, 1H), 2,16 - 1,98 (m, 1H), 1,94 - 1,68 (m, 3H).
EXEMPLO 309
2-(1-acriloil-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 110°C, 3h, 53% 3,5 h
[01253] Inserir: 1-bromo-8-metil-naftaleno. A uma solução de 1,8- dibromonaftaleno (1 g, 3,50 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) foi adicionado MeLi (1,6 M em éter dietílico, 2,62 mL, 1,2 eq) a 0°C gota a gota. Após agitar por 30 minutos a 0°C, foi adicionado gota a gota iodometano (3,38 g, 23,8 mmol, 1,48 mL, 6,81 eq). A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por outras 3 horas. A mistura de reação foi extinta com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 45% - 70%, 28 MIN ; 40% min.). 1-bromo-8- metil-naftaleno (340 mg, 1,49 mmol, 43% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo após liofilização.
[01254] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 (dd, J = 0,8, 7,2 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 0,8, 8,0 Hz, 1H), 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,30 - 7,22 (m, 2H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,05 (s, 3H).
[01255] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de 1-bromo-8-metil-naftaleno (122 mg, 551 umol, 1,3 eq), terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 200 mg, 424 umol, 1 eq), Cs2CO3 (345 mg, 1,06 mmol, 2,5 eq), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (77,7 mg, 84,8 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 110°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 por adição de solução aquosa de NaHCO 3 saturada e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(8- metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 224 umol, 53% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 612.
[01256] 1H NMR (400MHz, clorofórmia-d) δ = 7,73 - 7,60 (m, 2H), 7,42 (dd, J = 8,0, 16,0 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,16 (m, 2H), 4,61 (br s, 1H), 4,40 (br s, 1H), 4,30 - 4,16 (m, 2H), 4,10 - 3,71 (m, 4H), 3,58-3,45 (m, 1H), 3,43- 3,25 (m, 1H), 3,23 - 3,04 (m, 4H), 3,03 - 2,85 (m, 5H), 2,83 - 2,55 (m, 4H), 2,49 (br s, 3H), 2,40 - 2,20 (m, 1H), 2,14 - 2,06 (m, 1H), 1,92 - 1,71 (m, 2H), 1,55 - 1,44 (m, 9H).
[01257] Etapa B: 2-[4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (110 mg, 179 umol, 1 eq) em DCM (200 uL) foi adicionado TFA (307 mg, 2,70 mmol, 199 uL, 15 eq). Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (112 mg, 179 umol, 100% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo e utilizado na etapa seguinte diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[01258] Etapa C: 2-[4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (112 mg, 179 umol, 1 eq, TFA) em DCM (2 mL) foi adicionado TEA (181 mg, 1,79 mmol, 249 uL, 10 eq) a 0°C. E depois prop-2-enoil prop-2-enoato (18,1 mg, 143 umol, 0,8 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (1 mL), diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10/1 para 1/3) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 55% - 85%, 12 min.). Composto do título 2-[4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 309, 16,2 mg, 28,4 umol, 16% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido branco após liofilização. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01259] Condição SFC: “Coluna OJ-3S_5_5_40_3ML: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: etanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm".
[01260] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,46 - 7,38 (m, 1H), 7,34 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 6,68-6,52 (m J = 9,9 Hz, 1H), 6,46 - 6,35 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,59 (br s, 1H), 4,41 - 4,33 (m, 1H), 4,32 - 4,21 (m, 1H), 4,20 - 4,04 (m, 3H), 4,03 - 3,82 (m, 2H), 3,85-3,67 (m, 1H), 3,61 - 3,33 (m, 2H), 3,24 - 2,99 (m, 4H), 2,92 (s, 3H), 2,87 - 2,77 (m, 1H), 2,71 - 2,59 (m, 2H), 2,47 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,34 - 2,20 (m, 1H), 2,13 - 1,98 (m, 1H), 1,85 - 1,74 (m, 3H).
EXEMPLO 310 2-(1-acriloil-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
Cs2CO3, tolueno, 110°C, 3h, 56% 3,2 h
[01261] Inserir: 1-bromo-8-cloronaftaleno. A uma solução de percloroetano (1,66 g, 6,99 mmol, 792 uL, 1 eq) em THF (30 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexano, 4,20 mL, 1,5 eq) a -78°C gota a gota. Após agitação por um adicional de 10 minutos a -78°C, foi adicionado 1,8-dibromonaftaleno (2 g, 6,99 mmol, 1 eq) em THF (10 mL). A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi extinta com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 41 ACN%-71 ACN%, 30 min.; 50% min.). A mistura foi ajustada PH = 7 por adição de solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 1-bromo-8-cloronaftaleno (850 mg, 3,52 mmol, 50% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido amarelo.
[01262] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,92 (dd, J = 1,2, 7,2 Hz, 1H), 7,80 (ddd, J = 0,8, 8,0, 12,4 Hz, 2H), 7,67 (dd, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,32 - 7,25 (t, J = 8,0 Hz, 1H).
[01263] Etapa A: terc-butil 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de 1-bromo-8-cloro-naftaleno (133 mg, 551 umol, 1,3 eq), terc-butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 424 umol, 1 eq), Cs2CO3 (345 mg 1,06 mmol, 2,5 eq), RuPhos (39,6 mg, 84,8 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (77,7 mg, 84,8 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 110°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 por adição de solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Composto terc-butil 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 237 umol, 56% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 632.
[01264] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,39 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,51 - 4,33 (m, 2H), 4,22 - 4,15 (m, 1H), 4,10 - 3,77 (m, 4H), 3,57 (br s, 1H), 3,41 - 3,01 (m, 6H), 3,01 - 2,86 (m, 1H), 2,85 - 2,63 (m, 3H), 2,62 - 2,43 (m, 4H), 2,31 (br s, 1H), 2,13 - 2,06 (m, 1H), 1,78 (br s, 2H), 1,52 (s, 9H).
[01265] Etapa B: 2-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-
il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (150 mg, 237 umol, 1 eq) em DCM (200 uL) foi adicionado TFA (405 mg, 3,56 mmol, 263 uL, 15 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (153 mg, 236 umol, 100% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo e utilizado na etapa seguinte diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 532.
[01266] Etapa C: 2-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (153 mg, 237 umol, 1 eq, TFA) em DCM (2 mL) foi adicionado TEA (239 mg, 2,37 mmol, 329 uL, 10 eq) a 0°C. Após adição, o prop-2-enoil prop-2- enoato (23,9 mg, 189 umol, 0,8 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (1 mL) e diluída com água (20 mL), extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 52% - 82%, 12 min.). Composto do título 2-[4- [7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 310, 37 mg, 61,2 umol, 26% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido após lilofilização como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 586.
[01267] Condição SFC: “Coluna AD-3S_4_40_3ML: Chiralpak AD-3 100×4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: 40% isopropanol (0,05% DEA) em CO2 Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01268] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,39 (m, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,45 - 6,35 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,84 - 4,25 (m, 3H), 4,22 - 3,72 (m, 5H), 3,71-3,53 (m, 1H), 3,50-3,34 (m, 1H), 3,32 - 2,96 (m, 5H), 2,91 - 2,76 (m, 1H), 2,70 - 2,52 (m, 2H), 2,48 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,33 - 2,20 (m, 1H), 2,13 - 1,96 (m, 1H), 1,86 - 1,72 (m, 3H).
EXEMPLO 311 2-(1-acriloil-4-(7-(2-fluoronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 3h, 25% Acetonitrila 9,6% 20°C, 3h, 18%
[01269] Etapa 1: 2-fluoronaftalen-1-ol. A uma solução de naftalen-1-ol (2 g, 13,9 mmol, 5,00 mL, 1 eq) em CH3CN (50 mL) foi adicionado Select-F (4,91 g, 13,9 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 3 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE/EA = 3/1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 40% - 70%, 10 min.). A mistura foi ajustada PH = 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Composto 2-fluoronaftalen-1-ol (400 mg, 2,44 mmol, 18% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo.
[01270] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,47(t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 5,2, 8,8 Hz, 1H), 7,31 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,58 (br s, 1H).
[01271] Etapa 2: (2-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato. A uma solução de 2-fluoronftalen-1-ol (400 mg, 2,47 mmol, 1 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado Tf2O (765 mg, 2,71 mmol, 448 uL, 1,1 eq) e DIEA (637 mg, 4,93 mmol, 859 uL, 2 eq) a 0°C. Após agitação a 0°C por 1 hora, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (20 mL × 3). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL), seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 50/1 a 3/1). O composto (2-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (500 mg, 1,65 mmol, 67% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um óleo incolor.
[01272] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,95 - 7,85 (m, 2H), 7,70 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,62 - 7,54 (m, 1H), 7,41 (t, J = 9,2 Hz, 1H).
[01273] Etapa A: terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de (2-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (243 mg, 827 umol, 1,3 eq), terc- butil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 636 umol, 1 eq), Cs2CO3 (518 mg, 1,59 mmol, 2,5 eq), RuPhos (59,4 mg, 127 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (116 mg, 127 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada PH = 7 por adição de solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Composto terc-butil 2- (cianometil)-4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 155 umol, 25% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
616.
[01274] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,33 (br s, 1H), 7,84 (d, J = 7,76 Hz, 1H), 7,75-7,64 (m, 1H), 7,57 - 7,41 (m, 2H), 7,25-7,21 (m, 1H), 4,63 (br s, 1H), 4,47 - 4,16 (m, 4H), 4,13 - 3,82 (m, 4H), 3,61 - 3,25 (m, 3H), 3,20 - 2,90 (m, 4H), 2,81 - 2,56 (m, 4H), 2,49 (s, 3H), 2,38 - 2,19 (m, 1H), 2,14 - 2,06 (m, 1H), 1,88-1,69 (m, 2H), 1,53 (s, 9H).
[01275] Etapa B: 2-[4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil 2-(cianometil)-4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (100 mg, 162 umol, 1 eq) em DCM (200 uL) foi adicionado TFA (278 mg, 2,44 mmol, 180 uL, 15 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (102 mg, 162 umol, 100% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01276] Etapa C: 2-[4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4-[7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (102 mg, 197 umol, 1 eq, TFA) em DCM (2 mL) foi adicionado TEA (200 mg, 1,98 mmol, 275 uL, 10 eq) a 0°C. Após adição, o prop-2-enoil prop-2- enoato (19,9 mg, 158 umol, 0,8 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (1 mL) e diluída com água (20 ML),extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 52% - 82%, 12 min.). Composto do título 2-[4- [7-(2-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 311, 11 mg, 18,9 umol, 9,6% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido após liofilização como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01277] Condição SFC: “Coluna OD-3S_3_40_3ML: Chiralcel OD-3 100x4,6mm I.D., Fase móvel 3um: 40% de metanol (0,05% de DEA) em Taxa de fluxo de CO2: 3 mL/min. Comprimento de onda: 220 nm”.
[01278] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,34 (br s, 1H), 7,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 4,4, 8,8 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,47 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 6,65-6,50 (m, J = 10,5 Hz, 1H), 6,40 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,43 - 3,85 (m, 7H), 3,81 - 3,30 (m, 3H), 3,24 - 2,95 (m, 3H), 2,94 - 2,56 (m, 4H), 2,47 (s, 3H), 2,36 - 2,20 (m, 1H), 2,13 - 1,97 (m, 1H), 1,93 - 1,75 (m, 3H).
EXEMPLO 312 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila TBDPSCl, imidazol 0,5 h -40 – 20 °C, 0,5 h Duas etapas 72%
[01279] Etapa A: metil (2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxipirrolidina-2- carboxilato de metila. A uma solução de metil (2S,4R)-4-hidroxipirrolidina-2- carboxilato (10 g, 55,1 mmol, 1 eq, HCl) em acetato de etila (10 mL) foi adicionado imidazol (7,50 g, 110 mmol, 2 eq) e TBDPSCl (16,7 g, 60,6 mmol, 15,6 mL, 1,1 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 16 horas. O precipitado foi filtrado. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido com acetato de etila (200 mL) e água (100 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura (1 x 100 mL), seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 10/1 a 1/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar (2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxipirrolidina-2-carboxilato (2,9 g, 7,41 mmol, 13% de rendimento, 98% de pureza) como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 384.
[01280] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,64 (dt, J = 1,2, 7,2 Hz, 4H), 7,47 - 7,35 (m, 6H), 4,40 (td, J = 2,4, 4,8 Hz, 1H), 4,07 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,03 - 2,96 (m, 1H), 2,96 - 2,89 (m, 1H), 2,17 - 2,07 (m, 1H), 1,84 - 1,77 (m, 1H), 1,07 (s, 9H).
[01281] Etapa B: metil (2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidina-2-carboxilato de metila. A uma solução de metil (2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxipirrolidina-2-carboxilato (2,7 g, 7,04 mmol, 1 eq) e formaldeído (37% aquoso, 2,86 g, 35,2 mmol, 2,62 mL, 5 eq) em MeOH (20 mL) foi adicionado CH3COOH (423 mg, 7,04 mmol, 403 uL, 1 eq) e NaBH3CN (1,77 g, 28,2 mmol, 4 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi diluída com acetato de etila (200 mL) e lavada com água (2 × 100 mL) e salmoura (1 × 100 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 20/1 a 3/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar metil (2S,4R)-4-[terc-
butil(difenil)silil] oxi-1-metilpirrolidina-2-carboxilato (2,4 g, 5,71 mmol, 81% de rendimento, 94,6% de pureza) como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 398.
[01282] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,63 (ddd, J = 1,2, 4,0, 7,6 Hz, 4H), 7,46 - 7,32 (m, 6H), 4,47 - 4,39 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,32 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,24 (dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 2,43 - 2,40 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,23 - 2,00 (m, 2H), 1,07 (s, 9H).
[01283] Etapa C: [(2S,4R)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metanol. A uma solução de metil (2S,4R)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1- metilpirrolidina-2-carboxilato (2,20 g, 5,53 mmol, 1,00 eq) em THF (40 mL) foi adicionado LiAlH4 (840 mg, 22,1 mmol, 4,00 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura foi extinta com água (1,00 mL), solução de hidróxido de sódio (15,0%, 2,00 mL) e água (3,00 mL). O precipitado foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 1/10) para dar [(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (1,70 g, 4,55 mmol, 82% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 370.
[01284] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,68 - 7,61 (m, 4H), 7,46 - 7,35 (m, 6H), 4,35 - 4,26 (m, 1H), 3,62 (dd, J = 3,2, 10,8 Hz, 1H), 3,34 (dd, J = 2,0, 10,8 Hz, 1H), 3,14 (dd, J = 5,6, 10,0 Hz, 1H), 2,78 - 2,70 (m, 1H), 2,43 (dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,02 - 1,93 (m, 1H), 1,92 - 1,84 (m, 1H), 1,06 (s, 9H).
[01285] Etapa D: terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc- butil 2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,30 g, 531 umol, 1,00 eq) e [(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (295 mg, 797 umol, 1,50 eq) em THF (5 mL) foi adicionado t-BuONa (102 mg, 1,06 mmol, 2,00 eq) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura foi ajustada para pH = 7 por solução de HCl (1,00 M, 0,40 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila = 1/3) para dar 4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,22 g, 238 umol, 45% de rendimento) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 870.
[01286] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,68 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,66 - 7,61 (m, 4H), 7,57 (br t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,44 - 7,34 (m, 7H), 7,33 - 7,28 (m, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,45 - 4,28 (m, 2H), 4,09 - 3,95 (m, 4H), 3,87 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,28 - 3,15 (m, 4H), 3,10 (ddd, J = 3,6, 7,2, 12,0 Hz, 2H), 3,02 - 2,93 (m, 1H), 2,88 - 2,67 (m, 4H), 2,48 (s, 3H), 2,45 - 2,34 (m, 2H), 2,14 - 2,07 (m, 1H), 1,94 - 1,80 (m, 1H), 1,52 (s, 9H), 1,06 (s, 9H).
[01287] Etapa E: 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de terc-butil 4-[2- [[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,08 g, 91,9 umol, 1,00 eq) e TFA (157 mg, 1,38 mmol, 102 uL, 15,0 eq) em diclorometano (150 uL) foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (81,3 mg em bruto, TFA) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 770.
[01288] Etapa F: 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[4- [2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (0,08 g, bruto, TFA) e Et3N (91,6 mg, 905 umol, 125,96 uL) em diclorometano (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (11,4 mg, 90,5 umol) a -40°C. Após agitada a 20°C por 0,5 h, a mistura foi extinta com água (0,20 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 1/10). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazina-2-il]acetonitrila (0,06 g, 65,5 umol, duas etapas 72% de rendimento) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M/2+1]: 412.
[01289] Etapa G: 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- [2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,05 g, 60,7 umol, 1,00 eq) e TBAF (1,00 M, 607 uL, 10,0 eq) em THF (0,50 mL) foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, acetato de etila/metanol = 3/1) e flash de fase inversa [água (FA, 0,10%)/acetonitrila], em seguida, adicionalmente purificado por coluna de HPLC-prep: Boston pH-lex 150*25 10um; fase móvel: [água (0,10%, TFA) - ACN]; B%: 31%-61%, 10 min. e coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 42% - 72%, 12 min. As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[4-[2-[[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-
pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 312, 3,70 mg, 6,30 umol, 10% de rendimento, 99,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 586.
[01290] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,57 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 1,6, 16,4 Hz, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,06 (br s, 1H), 4,49 - 4,42 (m, 1H), 4,37 (ddd, J = 3,2, 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,25 - 4,17 (m, 1H), 4,15 - 4,06 (m, 3H), 3,97 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,60 (br s, 1H), 3,43 (dd, J = 6,0, 10,0 Hz, 1H), 3,33 (br s, 1H), 3,23 - 3,16 (m, 1H), 3,15 - 3,06 (m, 2H), 3,04 - 2,89 (m, 3H), 2,88 - 2,66 (m, 4H), 2,48 (s, 3H), 2,33 (dd, J = 6,0, 10,0 Hz, 1H), 2,13 - 1,93 (m, 2H).
EXEMPLO 313 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila
EtOAc/Água r.t., 13 h, 88% HCl/dioxano, dioxano t-BuONa, Cs2CO3, tolueno, tolueno, 0°C, 0,5h, 90°C, 7h, 64% 42%
[01291] Etapa A: 2-[[4-bromo-5-(trifluorometil) indazol-1-il]metoxi]etil- trimetil-silano. A uma solução de 4-bromo-5-(trifluorometil)-1H-indazol (1 g, 3,77 mmol, 1 eq) em DMF (45 mL) foi adicionado NaH (181 mg, 4,53 mmol, 60,0% de pureza, 1,2 eq) a 0°C. Depois de ser agitada a 0°C por 1 hora, uma solução de SEM-Cl (818 mg, 4,91 mmol, 868 uL, 1,3 eq) em DMF (15 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura foi aquecida até 20°C e agitada por 1 hora. A mistura foi extinta com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (50 mL), diluída com água (100 mL) e depois extraída com acetato de etila (2 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 100:1) para dar 2-[[4-bromo-5-(trifluorometil)indazol-1-il]metoxi]etil-trimetil- silano (430 g, 1,03 mmol, 27,4% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo incolor.
[01292] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,18 (s, 1H), 7,74 - 7,66 (m, 1H), 7,63 - 7,56 (m, 1H), 5,76 (s, 2H), 3,59 - 3,49 (m, 2H), 0,93 - 0,86 (m, 2H), - 0,01 - -0,08 (m, 9H).
[01293] Etapa B: terc-butil 4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. À solução de terc-butil 2- metilsulfanil-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (3,59 g, 8,36 mmol, 1 eq), 2-piperazin-2-il-acetonitrila (Intermediário 62, 1,99 g, 10,0 mmol, 1,2 eq, 2HCl) em DMF (30 mL) foi adicionado DIEA (2,16 g, 16,7 mmol, 2,91 mL, 2 eq), então, a mistura foi aquecida até 80°C e agitada a 80°C por 2 horas. Foi adicionada água (80 mL) à mistura. A mistura resultante foi diluída com EtOAc (20 mL) e extraída com EtOAc (5 x 60 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (80 mL), secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 40%) para dar terc-butil 4- [3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (2,37 g, 5,27 mmol, 63,1% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 405.
[01294] Etapa C: terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. À solução de terc-butil 4-[3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,37 g, 5,86 mmol, 1 eq), NaHCO3 (1,48 g, 17,6 mmol, 684 uL, 3 eq) em EtOAc (30 mL) e água (15 mL) foi adicionado CbzCl (2,00 g, 11,7 mmol, 1,67 mL, 2 eq), gota a gota, em seguida a mistura foi agitada a 25°C por 13 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (15 mL) e extraída com EtOAc (2 × 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc=20:1~0:1) para dar terc-butil 4-[4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,91 g, 5,13 mmol, 87,6% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 539.
[01295] Etapa D: terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. À solução de terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,91 g, 5,40 mmol, 1 eq) em EtOAc (60 mL) e ACN (20 mL) foi adicionado m-CPBA (1,10 g, 5,40 mmol, 85,0% de pureza, 1 eq) a 0°C, depois a mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por Na2S2O3 saturado (30 mL) a 0°C, em seguida, extraída com EtOAc (50 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase inversa (ACN/Água (0,1% NH3•H2O) = 62%) para dar terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (2,65 g, 4,73 mmol, 87,6% de rendimento, 99,0% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 555.
[01296] Etapa E: terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato. À solução de terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (2,2 g, 3,97 mmol, 1 eq), [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol (914 mg, 7,93 mmol, 2 eq) em tolueno (44 mL) foi adicionado t-BuONa (572 mg, 5,95 mmol, 1,5 eq) a 0°C, em seguida, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (15 mL) à mistura. A mistura resultante foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 45%) para dar terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (1,64 g, 2,52 mmol, 63,5% de rendimento, 93,0% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 605.
[01297] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,44 - 7,31 (m, 5H), 5,19 (s, 2H), 4,71 - 4,54 (m, 2H), 4,35 (br d, J=19,2 Hz, 1H), 4,24 - 4,16 (m, 2H), 4,11 - 3,92 (m, 2H), 3,79 (br d, J=12,4 Hz, 2H), 3,28 (br d, J=12,8 Hz, 3H), 2,98 (dt, J=3,2, 12,4 Hz, 1H), 2,87 - 2,44 (m, 8H), 2,36 (s, 3H), 2,12 - 2,06 (m, 1H), 1,87 (br s, 2H), 1,49 (s, 9H).
[01298] Etapa F: benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina -4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (1,64 g, 2,71 mmol, 1 eq) em dioxano (30 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 30 mL, 44,32 eq) a 0°C, em seguida, a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 35,5%) para dar benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il-]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,95 g, 1,78 mmol, 65,9% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 506.
[01299] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,32 (m, 5H), 5,19 (s, 2H), 4,66 (br s, 1H), 4,25 - 4,07 (m, 3H), 4,01 - 3,91 (m, 3H), 3,83 (br d, J=13,6 Hz, 1H), 3,38 - 3,18 (m, 2H), 3,16 - 3,07 (m, 1H), 3,03 - 2,92 (m, 2H), 2,81 (br s, 1H), 2,75 - 2,65 (m, 3H), 2,60 (br d, J=5,6 Hz, 3H), 2,55 - 2,45 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,14 - 1,97 (m, 1H), 1,68 - 1,54 (m, 2H).
[01300] Etapa G: benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de benzil 2- (cianometil)-4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (510 mg, 1,01 mmol, 1 eq), 2-[[4-bromo- 5-(trifluorometil) indazol-1-il]metoxi]etil-trimetil-silano (399 mg, 1,01 mmol, 1 eq),
RuPhos (188 mg, 403 umol, 0.4 eq) e Cs2CO3 (986 mg, 3,03 mmol, 3 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (185 mg, 202 umol, 0,2 eq) sob N2, a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N 2 várias vezes. A mistura foi aquecida até 90°C e agitada a 90°C por 14 horas. A mistura de reação foi filtrada, a torta de filtro foi lavada com EtOAc (2 × 15 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 55%) para dar benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il-]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol- 4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (365 mg, 423 umol, 41,9% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 820.
[01301] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,15 (s, 1H), 7,70 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,42 - 7,33 (m, 5H), 5,76 (s, 2H), 5,24 - 5,16 (m, 2H), 4,70 (br s, 1H), 4,42 - 4,27 (m, 2H), 4,21 (br d, J=6,8 Hz, 2H), 4,06 (br d, J=10,8 Hz, 1H), 3,90 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,61 - 3,54 (m, 2H), 3,50 - 3,38 (m, 2H), 3,31 (br d, J=11,6 Hz, 2H), 3,10 - 2,99 (m, 1H), 2,86 (br s, 2H), 2,81 - 2,66 (m, 4H), 2,65 - 2,57 (m, 1H), 2,56 - 2,44 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,12 - 2,06 (m, 1H), 2,04 - 1,96 (m, 1H), 1,69 - 1,56 (m, 1H), 0,95 - 0,87 (m, 2H), -0,03 - -0,10 (m, 9H).
[01302] Etapa H: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em MeOH (6 mL) por 5 minutos. À solução foi adicionado benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4- il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (310 mg, 378 umol, 1 eq), Pd/C (150 mg, 10,0% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 28°C por 1 hora. A mistura foi filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi usado na próxima etapa diretamente, sem purificação adicional. Composto 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (165 mg, 240 umol, 63,6% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
686.
[01303] Etapa I: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[4-[2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2- trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (190 mg, 277 umol, 1 eq), DIEA (107 mg , 831 umol, 145 uL, 3 eq) em DCM (4 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (41,9 mg, 332 umol, 1,2 eq) a 0°C, então, a mistura foi agitada a 28°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por Água (1 mL) e extraída com DCM (3 × 4 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi usado na próxima etapa diretamente, sem purificação adicional. Composto 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]- 7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, 233 umol, 84,2% de rendimento, 75,0% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 740.
[01304] Etapa J: 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5- (trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6, 8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop- 2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1-(2-trimetilsililetoximetil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (220 mg, 297 umol, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (1,70 g, 14,9 mmol, 1,10 mL, 50 eq), a mistura foi agitada a 28°C por 1 hora. A mistura de reação foi basificada por NaHCO3 saturado (12 mL) até PH=8. A mistura resultante foi extraída com
DCM: MeOH (10:1) (3 × 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EtOAc: MeOH=100:1~10:1), então, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 44%-74%, 12min.) para dar 2-[4-[2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-7-[5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazina- 2- il]acetonitrila (EXEMPLO 313, 1,23 mg, 2,01 umol, 6,74e-1% de rendimento, 99,4% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 610.
[01305] 1H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ = 8,38 (s, 1H), 7,70 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,57 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,84 (br s, 1H), 6,31 (br d, J=16,8 Hz, 1H), 5,86 (br d, J=10,8 Hz, 1H), 5,13 (br s, 1H), 4,62 (br s, 1H), 4,37 - 4,20 (m, 5H), 4,14 (br d, J=11,6 Hz, 1H), 3,64 (br s, 1H), 3,50 (br d, J=4,8 Hz, 2H), 3,41 - 3,34 (m, 1H), 3,29 - 3,16 (m, 2H), 3,03 (br d, J=6,4 Hz, 1H), 2,94 (br s, 2H), 2,88 - 2,80 (m, 1H), 2,80 - 2,72 (m, 1H), 2,69 (br t, J=6,8 Hz, 2H), 2,58 - 2,51 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,17 - 2,06 (m, 1H), 1,75 - 1,64 (m, 1H).
EXEMPLO 314 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
Cs2CO3, tolueno, 2 horas 100°C, 5 horas, 79% DIEA, DCM 0 °C, 0,5 hora Duas etapas 14%
[01306] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 900 mg, 1,78 mmol, 1,0 eq), Pd2(dba)3 (245 mg, 267 umol, 0,15 eq), RuPhos (166 mg, 356 umol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (1,16 g, 3,56 mmol, 2,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado (3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (Intermediário 30, 1,09 g, 3,56 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 100°C por 5 horas. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (20,0 mL) e extraída com EA (20 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE : EA = 10:1 - EA : MeOH = 10:1) para dar benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,0 g, 1,42 mmol, 79% de rendimento, 93,8% de pureza) como sólido amarelo.
[01307] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 - 7,32 (m, 7H), 6,91 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,27 - 5,15 (m, 2H), 4,70 (br s, 1H), 4,51 - 4,33 (m, 1H), 4,30 - 4,03 (m, 5H), 3,94 - 3,87 (m, 3H), 3,53 - 3,40 (m, 1H), 3,32 (br d, J = 12,4 Hz, 3H), 3,16
(br t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,06 (dt, J = 3,6, 12,6 Hz, 1H), 2,97 - 2,72 (m, 6H), 2,52 (s, 3H), 2,39 - 2,28 (m, 1H), 2,15 - 2,06 (m, 1H), 1,93 - 1,74 (m, 3H).
[01308] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado MeOH (50,0 mL) a -60°C por 30 minutos. Então benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,0 g, 1,51 mmol, 1,0 eq) e Pd/C (1,0 g, 10% de pureza) foram adicionados ao líquido acima sob atmosfera de N2. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 Psi) a 20°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada com Celite e concentrada sob vácuo. O produto 2-[(2S)-4-[7- (3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (600 mg, bruto) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 528.
[01309] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (600 mg, 1,14 mmol, 1,0 eq) e DIEA (882 mg, 6,82 mmol, 1,19 mL, 6,0 eq) em DCM (6,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (143 mg, 1,14 mmol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (100 mg) e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 52%-80%, 12min.). para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 314, 90,5 mg, 155 umol, 14,0% de rendimento 99,5% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:
582.
[01310] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,68 - 6,53 (m, 1H), 6,41 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,19 - 4,50 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,31 - 4,08 (m, 4H), 4,07 - 3,85 (m, 5H), 3,79 - 3,41 (m, 2H), 3,41 - 3,22 (m, 2H), 3,20 - 3,04 (m, 2H), 3,02 - 2,75 (m, 4H), 2,72 - 2,65 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,33 - 2,24 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,90 - 1,71 (m, 3H).
EXEMPLO 315 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila -78 – 20 °C, 1,5 h Duas etapas 55%
[01311] Etapa A: benzil (2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-
2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-metilsulfinil -7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 0,90 g, 1,55 mmol, 1,00 eq) e [(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metilpirrolidina-2-il]metanol (687 mg, 1,86 mmol, 1,20 eq) em THF (20,0 mL) foi adicionado t-BuONa (298 mg, 3,10 mmol, 2,00 eq) a 0°C. Depois de agitada a 25°C por 1 hora, a mistura foi diluída com acetato de etila (50,0 mL), lavada com água (30,0 mL) e salmoura (1 × 30,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 10/1) para dar benzil (2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,90 g, 873 umol, 56% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M/2+1]: 443.
[01312] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,24 - 8,18 (m, 1H), 7,90 - 7,83 (m, 1H), 7,71 - 7,57 (m, 5H), 7,53 - 7,47 (m, 2H), 7,45 - 7,35 (m, 12H), 7,14 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,43 - 4,36 (m, 1H), 4,33 (br dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,26 (br s, 2H), 4,16 - 4,03 (m, 3H), 3,93 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,47 (br s, 1H), 3,30 (br d, J = 10,4 Hz, 3H), 3,17 (br dd, J = 6,0, 10,0 Hz, 1H), 3,11 - 2,96 (m, 3H), 2,84 (br s, 2H), 2,78 - 2,70 (m, 1H), 2,48 - 2,37 (m, 4H), 2,11 (ddd, J = 4,8, 8,4, 12,8 Hz, 1H), 1,96 - 1,82 (m, 1H), 1,06 (s, 9H).
[01313] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em metanol (50 mL) a -60°C por 0,5 h. À mistura foi adicionado benzil (2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,90 g, 1,02 mmol, 1,00 eq) e Pd/C (0,10 g, 10,0% de pureza). Depois de agitada a 20°C por 1 hora sob H2 a 15 psi, a mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar 2- [(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-
naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (763 mg, bruto) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 752.
[01314] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)- 4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,76 g, bruto) e Et3N (511 mg, 5,05 mmol, 703 uL) em diclorometano (5,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (127 mg, 1,01 mmol) a -40°C. Depois de agitada a 20°C por 1 hora, a mistura foi extinta com bicarbonato de sódio saturado (0,20 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 10/01) para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,50 g, 552 umol, duas etapas de 55% de rendimento) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 806.
[01315] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,25 - 8,17 (m, 1H), 7,90 - 7,82 (m, 1H), 7,68 - 7,58 (m, 5H), 7,50 (td, J = 2,4, 5,2 Hz, 2H), 7,46 - 7,35 (m, 7H), 7,14 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,67 - 6,51 (m, 1H), 6,46 - 6,31 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,43 - 4,31 (m, 2H), 4,27 (br s, 2H), 4,16 - 4,00 (m, 4H), 3,67 - 3,55 (m, 1H), 3,46 (br s, 1H), 3,31 (br dd, J = 8,4, 14,4 Hz, 2H), 3,17 (br dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 3,11 - 2,73 (m, 6H), 2,47 (s, 3H), 2,42 (br dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 2,11 (tt, J = 4,0, 8,4 Hz, 1H), 1,96 - 1,84 (m, 1H), 1,06 (s, 9H).
[01316] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-
pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,40 g, 496 umol, 1,00 eq), KF (57,7 mg, 992 umol, 23,3 uL, 2,00 eq) e 18-crown-6 (262 mg, 992 umol, 2,00 eq) em THF (10,0 mL) foi agitada a 30°C por 24 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram ajustadas pH > 7 por bicarbonato de sódio saturado (2,00 mL) e extraídas com acetato de etila (3 × 30,0 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 37% - 67%, 12 min.). As frações desejadas foram concentradas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)- 4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 315, 51,5 mg, 90,7 umol, 18% de rendimento, 96,3% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 568.
[01317] SFC: “Coluna AS-3S_3_5_40_3ML: Chiralpak AS - 3 100×4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05%, DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3 mL/min Comprimento de onda: 220 nm”.
[01318] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,26 - 8,17 (m, 1H), 7,91 - 7,83 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 - 7,48 (m, 2H), 7,44 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,47 - 6,36 (m, 1H), 5,84 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,52 - 4,43 (m, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,34 - 4,20 (m, 3H), 4,15 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 4,02 (br d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,61 (br s, 1H), 3,53 - 3,41 (m, 2H), 3,34 (br s, 2H), 3,12 (br s, 1H), 3,05 - 2,89 (m, 3H), 2,88 - 2,66 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,34 (dd, J = 5,6, 10,0 Hz, 1H), 2,16 - 1,94 (m, 2H).
EXEMPLO 316
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(4-fluoronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 70°C, 12h, 48%
[01319] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 1,0 g, 1,98 mmol, 1,0 eq) e 1-bromo-4-fluoro- naftaleno (2,23 g, 9,89 mmol, 5,0 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (1,93 g, 5,93 mmol, 3,0 eq), XFos-Pd-G3 (335 mg, 396 umol, 0,2 eq), a mistura de reação foi agitada a 70°C por 24 horas sob N2. Após conclusão, à reação foi adicionada água (20,0 mL), extraída com EA (2 × 20,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=3/1 para
Acetato de etila: Metanol=20:1) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro- 1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (680 mg, 957 umol, 48% de rendimento, 91,4% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 650.
[01320] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (650 mg, 1,0 mmol, 1,0 eq) em MeOH (15 mL) foi adicionado NH3•MeOH (1,0 mmol, 15,0 mL, 1,0 eq) e Pd/C (500 mg, 10% de pureza), a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 Psi) a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a reação foi filtrada através de uma Celite e o filtrado foi concentrado para dar 2-[(2S)-4- [7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (460 mg, 824 umol, 82% rendimento, 92,4% de pureza) como sólido branco que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01321] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-ilo-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (460 mg, 892 umol, 1,0 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado DIEA (461 mg, 3,57 mmol, 622 uL, 4,0 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (113 mg, 892 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (5,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-prep ((Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]); B%: 53% - 83%, 12 min.), o produto obtido foi concentrado e depois sob liofilização. O composto do título 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-
hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 316, 100 mg, 175 umol, 20% de rendimento, 100 % de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01322] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,28 - 8,22 (m, 1H), 8,17 - 8,10 (m, 1H), 7,63 - 7,55 (m, 2H), 7,14 - 7,05 (m, 2H), 6,70 - 6,55 (m, 1H), 6,42 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,86 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,20 - 4,48 (m, 1H), 4,41 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,33 - 4,10 (m, 4H), 4,09 - 3,92 (m, 2H), 3,78 - 3,20 (m, 4H), 3,19 - 3,07 (m, 2H), 3,05 - 2,64 (m, 5H), 2,50 (s, 3H), 2,36 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,02 (m, 1H), 1,92 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 317 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12h, 42% Três etapas 14%
[01323] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidina -2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 880 mg, 1,87 mmol, 1,0 eq) e (4-bromo-2-naftil)2,2-dimetilpropanoato (Intermediário 54, 745 mg, 2,43 mmol, 1,3 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (1,22 g, 3,73 mmol, 2,0 eq), Ruphos (174 mg, 373 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (171 mg, 187 umol, 0,1 eq), a mistura foi agitada a 90°C por 12 horas sob N 2. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (30 mL), então, extraída com EA (2 x 20 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=3/1 para Acetato de etila: Metanol=20/1) para dar terc- butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (750 mg, 774 umol, 41% de rendimento, 72,9% de pureza) como sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 698.
[01324] Etapa B: [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2- dimetilpropanoato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (750 mg, 774 umol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado TFA (7,70 g, 67,5 mmol, 5,0 mL, 87,3 eq), a mistura de reação foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, a reação foi concentrada para dar [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2- dimetilpropanoato (550 mg, bruto, TFA) como óleo marrom que foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[01325] Etapa C: [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil]2,2-dimetilpropanoato. A uma mistura de [4-[4-[(3S)-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil] 2,2-dimetilpropanoato (550 mg, 773 umol, 1,0 eq, TFA) em DCM (5 mL) foi adicionado TEA (469 mg, 4,64 mmol, 645 uL, 6,0 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (97,5 mg, 773 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (5,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=3/1 para Acetato de etila/Metanol=10/1) para dar [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil- piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2-dimetilpropanoato (270 mg, 323 umol, 42% de rendimento, 78,2% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 652.
[01326] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-ilo-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de [4-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil- piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il]-2-naftil]2,2-dimetilpropanoato (270 mg, 323 umol, 1,0 eq) em THF (2,0 mL) foi adicionada uma solução de NaOH (38,8 mg, 969 umol, 3,0 eq) em H2O (2,0 mL), a mistura de reação foi agitada a 20°C por 4 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi adicionada água (10 mL), em seguida, extraída com EA (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Luna Fenil-Hexil 150_30_5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35% - 62%, 3min.), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. O composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3- hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il] -1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 317, 26,6 mg, 46,3 umol, 14% de rendimento, 98,8% de pureza) foi obtido como sólido rosa. LCMS [ESI, M+1]: 568.
[01327] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,01 - 7,93 (m, 1H), 7,64 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,41 (br t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,33 - 7,29 (m, 2H), 6,88 (s, 1H), 6,66 - 6,50 (m, 2H), 6,39 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,04 - 4,89 (br s, 1H), 4,64 - 4,49 (m, 1H), 4,32 - 4,21 (m, 1H), 4,11 (br s, 2H), 4,00 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,94 - 3,71 (m, 2H), 3,47 - 3,08 (m, 4H), 2,93 - 2,61 (m, 10H), 2,47 - 2,33 (m, 1H), 2,25 - 2,06 (m, 1H), 2,00 - 1,89 (m, 3H).
EXEMPLO 318 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano T_BuONa, tolueno, 0°C, 10 Dioxano 0- T_BuONa, tolueno, min., 56% 25°C, 1h, 90°C, 15 h, 48% 79%
[01328] Etapa A: terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (Intermediário 64, 500 mg, 901 umol, 1,00 eq) e [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (208 mg, 1,80 mmol, 2,00 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado t-BuONa (173 mg, 1,80 mmol, 2,00 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 minutos. Após conclusão, a mistura foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 30 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. O pH foi ajustado para 7 com solução saturada de bicarbonato de sódio e a mistura foi extraída com acetato de etila (2 × 30 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (340 mg, 505 umol, 56% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo.
[01329] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,45 - 7,32 (m, 5H), 5,28 - 5,12 (m, 2H), 4,70 - 4,55 (m, 2H), 4,42 - 4,29 (m, 2H), 4,15 - 3,93 (m, 3H), 3,90 - 3,75 (m, 2H), 3,43 - 3,16 (m, 3H), 3,09 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,98 (dt, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,89 - 2,54 (m, 5H), 2,47 (s, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,05 - 1,96 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H), 1,49 (s, 9H).
[01330] Etapa B: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (340 mg, 561 umol, 1,00 eq) em dioxano (4,00 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 4,00 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O pH foi ajustado para
8 com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturada e a mistura foi extraída com o solvente misturado (DCM/i-PrOH 2/1, 2 × 9 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il-metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (255 mg, 444 umol, 79% de rendimento, 88,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 506.
[01331] Etapa C: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[((2R)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 366 umol, 1,00 eq), 1-bromo-4-fluoro-naftaleno (247 mg, 1,10 mmol, 3,00 eq), RuPhos (68,2 mg, 146 umol, 0,40 eq), t-BuONa (87,8 mg, 914 umol, 2,50 eq) e Pd2(dba)3 (66,9 mg, 73,1 umol, 0,20 eq) em tolueno (2,00 mL) foi desgaseificada e, então, aquecida a 90°C por 15 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo, diluída com água (3 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. A mistura foi neutralizada com solução saturada de bicarbonato de sódio, concentrada sob vácuo para remover MeCN e extraída com acetato de etila (3 × 30 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1- naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazine-1-carboxilato (120 mg, 175 umol, 48% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo.
[01332] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,23 (dd, J = 2,0, 4,4 Hz, 1H), 8,16 - 8,08 (m, 1H), 7,60 - 7,52 (m, 2H), 7,44 - 7,33 (m, 5H), 7,14 - 7,02 (m, 2H), 5,28 - 5,16 (m, 2H), 4,69 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,29 - 4,14 (m, 4H), 4,07 (br s, 1H), 3,95 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,54 - 3,15 (m, 4H), 3,14 -
3,03 (m, 2H), 3,00 - 2,61 (m, 5H), 2,48 (s, 3H), 2,35 - 2,23 (m, 1H), 1,97 - 2,05 (m, 1H), 1,92 - 1,83 (m, 3H).
[01333] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em MeOH (5,00 mL) por 3 minutos a - 40°C. À solução foi adicionada uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 185 umol, 1,00 eq) em MeOH (5,00 mL) e Pd/C (60,0 mg, 10% pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A reação foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para dar 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (80,0 mg, 147 umol, 79% de rendimento, 94,6% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01334] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (80,0 mg, 155 umol, 1,00 eq) e TEA (78,5 mg, 776 umol, 108 uL, 5,00 eq) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (19,6 mg, 155 umol, 1,00 eq) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a reação foi extinta com MeOH (0,5 mL), diluída com água (2 mL) e extraída com EtOAc (2 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC-prep (EtOAc/MeOH 7/1) e HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 52% - 82%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 318, 21,0 mg, 36,7 umol, 24% de rendimento, 99,8% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01335] Condição SFC: Coluna OD-3S_3_40_3ML: Chiralcel OD-3 100x4,6mm I.D., Fase móvel 3um: 40% de metanol (0,05% de DEA) em Taxa de fluxo de CO2: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm.
[01336] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,33 - 8,22 (m, 1H), 8,16 - 8,08 (m, 1H), 7,62 - 7,52 (m, 2H), 7,14 - 7,02 (m, 2H), 6,59 (br s, 1H), 6,46 - 6,36 (m, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,10 (br s, 1H), 4,87 - 4,33 (m, 2H), 4,30 - 4,10 (m, 4H), 4,09 - 3,78 (m, 2H), 3,77 - 3,23 (m, 2H), 3,22 - 2,53 (m, 8H), 2,48 (s, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,92 - 1,76 (m, 3H).
EXEMPLO 319 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
3,5 h Cs2CO3, tolueno, 90°C, 3 h, 45%
[01337] Etapa A: benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de [(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (1,31 g, 11,4 mmol, 3 eq) em THF (10 mL) foi adicionado NaH (304 mg, 7,59 mmol, 60% de pureza em óleo mineral, 2 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin- 1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2 g, 3,79 mmol, 1 eq) foi adicionado à mistura e a mistura foi agitada a 80°C por 3 horas. A mistura de reação foi extinta com água gelada (20 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. As frações desejadas foram coletadas e ajustadas pH = 7 com solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraídas com acetato de etila (30 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (1 g, 1,60 mmol, 42% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 606.
[01338] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,31 (m, 5H), 5,19 (s, 2H), 4,75 - 4,64 (m, 1H), 4,59 (br s, 1H), 4,44 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 4,35 (br s, 1H), 4,21 - 4,11 (m, 1H), 4,07 - 3,64 (m, 4H), 3,43 (br s, 1H), 3,30-3,15 (m, 2H), 3,10 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,03 - 2,91 (m, 1H), 2,83 - 2,55 (m, 5H), 2,53 - 2,42 (m, 3H), 2,35 - 2,22 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,88 - 1,74 (m, 3H), 1,51 (s, 9H).
[01339] Etapa B: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. NH3 foi borbulhado em MeOH (100 mL) a -60°C por 30 minutos. A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (900 mg, 1,49 mmol, 1 eq) na mistura acima foi adicionado Pd/C seco (500 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (650 mg, 1,24 mmol, 84% de rendimento, 90% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 472.
[01340] Etapa C: terc-Butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de 1-bromo-3-cloro-2- (trifluorometil)benzeno (1,32 g, 5,09 mmol, 4 eq), terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4- [2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,27 mmol, 1 eq), Cs2CO3 (1,04 g, 3,18 mmol, 2,5 eq), Pd2(dba)3 (233 mg, 254 umol, 0,2 eq) e Ruphos (118 mg, 254 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/MeOH = 100/1 a 10:1) e ainda purificado por flash de fase inversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada PH = 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. terc-Butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (370 mg, 569 umol, 45% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 650
[01341] 1H NMR (400MHz, clorofórmio -d) δ = 7,40 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 - 7,24 (m, 1H), 7,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,40 (br s, 1H), 4,24 - 4,14 (m, 1H), 4,13 - 3,98 (m, 4H), 3,95 - 3,80 (m, 1H), 3,39 - 2,95 (m, 6H), 2,93 - 2,62 (m, 5H), 2,52 (br s, 3H), 2,32 (br s, 1H), 2,14 - 2,05 (m, 1H), 1,85-1,71 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[01342] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (370 mg, 569 umol, 1 eq) em DCM (700 uL) foi adicionado TFA (973 mg, 8,54 mmol, 632 uL, 15 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (377 mg, 567 umol, 99% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo e usado para a próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 550.
[01343] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (377 mg, 567 umol, 1 eq, TFA) em DCM (5 mL) foi adicionado TEA (574 mg, 5,68 mmol, 790 uL, 10 eq) a 0°C. Após adição, o prop-2-enoil prop-2-enoato (57,3 mg, 454 umol, 0,8 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO 3 (1 mL). Então, diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al 2O3, EA/MeOH = 100/1 para 10:1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 50% - 80%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 319, 95 mg, 154 umol, 27% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido branco após liofilização. LCMS [ESI, M+1]: 604.
[01344] Condição SFC: “Coluna OD-3S_3_5_40_3ML: Chiralcel OD - 3 100 × 4,6 mm I.D., Fase móvel 3um: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01345] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,29- 7,25 (m, 1H), 7,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,71 - 6,51 (m, 1H), 6,45 - 6,34 (m, 1H), 5,83 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,25-4,52 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,22 - 4,04 (m, 4H), 3,96 (br d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,74 - 3,02 (m, 5H), 2,99 - 2,61 (m, 6H), 2,48 (s, 3H), 2,35 - 2,23 (m, 1H), 2,14 - 1,97 (m, 1H), 1,92 - 1,79 (m, 3H).
EXEMPLO 320 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila 1,5 h
[01346] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-
naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 300 mg, 517 umol, 1,0 eq), [(2S)-1-isopropilpirrolidin-2- il]metanol (148 mg, 1,03 mmol, 2.0 eq) em tolueno (15,0 mL) foi adicionado t- BuONa (99,3 mg, 1,03 mmol, 2,0 eq) em porções a 0°C, a mistura de reação foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi lavado com água (10,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-60% MeCN). O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso satruado a pH~8 e, então, concentrado, o aquoso foi extraído com acetato de etila (3 × 20,0 mL) e a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 272 umol, 53% de rendimento, 99,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 660.
[01347] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em MeOH (20,0 mL) a -60°C por 30 minutos. Benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (130 mg, 197 umol, 1,0 eq) e Pd/C (80,0 mg, 197 umol, 10% de pureza, 1,0 eq) foi adicionada à mistura anterior, em seguida, a mistura foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora sob atmosfera de H 2. Após conclusão, a mistura bruta foi filtrada através de uma almofada de celite. A torta foi lavada com metanol (30,0 mL) e o filtrado foi seco sob alto vácuo.Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (75,0 mg, 132 umol, 67% de rendimento, 92,6% de pureza) foi obtido como um sólido cinza. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[01348] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (100 mg, 190 umol, 1,0 eq) em DCM (5,00 mL) foi adicionado DIEA (73,8 mg, 571 umol, 99,4 uL, 3,0 eq) e adicionada gota a gota prop-2-enoil prop- 2-enoato (36,0 mg, 285 umol, 1,50 eq) a 0°C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, a reação foi extinta com água (10,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (3 x 15,0 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (30,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo.O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Luna Fenil-Hexil 150_30_5um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 52% - 82%, 3 min.) e liofilização. Composto do título 2- [(2S)-4-[2-[[(2S)-1-isopropilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 320, 21,3 mg, 36,1 umol, 19% de rendimento, 98,1% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 580.
[01349] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,24 - 8,21 (m, 1H), 7,89 - 7,87 (m, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 - 7,50 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,65 - 6,57 (m, 1H), 6,42 (dd, J = 1,8, 16,8 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,16 - 4,51 (m, 1H) , 4,35 - 4,22 (m, 3H), 4,15 -3,95 (m, 4H), 3,68 - 3,47 (m, 1H), 3,42 - 2,77 (m, 11H), 2,58 - 2,52 (m, 1H),1,90 - 1,75 (m, 3H), 1,17 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
EXEMPLO 321
1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6-hidroxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona 12,5 h T_BuONa, tolueno, 90°C, 16 h, Duas etapas 64% 27%
[01350] Etapa A: terc-butil (3S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1-carboxilato. A solução de 7- benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (2 g, 6,80 mmol, 1 eq), terc-butil (3S)-3-metilpiperazina-1-carboxilato (1,50 g, 7,48 mmol, 1,1 eq), DIEA (1,76 g, 13,6 mmol, 2,37 mL, 2 eq) em NMP (40 mL) foi agitada a 100°C por 7 horas. Foi adicionada água (80 mL) à mistura. A mistura resultante foi diluída com EtOAc (20 mL) e extraída com EtOAc (3 x 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com EtOAc (3 × 5 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi triturado com (PE: EtOAc = 3:1, 20 mL) e filtrado e a torta de filtração foi lavada com (PE: EtOAc=3:1, 40 mL). Composto terc-butil (3S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1-carboxilato (1,44 g, 3,14 mmol, 46,2% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 458.
[01351] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,39 - 7,28 (m, 5H), 4,29 - 4,20 (m, 1H), 4,16 - 3,81 (m, 2H), 3,76 (br s, 1H), 3,73 (br s, 1H), 3,68 (s, 2H), 3,61 (d, J = 10,4 Hz, 2H), 3,37 - 3,28 (m, 1H), 3,11 (br s, 2H), 2,73 - 2,58 (m, 4H), 1,48 (s, 9H), 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
[01352] Etapa B: terc-butil (3S)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1- carboxilato. À solução de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (830 mg, 7,21 mmol, 855 uL, 2,5 eq) em THF (25 mL) foi adicionado NaH (230 mg, 5,76 mmol, 60% de pureza, 2 eq) a 0°C e agitada a 0°C por 0,5 hora. Então terc-butil (3S)-4-(7- benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1- carboxilato (1,32 g, 2,88 mmol, 1 eq) foi adicionado à mistura. A mistura de reação foi aquecida até 70°C por 12 horas num tubo sob N2. A mistura de reação foi extinta por água (10 mL). A mistura resultante foi diluída com EtOAc (20 mL) e extraída com EtOAc (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 40%) para dar terc-butil (3S)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1-carboxilato (1,35 g, 2,39 mmol, 82,9% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 537.
[01353] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,40 - 7,27 (m, 5H), 4,37 (br dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,22 - 4,14 (m, 2H), 4,07 - 3,73 (m, 2H), 3,71 - 3,64 (m, 3H), 3,63 - 3,49 (m, 2H), 3,34 - 3,24 (m, 1H), 3,21 - 2,92 (m, 3H), 2,79 - 2,64 (m, 2H), 2,63 - 2,56 (m, 3H), 2,51 (s, 3H), 2,33 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 2,12 - 2,05 (m, 1H), 1,92 - 1,69 (m, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,20 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
[01354] Etapa C: terc-butil (3S)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil (3S)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1-carboxilato (1,43 g, 2,66 mmol, 1 eq) em MeOH (28 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (500 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 4 horas. A mistura de reação foi filtrada, a torta de filtro foi lavada com MeOH (3 x 20 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 40%) para dar terc-butil (3S)-3-metil-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (810 mg, 1,72 mmol, 64,7% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 447.
[01355] Etapa D: terc-butil (3S)-4-[7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil- piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil (3S)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (500 mg, 1,12 mmol, 1 eq), 2-bromo-1-fluoro-3-metoxi-benzeno (459 mg, 2,24 mmol, 2 eq) e t-BuONa (323 mg, 3,36 mmol, 3 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado Pd-BrettPhos-G3 (304 mg, 336 umol, 0,3 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 16 horas. Foi adicionada água (10 mL) à mistura. A mistura resultante foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre
Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (de PE: EtOAc 2:1~0:1 para EtOAc: MeOH 1:0~5:1), então, o resíduo purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max- RP 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 32%- 57%,30;80%min.) para dar terc-butil (3S)-4-[7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil- piperazina-1-carboxilato (180 mg, 300 umol, 26,8% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo marrom. LCMS [ESI, M+1]: 571.
[01356] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,02 (dt, J = 6,4, 8,4 Hz, 1H), 6,75 - 6,65 (m, 2H), 4,36 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,24 - 4,17 (m, 1H), 4,12 - 4,09 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,74 - 3,65 (m, 1H), 3,38 - 3,27 (m, 3H), 3,24 - 2,94 (m, 3H), 2,67 (br d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,08 (br d, J=3,2 Hz, 1H), 2,04 - 1,98 (m, 1H), 1,87 - 1,69 (m, 4H), 1,49 (s, 9H), 1,25 - 1,21 (m, 3H).
[01357] Etapa E: 7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-4-[(2S)-2-metilpiperazin-1-il]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A solução de terc-butil (3S)-4-[7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1- carboxilato (210 mg, 368 umol, 1 eq) e TFA (839 mg, 7,36 mmol, 545 uL, 20 eq) foi agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-4-[(2S)-2-metilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (260 mg, bruto, 2TFA) foi obtido como um óleo amarelo.
[01358] Etapa F: 1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil- piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona. À solução de 7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-4-[(2S)- 2-metilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (260 mg, bruto, 2TFA), DIEA (481 mg, 3,72 mmol, 648 uL)
em DCM (5 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (46,9 mg, 372 umol) a 0°C, depois a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por água (1 mL). A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 33%) para dar 1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6-metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (130 mg, 235 umol, 63,2% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 525.
[01359] Etapa G: 3-bromo-1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6-hydroxy-phenyl)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3- metil-piperazin-1-il]propan-1-ona. A uma solução de 1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6- metoxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (80 mg, 152 umol, 1 eq) em PhBr (2 mL) foi adicionado Bbr3 (764 mg, 3,05 mmol, 294 uL, 20 eq). A mistura de reação foi agitada a 90°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi extinto com NaHCO3 saturado (2 mL) e extraído com EtOAc (2 × 20 mL). 3-bromo-1-[(3S)-4-[7-(2- fluoro-6-hidroxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1-il]propan-1-ona (90 mg, bruto) foi obtido como um óleo marrom. O produto bruto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional.
[01360] Etapa H: 1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6-hidroxi-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil- piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona. Para uma solução de 3-bromo-1-[(3S)-4-[7-(2- fluoro-6-hidroxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazin-1-il]propan-1-ona (90 mg, 152 umol, 1 eq) em THF (2 mL) foi adicionado TEA (154 mg, 1,52 mmol, 212 uL, 10 eq). A mistura de reação foi agitada a 20°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC-prep (DCM:
MeOH = 10:1), então, HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 48%-78%, 12min.) para dar o composto do título 1-[(3S)-4-[7-(2-fluoro-6- hidroxi-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (EXEMPLO 321, 10,6 mg, 20,1 umol, 13% de rendimento, 96,9% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 511.
[01361] 1H NMR (400MHz, Metanol-d4) δ = 7,17 - 6,97 (m, 1H), 6,93 - 6,76 (m, 1H), 6,71 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,61 (dd, J=8,8, 11,2 Hz, 1H), 6,29 (br dd, J=4,8, 16,4 Hz, 1H), 5,82 (br d, J=10,8 Hz, 1H), 4,58 - 4,27 (m, 4H), 4,20 - 4,04 (m, 3H), 4,03 - 3,87 (m, 1H), 3,68 - 3,39 (m, 2H), 3,30 (br s, 2H), 3,25 - 3,05 (m, 2H), 2,82 (br s, 2H), 2,75 (td, J=6,8, 13,6 Hz, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,36 (q, J=9,2 Hz, 1H), 2,13 - 2,08 (m, 1H), 1,89 - 1,78 (m, 2H), 1,77 - 1,67 (m, 1H), 1,28 (br d, J=5,2 Hz, 3H).
EXEMPLO 322 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(4-fluoronaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
Cs2CO3, dioxano, 90°C, 5h, 75,2% 91,8% 35,0% Duas etapas. 13,2%
[01362] Etapa A: 2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. benzil 2- (cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (2,00 g, 4,56 mmol, 1,00 eq.), 1-bromo-4-fluoro- naftaleno (1,54 g, 6,84 mmol, 1,50 eq.), Pd2(dba)3 (418 mg, 456 umol, 0,100 eq.), RuPhos (426 mg, 912 umol, 0,20 eq.) e carbonato de césio (4,46 g, 13,7 mmol, 3,00 eq.) em tolueno (40,0 mL) foi desgasificado e, então, aquecido até 110°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta por adição de água (20,0 mL) a 20°C, então, diluída com acetato de etila (30 mL) e extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50,0 mL), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=1/1 a 0/1) para dar benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2- metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,00 g, 3,43 mmol, 75,2% de rendimento) como um sólido amarelo.
[01363] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8,24 (dt, J=1,6, 4,8 Hz, 1H), 8,16 - 8,08 (m, 1H), 7,64 - 7,53 (m, 2H), 7,47 - 7,34 (m, 5H), 7,15 - 7,03 (m, 2H), 5,22
(s, 2H), 4,72 (br s, 1H), 4,29 - 4,17 (m, 2H), 4,12 - 4,04 (m, 1H), 3,95 (br d, J=12,0 Hz, 1H), 3,51 - 3,19 (m, 3H), 3,14 - 2,68 (m, 5H), 2,54 (s, 3H).
[01364] Etapa B: benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,06 g, 1,82 mmol, 1,00 eq.) em acetato de etila (33,0 mL) foi adicionado m-CPBA (332 mg, 1,64 mmol, 85,0% de pureza, 0,90 eq.) em uma porção de a 20°C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 20°C por 5 horas. A reação foi extinta por tiossulfato de sódio saturado (20,0 mL) e depois extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (30,0 mL), concentrada para dar benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,00 g, 1,67 mmol, 91,8% de rendimento) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [M+1]: 599.1.
[01365] Etapa C: benzil-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(4-fluoro-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil 2-(cianometil)-4-[7-(4-fluoro- 1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (500 mg, 835,16 umol, 1,00 eq.) e [(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metanol (216 mg, 1,67 mmol, 2,00 eq.) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado terc-butóxido de sódio (120 mg, 1,25 mmol, 1,50 eq.) numa porção a 0°C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min., A mistura de reação foi extinta por adição de água (10,0 mL) a 0°C e, em seguida, diluída com acetato de etila (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (10 ml × 3) As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20,0 mL), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo que foi purificado por HPLC-Prep (condição TFA) para dar benzil-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-fluoro-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 292 umol, 35,0% de rendimento, 97,0% de pureza) como um sólido incolor. LCMS [M+1]: 664.5.
[01366] Etapa D: 2-[4-[2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-fluoro-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 (g) foi borbulhado em metanol (2 mL) por 5 min. a 0°C, em seguida, adicionado em uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (4-fluoro-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (200 mg, 301umol, 1,00 eq.) em metanol (2,00 mL), depois foi adicionado Pd/C (100 mg, 10% de pureza) sob atmosfera de N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 1 hora. Filtrado e concentrado para dar 2-[4- [2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-fluoro-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, bruto) como um sólido preto que foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [M+1]: 530.5.
[01367] Etapa E: 2-[4-[2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-fluoro-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[4-[2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4- fluoro-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 189 umol, 1,00 eq.) e DIEA (73,2 mg, 566 umol, 98,7 uL, 3,00 eq.) em DCM (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (47,6 mg, 378 umol, 2,00 eq.) em DCM (1,00 mL) gota a gota a 0°C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 20°C por 30 min., foi adicionado metanol (1,00 mL) à mistura de reação e, em seguida, o solvente foi removido para dar um resíduo que foi purificado por TLC-Prep (SiO2, DCM: MeOH = 10:1, foi adicionada uma gota de NH4OH) para dar um produto bruto. Então, por HPLC-Prep (condição de base) para dar o composto do título 2-[4-[2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(4-fluoro- 1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-
il]acetonitrila (14,9 mg, 25,0 umol, 13,2% de rendimento, 97,9% de pureza) como um sólido branco. LCMS [M+1]: 584.5.
[01368] 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8,25 (dd, J=2,4, 4,8 Hz, 1H), 8,19 - 8,08 (m, 1H), 7,63 - 7,54 (m, 2H), 7,15 - 7,03 (m, 2H), 6,61 (br s, 1H), 6,47 - 6,38 (m, 1H), 5,86 (br d, J=10,2 Hz, 1H), 5,12 (br s, 1H), 4,38 (dd, J=4,4, 10,6 Hz, 1H), 4,24 (br s, 2H), 4,20 - 4,10 (m, 2H), 4,04 (br d, J=12,0 Hz, 2H), 3,76 - 2,67 (m, 12H), 2,52 - 2,37 (m, 1H), 2,32 - 2,21 (m, 1H), 2,09 - 1,97 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H), 1,16 (t, J=7,2 Hz, 3H).
EXEMPLO 323 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
TBDPSCl, Imidazol 0,5 h 1,5 h 0,5 h Duas etapas 48%
[01369] Etapa A: metil (2R,4S)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidina-2-carboxilato. A uma solução de (2R,4S)-4-hidroxipirrolidina-2-carboxilato (3 g, 20,7 mmol, 1 eq, HCl) e formaldeído (8,39 g, 103 mmol, 7,69 mL, 37% de pureza, 5 eq) em MeOH (30 mL) foi adicionado AcOH (1,24 g, 20,7 mmol, 1,18 mL, 1 eq) a 15°C. Depois de agitar por 30 minutos, foi adicionado NaBH3CN (3,25 g, 51,7 mmol, 2,5 eq). A mistura foi agitada por 16 horas. À mistura foi adicionada solução aquosa saturada de carbonato de sódio (50 mL) e depois extraída com diclorometano/metanol 10/1 (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. Metil (2R,4S)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidina-2-carboxilato (2 g, 12,6 mmol, 61% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo.
[01370] Etapa B: (2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidina-2- carboxilato. A uma solução de metil (2R,4S)-4-hidroxi-1-metilpirrolidina-2- carboxilato (1,70 g, 107 mmol, 1,00 eq) em DMF (10,0 mL) foi adicionado imidazol (1,67 g, 24,6 mmol, 2,30 eq) e terc- butilclorodifenilsilano (3,52 g, 12,8 mmol, 3,29 mL, 1,20 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 10 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (20,0 mL), lavada com salmoura (3 × 30,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 1/10) para dar metil (2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidina-2-carboxilato (3,00 g, 7,24 mmol, 68% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 398.
[01371] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,63 (ddd, J = 1,6, 3,6, 7,6 Hz, 4H), 7,46 - 7,35 (m, 6H), 4,47 - 4,40 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,32 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,25 (dd, J = 6,0, 10,0 Hz, 1H), 2,42 (br d, J = 5,2 Hz, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,18 - 2,01 (m, 2H), 1,07 (s, 9H).
[01372] Etapa C: [(2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metanol. A uma solução de metil (2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1- metilpirrolidina-2-carboxilato (1,50 g, 3,77 mmol, 1,00 eq) em THF (10,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (573 mg, 15,1 mmol, 4,00 eq) a -40°C. Após agitada a -40°C por 1 hora, a mistura foi extinta com água (0,50 mL), solução de NaOH (15,0%, 1,00 mL), água (1,50 mL). O precipitado formado foi filtrado e a torta de filtro foi lavada com acetato de etila (40,0 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila 1/10) para dar [(2R,4S)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metanol (1,20 g, 3,18 mmol, 84% de rendimento) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 370.
[01373] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,67 - 7,62 (m, 4H), 7,46 - 7,36 (m, 6H), 4,37 - 4,24 (m, 1H), 3,63 (dd, J = 3,2, 11,2 Hz, 1H), 3,35 (dd, J = 2,0, 10,8 Hz, 1H), 3,15 (dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 2,76 (br t, J = 8,0 Hz, 1H), 2,44 (dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,04 - 1,85 (m, 2H), 1,06 (s, 9H).
[01374] Etapa D: benzil (2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2R,4S)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (305 mg, 827 umol, 1,20 eq) em THF (5,00 mL) foram adicionados t-BuONa (132 mg, 1,38 mmol, 2,00 eq) a 0°C,
seguido por benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 0,40 g, 689 umol, 1,00 eq). Depois de agitar a 0°C por 0,5 h, a mistura foi diluída com acetato de etila (30,0 mL), lavada com água (1 × 20,0 mL), seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila = 1/3) para dar benzil (2S)-4-[2- [[(2R,4S)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,35 g, 328 umol, rendimento de 48%) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M/2+1]: 444.
[01375] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,24 - 8,18 (m, 1H), 7,90 - 7,84 (m, 1H), 7,69 - 7,59 (m, 5H), 7,52 - 7,48 (m, 2H), 7,44 - 7,36 (m, 12H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,42 - 4,36 (m, 1H), 4,32 (br dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,26 (br d, J = 6,8 Hz, 2H), 4,17 - 4,06 (m, 3H), 3,98 - 3,88 (m, 1H), 3,47 (br s, 1H), 3,29 (br d, J = 10,8 Hz, 3H), 3,16 (br dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 1H), 3,11 - 2,95 (m, 3H), 2,91 - 2,73 (m, 3H), 2,47 - 2,36 (m, 4H), 2,11 (ddd, J = 4,8, 8,4, 13,2 Hz, 1H), 1,95 - 1,82 (m, 1H), 1,06 (s, 9H).
[01376] Etapa E: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em metanol (40,0 mL) a -78°C por 0,5 h. Benzil (2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-benzil1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,32 g, 361 umol, 1,00 eq) e Pd/C (0,10 g, 10,0% de pureza) foi adicionado à mistura. Após agitar a 25°C sob H 2 a 15 psi por 1 hora, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,27 g, bruto) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M/2+1]: 377.
[01377] Etapa F: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)- 4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,27 g, bruto) e TEA (182 mg, 1,80 mmol, 250 uL) em diclorometano (2,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (45,3 mg, 359 umol) a 0°C. Após agitar a 25°C por 0,5 h, a mistura foi extinta com metanol (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila = 1/3) para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila (0,16 g, 171 umol, duas etapas 48% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 806.
[01378] Etapa G: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,16 g, 198 umol, 1,00 eq), KF (46,1 mg, 794 umol, 18,6 uL, 4,00 eq) e 18-crown-6 (210 mg, 794 umol, 4,00 eq) em THF (2,00 mL) foi agitada a 40°C por 12 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)/acetonitria]. A fração desejada foi coletada e ajustada em pH > 7 por bicarbonato de sódio saturado (2,00 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 30,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (Phenomenex Gemini 150*25mm * 10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 38%- 66%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4S)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-
il]acetonitrila (EXEMPLO 323, 36,3 mg, 63,9 umol, 32% de rendimento, 98,1% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 568.
[01379] SFC: “OJ-3S_3_5_40_3ML Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01380] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,25 - 8,18 (m, 1H), 7,91 - 7,83 (m, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 - 7,48 (m, 2H), 7,44 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,15 (d, J=7,2 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,46 - 6,35 (m, 1H), 5,84 (br d, J = 9,6 Hz, 1H), 5,20 - 4,53 (m, 1H), 4,47 (quin, J = 5,6 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,34 - 4,19 (m, 3H), 4,14 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,02 (br d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,63 (br s, 1H), 3,46 (br dd, J = 6,0, 9,6 Hz, 2H), 3,36 (br s, 2H), 3,12 (br s, 1H), 3,07 - 2,90 (m, 3H), 2,90 - 2,67 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,35 (dd, J = 5,2, 9,6 Hz, 1H), 2,14 - 2,04 (m, 1H), 2,04 - 1,96 (m, 1H).
EXEMPLO 324 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
Cs2CO3, tolueno, 90°C, 16 h, 45%
[01381] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)-2- [[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 65, 300 mg, 593 umol, 1,00 eq), 1- bromo-3-metoxi-2-metil-benzeno (239 mg, 1,19 mmol, 2 eq), Cs2CO3 (580 mg, 1,78 mmol, 3 eq), Pd2(dba)3 (109 mg, 119 umol, 0,2 eq) e RuPhos (83,1 mg, 178 umol, 0,3 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 16 horas sob atmosfera de N2.À mistura de reação foi adicionada H2O(1 × 200 ml) e acetato de etila (1 × 250 ml). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 200 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas até pH = 7 com solução de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (100 mL). Os extratos foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob vácuo. Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-
carboxilato (170 mg, 270 umol, 45% de rendimento, 99,2% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 626.
[01382] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,33 (m, 5H), 7,16 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,80 (br dd, J = 6,8, 11,6 Hz, 1H), 4,68 (br s, 1H), 4,45 (br dd, J = 4,4, 12,0 Hz, 1H), 4,21 - 4,08 (m, 3H), 4,05 (s, 2H), 3,94 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,67 - 3,56 (m, 1H), 3,32 (br d, J = 11,2 Hz, 3H), 3,24 - 3,01 (m, 3H), 2,95 - 2,67 (m, 8H), 2,32 - 2,10 (m, 5H), 2,00 (br s, 1H).
[01383] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)- 2-[[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (260 mg, 416 umol, 1,00 eq), Pd/C (130 mg, 10 % de pureza) e NH3 em MeOH (50 mL) foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 25°C por 1 h sob atmosfera de H2 à pressão de 15 psi. Depois disso, o catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (200 mg, 376 umol, 91% de rendimento, 92,4% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 492.
[01384] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-2-metil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-2-metil- fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 407 umol, 1,00 eq) e TEA (206 mg, 2,03 mmol, 283 uL, 5,00 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2- enoato (41,0 mg, 325 umol, 0,800 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 (5 mL) a
0°C, e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 50 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Acetato de etila/Metanol = 20/1 a 3/1). O resíduo foi purificado adicionalmente por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 48% - 78%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-metoxi-2- metil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 324, 35,2 mg, 63,6 umol, 16% de rendimento, 98,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 546.
[01385] Condição SFC: “Coluna OD-3S_3_40_3ML: Chiralcel OD-3 100x4,6mm I.D., Fase móvel 3um: 40% de metanol (0,05% de DEA) em Taxa de fluxo de CO2: 3 mL/min. Comprimento de onda: 220 nm”.
[01386] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,17 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,0, 1H) 6,68 (d, J = 8,4, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,46 - 6,34 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,10 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 4,20 - 4,09 (m, 2H), 4,06 (s, 2H), 4,02 - 3,92 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,59 (br s, 1H), 3,31 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,22 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,17 - 3,02 (m, 3H), 3,02 - 2,62 (m, 6H), 2,49 (s, 3H), 2,36 - 2,25 (m, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,13 - 1,99 (m, 1H), 1,91 - 1,70 (m, 2H).
EXEMPLO 325
2-(1-acriloil-4-(7-(7-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Pd2(dba)3, tolueno, 90°C, 5 h, 33% 0,5 h Duas etapas 25%
[01387] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2-cianofenil)-2-[[(2S)-1- metilpirolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 320 mg, 633 umol, 1 eq) e 2-bromobenzonitrila (230 mg, 1,27 mmol, 2 eq) em tolueno (30 mL) foi adicionado Cs 2CO3 (619 mg, 1,90 mmol, 3 eq), Ruphos (59,1 mg, 127 umol, 0,2 eq), Pd2(dba)3 (58,0 mg, 63,3 umol, 0,1 eq) em uma porção. A mistura foi desgaseificada e purgada com N 2 por 3 vezes, então, aquecida até 90°C e agitada por 5 horas. A mistura de reação foi diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (30 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (5 mL) e extraída com acetato de etila (100 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2-cianofenil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazina-1-carboxilato (139 mg, 210 umol, 33% de rendimento, 91,5% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 607.
[01388] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,62 (dd, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 1H), 7,42 - 7,33 (m, 5H), 7,09 - 7,00 (m, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,38 (br dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,19 - 4,01 (m, 3H), 3,92 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,78 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,44 - 3,21 (m, 3H), 3,15 - 2,95 (m, 3H), 2,85 - 2,61 (m, 4H), 2,49 (s, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,12 - 2,00 (m, 1H), 1,92 - 1,72 (m, 3H).
[01389] Etapa B: 2-[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]benzonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2-cianofenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (160 mg, 264 umol, 1 eq) em MeOH (12 mL) foi adicionado NH3•MeOH (20 mL) e Pd/C (20 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi utilizado diretamente na próxima etapa sem purificação. Composto 2-[4-[(3S)-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]benzonitrila (119 mg, bruto) foi obtido como um sólido verde. LCMS [ESI, M+1]: 473,
[01390] Etapa C: 2-[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7- il]benzonitrila. A uma mistura de 2-[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]benzonitrila (119 mg, bruto) e prop-2-enoil prop-2-enoato (31,8 mg, 252 umol) em DCM (5 mL) foi adicionado TEA (127 mg, 1,26 mmol, 175 uL) em porção a 0°C sob N 2. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 (5 mL) saturado a 0°C e, em seguida, extraída com DCM (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (15 mL x 1), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 43% - 73%, 12 min.). Composto do título 2-[4-[(3S)-3- (cianometil)-4-prop-2-enoil-piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]benzonitrila (EXEMPLO 325, 35,1 mg, 65,1 umol, duas etapas 25% de rendimento, 97,5% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 527.
[01391] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,10 - 7,00 (m, 2H), 6,59 (br s, 1H), 6,45 - 6,34 (m, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,38 (dd, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,21 - 4,08 (m, 2H), 3,99 (br d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,86 - 3,52 (m, 2H), 3,39 (br s, 2H), 3,18 - 2,99 (m, 3H), 2,97 - 2,59 (m, 5H), 2,49 (s, 3H), 2,37 - 2,21 (m, 1H), 2,17 - 1,98 (m, 1H), 1,94 - 1,79 (m, 2H).
EXEMPLO 326 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(7-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
Dioxano 88% 20 °C, 0,5 h Cs2CO3, 76% tolueno, 70°C, 12 h, 51%
[01392] Etapa A: metil-3,4-di-hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato. A uma solução de 7-metiltetralin-1-ona (2,5 g, 15,6 mmol, 1,0 eq) em DCM (40 mL) foi adicionado DIEA (6,05 g, 46,8 mmol, 8,15 mL, 3,0 eq) e Tf2O (6,60 g, 23,4 mmol, 3,86 mL, 1,5 eq) em porções a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 0 - 20°C por 3 horas sob N2. Após conclusão, a reação foi adicionada água gelada (40 mL) lentamente; a camada orgânica foi separada e depois seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=1:0) para dar (7-metil-3,4-di- hidronaftalen-1-il) trifluorometanossulfonato (4,0 g, 13,7 mmol, 88% de rendimento) como óleo amarelo.
[01393] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,18 (s, 1H), 7,12 - 7,06 (m, 2H), 6,02 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 2,85 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 2,54 - 2,45 (m, 2H), 2,37 (s, 3H).
[01394] Etapa B: (7-metil-1-naftil) trifluorometanossulfonato. A uma solução de (7-metil-3,4-di-hidronaftalen-1-il)trifluorometanossulfonato (4,0 g, 13,7 mmol, 1,0 eq) em dioxano (80,0 mL) foi adicionado DDQ (6,21 g, 27,4 mmol, 2,0 eq), a mistura de reação foi agitada a 105°C por 12 horas. Após conclusão, a reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila=1:0). O produto (7-metil-1-naftil) trifluorometanossulfonato (3,4 g, 11,7 mmol, 86% de rendimento) foi obtido como óleo amarelo.
[01395] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,89 - 7,81 (m, 3H), 7,49 - 7,40 (m, 3H), 2,60 (s, 3H).
[01396] Etapa C: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 1,20 g, 2,37 mmol, 1,0 eq) e (7-metil-1-naftil) trifluorometanossulfonato (1,03 g, 3,56 mmol, 1,50 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (1,55 g, 4,75 mmol, 2,0 eq) e XPHOS-Pd-G3 (301 mg, 356 umol, 0,15 eq), a mistura foi agitada a 70°C por 12 horas sob N2. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (20,0 mL), em seguida, extraída com acetato de etila (2 × 15,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3/1 para acetato de etila: Metanol=20:1). O produto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (820 mg, 1,22 mmol, 51% de rendimento, 95,9% de pureza) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[01397] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (790 mg, 1,22 mmol, 1,0 eq) em MeOH (15,0 mL) foi adicionado NH3•MeOH (1,22 mmol, 15,0 mL, 1,0 eq) e Pd/C (500 mg, 10% de pureza), a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 Psi) a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de Celite e a torta de filtro foi lavado com DCM (2 × 20 mL), o filtrado foi concentrado. O produto 2-[(2S)-4-[7- (7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (490 mg, 934 umol, 76% de rendimento, 97,5% de pureza) foi obtido como sólido branco que foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[01398] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (490 mg, 958 umol, 1,0 eq) em DCM (8,0 mL) foi adicionado DIEA (495 mg, 3,83 mmol, 667 uL, 4,0 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (121 mg, 958 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (5,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 de base, Acetato de etila/Metanol=20/1), então, o produto bruto obtido foi concentrado e repurificado por HPLC-prep ((coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 57%-87%, 12 min.), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. Composto do título 2- [(2S)-4-[7-(7-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 326, 133 mg, 235 umol, 25% de rendimento, 99,6% pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01399] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,00 (s, 1H), 7,78 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 - 7,32 (m, 2H), 7,13 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,69 - 6,49 (m, 1H), 6,42 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,85 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,20 - 4,52 (m, 1H), 4,42 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,36 - 4,24 (m, 2H), 4,22 - 4,10 (m, 2H), 4,06 - 3,95 (m, 2H), 3,76 - 3,22 (m, 4H), 3,21 - 3,07 (m, 2H), 3,04 -
2,63 (m, 5H), 2,56 (s, 3H), 2,51 (s, 3H), 2,35 - 2,26 (m, 1H), 2,14 - 2,02 (m, 1H), 1,92 - 1,75 (m, 3H).
EXEMPLO 327 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-metoxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 25 °C, 0,5 h 93%
[01400] Etapa 1:1-terc-butil 2-metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2- dicarboxilato. A uma solução de 1-terc-butil 2-metil(2S,4R)-4-hidroxipirrolidina- 1,2-dicarboxilato (9 g, 36,7 mmol, 1 eq) em CH3CN (150 mL) foi adicionado Ag2O (25,5 g, 110 mmol, 3 eq) e CH3I (54,3 g, 383 mmol, 23,8 ml, 10,4 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtro foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 20/1 a 3:1). O composto 1-terc-butil 2-metil (2S,4R)- 4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (9 g, 34,7 mmol, 95% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
[01401] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,94 - 3,79 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 3,2, 11,2 Hz, 1H), 3,44 - 3,34 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 2,92 - 2,53 (m, 2H), 2,40 - 2,25 (m, 4H),, 2,12 - 1,99 (m, 1H), 1,89 - 1,79 (m, 1H).
[01402] Etapa 2: [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol. A uma solução de 1-terc-butil 2-metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (5 g, 19,28 mmol, 1 eq) em THF (100 mL) foi adicionado LiAlH4 (2,20 g, 57,8 mmol, 3 eq). A mistura foi agitada a 80°C por 2 horas. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa de Na2SO4 saturada (6 mL). Então, a mistura foi filtrada e o filtro foi concentrado. O composto [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (1,8 g, 12,4 mmol, 64% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor e usado na próxima etapa diretamente sem purificação.
[01403] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 4,43 - 4,23 (m, 1H), 3,45 - 3,90 (m, 1H), 3,78 - 3,69 (m, 3H), 3,68 - 3,43 (m, 2H), 3,32 (s, 3H), 2,43 - 2,24 (m, 1H), 2,12-1,95 (m, 1H), 1,52 - 1,33 (m, 9H).
[01404] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metanol (600 mg, 4,13 mmol, 3 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)-4- [2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (800 mg, 1,38 mmol, 1 eq) em THF (10 mL) foi adicionado t-BuONa (397 mg, 4,13 mmol, 3 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e lavada com água (20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/MeOH=200/1 a 20:1). Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (910 mg, 1,28 mmol, 93% de rendimento, 93% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 662.
[01405] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em MeOH (80 mL) a -60°C por 10 minutos. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (850 mg, 1,28 mmol, 1 eq) em MeOH (30 mL) foi adicionado acima NH3•MeOH (20 mL) e Pd/C seco (500 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtro foi concentrado. Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (620 mg, 1,18 mmol, 91% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor e usado para a próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 528.
[01406] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (620 mg, 1,18 mmol, 1 eq) em diclorometano (10 mL) foi adicionado TEA (1,19 g, 11,7 mmol, 1,64 mL, 10 eq) a 0°C. Após adição, e prop-2-enoil-prop-2-enoato (118 mg, 940 umol, 0,8 eq) em diclorometano (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO 3 (1 mL). Então, diluída com água (20 mL) e extraída com diclorometano (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL),
secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, EA/MeOH=100/1 a 10:1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05 % v/v) - ACN]; B%: 45% - 75%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[2- [[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (101 mg, 167 umol, 14% de rendimento, 96,6% de pureza) foi obtido como um sólido branco por liofilização. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01407] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[01408] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,26 - 8,17 (m, 1H), 7,91 - 7,82 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,41 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,21 - 4,53 (m, 1H), 4,42 (dd, J = 4,4, 10,4 Hz, 1H), 4,34 - 4,17 (m, 3H), 4,13 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 4,04 - 3,93 (m, 2H), 3,70 - 3,42 (m, 3H), 3,31 (s, 5H), 3,22 - 2,69 (m, 7H), 2,48 (s, 3H), 2,33 (dd, J = 5,6, 9,6 Hz, 1H), 2,14 - 2,04 (m, 1H), 2,02 - 1,91 (m, 1H).
EXEMPLO 328
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 100°C, 18 hrs, 12% 0,5 h
[01409] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1,0 g, 1,98 mmol, 1,0 eq) e 1-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno (2,88 g, 11,9 mmol, 6,0 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (1,29 g, 3,96 mmol, 2,0 eq), RuPhos (185 mg, 396 umol, 0,2 eq) e P2(dba)3 (272 mg, 297 umol, 0,15 eq), a mistura foi agitada a 100°C por 18 horas sob N2. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (30,0 mL), em seguida, extraída com acetato de etila (2 × 20,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3/1 para Acetato de etila: Metanol=20:1). O produto obtido foi, em seguida, purificado por flash de fase reversa novamente (C18, 0,1% FA em MeCN), o produto obtido foi ajustado com NaHCO3 sólido até pH~7, a mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 15,0 mL), e a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto benzil (2S)-2-
(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il] metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (160 mg, 236 umol, 12% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como óleo marrom. LCMS [ESI, M+1]: 668.
[01410] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometetil) fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]fenil]-2-[[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il)]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (460 mg, 689 umol, 1,0 eq) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd/C (300 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (10 mL), a suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 10 min. Após conclusão, a reação foi filtrada através de uma almofada de Celite e o filtrado foi concentrado para dar 2-[(2S)-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (320 mg, 591 umol, 86% de rendimento, 98% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 534.
[01411] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil) fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (320 mg, 599 umol, 1,0 eq) em DCM (8,0 mL) foi adicionado DIEA (310 mg, 2,40 mmol, 418 uL, 4,0 eq) e prop- 2-enoil prop-2-enoato (75,6 mg, 599 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (5,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 de base, Acetato de etila/Metanol=20/1), então, o produto obtido foi concentrado e purificado novamente por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 51%-81%,
12min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (86,8 mg, 145 umol, 24% de rendimento, 98% pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 588.
[01412] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,55 - 7,45 (m, 1H), 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,02 - 6,91 (m, 1H), 6,68 - 6,53 (m, 1H), 6,41 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,85 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,11 - 4,52 (m, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 1H), 4,14 - 4,07 (m, 3H), 3,98 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,72 - 3,52 (m, 1H), 3,42 - 3,25 (m, 2H), 3,23 - 2,58 (m, 9H), 2,49 (s, 3H), 2,35 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,01 (m, 1H), 1,91 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 329 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
0,5 h Duas etapas 55%
[01413] Inserir: [(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2- il]metanol. Uma mistura de [(2R)-pirrolidin-2-il]metanol (0,50 g, 4,94 mmol, 481 uL, 1,00 eq), 2-bromoetoxi-terc-butil-dimetil-silano (1,18 g, 4,94 mmol, 1,00 eq) e K2CO3 (3,42 g, 24,7 mmol, 5,00 eq) em acetonitrila (30,0 mL) foi agitada a 83°C por 12 horas. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 10/1) para dar [(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol (0,50 g, 1,93 mmol, 39% de rendimento) como um óleo incolor.
[01414] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3.70 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,60 (dd, J = 3,6, 10,8 Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 3,6, 10,8 Hz, 1H), 3,20 (td, J = 4,4, 9,2 Hz, 1H), 2,89 (td, J = 6,4, 12,8 Hz, 1H), 2,74 - 2,65 (m, 1H), 2,50 (td, J = 5,2, 12,8 Hz, 1H), 2,42 - 2,32 (m, 1H), 1,92 - 1,81 (m, 1H), 1,78 - 1,66 (m, 3H), 0,90 (d, J = 0,8 Hz, 9H), 0,07 (d, J = 0,4 Hz, 6H).
[01415] Etapa A: benzil (2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol (344 mg, 1,33 mmol, 1,10 eq) em THF (10,0 mL) foi adicionado t-BuONa (232 mg, 2,41 mmol,
2,00 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 0,70 g, 1,21 mmol, 1,00 eq) a 0°C. Depois de agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura foi diluída com acetato de etila (10,0 mL), lavada com água (1 × 10,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, acetato de etila/éter de petróleo = 3/1) para dar benzil (2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (0,60 g, 704 umol, 58% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 776.
[01416] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,23 - 8,18 (m, 1H), 7,90 - 7,83 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,46 - 7,34 (m, 6H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,70 (br s, 1H), 4,34 (br dd, J = 4,2, 10,6 Hz, 1H), 4,30 - 4,20 (m, 2H), 4,17 - 3,89 (m, 4H), 3,75 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,49 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,38 - 3,13 (m, 4H), 3,10 - 2,90 (m, 4H), 2,89 - 2,70 (m, 3H), 2,63 - 2,52 (m, 1H), 2,41 - 2,31 (m, 1H), 2,04 - 1,94 (m, 1H), 1,87 - 1,73 (m, 3H), 0,88 (s, 9H), 0,05 (d, J = 1,2 Hz, 6H).
[01417] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em metanol (50,0 mL) a -78°C por 10 minutos. Benzil (2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,60 g, 773 umol, 1,00 eq) e Pd/C (0,1 g, 10% de pureza) foram adicionados à solução acima. Depois de agitada a 25°C por 1 hora sob H2 a 15 psi, o catalisador foi filtrado e a torta de filtro foi lavada com THF (10,0 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-
il]acetonitrila (0,50 g, bruto) como um amarelo óleo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M/2+1]: 321.
[01418] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil] oxietil]pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (0,50 g, bruto) e TEA (394 mg, 3,89 mmol, 542 uL) em diclorometano (5,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (98,2 mg, 779 umol) a -40°C. Após agitação a 25°C por 1 hora, a mistura foi extinta com bicarbonato de sódio saturado (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 10/1) para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila (0,35 g, 427 umol, duas etapas de 55% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 696.
[01419] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. Uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (0,35 g, 503 umol, 1,00 eq), KF (146 mg, 2,51 mmol, 58,9 uL, 5,00 eq) e 18-CROWN-6 (665 mg, 2,51 mmol, 5,00 eq) em THF (5,00 mL) foi agitada a 40°C por 12 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)/acetonitrila] e HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm * 10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 45% - 75%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-(2- hidroxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-
4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 329, 146 mg, 245 umol, 49% de rendimento, 97,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:582.
[01420] Condição SFC: "Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3 um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm".
[01421] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ =8,29 - 8,18 (m, 1H), 7,95 - 7,82 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,46 - 6,31 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,19 - 4,47 (m, 1H), 4,38 - 4,22 (m, 3H), 4,21 - 4,09 (m, 2H), 4,02 (br d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,71 - 3,57 (m, 2H), 3,53 - 3,27 (m, 3H), 3,22 - 2,76 (m, 9H), 2,62 (td, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,41 - 2,28 (m, 1H), 2,11 - 1,95 (m, 1H), 1,89 - 1,77 (m, 3H).
EXEMPLO 330 2-[(2S)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila
Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12 h, 30%
[01422] Inserir: 1-bromo-3-metoxi-2-(trifluorometil)benzeno. A uma solução de MeOH (264 mg, 8,23 mmol, 333 uL, 2,00 eq ) em DMF (25,0 mL) foi adicionado NaH (329 mg, 8,23 mmol, 60% de pureza em óleo mineral, 2,00 eq). A solução foi misturada à temperatura ambiente (25°C) por 30 minutos, tempo após o qual 1-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno (1,00 g, 4,12 mmol, 1,00 eq) foi adicionado. A solução foi, então, agitada a 25°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (50 mL) e extraída com EtOAc (2 × 50 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 1/0 a 100/1) para dar 1-bromo-3-metoxi-2- (trifluorometil)benzeno (880 mg, 3,11 mmol, 75% de rendimento, 90,0% pureza) como um óleo incolor.
[01423] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,34 - 7,27 (m, 2H), 6,99 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H).
[01424] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato
(Intermediário 65, 550 mg, 1,09 mmol, 1,00 eq), 1-bromo-3-metoxi-2- (trifluorometil)benzeno (416 mg, 1,63 mmol, 1,50 eq), RuPhos (152 mg, 326 umol, 0,30 eq), Cs2CO3 (1,06 g, 3,26 mmol, 3,00 eq) e Pd2(dba)3 (149 mg, 163 umol, 0,15 eq) em tolueno (30,0 mL) foi desgaseificado e, em seguida, aquecido até 90°C por 12 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (10 mL) e extraído com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas coletadas foram neutralizadas com solução saturada de bicarbonato de sódio, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 100 mL). As camadas orgicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 321 umol, 30% de rendimento, 94,9% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 680.
[01425] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-metoxi-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-dihidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 338 umol, 1,00 eq) em MeOH (4,00 mL) foi adicionado NH3/MeOH (7 M, 4,00 mL), Pd/C (70,0 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, o catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado para dar 2-[(2S)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 242 umol, 72% rendimento, 88,1% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 546.
[01426] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-[3-metoxi-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 242 umol, 1,00 eq) e TEA (122 mg, 1,21 mmol, 168 uL, 5,00 eq) em DCM (3,00 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (30,5 mg, 242 umol, 1,00 eq) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (0,1 mL) e água (2 mL). As camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 8 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC- prep (EtOAc/MeOH 7/1) e, então, HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 50% - 80%, 12 min.) e liofilizado para dar 2-[(2S)-4-[7-[3-metoxi-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 330, 28,2 mg, 45,6 umol, 19% de rendimento, 96,8% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 600.
[01427] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OD-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[01428] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,42 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,46 - 6,34 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,37 (dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,21 - 4,02 (m, 4H), 4,01 - 3,77 (m, 5H), 3,75 - 3,21 (m, 3H), 3,20 - 2,98 (m, 3H), 2,97 - 2,56 (m, 5H), 2,48 (s, 3H), 2,35 - 2,23 (m, 1H), 2,12 - 1,98 (m, 1H), 1,91 - 1,72 (m, 3H).
EXEMPLO 331
2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
[01429] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (700 mg, 1,16 mmol, 1,00 eq, 2 HCl) e TEA (1,76 g, 17,4 mmol, 2,42 mL, 15,0 eq) em DCM anidro (17,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (146 mg, 1,16 mmol, 1,00 eq) a 0°C. A mistura foi agitada por 1 hora a 25°C. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (1 mL) e água (10 mL). A fase aquosa separada foi extraída com EtOAc (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 2/1 a 0/1) e, em seguida, HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 52%-82%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-
il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 331, 122 mg, 205 umol, 18% de rendimento, 98,5% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:586.
[01430] Condição SFC: Coluna: Chiralpak AD-100 3 x 4,6 mm I.D., 3 um, fase móvel: 40% iso-propanol (0,05% de DEA) na Taxa de fluxo de CO2: 3 mL/min. Comprimento de onda: 220 nm.
[01431] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 13,2 Hz, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,45 - 6,33 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,49 - 4,30 (m, 2H), 4,22 - 3,66 (m, 5H), 3,63 - 3,32 (m, 2H), 3,32 - 2,97 (m, 5H), 2,91 - 2,52 (m, 4H), 2,48 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,36 - 2,21 (m, 1H), 2,12 - 1,96 (m, 1H), 1,86 - 1,70 (m, 3H).
EXEMPLO 332 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, 0,5 h tolueno, 80°C, 0,5 h, rendimento 55% Duas etapas rendimento: 10%
[01432] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- (2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc- butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (450 mg, 751 umol, 1,0 eq) e [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (218 mg, 1,50 mmol, 2,0 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado t-BuONa (144 mg, 1,50 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 min. A mistura de reação foi extinta por adição de H2O (10,0 mL) a 20°C e a mistura de reação foi extraída com EA (20,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/1 a EA/MeOH = 10/1). O produto terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,30 g, 413 umol, 55% de rendimento, 93,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 680.
[01433] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (270 mg, 397 umol, 1,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,0 mmol, 2,0 mL, 68,1 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 10 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto 2-[(2S)-4- [7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, bruto, 2TFA) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 580.
[01434] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, 371 umol, 1,0 eq, 2TFA) em DCM (3,0 mL) foi adicionado DIEA (480 mg, 3,71 mmol, 647 uL, 10,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (10,0 mL) a 20°C e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50%-80%, 12 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilização. Composto do título 2- [(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (27,6 mg, 43,5 umol, duas etapas de 10% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 634.
[01435] 1H NMR (400MHz, Clorofórmio-d) δ = 7,44 - 7,37 (m, 1H), 7,32 - 7,40 (m, 1H) 7,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,57 (br, d, J = 14,1 Hz, 1H), 6,44 - 6,37 (m, 1H), 5,84 (br, d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,1 (br, s, 1H), 4,45 - 4,35 (m, 1H), 4,19 (br, dd, J = 5,9, 10,9 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H), 4,00 - 3,90 (m, 2H), 3,75 - 3,4 (m, 2H),
3,40- 3,00 (m, 8H), 3,00 - 2,65 (m, 5H), 2,45 (s, 3H), 2,38 - 2,28 (m, 1H), 2,15 - 2,00 (m, 1H), 2,00 - 1,90 (m, 1H).
EXEMPLO 333 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 25 °C, 0,5 h 90°C, 6 h, 67% 93%
[01436] Inserir: (7-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato. A uma solução de 7-fluoronftalen-1-ol (980 mg, 6,04 mmol, 1 eq) e DIEA (2,34 g, 18,1 mmol, 3,16 mL, 3 eq) em DCM (40 mL) foi adicionado Tf2O (2,56 g , 9,07 mmol, 1,50 mL, 1,5 eq) gota a gota a -5°C. A mistura foi agitada a 25°C por 3 horas. Então, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 10/1). O composto (7-
fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (1,63 g, 5,54 mmol, 92% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
[01437] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,92 (dd, J = 5,6, 9,0 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 2,4, 9,9 Hz, 1H), 7,56 - 7,50 (m, 1H), 7,49 - 7,43 (m, 1H), 7,42 - 7,34 (m, 1H).
[01438] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 330 mg, 463 umol, 1 eq), (7-fluoro-1-naftil) trifluorometanossulfonato (273 mg, 927 umol, 2 eq), Pd2(dba)3 (84,9 mg, 92,7 umol, 0,2 eq), RuPhos (64,9 mg, 139 umol, 0,3 eq) e Cs2CO3 (453 mg, 1,39 mmol, 3 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 6 horas sob atmosfera de N 2. À mistura de reação foi adicionada H2O (1 × 200 mL) e acetato de etila (1 × 250 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 200 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas até pH = 7 com solução saturada de NaHCO3 e, em seguida, extraídas com acetato de etila (1 × 200 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(7- fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 308 umol, 100% de pureza, 67% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 650.
[01439] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,80 - 7,70 (m, 2H), 7,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,36 - 7,24 (m, 6H), 7,24 - 7,16 (m, 1H), 7,10 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,19 - 5,09 (m, 2H), 4,62 (br s, 1H), 4,51 (dd, J = 6,0, 11,2 Hz, 1H), 4,26 (dd, J =
5,6, 11,3 Hz, 1H), 4,15 (s, 2H), 4,11 - 3,99 (m, 2H), 3,90 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,38 - 3,11 (m, 5H), 3,08 - 2,95 (m, 2H), 2,93 - 2,71 (m, 3H), 2,70 - 2,62 (m, 1H), 2,60 (s, 3H), 2,53 - 2,42 (m, 1H), 2,15 - 2,02 (m, 1H), 1,96 - 1,75 (m, 3H).
[01440] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (810 mg, 1,25 mmol, 1 eq), Pd/C (400 mg, 10% de pureza) e NH3 em MeOH (7 M, 150 mL) foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 25°C por 0,5 h sob atmosfera de H2 à pressão de 15 psi. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo. 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro- 1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (600 mg, 1,16 mmol, 93% de rendimento, 99,4% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01441] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,89 - 7,79 (m, 2H), 7,61 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,40 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,24 (m, 1H), 7,19 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 5,6, 10,9 Hz, 1H), 4,30 - 4,19 (m, 3H), 4,05 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,88 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,37 - 3,21 (m, 4H), 3,19 - 3,09 (m, 2H), 3,06 - 2,84 (m, 5H), 2,61 - 2,53 (m, 5H), 2,47 - 2,36 (m, 1H), 2,19 - 2,08 (m, 1H), 1,97 - 1,76 (m, 3H).
[01442] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (600 mg, 1,16 mmol, 1 eq) e TEA (589 mg, 5,82 mmol, 810 uL, 5 eq) em DCM (30 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (117 mg, 931 umol, 0,8 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução de NaHCO3 saturada (10 mL) a 0°C e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 50 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Acetato de etila/Metanol = 20/1 a 3/1). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: waters xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 50% - 80%, 10 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 333, 139 mg, 244 umol, 21% rendimento, 100% pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01443] Condição SFC: "Coluna: Chiralpak AD-3 100 × 4.6mm I.D., 3um, fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm".
[01444] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,92 - 7,80 (m, 2H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,33 - 7,25 (m, 1H), 7,20 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,62 (br s, 1H), 6,47 - 6,37 (m, 1H), 5,85 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,27 - 4,52 (m, 1H), 4,41 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,25 (br s, 2H), 4,22 - 4,10 (m, 2H), 4,09 - 3,87 (m, 2H), 3,77 - 3,25 (m, 2H), 3,24 - 3,06 (m, 3H), 3,05 - 2,59 (m, 6H), 2,50 (s, 3H), 2,38 - 2,23 (m, 1H), 2,15 - 2,00 (m, 1H), 1,99 - 1,81 (m, 3H).
EXEMPLO 334
2-(1-acriloil-4-(7-(7-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila HCl.dioxano Dioxano 25°C, 2h t-BuONa, 0,5 h tolueno, 0-25°C, 10 min, 51% 0 – 25 °C, 0,5 h Duas etapas 16%
[01445] Etapa A: terc-butil (2R)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de NaH (1,11 g, 27,8 mmol, 60% de pureza, 1,2 eq) em THF (80 mL) foi adicionada uma solução de terc-butil (2R)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1- carboxilato (4,67 g, 23,2 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. BnBr (5,95 g, 34,8 mmol, 4,13 mL, 1,5 eq) foi adicionado gota a gota a 0°C e a mistura foi agitada a 25°C por 4 horas. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de cloreto de amônio (20 mL) a 0°C e depois diluída com acetato de etila (2 × 100 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (1 x 150 mL) e salmoura (1 x 150 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 2/1). Composto terc-butil (2R)-2- (benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato (5,03 g, 17,3 mmol, 74% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
[01446] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,37 - 7,14 (m, 5H), 4,47 (br s, 2H), 4,07 - 3,77 (m, 1H), 3,67 - 3,07 (m, 4H), 2,08 - 1,68 (m, 4H), 1,38 (s, 9H).
[01447] Etapa B: (2R)-2-(benziloximetil)pirrolidina. A uma mistura de terc- butil (2R)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato (4 g, 13,7 mmol, 1 eq) em dioxano (80 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 120 mL, 35 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. O composto (2R)-2-(benziloximetil)pirrolidina (3,13 g, HCl bruto) foi obtido como um sólido branco.
[01448] 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 9,76 (br s, 1H), 9,11 (br s, 1H), 7,43 - 7,23 (m, 5H), 4,55 (s, 2H), 3,75 - 3,61 (m, 3H), 3,13 (br d, J = 4,4 Hz, 2H), 2,07 - 1,76 (m, 3H), 1,66 - 1,56 (m, 1H).
[01449] Etapa C: (2R)-2-(benziloximetil)-1-etil-pirrolidina. A uma mistura de (2R)-2-(benziloximetil)pirrolidina (3 g, bruto, HCl) e iodoetano (2,05 g, 13,2 mmol, 1,05 mL) em CH3CN (65 mL) foi adicionado K2CO3 (1,82 g, 13,2 mmol) em porções a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 h, depois aquecida até 78°C e agitada por 11 horas. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (30 mL × 2), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a Acetato de etila/Metanol = 5/1). Composto (2R)-2-(benziloximetil)-1-etil- pirrolidina (2,41 g, 10,4 mmol, duas etapas 79% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como um óleo marrom.
[01450] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,30 - 7,18 (m, 5H), 4,47 (s, 2H), 3,46 (dd, J = 4,8, 9,2 Hz, 1H), 3,30 (dd, J = 6,4, 9,2 Hz, 1H), 3,10 (ddd, J = 2,4, 6,8, 8,8 Hz, 1H), 2,88 (qd, J = 7,6, 12,4 Hz, 1H), 2,62 - 2,49 (m, 1H), 2,24 (qd, J = 7,2, 12,4 Hz, 1H), 2,14 - 2,03 (m, 1H), 1,92 - 1,80 (m, 1H), 1,78 - 1,51 (m, 3H), 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[01451] Etapa D: [(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metanol. A uma solução de (2R)- 2-(benziloximetil)-1-etil-pirrolidina (2 g, 9,12 mmol, 1 eq) em MeOH (60 mL) foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 30 mL, 13,2 eq) para ajustar o pH para 3 ~ 4 e, em seguida, Pd(OH)2/C (300 mg, 20% de pureza) foi adicionado sob N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 25°C por 12 horas. O catalisador foi filtrado e concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. Composto [(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metanol (1,68 g, bruto, HCl) foi obtido como um sólido amarelo.
[01452] 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 3,88 (dd, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 3,75 - 3,45 (m, 4H), 3,21 - 3,08 (m, 2H), 2,30 - 1,82 (m, 4H), 1,37 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[01453] Etapa E: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. [(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metanol (334 mg, 2,01 mmol, 1,95 eq, HCl) foi dissolvido em solução saturada de carbonato de sódio (5 mL) e depois extraído acetato de etila (2 × 10 mL). Os extratos foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob vácuo. A uma mistura de benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 600 mg, 1,03 mmol, 1 eq) e ao resíduo acima em tolueno (35 mL) foi adicionado t-BuONa (298 mg, 3,10 mmol, 3 eq) em porções a 0°C sob N2. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por
10 min. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e o PH ajustado para 8-9 com HCl 2M a 0°C, depois extraída com acetato de etila (20 mL × 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (15 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (3 mL) e extraída com acetato de etila (100 mL x 2). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1- etilpirrolidin -2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (350 mg, 526 umol, 51% de rendimento, 97,1% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[01454] Etapa F: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (305 mg, 472 umol, 1 eq) em MeOH (40 mL) e NH3•MeOH (20 mL) foi adicionado Pd/C (300 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C durante 0,5 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi utilizado na etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (240 mg, bruto) foi obtido como um sólido verde. LCMS [ESI, M+1]:
512.
[01455] Etapa G: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (240 mg, bruto) em DCM (10 mL) foi adicionado TEA (237 mg, 2,35 mmol, 326 uL), depois prop-2-enoil prop-2-enoato (59,2 mg, 469 umol) foi adicionado numa porção a 0°C sob N2. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta adicionando solução de NaHCO3 saturada (2 mL) a 0°C e, em seguida, extraída com DCM mL (20 × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Éter de petróleo/Acetato de etila = 50/1 para Acetato de etila/Metanol = 5/1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 59% - 89%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2R)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 334, 44,2 mg, 75,2 umol, duas etapas, 16% de rendimento, 96,4% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01456] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,24 - 8,18 (m, 1H), 7,90 - 7,83 (m, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,47 - 6,35 (m, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,39 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,35 - 4,21 (m, 2H), 4,19 - 4,09 (m, 2H) , 4,02 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,47 (br s, 2H), 3,34 (br s, 2H), 3,26 - 3,07 (m, 3H), 3,05 - 2,63 (m, 5H), 2,44 (br dd, J = 6,8, 12,0 Hz, 1H), 2,26 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 2,12 - 1,94 (m, 1H), 1,80 (br d, J = 4,0 Hz, 4H), 1,15 (br t, J = 7,2 Hz, 3H).
EXEMPLO 335
2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 25°C, 10 0°C, 1 hora, 62% minutos 20°C, 1 hora 25-78°C, 23 horas, duas etapas 33% -30°C, 0,5 hora, duas etapas 28% -78°C, 1 hora, 88%
[01457] Etapa 1: metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-2-carboxilato. A uma solução de O1-terc-butil-O2-metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (5,00 g, 19,3 mmol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado TFA (7,70 g, 67,5 mmol, 5,0 mL, 3,50 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada. O produto metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-2- carboxilato (3,0 g, bruto, TFA) foi obtido como óleo amarelo.
[01458] Etapa 2: metil (2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidina-2-carboxilato. A uma solução de metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-2-carboxilato (3,0 g, 11,0 mmol, 1,0 eq, TFA) e K2CO3 (4,55 g, 32,9 mmol, 3,0 eq) em MeCN (30,0 mL) foi adicionado iodoetano (1,71 g, 11,0 mmol, 878 uL, 1,0 eq) em porções. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora e aquecida até 78°C, então, agitada a 78°C por 11 horas. Após conclusão, a mistura foi filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA=10:1 - EA:MeOH=10:1) para dar (2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidino-2-carboxilato (1,20 g, 6,41 mmol, duas etapas 33% de rendimento) como óleo amarelo.
[01459] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,04 - 3,95 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,55 - 3,33 (m, 2H), 3,29 (s, 3H), 2,83 - 2,70 (m, 1H), 2,53 - 2,35 (m, 2H), 2,14 (dd, J = 5,6, 8,0 Hz, 2H), 1,09 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[01460] Etapa 3: [(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metanol. A uma solução de metil (2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidina-2-carboxilato (1,20 g, 6,41 mmol, 1,0 eq) em THF (15,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (730 mg, 19,2 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a -78°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com Na2SO4 saturado aquoso (0,30 mL) e filtrada, lavada com THF (10,0 mL). O líquido mãe foi concentrado. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA=10:1 - EA; MeOH=5:1) para dar [(2S,4R)-1-etil-4-metoxi- pirrolidin-2-il] metanol (600 mg, 3,77 mmol, 59% de rendimento) como óleo amarelo.
[01461] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 3,92 - 3,83 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 3,2, 10,8 Hz, 1H), 3,49 - 3,35 (m, 2H), 3,30 (s, 3H), 2,89 - 2,76 (m, 2H), 2,40 - 2,27 (m, 2H), 2,07 - 1,97 (m, 1H), 1,93 - 1,82 (m, 1H), 1,08 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[01462] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metanol (266 mg, 1,67 mmol, 2,00 eq) em
THF (5,0 mL) foi adicionado t-BuONa (241 mg, 2,50 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Então, terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (500 mg, 835 umol, 1,0 eq) foi adicionado ao líquido acima. Após adição, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, à mistura foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, PE:EA=20:1 - EA:MeOH=10:1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (440 mg, 513 umol, 62% de rendimento, 81% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 694.
[01463] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,41 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,63 (br s, 1H), 4,42 (br dd, J = 4,4, 10,8 Hz, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 4H), 4,06 - 3,96 (m, 2H), 4,06 - 3,96 (m, 1H), 3,92 - 3,86 (m, 1H), 3,36 - 3,20 (m, 6H), 3,18 - 2,96 (m, 4H), 2,94 - 2,66 (m, 4H), 2,58 - 2,39 (m, 1H), 2,37 - 2,30 (m, 1H), 2,14 - 2,07 (m, 1H), 2,02 - 1,91 (m, 1H), 1,53 (s, 9H), 1,13 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
[01464] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1- etil-4-metoxi-pirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (390 mg, 455 umol, 1,0 eq) em DCM (1,00 mL) foi adicionado TFA (1,54 g, 13,5 mmol, 1,0 mL, 29,7 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 10 minutos. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-
5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (400 mg, bruto, 2 TFA) foi obtido como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 594.
[01465] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1- etil-4-metoxi-pirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (400 mg, 487 umol, 1,0 eq , 2 TFA) em DCM (2,0 mL) foi adicionado DIEA (629 mg, 4,87 mmol, 847 uL, 10,0 eq) a -30°C. Depois prop-2-enoil prop-2-enoato (92,0 mg, 730 umol, 1,50 eq) foi adicionado ao líquido acima a -30°C e a mistura foi agitada a -30°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (0,50 mL) e concentrada sob vácuo. O composto do título foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)- ACN]; B%: 50%-80%, 12min.) para dar 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-1-etil-4-metoxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 335, 120 mg, 182 umol, duas etapas, 28% de rendimento,99% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 648.
[01466] 1H NMR (400 MHz, Clorofórrmio-d) δ 7,42 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,68 - 6,55 (m, 1H), 6,42 (dd, J = 1,6, 16,4 Hz 1H), 5,85 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,20 - 4,51 (m, 1H), 4,42 (dd, J = 4,4, 10,8 Hz, 1H), 4,19 - 4,04 (m, 4H), 4,04 - 3,72 (m, 3H), 3,70 - 3,41 (m, 2H), 3,39 - 3,22 (m, 5H), 3,20 - 2,79 (m, 7H), 2,76 (br s, 1H), 2,50 - 2,40 (m, 1H), 2,33 (dd, J = 5,2, 10,0 Hz, 1H), 2,15 - 2,05 (m, 1H), 2,03 - 1,90 (m, 1H), 1,13 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
EXEMPLO 336
1-[(2R,5S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil-piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona 4,5 h Tolueno, 110°C, 5h, duas etapas 68% 0,5 h 0,5 h Três etapas 8,2%
[01467] Etapa A: terc-butil (2R,5S)-4-(7-benzil-2-cloro- 6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,5-dimetil-piperazina-1-carboxilato. Uma solução de 7-benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (2,70 g, 9,18 mmol, 1,00 eq), terc-butil (2R, 5S)-2,5-dimetilpiperazina-1-carboxilato (1,77 g, 8,26 mmol, 0,90 eq) e DIEA (2,37 g, 18,4 mmol, 3,20 mL, 2,00 eq) em NMP (30,0 mL) foi agitada a 100°C por 7 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (50,0 mL), lavada com salmoura (3 × 100 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1) para dar terc-butil (2R,5S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 2,5-dimetil-piperazina-1-carboxilato (2,80 g, 5,69 mmol, 62% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 472.
[01468] 1H NMR (400MHz, cloroórmio-d) δ = 7,40 - 7,29 (m, 5H), 4,45 - 4,19 (m, 2H), 3,71 - 3,61 (m, 4H), 3,54 - 3,43 (m, 3H), 3,41 - 3,36 (m, 1H), 2,81 - 2,67 (m, 2H), 2,64 - 2,49 (m, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,20 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,17 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
[01469] Etapa B: terc-butil (2R,5S)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil-piperazina-1- carboxilato. A uma solução de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (854 mg, 7,41 mmol, 880 uL, 2,50 eq) em THF (20,0 mL) foi adicionado NaH (237 mg, 5,93 mmol, 60,0% de pureza, 2,00 eq) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, terc-butil (2R,5S)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2,5- dimetil-piperazina-1-carboxilato (1,40 g, 2,97 mmol, 1,00 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 80°C por 4 horas. A mistura foi diluída com água (20,0 mL), extraída com acetato de etila (3 × 30,0mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura (1 × 40,0 mL) seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 1/10) para dar terc-butil (2R,5S)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil-piperazina-1- carboxilato (1,55 g, 2,56 mmol, 86% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 551.
[01470] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ =7,39 - 7,28 (m, 5H), 4,31 (br dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 2H), 4,16 - 4,08 (m, 1H), 3,72 - 3,62 (m, 4H), 3,61 - 3,56 (m, 1H), 3,52 - 3,43 (m, 2H), 3,38 (br s, 1H), 3,08 (br t, J = 8,0 Hz, 1H), 2,81 - 2,48
(m, 6H), 2,45 (s, 3H), 2,33 - 2,20 (m, 1H), 2,04 - 1,95 (m, 1H), 1,78 - 1,65 (m, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,17 (br d, J = 6,4 Hz, 6H).
[01471] Etapa C:terc-butilo (2R,5S)-2,5-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. NH3 foi borbulhado em metanol (150 mL) a -78°C por 15 min. terc-Butil (2R,5S)- 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil-piperazina-1-carboxilato (2,80 g, 5,08 mmol, 1,00 eq) e Pd/C (0,50 g, 10,0% de pureza) foi adicionado à mistura. Depois de agitada a 40°C por 5 horas sob H2 a 15 psi, a mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar terc-butil (2R,5S)-2,5-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,20 g, bruto) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 461.
[01472] Etapa D:terc-butil (2R,5S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil- piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2R,5S)-2,5-dimetil-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (1,00 g, bruto), 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (1,02 g, 3,26 mmol, 1,50 eq), RuPhos (203 mg, 434 pmol), Pd2(dba)3 (199 mg, 217 umol) e Cs2CO3 (2,12 g, 6,51 mmol) em tolueno (30,0 mL) foi agitada a 110°C por 5 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (20,0 mL), extraída com acetato de etila (3 × 40,0 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 × 50,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)/acetonitria]. A fração desejada foi coletada e ajustada para pH > 7 por bicarbonato de sódio saturado (5,00 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 30,0 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 × 30,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar terc-butil (2R,5S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil-
piperazina-1-carboxilato (1,06 g, 1,47 mmol, duas etapas 68% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M/2+1]: 347.
[01473] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,77 - 7,71 (m, 1H), 7,52 - 7,40 (m, 5H), 7,39 - 7,33 (m, 2H), 6,99 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,48 - 4,42 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,32 - 4,25 (m, 1H), 4,20 (br d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,16 - 4,09 (m, 1H), 3,76 (br s, 1H), 3,70 - 3,61 (m, 1H), 3,60 - 3,52 (m, 1H), 3,45 (br s, 2H), 3,24 (br s, 1H), 3,10 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,93 (br s, 1H), 2,80 - 2,61 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,33 - 2,25 (m, 1H), 2,12 - 2,03 (m, 1H), 1,91 - 1,76 (m, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,27 - 1,22 (m, 6H).
[01474] Etapa E: terc-butil (2R,5S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil- piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2R,5S)-4-[7-(3-benziloxi-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-2,5-dimetil-piperazina-1-carboxilato (0,90 g, 1,30 mmol, 1,00 eq) e Pd/C (0,10 g, 10,0% de pureza) em metanol (40,0 mL) foi agitada a 25°C por 1 hora sob H2 a 15 psi. A mistura foi filtrada e concentrada sob vácuo para dar terc-butil (2R,5S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil-piperazina-1-carboxilato (0,72 g, bruto) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 603.
[01475] Etapa F: 4-[4-[(2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol. Uma mistura de terc-butil (2R,5S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil- piperazina-1-carboxilato (0,70 g, bruto) e TFA (1,99 g, 17,42 mmol, 1,29 mL) em diclorometano (1,20 mL) foi agitada a 25°C por 0,5 h. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-[4-[(2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]naftalen-2-ol (849 mg, bruto, 2TFA) como um óleo amarelo e usada na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 503.
[01476] Etapa G: 1-[(2R,5S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5-dimetil- piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona. A uma solução de 4-[4-[(2S,5R)-2,5- dimetilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il] naftalen-2-ol (0,84 g, bruto, 2TFA) e TEA (1,16 g, 11,5 mmol, 1,60 mL) em diclorometano (3,00 mL) foram adicionados prop-2-enoil prop-2-enoato (102 mg, 805 umol) a -40°C. Após agitada a -40°C por 0,5 h, a mistura foi extinta com água (0,10 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% de TFA)-acetonitrila] e HPLC- prep (coluna: Phenomenex Luna Fenil-Hexil 150_30_5um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 45% - 75%, 3 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada para dar o composto do título 1-[(2R,5S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2,5- dimetil-piperazin-1-il]prop-2-en-1 -ona (EXEMPLO 336, 55,8 mg, 94,1 umol, três etapas, 8,2% de rendimento, 93,9% de pureza) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]:557.
[01477] SFC: "Coluna: Chiralpak AS-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm".
[01478] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,97 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,40 - 7,34 (m, 1H), 7,26 (dt, J = 1,6, 8,4 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,65 (br s, 1H), 6,61 - 6,43 (m, 1H), 6,39 - 6,26 (m, 1H), 5,73 (br t, J = 8,8 Hz, 1H), 4,83 (br s, 1H), 4,55 (br d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,43 - 4,04 (m, 4H), 3,91 (br d, J = 17,2 Hz, 1H), 3,77 - 3,26 (m, 5H), 3,19 (br t, J = 8,0 Hz, 1H),
3,06 - 2,68 (m, 3H), 2,63 (br s, 3H), 2,57 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,41 - 2,33 (m, 1H), 2,15 - 1,83 (m, 4H), 1,11 - 0,96 (m, 6H).
EXEMPLO 337 2-[(2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 6h, 40% 0 °C, 2,3 h 72% - 40 °C, 0,5 h Duas etapas 50%
[01479] Etapa 1: 1-(2-bromo-6-cloro-fenil) etanol. A um frasco de fundo redondo de 100 mL seco à chama equipado com uma barra de agitação magnética e sob N2 foi adicionado 2-bromo-6-cloro-benzaldeído (10,0 g, 45,6 mmol, 1 eq) e THF (100 mL). A mistura foi resfriada até 0°C e, em seguida, MeMgBr (3 M em Et2O, 22,8 mL, 1,5 eq) foi adicionado gota a gota por 20 min. A suspensão resultante foi agitada a 0°C por 2 h. A mistura de reação foi extinta por adição gota a gota de uma solução de NH4Cl aquosa saturado (10 mL). A mistura foi resfriada, derramada num funil de separação de 100 mL contendo água (150 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 10/1). Composto 1-(2-bromo-6-cloro-fenil) etanol (8,00 g, 32,6 mmol, 72% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M- 17]: 219.
[01480] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,46 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,31 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,07 - 6,96 (m, 1H), 5,68 - 5,44 (m, 1H), 3,24 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 1,61 (d, J = 4,4 Hz, 3H).
[01481] Etapa 2: 1-bromo-3-cloro-2-etil-benzeno. A uma mistura de 1-(2- bromo-6-cloro-fenil) etanol (8,00 g, 34,0 mmol, 1 eq) em DCE (150 mL) foi adicionado BF3.Et2O (14,5 g, 102 mmol, 12,6 mL, 3 eq) e Et3SiH (19,8 g, 170 mmol, 27,1 mL, 5 eq) em porções a 0°C. A mistura foi agitada a 50°C por 6 horas. A mistura de reação foi lavada com NaHCO3 saturado aquoso (2 × 75 mL) e salmoura saturada (1 × 75 mL), depois seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Éter de petróleo). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 65ACN% - 95ACN%, 30 min.; 60 % min.). Composto 1-bromo-3-cloro-2- etilbenzeno (1,50 g, 6,83 mmol, 20% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo.
[01482] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 300 mg, 636 umol, 1 eq), 1-bromo-3-cloro-2-etil-benzeno (279 mg, 1,27 mmol, 2 eq), Pd2(dba)3 (117 mg, 127 umol, 0,2 eq), RuPhos (89,1 mg, 191 umol, 0,3 eq) e Cs2CO3 (622 mg, 1,91 mmol, 3 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 6 horas sob atmosfera de N2.À mistura de reação foi adicionada H2O (1 × 200 mL) e Acetato de etila (1 × 250 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 200 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas até pH = 7 com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (1 × 200 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. terc-butil (2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (155 mg, 0,254 mmol, 100% de pureza, 40% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 610.
[01483] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,20 - 7,16 (m, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,07 - 7,03 (m, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 5,2, 10,6 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 1H), 4,09 - 3,95 (m, 4H), 3,91 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,26 (dd, J = 3,6, 13,7 Hz, 1H), 3,22 - 2,96 (m, 5H), 2,90 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 2,84 - 2,63 (m, 5H), 2,48 (s, 3H), 2,35 - 2,23 (m, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,83 - 1,70 (m, 3H), 1,52 (s, 9H), 1,22 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
[01484] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (310 mg, 508 umol, 1 eq) em DCM (600 uL) foi adicionado TFA (869 mg, 7,62 mmol, 564 uL, 15 eq) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 25°C por 1 h. Depois disso, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2-
[(2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (850 mg, bruto, 2 TFA) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 510.
[01485] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (850 mg, bruto, 2 TFA) e cloreto de prop-2-enoil (59,8 mg, 660 umol, 53,8 µL) em DCM (8 mL) foi adicionado TEA (514 mg, 5,08 mmol, 707 µL) em porção. A mistura foi agitada a -40°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta por solução saturada de NaHCO3 (2 mL) a 0°C e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 30 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3; Acetato de etila/Metanol = 20/1 a 3/1). O resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0.04% NH 3•H2O) - ACN]; B%: 65% - 95%, 10 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-cloro-2-etil-fenil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 337, 142 mg, 252 umol, duas etapas 50% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 564.
[01486] Condição SFC: “Coluna: Chiralpak AD-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01487] 1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ = 7,21 (s, 3H), 6,78 (dd, J = 10,4, 16,8 Hz, 1H), 6,15 (dd, J = 2,0, 16,8 Hz, 1H), 5,74 (dd, J = 2,0, 10,6 Hz, 1H), 4,84 (br s, 1H), 4,28 (dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,23 - 4,07 (m, 2H), 4,05 - 3,90 (m, 4H), 3,39 (br s, 1H), 3,27 (br dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 1H), 3,20 - 3,05 (m, 3H), 2,99
- 2,93 (m, 2H), 2,93 - 2,76 (m, 4H), 2,61 - 2,52 (m, 2H), 2,40 - 2,31 (m, 3H), 2,22 (q, J = 8,4 Hz, 1H), 2,00 - 1,87 (m, 1H), 1,77 - 1,54 (m, 3H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
EXEMPLO 338 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(8-fluoronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 100°C, 3h, 54%
[01488] Inserção: 1-bromo-8-fluoro-naftaleno. A uma solução de 1,8- dibromonaftaleno (2 g, 6,99 mmol, 1 eq) em THF (50 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexano, 4,20 mL, 1,5 eq) a - 78°C gota a gota. Após agitação por 10 minutos a -78°C, foi adicionada gota a gota uma solução de N- (benzenossulfonil)-N-fluoro-benzenossulfonamida (4,41 g, 13,9 mmol, 2 eq) em THF (10 mL). A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi extinta com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 50% - 75%, 25 min.). A mistura foi ajustada pH = 7 por adição de solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Foi obtido 1-bromo-8- fluoro-naftaleno (560 mg, 2,46 mmol, 35% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo.
[01489] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,81 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,49 - 7,39 (m, 1H), 7,31 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,23 (td, J = 0,8, 5,2 Hz, 1H).
[01490] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de 1-bromo-8-fluoro-naftaleno (310 mg, 1,38 mmol, 1,3 eq), terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 500 mg, 1,06 mmol, 1 eq), Cs2CO3 (863 mg, 2,65 mmol, 2,5 eq), RuPhos (98,9 mg, 212 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (194 mg, 212 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 100°C por 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. As frações desejadas foram ajustadas pH = 7 com solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraídas com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Composto terc- butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (370 mg, 570 umol, 54% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[01491] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,64 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,56 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,47 - 7,42 (m, 1H), 7,20 - 7,08 (m, 3H), 4,64 (br s, 1H), 4,47 - 4,27 (m, 2H), 4,23 - 4,14 (m, 2H), 4,11 - 3,82 (m, 3H), 3,81 - 3,65 (m, 1H), 3,44 - 3,23 (m, 2H), 3,19 - 3,07 (m, 2H), 3,02 - 2,79 (m, 3H), 2,77 – 2,66 (m, 2H), 2,56 (br s, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,34-2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,06 (m, 1H), 1,82 - 1,72 (m, 3H), 1,53 (s, 9H).
[01492] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (370 mg, 600 umol, 1 eq) em DCM (600 uL) foi adicionado TFA (1,03 g, 9,01 mmol, 667 uL, 15 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(8-fluoro- 1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (378 mg, 600 umol, 99% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[01493] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (261 mg, 506 umol, 1 eq, TFA) em DCM (5 mL) foi adicionado TEA
(512 mg, 5,07 mmol, 705 uL, 10 eq) a 0°C. Após adição, e prop-2-enoil prop-2- enoato (51,1 mg, 405 umol, 0,8 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (1 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 48% - 78%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-fluoro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 338, 93,5 mg, 163 umol, 32% de rendimento, 99,4% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[01494] Condição SFC: “Coluna OD-3_MeOH (DEA)_40_3mL-35T: Chiralcel OD-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: 40% de metanol (0,05% DEA) em CO2 Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01495] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 - 7,35 (m, 2H), 7,19-7,09 (m, 2H), 6,60 (br s, 1H), 6,40 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,30 - 4,48 (m, 1H), 4,46 - 4,28 (m, 2H), 4,27 - 3,85 (m, 5H), 3,73 (br s, 1H), 3,56 - 2,54 (m, 10H), 2,49 (s, 3H), 2,37 - 2,21 (m, 1H), 2,12 - 1,97 (m, 1H), 1,95 - 1,79 (m, 3H).
EXEMPLO 339
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-etilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 0-10°C, 17 horas, 0-15°C, 1 hora 20°C, 2 horas, duas 42% etapas 49% 25°C, 16 horas, 91% t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5h, 53% Duas etapas 10%
[01496] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de NaH (1,19 g, 49,6 mmol, 2,0 eq) em THF (50,0 mL) foi adicionada uma solução de terc-butil (2S)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1- carboxilato (5,00 g, 24,8 mmol, 1,0 eq) em THF (50,0 mL) a 0°C e a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora. Bromometilbenzeno (6,38 g, 37,3 mmol, 4,43 mL, 1,50 eq) foi adicionado gota a gota à mistura acima a 0°C e a mistura foi agitada a 10°C por 16 horas. Após conclusão, a mistura foi extinta com NH 4Cl saturado aquoso (20,0 mL) e diluída com acetato de etila (50,0 ml). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 × 30,0 mL) e seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo:Aetato de etila = 10:1-3:1) para dar terc-butil (2 S)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato (6,60 g, 10,4 mmol, 42% de rendimento) como óleo amarelo.
[01497] 1H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,44 - 7,26 (m, 5H), 4,53 (s, 2H), 4,00 - 3,85 (m, 1H), 3,61 - 3,39 (m, 2H), 3,38 - 3,33 (m, 2H), 2,04 - 1,77 (m, 4H), 1,50 - 1,36 (m, 9H).
[01498] Etapa B: (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina. A uma solução de terc- butil (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina-1-carboxilato (6,60 g, 22,7 mmol, 1,0 eq) em DCM (23,0 mL) foi adicionado TFA (34,7 g, 304 mmol, 22,5 mL, 13,4 eq) gota a gota a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar (2S)-2- (benziloximetil)pirrolidina (10,0 g, bruto, TFA) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 192.
[01499] Etapa C: (2S)-2-(benziloximetil)-1-etilpirrolidina. A uma solução de (2S)-2-(benziloximetil)pirrolidina (2,0 g, 6,55 mmol, 1,0 eq, TFA) e acetaldeído (1,44 g, 32,8 mmol, 1,84 mL, 5,0 eq) em MeOH (30,0 mL) foi adicionado CH3COOH (787 mg, 13,1 mmol, 749 uL, 2,0 eq) e NaBH3CN (1,65 g, 26,2 mmol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 2 horas. Após conclusão, o pH foi ajustado para 3 com HCl 1 M aquoso (15,0 mL) e concentrada sob vácuo para remover MeOH. A mistura foi extraída com solvente misturado (PE/EA = 10:1, 2 × 60,0 mL). A fase aquosa foi ajustada para o pH ~ 9 com Na 2CO3 saturado aquoso (10,0 mL) e extraída com solvente misturado (EA/MeOH = 10:1, 4 × 60,0 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto obtido foi purificado por flash de fase reversa (condição 0,1% TFA) para dar (2S)-2-(benziloximetil)-1-etilpirrolidina (707 mg, 3,18 mmol, 49% de rendimento, 99,0% de pureza) como óleo incolor.
[01500] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,36 - 7,31 (m, 4H), 7,31 - 7,26 (m, 1H), 4,58 - 4,54 (s, 2H), 3,52 (dd, J = 4,8, 9,2 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 6,4, 9,2 Hz, 1H), 3,20 - 3,12 (m, 1H), 3,01 - 2,89 (m, 1H), 2,66 - 2,58 (m, 1H), 2,35 - 2,25 (m, 1H), 2,21 - 2,05 (m, 1H), 2,03 - 1,87 (m, 1H), 1,83 - 1,62 (m, 3H), 1,11 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[01501] Etapa D: [(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metanol. A uma solução de (2S)- 2-(benziloximetil)-1-etil-pirrolidina (860 mg, 3,92 mmol, 1,00 eq) em MeOH (3,00 mL) foi adicionado HCl•MeOH (4 M, 0,80 mL) e Pd(OH)2/C (300 mg, 20% de pureza). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 25°C por 16 horas. Após conclusão, a mistura foi filtrada e concentrada. O produto [(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metanol (460 mg, 3,56 mmol, 91% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 130.
[01502] Etapa E: terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)- 1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3- cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (400 mg, 668 umol, 1,0 eq) e [(2S)-1- etilpirrolidin-2-il]metanol (173 mg, 1,34 mmol, 2,0 eq) em tolueno (8,0 mL) foi adicionado t-BuONa (128 mg, 1,34 mmol, 2,0 eq) a 0°C, a reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação foi adicionada água (30,0 mL), em seguida, extraída com EA (2 × 20,0 mL), a camada orgânica combinada foi lavada com salmoura saturada (1 × 30,0 mL), depois seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=5/1 para Acetato de etila/Metanol=20/1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (240 mg, 353 umol, 53% de rendimento, 97,6% de pureza) como sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 664.
[01503] Etapa F: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (240 mg, 361 umol, 1,0 eq)
em DCM (2,0 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,0 mmol, 2,0 mL, 74,8 eq), a mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (280 mg, bruto, 2TFA) como óleo amarelo que foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 564.
[01504] Etapa G: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (280 mg, 496 umol, 1,0 eq, 2TFA) em DCM (5,0 mL) foi adicionado DIEA (642 mg, 4,96 mmol, 865 uL, 10,0 eq) e prop- 2-enoil prop-2-enoato (62,6 mg, 496 umol, 1,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (5,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 de base, Acetato de etila/Metanol=20/1), então, o produto bruto foi concentrado e repurificado por HPLC-prep ((coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 12 min.), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. O composto do título 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 339, 31,9 mg, 50,2 umol, 10% de rendimento, 97,2% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 618.
[01505] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,37 - 7,29 (m, 1H), 7,23 - 7,18 (m, 1H), 7,11 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,58 - 6,46 (m, 1H), 6,32 (dd, J = 0,8, 16,4 Hz, 1H), 5,76 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,11 - 4,37 (m, 1H), 4,28 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,09 - 3,96 (m, 4H), 3,89 (br d, J = 12,4 Hz, 2H), 3,69 - 3,41 (m, 1H), 3,33 -
2,51 (m, 12H), 2,38 - 2,28 (m, 1H), 2,20 - 2,11 (m, 1H), 2,00 - 1,80 (m, 3H), 1,06 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
EXEMPLO 340 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(4-metoxipiridin-3-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila HCl.Dioxano dioxano Cs2CO3, tolueno, 32% TEA, DCM -60 °C, 0,5 hora Duas etapas 29%
[01506] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (580 mg, 1,23 mmol, 1,0 eq), 3-bromo-4-metoxi- piridina (694 mg, 3,69 mmol, 3,0 eq), Pd2(dba)3 (113 mg, 123 umol, 0,1 eq), RuPhos (115 mg, 246 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (1,20 g, 3,69 mmol, 3,0 eq) em tolueno (25,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 6 horas sob atmosfera de N 2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo e lavado com água (20,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 30,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (100 mL), secos sobre Na 2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% FA em água, 0-70% MeCN]. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso até pH~8, então, concentrado, a aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 50,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 397 umol, 32% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 579.
[01507] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (350 mg, 605 umol, 1,0 eq) em dioxano (3,0 mL) foi adicionado HCl 4M/dioxano (5,0 mL), a mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada, então, extraída com DCM (10,0 mL), a camada orgânica foi lavada com NaHCO3 aquoso saturado (2 × 10,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar 2-[(2S)- 4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (260 mg, bruto) como óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 479.
[01508] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (260 mg, 543 umol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado TEA (220 mg, 2,17 mmol, 302 uL, 4,0 eq) e cloreto de prop-2-enoil (63,9 mg, 706 umol, 57,6 uL, 1,3 eq) a -60°C, a mistura de reação foi agitada a -60°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (2,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al 2O3 de base, Éter de petróleo : Acetato de etila=3:1 para Acetato de etila/Metanol=20/1), então, o produto bruto foi concentrado e repurificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,04% NH3H2O)-ACN]; B%: 30%-54%, 10 min.), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(4-metoxi-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 340, 83,6 mg, 155 umol, 29% de rendimento, 98,8% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 533.
[01509] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,25 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 6,82 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 6,38 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 6,44 - 6,33 (m, 1H), 5,82 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,21 - 4,52 (m, 1H), 4,37 (dd, J = 4,8 Hz, 10,4 Hz, 1H), 4,33 - 4,26 (m, 1H), 4,24 - 4,13 (m, 2H), 4,06 (br d, J=13,6 Hz, 1H), 4,02 - 3,88 (m, 5H), 3,72 - 3,37 (m, 2H), 3,36 - 3,23 (m, 2H), 3,16 - 3,02 (m, 2H), 2,98 - 2,88 (m, 1H), 2,87 - 2,72 (m, 3H), 2,70 - 2,60 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,33 - 2,27 (m, 1H), 2,10 - 1,99 (m, 1H), 1,91 - 1,69 (m, 3H).
EXEMPLO 341
2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila t-BuONa, tolueno, 30- 25°C, 1 h, 99,9% 57% -40 °C, 0,5 h 61%
[01510] [(2S)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol. A uma mistura de [(2S)-pirrolidin-2-il]metanol (500 mg, 4,94 mmol, 481 uL, 1 eq) e 2-bromoetoxi-terc-butil-dimetil-silano (1,30 g, 5,44 mmol, 1,1 eq) em MeCN (30 mL) foi adicionado K2CO3 (3,42 g, 24,7 mmol, 5 eq) em porção sob N2. A mistura foi agitada a 50°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Acetato de etila/Metanol = 100/1 a 5/1). Composto [(2S)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol (437 mg, 1,68 mmol, 34,0% de rendimento) foi obtido como um óleo marrom.
[01511] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,71 (dd, J = 5,2, 6,4 Hz, 2H), 3,63 - 3,58 (m, 1H), 3,37 (dd, J = 3,2, 10,8 Hz, 1H), 3,21 (td, J = 4,8, 10,0 Hz, 1H), 2,90 (td, J = 6,4, 12,8 Hz, 1H), 2,74 - 2,67 (m, 1H), 2,52 (td, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 2,41 - 2,31 (m, 1H), 1,97 - 1,80 (m, 1H), 1,79 - 1,55 (m, 3H), 0,92 - 0,87 (m, 9H), 0,11 - 0,00 (m, 6H).
[01512] Etapa A: benzil (2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1)-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de [(2S)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metanol (447 mg, 1,72 mmol, 2 eq) em tolueno (35 mL) foi foi adicionado t-BuONa (248 mg, 2,58 mmol, 3 eq) em porções e, em seguida, à solução foi adicionado benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 500 mg, 861 umol, 1 eq) a 0°C. A mistura foi aquecida até 25°C e agitada por 1 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila 20 mL e o PH ajustado para 8-9 com HCl 2M a 0°C, depois extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (15 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 1/2). Composto benzil (2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (400 mg, 494 umol, 57,4% de rendimento, 95,8% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 776.
[01513] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-4-[2- [[(2S)-1-[2-[terc-butil (dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (380 mg, 490 umol, 1 eq) em MeOH (30 mL) foi adicionado Pd/C (230 mg, 490 umol, 10% de pureza, 1,00 eq) e NH3•MeOH (25 mL). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc-butil (dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (314 mg, 489 umol, 99,9% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo e usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 642.
[01514] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc-butil(dimetil) silil]oxietil]pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (314 mg, 489 umol, 1 eq) em DCM (15 mL) foi adicionado TEA (148 mg, 1,47 mmol, 204 uL, 3 eq) e cloreto de prop-2-enoil (57,6 mg, 636 umol, 51,9 ul, 1,3 eq) em porção, a -40°C sob N2. A mistura foi agitada a -40°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta por adição de solução saturada de NaHCO3 3 mL a -40°C e depois extraída com DCM (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 1/3). Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil] oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (210 mg, 300 umol, 61,4% de rendimento, 99,5% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 696.
[01515] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-[2-[terc- butil(dimetil)silil]oxietil]pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (205 mg, 295 umol, 1 eq) em THF (3 mL) foi adicionado KF (171 mg, 2,95 mmol, 69,0 uL, 10 eq) e 18-crown-6 (779 mg, 2,95 mmol, 10 eq) em porção. A mistura foi agitada a 40°C por 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 45% - 75%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[2- [[(2S)-1-(2-hidroxietil) pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 341, 43,4 mg, 71,6 umol, 24,3% de rendimento, 95,9% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01516] SFC: “OJ-3S_3_5_40_3ML Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01517] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,24 - 8,18 (m, 1H), 7,89 - 7,83 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,60 (br s, 1H), 6,40 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,84 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,36 - 4,22 (m, 3H), 4,16 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 2H), 4,01 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,72 - 3,55 (m, 3H), 3,53 - 3,26 (m, 3H), 3,24 - 2,68 (m, 10H), 2,62 (td, J = 4,0, 12,5 Hz, 1H), 2,39 - 2,28 (m, 1H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,90 - 1,75 (m, 3H).
EXEMPLO 342 2-[(2S)-1-[(E)-4-(dimetilamino) but-2-enoil]-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
HCl.dioxano dioxano 0 °C, 0,5 h 55% Cs2CO3, tolueno,90°C, 5h, 64% 0 °C, 0,5 h 52% 1, (COCl)2, DCM, 0 – 40 °C, 2,5 h 2, Py, 0 °C, 0,5 h 3, Me2NH, 20 °C, 1 h Duas etapas 65%
[01518] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc- butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3,00 g, 5,57 mmol, 1,00 eq) em dioxano (30,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4,00 M, 30,0 mL, 21,6 eq) a 0°C. Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (4,00 mL), ajustado pH > 8 por bicarbonato de sódio saturado (10,0 mL) e extraído com acetato de etila (3 × 30,0 mL). Os extratos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, metanol/acetato de etila = 10/1) para dar benzil(2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (2,10 g, 4,02 mmol, 72% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 439.
[01519] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,46 - 7,30 (m, 5H), 5,25 - 5,14 (m, 2H), 4,66 (br s, 1H), 4,14 - 4,05 (m, 1H), 4,04 - 3,90 (m, 3H), 3,84 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,26 (br d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,12 (td, J = 5,2, 12,4 Hz, 1H), 3,05 - 2,91 (m, 2H), 2,79 (br s, 1H), 2,74 - 2,56 (m, 3H), 2,49 (s, 3H).
[01520] Etapa B: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2- metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (2,00 g, 4,56 mmol, 1,00 eq), 1-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno (1,66 g, 6,84 mmol, 1,50 eq), Pd2(dba)3 (418 mg, 456 umol, 0,10 eq), Ruphos (426 mg, 912 umol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (2,97 g, 9,12 mmol, 2,00 eq) em tolueno (30,0 mL) foi agitada a 90°C por 5 horas. A mistura foi diluída com água (20,0 mL), extraída com acetato de etila (3 × 30,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 40,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas e ajustadas pH > 7 por bicarbonato de sódio saturado (5,00 mL), extraídas com acetato de etila (3 × 30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,00 g, 2,90 mmol, 64% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 601.
[01521] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,53 - 7,44 (m, 1H), 7,43 - 7,29 (m, 5H), 7,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,00 - 6,91 (m, 1H), 5,26 - 5,13 (m, 2H), 4,69 (br s, 1H), 4,16 - 4,10 (m, 3H), 4,04 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,87 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,39 - 3,22 (m, 3H), 3,19 - 3,09 (m, 1H), 3,04 (dt, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,83 (br s, 2H), 2,76 - 2,67 (m, 2H), 2,51 (s, 3H).
[01522] Etapa C: benzil(2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3- fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (1,90 g, 3,16 mmol, 1,00 eq) em acetato de etila (50,0 mL) foi adicionado m-CPBA (610 mg, 3,01 mmol, 85% de pureza, 0,95 eq) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura foi diluída com água (30,0 mL), pH ajustado > 7 por bicarbonato de sódio saturado (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 40,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/3) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro- 2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (1,20 g, 1,73 mmol, 55% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 617.
[01523] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,55 - 7,47 (m, 1H), 7,44 - 7,33 (m, 5H),, 7,08 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,03 - 6,94 (m, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,31 - 4,09 (m, 4H), 4,02 (br d, J=12,0 Hz, 1H), 3,46 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,40 - 3,09 (m, 4H), 2,90 (br d, J = 2,8 Hz, 6H), 2,74 - 2,64 (m, 1H).
[01524] Etapa D: benzil (2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (145 mg, 392 umol, 1,10 eq) em THF (5,00 mL) foram adicionados t-BuONa (68,6 mg, 714 umol, 2,00 eq) a 0°C. Então, benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (0,22 g, 357 umol, 1,00 eq) foi adicionado à mistura. Após agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura foi diluída com acetato de etila (10,0 mL) e água (10,0 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 20,0 mL), secos sobre Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila = 1/3) para dar benzil (2S)-4-[2- [[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil) silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,18 g, 185 umol, 52% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M/2+1]: 462.
[01525] Etapa E: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil (difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado em metanol (30,0 mL) a -78°C por 15 minutos. Benzil (2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,18 g, 195 umol, 1,00 eq) e Pd/C (0,10 g, 10% de pureza) foram adicionado à mistura. Depois de agitada a 40°C por 1 hora sob H2 a 15 psi, o catalisador foi filtrado e concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc- butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,13 g, bruto) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M/2+1]: 395.
[01526] Etapa F: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (0,50 g, 3,03 mmol, 1,00 eq) e dicloreto de oxalil (3,85 g, 30,31 mmol, 2,65 mL, 10,0 eq) em diclorometano (5 mL) foi agitada a 0°C por 0,5 h e 40°C por 2 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo acima (93,0 mg, bruto) foi adicionado à mistura de 2-[(2S)- 4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3- fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (80,0 mg, bruto) e Py (80,3 mg, 1,02 mmol, 82,0 µL) em diclorometano (0,50 mL) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, foi adicionada N- metilmetanamina (69,4 mg, 508 umol, 77,9 uL) e a mistura foi agitada a 20°C por
1 hora. Então a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)]. As frações desejadas foram ajustadas pH > 7 por bicarbonato de sódio saturado (1 × 5,00 mL) e extraídas com acetato de etila (3 × 10,0 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 10,0 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2- [[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- (dimetilamino)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (0,06 g, 48,05 umol, duas etapas 65% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
899.
[01527] Etapa G: 2-[(2S)-1-[(E)-4-(dimetilamino) but-2-enoil]-4-[7-[3-fluoro- 2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)-4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de 2- [(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-[terc-butil(difenil)silil]oxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3- fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- (dimetilamino)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (0,06 g, 66,7 umol, 1,00 eq), KF (38,8 mg, 667 umol, 15,6 uL, 10,0 eq) e 18-crown-6 (176 mg , 667 umol, 10,0 eq) em THF (0,10 mL) foi agitada a 40°C por 12 horas. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%/acetonitrila)] e coluna HPLC-prep: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 30% - 60%, 12 min. As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-1- [(E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil]-4-[7-[3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S,4R)- 4-hidroxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 342, 4,60 mg, 6,91 umol, 10% de rendimento, 99,2% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:661.
[01528] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,52 - 7,44 (m, 1H), 7,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,00 - 6,90 (m, 2H), 6,46 (br d, J = 15,2 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,50 - 4,42 (m, 1H), 4,36 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 5,6, 10,8 Hz,
1H), 4,16 - 4,06 (m, 3H), 3,96 (br d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,60 (br s, 1H), 3,43 (dd, J = 6,0, 10,0 Hz, 1H), 3,39 - 3,23 (m, 2H), 3,20 - 3,05 (m, 4H), 3,05 - 2,79 (m, 4H), 2,78 - 2,62 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,35 - 2,26 (m, 7H), 2,12 - 1,92 (m, 2H).
EXEMPLO 343 (S)-7-(2,3-dimetilfenil)-2-((1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-4-(4- (vinilsulfonil)piperazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina HCl.dioxano dioxano TEA, DCM 0,5 h -60 °C, 0,5 h Duas etapas 29%
[01529] Etapa A: 7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin. A uma solução de terc-butil 4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (350 mg, 652 umol, 1,0 eq) em dioxano (3,0 mL) foi adicionado HCl 4M/dioxano (5,0 mL), a mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada, em seguida, adicionado DCM (10,0 mL), a camada orgânica foi lavada com NaHCO3 saturado aquoso (2 × 10,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada para dar 7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (280 mg, em bruto) como óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 437.
[01530] Etapa B: 7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4- (4-vinil-sulfonilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma mistura de 7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin- 1il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (280 mg, 641 umol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado TEA (195 mg, 1,92 mmol, 268 uL, 3,0 eq) e cloreto de etenossulfonil (122 mg, 962 umol, 1,5 eq) a -60°C, a mistura de reação foi agitada a -60°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com MeOH (1,0 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 de base, Éter de petróleo : Acetato de etila=3/1~Acetato de etila/Metanol=20/1), então, o produto bruto foi concentrado e repurificado por HPLC-prep ((coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 62%-92%, 12 min.), o produto obtido foi concentrado e, então, sob liofilização. Composto do título 7-(2,3- dimetilfenil)-2-[[(2S)-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-(4-vinil-sulfonilpiperazin-1-il)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (EXEMPLO 343, 98,2 mg, 185 umol, 29% de rendimento, 99,3% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 527.
[01531] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,12 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,00 - 6,94 (m, 2H), 6,47 (dd, J = 10,0 Hz, 16,8 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 1H), 4,03 (s, 2H), 3,62 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,30 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,19 - 3,05 (m, 3H), 2,80 - 2,62 (m, 3H), 2,49 (s, 3H), 2,32 - 2,25 (m, 7H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,92 - 1,72 (m, 3H).
EXEMPLO 344
2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 40 min 67% -40 °C, 0,5 h Duas etapas 9,2%
[01532] Etapa A: benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (101 mg, 874 umol, 1,2 eq) em tolueno (15 mL) foi adicionado t-BuONa (140 mg, 1,46 mmol, 2 eq) a 0°C em 10 minutos. Em seguida, foi adicionada à mistura uma solução de benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 500 mg, 728 umol, 1 eq) em tolueno (10 mL) gota a gota a 0°C. Depois de agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura de reação foi diluída com H2O (1 × 7 mL) e Acetato de etila (1 × 25 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 20 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10/1 a 0/1). Composto benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (390 mg, 489 umol, 67% de rendimento, 92,6% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 738.
[01533] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,46 - 7,34 (m, 10H), 7,00 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,24 - 5,15 (m, 4H), 4,70 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,7 Hz, 1H), 4,33 - 4,22 (m, 2H), 4,20 - 4,11 (m, 3H), 3,93 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,56 - 3,19 (m, 4H), 3,14 - 2,61 (m, 7H), 2,48 (s, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 2,06 (m, 1H), 1,84 - 1,69 (m, 3H).
[01534] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado MeOH (100 mL) a -60°C por 20 minutos. A uma solução de benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (360 mg, 488 umol, 1 eq) em MeOH (25 mL) foi adicionado Pd/C (300 mg, 10% de pureza) e a solução acima (NH3•MeOH, 25 mL) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e concentrado sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 514.
[01535] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-
il]acetonitrila (230 mg, bruto) e TEA (453 mg, 4,48 mmol, 623 uL) em DCM (8 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoíla (40,5 mg, 448 umol, 36,5 uL) em porções a -40°C. A mistura foi agitada a -40°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 (2 mL) a 0°C e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 30 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3; Acetato de etila/Metanol = 20/1 a 3/1). O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 38% - 68%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 344, 25,6 mg, 44,8 umol, duas etapas, 9,2% de rendimento, 99,5% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 568.
[01536] Condição SFC: “Coluna AS-3_MeOH (DEA) _5_40_3mL-35T: Chiralpak AS-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm”.
[01537] 1H NMR (400 MHz, acético) δ = 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,29 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,90 - 6,68 (m, 2H), 6,38 (br d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,87 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,17 (br s, 1H), 4,82 (br s, 2H), 4,59 (br s, 1H), 4,45 - 4,25 (m, 3H), 4,21 - 3,61 (m, 4H), 3,60 - 3,19 (m, 5H), 3,17 - 2,83 (m, 7H), 2,45 - 2,31 (m, 1H), 2,23 - 2,10 (m, 3H).
EXEMPLO 345
2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano dioxano Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12 horas, 32% Duas etapas 18%
[01538] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (700 mg, 1,48 mmol, 1,0 eq), 4-cloro-3-metil-piridina (379 mg, 2,97 mmol, 2,0 eq), Pd2(dba)3 (204 mg, 223 umol, 0,15 eq), RuPhos (139 mg, 297 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (1,45 g, 4,45 mmol, 3,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 12 h sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo e lavado com água (15,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×25,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (60,0 mL), secos com Na2SO4 o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% de FA em água, 0-45% MeCN]. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso até pH~8, em seguida, concentrado, o aquoso foi extraído com acetato de etila (3×50,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. Composto terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metil-4- piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (270 mg, 475 umol, 32% de rendimento, 99,0% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:563.
[01539] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (200 mg, 355 umol, 1,0 eq) em dioxano (3,0 mL) foi adicionado HCl·dioxano (4 M, 3,0 mL, 33,8 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso a pH~8, em seguida, concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×15,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto 2- [(2S)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (125 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:463.
[01540] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (125 mg, bruto) em DCM (3,0 mL) foi adicionado TEA (137 mg, 1,35 mmol, 188 uL) e cloreto de prop-2-enoíla (36,7 mg, 405 umol, 33,1 uL) a -60°C.
A mistura foi agitada a -60°C por 30 min. A reação foi extinta com metanol (10,0 mL) e a mistura foi removida sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 32%-62%, 12min.) e liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 345, 25,3 mg, 48,4 umol, 18% de rendimento, 99 % de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:517.
[01541] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,33 – 8,29 (m, 2H), 6,83 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,65 – 6,50 (m, 1H), 6,38 (dd, J = 1,6 Hz, J = 16,8 Hz,1H), 5,82 (d, J = 10,8 Hz 1H), 5,41 (br s, 1H), 4,36 (dd, J = 4,8 Hz, J = 10,4 Hz,1H), 4,20 – 4,06 (m, 4H), 4,97 (br d, J = 11,6 Hz 2H),3,68 – 3,45 (m, 1H), 3,40 – 3,31 (m, 2H),3,26 – 3,15 (m, 1H),3,15 – 3,03 (m, 2H), 2,97 – 2,60 (m, 5H), 2,31 (s, 3H), 2,29 -2,21 (m, 3H) 2,15 – 2,10 (m, 1H), 2,09 – 2,00 (m, 1H) 1,88 – 1,70 (m, 3H).
EXEMPLO 346 2-[4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila
HCl.dioxano dioxano t-BuONa, tolueno, 0°C, 10 min., 75% Piridina, DCM, 0°C, 30 min.
Morfolina, 0°C, 3,5hrs, duas etapas 17%
[01542] Etapa 1: A uma solução de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (1,0 g, 6,06 mmol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado (COCl)2(COCl)2 (8,70 g, 68,5 mmol , 6 mL, 11,3 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 16 h sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto bruto cloreto (E)-4- bromobut-2-enoil (1,3 g, bruto) foi obtido como um líquido amarelo e utilizado para a próxima etapa sem purificação adicional.
[01543] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3- cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,30 g, 2,17 mmol, 1,0 eq) e [(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metanol (500 mg, 4,34 mmol, 515 uL, 2,0 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado t-BuONa (417 mg, 4,34 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 min. A mistura de reação foi extinta pela adição de salmoura saturada (30 mL) a 20°C e extraída com EA (3 × 30,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (30,0 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1 a EA/MeOH = 10/1). O produto terc-butil(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,10 g, 1,62 mmol, 75% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 650.
[01544] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 308 umol, 1,0 eq) em dioxano (2,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 2,0 mL, 26,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. sob atmosfera de N 2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO 3 saturado aquoso a pH~8, em seguida, concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×20,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (130 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:551.
[01545] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- morfolinobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-[3- cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 1.812 umol, 1,0 eq) e PIRIDINA (115 mg, 1,45 mmol, 117 uL, 8,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (133 mg, 727 umol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 h. Após o material de partida ser consumido, foi adicionada morfolina (79,2 mg, 909 umol, 80,0 uL, 5,0 eq) à mistura acima e agitada a 0°C por 3,5 h. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso a pH~8, em seguida, concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×15,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto do título 2- [(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-morfolinobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 346, 21,7 mg, 30,6 umol, 16,9% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 703.
[01546] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,40 (t, J = 8,0 Hz, J = 8,0 Hz 1H), 7,28 (s, 1H), 7,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,00 – 6,93(m, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,57 – 6,40 (m, 1H), 5,18 – 5,03 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 4,8 Hz, J = 10,4 Hz,1H), 4,16 (d d, J = 6,8 Hz, J = 10,4 Hz, 1H), 4,14 - 4,04 (m, 3H), 4, 04 - 3,88 (m, 2H), 3,74 (t, J = 4,4 Hz, J = 4,8 Hz, 4H), 3,52 (br s, 1H), 3,41 - 3,23 (m, 2H), 3,18 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 3,12- 3,08 (m, 2H), 2,95 - 2,85 (m, 2H), 2,30 - 2,15 (m, 3H), 2,55 - 2,45 (m, 7H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,90 - 1,75 (m, 3H).
EXEMPLO 347
2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-pirrolidin-1-ilbut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano dioxano 0°C, 2 Piridina, DCM, horas, 62% 0°C, 0,5 hora 70°C, 2 horas K2CO3, KI, THF, 0°C, 0,5 hora, duas etapas 7%
[01547] Inserir: cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil. Uma solução de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (1,00 g, 6,06 mmol, 1,00 eq) em (COCl)2 (14,5 g, 114 mmol, 10,0 mL, 18,9 eq) e DCM (10,0 mL) foi agitada a 70°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto cloreto de (E)-4- bromobut-2-enoil (1,00 g, bruto) foi obtido como óleo amarelo. O composto bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[01548] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (700 mg, 1,08 mmol, 1,0 eq) em dioxano (5,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 7,0 mL, 26,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 2 horas. Depois da conclusão, a mistura foi concentrada e ajustada com NaHCO3 saturado aquoso para pH~7, então,
extraída com EA (10,0 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (400 mg, 669 umol, 62% de rendimento, 92% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 550.
[01549] Etapa B: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4- [7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 364 umol, 1,00 eq) e Piridina (230 mg, 2,91 mmol, 235 uL, 8,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (267 mg, 1,45 mmol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com DCM (10,0 mL × 2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2- enoil]-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, bruto) foi obtido como óleo marrom.
[01550] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- pirrolidin-1-ilbut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de pirrolidina (306 mg, 4,30 mmol, 359 uL, 10,0 eq), K2CO3 (297 mg, 2,15 mmol, 5,0 eq) e KI (21,4 mg, 129 umol, 0,30 eq) em THF (2,0 mL) foi adicionado 2-[(2S)-1-[(E)-4- bromobut-2-enoil]-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, 430 umol, 1,0 eq) em porções a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, foi adicionada água (10,0 mL) à mistura e extraída com DCM (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna:
Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 70%-100%, 3 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)- 4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-pirrolidin-1-ilbut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 347, 17,1 mg, 24,5 umol, duas etapas, 7% de rendimento, 99% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 687.
[01551] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,41 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 - 6,95 (m, 1H), 6,47 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 5,20 - 4,60 (m, 1H), 4,39 (dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,22 - 4,07 (m, 4H), 3,97 (br d, J = 12,0 Hz, 2H), 3,42 - 3,23 (m, 3H), 3,21 - 3,04 (m, 3H), 2,96 - 2,86 (m, 2H), 2,79 - 2,64 (m, 5H), 2,62 - 2,54 (m, 4H), 2,49 (s, 3H), 2,35 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,01 (m, 1H), 1,83 - 1,70 (m, 7H).
EXEMPLO 348 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il] etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 48 min., 53% 25 °C, 1,5 h -60 – 25 °C, 1,3 h -40 °C, 0,5 h Duas etapas 68% 87% 12%
[01552] Inserir: terc-Butil (2R)-2-[(1R)-1-hidroxietil]pirrolidina-1-carboxilato. Uma mistura de BH3•Me2S (10 M em DMS, 610 uL, 1,3 eq) e (3aS)-1-metil-3,3- difenil-3a,4,5,6-tetra-hidropirrolo[1,2-c][1,3,2]oxazaborol (1 M em tolueno, 938 uL, 0,2 eq) em THF (10 mL) foi agitada a 25°C por 1 hora. Em seguida, foi adicionada uma solução de terc-butil (2R)-2-acetilpirrolidina-1-carboxilato (1,00 g, 4,69 mmol, 1 eq) em THF (10 mL) e a mistura agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi extinta com MeOH (4 mL), concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE/EtOAc = 50/1 a 5/1). terc-Butil (2R)-2-[(1R)-1-hidroxietil] pirrolidina-1-carboxilato (690 mg, 3,21 mmol, 68% de rendimento) foi obtido como um sólido branco.
[01553] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 5,19 (br s, 1H), 3,79 - 3,59 (m, 2H), 3,49 (br s, 1H), 3,35 - 3,18 (m, 1H), 2,04 - 1,90 (m, 1H), 1,88 - 1,68 (m, 3H), 1,47 (d, J = 0,8 Hz, 9H), 1,20 - 1,11 (m, 3H).
[01554] Etapa A: benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1- terc-butoxicarbonilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2R)-2-[(1R)- 1-hidroxietil]pirrolidina-1-carboxilato (263 mg, 1,22 mmol, 1,2 eq) em tolueno (15 mL) foi adicionado t-BuONa (196 mg, 2,04 mmol, 2 eq) a 0°C por 10 minutos. À mistura foi adicionado benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (700 mg, 1,02 mmol, 1 eq) em tolueno (15 mL) gota a gota a 0°C. Depois de agitada a 0°C por 0,5 h, adicionou-se à mistura de reação H2O (1 × 7 mL) e acetato de etila (1 × 35 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 20 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas até pH = 7 com solução de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (1 × 100 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2- [(1R)-1-[(2R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (470 mg, 536 umol, 53% de rendimento, 95,6% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 838.
[01555] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 - 7,48 (m, 2H), 7,46 - 7,31 (m, 10H), 7,00 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,78 - 5,44 (m, 1H), 5,30 - 5,08 (m, 4H), 4,70 (br s, 1H), 4,35 - 4,20 (m, 3H), 4,08 - 3,79 (m, 2H), 3,72 - 3,13 (m, 7H), 3,12 - 2,64 (m, 4H), 2,01 - 1,71 (m, 5H), 1,46 (s, 9H), 1,26 - 1,23 (m, 3H).
[01556] Etapa B: benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)- pirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-
hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (450 mg, 537 umol, 1 eq) em DCM (600 uL) foi adicionado TFA (918 mg, 8,05 mmol, 596 uL, 15 eq) a 0°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Então, a mistura foi concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)- 4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-pirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (700 mg, bruto, TFA) foi obtido como um óleo amarelo.
[01557] Etapa C: benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-pirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (650 mg, 763 umol, 1 eq, TFA), formaldeído (310 mg 3,81 mmol, 284 uL, 5 eq, 37% em água) e AcOH (45,8 mg, 763 umol, 43,6 uL, 1 eq) em MeOH (15 mL) foi agitada a 25°C por 0,5 h. Em seguida, NaBH3CN (120 mg, 1,91 mmol, 2,5 eq) foi adicionado e a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura foi extinta com H2O (10 mL) a 0°C, em seguida, extraída com acetato de etila (3 × 15 mL), lavada com salmoura (1 × 15 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa [água (0,1% de FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas até pH = 7 com solução de NaHCO 3 saturada e extraída com acetato de etila (2 × 50 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin- 2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (260 mg, 339 umol, duas etapas 68% de rendimento, 97,9% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo.
[01558] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado MeOH (100 mL) a - 60°C por 20 minutos. A uma solução de benzil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (260 mg, 346 umol, 1 eq) em MeOH (15 ml) foi adicionado Pd/C (200 mg, 10% de pureza) e mistura acima (NH 3•MeOH, 15 mL) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e concentrado sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 300 umol, 87% de rendimento, 88,0% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 528.
[01559] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[(1R)-1-[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 341 umol, 1 eq) e TEA (345 mg, 3,41 mmol, 475 uL, 10 eq) em DCM (8 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoil (30,9 mg, 341 umol, 27,8 uL, 1 eq) em porção a -40°C e a mistura foi agitada a - 40°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 (2 mL) a 0°C e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 30 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3; Acetato de etila/Metanol = 20/1 a 3/1). O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 42% - 72%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [(1R)-1-[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 348, 23,5 mg, 39,9 umol, 12% de rendimento, 99,0% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01560] Condição SFC: “OJ-3S_3_5_40_3ML Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO 2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01561] 1H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ = 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,32 - 7,23 (m, 1H), 6,98 - 6,74 (m, 3H), 6,31 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,85 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,27 - 5,15 (m, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,62 (br s, 1H), 4,33 - 4,00 (m, 5H), 3,75 - 3,38 (m, 2H), 3,27 - 2,81 (m, 7H), 2,75 - 2,62 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,47 - 2,31 (m, 1H), 2,11 - 1,96 (m, 1H), 1,86 - 1,69 (m, 3H), 1,34 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
EXEMPLO 349 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2,6-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
0 - 25 °C, 0,5 h -78 - 25 °C, 2,5 h 73% 25 °C, 0,5 h 100% 50% Cs2CO3, tolueno, 70°C, 12h, 3%
[01562] Etapa 1: 2-bromo-6-fluoro-3-metil-benzaldeído. A uma solução de 2-bromo-4-fluoro-1-metil-benzeno (10 g, 52,9 mmol, 1 eq) em THF (200 mL) foi adicionado LDA (2 M em tolueno, 31,7 mL, 1,2 eq) em - 78°C sob atmosfera de nitrogênio. Após agitada a -78°C por 2 horas, uma solução de DMF (4,64 g, 63,5 mmol, 4,88 mL, 1,2 eq) foi adicionada a -78°C. A mistura foi aquecida cuidadosamente até 25°C e agitada por 0,5 hora. A mistura foi extinta com água (5 mL) e a mistura foi diluída com éter de petróleo/acetato de etila (50 mL/5 mL) e água (50 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto 2-bromo-6-fluoro-3-metil- benzaldeído (11,5 g, 52,9 mmol, 100% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
[01563] Etapa 2: (2-bromo-6-fluoro-3-metil-fenil)metanol. A uma solução de 2-bromo-6-fluoro-3-metil-benzaldeído (11,5 g, 52,9 mmol, 1 eq) em MeOH (100 mL) foi adicionado NaBH4 (2,20 g, 58,2 mmol, 1,1 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura foi extinta com água a 0°C e a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 50/1 a 3/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo. Composto (2-bromo-6- fluoro-3-metil-fenil)metanol (8,5 g, 38,4 mmol, 73% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M-17]: 201.
[01564] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,20 (dd, J = 6,4, 8,4 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,35 - 2,11 (m, 1H).
[01565] Etapa 3: 3-bromo-2-(bromometil)-1-fluoro-4-metil-benzeno. A uma mistura de (2-bromo-6-fluoro-3-metil-fenil)metanol (5 g, 22,8 mmol, 1 eq) em THF (100 mL) foi adicionado PBR3 (12,4 g, 45,6 mmol, 2 eq) em porções a 0°C. Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com acetato de etila (100 mL) e lavado com água gelada (1 × 50 mL), solução aquosa de bicarbonato de sódio a 10% (2 × 50 mL) e solução salina (1 × 20 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 10/1). Composto 3-bromo-2- (bromometil)-1-fluoro-4-metil-benzeno (5,6 g, 19,9 mmol, 87% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
[01566] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,20 (dd, J = 6,4, 8,0 Hz, 1H), 6,97 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 2,41 (s, 3H).
[01567] Etapa 4: 3-bromo-1-fluoro-2,4-dimetil-benzeno. A uma solução de 3-bromo-2-(bromometil)-1-fluoro-4-metil-benzeno (5,6 g, 19,9 mmol, 1 eq) em DMF (50 mL) foi adicionado NaBH4 (1,50 g, 39,7 mmol, 2 eq) e AgNO3 (6,75 g, 39,7 mmol, 6,68 mL, 2 eq) a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O composto 3-bromo-1-fluoro-2,4-dimetil-benzeno (2,1 g, 9,93 mmol, 50% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um óleo incolor.
[01568] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,05 (dd, J = 6,0, 8,4 Hz, 1H), 6,91 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,35 (d, J = 2,4 Hz, 3H).
[01569] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-fluoro-2,6-dimetil- fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 1,06 mmol, 1 eq), 3-bromo-1-fluoro-2,4- dimetil-benzeno (430 mg, 2,12 mmol, 2 eq), RuPhos-Pd-G3 (177 mg, 212 umol, 0,2 eq), Cs2CO3 (863 mg, 2,65 mmol, 2,5 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 70°C por 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e ainda purificado por flash de fase inversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Composto terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-fluoro-2,6-dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- i]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (20 mg, 28,6 umol, 3% de rendimento, 85% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 594.
[01570] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-fluoro-2,6-dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-
il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-fluoro-2,6- dimetil-fenil)-2-[[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (20 mg, 33,7 umol, 1 eq) em DCM (100 uL) foi adicionado TFA (57,6 mg, 505 umol, 37,4 uL, 15 eq). Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4- [7-(3-fluoro-2,6-dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (20,5 mg, 33,7 umol, 100% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo.
[01571] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(3-fluoro-2,6-dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(3-fluoro-2,6- dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il] metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (20,5 mg, 33,7 umol, 1 eq, TFA) em DCM (1 mL) foi adicionado TEA (34,1 mg, 337 umol, 46,9 uL, 10 eq) a -40°C. Em seguida, cloreto de prop-2-enoil (3,05 mg, 33,7 umol, 2,75 uL, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado em gotas e a mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO 3 (0,1 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, diclorometano/metanol = 10/1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 25 * 10um; fase móvel: [água (0,225% FA)- ACN]; B%: 16% - 43%, 9min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-fluoro-2,6- dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 349, 0,39 mg, 0,693 umol, 2% rendimento, 97,3% de pureza) foi obtido como um sólido incolor. LCMS [ESI, M+1]: 548.
[01572] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,06 - 6,92 (m, 1H), 6,84 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 6,70 - 6,49 (m, 1H), 6,42 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,60 (br s, 1H), 4,39 - 4,27 (m, 1H), 4,25 - 3,83 (m, 5H), 3,75 - 3,22 (m, 5H), 3,19 - 2,47 (m, 10H), 2,34 - 2,21 (m, 6H), 2,21 - 1,89 (m, 4H).
EXEMPLO 350 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-hidroxinaftalen-1-il)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 0 °C, 0,5 h 69% t-BuONa, RuPhos, tolueno, tolueno, 0°C, 90°C, 5h, 69% 0,5h, 78% -40 °C, 0,5 h Duas etapas 6%
[01573] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de 3-benziloxi-1-bromo-naftaleno (Intermediário 29, 1,01 g, 3,21 mmol, 1,3 eq), terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-
hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 1 g, 2,47 mmol, 1 eq), Cs2CO3 (2,01 g, 6,18 mmol, 2,5 eq), RuPhos (230 mg, 494 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (452 mg, 494 umol, 0,2 eq) em tolueno (50 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 90°C por 5 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 100/1 a 3/1). Composto terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,2 g, 1,71 mmol, 69% de rendimento, 91% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 637.
[01574] Etapa B: terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,2 g, 1,88 mmol, 1 eq) em acetato de etila (50 mL) foi adicionado m-CPBA (382 mg, 1,88 mmol, 85% de pureza, 1 eq) a 0°C. Depois de agitada a 0°C por 0,5 hora, a mistura de reação foi extinta com solução saturada de Na 2S2O3 aquosa (20 mL) e, então, extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/MeOH = 100/1 a 10/1). Composto terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (900 mg, 1,30 mmol, 69% de rendimento, 94% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 653.
[01575] Etapa C: terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(3- benziloxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (793 mg, 1,22 mmol, 1 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t-BuONa (350 mg, 3,65 mmol, 3 eq) e [(3R)-1-metilpirrolidin- 3-il]metanol (420 mg, 3,65 mmol, 3 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10/1 a 0/1). Composto terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di- dihidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (700 mg, 944 umol, 78% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 704.
[01576] Etapa D: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. NH3 foi borbulhado MeOH (100 mL) a - 60°C por 10 minutos. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(3-benziloxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (700 mg, 994 umol, 1 eq) em MeOH (20 mL) foi adicionado Pd/C seco (300 mg, 10% de pureza) e a solução acima de NH3•MeOH (20 mL) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 com uma solução aquosa saturada de NaHCO 3 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Composto terc-butil (2S)- 2-(cianometil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 619 umol, 62% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 614.
[01577] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,02 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,29 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,57 (br s, 1H), 4,36 - 4,22 (m, 2H), 4,17 - 4,14 (m, 1H), 4,02 (br d, J = 13,6 Hz, 2H), 3,85 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,47 - 3,08 (m, 3H), 3,07 - 2,64 (m, 12H), 2,56 (s, 3H), 2,27 - 2,14 (m, 1H), 1,89 - 1,75 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).
[01578] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[((3R)-1- metilpirrolidin-3-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (400 mg, 651 umol, 1 eq) em DCM (500 uL) foi adicionado TFA (743 mg, 6,52 mmol, 482 uL, 10 eq). Após agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)- 2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (409 mg, bruto, TFA) foi obtido como um óleo marrom e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 514.
[01579] Etapa F: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (409 mg, 651 umol, 1 eq, TFA) em DCM (10 mL) foi adicionado TEA (659 mg, 6,52 mmol, 907 uL, 10 eq) a 0°C. Após adição, cloreto de prop-2-enoil
(53,1 mg, 586 umol, 47,8 uL, 0,9 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a -40°C. A mistura resultante foi agitada a -40°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO 3 (1 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/MeOH = 100/1 a 5/1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 11% - 41%, 10 min.). A mistura foi ajustada pH = 8 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com diclorometano (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 350, 25,5 mg, 39,9 umol, 6% de rendimento, 89% pureza) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 568.
[01580] 1H NMR (400MHz, Ácido acético-d4) δ = 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,29 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,75 (br s, 1H), 6,38 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,23 - 5,01 (m, 1H), 4,98 - 4,49 (m, 4H), 4,43 (s, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,23 - 4,00 (m, 1H), 3,99 - 3,51 (m, 5H), 3,50 - 3,23 (m, 4H), 3,17 - 2,91 (m, 8H), 2,63 - 2,24 (m, 1H).
EXEMPLO 351
2-[(2S)-4-[2-(1H-imidazol-2-ilmetoxi)-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 20 min., 56% 5,4%
[01581] Etapa 1: etil 1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2-carboxilato. Uma mistura de etil 1H-imidazol-2-carboxilato (5 g, 35,7 mmol, 1 eq), DHP (33,0 g, 392 mmol, 35,9 mL, 11,0 eq) e PTSA•H2O (400 mg , 2,32 mmol, 6,51e-2 eq) em THF (100 mL) foi agitada a 60°C (temperatura do banho de óleo) por 16 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo e depois diluída com acetato de etila (100 mL) e água (100 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 x 100 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 20/1 a 1/1) para dar etil 1-tetra- hidropiran-2-ilimidazol-2-carboxilato (6,2 g, 26,0 mmol, 73% de rendimento, 94 % de pureza) como um óleo amarelo claro.
[01582] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,40 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 6,21 (dd, J = 2,0, 10,0 Hz, 1H), 4,39 (dq, J = 0,8, 7,2 Hz, 2H),
4,20 - 4,10 (m, 1H), 3,71 (dt, J = 2,8, 11,6 Hz, 1H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 2,03 - 1,88 (m, 1H), 1,80 - 1,55 (m, 4H), 1,42 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[01583] Etapa 2: (1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2-il)metanol. A uma solução de etil 1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2-carboxilato (2 g, 8,92 mmol, 1 eq) em THF (40 mL) foi adicionado LiAlH4 (758 mg, 20,0 mmol, 2,24 eq) em 3 porções a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com Na2SO4 aquoso saturado (2,89 mL), filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 1/0 a 10/1) para dar (1-tetra-hidropiran-2-ylimidazol-2-il)metanol (1,57 g, 7,75 mmol, 87% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo amarelo.
[01584] 1H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ = 7,27 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,54 (dd, J = 2,4, 10,0 Hz, 1H), 4,74 - 4,61 (m, 2H), 4,15 - 3,99 (m, 1H), 3,76 - 3,68 (m, 1H), 2,06 - 1,88 (m, 3H), 1,84 - 1,60 (m, 3H).
[01585] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2- illimidazol-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-metilsulfinil-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 64, 380 mg, 654 umol, 1 eq) e (1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2- il)metanol (238 mg, 1,31 mmol, 2 eq) em tolueno (0,4 mL) foi adicionado t-BuONa (126 mg, 1,31 mmol, 2 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 20 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (10 mL) e extraído com EtOAc (2 × 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (SiO2, PE/EtOAc 3/1 a 1/3) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)- 4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (270 mg, 363,19 umol, 56% de rendimento, 94% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 699.
[01586] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-illimidazol-2- il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. NH3 foi borbulhado MeOH (3 mL) a -40°C por 10 minutos. Uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2-il)metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (260 mg, 372 umol, 1 eq) em MeOH (3 mL) foi adicionada a solução acima, depois Pd/C (100 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 6 vezes. A reação foi agitada sob H2 (15 psi) a 28°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-ylimidazol-2-il)metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (160 mg, 275 umol, 74% de rendimento, 97% pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 565.
[01587] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-illimidazol-2- il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2- ilimidazol-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (160 mg, 283 umol, 1,00 eq) e DIEA (73,2 mg, 567 umol, 98,7 uL, 2,00 eq) em DCM (3 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-eno (38,5 mg, 425 umol, 34,7 uL, 1,50 eq) gota a gota a -40°C. A mistura foi agitada a -40°C durante 10 minutos. Mediante conclusão, à mistura foi adicionado NaHCO3 aquoso saturado (1 mL) e água (3 mL). As camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, EtOAc/MeOH 50/1 a 10/1) para dar 2-[(2S)-4-[7- (1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-ilimidazol-2-il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (80 mg, 101 umol, 36% de rendimento, 78% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 619.
[01588] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-(1H-imidazol-2-ilmetoxi)-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. Uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-2-[(1-tetra-hidropiran-2-illimidazol-2- il)metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (67 mg, 84,5 umol, 1 eq) e TsOH•H2O (48,2 mg, 253 umol, 3 eq) em MeCN (1,5 mL) foi agitada a 60°C por 3 horas. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com NaHCO3 (1 mL) saturado a 0°C. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% NH3•H2O)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep (columa: PhenomenexSynergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água (0,225%FA) - ACN]; B%: 20% - 50%, 10,5 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-(1H-imidazol-2-ylmetoxi)-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 351, 2,55 mg, 4,22 umol, 5,4% de rendimento, 96% de pureza, FA) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 535.
[01589] Condição SFC: Coluna: Chiralpak AS-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm.
[01590] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,26 - 8,20 (m, 1H), 7,92 - 7,82 (m, 1H), 7,63 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,56 - 7,48 (m, 2H), 7,45 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,17 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,08 - 6,99 (m, 2H), 6,69 - 6,52 (m, 1H), 6,46 - 6,32 (m, 1H), 5,84 (br d, J=11,2 Hz, 1H), 5,56 - 5,44 (m, 2H), 5,24 - 4,90 (m, 1H), 4,88 - 4,14 (m, 4H), 4,14 - 3,79 (m, 2H), 3,79 - 3,37 (m, 3H), 3,35 - 2,64 (m, 4H), 2,61 - 2,49 (m, 1H).
EXEMPLO 352
2-[(2S)-4-[7-(4-ciclopropil-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano dioxano Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12hrs, 24,5% Duas etapas 8%
[01591] 3-bromo-4-ciclopropil-piridina. Uma mistura de 3,4-dibromopiridina (3,0 g, 12,7 mmol, 1,0 eq), ácido ciclopropilborônico (1,09 g, 12,7 mmol, 1,0 eq), Pd(dppf)Cl2 (927 mg, 1,27 mmol, 0,10 eq), K3PO4 (8,06 g, 38,0 mmol, 3,0 eq) em DMF (15,0 mL) e H2O (3,0 mL) foi degaseificada e purgada copm N2 por 3 vezes e, então, e a mistrua foi agitada a 60°C por 6 h sob pressão de N 2. O solvente orgânico foi lavado com água (80,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×100 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (300 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo : Acetato de etila = 30 : 1 a 20 : 1). O composto 3-bromo-4-ciclopropil-piridina (630 mg, 3,17 mmol, 25% de rendimento, 99,6% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 198.
[01592] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,69 – 8,61 (m, 1H), 8,39 – 8,32 (m, 1H), 6,75 – 6,71 (m, 1H), 2,29 – 2,18 (m, 1H), 1,20 – 1,12 (m, 2H), 0,84 – 0,77 (m, 2H).
[01593] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-ciclopropil-3-piridil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 500 mg, 1,06 mmol, 1,0 eq),3- bromo-4-ciclopropil-piridina (315 mg, 1,59 mmol, 1,50 eq), Pd2(dba)3 (97,09 mg, 106 umol, 0,10 eq), Ruphos (99,0 mg, 212 umol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (1,04 g, 3,18 mmol, 3,0 eq) em tolueno (5,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 12 horas sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi lavado com água (15,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×20 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% NH3•H2O em água, 0-60% MeCN]. O produto obtido foi, em seguida, concentrado, o aquoso foi extraído com EA (3×50 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-ciclopropil-3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 260 umol, 24,5% de rendimento, 85% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:589.
[01594] Etapa B : 2-[(2S)-4-[7-(4-ciclopropil-3-piridil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(4-ciclopropil-
3-piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (30,0 mg, 43,3 umol, 1,0 eq) em dioxano (1,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 1,0 mL, 92,4 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. sob atmosfera de N2. O solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso a pH~8, em seguida, concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×10,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-(4-ciclopropil-3-piridil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (30,0 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 489.
[01595] Etapa C : 2-[(2S)-4-[7-(4-ciclopropil-3-piridil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(4-ciclopropil-3- piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (30,0 mg, 61,4 umol, 1,0 eq) em DCM (1,50 mL) foi adicionado TEA (31,1 mg, 307 umol, 42,7 uL, 5,0 eq) e cloreto de prop-2-eno (8,34 mg, 92,1 umol, 7,51 uL, 1,50 eq) a -60°C. A mistura foi agitada a -60°C por 30 min. sob atmosfera de N2. A reação foi extinta com metanol (6,0 mL) e foi removida sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 33% -63%, 12 min.) e liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(4-ciclopropil-3- piridil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 352, 2,71 mg, 4,97 umol, 8,1% de rendimento, 99,5% pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 543.
[01596] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,29 (s 1H), 8,26 (d, J=5,2 Hz, 1H), 6,68 (d, J=5,2 Hz, 1H), 6,64 – 6,53 (m, 1H), 6,40 (dd, J=0,8 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 5,52 (d, J=10,4 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,39 (dd, J=4,8 Hz,
J=10,4 Hz, 1H), 4,29 – 4,23 (m, 1H), 4,21 – 4,15 (m, 2H), 4,13 – 4,07 (m, 1H), 4,00 – 3,95 (m, 1H), 3,57 (br s, 1H), 3,44 – 3,24 (m, 4H), 3,17 – 3,03 (m, 2H), 2,94 (dd, J=8,8 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 2,87 – 2,80 (m, 2H), 2,73 – 2,64 (m, 1H ), 2,49 (s, 3H), 2,35 – 2,22 (m, 3H), 2,11 – 2,00 (m, 1H), 1,89 – 1,76 (m, 3H),1,17 – 1,11 (m, 2H ), 0,90 – 0,77 (m, 3H).
EXEMPLO 353 1-[(3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona 0 - 70 °C, 12,5 h 58% Cs2CO3, -40 °C, 0,5 h tolueno, Duas etapas 105°C, 7h, 28% 47%
[01597] Etapa A: terc-butil (3R)-4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1-carboxilato. A solução de 7- benzil-2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (1,5 g, 5,10 mmol, 1 eq), terc-butil (3R)-3-metilpiperazina-1-carboxilato (1,12 g, 5,61 mmol, 1,1 eq), DIEA (1,32 g, 10,2 mmol, 1,78 mL, 2 eq) em NMP (30 mL) foi agitada a 100°C por 7 horas. Foi adicionada água (90 mL) à mistura. A mistura resultante foi diluída com EtOAc (20 mL) e extraída com EtOAc (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi misturado com (PE: EtOAc = 3:1, 20 mL) e filtrado e a torta de filtro foi lavada com (PE: EtOAc = 3:1, 40 mL) para dar terc-butil (3R)-4-(7- benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1- carboxilato (0,9 g, 1,73 mmol, 34 % de rendimento, 88,0% de pureza) como um sólido cinza. LCMS [ESI, M+1]: 458.
[01598] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,38 - 7,27 (m, 5H), 4,28 - 4,18 (m, 1H), 4,16 - 3,80 (m, 2H), 3,74 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 3,68 (s, 2H), 3,65 - 3,52 (m, 2H), 3,41 - 3,27 (m, 1H), 3,21 - 2,89 (m, 2H), 2,74 - 2,58 (m, 4H), 1,48 (s, 9H), 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
[01599] Etapa B: terc-butil (3R)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1- carboxilato. À solução de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (566 mg, 4,91 mmol, 583 uL, 2,5 eq) em THF (20 mL) foi adicionado NaH (157 mg, 3,93 mmol, 60,0% de pureza, 2 eq) a 0°C e agitada a 0°C por 0,5 hora. Então terc-butil (3R)-4-(7- benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1- carboxilato (900 mg, 1,97 mmol, 1 eq) foi adicionado à mistura. A mistura de reação foi aquecida até 70°C por 12 horas num tubo sob N2. A mistura foi extinta por Água (15 mL) A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 35%) para dar terc-butil (3R)-4-[7-benzil-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3- metil-piperazina-1-carboxilato (680 mg, 1,14 mmol, 58% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 537.
[01600] Etapa C: terc-butil (3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil (3R)-4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1-carboxilato (680 mg, 1,27 mmol, 1 eq) em MeOH (14 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (340 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 4 horas. A mistura de reação foi filtrada, a torta de filtro foi lavada com MeOH (3 × 10 mL) e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil (3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (540 mg, 1,09 mmol, 86% de rendimento, 90,0% de pureza) como um sólido marrom que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[01601] Etapa D: terc-butil (3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. À solução de terc-butil (3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (520 mg, 1,16 mmol, 1 eq), 1-bromonaftaleno (482 mg, 2,33 mmol, 324 uL, 2 eq), RuPhos (109 mg, 233 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (1,14 g, 3,49 mmol, 3 eq) em tolueno (11 mL) foram adicionados Pd2(dba)3 (107 mg, 116 umol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 105°C por 7 horas. Foi adicionada água (10 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 5:1 a 0:1). Então, o resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 61%). Composto terc-butil (3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato
(330 mg, 547 umol, 47% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 573.
[01602] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,26 - 8,18 (m, 1H), 7,89 - 7,84 (m, 1H), 7,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,43 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 4,26 (s, 3H), 4,18 - 4,14 (m, 1H), 4,03 - 3,68 (m, 2H), 3,45 - 3,00 (m, 6H), 2,84 (br s, 2H), 2,69 (br d, J = 6,4 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,35 - 2,24 (m, 1H), 2,12 - 2,06 (m, 1H), 1,91 - 1,70 (m, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,32 - 1,27 (m, 3H).
[01603] Etapa E: 4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A mistura de terc- butil (3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (330 mg, 576 umol, 1 eq) e TFA (657 mg, 5,76 mmol, 427 uL, 10 eq) foi agitada a 30°C por 40 min. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (340 mg, bruto, TFA) como um óleo marrom que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[01604] Etapa F: 1-[(3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona. À solução de 4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (340 mg, bruto, TFA), TEA (586 mg, 5,80 mmol, 807 uL) em DCM (6 mL) foi adicionado cloreto de prop- 2-enoíla (78,7 mg, 869 umol, 70,9 uL) a -40°C, a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora. A mistura foi extinta por NaHCO3 saturado (2 mL). A mistura foi diluída com EtOAc (5 mL) e extraída com EtOAc (10 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 12min.) para dar o composto do título
1-[(3R)-3-metil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (EXEMPLO 353, 85,5 mg, 162 umol, duas etapas 28% de rendimento, 99,8% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 527.
[01605] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,23 (br d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,90 - 7,84 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,70 - 6,52 (m, 1H), 6,37 (dd, J = 1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,77 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,66 - 4,31 (m, 3H), 4,27 (s, 2H), 4,14 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 1H), 4,02 - 3,73 (m, 2H), 3,64 - 3,25 (m, 4H), 3,24 - 2,99 (m, 2H), 2,86 (br s, 2H), 2,74 - 2,63 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H), 1,28 (br d, J = 4,4 Hz, 3H).
EXEMPLO 354 1-[3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
0 - 70 °C, 12,5 h 80% Cs2CO3, rt, 0,5h tolueno, 95- -40 °C, 0,5 h 105°C, 11h, 39%
[01606] Etapa A: terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3,3-dimetil-piperazina-1-carboxilato. A solução de 7-benzil-2,4- dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (1,5 g, 5,10 mmol, 1 eq) e terc-butil 3,3 -dimetilpiperazina-1-carboxilato (4,37 g, 20,4 mmol, 4 eq) foi agitada a 130°C por 22 horas. O resíduo foi usado diretamente para purificar. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 10:1). Em seguida, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*80mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 30%-60%, 35 min., 60% min.) para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-3,3-dimetil-piperazina-1-carboxilato (1 g, 2,12 mmol, 42% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 472.
[01607] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,39 - 7,28 (m, 5H), 4,01 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,69 (s, 2H), 3,55 - 3,44 (m, 6H), 2,78 - 2,66 (m, 4H), 1,51 (s, 6H), 1,48 (s, 9H).
[01608] Etapa B: terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,3-dimetil-piperazina-1-carboxilato. À solução de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (610 mg, 5,30 mmol, 629 uL, 2,5 eq) em THF (20 mL) foi adicionado NaH (169 mg, 4,24 mmol, 60% de pureza, 2 eq) a 0°C e agitada a 0°C por 0,5 hora. Em seguida, terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3,3-dimetil-piperazina-1-carboxilato (1 g, 2,12 mmol, 1 eq) foi adicionado à mistura. A mistura de reação foi aquecida até 70°C por 12 horas num tubo sob N2. A mistura de reação foi extinta por Água (10 mL). A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex luna C18 250*50mm*10 um; fase móvel: [água (FA 0,225%)-ACN]; B%: 25%-50%, 30; 79% min.) para dar terc-butil 4-[7-benzil-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,3- dimetil-piperazina-1-carboxilato (980 mg, 1,69 mmol, 80% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 551.
[01609] Etapa C: terc-butil 3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3,3-dimetil-piperazina-1-carboxilato (980 mg, 1,78 mmol, 1 eq) em MeOH (20 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (500 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 4 horas. A mistura foi filtrada, a torta de filtro foi lavada com MeOH (3 × 10 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil 3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (780 mg, 1,69 mmol, 95% de rendimento, 100% de pureza) como um óleo incolor que foi utilizado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:
461.
[01610] Etapa D: terc-butil 3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. À solução de terc-butil 3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 868 umol, 1 eq), 1-bromonaftaleno (360 mg, 1,74 mmol, 241 uL, 2 eq), Cs2CO3 (849 mg, 2,61 mmol, 3 eq) e RuPhos (81,0 mg, 174 umol, 0,2 eq) em tolueno (8 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (79,5 mg, 86,8 umol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 95°C por 8 horas. Foi adicionada água (10 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc = 10:1 ~ 0:1). Em seguida, o resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 52%) para dar terc-butil 3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 340 umol, 39% de rendimento, 95,0% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 587.
[01611] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 (dd, J = 3,2, 6,4 Hz, 1H), 7,87 - 7,82 (m, 1H), 7,58 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,51 - 7,45 (m, 2H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,39 - 4,27 (m, 2H), 4,12 - 4,05 (m, 3H), 3,60 - 3,26 (m, 6H), 3,14 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,79 (br s, 2H), 2,74 - 2,65 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,39 - 2,28 (m, 1H), 2,05 - 2,00 (m, 1H), 1,92 - 1,70 (m, 4H), 1,58 (br d, J = 4,0 Hz, 6H), 1,49 (s, 9H).
[01612] Etapa E: 4-(2,2-dimetilpiperazin-1-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A solução de terc- butil 3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 358 umol, 1 eq) e TFA (408 mg, 3,58 mmol, 265 uL, 10 eq) foi agitado a 30°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para dar 4-(2,2-dimetilpiperazin-1-il)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (210 mg, bruto, TFA) como um óleo marrom que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[01613] Etapa F: 1-[3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona. À solução de 4-(2,2-dimetilpiperazin-1-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (210 mg, bruto, TFA) e TEA (531 mg, 5,24 mmol, 730 uL) em DCM (4 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoíla (47,5 mg, 524 umol, 42,8 uL) a -40°C, a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora. A mistura foi extinta por água (2 mL). A mistura foi diluída com EtOAc (5 mL) e extraída com EtOAc (10 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 73%-100%, 12min.) para dar o composto do título 1-[3,3-dimetil-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (EXEMPLO 354, 104 mg, 189 umol, 53% de rendimento, 98,6% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 541.
[01614] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,26 - 8,18 (m, 1H), 7,85 (dd, J = 3,2, 6,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 3,2, 6,4 Hz, 2H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,65 - 6,52 (m, 1H), 6,48 - 6,33 (m, 1H), 5,79 - 5,70 (m, 1H), 4,37 - 4,26 (m, 2H), 4,21 (br t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,17 - 4,06 (m, 3H), 3,80 (s, 1H), 3,78 - 3,69 (m, 2H), 3,61 (s, 1H), 3,39 (br s, 2H), 3,13 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,80 (br s, 2H), 2,73 - 2,65 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,37 - 2,28 (m, 1H), 2,09 - 1,99 (m, 1H), 1,94 - 1,68 (m, 3H), 1,62 (br s, 6H).
EXEMPLO 355 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
1. ACE-Cl, DIEA, DCE, 15°C, 2 horas
2. MeOH, Cs2CO3, 60°C, 5 70°C, 1 hora, tolueno, horas, 82% 90°C, 8 93% horas, 89% 0°C, 0,5 t-BuONa, DCM, hora, tolueno, 25°C, 69% 0°C, 2 0,5 horas, 74% hora -50°C, 0,5 hora, duas etapas 49%
[01615] Etapa A: terc-butil 4-(7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de 7-benzil-4- cloro-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (5,0 g, 16,4 mmol, 1,0 eq) e terc-butil piperazina-1-carboxilato (4,57 g, 24,5 mmol, 1,50 eq) em DMSO (20,0 mL) foi adicionado DIEA (6,34 g, 49,1 mmol, 8,54 mL, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 5 horas. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (200 mL) e extraída com EA (200 mL × 3). A camada orgânica foi lavada com salmoura (500 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE : EA = 50:1 - 5:1) para dar terc-butil 4-(7-benzil-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (7,0 g, 15,4 mmol, 93% de rendimento) como um sólido marrom claro. LCMS [ESI, M+1]: 456.
[01616] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,40 - 7,27 (m, 5H), 3,68 (s, 2H), 3,58 (s, 2H), 3,54 - 3,48 (m, 4H), 3,47 - 3,38 (m, 4H), 2,65 (s, 4H), 1,48 (s, 9H).
[01617] Etapa B: terc-butil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-(7-benzil- 2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (7,0 g, 15,4 mmol, 1,0 eq) e DIEA (5,96 g, 46,1 mmol, 8,03 mL, 3,0 eq) em DCE (100 mL) foi adicionado 1-cloroetil carbonocloridrato (5,49 g, 38,4 mmol, 2,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 15°C por 2 horas. Então, a mistura foi concentrada. O resíduo foi dissolvido com MeOH (100 mL) e aquecido até 70°C, a mistura de reação foi agitada a 70°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-50% MeCN) para dar terc-butil 4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (4,6 g, 12,6 mmol, 82% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 366.
[01618] Etapa C: A uma solução de terc-butil 4-(2-metilsulfanil -5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (3,60 g, 9,85 mmol, 1,0 eq), (3-metoxi-1-naftil) trifluorometanossulfonato (Intermediário 30, 7,54 g, 24,6 mmol, 2,50 eq), RuPhos (919 mg, 1,97 mmol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (9,63 g , 29,6 mmol, 3,0 eq) em tolueno (30,0 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (1,35 g, 1,48 mmol, 0,15 eq). A mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N 2 3 vezes. Então, a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas. Após conclusão, a mistura foi adicionada água (50,0 mL) e extraída com EA (50,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE:EA = 20:1 - EA:MeOH = 10:1) para dar terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (4,60 g, 8,82 mmol, 89% de rendimento) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 522.
[01619] Etapa D: terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (3,80 g, 7,28 mmol, 1,0 eq) em EA (40,0 mL) foi adicionado m-CPBA (1,41 g, 6,56 mmol, 0,90 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura foi extinta com NaHSO3 saturado aquoso (30,0 ml) e extraída com EA (50,0 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-60% MeCN) para dar terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,70 g, 5,02 mmol, 69% de rendimento) como sólido amarelo.
[01620] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,52 - 7,42 (m, 1H), 7,39 - 7,33 (m, 1H), 6,92 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,42 (br s, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,61 (br d, J = 4,0 Hz, 8H), 3,52 - 3,34 (m, 2H), 3,08 - 2,81 (m, 5H), 1,50 (s, 9H).
[01621] Etapa E: terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,49 mmol, 1,0 eq) e t-BuONa (286 mg, 2,98 mmol, 2,0 eq) em tolueno (8,0 mL) foi adicionado [(2S, 4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (396 mg, 2,98 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-60% MeCN) para dar terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (670 g, 1,10 mmol, 74% de rendimento) como sólido amarelo.
[01622] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ = 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 - 7,41 (m, 1H), 7,38 - 7,31 (m, 1H), 6,90 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,29 - 5,06 (m, 1H), 4,44 (dd, J = 4,4, 10,8 Hz, 1H),
4,27 - 4,20 (m, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,66 - 3,43 (m, 9H), 3,36 (br s, 2H), 3,11 - 2,99 (m, 1H), 2,85 (br s, 2H), 2,70 - 2,55 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,40 - 2,26 (m, 1H), 2,05 - 1,91 (m, 1H), 1,50 (s, 9H).
[01623] Etapa F: 2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3- metoxi-1-naftil)-4-piperazina-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3- metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (650 mg, 1,07 mmol, 1,0 eq) em DCM (1,50 mL) foi adicionado TFA (2,39 g, 21,0 mmol, 1,55 mL, 19,6 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto 2-[[(2S,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (780 mg, bruto, 2 TFA) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 507.
[01624] Etapa G: 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona. A uma solução de 2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (3-metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (780 mg, 1,06 mmol, 1,0 eq, 2 TFA) e DIEA (1,65 g, 12,7 mmol, 2,22 mL, 12,0 eq) em DCM (8,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (201 mg, 1,59 mmol, 1,50 eq) a -50°C. A mistura foi agitada a -50°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (1 mL), depois concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 46%-76%, 12min.) a dar o composto do título 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3- metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona (EXEMPLO 355, 300 mg, 528 umol, duas etapas 49% de rendimento, 98% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 561.
[01625] 1 H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,10 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,49-7,42 (m, 1H), 7,40-7,32 (m , 1H), 6,91 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,61 (dd, J = 10,8, 16,8 Hz, 1H), 6,36 (dd, J = 2,0, 16,8 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 1,6, 10,4 Hz, 1H), 5,28 - 5,07 (m, 1H), 4,44 (dd, J = 4,8, 11,2 Hz, 1H), 4,30 - 4,19 (m, 3H), 3,93 (s, 3H), 3,84 (br s, 2H), 3,72 (br s, 2H), 3,65 - 3,50 (m, 5H), 3,37 (br s, 2H), 3,10 - 3,01 (m, 1H) , 2,87 (s largo, 2H), 2,70 - 2,55 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,42- 2,26 (m, 1H), 2,07 - 1,90 (m, 1H).
EXEMPLO 356 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona 98,2% t-BuONa, tolueno, 0°C, 30 mins 54% 0 °C, 30 mins duas etapas 18%
[01626] Etapa A: [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol. A uma solução de O1-terc-butil O2-metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,8 g, 6,94 mmol, 1,0 eqTH) em THF (30,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (790 mg, 20,8 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. Em seguida, a mistura agitada a 80°C por 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa de Na2SO4 saturada (6,0 mL). Então, a mistura foi filtrada e o filtro foi concentrado. O composto [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin- 2-il]metanol (1,1 g, 6,82 mmol, 98% de rendimento, 90% de pureza) foi obtido como um óleo incolor e usado para a próxima etapa sem purificação adicional.
[01627] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 3,90 - 3,82 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 3,2 Hz, 10,8 Hz, 1H), 3,46 - 3,37 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 2,77 - 2,65 (m, 1H), 2,64 - 2,57 (m, 1H), 2,35 - 2,30 (m, 4H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,90 - 1,79 (m, 1H).
[01628] Etapa B: terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil 4-[7-(3-metoxi-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,49 mmol, 1,0 eq), [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (454 mg, 3,12 mmol, 2,1 eq), t-BuONa (286 mg, 2,98 mmol, 2,0 eq) em tolueno (5,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N 2. Após conclusão, a mistura de reação foi adicionada água (15,0 mL), extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% FA em água, 0-60% MeCN]. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso até pH~8, então, concentrado, o aquoso foi extraído com EA (3 × 50,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-metoxi-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 808 umol, 54% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 619.
[01629] Etapa C: 2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3- metoxi-1-naftil)-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3- metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (450 mg, 727 umol, 1,0 eq) em DCM (6,0 mL) foi adicionado TFA (6,93 g, 60,8 mmol, 4,50 mL, 83,6 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo para dar 2- [[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (540 mg, bruto, 2TFA) como óleo amarelo. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 519.
[01630] Etapa D: 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona. A uma solução de 2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(3-metoxi-1-naftil)-4-piperazina-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (540 mg, 2TFA) em DCM (6,0 mL) foi adicionado gota a gota prop-2-enoil prop-2- enoato (130 mg, 1,03 mmol) e DIEA (800 mg, 6,19 mmol, 1,08 mL) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min. Após conclusão, a reação foi extinta com metanol (10,0 mL) e a mistura foi removida sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 48% - 78%, 12 min.) e sob liofilização. Composto do título 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(3-metoxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (EXEMPLO 356, 112 mg, 196 umol, 99% de pureza, 18% de rendimento) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:
573.
[01631] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 - 7,44 (m, 1H), 7,38 - 7,34 (m, 1H), 6,91 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,61 (dd, J = 10,4 Hz, 16,8 Hz, 1H), 6,35 (dd, J = 2,0 Hz, 16,8 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 1,6 Hz, 9,6 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 4,8 Hz, 10,8 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 4,22 - 4,16 (m, 1H ), 4,00 - 3,94 (m, 1H ), 3,92 (s, 3H), 3,83 - 3,67 (m, 4H), 3,62 - 3,48 (m, 4H), 3,47 - 3,42 (m, 1H), 3,40 - 3,33 (m, 2H), 3,30 (s, 3H), 2,94 - 2,82 (m, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,33 (dd, J = 6,0 Hz, 10,0 Hz, 1H), 2,12 - 2,04 (m, 1H), 2,01 - 1,93 (m, 1H ).
EXEMPLO 357 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
0 - 70 °C, 12,5 h 62% Cs2CO3, tolueno, Duas etapas, 97% 110°C, 5hrs, 44%
[01632] Etapa A: terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (631 mg, 4,74 mmol, 3,76 eq) em THF (7. 0 mL) foi adicionado NaH (126 mg, 3,16 mmol, 60% de pureza, 2,51 eq) a 0°C. Então, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 h. Então, terc-butil 4-(7-benzil-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (700 mg, 1,26 mmol, 1,0 eq) foi adicionado à mistura acima. Após adição, a mistura foi agitada a 70°C por 12 h. Depois da conclusão, a mistura foi extinta com NH4Cl saturado aquoso (15,0 mL) e extraída com EA (3 x 20,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Diclorometano: Metanol = 20:1 a 10:1) para dar terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (530 mg, 980 umol, 78% de rendimento) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 541.
[01633] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,24 - 7,13 (m, 5H), 5,08 - 4,91 (m, 1H), 4,23 (dd, J = 4,4 Hz, 10,8 Hz, 1H), 4,04 (dd, J = 6,0 Hz, 10,8 Hz, 1H),
3,53 (s, 2H), 3,45 - 3,42 (m, 2H), 3,38 - 3,33 (m, 5H), 3,31 - 3,27 (m, 4H), 2,90 - 2,84 (m, 1H), 2,52 - 2,46 (m, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,21 - 2,09 (m, 1H), 1,87 - 1,73 (m, 3 H), 1,34 (s, 9H).
[01634] Etapa B: terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-pirrolidin-2-metil- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[7-benzil-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-1di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (480 mg, 887 umol, 1 eq) em MeOH (6,0 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (270 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, EA/MeOH = 20:1 a 10:1). O produto terc-butil 4- [2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (350 mg, 706 umol, 79% de rendimento, 91% de pureza) foi obtido como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:451.
[01635] Etapa C: A uma mistura de terc-butil 4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (280 mg, 621 umol, 1,0 eq), Pd2(dba)3 (85,3 mg, 93,2 umol, 0,15 eq), RuPhos (58,0 mg, 124,3 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (404 mg, 1,24 mmol, 2,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado (4-bromo-2-naftil) 2,2-dimetilpropanoato (Intermediário 54, 572 mg, 1,86 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 110°C por 5 h sob N2. A mistura foi extinta com água (15,0 mL) e extraída com EA (3 × 20,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [18C, 0,1% FA em água, 0-70% MeCN]. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 saturado aquoso até pH-8, então, concentrado, o aquoso foi extraído com EA (3 × 40,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto terc-butil 4-[7-[3-(2,2- dimetilpropanoiloxi)-1-naftil]-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-
6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (190 mg, 272 umol, 44% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 677.
[01636] Etapa D: [4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]-2,2- dimetilpropanoato. A uma mistura de terc-butil 4-[7-[3-(2,2-dimetilpropanoiloxi)- 1-naftil]-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (110 mg, 162 umol, 1,0 eq) em DCM (1,5 mL) foi adicionado TFA (2,31 g, 20,2 mmol, 1,5 mL, 124 eq), em porções a 25°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar [4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil]-2,2-dimetilpropanoato (200 mg, bruto, 2TFA) como sólido amarelo, que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 577.
[01637] Etapa E: [4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-4-(4- prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]-2,2- dimetilpropanoato. A uma mistura de [4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]-2,2- dimetilpropanoato (200 mg, 2TFA) e TEA (493 mg, 4,87 mmol, 678 uL) em DCM (2,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (40,9 mg, 324 umol) em porções a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por MeOH (3,0 mL) a 0°C e, em seguida, concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, EA/MeOH = 20:1 a 10:1). Composto [4-[2- [[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2-naftil]-2,2-dimetilpropanoato (100 mg, 153 umol, 97% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:631.
[01638] Etapa F: 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2- en-1-ona. Uma mistura de [4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-2- naftil]-2,2-dimetilpropanoato (39,0 mg, 61,8 umol, 1,0 eq) e NaOH (61,8 mg, 1,55 mmol, 25,0 eq) em THF (1,5 mL) e H2O (1,5 mL) foi agitada a 25°C por 14 horas. Depois da conclusão, a mistura de reação foi extinta por água (10,0 mL) e, então, extraída com EA (3 x 15,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B: 38%-68%, 12min.) e liofilização. Composto do título 1-[4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(3-hidroxi-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (EXEMPLO 357, 10,1 mg, 18,4 umol, 30% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 547.
[01639] Condições SFC: 100% ee.
[01640] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 7,30 - 7,34 (m, 1H), 6,88 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,60 (dd, J = 10,4 Hz, 16,8 Hz, 1H), 6,37 (dd, J = 1,6 Hz, 16,8 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 2,0 Hz, 10,2 Hz, 1H), 5,28 - 5,14 (m, 1H), 4,46 (dd, J = 4,8 Hz, 11,2 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 5,2 Hz, 11,2 Hz, 1H), 4,18 (s, 2H), 3,82 - 3,68 (m, 2H), 3,66 - 3,55 (m, 4H), 3,52 - 3,42 (m 4H), 3,35 - 3,21 (m, 2H), 3,17 - 3,10 (m, 1H), 2,82 - 2,68 (m, 2H), 2,63 - 2,74 (m, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,40 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 1,94 (m, 1H).
EXEMPLO 358
1-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-prop-2-inil-piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
2. tolueno, 100°C, 25 °C, 0,5 h 1h, 68% 88,3% tolueno, 110°C, 3h 49% CH2Cl2, -40 °C, 0,25 h 52% 100 °C, 0,25 h 46%
[01641] Etapa A: Ácido (2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)pent-4-inoico. A uma suspensão de ácido (2S)-2-aminopent-4-inoico (5 g, 44,2 mmol, 1 eq) em THF (15 mL) foi adicionado H2O (15 ml), K2CO3 (18,3 g, 133 mmol, 3 eq) e Boc2O (11,1 g, 50,8 mmol, 11,7 ml, 1,15 eq). Foi adicionada água adicional para produzir uma solução que foi agitada por 12 horas a 25°C. O solvente orgânico foi, então, evaporado e a solução aquosa foi lavada com éter t-butilmetílico, depois acidificada até pH = 3 com ácido HCl 1N. A solução foi extraída com acetato de etila (2 × 100 mL). O solvente foi evaporado para dar ácido (2S)-2- (terc-butoxicarbonilamino)pent-4-inoico (8 g, 37,5 mmol, 85% de rendimento) como um óleo incolor usado sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 589.
[01642] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 8,0, 13,2 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 5,10 (br s, 1H), 4,49 - 4,33 (m, 2H), 4,21 - 4,01 (m, 3H), 3,96 - 3,79 (m, 2H), 3,60 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,44 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 3,32 - 2,97 (m, 5H), 2,88 - 2,53 (m, 4H), 2,48 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,29 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,87 - 1,71 (m, 3H).
[01643] Etapa B: etil 2-[benzil-[(2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)pent-4- inoil]amino]acetato de etila. A uma solução de ácido (2S)-2-(terc- butoxicarbonilamino)pent-4-inoico (7,75 g, 36,4 mmol, 1 eq), etil 2- (benzilamino)acetato (7,02 g, 36,4 mmol, 1 eq) e HATU (16,6 g, 43,5 mmol, 1,20 eq) em DMF (50 mL) foi adicionado TEA (7,35 g, 72,7 mmol, 10,1 mL, 2,00 eq) a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 h. A mistura foi diluída com acetato de etila (150 mL) e lavada com água (3 × 200 mL) e salmoura (1 × 100 mL). A camada orgânica separada foi lavada com água (1 × 100 mL), salmoura (1 × 100 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Composto etil 2-[benzil-[(2S)- 2-(terc-butoxicarbonilamino)pent-4-inoil]amino]acetato (13,7 g, 32,1 mmol, 88,3% de rendimento, 91% de pureza) foi obtido como um óleo vermelho que se torna para vermelho sólido quando repousando a 25°C por 16 horas. LCMS [ESI, M-99]: 289.
[01644] Etapa C: (3S)-1-benzil-3-prop-2-inil-piperazina-2,5-diona. A uma solução de etil 2-[benzil-[(2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)pent-4-inoil] amino]acetato (11,7 g, 30,1 mmol, 1 eq) em DCM (40 mL) foi adicionado TFA (46,2 g, 405 mmol, 30 mL, 13,5 eq) a 0°C e a mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo e foi adicionado tolueno (30 mL). Após agitada a 100°C por 1 hora, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (200 mL) e basificado com solução aquosa saturada de carbonato de sódio até pH = 8. A camada orgânica separada foi lavada com água (1 × 200 mL) e salmoura (1 × 100 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi triturado com (acetato de etila/éter de petróleo 1/5, 100 mL) e o precipitado foi filtrado. A torta de filtro foi seca sob vácuo. O composto (3S)-1-benzil-3-prop-2-inil-piperazina-2,5-diona (5 g, 20,5 mmol, 68% de rendimento, 99,5% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 243.
[01645] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,46 - 7,20 (m, 5H), 6,59 (br s, 1H), 4,76 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 4,20 (br d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,04 - 3,90 (m, 1H), 3,89 - 3,76 (m, 1H), 2,95 - 2,69 (m, 2H), 2,05 (t, J = 2,8 Hz, 1H).
[01646] Etapa D: (3S)-1-benzil-3-prop-2-inil-piperazina. A uma mistura de (3S)-1-benzil-3-prop-2-inil-piperazina-2,5-diona (5,00 g, 20,6 mmol, 1,00 eq) em THF (50,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (3,13 g, 82,6 mmol, 4,00 eq) a 25°C. Após agitada a 65°C por 12 horas, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com acetato de etila (100 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar (3S)-1- benzil-3-prop-2-inil-piperazina (4,10 g, 19,1 mmol, 93% de rendimento) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[01647] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,37 - 7,24 (m, 5H), 3,55 - 3,47 (m, 2H), 3,03 - 2,86 (m, 3H), 2,85 - 2,78 (m, 1H), 2,73 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,33 - 2,20 (m, 2H), 2,13 - 2,04 (m, 1H), 2,02 (t, J = 2,8 Hz, 1H), 1,90 - 1,83 (m, 1H).
[01648] Etapa E: terc-butil (2S)-4-benzil-2-prop-2-inil-piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de (3S)-1-benzil-3-prop-2-inil-piperazina (2,00 g, 9,33 mmol, 1,00 eq), TEA (2,83 g, 28,0 mmol, 3,90 mL, 3,00 eq) e (Boc) 2O (10,2 g, 46,7 mmol, 10,7 mL, 5,00 eq) em THF (20,0 mL) foi agitada a 25 por 1 hora. A mistura foi diluída com água (1 × 20,0 mL), extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (1 × 30,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 5/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil (2S)-4-benzil-2-prop-2-inil-piperazina-1-carboxilato (1,50 g, 4,20 mmol, 45% de rendimento, 88% de pureza) como um óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 315.
[01649] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,38 - 7,27 (m, 5H), 4,26 (br s, 1H), 3,99 - 3,74 (m, 1H), 3,59 - 3,45 (m, 2H), 3,08 - 2,89 (m, 2H), 2,79 - 2,68 (m, 2H), 2,62 - 2,53 (m, 1H), 2,11 (dd, J = 3,6, 11,2 Hz, 1H), 2,06 - 1,98 (m, 1H), 1,89 (t, J = 2,8 Hz, 1H), 1,48 - 1,45 (m, 9H).
[01650] Etapa F: (2S)-2-prop-2-inilpiperazina. Uma mistura de terc-butil (2S)-4-benzil-2-prop-2-inil-piperazina-1-carboxilato (1,40 g, 4,45 mmol, 1,00 eq), 1-cloro-1-(1-cloroviniloxi)etano (2,51 g, 17,8 mmol, 4,00 eq) em DCE (20,0 mL) foi agitada a 85°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (20,0 mL) e agitado a 65°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo e triturada com éter de petróleo (10,0 mL) para dar (2S)- 2-prop-2-inilpiperazina (0,80 g, bruto, 2 HCl) como um sólido amarelo e usada na próxima etapa sem purificação adicional.
[01651] 1H NMR (400MHz, metanol-d4) δ = 4,56 - 4,44 (m, 1H), 3,88 - 3,80 (m, 1H), 3,79 - 3,73 (m, 1H), 3,62 - 3,34 (m, 4H), 2,87 - 2,76 (m, 3H).
[01652] Etapa G: 4-benziloxi-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. Uma mistura de 4-benziloxi-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (2,00 g, 5,64 mmol , 1,00 eq), 1-bromonaftaleno (1,75 g, 8,46 mmol, 1,18 mL, 1,50 eq), Pd2(dba)3 (517 mg, 564 umol, 0,10 eq), RuPhos (527 mg, 1,13 mmol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (3,68 g, 11,3 mmol, 2,00 eq) em tolueno (20,0 mL) foi agitada a 110°C por 3 horas sob N2. A mistura foi diluída com água (5,00 mL), extraída com acetato de etila (3 × 5,00 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (TFA, 0,10%)/acetonitria]. A fração desejada foi coletada e ajustada para pH > 7 por bicarbonato de sódio saturado (5,00 mL) e depois extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na2S4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 4-benziloxi-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (1,34 g, 2,78 mmol, 49% de rendimento, 99,6% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 481.
[01653] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 - 8,16 (m, 1H), 7,89 - 7,82 (m, 1H), 7,59 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,51 - 7,45 (m, 4H), 7,45 - 7,33 (m, 4H), 7,14 (dd, J = 0,8, 7,2 Hz, 1H), 5,49 (s, 2H), 4,45 (dd, J = 5,6, 10,4 Hz, 1H), 4,27 - 4,18 (m, 3H), 3,55 - 3,24 (m, 2H), 3,12 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,89 (br s, 2H), 2,76 - 2,65 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,35 - 2,24 (m, 1H), 2,14 - 2,06 (m, 1H), 1,91 - 1,78 (m, 3H).
[01654] Etapa H: 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol. Uma mistura de 4-benziloxi-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (1,30 g, 2,70 mmol, 1,00 eq) e Pd/C (0,20 g, 10% de pureza) em metanol (200 mL) foi agitada a 25°C por 1 hora sob H2 a 15 psi. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H -pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol (1,00 g, 1,90 mmol, 70% de rendimento, 74% de pureza) como um sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 391.
[01655] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,24 - 8,16 (m, 1H), 7,90 - 7,81 (m, 1H), 7,59 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,43 - 4,31 (m, 2H), 4,05 (s, 2H), 3,38 (br s, 2H), 3,18 - 3,10 (m, 1H), 2,79 (br s, 2H), 2,70 - 2,54 (m, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,32 (dt, J = 7,2, 9,6 Hz, 1H), 2,02 - 1,96 (m, 1H), 1,91 - 1,75 (m, 3H).
[01656] Etapa I: [2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]trifluorometanossulfonato. A uma solução de 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-4-ol (0,40 g, 1,02 mmol, 1,00 eq) e TEA (207 mg, 2,05 mmol, 285 uL, 2,00 eq) em diclorometano (10,0 mL) foi adicionado Tf2O (318 mg, 1,13 mmol, 186 uL, 1,10 eq) a -40°C. Após agitada -40°C por 0,25 hora, a mistura foi diluída com água (3,00 mL) e, então, extraída com acetato de etila (3 × 5,00 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 5,00 mL), secos sobre Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 10/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar [2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]trifluorometanossulfonato (0,40 g, 528 umol, 52% de rendimento, 69% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 523.
[01657] Etapa J: 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-4-[(3S)-3- prop-2-inilpiperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. Uma mistura de [2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidina-4-il]trifluorometanossulfonato (0,38 g, 727 umol, 1,00 eq), (2S)-2- prop-2-inilpiperazina (350 mg, bruto, 2 HCl) e DIEA (939 mg, 7,27 mmol, 1,27 mL, 10,0 eq) em DMF (4,00 mL) foi agitada a 100°C por 0,25 hora. A mistura foi diluída com água (5,00 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 10,0 mL), secos sobre Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,1%)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-4-[(3S)-3- prop-2-inilpiperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (0,20 g, 336 umol, 46% de rendimento, 99% de pureza, 2 FA) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 497.
[01658] Etapa K: 1-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-prop-2-inil-piperazin-1-il]prop-2-en- 1-ona. A uma solução de 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-4-[(3S)- 3-prop-2-inilpiperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (145 mg, 246 umol, 1,00 eq, 2 FA) e TEA (374 mg, 3,69 mmol, 514 uL, 15,0 eq) em diclorometano (4,00 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoíla (22,3 mg, 246 umol, 20,1 uL, 1,00 eq) a -40°C. Após agitada a 25°C por 0,25 h, a mistura foi diluída com água (3,00 mL) e depois extraída com diclorometano (3 × 3,00 mL). Os extratos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3) - ACN]; B%: 57% - 87%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 1-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-prop-2-inil-piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona (EXEMPLO 358, 25,6 mg, 46,3 umol, 19% de rendimento, 99,5% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 551.
[01659] Condições SFC: “Coluna OD-3S_3_40_3ML: Chiralcel OD-3 100x4,6mm I.D., Fase móvel 3um: 40% de metanol (0,05% de DEA) em Taxa de fluxo de CO2: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm”.
[01660] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,21 (m, 1H), 7,91 - 7,81 (m, 1H), 7,60 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 7,46 - 7,39 (m, 1H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,65 (br s, 1H), 6,36 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 2,0, 10,8 Hz, 1H), 5,00 - 4,52 (m, 1H), 4,46 - 4,36 (m, 1H), 4,34 - 3,81 (m, 6H), 3,47 (m, 1H), 3,38 - 3,21 (m, 2H), 3,19 - 2,90 (m, 4H), 2,84 (br s, 1H), 2,73 - 2,52 (m, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,10 - 2,03 (m, 1H), 1,90 - 1,70 (m, 4H).
EXEMPLO 359 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 100°C, 2h, 39%
[01661] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de 1-bromo-8-metil-naftaleno (Intermediário 69, 507 mg, 1,65 mmol, 1,3 eq), terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 600 mg, 1,27 mmol, 1 eq), Cs2CO3 (1,04 g, 3,18 mmol, 2,5 eq), Ruphos (118 mg, 254 umol, 0,2 eq) e Pd2(dba)3 (233 mg, 254 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N 2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 100°C por 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Composto terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-fluoro-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (310 mg, 501 umol, 39% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 612.
[01662] 1HNMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,74 - 7,60 (m, 2H), 7,46 - 7,37 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 4,61 (br s, 1H), 4,43 - 4,33 (m, 1H), 4,30 - 4,14 (m, 2H), 4,10 - 3,72 (m, 4H), 3,60 - 3,44 (m, 1H), 3,38 (br dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 1H), 3,24 - 3,04 (m, 4H), 3,03 - 2,84 (m, 5H), 2,82 - 2,53 (m, 4H), 2,52 - 2,42 (m, 3H), 2,29 (br s, 1H), 2,05 - 1,95 (m, 1H), 1,91 - 1,69 (m, 2H), 1,52 (s, 9H).
[01663] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (310 mg, 506 umol, 1 eq) em DCM (500 uL) foi adicionado TFA (866 mg, 7,60 mmol, 562 uL, 15 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (317 mg, 506 umol, 99% de rendimento, TFA) foi obtido como um óleo amarelo e usado para a próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[01664] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (317 mg, 506 umol, 1 eq, TFA) em DCM (5 mL) foi adicionado TEA (512 mg, 5,07 mmol, 705 uL, 10 eq) a 0°C. Após adição, e prop-2-enoil prop-2- enoato (51,1 mg, 405 umol, 0,8 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (1 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 50% - 80%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7- (8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 359, 60,2 mg, 105 umol, 21% de rendimento, 99,5% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01665] Condição SFC: “Coluna OJ-3S_5_5_40_3ML: Chiralcel OJ-3 100×4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: etanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm”.
[01666] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 - 7,60 (m, 2H), 7,46 - 7,38 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,46 - 6,33 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,64 (br s, 1H), 4,44 - 4,32 (m, 1H), 4,31 - 4,21 (m, 1H), 4,20 - 4,03 (m, 3H), 3,98 - 3,83 (m, 1H), 3,78 - 3,62 (m, 1H), 3,60 - 3,36 (m, 2H), 3,23 - 2,96 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,88 - 2,74 (m, 1H), 2,73 - 2,55 (m, 2H), 2,47 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,35 - 2,21 (m, 1H), 2,13 - 1,97 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H).
[01667] Alternativamente, o EXEMPLO 359 pode ser preparado da seguinte forma: Cs2CO3, 80 °C, 1,5 h 79% tolueno, 90°C, 5h, 79% HCl.dioxano Dioxano 0°C, 1h, 93% Cs2CO3, tolueno, 90°C, 6h, 33% -40 °C, 0,5 h 32%
[01668] Etapa: terc-Butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato. A uma solução de terc-butil 2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pi8rimidina-7-carboxilato (18,8 g, 61,7 mmol, 1 eq) em DMF (200 mL) foi adicionado DIEA (15,9 g, 123 mmol, 21,5 mL, 2 eq) e benzil (2S)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 63, 16,0 g, 61,7 mmol, 1 eq). Após agitada a 80°C por 1,5 hora, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila (200 mL) e lavada com água (200 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 50/1 a 2/1). Composto terc-Butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (26 g, 48,8 mmol, 79% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 527.
[01669] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,34 (m, 5H), 5,20 (s, 2H), 4,73 - 4,60 (m, 2H), 4,45 (d, J = 19,2 Hz,, 1H), 4,13 - 4,02 (m, 2H), 3,94 - 3,75 (m, 2H), 3,45 - 3,25 (m, 3H), 3,11 (td, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,88 - 2,59 (m, 4H), 1,60 (s, 9H).
[01670] Etapa B: terc-Butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. Uma mistura de [(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (10,5 g, 91,1 mmol, 10,8 mL, 2 eq), terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (24 g, 45,6 mmol, 1 eq), Pd2(dba)3 (6,18 g, 6,84 mmol, 0,15 eq), RuPhos (4,26 g, 9,12 mmol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (37,1 g, 114 mmol, 2,5 eq) em tolueno (450 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 5 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (200 mL) e extraída com acetato de etila (500 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al 2O3, acetato de etila/metanol = 1/0 a 10/1). Composto terc-Butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (25 g, 35,9 mmol, 79% de rendimento, 87% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 606.
[01671] Etapa C: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (16 g, 26,4 mmol, 1 eq) em dioxano (100 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 99,1 mL, 15 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. O dioxano foi decantado e o sólido foi coletado. O resíduo sólido foi diluído com água (50 mL) e diclorometano (200 mL), em seguida, ajustado pH = 8 com solução saturada de Na2CO3 aquosa e extraído com acetato de etila (200 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 65, 13,5 g, 24,5 mmol, 93% de rendimento, 91,6% de pureza) como um óleo amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 506.
[01672] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,45 - 7,31 (m, 5H), 5,19 (s, 2H), 4,65 (br s, 1H), 4,40 - 4,31 (m, 1H), 4,14 - 4,04 (m, 2H), 4,03 - 3,91 (m, 3H), 3,91 - 3,77 (m, 1H), 3,24 (d, J = 13,2 Hz, 2H), 3,16 - 3,05 (m, 2H), 3,04 - 2,89 (m, 2H), 2,81 (br s, 1H), 2,75 - 2,51 (m, 4H), 2,47 (s, 3H), 2,35 - 2,22 (m, 1H), 2,08 - 2,00 (m, 1H), 1,92 - 1,76 (m, 3H).
[01673] Etapa D: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-
1-carboxilato (10 g, 19,8 mmol, 1 eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (Intermediário 69, 5,68 g, 25,7 mmol, 1,3 eq), RuPhos (2,77 g, 5,93 mmol, 0,3 eq), Cs2CO3 (16,1 g, 49,5 mmol, 2,5 eq) e Pd2(dba)3 (3,62 g, 3,96 mmol, 0,2 eq) em tolueno (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 6 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (200 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (500 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (9 g, 12,9 mmol, 33% de rendimento, 93% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
646.
[01674] 1H NMR (400MHz, C2D2Cl4) δ = 7,32 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,08 - 6,93 (m, 7H), 6,91 – 6,78 (m, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,30 (s, 1H), 4,13 - 3,95 (m, 1H), 3,88 - 3,33 (m, 6H), 3,22 - 2,87 (m, 2H), 2,86 - 2,65 (m, 4H), 2,65 - 2,42 (m, 5H), 2,41 - 2,32 (m, 1H), 2,30 - 2,13 (m, 2H), 2,07 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,92 (br s, 1H), 1,72 - 1,45 (m, 4H).
[01675] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (8 g, 12,4 mmol, 1 eq) em MeOH (100 mL) foi adicionado Pd/C (2 g, 10% de pureza) e NH3•MeOH (50 mL, 15%) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (5,7 g, 10,0 mmol, 81% de rendimento, 90% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[01676] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 3,2, 7,6 Hz, 1H), 7,40 (td, J = 4,4, 7,6 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 2H), 4,46 - 4,34 (m, 1H), 4,25 - 4,03 (m, 2H), 3,97 - 3,69 (m, 3H), 3,49 - 3,44 (m, 1H), 3,39 - 3,07 (m, 5H), 3,06 - 2,83 (m, 6H), 2,76 - 2,63 (m, 1H), 2,62 - 2,51 (m, 3H), 2,48 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 2,35 - 2,22 (m, 1H), 2,13 - 1,98 (m, 1H), 1,83 - 1,69 (m, 3H).
[01677] Etapa F: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (6,4 g, 12,5 mmol, 1 eq) em diclorometano (120 mL) foi adicionado TEA (19 g, 187 mmol, 26 mL, 15 eq) a -40°C. Após adição, uma solução de cloreto de prop-2-enoil (1,70 g, 18,8 mmol, 1,53 mL, 1,5 eq) em diclorometano (2 mL) foi adicionada gota a gota a - 40°C. Depois de agitada a -40°C por 0,5 hora, a mistura de reação foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO 3 (10 mL), em seguida, diluída com água (50 mL) e extraída com diclorometano (50 ml × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, DCM/MeOH = 100/1 a 10/1) e adicionalmente purificado por HPLC-prep (coluna: Kromasil 250*50mm*10um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 20% - 50%, 28 min.). A mistura foi ajustada pH = 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com diclorometano (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7- (8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 359, 2,3 g, 4,03 mmol, 32% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[01678] 1H NMR (400MHz, clorofórmio -d) δ = 7,74 - 7,59 (m, 2H), 7,46 - 7,36 (m, 1H), 7,33 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,15 (m, 2H), 6,70 - 6,47 (s, 1H), 6,39 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,82 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,16 - 4,47 (m, 1H), 4,44 - 4,32 (m, 1H), 4,30 - 3,62 (m, 6H), 3,58 - 3,26 (m, 2H), 3,25 - 2,95 (m, 5H), 2,91 (s, 3H), 2,86 - 2,55 (m, 4H), 2,48 (d, J = 5,2 Hz, 3H), 2,36 - 2,21 (m, 1H), 2,13 - 2,02 (m, 1H), 1,92 - 1,67 (m, 3H).
EXEMPLO 360 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 90°C, 12hrs, 34% 0 °C, 0,5 hr Duas etapas 17%
[01679] Inserir: 1-bromo-8-etil-naftaleno. A uma solução de 1,8- dibromonaphthalene (2,0 g, 6,99 mmol, 1,0 eq) e Pd(dppf)Cl2 (367 mg, 501 umol, 7,16 e-2 eq) em THF (15,0 ml) foi adicionado dietil zinco (1,0 M em tolueno, 3,50 mL, 0,50 eq) a -78°C. A mistura foi agitada a -78 -20°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi adicionada água (30,0 mL) e extraída com EA (30,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi triturado com PE (60,0 mL) e filtrado. A torta de filtro foi lavada com PE (10,0 mL × 2), o líquido mãe foi concentrado. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0 - 100% MeCN) para dar 1-bromo-8-etil-naftaleno (600 mg, 2,45 mmol, 35% de rendimento, 96% de pureza)) como óleo amarelo.
[01680] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,72 - 7,63 (m, 2H), 7,58 (dd, J = 2,4, 7,2 Hz, 1H), 7,30 - 7,23 (m, 2H), 7,13 - 7,04 (m, 1H), 3,43 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H).
[01681] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-
1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 66, 300 mg, 636 umol, 1,0 eq), t-BuONa (183 mg, 1,91 mmol, 3,0 eq), RuPhos (59,4 mg , 127 umol, 0,2 eq) e RuPhos-Pd-G3 (106 mg, 127 umol, 0,20 eq) em tolueno (5,0 mL) foi adicionado 1-bromo-8-etil- naftaleno (299 mg, 1,27 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 90°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-60% MeCN) para dar terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4- [7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 221 umol, 34% de rendimento, 98% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 626.
[01682] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (130 mg, 208 umol, 1,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado TFA (1,54 g, 13,5 mmol, 1,0 mL, 65,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 10 min. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O produto 2- [(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto, 2TFA) foi obtido como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[01683] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (150 mg, 199 umol, 1,0 eq, 2TFA) e DIEA (309 mg, 2,39 mmol, 416 uL, 12,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (37,7 mg, 299 umol, 1,50 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (1,0 mL) e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 53%-83%, 12min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 360, 20,0 mg, 33,8 umol, 17% de rendimento, 98% de pureza) como sólido rosa. LCMS [ESI, M+1]: 580.
[01684] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,74 - 7,64 (m, 2H), 7,46 - 7,35 (m, 2H), 7,27 - 7,20 (m, 2H), 6,64 - 6,60 (m, 1H), 6,46 - 6,36 (m, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,20 - 4,50 (m, 1H), 4,45 - 4,33 (m, 1H), 4,31 - 4,19 (m, 1H), 4,17 - 3,96 (m, 3H), 3,93 - 3,84 (m, 1H), 3,74 (br d, J = 18,0 Hz, 1H), 3,65 - 3,39 (m, 3H), 3,37 - 2,92 (m, 7H), 2,88 - 2,76 (m, 1H), 2,71 - 2,57 (m, 2H), 2,47 (br d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,98 (m, 1H), 1,80 - 1,72 (m, 3H), 1,17 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
EXEMPLO 361 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 1 hora, 66% 25°C, 0,5 hora 0°C, 0,5 hora, duas etapas 9%
[01685] Inserir: [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol. A uma solução de terc- buti (3R)-3-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato (1,0 g, 4,97 mmol, 1,0 eq) em THF (20,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (377 mg, 9,94 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0.5 hora, depois aquecida até 70°C e agitada a 70°C por 2 horas. Depois da conclusão, a mistura de reação foi extinta com Na2SO4 aquoso saturado (1,0 mL), em seguida, filtrada. A torta de filtro foi lavada com THF (10,0 mL). Em seguida, o líquido mãe foi concentrado para dar [(3R)-1-metilpirrolidin- 3-il]metanol (500 mg, 4,34 mmol, 87% de rendimento) como óleo incolor.
[01686] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 3,65 (dd, J = 4,8, 10,0 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 5,6, 10,0 Hz, 1H), 3,05 - 2,69 (m, 2H), 2,63 - 2,53 (m, 1H), 2,51 - 2,44 (m, 1H), 2,40 - 2,25 (m, 5H), 2,04 - 1,94 (m, 1H), 1,72 - 1,59 (m, 1H).
[01687] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metanol (178 mg, 1,55 mmol, 3,0 eq) em tolueno (3,0 mL) foi adicionado t-
BuONa (124 mg, 1,29 mmol, 2,50 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Em seguida, terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (300 mg, 516 umol, 1,0 eq) foi adicionado à mistura acima. Após adição, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0-60% de MeCN) para dar terc-butil (2S)-4-[7- (8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (220 mg, 342 umol, 66% de rendimento, 98% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 632.
[01688] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (360 mg, 569 umol, 1,0 eq) em DCM (1,50 mL) foi adicionado TFA (2,31 g, 20,3 mmol, 1,50 mL, 35,6 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (450 mg, bruto, 2TFA) como óleo amarelo.
[01689] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (450 mg, 592 umol, 1,0 eq, 2TFA) e DIEA (918 mg, 7,10 mmol, 1,24 mL), 12,0 eq) em DCM (4,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (112 mg, 888 umol, 1,50 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (1,0 mL) e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,04% NH3•H2O)-ACN]; B%: 70%-82%, 10 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 361, 32,6 mg, 53,8 umol, 9% de rendimento, 97% de pureza) como sólido cinza. LCMS [ESI, M+1]: 586.
[01690] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,68 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,41 -7,32 (m, 1H), 7,26 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,18 - 7,11 (m, 1H), 6,60 - 6,43 (m, 1H), 6,32 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,75 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,15 - 4,50 (m, 1H), 4,41 - 4,28 (m, 1H), 4,18 - 4,10 (m, 2H), 4,09 - 3,88 (m, 2H), 3,87 - 3,68 (m, 2H), 3,57 -3,45 (m, 1H), 3,42 - 3,26 (m, 1H), 3,25 - 2,87 (m, 5H), 2,86 - 2,74 (m, 1H), 2,73 - 2,57 (m, 3H), 2,56 - 2,47 (m, 2H), 2,46 - 2,37 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,07 - 1,90 (m, 1H). LCMS [ESI, M+1]:
586.
EXEMPLO 362 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0- 25 °C, 0,5 h 20°C, 1hr, 64% 0°C, 0,5 hr, duas etapas 23%
[01691] Etapa A: terc-butil(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de 2-(1-piperidil) etanol (133 mg, 1,03 mmol, 137 uL, 3,0 eq) em tolueno (2,0 mL) foi adicionado t-BuONa (66,2 mg, 688 umol, 2,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Em seguida, terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro- 1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 344 umol, 1,0 eq) foi adicionado ao líquido acima a 0°C. Após adição, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi adicionada água (5,0 mL) e extraída com EA (5,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, PE:EA = 3:1 - EA:MeOH = 10:1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 221 umol, 64% de rendimento, 95% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[01692] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,33 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 4,64 - 4,61 (m, 1H), 4,48 - 4,36 (m, 3H), 4,14 - 3,92 (m, 3H), 3,90 - 3,76 (m, 1H), 3,63 - 3,54 (m, 1H), 3,36 (br dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 1H), 3,26 - 3,06 (m, 3H), 3,01 - 2,86 (m, 1H), 2,82 - 2,76 (m, 2H), 2,71 (br d, J =
6,8 Hz, 1H), 2,64 - 2,58 (m, 1H), 2,58 - 2,50 (m, 4H), 2,48 - 2,42 (m, 1H), 2,06 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 1,64 - 1,57 (m, 5H), 1,52 (s, 9H).
[01693] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 387 umol, 1,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado TFA (1,54 g, 13,5 mmol, 1,0 mL, 34,9 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O produto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (300 mg, bruto, 2TFA) foi obtido como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 546.
[01694] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, 388 umol, 1,0 eq, 2TFA) e DIEA (601 mg, 4,65 mmol, 810 uL, 12,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (73,3 mg, 581 umol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (1,0 mL) e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)- ACN]; B%: 55%-85%, 12min.) para dar composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro- 1-naftil)-2-[2-(1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop- 2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 362, 54,0 mg, 88,1 umol, 23% de rendimento, 98% de pureza) como óleo incolor. LCMS [ESI, M+1]: 600.
[01695] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,39 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 6,58 - 6,62 (m, 1H), 6,44 - 6,36 (m, 1H), 5,83 (br d,
J = 10,8 Hz, 1H), 5,15 - 4,55 (m, 1H), 4,51 - 4,36 (m, 3H), 4,20 - 3,97 (m, 2H), 3,95 - 3,75 (m, 2H), 3,66 - 3,54 (m, 1H), 3,51 - 3,37 (m, 1H), 3,34 - 2,97 (m, 4H), 2,94 - 2,67 (m, 4H), 2,65 - 2,57 (m, 1H), 2,55 - 2,48 (m, 4H), 1,65 - 1,60 (m, 4H), 1,49 - 1,39 (m, 2H).
EXEMPLO 363 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 0°C, 12,5 horas, 88% t-BuONa, 25 °C, 0,5 hr tolueno, 0°C, 1 hora, 71% 0°C, 0,5 hr, duas etapas 18%
[01696] Inserir: [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metanol. A uma solução de terc- butil (2R)-2-(hidroximetil) morfolin-4-carboxilato (1,50 g, 6,90 mmol, 1,0 eq) em
THF (20,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (524 mg, 13,8 mmol, 2,0 eq) em porções a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora, depois aquecida até 60°C e agitada a 60°C por 12 horas. Depois da conclusão, a mistura de reação foi extinta com Na2SO4 aquoso saturado (1,50 mL), em seguida, filtrada. A torta foi lavada com THF (20,0 mL × 2). Em seguida, o líquido mãe foi concentrado para dar [(2R)-4- metilmorfolin-2-il] metanol (800 mg, 6,10 mmol, 88% de rendimento) como óleo amarelo.
[01697] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 3,92 - 3,86 (m, 1H), 3,73 - 3,52 (m, 4H), 2,84 - 2,56 (m, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,11 (dt, J = 3,6, 11,6 Hz, 1H), 1,93 (t, J = 10,8 Hz, 1H).
[01698] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4- metilmorfolin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2R)-4-metilmorfolin-2- il]metanol (203 mg, 1,55 mmol, 3,0 eq) em tolueno (4,0 mL) foi adicionado t- BuONa (99,2 mg, 1,03 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Em seguida, terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (300 mg, 516 umol, 1,0 eq) foi adicionado à mistura acima. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE: EA=3:1 - EA: MeOH=10:1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 366 umol, 71% de rendimento, 95% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 648.
[01699] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,39 (m, 1H), 7,33 (t, J = 7,8 Hz , 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 4,68 - 4,53 (m, 1H), 4,48 - 4,31 (m, 2H), 4,29 - 4,19
(m, 1H), 4,16 - 4,01 (m, 3H), 4,00 - 3,82 (m, 4H), 3,79 - 3,69 (m, 1H), 3,63 - 3,53 (m, 1H), 3,36 (br dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 1H), 3,29 - 3,06 (m, 3H), 3,01 - 2,86 (m, 2H), 2,83 - 2,64 (m, 3H), 2,63 - 2,45 (m, 1H), 2,36 - 2,28 (m, 3H), 2,19 (dt, J = 3,6, 11,6 Hz, 1H), 1,52 (s, 9H).
[01700] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4-metilmorfolin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4-metilmorfolin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (240 mg, 370 umol, 1,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado TFA (1,54 g, 13,5 mmol, 1,0 mL, 36,5 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R-4-metilmorfolin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, bruto, 2TFA) como óleo vermelho claro. LCMS [ESI, M+1]: 548.
[01701] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4-metilmorfolin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4- metilmorfolin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (300 mg, 387 umol, 1,0 eq, 2TFA) e DIEA (599 mg, 4,64 mmol, 808 uL, 12,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (73,1 mg, 580 umol, 1,50 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (1,0 mL) e concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,04% NH3•H2O)-ACN]; B%: 45%-75%, 10 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 363, 42,7 mg, 70,4 umol, 18% de rendimento, 99% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 602.
[01702] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,55 - 7,50 (m, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 6,65 - 6,52 (m, 1H), 6,39 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,83 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,25 - 4,53 (m, 1H), 4,48 - 4,32 (m, 2H), 4,30 - 4,21 (m, 1H), 4,19 - 4,00 (m, 2H), 3,99 - 3,89 (m, 3H), 3,88 - 3,76 (m, 1H), 3,75 - 3,68 (m, 1H), 3,64 - 3,55 (m, 1H), 3,52 - 3,35 (m, 1H), 3,31 - 2,98 (m, 4H), 2,92 - 2,55 (m, 5H), 2,31 (s, 3H), 2,18 (dt, J = 3,2, 11,4 Hz, 1H), 2,02 (dt, J = 1,6, 10,8 Hz, 1H).
EXEMPLO 364 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-metil-2-(trifluorometil)fenil]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 4h, 36% -40 °C -rt, 0,5 h 58% Ácido metilborônico -40 - -10 °C, Dioxano/água 0,5 h -40 °C, 0,5 h 100°C, 6h, 73% 24% 53%
[01703] Etapa 1: 1-bromo-3-metoxi-2-(trifluorometil)benzeno. A uma solução de MeOH (1,32 g, 41,2 mmol, 1,67 mL, 2 eq) em DMF (125 mL) foi adicionado NaH (1,65 g, 41,2 mmol, 60,0% de pureza, 2 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Em seguida, à mistura foi adicionado 1-bromo-3-fluoro-2- (trifluorometil)benzeno (5 g, 20,6 mmol, 1 eq) e agitada a 25°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta por água gelada (20 mL). Água (300 mL) foi adicionada à mistura e extraída com MTBE (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 mL) e salmoura (50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE) para dar 1-bromo-3-metoxi-2-(trifluorometil)benzeno (5,28 g, 18,6 mmol, 91,0% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo incolor.
[01704] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,34 - 7,28 (m, 2H), 7,01 - 6,97 (m, 1H), 3,91 (s, 3H).
[01705] Etapa 2: 1-metoxi-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno. À solução de 1- bromo-3-metoxi-2-(trifluorometil)benzeno (5,28 g, 20,7 mmol, 1 eq), Cs2CO3 (20,2 g, 62,1 mmol, 3 eq), ácido metilborônico (6,20 g, 104 mmol, 5 eq) em dioxano (105 mL) e Água (21 mL) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (2,27 g, 3,11 mmol, 0,15 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 100°C por 6 horas. Foi adicionada água (50 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (30 mL) e extraída com EtOAc (100 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE) para dar 1-metoxi-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno (3,2 g, 15,1 mmol, 73,1% de rendimento, 90,0% de pureza) como um óleo amarelo.
[01706] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,33 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,87 (br d, J=8,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J=7,2 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,49 (q, J=3,6 Hz, 3H).
[01707] Etapa 3: 3-metil-2-(trifluorometil)fenol. À solução de 1-metoxi-3- metil-2-(trifluorometil)benzeno (3,2 g, 16,8 mmol, 1 eq) em DCE (65 mL) foi adicionado BBr3 (21,1 g, 84,1 mmol, 8,11 mL, 5 eq) a -40°C, a mistura foi agitada a -40 - -10°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta por Água (100 mL). A mistura foi diluída com EtOAc (20 mL) e extraída com EtOAc (2 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 50:1) para dar 3-metil-2-(trifluorometil)fenol (740 mg, 4,08 mmol, 24,2% de rendimento, 97,0% de pureza) como um sólido amarelo.
[01708] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,29 - 7,24 (m, 1H), 6,87 - 6,77 (m, 2H), 5,95 (q, J=6,4 Hz, 1H), 2,46 (q, J=2,8 Hz, 3H).
[01709] Etapa 4: [3-metil-2-(trifluorometil)fenil]trifluorometanossulfonato. À solução de 3-metil-2-(trifluorometil)fenol (600 mg, 3,41 mmol, 1 eq), TEA (1,38 g, 13,6 mmol, 1,90 mL, 4 eq) em EtOAc (12 mL) foi adicionado Tf2O (1,44 g, 5,11 mmol, 843 uL, 1,5 eq) a -40°C, a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora. A mistura foi extinta por Água (10 mL). A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (30 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc de 1:0 a 100:1) para dar [3- metil-2-(trifluorometil)fenil]trifluorometanossulfonato (590 mg, 1,82 mmol, 53,0% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo incolor.
[01710] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,53 - 7,47 (m, 1H), 7,33 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J=8,4 Hz, 1H), 2,57 (q, J=2,8 Hz, 3H).
[01711] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[3-metil-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 65, 600 mg, 973 umol, 1 eq), [3-metil-2- (trifluorometil)fenil] trifluorometanossulfonato (450 mg, 1,46 mmol, 1,5 eq), Cs2CO3 (951 mg, 2,92 mmol, 3 eq) e RuPhos (90,8 mg, 195 umol, 0.2 eq) em tolueno (12 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (89,1 mg, 97,3 umol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 4 horas. Foi adicionada água (15 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (30 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), seca sobre Na 2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (de PE: EtOAc = 5:1 ~ 1:1 a EtOAc: MeOH = 1:0 ~ 20:1). Em seguida, o resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 50,0%) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[3-metil-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (240 mg, 354 umol, 36% de rendimento, 98,0% de pureza) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 664.
[01712] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,41 - 7,35 (m, 6H), 7,18 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,07 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,10 - 7,04 (m, 1H), 5,20 (s, 2 H), 4,69 (br s, 1H), 4,38 (dd, J=5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,16 (t, J=3,2 Hz, 1H), 4,05 (s, 2H), 3,89 (br d, J=12,0 Hz, 1H), 3,30 (br s, 2H), 3,21 - 2,95 (m, 5H), 2,92 - 2,62 (m, 6H), 2,52 (q, J=3,6 Hz, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,33 - 2,24 (m, 1H), 2,05 - 2,00 (m, 1H), 1,90 - 1,79 (m, 3H).
[01713] Etapa B: NH3 foi borbulhado em MeOH (5 mL) por 5 minutos. À solução foi adicionado benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[3-metil-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (240 mg, 362 umol, 1 eq), Pd/C (50 mg, 10,0% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 30°C durante 0,5 hora. A mistura de reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2- [(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-metil-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 336 umol, 93,0% de rendimento, 99,0% de pureza) como um óleo marrom que foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 530.
[01714] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-metil- 2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[3-metil-2-(trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (170 mg, 321 umol, 1 eq) e TEA (97,4 mg, 963 umol , 134 uL, 3 eq) em DCM (3,5 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoil (43,6 mg, 482 umol, 39,3 uL, 1,5 eq) a -40°C, a mistura foi agitada a - 40 - 30°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta por Água (2 mL) e separada. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (4 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 12min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[3-metil-2- (trifluorometil)fenil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 364, 110 mg, 188 umol, 58,0% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 584.
[01715] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,35 (m, 1H), 7,19 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,08 (d, J=7,6 Hz, 1H), 6,59 (br s, 1H), 6,40 (dd, J=1,6, 16,8 Hz, 1H), 5,83 (br d, J=10,4 Hz, 1H), 5,09 (br s, 1H), 4,64 (br s, 1H), 4,37 (dd, J=4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,18 - 4,08 (m, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,96 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,60 (br s, 1H), 3,30 (br s, 1H), 3,22 - 3,01 (m, 4H), 2,98 - 2,62 (m, 5H), 2,52 (q, J=3,2 Hz, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,99 (m, 1H), 1,90 - 1,68 (m, 3H).
EXEMPLO 365
2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila HCl.dioxano t-BuONa, Dioxano tolueno, 0°C, r.t., 15 30 min., 63% min.
Duas etapas 14%
[01716] Inserir: 3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propan-1- ol. A uma solução de (1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano (500 mg, 3,69 mmol, 1,0 eq, HCl), 3-bromopropan-1-ol (513 mg, 3,69 mmol, 333 uL, 1,0 eq) em CH3CN (6,0 mL) foi adicionado K2CO3 (1,53 g, 11,1 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 50°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila: MeOH = 50:1 a 20: 1) para dar 3 -[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propan-1-ol (195 mg, 1,12 mmol, 30% de rendimento, 90% de pureza) como óleo incolor.
[01717] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 4,42 (s, 1H), 3,99 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,82 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,65 - 3,61 (m, 1H), 3,53 - 3,45 (m, 2H), 2,99 - 2,92 (m, 2H), 2,84 - 2,77 (m, 1H), 2,67 - 2,61 (m, 1H), 1,86 - 1,80 (m, 1H), 1,79 - 1,58 (m, 3H).
[01718] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa- 5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato.A uma mistura de 3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propan-1-ol (325 mg, 2,06 mmol, 3,0 0 eq), t-BuONa (198 mg, 2,06 mmol, 3,0 eq) em tolueno (2,0 mL) foi adicionada uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (Intermediário 71, Etapa A, 400 mg, 688 umol, 1,0 eq) em tolueno (2,0 mL) em porções, a mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, ao solvente orgânico foi adicionada água (10,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 10 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos Na2SO4 o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila=3 : 1 a Acetato de etila : MeOH =20 : 1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (320 mg, 432 umol, 62% de rendimento, 91% pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 674.
[01719] Etapa B : 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (340 mg, 504 umol, 1,0 eq) em dioxano (3,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4,0 M, 3,0 mL, 23,8 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 15 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado (10 mL), extraído com acetato de etila (3 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa- 5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (270 mg, bruto) foi obtido como sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 574.
[01720] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (270 mg, 470 umol, 1,0 eq) em DCM (4,0 mL) foi adicionado TEA (143 mg, 1,41 mmol, 196 uL, 3,0 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (178 mg, 1,41 mmol, 3,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 de base, Éter de petróleo: Acetato de etila = 3: 1 a 1: 1), em seguida, o produto bruto foi concentrado e repurificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45%-75%, 12 min.) e sob liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 365, 43,1 mg, 67,7 umol, 14% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 628.
[01721] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,47 - 7,40 (m, 1H ), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,26 - 7,16 (m, 1H ), 6,67 - 6,54 (m, 1H ), 6,40 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,82 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,16 - 5,03 (m, 1H ), 4,48 - 4,40 (m, 1H ), 4,38 - 4,34 (m, 3H), 4,22 - 4,08 (m, 1H), 4,07 - 3,99 (m, 2H ), 3,97 - 3,74 (m, 2H ), 3,64 - 3,55
(m, 2H ), 3,54 - 3,35 (m, 2H ), 3,31 - 3,20 (m, 1H ), 3,19 - 3,14 (m, 1H ), 3,13 - 2,99 (m, 2H ), 2,92 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,89 - 2,81 (m, 1H ), 2,80 - 2,76 (m, 1H ), 2,75 - 2,68 (m, 1H ), 2,64 - 2,57 (m, 1H ), 2,52 (d, J=10,0 Hz, 1H), 1,98 - 1,89 (m, 2H), 1,85 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 1,74 - 1,70 (m, 2H).
EXEMPLO 366 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila HCl.dioxano t-BuONa, dioxano tolueno, 0°C, 25°C, 15 30 min., 67% min.
Duas etapas 28%
[01722] Inserir: A uma solução de O1-terc-butil O2-metil (2S)-4,4- difluoropirrolidina-1,2-dicarboxilato (300 mg, 1,13 mmol, 1,0 eq) em THF (8,0 mL)
foi adicionado LiAlH4 (129 mg, 3,39 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a -40°C por 1 hora. Então, a mistura foi agitada a 80°C por 2 horas sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com solução saturada de Na2SO4 aquosa (6,0 mL), seca com Na2SO4. Então, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. [(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (165 mg, bruto) foi obtido como óleo incolor e usado para a etapa seguinte sem purificação adicional.
[01723] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4-difluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S)-4,4-difluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metanol (156 mg, 1,03 mmol, 3,0 eq) em tolueno (2,0 mL) foi adicionado t-BuONa (99,2 mg, 1,03 mmol, 3,0 eq) a 0°C e uma solução de terc- butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 344 umol, 1,0 eq) em tolueno (1,0 mL) gota a gota a 0°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 30 min. Após conclusão, ao solvente orgânico foi adicionada água (10,0 mL), extraída com acetato de etila (3 × 10 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos com Na2SO4, filtrados e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila = 5 : 1 a 1 : 1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (160 mg, 230 umol, 67% de rendimento, 96% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 668.
[01724] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4- difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (137 mg, 205 umol, 1,0 eq) em dioxano
(1,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 1,0 mL, 19,5 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 15 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado (10 mL), extraído com acetato de etila (3 × 10 mL), seco sobre Na 2SO4, filtrado e concentrado. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4- difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (110 mg, bruto) foi obtido como sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 568.
[01725] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (110 mg, 194 umol, 1,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado TEA (196 mg, 1,94 mmol, 270 uL, 10,0 eq) e prop-2-enoil prop-2-enoato (73,3 mg, 581 umol, 3,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min. sob atmosfera de N2. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com metanol (6,0 mL) e a mistura foi removida sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150×25mm×10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55% - 85%, 12 min.) e sob liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-4,4-difluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 366, 34,1 mg, 54,5 umol, 28% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 622.
[01726] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,42 (m, 1H ), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 1H ), 6,63 - 6,57 (m, 1H ), 6,40 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,02 - 4,98 (m, 1H), 4,49 - 4,37 (m, 2H ), 4,31 - 4,22 (m, 1H ), 4,19 - 3,97 (m, 2H), 3,96 - 3,89 (m, 1H), 3,88 - 3,77 (m, 1H ), 3,76 - 3,65 (m,
1H ), 3,64 - 3,55 (m, 1H ), 3,52 - 3,37 (m, 2H ), 3,36 - 3,10 (m, 3H ), 3,07 - 2,95 (m, 2H ), 2,94 - 2,80 (m, 1H ), 2,79 - 2,48 (m, 4H ), 2,47 - 2,45 (m, 3H ), 2,36 - 2,24 (m, 1H ).
EXEMPLO 367 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-morfolinobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila HCl.dioxano dioxano 0 °C, 0,5 hr 25°C, 0,5 h 0 °C, 0,5 hr Duas etapas 16%
[01727] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-
il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (Intermediário 71, Etapa A, 200 mg, 316 umol, 1,0 eq) em dioxano (1,5 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 1,5 mL, 19,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora sob atmosfera de N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO 3 aquoso saturado (10 mL), extraído com acetato de etila (3 × 10 mL), seco sobre Na 2SO4, filtrado e o filtrado foi concentrado. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (130 mg, bruto) foi obtido como sólido amarelo e utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 532.
[01728] Etapa B: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 282 umol, 1,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado Piridina (446 mg, 5,64 mmol, 455 uL, 20,0 eq) e (E)-4-bromobut-2- enoil cloreto (155 mg, 846 umol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada. O produto bruto 2-[(2S)-1-[(E)-4- bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (190 mg, bruto) foi obtido como sólido amarelo e utilizado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 680.
[01729] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-morfolinobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2- enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (190 mg, 280 umol, 1,0 eq), KI (9,29 mg, 56,0 umol, 0,20 eq) e K2CO3 (387 mg, 2,80 mmol, 10,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionada morfolina (146 mg, 1,68 mmol, 148 uL, 6,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com metanol (10,0 mL) e a mistura foi removida sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 60%-90%, 12 min.) e, então, sob liofilização. O composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- [(E)-4-morfolinobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 367, 31,6 mg, 45,2 umol, 16% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 685.
[01730] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,78 - 7,73 (m, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,55 - 7,51 (m, 1H), 7,48 - 7,41 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 7,02 - 6,91 (m, 1H), 6,55 - 6,42 (m, 1H), 5,15 - 5,01 (m, 1H), 4,47 - 4,34 (m, 2H), 4,20 - 4,13 (m, 1H), 4,12 - 4,04 (m, 1H), 3,95 - 3,79 (m, 2H), 3,78 - 3,65 (m, 5H), 3,62 - 3,63 (m, 1H), 3,52 - 3,36 (m, 1H), 3,30 - 3,14 (m, 4H), 3,13 - 2,97 (m, 3H), 2,88 - 2,77 (m, 1H), 2,73 - 2,53 (m, 3H), 2,52 - 2,46 (m, 7H), 2,34 - 2,22 (m, 1H), 2,11 - 1,99 (m, 1H), 1,88 - 1,70 (m, 3H).
EXEMPLO 368 2-((2S,5S)-1-acriloil-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01731] Etapa A: ((2R,5S)-5-metilpiperazin-2-il)metanol: Ciclo(L-Ala-L-Ser) (400 mg, 2,53 mmol) foi diluído com complexo borano-tetra-hidrofurano (18.716 µl, 18,7 mmol), colocado sob nitrogênio e aquecido até 70°C. Após agitação por 12 horas, a reação foi deixada resfriar. A reação foi resfriada até 0°C num banho de gelo seguido pela adição lenta gota a gota de MeOH (5.116 µl, 126 mmol) seguida pela adição de HCl (1.096 µl, 6,58 mmol). Após agitar por uma hora, a reação foi concentrada para proporcionar ((2R,5S)-5-metilpiperazin-2-il)metanol (328 mg, 2,52 mmol, 99,6% de rendimento).
[01732] Etapa B: terc-butil (6S,8aR)-6-metil-3-oxotetra-hidro-3H- oxazolo[3,4-a]pirazina-7(1H)-carboxilato: ((2R, 5S)-5-metilpiperazin-2-il) metanol (500 mg, 3,84 mmol) foi diluído com metanol (5 mL), colocado sob nitrogênio e resfriado até 0°C. Foi adicionado TEA (2.141 µl, 15,4 mmol) seguido por BOC- Anidrido (2.675 µl, 11,5 mmol) (em metanol 5 mL, durante 15 minutos). A reação foi mantida <10°C por 1 hora e depois o banho de gelo foi removido. Após 1 hora adicional, a reação foi aquecida até 50°C. Após agitação a 50°C por 12 horas, a reação foi concentrada para proporcionar terc-butil (6S,8aR)-6-metil-3- oxotetra-hidro-3H-oxazolo [3,4-a]pirazina-7(1H)-carboxilato (980 mg, 3,82 mmol, 99,6% de rendimento).
[01733] Etapa C: terc-butil (2S,5R)-5-(hidroximetil)-2-metilpiperazina-1- carboxilato: Terc-butil (6S,8aR)-6-metil-3-oxotetra-hidro-3H-oxazolo[3,4- a]pirazina-7(1H)-carboxilato (980 mg, 3,82 mmol) foi diluído com etanol (10.047 µl, 172 mmol) seguido pela adição de NaOH (9559 µl, 19,1 mmol). A reação foi colocada sob nitrogênio, aquecida até 95°C e agitada por 4 horas. A coloração por TLC (metanol/DCM/NH4OH, 10/89/1) com KMNO4 indicou o desaparecimento de uma mancha rf ligeiramente mais alta. A reação foi deixada esfriar e depois colocada em um banho de gelo. O pH foi ajustado para ~9 com HCl 2N e depois extraída duas vezes com DCM. O DCM foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado para proporcionar terc-butil (2S,5R)-5-(hidroximetil)-2- metilpiperazina-1-carboxilato (850 mg, 3,69 mmol, 96,5% de rendimento).
[01734] Etapa D: 1 benzil 4-(terc-butil) (2R,5S)-2-(hidroximetil)-5- metilpiperazina-1,4-dicarboxilato: Tert-butil (2S,5R)-5-(hidroximetil)-2- metilpiperazina-1-carboxilato (350 mg, 1,52 mmol) foi diluído com THF (4 mL), colocado sob nitrogênio e resfriado até 0°C. Foi adicionado NaOH (1.672 µl, 1,67 mmol) seguido pela adição de cloroformato de benzila (228 µl, 1,52 mmol). Após agitação por 2 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e água. A água foi extraída mais duas vezes e o acetato de etila foi combinado, seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10-80% de acetato de etila/hexanos para fornecer 1-benzil 4-(terc-butil) (2R, 5S)-2-(hidroximetil)-5-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato (300 mg, 0,823 mmol, 54,2% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 265,1 [M+H]+ (menos boc).
[01735] Etapa E: 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5S)-5-metil-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato: 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5S)-2-(hidroximetil)-5-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato (300 mg, 0,823 mmol) foi diluído com DCM (4 mL), colocado sob nitrogênio e resfriado até 0°C. Foi adicionado DIEA (216 µl, 1,23 mmol) seguido pela adição de cloreto de metanossulfonila (70,1 µl, 0,905 mmol). Após agitar por 2 horas a 0°C, a reação foi diluída com DCM e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10-50% de acetato de etila/hexanos para fornecer 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5S)-5-metil-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato (290 mg, 0,655 mmol, 79,6% de rendimento).
[01736] Etapa F: 1-benzil 4-(terc-butil) (2S,5S)-2-(cianometil)-5- metilpiperazina-1,4-dicarboxilato: 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5S)-5-metil-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato (290 mg, 0,655 mmol) foi diluído com DMA (4 mL) seguido pela adição de NaCN (64,2 mg, 1,31 mmol). A reação foi aquecida até 55°C e agitada por 12 horas. A reação foi deixada resfriar, diluída com MTBE e lavada com bicarbonato de sódio saturado, água e salmoura. O MTBE foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10-50% de acetato de etila/hexanos para proporcionar 1-benzil 4-(terc-butil) (2S,5S)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1,4- dicarboxilato (200 mg, 0,536 mmol, 81,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 274,2 [M+H]+ (menos boc).
[01737] Etapa G: benzil (2S,5S)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1- carboxilato: 4-(terc-butil) (2S,5S)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1,4- dicarboxilato (200 mg, 0,536 mmol) foi diluído com DCM (2 mL) seguido pela adição de HCl (669 µl, 2,68 mmol). Após agitar por 3 horas, a reação foi concentrada para proporcionar benzil (2S,5S)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-
1-carboxilato (146 mg, 0,534 mmol, 99,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 274,1 [M+H]+.
[01738] Etapa H: terc-butil 4-((2S,5S)-4-((benziloxi)carbonil)-5-(cianometil)- 2-metilpiperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato:terc-Butil 2,4-dicloro-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(8H)- carboxilato (211 mg, 0,695 mmol) foi diluído com DMA (4 mL) seguido pela adição de benzil (2S,5S)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato (190 mg, 0,695 mmol) e DIEA (364 µl, 2,09 mmol). A reação foi deixada agitar à temperatura ambiente por 12 horas. Foi detectado muito pouco produto, de modo que a reação foi aquecida até 75°C por 12 horas adicionais. A reação foi deixada resfriar, diluída com acetato de etila e água. O acetato de etila foi lavado com água, salmoura, seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10-50% de acetato de etila/hexanos para fornecer terc-butil 4-((2S,5S)-4-((benziloxi) carbonil)-5-(cianometil)-2- metilpiperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (53 mg, 0,0980 mmol, 14,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 541,2 [M+H] +.
[01739] Etapa I: benzil (2S,5S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato: Tert-butil 4- ((2S,5S)-4-((benziloxi)carbonil)-5-(cianometil)-2-metilpiperazin-1-il)-2-cloro-5,8- di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (53 mg, 0,098 mmol) foi diluído com DCM seguido pela adição de HCl (122 µl, 0,49 mmol). Após agitar por 4 horas, a reação foi concentrada para proporcionar (2S,5S)-4-(2-cloro-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1- carboxilato (43 mg, 0,098 mmol, 100% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 441,1 [M+H]+.
[01740] Etapa J: benzil (2S,5S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato: Benzil (2S,5S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-
(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato (43 mg, 0,0975 mmol), 1- iodonaftaleno (124 mg, 0,488 mmol), Cs2CO3 (95,3 mg, 0,293 mmol) e Metanossulfonato(2-diciclohexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (12,5 mg, 0,0146 mmol) foram diluídos com DMA (600 uL), purgados com argônio, selados e aquecidos até 92°C. Após agitar por 12 horas, a reação foi deixada resfriar, diluída com acetato de etila e água. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi lavado com salmoura, seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10-50% de acetato de etila/hexanos para proporcionar benzil (2S,5S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato (26,5 mg, 0,0467 mmol, 47,9% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
[01741] Etapa K: 2-((2S,5S)-5-metil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: benzil (2S,5S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato (26,5 mg, 0,0467 mmol), (s)-(diciclo-hexil (2’,6’-di-isopropoxi-[1,1’-bifenil]-2-il)-l5- fosfanil)(2’-(metilamino)-[1,1’-bifenil]-2-il)paládio(III) metanossulfonato (7,96 mg, 0,00935 mmol) e Cs2CO3 (76,1 mg, 0,234 mmol) foram diluídos com DMA (300 uL) seguidos pela adição de N-metil-l-prolinol (21,5 mg, 0,187 mmol). A reação foi purgada com argônio, vedada e aquecida até 90°C. Após agitar por 12 horas, a reação foi deixada resfriar, diluída com acetato de etila e água. O acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% NH4OH) para fornecer benzil (2S,5S)-2-(cianometil)-5-metil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (8 mg, 0,0124 mmol, 26,5% de rendimento) e 2-((2S,5S)-5-metil-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1)-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (10 mg, 0,0195 mmol, 41,8% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01742] Etapa L: 2-((2S,5S)-1-acriloil-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: 2-((2S,5S)-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (10 mg, 0,020 mmol) foi diluído com DCM (200 uL) seguido pela adição de DIEA (6,8 µl, 0,039 mmol). A reação foi colocada sob nitrogênio e resfriada até 0°C. foi adicionado cloreto de acriloíla (1,8 µl, 0,021 mmol) e a reação foi agitada por 2 horas. A reação foi derramada em uma solução de bicarbonato de sódio a 10% e extraída com DCM. O DCM foi seco sobre MgSO 4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% metanol/DCM (1% NH4OH) para proporcionar o composto do título 2-((2S,5S)- 1-acrilil-5-metil-4-(2-((S))-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 368, 6 mg, 0,011 mmol, 54% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 369 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-acrililpiperazin- 2-il)acetonitrila
[01743] Etapa A: terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Benzil (S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato cloridrato (10 g, 34 mmol) em DMA (68 ml, 34 mmol). À solução foi a seguir adicionado terc-butil 2,4- dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (9,3 g, 30 mmol) seguido por Base de Hunig (24 ml, 135 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi depois derramada em água básica e extraída com MTBE. Os orgânicos foram lavados com água adicional, salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O material foi cromatografado usando 10% a 70% EtOAc:Hexano como eluente para dar terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (12 g, 23 mmol, 67% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 527,2 [M+H]+.
[01744] Etapa B: benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (1 g, 2 mmol) foi dissolvido em DCM (19 ml, 2 mmol) e tratado com Ácido Clorídrico (solução 4,0 M em 1,4-dioxano) (2 ml, 9 mmol). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e ressuspensa em DCM. A suspensão foi lavada com
NaOH 1M. A camada aquosa foi extraída com DCM (2X). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, concentrados in vacuo e levados adiante como benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato bruto (0,8 g, 2 mmol, 99% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 427,1 [M+H]+.
[01745] Etapa C: benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0) (343 mg, 0,375 mmol) e 2-(Diciclo- hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil (357 mg, 0,750 mmol) foi dissolvido em 1,4-dioxano (18.740 µl, 1,87 mmol) e purgado sob Argônio por 5 minutos. A reação agitada a 100°C sob argônio por um adicional de 15 min. À reação foi adicionado benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,87 mmol), 1-bromo-8- metilnaftaleno (1.243 mg, 5,62 mmol) e carbonato de césio (1.832 mg, 5,62 mmol) sob Argônio. A reação foi tampada sob Argônio e agitada a 100°C durante a noite. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi concentrado in vacuo e purificado por cromatografia de fase normal no CombiFlash eluindo com 0%-15% de DCM: MeOH(+2% NH4OH modificador) para dar benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (378 mg 0,667 mmol, 35,6% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
[01746] Etapa D: benzil (S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftaleno)-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Em um frasco de fundo redondo, uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,3 g, 0,529 mmol) em dioxano (5,29 ml, 0,529 mmol) foi espargido com Argônio. 3-((1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propan-1-ol (0,250 g, 1,59 mmol), Cs2CO3 (0,517 g,
1,59 mmol), Tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (0,0969 g, 0,106 mmol) e 9,9- Dimetil-4,5-Bis(Difenil-Fosfino)Xanteno (0,122 g, 0,212 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por um adicional de 5 minutos. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 2 horas. A reação foi filtrada através de papel GF/F e concentrada in vacuo. O concentrado foi purificado por sílica gel eluindo com 0-12% de MeOH em DCM com 2% de NH4OH para fornecer benzil (S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,155 g, 0,225 mmol, 42,6% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 688,3 [M+H]+.
[01747] Etapa E: 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de benzil (S)-4-(benzil)2-(3-((1S,4S)-2- oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (155 mg, 0,225 mmol) em EtOH (2.253 µl, 0,225 mmol) e THF (2253 µl, 0,225 mmol) e EtOH (2.253 µl, 0,225 mmol) foram purgados com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado Paládio (60,0 mg, 0,0563 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O), e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução, então, foi agitada sob uma atmosfera de H 2. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)- 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi))-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (98 mg, 0,177 mmol, 78,5% de rendimento). Isso foi levado adiante como bruto. ESI+APCI MS m/z 554,3 [M+H]+.
[01748] Etapa F: 2-((S)-4-(2-(3-((1S, 4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 1-acriloilpiperazin-2-il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)-
2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (98 mg, 0,177 mmol) em diclorometano (1.770 µl, 0,177 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Aciloíla (14,4 µl, 0,177 mmol) seguido pela base de Hunig (61,8 µl, 0,354 mmol). A reação foi, então, agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi concentrada in vacuo. O concentrado foi ressuspenso numa mistura 60:40 de ACN: H2O e purificado na Gilson (HPLC- prep reversa), eluindo com 5 --> 95% ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo para dar o composto do título 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-acrililpiperazina-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 369, 63,5 mg, 0,104 mmol, 59,0% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 608,3 [M+H]+.
EXEMPLO 370 (S)-2-(1-acriloil-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01749] (S)-2-(1-acriloil-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(3-morfolinopropoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o EXEMPLO 369 usando N-
Hidroxipropanilmorfolina no lugar de 3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il)propan-1-ol e também usando Metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'- di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) no lugar de Tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) e 9,9-Dimetil-4,5-Bis(difenil- fosfino)Xanteno na Etapa D. ESI+APCI MS m/z 596,3 [M+H]+.
EXEMPLO 371 (S)-3-((4-(4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida
[01750] (S)-3-((4-(4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida: O composto do título foi preparado seguindo o EXEMPLO 369 usando 3-Hidroxi- N,N-dimetilpropanamida no lugar de 3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il)propan-1-ol e também usando Metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'- di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) no lugar de Tris (dibenzilidenacetona)dipaládio (0) e 9,9-Dimetil-4,5-Bis(Difenil-Fosfino)Xanteno na Etapa D. ESI+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 372
2-((S)-1-((E)-but-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01751] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-but-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidina)-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (30 mg, 0,05863 mmol) e ácido 3-(E)-but-2-enoico (6,562 mg, 0,07622 mmol) foram diluídos com DMF (400 uL) seguidos pela adição de DIEA (20,48 µl, 0,1113 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (52,35 µl, 0,08795 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título 2-((S)-1-((E)-but-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen- 1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 372, 10 mg, 0,01725 mmol, 29,42% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 580,3 [M+H]+.
EXEMPLO 373
2-(1-acriloíl-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-2-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Cs2CO3, dioxano
[01752] Etapa A: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-2-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato: Em um tubo de micro-ondas benzil 2-(cianometil)- 4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (100 mg, 0,198 mmol) foi dissolvido em dioxano (98,9 µl, 0,198 mmol) e tratado com carbonato de césio (129 mg, 0,396 mmol) e 2- Fluoro-3-(trifluorometil)piridina (163 mg, 0,989 mmol). O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C por 12 h. A reação foi resfriada e filtrada através de papel GF/F e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica (0-12% de MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer benzil 2- (cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-2- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (70 mg, 0,11 mmol, 54%).
[01753] Etapa B: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-2-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. O composto do título foi preparado seguindo o EXEMPLO 375,
Etapas F-G, usando benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(3-(trifluorometil)piridina-2-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato no lugar de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato no EXEMPLO 375 Etapa F. ESI+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 374 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(2,2,2-trifluoroetil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01754] 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(2,2,2- trifluoroetil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 375, Etapas E-G, usando 1- bromo-2-(2,2,2-trifluoroetil)benzeno no lugar de bromidrato de 4-Bromo-3- (trifluorometil)piridina na Etapa E. ESI+APCI MS m/z 584,3 [M+H]+.
EXEMPLO 375
2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-4-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01755] Etapa A: terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: terc-butil 2,4-dicloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-(6H)-carboxilato (8,0 g, 26,3 mmol), base de Hunig (22,9 ml, 132 mmol) e 2-(piperazin-2-il)acetonitrila dicloridrato (5,21 g, 26,3 mmol) foram colocados em DMA (75 mL) e agitados à rt por 20 min. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com EtOAc (3x100 mL). Os extratos foram combinados e lavados com água (3x 50 mL), então, foram secos com sulfato de sódio. Os sólidos foram filtrados e o filtrado foi concentrado para fornecer terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato bruto. ESI+APCI MS m/z 337,1 [M+H]+.
[01756] Etapa B: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (10,50 g, 26,725 mmol) e TEA (5,5876 mL, 40,088 mmol) foram colocados em THF (100 mL) e foram resfriados até 0°C. Benzil carbonocloridato (5,6518 ml, 40,088 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 0°C por 30 min. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM (3x 50 mL). Os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-60% EtOAc em hex) para fornecer terc- butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-
hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (12,939 g, 24,551 mmol, 91,865% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 527,2 [M+H]+.
[01757] Etapa C: terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Em um frasco de fundo cônico uma solução de terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (3,28 g, 6,22 mmol) em dioxano (62,2 ml, 6,22 mmol) foi espargido com argônio e (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol (2,15 g, 18,7 mmol), Cs2CO3 (6,08 g, 18,7 mmol), Metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil) (2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (0,795 g, 0,934 mmol) foram adicionados sequencialmente sob argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 18 h. A reação foi resfriada e foi adicionada água. A mistura foi extraída com DCM (3x15 mL) e os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0- 12% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer terc-butil 4-((S)-4- ((benziloxi) carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (2,65 g, 4,37 mmol, 70,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 606,3 [M+H]+.
[01758] Etapa D: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazina-1-carboxilato: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,6 g, 1,0 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 ml, 1,0 mmol) e tratado com ácido clorídrico (Solução 4,0 M em 1,4-dioxano (1 ml, 5 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi em seguida concentrada in vacuo e o material particionado entre EtOAc e água básica e as camadas separadas. Os orgânicos foram lavados em seguida com salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-
(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,4 g, 0,8 mmol, 80% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 506,2 [M+H]+.
[01759] Etapa E: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato: A um frasco foi adicionado Carbonato de césio (193 mg, 0,593 mmol), benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (60 mg, 0,119 mmol) e Rhuphos Pd G3 (9,92 mg, 0,0119 mmol) e bromidrato de 4- Bromo-3-(trifluorometil)piridina (93,4 mg, 0,356 mmol). o frasco foi selado e o 1,4-dioxano (1187 µl, 0,119 mmol) adicionado através de um septo. Ar foi borbulhado através da mistura por 5 minutos e, em seguida, a mistura foi aquecida a 70oC por 7h. a reação foi resfriada, filtrada através de papel qualitativo e concentrada. Os sólidos amarelos foram dissolvidos em DCM mínimo e purificados por cromatografia de sílica (0-12% MeOH em DCM) para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (35 mg, 0,0541 mmol, 45,6%). ESI+APCI MS m/z 551,3 [M+H]+.
[01760] Etapa F: 2-(4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2))-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (35.2 mg, 0,0541 mmol) em EtOH (541 µl, 0,0541 mmol) e THF (541 µl, 0,0541 mmol) foi adicionado Paládio (28,8 mg, 0,0135 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O) e, em seguida, uma atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguido de pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente por 1h. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para fornecer 2-(4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-
4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (26,4 mg, 0,0511 mmol, 94,5% de rendimento).
[01761] Etapa G: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-(4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2)-il)metoxi)-7- (3-(trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (26,4 mg, 0,0511 mmol) em CH2Cl2 (511 µl, 0,0511 mmol) a -78oC foi adicionado cloreto de acriloíla (1.022 µl, 0,102 mmol) (solução 0,1M recém-preparada em DCM) seguido de trietilamina (14,2 µl, 0,102 mmol). A reação foi, então, agitada a 0°C por 45 minutos. LC-MS indicou a formação de produto. Reação concentrada e purificada por HPLC-prep para fornecer o composto do título 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (EXEMPLO 375, 3 mg, 0,00526 mmol, 10,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 376 2-(1-(but-2-inoil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 2,2,2- trifluoroacetato
[01762] Etapa A: terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: terc-butil 2,4-dicloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-(6H)-carboxilato (8,0 g, 26,3 mmol), base de Hunig (22,9 ml, 132 mmol) e 2-(piperazin-2-il)acetonitrila dicloridrato (5,21 g, 26,3 mmol) foram colocados em DMA (75 mL) e agitados à rt por 20 min. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com EtOAc (3x100 mL). Os extratos foram combinados e lavados com água (3x 50 mL), então, foram secos com sulfato de sódio. Os sólidos foram filtrados e o filtrado foi concentrado para fornecer terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato bruto. ESI+APCI MS m/z 337,1 [M+H]+.
[01763] Etapa B: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: terc-butil 2-cloro-4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (10,50 g, 26,73 mmol) e TEA (5,59 mL, 40,0 mmol) foram colocados em THF (100 mL) e foram resfriados até 0°C. Benzil carbonocloridato (5,65 ml, 40,0 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 0°C por 30 min. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM (3x 50 mL). Os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-60% EtOAc em hex) para fornecer terc-butil 4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-
d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (12,94 g, 24,6 mmol, 92% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 527,2 [M+H]+.
[01764] Etapa C: terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Em um frasco de fundo cônico uma solução de terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (3,28 g, 6,22 mmol) em dioxano (62,2 ml, 6,22 mmol) foi espargido com argônio e (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol (2,15 g, 18,7 mmol), Cs2CO3 (6,08 g, 18,7 mmol), metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (0,795 g, 0,934 mmol) foram adicionados sequencialmente sob argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 18 h. A reação foi resfriada e foi adicionada água. A mistura foi extraída com DCM (3x15 mL) e os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0- 12% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer terc-butil 4-((S)-4- ((benziloxi) carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (2,65 g, 4,37 mmol, 70% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 606,3 [M+H]+.
[01765] Etapa D: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazina-1-carboxilato: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,6 g, 1,0 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 ml, 1,0 mmol) e tratado com ácido clorídrico (Solução 4,0 M em 1,4-dioxano (1 ml, 5 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e o material particionado entre EtOAc e água básica e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-
2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,4 g, 0,8 mmol, 80% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 506,2 [M+H]+.
[01766] Etapa E: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: A um frasco foi adicionado carbonato de césio (193 mg, 0,59 mmol), benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (60 mg, 0,12 mmol) e Rhuphos Pd G3 (9,92 mg, 0,012 mmol) e 1-bromonaftaleno (49,8 µl, 0,36 mmol). O frasco foi selado e o 1,4-dioxano (1.187 µl, 0,12 mmol) foi adicionado através de um septo. Ar foi borbulhado através da mistura por 5 minutos e depois a mistura foi aquecida até 70°C por 7 h. A reação foi resfriada, filtrada através de papel qualitativo e concentrada. Os sólidos amarelos foram dissolvidos em DCM mínimo e purificados por cromatografia de sílica (0-12% MeOH em DCM) para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (28 mg, 0,044 mmol, 37% de rendimento) ESI+APCI MS m/z 632,4 [M+H]+.
[01767] Etapa F: 2-(4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (45 mg, 0,071 mmol) em EtOH (712 µl, 0,071 mmol) e THF (712 µl, 0,071 mmol) foi adicionado paládio (38 mg, 0,018 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O) e, em seguida, uma atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguida por pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente por 1h. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para fornecer 2-(4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (30 mg, 0,060 mmol, 85% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 498,3 [M+H]+.
[01768] Etapa G: 2-(1-(but-2-inoil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila 2,2,2-trifluoroacetato: A 0°C, a um RBF de 25 mL contendo N,N- dimetilformamida (603 µl, 0,060 mmol) foi adicionada 2-(4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (30 mg, 0,060 mmol) e trietilamina (12,2 mg, 0,12 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido 2-butinoico (6,08 mg, 0,072 mmol) foi adicionado em uma porção. Anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (26,9 µl, 0,090 mmol) foi adicionado lentamente à mistura agitada. A reação foi deixada agitar por 2 h a 0°C. Foi adicionada água e a reação extraída com EtOAc (2x 25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com LiCl saturado, NaCl e água (10 mL cada lavagem). Secas e concentradas em um sólido que foi purificado por HPLCprep (5-95% ACN:H2O, TFA) que forneceu o composto do título 2-(1-(but-2-inoil)-4-(2-(((S))- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 2,2,2-trifluoroacetato (EXEMPLO 376, 11,2 mg, 0,02 mmol, 33% de rendimento) ESI+APCI MS m/z 564,3 [M+H]+.
EXEMPLO 377 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01769] Etapa A: 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,30 g, 0,54 mmol) em dioxanos foi adicionado (S)-(1-metilpiperidina-2-il)metanol (0,49 g, 3,8 mmol) e Cs2CO3 (0,53 g, 1,6 mmol) e a reação desgaseificada com Argônio por 15 minutos, seguida pela adição de Rhuphos Pd G3 (0,068 g, 0,081 mmol) e a reação aquecida a 100oC durante a noite. A reação foi resfriada e filtrada através de papel GFF e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi cromatografado em seguida usando 1→15% de MeOH/DCM com 2% de Hidróxido de Amônio como eluente para dar 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi))-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (0,23 g, 0,45 mmol, 83% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01770] Etapa B: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (0,23 g, 0,45 mmol) em DCM (20 mL) resfriada a 0°C foi adicionada N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,16 ml, 0,90 mmol) seguida por adição de uma solução de cloreto de acriloíla (0,037 ml, 0,45 mmol) (em 10 mL de DCM) e a reação agitada a 0°C por 10 minutos. À reação foi a seguir adicionado 1 mL de metanol e a reação concentrada in vacuo. O material foi em seguida cromatografado 2X usando 1→ 10% de MeOH/DCM, com 2% de NH4OH como eluente para dar um sólido que foi ainda purificado por HPLC-prep reversa usando 5→95% de ACN/água com 0,1% TFA como modificador para dar composto do título 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (EXEMPLO 377, 0,030 g, 0,053 mmol, 12% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 378 2-((2S,5R)-1-acrilil-5-metil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01771] Etapa A: benzil 4-(terc-butil) (2R,5R)-2-(hidroximetil)-5- metilpiperazina-1,4-dicarboxilato: Terc-butil (2R,5R)-5-(hidroximetil)-2- metilpiperazina-1-carboxilato (1,0 g, 4,34 mmol) foi dissolvido em água (50 mL) seguido pela adição de EtOAc (6,68 ml, 4,34 mmol) e hidrogênio carbonato de sódio (1,09 g, 13,0 mmol) e a reação agitada 3 minutos. À reação foi adicionado cloridrato de benzila (0,648 ml, 4,56 mmol) em 1 bolus (temperatura interna de 19 --> 25°C) e a reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. As camadas foram separadas em seguida e os orgânicos lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O resíduo foi cromatografado usando 10→70% EtOAc/Hex como eluente para dar 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5R)-2-(hidroximetil)-5-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato (1,2 g, 3,29 mmol, 75,8% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 265,2 [M+H-boc]+.
[01772] Etapa B: 4-(terc-butil) (2R,5R)-5-metil-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5R)-2-(hidroximetil)-5-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato (1,2 g, 3,3 mmol) em DCM resfriado a 0C foi adicionada N-etil-N-isopropilpropan-2- amina (0,64 g, 4,9 mmol) e cloreto de metanossulfonila (0,30 ml, 3,6 mmol) e a reação agitada a 0°C por 2 h. Os orgânicos foram em seguida lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O material foi cromatografado em seguida usando 10→70% de EtOAc/hex como eluente para dar 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5R)-5-metil-2-(((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina- 1,4-dicarboxilato (1,3 g, 2,9 mmol, 89% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 343,1 [M+H-boc]+.
[01773] Etapa C: 1-benzil 4-(terc-butil) (2S,5R)-2-(cianometil)-5- metilpiperazina-1,4-dicarboxilato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (2R,5R)-5-metil-2-(((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato (1,3 g, 2,9 mmol) em DMA (20 mL) foi adicionado cianossódio (0,29 g, 5,9 mmol) e a reação agitada 48 horas a 55oC. A reação foi a seguir diluída com água básica (220 mL) e a camada aq extraída com MTBE. Os orgânicos foram em seguida lavados com água (2x50 mL), salmoura (50 mL), secos sobre MgSO 4 e concentrados in vacuo. O material foi posteriormente cromatografado usando 10→50% EtOAc/hex como eluente para dar 1-benzil 4-(terc-butil) (2S,5R)-2-
(cianometil)-5-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato (0,90 g, 2,4 mmol, 82% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 274,1 [M+H-boc]+.
[01774] Etapa D: benzil (2S,5R)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1- carboxilato cloridrato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (2S,5R)-2- (cianometil)-5-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato (0,90 g, 2,4 mmol) em DCM foi adicionado cloreto de hidrogênio (3,0 ml, 12 mmol) e a reação agitada por 2 h à rt (adicionados mais 5 eq de HCl à 1 h). A reação foi em seguida concentrada in vacuo e o material usado em bruto na reação seguinte. ESI+APCI MS m/z 274,2 [M+H]+.
[01775] Etapa E: terc-butil 4-((2R,5S)-4-((benziloxi)carbonil)-5-(cianometil)- 2-metilpiperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Ao benzil (2S,5R)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato cloridrato sólido (0,75 g, 2,4 mmol) e terc-butil 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,74 g, 2,4 mmol) foi adicionado DMA (10 mL) seguido de Base de Hunig (1,3 ml, 7,3 mmol) e a reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A reação foi, então, derramada em água e a camada aquosa extraída com MTBE. A camada de MTBE foi lavada com água, salmoura, seca sobre MgSO4 e concentrada in vacuo. O material foi purificado por cromatografia de coluna usando 10→70% de etoac/hex como eluente para dar terc-butil 4-((2R,5S)-4-((benziloxi)carbonil)-5-(cianometil)-2-metilpiperazina- 1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,72 g, 1,3 mmol, 55% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 541,3 [M+H]+.
[01776] Etapa F: benzil (2S,5R)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-((2R,5S)-4-((benziloxi)carbonil)-5-(cianometil)-2-metilpiperazin-1-il)- 2-cloro-5, 8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,72 g, 1,3 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado cloreto de hidrogênio (1,7 ml, 6,7 mmol) (4 M em dioxanos) e a reação agitada por 1 hora à temperatura ambiente. A reação foi em seguida concentrada in vacuo e o resíduo particionado entre EtOAc e água básica. Os orgânicos foram separados e lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O material foi usado bruto na próxima rxn. ESI+APCI MS m/z 441,2 [M+H]+.
[01777] Etapa G: (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,5R)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)-5-metilpiperazina-1-carboxilato (0,48 g, 1,1 mmol) em dioxanos (40 mL) foi adicionado 1-iodonaftaleno (1,4 g, 5,4 mmol) e Cs2CO3 (1,1 g, 3,3 mmol) e a reação desgaseificada com Ar por 15 minutos, seguida po adição de Metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio (II) (0,14 g, 0,16 mmol) e a reação aquecida até 100oC por 5 horas. A reação foi depois resfriada e filtrada através de papel GFF e concentrada in vacuo. O material foi cromatografado em seguida usando 10→70 etoac/hex como eluente para dar benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (2,8 g, 5,1 mmol, 64% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
[01778] Etapa H: 2-((2S,5R)-5-metil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma solução de benzil (2S,5R)-4-(2-cloro-7-(naftaleno-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)-5-metilpiperazina-1- carboxilato (0,48 g, 0,85 mmol) em dioxanos (40 mL) foram adicionados (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol (0,39 g, 3,4 mmol) e Cs2CO3 (1,4 g, 4,2 mmol) e a reação desgaseificada com Ar por 15 minutos seguidos por adição de Metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (0,11 g, 0,13 mmol) e a reação aquecida até 100oC durante a noite. A reação foi depois resfriada e filtrada através de papel GFF e concentrada in vacuo. O material foi cromatografado em seguida usando 1→15% (MeOH+2% NH4OH)/DCM para dar benzil (2S,5R)-2- (cianometil)-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 0,31 mmol, 37% de rendimento) e 2-((2S,5R)-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (0,14 g, 0,27 mmol, 32% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01779] Etapa I: 2-((2S,5R)-1-acriloil-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-ilo)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((2S,5R)-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (0,14 g, 0,274 mmol) resfriada até 0°C foi adicionada N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,0982 ml, 0,547 mmol) seguido de cloreto de acriloíla (0,0225 ml, 0,274 mmol) e a reação agitada a 0°C por 10 minutos. Foi adicionado 1 mL de metanol à reação e a reação concentrada in vacuo. O material foi a seguir purificado por HPLC 2 prep reversa gilson 2 vezes eluindo com 5→95% de ACN/água com 0,1% TFA como modificador. As frações combinadas foram particionadas entre EtOAc e água básica e as camadas separadas. Os orgânicos foram em seguida lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título 2-((2S,5R)-1- acriloil-5-metil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 378, 0,0118 g, 0,0209 mmol, 7,62% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 379
2-((S)-1-acriloíl-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01780] 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J, usando 1- bromo-2-(trifluorometil)benzeno mno lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 380 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01781] 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 375, Etapas C-G, usando (S)- (1-(2-metoxietil)pirrolidin-2-il)metanol no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2-
il)metanol na Etapa C e 1-bromonaftaleno no lugar de bromidrato de 4-bromo-3- (trifluorometil)piridina na Etapa E. ESI+APCI MS m/z 596,3 [M+H]+.
EXEMPLO 381 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-metoxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01782] Etapa A: terc-butil (2S,4R)-2-(((4-(4-acrilil-3-(cianometil)piperazin- 1-il)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4- metoxipirrolidina-1-carboxilato: foi preparado seguindo o Exemplo 375, Etapas C-F, usando terc-butil (2S,4R)-2-(hidroximetil)-4-metoxipirrolidina-1-carboxilato no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa C e 1-bromonaftaleno no lugar de bromidrato de 4-bromo-3-(trifluorometil)piridina na Etapa E Formaldeído
[01783] Etapa B: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((2S,4R)-4-metoxi-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: benzil 4-(2-(((2S,4R)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-
hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (27,0 mg, 0,04 mmol, formaldeído (15,7 µl, 0,2 mmol), Na(OAc)3BH (17,7 mg, 0,08 mmol) foram colocados em THF (2 mL) e agitados por 2 horas. Foi adicionado bicarbonato saturado e o a mistura foi extraída com 10% MeOH em DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados, secos com sulfato de sódio e concentrados para fornecer material bruto que foi usado como estava.
[01784] Etapa C: 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-metoxi-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila foi preparado seguindo o Exemplo 375 Etapas F e G, usando benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((2S,4R)-4-metoxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazina-1- carboxilato no lugar de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(3-(trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-1-carboxilato na Etapa F. ESI+APCI MS m/z 582,3 [M+H]+.
EXEMPLO 382 2-((S)-1-acriloíl-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01785] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas F-J, usando (R)- (1-metilpirrolidin-2-ilo)metanol no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol na
Etapa F e 1-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1- bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 383 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01786] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J, usando 3- bromo-5-fluoro-4-(trifluorometil)piridina no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 589,3 [M+H]+.
EXEMPLO 384 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5-fluoro- 4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01787] Etapa A: benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5,37 g, 10,2 mmol) foi colocado em DCM (75 mL) e foi resfriado até 0°C. Foi adicionado HCl (12,7 ml, 50,9 mmol) e a reação foi aquecida até rt e foi agitada por 2 h. A reação foi concentrada e foi criada em DCM. Foi adicionado bicarbonato saturado e a mistura foi extraída com DCM (3x 50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secas e concentradas para fornecer benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (benzil)cianometil)piperazina-1-carboxilato (4,33 g, 10,1 mmol, 99% de rendimento) que foi utilizado como estava.
dioxano
[01788] Etapa B: benzil (S)-4-(2-cloro-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato: A um frasco foi adicionado carbonato de césio (2,29 g, 7,0 mmol), benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,00 g, 2,3 mmol), metanossulfonato (2- diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2- il)paládio(II) (0,30 g, 0,35 mmol), 3-bromo-5-fluoro-4-(trifluorometil)piridina (1,29 g, 5,3 mmol) e 1,4-dioxano (15,6 ml, 2,3 mmol) o frasco foi desgaseificado com Ar e selado, então, aquecido até 90°C por 24 horas. A reação foi resfriada e água e NH4Cl saturado foram adicionados e a mistura foi extraída com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (5-75% de EtOAc em hexano) para fornecer benzil (S)- 4-(2-cloro-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (634 mg, 1,1 mmol, 46% de rendimento).
dioxano
[01789] Etapa C: terc-butil (2S,4R)-2-(((4-((S)-3-(cianometil)piperazin-1-il))- 7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oxi)metil)-4-fluoropirrolidina-1-carboxilato: Em um frasco de fundo cônico, uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (634 mg, 1,07 mmol) em dioxano (10.746 µl, 1,07 mmol) foi espargido com argônio. Terc-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (942 mg, 4,30 mmol), Cs2CO3 (1.050 mg, 3,22 mmol), metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino- 2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (137 mg, 0,161 mmol) foram adicionados sequencialmente sob argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tapada e aquecida a 100°C por 18 h. A reação foi resfriada e foi adicionada água. A mistura foi extraída com DCM (3x20mL) e os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-10% de MeOH) para fornecer terc-butil (2S,4R)-2-(((4-((S)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(5-fluoro-4-
(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4- fluoropirrolidina-1-carboxilato (579 mg, 0,907 mmol, 84% de rendimento).
[01790] Etapa D: terc-butil (2S,4R)-2-(((4-((S)-4-acriloil-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4-fluoropirrolidina-1-carboxilato: Terc- butil (2S,4R)-2-(((4-((S)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(5-fluoro-4- (trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4- fluoropirrolidina-1-carboxilato (579 mg, 0,907 mmol), trietilamina (379 µl, 2,72 mmol) foi colocado em CH2Cl2 (9.066 µl, 0,907 mmol) e resfriado até 0°C. Foi adicionado cloreto de acriloíla (6.044 µl, 1,81 mmol) (solução 0,3M recém- preparada em DCM) e a reação foi agitada por 45 min. a 0°C. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM (3x 15 mL). As camadas foram combinadas e concentradas para fornecer material bruto que foi usado como estava.
[01791] Etapa E: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-fluoro-4-(trifluorometethyl)pyridin- 3-il)-2-(((2S,4R)-4-fluoropirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Em um vaso selado terc-butil (2S,4R)-
2-(((4-((S)-4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il))-7-(5-fluoro-4- (trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4- fluoropirrolidina-1-carboxilato (628 mg, 0,91 mmol) foi colocado em MeOH (2 mL). Foi adicionado HCl (756 µl, 4,53 mmol) (aquoso 6M) e a mistura foi agitada à rt por 5 h. Adicionou-se lentamente bicarbonato saturado para obter o pH ~9. A mistura foi extraída com DCM (3x20 mL). Os extratos foram combinados, secos, filtrados e concentrados para fornecer material bruto que foi usado como estava.
[01792] Etapa F: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-fluoro-4- (trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((2S,4R)-4-fluoropirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (175 mg, 0,30 mmol), formaldeído (111 µl, 1,48 mmol), Na(OAc)3BH (125 mg, 0,59 mmol) e foram colocados em THF (2 mL) e agitados por 2 horas. Foi adicionado bicarbonato saturado e a mistura foi extraída com 10% de MeOH em DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados, secos com sulfato de sódio e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (4-13% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S, 4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (69,7 mg, 0,115 mmol, 39% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 607,2 [M+H]+.
EXEMPLO 385
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-cloro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01793] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-cloro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J, usando 3- bromo-5-cloro-4-(trifluorometil)piridina no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I. ESI+APCI MS m/z 605,3 [M+H]+.
EXEMPLO 386 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-isopropilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5- fluoro-4-(trifluorometil))piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01794] 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-isopropilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(5-fluoro-4-(trifluorometil))piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila foi preparada seguindo a preparação para o Exemplo 384, Etapa F, usando propan-2-ona no lugar de formaldeído na etapa F. ESI+APCI MS m/z 635,3 [M+H]+.
EXEMPLO 387 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-cloro-4-metilpiridin-3-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01795] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-cloro-4-metilpiridin-3-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234 , Etapas H-J, usando 3- bromo-5-cloro-4-metilpiridina no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 551,2 [M+H]+.
EXEMPLO 388 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01796] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J, usando 1-bromo-3-fluoro- 2-metilbenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na etapa H. ESI+APCI MS m/z 534,3 [M+H]+.
EXEMPLO 389 2-((S)-1-(but-2-inoil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01797] Etapa A: 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4- dicarboxilato: A terc-butil (R)-3-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (76,0 g, 351 mmol) em um frasco de 3 L foi adicionada água (500 mL) e a pasta foi agitada até o material estar completamente dissolvido. A esta mistura foi adicionado
EtOAc (541ml, 351 mmol) seguido de NaHCO3 (88,6 g, 1,05 mol) e a mistura resultante foi agitada por 3 min. (temp interna = 20°C). A esta mistura foi adicionado Cbz-Cl (52,5 ml, 369 mmol) durante 3 minutos (temp interna de 20°C a 25°C, efluente gasoso observado neste ponto) e a reação foi agitada por 1d à rt. A mistura de reação foi transferrred para um funil de separação e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca (MgSO4) e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 10-70% de EtOAc/hex para proporcionar 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4- dicarboxilato (114,6 g, 327,0 mmol, 93% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 251,1 [M-Boc+H]+.
[01798] Etapa B: 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato (32 g, 91,3 mmol) em CH2Cl2 (457 mL, 0,2 M) resfriada até 0°C foi adicionado DIEA (24,6 ml, 137 mmol) seguido por cloreto de metanossulfonila (7,77 ml, 100 mmol) durante 1 minuto e a mistura foi agitada a 0°C por 1 h. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação e lavada com água/salmoura 1:1 (500 mL). A camada orgânica foi coletada, seca (MgSO4) e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 10-60% EtOAc/hex para proporcionar 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2-(((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4- dicarboxilato) (33 g, 77,0 mmol, 84,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 329,1 [M-Boc+H]+.
[01799] Etapa C: 1-benzil 4-(terc-butil) (S)-2-(cianometil)piperazina-1,4- dicarboxilato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (R)-2- (((metilsulfonil)oxi)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato (12,6 g, 29,4 mmol) em DMA (368 ml, 73,5 mmol) foi espargido com argônio. À solução foi adicionado cianeto de sódio (3,60 g, 73,5 mmol) e a reação agitada a 55°C por 1d, monitorando por HPLC (método longo) para determinar a conclusão da reação. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação, diluída com
NaOH 0,5M (800 mL) e depois extratada com MTBE (2x). As camadas orgânicas combinadas foram em seguida lavadas com água básica (2x 200 mL), salmoura (100 mL), secas (MgSO4) e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 10-->60% EtOAc/hex como eluente para proporcionar 1-benzil 4-(terc-butil) (S)-2-(cianometil)piperazina-1,4-dicarboxilato (7,9) g, 22,0 mmol, 75% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 260,1 [M-Boc+H]+.
[01800] Etapa D: benzil (S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de 1-benzil 4-(terc-butil) (S)-2-(cianometil)piperazina-1,4-dicarboxilato (20,4 g, 56,8 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado cloreto de hidrogênio (99,3 mL, 397 mmol) (solução 4,0 M em dioxano) e a reação agitada à rt por 1,5 horas. A mistura de reação foi concentrada in vacuo e seca sob vácuo para dar benzil (S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato cloridrato (16,8 g, 56,8 mmol, 100% de rendimento) como uma espuma. ESI+APCI MS m/z 260,1 [M+H]+.
[01801] Etapa E: terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: A uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato cloridrato (16,8 g, 56,8 mmol) em DMA (114 ml, 56,8 mmol) foi adicionado terc- butil 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (15,5 g, 51,1 mmol) seguido por DIEA (39,7 ml, 227 mmol) e a mistura de reação foi agitada a RT por 1 h. A mistura de reação foi diluída com 1L de água e extraída com MTBE (2x). Os orgânicos commbinados foram lavados com água (2x200 mL), salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 10-60% EtOAc/hex como eluente para dar terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8- di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (22,8 g, 43,3 mmol, 76% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 527,2 [M+H]+.
Etapa F: terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-
carboxilato: Em RBF de parede pesada de 250 mL com tampa de rosca de PTFE, uma solução de terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5,55 g, 10,5 mmol) em dioxano (60,2 ml, 10,5 mmol) foi espargida com argônio e (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol (3,64 g, 31,6 mmol), Cs2CO3 (10,3 g, 31,6 mmol), Ruphos Pd G3 (0,881 g, 1,05 mmol) foi adicionado sequencialmente e a mistura resultante foi espargida com argônio por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 1d. Mediante consumo do material de partida, a mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e Cbz- Cl foi adicionado conforme necessário para converter o produto hidrolisado de Cbz no composto do título. A mistura de reação foi, então, particionada entre EtOAc/10% de salmoura. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com um gradiente de 1,5% MeOH/0,15% NH4OH/DCM a 11,25% MeOH/1,125% NH4OH/DCM (Pré-mistura 15% MeOH/1,5% NH4OH em DCM e rampa de 10-75% desta mistura em DCM) para proporcionar o composto do título (4,51 g, 7,45 mmol, 71%). ESI MS m/z 606,3 [M+H]+.
[01802] Etapa G: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1- il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (7,2 g, 12 mmol) em DCM (1,0 g, 12 mmol) foi adicionado HCl (4M em dioxano, 15 ml, 59 mmol). A mistura foi agitada à RT por 2 h. A mistura de reação foi concentrada até o sal bis HCl. O resíduo foi particionado entre DCM/NaHCO3 (sat) e a camada aquosa foi extraída com DCM (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para proporcionar o composto do título 4,72 g (0,009 mmol, 79%). ESI MS m/z 506,3 [M+H]+.
[01803] Etapa H: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: A um frasco foi adicionado carbonato de césio (967 mg, 2,97 mmol), benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (500 mg, 0,989 mmol), Rhuphos Pd G3 (124 mg, 0,148 mmol), 1-bromo-2,3-dimetilbenzeno (915 mg, 4,94 mmol) e 1,4-dioxano (9.889 µl, 0,989 mmol), o frasco foi desgaseificado com Ar e selado e depois aquecido até 75°C por 24 horas. Adicionou-se água e NH4Cl saturado e a mistura foi extraída com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0- 12% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer benzil (S)-2- (cianometil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (505 mg, 0,828 mmol, 83,7% de rendimento). ESI MS m/z 610,4 [M+H]+.
[01804] Etapa I: 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (505 mg, 0,828 mmol) em EtOH (8282 µl, 0,828 mmol) e THF (8282 µl, 0,828 mmol) foi adicionado paládio (441 mg, 0,207 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O) e, em seguida, uma atmosfera de H2 foi introduzida via vácuo seguida por pressão de balão. A mistura foi, então, agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi, então, diluída com MeOH e THF 1:1 e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para fornecer o produto bruto que foi usado como estava. ESI MS m/z 476,3 [M+H]+.
[01805] Etapa J: 2-((S)-1-(but-2-inoil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: A 0oC, a um RBF de 25 mL contendo N,N-dimetilformamida (4.415 µl, 0,4415 mmol) foi adicionado 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-
metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (210 mg, 0,44 mmol) e trietilamina (122,7 µl, 0,88 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido but-2-inoico (44,54 mg, 0,53 mmol) era adicionado em uma porção. Anidrido cíclico de ácido 1- propanofosfônico (197,1 µl, 0,66 mmol) foi adicionado lentamente à mistura agitada. A reação foi deixada a agitar por 2 h a 0 oC. Foi adicionada água e os sólidos foram filtrados. Os sólidos foram purificados por sílica gel (5-18% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer o composto do título 2-((S)-1-(but- 2-inoil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 389, 144 mg, 0,27 mmol, 60%). . ESI+APCI MS m/z 542,3 [M+H]+.
EXEMPLO 390 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,3S)-3-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01806] Etapa A: benzil (S)-4-(2-(((2R,3S)-1-(terc-butoxicarbonil)-3-((terc- butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-
hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: foi preparado de acordo com o Exemplo 400, Etapas C-E usando terc-butil (2R,3S)- 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato no lugar de (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa C.
[01807] Etapa B: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,3S)-3-hidroxipirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila terc-butil (2R, 3S)-2-(((4-((S)-4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1- il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-3-((terc- butildimetilsilil)oxi) pirrolidina-1-carboxilato (363 mg, 0,473 mmol) foi colocado em MeOH (10 mL). HCl aquoso 6M foi adicionado e agitado à rt por 6 h. A reação foi resfriada até 0°C e bicarbonato saturado foi adicionado lentamente. A mistura foi extraída com DCM (3x20 ml). Os extratos foram combinados, secos, filtrados e concentrados para fornecer material bruto que foi usado como estava.
[01808] Etapa C: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,3S)-3-hidroxi-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: Foi preparado de acordo com o EXEMPLO 384, Etapa F, usando 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,3S)-3-hidroxipirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila no lugar de 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5-fluoro-4-(trifluorometil) piridin-3- il)-2-(((2S,4R)-4-fluoropirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. ESI+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 391
2-((S)-1-(but-2-inoil)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01809] 2-((S)-1-(but-2-inoil)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Foi preparado de acordo com o Exemplo 389, Etapa H-J, usando 1-bromo-8-cloronaftaleno no lugar de 1-bromo-2,3-dimetilbenzeno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 598,2 [M+H]+.
EXEMPLO 392 2-((S)-1-(ciclobut-1-eno-1-carbonil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01810] 2-((S)-1-(ciclobut-1-eno-1-carbonil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 389 Etapa J,
usando ácido ciclobut-1-eno-1-carboxílico no lugar de ácido but-2-inoico. ESI+APCI MS m/z 556,3 [M+H]+.
EXEMPLO 393 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-metil-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Dioxano
[01811] Etapa A: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(3-metil-2- (trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. Benzil (S)-4-(7-(3-cloro- 2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 0,22 mmol), K2CO3 (329 µl, 0,66 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6- trioxatriborinano (82,6 mg, 0,658 mmol) e Tetrakis (25,3 mg, 0,022 mmol) foram colocados em dioxano (731 µl, 0,22 mmol) e aquecidos a 90°C por 18 horas. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com 10% de MeOH em DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (2-80% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(3-metil-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (75 mg, 0,11 mmol, 52% de rendimento).
[01812] Etapa B: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-metil-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas I e J usando benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(3-metil-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato no lugar de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi) de benzil-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato na etapa I. ESI+APCI MS m/z 584,3 [M+H]+.
EXEMPLO 394 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01813] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J, usando 1-bromo-2,3- dimetilbenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 530,3 [M+H]+.
EXEMPLO 395
2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
Etapa A: benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato : Em um tubo de micro-ondas benzil 4-(2- cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 0,326 mmol) foi dissolvido em dioxano (181 µl, 0,362 mmol) e tratado com carbonato de césio (236 mg, 0,723 mmol) e (S)-terc-butil 2-(hidroximetil)-2-metilpirrolidina-1-carboxilato (389 mg, 1,81 mmol). O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C por 2 horas.
A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e filtrada através de papel GF/F.
O filtrado foi concentrado in vacuo e cromatografado no CombiFlash eluindo com 0%-10% DCM:MeOH.
Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas para dar benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-2-
metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (264 mg, 0,361 mmol, 99,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 732,4 [M+H]+.
Etapa B: benzil 2-(cianometil)-4-(2-((S)-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil))-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (264 mg, 0,361 mmol) foi dissolvido em diclorometano (3607 µl, 0,361 mmol) e tratado com TFA (556 µl, 7,21 mmol). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e tratada com bicarb saturado. A fase aquosa foi extraída com DCM (2X) e os orgânicos combinados secos sobre Na2SO4. Os orgânicos foram concentrados in vacuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (210 mg, 0,332 mmol, 92,2% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 632,3 [M+H]+.
Etapa C: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato. Benzil 2-(cianometil)-4-(2-((S)-2-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (105 mg, 0,1662 mmol) foi dissolvido em ácido fórmico (94,05 µl, 2,493 mmol) e tratado com Formaldeído (1868 µl, 24,93 mmol). A mistura de reação foi agitada a 85°C por 1 hora. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e tratada com bicarb. saturado. O aquoso foi extraído com DCM (2X). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, concentrados in vacuo e cromatografados no CombiFlash eluindo com 0%-10% DCM:MeOH. Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1)-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-
carboxilato (75 mg, 0,11161 mmol, 69,88% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 646,3 [M+H]+.
Etapa D: 2-(4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (117 mg, 0,181 mmol) em EtOH (1812 µl, 0,181 mmol) e THF (1812 µl, 0,181 mmol) foi purgada com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado Paládio (96,4 mg, 0,0453 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O), e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução, então, foi agitada sob uma atmosfera de H2. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-(4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6),7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (88 mg, 0,172 mmol, 94,9% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01814] Etapa E: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-(4-(2-(((S)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (88 mg, 0,17 mmol) em diclorometano (1.720 µl, 0,17 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Acriloíla (14 µl, 0,17 mmol) seguido por base de Hunig (60 µl, 0,34 mmol). A reação foi, então, agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura de reação foi, então, concentrada in vacuo. O concentrado foi suspenso numa mistura 60:40 de ACN: H2O e purificado na Gilson (HPLC-prep reversa), eluindo com 5 --> 95% ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas,
secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo para dar 2-(1-acriloil-4-(2-(((S)- 1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftaleno)-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (14 mg, 0,025 mmol, 14% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 396 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Etapa A: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: Em um frasco de fundo cônico, uma solução de 4-(2-cloro-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 0,326 mmol) em dioxano (3.616 µl, 0,326 mmol) foi espargida com Argônio e (S)-(1-(ciclopropilmetil) pirrolidin-2-il) metanol (168 mg, 1,08 mmol), Cs2CO3 (353 mg, 1,08 mmol), Rhuphos Pd G3 (30,2 mg, 0,0362 mmol) foram sequencialmente adicionados sob argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente. Foi adicionado EtOAc e lavado com salmoura (2x). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi purificado por cromatografia flash eluindo com 0-20% DCM/MeOH + 2% NH4OH. Todas as frações contendo produto limpo desejado foram combinadas e concentradas para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (90 mg, 0,134 mmol, 37,0% de rendimento).. ESI+APCI MS m/z 672,4 [M+H]+.
[01815] Etapa B: 2-(4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- (ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (90 mg, 0,13 mmol) em EtOH (1.340 µl, 0,13 mmol) e THF (1.340 µl, 0,13 mmol) foi purgada com N2 por 5 min. A esta solução foi adicionado Paládio (36 mg, 0,033 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O), e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 min. A solução em seguida agitada sob uma atmosfera de H 2. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi concentrado in vacuo para fornecer 2-(4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6),7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila em bruto (71 mg, 0,13 mmol, 99% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 538,3 [M+H]+.
[01816] Etapa C: 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-(4-(2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (71 mg, 0,132 mmol) em diclorometano (1.320 µl, 0,132 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Acriloíla (10,7 µl, 0,132 mmol) seguido por base de Hunig (46,1 µl, 0,264 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada in vacuo.
O concentrado foi suspenso numa mistura 60:40 de ACN: H 2O e purificado na Gilson (HPLC-prep reversa), eluindo com 5 --> 95% ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo para dar o composto do título 2-(1-acriloil-4- (2-(((S)-1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 396, 15,7 mg, 0,0265 mmol, 20,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 592,4 [M+H]+.
EXEMPLO 397 2-(1-acriloil-4-(2-(2-(dimetilamino)-2-metilpropoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01817] 2-(1-acriloil-4-(2-(2-(dimetilamino)-2-metilpropoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 396 usando 2- Dimetilamino-2-metil-1-propanol no lugar de (S)-(1-(ciclopropilmetil)pirrolidin-2- il)metanol na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 554,4 [M+H]+.
EXEMPLO 398
2-((2S)-2-(((4-(4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)-N,N-dimetilacetamida
Etapa A: 2- benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: Em um tubo de micro-ondas benzil 4-(2- cloro-7-(naftaleno)-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 0,362 mmol) foi dissolvido em dioxano (181 µl, 0,362 mmol) e tratado com carbonato de césio (236 mg, 0,723 mmol) e N-terc-Butoxicarbonil-L-prolinol (364 mg, 1,81 mmol). O tubo foi, então, tampado e aquecido até 90°C durante a noite.
A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e filtrada através de papel GF/F e concentrada in vacuo.
O concentrado foi cromatografado no CombiFlash eluindo com 0%-10% DCM:MeOH.
Todas as frações contendo produto limpo foram combinadas e concentradas para dar benzil 4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-
il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (225 mg, 0,313 mmol, 86,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 718,4 [M+H]+.
Etapa B: benzil 2-(cianometil)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((S)-pirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Benzil 4-(2- (((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(benzilo)naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (225 mg, 0,313 mmol) foi dissolvido em diclorometano (3.134 µl, 0,313 mmol) e tratado com TFA (483 µl, 6,27 mmol). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e os orgânicos lavados com bicarb saturado. Os orgânicos foram extraídos com DCM(3X). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar benzil 2-(cianometil)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((S)-pirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (111 mg, 0,180 mmol, 57,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 618,3 [M+H] +.
Etapa C: benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-(2-(dimetilamino)-2-oxoetil)pirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Benzil 2-(cianometil)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((S)- pirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (111 mg, 0,1797 mmol) foi dissolvido em diclorometano (1.797 µl, 0,19797 mmol) e tratado com N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (156,9 µl, 0,8984 mmol) e Cloroacetildimetilamina (46,20 µl, 0,4492 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Foram adicionadas mais 2 equivalências de base e a reação foi agitada por um adicional de 3 horas. A reação foi concentrada in vacuo e foi cromatografada no CombiFlash eluindo com modificador 0%-15% DCM/MeOH + 0,5% NH4OH modifier. Todas as frações contendo produto desejado limpo foram combinadas e concentradas para dar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-(2-(dimetilamino)-2-oxoetil)pirrolidin-2-
il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (73 mg, 0,1039 mmol, 57,80% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 703,3 [M+H]+.
Etapa D: 2-((2S)-2-(((4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido)[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)-N,N- dimetilacetamida: Uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-(2- (dimetilamino)-2-oxoetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (73 mg, 0,10 mmol) em EtOH (1,039 uL, 0,10 mmol) e THF (1,039 uL, 0,10 mmol) foi purgada com N 2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado Paládio (28 mg, 0,026 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O), e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução, então, foi agitada sob uma atmosfera de H2. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2- ((2S)-2-(((4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)-N,N-dimetilacetamida (43 mg, 0,076 mmol, 73% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 569,3 [M+H]+.
[01818] Etapa E: 2-((2S)-2-(((4-(4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)- N,N-dimetilacetamida: A uma suspensão de 2-((2S)-2-(((4-(3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)-N,N-dimetilacetamida (43 mg, 0,0756 mmol) em diclorometano (756 µl, 0,0756 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Acriloíla (6,14 µl, 0,0756 mmol) seguido por base de Hunig (26,4 µl 0,151 mmol). A reação foi, então, agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada in vacuo e ressuspensa numa mistura 60:40 de ACN: H2O e purificada na Gilson (HPLC-prep inversa), eluindo com 5 - ->95% de ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo para dar 2-((2S)-2- (((4-(4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)-N,N-dimetilacetamida (14,9 mg, 0,0239 mmol, 31,6% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 623,3 [M+H]+.
EXEMPLO 399 2-(1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01819] 2-(1-acriloil-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 396 usando (3R)-(1-Metil- pirrolidin-3-il)-metanol no lugar de (S)-(1-(ciclopropilmetil) pirrolidin-2-il)metanol na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 552,3 [M+H]+.
EXEMPLO 400
2-((S)-1-acriloíl-4-(2-((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01820] Etapa A: benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de terc- butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5,0 g, 9,5 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado cloreto de hidrogênio (12 mL, 47 mmol, solução 4 M em dioxanos) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi em seguida concentrada até uma pasta espessa e uma mistura de EtOAc/água foi adicionada. A camada aquosa foi basificada com NaOH 1M e a camada aquosa extraída com EtOAc (2X). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo para dar benzil (S)-4-(2- cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (4,0 g, 9,4 mmol, 99% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 427,1 [M+H]+.
[01821] Etapa B: benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (3,4 g, 8,0 mmol) em dioxanos (40 mL) foi adicionado 1-iodonaftaleno (6,0 ml, 40 mmol) e carbonato de césio (5,2 g, 16 mmol) e a reação desgaseificada com Argônio por 15 minutos seguida de adição de Rhuphos Pd G3 (1,00 g, 1,2 mmol) e a reação aquecida até 100°C durante a noite. A reação foi a seguir filtrada através de papel GF/F e concentrada in vacuo. O material foi cromatografado em seguida usando 10-->70 EtOAc/Hexanos como eluente para dar benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,8 g, 5,1 mmol, 64% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 553,2 [M+H]+.
[01822] Etapa C: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Em um frasco de fundo cônico, uma solução de benzil (S)-4-(2- cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 0,452 mmol) em dioxano (4.520 µl, 0,452 mmol) foi espargida com Argônio por 5 minutos. (3R)-(1-Etil-pirrolidin-3-il)- metanol (175 mg, 1,36 mmol), Cs2CO3 (442 mg, 1,36 mmol), Rhuphos Pd G3 (37,8 mg, 0,0452 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 1 hora. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com salmoura (2x), secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi purificado por cromatografia flash eluindo com 0-20% (MeOH + 2% NH4OH)/DCM. Todas as frações contendo o produto desejado limpo foram combinadas e concentradas para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (118 mg, 0,183 mmol, 40,4% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 646,3 [M+H]+.
[01823] Etapa D: 2-((S)-4-(2-((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidina)-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (237 mg, 0,367 mmol) em EtOH (3.670 µl, 0,367 mmol) e THF (3.670 µl, 0,367 mmol) foi purgada com N2 por 5 min. A esta solução foi adicionado Paládio (97,6 mg, 0,0917 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% H2O), e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 min. A solução foi, então, agitada sob uma atmosfera de H2. A mistura foi, então, diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-((S)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (155 mg, 0,303 mmol, 82,5% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01824] Etapa E: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma suspensão de 2-((S)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (226 mg, 0,442 mmol) em diclorometano (4.417 µl, 0,442 mmol) à temperatura ambiente foi adicionado Cloreto de Aciloíla (35,9 µl, 0,442 mmol) seguido por base de Hunig (154 µl, 0,883 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi concentrada in vacuo e carregada em uma coluna de 12g RediSep Gold e cromatografada no CombiFlash (0%-15% DCM:MeOH + 1% de modificador de NH4OH). Todas as fracções contendo produto foram combinadas e concentradas in vacuo. O concentrado foi suspenso em uma mistura 60:40 de ACN:H 2O e purificado na Gilson (HPLC prep reversa), eluindo com 5-->95% ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar o composto do título 2-((S)-1-acriloil- 4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 400, 136 mg, 0,240 mmol, 54,4% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 566,2 [M+H]+.
EXEMPLO 401
2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[01825] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(2-(((S)-1- etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (150 mg, 0,293 mmol), ácido (2E)-4- (dimetilamino)but-2-enoico (75,7 mg, 0,586 mmol), DIEA (256 µl, 1,47 mmol) em DCM (2.932 µl, 0,293 mmol) foi adicionado HATU (167 mg, 0,440 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 5 horas. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e Salmoura. A aquosa foi extraída com EtOAc (2x). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na 2SO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi diluído em 60:40 ACN:H2O e purificado na Gilson (HPLC prep reversa), eluindo com 5-->95% de ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo para dar o composto do título 2-((S)-1-((E)-4- (dimetilamino)but-2-enoil)-4-(2-(((S)-1-etilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 401, 27,6 mg, 0,0443 mmol, 15,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 623,4 [M+H]+.
EXEMPLO 402 2-((S)-2-(((4-((S)-4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)-N,N-dimetilacetamida
[01826] 2-((S)-2-(((4-((S)-4-acriloil-3-(cianometil)piperazin-1-il))-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidin-1-il)- N,N-dimetilacetamid: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 39 usando benzi (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato no lugar de benzil 4-(2- cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 623,3 [M+H]+.
EXEMPLO 403
(S)-2-(cianometil)-4-(2-((S)-3-(dimetilamino)pirrolidin-1-il)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato
[01827] benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((S)-3-(dimetilamino)pirrolidin-1-il)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 400 usando (3S)-(-)-3-(Dimetilamino)Pirrolidina no lugar de (3R)-(1-Etil-pirrolidin-3-il)- metanol na Etapa C. ESI+APCI MS m/z 551,3 [M+H]+.
EXEMPLO 404 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidina)-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01828] Etapa A: 2- terc-butil 4 -((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato Em um frasco de fundo redondo, uma solução de terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5 g, 9,487 mmol) em dioxano (94,87 ml, 9,487 mmol) foi espargida com argônio e (S)-(1- metilpirrolidin-2-il) metanol (3,278 g, 28,46 mmol), Cs2CO3 (9,273 g, 28,46 mmol), Metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (0,8078 g, 0,9487 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por um adicional de 5 minutos. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C durante a noite. A reação foi filtrada através de papel GF/F e concentrada in vacuo. O concentrado foi purificado na Combi flash (% de MeOH em DCM com 2% NH4OH) para fornecer terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5,425 g, 8,508 mmol, 89,68% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 606,4 [M+H] +.
Etapa B: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: terc-butil 4-((S)-4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-carboxilato (5,4 g, 8,915 mmol)
foi dissolvido em diclorometano (89,15 ml, 8,915 mmol) e tratado com Ácido Clorídrico (solução 4,0 M em 1,4-dioxano) (11,14 ml, 44,57 mmol). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi a seguir diluída com mais DCM e NaOH 1M e as camadas separadas. Os orgânicos foram em seguida lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (4,364 g, 8,631 mmol, 96,82% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 506,3 [M+H]+.
Etapa C: 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Em um frasco de fundo redondo, uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (4,364 g, 8,631 mmol) em dioxano (43,15 ml, 8,631 mmol) foi espargido com Argônio por 5 minutos. 1-Bromo-2,3-dimetilbenzeno (5,851 ml, 43,15 mmol), Cs2CO3 (14,06 g, 43,15 mmol) e Metanossulfonato(2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (0,7348 g, 0,8631 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C ON. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etila e a reação filtrada através de papel GF/F e concentrada in vácuo. O concentrado foi purificado duas vezes via cromatografia de fase normal no CombiFlash utilizando 0-15% de MeOH em DCM, com 2% de NH4OH como eluente. As frações contendo o produto desejado foram coletadas e concentradas in vacuo para dar 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (0,411 g, 0,8641 mmol, 100,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 476,3 [M+H]+.
[01829] Etapa D: 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7-(2,3- dimetilfenil)-2-(((S))-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(7-(2,3- dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (95 mg, 0,200 mmol), ácido (2E)-4- (dimetilamino)but-2-enoico (51,6 mg, 0,399 mmol), DIEA (174 µl, 0,999 mmol) em DCM (1.997 µL, 0,200 mmol) foi adicionado HATU (114 mg, 0,300 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 5 horas. A mistura de reação foi lavada com Salmoura e a camada aquosa extraída com DCM (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, concentradas, diluídas em 60:40 ACN:H2O e purificadas na Gilson (HPLC prep inversa), eluindo com 5%-95% de ACN/TFA a 0,1% em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e basificadas livres com bicarb saturado e os orgânicos extraídos com DCM. Os orgânicos foram secos sobre Na 2SO4 e concentrados in vacuo para dar 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7- (2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (38 mg, 0,0648 mmol, 32,4% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 587,4 [M+H]+.
EXEMPLO 405 2-((2S)-1-acriloil-4-(2-(3-(dimetilamino)piperidin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01830] 2-((2S)-1-acriloil-4-(2-(3-(dimetilamino)piperidin-1-il)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 400 usando N,N-
Dimetilpiperidin -3-amina no lugar de (3R)-(1-Etil-pirrolidin-3-il)-metanol na Etapa C. ESI+APCI MS m/z 565,4 [M+H]+.
EXEMPLO 406 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2-cloro-3-fluorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,78-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01831] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2-cloro-3-fluorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 234 usando 1-Bromo- 2-cloro-3-fluorobenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 554,2 [M+H]+.
EXEMPLO 407 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-difluorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01832] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-difluorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 234 usando 1-Bromo-2,3- difluorobenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno em Etapa H. ESI+APCI MS m/z 538,2 [M+H]+.
EXEMPLO 408 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)amino)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01833] Etapa A: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metil)amino)-7)(7)(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (300 mg, 0,542 mmol) foi dissolvido em Dioxano e tratado com (S)-(1-metilpirrolidin-2- il)metanamina (356 µl, 2,71 mmol). A reação foi agitada a 80°C por 3 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e particionada entre água e EtOAc. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2X). Os orgânicos combinados foram lavados com água e salmoura, em seguida secos sobre
Na2SO4 e filtrados. O filtrado foi concentrado in vacuo e cromatografado no CombiFlash eluindo com 0%-15% de DCM:MeOH + 2% NH4OH para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)amino)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato acetonitrila (146 mg, 0,231 mmol, 42,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 631,3 [M+H] +. O restante da síntese para o composto do título foi feito seguindo o Exemplo 396 Etapas B até C. ESI+APCI MS m/z 551,3 [M+H]+.
EXEMPLO 409 (S)-2-(1-acriloil-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(2-(piperidin-1-il)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01834] (S)-2-(1-acriloil-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(2-(piperidin-1-il)etoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 400 usando 1- Piperidinaetanol no lugar de (3R)-(1-etil-pirrolidin-3-il)-metanol na Etapa C. ESI+APCI MS m/z 556,3 [M+H]+.
EXEMPLO 410
2-((S)-1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01835] 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-3-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 400 usando (R)-3- (hidroximetil)-1-metilpirrolidina no lugar de R (3R)-(1-Etil-pirrolidin-3-il)-metanol na Etapa C. ESI+APCI MS m/z 552,3 [M+H]+.
EXEMPLO 411 2-(1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01836] 2-(1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 375, Etapas E-G, usando 1-bromo-3-fluoro- 2-metilbenzeno no lugar de 4-bromo-3-(bromidrato de trifluorometil)piridina na Etapa E. ESI+APCI MS m/z 534,3 [M+H]+.
EXEMPLO 412 2-(1-acriloíl-4-(7-(2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01837] 2-(1-acriloil-4-(7-(2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 375 Etapas E-G, usando 2- bromo-1-fluoro-3-(trifluorometil)benzeno no lugar de 4-bromo-3- (trifluorometil)piridina bromidrato na Etapa E. ESI+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 413 2-(1-acriloíl-4-(7-(4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01838] 2-(1-acriloil-4-(7-(4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitril: foi preparado seguindo o Exemplo 375 Etapas E-G, usando 1-
bromo-4-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 4-bromo-3- (trifluorometil)piridina bromidrato na Etapa E. ESI+APCI MS m/z 588,3 [M+H]+.
EXEMPLO 414 2-(1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01839] 2-(1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 375 Etapas E-G, usando 1- bromo-3-cloro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 4-bromo-3- (trifluorometil)piridina bromidrato na Etapa E e THF no lugar de MeOH na Etapa F. ESI+APCI MS m/z 604,2 [M+H]+.
EXEMPLO 415 2-(1-acriloíl-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((2R,4S)-4-hidroxi-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01840] Etapa A: benzil 4-(2-cloro-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A um frasco foi adicionado carbonato de césio (4,01 g, 12,3 mmol), benzil 4-(2-cloro- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina)-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (1,75 g, 4,10 mmol) e Rhuphos Pd G3 (0,343 g, 0,410 mmol) e 1- bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno (4,98 g, 20,5 mmol). O frasco foi selado e o 1,4-dioxano (41,0 ml, 4,10 mmol) foi adicionado através de um septo. Ar foi borbulhado através da mistura por 5 minutos e depois a mistura foi aquecida até 70°C por 7 h. A reação foi resfriada, filtrada através de papel qualitativo e concentrada. Os sólidos amarelos foram dissolvidos em DCM mínimo e purificados por cromatografia de sílica (0-12% de MeOH em DCM) que forneceu benzil 4-(2-cloro-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,3 g, 2,21 mmol, 54% de rendimento.
[01841] Etapa B: benzil 4-(2-(((2R,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Uma solução de benzil 4-(2-cloro-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 0,255 mmol) em dioxano (2.547 µl, 0,255 mmol) foi espargida com argônio e (2S,4R)-4-{[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (211 mg, 0,637 mmol), Cs2CO3 (249 mg, 0,76 mmol), Rhuphos Pd G3 (21,3 mg, 0,026 mmol) foi adicionado sequencialmente sob argônio e espargido por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 4 h. A mistura foi filtrada através de papel GF/F, concentrada e o resíduo foi dissolvido em DCM e lavado com água, aquoso foi separado e extraído com DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados e concentrados e o resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-50% EtOAc/hex 20CV, 50% EA/hex 2CV, 50-100% EA/hex 10CV) para fornecer benzil 4-(2-(((2R,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (95 mg, 0,107 mmol, 42% de rendimento).
[01842] Etapa C: terc-butil (2R,4S)-2-(((4-(4-acriloil-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil))-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidina-1- carboxilato: foi preparado seguindo a preparação para EXEMPLO 375, Etapas F e G, usando benzil 4-(2-(((2R,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato no lugar de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3- (trifluorometil)piridin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato na Etapa F.
[01843] Etapa D: 2-(1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)phenyl)-2- (((2R,4S)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado de acordo com o EXEMPLO 390, Etapas B e C, usando terc-butil (2R,4S)-2-(((4-(4-acriloil-3-
(cianometil)piperazin-1-il)-7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi) pirrolidina-1- carboxilato no lugar de terc-butil (2R3S)-2-(((4-((S)-4-acriloil-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi) pirrolidina-1-carboxilato na Etapa B. . ESI+APCI MS m/z 604,3 [M+H]+.
EXEMPLO 416 2-(1-acriloíl-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((2R,4R)-4-hidroxi-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01844] 2-(1-acriloil-4-(7-(3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((2R,4R)-4- hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 415, Etapas B-D usaindo terc-butil (2R,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)pirrolidina- 1-carboxilato no lugar de (2S,4R)-4-{[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}-2- (hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato na Etapa B. ESI+APCI MS m/z 604,3 [M+H]+.
EXEMPLO 417
2-(1-acriloil-4-(2-(((2R,4S)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[01845] 2-(1-acriloil-4-(2-(((2R,4S)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 415 , Etapas B-D usando terc-butil (2R,4S)-4-fluoro-2-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato no lugar de (2S,4R)-4-{[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}-2-(hidroximetil)pirrolidina-1- carboxilato na Etapa B. ESI+APCI MS m/z 606,2 [M+H]+.
EXEMPLO 418 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[01846] 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-1,2-dimetilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-
il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 415, Etapas B-D usando terc- butil (R)-2-(hidroximetil)-2-metilpirrolidina-1-carboxilato no lugar de (2S,4R)-4- {[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato na Etapa B. ESI+APCI MS m/z 602,3 [M+H]+.
EXEMPLO 419 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4S)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01847] 2-(1-acriloil-4-(2-(((2S,4S)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: foi preparado seguindo o Exemplo 415, Etapas A-D usando 1- bromonaftaleno no lugar de 1-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzeno na Etapa A terc-butil (2S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1- carboxilato de no lugar de (2S,4R)-4-{[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}-2- (hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato na Etapa B. ESI+APCI MS m/z 568,3 [M+H]+.
EXEMPLO 420
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01848] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J usando 1-bromo-3-cloro-2- metilbenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I. ESI+APCI MS m/z 550,3 [M+H]+.
EXEMPLO 421 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-diclorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01849] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-diclorofenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J usando 1-bromo-2,3- diclorobenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I. ESI+APCI MS m/z 570,2 [M+H]+.
EXEMPLO 422
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-metoxifenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01850] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-metoxifenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapas H-J usando 1- bromo-3-cloro-2-metoxibenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I. ESI+APCI MS m/z 566,2 [M+H]+.
EXEMPLO 423 2-((S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[01851] Etapa A: 2-((S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Exemplo 234, Etapa F-I usando (R)-(1-metilpirrolidin-2- il)metanol no lugar de (S))-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa F, 1-bromo-3-
cloro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I.
[01852] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4- (dimetilamino)but-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: N,N’-Di-isopropiletilamina (29,5 µl, 0,166 mmol) e O-(7-Azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio PF6 HATU (25,2 mg, 0,066 mmol) foram adicionados a uma solução de ácido trans- 4-dimetilaminocrotônico (6,42 mg, 0,05 mmol) e 2-((S)-4-(7-(3-cloro-2- (trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila 2,2,2-trifluoroacetato (22 mg, 0,033 mmol) em diclorometano (331 µl, 0,033 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. A mistura foi lavada com salmoura, extraída com 30% de iPrOH/CHCl3 (3x), extratos combinados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de fase reversa (5-95% ACN/H2O com 0,1% TFA) e depois com base livre usando DCM e bicarb aquoso para dar o composto do título 2-((S)-4-(7-(3-cloro)-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4- (dimetilamino)but-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 423, 10 mg, 0,015 mmol, 46% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 661,3[M+H]+.
EXEMPLO 424 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(4-fluoro-2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01853] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(4-fluoro-2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapa H-J usando 1- bromo-4-fluoro-2,3-dimetilbenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H. ESI+APCI MS m/z 548,3 [M+H]+.
EXEMPLO 425 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2-cloro-3-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01854] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2-cloro-3-metilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 234, Etapa H-J usando 1-bromo-2-cloro-3- metilbenzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I. ESI+APCI MS m/z 550,2 [M+H]+.
EXEMPLO 426
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((2S,4R)-4-hidroxi-1- metilpirrolidin-2-ilo)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01855] Etapa A: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(metiltio)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(metiltio)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (6H)-carboxilato (741 mg, 1,38 mmol) em diclorometano (9.171 µl, 1,38 mmol) foi tratada com ácido clorídrico (1.720 µl, 6,88 mmol) a 0°C e agitada por 1 h após aquecimento até rt. A mistura foi extinta com NaHCO3 saturado, a fase aquosa foi separada e extraída com DCM (3x). Os extratos combinados foram secos, filtrados e concentrados para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(metiltio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (608 mg, 1,39 mmol, 100% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 439,2 [M+H]+.
[01856] Etapa B: benzil (S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(metiltio)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato: A um frasco foi adicionado carbonato de césio (1,65 g, 5,06 mmol), benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(metiltio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,74 g, 1,69 mmol), e 1-bromo-3-cloro-2-
(trifluorometil)benzeno (0,876 g, 3,37 mmol) em 1,4-dioxano (11,2 ml, 1,69 mmol). A mistura foi purgada com Ar por 10 min. e tratada com metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2'6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil- 2-il)paládio(II) RuPhos Pd G4 (0,215 g, 0,253 mmol). A mistura foi purgada com Ar por 10 min., a mistura resultante foi aquecida até 100°C por 4 horas. A reação foi concentrada, tratada com água, extraída com 30% de iPrOH/CHCl3 (3x), seca, filtrada e concentrada e o resíduo resultante foi purificado por sílica gel (2-16% de MeOH em DCM com 0,25% de NH4OH) para fornecer benzil (S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(metiltio)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (388 mg, 0,63 mmol, 37% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 617,2 [M+H]+.
[01857] Etapa C: (2S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(metilsulfinil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato: A uma solução de benzil (S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2- (metiltio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (388 mg, 0,566 mmol) em diclorometano (5.659 µl, 0,566 mmol) foi adicionado ácido m-cloroperbenzoico (117,6 mg, 0,680 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a esta temperatura por 90 min. A mistura foi extinta com Na2S2O3 saturado, as camadas aquosas foram separadas e extraídas com EtOAc (3x). Os extratos foram combinados, secos, filtrados e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-100% EA/hex) para dar benzil (2S)-4-(7- (3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(metilsulfinil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (282 mg, 0,445 mmol, 79% de rendimento).
[01858] Etapa D: ((2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-metilpirrolidin-2- il)metanol: A uma suspensão de metil (2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1- metilpirrolidina-2-carboxilato (3,65 g, 13,3 mmol) em tetra-hidrofurano (66,7 ml, 13,3 mmol), a 0°C sob boro-hidreto de nitrogênio lítio (13,3 ml, 26,7 mmol) foi adicionado lentamente. A reação foi deixada aquecer até RT e a mistura agitada a rt por 18 h. A mistura de reação foi extinta lentamente com NH4Cl saturado, diluída com água e extraída duas vezes com EtOAc (20 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas, filtradas e concentradas e purificadas por sílica gel (0- 80% EA/hex) para dar ((2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-metilpirrolidin-2- il)metanol (1,8 g, 5,87 mmol, 44% de rendimento).
[01859] Etapa E: benzil (S)-4-(2-(((2S, 4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,4R)-1-boc-4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(hidroximetil) pirrolidina (144 mg, 0,587 mmol) e benzil (2S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2- (metilsulfinil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato 2,2,2-trifluoroacetato (258 mg, 0,294 mmol) em tolueno (2.935 µl, 0,294 mmol) foi adicionado t-butóxido de sódio (42,3 mg, 0,440 mmol). A reação foi agitada a rt por 1 h. A mistura foi lavada com água, extraída com 30% de iPrOH/CHCl3 (3x), extratos combinados, seca, filtrada e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por sílica gel (0-100% EA/hex 20 CV) para dar benzil (S)-4-(2-(((2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (57 mg, 0,070 mmol, 23% de rendimento).
[01860] Etapa F: 2-((S)-4-(2-(((2S, 4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de (S)-4- (2-(((2S,4R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-cloro- 2-(trifluorometil)fenil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (56 mg, 0,069 mmol) em THF (688 µl, 0,069 mmol) foi adicionado paládio (29 mg, 0,028 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e, em seguida, uma atmosfera de H2 foi introduzida por vácuo, seguida por pressão de balão e foi agitada por 6 horas. A mistura foi, então,
diluída com MeOH e filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi, então, concentrado para proporcionar o produto desejado que foi utilizado como estava.
[01861] Etapa G: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2- (((2S,4R)-4-hidroxi-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado de acordo com o EXEMPLO 384 Etapa D e E usando 2-((S)-4-(2-(((2S,4R)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila no lugar de Terc-butil (2S,4R)-2-(((4-((S)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(5-fluoro-4- (trifluorometil)piridin-3-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-4- fluoropirrolidina-1-carboxilato na Etapa D. ESI+APCI MS m/z 620,2 [M+H]+.
EXEMPLO 427 2-((S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-(dimetilamino) but-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[01862] 2-((S)-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4- (dimetilamino)but-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: foi preparado de acordo com o Exemplo 234, usando (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol no lugar de (R)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 661,3 [M+H]+.
EXEMPLO 428
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01863] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(3-cloro-2-(trifluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado de acordo com o Exemplo 234, Etapas H-J usando 1-bromo-3-cloro-2-(trifluorometil)benzeno no lugar de 1-bromonaftaleno na Etapa H e THF no lugar de MeOH na Etapa I. ESI+APCI MS m/z 604,2 [M+H]+.
EXEMPLO 429 1-(2-(metoximetil)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[01864] Etapa A: benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(metoximetil)piperazin- 1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Uma solução agitada de terc-butil 2-(metoximetil)piperazina-1-carboxilato (0,715 g, 3,10 mmol) em N,N-dimetilacetamida (3 ml, 2,96 mmol) foi resfriada em um banho de gelo e depois benzil 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato sólido (1,00 g, 2,96 mmol) foi adicionado em pequenas porções seguidas por adição de DIPEA (0,57 mL, 3,25 mmol). A solução resultante foi aquecida até r.t. e agitada por 1 hora. A mistura de reação foi particionada entre água (15 mL) e MTBE (50 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água (2*10 mL), salmoura (10 mL), seca sobre Na 2SO4 e evaporada in vacuo e o bruto usado na próxima reação.
[01865] Etapa B: benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(metoximetil)piperazin- 1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3- (metoximetil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato bruto (500 mg, 0,940 mmol), (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol (216 mg, 1,88 mmol), Cs2CO3 (612 mg, 1,88 mmol) e dioxano (0,5 mL) foi purgada com nitrogênio, o frasco foi tampado e agitado a 100°C por 2 horas e, em seguida, a 120oC durante a noite. A mistura de reação foi resfriada e particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL). A camada orgânica foi separada e lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo.
O resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando 4 a 10% de MeOH/DCM + 0,2% de NH4OH como eluente para dar produto (197 mg, 34%). ESI+APCI MS m/z 611,4 [M+H]+.
[01866] Etapa C: 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(metoximetil)piperazin-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidina-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (197 mg, 0,323 mmol), metanol (10 mL) e paládio em carbono (10 mg, 5 %, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada e agitada sob atmosfera de hidrogênio por 1 hora. A mistura foi filtrada através de Celite (2 mL) e a celite foi lavada com MeOH (3X3 mL). Os filtrados combinados foram evaporados in vacuo, azeotropados por evaporação com tolueno e secos sob alto vácuo para dar o produto (150 mg, 98%). ESI+APCI MS m/z 477,2 [M+H]+.
[01867] Etapa D: terc-butil 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (150 mg, 0,315 mmol), Cs2CO3 (308 mg, 0,944 mmol), dioxano (1 mL), 1-iodonaftaleno (0,0689 ml, 0,472 mmol) e metanossulfonato (2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil) (2-amino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G3, 0,1 eq., 26,3 mg, 0,0315 mmol) foi purgada com nitrogênio, o frasco foi tampado e a reação agitada a 70°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (15 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando 4 a 10% de MeOH + 0,5% NH4OH como eluente para dar o produto (131 mg, 69%). ESI+APCI MS m/z 603,3 [M+H]+.
[01868] Etapa E: 1-(2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2- en-1-ona: Terc-butil 2-(metoximetil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (130 mg, 0,2157 mmol) foi dissolvido em 1M TFA/DCM e a solução foi agitada à r.t. por 1 hora. A solução foi particionada entre 2 M Na 2CO3 (5 mL) e DCM (15 mL) e as camadas separadas e a camada orgânica concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL) e resfriado a -30oC com agitação e trietilamina (0,09018 mL, 0,6470 mmol) adicionada seguida por adição de cloreto de acriloíla (0,03504 mL, 0,4313 mmol). Após 1 minuto a -30°C a mistura de reação foi extinta com NH4OH (0,05 mL) e evaporada in vacuo e seca sob alto vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL), filtrada através de um tampão de algodão e cromatografado em sílica gel utilizando 5 a 10% de MeOH/DCM +0,25% de NH4OH como eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 429, 19,55 mg, 16%) ESI+APCI MS m/z 557,3 [M+H]+.
EXEMPLO 430 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(isoquinolin-8-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01869] Etapa A: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(isoquinolin-8-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1))- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (125 mg, 0,247 mmol), Cs2CO3 (242 mg, 0,742 mmol), 8- bromoisoquinolina (77,2 mg, 0,371 mmol) e metanossulfonato(2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2-amino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G3, 0,1 eq., 20,7 mg, 0,0247 mmol) em 2 mL de dioxano foi purgada com nitrogênio, o frasco foi tampado e agitado a 80°C por 2,5 horas. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH/DCM + 0,4% de NH4OH como eluente para dar o produto (100 mg, 64%). ESI+APCI MS m/z 633,3 [M+H]+.
[01870] Etapa B: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(isoquinolin-8-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: A uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(isoquinolin-8)- il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (100 mg, 0,1580 mmol) em MeOH-THF (1:1; 3 mL) foi adicionado paládio em carbono (30 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) e a mistura foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e o a reação agitada sob atmosfera de hidrogênio por 2 horas. A reação foi filtrada através de Celite (2 mL) e a celite foi lavada com EtOH (3*2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (10 mL) e a solução foi resfriada com agitação até -30°C. À solução foi adicionado NEt3 (0,14 mL) seguido por cloreto de acriloíla (0,02568 ml, 0,3161 mmol) e a mistura de reação agitada a -30°C por 1 minuto. A reação foi extinta com adição de NH4OH (0,05 mL) e concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL), filtrado através de um tampão de algodão e cromatografado em sílica gel utilizando 6 a
10% de MeOH/DCM + 0,6% de NH4OH como eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 430, 22,19 mg, 25%) ESI+APCI MS m/z 553,3 [M+H]+.
EXEMPLO 431 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(ftalazin-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01871] Etapa A: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(ftalazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1))- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (101 mg, 0,200 mmol), 1-cloroftalazina (65,8 mg, 0,400 mmol) e N- etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,0696 ml, 0,400 mmol) em 1,4-dioxano (0,5 ml, 0,200 mmol) foi purgada com nitrogênio, a reação tampada e agitada a 80°C por 16 horas. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), seca sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 6% de MeOH/DCM +0,6% de NH4OH como eluente para dar o produto (53 mg, 42%). ESI+APCI MS m/z 634,3 [M+H]+.
[01872] Etapa B: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (ftalazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(ftalazin-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (60 mg, 0,09467 mmol), metanol (2 ml) e paládio sobre carbono (20 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação foi agitada sob atmosfera de hidrogênio por 4 horas. A reação foi filtrada através de Celite (2 mL) e a celite foi lavada com MeOH (3X3 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL) e resfriado até -30°C com agitação. À solução foi a seguir adicionada trietilamina (0,06598 ml, 0,4734 mmol) seguida de cloreto de acriloíla (0,02308 ml, 0,2840 mmol) e a reação foi agitada por 5 minutos a -30oC. A reação foi extinta por adição de NaHCO3 sat. (1 mL). A mistura foi aquecida até r.t., foi adicionada água (2 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo e o resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando 4 a 10% de MeOH +0,4% NH4OH como eluente para dar o produto impuro, o qual foi purificado na HPCL prep reversa Gilson eluindo com 5 a 95% de acetonitrila em água +0,1% de TFA. As frações contendo produto foram particionadas entre DCM e sat. Na2CO3 e as camadas separadas. Os orgânicos foram em seguida lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título (Exemplo 431, 1,1 mg, 2%). ESI+APCI MS m/z 554,2 [M+H]+.
EXEMPLO 432
2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((R)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01873] Etapa A: 2-((S)-4-(2-(((R)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma mistura de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 0,452 mmol), (R)-(1-metilpiperidin-2-il)metanol (175 mg, 1,36 mmol) e Metanossulfonato(2- diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2- il)paládio(II) (19,2 mg, 0,0226 mmol) em 1,4-dioxano (2 mL) foi purgada com nitrogênio e agitada a 80oC durante a noite. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre MTBE (20 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), seca sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH (5 mL) seguido por adição de paládio em carbono (70 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W). A mistura de reação foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação foi agitada sob atmosfera de H 2 por 1,5 horas. A reação foi filtrada através de Celite (2 mL) e a Celite foi lavada com MeOH (3X3 mL) e concentrada in vacuo para dar o produto, que foi usado em bruto na reação seguinte. ESI+APCI MS m/z 512,3 [M+H]+.
[01874] Etapa B: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: 2-((S)-4-(2-((((R)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila bruto (292 mg, 0,57068 mmol) foi dissolvido em DCM (10 mL) seguido por adição de trietilamina (238,63 µl, 1,7120 mmol) e a solução foi resfriada até -30oC. À reação foi adicionado em seguida cloreto de acriloíla (92,728 µl, 1,1414 mmol) gota a gota e a mistura foi agitada a -30oC por 10 minutos. EtOH (0,1 mL) foi adicionado a seguir e a reação foi aquecida até 0°C. A mistura foi cromatografada diretamente em sílica usando 5% de MeOH +0,5% NH4OH/DCM como eluente, seguido por repurificação do material usando as mesmas condições de eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 432, 107,47 mg, 33%). ESI+APCI MS m/z 566,3 [M+H]+.
EXEMPLO 433 1-((S)-2-(2-metoxietil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il) prop-2-en-1-ona
[01875] Etapa A: 4-benzil 1-(terc-butil) (S)-2-(2-hidroxietil)piperazina-1,4- dicarboxilato: Ao (S)-terc-butil-2-(2-hidroxietil)piperazina-1-carboxilato cloridrato sólido (500 mg, 1,874 mmol) e NaHCO3 (629,8 mg, 7,497 mmol) foram adicionados EtOAc e água (10 mL de cada) e a mistura resfriada até 0°C seguido por adição gota a gota de carbonocloridato de benzila (0,4013 ml, 2,811 mmol) e a mistura de reação agitada durante a noite enquanto aquecendo à temperatura ambiente. As camadas foram em seguida separadas e a camada orgânica lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na 2SO4 e concentradas in vacuo. O material foi depois cromatografado em sílica gel usando 20% a 40% de EtOAc/hexano como eluente para dar o produto (578 mg, 85%). ESI+APCI MS m/z 256,2 [M-Boc+H]+.
[01876] Etapa B: 4-benzil 1-(terc-butil) (S)-2-(2-metoxietil)piperazina-1,4- dicarboxilato: Uma solução agitada de 4-benzil 1-(terc-butil) (S)-2-(2- hidroxietil)piperazina-1,4-dicarboxilato (270 mg, 0,741 mmol) em N,N- dimetilformamida (3 mL, 0,741 mmol) sob N2 foi resfriada até -20°C, seguido por adição de hidreto de sódio (44,4 mg, 1,11 mmol) em um bolus. À reação foi adicionado a seguir iodometano (0,138 ml, 2,22 mmol) e a mistura de reação foi aquecida até r.t. durante 1 hora e continuada a agitação por 1 hora em temperatura ambiente. A reação foi extinta por adição de gelo (~5g) e a mistura foi particionada entre MTBE (20 mL) e água (10 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), seca sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo para dar o produto que foi utilizado em bruto na reação seguinte (252 mg, 90%). ESI+APCI MS m/z 279,1 [M- Boc+H]+.
[01877] Etapa C: terc-butil (S)-2-(2-metoxietil)piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de 4-benzil 1-(terc-butil) (S)-2-(2-metoxietil)piperazina 1,4- dicarboxilato (252 mg, 0,666 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionado paládio sobre carbono (50 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) e a reação desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação agitada sob atmosfera de hidrogênio por 3 horas. A pasta foi filtrada através de Celite (2 mL) e a Celite lavada com MeOH (3X3 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados in vacuo e secos sob alto vácuo para dar produto (140 mg, 86%). ESI+APCI MS m/z 245,2 [M+H]+.
[01878] Etapa D: (S)-4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-(2-metoxietil)piperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Uma solução de terc-butil (S)-2-(2-metoxietil)piperazina-1-carboxilato (140 mg, 0,573 mmol) e N,N-dimetilacetamida (0,5 ml, 0,573 mmol)) foi resfriada até 0°C e benzil 2,4- dicloro-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(8H)-carboxilato (194 mg, 0,573 mmol) foi adicionado em um bolus. A mistura de reação foi agitada durante a noite seguida pela adição de N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,150 ml, 0,859 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi particionada entre MTBE (20 mL) e NaHCO3 (5 mL) sat. e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), seca sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 2% de MeOH/DCM como eluente para dar o produto (190 mg, 61%).
[01879] Etapa E: benzil 4-((S)-4-(terc-butoxicarbonil)-3-(2- metoxietil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (6H)-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-4-(4- (terc-butoxicarbonil)-3-(2-metoxietil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (190 mg, 0,348 mmol), (S)-(1-metilpirrolidin-2- il)metanol (120 mg, 1,04 mmol), Cs2CO3 (340 mg, 1,04 mmol) e 1,4-dioxano (0,5 ml) sob atmosfera de N2 foi aquecida até 120°C por 20 horas. A reação foi resfriada, diluída com EtOAc (3 mL), filtrada através de Celite e concentrada in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 4 a 8% de MeOH/DCM +0,4% de NH4OH como eluente para dar produto (77 mg, 35%). ESI+APCI MS m/z 625,3 [M+H]+.
[01880] Etapa F: terc-butil (S)-2-(2-metoxietil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: A uma mistura de benzil 4-((S)-4-(terc-butoxicarbonil)-3-(2-metoxietil)piperazin-1- il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (77 mg, 0,12 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionado paládio sobre carbono (20 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) e a pasta foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação agitada sob atmosfera de hidrogênio durante a noite. A pasta foi filtrada através de Celite (2 mL) e a celite lavada com MeOH (3X3 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados in vacuo e azeotropados com tolueno (2X2 mL) para dar o produto que foi usado em bruto na próxima reação. ESI+APCI MS m/z 491,3 [M+H]+.
[01881] Etapa G: terc-butil (S)-2-(2-metoxietil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil (S)-2-(2-metoxietil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-
1-carboxilato bruto (60 mg, 0,122 mmol), Cs2CO3 (120 mg, 0,367 mmol), dioxano (2 mL), 1-iodonaftaleno (0,0268 ml, 0,183 mmol) (1,5 eq.) e metanossulfonato (2- diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2-amino-1,1'-bifenil-2- il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G3, 0,1 eq., 10,2 mg, 0,0122 mmol) foi purgada com nitrogênio e a reação foi tampada e agitada a 80°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 5% de MeOH/DCM +0,5% de NH4OH como eluente para dar o produto (56 mg, 74%). ESI+APCI MS m/z 617,4 [M+H]+.
[01882] Etapa H: 4-((S)-3-(2-metoxietil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidina: Ao terc-butil (S)-2-(2-metoxietil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato sólido (56 mg, 0,091 mmol) foi adicionado cloreto de hidrogênio (0,5 ml, 2,0 mmol) e a reação agitada a 0oC seguida por aquecimento à temperatura ambiente por 15 minutos, em cujo ponto um sólido se formou. Os orgânicos foram decantados e os sólidos particionados entre entre DCM (12 mL) e 2M Na2CO3 (1 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi seca sobre K2CO3 e concentrada in vacuo para dar produto em bruto. ESI+APCI MS m/z 517,3 [M+H]+.
[01883] Etapa I: 1-((S)-2-(2-metoxietil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 1-il)prop-2-en-1-ona. 4-((S)-3-(2-metoxietil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidina (39 mg, 0,07548 mmol) foi dissolvido em DCM (10 mL), seguido pela adição de trietilamina (31,56 µl, 0,2264 mmol) e a solução foi resfriada até -40oC e agitada por 5 minutos, seguido de adição gota a gota de cloreto de acriloíla (12,26 µl, 0,1510 mmol). A mistura de reação foi agitada a -30oC por 10 minutos,
seguida pela adição de MeOH (0,05 mL). A mistura foi aquecida até 0°C e os orgânicos lavados com 0,5 M Na2CO3. A camada orgânica foi evaporada in vacuo e cromatografado em sílica gel usando 5% MeOH +0,5% NH4OH em DCM como eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 433, 25,45 mg, 59%). ESI+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 434 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- (trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[01884] Etapa A: 8-(trifluorometil)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato: A uma solução agitada de 8-(trifluorometil)naftalen-1-ol (500 mg, 2,36 mmol) em DCM (10 mL) a 0oC foi adicionado N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (616 µl, 3,53 mmol) seguido por adição gota a gota de anidrido trifluorometanossulfônico (475 µl, 2,83 mmol) e a mistura de reação foi agitada 1 hora enquanto aquecendo até temperatura ambiente. A reação foi em seguida diluída com hexano (20 mL) e MTBE (5 mL) e os orgânicos foram lavados com NaHCO3 sat., água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O resíduo foi dissolvido em 10% EtOAc/10% DCM em hexano e o material filtrado através de um tampão de sílica gel. Os orgânicos foram concentrados e cromatografados em sílica gel usando 5 a 10% EtOA/hexano como eluente para dar material impuro. O sólido foi finalmente cristalizado de hexano e o sólido lavado com pequena quantidade de hexano frio para dar produto (482 mg, 59%).
[01885] Etapa B: (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(8-(trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato bruto (700 mg, 1,38 mmol) , Cs2CO3 (1.353 mg, 4,15 mmol), tolueno (7 ml), metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi- 1,1'-bifenil) (2-amino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G4, 0,1 eq., 116 mg, 0,138 mmol) e 8-(trifluorometil)naftalen-1-il trifluorometanossulfonato (715 mg, 2,08 mmol) foi purgada com nitrogênio e a reação foi tampada e agitada a 90°C por 5 horas. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (50 mL) e água (20 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (10 mL cada), secas sobre Na 2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH/DCM +0,4% de NH4OH como eluente para dar o produto (86 mg, 9%). ESI+APCI MS m/z 700,3 [M+H]+.
[01886] Etapa C: 2-((S)-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- (trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. Uma mistura de (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(8-(trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (86 mg, 0,123 mmol), metanol (3 ml, 74,2 mmol) e paládio sobre carbono (30 mg, 5%, tipo Degussa E101 N/W) foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação foi agitada sob atmosfera de H2 por 1 hora. A reação foi depois filtrada através de Celite (2 mL) e a Celite foi lavada com MeOH (3X3 mL). Os orgânicos combinados foram concentrados in vacuo para dar o produto bruto (60 mg, 86%).
[01887] Etapa D: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (8-(trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- (trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (50 mg, 0,08839 mmol) foi dissolvido em DCM (10 mL) seguido pela adição de trietilamina (36,96 µl, 0,2652 mmol) e a solução foi resfriada até - 40oC e agitada por 5 minutos seguida por adição gota a gota de cloreto de acriloíla (14,36 µl, 0,1768 mmol). A mistura de reação foi agitada a -30oC por 10 minutos, seguida pela adição de cloreto de acriloíla 0,01 mL. MeOH (0,05 mL) foi adicionado à reação em seguida e a mistura aquecida até 0°C. A reação foi em seguida lavada com 0,5 M Na2CO3 e os orgânicos separados. Os orgânicos foram evaporados in vacuo e cromatografados sobre sílica gel usando 5% MeOH + 0,5%NH4OH em DCM como eluente para dar o composto do título (Exemplo 434, 39 mg, 71%).
EXEMPLO 435
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-di-hidrobenzofuran-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01888] Etapa A: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(2,3-di-hidrobenzofuran-7- il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (200 mg, 0,396 mmol), Cs2CO3 (387 mg, 1,19 mmol), dioxano (0,5 mL), 7-bromo-2,3-di-hidrobenzofurano (118 mg, 0,593 mmol, 1,5 eq) e metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2'6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G4, 0,1 eq., 33,7 mg, 0,0396 mmol) foi purgada com nitrogênio, a reação foi tampada e agitada a 80°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH/DCM +0,4% de NH4OH como eluente para dar o produto (97 mg, 39%). ESI+APCI MS m/z 624,3 [M+H]+.
[01889] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(2,3-di-hidrobenzofuran-7-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(2,3-di-
hidrobenzofuran-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (97 mg, 0,16 mmol), metanol (4 ml), THF (4 mL) e paládio sobre carbono (30 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação agitada sob atmosfera de hidrogênio durante a noite. O resíduo foi filtrado através de Celite (1 mL) e a celite foi lavada com MeOH (3x2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo para dar o produto bruto. ESI+APCI MS m/z 490,3 [M+H]+.
[01890] Etapa C: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-di-hidrobenzofuran-7-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de 2-((S)-4-(7-(2,3-di-hidrobenzofuran- 7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-2-il)acetonitrila (69 mg, 0,1409 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada até -30oC com agitação. Trietilamina (58,93 µl, 0,4228 mmol) foi adicionada seguida pela adição de cloreto de acriloíla (22,90 µl, 0,2818 mmol) e a reação agitada por 5 minutos a -30oC. A reação foi, então, extinta por adição de MeOH (0,05 mL) e a reação aquecida até a temperatura ambiente. Os orgânicos foram lavados com 0,5 M Na2CO3 (4 mL), secos sobre K2CO3 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 5% de MeOH +0,5% NH4OH como eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 435, 45,85 mg, 60%). ESI+APCI MS m/z 544,3 [M+H]+.
EXEMPLO 436
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(1-metil-1H-indol-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01891] Etapa A: 7-iodo-1-metil-1H-indol: Uma solução agitada de 7-iodo- 1H-indol (4,11 ml, 2,06 mmol) em N,N-dimetilformamida (4 ml, 51,9 mmol) foi resfriada até -20oC e hidreto de sódio (123 mg, 3,09 mmol) foi adicionado em pequenas porções seguido por adição de iodometano (0,256 ml, 4,11 mmol) e a mistura foi aquecida até a temperatura ambiente durante um período de 2 horas. A mistura foi particionada entre MTBE (40 mL) e mistura de gelo-água (20 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água (2X20 mL), salmoura (10 mL), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O sólido foi lavado com MTBE (1 mL) O sólido foi recristalizado a partir de MTBE para dar o produto (0,31 g, 59%).
[01892] Etapa B: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(1-metil-1H-indol-7-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (200 mg, 0,396 mmol) , Cs2CO3 (387 mg, 1,19 mmol), dioxano (0,5 mL), 7-iodo-1-metil-1H-indol (153 mg, 0,593 mmol) (1,5 eq.) e metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2- il)paládio(II) (RuPhos-Pd- G4, 0,1 eq., 33,7 mg, 0,0396 mmol) foi purgada com nitrogênio e a reação foi tampada e agitada a 90°C por 5 horas, depois durante a noite a 80°C. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH/DCM +0,4% de NH4OH como eluente para dar o produto (65 mg, 26%). ESI+APCI MS m/z 635,3 [M+H]+.
[01893] Etapa C: 2-((S)-4-(7-(1-metil-1H-indol-7-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(1-metil-1H-indol-7-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (65 mg, 0,10 mmol), metanol (6 ml) e paládio sobre carbono (30 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada com vácuo e preenchida com hidogênio e a mistura agitada sob uma atmosfera de hidrogênio durante a noite. A pasta foi filtrada através de Celite (1 mL) e a Celite foi lavada com MeOH (3x2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo para dar o produto bruto. ESI+APCI MS m/z 501,3 [M+H]+.
[01894] Etapa D: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(1-metil-1H-indol-7-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Uma solução de 2-((S)-4-(7-(1-metil-1H-indol-7-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (51 mg, 0,1019 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada a -30oC com agitação seguida de adição de trietilamina (42,60 µl, 0,3056 mmol) e cloreto de acriloíla (16,55 µl, 0,2037 mmol). Depois de agitar a 5 minutos a -30°C, a mistura de reação foi extinta com MeOH (0,05 mL) e aquecida até a temperatura ambiente. Os orgânicos foram lavados com 0,5 M Na2CO3 (4 mL), secos sobre K2CO3 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 5% de MeOH +0,5% NH4OH como eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 436, 36 mg, 64%). ESI+APCI MS m/z 555,3 [M+H]+.
EXEMPLO 437 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01895] Etapa A: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((2S,4R)-4- fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila : Uma solução de 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2- (((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (50 mg, 0,1013 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada até -30oC, seguida pela adição de trietilamina (42,35 µl, 0,3039 mmol) e cloreto de acriloíla (16,46 µl, 0,2026 mmol). Depois de agitar 5 minutos a -30°C, a mistura de reação foi extinta com MeOH (0,05 mL) e aquecida até a temperatura ambiente. Os orgânicos foram lavados com 0,5 M Na 2CO3 (4 mL), secos sobre K2CO3 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 4% de MeOH + 0,4% NH4OH como eluente para dar o composto do título (Exemplo 437, 34 mg, 61%). ESI+APCI MS m/z 548,3 [M+H]+.
EXEMPLO 438
2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((2S,4R)-4- fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila Reagente HATU
[01896] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7-(2,3- dimetilfenil)-2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução agitada de 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (50 mg, 0,1013 mmol) em DCM (1 mL) foi adicionado ácido (2E)-4-(Dimetilamino)but-2- enoico (26,17 mg, 0,2026 mmol), N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,03529 ml, 0,2026 mmol) e O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio hexafluorofosfato (57,77 mg, 0,1519 mmol) e a mistura de reação agitada à temperatura ambiente por 4 horas. Água (1 mL) foi a seguir adicionada e a mistura de reação agitada por 5 minutos. A mistura foi particionada entre EtOAc (10 mL) e NaHCO3 (5 mL) sat. e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3, salmoura, seca sobre K2C3 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 5% de MeOH +0,5% de NH4OH como eluente para dar o composto do título (EXEMPLO 438, 45 mg, 74%). ESI+APCI MS m/z 605,3 [M+H]+.
EXEMPLO 439 2-(4-acriloil-1-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01897] Etapa A: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-2- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Uma solução agitada de 2-(piperazin-2-il)acetonitrila (0,2 g, 1,278 mmol) em uma mistura de DCM (20 mL) e iPrOH (10 mL) foi resfriada até -30oC e benzil carbonocloridato (0,2190 ml, 1,534 mmol) foi adicionado gota a gota e a reação foi agitada por 1 hora enquanto aquecendo à temperatura ambiente. Os orgânicos foram evaporados sob o fluxo lento de N2. O resíduo foi dissolvido em N,N-dimetilacetamida (1 ml, 1,278 mmol), seguido pela adição de N-etil-N- isopropilpropan-2-amina (0,3340 ml, 1,917 mmol) e terc-butil 2,4-dicloro-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (0,3888 g, 1,278 mmol). A mistura de reação foi aquecida até 70°C por 2 horas seguida por agitação à temperatura ambiente por 4 dias. A reação foi particionada entre água (5 mL) e MTBE (20 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 40 a 100% de EtOAc/hexanos como eluente para dar o produto (134 mg, 20%). ESI+APCI MS m/z 527,2 [M+H]+.
[01898] Etapa B: terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-2- (cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato: Uma mistura de terc-butil 4-(4- ((benziloxi)carbonil)-2-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (134 mg, 0,254 mmol), Cs2CO3 (249 mg, 0,763 mmol), metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (21,6 mg, 0,0254 mmol), (S)-(1- metilpirrolidin-2-il)metanol (146 mg, 1,27 mmol) e 1,4-dioxano (2 ml, 0,254 mmol) foi purgada com N2, a reação tampada e agitada a 80°C por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (5 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com salmoura (5 mL), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH + 0,4% de NH4OH/DCM como eluente para dar o produto (60 mg, 39%). ESI+APCI MS m/z 606,3 [M+H]+.
[01899] Etapa C: benzil 3-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: (terc-butil 4-(4-((benziloxi)carbonil)-2-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidina)-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato puro (60 mg, 0,09905 mmol)) foi diluído com DCM (0,2 mL). A reação foi resfriada até 0°C e HCl 4M em dioxano (0, 50 mL, 20 eq) foi adicionado com agitação. A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente e deixada no frigorífico durante a noite, em cujo ponto precipitou um sólido. A fase líquida foi decantada e o sólido particionado entre DCM (10 mL) e 2M Na 2CO3 (0,5 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram secos sobre K 2CO3 e evaporados sob fluxo de N2. O produto foi usado em bruto na próxima reação.
[01900] Etapa D: benzil 3-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de benzil 3-(cianometil)-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato bruto (50 mg, 0,0989 mmol), Cs2CO3 (96,7 mg, 0,297 mmol), dioxano (0,5 mL), 1-iodonaftaleno (37,7 mg, 0,148 mmol, 1,5 eq.) e metanossulfonato(2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G4, 0,1 eq., 8,42 mg, 0,00989 mmol) foi purgad com nitrogênio e a reação tampada e agitada a 80°C por 2 horas. A mistura de reação foi resfriada e particionada entre EtOAc (20 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica usando 4% MeOH/DCM +0,4% NH4OH como eluente para dar produto impuro, o qual foi purificado por cromatografia HPLC prep reversa, eluindo com 5 a 95% MeCN/água + 0,1% TFA (primeiro composto eluído) As frações alvo foram diluídas com 2 M Na2CO3 e depois o aquoso extraído com DCM (3X20 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (15 mL), secos sobre K2CO3 e evaporados in vacuo para originar o produto (26 mg, 42%). ESI+APCI MS m/z 632,3 [M+H]+.
[01901] Etapa E: 2-(1-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma mistura de benzil 3-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (26 mg, 0,041 mmol), metanol (2 ml) e paládio em carbono (10 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação agitada sob uma atmosfera de hidrogênio por 1,5 horas. A reação foi filtrada através de Celite (2 mL) e a Celite foi lavada com MeOH
(3X3 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo para dar o produto que foi usado em bruto na próxima reação. ESI+APCI MS m/z 498,3 [M+H]+.
[01902] Etapa F: 2-(4-acriloil-1-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Uma solução de 2-(1-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (15 mg, 0,03014 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada até -30oC com agitação seguida de adição de trietilamina (12,60 µl, 0,09043 mmol) e cloreto de acriloíla (4,889 µl, 0,06028 mmol). Depois de agitar 5 minutos a -30°C, a mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (0,05 mL) e aquecida até a temperatura ambiente. Os orgânicos foram lavados com 0,5 M Na 2CO3 (4 mL), secos sobre Na2CO3 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 4% de MeOH + 0,4% NH4OH como eluente para dar o composto do título (Exemplo 439, 8,43 mg, 51%). ESI+APCI MS m/z 552,2 [M+H]+.
EXEMPLO 440 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,3R)-3-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01903] Etapa A: ácido (2R, 3R)-3-fluoropirrolidina-2-carboxílico: Ao ácido (2R, 3R)-1-Boc-3-fluoropirrolidina-carboxílico (400 mg, 1,71 mmol) foi adicionado cloreto de hidrogênio 4M (2.144 µl, 8,57 mmol) gota a gota e a mistura de reação agitada à temperatura ambiente por 1,5 horas. A mistura de reacção foi evaporada in vacuo, seguido por adição de NaHCO3 sólido (173 mg, 2,06 mmol) e metanol (1.715 µl, 1,71 mmol) e a suspensão agitada à temperatura ambiente durante a noite. À mistura foi adicionada uma porção adicional de MeOH (10 mL) e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos e foi sonicada até que a dispersão completa dos semissólidos fosse alcançada. Essa pasta foi usada em bruto na próxima reação.
[01904] Etapa B: Ácido (2R,3R)-3-fluoro-1-metilpirrolidina-2-carboxílico: A uma suspensão agitada de ácido (2R,3R)-3-fluoropirrolidina-2-carboxílico bruto (228 mg, 1,71 mmol) em MeOH (12 mL) foi adicionado paládio sobre carbono (30 mg, 5%, tipo Degussa E101 NO/W) seguido por adição de formaldeído aquoso (159 µl, 2,14 mmol) e a mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio e agitada sob hidrogênio durante a noite. A mistura de reação foi filtrada através de Celite e a Celite foi lavada com MeOH (3x2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. O semissólido foi absorvido em dioxano e evaporado sob N2 ao longo do fim de semana. O produto foi usado em bruto na próxima reação.
[01905] Etapa C: ((2R,3R)-3-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il) metanol: Uma suspensão agitada de ácido 1-Boc-2-(S)-pirrolidinodicarboxílico bruto, 3-(R)- fluoro-(252 mg, 1,71 mmol) em THF, sob nitrogênio, foi resfriada até 0°C, seguida pela adição gota a gota de 2,4 M hidreto de lítio alumínio (0,999 ml, 2,40 mmol) e a reação agitada por 30 minutos enquanto aquecendo até a temperatura ambiente. A reação foi sonicada seguida pela adição de outra porção de hidreto de lítio alumínio em THF (0,999 ml, 2,40 mmol) e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente. A pasta foi resfriada até 0°C e extinta com adição sucessiva de água (0,18 mL), NaOH a 15% (0,18 mL) e água (0,54 mL). A pasta foi diluída com éter (20 mL) e o precipitado separado. A mistura de reação foi filtrada através de Celite e a Celite foi lavada com éter (3X3 mL). Aos orgânicos combinados foi adicionado HCl 4M/dioxano (0,45 mL, 1,1 eq.). A mistura passou de uma suspensão incolor para um precipitado avermelhado. A solução sobrenadante foi evaporada in vacuo. O sólido vermelho residual foi extraído com uma quantidade mínima de água, filtrado através de um tampão de algodão e o tampão de algodão foi lavado com uma pequena quantidade de água. A solução combinada de água foi saturada com KOH e extraída com éter (3X7 mL). Os extratos combinados foram secos sobre NaOH e evaporados parcialmente sob nitrogênio para dar produto como uma solução em éter (340 mg como solução a 40% em éter, 60%)
[01906] Etapa D: (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,3R)-3-fluoro-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de (S)-4-(2-cloro-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 0,2712 mmol), Cs2CO3 (265,1 mg, 0,8137 mmol), 1,4-dioxano (1 ml), metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'- di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1’-bifenil-2-il)paládio (II)) (23,09 mg,
0,02712 mmol) e Ruphos (9,492 mg, 0,02034 mmol) foi desgaseificada com nitrogênio e agitada a 70°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi resfriada e particionada entre EtOAc (20 mL) e água (5 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando 3% MeOH +0,3% NH4OH como eluente para dar produto (108 mg, 61%). ESI+APCI MS m/z 650,3 [M+H]+.
[01907] Etapa E: 2-((S)-4-(2-(((2R,3R)-3-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,3R)-3-fluoro- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (108 mg, 0,166 mmol), metanol (5 ml) e paládio em carbono (35 mg, 5%, Tipo Degussa tipo E101 NO/W) foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação agitada sob atmosfera de hidrogênio por 1,5 horas. A mistura de reação foi filtrada através de Celite (2 mL) e a celite foi lavada com MeOH (3X3 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo para dar o produto bruto que foi usado na próxima reação.
[01908] Etapa F: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,3R)-3-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Uma solução de 2-((S)-4-(2-(((2R,3R)-3-fluoro-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (78 mg, 0,1513 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada até -30oC, seguida pela adição de trietilamina (63,25 µl, 0,4538 mmol) e cloreto de acriloíla (24,58 µl, 0,3025 mmol). Depois de agitar 5 minutos a -30oC, a mistura de reação foi extinta com MeOH (0,05 mL) e aquecida até a temperatura ambiente. A mistura foi lavada com 0,5 M Na2CO3 (4 mL), seca sobre Na2CO3 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% a
10% de eluente MeOH para dar o composto do título (EXEMPLO 440, 63 mg, 73%). ESI+APCI MS m/z 570,3 [M+H]+.
EXEMPLO 441 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01909] Etapa A: terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (500 mg, 0,949 mmol), (D)-(R)-(1-metilpirrolidin-2- il) metanol (328 mg, 2,85 mmol) (3 eq.), Cs2CO3 (927 mg, 2,85 mmol), dioxano (1 mL) e metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil) (2- amino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G3, 0,1 eq., 79,3 mg, 0,0949 mmol) foi purgada com nitrogênio e a reação foi tampada e agitada a 70°C por 5 horas. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando 4 a 10% de MeOH + +0,5% NH 4OH como eluente para dar o produto (150 mg, 26%). ESI+APCI MS m/z 606,3 [M+H]+.
[01910] Etapa B: (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido de benzil [3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma solução de terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin- 1-il)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato (296 mg, 0,489 mmol) em DCM (2,5 mL) foi resfriada em gelo seco seguida por adição de HCl 4M em dioxano (1,2 mL) e a reação agitada por 3 horas enquanto aquecendo à temperatura ambiente, em cujo ponto um precipitado se formou. A camada líquida foi decantada e o precipitado foi lavado com DCM (2 mL). O sólido foi, então, agitado com uma mistura de DCM (20 mL) e 2 M NaCO3 (3 mL) por 1 hora. As camadas foram separadas e os orgânicos foram secos sobre Na2CO3, filtradas e evaporadas in vacuo. O material foi usado em bruto na próxima reação. ESI+APCI MS m/z 506,3 [M+H]+.
[01911] Etapa C: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato bruto (247 mg, 0,489 mmol), Cs2CO3 (477 mg, 1,47 mmol), dioxano (2 mL), 1-iodonaftaleno (107 µl, 0,733 mmol, 1,5 eq. ) e metanossulfonato (2- diciclohexilfosfino-2',6’-di-i-propoxi-1,1’-bifenil)(2-diciclo-hexilfosfino-2’,6’-di-i- propoxi-1,1’-bifenil)(2-amino-1,1’-bifenil-2-yl)paládio(II) (RuPhos-Pd-G3, 0,1 eq., 40,9 mg, 0,0489 mmol) foi purgada com nitrogênio e a reação foi tampada e agitada a 80°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas separadas. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na 2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 5% de MeOH/DCM +0,25% de NH4OH como eluente para dar o produto (216 mg, 70%). ESI+APCI MS m/z 632,3 [M+H]+.
[01912] Etapa D: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: A uma solução agitada de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (216 mg, 0,3419 mmol) em MeOH-THF (1:1, 3 mL) foi adicionado paládio em carbono (50 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) e a mistura foi desgaseificada sob vácuo, preenchida com hidrogênio e a reação agitada sob atmosfera de hidrogênio por 4 horas. A mistura de reação foi filtrada através de Celite (2 mL) e a celite lavada com EtOH (3X2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo e o resíduo dissolvido em DCM (10 mL). A solução foi resfriada com agitação até -30°C, seguido por adição de NEt3 (0,28 mL, 1,71 mmol) cloreto de acriloíla (0,08333 ml, 1,026 mmol) e a reação agitada a -30oC por 1 minuto. A reação foi extinta com adição de NH4OH (0,05 mL) e aquecida até a temperatura ambiente. A solução foi evaporada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (10 mL), filtrado através de um tampão de algodão e cromatografado em sílica gel utilizando 5 a 10% de MeOH +0,25% NH4OH em DCM como eluente para dar o composto do título (Exemplo 441, 109 mg, 58%). ESI+APCI MS m/z 552,3 [M+H]+.
EXEMPLO 442
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(indolizin-5-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01913] Etapa A: 5-iodoindolizina: A uma solução agitada de indolizina (5,69 ml, 1,71 mmol) e N1,N1,N2,N2-tetrametiletano-1,2-diamina (0,282 ml, 1,88 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (5,7 ml, 1,71 mmol) resfriada até -80oC foi adicionada gota a gota uma solução de butillítio (120 mg, 1,88 mmol). A mistura de reação foi aquecida até -20°C e mantida a -20°C por 2 horas. A mistura foi resfriada até -80°C e uma solução de iodo (433 mg, 1,71 mmol) em THF seco (3 mL) foi adicionada. A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente e tratada com uma solução saturada de cloreto de amônio. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com hexano. Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4 anidro e concentrados in vacuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel usando hexano como eluente para dar produto (216 mg).
[01914] Etapa B: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(indolizin-5-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-)1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato bruto (100 mg, 0,198 mmol), Cs2CO3 (193 mg, 0,593 mmol), dioxano (0,5 mL), 5-iodoindolizina (72,1 mg, 0,297 mmol) (1,5 eq.) e metanossulfonato (2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio (II) (RuPhos-Pd-G4, 0,1 eq., 16,8 mg, 0,0198 mmol) foi purgada com nitrogênio e a reação foi tampada e agitada a 80°C por 4 horas. A mistura de reação foi resfriada, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (10 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (5 mL cada), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH/DCM +0,4% de NH 4OH como eluente para dar o produto (74 mg, 60%). ESI+APCI MS m/z 621,3 [M+H]+.
[01915] Etapa C: 2-((S)-4-(7-(indolizin-5-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila : Uma mistura de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(indolizin-5-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (74 mg, 0,12 mmol), metanol (5 ml) e paládio em carbono (20 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada sob vácuo e preenchida com hidrogênio e a reação foi agitada sob atmosfera de hidrogênio por 2 horas. A pasta foi filtrada através de Celite (1 mL) e a Celite foi lavada com MeOH (3X2 mL). Os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo para dar o produto que foi usado em bruto na próxima reação. ESI+APCI MS m/z 487,3 [M+H]+.
[01916] Etapa D: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(indolizin-5-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Uma solução de 2-((S)-4-(7-(indolizin-5-il)-2)-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (50 mg, 0,1027 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada até -30oC seguido por adição de trietilamina (42,96 µL, 0,3082 mmol) e cloreto de acriloíla (16,70 µL, 0,2055 mmol). Após agitar 5 minutos a -30°C a mistura de reação foi extinta com NaHCO3 (1 mL) e aquecida até à temperatura ambiente seguido por adição de água (2 mL). As camadas foram separadas e os orgânicos foram secos sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% MeOH +0,4% NH4OH como eluente para dar o composto do título (Exemplo 442, 33 mg, 59%). ESI+APCI MS m/z 571,3 [M+H]+.
EXEMPLO 443 2-(1-Acriloíl-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01917] Etapa A: terc-Butil (2R)-2-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil) morfolin-4-carboxilato: Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo benzil 4-(2-cloro)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (65 mg, 0,118 mmol) e (R)-N-Boc-2- hidroximetilmorfolina (76,6 mg, 0,353 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para proporcionar terc-butil (2R)-2-(((4-(4-
((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (49 mg, 0,0668 mmol, 56,8% de rendimento). ESI+ MS m/z 734,3 (100%) [M+H]+.
[01918] Etapa B: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato cloridrato: Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (2R)-2-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (49 mg, 0,067 mmol) para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-2-il)metoxi)-7)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato cloridrato (45 mg, 0,067 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 634,3 (100%) [M+H]+.
Etapa C: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato cloridrato (45 mg, 0,067 mmol), formaldeído (54 mg, 0,67 mmol) (37% em peso de MeOH/água) em DCM (671 µl, 0,067 mmol) e THF (671 µl, 0,067 mmol) foi adicionado NaBH(OAc)3 (142 mg, 0,67 mmol) e a mistura resultante foi agitada à RT por 15 min. A mistura de reação foi particionada entre acetato de etila e 1N NaOH. A camada aquosa foi extraído com acetato de etila (1x). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e concentradas para dar um resíduo que foi purificado por flash eluindo com um gradiente de 25-50% de um a mistura de 10% MeOH/1% NH4OH/DCM em DCM. As frações contendo produto foram concentradas para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4- metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (22 mg, 0,034 mmol, 51%). ESI+ MS m/z 648,3 (100%) [M+H]+.
[01919] Etapa D: 2-(4-(2-(((R)-4-Metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil 2- (cianometil)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (22 mg, 0,034 mmol) para proporcionar 2-(4-(2-(((R)))-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (15,9 mg, 0,031 mmol, 91%). ESI+ MS m/z 514,3 (100%) [M+H]+.
[01920] Etapa E: 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-(4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (16 mg, 0,031 mmol) para proporcionar o composto do título 2-(1-acriloil-4-(2-(((R)-4- metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 443, 8,0 mg, 0,014 mmol, 46%). ESI+ MS m/z 568,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 444 2-(1-Acriloil-4-(2-((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01921] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil) morfolina-4-carboxilato: Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, usando benzil 4-(2-cloro)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (65 mg, 0,118 mmol) e terc-butil (S)-2-(hidroximetil) morfolina-4- carboxilato (76,6 mg, 0,353 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para proporcionar terc-butil (2S)-2-(((4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil) morfolina-4-carboxilato (43 mg, 0,059 mmol, 49,9% de rendimento). ESI+ MS m/z 734,3 (100%) [M+H]+.
[01922] Etapa B: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-morfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato cloridrato: Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (2S)-2-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (43 mg, 0,059 mmol) para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-morfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato cloridrato (39 mg, 0,058 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 634,3 (100%) [M+H]+.
[01923] Etapa C: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-morfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato cloridrato (39 mg, 0,067 mmol) para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4- metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (17 mg, 0,026 mmol, 45%). ESI+ MS m/z 648,3 (100%) [M+H]+.
[01924] Etapa D: 2-(4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil 2- (cianometil)-4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (17 mg, 0,026 mmol) para proporcionar 2-(4-(2-(((S)))-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (13,5 mg, 0,026 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 514,3 (100%) [M+H]+.
[01925] Etapa E: 2-(1-Acriloil-4-(2-((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-(4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (13,5 mg, 0,026 mmol) para proporcionar o composto do título 2-(1-acriloil-4-(2-(((S)-4- metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 444, 9,5 mg, 0,017 mmol, 65%). ESI+ MS m/z 568,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 445
2-(1-Acriloil-4-(2-((S)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01926] Etapa A: terc-Butil (3S)-3-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo benzil 4-(2-cloro-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (65 mg, 0,118 mmol) e terc-butil (R)-3- (hidroximetil)morfolina-4-carboxilato (76,6 mg, 0,353 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% de hex/EtOAc para proporcionar terc- butil (3S)-3-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-
1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (80 mg, 0,109 mmol, 92,8% de rendimento). ESI+ MS m/z 734,3 (100%) [M+H]+.
[01927] Etapa B: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-morfolin-3-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (3S)-3-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (80 mg, 0,11 mmol) para proporcionar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-morfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato cloridrato (73 mg, 0,11 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 634,3 (100%) [M+H]+.
[01928] Etapa C: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-3- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-morfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato cloridrato (73 mg, 0,109 mmol), para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4- metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (27,6 mg, 0,042 mmol, 39%). ESI+ MS m/z 648,3 (100%) [M+H]+.
[01929] Etapa D: 2-(4-(2-(((S)-4-Metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil 2- (cianometil)-4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (27,6 mg, 0,042 mmol) para proporcionar 2-(4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (20,2 mg, 0,039 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 514,3 (100%) [M+H]+.
[01930] Etapa E: 2-(1-Acriloil-4-(2-((S)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-(4-(2-(((S)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (20,2 mg, 0,0393 mmol) para proporcionar o composto do título 2-(1-acriloil-4-(2-(((S)-4- metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 445, 15 mg, 0,026 mmol, 67%). ESI+ MS m/z 568,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 446 2-(1-Acriloil-4-(2-((R)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01931] Etapa A: terc-Butil (3R)-3-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo benzil 4-(2-cloro-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (65 mg, 0,118 mmol) e terc-butil (S)-3- (hidroximetil)morfolina-4-carboxilato (76,6 mg, 0,353 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para proporcionar terc-butil (3R)-3-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (50 mg, 0,068 mmol, 58,0% de rendimento). ESI+ MS m/z 734,3 (100%) [M+H]+.
[01932] Etapa B: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-3-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato cloridrato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (3R)-3-(((4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (50 mg, 0,068 mmol) para proporcionar benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-
il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (46 mg, 0,068 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 634,3 (100%) [M+H]+.
[01933] Etapa C: Benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-3- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato cloridrato (73 mg, 0,109 mmol), para fornecer benzil 2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4- metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (23,0 mg, 0,036 mmol, 52%). ESI+ MS m/z 648,3 (100%) [M+H]+.
[01934] Etapa D: 2-(4-(2-(((R)-4-Metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil 2- (cianometil)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (23,0 mg, 0,036 mmol) para proporcionar 2-(4-(2-(((R))-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (18,2 mg, 0,036 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 514,3 (100%) [M+H]+.
[01935] Etapa E: 2-(1-Acriloil-4-(2-((R)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-(4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (18,2 mg, 0,036 mmol) para proporcionar o composto do título 2-(1-acriloil-4-(2-(((R)-4- metilmorfolin-3-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina- 2-il)acetonitrila (EXEMPLO 446, 14 mg, 0,025 mmol, 69%). ESI+ MS m/z 568,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 447 2-((S)-1-Acriloil-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01936] Etapa A: Benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4,4- difluoropirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo benzil (S)-4-(2-cloro- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (50 mg, 0,090 mmol) e terc-butil (S)-4,4- difluoro-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (64,3 mg, 0,271 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para fornecer benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil))-4,4-difluoropirrolidin-2-
il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (15 mg, 0,020 mmol, 22,0% de rendimento). ESI+ MS m/z 754,3 (100%) [M+H]+.
[01937] Etapa B: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4,4-difluoropirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo (S)-4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil))-4,4-difluoropirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (18 mg, 0,024 mmol) para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4,4-difluoropirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (16 mg, 0,023 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 654,3 (100%) [M+H]+.
[01938] Etapa C: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil (S)-2-(cianometil)- 4-(2-(((S)-4,4-difluoropirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (16 mg, 0,023 mmol) para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (16,0 mg, 0,024 mmol, 52%). ESI+ MS m/z 668,3 (100%) [M+H]+.
[01939] Etapa D: 2-((S)-4-(2-((S)-4,4-Difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (16,0 mg, 0,024 mmol) para proporcionar 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4- difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-
hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (8,0 mg, 0,015 mmol, 63%). ESI+ MS m/z 534,3 (100%) [M+H]+.
[01940] Etapa E: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (8,0 mg, 0,015 mmol) para proporcionar o composto do título 2-((S)- 1-acriloil-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 447, 4 mg, 0,007 mmol, 45%). ESI+ MS m/z 588,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 448 2-((S)-1-Acriloil-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7- (naftaleno)1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[01941] Etapa A: terc-Butil (R)-6-(((4-((S)-4-(benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octano-4-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (25 mg, 0,045 mmol) e terc-butil (R)-6- (hidroximetil)-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octano-4-carboxilato (33,0 mg, 0,136 mmol), purificado por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para proporcionar terc-butil (R)-6-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-7-oxa-4-azaspiro[2,5]octano-4-carboxilato (35 mg, 0,0461 mmol, 100% de rendimento). ESI+ MS m/z 760,3 (100%) [M+H] +.
[01942] Etapa B: Benzil (S)-4-(2-(((R)-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octan-6- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato cloridrato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (R)-6-(((4-((S)-4- ((benziloxi)carbonil)-3)(cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octano-4- carboxilato (35 mg, 0,046 mmol) para fornecer benzil (S)-4-(2-(((R)-7-oxa-4-
azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (32 mg, 0,046 mmol, 100%) ESI+ MS m/z 660,3 (100%) [M+H]+.
[01943] Etapa C: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4- azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil (S)-4-(2-(((R)-7-oxa- 4-azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato cloridrato (32 mg, 0,046 mmol), para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4- azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (31 mg, 0,046 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 674,3 (100%) [M+H]+.
[01944] Etapa D: 2-((S)-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octan-6- il)metoxi)-7-(naftalen-1)-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4- azaspiro[2.5]octanol) 6-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (31,0 mg, 0,046 mmol) para fornecer 2- ((S)-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-(naftalen-1)-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (18,0 mg, 0,033 mmol, 72%). ESI+ MS m/z 540,3 (100%) [M+H]+.
[01945] Etapa E: 2-((S)-1-Acriloil-4-(2-((R)-4-metil-7-oxa-4- azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-((S)-4-(2-(((R)-4-metil-7- oxa-4-azaspiro[2.5]octan-6-il))metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (18,0 mg, 0,033 mmol)
para proporcionar composto do título 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((R)-4-metil-7-oxa-4- azaspiro[2.5]octan-6-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 448, 5,8 mg, 0,010 mmol, 29%). ESI+ MS m/z 594,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 449 2-(1-Acriloil-4-(7-(2-(difluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01946] Etapa A. Benzil 2-(cianometil)-4-(7-(2-(difluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Uma mistura de 2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato
(30 mg, 0,0593 mmol), 1-Bromo-2-difluorometilbenzeno (36,8 mg, 0,178 mmol), BINAP Palladacycle Gen. 3 (5,9 mg, 0,006 mmol), Cs2CO3 (77,3 mg, 0,237 mmol) em dioxano (593 µl, 0,0593 mmol) foi espargida com Ar por 5min. e depois selada e aquecida a 100°C por 1d. A mistura de reação foi carregada em uma amostra de sílica gel e purificada por cromatografia flash eluindo com um gradiente de 1-10% de MeOH/DCM (1% de NH4OH) para fornecer benzil 2- (cianometil)-4-(7-(2-(difluorometil))fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (12 mg, 0,019 mmol, 32%). ESI+ MS m/z 632,3 (100%) [M+H]+.
[01947] Etapa B: 2-((S)-4-(2-((R)-4-metil-7-oxa-4-azaspiro[2.5]octan-6- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil 2-(cianometil)-4-(7-(2-(difluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (12,0 mg, 0,019 mmol) para proporcionar 2-(4-(7-(2- (difluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (9,5 mg, 0,019 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 498,3 (100%) [M+H]+.
[01948] Etapa C: 2-(1-acriloil-4-(7-(2-(difluorometil)fenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-(4-(7-(2-(difluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (9,5 mg, 0,019 mmol) para proporcionar o composto do título 2-(1-acriloil-4-(7- (2-(difluorometil)fenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 449, 4,2 mg, 0,008 mmol, 40%). ESI+ MS m/z 552,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 450
2-((S)-1-Acriloil-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01949] Etapa A: terc-Butil (R)-2-(((4-((S)-4-(benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443 Etapa A, substituindo (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (95 mg, 0,172 mmol) e (R)-N-Boc-2-hidroximetilmorfolina (112 mg, 0,515 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para proporcionar terc-butil (R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-
d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (126 mg, 0,172 mmol, 100% de rendimento). ESI+ MS m/z 734,3 (100%) [M+H]+.
[01950] Etapa B: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-morfolin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato: Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)morfolina-4-carboxilato (126 mg, 0,172 mmol) para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((R)-morfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (109 mg, 0,172 mmol 100%). ESI+ MS m/z 634,3 (100%) [M+H]+.
[01951] Etapa C: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443 Etapa C, substituindo (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (109 mg, 0,172 mmol) para proporcionar benzil (S)-2-(cianometil)-4- (2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (76 mg, 0,117 mmol, 68%). ESI+ MS m/z 648,3 (100%) [M+H]+.
[01952] Etapa D: 2-((S)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (76 mg, 0,117 mmol) para fornecer 2-((S)-4-(2-((((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (57,1 mg, 0,111 mmol, 95%). ESI+ MS m/z 514,3 (100%) [M+H]+.
[01953] Etapa E: 2-(1-acriloil-4-(2-((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-((S)-4-(2-(((R)-4-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il))- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (56 mg, 0,11 mmol) para proporcionar o composto do título 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((R)-4- metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 450, 50 mg, 0,088 mmol, 81%). ESI+ MS m/z 568,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 451 2-((S)-1-Acriloil-4-(2-(((2R,5R)-4,5-dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01954] Etapa A: terc-Butil (2R,5R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)- 3)(cianometil)piperazin-1-il))-7-(naftaleno)1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-5-metilmorfolina-4-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo benzil (S)-4-(2-cloro- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (95 mg, 0,172 mmol) e terc-butil (2R,5R)-2- (hidroximetil)-5-metilmorfolina-4-carboxilato (119 mg , 0,515 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para fornecer terc-butil (2R,5R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)))-3-(cianometil)piperazin-1-il)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-5- metilmorfolina-4-carboxilato (128 mg, 0,171 mmol, 100% de rendimento). ESI+ MS m/z 748,3 (100%) [M+H]+.
[01955] Etapa B: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,5R)-5-metilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (2R,5R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1)-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-5-metilmorfolina-4-carboxilato (128 mg, 0,171 mmol)
para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,5R)-5-metilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (111 mg, 0,171 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 648,3 (100%) [M+H]+.
[01956] Etapa C: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,5R)-4,5- dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil (S)-2-(cianometil)- 4-(2-(((2R,5R)-5-metilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (111 mg, 0,171 mmol), para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,5R)-4,5-dimetilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (56 mg, 0,085 mmol, 49%). ESI+ MS m/z 662,3 (100%) [M+H]+.
[01957] Etapa D: 2-((S)-4-(2-(((2R,5R)-4,5-Dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((2R,5R)-4,5-dimetilmorfolin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (56 mg, 0,085 mmol) para proporcionar 2-((S)-4-(2-(((2R,5R)-4,5- dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (44,3 mg, 0,084 mmol, 99%). ESI+ MS m/z 528,3 (100%) [M+H]+.
[01958] Etapa E: 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((2R,5R)-4,5-dimetilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa G, substituindo 2-((S)-4-(2-(((2R,5R)-4,5-dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (43 mg, 0,081 mmol) para fornecer o composto do título 2-((S)-1- acriloíl-4-(2-(((2R,5R)-4,5-dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-
tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 451, 32 mg, 0,055 mmol, 68%). ESI+ MS m/z 582,3 (100%) [M+H]+.
EXEMPLO 452 2-((S)-1-Acriloil-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5-trimetilmorfolin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[01959] Etapa A: terc-Butil (R)-2-(((4-((S)-4-(benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-5,5-dimetilmorfolina-4-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa C, substituindo (S)-4-(2- cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (95 mg, 0,172 mmol) e terc-butil (R)-2-
(hidroximetil)-5,5-dimetilmorfolina-4-carboxilato (126 mg, 0,515 mmol), purificando por cromatografia flash eluindo com 25-100% hex/EtOAc para proporcionar terc-butil (R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-5,5-dimetilmorfolina-4-carboxilato (131 mg, 0,172 mmol, 100% de rendimento). ESI+ MS m/z 762,3 (100%) [M+H]+.
[01960] Etapa B: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-5,5-dimetilmorfolin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa D, substituindo terc-butil (R)-2-(((4-((S)-4-((benziloxi) carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)-5,5-dimetilmorfolina-4-carboxilato (131 mg, 0,172 mmol) para fornecer (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-5,5-dimetilmorfolin-2-il)metoxi)- 7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (114 mg, 0,172 mmol, 100%). ESI+ MS m/z 662,3 (100%) [M+H]+.
[01961] Etapa C: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5- trimetilmorfolin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 443, etapa C, substituindo benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((R)-5,5- dimetilmorfolin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (114 mg, 0,172 mmol), para proporcionar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5-trimetilmorfolin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (77 mg, 0, 114 mmol, 66%). ESI+ MS m/z 676,3 (100%) [M+H]+.
[01962] Etapa D: 2-((S)-4-(7-(Naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5-trimetilmorfolin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila . Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 375 Etapa F, substituindo benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5-trimetilmorfolin-2-
il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (77 mg, 0,114 mmol) para proporcionar 2-((S)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5- trimetilmorfolin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (47 mg, 0,087 mmol, 77%). ESI+ MS m/z 542,3 (100%) [M+H]+.
[01963] Etapa E: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5- trimetilmorfolin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 1 Etapa G, substituindo 2-((S)-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5- trimetilmorfolin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (46 mg, 0,085 mmol) para fornecer o composto do título 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(naftalen-1-il)-2-(((R)-4,5,5-trimetilmorfolin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 452, 36 mg, 0,060 mmol, 71%). ESI+ MS m/z 582,3 (100%) [M+H] +.
EXEMPLO 453 1-[4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
2. AcOK, 18-Crown-6, CHCl3, 35 °C, 0,5 h 30% CS2CO3, tolueno, 90°C, 8 h, 31% -40°C, 0,5 h Duas etapas 30%
[01964] Etapa 1: 3-bromo-1,2,4-trimetil-5-nitro-benzeno. A uma solução de 1,2,4-trimetil-5-nitro-benzeno (10 g, 60 mmol, 1 eq) em DCE (200 mL) foi adicionado FeBr3 (358 mg, 1,21 mmol, 0,02 eq), Fe (879 mg, 15,7 mmol, 0,26 eq) seguido por Br2 (11,6 g, 72,6 mmol, 3,74 mL, 1,2 eq) gota a gota. Depois de agitada a 25°C por 1 hora, a mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto em bruto foi suspenso em água e coletado por filtração. Foi obtido 3-bromo-1,2,4-trimetil-5- nitro-benzeno (8,6 g, 34,9 mmol, 58% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido branco.
[01965] Etapa 2: 3-bromo-2,4,5-trimetil-anilina. A uma solução de 3-bromo- 1,2,4-trimetil-5-nitro-benzeno (5,2 g, 21,3 mmol, 1 eq) em EtOH (100 mL) foi adicionado Fe (5,95 g, 107 mmol, 5 eq) e AcOH (12,8 g, 213 mmol, 12,2 ml, 10 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 3 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 aquoso saturado e, então, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 100 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar 3-bromo-2,4,5-trimetil-anilina (3,4 g, 14,3 mmol, 67% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo.
[01966] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 6,51 (s, 1H), 3,56 (br s, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H).
[01967] Etapa 3: 4-bromo-5,6-dimetil-1H-indazol. 3-bromo-2,4,5-trimetil- anilina (200 mg, 934,14 umol, 1 eq) foi dissolvido em trifluoroborano; hidrofluoreto (1,69 g, 7,71 mmol, 1,20 mL, 8,25 eq, 40% em água) gota a gota a 0°C. Uma solução aquosa resfriada de NaNO2 (96,7 mg, 1,40 mmol, 1,5 eq) (no mínimo de água para aquosa saturada). Após adição, a mistura foi agitada a 0°C por 1 hora e 25°C por 0,5 hora. NaNO2 (64 mg, no mínimo de água para aquosa saturada) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Em seguida, o precipitado resultante foi filtrado, lavado com (i-Pr)2O (40 mL) e concentrado sob vácuo, o qual foi adicionado diretamente em uma porção sob N2 a uma mistura agitada de KOAc (183 mg, 1,87 mmol, 2 eq) e 18-CROWN-6 (12,4 mg, 46,7 umol, 0,05 eq) em CHCl3 (8 mL). A mistura foi agitada a 35°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 100/1 a 5/1) para dar 4-bromo-5,6-dimetil-1H-indazol (70 mg, 280 umol, 30% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo.
[01968] Etapa 4: 4-bromo-5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol. A uma solução de 4-bromo-5,6-dimetil-1H-indazol (290 mg, 1,29 mmol, 1 eq) em DCM (6 mL) foi adicionado TsOH•H2O (24,5 mg, 129 umol, 0,1 eq), seguido por DHP (217 mg, 2,58 mmol, 236 uL, 2 eq) e MeCN (1 mL). A mistura foi agitada a 25°C por 5 horas. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 mL), diluída com água (20 mL). camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 100/1 a 25/1) para dar 4-bromo-5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (320 mg, 828 umol, 64% 80% de pureza) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 309.
[01969] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,94 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 5,66 (dd, J = 2,8, 9,2 Hz, 1H), 4,06 - 3,97 (m, 1H), 3,79 - 3,67 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,16 (qd, J = 4,4, 7,6 Hz, 1H), 2,06 (qd, J = 3,2, 13,2 Hz, 1H), 1,83 - 1,64 (m, 4H).
[01970] Etapa A: terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4- il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (385 mg, 890 umol, 1 eq), 4-bromo-5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (303 mg, 979 umol, 1,10 eq), Pd2(dba)3 (163 mg, 178 umol, 0,2 eq), RuPhos (166 mg, 356 umol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (725 mg, 2,23 mmol, 2,5 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificado e, em seguida, aquecido até 90°C por 8 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EtOAc/MeOH 100/1 a 5/1) para dar terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il-)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (200 mg, 275 umol, 31% de rendimento, 91% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 661.
[01971] Etapa B: 7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (190 mg, 288 umol, 1 eq) em DCM (0,4 mL) foi adicionado TFA (924 mg, 8,10 mmol, 0,6 mL, 28,2 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar 7-(5,6-dimetil- 1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il] metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (220 mg, bruto, 2TFA) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem mais purificação.
[01972] Etapa C: 1-[4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1- il]prop-2-en-1-ona. A uma solução de 7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (200 mg, 284 umol, 1 eq, 2 TFA) e TEA (574 mg, 5,68 mmol, 790 uL, 20 eq) em DCM (4 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (35,8 mg, 284 umol, 1 eq) em gotas a - 40°C. A mistura foi agitada a -40°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (0,5 mL), diluída com água (5 mL) e depois extraída com DCM (2 × 10 mL). Os extratos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 100/1 a 10/1) e HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35% -65%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 1-[4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona (EXEMPLO 453, 45,3 mg 85,2 umol, duas etapas, 30% de rendimento, 99,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:531.
[01973] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[01974] 1H NMR (400 MHz, clorofórm-d) δ = 10,84 (br s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,59 (dd, J = 10,4, 16,8 Hz, 1H), 6,34 (dd, J = 1,2, 16,8 Hz, 1H), 5,79 - 5,68 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,17 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 1H), 3,90 - 3,39 (m, 10H), 3,09 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,89 - 2,62 (m, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,30 - 2,23 (m, 1H), 2,09 - 1,97 (m, 1H), 1,91 - 1,69 (m, 3H).
Exemplo 454 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 25-90°C, 12,5 hrs, duas etapas 37% t-BuONa, 25 °C, 0,5 h tolueno, 0°C, 0,5 hr, 64% TEA, DCM, 0°C, 0,5 hr, duas etapas 22%
[01975] Etapa 1: 4,4-difluoropiperidina. A uma solução de terc-butil 4,4- difluoropiperidina-1-carboxilato (2,0 g, 9,04 mmol, 1,0 eq) em DCM (0,50 mL) foi adicionado TFA (770 mg, 6,75 mmol, 0,50 mL, 7,47 e-1 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo para dar o produto 4,4-difluoropiperidina (1,50 g, em bruto, TFA) como óleo amarelo, o qual foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional.
[01976] Etapa 2: 1-(2-benziloxietil)-4,4-difluoro-piperidina. A uma solução de 4,4-difluoropiperidina (1,50 g, 6,38 mmol, 1,0 eq, TFA) em MeCN (20,0 mL) foi adicionado NaOH (765 mg, 19,1 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Em seguida, 2-bromoetoximetilbenzeno (1,65 g, 7,65 mmol, 1,21 mL, 1,20 eq) e KI (212 mg, 1,28 mmol, 0,20 eq) foram adicionados ao líquido acima, a mistura foi agitada a 90°C por 12 horas. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (20,0 mL), e depois extraída com EA (3 × 20,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre por Na 2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo: Acetato de etila = 10:1 para 0:1 ) para dar 1-(2-benziloxietil)-4,4- difluoro-piperidina (600 mg, 2,35 mmol, duas etapas 37% de rendimento) como óleo amarelo.
[01977] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,41 - 7,29 (m, 5H), 4,54 (s, 2H), 3,82 - 3,72 (m, 2H), 3,33 - 2,94 (m, 6H), 2,37 - 2,15 (m, 4H).
[01978] Etapa 3: 2-(4,4-difluoro-1-piperidil)etanol. Uma solução de 1-(2- benziloxietil)-4,4-difluoro-piperidina (400 mg, 1,57 mmol, 1,0 eq) e Pd/C (200 mg, 10% de pureza) em EtOH (5,0 mL) foi agitada sob atmosfera de H 2 (15 psi) a 25°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de Celite, a torta de filtro foi lavada com THF (10,0 mL). O filtrado foi coletado e concentrado para dar o produto 2-(4,4-difluoro-1-piperidil)etanol (170 mg, 1,03 mmol, 66% de rendimento) como óleo incolor. O produto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional.
[01979] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 3,84 - 3,70 (m, 2H), 2,98 - 2,89 (m, 4H), 2,86 - 2,80 (m, 3H), 2,24 - 2,11 (m, 4H).
[01980] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4-difluoro-1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de 2-(4,4-difluoro-1- piperidil)etanol (102 mg, 619 umol, 3,0 eq) em tolueno (3,0 mL) e terc-butil (2S)- 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (120 mg, 206 umol, 1,0 eq) foi adicionado t- BuONa (39,7 mg, 413 umol, 2,0 eq), a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com EA (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% de NH3•H2O, 0-60% de MeCN) para dar o produto terc-butilo (2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (90,0 mg, 132 umol, 64% de rendimento) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 682.
[01981] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4-difluoro-1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4- difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (30,0 mg, 44,0 umol, 1,0 eq) em DCM (0,5 mL) TFA (770 mg, 6,75 mmol, 0,50 mL, 154 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada. O resíduo foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado até pH ~ 7, depois extraído com EA (3 x 5,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o produto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (26,0 mg, bruto) como óleo amarelo que foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01982] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(4,4-difluoro-1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2- (4,4-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (26,0 mg, 44,7 umol, 1,0 eq) e DIEA (69,3 mg, 536 umol, 93,4 uL, 12,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil-prop-2-enoato (8,45 mg, 67,0 umol, 1,50 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta por adição de MeOH (1,0 mL) e depois concentrada para dar um resíduo. Em seguida, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 47% - 77%, 12 min.) para dar composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2- (4,4-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop- 2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 454, 6,35 mg, 9,82 umol, duas etapas, 22% de rendimento, 98% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 636.
[01983] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 6,67 - 6,54 (m, 1H), 6,40 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,83 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 5,20 - 4,56 (m, 1H), 4,50 - 4,35 (m, 3H), 4,22 - 4,01 (m, 2H), 3,98 - 3,75 (m, 2H), 3,66 - 3,57 (m, 1H), 3,53 - 3,36 (m, 1H), 3,31 - 2,98 (m, 4H), 2,91 - 2,80 (m, 3H), 2,79 - 2,49 (m, 6H), 2,09 - 1,94 (m, 4H).
EXEMPLO 455
2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 25 °C, 0,5 hr 0°C, 0,5 hr, 87% 0 °C, 0,5 hr Duas eetapas 26%
[01984] Etapa 1: 1-(2-benziloxietil)-3,3-difluoro-piperidina. A uma solução de 3,3-difluoropiperidina (1,0 g, 6,35 mmol, 1,0 eq, HCl) em MeCN (6,0 mL) foi adicionado NaOH (761 mg, 19,0 mmol, 3,0 eq) em uma porção a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C por 5 minutos, em seguida, 2-bromoetoximetilbenzeno (1,64 g, 7,61 mmol, 1,20 mL, 1,20 eq) e KI (211 mg, 1,27 mmol, 0,20 eq) foram adicionados. A mistura foi agitada a 90°C por 12 horas. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada H2O (15,0 mL) e depois extraída com EA (3 × 20,0mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre por Na 2SO4, filtradas e concentradas para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 10:1 para 5:1) para dar 1-(2-benziloxietil)-3,3-difluoro-piperidina (1,40 g, 5,48 mmol, 86% de rendimento) como óleo incolor.
[01985] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,38 - 7,31 (m, 5H), 4,56 (s, 2H), 3,64 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,79 - 2,73 (m, 4H), 2,55 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,85 - 1,85 (m, 2H), 1,82 - 1,76 (m, 2H).
[01986] Etapa 2 : 2-(3,3-difluoro-1-piperidil)etanol. A uma solução de 1-(2- benziloxietil)-3,3-difluoro-piperidina (400 mg, 1,57 mmol, 1,0 eq) em MeOH (5,0 mL) foi adicionado Pd/C (200 mg, 10% de pureza) em N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada para dar 2-(3,3-difluoro-1-piperidil)etanol (240 mg, 1,45 mmol, 93% de rendimento) como óleo incolor. O produto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional.
[01987] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 3,64 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,73 (t, J = 11,2 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,54 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 1,97 - 1,87 (m, 2H), 1,82 - 1,76 (m, 2H).
[01988] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3-difluoro-1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilao (230 mg, 396 umol, 1,0 eq), 2-(3,3-difluoro- 1-piperidil)etanol (196 mg, 1,19 mmol, 3,0 eq), t-BuONa (114 mg, 1,19 mmol, 3,0 eq) em tolueno (5,0 mL) foi degaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, então, a mistura foi agitada a 0 °C por 0,5 hora sob atmosfera de N 2. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por H2O (5,0 mL) e extraída com EA (3 × 10,0 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com solução saturada de NaCl aquosa (20,0 ml), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila=3:1 a 0:1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[2-(3,3-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina -1-carboxilato (250 mg, 344 umol, 87% de rendimento, 94% de pureza) como óleo amarelo.
[01989] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,50 - 7,42 (m, 1H), 7,37 - 7,33 (m, 1H), 7,27 - 7,20 (m, 1H), 4,67 - 4,64 (m, 1H), 4,48 - 4,39 (m, 3H), 4,06 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,01 - 3,80 (m, 3H), 3,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 1H), 3,27 - 3,10 (m, 3H), 2,97 - 2,90 (m, 3H), 2,84 - 2,78 (m, 3H), 2,61 - 2,57 (m, 2H), 1,89 - 1,85 (m, 3H), 1,72 - 1,54 (m, 3H), 1,53 (s, 9H).
[01990] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3-difluoro-1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3- difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 293 umol, 1,0 eq) em DCM (1.50 mL) foi adicionado TFA (2,31 g, 20,3 mmol, 1,50 mL, 69,0 eq) em uma porção, a 25°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura foi concentrada para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3-difluoro- 1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (400 mg, bruto, 2TFA) como sólido amarelo. O produto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 582.
[01991] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3-difluoro-1- piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil- piperazin-2-il]acetonitrila.A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2- (3,3-difluoro-1-piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (400 mg, 494 umol, bruto, 2TFA) e TEA (727 mg, 7,18 mmol, 1,0 mL) em DCM (2,0 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (100 mg, 793 umol) em uma porção a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi extinta por adição de MeOH (3,0 mL) a 0°C e depois concentrada para dar um resíduo. Em seguida, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um; fase móvel: [água (10,0 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 57%-87%, 10 min.) e liofilizado para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[2-(3,3-difluoro-1-
piperidil)etoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-il-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 455, 48,4 mg, 75,8umol, 26 % de rendimento, 99% de pureza) como sólido branco.
[01992] Condição SFC: 100%.e.e.
[01993] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,50 - 7,43 (m, 1H), 7,36 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,21 (m, 1H), 6,60 - 6,58 (m, 1H), 6,44 - 6,39 (m, 1H), 5,85 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,10 - 4,66 (m, 1H), 4,49 - 4,40 (m, 3H), 4,18 - 4,08 (m, 2H), 3,94 - 3,89 (m, 1H), 3,85 - 3,73 (m, 1H), 3,63 - 3,60 (m, 1H), 3,50 - 3,41 (m, 1H), 3,33 - 3,02 (m, 4H), 2,94 - 2,76 (m, 6 H), 2,64 - 2,61 (m, 3H), 1,95 - 1,85 (m, 2H), 1,80 - 1,78 (m, 2H). LCMS [ESI, M+1]: 636.
EXEMPLO 456 5,6-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1- il)-6,8-di-hidro -5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-1,3-di-hidrobenzimidazol-2-ona tolueno, 80°C, 8 h, 6% Duas etapas 18% HCl.dioxano, dioxano 0 - 25 °C, 0,5 h TEA, DCM, -40 °C, 0,5h Duas etapas 20%
[01994] Inserir Etapa 1: 2-bromo-3,4-dimetil-6-nitro-anilina. A uma solução de 4,5-dimetil-2-nitro-anilina (5 g, 30,1 mmol, 1 eq) em CHCl3 (100 mL) foi adicionado Br2 (7,21 g, 45,1 mmol, 2,33 mL, 1,5 eq) gota a gota a 10°C. A mistura de reação foi agitada a 10°C por 30 min. e 25°C por 30 min. Depois da conclusão, a mistura de reação foi lavada com NaHCO3 aquoso saturado (80 mL). A fase aquosa foi extraída com CHCl3 (30 mL). A fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada através de uma almofada de sílica gel e, em seguida, concentrada até secura. 2-bromo-3,4-dimetil-6-nitro-anilina (7 g, 28,5 mmol, 95% de rendimento, 99,7% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+3]: 247
[01995] Etapa 2: 3-bromo-1,2-dimetil-4,5-dinitro-benzeno. A uma solução de 2-bromo-3,4-dimetil-6-nitro-anilina (7 g, 28,6 mmol, 1 eq) em TFA (50 mL) foi adicionado peróxido de hidrogênio (25,9 g, 229 mmol, 22,0 mL, 30% de pureza,
8,0 eq) gota a gota a 10°C. A mistura de reação foi agitada a 10°C por 30 min. e 25°C por 30 min. e depois a 40°C por outras 2 horas. A mistura de reação foi resfriada até 5 - 10°C e depois foi filtrada. A torta de filtro foi lavada com PE (3 × 20 mL). O sólido foi, então, seco sob pressão reduzida a 50°C. 3-bromo-1,2- dimetil-4,5-dinitro-benzeno (5 g, 18,2 mmol, 64% de rendimento) foi obtido como sólido amarelo.
[01996] Etapa A: terc-butil 4-[7-(2,3-dimetil-5,6-dinitro-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (250 mg, 578 umol, 1 eq), 3-bromo-1,2-dimetil-4,5-dinitro-benzeno (318 mg, 1,16 mmol, 2 eq), Pd2(dba)3 (52,9 mg, 57,8 umol, 0,1 eq), RuPhos (40,5 mg, 86,7 umol, 0,15 eq) e Cs2CO3 (377 mg, 1,16 mmol, 2 eq) em tolueno (25 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas, sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com H2O (100 mL × 1) e acetato de etila (100 mL × 2). A fase orgânica separada foi lavada com salmoura (100 mL × 1), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (SiO2, Acetato de etila/MeOH = 50/1 a 3/1) e flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com uma solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (1 × 100 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. terc-butil 4-[7-(2,3-dimetil-5,6-dinitro- fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (22,0 mg, 140 umol, 6% de rendimento, 99,7% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 627.
[01997] Etapa B: terc-butil 4-[7-(2,3-diamino-5,6-dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[7-(2,3-dimetil-5,6-dinitro-fenil)-2-
[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (120 mg, 191 umol, 1 eq) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd/C (24,0 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo. terc-butil 4-[7-(2,3-diamino-5,6- dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (100 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 567.
[01998] Etapa C: terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-2-oxo-1,3-di- hidrobenzimidazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4- [7-(2,3-diamino-5,6-dimetil-fenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 176 umol, 1 eq) em THF (10 mL) foi adicionado CDI (57,2 mg, 353 umol, 2 eq). Após agitada a 50°C por 1 h, foi adicionado CDI (171 mg) e a mistura foi agitada a 70°C por mais 3 horas. A mistura de reação foi extinta com H2O (3 mL × 1), e, em seguida, extraída com acetato de etila (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 10 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 17% - 47%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de NaHCO3 e extraídas com acetato de etila (1 × 30 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-2-oxo-1,3-di-hidrobenzimidazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (20,0 mg, 33,7 umol, duas etapas 19% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 593.
[01999] Etapa D: 5,6-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4- piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-1,3-di- hidrobenzimidazol-2-ona. A uma solução de terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-2-oxo- 1,3-di-hidrobenzimidazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (16,0 mg, 27,0 umol, 1 eq) em dioxano (2 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 101 uL, 15 eq) a 0°C. Após agitação a 25°C por 0,5 h, a mistura foi concentrada sob vácuo. 5,6-dimetil-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-7-il]-1,3-di-hidrobenzimidazol-2-ona (20,0 mg, bruto, HCl) foi obtida como um óleo amarelo e usada na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 493.
[02000] Etapa E: 5,6-dimetil-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-(4- prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-1,3-di- hidrobenzimidazol-2-ona. A uma mistura de 5,6-dimetil-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 7-il]-1,3-di-hidrobenzimidazol-2-ona (20,0 mg, 37,8 umol, 1 eq, HCl) e TEA (38,3 mg, 378 umol, 52,6 uL, 10 eq) em DCM (2 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop- 2-enoato (4,77 mg, 37,8 umol, 1 eq) em porção a -40°C. Depois de agitada a - 40°C por 30 min., a mistura de reação foi extinta com uma solução saturada de NaHCO3 (0,5 mL) a 0°C, e, em seguida, extraída com CH2Cl2 (2 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 10 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 25 * 10um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 10% - 37%, 9min.). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilizadas. Composto do título 5,6-dimetil-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-(4-prop-2-enoilpiperazin-1-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-7-il]-1,3-di-hidrobenzimidazol-2-ona (EXEMPLO 456, 3,15 mg, 5,25 umol, duas etapas, 14% de rendimento, 98,8% de pureza, HCOOH) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 547.
[02001] 1H NMR (400 MHz, metanol-d4) 6,90 - 6,81 (m, 1H), 6,80 - 6,72 (m, 1H), 6,28 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,82 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,72 - 4,46 (m, 2H), 4,32 - 4,01 (m, 2H), 3,93 - 3,53 (m, 10H), 3,53 - 3,38 (m, 1H), 3,21 - 3,02 (m, 2H), 2,98 (s, 3H), 2,95 - 2,58 (m, 2H), 2,48 - 2,32 (m, 1H), 2,31 (br s, 3H), 2,29 (br s, 3H), 2,19 - 1,94 (m, 3H).
EXEMPLO 457 1-[4-[7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1-ona
Duas etapas rendimento 18% TBAF, etano-1,2- diamina Cs2CO3, tolueno, 90°C, 8h, 13% 25 °C, 0,5 h - 40 °C, 0,5h Duas etapas rendimento 23%
[02002] Etapa 1: (E)-2-(2-bromo-3,4-dimetil-6-nitro-fenil)-N,N-dimetil- etenamina. A uma solução de 3-bromo-1,2,4-trimetil-5-nitro-benzeno (2 g, 8,19 mmol, 1 eq) em DMF (20 mL) foi adicionado DMFDMA (5,86 g, 49,2 mmol, 6,53) mL, 6 eq). A mistura foi agitada a 130°C por 10 horas. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar (E)-2-(2-bromo-3,4-dimetil-6-nitro-fenil)-N,N- dimetil-etenamina (2,5 g, em bruto) como um óleo marrom que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02003] Etapa 2: 4-bromo-5,6-dimetil-1H-indol. A uma solução de (E)-2-(2- bromo-3,4-dimetil-6-nitro-fenil)-N,N-dimetil-etenamina (2,5 g, 8,36 mmol, 1 eq) em EtOH (50 mL) foi adicionado Fe (2,33 g, 41,8 mmol, 5 eq) e AcOH (5,02 g, 83,6 mmol, 4,78 mL, 10 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. A mistura foi ajustada pH = 7 com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (50 mL × 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 1/0 a 50/1) para dar 4-
bromo-5,6-dimetil-1H-indol (380 mg, 1,46 mmol, duas etapas rendimento de 18%, 86% de pureza) como um óleo amarelo.
[02004] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,12 (br s, 1H), 7,20 - 7,10 (m, 2H), 6,59 - 6,52 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,43 (s, 3H).
[02005] Etapa 3: 2-[(4-bromo-5,6-dimetil-indol-1-il)metoxi]etil-trimetil- silano. A uma solução de 4-bromo-5,6-dimetil-1H-indol (450 mg, 2,01 mmol, 1 eq) em THF (9 mL) foi adicionado NaH (161 mg, 4,02 mmol, 60% de pureza, 2 eq) a 0°C. A reação foi agitada a 0°C por 15 minutos sob N2. A reação foi deixada aquecer até 25°C e agitada por 0,5 hora. A reação foi resfriada novamente até 0°C. E SEM-Cl (502 mg, 3,01 mmol, 533 uL, 1,5 eq) em THF (100 uL) foi adicionado gota a gota a 0°C. Após agitação por 5 minutos, a mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente (25°C) e agitada por mais 5 horas. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (20 mL), diluída com água (10 mL) e depois extraída com acetato de etila (2 × 30 mL). Os extratos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 1/0 a 50/1) para dar 2-[(4-bromo-5,6-dimetil-indol-1-il)metoxi]etil-trimetil-silano (440 mg, 1,18 mmol, 59% de rendimento, 95% de pureza) como um óleo amarelo.
[02006] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,25 (s, 1H), 7,11 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,43 (s, 2H), 3,52 - 3,40 (m, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,46 (s, 3H), 0,92 - 0,87 (m, 2H), -0,01 - -0,08 (m, 9H).
[02007] Etapa A: terc-butil 4-[7-[5,6-dimetil-1-(2-trimetilsililetoximetil)indol- 4-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metox]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (Intermediário 66, 450 mg, 1,04 mmol, 1 eq), 2-[(4-bromo-5,6-dimetil-indol-1- il)metoxi]etil-trimetil-silano (406 mg, 1,14 mmol, 1,1 eq), Pd2(dba)3 (191 mg, 208 umol, 0,2 eq), RuPhos (194 mg, 416 umol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (847 mg, 2,60 mmol,
2,5 eq) em tolueno (30 mL) foi desgaseificado e, então, aquecido até 90°C por 8 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EtOAc/MeOH 50/1 a 10/1) para dar terc-butil 4-[7-[5,6-dimetil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indol-4-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (106 mg, 135 umol, 13% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 706.
[02008] Etapa B: terc-butil 4-[7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[7-[5,6-dimetil-1-(2- trimetilsililetoximetil)indol-4-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (70 mg, 99,2 umol, 1 eq) em DMF (0,35 mL) foi adicionado TBAF (1 M em THF, 496 uL, 5 eq) seguido de etano-1,2-diamina (8,94 mg, 149 umol, 9,95 uL, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 85°C por 3 horas. Após conclusão, a mistura foi diluída com EtOAc (3 mL) e água (2 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC-prep (DCM/MeOH 10/1) para dar terc- butil 4-[7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (50 mg, 60,8 umol, 61% rendimento, 70% de pureza) como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
576.
[02009] Etapa C: 7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de terc- butil 4-[7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (45 mg, 78,2 umol, 1 eq) em DCM (70 uL) foi adicionado TFA (89,1) mg, 782 umol, 57,9 uL, 10 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar 7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina
(60 mg, bruto, 2 TFA) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02010] Etapa D: 1-[4-[7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona. A uma solução de 7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2- il]metoxi]-4-piperazin-1-il-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (55 mg, 78,2 umol, 1 eq, 2 TFA) e TEA (158 mg, 1,56 mmol, 218 uL, 20 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado prop-2-enoil prop-2-enoato (9,86 mg, 78,2 umol, 1 eq) gota a gota a -40°C. A mistura foi agitada a 40°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com MeOH (0,5 mL), diluída com água (5 mL) e depois extraída com DCM (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 100/1 a 10/1) e HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 16%-43%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 aquoso saturado e extraídas com DCM (2 × 15 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar o composto do título 1-[4-[7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-1-il]prop-2-en-1- ona (EXEMPLO 457, 9,81 mg, 18,3 umol, duas etapas 23% de rendimento, 98,8% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 530.
[02011] Condição SFC: OJ-3S_3_5_40_3ML Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[02012] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 (br s, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,07 - 7,03 (m, 1H), 6,60 (dd, J = 10,8, 16,8 Hz, 1H), 6,53 - 6,48 (m, 1H), 6,34 (dd, J = 2,0, 16,9 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 2,0, 10,4 Hz, 1H), 4,49 - 4,10 (m, 4H), 3,81 (br s, 2H), 3,76 - 3,38 (m, 8H), 3,13 (br t, J = 7,2 Hz, 1H), 3,02 - 2,56 (m,
3H), 2,50 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,34 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,06 (m, 1H), 1,84 - 1,71 (m, 3H).
EXEMPLO 458 2-((S)-1-(but-2-inoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02013] Etapa A: 1-bromo-8-metilnaftaleno: A uma solução de 1,8- dibromonaftaleno (33,8 g, 118 mmol) em THF (200 mL) resfriada até -78°C foi adicionado butillítio (49,6 mL, 124 mmol) a uma taxa tal que a temperatura interna não ultrapassasse -69°C. Após adição completa, a reação foi resfriada até -78°C e iodeto de metila (14,8 ml, 236 mmol) foi adicionado em um bolus, de modo que a temperatura interna aumentasse até -40°C. Após adição de iodeto de metila, o banho de gelo seco/acetona foi removido e a reação aquecida até a temperatura ambiente. A reação foi em seguida derramada em salmoura e a camada aquosa extraída com EtOAc (300 mL) e os orgânicos separados. Os orgânicos foram a seguir secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo e o resíduo foi cromatografado usando hexanos como eluente para dar um sólido branco (24 g). O sólido foi a seguir transformado em pasta em IPA (cerca de 60 mL) e a pasta aquecida até 60°C, em cujo ponto os sólidos dissolveram. A solução foi removida do aquecimento e resfriada até a temperatura ambiente durante 2 h. A pasta resultante foi filtrada e os sólidos secos in vacuo para dar 1-bromo-8-metilnaftaleno (16 g, 72,4 mmol, 61% de rendimento) >95% de pureza.
[02014] Etapa B: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Uma solução de xantphos (4,5 g, 7,8 mmol) e Pd2(dba)3 (3,5 g, 3,9 mmol) em dioxano (100 mL) foi desgaseificada com Argônio por 15 minutos, seguido por aquecimento da solução por 20 minutos a 100°C. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente e benzil (S)-2- (cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (9,8 g, 19 mmol), 1-bromo-8- metilnaftaleno (13 g, 58 mmol) e Cs2CO3 (32 g, 97 mmol), Pd2(dba)3 (3,5 g, 3,9 mmol) foram adicionados à solução e a mistura foi desgaseificada por um adicional de 20 minutos com Argônio e a reação aquecida até 100°C durante a noite. A reação foi a seguir resfriada até a temperatura ambiente e filtrada através de papel GFF e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi depois cromatografado 3 vezes usando 1 --> 10% (MeOH+2% NH4OH)/DCM para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (7,8 g 12 mmol, 62% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 646,3 [M+H]+.
[02015] Etapa C: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (7,8 g, 12 mmol) em EtOH/THF 1:1 (100 mL) foi desgaseificada com N2 por 5 minutos seguido por adição de Pd/C (2,6 g, 2,4 mmol). A pasta foi depois desgaseificada sob vácuo e preenchida com H2 (3X). No terceiro enchimento, a mistura foi agitada sob um balão de hidrogênio durante a noite. A pasta foi novamente desgaseificada com N2 e a pasta filtrada através de celite. O filtrado combinado foi concentrado in vacuo e os sólidos cromatografados usando 1--> 10% (MeOH+2% NH4OH)/DCM como eluente para dar 2-((S)-4-(7- (8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (5,0 g, 9,8 mmol, 81% de rendimento).
[02016] Etapa D: 2-((S)-1-(but-2-inoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: A 0°C, a um RBF de 25 mL contendo N,N-dimetilformamida (1.954 µl, 0,391 mmol) foi adicionado 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (200 mg, 0,391 mmol) e trietilamina (136 µl, 0,977 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido but-2-inoico (49,3 mg, 0,586 mmol) era adicionado em uma porção. Anidrido cíclico de ácido 1- propanofosfônico (175 µl, 0,293 mmol) foi adicionado lentamente à mistura agitada. A reação foi deixada agitar à rt por 18 h. Foi adicionada água e os sólidos foram filtrados. Os sólidos foram purificados por sílica gel (5-18% MeOH em DCM com 0,25% NH4OH) para fornecer o composto do título 2-((S)-1-(but-2- inoil)-4-(7-(8-metilnaftaleno)-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 458, 110 mg, 0,190 mmol, 49% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 578,3 [M+H] +.
EXEMPLO 459
2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1)- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02017] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-4-(dimetilamino)but-2-enoil)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Uma mistura agitada de 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (100 mg, 0,1954 mmol), ácido (E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (37,86 mg, 0,2932 mmol) e N,N- dimetilformamida (2 mL, 25,58 mmol) foi resfriaa em banho de gelo-sal e trietilamina (0,02724 mL, 0,1954 mmol) foi adicionada de uma só vez, seguida por 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido, 50% em EtOAc (0,1745 mL, 0,2932 mmol). A mistura de reação foi deixada aquecer até a rt durante 5 min., depois agitada à rt por 3 h. A mistura de reacção foi particionada entre EtOAc (50 mL) e 0,5M Na2CO3 0,5 (20 mL), as fases orgânicas foram separadas, a camada orgânica foi lavada com água e salmoura (10 mL cada),
seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. A cromatografia em sílica gel em 5 a 10% MeOH + 0,5% NH4OH em DCM deu o produto bruto que foi purificado em fase reversa, Gilson, 5 a 95% MeCN +0,1% TFA em água. As frações alvo foram combinadas, basificadas com 2 M Na2CO3 e extraídas com DCM (3*20 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (10 mL), secos sobre Na 2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo sólido foi dissolvido em DCM (3 mL), filtrado e evaporado para produzir o composto do título desejado como sólido incolor (EXEMPLO 459, 40 mg, 33%). ESI+APCI MS m/z 623,3 [M+H]+.
EXEMPLO 460 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-morfolinobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila
0 °C, 0,5 h Cs2CO3, tolueno, 90°C, 12hrs, 63% 0 °C, 0,5 hr Duas etapas 16%
[02018] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 500 mg, 989 umol, 1,0 eq), Pd2(dba)3 (181 mg, 198 umol, 0,20 eq), Xantphos (172 mg, 297 umol, 0,30 eq) e Cs2CO3 (967 mg, 2,97 mmol, 3,0 eq) em tolueno (5,0 mL) foi adicionado 1-bromo-8-metil-naftaleno (Intermediário 69, 284 mg, 1,29 mmol, 1,30 eq). A mistura foi agitada a 90°C por 12 horas. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL × 4). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (C18, 0,1% em ácido fórmico, 0-70% acetonitrila) para dar o produto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (400 mg, 619 umol, 63% de rendimento) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[02019] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (700 mg, 1,08 mmol, 1,0 eq) e NH3•MeOH (20,0 mL, 30% de pureza) em metanol (20,0 mL) foi adicionado Pd/C (200 mg, 10% de pureza). A mistura foi purgada por nitrogênio por 3 vezes. Em seguida, a mistura foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (15 Psi) a 25°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de celite, a torta de filtro foi lavada com tetra- hidrofurano (20,0 mL). O licor mãe foi coletado e concentrado sob vácuo para dar o produto 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (500 mg, 977 umol, 90% de rendimento) como óleo amarelo.
[02020] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 3,2, 7,2 Hz, 1H), 7,43 - 7,37 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 2H), 4,43 - 4,33 (m, 1H), 4,22 (dd, J = 6,8, 18,0 Hz, 1H), 4,17 - 4,08 (m, 1H), 4,07 - 3,89 (m, 1H), 3,89 - 3,70 (m, 2H), 3,52 - 3,45 (m, 2H), 3,38 - 3,20 (m, 1H), 3,19 - 3,04 (m, 4H), 3,03 - 2,94 (m, 2H), 2,93 - 2,82 (m, 4H), 2,70 - 2,60 (m, 1H), 2,60 - 2,49 (m, 3H), 2,47 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,31 - 2,22 (m, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,88 - 1,76 (m, 3H).
[02021] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (250 mg, 489 umol, 1,0 eq) e piridina (309 mg, 3,91 mmol, 316 uL, 8,0 eq) em diclorometano (4,0 mL) foi adicionado cloreto de (E)- 4-bromobut-2-enoil (359 mg, 1,95 mmol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar o produto 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil))-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-
il]acetonitrila (330 mg, bruto) como óleo amarelo. O produto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 658.
[02022] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-morfolinobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2- enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, bruto) e K2CO3 (630 mg, 4,55 mmol, 10,0 eq) em diclorometano (2,0 mL) foi adicionada morfolina (238 mg, 2,73 mmol, 241 uL, 6,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 12 horas. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN]; B%: 50%-80%, 12 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-1-[(E)-4-morfolinobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 460, 48,2 mg, 72,5 umol, 16% de rendimento) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 665.
[02023] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 7,6, 15,2 Hz 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 7,02 - 6,91 (m, 1H), 6,55 - 6,39 (m, 1H), 5,23 - 4,47 (m, 1H), 4,40 - 4,33 (m, 1H), 4,31 - 4,19 (m, 1H), 4,19 - 4,09 (m, 2H), 4,07 - 3,83 (m, 2H), 3,81 - 3,64 (m, 5H), 3,59 - 3,40 (m, 2H), 3,24 - 3,13 (m, 4H), 3,12 - 2,94 (m, 3H), 2,92 (s, 3H), 2,86 - 2,76 (m, 1H), 2,75 - 2,54 (m, 3H), 2,50 (br s, 4H), 2,48 - 2,45 (m, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,10 - 2,00 (m, 1H), 1,87 - 1,71 (m, 3H).
EXEMPLO 461
2-[(2R)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila 1, DIEA, DMAC 0 – 25 °C, 1,5 h 2, CbzCl 0 – 25 °C, 2,5 h 79%
1. HCl.dioxano dioxano 0 - 25 °C, 0,5 h Cs2CO3, 77% Cs2CO3, tolueno, tolueno, 90°C, 8h, 31% 90°C, 7h, 66% - 40 °C, 0,5 h 16%
[02024] Etapa A: terc-butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de terc-butil 2,4-dicloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3 g, 9,86 mmol, 1 eq) em DMAc (60 mL) foi adicionado DIEA (3,82 g, 29,6 mmol, 5,15 mL, 3 eq) e 2-piperazin-2-ilacetonitrila (Intermediário 62, 2,15 g, 10,9 mmol, 1,1 eq, 2HCl) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1,5 horas. Em seguida, adicionou-se à solução DIEA (2,55 g, 19,7 mmol, 3,43 mL, 2 eq) e cloroformato de benzila (2,52 g, 14,8 mmol, 2,10 mL, 1,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por outras 2,5 h. À mistura de reação adicionou-se H2O (40 mL) e acetato de etila (100 mL). A fase orgânica separada foi lavada com 5% de solução aquosa de ácido cítrico (40 mL x 1), solução aquosa saturada de Na2CO3 (40 mL x 1) e salmoura (40 mL x 1), seca sobre sulfato de sódio e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi triturado com metil terc-butil éter (25 mL) para dar um produto puro. terc-butil 4-[4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (4.10 g, 7,62 mmol, 79% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 527.
[02025] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,43 - 7,29 (m, 5H), 5,17 (s, 2H), 4,71 - 4,55 (m, 2H), 4,48 - 4,37 (m, 1H), 4,21 - 3,97 (m, 2H), 3,92 - 3,67 (m, 2H), 3,40 – 3,20 (m, 3H), 3,09 (dt, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,88 - 2,57 (m, 4H), 1,47 (s, 9H).
[02026] Condição SFC (40935): Coluna: Chiralcel OD - 3 50 × 4,6 mm I.D., 3 um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm.
[02027] Etapa B: terc-butil 4-[(3R)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato. terc-Butil 4-[4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2.20 g, 4,17 mmol, 1 eq) foi separado por SFC (coluna: OD (250 mm * 30 mm, 10um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O MeOH]; B%: 40% - 40%, 3,1 min.: 180 min.). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil 4-[(3R)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidina-7-carboxilato (940 mg, 1,78 mmol, 43% de rendimento, 99,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 527.
[02028] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OD - 3 50 × 4,6 mm I.D., 3 um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm.
[02029] Etapa C: terc-Butil 4-[(3R)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma mistura de terc-butil 4-[(3R)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (290 mg, 550 umol, 1 eq), [(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (127 mg, 1,10 mmol, 131 uL, 2 eq), Pd2(dba)3 (60,5 mg, 66,0 umol, 0,12 eq), RuPhos (51,4 mg, 110 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (448 mg, 1,38 mmol, 2,5 eq) em tolueno (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 7 horas sob atmosfera de N 2. À mistura de reação foi adicionada H2O (25 mL x 1) e acetato de etila (25 mL x 2). A fase orgânica separada foi lavada com salmoura (100 mL × 1), seca sobre sulfato de sódio e depois filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com acetato de etila (50 mL) e acidificado com solução aquosa de HCl (1 mol/L) até pH = 3 ~ 4. À camada de água separada foi adicionado acetato de etila (60 mL) e basificada com solução de Na2CO3 aquosa saturada até pH = 8 ~ 9. A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. terc- Butil 4-[(3R)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (225 mg, 0,36 mmol, 66% de rendimento, 97,7% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 606.
[02030] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,47 - 7,30 (m, 5H), 5,19 (s, 2H), 4,73 - 4,52 (m, 2H), 4,44 - 4,26 (m, 2H), 4,22 - 4,14 (m, 1H), 4,03 - 3,74 (m,
3H), 3,41 - 3,21 (m, 3H), 3,08 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,97 (dt, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,89 - 2,53 (m, 5H), 2,46 (s, 3H), 2,38 - 2,10 (m, 2H), 2,08 - 2,03 (m, 1H), 1,89 - 1,65 (m, 3H), 1,48 (s, 9H).
[02031] Condição SFC: coluna: Chiralpak AD - 3 50 × 4,6 mm ID, 3um, fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, vazão: 3 mL / min, comprimento de onda: 220 nm.
[02032] Etapa D: benzil (2R)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[(3R)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1- il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (620 mg, 1,02 mmol, 1 eq) em dioxano (12 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 12,4 mL, 48,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 h. O líquido foi decantado e o resíduo foi concentrado sob vácuo. (2R)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (470 mg, bruto, HCl) foi obtido como um óleo amarelo que foi dissolvido em DCM (10 mL). A mistura foi basificada com solução aquosa saturada de carbonato de sódio até pH = 9. A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (5 mL × 1), filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo que era suficientemente puro sem purificação adicional. Benzil (2R)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 718 umol, 77% de rendimento, 90,8% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 506.
[02033] Etapa E: benzil (2R)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de (2R)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 415 umol, 1 eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (Intermediário 69, 119 mg,
540 umol, 1,3 eq) Pd2(dba)3 (76,1 mg, 83,1 umol, 0,2 eq), Cs2CO3 (406 mg, 1,25 mmol, 3 eq) e Xantphos (72,1 mg, 125 umol, 0,3 eq) em tolueno (7 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas, sob atmosfera de N2. À mistura de reação foi adicionada H2O (20 mL x 1) e a mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 2). Os extratos foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com acetato de etila (50 mL) e acidificado até pH = 3 ~ 4 com solução aquosa de HCl (1 mol/L). À camada de água foi adicionado acetato de etila (60 mL) e basificada até pH = 8 a 9 com solução aquosa saturada de Na2CO3. A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol 50/1 a 5/1). Benzil (2R)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metlpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (86 mg, 0,128 mmol, 31% de rendimento, 96,0 pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[02034] Etapa E: 2-[(2R)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2R)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (130 mg, 201 umol, 1 eq) em MeOH (15 mL) foi adicionado Pd/C (25 mg, 15,5 umol, 10% de pureza) e NH3•MeOH (15,5 umol, 15 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado através de uma almofada de celite. O filtrado foi concentrado sob vácuo. 2-[(2R)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 0,183 mmol, 91% de rendimento, 93,5% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02035] Etapa F: 2-[(2R)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2R)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (100 mg, 195 umol, 1 eq) e TEA (198 mg, 1,95 mmol, 272 uL, 10 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoil (17,7 mg, 195 umol, 15,9 uL, 1 eq) em porção. Após agitação a -40°C por 30 min., a mistura foi extinta com MeOH (2 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, diclorometano/metanol = 10/1 a 10/1). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 25% - 45%, 7,8 min.) e (coluna: Gemini 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 57% - 87%, 12 min.). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para remover acetonitrila e depois liofilizadas. Composto do título 2-[(2R)-4-[7-(8- metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 461, 17,6 mg, 31,0 umol, 16% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 566.
[02036] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OJ-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm.
[02037] 1H NMR (400M Hz, clorofórmio-d) δ = 7,77 - 7,63 (m, 2H), 7,48 - 7,32 (m, 2H), 7,31 - 7,18 (m, 2H), 6,61 (br s, 1H), 6,48 - 6,37 (m, 1H), 5,85 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,27 - 4,49 (m, 1H), 4,45 - 4,33 (m, 1H), 4,33 - 4,06 (m, 4H), 4,05 - 3,62 (m, 3H), 3,61 - 3,34 (m, 2H), 3,33 - 2,99 (m, 5H), 2,94 (s, 3H), 2,88 - 2,77 (m, 1H), 2,75 - 2,57 (m, 2H), 2,54 - 2,44 (m, 3H), 2,30 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 2,15 – 1,95 (m, 1H), 1,95 - 1,79 (m, 3H).
EXEMPLO 462
2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno, 90°C, 8h, 37% -40 °C, 0,5h Duas etapas 15%
[02038] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,27 mmol, 1 eq), 4-bromo-5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (511 mg, 1,65 mmol, 1,3 eq), RuPhos (237 mg, 509 umol, 0,4 eq), Cs2CO3 (1,04 g, 3,18 mmol, 2,5 eq) e Pd2(dba)3 (233 mg, 254 umol, 0,2 eq) em tolueno (20 mL) foi desgaseificada e, em seguida, aquecida até 90°C por 8 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 aquoso saturado. A mistura foi concentrada sob vácuo para remover MeCN e extraída com EtOAc (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (365 mg, 469 umol, 37% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 700.
[02039] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,99 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 5,66 (dd, J = 2,8, 9,6 Hz, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,40 (br dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,26 (br s, 2H), 4,09 - 3,97 (m, 3H), 3,90 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,80 - 3,71 (m, 1H), 3,50 (br t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,25 (br s, 2H), 3,09 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,99 (br t, J = 11,2 Hz, 1H), 2,83 - 2,51 (m, 6H), 2,48 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,31 - 2,24 (m, 1H), 2,21 - 2,13 (m, 1H), 2,11 - 2,06 (m, 1H), 1,90 - 1,69 (m, 8H), 1,52 (s, 9H).
[02040] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1- tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (720 mg, 1,03 mmol, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (4,62 g, 40,5 mmol, 3 mL, 39,4 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 4 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com DCM (10 mL) e neutralizada com NaHCO3 aquoso saturado. Em seguida, a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (880 mg, bruto) como um sólido amarelo que foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 516.
[02041] Etapa C: (2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2- enoil-piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto) e TEA (177 mg, 1,75 mmol, 243 uL) em DCM (4 mL) foi adicionado cloreto de prop-2-enoil (13,2 mg, 145 umol, 11,9 uL), gota a gota a -40°C. Depois de agitar a -40°C por 30 minutos, a mistura foi extinta com NaHCO3 aquoso saturado (1 mL) e extraída com DCM (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 1/0 a 10/1) seguido por HPLC-prep (coluna: Gemini 200*30 10μ; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3) - ACN]; B%: 40%-70%, 6,0 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título (2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-prop-2-enoil-piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 462, 15,6 mg, 27,2 umol, duas etapas 15% de rendimento, 99,6% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:570.
[02042] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[02043] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 10,26 (br s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,57 (br d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 1,2, 16,4 Hz, 1H), 5,83 (br d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,12 - 4,38 (m, 2H), 4,28 (s, 2H), 4,23 - 3,84 (m, 4H), 3,73 - 3,40 (m, 3H), 3,32 (br s, 1H), 3,10 (br t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,98 - 2,61 (m, 5H), 2,48 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,32 - 2,24 (m, 1H), 2,11 - 1,99 (m, 1H), 1,91 - 1,78 (m, 3H).
EXEMPLO 463
(S,E)-3-((4-(3-(cianometil)-4-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)piperazin-1-il)-7-(8- metilnaftalen-1-ilo))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N- dimetilpropanamida
[02044] Etapa A: terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato: Benzil (S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato cloridrato (10 g, 34 mmol) em DMA (68 ml, 34 mmol). À solução foi a seguir adicionado terc-butil 2,4- dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (9,3 g, 30 mmol) seguido por Base de Hunig (24 ml, 135 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi depois derramada em água básica e extraída com MTBE. Os orgânicos foram lavados com água adicional, salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo. O concentrado foi, então, cromatografado usando 10→70% de EtOAc/Hexano como eluente para dar terc- butil (S)-4-(4-((benziloxi) carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-
hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (12 g, 67% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 580,3 [M+H]+.
[02045] Etapa B: benzil 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: Terc-butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato (1,5 g, 2,8 mmol) foi dissolvido em DCM (28 ml, 2,8 mmol) e tratado com solução de Ácido Clorídrico (4,0 M em 1,4-dioxano) (3,6 ml, 14 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Os orgânicos foram lavados com NaOH 1M. A camada aquosa foi extraída com DCM (2X). Os orgânicos combinados foram secos sobre Na2SO4, concentrados in vacuo e levados adiante como benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato bruto (1,2 g, 99% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 427,2 [M+H]+.
[02046] Etapa C: benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (0,51 g, 0,56 mmol) e Xantphos (0,54 g, 1,1 mmol) foram dissolvidos em 1,4-dioxano (28 ml, 2,8 mmol) e purgados sob Argônio por 5 minutos seguido de agitação a 100°C sob Argônio por 15 minutos. A reação foi a seguir resfriada até a temperatura ambiente. À reação foi adicionado benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,2 g, 2,8 mmol), 1-bromo-8-metilnaftaleno (1,9 g, 8,4 mmol) e Carbonato de Césio (2,7 g, 8,4 mmol) sob Argônio. A reação foi tampada sob Argônio e agitada a 100°C durante a noite. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e foi filtrada através de papel GF/F. O filtrado foi concentrado in vacuo e purificado por cromatografia de fase normal no CombiFlash usando 0% →75% de Hexanos/EtOAc como o eluente para dar benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,45 g, 28% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
[02047] Etapa D: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(3-(dimetilamino)-3- oxopropoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 3,4-di-hidropirazina-1 (2H)-carboxilato: Em um tubo de micro-ondas, uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 0,441 mmol) em dioxano (4.408 µl, 0,441 mmol) foi espargida com Argônio por 5 minutos. 3-Hidroxi-N,N-dimetilpropanamida (155 mg, 1,32 mmol), Carbonato de Césio (431 mg, 1,32 mmol), Metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i- propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (37,5 mg, 0,0441 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e a reação espargida por um adicional de 5 minutos com Argônio. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 1 hora. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionado Acetato de Etila. A reação foi filtrada através de papel GF/F e o filtrado concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash eluindo com 0 →20% de MeOH + 2% de NH4OH/DCM. Todas as frações contendo o produto limpo desejado foram combinadas e concentradas para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(3-(dimetilamino)-3-oxopropoxi)-7-(8-metilnaftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-3,4-di-hidropirazina-1(2H)- carboxilato (140 mg, 49,2% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 648,3 [M+H]+.
[02048] Etapa E: (S)-3-((4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida: Solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(3-(dimetilamino)-3-oxopropoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (140 mg, 0,216 mmol) em EtOH (2.161 µl, 0,216 mmol) e THF (2.161 uL, 0,216 mmol) foi purgada com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado Paládio (57,5 mg, 0,0540 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e a reação foi tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução foi agitada sob uma atmosfera de H2 durante a noite. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer (S)-3-((4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen- 1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida (111 mg, 100,0% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 514,3 [M+H]+.
[02049] Etapa F: (S,E)-3-((4-(3-(cianometil)-4-(4-(dimetilamino)but-2- enoil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida: A um frasco de fundo redondo de 25 mL contendo diclorometano (2.161 µl, 0,216 mmol), resfriado até 0°C foi adicionado (S)-3-((4-(3-(cianometil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7, 8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida (111 mg, 0,216 mmol) e base de Hunig (226 µl, 1,30 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido (E)-4-(dimetilamino) but-2-enoico (167 mg, 1,30 mmol) era adicionado em uma porção. Em seguida, anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (772 µl, 1,30 mmol) foi adicionado lentamente à mistura agitada. A reação foi agitada por 2 horas a 0°C. A reação foi tratada com água básica e a camada aquosa extraída com EtOAc (3X). Os orgânicos combinados foram concentrados in vacuo e purificados em Gilson (HPLC prep) eluindo com 5 →95% de ACN + 0,1% TFA/água + 0,1% TFA. As frações contendo produto foram combinadas, diluídas com NaOH 1M e a camada aquosa extraída com DCM. Os orgânicos foram secos sobre Na 2SO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título (S,E)-3-((4-(3-(cianometil)- 4-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi)-N,N-dimetilpropanamida (17,6 mg, 13,0% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 625,4 [M+H]+.
EXEMPLO 464
2-((S)-1-acriloil-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02050] Etapa A: Benzil (S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (200 mg, 0,396 mmol), Cs2CO3 (644 mg, 1,98 mmol), 1,8- dibromonaftaleno (339 mg, 1,19 mmol), Pd2(dba)3 (72,4 mg, 0,0791 mmol) e XANTPHOS (91,6 mg, 0,158 mmol) foram diluídos com tolueno (1.582 µl, 0,396 mmol). A reação foi purgada com argônio, vedada e aquecida até 100°C. Após agitação por 23 horas, a reação foi resfriada e diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 1-10% de metanol/DCM (1% NH4OH como aditivo) para fornecer benzil (S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina- 1-carboxilato (68 mg, 24,2% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 712,2 [M+H]+.
[02051] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrile: Benzil (S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (25 mg, 0,035 mmol) foi diluído com TFA (2 mL), colocado sob nitrogênio e aquecido até 90°C. Após agitar por 2 horas, a reação foi resfriada e concentrada. O material foi diluído com DCM e lavado com bicarbonato de sódio saturado. O DCM foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% NH4OH como aditivo) para fornecer 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (8 mg, 39% de rendimento) ESI-APCI MS m/z 578,2 [M+H]+.
[02052] Etapa C: 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (8 mg, 0,014 mmol) foi diluído com DCM (200 µL) seguido pela adição de cloreto de acriloíla (1,4 mg, 0,015 mmol) e DIEA (4,8 µl, 0,028 mmol). Após agitação por 12 horas, a reação foi diluída com carbonato de sódio saturado e extraída duas vezes com DCM. O DCM foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% NH4OH como aditivo) para proporcionar o composto do título 2-((S)-1-acriloil-4- (7-(8-bromonaftalen-1-il))-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 464, 6 mg, 69% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 632,2 [M+H]+.
EXEMPLO 465 (R)-4-acriloil-1-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-2-carbonitrila
[02053] Etapa A: benzil (R)-4-(4-(terc-butoxicarbonil)-2-cianopiperazin-1- il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (6H)-carboxilato: Uma mistura de benzil 2,4-dicloro-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (8H)-carboxilato (700 mg, 2,07 mmol), R-1-N-Boc-3-cianopiperazina (656 mg, 3,10 mmol), N,N- dimetilacetamida (1 ml) e N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,433 ml, 2,48 mmol) foi agitada a 60°C sob atmosfera de nitrogênio por 48 horas . A mistura de reação foi resfriada, particionada entre MTBE (50 mL) e 0,2 M Na 2CO3 (15 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (10 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O material cristalizou mediante diluição com MTBE (5 mL). O licor mãe foi decantado e o sólido foi lavado com MTBE (2*1 mL) seguido por purificação em sílica gel usando 40 a
60% de EtOAc/hexano como eluente para dar produto (308 mg, 29%). ESI+APCI MS m/z 513,2 [M+H]+.
[02054] Etapa B: benzil 4-((R)-4-(terc-butoxicarbonil)-2-cianopiperazin-1- il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7 (6H)- carboxilato: Uma mistura de benzil (R)-4-(4-(terc-butoxicarbonil)-2- cianopiperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (308 mg, 0,600 mmol), Cs2CO3 (587 mg, 1,80 mmol), meanossulfonato(2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos-Pd-G4, 51,1 mg, 0,0600 mmol), (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metanol (346 mg, 3,00 mmol) e 1,4-dioxano (4 ml) foi purgada com N2 e o frasco foi tampado e a reação agitada a 70°C por 2 horas. A mistura de reação foi particionada entre água (5 mL) e EtOAc (20 mL) e a camada orgânica foi separada. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura (3 mL cada), secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel usando 4% de MeOH + 0,4% NH4OH/DCM como eluente para dar o produto como uma mistura de isômeros (214 mg de ~60% de pureza, 36%). ESI+APCI MS m/z 592,3 [M+H]+.
[02055] Etapa C: terc-butil (R)-3-ciano-4-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: Uma mistura de benzil 4-((R)-4-(terc-butoxicarbonil)-2-cianopiperazin-1-il)-2- ((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato bruto (214 mg, 0,326 mmol), metanol (7 ml, 0,326 mmol) e paládio em carbono (20 mg, 5%, Tipo Degussa E101 NO/W) foi desgaseificada e agitada sob atmosfera de hidrogênio por 1,5 horas. A mistura de reação foi filtrada através de Celite (2 mL), a celite lavada com MeOH (3*3 mL) e os orgânicos combinados foram evaporados in vacuo para darproduto que foi usado em bruto na reação seguinte. ESI+APCI MS m/z 458,3 [M+H]+.
[02056] Etapa D: terc-butil (R)-3-ciano-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil (R)-3-ciano-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (165 mg, 0,361 mmol), Cs2CO3 (352 mg, 1,08 mmol), dioxano (0,5 mL), 1- iodonaftaleno (0,0790 ml, 0,541 mmol) e metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino- 2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (RuPhos- Pd-G4, 0,1 eq., 30,7 mg, 0,0361 mmol) foi purgada com nitrogênio, o frasco tampado e agitado a 70°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi resfriada e particionada entre EtOAc (20 mL) e água (5 mL) e as camadas separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 4% de MeOH + 0,4% NH4OH/DCM como eluente para dar produto (120 mg, 57%). ESI+APCI MS m/z 584,3 [M+H]+.
[02057] Etapa E: (R)-1-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-2-carbonitrila: O (terc- butil (R)-3-ciano-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi))-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (120 mg, 0,206 mmol) foi dissolvido em diclorometano (0,5 ml) e resfriado até 0°C seguido por adição de cloreto de hidrogênio 4M (1,03 ml, 4,11 mmol) e a reação agitada por 1 h enquanto aquecendo até à temperatura ambiente. A mistura foi evaporada in vacuo e o resíduo foi particionado entre DCM (10 mL) e Na 2CO3 2M (0,5 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram secos sobre Na2CO3, filtrados e evaporados in vacuo. O material foi usado em bruto na próxima reação. ESI+APCI MS m/z 484,2 [M+H]+.
[02058] Etapa F: (R)-4-acriloil-1-(2-((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-2- carbonitrila: Uma solução de (R)-1-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7- (naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-2-
carbonitrila (79 mg, 0,1634 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada até -30oC com agitação seguida de adição de trietilamina (68,31 µl, 0,4901 mmol) e cloreto de acriloíla (26,54 µl, 0,3267 mmol). Após 5 minutos a -30oC, a reação foi extinta por adição de MeOH (0,05 mL) e a reação aquecida até a temperatura ambiente. As fases orgânicas foram em seguida separadas e lavadas com Na 2CO3 0,5M (4 mL), secas sobre Na2CO3 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 4% de MeOH + 0,4% NH4OH/DCM como eluente para dar o composto do título (Exemplo 465, 17 mg, 19%). ESI+APCI MS m/z 538,3 [M+H]+.
EXEMPLO 466 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02059] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 454, usando o Intermediário 66 no lugar de terc-butil 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato na Etapa A.
EXEMPLO 467
2-((S)-1-acriloil-4-(2-((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[02060] 2-((S)-1-acriloil-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila : O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 447 usando benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato no Exemplo 447, Etapa A no lugar de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato no Exemplo 447, Etapa A.
EXEMPLO 468 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02061] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-4,4-difluoro-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 447 usando benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-cloronaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato no Exemplo 447, Etapa A no lugar de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato no Exemplo 447, Etapa A.
EXEMPLO 469 (S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-yl)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indol-4- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[02062] (S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-yl)metoxi)-7-(5,6- dimetil-1H-indol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona: O composto do título é preparado seguindo o EXEMPLO 457, usando o EXEMPLO 139, Etapa B produto 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)etanol no lugar de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol na preparação do Intermediário 66, Etapa E e, em seguida, seguindo o EXEMPLO 457 Etapas B - D.
EXEMPLO 470
(S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-yl)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indazol- 4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)prop-2-en-1-ona
[02063] (S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6- dimetil-1H-indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1- il)prop-2-en-1-ona: O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 453 usando o Exemplo 139, Etapa B produto 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)etanol no lugar de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol na preparação do Intermediário 66, Etapa E e, em seguida, seguindo o Exemplo 453 Etapas B - C.
EXEMPLO 471 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)but- 2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila
HCl-dioxano dioxano t-BuONa, tolueno, 0°C, 10 min., rendimento: 75 Piridina, DCM, 0°C, 30 min.
Duas etapas rendimento: 14%
[02064] cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil. A uma solução de ácido (E)-4- bromobut-2-enoico (500 mg, 3,03 mmol, 1,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado (COCl)2 (4,35 g, 34,3 mmol, 3,0 mL, 11,3 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (500 mg, bruto) foi obtido como um óleo marrom.
[02065] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3- cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,30 g, 2,17 mmol, 1,0 eq) e [(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metanol (500 mg, 4,34 mmol, 515 uL, 2,0 eq) em tolueno (20,0 mL) foi adicionado t-BuONa (417 mg, 4,34 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 min. A mistura de reação foi extinta por adição de salmoura saturada (30,0 mL) a 20°C e extraída com EA (3 × 30,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (30,0 ml), secas sobre
Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 3/1 a EA/MeOH = 10/1). O produto terc-butil(2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,1 g, 1,62 mmol, 75% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 650.
[02066] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-[3-cloro-2- (trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (100 mg, 154 umol, 1,00 eq) em dioxano (0,5 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 1,00 mL, 26,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover dioxano. O resíduo foi diluído com NaHCO3 saturado aquoso (10,0 ml) e extraído com EA (10 ml × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (20,0 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (90,0 mg, bruto) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:550.
[02067] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- (3,3-difluoropirrolidin-1-il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (80,0 mg, 145 umol, 1,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado Py (115 mg, 1,45 mmol, 117 uL, 10,0 eq) e cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (107 mg, 582 umol,
4,0 eq) em DCM (3,0 mL). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após o material de partida ser consumido, então, a uma solução de 3,3-difluoropirrolidina (156 mg, 1,45 mmol, 10,0 eq) em DCM (6,0 mL) foi adicionada a mistura de reação. A mistura foi agitada a 0°C por 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 62%-92%, 12min.). E o resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover o ACN e, então, liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-[3-cloro-2-(trifluorometil)fenil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3,3- difluoropirrolidin-1-il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 471, 15,4 mg, 20,8 umol, 14% de rendimento, 97,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 723.
[02068] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,40 (t, J=8,2 Hz, 1H), 7,30 - 7,26 (m, 1H), 7,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,05 - 6,90 (m, 1H), 6,60 - 6,40 (m, 1H), 5,08 (br s, 1H), 4,39 (br dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,17 (br dd, J=6,8, 10,8 Hz, 1H), 4,1 (br s, 2H), 4,12 - 4,05 (m, 1H), 3,97 (br d, J=10,8 Hz, 2H), 3,70 - 3,53 (m, 1H), 3,35 - 3,25 (m, 3H), 3,17 - 3,07 (m, 2H), 2,96 (br t, J=13,2 Hz, 3H), 2,90 - 2,85 (m, 1H), 2,81 (br t, J = 6,8 Hz, 3H), 2,75 - 2,65 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,40 - 2,27 (m, 3H), 2,15 - 1,95 (m, 1H), 1,95 - 1,72 (m, 5H).
EXEMPLO 472
2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila 2 horas 0°C, 1 hora duas etapas rendimento: 62%
[02069] Cloreto de 2-cloroprop-2-enoil. A uma solução de ácido 2- fluoroprop-2-enoico (400 mg, 4,44 mmol, 1,0 eq) em DCM (1,50 mL) foi adicionado (COCl)2 (846 mg, 6,66 mmol, 583 uL, 1,50 eq) e DMF (32,5 mg, 444 umol, 34,2 uL, 0,10 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Cloreto 2- cloroprop-2-enoil (400 mg, bruto) foi usado para a próxima etapa diretamente.
[02070] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de tert-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (200 mg, 347 umol, 1,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,0 mmol, 2,0 mL, 77,8 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 10 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, bruto, TFA) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02071] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-
2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 339 umol, 1,0 eq, TFA) em DCM (2,0 mL) foi adicionado DIEA (1,11 g, 8,61 mmol, 1,50 mL, 25,4 eq) e cloreto de 2-fluoroprop- 2-enoil (200 mg, 1,84 mmol, 5,43 eq) em DCM (2,0 mL). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)- ACN]; B%: 55%-83%, 12min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- (2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 472, 120 mg, 217 umol, duas etapas 62% de rendimento, 98,9% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 548.
[02072] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,11 (t, J=7,8 Hz, 1H), 7,01 - 6,91 (m, 2H), 5,52 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (dd, J=3,2, 16,8 Hz, 1H), 5,08 - 4,70 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 4,25 - 4,02 (m, 5H), 3,97 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,43 - 3,73 (br s, 1H) 3,32 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,25 - 3,16 (m, 1H), 3,15 - 3,02 (m, 3H), 3,01 - 2,91 (m, 1H), 2,90 -2,80 (m, 2H) 2,79 - 2,60 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,31-2,28 (m, 7H), 2,13 - 1,97 (m, 1H), 1,90 - 1,70 (m, 3H).
EXEMPLO 473 2-[(2S)-1-(2-cloroprop-2-enoil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
0,5 hora 0,5 hora -78°C, 0,5 hora duas etapas 1%
[02073] Cloreto de 2-cloroacriloíla. Uma solução de ácido 2-cloroprop-2- enoico (400 mg, 3,76 mmol, 1,0 eq) e (COCl)2 (715 mg, 5,63 mmol, 493 uL, 1,50 eq) em DCM (1,0 mL) foi agitada a 25°C durante 0,5 hora. Após a conclusão, a mistura de reação não foi processada e usada diretamente para a próxima etapa.
[02074] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (Intermediário 73, 400 mg, 695 umol, 1,0 eq) em DCM (0,50 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,0 mmol, 2,0 mL, 38,9 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura foi concentrada e ajustada com NaHCO3 saturado aquoso para pH~7, então, extraída com DCM (5,0 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (400 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02075] Etapa B: 2-[(2S)-1-(2-cloroprop-2-enoil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, 631 umol, 1,0 eq) e DIEA (245 mg, 1,89 mmol, 330 uL, 3,0 eq) em DCM (1,0 mL) foi adicionado cloreto de 2-cloroprop-2- enoil (236 mg, 1,89 mmol, 3,0 eq) a -78°C. A mistura foi agitada a -78°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, à mistura foi adicionado NaHCO3 saturado aquoso (2,0 ml) e extraída com EA (10,0 mL x 3). O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 53%-83%, 12min.) para dar o composto título 2-[(2S)-1- (2-cloroprop-2-enoil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 473, 4,72 mg, 8,35 umol, duas etapas 1% de rendimento, 99,8% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 564.
[02076] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,11 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,98 - 6,94 (m, 2H), 5,86 - 5,78 (m, 1H), 5,77 - 5,72 (m, 1H), 5,15 - 4,78 (m, 1H), 4,45 - 4,30 (m, 1H), 4,21 - 4,12 (m, 1H), 4,10 - 4,03 (m, 3H), 3,96 (br d, J = 12,4 Hz, 2H), 3,30 (br dd, J = 3,2, 13,6 Hz, 1H), 3,23 - 3,04 (m, 4H), 3,04 - 2,54 (m, 6H), 2,50 (br s, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 7H), 2,12 - 2,02 (m, 1H), 1,91 - 1,66 (m, 3H).
EXEMPLO 474 2-((S)-1-(4-hidroxibut-2-inoil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen- 1-il))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
Cs2CO3, tolueno, 90°C, 2h, 46%
[02077] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (Intermediário 65, 1 g, 1,58 mmol, 1 eq) e 1-bromonaftaleno (655 mg, 3,16 mmol, 440 uL, 2 eq) em tolueno (20 mL) foi adicionado Pd 2(dba)3 (145 mg, 158 umol, 0,1 eq), Ruphos (148 mg, 316 umol, 0,2 eq), Cs2CO3 (1,55 g, 4,75 mmol, 3 eq) em uma porção. A mistura foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, então, aquecida até 90°C e agitada por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com água (15 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 mL x 1), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% TFA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (6 mL) e extraída com acetato de etila (100 mL x 2). As camadas orgânicas separadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (515 mg, 726 umol, 45,9% de rendimento, 89,1% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 632.
[02078] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1 g, 1,58 mmol, 1 eq) em MeOH (60 mL) foi adicionado Pd/C (500 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (20%, 50 mL) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (680 mg, 1,26 mmol, 80% de rendimento, 92,3% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 498.
[02079] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,26 - 8,19 (m, 1H), 7,89 - 7,83 (m, 1H), 7,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,53 - 7,47 (m, 2H), 7,43 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,16 - 7,12 (m, 1H), 4,41 (dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,16 (dd, J = 7,2, 10,8 Hz, 1H), 4,01 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,95 - 3,82 (m, 1H), 3,44 - 3,21 (m, 3H), 3,18 - 2,97 (m, 4H), 2,95 - 2,76 (m, 3H), 2,74 - 2,63 (m, 1H), 2,55 (dd, J = 1,2, 5,6 Hz, 2H), 2,51 - 2,46 (m, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,12 - 1,99 (m, 1H), 1,88 - 1,80 (m, 3H).
[02080] Etapa C: 2-[(2S)-1-(4-hidroxibut-2-inoil)-4-[2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de ácido 4-[terc- butil(dimetil)silil]oxibut-2-inoico (172 mg, 803 umol, 2 eq) e DIEA (155 mg, 1,21 mmol, 210 uL, 3 eq) em MeCN (5 mL) foi adicionado MsCl (92,1 mg, 803 umol, 62,2 uL, 2 eq) a 0°C. Após agitação a 0°C por 20 minutos, foi adicionado à mistura 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-
5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 402 umol, 1 eq) e a mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida até 80°C e agitada por 10 horas. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC prep (coluna: Boston Green ODS 150*30 5u; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 25% - 45%, 10 min.) e posteriormente purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45% - 75%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-1-(4-hidroxibut-2-inoil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 474, 1,43 mg, 2,39 umol, 1% de rendimento, 96,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 580.
[02081] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,22 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,90 - 7,82 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,26 - 4,89 (m, 1H), 4,60 - 4,34 (m, 4H), 4,33 - 4,16 (m, 3H), 4,14 - 3,96 (m, 1H), 3,95 - 3,80 (m, 1H), 3,78 - 3,50 (m, 2H), 3,50 - 3,28 (m, 2H), 3,27 - 3,07 (m, 3H), 3,06 - 2,82 (m, 3H), 2,80 - 2,64 (m, 2H), 2,51 (d, J=12,4 Hz, 3H), 2,38 - 2,24 (m, 1H), 2,14 - 2,00 (m, 1H), 1,97 - 1,85 (m, 2H).
EXEMPLO 475
2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2,3,3-trideuterioprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila 5 – 80 °C, 13,5 hrs 20% de rendimento
[02082] Etapa A: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2,3,3-trideuterioprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de deutério 2,3,3-trideuterioprop- 2-enoato (68,8 mg, 904 umol, 3 eq) e DIEA (234 mg, 1,81 mmol, 315 uL, 6 eq) em MeCN (3 mL) foi adicionado MsCl (69,1 mg, 603 umol, 46,7 uL, 2 eq) a 5°C durante 0,5 hora. À reação resultante foi adicionado 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 301 umol, 1 eq). A mistura de reação foi agitada a 5°C por 1 hora. Então, a mistura de reação foi aquecida até 80°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por água (0,5 mL). A mistura de resíduos foi purificada por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50%-80%, 12min.) para dar o composto título 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 1-(2,3,3-trideuterioprop-2-enoil)piperazin-2-il] acetonitrila (EXEMPLO 475, 34,2 mg, 60,2 umol, 20% rendimento, 97,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 555.
[02083] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,28 - 8,16 (m, 1H), 7,91 - 7,83 (m, 1H), 7,63 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,48 (m, 2H), 7,45 (t, J=7,6 Hz, 1H),
7,16 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,28 - 4,94 (m, 1H), 4,41 (dd, J=5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,36 - 4,24 (m, 2H), 4,23 - 4,11 (m, 2H), 4,04 (br d, J=11,6 Hz, 2H), 3,73 - 3,25 (m, 3H), 3,22 - 2,74 (m, 7H), 2,69 (td, J=6,4, 13,2 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,36 - 2,24 (m, 1H), 2,15 - 2,02 (m, 1H), 1,83 - 1,77 (m, 3H).
EXEMPLO 476 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoropirrolidin-1-il)but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila
12 horas (E)-4-bromobut-2-enoil cloreto HCl.dioxano, dioxano 0°C, 0,5 hora Piridina, DCM 0°C, 0,5 hora 0°C, 0,5 hora três etapas 56%
[02084] Inserir: cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoíl. Uma solução de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (1,0 g, 6,06 mmol, 1,0 eq) em (COCl)2 (14,5 g, 114 mmol, 10,0 mL, 18,9 eq) e DCM (10,0 mL) foi agitada a 70°C por 2 horas. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto cloreto de (E)-4- bromobut-2-enoil (1,0 g, bruto) foi obtido como óleo amarelo. O composto bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02085] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (Intermediário 73, 200 mg, 347 umol, 1,0 eq) em dioxano (2,0 mL) foi adicionado HCl-dioxano (4,0 M, 2,0 mL, 23,0 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi ajustado pH=7 com solução saturada de NaHCO3 aquosa e extraída com EA (5,0 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O produto 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (160 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02086] Etapa B: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(2,3-dimetilfenil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (160 mg, 336 umol, 1,0 eq) em DCM (6,0 mL) foi adicionado Py (532 mg, 6,73 mmol), 543 uL, 20,0 eq) e cloreto de (E)-4- bromobut-2-enoil (246 mg, 1,35 mmol, 4,0 eq) em DCM (2,0 mL). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de MeOH (5,0 mL) a 0°C e, então, concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(2,3- dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem mais purificação. LCMS [ESI, M+1]: 622.
[02087] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3- fluoropirrolidin-1- il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-1-[(E)-4- bromobut-2-enoil]-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 321 umol, 1,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado K2CO3 (88,8 mg, 642 umol, 2,0 eq), KI (2,67 mg, 16,1 umol, 0,05 eq)) e 3-fluoropirrolidina (403 mg, 3,21 mmol, 10,0 eq, HCl sal). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi ajustado pH=7 com uma saturada de solução aquosa de NaHCO 3 e extraída com EA (10,0 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,04% NH3H2O)-ACN]; B%: 60% -84%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida e, então, liofilizado para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(2,3-dimetilfenil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3- fluoropirrolidin-1-il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 476, 123 mg, 193 umol, 56% de rendimento em três etapas, 99,2% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 631.
[02088] 1H NMR (400MHz, Clorofórmio-d) δ 7,16 - 7,07 (m, 1H), 7,02 - 6,92 (m, 3H), 6,59 - 6,41 (m, 1H), 5,31 - 5,10 (m, 1H), 5,09 - 4,46 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,26 - 3,83 (m, 6H), 3,80 - 3,45 (m, 1H), 3,42 - 3,24 (m, 3H), 3,23 - 3,15 (m, 1H), 3,14 - 3,03 (m, 3H), 3,02 - 2,83 (m, 4H), 2,82 - 2,62 (m, 4H), 2,54 - 2,49 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,32 - 2,26 (m, 6H), 2,25 - 2,17 (m, 1H), 2,16 - 2,09 (m, 1H), 2,08 - 2,02 (m, 1H), 1,92 - 1,78 (m, 4H).
EXEMPLO 477 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2,3,3-trideuterioprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila
5 - 80 °C, 13,5 h 9%
[02089] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2,3,3-trideuterioprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de deutério 2,3,3-trideuterioprop-2- enoato (56,6 mg, 744 umol, 3 eq) e DIEA (481 mg, 3,72 mmol, 648 uL, 15 eq) em ACN (3 mL) foi adicionado MsCl (56,8 mg, 496 umol, 38,4 uL, 2 eq) a 5°C, a mistura foi agitada a 5°C por 0,5 hora. Em seguida, à mistura foi adicionado 2- [(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (Intermediário 71, 150 mg, 248 umol, 1 eq, 2 HCl), a mistura resultante foi agitada a 5°C por 1 hora. Depois a mistura foi aquecida a 80°C e agitada a 80°C por 12 horas. A mistura foi extinta por Água (0,5 mL). A mistura de reação foi purificada por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm* 10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50% - 80%, 10 min.) para dar o composto do título 2- [(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2,3,3-trideuterioprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 477, 13,0 mg, 21,6 umol, 9% de rendimento, 98,2% de pureza) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 589.
[02090] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 8,0, 13,2 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 5,10 (br s, 1H), 4,49 - 4,33 (m, 2H), 4,21 - 4,01 (m, 3H), 3,96 - 3,79 (m, 2H), 3,60 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,44 (br d, J
= 13,6 Hz, 1H), 3,32 - 2,97 (m, 5H), 2,88 - 2,53 (m, 4H), 2,48 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,29 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,87 - 1,71 (m, 3H).
EXEMPLO 478 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila
[02091] Cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil. A uma solução de ácido 2- fluoroprop-2-enoico (400 mg, 4,44 mmol, 1 eq) em DCM (4 mL) foi adicionado (COCl)2 (846 mg, 6,66 mmol, 583 uL, 1,5 eq) e DMF ( 32,5 mg, 444 umol, 34,2 uL, 0,1 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover uma parte do solvente e dar um resíduo em DCM. O composto cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil (400 mg, bruto) foi obtido como um líquido amarelo e utilizado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02092] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg, 528 umol, 1 eq, HCl) em DCM (5 mL) foi adicionado DIEA (1,73 g, 13,4 mmol, 2,33 mL, 25,4 eq) e cloreto de 2-fluoroprop- 2-enoil (286 mg, 2,64 mmol, 5 eq) em DCM (5 mL). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al 2O3, diclorometano/metanol = 10/1 a 10/1). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)- ACN]; B%: 55% - 85%, 12 min.). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30mm * 4um; fase móvel: [água (FA 0,225%)- ACN]; B%: 20% - 50%, 10,5 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois lioflização. Composto do título 2-[(2S)-4- [7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 478, 24,1 mg, 36,7 umol, 7% de rendimento, 99,1% de pureza, FA) foi obtido como um sólido marrom.
[02093] Condição SFC: "AD - 3S_3_5_40_3ML Coluna: Chiralpak AD - 3 ID de 100 × 4,6 mm, 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm".
[02094] 1H NMR (400 MHz, Acético) δ = 7,82 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,30 (m, 2H), 5,58 - 5,25 (m, 2H), 5,17 - 4,59 (m, 4H), 4,57 - 4,28 (m, 3H), 4,24 - 3,78 (m,
4H), 3,67 - 3,13 (m, 7H), 3,08 (br d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,98 (br d, J = 6,4 Hz, 1H), 2,83 - 2,61 (m, 1H), 2,45 - 2,29 (m, 1H), 2,24 - 2,08 (m, 3H).
EXEMPLO 479 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila Duas etapas 46%
[02095] Etapa A: etil (E)-4-fluorobut-2-enoato. Uma mistura de etil (E)-4- bromobut-2-enoato (2,00 g, 10,4 mmol, 1,43 mL, 1,00 eq) e AgF (3,94 g, 31,1 mmol, 674 uL, 3,00 eq) em acetonitrila (20,0 mL) foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura foi filtrada e lavada com THF (10,0 mL), depois concentrada sob vácuo para dar etil (E)-4-fluorobut-2-enoato (2,50 g, bruto) como um óleo amarelo e usada na próxima etapa sem purificação adicional.
[02096] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ =7,04 - 6,89 (m, 1H), 6,12 (qd, J = 2,0, 16,0 Hz, 1H), 5,14 - 4,94 (m, 2H), 4,22 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,30 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[02097] Etapa B: Ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico. Uma mistura de etil (E)- 4-fluorobut-2-enoato (0,10 g, em bruto) e NaOH (121 mg, 3,03 mmol) em THF (1,00 mL) e H2O (1,00 mL) foi agitada a 25°C por 2 horas. O valor de pH foi ajustado para 1~3 por HCl (1 N, 5,00 mL), extraído com acetato de etila (3 x 10,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar Ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (0,02 g, 192 mmol, duas etapas 46%) como um óleo amarelo e usada na próxima etapa sem purificação adicional.
[02098] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,37 - 7,31 (m, 1H), 7,15 - 7,01 (m, 1H), 6,15 (dd, J=1,6, 16,0 Hz, 1H), 5,22 - 4,96 (m, 2H).
[02099] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (7,32 mg, 70,4 umol, 2 eq) e Py (8,35 mg, 106 umol, 8,52 uL, 3,00 eq) em acetonitrila (1,00 mL) foi adicionado MsCl (8,06 mg, 70,4 umol, 5,45 uL, 2,00 eq) a 0°C. Após agitação a 0°C por 1 hora, 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[((2S)-1- metilpirrolidin-2-il]]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (0,02 g, 35,2 umol, 1,00 eq, HCl) foi adicionado à mistura. A mistura foi agitada a 25°C por 12 h. A mistura foi diluída com água (5,00 mL), extraída com acetato de etila (3 x 5,00 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50% - 80%, 12 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-
enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 479, 3,01 mg, 4,82 umol, 14% de rendimento, 98,9% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 618.
[02100] 1H NMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 12,8 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 7,09 - 6,91 (m, 1H), 6,59 (br d, J = 15,6 Hz, 1H), 5,19 - 5,05 (m, 2H), 4,49 - 4,36 (m, 2H), 4,22 - 3,79 (m, 5H), 3,76 - 2,96 (m, 8H), 2,92 - 2,55 (m, 4H), 2,48 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,29 (br d, J = 9,6 Hz, 1H), 2,06 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 1,83 - 1,71 (m, 3H).
EXEMPLO 480 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoropirrolidin-1-il)but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila
12 horas Piridina, DCM 0°C, 1 hora 0°C, 0,5 hora duas etapas rendimento: 6%
[02101] Inserir: cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil. A uma solução de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (930 mg, 5,64 mmol, 1,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado (COCl)2 (2,90 g, 22,9 mmol, 2,0 mL, 4,05 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (650 mg, bruto) foi obtido como óleo amarelo e usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02102] Etapa A: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (Intermediário 71, 150 mg, 282 umol, 1,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado Py ( 446 mg, 5,64 mmol, 455 uL, 20,0 eq) e cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (207 mg, 1,13 mmol, 4,0 eq) em DCM (1,0 mL). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto 2-[(2S)-1- [(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto) foi obtido como óleo marrom e usado na próxima etapa sem mais purificação. LCMS [ESI, M+1]: 680.
[02103] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoropirrolidin-1- il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-1-[(E)-4- bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 221 umol, 1,0 eq) em DCM (10,0 mL) foi adicionado K2CO3 (366 mg, 2,65 mmol, 12,0 eq)), KI (1,83 mg, 11,0 umol, 0,05 eq) e 3-fluoropirrolidina (277 mg, 2,21 mmol, 10,0 eq, HCl). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi ajustado pH~7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraído com EA (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,04% de NH3•H2O)-ACN]; B%: 60% - 84%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida e depois liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3- fluoropirrolidin-1-il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 480, 9,67 mg, 14,0 umol, 6% de rendimento, 99,2% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 687.
[02104] 1H NMR (400MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 7,05 - 6,92 (m, 1H), 6,57 - 6,42 (m, 1H), 5,32 - 5,11 (m, 1H), 5,10 - 4,50 (m, 1H), 4,47 - 4,35 (m, 2H), 4,19 - 4,00 (m, 2H), 3,95 - 3,75 (m, 2H), 3,65 - 3,55 (m, 1H), 3,47 - 3,28 (m, 3H), 3,24 - 3,05 (m, 4H), 3,04 - 2,86 (m, 4H), 2,85 - 2,71 (m, 2H), 2,70 - 2,50 (m, 3H), 2,47 - 2,45 (m, 3H), 2,32 - 2,15 (m, 2H), 2,14 - 2,02 (m, 2H), 1,87 - 1,67 (m, 4H).
EXEMPLO 481
[02105] 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il)but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila Dicloreto de oxalila HCl.dioxano Dioxano, 25°C, 0,5 hr Duas etapas 6%
[02106] Inserir: cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil. A uma solução de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (1 g, 6,06 mmol, 1,0 eq) em DCM (5,0 mL) foi adicionado dicloreto de oxalil (7,25 g, 57,1 mmol, 5,0 mL, 9,4 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (850 mg, bruto) como óleo amarelo que foi utilizado para a próxima etapa sem purificação adicional.
[02107] Etapa A: Intermediário 71, 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-
il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (310 mg, 414 umol, 1,0 eq) em dioxano (4,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4,0 M, 4,0 mL, 39,0 eq) a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação foi extinta por solução aquosa saturada de NaHCO3 (20,0 mL) e, então, extraída com EA (3 x 40,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa saturada de NaCl (100,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para dar um resíduo 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (250 mg, bruto) como sólido amarelo. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 532.
[02108] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1- il)but-2-enoil]piperazin-2-il ]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro- 1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (Intermediário 71, 150 mg, 282 umol, 1.0 eq, bruto) em DCM (6,0 mL) foi adicionado Py (446 mg, 5,6 mmol, 455 uL, 20,0 eq) e cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (207 mg, 1,2 mmol, 4,0 eq, bruto) em DCM (1,0 mL). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Em seguida, K 2CO3 (779 mg, 5,6 mmol, 20,0 eq), KI (4,6 mg, 28,2 umol, 0,1 eq) e 3-fluoroazetidina (472 mg, 4,2 mmol, 15,0 eq, HCl) foi adicionada a 0°C. Depois a mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um; fase móvel: [água (10,0 mM de NH4HCO3)-ACN]; B%: 55% -85%, 10 min.) e liofilização para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7- (8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il)but-2-enoil]piperazina -2-
il]acetonitrila (EXEMPLO 481, 10,8 mg, 15,7 umol, 6% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 673.
[02109] Condições SFC: 100% .ee
[02110] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,77 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,63 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,54 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 7,50-7,43 (m, 1 H), 7,35 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,26 - 7,21 (m, 1 H), 6,89 (d, J = 15,2 Hz, 1 H), 6,42 (d, J = 14,8 Hz, 1 H), 5,26-4,62 (m, 1 H), 5,11 (t, J = 5,2 Hz, 1 H), 4,80 - 4,37 (m, 2 H), 4,20 - 4,08 (m, 2 H), 3,92 (br d, J = 17,6 Hz, 1 H), 3,86 - 3,71 (m, 3 H), 3,60 (s, 1 H), 3,52 - 3,47 (m, 1 H), 3,45 - 3,33 (m , 1 H), 3,28 - 3,21 (m, 3 H), 3,16 - 3,11 (m, 3 H), 3,03 (dd, J = 8,4, 16,8 Hz, 1 H), 2,82 - 2,60 (m, 4 H), 2,49 (d, J = 2,8 Hz, 3 H), 2,37 - 2,25 (m, 1 H), 2,09 - 2,03 (m, 1 H), 1,86 - 1,83 (m, 1 H), 1,78 - 1,76 (m, 3 H).
EXEMPLO 482 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-[metil(2,2,2-trifluoroetil)amino]but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila
Cloreto de oxalila 12 horas Piridina, DCM 0°C, 0,5 hora 0-25°C,12 horas duas etapas 2%
[02111] Inserir: cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil. Uma solução de ácido (E)-4-bromobut-2-enoico (600 mg, 3,64 mmol, 1,0 eq) em (COCl)2 (10,2 g, 80,0 mmol, 7,0 mL, 22,0 eq) e DCM (7,0 mL) foi agitada a 70°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar cloreto de (E)-4- bromobut-2-enoil (500 mg, bruto) como óleo amarelo. O produto bruto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional.
[02112] Etapa A: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 188 umol, 1,0 eq) e piridina (119 mg, 1,50 mmol, 121 uL, 8,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado cloreto de (E)-4- bromobut-2-enoil (138 mg, 752 umol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar 2-[(2S)-1- [(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (130 mg, bruto) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 678, 680.
[02113] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-[metil(2,2,2- trifluoroetil)amino]but-2-enoil]piperazina-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-
[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (128 mg, 189 umol, 1,0 eq), K2CO3 (130 mg, 943 umol, 5,0 eq) e KI (9,39 mg, 56,6 umol, 0,30 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado 2,2,2-trifluoro-N-metil- etanamina (213 mg, 1,88 mmol, 10,0 eq) em porções. A mistura foi agitada a 0- 25°C por 12 horas. Após conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto obtido foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,04% de NH3•H2O)-ACN]; B%: 70%-100%, 10 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-[metil(2,2,2- trifluoroetil)amino]but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 482, 2,87 mg, 3,84 umol, 2% de rendimento, 95% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 711.
[02114] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 6,95 -6,79 (m, 1H), 6,54 - 6,38 (m, 1H), 5,12 - 4,50 (m, 1H) , 4,48 - 4,35 (m, 2H), 4,24 - 3,99 (m, 3H), 3,96 - 3,78 (m, 2H), 3,77 - 3,64 (m, 1H), 3,61 - 3,53 (m, 1H), 3,52 - 3,34 (m, 3H), 3,33 - 2,97 (m, 7H), 2,92 - 2,76 (m, 1H), 2,75 -2,65 (m, 1H), 2,63 - 2,55 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,49 (br d, J = 3,2 Hz, 3H), 2,35 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 1,99 (m, 1H), 1,89 - 1,67 (m, 3H).
EXEMPLO 483
2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(4-hidroxibut-2-inoil)piperazin-2-il]acetonitrila DMF, 0 -25 °C, 12,2 h 4,1%
[02115] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(4-hidroxibut-2- inoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de ácido 4-[terc- butil(dimetil)silil]oxibut-2-inoico (129 mg, 564 umol, 1,50 eq) e DIEA (194 mg, 1,50 mmol, 262 uL, 4,00 eq) em DMF (2,00 mL) foi adicionado HATU (214 mg, 564 umol, 1,50 eq) a 0°C. Após agitação a 0°C por 10 minutos, 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,20 g, 376 umol, 1,00 eq) foi adicionada à mistura. Depois de agitada a 25°C por 12 horas, a mistura foi diluída com acetato de etila (10,0 mL), lavada com salmoura (3 x 10,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas, neutralizadas com bicarbonato de sódio saturado (5,00 mL) até pH > 7 e extraídas com acetato de etila (3 x 20,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna HPLC-prep: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225%, FA)-ACN]; B%: 10% - 40%, 10 min. As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(4-hidroxibut-2- inoil)piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 483, 10,1 mg, 15,3 umol, 4,1% de rendimento, 99,6% de pureza, FA) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
614.
[02116] 1H NMR (400MHz, Ácido acético-d4) δ = 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 2H), 5,14 - 4,73 (m, 4H), 4,70 - 4,23 (m, 5H), 4,01 - 3,81 (m, 3H), 3,80 - 3,51 (m, 3H), 3,49 - 3,17 (m, 4H), 3,09 (m, 5H), 2,81 - 2,63 (m, 1H), 2,45 - 2,34 (m, 1H), 2,22 - 2,08 (m, 3H).
EXEMPLO 484 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4,4-difluorobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila Tolueno, 0- 25°C, 4h Duas etapas 44% EDCl, HOBt, Py seco
[02117] Etapa 1: 4,4-difluoro-3-hidroxi-butanoato. A uma solução de etil 4,4-difluoro-3-oxo-butanoato (5,00 g, 30,1 mmol, 1,00 eq) em tolueno (150 mL) foi adicionado NaBH4 (1,20 g, 31,7 mmol, 1,05 eq) a 0°C. Após agitada a 25°C por 4 horas, a mistura foi diluída com água (50,0 mL) a 0°C e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 x 100 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo para dar etil 4,4- difluoro-3-hidroxi-butanoato (4,30 g, em bruto) como um óleo amarelo e usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02118] 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 6,05 - 5,87 (m, 1H), 5,86 - 5,72 (m, 1H), 4,11 - 4,01 (m, 2H), 2,57 (dd, J = 4,0, 15,6 Hz, 1H), 2,38 (dd, J = 9,2, 15,6 Hz, 1H), 1,21 - 1,17 (m, 3H).
[02119] Etapa 2: etil (E)-4,4-difluorobut-2-enoato. A uma solução de etil 4,4- difluoro-3-hidroxi-butanoato (3,00 g, bruto) em diclorometano (20,0 mL) foi adicionado TEA (1,81 g, 17,8 mmol, 2,48 mL) e MsCl (3,68 g, 32,1 mmol, 2,49 mL) a 0°C. Após agitada por 4 horas, foi adicionado à mistura TEA (3,61 g, 35,68 mmol, 4,97 mL, 2 eq) a 0°C. Depois de aquecida até 25°C e agitada por 12 horas, a mistura foi diluída com água (10,0 mL), lavada com HCl (1 N, 1 x 20,0 mL) e salmoura (1 × 20,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar etil (E)-4,4-difluorobut-2-enoato (1,40 g, 9,33 mmol, duas etapas 44% de rendimento) como um óleo incolor e usada na próxima etapa com purificação adicional.
[02120] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 6,81 (m, 1H), 6,29 (dt, J = 2,8, 1,6 Hz, 1H), 6,23 (dd, J = 4,0, 55,2 Hz, 1H), 4,25 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[02121] Etapa 3: ácido (E)-4,4-difluorobut-2-enoico. Uma mistura de etil (E)-4,4-difluorobut-2-enoato (1,30 g, 8,66 mmol, 1,00 eq) e NaOH (1,39 g, 34,6 mmol, 4,00 eq) em THF (5,00 mL) e H2O (5,00 mL) foi agitada a 25°C por 2 horas. A mistura foi acidificada com HCl (2N, 20,0 mL) até pH = 1 ~ 3 e extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar (E)-4,4-difluorobut-2-enoico (0,35 g, 2,87 mmol, 33% de rendimento) como um sólido amarelo e usadas na próxima etapa sem purificação adicional.
[02122] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 6,92 (m, 1H), 6,32 (dtd, J = 0,8, 2,8, 16,8 Hz, 1H), 6,27 (dtd, J = 1,2, 54,8 Hz, 4,0, 1H).
[02123] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4,4-difluorobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de ácido (E)-4,4-difluorobut-2- enoico (68,8 mg, 564 umol, 1,50 eq), EDCI (108 mg, 564 umol, 1,50 eq) e HOBt (50,8 mg, 376 umol, 1,00 eq ) em Py (3 mL) foi agitado a 0°C por 15 min., então, 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (Intermediário 71, 0,20 g, 376 umol, 1,00 eq) foi adicionado à mistura. Após agitada a 0°C por 1 hora e 25°C por 1 hora, a mistura foi diluída com água (10,0 mL), extraída com acetato de etila (1 x 10,0 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (1 × 10,0 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitria]. As frações desejadas foram coletadas e a mistura foi neutralizada com bicarbonato de sódio saturado (5,00 mL), extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 55% - 85%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4,4-difluorobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 484, 66,9 mg, 104 umol, 28% de rendimento, 98,7% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 636.
[02124] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 12,8 Hz, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 6,88 - 6,71 (m, 2H), 6,45 - 6,12 (m, 1H), 5,17 - 4,59 (m, 1H), 4,55 - 4,41 (m, 1H), 4,40 - 4,33 (m, 1H), 4,21 - 3,69 (m, 5H), 3,64 - 3,32 (m, 2H), 3,31 - 2,97 (m, 5H), 2,96 - 2,52 (m, 4H), 2,47 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,90 - 1,77 (m, 3H).
EXEMPLO 485 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[2-(metoximetil)prop-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila
[02125] Etapa 1: brometo de 1-(2-(etoxicarbonil)alil)-1,4- diazabiciclo[2.2.2]octan-1-io. A etil 2-(bromometil)prop-2-enoato (15 g, 77,7 mmol, 1 eq) em THF (5 mL) foi adicionado DABCO (10,5 g, 93,6 mmol, 10,3 mL, 1,20 eq) e a mistura resultante foi agitada a 25°C por 2 horas. O precipitado foi formado e filtrado sob atmosfera de nitrogênio. A torta de filtro foi coletada para dar brometo de 1-(2-(etoxicarbonil) alil)-1,4-diazabiciclo[2.2.2]octan-1-io (15 g, 49,6 mmol, 64% de rendimento) como um sólido amarelo claro que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02126] Etapa 2: etil 2-(metoximetil)prop-2-enoato. Uma mistura de brometo de 1-(2-(etoxicarbonil)alil)-1,4-diazabiciclo[2.2.2]octan-1-io (15 g, 49,6 mmol, 1 eq) e TEA (10,5 g, 104 mmol, 14,5 mL, 2,09 eq) em MeOH (150 mL) foi agitada a 25°C por 16 horas. O solvente foi evaporado sob vácuo (25°C). O resíduo foi dissolvido em DCM (40 mL) e depois lavado com solução aquosa de ácido cítrico a 5% (1 x 40 mL) e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (1 x 40 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo a 25°C para dar etil 2-(metoximetil)prop-2-enoato (5,3 g, 36,8 mmol, 74% de rendimento) como um líquido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02127] Etapa 3: ácido 2-(metoximetil) prop-2-enoico. A uma solução de etil 2-(metoximetil)prop-2-enoato (5,1 g, 35,4 mmol, 1 eq) em THF (71 mL) foi adicionada uma solução de NaOH (5,66 g, 142 mmol, 4 eq) em H2O (71 mL) a 5°C. A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Mediante conclusão, o THF foi evaporado sob vácuo. O pH da mistura foi ajustado para 3 com HCl 1 M e extraída com EtOAc (3 x 70 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar ácido 2-(metoximetil)prop-2-enoico (3,4 g, 26,4 mmol, 75% de rendimento, 90% de pureza) como um líquido amarelo claro que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02128] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 6,45 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,98 (q, J = 1,6 Hz, 1H), 4,16 (t, J = 1,2 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H).
[02129] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[2-(metoximetil)prop-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de ácido 2-(metoximetil)prop-2- enoico (175 mg, 1,50 mmol, 2 eq) e DIEA (389 mg, 3,01 mmol, 524 uL, 4 eq) em DCM (8 mL) foi adicionado HATU (429 mg, 1,13 mmol, 1,5 eq) a -40°C. Após agitada a -40°C por 10 minutos, 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (Intermediário 71, 400 mg, 752 umol, 1 eq) foi adicionado à mistura. A mistura foi agitada a -40°C por 20 minutos, 0°C por 0,5 hora e 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, à mistura foi adicionada água (10 mL) e extraída com DCM (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 100/1 a 40/1) e purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50% - 80%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[2-(metoximetil)prop-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 485, 73,0 mg, 116 umol, 15% de rendimento, 98,9% de pureza) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]:630.
[02130] Condição SFC: Coluna: Chiralpak AS-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[02131] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (br d, J= 8 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 13,2 Hz, 1H), 7,37 - 7,30 (m, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,32 (br s, 1H), 5,19 - 4,58 (m,
1H), 4,48 - 4,34 (m, 2H), 4,23 - 4,07 (m, 4H), 4,06 - 3,78 (m, 3H), 3,64 - 3,55 (m, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,36 - 2,72 (m, 8H), 2,71 - 2,53 (m, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,35 - 2,22 (m, 1H), 2,14 - 1,98 (m, 1H), 1,90 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 486 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila Etapa A: 2- terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxilato. Num frasco de fundo redondo, uma solução de terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5 g, 9,487 mmol) em dioxano (94,87 ml, 9,487 mmol) foi espargido com argônio e (S)-(1-metilpirrolidin-2-il) metanol (3,278 g,
28,46 mmol), Cs2CO3 (9,273 g, 28,46 mmol), Metanossulfonato(2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2’-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio (II) (0,8078 g, 0,9487 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por um adicional de 5 minutos. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C durante a noite. A reação foi filtrada através de papel GF/F e concentrada in vacuo. O concentrado foi purificado na Combi flash (% de MeOH em DCM com 2% NH4OH) para fornecer terc-butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)- 3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (5,425 g, 8,508 mmol, 89,68% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 606,4 [M+H]+.
Etapa B: benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato: terc-butil 4-((S)-4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-carboxilato (5,4 g, 8,915 mmol) foi dissolvido em diclorometano (89,15 ml, 8,915 mmol) e tratado com Ácido Clorídrico (solução 4,0 M em 1,4-dioxano) (11,14 ml, 44,57 mmol). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi diluída com mais DCM e NaOH 1M e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram em seguida lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (4,364 g, 8,631 mmol, 96,82% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 506,3 [M+H]+.
Etapa C: 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Em um frasco de fundo redondo, uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (4,364 g, 8,631 mmol) em dioxano (43,15 ml, 8,631 mmol) foi espargido com Argônio por 5 minutos. 1-Bromo-2,3-dimetilbenzeno (5,851 ml, 43,15 mmol), Cs2CO3 (14,06 g, 43,15 mmol) e Metanossulfonato(2-diciclo-
hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (0,7348 g, 0,8631 mmol) foram adicionados sequencialmente sob Argônio e espargidos por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C ON. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etila e a reação filtrada através de papel GF/F e concentrada in vácuo. O concentrado foi purificado duas vezes via cromatografia de fase normal no CombiFlash utilizando 0-15% de MeOH em DCM, com 2% de NH4OH como eluente. As frações contendo o produto desejado foram coletadas e concentradas in vacuo para dar 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (0,411 g, 0,8641 mmol, 100,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 476,3 [M+H]+.
[02132] Etapa D: 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (200 mg, 0,420 mmol), ácido 4,4,4-trifluorocrotônico (118 mg, 0,841 mmol), DIEA (367 µl, 2,10 mmol) em DCM (4.205 µL, 0,420 mmol) foi adicionado HATU (240 mg, 0,631 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 5 horas. . A mistura de reação foi lavada com Salmoura e a camada aquosa extraída com DCM (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, concentradas, diluídas em 60:40 ACN:H2O e purificadas na Gilson (HPLC prep inversa), eluindo com 5 --> 95% de ACN/TFA a 0,1% em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e basificadas livres com bicarb saturado e os orgânicos extraídos com DCM. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-
4,4,4-trifluorobut-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 486, 28 mg, 0,0468 mmol, 11,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 598,3 [M+H]+.
EXEMPLO 487 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-(trifluorometil)acriloil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02133] 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-(trifluorometil)acrililil)piperazin- 2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 486 usando Ácido 2-(trifluorometil)propenoico no lugar de Ácido 4,4,4- trifluorocrotônico na Etapa D. ESI + APCI MS m/z 598,3 [M+H]+.
EXEMPLO 488 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-(hidroximetil)acrililil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02134] 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-(hidroximetil)acrilil)piperazin-2- il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 486 usando Ácido 2-(hidroximetil) prop-2-enoico no lugar de Ácido 4,4,4- trifluorocrotônico na Etapa D. ESI+APCI MS m/z 560,3 [M+H]+.
EXEMPLO 489 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila Reagente HATU
[02135] Etapa A: 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (50 mg, 0,1051 mmol) em DCM (1 mL) foi adicionado ácido (E)-4-metoxibut-2-enoico (24,41 mg, 0,2102 mmol), N-etil-N - isopropilpropan-2-amina (0,03662 ml, 0,2102 mmol) e O-(7-azabenzotriazol-1-il)- N,N, N',N'-tetrametilurônio PF6 (59,96 mg, 0,1577 mmol) e a mistura de reação agitada à temperatura ambiente por 4 horas. Água (1 mL) foi a seguir adicionada e a mistura de reação agitada por 5 minutos. A mistura foi dividida entre EtOAc (10 mL) e 0,5 M de NaHCO3 (5 mL) e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram lavados com salmoura (3 ml), secos sobre Na 2SO4 e evaporados in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel usando 3% de MeOH + 0,3% NH4OH a 4% MeOH + 0,4% NH4OH como eluente para dar o composto do título (Exemplo 489, 26 mg, 43%). ESI+APCI MS m/z 574,4 [M+H] +.
EXEMPLO 490 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02136] Etapa A: benzil (S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de benzil (S)-2-(cianometil)- 4-(2-(((S))-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (0,6 g, 1,2 mmol) em dioxanos (10 mL) foi adicionado 1-bromo-8-cloronaftaleno (0,37 g, 1,5 mmol) e a reação foi desgaseificada com Ar por 15 minutos, seguida pela adição de Cs2CO3 (1,2 g, 3,6 mmol), Pd2 (dba)3
(0,22 g, 0,24 mmol) e 2-Diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil (0,11 g, 0,24 mmol) e a reação foi aquecida a 100oC durante a noite. A reação foi depois filtrada através de papel GFF e o filtrado concentrado in vacuo. O resíduo foi em seguida cromatografado usando 1→10% (MeOH+2% de NH4OH)/DCM para dar benzil (S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (0,20 g, 0,30 mmol, 25% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 666,2 [M+H]+.
[02137] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de (S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(benzil)((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina- 1-carboxilato (0,17 g, 0,255 mmol) em THF (30 mL) foi purgada com N2 seguido por adição de Pd/C (0,0272 g, 0,255 mmol). A reação foi evacuada por vácuo e novamente preenchida com H2 3x e a mistura foi agitada por 3 dias à temperatura ambiente. A reação foi novamente purgada com N2 seguido por filtração através de celite e o filtrado concentrado in vacuo. O material usado bruto na próxima reação. ESI+APCI MS m/z 532,2 [M+H]+.
[02138] Etapa C: 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut- 2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução de 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen- 1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (0,055 g, 0,10 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,040 g, 0,31 mmol), ácido (E)- 4,4,4-trifluorobut-2-enoico (0,017 g, 0,12 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1- propanofosfônico (0,033 g, 0,10 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Em seguida foram adicionados TEP3 e ácido (0,24 mmol) adicionais e a reação uma adição de 1 hora. As fases orgânicas foram em seguida lavadas com NaOH 1 N, salmoura, secas sobre MgSO4 e concentradas in vacuo. O material foi cromatografado 2x em sílica de fase normal (1→10%
(MeOH+2% de NH4OH)/DCM) seguido de purificação por gilson HPLC prep inversa usando 5→95% de ACN/água com 0,1% de TFA como aditivo. As frações PURE foram derramadas em água básica e extraídas em EtOAc. Os orgânicos foram lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)- 4,4,4-trifluorobut-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 490, 0,0094 g, 0,014 mmol, 14% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 654,2 [M+H]+.
EXEMPLO 491 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02139] Etapa A: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7, 8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: A 0°C, a um RBF de 25 mL contendo N,N- dimetilformamida (2.932 µl, 0,293 mmol) foi adicionado 2-((S)-4-(7-(8-
metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (150 mg, 0,293 mmol) e a base de Hunig (102 µl, 0,586 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido (E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoico (49,3 mg, 0,352 mmol) foi adicionado em uma porção. Em seguida, foi adicionado lentamente anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (262 µl, 0,440 mmol) à mistura agitada. A reação foi agitada por 2 horas a 0°C. A reação foi tratada com água básica e a camada aquosa extraída com EtOAc (3X). Os orgânicos combinados foram concentrados in acuo e ressuspensos numa mistura 60:40 de ACN:H 2O e purificados na Gilson (HPLC prep inversa), eluindo com 5 -->95% de ACN/0,1% TFA em água/0,1% TFA. As frações contendo o produto foram combinadas e particionadas entre bicarb saturado e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM mais duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar o composto do título 2-((S)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidina)-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila (EXEMPLO 491, 74,5 mg, 0,118 mmol, 40,1% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 634,3 [M+H]+.
EXEMPLO 492 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-(trifluorometil)acrililil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02140] 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- (trifluorometil)acrililil)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 491 usabdi ácido 2-(trifluorometil)acrílico no lugar de ácido (E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoico na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 634,2 [M+H]+.
EXEMPLO 493 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-3-(piridin-2-il)acriloil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02141] 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-3-(piridin-2- il)acriloil)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 491 usando ácido 3-(piridin-2-il)acrílico no lugar de ácido (E)-4,4,4- trifluorobut-2-enoico na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 643,3 [M+H]+.
EXEMPLO 494
2-((S)-1-((E)-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)acriloil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02142] 2-((S)-1-((E)-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)acriloil)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 491 usando ácido (2E)-3-(1-metil-1H-pirazol-4- il)-acrílico no lugar de ácido (E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoico na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 646,4 [M+H]+.
EXEMPLO 495 2-((S)-1-((E)-4,4-difluorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02143] 2-((S)-1-((E)-4,4-difluorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 491 usando ácido 4,4-difluorobut-2-enoico no lugar de ácido (E)-4,4,4- trifluorobut-2-enoico na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 616,3 [M+H]+.
EXEMPLO 496 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpiperidin-2-il)metoxi)-7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-3-(piridin-3-il)acriloil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02144] Etapa A: A uma solução de 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (0,12 g, 0,23 mmol) em DCM (10 mL) N-etil-N- isopropilpropano-2-amina (0,13 ml, 0,70 mmol), ácido (E)-3-(piridin-3-il)acrílico (0,070 g, 0,47 mmol) e 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido (0,30 g, 0,47 mmol) e a reação agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi a seguir derramada em NaOH 1 N e as camadas separadas. Os orgânicos foram depois lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo. O material foi em seguida purificado por HPLC prep reversa Gilson eluindo com 5→95 ACN/água com 0,1% de TFA como modificador. As frações contendo produto foram derramadas em NaOH 1N e a camada aquosa extraída com EtOAc (3X). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-3-(piridin-3- il))acriloil)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 496, 0,040 g, 0,062 mmol, 27% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 643,3 [M+H]+.
EXEMPLO 497 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(3-oxociclopent-1-eno-1- carbonil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02145] Etapa A: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(3-oxociclopent-1-eno- 1-carbonil)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (30 mg, 0,05863 mmol) e ácido 3-oxociclopent-1-enocarboxílico (9,612 mg, 0,07622 mmol) foram diluídos com DMF (400 uL) seguidos pela adição de DIEA (20,48 µl 0,173 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1- propanofosfônico (52,35 µl, 0,08795 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título 2-((S)-4- (7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(3-oxociclopent-1-eno-1-carbonil)piperazin-2- il)acetonitrila (EXEMPLO 497, 2,3 mg, 0,003711 mmol, 6,329% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 620,3 [M+H]+.
EXEMPLO 498 2-((S)-1-((E)-4-clorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02146] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-4-clorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1- il)-2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (30 mg, 0,05863 mmol) e ácido gama-clorocrotônico (10,60 mg, 0,08795 mmol) foram diluídos com DMF (400 uL) seguidos pela adição de DIEA (20,48 µl, 0,11173 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (55,84 µl, 0,09381 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título 2-((S)-1-((E)-4-clorobut-2-enoil)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 498, 4,5 mg, 0,007327 mmol, 12,50% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 614,3 [M+H]+.
EXEMPLO 499
(E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-N,N-dimetil- 4-oxobut-2-enamida
[02147] Etapa A: (E)-4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-enoato: Éster monoetílico do ácido fumárico (442 mg, 3,07 mmol) foi diluído com DCM (5 mL) seguido pela adição de cloreto de oxalil (1.533 µl, 3,07 mmol) e 1 gota de DMF. Após agitação por 15 minutos, foi adicionada dimetilamina (4.600 µl, 9,20 mmol) e a reação foi agitada por 3 horas. A reação foi diluída com acetato de etila e água. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10- 70% de acetato de etila/hexanos para proporcionar (E)-4-(dimetilamino)-4- oxobut-2-enoato (382 mg, 2,23 mmol, rendimento de 72,8%). ESI+APCI MS m/z 172,1 [M+H]+.
[02148] Etapa B: Ácido (E)-4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-enoico: Etil (E)-4- (dimetilamino)-4-oxobut-2-enoato (382 mg, 2,23 mmol) foi diluído com metanol (8 mL) seguido pela adição de NaOH (4.463 µl, 8,93 mmol). Após agitação por 4 horas, a reação foi diluída com Hcl 2N (4,5 mL) e extraída com acetato de etila. O acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado para proporcionar ácido (E)-4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-enoico.
[02149] Etapa C: (E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)-N,N-dimetil-4-oxobut-2-enamida: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1- il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (30 mg, 0,05863 mmol) foi diluído com DMF seguido pela adição de ácido (E)-4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-enoico (10,07 mg, 0,07036 mmol), DIEA (20,48 µl, 0,1173 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1- propanofosfônico (52,35 µl, 0,08795 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título (E)-4-((S)- 2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftaleno)1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-N,N-dimetil-4-oxobut- 2-enamida (EXEMPLO 499, 3,7 mg, 0,005810 mmol, 9,910% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 637,3 [M+H]+.
EXEMPLO 500
[02150] (E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 1-il)-4-oxobut-2-enamida
[02151] Etapa A: Etil (E)-3-cianoacrilato: Etil cis-(beta-ciano) acrilato (1,0 g, 7,99 mmol) foi diluído com ACN (30 mL), colocado sob nitrogênio e aquecido até refluxo por 3 dias. A reação foi deixada esfriar e depois concentrada. O material foi purificado em sílica gel eluindo com hexanos para proporcionar etil (E)-3- cianoacrilato (300 mg, 2,40 mmol, 30,0% de rendimento).
[02152] Etapa B: Ácido (E)-4-amino-4-oxobut-2-enoico: Etil (E)-3- cianoacrilato (300 mg, 2,40 mmol) foi diluído com HCl (3.996 µl, 24,0 mmol). A reação foi colocada sob nitrogênio e aquecida até 100°C por 4 horas. A reação foi deixada resfriar e depois concentrada para proporcionar ácido (E)-4-amino-4- oxobut-2-enoico (214 mg, 1,86 mmol, 77,6% de rendimento).
[02153] Etapa C: (E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-enamida: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (20 mg, 0,039 mmol), HATU (30 mg, 0,078 mmol) e ácido (E)-4- amino-4-oxobut-2-enoico (9,0 mg, 0,078 mmol) foram diluídos com DMF (400 uL) seguidos pela adição de DIEA (14 µl, 0,078 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título (E)-4-((S)- 2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftaleno)1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-enamida (EXEMPLO 500, 2,9 mg, 0,0048 mmol, 12% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 609,3 [M+H]+.
EXEMPLO 501 (E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2- enoenitrila
[02154] Etapa A: Etil (E)-3-cianoacrilato: Etil cis-(beta-ciano) acrilato (1,0 g, 7,99 mmol) foi diluído com ACN (30 mL), colocado sob nitrogênio e aquecido até refluxo por 3 dias. A reação foi deixada esfriar e depois concentrada. O material foi purificado em sílica gel eluindo com hexanos para proporcionar etil (E)-3- cianoacrilato (300 mg, 2,40 mmol, 30,0% de rendimento).
[02155] Etapa B: Ácido (E)-3-cianoacrílico: Etil (E)-3-cianoacrilato (10 mg, 0,080 mmol) foi diluído com HCl (133 µl, 0,80 mmol), colocado sob nitrogênio e aquecido até 100°C. Após agitar por 15 minutos, a reação foi concentrada para proporcionar ácido (E)-3-cianoacrílico (7,5 mg, 0,077 mmol, 97% de rendimento).
[02156] Etapa C: (E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-enonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (20 mg, 0,03909 mmol) e ácido (E)-3-cianoacrílico (5,312 mg, 0,05472 mmol) foram diluídos com DMF (400 uL) seguidos pela adição de DIEA (13,65 µl, 0,07817 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (34,90 µl, 0,05863 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título (E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8- metilnaftaleno)1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-enonitrila (EXEMPLO 501, 3,5 mg, 0,005925 mmol, 15,16% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 591,3 [M+H]+.
EXEMPLO 502
(Z)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2- enoenitrila
[02157] Etapa A: Ácido (Z)-3-cianoacrílico: Etil cis-(beta-ciano) acrilato (50 mg, 0,40 mmol) foi diluído com HCl (200 µl, 1,2 mmol), colocado sob nitrogênio e aquecido até 100°C. Após agitação por 1 minuto, a reação foi resfriada e concentrada para proporcionar ácido (Z)-3-cianoacrílico (35 mg, 0,36 mmol, 90% de rendimento).
[02158] Etapa B: (Z)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-enoenitrila: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (20 mg, 0,03909 mmol) e ácido (Z)-3-cianoacrílico (6,071 mg, 0,06254 mmol) foram diluídos com DMF (400 uL) seguidos pela adição de DIEA (13,65 µl, 0,07817 mmol) e anidrido cíclico do ácido 1- propanofosfônico (39,56 µl, 0,06645 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar o composto do título (Z)-4-((S)- 2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftaleno)1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-enonitrila
(EXEMPLO 502, 2,1 mg, 0,003555 mmol, 9,095% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 591,3 [M+H]+.
EXEMPLO 503 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(dimetilamino)-2-fluoro-but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila 25 °C, 1,5 hrs 38%
[02159] Etapa 1: Ácido (E)-4-[terc-butoxicarbonil(metil)amino]-2-fluoro-but- 2-enoico. À solução de etil 2-dietoxifosforil-2-fluoro-acetato (2 g, 8,26 mmol, 1,68 mL, 1 eq) e terc-butil N-metil-N-(2-oxoetil)carbamato (2,15 g, 12,4 mmol, 1,5 eq) em THF (40 mL) foi adicionado NaH (661 mg, 16,5 mmol, 60% de pureza, 2 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1,5 hora. Mediante finalização, a mistura de reação foi extinta por NH4Cl (8 ml) saturado e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 20ACN%-50ACN%, 30 min.; 50% mín.) para dar ácido (E)-4-[terc-butoxicarbonil(metil)amino]-2-fluoro- but-2-enoico (820 mg, 3,16 mmol, 38,3% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo marrom.
[02160] Etapa A: terc-butil N-[(E)-4-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazin-1-il]-3-fluoro-4-oxo-but-2-enil]-N-metil-carbamato. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (Intermediário 71, 300 mg, 564 umol, 1 eq), ácido (E)-4-[terc-butoxicarboni (metil)amino]-2- fluoro-but-2-enoico (600 mg, 2,57 mmol, 4,56 eq) e DIEA (729 mg, 5,64 mmol, 982 uL, 10 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado HATU (643 mg, 1,69 mmol, 3 eq) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com água (3 mL) e extraída com DCM (3 × 8 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash reversa (condição FA: 60% MeCN em água (0,1% FA)) para dar terc-butil N-[(E)-4-[(2S)-4-[7-(8-cloro- 1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazin-1-il]-3-fluoro-4-oxo-but-2-enil]-N-metil- carbamato (330 mg, 404 umol, 72% de rendimento, 91,5% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 747.
[02161] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-2-fluoro-4- (metilamino)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil N- [(E)-4-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazin-1-il]-3-fluoro-4-oxo- but-2-enil]-N-metil-carbamato (300 mg, 401 umol, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (915 mg, 8,03 mmol, 594 uL, 20 eq). A mistura de reação foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi diluída por DCM (10 mL) e basificada por NaHCO3 saturado (8 ml). A mistura foi extraída com DCM (3 x 10 mL). A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e concentrada sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-2- fluoro-4-(metilamino)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (240 mg, 356 umol, 89% de rendimento, 95,9% de pureza) como um sólido marrom que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 647.
[02162] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(dimetilamino)-2- fluoro-but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-2-fluoro-4-(metilamino)but-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (120 mg, 185 umol, 1 eq) e paraformaldeído (83,5 mg, 927 umol, 5 eq), HCOOH (26,7 mg, 556 umol, 3 eq) em MeOH (5 mL) foi adicionado NaBH3CN (35,0 mg, 556 umol), 3 eq). A mistura de reação foi agitada a 25°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por água (0,5 mL) e filtrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EA:MeOH:NH3•H2O=50:1:0 a 10:1:0,1), seguido de HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)- ACN]; B%: 50%-100%, 10 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(dimetilamino)-2-fluoro-but-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 503, 26,7 mg, 40,2 umol, 22% de rendimento, 99,5% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 661.
[02163] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,68 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,54 (t, J=7,2 Hz, 1H), 7,45 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,37 (td, J=7,6, 12,8 Hz, 1H), 7,26 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,19 - 7,08 (m, 1H), 5,81 - 5,60 (m, 1H), 5,04 - 4,41 (m, 1H), 4,40 - 4,25 (m, 2H), 4,16 - 3,91 (m, 3H), 3,88 - 3,71 (m, 2H), 3,66 - 3,46 (m, 2H), 3,36 (br d, J=10,8 Hz, 1H), 3,27 - 2,69 (m, 9H), 2,64 - 2,56 (m, 1H), 2,55 - 2,46 (m, 1H), 2,40 (d, J=2,4 Hz, 3H), 2,27 - 2,15 (m, 7H), 2,06 - 1,90 (m, 1H), 1,85 - 1,72 (m, 3H).
EXEMPLO 504 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[2-(trifluorometil)prop-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila CH2Cl2, 0 °C, 0,5 h 10,5%
[02164] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[2-(trifluorometil)prop-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de ácido 2-(trifluorometil) prop-2- enoico (39,5 mg, 282 umol, 1,50 eq), 2-[(2)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (Intermediário 71, 0,10 g, 188 umol, 1,00 eq) e DIEA (48,6 mg, 376 umol, 65,5 uL, 2,00 eq) em diclorometano (0,20 mL) foi adicionado HATU (107 mg, 282 umol, 1,50 eq) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura foi diluída com água e a camada foi separada. A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,1%)/acetonitrila] e HPLC prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 56%-86%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[2-(trifluorometil)prop-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 504, 13,1 mg, 19,6 umol, 10,5% de rendimento, 97,9% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 654.
[02165] Condição SFC: coluna: Chiralcel OJ-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm.
[02166] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 - 7,59 (m, 1H), 7,55 - 7,50 (m, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 10,0 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 6,18 (br s, 1H), 5,86 (br s, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,57 - 4,36 (m, 2H), 4,33 - 4,10 (m, 2H), 4,04 (br d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,97 - 3,79 (m, 2H), 3,66 - 3,54 (m, 1H), 3,50 - 3,33 (m, 1H), 3,29 - 3,07 (m, 4H), 3,04 - 2,72 (m, 4H), 2,63 - 2,50 (m, 4H), 2,45 - 2,32 (m, 1H), 2,15 - 2,04 (m, 1H), 1,90 (br s, 3H).
EXEMPLO 505
2-((S)-1-((Z)-3-cloroacrilil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02167] 2-((S)-1-((Z)-3-cloroacrilil)-4-(7-(2,3-dimetilfenil)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Foi preparado seguindo o Exemplo 389 Etapa J, usando ácido (Z)-3-cloroacrílico no lugar de ácido but-2-inoico. ESI+APCI MS m/z 564,3 [M+H]+.
EXEMPLO 506 2-((S)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02168] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1- il)-2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: A 0°C, a um RBF de 25 mL contendo N,N- dimetilformamida (3.909 µl, 0,39 mmol) foi adicionado 2-((S)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2)-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (200 mg, 0,391 mmol) e trietilamina (136 µl, 0,98 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (61,0 mg, 0,59 mmol) foi adicionado em uma porção. Em seguida, foi adicionado lentamente anidrido cíclico do ácido 1- propanofosfônico (175 µl, 0,59 mmol) à mistura em agitação. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com EtOAc (3x 15 mL). Os extratos foram combinados e lavados com água (1x 10 mL) e concentrados. O resíduo foi purificado por sílica gel (5-18% de MeOH em DCM com 0,25% de NH4OH) para proporcionar o composto do título 2-((S)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (EXEMPLO 506, 89,3 mg, 0,15 mmol, 38% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 598.3 [M+H]+.
EXEMPLO 507 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02169] Etapa A: 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1)-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (8 g, 15,63 mmol) foi diluído com DMF (78,17 ml, 15,63 mmol), colocado sob nitrogênio e resfriada até 0°C. Foi adicionado DIEA (6,827 ml, 39,09 mmol) seguido pela adição de ácido 2-fluoroacrílico (2,112 g, 23,45 mmol) e a adição em gotas de anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (9,307 ml, 15,63 mmol). A reação foi agitada a 0°C por 6 horas e deixada agitar por umas 10 horas adicionais aquecendo até a temperatura ambiente. A reacção foi derramada numa solução de bicarbonato de sódio a 5% e extraída duas vezes com acetato de etila. O acetato de etila foi lavado com água, salmoura, seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 1-10% de metanol/DCM (1% de NH4OH como aditivo) para proporcionar o composto do título 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen- 1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazina-2-il)acetonitrila (EXEMPLO 507, 6,6 g, 11,31 mmol, 72,32% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 584,3 [M+H]+.
EXEMPLO 508 2-((S)-1-(4-hidroxibut-2-inoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila
[02170] 2-((S)-1-(4-hidroxibut-2-inoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: foi preparado de acordo com o Exemplo 458, Etapa D, usando ácido 4-((terc-butildimetilsilil)oxi)but-2-inoico no lugar de ácido but-2-inoico. ESI+APCI MS m/z 594,3 [M+H]+.
EXEMPLO 509 2-((S)-1-((E)-4-(1H-pirazol-1-il)but-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02171] Etapa A: Ácido (E)-4-(1H-pirazol-1-il)but-2-enoico. Uma solução de ácido 4-bromocrotônico (100 mg, 0,606 mmol) e pirazol (37,1 mg, 0,546 mmol) em acetonitrila (1 ml, 19,1 mmol) foi aquecida num frasco fechado por 48 h a 60°C com agitação. A solução verde-claro resultante foi dividida entre água (5 mL) e EtOAc (15 mL), os orgânicos foram separados, a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O material foi cromatografado em sílica gel em 2 a 5% de MeOH/DCM + 0,2% de TFA. O sólido resultante foi dissolvido numa quantidade mínima de HCl 6M e evaporado sob fluxo de N2 lento. Esse material foi utilizado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02172] Etapa B: 2-((S)-1-((E)-4-(1H-pirazol-1-il)but-2-enoil)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. Uma mistura agitada de 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (42,37 mg, 0,08281 mmol), ácido (E)-4-(1H-pirazol-1-il)but-2-enoico (12,6 mg, 0,08281 mmol) e N,N- dimetilformamida (1 mL, 12,79 mmol) foram resfriados em banho de sal gelado com agitação e trietilamina (0,03463 mL, 0,2484 mmol) foi adicionada de uma só vez, seguida por 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido, 50% em EtOAc (0,07395 mL, 0,1242 mmol). A mistura de reação foi deixada aquecer até a r.t. durante 5 minutos e foi agitada à r.t. durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre 0,5 M Na2CO3 (5 mL) e EtOAc (10 mL), as fases orgânicas foram separadas, a camada orgânica foi lavada com água e salmoura (5 ml cada), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de sílica gel utilizando 5% MeOH + 0,5% NH4OH em DCM para dar o composto do título como um sólido incolor (Exemplo 509, 11,46 mg, 23%). ESI+APCI MS m/z 646,3 [M+H]+.
EXEMPLO 510
2-((S)-1-((E)-4-hidroxibut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila Reagente HATU
[02173] Etapa A: Ácido (E)-4-hidroxibut-2-enoico. A uma suspensão agitada de ácido 4-bromocrotônico (4.824 mg, 29,24 mmol) em água (48 mL), uma solução 2M de hidróxido de potássio (4,921 g, 87,72 mmol) foi adicionada gota a gota e a solução resultante foi aquecida até refluxo por 5 min. A mistura de reação foi deixada sob uma corrente de N2 para resfriar e concentrar. O resíduo foi resfriaido em banho de gelo, acidificado com 4M H 2SO4 até um pH de 1-2, a suspensão resultante foi evaporada in vacuo pela metade e, em seguida, extraída com EtOAc (3*60 mL). Os extratos combinados foram secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. O material foi purificado por cromatografia usando 2 a 5% de MeOH+0,2% de TFA para proporcionar o ácido alvo como cristais incolores (2,165 g, 73%).
[02174] Etapa B: 2-((S)-1-((E)-4-hidroxibut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1- il)-2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução agitada de 2-((S)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (100 mg, 0,1954 mmol), ácido (2E)-4-hidroxibut-2-enoico (39,90 mg, 0,3909 mmol) e N-etil-N- isopropilpropan-2-amina (0,06809 ml, 0,3909 mmol) em DCM (5 mL), O-(7- Azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-Tetrametilurônio hexafluorofosfato (111,5 mg, 0,2932 mmol) foi adicionado de uma só vez e a mistura de reação foi agitada à r.t. por 4 h. Foi adicionada água (1 mL), a mistura de reação foi agitada por 5 min. e dividida entre EtOAc (10 mL) e NaHCO3 (5 mL) sat.. A camada orgânica foi separada, lavada com NaHCO3, salmoura (5 mL cada), seca sobre K2CO3 e evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel com 5% de MeOH+0,5% NH4OH. Composto do título como um sólido incolor (EXEMPLO 510, 29 mg, 25%). ESI+APCI MS m/z 596,3 [M+H]+.
EXEMPLO 511 2-((S)-1-((E)-4-metoxibut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02175] Etapa A: 2-((S)-1-((E)-4-metoxibut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1- il)-2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila. Uma mistura agitada de 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen- 1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (250 mg, 0,4886 mmol), ácido (E)-4-metoxibut-2-
enoico (85,10 mg, 0,7329 mmol) e N,N-dimetilformamida (2 mL, 25,58 mmol) foi resfriada em um banho de sal gelado e trietilamina (0,2043 mL, 1,466 mmol) foi adicionada de uma só vez, seguida de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido, 50% em EtOAc (0,4363 mL, 0,7329 mmol). A mistura de reação foi deixada aquecer até r.t. durante 5 min. e agitada à r.t. por 2 h. A solução resultante foi dividida entre 0,5 M Na2CO3 (10 mL) e EtOAc (30 mL), a camada orgânica foi separada, lavada com água e salmoura (10 mL cada), seca sobre Na2SO4 e evaporada in vacuo. O material foi purificado por cromatografia de sílica gel usando 5% de MeOH +0,5% NH4OH em DCM. O material foi ainda purificado por cromatografia de fase reversa, Gilson, 25 a 75% MeCN/H2O + 0,1% TFA. Frações alvo foram basificadas com excesso de Na2CO3 2M e extraídas com DCM (3*50 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre Na2SO4 e evaporados in vacuo. Composto do título como um sólido amarelo claro (EXEMPLO 511, 123 mg, 41%). ESI+APCI MS m/z 610,3 [M+H]+.
EXEMPLO 512 2-[(2S)-1-(2-metoxiprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
CH2Cl2, 0 °C, 0,5 h
[02176] Etapa A: metil 2,2-dimetoxipropanoato. A uma solução de etil 2- oxopropanoato (4,00 g, 34,5 mmol, 3,81 mL, 1,00 eq) e trimetoximetano (4,75 g, 44,8 mmol, 4,91 mL, 1,30 eq) em metanol (10,0 mL) foi adicionado H2SO4 (33,8 mg, 344 umol, 18,4 uL, 0,01 eq). Após agitada a 65°C por 4 horas, o valor de pH foi ajustado > 7 por KOH (120 mg em 20,0 mL de água) e extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 × 30,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi destilado a 60°C sob bomba de óleo para dar metil 2,2-dimetoxipropanoato (4,00 g, 27,0 mmol, 78% de rendimento) como um óleo incolor e usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02177] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,81 (s, 3H), 3,28 (s, 6H), 1,52 (s, 3H).
[02178] Etapa B: metil 2-metoxiprop-2-enoato. A uma solução de metil 2,2- dimetoxipropanoato (2,00 g, 13,5 mmol, 1,00 eq) em DMF (20,0 mL) foi adicionado P2O5 (1,05 g, 7,42 mmol, 458 uL, 0,55 eq) em porções. Depois de aquecida até 100°C por 1 hora, a mistura foi diluída com bicarbonato de sódio saturado (20,0 mL), extraída com éter isopropílico (3 x 30,0 mL), lavada com salmoura (3 x 40,0 ml), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi destilado sob bomba de óleo para dar metil 2-metoxiprop-2-enoato
(0,65 g, 5,60 mmol, 41% de rendimento) como um óleo incolor e usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02179] Etapa C: ácido 2-metoxiprop-2-enoico. Uma mistura de metil 2- metoxiprop-2-enoato (0,60 g, 5,17 mmol, 1,00 eq) e NaOH (827 mg, 20,7 mmol, 4,00 eq) em H2O (5,00 mL) e THF (5,00 mL) foi agitada 60°C por 1 hora. A mistura foi ajustada para pH < 3 por HCl concentrado (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar ácido 2-metoxiprop-2-enoico (0,40 g, 1,96 mmol, 38% de rendimento, 50% de pureza) na forma de um óleo cor de rosa e utilizada na próxima etapa sem mais purificação.
[02180] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,63 (br s, 1H), 5,52 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H).
[02181] Etapa D: 2-[(2S)-1-(2-metoxiprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,14 g, 274 umol, 1,00 eq), ácido 2-metoxiprop-2- enoico (112 mg, 1,09 mmol, 4,00 eq) e DIEA (141 mg, 1,09 mmol, 191 uL, 4,00 eq) em diclorometano (5,00 mL) foi adicionado HATU (208 mg, 547umol, 2,00 eq) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, a mistura foi diluída com água (3,00 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (FA, 0,10%)/acetonitrila] e HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 60% - 90%, 12 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada para dar o composto do título 2-[(2S)-1-(2- metoxiprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO
512, 10,27 mg, 17,22 umol, 6,3% de rendimento, 99,9% de pureza) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 596.
[02182] Condição SFC: "IC-3S_3_40_3ML Coluna: Chiralpak IC-3 100 × 4,6 mm I.D., 3 um, fase móvel: 40% de metanol (0,05% DEA) em CO2, Taxa de fluxo: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm".
[02183] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,45 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,05 - 4,61 (m, 1H), 4,48 (br s, 1H), 4,37 (td, J = 4,4, 10,0 Hz, 1H), 4,30 - 3,98 (m, 4H), 3,96 - 3,74 (m, 2H), 3,69 (br s, 3H), 3,59 - 3,28 (m, 2H), 3,27 - 2,93 (m, 6H), 2,92 (s, 3H), 2,88 - 2,51 (m, 4H), 2,47 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,98 (m, 1H), 1,89 - 1,74 (m, 3H).
EXEMPLO 513 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila
DCM, 25°C, 1 h duas etapas, 13% Duas etapas: 7,6%
[02184] Etapa 1: etil (E)-4-hidroxibut-2-enoato. A uma solução de ácido (E)- 4-etoxi-4-oxo-but-2-enoico (1,0 g, 7,29 mmol, 1,0 eq) em THF (6,0 mL) foi adicionada uma solução de BH3-Me2S (10,0 M, 692 uL, 0,95 eq) em THF (8,0 mL) gota a gota ao longo de 1 hora a -10°C. A mistura de reação foi gradualmente aquecida até 25°C e agitada por 17 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de água (30,0 mL) e extraída com acetato de etila (30,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30,0 mLx2), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O composto etil (E)-4-hidroxibut-2-enoato (900 mg, bruto) foi obtido como um óleo incolor. O produto bruto foi utilizado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02185] Etapa 2: (E)-4-hidroxibut-2-enoato. Uma mistura de etil (E)-4- hidroxibut-2-enoato (900 mg, bruto), [cloro(difenil)metil]benzeno (2,89 g, 10,4 mmol), DMAP (84,5 mg, 692 umol), TEA (1,4 g, 13,8 mmol, 1,9 mL) em DCM (5,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora sob atmosfera de N2. Depois da conclusão. a mistura de reação foi extinta por adição de H2O (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila=20:1 a 15:1). O composto etil (E)-4-tritiloxibut-2-enoato (340 mg, 913 umol, 13% de rendimento) foi obtido como óleo incolor.
[02186] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,38 - 7,35 (m, 6 H), 7,26 - 7,22 (m, 6 H), 7,18 - 7,15 (m, 3 H), 6,88 (dt, J = 15,6, 3,6 Hz, 1 H), 6,29 (dt, J = 15,6, 2,2 Hz, 1 H), 4,16 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,72 (dd, J = 2,4, 2,0 Hz, 2 H), 1,25 (t, J = 7,0 Hz, 3 H).
[02187] Etapa 3: ácido (E)-4-tritiloxibut-2-enoico. A uma solução de etil (E)- 4-tritiloxibut-2-enoato (170 mg, 456 umol, 1,0 eq) em MeOH (1,0 mL) foi adicionada solução de NaOH (54,5 mg, 1,37 mmol, 3,0 eq) em H2O (0,5 mL) e, em seguida, a mistura foi agitada a 40°C por 1 hora sob atmosfera de N 2. Após a conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de HCl 1 M a 0°C, até pH = 5 e, em seguida, extraída com acetato de etila (8,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3:1 a 1:1). O composto ácido (E)-4-tritiloxibut-2-enoico (113 mg, 328 umol, rendimento de 72%) foi obtido como um sólido branco.
[02188] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,38 - 7,36 (m, 6 H), 7,26 - 7,24 (m, 5 H), 7,20 - 7,16 (m, 4 H), 7,0 (dt, J = 15,6, 3,6 Hz, 1 H), 6,32 (dt, J = 15,6, 2,0 Hz, 1 H), 3,76 (dd, J = 3,2, 2,4 Hz, 2 H).
[02189] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-tritiloxibut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (Intermediário 71, 60,0 mg, 113 umol, 1.0 eq), ácido (E)-4-tritiloxibut -2-enoico (77.8 mg, 226 umol, 2,0 eq) e DIEA (73,0 mg, 564 umol, 98 uL, 5,0 eq) em DCM (2,0 mL) foi adicionado HATU (64 mg, 169 umol, 1,5 eq) em uma porção, a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora.
Depois da conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de H2O (8,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo e o produto bruto foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 858.
[02190] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-hidroxibut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- [(E)-4-tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto) em DCM (1,0 mL) foi adicionado TFA (1,0 mL, 13,5 mmol). A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Após a conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de solução aquosa de NaHCO3 a 0°C, até pH = 8 e, em seguida, extraída com acetato de etila (10,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um; fase móvel: [água (0,04% de NH3H2O + 10 mM de NH4HCO3)-ACN]; B%: 48%-72%, 10 min.) e liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 513, 8,21 mg, 13,3 umol, 7,6% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[02191] Condição SFC: 100% e.e.
[02192] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,70- 7,33 (m, 1 H), 7,49 (dd, J = 6,8, 0,8 Hz, 1 H), 7,37 (dt, J = 11,98, 7,82 Hz, 1 H),
7,26 (t, J = 11,8 Hz, 1 H), 7,19 - 7,11 (m, 1 H), 6,99 (dt, J = 14,8, 3,4 Hz, 1 H), 6,56 (br s, 1 H), 5,02-4,57 (m, 1 H), 4,39-4,29 (m, 4 H), 4,12-4,06 (m, 1 H), 4,03- 3,99 (m, 2 H), 3,85-3,72 (m, 2 H), 3,67-3,36 (m, 3 H), 3,24-3,09 (m, 2 H), 3,03- 2,89 (m, 3 H), 2,73 (br s, 1 H), 2,63-2,61 (m, 1 H), 2,50 (br s, 1 H), 2,41 (s, 3 H), 2,25-2,19 (m, 1 H), 2,03-1,92 (m, 1 H), 1,70-1,60 (m, 3 H).
EXEMPLO 514 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-metoxiprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila 0,5 h
[02193] Etapa 1: metil 2,2-dimetoxipropanoato. A uma solução de etil 2- oxopropanoato (4,00 g, 34,5 mmol, 3,81 mL, 1,00 eq) e trimetoximetano (4,75 g, 44,8 mmol, 4,91 mL, 1,30 eq) em metanol (10,0 mL) foi adicionado H 2SO4 (33,8 mg, 344 umol, 18,4 uL, 0,01 eq). Após agitar a 65°C por 4 horas, a mistura de reação foi ajustada para valor de pH foi ajustado > 7 por KOH aquoso (120 mg em 20,0 mL de água) e extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (1 × 30,0 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi destilado a 60°C sob vácuo para dar metil 2,2-dimetoxipropanoato (4,00 g, 27,0 mmol, 78% de rendimento) como um óleo incolor.
[02194] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 3,81 (s, 3H), 3,28 (s, 6H), 1,52 (s, 3H).
[02195] Etapa 2: metil 2-metoxiprop-2-enoato. A uma solução de metil 2,2- dimetoxipropanoato (2,00 g, 13,5 mmol, 1,00 eq) em DMF (20,0 mL) foi adicionado P2O5 (1,05 g, 7,42 mmol, 458 uL, 0,55 eq) em porções. Depois de agitar a 100°C por 1 hora, a mistura foi diluída com bicarbonato de sódio saturado (20,0 mL), extraído com éter isopropílico (3 x 30,0 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (3 × 40,0 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi destilado sob vácuo para dar metil 2- metoxiprop-2-enoato (0,65 g, 5,60 mmol, 41% de rendimento) como um óleo incolor que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02196] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 5,36 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,66 (s, 3H).
[02197] Etapa 3: ácido 2-metoxiprop-2-enoico. Uma mistura de metil 2- metoxiprop-2-enoato (0,60 g, 5,17 mmol, 1,00 eq) e NaOH (827 mg, 20,7 mmol, 4,00 eq) em H2O (5,00 mL) e THF (5,00 mL) foi agitada 60°C por 1 hora. A mistura foi ajustada para pH < 3 por HCl concentrado (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar ácido 2-metoxiprop-2-enoico (0,40 g, 1,96 mmol, 38% de rendimento, 50% de pureza) na forma de um óleo cor de rosa e utilizada na próxima etapa sem mais purificação.
[02198] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,63 (br s, 1H), 5,52 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H).
[02199] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-metoxiprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (0,20 g, 376 umol, 1,00 eq), ácido 2-metoxiprop-2- enoico (153 mg, 1,50 mmol, 4,00 eq) e DIEA (194 mg, 1,50 mmol, 262 uL, 4,00 eq) em diclorometano (5,00 mL) foi adicionado HATU (286 mg, 752 umol, 2,00 eq) a 0°C. Após agitada a 0°C por 0,5 h, a reação foi purificada por flash de fase reversa [água (FA, 0,1%)/acetonitrila], HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225 % FA)-ACN]; B%: 25% - 45%, 7,8 min) e HPLC-prep adicional (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN ]; B%: 55% - 79%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro- 1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-(2-metoxiprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 514 30,1 mg, 48,9 umol, 13% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[02200] Condição SFC: "AS-3_ MeOH (DEA) _5_40_3mL-35T Coluna: Chiralpak AS-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm".
[02201] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,44 (td, J = 7,6, 13,6 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 5,07 - 4,63 (m, 1H), 4,57 - 4,29 (m, 4H), 4,21 - 3,96 (m, 3H), 3,95 - 3,77 (m, 2H), 3,69 (br s, 3H), 3,59 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,51 - 3,32 (m, 1H), 3,30 - 3,02 (m, 5H), 2,89 - 2,50 (m, 4H), 2,47 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 2,32 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,89 - 1,72 (m, 3H).
EXEMPLO 515 2-[(2S)-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il)but-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila Piridina, DCM 0°C, 0,5 hr 0-20°C, 0,5h duas etapas 29%
[02202] Etapa A: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 293 umol, 1,0 eq) e piridina (186 mg, 2,35 mmol, 189 uL, 8,0 eq) em diclorometano (4,0 mL) foi adicionado cloreto de (E)- 4-bromobut -2-enoil (215 mg, 1,17 mmol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada para dar o produto 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil))-2-[[(2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (200 mg, bruto) como óleo amarelo. O produto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 658.
[02203] Etapa B: 2-[(2S)-1-[(E)-4-(3- fluoroazetidin-1-il)but-2-enoil]-4-[7-(8- metil-1-naftil))-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila.A uma solução de 2-[(2S)-1-[(E)-4- bromobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 228 umol, 1,0 eq) e K2CO3 (315 mg, 2,28 mmol, 10,0 eq) em acetonitrila (2,0 mL) foi adicionada 3-fluoroazetidina (152 mg, 1,37 mmol, 6,0 eq, HCl). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (5,0 mL) e extraída com acetato de etila (5,0 mL × 4). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN]; B%: 60% -90%, 12 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il)but-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil))-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 515, 45,0 mg, 66 umol, 29% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 653.
[02204] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 7,6, 15,2 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 6,92 -6,82 (m, 1H), 6,52 - 6,31 (m, 1H), 5,28 - 5,08 (m, 1H), 5,07 - 4,46 (m, 1H), 4,41 - 4,33 (m, 1H), 4,32 - 4,01 (m, 4H), 4,01 - 3,79 (m, 2H), 3,79 - 3,56 (m, 3H), 3,55 - 3,37 (m, 2H), 3,36 - 3,31 (m, 2H), 3,30 - 3,24 (m, 1H), 3,23 - 3,18 (m, 2H), 3,17 - 3,15 (m, 1H), 3,14 - 3,06 (m, 2H), 3,05 - 2,95 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,86 - 2,75 (m, 1H), 2,71 - 2,57 (m, 2H), 2,47 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,11 - 1,99 (m, 1H), 1,88 - 1,67 (m, 3H).
EXEMPLO 516
2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((R)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila HCL.dioxano Cs2CO3, tolueno, Cs2CO3, Dioxano 0°C, 90°C, 6 h, 54% tolueno, 1h, 80% 90°C, 5h, 53% 0 °C, 0,5 h 30%
[02205] Etapa A: terc-Butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. Uma mistura de terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (5,5 g, 10,4 mmol, 1 eq), [(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (2,40 g, 20,9 mmol, 2,25 mL, 2 eq), Pd2(dba)3 (1,91 g, 2,09 mmol, 0,2 eq), RuPhos (1,95 g, 4,17 mmol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (8,50 g, 26,1 mmol, 2,5 eq) em tolueno (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 5 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi diluído com acetato de etila (100 mL) e água (50 mL). Depois a mistura foi acidificada até PH ~ 4 com solução aquosa de HCl 1 M. A fase de água foi separada e basificada até PH ~ 8 com uma solução saturada de Na2CO3 aquosa, em seguida, a mistura foi extraída com acetato de etila (50 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. terc-Butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (4 g, 5,55 mmol, 53% de rendimento, 84% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na próxima etapa sem purificação.
[02206] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,46 - 7,31 (m, 5H), 5,23 (s, 2H), 4,74 - 4,49 (m, 2H), 4,43 - 4,27 (m, 2H), 4,21 - 3,70 (m, 5H), 3,42 - 3,17 (m, 3H), 3,09 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,98 (td, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,86 - 2,74 (m, 1H), 2,74 - 2,54 (m, 4H), 2,47 (s, 3H), 2,35 - 2,21 (m, 1H), 2,05 - 1,97 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H), 1,49 (s, 9H).
[02207] Etapa B: (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido de benzil[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (3,7 g, 6,11 mmol, 1 eq) em dioxano (20 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 22,9 mL, 15 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. O líquido foi decantado e o sólido foi coletado. O resíduo sólido foi diluído com água (50 mL) e diclorometano (100 mL), em seguida a mistura foi basificada até pH ~ 8 com solução saturada de Na2CO3 aquosa e extraída com diclorometano (100 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2,6 g, 4,89 mmol, 80% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 506.
[02208] Etapa C: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (2,3 g, 4,55 mmol, 1 eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (Intermediário 69,1,31 g, 5,91 mmol, 1,3 eq), Cs2CO3 (3,71 g, 11,4 mmol, 2,5 eq), Pd2(dba)3 (833 mg, 909 umol, 0,2 eq) e Xantphos (1,05 g, 1,82 mmol, 0,4 eq) em tolueno (50 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 6 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (200 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila / metanol = 100/1 a 10/1). Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (1,6 g, 2,48 mmol, 54% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo.
[02209] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (1,60 g, 2,48 mmol, 1,00 eq) em MeOH (20,0 mL) e NH3 (20% p/p em MeOH, 7 mL) foi hidrogenada com Pd/C (100 mg, 2,48 mmol, 10% de pureza, 1,00 eq) como um catalisador sob H2 (4,99 mg, 2,48 mmol, 1,00 eq, 15 psi) a 25°C por 3 horas. O catalisador foi filtrado através de uma almofada de celite e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O produto bruto foi utilizado na etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazin-2-il]acetonitrila (1,20 g, 2,35 mmol, 95% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02210] Etapa E: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (140 mg, 274 umol, 1,00 eq) e ácido 2-fluoroprop-2- enoico (73,9 mg, 821 umol, 3,00 eq) em diclorometano (3,00 mL) foi adicionado DIEA (212 mg, 1,64 mmol, 286 uL, 6,00 eq), HATU (312 mg, 821 umol, 3,00 eq) em uma porção a 0°C sob N2. Após agitação a 0°C por 30 min., a mistura de reação foi diluída com água (10,0 mL) e extraída com diclorometano (2 x 10,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (1 x 10,0 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10um; fase móvel: [água (0,04% NH3H2O + 10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 55% - 85%, 10 min.). Composto do título 2-[(2S)-1-(2- fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 516, 48,7 mg, 82,1 umol, 30% de rendimento, 98,4% de pureza) foi obtido como um sólido branco.
[02211] Condição SFC: "Coluna: Chiralcel OJ-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3 mL/min., Comprimento de onda: 220 nm".
[02212] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,62 (m, 2H), 7,45 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,53 - 5,34 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 17,2 Hz, 1H), 4,88 (br s, 1H), 4,41 - 4,32 (m, 1H), 4,31 - 4,22 (m, 1H), 4,21 - 4,10 (m, 2H), 4,10 - 4,02 (m, 1H), 3,89 (br d, J = 18,0 Hz, 1H), 3,78 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,59 - 3,40 (m, 2H), 3,27 - 3,15 (m, 2H), 3,14 - 3,04 (m, 2H), 3,03 - 2,90 (m, 4H), 2,90 -
2,73 (m, 2H), 2,72 - 2,56 (m, 2H), 2,47 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 1,98 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H).
EXEMPLO 517 2-((S)-1-((E)-4-hidroxibut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila 0,5 h
[02213] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-tritiloxibut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, 234 umol, 1 eq), TEA (142 mg, 1,41 mmol, 195 uL, 6 eq) e ácido (E)-4-tritiloxibut-2-enoico (96,9 mg, 281 umol, 1,2 eq) em acetato de etila (2 mL) foi adicionado T3P (448 mg, 703 umol, 418 uL, 50% de pureza em EtOAc, 3 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (5 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL ×
3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/Metanol = 200/1 a 10/1). 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (90 mg, 103 umol, 44% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
838.
[02214] Etapa B: 2-[(2S)-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- [(E)-4-tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (80 mg, 95,5 umol, 1 eq) em diclorometano (200 uL) foi adicionado TFA (218 mg, 1,91 mmol, 141 uL, 20 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi diluída com água (5 mL) e basificada até pH ~ 8 com solução de NaHCO3 aquosa (2 mL). A mistura foi extraída com diclorometano (5 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50% - 80%, 12 min.). A mistura foi coletada e lioflizada. Composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 517, 10,2 mg, 16,8 umol, 18% de rendimento, 98,5% de pureza) foi obtido como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 596.
[02215] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OD-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, Fase móvel: 40% de metanol (0,05% DEA) em CO2, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm.
[02216] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,61 (m, 2H), 7,46 - 7,30 (m, 2H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 7,06 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 6,62 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 5,25 - 4,53 (m, 1H), 4,48 - 4,32 (m, 3H), 4,30 - 3,95 (m, 4H), 3,93 - 3,82 (m, 1H), 3,81 - 3,61 (m, 1H), 3,59 - 3,39 (m, 2H), 3,30 - 2,96 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,87 - 2,53 (m, 4H), 2,47 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,34 - 2,21 (m, 1H), 2,13 - 1,99 (m, 1H), 1,98 - 1,82 (m, 3H).
EXEMPLO 518 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil))- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0,5 hr, 82% 0 °C, 0,5 hr 27%
[02217] Etapa 1: O1-terc-butil O2-metil (2R,4R)-4-fluoropirrolidina-1,2- dicarboxilato. A uma solução de ácido (2R,4R)-1-terc-butoxicarbonil-4-fluoro- pirrolidina-2-carboxílico (300 mg, 1,29 mmol, 1,0 eq) e K2CO3 (533 mg, 3,86 mmol, 3,0 eq) em DMF (2,0 mL) foi adicionado MeI (4,80 g, 33,8 mmol, 2,11 mL, 26,3 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 12 horas. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (5,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL × 2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila = 10:1-1:1) para dar o produto O1-terc-butil-O2-metil (2R,4R)-4-fluoropirrolidina- 1,2-dicarboxilato (300 mg, 1,21 mmol, 94% de rendimento) como óleo amarelo.
[02218] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,30 - 5,10 (m, 1H), 4,58 - 4,37 (m, 1H), 3,94 - 3,76 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,72 - 3,55 (m, 1H), 2,54 - 2,23 (m, 2H), 1,52 - 1,40 (m, 9H).
[02219] Etapa 2: [(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol A uma solução de O1-terc-butil O2-metil (2R,4R)-4-fluoropirrolidina-1,2-dicarboxilat. (300 mg, 1,21 mmol, 1,0 eq) em THF (3,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (138 mg, 3,64 mmol, 3,0 eq) a -40°C. A mistura foi agitada a esta temperatura por 1 hora, depois aquecida até 70°C e agitada a 70°C por 2 horas. Depois da conclusão, a mistura de reação foi extinta com solução saturada de Na2SO4 aquosa (0,30 mL), em seguida, filtrada. O licor mãe foi coletado e concentrado sob vácuo para dar o produto [(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (130 mg, 976 umol, 80% de rendimento) como óleo amarelo.
[02220] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,18 - 4,98 (m, 1H), 3,76 - 3,70 (m, 1H), 3,54 - 3,43 (m, 1H), 3,38 - 3,28 (m, 1H), 2,51 - 2,44 (m, 1H), 2,42 - 2,37 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,34 - 2,26 (m, 1H), 2,21 - 2,09 (m, 1H).
[02221] Etapa A: benzil(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato A uma solução de [(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-
2-il] metanol (103 mg, 773 umol, 2,0 eq) e t-BuONa (55,8 mg, 580 umol, 1,50 eq) em tolueno (2,0 mL) foi adicionado benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (230 mg, 387 umol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa (C18, 0,1% FA em água, 0 - 60% MeCN) para dar o produto benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (210 mg, 316 umol, 82% de rendimento) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:664.
[02222] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 7,45 - 7,32 (m, 7H), 7,26 - 7,17 (m, 2H), 5,24 - 5,02 (m, 3H), 4,73 - 4,61 (m, 1H), 4,53 - 4,42 (m, 1H), 4,30 - 4,18 (m, 2H), 4,11 - 3,96 (m, 2H), 3,94 - 3,81 (m, 1H), 3,81 - 3,67 (m, 1H), 3,58 - 3,47 (m, 1H), 3,46 - 3,29 (m, 2H), 3,24 - 3,06 (m, 3H), 3,05 - 2,96 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,82 - 2,71 (m, 2H), 2,70 - 2,51 (m, 2H), 2,50 - 2,47 (m, 4H), 2,45 - 2,35 (m, 1H), 2,12 - 2,05 (m, 1H).
[02223] Etapa B: 2-[(2)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 301 umol, 1,0 eq) e NH3•MeOH (2,0 mL, 20% de pureza) em metanol (4,0 mL) foi adicionado Pd/C (80 mg, 10% de pureza). A mistura foi purgada por N2 por 3 vezes e, em seguida, agitada sob atmosfera de H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de Celite. O licor mãe foi concentrado sob vácuo para dar o produto 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (140 mg, 264 umol, 88% de rendimento) como óleo amarelo. O produto foi usado para a próxima etapa diretamente, sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:664.
[02224] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-pirrolidin-2-metil- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila.A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, 226 umol, 1,0 eq), 2- ácido fluoroprop-2-enoico (61,2 mg, 680 umol, 3,0 eq) e DIEA (176 mg, 1,36 mmol, 238 uL, 6,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado HATU (258,44 mg, 679,69 umol, 3 eq) . A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura de reação foi adicionada água (5,0 mL) e extraída com acetato de etila (5,0 mL × 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de aônia v/v)-ACN]; B%: 50% -80%, 12 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 518, 37,9 mg, 60,1 umol, 27% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 602.
[02225] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 5,53 - 5,32 (m, 1H), 5,30 - 5,22 (m, 1H), 5,21 - 5,03 (m, 1H), 4,97 - 4,68 (m, 1H), 4,52 - 4,42 (m, 1H), 4,29 - 4,20 (m, 2H), 4,18 - 4,03 (m, 2H), 3,95 - 3,68 (m, 2H), 3,60 - 3,41 (m, 2H), 3,39 - 3,30 (m, 1H), 3,26 - 3,15 (m, 2H), 3,15 - 2,95 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,90 - 2,54 (m, 4H), 2,53 - 2,46 (m, 4H), 2,45 - 2,35 (m, 1H), 2,13 - 1,97 (m, 1H).
EXEMPLO 519
2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il] metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, NH3 · MeOH tolueno, 0°C, 20 °C, 0,5 h 0,5 h, 75% 76% T3P, TEA,
DCM 0 °C, 0,5 h 35%
[02226] Etapa 1: O1-terc-butil O2-metil(2R,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2- dicarboxilato. A uma solução de O1-terc-butil O2-metil (2R,4R)-4- hidroxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (2,1 g, 8,56 mmol, 1 eq) em MeCN (42 mL) foi adicionado Ag2O (5,95 g, 25,7 mmol, 3 eq) e CH3I (7,75 g, 54,6 mmol, 3,40 mL, 6,38 eq). A mistura de reação foi agitada a 33°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 8/1 a 5/1) para dar 1- O1-terc-butil O2-metil (2R,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,88 g, 6,89 mmol, 80% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo incolor.
[02227] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 4,45 - 4,26 (m, 1H), 3,96 - 3,89 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,68 - 3,55 (m, 1H), 3,54 - 3,43 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 2,38 - 2,17 (m, 2H), 1,51 - 1,37 (m, 9H).
[02228] Etapa 2: [(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol. À solução de O1-terc-butil O2-metil (2R,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (2,98 g, 11,5 mmol, 1 eq) em THF (60 mL) foi adicionado LiAlH4 (872 mg, 23,0 mmol, 2 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida até 80°C e agitada por 2 horas. A mistura foi extinta com solução saturada de Na2SO4 aquosa (3 mL), em seguida, filtrada e a torta de filtração foi lavada com THF (3 x 20 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar [(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (1,53 g, 10,0 mmol, 87% de rendimento, 95,0% de pureza) como um óleo marrom que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02229] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 3,82 - 3,76 (m, 1H), 3,69 (dd, J = 3,2, 11,2 Hz, 1H), 3,45 (dd, J = 1,6, 10,8 Hz, 1H), 3,29 (s, 3H), 3,18 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,62 (br s, 1H), 2,42 (tdd, J = 2,8, 6,4, 9,2 Hz, 1H), 2,38 - 2,33 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,16 (ddd, J = 6,8, 8,8, 14,0 Hz, 1H), 1,92 (tdd, J = 1,6, 6,8, 14,0 Hz, 1H).
[02230] Etapa A: (benzil(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de [(2R,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il] metanol (1,37 g, 9,42 mmol, 2,8 eq) em tolueno (40 mL) foi adicionado t-BuONa (970 mg, 10,1 mmol, 3 eq) a 0°C, depois benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2 g, 3,36 mmol, 1 eq) foi adicionado a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (20 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 57%) para dar (benzil (2S)-2-(cianometil)- 4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (1,8 g, 2,53 mmol, 75% de rendimento, 95,0% de pureza)) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 676.
[02231] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,60 (m, 2H), 7,47 - 7,31 (m, 7H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,67 (br s, 1H), 4,45 (br dd, J = 4,4, 10,0 Hz, 1H), 4,24 - 4,16 (m, 2H), 4,10 - 3,96 (m, 2H), 3,96 - 3,65 (m, 3H), 3,59 - 3,40 (m, 2H), 3,29 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 3,25 - 3,06 (m, 4H), 3,00 (dt, J = 3,6, 12,4 Hz, 1H), 2,91 (s, 3H), 2,81 - 2,55 (m, 4H), 2,45 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,42 - 2,29 (m, 2H), 1,88 - 1,68 (m, 2H).
[02232] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. À solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (2 g, 2,96 mmol, 1 eq) e NH3•MeOH (20 mL, 20% de pureza) em MeOH (40 mL) foi adicionado Pd/C (1 g, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (1,29 g, 2,26 mmol, 76% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 542.
[02233] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 277 umol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-enoico (74,8 mg, 831 umol, 3 eq) e TEA (336 mg, 1,66 mmol, 462 uL, 50% de pureza, 6 eq) em EtOAc (3 mL) foi adicionado T3P (264 mg, 831 umol, 247 uL, 3 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (4 mL) à mistura. A mistura foi extraída com EtOAc (3 × 8 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 32%). Em seguida, o resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 12min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-1-(2- fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8- metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 519, 59,5 mg, 97,0 umol, 35% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 614.
[02234] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 - 7,38 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,53 - 5,33 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,88 (br s, 1H), 4,50 - 4,41 (m, 1H), 4,30 - 3,99 (m, 4H), 3,96 - 3,71 (m, 3H), 3,59 - 3,40 (m, 2H), 3,30 (s, 3H), 3,25 - 3,15 (m, 3H), 3,14 - 2,94 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,90 - 2,74 (m, 2H), 2,73 - 2,55 (m, 2H), 2,45 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 2,42 - 2,29 (m, 2H), 1,81 (br dd, J = 7,2, 14,4 Hz, 1H).
EXEMPLO 520
2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il) but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, 0,5 hora, tolueno, 0°C, r.t. 83% 0,5 hora, 80% 0°C, 0,5 hora 0-20°C, 1 hora duas etapas 92%
[02235] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metanol (609,98 mg, 4,04 mmol, 3,0 eq) e t- BuONa (388 mg, 4,04 mmol, 3,0 eq) em tolueno (2,0 mL) foi adicionada gota a gota uma solução de benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,35 mmol, 1,0 eq) em tolueno
(4,0 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi lavada com água (15,0 ml) e extraída com acetato de etila (3 × 20,0 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (50,0 mL), secos com Na2SO4, filtrados e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% FA em água, 0-80% MeCN]. O produto obtido foi, então, concentrado, o aquoso foi extraído com acetato de etila (3 x 50,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Composto benzil(2S)-2-(cianometil)- 4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (750 mg, 1,08 mmol, 80,1% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 682.
[02236] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. benzil(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (650 mg, 953 umol, 1.0 eq) e Pd/C (200 mg, 10% de pureza) foram adicionados em MeOH (8,0 mL) e NH3MeOH (8,0 mL, 20% de pureza), em seguida, a mistura foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora sob atmosfera de H2 (15 psi). Após conclusão, a mistura bruta foi filtrada através de uma almofada de celite. A torta foi lavada com MeOH (50,0 mL) e o filtrado seco sob alto vácuo. Composto 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8- metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (420 mg, 736 umol, 77,2% de rendimento, 96% de pureza) foram obtidos como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 548.
[02237] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[2-[[(2S)-4,4- difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-
[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (420 mg, 822 umol, 1,0 eq) e piridina (520 mg, 6,57 mmol, 531 uL, 8,0 eq) em DCM (6,0 mL) foi adicionado cloreto de (E)-4-bromobut-2-enoil (603 mg, 3,29 mmol, 4,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O produto 2-[(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[2-[[(2S)- 4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (500 mg, bruto) foi obtido como óleo amarelo. O produto bruto foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 695.
[02238] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- (3-fluoroazetidin-1-il)but-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2- [(2S)-1-[(E)-4-bromobut-2-enoil]-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (500 mg, 720 umol, 1.0 eq) e K2CO3 (995 mg, 7,20 mmol, 10,0 eq) em MeCN (12,0 mL) foi adicionada 3-fluoroazetidina (482 mg, 4,32 mmol, 6,0) eq, HCl), a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, o solvente orgânico foi lavado com água (10,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3×10 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos Na2SO4 o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Base Al2O3, Éter de petróleo: Acetato de etila = 3: 1 para Acetato de etila : Metanol = 100:1), em seguida, o produto em bruto foi concentrado e purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150×25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 55% -79%, 10min.]; B%: 45% -75%, 12 min.) e liofilização. Composto do título 2-[(2S)- 4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il)but-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 520, 45,8 mg, 66,5 umol, rendimento de 9,24%, 100% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
689.
[02239] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,74 - 7,63 (m, 2H), 7,47 - 7,32 (m, 2H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 6,88 (br d, J = 15,3Hz, 1H), 6,42 (br d, J = 15,4 Hz, 1H), 5,27 - 5,05 (m, 1H), 4,64 (br s, 1H), 4,48 - 4,41 (m, 1H), 4,31 - 4,18 (m, 2H), 4,16 - 3,95 (m, 2H), 3,94 - 3,84 (m, 1H), 3,82 - 3,66 (m, 3H), 3,54 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,50 - 3,36 (m, 2H), 3,34 (br d, J = 3,8 Hz, 2H), 3,30 - 3,24 (m, 1H), 3,24 - 3,08 (m, 4H), 3,07 - 2,95 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,86 - 2,76 (m, 1H), 2,76 - 2,57 (m, 3H), 2,57 - 2,47 (m, 1H), 2,46 (d, J = 4,5 Hz, 3H), 2,34 - 2,17 (m, 1H).
EXEMPLO 521 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila
Duas etapas 15%
[02240] Etapa A: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1- tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (720 mg, 1,03 mmol, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (4,62 g, 40,5 mmol, 3 mL, 39,4 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 4 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com DCM (10 mL) e neutralizada com NaHCO3 aquoso saturado. Em seguida, a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar 2- [(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (880 mg, bruto) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02241] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(5,6- dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (500 mg, bruto), ácido 2-
fluoroprop-2-enoico (61,1 mg, 679 umol) e TEA (294 mg, 2,91 mmol, 405 uL) em DMF (10 mL) foi adicionado T3P (926 mg, 1,45 mmol, 865 uL, 50% de pureza em EtOAc) a -40°C. Em seguida, a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora e 0°C por mais 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (20 mL) e extraída com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 aquoso saturado e extraídas com EtOAc (2 × 70 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por meio de HPLC- prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um; fase móvel: [água (0,225% de FA)-ACN]; B%: 10%-40%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 521, 52,5 mg, 79,8 umol, duas etapas 15% de rendimento, 96,4% de pureza, FA) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:588.
[02242] Condição SFC: Coluna: Chiralcel OJ-3 100 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm.
[02243] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,03 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 5,53 - 5,34 (m, 1H), 5,25 (br dd, J = 3,2, 16,8 Hz, 1H), 5,02 - 4,61 (m, 3H), 4,43 (dd, J = 4,8, 11,6 Hz, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,19 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,01 (br d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,68 - 3,56 (m, 1H), 3,55 - 3,50 (m, 2H), 3,49 - 3,21 (m, 3H), 3,14 (br s, 1H), 2,98 (br s, 1H), 2,91 - 2,61 (m, 7H), 2,41 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,23 (qd, J = 8,4, 12,4 Hz, 1H), 2,14 - 1,95 (m, 3H).
EXEMPLO 522
2-((S)-4-(2-(((2R,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-hidroxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila HATU, DIEA, DCM 20 °C, DCM 0 °C, 0,5 hr 29% 0,5 hr 90%
[02244] Etapa A: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 378 umol, 1,0 eq), ácido (E)-4-tritiloxibut-2-enoico (169 mg, 491 umol, 1,3 eq) e DIEA (293 mg, 2,27 mmol, 395 uL, 6,0 eq) em DCM (3,0 mL) foi adicionado HATU (431 mg, 1,13 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, à mistura foi adicionada água (10 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 3/1 para Acetato de etila : Metanol=20:1). O produto 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (290 mg, 339 umol, 90% de rendimento) foi obtido como sólido amarelo.
[02245] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- hidroxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (290 mg, 339 umol, 1,0 eq) em diclorometano (1,5 mL) foi adicionado TFA (2,31 g, 20,3 mmol, 1,5 mL, 59,8 eq), a mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação foi concentrada, em seguida, adicionado diclorometano (10,0 mL), a camada orgânica foi lavada com solução saturada de NaHCO3 aquosa (2 x 10,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Base Al2O3, Éter de petróleo/Acetato de etila=3/1 para Acetato de etila: Metanol=20:1). O produto bruto foi, então, repurificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45% -75%, 12 min.), o produto obtido foi concentrado e sob liofilização. Composto do título 2- [(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (EXEMPLO 522, 61,3 mg, 99,9 umol, 29% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 614.
[02246] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,73 - 7,61 (m, 2H), 7,46 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 7,06 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 6,62 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,27 - 4,97 (m, 1H), 4,74 - 4,55 (m, 1H), 4,52 - 4,34 (m, 3H), 4,31 - 4,16 (m, 2H), 4,15 - 3,96 (m, 2H), 3,94 - 3,58 (m, 3H), 3,56 - 3,48 (m, 1H), 3,46 - 3,41 (m, 1H), 3,36 - 3,29 (m, 1H), 3,26 - 3,07 (m, 3H), 3,04 - 2,97 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,85 - 2,57 (m, 4H), 2,49 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,45 - 2,34 (m, 1H), 2,29 - 1,91 (m, 2H).
EXEMPLO 523 2-[(2S)-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila T3P, TEA,
EA 0 °C, 0,5 h 71%
[02247] Etapa A: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)- 4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 369 umol, 1 eq), ácido (E)-4-tritiloxibut-2-enoico (254 mg, 738 umol, 2 eq) e TEA (374 mg, 3,69 mmol, 514 uL, 10 eq) em EtOAc (4 mL) foi adicionado T3P (705 mg, 1,11 mmol, 659 uL, 50% de pureza, 3 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (10 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (5 mL) e extraída com EtOAc (15 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 mL), seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 70%) para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-tritiloxibut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, 262 umol, 71% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo.
[02248] Etapa B: 2-[(2S)-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]-4-[2-[[(2R,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-tritiloxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (230 mg, 265 umol, 1 eq) em DCM (2,3 mL) foi adicionado TFA (3,54 g, 31,1 mmol, 2,3 mL, 117 eq), a mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi basificada com NaHCO3 saturado (30 mL) até PH = 7 ~ 8, em seguida, extraída com DCM (2 x 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 32%). Então o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN]; B%: 37% -67%, 12 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-hidroxibut-2-enoil]-4-[2-[[(2R,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 523, 41,7 mg, 66,6 umol, 25% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 626.
[02249] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 - 7,38 (m, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 7,07 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 6,62 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,85 - 4,55 (m, 1H), 4,51 - 4,37 (m, 3H), 4,30 - 3,97 (m, 4H), 3,94 - 3,65 (m, 2H), 3,58 - 3,40 (m, 2H), 3,29 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 3,25 - 2,96 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,86 - 2,54 (m, 4H), 2,45 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,42 - 2,28 (m, 2H), 1,81 (br dd, J = 8,9, 13,6 Hz, 1H).
EXEMPLO 524 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2-enoil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02250] Etapa A: 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma mistura agitada de ácido 2-((S)-4-(7-(8- cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (100 mg, 0,1879 mmol), ácido (E)-4-metoxibut-2-enoico (32,73 mg, 0,2819 mmol) e N,N- dimetilformamida (1 mL, 12,79 mmol) foi resfriada até 0°C seguida pela adição de trietilamina (0,07859 mL, 0,5638 mmol) e 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6- trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido, 50% em EtOAc (0,1678 mL, 0,2819 mmol). A mistura de reação foi agitada por 2 horas enquanto aquecendo até a temperatura ambiente. A mistura foi particionada entre 0,5 M Na2CO3 (5 mL) e EtOAc (15 mL) e os orgânicos separados. As fases orgânicas foram em seguida lavadas com água e salmoura (5 mL cada), secas sobre Na2SO4 e evaporadas in vacuo. O resíduo foi em seguida cromatografado sobre sílica gel usando 4%MeOH + 0,4% NH4OH/DCM como eluente para dar um material impuro o qual foi adicionalmente purificado por Gilson HPLC prep inversa, eluindo com 5 a 75% ACN+0,1% TFA/H2O + 0,1% TFA. As frações contendo produto puro foram combinadas e particionadas entre DCM e uma solução saturada de Na2CO3 e as camadas foram separadas. As fases orgânicas foram em seguida lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4 e concentradas in vacuo para dar o composto do título puro (EXEMPLO 524, 33 mg, 28%). ESI+APCI MS m/z 630,3 [M+].
EXEMPLO 525 N-(3-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-3-oxoprop- 1-en-2-il)acetamida
[02251] Etapa A: N-(3-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il))metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-
il)piperazin-1-il)-3-oxoprop-1-en-2-il)acetamida: A um frasco de fundo redondo de 25 mL contendo diclorometano (2.932 ul, 0,2932 mmol), resfriado até 0°C foi adicionado 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (150 mg, 0,2932 mmol) e base de Hunig (307,2 µl, 1,759 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido 2-acetamidoacrílico (227,1 mg, 1,759 mmol) foi adicionado em uma porção. A seguir, foi adicionado lentamente anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (1.047 µl, 1,759 mmol) à mistura agitada. A reação foi agitada por 2 horas a 0°C. A reação foi tratada com água básica e a camada aquosa extraída com EtOAc (3X). Os orgânicos combinados foram concentrados in vacuo e purificados em Gilson (HPLC prep) eluindo com 5→95% de ACN+0,1% TFA/água+0,1% TFA. As frações contendo produto foram combinadas e basificadas com NaOH 1M e a camada aquosa extraída com DCM (2X). Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4 e concentrados in vacuo para dar o composto do título N-(3-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 1-il)-3-oxoprop-1-en-2-il)acetamida (EXEMPLO 525, 124,2 mg, 68,03% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 623,3 [M+H]+.
EXEMPLO 526 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-3-(piridin-4-il)acriloil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02252] 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-3-(piridin-4- il)acriloil)piperazin-2-il)acetonitrila: O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 525 usando Ácido Trans-3-(4-piridil) Acrílico no lugar de Ácido 2- acetamidoacrílico na Etapa A. ESI+APCI MS m/z 643,3 [M+H+.
EXEMPLO 527 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila
Pd2(dba)3, RuPhos, tolueno,
[02253] 1-bromo-5-fluoro-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno. A uma solução de 1-bromo-5-fluoro-2-iodo-3-metil-benzeno (2 g, 6,35 mmol, 1 eq) em DMF (40 mL) foi adicionado CuI (7,26 g, 38,1 mmol, 6 eq) e metil 2,2-difluoro-2- fluorossulfonil-acetato (7,32 g, 38,1 mmol, 4,85 mL, 6 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 12 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (20 mL × 3). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 10/1). Foi obtido 1-bromo-5-fluoro-3-metil-2- (trifluorometil) benzeno (1,3 g, 3,74 mmol, 59% de rendimento, 74% de pureza) como um óleo amarelo.
[02254] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,33 (dd, J = 2,4, 7,6 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 2,0, 8,8 Hz, 1H), 2,54 (q, J = 3,6 Hz, 3H).
[02255] 2-bromo-6-fluoro-4-metil-3-(trifluorometil)benzaldeído. A uma mistura de 1-bromo-5-fluoro-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno (900 mg, 3,50 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) foi adicionado LDA (2 M em THF, 3,50 mL, 2 eq) a -60°C sob atmosfera de nitrogênio. Após agitação por 0,5 hora, à mistura foi adicionado DMF (768 mg, 10,5 mmol, 808 uL, 3 eq). A mistura foi agitada a - 60°C por 1 hora. A reação foi extinta com solução aquosa saturada de NH4Cl (10 mL) e depois extraída com acetato de etila (50 mL x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (10 mL), seca sobre NaSO 4 anidro, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 200/1 a 5/1). Foi obtido 2-bromo-6- fluoro-4-metil-3-(trifluorometil)benzaldeído (700 mg, 2,46 mmol, 70% de rendimento) como um óleo amarelo.
[02256] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,35 (s, 1H), 7,08 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,66 - 2,58 (m, 3H).
[02257] 4-bromo-6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol. Uma solução de 2- bromo-6-fluoro-4-metil-3-(trifluorometil)benzaldeído (600 mg, 2,11 mmol, 1 eq) e hidrazina mono-hidratada (2,11 g, 42,1 mmol, 2,05 mL, 20 eq) em DMSO (8 mL) foi agitada a 60°C por 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (50 mL) e lavada com água (3 x 50 mL) e salmoura (1 x 50 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Foi obtido 4- bromo-6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol (550 mg, 1,97 mmol, 94% de rendimento) como um sólido branco.
[02258] 4-bromo-6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol. A uma solução de 4-bromo-6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol (500 mg, 1,79 mmol, 1 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado ácido 4-metilbenzenossulfônico hidratado (34,1 mg, 1791 umol , 0,1 eq) seguido por uma solução de um DHP (603 mg, 7,17 mmol, 655 uL, 4 eq) em CH3CN (2 mL). A mistura foi agitada a
25°C por 16 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (100 mL) e lavada com água (2 x 100 mL) e salmoura (1 x 50 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 20/1 a 3/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 4-bromo-6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol (600 mg, 1,54 mmol, 86% de rendimento, 93% de pureza) como um goma amarela clara. LCMS [MSI, M+1]: 363.
[02259] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-[6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 848 umol, 1 eq), 4-bromo-6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol (431 mg, 1,19 mmol, 1,4 eq) Pd2(dba)3 (155 mg, 170 umol, 0,2 eq), RuPhos (158 mg, 339 umol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (691 mg, 2,12 mmol), 2,5 eq) em tolueno (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e, em seguida, a mistura foi agitada a 100°C por 16 horas sob atmosfera de N2. À mistura foi adicionada H2O (20 mL x 1) e acetato de etila (20 mL x 1). A fase orgânica foi separada, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (Acetato de etila/Metanol = 50/1 a 2/1). terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-1- tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil)indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 535 umol, 32% rendimento, 80,7% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [MSI, M+1]: 754.
[02260] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil- 5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-
(trifluorometil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (470 mg, 503 umol, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (2,29 g, 20,1 mmol, 1,49 mL, 40 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 h. À mistura foi adicionado diclorometano (5 mL) e basificada com solução aquosa saturada de NaHCO3 até pH = 8 ~ 9. A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (420 mg, 453 umol, 90% de rendimento, 61,4% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [MSI, M+1]: 570.
[02261] Etapa C: 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(6-metil-5-(trifluorometil)-1H- indazol-4-il)-2-(((S))-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (380 mg, 410 umol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-enoico (18,4 mg, 205 umol, 0,5 eq) e TEA (124 mg, 1,23 mmol, 171 uL, 3 eq) em DMF (8 mL) foi adicionado T3P (391 mg, 614 umol, 365 uL, 50% de pureza) em DMF, 1,5 eq) a -40°C. Em seguida, a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora e 0°C por mais 0,5 hora. Adicionou-se ácido 2-fluoroprop- 2-enoico (11 mg) e T3P (100 µL) e a mistura foi agitada a -40°C por mais 0,5 hora. A mistura foi diluída com água (15 mL) e extraída com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - ACN]; B%: 22% - 42%, 7,8 min.) e (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10um; fase móvel: [água (0,04% de NH3H2O + 10 mM NH4HCO3)-ACN];% B: 50% - 68%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il)-2-(((S)-1-
metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila (EXEMPLO 527) como um sólido branco.
EXEMPLO 528 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-(3-fluoroazetidin-1-il)but-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02262] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 520 modificando o Intermediário 66 usando (S)-(4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metanol no lugar de (1-metilpirrolidin-2-il)metanol no Intermediário 66, Etapa E, o Intermediário 66 modificado é desprotegido usando as condições no Intermediário 71, Etapa A, depois é usando no lugar do Intermediário 66 no Exemplo 520, Etapa A.
EXEMPLO 529
2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02263] O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 467 usando ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico no lugar de cloreto de acriloíla usando as condições do Exemplo 479, Etapa C. LCMS [ESI, M+1]: 634.
[02264] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 - 7,38 (m, 1H), 7,38 - 7,32 (m, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 7,09 - 6,93 (m, 1H), 6,60 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,32 - 4,93 (m, 3H), 4,64 (br s, 1H), 4,45 (td, J = 5,2, 11,2 Hz, 1H), 4,32 - 3,63 (m, 6H), 3,58 - 3,36 (m, 3H), 3,25 - 2,96 (m, 5H), 2,93 (s, 3H), 2,88 - 2,77 (m, 1H), 2,75 - 2,50 (m, 3H), 2,46 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,34 - 2,15 (m, 1H).
[02265] Condição SFC: coluna: Chiralcel OJ-3 50 × 4,6 mm I.D., 3um, fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40%, Taxa de fluxo: 3mL/min., Comprimento de onda: 220nm.
EXEMPLO 530 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02266] O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 467 usando cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil no lugar de cloreto de acriloil usando as condições do Exemplo 478, Etapa A. LCMS [ESI, M+1]: 620.
[02267] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,63 (m, 2H), 7,46 - 7,33 (m, 2H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 5,54 - 5,33 (d, J = 47,6 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,05 - 4,62 (m, 1H), 4,58 - 4,37 (m, 1H), 4,31 - 4,13 (m, 3H), 4,12 - 4,05 (m, 1H), 3,97 - 3,73 (m, 1H), 3,59 - 3,36 (m, 3H), 3,27 - 2,95 (m, 6H), 2,92 (s, 3H), 2,89 - 2,49 (m, 5H), 2,46 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,34 - 2,17 (m, 1H).
[02268] SFC: "Coluna: Chiralcel OJ - 3 50×4,6 mm I.D., 3 um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm".
EXEMPLO 531 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02269] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 467 usando ácido (metoximetil)prop-2-enoico no lugar de cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 489, Etapa A.
EXEMPLO 532
2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-hidroxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02270] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 467, usando ácido 4-[terc-butil(dimetil)silil]oxibut-2-inoico no lugar de cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 483, Etapa A.
EXEMPLO 533 (S,E)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indol- 4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-fluorobut-2-en- 1-ona
[02271] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 469 usando ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 479, Etapa C.
EXEMPLO 534
(S,E)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indol- 4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-metoxibut-2-en- 1-ona
[02272] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 469 usando ácido 2-(metoximetil) prop-2-enoico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 489, Etapa A.
EXEMPLO 535 (S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-yl)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indol-4- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-2-fluoroprop-2-en-1- ona
[02273] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 469 usando ácido 2-fluoroacrílico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 478, Etapa A.
EXEMPLO 536
(S,E)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indol- 4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-hidroxibut-2-en- 1-ona
[02274] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 469 usando ácido 4-[terc-butil (dimetil)silil]oxibutil-2-inoico no lugar de prop-2-enoil prop-2- enoato no Exemplo 469, Etapa D, e seguindo os procedimentos do Exemplo 483, Etapa A.
EXEMPLO 537 (S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-yl)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indazol- 4-yl)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-2-fluoroprop-2- en-1-ona
[02275] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 470, usando ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 478, Etapa A.
EXEMPLO 538 (S,E)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4- fluorobut-2-en-1-ona
[02276] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 470, usando ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 479, Etapa C.
EXEMPLO 539 (S)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-yl)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H-indol-4- il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-2-fluoroprop-2-en-1- ona
[02277] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 470 usando ácido 2-fluoroacrílico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 478, Etapa A.
EXEMPLO 540 (S,E)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4- metoxibut-2-en-1-ona
[02278] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 470 usando ácido 2-(metoximetil) prop-2-enoico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato no Exemplo 489, Etapa A.
EXEMPLO 541 (S,E)-1-(4-(2-((4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4- hidroxibut-2-en-1-ona
[02279] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 470 usando ácido 4-[terc-butil (dimetil)silil]oxibut-2-inoico no lugar de prop-2-enoil prop-2-
enoato no Exemplo 470, Etapa C e seguindo os procedimentos do Exemplo 483, Etapa A.
EXEMPLO 542 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02280] O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 468 usando cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil no lugar de cloreto de acriloil usando as condições do Exemplo 479, Etapa C. LCMS [ESI, M+1]: 655.
[02281] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,50 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 7,08 - 6,94 (m, 1H), 6,60 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,26 - 5,03 (m, 2H), 4,90 - 4,58 (m, 1H), 4,52 - 4,38 (m, 2H), 4,31 - 4,21 (m, 1H), 4,19 - 3,98 (m, 2H), 3,97 - 3,72 (m, 2H), 3,66 - 7,56 (m, 1H), 3,53 - 3,37 (m, 2H), 3,34 - 3,11 (m, 3H), 3,07 - 2,92 (m, 2H), 2,89 - 2,79 (m, 1H), 2,77 - 2,48 (m, 4H), 2,47 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,35 - 2,18 (m, 1H).
EXEMPLO 543
2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02282] O composto do título foi preparado seguindo o Exemplo 468 usando cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil no lugar de cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 478, Etapa A. LCMS [ESI, M+1]: 640.
[02283] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 12,4 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,19 (m, 1H), 5,54 - 5,33 (dd, J = 2,8, 47,6 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,85 (br s, 1H), 4,51 - 4,38 (m, 2H), 4,31 - 3,77 (m, 4H), 3,69 - 3,54 (m, 1H), 3,41 (m, 2H), 3,35 - 2,48 (m, 11H), 2,47 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,35 - 2,16 (m, 1H).
[02284] SFC: "Coluna: Cellucoat 50 × 4,6 mm I.D., 3um Fase móvel: metanol (0,05% DEA) em CO2 de 5% a 40% Taxa de fluxo: 3mL/min. Comprimento de onda: 220nm".
EXEMPLO 544
2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02285] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 468, usando ácido (metoximetil)prop-2-enoico no lugar e cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 489, Etapa A.
EXEMPLO 545 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-cloronaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-hidroxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02286] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 468, usando ácido 4-[terc-butil (dimetil) silil]oxibut-2-inoico no lugar de cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 483, Etapa A.
EXEMPLO 546 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02287] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 527 usando cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil no lugar de cloreto de acriloil usando as condições do Exemplo 479, Etapa C.
EXEMPLO 547 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02288] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 527 usando cloreto de 2-fluoroprop-2-enoil no lugar de cloreto de acriloil usando as condições do Exemplo 478, Etapa A.
EXEMPLO 548 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-metoxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02289] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 527 usando ácido (metoximetil)prop-2-enoico no lugar de cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 489, Etapa A.
EXEMPLO 549 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-cloronaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-hidroxibut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02290] O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 527, usando ácido 4-[terc-butil (dimetil)silil]oxibut-2-inoico no lugar de cloreto de acriloíl usando as condições do Exemplo 483, Etapa A.
EXEMPLO 550 2-((S)-4-(7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02291] 2-((S)-1-acriloil-4-(7-(5,6-dimetil-1H-indol-4-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. O composto do título é preparado seguindo o Exemplo 466 usando ácido 2-fluoroacrílico no lugar de prop-2-enoil prop-2-enoato como descrito no Exemplo 478, Etapa A.
EXEMPLO 551
2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil))- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila 0°C, 0,5 hora, 21%
[02292] Etapa A: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- metoxibut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 378 umol, 1,0 eq), ácido (E)-4-metoxibut-2-enoico (110 mg, 944 umol, 2,5 eq) em DMF (3,0 ml) foi adicionado TEA (382 mg, 3,78 mmol, 526 uL, 10,0 eq) e T3P (721 mg, 1,13 mmol, 674 uL, 50% de pureza, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, o solvente orgânico foi lavado com água (10,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 10,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos com Na2SO4 e filtrados. O solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Base Al2O3, Éter de petróleo: Acetato de etila = 10:1 a 1:1), em seguida o produto bruto foi concentrado e repurificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150×25mm×10um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia 0,05% v/v)-ACN]; B%: 48%-78%, 9-10min.) e liofilização para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7- (8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-metoxibut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 551, 50 mg, 79,6 umol, 21%
rendimento, 99,9% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 628.
[02293] 1H NMR (400MHz, Clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,62 (m, 2H), 7,45 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 7,05 - 6,94 (m, 1H), 6,55 (br d, J = 15,0 Hz, 1H), 5,23 - 5,03 (m, 1H), 4,66 (br s, 1H), 4,52 - 4,42 (m, 1H), 4,30 - 4,18 (m, 2H), 4,18 – 3,94 (m, 4H), 3,93 - 3,84 (m, 1H), 3,83 - 3,65 (m, 1H), 3,54 (br d, J = 6,7 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 3,42 - 3,26 (m, 2H), 3,25 - 3,15 (m, 2H), 3,05 (br dd, J = 8,5, 16,4 Hz, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,88 - 2,58 (m, 4H), 2,57 -2,35 (m, 5H), 2,14 - 1,96 (m, 1H).
EXEMPLO 552 2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila T3P, TEA, DMF 0 °C, 0,5 h 21%
[02294] Etapa A: 2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[2-[[(2R,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 277 umol, 1 eq), ácido (E)-4-metoxibut-2-enoico (64,3 mg, 554 umol, 2 eq) e TEA (280 mg, 2,77 mmol, 385 uL, 10 eq) em DMF (3 mL) foi adicionado T3P (529 mg, 831 umol, 494 uL, 50% de pureza, 3 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (10 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 35%). Em seguida, o resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50% - 74%, 10 min.) para dar composto do título 2-[(2S)- 1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidina-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (EXEMPLO 552, 37,1 mg, 57,2 umol, 21% de rendimento, 98,7% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 640.
[02295] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,45 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 6,99 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 6,55 (br d, J = 15,2 Hz, 1H), 5,07 (br s, 1H), 4,51 - 4,40 (m, 1H), 4,31 - 4,04 (m, 5H), 3,95 - 3,68 (m, 3H), 3,63 - 3,47 (m, 2H), 3,44 (s, 3H), 3,42 - 3,35 (m, 1H), 3,30 (d, J = 1,2 Hz, 3H), 3,24 - 2,96 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,76 (br dd, J = 8,0, 16,8 Hz, 1H), 2,72 - 2,52 (m, 3H), 2,45 (d, J = 5,2 Hz, 3H), 2,41 - 2,27 (m, 2H), 1,81 (br dd, J = 7,2, 14,0 Hz, 1H).
EXEMPLO 553
2-((S)-1-((E)-4-metoxibut-2-enoil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((R)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila NaBH4, tolueno Duas etapas, 8,6% 67,3% 0,3%
[02296] Etapa A: metil 3-hidroxi-4-metoxi-butanoato. A uma solução de metil 4-metoxi-3-oxo-butanoato (20 g, 137 mmol, 1,0 eq) em tolueno (300 mL) foi adicionado NaBH4 (5,44 g, 144 mmol, 1,05 eq) a 0°C. Depois a mistura foi agitada a 20°C por 4 horas. Após conclusão, a mistura foi diluída com água (100 mL) a 0°C e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). Os extratos foram lavados com salmoura (200 mL), secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo para dar metil 3-hidroxi-4-metoxi-butanoato (7,5 g, bruto) como óleo amarelo e utilizados para a próxima etapa sem mais purificação.
[02297] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 4,23 - 4,15 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,44 - 3,38 (m, 2H), 3,37 (s, 3H), 3,04 (br s, 1H), 2,51 (d, J = 6,4 Hz, 2H).
[02298] Etapa B: metil (E)-4-metoxibut-2-enoato. A uma solução de metil 3-hidroxi-4-metoxi-butanoato (7,5 g, bruto) em DCM (50,0 mL) foi adicionado TEA (5,12 g, 50,6 mmol, 7,05 mL) e MsCl (8,70 g, 75,9 mmol, 5,88 mL) a 0°C. Após agitada por 4 horas, à mistura foi adicionado TEA (10,2 g, 101 mmol, 14,1 mL) a 0°C. A mistura foi aquecida até 20°C e agitada por 12 horas. Após conclusão, a mistura foi diluída com água (50,0 mL), lavada com HCl (1 N, 15,0 mL) e salmoura (20,0 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/0 a 50:1) para dar metil (E)-4-metoxibut-2-enoato (1,7 g, 11,8 mmol, duas etapas 8,6% de rendimento, 90% de pureza) como óleo amarelo.
[02299] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 6,93 (td, J = 4,3, 15,8 Hz, 1H), 6,04 (td, J = 2,0, 15,8 Hz, 1H), 4,06 (dd, J = 2,0, 4,3 Hz, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,36 (s, 3H).
[02300] Etpa C: ácido (E)-4-metoxibut-2-enoico.Uma mistura de (E)-4- metoxibut-2-enoato (300 mg, 2,31 mmol, 1,0 eq) e KOH (517 mg, 9,22 mmol, 4,0 eq) em MeOH (2,0 mL) e H2O (2,0 mL) foi agitada a 20°C por 2 horas.Após conclusão, a mistura foi acidificada com HCl (2 N, 5,0 mL) até pH = 1 - 3 e extraída com acetato de etila (2×20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar ácido (E)-4- metoxibut-2-enoico (200 mg, 1,55 mmol, 67,3% de rendimento, 90% de pureza) como sólido amarelo.
[02301] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 11,13 (br s, 1H),7,06 (td, J= 4,1, 15,7 Hz, 1H), 6,08 (td, J = 2,0, 15,7 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 2,0, 4,1 Hz, 2H), 3,40 (s, 3H).
[02302] Etapa D: 2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 391 umol, 1 eq), ácido (E)-4-metoxibut-2- enoico (113 mg, 977 umol, 2,5 eq), TEA (395 mg, 3,91 mmol, 544 uL, 10 eq) em DMF (4 mL) foi adicionado T3P (746 mg, 1,17 mmol, 697 uL, 50% de pureza, 3 eq)) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,3 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (10 mL × 3). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Acetato de etila/MeOH = 100/1 a 10:1) e ainda purificado por HPLC-prep (coluna: Boston pH - lex 150*25 10 um; fase móvel: [água (0,1% de TFA)-ACN]; B%: 35% - 59%, 8 min.). A mistura foi coletada e liofilizada. Composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[7- (8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (EXEMPLO 553, 37,5 mg, 60,4 umol, 15% de rendimento, 98,2% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 610.
[02303] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,77 - 7,57 (m, 2H), 7,46 - 7,37 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 6,99 (br d, J = 14,4 Hz, 1H), 6,55 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,24 - 4,49 (m, 1H), 4,46 - 4,32 (m, 1H), 4,32 - 3,74 (m, 7H), 3,73 - 3,25 (m, 6H), 3,25 - 2,94 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,86 - 2,54 (m, 4H), 2,49 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 2,38 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 2,00 (m, 1H), 1,93 - 1,65 (m, 3H).
EXEMPLO 554
2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila HCL.dioxano 25°C, 1 hora Cs2CO3, tolueno, 90°C, 8hrs, 57% 20°C, 1 hora, 21%
[02304] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[((2R)-1-metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil(2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (850 mg, 1,80 mmol, 1,0 eq), 1-bromo-8-metil- naftaleno (1,20 g, 5,41 mmol, 3,0 eq), Pd2(dba)3 (330 mg, 360 umol, 0,20 eq), Xantphos (417 mg, 721 umol, 0,40 eq) e Cs2CO3 (1,76 g, 5,41 mmol, 3,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas sob N2. Após conclusão, a reação foi lavada com HCl 2 N (2 x 15,0 mL). A fase aquosa foi basificada com NaHCO3 sólido até pH ~ 7 e extraída com acetato de etila (2 x 50,0 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% de FA em água, 0 - 65% MeCN] e ajustada com NaHCO3 sólido até pH ~ 7 e extraído com acetato de etila (2 × 150 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. Composto terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (650 mg, 1,03 mmol, 57% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 612.
[02305] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,44 - 7,37 (m, 1H), 7,36 - 7,30 (m, 1H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 4,63 - 4,52 (m, 1H), 4,46 - 4,36 (m, 1H), 4,30 - 4,15 (m, 2H), 4,09 - 3,95 (m, 2H), 3,93 - 3,73 (m, 2H), 3,57 - 3,47 (m, 1H), 3,42 - 3,27 (m, 1H), 3,22 - 3,04 (m, 4H), 3,02 - 2,94 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,81 - 2,54 (m, 4H), 2,53 - 2,47 (m, 3H), 2,40 - 2,26 (m, 1H), 2,12 - 2,05 (m, 1H), 1,92 - 1,71 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[02306] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (600 mg, 981 µmol, 1,0 eq) em dioxano (3,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 3,0 mL, 12,2 eq) a 25°C e a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por solução aquosa saturada de NaHCO3 (8,0 mL) a 0°C e, em seguida, diluída com H2O (5,0 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 15,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (410 mg, bruto) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02307] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut- 2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila.A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 293 µmol, 1,0 eq), ácido (E)-4-metoxibut-2- enoico (102 mg, 880 µmol, 3,0 eq) em acetato de etila (3,0 mL) foi adicionado TEA (237 mg, 2,35 mmol, 326 µL, 8,0 eq) e T3P (560 mg, 880 µmol, 523 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, foi adicionada água (5,0 mL). A camada orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 10 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo : acetato de etila = 3 : 1 para acetato de etila: metanol = 50 : 1), em seguida o produto bruto foi repurificado por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônio v/v)-MeCN]; B%: 50% -77%, 10 min.) e liofilização. Composto 2-[(2S)-1- [(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (38,6 mg, 62,4 µmol, 21% de rendimento , 98% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02308] Etapa D: 2-[(2S)-1-[(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 293 µmol, 1,0 eq), ácido (E)-4-metoxibut-2-
enoico (102 mg, 880 µmol, 3,0 eq) em acetato de etila (3,0 mL) foi adicionado TEA (237 mg, 2,35 mmol, 326 µL, 8,0 eq) e T3P (560 mg, 880 µmol, 523 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, foi adicionada água (5,0 mL). A camada orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 10 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos com Na 2SO4, filtrados e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo : acetato de etila = 3 : 1 para acetato de etila: metanol = 50 : 1), em seguida o produto bruto foi repurificado por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônio v/v)-MeCN]; B%: 50% -77%, 10 min.) e liofilização. Composto 2-[(2S)-1- [(E)-4-metoxibut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (38,6 mg, 62,4 µmol, 21% de rendimento , 98% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 610.
[02309] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,73 - 7,62 (m, 2H), 7,45 - 7,31 (m, 2H), 7,26 - 7,17 (m, 2H), 6,99 (br d, J = 15,2 Hz, 1H), 6,55 (br d, J = 15,6 Hz, 1H), 5,20 - 4,50 (m, 1H) 4,43 - 4,33 (m, 1H), 4,29 - 3,96 (m, 6H), 3,94 - 3,83 (m, 1H), 3,81 - 3,63 (m, 1H), 3,58 - 3,37 (m, 5H), 3,23 - 2,96 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,87 - 2,54 (m, 4H), 2,52 - 2,43 (m, 3H), 2,33 - 2,24 (m, 1H), 2,13 - 2,01 (m, 1H), 1,87 - 1,72 (m, 3H).
EXEMPLO 555
2-((S)-1-(2-Fluoroacrilil)-4-(7-(6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila Pd2(dba)3, RuPhos, Cs2CO3, tolueno
[02310] 1-Bromo-5-fluoro-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno. A uma solução de 1-bromo-5-fluoro-2-iodo-3-metil-benzeno (2 g, 6,35 mmol, 1 eq) em DMF (40 mL) foi adicionado CuI (7,26 g, 38,1 mmol, 6 eq) e metil 2,2-difluoro-2- fluorossulfonil-acetato (7,32 g, 38,1 mmol, 4,85 mL, 6 eq). A mistura foi agitada a 60°C por 12 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (20 mL × 3). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 10/1). Foi obtido 1-bromo-5-fluoro-3-metil-2-
(trifluorometil) benzeno (1,3 g, 3,74 mmol, 59% de rendimento, 74% de pureza) como um óleo amarelo.
[02311] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,33 (dd, J = 2,4, 7,6 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 2,0, 8,8 Hz, 1H), 2,54 (q, J = 3,6 Hz, 3H).
[02312] 2-Bromo-6-fluoro-4-metil-3-(trifluorometil)benzaldeído. A uma mistura de 1-bromo-5-fluoro-3-metil-2-(trifluorometil)benzeno (900 mg, 3,50 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) foi adicionado LDA (2 M em THF, 3,50 mL, 2 eq) a -60°C sob nitrogênio. Após agitação por 0,5 hora, à mistura foi adicionado DMF (768 mg, 10,5 mmol, 808 µL, 3 eq). A mistura foi agitada a -60°C por 1 hora. A reação foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (10 mL) e depois extraída com acetato de etila (50 mL x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (10 mL), seca sobre NaSO4 anidro, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 200/1 a 5/1). Foi obtido 2-bromo-6-fluoro-4-metil-3-(trifluorometil)benzaldeído (700 mg, 2,46 mmol, 70% de rendimento) como um óleo amarelo.
[02313] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,35 (s, 1H), 7,08 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,66 - 2,58 (m, 3H).
[02314] 4-Bromo-6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol. Uma solução de 2- bromo-6-fluoro-4-metil-3-(trifluorometil)benzaldeído (600 mg, 2,11 mmol, 1 eq) e hidrazina mono-hidratada (2,11 g, 42,1 mmol, 2,05 mL, 20 eq) em DMSO (8 mL) foi agitada a 60°C por 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (50 mL) e lavada com água (3 x 50 mL) e salmoura (1 x 50 mL). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi utilizado na próxima etapa sem purificação adicional. Foi obtido 4- bromo-6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol (550 mg, 1,97 mmol, 94% de rendimento) como um sólido branco.
[02315] 4-Bromo-6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil)indazol. A uma solução de 4-bromo-6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol (500 mg, 1,79 mmol, 1 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado ácido 4-metilbenzenossulfônico hidratado (34,1 mg, 1791 µmol , 0,1 eq) seguido por uma solução de um DHP (603 mg, 7,17 mmol, 655 µL, 4 eq) em CH3CN (2 mL). A mistura foi agitada a 25°C por 16 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (100 mL) e lavada com água (2 x 100 mL) e salmoura (1 x 50 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica gel (éter de petróleo/acetato de etila 20/1 a 3/1). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar 4-bromo-6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol (600 mg, 1,54 mmol, 86% de rendimento, 93% de pureza) como um goma amarela clara. LCMS [MSI, M+1]: 363.
[02316] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-[6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol-4-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 848 µmol, 1 eq), 4-bromo-6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5-(trifluorometil) indazol (431 mg, 1,19 mmol, 1,4 eq) Pd2(dba)3 (155 mg, 170 µmol, 0,2 eq), RuPhos (158 mg, 339 µmol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (691 mg, 2,12 mmol), 2,5 eq) em tolueno (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e, em seguida, agitada a 100°C por 16 horas sob N2. À mistura foi adicionada H2O (20 mL x 1) e acetato de etila (20 mL x 1). A fase orgânica foi separada, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (acetato de etila/metanol = 50/1 a 2/1). terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5- (trifluorometil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-
1-carboxilato (500 mg, 535 µmol, 32% rendimento, 80,7% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [MSI, M+1]: 754.
[02317] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-Metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil- 5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-1-tetra-hidropiran-2-il-5- (trifluorometil) indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (470 mg, 503 µmol, 1 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (2,29 g, 20,1 mmol, 1,49 mL, 40 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 1 h. À mistura foi adicionado diclorometano (5 mL) e basificada com NaHCO3 aquoso saturado até pH = 8 ~ 9. A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-[6-metil-5-(trifluorometil)-1H-indazol-4-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (420 mg, 453 µmol, 90% de rendimento, 61,4% de pureza) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [MSI, M+1]: 570.
[02318] Etapa C: 2-((S)-1-(2-Fluoroacrilil)-4-(7-(6-metil-5-(trifluorometil)- 1H-indazol-4-il)-2-(((S))-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução de 2- [(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[6-metil-5-(trifluorometil)-1H- indazol- 4-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (380 mg, 410 µmol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-enoico (18,4 mg, 205 µmol, 0,5 eq) e TEA (124 mg, 1,23 mmol, 171 µL, 3 eq) em DMF (8 mL) foi adicionado T3P (391 mg, 614 µmol, 365 µL, 50% de pureza) em DMF, 1,5 eq) a -40°C. Em seguida, a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora e 0°C por mais 0,5 hora. Adicionou-se ácido 2-fluoroprop-2-enoico (11 mg) e T3P (100 µL) e a mistura foi agitada a -40°C por mais 0,5 hora. A mistura foi diluída com água (15 mL) e extraída com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - MeCN]; B%: 22% - 42%, 7,8 min.) e (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10um; fase móvel: [água (0,04% de NH3H2O + 10 mM NH4HCO3)- MeCN];% B: 50% - 68%, 12 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(6-metil-5- (trifluorometil)-1H-indazol-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 642.
EXEMPLO 556 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano Cs2CO3, tolueno, 90°C, 6h, 25% NaH, DMF 0- 0,5 h 30 °C, 1,5 hr 84%
[02319] 3-Bromo-1-(metoximetoxi)naftaleno. A uma solução de 4- bromonaftalen-2-ol (3,50 g, 15,7 mmol, 1,0 eq) em DMF (35,0 mL) foi adicionado NaH (941 mg, 23,5 mmol, 60% de pureza, 1,50 eq). Após adição, a mistura foi agitada a esta temperatura durante 0,5 hora e, em seguida, cloro(metoxi)metano (5,90 g, 73,3 mmol, 5,57 mL, 4,67 eq) foi adicionado gota a gota a 0°C. A mistura foi aquecida a 30°C e agitada por mais 1 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação combinad foi diluída com água (100 mL) e extraída com EtOAc (3 × 50,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (200 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 100/1). O composto 3- bromo-1-(metoximetoxi)naftaleno (3,50 g, 13,1 mmol, 84% de rendimento) foi obtido como um óleo vermelho.
[02320] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ = 88,19 - 8,12 (m, 1H), 7,78 - 7,71 (m, 1H), 7,61 - 7,57 (m, 1H), 7,52 - 7,44 (m, 2H), 7,40 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H), 3,53 (s, 3H),
[02321] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-(metoximetoxi)-1- naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4- [2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (800 mg, 1,70 mmol, 1,0 eq) e 1-bromo-3- (metoximetoxi)naftaleno (680 mg, 2,54 mmol, 1,50 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado Cs2CO3 (2,21 g, 6,79 mmol, 4,00 eq), RuPhos (158 mg, 339 µmol, 0,20 eq) e Pd2(dba)3 (233 mg, 254 µmol, 0,15 eq) A mistura foi agitada a 90°C por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com H2Oa (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi ainda purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico 0,1%)acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH=7 com solução aquosa de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (3 x 50,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Composto terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-[3-(metoximetoxi)-1-naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 426 µmol, 25% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
658.
[02322] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,40 - 7,34 (m, 1H), 7,16 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,63 (br s, 1H), 4,40 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,33 - 4,22 (m, 2H), 4,21 - 4,16 (m, 1H), 4,09 - 3,86 (m, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,51 - 3,40 (m, 1H), 3,37 - 3,17 (m, 3H), 3,15 - 2,96 (m, 3H), 2,89 - 2,73 (m, 3H), 2,72 - 2,64 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,33 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,05 (m, 1H), 1,91 - 1,78 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[02323] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-[3-(metoximetoxi)-1-naftil]-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (260 mg, 395 µmol, 1,0 eq) em dioxano (2,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 98,8 µL, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi ajustado pH = 7 com saturada de solução aquosa de NaHCO3 e extraído com acetato de etila (3 × 20,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. Composto 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 373 µmol, 94% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 514.
[02324] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 389 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2- enoico (105 mg, 1,17 mmol, 3,0 eq) em DMF (4,00 mL) foi adicionado TEA (158 mg, 1,56 mmol, 217 µL, 4,0 eq) e T3P (743 mg, 1,17 mmol, 695 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi diluída com H2O (10,0 mL) e extraída com DCM (3 x 10,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (20,0 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 para DCM/MeOH = 5/1) e o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10 µm; fase móvel: [água (0,04% NH3H2O+10 mM de NH4HCO3)- MeCN]; B%: 45%-75%, 12 min.). Composto do título 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2- enoil)-4-[7-(3-hidroxi-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (50,0 mg, 85,0 µmol, 22% de rendimento, 99,6% de pureza) obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 586.
[02325] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,94 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,40 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,31 - 7,26 (m, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,52 (br s, 1H), 5,51 - 5,29 (m, 1H), 5,25 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,95 - 4,35 (m, 2H), 4,24 (dd, J = 4,4, 11,2 Hz, 1H), 4,15 - 3,93 (m, 3H), 3,85 - 3,69 (m, 1H), 3,45 - 3,26 (m, 1H), 3,25 - 3,18 (m, 2H), 3,17 - 2,95 (m, 2H), 2,94 - 2,73 (m, 3H), 2,72 - 2,62 (m, 5H), 2,60 - 2,50 (m, 1H), 2,45 - 2,35 (m, 1H), 2,15 - 2,06 (m, 1H), 2,01 - 1,93 (m, 1H), 1,88 - 1,74 (m, 3H).
EXEMPLO 557
2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 25 °C, 0,5 hr Cs2CO3, tolueno, 0,5h, 47% 94% 90°C, 8 hrs, 80% HCl.dioxano 15°C, 1 hora, 0-20°C, 1 82% hora, 16%
[02326] Etapa A: Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de [(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (934 mg, 8,11 mmol, 3,0 eq) e t-BuONa (780 mg, 8,11 mmol, 3,0 eq) em tolueno (15,0 mL) foi adicionada uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (1,5 g, 2,70 mmol, 1,0 eq) em tolueno (10,0 mL) gota a gota a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por outra 0,5 hora. Após conclusão, a reação foi extinta com água (30,0 mL). A mistura bruta foi extraída com acetato de etila (2 x 50,0 mL). Extratos combinados foram lavados com salmoura (100 mL), secos com Na2SO4, o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% de FA em água, 0 - 65% MeCN] e foi acidificado com NaHCO3 até pH = 8 e extraído com acetato de etila (2 × 150 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. Composto benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (820 mg, 1,26 mmol, 47% de rendimento, 93% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:
606.
[02327] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ 7,42 - 7,29 (m, 5H), 5,18 (s, 2H), 4,69 (br d, J = 18,6 Hz, 1H), 4,59 (br s, 1H), 4,44 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 4,34 (br s, 1H), 4,05 - 3,69 (m, 4H), 3,42 (br s, 1H), 3,24 (br d, J = 13,0 Hz, 2H), 3,09 (br t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,02 - 2,90 (m, 1H), 2,81 - 2,56 (m, 5H), 2,47 (s, 3H), 2,28 (dt, J = 7,2, 9,4 Hz, 1H), 2,05 - 1,99 (m, 1H), 1,89 - 1,67 (m, 4H), 1,51 (s, 9H).
[02328] Etapa B: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. NH3 foi borbulhado em MeOH (10,0 mL) de a -70°C por 0,5 h. Benzil 4-[(3S)-4- terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (820 mg, 1,35 mmol, 1,0 eq) e Pd/C (250 mg, 10% de pureza) foram adicionados à mistura acima e MeOH (10,0 mL), em seguida, a mistura foi desgaseificada e purgada com H2 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 20°C por 0,5 h sob H2 (15 psi). Após conclusão, a mistura bruta foi filtrada através de uma almofada de celite. A torta foi lavada com MeOH (50,0 mL) e o filtrado seco sob alto vácuo. Composto terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,27 mmol, 94% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco e usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:
472.
[02329] Etapa C: terc-Butil(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (550 mg, 1,17 mmol, 1,0 eq), 1-bromo-8- cloro-naftaleno (845 mg, 3,50 mmol, 3,0 eq), Pd2(dba)3 (160 mg, 175 µmol, 0,15 eq), Xantphos (135 mg, 233 µmol, 0,20 eq) e Cs2CO3 (1,14 g, 3,50 mmol, 3,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi desgaseificado e purgado com N2 3 vezes, e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 8 h sob N 2. Após conclusão, a reação foi lavada com solução aquosa de HCl (2N 2 × 15 mL). A fase aquosa foi basificada com NaHCO3 até pH 8 e extraída com acetato de etila (2 × 50 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa [C18, 0,1% de FA em água, 0 - 65% MeCN] e foi acidificado com NaHCO3 até pH = 8 e extraído com acetato de etila (2 × 150 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. Composto terc-butil(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (600 mg, 930 µmol, 80% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:
632.
[02330] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ 7,75 (br d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,44 (td, J = 7,8, 15,2 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 4,61 (br s, 1H), 4,48 - 4,34 (m, 2H), 4,10 - 3,91 (m, 3H), 3,90 - 3,78 (m, 1H), 3,63 - 3,53 (m, 1H), 3,34 (br dd, J = 3,6, 13,8 Hz, 1H), 3,30 - 3,01 (m, 5H), 2,95 (dt, J = 3,5, 12,3 Hz, 1H), 2,89 - 2,75 (m, 1H), 2,70 (br s, 2H), 2,57 (br d, J = 14,2 Hz, 1H), 2,53 - 2,46 (m, 3H), 2,35 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,06 (m, 1H), 1,93 - 1,66 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[02331] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (200 mg, 316 µmol, 1,0 eq) em dioxano (2,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 2,0 mL, 25,3 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 0,5 hora sob N2. Após conclusão, o solvente orgânico foi removido sob vácuo. O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado até Ph = 8, em seguida, concentrado. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 10,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto bruto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (145 mg, 259 µmol, 82% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como sólido amarelo e usado na próxima etapa sem mais purificação. LCMS [ESI, M+1]: 532
[02332] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (125 mg, 235 µmol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2- enoico (42,3 mg, 470 µmol, 2,0 eq) em acetato de etila (2,0 mL) foi adicionado TEA (190 mg, 1,88 mmol, 262 µL, 8,0 eq) e T3P (449 mg, 705 µmol, 419 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, o solvente orgânico foi lavado com água (5,0 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 10 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20,0 mL), secos com Na2SO4 o solvente foi, então, removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo: acetato de etila = 3 : 1 para acetato de etila : metanol = 50 : 1), em seguida, o produto bruto foi concentrado e repurificado por HPLC- prep (coluna: Phenomenex Gemini 150 × 25 mm × 10 µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio 0,05% v/v)-MeCN]; B%: 55% - 85%, 11,5 min.) e liofilização. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (22,5 mg, 37,1 µmol, 16% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:
605.
[02333] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 5,51 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (br dd, J = 3,2, 16,8 Hz, 1H), 4,90 (br s, 1H), 4,49 - 4,34 (m, 2H), 4,24 - 4,01 (m, 3H), 3,97 - 3,78 (m, 2H), 3,64 - 3,55 (m, 1H), 3,44 (br s, 1H), 3,32 - 2,95 (m, 5H), 2,94 - 2,43 (m, 7H), 2,38 - 2,20 (m, 1H), 2,14 – 1,99 (m, 1H) 1,91 - 1,71 (m, 3H).
EXEMPLO 558 2-((S)-4-(7-(8-Cloronaftalen-1-il)-2-(((2R,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin- 2-il)acetonitrila t-BuOna, Cs2CO3, tolueno, tolueno, 0°C, 90°C, 12 hrs, 1h, 57% 43% HCl.dioxano Dioxano, 20°C, 4 hrs Duas etapas 14%
[02334] Etapa A: Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de [(2R,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (169 mg, 1,27 mmol, 1,5 eq) em tolueno (4,0 mL) foi adicionado t-BuONa (163 mg, 1,69 mmol, 2,0 eq) a 0°C, após a mistura de reação ser agitada a 0°C por 0,5 hora, benzil 4-[(3S)-4-terc -butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-d-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (470 mg, 847 µmol, 1,0 eq) foi adicionado à mistura, a mistura de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação foi adicionada à água (10 mL), em seguida, extraída com acetato de etila (2 x 10,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 para acetato de etila/metanol=20/1) para dar benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (330 mg, 484 µmol, 57% 92% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 624.
[02335] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,40 - 7,30 (m, 5H), 5,24 - 5,03 (m, 3H), 4,69 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 4,61 - 4,53 (m, 1H), 4,51 - 4,38 (m, 2H), 4,23 (dd, J = 7,6, 10,4 Hz, 1H), 4,08 - 3,73 (m, 4H), 3,52 - 3,11 (m, 4H), 3,04 - 2,91
(m, 1H), 2,81 - 2,57 (m, 5H), 2,55 - 2,36 (m, 5H), 2,11 - 1,99 (m, 1H), 1,51 (s, 9H).
[02336] Etapa B: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (330 mg, 529 µmol, 1,0 eq) em metanol (3,0 mL) e NH3.MeOH (529 µmol, 3 mL, 20% de pureza, 1,0 eq) foi adicionado Pd/C (50 mg, 529 µmol, 10% de pureza) sob N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 3 horas. Após conclusão, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com THF (2 x 3,0 mL), o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia flash de fase reversa (0,1% de FA em MeCN). A mistura foi ajustada com NaHCO3 sólido até pH~8, então, concentrada. A camada aquosa (20,0 mL) foi extraída com acetato de etila (2 x 15,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (150 mg, 299 µmol, 58% de rendimento, 98% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 490.
[02337] Etapa C: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-fluoro- 1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (150 mg, 306 µmol, 1,0 eq) e 1-bromo-8-cloro-naftaleno (148 mg, 618 µmol, 2,0 eq) em tolueno (3,0 mL) foram adicionados XantPhos (35,5 mg, 61,3 µmol, 0,2 eq), Pd2(dba)3 (42,1 mg, 45,9 µmol, 0,15 eq) e Cs2CO3 (399 mg, 1,23 mmol, 4,0 eq), a mistura de reação foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi lavado com HCl aquoso 1N (2 x 10,0 mL), a camada aquosa foi ajustada para pH~8 com Na 2CO3 sólido, então, extraída com acetato de etila (2 × 15,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash de fase reversa (0,1% de FA em MeCN). O produto obtido foi ajustado com NaHCO 3 sólido até pH~8 e concentrado. A camada aquosa (20 mL) foi extraída com acetato de etila (2 x 15,0 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto terc-butil(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (85 mg, 129 µmol, 43% de rendimento, 98 % de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1, M+23]: 650, 672.
[02338] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 5,24 - 5,03 (m, 1H), 4,67 - 4,55 (m, 1H), 4,52 - 4,36 (m, 2H), 4,23 (dd, J = 7,6, 10,4 Hz, 1H), 4,13 - 3,77 (m, 4H), 3,65 - 3,52 (m, 1H), 3,43 - 2,86 (m, 7H), 2,84 - 2,64 (m, 3H), 2,62 - 2,38 (m, 5H), 2,16 - 1,98 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).
[02339] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)- 4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (85,0 mg, 131 µmol, 1,0 eq) em dioxano (1,0 mL) foi adicionado HCl 4 M/dioxano (1,0 mL), a mistura de reação foi agitada a 20°C por 4 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada, à mistura foi adicionado diclorometano (10 mL), em seguida, ajustada com Na 2CO3 aquoso saturado até pH~8, a camada orgânica foi separada, então, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (90 mg, bruto) foi obtido como sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 550.
[02340] Etapa E: 2-((S)-4-(7-(8-Cloronaftalen-1-il)-2-(((2R,4R)-4-fluoro-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2R,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (90.0 mg, 120 µmol, 73% de pureza, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (21,7 mg, 241 µmol, 2,0 eq) em acetato de etila (2,0 mL) foi adicionado T3P (230 mg, 361 µmol, 215 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) e TEA (97,6 mg, 962 µmol, 134 µL, 8,0 eq), a mistura de reação foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, foi adicionada água (10,0 mL), então, a camada orgânica foi separada, a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 10,0 mL). A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 para acetato de etila: metanol=10:1). O produto bruto foi repurificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 µm; fase móvel: [água (0,04% de NH3H2O + 10mM NH4HCO3)-MeCN]; B%: 48%-78%, 12 min.), o produto obtido foi concentrado e, então, liofilizado. O composto do título de produto 2-((S)-4-(7-(8- cloronaftalen-1-il)-2-(((2R,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila (10,9 mg, 17,3 µmol, 14% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 622.
[02341] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 5,50 - 5,34 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,22 - 5,04 (m, 1H), 4,98 - 4,72 (m, 1H), 4,54 - 4,37 (m, 2H), 4,30 - 4,02 (m, 3H), 3,96 - 3,75 (m, 2H), 3,66 - 3,54 (m, 1H), 3,51 - 2,99 (m, 6H), 2,98 - 2,67 (m, 3H), 2,64 - 2,36 (m, 6H), 2,14 - 1,97 (m, 1H).
EXEMPLO 559 2-[(2S)-4-[2-[2-(Dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila Cs2CO3, tolueno 1,5 h Cs2CO3, tolueno, 100°C, 12 h, 73% 0-10 °C, 0,5 h 57%
[02342] Etapa A: 2-[(7-Benzil-4-metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina. À solução de 7-benzil-2-cloro-4- metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (5 g, 17,3 mmol, 1 eq), 2- (dimetilamino)etanol (3,08 g, 34,5 mmol, 3,46 mL, 2 eq), Cs2CO3 (5,62 g, 17,3 mmol, 1 eq) e BINAP (2,15 g, 3,45 mmol, 0,2 eq) em tolueno (100 mL) foi adicionado Pd(OAc)2 (387 mg, 1,73 mmol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 100°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada. Ao filtrado foi adicionado HCl (2 M, 200 mL) e depois separado. A fase aquosa foi basificada com NaHCO3 e K2CO3 até PH = 8~9, em seguida extraída com EtOAc (5 x 80 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (100 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada in vacuo para dar 2-[(7-benzil-4-metoxi-
6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina (4,8 g, 12,6 mmol, 73% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo marrom que foi usado para a próxima etapa sem mais purificação.
[02343] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,40 - 7,28 (m, 5H), 4,40 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 3,50 (s, 2H), 2,76 - 2,69 (m, 4H), 2,62 - 2,56 (m, 2H), 2,32 (s, 6H).
[02344] Etapa B: 2-[(4-Metoxi-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina. À solução de 2-[(7-benzil-4-metoxi-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina (4,8 g, 14,0 mmol, 1 eq) em MeOH (100 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (2 g, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 18 horas. À mistura foi adicionado HCl/MeOH (4 M, 7,01 mL, 2 eq). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 40°C por 2 horas. A mistura foi filtrada, a torta de filtração foi lavada com NH3•MeOH (10%, 3 x 30 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com água (10 mL) e EtOAc (10 mL), em seguida a mistura foi basificada com K2CO3 até pH = 11. A mistura foi extraída com EtOAc (8 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 2-[(4-metoxi-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina (2,58 g, 8,69 mmol, 62% de rendimento, 85% de pureza) como um óleo marrom que foi utilizado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 253.
[02345] Etapa C: 2-[[4-metoxi-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil-etanamina. À solução de 2-[(4-metoxi-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina (2,28 g, 7,68 mmol) , 1eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (2,55 g, 11,5 mmol, 1,5 eq), Cs2CO3 (7,51 g, 23,0 mmol, 3 eq) e Xantphos (889 mg , 1,54 mmol, 0,2 eq) em tolueno
(70 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (703 mg, 768 µmol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 100°C por 16 horas. A mistura de reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc = 10:1 ~ 0: 1 para EtOAc: MeOH = 1: 0 ~ 10:1) para dar 2-[[4- metoxi-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N- dimetil-etanamina (3,2 g, 7,34 mmol, 95% de rendimento, 90 % de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 393.
[02346] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,40 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,22 (m, 2H), 4,44 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,17 - 4,05 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,81 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 3,57 - 3,48 (m, 1H), 3,20 (dt, J = 4,0, 11,2 Hz, 1H), 2,94 - 2,82 (m, 4H), 2,75 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,67 (br d, J = 16,4 Hz, 1H), 2,34 (s, 6H).
[02347] Etapa D: 2-[2-(Dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol. À solução de EtSH (1,96 g, 31,5 mmol, 2,33 mL, 3,64 eq) em DMF (60 mL) foi adicionado NaH (693 mg, 17,3 mmol, 60% de pureza, 2 eq), a mistura foi agitada a 10°C por 0,5 hora. Então 2-[[4-metoxi-7-(8- metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oxi]-N,N-dimetil- etanamina (3,4 g, 8,66 mmol, 1 eq) em DMF (10 mL) foi adicionado, a mistura foi aquecida até 60°C e agitada por 1 hora. A mistura foi derramada em água gelada (200 mL) e extraída com EtOAc (30 mL). A fase aquosa foi acidificada com HCl (2 M) até PH = 7~8, então, extraída com EtOAc (6 × 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi triturado com PE: EtOAc = 5:1 para dar 2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-ol (2,4 g, 6,28 mmol, 72% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 379.
[02348] Etapa E: [2-[2-(Dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]trifluorometanossulfonato. À solução de 2-[2- (dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol (1 g, 2,64 mmol, 1 eq) e TEA (668 mg, 6,61 mmol, 919 µL, 2,5 eq) em DCM (20 mL) foi adicionado Tf2O (1,12 g, 3,96 mmol, 654 µL, 1,5 eq) a -40°C, a mistura foi agitada a -40°C por 10 min. À mistura foi adicionada água (10 mL), então, separada. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc = 5:1 ~ 0:1) para dar [2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] trifluorometanossulfonato (650 mg, 1,15 mmol, 43% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo marrom.
[02349] Etapa F: 2-[(2S)-4-[2-[2-(Dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de [2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il] trifluorometanossulfonato (350 mg, 685 µmol, 1 eq) e 2-[(2S)- piperazin-2-il]acetonitrila (111 mg, 754 µmol, 1,1 eq) em DMAC (4 mL) DIEA (177 mg, 1,37 mmol, 239 mL, 2 eq), a mistura foi agitada a 10°C por 10 min. A mistura foi purificada por coluna flash de fase reversa (MeCN/água (0,1% FA) = 40%) para dar 2-[(2S)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60 mg, 121 µmol, 18% de rendimento, 98% de pureza) como um óleo marrom. LCMS [ESI, M+1]: 486.
[02350] Etapa F: 2-[(2S)-4-[2-[2-(Dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60 mg, 123 µmol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (22,2 mg, 247 µmol, 2 eq) e TEA (100 mg, 988 µmol, 138 µL, 8 eq) em EtOAc (1,2 mL) foi adicionado T3P (236 mg, 370 µmol, 220 µL, 50% de pureza, 3 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 10°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (5 mL) à mistura. A mistura foi extraída com EtOAc (2 x 8 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de Al2O3 (EtOAc: MeOH = 1:0 ~ 20:1). Em seguida, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150*25 5µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-MeCN]; B%: 53% - 83%, 12 min.) para dar composto do título 2-[(2S)-4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila (39,5 mg, 70,4 µmol, 57% de rendimento, 99,4% de pureza) como um sólido cinza. LCMS [ESI, M+1]: 558.
[02351] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,46 - 7,38 (m, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 5,52 - 5,33 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,88 (br s, 1H), 4,47 - 4,37 (m, 2H), 4,31 - 4,18 (m, 1H), 4,17 - 4,01 (m, 2H), 3,94 - 3,84 (m, 1H), 3,77 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 3,58 - 3,41 (m, 2H), 3,25 - 2,95 (m, 4H), 2,92 (s, 3H), 2,90 - 2,77 (m, 2H), 2,77 - 2,70 (m, 2H), 2,68 - 2,56 (m, 1H), 2,34 (d, J = 3,6 Hz, 6H).
EXEMPLO 560 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-Fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil))- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila
[02352] 1-terc-Butil-2-metil (2S,4R)-4-fluoropirrolidina-1,2-dicarboxilato. A uma solução de ácido (2S,4R)-1-terc -butoxicarbonil-4-fluoro-pirrolidina-2- carboxílico (2,0 g, 8,58 mmol, 1,0 eq) e Ag2O (3,97 g, 17,2 mmol, 2,0 eq) em CH3CN (20,0 mL) foi adicionado MeI (2,43 g, 17,2 mmol, 1,07 mL, 2,0 eq) a 0°C em porções, a mistura de reação foi agitada a 15°C por 12 horas. Depois da conclusão, a mistura de reação foi adicionada à água (30,0 mL), em seguida a camada orgânica foi separada, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (30,0 mL×2), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo: acetato de etila=3:1 para acetato de etila: metanol=10:1). O produto 1- terc-butil-2-metil (2S,4R)-4-fluoropirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,98 g, 8,01 mmol, 93% de rendimento) foi obtido como um óleo incolor.
t-BuONa, Cs2CO3, tolueno, 90°C, tolueno, 0°C, 12 hrs, duas etapas 36% 1 h, 78% HCl.dioxano Duas etapas 26%
[02353] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,29-5,15 (m, 1H), 4,49-4,38 (m, 1H), 3,92-3,74 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,60-3,56 (m, 1H), 2,63-2,54 (m, 1H), 2,17-2,05 (m, 1H), 1,44 (d, J=18,0 Hz, 9H).
[02354] [(2S,4R)-4-Fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il] metanol. A uma solução de 1-terc-butil-2-metil (2S,4R)-4-fluoropirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,98 g, 8,0 mmol, 1,0 eq) em THF (20,0 mL) foi adicionado LiAlH4 (912 mg, 24,0 mmol, 3,0 eq) lentamente a -40°C, após conclusão a mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora, em seguida, a mistura foi aquecida até 70°C e agitada a esta temperatura por 3 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de uma solução de Na2SO4 (6,0 mL) a 0°C e, em seguida, diluída com THF (10,0 mL), em seguida, filtrada e o sólido foi lavado com acetato de etila (30,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar [(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metanol (800 mg, 6,01 mmol, 75% de rendimento) como óleo amarelo.
[02355] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,13-4,97 (m, 1H), 3,67-3,63 (m, 1H), 3,51-3,37 (m, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,74-2,68 (m, 1H), 2,63-2,51 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,07-2,02 (m, 1H), 1,99-1,95 (m, 1H).
[02356] Etapa A: Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. Uma mistura de [(2S,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (480 mg, 3,6 mmo 2,0 eq) e t-BuONa (295 mg , 3,1 mmol, 1,7 eq) em tolueno (8,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e a mistura foi agitada a 0°C, em seguida, benzil 4-[(3S)-4-terc-- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (1 g, 1,8 mmol, 1,0 eq) em tolueno (8,0 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora sob N 2. Depois da conclusão, a mistura foi extinta por adição de H2O (25,0 mL) e, então, extraída com acetato de etila (30,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa (18C, 0,1% de FA em água, 0-60% de MeCN). O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso satruado até pH~8, em seguida, concentrado, a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (100,0 mL×3), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S,44R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (860 mg, 1,38 mmol, 76% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 624.
[02357] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,31-7,25 (m, 5H), 5,15-5,02 (m, 3H), 4,63-4,58 (m, 1H), 4,51 (br s, 1H), 4,39-4,31 (m, 2H), 4,16-4,12 (m, 1H), 3,99-3,88 (m, 3H), 3,71 (br d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,52-3,41 (m, 1H), 3,36 (br s, 1H), 3,19-3,16 (m, 2H), 2,99-2,86 (m, 2H), 2,71-2,48 (m, 5 H), 2,43 (s, 3H), 2,76-2,17 (m, 1H), 1,96-1,80 (m, 1H), 1,74 (br s, 1H), 1,43 (s, 9H).
[02358] Etapa B: terc-Butil-(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (860 mg, 1,4 mmol, 1,0 eq) em MeOH (20,0 ml) e NH3•MeOH (10,0 mL, 50% p/p) foi adicionado Pd/C (200 mg, 10% de pureza, 1,0 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar terc-butil-(2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (620 mg, bruto) como sólido branco. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 490.
[02359] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 5,16-5,02 (m, 1H), 4,51 (br s, 1H), 4,31 (dd, J = 4,8, 11,2 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 6,0, 11,2 Hz, 1H), 3,87 (s, 2H), 3,76 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,52-3,41 (m, 1H), 3,14 (dd, J = 3,6, 13,6 Hz, 2H), 3,06-
3,03 (m, 1H), 2,99-2,88 (m, 3H), 2,74-2,48 (m, 6H), 2,43 (s, 3H), 2,29-2,18 (m, 1H), 1,96-1,80 (m, 1H), 1,68-1,59 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).
[02360] Etapa C: terc-Butil-(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil-(2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,2 mol, 1,0 eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (812 mg, 3,7 mmol, 3,0 eq), Pd2(dba)3 (168 mg, 184 µmol, 0,15 eq), Cs2CO3 (1,2 g, 3,7 mmol, 3,0 eq) e Xantphos (142 mg, 246 µmol, 0,2 eq) em tolueno (5,0 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 12 horas sob N 2. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo e, em seguida, o resíduo foi dissolvido com EA 15,0 mL, depois foi ajustado com HCl 0,5 M até pH~2. A camada orgânica foi lavada com H2O (15,0 mL×3), em seguida, o NaHCO3 sólido foi adicionado à fase aquosa combinada até que pH alcançasse 8, depois disso, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (50,0 mL×3), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4 , filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa (18C, 0,1% de TFA em água, 0-50% de MeCN). O produto obtido foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado até pH-8, em seguida, concentrado, a camada aquosa foi extraída com EA (100,0 mL×3), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2 SO4, filtrada e concentrada para dar terc-butil-(2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 467 µmol, 35% de rendimento, 99% pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 630.
[02361] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-Fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil-(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-
fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 318 µmol, 1,0 eq) em dioxano (1,5 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 2,0 mL, 25,0 eq) a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 aquoso saturado (6,0 mL) a 0°C e, em seguida, diluída com H2O 10,0 mL e extraída EA (15,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, bruto) como óleo amarelo. O produto foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 530.
[02362] Etapa E: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 283 µmol, 1,0 eq) em acetato de etila (1,0 mL) foi adicionada uma solução de ácido 2-fluoroprop- 2-enoico (42,9 mg, 476 µmol, 1,68 eq) em acetato de etila (0,5 mL), em seguida foi adicionado TEA (1,93 g, 19 mmol, 2,65 mL, 67,0 eq) e T3P (455 mg, 715 µmol, 425 µL, 50% de pureza, 2,5 eq) e a mistura foi agitada a 0°C, depois a mistura de reação foi aquecida a 20°C e agitada por 1 hora. Depois da conclusão, a mistura foi extinta por adição de H2O 10,0 mL e, então, extraída com acetato de etila (15,0 mL×3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-MeCN]; B%: 58% -88%, 11,5 min.) e liofilização para dar o composto do título 2-[(2S)-4- [2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-
il]acetonitrila (50,1 mg, 82,9 µmol, duas etapas com 26% de rendimento, 99,5% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 602.
[02363] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,67 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,46-7,43 (m, 2H), 7,26-7,21 (m, 2H), 5,50-5,38 (m, 1H), 5,30- 5,11 (m, 2H), 4,89 (br s, 1H), 4,45-4,40 (m, 1H), 4,30-4,20 (m, 2H), 4,19-4,13 (m, 1H), 4,10-4,05 (m, 1H), 3,92-3,88 (m, 1H), 3,82-3,77 (m, 1H), 3,62-3,46 (m, 3H), 3,25-3,18 (m, 2H), 3,15-3,09 (m, 1H), 3,08-2,98 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,90-2,77 (m, 2H), 2,67-2,56 (m, 2H), 2,51 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,38-2,27 (m, 1H), 2,07-1,89 (m, 1H).
EXEMPLO 561 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila HCl.dioxano t- Dioxano, BuONa, Cs2CO3, 10°C, 1 tolueno, tolueno, h, 8% 0-8°C, 1 90°C, 12 h, 55% hrs, 58% 0-10 °C, 0,5 h 0-80 °C, 9,5 h 25% 73%
[02364] 1-terc-Butil-2-metil(2S,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato. À solução de ácido (2S,4R)-1-terc-butoxicarbonil-4-hidroxi-pirrolidina-2-carboxílico (2 g, 8,65 mmol, 1 eq) e Ag2O (6,01 g, 26,0 mmol), 3 eq) em MeCN (40 mL) foi adicionado CH3I (10,0 g, 70,8 mmol, 4,41 mL, 8,19 eq), a mistura foi agitada a 30°C por 14 horas. À mistura foi adicionado CH3I (13,2 g, 93,1 mmol, 5,80 mL, 10,8 eq), a mistura foi agitada a 30°C por 6 horas. A mistura de reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE: EtOAc = 20:1~10:1) para dar 1-terc-butil-2-metil (2S,4R)-4- metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,85 g, 6,99 mmol, 81% de rendimento, 98% de pureza) como um óleo amarelo.
[02365] [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol. À solução de O1- terc-butil O2-metil (2S,4R)-4-metoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,85 g, 7,13 mmol, 1 eq) em THF (50 mL) foi adicionado LiAlH4 (542 mg, 14,3 mmol, 2 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Depois a mistura foi aquecida até 70°C e agitada por 3 horas. Em seguida, LiAlH4 (542 mg, 14,27 mmol, 2 eq) foi adicionado a 10°C, a mistura foi aquecida até 80°C e agitada por 6 horas. A mistura de reação foi extinta por Na2SO4 saturado (5 mL), em seguida, filtrada. A torta de filtro foi lavada com THF (3 × 30 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar [(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (840 mg, 5,21 mmol, 73% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02366] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 3,93 - 3,83 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 3,2, 11,2 Hz, 1H), 3,48 - 3,36 (m, 2H), 3,30 (s, 3H), 2,67 - 2,58 (m, 1H), 2,40 - 2,30 (m, 4H), 2,08 (td, J = 8,0, 13,2 Hz, 1H), 1,90 - 1,79 (m, 1H).
[02367] Etapa A: Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. À solução de [(2S,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il] metanol (367 mg, 2,52 mmol, 2 eq) em tolueno (18 mL) foi adicionado t -BuONa (364 mg, 3,79 mmol, 3 eq) a 0°C, depois benzil 4- [(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (700 mg, 1,26 mmol, 1 eq) foi adicionado a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 8°C por 1 hora. Foi adicionada água (30 mL) à mistura. A mistura foi diluída com EtOAc (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (MeCN/Água (0,1% FA) = 30%) para dar benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S,4R)- 4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (450 mg, 694 µmol, 55% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 636.
[02368] Etapa B: terc-Butil-(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. À solução de benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (490 mg, 771 µmol, 1 eq) e NH3•MeOH (5 mL, 25% de pureza) em MeOH (5 mL) foi adicionado Pd/C (100 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada, a torta de filtro foi lavada com MeOH (3 x 5 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar terc-butil(2S)-2-(cianometil)- 4-[2-[[((2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (360 mg, 682 µmol, 88% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02369] Etapa C: terc-Butil(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (360 mg, 718 µmol, 1 eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (238 mg, 1,08 mmol, 1,5 eq, Cs2CO3 (701 mg, 2,15 mmol, 3 eq) e Xantphos (83,0 mg, 143 µmol, 0,2 eq) em tolueno (8 mL) Pd2(dba)3 (65,7 mg, 71,8 umol, 0,1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 12 horas. A mistura de reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (de PE: EtOAc = 5:1~1:1 para EtOAc: MeOH = 1:0~20:1). Em seguida, o resíduo foi purificado por coluna flash de fase reversa (ACN/Água (0,1% FA) = 45%) para dar terc-butil(2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 414 µmol, 58% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 642.
[02370] 1H NMR (400 MHz, cloroórmio-d) δ = 7,74 - 7,60 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 4,61 (br s, 1H), 4,39 (ddd, J = 4,8, 6,8, 11,2 Hz, 1H), 4,30 - 4,20 (m, 1H), 4,16 - 4,11 (m, 1H), 4,11 - 3,89 (m, 4H), 3,88 - 3,68 (m, 1H), 3,56 - 3,47 (m, 1H), 3,46 - 3,32 (m, 2H), 3,30 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 3,21 - 3,05 (m, 3H), 3,01 - 2,85 (m, 5H), 2,81 - 2,67 (m, 2H), 2,65 - 2,54 (m, 1H), 2,46 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,35 - 2,26 (m, 1H), 2,11 - 2,05 (m, 1H), 2,00 - 1,88 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).
[02371] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. À solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 436 µmol, 1 eq) em dioxano (1 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 1,64 mL, 15 eq) foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. A mistura foi basificada com NaHCO3 saturado até PH = 8~9 e extraída com EtOAc (3 × 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (210 mg, 349 µmol, 80% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 542.
[02372] Etapa E: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4- metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 185 µmol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (33,2 mg, 369 µmol, 2 eq) e TEA (149 mg, 1,48 mmol, 206 μL, 8 eq) em EtOAc (2 mL) foi adicionado T3P (352 mg, 554 µmol, 329 uL, 50% de pureza, 3 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 10°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (3 mL) à mistura. A mistura foi extraída com EtOAc (2 × 3 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 52% - 82%, 12 min.) para dar o composto do título 2- [(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (28,1 mg, 45,5 µmol, 25% de rendimento, 99,4% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 614.
[02373] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,65 - 7,54 (m, 2H), 7,38 - 7,30 (m, 1H), 7,27 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,19 - 7,10 (m, 2H), 5,46 - 5,26 (m, 1H), 5,18 (br dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,83 (br s, 1H), 4,37 - 4,27 (m, 1H), 4,23 - 3,94 (m, 4H), 3,92 - 3,85 (m, 1H), 3,84 - 3,76 (m, 1H), 3,70 (br d, J = 18,0 Hz, 1H), 3,46 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,42 - 3,31 (m, 2H), 3,22 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 3,18 -
3,07 (m, 2H), 3,06 - 2,87 (m, 2H), 2,87 - 2,64 (m, 6H), 2,59 - 2,49 (m, 1H), 2,38 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,24 (ddd, J = 3,2, 6,0, 9,6 Hz, 1H), 2,04 - 1,94 (m, 1H), 1,93 - 1,81 (m, 1H).
EXEMPLO 562 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin- 3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 10 min., 51% 0,5 h -40 °C, 0,5 h 11%
[02374] [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol. À solução de terc-butil (3R)-3- (hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,5 g, 2,48 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) foi adicionado LiAlH4 (189 mg, 4,97 mmol , 2 eq) a 0°C, em seguida, a mistura foi aquecida até 70°C e agitada a 70°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com Na2SO4 saturado (1 mL). O precipitado foi filtrado e a torta de filtro foi lavada com THF (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol (220 mg, 1,72 mmol, 69% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo incolor que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02375] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 3,67 - 3,57 (m, 1H), 3,50 (dd, J = 6,0, 10,0 Hz, 1H), 3,45 - 3,18 (m, 1H), 2,70 (dt, J = 4,8, 8,8 Hz, 1H), 2,56 - 2,44 (m, 2H), 2,42 - 2,24 (m, 5H), 2,04 - 1,90 (m, 1H), 1,68 - 1,54 (m, 1H).
[02376] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1 eq) e [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol (194 mg, 1,68 mmol, 2 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t-BuONa (162 mg, 1,68 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (EtOAc/MeOH 50/1 a 3/1) para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (290 mg 427 µmol, 51% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[02377] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 5H), 7,37 - 7,30 (m, 2H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 5,28 - 5,15 (m, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,30 - 4,01 (m, 6H), 4,00 - 3,73 (m, 2H), 3,56 - 3,31 (m, 2H), 3,26 - 3,06 (m, 3H), 3,05 - 2,94 (m, 2H), 2,91 (s, 3H), 2,82 - 2,70 (m, 4H), 2,70 - 2,57 (m, 2H), 2,47 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,20 - 2,07 (m, 1H), 1,80 - 1,67 (m, 1H).
[02378] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (290 mg, 449 µmol, 1 eq) em MeOH (4 mL) foi adicionado NH3•MeOH (2 mL, 15% de pureza), Pd/C (100 mg, 449 µmol, 10% de pureza, 1 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(8- metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 279 µmol, 62% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02379] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(3R)-1-metilpirrolidina-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, 235 µmol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (42,2 mg, 469 µmol, 2 eq) e TEA (71,2 mg, 704 µmol, 97,9 µL, 3 eq) em DMF (2 mL) foi adicionado T3P (224 mg, 352 µmol, 209 µL, 50% de pureza em EtOAc, 1,5 eq) a -40°C. A mistura foi agitada a -40°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (2 mL) e extraída com o solvente misto (EtOAc/MeOH 10/1, 5 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 50/1 a 20/1) seguido por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10µm; fase móvel: [água (10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 50%- 100%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)- 1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-
2-il]acetonitrila (16,0 mg, 26,5 µmol, 11% de rendimento, 96,5% de pureza) como sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 584.
[02380] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,74 - 7,61 (m, 2H), 7,45 - 7,38 (m, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,55 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,88 (br s, 1H), 4,33 - 4,02 (m, 5H), 4,01 - 3,65 (m, 2H), 3,61 - 3,36 (m, 2H), 3,27 - 2,97 (m, 4H), 2,92 (s, 3H), 2,90 - 2,74 (m, 2H), 2,74 - 2,56 (m, 4H), 2,55 - 2,42 (m, 2H), 2,36 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,14 - 1,99 (m, 1H), 1,66 - 1,52 (m, 1H).
EXEMPLO 563 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila
[02381] 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (260 mg, 508 µmol, 1,0 eq) em acetato de etila (1,5 mL) foi adicionada uma solução de ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (106 mg, 1,02 mmol, 2,0 eq) em acetato de etila (0,5 mL), TEA (206 mg, 2,03 mmol, 283 µL, 4,0 eq) e T3P (647 mg, 1,02 mmol, 605 µL, 50% de pureza, 2,0 eq) e a mistura foi agitada a -40°C e agitada por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta por H2O (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 15,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 25%- 45%, 7,8 min.). O produto obtido foi ajustada para pH~8 com NaHCO 3 aquoso saturado, em seguida, concentrado, a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2- enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (132 mg, 220 µmol, 43% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[02382] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 - 7,62 (m, 2H), 7,43 - 7,38 (m, 1H), 7,36 - 7,31 (m, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 2H), 7,04 - 6,94 (m, 1H), 6,59 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 5,17 - 4,60 (m, 3H), 4,41 - 4,35 (m, 1H), 4,28 - 3,44 (m, 9H), 3,20 - 3,08 (m, 4H), 3,05 - 2,99 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,83 - 2,77 (m, 1H), 2,72 - 2,62 (m, 2H), 2,47 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,32 - 2,25 (m, 1H), 2,09 - 2,01 (m, 1H), 1,88 - 1,70 (m, 3H).
EXEMPLO 564
2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, Cs2CO3, tolueno, 0°C, tolueno, 1 h, 55% 90°C, 10h, 50% HCl.dioxano Dioxano, 0-10 °C, 0,5 h 10°C, 1h, 24% 73%
[02383] Etapa A: Benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc-butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfinil- 6,8-d-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (800 mg, 1,44 mmol, 1 eq) em tolueno (20 mL) foi adicionado t- BuONa (277 mg, 2,88 mmol, 2 eq) e 3- [(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propan-1-ol (340 mg, 2,16 mmol, 1,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico
0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH = 7 com NaHCO3 aquoso saturado e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (500 mg, 725 µmol, 50% de rendimento, 94% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 648.
[02384] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,44 - 7,30 (m, 5H), 5,19 (s, 2H), 4,79 - 4,53 (m, 2H), 4,51 - 4,30 (m, 4H), 4,09 - 3,71 (m, 5H), 3,67 - 3,58 (m, 1H), 3,54 - 3,36 (m, 2H), 3,32 - 3,12 (m, 2H), 3,04 - 2,87 (m, 2H), 2,85 - 2,46 (m, 7H), 2,00 - 1,89 (m, 2H), 1,85 ( d, J=9,2 Hz, 1H), 1,72 ( d, J=9,2 Hz, 1H), 1,51 (s, 9H).
[02385] Etapa B: terc-Butil(2S)-2-(cianometil)-4-[2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil 4-[(3S)-4-terc- butoxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (900 mg, 1,39 mmol, 1 eq) em MeOH (30 mL) foi adicionado Pd/C (100 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (20 mL, 25% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo. terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[3- [(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (650 mg, 1,06 mmol, 77% de rendimento, 84% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado para a próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 514.
[02386] Etapa C: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa- 5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. À solução de terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 350 µmol, 1 eq), 1-bromo-8-cloro-naftaleno (127 mg, 526 µmol, 1,5 eq), Cs2CO3 (342 mg, 1,05 mmol, 3 eq) e RuPhos (65,4 mg, 140 µmol, 0,4 eq) em tolueno (6 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (64,2 mg, 70,1 µmol, 0,2 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 10 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (de PE: EtOAc = 5:1 ~ 1:1 a EtOAc: MeOH = 1:0~20:1) para dar terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (130 mg, 173 µmol, 50% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 674.
[02387] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 222 µmol, 1 eq) em dioxano (0,6 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 556 µL, 10 eq), a mistura foi agitada a 10°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com água (15 mL) e EtOAc (10 mL) e depois separado. A fase aquosa foi basificada por NaHCO3 sólido para PH = 8~9 e extraída com EtOAc (2 × 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7- (8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 162 µmol, 73% de rendimento, 93% de pureza) como um sólido marrom que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 574.
[02388] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- (2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. À solução de 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 174 µmol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (31,4 mg, 348 µmol, 2 eq) e TEA (141 mg, 1,39 mmol, 194 μL, 8 eq) em EtOAc (2 mL) foi adicionado T3P (332 mg, 522 µmol, 311 µL, 50% de pureza, 3 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 10°C por 0,5 hora. Foi adicionada água (3 mL) à mistura. A mistura foi extraída com EtOAc (2 × 3 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 10μ 250 mm *50 mm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45%-75%, 12 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5- il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (26,5 mg, 41 µmol, 24% de rendimento, 99,9% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[02389] 1H NMR (400 MHz, chloroform-d) δ = 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 7,6, 12,4 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 5,53 - 5,32 (m, 1H), 5,25 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,12 - 4,64 (m, 1H), 4,49 - 4,31 (m, 4H), 4,21 - 3,98 (m, 3H), 3,95 - 3,76 (m, 2H), 3,68 - 3,55 (m, 2H), 3,52 - 3,36 (m, 2H), 3,33 - 2,97 (m, 4H), 2,95 - 2,66 (m, 5H), 2,64 - 2,49 (m, 2H), 1,93 (m, 2H), 1,84 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 1,71 (br d, J = 10,0 Hz, 1H).
EXEMPLO 565
2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano Dioxano, 0°C, Cs2CO3, 1h tolueno, 90°C, 12 h, 56% -70 °C, 0,5 h 10%
[02390] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3- [(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (350 mg, 681 µmol, 1 eq), 1-bromo-8-metil-naftaleno (226 mg, 1,02 mmol, 1,5 eq), Xantphos (78,9 mg, 136 µmol, 0,2 eq), Pd2(dba)3 (62,4 mg, 68,1 µmol, 0,1 eq) e
Cs2CO3 (555 mg, 1,70 mmol, 2,5 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etil/metanol = 300/1 a 10/1). terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (270 mg, 379 µmol, 56% de rendimento, 92% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 654.
[02391] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 - 7,61 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,34 (t, J=7,2 Hz, 1H), 7,26 - 7,15 (m, 2H), 4,62 (br s, 1H), 4,45 - 4,31 (m, 3H), 4,30 - 4,16 (m, 1H), 4,10 - 3,70 (m, 5H), 3,61 (br d, J=7,6 Hz, 1H), 3,57 - 3,44 (m, 2H), 3,43 - 3,25 (m, 1H), 3,24 - 3,05 (m, 3H), 3,03 - 2,86 (m, 5H), 2,84 - 2,67 (m, 4H), 2,66 - 2,48 (m, 2H), 2,00 - 1,88 (m, 2H), 1,84 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 1,72 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 1,52 (s, 9H).
[02392] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7- (8-metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (250 mg, 382 µmol, 1 eq) em dioxano (2 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 1,91 mL, 1,00 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (20 ml) e, em seguida, a mistura foi ajustada pH = 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraído com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3-
[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (260 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo e usado para a próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 554.
[02393] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4- [7-(8-metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, 216 µmol, 1 eq), TEA (87,7 mg, 866 µmol, 121 µL, 4 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2- enoico (45,1 mg, 433 µmol, 2 eq) em acetato de etila (2 mL) foi adicionado T3P (276 mg, 433 µmol, 258 µL, 50% de pureza, 2 eq) a -70°C. A mistura foi agitada a -70°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi extinta com diluída com HCl (1 N, 1 mL) e depois diluída com água (20 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 40%-70%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas. Composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-2-il]acetonitrila (14,5 mg, 22,5 µmol, 10% de rendimento, 99,3% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 640.
[02394] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 - 7,30 (m, 2H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 7,09 - 6,91 (m, 1H), 6,59 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 5,29 - 4,48 (m, 3H), 4,44 - 4,31 (m, 3H), 4,29 - 3,72 (m, 6H), 3,71 - 3,40 (m, 4H), 3,28 - 2,96 (m, 4H), 2,95 - 2,88 (m, 4H), 2,87 - 2,56 (m,
5H), 2,52 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 1,99 - 1,87 (m, 2H), 1,84 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 1,71 (d, J = 9,6 Hz, 1H).
EXEMPLO 566 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila 0 °C, 0,5 h 11%
[02395] 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[3- [(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil- 1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1] heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 181 µmol, 1 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (32,5 mg, 361 µmol, 2 eq) em DCM (1 mL) foi adicionado HATU (137 mg, 361 µmol, 2 eq) e DIEA (93,4 mg, 722 µmol, 126 µL, 4 eq). Após agitação a 0°C por 0,5 hora, a mistura de reação foi diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC (DCM/MeOH = 10/1) e posteriormente purificado por HPLC- prep (coluna: Xtimate C18 10μ 250 mm *50 mm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45%-75%, 12 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. Composto do título 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8- metil-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (12 mg, 19,1 µmol, 11% de rendimento, 99,6% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 626.
[02396] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 8,4 Hz, 1H),7,39 - 7,23 (m, 2H), 7,19 - 7,09 (m, 2H), 5,35 (d, J = 48,8 Hz, 1H), 5,18 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,04 - 4,40 (m, 1H), 4,37 - 3,89 (m, 7H), 3,86 - 3,61 (m, 2H), 3,59 - 3,32 (m, 4H), 3,20 - 2,40 (m, 14H), 1,95 - 1,81 (m, 2H), 1,78 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 1,65 (d, J = 9,6 Hz, 1H).
EXEMPLO 567 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-[8-(hidroximetil)-1-naftil]-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila
0,5 h Duas etapas 72% Cs2CO3, 0,5 h tolueno, 90°C, 10 h, 34%
[02397] 8-Bromonaftaleno-1-carbaldeído. A uma solução de 1,8- dibromonaftaleno (5 g, 17,5 mmol, 1 eq) em THF (100 mL) foi adicionado n-BµLi (2,5 M, 9,09 mL, 1,3 eq) a -70°C gota a gota. Depois de agitar por 30 minutos a -70°C, DMF (12,8 g, 175 mmol, 13,5 mL, 10 eq) foi adicionado gota a gota. A mistura foi aquecida até 12°C e agitada por mais 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (20 mL). A fase aquosa separada foi extraída com EtOAc (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 8-bromonaftaleno-1-carbaldeído (4,5 g, em bruto) como um sólido amarelo, o qual foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02398] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 11,4 (s, 1H), 8,04 - 7,92 (m, 2H), 7,90 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,60 - 7,55 (m, 1H), 7,39 (t, J = 8,0 Hz, 1H).
[02399] (8-Bromo-1-naftil) metanol. A uma mistura de 8-bromonaftaleno-1- carbaldeído (4,5 g, 19,1 mmol) em MeOH (80 mL) foi adicionado NaBH4 (2,90 g, 76,6 mmol) em uma porção, a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 30 minutos. Mediante conclusão, à mistura foi adicionada água (1 mL) e a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (10 mL) e extraído com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 30/1 a 3/1) para dar (8-bromo-1-naftil)metanol (3,3 g, 12,5 mmol, duas etapas, 72% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo amarelo.
[02400] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,92 - 7,82 (m, 3H), 7,71 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,32 - 7,27 (m, 1H), 5,48 (br s, 2H).
[02401] 2-[(8-Bromo-1-naftil)metoxi]tetra-hidropirano. A uma solução de (8-bromo-1-naftil)metanol (0,5 g, 2,11 mmol, 1 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado DHP (355 mg, 4,22 mmol, 386 µL, 2 eq), seguido por TsOH•H2O (40,1 mg, 211 µmol, 0,1 eq) a 12°C. A mistura foi agitada a 12°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com solução de NaHCO3 aquosa saturada (2 mL) e diluída com água (5 mL). A fase aquosa separada foi extraída com EtOAc (10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 500/1 a 100/1) para dar 2-[(8-bromo-1-naftil)metoxi]tetra-hidropirano (560 mg, 1,57 mmol, 74% de rendimento, 90% pureza) como um óleo incolor.
[02402] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,94 - 7,88 (m, 2H), 7,85 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,56 - 7,50 (m, 1H), 7,36 - 7,28 (m, 1H), 5,63 (s, 2H), 4,92 (t, J = 3,6 Hz, 1H), 4,07 - 3,97 (m, 1H), 3,69 - 3,61 (m, 1H), 2,08 - 1,76 (m, 4H), 1,75 - 1,65 (m, 2H).
[02403] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. 2-[(8-bromo-1-naftil)metoxi]tetra- hidropirano (476 mg, 1,48 mmol, 1,5 eq), benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (500 mg, 989 µmol, 1 eq), Cs2CO3 (806 mg, 2,47 mmol, 2,5 eq), (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-xanten-4-il)-difenil-fosfano (229 mg, 396 µmol, 0,4 eq) e Pd2(dba)3 (181 mg, 198 µmol, 0,2 eq) em tolueno (20 mL) foram desgaseificados e depois aquecidos até 90°C por 10 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas, neutralizadas com NaHCO3 aquoso saturado, concentradas sob vácuo para remover o MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 30 L). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 338 µmol, 34% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 746.
[02404] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra- hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)benzil)-1-naftil]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 375 µmol, 1 eq) em MeOH (6 mL) foi adicionado NH3/MeOH (4 mL, 20% de pureza), Pd/C (120 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (200 mg, 294 µmol, 78% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 612.
[02405] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8-di-hidro-
5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2- [(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1- naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 294 µmol, 1 eq), T3P (562 mg , 883 µmol, 525 µL, 50% de pureza em EtOAc, 3 eq) e TEA (238 mg, 2,35 mmol, 328 µL, 8 eq) em EtOAc (4 mL) foi adicionado ácido 2-fluoroprop-2-enoico (53,0 mg, 588 ol, 2 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 15°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (4 mL) e extraída com EtOAc (3 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 100 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-1-(2-fluorprop-2-enoil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (160 mg, 227 µmol, rendimento de 77%, pureza de 97%) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 684.
[02406] Etapa D: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoyl)-4-[7-[8-(hidroximetil)-1- naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)- 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil] -6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 219 umol, 1 eq) em DCM (160 mL) foi adicionado TFA (250 mg, 2,19 mmol, 162 mL, 10 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com diclorometano (3 mL) e ajustada pH = 9 com uma solução aquosa saturada de Na2CO3. A fase aquosa separada foi extraída com DCM (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05%
v/v)-ACN]; B%: 42%-72%, 8 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-[8- (hidroximetil)-1-naftil]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (62,0 mg, 103 µmol, 47% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 600.
[02407] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 3,2, 7,2 Hz, 1H), 7,55 - 7,44 (m, 3H), 7,44 - 7,38 (m, 1H), 5,55 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,21 - 4,94 (m, 2H), 4,89 (br t, J = 13,2 Hz, 1H), 4,41 - 3,90 (m, 7H), 3,66 - 3,39 (m, 2H), 3,37 - 3,00 (m, 5H), 3,00 - 2,58 (m, 4H), 2,50 - 2,43 (m, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,11 - 1,98 (m, 1H), 1,90 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 568 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila
HCl.dioxano Dioxano, 20°C, 0,5 h, Cs2CO3, tolueno, 81% 90°C, 8 h, 72% 0,5 h t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5 h, 56% 0,5 h 0,5 h
[02408] Etapa A: terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato. A uma mistura de terc-butil 2-metilsulfanil-4- (trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (20,0 g, 46,6 mmol, 1,00 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (13,3 g, 51,2 mmol, 1,10 eq) em DMAc (250 mL) foi adicionado DIEA (18,1 g, 140 mmol, 24,3 mL, 3 eq) em porção a 0°C sob N 2. A mistura foi aquecida até 50°C e agitada por 1 hora. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3 x 500 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 50/1 a 1/1). Composto terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2- metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (23,0 g, 42,7 mmol, 92% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 539.
[02409] Etapa B: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de terc- butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-2-metilsulfanil-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (23,0 g, 42,7 mmol, 1,00 eq) em dioxano (200 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 192 mL, 18,0 eq). Após agitada a 20°C e por 0,5 hora, a mistura de reação foi filtrada e a torta de filtro foi dissolvida em acetato de etila (200 mL). O pH foi ajustado para 8-9 com uma solução saturada de Na2CO3 e, em seguida, diluída com água (20,0 mL). A camada de água separada foi extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi usado na etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. Composto benzil (2S)-2- (cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (16,1 g, 34,5 mmol, 81% de rendimento, 94% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo.
[02410] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,42 - 7,33 (m, 5H), 5,25 - 5,12 (m, 2H), 4,66 (br s, 1H), 4,11 - 4,04 (m, 1H), 4,03 - 3,90 (m, 3H), 3,84 (br d, J = 13,6 Hz, 1H), 3,34 - 3,17 (m, 2H), 3,11 (td, J = 5,2, 10,4 Hz, 1H), 3,04 - 2,93 (m, 2H), 2,88 - 2,76 (m, 1H), 2,75 - 2,56 (m, 3H), 2,50 (s, 3H).
[02411] Etapa C: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (16,1 g, 36,7 mmol, 1,00 eq) e 1-bromo-8-metil-naftaleno (10,6 g, 47,7 mmol, 1,30 eq) em tolueno (350 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (6,72 g, 7,34 mmol , 0,20 eq), Xantphos (8,50 g, 14,7 mmol, 0,40 eq) e Cs2CO3 (35,9 g, 110 mmol, 3,00 eq). A mistura foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. Após agitada a 90°C por 8 horas, a mistura de reação foi diluída com água (1 × 100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (1 × 300 mL) e salmoura (1 × 300 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/1 a 01/02) e concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazina-1-carboxilato (15,3 g, 26,5 mmol, 72% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo.
[02412] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,68 - 7,55 (m, 2H), 7,40 - 7,28 (m, 7H), 7,22 (s, 2H), 5,22 - 5,09 (m, 2H), 4,64 (br s, 1H), 4,27 - 4,14 (m, 1H), 4,05 - 3,84 (m, 2H), 3,83 - 3,68 (m, 1H), 3,55 - 3,30 (m, 2H), 3,18 - 3,03 (m, 3H), 3,01 - 2,79 (m, 5H), 2,78 - 2,50 (m, 3H), 2,45 (d, J = 4,8 Hz, 3H).
[02413] Etapa D: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (13,3 g, 23,0 mmol, 1,00 eq) em EtOAc (200 mL) foi adicionado m-CPBA (4,67 g, 23,0 mmol, 85% de pureza, 1,00 eq) a 0°C sob N2. Depois de agitar a 0°C por 30 min., a mistura de reação foi extinta com Na2S2O3 saturado (100 mL) a 0°C. A camada orgânica separada foi diluída com água (1 × 100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, éter de petróleo/acetato de etila = 50/1 a 0/1). Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7- (8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (9,60 g, 15,3 mmol, 67% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 595.
[02414] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,74 - 7,63 (m, 2H), 7,47 - 7,31 (m, 7H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,25 - 5,17 (m, 2H), 4,67 (br s, 1H), 4,48 - 4,21 (m, 2H), 4,10 - 3,88 (m, 2H), 3,66 - 3,46 (m, 2H), 3,42 - 3,04 (m, 4H), 3,02 - 2,83 (m, 6H), 2,81 - 2,60 (m, 1H), 2,81 - 2,60 (m, 3H).
[02415] Etapa E: terc-Butil (2S)-4-[2-[[(2S)-1-terc -butoxicarbonilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1,00 eq) e terc-butil (2S)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (338 mg, 1,68 mmol, 2,00 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado t-BuONa (242 mg, 2,52 mmol, 3,00 eq) em porção, a 0°C sob N2. Após agitação a 0°C por 30 min., a mistura de reação foi extinta por adição de ácido clorídrico (1 M) 2 mL a 0°C e água (10 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (30 mL × 1) e salmoura (30 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 50/1 a 0/1). Composto terc-butil (2S)-4-[2-[[(2S)-1-terc- butoxicarbonilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (330 mg, 473 µmol, 56% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo.
[02416] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,61 (m, 2H), 7,47 - 7,31 (m, 7H), 7,26 - 7,15 (m, 2H), 5,27 - 5,14 (m, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,42 - 4,17 (m, 3H), 4,07 - 3,73 (m, 3H), 3,58 - 3,29 (m, 5H), 3,25 - 2,88 (m, 8H), 2,86 - 2,51 (m, 3H), 2,03 - 1,76 (m, 4H), 1,44 (d, J = 4,8 Hz, 9H).
[02417] Etapa F: terc-Butil (2S)-2-[[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-7- (8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oximetil] pirrolidina-1- carboxilato. A uma mistura de terc-butil (2S)-4-[2-[[(2S)-1-terc-
butoxicarbonilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (330 mg, 473 µmol, 1,00 eq) em MeOH (15 mL) foi adicionado NH3•MeOH (15 mL, 20% de pureza), Pd(OH)2/C (80 mg, 20% de pureza) numa porção sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional. Composto terc- butil (2S)-2-[[4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il] oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (200 mg, 335 µmol, 71% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
598.
[02418] Etapa G: terc-Butil (2S)-2-[[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-(2-fluoroprop- 2-enoil)piperazin-1-il]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma mistura de terc-butil (2S)-2-[[4-[(3S)-3- (cianometil)piperazin-1-il]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (190 mg, 318 µmol, 1,00 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (42,9 mg, 477 µmol, 1,50 eq) em DCM (15,0 mL) foram adicionados DIEA (123 mg, 954 µmol, 166 uL, 3,00 eq) e HATU (181 mg, 477 µmol, 1,50 eq) em uma porção a 0°C sob N2. Após agitar a 0°C por 30 min., a mistura de reação foi diluída com água (10 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (1 × 10 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, DCM: MeOH = 50:1 a 5:1). Composto terc-butil (2S)-2-[[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-1-il]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (210 mg, 292 µmol, 92% de rendimento, 93% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 670.
[02419] Etapa H: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil (2S)-2-[[4-[(3S)-3-(cianometil)-4-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-1-il]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il] oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (210 mg, 314 µmol, 1,00 eq) em DCM (5,00 mL) foi adicionado TFA (1,07 g, 9,41 mmol, 696 mL, 30,0 eq) em uma porção a 20°C sob N2. Após agitada a 20°C por 30 min., a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30 mm x 4 µm; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 20%-50%, 5 min.). Composto do título 2- [(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (75,5 mg, 122 µmol, 39% de rendimento, 99,8% de pureza, FA) foi obtido como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 570.
[02420] 1H NMR (400MHz, clorofórrmio-d) δ = 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,44 - 7,30 (m, 2H), 7,27 - 7,14 (m, 2H), 6,49 - 5,98 (m, 1H), 5,55 - 5,32 (m, 1H), 5,25 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,58 - 4,42 (m, 2H), 4,36 - 3,87 (m, 5H), 3,86 - 3,67 (m, 1H), 3,64 - 3,37 (m, 2H), 3,35 - 3,26 (m, 2H), 3,25 - 2,94 (m, 4H), 2,92 - 2,70 (m, 5H), 2,66 - 2,51 (m, 1H), 2,18 - 1,81 (m, 4H).
EXEMPLO 569
2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila 0,5 h t-BuONa, tolueno, 0-15°C, 1 h, 29% 0 °C, 0,5 h Duas etapas 26%
[02421] (5S)-5-(Tetra-hidropiran-2-iloximetil)pirrolidin-2-ona. A uma mistura de (5S)-5-(hidroximetil)pirrolidin-2-ona (5,00 g, 43,4 mmol, 1,00 eq) e DHP (3,65 g, 43,4 mmol, 3,97 mL, 1,00 eq) em DCM (80,0 mL) foi adicionado TsOH.H2O (826 mg, 4,34 mmol, 0,10 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 12 horas. A mistura de reação foi lavada com salmoura (30,0 mL × 1), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 0:1). O composto (5S)-5-(tetra-hidropiran-2- iloximetil)pirrolidin-2-ona (5,70 g, 28,6 mmol, 66% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo.
[02422] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 6,36 - 6,01 (m, 1H), 4,66 - 4,47 (m, 1H), 3,92 - 3,71 (m, 2,5H), 3,64 - 3,43 (m, 2H), 3,24 (dd, J = 8,0, 9,6 Hz, 0,5H), 2,42 - 2,10 (m, 3H), 1,86 - 1,64 (m, 3H), 1,62 - 1,48 (m, 4H).
[02423] (5S)-1-metil-5-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)pirrolidin-2-ona. A uma mistura de (5S)-5-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)pirrolidin-2-ona (5,60 g, 28,1 mmol, 1,00 eq) em DMF (60,0 mL) foi adicionado NaH (1,35 g, 33,7 mmol, 60 % de pureza, 1,20 eq) em porção a -40°C sob N2. A mistura foi agitada a -40°C por 30 min., depois CH3I (6,58 g, 46,4 mmol, 2,89 mL, 1,65 eq) foi adicionado e agitado a 0°C por 2,5 horas. A mistura de reação foi extinta por adição de solução aquosa de NaHSO3 saturada (30,0 mL) e extraída com EA (3 x 50,0 mL). A fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e concentrada até secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 0/1). O composto (5S)-1-metil-5-(tetra-hidropiran-2-iloximetil) pirrolidin- 2-ona (4,40 g, 20,6 mmol, 73% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo.
[02424] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 4,59 (td, J = 3,2, 13,6 Hz, 1H), 3,93 - 3,73 (m, 2H), 3,63 - 371 (m, 1H), 3,57 - 3,44 (m, 2H), 2,88 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,54 - 2,40 (m, 1H), 2,38 - 2,24 (m, 1H), 2,07 -2,20 (m, 1H), 1,93 - 1,53 (m, 7H).
[02425] (5S)-5-(Hidroximetil)-1-metil-pirrolidin-2-ona. A uma mistura de (5S)-1-metil-5-(tetra-hidropiran-2-iloximetil)pirrolidin-2-ona (2,20 g, 10,3 mmol, 1,00 eq) em DCM (20,0 mL) foi adicionado TFA (23,5 g, 206 mmol, 15,3 mL, 20,0 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional. O composto (5S)-5-(hidroximetil)- 1-metil-pirrolidin-2-ona (2,60 g, bruto) foi obtido como um óleo vermelho.
[02426] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de (5S)-5-(hidroximetil)-1-metil-
pirrolidin-2-ona (543 mg, 4,20 mmol, 5,00 eq) em THF (30,0 mL) foi adicionado t-BuONa (808 mg, 8,41 mmol, 10,0 eq) em porção a 0°C sob N 2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min., depois o benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1,00 eq) foi adicionado e aquecido até 15°C e agitado por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 mL x 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% TFA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (50,0 mL x 2). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (162 mg, 243 µmol, 29% de rendimento, 99% de pureza) foram obtidos como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 660.
[02427] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (130 mg, 197 µmol, 1,00 eq) em MeOH (2,00 mL) foi adicionado NH3•MeOH (1,00 mL, 20% de pureza) e Pd/C (35,0 mg, 10% de pureza). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional. Composto 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-
il]acetonitrila (70,0 mg, bruto) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[02428] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60,0 mg, 114 µmol, 1,00 eq) e ácido 2-fluoroprop- 2-enoico (20,6 mg, 228 µmol, 2,00 eq) em EA (1,00 mL) foi adicionado TEA (92,4 mg, 913 µmol, 127 µL, 8,00 eq), T3P (218 mg, 342 µmol, 204 µL, 50% pureza, 3,00 eq) em porção, a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min. A mistura de reação foi diluída com água (5,00 mL) e extraída com acetato de etila (10,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (10,0 mL × 1) e salmoura (10,0 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 × 25 mm × 5 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 42%-72%, 10 min.) Composto do título 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil- 5- oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (26,8 mg, 43,9 µmol, duas etapas, 26% de rendimento 98% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[02429] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,62 (m, 2H), 7,46 - 7,38 (m, 1H), 7,38 - 7,32 (m, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,55 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,08 - 4,63 (m, 1H), 4,53 - 4,39 (m, 1H), 4,37 - 4,26 (m, 1H), 4,25 - 4,00 (m, 3H), 3,97 - 3,71 (m, 3H), 3,59 - 3,35 (m, 2H), 3,29 - 2,98 (m, 4H), 2,91 (d, J = 5,6 Hz, 8H), 2,69 - 2,58 (m, 1H), 2,57 - 2,45 (m, 1H), 2,42 - 2,29 (m, 1H), 2,28 - 2,14 (m, 1H), 2,06 - 1,91 (m, 1H).
EXEMPLO 570
2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila
Imidazol, DMF, 0-15°C, 24 h, 69% Três etapas 7,6% t-BuoNa, tolueno
[02430] Ácido (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-[terc-butil (difenil)silil]oxi-propanoico. A uma solução de ácido (2R)-2-(terc- butoxicarbonilamino)-3-hidroxi-propanoico (27 g, 132 mmol, 1 eq) em DMF (270 mL) foi adicionado imidazol (45,4 g, 667 mmol 5,07 eq) a 0°C sob nitrogênio. Depois que a solução ficou transparente, foi adicionado TBDPSCl (90,4 g, 329 mmol, 84,5 mL, 2,5 eq). A reação foi aquecida até 15°C. Após agitar a 15°C por 24 h, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo, diluída com éter (250 ml) e derramada em NaCl saturado (100 mL). A camada orgânica separada foi lavada com uma mistura de 10% Hcl (25 mL) e NaCl saturado (50 mL), seca sobre Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com acetonitrila e depois foi formado precipitado branco. O precipitado foi filtrado e a torta de filtro foi seca sob vácuo para dar ácido (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)- 3-[terc-butil(difenil)silil]oxi-propanoico (45 g, 90 mmol, 69% de rendimento, 89% de pureza) como um sólido branco.
[02431] terc-Butil N-[(1R)-1-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-2-(2,2-dimetil- 4,6-dioxo-1,3-dioxan-5-ilo)-2-oxo-etil]carbamato. A uma solução agitada de ácido (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-[terc-butil (difenil)silil]oxi-propanoico (24 g, 54,1 mmol, 1 eq) em DCM (400 mL) a 0°C foi adicionado 2,2-dimetil-1,3- dioxano-4,6-diona (8,19 g, 56,8 mmol, 1,05 eq) e DMAP (16,0 g, 131 mmol, 2,42 eq), seguido por BOP (25,1 g, 56,8 mmol, 1,05 eq) em pequenas porções. A mistura foi agitada por 1 hora a 0°C. Mediante conclusão, a mistura foi lavada com 1N KHSO4 (2 × 360 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre NaSO4 e concentradas sob vácuo à temperatura ambiente para dar terc-butil N-[(1R)-1- [[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-2-(2,2-dimetil-4,6-dioxo-1,3-dioxan-5-il)-2-oxo-etil] carbamato (35 g, bruto) como um óleo amarelo que é usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02432] terc-Butil (2R)-2-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-3,5-dioxo- pirrolidina-1-carboxilato. terc-butil N-[(1R)-1-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-2- (2,2-dimetil-4,6-dioxo-1,3-dioxan-5-il)-2-oxo-etil]carbamato (35 g, 61,43 mmol, 1 eq) foi refluxado em EtOAc (600 mL) a 77°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo para dar terc-butil (2R)-2-[[terc-butil (difenil)silil]oximetil]-3,5-dioxo-pirrolidina-1-carboxilato (30 g, bruto) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional.
[02433] terc-Butil (2R,3R)-2-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-3-hidroxi-5-oxo- pirrolidina-1-carboxilato. terc-butil (2R)-2-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-3,5-
dioxo-pirrolidina-1-carboxilato (30 g, 64,2 mmol, 1 eq) foi dissolvido em DCM (480 mL) a 0°C, seguido por NaBH4 (3,78 g, 99,9 mmol, 1,56 eq) em pequenas porções. A suspensão foi agitada a 18°C por 16 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi derramada em água (300 ml) e agitada até não restar nenhum sólido. A camada orgânica separada foi lavada com água (150 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 10/1 a 2/1) seguida por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3, concentradas sob vácuo para remover MeCN e, em seguida, extraídas com DCM (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar terc-butil (2R,3R)-2-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]-3-hidroxi-5-oxo-pirrolidina-1-carboxilato (2,13 g, 3,99 mmol, três etapas 7,6% de rendimento, 88% de pureza) como um sólido amarelo.
[02434] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,72 (dd, J = 1,6, 8,0 Hz, 2H), 7,59 (dd, J = 1,2, 8,0 Hz, 2H), 7,47 - 7,39 (m, 6H), 5,67 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,57 - 4,46 (m, 1H), 4,09 - 3,97 (m, 2H), 3,83 (dd, J = 2,8, 10,0 Hz, 1H), 2,75 - 2,65 (m, 1H), 2,62 - 2,53 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 0,93 (s, 9H).
[02435] terc-Butil (2R,3R)-2-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-5-oxo-3-tetra- hidropiran-2-iloxi-pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2R,3R)- 2-[[terc-butil(difenil)silil] oximetil]-3-hidroxi-5-oxo-pirrolidina-1-carboxilato (2,55 g, 5,43 mmol, 1 eq) em DCM (50 mL) foi adicionado DHP (913 mg, 10,9 mmol, 993 uL, 2 eq), seguido por TsOH•H2O (103 mg, 543 umol, 0,1 eq) a 20°C. A mistura foi agitada a 20°C por 16 horas. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com solução de NaHCO3 aquosa saturada (10 mL), diluída com água (5 mL) e extraída com DCM (2 × 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (PE/EtOAc 15/1 a 7/1) para dar terc-butil (2R,3R)-2- [[terc-butil (difenil)silil]oximetil]-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidina-1-
carboxilato (2,62 g, 4,64 mmol, 85% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo.
[02436] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 (td, J = 1,2, 7,6 Hz, 2H), 7,66 (td, J = 1,6, 8,0 Hz, 2H), 7,47 - 7,34 (m, 6H), 4,75 - 4,68 (m, 1H), 4,63 - 4,51 (m, 1H), 4,20 - 4,17 (m, 1H), 3,99 - 3,88 (m, 2H), 3,87 - 3,74 (m, 1H), 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,23 - 3,01 (m, 1H), 2,76 (ddd, J = 8,8, 10,4, 16,8 Hz, 1H), 2,01 - 1,80 (m, 2H), 1,79 - 1,62 (m, 4H), 1,45 (s, 9H), 1,02 (d, J = 8,0 Hz, 9H).
[02437] (4R,55R)-5-[[terc-Butil(difenil) silil]oximetil]-4-tetra-hidropiran-2- iloxi-pirrolidin-2-ona. A uma solução de terc-butil (2R,3R)-2-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidina-1-carboxilato (2,62 g, 4,73 mmol, 1 eq) em MeCN (50 mL) foi adicionado Mg(ClO4)2 (211 mg, 946 µmol, 95,6 µL, 0,2 eq). A mistura de reação foi agitada a 70°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar (4R,5R)-5-[[terc-butil(difenil) silil]oximetil]-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2- ona (1,14 g, 2,29 mmol, 48% de rendimento, 91% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 454.
[02438] (4R,5R)-5-[[terc-Butil(difenil)silil]oximetil]-1-metil-4-tetra- hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona. A uma solução de (4R,5R)-5-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona (0,95 g, 2,09 mmol, 1 eq) em THF (20 mL) foi adicionado NaH (168 mg, 4,19 mmol, 60% de pureza em óleo mineral, 2 eq) em porção a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 minutos, depois o CH3I (594 mg, 4,19 mmol, 261 uL, 2 eq) foi adicionado. Depois de agitado a 0°C por outra 0,5 hora, a mistura foi extinta com água (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 30 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar (4R,5R)-5-[[terc- butil(difenil)silil]oximetil]-1-metil-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona (820 mg, 1,67 mmol, 80% de rendimento, 95% de pureza) como um óleo marrom.
[02439] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 - 7,70 (m, 2H), 7,70 - 7,65 (m, 2H), 7,48 - 7,36 (m, 6H), 4,68 - 4,60 (m, 1H), 4,59 - 4,48 (m, 1H), 4,07 - 3,77 (m, 2H), 3,77 - 3,66 (m, 1H), 3,65 - 3,56 (m, 1H), 3,55 - 3,40 (m, 1H), 2,89 - 2,79 (m, 3H), 2,79 - 2,53 (m, 2H), 1,90 - 1,69 (m, 2H), 1,68 - 1,53 (m, 4H), 1,09 - 1,03 (m, 9H).
[02440] (4R,5R)-5-(Hidroximetil)-1-metil-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin- 2-ona. A uma mistura de (4R,5R)-5-[[terc-butil(difenil)silil]oximetil]-1-metil-4- tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona (1,07 g, 2,29 mmol, 1 eq) em DMSO (10 mL) foi adicionado CsF (1,04 g, 6,86 mmol, 253 µL, 3 eq). A mistura foi agitada a 65°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 50/1 a 01/05) para dar (4R,5R)-5-(hidroximetil)-1-metil-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona (380 mg, 1,49 mmol, 65% de rendimento, 90% de pureza) como um óleo amarelo.
[02441] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 4,80 - 4,52 (m, 2H), 3,98 - 3,81 (m, 3H), 3,72 - 3,61 (m, 1H), 3,60 - 3,48 (m, 1H), 2,87 (d, J = 9,6 Hz, 3H), 2,67 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 2,60 - 2,46 (m, 1H), 1,86 - 1,74 (m, 2H), 1,67 - 1,51 (m, 4H).
[02442] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 471 µmol, 1 eq) e (4R,5R)-5-(hidroximetil)-1-metil-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona (140 mg, 612 umol, 1,3 eq) em tolueno (6 mL) foi adicionado t-BuONa (90,5 mg, 942 ol, 2 eq) a 0°C. Depois de agitada a 0°C por 10 minutos, a mistura foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4- [7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 258 µmol, 55% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 760.
[02443] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,74 - 7,63 (m, 2H), 7,47 - 7,31 (m, 7H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,84 - 4,43 (m, 5H), 4,30 - 3,70 (m, 8H), 3,59 - 3,34 (m, 3H), 3,25 - 2,98 (m, 4H), 2,96 - 2,90 (m, 6H), 2,81 - 2,56 (m, 4H), 1,83 - 1,63 (m, 2H), 1,60 - 1,47 (m, 4H).
[02444] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Metil-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3- tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2- iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (150 mg, 197 umol, 1 eq) em MeOH (3 mL) foi adicionado NH3/MeOH (3 mL, 20% de pureza), Pd/C (75 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 144 µmol, 73% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 626.
[02445] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-1- metil-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-dihidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 160 µmol, 1 eq) em DCM (100 µL) foi adicionado TFA (273 mg, 2,40 mmol, 177 µL, 15 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com DCM (5 mL) e basificada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturada até pH = 8. A camada aquosa separada foi extraída com EtOAc (3 x 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5- oxopirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (80 mg, 126 µmol, 79% de rendimento, 85% de pureza) como um óleo amarelo que foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02446] Etapa D: 2-[(2S)-1-(2-Fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2R,3R)-3-hidroxi- 1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (80 mg, 148 µmol, 1 eq), TEA (44,8 mg, 443 µmol, 61,7 µL, 3 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (26,6 mg, 295 µmol, 2 eq) em EA (3 mL) foi adicionado T3P (141 mg, 222 µmol, 132 µL, 50% de pureza em EtOAc, 1,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 1/0 a 10/1) seguida por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25mm*5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 34% -64%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2- enoil)-4-[2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (11,8 mg, 19,1 µmol, 13% de rendimento, 99,3% de pureza) como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 614.
[02447] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,69 - 7,63 (m, 1H), 7,41 (q, J = 7,6 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,19 (m, 2H), 5,55 - 5,33 (m, 1H), 5,27 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,86 (dd, J = 5,6, 12,0 Hz, 1H), 4,79 (dd, J = 5,6, 12,0 Hz, 1H), 4,63 - 4,49 (m, 2H), 4,39 - 3,94 (m, 3H), 3,89 - 3,77 (m, 2H), 3,76 - 3,63 (m, 1H), 3,61 - 3,44 (m, 2H), 3,38 - 2,99 (m, 4H), 2,91 (d, J = 7,2 Hz, 6H), 2,89 - 2,70 (m, 2H), 2,70 - 2,55 (m, 2H), 2,46 (dt, J = 5,2,
16.0 Hz, 1H).
EXEMPLO 571 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-((S)-pirrolidin-2-ilmetoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
Cs2CO3, Cs2CO3, tolueno, tolueno, 90°C, 110°C, 8 hrs, 12 hrs, 36% 60% 1,5 hrs Peneira molecular 4A, DCM, -40°C, 10 min. 49% Duas etapas 29%
[02448] Etapa A: terc-Butil (2S)-2-[(7-benzil-4-metoxi-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il)oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de 7- benzil-2-cloro-4-metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (4,00 g, 13,8 mmol, 1,00 eq) e terc-butil (2S)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato (5,56 g, 27,6 mmol, 2,00 eq) em tolueno (80,0 mL) foi adicionado BINAP (1,72 g, 2,76 mmol, 0,20 eq), Pd(OAc)2 (310 mg, 1,38 mmol, 0,10 eq) e Cs2CO3 (13,5 g, 41 mmol, 3,00 eq). A mistura foi agitada a 110°C por 8 horas.Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi diluído com H2O (200 mL) e acetato de etila (200 mL). A mistura foi acidificada até pH~3 com HCl aquoso (2N). A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 1/1) para dar terc- butil(2S)-2-[(7-benzil-4-metox-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (3,80 g, 8,26 mmol, 60% de rendimento, 99% de pureza) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 455.
[02449] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,37 - 7,27 (m, 5H), 4,50 - 4,35 (m, 1H), 4,25 - 4,16 (m, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 3,50 (s, 2H), 3,43 - 3,33
(m, 2H), 2,76 - 2,72 (m, 2H), 2,62 - 2,57 (m, 2H), 2,04 - 1,90 (m, 3H), 1,85 - 1,76 (m, 1H), 1,61 - 1,54 (m, 1H), 1,45 (s, 9H).
[02450] Etapa B: terc-Butil (2S)-2-[(4-metoxi-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[(7-benzil-4-metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (3,80 g, 8,36 mmol, 1,00 eq) em metanol (100 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (1,00 g, 10,3 mmol, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 três vezes. A mistura foi agitada sob H2 (45 psi) a 40°C por 24 horas. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. Composto terc-butil (2S)-2-[(4-metoxi-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (2,70 g, 7,17 mmol, 86% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como óleo amarelo e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 365.
[02451] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 4,54 - 4,35 (m, 1H), 4,25 - 4,10 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,86 (s, 2H), 3,48 (s, 1H), 3,43 - 3,33 (m, 2H), 3,13 - 3,04 (m, 2H), 2,56 - 2,46 (m, 2H), 2,10 - 1,93 (m, 3H), 1,87 - 1,82 (m, 1H), 1,45 (s, 9H).
[02452] Etapa C: terc-Butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-metoxi-6,8-di-hidro -5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[(4-metoxi-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oximetil] pirrolidina-1-carboxilato (2,5 g, 6,86 mmol, 1,0 eq) e 1-bromo-8-cloro- naftaleno (3,31 g, 13,7 mmol, 2,0 eq) em tolueno (50 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (1,26 g, 1,37 mmol, 0,2 eq), Cs2CO3 (5,59 g, 17,2 mmol, 2,5 eq) e Ruphos (1,28 g, 2,74 mmol, 0,4 eq), a mistura de reação foi agitada a 90°C por 12 horas sob N2. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi lavado com salmoura saturada (1 x 80 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 3/1). O produto terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il] oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (1,3 g, 2,46 mmol, 36% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]:
525.
[02453] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,23 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,60 - 4,37 (m, 1H), 4,34 - 4,16 (m, 3H), 4,03 (s, 3H), 3,87 (br d, J = 17,2 Hz, 1H), 3,63 - 3,57 (m, 1H), 3,45 - 3,30 (m, 2H), 3,21 - 3,10 (m, 1H), 2,99 (br s, 1H), 2,62 (br d, J = 16,8 Hz, 1H), 2,07 - 1,79 (m, 4H), 1,45 (s, 9H).
[02454] Etapa D: terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-hidroxi-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de NaH (168 mg, 4,19 mmol, 60% de pureza, 2,0 eq) em DMF (15 mL) foi adicionado EtSH (391 mg, 6,29 mmol, 465 µL, 3,0 eq) em porções a 15°C. Após agitar por 0,5 hora, uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4- metoxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (1,1 g, 2,10 mmol, 1,0 eq) em DMF (7,0 mL) foi adicionado à mistura, em seguida a mistura de reação foi agitada a 60°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi derramada em água gelada (10 mL), depois a mistura foi ajustada com HCl 1N aquoso até pH 7~8, a mistura foi filtrada, a torta de filtro foi dissolvida com diclorometano (10 mL), lavada com salmoura saturada (2 x 15 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 para acetato de etila: metanol=10:1) para dar terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-hidroxi-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (670 mg, 1,28 mmol, 61% de rendimento, 98% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 511.
[02455] Etapa E: terc-Butil(2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4- (trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(8- cloro-1-naftil)-4-hidroxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (640 mg, 1,25 mmol, 1,0 eq) em DCM (10 mL) foi adicionado TEA (380 mg, 3,76 mmol, 523 µL, 3,0 eq), peneiras moleculares 4A (500 mg) e Tf2O (530 mg, 1,88 mmol, 310 µL, 1,5 eq) a -40°C e a mistura de reação foi agitada a -40°C por 10 min. Após conclusão, foi adicionada água (10 mL) em porções a -40°C, depois a mistura de reação foi aquecida até 15°C e a camada orgânica foi separada e lavada com salmoura saturada (1 × 10 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 3/1). O produto terc-butil(2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4- (trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (400 mg, 616 µmol, 49% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 643.
[02456] Etapa F: terc-Butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(3S)-3- (cianometil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(8- cloro-1-naftil)-4-(trifluorometilsulfoniloxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2- il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (400 mg, 622 µmol, 1,0 eq) em DMAC (4,0 mL) foi adicionado 2-[(2S)-piperazin-2-il]acetonitrila (86,5 mg , 622 µmol, 1,0 eq) e DIEA (161 mg, 1,24 mmol, 217 µL, 2,0 eq), a mistura de reação foi agitada a 15°C por 10 min. Após conclusão, a mistura de reação foi derramada em água gelada (10 mL), o sólido precipitado foi filtrado, dissolvido com acetato de etila (15 mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura saturada (2 x 15 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa (0,1% de FA condição, 20%-30% MeCN em água), o produto obtido foi ajustado com NaHCO3 sólido até pH~8, em seguida, concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 15 mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura saturada (1 x 20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O produto terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1- il]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (300 mg, 480 µmol, 77% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 618.
[02457] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,61 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,47 - 7,42 (m, 1H), 7,33 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,23 (br t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,71 - 4,31 (m, 2H), 4,29 - 4,06 (m, 3H), 3,95 - 3,69 (m, 2H), 3,63 - 3,28 (m, 4H), 3,26 - 2,82 (m, 7H), 2,72 - 2,46 (m, 3H), 2,02 - 1,79 (m, 4H), 1,45 (s, 9H).
[02458] Etapa G: terc-Butil(2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(3S)-3- (cianometil)-4-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(3S)-3-(cianometil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (100 mg, 162 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (29,1 mg, 324 µmol, 2,0 eq) em acetato de etila (1,5 mL) foi adicionado TEA (131 mg, 1,29 mmol, 180 µL, 8,0 eq) e T3P (309 mg, 485 µmol, 289 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) em porções a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, foi adicionada água (10 ml), depois a camada orgânica foi separada, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 a 1/1). O produto terc-butil (2S)-2-[[7-(8- cloro-1-naftil)-4-[(3S)-3-(cianometil)-4-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-1-il]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (110 mg, bruto) foi obtido como sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 690.
[02459] Etapa H: 2-((S)-4-(7-(8-Cloronaftalen-1-il)-2-((S)-pirrolidin-2- ilmetoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin- 2-il)acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[[7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(3S)- 3-(cianometil)-4-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-2-il]oximetil]pirrolidina-1-carboxilato (90,0 mg, 130,40 µmol, 1,0 eq) em diclorometano (0,5 mL) foi adicionado TFA (770 mg, 6,75 mmol, 0,5 mL, 51,8 eq) e a mistura de reação foi agitada a 20°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada, em seguida, dissolvida com acetato de etila (10 mL), lavada com Na2CO3 aquoso saturado (1 x 10 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 para acetato de etila: metanol=10:1), em seguida purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10µm; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 20%-50%, 10 min.), o produto obtido foi concentrado e liofilizado. Composto do título 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-((S)-pirrolidin-2-ilmetoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila (24,7 mg, 38,1 µmol, 29% de rendimento, 98% de pureza, FA) foi obtido como sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 590.
[02460] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 1H), 7,54 - 7,50 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 5,53 - 5,32 (m, 1H), 5,25 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,89 - 4,52 (m, 1H), 4,64 - 4,45 (m, 2H), 4,42 - 4,23 (m, 2H), 4,17 - 3,92 (m, 4H), 3,89 - 3,78 (m, 2H), 3,51 - 3,42 (m, 1H), 3,35 - 3,05 (m, 5H), 2,95 - 2,73 (m, 2H), 2,62 - 2,51 (m, 1H), 2,21 - 1,84 (m, 4H).
EXEMPLO 572
2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila HCl.dioxano, dioxano 0,5 h
[02461] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5- oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de (5S)-5-(hidroximetil)-1- metil-pirrolidin-2-ona (556 mg, 4,30 mmol, 5,00 eq) em THF (20,0 mL) foi adicionado t-BuONa (827 mg, 8,60 mmol, 10,0 eq) em porção a 0°C sob N 2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min., seguida por adição de terc-butil (2S)-4-[7- (8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-
(cianometil)piperazina-1-carboxilato (500 mg, 860 µmol, 1,00 eq). A mistura foi aquecida a 15°C e agitada por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (50,0 mL) e lavada com água (30 mL × 2), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% TFA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (50,0 mL ×3). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (125 mg, 193 µmol, 22% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo.
[02462] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 4,8, 8,0 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 0,8, 7,2 Hz, 1H), 7,45 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 7,37 - 7,28 (m, 1H), 7,23 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,70 - 4,31 (m, 3H), 4,10 - 3,82 (m, 4H), 3,65 - 3,51 (m, 1H), 3,46 - 2,99 (m, 5H), 2,98 - 2,82 (m, 3H), 2,79 - 2,37 (m, 5H), 2,22 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 1,93 - 1,59 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[02463] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma mistura de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (100 mg, 155 µmol, 1,00 eq) em dioxano (1,50 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 967 µL, 25,0 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi dissolvido com acetato de etila (10,0 mL) e basificado até pH = 8 com solução de NaHCO3 saturada (3,00 ml) e extraído com acetato de etila (5,00 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10,0 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional. Composto 2- [(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (80,0 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 546.
[02464] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60,0 mg, 110 µmol, 1,00 eq) e ácido 2- fluoroprop-2-enoico (19,8 mg, 220 µmol, 2,00 eq) em EA (1 mL) foi adicionado TEA (89,0 mg, 879 µmol, 122 µL, 8,00 eq), T3P (210 mg, 330 µmol, 196 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 3,00 eq) em porção a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 0°C por 30 min. A mistura de reação foi diluída com água (5 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (10 mL × 1) e salmoura (10 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 × 25 mm × 5 µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35%-65%, 10 min.). Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (11,3 mg, 18,2 umol, 17% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido branco LCMS [ESI, M+1]: 618.
[02465] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,46 (td, J = 8,0, 10,4 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,20 (m, 1H), 5,52 - 5,34 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,92 (br s, 1H), 4,52 - 4,31 (m, 3H), 4,27 - 3,77 (m, 5H), 3,61 (br d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,46 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,36 - 2,94 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,90 - 2,79 (m, 1H), 2,64 - 2,48 (m, 2H), 2,41 - 2,31 (m, 1H), 2,28 - 2,17 (m, 1H), 2,05 - 1,95 (m, 1H).
EXEMPLO 573 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno
[02466] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-1-metil-5- oxo-3-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc- butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (280 mg, 482 µmol, 1 eq) e (4R,5R)-5-(hidroximetil)-1-metil-4-tetra-hidropiran-2-iloxi-pirrolidin-2-ona (144 mg, 626 umol, 1,3 eq) em tolueno (6 mL) foi adicionado t-BuONa (92,6 mg, 964 µmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 minutos. Após conclusão, a mistura foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar terc- butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3-tetra-hidropiran-2- iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (280 mg, 345 µmol, 72% de rendimento, 92% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 746.
[02467] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,66 - 7,57 (m, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,50 - 7,41 (m, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 4,88 - 4,69 (m, 1H), 4,68 - 4,47 (m, 4H), 4,46 - 4,35 (m, 1H), 4,11 - 3,74 (m, 6H), 3,65 - 3,48 (m, 2H), 3,44 - 2,99 (m, 5H), 2,96 (dd, J = 2,8, 8,4 Hz, 3H), 2,91 - 2,51 (m, 5H), 1,81 - 1,64 (m, 2H), 1,52 (s, 13H).
[02468] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1- metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2R,3R)-1-metil-5-oxo-3-tetra-hidropirano-2-iloxi-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 268 µmol, 1 eq) em DCM (0,15 mL) foi adicionado TFA (458 mg, 4,02 mmol, 298 µL, 15 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com DCM (5 mL) e basificada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturada até pH = 8. A camada aquosa separada foi extraída com EtOAc (5 x 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 230 µmol,
86% de rendimento, 86% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 562.
[02469] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1- metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 267 umol, 1 eq), TEA (81,0 mg, 801 umol, 111 uL, 3 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (48,1 mg, 534 umol, 2 eq) em EtOAc (4 mL) foi adicionado T3P (255 mg, 400 umol, 238 uL, 50% de pureza em EtOAc, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 mL) e extraída com EtOAc (2 × 10 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 1/0 a 20/1) seguida por HPLC- prep (coluna: Xtimate C18 150*25mm*5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 33%-63%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2R,3R)-3-hidroxi-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (22,0 mg, 34,5 umol, 13% de rendimento, 99,6% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 634.
[02470] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 4,4, 8,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,46 (dt, J = 6,0, 8,0 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,21 (m, 1H), 5,54 - 5,33 (m, 1H), 5,27 (dd, J = 2,8, 17,2 Hz, 1H), 4,88 (dd, J = 1,6, 12,0 Hz, 1H), 4,80 (dd, J = 6,0, 12,0 Hz, 1H), 4,64 - 4,48 (m, 2H), 4,47 - 3,94 (m, 4H), 3,91 - 3,65 (m, 3H), 3,64 - 3,43 (m, 2H), 3,37 - 2,98 (m, 4H), 2,91 (d, J = 7,6 Hz, 3H), 2,89 - 2,76 (m, 1H), 2,70 - 2,53 (m, 2H), 2,46 (dt, J = 5,2, 16,4 Hz, 1H).
EXEMPLO 574 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila HCl.dioxano t-BuONa, T3P, EA, 15°c, 1 tolueno, 0°C, 1 hora, 0°C, 1 hora, 85% hora, 75% 37%
[02471] Etapa A: terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de [(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metanol (275 mg, 2,06 mmol, 2,0 eq) em tolueno (12,0 mL) foi adicionado t -BuONa (198 mg, 2,06 mmol, 2,0 eq) em porções a 0°C, após agitação a 0°C por 0,5 hora, terc- butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,03 mmol, 1,0 eq) foi adicionado e agitado a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, foi adicionada água (15,0 mL), a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa (C18, 0,1% TFA em água, 30%-50% MeCN), o produto obtido foi ajustado com NaHCO3 sólido até pH=8, em seguida, concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 15 mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura saturado (20,0 mL), depois seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (510 mg, 769 µmol, 75% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 650.
[02472] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,80 - 7,72 (m, 1H), 7,62 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,56 - 7,50 (m, 1H), 7,46 - 7,40 (m, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 5,29 - 5,07 (m, 1H), 4,65 - 4,57 (m, 1H), 4,50 - 4,34 (m, 2H), 4,30 - 4,17 (m, 1H), 4,06 - 3,76 (m, 3H), 3,65 - 3,47 (m, 2H), 3,41 - 2,86 (m, 7H), 2,84 - 2,45 (m, 7H), 2,40 - 2,24 (m, 1H), 2,04 - 1,86 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).
[02473] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)- 4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (500 mg, 769 µmol, 1,0 eq) em dioxano (5,0 mL) foi adicionado 4N HCl•dioxano (5,0 mL), a mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o sólido foi dissolvido com diclorometano (15,0 mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura saturada (1 x 15 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (360 mg, 635 µmol, 85% de rendimento, 97% de pureza) como um sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 550.
[02474] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (120 mg, 218 µmol, 1,0 eq) e ácido 2- fluoroprop-2-enoico (39,3 mg, 436 µmol, 2,0 eq) em acetato de etila (1,2 mL) foi adicionado TEA (177 mg, 1,75 mmol, 243 µL, 8,0 eq) e T3P (416 mg, 654 µmol, 389 µL, 50% de pureza, 3,0 eq) a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 0°C por 1 hora. Depois da conclusão, a mistura de reação foi adicionada à água (10,0 mL), em seguida, extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo/acetato de etila=1/3 para acetato de etila/metanol=20/1), o produto bruto foi repurificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 45%-75%, 10 min.]; B%: 45% -75%, 10 min.), o produto obtido foi concentrado e liofilizado. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (50,9 mg, 81,0 µmol, 37% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 622.
[02475] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 5,55 - 5,33 (m, 1H), 5,30 - 5,07 (m, 2H), 5,01 - 4,66 (m, 1H), 4,53 - 4,35 (m, 2H), 4,29 - 3,98 (m, 3H), 3,96 - 3,78 (m, 2H), 3,73 - 3,33 (m, 3H), 3,32 - 2,98 (m, 5H), 2,94 - 2,71 (m, 2H), 2,68 - 2,53 (m, 2H), 2,51 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,39 - 2,23 (m, 1H), 2,08 - 1,87 (m, 1H).
EXEMPLO 575
2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila HCl.dioxano t-BuONa, 15°C, 1 hora, tolueno, 0°C, 71% 1 hora, 66% 0°C, 1 hora, 38%
[02476] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metanol (297 mg, 2,58 mmol, 2,50 eq) em tolueno (6,0 mL) foi adicionado t- BuOA (198 mg, 2,06 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Em seguida, terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,03 mmol, 1,0 eq) foi adicionado ao líquido acima. Após adição, a mistura foi agitada a 0°C por outra 0,5 hora. Após conclusão, foi adicionada água (20,0 mL) e a mistura resultante extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% de FA em água, 0-60% MeCN) para dar o composto terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (430 mg, 680 µmol, 66% de rendimento) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 632.
[02477] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,48 - 7,39 (m, 1H), 7,33 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,15 (m, 1H), 4,67 - 4,55 (m, 1H), 4,50 - 4,35 (m, 1H), 4,27 - 4,17 (m, 2H), 4,08 - 3,75 (m, 4H), 3,65 - 3,50 (m, 1H), 3,39 - 3,02 (m, 5H), 3,00 - 2,86 (m, 1H), 2,81 - 2,64 (m, 4H), 2,62 - 2,46 (m, 4H), 2,35 (s, 3H), 2,15 - 2,05 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).
[02478] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (400 mg, 632 µmol, 1,0 eq) em dioxano (2,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4,0 M, 2,0 mL, 12,6 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado (10,0 mL) até pH~7 e, em seguida, extraído com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (240 mg, 451 µmol, 71% de rendimento) como sólido amarelo o qual fo usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:
532.
[02479] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-
enoil)piperazin-2-il]acetonitrila.A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (80,0 mg, 150 µmol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2- enoico (27,1 mg, 301 µmol, 2,0 eq) e TEA (122 mg, 1,20 mmol, 167 µL, 8,0 eq) em acetato de etila (2,0 mL) foi adicionado T3P (287 mg, 451 umol, 268 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl (12,0 M, 60,0 uL em 2,0 mL de água). A mistura foi ajustada até pH ~ 8 com NaHCO3 aquoso saturado e extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10 µm; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 25%- 45%, 8 min.), então, concentrado. A camada aquosa foi ajustada com NaHCO 3 aquoso satruado para pH ~ 8 e extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (35,9 mg, 57,5 µmol, 38% de rendimento, 96,8% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 604.
[02480] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,78 - 7,73 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 5,54 - 5,32 (m, 1H), 5,30 - 5,21 (m, 1H), 5,04 - 4,75 (m, 1H), 4,48 - 4,36 (m, 1H), 4,27 - 4,17 (m, 2H), 4,16 - 3,96 (m, 2H), 3,89 - 3,75 (m, 1H), 3,64 - 3,55 (m, 1H), 3,51 - 3,32 (m, 1H), 3,30 - 2,98 (m, 4H), 2,96 - 2,67 (m, 4H), 2,66 - 2,46 (m, 4H), 2,37 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 2,14 - 2,06 (m, 1H), 1,70 - 1,57 (m, 1H).
EXEMPLO 576
2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila HCl.dioxano tolueno, Dioxano, 0°C, 1 h, 20°C, 1 51% h, 70% 0 °C, 0,5 h 14%
[02481] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (300 mg, 516 µmol, 1 eq) em tolueno (5,00 mL) foi adicionado t-BuONa (124 mg, 1,29 mmol, 2,5 eq) e [(2R,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metanol (149 mg, 1,03 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etil/metanol = 100/1 a 10:1). terc-butil (2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 265 µmol, 51% de rendimento, 88% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 662.
[02482] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)- 4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 302 µmol, 1 eq) em dioxano (1,00 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 1,13 mL, 1,00 eq). A mistura foi agitada a 20°C por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e diluída com água (20 mL). A mistura foi ajustada até pH = 8 com solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. 2- [(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (110 mg, 154,60 µmol, 70% de rendimento, 79% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 562.
[02483] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (110 mg, 195 µmol, 1 eq) em acetato de etila (1,00 mL) foi adicionado ácido 2-fluoroprop-2-enoico (35,3 mg, 391 µmol, 2 eq), T3P (374 mg, 587 µmol, 349 µL, 50% de pureza, 3 eq) e TEA (158 mg, 1,57 mmol, 218 µL, 8 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e ainda por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5μ; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônio v/v)-ACN]; B%: 45% - 75%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas. Composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (17 mg, 26,7 µmol, 14% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como uma goma branca. LCMS [ESI, M+1]: 634.
[02484] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 5,42 (d, J = 49,2 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,91 (br s, 1H), 4,54 - 4,34 (m, 2H), 4,27 - 4,00 (m, 3H), 3,96 - 3,77 (m, 2H), 3,67 - 3,54 (m, 1H), 3,51 - 3,37 (m, 1H), 3,37 - 2,96 (m, 9H), 2,95 - 2,64 (m, 3H), 2,63 - 2,53 (m, 1H), 2,52 - 2,27 (m, 5H), 1,91 - 1,74 (m, 1H).
EXEMPLO 577 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila
HCl.dioxano t-BuONa, Dioxano, T3P, tolueno, 10°C, 0,5 TEA, EA, 0°C, 0,5 h, h 0°C, 1 h, 63% duas etapas 31%
[02485] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metanol (300 mg, 2,06 mmol, 2,0 eq) e t-BuONa (149 mg, 1,55 mmol, 1,50 eq) em tolueno (7,0 mL) foi adicionado terc-butil(2S)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (600 mg, 1,03 mmol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, foi adicionada água (20,0 mL) e a mistura resultante extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% de FA em água, 0-60% MeCN) para dar o composto terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (450 mg, 652 µmol, 63% de rendimento) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 662.
[02486] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,48 - 7,40 (m, 1H), 7,35 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,16 (m, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 1H), 4,50 - 4,35 (m, 2H), 4,23 - 4,15 (m, 1H), 4,12 - 3,91 (m, 4H), 3,90 - 3,75 (m, 1H), 3,65 - 3,53 (m, 1H), 3,50 - 3,39 (m, 1H), 3,38 - 3,32 (m, 1H), 3,30 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 3,28 - 3,06 (m, 3H), 3,02 - 2,85 (m, 2H), 2,83 - 2,64 (m, 2H), 2,62 - 2,52 (m, 1H), 2,47 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,35 - 2,29 (m, 1H), 2,11 - 2,06 (m, 1H), 2,03 - 1,91 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).
[02487] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-
1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (450 mg, 680 µmol, 1,0 eq) em dioxano (4,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4 M, 4,0 mL, 23,6 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado (10,0 mL) até pH~7 e, em seguida, extraído com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- [[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (300 mg bruto) como sólido amarelo o qual foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]:
562.
[02488] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (90,0 mg, 160 µmol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (28,8 mg, 320 µmol, 2,0 eq) e TEA (130 mg, 1,28 mmol, 178 µL, 8,0 eq) em EA (3.0 mL) foi adicionado T3P (306 mg, 480 µmol, 286 µL, 50% de pureza, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Após conclusão, foi adicionada água (10,0 mL) e a mistura resultante extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5μ; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônio v/v)-ACN]; B%: 50%-80%, 10 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (32,0 mg, 50,3 µmol, 31% de rendimento, 99% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 635.
[02489] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 5,54 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,10 - 4,70 (m, 1H), 4,52 - 4,34 (m, 2H), 4,27 - 3,80 (m, 6H), 3,69 - 3,54 (m, 1H), 3,50 - 3,37 (m, 2H), 3,30 (d, J = 1,6 Hz, 3H), 3,28 - 3,02 (m, 4H), 2,98 - 2,68 (m, 3H), 2,65 - 2,53 (m, 1H), 2,47 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,37 - 2,28 (m, 1H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 2,02 - 1,90 (m, 1H).
EXEMPLO 578 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila t-BuONa, 15 °C, 0,5 h tolueno, 0°C, 98% 1 h, 60%
[02490] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8- metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (500 mg, 840 µmol, 1,00 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado t- BuONa (202 mg, 2,10 mmol, 2,50 eq) e [(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metanol (224 mg, 1,68 mmol, 2,00 eq). Após agitação a 0°C por 1 hora, a mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1). Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil)-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (340 mg, 502 µmol, 60% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 664.
[02491] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-
metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 301 µmol, 1,00 eq) em MeOH (15,0 mL) foi adicionado Pd/C (30,0 mg, 10% de pureza) e NH3/MeOH (5,00 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 0,5 hora. O catalisador foi filtrado. O filtrado foi concentrado sob vácuo. 2-[(2S)-4-[2- [[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil))-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (159 mg, 294 µmol, 98% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 530.
[02492] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2- [[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (140 mg, 264 µmol, 1.00 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (82,5 mg, 793 µmol, 3.00 eq) em acetato de etila (2,00 mL) foi adicionado TEA (160 mg, 1,59 mmol, 220 mL, 6,00 eq) e T3P (505 mg, 793 µmol, 472 µL, 50% de pureza, 3,00 eq) a - 70°C. A mistura foi agitada a -60°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com HCl (12 N, 130 µL em 2 mL de água) a -70°C. A mistura foi aquecida a 0°C e basificada com solução aquosa saturada de NaHCO3 até pH = 8 e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5µ; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 45% - 75%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas. Composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1- metil-pirrolidina-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (34,5 mg, 55,8 umol, 21% de rendimento, 99,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 616.
[02493] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,74 - 7,62 (m, 2H), 7,46 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 7,09 - 6,93 (m, 1H), 6,59 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 5,30 - 4,51 (m, 4H), 4,48 - 4,35 (m, 1H), 4,30 - 3,66 (m, 6H), 3,63 - 3,34 (m, 3H), 3,24 - 2,96 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,87 - 2,53 (m, 4H), 2,50 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,40 - 2,22 (m, 1H), 2,10 - 1,86 (m, 1H) (m, 3H).
EXEMPLO 579 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5 h, 40%
[02494] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2R)- 1-metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t- BuONa (242 mg, 2,52 mmol, 3 eq) e [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (194 mg, 1,68 mmol, 2 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/MeOH = 100/1 a 10/1). benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (240 mg, 338 µmol, 40% de rendimento, 91% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[02495] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (240 mg, 372 µmol, 1 eq) em MeOH (15 mL) foi adicionado Pd/C (30 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (5 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado. O filtrado foi concentrado sob vácuo. 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 352 µmol, 95% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02496] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 195 umol, 1 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2- enoico (40,7 mg, 391 umol, 2 eq) em EtOAc (2 mL) foi adicionado TEA (79,1 mg, 782 umol, 109 uL, 4 eq) e T3P (249 mg, 391 umol, 232 uL, 50% de pureza em EtOAc, 2 eq) a -70°C. A mistura foi agitada a -70°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com HCl (60 uL (12 M) em 2 mL de água). A mistura foi ajustada até pH = 8 com solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 25% - 45%, 7,8 min.) e posteriormente purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; B%: 52%-79%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas. Composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazin-2-il]acetonitrila (16,6 mg, 27,7 umol, 14% de rendimento, 99,6% de pureza) foi obtido como uma goma amarela. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[02497] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,72 - 7,62 (m, 2H), 7,45 - 7,32 (m, 2H), 7,27 - 7,16 (m, 2H), 7,07 - 6,93 (m, 1H), 6,60 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 5,26 - 4,51 (m, 3H), 4,39 (s, 1H), 4,31 - 3,33 (m, 9H), 3,27 - 2,97 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,87 - 2,76 (m, 1H), 2,65 (m, 2H), 2,49 (br d, J=4,6 Hz, 3H), 2,29 (m, 1H), 2,15 - 1,96 (m, 1H), 1,92 - 1,67 (m, 3H).
EXEMPLO 580 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 0,5 h, 40%
[02498] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2R)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t- BuONa (242 mg, 2,52 mmol, 3 eq) e [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (194 mg, 1,68 mmol, 2 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/MeOH = 100/1 a 10/1). Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (240 mg, 338 µmol, 40% de rendimento, 91% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 646.
[02499] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((2R)-1-
metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (240 mg, 372 µmol, 1 eq) em MeOH (15 mL) foi adicionado Pd/C (30 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (5 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. O catalisador foi filtrado. O filtrado foi concentrado sob vácuo. 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 352 µmol, 95% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo e utilizado na próxima etapa sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02500] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 195 µmol, 1 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2- enoico (40,7 mg, 391 umol, 2 eq) em EtOAc (2 mL) foi adicionado TEA (79,1 mg, 782 µmol, 109 µL, 4 eq) e T3P (249 mg, 391 µmol, 232 µL, 50% de pureza em EtOAc, 2 eq) a -70°C. A mistura foi agitada a -70°C por 1 hora. A mistura de reação foi extinta com HCl (60 µL (12 M) em 2 mL de água). A mistura foi ajustada até pH = 8 com solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,225% FA) - MeCN]; B%: 25% - 45%, 7,8 min.) e posteriormente purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônio v/v) - MeCN]; B%: 52%-79%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas. Composto do título 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazin-2-il]acetonitrila (16,6 mg, 27,7 µmol, 14% de rendimento, 99,6% de pureza) foi obtido como uma goma amarela. LCMS [ESI, M+1]: 628.
[02501] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,62 (m, 2H), 7,45 - 7,32 (m, 2H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 7,08 - 6,93 (m, 1H), 6,60 (br d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,26 - 4,54 (m, 3H), 4,40 (m, 1H), 4,31 - 3,69 (m, 7H), 3,61 - 3,36 (m, 3H), 3,30 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 3,24 - 2,96 (m, 4H), 2,92 (s, 3H), 2,91 - 2,55 (m, 4H), 2,47 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,37 - 2,26 (m, 1H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 2,01 - 1,89 (m, 1H).
EXEMPLO 581 2-[(2S)-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin- 3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°C, 10 min., 60% 0,5 h
[02502] Etapa A: Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[((3R)- 1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil -1- naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (450 mg, 757 umol, 1 eq) e [(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metanol (131 mg, 1,13 mmol, 1,5 eq) em tolueno (9 mL) foi adicionado t-BuONa (145 mg, 1,51 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 10 minutos. Mediante conclusão, foi adicionada água (15 mL) e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (30 mL × 2). As camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 50 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il] metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 4455 µmol, 60% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido rosa.
[02503] 1H NMR (400 MHz, chloroform-d) δ = 7,73 - 7,60 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 5H), 7,37 - 7,30 (m, 2H), 7,26 - 7,16 (m, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,30 - 3,78 (m, 7H), 3,59 - 3,29 (m, 2H), 3,25 - 2,94 (m, 4H), 2,91 (s, 3H), 2,82 - 2,62 (m, 4H), 2,62 - 2,53 (m, 2H), 2,53 - 2,42 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,05 (s, 1H), 1,66 - 1,51 (m, 1H).
[02504] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (300 mg, 465 µmol, 1 eq) em MeOH (4 mL) foi adicionado Pd/C (150 mL, 10% de pureza), NH3/MeOH (4 mg, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(3R)-1-metil pirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (210 mg, 369 µmol, 80% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido rosa que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 512.
[02505] Etapa C: 2-[(2S)-1-[(E)-4-Fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (70 mg, 137 µmol, 1 eq), TEA (41,5 mg, 410 µmol, 57,1 µL, 3 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (28,5 mg, 274 µmol, 2 eq) em EtOAc (2 mL) foi adicionado T3P (131 mg, 205 µmol, 122 µL, 50% de pureza em EtOAc, 1,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl 1 M (0,4 mL) a -40°C e agitada até não restar gelo. A camada aquosa separada foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30 mm*4 µm; fase móvel: [água (0,225%FA)-MeCN]; B%: 20%-50%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar o composto do título 2-[(2S)-1- [(E)-4-fluorobut-2-enoil]-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (13,7 mg, 20,8 µmol, 15% de rendimento, 97,7% de pureza, FA) como um sólido cinza. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[02506] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,59 - 7,51 (m, 1H), 7,32 (td, J = 7,6, 11,6 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,19 - 7,07 (m, 2H), 7,00 - 6,83 (m, 1H), 6,52 (br d, J= 14,8 Hz, 1H), 5,21 - 4,31 (m, 3H), 4,29 - 3,96 (m, 3H), 3,94 - 3,53 (m, 7H), 3,45 (br d, J = 6,8 Hz, 4H), 3,15 - 2,88 (m, 7H), 2,84 (s, 3H), 2,81 - 2,74 (m, 1H), 2,61 - 2,47 (m, 2H), 2,18 (br s, 1H), 1,85 (br s, 1H).
EXEMPLO 582 2-((S)-4-(7-(8-Cloronaftalen-1-il)-2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
-65°C, 1 hora, 34%
[02507] 2-((S)-4-(7-(8-Cloronaftalen-1-il)-2-(((2S,4R)-4-fluoro-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4- fluorobut-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8- cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 327 µmol, 1,0 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (102 mg, 982 µmol, 3,0 eq) foi adicionado TEA (265 mg, 2,62 mmol, 364 µL, 8,0 eq) e T3P (833 mg, 1,31 mmol, 778 µL, 50% pureza, 4,0 eq), a mistura de reação foi agitada a -65°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl 2 N até pH~7 a -65°C, em seguida a camada orgânica foi separada, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 para acetato de etila/metanol=20/1), o produto bruto foi repurificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-MeCN]; B%: 50% a 80%, 8 min.), o produto obtido foi concentrado e liofilizado. Composto do título 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((2S,4R)-4- fluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1- ((E)-4-fluorobut-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila (72,2 mg, 113 µmol, 34% de rendimento, 99% de pureza) foram obtidos como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 637.
[02508] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,79 - 7,73 (m, 1H), 7,62 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 1H), 7,08 - 6,93 (m, 1H), 6,59 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,29 - 5,03 (m, 3H), 4,54 - 4,52 (m, 1H), 4,50 - 4,35 (m, 2H), 4,30 - 3,78 (m, 5H), 3,76 - 3,35 (m, 3H), 3,32 - 2,96 (m, 5H), 2,91 - 2,54 (m, 4H), 2,51 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 2,39 - 2,23 (m, 1H), 2,08 - 1,86 (m, 1H).
EXEMPLO 583 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il] metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila
[02509] 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila.A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-
cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 267 µmol, 1,0 eq), ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (55,6 mg, 534 µmol, 2,0 eq) e TEA (108 mg, 1,07 mmol, 149 µL, 4,0 eq) em acetato de etila (4,0 mL) foi adicionado T3P (340 mg, 534 µmol, 317 µL, 50% de pureza, 2,0 eq). A mistura foi agitada a -70°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl (12 M, 60,0 µL em 2,0 mL de água). A mistura foi ajustada para pH~8 com solução aquosa de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila (3 x 20,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada (60,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25mm*5um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônio v/v)-MeCN]; B%: 50%-80%, 8 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)- 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S,4R)-4-metoxi-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila (39,6 mg, 60,9 µmol, 23% de rendimento, 99% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 619.
[02510] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 7,08 - 6,94 (m, 1H), 6,67 - 6,54 (m, 1H), 5,25 - 5,03 (m, 2H), 4,80 - 4,60 (m, 1H), 4,48 - 4,34 (m, 2H), 4,21 - 3,77 (m, 5H), 3,65 - 3,55 (m, 1H), 3,51 - 3,37 (m, 1H), 3,31 - 2,97 (m, 5H), 2,88 - 2,54 (m, 4H), 2,48 (d, J = 3,6 Hz, 3H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,90 - 1,69 (m, 3H).
EXEMPLO 584
2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila 0°C, 0,5 hora, 13%
[02511] 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1- metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (100 mg, 188 µmol, 1,0 eq), ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (39,1 mg, 376 µmol, 2,0 eq) e TEA (95,1 mg, 940 mmol, 131 µL, 5,0 eq) em acetato de etila (3,0 mL) foi adicionado T3P (179 mg, 282 µmol, 168 µL, 50% de pureza, 1,50 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl (12 M, 5,0 eq) a -40°C. A mistura foi ajustada para pH~8 com NaHCO3 aquoso saturado e extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30,0 mL),
secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*25*10µm; fase móvel: [água (0,225% de FA)-MeCN]; B%: 30% -50%, 8 min.) para dar o composto do título 2- [(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(3R)-1-metilpirrolidin-3-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (15,7 mg, 24,9 µmol, 13% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo LCMS [ESI, M+1]: 619.
[02512] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 - 7,59 (m, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 1H), 7,48 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 7,08 - 6,92 (m, 1H), 6,74 - 6,46 (m, 1H), 5,25 - 4,95 (m, 3H), 4,75 - 4,55 (m, 1H), 4,47 - 4,36 (m, 1H), 4,35 - 4,26 (m, 2H), 4,14 - 3,92 (m, 2H), 3,91 - 3,76 (m, 1H), 3,64 - 3,55 (m, 1H), 3,53 - 3,35 (m, 1H), 3,33 - 3,04 (m, 7H), 3,03 - 2,72 (m, 4H), 2,67 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,64 - 2,51 (m, 1H), 2,31 - 2,19 (m, 1H), 1,98 - 1,85 (m, 1H).
EXEMPLO 585 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo [2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8- cloronaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut- 2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila
HCl.dioxano t-BuONa, tolueno, 0°C, 1 hr, 52%
[02513] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa- 5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de 3-[(1S,4S)-2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan -5-il]propan-1-ol (150 mg, 954 µmol, 1,85 eq) em tolueno (3,0 mL) foi adicionado t-BuONa (99,2 mg, 1,03 mmol, 2,0 eq) em porções a 0°C, após agitação a 0°C por 0,5 hora, terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (300 mg, 516 µmol, 1,0 eq) foi adicionado à mistura e agitado a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, foi adicionada água (15 mL) e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase inversa (C18, 0,1% de TFA em água, 30%-50% de MeCN), o produto obtido foi ajustado com NaHCO3 sólido até pH~8, em seguida concentrado, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 15 ml), a camada orgânica foi lavada com solução salmoura saturada (1 x 20 mL), seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada. O produto terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa- 5-azabiciclo [2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (180 mg, 267 µmol, 52% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como sólido amarelo claro. LCMS [ESI, M+1]: 674.
[02514] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,48 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 4,66 - 4,54 (m, 1H), 4,50 - 4,29 (m, 4H), 4,08 - 3,77 (m, 5H), 3,65 - 3,54 (m, 2H), 3,51 - 3,44 (m, 1H), 3,39 - 3,31 (m, 1H), 3,29 - 3,02 (m, 4H), 3,00 - 2,87 (m, 2H), 2,84 - 2,46 (m, 6H), 1,99 - 1,82 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[02515] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa -5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-4-[7-(8-chloro-1- naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 222 µmol, 1,0 eq) em dioxano (1,0 mL) foi adicionado 4N HCl•dioxano (1,0 mL), a mistura de reação foi agitada a 15°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada, adicionado diclorometano (10 mL), em seguida lavada com Na2CO3 aquoso saturado (1 × 10 mL), a camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O produto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3- [(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 172 µmol, 77% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como óleo marrom. LCMS [ESI, M+1]: 574.
[02516] Etapa C: 2-((S)-4-(2-(3-((1S,4S)-2-Oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan- 5-il)propoxi)-7-(8-cloronaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)piperazin-2-il)acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4- [7-(8-cloro-1-naftil)-2-[3-[(1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il]propoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (90,0 mg, 157 µmol, 1,0 eq) e ácido (E) 4-fluorobut-2-enoico (48,9 mg, 470 µmol, 3,0 eq) em acetato de etila (1,0 mL) foi adicionado TEA (127 mg, 1,25 mmol, 175 µL, 8,0 eq) e T3P (399 mg, 627 µmol, 373 µL, 50% de pureza, 4,0 eq) em porções a -65°C, a mistura de reação foi agitada a -65°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl 2 N até pH~7 a -65°C, em seguida a camada orgânica foi separada, a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 × 10 mL), a camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (Al2O3 básico, éter de petróleo/acetato de etila=3/1 para acetato de etila/metanol=20/1), o produto bruto foi repurificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 µm; fase móvel: [água (hidróxido de amônio a 0,05% v/v)-MeCN]; B%: 44%-74%, 8 min.), o produto obtido foi concentrado e liofilizado. Composto do título 2-((S)-4-(2- (3- ((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il)propoxi)-7-(8-cloronaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut-2-enoil)piperazin- 2-il)acetonitrila (10,6 mg, 16,0 µmol, 10% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 660.
[02517] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 1H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,26 - 7,18 (m, 1H), 7,09 - 6,93 (m, 1H), 6,60 (br d, J = 14,0 Hz, 1H), 5,26 - 5,01 (m, 2H), 4,76 - 7,54 (m, 1H), 4,52 - 4,29 (m, 4H), 4,19 - 3,97 (m, 3H), 3,95 - 3,69 (m, 2H), 3,66 - 3,37 (m, 4H), 3,33 - 2,99 (m, 4H), 2,97 - 2,67 (m, 5H), 2,65 - 2,48 (m, 2H), 2,01 - 1,90 (m, 2H), 1,90 - 1,82 (m, 1H), 1,76 - 1,69 (m, 1H).
EXEMPLO 586 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila
HCl.dioxano t-BuONa3, tolueno, 0°C, 0,5 hr, 91% Duas etapas 12%
[02518] Etapa A: terc-Butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metanol (99,1 mg, 860 µmol, 2.50 eq) em tolueno (5,0 mL) foi adicionado t- BuONa (66,2 mg, 688 µmol, 2.0 eq) e terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (200 mg, 344 µmol, 1,0 eq) em porções. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Após conclusão, foi adicionada água (20,0 mL) e a mistura resultante extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa (C18, 0,1% de FA em água, 0-60% MeCN) para dar o composto terc-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 313 µmol, 91% de rendimento) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:
632.
[02519] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,77 - 7,73 (m, 1H), 7,61 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,54 - 7,50 (m, 1H), 7,49 - 7,39 (m, 1H), 7,33 (t, J = 7,6 Hz, 1H),
7,27 - 7,16 (m, 1H), 4,67 - 4,56 (m, 1H), 4,47 - 4,35 (m, 2H), 4,23 - 4,15 (m, 1H), 4,09 - 3,89 (m, 3H), 3,88 - 3,77 (m, 1H), 3,63 - 3,53 (m, 1H), 3,41 - 3,30 (m, 1H), 3,22 - 3,03 (m, 4H), 3,01 - 2,85 (m, 1H), 2,74 - 2,67 (m, 2H), 2,63 - 2,51 (m, 2H), 2,49 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,36 - 2,25 (m, 1H), 2,11 - 2,05 (m, 1H), 1,90 - 1,74 (m, 3H), 1,52 (s, 9H).
[02520] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de tert-butil (2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (200 mg, 316 µmol, 1,0 eq) em dioxano (3,0 mL) foi adicionado HCl•dioxano (4,0 M, 3,0 mL, 37,9 eq). A mistura foi agitada a 15°C por 0,5 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi ajustado com NaHCO3 aquoso saturado (10,0 mL) até pH~7 e, em seguida, extraído com acetato de etila (3 × 10,0 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (150 mg, bruto) como sólido amarelo. O produto foi utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 532.
[02521] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-Cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 188 µmol, 1.0 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2- enoico (39,1 mg, 376 µmol, 2.0 eq) em acetato de etila (2,0 mL) foi adicionado TEA (76,1 mg, 752 µmol, 105 µL, 4.0 eq) e T3P (239 mg, 376 µmol, 224 µL, 50% de pureza, 2,0 eq) a -70°C. A mistura foi agitada a -60°C por 1 hora. Após conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl (12,0 M, 60,0 µL em 2,0 mL de água). A mistura foi ajustada até pH = 8 com NaHCO3 aquoso saturado e extraída com acetato de etila (3 × 10,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5µm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônio v/v)-MeCN]; B%: 598%-89%, 8 min.) para dar o composto do título 2-[(2S)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2R)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2- enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (13,97 mg, 22,2 µmol, 12% de rendimento, 98,4% de pureza) como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 619.
[02522] 1H NMR (400 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,76 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,40 (m, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 7,08 - 6,94 (m, 1H), 6,67 - 6,54 (m, 1H), 5,25 - 5,03 (m, 2H), 4,80 - 4,60 (m, 1H), 4,48 - 4,34 (m, 2H), 4,21 - 3,77 (m, 5H), 3,65 - 3,55 (m, 1H), 3,51 - 3,37 (m, 1H), 3,31 - 2,97 (m, 5H), 2,88 - 2,54 (m, 4H), 2,48 (d, J = 3,6 Hz, 3H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,90 - 1,69 (m, 3H).
EXEMPLO 587 N-((E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- ilo)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2- en-1-il)-N-metilacetamida
[02523] Etapa A: Etil (E)-4-(N-metilacetamido)but-2-enoato: Etil (E)-4- acetamidobut-2-enoato (140 mg, 0,818 mmol) foi diluído com DMF (4 mL) seguido pela adição de NaH (21,6 mg, 0,900 mmol) e MeI (56,2 µl, 0,900 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10-70% de acetato de etila/hexanos para proporcionar etil (E)-4-(N- metilacetamido)but-2-enoato (120 mg, 0,648 mmol, 79,2% de rendimento).
[02524] Etapa B: Ácido (E)-4-(N-metilacetamido)but-2-enoico: Etil (E)-4-(N- metilacetamido)but-2-enoato (20 mg, 0,11 mmol) foi diluído com metanol (1 mL) seguido pela adição de NaOH (270 µl, 0,54 mmol). Após agitar por 4 horas, a reação foi diluída com HCl 2N até pH ~4 e a camada aquosa extraída com acetato de etila. O acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado para proporcionar (E)-4-(N-metilacetamido)but-2-enoico (15 mg, 0,095 mmol, 88% de rendimento).
[02525] Etapa C: N-((E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2-en-1-il)-N-metilacetamida: 2-((S)-4-(7-(8- metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (20 mg, 0,039 mmol) foi diluído com DMF seguido pela adição de DIEA (13,65 µl, 0,07817 mmol). Foi adicionado ácido (E)-4-(N-metilacetamido)but-2-enoico (9,83 mg, 0,0625 mmol) seguido pela adição de anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (39,6 µl, 0,0664 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para proporcionar N-((E)-4-((S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-il)-4-oxobut-2- en-1-il)-N-metilacetamida (EXEMPLO 502, 2,1 mg, 0,0032 mmol, 8,2% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 651,4 [M+H]+.
EXEMPLO 588 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02526] Etapa A: Benzil (S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 1-carboxilato (140 mg, 0,277 mmol), 1,8-dibromonaftaleno (238 mg, 0,831 mmol), Pd2(dba)3 (25,4 mg, 0,0277 mmol), Cs2CO3 (451 mg, 1,38 mmol) e XANTPHOS (32,0 mg, 0,0554 mmol) foram diluídos com tolueno (111 µl, 0,277 mmol). A reação foi purgada com argônio, selada e aquecida até 110°C enquanto agitando por 12 horas. A reação foi deixada resfriar e diluída com acetato de etila e água. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 1-10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para obter benzil (S)-4-(7- (8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (80 mg 0,131 mmol, 40,7% de rendimento).
[02527] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Benzil (S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-
carboxilato (80 mg, 0,11 mmol) foi diluído com TFA (2 mL), colocado sob nitrogênio e aquecido até 90°C. Após agitar por 2 horas, a reação foi resfriada e concentrada. O material foi diluído com DCM e lavado com bicarbonato de sódio saturado. O DCM foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH 4OH) para fornecer 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (23 mg, 0,040 mmol, 35% de rendimento).
[02528] Etapa C: 2-((S)-4-(7-(8-Bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1)-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (23 mg, 0,040 mmol) foi diluído com DMF (350 µL) seguido pela adição de DIEA (22 µl, 0,13 mmol) e ácido 2-fluoroacrílico (5,4 mg, 0,060 mmol). 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido (25 mg, 0,040 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada por 12 horas à temperatura ambiente. A reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para fornecer 2-((S)-4-(7-(8- bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacriloil)piperazin-2-il)acetonitrila (9 mg, 0,014 mmol, 35% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 650,2 [M+H]+.
EXEMPLO 589
2-((S)-1-(2-Fluoroacrilil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- (trifluorometil)naftalen-1-ilo)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02529] Etapa A: 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(8-(trifluorometil)naftaleno)1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-7-(8-(trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (24 mg, 0,042 mmol) foi diluído com DMF (400 µL), foi adicionado DIEA (19 µl, 0,11 mmol) seguido pela adição de ácido 2-fluoroacrílico (6,1 mg, 0,068 mmol) e a adição de 2,4,6-tripropil- 1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido (30 µl, 0,047 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 10 horas. A reação foi derramada numa solução de bicarbonato de sódio a 5% e extraída duas vezes com acetato de etila. O acetato de etila foi lavado com água, salmoura, seca sobre MgSO 4, filtrada e concentrada. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10%
de metanol/DCM (1% de NH4OH) para fornecer 2-((S)-1-(2-fluoroacriloil)-4-(2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-(trifluorometil)naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (5 mg, 0,0078 mmol, 18% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 638,3 [M+H]+.
EXEMPLO 590 2-((S)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02530] Etapa A: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)- 2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: (S)-4-(7-(8-bromonaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-
(cianometil)piperazina-1-carboxilato (30 mg, 0,042 mmol) e aduto de dicloro[1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) diclorometano (14 mg, 0,017 mmol) foram diluídos com brometo de ciclopropilzinco (253 µl, 0,13 mmol). A reação foi purgada com argônio, vedada e aquecida até 90°C. Após agitação por 12 horas, a reação foi deixada resfriar e diluída com acetato de etila e água. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO 4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em sílica gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8- ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (7 mg, 0,010 mmol, 25% de rendimento).
[02531] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)- 1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (9 mg, 0,01 mmol) foi diluído com metanol (1 mL) seguido pela adição de Pd-C (1 mg, 0,01 mmol). A reação foi equipada com um balão de hidrogênio e purgada três vezes seguida por agitação sob uma atmosfera de hidrogênio por 4 horas. Os sólidos foram coletados por filtração, enxaguados com metanol e a fase orgânica combinada foi concentrada para render 2-((S)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1)-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (7 mg, 0,01 mmol, 97% de rendimento).
[02532] Etapa C: 2-((S)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1)-il)-2- (((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (10 mg, 0,019 mmol) foi diluído com DMF (500 µL) seguido pela adição de DIEA (11 µl, 0,065 mmol), ácido 2-fluoroacrílico (2,5 mg,
0,028 mmol) e 2,4,6-tripropil -1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido (13 µl, 0,020 mmol). Após agitar por 12 horas, a reação foi diluída com acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. As camadas foram separadas e o acetato de etila foi seco sobre MgSO4, filtrado e concentrado. O material foi purificado em silca gel eluindo com 10% de metanol/DCM (1% de NH4OH) para fornecer 2- ((S)-4-(7-(8-ciclopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila (0,9 mg, 0,0015 mmol, 7,9% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 610,3 [M+H] +.
EXEMPLO 591 2-((S)-1-(2-Fluoroacrilil)-4-(7-(8-isopropilnaftalen-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02533] Sintetizado da mesma maneira que o Exemplo 590 usando brometo de isopropil zinco no lugar de brometo de ciclopropil zinco na etapa A. ESI+APCI MS m/z 612,3 [M+H]+.
EXEMPLO 592
2-((S)-1-(2-Fluoroacrilil)-4-(7-(1-metilisoquinolin-8-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02534] Sintetizado da mesma maneira que o Exemplo 588 usando 8- bromo-1-metilisoquinolina no lugar de 1,8-dibromonaftaleno na etapa A. ESI+APCI MS m/z 585,3 [M+H]+.
EXEMPLO 593 2-((S)-4-(7-(5-Cloroisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02535] Sintetizado da mesma maneira que o Exemplo 588 usando 1,8- dibromonaftaleno no lugar de 4-bromo-5-cloroisoquinolina na etapa A. ESI+APCI MS m/z 605,2 [M+H]+.
EXEMPLO 594
2-((S)-4-(7-(8-Bromoisoquinolin-1-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02536] Sintetizado da mesma maneira que o Exemplo 588 usando 1,8- dibromonaftaleno no ligar de 8-bromo-1-cloroisoquinolina na etapa A. ESI+APCI MS m/z 651,2 [M+H]+.
EXEMPLO 595 2-((S)-4-(7-(1-cloroisoquinolin-8-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02537] Sintetizado da mesma maneira que o Exemplo 589 usando 1,8- dibromonaftaleno no lugar de 8-bromo-1-cloroisoquinolina na etapa A. ESI+APCI MS m/z 605,3 [M+H]+.
EXEMPLO 596
2-((S)-4-(2-(((S)-1-benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
[02538] Etapa A: Benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (3 g, 5,7 mmol) foi dissolvido em DCM (57 ml, 5,7 mmol) e tratado com solução de ácido clorídrico (4,0M em 1,4-dioxano) (7,1 ml, 28 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi lavada com NaOH 1M. A fase aquosa foi extraída com DCM adicional (2X), a fase orgânica combinada foi seca sobre MgSO4 e concentrada in vacuo para dar benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-
(cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,4 g, 5,6 mmol, 99% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 427,2 [M+H]+.
[02539] Etapa B: Benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Tris (dibenzilidenacetona)dipaládio (0) (1,030 g, 1,124 mmol) e 9,9-dimetil-4,5-bis (difenilfosfino)xanteno (1,301 g, 2,249 mmol) foi dissolvido em 1,4-dioxano (56,22 ml, 5,622 mmol) e purgado sob argônio por 5 minutos. A reação foi agitada a 100°C sob argônio por 15 minutos e a reação foi resfriada até a temperatura ambiente. À reação foi adicionado benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,4 g, 5,622 mmol), 1-bromo-8-metilnaftaleno (3,729 g, 16,87 mmol) e carbonato de césio (5,495 g, 16,87 mmol) sob argônio. A reação foi tampada sob argônio e agitada a 100°C durante a noite. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e os sólidos foram removidos por filtração. O filtrado foi concentrado in vacuo e purificado por cromatografia de fase normal (2X) no CombiFlash usando 0→75% de Hexanos/EtOAc como o eluente para dar benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (2,532 g, 4,465 mmol, 79,42% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
[02540] Etapa C: 2-((S)-4-(2-((S)-1-benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Em um tubo de micro-ondas, uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro- 7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 0,441 mmol) em dioxano (2204 µl, 0,441 mmol) foi espargida com argônio por 5 minutos. (S)-(-)-1-benzil-2- pirrolidinametanol (169 mg, 0,882 mmol), Cs2CO3 (431 mg, 1,32 mmol), metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil) (2'- metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (37,5 mg, 0,0441 mmol) foram adicionados sequencialmente sob argônio e a reação espargida com Ar por 5 minutos adicionais. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 2 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etila. Os sólidos foram removidos por filtração e o filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia flash, eluindo com 0 →20% de DCM/MeOH + 2% de NH4OH. Todas as frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas para dar 2-((S)-4-(2-(((S)-1-benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-ilo)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (120 mg, 0,204 mmol, 77,2% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 722,4 [M+H]+.
[02541] Etapa D: 2-((S)-4-(2-((S)-1-benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Uma solução de benzil (S)-4-(2-(((S)-1-benzilpirrolidin-2- il))metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (200 mg, 0,277 mmol) em EtOH (2,770 µl, 0,277 mmol) e THF (2770 µl, 0,277 mmol) foi purgada com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado paládio (73,7 mg, 0,0693 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução foi em seguida agitada sob uma atmosfera de H2 por 1 hora. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-((S)-4- (2-(((S)-1-benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il))-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila bruta (160 mg, 0,272 mmol, 98,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 588,4 [M+H]+.
[02542] Etapa E: 2-((S)-4-(2-(((S)-1-benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila: A um RBF de 25 mL contendo diclorometano (2722 µl, 0,272 mmol) a 0°C foi adicionado 2-((S)-4-(2-(((S)-1- benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (160 mg, 0,272 mmol) e base de Hunig
(95,1 µl, 0,544 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido 2-fluoroacrílico (98,1 mg, 1,09 mmol) foi adicionado em uma porção. Em seguida, foi adicionado lentamente anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (243 µl, 0,408 mmol) à mistura agitada. A reação foi agitada por 2 horas a 0°C. A reação foi tratada com água básica e a camada aquosa extraída com DCM (3X). A fase orgânica combinada foi concentrada in vacuo e o resíduo ressuspenso numa mistura 60:40 de MeCN:H2O e purificada (HPLC prep), eluindo com 5→95% de MeCN/0,1% de TFA em água/0,1% de TFA para dar produto. As frações puras foram reunidas e diluídas com EtOAc e NaOH 1N e as camadas separadas. A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre MgSO4 e concentrada in vacuo para dar 2-((S)-4-(2-(((S)-1- benzilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila (8 mg 0,0121 mmol, 4,45% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 660,4 [M+H]+.
EXEMPLO 597 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-(2-fluoroetil)pirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02543] Etapa A: (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato de benzila: terc-butil (S)-4-(4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7 (6H)-carboxilato (2 g, 3,795 mmol) foi dissolvido em DCM (37,95 ml, 3,795 mmol) e tratado com solução de ácido clorídrico (4,0 M em 1,4-dioxano) (4,744 ml, 18,97 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi lavada com NaOH 1M e a camada aquosa extraída com DCM (2X). A fase orgânica foi combinada, seca sobre Na2SO4 e concentrada para dar benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,619 g, 3,792 mmol, 99,93% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 427,2 [M+H]+.
[02544] Etapa B: (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato: Tris (dibenzilidenacetona)dipaládio(0) (0,6946 g, 0,7585 mmol) e 9,9-dimetil-4,5- bis(difenilfosfino)xanteno (0,8778 g, 1,517 mmol) foram dissolvidos em 1,4- dioxano (37,92 ml, 3,792 mmol), purgados sob argônio por 5 minutos e agitados a 100°C sob argônio por 15 minutos e a reação resfriada à temperatura ambiente. À mistura foi adicionado benzil (S)-4-(2-cloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (1,619 g, 3,792 mmol), 1-bromo-8-metilnaftaleno (2,515 g, 11,38 mmol) e carbonato de césio (3,707 g, 11,38 mmol) sob argônio. A reação foi tampada sob argônio e agitada a 100°C durante a noite. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e os sólidos removidos por filtração. O filtrado foi concentrado in vacuo e purificado por cromatografia de fase normal (2X) usando 0→75% de hexanos/EtOAc como o eluente para dar benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen- 1-ilo)benzil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (958 mg, 1,669 mmol, 44,54% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 567,2 [M+H]+.
[02545] Etapa C: terc-Butil (S)-2-(((4-((S)-3-(cianometil)piperazin-1-il))-7- (8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-2- il)oxi)metil)pirrolidina-1-carboxilato: Em um tubo de micro-ondas, uma solução de benzil (S)-4-(2-cloro-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (250 mg, 0,441 mmol) em dioxano (2204 µl, 0,441 mmol) foi espargido com argônio por 5 minutos. (S)-(-)- 1-(terc-Butoxicarbonil)-2-pirrolidinometanol (222 mg, 1,10 mmol), Cs2CO3 (431 mg, 1,32 mmol) e metanossulfonato(2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'- bifenil) (2'-metilamino-1,1'-bifenil-2-il)paládio(II) (37,5 mg, 0,0441 mmol) foram adicionados sequencialmente sob argônio e a reação aspergid com Ar por um adicional de 5 minutos. A mistura de reação foi tampada e aquecida a 100°C por 2 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etila. Os sólidos foram removidos por filtração, o filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia flash, eluindo com 0 →20% de DCM/MeOH + 2% de NH4OH. Todas as frações contendo produto desejado foram combinadas e concentradas para dar benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(terc- butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (306 mg, 0,418 mmol, 94,8% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 598,3 [M+H]+.
[02546] Etapa D: Benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato: terc-Butil (S)-2-(((4-((S)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-2-il)oxi)metil)pirrolidina-1-carboxilato (93 mg, 0,1556 mmol) foi dissolvido em diclorometano (1.556 µl, 0,1566 mmol) e tratado com base de Hunig (135,9 µl, 0,7779 mmol) e cloridrato de benzil carbono (33,31 µl, 0,2334 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A reação foi particionada entre DCM e água e as camadas separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (2X). A fase orgânica combinada foi seca sobre Na 2SO4,
concentrada in vacuo e o resíduo purificado por cromatografia utilizando 0→15% de DCM/MeOH + 2% de NH4OH como eluente. Todas as frações contendo o produto foram combinadas e concentradas para dar benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(terc- butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1)-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (367 mg, 0,5014 mmol, 322,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 732,4 [M+H]+.
[02547] Etapa E: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- (((S)-pirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: Benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(terc-butoxicarbonil))pirrolidin- 2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato (367 mg, 0,501 mmol) foi dissolvido em DCM (5.014 µl, 0,501 mmol) e tratado com TFA (193 µl, 2,51 mmol) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. Nenhuma reação foi observada. A mistura foi concentrada in vacuo e ressuspensa em DCM. A essa foi adicionado HCl (4M em dioxano, 500μL) e a reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e o resíduo foi particionado entre NaOH 1M e DCM. A fase orgânica combinada foi concentrada in vacuo para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)- pirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato bruto (192 mg, 0,304 mmol, 60,6% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 632,3 [M+H]+.
[02548] Etapa F: Benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(2-((terc-butildimetilsilil)oxi) etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftaleno)1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato : A uma solução agitada de benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-(((S)-pirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 0,23742 mmol) em 2,5 mL de DMF foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo mineral (8,5465 mg, 0,35614 mmol)). Após 15 minutos (2- bromoetoxi)(terc-butil)dimetilsilano (142,00 mg, 0,59356 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida até 75°C por 3,5 horas. A reação foi resfriada até à temperatura ambiente e particionada entre água e EtOAc e as camadas separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc e a fase orgânica combinada foi lavada com mais água e salmoura, seca sobre Na 2SO4 e concentrada in vacuo para dar benzil (S)-4-(2-(((S)-1-(2-((terc- butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato bruto (187 mg, 0,237 mmol, 99,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 790,4 [M+H]+.
[02549] Etapa G: 2-((S)-4-(2-((S)-1-(2-((terc-butildimetilsilil)oxi) etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: Uma solução de benzil (S)-4-(2-(((S)-1- (2-((terc-butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-2-(cianometil)piperazina-1- carboxilato (187 mg, 0,237 mmol) em EtOH (2367 µl, 0,237 mmol) e THF (2.367 µl, 0,237 mmol) foi purgada com N2 por 5 minutos. A esta solução foi adicionado paládio (63,0 mg, 0,0592 mmol) (Tipo Degussa, 10% em peso, 50% de H2O) e foi imediatamente tampada e purgada com N2 por um adicional de 5 minutos. A solução foi em seguida agitada sob uma atmosfera de H 2 durante a noite. A mistura foi diluída com MeOH e filtrada através de celite empacotada. O filtrado foi, então, concentrado in vacuo para fornecer 2-((S)-4-(2-(((S)-1-(2-((terc- butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila bruta (134 mg, 0,204 mmol, 86,3% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 656,4 [M+H]+.
[02550] Etapa H: 2-((S)-4-(2-((S)-1-(2-((terc- Butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila: A 0°C, a um RBF de 25 mL contendo N,N-dimetilformamida (2.043 µl, 0,204 mmol) foi adicionado 2-((S)-4-(2-(((S)-1-(2-((terc-butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2- il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-
il)piperazin-2-il)acetonitrila (134 mg, 0,204 mmol) e base de Hunig (71,4 µl, 0,409 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido 2- fluoroacrílico (22,1 mg, 0,245 mmol) foi adicionado em uma porção. Em seguida, foi adicionado lentamente anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (182 µl, 0,306 mmol) à mistura agitada. A reação foi agitada por 1 hora a 0°C. A reação foi tratada com NaOH aquoso e a camada aquosa extraída com EtOAc (3X). A fase orgânica combinada foi concentrada in vacuo para dar 2-((S)-4-(2-(((S)-1- (2-((terc-butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacriloil)piperazin-2- il)acetonitrila bruta (120 mg, 0,165 mmol, 80,7% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 728,4 [M+H]+.
[02551] Etapa I: 2-((S)-1-(2-Fluoroacriloil)-4-(2-(((S)-1-(2- hidroxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(2-(((S)-1-(2- ((terc-butildimetilsilil)oxi)etil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila (50 mg, 0,069 mmol) foi dissolvida em diclorometano (687 µl, 0,069 mmol) e tratada com cloreto de hidrogênio (52 µl, 0,21 mmol) (4M em dioxano). A reação agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi, então, concentrada in vacuo e ressuspensa em uma mistura 60:40 de MeCN:H2O e purificada (HPLC prep), eluindo com 5→95% de MeCN/0,1% de TFA em água/0,1% de TFA. Frações contendo produto foram combinadas e particionadas entre NaOH 1M e DCM e as camadas separadas e a camada aquosa extraída com DCM adicional. A fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo para dar 2-((S)-1-(2-fluoroacriloil)-4-(2-(((S)-1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-il)metoxi)-7-(8- metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila (2,7 mg, 0,0044 mmol, 6,4% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 614,3 [M+H]+.
EXEMPLO 598
2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-(2-fluoroetil)pirrolidin-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2- il)acetonitrila
[02552] Etapa A: 2-((S)-4-(7-(8-Cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-(2- fluoroetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila: 2-((S)-4-(7-(8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)- pirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila (30 mg, 0,0508 mmol) foi dissolvida em acetonitrila (508 µl, 0,0508 mmol) e carbonato de césio (19,9 mg, 0,0610 mmol) foi adicionada em uma porção. A essa mistura foi, então, adicionado 1-fluoro-2- iodoetano (3,72 µl, 0,0458 mmol) e a reação agitada a 60°C durante a noite. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente, os sólidos foram removidos por filtração e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi ressuspenso em 60:40 MeCN:água e purificado (HPLC prep), eluindo com 5→95% de MeCN/0,1% de TFA em água/0,1% de TFA. Frações contendo produto desejado foram combinadas e particionadas entre EtOAc e NaOH 1M e as camadas separadas.
A camada aquosa foi extraída com EtOAc adicional (2X). A fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e concentrada in vacuo para dar 2-((S)-4-(7- (8-cloronaftalen-1-il)-2-(((S)-1-(2-fluoroetil)pirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacriloil)piperazin-2-il)acetonitrila (4,8 mg, 0,00755 mmol, 14,8% de rendimento). ESI+APCI MS m/z 636,3 [M+H]+.
EXEMPLO 599 2-((S)-1-(2-Fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-((((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metil)tio))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
[02553] Etapa A: terc-Butil (S)-2-(((metilsulfonil)oxi)metil)pirrolidina-1- carboxilato: A uma solução de terc-butil (S)-2-(hidroximetil)pirrolidina-1- carboxilato (3,0 g, 14,91 mmol) em DCM (74,53 ml, 14,91 mmol) resfriada até 0°C foi adicionada N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (4,01 ml, 22,36 mmol) seguida pela adição de cloreto de metanossulfonil (1,38 ml, 17,89 mmol) ao longo de 1 minuto e a reação agitada a 0°C por 1 h. A reação foi lavada em seguida com 1:1 água/salmoura (10 mL) e as camadas foram separadas. A fase orgânica combinada foi em seguida seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada in vacuo. O material foi purificado em seguida por cromatografia usando 0-10% de MeOH em DCM como eluente para dar terc-butil (S)-2-
(((metilsulfonil)oxi)metil)pirrolidina-1-carboxilato (3,786 g, 13,55 mmol, 90,9% de rendimento).
[02554] Etapa B: terc-Butil (S)-2-(((3-metoxi-3-oxopropil) tio)metil)pirrolidina-1-carboxilato: terc-Butil (S)-2-(((metilsulfonil)oxi) metil)pirrolidina-1-carboxilato (2,00 g, 7,16 mmol) e Cs2CO3 (4,665 g, 14,32 mmol) foi colocado em dioxano (10 mL) e agitado por 3 horas à temperatura ambiente. Foi adicionado NaOH (0,5 M) e a mistura foi extraída com DCM. A fase orgânica combinada foi concentrada e o resíduo purificado por sílica gel (0- 12% de MeOH em DCM com 0,25% de NH4OH) para proporcionar terc-butil (S)- 2-(((3-metoxi-3-oxopropil)tio)metil)pirrolidina-1-carboxilato (2,172 g, 7,16 mmol, 99% de rendimento).
[02555] Etapa C: Metil (S)-3-(((1-metilpirrolidin-2-il)metil)tio)propanoato: A um frasco foi adicionado terc-butil (S)-2-(((3-metoxi-3- oxopropil)tio)metil)pirrolidina-1-carboxilato (2,172 g, 7,16 mmol) em ácido fórmico (6,751 ml, 179,0 mmol) seguido pela adição de formaldeído (10,76 ml, 143,2 mmol) (37% aquoso). A mistura foi, então, aquecida até 65ºC e agitada por 18 horas. A reação foi resfriada e bicarbonato saturado foi adicionado lentamente e a mistura foi extraída com 10% de MeOH em DCM (3x20 mL). Os extratos foram combinados, secos sobre MgSO4 e concentrados. O resíduo foi purificado por sílica gel (5-20% de MeOH em DCM com 0,25% de NH4OH) para fornecer metil (S)-3-(((1-metilpirrolidin-2-il)metil)tio)propanoato (186 mg, 0,86 mmol, 12% de rendimento).
[02556] Etapa D: terc-Butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3- (cianometil)piperazin-1-il)-2-((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato,: Metil (S)-3-(((1-metilpirrolidin-2- il)metil)tio)propanoato (186 mg, 0,854 mmol) foi colocado em dioxano (5 mL). Foi adicionado KOtBu (1.708 µl, 1,71 mmol) e a mistura foi agitada por 30 minutos. terc-Butil (S)-4-(4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2- cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (300 mg, 0,569 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida até 80ºC por 24 horas. A mistura foi resfriada, diluída com água e extraída com DCM (3x15 mL). Os extratos foram combinados e concentrados. O resíduo foi purificado por sílica gel (0-15% de MeOH em DCM com 0,25% de NH4OH) para fornecer terc-butil 4-((S)-4- ((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin1-il)-2-((((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metil)tio)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (72 mg 0,116 mmol, 20,3% de rendimento).
[02557] Etapa E: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato:
terc-Butil 4-((S)-4-((benziloxi)carbonil)-3-(cianometil)piperazin-1-il)-2-((((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato (72 mg, 0,12 mmol) foi colocado em DCM (5 mL) e resfriado até 0°C. Foi adicionado HCl (145 µL, 0,58 mmol) e a reação aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 18 horas. A reação foi concentrada e foi criada em DCM. Foi adicionado bicarbonato saturado e a mistura foi extraída com DCM (3x 20 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO 4 e concentradas para fornecer benzil (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (61 mg, 0,12 mmol).
[02558] Etapa F: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- ((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)tio))-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato: A uma solução de (S)-2-(cianometil)-4-(2-((((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (61 mg, 0,12 mmol) em tolueno (2 mL) foi adicionado 1-bromo-8-metilnaftaleno (78 mg, 0,35 mmol) e a reação foi desgaseificada com argônio por 15 minutos, seguida pela adição de Cs2CO3 (190 mg, 0,58 mmol), Pd2(dba)3 (21 mg, 0,023 mmol) e Xantphos (27 mg, 0,047 mmol) e a reação aquecida a 100 ºC por 18 horas. Os sólidos foram removidos por filtração e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi em seguida purificado por cromatografia utilizando 1→12% MeOH/DCM, com 2% NH4OH como aditivo para dar benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-((((S)-1-
metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (54 mg, 0,082 mmol, 70% de rendimento).
[02559] Etapa G: 2-((S)-4-(7-(8-Metilnaftalen-1-il)-2-((((S)-1-metilpirrolidin- 2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2- il)acetonitrila: Benzil (S)-2-(cianometil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-((((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato (54 mg, 0,082 mmol) foi colocado em DCM (10 mL) e a reação foi resfriada até 0ºC. AcOH (14,01 µL, 0,244 mmol) e TMS-I (69,67 µL, 0,490 mmol) foram adicionados e a reação foi lentamente aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 1 hora. Foi adicionado bicarbonato saturado e a mistura foi extraída com DCM. Os extratos foram concentrados e o resíduo purificado por cromatografia de fase reversa (5-95% de MeCN em água com 0,1% de TFA). O produto isolado foi, então, de base livre criando em DCM e adicionando bicarbonato saturado. A camada orgânica foi separada, seca sobre MgSO4 e concentrada para proporcionar 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2- ((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila (8 mg, 0,15 mmol, 19%).
[02560] Etapa H: 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-((((S)- 1-metilpirrolidin-2-il))metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazin-2-il)acetonitrila: A uma solução a 0°C de N,N-dimetilformamida (152 µl, 0,015 mmol) foi adicionada 2-((S)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-2-((((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-
2-il)acetonitrila (8,0 mg, 0,015 mmol) e trietilamina (7,37 µl, 0,053 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente agitada enquanto ácido 2-fluoroacrílico (4,10 mg, 0,046 mmol) foi adicionado em uma porção. Em seguida, foi adicionado lentamente anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfônico (13,5 µl, 0,023 mmol) à mistura agitada. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM e os extratos foram concentrados. O resíduo foi purificado por sílica gel (0-12% de MeOH em DCM com 0,25% de NH4OH) para fornecer 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8- metilnaftalen-1)-il)-2-((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)tio)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina- 2-il)acetonitrila (2,3 mg, 0,0038 mmol, 25,3% de rendimento). ES+APCI MS m/z 600,3 [M+H]+.
EXEMPLO 600 2-((S)-4-(7-(5-Cloro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin- 2-il)acetonitrila
[02561] 2-((S)-4-(7-(5-Cloro-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila foi preparado de acordo com o Exemplo 359 usando 3,5-dicloro-4-(trifluorometil)piridina no lugar de 1-bromo-8- metilnaftaleno na etapa A. ES+APCI MS m/z 623,2 [M+H]+.
EXEMPLO 601 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0°c, 0,5 h, 50%
A A
[02562] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-
metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1 eq) e [(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metanol (191 mg, 1,26 mmol, 1,5 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t- BuONa (162 mg, 1,68 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 30 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (10 mL) e extraída com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 100 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4- difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-dihidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 418 µmol, 50% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 682.
[02563] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[((2S)-4,4- difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (260 mg, 381 µmol, 1 eq) em MeOH (4 mL) foi adicionado Pd/C (120 mg, 10% de pureza), NH 3/MeOH (3 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil- 1-naftil)-6,8-dihidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 296 µmol, 78% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 548.
[02564] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)- 4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (150 mg, 274 umol, 1 eq), TEA (222 mg, 2,19 mmol, 305 uL, 8 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (57,0 mg, 548 µmol, 2 eq) em EA (3 mL) foi adicionado T3P (523 mg, 822 µmol, 489 µL, 50% de pureza em EA, 3 eq) a -70°C. A mistura foi agitada a -70°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com HCl 1 M (2,2 mL) a - 70°C e agitada até não restar gelo. As camadas foram separadas. A camada orgânica foi basificada com solução aquosa saturada de NaHCO 3 até pH = 8 e extraída com acetato de etila (15 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, EtOAc/MeOH 1/0 a 20/1) seguido por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4- fluorobut-2-enoil]piperazina-2-il]acetonitrila (50,6 mg, 78 µmol, 29% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 634.
[02565] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 - 7,38 (m, 1H), 7,38 - 7,32 (m, 1H), 7,27 - 7,18 (m, 2H), 7,09 - 6,93 (m, 1H), 6,60 (br d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,32 - 4,93 (m, 3H), 4,64 (br s, 1H), 4,45 (td, J = 5,2, 11,2 Hz, 1H), 4,32 - 3,63 (m, 6H), 3,58 - 3,36 (m, 3H), 3,25 - 2,96 (m, 5H), 2,93 (s, 3H), 2,88 - 2,77 (m, 1H), 2,75 - 2,50 (m, 3H), 2,46 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,34 - 2,15 (m, 1H).
EXEMPLO 602
2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila RuPhos, tolueno, 90°C, 3 h, 53%
A Duas etapas rendimento 11%
C
[02566] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (300 mg, 593 umol, 1,0 eq), 1-bromonaftaleno (184 mg, 890 µmol, 124 µL, 1,5 eq), Pd2(dba)3 (54,3 mg, 59,3 µmol, 0,1 eq), Cs2CO3 (483 mg, 1,48 mmol, 2,5 eq) e RuPhos (55,4 mg, 119 umol, 0,2 eq) em tolueno (10 mL) foram desgaseificadas e purgadas com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 90°C por 3 horas sob atmosfera de N2. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (1 × 50 mL) e a camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (condição de 0,1% FA). O resíduo foi basificado com solução aquosa saturada de NaHCO3 até pH ~ 8 e depois extraído com acetato de etila (2 × 25 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5-H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 317 µmol, 53% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 632.
[02567] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 158 µmol, 1,0 eq) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd/C (20 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (8 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (70 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo e utilizado nas próximas etapas sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 498.
[02568] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (60 mg, 121 umol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (21,7 mg, 241 µmol, 2,0 eq) e Et3N (97,6 mg, 965 umol, 134 uL, 8,0 eq) em acetato de etila (6 mL) foi adicionado T3P (230 mg, 362 µmol, 215 uL, 50% de pureza, 3,0 eq) a
0°C. A mistura foi agitada a 0 - 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (6 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 10 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna (SiO 2, acetato de etila/metanol = 20/1 a 5/1). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 60% - 78%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilizado. 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)- 4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (7,23 mg, 12,7 µmol, 11% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 571.
[02569] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,27 - 8,16 (m, 1H), 7,91 - 7,81 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 - 7,47 (m, 2H), 7,43 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,56 - 5,33 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,2, 16,8 Hz, 1H), 4,85 (br s, 1H), 4,41 (dd, J = 5,2, 10,8 Hz, 1H), 4,34 - 4,24 (m, 2H), 4,22 - 3,96 (m, 4H), 3,75 - 3,21 (m, 4H), 3,12 (br t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,04 - 2,92 (m, 2H), 2,87 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,38 - 2,23 (m, 1H), 2,15 - 1,99 (m, 1H), 1,94 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 603
2-[(2S)-4-[2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, - 10°C, 0,5 h, 54%
A Duas etapas rendimento 17%
C
[02570] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido de benzil[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato. A uma solução de ciclopentilmetanol (50,5 mg, 504 µmol, 54,6 µL, 3,0 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 168 µmol, 1,0 eq) em tolueno (5 mL) foi adicionado t-BuONa (48,5 mg, 504 umol, 3,0 eq) a -10°C. A mistura foi agitada a -10°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com água (5 mL) a -10°C e depois extraída com acetato de etila (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 20 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 50/1 a 3/1). O composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4- [2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (58 mg, 91,6 µmol, 54% de rendimento, 99,6% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 631.
[02571] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,46 - 7,30 (m, 7H), 7,26 - 7,16 (m, 2H), 5,27 - 5,15 (m, 2H), 4,69 (br s, 1H), 4,32 - 3,72 (m, 7H), 3,59 - 3,30 (m, 2H), 3,24 - 2,87 (m, 7H), 2,87 - 2,30 (m, 4H), 1,90 - 1,76 (m, 2H), 1,64 (m, 2H), 1,57 - 1,51 (m, 1H), 1,42 - 1,21 (m, 3H).
[02572] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-(ciclopentilmetoxi) -7-(8-metil-1-naftiyl)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (58 mg, 92,0 µmol, 1,0 eq) em MeOH (3 mL) foi adicionado Pd/C (20 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (2 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. 2- [(2S)-4-[2- (ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1-naftiyl)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (34 mg, bruto) foi obtido como um óleo amarelo e utilizado nas próximas etapas sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 497.
[02573] Etapa C: 2-[(2S)-4-[2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (30 mg, 60,4 µmol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (16,3 mg, 181 umol, 3,0 eq) e Et3N (55,0 mg, 544 µmol, 75,7 µL, 9,0 eq) em EA (2,0 mL) foram adicionados T3P (154 mg, 242 umol, 144 µL, 50% de pureza, 4,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (6 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 10 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 1/1). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 65%-95%, 10 min.).
O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilizado. 2-[(2S)-4-[2-(ciclopentilmetoxi)-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (8,85 mg, 15,3 µmol, duas etapas 17% de rendimento, 98,2% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 569.
[02574] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,70 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,67 - 7,61 (m, 1H), 7,46 - 7,36 (m, 1H), 7,36 - 7,31 (m, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 2H), 5,56 - 5,32 (m, 1H), 5,25 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,89 (br s, 1H), 4,33 - 3,98 (m, 5H), 3,95 - 3,72 (m, 2H), 3,60 - 3,39 (m, 2H), 3,30 - 2,96 (m, 4H), 2,92 (s, 3H), 2,91 - 2,73 (m, 2H), 2,69 - 2,54 (m, 1H), 2,45 - 2,29 (m, 1H), 1,93 - 1,74 (m, 2H), 1,69 - 1,62 (m, 2H), 1,60 - 1,53 (m, 2H), 1,45 - 1,25 (m, 2H).
EXEMPLO 604 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila
Cs2CO3, 0,5 h tolueno, -90°C, 8 h, 62%
A
[02575] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (1 g, 1,98 mmol, 1 eq), 4-bromo-5,6- dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (795 mg, 2,57 mmol, 1,3 eq), RuPhos (369 mg, 791 umol, 0,4 eq), Cs2CO3 (1,61 g, 4,94 mmol, 2,5 eq) e Pd2(dba)3 (362 mg, 396 umol, 0,2 eq) em tolueno (20 mL) foi desgaseificada e, em seguida, aquecida até 90°C por 8 horas sob N2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 sólido, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6- dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (900 mg, 1,23 mmol, 62% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido marrom.
[02576] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,98 (s, 1H), 7,43 - 7,33 (m, 5H), 7,22 (s, 1H), 5,66 (dd, J = 2,8, 9,6 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,0 Hz, 1H), 4,25 (s, 2H), 4,18 - 4,14 (m, 1H), 4,04 (br d, J = 12,0
Hz, 2H), 3,95 - 3,84 (m, 1H), 3,75 (dt, J = 2,8, 10,8 Hz, 1H), 3,50 (br t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,30 (br s, 2H), 3,13 - 2,98 (m, 2H), 2,95 - 2,52 (m, 6H), 2,47 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,30 - 2,23 (m, 1H), 2,22 - 2,11 (m, 1H), 2,07 (br d, J = 3,2 Hz, 1H), 1,89 - 1,63 (m, 8H).
[02577] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4- il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7- (5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (0,9 g, 1,23 mmol, 1 eq) em MeOH (20 mL) foi adicionado NH3•MeOH (20 mL, 20% de pureza), Pd/C (0,45 g, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, o catalisador foi removido por filtração através de um tampão de celite. O solvente foi removido sob pressão reduzida. 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (620 mg, 1,03 mmol, 84% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 600.
[02578] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4- il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4- [7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (600 mg, 1,00 mmol, 1 eq) em DMF (8 mL) foi adicionado ácido 2-fluoroprop-2-enoico (180 mg, 2,00 mmol, 2 eq) em EA (4 mL) e TEA (304 mg, 3,00 mmol, 414 μL, 3 eq) seguido por T3P (955 mg, 1,50 mmol, 892 µL, 50% de pureza em EtOAc, 1,5 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (20 mL) e extraída com EtOAc (3 × 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 sólido, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (3 × 100 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- (2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (380 mg, 554 µmol, 55% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 672.
[02579] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,98 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 5,66 (dd, J = 2,4, 9,2 Hz, 1H), 5,51 - 5,32 (m, 1H), 5,25 (br dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,09 - 4,59 (m, 1H), 4,44 - 4,33 (m, 1H), 4,26 (br s, 2H), 4,19 - 4,14 (m, 1H), 4,05 (br d, J = 14,4 Hz, 2H), 4,00 - 3,91 (m, 1H), 3,76 (dt, J = 2,4, 11,2 Hz, 1H), 3,59 - 3,39 (m, 3H), 3,37 - 3,21 (m, 1H), 3,14 - 3,02 (m, 2H), 2,90 - 2,52 (m, 6H), 2,48 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,29 - 2,23 (m, 1H), 2,22 - 2,08 (m, 2H), 1,90 - 1,69 (m, 8H).
[02580] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(5,6- dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila (360 mg, 536 umol, 1 eq) em DCM (0,4 mL) foi adicionado TFA (1,22 g, 10,7 mmol, 794 µL, 20 eq). A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com DCM (10 mL) e neutralizada com solução de NaHCO3 saturado. A camada aquosa separada foi extraída com DCM (2 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 sólido, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com EtOAc (2 × 15 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25mm*5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 40%-70%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (73,3 mg, 120 µmol, 22% de rendimento, 96,6% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 588.
[02581] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 9,97 (br s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 5,55 - 5,31 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 3,6, 16,8 Hz, 1H), 5,08 - 4,50 (m, 1H), 4,39 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 4,20 - 3,68 (m, 4H), 3,65 - 3,27 (m, 4H), 3,10 (br t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,02 - 2,72 (m, 4H), 2,71 - 2,60 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,31 - 2,24 (m, 1H), 2,12 - 2,01 (m, 1H), 1,93 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 605 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2-piridilmetoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, -10°C, 0,5 h, 59%
A
[02582] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2- piridilmetoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de 2-piridilmetanol (55,1 mg, 504 µmol, 48,7 µL, 3,0 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 168 µmol, 1,0 eq) em tolueno (5,00 mL) foi adicionado t-BuONa (48,5 mg, 504 µmol, 3,0 eq) a -10°C. A mistura foi agitada a -10°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com água (5.00 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 10 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 50/1 a 1/1). Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2-piridilmetoxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (64,0 mg, 98,8 µmol, 59% de rendimento, 98,8% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 641.
[02583] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2-piridilmetoxi)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2-piridilmetoxi)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (64,0 mg, 100 µmol, 1,0 eq)
em MeOH (3,00 mL) foi adicionado Pd/C (20,0 mg, 10% de pureza) e NH3•MeOH (2,00 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, diclorometano/metanol = 100/1 a 8/1). 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2-piridilmetoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (15,0 mg, 19,3 µmol, 19% de rendimento, 64,9% de pureza) foi obtida como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 506.
[02584] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- (2-piridilmetoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-(2-piridilmetoxi)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (10,0 mg, 19,8 µmol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (5,34 mg, 59,3 µmol, 3,0 eq) e Et3N (18,0 mg, 178 µmol, 24,8 µL, 9,0 eq) em EtOAc (2,00 mL) foi adicionado T3P (50,3 mg, 79,1 µmol, 47,1 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 4,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (3,00 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 10 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 50/1 a 10/1). O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 * 25mm * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 50% - 80%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilizado. 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-(2-piridilmetoxi)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (1,41 mg, 2,44 umol, 12% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 579.
[02585] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,61 - 8,55 (m, 1H), 7,74 - 7,62 (m, 3H), 7,55 - 7,48 (m, 1H), 7,45 - 7,32 (m, 2H), 7,26 - 7,17 (m, 3H), 5,52 -
5,48 (m, 2H), 5,47 - 5,33 (m, 1H), 5,25 (dd, J = 3,6, 17,2 Hz, 1H), 4,79 (br s, 1H), 4,38 - 3,73 (m, 6H), 3,61 - 3,41 (m, 2H), 3,26 - 3,12 (m, 2H), 3,09 - 2,95 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,85 - 2,56 (m, 2H).
EXEMPLO 606 2-((S)-4-(7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-(((2S,4R)-4-fluoro-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2-fluoroacrilil)piperazin- 2-il)acetonitrila Ca2CO3, tolueno, tolueno, 0°C, 1 hr, t-BuONa, tolueno, 90°C, 8 hrs, 63% 72% 0°C, 0,5 h, 73%
A B C 0 °C, 0,5 hr 25 °C 0,5 hr 27% 93 % E
D EA, 0 °C, 0,5 hr 7%
F
[02586] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2- metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (5,0 g, 11,4 mmol, 1,0 eq), 4-bromo-5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (7,05 g, 22,8 mmol, 2,0 eq), Pd2(dba)3 (2,09 g, 2,28 mmol, 0,2 eq), Ruphos (2,13 g, 4,56 mmol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (9,29 g, 28,5 mmol, 2,5 eq) em tolueno (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 2/1) e ainda purificado por flash de fase inversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfanil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (4,90 g, 7,20 mmol, 63% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 667.
[02587] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,98 (s, 1H), 7,50 - 7,31 (m, 5H), 7,22 (s, 1H), 5,66 (dd, J=2,4, 9,6 Hz, 1H), 5,27 - 5,13 (m, 2H), 4,69 (br s, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,13 - 3,97 (m, 3H), 3,89 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,81 - 3,68 (m, 1H), 3,51 (t, J=5,2 Hz, 2H), 3,30 (br s, 2H), 3,04 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 2,93 - 2,66 (m, 4H), 2,62 - 2,48 (m, 4H), 2,43 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,23 - 2,12 (m, 1H), 2,11 - 2,05 (m, 1H), 1,85 - 1,67 (m, 3H).
[02588] Etapa B: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6- dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 749 µmol, 1,0 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado m-CPBA (152 mg, 749 µmol, 85% de pureza, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura foi diluída com água (10 mL) e o pH ajustado ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3. Em seguida, a mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 539 µmol, 72% de rendimento, 92% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 683.
[02589] Etapa C: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (350 mg, 512 µmol, 1.0 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado t-BuONa (148 mg, 1,54 mmol, 3,0 eq) e [(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (136 mg, 1,03 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (280 mg, 372 µmol, 73% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 752.
[02590] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4- il)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 306 umol, 1,0 eq) em metanol (2,0 mL) foi adicionado Pd/C seco (50,0 mg, 10% de pureza) e NH3/metanol (1,00 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C durante 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2- il-indazol-4-il)-2-[[(2S, 4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (180 mg, 285 µmol, 93% de rendimento, 98% de pureza) foi obtida como um sólido amarelo e usada na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 618.
[02591] Etapa D: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (30 mg, 48,6 µmol, 1,0 eq) em diclorometano (300 uL) foi adicionado TFA (221 mg, 1,94 mmol, 144 µL, 40 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo e diluída com água (10 mL). A mistura foi ajustada pH ~ 8 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com diclorometano (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 * 25mm * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 26% - 56%, 1min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (7,08 mg, 13,1 µmol, 27% de rendimento, 98,5% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 534.
[02592] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,14 (br s, 1H), 8,04 (d, J=0,8 Hz, 1H), 7,14 (s, 1H), 5,32 - 5,03 (m, 1H), 4,44 (dd, J=4,4, 11,2 Hz, 1H), 4,33 - 4,19 (m, 3H), 4,00 (br d, J=12,8 Hz, 1H), 3,82 (br d, J=12,0 Hz, 1H), 3,65 - 3,41 (m, 3H), 3,27 (br d, J=6,4 Hz, 1H), 3,17 - 2,95 (m, 4H), 2,90 (br dd, J=10,0, 12,4 Hz, 1H), 2,83 - 2,47 (m, 8H), 2,41 (s, 3H), 2,38 - 2,23 (m, 4H), 2,09 - 1,90 (m, 1H).
[02593] Etapa E: 2-[(2S)-4-[7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4- fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1- (2-fluoroprop-2-enoil)piperazina-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7- (5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 187 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (25,3 mg, 281 µmol, 1,5 eq) em acetato de etila (2,0 mL) foi adicionado T3P (477 mg, 749 µmol, 446 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 4,0 eq) e TEA (114 mg, 1,12 mmol, 156 µL, 6,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge
150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 38% - 68%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[7- (5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-2-[[(2S,4R)-4-fluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila (8 mg, 12,8 umol, 7% de rendimento, 96,9% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 606.
[02594] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,03 (br s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 5,42 (dd, J=6,4 Hz, J=47,2 Hz 1H), 5,31 - 5,05 (m, 2H), 5,04 - 3,76 (m, 9H), 3,65 - 3,47 (m, 3H), 3,42 - 3,25 (m, 1H), 3,20 - 2,70 (m, 6H) 2,70 - 2,55 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,38 - 2,25 (m, 4H), 2,10 - 1,87 (m, 1H).
EXEMPLO 607 2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(6-metilisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila
HCl.dioxano 25 °C, 0,3 hr Ca2CO3, tolueno, 45% 90°C, 8 hrs, 66% B
A T3P ·EA, TEA, EA 0 °C, 0,5 h 9%
C
[02595] Etapa A: terc-butilo (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(6-metil-4-isoquinolil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (250 mg, 530 µmol, 1,0 eq), 4-bromo-6-metil- isoquinolina (235 mg, 1,06 mmol, 2,0 eq), Ruphos (98,9 mg, 212 µmol, 0.4 eq), Pd2(dba)3 (97,1 mg, 106 umol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (432 mg, 1,33 mmol, 2,5 eq) em tolueno (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes e, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas, sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (ácido fórmico 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (3 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. terc-butil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(6-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-
di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (230 mg, 349 µmol, 66% de rendimento, 93% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 613.
[02596] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(6-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(6-metil-4- isoquinolil)-2-[[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il])metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (50 mg, 81,6 µmol, 1,0 eq) em dioxano (400 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4 M, 408 uL). A mistura foi agitada a 25°C por 0,3 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo e diluída com água (10 mL). A mistura foi ajustada pH ~ 8 com solução aquosa saturada de NaHCO 3 e extraída com diclorometano (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 * 25mm * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 28% - 58%, 1 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[7-(6-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (19 mg, 37 µmol, 45% de rendimento, 99,9% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 513.
[02597] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,94 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,92 - 7,83 (m, 2H), 7,45 (dd, J=1,2, 8,4 Hz, 1H), 4,40 (dd, J=4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 4,17 (dd, J=6,8, 10,8 Hz, 1H), 4,03 (br d, J=12,8 Hz, 1H), 3,86 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,42 (br t, J=5,2 Hz, 2H), 3,33 - 3,22 (m, 1H), 3,17 - 2,80 (m, 7H), 2,72 - 2,63 (m, 1H), 2,61 - 2,52 (m, 5H), 2,47 (s, 3H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 2,06 (m, 1H), 1,89 - 1,68 (m, 3H).
[02598] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluorprop-2-enoil)-4-[7-(6-metil-4-isoquinolil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-
il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(6-metil-4-isoquinolil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 195 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2- enoico (35,1 mg, 390 umol, 2,0 eq) em acetato de etila (2 mL) foram adicionados T3P (372 mg, 585 µmol, 348 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 3,0 eq) e TEA (158 mg, 1,56 mmol, 217 µL, 8,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 38% - 62%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(6-metil-4- isoquinolil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (11 mg, 18,6 µmol, 9% de rendimento, 98,9% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 585.
[02599] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,96 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,93 - 7,85 (m, 2H), 7,46 (dd, J=1,2, 8,4 Hz, 1H), 5,49 - 5,36 (m, 1H), 5,26 (dd, J=3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,88 (br s, 1H), 4,50 - 4,29 (m, 3H), 4,27 - 3,96 (m, 4H), 3,61 - 3,30 (m, 4H), 3,22 - 3,06 (m, 2H), 3,04 - 2,77 (m, 4H), 2,75 - 2,65 (m, 1H), 2,59 (s, 3H), 2,49 (s, 3H), 2,31 - 2,29 (m, 1H), 2,15 - 1,97 (m, 1H), 1,80 - 1,77 (m, 3H).
EXEMPLO 608
2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila T3P ·EA, DMF, TEA -40 °C, 0,5 h 10% t-BuONa, C tolueno, 35%
A
[02600] Etapa A: terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (240 mg, 508,91 µmol, 1 eq), t-BuONa (146,72 mg, 1,53 mmol, 3 eq), RuPhos (47,50 mg, 101,78 umol, 0,2 eq) e RuPhos Pd G3 (85,13 mg, 101,78 µmol, 0,2 eq) em tolueno (5 mL) foi adicionado 1-bromo-8-etil-naftaleno (239,31 mg, 1,02 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 90°C por 12 horas. À mistura foi adicionada água (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC flash de fase reversa (C18, 0,1% de FA em água, 0-45% de MeCN). O produto de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-etil-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (113 mg, 180,57 µmol, 35,48% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:626.
[02601] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (103 mg, 164,59 µmol, 1 eq) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (2 mL)) a 25°C. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 0,5 h. A mistura de reação foi extinta por adição de NaHCO3 saturado aquoso (20 mL) a 25°C, até pH = 8 e depois extraída com acetato de etila (3 × 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (81 mg, bruto) foi obtido como sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[02602] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,66 - 7,55 (m, 2H), 7,37 - 7,25 (m, 2H), 7,25 - 7,20 (m, 1H), 7,19 - 7,14 (m, 1H), 4,36 - 4,26 (m, 1H), 4,21 - 4,02 (m, 2H), 4,00 - 3,62 (m, 3H), 3,56 - 2,73 (m, 11H), 2,65 - 2,34 (m, 7H), 2,26 - 2,14 (m, 1H), 2,02 - 1,88 (m, 1H), 1,82 - 1,62 (m, 4H), 1,13 - 1,02 (m, 3H).
[02603] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (61 mg, 116,04 µmol, 1 eq) e ácido 2-fluoroprop-2- enoico (20,90 mg, 232,08 µmol, 2 eq) em DMF (10 mL) foram adicionados TEA (281,81 mg, 2,78 mmol, 387,63 µL, 24 eq) e T3P (332,29 mg, 1,04 mmol, 310,55 uL, 9 eq) a -40°C. Após adição, a mistura foi agitada a 0°C por 2 horas. A mistura foi diluída com água (3 × 20 mL) e diluída com acetato de etila (3 × 20 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 × 20 ml), seca sobre Na 2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 10 min.). A mistura foi diluída com água (3 × 20 mL)
e diluída com acetato de etila (3 × 20 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (1 × 20 ml), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar 2-[(2S)-4-[7-(8-etil-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (7 mg, 11,63 µmol, 10,02% de rendimento, 99,3% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]:598.
[02604] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,67 - 7,54 (m, 2H), 7,39 - 7,26 (m, 2H), 7,25 - 7,20 (m, 1H), 7,15 (s, 1H), 5,45 - 5,24 (m, 1H), 5,23 - 5,12 (m, 1H), 4,95 - 4,58 (m, 1H), 4,33 - 4,25 (m, 1H), 4,25 - 3,63 (m, 6H), 3,57 - 3,33 (m, 3H), 3,21 - 2,49 (m, 10H), 2,44 - 2,35 (m, 3H), 2,27 - 2,15 (m, 1H), 2,03 - 1,90 (m, 1H), 1,82 - 1,66 (m, 3H), 1,13 - 1,04 (m, 3H).
EXEMPLO 609 2-[(2S)-4-[7-(6-fluoro-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila
NH3·MeOH 25 °C, 1,5 hrs Ca2CO3, tolueno, 41% 90°C, 10 hrs, 26% B
A
[02605] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(6-fluoro-4-isoquinolil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. À mistura de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido benzílico[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 791 µmol, 1,0 eq), 4-bromo-6-fluoro- isoquinolina (215 mg, 949 µmol, 1,2 eq), Cs2CO3 (773 mg, 2,37 mmol, 3,0 eq) e RuPhos (148 mg, 316 µmol, 0,4 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (145 mg, 158 µmol, 0,2 eq) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com N2 várias vezes. A mistura foi agitada sob N2 a 90°C por 10 horas. A mistura de reação filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e basificadas com NaHCO3 sólido, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com acetato de etila (2 × 40 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-[8-(tetra- hidropiran-2-iloximetil)-1-naftil]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (140 mg, 204 µmol, 26% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo.
[02606] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(6-fluoro-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. À mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(6-fluoro-4-isoquinolil)- 2-[[((2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (30 mg, 46,1 µmol, 1,0 eq) e NH3•MeOH (0,3 mL, 20% de pureza) em MeOH (0,3 mL) foi adicionado Pd/C (10 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25mm * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 30%-60%, 1min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[(2S)-4-[7-(6-fluoro-4- isoquinolil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (9,78 mg, 18,9 µmol, 41% de rendimento, 99,9% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 517.
[02607] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,00 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,02 (dd, J=5,6, 9,2 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=2,4, 10,4 Hz, 1H), 7,39 (dt, J=2,4, 8,8 Hz, 1H), 4,41 (dd, J=4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,28 (s, 2H), 4,18 (dd, J=6,8, 10,4 Hz, 1H), 4,02 (br d, J=12,4 Hz, 1H), 3,91 - 3,82 (m, 1H), 3,47 - 3,35 (m, 2H), 3,33 - 3,24 (m, 1H), 3,18 - 3,07 (m, 3H), 3,07 - 2,97 (m, 1H), 2,93 (dd, J=9,6, 12,8 Hz, 1H), 2,85 (br s, 2H), 2,73 - 2,64 (m, 1H), 2,56 (dd, J=2,4, 6,4 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,34 - 2,24 (m, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,91 - 1,76 (m, 3H).
[02608] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(6-fluoro-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. À mistura de 2-[(2S)-4-[7-(6-fluoro- 4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (80 mg, 155 µmol, 1,0 eq), ácido 2- fluoroprop-2-enoico (41,8 mg, 464 µmol, 3,0 eq) e TEA (235 mg, 2,32 mmol, 323 uL, 15 eq) em acetato de etila (1,5 mL) e DMF (1 mL) foi adicionado T3P (493 mg, 774 µmol, 460 uL, 50% de pureza, 5,0 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 25°C por 1 hora. Foi adicionada água (10 mL) à mistura. A mistura foi diluída com acetato de etila (30 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150*25mm * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 40% - 70%, 1min.). As frações desejadas foram recolhidas e liofilizadas para dar2-[(2S)-4-[7-(6-fluoro-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (17,4 mg 29,3 µmol, 19% de rendimento, 99,2% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 589.
[02609] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,01 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,03 (dd, J=5,6, 8,8 Hz, 1H), 7,73 (dd, J=2,4, 10,4 Hz, 1H), 7,40 (dt, J=2,4, 8,8 Hz, 1H), 5,52 - 5,35 (m, 1H), 5,27 (dd, J=3,6, 17,2 Hz, 1H), 5,02 - 4,62 (m, 1H), 4,46 - 4,38 (m, 1H), 4,36 - 4,25 (m, 2H), 4,24 - 4,07 (m, 3H), 4,02 (br d, J=13,2 Hz, 1H), 3,62 - 3,29 (m, 4H), 3,13 (br s, 2H), 3,03 - 2,93 (m, 2H), 2,91 - 2,77 (m, 2H), 2,72 (br s, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,32 (br d, J=8,4 Hz, 1H), 2,13 - 2,02 (m, 1H), 1,92 - 1,70 (m, 3H).
EXEMPLO 610
(S)-2-(1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(naftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila HCk.dioxano MeCN, 25 °C, 0,5 h 89%
D EA, TEA, T3P 0-25 °C, 0,5 h RuPhos, 21% tolueno, 90°C, G 5 h, 38%
E
[02610] Etapa A: terc-butil 4-hidroxi-6,8-di-hidro-5H -pirido[3,4-d]pirimidina- 7-carboxilato. A uma mistura de O1-terc-butil O4-etil 3-oxopiperidina-1,4- dicarboxilato (5,00 g, 18,4 mmol, 1,00 eq) em n-BuOH (30,0 mL) foi adicionado ácido acético; metanimidamida (9,59 g, 92,2 mmol, 5,00 eq) em porções. A mistura foi agitada a 120°C por 12 horas. A mistura foi concentrada para remover o solvente. Ao resíduo foi adicionada água (30,0 mL) e filtrada. O precipitado foi lavado com água (30,0 mL) e concentrado. O produto bruto foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional. O composto terc-butil 4-hidroxi-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (4,10 g, 16,1 mmol, 87% de rendimento, 98,4% de pureza) foi obtido como um sólido marrom. LCMS [ESI, M+1]: 196.
[02611] Etapa B: terc-butil 4-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato. A uma mistura de terc-butil 4-hidroxi-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (3,30 g, 13,1 mmol, 1,00 eq) em DCE (60,0 mL) foi Adicionado PPh3 (6,89 g, 26,3 mmol, 2,00 eq), CCll4 (6,06 g, 39,4 mmol, 3,79 mL, 3,00 eq) em porção sob N2. A mistura foi agitada a 70°C por 3 horas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 1/1). O composto terc-butil 4-cloro-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato (2,54 g, 9,42 mmol, 72% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 214.
[02612] Etapa C: terc-butil 4-[(3S)-4-benziloxicarbonil-3- (cianometil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7-carboxilato. A uma mistura de terc-butil 4-cloro-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina-7- carboxilato (1,30 g, 4,82 mmol, 1,00 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)piperazina- 1-carboxilato (1,00 g, 3,86 mmol, 0,80 eq) em DMAc (30,0 mL) foi adicionado DIEA (3,11 g, 24,1 mmol, 4,20 mL, 5,00 eq) sob N2. A mistura foi agitada a 100°C por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (100 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (30 mL × 2) e salmoura (30 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 0/1). Composto terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (1,18 g, 2,30 mmol, 48% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 493.
[02613] Etapa D: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato A uma mistura de terc-butil 4-[(3S)-4- benziloxicarbonil-3-(cianometil)piperazin-1-il]-6,8-di-hidro-H-pirido[3,4- d]pirimidina-7-carboxilato (1,20 g, 2,44 mmol, 1,00 eq) em acetonitrila (10,0 mL) foi adicionado HCl/dioxano (4,00 M, 12,2 ml, 20,0 eq) em porção a 25°C sob N 2. A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O produto bruto foi usado na próxima etapa diretamente sem purificação adicional. Composto benzil (2S)-2- (cianometil)-4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (883 mg, 2,16 mmol, 89% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 393.
[02614] Etapa E: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (300 mg, 764 µmol, 1,00 eq) e 1-bromonaftaleno (317 mg, 1,53 mmol, 212 uL, 2,00 eq) em tolueno (15,0 mL) foi adicionado Pd 2(dba)3 (140 mg, 153 µmol, 0,20 eq), RuPhos (143 mg, 306 ol, 0,40 eq) Cs2CO3 (747 mg, 2,29 mmol, 3,00 eq) numa única porção, sob N2. A mistura foi agitada a 90°C por 5 horas. A mistura de reação foi diluída com água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20,0 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (5,00 mL) e extraída com acetato de etila (50,0 mL x 2). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)- 4-[7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (150 mg, 289 µmol, 38% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo.
[02615] Etapa F: 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4- [7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (50,0 mg, 96,4 ol, 1,00 eq) em MeOH (3,00 mL) foi adicionado Pd/C (30,0 mg, 10% de pureza), NH3•MeOH (0,50 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150 × 25 5 u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35% - 59%, 10 min.). Composto 2-[(2S)-4-[7-(1- naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (8,63 mg, 22,4 µmol, 23% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 385.
[02616] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,63 (s, 1H), 8,26 - 8,19 (m, 1H), 7,91 - 7,84 (m, 1H), 7,62 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 7,45 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,17 (d, J=7,2 Hz, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,99 (br d, J=12,8 Hz, 1H), 3,83 (br d, J=12,8 Hz, 1H), 3,53 - 3,23 (m, 3H), 3,20 - 3,07 (m, 2H), 3,07 - 2,90 (m, 4H), 2,63 - 2,49 (m, 2H).
[02617] Etapa G: A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- irido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60,0 mg, 156 µmol, 1,00 eq) em acetato de etila (0,60 mL) foi adicionado ácido 2-fluoroprop-2-enoico (56,2 mg, 624 µmol, 4,00 eq), TEA (253 mg, 2,50 mmol, 348 uL, 16,0 eq) e T3P (596 mg, 936 ol, 557 uL, 50% de pureza, 6,00 eq) em porção, a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta por adição de água (1,00 mL) a 0°C e depois extraída com acetato de etila (10,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5,00 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 × 25 5 u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 40% -70%, 10 min.). Composto 2-[(2S)-1-(2-luoroprop-2-enoil)-4-[7-(1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (15,2 mg, 32,8 µmol, 21% de rendimento, 98,9% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 457.
[02618] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,67 (s, 1H), 8,26 - 8,18 (m, 1H), 7,91 - 7,84 (m, 1H), 7,63 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 2H), 7,45 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,18 (d, J=6,8 Hz, 1H), 5,54 - 5,34 (m, 1H), 5,27 (dd, J=4,0, 17,2 Hz, 1H), 4,91 (br s, 1H), 4,46 - 4,29 (m, 2H), 4,14 (br d, J=13,6 Hz, 1H), 3,99 (br d, J=13,2 Hz, 1H), 3,63 - 3,32 (m, 4H), 3,16 (br t, J=11,2 Hz, 2H), 2,99 (br dd, J=8,0, 16,4 Hz, 3H), 2,90 - 2,77 (m, 1H).
EXEMPLO 611 (S)-2-(1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(8-metilnaftalen-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila EA, TEA, T3P RusPhos, tolueno, 0-25 °C, 0,5 h 90°C, 5 hrs C
A
[02619] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (100 mg, 255 µmol, 1,00 eq) e 1-bromo-8-metil-naftaleno (113 mg, 510 µmol, 10,6 uL, 2,00 eq) em tolueno (8,00 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (46,7 mg, 51,0 µmol, 0,20 eq), RuPhos (47,6 mg, 102 µmol, 0,40 eq) Cs2CO3 (249 mg, 764 µmol, 3,00 eq) em uma porção sob N2. A mistura foi agitada a 90°C por 5 horas. A mistura de reação foi diluída com água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20,0 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (5,00 mL) e extraída com acetato de etila (50,0 mL x 2). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)- 4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (150 mg, bruto) foi obtido como um sólido amarelo.
[02620] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)- 4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1- carboxilato (50,0 mg, 93,9 ol, 1,00 eq) em metanol (1,00 mL) foi adicionado NH3•MeOH (93,9 mol, 0,2 mL, 20% de pureza, 1,00 eq), Pd/C (15,0 mg, 10% de pureza), sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 38%-62%, 10 min.). Composto 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (6,13 mg, 15,3 µmol, 16% de rendimento, 99,5% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 399.
[02621] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,61 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,74 - 7,63 (m, 2H), 7,41 (dt, J=2,8, 7,6 Hz, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,27 - 7,22 (m, 2H), 4,32 (br d, J=18,0 Hz, 1H), 4,07 - 3,92 (m, 1H), 3,92 - 3,86 (m, 1H), 3,86 - 3,67 (m, 1H), 3,56 - 3,48 (m, 1H), 3,30 - 3,24 (m, 1H), 3,24 - 3,18 (m, 1H), 3,18 - 2,96 (m, 4H), 2,94 (d, J=2,4 Hz, 3H), 2,92 (br s, 1H), 2,92 - 2,83 (m, 1H), 2,69 - 2,59 (m, 1H), 2,57 - 2,53 (m, 2H).
[02622] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (60,0 mg, 151 µmol, 1,00 eq) em acetato de etila (1,00 mL) foi adicionado ácido 2-fluoroprop-2-enoico (54,2 mg, 602 µmol, 4,00 eq), TEA (244 mg, 2,41 mmol, 335 uL, 16,0 eq) e T3P (575 mg, 903 ol, 537 uL, 50% de pureza, 6,00 eq) em porção, a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta por adição de água (1,00 mL) a 0°C e depois extraída com acetato de etila (10 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 × 25 5 u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 40% -70%, 10 min.). Composto 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (8,97 mg, 18,7 µmol, 12% de rendimento, 98,2% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 492.
[02623] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,64 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,74 - 7,64 (m, 2H), 7,47 - 7,39 (m, 1H), 7,39 - 7,32 (m, 1H), 7,29 (br d, J=1,2 Hz, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 1H), 5,53 - 5,33 (m, 1H), 5,26 (dd, J=3,6, 17,2 Hz, 1H), 4,87 (br s, 1H), 4,33 (br dd, J=14,8, 18,0 Hz, 1H), 4,19 (br d, J=13,6 Hz, 1H), 4,12 - 3,97 (m, 2H), 3,95 - 3,84 (m, 1H), 3,61 - 3,42 (m, 2H), 3,27 - 3,04 (m, 4H), 2,92 (d, J=2,4 Hz, 3H), 2,89 - 2,62 (m, 3H).
EXEMPLO 612
(S)-2-(4-(7-(5-cloroisoquinolin-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)- 1-(2-fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila T3P, EA, TEA 0-25 °C, 0,5 h Ca2CO3, tolueno, 11% 90°C, 5 hrs, 29% C
A
[02624] Etapa A: (2S)-4-[7-(5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-2-(cianometil)piperazina-1-carboxilato. A uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1- carboxilato (300 mg, 764 µmol, 1,00 eq) e 4-bromo-5-cloro-isoquinolina (371 mg, 1,53 mmol, 10,6 µL, 2,00 eq) em tolueno (15,0 mL) foi adicionado Pd 2(dba)3 (140 mg, 153 µmol, 0,20 eq), RuPhos (143 mg, 306 µmol, 0,40 eq), Cs2CO3 (747 mg, 2,29 mmol, 3,00 eq) em uma porção sob N2. A mistura foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes e agitada a 90°C por 5 horas. A mistura de reação foi diluída com água (10,0 mL) e extraída com acetato de etila (20,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20,0 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução de NaHCO3 saturada (5 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL x 2). A camada orgânica separada foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. Composto benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metil-5-oxo-pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (130 mg, 223 µmol, 29% de rendimento, 95% de pureza) foram obtidos como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 554.
[02625] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-4-[7- (5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2-
(cianomethyl)piperazina-1-carboxilato (30,0 mg, 54,2 µmol, 1,00 eq) em metanol (3,00 mL) foi adicionado NH3•MeOH (0,50 mL, 20% de pureza), Pd/C (35,0 mg, 10% pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo.O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 × 25 5 u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 22%-46%, 10 min.). Composto 2-[(2S)-4-[7-(5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-2-il]acetonitrila (8,51 mg, 20,1 µmol, 37% de rendimento, 99,4% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 420.
[02626] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,02 (s, 1H), 8,60 (d, J=4,4 Hz, 1H), 8,35 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J=1,2, 8,4 Hz, 1H), 7,75 (dd, J=1,2, 7,2 Hz, 1H), 7,50 (t, J=7,6 Hz, 1H), 4,54 (br d, J=17,2 Hz, 1H), 4,06 - 3,61 (m, 4H), 3,41 - 3,08 (m, 5H), 3,07 - 2,85 (m, 2H), 2,72 - 2,59 (m, 1H), 2,58 - 2,49 (m, 2H).
[02627] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma mistura de 2-[(2S)-4-[7-(5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (60,0 mg, 143 µmol, 1,00 eq) em acetato de etila (0,80 mL) foi adicionado ácido 2-fluoroprop-2-enoico (25,7 mg, 286 µmol, 2,00 eq), TEA (86,8 mg, 857 ol, 119 uL, 6,00 eq) e T3P (273 mg, 429 ol, 255 uL, 50% de pureza, 3,00 eq) em porção, a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C por 30 min. A mistura de reação foi extinta por adição de água (1,00 mL) a 0°C e depois extraída com acetato de etila (10,0 mL × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5,00 mL × 1), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 × 25 5 u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 22%-52%, 10 min.). Composto 2-[(2S)-4-[7-(5-cloro-4-isoquinolil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (7,88 mg, 16,0 µmol, 11% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 492.
[02628] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,04 (d, J=3,6 Hz, 1H), 8,65 (d, J=6,4 Hz, 1H), 8,35 (d, J=11,6 Hz, 1H), 7,96 - 7,88 (m, 1H), 7,76 (dd, J=1,2, 7,2 Hz, 1H), 7,56 - 7,47 (m, 1H), 5,55 - 5,33 (m, 1H), 5,26 (dd, J=3,2, 16,8 Hz, 1H), 5,03 - 4,70 (m, 1H), 4,55 (br dd, J=6,4, 18,0 Hz, 1H), 4,23 - 3,84 (m, 4H), 3,69 (br d, J=6,4 Hz, 1H), 3,50 (br d, J=13,6 Hz, 1H), 3,35 - 3,19 (m, 3H), 3,16 - 3,00 (m, 1H), 2,97 - 2,61 (m, 3H).
EXEMPLO 613 2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-(2- fluoroacrilil)piperazin-2-il)acetonitrila
Ca2CO3, tolueno, tolueno, 0°C, 1 tolueno, 0°C, 0,5 90°C, 8 hrs, 63% hr, 72% hr, 60%
A B C NH3 ·MeOH, 0 °C, 0,5 hr 25 °C, 0,5 hr 17% 99%
E
D T3P ·EA, TEA, DMF 0 °C, 0,5 hr 10%
F
[02629] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-(2- metilsulfanil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (5,0 g, 11,4 mmol, 1,0 eq), 4-bromo-5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol (7,05 g, 22,8 mmol, 2,0 eq), Pd2(dba)3 (2,09 g, 2,28 mmol, 0,2 eq), Ruphos (2,13 g, 4,56 mmol, 0,4 eq) e Cs2CO3 (9,29 g, 28,5 mmol, 2,5 eq) em tolueno (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes e depois a mistura foi agitada a 90°C por 8 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 2/1) e ainda purificado por flash de fase inversa [água (ácido fórmico a 0,1%)/acetonitrila)]. A mistura foi ajustada pH ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila (3 × 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secas sobre
Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2- metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (4,90 g, 7,20 mmol, 63% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 667.
[02630] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,98 (s, 1H), 7,50 - 7,31 (m, 5H), 7,22 (s, 1H), 5,66 (dd, J=2,4, 9,6 Hz, 1H), 5,27 - 5,13 (m, 2H), 4,69 (br s, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,13 - 3,97 (m, 3H), 3,89 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,81 - 3,68 (m, 1H), 3,51 (t, J=5,2 Hz, 2H), 3,30 (br s, 2H), 3,04 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 2,93 - 2,66 (m, 4H), 2,62 - 2,48 (m, 4H), 2,43 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,23 - 2,12 (m, 1H), 2,11 - 2,05 (m, 1H), 1,85 - 1,67 (m, 3H).
[02631] Etapa B: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra- hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6- dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfanil-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 749 µmol, 1,0 eq) em tolueno (10 mL) foi adicionado m-CPBA (152 mg, 749 µmol, 85% de pureza, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura foi diluída com água (10 mL) e o pH ajustado ~ 7 com solução aquosa saturada de NaHCO3. Em seguida, a mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. Benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2-metilsulfinil- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 539 µmol, 72% de rendimento, 92% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 683.
[02632] Etapa C: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil- pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-
hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-2- metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (900 mg, 1,32 mmol, 1,0 eq) em tolueno (20 mL) foram adicionados t-BuONa (379 mg, 3,95 mmol, 3,0 eq) e [(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metanol (398 mg, 2,64 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, acetato de etila/Metanol = 100/1 a 10/1). Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (630 mg, 793 µmol, 60% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 770.
[02633] Etapa D: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)- 2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil- 1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (400 mg, 519 umol, 1,0 eq) em metanol (2 mL) foi adicionado Pd/C seco (50 mg, 10% de pureza) e NH3/metanol (1 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (330 mg, 519 µmol, 99% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo e usado na próxima etapa diretamente sem purificação. LCMS [ESI, M+1]: 636.
[02634] Etapa E: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1- metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1-tetra-hidropiran-2-il-indazol-4-il)-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (50 mg, 78,6 µmol, 1,0 eq) em diclorometano (50 µL) foi adicionado TFA (359 mg, 3,15 mmol, 233 µL, 40 eq). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo e diluída com água (10 mL). A mistura foi ajustada pH ~ 8 com solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com diclorometano (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar o produto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 30% - 60%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (7,29 mg, 13,2 µmol, 17% de rendimento, 99,7 % de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 552.
[02635] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,95 (br s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 4,48 (dd, J=4,4, 10,8 Hz, 1H), 4,33 - 4,19 (m, 3H), 4,00 (br d, J=11,6 Hz, 1H), 3,83 (br d, J=11,6 Hz, 1H), 3,51 (t, J=5,2 Hz, 2H), 3,42 (dt, J=5,6, 11,7 Hz, 1H), 3,26 (br s, 1H), 3,17 - 2,95 (m, 4H), 2,94 - 2,85 (m, 1H), 2,84 - 2,62 (m, 3H), 2,61 - 2,49 (m, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,32 - 2,18 (m, 1H).
[02636] Etapa F: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazina-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)- 4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-
il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 181 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (24,5 mg, 272 µmol, 1,5 eq) em DMF (2 mL) foi adicionado T3P (461 mg, 725 µmol, 431 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 4,0 eq) e TEA (147 mg, 1,45 mmol, 202 uL, 8,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 38% - 68%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4- difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (11 mg, 17,5 µmol, 10% de rendimento, 99,2% de pureza, 100% ee) foi obtido como um sólido esbranquiçado. LCMS [ESI, M+1]: 624.
[02637] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,27 - 9,49 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 5,55 - 5,34 (m, 1H), 5,26 (dd, J=3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,86 (br s, 1H), 4,46 (dd, J=4,8, 10,8 Hz, 1H), 4,34 - 3,88 (m, 6H), 3,66 - 3,25 (m, 5H), 3,19 - 2,62 (m, 7H), 2,60 - 2,45 (m, 4H), 2,42 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,32 - 2,19 (m, 1H).
EXEMPLO 614
2-((S)-4-(2-(((S)-4,4-difluoro-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-7-(5,6-dimetil-1H- indazol-4-il)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)-1-((E)-4-fluorobut-2- enoil)piperazin-2-il)acetonitrila T3P ·EA, TEA, DMF 0 °C, 0,5 hr 10%
A
[02638] Etapa A: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2- il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)- 4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro-1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4- il)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 181 µmol, 1,0 eq) e ácido (E)-4-fluorobut-2-enoico (28,3 mg, 272 µmol, 1,5 eq) em DMF (2 mL) foi adicionado T3P (461 mg, 725 µmol, 431 uL, 50% de pureza em acetato de etila, 4,0 eq) e TEA (147 mg, 1,45 mmol, 202 uL, 8,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 * 25 * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 40% - 70%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S)-4,4-difluoro- 1-metil-pirrolidin-2-il]metoxi]-7-(5,6-dimetil-1H-indazol-4-il)-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-[(E)-4-fluorobut-2-enoil]piperazin-2-il]acetonitrila (12 mg, 18,3 µmol, 10% de rendimento, 97,3% de pureza, 95% ee) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 638.
[02639] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 10,06 (br s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,07 - 6,97 (m, 1H), 6,61 (br d, J=14,8 Hz, 1H), 5,20 – 5,07 (m, 3H), 4,48 (dd, J=4,8, 11,2 Hz, 1H), 4,31 - 4,27 (m, 3H), 4,20 - 3,80 (m, 3H), 3,55 (br t, J=5,2 Hz, 3H), 3,49 - 3,27 (m, 2H), 3,13 (br s, 1H), 3,05 - 2,63 (m, 6H), 2,62 - 2,46 (m, 4H), 2,43 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,33 - 2,21 (m, 1H).
EXEMPLO 615 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1,4,4- trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, - 10°C, 0,5 h, 53% 25 °C, 0,5 h
A B Duas etapas rendimento 11%
C
[02640] Etapa A: benzil(2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)- 1,4,4-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. A uma solução de [(2S)-1,4,4-trimetilpirrolidin-2- il]metanol (217 mg, 1,51 mmol, 68,2 µL, 3 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7- (8-metil-1-naftil)-2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 504 µmol, 1 eq) em tolueno (15 mL) foi adicionado t-BuONa (145 mg, 1,51 mmol, 3 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 50 ml), secas sobre Na 2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por flash de fase reversa [água (0,1% FA) / acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com solução saturada de Na2CO3 (10 mL) e extraídas com acetato de etila (3 × 50 mL). As camadas orgânicas separadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1- naftil)-2-[[(2S)-1,4,4-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (180 mg, 267 µmol, 53% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 675.
[02641] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,73 - 7,60 (m, 2H), 7,27 (s, 9H), 5,21 (s, 2H), 4,68 (br s, 1H), 4,47 - 4,34 (m, 1H), 4,30 - 4,15 (m, 2H), 4,13 - 4,04 (m, 1H), 3,95 - 3,69 (m, 2H), 3,56 - 3,34 (m, 2H), 3,28 - 2,48 (m, 13H), 2,47 - 2,33 (m, 3H), 2,22 - 2,11 (m, 1H), 1,88 (br dd, J=8,4, 12,6 Hz, 1H), 1,56 (ddd, J=4,6, 7,8, 12,6 Hz, 1H), 1,16 (d, J=4,0 Hz, 3H), 1,10 - 0,98 (m, 3H).
[02642] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1,4,4-trimetil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1,4,4-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (130 mg, 193 µmol, 1 eq) em MeOH (4 mL) foi adicionado NH3•MeOH (2 mL, 15% de pureza) e Pd/C (26 mg, 10% pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C durante 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. 2-[(2S)-4- [7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1,4,4-trimetil pirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 159 µmol, 85,9% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. LCMS [ESI, M+1]: 540.
[02643] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1,4,4-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2- [[(2S)-1,4,4-trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (90 mg, 143 µmol, 1 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (38,7 mg, 430 µmol, 3 eq) e Et3N (130 mg, 1,29 mmol, 179 uL, 9 eq) em acetato de etila (15 mL) foi adicionado T3P (365 mg, 573 µmol, 341 uL, 50% de pureza em acetato de etila, 4 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (3 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (1 × 10 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna
(SiO2, acetato de etila/metanol = 20/1 a 10/1). O resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v / v) - ACN]; B%: 62% - 89%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilização. 2- [(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)-2-[[(2S)-1,4,4- trimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin- 2-il]acetonitrila (12,7 mg, 20,6 µmol, 99,7% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 612.
[02644] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,79 - 7,56 (m, 2H), 7,51 - 7,31 (m, 2H), 7,27 - 7,08 (m, 2H), 5,65 - 5,08 (m, 2H), 4,85 (br s, 1H), 4,49 - 4,32 (m, 1H), 4,30 - 3,96 (m, 4H), 3,95 - 3,71 (m, 1H), 3,59 - 3,35 (m, 2H), 3,28 - 2,54 (m, 13H), 2,42 (br s, 3H), 2,16 (br d, J=8,8 Hz, 1H), 1,96 - 1,81 (m, 1H), 1,63 - 1,45 (m, 1H), 1,15 (br s, 3H), 1,06 (br s, 3H).
EXEMPLO 616 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2- il]acetonitrila t-BuONa, tolueno, 0 °C, 0,5 h 0°C, 0,5 h 25 °C, 0,5 h 19% 55% 17%
C A B
[02645] Etapa A: (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato. A uma solução de [(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2-il]metanol (326 mg, 2,52 mmol, 68,2 uL, 3 eq) e benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(8-metil-1-naftil)- 2-metilsulfinil-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (500 mg, 841 µmol, 1 eq) em tolueno (20 mL) foi adicionado t-BuONa (242 mg, 2,52 mmol, 3 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi extinta com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 × 20 ml), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (condição de 0,1% FA). O resíduo foi basificado com solução aquosa saturada de NaHCO3 até pH = 8 e depois extraído com acetato de etila (3 × 50 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. benzil (2S)-2- (cianometil)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (328 mg, 461 µmol, 55% de rendimento, 92,7% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 661.
[02646] Etapa B: 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7- (8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4- dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil)-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (100 mg, 151 µmol, 1 eq) em MeOH (4 mL) foi adicionado NH3•MeOH (2 mL, 20% de pureza) e Pd/C (20 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C durante 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC - prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30mm * 4um; fase móvel: [água (FA 0,225%)-ACN]; B%: 13% - 43%, 10 min.). Após isso, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v / v) - ACN]; B%: 55% - 85%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilização. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]- 7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (13,9 mg, 26,4 µmol, 17% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 526.
[02647] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,69 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,64 (dd, J=2,6, 7,6 Hz, 1H), 7,40 (dt, J=4,0, 7,8 Hz, 1H), 7,36 - 7,31 (m, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 2H), 4,43 (dt, J=4,8, 10,2 Hz, 1H), 4,28 - 4,11 (m, 2H), 4,07 - 3,70 (m, 3H), 3,48 (br d, J=11,8 Hz, 1H), 3,38 - 2,82 (m, 11H), 2,80 - 2,64 (m, 2H), 2,61 - 2,53 (m, 3H), 2,49 (t, J=8,6 Hz, 1H), 2,42 (d, J=2,4 Hz, 3H), 2,35 - 2,15 (m, 2H), 1,39 - 1,25 (m, 1H), 1,08 (d, J=6,8 Hz, 3H).
[02648] Etapa C: 2-[(S)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8- metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2- enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4- dimetilpirrolidin-2-il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil))-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (100 mg, 190 µmol, 1 eq), ácido 2-
fluoroprop-2-enoico (51,4 mg, 571 µmol, 3 eq) e Et3N (173 mg, 1,71 mmol, 238 uL, 9 eq) em DMF (10 mL) foi adicionado T3P (484 mg, 761 µmol, 452 uL, 50% de pureza, 4 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, o resíduo foi diluído com água (10 mL) e extraído com acetato de etila (2 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 20 mL), secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob vácuo. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna (SiO2, Diclorometano/Metanol = 10/1). Após isso, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Xtimate C18 150 * 25mm * 5um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 60% - 90%, 10 min.). O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para remover ACN e depois liofilização. 2-[(2S)-4-[2-[[(2S,4S)-1,4-dimetilpirrolidin-2- il]metoxi]-7-(8-metil-1-naftil)-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (22,2 mg, 37,1 µmol, 19% de rendimento, 99,8% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 598.
[02649] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,72 - 7,61 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 2H), 5,53 - 5,32 (m, 1H), 5,26 (dd, J=3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,86 (br s, 1H), 4,48 - 4,35 (m, 1H), 4,30 - 3,99 (m, 4H), 3,95 - 3,73 (m, 1H), 3,60 - 3,39 (m, 2H), 3,29 - 2,94 (m, 5H), 2,93 - 2,67 (m, 7H), 2,66 - 2,56 (m, 1H), 2,55 - 2,47 (m, 1H), 2,43 (d, J=4,6 Hz, 3H), 2,35 - 2,13 (m, 2H), 1,36 - 1,25 (m, 1H), 1,09 (dd, J=3,0, 6,8 Hz, 3H).
EXEMPLO 617
2-((S)-1-(2-fluoroacrilil)-4-(7-(3-metilisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila Dioxano, 110°c, 12 NH3·MeOH, 25 °C, 0,5 hr hrs, 51% 19%
A B 0 °C, 0,5 hr 13%
C
[02650] Etapa A: benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (300 mg, 593 µmol, 1,0 eq), 4-bromo-3-metilisoquinolina (198 mg, 890 µmol, 1,5 eq), Cs2CO3 (483 mg, 1,48 mmol, 2,5 eq), BINAP-Pd-G3 (118 mg, 119 umol, 0,2 eq) em dioxano (6 mL) foi desgaseificada e purgada com N 2 3 vezes. A mistura foi aquecida a 110°C por 12 horas. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO 2, acetato de etila / Metanol = 100/1 a 10:1). (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)-2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (200 mg, 303 µmol, 51% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 647.
[02651] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[7-(3-metil-4- isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazina-1-carboxilato (50 mg, 77,3 µmol, 1,0 eq) em metanol (2 mL) foi adicionado Pd/C seco (10 mg, 10% de pureza) e NH 3/MeOH (1 mL, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C durante 0,5 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 30% - 60%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin- 2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (7,81 mg, 14,9 µmol, 19% de rendimento, 98,3% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 513.
[02652] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,07 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,65 (dt, J=1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,58 - 7,47 (m, 1H), 4,41 (br dd, J=4,8, 10,4 Hz, 1H), 4,3 (s, 2H), 4,16 (dd, J=6,8, 10,8 Hz, 1H), 4,10 - 3,93 (m, 1H), 3,91 - 3,77 (m, 1H), 3,57 - 3,37 (m, 2H), 3,36 - 3,21 (m, 1H), 3,18 - 2,85 (m, 6H), 2,75 - 2,61 (m, 5H), 2,56 (br d, J=6,8 Hz, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,12 - 1,98 (m, 1H), 1,94 - 1,80 (m, 3H).
[02653] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluorprop-2-enoil)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazin-2-il]acetonitrila (80 mg, 156 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2- enoico (28,1 mg, 312 µmol, 2,0 eq) em DMF (2 mL) foram adicionados T3P (297 mg, 468 µmol, 278 µL, pureza de 50% em acetato de etila, 3,0 eq) e TEA (126 mg, 1,25 mmol, 173 µL, 8,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150 * 25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35% - 65%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(3-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (12 mg, 19,9 µmol, 13% de rendimento, 97,4% de pureza, 100% ee) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 585.
[02654] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 9,08 (s, 1H), 8,26 - 8,04 (m, 1H), 7,97 (br d, J=7,6 Hz, 1H), 7,73 - 7,60 (m, 1H), 7,58 - 7,49 (m, 1H), 5,42 (d, J=47,6 Hz, 1H), 5,27 (dd, J=3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,85 (br s, 1H), 4,45 - 3,92 (m, 7H), 3,83 - 3,25 (m, 4H), 3,22 - 2,59 (m, 10H), 2,49 (s, 3H), 2,36 - 2,24 (m, 1H), 2,13 - 1,99 (m, 1H), 1,92 - 1,76 (m, 3H).
EXEMPLO 618
(S)-benzil-2-(cianometil)-4-(7-(7-fluoroisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirr olidin-2- il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato Ca2CO3, tolueno, 90°C, 16 hrs, 27%
A 0 °C, 0,5 h 7,6%
C
[02655] Etapa A: (S)-benzil-2-(cianometil)-4-(7-(7-fluoroisoquinolin-4-il)-2- (((S)-1-metilpirr olidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2- [[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4- il]piperazina-1-carboxilato (300 mg, 0,59 mmol, 1,0 eq) em tolueno (10,0 mL) foi adicionado 4-bromo-7-fluoro-isoquinolina (268 mg, 1,19 mmol, 2,0 eq), RuPhos (111 mg, 237 µmol, 0,40 eq), Cs2CO3 (483 mg, 1,48 mmol, 2,5 eq) e Pd2(dba)3 (109 mg, 118 µmol, 0,20 eq) a 25°C, a mistura foi agitada a 90°C por 16 horas. A mistura de reação foi diluída com água (5,0 mL) e extraída com acetato de etila
(3 × 5,0 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 × 5,0 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de petróleo/Acetato de etila = 1/1 para Éter de petróleo/Acetato de etila/EtOH (2% de NH3H2O) = 4/3/1). Depois o produto bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (condição de 0,1% FA). As frações desejadas foram coletadas e concentradas sob vácuo para dar (S)-benzil-2- (cianometil)-4-(7-(7-fluoroisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirr olidina)-2-il)metoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (105 mg, 160 µmol, 27% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [M+1]: 651.
[02656] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio -d) δ = 2,04 - 2,08 (m, 4 H), 2,69 (d, J=5,64 Hz, 1 H), 2,73 (d, J=5,52 Hz, 1 H), 2,81 - 2,85 (m, 3 H), 2,87 - 3,02 (m, 3 H), 3,09 - 3,19 (m, 1 H), 3,32 - 3,45 (m, 3 H), 3,45 - 3,55 (m, 1 H), 3,57 - 3,68 (m, 1 H), 3,99 (br d, J=12,52 Hz, 1 H), 4,09 - 4,17 (m, 1 H), 4,28 - 4,34 (m, 1 H), 4,31 (m, 1 H), 4,46 (dd, J=11,84, 4,31 Hz, 1 H), 4,63 - 4,74 (m, 1 H), 4,80 (br dd, J=11,32, 6,82 Hz, 1 H), 5,20 - 5,23 (m, 2H), 5,30 - 5,32 (m, 2 H), 7,35 - 7,42 (m, 5 H), 7,47 - 7,53 (m, 1 H), 7,60 (dd, J=8,68, 2,56 Hz, 1 H), 8,16 (dd, J=9,24, 5,25 Hz, 1 H), 8,22 - 8,25 (m, 1 H), 8,95 - 9,00 (m, 1 H).
[02657] Etapa B: 2-((S)-4-(7-(7-fluoroisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1- metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin- 2-il)acetonitrila. A uma solução de (S)-benzil 2-(cianometil)-4-(7-(7- fluoroisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carboxilato (30,0 mg, 46,1 µmol, 1,0 eq) em MeOH (1,0 mL) foi adicionado NH3/MeOH (46,1 µmol, 1,5 mL, 15% de pureza, 1,0 eq) e Pd/C (20,0 mg, 46,1 µmol, 10% de pureza, 1,0 eq) sob N 2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 (93,1 ug, 46,1 umol, 1,0 eq) várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 25°C por 1 hora. A mistura de reação foi filtrada através de um celite e lavada com MeOH (20 mL).
O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida a 45°C para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (condição básica) (coluna: Xtimate C18 150*25 mm*5 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v) - ACN]; B%: 43%-73%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-((S)-4-(7- (7-fluoroisoquinolin-4-il)-2-(((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il)piperazin-2-il)acetonitrila (7 mg, 13,3 µmol, 28,8% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. LCMS [M+1]:
517.
[02658] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 1,75 - 1,90 (m, 3 H), 1,99 - 2,13 (m, 1 H), 2,24 - 2,34 (m, 1 H), 2,45 - 2,51 (m, 3 H), 2,53 - 2,58 (m, 2 H), 2,64 - 2,74 (m, 1 H), 2,80 - 2,88 (m, 2 H), 2,89 - 2,96 (m, 1 H), 2,97 - 3,06 (m, 1 H), 3,07 - 3,18 (m, 3 H), 3,22 - 3,33 (m, 1 H), 3,38 - 3,48 (m, 2 H), 3,82 - 3,89 (m, 1 H), 4,03 (br d, J=12,36 Hz, 1 H), 4,18 (dd, J=10,56, 6,69 Hz, 1 H), 4,30 (s, 2 H), 4,40 (dd, J = 10,64, 4,75 Hz, 1 H), 7,49 (ddd, J=9,16, 8,35, 2,63 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J=8,76, 2,50 Hz, 1 H), 8,17 (dd, J= 9,24, 5,38 Hz, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 8,96 (s, 1 H).
[02659] Etapa C: 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-4-isoquinolyl)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-1-(2- fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila. A uma solução de 2-[(2S)-4-[7-(7- fluoro-4-isoquinolyl)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (90,7 mg, 175 µmol, 1,0 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (31,6 mg, 351 µmol, 2,0 eq) em DMF (2 mL) foi adicionado T3P (335 mg, 526 µmol, 313 µL, 50% de pureza em acetato de etila, 3,0 eq) e TEA (142 mg, 1,40 mmol, 195 µL, 8,0 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (20 mL) e lavada com água (3 × 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, acetato de etila/metanol = 100/1 a 10/1) e purificação adicional por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 mm*5 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 32% - 59%, 10 min.). A fração desejada foi coletada e liofilizada. 2-[(2S)-4-[7-(7-fluoro-4- isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]-1-(2-fluoroprop-2-enoil)piperazin-2-il]acetonitrila (8 mg, 13,4 µmol, 7,6% de rendimento, 98,3% de pureza, 100% ee) foi obtido como um sólido branco. LCMS [M+1]: 589.
[02660] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 8,97 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,16 (dd, J=5,2, 9,2 Hz, 1H), 7,60 (dd, J=2,4, 8,8 Hz, 1H), 7,54 - 7,40 (m, 1H), 5,55 - 5,33 (m, 1H), 5,27 (dd, J=3,6, 16,8 Hz, 1H), 4,87 (br s, 1H), 4,44 - 3,94 (m, 7H), 3,72 - 3,28 (m, 4H), 3,22 - 3,06 (m, 2H), 3,04 - 2,93 (m, 2H), 2,93 - 2,74 (m, 2H), 2,72 - 2,66 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,36-2,24 (m, 1H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 1,92 - 1,76 (m, 3H).
EXEMPLO 619 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(5-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila
Ca2CO3, tolueno, 95°C, 10 hrs, 36%
A
[02661] Etapa A: benzil (2S)-4-[7-(1-cloro-5- metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato. Benzil (2S)-2-(cianometil)-4-[2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazina- 1-carboxilato (300 mg, 593 µmol, 1,0 eq), 4-bromo-1-cloro-5-metilisoquinolina (198 mg, 771 µmol, 1,3 eq), Pd2(dba)3 (109 mg, 119 µmol, 0,2 eq) e Cs2CO3 (483 mg, 1,48 mmol, 2,5 eq), XantPhos (137 mg, 237 µmol, 0,4 eq) em tolueno (10 mL) foi desgaseificado e, em seguida, aquecido até 95°C por 10 horas sob N 2. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila 2/1 a 0/1) seguido de flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações desejadas foram coletadas e neutralizadas com NaHCO3 sólido, concentradas sob vácuo para remover MeCN e extraídas com acetato de etila (2 × 15 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo para dar benzil (2S)-4-[7-(1-cloro-5-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (150 mg, 209 µmol, 35% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 681.
[02662] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 8,27 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,08 - 7,99 (m, 1H), 7,60 - 7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,36 (m, 5H), 5,25 - 5,17 (m, 2H), 4,74 - 4,60 (m, 1H), 4,41 - 4,32 (m, 1H), 4,28 - 4,14 (m, 2H), 4,08 - 3,88 (m, 2H), 3,83 (br d, J = 17,6 Hz, 1H), 3,61 - 3,51 (m, 1H), 3,50 - 3,36 (m, 1H), 3,31 - 2,94 (m, 6H), 2,91 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,81 - 2,59 (m, 4H), 2,46 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,33 - 2,21 (m, 1H), 2,06 - 1,97 (m, 1H), 1,92 - 1,72 (m, 3H).
[02663] Etapa B: 2-[(2S)-4-[7-(5-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila. A uma solução de (2S)-4-[7-(1-cloro-5-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-2- (cianometil)piperazina-1-carboxilato (130 mg, 191 µmol, 1 eq) em MeOH (3 mL) foi adicionado NH3•MeOH (2 mL, 20% de pureza), Pd/C (65 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H 2 várias vezes. A mistura foi agitada a 25°C por 2 horas. Mediante conclusão, o catalisador foi removido por filtração através de um tampão de celite. O solvente foi removido sob pressão reduzida para dar 80 mg de produto bruto. Tomando 20 mg do produto bruto foram purificados por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 28%-58%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[(2S)-4-[7-(5-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8- di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (10,8 mg, 21,0 µmol, 44% de rendimento, 99,9% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 513.
[02664] Etapa C: 2-[(2S)-1-(2-fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(5-metil-4- isoquinolil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidina-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4- d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila.A uma solução de ácido 2-f luoroprop 2- enoico (24,6 mg, 273 umol, 2,0 eq) e DIEA (70,6 mg, 546 umol, 95,1 uL, 4,0 eq) em DCM (1,4 ml) foi adicionado HATU (77,9 mg, 205 umol, 1,5 eq) a 0°C. Após agitação a 0°C por 20 minutos, 2-[(2S)-4-[7-(5-metil-4-isoquinolil)-2-[[((2S)-1-
metilpirrolidin-2-il]]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2- il]acetonitrila (70 mg, 137 umol, 1,0 eq) foi adicionado à mistura. A mistura foi agitada a 25°C por 40 minutos. Mediante conclusão, a mistura foi diluída com água (2 mL) e extraída com diclorometano (6 × 5 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (Al2O3, éter de petróleo/acetato de etila 1/1 para acetato de etila/metanol 10/1) seguido por HPLC-prep (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 35%-65%, 10 min.). As frações desejadas foram coletadas e liofilizadas para dar 2-[(2S)-1-(2- fluoroprop-2-enoil)-4-[7-(5-metil-4-isoquinolil)-2-[[(2S)-1-etilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]piperazin-2-il]acetonitrila (20,6 mg, 34,3 µmol, 25% de rendimento, 97,3% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 585.
[02665] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 9,03 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,83 (br d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,55 - 7,44 (m, 2H), 5,54 - 5,32 (m, 1H), 5,31 - 5,18 (m, 1H), 5,09 - 4,48 (m, 1H), 4,43 - 4,34 (m, 1H), 4,32 - 4,07 (m, 4H), 4,06 - 3,81 (m, 2H), 3,64 - 3,42 (m, 2H), 3,35 - 3,26 (m, 1H), 3,25 - 2,96 (m, 4H), 2,92 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,90 - 2,73 (m, 2H), 2,72 - 2,61 (m, 2H), 2,51 - 2,42 (m, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,13 - 1,99 (m, 1H), 1,92 - 1,73 (m, 3H).
EXEMPLO 620
1-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-2-fluoro-prop-2-en-1-ona
[02666] Etapa A: terc-butil 4-benzil-6-fluoro-1,4- diazepano-1-carboxilato. terc-butil 4-benzil-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato. A uma solução de terc- butil (3R)-4-benzil-3-(hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (1,5 g, 4,90 mmol, 1 eq) em DCM (40 mL) foi adicionado DAST (3,95 g, 24,48 mmol, 3,23 mL, 5 eq) gota a gota a 0° e a mistura foi agitada a 20°C por 5 horas. À mistura foi adicionado NaHCO3 (30 mL) e extraído com acetato de etila (30 mL×2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada, concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel (PE: EA=20~5:1) para dar terc- butil 4-benzil-6-fluoro-1,4 - diazepano-1-carboxilato (980 mg, 3,18 mmol, 64,91% de rendimento) como óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 309.
[02667] Etapa B: terc-butil 6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-benzil-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (900,00 mg,
2,92 mmol, 1 eq) e Pd/C (200 mg, 2,92 mmol, 10% de pureza, 1 eq) e Pd(OH)2 (179,92 mg, 1,28 mmol, 4.39e-1 eq) em MeOH (20 mL) e a mistura foi agitada a 40°C por 12 h sob H2 (50 psi). A mistura foi filtrada, concentrada para dar terc- butil 6-fluoro-1, 4-diazepano-1-carboxilato (630 mg, 2,89 mmol, 98,90% de rendimento) como óleo incolor.
[02668] Etapa C: [7-(8-cloro-1naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] trifluorometanossulfonato. A uma solução de 7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1–metilpirrolidin -2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol (700 mg, 1,65 mmol, 1 eq) e TEA (500,09 mg, 4,94 mmol, 687,88 µL, 3 eq), peneiras moleculares 4A (500 mg) em DCM (7 mL) foi adicionado Tf2O (697,18 mg, 2,47 mmol, 407,71 µL, 1,5 eq) a -40°C e agitada a 0°C por 30 min. À mistura foi adicionada água (2 mL) e extraída com DCM (5 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada, concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel (PE: EA = 10~1:1) para dar [7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] trifluorometanossulfonato (470 mg, 843,83 µmol, 51,22% de rendimento) como óleo vermelho. LCMS [ESI, M+1]: 557.
[02669] Etapa D: terc-butil 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepane-1- carboxilato. À solução de [7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il], trifluorometanossulfonato (440 mg, 789,97 µmol, 1 eq) e terc-butil-6–fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (258,64 mg, 1,18 mmol, 1,5 eq) em DMAC (5 mL) foi adicionado DIEA (306,29 mg, 2,37 mmol, 412,79 µL, 3 eq) e a mistura foi agitada a 25°C por 30 min. A mistura foi purificada por coluna de cromatografia de coluna de sílica gel reversa (0,001 FA) para dar terc-butil 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1- carboxilato (260 mg, 415,88 µmol, 52,65% de rendimento) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 625.
[02670] Etapa E: 7-(8-cloro-1-naftil)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[[(2S)- 1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de terc-butil 4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (240,00 mg, 383,89 µmol, 1 eq) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (12,32 g, 108,05 mmol, 8,00 mL, 281,45 eq) e a mistura foi agitada a 20°C por 30 min. A mistura foi concentrada e adicionado DCM (10 mL), lavada com Na 2CO3 sat. (5 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada, concentrada para dar 7-(8-cloro-1-naftil)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5Hpirido[3,4-d]pirimidina (200 mg, bruto) como sólido amarelo. Parte deste material (160 mg, 304,73 µmol) foi utilizada diretamente na próxima etapa. 40 mg de produto bruto foram purificados por HPLC-prep (purificado por HPLC-prep (coluna: Shim-pack C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 4%-34%, 10 min.); em seguida, o resíduo foi preparado por HPLC (coluna: Xtimate C18 150*25mm*5 um; fase móvel: [água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v)-ACN]; B%: 60%-90%, 10min.) para dar 7-(8- cloro-1-naftil)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina (9 mg, 16,99 µmol). LCMS [ESI, M+1]:
523.
[02671] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ =7,76 (d, J=8,07 Hz, 1 H) 7,61 (t, J=8,38 Hz, 1 H) 7,52 (br d, J=7,46 Hz, 1 H) 7,44 (dt, J=15,86, 7,90 Hz, 1 H) 7,34 (t, J=7,76 Hz, 1 H) 7,25-7,18 (dd, J=7,46 Hz, 1 H) 4,80 - 5,24 (m, 1 H) 4,31 - 4,46 (m, 2 H) 4,08 - 4,30 (m, 2 H) 3,71 - 4,04 (m, 3 H) 3,50 - 3,68 (m, 2 H) 2,81 - 3,37 (m, 7 H) 2,46 - 2,73 (m, 5 H) 2,25 - 2,35 (m, 1 H) 2,01 - 2,14 (m, 1 H) 1,82 - 1,91 (m, 3 H).
[02672] Etapa F: 1-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-dihidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-2- fluoro-prop-2-en-1-ona. A uma solução de 7-(8-cloro-1-naftil)-4-(6-fluoro-1,4- diazepan-1-il)-2-[[(2S)-1–metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-
d]pirimidina (150,00 mg, 285,68 µmol, 1 eq) e ácido 2-fluoroprop-2-enoico (51,45 mg, 571,36 µmol, 2 eq) em EA (2 mL) foi adicionado T3P (50 M, 17,14 µL, 3 eq) e TEA (231,27 mg, 2,29 mmol, 318,11 µL, 8 eq) a -40°C, e a mistura foi agitada a -40°C por 30 min. A mistura foi diluída com água (2 mL) e extraída com acetato de etila (2 mL×2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada, concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Shim-pack C18 150*25*10um; fase móvel: [água (0,225% FA)-ACN]; B%: 18%-48%, 10min.) para dar 1-[4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di- hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-2-fluoro-prop-2- en-1-ona (90 mg, 140,78 µmol, 49,28% de rendimento, 93,4% de pureza) como sólido amarelo. LCMS [ESI, M+1]: 597.
[02673] 1H NMR (400MHz, clorofórmio-d) δ = 7,76 (d, J=8,19 Hz, 1 H) 7,58 - 7,66 (m, 1 H) 7,50 - 7,56 (m, 1 H) 7,38 - 7,50 (m, 1 H) 7,31 - 7,37 (m, 1 H) 7,24 - 7,16 (m, 1 H) 4,90 - 5,55 (m, 3 H) 4,32 - 4,48 (m, 2 H) 3,48 - 4,27 (m, 11 H) 3,21 - 3,43 (m, 1 H) 2,80 - 3,16 (m, 2 H) 2,44 - 2,73 (m, 5 H) 2,25 - 2,36 (m, 1 H) 2,00 - 2,14 (m, 1 H) 1,77 - 1,91 (m, 3 H).
EXEMPLO 621 1-[(3R)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazin-1-il]-2-fluoro-prop-2-en- 1-ona
Duas etapas 15% Refluxo, 12 hrs, 64% 2,5 hrs
C
A -40 °C, 0,5 hr 69%
E
[02674] Etapa A: terc-butil (3R)-4-benzil-3-(hidroximetil)piperazina-1- carboxilato. Uma mistura de reação de terc-butil (3R)-3-(hidroximetil)piperazina- 1-carboxilato (10 g, 46,2 mmol, 1 eq), BnBr (8,70 g, 50,9 mmol, 6,04 mL, 1,1 eq) e TEA (7,02 g, 69,36 mmol, 9,65 mL, 1,5 eq) em MeCN (100 mL) foi aquecida a 80°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água (30 mL) e acetato de etila (50 mL) .A mistura foi extraída com acetato de etila (3 × 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (éter de petróleo: acetato de etila=5:1 a 3:1). terc-butil (3R)-4-benzil-3- (hidroximetil)piperazina-1-carboxilato (9 g, 29,4 mmol, 64% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 307.
[02675] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,28 - 7,20 (m, 5H), 3,95 (br d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,79 (dd, J = 5,6, 11,6 Hz, 1H), 3,61 (br dd, J = 3,2, 13,6 Hz, 1H), 3,52 (br dd, J = 4,0, 11,2 Hz, 2H), 3,35 (br d, J = 13,3 Hz, 2H), 3,09 (br s,
1H), 2,77 - 2,65 (m, 1H), 2,51 (br s, 1H), 2,20 (ddd, J = 3,2, 8,4, 12,0 Hz, 1H), 1,38 (s, 9H).
[02676] Etapa B: terc-butil (3R)-4-benzil-3-formil-piperazina-1-carboxilato. DMSO (13,8 g, 176 mmol, 13,8 mL, 6,0 eq) foi adicionado a uma solução de (COCl)2 a -65°C (11,2 g, 88,1 mmol, 7,71 mL, 3,0 eq) em diclorometano (90 mL). Após 10 min., uma solução de terc-butil (3R)-4-benzil-3-(hidroximetil)piperazina- 1-carboxilato (9 g, 29,4 mmol, 1 eq) em diclorometano (40 mL) foi introduzida lentamente ao longo de 15 minutos. Após agitação a -65°C por 1 hora, TEA (29,7 g, 294 mmol, 40,9 mL, 10,0 eq) foi adicionado. A mistura foi aquecida até 28°C ao longo de 30 min. e depois agitada por outros 30 min. a essa temperatura. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta com água (5 mL) e separada. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada sob vácuo. terc-butil (3R)-4-benzil-3-formil-piperazina-1-carboxilato (8,9 g, 29 mmol) foi obtido como um óleo amarelo que foi utilizado para a próxima etapa sem purificação adicional.
[02677] Etapa C: terc-butil (3R)-4-benzil-3-(difluorometil)piperazina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil (3R)-4-benzil-3-formil-piperazina-1- carboxilato (8,9 g, 29,2 mmol, 1,0 eq) em diclorometano (180 mL) foi adicionado DAST (9,43 g, 58,5 mmol) , 7,73 mL, 2 eq) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 2 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por NaHCO3 saturado (150 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 mL) e concentradas sob vácuo. O resíduo (Éter de petróleo: Acetato de etila = 5:1) foi purificado por cromatografia de sílica gel (Éter de petróleo: Acetato de etila = 1:0 a 10:1). terc-butil (3R)-4-benzil-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (1,5 g, 4,48 mmol, duas etapas 15% de rendimento, 97,5% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. LCMS [ESI, M+1]:327.
[02678] Etapa D: terc-butil (3R)-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (3R)-4-benzil-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato
(1,5 g, 4,60 mmol, 1,0 eq) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd/C (150 mg, 10% de pureza), Pd(OH)2/C (150 mg, 20% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (50 psi) a 40°C por 12 horas. Mediante conclusão, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. terc-butil (3R)-3-(difluorometil)piperazina-1- carboxilato (1,0 g, 4,23 mmol, 92% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo que foi utilizado na próxima etapa sem purificação adicional.
[02679] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 5,91 - 5,43 (m, 1H), 4,17 - 3,78 (m, 2H), 3,13 - 2,66 (m, 5H), 1,48 (s, 9H).
[02680] Etapa E: [7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]- 6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] trifluorometanossulfonato. A uma solução de 7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro- 5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-ol (1,0 g, 2,35 mmol, 1 eq), peneira molecular 4A (1,0 g) e TEA (953 mg, 9,41 mmol, 1,31 mL, 4,0 eq) em diclorometano (20 mL) foi adicionado Tf2O (996 mg, 3,53 mmol, 582 uL, 1,5 eq) a -40°C e agitada por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por água (15 mL). A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite. O filtrado separado e as camadas aquosas foram extraídas com diclorometano (30 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas sobre Na 2SO4 e concentradas sob vácuo. A mistura foi purificada por cromatografia de sílica gel (SiO2, Éter de petróleo: Acetato de etila = 5:1 a 0:1) para dar [7-(8-cloro-1-naftil)- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il] trifluorometanossulfonato (1,0 g, 1,63 mmol, 69% de rendimento, 91% de pureza) como um óleo marrom. LCMS [ESI, M+1]:557.
[02681] Etapa F: terc-butil (3R)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1- metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3- (difluorometil)piperazina-1-carboxilato. Uma mistura de reação de [7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-
4-il] trifluorometanossulfonato (1,0 g, 1,80 mmol, 1,0 eq) e terc-butil (3R)-3- (difluorometil)piperazina-1-carboxilato (780 mg, 3,30 mmol, 1,84 eq) foi agitado a 90°C por 5 horas. Mediante conclusão, a mistura de reação foi dissolvida em MeCN (5 mL). A mistura de reação foi purificada por flash de fase reversa [água (0,1% FA)/acetonitrila]. As frações foram basificadas por NaHCO3 sólido até pH > 7 e concentradas sob vácuo. A camada aquosa foi extraída com Acetato de etila (3 x 20 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (diclorometano: MeOH=7:1) para dar terc-butil (3R)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (80 mg, 122 µmol, 7% de rendimento, 98% de pureza) como um óleo marrom. LCMS [ESI, M+1]: 643.
[02682] Etapa G: 7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(2R)-2-(difluorometil)piperazin-1-il]- 2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidina. A uma solução de terc-butil (3R)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1- carboxilato (20 mg, 31,1 µmol, 1 eq) em diclorometano (0,05 mL) foi adicionado TFA (70,9 mg, 622 µmol, 46,0 µL, 20 eq). A mistura de reação foi agitada a 25°C por 1 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por Na 2CO3 saturado (4 mL) e extraída com diclorometano: MeOH (10: 1, 3 x 8 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 43%-73%, 10 min.). As frações foram concentradas e liofilizadas. 7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(2R)-2- (difluorometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (4,22 mg, 7,77 µmol, 25% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]:543.
[02683] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,81 - 7,74 (m, 1H), 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,56 - 7,52 (m, 1H), 7,50 - 7,40 (m, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,28 - 7,16 (m, 1H), 6,69 - 6,09 (m, 1H), 4,68 - 4,54 (m, 1H), 4,51 - 4,34 (m, 2H),
4,30 - 4,11 (m, 1H), 4,07 - 3,68 (m, 2H), 3,63 - 3,46 (m, 2H), 3,44 - 3,31 (m, 2H), 3,30 - 3,21 (m, 1H), 3,20 - 2,97 (m, 4H), 2,92- 2,83 (m, 1H), 2,78 - 2,67 (m, 1H), 2,58 - 2,49 (m, 3H), 2,38 - 2,26 (m, 1H), 2,15 - 2,02 (m, 1H), 1,94 - 1,73 (m, 3H).
[02684] Etapa H: 1-[(3R)-4-[7-(8-cloro-1-naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2- il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazin-1- il]-2-fluoro-prop-2-en-1-ona. A uma solução de 7-(8-cloro-1-naftil)-4-[(2R)-2- (difluorometil)piperazin-1-il]-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H- pirido[3,4-d]pirimidina (45 mg, 82,9 µmol, 1,0 eq), ácido 2-fluoroprop-2-enoico (22,4 mg, 249 µmol, 3,0 eq) em acetato de etila (1 mL) foi adicionada peneira molecular 4A (100 mg). Após agitação a 25°C por 0,5 hora, TEA (126 mg, 1,24 mmol, 173 µL, 15 eq) e T3P (211 mg, 331 µmol, 197 µL, 50% de pureza, 4 eq) foram adicionados a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 hora. Mediante conclusão, a mistura de reação foi extinta por água (1 mL) e extraída com acetato de etila (3 × 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna (Al 2O3, Éter de petróleo: Acetato de etila = 3:1 a 0:1), seguido por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v)-ACN]; B%: 55%-85%, 10min.) para dar 1-[(3R)-4-[7-(8-cloro-1- naftil)-2-[[(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxi]-6,8-di-hidro-5H-pirido[3,4-d]pirimidin- 4-il]-3-(difluorometil)piperazin-1-il]-2-fluoro-prop-2-en-1-ona (5,98 mg, 9,72 µmol, 11% de rendimento, 99,4% de pureza) como um sólido branco. LCMS [ESI, M+1]: 615.
[02685] 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ = 7,81 - 7,75 (m, 1H), 7,67 - 7,61 (m, 1H), 7,55 (td, J = 1,2, 7,6 Hz, 1H), 7,51 - 7,41 (m, 1H), 7,36 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,28 - 7,17 (m, 1H), 6,48 - 5,83 (m, 1H), 5,47 - 5,31 (m, 1H), 5,27 - 5,19 (m, 1H), 4,88 - 4,65 (m, 1H), 4,59 - 4,31 (m, 4H), 4,21 - 4,10 (m, 1H), 4,04 - 3,76 (m, 2H), 3,69 - 3,44 (m, 3H), 3,33 - 2,92 (m, 4H), 2,75 - 2,64 (m, 1H), 2,61 - 2,52 (m, 1H), 2,49-2,48 (m, 3H), 2,36 - 2,25 (m, 1H), 2,13 - 2,02 (m, 1H), 1,88 - 1,72 (m, 3H).
[02686] EXEMPLOS 622- 678 listados na Tabela 1 são preparados usando intermediários disponíveis comercialmente e/ou aqueles intermediários aqui divulgados seguindo os métodos delineados nos esquemas gerais de reações e os ensinamentos dos Exemplos exemplificados.
Tabela 1 EXEMPLOS 622 – 678 Exempl Estrutura Exempl Estrutura o Nº o Nº 622 650 623 651 624 652
EXEMPLO A Ensaio de Modificação KRas G12C
[02687] Este Exemplo ilustra que compostos exemplares da presente invenção ligam covalentemente a KRas G12C usando um ensaio LCMS para detectar um aduto covalente do composto exemplar e KRAS G12C.
[02688] A concentração de proteína de K-Ras (1-169) carregada de GDP G12C, C51S,C80L,C118S e K-Ras (1-169) carregada com GTP G12C,C51S,C80L,C118S,Q61H foi ajustada para 2 µM em Tampão de Ensaio K-Ras (25 mM HEPES, 150 mM NaCl, 5 mM MgCl2 e 10 mM de Octil β- glicopiranosídeo a pH 7,5). Uma alíquota de 10 µL de cada solução de proteína foi, então, transferida para uma placa de microtitulação de 384 poços. Os estoques de compostos iniciais foram gerados a cinquenta vezes a concentração de ensaio final desejada em DMSO.
[02689] Compostos exemplares de Fórmula (I) foram diluídos 25 vezes em Tampão de Ensaio K-Ras até um final de duas vezes sua concentração final. Uma alíquota de 10 µL de cada solução de composto diluída foi, então, adicionada a cada uma das soluções de proteína na placa de microtitulação para iniciar a reação. As concentrações de compostos finais típicas foram de 3,0, 5,0 e 25,0 µM. Em cada ponto no tempo, as reações foram extintas com 20 µL de uma solução de ácido acético 25 mM. Os pontos finais de ensaio normais foram de 15, 180 e 1.440 minutos. Uma vez que todas as reações foram extintas, as placas foram seladas a quente e as amostras foram injetadas em um sistema de LC/MS para aquisição de dados.
[02690] A coleta de dados ocorreu em um Espectrômetro de Massa Agilent 6520 Q-TOF Accurate. As amostras foram injetadas em sua fase líquida em uma coluna de fase reversa C-3 para remover tampão de ensaio e preparar as amostras para o espectrômetro de massa. As proteínas foram eluídas da coluna usando um gradiente de acetonitrila e alimentadas diretamente no analisador de massa. A análise inicial dos dados brutos ocorreu no software Agilent MassHunter imediatamente após a aquisição dos dados.
[02691] A análise de dados brutos da proteína intacta foi exclusivamente uma deconvolução dos estados de carga múltipla de cada proteína em solução usando uma deconvolução de entropia máxima fornecida em Mass Hunter. Para minimizar a complexidade, apenas os dados através de faixas de massa limitadas foram considerados para análise, com um mínimo de intervalos de etapa de massa de um Dalton. As alturas de todas as massas identificadas durante a análise de dados brutos foram exportadas para serem ainda analisadas em software de análise de dados Spotfire®.
[02692] A análise de dados final foi um processo de múltiplas etapas no pacote de software de análise de dados Spotfire®. Resumidamente, cada massa de proteína foi calculada como uma porcentagem do sinal total dessa amostra, essa porcentagem foi, então, normalizada para a porcentagem de sinal da proteína na ausência de compostos reativos. Esses sinais normalizados foram relatados como porcentagem normalizada de controle (POC). Um valor de POC aumentado indica um composto que exibe um grau mais alto de modificação em uma determinada condição em comparação com outros compostos nas mesmas condições. Os resultados para compostos exemplares de Fórmula (I) e Fórmula (II) testados na concentração de 5 µM por 3 horas são mostrados na Tabela 2. Legenda: “A” ≤ 25% POC; “B”> 25% POC - ≤ 50% de POC; “C” > 50% POC e ND = não determinado.
Tabela 2 Inibição da Atividade de KRas G12C por Compostos Exemplares Exemplo Nº POC Exemplo Nº POC 1 B 291 C 2 A 292 A 3 A 293 C 4 A 294 C 5 A 295 A 6 B 296 C 7 A 297 C 8 B 298 C 9 C 299 C 10 C 300 C 11 C 301 C 12 C 302 C 13 C 303 C 14 C 304 C 15 C 305 C
16 C 306 C 17 B 307 C 18 C 308 C 19 C 309 C 20 C 310 C 21 C 311 C 22 C 312 C 23 C 313 C 24 A 314 C 25 A 315 C 26 C 316 C 27 C 317 C 28 C 318 C 29 C 319 C 30 A 320 C 31 B 321 B 32 C 322 C 33 B 323 C 34 A 324 C 35 C 325 C 36 C 326 C 37 C 327 C 38 C 328 C 39 C 329 C 40 C 330 C 41 A 331 C 42 A 332 C 43 C 333 C
44 C 334 C 45 A 335 C 46 A 336 C 47 C 337 C 48 C 338 C 49 B 339 C 50 C 340 C 51 A 341 C 52 C 342 C 53 C 343 C 54 A 344 C 55 C 345 C 56 C 346 C 57 C 347 C 58 C 348 C 59 C 349 C 60 C 350 C 61 C 351 C 62 C 352 C 63 C 353 C 64 C 354 C 65 C 355 A 66 C 356 C 67 C 357 A 68 A 358 C 69 A 359 C 70 C 360 C 71 A 361 C
72 C 362 C 73 C 363 C 74 C 364 C 75 C 365 C 76 C 366 C 77 C 367 C 78 C 368 C 79 A 369 C 80 C 370 C 81 C 371 C 82 C 372 C 83 C 373 C 84 A 374 C 85 C 375 C 86 A 376 C 87 A 377 C 88 C 378 C 89 C 379 C 90 C 380 C 91 A 381 C 92 C 382 C 93 C 383 C 94 A 384 C 95 A 385 C 96 A 386 C 97 C 387 C 98 C 388 C 99 C 389 C
100 C 390 C 101 C 391 C 102 C 392 C 103 C 393 C 104 C 394 C 105 B 395 C 106 A 396 C 107 C 397 C 108 C 398 C 109 C 399 C 110 C 400 C 111 C 401 C 112 A 402 C 113 C 403 C 114 B 404 C 115 C 405 C 116 C 406 C 117 C 407 C 118 A 408 C 119 B 409 C 120 C 410 C 121 C 411 C 122 C 412 C 123 A 413 C 124 C 414 C 125 A 415 C 126 C 416 C 127 C 417 C
128 C 418 C 129 C 419 C 130 C 420 C 131 C 421 C 132 C 422 C 133 C 423 C 134 C 424 C 135 C 425 C 136 C 426 C 137 C 427 C 138 C 428 C 139 C 429 C 140 C 430 C 141 C 431 C 142 C 432 C 143 C 433 C 144 C 434 C 145 C 435 C 146 B 436 C 147 C 437 C 148 C 438 C 149 B 439 C 150 C 440 C 151 B 441 C 152 C 442 C 153 C 443 C 154 C 444 C 155 C 445 C
156 C 446 C 157 C 447 C 158 C 448 C 159 C 449 C 160 C 450 C 161 C 451 C 162 B 452 C 163 C 453 C 164 C 454 C 165 C 455 C 166 B 456 C 167 B 457 C 168 C 458 C 169 C 459 C 170 C 460 C 171 C 461 C 172 C 462 C 173 C 463 C 174 C 464 C 175 C 465 C 176 C 466 C 177 C 467 ND 178 C 468 N.D. 179 C 469 N.D. 180 C 470 N.D. 181 C 471 C 182 C 472 C 183 C 473 C
184 C 474 C 185 C 475 C 186 B 476 C 187 C 477 C 188 C 478 C 189 C 479 C 190 C 480 C 191 C 481 C 192 C 482 C 193 C 483 C 194 C 484 C 195 C 485 A 196 C 486 C 197 C 487 A 198 C 488 B 199 C 489 C 200 C 490 C 201 B 491 C 202 C 492 A 203 C 493 C 204 C 494 C 205 C 495 C 206 C 496 C 207 C 497 C 208 C 498 C 209 C 499 C 210 C 500 C 211 C 501 C
212 C 502 C 213 C 503 C 214 C 504 C 215 C 505 C 216 C 506 C 217 C 507 C 218 C 508 C 219 C 509 C 220 C 510 C 221 C 511 C 222 C 512 A 223 C 513 C 224 C 514 A 225 C 515 N.D. 226 C 516 N.D. 227 A 517 N.D. 228 C 518 N.D. 229 C 519 N.D. 230 C 520 N.D. 231 C 521 N.D. 232 C 522 N.D. 233 C 523 N.D. 234 C 524 C 235 C 525 B 236 C 526 C 237 C 527 N.D. 238 C 529 C 239 C 530 C
240 C 542 C 241 C 543 C 242 C 554 C 243 C 555 C 244 C 556 C 245 C 557 C 246 C 558 C 247 C 559 C 248 C 560 C 249 C 561 C 250 C 562 C 251 C 563 C 252 C 564 C 253 C 565 C 254 C 566 C 255 A 567 C 256 C 568 C 257 C 569 N.D 258 C 570 N.D 259 C 571 C 260 C 572 C 261 A 573 N.D. 262 A 574 C 263 C 575 C 264 C 576 C 265 C 577 C 266 C 578 C 267 C 579 C
268 C 580 C 269 C 581 C 270 C 582 C 271 C 583 C 272 C 584 N.D. 273 C 585 C 274 C 586 C 275 C 587 A 276 C 588 C 277 C 589 C 278 C 590 B 279 C 591 B 280 C 592 C 281 C 593 C 282 A 594 A 283 C 595 C 284 C 596 C 285 C 597 C 286 C 598 C 287 C 599 C 288 A 600 C 289 C 290 C
EXEMPLO B Inibição de Crescimento de Célula dependente de KRas G12C
[02693] Este Exemplo ilustra que compostos exemplares da presente invenção inibem o crescimento de linhagens de células tumorais que expressam KRas G12C.
[02694] A inibição celular de KRAs G12C por compostos exemplares da presente invenção foi determinada medindo a quantidade de um marcador a jusante de atividade de KRas, ERK fosforilado ("Phospho-ERK").
[02695] As células NCI-H358 (ATCC CRL-5807) expressam KRas G12C e foram cultivadas em meio RPMI suplementado com soro fetal bovino a 10%, penicilina/estreptomicina e HEPES 10 mM. As células foram plaqueadas em placas de 96 poços revestidas com poli-D-lisina a uma concentração de 50.000 células/poço e deixadas fixar por 8-12 horas. Os compostos diluídos foram, então, adicionados a uma concentração final de 0,5% de DMSO. Após 3 horas, o meio foi removido, foram adicionados 150 µL de formaldeído a 4% e as placas foram incubadas por 20 minutos. As placas foram lavadas com PBS e permeabilizadas usando 150 µL de metanol 100% gelado por 10 minutos. A ligação de anticorpo não específico às placas foi bloqueada usando 100 µL de Tampão de Bloqueio de Licor (Li-Cor Biotechnology, Lincoln NE) durante 1 hora à temperatura ambiente. Amostras de controle positivas e amostras sem células foram processadas em paralelo com amostras de teste como padrão.
[02696] A quantidade de Phospho-ERK foi determinada utilizando um anticorpo específico para a forma fosforilada de ERK e comparada com a quantidade de GAPDH. Os anticorpos primários usados para detecção foram adicionados da seguinte forma: Phospho-ERK (Cell Signaling cs9101) diluído 1:500 e GAPDH (Millipore MAB374) diluído 1:5.000 no bloco de Licor + 0,05% de Tween 20. As placas foram incubadas por 2 horas em temperatura ambiente. As placas foram lavadas com PBS + 0,05% de Tween 20.
[02697] Os anticorpos secundários utilizados para visualizar os anticorpos primários foram adicionados da seguinte forma: Anti-coelho-680 diluído 1:1.000 e Anti-camundongo-800 diluído 1:1.000 em Licor Block + 0,05% de Tween 20 e incubados por 1 hora à temperatura ambiente. As placas foram lavadas com PBS + 0,05% de Tween 20. Uma alíquota de 100 µL de PBS foi adicionada a cada poço e as placas foram lidas em um leitor de placas LICOR AERIUS.
[02698] O sinal pERK (Thr202/Tyr204) foi normalizado com o sinal GAPDH e a porcentagem de valores de controle de DMSO foi calculada. Os valores de IC50 foram gerados utilizando uma adequação de 4 parâmetros da curva de resposta de dose. Os resultados para compostos exemplares da Fórmula (I) Fórmula (II) são mostrados na Tabela 3. Legenda: “A” ≥ 0,0001 - ≤ 1 µM; “B”> 1 µM e ND = não determinado.
Tabela 3 Inibição da Proliferação Celular Mediada por KRas G12C por Compostos Exemplares Exemplo Nº IC50 Exemplo Nº IC50 1 B 301 A 2 B 302 A 3 B 303 A 4 B 304 A 5 B 305 B 6 B 306 A 7 B 307 B 8 B 308 A 9 B 309 A 10 B 310 A 11 A 311 A 12 B 312 A 13 B 313 A
14 B 314 A 15 B 315 A 16 B 316 A 17 B 317 A 18 B 318 A 19 A 319 A 20 B 320 A 21 A 321 B 22 B 322 A 23 B 323 A 24 B 324 A 25 B 325 B 26 B 326 A 27 A 327 A 28 A 328 A 29 B 329 A 30 B 330 A 31 B 331 A 32 A 332 A 33 B 333 A 34 B 334 A 35 B 335 A 36 B 336 A 37 B 337 A 38 A 338 A 39 A 339 A 40 A 340 B 41 B 341 A
42 B 342 A 43 B 343 B 44 B 344 A 45 B 345 B 46 B 346 A 47 B 347 A 48 B 348 A 49 B 349 A 50 B 350 A 51 B 351 A 52 A 352 A 53 B 353 B 54 B 354 B 55 A 355 B 56 A 356 B 57 B 357 A 58 B 358 A 59 B 359 A 60 B 360 A 61 B 361 A 62 B 362 A 63 B 363 A 64 A 364 A 65 B 365 A 66 B 366 A 67 A 367 A 68 B 368 B 69 B 369 A
70 B 370 A 71 B 371 A 72 A 372 A 73 B 373 B 74 A 374 B 75 A 375 B 76 B 376 A 77 A 377 A 78 B 378 A 79 B 379 A 80 B 380 A 81 B 381 A 82 A 382 A 83 B 383 A 84 B 384 A 85 B 385 A 86 B 386 A 87 B 387 A 88 A 388 A 89 A 389 B 90 A 390 A 91 B 391 A 92 A 392 B 93 B 393 A 94 B 394 A 95 B 395 A 96 B 396 A 97 A 397 A
98 B 398 A 99 B 399 A 100 B 400 A 101 A 401 A 102 A 402 A 103 A 403 A 104 A 404 A 105 B 405 A 106 B 406 A 107 B 407 B 108 A 408 B 109 B 409 A 110 A 410 A 111 A 411 A 112 B 412 A 113 B 413 A 114 B 414 A 115 A 415 A 116 A 416 A 117 B 417 A 118 B 418 A 119 B 419 A 120 A 420 A 121 B 421 A 122 B 422 A 123 B 423 A 124 B 424 A 125 B 425 A
126 B 426 A 127 A 427 A 128 B 428 A 129 A 429 B 130 A 430 A 131 A 431 B 132 A 432 A 133 B 433 B 134 B 434 A 135 A 435 A 136 B 436 A 137 B 437 A 138 B 438 A 139 B 439 B 140 B 440 A 141 B 441 A 142 B 442 A 143 B 443 A 144 A 444 A 145 A 445 A 146 B 446 B 147 A 447 A 148 A 448 A 149 A 449 A 150 A 450 A 151 B 451 A 152 A 452 A 153 A 453 A
154 A 454 A 155 A 455 A 156 A 456 B 157 B 457 A 158 B 458 A 159 B 459 A 160 B 460 A 161 B 461 A 162 B 462 A 163 B 463 A 164 B 464 A 165 B 465 B 166 B 466 A 167 B 467 N.D. 168 B 468 N.D. 169 A 469 N.D. 170 A 470 N.D. 171 B 471 B 172 B 472 A 173 B 473 A 174 B 474 A 175 A 475 A 176 A 476 A 177 A 477 A 178 A 478 A 179 A 479 A 180 A 480 A 181 B 481 A
182 A 482 A 183 A 483 A 184 B 484 A 185 A 485 A 186 B 486 A 187 A 487 A 188 A 488 B 189 B 489 A 190 A 490 A 191 B 491 A 192 A 492 A 193 A 493 A 194 B 494 B 195 B 495 A 196 A 496 A 197 A 497 A 198 B 498 A 199 B 499 A 200 B 500 A 201 B 501 A 202 A 502 A 203 A 503 B 204 B 504 A 205 B 505 B 206 A 506 A 207 B 507 A 208 B 508 A 209 B 509 A
210 A 510 A 211 A 511 A 212 A 512 B 213 B 513 A 214 B 514 B 215 B 515 N.D. 216 B 516 A 217 B 517 A 218 A 518 A 219 B 519 A 220 A 520 A 221 A 521 A 222 A 522 A 223 A 523 A 224 A 524 A 225 A 525 A 226 A 526 A 227 A 527 A 228 A 528 B 229 A 529 A 230 A 530 A 231 A 542 A 232 B 543 A 233 A 554 A 234 A 555 A 235 A 556 A 236 A 557 A 237 A 558 A
238 A 559 A 239 B 560 A 240 B 561 A 241 B 562 A 242 A 563 A 243 A 564 A 244 A 565 A 245 A 566 A 246 A 567 B 247 B 568 A 248 B 569 B 249 A 570 B 250 B 571 A 251 A 572 B 252 A 573 B 253 A 574 A 254 A 575 A 255 B 576 A 256 B 577 A 257 A 578 A 258 B 579 A 259 A 580 A 260 A 581 A 261 B 582 A 262 B 583 A 263 A 584 A 264 B 585 A 265 A 586 A
266 A 587 B 267 A 588 A 268 A 589 A 269 A 590 B 270 A 591 B 271 A 592 B 272 A 593 A 273 B 594 B 274 A 595 A 275 A 596 A 276 A 597 A 277 A 598 A 278 A 599 B 279 A 600 A 280 A 601 A 281 A 602 A 282 B 603 B 283 A 604 A 284 A 605 B 285 A 606 A 286 A 607 A 287 A 608 A 288 B 609 A 289 B 610 B 290 A 611 B 291 A 612 B 292 B 613 A 293 A 614 A
294 B 615 A 295 B 616 A 296 A 617 B 297 A 618 B 298 A 619 A 299 A 620 N.D. 300 A 621 B
EXEMPLO C Estabilidade In Vitro Aperfeiçoada de Compostos Tendo Substituições em R A ou RB em Sangue Total
[02699] Este Exemplo ilustra que compostos exemplares da presente invenção compreendendo substituições em RA ou pelo menos um RB exibem estabilidade de sangue total melhorada em comparação com compostos nos quais RA e ambos os substituintes RB são hidrogênio.
[02700] Materiais: Os seguintes reagentes foram usados como recebidos: acetonitrila (grau HPLC, Burdick & Jackson, Madison, WI), salina tamponada com fosfato (PBS), pH 7,4 (Sigma-Aldrich, Co., St. Louis, MO), água (Grau HPLC, JT Baker, Phillipsburg, NJ), DMSO (EM Science, Merck KGaA, Darmstadt, Germany) e isopropanol (IPA, grau reagente, EMD Chemicals, Gibbstown,NJ). Propantelina e esmolol (Sigma-Aldrich) foram utilizados como compostos de controle positivo no ensaio. Diazepam (Sigma-Aldrich) foi utilizado como padrão interno para quantificação. Sangue total humano foi obtido de BioIVT (Westbury, NY) e era do sexo masculino. Todos os outros reagentes e solventes foram do mais alto grau analítico fornecidos por Sigma (St. Louis, MO) e foram usados como recebidos.
[02701] Incubações de Sangue: A estabilidade in vitro de compostos inibidores de KRas G12C representativos da presente invenção na presença de sangue total foi realizada da seguinte maneira. Esmolol ou propantelina, que são conhecidos por sofrerem hidrólise de éster por esterases no sangue e no plasma, foram utilizados como controles positivos nos ensaios. Uma solução de estoque 10 mM de propantelina, esmolol ou um composto da presente invenção em DMSO foi diluída até 500 µM com DMSO. Alíquotas de sangue total (600 μL), em triplicata, foram colocadas nos poços apropriados de uma placa de 96 poços de profundidade de polipropileno (Axygen Scientific, Union City, CA). O sangue foi diluído até 50% usando PBS, pH 7,4 (600 μL). O sangue diluído foi pré- incubado por 15 minutos a 37°C. Cada poço foi dosado com 12 μL do estoque de DMSO 500 μM simultaneamente para uma concentração de teste final de 5 μM. As placas foram misturadas a 600 rpm por 10 segundos em um agitador de placas (IKA MTS 2/4 Digital Microtiter Shaker, VWR). Alíquotas de 100 μL de cada poço de sangue total foram transferidas para três placas de 96 poços de profundidade separadas, marcadas 0, 60 ou 240 minutos. No final de cada ponto no tempo designado, as células de sangue total foram lisadas com 100 μL de água, misturadas a 600 rpm por um minuto e paradas com 800 μL de acetonitrila contendo IS (diazepam 0,625 µM). As placas foram misturadas no agitador de placas a 600 rpm por um minuto e giradas em uma centrífuga a 2.095 x g por 7 minutos à temperatura ambiente usando uma centrífuga de bancada Allegra (Beckman Coulter, Fullerton, CA). O sobrenadante (100 μL) foi transferido para uma placa rasa de 96 poços (Costar) usando um sistema de manipulação de amostras de líquidos (Apricot, Perkin-Elmer, Boston, MA). A adição de 100 µL de água foi feita para cada amostra de sobrenadante até um volume final de 200 µL. As placas foram seladas e o conteúdo de cada poço foi analisado por LC- MS/MS.
[02702] Quantificação analítica: o sistema LC-MS/MS era composto por um autoamostrador HTS-PAL (Leap Technologies, Carrboro, NC), um HP1200
HPLC (Agilent, Palo Alto, CA) e um espectrômetro de massa API4000 triplo quadripolo (PE Sciex, uma divisão da Applied Biosystems, Foster City, CA). A separação cromatográfica do analito e do padrão interno foi obtida à temperatura ambiente usando uma coluna C18 (Kinetex®, 30 x 3,0 mm, tamanho de partícula de 2,6 µm, Phenomenex, Torrance, CA) em conjunto com condições de gradiente usando fases móveis A (ácido fórmico 0,1% aquoso com álcool isopropílico a 1%) e B (ácido fórmico 0,1% em acetonitrila). O tempo de passagem total, incluindo reequilíbrio, para uma única injeção foi de 2 minutos. A detecção de espectrometria de massa dos analitos foi realizada usando o modo de ionização ESI+. A corrente de íon foi otimizada durante infusão de uma solução de estoque de propantelina, esmolol ou o composto de teste representativo. As respostas do analito, incluindo o IS, foram medidas por monitoramento de reação múltiplo (MRM) de transições únicas para cada composto.
[02703] Cálculos: Os dados foram adquiridos e as áreas de pico foram calculadas para os compostos de teste e o padrão interno usando o software Analyst 1.6.2 (Sciex). As razões de área de pico média foram calculadas calculando a média das razões de área e pico (n=3) de cada composto de teste e o IS para cada amostra.
[02704] As tabelas de áreas de pico foram exportadas para o BioAssay Enterprise (CambridgeSoft, Cambridge, MA), onde as razões médias de analito para área de pico padrão interna foram usadas para calcular a porcentagem restante (% REM) e a meia-vida (t1/2). A porcentagem restante (f) foi calculada determinando a razão da área de pico em cada ponto no tempo para a razão de área de pico das amostras no tempo zero. O t1/2 foi determinado dividindo ln(2) por km. A taxa de perda do composto de teste (km) foi determinada por regressão linear de –ln(f(t)) versus tempo. A regressão utilizou a forma “y=mx”, portanto, o modelo forçou uma interceptação de 100% restante e assumiu que o metabolismo seguia a cinética de primeira ordem.
[02705] Os compostos de controle positivo, propantelina ou esmolol e compostos inibidores de KRas G12C representativos da presente invenção foram incubados na presença de sangue total humano a 37°C durante um período de incubação de 240 minutos. A meia-vida de propantelina, esmolol e cada composto de teste após 240 minutos de incubação a 37°C é mostrada na Tabela 4. Legenda: A ≤ 200 min.; B > 200 min. - ≤ 1.000 min.; C > 1.000 min. - ≤
2.000 min.; e D > 2.000 min.
Tabela 4 Estabilidade In Vitro de Inibidores de KRas G12C Exemplares em Sangue Total Humano Exemplo N° Meia-vida de Composto propantelina A 235 D 236 B 331 B 359 B 367 C 372 D 478 D 479 D 480 D 481 D 482 D 484 A 485 D 490 A
491 A 495 B 498 D 501 A 502 B 504 A 506 C 507 D 509 D 510 C 511 D 512 D 513 C 514 D 515 D 516 D 517 C 524 D 552 D 557 D 579 C
[02706] Resultados: Como esperado, propantelina de controle positivo exibiu uma meia vida curta de 98 min. Em comparação, a meia vida de compostos inibidores de Kras G12C exemplares compreendendo substituições em RA ou RB em sangue total humano foi, em alguns casos, aumentada em mais de 3 vezes ou mais de que quatro vezes em comparação com os compostos não substituídos, por exemplo, Exemplos 331 e 359, resultando em propriedades farmacodinâmicas e farmacocinéticas grandemente aprimoradas destes compostos resultando em maior estabilidade in vivo e maior biodisponibilidade.
[02707] Embora a invenção tenha sido descrita em conexão com modalidades específicas da mesma, será entendido que ela é capaz de modificações adicionais e que este pedido se destina a cobrir quaisquer variações, usos ou adaptações da invenção seguindo, em geral, os princípios da invenção e incluindo tais desvios da presente divulgação que venham dentro da prática conhecida ou costumeira dentro da técnica à qual a invenção pertence e como possa ser aplicado às características essenciais aqui estabelecidas anteriormente e como segue no escopo das reivindicações anexas.

Claims (89)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto, caracterizado pelo fato de que é de fórmula (II): R1
N
X
N R3(m)
N R4 N R2
L N Y Fórmula (II) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: em que: X é um ane de 4-12 membros saturado ou parcialmente saturado monoclico, em ponte ou espirocíclico, em que o anel saturado ou parcialmente saturado monocíclico é opcionalmente substituído por um ou mais R8; Y é uma ligação, O, S ou NR5; R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p ou –SO2C(RA) C(RB)p; R2 é hidrogênio, alquil, hidroxialquil, di-hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, -Z-NR5R10, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril, ou heteroarilalquil, em que cada um de Z, heterociclil, heterociclilalquil, aril, heteroaril e heteroarilalquil podem ser, opcionalmente, substituídos por um ou mais R9; cada Z é C1 - C4 alquileno; cada R3 é independentemente C1 - C3 alquil, oxo, haloalquil, hidroxil ou halogênio; L é uma ligação, -C(O)- ou C1 - C3 alquileno;
R4 é hidrogênio, cicloalquil, heterociclil, aril, aralquil ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterocociclil, aril, aralquil e heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8; cada R5 é independentemente hidrogênio ou C1 - C3 alquil; R6 é cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, aril, ou heteroaril, em que cada um do cicloalquil, heterococlil, aril, ou heteroaril pode ser opcionalmente substituído por um ou mais R7; cada R7 é independentemente halogênio, hidroxil, C1 - C6 alquil, cicloalquil, alcóxi, haloalquil, amino, ciano, heteroalquil, hidroxialquil ou Q- haloalquil, em que Q é O ou S; R8 é oxo, C1 - C3-alquil, C2 - C4 alquinil, heteroalquil, ciano, -C(O)OR5, - C(O)N(R5)2, -N(R5)2, em que o C1 - C3 alquil pode ser opcionalmente substituído por ciano, halogêneo, -OR5, -N(R5)2 ou heteroaril; cada R9 é independentemente hidrogênio, oxo, acil, hidroxil, hidroxialquil, ciano, halogêneo, C1 - C6 alquil, aralquil, haloalquil, heteroalquil, cicloalquil, heterociclil, heterociclilalquil, alcóxi, dialquilaminil, dialquilamidoalquil ou dialquilaminilalquil, em que o C1 - C6 alquil pode ser opcionalmente substituído por cicloalquil; cada R10 é independentemente hidrogênio, acil, C1 - C3-alquil, heteroalquil ou hidroxialquil; R11 é haloalquil; RA é ausente, hidrogênio, deutério, ciano, halogêneo, C1 - C-3 alquil, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2 ou hidroxialquil; cada RB é, independentemente, hidrogênio, deutério, ciano, C1 - C3- alquil, hidroxialquil, heteroalquil, C1 - C3 alcóxi, halogêneo, haloalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3-alquil, -CH2-NHC(O)C1 - C3 alquil, heteroaril, heteroarilalquil, dialquilaminilalquil, ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e C1 - C3-alquil, em que o heteroaril ou a porção heteroaril do heteroarilalquil é opcionalmente substituída por um ou mais R7; ou quando é uma ligação dupla e p é de dois, um de RB é hidrogênio e RA e RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 4-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo; m é zero ou um inteiro entre 1 e 2; p é um ou dois; e em que, quando é uma ligação tripla, então RA está ausente, p é igual a um e RB é hidroxialquil, ou quando é uma ligação dupla, então RA está presente, RB está presente e p é igual a dois, em que quando RA é hidrogênio ou C1 - C3 alquil, pelo menos um RB é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, hidroxialquil, heteroalquil, heteroaril, heteroarilalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3- alquil, -CH2-NHC(O)C1 - C3 alquil ou heterociclilalquil, em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxil, alcóxi e C1-C3 alquil; ou quando cada RB é hidrogênio, então, RA é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, -C(O)N(R5)2, hidroxialquil ou heteroalquil.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1-X é: R1
N
N em que o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que R1 é -C(O)C(RA) C(RB)p.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que é uma ligação tripla e RA está ausente, p é um e RB é hidroxialquil ou C1 - C3 alcóxi.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla e RA é hidrogênio, p é dois e pelo menos um RB é, independentemente, deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, hidroxialquil, heteroalquil, heteroaril, heteroarilalquil, -ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, - NHC(O)C1 - C3-alquil ou heterociclilalquil em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi ou C1 - C3 alquil.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é halogêneo.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é haloalquil.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é -ZNR5R11.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que Z é metileno, R5 é metil e R11 é trifluorometil.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é ciano.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é hidroxialquil.
12. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é heteroalquil.
13. Composto, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o heteroalquil é metoximetil.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é -C(O)N(R5)2, em que cada R5 é hidrogênio.
15. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é -C(O)N(R5)2, em que cada R5 é C1-C3 alquil.
16. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é heteroaril opcionalmente substituído por um ou mais R7.
17. Composto, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que o heteroaril é pirrolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil ou triazinil, cada um substituído por um ou mais R7.
18. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é heteroarilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R7.
19. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a porção heteroaril do heteroarilalquil é pirrolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil ou triazinil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R7.
20. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um RB é heterociclilalquil substituído por um ou mais R 7.
21. Composto, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a porção heterociclil do heterociclilalquil é azetindinil, pirrolidinil, piperidinil piperazinil ou morfolinil, cada um substituído por um ou mais grupos selecionados independentemente de halogênio, hidroxil, alcóxi ou C1 - C3 alquil.
22. Composto, de acordo com qualquer das reivindicações 5 a 21, caracterizado pelo fato de que a ligação dupla está na configuração E.
23. Composto, de acordo com qualquer das reivindicações 5 a 21, caracterizado pelo fato de que a ligação dupla está na configuração Z.
24. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla e p é dois, cada RB é hidrogênio e RA é deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2, ou hidroxialquil.
25. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que RA é halogêneo.
26. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que RA é haloalquil.
27. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que RA é ciano.
28. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que RA é heteroalquil.
29. Composto, de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que o heteroalquil é metoximetil.
30. Composto, de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que o heteroalquil é alcóxi.
31. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que RA é -C(O)N(R5)2, em que cada R5 é hidrogênio.
32. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que RA é hidroxialquil.
33. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla e p é dois, um RB é hidrogênio, o segundo RB é dialquilaminilalquil e RA é halogêneo.
34. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla e p é dois, cada RB é deutério e RA é deutério.
35. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que é uma ligação dupla e p é de dois, um RB é hidrogênio e RA e um RB e os átomos de carbono aos quais eles estão fixados formam um cicloalquil de 5-8 membros parcialmente saturado substituído por oxo.
36. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 35, caracterizado pelo fato de que Y é O.
37. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 36, caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado do grupo consistindo em hidroxialquil, alquilaminilalquil, dialquilaminilalquil, -ZNR5R10, heterociclil e heterociclilalquil, em que cada um de Z, heterociclil ou heterociclilalquil opcionalmente são independentemente substituídos por R9.
38. Composto, de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que R2 é heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9.
39. Composto, de acordo com a reivindicação 38, caracterizado pelo fato de que o heterociclil do heterociclilalquil é, independentemente, azetidinil, metilazetidinil, etilazetidinil, isopropilazetidinil, difluoroazetidinil, ciclopropilazetidinil, tertra-hidropiranilazetidinil, tetra-hidropiranil, pirrolidinil, metilpirrolidinil, dimetilpirrolidinil, isopropilpirrolidinil, cicloalquilalquilpirrolidinil, hidroxipirrolindinil, fluoropirrolidinil, difluoropirrolidinil, (N-metil)fluoropirrolidinil, (N-metil)difluoropirrolidinil, metoxietilpirrolidinil, (N-metil)metoxipirrolidinil, piperazinil, dimetilaminilpirrolidinil, pirrolidinona, metilpirrolidinona, morfolinil, metilmorfolinil, etilmorfolinil, isopropilmorfolinil, oxetanil, 1,4-oxazepanil, piperdinil, metilpiperidinil acilpiperdinil, cianopiperdinil, cicloalquilpiperdinil, halopiperdinil, di-halopiperdinil, fluoropiperdinil, difluoropiperdinil, alcoxipiperdinil, pirrolidonil, piperidinonil, tetra-hidropirrolizinil, tiomorfolinil-1,1- dióxido, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanil, oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il ou azabiciclo[2.2.1]heptan-2-il.
40. Composto, de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que o (N-metil)difluoropirrolidinil é 3,3-difluoro-1-metilpirrolidinil.
41. Composto, de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que o heterociclil é N-metilpirrolidinil.
42. Composto, de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que R2 é dialquilaminilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R 9.
43. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 42, caracterizado pelo fato de que R4 é aril opcionalmente substituído por um ou mais R7.
44. Composto, de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que o aril é selecionado do grupo que consiste em fenil e naftil opcionalmente substituído por um ou mais R7.
45. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracterizado pelo fato de que o fenil e o naftil são cada um opcionalmente substituídos por um ou mais R7 selecionados do grupo que consiste em halogêneo, hidroxil, C1-C6 alquil, haloalquil, Q-haloalquil e alcóxi.
46. Composto, de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que R7 é selecionado do grupo consistindo em halogêneo, haloalquil, metil, isopropil, metóxi, Q-haloalquil, hidroxil e ciano.
47. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 42, caracterizado pelo fato de que R4 é heteroaril.
48. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 42, caracterizado pelo fato de que R4 é aralquil opcionalmente substituído por um ou mais R7.
49. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 48, caracterizado pelo fato de que m é zero.
50. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 49, caracterizado pelo fato de que L é uma ligação.
51. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 50, caracterizado pelo fato de que R8 é heteroalquil, C2-C4 alquinil, ou C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por -OR5, ciano ou heteroaril.
52. Composto, de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que R8 é C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por ciano.
53. Composto, de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que R8 é cianometil.
54. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 53, caracterizado pelo fato de que X é substituído por um R8.
55. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é:
F F
F
N
N
O
F
O N
O NC (S)
N
NC N (S) NC (S) N
N
N
N
N
N N (S) N (S) N O N (S) N O
N O
N N CF3 N Cl , , ,
OH
D D
O O
O D Cl
N N
N NC NC NC (S) (S) (S)
N N
N
N N
N N (S) N (S) N (S) N O N O
N O N Cl N
N , , ,
F
F N (E) O O (E)
F O
N N
NC N (S) NC (S) NC (S)
N N N
N N N N (S) N (S) N (S)
N O N O N O Cl N Cl N Cl N , , ,
F
OH N N CF3
O (E) (E)
O O
N NC (S) N
N NC NC (S) (S)
N
N N
N
N N N (S) N (S) N (S) N O
N O N O Cl N Cl N Cl N , , ,
F
F (E) O O CF3
N
O O NC (S)
N N NC (S) NC
N
N N
N
N N (S) N N O N (S)
N O N Cl N N O Cl N
N , , ,
O
O O OH O CF3
N N
N NC
NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O
N N N , , , CF3 CF3
O O O CF3
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O N Cl N N , , ,
N F
N
N F
O O
O
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O
N N N , , ,
N O
O O O Cl
N N
NC N NC
NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O
N N N , , ,
O O
O CN
O
N N CN
N NC
N NC
NC
N
N N
N
N
N
N N
N N O
N O N O
N N N , , ,
N
O
O F (E)
O N
F NC N Cl
N NC NC (S) N
N
N
N
N N
N N (S) N N O
N O N O Cl N N
N , , ,
N
F N
O
OH
O O
N
NC N
NC N
NC
N
N N
N
N N
N N
N O N
N O N O
N N N , , ,
O
O O
OH O O
N N
NC N NC
NC
N N
N
N N N
N N N
N O N O N O
N N N , , ,
F
OH
N (E) O
O O (E)
N O N NC (S) NC (S) N
NC N (S)
N
N
N N
N N (S) N (S) N O N O N (S)
N O Cl N Cl N N , , ,
OH O (E) O
F O F
N N NC (S) N NC (S) NC (S)
N N
N
N N N N (R) N (R) N N O N O (R) (R)
N O F
N N N , , ,
F
N
O F (E)
N O NC (S)
N NC (S)
N
N
N
N N (R) N O (R) N (S) F OMe N O F
N N , ,
O
F
N NC (S)
N (Z)
N N HN N (S)
N O
N ,
OH
OH
O (E) O (E) O O NH2
N N NC (S)
N NC NC (S)
N N N
N N N N (R) N (R) N N O (R) F N O (R) N O OMe
N N N , , ,
O
O CN O
O
N N CN
NC NC N
NC
N N
N
N N
N
N N N
N O N O N O N N Cl N , , ,
HN O
O N
O
F
N
NC O N NC (S)
N
N NC
N
N N (Z)
N N
N N N O HN N (S)
N
N O N O
N
N N CF3 , , ,
F
N
F
O O O
F
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N F N F N F
N O F
N O F N O F Cl N N N , , ,
O OH
O O
N N
NC NC
N N
N N
N F N F
N O F N O F
N N , ,
F
O
N
N
N HN N (S) F
N O F
N ,
O
O
F
O
N
N
N
N
N N HN N (S) F
HN F N O F N (S)
N O F N
N , ,
OH
O
N
N
N HN N (S) F
N O F
N ,
F O (E)
F O
N
N
N N (Z) N (Z)
N N N HN N (S) F HN F N (S)
N O F N O F
N N , ,
O
F
N
N
N HN N (S) F
N O F
N ,
O
OH (E) O (E)
O
N
N
N N (Z) N (Z)
N N N HN N (S) F HN F N (S)
N O F N O F
N N , ,
O
F
O
O
F O
N
N NC N
NC NC
N
N N
N N
N
N F N F
N O N F
N O F F N O F Cl N Cl N Cl N , , ,
OH F (E)
O O O
F
N N N
NC
N N N
N N (Z)
N
N N
N F N O HN N (S) F HN N (S) F
F N O N O Cl N F F
N N , , ,
O
OH (E) O (E) O
O F
N N
N NC
N N
N (Z) (Z)
N N N N N HN N (S) F HN N (S) F HN N (S)
N O F N O N O
F
N N N CF3 CF3 , , , OMe O OMe (E) (E) (E) O
O O
N N N NC (S) NC (S) NC (S)
N
N N
N N
N N (R) N (R) N (R) N O (R) N O (R) N O F OMe
N N N , , ,
O
O O F
F F
N
N N NC NC NC (S) (S)
N N
N (Z) N N
N N HO N (S) N HN N (S) N O N O
N O N Cl N
N CF3 , ,
F
O F
O F O
N N NC NC (S) N (S) NC (S)
N N
N
N N N N (R) N N N (S) N O (R) F N O N O (R)
F Cl N N , , , ,
F
O O F F (E)
O
N N NC (S) NC (S) N NC (S)
N N
N
N N
N N (S) N (R) N O (R) N O N (R) OMe N O
N N N , , ,
F (E) O
O O F
F
N N N NC (S) NC (S) NC (S)
N
N N
N N
N N N N (S) N O N (S) N O N (S) N O N Cl (S) O (S) O (S) O , , ,
O
O F O
F F
N N NC (S)
N NC (S) NC (S)
N N
N
N N N N (S) N (S) N (S)
N O N O N O
N HN N
OH
O , , ,
O
O O F
F F
N N N NC (S) NC (S) NC (S)
N
N N
N N N
OH N (R) (R) N (S) N (S)
N O N O N O N Cl HN Cl N
O O , , ,
O O O
F F F
N N N NC (S) NC (S) NC (S)
N N N
N OH N N N (R) (R) N (S) (R) N (R)
N O N O F N O Cl N Cl N Cl N
O , , ,
F (E)
O O O
F F
N N N NC (S) NC (S) (S)
N
N N N
N N N N (R) (R) N (S) (R) N (S) N O N O N O (R)
O O F Cl N Cl N N , ,
F F F (E) (E) O (E)
O O
N N N NC (S) NC (S) NC (S)
N N N
N N N N (R) N (S) N (R) N O N O (R)
O N O
N N N , , , ,
F F (E) (E)
O O
N N NC (S) NC (S)
N N
N N N (S) N (S) N O (R) N O (R)
F O Cl N Cl N , ,
F
F F (E) O (E) (E)
O O
N NC (S)
N N NC (S) NC (S)
N N N
N N N N (R) N N (R) N O N O N (S)
N O Cl N Cl (S) O Cl N , , ,
O
O O O
N F F
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O N Br N CF3 N , , ,
O O O
F F F
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O
N N N
N , , ,
O O O
F F F
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N N
N N O N O N O Cl N Br N Cl N
N , , ,
O
F
O
N F O
NC F
N
NC N
N NC
N
N N
N N
N O N
N
N N O N
N O
N Cl N
F , HO , ,
F F
O O
N N
NC NC
N N
N N
N N
N S N N O
N N CF3 , Cl ,
F (E) O O
O F F N abs N
N NC NC (S) (S) (S) N
N N N
N N N N (S) F N (S) N
N O N O N O
F
N N , , ,
O
O F
F abs N N (S) NC (S) N
N
N
N
N N
N HN N (S) N O
N O
N
N , ,
O
F abs N (S)
N
N
N N HN N (S) N O (R) abs F
N ,
O O
F O F
F abs N abs N abs N (S) (S) N
N N (S)
N N
N
N N N N (S) N (S) N (S) N N O N O N N O abs abs abs
N N N , , F ,
O O O
F F F N abs N abs N N (S) N (S) (S)
N
N N N
N N N
N N N
N N N N Cl , , ,
F
O O
F abs N N (S) N N abs
N N
N N N N HN N (S) HN N abs F
N O F abs N O F
N F N , ,
O
F abs N (S)
N
N
N N (S)
N O
N ,
O O
O
F F
F
N N abs N (S) (S) N N N (S)
N
N N
N N N N (S) N (S) N N O (S) N (S) N O N N O abs N
N N , , F ,
O O
F O
N N F F (S) F N
N (R)
N N F2C N
N N N N (S) N N (S)
N N O N O N O N Cl N Cl N , , ,
F F
O O F
O
N N
NC NC N
NC
N N
N
N N
N O
N N
N O N O N N
N N O
N
O , , ,
F F
F O
O
O
N N
N NC NC
NC
N N
N
N N N
N N N
N O N O N N O
N
N O , , ,
F F
O O
N N
NC NC
N N
N N
N N
N O N O N
N O , ,
F
O
N
NC
N
N
N
N O N
O ,
F F
O O O
F
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N O N O
O N N , , ,
O O
F F
N N
NC NC
N N
N N O
N N N
N O N N O
O , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O
N ,
O O
F F
N N
NC NC
N N
N N
N N
N O N N O
N
O , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O
N ,
O
O F
F
N
N NC
NC
N
N
N N
N N
N O N N O N
O O , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O
O ,
F
O O
F
N N
NC NC
N
N
N
N
N
N N O
N O N
N , O ,
F
O
N
NC
N
N
N
N O
N ,
F F
O O
N N
NC NC
N N
N N
N N
N O N O
N
N , ,
F
O
N
NC
N
N
N
N O Cl N ,
F
F
O
O
N
NC N
NC
N N
N N O
N N N
N O N N O Cl Cl
O , ,
F
O
N
NC
N
N
N
N O Cl N ,
F F F
O O O
N N N
NC NC NC
N N N
N N N
N N N
N O N N O N O
N Cl O Cl Cl N , , ,
F
F
O
O
N
NC N
NC
N
N
N N
N N
N O N N O N Cl O Cl O , ,
F
O
N
NC
N
N
N
N O Cl O ,
F
O O
F
N N
NC NC
N N
N N
N N
N O N O Cl N Cl N , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O N Cl
O ,
O
O F
F
N
N
NC NC
N N
N N
O
N N N
N O N O Cl Cl N , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O N Cl O ,
O
O F
F
N
N NC
NC
N
N
N
N
N N
N O N O
N N Cl Cl , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O N Cl O ,
O O
F F
N N
NC NC
N N
N N
N N
N O N N O Cl O Cl O , ,
O
F
N
NC
N
N
N
N O Cl N ,
F
F F
O
O O
N
N N NC
NC NC
N
N
N
N N
N
N N
N O N N O
N O Cl N Cl N Cl N O , , ,
O O
F
N N
NC NC
N N
N N
N N
N O N O Cl N
N , ou .
56. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é de Fórmula II-A:
R1
N
N R3(m) N R11 R4 N NR5R10
L N O Fórmula II-A em que o anel piperazinil é opcionalmente substituído por R8, em que R1, R3, R4, R5, R8, R10, L e m são como definidos na reivindicação 1 e R11 é hidrogênio, metil ou hidroxialquil.
57. Composto, de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pelo fato de que R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p e é uma ligação dupla e RA é hidrogênio, p é dois e pelo menos um RB é, independentemente, deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, hidroxialquil, heteroalquil, heteroaril, heteroarilalquil, - ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3-alquil ou heterociclilalquil em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi ou C1 - C3 alquil.
58. Composto, de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pelo fato de que R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p e é uma ligação dupla, cada RB é hidrogênio e RA é deutério, ciano, halogêneo, C1 - C-3 alquil, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2, ou hidroxialquil.
59. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 57 a 58, caracterizado pelo fato de que R5 e R10 são cada um C1 - C3 alquil.
60. Composto, de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que R11 é metil.
61. Composto, de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que R8 é heteroalquil, C2-C4 alquinil, ou C1 - C3 alquil opcionalmente substituído por -OR5, ciano ou heteroaril.
62. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 54 a 61, caracterizado pelo fato de que L é uma ligação e R4 é aril ou heteroaril, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8.
63. Composto, de acordo com a reivindicação 62, caracterizado pelo fato de que o aril ou heteroaril são substituídos por um ou mais R7 selecionados independentemente de hidroxil, amino, halogêneo, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q- haloalquil, cicloalquil e alcóxi.
64. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é de Fórmula II-B: R1
N
N R3(m)
N R4 N R2
L N O Fórmula II-B onde o anel de piperazinil é opcionalmente substituído por R8 e R1, R3, R4, R8, L e m são como definidos na reivindicação 1.
65. Composto, de acordo com a reivindicação 64, caracterizado pelo fato de que R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p e é uma ligação dupla e RA é hidrogênio, p é dois e pelo menos um RB é, independentemente, deutério, ciano, halogêneo, haloalquil, hidroxialquil, heteroalquil, heteroaril, heteroarilalquil, - ZNR5R11, -C(O)N(R5)2, -NHC(O)C1 - C3-alquil ou heterociclilalquil em que a porção heterociclil é substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogêneo, hidroxil, alcóxi e C1 - C3 alquil.
66. Composto, de acordo com a reivindicação 64, caracterizado pelo fato de que R1 é –C(O)C(RA) C(RB)p e é uma ligação dupla, cada RB é hidrogênio e RA é deutério, ciano, halogêneo, C1 - C-3 alquil, haloalquil, heteroalquil, -C(O)N(R5)2, ou hidroxialquil.
67. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 65 a 66, caracterizado pelo fato de que R2 é heterociclilalquil opcionalmente substituído por um ou mais R9.
68. Composto, de acordo com a reivindicação 67, caracterizado pelo fato de que a porção heterociclil do heterociclilalquil é pirrolidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, 1,4-oxazepanil, tiomorfolinil-1,1-dióxido, 3- azabiciclo[3.1.0]hexanil, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il, ou azabiciclo[2.2.1]heptan-2-ilo, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R 9.
69. Composto, de acordo com a reivindicação 68, caracterizado pelo fato de que cada R9 é, independentemente, acil, ox, halogêne, ciano, C1 - C6 alquil, hidroxialquil, heteroalquil, cicloalquil, aralquil ou dialquilamidoalquil.
70. Composto, de acordo com a reivindicação 69, caracterizado pelo fato de que R9 é independentemente C1-C6 alquil, heteroalquil, ou halogêneo.
71. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 65 a 70, caracterizado pelo fato de que o heterociclil é pirrolidinil opcionalmente substituído por um ou mais R9.
72. Composto, de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que o heterociclil é 3,3-difluoro-1-metilpirrolidinil.
73. Composto, de acordo com a reivindicação 72, caracterizado pelo fato de que R8 é heteroalquil, C2-C4 alquinil, ou C1 - C3alquil opcionalmente substituído por -OR5, ciano ou heteroaril.
74. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracterizado pelo fato de que R8 é C1-C3 alquil opcionalmente substituído por ciano.
75. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 65 a 74, caracterizado pelo fato de que L é uma ligação e R4 é aril ou heteroaril, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R6, R7 ou R8.
76. Composto, de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que o aril ou heteroaril são substituídos por um ou mais R7 selecionados independentemente de hidroxil, amino, halogêneo, C1 - C3 alquil, haloalquil, Q- haloalquil, cicloalquil e alcóxi.
77. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 75 a 76, caracterizado pelo fato de que R4 é aril opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7.
78. Composto, de acordo com a reivindicação 77, caracterizado pelo fato de que R4 é fenil ou naftil, cada um opcionalmente substituído por um ou mais R6 ou R7.
79. Composto, de acordo com a reivindicação 77, caracterizado pelo fato de que R4 é opcionalmente substituído por um ou mais R7 selecionados independentemente de halogêneo, C1-C6 alquil e haloalquil.
80. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 65 a 79, caracterizado pelo fato de que m é zero.
81. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-80 e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
82. Método para inibir atividade de KRas G12C em uma célula, caracterizado pelo fato de que compreende contatar a célula na qual a inibição de atividade de KRas G12C é desejada com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B de acordo com qualquer um das reivindicações 1-80, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo ou composições farmacêuticas contendo o composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
83. Método para tratar câncer, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um paciente tendo câncer uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-80, sozinho ou combinado com um transportador, excipiente ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis.
84. Método, de acordo com a reivindicação 83, caracterizado pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz do composto está entre cerca de 0,01 a 100 mg/kg por dia.
85. Método, de acordo com a reivindicação 84, caracterizado pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz do composto está entre cerca de 0,1 a 50 mg/kg por dia.
86. Método, de acordo com a reivindicação 83, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado do grupo que consiste em Cardíaco: sarcoma (angiossarcoma, fibrossarcoma, rabdomiossarcoma, lipossarcoma), mixoma, rabdomioma, fibroma, lipoma e teratoma; Pulmão: carcinoma broncogênico (célula escamosa, célula pequena indiferenciada, célula grande indiferenciada, adenocarcinoma), carcinoma alveolar (bronquiolar), adenoma brônquico, sarcoma, linfoma, hamartoma condromatoso, mesotelioma; Gastrointestinal: esôfago (carcinoma de célula escamosa, adenocarcinoma, leiomiossarcoma, linfoma), estômago (carcinoma, linfoma, leiomiossarcoma), pâncreas (adenocarcinoma ductal, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, tumores carcinoides, vipoma), intestino delgado (adenocarcinoma, linfoma, tumores carcinoides, sarcoma de Kaposi, leiomioma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, fibroma), intestino grosso (adenocarcinoma, adenoma tubular, adenoma viloso, hamartoma, leiomioma); Trato genitourinário: rim (adenocarcinoma, tumor de Wilm (nefroblastoma), linfoma, leucemia), bexiga e uretra (carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula transicional, adenocarcinoma), próstata (adenocarcinoma, sarcoma), testículo (seminoma, teratoma, carcinoma embrionário, teratocarcinoma, coriocarcinoma, sarcoma, carcinoma de célula intersticial, fibroma, fibroadenoma, tumores adenomatoides, lipoma); Fígado: hepatoma (carcinoma hepatocelular), colangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiossarcoma, adenoma hepatocelular, hemangioma; Trato biliar: carcinoma da vesícula biliar, carcinoma ampular, colangiocarcinoma; Osso: sarcoma osteogênico (osteossarcoma), fibrossarcoma, histiocitoma fibroso maligno, condrossarcoma, sarcoma de Ewing, linfoma maligno (sarcoma de célula reticular), mieloma múltiplo, cordoma de tumor de célula gigante maligno, osteocronofroma (exostoses osteocartilaginosas), condroma benigno, condroblastoma, condromixofibroma, osteoma osteoide e tumores de células gigantes; Sistema nervoso: crânio (osteoma, hemangioma, granuloma, xantoma, osteíte deformante), meninges (meningioma, meningiossarcoma, gliomatose), cérebro (astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma (pinealoma), glioblastoma multiforme, oligodendromioma, schwanoma, retinoblastoma, tumores congênitos), neurofibroma da coluna espinhal, meningioma, glioma, sarcoma); Ginecológico: útero (carcinoma endometrial (cistadenocarcinoma seroso, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinoma não classificado), tumores de células granulosa-tecais, tumores de células Sertoli- Leydig, disgerminoma, teratoma maligno), vulva (carcinoma de célula escamosa, carcinoma intraepitelila, adenocarcinoma, fibrossarcomma, melanoma) vagina (carcinoma de células claras, carcinoma de célula escamosa, sarcoma botroide (rabdomiossarcoma embrionário), trompas de falópio (carcinoma); Hematológico: sangue (leucemia mieloide (aguda e crônica), leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crônica, doenças mieloproliferativas, mieloma múltiplo, síndrome mielodisplásica), doença de Hodgkin, linfoma não Hodgkin (linfoma maligno); Pele: melanoma maligno, carcinoma basocelular, carcinoma de célula escamosa, sarcoma de Kaposi, nevos displásicos moles, lipoma, angioma, dermatofibroma, queloides, psoríase e glândulas Adrenais: neuroblastoma.
87. Método, de acordo com a reivindicação 86, caracterizado pelo fato de que o câncer em que o câncer é um câncer associado a KRas G12C.
88. Método, de acordo com as reivindicações 83 a 87, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer de pulmão de célula não pequena.
89. Método para tratar câncer num paciente em necessidade do mesmo, o méodo caracterizado pelo fato de que compreende (a) determinar que o câncer está associado com uma mutação KRas G12C (por exemplo, um câncer associado a KRas G12C); e (b) administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (II), Fórmula II-A ou Fórmula II-B ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-80, ou uma composição farmacêutica do mesmo.
BR112020009818-3A 2017-11-15 2018-11-14 inibidores kras g12c BR112020009818A2 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762586775P 2017-11-15 2017-11-15
US62/586,775 2017-11-15
PCT/US2018/061060 WO2019099524A1 (en) 2017-11-15 2018-11-14 Kras g12c inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112020009818A2 true BR112020009818A2 (pt) 2020-11-03

Family

ID=66431793

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112020009818-3A BR112020009818A2 (pt) 2017-11-15 2018-11-14 inibidores kras g12c

Country Status (29)

Country Link
US (4) US10689377B2 (pt)
EP (2) EP3710439B1 (pt)
JP (2) JP7322019B2 (pt)
KR (1) KR20200100632A (pt)
CN (1) CN111989321B (pt)
AU (1) AU2018369759B2 (pt)
BR (1) BR112020009818A2 (pt)
CA (1) CA3082579A1 (pt)
CL (1) CL2020001271A1 (pt)
CO (1) CO2020007244A2 (pt)
DK (1) DK3710439T3 (pt)
EA (1) EA202091186A1 (pt)
ES (1) ES2944547T3 (pt)
FI (1) FI3710439T3 (pt)
HR (1) HRP20230377T1 (pt)
HU (1) HUE061599T2 (pt)
IL (1) IL274601B2 (pt)
LT (1) LT3710439T (pt)
MX (1) MX2020005063A (pt)
PH (1) PH12020550622A1 (pt)
PL (1) PL3710439T3 (pt)
PT (1) PT3710439T (pt)
RS (1) RS64182B1 (pt)
SG (1) SG11202004427TA (pt)
SI (1) SI3710439T1 (pt)
TW (1) TWI809005B (pt)
UA (1) UA125802C2 (pt)
WO (2) WO2019099524A1 (pt)
ZA (1) ZA202002105B (pt)

Families Citing this family (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3024523A1 (en) * 2016-05-18 2017-11-23 Mirati Therapeutics, Inc. Kras g12c inhibitors
HUE061599T2 (hu) * 2017-11-15 2023-07-28 Mirati Therapeutics Inc KRas G12C inhibotorok
WO2019217307A1 (en) 2018-05-07 2019-11-14 Mirati Therapeutics, Inc. Kras g12c inhibitors
TW202012415A (zh) 2018-05-08 2020-04-01 瑞典商阿斯特捷利康公司 化學化合物
ES2961253T3 (es) * 2018-08-31 2024-03-11 Mirati Therapeutics Inc Inhibidores de KRas G12C
AU2019340366A1 (en) * 2018-09-10 2021-04-01 Mirati Therapeutics, Inc. Combination therapies
CA3111977A1 (en) * 2018-09-10 2020-03-19 Mirati Therapeutics, Inc. Combination therapies
JP2022500381A (ja) * 2018-09-10 2022-01-04 ミラティ セラピューティクス， インコーポレイテッド 組み合わせ療法
WO2020055760A1 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Mirati Therapeutics, Inc. Combination therapies
US11236068B2 (en) 2018-11-09 2022-02-01 Genentech, Inc. Fused ring compounds
WO2020118066A1 (en) 2018-12-05 2020-06-11 Mirati Therapeutics, Inc. Combination therapies
EP3908283A4 (en) 2019-01-10 2022-10-12 Mirati Therapeutics, Inc. KRAS G12C INHIBITORS
WO2020165732A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising tno155 and a krasg12c inhibitor
TW202110837A (zh) * 2019-05-24 2021-03-16 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 氫化吡啶并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用
JP2022534765A (ja) * 2019-05-29 2022-08-03 上▲海▼翰森生物医▲薬▼科技有限公司 窒素含有複素環系誘導物レギュレーター、その製造方法及び使用
CN112047939B (zh) * 2019-06-06 2023-05-02 江苏先声药业有限公司 一种具有抗肿瘤活性的四氢吡啶并嘧啶类化合物
CN112300153B (zh) * 2019-07-26 2023-06-13 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种杂环化合物、药物组合物和用途
KR20220079521A (ko) * 2019-08-02 2022-06-13 상하이 제민케어 파마슈티칼스 컴퍼니 리미티드 테트라시클릭 화합물, 그의 제조 방법 및 용도
US20210040089A1 (en) * 2019-08-07 2021-02-11 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Kras mutant protein inhibitors
CN112390788A (zh) * 2019-08-13 2021-02-23 苏州闻天医药科技有限公司 一种用于抑制krasg12c突变蛋白的化合物及其制备方法和用途
CN112390797A (zh) * 2019-08-15 2021-02-23 微境生物医药科技(上海)有限公司 新型螺环类K-Ras G12C抑制剂
CN114616232A (zh) * 2019-09-06 2022-06-10 正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司 氮杂环庚烷并嘧啶类衍生物及其医药用途
WO2021055728A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Small molecule inhibitors of kras g12c mutant
MX2022003537A (es) * 2019-09-24 2022-07-11 Mirati Therapeutics Inc Terapias de combinacion.
CN112552295A (zh) * 2019-09-25 2021-03-26 北京加科思新药研发有限公司 Kras突变蛋白抑制剂
CN114555586B (zh) * 2019-10-10 2023-06-23 信达生物制药(苏州)有限公司 Krasg12c蛋白抑制剂及其制备方法和用途
CN112694475A (zh) 2019-10-23 2021-04-23 苏州泽璟生物制药股份有限公司 环烷基类和杂环烷基类抑制剂及其制备方法和应用
EP4051678A1 (en) 2019-10-28 2022-09-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Small molecule inhibitors of kras g12c mutant
CN117645614A (zh) * 2019-10-30 2024-03-05 劲方医药科技(上海)有限公司 取代的杂环并环类化合物，其制法与医药上的用途
MX2022005359A (es) 2019-11-04 2022-06-02 Revolution Medicines Inc Inhibidores de ras.
CN113286794B (zh) * 2019-11-04 2024-03-12 北京加科思新药研发有限公司 Kras突变蛋白抑制剂
AU2020379731A1 (en) 2019-11-04 2022-05-05 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
EP4055028A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN112778301A (zh) * 2019-11-07 2021-05-11 苏州泽璟生物制药股份有限公司 四氢吡啶并嘧啶类抑制剂及其制备方法和应用
CN112824410A (zh) * 2019-11-21 2021-05-21 苏州泽璟生物制药股份有限公司 氮杂七元环类抑制剂及其制备方法和应用
US11654145B2 (en) 2019-11-27 2023-05-23 Turning Point Therapeutics, Inc. Combination therapy involving diaryl macrocyclic compounds
WO2021108683A1 (en) 2019-11-27 2021-06-03 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
WO2021106231A1 (en) * 2019-11-29 2021-06-03 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. A compound having inhibitory activity against kras g12d mutation
AU2020395397A1 (en) * 2019-12-02 2022-06-09 Shanghai Yingli Pharmaceutical Co., Ltd Oxygen-containing heterocyclic compound, preparation method and application thereof
AU2020402701B2 (en) * 2019-12-11 2024-03-14 Eli Lilly And Company KRas G12C inhibitors
CN113004269A (zh) * 2019-12-19 2021-06-22 首药控股(北京)有限公司 Kras-G12C抑制剂杂环化合物
CN115192577B (zh) * 2019-12-19 2024-03-29 北京加科思新药研发有限公司 Kras突变蛋白抑制剂
WO2021120890A1 (en) * 2019-12-20 2021-06-24 Novartis Ag Pyrazolyl derivatives useful as anti-cancer agents
MX2022007515A (es) 2019-12-20 2022-09-19 Mirati Therapeutics Inc Inhibidores de sos1.
CN113045565A (zh) * 2019-12-27 2021-06-29 微境生物医药科技(上海)有限公司 新型K-Ras G12C抑制剂
CN112094269B (zh) * 2020-01-01 2021-12-07 上海凌达生物医药有限公司 一类饱和六元环并杂环类化合物、制备方法和用途
CN113087700B (zh) * 2020-01-08 2023-03-14 苏州亚盛药业有限公司 螺环四氢喹唑啉
GB202001344D0 (en) 2020-01-31 2020-03-18 Redx Pharma Plc Ras Inhibitors
US20230099858A1 (en) * 2020-02-20 2023-03-30 Beta Pharma, Inc. Pyridopyrimidine derivatives as kras inhibitors
TW202140450A (zh) * 2020-02-24 2021-11-01 大陸商泰勵生物科技（上海）有限公司 用於癌症治療的ｋｒａｓ抑制劑
CN115427414A (zh) * 2020-04-28 2022-12-02 贝达药业股份有限公司 稠环化合物及其在医药上的应用
CN116194456A (zh) * 2020-04-30 2023-05-30 上海科州药物研发有限公司 作为kras抑制剂的杂环化合物的制备及其应用方法
WO2021231526A1 (en) * 2020-05-13 2021-11-18 Incyte Corporation Fused pyrimidine compounds as kras inhibitors
CN113666923A (zh) * 2020-05-15 2021-11-19 苏州泽璟生物制药股份有限公司 烷氧基烷基取代杂环基类抑制剂及其制备方法和应用
EP4157836A1 (en) 2020-06-02 2023-04-05 Boehringer Ingelheim International GmbH Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
IL298670A (en) * 2020-06-04 2023-01-01 Antengene Discovery Ltd Inhibitors of kras g12c protein and uses thereof
AU2021293228A1 (en) 2020-06-18 2023-02-09 Revolution Medicines, Inc. Methods for delaying, preventing, and treating acquired resistance to RAS inhibitors
EP4171570A1 (en) 2020-06-24 2023-05-03 Boehringer Ingelheim International GmbH Anticancer combination therapy comprising a sos1 inhibitor and a kras g12c inhibitor
US20230233558A1 (en) * 2020-06-25 2023-07-27 Tolremo Therapeutics Ag Combination of a cbp/p300 bromodomain inhibitor and a kras inhibitor for the treatment of cancer
CN113912608B (zh) * 2020-07-10 2023-07-14 江苏恒瑞医药股份有限公司 嘧啶并嘧啶酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN113980014B (zh) * 2020-07-27 2023-05-12 江苏恒瑞医药股份有限公司 氢化吡啶并嘧啶类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
AU2021344830A1 (en) 2020-09-03 2023-04-06 Revolution Medicines, Inc. Use of SOS1 inhibitors to treat malignancies with SHP2 mutations
MX2023002942A (es) * 2020-09-11 2023-05-22 Mirati Therapeutics Inc Formas cristalinas de un inhibidor de kras g12c.
CN116133662A (zh) 2020-09-11 2023-05-16 南京明德新药研发有限公司 氮杂环丁烷取代化合物的晶型
KR20230067635A (ko) 2020-09-15 2023-05-16 레볼루션 메디슨즈, 인크. 암의 치료에서 ras 억제제로서 인돌 유도체
US20220112204A1 (en) * 2020-10-14 2022-04-14 Accutar Biotechnology Inc. Substituted dihydropyranopyrimidine compounds as kras inhibitors
WO2022087270A1 (en) * 2020-10-23 2022-04-28 Mirati Therapeutics, Inc. Methods for treatment of lung cancers
KR20230098252A (ko) * 2020-10-30 2023-07-03 노파르티스 아게 Kras g12c 억제제 화합물의 새로운 결정형
EP4242207A1 (en) 2020-11-06 2023-09-13 Tyligand Bioscience (Shanghai) Limited Kras inhibitors for treatment of cancers
CN114591319A (zh) * 2020-12-04 2022-06-07 江苏先声药业有限公司 四氢吡啶并嘧啶类衍生物及其用途
US20230072276A1 (en) * 2020-12-15 2023-03-09 Mirati Therapeutics, Inc. Azaquinazoline pan-KRas inhibitors
WO2022133038A1 (en) * 2020-12-16 2022-06-23 Mirati Therapeutics, Inc. Tetrahydropyridopyrimidine pan-kras inhibitors
CN116529249A (zh) * 2020-12-18 2023-08-01 正大天晴药业集团股份有限公司 吡啶并嘧啶酮类化合物
WO2022133345A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones
PE20240545A1 (es) 2020-12-18 2024-03-19 Amphista Therapeutics Ltd Moleculas bifuncionales novedosas para la degradacion de proteinas dirigidas
US20240100172A1 (en) 2020-12-21 2024-03-28 Hangzhou Jijing Pharmaceutical Technology Limited Methods and compounds for targeted autophagy
JP2023554471A (ja) * 2020-12-22 2023-12-27 ノバルティス アーゲー Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤を含む医薬組み合わせ及び癌の治療のためのｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤の使用
WO2022148421A1 (en) * 2021-01-08 2022-07-14 Beigene, Ltd. Bridged compounds as kras g12d inhibitor and degrader and the use thereof
JP2024504831A (ja) * 2021-02-01 2024-02-01 メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド ピリミドピラン化合物
WO2022171143A1 (zh) * 2021-02-09 2022-08-18 南京明德新药研发有限公司 5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶化合物
WO2022187527A1 (en) * 2021-03-05 2022-09-09 Nikang Therapeutics, Inc Quinazoline nitrile derivatives as kras inhibitors
WO2022195355A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Novartis Ag Benzisoxazole derivatives and uses thereof
WO2022194192A1 (zh) * 2021-03-18 2022-09-22 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 一类杂芳环化合物、其制备方法及用途
CN115124524A (zh) * 2021-03-26 2022-09-30 浙江海正药业股份有限公司 三环类衍生物及其制备方法和用途
CN116157400A (zh) * 2021-03-30 2023-05-23 浙江海正药业股份有限公司 杂环类衍生物及其制备方法和用途
KR20230167053A (ko) 2021-04-08 2023-12-07 미라티 테라퓨틱스, 인크. 암 치료를 위해 prmt5 저해제를 사용하는 병용 요법
WO2022217042A1 (en) * 2021-04-09 2022-10-13 Ikena Oncology, Inc. Naphthyl-substituted quinoline-4(1h)-ones and related compounds and their use in treating medical conditions
EP4319757A1 (en) 2021-04-09 2024-02-14 Boehringer Ingelheim International GmbH Anticancer therapy
CN117203208A (zh) * 2021-04-23 2023-12-08 清华大学 靶向活化与失活态kras g12d的抑制剂
WO2022235870A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
WO2022235864A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN117337193A (zh) * 2021-05-19 2024-01-02 基因泰克公司 组合疗法
CN117813306A (zh) * 2021-05-22 2024-04-02 上海科州药物研发有限公司 作为kras抑制剂的杂环化合物，及其制备和治疗用途
CN117769554A (zh) * 2021-05-28 2024-03-26 大鹏药品工业株式会社 Kras突变蛋白的小分子抑制剂
EP4347606A1 (en) * 2021-05-28 2024-04-10 Merck Sharp & Dohme LLC Small molecule inhibitors of kras g12c mutant
EP4352053A1 (en) 2021-06-09 2024-04-17 Eli Lilly and Company Substituted fused azines as kras g12d inhibitors
WO2022266206A1 (en) 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Kras inhibitor conjugates
AR126166A1 (es) * 2021-06-18 2023-09-27 Antengene Discovery Ltd Combinación de un inhibidor de erk y un inhibidor de kras y usos de estos
TW202317100A (zh) 2021-06-23 2023-05-01 瑞士商諾華公司 包含ｋｒａｓ ｇ１２ｃ抑制劑的藥物組合及其用於治療癌症之用途
CN117751116A (zh) * 2021-07-07 2024-03-22 微境生物医药科技(上海)有限公司 作为KRas G12D抑制剂的稠环化合物
CN117980310A (zh) 2021-07-14 2024-05-03 尼坎治疗公司 作为kras抑制剂的亚烷基衍生物
WO2023283933A1 (en) * 2021-07-16 2023-01-19 Silexon Biotech Co., Ltd. Compounds useful as kras g12d inhibitors
CN117677398A (zh) 2021-07-27 2024-03-08 东丽株式会社 用于癌的治疗和/或预防的药品
CN113527294A (zh) * 2021-08-25 2021-10-22 都创(上海)医药开发有限公司 Mrtx849化合物的晶型及其制备方法和用途
WO2023031781A1 (en) 2021-09-01 2023-03-09 Novartis Ag Pharmaceutical combinations comprising a tead inhibitor and uses thereof for the treatment of cancers
WO2023039020A1 (en) * 2021-09-09 2023-03-16 Mirati Therapeutics, Inc. Processes and intermediates for synthesis of adagrasib
WO2023051586A1 (zh) * 2021-09-29 2023-04-06 先声再明医药有限公司 Kras g12d抑制剂化合物及其制备方法和应用
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
AU2022371727A1 (en) 2021-10-22 2024-05-02 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Nitrogen-containing tetracyclic compound, preparation method therefor, and medical use thereof
US20230203062A1 (en) 2021-11-24 2023-06-29 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
TW202332429A (zh) 2021-11-24 2023-08-16 美商建南德克公司 治療性化合物及其使用方法
WO2023114954A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023117681A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Heteroaromatic compounds for the treatment of cancer
WO2023126822A1 (en) 2021-12-28 2023-07-06 Astrazeneca Uk Limited Combination of antibody-drug conjugate and rasg12c inhibitor
CN114409653A (zh) * 2021-12-31 2022-04-29 苏州闻天医药科技有限公司 一种桥环并嘧啶并环类化合物及其用途
EP4227307A1 (en) 2022-02-11 2023-08-16 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023154528A1 (en) * 2022-02-11 2023-08-17 Wave Life Sciences Ltd. Stereoselective technologies for chiral compounds
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
US20240043451A1 (en) 2022-03-25 2024-02-08 Eli Lilly And Company Kras inhibitors
WO2023194310A1 (en) 2022-04-04 2023-10-12 Sanofi Therapeutic combination of kras g12c inhibitor and tead inhibitor
WO2023199180A1 (en) 2022-04-11 2023-10-19 Novartis Ag Therapeutic uses of a krasg12c inhibitor
WO2023205074A1 (en) * 2022-04-18 2023-10-26 Mirati Therapeutics, Inc. Processes and intermediates for synthesis of adagrasib
WO2023205701A1 (en) 2022-04-20 2023-10-26 Kumquat Biosciences Inc. Macrocyclic heterocycles and uses thereof
CN114907387B (zh) * 2022-05-26 2023-11-10 中山大学 嘧啶并吡咯类kras抑制剂及其制备方法与应用
CN117164580A (zh) * 2022-05-27 2023-12-05 苏州泽璟生物制药股份有限公司 一种kras g12c抑制剂的制备方法及其中间体
CN117164526A (zh) * 2022-05-27 2023-12-05 苏州泽璟生物制药股份有限公司 2-(哌嗪-2-基)乙腈类衍生物及其制备方法和应用
WO2023240189A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydropyrido 3,4-d pyrimidine derivatives as kras inhibitors
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2024040131A1 (en) 2022-08-17 2024-02-22 Treeline Biosciences, Inc. Pyridopyrimidine kras inhibitors
GB202212641D0 (en) 2022-08-31 2022-10-12 Jazz Pharmaceuticals Ireland Ltd Novel compounds
WO2024102421A2 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Revolution Medicines, Inc. Compounds, complexes, and methods for their preparation and of their use
CN116478141B (zh) * 2023-06-20 2023-10-24 药康众拓(江苏)医药科技有限公司 氘代kras抑制剂药物及用途

Family Cites Families (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR0116662A (pt) 2001-01-02 2003-09-23 Hoffmann La Roche Derivados de quinazolona como antagonistas receptores alfa 1a/b adrenérgicos
WO2002088079A2 (en) 2001-05-01 2002-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Dual inhibitors of pde 7 and pde 4
US7105667B2 (en) * 2001-05-01 2006-09-12 Bristol-Myers Squibb Co. Fused heterocyclic compounds and use thereof
US20080051387A1 (en) 2006-06-09 2008-02-28 Yuelian Xu Tetrahydropyrido[3,4-d]pyrimidines and related analogues
US9259426B2 (en) 2006-07-20 2016-02-16 Gilead Sciences, Inc. 4,6-di- and 2,4,6-trisubstituted quinazoline derivatives useful for treating viral infections
EP2518063B1 (en) 2006-12-21 2017-02-01 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Pyridazinones and furan-containing compounds
WO2008103470A2 (en) 2007-02-21 2008-08-28 Trustees Of Columbia University In The City Of New York Oncogenic-ras-signal dependent lethal compounds
JP5577104B2 (ja) 2007-03-14 2014-08-20 エクセリクシス パテント カンパニー エルエルシー ヘッジホッグ経路の阻害剤
EP2209775A1 (en) 2007-10-09 2010-07-28 UCB Pharma, S.A. Heterobicyclic compounds as histamine h4-receptor antagonists
US20090253693A1 (en) 2008-04-07 2009-10-08 Dmitry Koltun 2H-BENZO[b][1,4]OXAZIN-3(4H)-ONE DERIVATIVES FOR USE AS STEAROYL CoA DESATURASE INHIBITORS
AR073354A1 (es) 2008-07-31 2010-11-03 Genentech Inc Compuestos de pirimidina, composiciones farmaceuticas y su uso en el tratamiento del cancer.
WO2010120996A1 (en) 2009-04-17 2010-10-21 Wyeth Llc 5,6,7,8-tetrahydropyrido[3,4-d]pyrimidine compounds, their use as mtor kinase and pi3 kinase inhibitors, and their syntheses
CA2785284A1 (en) 2009-12-25 2011-06-30 Tomoyuki Kamino Novel aryl urea derivative
WO2011082285A1 (en) 2009-12-30 2011-07-07 Avila Therapeutics, Inc. Ligand-directed covalent modification of protein
CN104379563B (zh) 2012-04-10 2018-12-21 加利福尼亚大学董事会 用于治疗癌症的组合物和方法
WO2014011973A2 (en) 2012-07-13 2014-01-16 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Quinazolinone-based oncogenic-ras-selective lethal compounds and their use
US9745319B2 (en) 2013-03-15 2017-08-29 Araxes Pharma Llc Irreversible covalent inhibitors of the GTPase K-Ras G12C
EP2970121B1 (en) 2013-03-15 2017-12-13 Araxes Pharma LLC Covalent inhibitors of kras g12c
US9227978B2 (en) 2013-03-15 2016-01-05 Araxes Pharma Llc Covalent inhibitors of Kras G12C
CN106488910B (zh) 2013-10-10 2020-07-31 亚瑞克西斯制药公司 Kras g12c的抑制剂
JO3805B1 (ar) 2013-10-10 2021-01-31 Araxes Pharma Llc مثبطات كراس جي12سي
CA2950581A1 (en) 2014-05-30 2015-12-03 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Multivalent ras binding compounds
WO2016025650A1 (en) 2014-08-13 2016-02-18 Celgene Avilomics Research, Inc. Combinations of an erk inhibitor and a cdk4/6 inhibitor and related methods
JO3556B1 (ar) 2014-09-18 2020-07-05 Araxes Pharma Llc علاجات مدمجة لمعالجة السرطان
WO2016049565A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 Araxes Pharma Llc Compositions and methods for inhibition of ras
AR102094A1 (es) 2014-09-25 2017-02-01 Araxes Pharma Llc Inhibidores de proteínas kras con una mutación g12c
US10011600B2 (en) 2014-09-25 2018-07-03 Araxes Pharma Llc Methods and compositions for inhibition of Ras
US10017540B2 (en) 2015-03-11 2018-07-10 California Institute Of Technology Cyclic peptide binder against oncogenic K-Ras
BR112017021869A2 (pt) 2015-04-10 2018-12-11 Araxes Pharma Llc compostos quinazolina substituídos e métodos de uso dos mesmos
WO2016168540A1 (en) 2015-04-15 2016-10-20 Araxes Pharma Llc Fused-tricyclic inhibitors of kras and methods of use thereof
WO2016172692A1 (en) 2015-04-24 2016-10-27 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Mutant kras inhibitors
KR20180017013A (ko) 2015-05-06 2018-02-20 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 K-Ras 조절제
US10144724B2 (en) 2015-07-22 2018-12-04 Araxes Pharma Llc Substituted quinazoline compounds and methods of use thereof
BR112018004620A2 (pt) 2015-09-24 2018-09-25 Ionis Pharmaceuticals, Inc. moduladores da expressão de kras
EP3356347A1 (en) 2015-09-28 2018-08-08 Araxes Pharma LLC Inhibitors of kras g12c mutant proteins
EP3356354A1 (en) 2015-09-28 2018-08-08 Araxes Pharma LLC Inhibitors of kras g12c mutant proteins
WO2017058915A1 (en) 2015-09-28 2017-04-06 Araxes Pharma Llc Inhibitors of kras g12c mutant proteins
WO2017058728A1 (en) 2015-09-28 2017-04-06 Araxes Pharma Llc Inhibitors of kras g12c mutant proteins
EP3356339A1 (en) 2015-09-28 2018-08-08 Araxes Pharma LLC Inhibitors of kras g12c mutant proteins
WO2017058768A1 (en) 2015-09-28 2017-04-06 Araxes Pharma Llc Inhibitors of kras g12c mutant proteins
US10882847B2 (en) 2015-09-28 2021-01-05 Araxes Pharma Llc Inhibitors of KRAS G12C mutant proteins
WO2017070256A2 (en) 2015-10-19 2017-04-27 Araxes Pharma Llc Method for screening inhibitors of ras
WO2017070611A1 (en) 2015-10-22 2017-04-27 The Scripps Research Institute Cysteine reactive probes and uses thereof
WO2017080980A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 Astrazeneca Ab Dihydropyrrolopyrazinone derivatives useful in the treatment of cancer
WO2017079864A1 (en) 2015-11-12 2017-05-18 Hangzhou Yier Biotech Co., Ltd. Treatment of cancers related to chronically active ras
CN108779097A (zh) 2015-11-16 2018-11-09 亚瑞克西斯制药公司 包含取代的杂环基的2-取代的喹唑啉化合物及其使用方法
US9988357B2 (en) 2015-12-09 2018-06-05 Araxes Pharma Llc Methods for preparation of quinazoline derivatives
CA3024523A1 (en) * 2016-05-18 2017-11-23 Mirati Therapeutics, Inc. Kras g12c inhibitors
US10646488B2 (en) 2016-07-13 2020-05-12 Araxes Pharma Llc Conjugates of cereblon binding compounds and G12C mutant KRAS, HRAS or NRAS protein modulating compounds and methods of use thereof
US10280172B2 (en) 2016-09-29 2019-05-07 Araxes Pharma Llc Inhibitors of KRAS G12C mutant proteins
EP3523289A1 (en) 2016-10-07 2019-08-14 Araxes Pharma LLC Heterocyclic compounds as inhibitors of ras and methods of use thereof
CA3082011A1 (en) 2016-11-30 2018-06-07 Bantam Pharmaceutical, Llc Methods of using substituted pyrazole and pyrrole compounds and for treatment of hyperproliferative diseases
CN110603254B (zh) 2016-11-30 2024-04-12 班塔姆制药有限责任公司 被取代的吡唑化合物以及使用其治疗过度增生性疾病的方法
KR20190095355A (ko) 2016-12-15 2019-08-14 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 암의 치료를 위한 조성물 및 방법
EP3558979B1 (en) 2016-12-22 2021-02-17 Boehringer Ingelheim International GmbH Novel benzylamino substituted quinazolines and derivatives as sos1 inhibitors
HUE056777T2 (hu) 2016-12-22 2022-03-28 Amgen Inc Benzizotiazol-, izotiazolo[3,4-b]piridin-, kinazolin-, ftálazin-, pirido[2,3-d]piridazin- és pirido[2,3-d]pirimidin-származékok mint KRAS G12C inhibitorok tüdõ-, hasnyálmirigy- vagy vastagbélrák kezelésére
US10344026B2 (en) 2017-01-18 2019-07-09 Nantbio, Inc. Compositions and methods of targeting mutant K-ras
WO2018140513A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Araxes Pharma Llc 1-(3-(6-(3-hydroxynaphthalen-1-yl)benzofuran-2-yl)azetidin-1yl)prop-2-en-1-one derivatives and similar compounds as kras g12c modulators for treating cancer
US11274093B2 (en) 2017-01-26 2022-03-15 Araxes Pharma Llc Fused bicyclic benzoheteroaromatic compounds and methods of use thereof
US11136308B2 (en) 2017-01-26 2021-10-05 Araxes Pharma Llc Substituted quinazoline and quinazolinone compounds and methods of use thereof
WO2018140599A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Araxes Pharma Llc Benzothiophene and benzothiazole compounds and methods of use thereof
CN110382482A (zh) * 2017-01-26 2019-10-25 亚瑞克西斯制药公司 稠合的杂-杂二环化合物及其使用方法
US20200385364A1 (en) 2017-01-26 2020-12-10 Araxes Pharma Llc Fused n-heterocyclic compounds and methods of use thereof
JOP20190186A1 (ar) 2017-02-02 2019-08-01 Astellas Pharma Inc مركب كينازولين
AU2018255413A1 (en) 2017-04-20 2019-12-05 Leidos Biomedical Research, Inc. K-Ras modulators
JP7150823B2 (ja) 2017-09-08 2022-10-11 アムジエン・インコーポレーテツド ＫＲａｓ Ｇ１２Ｃの阻害剤及びそれを使用する方法
HUE061599T2 (hu) * 2017-11-15 2023-07-28 Mirati Therapeutics Inc KRas G12C inhibotorok
TW201938561A (zh) 2017-12-08 2019-10-01 瑞典商阿斯特捷利康公司 化學化合物
TW201942115A (zh) 2018-02-01 2019-11-01 美商輝瑞股份有限公司 作為抗癌藥之經取代的喹唑啉和吡啶並嘧啶衍生物
TW201942116A (zh) 2018-02-09 2019-11-01 美商輝瑞股份有限公司 作為抗癌劑之四氫喹唑啉衍生物

Also Published As

Publication number Publication date
PL3710439T3 (pl) 2023-06-26
US20190144444A1 (en) 2019-05-16
HUE061599T2 (hu) 2023-07-28
RS64182B1 (sr) 2023-05-31
EP3880208A1 (en) 2021-09-22
HRP20230377T1 (hr) 2023-06-23
TW201938555A (zh) 2019-10-01
JP2022508108A (ja) 2022-01-19
UA125802C2 (uk) 2022-06-08
TWI809005B (zh) 2023-07-21
WO2020101736A1 (en) 2020-05-22
IL274601A (en) 2020-06-30
CN111989321A (zh) 2020-11-24
CA3082579A1 (en) 2019-05-23
KR20200100632A (ko) 2020-08-26
MX2020005063A (es) 2021-01-08
EP3710439A4 (en) 2021-08-11
EA202091186A1 (ru) 2020-10-01
EP3880208A4 (en) 2022-08-17
SG11202004427TA (en) 2020-06-29
JP7322019B2 (ja) 2023-08-07
IL274601B2 (en) 2024-04-01
LT3710439T (lt) 2023-05-10
EP3710439A1 (en) 2020-09-23
WO2019099524A1 (en) 2019-05-23
CO2020007244A2 (es) 2020-10-30
US20200262837A1 (en) 2020-08-20
FI3710439T3 (fi) 2023-05-02
EP3710439B1 (en) 2023-02-15
IL274601B1 (en) 2023-12-01
CL2020001271A1 (es) 2020-12-18
US20230373999A1 (en) 2023-11-23
JP2021502993A (ja) 2021-02-04
SI3710439T1 (sl) 2023-06-30
US10689377B2 (en) 2020-06-23
ES2944547T3 (es) 2023-06-22
US20240101553A1 (en) 2024-03-28
PT3710439T (pt) 2023-05-15
DK3710439T3 (da) 2023-04-24
AU2018369759B2 (en) 2022-11-24
CN111989321B (zh) 2024-05-14
AU2018369759A1 (en) 2020-06-25
JP7346565B2 (ja) 2023-09-19
PH12020550622A1 (en) 2021-01-25
ZA202002105B (en) 2021-04-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7322019B2 (ja) Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤
US10633381B2 (en) KRas G12C inhibitors
EP4087573A1 (en) Kras g12c inhibitors
WO2023150284A2 (en) Quinazoline pan-kras inhibitors
EP4322945A2 (en) Kras g12c inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
B350 Update of information on the portal [chapter 15.35 patent gazette]
B06W Patent application suspended after preliminary examination (for patents with searches from other patent authorities) chapter 6.23 patent gazette]