TW202110837A

TW202110837A - 氫化吡啶并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

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Publication number: TW202110837A
Application number: TW109117163A
Authority: TW
Inventors: 陸標; 張俊珍; 張蔡華; 賀峰; 白昌; 陶維康
Original assignee: 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司; 大陸商上海恆瑞醫藥有限公司
Priority date: 2019-05-24
Filing date: 2020-05-22
Publication date: 2021-03-16
Also published as: CN113874374A; WO2020238791A1

Abstract

本公開涉及氫化吡啶并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。具體而言，本公開涉及一種通式(I)所示的氫化吡啶并嘧啶類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑，特別是作為KRAS抑制劑的用途，其中通式(I)的各取代基與說明書中的定義相同。

Description

氫化吡啶并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

本公開屬於醫藥領域，涉及一種通式(I)所示的氫化吡啶并嘧啶類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑，特別是作為KRAS抑制劑的用途。

RAS(Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog)家族屬於小GTP酶超家族，廣泛表達於各類真核生物。人體中有三種RAS基因(HRAS、KARS和NARS)，可表達為四種高度相關的RAS小GTP酶(HRAS、KRAS4A、KARS4B和NRAS)。其作為GDP-GTP調控的二元開關發生作用。通常情況下它們有兩種表現形式：非激活狀態下的GDP(二磷酸鳥苷)結合形式和激活狀態下的GTP(三磷酸鳥苷)結合形式。RAS蛋白藉由在兩種活性狀態間切換，來調控包括RAF-MEK-ERK、PI3K/Akt/mTOR在內的多個下游通路，從而影響細胞的生長、增殖和分化(Nat Rev Cancer,2007,7,295-308)。RAS基因在胰腺癌、結直腸癌、非小細胞肺癌等多種腫瘤中突變率較高，激活的突變RAS蛋白會促進異常信號轉導，從而導致癌症發生和發展，以及對靶向藥產生耐藥性。其中KRAS突變是人類致癌基因中突變率最高的基因，占所有腫瘤的20~30%。

對於KRAS蛋白的突變形式和信號通路研究，近年來分子生物學已取得重大進展，然而開發相關的靶向藥物卻依然挑戰重重。在化學藥開發方面，由於KRAS和GTP的親和力非常高，達到60pM，而且細胞內GTP濃度在mM水平，因此這類直接競爭的分子對化合物親和力要求極高，目前為止還沒有成功的案例。在生物藥開發方面，抗體藥穿透細胞膜靶向KRAS蛋白，藥物遞送效率比較低下。所以不少研究者曾試圖另闢蹊徑，希望抑制KRAS下游信號通路中RAF、MEK和ERK等激酶的活性，達到抑制KRAS通路的目的。這類化合物有一定療效，但是由於下游抑制劑不能完全阻斷KRAS信號，而且靶點相關毒副作用很大，導致這些化合物在KRAS突變腫瘤上藥效欠佳。因此，開發新作用機理的KRAS抑制劑有非常大的臨床應用價值。

KRAS突變以點突變為主，包括12、13和61位胺基酸的突變。其中12位的甘胺酸突變成半胱胺酸(G12C)最為常見，該突變在肺癌，尤其是非小細胞肺癌中比例較大(14%)；此外還在一些結直腸癌(4%)、胰腺癌(2%)患者體內表達。在美國癌症人群中，該基因突變發生率甚至大於ALK、RET、TRK基因突變總和。

面對KRAS蛋白成藥性的難點，加州大學舊金山分校Kevan Shokat教授率先驗證了某些特殊的化合物可藉由共價鍵綁定KRAS G12C突變蛋白。藉由進一步研究發現，這些共價化合物可與KRAS突變蛋白12位的半胱胺酸結合，並佔據II號分子開關區域(switch-II regions)一個疏水別構調節口袋，被綁定的KRAS G12C突變體會被不可逆地鎖定在失活狀態，從而阻斷依賴該蛋白的信號通路和癌細胞生存能力(Nature 2013，503,548-551)。KRAS G12C小分子抑制劑ARS-1620在多種KRAS G12C突變腫瘤模型上都能有效抑制腫瘤生長，甚至使腫瘤完全消退。由於KRAS G12C是腫瘤細胞中的突變蛋白，而野生型KRAS並沒有這個突變位點，因此提供了一個完美的腫瘤選擇性靶標(Cell，2018，572， 578-589)。以Araxas、Amgen和Mirati為代表的公司發表了若干KRAS G12C抑制劑的專利(WO2014152588、WO2016164675、WO2017087528、WO2017201161、WO2018119183等)。目前還沒有KRAS G12C的抑制劑藥物被批准上市，進展最快的Amgen和Mirati的小分子KRAS G12C抑制劑分別在2018年9月和12月進入臨床一期試驗，因此相關病患人群中存在重大未滿足的醫學需求。

本公開的目的在於提供一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，

其中：

環A為環烷基或雜環基；

環B為含氮的雜環基；

Y選自N或C；

L₁選自-S-(CH₂)_q-、-O-(CH₂)_q-、-NH-(CH₂)_q-或伸烷基；

L₂為鍵或伸烷基；

R¹選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、-OR⁹、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R²選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-NR⁷R⁸、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R³相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基和硝基，該烷基、烷氧基、鹵烷基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁴選自-C(O)R⁹或-S(O)₂R⁹；

R⁵相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基和羥烷基；

R⁶相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基和羥烷基；

R⁷、R⁸相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基或羥烷基；或者，R⁷和R⁸與相鄰的N原子一起形成雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁹選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、炔基、烯基、羥基或羥烷基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、炔基和烯基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR¹⁰R¹¹、環烷基、雜環基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R¹⁰、R¹¹相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基或羥烷基；或者，R¹⁰和R¹¹與相鄰的N原子一起形成雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

n為0、1、2或3；

m為0、1、2或3；

q為0、1、2、3、4、5或6；且

p為0、1、2、3或4。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為環烷基；

R²選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-NR⁷R⁸、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R⁷、R⁸、q如通式(I)中所定義。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環B為含氮雜環基；較佳地，環B為3-8員含氮雜環基；更佳地，環B為哌嗪基。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中：

環A、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如通式(I)中所定義。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為環烷基；較佳地，環A為C_3-6環烷基；更佳地，環A為環丙基或環丁基；進一步較佳地，環A為環丙基。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中L₁選自-S-、-O-、-O-CH₂-、-NH-或-NH-CH₂-；較佳地，L₁選自-S-、-O-、-NH-或-O-CH₂-；進一步較佳地，L₁選自-S-、-O-或-NH-。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中L₂為鍵或亞甲基；較佳地，L₂為鍵。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R¹選自：

其中：

環D選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；較佳地，環D為C_3-6環烷基、3-8員雜環基、C_6-10芳基或5-10員雜芳基；更佳地，環D為芳基、噻吩基或吡唑基；進一步較佳地，環D為苯基；

R^a相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基；較佳地，R^a相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、羥基、C_1-6羥烷基、氰基、胺基、硝基、C_3-6環烷基和3-8員雜環基；

R^b相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基；較佳地，R^b相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、羥基、C_1-6羥烷基、氰基、胺基、硝基、C_3-6環烷基和3-8員雜環基；

s為0、1、2、3或4；且

t為0、1、2、3或4。

其中：

s為0、1、2、3或4；且

t為0、1、2、3或4。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R²選自環烷基、雜環基、雜芳基或-(CH₂)_qNR⁷R⁸，該環烷基或雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

較佳地，R²選自C_3-6環烷基、3-8員雜環基、5-10員雜芳基或-NR⁷R⁸，該C_3-6環烷基或3-8員雜環基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和C_1-6羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

或較佳地，R²為雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基中的一個或多個取代基所取代；更佳地，R²為3-8員雜環基，該3-8員雜環基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基中的一個或多個取代基所取代；

或較佳地，R²選自-NR⁷R⁸，R⁷和R⁸與相鄰的N原子一起形成3-8員雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和C_1-6羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

或較佳地，R²為

，R^c為鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基或羥烷基；R^d為氫原子或烷基；w為0、1、2、3、4、5；v為1或2。

R⁷和R⁸如通式(I)中所定義。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R³為烷基，該烷基視需要進一步被一個或多個氰基取代；較佳-CH₂-CN。

在本公開一些較佳的實施方案中，該該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R⁴為-C(O)R⁹或-S(O)₂R⁹；R⁹選自烷基、炔基或烯基，該烷基、炔基、烯基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、雜環基、環烷基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；較佳地，R⁹選自C_1-6烷基、C_2-6炔基或C_2-6烯基，該該C_1-6烷基、C_2-6炔基、C_2-6烯基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、羥基和C_1-6羥烷基中的一個或多個取代基所取代；進一步較佳地，R⁹為乙烯基；

R⁷、R⁸和q如通式(I)中所定義；

較佳地，R⁷、R⁸相同或不同，且各自獨立地選自氫原子和C_1-6烷基，q為0、1、2、3、4、5或6。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R⁵為氫原子。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R⁶為氫原子。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(III)或通式(IV)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中：

R^e為氫原子或-(CH₂)_qNR¹⁰R¹¹；

R^f為氫原子或鹵素；L₁、R¹、R²、R¹⁰、R¹¹和q如通式(I)中所定義。

在本公開一些較佳的實施方案中，該通式(III)或通式(IV)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：

R¹為

，

L₁為-O-CH₂-，

R²為

，

R^c為鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基或羥烷基；

s為0、1、2、3或4；

t為0、1、2、3或4；

w為0、1、2、3、4、5；

v為1或2；

較佳地，R^b相同或不同，且各自獨立地為C_1-6烷基或鹵素，s為 2，t為0；R²為

。

本公開的典型化合物包括但不限於：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽。

本公開的另一方面涉及一種通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中：

環A為環烷基或雜環基；

環B為含氮的雜環基；

Y選自N或C；

L₁選自-S-(CH₂)_q-、-O-(CH₂)_q-、-NH-(CH₂)_q-或伸烷基；

L₂為鍵或伸烷基；

n為0、1、2或3；

m為0、1、2或3；

q為0、1、2、3、4、5或6；且

p為0、1、2、3或4。

其中：環A為環烷基；

R⁷、R⁸、q如通式(IA)中所定義。

本公開通式(IA)的典型化合物包括但不限於：

本公開的另一方面涉及一種製備通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；X-R⁴較佳丙烯醯氯；

環A、環B、Y、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如通式(I)中所定義。

本公開的另一方面涉及一種製備通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IIA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(II)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；X-R⁴較佳丙烯醯氯；

環A、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如通式(II)中所定義。

本公開的另一方面涉及一種製備通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IIIA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(III)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；X-R⁴較佳丙烯醯氯；

L₁、R¹和R²如通式(III)中所定義。

本公開的另一方面涉及一種製備通式(IV)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IVA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與式(IVB)化合物發生醯化或磺醯化反應，得到通式(IV)的化合物，其中：

X為鹵素或羥基；

L₁、R¹、R²、R^e和R^f如通式(IV)中所定義。

本公開的另一方面涉及一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的本公開通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

本公開進一步涉及通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物在製備用於抑制KRAS的藥物中的用途，較佳在製備用於抑制KRAS G12C的藥物中的用途。

本公開進一步涉及通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物在製備用於治療或預防癌症、炎症、或其它增殖性疾病的藥物中的用途，較佳在製備用於治療或預防癌症的藥物中的用途；該癌症選自胃癌、食管癌、黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌(如非小細胞肺癌或小細胞肺癌)、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤(如多發性骨髓瘤)、星形細胞瘤和膠質瘤。較佳地，該癌症選自黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌(如非小細胞肺癌或小細胞肺癌)、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤(如多發性骨髓瘤)、星形細胞瘤和膠質瘤。

本公開還涉及一種抑制KRAS的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物。

本公開還涉及一種治療或預防KRAS介導的疾病的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物。

本公開還涉及一種治療或預防癌症、炎症、或其它增殖性疾病的方法，較佳治療癌症的方法，其包括給予所需患者治療或預防有效量的通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物；其中該癌症選自胃癌、食管癌、黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌(如非小細胞肺癌或小細胞肺癌)、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤(如多發性骨髓瘤)、星形細胞瘤和膠質瘤。較佳地，該癌症選自黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌(如非小細胞肺癌或小細胞肺癌)、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤(如多發性骨髓瘤)、星形細胞瘤和膠質瘤。

本公開進一步涉及一種通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物，其用作藥物。

本公開還涉及通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物，其用作KRAS抑制劑，較佳KRAS G12C抑制劑的用途。

本公開還涉及通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物，其用於治療或預防KRAS介導的疾病，較佳KRAS G12C介導的疾病的用途。

本公開還涉及通式(I)或通式(II)或通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物，其用於治療或預防癌症、炎症、或其它增殖性疾病，較佳癌症的用途；其中該癌症選自胃癌、食管癌、黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌(如非小細胞肺癌或小細胞肺癌)、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤(如多發性骨髓瘤)、星形細胞瘤和膠質瘤。較佳地，該癌症選自黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌(如非小細胞肺癌或小細胞肺癌)、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤(如多發性骨髓瘤)、星形細胞瘤和膠質瘤。

可將活性化合物製成適合於藉由任何適當途徑給藥的形式，活性化合物較佳是以單位劑量的方式，或者是以患者可以以單劑自我給藥的方式。本公開化合物或組合物的單位劑量的表達方式可以是片劑、膠囊、扁囊劑、瓶裝藥水、藥粉、顆粒劑、錠劑、栓劑、再生藥粉或液體製劑。

本公開治療方法中所用化合物或組合物的劑量通常將隨疾病的嚴重性、患者的體重和化合物的相對功效而改變。不過，作為一般性指導，合適的單位劑量可以是0.1~1000mg。

本公開的醫藥組成物除活性化合物外，可含有一種或多種輔料，該輔料選自以下成分：填充劑(稀釋劑)、黏合劑、潤濕劑、崩解劑或賦形劑等。根據給藥方法的不同，組合物可含有0.1至99重量%的活性化合物。

含活性成分的醫藥組成物可以是適用於口服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑或酏劑。可按照本領域任何已知製備藥用組合物的方法製備口服組合物，此類組合物可含有一種或多種選自以下的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供悅目和可口的藥用製劑。片劑含有活性成分和用於混合的適宜製備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。

水懸浮液含有活性物質和用於混合的適宜製備水懸浮液的賦形劑。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑。

油混懸液可藉由使活性成分懸浮於植物油中配製而成。油懸浮液可含有增稠劑。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的製劑。

藉由加入水可使適用於製備水混懸液的可分散粉末和顆粒提供活性成分和用於混合的分散劑或濕潤劑、懸浮劑或一種或多種防腐劑。適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑可說明上述的例子。也可加入其他賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。藉由加入抗氧化劑例如抗壞血酸保存這些組合物。

本公開的醫藥組成物也可以是水包油乳劑的形式。

醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶劑有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相的無菌注射水包油微乳。例如將活性成分溶於大豆油和卵磷脂的混合物中。然後將油溶液加入水和甘油的混合物中處理形成微乳。可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本公開化合物恒定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恒定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。這種裝置的實例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。

醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在腸胃外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。

可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本公開化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。此類物質包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

如本領域技術人員所熟知的，藥物的給藥劑量依賴於多種因素，包括但并非限定於以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行為、患者的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、通式化合物(I)的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。

發明的詳細說明

除非有相反陳述，在說明書和申請專利範圍中使用的術語具有下述含義。

術語“烷基”指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子的烷基，更佳為含有1至6個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳的是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自H原子、D原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的環烷基)，其中烷基的定義如上所述，環烷基的定義如下所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基。烷氧基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自H原子、D原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“伸烷基”指飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其具有2個從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子，更佳含有1至6個碳原子的伸烷基。伸烷基的非限制性實例包括但不限於亞甲基(-CH₂-)、1,1-伸乙基(-CH(CH₃)-)、1,2-伸乙基(-CH₂CH₂)-、1,1-伸丙基(-CH(CH₂CH₃)-)、1,2-伸丙基(-CH₂CH(CH₃)-)、1,3-伸丙基(-CH₂CH₂CH₂-)、1,4-伸丁基(-CH₂CH₂CH₂CH₂-)等。伸烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基和氧代基中的一個或多個取代基所取代。

術語“烯基”指分子中含有碳碳雙鍵的烷基化合物，其中烷基的定義如上所述。烯基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“炔基”指分子中含有碳碳三鍵的烷基化合物，其中烷基的定義如上所述。炔基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，環烷基環包含3至20個碳原子，較佳包含3至12個碳原子，較佳包含3至8個碳原子，更佳包含3至6個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。

術語“螺環烷基”指5至20員的單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基或多螺環烷基，較佳為單螺環烷基和雙螺環烷基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺環烷基。螺環烷基的非限制性實例包括：

術語“稠環烷基”指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環烷基。稠環烷基的非限制性實例包括：

術語“橋環烷基”指5至20員，任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋環烷基的非限制性實例包括：

該環烷基環包括如上所述的環烷基(包括單環、螺環、稠環和橋環)稠合於芳基、雜芳基或雜環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實例包括茚滿基、四氫萘基、苯并環庚烷基等；較佳苯基并環戊基、四氫萘基。

環烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包含3至20個環原子，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)z(其中z是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包含3至12個環原子，其中1~4個是雜原子；更佳包含3至8個環原子，其中1-3是雜原子；更佳包含3至6個環原子，其中1-3個是雜原子；最佳包含5或6個環原子，其中1-3個是雜原子。單環雜環基的非限制性實例包括吡咯烷基、四氫吡喃基、1,2.3.6-四氫吡啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。

術語“螺雜環基”指5至20員的單環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_z(其中z是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺雜環基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基，較佳為單螺雜環基和雙螺雜環基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺雜環基。螺雜環基的非限制性實例包括：

術語“稠雜環基”指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_z(其中z是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環稠雜環基。稠雜環基的非限制性實例包括：

術語“橋雜環基”指5至14員，任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_z(其中z是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋雜環基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋雜環基的非限制性實例包括：

該雜環基環包括如上所述的雜環基(包括單環、螺雜環、稠雜環和橋雜環)稠合於芳基、雜芳基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，其非限制性實例包括：

和

等。

雜環基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為6至10員，例如苯基和萘基。該芳基環包括如上所述的芳基環稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，其非限制性實例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“雜芳基”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為5至10員，更佳為5員或6員，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基等。該雜芳基環包括如上述的雜芳基稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：

雜芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“環烷基氧基”指環烷基-O-，其中環烷基如上所定義。

術語“鹵烷基”指烷基被一個或多個鹵素取代，其中烷基如上所定義。

術語“氘代烷基”指烷基被一個或多個氘原子取代，其中烷基如上所定義。

術語“羥基”指-OH基團。

術語“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基如上所定義。

術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。

術語“胺基”指-NH₂。

術語“氰基”指-CN。

術語“硝基”指-NO₂。

術語“羰基”指C=O。

術語“羧基”指-C(O)OH。

術語“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(環烷基)，其中烷基、環烷基如上所定義。

本公開還包括各種氘化形式的式(I)化合物。與碳原子連接的各個可用的氫原子可獨立地被氘原子替換。本領域技術人員能夠參考相關文獻合成氘化形式的式(I)化合物。在製備氘代形式的式(I)化合物時可使用市售的氘代起始物質，或它們可使用常規技術採用氘代試劑合成，氘代試劑包括但不限於氘代硼烷、三氘代硼烷四氫呋喃溶液、氘代氫化鋰鋁、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。

“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“視需要進一步被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。

“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。

“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。

“可藥用鹽”是指本公開化合物的鹽，這類鹽用於哺乳動物體內時具有安全性和有效性，且具有應有的生物活性。

本公開的化合物還可包含其同位素衍生物。術語“同位素衍生物”指結構不同僅在於存在一種或多種同位素富集原子的化合物。例如，具有本公開的結構，除了用“氘”或“氚”代替氫，或者用¹⁸F-氟標記(¹⁸F同位素)代替氟，或者用¹¹C-、¹³C-、或者¹⁴C-富集的碳(¹¹C-、¹³C-、或者¹⁴C-碳標記；¹¹C-、¹³C-、或者¹⁴C-同位素)代替碳原子的化合物處於本公開的範圍內。這樣的化合物可用作例如生物學測定中的分析工具或探針，或者可以用作疾病的體內診斷成像示蹤劑，或者作為藥效學、藥動學或受體研究的示蹤劑。氘代物通常可以保留與未氘代的化合物相當的活性，並且當氘代在某些特定位點時可以取得更好的代謝穩定性，從而獲得某些治療優勢(如體內半衰期增加或劑量需求減少)。

針對藥物或藥理學活性劑而言，術語“治療有效量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。有效量的確定因人而異，取決於受體的年齡和一般情況，也取決於具體的活性物質，個案中合適的有效量可以由本領域技術人員根據常規試驗確定。

本公開化合物的合成方法

為了完成本公開的目的，本公開採用如下技術方案：

方案一

本公開通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：

通式(IA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；X-R⁴較佳丙烯醯氯；

環A、環B、Y、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如通式(I)中所定義。

方案二

本公開通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：

通式(IIA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(II)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；X-R⁴較佳丙烯醯氯；

環A、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如通式(II)中所定義。

方案三

本公開通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：

通式(IIIA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(III)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；X-R⁴較佳丙烯醯氯；

L₁、R¹、R²如通式(III)中所定義。

方案四

本公開通式(IV)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：

通式(IVA)的化合物在鹼性條件下(可選加入縮合劑)與式(IVB)化合物發生醯化或磺醯化反應，得到通式(IV)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；

L₁、R¹、R²、R^e和R^f如通式(IV)中所定義。提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、N,N-二乙基乙二胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、乙酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；較佳三乙胺。

該縮合劑包括但不限於1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、N,N'-二環己基碳二亞胺、N,N'-二異丙基碳二亞胺、O-苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸鹽、1-羥基苯并三唑、1-羥基-7-偶氮苯并三唑、O-苯并三唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸鹽、2-(7-偶氮苯并三唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽、2-(7-氧化苯并三唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽、苯并三唑-1-基氧基三(二甲基胺基)磷鎓六氟磷酸鹽、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸鹽或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷。

上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、第三丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水或N,N-二甲基甲醯胺及其混合物，較佳二氯甲烷。

以下結合實施例進一步描述本公開，但這些實施例并非限制著本公開的範圍。

實施例

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d ₆)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。

MS的測定用Agilent 1200/1290 DAD-6110/6120 Quadrupole MS液質聯用儀(生產商：Agilent，MS型號：6110/6120 Quadrupole MS)，waters ACQuity UPLC-QD/SQD(生產商：waters，MS型號：waters ACQuity Qda Detector/waters SQ Detector)，或THERMO Ultimate 3000-Q Exactive(生產商：THERMO，MS型號：THERMO Q Exactive)。

高效液相色譜法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC 1200VWD和Waters HPLC e2695-2489高壓液相色譜儀。

手性HPLC分析測定使用Agilent 1260 DAD高效液相色譜儀。

高效液相製備使用Waters 2545-2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson GX-281製備型色譜儀。

手性製備使用Shimadzu LC-20AP製備型色譜儀。

CombiFlash快速製備儀使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。

矽膠管柱色譜法使用煙臺黃海矽膠200~300目矽膠為載體。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。

本公開的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG、Acros Organics、Aldrich Chemical Company、韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。

實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。

氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。

加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。

氫化反應通常抽真空，充入氫氣，重複操作3次。

微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。

實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃~30℃。

實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)，反應所使用的展開劑，純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層色譜法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷/甲醇體系，B：正己烷/乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等鹼性或酸性試劑進行調節。

實施例1

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈1

第一步

(S)-2-(1-羥基環丙基)吡咯烷-1-羧酸第三丁酯1b

在氬氣氛下，將(S)-1-第三丁基2-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯1a(26g，113.4mmol，韶遠科技(上海)有限公司)和鈦酸四異丙酯(38.85g，136.68mmol，韶遠科技(上海)有限公司)加入400mL四氫呋喃中，再緩慢滴加乙基溴化鎂(1M,340mL)，加畢室溫反應3小時。加入50mL飽和氯化銨溶液，墊矽藻土過濾，濾液分液，水相用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系B純化得到標題化合物1b(8.3g)，產率：32.2%。

第二步

(S)-1-(1-甲基吡咯烷-2-基)環丙基醇1c

將化合物1b(7.6g，33.43mmol)溶於300mL四氫呋喃中，滴加氫化鋁鋰(1M，100mL)，反應在回流攪拌17小時。緩慢加50mL水，用乙酸乙酯萃取(200mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物1c(3.9g)，產率：82.6%。

第三步

2-(甲硫基)-4-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸第三丁酯1e

將4-羥基-2-(甲硫基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸第三丁酯1d(10.3g,34.64mmol，採用專利申請“WO2017/201161A1中說明書第79頁的實施例中間體32”公開的方法製備而得)溶於200mL二氯甲烷中，冰浴下，分別加入N,N-二異丙基乙胺(6.72g，52mmol)和三氟甲磺酸酐(11.8g，41.82mmol)，室溫攪拌17小時。加入50mL飽和碳酸氫鈉溶液，二氯甲烷萃取(300mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系B純化得到標題化合物1e(9.5g)，產率：63.9%。

第四步

(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰甲基)哌嗪-1-基)-2-(甲硫基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸第三丁酯1f

將化合物1e(9.5g，22.12mmol)溶於80mL乙腈中，分別加入N,N-二異丙基乙胺(5.72g，44.25mmol)和(2S)-2-(氰基甲基)哌啶-1-羧酸苄基酯(6.89g，26.57mmol，採用專利申請“US2018/0072723A1中說明書第110頁的實施例中間體63”公開的方法製備而得)，回流17小時。反應液減壓濃縮，殘留物中加入30mL飽和碳酸氫鈉溶液，乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系B純化得到標題化合物1f(10.3g)，產率：86.4%。

第五步

(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(甲磺醯基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸第三丁基酯1g

將化合物1f(9.8g，18.19mmol)溶於200mL二氯甲烷中，加入間氯過氧苯甲酸(6.28g，36.38mmol)，反應在室溫攪拌2小時。加50mL飽和碳酸氫鈉溶液，二氯甲烷萃取(200mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物1g(10.3g)，產率：99.2%。

MS m/z(ESI)：571.2[M+1]。

第六步

4-((S)-4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸第三丁基酯1h

將化合物1c(3.9g，27.62mmol)溶於100mL四氫呋喃中，冷卻到0℃，滴加入雙(三甲基矽基)胺基鈉(2M，14mL，阿達瑪斯)，攪拌15分鐘，再加入化合物1g(10g，17.52mmol)，室溫反應1小時。加入20mL飽和氯化鈉溶液，分液，水相用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物1h(3.2g)，產率：28.9%。

MS m/z(ESI)：632.3[M+1]。

第七步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯1i

將化合物1h(3.2g,5.06mmol)溶於20mL二氯甲烷中，加入5mL三氟乙酸，室溫攪拌2小時。反應液減壓濃縮，加飽和碳酸氫鈉溶液調pH大於8，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物1i(2.8g)，產物不經純化直接進行下一步反應。

MS m/z(ESI)：532.3[M+1]。

第八步

(S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄基酯1j

在氬氣氛下，將化合物1i(150mg，282.14umol)、1-溴-8-氯-萘(103mg，426.48umol，韶遠科技(上海)有限公司)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(71mg，84.78umol，安耐吉化學)和碳酸銫(276mg，847.1umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻到室溫，反應液減壓濃縮，用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物1j(120mg)，產率：61.4%。

第九步

2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈1k

將化合物1j(120mg，173.34umol)溶於10mL二氯甲烷中，於0℃加入三溴化硼(17% in二氯甲烷)(1.0M，870uL)，攪拌30分鐘。反應液中加入10mL飽和碳酸鈉溶液，調節pH大於7，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物1k(52mg)，產率：53.7%。

MS m/z(ESI)：558.2[M+1]。

第十步

將化合物1k(52mg，93.17umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(28mg，276.70umol)，再滴加丙烯醯氯(17mg，187.82umol)，室溫攪拌1小時。加水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物1(5mg)，產率：8.7%。

MS m/z(ESI)：612.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.77-7.78(m,1H),7.64-7.66(m,1H),7.55-7.56(m,1H),7.48-7.50(m,1H),7.39-7.40(m,1H),7.29-7.31(m,1H),6.61-6.63(m,1H),6.41-6.45(m,1H),5.85-5.86(m,1H),5.10-5.12(m,1H),4.36-4.42(m,1H),4.12-4.22(m,2H),3.85-3.92(m,2H),3.60-3.62(m,2H),3.40-3.43(m,2H),3.23-3.24(m,1H),3.10-3.12(m,2H),2.87(s,3H),2.72-2.74(m,1H),2.61-2.64(m,1H),2.31-2.34(m,1H),2.10-2.15(m,2H),2.02-2.04(m,3H),1.64-1.66(m,1H),0.92-1.03(m,4H)。

實施例2

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈2

第一步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯2a

在氬氣氛下，將化合物1i(150mg，282.14umol)、1-溴-3-氟-2-三氟甲基苯(137mg，563.79umol，韶遠科技(上海)有限公司)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(71mg，84.79umol，安耐吉化學)、碳酸銫(276mg，847.1umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻到室溫，反應液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物2a(120mg)，產率：61.3%。

MS m/z(ESI)：694.0[M+1]。

第二步

2-((S)-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈2b

在氫氣氛下，將化合物2a(120mg，172.98umol)加入10mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1：1)，加入鈀碳(37mg，17.38umol，5%純度)，攪拌2小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物2b(96mg)，產率：99.1%。

MS m/z(ESI)：560.1[M+1]。

第三步

將化合物2b(96mg，171.55umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(52mg，513.88umol)，再滴加丙烯醯氯(31mg，342.51umol)，室溫攪拌1小時。加5mL水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物2(52mg)，產率：49.4%。

MS m/z(ESI)：614.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.50-7.53(m,1H),7.09-7.11(m,1H),6.96-7.01(m,1H),6.60-6.63(m,1H),6.41-6.44(m,1H),5.85-5.87(m,1H),5.10-5.12(m,1H),4.06-4.12(m,3H),3.95-3.98(m,1H),3.63-3.65(m,1H),3.31-3.34(m,2H),3.16-3.18(m,1H),3.05-3.07(m,2H),2.92-2.94(m,2H),2.73-2.75(m,2H),2.53(s,3H),2.22-2.24(m,1H),1.98-2.01(m,1H),1.85-1.88(m,1H),1.73-1.75(m,2H),1.62-1.64(m,2H),1.08-1.12(m,1H),1.00-1.02(m,1H),0.89-0.93(m,2H)。

實施例3

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈3

第一步

(2S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯3a

在氬氣氛下，將化合物1i(200mg，376.18umol)、4-溴-5-甲基-1-四氫吡喃-2-基-吲唑(168mg，569.15umol，採用專利申請“WO2017/201161A1中說明書第95頁的實施例中間體51”公開的方法製備而得)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(95mg，113.45umol，安耐吉化學)和碳酸銫(368mg，1.12umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻到室溫，反應液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物3a(150mg)，產率：53.45%。

MS m/z(ESI)：746.2[M+1]。

第二步

2-((2S)-4-(7-(5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈3b

在氫氣氛下，將化合物3a(150mg，201.1umol)加入10mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1：1)，加入鈀碳(43mg，20.2umol，5%純度)，攪拌2小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物3b(120mg)，產率：97.5%。

MS m/z(ESI)：612.2[M+1]。

第三步

2-((2S)-1-丙烯醯基-4-(7-(5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈3c

將化合物3b(120mg，196.14umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(60mg，592.94umol)，再滴加丙烯醯氯(36mg，397.75umol)，室溫攪拌1小時。加5mL水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物3c(85mg)，產率：65.08%。

MS m/z(ESI)：666.1[M+1]。

第四步

將化合物3c(85mg，127.66umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入2mL三氟乙酸，室溫攪拌1小時。反應液減壓濃縮，殘餘物中加入乙酸乙酯(20mL)，用飽和碳酸鈉溶液洗(50mL×2)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物3(50mg)，產率：67.33%。

MS m/z(ESI)：582.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 10.20-10.23(m,1H),8.11(s,1H),7.28-7.30(m,1H),7.23-7.26(m,1H),6.60-6.64(m,1H),6.40-6.45(m,1H),5.84-5.87(m,1H),5.10-5.13(m,1H),4.33(s,2H),4.09-4.12(m,1H),3.97-4.00(m,2H),3.56-3.62(m,3H),3.30-3.34(m,1H),3.06-3.09(m,2H),2.92-2.94(m,2H),2.79-2.81(m,2H),2.55(s,3H),2.45(s,3H),2.23-2.26(m,1H),2.00-2.03(m,1H),1.75-1.87(m,4H),1.28-1.31(m,1H),1.11-1.14(m,1H),1.03-1.05(m,2H)。

實施例4

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈4

第一步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-((S)-1-(1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯4a

在氬氣氛下，將化合物1i(150mg，282.14umol)、1-溴-2-三氟甲基苯(96mg，426.65umol，阿達瑪斯)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(71mg，84.79umol，安耐吉化學)和碳酸銫(276mg，847.1umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻到室溫，反應液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物4a(150mg)，產率：78.7%。

MS m/z(ESI)：676.1[M+1]。

第二步

2-((2S)-4-(2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈4b

在氫氣氛下，將化合物4a(150mg，221.97umol)加入10mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1：1)，加入鈀碳(48mg，22.55umol，5%純度)，攪拌2小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物4b(120mg)，產率：99.8%。

MS m/z(ESI)：542.2[M+1]。

第三步

將化合物4b(120mg，221.56umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(67mg，662.12umol)，再滴加丙烯醯氯(40mg，441.94umol)，室溫攪拌1小時。加5mL水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物4(34mg)，產率：25.7%。

MS m/z(ESI)：596.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.71-7.72(m,1H),7.58-7.62(m,1H),7.44-7.46(m,1H),7.29-7.35(m,1H),6.60-6.63(m,1H),6.40-6.45(m,1H),5.84-5.88(m,1H),5.10-5.13(m,1H),4.08-4.10(m,3H),3.95-3.98(m,1H),3.62-3.65(m,1H),3.31-3.34(m,1H),3.21-3.25(m,1H),3.13-3.15(m,1H),3.04-3.06(m,1H),2.93-2.99(m,2H),3.09-3.11(m,1H),2.73-2.77(m,2H),2.53-2.56(m,2H),2.22-2.26(m,1H),2.00-2.04(m,1H),1.83-1.86(m,1H),1.73-1.76(m,1H),1.60-1.65(m,4H),0.99-1.09(m,2H),0.87-0.92(m,2H)。

實施例5

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈5

第一步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯5a

在氬氣氛下，將化合物1i(150mg，282.14umol)、1-溴-8-甲基萘(94mg，425.16umol採用公知的方法Journal of Organic Chemistry,2016,81(22),10791-10801製備而得))、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(71mg，84.umol，安耐吉化學)和碳酸銫(276mg，847.09umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻到室溫，反應液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物5a(140mg)，產率：73.8%。

MS m/z(ESI)：672.1[M+1]。

第二步

2-((S)-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈5b

在氫氣氛下，將化合物5a(140mg，208.38umol)加入10mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1：1)，加入鈀碳(44mg，20.67umol，5%純度)，攪拌2小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物5b(72mg)，產率：64.2%。

MS m/z(ESI)：538.2[M+1]。

第三步

將化合物5b(72mg，133.90umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(41mg，405.18umol)，滴加丙烯醯氯(25mg，276.21umol)，室溫攪拌1小時。加5mL水，用二氯甲烷萃取三次(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物5(10mg)，產率：12.6%。

MS m/z(ESI)：592.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.68-7.73(m,2H),7.43-7.45(m,1H),7.35-7.37(m,1H),7.24-7.29(m,2H),6.58-6.63(m,1H),6.42-6.46(m,1H),5.85-5.87(m,1H),5.08-5.12(m,1H),4.23-4.27(m,1H),4.11-4.19(m,2H),3.87-3.94(m,1H),3.74-3.80(m,1H),3.52-3.57(m,1H),3.42-3.46(m,1H),3.20-3.25(m,3H),3.04-3.12(m,2H),2.95(s,3H),2.85-2.89(m,1H),2.76-2.78(m,1H),2.66-2.68(m,2H),2.51-2.54(m,2H),2.23-2.27(m,1H),2.02-2.07(m,2H),1.83-1.86(m,3H),1.03-1.09(m,2H),0.91-0.86(m,2H)。

實施例6

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-7-(鄰-甲苯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈6

第一步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-7-(鄰-甲苯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯6a

在氬氣氛下，將化合物1i(200mg，376.18umol)、1-溴-2-甲基苯(97mg，567.13umol，韶遠科技(上海)有限公司)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(95mg，113.45umol，安耐吉化學)和碳酸銫(368mg，1.12umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻到室溫，反應液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物6a(180mg)，產率：76.9%。

MS m/z(ESI)：622.2[M+1]

第二步

2-((S)-4-(2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-7-(鄰-甲苯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈6b

在氫氣氛下，將化合物6a(180mg，289.49umol)加入10mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1：1)，加入鈀碳(62mg，29.12umol，5%純度)，攪拌2小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物6b(130mg)，產率：92.1%。

MS m/z(ESI)：488.3[M+1]

第三步

將化合物6b(130mg，266.59umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(81mg，800.48umol)，再滴加丙烯醯氯(48mg，530.33umol)，室溫攪拌1小時。加5mL水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物6(108mg)，產率：74.7%。

MS m/z(ESI)：542.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.23-7.26(m,2H),7.08-7.11(m,2H),6.60-6.63(m,1H),6.38-6.46(m,1H),5.84-5.89(m,1H),5.08-5.12(m,1H),4.18-4.21(m,1H),4.08-4.09(m,2H),3.99-4.03(m,1H),3.82-3.85(m,1H),3.60-3.63(m,2H),3.27-3.33(m,2H),3.12-3.14(m,2H),2.90-2.94(m,5H),2.73-2.77(m,3H),2.38(s,3H),2.13-2.16(m,2H),2.02-2.05(m,2H),1.81-1.84(m,1H),1.32-1.34(m,1H),1.27-1.29(m,1H),1.12-1.15(m,1H),1.02-1.06(m,1H)。

實施例7

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(3-羥基萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈7

第一步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯7a

在氬氣氛下，將化合物1i(150mg，282.14umol)、[3-(甲氧甲氧基)-1-萘]三氟甲磺酸酯(142mg，422.26umol，採用專利申請“WO2017/201161A1中說明書第59頁的實施例中間體1”公開的方法製備而得)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(71mg，84.78umol，安耐傑化學)和碳酸銫(276mg，847.09umol)加入到20mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻反應到室溫，反應液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物7a(120mg)，產率：59.2%。

MS m/z(ESI)：718.1[M+1]。

第二步

2-((S)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈7b

在氫氣氛下，將化合物7a(120mg，167.16umol)加入10mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1/1)，加入鈀碳(36mg，16.91，5%純度)，攪拌2小時。反應液過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物7b(67mg)，產率：68.6%。

第三步

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈7c

將化合物7b(67mg，114.78umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(35mg，345.88umol)，再滴加丙烯醯氯(21mg，232.02umol)，室溫攪拌1小時。加5mL水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物7c(45mg)，產率：61.5%。

第四步

將化合物7c(45mg，70.55umol)溶於6mL四氫呋喃和甲醇的混合溶劑中(V/V=1/2)，加入1mL鹽酸(6M)，室溫攪拌6小時。反應液用10mL飽和碳酸鈉溶液調節pH大於7，二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物7(8mg)，產率：19.1%。

MS m/z(ESI)：594.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.99-8.01(m,1H),7.59-7.61(m,1H),7.35-7.39(m,1H),7.27-7.29(m,1H),6.90-6.92(m,2H),6.53-6.58(m,1H),6.37-6.41(m,1H),5.81-5.84(m,1H),5.00-5.04(m,1H),4.50-4.53(m,1H),4.21-4.25(m,2H),4.01-4.04(m,1H),3.90-3.92(m,2H),3.46-3.49(m,2H),3.28-3.31(m,2H),3.20-3.23(m,1H),3.00-3.08(m,2H),2.68-2.83(m,7H),2.48-2.52(m,1H),2.02-2.05(m,2H),1.82-1.87(m,2H),1.03-1.11(m,4H)。

實施例8

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈8

第一步

1-(吡咯烷-1-羰基)環丙烷-1-羧酸甲酯8b

冰水浴下，將1-(甲氧基羰基)環丙烷-1-羧酸8a(3g，20.81mmol，韶遠科技(上海)有限公司)溶於80mL二氯甲烷，0℃加入草醯氯(10.5g，83.26mmol)和3滴N,N-二甲基甲醯胺，攪拌10分鐘。反應升溫至35℃繼續攪拌3小時，減壓濃縮。加入60mL無水二氯甲烷，冷卻到0℃，加入三乙胺(10g，104.15mmol)和吡咯烷(1.77g，24.90mmol)，繼續反應3小時，減壓濃縮。殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物8b(3.2g)，產率：77.9%。

MS m/z(ESI)：198.1[M+1]。

第二步

(1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲醇8c

將化合物8b(1.5g，7.60mmol)溶於20mL四氫呋喃中，冷卻到-78℃，加入四氫鋁鋰16.7mL(1M)，室溫攪拌2小時。反應液冷卻到-60℃，緩慢加入30mL乙酸乙酯，然後加入10mL水和20mL 2M氫氧化鈉溶液，在室溫攪拌1小時，過濾。濾餅用二氯甲烷(100mL×3)洗滌，濾液中的有機相減壓濃縮，水相用二氯甲烷(100mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物8c(300mg)，產率：25.4%。

MS m/z(ESI)：156.1[M+1]。

第三步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(甲硫基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯8e

將(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(甲硫基)-5,8-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸第三丁酯8d(3g，5.57mmol，採用專利申請“US2019/144444,2019,A1中說明書第157頁的實施例中間體68”公開的方法製備而得)溶於20mL二氯甲烷和5mL三氟乙酸中，攪拌反應1小時，減壓濃縮。殘餘物中加入30mL飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌10分鐘，用二氯甲烷(100mL×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物8e(1.77g)，產率：72.5%。

MS m/z(ESI)：439.1[M+1]。

第四步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-(甲硫基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯8f

在氬氣氛下，將化合物8e(1g，2.28mmol)、7-氟-8-甲基萘-1-基三氟甲烷磺酸鹽(702mg，2.28mmol，採用專利申請“US2019/0270743A1中說明書第76頁的實施例中間體77”公開的方法製備而得)、甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)(347mg，0.46mmol，安耐吉化學)和碳酸銫(1.86g，5.71mmol)加入到60mL甲苯中，在95℃攪拌17小時。冷卻反應到室溫，反應液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物8f(0.57g)，產率：41.9%。

MS m/z(ESI)：597.2[M+1]。

第五步

(2S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-(甲基亞磺醯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯8g

將化合物8f(0.57g，0.95mmol)、3-氯過氧苯甲酸(180mg，1.05mmol)溶於20mL二氯甲烷中，攪拌反應2小時。向反應液中加入10mL飽和碳酸氫鈉溶液，攪拌10分鐘，分層，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物8g(0.41g)，產率：70%

MS m/z(ESI)：613.2[M+1]。

第六步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯8h

將化合物8c(0.2g，1.28mmol)溶於10mL四氫呋喃中，冷卻到0℃，滴加入雙(三甲基矽基)胺基鈉(2M，0.64mL，阿達瑪斯)，攪拌15分鐘，再加入化合物8g(0.39g，0.64mmol)，室溫反應1小時。加入20mL飽和氯化鈉溶液，分液，水相用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物8h(0.24g)，產率：52.9%。

MS m/z(ESI)：704.3[M+1]。

第七步

(S)-2-(4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈8i

將化合物8h(240mg，340.98umol)加入10mL四氫呋喃中，加入鈀碳(100mg，5%純度)，氫氣置換三次，攪拌2小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物8i(180mg)，產率：92.6%。

MS m/z(ESI)：570.3[M+1]。

第八步

將化合物8i(70mg，122.87umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入N,N-二乙基乙二胺(32mg，245.81umol)，再滴加丙烯醯氯(12mg，35.23umol)，攪拌反應1小時。加水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物8(25mg)，產率：32.6%。

MS m/z(ESI)：624.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.84(t,1H),7.71(t,1H),7.47-7.36(m,3H),6.85(br,s,1H),6.18(d,1H),5.78(d,1H),4.96-4.41(m,4H),4.10-3.98(m,5H),3.71-3.41(m,6H),3.08-3.06(m,6H),2.88(s,3H),2.86-2.78(m,3H),1.67(s,3H),0.57-0.41(m,4H)。

實施例9

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-((二甲胺基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈9

採用實施例8的合成路線，將第一步原料吡咯烷替換為二甲胺，將第四步原料7-氟-8-甲基萘-1-基三氟甲烷磺酸酯替換為1-溴-8-氯代萘製得標題化合物9(12mg)。

MS m/z(ESI)：602.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.45(d,1H),7.61(t,1H),7.51(d,1H),7.43-7.45(m,1H),7.33(t,1H),7.23-7.26(m,1H),6.58(br,s,1H),6.38(d,1H),5.80(d,1H),4.50-4.53(m,1H),4.26-4.44(m,3H),4.02-4.12(m,1H),3.80-3.90(m,2H),3.49-3.56(m,2H),3.10-3.26(m,6H),2.62-3.01(m,9H),2.47-2.61(m,1H),0.98(s,2H),0.85-0.88(m,2H)。

實施例10

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈10

第一步

1-(氯羰基)環丙烷-1-羧酸甲酯10-1

將化合物8a(1.4g，9.71mmol)溶解於20mL二氯甲烷中，加入0.2mL N,N-二甲基甲醯胺，於0℃滴加草醯氯(1.26g，9.92mmol，泰坦)，反應於0℃攪拌1小時。所得混合物濃縮得到標題產物粗品10-1(1.58g)，產物不經純化直接進行下一步反應。

第二步

1-(吡咯烷-1-羰基)環丙烷-1-羧酸甲酯10-2

將化合物10-1(1.58g，9.71mmol)溶於500mL四氫呋喃中，於0℃加入吡咯烷(3.45g，48.48mmol，安耐吉)。反應液在室溫攪拌16小時，停止反應。加入50mL水，乙酸乙酯(50mL×3)萃取，乾燥，過濾，減壓濃縮，得到標題產物10-2(1.64g)，產物不經純化直接進行下一步反應。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 3.72(s,3H),3.50(t,2H),3.44(t,2H),1.94-1.87(m,4H),1.48-1.45(m,2H),1.36-1.33(m,2H)。

第三步

(1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲醇10-3

氬氣氛下，將化合物10-2(1.0g，5.07mmol)溶於100mL四氫呋喃中，於0℃加入四氫鋁鋰四氫呋喃溶液(1M，10mL，10mmol，安耐吉)，反應液在0℃攪拌4小時。加入3.2g十水合硫酸鈉淬滅反應。乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物10-3(624mg)，產率：79%。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 3.55(s,2H),2.61-2.57(m,6H),1.77-1.73(m,4H),0.49-0.47(m,2H),0.37-0.35(m,2H)。

第四步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物10-3，製得標題產物10(10mg)。收率：11.4%。

MS m/z(ESI)：626.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.73-7.75(m,1H),7.59-7.61(m,1H),7.50-7.52(m,1H),7.36-7.46(m,1H),7.30-7.34(m,1H),7.19-7.26(m,1H),6.58(br,1H),6.36-6.41(m,1H),5.80-5.83(m,1H),4.40-4.45(m,1H),4.22-4.37(m,2H),4.0-4.18(m,1H),3.78-3.93(m,2H),3.56-3.72(m,1H),3.28-3.50(m,1H),3.02-3.25(m,4H),2.65-2.95(m,8H),2.40-2.65(m,2H),1.68-1.93(m,4H),1.28-1.38(m,1H),0.65-0.78(m,2H),0.48-0.62(m,2H)。

實施例11

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(哌啶-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈11

第一步

1-(哌啶-1-羰基)環丙基-1-羧酸甲酯11-1

將化合物8a(5.0g，34.69mmol)，哌啶(2.95g，34.69mmol，畢得醫藥)、1-羥基苯并三唑(5.63g，41.03mmol，泰坦)、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(7.98g，41.03mmol，泰坦)和N,N-二異丙基乙胺(13.45g，104.08mmol)溶解於50mL二氯甲烷中，攪拌3小時。加20mL水，二氯甲烷(20mL×3)萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物經CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化得到標題化合物11-1(4.8g)。

第二步

(1-(哌啶-1-基甲基)環丙基)甲醇11-2

氬氣氛下，將化合物11-1(4.8g，22.72mmol)溶解於50mL乾燥四氫呋喃中，於0℃加入氫化鋁鋰四氫呋喃溶液(1M，68mL，68mmol，國藥)，反應液在0℃攪拌1小時。加入十水合硫酸鈉(70g)攪拌30分鐘并過濾。濾液減壓濃縮，殘餘物經CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化得到標題產物11-2(1.81g)，產率：47%。

1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.13(brs,1H),3.54(s,2H),2.52(brs,4H),2.44(s,2H),1.61-1.56(m,4H),1.44(s,2H),0.51-0.48(m,2H),0.36-0.33(m,2H)。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物11-2，製得標題產物11(10mg)。收率：15.6%。

MS m/z(ESI)：640.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.73-7.75(m,1H),7.60-7.62(m,1H),7.50-7.52(m,1H),7.38-7.48(m,1H),7.30-7.34(m,1H),7.23-7.26(m,1H),6.50-6.75(br,1H),6.36-6.40(m,1H),5.80-5.82(m,1H),4.38-4.45(m,1H),4.12-4.32(m,2H),3.98-4.13(m,1H),3.75-3.95(m,2H),3.51-3.76(m,1H),3.32-3.51(m,1H),2.92-3.29(m,4H),2.65-2.91(m,2H),2.28-2.65(m,6H),2.09-2.26(m,1H),1.81-2.08(m,1H),1.45-1.75(m,4H),1.33-1.43(m,2H),1.25-1.32(m,1H),0.55-0.75(m,2H),0.28-0.55(m,2H)。

實施例12

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈12

第一步

(R)-1-(3-氟吡咯烷-1-羰基)環丙烷-1-羧酸甲酯12-1

於0℃，將3-(R)-氟吡咯烷鹽酸鹽(0.6g，4.78mmol，晶石醫藥)、化合物8a(0.8g，5.55mmol)、1-乙基-(3-二甲基胺基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽(1.2g，6.26mmol，畢得)和1-羥基苯并三唑(0.83g，6.14mmol，畢得)溶解於20mL二氯甲烷中，加入N,N-二異丙基乙胺(4.0g，30.95mmol)，攪拌反應16小時。減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系B純化得到標題化合物12-1(0.6g)，產率：50%。

第二步

(R)-(1-((3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲醇12-2

氬氣氛下，將化合物12-1(0.6g，2.79mmol)加入20mL四氫呋喃中，於0℃加入氫化鋁鋰(1M的四氫呋喃溶液，5.6mL，5.6mmol)。反應液於0℃攪拌4小時。加入十水合硫酸鈉(3.2g)淬滅反應，過濾，減壓濃縮得粗品產物12-2(0.4g)，產物不經純化直接進行下一步反應。

第三步

採用實施例8的合成路線，將第六步化合物8c替換為化合物12-2，製得標題產物12(16mg)，收率：21%。

MS m/z(ESI)：642.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ.85(t,1H),7.72(t,1H),7.45-7.34(m,3H),6.84(brs,1H),6.19(d,1H),5.78(d,1H),5.16(d,1H),4.99-4.73(m,1H),4.44-3.60(m,7H),3.50-3.41(m,2H),3.24-3.03(m,4H),2.94-2.72(m,6H),2.68-2.50(m, 2H),2.46-2.42(m,2H),2.34-2.25(m,2H),2.08-2.01(m,1H),1.87-1.78(m,1H),0.56-0.54(m,2H),0.40(s,2H)。

實施例13

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈13

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物12-2，製得標題產物13(10mg)，收率：15.5%。

MS m/z(ESI)：644.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.66-7.82(m,1H),7.55-7.66(m,1H),7.48-7.55(m,1H),7.36-7.48(m,1H),7.29-7.36(m,1H),7.15-7.25(m,1H),6.50-6.75(br,1H),6.30-6.48(m,1H),5.72-5.92(m,1H),4.35-4.78(m,1H),4.28-4.34(m,1H),4.13-4.23(m,1H),4.00-4.12(m,1H),3.86-3.98(m,1H),3.75-3.89(m,1H),3.52-3.75(m,2H),3.33-3.50(m,1H),2.96-3.30(m,5H),2.78-2.98(m,3H),2.63-2.77(m,2H),2.53-2.63(m,1H),2.32-2.50(m,1H),1.91-2.15(m,2H),1.70-1.92(m,1H),1.25-1.42(m,2H),0.31-0.83(m,4H)。

實施例14

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-((1-(哌啶-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈14

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物11-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物14(5mg)，收率：13%。

MS m/z(ESI)：620.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.77-7.71(m,2H),7.48-7.44(m,1H),7.35-7.27(m,3H),6.86(br,1H),6.19(d,1H),5.78(d,1H),4.99-4.76(m,1H),4.40-3.90(m,5H),3.75-3.60(m,2H),3.43-3.36(m,3H),3.27-3.12(m,4H),3.09-2.98(m,1H),2.86(s,3H),2.80-2.55(m,1H),2.32(brs,4H),2.21(s,2H),1.44-1.42(m,4H),1.34(s,2H),0.56-0.54(s,2H),0.36-0.33(s,2H)。

實施例15

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈15

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物10-3，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物15(13mg)，收率：20%。

MS m/z(ESI)：606.4[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.76-7.68(m,2H),7.48-7.26(m,4H),6.86(brs,1H),6.19(d,1H),5.78(d,1H),4.97-4.79(m,1H),4.15-3.94(m,6H),3.76-3.62(m,1H),3.12-3.04(m,6H),2.86(s,3H),2.73-2.68(m,1H),2.42-2.36(m,6H),1.64(s,4H),1.23(m,2H),0.53(d,2H),0.38(s,2H)。

實施例16

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(2-((1-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈16

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物12-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題化合16(12mg)，收率：9.1%。

MS m/z(ESI)：624.6[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.76-7.68(m,2H),7.46-7.26(m,4H),6.86(brs,1H),6.21-6.05(m,1H),5.78(d,1H),5.23-5.09(m,1H),4.97-4.77(m,1H),4.15-3.94(m,6H),3.70-3.66(m,1H),3.42-3.39(m,1H),3.12-3.10(m,5H),2.92- 2.90(m,1H),2.86(s,3H),2.82-2.76(m，3H),2.71-2.60(m,1H),2.62-2.43(m,2H),2.33-2.28(m,2H),2.10(m,1H),1.88-1.80(m,1H),0.54(d,2H),0.40(s,2H)。

實施例17

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈17

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物10-1，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-3-氟-2-(三氟甲基)苯(畢得)製得標題產物將17(23mg)，收率：40.4%。

MS m/z(ESI)：628.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.43-7.54(m,1H),7.04-7.06(m,1H),6.90-7.00(m,1H),6.51-6.63(m,1H),6.34-6.45(m,1H),5.80-5.83(m,1H),4.16-4.29(m,2H),4.05-4.16(m,3H),3.85-4.02(m,2H),3.48-3.71(m,1H),3.20-3.36(m,2H),3.12-3.19(m,1H),3.00-3.11(m,1H),2.76-2.98(m,3H),2.65-2.76(m,2H),2.33-2.63(m,6H),1.65-1.82(m,4H),0.55-0.68(m,2H),0.32-0.54(m,2H)。

實施例18

(S)-2-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-((二甲基胺基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈18

將化合物18-1(55mg，101ummol，採用實施例8的合成路線，將第一步原料吡咯烷替換為二甲胺，將第四步原料7-氟-8-甲基萘-1-基三氟甲烷磺酸酯替換為1-溴-8-氯代萘製備而得)、2-氟丙烯酸(18mg，200umol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲胺基)磷鎓六氟磷酸鹽(90mg，203umol，阿達瑪斯)、N,N-二乙基乙二胺(40mg，309umol)加入到20mL二氯甲烷中，在室溫攪拌16小時。向反應液中加入60mL水，用二氯甲烷(30mL×3)萃取，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物18(15mg)，產率：24.1%。

MS m/z(ESI)：619.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.74(d,1H),7.60(t,1H),7.51(d,1H),7.42-7.45(m,1H),7.32(t,1H),6.99-7.22(m,1H),5.22-5.46(m,2H),4.38-4.45(m,1H),4.16-4.21(m,2H),4.02-4.06(m,1H),3.79-3.91(m,3H),3.57-3.58(m,1H),3.29-3.31(m,1H),3.09-3.21(m,4H),2.84-2.86(m,2H),2.55(t,1H),2.26-2.35(m,8H),1.26-1.39(m,1H),0.64(s,2H),0.45(s,2H)。

實施例19

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(2,3-(二甲基苯基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈19

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物10-1，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-2,3-二甲基苯(阿達瑪斯)製得標題產物將19(25mg)，收率：43.8%。

MS m/z(ESI)：570.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.05-7.15(m,1H),6.91-6.98(m,2H),6.51-6.65(m,1H),6.33-6.43(m,1H),5.78-5.86(m,1H),4.16-4.30(m,2H),4.08-4.15(m,1H),4.00-4.05(m,2H),3.86-4.00(m,2H),3.42-3.71(m,1H),3.23-3.35(m,1H),3.01-3.21(m,3H),2.67-2.98(m,5H),2.35-2.66(m,6H),2.29(s,3H),2.26(s,3H),1.71-1.86(m,4H),0.55-0.68(m,2H),0.38-0.54(m,2H)。

實施例20

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丁基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈20

第一步

1-(吡咯烷-1-羰基)環丁烷-1-甲酸乙酯20-1

於0℃，將1-(乙氧羰基)環丁酸20-0(4.5g，26.16mmol，樂研)、吡咯烷(1.86g，26.16mmol)、1-羥基苯并三唑(4.24g，31.39mmol)、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(6.12g，31.39mmol)、N,N-二異丙基乙胺(10.1g，78.48mmol)溶解於100mL二氯甲烷中，攪拌5小時。所得混合物加20mL水，二氯甲烷(20mL×3)萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物經CombiFlash快速製備儀以沖提劑B純化得到標題產物20-1(4.0g)，產率：67%。

第二步

(1-(吡咯烷-1-基甲基)環丁基)甲醇20-2

氬氣氛下，將化合物20-1(4.0g，17.76mmol)溶解於50mL乾燥四氫呋喃中，於0℃加入氫化鋁鋰四氫呋喃溶液(1M，53mL，53mmol)，攪拌1小時。加乙酸乙酯淬滅後再加十水硫酸鈉(50g)攪拌30分鐘，過濾，減壓濃縮得粗產品。經CombiFlash快速製備儀以沖提劑A純化得到標題產物20-2(800mg)，產率：26%。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物20-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物20(22mg)，收率：19%。

MS m/z(ESI)：620.5[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.77-7.68(m,2H),7.47-7.42(m,1H),7.39-7.26(m,3H),6.85(br,1H),6.19(d,1H),5.79-5.76(d,1H),4.98-4.77(m,1H),4.27-4.25(m,2H),4.06-3.96(m,4H),3.72-3.67(m,2H),3.43-3.39(m,1H),3.29-3.00(m,6H),2.92(s,3H),2.88-2.84(m,1H),2.56(s,2H),2.41(s,4H),1.95-1.80(m,6H),1.62-1.61(m,4H)。

實施例21

(S)-2-(4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈21

第一步

((S)-2-(4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈21

將化合物8i(150mg，263.29mmol)、2-氟丙烯酸(47mg，526.68mmol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲胺基)磷鎓六氟磷酸鹽(233mg，526.58mmol，阿達瑪斯)、N,N-二乙基乙二胺(136mg，1.05mmol)加入到20mL二氯甲烷中，在室溫攪拌16小時。向反應液中加入60mL水，用二氯甲烷(30mL×3)萃取，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物21(43mg)，產率：25.4%。

MS m/z(ESI)：642.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.85(t,1H),7.72(t,1H),7.44-7.32(m,3H),5.42-5.21(m,3H),4.09-3.98(m,6H),3.73(t,2H),3.43-3.40(m,3H),3.3.(s,2H),3.08(d,1H),2.96(d,3H),2.80(t,1H),2.78(s,3H),2.67-2.43(m,2H),2.33(brs,s,3H),1.66(s,3H),0.55-0.41(d,4H)。

實施例22

(S)-2-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈22

將化合物22-1(100mg，174umol，採用實施例10的合成路線製得)溶於20mL二氯甲烷中，加入2-氟丙烯酸(32mg，355umol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲胺基)磷鎓六氟磷酸鹽(154mg，348umol)，再滴加N,N-二異丙基乙胺(67mg，519umol)，攪拌3小時。加入水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，飽和氯化鈉洗滌(10mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物22(28mg)，產率：24.8%。

MS m/z(ESI)：644.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.73-7.75(m,1H),7.60-7.68(m,1H),7.50-7.55(m,1H),7.38-7.46(m,1H),7.30-7.36(m,1H),7.15-7.25(m,1H),5.34-5.46(m,1H),5.21-5.26(m,1H),4.37-4.45(m,1H),4.16-4.26(m,2H),3.95-4.15(m,2H),3.75-3.95(m,2H),3.52-3.66(m,1H),3.32-3.48(m,1H),2.95-3.29(m,4H),2.75-2.96(m,2H),2.27-2.75(m,7H),1.65-1.98(m,5H),0.55-0.72(m,2H),0.38-0.54(m,2H)。

實施例23

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(2-(1-((二甲胺基)甲基)環丙氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈23

第一步

1-羥基-N,N-二甲基環丙烷-1-甲醯胺23-1

將化合物23-0(1g，9.80mmol，畢得)加入N,N-二甲基甲醯胺和二氯甲烷的混合溶劑(21mL，V/V=1/20)中，加入1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(2.82g，14.71mmol)、1-羥基苯并三唑(1.46g，10.80mmol)、N-甲基嗎啉(2.20g，21.75mmol)和1M二甲胺(10mL)。反應於0℃攪拌1小時。反應液加入20mL水，二氯甲烷萃取(40mL×3)。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，殘餘物經管柱層析色譜法以沖提劑B純化得到標題產物23-1(770mg)，產率：60%。

第二步

1-((二甲胺基)甲基)環丙烷-1-醇23-2

氬氣氛下，將化合物23-1(0.25g，1.94mmol)加入10mL四氫呋喃中，於0℃加入1M硼烷四氫呋喃溶液(7.8mL，安耐吉)。反應液於0℃攪拌0.5小時後升溫至35℃攪拌1小時。於0℃加入20mL甲醇淬滅，過濾，濾液減壓濃縮，得標題化合物23-2(0.2g)，不純化直接進行下一步反應。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 5.51(s,1H),2.88(s,2H),2.69(s,6H),0.68-0.59(m,4H)。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物23-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物23(16mg)，收率：20%。

MS m/z(ESI)：566.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.77-7.68(m,2H),7.49-7.45(m,1H),7.39-7.26(m,3H),6.87-6.83(m,1H),6.21-6.17(m,1H),5.78(d,1H),4.97-4.77(m,1H),4.08-3.87(m,4H),3.85-3.56(m,3H),3.20-2.98(m,6H),2.87(s,3H),2.72-2.67(m,3H),2.20(s,6H),0.88-0.76(m,4H)。

實施例24

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈24

第一步

1-(吡咯烷-1-羰基)環丙基甲腈24-1

將化合物1-氰基-1-環丙烷羧酸24-0(2g，18mmol，畢得)溶於20mL二氯甲烷中，加入吡咯烷(1.28g，18mmol，1.5mL，安耐吉)、N,N-二異丙基乙胺(4.65g，36mmol，5.9mL)、苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(8.19g，21.6mmol，阿達瑪斯)，室溫攪拌17小時。加水，水相用二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系B純化得到標題化合物24-1(2.5g)，產率：84.5%。

第二步

(1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲胺24-2

將化合物24-1(2.5g,15.24mmol)溶於20mL四氫呋喃中，於0℃滴加氫化鋁鋰(1M,18.2mL)，將反應回流攪拌17小時。冷卻至0℃，慢慢滴加水淬滅，再滴加20%氫氧化鈉溶液1mL，過濾，濾液用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得標題化合物24-2(820mg)，產物不經純化直接進行下一步反應。

第三步

(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲基)胺基)-5,8-二氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸第三丁基酯24-3

將化合物1g(2g，3.5mmol)溶於30mL四氫呋喃中，加入化合物24-2(811mg，5.25mmol)、第三丁醇鈉(337mg，3.5mmol)，反應在室溫攪拌3 小時。加水，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物24-3(600mg)，產率：26.5%。

第四步

採用實施例1的合成路線，將第七步1h替換為化合物24-3，將第八步的1-溴-8-氯-萘替換為1-溴-3-氟-2-(三氟甲基)苯製得標題產物24(35mg)。收率：53.3%。

MS m/z(ESI)：627.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.39-7.49(m,1H),7.03-7.10(m,1H),6.87-6.97(m,1H),6.50-6.66(m,1H),6.33-6.43(m,1H),5.77-5.86(m,1H),3.99-4.05(m,2H),3.89-3.95(m,1H),3.77-3.86(m,1H),3.46-3.52(m,3H),3.35-3.43(m,2H),3.11-3.28(m,3H),2.93-2.99(m,1H),2.83-2.90(m,1H),2.70-2.80(m,2H),2.59-2.68(m,2H),2.49-2.58(m,3H),2.37-2.48(m,2H),1.72-1.87(m,4H),1.54-1.71(m,4H)。

實施例25

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(2-((1-(甲胺基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈25

第一步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(甲硫基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯25-1

將化合物1f(6.5g，12.07mmol)溶於5mL二氯甲烷中，滴加10mL三氟乙酸，攪拌2小時。減壓濃縮得到標題產物25-1(5.2g)，不純化直接用於下一步反應。

第二步

(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(甲硫基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯25-2

氬氣氛下，將化合物25-1(5.2g，11.86mmol)，1-溴-8-甲基萘(2.62g，11.86mmol)，甲磺酸(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)(2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)(II)(992mg，1.19mmol，艾柏化工)，碳酸銫(11.59g，35.57mmol)加入10mL甲苯中，反應在90℃攪拌16小時。減壓濃縮得粗產品，經CombiFlash快速製備儀以沖提劑A體系純化得到標題產物25-2(2.6g)，產率：37%。

第三步

(2S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(甲基亞磺醯基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯25-3

於0℃，將化合物25-2(2.6g，4.49mmol)、間氯過氧苯甲酸(866mg，5.03mmol，濟南嘉彬，85%)溶解於10mL二氯甲烷中，反應液於0℃，攪拌30分鐘，停止反應。所得混合物低溫濃縮得粗產品，經CombiFlash快速製備儀以沖提劑B體系純化得到標題產物25-3(2.2g)，產率：82%。

第四步

(S)-4-(2-((1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯25-4

氬氣氛下，將化合物25-3(600mg，1.01mmol)、(1-(羥甲基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(283mg，1.51mmol，韶遠)、第三丁醇鈉(193mg，2.02mmol，泰坦)溶解於8mL甲苯中，於0℃攪拌30分鐘。所得混合物用20mL水淬滅，二氯甲烷(20mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品，經CombiFlash快速製備儀以沖提劑B體系純化得到標題產物25-4(500mg)，產率：69%。

第五步

(S)-4-(2-((1-((第三丁氧羰基)(甲基)胺基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯25-5

將化合物25-4(250mg，0.348mmol)溶解於10mL四氫呋喃中，於0℃，加入氫化鈉(16.7mg，0.696mmol，泰坦)，攪拌反應1小時。再加入碘甲烷(98.86mg，0.696mmol，國藥)，室溫反應2小時。加20mL水，二氯甲烷(20mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品，經CombiFlash快速製備儀以沖提劑B體系純化得到標題產物25-5(200mg)，產率：78%。

第六步

(S)-(1-(((4-(3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)環丙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯25-6

將化合物25-5(200mg，0.273mmol)溶解於5mL甲醇中，加入鈀碳(40mg，5%純度，權中化工)，氫氣置換三次，攪拌1小時。所得混合物過濾濃縮得到標題產物25-6(105mg)，產物未經純化直接用於下步反應。

第七步

(S)-(1-(((4-(4-丙烯醯基-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)環丙基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯25-7

將化合物25-6(105mg，0.175mmol)溶解於5mL二氯甲烷中，於0℃滴加丙烯醯氯(15.9mg，0.175mmol，畢得)，而後加入三乙胺(53.3mg，0.526mmol)。反應於0℃攪拌1小時。所得混合物用碳酸氫鈉水溶液(20mL)淬滅，二氯甲烷(20mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品，經CombiFlash快速製備儀以沖提劑A體系純化得到標題產物25-7(90mg)，產率：78%。

第八步

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(2-((1-(甲基胺基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈25

將化合物25-7(90mg，0.138mmol)溶解於5mL二氯甲烷中，向反應液滴加三氟乙酸(5mL)，反應於室溫攪拌1小時。所得混合物用碳酸氫鈉水溶液(20mL)淬滅，二氯甲烷(20mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品。經過高效液相製備分離(甲酸)得到標題產物25(14mg)，產率：18%。

MS m/z(ESI)：552.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.76-7.68(m,2H),7.48-7.26(m,4H),6.85-6.85(brs,1H),6.20-6.16(d,1H),5.79-5.76(d,1H),4.95-4.78(m,1H),4.22-4.21(m,2H),4.03-3.65(m,5H),3.34-3.31(m,3H),3.18-2.92(m,5H),2.86(s,3H),2.72-2.54(m,1H),2.33(d,3H),0.62(m,4H)。

實施例26

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(2-氯-4-氟苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈26

採用實施例1的合成路線，將第八步原料1-溴-8-氯-萘替換為1-溴-2-氯-4-氟苯，製得標題產物26(3mg)，產率：9.1%。

MS m/z(ESI)：580.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.19-7.16(m,1H),7.02-6.98(m,1H),6.73(brs,s,1H),6.20(d,1H),5.75(d,1H),4.49(t,2H),40.14-3.94(m,3H),3.62(brs,s,1H),3.37-3.29(m,3H),3.06(s,3H),2.88-2.73(m,5H),2.16-2.10(m,1H),1.94(d,2H),1.84(s,3H),1.70(s,1H),1.24-0.81(m,6H)。

實施例27

(S)-2-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(哌啶-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈27

將化合物27-1(80mg，136umol，採用實施例11的合成路線製得)溶於20mL二氯甲烷中，加入2-氟丙烯酸(25mg，277umol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲胺基)磷鎓六氟磷酸鹽(121mg，273umol)，再滴加N,N-二異丙基乙胺(53mg，410umol)，攪拌3小時。加入水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，飽和氯化鈉溶液洗滌(10mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物27(8mg)，產率：8.9%。

MS m/z(ESI)：658.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.73-7.75(m,1H),7.55-7.68(m,1H),7.50-7.55(m,1H),7.38-7.48(m,1H),7.30-7.38(m,1H),7.15-7.25(m,1H),5.31-5.51(m,1H),5.15-5.30(m,1H),4.35-4.48(m,1H),4.16-4.31(m,2H),4.08-4.18(m,1H),3.97-4.08(m,1H),3.72-3.95(m,2H),3.52-3.63(m,1H),3.35-3.48(m,1H),2.96-3.30(m,4H),2.73-2.95(m,2H),2.26-2.70(m,5H),2.12-2.25(m,1H),1.95-2.08(m,1H),1.70-1.93(m,3H),1.50-1.70(m,3H),1.38-1.48(m,1H),0.60-1.80(m,2H),0.25-0.6-58(m,2H)。

實施例28

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(2-((1-(二甲胺基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈28

第一步

(1-胺基環丙基)甲醇鹽酸鹽28-1

將化合物1-(第三丁氧羰基胺基)環丙基甲醇28-0(1.0g，5.31mmol，韶遠)溶解於10mL 1,4-二噁烷中，加入4M氯化氫1,4-二噁烷溶液(4mL，Chemart)，攪拌1小時。所得混合物濃縮得到標題產物粗品28-1(465mg)，產物未經純化直接用於下一步反應。

第二步

(1-(二甲胺基)環丙基)甲醇28-2

將化合物28-1(232mg，2.66mmol)溶於20mL 1,2-二氯乙烷中，加入甲醛水溶液(1.2g，30%，國藥)和三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4g，16.04mmol，韶遠)，攪拌16小時。所得混合物用50mL水淬滅，二氯甲烷(50mL×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品。經CombiFlash快速製備儀以沖提劑A體系純化得到標題產物28-2(100mg)，產率：33%。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 4.33(t,1H),3.47(d,2H),2.34(s,6H),0.49-0.46(m,2H),0.41-0.38(m,2H)。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物28-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物28(32mg)，收率：33%。

MS m/z(ESI)：566.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.77-7.68(m,2H),7.49-7.26(m,4H),6.87-6.83(m,1H),6.19(d,1H),5.78(d,1H),5.01-4.72(m,1H),4.28(d,2H),4.06-3.94(m,3H),3.77-3.66(m,1H),3.42-3.39(m,2H),3.29-3.24(m,1H),3.21-2.86(m,5H),2.82(s,3H),2.74-2.56(m,2H),2.35(s,6H),0.64-0.56(m,4H)。

實施例29

2-((S)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)-哌嗪-2-基)-乙腈29

採用實施例18的合成路線，將原料化合物18-1替換為化合物2-((S)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(採用實施例12的合成路線製備而得)，製得標題產物29(10mg)，產率：8.9%。

MS m/z(ESI)：660.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.85(t,1H),7.72(t,1H),7.46-7.34(m,3H),5.42-5.09(m,3H),4.15-4.05(m 6H),3.74(t,2H),3.30(s,3H),3.21(d,2H),3.09.(d,4H),2.95-2.91(m,2H),2.80(s,6H),2.46-2.33(m,3H),2.29-1.80(m,3H),0.48(d,4H)。

實施例30

2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈30

將化合物30-1(50mg，84umol，採用實施例13的合成路線製得)溶於20mL二氯甲烷中，加入2-氟丙烯酸(16mg，177umol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲胺基)磷鎓六氟磷酸鹽(75mg，169umol)，再滴加N,N-二異丙基乙胺 (33mg，255umol)，攪拌3小時。加入水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，飽和氯化鈉溶液洗滌(10mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物30(10mg)，產率：17.5%。

MS m/z(ESI)：662.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.74-7.76(m,1H),7.60-7.68(m,1H),7.49-7.55(m,1H),7.38-7.48(m,1H),7.30-7.38(m,1H),7.16-7.26(m,1H),5.32-5.50(m,1H),5.18-5.28(m,1H),3.75-4.50(m,8H),3.51-3.64(m,1H),2.95-3.50(m,7H),2.75-2.95(m,3H),2.25-2.70(m,4H),1.85-2.20(m,1H),1.25-1.40(m,2H),0.71-1.03(m,2H),0.35-0.70(m,2H)。

實施例31

(S)-2-(1-(2-氟丙烯醯基)-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈31

採用實施例18的合成路線，將原料化合物18-1替換為化合物(S)-2-(4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(採用實施例15的合成路線製備而得)，製得標題產物31(20mg)，產率：25.3%。

MS m/z(ESI)：624.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.69-7.62(m,2H),7.39-7.19(m,4H),5.34-5.14(m,2H),4.36-4.95(m,1H),4.00-3.81(m,6H),3.63(t,2H),3.15(d,2H),3.02(m,4H),2.87(m,1H),2.79(s,3H),2.65(d,1H),2.38(d,6H),1.58(s,4H),0.47(s,2H),0.33(s,2H)。

實施例32

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(8-氟萘-1-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈32

採用實施例1的合成路線，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-8-氟萘(採用公知的方法“Tetrahedron Letters,2007,vol.48,# 31,p.5539-5541”製備而得)，製得標題產物32(5mg)，收率：9.1%。

MS m/z(ESI)：596.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.57-7.59(m,1H),7.50-7.57(m,1H),7.28-7.43(m,2H),7.02-7.13(m,2H),6.45-6.57(m,1H),6.28-6.40(m,1H),5.72-82(m,1H),4.12-4.35(m,2H),4.00-4.11(m,2H),3.76-3.98(m,2H),3.50-3.75(m,2H),3.23-3.40(m,1H),3.08-3.20(m,1H),3.00-3.07(m,1H),2.90-3.00(m,3H),2.65-2.88(m,3H),2.40-2.63(m,1H),2.06-2.36(m,2H),1.75-2.05(m,2H),1.32-1.45(m,3H),0.85-1.10(m,4H)。

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈33

採用實施例1的合成路線，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-3-氯-2-(三氟甲基)苯(阿達瑪斯)，製得標題產物33(8mg)，收率：9.5%。

MS m/z(ESI)：630.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.43-7.48(m,1H),7.30-7.33(m,1H),7.24-7.26(m,1H),6.55-6.68(m,1H),6.38-6.48(m,1H),5.81-5.92(m,1H),4.97-5.20(m,1H),4.15-4.26(m,1H),4.06-4.14(m,2H),3.91-4.05(m,2H),3.52-3.77(m,2H),3.26-3.42(m,2H),3.08-3.21(m,2H),2.83-3.03(m,4H),2.60-2.80(m,3H),2.19-2.30(m,1H),2.08-2.18(m,1H),1.95-2.06(m,2H),1.76-1.88(m,2H),0.96-1.15(m,2H),0.76-0.91(m,2H)。

實施例34

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(2,3-二甲基苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈34

採用實施例1的合成路線，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-2,3-二甲基苯(阿達瑪斯)，製得標題產物34(8mg)，收率：16.0%。

MS m/z(ESI)：556.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.08-7.16(m,1H),6.90-7.02(m,2H),6.51-6.66(m,1H),6.33-6.44(m,1H),5.76-5.87(m,1H),4.86-5.22(m,1H),4.32-4.48(m,1H),4.18-4.28(m,1H),4.06-4.14(m,1H),3.97-4.05(m,3H),3.86-3.96(m,1H),3.28-3.38(m,1H),3.18-3.27(m,1H),2.87-3.16(m,7H),2.64-2.85(m,3H),2.34(s,3H),2.30(s,3H),2.17-2.25(m,2H),1.98-2.08(m,2H),1.58-1.66(m,1H),1.11-1.20(m,2H),0.93-1.08(m,2H)。

實施例35

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(1-((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈35

第一步

(R)-2-(1-羥基環丙基)吡咯烷-1-羧酸第三丁酯35-1

氬氣氛下，將化合物N-第三丁氧羰基-D-脯胺酸甲酯35-0(10g，43.61mmol，畢得)溶於300mL四氫呋喃中，加入鈦酸四異丙酯(14.87g，52.31mmol，15.5mL)，再緩慢滴加乙基溴化鎂(2M，65.4mL)，加畢室溫反應3小時。加入飽和氯化銨水溶液淬滅，墊矽藻土過濾，濾液分液，水相用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系B純化得到標題化合物35-1(7.8g)，產率：78.6%。

第二步

(R)-1-(1-甲基吡咯烷-2-基)環丙基醇35-2

將化合物35-1(7.8g，34.31mmol)溶於200mL四氫呋喃中，滴加氫化鋁鋰(1M，102.8mL)，將反應液回流攪拌17小時。冷卻至0℃，緩慢加入50mL水，用乙酸乙酯萃取(200mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物35-2(4.5g)，產物不經純化直接進行下一步反應。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物35-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物35(8mg)，收率：14.5%。

MS m/z(ESI)：592.4[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.59-7.75(m,2H),7.31-7.55(m,3H),7.16-7.23(m,1H),6.50-6.67(m,1H),6.33-6.45(m,1H),5.76-5.87(m,1H),4.91-5.17(m,1H),4.45-4.72(m,1H),4.02-4.32(m,4H),3.83-3.95(m,1H),3.68-3.81(m,1H), 3.47-3.59(m,2H),3.29-3.43(m,2H),3.08-3.28(m,4H),2.86-3.05(m,6H),2.70-2.85(m,4H),2.50-2.68(m,2H),0.92-1.18(m,4H)。

實施例36

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲基)胺基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈36

採用實施例1的合成路線，將第七步1h替換為化合物24-3，將第八步的1-溴-8-氯-萘替換為1-溴-8-甲基-萘製得標題產物36(8mg)，收率：11.2%。

MS m/z(ESI)：605.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.58-7.65(m,1H),7.52-7.55(m,1H),7.23-7.35(m,3H),7.11-7.13(m,1H),6.45-6.61(m,1H),6.26-6.36(m,1H),5.68-5.76(m,1H),3.98-4.02(m,1H),3.77-3.95(m,2H),3.62-3.75(m,1H),3.51-3.62(m,1H),3.37-3.47(m,1H),3.27-3.35(m,2H),3.14-3.26(m,1H),2.91-3.13(m,4H),2.83-2.88(m,4H),2.71-2.79(m,1H),2.38-2.56(m,4H),1.88-2.00(m,1H),1.70-1.85(m,4H),1.46-1.69(m,8H)。

實施例37

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈37

採用實施例1的合成路線，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物1-溴-4-氟-2-(三氟甲基)苯(韶遠)，製得標題產物37(10mg)，收率：15.2%。

MS m/z(ESI)：614.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.36-7.50(m,1H),7.28-7.35(m,1H),7.02-7.19(m,1H),6.51-6.67(m,1H),6.35-6.47(m,1H),5.81-5.91(m,1H),5.02-5.16(m,1H),4.13-4.25(m,1H),3.85-4.10(m,4H),3.52-3.73(m,2H),3.26-3.41(m,1H),3.14-3.24(m,1H),3.03-3.13(m,2H),2.84-3.02(m,4H),2.62-2.83(m,3H),2.19-2.27(m,1H),2.08-2.18(m,1H),1.95-2.06(m,2H),1.72-1.90(m,2H),0.96-1.15(m,2H),0.77-0.95(m,2H)。

實施例38

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(苯并[b]噻吩-4-基)-2-(1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈38

採用實施例1的合成路線，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物4-溴-苯并[b]噻吩(畢得)，製得標題產物38(5mg)，收率：15.1%。MS m/z(ESI)：584.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.58-7.65(m,1H),7.42-7.47(m,2H),7.28-7.34(m,2H),6.91-7.01(m,1H),6.51-6.67(m,1H),6.34-6.46(m,1H),5.78-5.88(m,1H),4.19-4.37(m,3H),3.94-4.08(m,3H),3.59-3.69(m,1H),3.26-3.39(m,2H),3.08-3.18(m,2H),2.99-3.06(m,4H),2.87-2.98(m,2H),2.65-2.84(m,3H),2.12-2.31(m,2H),1.86-2.11(m,2H),1.42-1.49(m,2H),0.96-1.09(m,2H)。

實施例39

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(2-((1-((3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈39

第一步

1-(3,3-二氟吡咯烷-1-羰基)環丙烷-1-羧酸甲酯39-1

於0℃，將化合物1,1-環丙基二甲酸單甲酯39-0(700mg，4.86mmol，叮噹化學)、3,3-二氟吡咯烷(697mg，4.86mmol，畢得)、1-羥基苯并三唑(787mg，5.83mmol)、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽三乙胺(1.12g，5.83mmol)、N,N-二異丙基乙胺(1.88g，14.57mmol)溶解於15mL二氯甲烷中，攪拌16小時。加20mL水，二氯甲烷(20mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品，經CombiFlash快速製備儀以沖提劑B體系純化得到標題產物39-1(800mg)，產率：70%。

第二步

(1-((3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲醇39-2

將化合物39-1(600mg，2.57mmol)溶解於10mL四氫呋喃中，加入1M氫化鋁鋰(7.7mL，7.7mmol)，反應於0℃攪拌1小時。所得混合物加乙酸乙酯淬滅，然後加十水硫酸鈉(8g)攪拌30分鐘，過濾濃縮得粗產品。經CombiFlash快速製備儀以沖提劑B體系純化得到標題產物39-2(220mg)，產率：44%。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物39-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物39(55mg)，收率：28%。

MS m/z(ESI)：642.5[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.76-7.74(m,1H),7.70-7.67(m,1H),7.46-7.44(m,1H),7.38-7.25(m,3H),6.82-6.82(brs,1H),6.20-6.16(d,1H),5.79-5.76(d,1H),4.96-4.78(m,1H),4.09-3.93(m,5H),3.70-3.65(m,2H),3.42-3.38(m,2H),3.24-3.04(m,5H),2.90-2.84(m,6H),2.68-2.68(m,3H),2.40-2.40(s,2H),2.22-2.15(m,2H),0.55(s,2H),0.40(s,2H)。

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-甲基萘-1-基)-2-(1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈40

第一步

(1-羥基環丙基)(吡咯烷-1-基)甲酮40-1

將化合物1-羥基環丙烷羧酸40-0(1.0g，9.80mmol，畢得醫藥)、吡咯烷(1.04g，14.69mmol，泰坦)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(3.72g，9.80mmol)和三乙胺(2.97g，29.39mmol)溶解於10mL N,N-二甲基甲醯胺中，攪拌16小時。加20mL水，二氯甲烷(20mL×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品。經CombiFlash快速製備儀以沖提劑A體系純化得到標題產物40-1(600mg)，產率：39%。

第二步

1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙烷-1-醇40-2

將化合物40-1(400mg，2.58mmol)溶解於10mL四氫呋喃中，加入硼烷四氫呋喃溶液(1.11g，12.89mmol，泰坦)，反應於0℃攪拌1小時，升溫到40℃，反應4小時。加甲醇淬滅，濃縮得到標題產物40-2(200mg)，產物未經純化直接用於下一步反應。

第三步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物40-2，將第八步原料化合物1-溴-8-氯萘替換為化合物1-溴-8-甲基萘製得標題產物40(4mg)，收率：5.7%。

MS m/z(ESI)：592.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.76-7.68(m,2H),7.48-7.26(m,4H),6.89-6.83(brs,1H),6.21-6.16(d,1H),5.79-5.76(d,1H),4.96-4.77(m,1H),4.41(m,1H),4.01-3.91(m,4H),3.71-3.42(m,5H),3.13-3.08(m,2H),3.04-2.90(m,5H),2.86-2.80(m,2H),2.78-2.75(m,3H),2.72-2.62(m,1H),1.64(s,4H),0.86-0.76(m,4H)。

實施例41

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(哌啶-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈41

採用實施例8的合成路線，將第一步原料吡咯烷替換為哌啶製得標題產物41(6mg)，產率：10.9%。

MS m/z(ESI)：638.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ 7.76-7.65(m,2H),7.43-7.24(m,3H),6.85-6.79(m,1H),6.31(d,1H),5.85(d,1H),5.08(t,1H),4.63(d,2H),4.36-4.07(m,5H),3.78-3.50(m,4H),3.25-3.10(m,4H),2.98-2.67(m,5H),2.48-2.37(m,5H),1.62-1.30(m,6H),0.67-0.48(m,4H)。

實施例42

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(2-((1-((二甲胺基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈42

採用實施例8的合成路線，將第一步原料吡咯烷替換為二甲胺(2M四氫呋喃溶液，Alfa)，製得標題產物42(18mg)，產率：23.4%。

MS m/z(ESI)：598.1[M+1]。

1H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.70-7.60(m,1H),7.40-7.34(m,1H),7.25-7.20(m,3H),6.60(s,1H),6.42(d,1H),5.84(d,1H),5.10(s,1H),4.31-3.77(m,8H),3.54(t,2H),3.23-2.98(m,4H),2.86(s,4H),2.64(t,1H),2.29(s,6H),1.34-1.27(m,2H),0.67-0.47(m,4H)。

實施例43

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(嗎啉甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈43

第一步

1-(嗎啉-4-羰基)環丙烷羧酸甲酯43a

將化合物8a(3g，20.81mmol，韶遠科技(上海)有限公司)溶於80mL二氯甲烷中，冰水浴下滴加草醯氯(10.5g，83.26mmol)和3滴DMF，攪拌10分鐘，升溫到35℃繼續反應3小時。減壓濃縮，加入60mL無水二氯甲烷，冷卻至0℃，加入三乙胺(10g，104mmol)和嗎啡啉(2.18g，25.02mmol)，繼續反應3小時，減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物43a(2g)，產率：45.06%。

MS m/z(ESI)：214.1[M+1]。

第二步

(1-(嗎啉甲基)環丙基)甲醇43b

將化合物43a(1.0g，4.69mmol)溶於20mL四氫呋喃中，冷卻至-78℃，加入四氫鋁鋰9.38mL(1M)，然後於室溫攪拌2小時。反應液冷卻至-60℃，緩慢加入30mL乙酸乙酯，然後加入10mL水和20mL 2M氫氧化鈉溶液，在室溫攪拌1h，過濾，濾餅用二氯甲烷(100mL×3)洗滌，濾液減壓濃縮，水相用二氯甲烷(100mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化，得到標題產物43b(760mg)，產率：94.6%。

MS m/z(ESI)：172.1[M+1]。

第三步

(S)-苄基2-(氰基甲基)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(嗎啉甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸43c

將化合物8g(0.3g，0.49mmol)和化合物43b(0.13g，0.74mmol)溶於10mL四氫呋喃中，冷卻至0℃，滴加雙(三甲基矽基)胺基鋰(1M，1.47mL，阿達瑪斯)，攪拌35分鐘。加入20mL飽和氯化鈉溶液，分液，水相用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱層析色譜法以沖提劑體系A純化得到標題化合物43c(0.11g)，產率：31.2%。

MS m/z(ESI)：720.2[M+1]。

第四步

(S)-2-(4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(嗎啉甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈43d

將化合物43c(110mg，152.81umol)加入10mL甲醇中，加入鈀碳(100mg，5%純度)，氫氣置換三次，攪拌16小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物43d(70mg)，產率：78.2%。

MS m/z(ESI)：586.1[M+1]。

第五步

將化合物43d(70mg，119.51umol)溶於10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(36mg，358.53umol)，再滴加丙烯醯氯(12mg，131.46umol)，室溫攪拌1小時。加水，用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用薄層色譜法以展開劑體系A純化得到標題產物43(11.2mg)，產率：14.6%。

MS m/z(ESI)：640.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ 7.77-7.65(m,1H),7.23-7.64(m,3H),6.82(s,1H),6.31(d,1H),5.85(d,1H),5.08(s,1H),4.60(s,1H),4.34-4.10(m,6H),3.76-3.52(m,7H),3.25-3.10(m,4H),2.93-2.67(m,5H),2.49-2.38(m,6H),1.31(t,1H),0.67-0.47(m,4H)。

實施例44

(S)-2-(1-丙烯醯基-4-(7-(8-氯-7-氟萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈44

第一步

5-氯-6-氟-1,4-二氫-1,4-環氧萘44-1

在氬氣氛下，將化合物1-溴-3-氯-2,4-二氟苯44-0(10.0g，43.97mol，韶遠)和呋喃(3.59g，52.76mol，韶遠)溶於乾燥的100mL甲苯中，反應液降溫至-15℃，滴加正丁基鋰(1.6M的正己烷溶液，2.82g，43.97mmol，華倫化工)，室溫攪拌3小時。向反應液中加水(20mL)，乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到標題產物44-1(8.4g)，產物不經純化直接進行下一步反應。

第二步

8-氯-7-氟萘-1-酚44-2

於室溫將化合物44-1(8.4g，42.85mmol)溶於40mL無水乙醇中，加入16mL濃鹽酸，反應液升溫至78℃攪拌2小時。冷卻，減壓濃縮，向所得殘餘物中加20mL水，用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘留物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化得到標題化合物44-2(3.2g)，產率：38%。

第三步

8-氯-7-氟萘-1-基三氟甲磺酸酯44-3

在氬氣氛下，將化合物44-2(3.2g，16.32mmol)，N,N-二異丙基乙胺(10.5g，81.6mmol)溶於200mL二氯甲烷中，冷卻到-78℃，加入三氟甲磺酸酐(5.5g，19.59mmol)，攪拌1小時。反應液減壓濃縮，殘留物用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化，得到標題產物44-3(3.4g)，產率：63%。

第四步

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物10-3，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物44-3製得標題化合44(95mg)，收率：54.4%。

MS m/z(ESI)：644.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d ₄)δ 7.77-7.81(m,1H),7.60-7.62(m,1H),7.38-7.40(m,1H),7.28-7.33(m,2H),6.61-6.76(m,1H),6.17-6.21(m,1H),5.72-5.75(m,1H),4.90-4.98(m,1H),4.81-4.89(m,1H),3.98-4.20(m,5H),3.51-3.66(m,1H),3.39-3.49(m,2H),3.25-3.34(m,2H),3.11-3.13(m,3H),2.60-3.03(m,7H),2.56-2.66(m,1H),1.80-1.89(m,4H),0.60-0.70(m,4H)。

實施例45

2-((S)-1-丙烯醯基-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(((S)-2-甲基吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈45

採用實施例1的合成路線，將第六步原料化合物1c替換為化合物(S)-(1-((2-甲基吡咯烷-1-基)甲基)環丙基)甲醇(採用實施例11的合成路線，將第一步的原料化合物吡咯烷替換成S-2-甲基吡咯烷製備而得)，將第八步原料化合物1-溴-8-氯-萘替換為化合物7-氟-8-甲基萘-1-基三氟甲烷磺酸，製得標題化合45(4mg)，收率：5.0%。

MS m/z(ESI)：638.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.84-7.82(m,1H),7.73-7.70(m,1H),7.42-7.36(m,3H),6.8-6.83(brs,1H),6.20-6.16(d,1H),5.79-5.76(m,1H),4.95-4.78(m,1H),4.4-4.42(m,1H),4.06-3.97(m,4H),3.74-3.72(m,2H),3.42-3.40(m,2H),3.23-3.12(m,2H),3.10-3.03(m,6H),2.80-2.78(m,3H),2.75-2.67(m,1H),2.23-2.21(m,1H),2.02-1.99(m,1H),1.81-1.80(m,1H),1.60-1.58(m,2H),1.50-1.47(m,1H),1.21-1.20(m,1H),0.93-0.91(m,3H),0.51-0.49(m,3H),0.44-0.44(m,1H)。

實施例46

(S,E)-2-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈46

將(E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(44mg，0.263mmol，畢得)溶解於2.0mL N,N-二甲基甲醯胺中，冰水浴下加入O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸鹽(66mg，0.173mmol，畢得)和N,N-二異丙基乙胺(74mg，0.577mmol，丹語生物)。反應液氬氣保護下攪拌15分鐘，隨後將化合物22-1(33mg，0.058mmol，採用實施例10製得)加入反應液中，室溫攪拌1小時。LC-MS檢測反應完全。將反應液倒入冰水中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合併有機相，飽和氯化鈉溶液(10mL×5)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物經高效液相製備色譜得到標題產物46(4.44mg)，產率：11%。

MS m/z(ESI)：683.6[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.92(d,1H),7.80-7.69(m,1H),7.56(dd,2H),7.45(t,1H),7.39-7.28(m,1H),6.68(s,2H),4.84(m,1H),4.40(s,1H),4.25-3.93(m,6H),3.71(d,2H),3.46(m,6H),3.08(m,5H),2.37(s,2H),2.16(s,5H),1.99(s,1H),1.66(s,4H),1.19(m,2H),0.55(s,2H),0.40(s,2H)。

實施例47

(S)-2-(4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(嗎啉甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(2-氟丙烯醯基)哌嗪-2-基)乙腈47

採用實施例30的合成路線，將原料化合物30-1替換成43d製得標題化合物47(18mg)，產率：40%。

MS m/z(ESI)：658.5[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.70-7.64(m,1H),7.62-7.58(m,1H),7.40-7.31(m,1H),7.25-7.17(m,2H),5.35-5.48(d,1H),5.23-5.27(d,1H),5.10-4.43(d,2H),4.29-4.22(m,3H),4.20-3.89(m,2H),3.89-3.75(m,2H),3.66(s,3H),3.60-3.35(m,2H),3.32-2.94(m,5H),2.84-2.83(m,5H),2.68-2.56(m,1H),2.43(d,4H),2.0(s,1H),0.63(s,2H),0.43(s,2H)。

實施例48

(S,E)-2-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基)-4-(7-(7-氟-8-甲基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基甲基)環丙基)甲氧基)-5,6,7,8-四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈48

採用實施例46的合成路線，將原料化合物22-1替換成8i製得標題化合物48(39mg)，產率：27%。

MS m/z(ESI)：681.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.89-7.79(m,1H),7.73(d,1H),7.49-7.41(m,1H),7.37(t,2H),7.05-6.80(m,1H),6.70-6.53(m,1H),5.05-4.65(m,1H),4.55-4.37(m,1H),4.27(d,4H),4.14-3.97(m,2H),3.81-3.71(m,1H),3.70-3.52(m,3H),3.50-3.35(m,2H),3.33-3.14(m,4H),3.14-2.94(m,5H),2.93-2.82(m,1H),2.77(s,9H),2.72-2.55(m,1H),2.00(s,2H),1.87(s,2H),0.80(s,4H)。

生物學評價

測試例1：本發明化合物對H358細胞ERK磷酸化抑制的生物學評價

一、測試目的

本實驗藉由檢測化合物對細胞ERK磷酸化抑制作用，根據IC₅₀大小評價本公開化合物對KRAS靶點(含G12C突變)的抑制作用。

二、實驗方法

H358細胞(ATCC，CRL-5807)用含有10%胎牛血清的RPMI1640(Hyclone，SH30809.01)完全培養基進行培養。實驗第一天，使用完全培養基將H358細胞以25,000個/孔的密度種於96孔板，每孔190μL細胞懸液，放置37℃，5% CO₂細胞培養箱培養過夜。第二天，每孔加入10μL用完全培養基配製的梯度稀釋的待測化合物，化合物的終濃度是從10μM開始進行6倍梯度稀釋的9個濃度點，設置含有0.5% DMSO的空白對照，孔板放置37℃，5% CO₂的細胞培養箱孵育3個小時。3小時後，取出96孔細胞培養板，吸掉培養基，每孔加入200μL PBS(上海源培生物科技股份有限公司，B320)洗一遍。吸掉PBS，每孔加入50μL含封閉液(blocking reagent，Cisbio，64KB1AAC)的裂解緩衝液(lysis buffer，Cisbio，64KL1FDF)，孔板放置振盪器上室溫震盪裂解30分鐘。裂解後用移液器吹打混勻，每孔各轉移16 μL裂解液分別至兩塊HTRF 96孔檢測板(Cisbio，66PL96100)中，之後兩塊板分別加入4μL預混的phospho-ERK1/2抗體溶液(Cisbio，64AERPEG)或4μL預混的total-ERK1/2抗體溶液(Cisbio，64NRKPEG)。微孔板用封板膜密封，在微孔板離心機中離心1分鐘，室溫避光孵育過夜。第三天，使用PHERAstar多功能酶標儀(BMG Labtech，S/N 471-0361)讀取337nm波長激發，665nm和620nm波長發射的熒光值。

三、數據分析

用Graphpad Prism軟體根據化合物濃度和pERK/total ERK的比值計算化合物抑制活性的IC₅₀值，結果參見下表1。

表1本發明化合物對H358細胞ERK磷酸化的抑制活性數據

結論：本公開化合物對H358細胞ERK磷酸化具有很好的抑制作用。

測試例2：本發明化合物對H358細胞增殖抑制的生物學評價

一、測試目的

藉由測試本公開化合物對H358細胞的增殖抑制作用，評價本公開化合物對KRAS靶點(含G12C突變)的抑制作用。

二、實驗方法

H358細胞(ATCC，CRL-5807)用完全培養基即含有10%胎牛血清(Corning，35-076-CV)的RPMI1640培養基(Hyclone，SH30809.01)進行培養。實驗第一天，使用完全培養基將H358細胞以1500個細胞/孔的密度種於96孔板，每孔100μL細胞懸液，放置37℃，5% CO₂細胞培養箱培養過夜。第二天，每孔加入10μL用完全培養基配製的梯度稀釋的待測化合物，化合物的終濃度是從10μM開始進行5倍梯度稀釋的9個濃度點，設置含有0.5% DMSO的空白對照，孔板放置37℃，5% CO₂的細胞培養箱培養120小時。第七天，取出96孔細胞培養板，每孔加入50μL CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(Promega，G7573)，室溫放置10分鐘後，使用多功能微孔板酶標儀(PerkinElmer，VICTOR 3)讀取發光信號值。

三、數據分析

用Graphpad Prism軟體計算化合物抑制活性的IC₅₀值，結果參見下表2。

表2本發明化合物對H358細胞增殖的抑制活性數據

結論：本公開化合物對H358細胞增殖具有很好的抑制作用。

測試例3：本發明化合物對hERG鉀電流的阻斷作用

1、實驗目的

應用全自動膜片鉗在轉染hERG鉀通道的穩定細胞株上測試本公開化合物對hERG鉀電流的阻斷作用。

2、實驗方法

2.1 實驗材料與儀器

2.1.1 實驗材料：

2.1.2 實驗儀器：

2.2 全自動膜片鉗實驗步驟

HEK293-hERG穩定細胞株(上海恒瑞醫藥公司內部構建：參照參考文獻：Zhou,Z.,et al.(1998)Properties of HERG channels stably expressed in HEK 293 cells studied at physiological temperature.Biophysical Journal；74：230-241中的方法，按照Lipofectamine® 3000轉染試劑說明書將herg-pcDNA3.1質粒轉入HEK293細胞中，轉染48h後加G418篩選陽性細胞，藉由Western blot挑選表達herg的單株細胞株)按照1：4的密度在MEM/EBSS培養基(10%FBS，400μg/ml G418,1% MEM非必需胺基酸溶液(100×),1%丙酮酸鈉溶液)中進行傳代培養，培養48-72小時之內進行全自動膜片鉗實驗。實驗當天將細胞用0.25%胰酶(invitrogen，25200-072#)消化後，離心收集細胞，用細胞外液(140mM NaCl，4mM KCl，1mM MgCl₂，2mM CaCl₂，5mMD一水葡萄糖，10mM Hepes，pH7.4，298mOsmol)重新懸浮細胞製成細胞懸液。將細胞懸液放置在Patchliner儀器的細胞庫上，Patchliner儀器利用負壓控制器將細胞加到芯片(NPC-16)上，負壓將單個細胞吸引在芯片的小孔上。當形成全細胞模式後，儀器將按照設定的hERG電流電壓程序得到hERG電流，然後儀器自動的由低濃度到高濃度，進行化合物灌流。藉由HEAK Patchmaster(Nanion)、HEAK EPC10膜片鉗放大器(Nanion)和Pathliner軟體以及Pathcontrol HT軟體提供的數據分析軟體，對化合物各濃度下的電流以及空白對照電流進行分析。

2.3 測試結果

本公開化合物對hERG鉀電流的阻斷作用藉由以上的試驗進行測定，測得的IC₅₀值見表3。

表3本發明化合物對hERG鉀電流的阻斷作用的IC₅₀

結論：本公開化合物對hERG的抑制作用弱，可降低由hERG通路引起的副作用。

Claims

一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，

其中：

環A為環烷基或雜環基；

環B為含氮的雜環基；

Y選自N或C；

L₁選自-S-(CH₂)_q-、-O-(CH₂)_q-、-NH-(CH₂)_q-或伸烷基；

L₂為鍵或伸烷基；

R¹選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、-OR⁹、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R²選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-NR⁷R⁸、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R³相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基和硝基，該烷基、烷氧基、鹵烷基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁴選自-C(O)R⁹或-S(O)₂R⁹；

R⁵相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基和羥烷基；

R⁶相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基和羥烷基；

R⁷、R⁸相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基或羥烷基；或者，R⁷和R⁸與相鄰的N原子一起形成雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁹選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、炔基、烯基、羥基或羥烷基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、炔基和烯基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR¹⁰R¹¹、環烷基、雜環基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R¹⁰、R¹¹相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基或羥烷基；或者，R¹⁰和R¹¹與相鄰的N原子一起形成雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

n為0、1、2或3；

m為0、1、2或3；

q為0、1、2、3、4、5或6；且

p為0、1、2、3或4。
如申請專利範圍第1項中所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為環烷基；

R²選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-NR⁷R⁸、芳基和雜芳基中的一個或更多個取代基所取代；

R⁷、R⁸、q如申請專利範圍第1項所定義。
如申請專利範圍第1項中所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環B為含氮雜環基；較佳地，環B為3-8員含氮雜環基；更佳地，環B為哌嗪基。
如申請專利範圍第1至3項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中：

環A、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第1至4項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為環烷基；較佳地，環A為C_3-6環烷基；更佳地，環A為環丙基或環丁基；進一步較佳地，環A為環丙基。
如申請專利範圍第1至5項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中L₁選自-S-、-O-、-O-CH₂-、-NHCH₂-或-NH-；較佳地，L₁選自-S-、-O-、-O-CH₂-或-NH-；進一步較佳地，L₁選自-S-、-O-或-NH-。
如申請專利範圍第1至6項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中L₂為鍵或亞甲基。
如申請專利範圍第1至7項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R¹選自：

其中：

環D選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；較佳地，環D為C_3-6環烷基、3-8員雜環基、C_6-10芳基或5-10員雜芳基；更佳地，環D為芳基、噻吩基或吡唑基；進一步較佳地，環D為苯基；

R^a相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基；較佳地，R^a相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、羥基、C_1-6羥烷基、氰基、胺基、硝基、C_3-6環烷基和3-8員雜環基；

R^b相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基；較佳地，R^b相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、羥基、C_1-6羥烷基、氰基、胺基、硝基、C_3-6環烷基和3-8員雜環基；

s為0、1、2、3或4；且

t為0、1、2、3或4。
如申請專利範圍第1至8項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R¹選自：

其中：

R^a相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基；較佳地，R^a相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、羥基、C_1-6羥烷基、氰基、胺基、硝基、C_3-6環烷基和3-8員雜環基；

R^b相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基；較佳地，R^b相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、羥基、C_1-6羥烷基、氰基、胺基、硝基、C_3-6環烷基和3-8員雜環基；

s為0、1、2、3或4；且

t為0、1、2、3或4。
如申請專利範圍第1至9項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R²選自環烷基、雜環基、雜芳基或-NR⁷R⁸，該環烷基或雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或更多個取代基所取代；

較佳地，R²選自C_3-6環烷基、3-8員雜環基、5-10員雜芳基或-NR⁷R⁸，該C_3-6環烷基或3-8員雜環基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和C_1-6羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

或較佳地，R²為雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基中的一個或多個取代基所取代；更佳地，R²為3-8員雜環基，該3-8員雜環基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基中的一個或多個取代基所取代；

或較佳地，R²選自-NR⁷R⁸，R⁷和R⁸與相鄰的N原子一起形成3-8員雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和C_1-6羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁷和R⁸如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第1至10項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R³為烷基，所述的烷基視需要進一步被一個或多個氰基取代；較佳-CH₂-CN。
如申請專利範圍第1至11項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R⁴為-C(O)R⁹或-S(O)₂R⁹；R⁹選自烷基、炔基或烯基，該烷基、炔基、烯基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；較佳地，R⁹選自C_1-6烷基、C_2-6炔基或C_2-6烯基，該C_1-6烷基、C_2-6炔基、C_2-6烯基視需要進一步被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、羥基和C_1-6羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁷、R⁸和q如申請專利範圍第1中所定義。
如申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R⁵為氫原子。
如申請專利範圍第1至13項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R⁶為氫原子。
如申請專利範圍第1至14項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中：L₁，R¹和R²如申請專利範圍第1項中所定義。
如申請專利範圍第1至15項中任一項所述的通式(I)所示的化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自以下任一化合物：
一種通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，

其中：

環A為環烷基或雜環基；

環B為含氮的雜環基；

Y選自N或C；

L₁選自-S-(CH₂)_q-、-O-(CH₂)_q-、-NH-(CH₂)_q-或伸烷基；

L₂為鍵或伸烷基；

R¹選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、-OR⁹、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R²選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-NR⁷R⁸、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；

R³相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基和硝基，該烷基、烷氧基、鹵烷基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁵相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基和羥烷基；

R⁶相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基和羥烷基；

R⁷、R⁸相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基或羥烷基；或者，R⁷和R⁸與相鄰的N原子一起形成雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R⁹選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、炔基、烯基、羥基或羥烷基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、炔基和烯基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、-(CH₂)_qNR¹⁰R¹¹、環烷基、雜環基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

R¹⁰、R¹¹相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基或羥烷基；或者，R¹⁰和R¹¹與相鄰的N原子一起形成雜環基，該雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基和羥烷基中的一個或多個取代基所取代；

n為0、1、2或3；

m為0、1、2或3；

q為0、1、2、3、4、5或6；且

p為0、1、2、3或4。
如申請專利範圍第17項所述的通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為環烷基；

R²選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-(CH₂)_qNR⁷R⁸、芳基和雜芳基，該烷基、烷氧基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、-NR⁷R⁸、芳基和雜芳基中的一個或更多個取代基所取代；

R⁷、R⁸、q如申請專利範圍第17項所定義。
如申請專利範圍第17項所述的通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自：
一種製備如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IA)的化合物在鹼性條件下與化合物X-R⁴發生醯化或磺醯化反應，得到通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：

X為鹵素或羥基；較佳地，X為Cl；

環A、環B、Y、L₁、L₂、R¹~R⁶、m、n和p如申請專利範圍第1項中所定義。
一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的如申請專利範圍第1至16項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
一種如申請專利範圍第1至16項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其立體異構體、互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽或如申請專利範圍第21項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於抑制KRAS的藥物，較佳在製備用於抑制KRAS G12C的藥物。
一種如申請專利範圍第1至16項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其立體異構體、互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽或如申請專利範圍第21項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於治療或預防癌症、炎症、或其它增殖性疾病的藥物，較佳在製備用於治療或預防癌症的藥物中的用途；該癌症選自胃癌、食管癌、黑色素瘤、肝癌、腎癌、肺癌、鼻咽癌、結腸直腸癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病、頭頸鱗狀細胞癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、成神經細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤、星形細胞瘤和膠質瘤。