UA59329C2 - Азациклогексапептидні сполуки, фармацевтична композиція і спосіб лікування (варіанти) - Google Patents

Abstract

Описано деякі азациклогексапептидні сполуки, що виявляють високі антибіотичні властивості. Також описані антимікробні композиції на їхній основі і способи лікування грибкових інфекцій і пневмоцистичної пневмонії.

Description

Опис винаходу

Настоящее изобретение относится к некоторьім аза циклогексапептидньім соединениям и способам их 2 получения.

Аза циклогексапептиднье соединения, в настоящем изобретениий - Соединение | (Зед ІЮ Мов. 1-15), отличаются тем, что имеют атом азота, присоединенньій к циклогексапептидному кольцу по 5-му атому углерода компонента 4-гидрокси-орнитина (в дальнейшем- "С-5-оря") и могут бьіть представленьї формулой

ВН ВШ

70 вно о М (о)5 2 (о)

ГУ ож»

М ву 07 КН св но щн о-о он он он но где

Ку - Нили ОН

ЕР» - НІСНуз или ОН

З - Н, СНу, СНоСМ, СНОСНЬМН»о или СНОСОМН»о сч

В! - Се-Созалкил, Со-Созалкенил, Сі-Сіралкоксифенил или

С1-Сіралкоксинафтил і)

В! - Н, С/-Слалкил, Сз-Сзалкенил, (СН2)».4ОН, (сн2)»АМА УВУ, СО(СНо)їАМН»

В.Н, Сі-Сдлалкил, Сз-Слалкенил, (СН2)2.40ОН, Ге») (сСН)» МА УВУ или сч

Ви

В!" взятье вместе-(СНо)у-, «(СНа)в-, ««СНа)»О(СН»)»-, о «(сно МН(СН2)»- Ф

ВМ - Н или С.-Суалкил, ою

ВУ- Нили Сі-С;алкил; и их аддитивнье соли кислоть.

Мспользованнье здесь вьіражения "алкил", "алкенил" или "алкокси" подразумевают радикаль как с разветвленньми, так и с нормальньми цепями.

Соединения в настоящем изобретениий главньім образом полученьї в виде смесей стереоизомерньїх форм, в «

Которьх обьічно преобладаєт одна форма. Подбор условий с целью получения целевого изомера в качестве пт) с преобладающего не вьіходит за рамки обьічньїх навьков опьітного синтетика. Соединения в предпочтительной стереоизомерной форме, указанной здесь как "нормальная" форма, показаньь в рабочих примерах с :з» пунктирньіми линиями связей, лежащих за плоскостью в положений "С-5-орн". Обозначение "зпи" применяется к тем соединениям, в которьїх группа в положений "С-5-орн" находится над плоскостью.

Фармацевтически применимьсе соли, получаемьсе в качестве солей связанньїх кислот, образуются с такими г кислотами, как хлороводородная, бромоводородная, фосфорная, серная, малеийновая, лимонная, уксусная, винная, сукциновая, щавелевая, малоновая, глутаминовая и им подобньми, и включают другие кислоть, ісе) дающие фармацевтически применимьсе соли, перечисленньм в доишгпаї ої Рпагтасеціїса!| Зсіепсе, 66, 2, (1977). оо Характернье ядра для аза производньїх в настоящем изобретении (Соединение І) и идентификатор последовательности (Зедцепсе ІО) для зтих соединений представлень! в нижеследующей таблице. Поскольку о пептиднье ядра являются неизменньми, независимо от заместителей Б І, В" или В/!, и поскольку номер

Ге) идентификатора последовательности назначен для вариаций ядер, то аминь и соли имеют те же идентификаторьї последовательностей. о ю во 60 он оносноснамна 6 8 онісна, снєм 8 б5 8 оніснасноснамна 9

Іо он снз снз 10

;

Одно из соединений, особенно вьіделяющееся из остальньїх, поскольку способно бороться с грибковьіми инфекциями, обозначено как Соединение І-6б, где Б" - Н, В! - СНоСНоМН» и В! - 9,11 - диметилтридецил 70 (ДМТД), и которое может бьіть отмечено как Соединение 1-6-1 (Зед. ІЮ Мо.6).

І: --к он но о н суне ов мовної й лого х- и он но Мн о-х н М ач он 20 в) (6-1) бед 10 Моб

Вьішеназванное обозначение І-6-1 относится к первому соединению, в котором расположение ядра - 1-6.

Поскольку во всех соединениях в настоящем изобретений заместитель в "С-5-орн" - азот, заместители по с 29 указанному атому азота могут варьироваться и все соединения, которне имеют одинаковье К.4, Б» и Бз, будут г) относиться к Зед ІО Мо.6.

Соединения растворимьі в низших спиртах и полярньх апротонньїх растворителях, таких как диметилформамид (ДМФА), диметилсульфоксид (ДМСО) и пиридин. Они нерастворимь! в растворителях типа дизтилового зфира и ацетонитрила. Ме.

Соединения по настоящему изобретению используются как антибиотики, особенно как фунгицидь, или как с средства борьбь! с простейшими организмами. В качестве фунгицидов они используются для борьбь, как с волокнистьми грибами, так и дрожжами. Зти соединения особенно приспособлень! для использования при Ше лечений грибковьїх инфекций млекопитающих, особенно вьізванньїх видами Сападіда, такими как С. аїрісапв, С. б ігорісайїв и С. рзешцйдоїгорісайв. видами Стгуріососсиз, такими как С. пеоїогтапз и видами Азрегойи8: А.

Зо Ютідашв. А. Яамив. А. підег. Они также используются для лечения или профилактики пневмониий Рпецтосувіїв о сагіпії, к которой пациентьї с пониженньм иммунитетом особенно восприимчивь, о Чем будет сказано в дальнейшем.

Соединения по настоящему изобретению могут бьіть полученьі из циклопептидов формульї «

ВАН реч о - с ПИ дея з ту о "М дь но МН о- он ду «сл Н

Го)гї се) (95) Но (бед Дю. 1-15) ко 50 путем серии превращений, в которьїх атом кислорода в положениий "С-5-орн" (которое также может бьть названо как гемиаминальное положение) в конечном итоге замещается атомом азота. Исходньми материалами с могут бить натуральнье или модифицированнье натуральнье продуктьї, как зто будет впоследствии описано.

Если Ку - водород, а не гидроксил, аза соединения могут бьіть полученьі! в результате другой серии реакций.

Метод, применимьй для получения соединений, в которьїх Кі может бьїіть, как водородом, так и гидроксилом, 59 описан первьм.

ГФ) Инентификаторь! последовательностей исходньїх материалов показаньі! в следующей таблице: з в в

А-7 ОоН/|сНнЗ| СНоСОМНо 22

; 70 З З

Соединения А-4 и А-7 описань! в литературе (3). Апііріоїйсв 45, 1855-60 ЮОес. 1992) как пневмокандин Во и пневмокандин Ао, если в ЕДМТД.

Когда в Соединениий А-1 К; и Ко представленьі одним из возможньїх заместителей и Кз - Н, СН3з или -СНЬСОМН» (Зед ІЮО Мов. 16, 19, 22, 25-27 и 30), оно может бьіть непосредственно использовано в первом методе. Если Кз - СНЬСМ или - СНСНЬМН», то группа -«СНОСОМН» сначала может бьіть превращена в -СНОСМ или - СНЬСНЬМН», как зто последовательно описано, и все модифицированнье соединения (Зед ІЮ Мов. 17-18, 20-21, 23-24, 28-29) могут использоваться в первом методе, или иначе, соединение, в котором К»з - СНОСОМН», может бьіть использовано для получения соединения с азотом в гемиаминальном положении, и затем -

СНоСОМН»-группа полученного продукта может бьіть превращена в - СНОСМ или -СНЬСНОМН».

Если Ку, К» и Кз в исходном материале такие же, что и в продукте, то может бьіть использована следующая последовательность превращений:

І; о) он вно д

У. мн в с

М пу фо ки СН; МСС Н о -Ш---58Ш2Ш2Ш2ШНИНННтнНн-»Т но о-д ов нт в К " Н Ф зо он Стадия А сч (4) но (бед ІЮ Мов. 16-30) (зе)

Ге)

Зо наснсня ОН ю о; 2.20)

ФМ сну"

Стадия В (В (Бед ІЮ Мов. 31-45) як с . ГУ " й Положение "С-5-орн" или гемиаминальногє положениє. т " нка он - 15 нУрРІС ри с Ч Ак

К он Стадия І ГА)

Те) Го) в (бед ІО Мов 115) ра і ч як Ф юю 50 ік; (бе4 Ю Мох 1-15)

Стадяя С (Че) ни " М ово, он

ІФ) д-тх ч мА с п

ГФ) (Зса ІЮ Мов 31-45) ВХ МН з нормальньй или зпи х ВШ

Стадня С

ПП Ш

60 вий он у-й У й А нормальний или зпи () (Зед ІР Мох 1-15) бо На стадии А исходньій материал, Соединение А (Зед ІЮ Мов. 16-30), алкилтиол или арилтиол и кислота реагируют в апротонном растворителе в условиях отсутствия влаги в течение времени, достаточного для протекания реакции с образованием Соединения В (Зед ІЮ Мов. 31-45), показанного в следующей таблице.

Бьло установлено, что зтиламинотиол хорошо подходит для проведения зтой стадии.

Я в оононібнюнжну 00360000 я в онопзснюнмн 09 2

Для Стадим А подходящими кислотами являются сильнье органические и минеральнье кислотьї. сч 29 Примерами сильньїх органических кислот являются сульфокамфарная кислота, п-толуолсульфокислота и Ге) метансульфокислота. Минеральнье кислотьії включают в себя хлороводородную и бромоводородную кислоту.

Предпочтительной является сульфокамфарная кислота.

Подходящими растворителями являются ДМФА, ДМСО, 1-метил-2-пирролидон и гексаметилтриамид фосфорной кислоть! (ГМАФ). Предпочтительньї ДМФА и ДМСО. о

Реакция в общем случає протекает при комнатной температуре в течение 1-10 дней. Ге

При проведений реакции, циклогексапептидное соединение, тиол и кислота перемешиваются в подходящем растворителе до оокончания превращения. Реакционнуя смесь разбавляют водой и проводят о обра-щеннофазную флзш-хроматографшо, используя в качестве злюента 10-4095 раствор ацетонитрила в воде, Фд) содержащий 0.195 трифторуксусной кислотьі. Трифторуксусная кислота, в дальнейшем, именуется ТФУК.

Фракции, содержащие целевой продукт, могут бьть сконцентрированьії и лиофилизировань;, и юю лиофилизированньй материал может бьть оочищен препаративной вьісокозффективной /жидкостной хроматографией (ВЗЖХ).

Подходящие колонки для ВЗЖХ продаются под торговьіми марками или торговьіми названиями "ЛОКВАХ" « (ОиРопО, "ОенкаРак" (Уу/ас(егв), Віо-Кайдй (Віо-Кад), "ІСНКОРКЕР" КРІ18 (Е. МегсК). Конкретнье типь! колонок т0 указань! в рабочих примерах. 8 с На Стадии В Соединение С, сульфон (Зед ІЮО Мов. 31-45), получают окислением Соединения В. "з Подходящими оокислителями являются "ОХОМЕ"КНЗО 5Б'КНЗО:К»ЗОЇ-2:1:1, Аїапсп СПетіса!5), м-хлор-пероксибензойная кислота и пероксиуксусная кислота. Идентификатор последовательности (Зеяд ІЮ) для

Соединения С такой же, как и для Соединения В, поскольку атом, присоединенньй к гемиаминальному углероду, по-прежнему, остается атомом серьі. Таким образом, идентификаторь! последовательностей (Зеад ІВ)

Мн для сульфонов таковь!: (Се) і ю 2

Ф

5 о з бо бе

Окисление тиозфира (Соединение В) до сульфона (Соединение С) проводится, примерно, двумя молями окислителя. При использований одного моля окислителя продуктом реакции является сульфоксид, которьй может бьть далее превращен в сульфон. При образований аза соединений в качестве промежуточньх продуктов могут использоваться сульфоксидьі, но предпочтительнее использование сульфонов. Используют незначительньй избьток окислителя сверх двухмольного количества.

Реакция проводится в водной среде, преимущественно в смеси ацетонитрила с водой. Предпочтительнее примерно одинаковое содержание компонентов, хотя можно использовать смеси с их соотношением от 1:9 до 9:1. 70 При проведений реакции окислитель добавляется к раствору Соеєдинения В (Зед ІЮ Моз 31-45) в смеси ацетонитрил : вода - 1:11. и смесь оставляют стоять при комнатной температуре на время, достаточное для завершения реакции образования Соединения С, обьічно от 30 минут до 1 часа.

По завершений реакции, соединение вьіделяют из реакционной смеси разбавлением водой и хроматографированием. Для стадии очистки подходящей является обращеннофазная колоночная 7/5 фФлзш-хроматография (С18). Предпочтительньмм злюентом является 30-459о ацетонитрил в воде (содержащий 0.196 ТФУК) с шагом изменения состава 595. Нужнье фракции лиофшишзируют для вьіделения целевого промежуточного сульфона, Соединения С (Зед ІЮ Мов. 31-45). Промежеточньй продукт является неустойчивь!м, позтому вьіделение должно проводиться как можно бьістрее.

Соединение С может бьть превращено в соединение, имеющее атом азота, непосредственно присоединенньій к положению "С-5-орн". Как показано на схеме синтеза, реакция Соединения С с азидом щелочного металла приводит к вступлению азидной группь! в то положение, тогда как реакция с аммиаком или амином дает аминогруппу в положение "С-5-орн" (Соединение ІМ. Соединение ОО - важньй промежуточньй продукт для получения большинства веществ по настоящему изобретению. Хотя Соединение Ю имеет атом азота в положений "С-5-орн", но поскольку оно не является продуктом, для него установлен отдельньій номер с ов идентификатора последовательности. Номера идентификаторов последовательности (Зед ІО Мов.) для

Соединения О находятся в следующей таблице: і)

Ф

» см с

Ф

5 ононобнюнани 5 » їй з онов сю 5 05 оноснюнан 5 їх и, - - г» і овлво носнуоснао во о Азид может бьіть получен добавлением азида щелочного металла к раствору сульфона (Соединения С; Зед (се) ІО Мов. 31-45) в апротонном растворителе при перемешиваний при комнатной температуре в течение времени, достаточного для завершения реакции образования азида, определяемого методом ВЗЖХ. После зтого

Мн реакционная смесь может бьіть разбавлена водньім раствором кислотьї, например ТФУК, и затем целевой азид ко 50 (Соединение ОО) может бьть вьіделен из реакционной смеси хроматографически. Для зтого подходящей является обращеннофазная колоночная флзш-хроматография (С 18) с использованием 10-2595 ацетонитрила в с воде (содержащего 0.195 ТФУК) с шагом изменения состава 5905.

Азид (Соединение І) может бьіть восстановлен до соединения, имеющего свободную аминогруппу, которое представлено среди продуктов в настоящем изобретений (5еад ІЮ Моз. 1-15). 99 Восстановление может бьіть проведено путем смешивания азида (Соединение І) с палладием, нанесенньм

ГФ) на уголь (Ра/С), в растворителе типа ледяной уксусной кислотьї и насьщения водородом под давлением, кю равньм давлению в питающем баллоне, в течение 10-20 часов. Для вьіделения продукта сначала отфильтровьівают катализатор, а фильтрат лиофшшзируют для получения аминосоединения (Зед ІЮ 1-15), в котором аминогруппа является первичной. 60 Полученньй таким образом амин может бьіть превращен в замещенньй амин, как зто описано далее.

Соединение І, в котором -МЕ"В!! представлен группой - МНСНоСНоМН» или гомологами -«МН(СН»)» Ам УВУ может бьть получен из сульфона по методу, согласно которому диамин НоМ(СН»)»4 МЕ/УВУ реагирует с сульфоном (Соединение С, Зед ІЮ Мов. 31-45). 65 Реакция проводится в указанном ранее апротонном растворителе при комнатной температуре.

Используемьй избьіток амина составляет порядка 1О0моль. Реакция проводится в течение времени от одного до нескольких часов.

При проведений реакции соответствующий амин добавляется в раствор сульфона в безводном апротонном растворителе, и реакционная смесь перемешивается при комнатной температуре до получения Соединения (Вед ІО Мов. 1-15), в котором заместитель в положений "С-Борн" - МВВ",

Целевое соединение может бьіть вьіделено разбавлением реакционной смеси водньмм раствором ТФУК с последующим хроматографическим разделением. Для зтого подходящей является обращеннофазная колоночная флзш-хроматография (С18) с использованием 10-2595 ацетонитрила в воде (содержащего 0.190

ТФУК) с шагом изменения состава 595. Соответствующие фракции могут бьїть лиофилизировань! для 70 Ввіделения продукта в виде трифторацетата.

Трифторацетат может бьть превращен в гидрохлорид путем растворения в воде и пропускания Через колонку Віо-Каа АС2-Х8(СІ-).

Если в формуле (І) Кі - водород, Соединение ГГ (Зед ІЮО Мов. 1-3, 15), то атом азота может бьть непосредственно введен в гемиаминальное положение путем реакции образования азида, которьій затем 75 восстанавливают в амин, которьій, в свою очередь, может бьїть частично алкилирован или ацилирован для получения конечного продукта.

Реакция показана на приведенной ниже схеме синтеза. но он вАНО но

Тк» 0 ее: ШИЯ ук у но Ми 0-Х Сон ТФУК чі «б ду н он сч

Мо І-3) (8) ня он ну іФоРа/С бу п дк Ф

Хотя в некоторьхх натуральньїх циклогексапептидах К 1 - водород, более часто Кі - гидроксил. Таким образом, для некоторьїх соединений, Соединение А" на схеме синтеза получено на первой стадии из с соответствующего соединения, в котором Ку - гидроксил. со

Получение восстановленного соединения может бьїть вьіполнено при перемешиваний соответствующего гидроксисоединения в растворе ГІСІО) в дизтиловом зфире при комнатной температуре, добавлении ТФУК и о последующем прибавлениий тризтилсилана. После зтого смесь подвергают бьістрому перемешиванию (4-10 цю часов) до тех пор, пока исходное гидроксисоединение более не обнаруживаєется аналитической ВЗЖХ. После зтого реакционную смесь вьіливают в дистиллированную воду, чтобьі получить восстановленньй продукт в виде осадка, которьій потом отделяется обьічньми методами. Полученньій таким образом восстановленньій продукт « может использоваться для получения азида в очищенном либо неочищенном виде.

Продуктьї, в которьїх Б. - оводород, могут бьть полученьь прибавлениеєм модифицированного /-Шей с циклогексапептида к предварительно приготовленному раствору НМз. НМ3 может бьіть получен из азида натрия й и ТФУК. Реакция протекает при комнатной температуре с получением продукта, содержащего азидную группу, и "» которьїй может бьїіть вьіделен обьічньїіми методами и очищен ВЗЖХ.

Очищенньй азид может бьть восстановлен водородом на опалладии, нанесенном на уголь, в аминосоединение способом, подобньім вьішеописанному. с Аминьі, полученньюе как зто указано вьіше, и имеющие первичную аминогуппу - МН»о, затем могут бьть алкилированьї обьічньіми способами для получения замещенной аминогруппьі. Короче говоря, алкилирование

Ф может проводиться взаймодействием соответствующего алкилгалогенида с амином (Соединение |, о Ме '"вВ/Л-МН»о); Зед І Мов. 1-15) в апротонном растворителе в присутствий основания для получения

МУ 70 монозамещенного амина (Соединениє І, МЕ'В'"-МНА", где В" -Сі-Слалкил, Сз-Слалкенил, (СН2)24ОН, (сн.о)»аМв'УВУ). Последние могут бьїть вьіделеньї из реакционной смеси обьічньіми методами. с Аминьі, полученнье как зто описьшалось вьше, и имеющие первичную аминогуппу-МНо, могут бьть ацшшрованьї обьічньмми способами для получения замещенной аминогруппьії. Предполагается, что ацильная группа - СО(СН»)/.АМН». Поскольку адилирующая кислота содержит первичную аминогруппу, то до проведения 59 ацилирования она защищена заместителем типа бензилоксикарбонильной группьі. Предпочтительньїм является

ГФ) использование активированного зфира типа пентафторфенилового. Ацилирование можно проводить в 7 апротонном растворителе в присутствиий основания, такого как ди(изо-пропил)зтиламин, при комнатной температуре в течение времени от одного до нескольких часов до получения продукта ацилирования. Продукт бр Может бьїть вьіделен разбавлением реакционной смеси метанолом и очищен ВЗЖХ. (Соединение І, МЕ! В/!--МН

СО(СН2)АМН»).

Аминосоединение, в котором аминогруппа в гемиаминальном положениий является полностью замещенной, т. е. в которой ни В. ни В! не являются атомами водорода, б5

ВА ит он о - ч, А предпочтительнее получать из сульфона (Соединение В, Зед І Мов. 31-45) взаймодействием с соответствующим замещенньм амином МНЕ'В'!, Реакция может бьіть проведена путем добавления амина к перемешиваемому раствору сульфона в течение времени, достаточного для протекания реакции. Продукт может бьїіть вьіделен и очищен препаративной ВЗЖХ с лиофилизацией соответствующих компонентов. 70 Изобретение также охватьввает соли связанньїх кислот. Соединение, при обьічном способе его вьіделения, получается в виде соли с какой-либо кислотой (связанной кислотой). Обьічно, зто соль ТФУК. Полученная таким образом соль может бьіть растворена в воде и пропущена через анионообменную колонку, несущую целевой анион. Злюат, содержащий целевую соль, может бьіть сконцентрирован для получения соли в виде твердого продукта. 75 Соединения по настоящему изобретению активньі против многих грибков, в частности - против видов

Сапаїда. Фунгициднье свойства могут бьіть проиллюстрированьь минимальной фунгицидной концентрацией (МФК), определенной для некоторьїх организмов вида Сапдіда в опьте по разбавлению культурь микроорганизмов, вбіполненном в среде азотной грибковой основьі с добавкой 195 декстрозь! (Уеаві Мігодеп

Вазе (ПІРСО) тедіцт м йй 195 дехігозе (УМВО).

В представленном опьте, соединения с начальной концентрацией Ббмг/мл бьли солюбилизировань! в 10095-ом ДМСО. Приготовленньій раствор лекарства разбавлением водой бьл доведен до концентрации 512мкг/мл, так что окончательное содержание ДМСО бьло около 1095, Затем раствор распределялся из многоканального дозатора в первую колонку 9б-ячеечной тарелки (каждая ячейка содержала 0.075мл УМВО), так, что полученная концентрация лекарства составила 256мкг/мл. Соединения из первой колонки разбавлялись сч ов от ряда к ряду в 2 раза, при зтом концентрация лекарства изменялась от 256 до 0.12мкг/мл.

С использованием спектрофотометра при бООнм бьло установлено, что культурьї микроорганизмов о возрастом 4 часа, подлежащие испьітанию, соответствуют 0.5 стандарта Мак Фарланда. Зта суспензия бьла разбавлена в УМВО в соотношений 1:100 до достижения в ячейке концентрации клеток 1-5х107, образующих колонию организмов (ОКО)/мл. Аликвоть! суспензии (0.075мл) бьіли привить! в каждую ячейку микротитровой Ге! зо тарелки, что вьіразилось в конечной концентрации клеток 5-25Х103 ОКО/мл и конечной концентрации лекарства от 128 до 0.Обмкг/мл. Каждьй опьїт включал один ряд контрольньїх ячеек, не содержащих лекарства, и один ряд с контрольньїх ячеек, не содержащих клеток. со

После 24 часов инкубации микротитровье тарелки осторожно встряхнули на вибростоле для перемешивания суспензии клеток. Для перенесения 1.5мкл образцов из каждой ячейки 9б-ячеечной б микротитровой тарелки в одиночнье ячейки, содержащие декстрозньій агар Зарошгаца (ЗОБА), бьіл использован (З микродозатор МІС-2000. Привитьсе ячейки с ЗОБА подвергли инкубации в течение 24 часов при 35"С. Результать били следующими: 000 соєдинениє» « 4 З с вв»; ва двоямомуловвмутозв муїтво МУЛОЮ МУто і г» 5 1 : ж-- в виде солей связанньїх кислот. (95)

Активность соединений против грибков іп міго может бьіть продемонстрирована для тех же соединений в о опиьте іп мімо.

Ге) Организмьї из посеянной предьідущим вечером культурьі Сапаїда аїрісапз МУ 1055 суспендируют в стерильном соляном растворе и определяют концентрацию клеток гемацитометрическим подсчетом и доводят до 3.75Х105 клеток/мл. Затем 0.2мл зтой суспензии вводят в вену, расположенную на хвосте мьіши, так, что конечная прививка составляет 7.5хХ107 клеток/мьішь. о Опьт продолжают внутрибрюшинньм (І.Р.) введением водного раствора Соединения | с различной концентрацией дваждь в день в течение последующих 4 дней самкам мьіши ОВА/2 весом от 18 до 20г, которье іме) бьіли предварительно инфицировань! Сапайїда аірісапз способом, описанньім ранее. Контрольной группе мьішей вводят (І.Р.) дистиллированную воду. Через 7 дней мьішей умерщвляют углекисльм газом, обе почки удаляют в 60 асептических условиях и помещают в стерильнье полизтиленовье пакетьї, содержащие 5 мл стерильного солевого раствора. Почки в пакетах раздробляют до гомогенного состояния, разбавляют стерильньі!м солевьм раствором и аликвоть! наносят на поверхность тарелок ЗОБА. Тарелки подвергают инкубации при 357С в течение 48 часов, и грибкове колоний пронумеровьівают для подсчета образующих колонию организмов (ОКО) на грамм почек. Соединения (1), (2), (3) и (4) дали более чем 9995-й зффект снижения концентрации вьіделяемьсмх 65 ОКО Сапаїда при 0.09 и 0.375мг/кг (І.Р.) дваждь в день в течение 4 последовательньх дней.

Соединения по настоящему изобретению также полезньі для ингибирования или облегчения течения инфекционньїх заболеваний, вьізванньїх Рпеийптосувіїв сагіпі у пациентов с пониженньм иммунитетом.

Зфофективность соединений, являющихся предметом настоящего изобретения, в терапевтических или противоинфекционньїх целях может бьть продемонстрирована в опьтах на крьсах с подавленньм

Мммунитетом.

В представленном опьіте бьла оопределена зффективность Соединения І-6-1 (КК 4-ОН; о-Н; в3-:сСНоСНоМНо; В'ЄДМтд; ВИН; В/ЛСНоСНоМН»). У крьіс Спрага-Доули (Зргадое-Оаміеу) весом около 250г иммунитет бьл подавлен добавлением дексазона в питьевую воду (2.Омг/л). Крьс одержали на низкопротеиновой диете в течение 7 недель, чтобь! вьізвать развитие пневмоцистозной пневмоний из скрьітой 70 мнфекции. Перед применением лекарства две крьісь! бьіли умерщвлень!ї для подтверждения наличия пневмоний

Рпешйтосузіїз сагіпі. Біло найдено, что обе крьісь! заражень. Пяти крьісам, весящим около 150г, дваждь! в день в течение 4 дней вводили подкожно (зс) Соединение І-6-1 в 0.25мл растворителя (дистиллированная вода).

Также проводился контрольньй опьїт с чистьім растворителем. Все животнье продолжали получать дексазон в питьевой воде и находились на низкопротеиновой диете в течение всего периода лечения. По окончаний 75 лечения, все животнье бьіли умерщвлень, легкие бьіли удаленьі и обследованьі, степень заболевания бьла определена микроскопическим исследованием окрашенньх срезов. По результатам исследований, Соединение

І-6-1 понизило содержание цист Р. сагіпі у 5 крьіс по меньшей мере на 9095 при дозировке 0.075мг/кг и вьживании всех крьс.

Вьідающиеся свойства используются найболее зффективно в том случає, если соегдинение вводится в новую фармацевтическую композицию, содержащую подходящий носитель, в соответствии с общепринятьми технологиями составления лекарств.

Новне композиции содержат, как минимум, терапевтическую противогрибковую или антипневмоцистическую дозу активного соединения. В общем случае, композиция содержит, по меньшей мере, 195 (масс.) Соединения |.

Концентрированнье композиции, используемье для разбавления, могут содержать его 9095 и более. с Композиции включают в себя формьі, пригодньіе для перорального, местного, парентерального (включая внутрибрюшинное, подкожное, внутримьішечное и внутривенное) введение, прием через нос, в виде свеч и і) вдьжханием. Композиции могут бьїть упакованьї тонко смешанньми с компонентами, пригодньмми в качестве благоприятной средн!.

Композиции, предназначеннье для перорального применения, могут бьіть жидкими или твердьми. Для Ге»! приготовления жидких составов, терапевтический агент может бьїть смешан с жидким носителем, таким как вода, гликоли, масла, спирть, и т. п., а для твердьїх препаратов, таких как капсуль! и таблетки, - с твердьми с носителями, такими как крахмаль, сахара, каолин, зтилцеллюлоза, карбонатьіь кальция и натрия, фосфат со кальция, тальк, лактоза, обьічно, с замасливателем, таким как стеарат кальция вместе с разрьїхлителями и т. п. из-за легкости их приема, таблетки и капсульі представляются найболее многообедающими дозированньми б пероральньми формами. Найболее перспективньмм представляєтся приготовление дозированньх форм с ою целью облегчения приема и единообразия дозировки. Композиции в виде дозированньх форм составляют предмет настоящего изобретения.

Композиции могут бьіть составлень! для иньекций и могут иметь форму суспензий, растворов или змульсий « в маслообразньїх или водньїх растворителях, таких как 0.859560 хлорид натрия или 595 декстроза в воде, и могут содержать суспендирующиє, стабилизирующие и/или диспергирующиеє агенть. Буфернье агентьї, а также й с солевой раствор или глюкоза, могут добавляться для того, чтобь! сделать растворь! изотоническими. й Соединения также могут бьіть солюбилизированьі в спирте/пропиленгликоле или полизтиленгликоле для "» капельньїх внутривенньїх вливаний. Зти композиции также могут бьіть представленьі дозированньми формами в ампулах или многодозовьїх упаковках, преимущественно с добавлением консерванта. С другой сторонь, 5 активнье ингредиенть! могут бьіть в форме порошков для разбавления подходящим растворителем перед с введением.

Термин "дозированная форма" используется в описаний и формуле и обозначаеєт физически дискретнье ї-о порции, каждая из которьїх содержит заранее определенное количество активного ингредиента вместе с о фармацевтическим носителем, рассчитанное для произведения желаемого терапевтического зффекта. Примерами таких дозированньїх форм являются таблетки, капсульі, пилюли, пакеть! порошка, брикетьі, мернье о дозь! в ампулах или многодозовье упаковки и т. п. Порционная дозировка в настоящем изобретений содержит, (Че) обьічно, от 100 до 200мг одного из соединений.

Если соединение предназначено для противогрибкового использования, то может бьіть использован любой метод введения. Для лечения грибковьїх инфекций обьічно используется пероральное или внутривенное

Ввведение.

Если соединение должно использоваться в борьбе с пневмоцистическими инфекциями, желательно о непосредственно вводить его в легкие или бронхи. По зтой причине, предпочтительнее ингаляция. Для ко ингаляционного введения упаковку соединения по настоящему изобретению удобно производить в виде азрозольного пульверизатора, представленного упаковками под давлением или распьілителями. 60 Предпочтительной системой для ингаляции является дозированньій азрозоль, которьій может бьть представлен в виде суспензиий или раствора Соединения | в подходящих распьіляемьх носителях, таких как фтороуглеродь! или углеводородь.

Хотя соединения в настоящем изобретениий могут использоваться в качестве таблеток, капсул, местньсх препаратов, ингаляционньїх порошков, свеч и т. п., растворимость в воде зтих соединений делает их 65 пригодньми для использования в составах для иньекций, а также в жидких композициях и азрозольньмх пульверизаторах.

Следующие примерьі иллюстрируют изобретение, но не могут бьіть истолковань как ограничения.

Примерьї 1-3 иллюстрируют получение продуктов по первому из описанньїх методов, а именно - через сульфон. Зтот метод может использоваться при получениий любого из соединений, но должен использоваться для достижения хорошего вьіхода, если к.-ОН.

Пример 4 и последующие иллюстрируют получение продуктов прямьмм замещением азота на кислород в гемиаминальном положений "5-орн". Зтот метод предпочтителен, если В., В" и В/!-Н.

Пример З иллюстрирует использование в качестве исходного материала соединения, в котором К 3 бьл восстановлен до - СНОСНЬОМН». из натурального продукта в котором Кз - СНЬСОМН».О Аналогично, для 70 соединений, в которьїх Кз - СНОСМ, также может использоваться частично модифицированное соединение.

Примерьї 9 и 10 иллюстрируют проведение превращения гемиаминального кислорода в азот и превращение -СнНьсМ в -СнНьЬсСнНЬМН»о

ПРИМЕР 1 -2НСІ вк

А, зон но М І що 5-5 я дн во кн од о Нв що з, соя

Ще сч во водно (о)

Часть А. Получение промежуточного 1-Ід-гидрокси-5-(зпи)-аминозтилтио-М 2-(10,12-диметил-1-оксотетрадецил)орнитині-5-(З-гидроксиглутамин)-6-(3-г идроксипролин)ехинокандина В. (Зед ІЮ Мо. 34) Ге! зо Раствор 5ООмг (0.47ммоль) пневмокандина Во (Зед4 І! Мо 19), 5.34г (47ммоль) гидрохлорида 2-амино-зтантиола и 109мг (0.47ммоль) (15)-(--10-сульфокамфарной кислотьі в 4О0мл безводного ДМФА с перемешивают при 25"С в течение б дней. Реакционную смесь разбавляют 40мл водь и с флзш-хроматографируют на "ПГІСНКО-РКЕР" е КРІ18 (40-6Змкм, 15.0г), набитом в колонку с использованием 1096-го ацетонитрила в воде. Колонку злюируют 10-4095 ацето-нитрилом в воде, собирают две фракции по ме) 120мл при каждом шаге изменения концентрации в 1095. Из двух фракций в 4095 водном ацето-нитриле ю получают 185мл материала, которьій очищают препаративной ВЗОЖХ "7ОКВАХ" С8 (21.2х250мм), злюируя 40-45956 ацетонитрилом в воде с о добавкой 0.1950 ТФУК и получают 128мг трифторацетата 1-(4-гидрокси-5-(зпи)-аминозтилтио-М2 « -(10,12-диметил-1-оксотетрадецил)-орнитин|-5-(З-гидроксиглутамин)-6-(З-гидроксипролин)ехинокандина В в виде белого безводного твердого вещества. в с ПМР (400 Мгц, СОзО0) 5 1.34 (а, 9-6.3 Н2,ЗН), 2.89 (т, 1Н), 4.72 (д,90-4.9Н2, ІН) ц Масс-спектр (Ії), т/е 1131 (МНН )" "» Часть В. Получение промежуточного сульфона (зеа ІЮ 34).

К перемешиваемому раствору тиосоединения (444мг, 0.358ммоль), полученного как зто описано в части А, в 15мл раствора ацетонитрила, разбавленного водой в соотношений 1:1, добавляют "ОХОМЕ" (324Мг сл зквивалентньїх 1.0бммоль кислого персульфата калия). После 45 минут раствор разбавляют таким же обьемом водьі и бьістро хроматографируют, используя обращеннофазную (С18) флзш-хроматографическую колонку, о злюируя 35-4395 ацетонитрилом в воде с добавкой 0.195 ТФУК с шагом изменения концентрации 2905. Фракции,

Ге) содержащие продукт лиофилизируют и получают З357мг (вьіход 8695) зписульфона.

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 3.48 (т,2Н), 3.55 (т, ІН), 3.71 (т, ІН), 3.91 (аа, ІН), 4.00 (т, ІН), 5.17 (аа, о ІН), 6.76 (9, 2Н),7.16, (а, 2Н). (Че) Часть С. Получение продукта формульі (1); Соединение 1-4 (Зед ІО Мо 4).

К перемешиваемому раствору 1.2г (0.945ммоль) зписульфона, полученного, как зто описано в части В, в 20мл безводного ДМФА, добавляют зтилендиамин (568мг,9.45ммоль). После 1 часа анализ реакционной смеси с применением ВЗЖХ (КР-С18, 4095 СНУСМ/НьЬО (0.196 ТФУК) показал полное превращение в два полярньйх продукта в соотношении 37:63. За проведением обращеннофазной колоночной(С18) флзш-хроматографии с і) 10-4095 ацетонитрилом в воде с добавкой 0.196 ТФУК в качестве злюента и шагом изменения концентрации 590 ко следует лиофилизация соответствующих фракций с образованием 20Омг (вьіход 2195) нормального продукта в форме (бис)-трифторацетата. во ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 1.14 (а, 9-62 Но, ЗН), 2.72 (да, 0-15,4 и 3.8 Нл, 1Н), 4.10 (т,), 5.04 (аа,

У-8.7 и 3.2 Но, 1), 5.09 (ад, 9-8.5 и 4.2 Но, 1Н), 5.18 (рг 5, 1Н), 6.74 (а, 9-86 Нл, 2Н), 7.12 (а, 9-8.6

На, 2Н), 7.47 (й, 9-8.6 Н2, 1Н), 7.71 (а, 9-10.0 Но, 1Н), 8.11 (а, 9-8.7 Ня, 1Н), 8.71 (а, 9-8.7На, 1Н).

Масс-спектр (Гі), т/е 1113.5 (МІ 7 (Бис)-трифторацетат, полученньій ранее, растворяют в воде, и раствор пропускают через колонку Віо-Каа 65 Ас2-Х8 (СІ) опромьшваемую водой. Злюат, содержащий продукт, лиофилизируют с образованием вьішеуказанньїх соединений в виде (бис)-гидрохлорида.

Лиофилизация фракций, содержащих основное вещество, дает зпипродукт.

ПМР (400 Мгц, СОзОВ) 5 3.02 (т, 1Н), 3.14 (т, ЗН), 4.16 (т, 1Н), 5.10 (аа, 1Н), 6.76 (а, 2Н),7.14, (а, 2Н).

Масс-спектр (Ії), т/е 1113.9 (МІ).

ПРИМЕР 2 «ЗНСЇ ни

В, рн о нка о

Б М

70 ЗИ дя п М МН он

Ні он и ний зон 2 5/9) Бед ШО Мо.6

Часть А. Получение промежуточного сульфона (Зед ІО Мо. 36)

Мсходное вещество, Соединение А-6 в'-ДМТД (бед ІЮ Мо. 21), получают, как зто описано для таких соединений в разделе "Получение исходньїх материалов".

Соединение А-6 превращают затем в зпитиосоединение В-6б (бЗед ІЮ Мо. 36) способом, аналогичньм описанному в части А Примера |.

К перемешиваемому раствору 285мг (0.241ммоль) Соединения В-б в 14мл раствора ацетонитрила, с разбавленного водой в соотношений 1:11, добавляют "ОХОМЕ" (162мг зквивалентньїх 0.530ммоль кислого персульфата калия). После 45 минут раствор разбавляют таким же обьемом водьі и хроматографируют. За о проведениегм обращеннофазной колоночной (С18) флзш-хроматографии с 30-4595 ацетонитрилом в воде с добавкой 0.190 ТФУК в качестве злюента и шагом изменения концентрации 595 следует лиофилизация содержащих продукт фракций с образованием 212мг зписульфона (Соединение С-6 Зед ІО Мо. 36). Вьіход 8496. Ге»!

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 3.08 (т,2Н), 3.46 (ї, 92-6.6 Но, 2Н), 3.68 (т), 5.05 (т), 6.77 (а, 9-8.5 Н?, 2Н), сч 7.15 (а, 920-8.5 Н2, 2Н).

Масс-спектр (Ії), т/е 1039.9. со

Часть В. Получение продукта формуль! (2) (Соединение 1-6; В'-Н; В/-2-аминозтил): Зед ІО Мо. 6 Ф

К перемешиваемому раствору Соединения С-6, полученного как зто описано у части А, (418мг, 0.305ммоль) в 1Омл безводного ДМФА, добавляют зтилендиамин (18Змг,3.05ммоль). После 1 часа анализ реакционной ІС о) смеси с применением ВЗЖХ (КР-С18, 3596 СНаУСМ/НьЬО (0.195 ТФУК) показал полное превращение в два полярньїх продукта в соотношений 36:64. Реакционную смесь разбавляют раствором, содержащим 190мл водь! и О.4мл ТФУК, и хроматографируют. За проведением обращеннофазной колоночной(С18) флзш-хроматографийи « с 10-2595 ацетонитрилом в воде с добавкой 0.1906 ТФУК в качестве злюента и шагом изменения концентрации

Бу следует лио-филизация соответствующих фракций с ообразованием 111мг продукта в форме - с (трис)-трифторацетата. Вьїход 21965. а ПМР(40ОО Мгц, СО5О0) 85 1.17 (а, .9-6.2 Но), 2.44(да4, 0-7. и 13.2 Нл, 1Н), 4.10 (ту), 2.7-3.0 (т, 4Н), » 3.06 (5, 92-7.0 Но, 2Н), 3.82 (т, ЗН), 3.97 (ад, 9-І 1.2 и 3.2 Н?, 1Н), 4.03 (т, 2Н), 4.70 (а, 90-2.3 Н?, 1Н), 5.00 (а, 9-3.3 Н2, 1Н), 6.75 (а, У-8.6 Не, 2Н), 7.11 (а, 9-8.6 Но, 2Н).

Масс-спектр (Ії), т/е 1099.9 (МІ) о (Трис)-трифторацетат, полученньій ранее, растворяют в воде и раствор пропускают через колонку Віо-Кай со Ас2-Х8 (С1-) промьіваемую водой. Злюат, содержащий продукт, лиофилизируют с образованием 9Змг вьішеуказанного соединения в виде (трис)-гидрохлорида. (95) ПРИМЕР З зо вх он о я й (32) Но М ? 9) М юн 29 не Ф чн он о НО М М но Ну , (ої 60 то сао мом

Часть А. Получение азида (5ед ІО Мо. 49)

К перемешиваемому раствору 297мг (0.257ммоль) зпи-сульфона(Пример 1, часть В), в 1Омл безводного

ДМФА, добавляют азид лития (126бмг,257ммоль). После 1 часа анализ реакционной смеси с применением ВЗЖХ 65 (КР-С18, 4095 СНЗУСМ/НЬО (0.195 ТФУК) показал полное превращение в единственньій, значительно менее полярньій продукт в соотношении 37:63. За проведением обращеннофазной /колоночной(С18)

флзш-хроматографии с 30-6595 ацетонитрилом в воде в качестве злюента и шагом изменения концентрации 590 следует лиофили-зация соответствующих фракций с образованием сьірого азида. С помощью препаративной вОЖжХ (С18, 40-4595 СНУСМ/НЬО (0.196 ТФУК) с шагом изменения концентрации 595 получено азидное бСоединение 0-4 (бед ІО Мо. 49).

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 1.14 (а, 9-6.1 Но, ЗН), 2.50 (аа, 2-15.,6 и 9.9 Н7, 1Н), 2.84 (да, 0-15.6 и 3.3

На, 1Н), 3.95 (да, 9-11.2 и 3.1 Но, 1Н), 4.05 (т, 2Н), 4.56 (т, ЗН), 4.98 (да, 9-8.5 и 3.5 Нл, 1Н), 5.10 (аа, 3У-8.3 и 4.2 Н7, 1Н), 5.26 (да, 0-8.5 и 2.2 Но, 1Н), 6.74 (а, 90-8.6 Но, 2Н), 7.12 (а, 9-8.6 Но, 2Н), 7.44 (а, 3-83 НІ, 1Н), 7.76 (д, 2-9.9 Но, 1Н), 8.26 (д, 2-8.1 Но, 1Н), 8.83 (0, 2-8.7 Но, 1Н), 9.00(а, 9-8.5 На, ІЄ). 76 ИК-спектр (Мціої), 2110 см".

Часть В. Получение амина.

Смесь азидного соединения 0-4, полученного как зто описано в части А (137мг, 0.12бммоль), и 1095-й Ра/С (137мг) в ледяной уксусной кислоте (1Омл) насьщают водородом под давлением, равньм давлению в питающем баллоне, в течение 14 часов. Катализатор удаляют фильтрованием, и фильтрат лиофилизируют для 75 получения сьірого амина. Очистка с помощью препаративной ВЗЖХ (С18, 35-4195 СН зСМ/НЬО (0.195 ТФУК) с шагом изменения концентрации 395), за которой следует лиофилизация соответствующих фракций дает аза соединение І-І, В", В/"-Н (Зед ІО Мо. 1) в виде трифторацетата. Вьіход 4895.

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 1.13 (а, 9-6.1 Но, ЗН), 2.49 (аа, 9-15.6 и 9.8 Нл, 1Н),2.81 (да, 9-15.6 и 3.4Н52, 1Н), 3.97 (да, 90-1.11 и 3.1 Нл, 1Н), 4.03 (т, 1Н), 4.11 (т, 1Н), 4.47 (ад, 0-1.17 и 5.5 Нл, 1Н), 4.57 (т, 2Н), 5.00 (т, 1Н), 5.10 (т, 1Н), 5.14 (а, 0-2.2Н7, 1Н), 6.74 (0, 9-8.6 Но, 2Н), 7.12 (і 90-8.6 Н7, 2Н), 7.42 (9, 9-8.3 Но, 1Н), 8.89 (а, 9У-8.8 Н2, 1Н).

Масос-спектр га/2 1071.0 (МІ)".

Трифторацетат растворяют в воде и раствор пропускают через колонку Віо-Кад АС2-Х8 (С1-), промьіваемую водой. Злюат, содержащий продукт, лиофилизируют с образованием ббмг соединения 1-4, К Ці В/Н в виде с 29 гидрохлорида. Ге)

В следующих опьтах Растворитель А - 9595 водьі, 595 ацетонит-рила, 0.1956 ТФУК, а Растворитель В - 95905 ацетонитрила, 595 водь, 0.190 ТФУК. Используемьсе вніражения "в вакууме" и "на роторе" относятся к удалению растворителя с помощью роторного испарителя.

ПРИМЕР 4 Ф "НОдАе Га

НМ «он но З М т о з Мн Ф вдо но МН я, з, 70 Ф З с Но бед ІЮ Мо.1 "з А. Получение промежуточного азида. Соединение О (Зед ІЮО Мо.46).

Пневмокандин Во (Соединение А-4; Зед ІО Мо. 19) (5.00г, 4.69ммоль) растворяют в 2М ГіСІО; в дизтиловом зфире при комнатной температуре. Добавляют при перемешиваний ТФУК (2.50мл), затем к раствору прибавляют тризтилсилан (5.00мл). Гетерогенную смесь интенсивно перемешивают в течение 6 часов, после і-й чего аналитическая ВЗЖХ (С18 "7ОКВАХ", 4596 Растворителя А, 55906 Растворителя В, 0.195 ТФУК, 1.5мл/мин) се не обнаружила присутствия исходного пневмокандина Во в количествах, превьішающих следовье. Смесь вьіливают в 200мл дистиллированной водьі, фильтруют и вьісушивают на воздухе. Влажньій твердьій продукт

Мн перемешивают с дизтиловьм зфиром, фильтруют и вьсушивают на воздухе; получают 5.бг сьрого ко 20 моновосстановленного пневмокандина Во (Соединение А-1, Зед ІЮ Мо.16).

Вьіделенньй сьрой продукт в твердом виде добавляют к заранее приготовленному раствору НМ з, со полученному растворением при охлаждении Маму» (3.06г, 47.Оммоль) в 100мл ТФУК. После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 минут реакционную смесь вьіливают в З5О0мл дистиллированной водь и перемешивают в течение 15 минут. Осадок отфильтровьівают, растворяют в метаноле и отгоняют растворитель 29 в роторном испарителе. Остаточная вода удаляется азеотропной отгонкой со 10090-м зтанолом. Конечньй

ГФ) твердьій продукт сушат в глубоком вакууме для удаления летучих примесей. Смесь очищают двумя равньми юю порциями с помощью препаративной ВЗЖХ (С18 "ОЕЇ ТАРАК", бомл/мин, фракции 48мл) с использованием изменяющейся концентрации злюента от 7095 А/3095 В до 5095 А/5095 В. Соответствующие фракции во (определяются по УФ-поглощению при 5-220 и 277нм) обьединяют. Недостаточно очищеннье фракции также обьединяют, и процесс повторяют, как зто описано вьіше. Таким способом получают 1.78г (вьіход 3595) азида О-Ї (Зед ІО Мо.46).

ПМР (400 Мгц, СОз3О0) 5 7.02 (а, 2Н), 6.69 (а, 2Н), 5.30 (а, 1Н), 5,11 (а, 1н), 4.98 (41Н), 2.74 (аа Ін), 13 (а, ЗН).

Масс-спектр (Ії), т/2 1081 (МНН |)". 65 В. Получение амина формуль! (4). Соединение І-І (В, В/"-Н; Зед І Мо.1)

Очищенньй азид (1.50г), Соединение 0-1, полученньй, как зто описано вьіше, растворяют в 40мл метанола.

Добавляют 3395-ю водную уксусную кислоту (15мл), затем - 0.20г 1095-го Ра/С, затем продувают реакционньй сосуд азотом. Вьтесняют азот водородом и интенсивно перемешивают смесь в атмосфере водорода в течение

З часов. Суспензию фильтруют через стеклянньій фильтр (дпор-0.2мкм) и чистьій раствор упаривают досуха на Воторном испарителе. Осадок растворяют примерно в 20мл дистиллированной водьі), вьімораживают и лиофилизируют. Получают 1.47г (9596) целевого аминосоединения (Зед ІЮ Мо.1) в виде белого твердого вещества.

ПМР (400 Мгц, СОзО0) 5 7.02 (а, 2Н), 6.69 (9, 2Н), 5,09 (а, 1Н), 5.01 (а, 1н), 2.77(да, 1Н),1.15(4, ЗН).

Масо-спектр (Ії), т/2 1055 (МНН Ї)7. 70 ПРИМЕР 5 зо

НМ о НМ, ОН п М І 9) З М дн

НІ! на У би ово

І2(в) МН 5, с3 но о Юко

А. Получение промежуточного бензилоксикарбонильного соединения (Зеяд ІЮ Мо.1) с

В мл ДМФА растворяют амин формуль! (4) (Пример 4) (200мг, 0.180ммоль) и пентафторфеншг

М-бензилоксикарбонил-З3-аминопропанат. Добавляют ди(изо-пропил)зтиламин (0.03Б5мл, 0.198ммоль) и (8) перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакионную смесь разбавляюют 2мл метанола и очищают препаративной ВОЗЖХ (С 18 "ОБ! ТАРАК", фракция 48мл) с использованием изменяющейся концентрации злюента от 7095 А/3095 В до 4895 А/5295 В. Соответствующие фракции б зо (определяются по УФ-поглощению при 5-220 и 277нм) обьединяют, вьиімораживают и лиофилизируют.

Получают 10Омг (4495) целевого промежуточного продукта. с

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 7.32 (й, 5Н), 7.01 (а, 2Н), 6.69 (а, 2Н), 5.64 (ра, 1н),1.18(а, ЗН). с

Масс-спектр (Ії), т/2 1259 (МІ)7.

В. Получение З-аминопропаноильного соединения формульі (5); Ф

Соединение І-І Е"-Н. В//"-СсО(СН)»МН» (Зед ІО Мо.1). юю

Бензилоксикарбонильное соединение (см. часть А) (94мг, 0.075ммоль) растворяют в смеси Змл метанола, 1Тмл водьі и 0.2мл уксусной кислотьі. Добавляют 1095-й Ра/С (48мг) и продувают реакционньій сосуд азотом.

Затем, продувают сосуд водородом и интенсивно перемешивают смесь в течение 2 часов под давлением « водорода Татм. Удалением летучих веществ в роторном испарителе получают твердьй продукт. Продукт растворяют, примерно, в 4 мл 5096-го водного ацетонитрила, внімораживают и лиофилизируют. Получают 8Омг - с (91965) целевого соединения формульї! (5) в виде белого твердого вещества. ч» ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 7.01 (а, 2Н), 6.69 (а, 2Н), 6.67 (а, 1), 5.10 (а, тн), 4.99 (а, 1н), 3.12 (т, " 2Н), 1.91 (в, ЗН), 1.17 (д, ЗН). Масс-спектр (Ії), т/2 1125 (МІ).

ПРИМЕР 6

Н о вснк, ОН (Се) о М б

З не Мн

Мамі о, МН он й ко о у й оно Х 5 (в) Ми (32) не най мито (в) б но Зеа Ю Мо.1 о Получение М-метиламиносоединения формуль! (6); Соєдинение І-І (В! -Н; В/"-СНа) (Зед І Мо.1) о Амин формульїі (5) из Примера 5 (45.бмг, 0.135ммоль) растворяют в 0.5мл сухого ДМФА. Добавляют 0.021мл (0.47З3ммоль) иод-метана, затем - 0.0824мл (0.47З3ммоль) ди(изо-пропил)зтиламина. После 24 часового 60 перемешивания при комнатной температуре отгонкой на роторном испарителе удаляют летучие вещества и сьірой продукт анализируют масс-спектрометрически.

Масс-спектр (Гі), т/2 1068 (МІ 7.

ПРИМЕР 7 б5

"«2НСІ

ТМ Н я зон й но М во-ук

ОМ ної чн оно о М. на 70 То» 7

Но о ркол

А. Получение промежуточного нитрильного (Мм-цианометильного) й Соединения І-І: В"-Н; В/Л-СНЬСН (Зед ІО Мо.1).

Аминосоединение, полученное, как описано в Примере 4 (500мг, 0.451ммоль), растворяют в Змл сухого

ДМФА. Добавляют 0.0бЗмл (0.902ммоль) бромацетонитрила, которьій бьіл предварительно очищен путем пропускания через небольшой слой МаЗО /-МансСо», после чего добавляют ди(изо-пропил)зтиламин (0.157мл, 0.902ммоль). Прозрачную реакционную смесь перемешивают в течение 12 часов, после чего разбавляют небольшим обьемом водьї. Раствор очищают препаративной ВЗЖХ (С18 "ОЕЇ ТАРАК", изменение концентрации от 7095 А/309о В до 4795 А/5395 В, фракции 48мл). Соответствующие фракции, определяемье по УФ-поглощению при 220 и 277нм, собирают, виімораживают и лиофилизируют. Получают 338мг (6290) целевого промежуточного цианометильного соединения в виде нерастворимого в воде твердого вещества. сч

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 8 7.01 (а, 2Н), 6.69 (а, 2Н), 5.12 (аа, 1), 5.01 (ад, їн), 3.80 (в, 2Н), 2.76 (аа, 1н), 1.15(а9, ЗН). о

Масос-спектр (Гі), т/2 1094 (МН |)".

В. Получение М-аминозтильного соединения формульі (7).

Соединение І-І: ВН: В//-(СН2)»МН» (Зед ІО Мо.1). ФО

Нитрильное (цианометильное) соединение, полученное ранее, З0Омг, 0,249ммоль) растворяют в бмл метанола, затем добавляют 237мг (0.997ммоль) гексагидрата хлорида никеля (Ії). Тремя порциями добавляют к сч раствору 189мг (4.99Ууммоль) боргидрида натрия. Сразу же образуется черньій осадок, после чего смесь со перемешивают 15 минут при комнатной температуре. Гетерогенную смесь разбавляют примерно 20-40мл водь! и добавляют примерно 10-15мл 2 н. НСІ. Перемешивание продолжают еще в течение 45 минут до тех пор, пока Ф

Ччерньій осадок не растворится с образованием сине-зеленого раствора. Очистка проводится препаративной юю ваЇжх (С18 "ОБ! ТАРАК", изменение концентрации от 7095 А/3095 В до 55950 А/4595 В, фракции 48мл).

Соответствующие фракции, определяемье по УФ-поглощению при 220 и 277нм, собирают, виімораживают и лиофилизируют. Получают 180мг (5590) целевого продукта. Вещество растворяют в ЗОмл водьі и пропускают « через ионообменную колонку (в форме СГ), промьіваемую дистиллированной водой. Раствор вьімораживают и лиофилизируют; Получают 149мг (степень извлечения 94905) целевого аминозтильного соединения формуль! (7) - с в виде белого твердого вещества. ч» ПМР (400 Мгц, СОзОВ) 5 7.01 (а, 2Н), 6.69 (д, 2Н), 5.11 (да, 1н), 5.07 (аа, 1Нн), 1.14 (а,3Н). " Масс-спектр (Гі), т/2 1098 (МНН |)".

ПРИМЕР 8 "ТФУК с нм. ОН

ОО М ІЙ о МС й ме рн ва 20 ту бю оно Х

І5 в) МН з, зх

Зо Он 59 но даю (Ф, А. Получение промежуточного азида. (Зед ІЮ Мо.47). ка Нитрил пневмокандина Во (2.00г, 1.91ммоль) растворяют в 24мл 2М раствора ГіСІО) в дизтиловом зфире.

Добавляют 2.00мл тризтилсилана, затем їмл ТФУК, смесь интенсивно перемешивают в течение 6 часов при бо Комнатной температуре. Смесь вьливают в З0Омл водьії, перемешивают и фильтруют. Вещество с фильтра растворяют в минимальном количестве метанола, и растворитель отгоняют на роторном испарителе.

Остаточную воду удаляют азеотропной перегонкой со 100956-м зтанолом, и остаток оставляют на ночь в глубоком вакууме для удаления летучих примесей. Получают моновосстановленньй по месту бензильного углерода продукт. Полученное сьюфрое твердое вещество и азид натрия (1.2б6г, 194Аммоль) помещают в 65 Круглодонную колбу, снабженную мешалкой и помещенную в охлаждающую баню. Медленно добавляют 50мл

ТФУК, охлаждающую баню убирают и смесь перемешивают 2 часа. Смесь вьливают в ЗООмл водь. и фильтруют. Твердое вещество растворяют в метаноле, растворитель отгоняют на роторном испарителе, вьідерживают в глубоком вакууме для удаления летучих примесей. Сьрой материал очищают препаративной ваЇжх (С18 "ОБ! ТАРАК", изменение концентрации от 5595 А/4595 В до 4595 А/5595 В, фракции 5бмл).

Соответствующие фракции, определяемье по УФ-поглощению при 220 и 277 нм, собирают, вьиімораживают и лиофилизируют. Получают 0.59г (2995) целевого промежуточного азида.

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 7.00 (а, 2Н), 6.69 (а. 2Н), 5.34 (а. 1н), 5.07 (аа, тн), 5.00 (т, тн), 2.88 (аа. 1Н), 1,17 (а, ЗН).

Масс-спектр (Ії), т/2 1036 (М-Мо ні)". 70 В. Получение соединения формульі (8) (Зед ІЮ Мо.48).

Очищенньій азид (часть А) (0.15г, 0.142ммоль) растворяют в смеси 4мл метанола, їмл водь и 0.бмл уксусной кислотьі. К раствору добавляют 50мг 1095-го Ра/С. Реакционньій сосуд продувают М», затем Но. Смесь интенсивно перемешивают в течение 5 часов при комнатной температуре под давлением Но атм.

Последующая фильтрация через стеклянньй фильтр (а пор-0.2мкм) и удаление летучих примесей на роторном 75 испарителе позволяет получить 0.124г (8095) целевого соединения формуль (8) в виде белого твердого вещества.

ПМР (400 Мгц, СОз3О0) 5 7.00 (а, 2Н), 6.69 (а, 2Н), 5.04 (а, 1Н), 5.01 (т, 1Н), 2.79 (аа, 1н), 1.18 (а, ЗН).

Масс-спектр (Гі), т/2 1037 (МНН |)".

ПРИМЕР 9 "тФУК

Нм. ОБ но М о чн МЕ що й Ми он ся о М. най

ОН Ге! то с южмо с

Получение аминосоединения формульі (9) (Зед ІЮ Мо.3). со

Очищенньй азид-нитрил из Примера 8 (часть А) (44мг, 0.041бммоль) растворяют в 1.5мл метанола, после чего добавляют Сосі 2 6НьЬО (59мг, 0.25ммоль). Затем порциями, осторожно, добавляют Мавн , (8х12мг, о 2.50ммоль). Черную гетерогенную реакционную смесь перемешивают ЗО минут при комнатной температуре.

Реакцию прекращают путем добавления примерно 1.5мл 2 н. НСІ и достаточного для растворения осадка количества уксусной кислотьі. Мутньій раствор разбавляют Змл водьі и очищают препаративной ВОЖХ (С18 "ХОКВАХ", изменение концентрации от 7095 А/3З095 В до 6бОбо А/4095 В, 1бмл/мин, фракции 15мл). «

Соответствующие фракции, определяемье по УФ-поглощению при 210 и 277нм, собирают, виімораживают и лиофилизируют. Получают З8г (72905) соединения формульї! (9) в виде белого твердого вещества. - с ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 6.99 (а, 2Н), 6.70 (а, 2Н), 5.11 (а, 1Н), 5.0 (т, 1Н), 3.05 (т, 2Н), 1.17 (а, ЗН). м Масс-спектр (Ії), т/2 1041 (МНН |)". » ПРИМЕР 10 "НС ня сл Й ОК, зн но М т (Се) 7 Як Мн. 2) Ж М Мн он

Ні) (Че) с г'н зон

Он 29 ю бе мої (Ф) А. Получение промежуточного бис-нитрильного соединения. г) (Соеєдинение І-2: В'-Н: В/"'-СНЬСМ: В'-ДМТАД) (Зед ІО Мо.2)

Амино-нитрильное соединение из Примера 8 (часть В) (500Омг, 0.459ммоль) растворяют в Змл сухого ДМФА. 60 Добавляют 0.0б4мл (0.917ммоль) бромацетонитрила, которьій бьіл предварительно очищен путем пропускания через небольшой слой МаЗО,-Мансо)», после чего добавляют ди(изо-пропил)зтиламин (0.155мл, 0.917ммоль).

Реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов. Смесь разбавляют водой и очищают препаративной важх (сС18 "ОБ! ТАРАК", бомл/мин, изменение концентрации от 7090 А/30908 до 5095 А/5095 В, фракции 48мл).

Соответствующие фракции, определяемье по УФ-поглощению при 220 и 277нм, собирают, виімораживают и в5 лиофилизируют. Получают 198мг (3695) целевого Соединения 1-2; В'-Н; В/Л-СНЬСМ.

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 8 7.00 (а, 2Н), 6.69 (а, 2), 5.08 (аа, тн), 5.01 (ад, їн), 3.73 (в, 2Н), 2.79

(аа, 1н), 1.18 (а, зн).

Масс-спектр (Гі), т/2 1076 (МНН |)".

В. Получение соединения формульїі (10) (Зед ІЮ Мо.3).

Бис-нитрил (часть А) (184мг, 0.155ммоль) растворяют в Змл метанола. Также, в метаноле растворяют 148мМг (0,621ммоль) МіСІ»-бНьО, и тремя порциями добавляют 117мг (3.1ммоль) Мавн /. Через 5 минут добавляют 148мг (0.621ммоль) СосСіІ»бНьО и перемешивают еще 1 минуту. Дополнительно прибавляют еще 117 мг МавнНу и продолжают перемешивание еще в течение 15 минут. Последние бОмг Мавн.у добавляются для того, чтобь довести реакцию до завершения. Смесь разбавляют водой, подкисляют 2 н. НСІ и перемешивают до 70 растворения черного осадка. Очистка препаративной ВОЗЖХ (С18 "2ОБ-ВАХ", 15мл/мин, изменение концентрации от 7095 А/30908 до 55905 А/4590 В, фракции 22.5мл, 220, 277нм) после лиофилизации дает твердое вещество. Твердое вещество растворяют в воде и пропускают через ионообменную колонку (в форме СІ-), ввімораживают и лиофилизи-руют. Получают 81.1мг (4495) целевого соединения формульї (10) (Соединение 1-3;

Зед ІО Мо.3) в виде белого твердого вещества.

ПМР (400 Мгц, СО3О0) 5 7.00 (а, 2Н), 6.70 (а, 2Н), 3-3.3 (т, 6Н), 1.18 (а,3Н).

Масс-спектр (Гі), т/2 1084 (МНН |)".

ПРИМЕРЬЇ 11-14

В действиях, вьіполняемьх аналогично тому, что описано в Примере 4, соответствующие натуральнье или модифицированнье натуральнье циклопептиднье продуктьї, полученнье, как зто описано в дальнейшем при приготовлений исходньїх материалов, при проведений раздельньїх операций растворяют в растворе ГіСІОХ в дизтиловом зфире и при перемешиваниийи прибавляют туда ТФУК и тризтилсилан в течение 5-10 часов. Затем вьіливают смесь в воду, фильтруют и перемешивают твердьй продукт с дизтиловьім зфиром, вьісушивают на воздухе и получают циклопептид, в котором Ку. восстановлен до Н.

Моновосстановленное соединение добавляют при охлаждении к предварительно полученному из МамМз и Се

ТФУК раствору НМз, перемешивают при комнатной температуре от 30 минут до 1 часа и затем вьіливают в воду о для получения азида, которьйй вьіделяют способом, описанньїм ранее.

Азид обрабатьвают водородом, как зто описано ранее, используя Ра/С в качестве катализатора, и вьіделяют продукт из фильтрата после отделения катализатора.

Продуктьї, получаемье зтим способом, таковь!: (22) поижевів|т5| вве я беомо см с

Ф зв ю

ПРИМЕРЬЇ 15-17

В действиях, вьіполняемьїх аналогично тому, что описано в Примере 7, соединения из примеров 11, 13 и 14 « растворяют в ДМФА и добавляют к раствору очищенньй бромацетонитрил, а затем - ди(изо-пропил)амин, смесь перемешивают в течение 12-18 часов для получения нитрильного (М-цианометильного) соединения. В З с дальнейшем его очищают препаративной ВЗЖХ. з» Нитрил растворяют в метаноле и химически восстанавливают с использованием хлорида никеля (ІЇ) и боргидрида натрия для получения аминозтильного замещенного соединения. з поинерівв, те як 10 беомо т

Фо с

МО 200000 ПРИМЕРЬ 18-21 с В результате операций, вьіполняемьх аналогично тому, что описано в Примерах 1, 2 и 3, могут бьть полученьї соединения, содержащие перечисленнье ниже заместители: поямев|ти|яе| яз (косяк веното) 5 о 79 онсносносномня Нонна ДМА 5 ю то оно сном н соні дМтА 5 60

ПРИМЕРЬЇ 22 -25

В результате операций, вьіполняемьх аналогично тому, что описано в Примере 1 получаются нижеследующие соединения: о пряеерінво| те фо | 0ко0веноко, 22 ОонІСснЗ сНЗ НО СносСноМн» (СвнНОсВНІ7 10 оо оно носноснамно Но (снозмна) ДМ 6 25 он носносноно Зо сноснано ДМ 5

ПРИМЕР 26 -2ТФУК пс Сн.

З ь ра З

М зн но М о яке МН. нм М і З-у бю усе но Мн ого

Моне що, о, з я

С Я "н "он он со) . 5-5) бед 12 Мо.б

Вьішеуказанное соединение получают способом, аналогичньім описанному в Примере 2 (часть В), замещая диметиламин зтилендиамином для получения соединения с М. м. 1334.43.

ПРИМЕР 27

ФІ "2ІФУК

М «он сч но М 7 о як МН нм М 2 ян юн г-ан он Ге) но МН о Мо Ну М с

НО, зн " - --, он со он но с Ге)

Бед ТО Мо.6

Іо)

Вьішеуказанное соединение получают способом, аналогичньм описанному в Примере 26, замещая пиперидин диметиламином для получения соединения с М. м. 1374.

ПРИМЕР 28 « 1 000 спрессованньїх таблеток, каждая из которьїх содержит 500мг соединения формуль (2) |Соединение 1-6 40. (ВН; В! -2-амино-зтил); Зед ІО Мо.6), получаемьх из следующих ингредиентов: - с . »

Гидрат двухосновного фосфата кальция с іс, Тонкоизмельченнье ингредиентьі хорошо смешивают и гранулируют с 1095-й крахмальной пастой. Грануль!

Га сушат и спрессовьівают в таблетки.

ПРИМЕР 29 о 1000 твердьїх желатиновьїх капсул, каждая из которьїх содержит 500мг того же соединения, получаемьх из

Ге) следующих ингредиентов : вв о о бо

Однородная смесь ингредиентов, полученная смешением, используется для наполнения твердьїх желатиновьїх капсул, состоящих из двух частей.

ПРИМЕР 30

Азрозольная композиция может бьїіть получена, исходя из следующих ингредиентов: б5 я

Соединение Содержание в одной емкости

ПРИМЕР 31 250О0мл раствора для иньекций могут бьть полученьії с использованием общепринятьїх методов из следующих ингредиентов: д

Ингредиенть! смешивают и затем стерилизуют для использования.

Получение исходньїх материалов:

А-4, если В'ЄДМТД, может бьть произведен путем культивирования 7аїегіоп агрогісоїа АТСОС 206868 в питательной среде с использованием маннитола в качестве первичного источника углерода, как зто описано в пат. США Мо5, 021, 341 от 4 июня 1991г. 7 А-7, если В'-ЄДМТД, может бьть произведен путем культивирования 7аїегіоп агрогісоїа АТСС 20868 в питательной среде как зто описано в пат. США Мо4, 931, 352 от 5 июня 1990Гг.

А-10, если В! - линолейл, может бьіть произведен путем культивирования Азрегоіїив підціапе МЕВІ. 11440 в питательной среде, как зто описано в пат. США Мо4, 288, 549 от 8 сентября 1981г. с

А-11, если ВК! - 11-метилгридецил, может бьть произведен путем культивирования Азрегодіййе вудомжмі в питательной среде, как зто описано в У.Апіїріоїісз ХІ. (Мо.3) р28 (1987). і9)

А-12 может бьіть произведен путем культивирования 7аїегіоп агрогісоїа АТСС 20958 11440 в питательной среде, как зто описано в заявке сер. Мо07/630, 457, поданной 19 декабря 1990г. (Ану ЮоскКеї Мо.18268).

Соединения, в которьх Ку - водород, могут бьіть получень, как зто описано в Примере 4, часть А. Ге»!

Соединения, в которьїх Кз - СНоОСМ, такие как А-2, А-5 и А-8, могут бьіть произведеньі путем реакции соединения, имеющего карбоксамидную группу в соответствующем положений с избьтком цианурхлорида в с апротонном растворителе. При зтом могут использоваться молекулярнье сита. По завершений реакции сита, со если они использовались, удаляют, и фильтрат концентрируют для получения нитрильного соединения, как зто более полно описано в заявке сер. Мо936, 434 от З сентября 1992г. б

Соединения, в которьіх Кз - СНоОСНоМН», такие как А-3, А-6б6 и А-9, могут бьїть произведень путем как (о химического, так и каталитического восстановления нитрила. Найболее подходящим для зтого является проведение реакции с использованием большого мольного избьітка боргидрида натрия с хлоридом кобальта, как зто более полно описано в заявке сер. Мо936, 558 от З сентября 1992Гг. «

Исходнье материаль, в которьхх В! - различнье группьі из встречающихся в натуральньїх продуктах, могут бьть полученьї деацилированием липофильньх групп натуральньїх продуктов, подвергая зти продукть! - с действию деацилирующих знзимов в питательной среде до тех пор, пока не произойдет полное а деацилирование. Указаннье знзимь! предварительно получают культивированием микроорганизмов семейства ,» Рзейдотопдасеае или Асііпоріапаседе как зто описано в Ехрегепіїа 34,1670 (1978) или пат. США 4,293,482, вьіделяют деацилированньій циклопептид и, затем, адилируют деацилированньй циклопептид, смешивая с подходящим активньм зфиром В /СОХ для получения Соединения А с требуемой ацильной группой. 1 се)

Claims (14)

Формула винаходу

1. Соединения формуль! іме) ви ВШ ;() (Че) М и о) кАНО о о гУ- мн-б-вІ у мя

(Ф. в о СН ко но МН о- Он й В (о; н М ї ов он 58) б5 где

Ку - Н или ОН; Р» - Н, СНуз или ОН; З - Н, СНу, СНоСМ, СНОСНЬМН»о или СНЬСОМН»; В! - Се - Со алкил, Со - Со алкенил, Сі - Сіо алкоксифенил или С. - Со алюоксинафтил; В! - Н, Сі - Су; алкил, Сз - Сх алкенил, (СН2)»4ОН, (СН2)» ам УВУ, СО(СН»)я МН»; В/!- Н, С. - С; алкил, Сз - Сх алкенил, (СН2)».4ОН, (СНо)» аМВ УВУ или В" и В", взятье вместе -(СНо)ул-, ««СНо)в-, ««СНо)» ФО(СН2)»-, ««СНО»МН(СН2»о-; ВУ - Н или С. - Су алкил, то ВУ - Н или С. - Су алкил; и их аддитивнье соли кислоть.

2. Соединения по п. 1, где КЕ. - ОН, Б» - Н, Кз - СНОСОМН», В! - 9,11-диметилтридецил, В! - Н и В! -

СНО.СНОМН» и их аддитивнье соли кислоть.

3. Соединения по п. 1, где Б - ОН, Б» - Н, Кз - СН»СНоМН», В! - 9,11-диметилтридецил,ї В/'-Ни в. -

СН.СНОМН» и их аддитивнье соли кислоть.

4. Соединения по п. 1, где КЕ. - ОН, Б» - Н, Кз - СНЬСОМН», В! - 9,11-диметилтридецил,ї В'И В/! - Н и их аддитивнье соли кислоти.

5. Соединения по п. 1, где КБ. - Н, Б» - Н, Кз - СНЬСОМН», В! - 9,11-диметилтридецил,ї ЕК и КЕ"! - Н и их аддитивнье соли кислоть.

б. Соєдинения по п. 1, где В - Н, Б» - Н, з - СНеСОМН», В! - 9,11-диметилтридецил, В" - Н, В/! - СОосСНнОсСНнО.МН»о и их аддитивнье соли кислоть.

7. Соєдинения по п. 1, где Б. - Н, Б» - Н, Вз - СНСОМН», В! - 9,11-диметилтридецил, В! - Н, В!! - СНЬСНоОМН» сч ре М их аддитивнье соли кислоть!.

8. Соединения по п. 1, где КБ. - Н, Б» - Н, Кз - СНЬСНоМН», В! - 9,11-диметилтридецил, В'й В! - Н и их (8) аддитивнье соли кислоти. 9, Соединения по п. 1, где Б. - Н, Б» - Н, Бз - СНОСНОМН», В! - 9,11-диметилтридецил, В'-Н и В! -

СН.СНОМН» и их аддитивнье соли кислоть. Ге»!

10. Антимикробная композиция, содержащая соединение по п. 1 в смеси с фармацевтически приемлемь!м сч носителем.

11. Антимикробная композиция, содержащая соединение по п. 2 в смеси с фармацевтически приемлемьм со носителем. - я - Ге)

12. Способ лечения грибковьїх инфекций, включающий в себя введение противогрибковой дозь! соединения по п. 1 особям рода млекопитающих в лечебньх целях. юю

13. Способ лечения пневмоцистической пневмоний у пациентов с пониженньім иммунитетом, включающий в себя введение терапевтически зффективной дозь! соєдинения по п. 1.

14. Соединение формуль!: « мн Чт! ню 5 У З с рум " ня М но о н М с рон Ге) он (95) 5 (в) ко и его аддитивнье соли кислоть. (Че)

(Ф. ко бо б5