PT99580B - Processo de preparacao de derivados do taxol ou de 10-desacetiltaxol, dos seus intermediarios e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

PATENTE DE INVENÇÃO

N.^e 99 580

REQUERENTE: RHÔNE-POULENC RORER S.A., francesa, com sede em 20, avenue Raymond Aron, 92160 Antony, França

EPÍGRAFE: Processo de preparação de derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol, dos seus intermediários e de composições farmacêuticas que os contêm

INVENTORES: Jean-Dominique Bourzat, Alain Commerçon e Jean-Marc Paris

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.

França em 23 de Novembro de 1990 sob o nQ 90 14635 e em 25 de Julho de 1991 sob o nQ 91 09423.

INPI MOQ 113 RF 18732

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ST 90071/91045 ^:τ ff

PATENTE N^s. 99 580

Processo de preparação de derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol, dos seus intermediários e de composições farmacêuticas que os contêm

RESUMO

O presente invento refere-se ao processo de preparação de derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol de fórmula geral:

na qual R representa um radical t-butoxilo ou fenilo, Rj_ representa um átomo de hidrogénio ou um radical acetilo e Ar representa um radical arilo, caracterizado por compreender:

a) a condensação de um derivado de oxazolidina de fórmula geral:

Ar .COOH (I.)

Boc-hL

X.

Re R?

com um derivado de taxol ou de 10-desacetiltaxol de fórmula geral: ---—-—.——

para se obter um produto de fórmula geral:

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-2b) o tratamento em meio ácido, em condições sem efeito sobre R'l e R₂, para se obter o produto de fórmula geral:

c) o tratamento com um reagente conveniente, que permita introduzir um radical t-butoxicarbonilo ou benzoílo sobre a função amino, para se obter um produto com a fórmula geral:

d) a substituição dos grupos protectores R^ e R₂ por átomos de hidrogénio, em condições apropriadas e, depois,

e) o isolamento e, eventualmente, a purificação do produto.

O presente invento refere-se também ao processo ção de composições farmacêuticas compreendendo estes ao processo de preparação de intermediários.

de preparaderivados e

Os novos derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol são úteis como agentes anti-leucémicos e antitumorais.

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-3MEMÓRIA DESCRITIVA

O presente invento refere-se a um processo para a preparação de derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol (daqui em diante também designados por derivados de taxol ou de 10desacetiltaxol) com a fórmula geral:

na qual R representa um radical t-butoxilo ou fenilo, R^ representa um átomo de hidrogénio ou um radical acetilo e Ar representa toa radical arilo.

De preferência, Ar representa um radical fenilo, eventualmente substituído, ou a- ou 0-naftilo, eventualrnente substituído por um ou vários átomos ou radicais escolhidos de entre os átomos de halogêneo (fluor, cloro, bromo, iodo) e os radicais alquilo, arilo, arilalquilo, alcoxilo, alquiltio, ariloxilo, ariltio, hidroxilo, mercapto, acilamino, aroilamino, alcoxicarbonilamino, amino, alquilamino, dialquilamino, carboxilo, alcoxicarbonilo, carbamoílo, dialquilcarbamoílo, ciano, nitro e trifluorometilo, estando pressuposto que os radicais alquilo e as porções alquilo dos outros radicais contêm 1 a 4 átomos de carbono e que os radicais arilo são radicais fenilo ou a- ou /3-naftilo.

presente invento refere-se igualmente ao processo de preparação de novos derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol com a fórmula geral (I) na qual R-l representa um átomo de hidrogénio, R representa um radical t-butoxilo ou fenilo e Ar representa um radical fenilo substituído ou um radical a- ou βnaftilo, eventualrnente substituído como anteriormente se referiu, isto é, os derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol com a fórmula:

(segue fórmula II)

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Mais particularmente, o presente invento refere-se ao processo de preparação de novos derivados do taxano com a fórmula geral (II) na qual Ar representa um radical fenilo substituído por um ou vários átomos ou radicais, idênticos ou diferentes, escolhidos de entre os átomos de halogéneo e os radicais alquilo, alcoxilo, amino, alquilamino, dialquilamino, acilamino, alcoxicarbonilamino e trifluorometilo.

Ainda mais particularmente, o presente invento refere-se ao processo de preparação de produtos com a fórmula geral (II), na qual Ar representa um radical fenilo substituído por um átomo de cloro ou de fluor, ou por um radical alquilo (metilo), alcoxilo (metoxilo), dialquilamino (dimetilamino), acilamino (acetilamino) ou alcoxicarbonilamino (t-butoxicarbonilamino).

De acordo com o invento, os derivados do taxano com a fórmula geral (I) podem ser obtidos da seguinte forma:

1) condensa-se o derivado da oxazolidina de fórmula geral:

(III) na qual Ar é definido como anteriormente, Boc representa o radical t-butoxicarbonilo e R₆ R₇, idênticos ou diferentes, representam um radical alquilo, contendo 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por um ou vários radicais arilo (fenilo), ou arilo (fenilo), ou R₆ e R₇ formam, em conjunto com o átomo de carbono ao qual se ligam, um ciclo com 4 a 7 átomos na cadeia, com um derivado do taxano de fórmula geral:

4,.

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na qual R'^ representa um radical acetilo ou um grupo protector da função hidroxilo tal como o radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo e R₂ representa um grupo protector de função hidroxilo tal como o radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo ou um radical trialquilsililo, no qual cada porção alquilo contém 1 a 4 átomos de carbono, para se obter o produto com a fórmula geral:

na qual Ar, R'_lz R₂, Rg e R₇ são definidos como anteriormente.

Geralmente, a esterificação é efectuada na presença de um agente de condensação tal como uma carbodiimida, tal como a diciclo-hexilcarbodiimida, ou um carbonato reactivo, tal como o carbonato de 2-dipiridilo, e de um agente de activaçâo tal como uma dialquilaminopiridina, tal como a 4-dimetilaminopiridina, operando num solvente orgânico tal como o benzeno, o tolueno, os xilenos, o etilbenzeno, o isopropilbenzeno ou o clorobenzeno, a uma temperatura compreendida entre 60 e 90°C.

É particularmente vantajoso utilizar um excesso molar do ácido com a fórmula (III) em relação ao derivado do taxano de fórmula (IV), sendo o agente de condensação utilizado na quanti73 273

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-5dade estequiométrica em relação ao ácido de fórmula (III) e sendo o agente de activação utilizado na quantidade estequiométrica em relação ao derivado do taxano de fórmula (IV).

produto de fórmula geral (V) na qual R'^ é definido como anteriormente, e R'₂ representa um radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, pode ser obtido por esterificação de um derivado do taxano de fórmula geral (IV), na qual R'^ é definido como anteriormente e R₂ representa um radical trialquisililo seguido da substituição do radical trialquilsililo por um radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, passando intermediariamente, pelo produto de fórmula geral:

na qual Ar, R^, R₆ e

R₇ são definidos como anteriormente.

A esterificação pode mente descritas.

ser efectuada nas condições anterior0 produto de fórmula geral (VI) pode ser obtido tratando o éster com a fórmula geral (V), na qual R₂ representa um radical trialquilsililo, no qual cada porção alquilo contém 1 a 4 átomos de carbono, com ácido clorídrico gasoso, num álcool tal como o etanol.

O produto de fórmula geral (V), na qual R₂ representa um radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, pode ser obtido tratando o produto com a fórmula geral (VI) com o cloroformiato de 2,2,2-tricloroetilo, operando num solvente orgânico básico tal como a piridina.

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-72) 0 produto com a fórmula geral (V), na qual um radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, é tratado mineral ou orgânico, eventualmente, num álcool, em qualquer efeito nos grupos protectores R⁷·^ e R₂, de o produto de fórmula geral:

R₂ representa com um ácido, condições sem forma a obter

na qual Ar e R⁷-^ são definidos como anteriormente e R₂ representa um radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo.

De um modo geral, utiliza-se o ácido fórmico, eventualmente, num álcool, tal como o etanol, ou o ácido clorídrico gasoso num álcool tal como o etanol.

3) 0 produto com a fórmula geral (VII) é tratado por um composto que permite introduzir, na função amino, um radical t-butoxicarbonilo ou benzoilo, para se obter o produto com a fórmula:

na qual Ar, R e R⁷^ são definidos como anteriormente e R₂ representa um radical 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo.

De um modo geral, faz-se reagir o dícarbonato de di-terc-butilo ou o cloreto de benzoilo com o produto de fórmula geral

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-8(VIII), operando num solvente orgânico, tal como o cloreto de metileno, na presença de uma base mineral tal como ou bicarbonato de sódio, ou de uma base orgânica tal como uma amina terciária, tal como a trietilamina.

4) 0 produto de fórmula geral (VIII) é transformado no produto com a fórmula geral (I), por substituição dos grupos 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, representados por R^z2 β ^2' P°^r átomos de hidrogénio, sem tocar no resto da molécula.

De um modo geral, o produto com a fórmula geral (VIII) é tratado com zinco, na presença de ácido acético, a uma temperatura compreendida entre 30 e 60 °C, ou usando um ácido mineral ou orgânico, tal como o ácido clorídrico ou o ácido acético, em solução num álcool alifático, contendo 1 a 3 átomos de carbono, na presença de zinco.

produto com a fórmula geral (IV) pode ser preparado nas condições descritas na Patente Europeia EP 0 336 841.

ácido com a fórmula geral (III) pode ser obtido por saponificação, em meio básico, do éster com a fórmula geral:

Ar _sCOORg

Boc-N na qual Ar, R₆ e R₇ são definidos como anteriormente e R₃ representa um radical alquilo, contendo 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por um radical fenilo.

De um modo geral, a saponificação é efectuada usando uma base mineral, tal como um hidróxido de metal alcalino (lítio, sódio, potássio), um carbonato ou bicarbonato de metal alcalino (bicarbonato de sódio, carbonato ou bicarbonato de potássio) em meio hidro-alcoólico, tal como uma mistura de metanol-água, a uma temperatura compreendida entre 10 e 40°C, de preferência, a uma temperatura de cerca de 20°C.

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-90 éster com a fórmula geral (IX) pode ser obtido por acção de um metoxialceno, eventualmente substituído por um ou vários radicais arilo (2-metoxipropeno), de um gem-dimetoxialcano, eventualmente substituído por um ou vários radicais arilo (2,2-dimetoxipropano) ou de um gem-dimetoxicicloalcano, contendo 4 a 7 átomos de carbono, com um derivado da feniliso-serina com a fórmula geral:

Ar C 0 0 R q )—\ «) (CH₃)₃CO-CO-NH oh

J na qual Ar e R₃ são definidos como anteriormente, sob a forma racémica ou, de preferência, sob a forma 2R, 3S.

De um modo geral, a reacção do metoxialceno, do gem-dimetoxialcano ou do gem-dimetoxicicloalcano com o produto com a fórmula geral (X) é efectuada operando num solvente orgânico inerte, na presença de um ácido forte, tal como o ácido p-toluenossulfónico, a uma temperatura compreendida entre 0°C e a temperatura de ebulição da mistura reaccional. Os solventes particularmente adequados são escolhidos de entre os hidrocarbonetos aromáticos (benzeno, tolueno, xileno).

>

produto com a formula geral (X) pode ser obtido por acilação de um derivado da /3-feniliso-serina com a fórmula geral:

Ar COOR₃ h₂n oh (XI) na qual Ar e R₃ são definidos como anteriormente.

A reacção é realizada, de um modo geral, fazendo reagir o dicarbonato de di-terc-butilo, operando num solvente orgânico tal como um éster, tal como o acetato de metilo ou de etilo, a uma temperatura compreendida entre 0 e 40°C, de preferência, a uma

£7 ,

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-10temperatura de cerca de 20°C.

O derivado da /3-feniliso-serina com a fórmula geral (XI) pode ser obtido por redução de um hidroxi-azida com a fórmula geral:

Ar COORq n/ oh (XII) na qual Ar e R₃ são definidos como anteriormente.

De um modo geral, a redução é efectuada usando hidrogénio na presença de um catalisador, tal como paládio sobre carbono, operando num solvente orgânico inerte, tal como o acetato de etilo. De preferência, opera-se a uma temperatura compreendida entre 0 e 50 °C. É vantajoso efectuar a hidrogenação sob uma pressão compreendida entre 1 e 5 bar.

produto com a fórmula geral (XII) pode ser obtido por reacção de uma azida de metal alcalino, tal como a azida de sódio, com um éster do ácido 0-fenilglicídico com a fórmula geral:

A

Ar C 0 0 R 3 (XIII) na qual Ar e R₃ são definidos como anteriormente.

De um modo geral, opera-se numa mistura hidro-orgânica, tal como uma mistura de água-tetra-hidrofurano, à temperatura de refluxo da mistura reaccional.

éster com a fórmula geral (XIII) pode ser obtido por desidro-halogenação de um produto com a fórmula geral:

(segue fórmula)

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-XMw i$l, · ír

(XIV) na qual Ar é definido como anteriormente, Hal representa um átomo de halogéneo, de preferência, um átomo de bromo e R₄ e r₅, que são idênticos ou diferentes, representam um radical alquilo contendo 1 a 4 átomos de carbono ou fenilo.

De um modo geral, opera-se na presença de um excesso de um alcoolato de metal alcalino, eventualmente preparado in situ. num solvente orgânico inerte tal como o tetra-hidrofurano, a uma temperatura compreendida entre -80°C e +25°C.

produto com a fórmula geral (XIV) pode ser obtido por reacção de um aldeído com a fórmula geral:

Ar-CHO (XV) na qual Ar é definido como anteriormente, com um halogeneto com a fórmula geral:

(XVI) na qual Hal, R₄ e R₅ são definidos como anteriormente, previamente anionizado.

De um modo geral, opera-se num solvente orgânico inerte escolhido de entre os éteres (éter etílico) e os hidrocarbonetos alifáticos halogenados (cloreto de metileno) a uma temperatura compreendida entre -80°C e 25 °C, na presença de uma amina terciária (trietilamina) e de um agente de enolização (triflato de di-n-butilboro).

O produto com a fórmula geral (XVI) pode ser obtido por re-

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-12acção de um halogeneto de um ácido halogenoacético, de preferência, o brometo do ácido bromoacético, com a oxazolidinona correspondente .

Os espectros de ressonância magnética nuclear do protão são efectuados em clorofórmio deuterado. De acordo com a natureza da cadeia lateral, a numeração dos átomos é a seguinte:

H-2

OH b-<· ις _z

T^h,⁰

H

Ar. z

Boc-N

R

R7

Cadeia linear

Cadeia cíclica

As abreviaturas utilizadas têm os significados seguintes: s = singuleto d = dupleto dd = dupleto de dupletos t = tripleto q = quadrupleto m = maciço

Os exemplos seguintes ilustram o presente invento:

EXEMPLO 1

Aquece-se uma solução de 0,5 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metilfenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5-/3,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j0, 10p-bis (2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, numa mistura de 10 cm³ de metanol e de 10 cm³ de ácido acético, sob agitação e sob atmosfera de árgon até uma temperatura de cerca de 60°c e, depois, adiciona-se 1 g de zinco em pó. Em seguida, agita-se a mistura reaccional durante 30 minutos a 60 °C, depois arrefece-se até uma temperatura próxima de 20°C e filtra-se sobre vidro poroso guarnecido de Celite. 0 vidro poroso é lavado com 3 vezes 10 cm³ de diclorometano e reunem-se os filtrados e, depois, concentram-

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-13-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa), ra de cerca de 40°C.

Ao resíduo adicionam-se 20 cm³ de água destilada e separa-se, por filtração, o sólido cristalizado, lava-se com 4 vezes 5 cm³ de água destilada e seca-se sob pressão reduzida (0,27 kPa) a 20°C, durante 16 horas. Obtém-se 0,25 g de um merengue branco que é purificado por cromatografia sobre 40 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 2 cm de diâmetro [eluente: diclorometano-metanol (97-3 em volume)] recolhendo fracções de 20 cm³. Reunem-se as fracções 5 a 12 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (0,27 kPa) a 40°C durante 16 horas. Obtêm-se assim 0,2 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metilfenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S ) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l, 70, lO0-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo, sob a forma de um merengue branco cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -32° (c = 0,1; metanol)

- espectro de RMN (250 MHz; CDC1₃) δ (ppm): 1,14 (S, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,24 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,35 (s, 9H: -C(CH₃)₃); 1,7 (S, IH: —OH 1); 1,77 (S, 3H: -CH₃ 19); 1,85 (m, IH: -(CH)-H 6); 1,87 (s, 3H: -CH₃ 18); 2,26 (m, 2H: -CH₂- 14); 2,33 (S, 3H: -COCH3); 2,4 (s, 3H: CH₃-CgH₄); 2,6 (ddd, IH, J—6,5, 9,5 e 15 Hz: -(CH)-H 6); 3,38 (d, IH, J=5,5 Hz: -OH 2'); 3,92 (d, IH, j=7 Hz: -H 3); 4,18 (d, IH, J=8 Hz; -(CH)-H 20); 4,22 (m, 2H: -H 7 e -OH 10); 4,33 (d, IH, J=8 Hz: -(CH)-H 20); 4,6 (m, IH: -H 2'); 4,96 (dd, IH, J=l,5 e 9,5 Hz: -H

5); 5,22 (s, IH: -H 10); 5,22 (m, IH: -H 3'); 5,4 (d, IH, J=9 Hz: -NHCO-); 5,68 (d, IH, J=7 Hz: -H 2); 6,2 (t, IH, J=9 Hz: -H 13); 7,23 (AB, 4H, J_AB=8 Hz: CH₃-CgH₄); 7,5 [t, 2H, J=7,5 Hz: -OCOCgH₅(-H 3 e -H 5)]; 7,62 [tt, IH, J=1 e 7,5 Hz: -OCOCgH₅(-H

4)]; 8,12 [d, 2H, J=7,5 Hz: -OCOCgH₅(-H 2 e -H 6)].

3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metilfenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70,lO0-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo pode ser preparado da seguinte forma:

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-14a uma solução de 0,45 g de 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j0,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β, 10/J-bis (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo em 5 cm^ de diclorometano, mantida sob atmosfera de árgon, adicionam-se 0,037 g de hidrogenocarbonato de sódio e, depois, gota a gota, a uma temperatura de cerca de 20°C, uma solução de 0,108 g de dícarbonato de di-terc-butilo em 5 cm³ de diclorometano. Agita-se a solução obtida, durante 24 horas, a uma temperatura de cerca de 20°C, e depois adiciona-se uma mistura de 15 cm³ de água destilada e de 20 cm³ de diclorometano. Separa-se a fase aquosa por decantação e, depois, extrai-se de novo com 20 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtêm-se assim 0,5 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metilfenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j0,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/J, 10j8-bis (2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

O 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β, 10/3-bis (2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo pode ser preparado da seguinte forma:

agita-se uma solução de 0,6 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)-5-oxazolidinacarboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/J,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/3,10/3-bis( 2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, em 6 cm³ de ácido fórmico, durante 4 horas a uma temperatura de cerca de 20°C e, depois concentra-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40 °C. Ao resíduo, adicionam-se 40 cm³ de tolueno e, depois, concentra-se a solução obtida até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Repete-se a mesma operação com 40 cm³ de tolueno. Dissolve-se o merengue obtido em 50 cm³ de diclorometamo e, à solução obtida, adicionam-se 25 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Separa-se a fase aquosa por decantação e extrai-se de novo com 25 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio,

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-15filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtêm-se 0,65 g de um merengue branco que é purificado por cromatografia sobre 40 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 2 cm de diâmetro [eluente: diclorometano-metanol (98-2 em volume)] recolhendo fracções de 20 cm³. Reunem-se as fracções 5 a 9 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 0,45 g de 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j6,20-epoxi—1—hidroxi-9—oxo—7)S, 100-bis (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxilato- (4S, 5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8,10j8-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução de 0,4 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) em 10 cm³ de tolueno, adicionam-se 0,247 g de N,N'-diciclo-hexilcarbodiimida, 0,675 g de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l,13a-di-hidroxi-9-oxo-70,lO0-bis-(2,2,2-tricloroetoxi )carboniloxi-ll-taxeno e 0,046 g de 4-dimetilaminopiridina. Em seguida, aquece-se o meio reaccional sob agitação durante 3 horas a uma temperatura de cerca de 80^DC e, depois arrefece-se até uma temperatura de cerca de 20 °C e adiciona-se uma mistura de 20 cm³ de diclorometano e de 25 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Separa-se a fase aquosa por decantação e, depois, extrai-se de novo com 15 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 50°C. Obtêm-se assim 1,1 g de um merengue amarelo que é purificado por cromatografia sobre 40 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 2 cm de diâmetro [eluente: diclorometano-metanol (98-2 em volume)] recolhendo fracções de 15 cm³. Reunem-se as fracções 3 a 6 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 0,6 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-di-

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-16-metil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de

4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7jS, 10/?-bis (2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l,13a-di-hidroxi-9-oxo-7j8,10j8-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno pode ser preparado de acordo com o processo descrito na Patente Europeia EP 0 336 841.

ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução de 0,54 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo em 10 cm³ de etanol, adiciona-se, a uma temperatura de cerca de 25°C, uma solução de 0,19 g de hidrato de hidróxido de lítio em 3 cm³ de água destilada. Agita-se o meio reaccional durante 20 minutos a uma temperatura de cerca de 25°C e, depois, concentra-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40 °C. Dissolve-se o resíduo obtido em 3,5 cm³ de água destilada e, depois, extrai-se com 2 vezes 1 cm³ de óxido de di-isopropilo. Seguidamente, acidifica-se a fase aquosa até um pH de cerca de 1, com 5 cm³ de uma solução aquosa IN de ácido clorídrico e, depois, extrai-se com 3 vezes 4 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até a secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtém-se assim 0,43 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um óleo cor-de-laranja.

3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

agita-se uma solução de 0,63 g de 3-terc-butoxicarbonilami73 273

ST 90071/91045

no-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de etilo, de 0,2 cm³ de 2-metoxipropeno e de 3,4 mg de p-toluenossulfonato de piridínio em 18 cm³ de tolueno, durante 2 horas e 30 minutos, a uma temperatura de cerca de 20°C. Aquece-se a mistura reaecional até à ebulição e recolhe-se o destilado num recipiente graduado enquanto se adiciona, gota a gota, uma solução de 1,25 cm³ de 2-metoxipropeno em 15 cm³ de tolueno, ao meio reaecional, de modo a manter constante o volume desse meio. Após 15 minutos de destilação, adicionam-se 3,4 mg de p-toluenossulfonato de piridínio e, depois, prossegue-se a destilação durante 15 minutos. 0 volume de destilado recolhido é agora de 20 cm³. Arrefece-se o meio reaecional até uma temperatura de cerca de 20°C e adicionam-se em seguida 2 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 2 vezes 5 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,3 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 0,54 g de 3-terc-butoxicarbonil-2, 2-dimetil-4-(4-metilfenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato- (2R,3S) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução de cerca de 0,8 g de 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de etilo em 12 cm³ de diclorometano, mantida sob atmosfera de árgon, adicionam-se 0,33 g de hidrogenocarbonato de sódio e, depois, gota a gota, a uma temperatura de cerca de 20°C, uma solução de 0,94 g de dicarbonato de di-terc-butilo em 4 cm³ de diclorometano. Agita-se a solução obtida durante 2 horas e 30 minutos a uma temperatura de cerca de 20°C e, depois, adicionam-se 20 cm³ de água destilada. Separa-se a fase aquosa por decantação e, depois, extrai-se de novo com 20 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtêm-se assim, após cristalização em ciclo-hexano, 0,65 g de

3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-

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ST 90071/91045

-18-(2R,3S) de etilo que funde a 130°C.

O 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R, 3S) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução de 1,15 g de 3-azido-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de etilo em 35 cm³ de acetato de etilo, adicionam-se 0,115 g de paládio a 10%, sobre pó de carbono. Agita-se a mistura reaccional sob uma pressão de 120 KPa de hidrogénio e a uma temperatura de cerca de 22°C durante 8 horas e, depois, filtra-se sobre vidro poroso guarnecido de celite. Lava-se o vidro poroso com 5 cm³ de acetato de etilo, reunem-se os filtrados e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40 °C. Obtêm-se assim 0,83 g de 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de uma pasta amarelo-claro.

O 3-azido-2-hidroxi-3-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução de 2,2 g de 3-(4-metilfenil)oxirano-2-carboxilato-(2R,3R) de etilo em 60 cm³ de etanol, adicionam-se 1,04 g de azida de sódio e 0,86 g de cloreto de amónio. Agita-se a mistura reaccional ao refluxo durante 5 horas e 30 minutos e, depois, arrefece-se até uma temperatura de cerca de 20 °C e adiciona-se uma mistura de 50 cm³ de acetato de etilo e de 50 cm³ de água destilada. Separa-se a fase aquosa por decantação e extrai-se de novo com 50 cm³ de acetato de etilo. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtêm-se assim 2,4 g de um óleo cor-de-laranja que é purificado por cromatografia sobre 80 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidas numa coluna de 2 cm de diâmetro [eluente: ciclo-hexano-acetato de etilo (90-10 em volume)], recolhendo fracçóes de 50 cm³. Reunem-se as fracçóes 8 a 16 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 1,55 g de 3-azido-2-hidroxi-2-(4-metilfenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo

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ST 90071/91045 —19 — cor-de-laranj a.

O 3-(4-metilfenil)oxiranocarboxilato-(2R,3S) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução, arrefecida a uma temperatura de cerca de -75°C de 2,3 cm³ de etanol em 40 cm³ de tetra-hidrofurano, adicionam-se, mantendo a temperatura a -75°C, 25 cm³ de uma solução 1,6M de n-butil-lítio em hexano e, depois, gota a gota, uma solução de 8,36 g de l-[2-bromo-3-hidroxi-3-(4-metilfenil)-l-oxopropil]-(2S,3R)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) em 120 cm³ de tetra-hidrofurano. Aquece-se de novo a meio reaccional até uma temperatura de cerca de -75°C. Em seguida, adiciona-se, mantendo a temperatura a -75°C, uma solução de 5,04 g de ácido cítrico em 28 cm³ de tetra-hidrofurano. Aquece-se de novo o meio reaccional até uma temperatura de cerca de 15°C, mantém-se a 15°C durante 1 hora e adiciona-se uma mistura de 40 cm³ de água destilada e de 200 cm³ de éter etílico. Separa-se a fase aquosa por decantação e extrai-se de novo com 2 vezes 50 cm³ de éter etílico. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtramse e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtêm-se 5,3 g de um óleo cor-de-laranja que é purificado por cromatografia sobre 200 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 2 cm de diâmetro [eluente: ciclo-hexano-acetato de etilo (90-10 em volume)] recolhendo fracções de 50 cm³. Reunem-se as fracções 10 a 20 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim, após recristalização em óxido de di-isopropilo, 2,2 g de 3-(4-metilfenil)oxirano-2-carboxilato-(2R,3R) de etilo que funde a 66°C.

A 3-[2-bromo-3-hidroxi-3-(4-metilfenil)-l-oxopropil]-(2S, 3R)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) pode ser preparado da seguinte forma:

A uma solução de 35,8 g de 3-(2-bromo-l-oxoetil)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) em 300 cm³ de éter etílico anidro, adicionam-se, a uma temperatura de cerca de 20°C, 23,4 cm³ de

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trietilamina e, depois, gota a gota, 135 cm³ de uma solução 1M de triflato de di-n-butilboro em diclorometano. Arrefece-se o meio reaccional até uma temperatura de cerca de -75°c, depois adicionam-se, mantendo a temperatura a -75°C, 10,64 cm³ de

4-metilbenzaldeído e aquece-se de novo o meio reaccional até uma temperatura de cerca de 20°C e mantém-se a 20°C durante 18 horas. Em seguida, adicionam-se 100 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenossulfato de sódio e separa-se a fase aquosa por decantação e extrai-se de novo com 2 vezes 100 cm³ de éter etílico. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtêm-se 69 g de um óleo castanho que é purificado por cromatografia sobre 2 000 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 5 cm de diâmetro [eluente: ciclo-hexano-acetato de etilo (70-30 em volume)] recolhendo fracções de 200 cm³. Reunem-se as fracções 16 a 24 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim, após cristalização em óxido de di-isopropilo, 17 g de 3-[2-(bromo-3-hidroxi-3-(4-metilfenil)-1-oxopropil]-(2S,3R)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) que funde a 139°C.

A 3-(2-bromo-l-oxoetil)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S, 5R) pode ser preparada da seguinte forma:

a uma solução, arrefecida até uma temperatura de cerca de -75°C, de 106,2 g de 4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) em 1080 cm³ de tetra-hidrofurano anidro, adicionam-se, mantendo a temperatura a -75 °C, 375 cm³ de uma solução 1,6M de n-butil-lítio em hexano e, depois, gota a gota, 62,6 cm³ de brometo de bromoacetilo. Agita-se o meio reaccional a uma temperatura de cerca de -70°C durante 1 hora e 30 minutos e, depois, aquece-se de novo até uma temperatura de cerca de -10°C e adicionam-se 600 cm³ de uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio. Separa-se a fase aquosa por decantação e extrai-se de novo com 500 cm³ de éter etílico. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a 40°C. Obtém-se 201 g de um óleo ama-

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-21relo que é purificado por cromatografia sobre 4 000 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 10 cm de diâmetro [eluente: ciclo-hexano-acetato de etilo (66-33 em volume)] recolhendo fracções de 500 cm³. Reunem-se as fracções 4 a 13 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtém-se assim 139,5 g de 3-(2-bromo-l-oxoetil)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) sob a forma de um óleo amarelo-claro.

EXEMPLO 2

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(3-fluorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β, 10j8-bis- (2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, obtêm-se 0,14 g de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,2O-epoxi-l,7j8,lOj0-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo, sob a forma de um merengue branco cujas características sao as seguintes:

-poder rotatório: [a]²⁰D = -34° (c=0,59; metanol)

- espectro de RMN (300 MHz; CDC1₃) δ (ppm): 1,15 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,25 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,36 (s, 9H: -C(CH₃)₃); 1,77 (s, 3H: -CH₃ 19); 1,87 (s e m, 4H: respectivarnente -CH₃ 18 e -(CH)-H 6); 2,27 (d, 2H, J=9 Hz: -CH₂- 14); 2,38 (S, 3H; -COCH₃); 2,6 (m, IH: -(CH)-H 6); 3,42 (m, IH: -OH 2'); 3,92 (d, IH, J=7 Hz: -H 3); 4,23 (dd, IH, J=7 e 12 Hz: -H 7); 4,26 (AB, 2H, J_AB=8 Hz: -CH₂- 20); 4,61 (s, IH: -H 2^Z); 4,95 (d, IH, J=9 Hz: -H 5); 5,22 (s, IH: -H 10); 5,26 e 5,43 (d e d, IH cada um, J=9,5 Hz: -CH-NHC0-); 5,69 (d, IH, J=7 Hz: -H

2); 6,24 (t, IH, J=9 Hz: -H 13); 7 a 7,4 (m, 4H: F-Cgí^); 7,5 [t, 2H, J=7,5 Hz: -OCOCgHg (-H 3 e -H 5)]; 7,62 [t, IH, J=8 Hz: -OCOC₆H₅ (-H 4)]; 8,10 [d, 2H, J=8 Hz: -OCOCgHg (-H 2 e -H 6)]

Procedendo como no Exemplo 1, a partir das matérias primas adequadas, preparam-se os intermediários seguintes:

- 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(3-fluorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7β,lOjS-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

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- 3-amino-2-hidroxi-3-(3-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l-hidroxi-7j8,10j8-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 140°C.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(3-fluorofenilJoxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j0,lO/3-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-11-taxeno-13a-ilo, sob a forma de um óleo amarelo.

- ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(3-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um merengue amarelo.

- 3-terc-butoxicarboni1-2,2-dimeti1-4- (3 -fluorofeni1)oxaz olidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(3-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 112°C.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(3-£luorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 80°C.

- 3-azido-2-hidroxi-3-(3-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-(3-fluorofenil)—oxirano-2-carboxilato—(2R,3R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-[2-bromo-3-hidroxi-3-(3-fluorofenil)-1-oxopropil]-(2S,3R) -4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) sob a forma de cristais brancos que fundem a 145°C.

EXEMPLO 3

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(2-fluorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8, lOjS-bis- (2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-l3a-ilo, obtêm-se 0,17 g

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-23....ftU;

de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(2-fluorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-5j0,20-epoxi-l, 7jS, 10j8-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -42° (c=0,58; metanol)

- espectro de RMN (400 MHz; CDC1₃) δ (ppm): 1,14 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,25 (s, 3H: -ch₃ 16 ou 17); 1,32 (s, 9H: -C(CH₃)₃); 1,76 (s, 3H: -¾ 19); 1,86 (m, 1H: -(CH)-H 6); 1,93 (s, 3H: -CH₃ 18); 2,22 (dd, 1H, J=9 e 16 Hz: -(CH)-H 14); 2,37 (dd, 1H, J=9 e 16 Hz: -(CH)-H 14); 2,45 (s, 3H: -COCH₃); 2,6 (m, 1H: -(CH)-H 6); 3,35 (s, 1H: -OH 2'); 3,94 (d, 1H, J=7 Hz: -H 3); 4,26 (ΔΒ, 2H, J_AB=9 Hz: -CH₂~ 20); 4,28 (dd, 1H, J=7 e 12 Hz: -H 7); 4,62 (m, 1H, -H 2'); 4,98 (d, 1H, J=9 Hz: -H 5); 5,23 (s, 1H: -H 10); 5,45 e 5,58 (d e d, 1H cada um, J=10 Hz: -CH-NHCO-); 5,7 (d, 1H, J=7 Hz: -H 2); 6,28 (t, 1H, J=9 Hz: -H 13); 7,06 a 7,4 (m, 4H: F-CgH₄); 7,5 [t, 2H, J=8 Hz: -OCOCgHg (—H 3 e -H 5)]; 7,61 [t, 1H, J=8 Hz: -OCOC₆H₅ (-H 4)]; 8,13 [d, 2H, J=8 Hz: -0C0C₆H₅ (-H 2 e -H 6)].

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir das matérias primas adequadas, preparam-se os intermediários seguintes:

- 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(2-fluorofenil)-2-hidroxipropionato—(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 jS,lOj8-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(2-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 j8, lOj0-bis- (2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(2-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70,100-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-11-taxeno-13a-ilo, sob a forma de um merengue branco.

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-24- ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(2-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de cristais brancos que fundem a 164°C.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(2-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(2-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 99°C.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(2-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 73°C.

- 3-azido-2-hidroxi-3-(2-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-(2-fluorofenil)oxirano-2-carboxilato-(2R,3R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-[2-bromo-3-hidroxi-3-(2-fluorofenil)-1-oxopropil]-(2S,3R) -4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) sob a forma de um merengue amarelo.

EXEMPLO 4

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-clorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/3,10/3-bis- (2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, obtêm-se 0,35 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-clorofenil)-2-hidroxipropionato—(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-henzoiloxi-5/3,20-epoxi-l,7/3,10/3-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -27° (c=0,97; metanol)

- espectro de RMN (400 MHz: CDC1₃) δ (ppm): 1,15 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,25 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,35 (s, 9H: -C(CH₃)₃); 1,77 (s, 3H: -CH₃ 19); 1,9 (m, IH:

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FXassíSS»

-25-(CH)-H 6 e s, 3H: -CH₃ 18); 2,3 (d, 2H, J=8,5 Hz; -CH₂ 14); 2,39 (s, 3H: -COCH₃); 2,6 (m, IH: -(CH)-H 6); 3,48 (s, IH; -OH 2'); 3,92 (d, IH, J=7 Hz; -H 3); 4,24 (dd, IH, J=7 e 12 Hz: -H 7);

4,26 (AB, 2H, J_AB=9 Hz: -CH₂- 20); 4,61 (s, IH: -H 2')/* 4,96 (d,

IH, J=9 Hz: -H 5); 5,24 (s, IH: -H 10); 5,26 (m, IH: -H 3'),’ 5,43 (d, IH, J=9 Hz: -NHCO-); 5,68 (d, IH, J=7 Hz: -H 2); 6,25 (t, IH,

J=8,5 Hz: -H 13); 7,35 (m, 4H: Cl-CgH₄); 7,5 [t, 2H, J=8 Hz:

-OCOCgHg (-H 3 e H 5); 7,62 [t, IH, J=8 Hz: -OCOCgHg (-H 4)];

8,10 [d, 2H, J=8 Hz: -OCOCgHg (-H 2 e -H 6)].

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir das matérias primas adequadas, preparam-se os intermediários seguintes:

- 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-clorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5jS, 20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/3,lO0-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(4-clorofenil)propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8, lop-bis-( 2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-clorofenil)-oxazolidina-5-carboxilato(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/3,10/3-bis- (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-clorofenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um óleo incolor.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-clorofenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(4-clorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais castanhos-claros que fundem a 117“C.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(4-clorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo

273

ST 90071/91045

-26sob a forma de um óleo castanho.

- 3-azido-2-hidroxi-3-(4-clorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-(4-clorofenil)oxirano-2-carboxilato-(2R,3R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-[2-bromo-3-hidroxi-3-(4-clorofenil)-1-oxopropil]-(2S,3R)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) sob a forma de cristais brancos que fundem a 140°C.

EXEMPLO 5

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metoxifenil)-2-hidroxipropionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70,lO0-bis-(2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, obtêm-se 0,15 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metoxifenil)-2-hidroxipropionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l ,7β, 10/3-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas caracteristicas são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -32° (c=0,47; metanol)

- espectro de RMN (400 MHz; CDC1₃) δ (ppm): 1,15 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,25 (s, 3H: -CH₃ 16 ou 17); 1,38 (s, 9H: -C(CH₃)₃); 1,7 (m , ÍH: -OH 1); 1,78 (s, 3H: -CH₃ 19); 1,88 (m, ÍH: -(CH)-H 6 e s, 3H: -CH₃ 18); 2,28 (d, 2H, J=8,5 Hz: -CH₂ 14); 2,38 (s, 3H: -COCH₃); 2,6 (m, ÍH: -(CH)-H 6); 3,4 (m, ÍH: -OH 2'); 3,8 (s, 3H: -C₆H₄-OCH₃); 3,92 (d, ÍH, J=7 Hz: -H 3); 4,2 e 4,33 (2d, ÍH cada um, J=9: Hz: -CH₂ 20); 4,25 (m, ÍH: -H 7); 4,1 a 4,4 (m desdobrado, ÍH: -OH 10); 4,59 (m, ÍH: -H 2^Z); 4,95 (d, ÍH, J=9 Hz: -H 5); 5,2 e 5,37 (2m, ÍH cada um: -CH-NHCOO-); 5,22 (s, ÍH: -H 10); 5,69 (d, ÍH, J=7 Hz: -fl 2); 6,22 (t, ÍH, J=8,5 Hz: -fl 13); 6,92 [d, 2H, J=8 Hz: -CgH₄-OCfl₃ (-fl 3 e -H 5)]; 7,31 [d, 2H, J=8 Hz: -C₆H₄-OCfl₃ (-H 2 e -fl 6)]; 7,45 [t, 2H, J=8 Hz: -OCOCgHg (-fl 3 e -fl 5)]; 7,62 [t, ÍH, J=8 Hz: -OCOC₆H₅ (-fl 4)]; 8,11 [d, 2H, J=8 Hz: -OCOC₆H₅ (-H 2 e -fl

6)].

273

ST 90071/91045

-27Procedendo como o Exemplo 1, mas a partir das matérias primas adequadas, preparam-se os intermediários seguintes:

- 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-metoxifenil)-2-hidroxipropionato- (2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5jS,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β,100-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metoxifenil)-2-hidroxipropionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5jS, 20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8,10j3-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

3-terc-butoxicarbonilamino-2,2-dimetil-4-(4-metoxifenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β, 10/3-bis- (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metoxifenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um merengue branco.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-metoxifenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(4-metoxifenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 135^eC.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(4-metoxifenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-azido-2-hidroxi-3-(4-metoxifenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-(4-metoxifenil)oxirano-2-carboxilato-(2R,3R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-[3-bromo-3-hidroxi-3-(4-metoxifenil)-1-oxopropil]-(2S,3R)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) sob a forma de cristais

273

ST 90071/91045 brancos que fundem a 130°C.

EXEMPLO 6

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-fluorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/3,l0j3-bis-(2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-l3a-ilo, obtêm-se 0,086 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-fluorofenil)-2-hidroxi-propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benziloxi-5/3,20-epoxi-l, 7β, 10/3-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas características são as seguintes:

. - poder rotatório: [α]³θρ = -35° (c=0,49; metanol)

x. - espectro de RMN (250 MHz; CDC1₃) (ô ppm): 1,14 (s, 3H: -CHg 16 ou 17); 1,25 (s, 3H: -CHg 16 ou 17); 1,35 (s, 9H: -C(CH₃)₃); 1,7 (m, 1H: -OH1); 1,77 (s, 3H: -CH₃ 19); 1,87 (m, 1H: -(CH)-H 6); 1,87 (s, 3H: -CH₃ 18); 2,3 (d, 2H, J=9 Hz: -C-H₂ 14); 2,36 (s, 3H: -COCH₃); 2,6 (m, 1H: -(CH)-H 6); 3,43 (m, 1H: -OH 2'); 3,93 (d, 1H, J=7 Hz: -H 3); 4,2 e 4,33 (AB, 2H, J_À_B=^{8 Hz:} “CH2 20)? 4,23 (m, 1H: -H 7); 4,6 (m, 1H: -H 2'); 4,96 (dd, 1H, J=2 e 10,5 Hz: -H 5); 5,22 (s, 1H: -H 10); 5,25 (m, 1H: -H 3^z); 5,42 (d, 1H, J=10 Hz: -CH-NHCO-); 5,7 (dd, 1H, J=7 Hz: -H 2); 6,24 (t, 1H, J=9 Hz: -H 13); 7,09 [t, 2H, J=8,5 Hz: F-C6H₄ (-H 3 e -H 5)]; 7,38 [dd, 2H, J=8,5 Hz: F-C₆H₄ (-H 2 e -H 6)]; 7,5 [t, 2H, J=8,5 Hz: -OCOC₆H₅ (-H 3 e -H 5) ];

| 7,62 [t, 1H, J=8,5 Hz: -OCOCgHg (-H 4)]; 8,1 [d, 2H, J=8,5 Hz:

-OCOCgHg (-H 2 e -H 6)].

Procedendo como no Exemplo 1, mas a partir das matérias primas adequadas, prepara-se os intermediários seguintes:

- 3-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-fluorofenil)-2-hidroxipropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j0,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β,10/3-bis- (2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(4-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8,10j8-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

273

ST 90071/91045

-29- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5jS, 20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β,10j8-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, sob a forma de um merengue branco.

- ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-(4-fluorofenil)oxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-(4-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 116°C.

- 3-amino-2-hidroxi-3-(4-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de cristais brancos que fundem a 105°C.

- 3-azido-2-hidroxi-3-(4-fluorofenil)propionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- 3-(4-fluorofenil)oxiranocarboxilato-(2R,3R) de etilo sob a forma de cristais amarelos-claros que fundem a 40°C.

- 1-[2-bromo-3-hidroxi-3-(4-fluorofenil)-1-oxopropil]-(2S,3R)-4-metil-5-fenil-2-oxazolidinona-(4S,5R) sob a forma de um merengue amarelo.

EXEMPLO 7

A uma solução de 5,52 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) em 350 cm³ de tolueno, adicionam-se 3,55 g de Ν,Ν'-diciclo-hexilcarbodiimida. Agita-se a solução durante 10 minutos a uma temperatura de cerca de 20°C e, depois, adicionam-se 3 g de 4,lO0-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5jS, 20-epoxi-l, 13a-di-hidroxi-9-oxo-7j0-trietilsililoxi-ll” -taxeno [preparado de acordo com o processo descrito por J-N. Denis et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 5917 (1988)] e 0,52 g de 4-dimetilaminopiridina. Em seguida, aquece-se o meio reaccional

273

ST 90071/91045 —30—

durante 2 horas a uma temperatura de cerca de 80°C e, após ter arrefecido a mistura reaccional até uma temperatura de cerca de 20 °C, adicionam-se 250 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 2 vezes 200 cm³ de diclorometano. Secam-se as fases orgânicas reunidas, sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a tuna temperatura de cerca de 30°C. Obtém-se assim 10,8 g de um óleo cor-de-laranja que é purificado por cromatografia flash [eluente: diclorometano-metanol (99,5-0,5 em volume)]. Após concentração, até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 60 a 73, obtêm-se 3,7 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4,10/3-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5j6,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j0-trietilsililoxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue amarelo cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²% = -45,3° (c=0,5; metanol)

-espectro de RMN	(400 MHz; desvios em ppm)
7,35	ppm	m, 5H, CgHjj (cadeia)
6,5	ppm	s, IH, H-10
6,25	ppm	t, IH, H-13
5,15	ppm	m, IH, CHN (H-4Z)
4,5	ppm	m, 2H, CHO (H-5z)+H-7
4,15	e 4,25 ppm	2d, 2H, H-20
1,25	ppm	S, 15H, C(CH3)3+2 CH3
0,98	ppm	t, 9H, CH3CSÍ
0,6	ppm	q, 6H, CH2SÍ

Adicionam-se 3 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4,10/3-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5j0,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/3-trietilsililoxi-ll-taxeno-13a-ilo a 60 cm³ de uma solução etanólica 0,lN de ácido clorídrico gasoso mantido a 0°c. Agita-se o meio reaccional durante 48 horas a 0°C, adicionam-se, em seguida, 250 cm³ de diclorometano e, depois, uma mistura de 30 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e de 30 cm³ de água. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, filtra-se e, depois, concentra-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) jfeweeBW*

-3173 273

ST 90071/91045 a uma temperatura de cerca de 30°C. Obtêm-se 2,8 g de um merengue branco que é purificado por cromatografia flash” [eluente: diclorometano-metanol (99-1 em volume)]. Após concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracçóes 15 a 30, obtêm-se 2,33 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4,10j8-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5β,20-epoxi-l,7/3-di-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue amarelo cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]2°_D = -65,1° (c=l, metanol)

- espectro de RMN (250 MHz; desvios em ppm)

7,35 ppm 6,3 ppm

5.1 ppm 4,5 ppm 4,45 ppm

4.1 e 4,3 ppm 1,05 a 1,15 ppm m, 5H, C₆H₅ (cadeia) m, 2H, H-10 e H-13 m, IH, CHN (H-4') d, IH, CHO (H-5') m, IH, H-7 2d, 2H, H-20 m, 9H, C(CH₃)₃

A uma solução de 2,3 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de 4,10j8-diacetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l, 7 j8-di-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo em 35 cm³ de piridina, adicionam-se, gota a gota, durante 10 minutos, 0,4 cm³ de cloroformato de 2,2,2-tricloroetilo. Aquece-se o meio reaccional a 80°C durante 1 hora e, depois, adicionam-se 0,36 cm³ de cloroformato de 2,2,2-tricloroetilo. Mantém-se o meio reaccional durante 4 horas a 80°C, adicionam-se então 0,36 cm³ de cloroformato de 2,2,2-tricloroetilo e mantém-se a temperatura a 80°C durante 30 minutos.. Após ter arrefecido o meio reaccional até uma temperatura de cerca de 20°c, adicionam-se 175 cm³ de água, 175 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e 150 cm³ de diclorometano. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 2 vezes 25 cm³ de diclorometano. Secamse as fases orgânicas reunidas, sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (0,13 kPa) a uma temperatura de cerca de 30°C. Obtêm-se 2,8 g de um merengue branco que é purificado por cromatografia flash [eluente: diclorometano-metanol (99-1 em volume)]. Após

273

ST 90071/91045 v .-'TiSfe .---¾⁷

-32concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 28 a 42, obtêm-se 2,57 g de 2-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4,10/3-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7/?-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas

características são as seguintes:
- poder rotatório:	[a]20D = -55° (c=0,5; metanol
- espectro de RMN	(400 MHz; desvios em ppm)
7,35 ppm	m, 5H, C6H5 (cadeia)
6,4 ppm	m, 1H, H-10
6,25 ppm	t, 1H, H-13
5,6 ppm	dd, 1H, H-7
5,1 ppm	m, 1H, CHN (H-4')
5,05 e 4,65 ppm	2d, 2H, CH2CC13
4,5 ppm	d, 1H, CHO (H-5')
4,1 e 4,3 ppm	2d, 2H, H-20
1,05 a 1,15 ppm	m, 9H, C(CH3)3

Agita-se uma solução de 3,2 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de 4,10/3-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo em 32 cm³ de ácido fórmico, durante 4,5 horas a uma temperatura de cerca de 20°C. Concentra-se o meio reaccional até à secura sob pressão reduzida (0,13 kPa) a uma temperatura de cerca de 30°C. Coloca-se o resíduo obtido em solução em 150 cm³ de diclorometano, lava-se esta solução com 50 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, seca-se sobre sulfato de magnésio, filtra-se concentra-se até à secura sob pressão reduzida (0,13 kPa) a uma temperatura de cerca de 30°C. Obtêm-se 2,74 g de um merengue castanho-claro que é purificado por cromatografia flash’’ [eluente: diclorometano-metanol (99-1 em volume)]. Após concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 13 a 25, obtêm-se 2,17 g de 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4,10/3-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 /3-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue /

273

ST 90071/91045

-33branco cujas características são as seguintes:

- po<	àer rotatório:	[<*1	20d = -60,2’ (c=0,5;
- espectro de RMN	(400	MHz? desvios em ppm)
7,4 i	a 7,25 ppm	m,	5H, C6H5 (cadeia)
6,4	PPm	s,	1H, H-10
6,15	PPm	t,	1H, H-13
5,55	PPm	dd	, 1H, H-7
5,05	e 4,65 ppm	2d	, 2H, CH2CC13
4,35	PPm	m,	2H, H-2Z e H-3Z
4,15	e 4,3 ppm	2d	, 2H, H-20

O 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4,10/?-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j3-( 2,2,2-tricloroetoxi )carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo pode igualmente ser preparado da seguinte forma:

agita-se uma solução de 0,1 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4,10/3-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5/J, 2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo numa mistura de 1,4 cm³ de uma solução etanólica 3,4N de ácido clorídrico gasoso e de 0,6 cm³ de diclorometano, durante 7 horas a uma temperatura de cerca de 20°c. Ao meio reaccional adicionam-se então 2 cm³ de diclorometano, 1 cm³ de água e 1 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, filtra-se e concentra-se até à secura sob pressão reduzida (0,13 kPa) a uma temperatura de cerca de 30°C. Obtêm-se 0,1 g de um merengue amarelo que é purificado por cromatografia flash [eluente: diclorometano-metanol (98-2 em volume)]. Após concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 14 a 20, obtêm-se 0,023 g de 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4,10 j0-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5 0,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7)3-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco.

A uma solução agitada de 2,1 g de 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R, 3S) de 4,10j8-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-

273

ST 90071/91045

-l-hidroxi-9-oxo-7 j8- (2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo em 52,5 cm³ de acetato de etilo, adiciona-se uma mistura de 140 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e de 140 cm³ de água. Em seguida, adicionam-se, durante 2 minutos, 0,277 cm³ de cloreto de benzoílo. Agita-se o meio reaccional durante 15 minutos a uma temperatura de cerca de 24°C, decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 3 vezes 50 cm³ de diclorometano. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 30^eC. Obtêm-se 2,3 g de um merengue castanho-claro que é purificado por cromatografia flash [eluente: diclorometano -metanol (99-1 em volume)]. Após concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40 ⁰ C, das fracções 31 a 38, obtêm-se 2,03 g de 3-benzoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4,10j8-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -41,9° (c=0,5; metanol)

- espectro de RMN (250 MHz; desvios em ppm)

8,15	PPm	d, 2H ]
7,8	PPm	d, 2H ] 2 x C(
7,6	ppm	t, 1H ]
7,6 ι	a 7,3 ppm	m, 10H ]
7,05	PPm	d, 1H, NH
6,35	PPm	s, 1H, H-10
6,2	PPm	t, 1H, H-13
5,8	PPm	dd, 1H, H-3'
5,55	PPm	dd, 1H, H-7
5,05	e 4,62 ppm	2d, 2H, CH2CC1
4,8	PPm	d, 1H, H-2Z
4,2	e 4,35 ppm	2d, 2H, H-20

] 2 x C₆H₅CO + CgHg (cadeia)

3-benzoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4,10j8-diacetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j8-( 2, 2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo pode ser transformado em taxol por substituição do grupo 2,2,2-tricloroetoxi73 273

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-35carbonilo por um átomo de hidrogénio, usando zinco, na presença de ácido acético, de acordo com o processo descrito na Patente Europeia EP 0 253 738.

ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidi na-5-carboxílico-(4S,5R) pode ser preparado da seguinte forma:

a uma solução agitada de 12,8 g de 3-terc-butoxicarbonil-2, 2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo em 200 cm³ de etanol, adiciona-se, durante 10 minutos, uma solução de 4,62 g de hidrato de hidróxido de lítio em 80 cm³ de água. Após 10 minutos de agitação suplementar, concentra-se o meio reaccional até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Dissolve-se o resíduo obtido em 70 cm³ de água e, depois, extrai-se com 3 vezes 20 cm³ de óxido de isopropilo. Em seguida, acidifica-se a fase aquosa até um pH de cerca de 2,6 pela adição de cerca de 100 cm³ de uma solução aquosa IN de ácido clorídrico e, depois, extrai-se com 3 vezes 50 cm³ de diclorometano. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, filtram-se e, depois, concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 11,3 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um óleo amarelo cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: = -3,3° (c=0,8; CHCI3)

- espectro de RMN (250 MHz; desvios em ppm)
7,4	ppm	m, 5H,	C6H5
5,2	ppm	m, IH,	CHN
4,55	ppm	d, IH,	CHO
1,85	ppm	s, 3H,	c-ch3
1,75	ppm	s, 3H,	C-CH3
1,2	ppm	m, 9H,	c(ch3)3

3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

agita-se uma solução de 11,7 g de 3-terc-butoxicarbonilami73 273

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-36- .....

no-2-hidroxi-3-£enilpropionato-(2R,3S) de etilo, de 3,6 cm³ de 2-metoxipropeno e de 0,06 g de ácido p-toluenossulfónico em 120 cm³ de tolueno, durante 1 hora, a uma temperatura de cerca de 20 ⁰ C. Leva-se o meio reaccional à ebulição e, depois, adicionam-se 0,06 g de ácido p-toluenossulfónico. Recolhe-se o destilado num recipiente graduado enquanto que se adiciona, gota a gota, uma solução de 18 cm³ de 2-metoxipropeno em 82 cm³ de tolueno de modo a manter constante o volume do meio reaccional. Após 1 hora e 20 minutos de destilação, adicionam-se 0,06 g de ácido p-toluenossulfónico e, depois, prossegue-se a destilação durante 10 minutos; o volume de destilado recolhido é então de 100 cm³. Arrefece-se o meio reaccional até uma temperatura de cerca de 20 °C, e adicionam-se então 25 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 2 vezes 10 cm³ de diclorometano; secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, filtram-se e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 20,8 g de um óleo amarelo que é purificado por cromatografia sobre 630 g de gel de silica [diâmetro da coluna: 5,5 cm, eluente: ciclo-hexano-acetato de etilo (70-30 em volume), fracções de 100 cm³]. Após concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 3 a 9, obtêm-se 13 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo cujas caracteristicas são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰p = -7,3° (c=l; CHC1₃)

- espectro	de RMN	(25C	1 MHz; desvios em ppm):
7,3	ppm	m,	5H,	C6H5
5,05	ppm	m,	ÍH,	CHN
4,45	ppm	d,	ÍH,	CHO
4,25	ppm	q,	2H,	och2_
1,8	ppm	s,	3H,	C-CH3
1,7	PPm	s,	3H,	c-ch3
1,3	PPm	t,	3H,	o-c-ch3
1,1	PPm	m,	9H,	c(ch3)3

3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato73 273

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-37-(2R,3S) de etilo pode ser preparado de acordo com o processo seguinte ;

a uma solução agitada de 16 g de 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de etilo em 160 cm³ de diclorometano, adicionam-se 7,1 g de hidrogenocarbonato de sódio e, depois, adicionam-se, durante 40 minutos, uma solução de 22,1 g de dicarbonato di-terc-butilo em 40 cm³ de diclorometano. Agita-se o meio reaccional durante 3,25 horas a uma temperatura de cerca de 20°C e, depois, adicionam-se 150 cm³ de água. Decanta-se a fase orgânica, extrai-se a fase aquosa com 50 cm³ de diclorometano e, depois,

J secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, filtram-se e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 30°C. Tritura-se o resíduo obtido em 50 cm³ de éter isopropílico; filtra-se o sólido obtido e, depois, seca-se sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 20 °C. Obtêm-se assim 11,9 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de etilo sob a forma de um pó branco que funde a 124°C, cujo poder rotatório é [a]²⁰D = 6,3° (c=l; CHC1₃).

3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de etilo pode ser preparado de acordo com o processo descrito por H. Honig et al, Tetrahedron, 46, p. 3841 (1990).

J

EXEMPLO 8

Procedendo de uma forma análoga à que se descreve no Exemplo 7, mas a partir de 10 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) e de 12,6 g de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l, 13a-di-hidroxi-9-oxo-7 β,ΙΟβ-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno, obtêm-se, após purificação por cromatografia flash [eluente: diclorometano-metanol (98-2 em volume)] e concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 22 a 39, obtêm-se 14 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70,10/3-bis-( 2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um

. ír te '

273

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-38merengue branco cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -37,2° (c=l; metanol)

- espectro de RMN (400 MHz; desvios em ppm)

7,4 a 7,2 ppm	m,	5H, c6h5 (cadeia)
6,25 ppm	t,	1Η, H-13
6,2 ppm	s,	IH, H-10
5,55 ppm	dd,	IH, H-7
5,1 ppm	m,	IH, CHN (H-4')
4,9 e 4,6 ppm	2d,	2H, CH2CC13
7,78 ppm	s,	2H, CH2CC13
4,45 ppm	d,	IH, CHO (H-5')
4,1 e 4,28 ppm	2d,	2H, H-20
1,1 ppm	m,	9H, C(CH3)3

O 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5,20-epoxi-l,13a-di-hidroxi-9-oxo-70,lO0-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno pode ser preparado de acordo com o processo descrito na Patente Europeia EP 0 253 738.

EXEMPLO 9

Procedendo de uma forma análoga à que se descreve no Exemplo 7, mas a partir de 14 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7β,100-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, obtêm-se, após purificação por cromatografia flash [eluente: diclorometano-metanol (95-5 em volume)] e concentração até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracções 7 e 8, obtêm-se 6,3 g de 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70,lO0-bis-(2,

2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas características são as seguintes:

- poder rotatório: [a]²⁰D = -39,7° (c=l; metanol)

- espectro de RMN (400 MHz; desvios em ppm)

7,45	a 7,3 ppm	m,	5H,	C6H5 (cadeia)
6,3	PP®	s,	IH,	H-10
6,22	ppm	t,	IH,	H-13
5,6	ppm	dd	, IH	, H-7

273

ST 90071/91045

4,95 e 4,65 ppm	2d,	2H, CH2CC13
4,8 ppm	s,	2H, CH2CC13
4,40 ppm	m,	3H, H-2'+H-3'+H-20
4,2 ppm	a,	1H, H-20

O 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3, 2 0-epoxi-1-hidroxi-9-oxo-7/3,10/3-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)-ll-taxeno-13a-ilo é transformado em 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2α-benzoiloxi-5β,20-epoxi-1-hidroxi-9-oxo-7β,10β-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo por reacção com dicarbonato de di-terc-butilo na presença de uma base inorgânica ou orgânica.

3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β, 10/3-bis- (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo é transformado em 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l,7/3,10j3-tri-hidroxi-9-oxo-ll-taxeno-13a-ilo por substituição dos grupos

2,2,2-tricloroetoxicarbonilo por um átomo de hidrogénio, usando zinco na presença de ácido acético, de acordo com o processo descrito no pedido de Patente Europeia EP 0 253 738.

EXEMPLO 10

Procedendo de uma forma análoga à que se descreve no Exemplo 7, mas a partir de 0,54 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4SR,5RS) e de 0,47 g de

4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/?,10-epoxi-l,13a!-di-hidroxi-9-oxo-7/J, 10/3-bis (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno, obtêm-se, após purificação por cromatografia flash [eluente: diclorometanometanol (99,5-0,5 em volume)] e concentração até à secura das fracções 9 a 11, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, 0,5 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 /3,10/3-bis- (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo sob a forma de um merengue branco cujas caracteristicas são idênticas às do produto obtido no

273

ST 90071/91045 —40—

Exemplo 8.

ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4SR,5RS) pode ser obtido nas condições descritas no Exemplo 6, para a preparação do ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R).

Deste nodo, a partir de 5 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4SR,5RS) de etilo, obtêmse 4,54 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4SR,5RS) sob a forma de um sólido branco que funde a 110°C, cujas características são as seguintes;

- espectro de RMN (250 MHz; desvios em ppm)
7,4	ppm	m,	5H, C6H5
5,2	PPm	m,	IH, CHN
4,55	ppm	d,	IH, CHO
1,85	PPm	s,	3H, C-CH3
1,75	PPm	s,	3H, C-CH3
1,2	PPm	m,	9H, C(CH3)3

3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4SR,5RS) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

leva-se uma solução de 0,42 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2RS,3SR) de etilo, de 1 cm³ de 2,2-dimetoxipropano e de 0,01 g de ácido p-toluenossulfónico em 10 cm³ de tolueno, à ebulição durante 15 minutos; recolhem-se 5 cm³ de destilado. Adicionam-se então 5 cm³ de tolueno e 1 cm³ de

2,2-dimetoxipropano e, depois, destilam-se de novo 5 cm³ de destilado durante 15 minutos. Repete-se este processo duas vezes. Arrefece-se o meio reaccional até uma temperatura de cerca de 20°C, e adicionam-se então 20 cm³ de uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 20 cm³ de diclorometano; secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, filtram-se e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 0,42 g de um óleo

273

ST 90071/91045

-414' amarelo que é purificado por cromatografia sobre 15 g de gel de sílica (diâmetro da coluna: 1,5 cm; eluente: diclorometano; fracçóes de 10 cm³). Após concentração até à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C, das fracçóes 6 a 13, obtêm-se 0,2 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4SR,5RS) de etilo sob a forma de um óleo amarelo cujas características são as seguintes:

- espectro	de RMN	(25C	ι MHz; desvios em ppm)
7,3	ppm	m,	5H,	C6H5
5,05	PPm	m,	IH,	CHN
4,45	ppm	d.	IH,	CHO
4,25	PPm	q,	2H,	och2_
1/8	PPm	S,	3H,	c-ch3
1/7	PPm	s,	3H,	c-ch3
1/3	PPm	t,	3H,	o-c-ch3
1,1	PPm	m,	9H,	c(ch3)3

O 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2RS,3SR) de etilo pode ser preparado de acordo com o processo descrito no Exemplo 7 para a preparação do 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de etilo.

Deste modo, a partir de 0,78 g de 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2RS,3SR) de etilo, obtêm-se 0,6 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2RS,3SR) de etilo sob a forma de um pó branco que funde a 102°C.

O 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2RS,3SR) de etilo pode ser preparado de acordo com o processo descrito por H. Honig et al., Tetrahedron, 46, p. 3841 (1990).

EXEMPLO 11

Procedendo de uma forma análoga à que se descreve no Exemplo

7, mas a partir de 1,7 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) e de 2,9 g de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l, 13a-di-hidroxi-9-oxo-7 β, 10/3-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno, obtêm-se 3,5 g de 373 273

ST 90071/91045

-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-( 4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-1-hidroxi-9-oxo-70-100-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a~ilo sob a forma de um merengue branco.

- poder rotatório: [α]²θ₀ = -41,2° (c=l; metanol)

O 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-( 4S ,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j8,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo—7 β_f100-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo é transformado no 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R, 3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo—7β,100—bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo por reacção com ácido fórmico como se descreve no Exemplo 7 para o 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-70,lO0-bis-(2,2,2-tricloroetoxi )carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo. 0 produto assim obtido possui as características físicas, em todos os aspectos idênticas às descritas no Exemplo 9 para o mesmo produto.

- poder rotatório: [a]²⁰D = -38,3° (c=0,8? metanol).

ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) pode ser obtido nas condições que se descrevem no Exemplo 7 para a preparação do ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R). Deste modo, a partir de 2,3 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo, obtêm-se 1,7 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de cristais brancos que fundem a 185°C.

- poder rotatório: [a]²⁰^ = +2,4° (c= 0,5; metanol).

3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

agita-se uma solução de 2,5 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de etilo, de 1,12 g de 3,373 273

ST 90071/91045

-43L. -¹

-dimetoxipentano e de 25 mg de p-toluenossulfonato de piridínio em 25 cm³ de tolueno, durante 3 horas, a uma temperatura de cerca de 20“C. Aquece-se a mistura reaceional até à ebulição e recolhe-se o destilado num recipiente graduado. Após ter recolhido 20 cm³ de destilado, adiciona-se uma solução de 1,12 g de

3,3-dimetoxipentano e de 25 mg de p-toluenossulfonato de piridinio em 10 cm³ de tolueno, ao meio reaceional, e aquece-se ao refluxo do tolueno durante 5 horas. Arrefece-se o meio reaceional até uma temperatura de cerca de 20°C e, em seguida, adicionam-se 10 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 2 vezes 10 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e concentram-se até á secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 2,3 g de 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dietil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

- poder rotatório: [a]²⁰D = -8,9° (c=l; metanol).

3,3-dimetoxipentano pode ser preparado de acordo com o processo descrito por Lorette et al., J. Org. Chem., 24./ 1731, (1959).

EXEMPLO 12

Procedendo de uma forma análoga à que se descreve no Exemplo 7, mas a partir de 0,9 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) e de 1,443 g de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5£,20-epoxi-l,13a-di-hidroxi-9-ΟΧΟ-7 β,100-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi-ll-taxeno, obtêm-se 1,85 g de 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-50,2O-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7j0, 10/3-bis- (2,2,2-tricloroetoxi )carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo, sob a forma de um merengue branco.

3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S, 5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5/3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β,10/3-bis-(2,2,2-tricloroetoxi)carboniloxi73 273

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-44yt?

-ll-taxeno-13a-ilo é transformado no 3-amino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5j3,20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 j0, lOjS-bis- (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo por reacção com ácido fórmico como se descreve no Exemplo 7 para o 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de 4-acetoxi-2a-benzoiloxi-5jS, 20-epoxi-l-hidroxi-9-oxo-7 β, 100-bis- (2,2,2-tricloroetoxi) carboniloxi-ll-taxeno-13a-ilo. 0 produto assim obtido possui as caracteristicas físicas em todos os aspectos idênticas às que se descrevem no Exemplo 9 para o mesmo produto.

- poder rotatório: [a]²⁰D = -41,7° (c=0,5? metanol).

ácido 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) pode ser obtido nas condições que se descrevem no Exemplo 7 para a preparação do ácido 3-terc-butoxicarbonil-2,2-dimetil-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S, 5R). Deste modo, a partir de 1,2 g de 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo, obtém-se 1 g de ácido 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclohexano-4-feniloxazolidina-5-carboxílico-(4S,5R) sob a forma de um merengue branco.

- poder rotatório: [a]²⁰D = -4,5° (c=0,5; metanol).

O 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo pode ser preparado da seguinte forma:

agita-se uma solução de 2,5 g de 3-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-fenilpropionato-(2R,3S) de etilo, de 1,22 g de 1,1-dimetoxiciclo-hexano e de 25 mg de p-toluenossulfonato de piridinio em 25 cm³ de tolueno, durante 3 horas a uma temperatura de cerca de 20 °C. Aquece-se a mistura reaccional até à ebulição e recolhe-se o destilado num recipiente graduado. Após ter recolhido 20 cm³ de destilado, adiciona-se, ao meio reaccional, uma solução de 1,22 g de 1,1-dimetoxiciclo-hexano e de 25 mg de p-toluenossulfonato de piridinio em 10 cm³ de tolueno e aquece-se ao refluxo do tolueno durante 30 horas. Arrefece-se o meio reaccional até uma temperatura de cerca de 20°C, e adicionam-se, em

273

ST 90071/91045

-45seguida, 10 cm³ de uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Decanta-se a fase aquosa e, depois, extrai-se com 2 vezes 10 cm³ de diclorometano. Reunem-se as fases orgânicas, secam-se sobre sulfato de magnésio, filtram-se e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (2,7 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se 2,6 g de um merengue branco que é purificado por cromatografia sobre 100 g de sílica (0,063-0,2 mm) contidos numa coluna de 2 cm de diâmetro (eluente: diclorometano) recolhendo fracções de 25 cm³. Reunem-se as fracções 6 a 13 e concentram-se até à secura sob pressão reduzida (0,27 kPa) a uma temperatura de cerca de 40°C. Obtêm-se assim 1,25 g de 3-terc-butoxicarbonil-2-espirociclo-hexano-4-feniloxazolidina-5-carboxilato-(4S,5R) de etilo sob a forma de um óleo amarelo.

O 1,l-dimetoxiciclo-hexano pode ser preparado pelo processo descrito por Lorette et al., J. Org. Chem., 24., 1731, (1959).

Os novos produtos com a fórmula geral (II) apresentam actividades biológicas particularmente interessantes.

In vivo, os produtos de fórmula geral (II) mostram-se activos no ratinho enxertado com o melanoma B16 com doses compreendidas entre 1 e 10 mg/kg por via intraperitoneal, bem como sobre outros tumores líquidos ou sólidos.

De um modo geral, os produtos com a fórmula geral (II) têm uma actividade pelo menos igual ou superior à do taxol ou dos derivados do taxano que são objecto da Patente Europeia EP-0 253 738.

presente invento refere-se igualmente ao processo de preparação de composições farmacêuticas contendo um produto com a fórmula geral (II) em associação com qualquer outro produto farmaceuticamente aceitável, quer inerte, quer fisiologicamente activo.

Estas composições podem ser apresentadas sob qualquer forma apropriada à via de administração prevista. A via parentérica, e, nomeadamente, a via intravenosa, é a via de administração prefe73 273

ST 90071/91045

-46rencial.

As composições para administração parentérica podem ser soluções estéreis, aquosas ou não aquosas, suspensões ou emulsões. Como solvente ou veículo, podem-se utilizar o propilenoglicol, os óleos vegetais, em particular, o azeite, e os ésteres orgânicos injectáveis, por exemplo, o oleato de etilo. Estas composições podem compreender igualmente, adjuvantes, em particular, agentes molhantes, emulsionantes ou dispersantes. A esterilização pode ser realizada de várias formas, por exemplo, com o auxílio de um filtro bacteriológico, incorporando na composição agentes esterilizantes, por irradiação e por aquecimento. Podem estar igualmente na forma de composições estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril ou em qualquer outro meio estéril injectável.

Os produtos com a fórmula geral (II) são particularmente úteis no tratamento de leucemias agudas e de tumores sólidos em doses compreendidas entre 1 e 2 mg/kg, por via intravenosa, para um adulto.

Exemplo seguinte ilustra uma composição de acordo com o invento.

EXEMPLO

Dissolvem-se 40 mg do produto obtido no Exemplo 1 em 1 cm³ de Emulphor EL 620 e 1 cm³ de etanol e, depois, dilui-se a solução pela adição de 18 cm³ de soro fisiológico.

A composição é administrada por introdução numa perfusão de um soluto fisiológico durante 1 hora.

273

ST 90071/91045 ' y~''

c.---,_χ->

‘ ’ ,4-47-

Claims (10)

1 - Processo de preparação de derivados de

10-desacetiltaxol de fórmula geral:

taxol ou de na qual R representa um radical t-butoxilo ou fenilo, R-|_ representa um átomo de hidrogénio ou um radical acetilo e Ar representa um radical arilo, caracterizado por compreender:

a) a condensação de um derivado de oxazolidina de fórmula geral:

Ar

Boc-N o

Ό00Η (II) na qual Ar é definido como anteriormente, Boc representa o radical t-butoxicarbonilo e Rg e R₇, que são iguais ou diferentes, representam um radical alquilo contendo 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente, substituído por um ou vários radicais arilo (fenilo), ou arilo (fenilo), ou Rg e R_? formam, em conjunto com o átomo de carbono ao qual se ligam, um ciclo com 4 a 7 elementos com um derivado de taxol ou de 10-desacetiltaxol de fórmula geral:

na qual representa um radical acetilo ou um grupo protector da função hidroxilo e R₂ representa um grupo protector da função hidroxilo, para se obter um produto de fórmula geral:

73 273

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-48— (IV) na qual Ar, R^zlz R₂, Rg e R₇ são definidos como anteriormente,

b) o tratamento em meio ácido, em condições sem efeito sobre

R^z^ e R₂, para se obter o produto de fórmula geral:

(V) na qual R^z]_ e R₂ são definidos como anteriormente,

c) o tratamento com um reagente conveniente, que permita introduzir um radical t-butoxicarbonilo ou benzoílo sobre a função amino, para se obter um produto com a fórmula geral:

d) a substituição dos grupos protectores R^z^ e R₂ por átomos de hidrogénio, em condições apropriadas e, depois,

e) o isolamento e, eventualrnente, a purificação do produto.

2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar um produto de fórmula geral (I) na qual R e Rsão definidos como na reivindicação 1 e Ar representa um radical fenilo, eventualrnente, substituído ou um radical α ou /3-naftilo, eventualrnente, substituído por um ou vários átomos ou radicais

73 273

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-49escolhidos de entre os átomos de halogéneo (flúor, cloro, bromo, iodo) e os radicais alquilo, arilo, arilalquilo, alcoxilo, alquiltio, ariloxilo, ariltio, hidroxilo, mercapto, acilamino, aroilamino, alcoxicarbonilamino, amino, alquilamino, dialquilamino, carboxilo, alcoxicarbonilo, carbamoílo, dialquilcarbamoílo, ciano, nitro e trifluorometilo, estando pressuposto que os radicais alquilo e as porções alquilo dos outros radicais contêm 1 a 4 átomos de carbono e que os radicais arilo são radicais fenilo ou a ou jS-naftilo.

3 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado por os radicais protectores representados por ^R/1 ^{e r}2 ^serem radicais 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo ou radicais que podem ser transformados em radicais 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo.

4 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 3, caracterizado por a condensação do produto de fórmula geral (II) com o derivado de taxol ou de 10-desacetiltaxol de fórmula geral (III) ser efectuada na presença de um agente de condensação e de um agente de activação.

5 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 4, caracterizado por o tratamento selectivo do produto de fórmula geral (IV) ser efectuado usando tua ácido mineral ou orgânico, eventualmente, num álcool.

6 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 5, caracterizado por a introdução de um radical t-butoxicarbonilo ou benzoilo no produto de fórmula geral (V) ser efectuada usando dicarbonato de di-t-butilo.

7 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por a substituição dos grupos protectores, representados por R'^ e R₂, pelos átomos de hidrogénio, ser efectuada usando zinco em meio de ácido acético ou usando um ácido mineral ou orgânico num álcool alifático, na presença de zinco.

-5073 273

ST 90071/91045

8 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem derivados de taxol ou de 10-desacetiltaxol de fórmula geral:

na gual R representa um radical t-butoxilo ou fenilo e Ar representa um radical fenilo substituído ou a- ou β-naftilo eventualmente substituído por um ou vários átomos ou radicais escolhidos de entre os átomos de halogéneo (flúor, cloro, bromo, iodo) e os radicais alquilo, arilo, arilalquilo, alcoxilo, alquiltio, ariloxilo, ariltio, hidroxilo, mercapto, acilamíno, aroilamino, alcoxicarbonilamino, amino, alquilamino, dialquilamino, carboxilo, alcoxicarbonilo, carbamoilo, dialquilcarbamoílo, ciano, nitro e trifluorometilo, estando pressuposto que os radicais alquilo e as porções alquilo dos outros radicais contêm 1 a 4 átomos de carbono e que os radicais arilo são radicais fenilo ou a- ou jS-naftilo.

9 - Processo de preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se associar uma quantidade suficiente de pelo menos um derivado de acordo com a reivindicação 8. com um ou vários produtos farmaceuticamente aceitáveis, quer inertes quer fisiologicamente activos.

10 - Processo de preparação de derivados da oxazolidina de fórmula geral:

Ar COOH

Ή'

Boc-bf ^0 Ref' r₇ na qual Ar é definida como em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, Boc representa o radical t-butoxicarbonilo e R_g e R₇, iguais ou diferentes, representam um radical alquilo contendo 1

73 273

ST 90071/91045 —51—

4 átomos de carbono eventualmente substituído por um ou vários radicais arilo (fenilo), ou arilo (fenilo), ou R₆ e R₇ formam, em conjunto com o átomo de carbono ao qual se ligam, um ciclo de 4 a 7 elementos, caracterízado por se fazer reagir um metoxialceno, eventualmente, substituído por um ou vários radicais arilo, um dimetoxialcano eventualmente substituído por um ou vários radicais arilo, ou um gem-dimetoxicicloalcano contendo 4 a 7 átomos de carbono, com um derivado da feniliso-serina de fórmula geral:

Ar

COOR

Boc-NH

OH na qual Ar é definido como em qualquer das reivindicações 1 ou 2, Boc representa o radical t-butoxicarbonilo e R representa um radical alquilo contendo 1 a 4 átomos de carbono eventualmente substituído por um radical fenilo e, depois, se saponificar o produto obtido.