FI106261B - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten taksaanijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

! 106261

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten taksaani johdannaisten valmistamiseksi

Jakamalla erotettu hakemuksesta 932331 5

Keksinnön kohteena ovat uudet taksaanijohdannaiset, joiden yleinen kaava on:

HO o 2H

10 R-coyH 0 N /-VjL

^O /ϊ^λο (la)

°H Η0Ξ H

15 ÖCOC6H5 jossa R esittää t-butoksi- tai fenyyliradikaalia ja Ar esittää fenyyliradikaalia, joka on substituoitu, tai a-tai β-naftyyliradikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla atomilla tai radikaalilla, jotka 20 on valittu halogeeniatomien (fluori, kloori, bromi, jodi) ja alkyyli-, aryyli-, aralkyyli-, alkoksi-, alkyylitio-, aryylioksi-, -aryylitio-, merkapto-, asyyliamino-, aroyy- ···. liamino-, alkoksikarbonyyliamino-, amino-, alkyyliamino-, • · !!! dialkyyliamino-, karboksi-, alkoksikarbonyyli-, karbamoyy- • « 1 . 25 li-, dialkyylikarbamoyyli-, syano-, nitro- ja trifluorime- '·'· | tyyliradikaalien joukosta, jolloin alkyyliradikaalit ja * 1 muiden radikaalien alkyyliosat sisältävät 1-4 hiiliato- • · :.V mia ja että aryyliradikaalit ovat fenyyli- tai a- tai • · · ·,! ’ β-naf tyyliradikaaleja .

30 Keksintö koskee erityisesti uusia kaavan (Ia) mu- kaisia taksaanijohdannaisia, jossa kaavassa Ar esittää fe- • · · .·1·. nyyliradikaalia, joka on substituoitu yhdellä tai useam- ΜΓ = maila samanlaisella tai erilaisella atomilla tai radikaa- c lilla, jotka on valittu halogeeniatomien ja alkyyli-, al- ' ' 35 koksi-, amino-, alkyyliamino-, dialkyyliamino-, asyyliami- 2 106261 no-, alkoksikarbonyyliami.no- ja trifluorimetyyliradikaa-lien joukosta.

Keksintö koskee vielä erityisesti yleisen kaavan (II) mukaisia yhdisteitä, jossa kaavassa Ar esittää fenyy-5 liradikaalia, joka on substituoitu kloori- tai fluoriato-milla tai alkyyli- (metyyli-), alkoksi- (metoksi-), dial-kyyliamino- (dimetyyliamino-) , asyyliamino- (asetyyliami-no-) tai alkoksikarbonyyliamino- (t-butoksikarbonyyliami-no-) radikaalilla.

10 EP-hakemusjulkaisussa nro 0 253 739 kuvataan takso- lien valmistamista Taksoteeristä ((2R,3S)-(4-asetoksi-2-bentsoyylioksi-5S, 20-epoksi-7S, 10S-dihydroksi-9-okso-ll-taksen-13a-yyli) - 3-t-butoksikarbonyyliamino-3 -fenyyli-2-hydroksipropionaatista), jota taas voidaan valmistaa mene- 15 telmällä, joka on kuvattu EP-hakemusjulkaisussa 0 336 841 kondensoimalla 3 -1-butoksikarbonyy1iamino-3 - fenyyli-2-hyd-roksi(suojattu)happo 10-deasetyylibakkatiini III:een, joka on sopivasti suojattu. Taksolilla ja Taksoteerillä on tuu-moreita ehkäiseviä ja antileukeemisia vaikutuksia. Chem.

20 Abstr. 114 94569 q (1991) mukaan taksolin metaboliitit, jotka ovat fenyylirenkaan 3'-asemasta tai bentsoyylin fe-nyylirenkaan 2-asemasta hydroksyloituja johdannaisia, ovat selvästi vähemmän vaikuttavia kuin taksoli.

Keksinnön mukaan yleisen kaavan (Ia) mukaisia tak- ( 25 saaneita voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: • 1 · ....: 1) Oksat solidiini johdannainen, jonka yleinen kaava • · on: • · e • · • · ·

: Ar oC00H

30 ^ \ (ID

: : Boc-N. o ... v/ ·«· *...: R6 «7

' < T

jossa Ar on sama kuin edellä, Boc esittää t-butoksikarbo- 35 nyyliradikaalia ja R6 ja R7, jotka ovat samanlaisia tai « 1 9 3 106261 erilaisia, esittävät 1-4 hiiliatomia sisältävää alkyy-liradikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä * tai useammalla aryyli- (fenyyli-) radikaalilla, tai aryy- li- (fenyyli-) radikaalia tai sitten R6 ja R? muodostavat 5 yhdessä sen hiiliatomin kanssa, johon ovat sitoutuneet, 4-7 hiiliatomin ketjun sisältävän renkaan, kondensoidaan taksaanijohdannaisen kanssa, jonka yleinen kaava on: io R‘ 1 * *R 2

HO""/ VT

ÖCOCH3 15 ÖCOCgHg jossa R', esittää asetyyliradikaalia tai hydroksifunktiota suojaavaa ryhmää, kuten 2,2,2-trikloorietoksikarbonyylira-20 dikaalia, ja R2 esittää hydroksifunktiota suojaavaa ryhmää, kuten 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliradikaalia tai trial-kyylisilyyliradikaalia, jonka kukin alkyyliosa sisältää 1-4 hiiliatomia, jolloin saadaan yhdiste, jonka yleinen kaava on: ; : . 25 R,ro. o o-r2 :Ύ: Ar oC0-0"m/ jT JL 0V) 30 d J ^ H TV^° . ·. Boc-N o HO 1 OCOCH3 ·***· R$ Ry ÖCOCgHg *♦· . jossa Ar, R11, R2, R6 ja R7 ovat samoja kuin edellä.

4 106261

Yleensä esteröinti suoritetaan kondensoivan aineen, kuten karbodi-imidin, esimerkiksi disykloheksyylikarbodi-imidin, tai reaktiivisen karbonaatin, kuten 2-dipyridyyli-karbonaatin, ja aktivaattorin, kuten dialkyyliaminopyri-5 diinin, esimerkiksi 4-dimetyyliaminopyridiinin läsnä ollessa suorittamalla reaktio orgaanisessa liuottimessa, kuten bentseenissä, tolueenissa, ksyleeneissä, etyylibent-seenissä, isopropyylibentseenissä tai klooribentseenissä 60 - 90 °C:n lämpötilassa.

10 On erityisen edullista käyttää kaavan (III) mukai sen taksaanijohdannaisen suhteen molaarista ylimäärää kaavan (II) mukaista happoa, käyttämällä kaavan (II) mukaisen hapon suhteen stökiömetrinen määrä kondensoivaa ainetta ja käyttämällä kaavan (III) mukaisen taksaanijohdannaisen 15 suhteen stökiömetrinen määrä aktivaattoria.

Yleisen kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa R'., on sama kuin edellä ja jossa R2 esittää 2,2,2-trikloori-etoksikarbonyyliradikaalia, voidaan valmistaa esteröimällä yleisen kaavan (III) mukainen johdannainen, jossa R'., on on 20 sama kuin edellä ja R2 esittää trialkyylisilyyliradikaalia, jonka jälkeen seuraa trialkyylisilyyliradikaalin korvaaminen 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliradikaalilla, jolloin muodostuu välituote, jonka yleinen kaava on:

I 4 I

4 « I

25 R'i-°a ,p qh

Ar Nco-o·"·./ x ^ JL ^ v : ^-ν' \_Jj 30 Boc-N o ho OCOCHg *^«7 ÖCOCcHc IM * • · m • · · jossa Ar, R'j, R6 ja R7 ovat samoja kuin edellä.

r % . Esteröinti voidaan suorittaa edellä kuvatuissa olo- 35 suhteissa.

f 4 4 4 4 l 9 « · = 106261

Yleisen kaavan (IVa) mukaista yhdistettä voidaan valmistaa käsittelemällä yleisen kaavan (IV) mukaista esteriä, jossa R2 esittää trialkyylisilyyliradikaalia, jonka kukin alkyyliosa sisältää 1-4 hiiliatomia, kaasumaisella 5 kloorivetyhapolla alkoholissa, kuten etanolissa.

Yleisen kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa R2 esittää 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliradikaalia, voidaan valmistaa käsittelemällä yleisen kaavan (IVa) mukaista yhdistettä 2,2,2-trikloorietyylikloroformiaatilla suoritta- 10 maila reaktio emäksisessä orgaanisessa liuottimessa, kuten pyridiinissä.

2) Yleisen kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa R2 esittää 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliä, käsitellään epäorgaanisella tai orgaanisella hapolla mahdollisesti alko- 15 holissa olosuhteissa, jotka eivät vaikuta suojaaviin ryhmiin R^ ja R2, niin että saadaan yhdiste, jonka yleinen kaava on: 2 0 RV°a 0 0-r2

Ar vC0-0 mu/ l JL (V) y—\ v_/' /No°

NH;? OH H

2 HO E 0C0CH3 25 ÖCOCcHr

··· · VV

• · jossa Ar ja R' ovat samoja kuin edellä ja R, esittää 2,2,2 -trikloorietoksikarbonyyliradikaalia.

• · · ’ Yleensä käytetään muurahaishappoa mahdollisesti 30 alkoholissa, kuten etanolissa tai kaasumaista kloorivety- • · * ’··.* happoa alkoholissa, kuten etanolissa.

• M

3) Kaavan (V) mukaista yhdistettä käsitellään yh-disteellä, jonka avulla saadaan lisätyksi aminofunktioon t-butoksikarbonyyli- tai bentsoyyliradikaali, jolloin saa- 35 daan yhdiste, jonka kaava on: I I « 6 106261 ,. Ar xC0-0.....( X L JL ^ y—\ \ Jz /^ϊθο R-CONH OH /V H äcOCHj öcoc6h5 10 jossa Ar, R ja R',, ovat samoja kuin edellä ja R2 esittää 2,2,2 -trikloorietoksikarbonyyliradikaalia.

Yleensä ditert-butyylidikarbonaatti tai bentsoyyli-kloridi saatetaan reagoimaan yleisen kaavan (VI) mukaisen yhdisteen kanssa suorittamalla reaktio orgaanisessa liuot-15 timessa, kuten metyleenikloridissa, epäorgaanisen emäksen, kuten natriumbikarbonaatin, tai orgaanisen emäksen, kuten tertiäärisen amiinin, esimerkiksi trietyyliamiinin läsnä ollessa.

4) Yleisen kaavan (VI) mukainen yhdiste muutetaan 20 yleisen kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi korvaamalla R',,:n ja Rj:n esittämät 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliryhmät vetyatomeilla kajoamatta molekyylin muihin osiin.

Yleensä kaavan (VI) mukaista yhdistettä käsitellään sinkillä etikkahapon läsnäollessa 30 - 60 °C:n lämpötilas- : 25 sa tai epäorgaanisen tai orgaanisen hapon, kuten kloori- ··· · vetyhapon tai etikkahapon läsnäollessa, liuotettuna 1-3 • · . . hiiliatomia käsittävään alifaattiseen alkoholiin sinkin • · · • · · M läsnä ollessa.

• · · * Yleisen kaavan (III) mukaista yhdistettä voidaan 30 valmistaa olosuhteissa, jotka on kuvattu EP-patenttijul- ««· kaisussa nro 0 336 841.

• · · *...· Yleisen kaavan (II) mukaista happoa voidaan valmis taa saippuoimalla emäksisessä ympäristössä esteri, jonka yleinen kaava on: c « __ « 7 106261

Ar COORo \_o' 3

Boc-N O (Vn) R6 'S'R7 5 jossa Ar, R6 ja R? ovat samoja kuin edellä ja R3 esittää 1-4 hiiliatomia sisältävää alkyyliradikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu fenyyliradikaalilla.

Yleensä saippuointi suoritetaan epäorgaanisen emäk-10 sen, kuten alkaalimetalli (litium, natrium, kalium) hydroksidin tai alkaalimetallikarbonaatin tai -bikarbonaatin (natriumbikarbonaatin, kaliumkarbonaatin tai -bikarbonaatin) avulla vesi-alkoholi-liuoksessa, kuten metanoli-vesi-seoksessa, 10 - 40 °C:n, mieluiten noin 20 °C:n lämpöti- 15 lassa.

Yleisen kaavan (VII) mukaista esteriä voidaan valmistaa saattamalla metoksialkeeni, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla aryyliradikaalilla (2-metoksipropeenilla), gem-dimetoksialkaanilla, joka on 20 mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla aryyli radikaalilla (2,2-dimetoksipropaanilla) tai gem-dimetoksi-sykloalkaanilla, joka sisältää 4-7 hiiliatomia, reagoimaan fenyyli-isoseriinijohdannaisen kanssa, jonka yleinen . ‘. kaava on: 25

Iti • · · · ***** Ar COOR^ \ (vni)

(CH3)3CO-CO-NH OH

30 • · f . ·...· jossa Ar ja R3 ovat samoja kuin edellä, raseemisena seok- • * · \<t· sena, tai mieluiten 2R, 3S-muodossa.

Yleensä metoksialkeenin tai gem-dimetoksialkaanin tai gem-dimetoksisykloalkaanin reaktio yleisen kaavan 35 (Vili) mukaisen yhdisteen kanssa suoritetaan tekemällä t l ( « · I < « 8 106261 reaktio inertissä orgaanisessa liuottimessa vahvan hapon, kuten p-tolueenisulfonihapon läsnäollessa lämpötilassa, joka on 0 °C:n ja reaktioseoksen kiehumispisteen välillä. Liuottimet, jotka sopivat erityisen hyvin, valitaan aro-5 maattisten hiilivetyjen (bentseeni, tolueeni, ksyleeni) joukosta.

Yleisen kaavan (VIII) mukainen yhdiste voidaan asy-loida β-fenyyli-isoseriinillä, jonka yleinen kaava on: 10

Ar COOR<j ) \ ™ h2n oh 15 jossa Ar ja R3 ovat samoja kuin edellä.

Reaktio toteutetaan yleensä di-tert-butyylidikar-bonaatin reaktiolla inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten esterissä, esimerkiksi metyyli- tai etyyliasetaatissa 0 - 40 °C:n, mieluiten noin 20 °C.-n lämpötilassa.

20 Yleisen kaavan (IX) mukainen β-fenyyli-isoseriini- johdannaista voidaan valmistaa pelkistämällä hydroksiat-sidi, jonka yleinen kaava on: 25 \ P00R3 \ (x) n3' oh • · · • « · • · « ·· • · · '·1 1 jossa Ar ja R3 ovat samoja kuin edellä.

30 Yleensä pelkistys suoritetaan vedyn avulla kataly- • « · saattorin, kuten palladiumilla päällystetyn hiilen läsnä-ollessa inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten etyyliasetaatissa. Reaktio suoritetaan mieluiten 0 - 50 °C:n lämpötilassa. Hydraus on edullista suorittaa 100 - 500 . 35 kPa:n (1-5 barin) paineessa.

I I < 1 • · 9 106261

Yleisen kaavan (X) mukaista yhdistettä voidaan valmistaa alkaalimetalliatsidin, kuten natriumatsidin, reaktiolla β-fenyyliglysidiinihapon esterin kanssa, jonka yleinen kaava on: 5

O

A «»

Ar COOR3 10 jossa Ar ja R3 ovat samoja kuin edellä.

Reaktio suoritetaan yleensä hydro-orgaanisessa seoksessa, kuten vesi-tetrahydrofuraaniseoksessa reaktio-seoksen kiehumislämpötilassa.

Yleisen kaavan (XI) mukaista esteriä voidaan val-15 mistaa dehydrohalogenoinnilla yhdisteestä, jonka yleinen kaava on: ΛΥ> -

Hai )-\

Ftf R5 ; jossa Ar on sama kuin edellä, Hai esittää halogeeniatomia, ; , 25 mieluiten bromiatomia ja R4 ja R5, jotka ovat samanlaisia • ·· · mmmml tai erilaisia, esittävät 1-4 hiiliatomia sisältävää al- • · . . kyyliradikaalia tai fenyyliradikaalia.

*,* Reaktio suoritetaan yleensä alkaalimetallialkoho- • * * *·' ’ laatin ylimäärän läsnäollessa, joka on mahdollisesti val- 30 mistettu in situ, inertissä orgaanisessa liuottimessa, • · · • *...· kuten tetrahydrofuraanissa lämpötilassa, joka on -80 °C:n ja +25 °C:n välillä.

Yleisen kaavan (XII) mukaista yhdistettä voidaan rt; valmistaa saattamalla yleisen kaavan mukainen aldehydi : • ( I » 10 106261

Ar-CHO (XIII) jossa Ar on sama kuin edellä, reagoimaan halogenidin kanssa, jonka yleinen kaava on: 5 O 0

Ha,\^A.NAQ οσν) M, „ "* " jossa Hai, R4 ja R5 ovat samoja kuin edellä ja joka on sitä ennen anionisoitu.

Reaktio suoritetaan yleensä inertissä orgaanisessa 15 liuottimessa, joka on valittu eettereistä (etyylieetteri) tai alifaattisistä halogenoiduista hiilivedyistä (metylee-nikloridi) , lämpötilassa, joka on -80 °C:n ja +25 °C:n välillä, tertiäärisen amiinin (trietyyliamiinin) ja enoli-soivan aineen (di-n-butyylibooritriflaatin) läsnäollessa.

20 Yleisen kaavan (XIV) mukaista yhdistettä voidaan valmistaa halogenoetikkahappohalogenidin, mieluiten bro-mietikkahappobromidin, reaktiolla vastaavan oksatsolidi-nonin kanssa.

t < r

Protonien ydinmagneettiset resonanssispektrit mi- i : 25 tataan deuteroidussa kloroformissa. Lateraalisen ketjun • * · ^ * * 9 * i·· luonteen mukaisesti atomien numerointi on seuraava: • · • · • · · \v o ·"· i? ' H-4' 11 o' H-3’ ^ O‘ 30 Ar^: ^H-2’ / Υ^Η-δ' 7-\ Boc-N .0 ::: nh/ oh χ R6 R7 « • « · • « • *

Lineaarinen ketju Syklinen ketju 35 $ * « « • < < « • n 106261 Käytetyt lyhenteet ovat seuraavat: s = singletti d = dupletti dd = dupletin dupletti 5 t = tripletti q = kvadrupletti m = rykelmä

Seuraavat esimerkit valaisevat tätä keksintöä.

Esimerkit 1-6 kuvaavat kaavan (Ia) mukaisten yh-10 disteiden valmistusta, muut ovat vertailuesimerkkejä.

Esimerkki 1

Liuosta, jossa on 0,5 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyyli-5S, 2 0-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-tri-kloorietoksi) -7f>, lOS-karbonyylioksi-ll-taksen-lSa-yyli] -3-15 tertbutoksikarbonyyliamino-3-(4-metyyli)fenyyli-2-hydrok- sipropionaattia seoksessa, jossa on 10 cm3 metanolia ja 10 cm3 etikkahappoa, kuumennetaan sekoittaen argonatmos f äärissä, kunnes lämpötila on noin 60 °C, sitten lisätään 1 g sinkkiä jauheena. Sitten reaktioseosta sekoitetaan 30 mi-20 nuutin ajan 60 °C:ssa, jäähdytetään sitten noin 20 °C:n lämpötilaan ja suodatetaan celitellä varustetun lasisint-terin läpi. Sintteri pestään 3 kertaa 10 cm3:llä dikloori-metaania ja suodokset yhdistetään, konsentroidaan sitten alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 4 0 °C:n lämpötilassa.

« i i 25 Jäännökseen lisätään 20 cm3 tislattua vettä ja ki- • · ♦ *** I teytynyt kiinteä aine erotetaan suodattamalla, pestään 4 , , kertaa 5 cm3:llä tislattua vettä ja kuivataan alennetussa • · · *·*·* paineessa (0,27 kPa) 20 °C:ssa 16 tunnin ajan. Näin saa- • · · ’.* * daan 0,25 g valkoista marenkimaista ainetta, joka puhdis- 30 tetaan kromatografisesti halkaisijaltaan 2 cm:n suuruises- ··· . ϊ,,,ί sa pylväässä, joka sisältää 40 g silikageeliä (0,063 - 0,2 ·***: mm) [eluantti: dikloorimetaani-metanoli (97 - 3 tilavuuk- » · . sinä) ] . Fraktiot 5-12 yhdistetään ja konsentroidaan kui- « » viin alennetussa paineessa (0,27 kPa) 40 °C:ssa 16 tunnin 35 ajan. Näin saadaan 0,2 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyy- e · « • · 106261 12 lioksi-5S, 20-epoksi-l, 7β, 10S-trihydroksi-9-okso-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyliamino-3-(4-metyyli)-fenyyli-2-hydroksipropionaattia valkoisessa marenkimaises-sa muodossa, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: 5 - kiertokyky: O]DZ0 = -32° (c=0,l; metanoli) -NMR-spektri (250 MHz; CDClj) δ (ppm): 1,14 (s, 3H: -(1¾ 16 tai 17); 1,24 (s,3H: -(3¾ 16 tai 17); 1,35 (s,9H: -C(CH3)3; 1,7 (s, 1H: -OH 1); 1,77 (s, 3H: -CH3 19); 1,85 (m, 1H:-(CH)-H 6); 1,87 (s, 3H: -0¾ 10 18); 2,26 (m, 2H:-CH2- 14); 2,33 (s, 3H: -000¾) ; 2,4 (s, 3H: CH3-C6H4) ; 2,6 (ddd, 1H, J=6,5, 9,5 ja 15 Hz: - (CH)-H 6); 3,38 (d, 1H, J=5,5 Hz: -OH 2'); 3,92 (d, 1H, J=7 Hz: -H 3); 4,18 (d, 1 H, J=8 Hz: - (CH)-H 20); 4,22 (m, 2H: -H 7 ja -OH 10); 4,33 (d, 1H, J=( Hz: -(CH)-H 20); 4,6 (m, 15 1H: -H 2'); 4,96 (dd, 1H, J=l,5 ja 9,5 Hz: -H 5); 5,22 (s, 1H: -H 10); 5,22 (m, 1H: -H 3'); 5,4 (d, 1H, J=9 Hz: -NHCO-) ; 5,68 (d, 1H, J=7 Hz) -H2) ; 6,2 (t, 1H, J=9 Hz: -H 13); 7,23 (AB, 4H, JAB=8 Hz: CHj-C^) ; 7,5 [t, 2H, J=7,5 Hz: -OCOC6H5(-H 3 ja H 5)]7,62 [tt, 1H, J=1 ja 7,5 2 0 Hz: -OCOC6H5(-H 4)]; 8,12 [d, 2H, J=7,5 Hz: OCOC6H5(-H 2 ja -H 6) 3 .

(2R, 3S) [4-asetoksi-2or-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi)-7β, ΙΟβ-kar- • · · bonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli] -3-tertbutoksikarbonyyli- • · .\.m 25 amino-3- (4-metyyli) fenyyli-2-hydroksipropionaattiavoidaan • · · '1' \ valmistaa seuraavalla tavalla: \ ’ Liuokseen, jossa on 0,45 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a- • · · *·^* bentsoyylioksi-5fi,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2- * trikloorietoksi)-7β, 10fi-karbonyylioksi-ll-taksen-13of-yy- 30 li] -3-amino-2-hydroksi-3- (4-metyyli) fenyylipropionaattia 5 cm3:ssä dikloorimetaania ja jota on pidetty argonatmos- ·***: fäärissä, lisätään 0,037 g natriumvetykarbonaattia, sitten • · · tipottain noin 20 °C:n lämpötilassa liuosta, jossa on **’. 0,108 g di-tert-butyylidikarbonaattia 5 cm3:ssä dikloorime- 35 taania. Saatua liuosta sekoitetaan 24 tuntia noin 20 °C:n • 1 • · « · · • 13 106261 lämpötilassa, sitten lisätään seos, jossa on 15 cm3 tislattua vettä ja 20 cm3 dikloorimetaania. Vesifaasi erotetaan dekantoimalla, sitten uutetaan uudelleen 20 cm3:llä dikloorimetaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan mag-5 nesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 0,5 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyy-li-5S, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietok-si) -7β, 10S-karbonyylioksi-ll-taksen-13o!-yyli] -3-tertbutok-10 sikarbonyyliamino-3- (4-metyyli) fenyyli-2-hydroksipropio- naattia valkoisena marenkimaisena aineena.

(2R, 3S) [4-asetoksi-2of-bentsoyyli-5S, 20-epoksi-l- hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorletoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-amino-2-hydroksi-3-(4-me-15 tyyli)fenyylipropionaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuosta, jossa on 0,6 g (4S,5R) [4-asetoksi-2a-ben-tsoyyli-5β,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis(2,2,2-trikloo-rietoksi)-7β,10fi-karbonyylioksi-ll-taksen-13or-yyli]-3-20 tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-metyyli) fenyyli- 5-oksatsolidinkarboksylaattia 6 cm3:ssä muurahaishappoa, sekoitetaan 4 tuntia noin 20 °C:n lämpötilassa, sitten se konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) • i · <* 4 0 °C:ssa. Jäännökseen lisätään 40 cm tolueenia, sitten 25 saatu liuos konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa "'I (2,7 kPa) 40 °C:ssa. Samaperaatio toistetaan 40 cm3:llä • / tolueenia. Saatu marenkimainen aine liuotetaan 50 cm3:iin • · · _ "·** dikloorimetaania ja saatuun liuokseen lisätään 25 cm3 kyl- ·« Λ • 9 · *.* * lästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta. Vesifaasi 30 erotetaan dekantoimalla ja uutetaan 25 cm3:llä dikloori- • - metaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan mag- ·’**: nesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten ··· - alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40 °C:ssa. Näin saadaan 0,65 g valkoista marenkimaista ainetta, joka puhdistetaan 35 kromatografisesti halkaisijaltaan 2 cm:n suuruisella pyi- « * • · • t « * · 14 106261 väällä, joka sisältää 40 g silikageeliä (0,063 - 0,2 mm) [eluantti: dikloorimetaani-metanoli (98-2 tilavuuksina)], keräämällä 20 cm3:n fraktioita. Fraktiot 5-9 yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 5 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 0,45 g (2R,3S) [4-aset- oksi-2a-bentsoyyli-5fi, 20-epoksi-l-hydroksi-9-oksobis-(2,2,2-trikloorietoksi) -7β, 10S-karbonyylioksi-ll-taksen-13a;-yyli] -3-amino-2-hydroksi-3- (4-metyyli) fenyylipropio-naattia valkoisena marenkimaisena aineena.

10 (4S,5R) [4-asetoksi-2a-bentsoyyli-5S,20-epoksi-l- hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-nyylioksi-11-taksen-13a-yyli]-3 -tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-metyyli) fenyyli-5-oksatsolidinkarbok-sylaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 15 Liuokseen, jossa on 0,4 g (4S,5R) 3-tert-butoksi- karbonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-metyyli) fenyyli-5-oksatsoli-dinkarboksyylihappoa 10 cm3:ssä tolueenia, lisätään 0,247 g N, N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä, 0,675 g4-asetoksi-2a-bentsoyyli-5fi, 20-epoksi-l, 13o,-dihydroksi-9-okso-bis (2,2,2- 20 trikloorietoksi)-7β,ΙΟβ-karbonyylioksi-ll-takseenia ja O, 046 g 4-dimetyyliaminopyridiiniä. Sitten reaktioseosta kuumennetaan sekoittaen 3 tuntia noin 80 °C:n lämpötilas- ···, sa, jäähdytetään sitten noin 20 °C:n lämpötilaan ja lisä-

l I

tään seos, jossa on 20 cm3 dikloorimetaania ja 25 cm3 kyl- i , 25 lästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta. Vesifaasi • · « :·· · erotetaan dekantoimalla, uutetaan sitten taas 15 cm3:llä dikloorimetaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan • · *.*.* magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan *·· V · sitten alennetussa paineessa (2,7 kPa) 50 °C:ssa. Näin 30 saadaan 1,1 g keltaista marenkimaista ainetta, joka puh-distetaan kromatografisesti halkaisijaltaan 2 cm:n suurui- • · · ·'**: sella pylväällä, joka sisältää 40 g silikageeliä (0,063 - • · * 0,2 mm) [eluantti: dikloorimetaani-metanoli (98-2 tila- • · ‘••'l vuuksina) ] , keräämällä 15 cm3:n fraktioita. Fraktiot 3-6 ' ' 35 yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa paineessa (2,7 • « • · • ·· « f * · is 106261 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 0,6 g (4S,5R) [4 - ase toksi -2ο1-bent soyyli -5S, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β,ΙΟβ-karbonyylioksi-ll-tak-sen-13a-yyli] -3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-5 metyyli)fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattia valkoisena marenkimaisena aineena.

4 -aset oksi -2a;-bent soyyli-5β, 20-epoksi-l, 13o;-dihyd- roksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbonyyli- oksi-ll-takseenia voidaan valmistaa EP-patenttijulkaisussa 10 nro 0 336 841 kuvatulla menetelmällä.

(4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-metyyli)fenyyli-5-oksat soiidinkarboksyylihappoa voidaan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 0,54 g (4S,5R) 3-tert-butoksi- 15 karbonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-metyyli) fenyyli-5-oksatso- lidinetyylikarboksylaattia 10 cm3:ssä etanolia, lisätään noin 25 °C:n lämpötilassa liuos, jossa on 0,19 g litium- hydroksidihydraattia 3 cm3:ssä tislattua vettä. Reaktio- seosta sekoitetaan 20 minuuttia noin 25 °C:n lämpötilassa, 20 konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Saatu jäännös liuotetaan 3,5 cm3:iin tislattua vettä, uutetaan sitten kaksi kertaa 1 cm3:llä di-isopropyylioksidia. Vesifaasi tehdään sitten happamaksi noin pH l:een 5 cm3:llä 1 N kloorivetyhapon ve- ,1 , 25 siliuosta, uutetaan sitten 3 kertaa 4 crtrrllä dikloorime- « · « • · · *** 2 taania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magne- * / siumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan sitten • · · *·1·’ kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C.-n läm- ··· ·.· · pötilassa. Näin saadaan 0,43 g (4S,5R)-3-tert-butoksikar- 30 bonyyli-2,2-dimetyyli-4- (4-metyyli) fenyyli-5-oksatsolidin- ·2♦ karboksyylihappoa oranssinvärisenä öljynä.

·3: (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dime tyyli-4- n1 . (4-metyyli)fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia c · voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: i · » · · t i 2 • · 3 f 1 · * « · 16 106261

Liuosta, jossa on 0,63 g (2R,3S) 3-tert-butoksikar-bonyyliamino-2-hydroksi-3-(4-metyyli)fenyylietyylipropio-naattia, 0,2 cm3 2-metoksipropeenia ja 3,4 mg pyridinium-p-tolueenisulfonaattia 18 cm3.-ssä tolueenia, sekoitetaan 2 5 tuntia 30 minuuttia noin 20 °C:ssa. Reaktioseosta kuumennetaan kiehumispisteeseen ja tisle kerätään mittalasiin, kun reaktioseokseen lisätään tipottain liuos, jossa on 1,25 cm3 2-metoksipropeenia 15 cm3:ssä tolueenia, niin että seoksen tilavuus pysyy vakiona. 15 minuutin tislaamisen 10 jälkeen lisätään 3,4 mg pyridinium-p-tolueenisulfonaattia, sitten tislaamista jatketaan 15 minuuttia. Kerätyn tisleen tilavuus on sitten 20 cm3. Reaktioseos jäähdytetään noin 20 °C:seen, sitten lisätään 2 cm3 kyllästettyä natriumvety-karbonaatin vesiliuosta. Vesifaasi dekantoidaan, uutetaan 15 sitten 2 kertaa 5 cm3:llä dikloorimetaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (2,3 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 0,54 g (4S,5R)3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-metyy-20 li)fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia keltaisena öljynä.

(2R,3S)3-tert-butoksi karbonyy1i amino-2 -hydroksi-3 -(4-metyyli)fenyylietyylipropionaattia voidaan valmistaa <-·' seuraavalla tavalla:

I I I

V ' 25 Liuokseen, jossa on 0,8 g (2R,3S) 3-amino-2-hydrok- • · - : si-3-(4-metyyli) fenyylietyylipropionaattia 12 cm :ssä di- *t**: kloorimetaania ja jota on pidetty argonatmosfäärissä, li- :V: sätään 0,33 g natriumvetykarbonaattia, sitten tipottain noin 20 °C:n lämpötilassa liuos, jossa on 0,94 g ditert-30 butyylidikarbonaattia 4 cm3:ssa dikloorimetaania. Saatua ,···. liuosta sekoitetaan 2 tuntia 30 minuuttia noin 20 °C:n lämpötilassa, sitten lisätään 20 cm tislattua vettä. Vesi- faasi erotetaan dekantoimalla, sitten uutetaan uudelleen ,,/ 20 cm3:llä dikloorimetaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, 35 kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsent- * « • · » 106261 roidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40 °C:ssa. Näin saadaan sykloheksaanista kiteyttämisen jälkeen 0,65 g (2R,3S) 3-tert-butoksikarbonyyliamino-2- hydroksi-3-(4-metyyli)fenyylietyylipropionaattia, joka su-5 laa 130 °C:ssa.

(2R,3S) 3-amino-2-hydroksi-3-(4-metyyli)fenyylietyylipropionaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: Liuokseen, jossa on 1,15 g (2R,3S) 3-atsido-2-hyd-roksi-3-(4-metyyli)fenyylietyylipropionaattia 35 cm3:ssä 10 etyyliasetaattia, lisätään 0,115 g 10%:sesti palladiumilla päällystettyä hiilijauhetta. Reaktioseosta sekoitetaan 120 kPa:n vetypaineessa ja noin 22 °C:n lämpötilassa 8 tunnin ajan, sitten se suodatetaan celitellä varustetun lasisint-terin läpi. Sintteri pestään 5 cm3:llä etyyliasetaattia ja 15 suodokset yhdistetään, konsentroidaan sitten alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 0,83 g (2R,3S) 3-amino-3-hydroksi-3-(4-metyyli)fenyylietyylipropionaattia vaaleankeltaisena tahnana.

(2R,3S) 3-atsido-2-hydroksi-3-(4-metyyli)fenyyli-20 etyylipropionaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 2,2 g (2R,3R) 3-(4-metyyli)fe-nyyli-2-oksiranetyylikarboksylaattia 60 cm3:ssä etanolia, ,,, lisätään 1,04 g natriumatsidia ja 0,86 g ammoniumkloridia.

«

Reaktioseosta sekoitetaan pystyjäähdyttäjän alla 5 tuntia ' 25 30 minuuttia, jäähdytetään sitten noin 20 °C:n lämpötilaan c * :.: I ja lisätään seos, jossa on 50 cm3 etyyliasetaattia ja 50 cm3 tislattua vettä. Vesifaasi erotetaan dekantoimalla ja ::: uutetaan uudelleen 50 cm3:llä etyyliasetaattia. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, 30 suodatetaan ja konsentroidaan sitten alennetussa paineessa .···. (2,7 kpa) 40 °C:ssa. Näin saadaan 2,4 g oranssia öljyä, • * ,···. joka puhdistetaan kromatografisesti halkaisijaltaan 2 cm:n 9 . suuruisella pylväällä, joka sisältää 80 g silikageeliä (0,063 - 0,2 mm) [eluantti: sykloheksaani-etyyliasetaatti 35 (90-10 tilavuuksina)], keräämällä 50 cm3:n fraktioita.

i f « t · « · · • · ie 106261

Fraktiot 8-16 yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 1,55 g (2R,3S) 3-atsido-2-hydroksi-3-(4-metyyli)fe-nyyli)etyylipropionaattia oranssina öljynä.

5 3- (4-metyyli) fenyyli-2-oksiranetyylikarboksylaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuokseen, joka on jäähdytetty -75 °C:seen ja jossa on 2,3 cm3 etanolia 40 cm3:ssä tetrahydrofuraania, lisätään pitämällä lämpötila -75 °C:ssa, 25 cm3 1,6M n-butyylili-10 tiumliuosta heksaanissa, sitten tipottain liuos, jossa on 8,36 g (2S,3R) 3-[2-bromi-3-hydroksi-3-(4-metyyli)fenyyli-1-oksopropyyli-(2S,5R)-4-metyyli-5-fenyyli-2-oksatsolidi-nonia 120 cm3:ssä tetrahydrofuraania. Reaktioseosta lämmitetään, kunnes lämpötila on noin 0 °C, sitten sitä pide-15 tään 0 °C:ssa yksi tunti ja jäähdytetään uudelleen noin -75 °C:n lämpötilaan. Pitämällä lämpötila -75 °C:ssa, lisätään sitten liuos, jossa on 5,04 g sitruunahappoa 28 cm3:ssä tetrahydrofuraania. Reaktioseosta kuumennetaan, kunnes lämpötila on noin 15 °C, sitten seosta pidetään 20 15 °C:ssa 1 tunnin ajan ja siihen lisätään seos, jossa on 40 cm3 tislattua vettä ja 200 cm3 dietyylieetteriä. Vesi-faasi erotetaan dekantoimalla ja uutetaan uudelleen 2 kertaa 50 cm3:llä dietyylieetteriä. Orgaaniset faasit yhdis-tetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, « f · 25 konsentroidaan sitten alennetussa paineessa (2,7 kPa) • « : 40 °C:ssa. Näin saadaan 5,3 g oranssinväristä öljyä, jo- ka puhdistetaan kromatografisesti halkaisijaltaan 2 cm:n I/.'’. suuruisella pylväällä, joka sisältää 200 g silikageeliä (0,063 - 0,2 mm) [eluantti: sykloheksaani-etyyliasetaatti 30 (90 - 10 tilavuuksina)], keräämällä 50 cm3:n fraktioita.

.··, Fraktiot 10 - 20 yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa .··, paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saa- daan di-isopropyylioksidista kiteyttämisen jälkeen 2,2 g (2R,3R) 3-(4-metyyli)fenyyli-2-oksiranetyylikarboksylaat-35 tia, joka sulaa 66 °C:ssa.

I I · i « I f · 19 106261 (2S, 3R) -3- [2-bromi-3-hydroksi-3- (4-metyyli) fenyyli-1-oksopropyyli] - (4S,5R) -4-metyyli-5-fenyyli-2-oksatsolidi-nonia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 35,8 g (4S,5R) 3-(2-bromi- 5 1-oksoetyyli)-4-metyyli-5-fenyyli-2-oksatsolidinonia 300 cm3:ssä vedetöntä dietyylieetteriä, lisätään noin 20 °C:ssa 23,4 cm3 trietyyliamiinia, sitten tipottain 135 cm3 IM di-n-butyylibooritriflaattiliuosta dikloorimetaanissa. Reak-tioseos jäähdytetään noin -75 °C:n lämpötilaan, sitten 10 pitämällä lämpötila noin -75 °C:ssa lisätään 10,64 cm3 4-metyylibentsaldehydiä ja reaktioseosta kuumennetaan taas, kunnes lämpötila on noin 20 °C ja sitä pidetään 20 °C:ssa 18 tunnin ajan. Sitten lisätään 100 cm3 kyllästettyä natriumvetysulfaattia ja vesifaasi erotetaan dekan-15 toimalla ja uutetaan 2 kertaa 100 cm3:llä dietyylieetteriä. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40 °C:ssa. Näin saadaan 69 g ruskeaa öljyä, joka puhdistetaan kromatografisesti 20 halkaisijaltaan 5 em:n suuruisella pylväällä, joka sisältää 2000 g silikageeliä (0,063 - 0,2 mm) [eluantti: syklo-heksaani-etyyliasetaatti (70 - 30 tilavuuksina)], kerää-mällä 200 cm3:n fraktioita. Fraktiot 16 - 24 yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 25 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan di-isopropyylioksidista ! kiteyttämisen jälkeen 17 g (2S, 3R)-3-[2-bromi-3-hydroksi- *’**· 3- (4-metyyli) fenyyli-l-oksopropyyli] - (4S, 5R) -4-metyyli-5- • · :.V fenyyli-2-oksatsolidinonia, joka sulaa 139 °C:ssa.

: (4S, 5R) 3- (2-bromi-l-oksoetyyli) -4-metyyli-5-fenyy- 30 li-2-oksatsolidinonia voidaan valmistaa seuraavalla taval- ..*··. la: » · • · · .···. Liuokseen, joka on jäähdytetty noin -75 °C:n lämpö tilaan ja jossa on 106,2 g (4S,5R)-4-metyyli-5-fenyyli-2-<<.' oksat soi idinonia 1080 cm3: ssä vedetöntä tetrahydrof uraania, 35 lisätään pitämällä lämpötila -75 °C:ssa 1,6M n-butyylili- i « iti·· I · 20 1 0 6 2 61 tiumliuosta heksaanissa, sitten tipottain 62,6 cm3 bromi-asetyylibromidia. Reaktioseosta sekoitetaan noin -70 °C:n lämpötilassa 1 tunnin 30 minuutin ajan, sitten se lämmitetään noin -10 °C:n lämpötilaan ja lisätään 600 cm3 kylläs-5 tettyä ammoniumkloridin vesiliuosta. Vesifaasi erotetaan dekantoimalla ja uutetaan uudelleen 500 cm3:llä dietyyli-eetteriä. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) 40 °C:ssa. Näin 10 saadaan 201 g keltaista öljyä, joka puhdistetaan kroma-tografisesti halkaisijaltaan 10 cm:n suuruisella pylväällä, joka sisältää 4000 g silikageeliä (0,063 - 0,2 mm) [eluantti: sykloheksaani-etyyliasetaatti (66-33 tilavuuksina)], keräämällä 500 cm3:n fraktioita. Fraktiot 4-13 15 yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 139,5 g 3-(2-bromi -1 - oksoe tyyl i) - 4 -metyyl i - 5 - f enyyl i - 2 - oksat soi idinonia vaaleankeltaisena öljynä.

Esimerkki 2 20 Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä lähtöaineena (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-1-hydroksi-9-okso-bis(2,2,2 -trikloorletoksi)-7β, 10S-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksi- '··' karbonyyliamino-3- (2-fluori) fenyyli-2-hydroksipropionaat- ' 25 tia, saadaan 0,17 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi- • ·.: · 5β, 20-epoksi-l, 7β, 10fi-trihydroksi-9-okso-ll-taksen-13ar- *ί1” yyli] -3-tert-butoksikarbonyyliamino-3- (2-fluori) fenyyli-2- :Y: hydroksipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena, • · jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: 30 - kiertokyky: [a]D20 = -42° (c=0,58; metanoli) .···. - NMR-spektri (400 MHz; CDCl,) δ (ppm): 1,14 (s, 3H: -¾ 16 tai 17); 1,25 (s,3H: -(¾ 16 •J'1 tai 17); 1,32 (s, 9H: -C(CH3)3); 1,76 (s, 3H: -(¾ 19) ; 1,86 C.!: (m, 1H: - (CH) -H 6); 1,93 (s, 3H: -CH3 18); 2,22 (dd, 1H, 35 J=9 ja 16 Hz: - (CH) -H 14; 2,37 (dd, 1H, J=9 ja 16 Hz: f « f < « i « · < · 4 t 9 « 1 2i 106261 - (CH) -H 14) ; 2,45 (s, 3H: -COCHj) ; 2,6 (m, 1H: - (CH) -H 6) ; 3,35 (s, 1H: -OH 2'); 3,94 (d, 1H, J=7 Hz: -H 3); 4,26 (AB, 2H, Jab=9 Hz:-CH2- 20); 4,28 (dd, 1H, J=7 ja 12 Hz: -H 7); 4,62 (m, 1H: -H 2'); 4,98 (d, 1H, J=9 Hz: -H 5) ; 5 5,23 (s, 1H: -H 10); 5,45 ja 5,58 (d ja d 1H kumpikin, J=10 Hz: -CH-NHCO-); 5,7 (d, 1H, J=7 Hz: -H 2); 6,28 (t, 1H, J=9 Hz: -H 13); 7,06 - 7,4 (m, 4H: F-C^);T,5 [t, 2H, J=8 Hz: OCOC6H5 (-H 3 ja -H 5)]; 7,61 [t, 1H, J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 4)]; 8,13 [d, 2H, J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 2 ja 10 -H 6)].

Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä sopivia valmistusaineita, valmistetaan seuraavat välituotteet : (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-15 hydroksi-9-okso-bis (2,2,2 -trikloorietoksi) -7S, ΙΟβ-karbo- nyylioksi-11 -taksen- 13a-yyli] -3 -1ert-butoksikarbonyyliami-no-3-(2-fluori)fenyyli-2-hydroksipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena.

(2R,3S) [4-asetoksi-2of-bentsoyylioksi-5S, 20-epoksi-l-20 hydroksi-9-okso-bis (2,2,2- trikloorietoksi) -7S, 10S-karbo- nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli] -3-amino-2-hydroksi-3- (2-fluori) fenyylipropionaattia valkoisena marenkimaisen aineena. -(4S,5R)[4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hyd- roksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbonyyli- 25 oksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tertbutoksikarbonyyli-2,2-di- i.i : metyyli-4-(2-fluori) fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattia valkoisena marenkimaisen aineena.

:Y: - (4S,5R) [3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(2- • f ·*·*: fluori) fenyyli-5-oksatsolidin]karboksyylihappoavalkoisina 30 kiteinä, jotka sulavat 164 °C:ssa.

.···. - (4S,5R) [3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(2- • · fluori)fenyyli-5-oksatsolidin]etyylikarboksylaattia kel- c - !' täisenä öljynä.

- (2R,3S) [3-tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-(2- 35 fluori) fenyyli] etyylipropionaattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 99 °C:ssa.

i i I ' < I « 22 106261 - (2R,3S) [3-amino-2-hydroksi-3-(2-fluori)fenyyli]etyyli-propionaattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 73 °C.-ssa.

- (2R,3S) [3-atsido-2-hydroksi-3-(2-fluori)fenyyli]etyyli-propionaattia keltaisena öljynä.

5 - (2R,3R) [3-(2-fluori)fenyyli-2-oksiran]etyylikarboksy- laattia keltaisena öljynä.

(2S,3R)3-[2-bromi-3-hydroksi-3-(2-fluori)fenyyli-l-ok-so]propyyli- (4S, 5R) -4-metyyli-5-fenyyli-2-oksatsolidinonia keltaisena marenkimaisena aineena.

10 Esimerkki 3

Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä lähtöaineena (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5a,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, 10-B-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbo-15 nyyliamino-3-(4-kloori)fenyyli-2-hydroksipropionaattia saadaan 0,35 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi- 5a, 20-epoksi-l,7β,10fi-trihydroksi-9-okso-ll-taksen-13a-yyli]-3-(4-kloori)fenyyli-2-hydroksipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat 20 seuraavat: - kiertokyky: [a]D20 = -27° (c=0,97; metanoli) -NMR-spektri (4 00 MHz; CDCl3) δ (ppm): 1,15 (s, 3H: -¾ 16 tai 17); 1,25 (s,3H: -(¾ 16 tai 17); 1,35 (s, 9H: -C(CH3)3); 1,77 (s, 3H: -¾ 19); 1,9 25 (m, 1H: - (CH)-H 6 ja s, 3H: -¾ 18); 2,3 (d, 2H,J=8,5 Hz : :.: : -¾ 14) ; 2,39 (s, 3H: -COCHj) ; 2,6 (m, 1H: - (CH)-H 6) ; 3,48 (s, 1H: -OH 2’); 3,92 (d, 1H, J=7 Hz: -H 3); 4,24 sV: (dd, 1H/ J=7 ja 12 Hz: -H 7); 4,26 (AB, 2H, JAB=9 Hz: -¾ :T: 20); 4,61 (s, 1H: -H 2·); 4,96 (d, 1H, J=9 Hz:-H 5); 5,24 30 (s, 1H: -H 10); 5,26 (m, 1H: -H 3’); 5,43 (d, 1H, J=9 Hz: .·1·. -NHCO-); 5,68 (d, 1H, J=7 Hz: -H 2); 6,25 (t, 1H, J=8,5Hz: .·♦·. -H 13); 7,35 (m, 4H: Cl-C^) ; 7,5 [t, 2H, J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 3 ja -H 5)]; 7,62 [t, 1H, J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 4)]; 8,10 [d, 2H, J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 2 ja -H 6)].

« f r r I < « < » 23 106261

Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä sopivia lähtöaineita, valmistetaan seuraavat välituotteet: (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2- trikloorletoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-5 nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyliami- no-2-hydroksi-3-(4-kloori)fenyylipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena.

(2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-10 nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli] -3-amino-2-hydroksi-3- (4-klo ori) fenyylipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena .

(4S,5R) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-15 nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyli- 2,2-dimetyyli-4-(4-kloori)fenyyli-5-oksatsolinkarboksy-laattia valkoisena marenginvärisenä aineena.

-(4S,5R)-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-klo-ori)fenyyli-5-oksatsolidinkarboksyylihappoa keltaisena 20 värittömänä öljynä.

-(4S,5R)-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-klo-ori)fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattiakeltaisena ... öljynä.

- (2R,3S) 3-tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-(4- ' 25 kloori) fenyylietyylipropionaatti kermanvärisinä kiteinä, • * : jotka sulavat 117 °C:ssa.

*·'*· - (2R,3S) 3-amino-2-hydroksi-3-(4-kloori) fenyylietyylipro- • · pionaatti ruskeana öljynä.

- (2R,3S) 3-atsido-2-hydroksi-3-(4-kloori) fenyylietyyli- 30 propionaatti keltaisena öljynä.

.···. - (2R,3R) 3-(4-kloori) fenyyli-2-oksiranetyylikarboksylaat- • · · .···. ti keltaisena öljynä.

- (2S,3R) 3- [2-bromi-3-hydroksi-3- (4-kloori) fenyyli-l-ok-sopropyyli]-4-metyyli-5-fenyyli-2-oksatsolidinoni valkoi- 35 sinä kiteinä, jotka sulavat 140 °C:ssa.

« t i · « « i < I · 24 106261

Esimerkki 4

Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä lähtöaineina (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2 -trikloorietoksi) -7β, 10-5 S-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbo- nyyliamino-3- (4-metoksi) fenyyli-2-hydroksipropionaattia, saadaan 0,15 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi,-20-epoksi-l, 7β, 10fi-trihydroksi-9-okso-ll-taksen-13ar-yyli] - 3-tert-butoksikarbonyyliamino-3-(4-metoksi)fenyyli-2-hyd-10 roksipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena, jon ka ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [or]D20 = -32° (c = 0,47; metanoli) - NMR-spektri (400 MHz; CDCl3) δ (ppm): 1,15 (s, 3H: -CH3 16 tai 17); 1,25 (s,3H: -CH3 16 15 tai 17); 1,38 (s, 9H: -C(CH3)3); 1,7 (m, 1H: -OH 1); 1,78 (s, 3H: -CH3 19); 1,88 (m, 1H: - (CH)-H 6 ja s, 3H: -0¾ 18); 2,28 (d, 2H, J=8,5 Hz: -0¾ 14); 2,38 (s, 3H: -000¾) ; 2,6 (m, 1H: - (CH)-H 6); 3,4 (m, 1H: -OH 2'); 3,8 (s, 3H: -C6H4- 00¾) ; 3,92 (d, 1H, J=7 Hz: H 3); 4,2 ja 4,33 (2d, 1H 20 kukin, J=9: Hz: -0¾ 20); 4,25 (m, 1H: -H 7) ; 4,1 - 4,4 (leveä m, 1H: -OH 10); 4,59 (m, 1H: -H 2’);4,95 (d, 1H, J=9 Hz: -H 5); 5,2 ja 5,37 (2m, 1H kukin: -CH-NHCOO-); 5,22 (s, 1H: -H 10); 5,69 (d, 1H, J=7 Hz: -H 2); 6,22 (t, i 1H, J=8,5 Hz: -H 13); 6,92 (d, 2H, J=8 Hz: -C6H4-OCH3 (-H 3 V : 25 ja H 5)]; 7,31 [d, 2H, J=8 Hz: -C,H4-0CH, (-H 2 ja H 6)]; ! 7,45 [t, 2H, J=8 Hz: OCOC6H5 (-H 3 ja H 5)]; 7,62 [t, 1H, •i**i J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 4)]; 8,11 [d, 2H, J=8 Hz: -OCOC6H5 (-H 2 ja -h 6) ] .

• · — — :*·*: Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä 30 sopivia lähtöaineita, valmistetaan seuraavat välituotteet: .···. - (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi, 20-epoksi-l- • · hydroksi-9-okso-bis (2,2,2- trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyliami- • « · no-3- (4-metoksi) fenyyli-2-hydroksipropionaattiavalkoisena 35 marenkimaisena aineena.

• « m « 9 « « « f « • * 25 1 0 6 2 61 (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2 - trikloorietoksi) -7β, 10S-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli] -3-amino-2-hydroksi-3- (4-me-toksi)fenyylipropionaattia valkoisena marenkimaisena ai-5 neena.

(4S,5R) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l- hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7S, ΙΟδ-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13o!-yyli] -3-tert-butoksikarbonyyliami-no-2,2,-dimetyyli-4-(4-metoksi)fenyyli-5-oksatsolidinkar-10 boksylaattia valkoisena marenkimaisena aineena.

- (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-metoksi) fenyyli-5-oksatsolidinkaboksyylihappoa valkoisena marenkimaisena aineena.

- (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-me- 15 toksi)fenyyli-5-oksatsolidinetyylikaboksylaattiakeltaise- na öljynä.

(2R,3S)-3-tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-(4-metoksi)fenyylietyylipropionaattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 135 °C:ssa.

20 - (2R,3S)-3-amino-2-hydroksi-3-(4-metoksi)fenyylietyyli propionaattia keltaisena öljynä.

- (2R,3S) 3-atsido-2-hydroksi-3-(4-metoksi)fenyyli)etyyli-propionaattia keltaisena öljynä.

- ((2R,3R) 3-(4-metoksi) fenyyli-2-oksiranetyylikarboksy- ' 25 laattia keltaisena öljynä.

:.· · - (2S,3R) 3-[2-bromi-3-hydroksi-(4-metoksi) fenyyli-l-ok- « sopropyyli]-(4S,5R)-4-metyyli-5-fenyylioksatsolidinonia :V: valkoisina kiteinä, jotka sulavat 130 °C:ssa.

• «

Esimerkki 5 30 Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä .···. lähtöaineena (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-56; 20- * · epoksi-1-hydroksi- 9-okso-bis(2,2,2-trikloorietoksi)-• 7S,10fi>-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksi- karbonyyliamino-3- (4-fluori) fenyyli-2-hydroksipropionaat-35 tia, saadaan 0,086 g (2R,3S) 4-asetoksi-2o;-bentsoyylioksi- • • · I M « « 26 1 0 6 2 61 5β, 20-epoksi-l,7β,10fi-trihydroksi-9-okso-ll-taksen-13a!-yyli] -3-tert-butoksikarbonyyliamino-3- (4-fluori) fenyyli-2-hydroksipropionaattia valkoisena raarenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: 5 - kiertokyky: [a]020 = -35° (c=0,49; metanoli) - NMR-spektri (250 MHz; CDCl3) δ (ppm): 1,14 (s, 3H: -CH3 16 tai 17); 1,25 (s,3H: -CH3 16 tai 17); 1,35 (s, 9H: -C(CH3)3); 1,7 (m, 1H: -OH 1); 1,77 (s, 3H: -CH3 19); 1,87 (m, 1H: - (CH)-H 6); 1,87 (s, 3H: 10 -CH3 18); 2,3 (d, 2H, J=9 Hz: -C-H2 14); 2,36 (s, 3H: -COCH3J ; 2,6 (m, 1H: - (CH)-H 6); 3,43 (m, 1H: -OH 2'); 3,93 (d, 1H, J=7 Hz: -H 3); 4,2 ja 4,33 (AB, 2H, JA.B=8 Hz: -CH2 20); 4,23 (m, 1H: -H 7) ; 4,6 (m, 1H : -H 2 ' ) ; 4,96 (dd, 1H, J=2 ja 10,5 Hz: -H 5); 5,22 (s, 1H : -H 10); 5,25 15 (m, 1H: -H 3'); 5,42 (d, 1H, J=10 Hz: -CH-NHCO-); 5,7 (dd, 1H, J=7 Hz: -H 2); 6,24 (t, 1H, J=9 Hz: -H 13); 7,09 [t, 2H, J=8,5 Hz: F-C6H4 (-H 3 ja H 5)]; 7,38 [dd, 2H, J=8,5 Hz: F-C6H4 (-H 2 ja -H 6)]; 7,5 [t, 2H,J=8,5 Hz: -OCOC6H5 (-H 3 ja -H 5)]; 7,62 [t, 1H, J=8,5 Hz: -OCOC6H5 (-H 4)1; 20 8,1 [d, 2H, J=8,5 Hz: -OCOC6H5 (-H 2 ja -H 6)].

Tekemällä kuten esimerkissä 1, mutta käyttämällä sopivia valmistusaineita, valmistetaan seuraavat välituotteet: *«··' - (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi,20-epoksi-l- • · · 25 hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi)-7β, ΙΟβ-karbo- • · ·.: · nyylioksi-ll-taksen-13o!-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyliami- ,:··: no-3-(4-fluori)fenyyli-2-hydroksipropionaattia valkoisena marenkimaisena aineena, - (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5B, 20-epoksi-l- 30 hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo- ,···, nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli3 -3-amino-2-hydroksi-3 - (4- • · !!! fluori) fenyylipropionaattia valkoisena marenkimaisena ai- neena, • » · - (4S,5R) [4-asetoksi-2α-bentsoyylioksi-5β, 20-epoksi-l- ·:··'. 35 hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo- • * « · · * 27 106261 nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4 (4-fluori) fenyyli-5-oksatsolidinkarboksy-laattia valkoisena marenkimaisena aineena, - (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-flu- 5 ori)fenyyli-5-oksatsolidinkarboksyylihappoa keltaisena öljynä, - (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-(4-fluori )fenyyli-5-oksat solidinetyylikarboksylaat tiakeltai sena öljynä, 10 - (2R,3S) -3-tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-(4- f luori) fenyylietyylipropionaattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 116 °C:ssa, - (2R,3S) 3-amino-2-hydroksi-3-(4-fluori)fenyylietyylipropionaattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 105 °C:ssa, 15 - (2R,3S) 3-atsido-2-hydroksi-3-(4-fluori)fenyylietyyli propionaattia keltaisena öljynä, - (2R,3S) 3-(4-fluori)fenyyli-2-oksiranetyylikarboksylaat-tia vaaleankeltaisina kiteinä, jotka sulavat 40 °C:ssa, - (4S,5R) 3-[2-bromi-3-hydroksi-3-(4-fluori)fenyyli-l-ok- 20 sopropyyli]-4-metyyli-5-fenyyli-2-oksatsolidinoniakeltai- sena marenkimaisena aineena.

Esimerkki 6

Liuokseen, jossa on 5,52 g (4S,5R) 3-tert-butoksi-karbonyyli-2,2-dimetyyli-4 - f enyyli-5-oksatsolidinkarbok-‘ 25 syylihappoa 350 cm3:ssä tolueenia, lisätään 3,55 g N,N1- • · : disykloheksyylikarbodi-imidiä. Liuosta sekoitetaan 10 mi- « nuuttia noin 20 °C:n lämpötilassa, sitten lisätään 3 g :V: 4,10S-diasetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l,I3a-di- ·’*; hydroksi-9-okso-7S-trietyylisilyylioksi-ll-takseenia [vai- f 30 mistettu J-N. Denisin et ai. mukaisella menetelmällä, J.

,···, Am. Chem. Soc. , 110. 5917 (1988)] ja 0,52 g 4-dimetyyli- • · aminopyridiiniä. Reaktioseosta kuumennetaan sitten 2 tun- t ' tia noin 80 °C:n lämpötilassa, kun reaktioseos on jäähdy-

I f I

tetty noin 20 °C:n lämpötilaan, lisätään 250 cm3 natrium- * 35 vetykarbonaatin kyllästettyä vesiliuosta. Vesifaasi dekan- « • · > * · a « 28 106261 toidaan, uutetaan sitten 2 kertaa 200 cm3:llä dikloorime-taania. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan magnesium-sulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 30 °C:n lämpö-5 tilassa. Näin saadaan 10,8 g oranssinväristä öljyä, joka puhdistetaan flash-kromatografiällä (eluantti: dikloorime-taani-metanoli [99,5 - 0,5 tilavuuksina]). Kun fraktiot 60 - 73 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 3,7 g (4,10S-di-10 asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso- 7S-trietyylisilyylioksi-ll-taksen-13a-yyli)-3-tert-butok-sikarbonyyl i -2,2 -dimetyyli -4 - f enyyl i - 5-oksat soiidinkarbok-sylaattia keltaisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: 15 - kiertokyky: [a]020 = -45,3,° (c=0,5; metanoli) - NMR-spektri (400 MHz; siirtymät ppm:inä) 7,35 ppm m, 5H, C6H5 (ketju) 6.5 ppms, 1H, H-10 6.25 ppm t, 1H, H-13 20 5,15 ppm m, 1H,CHN (H-4') 4.5 ppmm, 2H, CHO (H-5')+H-7 4,15 ja 4,25 ppm 2d, 2H, H-20 1.25 ppm s, 15H, C(CH3)3 + takseenirenkaan 2 CH3 0,98 ppm t, 9H, CH3CSi ' 25 0,6 ppmq, 6H, CH2Si i « ; 3 g (4S,5R) (4,106-diasetoksi-2a-bentsoyylioksi- *?**! 5β, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-7S-trietyylisilyylioksi-ll- :V: taksen-13a-yyli) -3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4- ♦*·’; fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattia lisätään 60 cm3:iin 9 30 0,IN kaasumaisen kloorivetyhapon etanoliliuosta, jota on ,···, pidetty 0 °C:ssa. Reaktioseosta sekoitetaan 48 tuntia • · !ö 0 °C:ssa, sitten lisätään 250 cm3 dikloorimetaania, sitten t · • ^ seos, jossa on 30 cm natriumvetykarbonaatin vesiliuosta ja • · t _ 30 cm vettä. Orgaaninen faasi dekantoidaan, kuivataan mag- '!"! 35 nesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten « « • · * · « « • · » i · i t 29 1 0 6 2 61 kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 30 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 2,8 g valkoista marenkimaista ainetta, joka puhdistetaan flash-kromatografiällä (eluantti: dikloorimetaani-metanoli [99-1] tilavuuksina]). Kun frak-5 tiot 15 - 30 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) ja noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 2,33 g (4S, 5R) (4,10S-diasetoksi-2a-bentsoyylioksi-513,2 0-epoksi- 1,7S-dihydroksi-9-okso-11-taksen- 13oi-yyli) -3 -1ert-butoksi karbonyyli-2 , 2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarbok-10 sylaattia keltaisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [or]D20 = -65,1,° (c=l; metanoli) - NMR-spektri (250 MHz; siirtymät ppm:inä) 7,35 ppm m, 5H, C6H5 (ketju) 15 6,3 ppm m, 2H, H-10 ja H-13 5.1 ppm m, 1H, CHN (H-4') 4,5 ppm d, 1H, CHO (H-51) 4,45 ppm m, 1H, H-7 4.1 ja 4,3 ppm 2d, 2H, H-20 20 1,05 - 1,15 ppm m, 9H, C(CH3)3

Liuokseen, jossa on 2,3 g (4S,5R) (4,10S-diasetok- si-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l,7E-dihydroksi-9-okso- 11-taksen-13a-yyli)-3 -tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyy- : li-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattia 35 cm3-.ssä py- j':‘; 25 ridiiniä, lisätään 10 minuutin aikana tipottain 0,4 cm3 : 2,2,2-trikloorietyylikloroformiaattia. Reaktioseosta kuu- * · · · mennetaan 80 °C:ssa 1 tunnin ajan, sitten lisätään 0,36 a · cm3 2,2,2-trikloorietyylikloroformiaattia. Reaktioseosta i · · pidetään 4 tuntia 80 °C:ssa, sitten lisätään 0,36 cm3 aa· • 30 2,2,2-trikloorietyylikloroformiaattia ja pidetään lämpö tila 80 °C:ssa 30 minuutin ajan. Kun reaktioseos on jääh-*···1 tynyt noin 20 °C:n lämpötilaan, lisätään 175 cm3 vettä, I I « 175 cm3 kyllästettyä natriumbetykarbonaatin vesiliuosta ja 150 cm3 dikloorimetaania. Vesifaasi dekantoidaan, uutetaan * 1 1 » 1 35 sitten 2 kertaa 25 cm :llä dikloorimetaania. Yhdistetyt « « «

« a I A I

• · 30 1 0 6 2 61 orgaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten alennetussa paineessa (0,13 kPa) noin 30 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 2,8 g valkoista marenkimaista ainetta, joka puhdistetaan flash-5 kromatografiällä (eluantti: dikloorimetaani-metanoli [99-1 tilavuuksina]). Kun fraktiot 28 - 42 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 2,57 g (4S,5R) (4,10iS-diasetoksi-2ai-bent-soyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-2,2,2-trikloo-10 rietoksi-7S-karbonyylioksi-ll-taksen-13oi-yyli)-3-tert-bu- toksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkar-boksylaattia valkoisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [ar]oZ0 = -55,° (c=0,5; metanoli) 15 - NMR-spektri (400 MHz; siirtymät ppm:inä) 7,35 ppm m, 5H, C6H5 (ketju) 6.4 ppm s, 1H, H-10 6,25 ppm t, 1H, H-13 5,6 ppm dd, 1H, H-7 20 5,1 ppm m, 1H, CHN(H-4') 5.05 ja 4,65 ppm 2d, 2H, CH2CC13 4.5 ppm d, 1H, CHO (H-5’) 4,1 ja 4,3 ppm 2d, 2H, H-20 1.05 - 1,15 ppm m, 9H, C(CH3)3 e f » 25 Liuosta, jossa on 3,2 g (4S,5R) [4,10S-diasetoksi- : 2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-2,2,2- • · · trikloorietoksi-7S-karbonyylioksi-ll-taksen-13o'-yyli) ] -3- • · . . tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatso- • · · lidinkarboksylaattia 32 cm3:ssä muurahaishappoa, sekoite- • · · *·' ’ 30 taan 4,5 tuntia noin 20 °C:n lämpötilassa. Sitten reaktio- seos konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (0,13 • « m :...· kPa) noin 30 °C:n lämpötilassa. Saatu jäännös liuotetaan 150 cm3:iin dikloorimetaania, tämä liuos pestään 50 cm3:llä .«·. kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta, kuivataan 35 magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan • · t · « · · 31 106261 kuiviin alennetussa paineessa (0,13 kPa) noin 30 °C-.n lämpötilassa. Näin saadaan 2,74 g kermanväristä marenkimaista ainetta, joka puhdistetaan flash-kromatografiällä (eluant-ti: dikloorimetaani-metanoii [99-1 tilavuuksina]). Kun 5 fraktiot 13 - 25 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 2,17 g (2R,3S) [4,106-diasetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi- I- hydroksi-9-okso-2,2,2-trikloorietoksi-7S-karbonyylioksi- II- taksen-13o!-yyli) ] -3-amino-2-hydroksi-3-fenyylipropio-10 naattia valkoisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [a]D20 <= -60,2° (c=0,5; metanoli) - NMR-spektri (4 0 0 MHz; siirtymät ppm-.inä) 7.4 - 7,2 5 ppm m, 5H, C6H5 (ketju) 15 6,4 ppm s, 1H, H-10 6,15 ppm t, 1H, H-13 5,55 ppm dd, 1H, H-7 5.05 ja 4,65 ppm 2d, 2H, CH2CC13 4,35 ppm m, 2H, H-2' ja H-3' 20 4,15 ja 4,3 ppm 2d, 2H, H-20 (2R,3S) [4,10fi-diasetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20- epoksi-l-hydroksi-9-okso-2,2,2-trikloorietoksi-7S-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli) ] -3-amino-2-hydroksi-3-fenyy-lipropionaattia voidaan valmistaa myös seuraavalla taval-25 la:

Liuosta, jossa on 0,1 g (4S,5R) [4, ΙΟβ-diasetoksi- • · * 2a-bentsoyylioksi-5fi, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-2,2,2- 9 9 . . trikloorietoksi-7S-karbonyylioksi-ll-taksen-13cx-yyli) ] -3- * · · ’;[·* tert-butoksikarbonyyli-2,2 - dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatso- • · * ** * 30 lidinkarboksylaattia seoksessa, jossa on 1,4 cm 3,4 N kaa sumaisen kloorivetyhapon etanoliliuosta ja 0,6 cm3 dikloo- • · t :...· rimetaania, sekoitetaan 7 tuntia noin 20 °C:n lämpötilas- e c f 7 •'"S sa. Sitten reaktioseokseen lisätään 2 cm dikloorimetaania, ,···. 1 cm3 vettä ja 1 cm3 kyllästettyä natriumvetykarbonaatin r « 35 vesiliuosta. Orgaaninen faasi dekantoidaan, kuivataan mag- • · i I < « « 32 106261 nesiumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (0,13 kPa) noin 30 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 0,1 g keltaista marenkimaista ainetta, joka puhdistetaan flash-kromatografiällä (eluantti: 5 dikloorimetaani-metanoii [98-2 tilavuuksina]). Kun frak tiot 14 - 20 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 0,023 g (2R,3S) [4,10S-diasetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi- l-hydroksi-9-okso-2,2,2-trikloorietoksi-7£-karbonyylioksi-10 ll-taksen-13a-yyli) ] -3-amino-2-hydroksi-3-fenyylipropio-naattia valkoisena marenkimaisena aineena.

Liuokseen, jossa sekoitetaan 2,1 g (2R,3S) [4,10β- diasetoksi-2α-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-1-hydroksi-9-okso-2,2,2-trikloorietoksi-76-karbonyylioksi-ll-taksen-15 13a-yyli)]- 3-amino-2-hydroksi-3 - fenyylipropionaattia 52,5 cm3:ssä etyyliasetaattia, lisätään seos, jossa on 140 cm3 kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta ja 140 cm3 vettä. Sitten lisätään 2 minuutin aikana 0,277 cm3 bentsoyylikloridia. Reaktioseosta sekoitetaan 15 minuuttia 20 noin 24 °C:n lämpötilassa, vesifaasi dekantoidaan, uutetaan sitten 3 kertaa 50 cm3:llä dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa ·", paineessa (2,7 kPa) noin 30 °C:n lämpötilassa. Näin saa- < i r 25 daan 2,3 g kermanväristä marenkimaista ainetta, joka puh-

t ( I

distetaan f lash-kromatograf iällä (eluantti: dikloorimetaa- *” * ni-metanoli [99-1 tilavuuksina]). Kun fraktiot 31 - 38 on ] ’ konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin • · · ’·*’ 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 2,03 g (2R,3S) [4,10B-di- • · · ' 30 asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-1-hydroksi-9-oks- 2,2,2-trikloorietoksi-7S-karbonyylioksi-11-taksen-13 a-: yyli) ] -3-bentsoyyliamino-2-hydroksi-3-fenyylipropionaattia • valkoisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet « I · ovat seuraavat: ·”. 35 - kiertokyky: [a]DZ0 = -41,9° (c=0,5; metanoli) - NMR-spektri (250 MHz; siirtymät ppm:inä) t · « · • «» • « 8,15 ppm d, 2H ] 33 1 0 6 2 61 7.8 ppm d, 2H ] 2 x C6H5CO + C6H5 (ketju) 7.6 ppm t, 1H ] 7.6 - 7,3 ppm m, 10H ]

5 7,05 ppm d, 1H, NH

6,35 ppm s, 1H, H-10 6.2 ppm t, 1H, H-13 5.8 ppm dd, 1H, H-3' 5,55 ppm dd, 1H, H-7 10 5,05 ja 4,62 ppm 2d, 2H, CH2CC13 4.8 ppm d, 1H, H-2' 4.2 ja 4,35 ppm 2d, 2H, H-20 (2R, 3S) [4,10E-diasetoksi-2or-bentsoyylioksi-5S, 20- epoksi-l-hydroksi-9-okso-2,2,2-trikloorietoksi-7S-karbo-15 nyylioksi-ll-taksen-13o!-yyli) I -3-bentsoyyliamino-2-hydrok-si-3-fenyylipropionaatti voidaan muuttaa taksoliksi korvaamalla 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliryhmä vetyatomilla sinkin avulla etikkahapon läsnäollessa EP-patenttijulkai-sussa nro 0 253 738 kuvatun menetelmän mukaisesti.

20 (4S,5R) tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fe- nyyli-5-oksatsolidinkarboksyylihappoa voidaan valmistaa seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa sekoitetaan 12,8 g (4S,5R) tert-butoksikarbonyyli-2, 2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidin-25 etyylikarboksylaattia 200 cm3:ssä etanolia, lisätään 10 : minuutin aikana liuos, jossa on 4,62 g litiumhydroksidi- hydraattia 80 cm3:ssä vettä. 10 minuutin ylimääräisen se- * · . . koittamisen jälkeen reaktioseos konsentroidaan kuiviin • · * « « * M alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa.

• · · ’·* ' 30 Saatu jäännös liuotetaan 70 cm3: iin vettä, uutetaan sitten 3 kertaa 20 cm3:llä di-isopropyylioksidia. Vesifaasi teh- • · * dään sitten happamaksi noin pH 2,6:een lisäämällä noin » · · - 100 cm3 IN kloorivetyhapon vesiliuosta, uutetaan sitten 3 kertaa 50 cm :llä dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset 35 faasit kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan, • · « • · ·

• H

• · 34 106261 konsentroidaan sitten kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 11,3 g (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli- 5-oksatsolidinkarboksyylihappoa keltaisena öljynä, jonka 5 ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [ce]D20 = -3,3° (c=0,8; CHC13) - NMR-spektri (250 MHz; siirtymät ppm:inä) 7,4 ppm m, 5H, C6H5

5.2 ppm m, 1H, CHN

10 4,55 ppm d, 1H, CHO

1,85 ppm s, 3H, C-CHj 1,75 ppm s, 3H, C-CH3 1.2 ppm m, 9H, C(CH3)3 (4S,5R) tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fe-15 nyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia voidaan valmis taa seuraavalla tavalla:

Liuosta, jossa on 11,7 g (2R,3S) tert-butoksikar-bonyyl iamino-2 -hydroksi -3 - f enyyl ie tyyl ipropionaatt ia, 3,6 cm3 2-metoksipropeenia ja 0,06 g p-tolueenisulfonihap-2 0 poa 12 0 cm3:ssä tolueenia, sekoitetaan 1 tunnin ajan noin 20 °C:n lämpötilassa. Reaktioseos kiehautetaan, lisätään sitten 0,06 g p-tolueenisulfonihappoa. Tisle kerätään mittalasiin, kun reaktioseokseen lisätään tipottain liuos, t‘"; jossa on 18 cm3 2-metoksipropeenia 82 cm3:ssä tolueenia, I I < 25 niin että reaktioseoksen tilavuus pysyy vakiona. 1 tunnin : ja 20 minuutin tislaamisen jälkeen lisätään 0,06 g p-to- • i lueenisulfonihappoa, sitten tislaamista jatketaan 10 mi-

• · T

, . nuuttia: kerätyn tisleen tilavuus on silloin 100 cm . Reak- • · · tioseos jäähdytetään noin 20 °C:seen, sitten lisätään 25 '·1 ' 30 cm kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta. Vesi- faasi dekantoidaan, uutetaan sitten 2 kertaa 10 cm3:llä di- ··· kloorimetaania: yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan ' t>: magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan /··. kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n läm- "\ 35 pötilassa. Näin saadaan 20,8 g keltaista öljyä, joka puh- « « • · • · « · · » 35 106261 distetaan kromatografisesti 630 g:lla silikageeliä (pylvään halkaisija: 5,5 cm, eluantti: sykloheksaani-etyyliasetaatti [70-30 tilavuuksina], 100 cm3:n fraktiot). Kun fraktiot 3 - 9 on konsentroitu kuiviin alennetussa pai-5 neessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 13 g (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli- 5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia keltaisena öljynä, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [a]D20 = -7,3° (c-1; CHC13) 10 - NMR-spektri (250 MHz; siirtymät ppmrinä) 7.3 ppm m, 5H, C6H5

5,05 ppm m, 1H, CHN

4,55 ppm d, 1H, CHO

4,25 ppm q, 2H, 0-CH2- 15 1,8 ppm s, 3H, C-CH3 1,7 ppm s, 3H, C-CH3 1.3 ppm t, 3H, 0-C-CH3 1,1 ppm m, 9H C(CH3)3 (2R,3S) tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-20 fenyylietyylipropionaattia voidaan valmistaa seuraavalla menetelmällä:

Liuokseen, jossa sekoitetaan 16 g (2R,3S) 3-amino-2-hydroksi-3-fenyylietyylipropionaattia 160 cm3:ssä di-kloorimetaania, lisätään 7,1 g natriumvetykarbonaattia, , 25 sitten 40 minuutin aikana kaadetaan liuos, jossa on 22,1 g , <. t di-tert-butyylidikarbonaattia 40 cm3:ssä dikloorimetaania.

• · ·

Reaktioseosta sekoitetaan 3,25 tuntia noin 20 °C:n lämpö- |. tilassa, sitten lisätään 150 cm3 vettä. Orgaaninen faasi *·’·1 dekantoidaan, vesifaasi uutetaan 50 cm :llä dikloorimetaa- • · · *.1 1 30 nia, sitten yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan magne siumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan kui- • · · viin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 30 °C:n lämpö- ‘ tilassa. Saatu jäännös hienonnetaan 50 cm3:ssä isopropyyli- eetteriä; saatu kiinteä aine suodatetaan, kuivataan sitten • · 35 alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 20 °C:n lämpötilassa.

9 • · · • M « s6 106261 Näin saadaan 11,9 g (2R,3S) tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-fenyylietyylipropionaattia valkoisena jauheena, joka sulaa 124 °C:ssa ja jonka kiertokyky [or]D20 = 6,3° (c=l, CHClj) .

5 (2R,3S) 3-amino-2-hydroksi-3-fenyylietyylipropio- naattia voidaan valmistaa H. Hönigin et ai. kuvaaman menetelmän mukaisesti, Tetrahedron, 467, s. 3841 (1990).

Esimerkki 7

Tekemällä esimerkissä 6 kuvatulle tavalle analogi-10 sesti, mutta käyttämällä lähtöaineina 10 g (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidin-karboksyylihappoa ja 12,6 g 4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5β, 20-epoksi-l, 13or-dihydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloori-etoksi)-7β,ΐθβ-karbonyylioksi-ll-takseenia, saadaan flash-15 kromatografiapuhdistuksen jälkeen (eluantti: dikloorime- taani-metanoli [98-2 tilavuuksina] ja kun fraktiot 22-39 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, 14 g (4S,5R) [4-asetoksi-2oi- bentsoyylioksi-5fi, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-20 trikloorietoksi)-7β, 10fi-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yy- li]-3-ter-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-ok-satsolidinkarboksylaattia valkoisena marenkimaisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - kiertokyky: [a]D20 = -37,2° (c=l; metanoli)

< I I

25 - NMR-spektri (400 MHz; siirtymät ppmrinä) : 7,4 -7,2 ppm m, 5H, C6H5 (ketju) *”^5 6,25 ppm t, 1H, H-13 , , 6,2 ppm s, 1H, H-10 • · · *·/,* 5,55 ppm dd, 1H, H-7 '' 30 5,1 ppm m, 1H, CHN(H-4') 4,9 ja 4,6 ppm 2d, 2H, CH2CC13 7,78 ppm s, 2H, CH2CCl3 4,45 ppm d, 1H, CHO (H-5') 4,1 ja 4,28 ppm 2d, 2H, H-20 i * "'Λ 35 1,1 ppm m, 9H, C(CH3)3 • · % • * • « • « · « • · 37 106261 4-asetoksi-2or-bentsoyylioksi-5S, 20-epoksi-l, 13a-di-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-nyylioksi-ll-takseenia voidaan valmistaa EP-patentissa nro 0 253 738 kuvatulla menetelmällä.

5 Esimerkki 8

Tekemällä esimerkissä 6 kuvatulle tavalle analogisesti, mutta käyttämällä lähtöaineena 14 g (4S,5R) [4-ase- toksi-2a-bent soyy1ioks i- 5 β,2 0 -epoks i-1-hydroks i- 9 -okso -bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbonyylioksi-ll-tak-10 sen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattia, saadaan flash-kro-matografiapuhdistuksen jälkeen (eluantti: dikloorimetaani-metanoli [95-5 tilavuuksina] ja kun fraktiot 7 ja 8 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 15 40 °C:n lämpötilassa, 6,3 g (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentso- yylioksi-5B, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbonyylioksi -11-taksen-13or-yyli] -3-ami-no-2-hydroksi-3-fenyylipropionaattia valkoisena marenki-maisena aineena, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: 2 0 - kiertokyky: [a] Dzo = -39,7° (c=l; metanoli) - NMR-spektri (400 MHz; siirtymät ppm:inä) 7,45 -7,3 ppm m, 5H, C6H5 (ketju) 6,3 ppm s, 1H, H-10 ", 6,22 ppm t, 1H, H-13 25 5,6 ppm dd, 1H, H-7 4,95 ja 4,65 ppm 2d, 2H, CH,CC1, ··1 ; 4,8 ppm s, 2H, CH2CC13 4,40 ppm m, 3H, H-2 ' + H-3' + H-20 • · 4,2 ppm d, 1H, H-20 M· V ; 30 (2R,3S)[4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi,20-epoksi- l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-amino-2-hydroksi-3-fenyy- • · « - lipropionaatti muutetaan (2R,3S) [4-asetoksi-2a-bentsoyy-

( f I

lioksi-5fi, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloori- • « '··’ 35 etoksi) -7β, 10β-karbonyylioksi-ll-taksen-13α-yyli] -3-tert- · • · · « « · 38 106261 butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi-3-fenyylipropionaatiksi saattamalla se reagoimaan ditert-butyylidikarbonaatin kanssa epäorgaanisen tai orgaanisen emäksen läsnä ollessa.

(2R,3S)[4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-5 l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi)-7β, ΙΟβ-karbo-nyylioksi-ll-taksen-13oi-yyli] -3-tert-butoksikarbonyyliami-no-2-hydroksi-3-fenyylipropionaatti muutetaan (2R,3S) [4- asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5fi, 20-epoksi-l, 7β, ΙΟβ-trihyd-roksi-9-okso-ll-taksen-13oi-yyli] -3-tert-butoksikarbonyyli-10 amino-2-hydroksi-3-fenyylipropionaatiksi korvaamalla 2,2, - 2 -1rikloorietoksikarbonyyliryhmät vetyatomilla sinkin avulla etikkahapon läsnäollessa EP-patenttijulkaisussa nro 0 253 738 kuvatun menetelmän mukaisesti.

Esimerkki 9 15 Tekemällä esimerkissä 6 kuvatulle tavalle analogi sesti, mutta käyttämällä lähtöaineena 0,54 g (4SR,5RS) 3 -1 ert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4 - fenyyli-5-oksat-solidinkarboksyylihappoa ja 0,47 g 4-asetoksi-2a-bentsoyy-lioksi-5β, 10-epoksi-l, 13a-dihydroksi-9-okso-bis (2,2,2-tri- 20 kloorietoksi)-7β,ΙΟβ-karbonyylioksi-ll-takseenia, saadaan flash-kromatografiapuhdistuksen jälkeen (eluantti: dikloo-rimetaani-metanoli [99,5-0,5 tilavuuksina] ja kun fraktiot 9 ja 11 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 “·, kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, 0,5 g (4S,5R) 4-asetoksi- 25 2o!-bentsoyylioksi-5ar, 20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis- . (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbonyylioksi-11 -taksen- * t · ··· ' 13o'-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyy- li-5-oksatsolidinkarboksylaattia valkoisena marenkimaisena • · · aineena, jonka ominaispiirteet ovat identtiset esimerkissä ·»· V · 30 7 saadun yhdisteen kanssa.

(4SR,5RS)3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-;***: fenyyli-5-oksatsolidinkarboksyylihappoa voidaan valmistaa esimerkissä 6 kuvatuissa olosuhteissa valmistettaessa (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli- c < 35 5-oksatsolidinkarboksyylihappoa.

(««Il « I

< f I I « · 39 1 0 6 2 61

Siten 5 g:sta (4SR,5RS) 3-tert-butoksikarbonyyli-2;2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsoiidinetyylikarboksylaat-tia saadaan 4,54 g (4SR,5RS) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4 -fenyyli- 5-oksatsoiidinkarboksyylihappoa ki in-5 teänä valkoisena aineena, joka sulaa 110 °C:ssa ja jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - NMR-spektri (250 MHz; siirtymät ppm-.inä) 7,4 ppm m, 5H, C6Hg

5.2 ppm m, 1H, CHN

10 4,55 ppm d, 1H, CHO

1,85 ppm s, 3H, C-CH3 1,75 ppm s, 3H, C-CH3 1.2 ppm m, 9H C(CH3)3 (4SR,5RS)3 -tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-15 fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia voidaan val mistaa seuraavalla tavalla:

Liuosta, jossa on 0,42 g (2RS,3SR)- 3-tert-butok-sikarbonyyliamino-2-hydroksi-3 -fenyylietyylipropionaattia, 1 cm3 2,2-dimetoksipropaania ja 0,01 g p-tolueenisulfoni-20 happoa 10 cm3:ssä tolueenia, pidetään kiehumispisteessä 15 minuutin ajan; otetaan talteen 5 cm3 tislettä. Sitten lisätään 5 cm3 tolueenia ja 1 cm3 2,2-dimetoksipropaania, tislataan sitten uudelleen 5 cm3 tislettä 15 minuutin ajan. Tämä toimenpide toistetaan 2 kertaa. Reaktioseos jäähdyte-25 tään noin 20 °C:n lämpötilaan, sitten lisätään 20 cm3 kyl-*'1, lästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta. Vesifaasi dekan- ··· \ toidaan, uutetaan sitten 2 0 cm :llä dikloorimetaania; yh- ' ' distetyt orgaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatin • · ·.·.1 päällä, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa • « · V ’ 30 paineessa (2,7 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saa daan 0,42 g keltaista öljyä, joka puhdistetaan kromatogra-fisesti 15 g:11a silikageeliä (pylvään halkaisija: 1,5 cm, rrr • eluantti: dikloorimetaani; 10 cm :n fraktiot). Kun fraktiot 6 - 13 on konsentroitu kuiviin alennetussa paineessa (2,7 ’"j 35 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa, saadaan 0,2 g (4SR,5RS)-3- < · 4 · 4 · 4 4 · 4 f 40 1 0 6 2 61 tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatso-lidinetyylikarboksylaattia keltaisena öljynä, jonka ominaispiirteet ovat seuraavat: - NMR-spektri (250 MHz; siirtymät ppm:inä) 5 7,3 ppm m, 5H, C6H5

5.05 ppm m, 1H, CHN

4,45 ppm d, 1H, CHO

4,25 ppm q, 2H, OCHz- 1,8 ppm s, 3H, C-CHj 10 1,7 ppm s, 3H, C-CH3 1,3 ppm t, 3H, 0-C-CH3 1,1 ppm m, 9H C(CH3)3 (2RS, 3SR) -3-tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi- 3-fenyylietyylipropionaattia voidaan valmistaa esimerkissä 15 6 kuvatun menetelmän mukaisesti valmistettaessa (2R,3S)-3- t ert-but oksikarbonyyliamino-2 -hydroksi-3 - fenyylietyylipropionaattia .

Siten käyttämällä lähtöaineena 0,78 g (2RS,3SR)-3-amino-2-hydroksi-3-fenyylietyylipropionaattia, saadaan 20 0,6 g (2RS,3SR)-3-tert-butoksikarbonyyliamino-2-hydroksi- 3-fenyylietyylipropionaattia valkoisena jauheena, joka sulaa 102 °C:ssa.

(2RS, 3 SR) - 3 - amino- 2 -hydroksi - 3 - f enyyl ietyyl ipropio - ,,, naattia voidaan valmistaa H. Hönigin et ai. kuvaamalla 25 menetelmällä, Tetrahedron, 46, s. 3841 (1990).

'·’ Esimerkki 10 • * • · · · Tekemällä esimerkissä 6 kuvatulle tavalle analo- *·’· gisesti, mutta käyttämällä lähtöaineena 1,7 g (4S,5R) • · V.: 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dietyyli-4-f enyyli-5-oksatso- : 30 lidinkarboksyylihappoa ja 2,9 g 4-asetoksi-2a-bentsoyyli- oksi-5S, 20-epoksi-l, 13o;-dihydroksi-9-okso-bis (2,2,2-tri-.···. kloorietoksi)-7S, 10S-karbonyylioksi-ll-takseenia, saadaan r r t 3.5 g (4S,5R) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S, 20-epoksi- ' l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7S, ΙΟβ-karbo- 35 nyylioksi-ll-taksen-13oi-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyli- « i I · 4 · • « · • · 41 106261 2.2- dietyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattia valkoisena marenkimaisena aineena.

- kiertokyky: [α]οΖ0 = -41,2° (c=l; metanoli) .

(4S, 5R) - [4-asetoksi-2or-bentsoyylioksi-5E,20-epoksi-5 l-hydroksi-9-okso-bis(2,2,2-trikloorietoksi)-7S,10E-karbo- nyylioksi -ll-taksen-13a!-yyli]-3-tert-butoksikarbonyyli- 2.2- dietyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaattimuute-taan(2R,3S)-[4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5E,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2 - trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-karbo- 10 nyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-amino-2-hydroksi-3-fenyy- lipropionaatiksi muurahaishapon avulla kuten esimerkissä 6 kuvataan (4S,5R)-[4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5E,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2- trikloorietoksi) -7β,10-E-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli]-3-tert-butoksikarbo-15 nyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaa- tille. Näin saatu yhdiste on kaikissa kohdissa fysikaalisilta ominaisuuksiltaan identtinen esimerkissä 9 kuvatun saman yhdisteen kanssa.

- kiertokyky: [a]DZ0 = -38,3° (c=0,8; metanoli).

20 (4S, 5R)-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dietyyli-4- fenyyli-5-oksatsolidinkarboksyylihappoa voidaan valmistaa esimerkissä 6 kuvatuissa olosuhteissa valmistettaessa (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli- 5-oksatsolidinkarboksyylihappoa. Siten 2,3 g:sta (4S,5R) 2 5 3 -tert-butoksikarbonyyli-2,2 - dietyyli -4 - f enyyli -5-oksat- solidinetyylikarboksylaatista saadaan 1,7 g (4S,5R) • « · :·: : 3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dietyyli-4-fenyyli-5-oksatso- * * lidinkarboksyylihappoa valkoisina kiteinä, jotka sulavat • · ·.·.· 185 °C:Ssa.

’ 30 - kiertokyky: [a]DZ0 = +2,4° (c=0,5; metanoli).

(4S, 5R)-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dietyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia voidaan vai- <· r r mistaa seuraavalla tavalla:

Liuosta, jossa on 2,5 g (2R,3S)-3-tert-butoksikar-35 bonyyliamino-2-hydroksi-3-fenyylietyylipropionaattia, « c f t c * I Γ ill#· I « 42 106261 1,12 g 3,3-dimetoksipentaania ja 25 mg pyridinium-p-tolu-eenisulfonaattia 25 cm3:ssä tolueenia, sekoitetaan 3 tunnin ajan noin 20 °C:n lämpötilassa. Reaktioseosta kuumennetaan kiehumispisteessä ja tisle kerätään mittalasiin. Kun tis-5 lettä on kertynyt 20 cm3, lisätään reaktioseokseen liuos, jossa on 1,12 g 3,3-dimetoksipentaania ja 25 mg pyridi-nium-p-tolueenisulfonaattia 10 cm3:ssä tolueenia, ja kuumennetaan tolueenin kiehumispisteessä 5 tunnin ajan. Reak-tioseos jäähdytetään noin 20 °C:n lämpötilaan, sitten li-10 sätään 10 cm3 kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesi-liuosta. Vesifaasi dekantoidaan, uutetaan sitten 2 kertaa 10 cm3:llä dikloorimetaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 kPa) noin 15 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 2,3 g (4S,5R) 3-tert- butoksikarbonyyli - 2,2 - dietyyli - 4 - f enyyli - 5 - oksat solidin-etyylikarboksylaattia keltaisena öljynä.

- - kiertokyky: [or]D20 = -8,9° (c=l; metanoli) .

3,3-dimetoksipentaania voidaan valmistaa Loretten 20 et ai. kuvaaman menetelmän mukaisesti, J. Org. Chem., 24., 1731, (1959).

Esimerkki 11

Tekemällä esimerkissä 6 kuvatulle tavalle analogisesti, mutta käyttämällä lähtöaineena (4S,5R)-3-tert-bu-25 toksikarbonyyliamino-2 [spiro] sykloheksan-4-fenyyli-5-ok- ·' * satsolidinkarboksyylihappoa ja 1,443 g 4-asetoksi-2a-bent- : soyylioksi-5fi,20-epoksi-l,13a-dihydroksi-9-okso-bis(2,2,2- trikloorietoksi)-7S,10S-karbonyylioksi-ll-takseenia, saa-ί^ϊ daan 1,85 g (4S, 5R) - [4-asetoksi-2or-bentsoyylioksi-5B, 20- 30 epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, 10- m fi-karbonyylioksi-ll-taksen-13Q;-yyli] -3-tert-butoksikarbo- .···. nyyli-2 [spiro] sykloheksan-4-f enyyli-5-oksatsolidinkarbok- « · · ,···. sylaattia valkoisena marenkimaisena aineena.

» (4S,5R) - [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5B,20-epoksi- « · * 35 l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, ΙΟβ-kar- • · • 4 « t « « · · • · 43 106261 bonyylioksi-ll-taksen-13a;-yyli] -3-tert-butoksikarbonyyli-2 [spiro] sykloheksan-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaatti muutetaan (2R,3S)-[4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-epoksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, 10-5 S-karbonyylioksi-ll-taksen-13o;-yyli]-3-atnino-2-hydroksi-3-fenyylipropionaatiksi muurahaishapolla, kuten esimerkissä 6 kuvataan (4S,5R) [4-asetoksi-2a-bentsoyylioksi-5S,20-e-poksi-l-hydroksi-9-okso-bis (2,2,2-trikloorietoksi) -7β, 10β-karbonyylioksi-ll-taksen-13a-yyli] -3 - tert-but oksi karbonyy-10 li-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksylaatille.

Näin saatu yhdiste on kaikissa kohdissa fysikaalisilta ominaisuuksiltaan identtinen esimerkissä 8 kuvatun saman yhdisteen kanssa.

- kiertokyky: [or]020 = -41,7° (c=0,5; metanoli) .

15 (4S,5R)-3-tert-butoksikarbonyyliamino-2[spiro]syk- loheksan-4 -fenyyli-5-oksatsoiidinkarboksyylihappoavoidaan valmistaa esimerkissä 6 kuvatuissa olosuhteissa valmistettaessa (4S,5R)-3-tert-butoksikarbonyyli-2,2-dimetyyli-4-fenyyli-5-oksatsolidinkarboksyylihappoa. Siten 1,2 g:sta 20 (4S, 5R)-3-tert-butoksikarbonyyli-2[spiro]sykloheksan-4- fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia saadaan 1 g 3-tert-butoksikarbonyyli-2[spiro]sykloheksan-4-fenyyli-5-oksatsoiidinkarboksyylihappoa valkoisena marenkimaisena aineena.

25 - kiertokyky: [a]D20 = -4,5° (c=0,5; metanoli).

. (4S, 5R) -3-tert-butoksikarbonyyli-2 [spiro] syklohek- • · · ··· \ san-4-fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia voidaan ’ 1 valmistaa seuraavalla tavalla: • ·.2.· Liuosta, jossa on 2,5 g (2R,3S)-3-tert-butoksikar- • 1« V · 30 bonyyliamino-2-hydroksi-3-fenyylietyylipropionaattia, 1,22 g 1,1-dimetoksisykloheksaania ja 25 mg pyridinium-p-:3: tolueenisulfonaattia 25 cm3:ssä tolueenia, sekoitetaan 3

f M

• · tunnin ajan noin 20 °C:n lämpötilassa. Reaktioseosta kuu- • · · mennetaan kiehumispisteessä ja tisle kerätään mittalasiin.

2 ’’"l 35 Kun tislettä on kertynyt 20 cm3, lisätään reaktioseokseen • « 3 « · • · • · · 44 106261 liuos, jossa on 1,22 g 1,1-dimetoksisykloheksaania ja 25 mg pyridinium-p-tolueenisulfonaattia 10 cm3:ssä toluee-nia, ja kuumennetaan tolueenin kiehumispisteessä 30 tunnin ajan. Reaktioseos jäähdytetään noin 20 °C:n lämpötilaan, 5 sitten lisätään 10 cm3 kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta. Vesifaasi dekantoidaan, uutetaan sitten 2 kertaa 10 cm3:llä dikloorimetaania. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (2,7 10 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 2,6 g valkoista marenkimaista ainetta, joka puhdistetaan kromato-grafisesti 100 g:lla silikageeliä (0,063 - 0,2 mm) halkaisijaltaan 2 cm:n suuruisella pylväällä (eluantti: dikloo-rimetaani) keräämällä 25 cm3:n fraktioita. Fraktiot 6-13 15 yhdistetään ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (0,27 kPa) noin 40 °C:n lämpötilassa. Näin saadaan 1,25 g (4S,5R) 3-tert-butoksikarbonyyli-2[spiro]sykloheksan-4-fenyyli-5-oksatsolidinetyylikarboksylaattia keltaisena öljynä.

20 1,1-dimetoksisykloheksaania voidaan valmistaa Lo- retten et ai. kuvaamalla menetelmällä, J. Org. Chem., 24, 1731, (1959).

Uusilla yleisen kaavan (Ia) mukaisilla yhdisteillä on erityisen kiinnostavia biologisia vaikutuksia.

25 Uusilla yleisen kaavan (Ia) mukaisilla yhdisteillä

^ t I

/1,' on merkittävä inhiboiva vaikutus epänormaaliin solunjakau- • · · *· tumiseen ja niiden terapeuttisten ominaisuuksien vuoksi f 1 niitä voidaan käyttää hoidettaessa sairaita, joiden pato- • · ·.·,· loginen tila liittyy epänormaaliin solunjakautumiseen.

n· ! 30 Patologisiin tilohin kuuluvat pahanlaatuisten tai hyvän laatuisten solujen epänormaali solunjakautuminen erilai- ·"1· sissa kudoksissa ja/tai elimissä, joihin kuuluvat niitä »# · mitenkään rajoittamatta, lihas-, luu- tai sidekudokset, 1 « > iho, aivot, keuhkot, sukupuolielimet, lymfaattinen tai 35 munuaisjärjestelmä, rintarauhasen solut tai verisolut, a a a « a « « a «a a v a · 45 106261 maksa, ruoansulatusjärjestelmä, haima ja kilpirauhanen tai lisämunuaiset. Patologisiin tiloihin kuuluvat myös psoriasis, kiinteät kasvaimet, munasarja-, rinta-, aivo-, etu-rauhas-, paksusuoli-, vatsa-, munuais- tai kivessyöpä, 5 Kaposin sarkooma, kolangiokarsinooma, korionkarsinooma, neuroblastooma, Wilmsin tuumori, Hodgkinin tauti, melanoomat, multippelimyeloomat, krooniset lymfaattiset leukemiat, akuutit tai krooniset granulosyyttiset lymfoomat, Uudet keksinnön mukaiset yhdisteet ovat erityisen hyödylle» lisiä hoidettaessa munasarjasyöpää. Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää estämään tai hidastamaan patologisten tilojen ilmestymistä tai uusiutumista tai hoidettaessa näitä patologisia tiloja.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan antaa poti-15 laalle eri muodoissa, jotka soveltuvat valittuun annostus-tapaan, joka on mieluiten parenteraalinen. Parenteraali-seen annostustapaan kuuluvat laskimonsisäinen, vatsaonte-lonsisäinen, lihakseen annettava tai subkutaaninen annostus. Erityisen suositeltava on vatsaontelonsisäinen tai 20 laskimonsisäinen annostus.

Yhdisteitä (Ia) voidaan käyttää farmaseuttisissa valmisteissa, jotka sisältävät ainakin yhtä yleisen kaavan (Ia) mukaista yhdistettä riittävässä määrin, jotta se so-.<'t veltuu käytettäväksi ihmisten tai eläinteen hoitoon. Vai- I < 11', 2 5 misteita voidaan valmistaa tavanomaisilla menetelmillä c i * käyttämällä yhtä tai useampaa farmaseuttisesti hyväksyttä- • · · | vää lisäainetta, kantajaa tai täyteainetta. Sopiviin kan- * * tajiin kuuluvat laimentimet, steriilit vesiliuokset ja • « *.·,· erilaiset ei-toksiset liuottimet. Valmisteet ovat mielui- • · * · 30 ten vesiliuoksina tai -suspensioina, injektoitavina liuok sina, jotka voivat sisältää emulgaattoreita, väriaineita, säilöntäaineita tai stabilaattoreita.

t ft

Lisäaineitten tai täyteaineitten valinta voi mää räytyä yhdisteen liukoisuuden tai kemiallisten ominaisuuk- c « f I I « *

| I

I « ( · < · · « f 46 1C6261 sien, erityisen annostustavan ja hyvän farmaseuttisen käytännön perusteella.

Parenteraaliseen annostukseen käytetään steriilei-tä vesi- tai vedettömiä liuoksia tai suspensioita. Vedet-5 tömien liuosten tai suspensioiden valmistukseen voidaan käyttää luonnon kasviöljyjä, kuten oliiviöljyä, seesamiöl-jyä tai paraffiiniöljyä tai injektoitavia orgaanisia este-reitä, kuten etyylioleaattia. Steriilit vesiliuokset voivat muodostua farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan liuok-10 sesta veteen liuottettuna. Vesiliuokset soveltuvat hyvin laskimonsisäiseen annostukseen, kun pH on säädetty sopivaksi ja kun liuos on tehty isotoniseksi, esimerkiksi riittävällä määrällä natriumkloridia tai glukoosia. Sterilointi voidaan suorittaa kuumentamalla tai jollakin muulla 15 tavalla, joka ei muuta valmistetta.

On itsestään selvää, että kaikkien yhdisteiden, joita käytetään keksinnön mukaisissa valmisteissa, on oltava puhtaita ja ei-toksisia käytetyissä määrissä.

Valmisteet voivat sisältää ainakin 0,01 % terapeut-20 tisesti vaikuttavaa ainetta. Vaikuttavan aineen määrä valmisteessa on sellainen, että sopiva annostus voidaan määrätä. Valmisteet valmistetaan mieluiten niin, että yksit-täisannos sisältää noin 0,01 - 1 000 mg vaikuttavaa ainet-ta parenteraalisessa annostuksessa.

• 2 5 Terapeuttinen hoito voidaan suorittaa yhdessä mui- den terapeuttisten hoitojen kanssa, mukaanlukien antineo- • · . . plastiset lääkkeet, monoklonaaliset vasta-aineet, immuno- • · · ’·*; logiset terapiat tai radioterapiat tai biologisen vasteen • » · ’·* muuntajat. Vasteen muuntajiin kuuluvat mitenkään rajoit- 30 tamatta lymfokiinit ja sytokiinit, kuten interleukiinit, • · · interferonit (α, β tai δ) ja TNF. Muina hyödyllisinä kemo- ·>#>ϊ terapeuttisina aineina hoidettaessa solujen epänormaalista ,jakautumisesta johtuvia häiriöitä ovat, mitenkään rajoit-< < tamatta, alkyloivat aineet, kuten typpeä sisältävät sinap- I * . 35 pikaasut, esimerkiksi mekloretamiini, syklofosfamidi, mel- « · · « « 47 106261 falaani ja klorambusiili, alkyylisulfonaatit, kuten busul-faani, nitrosoureat, kuten karmustiini, lomustiini, sel-mustiini ja streptotsosiini, triatseenit, kuten dakarbat-siini, antimetaboliitit, kuten foolihapon analogit, esi-5 merkiksi metotreksaatti, pyrimidiinianalogit, kuten fluo-rourasiili ja sytarabiini, puriinianalogit, kuten merkap-topuriini ja tioguaniini, luonnolliset yhdisteet, kuten vinka-alkaloidit, esimerkiksi vinblastiini, vinkristiini ja vindesiini, epipodofyllotoksiinit, kuten etoposidi ja 10 teniposidi, antibiootit, kuten daktinomysiini, daunorubi-siini, doksorubisiini, bleomysiini, plikamysiini ja mito-mysiini, entsyymit, kuten L-asparaginaasi, erilaiset aineet, kuten platinan koordinaatiokompleksit, kuten sispla-tiini, substituoidut ureat, kuten hydroksiurea, metyyli-15 hydratsiinijohdannaiset, kuten prokarbatsiini, adrenokor-tikoidisupressorit, kuten mitotaani ja aminoglutetymidi, hormonit ja antagonistit, kuten adrenokortikosteroidit, esimerkiksi prednisoni, progestiinit, kuten hydroksipro-gesteronikaproaatti, metoksiprogesteroniasetaatti ja me-20 gestroliasetaatti, estrogeenit, kuten dietyylistilbestroli ja etinyyliestradioli, antiestrogeenit, kuten tamoksifee-ni, androgeenit, kuten testosteronipropionaatti ja fluok-simesteroni.

Käytetyt annokset keksinnön mukaisten menetelmien 25 toteuttamiseksi ovat sellaisia, että niillä saadaan aikaan profylaktinen hoito tai maksimaalinen terapeuttinen vaste.

• · .. Annokset vaihtelevat annostustavan, tietyn valitun yhdis- • · · teen ja hoidettavalle kohteelle ominaisten piirteiden mu- • « » *·’ 1 kaan. Yleensä annokset ovat sellaisia, että saavutetaan 30 terapeuttinen teho hoidettaessa epänormaalista solunjakau- • · · . tumisesta johtuvia häiröitä. Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan antaa myös niin usein kuin on tarpeen halutun te-rapeuttisen tehon saavuttamiseksi. Tietyt potilaat voivat reagoida suhteellisen nopeasti suurille tai pienille an- « · , 35 noksille, jolloin tarvitaan pieniä tai ei lainkaan ylläpi-

« I

106261 48 toannoksia. Yleensä hoidon alussa käytetään pieniä annoksia ja tarvittaessa annetaan yhä suurempia annoksia, kunnes saavutetaan optimaalinen teho. Toisille potilaille voi olla tarpeen antaa 1-8 ylläpitoannosta, mieluiten 1-4 5 kertaa kunkin potilaan fysiolodisten tarpeitten mukaisesti. On myös mahdollista, että tietyille potilaille ei ole tarpeen antaa kuin 1 tai 2 päivittäistä annosta.

Ihmisellä annokset ovat yleensä 0,01 - 200 mg/kg. Intraperitonaaliset annokset ovat yleensä 0,1 - 100 mg/kg, 10 mieluiten 0,5 - 50 mg/kg, vielä erityisesti 1-10 mg/kg. Laskimonsisäiset annokset ovat yleensä 0,1 - 50 mg/kg, mieluiten 0,1 - 5 mg/kg ja vielä erityisesti 1-2 mg/kg. On selvää, että sopivan annoksen valitsemiseksi täytyy ottaa huomioon annostustapa, potilaan paino, hänen yleinen 15 terveydentilansa, ikänsä ja muut hoidon tehokkuuteen vaikuttavat tekijät.

Seuraava esimerkki kuvaa yhdistettä (Ia) sisältävää valmistetta.

Esimerkki 20 Liuotetaan 40 mg esimerkissä 1 valmistettua yhdis tettä 1 cm3:iin Emulphor EL 620:a ja 1 cm3:iin etanolia, sitten liuos laimennetaan lisäämällä 18 cm3 fysiologista ·. suolaliuosta.

•ym Valmiste annetaan lisäämällä sitä fysiologiseen . 25 perfuusioliuokseen 1 tunnin aikana.

··· ; Uusien kaavan Ia mukaisten yhdisteiden edullisten ominaisuuksien osoittamiseksi seuraavassa taulukossa on

V 9 • I I

esitetty koetulokset, joissa mitattiin keksinnön mukaises- **· · ti valmistettujen yhdisteiden aktiivisuutta in vitro hii- 30 ren P-388-leukemiasolulinjan avulla 3 x 105 solua/cm3 vil- :***: jeltiin 96 tuntia eri pitoisuuksien tutkittavia yhdisteitä • · · ·**’; läsnä ollessa. Soluja inkuboitiin 16 tuntia 0,02-%: isessa ·»« "natural red"-väriliuoksessa, minkä jälkeen ne pestiin ja • · '···’ hajotettiin natriumdodekyylisulfaatilla (SDS, 1 %) . Värin 1 • · ’ 35 inkorporoituminen soluihin, mikä kuvastaa solujen kasvua, • • · • · · 49 106261 määritettiin optisen tiheyden avulla aallonpituuksilla 540 ja 360 nm. Määritettiin pitoisuus, joka inhiboi 50-%:ises-ti solujen kasvua. Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden IC50-arvot ovat noin puolet pienem-5 piä kuin taksolivertailuyhdisteen, eli uudet yhdisteet inhiboivat solujen kasvua selvästi enemmän.

Taulukko 10 YHDISTE IC50(mg/cm3) 1 0,04 3 0,04 4 0,05 15 5 0,05 6 0,03 7 (taksoli) 0,09 9 (taksoteeri) 0,05 • · • « · • « · I I · I · * * 9 < · · • · · · • · • * • · · • · · 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9 99 9 • I · I « · * « · 9 9 9 9 9 9

Claims (4)

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten taksaani] ohdannaisten valmistamiseksi, joiden yleinen kaava 5 on: HO g OH R'cof ° \)—yJL 10 ÖH H (Ia) HO ; ÖCOCH3 öcoc6h5 jossa R esittää t-butoksi- tai f enyyliradikaalia ja Ar 15 esittää fenyyliradikaalia, joka on substituoitu, tai a- tai β-naftyyliradikaalia, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla atomilla tai radikaalilla, jotka on valittu halogeeniatomien (fluori, kloori, bromi, jodi) ja alkyyli-, aryyli-, aralkyyli-, alkoksi-, alkyylitio-, aryy-20 lioksi-, aryylitio-, merkapto-, asyyliamino-, aroyyliami-no-, alkoksikarbonyyliamino-, amino-, alkyyliamino-, dial- ... kyyliamino-, karboksi-, alkoksikarbonyyli-, karbamoyyli-, dialkyylikarbamoyyli-, syano-, nitro- ja trifluorimetyyli- ' radikaalien joukosta, jolloin alkyyliradikaalit ja muiden < I 1 25 radikaalien alkyyliosat sisältävät 1-4 hiiliatomia ja et- **"· tä aryyliradikaalit ovat fenyyli- tai a- tai S-naftyy- * · *.·.· liradikaaleja, tunnettu siitä, että korvataan suo- IM ; jaryhmät vetyatomeilla sopivissa olosuhteissa yhdisteessä, jonka yleinen kaava on: M* : : 30 R,r<\ o 2r2 C: MVS ·:·! Ar ,CO-Onm( V X (VI) I35 R-C0NH 0H ' ' öcoc6h5 51 106261 jossa R ja Ar ovat edellä määriteltyjä ryhmiä ja R'l ja R2 ovat suojaryhmiä, kuten t-butoksikarbonyyli- tai bentsoyy-liradikaaleja.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-5 n e t t u siitä, että valmistetaan kaavan Ia mukainen yhdiste, jossa Ar esittää fenyyliradikaalia, joka on substi-tuoitu yhdellä tai useammalla samanlaisella tai erilaisella atomilla tai radikaalilla, jotka on valittu halogeeniatomi-en ja alkyyli-, alkoksi-, amino-, alkyyliamino-, dialkyy- 10 liamino-, asyyliamino-, alkoksikarbonyyliamino- ja trifluo-rimetyyliradikaalien joukosta.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan Ia mukainen yhdiste, jossa Ar esittää fenyyliradikaalia, joka on substi- 15 tuoitu kloori- tai fluoriatomilla tai alkyyli-, alkoksi-, dialkyyliamino-, asyyliamino- tai alkoksikarbonyyli-aminoradikaalilla.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan Ia mukainen yh- 20 diste, jossa Ar esittää fenyyliradikaalia, joka on substi-tuoitu kloori- tai fluoriatomilla tai metyyli-, metoksi-, dimetyyliamino-, asetyyliamino- tai t-butoksikarbonyyliami- • : noradikaalilla. « » · • · · • · • I I « · · « * « · • V • • · « • · · « · • · f • · · * · I • · · · • · ^ II» • • · • • 9 · t I « « f II » I f 52 106261