KR20060101485A - 다중특이적 탈면역화된 cd3-바인더 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 제1 도메인 및 Ig-유래의 제2 결합 도메인을 포함하는, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체를 엔코딩하고 있는 핵산 서열을 제공한다. 본 발명의 또다른 측면들은 상기 핵산 서열을 포함하는 벡터들 및 숙주 세포들, 본 발명의 구조체를 생산하는 방법 및 상기 구조체를 포함하는 조성물이다. 본 발명은 또한 특정 질환들을 치료하는 약학적 조성물을 제조하기 위한 상기 구조체의 용도, 특정 질환들을 치료하는 방법 및 본 발명의 결합 구조체를 포함하는 키트를 제공한다.
CD3, 다중특이성, 핵산 서열
Description
본 발명은 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 제1 도메인 및 Ig-유래의 제2 결합 도메인을 포함하는, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체를 코딩하는 핵산 서열을 제공한다. 본 발명의 또다른 측면은 상기 핵산 서열을 포함하는 벡터들 및 숙주 세포들, 본 발명의 구조체를 생산하는 방법 및 상기 구조체를 포함하는 조성물이다. 본 발명은 또한 특정 질환들을 치료하기 위한 약학적 조성물을 제조하기 위한 상기 구조체의 용도, 특정 질환들을 치료하는 방법 및 본 발명의 결합 구조체를 포함하는 키트를 제공한다.
인간 CD3는 다분자 T-세포 복합체의 일부로서 T-세포 상에 발현되는 항원을 나타내고, 세 개의 상이한 체인들인 CD3-ε, CD3-δ 및 CD3-γ로 이루어진다. 예를 들면, 고정화된 항-CD3 항체들에 의한 T-세포 상의 CD3의 군집 형성은, T-세포 수용체의 진입 기전(engagement)과 유사하지만 클론-전형적인 특이성과 무관한 T-세포 활성을 가져온다; WO 99/54440 공보 또는 호프만(Hoffman)(1985) J. Immunol. 135:5-8 참조.
CD3 항원을 특이적으로 인식하는 항체들은 선행 기술, 예를 들면, Traunecker, EMBO J 10 (1991), 3655-9 및 Kipriyanov, Int.J. Cancer 77 (1998), 763-772 에 기재되어 있다. 최근에, 다양한 질환의 치료에, CD3에 대해 지시되는 항체들이 제안되어 오고 있다. 이러한 항체들 또는 항체 구조체들은, 유럽특허 1 025 854에 기재된 바와 같이, T-세포 제거제(depleting agent) 또는 분열촉진제로서 작용한다. 인간 CD3 항원 복합체에 특이적으로 결합하는 인간/설치류 하이브리드 항체들은 WO 00/05268에 기재되어 있고, 예를 들어 신장 이식, 감염(septic) 및 심장 동종이식에 수반하는 거부 반응 치료용 면역억제제로 제안되었다. WO 03/04648는 CD3 및 난소암 항원에 대해 지시된 이중특이성 항체를 기술하고 있다. 또한, Kufer (1997) Cancer Immunol Immunother 45:193-7 는 미세 잔류 암(minimal residual cancer) 치료용의 CD3 및 EpCAM에 특이적인 이중특이성 항체에 관한 것이다.
그러나, CD3에 대해 지시되는 선행 기술의 항체들은 비-인간 근원으로부터 유래된 것이다. 이것은 상기 항-CD3 항체들을 인간에 대한 치료요법의 일부로서 사용할 때 몇 가지 심각한 문제들을 가져온다.
그러한 문제 중 하나는 "사이토킨 방출 증후군(CRS)"이다. CRS는 항-CD3 항체의 최초 몇번 투여 후 관찰되어 온 임상 증후군이며, CD3에 대해 지시된 많은 항체들이 분열을 촉진한다는 사실과 관련되어 있다. 시험관내 에서, CD3에 대해 지시된 분열촉진 항체들은 T-세포 증식 및 사이토킨 생산을 유도한다. 생체 내에서 이러한 분열 촉진 활성은 항체의 최초 주입 후 초기 시간 내에, 다수의 T-세포-유래 의 사이토킨들을 포함하여, 사이토킨들의 대량 방출을 가져온다. CD3-특이적 항체들의 분열 촉진 능력은 단핵세포/대식세포 의존적이며, 이들 세포들에 의한 IL-6 및 IL-1β의 생산과 관련되어 있다.
CRS 증후군은 빈번하게 보고된 가벼운 "독감-유사"증후군에서부터 덜 보고된 심각한 "쇼크-유사" 반응(이것은 심장혈관계 및 중추신경계 증상을 포함한다)까지 범위가 넓다. 증후군은 특히 두통, 떨림, 구역/구토, 설사, 복통, 권태감 및 근육/관절의 아픔과 통증, 일반화된 허약(generalized weakness), 심폐 고장(cardiorespiratory events) 뿐 아니라, 신경-정신학적 고장(neuro-psychiatric events)을 포함한다. 심각한 폐부종이 수액 과부하 (fluid overload)를 가진 환자들 및 수액 과부하를 가지지 않은 것으로 보이는 환자들에게서 발생하였다. 특히, 마우스 모노클로널 항체들의 치료상의 이용을 방해하는 또 다른 심각한 문제는 상기 항체들에 대한 체액 면역 반응의 발생이며, 인간 항-마우스 항체들(HAMAs;human anti-mouse antibodies)의 생산을 가져온다. (Schroff (1985) Cancer Res.45:879-885, Shawler (1985) J. Immunol. 135:1530-1535). 인간 항-마우스 항체들은 마우스 항체로 치료하는 2주차에 전형적으로 발생하고, 마우스 항체들을 중화함에 따라, 그들이 의도된 표적에 결합하는 능력을 방해한다. HAMA 반응은 마우스 불변(mouse constant) ("Fc") 항체 영역들 또는/및 마우스 가변("V") 영역들의 성질에 의존할 수 있다.
선행 기술은 비-인간 유래의 모노클로널 항체들을 변경시킴에 의해 HAMAs의 생산을 감소하거나 방지하는 다양한 접근들을 포함한다.
그러한 항체들의 면역원성(immunogenicity)을 감소시키는 하나의 접근으로, 예를 들면 WO 91/09968 및 미국특허 6,407,213호에 기재된 것과 같은, 인간화(humanization)에 의한 것이 있다. 일반적으로, 인간화는 비-인간 항체 서열의 대응하는 인간 서열로의 치환을 의미하며, CDR-이식이 그 예이다.
상기 항체들의 면역원성(immunogenicity)을 감소시키는 또 다른 접근으로는 탈면역화(deimmunization)에 의한 것, WO 00/34317, WO 98/52976, WO 02/079415, WO 02/012899 및 WO 02/069232에 그 예가 기재되어 있다. 일반적으로, 탈면역화는 잠재 T-세포 에피토프 내에 아미노산 치환을 수행하는 것을 의미한다. 이런 식으로, 주어진 서열이 세포내 단백질 가공시 T-세포 에피토프를 생성시킬 가능성이 감소된다. 게다가, WO 92/10755는 단백질상 항원 결정기를 처리하는 접근을 기재하고 있다. 특히, 단백질들은 에피토프 매핑되고(epitope mapped), 그들의 아미노산 서열은 유전공학을 통해 변화된다.
그러나, 인간화된 항체들은 그들의 비-인간화된 모(parent) 항체들과 비교했을 때, 종종 그들의 표적에 대하여 감소된 결합 친화성을 보이고, 또한 종종 인간 숙주에서 다소 면역원성(immunogenic)이기도 하다.
그러므로, 본 발명의 기술적인 문제는 T-세포 매개 면역 반응의 유도에 의한 B-세포 관련 질병들뿐만 아니라, 종양성 질병, 증식성 장애들을 치료 및/또는 개선하기 위한 수단 및 방법의 제공이다. 전술한 수단 및 방법들은 공지의 항체-기반의 치료법의 기술한 불리함을 극복해야 한다.
상기 기술적 문제의 해결은 특허청구범위에 기재된 실시태양을 제공함에 의 해 달성된다.
따라서, 본 발명은 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 제1 도메인 및 Ig-유래의 제2 결합 도메인을 포함하는, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체에 관한 것이며,
여기에서 상기 제1 도메인은 탈면역화되고, CDR-H1 영역, CDR-H12 영역 및 CDR-H3 영역을 포함하며, 상기 CDR-H3 영역은 서열식별번호: 96, 108, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 또는 127 에 도시된 바와 같은 아미노산 서열을 포함하고;
상기 제1 도메인은 그 골격 H1 내에 서열 VKK (Val-Lys-Lys)를 추가로 포함하고, 여기에서 골격 H1 및 CDR-H1 영역 간 전이 서열(transition sequence)은 서열 Ala-Ser-Gly-Tyr-Thr-Phe (ASGYTF; 서열식별번호: 233)을 포함한다.
앞서 기술된, 구조 영역뿐만 아니라 공지된 CDR 영역 및 그들의 대응하는 전이 서열에 대한 특정 변형은, 원래의 탈면역화 되지않은 서열과 비교했을 때 감소된 면역원성을 보이지만, 놀랍게도 독성 활성을 보유한, 탈면역화된 CD3 특이적 결합 분자들을 초래하는 것을 발견했다. 이러한 발견은 모든 가능한 탈면역 프로토콜이 뚜렷한 독성 활성을 보이는, 생활성의, 기능성 구조체를 유도하는 것은 아니기 때문에 특히 놀라운 것이었다; 부가한 실시예 참조. 게다가, 놀랍게도 탈면역화된 세포독성적으로 활성인 CD3 결합 분자들은 생산성이 증가함을 보였다. 본 발명에 따라, 탈면역화되지 않은 항체들의 특정 서열이, 여기에서 상기 기술된 서열들로 대체되거나, 상기 기술된 서열들로 변형되었다. 특히, 골격 H1 영역에서 원래의 서열 Leu-Ala-Arg (LAR)는 서열 Val-Lys-Lys (VKK)에 의해 치환되었다. 게다가, 일부 변형되지않은/탈면역화되지않은 CD3 특이적 항체들의 구조 H1 및 CDR-H1의 변이 영역에 포함된 서열 Thr-Ser-Gly-Tyr-Thr-Phe (TSGYTF)은, 본 발명에 따라 Ala-Ser-Gly-Tyr-Thr-Phe (ASGYTF) (서열식별번호:233) 로 변형되었다. (도 14 참조) 바람직한, 발명의 CD3-특이적 결합 구조체는 적어도 두 개의 결합 특이성을 포함하며, 여기서 제2 결합 특이성은 Ig-유래의 것을 특징으로 한다. 게다가, 상기 바람직한 구조체는 전술한 특정 아미노산 서열을 특징으로 한다. 첨부한 실시예들에 쓰여져 있는 바와 같이, 여기서 제공된 구조체들은 그들의 변형된/탈면역화된 형태에서도 여전히 생활성(bioactivity)을 보유한다. 실시예들은 또한 모든 탈면역화(deimmunization)가 생활성 분자들을 초래하는 것은 아님을, 기술분야에 공지된 방법들(WO 92/10755, WO 00/34317, WO 98/52976, WO 02/079415 또는 WO 02/012899)에 의해 결정하여, 서술하고 있다; 특히 실시예 2 및 5 참조.
여기에서 사용된 용어 "독성학적으로 활성인 CD3 결합 구조체"는 T-세포 상에 발현된 인간 CD3 복합체에 결합할 수 있고, 표적 세포의 제거/용해을 유도할 수 있는 CD3 특이적 구조체와 관한 것이다. CD3/CD3 복합체(예를 들면, 항체, 항체 유도체 또는 항체 단편)의 CD3 특이적 바인더의 결합은 기술분야에 공지된 것과 같이 T-세포의 활성을 가져온다; WO 99/54440 참조.따라서, 발명의 구조체는 생체 내 및/또는 생체 외에서 표적 세포를 제거/용해시킬 수 있어야 한다. 대응하는 표적 세포는 본 발명의 구조체의 제2 Ig-유래의 결합 도메인에 의해 인지되는, 표면 분자를 발현하는 세포를 포함한다. 상기 표면 분자들은 이후에 설명한다. 세포독성은 기술분야에 공지된 방법 및 이후에 설명하고 부가한 실시예들에 기재된 방법에 의해 탐지할 수 있다. 따라서, 그러한 방법은 특히, 생리학적 시험관내 측정법을 포함한다. 그러한 생리학적 측정법은 예를 들면, 세포막 완전성(integrity)의 손실에 의해 세포 사멸을 모니터할 수 있다. (예를 들면, FACS에 기초한 프로피디움 요오드화물(propidium Iodide) 측정법, 트리판 블루 유입(trypan Blue influx) 측정법, 포토메트릭(photometric) 효소 방출 측정법(LDH), 방사성측정 51Cr 방출 측정법, 형광측정 유로퓸(fluorometric Europium) 방출 및 칼세인(Calcein)AM 방출 측정법). 추가적인 측정법은 예를 들면, 광도측정 MTT, XTT, WST-1 및 알라마블루(alamarBlue) 측정법, 방사성측정 3H-Thd 혼합 측정법, 세포 분열 활성을 측정하는 클론원성(clonogenic) 측정법, 및 미토콘드리아의 막횡단 구배(transmembrane gradient)를 측정하는 형광측정 로다민123(Rhodamine123) 측정법에 의해, 세포의 생육성을 모니터링하는 것을 포함한다. 또한, 세포사멸은 예를 들면 FACS에 기초한 포스파티딜세린 노출 측정법, ELISA에 기초한 TUNEL 검사, 카스파제 활성 측정법(광도측정, 형광측정 또는 ELISA에 기초한) 또는 변화된 세포 형태 분석(수축, 세포막 기포)에 의해 모니터할 수 있다. 세포독성적 활성은 형광-기반의 염료의 방출의 FACS-기초한 측정에 의해 분석하는 것이 바람직하다. 상기 측정법에서, 본 발명의 세포독성적으로 활성인 이중특이적 CD3 결합 구조체의 제2 도메인에 결합하는 분자를 운반하는, 형광 표지된 세포들은(바람직하게는, CD19에 대한 NALM-6 세포들 및 EpCAM 항원에 대한 카토(Kato) 세포들), 본 발명의 세포독성적으로 활성인 이중특이적 CD3 결합 구조체의 존재하에 임의의 제공자의 격리된 말초혈액 단핵세포(PBMCs) 또는 표준화된 T-세포주(standardized T-cell line)와 함께 배양한다. 배양 후, 형광 표적 세포들로부터 상청액(supernatant)으로의 염료의 방출은 분광 형광계에 의해 측정한다. 본 발명의 세포독성적으로 활성인 탈면역화된 이중특이적 CD3 결합 구조체는 탈면역화되지 않거나 또는 표적 세포들에 특이성을 가지지 않은 유사한 구조의 생활성(bioactivity)을 측정함으로써 얻어진 비교된 값을 특징으로 한다.
본 발명의 내용에 사용된 "~에 결합/~와 상호작용"이라는 용어는 적어도 두 개의 "항원-상호작용-장소"가 서로 결합/상호작용하는 것을 정의한다. 본 발명에 따른, "항원-상호작용-장소"는 특정 항원 또는 특정 항원군과 특이적으로 상호작용하는 능력을 보이는 폴리펩티드의 모티프(motif)를 정의한다. 상기 결합/상호작용은 또한 "특이적 인식"을 정의하는 것으로 이해된다. "특이적으로 인식함"이란 용어는 본 발명에 따르면, 여기서 정의된 각각의 인간 표적 분자들의 적어도 두 개의 아미노산에 항체분자가 특이적으로 상호작용 및/또는 결합할 수 있는 것을 의미한다. 항체들은, 동일한 표적분자 상의 다른 에피토프들을 인식, 상호작용 및/또는 결합 할 수 있다. 상기 용어는, 예를 들어 여기서 정의된 인간 표적 분자의 특정 영역들을 분별하는 능력과 같은, 항체 분자의 특이성에 관한 것이다. 항원-상호작용-장소의 특정 항원과의 특이적 상호작용은, 예를 들어 항원의 구조의 변화, 항원의 올리고머화(oligomerization) 등의 유도에 기인하여, 신호의 개시를 가져올 수 있다. 그래서, 항원-상호작용-장소의 아미노산 서열의 특이적 모티프 및 항원은 그들의 1차, 2차 또는 3차 구조의 결과뿐 아니라 상기 구조의 2차 변형의 결과로 서로 결합한다.
본 발명에서 사용된 "특이적 상호작용"이란 용어는, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체가 유사한 구조체들의 (폴리)펩티드들과 상호-작용하지 않거나, 또는 본질적으로 상호-작용하지 않음을 의미한다. 따라서, 본 발명의 구조체는 인간 CD3와 특이적으로 결합/상호작용하고, 제2의, Ig-유래의 도메인에 기인하여, 특정의 선택된 다른 화합물들, 항원들, 세포 표면 표지들, 종양 표지들 등과 상호작용하는 것이 가능하다. 상기 제2의, Ig-유래의 도메인이 지시되는 상기 분자들의 특별한 예들은 여기서 이하에 제공된다.
연구중인 구조들의 패널의 상호-반응성은 예를 들어, 종래의 조건들 (예를 들면, Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988 및 Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999 참조) 하에서, 관심 있는 (폴리)펩티드들과, 어느 정도 (구조적으로 및/또는 기능적으로) 밀접하게 관련된 다수의 (폴리)펩티드들에 대한 이중특이적 단일 쇄 구조체들의 상기 패널의 결합을 평가함으로써 테스트될 수 있다. 관심 있는 (폴리)펩티드/단백질과 결합하고, 관심 있는 (폴리)펩티드로서 동일한 조직, 예를 들면, 심장 조직의 세포들에 의해 바람직하게 발현되는 다른 어떤 (폴리)펩티드들과는 결합하지 않거나, 반드시 결합하지 않는 오직 그러한 구조들 (예를 들면, 항체들, (이중특이적) scFvs 등)만이, 관심 있는 (폴리)펩티드/단백질에 대해 특이적인 것으로 고려되고, 여기서 제공되고, 첨부한 실시예들에서 자세히 설명된 방법에 따른 추가적인 연구들에 대해 선택된다. 이러한 방법들은 특히, 구조적 및/또는 기능적으로 밀접하게 관련된 분자들의 결합 연구분야, 차단 및 경쟁 연구분야를 포함할 수 있다. 이러한 결합 연구분야들은 또한 FACS 분석, 표면 플라즈몬 공명(surface plasmon resonance)(SPR, 예를 들면, BIAcore®로), 분석적 초원심분리, 등온 적정 열량측정법, 형광 비등방성, 형광 분광법 또는 방사성 표지 리간드 결합 분석 등을 포함한다. 게다가, 세포독성 측정법(실시예들에서 설명한 바와 같이) 및 전술한 측정법과 같은 생리적 측정법들이 수행될 수 있다. 그에 따라, 항원-상호작용-장소의 특정 항원에 대한 특이적 상호작용의 예들은 그 수용체에 대한 리간드의 특이성을 포함할 수 있다. 상기 정의는 특히 그 특이적 수용체에 결합 즉시 신호를 유도하는 리간드들의 상호작용을 포함한다. 대응하는 리간드들의 예들로는 그 특이적 사이토킨-수용체들과 상호작용/결합하는 사이토킨들을 포함한다. 또한 상기 정의에는 셀렉틴(selectin) 패밀리, 인테그린(integrin) 및 EGF 같은 성장인자의 패밀리의 항원 같은 항원에 대한 항원-상호작용-장소의 결합이 포함된다. 또한 특히 상기 정의에 포함되는 상기 상호작용의 또다른 예는 항체의 항원 결합 영역와 항원 결정인자(에피토프)의 상호작용이다.
용어 "결합/상호작용"은 선형 에피토프에 관한 것일 뿐 아니라, 입체형체(conformational) 에피토프, 구조적 에피토프 또는 사람 표적 분자 또는 그 일부의 두 개의 영역으로 이루어진 불연속 에피토프에 관한 것이다. 본 발명에서, 입체형체 에피토프는 폴리펩티드가 원래의 단백질로 접히는(folded) 경우에 분자의 표면상에서 가까워지는 일차 서열에서 분리된 두 개 이상의 불연속(discrete) 아미노산 서열로 정의된다 (Sela, (1969) Science 166, 1365 및 Laver, (1990) Cell 61, 553-6).
용어 "불연속 에피토프"는 본 발명에서 폴리펩티드 쇄의 원격 부분의 잔기들로 조합되는 비-선형 에피토프를 의미한다. 이들 잔기는 폴리펩티드 쇄가 삼차원 구조로 접혀서 입체형체/구조적 에피토프를 구성하는 경우에 분자의 표면상에서 만난다.
본 발명의 구조체는 또한 하기에 기술되는 바와 같이 상술한 인간 CD3 복합체 또는 그 일부의 두 영역으로 이루어지거나 및/또는 이를 포함하는 입체형체/구조적 에피토프(들)에 특이적으로 결합하거나/이와 상호작용하도록 고안된다.
따라서 특이성은 기술 분야에 공지된 방법 및 본 명세서에 기재되고 상세히 설명된 바와 같은 방법에 의해 실험적으로 측정할 수 있다. 이러한 방법은 제한되지 않지만 웨스턴 블롯, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-, EIA-시험 및 펩티드 스캔을 포함한다.
용어 "Ig-유래의 제2 결합 도메인"은 "면역글로불린-유도된 도메인"에 관한 것이며, 특히 항체 또는 그들의 단편, 단일 쇄 항체, 합성 항체, Fab, F(ab2)', Fv 또는 scFv 단편 등과 같은 항체 단편, 또는 이들 중 어느 하나의 화학적으로 변형된 유도체에 관한 것이다. 이러한 항체 분자들은 상이한 종들로부터 유도되거나, 키메라 유래(chimeric origin)일 수 있다. 가장 바람직하게는 (이하에서 상술한 바와 같이), 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체에서 포함되는 상기 Ig-유래의 제2 영역은 scFv이다. 본 발명에 따라 사용될 항체, 항체 구조체, 항체 단편, 항체 유도체(모두 Ig-유래의) 또는 그들의 상응하는 면역 글로불린 쇄(들)은 당해 기술 분야에 공지된 통상적인 기술을 사용하여, 예를 들어 아미노산 결실, 삽입, 치환, 부가, 및/또는 재조합 및/또는 단독으로 또는 이들을 결합하여 당해 분야에 공지된 임의의 변형을 사용하여 더욱 변형할 수 있다. 면역 글로불린 쇄의 아미노산 서열을 기본으로 하는 DNA 서열에 이러한 변형을 도입하는 방법은 당해 분야의 기술자에게 잘 알려져 있다 (예를 들면, Sambrook (1989), loc. cit 참조). 용어 "Ig-유래의 도메인"은 특히 적어도 하나의 CDR을 포함하는 (폴리)펩티드 구조체들에 관한 것이다. 기술된 Ig-유래의 도메인의 단편 또는 유도체는 상기 항체 분자의 일부, 및/또는 화학적/생화학적 또는 분자 생물학적 방법에 의해 변형된 (폴리)펩티드를 정의한다. 상응하는 방법은 당해 분야에 공지되어 있으며 또한 특히 실험실 매뉴얼에 기술되어 있다 (참조, Sambrook 등; 분자 클로닝: 실험실 매뉴얼; Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd edition 1989 및 3rd edition 2001; Gerhardt 등; Methods for General and Molecular Bacteriology; ASM Press, 1994; Lefkovits; 면역학 방법 매뉴얼: The Comprehensive Sourcebook of Techniques; Academic Press, 1997; Golemis; 단백질-단백질 상호작용: 분자 클로닝 매뉴얼; Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2002).
여기서 사용된 용어 "탈면역화된"은 전술한 본 발명의 CD3 결합 구조체의 제1 도메인과 관련한 것이며, 여기에서 상기 제1 도메인은 원래의 야생형 구조체와 비교했을 때 상기 야생의 구조체를 인간에게 비-면역원성 또는 덜 면역원성으로 함으로서 변형된다. 본 발명에 따른 야생의 구조체들은 비-인간 유래의 항체들 또는 그들의 일부(골격 및/또는 CDR)에 관한 것이다. 대응하는 예들은 미국특허 4,361,549 또는 WO 99/54440에 기재된 항체 또는 그것의 단편들이다. 용어 "탈면역화된"은 또한 T-세포 에피토프를 생산하는데 성향이 감소된 구조체들에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 용어 "T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향"은 특정 T-세포 활성화를 초래하는 T-세포 에피토프의 제거에 관한 것이다. 게다가, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향은 T-세포 에피토프의 형성에 기여하는 아미노산의 치환, 예를 들면, T-세포 에피토프의 형성에 필수적인 아미노산의 치환을 의미한다. 즉, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향은 감소된 면역원성 또는 감소된 항원 독립성 T-세포 증식을 유도하는 능력에 관한 것이다. 또한, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향은 탈면역화에 관한 것이며, 이는 항원 독립성 T-세포 증식을 포함하는 아미노산 서열의 잠재 T-세포 에피토프의 손실 또는 감소를 의미한다. 본 발명에 따라, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 가지는, CD3 결합 영역은 비-면역화된 분자에 비해 덜 면역원성이거나 또는 바람직하게는 비 면역원성이지만, 예를 들면, CD3에 결합하는 낮은 또는 비 면역원성 항체 구조체와 같이, 여전히 CD3에 결합하는 능력을 보유한다.
용어 "T-세포 에피토프"는 세포 내에서 펩티드, 폴리펩티드 또는 단백질의 분해시 방출되고, 그 후 T-세포의 활성화를 야기하기 위해 주조직 적합 복합체(MHC) 분자에 의해 표시될 수 있는 짧은 펩티드 서열에 관한 것이다; 특히 WO 02/066514 참조. MHC 클래스 II에 의해 표시되는 펩티드에 대해, T세포의 상기 활성화는 그 후 항체를 생산하기 위해 T세포의 직접적 자극에 의해 항체 반응을 가져온다.
따라서, 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 탈면역화된 제1 도메인은 골격 H3 및 H4 사이에 위치하는 전술한 CDR-H3을 적어도 포함하며, 여기서 상기 제1 결합 도메인은 구조 H3 및 H4 사이에 위치하는 변화없는 야생형 (wt)-CDR-H3을 포함하는 비-면역화된 제1 도메인에 비해 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 보인다. 또한, 상기 탈면역화된 제1 도메인은 적어도 골격 H1 및 CDR-H1의 전이 영역에, 변화없는 골격 H1 및 CDR-H1의 wt-H1 전이 영역을 포함하는 탈면역화되지 않은 제1 도메인에 비해 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 제공하는 전술한 서열 모티프를 포함한다. "T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향" 및/또는 "탈면역화"는 기술분야에서 공지된 방법으로 측정할 수 있다. 바람직하게는, 단백질의 탈면역화는 시험관내에서 T-세포 증식 측정법에 의해 측정할 수 있다. 이러한 측정법에서 전세계의 HLA-DR 대립유전자들의 > 80 %를 나타내는 공여자로부터의 PBMC들은 야생형 또는 탈면역화된 펩티드에 대한 반응으로서의 증식이 스크린닝된다. 이상적으로 세포 증식은 오직 야생형 펩티드들과 함께 항원 제시 세포의 부하에 의해 검출될 수 있다. 선택적으로, 모든 일배체형(haplotype)을 나타내는 HLA-DR 테트라머(tetramer)를 발현함으로서 탈면역화를 실험할 수 있다. 이러한 테트라머는 펩티드 결합용으로 실험될 수 있거나 또는 증식 측정법에서 항원 제시 세포용 펩티드 치환체를 실을 수 있다. 탈면역화된 펩티드가 HLA-DR 일배체형상에 제시되는지를 실험하기 위해, 예를 들면 말초혈액 백혈구 상에 형광-표지된 펩티드들의 결합을 측정할 수 있다. 또한, 탈면역화는 환자에 투여 후 탈면역화된 분자에 대한 항체가 형성되는지 어떤지를 결정하는 것에 의해 입증할 수 있다. 특히 바람직한 방법은, 특히, 첨부한 실시예 6에서와 같은 T-세포 증식 측정법이다.
바람직하게는, T-세포 에피토프를 유도하는 감소된 성향을 생성하기 위해 항체-유래의(derived) 분자들은 골격 영역에서 탈면역화되고, 대부분의 CDR 영역은 변형되지 않아서, CDR 영역의 결합 친화성은 영향받지 않는다. 심지어 하나의 T-세포 에피토프의 제거도 감소된 면역원성을 가져온다. 바람직하게는, 상기 분자는 VL 쇄의 CDR2 영역에서 탈면역화되고, 더욱 바람직하게는 VH 쇄의 CDR2 영역에서, 더욱더 바람직하게는 VL 쇄의 CDR1 영역에서, 더욱더 바람직하게는 VH쇄의 CDR1 영역에서, 더욱 바람직하게는 VL 쇄의 골격 영역(FR)에서, 가장 바람직하게는 VH 쇄의 골격 영역(FR)에서 탈면역화된다.
여기서 사용된 용어 "CDR"은 "상보 결정 영역(complementary determining region)"에 관한 것이며, 이는 당 기술분야에 잘 알려져 있다. CDR은, 상기 분자의 특이성을 결정하고 특정 리간드와 접촉하게 하는, 면역글로불린 및 T-세포 수용체의 일부이다. CDR은 분자의 가장 가변적인 부분이며, 이러한 분자들의 다양성에 기여한다. 각 V 도메인에는 CDR1, CDR2 및 CDR3의 CDR 영역이 있다. CDR-H는 가변 중쇄(heavy chain)의 CDR 영역을 나타내고, CDR-L은 가변 경쇄(light chain)의 CDR q영역이다. H는 가변 중쇄를 의미하고 L은 가변 경쇄를 의미한다. Ig-유래의 영역의 CDR 영역은, Kabat (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th edit., NIH Publication no. 91-3242 U.S. Department of Health and Human Services, Chothia (1987). J. Mol. Biol. 196, 901-917 및 Chothia (1989) Nature, 342, 877-883 에 기재된 바와 같이 결정될 수 있다.
일반적으로 CDR-L1은 10-17 아미노산 잔기로 구성되며, 대략 Ig-유래의 서열의 전 VL 영역의 아미노산 잔기 24 및 CDR-L1에 선행하는 잔기 Cys에서 시작한다. 바람직하게는, 잔기 Trp는 CDR-L1을 따른다. CDR-L2는 바람직하게는 CDR-L1 이후의 16 아미노산 잔기에서 시작하며, 바람직하게는 7개의 잔기로 구성된다. 바람직하게는, 아미노산 잔기 Ile-Tyr 뿐 아니라, Val-Tyr, Ile-Lys, Ile-Phe도 CDR-L2에 선행한다. CDR-L3는 바람직하게는, CDR-L2 이후의 33 아미노산 잔기에서 시작하며, 바람직하게는, 7-11 잔기로 구성된다. CDR-L3는 바람직하게는, 잔기 Cys에 후속하고, 또한 바람직하게는, 잔기 Phe-Gly-Xaa-Gly는 CDR-L3에 바로 후속한다. CDR-H1는, 바람직하게는, 10-12 잔기로 구성되며, 바람직하게는, VH 영역의 처음으로부터 대략 잔기 26에서 시작한다. 바람직하게는, 잔기 Trp은 CDR-H1에 후속한다. CDR-H2는, 바람직하게는, CDR-H1의 말단 이후의 15 아미노산 잔기에서 시작하며, 바람직하게는, 16 내지 19 잔기로 구성된다. 바람직하게는, 잔기 Lys/Arg-Leu/Ile/Val/Phe/Thr/Ala-Thr/Ser/Ile/Ala는 CDR-H2에 후속한다. CDR-H3는 CDR-H2 이후의 33 아미노산 잔기에서 시작하고, 3-25 아미노산 잔기의 길이를 갖는다. CDR-H3는 서열 Cys-Xaa-Xaa(바람직하게는 Cys-Ala-Arg)에 후속하고, 잔기 Trp-Gly-Xaa-Gly는 CDR-H3에 후속한다. CDR 영역의 구조는 http://www.bioinf.org.uk/abs/에 기재되어 있다.
전술한 CDR-H1 및 CDR-H2 영역은 인간 CD3와 특이적으로 결합/상호작용할 수 있는 항체 분자로부터 유도된다. 상기 CD3 특이적 항체는 기술분야에서 공지이며 특히 모노클로널 항체 OKT-3, TR-66 또는 X35-3, VIT3, BMA030 (BW264/56), CLB-T3/3, CRIS7, YTH12.5, F111-409, CLB-T3.4.2, TR-66, WT32, SPv-T3b, 11D8, XIII-141, XIII-46, XIII-87, 12F6, T3/RW2-8C8, T3/RW2-4B6, OKT3D, M-T301, SMC2, F101.01, UCHT-1 또는 WT-31를 포함한다. 모든 상술한 항-CD3 항체는 인간 특이적이며, 본 발명에 따라 다양한 CDR 영역, 특히 항체의 CDRH 영역에 결합할 수 있다.
더 바람직한 실시 형태에서, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 가진 상기 CD3 특이적 도메인의 상기 CDR-H1 및 CDR-H2 영역은 WO 99/54440에 기재된 항체 구조체로부터 유도된다. 더욱더 바람직한(및 첨부한 실시예들에서 자세히 설명한) 상기 CDR-H1 및 CDR-H2 영역 및 CDR-H3 영역은 Traunecker (1991), EMBO J. 10, 3655-3659 에 기술된 CD3 분자에 대해 특이성을 갖는 항체/항체 유도체로부터 유도된다. 본 발명에 따라, 상기 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3 영역은 다른 TCR 서브유닛의 내용에서, 예를 들어 인간의 CD3-ε쇄가 유전자 도입된 마우스 세포에서, 인간의 CD3-ε쇄를 특이적으로 인식할 수 있는 항체/항체 유도체 등으로부터 유도된다. 이들 유전자 도입된 마우스 세포는 천연 또는 거의 천연 입체형태로 인간의 CD3-ε체인을 발현한다.
본 발명에 따라, 골격 영역은 항원과 접촉하도록 초가변(hypervariable) 상보 결정 영역(CDR)에 대한 단백질 골격을 제공하는, 면역글로불린 및 T-세포 수용체의 V 도메인(VH 또는 VL 도메인) 내의 영역에 관한 것이다. 각각의 V도메인에는, FR1, FR2, FR3 및 FR4로 지정된 4개의 골격 영역이 있다. 골격 1은 V 도메인의 N-단말로부터 CDR1의 시작까지의 영역을 둘러싸고, 골격 2는 CDR1 및 CDR2 사이의 영역에 관한 것이고, 구조 3은 CDR2 및 CDR3 사이의 영역을 둘러싸고, 골격 4는 CDR3의 끝에서부터 V 도메인의 C-단말까지의 영역을 의미한다; 특히 Janeway, Immunobiology, Garland Publishing, 2001, 5th ed. 참조. 그러므로, 골격 영역은 VH 또는 VL 도메인 내의 CDR 영역 바깥의 모든 영역을 둘러싼다. 또한, 용어 "구조 및 CDR 영역 사이의 전이 서열"은 골격 및 CDR 영역 사이의 직접 접합(direct junction)에 관한 것이다. 특히, 용어 "골격 및 CDR 영역 사이의 전이 서열"은 CDR 영역 또는 CDR 영역을 둘러싸는 아미노산의 N- 및 C- 말단에 직접적으로 위치하는 서열에 관한 것이다. 그러므로, 골격는 또한 상이한 CDR 영역 간의 서열을 포함할 수 있다. 당업자는 손쉽게 주어진 서열로부터 골격 영역, CDR 및 대응하는 전이 서열을 추론할 수 있다; Kabat (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th edit., NIH Publication no. 91-3242 U.S. Department of Health and Human Services, Chothia (1987). J. Mol. Biol. 196, 901-917 및 Chothia (1989) Nature, 342, 877-883. 참조.
바람직한 세포독성적으로 활성인 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는 또한 상기 제1 도메인 내에 서열 Met-Glu-Leu-Ser (MELS; 서열식별번호: 234)을 포함하는 골격 H3을 포함한다. 더욱 바람직한 본 발명의 구조체는 상기 제1 도메인 내에 서열 Ile-Thr-Thr-Asp-Lys (ITTDK; 서열식별번호: 235)를 포함하는 골격 H3을 포함한다.
본 발명에 따라, 인간 CD3에 특이적으로 결합/상호작용하고, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 갖는 본 발명 구조체의 제1 도메인은 여기서 정의한 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3 영역을, 바람직한 실시태양에서, 전술한 VH-골격(골격 1,2,3,4), 특히 서열식별번호: 152 또는 153, 156 또는 157, 160 또는 161 및/또는 164 또는 165의 어느 하나에서 보인 것과 같은 것을 포함한다. 그러므로, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는 특이적으로 인간 CD3에 결합하고, 서열식별번호 152 또는 153에서 보인 것과 같은 골격 영역 1, 서열식별번호 156 또는 157에서 보인 것과 같은 골격 영역 2, 서열식별번호 160 또는 161에서 보인 것과 같은 골격 영역 3 및/또는 서열식별번호 164 또는 165에서 보인 것과 같은 골격 영역 4를 포함하는 제 1 도메인을 포함한다.
본 발명의 특히 바람직한 실시 형태에서, 세포독성적으로 활성인 탈면역화된 CD3 특이적 결합 구조체는 그 제1 도메인에 (a) 서열식별번호: 88로 나타낸 CDR-H1; 및 (b) 서열번호 90 또는 92로 나타낸 CDR-H2를 포함한다.
따라서, 변형된 CDR-H1 및 CDR-H2 영역은 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 가져오며, CD3-ε쇄 특이적 항체로부터 유도된다. 본 발명에 따라 가장 바람직하게는 상기 (모) 항체는 TCR 복합체의 내용중에 존재하는 인간의 CD3의 입체형태 에피토프 또는 천연 또는 거의 천연 구조를 반영하는 에피토프를 특이적으로 결합할 수 있어야 한다.
바람직하게는, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는 서열식별번호 74 또는 76으로 나타낸 VH-영역을 포함한다. 서열식별번호 74는 예시가 되는 탈면역화된 가변의 중 영역(heavy region)을 나타내며, 이와 유사하게 서열식별번호 76은 예시가 되는 탈면역화된 가변 중 영역을 나타낸다.
바람직하게는, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는 서열식별번호 98 또는 100에 나타낸 것과 같은 CDR-L1, 서열식별번호 102에 묘사된 CDR-L2 및/또는 서열식별번호 104에 나타낸 CDR-L3을 포함한다.
본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는, 바람직한 실시태양에서, VL 영역을 그 CD3-특이적 부위에 포함하며, 여기서 상기 VL 영역은 서열식별번호 78, 서열식별번호 80, 서열식별번호 82 및 서열식별번호 112를 포함하는 그룹으로부터 선택된다. 서열식별번호 78을 특징으로 하는 VL1, 서열식별번호 80을 특징으로 하는 VL2 및 서열식별번호 82를 특징으로 하는 VL3은 본 발명에 따른 모두 탈면역화된 VL 영역에 관한 것이며, 또한 이들은 전술한 VH 영역과 다양하게 조합되어 사용될 수 있다. 게다가, 탈면역화 되지않은 VL 영역을, 본 발명에 따라, 전술한 탈면역화된 VH 영역과 조합하는 것이 또한 예견된다. 본 발명의 세포독성적으로 활성인 CD3 결합 구조체에 바람직하게 사용된 대응하는 탈면역화 되지않은 VL-영역은, 서열식별번호 112에 나타낸다. 따라서, 본 발명의 CD3 구조체의 전술한 "제1 도메인"의 중쇄 부분만이 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 갖도록 변형될 수 있는 것은 아니다. 상기 도메인은 대응하는 가변 경쇄 부분들을 포함하는 것이 또한 예견된다. 서열식별번호 78, 80, 및 82는, 예를 들어, WO 99/54440에 기재된 구조의 CD3 결합 부분의 탈면역화된 VL1, VL2 및 VL3 영역들을 나타낸다.
전술과 같이, 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는, 가장 바람직하게는, scFv인 Ig-유래의 제2 도메인을 포함한다. 따라서, 본 발명의 가장 바람직한 실시 형태에서는, 인간 CD3에 대한 하나의 특이성 및 제2 scFv에 의해 매개되고, 추가적인 분자/화합물에 대해 유도되고/상호작용할 수 있는 추가의 특이성을 가진 탈면역화된, 이중특이성 단일 쇄 항체 구조체를 제공한다. 이러한 추가적인 분자/화합물은 세포 표면 분자, 종양 표지, 종양 항원 등을 포함한다. 상기 추가적인 화합물/분자는 이하에서 예시되고 특정 구조 또한 첨부한 실시예에 제공된다.
용어 "이중특이성 단일 쇄 항체 구조체"는 두 개의 항체 유래 결합 도메인, 바람직하게는 scFvs를 포함하는 구조체에 관한 것이다. 상기 결합 도메인 중의 하나는 인간의 CD 3 항원 (표적 분자 1)에 특이적으로 결합/상호작용할 수 있는 항체, 항체 단편 또는 그들의 유도체의 가변 영역(또는 그들의 일부)으로 이루어진다. 제2 결합 도메인은 아래에서 정의된 바와 같이 다른 (인간) 항원 (표적 분자 2)에 특이적으로 결합/상호작용할 수 있는 항체, 항체 단편 또는 그들의 유도체의 가변 영역(또는 그들의 일부)으로 이루어진다. 따라서, 상기 제2 결합 도메인은, 본 발명에 따라, 세포 표면 분자 및/또는 종양 특이적 표지에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용-장소를 포함하는 전술한 Ig-유래의 제2 도메인이다. 이중특이성 구조체 내의 상기 2 도메인/영역, 바람직하게는 상기 이중특이적 단일 쇄 항체 구조체는, 바람직하게는 단일 쇄로 서로 공유 결합된다. 이 결합은 직접적으로 (도메인1 [전술한 바와 같이, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 포함하고, CDR-영역 또는 CDR-영역 및 골격 영역을 포함하는 인간 CD3 항원에 대해 특이적인]-도메인 2 [세포 표면 분자 및/또는 종양 특이적 표지에 특이적인] 또는 도메인 1 [세포 표면 분자 및/또는 종양 특이적 표지에 특이적인]- 도메인 2 [전술한 바와 같이, T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 포함하고, CDR-영역 또는 CDR-영역 및 골격 영역을 포함하는 인간 CD3 항원에 대해 특이적인]) 또는 추가의 폴리펩티드 결합 서열 (도메인 1-링커 서열-도메인 2)을 통하여 수행될 수 있다. 링커가 사용되는 경우에, 이 링커는 제1 및 제2 도메인의 각각이, 서로 독립적으로, 그들의 차등 결합 특이성을 유지함을 보장하는데 충분한 길이 및 서열이 바람직하다. 전술과 같고, 첨부한 실시예에서 상세히 설명한 바와 같이, 바람직하게는, 여기서 정의된 적어도 두 개의 도메인을 포함하는 CD3 특이적 결합 구조체는 "이중특이적 단일 쇄 항체 구조체"이고, 더욱 바람직하게는 이중특이성 단일 쇄 Fv (scFv)이다. 상기 구조체를 약학적 조성물의 내용물에 사용하는 것을 특히 고안하였다. 이중특이적 단일 쇄 분자는 당해 분야에 공지되어 있으며 또한 WO 99/54440, Mack, J. Immunol. (1997), 158, 3965-3970, Mack, PNAS, (1995), 92, 7021-7025, Kufer, Cancer Immunol. Immunother., (1997), 45, 193-197, Loffler, Blood, (2000), 95, 6, 2098-2103 및 Bruhl, J. Immunol., (2001), 166, 2420-2426에 기재되어 있다. 본 발명의 특히 바람직한 분자형태는 본 발명의 구조체의 CD3 특이적 결합 도메인이 전술과 같이 적어도 하나의 VH 및 하나의 VL 영역을 포함하는 폴리펩티드 구조체를 제공한다. 여기서 정의되고 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 갖는 VH-영역에 더하여, 상기 특이적 결합 구조체는 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 갖는 추가적인 영역/도메인을 포함할 수 있음을 주목해야 한다. 전술한 것과 같이, VL-영역 및/또는 대응하는 골격 역시 본 발명에 따라 T-세포 에피토프 생산에 대해 감소된 성향을 갖도록 설계된 아미노산 스트레치(stretche)를 포함할 수 있다. scFV 형태에서, 링커-도메인에 의해 서로 결합된, VH-도메인 및 VL-도메인의 분자 내 배향은 기술된 이중특이성 단일 쇄 구조체들에 결정적이지 않다. 따라서 두 개의 가능한 배열(VH-도메인-링커 도메인 - VL-도메인; VL -도메인-링커 도메인-VH-도메인)을 갖는 scFv는 기술된 이중특이성 단일 쇄 구조체의 특수한 실시태양이다. CD3 특이적 도메인은 이중특이성 분자 내에서 N- 또는 C-말단에 위치할 수 있다. 각 도메인의 VH 및 VL 영역은 다른 순서로 배열될 수 있다. (VH-VL 또는 VL-VH).
본 발명에 따라 사용되는 용어 "단일 쇄"는 이중특이성 단일 쇄 구조체의 상기 제1 및 제2 도메인이 바람직하게는 단일 핵산 분자에 의해 엔코딩된 공-선형(co-linear) 아미노산 서열의 형태로 공유 결합되는 것을 의미한다.
본 발명의 구조체는 여기서 정의된 제1 도메인 및 Ig-유래의 제2 도메인에 더하여, 예를 들면, 재조합으로 생산된 구조의 분리 및/또는 제조용의 추가적인 도메인을 포함할 수 있음을 주목해야 한다.
본 발명에 따라, 본 발명의 CD3 구조체의 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 전술한 제1 도메인만이 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 가질 수 있는 것은 아님을 주목해야 한다. Ig-유래의 제2 도메인 및/또는 (a) 결합-링커-영역(들)은, 예를 들어 인간화 및/또는 또한 탈면역화되어 변형되는 것이 또한 예견된다.
전술과 같이, 탈면역화 접근은 특히 WO 00/34317, WO 98/52976, WO 02/079415 또는 WO 02/012899 및 첨부한 실시예들에 개시되어 있다. 이러한 접근은 잠재적 T세포 에피토프 내의 아미노산의 치환의 수행을 수반한다. 이런 식으로, 주어진 서열이 세포 내 단백질 가공 중 T 세포 에피토프를 생성시킬 가능성은 감소한다. 또한, WO 92/10755는 단백질상 항원 결정기를 처리하는 접근을 기재하고 있다. 특히, 단백질들은 에피토프 매핑되고, 그들의 아미노산 서열은 유전공학을 통해 변화된다.
또한, "인간화 접근"은 기술 분야에서 공지이며, 특히 항체 분자, 예를 들면 Ig-유래의 분자에 대해 기재되어 있다. 용어 "인간화된"은 비-인간 항체로부터 유래한 서열의 일부분을 포함하는 비-인간(예를 들면, 마우스)의 항체 또는 그 단편(예를 들어, 항체의 Fv, Fab, Fab' F(ab'), scFvs,또는 다른 항원-결합 부분 서열)의 인간화된 형태에 관한 것이다. 인간화된 항체는 인간 면역 글로불린의 상보 결정 영역(CDR)으로부터의 잔기가, 원하는 결합 특이성, 친화성 및 능력을 갖는 마우스, 쥐, 또는 토끼와 같은 비-인간 종의 CDR로부터의 잔기로 치환된, 인간 면역 글로불린을 포함한다. 일반적으로, 인간화된 항체는 실질적으로 적어도 하나, 및 일반적으로 두 개의 모든 가변 도메인을 포함할 수 있으며, 비-인간 면역 글로불린의 도메인에 대응하는 CDR 영역의 모두 또는 실질적으로 모두와, FR 영역의 모두 또는 실질적으로 모두는 인간 면역글로불린 공통 배열의 도메인이다. 인간화된 항체는 또한 선택적으로 적어도 일부의 면역 글로불린 불변 영역(Fc), 일반적으로는 인간 면역글로불린의 불변 영역을 포함한다; 특히 Jones 등, Nature 321:522-525 (1986), Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992) 참조.비-인간 항체의 인간화 방법은 기술 분야에서 공지이다. 일반적으로, 원래의 항체의 결합 활성을 여전히 보유하면서, 인간화된 항체는 인간 항체와 더욱 밀접하게 닮기 위해 비-인간으로부터 유래된 하나 이상의 아미노산을 그 안에 도입하여 가진다. 항체/항체 분자의 인간화 방법은 Jones 등, Nature 321:522-525 (1986); Riechmann 등, Nature 332:323-327 (1988); 및 Verhoeyen 등, Science 239:1534-1536 (1988)에 더욱 자세히 기재되어 있다. 인간화된 항체의 특정 예들, 예를 들면 EpCAM에 대해 지시되는 항체는 기술분야에서 공지이다. 예를 들어, (LoBuglio, Proceedings of the American Society of Clinical Oncology (Abstract). 1997, 1562 and Khor, Proceedings of the American Society of Clinical Oncology (Abstract), 1997, 847)를 참조.
따라서, 본 발명의 내용에는, 특히 이중특이성 단일 쇄 항체 구조체들이 제공되며, 이들은 탈면역화되고, 약학적 조성물에 성공적으로 사용될 수 있다.
전술한 바와 같이, 전술한 CD3 특이적 결합 구조체의 Ig-유래의 제2 도메인은 세포 표면 분자에 특이적인 항원-상호작용-장소를 포함할 수 있다.
여기서 사용된 용어 "세포 표면 분자"는 또한 세포의 표면상에 존재하는 분자를 나타낸다. 용어 "세포 표면 분자"는 세포의 표면상에 존재하며 Ig-유래의 결합 도메인에, 바람직하게는 항체, 항체 단편 또는 유도체들에 (생체 외 또는 생체 내에서) 접근할 수 있는 도메인 또는 에피토프를 구성하는, 분자에 관한 것이다. 전술한 바와 같이, 가장 바람직하게는 상기 Ig-유래의 도메인은 scFv이다. 상기 세포 표면 분자들에 대한 예로는 막 및 막횡단 단백질, 상기 단백질 또는 세포 표면 등에 적용되는 분자들이 있다. 본 발명의 더욱 바람직한 실시형태에 따라 상기 세포 표면 분자는 종양 특이적 마커(marker)이다. 본 발명의 내용에서, 용어 "종양 특이적 표지"는 분자에 관한 것이며, 이는 종양 세포의 표면상에 존재 및/또는 위치하거나 또는 어디에서도 발현되지만 종양 세포의 표면상에서 항체, 항체 단편 또는 항체 유도체의 결합에 대해서만 접근할 수 있다. 종양 표지의 예들은 이하에 제공되며, 여기에 한정되는 것은 아니지만, EpCAM, CD19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (점액소), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC5B, MUC7, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, CD44v6, Wue-1, 혈장 세포 항원(WO 01/47953 참조), 막-결합(membrane-bound) IgE, 흑색종 콘드로이틴 황산염 프로테오글리칸(MCSP), STEAP, 메소텔린(mesothelin), 전립선 줄기세포 항원 (PSCA), sTn (sialylated Tn 항원), FAP (피브로블라스트 활성화 항원), EGFRvIII, Igα, Igβ, MT-MMPs, 코라 항원(Cora antigen), EphA2, L6 및 CO-29를 포함한다.
본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체의 Ig-유래의 제2 도메인은 EpCAM, CCR5, CD19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (점액소), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC5B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, 강글리오시드 GD3, 9-O-아세틸-GD3, GM2, 글로보(Globo) H, 퓨코실(fucosyl) GM1, 폴리 SA, GD2, 카르보안하이드라제 IX (MN/CA IX), CD44v6, 음파 고슴도치(Sonic Hedgehog) (Shh), Wue-1, 혈장 세포 항원, (막-결합) IgE, 흑색종 콘드로이틴 황산염 프로테오글리칸(MCSP), CCR8, TNF-알파 전구체, STEAP, 메소텔린(mesothelin), A33 항원, 전립선 줄기세포 항원(PSCA), Ly-6; 데스모글레인(desmoglein) 4, E-카드헤린 네오에피토프(cadherin neoepitope), 태아 아세틸콜린 수용체, CD25, CA19-9 표지, CA-125 표지 및 뮐러관 억제 물질 (MIS) 수용체 타입 II, sTn (sialylated Tn antigen), FAP (피브로블라스트 활성화 항원), 엔도시아린(endosialin), EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-항원, 코라 항원, CD7, CD22, Igα(CD79a), Igβ(CD79b), G250, gp100, MT-MMPs, F19-항원, CO-29 및 EphA2로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 분자에 대해 특이성을 가진 항원-상호작용 장소를 또한 포함할 수 있다.
여기서 제공된 구조체들은 의학적 세팅에 특히 유효하다. 예를 들면, 종양성 질환 및/또는 림프종, 바람직하게는 비(非)-호지킨 B-세포 림프종은 인간 CD3 및 CD20 (CD3xCD20 또는 CD20xCD3)에 대해 지시된 본 발명의 탈면역화된(이중특이적) 구조체로 치료할 수 있다. 자가면역 질환은 인간 CD3 및 CD30 또는 CD19 (예를 들면, CD3xCD30 또는 CD30xCD3 또는 CD3xCD19 또는 CD19xCD3)에 대해 지시된 탈면역화된(이중특이적) 구조체를 투여함으로써 치료할 수 있다. 류마티스 관절염, 및 기타 염증성 질환은 인간의 CD3 및 CCR5 (CD3xCCR5 또는 CCR5xCD3)에 대해 지시된 본 발명의 탈면역화된 (이중특이적) 구조체로 치료할 수 있다. 여기서 정의되고 TNF-알파 전구체에 대해 지시되고/결합하는 제2 Ig-유래의 도메인을 포함하는 탈면역화된 CD3 특이적 결합 구조체는 또한 염증성 질환의 치료 또는 예방에 유용할 수 있다. 여기서 정의되고 EpCAM, CD19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (점액소), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC5B, MUC7, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, CD44v6, Wue-1, 혈장 세포 항원 (WO 01/47953 참조), (막-결합) IgE, 흑색종 콘드로이틴 황산염 프로테오글리칸 (MCSP), STEAP, 메소텔린(mesothelin), 전립선 줄기세포 항원 (PSCA), sTn (sialylated Tn antigen), FAP (fibroblast activation antigen), EGFRvIII, Igα, Igβ, MT-MMPs, 코라 항원, EphA2, L6 및 CO-29에 대해 지시되고/결합하고/상호작용하는 제2의, Ig-유래의 도메인을 포함하는 CD3 구조체는 특히 유방암, 결장암, 전립선암, 두경부암, 피부암(흑색종), 예를 들어 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암 및 신장암과 같은 비뇨-생식관의 암, 폐암, 위암, 소장암, 간암, 췌장암, 쓸개암, 쓸개관암, 식도암, 침분비선의 암 및 갑상선암과 같은 종양성 질환, 또는 혈액암, 신경교종(gliomas), 육종 또는 골육종과 같은 기타 종양성 질환의 의학적 처치에 유용할 수 있다. CD3 결합 구조체의 투여는 또한 미세 잔류 질환(minimal residual disease), 바람직하게는 초기 고형 종양, 진행된 고형 종양 또는 전이된 고형 종양에 대해 지시된다.
또한 첨부한 실시예에서 보인 바와 같이, 본 발명의 특히 바람직한 CD3 특이적 결합 구조체는 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 갖는 전술한 제1 도메인 및 EpCAM에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 제2의, Ig-유래의 도메인을 포함한다.
상피세포 부착분자(EpCAM, 또한 17-1A 항원, KSA, EPG40, GA733-2, ks1-4 또는 esa로 호칭됨)는 특정한 상피 및 많은 사람 암종에서 특이성 발현을 하는 314개 아미노산의 40-kDa 막(membrane)-통합 당단백질이다 (참고: Balzar, J. Mol. Med. 1999, 77, 699-712). EpCAM은 마우스의 모노클로날 항체 17-1A/에드레콜로맵에 의한 인식을 통해 발견되고 이어서 클로닝 되었다 (Goettlinger, Int J Cancer. 1986; 38, 47-53 및 Simon, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990; 87, 2755-2759). EpCAM은 방향성을 갖고 매우 정돈된 방식으로 상피세포들을 부착시키는 작용을 한다 (Litvinov, J Cell Biol. 1997, 139, 1337-1348). 상피세포의 악성 세포 전환시, 빠르게 성장하는 종양세포는 상피의 높은 세포 질서를 이탈한다. 그 결과, EpCAM의 표면 분포는 덜 제한되고 또한 분자는 종양 세포에 더 잘 노출되며, 종양 세포의 표면상에 항체, 항체 단편 또는 항체 유도체의 결합이 접근가능하다. 이들의 상피세포 기원 때문에, 대부분의 암종으로부터의 종양 세포는 그들의 표면상에 EpCAM을 발현한다.
생체 내에서, EpCAM의 발현은 증가된 상피 증식과 관련되어 있으며 또한 세포 분화와 역으로 상호관련되어 있다 (참고: Balzar, 1999, J. Mol. Med. 77, 699-712). EpCAM의 발현은 모든 주요 암종에서 필수적으로 나타낸다 (참고: Balzar, J Mod Med. 1999, 77, 699-712 또는, 특히, De Bree, Nucl Med Commun. 1994, 15, 613-27; Zhang, Clin Cancer Res. 1998, 4, 295-302에 기재됨.). 널리 퍼진 발현 때문에, EpCAM은 "범 암종"(pancarcinoma) 항원으로 불린다. 많은 경우에, 종양 세포는 이들의 기원(parental) 상피 또는 상기 암의 덜 공격성 형태보다 훨씬 더 높은 정도로 EpCAM을 발현하는 것으로 관찰되었다. 예를 들면, 증가된 EpCAM 발현은 전립선암의 발달에서 초기 단계를 나타낸다 (Poczatek, J Urol., 1999, 162, 1462-1644). 그 외에, 자궁경부의 편평상피 및 샘암종의 대부분에서, 강한 EpCAM 발현은 증가된 증식및 말단 분화에 대한 표지의 소멸과도 상호관련된다 (Litvinov, Am. J. Pathol. 1996, 148, 865-75). 유방암에서, 종양 세포 상 EpCAM의 과잉 발현은 생존의 예측자이다. (Gastl, Lancet. 2000, 356, 1981-1982). 더욱이, EpCAM은 머리, 목, 및 폐의 편평세포암종(squamous cell carcinoma)을 겪고 있는 환자의 퍼져 있는 종양 세포의 검출을 위한 마커(marker)이다 (Chaubal, Anticancer Res 1999, 19, 2237-2242, Piyathilake, Hum Pathol. 2000, 31, 482-487). 외피, 구강, 후두개, 인두, 후두 및 식도에서 발견되는, 정상 편평상피는 EpCAM을 현저하게 발현하지 않았다.(Quak, Hybridoma, 1990, 9, 377-387). EpCAM은 대부분의 일차, 전이성 및 범발성 NSCLC (비-소형 세포 폐암 세포)에 대해 (Passlick, Int J Cancer, 2000, 87, 548-552), 위 및 위-식도 접합부 샘암종에 대해(Martin, J Clin Pathol 1999, 52, 701-4) 또한 결장, 췌장 암종 및 유방암종으로부터 유도된 세포주에서 (Szala, Proc Natl Acad Sci USA 1990, 87, 3542-6, Packeisen, Hydridoma, 1999, 18, 37-40) 발현하는 것으로 나타났다.
가장 바람직한 실시태양에서, EpCAM에 대해 지시되고/결합하는 제2 Ig-유래의 도메인을 포함하는 본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는 다음 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.
(a) 서열식별번호: 31, 33, 35, 37, 39, 49, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323 및 325의 어느 하나에 나타낸 바와 같은 아미노산 서열;
(b) 서열식별번호: 30, 32, 34, 36, 38, 48, 54, 57, 60, 62, 64, 66, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322 및 324의 어느 하나에 나타낸 바와 같은 핵산 서열로부터 엔코딩된 아미노산 서열; 및
(c) 상기 (b)의 뉴클레오티드 서열에 대한 유전부호의 결과로서 디제너레이티드되는(degenerated) 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열.
따라서, 본 발명은, 특히 바람직한 실시태양에서 T-세포 에피토프를 생산하는 감소된 성향을 갖는 CD3 결합/상호작용 부분("항-CD3") 및 EpCAM과 특이적으로 상호작용/결합하는("항-EpCAM") 추가적인 단일 쇄 부분(Ig-유래의 도메인)을 포함하는 특이적 CD3 구조체를 제공한다. 다음의 표 1A, 1B, 2A, 2B, 3A, 3B, 4A, 4B, 5A 및 5B는 상기 CD3 및 EpCAM 결합 구조체의 바람직한 구성(configuration)에 관한 것이다.
EpCAM 3-1, EpCAM 3-5, EpCAM 4-1, EpCAM 4-7 및 EpCAM 5-10은 WO99/25818에서 파지(phage) 디스플레이에 의해 분리된 EpCAM에 대한 특이적 단일 쇄 항체에 관한 것이다.
표 1A, 2A, 3A, 4A 및 5A에서 각각의 단백질 구조는, A-G로 나타낸, 7개의 다른 단백질 모듈(module)를 포함한다. 단백질 모듈 A-G는, 단백질 모듈 A는 N-말단에 그리고 단백질 모듈 G는 C-말단에, A-B-C-D-E-F-G의 순서로 펩티드 결합에 의해 단일의 연속된 폴리펩티드 쇄에서 직접 및 공유결합으로 서로 연결된다. 단백질 모듈 A, C, E 및 G는 인간 CD3 또는 EpCAM 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 VH 또는 VL 도메인 중 어느 것도 될 수 있는 항체 가변 도메인을 나타낸다. 모듈 B, D 및 F는 VH 및 VL 도메인을 연결하는 링커이다.
만일 단백질 모듈 A가 VH 항체 도메인인 경우, 단백질 모듈 C 는 VL 단백질 도메인이며, 그 역도 성립한다. 만일 단백질 모듈 E가 VH 항체 도메인인 경우, 단백질 모듈 G는 VL 단백질 도메인이며, 그 역도 성립한다.
인간 CD3 항원에 대해 특이성을 가지는 항체의 탈면역화된 VH 도메인은 서열식별번호: 74 또는 76에 나열된 서열들에서 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 가지는 항체의 탈면역화된 VL 도메인은 서열식별번호: 78, 80 또는 82에 나열된 서열들에서 선택될 수 있다. 인간 EpCAM 3-1, 3-5, 4-1, 4-7 및 5-10 항체의 VH 단백질 도메인은 각각, 서열식별번호: 137, 141, 145, 149 및 133 에 나열된 것이다. 인간 EpCAM 3-1, 3-5, 4-1, 4-7 및 5-10 항체의 VL 단백질 도메인은 각각, 서열식별번호: 139, 143, 147, 151 및 135 에 나열된 것이다.
단백질 모듈 쌍 A/C 및 E/G에 의해 나타낸 항체 가변 도메인의 쌍들은 추가적인 연결 단백질 모듈에 의해 결합되며, 여기서 단백질 모듈 B는 모듈 쌍 A/C를 직접 연결하는 기능을 하고, 단백질 모듈 F는 모듈 쌍 E/G를 직접 연결하는 기능을 한다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G의 어느 것이 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인의 쌍인 경우, 단백질 모듈 B 또는 F는, 각각, 서열식별번호:3 에 나열된 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G의 어느 것이 EpCAM 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH의 쌍인 경우, 단백질 모듈 B 또는 F는, 각각, 서열식별번호: 168에 기술된 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 D는 ABC 및 EFG 모듈 그룹을 연결한다.
단백질 모듈 A-B-C의 조합 및 단백질 모듈 E-F-G의 조합은 각각 인간 CD3 항원 또는 EpCAM 중 어느 것에 대해 특이성을 가지는 항체의 한 scFv 단편을 구성한다. 만일 모듈 A 및 C가 CD3 결합 서열을 나타내면, 단백질 모듈 A-B-C 및 E-F-G의 각 그룹은 서열식별번호 176에 기술된 서열을 가지는, 단백질 모듈 D를 통해서 서로 연결된다. 이와는 달리, 만일 모듈 A 및 C가 EpCAM 결합 서열을 나타내면, 단백질 모듈 A-B-C 및 E-F-G의 각 그룹은 서열식별번호 174에 기술된 서열을 가지는, 단백질 모듈 D를 통해서 서로 연결된다. 따라서, 클로닝 목적으로 VL 쇄의 뒤에 추가적인 세린이 도입될 수 있다. 그러나, 당업자는 VL 도메인을, 후속하는 V 도메인과 연결하기 위해서 서열식별번호 176 대신 서열식별번호 174로 나타낸 링커를 또한 이용할 수 있다. 단백질 모듈 D는 단백질 모듈 C의 C-말단을 단백질 모듈 E의 N-말단과 연결하는 기능을 한다.
표 1B, 2B, 3B, 4B 및 5B에서 각각의 핵산 구조체는 A-G로 나타낸, 7개의 다른 핵산 모듈을 포함한다. 핵산 모듈 A-G는, 각각의 핵산 구조에서 핵산 모듈 A는 5'-말단에 그리고 핵산 모듈 G는 3'-말단에, A-B-C-D-E-F-G의 순서로 인산염 글리코시드 결합에 의해 단일의 인접하는 뉴클레오티드 쇄에서 직접 및 공유결합으로 서로 연결된다. 핵산 모듈 A, C, E 및 G는 인간 CD3 또는 EpCAM 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 VH 또는 VL 도메인 중 어느 것도 될 수 있는 항체 가변 도메인에 대한 코딩 영역을 나타낸다.
만일 핵산 모듈 A가 VH 항체 도메인을 엔코딩하는 경우, 핵산 모듈 C 는 VL 단백질 도메인을 엔코딩하며, 그 역도 마찬가지이다. 만일 핵산 모듈 E가 VH 항체 도메인을 엔코딩하는 경우, 핵산 모듈 G는 VL 단백질 도메인을 엔코딩하며, 그 역도 마찬가지이다.
인간 CD3 항원에 대해 특이성을 가지는 항체의 탈면역화된 VH 도메인을 코딩하는 핵산모듈은 서열식별번호: 73 또는 75에 제시된 서열들에서 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 가지는 항체의 탈면역화된 VL 도메인을 코딩하는 핵산 모듈은 서열식별번호: 77, 79 또는 81에 제시된 서열들에서 선택될 수 있다. 인간 EpCAM 3-1, 3-5, 4-1, 4-7 및 5-10 항체의 VH 단백질 도메인을 코딩하는 핵산 분자는 각각 서열식별번호: 136, 140, 144, 148 및 132에 제시된 것이다. 인간 EpCAM 3-1, 3-5, 4-1, 4-7 및 5-10 항체의 VL 단백질 도메인을 코딩하는 핵산 분자는, 각각 서열식별번호: 138, 142, 146, 150 및 134에 제시된 것이다.
핵산 모듈 쌍 A/C 및 E/G에 의해 나타낸 항체 가변 도메인을 코딩하는 핵산의 쌍들은 추가적인 연결 핵산 모듈에 의해 결합되며, 여기서 핵산 모듈 B는 모듈 쌍 A/C를 직접 연결하는 기능을 하고, 핵산 모듈 F는 모듈 쌍 E/G를 직접 연결하는 기능을 한다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G중 하나가 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인의 쌍을 코딩하는 핵산을 나타내는 경우, 핵산 모듈 B 또는 F는, 각각, 서열식별번호:202 에 제시된 뉴클레오티드 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G중 하나가 인간 EpCAM 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH의 쌍을 코딩하는 핵산을 나타내는 경우, 핵산 모듈 B 또는 F는, 각각, 서열식별번호:201에 제시된 뉴클레오티드 서열을 갖는다.
핵산 모듈 A-B-C의 조합 및 핵산 모듈 E-F-G의 조합은 각각 인간 CD3 항원 또는 EpCAM 항원 중 어느 하나에 대해 특이성을 가지는 항체의 하나의 scFv 단편을 구성한다. 만일 모듈 A 및 C 모듈이 CD3 결합 서열을 포함하면, 핵산 모듈 A-B-C 및 E-F-G의 각 그룹은 서열식별번호 175에 제시된 뉴클레오티드 서열을 가지는, 핵산 모듈 D를 통해서 서로 연결된다. 만일 A 및 C 모듈이 EpCAM 결합 서열을 포함하면, 핵산 모듈 A-B-C 및 E-F-G의 각 그룹은 서열식별번호 173에 제시된 뉴클레오티드 서열을 가지는, 핵산 모듈 D를 통해서 서로 연결된다. 그러나, 전술한 바와 같이, (서열식별번호:175 내의) 세린을 코딩하는 추가적인 코돈이 클로닝 목적으로 삽입될 수 있다. 당업자는 서열번호 173으로 나타낸 링커로 링커의 5'-말단에서 세린을 코딩하는 추가적인 코돈 없이 VL 쇄를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을, 후속하는 V 도메인과 직접 연결할 수 있다. 핵산 모듈 D는 핵산 모듈 C의 3'-말단을 핵산 모듈 E의 5'-말단과 연결하는 기능을 한다.
가장 바람직하게는, 본 발명은 CD3 및 EpCAM에 결합하는 특이성을 포함하고, 서열식별번호: 30, 31 (표 1A 및 1B 의 구조체 2), 서열식별번호: 48, 49 (표 1A, 1B 의 구조체 5), 서열식별번호: 64, 65 (표 2A, 2B 의 구조체 2), 서열식별번호: 54, 55 (표 2A, 2B 의 구조체 5), 서열식별번호: 66, 67 (표 3A, 3B 의 구조체 2), 서열식별번호: 32, 33 (표 4A, 4B 의 구조체 2), 서열식별번호: 34, 35 (표 4A, 4B 의 구조체 4), 서열식별번호: 60, 61 (표 4A, 4B 의 구조체 5), 서열식별번호: 36, 37 (표 5A, 5B 의 구조체 2), 서열식별번호: 38, 39 (표 5A, 5B 의 구조체 4) 또는 서열식별번호: 62, 63 (표 5A, 5B 의 구조체 5)를 갖는 이중특이성 항체 구조체들을 제공한다.
여기에 상기 제공된 구조체들에 따라, 본 발명의 특히 바람직한 CD3 및 EpCAM 결합 구조체는 적어도 상기 기술된, T-세포 에피토프 생성에 대해 감소된 경향을 갖는 제1 도메인 및 제2의 Ig-유래의 EpCAM에 대해 특이성을 갖는 도메인이 서열식별번호: 31, 33, 35, 37, 39, 49, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323 및 325 에 나타난다. 여기에 정의된 상기 바람직한 CD3 및 EpCAM 결합 구조체를 엔코딩하는 상응하는 핵산 분자들은, 서열식별번호: 30, 32, 34, 36, 38, 48, 54, 57, 60, 62, 64, 66, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322 및 324 를 포함한다.
따라서, 본 발명은 또한 인간 CD3에 특이적으로 결합하고 T-세포 에피토프를 생성시키는 경향이 감소된 제1 도메인; 및 하기 (a) 부터 (d)로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는, EpCAM에 대해 지시되는/EpCAM에 결합할 수 있는, Ig-유래의 제2 도메인을 포함하는 CD3 특이적 결합 구조체를 제공한다:
(a) 서열식별번호: 31, 33, 35, 37, 39, 49, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257,.259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323 또는 325 중 어느 하나에 보이는 아미노산 서열;
(b) 서열식별번호: 30, 32, 34, 36, 38, 48, 54, 57, 60, 62, 64, 66, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322 또는 324 중 어느 하나에 보이는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열;
(c) 상기 (b)의 뉴클레오티드 서열에 대한 유전부호의 결과로 디제너레이트(degenerate)된 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열;
(d) 엄격 하이브리드 형성 조건에서 상기 (b)에 정의된 핵산 서열의 상보성 가닥과 함께 하이브리드 형성된 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열.
본 발명은 또한 인간 CD3에 특이적으로 결합하고 T-세포 에피토프를 생성시키는 경향이 감소된 제1 도메인; 및 엄격 하이브리드 형성 조건에서 상기 (b)에 정의된 바와 같은 핵산 서열, 즉 서열식별번호: 30, 32, 34, 36, 38, 48, 54, 57, 60, 62, 64, 66, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322 또는 324 의 어느 하나에 보이는 핵산 서열의 상보성 가닥과 하이브리드 형성하는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열을 포함하는, EpCAM에 대해 지시된/EpCAM에 결합할 수 있는, Ig-유래의 제2 도메인을 포함하는, CD3 특이적 결합 구조체를 제공한다.
"하이브리드 형성"이란 용어는, 여기 정의된 탈면역화된 구조체를 엔코딩하는 폴리뉴클레오티드에 하이브리드 형성을 할 수 있는 폴리뉴클레오티드/핵산 서열을 뜻한다. 그러므로 상기 폴리뉴클레오티드는 RNA 또는 DNA 제조시 각각, 노던 또는 써던 블롯 분석에서 탐침으로서 유용할 수 있고, 또는 그들의 각각의 크기에 따라 PCR 분석에서 올리고뉴클레오티드 프라이머로서 사용될 수 있다. 바람직하게는, 상기 하이브리드 형성 폴리뉴클레오티드는 적어도 길이가 10, 더 바람직하게는 적어도 15 뉴클레오티드를 포함하고, 탐침으로 사용될 본 발명의 하이브리드 형성 폴리뉴클레오티드는 길이가 바람직하게는 적어도 100, 더 바람직하게는 적어도 200 또는 가장 바람직하게는 적어도 500 뉴클레오티드를 포함한다.
핵산 분자들과 어떻게 하이브리드 형성 실험을 수행하는지는 업계에 잘 알려져 있다. 즉, 당업자는 본 발명에 따라 어떠한 하이브리드 형성 조건들을 사용하여야 하는지를 알고 있다. 그러한 하이브리드 형성조건은 "Molecular Cloning A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory (2001) N.Y" 과 같은 표준 교과서에 실려 있다. 본 발명에 따라 바람직한 것은, 엄격한 하이브리드 형성 조건하에서, 본 발명의 폴리뉴클레오티드에 또는 그것의 일부분에 하이브리드 형성할 수 있는 폴리뉴클레오티드이다.
"엄격한 하이브리드 형성 조건"은 예를 들어 50% 포름아마이드, 5x SSC (750 mM NaCl, 75mM 구연산 나트륨), 50mM 소디움 포스페이트 (pH 7.6), 5x 덴하르드트 용액, 10% 덱스트란 설페이트, 및 20㎍/ml 의 변성되고 절단된 연어 정액 DNA를 함유하는 용액 중에 42oC 에서 하룻밤 배양한 다음 약 65oC 에서 0.1 x SSC 중에서 필터를 세척하는 것을 뜻한다. 또한 더 낮은 엄격 하이브리드 조건에서 본 발명의 폴리뉴클레이티드에 하이브리드 형성하는 핵산 분자가 고안되었다. 하이브리드 형성의 엄격 정도의 변화 및 신호 검색은 포름아마이드 농도 (포름아마이드의 더 낮은 백분율은 저하된 엄격함을 야기한다); 염 조건, 또는 온도의 조정을 통하여 주로 달성된다. 예를 들면 더 낮은 엄격함 조건은 6x SSPE (20 X SSPE = 3M NaCl; 0.2 NaH2PO4; 0.02M EDTA, pH 7.4), 0.5% SDS, 30% 포름아마이드, 100㎍/ml 연어 정액 차단 DNA를 포함하는 용액 중에 37oC 에서 하룻밤 배양한 다음; 약 50oC에서 1 x SSPE, 0.1% SDS로 세척함을 포함한다. 그 외에, 훨씬 덜한 엄격함을 달성하기 위하여, 엄격한 하이브리드 형성 후에 수행된 세척은 더 높은 염 농도 (예, 5X SSC)에서 행할 수 있다. 상기 조건에서 변이들은 하이브리드 형성 실험에서 배경을 억제하는데 사용되는 교대(alternate) 차단제의 도입 및/또는 치환을 통하여 달성할 수 있다. 전형적인 차단제는 덴하르드트 제(Denhardt's reagent, BLOTTO, 헤파린, 변성된 연어 정액 DNA, 및 상업적으로 이용 가능한 전매 제형을 포함한다. 특이성 차단제의 삽입은 적합성의 문제로 인하여 상술한 하이브리드 형성 조건의 변형을 필요로 할 수 있다.
기술된 핵산 분자는 예를 들어 DNA, cDNA, RNA 또는 합성으로 생산된 DNA 또는 RNA, 또는 단독으로 또는 조합으로 이들 폴리뉴클레오티드의 어느 것을 포함하는 재조합적으로 생산되는 키메르 핵산 분자일 수 있다.
본 발명에 제공된 탈면역화된 CD3 및 EpCAM 결합 구조체는, 예를 들면 종양질환 특히 유방암, 대장암, 전립선암, 머리 및 목 암, 피부암 (흑색종(melanoma)), 요생식기관 암, 예를 들어 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암 및 신장암, 폐암, 위암, 소장 암, 간암, 췌장암, 담낭암, 단관암, 식도암, 수액선암, 및 갑상선암의 예방, 치료 및/또는 경감에서의 의학 세팅에 특히 유용하다. 특히, CD3 및 EpCAM에 결합하는 탈면역화된 구조체는 상피암, 바람직하게는 선암 또는 최소 잔류 암, 특히 바람직하게는 초기 고형 암, 진행된 고형 암 또는 전이성 고형 암에 사용될 수 있다.
여기에 기술된 CD3 특이적 결합 구조체의 더 특별히 바람직한 실시태양에서, 상기 구조체는, CCR5에 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 제2 Ig-유래의 도메인을 포함한다.
케모카인(chemokine) 수용체 CCR5는 염증유발성(proinflammatory) 케모카인들인 RANTES, MIP1-α, MIP1-β 및 MCP-2 이 결합하는, G 단백질이 결합된 7개의 막횡단 도메인 수용체의 큰 패밀리의 구성원이다. 케모카인은 백혈구의 혈관밖 유출을 유도하기 위해 그리고 그들을 조직 손상 장소로 이동시키기 위해, 부착분자(adhesion molecule)와 협력하여 작용한다. CCR5는 단핵세포 및 T-세포의 소수에서 발현되고, 또한 HIV-감염 경로의 초기에 우세한 M-향성 (M-tropic) HIV-1 스트레인(strain)에 대한 주요 공동-수용체이다.
사람 면역결핍 바이러스(HIV)는 세포 표면에서 두 개의 핵심 분자, 즉 CD4 및 공동-수용체에 먼저 결합되지 않고는 인간의 세포로 들어갈 수 없다. 처음에는 CCR5로 인식되는 공동 수용체는, 그후 바이러스의 생활사의 후기에는 다른 케모카인 수용체 CXCR4가 HIV-1에 대한 공동-수용체가 된다 (D'Souza, Nature Med. 2, 1293 (1996); Premack, Nature Med. 2, 1174; Fauci, Nature 384, 529 (1996)). 대부분 성적 접촉에 의해 전달을 야기하는 HIV-1 스트레인는 M-향성 바이러스로 불린다. 이 HIV-1 스트래인들 (또한 비-합포체유도 (NSI) 일차(primary) 바이러스로 알려짐)은 일차 CD4+ T-세포 및 포식세포(macrophage)에서 복제할 수 있고, 케모카인 수용체 CCR5 (그리고 덜 빈번히는 CCR3)를 그들의 공동수용체로서 사용할 수 있다. T-향성(tropic) 바이러스 (종종 합포체 유도 (SI) 일차 바이러스로 불림)는 일차 CD4+ T-세포에서 또한 복제할 수 있으나, 시험관내에서 확립된 CD4+ T-세포주에도 또한 감염할 수 있는데, 이는 케모카인 수용체 CXCR4 (fusin)을 통해서 행한다. 이들 T-향성 스트레인들의 많은 것들이 CXCR4외에도 CCR5를 사용할 수 있고, 몇몇은 적어도 특정 시험관내 조건에서 CCR5를 통해 포식세포로 들어갈 수 있다 (D'Souza, Nature Med. 2, 1293 (1996); Premack, Nature Med. 2, 1174; Fauci, Nature 384, 529 (1996)). 다른 공동수용체들이 HIV-1 발병기전에 기여하는 지는 밝혀지지 않았지만, 몇몇 T-향성 스트레인들에 대한 다른 공동수용체의 존재는 시험관내 연구로부터 추론될 수 있다. M-향성 HIV-1 스트레인들이 HIV의 성적(sexual) 전달의 약 90%에 관련되기 때문에, CCR5 는 환자 내의 바이러스에 대한 우세한 공동수용체이다; CXCR4-사용 (T-향성) 스트레인의 전달 (또는 전신 확립(systemic establishment))은 매우 드물다 (D'Souza, Nature Med. 2, 1293 (1996); Premack, Nature Med. 2, 1174; Fauci, Nature 384, 529 (1996), Paxton, Nature Med. 2, 412 (1996); Liu, Cell 86, 367 (1996); Samson, Nature 382, 722 (1996); Dean, Science 273, 1856 (1996); Huang, Nature Med. 2, 1240 (1996)). 그렇지만, 일단 SI 바이러스가 생체 내에서 발전되면 (또는 그들이 전달되면), 그들은 특히 독성이고 더 급속한 질병의 진전을 야기한다 (D'Souza, Nature Med. 2, 1293 (1996); Premack, Nature Med. 2, 1174; Fauci, Nature 384, 529 (1996), Schuitemaker, J. Virol. 66, 1354 (1992); Connor, J. Virol. 67, 1772 (1993); Richman, J. Infect. Dis. 169, 968 (1994); R. I. Connor 등, J. Exp. Med. 185, 621 (1997); Trkola, Nature 384, 184 (1996)).
표적 세포에서 공동수용체 분자의 개수 및 특성(identity) 및 HIV-1 스트레인이 상이한 공동수용체들을 통해 세포에 들어갈 수 있을 것 같은 능력은 질병의 진전의 결정적인 결정자로 보인다. 이들 요인들은 HIV-1 감염의 숙주- 및 바이러스-의존 양상의 주요 영향을 주는 요인들이다. 예를 들면, CCR5의 동형접합의 결함 (델타 32)은 생체내 및 시험관내에서 HIV-1 감염에 대한 저항성과 강하게 관련되어 있다. 결함있는 CCR5 대립형질(allele)에 대해 이형접합인 개개는 감염에 대해 기껏해야 약하게 보호되고 질병의 진전이 단지 가장 약하게 느려진다. (Paxton, Nature Med. 2, 412 (1996); Liu, Cell 86, 367 (1996); Samson, Nature 382, 722 (1996); Dean, Science 273, 1856 (1996); Huang 등, Nature Med. 2, 1240 (1996)). 그렇지만, 다른 요인들이, 활성화된 CD4+ T-세포 에서의 CCR5 발현 수준에 영향을 줄 수 있고, 그럼으로써 시험관내 HIV-1 감염의 효율에 영향을 준다 (Trkola, Nature 384, 184 (1996); Bleul, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 1925 (1997)).
다발경화증에 대해, CCR5 및 CXCR3 가 탈수초성 뇌병변(demyelinating brain lesions)를 침투하는 T-세포에서 뿐 아니라, 병걸린 환자의 말초혈액에서 우월하게 발현된다는 것이 보여졌다. T-세포를 제거하면, 이 자가면역병의 T-세포 팔(arm)을 차단할 것이다.
CCR3 및 CCR5 의 높은 발현은 또한 호즈킨병의 환자로부터 유래된 림프절의 T 세포 및 B 세포에서 발견되었다.
당뇨병 타입 I은 T-세포 매개의 자가면역 질병으로 간주된다. CCR5 수용체의 췌장에서의 발현은 관련된 동물모델에서 타입 I 당뇨병의 진전과 연관되었다 (Cameron (2000) J. Immunol. 165, 1102-1110). 특히, CCR5 발현은 인슐린염(Insulinitis) 및 자발성 타입 I 당뇨병의 발전과 연관되었다.
(인간) CCR5 에 특이적으로 결합하는 여러 항체가 당 업계에 알려져 있으며, MC-1 을 포함한다 (Mack (1998) J. Exp. Med. 187, 1215-1224 또는 MC-5 (Blanpain (2002) Mol Biol Cell. 13:723-37, Segerer (1999) Kidney Int. 56:52-64, Kraft (2001) J Biol Chem. 14;276:34408-18). CCR-5 항체, 특히 MC-1 및 MC-5 은 본발명의 CD3 특이성 구조체의 Ig-유래의 제2 도메인에 대한 원천으로서 작용할 수 있다. 따라서, 바람직한 실시태양에서, 본 발명은 인간 CD3에 특이성을 제공하고 T-세포 에피토프를 생성시키는 경향이 감소된 제1 도메인 및 그럼으로써 Ig-유래의 제2 도메인이 (인간) CCR5에 특이성인 항체로부터 유래되는 것인 적어도 두개의 도메인을 포함하는 이중특이성 구조체에 관한 것이다.
MC-1은 인간 CCR5의 제2 세포외 고리(loop)의 제1 부분에 특이적으로 결합하는 것으로 보여졌고 첨부된 실시예에서 보여진 레서스 마카카(rhesus macaques)로부터 유래된 CCR5와는 교차반응하지 않았다. 그러므로, 본 발명의 CD3 특이성 구조체는, 예를 들면, CCR5, 바람직하게는 인간 CCR5 에 특이적인, 항체의 VL 및 VH 도메인 (즉, Ig-유래의 제2 도메인) 및 CD3 항원에 대해 특이적인 VH 및 VL 도메인을 포함한다. 인간 CCR5에 특이적인 상기 항체는, 특히 Mack (1998), J. Exp. Med. 187, 1215-1224 및 첨부된 실시예에 기술된, 마우스의 항-인간 CCR5 항체 MC-1 이다. 그렇지만, (첨부된 실시예 및 Blanpain (2002) Mol Biol Cell. 13:723-37, Segerer (1999) Kidney Int. 56:52-64 및 Kraft (2001) J Biol Chem. 14;276:34408-18 에 기술된 것에 특징지워진 것과 같은) MC-5 와 같은 다른 항-CCR5 항체가 본 발명에서 사용될 수 있다는 것이 예견될 수 있다.
본 발명의 특히 바람직한 실시태양에서, CD3-특이적 결합 구조체가 제공되는데, 그것은 인간 CD3에 대해 지시/인간 CD3에 결합/인간 CD3과 상호작용 하는 탈면역화된 도메인; 및 CCR5에 특이적으로 결합/상호작용하는 제2 Ig-유래의 도메인을 포함한다. 그러한 구조체는 표 6A 및 6B에 나타난다. 표 6A 및 6B 의 모듈 A-G 는 표 1-5에 상기 기술된 바와 같이 정의된다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VH 도메인들은, 서열식별번호: 74 또는 76에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VL 도메인들은, 서열식별번호: 78, 80 또는 82에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CCR5 항체의 VH 단백질 도메인은 서열식별번호: 129 에 기술된 것과 같다. 인간 CCR5 항체의 VL 단백질 도메인은 서열식별번호: 131에 기술된 것과 같다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인들의 쌍이면, 단백질 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 3에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, EpCAM 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH 의 쌍이면, 단백질 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 168에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 단백질 모듈 A-B-C 및 E-F-G 의 각각의 그룹은, 서열식별번호: 174에 기술된 바와 같은 서열을 갖는 단백질 모듈 D 을 통해 서로 연결된다. 그렇지만, 상기 언급된 바와 같이, 추가의 세린이 VL 및 뒤이은 V 도메인 사이에 클로닝 목적을 위해 도입될 수 있다 (서열식별번호:176에 서술된 것과 같은 링커).
인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VH 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들이, 서열식별번호: 73 또는 75에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VL 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 77, 79 또는 81에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CCR5 항체의 VH 단백질 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 128 에 기술된 것과 같다. 인간 CCR5 항체의 VL 단백질 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 130에 기술된 것과 같다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인들의 쌍을 엔코딩하면, 핵산 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 202에 기술된 바와 같은 핵산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, CCR5 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH 의 쌍을 엔코딩하는 핵산을 지칭하면, 핵산 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 201에 기술된 바와 같은 핵산 서열을 갖는다. 핵산 모듈 A-B-C 및 E-F-G 의 그룹은, 서열식별번호: 173에 기술된 바와 같은 서열을 갖는 단백질 모듈 D 을 통해 서로 연결된다. 또다른 링커 서열식별번호:175 가 또한 VL 도메인을 뒤이은 V 도메인 (클로닝 목적을 위한 세린을 코딩하는 추가의 코돈을 포함)과 접합시키는 데 사용될 수 있다.
바람직하게는 상기 구조체는 하기 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다:
(a) 서열식별번호: 206, 208, 210, 212, 214 또는 216 중 어느 하나에 나타낸 바와 같은 아미노산 서열;
(b) 서열식별번호: 205, 207, 209, 211, 213 또는 215 중 어느 하나에 나타낸 바와 같은 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및
(c) 뉴클레오티드 서열 (b)에 대한 유전부호의 결과로서 디제너레이트되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및
(d) 엄격한 하이브리드 형성 조건하에 상기 (b)에 정의한 바와 같은 핵산 서열의 상보적 가닥으로 하이브리드 형성하는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열.
CCR5 및 CD3 결합 구조체 서열식별번호:206, 208, 210 은 표 6의 구조체 5 를 나타내고 서열식별번호:212, 214 및 216 은 구조체 13을 나타내며, 3개의 상이한 VL 영역 (VL1 (서열식별번호:78), VL2 (서열식별번호:80), 또는 VL3 (서열식별번호:82))를 갖는다.
본 발명은 또한, 인간 CD3에 특이적으로 결합하고 T 세포 에피토프를 생성하는 감소된 경향을 갖는 제1 도메인 및 상기 (b)에 정의된 바와 같은 핵산 서열, 즉 서열식별번호: 205, 207, 209, 211, 213 또는 215의 어느 하나에 나타난 것과 같은 핵산 서열의 상보적 가닥과 엄격 하이브리드 형성 조건에서 하이브리드를 형성하는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 CCR5에 대해 지시되고/CCR5에 결합할 수 있는 Ig-유래의 제2 도메인을 포함한다. 용어 "하이브리드 형성" 및 "엄격 조건"은 상기 기술되었다. 여기에 적용된 상응하는 정의들 및 실시태양은 상기 기술된 바와 같다.
여기에 제공된 탈면역화된 CD3 및 CCR5 결합 구조체는 바이러스성 질환, 특히 HIV 감염 및 AIDS, 또는 자가면역 질환 및/또는 류마티스성 관절염과 같은 염증성 질환의 의료적 개입에 특히 유용하다.
또다른 실시태양에서, 본 발명은 상기 정의된 바와 같은 CD3 특이성 결합 구조체를 제공하는데, 본 발명의 구조체의 Ig-유래의 제2 도메인은 CD19에 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함한다 .
CD19는 매우 유용한 의학 표적임이 입증되었다. CD19 은 프로(pro) B 세포로부터 성숙 B 세포에 이르기까지 전체 B 세포 계보에서 발현된다. 이것은 흩어지지 않고, 모든 림프종 세포에서 균일하게 발현되고 줄기 세포에는 없다 (Haagen, Clin Exp Immunol 90 (1992), 368-75; Uckun, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 (1988), 8603-7). CD19에 대해 지시되는 항체 및 추가의 면역조절 항체 모두를 사용하는 조합 치료법이 B 세포 악성종양의 치료 (WO 02/04021, US2002006404, US2002028178) 및 자가 면역 질환 (WO 02/22212, US2002058029)의 치료에 대해 기술되었다. WO 00/67795 는 무통성 및 공격성 형태의 B-세포 림프종 및 급성 및 만성 림프성 백혈병의 치료를 위해 CD19에 대항하여 지시된 항체의 사용 i.a.를 기술한다. WO 02/80987는 B 세포 비-호지킨 림프종, 호지킨 림프종 또는 B 세포 백혈병 (예를들면, B 세포 급성 림프성 백혈병 (B-ALL), (예를들면, 털세포 림프종) B 세포 전구체 급성 림프성 백혈병 (pre-B-ALL), B 세포 만성 림프성 백혈병 (B-CLL))과 같은 질환들의 치료를 위한, 항원 CD19에 대한 항체에 기반한 면역독소의 치료적 사용을 기술한다.
본 발명의 특히 바람직한 실시태양에서, CD3-특이적 결합 구조체가 제공되는데, 그것은 인간 CD3에 대해 지시되는/인간 CD3에 결합하는/인간 CD3와 상호작용하는 탈면역화된 도메인 및 CD19에 특이적으로 결합/CD19와 상호작용하는 제2 Ig-유래의 도메인을 포함한다. 그러한 구조체는 표 7A 및 7B에 나타난다. 표 7A 및 7B의 모듈 A-G 은 표 1-5에 대해 상기 언급된 바와 같이 정의될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VH 도메인들은, 서열식별번호: 74 또는 76에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VL 도메인들은, 서열식별번호: 78, 80 또는 82에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD19 항체의 VH 단백질 도메인은 서열식별번호: 114 에 기술된 것과 같다. 인간 CCR5 항체의 VL 단백질 도메인은 서열식별번호: 116에 기술된 것과 같다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인들의 쌍이면, 단백질 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 3에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, CD19 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH 의 쌍이면, 단백질 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 168에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 단백질 모듈 A-B-C 및 E-F-G 의 각각의 그룹은, 서열식별번호: 174에 기술된 바와 같은 서열을 갖는 단백질 모듈 D 을 통해 서로 연결된다. 그렇지만, 상기 언급된 바와 같이, 추가의 세린이 VL 및 뒤이은 V 도메인 사이에 클로닝 목적을 위해 도입될 수 있다 (서열식별번호:176에 기술된 것과 같은 링커).
인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VH 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들이, 서열식별번호: 73 또는 75에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VL 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 77, 79 또는 81에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD19 항체의 VH 단백질 도메인을 엔코딩하는 핵산 분자은 서열식별번호: 113 에 기술된 것과 같다. 인간 CCR5 항체의 VL 단백질 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자는 서열식별번호: 115에 기술된 것과 같다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인들의 쌍을 엔코딩하는 핵산을 지칭하면, 핵산 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 202에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, CD19 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH 의 쌍을 엔코딩하는 핵산을 지칭하면, 핵산 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 201에 기술된 바와 같은 핵산 서열을 갖는다. 핵산 모듈 A-B-C 및 E-F-G 의 그룹은, 서열식별번호: 173에 기술된 바와 같은 서열을 갖는 단백질 모듈 D 을 통해 서로 연결된다. 또다른 링커 서열식별번호:175 가 또한 VL 도메인을 뒤이은 V 도메인 (클로닝 목적을 위한 세린을 코딩하는 추가의 코돈을 포함)을 접합시키는 데 사용될 수 있다.
더 바람직한 실시태양에서, 본 발명은 상기 기술된 것과 같은 CD3-결합 도메인을 포함하는 탈면역화된 CD3-특이적 결합 구조체; 및 CD19, 바람직하게는 인간 CD19에 특이적으로 결합/상호작용하는 CD3-결합 도메인을 포함하는 제2, Ig-유래의 도메인을 포함하는 탈면역화된 CD3-특이적 결합 구조체를 제공하는데, 이때 상기 CD3-특이적 결합 구조체는 하기 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다:
(a) 서열식별번호: 190, 192, 194, 196, 198, 200, 327, 329, 331, 333, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 357, 359, 361, 363, 365, 367, 369, 371, 373, 375, 377, 379, 381, 383, 385, 387, 389, 391, 393, 395, 397, 399, 401, 403, 405, 407 또는 409 중 어느 하나에 보이는 아미노산 서열;
(b) 서열식별번호: 189, 191, 193, 195, 197,199, 326, 328, 330, 332, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358, 360, 362, 364, 366, 368, 370, 372, 374, 376, 378, 380, 382, 384, 386, 388, 390, 392, 394, 396, 398, 400, 402, 404, 406 또는 408 중 어느 하나에 보이는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열;및
(c) 상기 (b)의 뉴클레오티드 서열에 대한 유전부호의 결과로 디제너레이트(degenerate)된 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및
(d) 엄격 하이브리드 형성 조건에서 상기 (b)에 정의된 핵산 서열의 상보성 가닥과 함께 하이브리드 형성된 핵산 서열에 의해 엔코딩된 아미노산 서열.
본 발명에 따른 바람직한 CD19 및 CD3 결합 구조체는 표 7의 구조체 5를 나타내는 서열식별번호:190, 192, 194 및 구조체 13를 나타내는 서열식별번호:196, 198 및 200이고, 3개의 상이한 VL 영역 (VL1 (서열식별번호:78), VL2 (서열식별번호:80), 또는 VL3 (서열식별번호:82))를 갖는 것이다.
본 발명은 또한 인간 CD3에 특이적으로 결합하고 T-세포 에피토프를 생성시키는 경향이 감소된 제1 도메인; 및 엄격 하이브리드 형성 조건에서 상기 (b)에 정의된 바와 같은 핵산 서열, 즉 서열식별번호: 189, 191, 193, 195, 197,199, 326, 328, 330, 332, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358, 360, 362, 364, 366, 368, 370, 372, 374, 376, 378, 380, 382, 384, 386, 388, 390, 392, 394, 396, 398, 400, 402, 404, 406 또는 408의 어느 하나에 보이는 핵산 서열의 상보성 가닥과 하이브리드 형성하는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열을 포함하는, CD19에 대해 지시된/CD19에 결합할 수 있는, Ig-유래의 제2 도메인을 포함하는 CD3 특이적 결합 구조체를 제공한다. 용어 "하이브리드 형성" 및 "엄격 조건"은 상기 기술되었다. 여기에 적용된 상응하는 정의들 및 실시태양은 상기 기술된 바와 같다.
여기에 제공된 탈면역화된 CD3 및 CD19 결합 구조체는 증식 질환, 종양성 질환, 염증성 질환, 면역학적 장애, 자가면역 질환, 감염질환, 바이러스 질환, 알레르기성 반응, 기생성 반응, 이식대숙주병, 숙주대이식병 또는 B-세포악성 종양, 특히 B 세포 비-호즈킨 림프종, 호지킨 림프종 또는 B 세포 백혈병 (예를들면, B 세포 급성 림프성 백혈병 (B-ALL), (예를들면, 털세포 림프종) B 세포 전구체 급성 림프성 백혈병 (pre-B-ALL), B 세포 만성 림프성 백혈병 (B-CLL)) 백혈병의 예방, 치료 및 완화에 특히 유용하다.
추가의 실시태양에서, 본 발명은 인간 CD3에 특이적으로 결합하고 T-세포 에피토프를 생성시키는 경향이 감소된 제1 도메인; 및 Ig-유래의 제2 도메인을 포함하고 CD20에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 CD3 특이적 결합 구조체에 관한 것이다.
CD20 는 B-림프구에 존재하는 세포 표면 단백질들 중의 하나이다. CD20 항원은 B-세포 비-호지킨림프종 (NHL)의 90%이상에서의 것들을 포함하여, 정상 및 악성 예비-B 및 성숙한 B 림프구에서 발견된다. 항원은 조혈 줄기 세포, 활성화된 B 림프구 (형질 세포(plasma cells)) 및 정상 조직에는 없다. 대부분이 마우스의(murine) 기원인 여러 항체들이 기술되어 왔다: 1F5 (Press 등, 1987, Blood 69/2, 584-591), 2B8 / C2B8, 2H7, 1H4 (Liu 등, 1987, J Immunol 139, 3521-3526; Anderson 등, 1998, 미국 특허 번호 5,736,137; Haisma 등, 1998, Blood 92, 184-190; Shan 등, 1999, J. Immunol 162, 6589-6595).
CD20는 캐리어 단백질에 연결된 scFv를 엔코딩하는 DNA로 예방접종하는 것을 사용하는 형질 세포 악성종양의 치료를 위한 면역치료법적 전략에 기술되어 왔고 (Treon 등, 2000, Semin Oncol 27(5), 598) 면역치료법적 치료에서 CD20 항체 (IDEC-C2B8)의 사용이 비-호지킨 B-세포 림프종의 치료에 효과적인 것으로 보여져 왔다. CD20 항체는 비-호지킨 림프종에서 효능 및 참을수 있음이 증명되었고, 이전에 치료받지 않은 또는 재발된/고질의(refractory) 무통의 비-호지킨림프종의 각각 73% 및 48% 의 반응률을 달성하였다 (Montserrat, 2003, Semin Oncol 30(1suppl2), 34-39). 게다가, CD20 항체는 재발 또는 발전된 단계의 B-세포 종양(neoplasms)를 약 50%의 효과로 치료하는데 널리 사용되어 왔다.
본 발명의 특히 바람직한 실시태양에서, CD3-특이적 결합 구조체가 제공되고, 이는 CD3에 대해 지시되는/CD3에 결합하는/CD3와 상호작용하는, 탈면역화된 도메인 및 CD20에 특이적으로 결합/CD20와 상호작용 하는 제2 Ig-유래의 도메인을 포함한다. 그러한 구조체는 표 8A 및 8B에 나타난다. 표 8A 및 8B의 모듈 A-G 은 표 1-5에 대해 상기 언급된 바와 같이 정의될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VH 도메인들은, 서열식별번호: 74 또는 76에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VL 도메인들은, 서열식별번호: 78, 80 또는 82에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD20 항체의 VH 단백질 도메인은 서열식별번호: 170 에 기술된 것과 같다. 인간 CD20 항체의 VL 단백질 도메인은 서열식별번호: 172에 기술된 것과 같다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인들의 쌍이면, 단백질 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 3에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, CD20 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH 의 쌍이면, 단백질 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 168에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 단백질 모듈 A-B-C 및 E-F-G 의 각각의 그룹은, 서열식별번호: 174에 기술된 바와 같은 서열을 갖는 단백질 모듈 D 을 통해 서로 연결된다. 그렇지만, 상기 언급된 바와 같이, 추가의 세린이 VL 및 뒤이은 V 도메인 사이에 클로닝 목적을 위해 도입될 수 있다 (서열식별번호:176에 기술된 것과 같은 링커).
인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VH 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들이, 서열식별번호: 73 또는 75에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체의 탈면역화된 VL 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 77, 79 또는 81에 기술된 바와 같은 서열들로부터 선택될 수 있다. 인간 CD20 항체의 VH 단백질 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 169 에 기술된 것과 같다. 인간 CD20 항체의 VL 단백질 도메인들을 엔코딩하는 핵산 분자들은 서열식별번호: 171에 기술된 것과 같다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, 인간 CD3 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 탈면역화된 VH/VL 또는 VL/VH 단백질 도메인들의 쌍을 엔코딩하면, 핵산 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 202에 기술된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는다. 모듈 쌍 A/C 또는 E/G 의 어느 하나가, CD20 항원에 대해 특이성을 갖는 항체로부터의 VH/VL 또는 VL/VH 의 쌍을 엔코딩하는 핵산을 지칭하면, 핵산 모듈 B 또는 F 각각은, 서열식별번호: 201에 기술된 바와 같은 핵산 서열을 갖는다. 핵산 모듈 A-B-C 및 E-F-G 의 그룹은, 서열식별번호: 173에 기술된 바와 같은 서열을 갖는 단백질 모듈 D 을 통해 서로 연결된다. 또다른 링커 서열식별번호:175 가 또한 VL 도메인을 뒤이은 V 도메인 (클로닝 목적을 위한 세린 잔기를 코딩하는 추가의 코돈을 포함)을 접합시키는 데 사용될 수 있다.
더 바람직하게는, 본 발명의 탈면역화된 CD3 및 CD20 결합 구조체는 하기 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다:
(a) 서열식별번호: 218, 220, 222, 224, 226, 또는 228 중 어느 하나에 나타낸 바와 같은 아미노산 서열;
(b) 서열식별번호: 217, 219, 221, 223, 225 또는 227 중 어느 하나에 나타낸 바와 같은 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및
(c) 뉴클레오티드 서열 (b)에 대한 유전부호의 결과로서 디제너레이트되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및
(d) 엄격한 하이브리드 형성 조건하에 상기 (b)에 정의한 바와 같은 핵산 서열의 상보적 가닥으로 하이브리드 형성하는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열.
본 발명은 또한, 인간 CD3에 특이적으로 결합하고 T 세포 에피토프를 생성하는 감소된 경향을 갖는 제1 도메인 및 엄격 하이브리드 형성 조건에서 상기 (b)에 정의된 바와 같은 핵산 서열, 즉 서열식별번호: 217, 219, 221, 223, 225 또는 227의 어느 하나에 나타난 것과 같은 핵산 서열의 상보적 가닥과 하이브리드를 형성하는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 CD20에 대해 지시되는/CD20에 결합할 수 있는 Ig-유래의 제2 도메인을 포함한다. 용어 "하이브리드 형성" 및 "엄격 조건"은 상기 기술되었다. 여기에 적용된 상응하는 정의들 및 실시태양은 상기 기술된 바와 같다.
여기에 기술된 탈면역화된 CD3 및 CD20 결합 구조체는 B-세포 관련 장애의 치료, 예방 및/또는 경감, 바람직하게는 림프종의 의료적 개입, 더 바람직하게는 비-호지킨 림프종의 치료에의 용도가 예견될 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 CD3 특이적 결합 분자를 엔코딩하는 핵산 서열을 제공한다.
조절 서열들이 본 발명의 핵산 분자에 추가될 수 있다는 것이 당업자에 명백하다. 예를 들면, 발명의 폴리뉴클레오티드의 유도된 발현을 허용하는 프로모터, 전사 인헨서 및/또는 서열들이 사용될 수 있다. 적합한 유도가능 시스템은, 예를 들면, 기술된 테트라사이클린-조절되는 유전자 발현, 예를들면, Gossen 및 Bujard (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89 (1992), 5547-5551) 및 Gossen 등 (Trends Biotech. 12 (1994), 58-62), 또는 기술된 덱사메타손-유도가능한 유전자 발현, 예를들면, Crook (1989) EMBO J. 8, 513-519 이 있다.
게다가, 추가의 목적의 위해, 핵산 분자들은 예를 들면, 티오에스테르 결합 및/또는 뉴클레오티드 유사체를 포함할 수 있다는 것을 예견할 수 있다. 상기 변형은 세포내의 엔도- 및/또는 엑소뉴클레아제에 대한 핵산 분자의 안정화에 유용할 수 있다. 상기 핵산 분자들은, 세포내에서 상기 핵산 분자의 전사를 가능하게 해주는 키메라 유전자를 포함하는 적절한 벡터에 의해 전사될 수 있다. 이 점에서, 그러한 폴리뉴클레이티드는 "유전자 표적" 또는 "유전자 치료법적" 접근을 위해 사용할 수 있는 것으로 또한 이해된다. 또 하나의 실시태양에서 상기 핵산 분자가 표지된다. 핵산의 탐지방법은 예를 들어 써던 및 노던 블롯(blotting), PCR 또는 프라이머 확장(primer extension)으로 당해 분야에 잘 알려져 있다. 이 실시태양은 유전자 치료법 접근 중에 상술한 핵산분자의 성공적인 도입을 입증하는 스크리닝 방법에 유용할 수 있다.
상기 핵산 분자(들)은, 전술한 핵산 분자의 어느 것을 단독으로 또는 조합으로 포함하는, 재조합적으로 생산된 키메라 핵산분자일 수 있다. 바람직하게는, 상기 핵산분자는 벡터의 일부이다.
따라서 본 발명은 본 발명에서 기술된 핵산분자를 함유하는 벡터를 포함하는 약학조성물에 관한 것이다.
많은 적합한 벡터는 분자생물학의 기술자들에게 공지되어 있으며, 이들의 선택은 원하는 기능에 따라 달라지고, 이들은 플라스미드, 코스미드, 바이러스, 박테리오파지 및 유전공학에 통상적으로 사용되는 다른 벡터를 포함한다. 당해 분야의 기술자들에게 공지된 방법들은 다양한 플라스미드 및 벡터를 구성하는데 사용할 수 있다; 예를 들면 Sambrook 등 (loc. cit) 및 Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology, Green Publishing Associates and Wiley Interscience, 뉴욕 (1989), (1994)에 개시된 기술 참조. 이와는 달리, 본 발명의 폴리뉴클레오티드 및 벡터는 표적세포에 전달하기 위한 리포좀으로 재구성할 수 있다. 하기에 더욱 상세하게 논의한 바와 같이, 클로닝 벡터는 DNA의 개개 서열을 분리하는데 사용되었다. 관련된 서열은 특별한 폴리펩티드의 발현이 필요한 발현벡터로 전달할 수 있다. 전형적인 클로닝 벡터는 pBluescript SK, pGEM, pUC9, pBR322 및 pGBT9를 포함한다. 전형적인 발현 벡터는 pTRE, pCAL-n-EK, pESP-1, pOP13CAT를 포함한다.
바람직하게 상기 벡터는 여기에 정의된 이중 특이성 단일 쇄 항체 구조체를 엔코딩 하는 상기 핵산 서열에 작동적으로(operably) 연결된 조절서열인 핵산 서열을 포함한다.
이러한 조절서열 (조절 요소)은 기술자에게 공지되어 있으며 또한 인서트를 벡터 내에 도입하기 위한 프로모터, 스플라이스 카셋트, 해독개시 코돈, 해독 및 삽입 장소를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 핵산분자는 진핵 또는 원핵세포에서 발현시키는 상기 발현 조절 서열에 작동적으로(operably) 연결된다.
상기 벡터는 여기에 기술된 이중 특이성 단일 쇄 항체 구조체를 엔코딩하는 핵산분자를 포함하는 발현 벡터인 것으로 예견된다.
용어 "조절 서열"은 결착되어 있는(ligated) 코딩서열의 발현을 수행하는데 필요한 DNA 서열을 말한다. 상기 조절서열의 성질은 숙주 유기체에 따라 다르다. 원핵생물에서 조절서열은 일반적으로 프로모터, 리보좀 결합 장소 및 종료자를 포함한다. 진핵생물에서는 일반적으로 조절서열은 프로모터, 종료자 및 약간의 경우에 인헨서, 전사 활성제 또는 전사 인자를 포함한다. 상기 용어 "조절서열"은 최소한 그의 존재가 발현에 필요한 모든 성분들을 포함하는 것으로 의도되며, 또한 추가의 유리한 성분들을 포함할 수 있다.
용어 "작동적으로 연결된"(operably linked)은 전술한 성분들이 그들의 의도한 방식으로 기능하도록 하는 관계에 있는 병렬에 관한 것이다. 코딩서열에 "작동적으로 연결된" 조절 서열은 코딩서열의 발현이 조절서열에 부합하는 조건하에 달성되는 방식으로 결착(ligated)된다. 조절서열이 프로모터인 경우에, 이중-가닥 핵산이 바람직하게 사용되는 것은 당업자에게 자명하다.
따라서 인용된 벡터는 바람직하게는 발현 벡터이다. "발현 벡터"는 선택된 숙주를 변형시키기 위해 사용할 수 있는 구조체이며 또한 선택된 숙주에서 코딩 서열의 발현을 제공한다. 발현 벡터는 예를 들면 클로닝 벡터, 이원 벡터(binary vector) 또는 통합 벡터(integrating vector)일 수 있다. 발현은 바람직하게는 해독 가능한 mRNA로의 핵산분자의 전사를 포함한다. 원핵 및/또는 진핵 세포에서 발현을 보장하는 조절 요소는 당해 기술자들에게 잘 알려져 있다. 진핵 세포의 경우에 이들은 보통 전사의 개시를 보장하는 프로모터 및 선택적으로 전사의 종료 및 전사의 안정화를 보장하는 폴리-A 신호를 포함한다. 원핵 숙주세포에서 발현시키는 가능한 조절 요소는 예를 들어 E. coli 에서 PL, lac, trp 또는 tac 프로모터를 포함하며 또한 진핵 숙주세포에서 발현시키는 조절요소의 예는 효모에서 AOX1 또는 GAL1 프로모터 또는 포유동물 및 기타 동물세포에서 CMV-, SV40-, RSV-프로모터 (라우스 육종 바이러스), CMV-인헨서, SV40-인헨서 또는 글로빈 인트론이다.
전사의 개시에 관여하는 요소 외에도, 이러한 조절 요소는 또한 전사 종료 신호, 예를 들어 SV40-폴리-A 장소 또는 tk-폴리-A 장소, 폴리뉴클레오티드의 하류를 포함할 수 있다. 또한, 사용된 발현 시스템에 따라, 폴리펩티드를 세포 구획에 향하게 하거나 또는 이를 배지 내에 분비할 수 있는 리더 서열(leader sequence)은 기술된 핵산 서열의 코딩 서열에 첨가할 수 있으며 또한 당해 분야에 잘 알려져 있다; 예를 들어 첨부된 실시예 1 참조. 리더 서열(들)은 세포질 공간 또는 세포외 배지 내로, 바람직하게는 해독된 단백질 또는 그의 일부의 분비를 지시할 수 있는 리더 서열, 및 해독, 개시 및 정지 서열과 함께 적절한 상으로 조합된다. 임의로, 이종 서열(heterologous sequence)은 원하는 특성, 예를 들어 발현된 재조합 생성물의 안정화 또는 단순화된 정제를 부여하는 N-말단 식별(identification) 펩티드를 포함한 융합단백질을 엔코딩 할 수 있다; 상기 참조. 본 명세서에서 적합한 발현 벡터는 당해 분야에 공지되어 있는데, 예를 들어 Okayama-Berg cDNA 발현 벡터 pcDV1 (Pharmacia), pEF-Neo, pCDM8, pRc/CMV, pcDNA1, pcDNA3 (인-비트로겐), pEF-DHFR 및 pEF-ADA 또는 pEF-neo (Raum 등, Cancer Immunol Immunother (2001) 50(3), 141-150) 또는 pSPORT1 (GIBCO BRL)등이 있다.
바람직하게는, 발현 조절 서열은 진핵 숙주 세포를 형질전환 또는 형질변환(transfecting) 할 수 있는 벡터에서 진핵 프로모터 시스템일 것이다. 그러나 원핵 숙주에 대한 조절 서열이 또한 사용될 수 있다. 벡터가 적절한 숙주내로 도입되면, 숙주는 뉴클레오티드 서열의 높은 수준 발현에 적합한 조건하에 유지되며 또한 본 발명의 폴리펩티드의 수집 및 정제를 뒤따를 수 있다; 참조 첨부된 실시예.
세포 사이클 상호작용 단백질을 발현하는데 사용될 수 있는 또 다른 발현 시스템은 곤충 시스템이다. 하나의 이러한 시스템에서, Autographa californica 핵 폴리헤드로시스 바이러스(AcNPV)는 Spodoptera frugiperda 세포 또는 Trichoplusia유충에서 외래 유전자를 발현하기 위한 벡터로 사용된다. 기술된 핵산 분자의 코딩 서열은 폴리헤드린 유전자와 같은 바이러스의 비필수 도메인내로 클론닝되며 또한 폴리헤드린 프로모터의 조절하에 위치시킬 수 있다. 상기 코딩 서열의 성공적인 삽입은 폴리헤드린 유전자를 비활성으로 만들며 또한 피복 단백질 피복이 부족한 재조합 바이러스를 생산한다. 재조합 바이러스는 이후 본 발명의 단백질이 발현되는 S. frugiperda 세포 또는 Trichoplusia 유충을 감염시키는데 사용된다 (Smith, J. Virol. 46(1983), 584; Engelhard, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 91 (1994), 3224-3227).
추가의 조절 요소는 전사는 물론 해독 인헨서를 포함할 수 있다. 유리하게는, 본 발명의 상술한 벡터는 선별 가능한 및/또는 계수 가능한 마커를 포함할 수 있다.
형질 전환된 세포 및 예를 들어 식물조직 및 식물의 선별에 유용한 선별 가능한 마커 유전자는 당해 분야의 기술자에게 잘 알려져 있으며 또한 예를 들어 메토트렉세이트(methotrexate)에 대한 내성을 부여하는 dhfr (Reiss, Plant Physiol. (Life Sci. Adv.) 13 (1994), 143-149); 아미노글리코시드 네오마이신, 카나마이신 및 파로마이신에 내성을 부여하는 npt (Herrera-Estrella, EMBO J. 2 (1983), 987-995), 및 히그로마이신에 대한 내성을 부여하는 hygro (Marsh, 유전자 32 (1984), 481-485)에 대한 선별을 기반으로 하는, 항대사물질 저항성을 포함한다. 추가의 선택가능 유전자, 즉 세포가 트립토판 대신에 인돌을 이용하게 해주는 trpB; 세포가 히스티딘 대신에 히스티놀을 사용하게 해주는 hisD (Hartman, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 (1988), 8047); 세포가 만노스를 이용하게 해주는 만노스-6-포스페이트 아이소메라제 (WO 94/20627) 및 오르니틴 데카르복실라제 억제제, 2-(디플루오로메틸)-D1-오르니틴, DFMO (McConlogue, 1987, In: Current Communication in Molecular Biology, Cold Spring Harbor Laboratory ed.) 에 대한 내성을 부여하는 ODC (오르니틴 데카르복실라제), 또는 블라스티시딘 S 에 대한 내성을 부여하는 아스퍼길루서 테레우스 (Aspergillus terreus) 로부터 탈아미노효소 (Tamura, Biosci. Biotechnol. Biochem. 59 (1995), 2336-2338)가 기술되어 있다.
유용한 계수 가능한 마커는 또한 당해 분야의 기술자에게 알려져 있으며 또한 상업적으로 입수가능하다. 유리하게는, 상기 마커는 루시페라제 (Giacomin, Pl. Sci. 116 (1996), 59-72; Scikantha, J. Bact. 178 (1996), 121), 녹색 형광 단백질 (Gerdes, FEBS Lett. 389 (1996), 44-47) 또는 β-글루크로니다제 (Jefferson, EMBO J. 6 (1987), 3901-3907)를 코딩하는 유전자이다. 이 실시태양은 기술된 벡터를 함유하는 세포, 조직 및 유기물의 간단하고 빠른 스크리닝에 특히 유용하다.
상술한 바와 같이, 기술된 핵산분자는 단독으로 또는 벡터의 일부로서 사용하여, 예를 들어 정제를 위해, 그러나 또한 유전자 요법 목적을 위해 엔코딩된 CD3 특이성 구조체를 세포 내에서 발현하기 위해 사용될 수 있다. 상술한 (이중 특이성) CD3 구조체들 중의 어느 하나를 엔코딩하는 DNA 서열을 포함하는 상기 핵산 분자 또는 벡터는 세포내로 도입되고 이어서 관심있는 폴리펩티드를 생산한다. 생체내 또는 생체외 기술에 의해 세포 내로 치료법의 유전자를 도입하는 것을 기본으로 하는 유전자 요법은 유전자 전달의 가장 중요한 적용중의 하나이다. 생체내 또는 생체외 유전자 요법을 위한 적절한 벡터, 방법, 또는 유전자-전달 시스템은 문헌에 기술되어 있으며 또한 당해 분야의 기술자에게 공지되어 있다. 참조: Giordano, Nature Medicine 2 (1996), 534-539; Schaper, Circ. Res. 79 (1996), 911-919; 앤더슨, Science 256 (1992), 808-813; 베르마, Nature 389 (1994), 239; Isner, Lancet 348 (1996), 370-374; Muhlhauser, Circ. Res. 77 (1995), 1077-1086; Onodera, Blood 91 (1998), 30-36; Verma, 유전자 Ther. 5 (1998), 692-699; Nabel, Ann. N.Y. Acad. Sci. 811 (1997), 289-292; Verzeletti, Hum. 유전자 Ther. 9(1998), 2243-51; Wang, Nature Medicine 2 (1996), 714-716; WO 94/29469; WO 97/00957, US 5,580,859; US 5,589,466; 또는 Schaper, Current Opinion in Biotechnology 7 (1996), 635-640. 기술된 핵산분자 및 벡터는 세포내로 직접 도입하거나 또는 리포좀이나 바이러스성 벡터 (예, 아데노바이러스, 레트로바이러스)를 통한 도입을 위해 고안될 수 있다. 바람직하게는, 상기 세포는 병원균 세포주, 배아세포 또는 난세포이거나 또는 그로부터 유도된 것이며, 가장 바람직하게 상기 세포는 줄기세포이다. 배아줄기세포의 예는 특히 Nagy, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 (1993), 8424-8428에 기술된 바와 같은 줄기세포일 수 있다.
상기에 따라, 본 발명은 여기에 정의된 이중 특이성 단일 쇄 항체 구조체의 폴리펩티드 서열을 엔코딩 하는 핵산분자를 포함하는 유전공학에서 통상적으로 사용되는 벡터, 바람직하게는 플라스미드, 코스미드, 바이러스 및 박테리오파지를 유도하는 방법에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 벡터는 발현 벡터 및/또는 유전자 전달 또는 표적화 벡터이다. 레트로바이러스, 백시니아 바이러스, 아데노-관련 바이러스, 헤르페스 바이러스, 또는 보바인 파릴로마 바이러스와 같은 바이러스로부터 유도된 발현벡터는 표적된 세포 모집단에게 기술된 폴리뉴클레오티드 또는 벡터의 전달을 위해 사용할 수 있다. 당해 분야의 기술자에게 잘 공지된 방법은 재조합 벡터를 구성하는데 사용할 수 있다; 예를 들어, Sambrook 등 (loc. cit), Ausubel (1989, loc cit) 또는 다른 표준 교과서에 기재된 기술들 참조. 또는, 기술된 핵산 분자 및 벡터는 표적세포로의 전달을 위해 리포좀 내로 재구성할 수 있다. 본 발명의 핵산분자를 함유하는 벡터는 잘 공지된 방법에 의해 숙주 세포내로 전달하며, 이는 세포 숙주의 유형에 따라 달라진다. 예를 들면, 염화칼슘 형질변환(transfection)은 원핵세포을 위해 통상적으로 사용되는 반면, 인산칼슘 처리 또는 전기천공(electroporation)은 다른 세포 숙주를 위해 사용할 수 있다; 참조 Sambrook, supra.
기술된 벡터는 pEF-DHFR, pEF-ADA 또는 pEF-neo일 수 있다. 벡터 pEF-DHFR, pEF-ADA, 및 pEF-neo는 당업계에, 예를 들어 Mack 등 (PANAS (1995) 92, 7021-7025) 및 Raum 등 (Cancer Immunol Immunother (2001) 50 (3), 141-150)에 기술되어 있다.
본 발명의 약학 조성물은 여기에 정의된 벡터로 형질전환 또는 형질변환된 숙주를 제공한다. 상기 숙주는 상술한 벡터의 하나 이상 또는 상술한 핵산 분자의 하나 이상을 숙주내로 도입하여 생산될 수 있다. 숙주 내에 상기 하나 이상의 벡터 또는 하나 이상의 핵산 분자의 존재는 상술한 이중 특이성 단일 쇄 항체 구조체를 엔코딩하는 유전자의 발현을 매개할 수 있다.
숙주 내에 도입되는 상술한 핵산 분자 또는 벡터는 숙주의 게놈내에 통합하거나 또는 염색체외로 유지할 수 있다.
숙주는 원핵 또는 진핵세포일 수 있다.
용어 "원핵생물"는 본 발명의 단백질의 발현을 위한 DNA 또는 RNA 분자로 형질전환 또는 형질변환될 수 있는 모든 박테리아를 포함한다. 원핵 숙주는 그람 양성은 물론 그람 음성 박테리아 예를 들어 E. coli, Serratia marcescens 및 Bacillus subtilis를 포함할 수 있다. 용어 "진핵생물"는 효모, 고등 식물, 곤충 및 바람직하게는 포유동물 세포를 포함하는 것을 의미한다. 재조합 생산 절차에서 사용된 숙주에 따라, 본 발명의 폴리뉴클레오티드에 의해 엔코딩된 단백질은 글리코실화 되거나 또는 비-글리코실화 될 수 있다. 특히 바람직한 것은 본 발명의 폴리펩티드의 코딩 서열을 함유하는 바이러스 또는 플라스미드의 사용이며 또한 여기에 N-말단 FLAS-tag 및/또는 C-말단 His-tag가 유전학적으로 융합된다. 바람직하게는 상기 FLAG-tag의 길이는 약 4 내지 8개 아미노산, 가장 바람직하게 8개 아미노산이다. 상술한 폴리뉴클레오티드는 당해 분야의 기술자들에게 통상적으로 공지된 기술의 어느 것을 사용하여 숙주를 형질전환 또는 형질변형 하는데 사용할 수 있다. 더욱이 융합되고 작동적으로 연결된(operably linked) 유전자를 제조하고 이들을 포유동물 세포 및 세균에서 발현하는 방법은 당해 분야에 공지되어 있다 (Sambrook, loc cit).
바람직하게는, 상기 숙주는 세균, 곤충, 진균, 식물 또는 동물 세포이다.
기술된 숙주는 포유동물 세포, 더욱 바람직하게는 사람세포 또는 사람 세포주인 것이 특별히 예견된다.
특히 바람직한 숙주세포는 CHO 세포, COS세포, SP2/0 또는 NS/0같은 골수종 세포주를 포함한다. 첨부된 실시예에 설명된 바와 같이 특히 바람직한것은 숙주로서 CHO 세포이다.
본 발명의 또 하나의 실시태양은 상기 기술된 CD3 특이성 구조체의 제조방법에 관한 것이며, 상기 방법은 상기 구조체를 발현시키는데 적합한 조건하에서 본 발명의 세포 및/또는 숙주를 배양하고 상기 세포 또는 상기 배양물로부터의 구조체를 분리하는 것을 포함한다.
형질전환된 숙주는 발효조에서 성장하고 최적 세포성장을 달성하기 위해 당해 분야에 공지된 기술에 따라 배양한다. 이어서 본 발명의 폴리펩티드는 성장 배지, 세포 용해질, 또는 세포막 분획으로부터 분리할 수 있다. 예들 들어 본 발명의 미생물로 발현된 폴리펩티드는 임의의 기존의 수단 예를 들어 제조용 크로마토그래피법 분리(preparative chromatographic separations), 및 면역학적 분리 예를 들어 첨부된 실시예에 기술된 바와 같이 또는 본 발명의 폴리펩티드의 태그에 대해 지시하는 모노클로날 또는 폴리클로날 항체의 사용을 수반하는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은, 여기 정의된 (인간) CD3-특이적 결합 구조체 및 상기 기술된 공정으로 생상된 (인간) CD3-특이적 결합 구조체, 본 발명의 핵산 분자, 본 발명의 벡터 또는 숙주를 포함하는 조성물을 제공한다. 상기 조성물은, 임의로, 또한 면역 작동 세포(effector cell)에 대한 활성화 신호를 제공할 수 있는 단백질성 화합물을 포함할 수 있다. 가장 바람직하게는, 상기 조성물은 약학 조성물이고, 임의로 적합한 운반체, 안정화제 및/또는 부형제를 포함한다.
본 발명에 따라, 용어 "약학 조성물"은 환자, 바람직하게는 인간 환자에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 바람직한 실시태양에서, 약학 조성물은 비경구, 경피성, 관강내(intraluminal), 동맥내(intra arterial), 경막내(intrathecal), 또는 정맥내 투여 또는 조직 또는 종양내에 직접 주사를 위한 조성물을 포함한다. 특히 상기 약학 조성물은 주입 또는 주사를 통해 환자에게 투여될 것이 예견된다. 적절한 조성물의 투여는 상이한 방법으로, 예를 들어 정맥내, 피하, 복강내, 근육내, 국소 또는 피내 투여에 의해 수행할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 허용되는 운반체를 추가로 포함할 수 있다. 적절한 약제학적 운반체의 예는 당 업계에 잘 알려져 있으며 또한 인산염 완충 염수 용액, 물, 유화액, 예를 들어 오일/물 유화액, 다양한 유형의 습윤제, 멸균액 등을 포함한다. 이러한 운반체를 포함하는 조성물은 잘 공지된 통상의 방법으로 제형화 할 수 있다. 이들 약학 조성물은 대상에게 적절한 용량으로 투여할 수 있다. 용량 요법은 주치의 및 임상 요소에 의해 결정할 수 있다. 의약 기술에서 잘 알려진 바와 같이, 특정한 하나의 환자를 위한 투여량은 환자 크기, 몸 표면적, 나이, 투여할 특정 화합물, 성, 시간 및 투여경로, 및 일반적 건강을 포함한 많은 인자에 따라 달라지며, 또한 다른 약제가 동시에 투여된다. 일반적으로, 약학 조성물의 정규적인 투여로서의 요법은 하루에 1㎍ 내지 5g 유니트의 범위 내여야 한다. 그렇지만 연속 주입에 대한 더 바람직한 용량은 체중 킬로그램당 시간당 0.01㎍ 내지 2mg, 바람직하게는 0.01㎍ 내지 1mg, 더욱 바람직하게는 0.01㎍ 내지 100㎍, 훨씬 더 바람직하게는 0.01㎍ 내지 50㎍ 및 가장 바람직하게는 0.01㎍ 내지 10㎍ 단위의 범위일 수 있다. 특히 바람직한 투여량은 아래에 기술된다. 진행은 주기적인 평가에 의해 모니터 될 수 있다. 투여량은 변할 것이지만 DNA의 정맥내 투여의 바람직한 투여량은 대략 106 내지 1012개 카피의 DNA 분자이다. 본 발명의 조성물은 국소적으로 또는 전신적으로 투여할 수 있다. 투여는 일반적으로 비경구, 예를 들어 정맥내일 것이며; DNA는 또한 예를 들어 내부 또는 외부 표적부위로 비올리스틱 전달(biolistic delivery)에 의해 또는 동맥 내의 어느 부위로 도관(catheter)에 의해 표적 장소에 직접적으로 투여할 수 있다. 바람직한 실시태양에서, 약학 조성물은 피하로 투여되며 또한 더욱 바람직한 실시태양에서는 정맥내로 투여된다. 비경구 투여용 제제는 멸균된 수성 또는 비수성 용액, 현탁액, 및 유화액을 포함한다. 비수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일 예를 들어 올리브 오일, 및 주사 가능한 유기 에스테르 예를 들어 에틸 올리에이트이다. 수성 운반체는 염수 및 완충 매체를 포함하여, 물, 알콜/수성 용액, 유화액 또는 현탁액을 포함한다. 비경구 운반체(vehicle)는 염화 나트륨 용액, 링거 덱스트로스, 덱스트로스 및 염화 나트륨, 유산을 가한 링거(lactated Ringer's) 또는 고정유(fixed oil)을 포함한다. 정맥내 운반체는 유체 및 영양 보충물, 전해질 보충물 (예를 들어 링거 덱스트로스 계통) 등을 포함한다. 보존제 및 다른 첨가제는 또한 예를 들어 항미생물제, 항산화제, 킬레이팅제, 및 불활성 기체 등일 수 있다. 그 외에, 본 발명의 약학 조성물은 혈청 알부민 또는 면역 글로빈과 같은 단백질계 운반체, 바람직하게는 인간 기원인 것을 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은, 단백질 계 이중 특이성 단일 쇄 항체 구조체 또는 이를 엔코딩하는 핵산 분자 또는 벡터(본 발명에서 기술된 바와 같음) 이외에, 약학 조성물의 의도한 용도에 따라 생물학적 활성제를 추가로 포함할 수 있음을 예견될 수 있다. 이러한 약제는 당업계에 알려진, 위장계에 작용하는 약물, 세포증식 억제제로 작용하는 약제, 고요산 혈증을 예방하는 약물, T-세포 공-자극성(co-stimulatory) 분자 또는 사이트카인(cytokine) 등의 약물, 면역반응을 억제하는 약물 (예, 코르티코스테로이드) 및/또는 순환계에 작용하는, 예를 들면 혈압에 작용하는 약물일 수 있다.
본 발명의 조성물(들)의 투여를 위한 가능한 징후는 종양질환 특히 상피 암/암종 예를 들어 유방암, 대장암, 전립선암, 머리 및 목 암, 피부암 (흑색종), 요생식기관 암, 예를 들어 난소암, 자궁내막 암, 자궁경부 암 및 신장 암, 폐암, 위암, 소장 암, 간암, 췌장암, 담낭 암, 단관 암, 식도암, 수액선 암, 및 갑상선 암이다. 본 발명의 조성물의 투여는 최소 잔류 질환 바람직하게 초기 고형 암, 진행된 고형 암 또는 전이성 고형 암에 나타나며, 이것은 단일 세포의 생존에 의해 원인이 된 종양의 국소 및 비-국소 재발에 의해 특징으로 한다.
본 발명은, 또한, 세포 증식 또는 세포 자극을 위해, 다른 화합물들, 예를 들면 면역 작동 세포에 대해 활성화 신호를 제공할 수 있는 분자들과의 공동 투여 프로토콜이 예견될 수 있다. 상기 분자는 예를 들어 T 세포의 추가 활성화 신호 (예를 들면, 추가의 공동자극성 분자: B7-패밀리, Ox40L, 4.1BBL의 분자), 또는 추가의 사이토카인: 인터루킨 (예, IL-2), 또는 NKG-2D 결합 화합물(engaging compound)일 수 있다.
상기 기술된 본 발명의 조성물은 또한 임의로 검출을 위한 수단 및 방법을 또한 포함하는 진단 조성물일 수 있다.
여기에 제공된 CD3-특이성 구조체는 또한 액체상에서 또는 고체상 운반체에 부착되어 사용될 수 있는 면역측정법에서 사용하기에 적합하다. 본 발명의 폴리펩티드를 사용할 수 있는 면역측정법의 예는 직접 또는 간접 형태의 경쟁적 또는 비-경쟁적 면역측정법이다. 그러한 면역측정법의 예는 효소연관면역흡착법(enzyme linked immunosorbent assay) (ELISA), 효소면역측정법(enzyme immunoassay) (EIA), 방사선면역측정법(radioimmunoassay) (RIA), 샌드위치 (면역계량 검사(immunometric assay)) 및 웨스턴 블롯 측정법이 있다.
본 발명의 CD3 특이적 결합 구조체는 많은 상이한 운반체에 결합될 수 있고, 상기 폴리펩티드에 특이적으로 결합하는 세포를 분리하는 데 사용될 수 있다. 잘 알려진 운반체로는 유리, 폴리스티렌, 폴리비닐 염소, 폴리프로필렌, 폴리에틸렌, 폴리카르보네이트, 덱스트란, 나일론, 아밀로오스, 천연 및 변형 셀룰로오스, 폴리아크릴아미드, 아가로오스, 및 자철광(magnetite)등이 있다. 운반체의 속성은 가용성 또는 불용성, 예를 들면, 본 발명의 목적을 위해 비드(beads)일 수 있다.
당업자에 알려진 표지의 많은 상이한 표지 및 방법이 있다. 본 발명에 사용될 수 있는 표지의 예로는, 효소, 방사성 동위원소, 콜로이드 금속, 형광 화합물, 화학발광 화합물, 및 생발광 화합물등이 있다; 또한 상기 논의된 실시태양을 참조.
본 발명의 가장 바람직한 실시태양에서, 약학 조성물의 제조를 위한 본 발명의 CD3 특이적 결합 분자, 본 발명의 벡터 또는 숙주의 사용이 예견된다. 상기 약학 조성물은 증식 질환, 종양성 질환, 염증성 질환, 면역학적 장애, 자가면역 질환, 감염질환, 바이러스 질환, 알레르기성 반응, 기생성 반응, 이식대숙주병 또는 숙주대이식병의 예방, 치료 또는 완화에 사용될 수 있다.
또한, 본 발명에 따르면, CD19 및 CD3 결합 도메인들, 바람직하게는 서열식별번호: 190, 192, 194, 196, 198, 200, 327, 329, 331, 333, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 357, 359, 361, 363, 365, 367, 369, 371, 373, 375, 377, 379, 381, 383, 385, 387, 389, 391, 393, 395, 397, 399, 401, 403, 405, 407 또는 409 를 포함하는 탈면역화된 구조체가 면역학적 장애 (다양한 B 세포 악성종양) 또는 자가면역 질환의 치료에 사용될 수 있고, CCR5 및 CD3 결합 도메인들, 바람직하게는 서열식별번호: 206, 208, 210, 212, 214 또는 216 를 포함하는 탈면역화된 구조체가 바이러스 질환 (HIV), 자가면역 질환 및/또는 (류마티스 관절염과 같은) 염증성 질환의 치료에 사용될 수 있고, CD20 및 CD3 결합 도메인들, 바람직하게는 서열식별번호: 218, 220, 222, 224, 226, 228를 포함하는 탈면역화된 구조체가 종양 질환, 바람직하게는 림프종, 더 바람직하게는 비-호지킨 B-세포 림프종의 치료에 사용될 수 있고, EpCAM 및 CD3 결합 도메인, 바람직하게는 서열식별번호: 31, 33, 35, 37, 39, 49, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323 또는 325 를 포함하는 탈면역화된 구조체가 종양 질환, 바람직하게는 상피암의 치료에 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 (이중특이성) CD3 특이적 결합 분자 또는 여기에 기술된 공정에 의해 생산된 (이중특이성) CD3 특이적 결합 분자, 본 발명의 핵산 분자, 벡터 또는 숙주를 예방, 치료 또는 완화가 필요한 대상에게 투여를 포함하는, 증식 질환, 종양성 질환, 염증성 질환, 면역학적 장애, 자가면역 질환, 감염질환, 바이러스 질환, 알레르기성 반응, 기생성 반응, 이식대숙주병 또는 숙주대이식병의 예방, 치료 또는 완화를 위한 방법에 관한 것이다. 상기 대상은 바람직하게는 인간이다.
예방, 치료 또는 완화를 위한 방법은 또한, 추가로, 면역 작동 세포에 활성화 신호를 공급할 수 있는 단백질성 화합물의 투여를 포함한다. 상기 단백질성 화합물은 본 발명의 CD3 결합 분자, 핵산 분자, 벡터 또는 숙주와 동시적으로 또는 비-동시적으로 투여될 수 있다. 단백질성 화합물은, 특히, 추가의 공동 자극성 분자:B7 패밀리의 분자들 (Ox40L, 4.1 BBL), 또는 추가의 사이토카인:인터루이킨 (예를들면, IL-2) 또는 NKG-2D 결합화합물 (engaging compounds)로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다.
마지막으로, 본 발명은 본 발명의 CD3 결합 분자, 핵산 분자, 벡터 또는 숙주를 포함하는 키트를 제공한다.
상기 키트는 본 발명의 약학 조성물의 제조에 특히 유용하고, 특히, 주사 또는 주입에 유용한 용기로 이루어질 수 있다. 유리하게는, 본 발명의 키트는, 또한 임의로 (a) 의료 또는 과학 목적 행위를 위해 필요한 완충액, 저장 용액 및/또는 나머지 제제 또는 물질을 더 포함한다. 또한, 본 발명의 키트의 구성폼은 바이얼(vial) 또는 병(bottle)에 개별로, 또는 용기의 조합 또는 다중용기 유니트에 포장될 수 있다. 본 발명의 키트는 특히 본 발명의 수행을 위해 장점을 갖고 사용될 수 있고, 예를 들면, 연구 도구 또는 의료 도구들과 같은 여기에 언급된 다양한 응용에 사용될 수 있다. 상기 키트의 제조는 바람직하게는 당업계에 알려진 표준 절차를 따른다.
이들 및 다른 실시태양들이 본 발명의 상세한 설명 및 실시예에 포함된다. 본 발명에 따라 사용될 항체, 방법, 용도 및 화합물 중의 임의의 하나에 관한 그 외의 문헌은, 예를 들면 전자 기기들을 사용하여 공공 도서관 및 데이터베이스에서 찾아볼 수 있다. 예를 들면, 인터넷에서 이용가능한 공공 데이터베이스 "Medline"이, 예를 들면, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed/medline.html 에서 이용가능하다. 또한 추가의 데이터베이스 및 주소, 예를 들면, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/, http://www.infobiogen.fr/, http://www.fmi.ch/biology/research_tools.html, http://www.tigr.org/ 이 당업자에 알려져 있고, 예를들면, http://www.lycos.com 를 사용하여 얻을 수 있다.
도 1. 탈면역화 되지않은 항-CD3 카세트의 DNA 및 아미노산 서열들 (서열식별번호: 1 및 2).
도 2.
A) 중쇄 VH2 (서열식별번호:70), VH3 (서열식별번호:72), VH5 (서열식별번호:74) 및 VH7 (서열식별번호:76) 및 경쇄 VL1 (서열식별번호:78), VL2 (서열식별번호:80) 및 VL3 (서열식별번호:82) 각각의 아미노산 서열,
B) 중쇄 VH2 (서열식별번호:69), VH3 (서열식별번호:71), VH5 (서열식별번호:73) 및 VH7 (서열식별번호:75) 및 경쇄 VL1 (서열식별번호:77), VL2 (서열식별번호:79) 및 VL3 (서열식별번호:81) 각각의 뉴클레오티드 서열,
C) 탈면역화 되지않은 항-CD3 의 중쇄 (각각, 서열식별번호:84, 90, 96), VH2 (각각, 서열식별번호:86, 94, 96), VH3 (각각, 서열식별번호:86, 94, 96), VH5 (각각, 서열식별번호:88, 92, 96) 및 VH7 (각각, 서열식별번호:88, 90, 96) 및 탈면역화 되지않은 항-CD3 의 경쇄 (각각, 서열식별번호:98, 102, 104), 쇄 VL1 (각각, 서열식별번호:100, 102, 104), VL2 (각각, 서열식별번호:100, 102, 104) 및 VL3 (각각, 서열식별번호:98, 102, 104) 의 CDR 1, 2 및 3 의 아미노산 서열, 및
D) 탈면역화 되지않은 항-CD3 의 중쇄 (각각, 서열식별번호:83, 89, 95), VH2 (각각, 서열식별번호:85, 93, 95), VH3 (각각, 서열식별번호:85, 93, 95), VH5 (각각, 서열식별번호:87, 91, 95) 및 VH7 (각각, 서열식별번호:87, 89, 95) 및 탈면역화 되지않은 항-CD3 의 경쇄 (각각, 서열식별번호:97, 101, 103), 쇄 VL1 (각각, 서열식별번호:99, 101, 103), VL2 (각각, 서열식별번호:99, 101, 103) 및 VL3 (각각, 서열식별번호:97, 101, 103) 의 CDRs 1, 2 및 3의 뉴클레오티드 서열.
도 3.
A) 항-CD3 의 뉴클레오티드 서열 (VH2/VL1) (서열식별번호:4)
B) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH2/VL1) (서열식별번호:5)
C) 항-CD3 의 뉴클레오티드 서열 (VH2/VL2) (서열식별번호:6)
D) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH2/VL2) (서열식별번호:7)
E) 항-CD3 의 뉴클레오티드 서열 (VH2/VL3) (서열식별번호:8)
F) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH2/VL3) (서열식별번호:9).
도 4.
A) 항-CD3 의 뉴클레오티드 서열 (VH3/VL1) (서열식별번호:10)
B) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH3/VL1) (서열식별번호:11)
C) 항-CD3 의 뉴클레오티드 서열 (VH3/VL2) (서열식별번호:12)
D) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH3/VL2) (서열식별번호:13)
E) 항-CD3 의 뉴클레오티드 서열 (VH3/VL3) (서열식별번호:14)
F) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH3/VL3) (서열식별번호:15).
도 5.
A) 항-CD3 (VH5/VL1) 의 뉴클레오티드 서열 (서열식별번호:16)
B) 항-CD3 (VH5/VL1) 의 아미노산 서열 (서열식별번호:17)
C) 항-CD3 (VH5/VL2) 의 뉴클레오티드 서열 (서열식별번호:18)
D) 항-CD3 (VH5xVL2) 의 아미노산 서열 (서열식별번호:19)
E) 항-CD3 (VH5/VL3) 의 뉴클레오티드 서열 (서열식별번호:20)
F) 항-CD3 (VH5/VL3) 의 아미노산 서열 (서열식별번호:21).
도 6.
A) 항-CD3 (VH7/VL1) 의 뉴클레오티드 서열 (서열식별번호:22)
B) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH7xVL1) (서열식별번호:23)
C) 항-CD3 (VH7/VL2) 의 뉴클레오티드 서열 (서열식별번호:24)
D) 항-CD3 의 아미노산 서열 (VH7xVL2) (서열식별번호:25)
E) 항-CD3 (VH7/VL3) 의 뉴클레오티드 서열 (서열식별번호:26)
F) 항-CD3 (VH7/VL3) 의 아미노산 서열 (서열식별번호:27).
도 7. 상이한 탈면역화된 항-CD3 부분:
항-CD3 (VH2/VL1) (서열식별번호:178), 항-CD3 (VH2/VL2) (서열식별번호:180), 항-CD3 (VH2/VL3) (서열식별번호:182), 항-CD3 (VH3/VL1) (서열식별번호:184), 항-CD3 (VH3/VL2) (서열식별번호:186), 항-CD3 (VH3/VL3) (서열식별번호:188), 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH5/VK2) (서열식별번호:192), 항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198), 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200),
를 갖는 이중특이성 항-CD19 구조체의,
A) CD3 및
B) CD19 에의 결합.
결합은 CD3 풍부화된 PBMCs (A) 또는 CD19-양성 NALM-세포 (B)를 사용하는 FACS-기반의 측정법에 의해 측정되었다. (A)에서 CD3 및 2차 FITC 표지된 항-마우스 Ig 항체가, (B)에서는 CD19 및 2차 FITC 표지된 항-마우스 Ig 항체가 음성 대조군으로 사용되었다. 구조체 항-CD19x항-CD3 및 항-EpCAM (M79)x항-CD3 가 대조군으로 사용되었다. MFI 는 평균 형광 강도를 나타낸다.
도 8: 280 nm 에서의 HCIC 컬럼으로부터의 항-CD19x항-CD3 단백질 분획의 탈면역화된 변이체의 대표적인 용출 패턴. 700 ml 에서의 주요 단계를 보여주는 바닥선은, 20 mM 아세테이트, pH 3.5 를 포함하는 용출 완충액의 이론적 그래디언트를 나타낸다. 280 nm 에서의 높은 흡착은 컬럼 통과에서의 비-결합 단백질에 기인한다. 810,98 ml 에서의 화살표는 용출된 탈면역화된 항-CD3 분획을 나타낸다.
도 9: 280 nm 에서의 Ni-킬레이팅 His Trap® 컬럼으로부터의 항-CD19x항-CD3 단백질 분획의 탈면역화된 변이체의 대표적인 용출 패턴. 85 ml 에서의 제 1단계 및 90ml 에서의 제2 주요 단계를 보여주는 바닥선은, 용출 완충액의 이론적 그래디언트를 나타낸다 (점선). 93,16 ml 에서의 화살표는 항CD19 x 항CD3 구조체를 포함하는 단백질 분획을 나타낸다.
도 10: 세파덱스 S200 겔여과 컬럼으로부터의 대표적인 단백질 용출 패턴. 분획은 0-130 ml 정체시간에 수집되었다. 80.44 ml 에서의 단백질 피크는 ca. 52 kD 의 분 자량에 해당하고 탈면역화된 항CD19 x 항CD3 구조체를 포함한다.
도 11:
A) 항-CD19x항-CD3 단백질 분획의 탈면역화된 변이체의 SDS-PAGE 분석. 레인 M: 분자량 마커; 레인 1: HCIC 흐름 통과; 레인 2:세포 배양 상청액; 레인 3: HCIC 용출물; 레인 4: IMAC 흐름 통과; 레인 5: IMAC 세척; 레인 6: IMAC 용출물; 레인 7: 겔 여과 용출물;
B) 항-CD19x항-CD3 단백질 분획의 정제된 탈면역화된 변이체의 웨스턴 블롯 분석. 정제된 이중특이성 단백질의 웨스턴 블롯 분석은 His-Tag (PentaHis, Qiagen) 및 알칼리 포스패테이즈로 표지된 염소 항 마우스 Ig 에 대해 지시된 항체로 수행되었다. 레인 M: 분자량 마커; 레인 1: HCIC 흐름 통과; 레인 2:세포 배양 상청액; 레인 3: HCIC 용출물; 레인 4: IMAC 흐름 통과; 레인 5: IMAC 세척; 레인 6: IMAC 용출물; 레인 7: 겔 여과 용출물.
도 12. 상이한 탈면역화된 항-CD3 부분:
항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200),
를 갖는 정제된 이중특이성 항-CD19 구조체의,
야생형 항- CD19x항-CD3 구조체에 비교한,
A) CD3 및
B) CD19 에의 결합.
결합은 CD3 풍부 PBMCs (A) 또는 CD19-양성 NALM-세포 (B)를 사용한 FACS-기반의 측정법으로 측정되었다. CD3 양성 세포와의 2차 항체는 (A)에서 음성 대조군으로 사용되었고, CD19 양성세포와 2차 항체는 (B)에서 음성 대조군으로 사용되었다. 구조체 항-CD19x항-CD3 및 항-EpCAM (M79)x항-CD3 는 대조군으로 사용되었다. 측정법은 1 ㎍/ml 및 5 ㎍/ml의 농도로 수행되었다. MFI 는 평균 형광 강도를 나타낸다.
도 13. 상이한 탈면역화된 항-CD3 부분 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192), 항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VK3) (서열식별번호:200)
를 갖는 이중특이성 항-CD19 구조체의, 대조군과 비교한, 세포 독성 측정법.
도 14. 탈면역화 되지않은 CD3 항체의 가변 중(heavy) 영역, VH5 (서열식별번호:74), VH7 (서열식별번호:76), VH2 (서열식별번호:70) 및 VH3 (서열식별번호:72)의 서열 배열. 골격 영역 1 (FR1), 상보성 결정영역 1 (CDR1), 골격 영역 1 (FR1), 상보성 결정영역 2 (CDR2), 골격 영역 3 (FR3), 상보성 결정영역 3 (CDR3) 및 골격 영역 4 (FR4) 가 도시되었다. FR1 에서 서열 LAR 및 VKK, 골격 1 영역에서 CDR1 영역까지의 전이(transition)에서 ASGYTF 및 ASGYTA 서열 및 FR3 에서 서열 LTTDK, ITTDK 및 MTTDT 및 FR3에서 서열 MQLS, MELS 및 LQMN가 박스로 표시되었다. 배열은 벡터 NTI Advance (Informax 사, 미국) 사의 AlingnX 프로그램을 사용하여 수행되었다.
도 15. CD3-양성 쥬르카트 및 EpCAM-양성 카토 III 세포에서,
FACS-기반의 측정법으로,
상이한 탈면역화된 항-CD3 부분:
(A) 항-CD3 (VH5/VL2)x5-10 (서열식별번호:37),
(B) 탈면역화된 항-CD3 (VH5/VL2)x4-7 (서열식별번호:33),
(C) 탈면역화된 항-CD3 (VH5/VL2)x3-1 (서열식별번호:31),
(D) 탈면역화된 항-CD3 (VH5/VL2)x4-7 (VL-VH) (서열식별번호:35), 및
(E) 탈면역화된 항-CD3 (VH5/VL2)x5-10 (VL-VH) (서열식별번호:39),
를 갖는 이중특이성 항 EpCAM 구조체의 결합 분석:
오른쪽으로의 변위(shift)는 결합을 나타낸다. 쥬르카트 세포에서 점선은 음성 대조군(오직 2차 항체)의 변위를 나타내고, 대시 선(dashed line)은 항-EpCAM-항-CD3 대조군 항체의 결합을 나타내고, 굵은 선은 관심대상의 이중특이성 구조체를 나타낸다. CD3 에의 모노클로날 항체 대신에 EpCAM-양성 카토 III-세포들을 사용하는 결합 측정법에서, EpCAM 에의 모노클로날 항체가 양성 대조군으로 사용되었다.
도 16. CD3-양성 쥬르카트 세포에서 및 EpCAM-양성 카토 세포에서,
FACS 기반 측정법으로,
상이한 탈면역화된 항-CD3 부분:
(A) 3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:49) 및
(B) 5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:63)
를 갖는 이중특이성 항 EpCAM 구조체의 결합 분석.
오른쪽으로의 변위는 결합을 나타낸다.
도 17. 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체에 비교한,
N-말단 위치에서 탈면역화된 항-CD3 부분 (디(di) 항-CD3) 항-CD3 (VH5/VL2)x3-1 (서열식별번호:31), 항-CD3 (VH5/VL2)x-5-10 (서열식별번호:37) 및 항-CD3 (VH5/VL2)x4-7 (서열식별번호:33) 를 갖는 EpCAM 구조체의 세포독성 측정법.
CB15 T 세포 클론 및 CHO-EpCAM 세포는 5:1 의 E:T 비율로 사용되었다. CHO-EpCAM 세포는 PKH26 염료로 염색되었고, 세포는 FACS 분석으로 이중특이성 단일쇄 항체 항온보관 후에 계수되었다.
도 18. 상응하는 탈면역화 되지않은 야생형 구조체에 비교한,
C-말단 위치에 탈면역화된 항-CD3 부분 3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:49) 및 5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:63)을 갖는 EpCAM 구조체의 세포독성 측정법. 세포독성 측정법은 도 17과 동일하게 수행되었다.
하기 실시예는 본 발명을 설명한다:
하기 실시예에서 많은 단일쇄 항-인간 CD3 항체가 인간에서의 감소된 면역발생성을 보이기 위해 설계되었다. 상이한 탈면역화된 항-인간 CD3 항체는 서로 결합된 4개의 상이한 VH 영역 (VH2 (서열식별번호: 69, 70), VH3 (서열식별번호: 71, 72), VH5 (서열식별번호:7 3, 74) 및 VH7 (서열식별번호: 75, 76)) 및 3개의 상이한 VL 영역 (VL1 (서열식별번호: 77, 78), VL2 영역(서열식별번호: 79, 80) 및 VL3 (서열식별번호: 81, 82))의 12개의 조합을 포함한다. 상기 언급된 VH 및 VL 영역의 아미노산 및 핵산 서열은 도 3-6에 나타난다. 설명된 것처럼, 탈면역화된 항-CD3 단일쇄 항체는 이중특이성 생산물을 형성하기 위해 항-CD19 단일쇄 항체 또는 항-EpCAM 단일쇄 항체와 결합되었다.
실시예
1.
탈면역화된
항-
CD3
구조체의
클로닝
및 발현
1.1. cDNA
엔코딩
단일쇄
항체의 이동
탈면역화된, 항-CD3 단일쇄 항체를 엔코딩하는 DNA는 여기에서 항-CD3 카세트로서 언급된다. 이 항-CD3 카세트는 consists of a SGGGGS 링커 (서열식별번호 :176), 항-CD3 VH 영역 (서열식별번호: 110), 14 아미노산 GS 링커 (VEGGSGGSGGSGGSGGVD 링커 (서열식별번호: 68)), 및 항-CD3 VL 쇄 영역 (서열식별번호: 112)로 이루어지고, 6 히스티딘 잔기가 뒤를 잇는다. 상기 언급된 DNA는 벡 터 p-PCR-Script-Amp SK(+) (Stratagene)의 Srf1 장소에 클로닝되었다. 항-CD3 카세트의 DNA 및 아미노산 서열은 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 2 및 도 1에 보인다.
1.2 면역원성 T 세포
에피토프에
대한 서열의 컴퓨터 분석 및
탈면역화된
단일쇄
항체 서열의 디자인
항-CD3 카세트의 아미노산 서열 (서열식별번호: 2)이, WO 98/52976에 기술된 방법으로 가능한 T 세포 에피토프를 동정하기 위해 펩티드 쓰레딩(threading) 프로그램에 의해 분석되었다. 서열식별번호: 3 은 탈면역화된 링커 서열을 나타내고 서열식별번호: 68은 원래의 링커 서열을 나타낸다.
1.3
탈면역화된
단일쇄
항체 서열의 구성
항-CD3 카세트의 탈면역화된 판(versions)은 오버래핑 PCR 재조합 방법에 의해 제조되었다. pPCR-S-Amp SK+ 에서의 항-CD3 카세트 (서열식별번호: 1, 2)는 필요한 탈면역화된 서열의 돌연변이 유발을 위한 주형으로 사용되었다. 돌연변이 유발성 프라이머 쌍의 세트가 변형될 영역을 포함하여 합성되었다. 4개의 상이한 VH 및 3개의 상이한 VL 영역을 포함하는 탈면역화된 서열이 생성되었는데, 벡터 pPCR-S-Amp SK+ 에 Not I 에서 Hind III 단편으로서 클로닝되었고, 전체의 DNA 서열은 정확한 것으로 확인되었다. 4 개의 상이한 VH 및 3 개의 상이한 VK 영역이 모든 조합 (총 12)으로, PCR에 의해 또는 VH 영역의 3'말단에 도입된 독특한 BstE II 장소 를 사용하여 결합되었다. 각각의 조합의 전체의 DNA 서열은 정확한 것으로 확인되었다. 상이한 탈면역화된 VH 영역 (서열식별번호: 70, 72, 74 및 76) 및 VL 영역 (서열식별번호: 78, 80 및 82)이, 항-CD3 구조체의 상응하는 본래의 탈면역화 되지않은 서열 (VH:서열식별번호: 110; VL:서열식별번호: 112)과 함께 표 9에 요약되었 다.
1.4
탈면역화된
단일쇄
항체 유전자의 발현 벡터로의 이동
탈면역화된 항-CD3 카세트는 pPCR-S-Amp-SK+ 로부터 BspE I및 Sal I 으로 절단되었고 VLCD19-VHCD19-VHCD3-VLCD3 를 포함하는 발현 벡터 pEF 로 클로닝된다. pEF-DHFR 벡터의 CD3 부분은 각각의 탈면역화된 항-CD3 카세트로 BspE I 장소로부터 Sal I 장소로 대체되고, 하기 12 구조체가 결과된다:
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH2/VL1) (서열식별번호: 177, 178)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH2/VL2) (서열식별번호: 179, 180)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH2/VL3) (서열식별번호: 181, 182)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH3/VL1) (서열식별번호: 183, 184)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH3/VL2) (서열식별번호: 185, 186)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH3/VL3) (서열식별번호: 187, 188)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호: 189, 190)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호: 191, 192)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호: 193, 194)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호: 195, 196)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호: 197, 198)
pEF 항-CD19x항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호: 199, 200).
상기 구조체는 또한 단백질 분비를 가능하게 하기 위해 마우스의 IgG 중쇄 리더를 포함한다. 발현 벡터의 탈면역화된 항-CD3 카세트의 DNA 서열은 서열 프라이머 (서열식별번호: 28 및 29)를 사용하여 확인되었다. pEF 벡터 내에서 BspE I 장소로부터 Sal I 장소로 12개의 탈면역화된 항-CD3 카세트의 DNA 및 아미노산 서열은 서열식별번호: 177-200에서 보인다.
1.5 항체 구조체의 생산
벡터를 E. coli K12 로 형질전환시킨 후에, 상이한 발현 벡터의 형질변환-등급 DNA 가 제조되었다. 분비된 단백질은 CHO-dhfr- 세포에서 생산되었다. 일시적인(transient) 생산을 위해, 세포 배양 상청액이 형질 변환 후에 2일간 수확되었다.안정한 형질변환된 세포를 생성하기 위해, 세포들은 형질변환 후에 2일간 선택 배지에 놓았다. 5개의 통과 후에, 안정한 풀이 얻어졌다. 이어서, 단일한 클론이 제한된 희석에서 동정되었다. 정제 과정을 촉진하기 위해, 세포는 형청-없는 배지에 채택되었다. 항체 구조체는 약 1L의 상청액으로부터 정제되었다.
생산율은 ELISA로 테스트되었다. 항-CD19 및 탈면역화된 항-CD3 구조체를 포함하는 상이한 구조체 간에 분비된 항체 수준의 큰 차이는 관찰되지 않았다.
실시예
2: 결합 측정법
탈면역화된 구조체의 CD3 및 CD19 에의 결합 효력을 분석하기 위해, FACS-기반의 측정법이 수행되었다. 처음에는, 조 상청액이 CD3-풍부 PBMCs 또는 CD19-양성 NALM-6 세포에 대한 결합에 대해 테스트되었다. 세포는 희석되지 않은 상청액과 함께 8℃에서 30분간 항온보관되었다. 두개의 세척 단계에서, 세포는 동일한 조건에서 항-His 항체 (Qiagen)로 표지되었다. 추가의 세척 단계 후에, 구조체의 결합이 FITC-접합된 양(sheep) 항-마우스 항체 (Sigma)로 검출되었다. 세포는 FACS Calibur 세포계산기 (B&D)로 분석되었다. 대조군으로서 항-CD19x항-CD3 의 상청액 및 GFP-형질변환된 세포가 포함되었다. CD3 및 2차 항체는 음성 대조군으로서 사용되었고 그것은 평균 형광 강도 (MFI) ca. 3.5 를 보였다. 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192), 항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) 를 포함하는 항-CD19x항-CD3 구조체는 MFI가 적어도 90 이었고, 그래서 약 25배 더 강하게 결합하였다. 탈면역화 되지않은 항-CD19x항-CD3 구조체인 양성대조군은, MFI가 60 부근까지 이르러서, 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192), 항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) 를 포함하는 탈면역화된 구조체가 CD3 에 매우 높은 효능으로 결합하는 것을 보였다. 제2 실험에서, 항-CD19 및 항-CD3: 항-CD3 (VH2/VL1) (서열식별번호:178), 항-CD3 (VH2/VL2) (서열식별번호:180), 항-CD3 (VH2/VL3) (서열식별번호:182, 항-CD3 (VH3/VL1) (서열식별번호:184), 항-CD3 (VH3/VL2) (서열식별번호:186) 및 항-CD3 (VH3/VL3) (서열식별번호:188) 를 포함하는 하기의 구조체가, 음성 대조군과 비슷한 결합을 보였다 (MFI ca. 6).
FACS-기반의 결합 측정법은 또한 CD19에 대해 수행되었다. 이 실험에서 CD19 및 2차 항체는 음성 대조군이었다. 이 실험에서, 모든 측정된 구조체의 MFI가 적어도 80 이었고, 음성대조군의 MFI는 ca. 3 이었다.
그래서, 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192), 항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) 를 포함하는 구조체는 비-변형된 항-CD19x항-CD3 (서열식별번호:204)와 같이 CD3 및 CD19 에도 결합하는 것으로 판명되었다. 그렇지만, 구조체 항-CD3 (VH2/VL1) (서열식별번호:178), 항-CD3 (VH2/VL2) (서열식별번호:180), 항-CD3 (VH2/VL3) (서열식별번호:182), 항-CD3 (VH3/VL1) (서열식별번호:184), 항-CD3 (VH3/VL2) (서열식별번호:186), 항-CD3 (VH3/VL3) (서열식별번호:188) 는 항-CD3 결합 능력을 완전히 잃어버렸고, 반면에 CD19 결합은 완전히 유지되었다 (도 7).
그래서, 탈면역화된 중쇄가 결합 특이성 및 강도에서 우세하다는 것이 보여졌다. 그 결과, VH5 및 VH7 그룹을 갖는 항-CD3 구조체가 정제되었고, 세포 독성활성이 분석되었다.
실시예
3. 높은 결합
친화도를
보이는
변이체의
발현 및 정제
탈면역화된 항-CD19x항-CD3 단백질 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192), 항-CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) 가 중국 햄스터 난소 세포 (CHO) 에서 발현되었다.
탈면역화된 항-CD3 부분을 포함하는 이중특이성 단일쇄 구조체를 정제하기 위해, CHO-CD19 세포가 수확하기 전에 7일간 HiClone CHO 변형된 DMEM 배지 (HiQ)®로 회전 병(roller bottle)에서 키워졌다. 세포는 원심분리에 의해 제거되었고, 발현된 단백질을 포함하는 상청액은 -20℃에서 보관되었다.
Akta FPLC System® (Pharmacia) 및 Unicorn Software®이 크로마토그래피를 위해 사용되었다. 모든 화학물질은 연구 등급이었고 Sigma (Deisenhofen) 또는 Merck (Darmstadt)로부터 구입하였다.
소수성 전하 유도 크로마토그래피(Hydrophobic charge induction chromatography)가 완충액 A1 (20 mM Tris pH 7.2)로 평형화된 XK16/60 컬럼 (Pharmacia)에 적재된 MEP Hypercel® 배지에서 수행되었다. 500ml 의 세포 배양 상청액이 3 ml/분 의 유속으로 컬럼 (10 ml)에 적용되었다. 결합되지 않은 샘플은 완충액 A1으로 세척되었고, 결합된 단백질은 완충액 A1 및 100% 완충액 B1 (20 mM 아세테이트 pH 3.5) 으로 용출되었다. 용출된 단백질 분획은 추가의 정제를 위해 모여졌다.
제작자의 프로토콜에 따라 NiSO4 가 적재된 HisTrap® 컬럼 (Pharmacia)을 사용하여 IMAC 이 수행되었다. 컬럼은 완충액 A2 (20 mM NaP pH 7.5, 0.4 M NaCl) 로 평형화되었고, 그 샘플은 완충액 A2 로 2:1 로 희석되어 pH 7 을 얻었다. 그 샘플은 1ml/분 의 유속으로 컬럼 (2ml)에 적용되었고, 그 컬럼은 완충액 A2 로 세척되어 결합되지 않은 샘플을 제거하였다. 결합된 단백질은 완충액 B2 (20 mM NaP pH 7.5, 0.4 M NaCl, 0.5 M 이미다졸)의 2 단계 그래디언트를 사용하여 용출되었다. 단계 1: 10 컬럼 부피 내의 20% 완충액 B2; 단계 2: 10 컬럼 부피 내의 100% 완충액 B2. 용출된 단백질은 추가의 정제를 위해 모여졌다.
겔여과 크로마토그래피가 PBS (Gibco)로 평형화된 Sephadex S200 HiPrep® 컬럼 (Pharmacia)에서 수행되었다. 용출된 단백질 샘플은 (유속 1ml/분)은 검출을 위해 SDS-Page 및 웨스턴 블롯을 행하였다 (도 11). 컬럼은 이전에 분자량 결정을 위해 보정되었다 (분자량 마커 키트, Sigma MW GF-200).
항-CD19x항-CD3 단백질의 탈면역화된 변이체는 소수성 전하 유도 크로마토그래피 (HCIC) (도 8), 고정된 금속 친화 크로마토그래피 (IMAC) (도 9) 및 겔 여과 (도 10)를 포함하는 3단계 정제 방법으로 분리되었다. 이중특이성 구조체는 PBS 내의 겔여과에 의해 결정된 바와 같은 음성 조건하에서 52 kDa 의 분자량을 가졌다.
정제된 이중특이성 단백질은 미리 성형된 4-12% Bis Tris 겔 (Invitrogen)을 사용하여 감소된 조건하에서 SDS-PAGE 로 분석되었다. 샘플 준비 및 응용은 제작자의 프로토콜을 따랐다. 분자량은 MultiMark® 단백질 표준 (Invitrogen) 으로 결정되었다. 겔은 콜로이드의 쿠마시 (Invitrogen 프로토콜)로 염색되었다. 분리된 단백질의 순도는 >95% (도 11a) 이었고 분자 크기는 52 kD이었다.
또한 항-CD19x항-CD3 단백질의 탈면역화된 변이체는 웨스턴 블롯에 의해 특이적으로 검출되었다. 웨스턴 블롯은 제작자의 권고에 따라 Optitran BA-S83® 막 및 Invitrogen Blot Module® 로 수행되었다. 사용된 항체는 Penta His (Quiagen) 및 알칼리성 포스패테이즈(AP) (Sigma)로 표지된 염소-항-마우스-Ig 이었고, 염색 용액은 BCIP/NBT 액체 (Sigma)이었다. 주요 신호는 SDS-PAGE 에서 52kD 의 주 밴드에 상응하는 것으로 보여졌다 (도 11b).
단백질 농도는 단백질 측정법 염료 (MicroBCA® Pierce) 및 IgG (Biorad)를 표준 단백질로 사용하여 결정되었다. 정제된 단백질 변이체의 최종 수율이 표 10에 요약되었는데, 모든 구조체의 높은 생산성 및 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190)을 갖는 구조체 924.8 mg 의 매우 좋은 수율을 보여준다.
탈면역화된 CD3 구조체 | 수율 [㎍/상청액] |
CD19x항 CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190) | 924.8 |
CD19x항 CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192) | 446.7 |
CD19x항 CD3 (VH5/VL3) (서열식별번호:194) | 218.4 |
CD19x항 CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196) | 268.5 |
CD19x항 CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) | 553.4 |
CD19x항 CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) | 477.3 |
CD19x항-CD3 (VH5/ VL2) 및 CD19x항-CD3(VH7/VL2) 구조체의 생산성은 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체와 비교되었다. 그 결과는 표 11에 나타냈다.
구조체 | 수율 (㎍/l) |
CD19x항-CD3 | 62 |
CD19x항CD3 (VH5/VL2) | 204 |
CD19x항CD3 (VH7/VL2) | 310 |
표 11 은 탈면역화된 CD3 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 구조체가 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체보다 훨씬 높은 (적어도 3배) 생산성을 갖는다는 것을 명확하게 보여준다.
실시예
4. 항-
CD3
구조체의
FACS
기반의 결합 측정법
항-CD19 및 항-CD3를 포함하는 선택된 정제된 항체 구조체의 결합은 다양한 농도에서 실시예 2에 상기 기술된 바에 의해 검출되었다. CD3 결합 측정법에서, CD3 양성 세포와 함께 배양된 음성 대조군 2차 항체 (항-His, FITC-접합된)는 MFI가 약 2.5 이었고, 양성 대조군 탈면역화된 항CD19x항-CD3 이중특이성 단일쇄 항체는 1 ㎍/ml 농도에서 약 70, 5 ㎍/ml 농도에서 50 이었다 (도 12A). 1 ㎍/ml 농도에서, 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190), 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 및 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) 탈면역화된 이중특이성 항체의 MFI 수치는 10-20이었고; 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190) 가 가장 높았다 (20). 5 ㎍/ml 에서, 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:198) 의 MFI가 25 에 달한 반면, 항-CD3 (VH7/VL1) (서열식별번호:196), 항-CD3 (VH7/VL3) (서열식별번호:200) 및 항-CD3 (VH5/VL1) (서열식별번호:190) 의 MFI 는 적어도 40 이었다. 따라서 탈면역화 되지않은 양성 대조군과 동일한 결합 효능을 보였다. 5 ㎍/ml 의 농도에서, 탈면역화된 항-CD3 부분 VH5/VL1 (서열식별번호:190), VH7/VL1 (서열식별번호:196), VH7/VL2 (서열식별번호:198), VH7/VL3 (서열식별번호:200) 를 갖는 가장 강한 결합 구조체는 탈면역화 되지않은 항-CD19x항-CD3 (서열식별번호:204) 뿐만 아니라 CD3 에도 결합했다.
모든 항체 구조체가 CD19에 높은 효능으로 결합했고 MFI가 약 200 이었고, 한편 탈면역화 되지않은 항-CD19x항-CD3 구조체 (서열식별번호:204) 는 80 MFI를 보였다. 상이한 구조체들에 대한 테스트된 농도에서 CD19 결합에 대해 차이가 발견되지 않았다 (도 12B).
실시예
5. 세포독성 측정법
항-CD19x항-CD3 은 CD19-양성 표적 세포에 대한 T 세포 의존성 세포독성을 매개한다. 이것은 항-CD19x항-CD3의 생물학적 효력(potency)의 결정을 위해 시험관 내에서 분석되었다.
이러한 목적을 위해, 형광 표지된 CD19-양성 NALM-6 표적 세포가, 항-CD19x항-CD3의 존재하에서 작동 세포로서 임의의 기증자의 분리된 PBMC 또는 CB15 T-세포 (표준화된 T-세포주)와 함께 항온 보관되었다. 습윤화된 항온보관기에서 37℃에서 4시간 동안의 항온 보관 후에, 표적세포로부터 상청액으로의 형광 염료의 방출이 분광형광계수기에서 결정된다. 항-CD19x항-CD3 없이 항온 보관된 표적 세포 및 항온 보관 마지막에 사포닌 첨가에 의해 완전히 용해된 표적 세포는 각각 음성 및 양성 대조군으로 작용한다. 특정 항-CD19x항-CD3 농도에서 매개된 특정 세포독성은 하기 식으로부터 계산될 수 있다:
용량 반응(dose response)이, EC50 수치를 특정하기 위해, 0.4 pg/ml 항-CD19x항-CD3 로부터 100 ng/ml 항-CD19x항-CD3 까지 분석되었다. 비록 EC50 수치가 항-CD19x항-CD3 의 생물학적 효능을 기술하지만, 절대 수치는 작동 세포의 공급원에 따라 상당히 달라질 것이다. 그래서 상대 효능은 하기 식에 기반하여 항-CD19x항-CD3 참조 물질에 비교하여 계산된다:
항-CD19 및 탈면역화된 항-CD3를 포함하는 구조체의 세포독성 활성은 도 13에 나타난다. 정제된 탈면역화 되지않은 항-CD19x항-CD3 은 대조군으로 사용되었다. 탈면역화된 구조체의 EC50 수치는 21.9-81.6 pg/ml 의 범위이었고, 반면 탈면역화 되지않은 항-CD19x항-CD3 구조체의 EC50 수치는 22.7 pg/ml 이었다. 그래서, 모든 탈면역화된 구조체는 탈면역화 되지않은 분자에 필적할 만한 EC50 수치를 나타냈다.
실시예
6. T-세포 증식 측정법
20 의 건장한 기증자가 HLA-DR 타이핑 기반의 T 세포 측정법에서 스크린닝하기 위해 선택되었다 (표 12). 이것은 T 세포 측정법에서 세계 인구에서 발현되는 DR 대립유전자(allele)의 80% 이상에 대해 펩티드의 스크린닝을 가능하게 한다.
HLA DR 동종이인자형 (Allotype) | |
1 | DRB1*07, DRB1*15, DRB4*01, DRB5 |
2 | DRB1*03, DRB1*04, DRB3, DRB4*01 |
3 | DRB1*04, DRB1*07 및 DRB4*01 |
4 | DRB1*07, DRB1*11, DRB4*01 |
5 | DRB1*04, DRB1*07, DRB4*01 |
6 | DRB1*01, DRB1*04, DRB4*01 |
7 | DRB1*03, DRB1*07, DRB3, DRB4*01 |
8 | DRB1*07, DRB1*11, DRB3, DRB4*01 |
9 | DRB1*12. DRB1*15, DRB3, DRB5 |
10 | DRB1*01, DRB1*09, DRB4*01 |
11 | DRB1*03, DRB1*15, DRB3, DRB5 |
12 | DRB1*10, DRB1*13, DRB3 |
13 | DRB1*03, DRB1*15, DRB3, DRB5 |
14 | DRB1*04, DRb1*15, DRB4*01, DRB5 |
15 | DRB1*04, DRB1*13, DRB3, DRB4*01 |
16 | DRB1*01, DRB1*13, DRB3 |
17 | DRB1*01, DRB1*04, DRB4*01 |
18 | DRB1*07, DRB1*13, DRB3, DRB4*01 |
19 | DRB1*07, DRB1*16, DRB4*01, DRB5 |
20 | DRB1*04, DRB1*15, DRB4*01, DRB5 |
6.1 T-세포 증식 측정법
펩티드는 Pepscan (네덜란드)로부터 90% 이상의 순도로 얻었다. 20 명의 선택된 건강한 기증자 (표 12)로부터의 말초혈액 단핵 세포 (PBMC)가 1 및 5μM 에서 3개 웰에서 개별 펩티드를 스크린닝하는데 사용되었다. 두 개의 양성 대조군 펩티드 (C32 및 C49) 및 열쇠구멍삿갓조개헤모시아닌(keyhole limpet hemocyanin) (KLH) 이 측정법에 포함되었다. 세포와 펩티드의 7일간의 배양 후에, T 세포 증식을 평가하기 위해, 1μCi/웰 의 3H-티미딘 으로 18 시간의 펄스가 사용되었다. 이들 데이터는 하기 자극 지수로 표현된다:
T 세포 에피토프는 2 보다 큰 자극 지수 (SI)를 주는 펩티드로서 정의된다.
두개의 독립적인 운영으로부터의 결과는 22 MHC 결합 펩티드 중의 5개가 인간의 T 세포 증식을 유도하는 능력이 있다는 것을 나타낸다 (SI>2). 이와는 대조적으로, 상응하는 탈면역화된 분자들은 어느것도 T 세포 증식을 유도하지 않았다. 표 13은 T 세포 증식 측정법 결과를 요약하였는데, 2개의 독립적인 운영의 평균 SI 수치를 보여 준다.
데이터는 또한 농도 의존 효과를 보여주는데, 이때 사용된 두 개의 농도 (1μm 또는 5μm)에서 오직 하나에서만 각각의 탈면역화 되지않은 결합 분자들이 SI' > 2 를 보여 주었다. 상이한 농도에서의 반응의 차이는, 개별 펩티드들이 T 세포의 증식을 유도하는 최적의 농도를 갖을 것이라는 사실에 의해 설명된다. 만약 이 농도를 넘어서면, 증식이 감소할 수 있다 (높은 펩티드 농도는 세포 증식에 억제 효과가 있을 수 있다). 이것은, 몇몇 경우에, 왜 증식이 더 낮은 농도에서 발견되고, 더 높은 농도에서 발견되지 않는지를 설명해 준다. 경험으로부터, 펩티드가 T 세포 에피토프를 포함하고 있다면, T 세포 증식은 사용된 하나 또는 두개의 농도에서 발견될 것이다. 이들 데이터는 탈면역화가 성공적으로 T 세포 에피토프를 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:19) 및 항-CD3 (VH7/VL2) (서열식별번호:25)로부터 제거했다는 것을 보여준다. 탈면역화 되지않은 항-CD3 서열로부터의 약 75%의 MHC 결합 펩티드들이 T 세포 증식을 유도하지 않았다는 사실은 인간 면역 시스템의 이들 펩티드들에 대한 내성(tolerance) 또는 인간 T 세포 레퍼토리(repertoire)가 이들 특정 펩티드들을 인식할 수 없음에 의해 설명된다.
탈면역화 되지않은 항- CD3 | 탈면역화된 항- CD3 | |||
펩티드 | 동종이인자형 | 농도 | 평균 SI | 평균 SI |
영역 | (μM) | |||
6-20 | 5 | 5 | 2.51 | 0.77 |
74-86 | 5 | 1 | 2.52 | 0.97 |
0.96 | ||||
90-102 | 5 | 5 | 2.21 | 0.56 |
1.38 | ||||
90-102 | 6 | 5 | 2.24 | 0.90 |
0.82 | ||||
90-102 | 11 | 5 | 2.23 | 0.83 |
0.78 | ||||
162-174 | 5 | 1 | 3.82 | 0.59 |
216-230 | 10 | 1 | 2.12 | 1.03 |
실시예
7. 항-
CD3
(
VH5
), 항-
CD3
(
VH7
), 항-
CD3
(
VH2
) 및 항-
CD3
(
VH3
) 의 탈면역화 되지않은 항-
CD3
VH 와의
상동성
배열
탈면역화 되지않은 CD3 항체의 가변 중(heavy) 영역, VH5 (서열식별번호:74), VH7 (서열식별번호:76), VH2 (서열식별번호:70) 및 VH3 (서열식별번호:72)가 Vector NTI Advance (Informax, Inc., USA)사의 AlingnX 프로그램을 사용하여 배열되었다. 사용된 Clustal W 알고리듬은 Nucleic Acid Research, 22 (22): 4673-4860, 1994 에 기술되어 있다. 상기 배열은 도 14에 나타냈다. 상기 배열로부터 놀랍게 좋은 결합을 보이는 가변부 VH5 및 VH7 는 골격 1 에서 CDR1로의 전이영역에 서열 ASGYTF를 갖는다. 또한, 결합을 보이지 않는 VH 영역 (VH2 (서열식별번호:70) 및 VH3 (서열식별번호:72))는 골격 1 에서 CDR1로의 전이영역에 서열 ASGYTA 를 포함한다. 따라서, T 세포 에피토프를 생성시키는 감소된 경향을 갖고 CD3에 결합하는 구조체를 얻기 위해, 상기 구조체는 골격 1 에서 CDR1로의 전이(transition)에 서열 ASGYTF 를 포함해야 한다. 놀랍게도 상기 언급된 서열 ASGYTF을 포함하고 CD 3에 결합하고 T 세포 에피토프를 생성하는 감소된 경향을 보이는 가변 중 영역이 좋은 결합을 보였다.
실시예
8.
탈면역화된
항-
CD3
및 항-
EpCAM
을 포함하는 구조체의
클로닝
본 발명의 탈면역화된 항-CD3 폴리펩티드가 다른 표적들과 기능적 구조체의 일부가 될 수 있다는 것을 입증하기 위해, 탈면역화된 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:19) 및 상이한 항-EpCAM 단일쇄 항체를 포함하는 많은 이중특이성 구조체가 생성되었다 (3-1 (서열식별번호:137, 139), 3-5 (서열식별번호:141, 143), 4-1 (서열식별번호:145, 147), 4-7 (서열식별번호:149, 151), 5-10 (서열식별번호:133, 135)).
8.1
탈면역화된
항-
CD3
부분 (서열식별번호: 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 및 39)을 포함하는 C-말단
EpCAM
-바인더의
클로닝
8.1.1 항-
CD19x
항-
CD3
(
VH5
/
VL2
) 구조체 (서열식별번호:192)로부터 탈면역화된 항-
CD3 의
증폭
N-말단의 탈면역화된 항-CD3(VH5/VL2)는, 탈면역화된 (CD19 x 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192)를 주형으로 사용하고 하기 프라이머를 사용하는 PCR에 의해 얻어졌다: (DI CD3 5-2 VH BsrGI AGGTGTACACTCCGACGTCCAACTGGTGCAGTCAG (서열식별번호:40), DI CD3 5-2 VL BspEI AATCCGGATTTGATCTCCACCTTGGTCCCG (서열식별번호:41).
8.1.2.
VH
CD3
-
VL
CD3
x
VH
EpCAM
-
VL
EpCAM
배향으로 된
탈면역화된
항-
CD3x
항-
EpCAM
탈면역
화된
구조체 의
클로닝
및 발현
상기 언급된, 탈면역화된 항-CD3를 포함하는 PCR 생산물이 제한효소 BsrG I 및 BspE I 으로 절단되었고 뒤이어서 블루스크립트 KS 벡타 (Stratagene, La Jolla, CA) 에 클로닝되었는데, 이는 진핵생물의 분비 신호(리더 펩티드)의 아미노산 서열을 EcoRI/BsrGI-단편으로 포함한다. 이 구조체를 EcoRI 및 BspEI 로 절단한 후에 이로 인한 각각의 리더 펩티드를 갖는 항-CD3 scFv를 포함하는 DNA 단편이, pEF-DHFR- 벡터내에 C-말단 위치에 EpCAM scFv 3-1, 4-7, 또는 5-10를 포함하는 EcoRI/BspEI 절단된 플라스미드에 클로닝되었다. 서열분석에 의해 이중특이성 단일쇄에 대한 서열을 확정한 후에 (Sequiserve, Vaterstetten), 진핵 발현을 위해 플라즈미드는 DHFR 결핍 CHO 세포들에 형질변환되었다. DHFR 결핍 CHO 세포들에서의 진핵 단백질 발현은 Kaufmann R.J. (1990) Methods Enzymol. 185, 537-566)에 기술된 바에 따라 수행하였다.
8.1.3.
VH
CD3
-
VL
CD3
x
VL
EpCAM
-
VH
EpCAM
배향으로된
탈면역화된
항-
CD3x
항-
EpCAM
구조체의 클로닝 및 발현
15 아미노산 표준 링커 (서열식별번호:168)를 포함하는 VL-VH 배향에서의 항-EpCAM 4-7이 PCR에 의해 얻어졌다. 4-7 VH 영역 및 4-7 VL 영역은 하기 프라이머들에 의해 별개로 증폭되었다: (4-7 VL: 4-7 VL BspEI FOR CTGAAATCCGGAGGTGGTGGATCCGAGCTCGTGATGACCCAGACTCC (서열식별번호: 117), 4-7 VL GS15 REV GGAGCCGCCGCCGCCAGAACCACCACCACCTTTGATCTCAAGCTTGGTCCCC (서열식별번호: 118); 4-7 VH: 4-7 VH GS15 FOR GGCGGCGGCGGCTCCGGTGGTGGTGGTTCTGAGGTGCAGCTGCTCGAGCAG (서열식별번호: 42), 4-7 VH Sal I REV TTTTAAGTCGACCTAATGATGATGAT-GATGATGTGAGGAGACGGTGACCGTGG (서열식별번호: 43)). 뒤이은 융합 PCR 동안 PCR 생산물에 도입된 오버랩핑 상보적 서열이 사용되어 15-아미노산 (G4S1)3 (단일-문자 아미노산 코드) 링커 (표준 링커) (서열식별번호: 99) 의 코딩 서열을 형성하였다. 이 증폭 단계는 프라이머 쌍 4-7 VL BspEI FOR 및 4-7 VH Sal I REV (서열식별번호 42 및 43) 로 수행되었다.
15 아미노산 표준 ((G4S1)3) 링커를 포함하는 VL-VH 배향에서의 항-EpCAM 5-10 이 PCR에 의해 얻어졌다. 5-10 VH 영역 및 5-10 VL 영역은 하기 프라이머에 의해 별개로 증폭되었다 (5-10 VL: 5-10 VL BspEI FOR CTGAAATCCGGAGGTGGTGGATCCGAGCTCGTGATGACACAGTCTCCAT (서열식별번호:44), 5-10 VL GS15 REV GGAGCCGCCGCCGCCAGAACCACCACCACCTTTGATCTCAAGCTTGGTCCCAG; (서열식별번호:45) 5-10 VH: 5-10 VH GS15 FOR GGCGGCGGCGGCTCCGGTGGTGGTGGTTCTGAGGTGCAGCTGCTCGAGC (서열식별번호:46), 5-10 VH SalI REV TTTTAAGTCGACCTAATGATGATGATGATGATGTGAGGAGACGGTGACCGTGG (서열식별번호:47). 뒤이은 융합 PCR 동안 PCR 생산물에 도입된 오버랩핑 상보적 서열이 사용되어 15-아미노산 (G4S1)3 (단일-문자 아미노산 코드) 링커 (표준 링커) (서열식별번호:168) 의 코딩 서열을 형성하였다. 이 증폭 단계는 프라이머 쌍 5-10 VL BspE I FOR 및 5-10 VH Sal I REV 로 수행되었다.
상기 PCR 생산물 (5-10 VL-VH 및 4-7 VL-VH)은 항-CD3 구조체 (VH5/VL2)를 포함하는 pEF-DHFR 벡터로 클로닝되었다. 서열분석(sequencing)에 의해 이중특이성 단일쇄를 코딩하는 서열을 확인한 후에, 플라스미드는 진핵 발현을 위해 DHFR 결핍 CHO 세포에 형질변환시켰다. DHFR 결핍 CHO 세포에서 진핵 단백질 발현은 Kaufmann R.J. (1990) Methods Enzymol. 185, 537-566)에 설명된 데로 수행되었다.
8.1.4.
탈면역화된
항-
CD3x
항-
EpCAM
구조체의
EpCAM
및
CD3 로의
결합
N-말단 배향에서 항-CD3 부분과 함께 이중특이성 단일쇄 분자의 EpCAM 및 CD3로의 결합은 FACS 분석에 의해 확인되었다. 이 목적을 위해, EpCAM 양성 인간 위 암 세포주 카토 III (ATCC HTB-103)가 사용되었다. 항-CD3 부분의 결합은 쥬르카트 세포 (ATCC TIB 152)에서 보여졌다.
세포는 공급자의 권고에 따라 배양되었고, 2% FCS (태아 송아지 혈청)가 첨가된 50㎕ PBS에서 200000 개의 세포가 10㎍/㎖ 의 구조체와 함께 배양되었다. 구조체의 결합은 2% FCS 가 첨가된 PBS에서 2㎍/ml의 항-His 항체 (Penta-His 항체, Quiagen, Hilden, FRG에서 구입)로 검출되었다. 두번째 단계로, 2% FCS가 첨가된 50㎕의 PBS 내에 1:100으로 희석된, 염소 항-마우스 IgG 로부터 유래된, R-피코에리트린-접합된(R-Phycoerythrin-conjugated) 친화성 정제된 F(ab')2 이 사용되었다 (Dianova, Hamburg, FRG에서 구입). 샘플은 FACSscan (BD biosciences, Heidelberg, FRG) 으로 측정되었다.
FACS 분석의 결과는 도 15에 보인다. 탈면역화된 항-CD3 부분을 포함하는 모든 구조체는, 탈면역화 되지않은 항-EpCAM (M79)x항-CD3 이중특이성 단일쇄 항체에서보다 EpCAM 양성 카토III 세포들에 대해 더 높은 결합 친화도를 보였다.
8.2
탈면역화된
항-
CD3
부분을 포함하는 N-말단
EpCAM
바인더의
클로닝
8.2.1 항-
EpCAM
x 항-
CD3
구조체 의
클로닝
8.2.1.1
탈면역화된
3-1x항-
CD3
(
VH5
/
VL2
)
구조체 의
클로닝
(서열식별번호:48, 49):
탈면역화된 구조체 3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호: 48)는 탈면역화 되지않은 구조체 항-EpCAM (3-1)x항-CD3로부터 유래되었다. 항-EpCAM 항체 3-1의 VH 및 VL 영역은 서열식별번호:137 및 139에서 보인다. 플라즈미드 pEF-DHFR-3-1x 항-CD3 및 pEF 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192)는, 각각 벡터 및 항-CD3 (VH5/VL2) 삽입체를 분리하기 위해 BspEI 및 SalI (Biolabs)으로 절단되었다. BspEI-SalI-절단된 벡터는 탈인산화되고 0.7% 아가로스겔에서 정제되었고, 삽입체는 1.5% 아가로스겔에서 정제되었다.
정제된 단편 (BspEI-SalI)은 이어서 pEF-DHFR 벡터의 상응하는 장소로 클로닝되었다. 최종 3-1x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체 (서열식별번호:48, 49)는 제한 절단 및 전체 삽입체의 DNA 서열분석에 의해 확인되었다.
탈면역화 되지않은 3-1x항- CD3 구조체의 클로밍 :
3-1x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체의 클로닝을 위해, 탈면역화 되지않은 구조체가 하기와 같이 생성되었다.
VH-VL 배향에서의 C-말단 3-1이 탈면역화 되지않은 3-1 x 항-CD3 분자의 제조를 위해 PCR에 의해 얻어졌다. 3-1 VH-VL 을 두부분으로 포함하는 단편 I 및 II 가 각각 프라이머 쌍 me 91a (서열식별번호: 53) /me 90 (서열식별번호: 52) 및 me 83 (서열식별번호: 50) /me 84 (서열식별번호: 51)를 사용하여 PCR에 의해 증폭되었다. 핫 스타트 PCR (Hot Start PCR)이 Roche Diagnostics사의 Expand High Fidelity System을 사용하여 수행되었다. 20 주기 (94℃/30초; 60℃/1분; 72℃/1분) 가 증폭을 위해 사용되었고, 이어서 72℃에서 3분 동안의 일 주기가 수행되었다.
PCR 단편 I 및 II는 1.5% 아가로스겔에서 전기영동을 행하였다. 단편은 혼합되어 (각각 1 ng) 전체 3-1을 포함하는 단편 III 의 증폭을 위한 프라이머 쌍 me 91a (서열식별번호: 53) 및 me 84 (서열식별번호: 51)으로 수행되는 다음번 PCR 반응을 위한 주형으로 사용되었다. PCR 은 상기 기술된 데로 수행되었으나 붙임온도(annealing temperature)는 68℃로 하였다. 단편 III 는 아가로오스 겔에서 정제되었고 BsrGI 및 BspEI (Biolabs)으로 절단되었고, 정제되고 뒤이어서 pEF-DHFR-항 EpCAM (M79) X 항-CD3 구조체의 상응하는 위치에 클로닝되었다. 이 클로닝된 영역은 제한효소 및 DAN-염기서열에 의해 확인되었다.
사용된
프라이머의
서열은 다음과 같다:
Me 83: 5'-GGT TCT GGC GGC GGC GGC TCC GGT GGT GGT GGT TCT GAG GTG CAG CTG CTC GA CAG TCT G -3' (서열식별번호: 50)
Me 84: 5'- GTG CTC CGG AGG AGA CGG TGA CCG TGG TCC CTT GGC CCC AG -3' (서열식별번호: 51)
Me 90: 5'- CCG GAG CCG CCG CCG CCA GAA CCA CCA CCA CCT TTG ATC TCA AGC TTG GTC CC -3' (서열식별번호: 52)
Me 91a: 5'- GGA TTG TAC A CTCC GA GCT CGT CAT GAC CCA GTC TCC ATC TTA TCT TGC TGC -3' (서열식별번호: 53)
8.2.1.2
탈면역화된
3-5x항-
CD3
(
VH5
/
VL2
) 구조체의
클로닝
(서열식별번호:54, 55):
VH-VL 배향에서 C-말단 3-5 는 3-5 x항-CD3 분자의 제조를 위해 PCR 에 의해 얻어졌다. 항-EpCAM 항체 3-5 의 VH 및 VL 영역은 서열식별번호:141 및 143에 보인다. 플라즈미드 pEF-DHFR-3-5x항-CD3 및 pEF 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호: 192)은 각각 삽입체 (3-5) 및 벡터의 분리를 위해 EcoRI 및 BspEI (Biolabs)에 의해 절단되었다. 탈인산화된 벡터 (EcoRI 및 BspEI 절단된) 및 삽입체는 아가로스겔-전기영동에 의해 정제되었다.
정제된 단편 (EcoRI-BspEI)은 pEF-DHFR 벡터의 상응하는 장소에 클로닝되었다. 최종 3-5x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:54) 구조체는 제한 절단에 의해 확인되었다.
탈면역화 되지않은 3-5x항- CD3 구조체의 클로닝 :
3-5x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체의 클로닝을 위해, 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체가 하기와 같이 생성되었다.
3-5를 두부분으로 포함하는 단편 I 및 II는 3-1x항-CD3에 대해 기술된 바에 따라 각각 프라이머 쌍 me 81 (서열식별번호: 56) /me 90 (서열식별번호: 52) 및 me 83 (서열식별번호: 50) /me 84 (서열식별번호: 51)을 사용하여 PCR에 의해 증폭되었다. PCR 단편 I 및 II 를 포함하는 아가로스겔 단편이, 전체 3-5를 포함하는 단편 III의 증폭을 위해 프라이머 쌍 me 81 (서열식별번호: 56) 및 me 84 (서열식별번호: 51)로 재증폭되었다. PCR 은 상기 기술된 데로 수행되었다. 단편 III는 아가로스겔에서 정제되었고 BssHII 및 BspEI (Biolabs)로 절단, 정제되고, 이어서 pEF-DHFR클로닝 벡터의 상응하는 장소에 클로닝되었다. 클로닝된 장소는 제한절단 및 DNA-서열분석에 의해 확인되었다.
Me81
프라이머의
서열(서열식별번호:56):
Me 81: 5'- GGA TGC GCG CGA GCT CGT GAT GAC CCA GAC TCCA CTC TCC -3'
8.2.1.3
탈면역화된
4-1x항-
CD3
(
VH5
/
VL2
) 구조체의
클로닝
(서열식별번호:57, 58):
VH-VL 배향에서의 C-말단 4-1 은, 4-1x항-CD3 분자의 제조를 위해 PCR에 의해 얻어졌다. 항-EpCAM 항체 4-1의 VH 및 VL 영역은 서열식별번호:145 및 147에 보인다. 플라즈미드 pEF-DHFR-4-1x항-CD3 및 pEF 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192)는, 각각 삽입체 (4-1) 및 벡터의 분리를 위해 EcoRI 및 BspEI (Biolabs) 에 의해 절단되었다. 탈인산화된 벡터 (EcoRI 및 BspEI 로 절단됨) 및 삽입체는 아가로스겔-전기영동에 의해 정제되었다.
정제된 단편 (EcoRI-BspEI)은 뒤이어서 벡터의 상응하는 장소에 클로닝되었다. 최종 구조체 4-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:57)는 제한 절단에 의해 확인되었다.
탈면역화
되지않은 4-1x항-
CD3
구조체의
클로닝
:
4-1x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체의 클로닝을 위해, 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체가 하기와 같이 생성되었다.
4-1를 두 부분으로 포함하는 단편 I 및 II 가, 상기 기술된 조건에서 각각 프라이머 쌍 me 91a (서열식별번호: 53) /me 90 (서열식별번호: 452) 및 me 83 (서열식별번호: 50) /me 84 (서열식별번호: 51)로 PCR에 의해 증폭되었다.
PCR 단편 I 및 II 를 포함하는 아가로스겔 단편은, 전체 4-1을 포함하는 단편 III의 증폭을 위해, 프라이머 쌍 me 92a (서열식별번호: 59) 및 me 84 (서열식별번호: 51) 로 재증폭되었다. PCR 은 상기 기술된 데로 수행되었으나, 다만 붙임(annealing)은 60℃대신 68℃에서 수행되었다. 단편 III 는 아가로스 겔에서 정제되었고, BsrGI 및 BspEI (Biolabs)으로 절단되었고, 정제되고 뒤이어서 pEF-DHFR-항 EpCAM (M79) X 항-CD3 cloning 벡터 구조체의 상응하는 위치에 클로닝되었다. 클로닝된 영역은 제한 절단 및 DNA 서열분석으로 확인되었다.
Me92a
프라이머의
서열 (서열식별번호: 59):
Me 92a: 5'- GGA TTG TAC A CTCC GA GCT CGT GAT GAC ACA GTCTCC ATC CTC C -3'
8.1.2.4
탈면역화된
4-7x항-
CD3
(
VH5
/
VL2
) 구조체의
클로닝
(서열식별번호: 60, 61):
VH-VL 배향에서 C-말단 4-7는 4-7 x항-CD3 의 제조를 위해 PCR 에 의해 얻어졌다. 항-EpCAM 항체 4-7 의 VH 및 VL 영역은 서열식별번호:149 및 151 에 보인다. 플라즈미드 pEF-DHFR-4-7x항-CD3 및 pEF 항-CD3 VH5/VL2 (서열식별번호:192)는 각각 삽입체 (4-7) 및 벡터의 분리를 위해 EcoRI 및 BspEI (Biolabs)로 절단되었다. 탈인산화된 벡터 (EcoRI 및 BspEI 로 절단됨) 및 삽입체는 아가로스겔-전기영동에 의해 정제되었다.
정제된 단편 (EcoRI-BspEI)는 뒤이어서 pEF-DHFR 벡터의 상응하는 장소에 클로닝되었다. 최종 구조체 4-7x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:60) 는 제한 절단에 의해 확인되었다.
탈면역화
되지않은 구조체 4-7x항-
CD3 의
클로닝
:
4-7x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체의 클로닝을 위해, 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체가 하기와 같이 생성되었다.
4-7를 두 부분으로 포함하는 단편 I 및 II 가, 각각 상기 언급된 조건에서 프라이머 쌍 me 81 (서열식별번호:56) /me 90 (서열식별번호:52) 및 me 83 (서열식별번호:50) /me 84 (서열식별번호:51) 를 사용하여 증폭되었다.
PCR 단편 I 및 II 를 포함하는 아가로스겔 단편은, 4-7 VH 및 VL 쇄 전체를 포함하는 단편 III를 증폭시키기 위해 프라이머 쌍 me 81 (서열식별번호:56) 및 me 84 (서열식별번호:51)로 재증폭되었다. PCR 은 상기 기술한 데로 수행되었다. 단편 III는 아가로스겔에서 정제되었고 및 BssHII 및 BspEI (Biolabs)로 절단되었고, 정제되고 뒤이어서 상응하는 pEF-DHFR 클로닝 벡터의 상응하는 장소에 클로닝되었다. 클로닝된 영역은 제한 절단 및 DNA 서열분석으로 확인되었다.
8.1.2.5
탈면역화된
5-10x 항-
CD3
(
VH5
/
VL2
) 구조체의
클로닝
(서열식별번호: 62, 63 ):
VH-VL 배향에서 C-말단 5-10는 5-10 x항-CD3 분자의 제조를 위해 PCR 에 의해 얻어졌다. 항-EpCAM 항체 5-10의 VH 및 VL 영역은 서열식별번호:133 및 135에 보인다. 플라즈미드 pEF-DHFR-5-10x항-CD3 및 pEF 항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:192)는, 각각 삽입체 (5-10) 및 벡터의 분리를 위해 EcoRI 및 BspEI (Biolabs)로 절단되었다. 탈인산화된 벡터 (EcoRI 및 BspEI 로 절단됨) 및 삽입체 아가로스겔-전기영동에 의해 정제되었다.
정제된 단편 (EcoRI-BspEI)은 뒤이어 상응하는 pEF-DHFR 벡터의 상응하는 장소에 클로닝되었다. 최종 구조체 5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호: 62) 는 제한 절단 및 DNA 서열분석에 의해 확인되었다.
탈면역화
되지않은 5-10x항-
CD3
구조체의
클로닝
5-10x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체의 클로닝을 위해, 상응하는 탈면역화 되지않은 구조체가 하기와 같이 생성되었다.
5-10를 두 부분으로 포함하는 단편 I 및 II 가, 상기 언급된 조건에서, 각각 프라이머 쌍 me 92a (서열식별번호: 59) /me 90 (서열식별번호: 52) 및 me 83 (서열식별번호: 50) /me 84 (서열식별번호: 51) 를 사용하여 PCR 에 의해 제조되었다.
PCR 단편 I 및 II를 포함하는 아가로스겔 단편은, 5-10 전체를 포함하는 단편 III의 증폭을 위해, 프라이머 쌍 me 92a 서열식별번호: 59) 및 me 84 (서열식별번호: 51)로 재증폭되었다. PCR 은 상기 기술된 데로 수행되었으나, 다만 붙임(annealing)은 68℃에서 수행되었다. 단편 III 는 아가로스 겔에서 정제되었고, BsrGI 및 BspEI (Biolabs)으로 절단되었고, 정제되고 뒤이어서 pEF-DHFR-항 EpCAM (M79) x 항-CD3 클로닝 벡터의 상응하는 위치에 클로닝되었다. 클로닝된 영역은 제한 절단 및 DNA 서열분석으로 확인되었다.
8.2.2 N-말단 위치에서 항-
EpCAM
으로 항
EpCAMx탈면역화된
-항-
CD3
분자들의 발현:
DHFR 유전자가 결핍된 CHO-세포는 10% 태아 송아지 혈청 (Life Technologies, 65℃ 에서 30 분동안 열 비활성화) 및 HT (하이포잔틴 및 티미딘; Life Technologies)를 보충한 알파 MEM 배지 (Life Technologies, cat.no: 32561)에서 유지되었다. 그 세포는 pEF-dHFR-3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호: 48), 및 pEF-dHFR-5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:62)로 Lipofectamine 2000 kit® (Invitrogen)를 사용하여 제작자의 지시에 의해 형질 변환되었다. 48시간 후에, 세포는 형질변환된 세포를 선택 배지 (열에 의해 비활성된 10% 투석된 태아의 송아지 혈청 (Life Technologies)을 포함하는 알파 MEM 배지)에서 선택을 수행하였다. 3-4주후, 세포 배양 상청액이 수집되었고, 4℃에서 10 분간 300g 에서 원심분리하여 세포 및 세포 찌꺼기를 제거하였다. 이중특이성 분자를 포함하고 있는 상청액은 더 이상의 분석이 있을 때까지 -20℃ 에서 보관하였다.
8.2.3
이중특이성
항-
EpCAMx
항-
CD3
변이체의
결합 분석:
(CD3 결합을 위한) 250000 쥬르카트 세포 및 (EpCAM 결합을 위한) 카토 세포가 독립적으로 이중특이성 구조체 (pEF-DHFR-3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (각각 Nr.50, 서열식별번호: 48) 및 pEF-DHFR-5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (Nr.54) (서열식별번호:62))를 포함하는 세포 배양 상청액 (50 ㎕)와 함께 독립적으로 45 분동안 4℃에서 배양되었다. 그후에, 세포는 FACS 완충액(1% 태아의 송아지 혈청 (FCS) 및 0.05% 소디움 아자이드(sodium azide)를 포함하는 포스페이트-완충액의 식염수)으로 두번 세척되었고, 마우스 항-His 항체 (Dianova, DIA910)과 함께 60 분동안 4℃에서 항온 보관되었다. 세척단계는 상기와 같이 수행되었다.
세포는 최종적으로 염소 항-마우스 Ig-FITC-접합된 항체 (BD 550003) 또는 PE와 접합된 항-마우스 Ig G (Sigma, P8547)과 함께 배양되었다. 세척 단계 후에, FACS Calibur (B&D)를 이용하여 10,000 번의 경우가 분석되었다. 결합 측정법의 결과는 도 16에 나타냈다. 구조체 3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:49) 및 5-10x항-CD3 (서열식별번호:63)는 쥬르카트 세포에서 CD3에, 그리고 카토 세포에서 CD19에 강한 결합을 보였다.
실시예
8.3.
탈면역화된
항-
CD3
부분을 갖는
이중특이성
항
EpCAM
구조체의 정제
탈면역화된 항-CD3 영역 및 EpCAM-특이성 영역을 포함하는 구조체가 고정된 금속 친화성 크로마토그래피 (IMAC) 및 겔 여과를 포함하는 두 단계 정제에 의해 정제되었다. 금속 친화성 크로마토그래피 (IMAC) 및 겔 여과는 실시예 3.2에서 보는 바와 같이 수행되었다.
추가의 고 해상도 양이온교환크로마토그래피가 MiniS 컬럼 (Amersham)에서 수행되었고, 20mM MES 버퍼 pH 5.5로 평형화되었다. 샘플은 동일한 완충액을 사용하여 컬럼에 적재하기 전에 1:3으로 희석하였다. 결합된 단백질은 1M NaCl: 0-30% 의 평형 완충액을 사용하여 용출되었다. 용출된 단백질 분획은 생활성 측정법에서 테스트되었다. 표 14는 정제된 탈면역화된 EpCAM 구조체의 수율을 보여준다. 모든 구조체는 효율적으로 생산될 수 있다. 놀랍게도 구조체 5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:63)는 2200 ㎍/l 라는 극히 좋은 수율을 가졌다.
구조체 | 단량체의 수율 [배양 리터당 정제된 단백질㎍] |
항-CD3 (VH5/VL2)x4-7 (서열식별번호:33) | 112.5 |
3-1x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:49) | 87.5 |
항-CD3 (VH5/VL2)x3-1 (서열식별번호:31) | 442.5 |
5-10x항-CD3 (VH5/VL2) (서열식별번호:63) | 2200 |
항-CD 3 (VH5/VL2)x5-10 (서열식별번호:37) | 80 |
실시예
8.4
탈면역화된
항-
CD3
부분을 갖는
이중특이성
항-
EpCAM
구조체의 세포독성 측정법
본 발명의 이중특이성 항체의 높은 생활성을 측정하기 위해, FACS 기반의 측정법이 수행되었다. CHO 세포가 상피세포 부착 분자 (EpCAM)로 형질변환되었다. 이 형질변환으로부터 유래된 세포 클론은 CHO-EpCAM 이라고 불리는데, 이 실험을 위해 사용되었다.
세포 독성 테스트를 위해, CHO-EpCAM (1.5x107) 세포는 혈청이 없도록 PBS로 두 번 세척하였고, 제작자의 지시에 따라 PKH26 염료(Sigma-Aldrich 사)로 항온 보관되었다. 염색후에, 세포는 RPMI/10% FCS로 두번 세척되었다.
세포는 계수되었고 CB15 작동 세포와 섞여졌다. CD4-양성 T 세포 클론 CB15은 독일의 Erlangen/Nuernberg 대학의 피켄셔 박사(Dr. Fickenscher)에 의해 제공되었다. 세포는 공급자의 권고에 따라서 배양되었다. 결과물인 세포 현탁액은 ML 당 400,000 표적 및 2 x 106 작동 세포를 포함하였다. 둥근 바닥 플레이트의 96웰에 웰당 혼합물 50 ㎕가 사용되었다.
항체는 요구되는 농도로 RPMI/10% FCS에서 희석되었고, 이 용액의 50㎕ 가 세포 현탁액에 첨가되었다. 표준 반응은 16 시간동안 37℃/ 5% CO2 에서 항온 보관되었다. 프로피디움 아이오다이드 가 최종농도 1 ㎍/㎖ 로 첨가되었다. 10분의 실온에서의 항온 보관후 세포는 FACS에 의해 분석되었다. 표적 세포의 양성 동정을 위해 PKH26 형광이 사용되었다. 세포독성은 모든 표적 세포들에 대한 PI 양성의 비율로서 측정되었다.
S자꼴 만곡의 분량 반응 커브(sigmoidal dose response curves)는 전형적으로 Prism Software (GraphPad Software 사, 샌디에고, 미국)에 의해 결정된바 대로 R2 값 >0.97 이었다. 세포 독성 측정법의 결과는 도 17 및 18에 보인다.
실시예
8.5.
CHO
세포에서
EpCAM
결합 부분 및
탈면역화된
CD3
결합 부분을 포함하는 이중특이성 분자들의 생산성의 비교
탈면역화된 구조체의 생산성을 결정하기 위해 단백질 L ELISA 이 수행되었다. 생산성 데이터는 배치 배양으로부터 계산되었다.
8.5.1 세포 배양
탈면역화된 (CHO-DHFR-) 및 탈면역화 되지않은 (CHO-DHFR- 또는 CHO-K1)를 생산하는 CHO 세포주는, 37℃ 및 5% CO2 의 CO2 배양기 내에서, HyQ PF CHO LS 배지 + 4 mM L-글루타민 에서 배양되었다. 세포수 및 생활성은 트리판 블루를 사용하여 결정되었다. 세포 밀도는 1-2 x 105 cell/ml로 고정되었다.
세포는 교반 플라스크(spinner flasks)로 옮겨졌고 그래서 교반되는 배양의 조건으로 조정되었다. 작동 변수 세팅은 CO2 배양기 내에 가스를 주며 80 rpm, 37℃ 및 5% CO2 이었다. 배양 부피는 100-500 ml-범위였고, 접종시의 세포 밀도는 1-2 x 105 세포/ml 이었다. T-플라스크에서의 하위배양에서, 배양물은 원심분리되고 신선한 각각의 통로에서 예비-온난화된 배지에 재현탁되었다. 세포 밀도는 1-2 x 105 세포/ml 로 고정되었다.
생산성 데이터 (표 15)의 분석을 위해, 세포는 최장 14일까지 어떠한 배지의 첨가 또는 교환없이 배양되었다. 세포수 및 생이용성은 매일 트리판 블루 염색을 사용하여 결정되었다. 상청액에서의 생산물 농도는 단백질 L ELISA에 의해 분석되었다.
8.5.2 단백질 L ELISA
이중특이성 분자들의 정량 결합이 r단백질 L-코팅된 마이크로타이터 플레이트로 수행되었다. r단백질 L 은 펩토스트렙토코커스 마그너스(Peptostreptococcus magnus)에 의해 생산되는 면역글로불린-결합 단백질 L의 재조합체 형태이다. 그것은 네개의 도메인이 있고 경쇄 (κ)를 통해 면역글로불린에 결합한다. 각각 모(parent) 항체의 두 개의 상이한 경쇄들을 포함하는 이중특이성 분자들은 또한 r단백질 L에 의해 결합된다.
마이크로 타이터 플레이트는 하루밤동안 2-8℃에서 PBS 완충액 (2 ㎍ r단백질 L/ml PBS 완충액) 내에서 r단백질 L로 코팅된다. 코팅에 이어서, 흡착 장소의 나머지는 차단 완충액 (PBS 완충액 내의 2% BSA)으로 차단된다. 그 후, 플레이트는 냉동되고 ≤18℃ 에서 보관된다. 사용하기 전에, 그 플레이트는 해동되고 세척 완충액 (PBS 완충액 내의 0.05% 트윈 20)에서 세척되어 코팅 용액 및 차단 완충액의 혼합물을 제거한다.
PBS 내의 1% BSA + 0.01% 트윈 20 (희석 완충액) 내의 세포 없는 배양 상청액의 순차적 희석이 분석되었다. 이중특이성 항-EpCAM(M79)x항-CD3 가 비교 희석들의 양의 대조군으로 사용되었다.
항온 보관은 하루밤동안 2-8℃에서 수행되었다.
세척 후에, 토끼(rabbit) 항-마우스 IgG (희석 완충액에서 1:5,000)가 첨가되었고 60분간 실온에서 항온 보관되었다. 세척 후에, 염기성 포스포테이즈로 표지된 염소-항-토끼-IgG 가 첨가되었다 (희석 완충액에서 1:1,000; 실온에서 60 분). pNPP 기질 용액이 첨가되었고, 반응은 3 M NaOH의 첨가로 중지되었다. 흡수는 ELISA 판독기로 405 nm (참조 필터 492 nm)에서 측정되었다.
구조체 | M79x항-항-CD3 | 5-10x항-CD3 (VH5/VL2) | |
기본 세포주 | CHO-K1 | CHO-dhfr- | CHO-dhfr- |
비(Specific) 생산성 | 하루당 0.2-0.6 pg/세포 | 하루당 1-3 pg/세포 | 하루당15-20 pg/세포 |
최대 세포 밀도 | 3x106 c/ml | 1.2-1.8x106 c/ml | 1.5x106 c/ml |
배가시간 | 17-20 h | 25-30 h | 25-30 h |
그래서, 발명의 5-10x항-CD3 (VH5/VL2) 구조체는, 선행 기술 이중특이성 탈면역화 되지않은 EpCAM 및 CD3 결합 항체보다 훨씬 더 높은 비 (specific) 생산성 (적어도 5배 이상 높음) 을 보인다.
SEQUENCE LISTING
<110> Micromet AG
<120> Multispecific deimmunized CD3 binders
<130> G 2728 PCT
<160> 409
<170> PatentIn version 3.1
<210> 1
<211> 729
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> wt Anti-CD3 cassette
<400> 1
gatatcaaac tgcagcagtc aggggctgaa ctggcaagac ctggggcctc agtgaagatg 60
tcctgcaaga cttctggcta cacctttact aggtacacga tgcactgggt aaaacagagg 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
aatcagaagt tcaaggacaa ggccacattg actacagaca aatcctccag cacagcctac 240
atgcaactga gcagcctgac atctgaggac tctgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca ctctcacagt ctcctcagtc 360
gaaggtggaa gtggaggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagtcga cgacattcag 420
ctgacccagt ctccagcaat catgtctgca tctccagggg agaaggtcac catgacctgc 480
agagccagtt caagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagtcagg cacctccccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tcccttatcg cttcagtggc 600
agtgggtctg ggacctcata ctctctcaca atcagcagca tggaggctga agatgctgcc 660
acttattact gccaacagtg gagtagtaac ccgctcacgt tcggtgctgg gaccaagctg 720
gagctgaaa 729
<210> 2
<211> 243
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> wt Anti-CD3 cassette
<400> 2
Asp Ile Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Val Glu Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Val Asp Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser
165 170 175
Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Tyr Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu
225 230 235 240
Glu Leu Lys
<210> 3
<211> 18
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> deimmunized linker
<400> 3
Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly
1 5 10 15
Ala Asp
<210> 4
<211> 729
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH2/VL1
<400> 4
gacgtccaac tggtgcagtc aggggctgaa gtgaaaaaac ctggggcctc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggcta caccgctact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
gcacagaagt tgcagggccg cgtcacaatg actacagaca cttccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcaacct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctcaggc 360
gaaggtacta gtactggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagcaga cgacattcag 420
atgacccagt ctccatctag cctgtctgca tctgtcgggg accgtgtcac catcacctgc 480
agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
agtgggtctg ggaccgacta ctctctcaca atcaacagct tggaggctga agatgctgcc 660
acttattact gccaacagtg gagtagtaac ccgctcacgt tcggtggcgg gaccaaggtg 720
gagatcaaa 729
<210> 5
<211> 243
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH2/VL1
<400> 5
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys
<210> 6
<211> 729
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH2/VL2
<400> 6
gacgtccaac tggtgcagtc aggggctgaa gtgaaaaaac ctggggcctc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggcta caccgctact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
gcacagaagt tgcagggccg cgtcacaatg actacagaca cttccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcaacct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctcaggc 360
gaaggtacta gtactggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagcaga cgacattgta 420
ctgacccagt ctccagcaac tctgtctctg tctccagggg agcgtgccac cctgagctgc 480
agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
agtgggtctg ggaccgacta ctctctcaca atcaacagct tggaggctga agatgctgcc 660
acttattact gccaacagtg gagtagtaac ccgctcacgt tcggtggcgg gaccaaggtg 720
gagatcaaa 729
<210> 7
<211> 243
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH2/VL2
<400> 7
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys
<210> 8
<211> 729
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH2/VL3
<400> 8
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tcctgcaagg cttctggcta caccgctact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
gcacagaagt tgcagggccg cgtcacaatg actacagaca cttccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcaacct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctcaggc 360
gaaggtacta gtactggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagcaga cgacattgta 420
ctgacccagt ctccagcaac tctgtctctg tctccagggg agcgtgccac cctgacctgc 480
agagccagtt caagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
agtgggtctg ggaccgacta ctctctcaca atcaacagct tggaggctga agatgctgcc 660
acttattact gccaacagtg gagtagtaac ccgctcacgt tcggtggcgg gaccaaggtg 720
gagatcaaa 729
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<211> 243
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH2VL3
<400> 9
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys
<210> 10
<211> 729
<212> DNA
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<220>
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<211> 243
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<213> artificial sequence
<220>
<223> VH3/VL1
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys
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<211> 729
<212> DNA
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<220>
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
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Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
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Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
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Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
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<220>
<223> VH3/VL3
<400> 15
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys
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Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys
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<212> DNA
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<220>
<223> VH5/VL1
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gcagacagcg tcaagggccg cttcacaatc actacagaca aatccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcaacct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctcaggc 360
gaaggtacta gtactggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagcaga cgacattcag 420
atgacccagt ctccatctag cctgtctgca tctgtcgggg accgtgtcac catcacctgc 480
agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
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gagatcaaa 729
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<223> VH5/VL1
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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<213> artificial sequence
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<223> VH5/VL2
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys
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<223> VH5/VL3
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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100 105 110
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
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Glu Ile Lys
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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<220>
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys
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gagatcaaa 729
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<211> 243
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> VH7/VL3
<400> 27
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
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Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys
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<211> 20
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Sequencing primer
<400> 28
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<210> 29
<211> 18
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Sequencing primer
<400> 29
agccgccacg tgggcctc 18
<210> 30
<211> 1473
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> anti-CD3 VH5/VL2 x 3-1 VHVL
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gaaggtacta gtactggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagcaga cgacattgta 420
ctgacccagt ctccagcaac tctgtctctg tctccagggg agcgtgccac cctgagctgc 480
agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
agtgggtctg ggaccgacta ctctctcaca atcaacagct tggaggctga agatgctgcc 660
acttattact gccaacagtg gagtagtaac ccgctcacgt tcggtggcgg gaccaaggtg 720
gagatcaaat ccggaggtgg tggatccgag gtgcagctgc tcgagcagtc tggagctgag 780
ctggtgaaac ctggggcctc agtgaagata tcctgcaagg cttctggata cgccttcact 840
aactactggc taggttgggt aaagcagagg cctggacatg gacttgagtg gattggagat 900
cttttccctg gaagtggtaa tactcactac aatgagaggt tcaggggcaa agccacactg 960
actgcagaca aatcctcgag cacagccttt atgcagctca gtagcctgac atctgaggac 1020
tctgctgtct atttctgtgc aagattgagg aactgggacg aggctatgga ctactggggc 1080
caagggacca cggtcaccgt ctcctcaggt ggtggtggtt ctggcggcgg cggctccggt 1140
ggtggtggtt ctgagctcgt catgacccag tctccatctt atcttgctgc atctcctgga 1200
gaaaccatta ctattaattg cagggcaagt aagagcatta gcaaatattt agcctggtat 1260
caagagaaac ctgggaaaac taataagctt cttatctact ctggatccac tttgcaatct 1320
ggaattccat caaggttcag tggcagtgga tctggtacag atttcactct caccatcagt 1380
agcctggagc ctgaagattt tgcaatgtat tactgtcaac agcataatga atatccgtac 1440
acgttcggag gggggaccaa gcttgagatc aaa 1473
<210> 31
<211> 491
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> anti-CD3 VH5/VL2 x 3-1 VHVL
<400> 31
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln
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Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys
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Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser
245 250 255
Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys
260 265 270
Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu
275 280 285
Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
290 295 300
Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser
305 310 315 320
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu
325 330 335
Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr
340 345 350
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly
355 360 365
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln
370 375 380
Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys
385 390 395 400
Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys
405 410 415
Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile Gly Asp Ile Phe Pro Gly
420 425 430
Ser Gly Asn Ile His Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu
435 440 445
Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu
450 455 460
Thr Phe Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp
465 470 475 480
Asp Glu Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
485 490 495
Ser
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<212> DNA
<213> artificial sequence
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<223> DI anti-CD3 K52VHBsrGI
<400> 40
aggtgtacac tccgacgtcc aactggtgca gtcag 35
<210> 41
<211> 30
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> DI anti-CD3 52VLBspEI
<400> 41
aatccggatt tgatctccac cttggtcccg 30
<210> 42
<211> 51
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 4-7 VH GS15 FOR
<400> 42
ggcggcggcg gctccggtgg tggtggttct gaggtgcagc tgctcgagca g 51
<210> 43
<211> 53
<212> DNA
<213> artificial sequence
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<223> 4-7 VH SalI REV
<400> 43
ttttaagtcg acctaatgat gatgatgatg atgtgaggag acggtgaccg tgg 53
<210> 44
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<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 510VLBspEI
<400> 44
ctgaaatccg gaggtggtgg atccgagctc gtgatgacac agtctccat 49
<210> 45
<211> 53
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 510VLGS15REV
<400> 45
ggagccgccg ccgccagaac caccaccacc tttgatctca agcttggtcc cag 53
<210> 46
<211> 49
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 510VHGS15
<400> 46
ggcggcggcg gctccggtgg tggtggttct gaggtgcagc tgctcgagc 49
<210> 47
<211> 53
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 510VHSalIREV
<400> 47
ttttaagtcg acctaatgat gatgatgatg atgtgaggag acggtgaccg tgg 53
<210> 48
<211> 1518
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 3-1(VL-VH)xanti-CD3(VH(5)-VL(2))
<400> 48
atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctacaggtgt acactccgag 60
ctcgtcatga cccagtctcc atcttatctt gctgcatctc ctggagaaac cattactatt 120
aattgcaggg caagtaagag cattagcaaa tatttagcct ggtatcaaga gaaacctggg 180
aaaactaata agcttcttat ctactctgga tccactttgc aatctggaat tccatcaagg 240
ttcagtggca gtggatctgg tacagatttc actctcacca tcagtagcct ggagcctgaa 300
gattttgcaa tgtattactg tcaacagcat aatgaatatc cgtacacgtt cggagggggg 360
accaagcttg agatcaaagg tggtggtggt tctggcggcg gcggctccgg tggtggtggt 420
tctgaggtgc agctgctcga gcagtctgga gctgagctgg tgaaacctgg ggcctcagtg 480
aagatatcct gcaaggcttc tggatacgcc ttcactaact actggctagg ttgggtaaag 540
cagaggcctg gacatggact tgagtggatt ggagatcttt tccctggaag tggtaatact 600
cactacaatg agaggttcag gggcaaagcc acactgactg cagacaaatc ctcgagcaca 660
gcctttatgc agctcagtag cctgacatct gaggactctg ctgtctattt ctgtgcaaga 720
ttgaggaact gggacgaggc tatggactac tggggccaag ggaccacggt caccgtctcc 780
tccggaggtg gtggctccga cgtccaactg gtgcagtcag gggctgaagt gaaaaaacct 840
ggggcctcag tgaaggtgtc ctgcaaggct tctggctaca cctttactag gtacacgatg 900
cactgggtaa ggcaggcacc tggacagggt ctggaatgga ttggatacat taatcctagc 960
cgtggttata ctaattacgc agacagcgtc aagggccgct tcacaatcac tacagacaaa 1020
tccaccagca cagcctacat ggaactgagc agcctgcgtt ctgaggacac tgcaacctat 1080
tactgtgcaa gatattatga tgatcattac tgccttgact actggggcca aggcaccacg 1140
gtcaccgtct cctcaggcga aggtactagt actggttctg gaggttcagg tggagcagac 1200
gacattgtac tgacccagtc tccagcaact ctgtctctgt ctccagggga gcgtgccacc 1260
ctgagctgca gagccagtca aagtgtaagt tacatgaact ggtaccagca gaagccgggc 1320
aaggcaccca aaagatggat ttatgacaca tccaaagtgg cttctggagt ccctgctcgc 1380
ttcagtggca gtgggtctgg gaccgactac tctctcacaa tcaacagctt ggaggctgaa 1440
gatgctgcca cttattactg ccaacagtgg agtagtaacc cgctcacgtt cggtggcggg 1500
accaaggtgg agatcaaa 1518
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<212> PRT
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<400> 49
Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Tyr Leu Ala Ala
20 25 30
Ser Pro Gly Glu Thr Ile Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Lys Ser Ile
35 40 45
Ser Lys Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Glu Lys Pro Gly Lys Thr Asn Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn Glu
100 105 110
Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln
130 135 140
Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val
145 150 155 160
Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr Trp Leu
165 170 175
Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile Gly Asp
180 185 190
Leu Phe Pro Gly Ser Gly Asn Thr His Tyr Asn Glu Arg Phe Arg Gly
195 200 205
Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Phe Met Gln
210 215 220
Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg
225 230 235 240
Leu Arg Asn Trp Asp Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Gln Leu Val Gln
260 265 270
Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys
275 280 285
Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg
290 295 300
Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser
305 310 315 320
Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
325 330 335
Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu
340 345 350
Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp
355 360 365
His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
370 375 380
Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp
385 390 395 400
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
405 410 415
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met
420 425 430
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
435 440 445
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
450 455 460
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu
465 470 475 480
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
485 490 495
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
500 505
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<211> 60
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Me83
<400> 50
ggttctggcg gcggcggctc cggtggtggt ggttctgagg tgcagctgct cgacagtctg 60
<210> 51
<211> 41
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Me84
<400> 51
gtgctccgga ggagacggtg accgtggtcc cttggcccca g 41
<210> 52
<211> 53
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Me90
<400> 52
ccggagccgc cgccgccaga accaccacca cctttgatct caagcttggt ccc 53
<210> 53
<211> 52
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Me91a
<400> 53
ggattgtaca ctccgagctc gtcatgaccc agtctccatc ttatcttgct gc 52
<210> 54
<211> 1560
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 3-5(VL-VH)xanti-CD3 (VH(5)-VL(2))
<400> 54
atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctacaggtgt acactccgcg 60
cgcgagctcg tgatgaccca gactccactc tccctgcctg tcagtcttgg agatcaagcc 120
tccatctctt gcagatctag tcagagcctt gtacacagta atggaaacac ctatttacat 180
tggtacctgc agaagccagg ccagtctcca aagctcctga tctacaaagt ttccaaccga 240
ttttctgggg tcccagacag gttcagtggc agtggatcag ggacagattt cacactcaag 300
atcagcagag tggaggctga ggatctggga gtttatttct gctctcaaag tacacatgtt 360
ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctt gagatcaaag gtggtggtgg ttctggcggc 420
ggcggctccg gtggtggtgg ttctgaggtg cagctgctcg agcagtctgg agctgagctg 480
gtaaggcctg ggacttcagt gaagctgtcc tgcaaggctt ctggctacac cttcacaagc 540
tatggtttaa gctgggtgaa gcagagaact ggacagggcc ttgagtggat tggagaggtt 600
tatcctagaa ttggtaatgc ttactacaat gagaagttca agggcaaggc cacactgact 660
gcagacaaat cctccagcac agcgtccatg gagctccgca gcctgacatc tgaggactct 720
gcggtctatt tctgtgcaag acggggatcc tacggtagta actacgactg gtacttcgat 780
gtctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc tcctccggag gtggtggctc cgacgtccaa 840
ctggtgcagt caggggctga agtgaaaaaa cctggggcct cagtgaaggt gtcctgcaag 900
gcttctggct acacctttac taggtacacg atgcactggg taaggcaggc acctggacag 960
ggtctggaat ggattggata cattaatcct agccgtggtt atactaatta cgcagacagc 1020
gtcaagggcc gcttcacaat cactacagac aaatccacca gcacagccta catggaactg 1080
agcagcctgc gttctgagga cactgcaacc tattactgtg caagatatta tgatgatcat 1140
tactgccttg actactgggg ccaaggcacc acggtcaccg tctcctcagg cgaaggtact 1200
agtactggtt ctggtggaag tggaggttca ggtggagcag acgacattgt actgacccag 1260
tctccagcaa ctctgtctct gtctccaggg gagcgtgcca ccctgagctg cagagccagt 1320
caaagtgtaa gttacatgaa ctggtaccag cagaagccgg gcaaggcacc caaaagatgg 1380
atttatgaca catccaaagt ggcttctgga gtccctgctc gcttcagtgg cagtgggtct 1440
gggaccgact actctctcac aatcaacagc ttggaggctg aagatgctgc cacttattac 1500
tgccaacagt ggagtagtaa cccgctcacg ttcggtggcg ggaccaaggt ggagatcaaa 1560
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<211> 520
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> 3-5(VL-VH)xanti-CD3 (VH(5)-VL(2))
<400> 55
Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser Ala Arg Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu
20 25 30
Pro Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln
35 40 45
Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln
50 55 60
Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp
85 90 95
Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr
100 105 110
Phe Cys Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu
145 150 155 160
Val Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr
165 170 175
Thr Phe Thr Ser Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln
180 185 190
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg Ile Gly Asn Ala Tyr
195 200 205
Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser
210 215 220
Ser Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser
225 230 235 240
Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Gly Ser Asn Tyr Asp
245 250 255
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
275 280 285
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr
290 295 300
Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln
305 310 315 320
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn
325 330 335
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser
340 345 350
Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
355 360 365
Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp
370 375 380
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr
385 390 395 400
Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile
405 410 415
Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg
420 425 430
Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp
435 440 445
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr
450 455 460
Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
465 470 475 480
Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala
485 490 495
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly
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Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
515 520
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<213> artificial sequence
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<400> 56
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<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 4-1(VL-VH)xanti-CD3(VH(5)-VL(2))
<400> 57
atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctacaggtgt acactccgag 60
ctcgtgatga cacagtctcc atcctccctg agtgtgtcag caggagagaa ggtcactatg 120
agctgcaagt ccagtcagag tctgttaaac agtggaaatc aaaagaacta cttggcctgg 180
taccagcaga aaccagggca gcctcctaaa ctgttgatct acggggcatc cactagggaa 240
tctggggtcc ctgatcgctt cacaggcagt ggatctggaa cagatttcac tctcaccatc 300
agcagtgtgc aggctgaaga cctggcagtt tattactgtc agaatgatta tagttatccg 360
tacacgttcg gaggggggac caagcttgag atcaaaggtg gtggtggttc tggcggcggc 420
ggctccggtg gtggtggttc tgaggtgcag ctgctcgagc agtctggagc tgagctggta 480
aggcctggga cttcagtgaa gatatcctgc aaggcttctg gatacgcctt cactaactac 540
tggctaggtt gggttaagca gaggcctgga catggacttg aatgggttgg agatattttc 600
cctggaagtg gtaatgctca ctacaatgag aagttcaagg gcaaagccac actgactgca 660
gacaagtcct cgtacacagc ctatatgcag ctcagtagcc tgacatctga ggactctgct 720
gtctatttct gtgcaagatt gcggaactgg gacgaggcta tggactactg gggccaaggg 780
accacggtca ccgtctcctc cggaggtggt ggctccgacg tccaactggt gcagtcaggg 840
gctgaagtga aaaaacctgg ggcctcagtg aaggtgtcct gcaaggcttc tggctacacc 900
tttactaggt acacgatgca ctgggtaagg caggcacctg gacagggtct ggaatggatt 960
ggatacatta atcctagccg tggttatact aattacgcag acagcgtcaa gggccgcttc 1020
acaatcacta cagacaaatc caccagcaca gcctacatgg aactgagcag cctgcgttct 1080
gaggacactg caacctatta ctgtgcaaga tattatgatg atcattactg ccttgactac 1140
tggggccaag gcaccacggt caccgtctcc tcaggcgaag gtactagtac tggttctggt 1200
ggaagtggag gttcaggtgg agcagacgac attgtactga cccagtctcc agcaactctg 1260
tctctgtctc caggggagcg tgccaccctg agctgcagag ccagtcaaag tgtaagttac 1320
atgaactggt accagcagaa gccgggcaag gcacccaaaa gatggattta tgacacatcc 1380
aaagtggctt ctggagtccc tgctcgcttc agtggcagtg ggtctgggac cgactactct 1440
ctcacaatca acagcttgga ggctgaagat gctgccactt attactgcca acagtggagt 1500
agtaacccgc tcacgttcgg tggcgggacc aaggtggaga tcaaa 1545
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<211> 515
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> 4-1(VL-VH)xanti-CD3(VH(5)-VL(2))
<400> 58
Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val
20 25 30
Ser Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu
35 40 45
Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val
145 150 155 160
Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala
165 170 175
Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly
180 185 190
Leu Glu Trp Val Gly Asp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Asn Ala His Tyr
195 200 205
Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser
210 215 220
Tyr Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala
225 230 235 240
Val Tyr Phe Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Ala Met Asp Tyr
245 250 255
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
260 265 270
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
275 280 285
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
290 295 300
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
305 310 315 320
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
325 330 335
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
340 345 350
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
355 360 365
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
370 375 380
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
385 390 395 400
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
405 410 415
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
420 425 430
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
435 440 445
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
450 455 460
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
465 470 475 480
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485 490 495
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
500 505 510
Glu Ile Lys
515
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<211> 44
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> Me92a
<400> 59
ggattgtaca ctccgagctc gtgatgacac agtctccatc ctcc 44
<210> 60
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<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> 4-7(VL-VH)xanti-CD3(VH(5)-VL(2))
<400> 60
atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctacaggtgt acactccgcg 60
cgcgagctcg tgatgaccca gactccactc tccctgcctg tcagtcttgg agatcaagcc 120
tccatctctt gcagatctag tcagagcctt gtacacagta atggaaacac ctatttacat 180
tggtacctgc agaagccagg ccagtctcca aagctcctga tctacaaagt ttccaaccga 240
ttttctgggg tcccagacag gttcagtggc agtggatcag ggacagattt cacactcaag 300
atcagcagag tggaggctga ggatctggga gtttatttct gctctcaaag tacacatgtt 360
ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctt gagatcaaag gtggtggtgg ttctggcggc 420
ggcggctccg gtggtggtgg ttctgaggtg cagctgctcg agcagtctgg agctgagctg 480
gcgaggcctg gggcttcagt gaagctgtcc tgcaaggctt ctggctacac cttcacaaac 540
tatggtttaa gctgggtgaa gcagaggcct ggacaggtcc ttgagtggat tggagaggtt 600
tatcctagaa ttggtaatgc ttactacaat gagaagttca agggcaaggc cacactgact 660
gcagacaaat cctccagcac agcgtccatg gagctccgca gcctgacctc tgaggactct 720
gcggtctatt tctgtgcaag acggggatcc tacgatacta actacgactg gtacttcgat 780
gtctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc tcctccggag gtggtggctc cgacgtccaa 840
ctggtgcagt caggggctga agtgaaaaaa cctggggcct cagtgaaggt gtcctgcaag 900
gcttctggct acacctttac taggtacacg atgcactggg taaggcaggc acctggacag 960
ggtctggaat ggattggata cattaatcct agccgtggtt atactaatta cgcagacagc 1020
gtcaagggcc gcttcacaat cactacagac aaatccacca gcacagccta catggaactg 1080
agcagcctgc gttctgagga cactgcaacc tattactgtg caagatatta tgatgatcat 1140
tactgccttg actactgggg ccaaggcacc acggtcaccg tctcctcagg cgaaggtact 1200
agtactggtt ctggtggaag tggaggttca ggtggagcag acgacattgt actgacccag 1260
tctccagcaa ctctgtctct gtctccaggg gagcgtgcca ccctgagctg cagagccagt 1320
caaagtgtaa gttacatgaa ctggtaccag cagaagccgg gcaaggcacc caaaagatgg 1380
atttatgaca catccaaagt ggcttctgga gtccctgctc gcttcagtgg cagtgggtct 1440
gggaccgact actctctcac aatcaacagc ttggaggctg aagatgctgc cacttattac 1500
tgccaacagt ggagtagtaa cccgctcacg ttcggtggcg ggaccaaggt ggagatcaaa 1560
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<211> 520
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> 4-7(VL-VH)xanti-CD3(VH(5)-VL(2))
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Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser Ala Arg Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu
20 25 30
Pro Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln
35 40 45
Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln
50 55 60
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65 70 75 80
Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp
85 90 95
Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr
100 105 110
Phe Cys Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu
145 150 155 160
Ala Arg Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr
165 170 175
Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln
180 185 190
Val Leu Glu Trp Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg Ile Gly Asn Ala Tyr
195 200 205
Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser
210 215 220
Ser Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser
225 230 235 240
Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Asp Thr Asn Tyr Asp
245 250 255
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
275 280 285
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr
290 295 300
Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln
305 310 315 320
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn
325 330 335
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser
340 345 350
Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
355 360 365
Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp
370 375 380
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr
385 390 395 400
Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile
405 410 415
Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg
420 425 430
Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp
435 440 445
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr
450 455 460
Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
465 470 475 480
Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala
485 490 495
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Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val
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Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu
35 40 45
Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys
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Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu
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Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
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Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val
145 150 155 160
Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala
165 170 175
Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly
180 185 190
Leu Glu Trp Ile Gly Asp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Asn Ile His Tyr
195 200 205
Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser
210 215 220
Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala
225 230 235 240
Val Tyr Phe Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Pro Met Asp Tyr
245 250 255
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
260 265 270
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
275 280 285
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
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Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
305 310 315 320
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
325 330 335
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
340 345 350
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
355 360 365
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
370 375 380
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
405 410 415
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
420 425 430
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
435 440 445
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
450 455 460
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
465 470 475 480
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
485 490 495
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys
515
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
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Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
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Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln
245 250 255
Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Leu Ser Cys
260 265 270
Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys
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Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg
290 295 300
Ile Gly Asn Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu
305 310 315 320
Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu
325 330 335
Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr
340 345 350
Gly Ser Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr
355 360 365
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
370 375 380
Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro
385 390 395 400
Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
405 410 415
Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys
420 425 430
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe
435 440 445
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
450 455 460
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe
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Cys Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
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Leu Glu Ile Lys
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<223> VH5/VL2x4-1
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
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Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
225 230 235 240
Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln
245 250 255
Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys
260 265 270
Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys
275 280 285
Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Val Gly Asp Ile Phe Pro Gly
290 295 300
Ser Gly Asn Ala His Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu
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Thr Ala Asp Lys Ser Ser Tyr Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu
325 330 335
Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp
340 345 350
Asp Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
355 360 365
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val Ser Ala Gly
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Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
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Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
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Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
435 440 445
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
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Lys
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<213> artificial sequence
<220>
<223> non-deimmunized linker sequence
<400> 68
Val Glu Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly
1 5 10 15
Val Asp
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gacgtccaac tggtgcagtc aggggctgaa gtgaaaaaac ctggggcctc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggcta caccgctact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
gcacagaagt tgcagggccg cgtcacaatg actacagaca cttccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcaacct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctca 357
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<400> 70
Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
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gacgtccaac tggtgcagtc aggggctgaa gtgaaaaaac ctggggcctc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggcta caccgctact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
gcacagaagt tgcagggccg cgtcacaatg actacagaca cttccaccag cacagcctac 240
ctgcaaatga acagcctgaa aactgaggac actgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctca 357
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
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<211> 357
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gacgtccaac tggtgcagtc aggggctgaa gtgaaaaaac ctggggcctc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggcta cacctttact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
gcagacagcg tcaagggccg cttcacaatc actacagaca aatccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcaacct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctca 357
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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gacgtccaac tggtgcagtc aggggctgaa gtgaaaaaac ctggggcctc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggcta cacctttact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
aatcagaagt tcaaggaccg cgtcacaatc actacagaca aatccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctca 357
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Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
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Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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gacattcaga tgacccagtc tccatctagc ctgtctgcat ctgtcgggga ccgtgtcacc 60
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aaggcaccca aaagatggat ttatgacaca tccaaagtgg cttctggagt ccctgctcgc 180
ttcagtggca gtgggtctgg gaccgactac tctctcacaa tcaacagctt ggaggctgaa 240
gatgctgcca cttattactg ccaacagtgg agtagtaacc cgctcacgtt cggtggcggg 300
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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
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<211> 318
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> anti-CD3 VL2
<400> 79
gacattgtac tgacccagtc tccagcaact ctgtctctgt ctccagggga gcgtgccacc 60
ctgagctgca gagccagtca aagtgtaagt tacatgaact ggtaccagca gaagccgggc 120
aaggcaccca aaagatggat ttatgacaca tccaaagtgg cttctggagt ccctgctcgc 180
ttcagtggca gtgggtctgg gaccgactac tctctcacaa tcaacagctt ggaggctgaa 240
gatgctgcca cttattactg ccaacagtgg agtagtaacc cgctcacgtt cggtggcggg 300
accaaggtgg agatcaaa 318
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<211> 106
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> anti-CD3 VL2
<400> 80
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
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Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
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<211> 318
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> anti-CD3 VL3
<400> 81
gacattgtac tgacccagtc tccagcaact ctgtctctgt ctccagggga gcgtgccacc 60
ctgacctgca gagccagttc aagtgtaagt tacatgaact ggtaccagca gaagccgggc 120
aaggcaccca aaagatggat ttatgacaca tccaaagtgg cttctggagt ccctgctcgc 180
ttcagtggca gtgggtctgg gaccgactac tctctcacaa tcaacagctt ggaggctgaa 240
gatgctgcca cttattactg ccaacagtgg agtagtaacc cgctcacgtt cggtggcggg 300
accaaggtgg agatcaaa 318
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<211> 106
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Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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<211> 10
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<220>
<223> vH CDR1 anti-CD3 wt
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Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His
1 5 10
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<211> 30
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ggctacaccg ctactaggta cacgatgcac 30
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Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr Thr Met His
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<212> DNA
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<220>
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ggctacacct ttactaggta cacgatgcac 30
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<211> 10
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH CDR1 VH5,7
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Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His
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<211> 51
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tacattaatc ctagccgtgg ttatactaat tacaatcaga agttcaagga c 51
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<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH CDR2 wt anti-CD3 VH7
<400> 90
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
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<211> 51
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<213> artificial sequence
<220>
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<400> 91
tacattaatc ctagccgtgg ttatactaat tacgcagaca gcgtcaaggg c 51
<210> 92
<211> 17
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH CDR2 VH5
<400> 92
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 93
<211> 51
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<213> artificial sequence
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tacattaatc ctagccgtgg ttatactaat tacgcacaga agttgcaggg c 51
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<211> 17
<212> PRT
<213> artificial sequence
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<223> vH CDR2 VH2,3
<400> 94
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln
1 5 10 15
Gly
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<211> 30
<212> DNA
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<220>
<223> vH CDR3 wt anti-CD3 VH2,3,5,7
<400> 95
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<211> 10
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH CDR3 wt anti-CD3 VH2,3,5,7
<400> 96
Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr
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<211> 30
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<220>
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agagccagtt caagtgtaag ttacatgaac 30
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<211> 10
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<213> artificial sequence
<220>
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Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn
1 5 10
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<211> 30
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> vK CDR1 VL 1,2
<400> 99
agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac 30
<210> 100
<211> 10
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vK CDR1 VL 1,2
<400> 100
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn
1 5 10
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<211> 21
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> vK CDR2 wt anti-CD3 VL1-3
<400> 101
gacacatcca aagtggcttc t 21
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<211> 7
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<220>
<223> vK CDR2 wt anti-CD3 VL1-3
<400> 102
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
1 5
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<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> vK CDR3 wt anti-CD3 VL1-3
<400> 103
caacagtgga gtagtaaccc gctcacg 27
<210> 104
<211> 9
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vK CDR3 wt anti-CD3 VL1-3
<400> 104
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
1 5
<210> 105
<211> 357
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH anti-CD3 with the mutations of cys->ser
<400> 105
gatatcaaac tgcagcagtc aggggctgaa ctggcaagac ctggggcctc agtgaagatg 60
tcctgcaaga cttctggcta cacctttact aggtacacga tgcactgggt aaaacagagg 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
aatcagaagt tcaaggacaa ggccacattg actacagaca aatcctccag cacagcctac 240
atgcaactga gcagcctgac atctgaggac tctgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actcccttga ctactggggc caaggcacca ctctcacagt ctcctca 357
<210> 106
<211> 119
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH anti-CD3 with the mutations of cys ->ser
<400> 106
Asp Ile Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Ser Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 107
<211> 30
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH CDR3 anti-CD3 with the mutation cys-> ser
<400> 107
tattatgatg atcattactc ccttgactac 30
<210> 108
<211> 10
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> vH CDR3 anti-CD3 with the mutation cys-> ser
<400> 108
Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Ser Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 109
<211> 357
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> wild type anti-CD3 VH
<400> 109
gatatcaaac tgcagcagtc aggggctgaa ctggcaagac ctggggcctc agtgaagatg 60
tcctgcaaga cttctggcta cacctttact aggtacacga tgcactgggt aaaacagagg 120
cctggacagg gtctggaatg gattggatac attaatccta gccgtggtta tactaattac 180
aatcagaagt tcaaggacaa ggccacattg actacagaca aatcctccag cacagcctac 240
atgcaactga gcagcctgac atctgaggac tctgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca ctctcacagt ctcctca 357
<210> 110
<211> 119
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> wild type anti-CD3 VH
<400> 110
Asp Ile Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 111
<211> 318
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> wild type anti-CD3 VK
<400> 111
gacattcagc tgacccagtc tccagcaatc atgtctgcat ctccagggga gaaggtcacc 60
atgacctgca gagccagttc aagtgtaagt tacatgaact ggtaccagca gaagtcaggc 120
acctccccca aaagatggat ttatgacaca tccaaagtgg cttctggagt cccttatcgc 180
ttcagtggca gtgggtctgg gacctcatac tctctcacaa tcagcagcat ggaggctgaa 240
gatgctgcca cttattactg ccaacagtgg agtagtaacc cgctcacgtt cggtgctggg 300
accaagctgg agctgaaa 318
<210> 112
<211> 106
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> wild type anti-CD3 VK
<400> 112
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Tyr Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 113
<211> 372
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> CD19 VH
<400> 113
caggtgcagc tgcagcagtc tggggctgag ctggtgaggc ctgggtcctc agtgaagatt 60
tcctgcaagg cttctggcta tgcattcagt agctactgga tgaactgggt gaagcagagg 120
cctggacagg gtcttgagtg gattggacag atttggcctg gagatggtga tactaactac 180
aatggaaagt tcaagggtaa agccactctg actgcagacg aatcctccag cacagcctac 240
atgcaactca gcagcctagc atctgaggac tctgcggtct atttctgtgc aagacgggag 300
actacgacgg taggccgtta ttactatgct atggactact ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct cc 372
<210> 114
<211> 124
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> CD19 VH
<400> 114
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gln Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Glu Thr Thr Thr Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 115
<211> 333
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gatatccagc tgacccagtc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc 60
atctcctgca aggccagcca aagtgttgat tatgatggtg atagttattt gaactggtac 120
caacagattc caggacagcc acccaaactc ctcatctatg atgcatccaa tctagtttct 180
gggatcccac ccaggtttag tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240
cctgtggaga aggtggatgc tgcaacctat cactgtcagc aaagtactga ggatccgtgg 300
acgttcggtg gagggaccaa gctcgagatc aaa 333
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<211> 111
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> CD19 VL
<400> 116
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
20 25 30
Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser Gly Ile Pro Pro
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys Gln Gln Ser Thr
85 90 95
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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ctgaaatccg gaggtggtgg atccgagctc gtgatgaccc agactcc 47
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<211> 52
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<223> 4-7 VL GS15 REV
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ggagccgccg ccgccagaac caccaccacc tttgatctca agcttggtcc cc 52
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<223> CDRH3 M1 mutant
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Tyr Ser Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr
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Tyr Tyr Asp Ala His Tyr Cys Leu Asp Tyr
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Tyr Tyr Asp Asp Gln Tyr Cys Leu Asp Tyr
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Tyr Tyr Asp Asp Pro Tyr Cys Leu Asp Tyr
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<223> CDRH3 M11 mutant
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Tyr Phe Asn Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr
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Tyr Tyr Asn Asp Gln Tyr Cys Leu Asp Tyr
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<223> CDRH3 M20 mutant
<400> 126
Tyr His Asp Asp Pro Tyr Cys Leu Asp Tyr
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<211> 10
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<223> CDRH3 M76 mutant
<400> 127
Tyr Tyr Asp Asp Asn Tyr Cys Leu Asp Tyr
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cagctggagc agtctggacc tgaactgaag aagcctggag agacagtcac gatctcctgc 60
aaggcttctg ggtatacctt cacgaagttc ggaatgaact gggtgaagca ggctccagga 120
aagggtttaa agtggatggg ctggatacac acctccactg gagagccaac atattctgat 180
gacttcaagg gacggtttgc cttctctttg gaaacgtctg ccagcactgc ctatttgcgg 240
atcaacaacc tcaaaaatga ggacatggct aaatacttct gtgccagagg tggtccttac 300
gtaaggggtg ctttggacta ctggggtcaa ggaacctcag tcaccgtctc ctcc 354
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<211> 118
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<213> artificial sequence
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<223> CCR5 Heavy chain
<400> 129
Gln Leu Glu Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val
1 5 10 15
Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Lys Phe Gly Met
20 25 30
Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp
35 40 45
Ile His Thr Ser Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ser Asp Asp Phe Lys Gly
50 55 60
Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Arg
65 70 75 80
Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Lys Tyr Phe Cys Ala Arg
85 90 95
Gly Gly Pro Tyr Val Arg Gly Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
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<211> 333
<212> DNA
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<223> CCR5 Light chain
<400> 130
gacattatcc tgatccaatc tccaccttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc 60
atctcctgca gaaccagcga aaatgttgac ggatacggca ttagttttat aaactggtac 120
caacagaagc caggacagcc acccaaactc ctcatctatg ctgcatccca ccaaggatcc 180
ggggtccctg ccagatttag tggcagtggg tctgggacag acttcagcct caacatccat 240
cctttggagg aggatgatac tgcaatgtat ttctgtcacc aaagtaagaa ggttccgtgg 300
acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaa 333
<210> 131
<211> 111
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> CCR5 Light chain
<400> 131
Asp Ile Ile Leu Ile Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Thr Ser Glu Asn Val Asp Gly Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser His Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Leu Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys His Gln Ser Lys
85 90 95
Lys Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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<212> DNA
<213> artificial sequence
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<223> EpCAM5-10 heavy chain
<400> 132
gaggtgcagc tgctcgagca gtctggagct gagctggtaa ggcctgggac ttcagtgaag 60
atatcctgca aggcttctgg atacgccttc actaactact ggctaggttg ggtaaagcag 120
aggcctggac atggacttga gtggattgga gatattttcc ctggaagtgg taatatccac 180
tacaatgaga agttcaaggg caaagccaca ctgactgcag acaaatcttc gagcacagcc 240
tatatgcagc tcagtagcct gacatttgag gactctgctg tctatttctg tgcaagactg 300
aggaactggg acgagcctat ggactactgg ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 360
<210> 133
<211> 120
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM5-10 heavy chain
<400> 133
Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly
1 5 10 15
Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn
20 25 30
Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Asp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Asn Ile His Tyr Asn Glu Lys
50 55 60
Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 339
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM5-10 light chain
<400> 134
gagctcgtga tgacacagtc tccatcctcc ctgactgtga cagcaggaga gaaggtcact 60
atgagctgca agtccagtca gagtctgtta aacagtggaa atcaaaagaa ctacttgacc 120
tggtaccagc agaaaccagg gcagcctcct aaactgttga tctactgggc atccactagg 180
gaatctgggg tccctgatcg cttcacaggc agtggatctg gaacagattt cactctcacc 240
atcagcagtg tgcaggctga agacctggca gtttattact gtcagaatga ttatagttat 300
ccgctcacgt tcggtgctgg gaccaagctt gagatcaaa 339
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<211> 113
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 5-10 light chain
<400> 135
Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
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<211> 360
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<223> EpCAM 3-1 VH
<400> 136
gaggtgcagc tgctcgagca gtctggagct gagctggtga aacctggggc ctcagtgaag 60
atatcctgca aggcttctgg atacgccttc actaactact ggctaggttg ggtaaagcag 120
aggcctggac atggacttga gtggattgga gatcttttcc ctggaagtgg taatactcac 180
tacaatgaga ggttcagggg caaagccaca ctgactgcag acaaatcctc gagcacagcc 240
tttatgcagc tcagtagcct gacatctgag gactctgctg tctatttctg tgcaagattg 300
aggaactggg acgaggctat ggactactgg ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 360
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<211> 120
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 3-1 VH
<400> 137
Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly
1 5 10 15
Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn
20 25 30
Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Asp Leu Phe Pro Gly Ser Gly Asn Thr His Tyr Asn Glu Arg
50 55 60
Phe Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Phe Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 321
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 3-1 VL
<400> 138
gagctcgtca tgacccagtc tccatcttat cttgctgcat ctcctggaga aaccattact 60
attaattgca gggcaagtaa gagcattagc aaatatttag cctggtatca agagaaacct 120
gggaaaacta ataagcttct tatctactct ggatccactt tgcaatctgg aattccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tggtacagat ttcactctca ccatcagtag cctggagcct 240
gaagattttg caatgtatta ctgtcaacag cataatgaat atccgtacac gttcggaggg 300
gggaccaagc ttgagatcaa a 321
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<211> 107
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<213> artificial sequence
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<223> EpCAM 3-1 VL
<400> 139
Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Tyr Leu Ala Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Thr Ile Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Lys Ser Ile Ser Lys Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Glu Lys Pro Gly Lys Thr Asn Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn Glu Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
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<211> 372
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<400> 140
gaggtgcagc tgctcgagca gtctggagct gagctggtaa ggcctgggac ttcagtgaag 60
ctgtcctgca aggcttctgg ctacaccttc acaagctatg gtttaagctg ggtgaagcag 120
agaactggac agggccttga gtggattgga gaggtttatc ctagaattgg taatgcttac 180
tacaatgaga agttcaaggg caaggccaca ctgactgcag acaaatcctc cagcacagcg 240
tccatggagc tccgcagcct gacatctgag gactctgcgg tctatttctg tgcaagacgg 300
ggatcctacg gtagtaacta cgactggtac ttcgatgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
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<211> 124
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 3-5 VH
<400> 141
Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly
1 5 10 15
Thr Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser
20 25 30
Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg Ile Gly Asn Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys
50 55 60
Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Gly Ser Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 142
<211> 336
<212> DNA
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<220>
<223> EpCAM 3-5 VL
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gagctcgtga tgacccagac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc 60
atctcttgca gatctagtca gagccttgta cacagtaatg gaaacaccta tttacattgg 120
tacctgcaga agccaggcca gtctccaaag ctcctgatct acaaagtttc caaccgattt 180
tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaagatc 240
agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tatttctgct ctcaaagtac acatgttccg 300
tacacgttcg gaggggggac caagcttgag atcaaa 336
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<213> artificial sequence
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Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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gaggtgcagc tgctcgagca gtctggagct gagctggtaa ggcctgggac ttcagtgaag 60
atatcctgca aggcttctgg atacgccttc actaactact ggctaggttg ggttaagcag 120
aggcctggac atggacttga atgggttgga gatattttcc ctggaagtgg taatgctcac 180
tacaatgaga agttcaaggg caaagccaca ctgactgcag acaagtcctc gtacacagcc 240
tatatgcagc tcagtagcct gacatctgag gactctgctg tctatttctg tgcaagattg 300
cggaactggg acgaggctat ggactactgg ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 360
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<211> 120
<212> PRT
<213> artificial sequence
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<223> EpCAM 4-1 VH
<400> 145
Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly
1 5 10 15
Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn
20 25 30
Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Gly Asp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Asn Ala His Tyr Asn Glu Lys
50 55 60
Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Tyr Thr Ala
65 70 75 80
Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 146
<211> 339
<212> DNA
<213> artificial sequence
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<223> EpCAM 4-1 VL
<400> 146
gagctcgtga tgacacagtc tccatcctcc ctgagtgtgt cagcaggaga gaaggtcact 60
atgagctgca agtccagtca gagtctgtta aacagtggaa atcaaaagaa ctacttggcc 120
tggtaccagc agaaaccagg gcagcctcct aaactgttga tctacggggc atccactagg 180
gaatctgggg tccctgatcg cttcacaggc agtggatctg gaacagattt cactctcacc 240
atcagcagtg tgcaggctga agacctggca gtttattact gtcagaatga ttatagttat 300
ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctt gagatcaaa 339
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<211> 113
<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 4-1 VL
<400> 147
Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
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<211> 372
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 4-7 VH
<400> 148
gaggtgcagc tgctcgagca gtctggagct gagctggcga ggcctggggc ttcagtgaag 60
ctgtcctgca aggcttctgg ctacaccttc acaaactatg gtttaagctg ggtgaagcag 120
aggcctggac aggtccttga gtggattgga gaggtttatc ctagaattgg taatgcttac 180
tacaatgaga agttcaaggg caaggccaca ctgactgcag acaaatcctc cagcacagcg 240
tccatggagc tccgcagcct gacctctgag gactctgcgg tctatttctg tgcaagacgg 300
ggatcctacg atactaacta cgactggtac ttcgatgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
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<212> PRT
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 4-7 VH
<400> 149
Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly
1 5 10 15
Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn
20 25 30
Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Val Leu Glu Trp
35 40 45
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50 55 60
Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
85 90 95
Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Asp Thr Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 336
<212> DNA
<213> artificial sequence
<220>
<223> EpCAM 4-7 VL
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gagctcgtga tgacccagac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc 60
atctcttgca gatctagtca gagccttgta cacagtaatg gaaacaccta tttacattgg 120
tacctgcaga agccaggcca gtctccaaag ctcctgatct acaaagtttc caaccgattt 180
tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaagatc 240
agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tatttctgct ctcaaagtac acatgttccg 300
tacacgttcg gaggggggac caagcttgag atcaaa 336
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<211> 112
<212> PRT
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<220>
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20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
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Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr
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Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile
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Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
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Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu
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Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg
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Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Leu Gln
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Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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atgcagctca gcagtctgac atctgaggac tctgcggtct attactgtgc aagatcgcac 300
tacggtagta actacgtaga ctactttgac tactggggcc aaggcacact agtcacagtc 360
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20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys His Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
85 90 95
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caacagattc caggacagcc acccaaactc ctcatctatg atgcatccaa tctagtttct 180
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cctgtggaga aggtggatgc tgcaacctat cactgtcagc aaagtactga ggatccgtgg 300
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tccggtggtg gtggttctca ggtgcagctg cagcagtctg gggctgagct ggtgaggcct 420
gggtcctcag tgaagatttc ctgcaaggct tctggctatg cattcagtag ctactggatg 480
aactgggtga agcagaggcc tggacagggt cttgagtgga ttggacagat ttggcctgga 540
gatggtgata ctaactacaa tggaaagttc aagggtaaag ccactctgac tgcagacgaa 600
tcctccagca cagcctacat gcaactcagc agcctagcat ctgaggactc tgcggtctat 660
ttctgtgcaa gacgggagac tacgacggta ggccgttatt actatgctat ggactactgg 720
ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctcc ggaggtggtg gctccgacgt ccaactggtg 780
cagtcagggg ctgaagtgaa aaaacctggg gcctcagtga aggtgtcctg caaggcttct 840
ggctacaccg ctactaggta cacgatgcac tgggtaaggc aggcacctgg acagggtctg 900
gaatggattg gatacattaa tcctagccgt ggttatacta attacgcaca gaagttgcag 960
ggccgcgtca caatgactac agacacttcc accagcacag cctacatgga actgagcagc 1020
ctgcgttctg aggacactgc aacctattac tgtgcaagat attatgatga tcattactgc 1080
cttgactact ggggccaagg caccacggtc accgtctcct caggcgaagg tactagtact 1140
ggttctggtg gaagtggagg ttcaggtgga gcagacgaca ttcagatgac ccagtctcca 1200
tctagcctgt ctgcatctgt cggggaccgt gtcaccatca cctgcagagc cagtcaaagt 1260
gtaagttaca tgaactggta ccagcagaag ccgggcaagg cacccaaaag atggatttat 1320
gacacatcca aagtggcttc tggagtccct gctcgcttca gtggcagtgg gtctgggacc 1380
gactactctc tcacaatcaa cagcttggag gctgaagatg ctgccactta ttactgccaa 1440
cagtggagta gtaacccgct cacgttcggt ggcgggacca aggtggagat caaacatcat 1500
caccatcatc attagagatc tgtcgac 1527
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Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Gln Pro Pro
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50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys Gln Gln Ser Thr
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Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly
100 105 110
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val
115 120 125
Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val
130 135 140
Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp Met
145 150 155 160
Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Gln
165 170 175
Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly
180 185 190
Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln
195 200 205
Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg
210 215 220
Arg Glu Thr Thr Thr Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
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Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp
245 250 255
Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser
260 265 270
Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr Thr
275 280 285
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly
290 295 300
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln
305 310 315 320
Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met
325 330 335
Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
340 345 350
Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
355 360 365
Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly Gly
370 375 380
Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
385 390 395 400
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
405 410 415
Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
420 425 430
Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly
435 440 445
Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu
450 455 460
Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
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Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu
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cctgtggaga aggtggatgc tgcaacctat cactgtcagc aaagtactga ggatccgtgg 300
acgttcggtg gagggaccaa gctcgagatc aaaggtggtg gtggttctgg cggcggcggc 360
tccggtggtg gtggttctca ggtgcagctg cagcagtctg gggctgagct ggtgaggcct 420
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gatggtgata ctaactacaa tggaaagttc aagggtaaag ccactctgac tgcagacgaa 600
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gtaagttaca tgaactggta ccagcagaag ccgggcaagg cacccaaaag atggatttat 1320
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caccatcatc attagagatc tgtcgac 1527
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Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser Gly Ile Pro Pro
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys Gln Gln Ser Thr
85 90 95
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly
100 105 110
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val
115 120 125
Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val
130 135 140
Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp Met
145 150 155 160
Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Gln
165 170 175
Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly
180 185 190
Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln
195 200 205
Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg
210 215 220
Arg Glu Thr Thr Thr Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
225 230 235 240
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp
245 250 255
Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser
260 265 270
Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ala Thr Arg Tyr Thr
275 280 285
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290 295 300
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln
305 310 315 320
Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met
325 330 335
Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
340 345 350
Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
355 360 365
Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly Gly
370 375 380
Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro
385 390 395 400
Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg
405 410 415
Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
420 425 430
Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly
435 440 445
Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu
450 455 460
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Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu
485 490 495
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gatggtgata ctaactacaa tggaaagttc aagggtaaag ccactctgac tgcagacgaa 600
tcctccagca cagcctacat gcaactcagc agcctagcat ctgaggactc tgcggtctat 660
ttctgtgcaa gacgggagac tacgacggta ggccgttatt actatgctat ggactactgg 720
ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctcc ggaggtggtg gctccgacgt ccaactggtg 780
cagtcagggg ctgaagtgaa aaaacctggg gcctcagtga aggtgtcctg caaggcttct 840
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Gly Ile Ser Phe Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Leu
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Glu Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Thr Ile
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Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Lys Phe Gly Met Asn Trp
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Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile His
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Thr Ser Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ser Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe
180 185 190
Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Arg Ile Asn
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Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Lys Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Gly
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Pro Tyr Val Arg Gly Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val
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Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Val Gln Leu Val Gln Ser
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Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg Gln
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Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg
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Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr
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Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly
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Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
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Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser
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Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro
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agcactgcct atttgcggat caacaacctc aaaaatgagg acatggctaa atacttctgt 660
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Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Arg Gln Pro
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Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys
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Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val
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Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr
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340 345 350
Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
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Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Gly
370 375 380
Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
385 390 395 400
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
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420 425 430
Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro
435 440 445
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile
450 455 460
Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp
465 470 475 480
Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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cagtctccat cctccctgac tgtgacagca ggagagaagg tcactatgag ctgcaagtcc 480
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ccagggcagc ctcctaaact gttgatctac tgggcatcca ctagggaatc tggggtccct 600
gatcgcttca caggcagtgg atctggaaca gatttcactc tcaccatcag cagtgtgcag 660
gctgaagacc tggcagttta ttactgtcag aatgattata gttatccgct cacgttcggt 720
gctgggacca agcttgagat caaatccgga ggtggtggat ccgacgtcca actggtgcag 780
tcaggggctg aagtgaaaaa acctggggcc tcagtgaagg tgtcctgcaa ggcttctggc 840
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Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp
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Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
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Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly
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Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn
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Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp
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Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
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Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
210 215 220
Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln
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Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val
245 250 255
Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala
260 265 270
Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr
275 280 285
Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser
290 295 300
Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly
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Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala
325 330 335
Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly
340 345 350
Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu Val Gln Ser
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Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys
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Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg Gln
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Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg
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Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser
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Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser
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Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp
165 170 175
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala
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Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser
195 200 205
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu
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Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly
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Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile
245 250 255
Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg
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Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp
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Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr
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Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
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Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala
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Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly
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Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser
355 360 365
Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu Val Gln
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Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys
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Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
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305 310 315 320
Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala
325 330 335
Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly
340 345 350
Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
355 360 365
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu Val Gln Ser
370 375 380
Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys
385 390 395 400
Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg Gln
405 410 415
Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg
420 425 430
Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr
435 440 445
Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg
450 455 460
Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His
465 470 475 480
Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
485 490 495
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gaggtgcagc tgctcgagca gtctggagct gagctggtaa ggcctgggac ttcagtgaag 60
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tcaagtgtaa gttacatgaa ctggtaccag cagaagccgg gcaaggcacc caaaagatgg 900
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Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly
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Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn
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Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp
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Ile Gly Asp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Asn Ile His Tyr Asn Glu Lys
50 55 60
Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala
65 70 75 80
Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe
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Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser
130 135 140
Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser
145 150 155 160
Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp
165 170 175
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala
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Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser
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Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu
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Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly
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Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile
245 250 255
Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg
260 265 270
Ala Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp
275 280 285
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr
290 295 300
Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
305 310 315 320
Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala
325 330 335
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly
340 345 350
Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser
355 360 365
Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu Val Gln
370 375 380
Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys
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Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg
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Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser
420 425 430
Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Ile
435 440 445
Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu
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Ser
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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met
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Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
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Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
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Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu
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Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
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Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Glu Gly Thr Ser Thr
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu
115 120 125
Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val
130 135 140
Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp
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Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn
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Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe
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Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser
195 200 205
Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr
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Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
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Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser
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Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys
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Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln
275 280 285
Arg Pro Gly Gln Val Leu Glu Trp Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg Ile
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Gly Asn Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr
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Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr
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Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Asp
340 345 350
Thr Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
355 360 365
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
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Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val
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Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu
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Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
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Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
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Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys
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Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu
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Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser
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Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys
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Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln Arg
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Pro Gly Gln Val Leu Glu Trp Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg Ile Gly
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Asn Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala
435 440 445
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser
450 455 460
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Asp Thr
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Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser
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Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Thr
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Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys
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Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His
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Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys
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Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly
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Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp
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Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr Phe
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Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
355 360 365
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser
370 375 380
Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys
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Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Leu Ser Trp Val Lys Gln
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Arg Pro Gly Gln Val Leu Glu Trp Ile Gly Glu Val Tyr Pro Arg Ile
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Gly Asn Ala Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr
435 440 445
Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr
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Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Asp
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu
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Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val
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Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp
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Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser
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Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
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Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val
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Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu
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Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
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Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
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Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys
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Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro
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Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
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tcctgcaagg cttctggcta cacctttact aggtacacga tgcactgggt aaggcaggca 120
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aatcagaagt tcaaggaccg cgtcacaatc actacagaca aatccaccag cacagcctac 240
atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctcaggc 360
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agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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355 360 365
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atggaactga gcagcctgcg ttctgaggac actgcagtct attactgtgc aagatattat 300
gatgatcatt actgccttga ctactggggc caaggcacca cggtcaccgt ctcctcaggc 360
gaaggtacta gtactggttc tggtggaagt ggaggttcag gtggagcaga cgacattgta 420
ctgacccagt ctccagcaac tctgtctctg tctccagggg agcgtgccac cctgagctgc 480
agagccagtc aaagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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355 360 365
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Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
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gggacagatt tcacactcaa gatcagcaga gtggaggctg aggatctggg agtttatttc 1020
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agagccagtt caagtgtaag ttacatgaac tggtaccagc agaagccggg caaggcaccc 540
aaaagatgga tttatgacac atccaaagtg gcttctggag tccctgctcg cttcagtggc 600
agtgggtctg ggaccgacta ctctctcaca atcaacagct tggaggctga agatgctgcc 660
acttattact gccaacagtg gagtagtaac ccgctcacgt tcggtggcgg gaccaaggtg 720
gagatcaaat ccggaggtgg tggatccgag gtgcagctgc tcgagcagtc tggagctgag 780
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
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Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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355 360 365
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370 375 380
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Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
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Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
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Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
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Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser
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tatgatgcat ccaatctagt ttctgggatc ccacccaggt ttagtggcag tgggtctggg 960
acagacttca ccctcaacat ccatcctgtg gagaaggtgg atgctgcaac ctatcactgt 1020
cagcaaagta ctgaggatcc gtggacgttc ggtggaggga ccaagctcga gatcaaaggt 1080
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Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu
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gtgtctctag ggcagagggc caccatctcc tgcaaggcca gccaaagtgt tgattatgat 1260
ggtgatagtt atttgaactg gtaccaacag attccaggac agccacccaa actcctcatc 1320
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
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Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys
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355 360 365
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Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala
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Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser
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acagacttca ccctcaacat ccatcctgtg gagaaggtgg atgctgcaac ctatcactgt 1020
cagcaaagta ctgaggatcc gtggacgttc ggtggaggga ccaagctcga gatcaaaggt 1080
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Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu
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Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
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Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys
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Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
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acagacttca ccctcaacat ccatcctgtg gagaaggtgg atgctgcaac ctatcactgt 1020
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Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu
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Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
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Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
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Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
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Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser
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Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys
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Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys
145 150 155 160
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser
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Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser
245 250 255
Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys
260 265 270
Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp Met Asn Trp Val Lys Gln
275 280 285
Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Gln Ile Trp Pro Gly Asp
290 295 300
Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr
305 310 315 320
Ala Asp Glu Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Ala
325 330 335
Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Glu Thr Thr Thr
340 345 350
Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
355 360 365
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
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Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala
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Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser
405 410 415
Val Asp Tyr Asp Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Ile Pro
420 425 430
Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser
435 440 445
Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
450 455 460
Leu Asn Ile His Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys
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Gln Gln Ser Thr Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu
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Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val
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Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp
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Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn
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Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser
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Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr
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Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
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Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro
245 250 255
Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys
260 265 270
Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr
275 280 285
Gln Gln Ile Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser
290 295 300
Asn Leu Val Ser Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly
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Thr Tyr His Cys Gln Gln Ser Thr Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly
340 345 350
Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
355 360 365
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu
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Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Gln Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr
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Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu
435 440 445
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100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Thr Cys
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Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser
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Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala
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Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro
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450 455 460
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Val Gln Leu
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Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
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Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser
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Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
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Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys
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Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser
450 455 460
Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr
465 470 475 480
Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
485 490 495
Val Ser Ser
Claims (41)
- 인간 CD3 에 특이적으로 결합하는 제1 도메인 및 Ig-유래의 제2 결합 도메인을 포함하는 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체에 있어서,상기 제1 도메인은 탈면역화되고, CDR-H1 영역, CDR-H2 영역 및 CDR-H3 영역을 포함하고, 상기 CDR-H3 영역은 서열식별번호: 96, 108, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 또는 127 에 도시된 것과 같은 아미노산 서열을 포함하고;상기 제1 도메인은 그것의 골격 H1 에 서열 VKK 를 더 포함하고, 골격 H1 및 CDRH1 영역 간의 전이 서열(transition sequence)이 서열 Ala-Ser-Gly-Tyr-Thr-Phe (ASGYTF; 서열식별번호: 233)을 포함하는 것인,세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1에 있어서, 상기 제1 도메인 내에, 서열 Met-Glu-Leu-Ser (MELS; 서열식별번호: 234)를 포함하는 골격 H3를 더 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 또는 2에 있어서, 상기 제1 도메인 내에, 서열 Ile-Thr-Thr-Asp-Lys (ITTDK; 서열식별번호: 235)를 포함하는 골격 H3를 더 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 상기 제1 도메인이, 서열식별번호: 152 또는 153 에 나타난 것과 같은 골격 H1을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 상기 제1 도메인이, 서열식별번호: 156 또는 157 에 나타난 골격 H2을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 상기 제1 도메인이, 서열식별번호: 160 또는 161 에 나타난 골격 H3을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 6 중 어느 한 항에 있어서, 인간 CD3에 특이적으로 결합하는 상기 제1 도메인이, 서열식별번호: 164 또는 165 에 나타난 골격 H4을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, 상기 구조체가(a) 서열식별번호: 88에 도시된 CDR-H1; 및(b) 서열식별번호: 90 또는 92 에 도시된 CDR-H2,를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, 상기 구조체가 서열식별번호:74 또는 76 에 도시된 것과 같은 VH-영역을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, 상기 구조체가 서열식별번호: 98 또는 100 에 도시된 것과 같은 CDR-L1 을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 10 중 어느 한 항에 있어서, 상기 구조체가 서열식별번호: 102 에 도시된 것과 같은 CDR-L2 을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 11 중 어느 한 항에 있어서, 상기 구조체가 서열식별번호: 104 에 도시된 것과 같은 CDR-L3 을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특 이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, CD3-특이성 부분에 VL 영역을 포함하고, 상기 VL 영역은 서열식별번호: 78, 서열식별번호: 80, 서열식별번호: 82 및 서열식별번호: 112 로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 도메인이 scFv 인 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 14 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 도메인 및/또는 (a) 연결하는 링커-영역(들)이 인간화 및/또는 탈면역화된 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 도메인이 세포 표면 분자에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용-장소를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 16에 있어서, 상기 세포 표면 분자가 종양 특이성 마커인 것인 세포 독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 16 또는 17 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 결합 도메인이 EpCAM, CCR5, CD19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (mucin), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC5B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, 강글리오시드(ganglioside) GD3, 9-O-아세틸-GD3, GM2, 글로보(Globo) H, 퓨코실(fucosyl) GM1, 폴리(Poly) SA, GD2, 카르보앤하이드라제(Carboanhydrase) IX (MN/CA IX), CD44v6, 음파 고슴도치(Sonic Hedgehog) (Shh), Wue-1, 혈장 세포 항원, (막-결합) IgE, 흑색종 콘드로이틴 황산염 프로테오 글리칸 (Melanoma Chondroitin Sulfate Proteoglycan) (MCSP), CCR8, TNF-알파 전구체, STEAP, 메소텔린(mesothelin), A33 항원, 전립선 줄기세포 항원 (PSCA), Ly-6; 데스모글레인(desmoglein) 4, E-카드헤린 네오-에피토프(neo-epitope), 태아 아세틸콜린(Fetal Acetylcholine) 수용체, CD25, CA19-9 마커, CA-125 마커 및 뮐러관 억제 물질 (MIS) 수용체 타입 II, sTn (sialylated Tn 항원, TAG72), FAP (피브로블라스트 활성화 항원), 엔도시알린(endosialin), EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-항원, Cora 항원, CD7, CD22, Igα, Igβ, G250, gp100, MT-MMPs, F19-항원, CO-29 및 EphA2 로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 분자에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 결합 도메인이 EpCAM에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용-장소를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 19에 있어서, 상기 CD3-특이적 결합 구조체가(a) 서열식별번호: 31, 33, 35, 37, 39, 49, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257,.259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323 및 325 중 어느 하나에 나타나는 아미노산 서열;(b) 서열식별번호: 30, 32, 34, 36, 38, 48, 54, 57, 60, 62, 64, 66, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322 및 324 중 어느 하나에 나타나는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열;(c) 상기 (b) 의 뉴클레오티드 서열에 대한 유전 부호의 결과로 디제너레이트 된 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열;(d) 엄격한 하이브리드 형성 조건하에 상기 (b)에 정의한 바와 같은 핵산 서열의 상보적 가닥으로 하이브리드 형성되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열,로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 결합 도메인은 CCR5에 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 21에 있어서, 상기 CD3-특이적 결합 구조체가:(a) 서열식별번호: 206, 208, 210, 212, 214 또는 216 중 어느 하나에 나타난 바와 같은 아미노산 서열;(b) 서열식별번호: 205, 207, 209, 211, 213 또는 215 중 어느 하나에 나타난 바와 같은 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및(c) 뉴클레오티드 서열 (b)에 대한 유전부호의 결과로서 디제너레이트되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및(d) 엄격한 하이브리드 형성 조건하에 상기 (b)에 정의한 바와 같은 핵산 서열의 상보적 가닥으로 하이브리드 형성되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열,의 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 결합 도메인은 CD19 에 대한 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 23에 있어서, 상기 CD3 특이적 결합 구조체가:(a) 서열식별번호: 190, 192, 194, 196, 198, 200, 327, 329, 331, 333, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 357, 359, 361, 363, 365, 367, 369, 371, 373, 375, 377, 379, 381, 383, 385, 387, 389, 391, 393, 395, 397, 399, 401, 403, 405, 407 또는 409 중 어느 하나에 나타난 아미노산 서열;(b) 서열식별번호: 189, 191, 193, 195, 197,199, 326, 328, 330, 332, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358, 360, 362, 364, 366, 368, 370, 372, 374, 376, 378, 380, 382, 384, 386, 388, 390, 392, 394, 396, 398, 400, 402, 404, 406 또는 408 중 어느 하나에 나타난 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열;및(c) 상기 (b)의 뉴클레오티드 서열에 대한 유전부호의 결과로 디제너레이트(degenerate)된 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및(d) 엄격 하이브리드 형성 조건에서 상기 (b)에 정의된 핵산 서열의 상보성 가닥과 함께 하이브리드 형성된 핵산 서열에 의해 엔코딩된 아미노산 서열,의 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Ig-유래의 제2 결합 도메인은 CD20에 대해 특이성을 갖는 항원-상호작용 장소를 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 25에 있어서, 상기 CD3-특이적 결합 구조체가:(a) 서열식별번호: 218, 220, 222, 224, 226, 또는 228 중 어느 하나에 나타난 바와 같은 아미노산 서열;(b) 서열식별번호: 217, 219, 221, 223, 225 또는 227 중 어느 하나에 나타난 바와 같은 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및(c) 뉴클레오티드 서열 (b)에 대한 유전부호의 결과로서 디제너레이트되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열; 및(d) 엄격한 하이브리드 형성 조건하에 상기 (b)에 정의한 바와 같은 핵산 서열의 상보적 가닥으로 하이브리드 형성되는 핵산 서열에 의해 엔코딩되는 아미노산 서열,의 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 것인, 세포독성적으로 활성인 CD3 특이적 결합 구조체.
- 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 CD3 특이적 결합 구조체를 엔코딩하는 핵산 서열.
- 청구항 27에 기재된 핵산 서열을 포함하는 벡터.
- 청구항 28에 있어서, 청구항 27 기재의 상기 핵산 서열에 작동적으로 연결된(operably-linked) 조절 서열인 핵산 서열을 더 포함하는 것인 벡터.
- 청구항 28 또는 29에 있어서, 상기 벡터가 발현 벡터인 것인 벡터.
- 청구항 28 내지 30중 어느 한 항에 기재된 벡터로 형질전환(transformed) 또는 형질변환(transfected)된 숙주.
- 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 CD3 특이적 결합 구조체의 생산 방법으로서, 상기 방법은 폴리펩티드 구조체의 발현을 허용하는 조건하에서 청구항 31 기재의 숙주를 배양하는 단계 및 생산된 폴리펩티드를 상기 배양으로부터 회수하는 단계를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 또는 청구항 32 기재의 방법에 의해 생성된 CD3 특이적 결합 구조체, 청구항 27 기재의 핵산 분자, 청구항 28 내지 30 중 어느 한 항에 기재된 벡터, 또는 청구항 31 기재의 숙주 및 임의로 면역 작동 세포(immune effector cell)에 대한 활성 신호를 제공할 수 있는 단백질성 화합 물(proteinaceous compound)을 포함하는 조성물.
- 청구항 33에 있어서, 상기 조성물은 약학 조성물이고, 임의로 운반체, 안정화제 및/또는 부형제의 적합한 제형을 더 포함하는 것인 조성물.
- 청구항 33에 있어서, 상기 조성물은 진단 조성물이고, 임의로 검출을 위한 수단 및 방법을 더 포함하는 것인 조성물.
- 증식 질환, 종양성 질환, 염증성 질환, 면역학적 장애, 자가면역 질환, 감염질환, 바이러스 질환, 알레르기성 반응, 기생성 반응, 이식대숙주병 또는 숙주대이식병의 예방, 치료 또는 완화를 위한, 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 또는 청구항 32 기재의 방법에 의해 생성된 CD3 특이적 결합 구조체, 청구항 27 기재의 핵산 분자, 청구항 28 내지 30 중 어느 한 항에 기재된 벡터 또는 청구항 31 기재의 숙주의 용도.
- 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 또는 청구항 32 기재의 방법에 의해 생성된 CD3 특이적 결합 구조체, 청구항 27 기재의 핵산 분자, 청구항 28 내지 30 중 어느 한 항에 기재된 벡터 또는 청구항 31 기재의 숙주를, 예방, 치료 또는 완화가 필요한 대상에 투여를 하는 것을 포함하는, 증식 질환, 종양성 질환, 염증성 질환, 면역학적 장애, 자가면역 질환, 감염질환, 바이러스 질환, 알레르기성 반 응, 기생성 반응, 이식대숙주병 또는 숙주대이식병의 예방, 치료 또는 완화를 위한 방법.
- 청구항 37에 있어서, 상기 대상은 인간인 것인 방법.
- 청구항 37 또는 38에 있어서, 면역 작동 세포에 활성화 신호를 공급할 수 있는 단백질성 화합물의 투여를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 39에 있어서, 상기 단백질성 화합물은 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 또는 청구항 32 기재의 방법에 의해 생성된 CD3 특이적 결합 구조체, 청구항 27 기재의 핵산 분자, 청구항 28 내지 30 중 어느 한 항에 기재된 벡터 또는 청구항 31 기재의 숙주와 동시적으로 또는 비-동시적으로 투여되는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 26 중 어느 한 항에 기재된 또는 청구항 32 기재의 방법에 의해 생성된 CD3 특이적 결합 구조체, 청구항 27 기재의 핵산 분자, 청구항 28 내지 30 중 어느 한 항에 기재된 벡터 또는 청구항 31 기재의 숙주를 포함하는 키트.
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AU2013202392B2 (en) * | 2006-12-20 | 2016-02-25 | Mmrglobal, Inc. | Antibodies and methods for making and using them |
EP2716657A3 (en) | 2006-12-20 | 2014-10-08 | Mmrglobal, Inc. | Antibodies and methods for making and using them |
DE202007016718U1 (de) * | 2007-02-21 | 2008-04-03 | K.L. Kaschier- Und Laminier Gmbh | Airbagdeckelscharnier mit kraftaufnehmendem System |
MX2009010611A (es) * | 2007-04-03 | 2010-03-26 | Micromet Ag | Enlazadores biespecificos, especificos para especies. |
HUE040467T2 (hu) * | 2007-04-03 | 2019-03-28 | Amgen Res Munich Gmbh | Keresztfaj-specifikus kötõdomén |
US8940298B2 (en) * | 2007-09-04 | 2015-01-27 | The Regents Of The University Of California | High affinity anti-prostate stem cell antigen (PSCA) antibodies for cancer targeting and detection |
EP2740490A1 (en) * | 2007-10-03 | 2014-06-11 | Cornell University | Treatment of proliferative disorders using antibodies to PSMA |
CN102099377A (zh) | 2008-04-11 | 2011-06-15 | 新兴产品开发西雅图有限公司 | Cd37免疫治疗剂及其与双功能化学治疗剂的联合 |
US20100069616A1 (en) * | 2008-08-06 | 2010-03-18 | The Regents Of The University Of California | Engineered antibody-nanoparticle conjugates |
PL2356153T3 (pl) | 2008-10-01 | 2016-11-30 | Swoiste międzygatunkowo dwuswoiste przeciwciało jednołańcuchowe PSMAXCD3 | |
US20120034228A1 (en) * | 2008-10-01 | 2012-02-09 | Micromet Ag | CROSS-SPECIES-SPECIFIC PSCAxCD3, CD19xCD3, C-METxCD3, ENDOSIALINxCD3, EPCAMxCD3, IGF-1RxCD3 OR FAPALPHAxCD3 BISPECIFIC SINGLE CHAIN ANTIBODY |
CA2738566C (en) | 2008-10-01 | 2024-04-30 | Micromet Ag | Bispecific single chain antibodies with specificity for high molecular weight target antigens |
HUE025452T2 (en) * | 2008-11-07 | 2016-05-30 | Amgen Res (Munich) Gmbh | A new procedure for the treatment of acute lymphoid leukemia in childhood |
HUE028175T2 (en) * | 2008-11-07 | 2016-12-28 | Amgen Res (Munich) Gmbh | Treatment of acute lymphoblastic leukemia |
EP3495000A1 (en) * | 2009-02-17 | 2019-06-12 | Cornell Research Foundation, Inc. | Methods and kits for diagnosis of cancer and prediction of therapeutic value |
CN102711825A (zh) | 2009-09-18 | 2012-10-03 | 米克罗麦特股份公司 | 用于施用EpCAMxCD3双特异性抗体的给药方案 |
MX354143B (es) | 2009-12-02 | 2018-02-14 | Imaginab Inc | Minicuerpos j591 y diacuerpos-cys para apuntar con especificidad de objetivo a un antígeno de membrana específico para próstata de humano (psma) y métodos para su uso. |
TWI653333B (zh) * | 2010-04-01 | 2019-03-11 | 安進研究(慕尼黑)有限責任公司 | 跨物種專一性之PSMAxCD3雙專一性單鏈抗體 |
WO2012058588A2 (en) * | 2010-10-29 | 2012-05-03 | Immunogen, Inc. | Novel egfr-binding molecules and immunoconjugates thereof |
JP2014500879A (ja) | 2010-11-16 | 2014-01-16 | ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | Bcma発現に相関性を有する疾患を治療する因子及び方法 |
US9249217B2 (en) | 2010-12-03 | 2016-02-02 | Secretary, DHHS | Bispecific EGFRvIII x CD3 antibody engaging molecules |
US10239952B2 (en) * | 2011-04-01 | 2019-03-26 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Anti-WT1/HLA bi-specific antibody |
AU2012245260B2 (en) | 2011-04-22 | 2016-09-08 | Aptevo Research And Development Llc | Prostate-specific membrane antigen binding proteins and related compositions and methods |
DE102011118022B4 (de) * | 2011-06-30 | 2018-01-18 | Gemoab Monoclonals Gmbh | Antikörper gegen das Prostata-spezifische Stammzellenantigen und dessen Verwendung |
CN102337298B (zh) * | 2011-08-19 | 2013-11-06 | 黄开红 | 一种输送siRNA的免疫纳米载体及其制备方法和应用 |
JP6159724B2 (ja) * | 2011-08-23 | 2017-07-05 | ロシュ グリクアート アーゲー | T細胞活性化抗原に対して特異的な二重特異性抗体及び腫瘍抗原および使用方法 |
TWI679212B (zh) | 2011-11-15 | 2019-12-11 | 美商安進股份有限公司 | 針對bcma之e3以及cd3的結合分子 |
AR089114A1 (es) | 2011-12-09 | 2014-07-30 | Amgen Res Munich Gmbh | PREVENCION DE LOS EFECTOS ADVERSOS CAUSADOS POR LOS ANTICUERPOS BIESPECIFICOS EpCAMxCD3 |
RS56773B1 (sr) | 2012-01-13 | 2018-04-30 | Univ Wuerzburg J Maximilians | Dvojna bipartitna funkcionalna komplementacija izazvana antigenom |
GB201203442D0 (en) * | 2012-02-28 | 2012-04-11 | Univ Birmingham | Immunotherapeutic molecules and uses |
ES2680151T3 (es) | 2012-03-01 | 2018-09-04 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Moléculas de unión de polipéptidos de larga duración |
JP6154895B2 (ja) | 2012-06-07 | 2017-06-28 | デューク ユニバーシティー | ヒト二重特異性EGFRvIII抗体結合分子 |
WO2014004549A2 (en) | 2012-06-27 | 2014-01-03 | Amgen Inc. | Anti-mesothelin binding proteins |
CA2874864C (en) * | 2012-08-14 | 2023-02-21 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | T-cell redirecting bispecific antibodies for treatment of disease |
US20150231241A1 (en) * | 2012-08-14 | 2015-08-20 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy for inducing immune response to disease |
US9682143B2 (en) | 2012-08-14 | 2017-06-20 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy for inducing immune response to disease |
EP3838923B1 (en) | 2012-08-24 | 2024-05-01 | The Regents of The University of California | Antibodies and vaccines for use in treating ror1 cancers and inhibiting metastasis |
JOP20200236A1 (ar) * | 2012-09-21 | 2017-06-16 | Regeneron Pharma | الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها |
MX369276B (es) * | 2012-11-13 | 2019-11-04 | Biontech Ag | Agentes para tratamiento de enfermedades cancerosas que expresan claudina. |
AU2014225788B2 (en) * | 2013-03-05 | 2018-03-29 | Baylor College Of Medicine | Engager cells for immunotherapy |
KR20210054067A (ko) | 2013-06-14 | 2021-05-12 | 싸이오서스 테라퓨틱스 엘티디. | 유형 b 아데노바이러스에 대한 투여 요법 및 제형 |
EP4067383A1 (en) | 2013-07-25 | 2022-10-05 | Cytomx Therapeutics Inc. | Multispecific antibodies, multispecific activatable antibodies and methods of using the same |
CN104342453A (zh) * | 2013-08-06 | 2015-02-11 | 深圳先进技术研究院 | 含基因工程抗体基因表达盒的微环dna重组母质粒、含该表达盒的微环dna及应用 |
JP6502931B2 (ja) | 2013-10-11 | 2019-04-17 | アメリカ合衆国 | Tem8抗体およびその使用 |
SG11201602887QA (en) | 2013-10-25 | 2016-05-30 | Psioxus Therapeutics Ltd | Oncolytic adenoviruses armed with heterologous genes |
EP3066130B1 (en) * | 2013-11-07 | 2019-05-15 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Anti-wt1/hla bi-specific antibody |
WO2015103549A1 (en) | 2014-01-03 | 2015-07-09 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use |
KR102480433B1 (ko) | 2014-02-07 | 2022-12-21 | 맥마스터 유니버시티 | 3기능성 t 세포-항원 커플러 및 이의 제조 방법 및 용도 |
TWI701042B (zh) | 2014-03-19 | 2020-08-11 | 美商再生元醫藥公司 | 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物 |
AU2015238261B2 (en) | 2014-03-26 | 2020-11-19 | Cell Medica Switzerland Ag | Binding members to TNF alpha |
SG11201608194VA (en) | 2014-04-03 | 2016-10-28 | Igm Biosciences Inc | Modified j-chain |
EP2930188A1 (en) * | 2014-04-13 | 2015-10-14 | Affimed Therapeutics AG | Trifunctional antigen-binding molecule |
US9212225B1 (en) | 2014-07-01 | 2015-12-15 | Amphivena Therapeutics, Inc. | Bispecific CD33 and CD3 binding proteins |
CN107108738A (zh) | 2014-07-25 | 2017-08-29 | 西托姆克斯治疗公司 | 抗cd3抗体、可活化抗cd3抗体、多特异性抗cd3抗体、多特异性可活化抗cd3抗体及其使用方法 |
JP6749312B2 (ja) | 2014-07-31 | 2020-09-02 | アムゲン リサーチ (ミュンヘン) ゲーエムベーハーAMGEN Research(Munich)GmbH | 最適化された種間特異的二重特異性単鎖抗体コンストラクト |
US10160795B2 (en) | 2014-11-14 | 2018-12-25 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to Ebola virus glycoprotein and their use |
DK3221359T3 (da) | 2014-11-17 | 2020-06-22 | Regeneron Pharma | Fremgangsmåder til tumorbehandling ved anvendelse af CD3XCD20-bispecifikt antistof |
RU2725807C2 (ru) * | 2014-12-08 | 2020-07-06 | 1Глоуб Байомедикал Ко., Лтд. | Растворимый универсальный усиливающий adcc синтетический слитный ген, пептидная технология и их применение |
EP3261665A1 (en) | 2015-02-24 | 2018-01-03 | The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services | Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use |
KR20220018081A (ko) | 2015-03-04 | 2022-02-14 | 아이쥐엠 바이오사이언스 인코포레이티드 | Cd20 결합 분자 및 그의 용도 |
US10562960B2 (en) | 2015-03-20 | 2020-02-18 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to gp120 and their use |
PT3283524T (pt) | 2015-04-17 | 2023-06-05 | Amgen Res Munich Gmbh | Construções de anticorpos biespecíficos para cdh3 e cd3 |
FI3298033T4 (fi) | 2015-05-18 | 2023-09-22 | Tcr2 Therapeutics Inc | Koostumuksia ja lääkinnällisiä käyttöjä fuusioproteiineja käyttävälle tcr:n uudelleenohjelmoinnille |
CN108289949B (zh) | 2015-05-29 | 2022-04-12 | 安普希韦纳治疗公司 | 双特异性cd33和cd3结合蛋白质的使用方法 |
TWI796283B (zh) | 2015-07-31 | 2023-03-21 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | Msln及cd3抗體構築體 |
TW202346349A (zh) | 2015-07-31 | 2023-12-01 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | Dll3及cd3抗體構築體 |
TWI829617B (zh) | 2015-07-31 | 2024-01-21 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | Flt3及cd3抗體構築體 |
TWI744242B (zh) | 2015-07-31 | 2021-11-01 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | Egfrviii及cd3抗體構築體 |
TWI717375B (zh) | 2015-07-31 | 2021-02-01 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | Cd70及cd3抗體構築體 |
JO3620B1 (ar) | 2015-08-05 | 2020-08-27 | Amgen Res Munich Gmbh | مثبطات نقطة فحص مناعية للاستخدام في علاج سرطانات محمولة عبر الدم |
KR20180050321A (ko) | 2015-08-07 | 2018-05-14 | 이미지냅 인코포레이티드 | 분자를 표적화하기 위한 항원 결합 구조체 |
EP3341009A4 (en) | 2015-08-28 | 2019-05-01 | Amunix Pharmaceuticals, Inc. | CHIMERIC POLYPEPTIDE ASSEMBLY AND METHODS OF PREPARING AND USING THE SAME |
CA2999138C (en) | 2015-09-21 | 2024-05-21 | Aptevo Research And Development Llc | Cd3 binding polypeptides |
WO2017059387A1 (en) * | 2015-09-30 | 2017-04-06 | Igm Biosciences, Inc. | Binding molecules with modified j-chain |
WO2017059380A1 (en) | 2015-09-30 | 2017-04-06 | Igm Biosciences, Inc. | Binding molecules with modified j-chain |
WO2017062748A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia |
WO2017070943A1 (zh) * | 2015-10-30 | 2017-05-04 | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 | 双特异性抗体、其制备方法和用途 |
CN115010805A (zh) | 2015-11-03 | 2022-09-06 | 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) | Hiv-1 gp41中和抗体及其用途 |
WO2017087789A1 (en) | 2015-11-19 | 2017-05-26 | Revitope Limited | Functional antibody fragment complementation for a two-components system for redirected killing of unwanted cells |
CN115920030A (zh) | 2015-12-09 | 2023-04-07 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | Ii型抗cd20抗体用于降低抗药物抗体形成 |
KR20180107105A (ko) | 2015-12-17 | 2018-10-01 | 싸이오서스 테라퓨틱스 엘티디. | 항-tcr-복합체 항체 또는 단편을 암호화하는 군 b 아데노바이러스 |
JOP20170017B1 (ar) * | 2016-01-25 | 2021-08-17 | Amgen Res Munich Gmbh | تركيب صيدلي يتضمن تركيبات جسم مضاد ثنائي الاختصاص |
EA039859B1 (ru) | 2016-02-03 | 2022-03-21 | Эмджен Рисерч (Мюник) Гмбх | Биспецифические конструкты антител, связывающие egfrviii и cd3 |
KR20180101623A (ko) | 2016-02-03 | 2018-09-12 | 암젠 리서치 (뮌헨) 게엠베하 | Psma 및 cd3 이중특이성 t 세포 맞물림 항체 작제물 |
MA43955B1 (fr) | 2016-02-03 | 2022-02-28 | Amgen Inc | Anticorps anti-bcma et anti-cd3 bispécifiques de format bite |
TW201808990A (zh) * | 2016-03-08 | 2018-03-16 | 馬弗瑞克療法公司 | 可誘導性結合蛋白和使用方法 |
WO2017167350A1 (en) * | 2016-03-30 | 2017-10-05 | Horst Lindhofer | Multispecific antibodies for use in the treatment of a neoplasm of the urinary tract |
JOP20170091B1 (ar) | 2016-04-19 | 2021-08-17 | Amgen Res Munich Gmbh | إعطاء تركيبة ثنائية النوعية ترتبط بـ cd33 وcd3 للاستخدام في طريقة لعلاج اللوكيميا النخاعية |
WO2017192589A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-11-09 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification |
EP3252078A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-12-06 | F. Hoffmann-La Roche AG | Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer |
KR20190053835A (ko) | 2016-06-21 | 2019-05-20 | 테네오바이오, 인코포레이티드 | Cd3 결합 항체 |
SG11201811559WA (en) | 2016-06-27 | 2019-01-30 | Univ California | Cancer treatment combinations |
TW201811824A (zh) | 2016-07-06 | 2018-04-01 | 美商西建公司 | 具有低免疫原性之抗體及其用途 |
AU2017306432A1 (en) | 2016-08-02 | 2019-03-21 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for TCR reprogramming using fusion proteins |
GB201713765D0 (en) | 2017-08-28 | 2017-10-11 | Psioxus Therapeutics Ltd | Modified adenovirus |
MY197324A (en) * | 2016-08-29 | 2023-06-13 | Akamis Bio Ltd | Adenovirus armed with bispecific t cell activator |
KR102505681B1 (ko) | 2016-09-14 | 2023-03-06 | 테네오바이오, 인코포레이티드 | Cd3 결합 항체 |
AU2017341048A1 (en) | 2016-10-07 | 2019-05-23 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for T-cell receptors reprogramming using fusion proteins |
US11851491B2 (en) | 2016-11-22 | 2023-12-26 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for TCR reprogramming using fusion proteins |
IL267485B2 (en) | 2016-12-21 | 2024-01-01 | Teneobio Inc | Antibodies against BCMA containing only heavy chains and their uses |
JOP20190189A1 (ar) | 2017-02-02 | 2019-08-01 | Amgen Res Munich Gmbh | تركيبة صيدلانية ذات درجة حموضة منخفضة تتضمن بنيات جسم مضاد يستهدف الخلية t |
AU2018219887A1 (en) | 2017-02-08 | 2019-08-22 | Dragonfly Therapeutics, Inc. | Multi-specific binding proteins for activation of natural killer cells and therapeutic uses thereof to treat cancer |
CN108395482B (zh) | 2017-02-08 | 2021-02-05 | 西比曼生物科技(香港)有限公司 | 一种靶向cd20抗原嵌合抗原受体的构建及其工程化t细胞的活性鉴定 |
WO2018147960A1 (en) | 2017-02-08 | 2018-08-16 | Imaginab, Inc. | Extension sequences for diabodies |
EP3580235B1 (en) | 2017-02-10 | 2024-05-01 | The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use |
AU2018220736A1 (en) | 2017-02-20 | 2019-09-05 | Dragonfly Therapeutics, Inc. | Proteins binding HER2, NKG2D and CD16 |
CN108690138A (zh) * | 2017-04-12 | 2018-10-23 | 鸿运华宁(杭州)生物医药有限公司 | 一种能与人cd19或cd20和人cd3结合的双特异性抗体及其应用 |
SG11201909547TA (en) | 2017-05-05 | 2019-11-28 | Amgen Inc | Pharmaceutical composition comprising bispecific antibody constructs for improved storage and administration |
EP3409322A1 (en) | 2017-06-01 | 2018-12-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Treatment method |
KR20200014304A (ko) | 2017-06-02 | 2020-02-10 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 암의 치료를 위한 제ii형 항-cd20 항체 및 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체 |
BR112019026907A2 (pt) | 2017-06-20 | 2020-06-30 | Teneobio, Inc. | Anticorpos apenas de cadeia pesadaanti-bcma, polinucleotídeo, vetor, célula,composição farmacêutica, seus usos e método paraproduzir os mesmos |
GB201710838D0 (en) | 2017-07-05 | 2017-08-16 | Ucl Business Plc | Bispecific antibodies |
GB201710835D0 (en) | 2017-07-05 | 2017-08-16 | Ucl Business Plc | ROR1 Antibodies |
GB201710836D0 (en) | 2017-07-05 | 2017-08-16 | Ucl Business Plc | ROR1 Car T-Cells |
WO2019028316A1 (en) | 2017-08-03 | 2019-02-07 | Amgen Inc. | INTERLEUKIN-21 MUTÉINS AND METHODS OF TREATMENT |
AR112797A1 (es) | 2017-09-08 | 2019-12-11 | Amgen Inc | Inhibidores de kras g12c y métodos para utilizarlos |
BR112020004543A2 (pt) | 2017-09-08 | 2020-09-08 | Maverick Therapeutics, Inc. | proteínas de ligação ativadas condicionalmente restritas |
CN107501412A (zh) * | 2017-10-11 | 2017-12-22 | 深圳精准医疗科技有限公司 | 突变型双特异性抗体及其应用 |
US11643472B2 (en) | 2017-10-12 | 2023-05-09 | Mcmaster University | T cell-antigen coupler with Y182T mutation and methods and uses thereof |
AU2018346955A1 (en) | 2017-10-13 | 2020-04-30 | Harpoon Therapeutics, Inc. | B cell maturation antigen binding proteins |
GB201717966D0 (en) * | 2017-10-31 | 2017-12-13 | Xenikos Bv | Immunotoxins, formulations thereof and their use in medicine |
BR112020011627A2 (pt) | 2017-12-11 | 2020-11-17 | Amgen Inc. | processo de fabricação contínuo para produtos de anticorpos biespecíficos |
TW201940518A (zh) | 2017-12-29 | 2019-10-16 | 美商安進公司 | 針對muc17和cd3之雙特異性抗體構建體 |
WO2019136029A1 (en) | 2018-01-02 | 2019-07-11 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use |
MX2020007291A (es) | 2018-01-12 | 2020-09-10 | Amgen Inc | Anticuerpos anti-pd-1 y metodos de tratamiento. |
MX2020008336A (es) | 2018-02-08 | 2020-09-21 | Dragonfly Therapeutics Inc | Dominios variables de anticuerpos que se dirigen al receptor nkg2d. |
AU2019226034A1 (en) | 2018-02-21 | 2020-10-15 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to HIV-1 Env and their use |
KR20210016390A (ko) | 2018-06-01 | 2021-02-15 | 노파르티스 아게 | Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도 |
JP2021526820A (ja) * | 2018-06-07 | 2021-10-11 | オンコワン・リサーチ・アンド・ディベロップメント・ゲゼルシャフト・ミト・ベシュレンクテル・ハフツング | 癌治療のための抗oxMIF/抗CD3抗体 |
WO2020010079A2 (en) | 2018-07-02 | 2020-01-09 | Amgen Inc. | Anti-steap1 antigen-binding protein |
US11110123B2 (en) | 2018-07-17 | 2021-09-07 | Triumvira Immunologics Usa, Inc. | T cell-antigen coupler with various construct optimizations |
US10640562B2 (en) | 2018-07-17 | 2020-05-05 | Mcmaster University | T cell-antigen coupler with various construct optimizations |
US20210301017A1 (en) | 2018-07-30 | 2021-09-30 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Prolonged administration of a bispecific antibody construct binding to cd33 and cd3 |
WO2020025596A1 (en) | 2018-07-31 | 2020-02-06 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Dosing regimen for bcma-cd3 bispecific antibodies |
AU2019314999A1 (en) | 2018-08-03 | 2021-02-11 | Amgen Inc. | Antibody constructs for CLDN18.2 and CD3 |
AU2019331024A1 (en) | 2018-08-31 | 2021-03-18 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for CD3/C20 bispecific antibodies |
CN110872356B (zh) * | 2018-09-03 | 2023-06-13 | 广西慧宝源健康产业有限公司 | 双特异性抗体及其使用方法 |
JP7425049B2 (ja) | 2018-09-25 | 2024-01-30 | ハープーン セラピューティクス,インク. | Dll3結合タンパク質および使用方法 |
CN112703204A (zh) | 2018-09-28 | 2021-04-23 | 安进公司 | 针对可溶性bcma的抗体 |
EP3864044A1 (en) | 2018-10-11 | 2021-08-18 | Inhibrx, Inc. | B7h3 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof |
SG11202103275YA (en) | 2018-10-11 | 2021-04-29 | Amgen Inc | Downstream processing of bispecific antibody constructs |
CN113518647A (zh) | 2018-10-11 | 2021-10-19 | 印希比股份有限公司 | 5t4单域抗体及其治疗性组合物 |
JP7453219B2 (ja) | 2018-10-11 | 2024-03-19 | インヒブリックス, インコーポレイテッド | Pd-1単一ドメイン抗体およびその治療用組成物 |
JP2022504822A (ja) | 2018-10-11 | 2022-01-13 | インヒブルクス インコーポレイテッド | Dll3シングルドメイン抗体およびその治療用組成物 |
MX2021004510A (es) | 2018-10-23 | 2021-06-08 | Amgen Inc | Calibracion automatica y mantenimiento automatico de modelos espectroscopicos de raman para predicciones en tiempo real. |
AU2019370339A1 (en) | 2018-11-01 | 2021-06-10 | Shandong New Time Pharmaceutical Co., Ltd. | Bispecific antibody and use thereof |
KR20210099614A (ko) * | 2018-12-04 | 2021-08-12 | 노파르티스 아게 | Cd3에 대한 결합 분자 및 이의 용도 |
EP3883609A2 (en) | 2018-12-20 | 2021-09-29 | The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof |
TW202043253A (zh) | 2019-01-28 | 2020-12-01 | 美商安進公司 | 藉由將藥物物質和藥物產品過程整體化的生物製劑製造之連續製造過程 |
EP3934762A1 (en) | 2019-03-05 | 2022-01-12 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Constrained conditionally activated binding proteins |
US20220227853A1 (en) | 2019-05-03 | 2022-07-21 | The United States Of America,As Represented By The Secretary,Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use |
BR112021022682A2 (pt) | 2019-05-14 | 2022-02-22 | Provention Bio Inc | Métodos e composições para prevenir diabetes do tipo 1 |
JP2022533957A (ja) * | 2019-05-14 | 2022-07-27 | ハープーン セラピューティクス,インク. | EpCAM結合タンパク質および使用方法 |
US20230085439A1 (en) | 2019-05-21 | 2023-03-16 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use |
US20220259329A1 (en) | 2019-06-07 | 2022-08-18 | Amgen Inc. | Bispecific binding constructs |
US20220259547A1 (en) | 2019-06-13 | 2022-08-18 | Amgeng Inc. | Automated biomass-based perfusion control in the manufacturing of biologics |
CA3140816A1 (en) | 2019-06-14 | 2020-12-17 | Nathan Trinklein | Multispecific heavy chain antibodies binding to cd22 and cd3 |
EP3994173A1 (en) | 2019-07-02 | 2022-05-11 | The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use |
WO2021041300A2 (en) * | 2019-08-23 | 2021-03-04 | Ab Therapeutics, Inc. | Bispecific antibodies and uses thereof |
EP4028416A1 (en) | 2019-09-10 | 2022-07-20 | Amgen Inc. | Purification method for bispecific antigen-binding polypeptides with enhanced protein l capture dynamic binding capacity |
EP4054590A1 (en) | 2019-11-04 | 2022-09-14 | Amgen Inc. | Methods for treating leukemia |
EP3819312A1 (en) | 2019-11-10 | 2021-05-12 | Amgen, Inc | Dosing regimen for anti-dll3 agents |
EP3819007A1 (en) | 2019-11-11 | 2021-05-12 | Amgen Research (Munich) GmbH | Dosing regimen for anti-bcma agents |
WO2021097344A1 (en) | 2019-11-13 | 2021-05-20 | Amgen Inc. | Method for reduced aggregate formation in downstream processing of bispecific antigen-binding molecules |
CA3164129A1 (en) | 2019-12-20 | 2021-06-24 | Amgen Inc. | Mesothelin-targeted cd40 agonistic multispecific antibody constructs for the treatment of solid tumors |
MX2022008654A (es) | 2020-01-13 | 2022-08-18 | Aptevo Res & Development Llc | Formulaciones para productos terapeuticos proteicos. |
EP4090348A4 (en) * | 2020-01-13 | 2024-05-15 | Univ California | METHODS FOR TREATING VIRAL INFECTIONS |
US20230151102A1 (en) | 2020-01-13 | 2023-05-18 | Aptevo Research And Development Llc | Methods and compositions for preventing adsorption of therapeutic proteins to drug delivery system components |
EP4093771A1 (en) | 2020-01-22 | 2022-11-30 | Amgen Research (Munich) GmbH | Combinations of antibody constructs and inhibitors of cytokine release syndrome and uses thereof |
US20230071627A1 (en) | 2020-02-03 | 2023-03-09 | Amgen Inc. | Multivariate Bracketing Approach for Sterile Filter Validation |
EP4118113A1 (en) | 2020-03-12 | 2023-01-18 | Amgen Inc. | Method for treatment and prophylaxis of crs in patients comprising a combination of bispecifc antibodies binding to cds x cancer cell and tnfalpha or il-6 inhibitor |
WO2021188851A1 (en) | 2020-03-19 | 2021-09-23 | Amgen Inc. | Antibodies against mucin 17 and uses thereof |
PE20230431A1 (es) | 2020-04-29 | 2023-03-08 | Teneobio Inc | Anticuerpos de cadena pesada multiespecificos con regiones constantes de cadena pesada modificadas |
AU2021275049A1 (en) | 2020-05-19 | 2022-12-22 | Amgen Inc. | MAGEB2 binding constructs |
MX2022014902A (es) | 2020-05-29 | 2023-01-04 | Amgen Inc | Administracion mitigadora de efectos adversos de un constructo biespecifico que se une a cd33 y cd3. |
US20230203198A1 (en) | 2020-06-04 | 2023-06-29 | Amgen Inc. | Bispecific binding constructs |
JP2023541845A (ja) | 2020-09-11 | 2023-10-04 | アムジエン・インコーポレーテツド | タンパク質凝集を減少させる材料及び方法 |
WO2022060878A1 (en) | 2020-09-16 | 2022-03-24 | Amgen Inc. | Methods for treating prostate cancer |
JP2023542257A (ja) | 2020-09-16 | 2023-10-05 | アムジェン インコーポレイテッド | 癌の治療のために二重特異性t細胞誘導分子の治療用量を投与する方法 |
JP2023547520A (ja) | 2020-11-05 | 2023-11-10 | メンドゥス・ベスローテン・フェンノートシャップ | 免疫療法における腫瘍非依存性抗原の使用 |
TW202233678A (zh) | 2020-11-06 | 2022-09-01 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | 具有增強的剪切特徵的多肽 |
CA3199976A1 (en) | 2020-11-06 | 2022-05-12 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Polypeptide constructs selectively binding to cldn6 and cd3 |
WO2022096698A1 (en) | 2020-11-06 | 2022-05-12 | Amgen Inc. | Polypeptide constructs binding to cd3 |
IL302599A (en) | 2020-11-06 | 2023-07-01 | Amgen Inc | Bispecific molecules bind multi-target antigens of increased selectivity |
WO2022103781A1 (en) | 2020-11-10 | 2022-05-19 | Amgen Inc. | Methods for administering a bcma x cd3 binding molecule |
WO2022109611A1 (en) | 2020-11-20 | 2022-05-27 | Simcere Innovation, Inc. | Armed dual car-t compositions and methods for cancer immunotherapy |
CN116783217A (zh) | 2020-12-03 | 2023-09-19 | 安进公司 | 具有多个结合结构域的免疫球蛋白构建体 |
WO2022132904A1 (en) | 2020-12-17 | 2022-06-23 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2 |
MX2023009244A (es) | 2021-02-09 | 2023-09-11 | Us Health | Anticuerpos contra la proteina espicular de coronavirus. |
CN117396502A (zh) | 2021-02-09 | 2024-01-12 | 佐治亚大学研究基金会有限公司 | 针对肺炎球菌抗原的人类单克隆抗体 |
CA3209216A1 (en) | 2021-03-10 | 2022-09-15 | Amgen Inc. | Methods for purification of recombinant proteins |
JP2024509878A (ja) | 2021-03-10 | 2024-03-05 | アムジエン・インコーポレーテツド | パラレルクロマトグラフィーシステム及び方法 |
AR125290A1 (es) | 2021-04-02 | 2023-07-05 | Amgen Inc | Construcciones de unión a mageb2 |
KR20240005691A (ko) | 2021-04-30 | 2024-01-12 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체 및 항-cd79b 항체 약물 접합체를 이용한 병용 치료를 위한 투약 |
WO2022228706A1 (en) | 2021-04-30 | 2022-11-03 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody |
WO2022234102A1 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-10 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Cd20 and cd22 targeting antigen-binding molecules for use in proliferative diseases |
CN117651717A (zh) | 2021-05-18 | 2024-03-05 | 克里斯蒂安-阿尔伯特基尔大学 | 共刺激多特异性抗体 |
JP2024519964A (ja) | 2021-05-21 | 2024-05-21 | アプティーボ リサーチ アンド デベロップメント エルエルシー | タンパク質治療薬のための投薬レジメン |
US11453723B1 (en) | 2021-06-25 | 2022-09-27 | Mcmaster University | BCMA T cell-antigen couplers and uses thereof |
AU2022345251A1 (en) | 2021-09-17 | 2024-03-28 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Synthetic humanized llama nanobody library and use thereof to identify sars-cov-2 neutralizing antibodies |
TW202326113A (zh) | 2021-10-27 | 2023-07-01 | 美商安進公司 | 使用光譜學進行的基於深度學習的預測 |
TW202334221A (zh) | 2021-11-03 | 2023-09-01 | 德商安富美德有限公司 | 雙特異性cd16a結合劑 |
WO2023079493A1 (en) | 2021-11-03 | 2023-05-11 | Affimed Gmbh | Bispecific cd16a binders |
CA3238406A1 (en) * | 2021-11-19 | 2023-05-25 | Wuhan Yzy Biopharma Co., Ltd. | Bispecific antibody and use thereof |
WO2023110918A1 (en) | 2021-12-14 | 2023-06-22 | Cdr-Life Ag | Dual mhc-targeting t cell engager |
WO2023154824A1 (en) | 2022-02-10 | 2023-08-17 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Human monoclonal antibodies that broadly target coronaviruses |
WO2023164474A1 (en) | 2022-02-23 | 2023-08-31 | Amgen Inc. | Cancer treatment targeting dll3 |
US20230414750A1 (en) | 2022-03-23 | 2023-12-28 | Hoffmann-La Roche Inc. | Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy |
WO2023192881A1 (en) | 2022-03-28 | 2023-10-05 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use |
TW202404637A (zh) | 2022-04-13 | 2024-02-01 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 抗cd20/抗cd3雙特異性抗體之醫藥組成物及使用方法 |
TW202346368A (zh) | 2022-05-12 | 2023-12-01 | 德商安美基研究(慕尼黑)公司 | 具有增加的選擇性的多鏈多靶向性雙特異性抗原結合分子 |
WO2023230626A2 (en) * | 2022-05-27 | 2023-11-30 | Bighat Biosciences, Inc. | Ph-selective anti-cd3 antibodies and use of the same |
WO2024030829A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase |
WO2024054822A1 (en) | 2022-09-07 | 2024-03-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth |
WO2024056758A1 (en) | 2022-09-14 | 2024-03-21 | Cdr-Life Ag | Mage-a4 peptide dual t cell engagers |
WO2024059675A2 (en) | 2022-09-14 | 2024-03-21 | Amgen Inc. | Bispecific molecule stabilizing composition |
WO2024064826A1 (en) | 2022-09-22 | 2024-03-28 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use |
WO2024077044A1 (en) | 2022-10-05 | 2024-04-11 | Amgen Inc. | Combination therapies comprising t-cell redirecting therapies and agonistic anti-il-2r antibodies or fragments thereof |
WO2024082269A1 (zh) * | 2022-10-21 | 2024-04-25 | 武汉友芝友生物制药股份有限公司 | 双特异性抗体在免疫细胞治疗方面的应用 |
WO2024088987A1 (en) | 2022-10-26 | 2024-05-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy for the treatment of cancer |
Family Cites Families (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4361549A (en) | 1979-04-26 | 1982-11-30 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Complement-fixing monoclonal antibody to human T cells, and methods of preparing same |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
WO1992010755A1 (en) | 1990-12-05 | 1992-06-25 | Novo Nordisk A/S | Proteins with changed epitopes and methods for the production thereof |
HU219537B (hu) * | 1991-03-06 | 2001-05-28 | Merck Patent Gmbh. | Humanizált és kiméra monoklonális antitestek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, az antitesteket kódoló szekvenciát tartalmazó expressziós vektorok, valamint eljárás az antitestek előállítására |
DK0590058T3 (da) | 1991-06-14 | 2004-03-29 | Genentech Inc | Humaniseret heregulin-antistof |
GB9304200D0 (en) | 1993-03-02 | 1993-04-21 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
US5885573A (en) * | 1993-06-01 | 1999-03-23 | Arch Development Corporation | Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies |
US6491916B1 (en) * | 1994-06-01 | 2002-12-10 | Tolerance Therapeutics, Inc. | Methods and materials for modulation of the immunosuppresive activity and toxicity of monoclonal antibodies |
WO1994029469A2 (en) | 1993-06-07 | 1994-12-22 | Vical Incorporated | Plasmids suitable for gene therapy |
EP0833907A1 (en) | 1995-06-23 | 1998-04-08 | President And Fellows Of Harvard College | Transcriptional regulation of genes encoding vascular endothelial growth factor receptors |
US6306393B1 (en) | 1997-03-24 | 2001-10-23 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies |
CA2290485C (en) | 1997-05-21 | 2008-08-05 | Biovation Limited | Method for the production of non-immunogenic proteins |
DE19725586C2 (de) * | 1997-06-17 | 1999-06-24 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper |
US7435549B1 (en) | 1997-11-17 | 2008-10-14 | Micromet Ag | Method of identifying binding site domains that retain the capacity of binding to an epitope |
KR100508289B1 (ko) | 1998-04-21 | 2005-08-17 | 마이크로메트 에이지 | Cd19×cd3 특이 폴리펩티드 및 그의 용도 |
GB9815909D0 (en) | 1998-07-21 | 1998-09-16 | Btg Int Ltd | Antibody preparation |
ES2278463T3 (es) | 1998-12-08 | 2007-08-01 | Biovation Limited | Metodo para reducir la inmunogenicidad de proteinas. |
DE19905048A1 (de) | 1999-02-08 | 2000-08-10 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verwendung depletorisch oder mitogen wirkender Antikörper in der Immuntherapie |
WO2002004021A1 (en) | 2000-07-12 | 2002-01-17 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Treatment of b cell malignancies using combination of b cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications |
US20020028178A1 (en) | 2000-07-12 | 2002-03-07 | Nabil Hanna | Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications |
US20020006404A1 (en) | 1999-11-08 | 2002-01-17 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications |
DE19962583A1 (de) | 1999-12-23 | 2001-06-28 | Mueller Hermelink Hans Konrad | Antikörper gegen Plasmazellen |
GB0018901D0 (en) | 2000-08-03 | 2000-09-20 | Biovation Ltd | Peptides presented by cells |
CA2422076A1 (en) | 2000-09-18 | 2002-03-21 | Idec Pharmaceutical Corporation | Combination therapy for treatment of autoimmune diseases using b cell depleting/immunoregulatory antibody combination |
ES2309167T3 (es) | 2001-02-19 | 2008-12-16 | Merck Patent Gmbh | Metodo para identificar epitotes de celulas t y metodo para preparar moleculas con inmunogenicidad reducida. |
US7189830B2 (en) * | 2001-02-19 | 2007-03-13 | Merck Patent Gmbh | Anti-KSA/IL-2 fusion proteins with reduced immunogenicity |
US6992174B2 (en) | 2001-03-30 | 2006-01-31 | Emd Lexigen Research Center Corp. | Reducing the immunogenicity of fusion proteins |
US20040136908A1 (en) | 2001-04-09 | 2004-07-15 | Olson William C. | Anti-cd19 immunotoxins |
CN1195779C (zh) | 2001-05-24 | 2005-04-06 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 抗人卵巢癌抗人cd3双特异性抗体 |
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