JP2024037912A - ポリヌクレオチド捕捉材料およびその使用方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】ポリヌクレオチドを含有する生物試料の処理方法ならびにこのような試料からRNAおよび/またはDNAなどのポリヌクレオチド分子を捕捉する材料を提供する。【解決手段】RNAおよび/またはDNAは、磁性粒子の表面などの表面に結合したポリアミドアミン(PAMAM(第0世代))により捕捉される。本方法および材料は、RNAおよびDNAの高い結合能および高い放出効率を有し、それによって定量的測定が可能になる。【選択図】なし
Description
優先権主張
本願は、35 USC 119(e)の下で、米国仮出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に基づく利益を主張する(引用によりその全体が本願に組み込まれる)。
本明細書に記載の技術は、一般に、生物試料の処理方法に関し、より具体的には、前記試料からRNAおよびDNAなどのポリヌクレオチド分子を捕捉し、それらの定量的測定を可能にする材料に関する。
本願は、35 USC 119(e)の下で、米国仮出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に基づく利益を主張する(引用によりその全体が本願に組み込まれる)。
本明細書に記載の技術は、一般に、生物試料の処理方法に関し、より具体的には、前記試料からRNAおよびDNAなどのポリヌクレオチド分子を捕捉し、それらの定量的測定を可能にする材料に関する。
ウイルスなどの病原体の存在または特定の遺伝子の存在を測定するための、臨床試料または食品の試験試料などの生物試料の分析は、一般的には、試料中に存在する1以上のポリヌクレオチドの検出を含む。検出の種類の1つには定性的検出があり、これは、標的ポリヌクレオチドの存否の測定ならびに/または、例えば種類、サイズ、変異の存否、および/または標的ポリヌクレオチドの配列に関連する情報の測定に関する。検出の種類のもう1つには定量的検出があり、これは、例えば濃度または質量もしくは容量での絶対量として表現される、試料中に存在する特定のポリヌクレオチド量の測定に関する。検出は、定性的および定量的側面の両方を含むこともできる。しかしながら、一般的には、定量的検出は、ポリヌクレオチドの存否の簡単な定性的測定よりも難しい仕事である。
ポリヌクレオチドの検出には、多くは酵素の使用を伴う。例えば、一部の検出法は、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)または関連増幅技術によるポリヌクレオチドの増幅を含む。検出されるポリヌクレオチドを増幅しない他の検出法もまた酵素を使用する。しかしながら、このような技術に用いられる酵素の機能は、多くの生物試料、特に臨床試料におけるポリヌクレオチドに付随する物質(阻害剤として知られる)の存在により阻害される場合がある。阻害剤は、例えば酵素の効率および/または特異性に干渉することができる。
ポリヌクレオチドの検出には、多くは酵素の使用を伴う。例えば、一部の検出法は、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)または関連増幅技術によるポリヌクレオチドの増幅を含む。検出されるポリヌクレオチドを増幅しない他の検出法もまた酵素を使用する。しかしながら、このような技術に用いられる酵素の機能は、多くの生物試料、特に臨床試料におけるポリヌクレオチドに付随する物質(阻害剤として知られる)の存在により阻害される場合がある。阻害剤は、例えば酵素の効率および/または特異性に干渉することができる。
今日では、ポリヌクレオチドの検出はこれまで以上に迅速でこれまで以上に高感度な技術に移りつつある。例えば、ウイルス感染の迅速で正確な診断は、適切な抗ウイルス療法の投与を指示し、不必要な抗生物質の利用を排除し、処方レジメンに対する個別レジメンをモニタリングすることによる正確な患者管理のために大変重要である。感度、特異性および結果を得るまでの時間という重要な利点を考慮すれば、ポリヌクレオチドの検出(または核酸検査)は、ウイルス診断の推定的国際標準になった。
しかしながら、ウイルス標的のルーチン診断への核酸検査の適用は、原価高、複雑さおよびこのような検査を実施するのに必要な能力水準により、大きな臨床検査室または大きな病院検査部に限定されてきた。近年、顕著な改善がなされてきたものの、特にRNAウイルスの検出の成功には毒性化学物質の使用に依存する大変面倒な抽出法をしばしば必要とする。さらにまた、RNA分子は大変不安定な場合があり、従ってその測定中に繊細な処理/取り扱いを必要とする場合がある。今日まで、これらの問題点は、大きく、高価な、時間がかかるロボット装置を用いて克服されてきた。
臨床医学に対する現行の需要と共に、患者試料の診断検査を実施する検査室は、極めてハイスループットであることに実質的利点を認め、所定の試料に対する診断結果に到達する時間が短ければ短いほど、検査室自体が助けられている。検査が行われる実際の試料が少量であればあるほど、検査がより迅速に行われる場合もある。つい最近では、臨床検体におけるウイルス標的から高品質RNAの抽出のための、小さくて、使用が容易で、低コストの自動プラットフォームの必要性が高まっている。
しかしながら、ウイルス標的のルーチン診断への核酸検査の適用は、原価高、複雑さおよびこのような検査を実施するのに必要な能力水準により、大きな臨床検査室または大きな病院検査部に限定されてきた。近年、顕著な改善がなされてきたものの、特にRNAウイルスの検出の成功には毒性化学物質の使用に依存する大変面倒な抽出法をしばしば必要とする。さらにまた、RNA分子は大変不安定な場合があり、従ってその測定中に繊細な処理/取り扱いを必要とする場合がある。今日まで、これらの問題点は、大きく、高価な、時間がかかるロボット装置を用いて克服されてきた。
臨床医学に対する現行の需要と共に、患者試料の診断検査を実施する検査室は、極めてハイスループットであることに実質的利点を認め、所定の試料に対する診断結果に到達する時間が短ければ短いほど、検査室自体が助けられている。検査が行われる実際の試料が少量であればあるほど、検査がより迅速に行われる場合もある。つい最近では、臨床検体におけるウイルス標的から高品質RNAの抽出のための、小さくて、使用が容易で、低コストの自動プラットフォームの必要性が高まっている。
従って、相応じて、阻害剤の存在を実際上避けるか、またはその有害な影響を低下させる方法で、複雑な生物試料から微小量のポリヌクレオチドを単離することができることの必要性はこれまで以上に重要である。さらにまた、種々のスタンドアロン自動増幅装置が入手できることを考慮すれば、未処理の臨床試料からルーチンにかつ高い信頼度で純度および量に関して増幅に対処できるポリヌクレオチド量を抽出できることが望ましい。
本明細書において、背景技術の説明はこの技術の状況を説明するために記載されたものである。本明細書で言及した事項のいずれも添付された請求項のいずれかの優先権主張日において、それまでに公開されたものである、既知である、または通常の一般知識の一部であるということの承認であると解釈してはならない。
明細書の説明および特許請求の範囲を通じて、用語「含む(comprise)」およびその語尾変化形、例えば「含むこと(comprising)」および「含む(comprises)」は、他の添加剤、成分、整数または工程を排除しないものとする。
本明細書において、背景技術の説明はこの技術の状況を説明するために記載されたものである。本明細書で言及した事項のいずれも添付された請求項のいずれかの優先権主張日において、それまでに公開されたものである、既知である、または通常の一般知識の一部であるということの承認であると解釈してはならない。
明細書の説明および特許請求の範囲を通じて、用語「含む(comprise)」およびその語尾変化形、例えば「含むこと(comprising)」および「含む(comprises)」は、他の添加剤、成分、整数または工程を排除しないものとする。
本明細書に記載の技術は、一般に、生物試料の処理方法を提供し、より具体的には、前記試料からRNAおよびDNAなどのポリヌクレオチド分子を捕捉し、それらの定量的測定を可能にする材料を提供する。
本明細書に記載の方法および材料は多数の検査標的に適用でき、特にRNAベースの検査標的、例えばインフルエンザ(AおよびB)、RSV、HSV、CMV、アデノウイルスおよびエンテロウイルスに適用できる。
本明細書に記載の技術は、高いRNAおよびDNA結合能を有する微粒子の使用による、RNAばかりでなくDNAの優れた捕捉および回収、例えば100μg/mgビーズおよび>90%放出効率を提供する。例示的な実施形態において、終夜培養物からRNA 8~10μgを抽出できる。本明細書記載の方法により、1つの容器での処理により、細胞またはウイルス材料からの大変迅速な(溶解を含めて15~20分)RNA抽出が可能になる。本明細書記載の方法は、未処理の試料から精製RNAへと進行する少数の工程(例えば6)を有する能率化された手順を含む。従って、前記方法は、未処理の生物試料からのRNAの極めて効果的な前処理を提供し、それによって、それについてのPCRを行うことを可能にする。本方法および過程は、未処理の試料を採取するときに用いるさまざまな試料マトリックスばかりでなく臨床緩衝液、例えばM4、UTMおよびトッドヘビット培地(Todd Hewit Broth)を通して適用できる。
臨床試験に用いられるアッセイを有し、本明細書記載の試料調製法の目的とすることができる適切な標的は、限定するものではないが、クラミジア・トラコマチス(Chlamydia trachomatis)(CT);ナイセリア・ゴノレア(Neisseria gonorrhea)(GC);B群溶連菌;HSV;HSVタイピング;CMV;インフルエンザA&B;MRSA;RSV;TB;トリコモナス;アデノウイルス;ボルデテラ;BK;JC;HHV6;EBV;エンテロウイルス;およびマイコプラズマ・ニューモニエ(M. pneumoniae)を含む。
本明細書に記載の技術は、高いRNAおよびDNA結合能を有する微粒子の使用による、RNAばかりでなくDNAの優れた捕捉および回収、例えば100μg/mgビーズおよび>90%放出効率を提供する。例示的な実施形態において、終夜培養物からRNA 8~10μgを抽出できる。本明細書記載の方法により、1つの容器での処理により、細胞またはウイルス材料からの大変迅速な(溶解を含めて15~20分)RNA抽出が可能になる。本明細書記載の方法は、未処理の試料から精製RNAへと進行する少数の工程(例えば6)を有する能率化された手順を含む。従って、前記方法は、未処理の生物試料からのRNAの極めて効果的な前処理を提供し、それによって、それについてのPCRを行うことを可能にする。本方法および過程は、未処理の試料を採取するときに用いるさまざまな試料マトリックスばかりでなく臨床緩衝液、例えばM4、UTMおよびトッドヘビット培地(Todd Hewit Broth)を通して適用できる。
臨床試験に用いられるアッセイを有し、本明細書記載の試料調製法の目的とすることができる適切な標的は、限定するものではないが、クラミジア・トラコマチス(Chlamydia trachomatis)(CT);ナイセリア・ゴノレア(Neisseria gonorrhea)(GC);B群溶連菌;HSV;HSVタイピング;CMV;インフルエンザA&B;MRSA;RSV;TB;トリコモナス;アデノウイルス;ボルデテラ;BK;JC;HHV6;EBV;エンテロウイルス;およびマイコプラズマ・ニューモニエ(M. pneumoniae)を含む。
本発明の1側面は、1以上のRNAおよび/またはDNA化合物の処理方法(例えば、RNAおよび/またはDNA化合物の検出および/または増幅を阻害する可能性のある阻害化合物(例えば、ヘモグロビン、ペプチド、糞便物質、腐植酸、粘液物質、DNA結合タンパク質または糖質)からRNAおよび/またはDNA化合物(単数または複数)を濃縮することおよび/またはRNAおよび/またはDNA化合物(単数または複数)を単離すること)に関する。
いくつかの実施形態において、本方法は、RNAおよび/またはDNA化合物を含有する試料と、阻害剤とは対照的にRNAおよび/またはDNA化合物と選択的に結合する(例えば、保持する)PAMAM(第0世代)とを接触させることを含む。PAMAM(第0世代)は、一般的には表面(例えば、1以上の粒子の表面)に結合する。PAMAM(第0世代)は、RNAおよび/またはDNA化合物を保持し、例えば化合物を有する表面と結合したRNAおよび/またはDNA化合物を洗浄することにより、RNAおよび/またはDNA化合物と阻害剤とを分離することができる。分離後、RNAおよび/またはDNA化合物とPAMAM(第0世代)との会合を妨害し、化合物および表面からRNAおよび/またはDNA化合物を放出(例えば、分離)させることができる。
いくつかの実施形態において、本方法は、RNAおよび/またはDNA化合物を含有する試料と、阻害剤とは対照的にRNAおよび/またはDNA化合物と選択的に結合する(例えば、保持する)PAMAM(第0世代)とを接触させることを含む。PAMAM(第0世代)は、一般的には表面(例えば、1以上の粒子の表面)に結合する。PAMAM(第0世代)は、RNAおよび/またはDNA化合物を保持し、例えば化合物を有する表面と結合したRNAおよび/またはDNA化合物を洗浄することにより、RNAおよび/またはDNA化合物と阻害剤とを分離することができる。分離後、RNAおよび/またはDNA化合物とPAMAM(第0世代)との会合を妨害し、化合物および表面からRNAおよび/またはDNA化合物を放出(例えば、分離)させることができる。
本開示は、細胞含有試料からポリヌクレオチドを単離する方法であって、ポリヌクレオチドが細胞から遊離され、PAMAM(第0世代)に結合するようにするために、試料と溶解液およびPAMAM(第0世代)でコーティングされた多数の結合粒子とを接触させ、それによって、ポリヌクレオチドが結合した結合粒子および残りの細胞物質を含有する溶液を作成し;ポリヌクレオチドが結合した結合粒子を密集させ;残りの細胞物質を含有する溶液を除去し;結合粒子を洗浄し;結合粒子からポリヌクレオチドを放出させることを含む前記方法を提供する。
本開示はさらに、ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤を含有する試料からRNAを濃縮する方法であって、500μl~1mlの試料と多数のRNA結合粒子とを接触させ、ここで結合粒子はポリメラーゼ連鎖反応阻害剤と比較して試料中のRNAを選択的に保持するように構成され;1以上のポリヌクレオチドが結合した多数の粒子を実効容量50ナノリットル~5マイクロリットルに濃縮し;1以上のポリヌクレオチドを<30μlの溶液に放出させることを含む前記方法を含む。
本開示はさらに、カルボキシル修飾微粒子;および微粒子上のカルボン酸基の1以上に、1分子当たり1以上のアミン基で結合したPAMAM(第0世代)を含む組成物を含む。
本開示はさらに、それぞれが溶解緩衝液を含有する多数の密閉管;PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;多数の試料を分析するのに十分な液体洗浄試薬を含有する管;および多数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含むキットであって、キットの各構成要素が気密容器に保存される前記キットを含む。
本開示はさらに、多数の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;多数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;液体洗浄試薬を含有する管;および液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器を含むキットを含む。
本開示はさらに、ポリヌクレオチド保持部材を製造する方法であって、炭酸塩およびMES緩衝液で多数の微小球体を洗浄し;スルホ-NHSおよびEDACを調製し;スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む前記方法を含む。
本開示はさらに、カルボキシル修飾微粒子;および微粒子上のカルボン酸基の1以上に、1分子当たり1以上のアミン基で結合したPAMAM(第0世代)を含む組成物を含む。
本開示はさらに、それぞれが溶解緩衝液を含有する多数の密閉管;PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;多数の試料を分析するのに十分な液体洗浄試薬を含有する管;および多数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含むキットであって、キットの各構成要素が気密容器に保存される前記キットを含む。
本開示はさらに、多数の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;多数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;液体洗浄試薬を含有する管;および液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器を含むキットを含む。
本開示はさらに、ポリヌクレオチド保持部材を製造する方法であって、炭酸塩およびMES緩衝液で多数の微小球体を洗浄し;スルホ-NHSおよびEDACを調製し;スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む前記方法を含む。
発明の詳細な説明
生物試料の分析は、しばしば1以上のポリヌクレオチド(例えば、DNA、RNA、mRNAまたはrRNA)が試料中に存在するかどうかを決定することを含む。本明細書記載の技術は、試料中に存在するRNAおよびDNAの両方を測定する利用可能性を有する。例えば、特定の病原体のRNAが存在するかどうかを測定するために、また他の病原体または同じ病原体のDNAが存在するかどうかを測定するためにも、試料を分析することができる。存在する場合、そのRNAまたはDNAは、一緒になって、または別々に、対応する疾患または状態を示すことができる。
よって、本明細書記載の技術は、ポリヌクレオチドに結合する材料および、生物試料由来のポリヌクレオチド、例えばDNAおよびRNAの単離における前記材料の使用に関する。前記材料は、その材料の使用方法と共に、RNAおよびDNAの両方の定量的測定を含む、多くの種々の生物試料由来のRNAおよびDNAの迅速で信頼性のある抽出を提供する。このような方法は、一般的には“試料調製”法と呼ばれる。この用語の意味するものは、細胞の形態として束縛された標的RNAおよび/または標的DNAを含有する未処理の試料、例えば患者または農産物または食品から直接得られる試料由来の標的生物のRNAおよび/またはDNAの遊離、抽出、濃縮および/または単離である。遊離された標的RNAおよび/または標的DNAは、本方法の中心過程で増幅および/または検出に適した形にされる。
生物試料の分析は、しばしば1以上のポリヌクレオチド(例えば、DNA、RNA、mRNAまたはrRNA)が試料中に存在するかどうかを決定することを含む。本明細書記載の技術は、試料中に存在するRNAおよびDNAの両方を測定する利用可能性を有する。例えば、特定の病原体のRNAが存在するかどうかを測定するために、また他の病原体または同じ病原体のDNAが存在するかどうかを測定するためにも、試料を分析することができる。存在する場合、そのRNAまたはDNAは、一緒になって、または別々に、対応する疾患または状態を示すことができる。
よって、本明細書記載の技術は、ポリヌクレオチドに結合する材料および、生物試料由来のポリヌクレオチド、例えばDNAおよびRNAの単離における前記材料の使用に関する。前記材料は、その材料の使用方法と共に、RNAおよびDNAの両方の定量的測定を含む、多くの種々の生物試料由来のRNAおよびDNAの迅速で信頼性のある抽出を提供する。このような方法は、一般的には“試料調製”法と呼ばれる。この用語の意味するものは、細胞の形態として束縛された標的RNAおよび/または標的DNAを含有する未処理の試料、例えば患者または農産物または食品から直接得られる試料由来の標的生物のRNAおよび/またはDNAの遊離、抽出、濃縮および/または単離である。遊離された標的RNAおよび/または標的DNAは、本方法の中心過程で増幅および/または検出に適した形にされる。
用語DNA(デオキシリボ核酸)およびRNA(リボ核酸)は、ポリヌクレオチドと共に、本明細書においては、例えばすべてに共通な特定のヌクレオチド配列を有することにより識別できる個々の分子または分子の集団を意味することもでき、あるいは総称的に、互いに異なる配列を有するDNAまたはRNA分子を意味することもできる。例えば、ヒト患者由来の生物試料は、1つの配列を有する患者の細胞由来のDNAおよび患者のDNAの配列とは異なる配列を有する病原体の細胞由来のDNAまたはRNAを含有することができる。従って、この試料は、たとえ試料中に互いに異なる(化学的に別個の)DNA(またはRNA)分子が存在するとしても、DNAおよびRNA(または、合わせてポリヌクレオチド)を含有すると呼ばれる。本明細書に記載の方法は、このような試料中の患者および病原体の細胞の両方由来のDNAおよびRNA分子をひとまとめにして遊離させることに使用できる。しかしながら、一般的には、このような例において、通例それは目的とする病原体のDNAまたはRNAであり、試料から最終的に単離された全DNAおよびRNAの中から選択的に増幅したものである。本明細書に記載の方法による抽出に最も適したDNAおよびRNAは、サイズが7.5Mbp未満である。しかしながら、より大きなDNAおよびRNA分子は、本明細書に記載の方法による抽出および検出に感受性が高いことは明らかであろう。
典型的には、生物試料は複雑な混合物である。例えば、試料は、血液サンプル、組織サンプル(例えば、鼻腔、頬、肛門または膣組織などのスワブ)、生検吸引物、溶解物、真菌または細菌として提供できる。測定されるRNAおよび/またはDNAは、通常、粒子(例えば、白血球または赤血球などの細胞)、組織片、細菌(例えば、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌)、真菌、または胞子内に含有される。1以上の液体(例えば、水、緩衝液、血液、血漿、唾液、尿、脳脊髄液(CSF)または有機溶媒)は、一般的には試料の一部である、かつ/または処理工程において試料に添加される。本明細書記載の材料、および方法は少なくとも血液、尿、CSF、スワブおよび血漿を含む種々の臨床マトリックスと適合する。
生物試料を解析する方法は、試料中の粒子(例えば、細菌)からRNAおよび/またはDNAを放出させること、放出させたRNAおよび/またはDNA(例えば、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)により)の1以上を増幅することおよび増幅されたポリヌクレオチド(単数または複数)の存在(または非存在)を測定すること(例えば、蛍光検出により)を含む。
臨床試料は、特に、PCRまたは類似の技術による標的RNAおよびDNAの検出に種々の困難さを示す。測定にあたって、競合する数百万または数十億コピーの核酸のバックグラウンド(例えば患者の正常細胞由来の)に対して標的核酸は10コピー/ミリリットル程度の低濃度で存在する場合がある。さらに、臨床試料中に存在する種々の他の生化学的実体がPCRを阻害する。例えばRNAまたはDNAを保持するように設計された材料により阻害剤が捕捉されることにより、その阻害剤が試料由来のRNAまたはDNAの単離を阻止する場合もある。阻害剤濃度が測定されるRNAまたはDNAに対して低減されないときは、分析が擬陰性結果を生じる恐れがある。これらの阻害剤の例は、当該の生物試料にもよるが、膜断片などの細胞壊死物質、腐植酸、粘液物質、ヘモグロビン、DNA結合タンパク質などの他のタンパク質、塩、DNA分解酵素、糞便、胎便、尿素、羊水、血液、脂質、糖質および多糖である。例えば、このような阻害剤はDNAおよびRNAの存在を測定するためのPCRおよび他の酵素技術によるDNAおよびRNAの増幅効率を低下させる恐れがある。
生物試料を解析する方法は、試料中の粒子(例えば、細菌)からRNAおよび/またはDNAを放出させること、放出させたRNAおよび/またはDNA(例えば、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)により)の1以上を増幅することおよび増幅されたポリヌクレオチド(単数または複数)の存在(または非存在)を測定すること(例えば、蛍光検出により)を含む。
臨床試料は、特に、PCRまたは類似の技術による標的RNAおよびDNAの検出に種々の困難さを示す。測定にあたって、競合する数百万または数十億コピーの核酸のバックグラウンド(例えば患者の正常細胞由来の)に対して標的核酸は10コピー/ミリリットル程度の低濃度で存在する場合がある。さらに、臨床試料中に存在する種々の他の生化学的実体がPCRを阻害する。例えばRNAまたはDNAを保持するように設計された材料により阻害剤が捕捉されることにより、その阻害剤が試料由来のRNAまたはDNAの単離を阻止する場合もある。阻害剤濃度が測定されるRNAまたはDNAに対して低減されないときは、分析が擬陰性結果を生じる恐れがある。これらの阻害剤の例は、当該の生物試料にもよるが、膜断片などの細胞壊死物質、腐植酸、粘液物質、ヘモグロビン、DNA結合タンパク質などの他のタンパク質、塩、DNA分解酵素、糞便、胎便、尿素、羊水、血液、脂質、糖質および多糖である。例えば、このような阻害剤はDNAおよびRNAの存在を測定するためのPCRおよび他の酵素技術によるDNAおよびRNAの増幅効率を低下させる恐れがある。
従って、効果的な試料調製法は、標的RNAまたはDNAの濃縮をもたらすべきであり、阻害物質の存在を最小にすべきである。本明細書記載の方法は、測定されるDNAおよび/またはRNAの濃度を上昇させることができる、かつ/または測定されるDNAおよび/またはRNAの濃度に対して阻害剤濃度を低下させることができる。
加えて、一部の標的生物、例えばグラム陽性細菌(例えばB群溶連菌)の細胞は溶解するのが大変困難であり、このことは溶解条件を大変厳しくしなければならないことを意味している。このような微生物は、さらなる溶解のためのムタノリシンなどの化学物質を必要とする場合があり、同様に最適な溶解のためにさらに高い温度を必要とする場合もある。このような条件は、本明細書記載の材料および方法により調節することができる。
加えて、一部の標的生物、例えばグラム陽性細菌(例えばB群溶連菌)の細胞は溶解するのが大変困難であり、このことは溶解条件を大変厳しくしなければならないことを意味している。このような微生物は、さらなる溶解のためのムタノリシンなどの化学物質を必要とする場合があり、同様に最適な溶解のためにさらに高い温度を必要とする場合もある。このような条件は、本明細書記載の材料および方法により調節することができる。
試料調製法
典型的な試料調製法は、第1条件セット(例えば、第1温度および/または第1pH)下で試料のRNAおよび/またはDNAを保持し、第2条件セット(例えば、第2のより高い温度および/または第2のより塩基性のpH)下でRNAを放出させ、第3条件セット(例えば、第3の異なる温度および/または第3の、第1および第2条件で用いられたものよりもより塩基性のpH)下でDNAを放出させるように構成された多数の粒子(例えば、ビーズ、微小球体)を含む処理チャンバー内で行うことができる。一般的には、試料中に存在する可能性のある阻害剤と比較して、DNAおよびRNAは選択的に保持される。
典型的な試料調製法を図1に示す。図1に関して述べた種々の試薬は、本明細書の他の部分でさらに詳細に説明されている。100において、処理管101、例えば標準実験室用1.7mlマイクロ遠心チューブは、液体109を含む生物試料、例えば水溶液および細胞物質111を含有し、ここで細胞物質の少なくとも一部は、目的とする標的のRNAおよび/またはDNAを含有することができる。生物試料は、本明細書の他の部分で記載されているいずれの生物試料であることもでき、処理管101は、さらに詳細に説明されている任意の管または適切な容器であることができる。本方法は図1に関して示されているが、本方法は、管内で行われることに限定されないことが理解されるべきである。試料および種々の試薬は、例えば、米国特許出願第11/281,247号(出願日:2005年11月16日)にさらに詳細に説明されているように、マイクロ流体カートリッジなどのマイクロ流体装置のチャンバー内に導入し、チャンバー内で混合し、反応させることもできる(引用により本願に組み込まれる)。
典型的な試料調製法は、第1条件セット(例えば、第1温度および/または第1pH)下で試料のRNAおよび/またはDNAを保持し、第2条件セット(例えば、第2のより高い温度および/または第2のより塩基性のpH)下でRNAを放出させ、第3条件セット(例えば、第3の異なる温度および/または第3の、第1および第2条件で用いられたものよりもより塩基性のpH)下でDNAを放出させるように構成された多数の粒子(例えば、ビーズ、微小球体)を含む処理チャンバー内で行うことができる。一般的には、試料中に存在する可能性のある阻害剤と比較して、DNAおよびRNAは選択的に保持される。
典型的な試料調製法を図1に示す。図1に関して述べた種々の試薬は、本明細書の他の部分でさらに詳細に説明されている。100において、処理管101、例えば標準実験室用1.7mlマイクロ遠心チューブは、液体109を含む生物試料、例えば水溶液および細胞物質111を含有し、ここで細胞物質の少なくとも一部は、目的とする標的のRNAおよび/またはDNAを含有することができる。生物試料は、本明細書の他の部分で記載されているいずれの生物試料であることもでき、処理管101は、さらに詳細に説明されている任意の管または適切な容器であることができる。本方法は図1に関して示されているが、本方法は、管内で行われることに限定されないことが理解されるべきである。試料および種々の試薬は、例えば、米国特許出願第11/281,247号(出願日:2005年11月16日)にさらに詳細に説明されているように、マイクロ流体カートリッジなどのマイクロ流体装置のチャンバー内に導入し、チャンバー内で混合し、反応させることもできる(引用により本願に組み込まれる)。
微粒子105の溶液107を第1ピペットチップ103に含有させ、これを処理管に導入し、それに含有される生物試料と接触させる。本明細書でさらに詳細に説明されているように、粒子105の表面は、溶液中の阻害剤に優先してRNAおよび/またはDNAを保持するように、PAMAM(O)が結合されているように修飾されている。本明細書でさらに詳細に説明されているように、溶液107は溶解液であることができる。本明細書の他の部分で記載のように、種々の酵素に加えて、溶解液は界面活性剤を含有することができる。微粒子、溶液および生物試料の十分な混合は、単に、微粒子を含有する溶液をピペットチップから放出させて2つの溶液を荒く混合することにより行うこともでき、処理管101の機械撹拌または手動撹拌で行うこともできる。
例えば使用者による手動操作または自動ピペッティングヘッドにより、処理チャンバー101の上部に第1ピペットチップ103を配置する。この例は、米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されている(引用により本願に組み込まれる)。
110において、同じ処理管101を用いて、図のように、例えば外部熱源からの加熱により微粒子、生物試料および溶解剤をインキュベートし、生物試料中の細胞を溶解させ、RNAおよび/またはDNAを遊離させる。本明細書でさらに詳細に説明されているように、これらの条件下で、微粒子の適切に構成された表面にDNA分子が結合する。典型的には、この粒子は、pH約9.5以下(例えば、約9.0以下、約8.75以下、約8.5以下)を有する液体からRNAおよび/またはDNAを保持する。親和性微粒子へのDNAの結合は、溶解処理と同時に生じ、その結合は、界面活性剤の存在および、場合によっては溶解液中の溶解酵素の存在によっても悪影響を受けないということにも注意する必要がある。温度の選択は、当該の細胞を溶解するのに必要な温度によってきまり、RNAまたはDNAを粒子に結合させるのに加熱を必要としない。一般的には、より丈夫な細胞壁を有する細胞(例えば、リステリアまたは炭疽菌)はより高い温度を必要とする。例えば、クラミジアの測定には、溶解および結合のために37℃の温度で5~10分間を用い、B群溶連菌の測定には、60℃の温度で5~10分間を用いる。一般に、液体は、粒子の存在下で液体を沸騰させるのに不十分な温度で加熱される。
例えば使用者による手動操作または自動ピペッティングヘッドにより、処理チャンバー101の上部に第1ピペットチップ103を配置する。この例は、米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されている(引用により本願に組み込まれる)。
110において、同じ処理管101を用いて、図のように、例えば外部熱源からの加熱により微粒子、生物試料および溶解剤をインキュベートし、生物試料中の細胞を溶解させ、RNAおよび/またはDNAを遊離させる。本明細書でさらに詳細に説明されているように、これらの条件下で、微粒子の適切に構成された表面にDNA分子が結合する。典型的には、この粒子は、pH約9.5以下(例えば、約9.0以下、約8.75以下、約8.5以下)を有する液体からRNAおよび/またはDNAを保持する。親和性微粒子へのDNAの結合は、溶解処理と同時に生じ、その結合は、界面活性剤の存在および、場合によっては溶解液中の溶解酵素の存在によっても悪影響を受けないということにも注意する必要がある。温度の選択は、当該の細胞を溶解するのに必要な温度によってきまり、RNAまたはDNAを粒子に結合させるのに加熱を必要としない。一般的には、より丈夫な細胞壁を有する細胞(例えば、リステリアまたは炭疽菌)はより高い温度を必要とする。例えば、クラミジアの測定には、溶解および結合のために37℃の温度で5~10分間を用い、B群溶連菌の測定には、60℃の温度で5~10分間を用いる。一般に、液体は、粒子の存在下で液体を沸騰させるのに不十分な温度で加熱される。
120において、微粒子を濃縮するかまたは密集させ、残りの細胞物質125を含有する残存溶液を、例えば第2ピペットチップ123により除去する。密集させるとは、微粒子が、実際上溶液に均一に分布する代わりに、処理管の一か所に互いに接触して集められることを意味する。微粒子が磁性を帯びている場合、微粒子を密集させることは、例えば処理チャンバー101の外側に磁石121を近づけ、チャンバーの外側で磁石を上下に動かすことにより達成できる。磁石により磁性粒子がひきつけられ、磁石に近接する処理チャンバーの壁の内側に向かって引きよせられる。
通常行われるように、微粒子の有意な量を吸い上げないで、ピペットチップ123により残存溶液(上清または残りの細胞物質を有する溶液と呼ばれる場合もある)をできるだけ除去する。典型的には、ピペットチップを微粒子に接触させないで処理チャンバー105にスライドさせることができる。このような方法で、それまでよりも少ない量の溶液を存在させることにより、微粒子が濃縮される。ピペットチップ123は、ピペットチップ103とは異なっていてもよいし、同じチップであってもよい。いくつかの実施形態において、残りの細胞物質を含有する溶液の除去後に、粒子と共に10マイクロリットル未満の溶液が残される。典型的には、このことは、微粒子を小さなペレットに密集させると共に、上清を除去するためにピペットが差し込まれる位置からペレットが離れるように位置決めすることにより達成される。上清のほとんどが除去されるように管の底部と関連したピペットの位置決めもまた重要である。ピペットチップは管の底部にほぼ近接している必要があるが(1~2mm以内)、管の底部をピペットチップが完全にシールしてはならない。溶解管の底部に星形の図形を使用することもできるが(米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているように(引用により本願に組み込まれる)、密集した微粒子の滑動が阻害されないようにし、星形の図形の頂点間の裂け目が微粒子をトラップしないように、磁石の位置に関連したこの図形の配置が重要になる。
通常行われるように、微粒子の有意な量を吸い上げないで、ピペットチップ123により残存溶液(上清または残りの細胞物質を有する溶液と呼ばれる場合もある)をできるだけ除去する。典型的には、ピペットチップを微粒子に接触させないで処理チャンバー105にスライドさせることができる。このような方法で、それまでよりも少ない量の溶液を存在させることにより、微粒子が濃縮される。ピペットチップ123は、ピペットチップ103とは異なっていてもよいし、同じチップであってもよい。いくつかの実施形態において、残りの細胞物質を含有する溶液の除去後に、粒子と共に10マイクロリットル未満の溶液が残される。典型的には、このことは、微粒子を小さなペレットに密集させると共に、上清を除去するためにピペットが差し込まれる位置からペレットが離れるように位置決めすることにより達成される。上清のほとんどが除去されるように管の底部と関連したピペットの位置決めもまた重要である。ピペットチップは管の底部にほぼ近接している必要があるが(1~2mm以内)、管の底部をピペットチップが完全にシールしてはならない。溶解管の底部に星形の図形を使用することもできるが(米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているように(引用により本願に組み込まれる)、密集した微粒子の滑動が阻害されないようにし、星形の図形の頂点間の裂け目が微粒子をトラップしないように、磁石の位置に関連したこの図形の配置が重要になる。
130において、密集した微粒子を含有する処理チャンバー101に、第3ピペットチップ133を用いて洗浄液131を導入する。洗浄液は、例えば、1%トリトンX100などの界面活性剤を含有し、最終pH8.0のトリス-EDTAなどの緩衝液を含むことができる。一般的には、試料が2ml以下の容量の場合、洗浄用緩衝液の容量は100マイクロリットル以下である。洗浄液は、微粒子への結合を生じた可能性のある、阻害剤などの任意の非DNAおよび非RNA分子を洗浄するために使用される。洗浄液は、微粒子に結合したRNAおよび/またはDNA分子を同じ位置に残したままで、非RNAおよび非DNA分子を選択的に洗浄するように選択される。ピペットチップ133は、ピペットチップ103および123の一方または両方異なるチップであることもできるし、どちらか1つのチップが再使用されることもできる。
粒子からRNAおよびDNAを別々に放出させるために、洗浄液131は、アルカリ(pH~9.0)放出液、例えば洗浄液のpHとは異なるpHを有する緩衝液に交換される。このことは、洗浄液をできるだけピペットで吸引し(例えば残留量を<5マイクロリットルにする)、次いで新しいピペットチップを用いて放出緩衝液を吐出することにより行うことができる。同じチップが用いられる場合、放出液が希釈されないように液体を十分に排出する必要がある。例えば、140において、微粒子に結合したRNAを、これらの微粒子から遊離させることができるように、処理チャンバー101に放出液141を加える。一般に、粒子上のPAMAM(第0世代)は(本明細書さらに詳細に説明されているように)、pHが約9のとき、最も効率的にRNAを放出する。その結果として、粒子から周囲の液体にRNAを放出させることができる。場合によっては、RNAの放出を促進するために、溶液を85℃に加熱するなど、処理管に熱を加えることができる。一般に、粒子の存在下で、液体が沸騰するのに不十分な温度で液体が加熱される。いくつかの実施形態において、温度は100℃以下である(例えば、100℃未満、約97℃以下)。いくつかの実施形態において、温度は約65℃以上である(例えば、約75℃以上、約80℃以上、約90℃以上)。いくつかの実施形態において、前記温度は約1分以上維持される(例えば、約2分以上、約5分以上、約10分以上)。いくつかの実施形態において、温度は約30分間維持される(例えば、約15分以下、約10分以下、約5分以下)。いくつかの実施形態において、処理管は約65~90℃(例えば、~約70℃)で約1~7分間(例えば、約2分間)加熱される。他の実施形態において、加熱は85℃で3分間である。さらに他の実施形態において、加熱は65℃で6分間である。一般に、低めの温度では長い加熱時間が必要とされる。代わりに、または組み合わせて、RNAを保持する粒子は、放出液の助けを借りずに、RNAを放出させるために加熱される。RNAを放出させるために加熱のみが用いられる場合、放出液は洗浄液と同じであることができる。
粒子からRNAおよびDNAを別々に放出させるために、洗浄液131は、アルカリ(pH~9.0)放出液、例えば洗浄液のpHとは異なるpHを有する緩衝液に交換される。このことは、洗浄液をできるだけピペットで吸引し(例えば残留量を<5マイクロリットルにする)、次いで新しいピペットチップを用いて放出緩衝液を吐出することにより行うことができる。同じチップが用いられる場合、放出液が希釈されないように液体を十分に排出する必要がある。例えば、140において、微粒子に結合したRNAを、これらの微粒子から遊離させることができるように、処理チャンバー101に放出液141を加える。一般に、粒子上のPAMAM(第0世代)は(本明細書さらに詳細に説明されているように)、pHが約9のとき、最も効率的にRNAを放出する。その結果として、粒子から周囲の液体にRNAを放出させることができる。場合によっては、RNAの放出を促進するために、溶液を85℃に加熱するなど、処理管に熱を加えることができる。一般に、粒子の存在下で、液体が沸騰するのに不十分な温度で液体が加熱される。いくつかの実施形態において、温度は100℃以下である(例えば、100℃未満、約97℃以下)。いくつかの実施形態において、温度は約65℃以上である(例えば、約75℃以上、約80℃以上、約90℃以上)。いくつかの実施形態において、前記温度は約1分以上維持される(例えば、約2分以上、約5分以上、約10分以上)。いくつかの実施形態において、温度は約30分間維持される(例えば、約15分以下、約10分以下、約5分以下)。いくつかの実施形態において、処理管は約65~90℃(例えば、~約70℃)で約1~7分間(例えば、約2分間)加熱される。他の実施形態において、加熱は85℃で3分間である。さらに他の実施形態において、加熱は65℃で6分間である。一般に、低めの温度では長い加熱時間が必要とされる。代わりに、または組み合わせて、RNAを保持する粒子は、放出液の助けを借りずに、RNAを放出させるために加熱される。RNAを放出させるために加熱のみが用いられる場合、放出液は洗浄液と同じであることができる。
一般的には、試料2mlからのRNAからは、前記において、他の部分に記載されている溶解、結合および洗浄の説明によれば、約20マイクロリットル以下(例えば、約10マイクロリットル以下、約5マイクロリットル以下または約2.5マイクロリットル以下)の液体に放出される。
加熱を含めてRNAの放出が記載されているが、RNAは加熱なしで放出させることができる。例えば、いくつかの実施形態において、放出液は、加熱を必要とせずに保持部材からRNAを放出させるイオン強度、pH、界面活性剤濃度、組成物またはそれらの組み合わせを有する。
例えば試料調製法における洗浄・放出(一般的にはDNA放出)において、吸引・吐出混合操作に際して、液体の急激な移動により生じる過剰な剪断力は、粒子の表面からPAMAM(第0世代)を遊離させる場合があり、PAMAM(第0世代)自体が下流のPCRの阻害の原因となるということにも注意すべきである。混合工程において、前後に移動する量は、ピペットで1~20マイクロリットルの移動、吸引・吐出操作1回につき1~10秒で行われる、10回未満の吸引・吐出操作に限定されるべきである。
150において、今では本質的にRNAをなにも結合していない微粒子を、この場合は、溶解したRNAを含有する放出液の除去を容易にするために、120に関して記載したものと類似の方法で密集させるまたは濃縮することができる。例えば、処理チャンバーの外側に磁石121を近接近させることにより、処理チャンバー壁の内部に磁性ビーズを回収することができる。図1において、120および150の両工程で微粒子を密集させるために磁石121が用いられるが、2つの例に異なる磁石を用いることができることは明らかであろう。
加熱を含めてRNAの放出が記載されているが、RNAは加熱なしで放出させることができる。例えば、いくつかの実施形態において、放出液は、加熱を必要とせずに保持部材からRNAを放出させるイオン強度、pH、界面活性剤濃度、組成物またはそれらの組み合わせを有する。
例えば試料調製法における洗浄・放出(一般的にはDNA放出)において、吸引・吐出混合操作に際して、液体の急激な移動により生じる過剰な剪断力は、粒子の表面からPAMAM(第0世代)を遊離させる場合があり、PAMAM(第0世代)自体が下流のPCRの阻害の原因となるということにも注意すべきである。混合工程において、前後に移動する量は、ピペットで1~20マイクロリットルの移動、吸引・吐出操作1回につき1~10秒で行われる、10回未満の吸引・吐出操作に限定されるべきである。
150において、今では本質的にRNAをなにも結合していない微粒子を、この場合は、溶解したRNAを含有する放出液の除去を容易にするために、120に関して記載したものと類似の方法で密集させるまたは濃縮することができる。例えば、処理チャンバーの外側に磁石121を近接近させることにより、処理チャンバー壁の内部に磁性ビーズを回収することができる。図1において、120および150の両工程で微粒子を密集させるために磁石121が用いられるが、2つの例に異なる磁石を用いることができることは明らかであろう。
試料がRNAおよびDNAの両方を含有し、かつ特定のRNAおよび特定のDNAを測定することが望ましい場合、DNAを放出させるように設計された第2放出液を用いて、本明細書記載の140および150における手順を繰り返すことができる。本明細書と同一日付に出願され、"ポリヌクレオチド捕捉材料およびその使用方法(POLYNUCLEOTIDE CAPTURE MATERIALS, AND METHODS OF USING SAME)"と題する米国特許出願第12/号にさらに詳細に説明されているように、DNAを放出させるように設計された溶液は、一般的には約12以上のpHを有する。この手順は、RNAおよびDNAは異なるpKaを有するという事実に依存し、従って、互いに異なるpHで、非共有結合的に結合された粒子の表面から溶出される。RNAに関する放出条件など(温度、試薬濃度など)の類似の考察がDNAの放出に適用される。
これまで、処理工程のすべてが1つの管で行われたということも注意すべきである。このことは、多くの理由から有利である。第1に、不必要な液体移動工程は、必然的に標的物質の一部の損失をもたらす。さらなる液体移動工程は、プロトコルの合計時間に加算することになる。1つの容器ですべての液体処理を行うことは、主として、連続する液体移動の間に残される残留量の理由から容易な仕事ではないことに留意すべきである。最終溶出量が大変低い場合、例えば30マイクロリットル未満または20マイクロリットル未満または10マイクロリットル未満または5マイクロリットル未満などの場合さらに困難になる。
それにもかかわらず、本明細書記載のプロトコルを用いれば、大変優れた収量を得ることができる。
これまで、処理工程のすべてが1つの管で行われたということも注意すべきである。このことは、多くの理由から有利である。第1に、不必要な液体移動工程は、必然的に標的物質の一部の損失をもたらす。さらなる液体移動工程は、プロトコルの合計時間に加算することになる。1つの容器ですべての液体処理を行うことは、主として、連続する液体移動の間に残される残留量の理由から容易な仕事ではないことに留意すべきである。最終溶出量が大変低い場合、例えば30マイクロリットル未満または20マイクロリットル未満または10マイクロリットル未満または5マイクロリットル未満などの場合さらに困難になる。
それにもかかわらず、本明細書記載のプロトコルを用いれば、大変優れた収量を得ることができる。
微粒子から遊離されたRNAおよび/または続いてDNAは、放出液の溶液において、それぞれを第4ピペットチップ153に吸い上げることができる。ピペットチップ153は、ピペットチップ103、123および133のすべてとは異なる必要はなく、従ってこれらのチップの再使用を意味することができる。磁性ビーズを使用することが望ましいが、本明細書において非磁性ビーズを用いることもでき、磁石を用いる代わりに、例えば遠心分離によって分離される。
特定の実施形態において、処理管に導入した元の試料の容量と、RNAまたはDNAを放出させた液体の容量との比は、少なくとも約10(例えば、少なくとも約50、少なくとも約100、少なくとも約250、少なくとも約500、少なくとも約1,000)である。いくつかの実施形態において、約2mlの容量を有する試料からのRNAまたはDNAは、処理管内に保持され、結合および洗浄後に、約4マイクロリットル以下(例えば約3マイクロリットル以下、約2マイクロリットル以下、約1マイクロリットル以下)の液体に放出されることができる。
いくつかの実施形態において、試料は、RNAまたはDNAを結合させた結合粒子の濃縮容量よりも少なくとも約10倍大きい容量を有する。
他の実施形態において、試料は100μl~1mlの容量を有し、密集させた粒子は2マイクロリットル未満の実効容量を占める。
RNAまたはDNAを放出させた液体は、一般的には、試料109中にそれぞれ存在するRNAまたはDNAの少なくとも約50%(例えば、少なくとも約75%、少なくとも約85%、少なくとも約90%または少なくとも約95%)を含む。従って、例えば、終夜培養物1mlからDNA約8~10μgを遊離させることができ、頬スワブ1つから、DNA約2~4μgを抽出することができる。放出液中に存在するRNAまたはDNAの濃度は、元の試料における対応する濃度よりも高いものであることができる。なぜなら、放出液の容量は、一般的には、元の液体試料の容量よりも少ないからである。例えば、放出液中のDNA濃度は、試料109中のDNA濃度よりも少なくとも約10倍高い(例えば、少なくとも約25倍高い、少なくとも約100倍高い)ものであることができる。RNAまたはDNAを放出させた液体中に存在する阻害剤濃度は、一般に、未精製試料から得られたものよりも、元の流体試料における阻害剤濃度よりもRNAまたはDNAの増幅効率を上げるのに十分少ない。
特定の実施形態において、処理管に導入した元の試料の容量と、RNAまたはDNAを放出させた液体の容量との比は、少なくとも約10(例えば、少なくとも約50、少なくとも約100、少なくとも約250、少なくとも約500、少なくとも約1,000)である。いくつかの実施形態において、約2mlの容量を有する試料からのRNAまたはDNAは、処理管内に保持され、結合および洗浄後に、約4マイクロリットル以下(例えば約3マイクロリットル以下、約2マイクロリットル以下、約1マイクロリットル以下)の液体に放出されることができる。
いくつかの実施形態において、試料は、RNAまたはDNAを結合させた結合粒子の濃縮容量よりも少なくとも約10倍大きい容量を有する。
他の実施形態において、試料は100μl~1mlの容量を有し、密集させた粒子は2マイクロリットル未満の実効容量を占める。
RNAまたはDNAを放出させた液体は、一般的には、試料109中にそれぞれ存在するRNAまたはDNAの少なくとも約50%(例えば、少なくとも約75%、少なくとも約85%、少なくとも約90%または少なくとも約95%)を含む。従って、例えば、終夜培養物1mlからDNA約8~10μgを遊離させることができ、頬スワブ1つから、DNA約2~4μgを抽出することができる。放出液中に存在するRNAまたはDNAの濃度は、元の試料における対応する濃度よりも高いものであることができる。なぜなら、放出液の容量は、一般的には、元の液体試料の容量よりも少ないからである。例えば、放出液中のDNA濃度は、試料109中のDNA濃度よりも少なくとも約10倍高い(例えば、少なくとも約25倍高い、少なくとも約100倍高い)ものであることができる。RNAまたはDNAを放出させた液体中に存在する阻害剤濃度は、一般に、未精製試料から得られたものよりも、元の流体試料における阻害剤濃度よりもRNAまたはDNAの増幅効率を上げるのに十分少ない。
一般に、本明細書記載の方法および材料は、大部分の実際的適用(診断分析に対する大部分の生物試料対象のサイズを考慮して)において、広範囲のサンプルサイズおよび試薬容量に(通例ルーチン適応のみに)よく機能することができるが、RNAおよび/またはDNAを結合させた密集させた粒子の生成容量は(放出前に)2~3μlの範囲であり、試料約2mlまでの試料量にはよらない。一般的には、必要な微粒子量は、試料中のRNAおよび/またはDNA量によって決まる。粒子への結合効率を考慮すれば、サンプルサイズにかかわらず、大部分の手動適用および大部分の関連する自動ピペッティングには粒子0.5mgで十分であることが認められている。従って、例えば、0.5マイクロリットル~3ミリリットルの容量を有する試料に関しては、密集させた粒子の容量は2~3μlである。例えば、クラミジア(Chlamydia)に関しては、サンプルサイズは一般的には1mlであり、粒子0.5mgで十分である。他の適用に関しては、試料2mlからのDNAは、粒子0.5mgで抽出することもでき、場合によってはビーズ1mgを使用することもできる。より少量の試料、例えば容量50μlを有する試料に関しても、やはり粒子0.5mgのみの使用が典型的である。
手動操作中、種々の工程で溶液を撹拌するために、上下に多数回、例えば10回、15回または20回溶液をピペッティングすることができる。このような手順は、放出工程ばかりでなく、洗浄工程においても許容される。ボルテックス処理もまたこれらの工程に役に立つ。しかしながら、自動処理に関してはどのような混合工程も耐えられず、混合操作回数は最小限にとどめられる。なぜなら、このことは、PAMAM(O)のはがれを引き起こし、下流のPCRを阻害する恐れがあるからである。
本明細書記載の方法は、PCRに備えた、極めて効果的な試料の前処理を提示し、臨床試料1ミリリットルからのわずか25コピーのRNAまたはDNAを検出する能力を提供する。溶出量がわずか3マイクロリットルですむので、RNAまたはDNAは高濃度で存在する。濃縮微小球体における残りの試料液および/または洗浄容量もまた少ないので、それによって試料または洗浄用緩衝液による希釈も最小限であり、残りの試料からの阻害も最小限である。
手動操作中、種々の工程で溶液を撹拌するために、上下に多数回、例えば10回、15回または20回溶液をピペッティングすることができる。このような手順は、放出工程ばかりでなく、洗浄工程においても許容される。ボルテックス処理もまたこれらの工程に役に立つ。しかしながら、自動処理に関してはどのような混合工程も耐えられず、混合操作回数は最小限にとどめられる。なぜなら、このことは、PAMAM(O)のはがれを引き起こし、下流のPCRを阻害する恐れがあるからである。
本明細書記載の方法は、PCRに備えた、極めて効果的な試料の前処理を提示し、臨床試料1ミリリットルからのわずか25コピーのRNAまたはDNAを検出する能力を提供する。溶出量がわずか3マイクロリットルですむので、RNAまたはDNAは高濃度で存在する。濃縮微小球体における残りの試料液および/または洗浄容量もまた少ないので、それによって試料または洗浄用緩衝液による希釈も最小限であり、残りの試料からの阻害も最小限である。
処理管101へのポリヌクレオチド含有試料の導入と放出液へのRNAまたはDNAの放出との時間間隔は、通例10~30分間であり、典型的には約15~20分間であり、15分以下(例えば、約10分以下、約5分以下)であることもできる。これらの時間には、溶解時間(一緒にして試料結合時間)も含まれ、極めて迅速である。1つの試料からRNAおよびDNAを別々の放出させるためには、図1の140に示す、さらなる放出手順を加えることが必要なだけである。
場合により、図1の160において、溶液中の放出させたRNAまたはDNAは、中和液165(例えば、等容量の25~50mMトリス-HCl緩衝液(pH8.0))と接触させることにより中和することができる。例えば、ピペットチップ153中の溶液におけるRNAまたはDNAは、中和液が存在する、標準実験室用PCR管などの第2処理チャンバーまたは容器161中に放出させることができる。PCR管を取り除き、さらなる分析のためにPCR装置に導入することができる。一般的には、RNAを抽出するための溶液はほぼ中性に近いため、独立した中和工程は必要ない。
容器161における溶液中のRNAまたはDNAは、PCRによりそれを増幅し、検出することができる状態にある。さらにまた、前述の処理工程は極めて信頼性があり、頑健であり、7log希釈液(標的RNAまたはDNA 10~107コピー/試料1ml)にわたる抽出RNAまたはDNAの定量的アッセイを可能にする。
場合により、図1の160において、溶液中の放出させたRNAまたはDNAは、中和液165(例えば、等容量の25~50mMトリス-HCl緩衝液(pH8.0))と接触させることにより中和することができる。例えば、ピペットチップ153中の溶液におけるRNAまたはDNAは、中和液が存在する、標準実験室用PCR管などの第2処理チャンバーまたは容器161中に放出させることができる。PCR管を取り除き、さらなる分析のためにPCR装置に導入することができる。一般的には、RNAを抽出するための溶液はほぼ中性に近いため、独立した中和工程は必要ない。
容器161における溶液中のRNAまたはDNAは、PCRによりそれを増幅し、検出することができる状態にある。さらにまた、前述の処理工程は極めて信頼性があり、頑健であり、7log希釈液(標的RNAまたはDNA 10~107コピー/試料1ml)にわたる抽出RNAまたはDNAの定量的アッセイを可能にする。
図1の方法は、手動フォーマットばかりでなく自動フォーマットにおいても効果的であることが明らかとなった。
図1に示す方法は、処理チャンバーを位置させることができ、適切な量の微粒子、溶解液、洗浄液、放出液および中和液が支給され、そのそれぞれに図1に示す使用のために1以上のピペットチップが接近できる試薬ホルダーと共に実施できる。例示的な試薬ホルダーは米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されている(引用により本願に組み込まれる)。
図1に示されている磁性微粒子を密集させるために使用する磁石については、米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されている磁性分離装置(引用により本願に組み込まれる)を使用することができる。
図1に示されている、処理チャンバー101を加熱することができるということに関し、米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているヒータアセンブリ(引用により本願に組み込まれる)を使用することができる。
図1に示す方法は、最適には、例えばマイクロ流体カートリッジ、例えば米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているマイクロ流体カートリッジ(引用により本願に組み込まれる)において実施できる低容量(例えば4μl)PCR反応に使用する高純度で濃縮されたRNAまたはDNAを調製するために使用される。
図1に示す方法は、処理チャンバーを位置させることができ、適切な量の微粒子、溶解液、洗浄液、放出液および中和液が支給され、そのそれぞれに図1に示す使用のために1以上のピペットチップが接近できる試薬ホルダーと共に実施できる。例示的な試薬ホルダーは米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されている(引用により本願に組み込まれる)。
図1に示されている磁性微粒子を密集させるために使用する磁石については、米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されている磁性分離装置(引用により本願に組み込まれる)を使用することができる。
図1に示されている、処理チャンバー101を加熱することができるということに関し、米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているヒータアセンブリ(引用により本願に組み込まれる)を使用することができる。
図1に示す方法は、最適には、例えばマイクロ流体カートリッジ、例えば米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているマイクロ流体カートリッジ(引用により本願に組み込まれる)において実施できる低容量(例えば4μl)PCR反応に使用する高純度で濃縮されたRNAまたはDNAを調製するために使用される。
図2に、分子レベルでの試料調製法の概略を示す。直径1μmを有する典型的な磁性粒子201を210に示す。粒子の周囲の溶液中のポリヌクレオチドに結合親和性を有する分子205が粒子201の表面に結合されている。分子205の接着は通例共有結合による。このような分子は本明細書でさらに詳細に説明され、いくつかの実施形態においてPAMAM分子(第0世代)である。210から220に移って、磁性粒子は、分子205のpKaよりも低いpH4~8で、RNAおよび/またはDNAを含有する溶液中でインキュベートされる。220において、粒子201は、親和性分子205に結合している分子211であるポリヌクレオチド(すなわちDNAおよび/またはRNA)を有することが示されている。小さな楕円、葉巻形および曲線で示された、非特異的に結合した種々の他の基質213もまた示されている。
図2の220から230に移って、RNAおよび/またはDNA分子211ならびに非特異的に結合した分子213が共に結合している粒子201は、洗浄されて非特異的に結合した基質が除去され、親和性分子205でコーティングされた粒子ならびにそれに結合したRNAおよび/またはDNA分子211が残る。230から240に移って、粒子の周囲の溶液のpHをpH~9(RNA)に増加させ、続いてpH12~13(DNAを放出させる)に増加させることにより、粒子の表面からRNAおよび/またはDNA分子211が放出される。放出させたRNAおよび/またはDNA分子を、別々にPCRのために使用準備のできたフォーマットに採取することができる。
本明細書に記載されている試料および種々の溶液は、マイクロリットル規模の体積を有することが記載されているが、他の体積も使用できる。例えば、阻害剤とは対照的にRNAおよび/またはDNAを選択的に保持するように構成された表面(例えば粒子)を有する処理管は、大容量(例えば、マイクロリットルの数十倍以上の、少なくとも約1ミリリットル以上の)を有することができる。いくつかの実施形態において、処理管は卓上規模を有し、他の溶液は対応してスケールアップされている。
図2の220から230に移って、RNAおよび/またはDNA分子211ならびに非特異的に結合した分子213が共に結合している粒子201は、洗浄されて非特異的に結合した基質が除去され、親和性分子205でコーティングされた粒子ならびにそれに結合したRNAおよび/またはDNA分子211が残る。230から240に移って、粒子の周囲の溶液のpHをpH~9(RNA)に増加させ、続いてpH12~13(DNAを放出させる)に増加させることにより、粒子の表面からRNAおよび/またはDNA分子211が放出される。放出させたRNAおよび/またはDNA分子を、別々にPCRのために使用準備のできたフォーマットに採取することができる。
本明細書に記載されている試料および種々の溶液は、マイクロリットル規模の体積を有することが記載されているが、他の体積も使用できる。例えば、阻害剤とは対照的にRNAおよび/またはDNAを選択的に保持するように構成された表面(例えば粒子)を有する処理管は、大容量(例えば、マイクロリットルの数十倍以上の、少なくとも約1ミリリットル以上の)を有することができる。いくつかの実施形態において、処理管は卓上規模を有し、他の溶液は対応してスケールアップされている。
ポリヌクレオチド捕捉材料
適切なポリヌクレオチド親和性分子は、低いpHでの大変高密度の陽性荷電を提供し、数分以内に、臨床での溶解物からRNAおよびDNAを含むポリヌクレオチドを強力に誘引し結合させることを可能にする分子である。
適切なポリヌクレオチド親和性分子は、低いpHでの大変高密度の陽性荷電を提供し、数分以内に、臨床での溶解物からRNAおよびDNAを含むポリヌクレオチドを強力に誘引し結合させることを可能にする分子である。
本明細書における材料の典型的な実施形態は、Sigma-Aldrich Chemical Company(“Sigma-Aldrich社”)から入手できる製品番号412368のポリアミドアミン(PAMAM)第0世代を用いる。本明細書では“PAMAM(第0世代)”または“PAMAM(GO)”の“PAMAM(O)”と呼ぶこの材料は、その分子が以下の構造を有するデンドリマーである。
PAMAM第0世代
この分子のコアは、アセチル基により両方の窒素原子について2回置換を受けたエチレンジアミンである。各アセチル基は、それ自体がエチレンジアミンモノマーと反応してアミノ置換アミド基を生じている。
しかしながら、本明細書記載の使用に適したPAMAM(O)形はSigma-Aldrich社から入手できる製品に限定されない。デンドリマーの性質を有するPAMAM(O)は、その合成中に可能なデンドリマー化の程度によって少なくとも部分的に制御を受け、広範囲の形態が可能である。従って、種々の異なる数の置換単位を有するPAMAM(O)の多くの変形が本明細書の使用に適している。一般に、ポリヌクレオチド捕捉に適したある範囲のサイズのデンドリマー分子(またはPAMAM(O)誘導体)が存在する。より小さなサイズではRNAまたはDNAを十分に捕捉しないのに対し、より大きなサイズではRNAまたはDNAを強く保持しすぎるため、放出が容易ではない。さらに、本明細書の使用に適したPAMAMの変形を製造するために、エチレンジアミンからの異なるモノマーを使用することができる。このようなモノマーは、限定するものではないが、1,2-プロピレンジアミン、1,3-プロピレンジアミン、1,2-ブチレンジアミン、1,3-ブチレンジアミンおよび1,4-ブチレンジアミンを含むことができる。
しかしながら、本明細書記載の使用に適したPAMAM(O)形はSigma-Aldrich社から入手できる製品に限定されない。デンドリマーの性質を有するPAMAM(O)は、その合成中に可能なデンドリマー化の程度によって少なくとも部分的に制御を受け、広範囲の形態が可能である。従って、種々の異なる数の置換単位を有するPAMAM(O)の多くの変形が本明細書の使用に適している。一般に、ポリヌクレオチド捕捉に適したある範囲のサイズのデンドリマー分子(またはPAMAM(O)誘導体)が存在する。より小さなサイズではRNAまたはDNAを十分に捕捉しないのに対し、より大きなサイズではRNAまたはDNAを強く保持しすぎるため、放出が容易ではない。さらに、本明細書の使用に適したPAMAMの変形を製造するために、エチレンジアミンからの異なるモノマーを使用することができる。このようなモノマーは、限定するものではないが、1,2-プロピレンジアミン、1,3-プロピレンジアミン、1,2-ブチレンジアミン、1,3-ブチレンジアミンおよび1,4-ブチレンジアミンを含むことができる。
本明細所の使用に適した分子PAMAMは分子量で特徴付けることもできる。特に、PAMAM(O)は分子量516を有する。他の適切なPAMAM分子は500~600Daの範囲の分子量を有する。
PAMAM(O)は、それ自体DNAおよびRNA増幅などの酵素処理の阻害薬として作用しうるので、放出させたRNAおよび/またはDNAと共に溶液中にPAMAM(O)が存在しないような方法で用いられることが重要である。この側面は、以下の実施例においてさらに詳細に説明されている。
PAMAM(O)は、それ自体DNAおよびRNA増幅などの酵素処理の阻害薬として作用しうるので、放出させたRNAおよび/またはDNAと共に溶液中にPAMAM(O)が存在しないような方法で用いられることが重要である。この側面は、以下の実施例においてさらに詳細に説明されている。
支持材料
使用するとき、PAMAM(O)は、典型的には、カルボキシル化ビーズまたは磁性もしくは非磁性ビーズなどの固体支持体の表面に固定化される(例えば結合される)。多くの実施形態において、このような固体支持体は、ビーズおよび微小球体などの微粒子を含む。本明細所において、これらの用語、微粒子、ビーズおよび微小球体は同義で使用することができる。粒子は、典型的には、PAMAM(O)が容易に結合できる材料で製造される。このような粒子を製造できる典型的な材料は、リガンドが結合するように修飾できるポリマー材料を含む。典型的には、このような固体支持体は、PAMAM(O)分子と容易に結合して表面とPAMAM(O)との間の化学結合を形成する表面官能基を与えるようにそれ自体を誘導体化することができる。しばしば用いられる、かつ、望ましい表面官能基はカルボン酸(-COOH)基である。PAMAM(O)を結合させることに利用できるカルボキシル基および/またはアミノ基を備える、または修飾して備えることができる例示的なポリマー材料は例えば、ポリスチレン、ラテックスポリマー(例えば、ポリカルボキシレートでコーティングされたラテックス)、ポリアクリルアミド、ポリエチレンオキシド、およびそれらの誘導体を含む。適切な粒子を製造するために用いることができるポリマー材料は、Mathiowitzらへの米国特許第6,235,313号(この特許は引用により本願に組み込まれる)に記載されている。他の材料は、ガラス、シリカ、アガロースおよびアミノプロピルトリエトキシシラン(APES)改質材料を含む。
使用するとき、PAMAM(O)は、典型的には、カルボキシル化ビーズまたは磁性もしくは非磁性ビーズなどの固体支持体の表面に固定化される(例えば結合される)。多くの実施形態において、このような固体支持体は、ビーズおよび微小球体などの微粒子を含む。本明細所において、これらの用語、微粒子、ビーズおよび微小球体は同義で使用することができる。粒子は、典型的には、PAMAM(O)が容易に結合できる材料で製造される。このような粒子を製造できる典型的な材料は、リガンドが結合するように修飾できるポリマー材料を含む。典型的には、このような固体支持体は、PAMAM(O)分子と容易に結合して表面とPAMAM(O)との間の化学結合を形成する表面官能基を与えるようにそれ自体を誘導体化することができる。しばしば用いられる、かつ、望ましい表面官能基はカルボン酸(-COOH)基である。PAMAM(O)を結合させることに利用できるカルボキシル基および/またはアミノ基を備える、または修飾して備えることができる例示的なポリマー材料は例えば、ポリスチレン、ラテックスポリマー(例えば、ポリカルボキシレートでコーティングされたラテックス)、ポリアクリルアミド、ポリエチレンオキシド、およびそれらの誘導体を含む。適切な粒子を製造するために用いることができるポリマー材料は、Mathiowitzらへの米国特許第6,235,313号(この特許は引用により本願に組み込まれる)に記載されている。他の材料は、ガラス、シリカ、アガロースおよびアミノプロピルトリエトキシシラン(APES)改質材料を含む。
磁性粒子などのカルボキシル化粒子とPAMAM(O)分子との反応過程において、PAMAM(O)分子上の全部の可能なアミン基、例えば前述のSigma Aldrich社の製品における6つの可能な基のうちのアミン基の1つが、粒子の表面のCOOH基との反応に消費されてカルボジイミド結合を形成する(例えば、米国特許出願第11/281,247号、40ページ)。アミン基の総数の残り、例えばSigma Aldrich社の前述の製品における5つの基はプロトン化に利用できる。
いくつかの実施形態において、合成プロトコルは、炭酸塩およびMES緩衝液で多数の微小球体を洗浄し;スルホ-NHSおよびEDACを調製し;スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む。PAMAM(0)を結合させた微粒子製造のための合成プロトコルの例は、以下の実施例に示されている。
PAMAM(O)に結合させることができ、本明細書記載の方法に使用できるビーズまたは粒子には種々の供給源がある。例えばSeradyn Magneticカルボキシル修飾磁性ビーズ(Part#3008050250、Seradyn社)、Polysciences BioMagカルボキシルビーズ、Dynalポリマー封入カルボキシルコーティング磁性ビーズおよびPolybeadカルボキシレート修飾微小球体(Polyscience社(カタログ番号09850)から入手できる)である。
ビーズ表面上の高密度のPAMAM(O)分子により、1ミリリットルの臨床試料に使用するのに少量のビーズ(0.5mg)でも可能であり、数十億コピーの他のポリヌクレオチドのバックグラウンド中で、低濃度の標的RNAまたはDNA(<100コピー)に対しても結合が可能となる。
いくつかの実施形態において、合成プロトコルは、炭酸塩およびMES緩衝液で多数の微小球体を洗浄し;スルホ-NHSおよびEDACを調製し;スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む。PAMAM(0)を結合させた微粒子製造のための合成プロトコルの例は、以下の実施例に示されている。
PAMAM(O)に結合させることができ、本明細書記載の方法に使用できるビーズまたは粒子には種々の供給源がある。例えばSeradyn Magneticカルボキシル修飾磁性ビーズ(Part#3008050250、Seradyn社)、Polysciences BioMagカルボキシルビーズ、Dynalポリマー封入カルボキシルコーティング磁性ビーズおよびPolybeadカルボキシレート修飾微小球体(Polyscience社(カタログ番号09850)から入手できる)である。
ビーズ表面上の高密度のPAMAM(O)分子により、1ミリリットルの臨床試料に使用するのに少量のビーズ(0.5mg)でも可能であり、数十億コピーの他のポリヌクレオチドのバックグラウンド中で、低濃度の標的RNAまたはDNA(<100コピー)に対しても結合が可能となる。
いくつかの実施形態において、少なくとも粒子の一部(例えば全部)が磁性を帯びている。別の実施形態において、粒子のほとんど(例えば全部)が磁性を帯びていない。磁性粒子が懸濁されている溶液からその磁性粒子を分離するために一般に遠心分離を必要としないため、磁性粒子は有利である。
典型的には、粒子は約20ミクロン以下(例えば、約15ミクロン以下、約10ミクロン以下)の平均直径を有する。いくつかの実施形態において、粒子は少なくとも約4ミクロン(例えば、少なくとも約6ミクロン、少なくとも約8ミクロン)の平均直径を有する。本明細書において、磁性粒子は典型には約0.5ミクロン~約3ミクロンの平均直径を有する。本明細書において、非磁性粒子は典型的には約0.5ミクロン~約10ミクロンの平均直径を有する。
粒子密度は、典型的には少なくとも約107粒子/ミリリットル(例えば、約108または約109粒子/ミリリットル)である。例えば、試料調製に用いるように構成されたマイクロ流体装置に存在する全量約1マイクロリットルの処理領域は、約103ビーズを含むことができる。
いくつかの実施形態において、少なくとも一部(例えば全部)の粒子は固体である。いくつかの実施形態において、少なくとも一部(例えば全部)の粒子は多孔質である(例えば、粒子は、少なくとも部分的にその中に形成されたチャンネルを有することができる)。
典型的には、粒子は約20ミクロン以下(例えば、約15ミクロン以下、約10ミクロン以下)の平均直径を有する。いくつかの実施形態において、粒子は少なくとも約4ミクロン(例えば、少なくとも約6ミクロン、少なくとも約8ミクロン)の平均直径を有する。本明細書において、磁性粒子は典型には約0.5ミクロン~約3ミクロンの平均直径を有する。本明細書において、非磁性粒子は典型的には約0.5ミクロン~約10ミクロンの平均直径を有する。
粒子密度は、典型的には少なくとも約107粒子/ミリリットル(例えば、約108または約109粒子/ミリリットル)である。例えば、試料調製に用いるように構成されたマイクロ流体装置に存在する全量約1マイクロリットルの処理領域は、約103ビーズを含むことができる。
いくつかの実施形態において、少なくとも一部(例えば全部)の粒子は固体である。いくつかの実施形態において、少なくとも一部(例えば全部)の粒子は多孔質である(例えば、粒子は、少なくとも部分的にその中に形成されたチャンネルを有することができる)。
本明細書記載の微粒子は、手動ピペッティング操作により取り扱われる処理管に使用するのに適しているばかりでなく、試料濃縮装置などのミクロ流体装置において使用することもでき、それによって、必要に応じてサブマイクロリットル溶出量でさえも処理することが可能となる。
PAMAM(O)を結合させた微粒子は、RNAを、さらにまたDNAを捕捉し放出させることに特に効果的である。いくつかの実施形態において、RNAに接触させるまえの結合粒子に対する結合粒子により捕捉されるRNAの質量比は5~20%である。他の実施形態において、この比は7~12%である。さらに他の実施形態において、この比は約10%であり、これは例えば、粒子1mgに対してRNA 100μgに相当する。
PAMAM(O)を結合させた微粒子は、広範囲の濃度にわたって一貫してRNAおよび/またはDNAの捕捉に特に効果的であり、それによってRNAおよび/またはDNAの定量分析を行うことが可能となる。いくつかの実施形態において、結合粒子は、細胞から溶液に遊離させ、結合粒子に接触させたRNAまたはDNAの90%以上を標的RNAまたはDNA 1~107コピー/試料1ミリリットルにわたって捕捉する。
いくつかの実施形態において、特定の放出条件が用いられるとき、結合させたDNAの90%以上を結合粒子は放出する。
PAMAM(O)を結合させた微粒子は、RNAを、さらにまたDNAを捕捉し放出させることに特に効果的である。いくつかの実施形態において、RNAに接触させるまえの結合粒子に対する結合粒子により捕捉されるRNAの質量比は5~20%である。他の実施形態において、この比は7~12%である。さらに他の実施形態において、この比は約10%であり、これは例えば、粒子1mgに対してRNA 100μgに相当する。
PAMAM(O)を結合させた微粒子は、広範囲の濃度にわたって一貫してRNAおよび/またはDNAの捕捉に特に効果的であり、それによってRNAおよび/またはDNAの定量分析を行うことが可能となる。いくつかの実施形態において、結合粒子は、細胞から溶液に遊離させ、結合粒子に接触させたRNAまたはDNAの90%以上を標的RNAまたはDNA 1~107コピー/試料1ミリリットルにわたって捕捉する。
いくつかの実施形態において、特定の放出条件が用いられるとき、結合させたDNAの90%以上を結合粒子は放出する。
試料調製キット
PAMAM(O)をコーティングされた微粒子は、凍結乾燥形などの固形または溶液で使用者に提供されることができる。しかしながら、どのような使用目的であっても、準備工程なしで、使用者により直ちに使用できるように試薬が提供されることが望ましい。本明細書記載の方法で製造された微粒子は、当該技術分野で公知の方法により凍結乾燥でき、本明細書記載のサイズおよび特徴を有する微粒子に適用できる。
本明細書記載のキットのそれぞれにおいて、キットがRNA化合物を測定するためのみに使用される場合、中和試薬を必要としない。従って、中和試薬が提供されても良いが、オプションとして提供される。中和試薬は、典型的には、そのキットがDNA測定に使用される場合か、またはRNAおよびDNAの両方の測定に使用される場合に用いられる。
前記微粒子は、例えば試料調製に用いられる他の試薬と共にキット形態で提供することもできる。キットの一実施形態は、それぞれが溶解緩衝液を含有する多数の、例えば24の密閉管;PAMAM(0)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;多数の試料を分析するのに十分な液体洗浄試薬を含有する管;多数の試料を分析するのに十分な液体中和試薬を含有する管;および多数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含み、キットの構成要素は気密容器に保存される。キット形態で利用可能な他の管の数は、12、25、30、36、48、50、60および100を含む。さらに他の数もまた許容され、本明細書の記載に矛盾しない。
PAMAM(O)をコーティングされた微粒子は、凍結乾燥形などの固形または溶液で使用者に提供されることができる。しかしながら、どのような使用目的であっても、準備工程なしで、使用者により直ちに使用できるように試薬が提供されることが望ましい。本明細書記載の方法で製造された微粒子は、当該技術分野で公知の方法により凍結乾燥でき、本明細書記載のサイズおよび特徴を有する微粒子に適用できる。
本明細書記載のキットのそれぞれにおいて、キットがRNA化合物を測定するためのみに使用される場合、中和試薬を必要としない。従って、中和試薬が提供されても良いが、オプションとして提供される。中和試薬は、典型的には、そのキットがDNA測定に使用される場合か、またはRNAおよびDNAの両方の測定に使用される場合に用いられる。
前記微粒子は、例えば試料調製に用いられる他の試薬と共にキット形態で提供することもできる。キットの一実施形態は、それぞれが溶解緩衝液を含有する多数の、例えば24の密閉管;PAMAM(0)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;多数の試料を分析するのに十分な液体洗浄試薬を含有する管;多数の試料を分析するのに十分な液体中和試薬を含有する管;および多数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含み、キットの構成要素は気密容器に保存される。キット形態で利用可能な他の管の数は、12、25、30、36、48、50、60および100を含む。さらに他の数もまた許容され、本明細書の記載に矛盾しない。
さらにまた、このようなキットの他の実施形態において、凍結乾燥微粒子を含有する容器は、さらに、プロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有することができる。細胞特異的溶解用途において、しばしばさらなる酵素が用いられる。
他の実施形態において、キットは、多数の、例えば24の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(0)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;多数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;液体洗浄試薬を含有する管;液体中和試薬を含有する管;および液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器を含む。キット形態で利用可能な他の管数は、12、25、30、36、48、50、60および100を含む。さらに他の数もまた許容され、本明細書の記載に矛盾しない。
さらにまた、このようなキットの他の実施形態において、凍結乾燥微粒子を含有する管は、さらに、プロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有することができる。細胞特異的溶解用途において、しばしばさらなる酵素が用いられる。
他の実施形態において、キットは、多数の、例えば24の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(0)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;多数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;液体洗浄試薬を含有する管;液体中和試薬を含有する管;および液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器を含む。キット形態で利用可能な他の管数は、12、25、30、36、48、50、60および100を含む。さらに他の数もまた許容され、本明細書の記載に矛盾しない。
さらにまた、このようなキットの他の実施形態において、凍結乾燥微粒子を含有する管は、さらに、プロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有することができる。細胞特異的溶解用途において、しばしばさらなる酵素が用いられる。
DNA結合および溶出条件
DNA捕捉材料の有効性を評価するとき考慮すべき1つの要素は材料のpKaである。酸であるHAのpKaは、pKa=-log10Ka(式中、Ka=[H+][A-]/[HA]である)で与えられる、平衡
HA⇔H++A-
の平衡定数である。溶液のpH(=-log10[H+])が酸のpKaと数値が一致するとき、平衡において酸は50%解離している。従って、材料のpKaを知ることにより、pHの適応が得られる。それ以下では、材料は主として解離しており(アニオン形)、それ以上では、材料は主としてイオン化していない。
アミノ基のpKaは、その共役塩基に関して次のとおりに定義されている:プロトン化アミンであるR-NH3 +は解離平衡にあり:
R-NH3 +⇔H++R-NH2
そのpKaは、log10Ka(式中、Ka=[H+][R-NH2]/[R-NH3 +]である)で与えられる。
DNA捕捉材料の有効性を評価するとき考慮すべき1つの要素は材料のpKaである。酸であるHAのpKaは、pKa=-log10Ka(式中、Ka=[H+][A-]/[HA]である)で与えられる、平衡
HA⇔H++A-
の平衡定数である。溶液のpH(=-log10[H+])が酸のpKaと数値が一致するとき、平衡において酸は50%解離している。従って、材料のpKaを知ることにより、pHの適応が得られる。それ以下では、材料は主として解離しており(アニオン形)、それ以上では、材料は主としてイオン化していない。
アミノ基のpKaは、その共役塩基に関して次のとおりに定義されている:プロトン化アミンであるR-NH3 +は解離平衡にあり:
R-NH3 +⇔H++R-NH2
そのpKaは、log10Ka(式中、Ka=[H+][R-NH2]/[R-NH3 +]である)で与えられる。
窒素原子が3価であることとデンドリマー化の条件によって、各PAMAM(O)分子は第一級アミンと第三級アミン基とを混合して有する。従って、PAMAM(O)分子は、第一級および第三級脂肪族アミンが示すpKa値の範囲とおおよそ一致する一連の値にまたがる複数のpKa値を示し、例えば、Table 12.2 of Organic Chemistry, 2nd Ed., Allinger, et al, Eds., Worth Publishers, Inc. (1976)から明らかなように、一般的にはそのpKa値は10~11の範囲にある。しかしながら、PAMAM(O)製造業者であるDendritech of Midland, Michiganにより提供された情報によれば、PAMAMは、実際上5.5(分子内部にある第三級アミンに関する)~9.5(PAMAM分子の表面上の第一級アミンに関する)の範囲のpKa値を有すると考えられる。このデータを引用した学術論文は、Tomalia, et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 29, 138-175 (1990) の160ページ、右段にある。
PAMAM(O)のアミン基はpKa5~9を有するため、PAMAM(O)は本明細書記載の方法の少なくとも一部分において、DNA結合剤として効果的である。従って、低いpHでは、それは典型的には正に荷電しており、そのpKaより低いpH値では、アミン基のプロトン化により生じる、1分子当たり複数の正電荷を有することすらでき、従って、典型的には溶液中でポリアニオンを含む(主に負電荷を有する)DNAおよびRNAなどのポリヌクレオチドに強く結合することができる。
PAMAM(O)のアミン基はpKa5~9を有するため、PAMAM(O)は本明細書記載の方法の少なくとも一部分において、DNA結合剤として効果的である。従って、低いpHでは、それは典型的には正に荷電しており、そのpKaより低いpH値では、アミン基のプロトン化により生じる、1分子当たり複数の正電荷を有することすらでき、従って、典型的には溶液中でポリアニオンを含む(主に負電荷を有する)DNAおよびRNAなどのポリヌクレオチドに強く結合することができる。
本明細書記載の方法におけるPAMAM(O)分子の使用中、細胞溶解と同時に遊離DNAを粒子に結合させるために用いる結合緩衝液(一般的にはトリス)のpHはおおよそ7~8である。このpHではすべてのアミン(Sigmaから入手できるPEI分子当たりの考えうる6つの基)は、プロトン化(正に荷電)されたままであり、負に荷電したDNA分子を強く引きよせ、ビーズに結合させる。
PAMAM(O)分子は、溶解酵素による分解、プロテアーゼ酵素(例えばペプチド結合を切断するプロテアーゼなどのエンドおよびエキソプロテアーゼの混合物)、界面活性剤などの過酷な化学物質および95℃への加熱ならびに溶解処理中にRNAおよびDNAに結合できるものに抵抗力がある、例えばそれらに反応を示さないという理由でも有利である。従って、細胞溶解とRNAおよび/またはDNA結合とを組み合わせて1つの(同時の)工程にすることができ、それによって時間および少なくとも1つの処理工程を省くことができる。RNAおよび/またはDNA分子のPAMAM(O)への強い結合は、洗浄液を用いてPAMAM(O)でコーティングされた親和性ビーズを迅速に洗浄してPCR阻害剤を除去することを可能にする。親和性ビーズからのRNAおよび/またはDNAの放出は放出試薬の存在下で温度の上昇によって実施される。
使用されるビーズ量は大変少量(<lμl)であるため、RNAおよび/またはDNAを3マイクロリットル程度の最終容量に放出させることができる。放出させたRNAおよび/またはDNAを中和試薬を用いて中和して最終容量5~50マイクロリットルにし、これで下流のPCRの準備は完了である。
PAMAM(O)分子は、溶解酵素による分解、プロテアーゼ酵素(例えばペプチド結合を切断するプロテアーゼなどのエンドおよびエキソプロテアーゼの混合物)、界面活性剤などの過酷な化学物質および95℃への加熱ならびに溶解処理中にRNAおよびDNAに結合できるものに抵抗力がある、例えばそれらに反応を示さないという理由でも有利である。従って、細胞溶解とRNAおよび/またはDNA結合とを組み合わせて1つの(同時の)工程にすることができ、それによって時間および少なくとも1つの処理工程を省くことができる。RNAおよび/またはDNA分子のPAMAM(O)への強い結合は、洗浄液を用いてPAMAM(O)でコーティングされた親和性ビーズを迅速に洗浄してPCR阻害剤を除去することを可能にする。親和性ビーズからのRNAおよび/またはDNAの放出は放出試薬の存在下で温度の上昇によって実施される。
使用されるビーズ量は大変少量(<lμl)であるため、RNAおよび/またはDNAを3マイクロリットル程度の最終容量に放出させることができる。放出させたRNAおよび/またはDNAを中和試薬を用いて中和して最終容量5~50マイクロリットルにし、これで下流のPCRの準備は完了である。
典型的には、導入する試料量は、約500マイクロリットル以下(例えば、約250マイクロリットル以下、約100マイクロリットル以下、約50マイクロリットル以下、約25マイクロリットル以下、約10マイクロリットル以下)である。いくつかの実施形態において、試料量は約2マイクロリットル以下(例えば約0.5マイクロリットル以下)である。
PAMAM(O)は、一部分において、その高い結合能および高い放出効率に基づいて、RNAおよびDNAの優れた回収率を示す。一般に、粒子に保持されるRNAまたはDNA質量対粒子質量は約25以下(例えば、約20以下、約10以下)である。例えば、いくつかの実施形態において、粒子約1グラムは、RNAまたはDNA約100ミリグラムを保持し、より少ない量で用いられた場合、類似の比率を得ることができる(例えば、RNAまたはDNA~100μg/mgビーズの結合能)。
PAMAM(O)は、一部分において、その高い結合能および高い放出効率に基づいて、RNAおよびDNAの優れた回収率を示す。一般に、粒子に保持されるRNAまたはDNA質量対粒子質量は約25以下(例えば、約20以下、約10以下)である。例えば、いくつかの実施形態において、粒子約1グラムは、RNAまたはDNA約100ミリグラムを保持し、より少ない量で用いられた場合、類似の比率を得ることができる(例えば、RNAまたはDNA~100μg/mgビーズの結合能)。
DNA捕捉のための他の装置
他の実施形態において、固体支持体は、試料物質(RNAおよび/またはDNAを含有する)が通過しなければならない保持部材(例えば、RNAおよび/またはDNAが通過する孔および/またはチャンネルなどの多数の開口部を有する、カラム、フィルター、多孔質膜、微細孔フィルターまたはゲルマトリックスなどの多孔質部材)として構成されることができる。このような保持部材は、適切な形状にした多数の表面修飾粒子で形成されることができる。
いくつかの実施形態において、保持部材は、例えばOsmonics社から入手できる、同様に表面修飾を受け、RNAおよび/またはDNAを保持するために使用することができるポリマーで形成される1以上のフィルター膜を含む。いくつかの実施形態において、保持部材は、試料が横切って通過する複数個の表面(例えば仕切り壁またはバッフル)として構成される。この仕切り壁またはバッフルは、例えばPCR阻害剤に優先してRNAおよび/またはDNAを保持するように修飾される。このような保持部材は典型的には微粒子が非磁性であるときに用いられる。
他の実施形態において、固体支持体は、試料物質(RNAおよび/またはDNAを含有する)が通過しなければならない保持部材(例えば、RNAおよび/またはDNAが通過する孔および/またはチャンネルなどの多数の開口部を有する、カラム、フィルター、多孔質膜、微細孔フィルターまたはゲルマトリックスなどの多孔質部材)として構成されることができる。このような保持部材は、適切な形状にした多数の表面修飾粒子で形成されることができる。
いくつかの実施形態において、保持部材は、例えばOsmonics社から入手できる、同様に表面修飾を受け、RNAおよび/またはDNAを保持するために使用することができるポリマーで形成される1以上のフィルター膜を含む。いくつかの実施形態において、保持部材は、試料が横切って通過する複数個の表面(例えば仕切り壁またはバッフル)として構成される。この仕切り壁またはバッフルは、例えばPCR阻害剤に優先してRNAおよび/またはDNAを保持するように修飾される。このような保持部材は典型的には微粒子が非磁性であるときに用いられる。
試料溶液がこのような保持部材(RNAおよび/またはDNAを選択的に保持するように適切に修飾された)を含有する処理領域を通過するとき、RNAおよび/またはDNAは保持されるのに対して、液体および他の溶液成分(例えば阻害剤)はあまり保持されない(例えば保持されない)で処理領域を出ていく。典型的には、このような保持部材は、処理領域に入った試料中に存在するRNAおよび/またはDNA分子のうち少なくとも約50%のRNAおよび/またはDNA分子(少なくとも約75%の、少なくとも約85%の、少なくとも約90%の)を保持する。処理領域は、試料導入の最中、典型的には約50℃以下(例えば、30℃以下)の温度に置かれる。保持部材を洗浄液で洗浄して、保持部材に保持されるRNAおよび/またはDNAから残存阻害剤を分類することにより処理を続けることができる。
いくつかの実施形態において、本明細書記載の試料調製法は、試料を導入し、試料からのRNAおよび/またはDNA分子を、その中に含有される固体支持体上に捕捉するように構成されたマイクロ流体カートリッジなどのミクロ流体装置内で行われる。例示的なマイクロ流体カートリッジは米国特許出願公開第2006/0166233号およびWO2008/061165に記載されている(共に引用により本願に組み込まれる)。このようなカートリッジは、カートリッジ内で種々の液体溶液の微小滴が移動ように構成された1以上のアクチュエータ、試料中の細胞を溶解するように構成されたチャンバーならびにカートリッジ内の液体流を直進させる、不通にするおよび脇にそらすように構成された1以上のチャンネルおよび関連バルブを含むことができる。
試料調製は、処理管またはマイクロ流体カートリッジなどの1つの場所で行われる操作の連続であるとして記載してきたが、他の配置も使用できる。例えば、いくつかの実施形態において、ポリヌクレオチド親和性材料を有する保持部材を、DNAおよび/またはRNA捕捉が行われる領域から取り出し、次の処理を他の場所で行うこともできる。例えば、保持部材を1つの位置でDNAおよび/またはRNAと阻害剤とを含む混合物と接触させ、次いで他の位置に移動させ、そこでRNAおよび/またはDNAを保持部材から取り出すことができる。
試料調製は、処理管またはマイクロ流体カートリッジなどの1つの場所で行われる操作の連続であるとして記載してきたが、他の配置も使用できる。例えば、いくつかの実施形態において、ポリヌクレオチド親和性材料を有する保持部材を、DNAおよび/またはRNA捕捉が行われる領域から取り出し、次の処理を他の場所で行うこともできる。例えば、保持部材を1つの位置でDNAおよび/またはRNAと阻害剤とを含む混合物と接触させ、次いで他の位置に移動させ、そこでRNAおよび/またはDNAを保持部材から取り出すことができる。
本明細書記載のDNA捕捉材料の他の利点
本明細書記載の抽出試薬および試料調製法は、試料調製のための現在入手可能な既成のキットと比較して優れた性能を提供する。本明細書の材料および方法の利点は以下を含む。
より少数の工程(処理の試料から精製RNAおよび/またはDNAまでわずか6工程)を有し、他の手順よりもより少数の容器を用いる能率化された試料調製手順。
親和性ビーズに加えて、抽出対照(細胞、プラスミドまたはネイキッド(naked))DNAを含むこともできる。臨床試料中に存在する他のDNA(例えば標的DNA)と共に内部対照DNAが同時精製されるように、溶解剤に内部対照DNAを含ませ、最終放出DNA中に溶出させることができる。溶出DNAの増幅中に、内部対照DNAもまた増幅し、続いて標的DNAとは異なる蛍光発色団を用いて検出することができる。これにより、試料調製過程が必要通りに機能したことをさらに確認できる。
本明細書の説明は、PAMAM(第0世代)でコーティングされた微粒子の特性および使用の解析を含んできた。他に記載されているように(例えば、米国特許出願公開第2006-0166233号(引用により本願に組み込まれる))、本明細書記載の方法に他の親和性分子を適切に使用できることは、当業者には明らかであろう。
本明細書記載の抽出試薬および試料調製法は、試料調製のための現在入手可能な既成のキットと比較して優れた性能を提供する。本明細書の材料および方法の利点は以下を含む。
より少数の工程(処理の試料から精製RNAおよび/またはDNAまでわずか6工程)を有し、他の手順よりもより少数の容器を用いる能率化された試料調製手順。
親和性ビーズに加えて、抽出対照(細胞、プラスミドまたはネイキッド(naked))DNAを含むこともできる。臨床試料中に存在する他のDNA(例えば標的DNA)と共に内部対照DNAが同時精製されるように、溶解剤に内部対照DNAを含ませ、最終放出DNA中に溶出させることができる。溶出DNAの増幅中に、内部対照DNAもまた増幅し、続いて標的DNAとは異なる蛍光発色団を用いて検出することができる。これにより、試料調製過程が必要通りに機能したことをさらに確認できる。
本明細書の説明は、PAMAM(第0世代)でコーティングされた微粒子の特性および使用の解析を含んできた。他に記載されているように(例えば、米国特許出願公開第2006-0166233号(引用により本願に組み込まれる))、本明細書記載の方法に他の親和性分子を適切に使用できることは、当業者には明らかであろう。
本発明の具体的な実施態様の例を以下に列挙する。
(1)細胞含有試料からポリヌクレオチドを単離する方法であって、
試料と溶解液およびPAMAM(第0世代)でコーティングされた多数の結合粒子とを接触させ、ポリヌクレオチドを細胞から遊離させてPAMAM(第0世代)に結合させ、それによって、ポリヌクレオチドが結合した結合粒子および残りの細胞物質を含有する溶液を作成し;
ポリヌクレオチドが結合した結合粒子を密集させ;
残りの細胞物質を含有する溶液を除去し;
結合粒子を洗浄し;
結合粒子からポリヌクレオチドを放出させること、
を含む前記方法。
(2)ポリヌクレオチドがDNAである、(1)記載の方法。
(3)ポリヌクレオチドがRNAである、(1)記載の方法。
(4)ポリヌクレオチドが7.5Mbp未満のサイズを有する、(1)記載の方法。
(5)PAMAM(第0世代)が結合粒子の表面に共有結合している、(1)記載の方法。
(6)ポリスチレン、ラテックスポリマー、ポリアクリルアミドおよびポリエチレンオキシドからなる群から選択されるポリマー材料で粒子が作られている、(1)記載の方法。
(7)ポリマー材料が1以上のカルボキシル基を提供するように修飾され、この基がPAMAM(第0世代)の結合部位を提供する、(6)記載の方法。
(8)粒子が約0.5ミクロン~約10ミクロンの平均直径を有する、(1)記載の方法。
(9)粒子が約107~109粒子/ミリリットルの密度で存在する、(1)記載の方法。
(10)少なくとも粒子のいくつかが磁性を帯びている、(1)記載の方法。
(11)PAMAM(第0世代)がポリメラーゼ連鎖反応阻害剤に優先してポリヌクレオチドに結合するように構成された、(1)記載の方法。
(12)ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤がヘモグロビン、ペプチド、糞便物質、腐植酸、粘液物質、DNA結合タンパク質または糖質の少なくとも1つを含む、(11)記載の方法。
(13)試料と溶解液および複数の結合粒子とを接触させることが、試料と前記溶液および前記粒子とを60℃で5~10分間インキュベートすることを含む、(1)記載の方法。
(14)接触させることが、試料をある温度に加熱することを含み、前記温度が、加熱中複数の粒子の存在下で液体を沸騰させるのに不十分である、(13)記載の方法。
(15)洗浄液がトリス-EDTAおよび1%トリトンX100(pH8.0)を含む、(1)記載の方法。
(16)洗浄液が界面活性剤を含む、(15)記載の方法。
(17)ポリヌクレオチドを放出させることが、放出液の存在下で3分間85℃で粒子を加熱することを含む、(1)記載の方法。
(18)ポリヌクレオチドがRNA分子を含み、放出液がpH>9を有する、(15)記載の方法。
(19)ポリヌクレオチドがDNA分子を含み、放出液がpH>12を有する、(15)記載の方法。
(20)ポリヌクレオチドがDNAおよびRNA分子の混合物を含み、連続する2つの放出液が用いられる、(15)記載の方法であって、第1放出液が9~12の範囲のpHを有し、第2放出液が12~14の範囲のpHを有する前記方法。
(21)方法が粒子の遠心分離を含まない、(1)記載の方法。
(22)接触させ、密集させ、除去し、洗浄し、放出させることを完了させるために必要な時間が10~30分間である、(1)記載の方法。
(23)試料が、それに結合させたポリヌクレオチドを有する結合粒子の濃縮容量より少なくとも約10倍大きい容量を有する、(1)記載の方法。
(24)試料が0.5マイクロリットル~3ミリリットルの容量を有する、(1)記載の方法。
(25)接触させ、密集させ、除去し、洗浄し、放出させることのすべてが1つの容器内で行われる、(1)記載の方法。
(26)放出させたポリヌクレオチドを中和し、それによってPCRのために使用準備のできたポリヌクレオチドを調製することをさらに含む、(1)記載の方法。
(27)ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤を含有する試料からRNAを濃縮する方法であって、500μl~1mlの試料と多数のRNA結合粒子とを接触させることであって、前記結合粒子はポリメラーゼ連鎖反応阻害剤と比較して試料中のRNAを選択的に保持するように構成され;
1以上のポリヌクレオチドが結合した多数の粒子を実効容量50ナノリットル~5マイクロリットルに濃縮し;
1以上のポリヌクレオチドを<30μlの溶液に放出させること、
を含む前記方法。
(28)カルボキシル修飾微粒子;および微粒子上のカルボン酸基の1以上に、1分子当たり1以上のアミン基で結合したPAMAM(第0世代)を含む組成物。
(29)それぞれが溶解緩衝液を含有する複数の密閉管;
PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;
複数の試料を分析するのに十分な液体洗試薬を含有する管;および
複数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含むキットであって、キットの構成要素が気密容器に保存される前記キット。
(30)数が24である、(29)記載のキット。
(31)凍結乾燥微粒子を含有する管が、さらにプロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有する、(30)記載のキット。
(32)複数の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;
複数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、
各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;
液体洗浄試薬を含有する管;および
液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器、
を含むキット。
(33)管の数が24である、(32)記載のキット。
(34)凍結乾燥微粒子を含有する各管が、さらにプロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有する、(33)記載のキット。
(35)ポリヌクレオチド保持部材を製造する方法であって、
炭酸塩およびMES緩衝液で複数の微小球体を洗浄し;
スルホ-NHSおよびEDACを調製し;
スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;
MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;
微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;
微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む前記方法。
(1)細胞含有試料からポリヌクレオチドを単離する方法であって、
試料と溶解液およびPAMAM(第0世代)でコーティングされた多数の結合粒子とを接触させ、ポリヌクレオチドを細胞から遊離させてPAMAM(第0世代)に結合させ、それによって、ポリヌクレオチドが結合した結合粒子および残りの細胞物質を含有する溶液を作成し;
ポリヌクレオチドが結合した結合粒子を密集させ;
残りの細胞物質を含有する溶液を除去し;
結合粒子を洗浄し;
結合粒子からポリヌクレオチドを放出させること、
を含む前記方法。
(2)ポリヌクレオチドがDNAである、(1)記載の方法。
(3)ポリヌクレオチドがRNAである、(1)記載の方法。
(4)ポリヌクレオチドが7.5Mbp未満のサイズを有する、(1)記載の方法。
(5)PAMAM(第0世代)が結合粒子の表面に共有結合している、(1)記載の方法。
(6)ポリスチレン、ラテックスポリマー、ポリアクリルアミドおよびポリエチレンオキシドからなる群から選択されるポリマー材料で粒子が作られている、(1)記載の方法。
(7)ポリマー材料が1以上のカルボキシル基を提供するように修飾され、この基がPAMAM(第0世代)の結合部位を提供する、(6)記載の方法。
(8)粒子が約0.5ミクロン~約10ミクロンの平均直径を有する、(1)記載の方法。
(9)粒子が約107~109粒子/ミリリットルの密度で存在する、(1)記載の方法。
(10)少なくとも粒子のいくつかが磁性を帯びている、(1)記載の方法。
(11)PAMAM(第0世代)がポリメラーゼ連鎖反応阻害剤に優先してポリヌクレオチドに結合するように構成された、(1)記載の方法。
(12)ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤がヘモグロビン、ペプチド、糞便物質、腐植酸、粘液物質、DNA結合タンパク質または糖質の少なくとも1つを含む、(11)記載の方法。
(13)試料と溶解液および複数の結合粒子とを接触させることが、試料と前記溶液および前記粒子とを60℃で5~10分間インキュベートすることを含む、(1)記載の方法。
(14)接触させることが、試料をある温度に加熱することを含み、前記温度が、加熱中複数の粒子の存在下で液体を沸騰させるのに不十分である、(13)記載の方法。
(15)洗浄液がトリス-EDTAおよび1%トリトンX100(pH8.0)を含む、(1)記載の方法。
(16)洗浄液が界面活性剤を含む、(15)記載の方法。
(17)ポリヌクレオチドを放出させることが、放出液の存在下で3分間85℃で粒子を加熱することを含む、(1)記載の方法。
(18)ポリヌクレオチドがRNA分子を含み、放出液がpH>9を有する、(15)記載の方法。
(19)ポリヌクレオチドがDNA分子を含み、放出液がpH>12を有する、(15)記載の方法。
(20)ポリヌクレオチドがDNAおよびRNA分子の混合物を含み、連続する2つの放出液が用いられる、(15)記載の方法であって、第1放出液が9~12の範囲のpHを有し、第2放出液が12~14の範囲のpHを有する前記方法。
(21)方法が粒子の遠心分離を含まない、(1)記載の方法。
(22)接触させ、密集させ、除去し、洗浄し、放出させることを完了させるために必要な時間が10~30分間である、(1)記載の方法。
(23)試料が、それに結合させたポリヌクレオチドを有する結合粒子の濃縮容量より少なくとも約10倍大きい容量を有する、(1)記載の方法。
(24)試料が0.5マイクロリットル~3ミリリットルの容量を有する、(1)記載の方法。
(25)接触させ、密集させ、除去し、洗浄し、放出させることのすべてが1つの容器内で行われる、(1)記載の方法。
(26)放出させたポリヌクレオチドを中和し、それによってPCRのために使用準備のできたポリヌクレオチドを調製することをさらに含む、(1)記載の方法。
(27)ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤を含有する試料からRNAを濃縮する方法であって、500μl~1mlの試料と多数のRNA結合粒子とを接触させることであって、前記結合粒子はポリメラーゼ連鎖反応阻害剤と比較して試料中のRNAを選択的に保持するように構成され;
1以上のポリヌクレオチドが結合した多数の粒子を実効容量50ナノリットル~5マイクロリットルに濃縮し;
1以上のポリヌクレオチドを<30μlの溶液に放出させること、
を含む前記方法。
(28)カルボキシル修飾微粒子;および微粒子上のカルボン酸基の1以上に、1分子当たり1以上のアミン基で結合したPAMAM(第0世代)を含む組成物。
(29)それぞれが溶解緩衝液を含有する複数の密閉管;
PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;
複数の試料を分析するのに十分な液体洗試薬を含有する管;および
複数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含むキットであって、キットの構成要素が気密容器に保存される前記キット。
(30)数が24である、(29)記載のキット。
(31)凍結乾燥微粒子を含有する管が、さらにプロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有する、(30)記載のキット。
(32)複数の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;
複数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、
各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;
液体洗浄試薬を含有する管;および
液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器、
を含むキット。
(33)管の数が24である、(32)記載のキット。
(34)凍結乾燥微粒子を含有する各管が、さらにプロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有する、(33)記載のキット。
(35)ポリヌクレオチド保持部材を製造する方法であって、
炭酸塩およびMES緩衝液で複数の微小球体を洗浄し;
スルホ-NHSおよびEDACを調製し;
スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;
MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;
微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;
微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む前記方法。
試料調製法
以下の6工程は、本明細書でさらに詳細に説明されている試薬キットを用いて1つの試料について20分程度、12試料からなる1バッチについては30分程度で行うことができる。これらの工程は米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているシステム(引用により本願に組み込まれる)において容易に自動化することもできる。これらの工程は図1にも概略が示されており、本明細書の他の部分にも記載されている。
以下の6工程は、本明細書でさらに詳細に説明されている試薬キットを用いて1つの試料について20分程度、12試料からなる1バッチについては30分程度で行うことができる。これらの工程は米国仮特許出願第60/959,437号(出願日:2007年7月13日)に記載されているシステム(引用により本願に組み込まれる)において容易に自動化することもできる。これらの工程は図1にも概略が示されており、本明細書の他の部分にも記載されている。
例示的な1方法は次のとおりである.
1.臨床試料~500μlと溶解緩衝液およびPAMAM(O)が表面に結合した親和性磁性ビーズ500μlとを混合する。EV13などのウイルスを検出するためのキットは、溶解緩衝液中によく溶解した溶解酵素を少量含む。
2.室温~60℃の温度で5~10分間、試料、溶解緩衝液およびビーズの混合物をインキュベートし、細胞を溶解し、RNAおよび/またはDNAを親和性ビーズに結合させる。
3.磁性ビーズを分離し、上清溶液をできるだけ除去する。
4.洗浄試薬でビーズを洗浄する。
5.3マイクロリットル程度の放出液の存在下、85℃で3分間ビーズを加熱することにより、ビーズからRNAおよび/またはDNAを放出させる。
6.放出させたRNAおよび/またはDNAを取りだし、中和試薬、例えばトリス緩衝液で溶液を中和し、PCRのために使用準備のできたRNAおよび/またはDNAを調製する。
1.臨床試料~500μlと溶解緩衝液およびPAMAM(O)が表面に結合した親和性磁性ビーズ500μlとを混合する。EV13などのウイルスを検出するためのキットは、溶解緩衝液中によく溶解した溶解酵素を少量含む。
2.室温~60℃の温度で5~10分間、試料、溶解緩衝液およびビーズの混合物をインキュベートし、細胞を溶解し、RNAおよび/またはDNAを親和性ビーズに結合させる。
3.磁性ビーズを分離し、上清溶液をできるだけ除去する。
4.洗浄試薬でビーズを洗浄する。
5.3マイクロリットル程度の放出液の存在下、85℃で3分間ビーズを加熱することにより、ビーズからRNAおよび/またはDNAを放出させる。
6.放出させたRNAおよび/またはDNAを取りだし、中和試薬、例えばトリス緩衝液で溶液を中和し、PCRのために使用準備のできたRNAおよび/またはDNAを調製する。
他の例示的な方法は次のとおりである。
・試料:血漿500μlとPrep緩衝液 500μlとを混合するか、またはRNA Prep緩衝液1mLにディップスワブを混合する。
・場合によりこの混合物を前濾過することができる。
・60℃で10分間インキュベートし;必要に応じて(スワブのみ)タンパク質分解酵素で精製し、本明細書でさらに詳細に説明されているように、PAMAM(GO)でコーティングされた親和性ビーズ(磁性を帯びている)によるRNAおよび/またはDNA捕捉を行う。
・場合により、RNAを測定することが望ましい場合、混合物をDNAseで処理する(例えば7U DNaseを用いて37℃で10分間)
・本明細書でさらに詳細に説明されているように、洗浄試薬100μl(2X)でRNAが結合したビーズを洗浄する。
・本明細書でさらに詳細に説明されているように、放出試薬の存在下で加熱(85℃;3分間)によりビーズからRNAを放出させ、それによってRT-PCRのために使用準備のできたRNAを遊離させる。
・試料:血漿500μlとPrep緩衝液 500μlとを混合するか、またはRNA Prep緩衝液1mLにディップスワブを混合する。
・場合によりこの混合物を前濾過することができる。
・60℃で10分間インキュベートし;必要に応じて(スワブのみ)タンパク質分解酵素で精製し、本明細書でさらに詳細に説明されているように、PAMAM(GO)でコーティングされた親和性ビーズ(磁性を帯びている)によるRNAおよび/またはDNA捕捉を行う。
・場合により、RNAを測定することが望ましい場合、混合物をDNAseで処理する(例えば7U DNaseを用いて37℃で10分間)
・本明細書でさらに詳細に説明されているように、洗浄試薬100μl(2X)でRNAが結合したビーズを洗浄する。
・本明細書でさらに詳細に説明されているように、放出試薬の存在下で加熱(85℃;3分間)によりビーズからRNAを放出させ、それによってRT-PCRのために使用準備のできたRNAを遊離させる。
さまざまなマトリックスへの適用
本明細書記載の手順は以下の完全ではないリストによって示されるように、臨床および非臨床試料の両方を含む、種々の試料マトリックスに役に立つ。
・鼻腔スワブ
・CSF
・M4に入れた鼻腔スワブ
・UTMに入れた鼻腔スワブ
・血漿
本明細書記載の手順は以下の完全ではないリストによって示されるように、臨床および非臨床試料の両方を含む、種々の試料マトリックスに役に立つ。
・鼻腔スワブ
・CSF
・M4に入れた鼻腔スワブ
・UTMに入れた鼻腔スワブ
・血漿
代表的結果
図3は、本明細書の他の部分で記載した溶解緩衝液を用いて、鼻腔スワブからエンテロウイルス13(EV13)RNAを単離・精製するための、本明細書でさらに詳細に説明したRNA抽出試薬、PAMAM(O)および方法の使用を示す。このグラフは、それぞれ2X104、2000、200、50および20コピー/RNA Prep緩衝液 1mLでスパイクした種々の試料のPCR曲線を示す。RNAは10μlに放出させたが、放出させたRNAの内2μlのみをRT-PCRに用いた。RT-PCRはQiagen RT-PCRキットを用いて行った。PCR曲線は、左から右へ低下した濃度順に軸から上に上がる。
図4は、RNA抽出試薬であるPAMAM(O)の使用および、M4培地に採取した鼻腔スワブからエンテロウイルス13(EV13)RNAを単離・精製するための本明細書でさらに詳細に説明した方法を示す。このグラフは、それぞれ1000、100および50コピー/試料1mLでスパイクした種々の試料のPCR曲線を示す。PCR曲線は、左から右へ低下した濃度順に軸から上に上がる。
図3は、本明細書の他の部分で記載した溶解緩衝液を用いて、鼻腔スワブからエンテロウイルス13(EV13)RNAを単離・精製するための、本明細書でさらに詳細に説明したRNA抽出試薬、PAMAM(O)および方法の使用を示す。このグラフは、それぞれ2X104、2000、200、50および20コピー/RNA Prep緩衝液 1mLでスパイクした種々の試料のPCR曲線を示す。RNAは10μlに放出させたが、放出させたRNAの内2μlのみをRT-PCRに用いた。RT-PCRはQiagen RT-PCRキットを用いて行った。PCR曲線は、左から右へ低下した濃度順に軸から上に上がる。
図4は、RNA抽出試薬であるPAMAM(O)の使用および、M4培地に採取した鼻腔スワブからエンテロウイルス13(EV13)RNAを単離・精製するための本明細書でさらに詳細に説明した方法を示す。このグラフは、それぞれ1000、100および50コピー/試料1mLでスパイクした種々の試料のPCR曲線を示す。PCR曲線は、左から右へ低下した濃度順に軸から上に上がる。
図5は、PAMAM(O)ビーズを用いたRNA抽出の、緩衝液試料と血漿との比較を示す。本明細書にさらに詳細に説明された方法に従って、緩衝液および血漿試料の両方にEV13RNA 500コピー/1mLを用いた。
図6は、PAMAM(O)ビーズを用いるDNA抽出を示す。M4緩衝液または本明細書記載の溶解緩衝液にスパイクしたDNA2.5pgを、本明細書でさらに詳細に説明した、M4回収緩衝液からRNAを抽出する方法を用いて抽出した。
図7は、7U DNAse処理を用いた、EV13RNA 200コピーを含有する血漿試料500μlからのRNA抽出のPCR曲線を示す。
図8はこの方法の感度を示す。プロビット分析により、LoDは50コピー/200μl CSFであることが示される。
図6は、PAMAM(O)ビーズを用いるDNA抽出を示す。M4緩衝液または本明細書記載の溶解緩衝液にスパイクしたDNA2.5pgを、本明細書でさらに詳細に説明した、M4回収緩衝液からRNAを抽出する方法を用いて抽出した。
図7は、7U DNAse処理を用いた、EV13RNA 200コピーを含有する血漿試料500μlからのRNA抽出のPCR曲線を示す。
図8はこの方法の感度を示す。プロビット分析により、LoDは50コピー/200μl CSFであることが示される。
M4、IX TCEP緩衝液に入れた乾燥スワブ、THB試料からのRNA抽出のための典型的なプロトコル
試料調製前処理(スワブ試料のみ濾過を必要とする)
RNA抽出およびPCR prep
血漿試料からのRNAの抽出のための典型的なプロトコル
RNA抽出およびPCR prep
RNA抽出およびPCR prep
RNA抽出のための2X TCEP緩衝液の調製方法
本明細書でさらに詳細に説明されるように、本実施例の手順は、RNA抽出に用いられる2X TCEP緩衝液(20mMトリスHCl(pH7.0)、2%Tx-100、10mM TCEP)を50mLまで調製するのに適した方法を提供する。以下は、本方法に用いられる試薬のリストである。
・1Mトリス-HCl(pH7.0)
・100%トリトンX-100(Tx-100)
・TCEP(トリス(2-カルボキシエチル)ホスフィン塩酸塩)
・超純水
本明細書でさらに詳細に説明されるように、本実施例の手順は、RNA抽出に用いられる2X TCEP緩衝液(20mMトリスHCl(pH7.0)、2%Tx-100、10mM TCEP)を50mLまで調製するのに適した方法を提供する。以下は、本方法に用いられる試薬のリストである。
・1Mトリス-HCl(pH7.0)
・100%トリトンX-100(Tx-100)
・TCEP(トリス(2-カルボキシエチル)ホスフィン塩酸塩)
・超純水
以下は、本方法に用いられる装置のリストである。
・層流フード
・血清学的ピペットホルダー
・血清学的ピペット
・ボルテックサー
・適切なサイズの容器
・新しい滅菌メスシリンダー
・適切な個人防護具(PPE)
・製品ラベル
・層流フード
・血清学的ピペットホルダー
・血清学的ピペット
・ボルテックサー
・適切なサイズの容器
・新しい滅菌メスシリンダー
・適切な個人防護具(PPE)
・製品ラベル
この手順を行う作業者は、緩衝液の調製方法の知識があり、優れたピペッティング技術を有さなければならず、一般的な実験室滅菌技術を使用して無菌性のために層流フード内で溶液を調製しなければならず、原液を汚染させないように注意しなければならない。作業者は、常に手袋およびラボコートを着用しなければならない。
50mLの2X TCEP緩衝液(2OmMトリスHCIpH7.0、2%Tx-IOO、10mM TCEP)の調製
RNA親和性磁性微小球体の典型的な製造方法
この手順は、一般にRNA親和性磁性微小球体と呼ばれる、PAMAM(GO)でコーティングされた磁性微小球体1バッチの適切な方法を提供する。1バッチは、RNA親和性磁性微小球体6mLを生じる1~10ml合成からなる。本方法のフローチャートを図9に示す。以下は、本方法に用いられる装置のリストである。
・ボルテックサー
・微量遠心機
・磁性ラック
・1.7mLマイクロ遠心チューブ
・4-オンス試料容器
・50mLコニカルチューブ
・15mLコニカルチューブ
・遠心機
・pHメーター
・ピペット
・ピペットチップ
・超音波ディスメンブレータ(dismembrator)
・dH20洗浄ボトル
・タスクワイパー
・天秤
・検査用マーカー
・手袋およびラボコート
・オービタルシェーカー
・ラベルテープ
・ピペットホルダー
・血清学的ピペット
この手順は、一般にRNA親和性磁性微小球体と呼ばれる、PAMAM(GO)でコーティングされた磁性微小球体1バッチの適切な方法を提供する。1バッチは、RNA親和性磁性微小球体6mLを生じる1~10ml合成からなる。本方法のフローチャートを図9に示す。以下は、本方法に用いられる装置のリストである。
・ボルテックサー
・微量遠心機
・磁性ラック
・1.7mLマイクロ遠心チューブ
・4-オンス試料容器
・50mLコニカルチューブ
・15mLコニカルチューブ
・遠心機
・pHメーター
・ピペット
・ピペットチップ
・超音波ディスメンブレータ(dismembrator)
・dH20洗浄ボトル
・タスクワイパー
・天秤
・検査用マーカー
・手袋およびラボコート
・オービタルシェーカー
・ラベルテープ
・ピペットホルダー
・血清学的ピペット
この手順を行う作業者は、微量天秤、ピペット、pHメーター、超音波ディスメンブレータおよび微量遠心機を使用できなければならず、緩衝液の調製法の知識を有し、優れたピペッティング技術を有さなければならない。作業者は、常に手袋、ラボコートおよび眼用保護具を着用しなければならない。超音波処理工程では、防音保護具を着用しなければならない。すべての溶液は層流フード内で調製される。
手順-緩衝液の調製方法
緩衝液SN-B(50mM MES緩衝液(pH6.1)、0.15%Triton X-100)70mLの調製方法
緩衝液SN-G(50mM Tris(pH7.5)、0.1%Triton X-100)50mLの調製方法
緩衝液SN-H(50mM MES(pH6.1)、Txなし)10mLの調製方法
1日目に行われる工程は以下を含む。
2日目に行われる工程は以下を含む。
前述の説明は、本技術の種々の側面を説明することを目的としたものである。本明細書に記載の実施例は、添付の特許請求の範囲を限定することを目的としたものではない。今や本発明は十分に説明されているが、添付の特許請求の範囲の精神と範囲から逸脱することなく、多くの変更および修飾をなすことができることは当業者には明らかであろう。
Claims (35)
- 細胞含有試料からポリヌクレオチドを単離する方法であって、
試料と溶解液およびPAMAM(第0世代)でコーティングされた多数の結合粒子とを接触させ、ポリヌクレオチドを細胞から遊離させてPAMAM(第0世代)に結合させ、それによって、ポリヌクレオチドが結合した結合粒子および残りの細胞物質を含有する溶液を作成し;
ポリヌクレオチドが結合した結合粒子を密集させ;
残りの細胞物質を含有する溶液を除去し;
結合粒子を洗浄し;
結合粒子からポリヌクレオチドを放出させること、
を含む前記方法。 - ポリヌクレオチドがDNAである、請求項1記載の方法。
- ポリヌクレオチドがRNAである、請求項1記載の方法。
- ポリヌクレオチドが7.5Mbp未満のサイズを有する、請求項1記載の方法。
- PAMAM(第0世代)が結合粒子の表面に共有結合している、請求項1記載の方法。
- ポリスチレン、ラテックスポリマー、ポリアクリルアミドおよびポリエチレンオキシドからなる群から選択されるポリマー材料で粒子が作られている、請求項1記載の方法。
- ポリマー材料が1以上のカルボキシル基を提供するように修飾され、この基がPAMAM(第0世代)の結合部位を提供する、請求項6記載の方法。
- 粒子が約0.5ミクロン~約10ミクロンの平均直径を有する、請求項1記載の方法。
- 粒子が約107~109粒子/ミリリットルの密度で存在する、請求項1記載の方法。
- 少なくとも粒子のいくつかが磁性を帯びている、請求項1記載の方法。
- PAMAM(第0世代)がポリメラーゼ連鎖反応阻害剤に優先してポリヌクレオチドに結合するように構成された、請求項1記載の方法。
- ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤がヘモグロビン、ペプチド、糞便物質、腐植酸、粘液物質、DNA結合タンパク質または糖質の少なくとも1つを含む、請求項11記載の方法。
- 試料と溶解液および複数の結合粒子とを接触させることが、試料と前記溶液および前記粒子とを60℃で5~10分間インキュベートすることを含む、請求項1記載の方法。
- 接触させることが、試料をある温度に加熱することを含み、前記温度が、加熱中複数の粒子の存在下で液体を沸騰させるのに不十分である、請求項13記載の方法。
- 洗浄液がトリス-EDTAおよび1%トリトンX100(pH8.0)を含む、請求項1記載の方法。
- 洗浄液が界面活性剤を含む、請求項15記載の方法。
- ポリヌクレオチドを放出させることが、放出液の存在下で3分間85℃で粒子を加熱することを含む、請求項1記載の方法。
- ポリヌクレオチドがRNA分子を含み、放出液がpH>9を有する、請求項15記載の方法。
- ポリヌクレオチドがDNA分子を含み、放出液がpH>12を有する、請求項15記載の方法。
- ポリヌクレオチドがDNAおよびRNA分子の混合物を含み、連続する2つの放出液が用いられる、請求項15記載の方法であって、第1放出液が9~12の範囲のpHを有し、第2放出液が12~14の範囲のpHを有する前記方法。
- 方法が粒子の遠心分離を含まない、請求項1記載の方法。
- 接触させ、密集させ、除去し、洗浄し、放出させることを完了させるために必要な時間が10~30分間である、請求項1記載の方法。
- 試料が、それに結合させたポリヌクレオチドを有する結合粒子の濃縮容量より少なくとも約10倍大きい容量を有する、請求項1記載の方法。
- 試料が0.5マイクロリットル~3ミリリットルの容量を有する、請求項1記載の方法。
- 接触させ、密集させ、除去し、洗浄し、放出させることのすべてが1つの容器内で行われる、請求項1記載の方法。
- 放出させたポリヌクレオチドを中和し、それによってPCRのために使用準備のできたポリヌクレオチドを調製することをさらに含む、請求項1記載の方法。
- ポリメラーゼ連鎖反応阻害剤を含有する試料からRNAを濃縮する方法であって、
500μl~1mlの試料と多数のRNA結合粒子とを接触させることであって、前記結合粒子はポリメラーゼ連鎖反応阻害剤と比較して試料中のRNAを選択的に保持するように構成され;
1以上のポリヌクレオチドが結合した多数の粒子を実効容量50ナノリットル~5マイクロリットルに濃縮し;
1以上のポリヌクレオチドを<30μlの溶液に放出させること、
を含む前記方法。 - カルボキシル修飾微粒子;および微粒子上のカルボン酸基の1以上に、1分子当たり1以上のアミン基で結合したPAMAM(第0世代)を含む組成物。
- それぞれが溶解緩衝液を含有する複数の密閉管;
PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を含有する管;
複数の試料を分析するのに十分な液体洗試薬を含有する管;および
複数の試料を分析するのに十分な液体放出試薬を含有する管を含むキットであって、キットの構成要素が気密容器に保存される前記キット。 - 数が24である、請求項30記載のキット。
- 凍結乾燥微粒子を含有する管が、さらにプロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有する、請求項30記載のキット。
- 複数の管を封入する第1気密容器であって、PAMAM(第0世代)を結合させた凍結乾燥微粒子を各管が含有する第1気密容器;
複数の試薬ホルダーを封入する第2気密容器であって、
各ホルダーが液体溶解剤を含有する管;
液体洗浄試薬を含有する管;および
液体放出試薬を含有する管を含む前記第2気密容器、
を含むキット。 - 管の数が24である、請求項33記載のキット。
- 凍結乾燥微粒子を含有する各管が、さらにプロテイナーゼK;プロテイナーゼKおよびムタノリシン;ならびにプロテイナーゼK、ムタノリシンおよび内部対照DNAからなる群から選択される試薬の粒子を含有する、請求項33記載のキット。
- ポリヌクレオチド保持部材を製造する方法であって、
炭酸塩およびMES緩衝液で複数の微小球体を洗浄し;
スルホ-NHSおよびEDACを調製し;
スルホ-NHSおよびEDACで30分間微小球体をインキュベートし;
MESおよびホウ酸塩緩衝液で微小球体を洗浄し;
微小球体とPAMAM(O)を8~10時間接触させ;
微小球体から非結合PAMAM(O)を洗い落とすことを含む前記方法。
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JP2018219050A Active JP7026604B2 (ja) | 2007-07-13 | 2018-11-22 | ポリヌクレオチド捕捉材料およびその使用方法 |
JP2021197749A Active JP7408229B2 (ja) | 2007-07-13 | 2021-12-06 | ポリヌクレオチド捕捉材料およびその使用方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (9) | US8324372B2 (ja) |
EP (3) | EP3741869A1 (ja) |
JP (7) | JP5651011B2 (ja) |
AU (1) | AU2008276211B2 (ja) |
CA (1) | CA2693654C (ja) |
ES (2) | ES2877602T3 (ja) |
WO (1) | WO2009012185A1 (ja) |
Families Citing this family (92)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6048734A (en) | 1995-09-15 | 2000-04-11 | The Regents Of The University Of Michigan | Thermal microvalves in a fluid flow method |
US6692700B2 (en) | 2001-02-14 | 2004-02-17 | Handylab, Inc. | Heat-reduction methods and systems related to microfluidic devices |
US8895311B1 (en) | 2001-03-28 | 2014-11-25 | Handylab, Inc. | Methods and systems for control of general purpose microfluidic devices |
US6852287B2 (en) | 2001-09-12 | 2005-02-08 | Handylab, Inc. | Microfluidic devices having a reduced number of input and output connections |
US7323140B2 (en) | 2001-03-28 | 2008-01-29 | Handylab, Inc. | Moving microdroplets in a microfluidic device |
US7010391B2 (en) | 2001-03-28 | 2006-03-07 | Handylab, Inc. | Methods and systems for control of microfluidic devices |
US7829025B2 (en) | 2001-03-28 | 2010-11-09 | Venture Lending & Leasing Iv, Inc. | Systems and methods for thermal actuation of microfluidic devices |
WO2005011867A2 (en) | 2003-07-31 | 2005-02-10 | Handylab, Inc. | Processing particle-containing samples |
US8852862B2 (en) | 2004-05-03 | 2014-10-07 | Handylab, Inc. | Method for processing polynucleotide-containing samples |
ES2553097T3 (es) | 2004-05-03 | 2015-12-04 | Handylab, Inc. | Procesamiento de muestras que contienen polinucleótidos |
US7998708B2 (en) * | 2006-03-24 | 2011-08-16 | Handylab, Inc. | Microfluidic system for amplifying and detecting polynucleotides in parallel |
US8883490B2 (en) | 2006-03-24 | 2014-11-11 | Handylab, Inc. | Fluorescence detector for microfluidic diagnostic system |
US11806718B2 (en) | 2006-03-24 | 2023-11-07 | Handylab, Inc. | Fluorescence detector for microfluidic diagnostic system |
US8088616B2 (en) | 2006-03-24 | 2012-01-03 | Handylab, Inc. | Heater unit for microfluidic diagnostic system |
WO2007112114A2 (en) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Handylab, Inc. | Integrated system for processing microfluidic samples, and method of using same |
US10900066B2 (en) | 2006-03-24 | 2021-01-26 | Handylab, Inc. | Microfluidic system for amplifying and detecting polynucleotides in parallel |
EP2091647A2 (en) | 2006-11-14 | 2009-08-26 | Handylab, Inc. | Microfluidic system for amplifying and detecting polynucleotides in parallel |
US9186677B2 (en) | 2007-07-13 | 2015-11-17 | Handylab, Inc. | Integrated apparatus for performing nucleic acid extraction and diagnostic testing on multiple biological samples |
US20090136385A1 (en) | 2007-07-13 | 2009-05-28 | Handylab, Inc. | Reagent Tube |
US8324372B2 (en) * | 2007-07-13 | 2012-12-04 | Handylab, Inc. | Polynucleotide capture materials, and methods of using same |
US9618139B2 (en) | 2007-07-13 | 2017-04-11 | Handylab, Inc. | Integrated heater and magnetic separator |
US8287820B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-10-16 | Handylab, Inc. | Automated pipetting apparatus having a combined liquid pump and pipette head system |
US8182763B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-05-22 | Handylab, Inc. | Rack for sample tubes and reagent holders |
US8105783B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-01-31 | Handylab, Inc. | Microfluidic cartridge |
US8133671B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-03-13 | Handylab, Inc. | Integrated apparatus for performing nucleic acid extraction and diagnostic testing on multiple biological samples |
USD621060S1 (en) | 2008-07-14 | 2010-08-03 | Handylab, Inc. | Microfluidic cartridge |
USD618820S1 (en) | 2008-07-11 | 2010-06-29 | Handylab, Inc. | Reagent holder |
USD787087S1 (en) | 2008-07-14 | 2017-05-16 | Handylab, Inc. | Housing |
TWI429475B (zh) * | 2009-10-30 | 2014-03-11 | Rbc Bioscience Corp | 一體式反應匣 |
EP2388324A1 (de) * | 2010-05-20 | 2011-11-23 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Kontrollmaterial für Nukleinsäureteste |
EP2576060A1 (en) * | 2010-06-01 | 2013-04-10 | Streck Inc. | Sample processing method and device |
US9475709B2 (en) | 2010-08-25 | 2016-10-25 | Lockheed Martin Corporation | Perforated graphene deionization or desalination |
GB201100152D0 (en) | 2011-01-06 | 2011-02-23 | Epistem Ltd | Genedrive RFID |
US8597884B2 (en) | 2011-03-09 | 2013-12-03 | Becton, Dickinson And Company | Process controls for molecular assay |
WO2012142516A1 (en) | 2011-04-15 | 2012-10-18 | Becton, Dickinson And Company | Scanning real-time microfluidic thermo-cycler and methods for synchronized thermocycling and scanning optical detection |
CN203941178U (zh) * | 2011-05-20 | 2014-11-12 | 珀金埃尔默保健科学公司 | 实验室部件和液体装卸系统及辅助性可流动材料装卸系统 |
US9720406B2 (en) * | 2011-08-15 | 2017-08-01 | Endress+Hauser Conducta Gmbh+Co. Kg | Measuring system |
USD692162S1 (en) | 2011-09-30 | 2013-10-22 | Becton, Dickinson And Company | Single piece reagent holder |
ES2825905T3 (es) | 2011-09-30 | 2021-05-17 | Becton Dickinson Co | Tira reactiva unificada |
WO2013067202A1 (en) | 2011-11-04 | 2013-05-10 | Handylab, Inc. | Polynucleotide sample preparation device |
CN107881219B (zh) | 2012-02-03 | 2021-09-10 | 贝克顿·迪金森公司 | 用于分子诊断测试分配和测试之间兼容性确定的外部文件 |
US11648561B2 (en) | 2012-02-13 | 2023-05-16 | Neumodx Molecular, Inc. | System and method for processing and detecting nucleic acids |
US11485968B2 (en) | 2012-02-13 | 2022-11-01 | Neumodx Molecular, Inc. | Microfluidic cartridge for processing and detecting nucleic acids |
CN104254595A (zh) | 2012-02-13 | 2014-12-31 | 纽莫德克斯莫勒库拉尔公司 | 用于处理和检测核酸的微流体盒 |
US9637775B2 (en) | 2012-02-13 | 2017-05-02 | Neumodx Molecular, Inc. | System and method for processing biological samples |
US9604213B2 (en) | 2012-02-13 | 2017-03-28 | Neumodx Molecular, Inc. | System and method for processing and detecting nucleic acids |
BR112014025384B1 (pt) | 2012-04-13 | 2022-01-25 | Becton, Dickinson And Company | Sistema e métodos para executar ensaio automatizado e teste reflexivo em amostras a partir dos respectivos exemplares |
US10118130B2 (en) | 2016-04-14 | 2018-11-06 | Lockheed Martin Corporation | Two-dimensional membrane structures having flow passages |
US9834809B2 (en) | 2014-02-28 | 2017-12-05 | Lockheed Martin Corporation | Syringe for obtaining nano-sized materials for selective assays and related methods of use |
US9610546B2 (en) | 2014-03-12 | 2017-04-04 | Lockheed Martin Corporation | Separation membranes formed from perforated graphene and methods for use thereof |
US9744617B2 (en) | 2014-01-31 | 2017-08-29 | Lockheed Martin Corporation | Methods for perforating multi-layer graphene through ion bombardment |
US10653824B2 (en) | 2012-05-25 | 2020-05-19 | Lockheed Martin Corporation | Two-dimensional materials and uses thereof |
US10980919B2 (en) | 2016-04-14 | 2021-04-20 | Lockheed Martin Corporation | Methods for in vivo and in vitro use of graphene and other two-dimensional materials |
WO2014066376A1 (en) | 2012-10-25 | 2014-05-01 | Neumodx Molecular, Inc. | Method and materials for isolation of nucleic acid materials |
EP2972353B1 (en) * | 2013-03-11 | 2023-02-22 | Meso Scale Technologies, LLC | Improved methods for conducting multiplexed assays |
TW201504140A (zh) | 2013-03-12 | 2015-02-01 | Lockheed Corp | 形成具有均勻孔尺寸之多孔石墨烯之方法 |
AU2013202778A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Gen-Probe Incorporated | Systems, methods, and apparatuses for performing automated reagent-based assays |
US9994916B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-06-12 | Becton, Dickinson And Company | Detection of neisseria gonorrhoeaes |
GB201304797D0 (en) | 2013-03-15 | 2013-05-01 | Diagnostics For The Real World Ltd | Apparatus and method for automated sample preparation and adaptor for use in the apparatus |
US9572918B2 (en) | 2013-06-21 | 2017-02-21 | Lockheed Martin Corporation | Graphene-based filter for isolating a substance from blood |
SG11201606287VA (en) | 2014-01-31 | 2016-08-30 | Lockheed Corp | Processes for forming composite structures with a two-dimensional material using a porous, non-sacrificial supporting layer |
KR20160142820A (ko) | 2014-01-31 | 2016-12-13 | 록히드 마틴 코포레이션 | 브로드 이온 필드를 사용한 2차원 물질 천공 |
WO2015138771A1 (en) | 2014-03-12 | 2015-09-17 | Lockheed Martin Corporation | Separation membranes formed from perforated graphene |
USD814653S1 (en) | 2014-08-07 | 2018-04-03 | Becton, Dickinson And Company | Sample tube holder and components thereof |
CN107073408A (zh) | 2014-09-02 | 2017-08-18 | 洛克希德马丁公司 | 基于二维膜材料的血液透析膜和血液过滤膜及其应用方法 |
DK3286323T3 (da) | 2015-04-24 | 2023-03-13 | Becton Dickinson Co | Multipleks detektion af bakteriel vaginose |
WO2017023376A1 (en) | 2015-08-05 | 2017-02-09 | Lockheed Martin Corporation | Perforatable sheets of graphene-based material |
JP2018530499A (ja) | 2015-08-06 | 2018-10-18 | ロッキード・マーチン・コーポレーション | グラフェンのナノ粒子変性及び穿孔 |
US10351893B2 (en) | 2015-10-05 | 2019-07-16 | GeneWeave Biosciences, Inc. | Reagent cartridge for detection of cells |
JP1565699S (ja) * | 2016-01-12 | 2016-12-19 | ||
US11155773B2 (en) | 2016-01-26 | 2021-10-26 | Nutech Ventures | Expedited PCR with stirring |
US20180135040A1 (en) | 2016-02-16 | 2018-05-17 | Life Magnetics, Inc. | Methods for separating nucleic acids with graphene coated magnetic beads |
SG11201808961QA (en) | 2016-04-14 | 2018-11-29 | Lockheed Corp | Methods for in situ monitoring and control of defect formation or healing |
WO2017180135A1 (en) | 2016-04-14 | 2017-10-19 | Lockheed Martin Corporation | Membranes with tunable selectivity |
EP3442739A4 (en) | 2016-04-14 | 2020-03-04 | Lockheed Martin Corporation | PROCESS FOR PROCESSING GRAPHENE SHEETS FOR LARGE SCALE TRANSFER USING A FREE FLOATING PROCESS |
WO2017180141A1 (en) | 2016-04-14 | 2017-10-19 | Lockheed Martin Corporation | Selective interfacial mitigation of graphene defects |
USD814652S1 (en) * | 2016-10-14 | 2018-04-03 | Spartan Bioscience In. | Cartridge |
FR3058734B1 (fr) * | 2016-11-15 | 2020-10-30 | Biomerieux Sa | Systeme et procede d’extraction pour extraire des micro-organismes contenus dans un echantillon |
US11077444B2 (en) * | 2017-05-23 | 2021-08-03 | Roche Molecular Systems, Inc. | Packaging for a molecular diagnostic cartridge |
USD836210S1 (en) * | 2017-07-14 | 2018-12-18 | Nipro Corporation | Cell preservation container |
US10816565B2 (en) * | 2017-12-08 | 2020-10-27 | Michael Doran | Test tube removal device and system |
JP1606642S (ja) * | 2017-12-14 | 2018-06-11 | ||
WO2019141779A1 (en) * | 2018-01-18 | 2019-07-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Hypercrosslinking with diamine crosslinkers |
USD907797S1 (en) * | 2019-06-19 | 2021-01-12 | Life Technologies Corporation | Reagent strip |
US11465145B2 (en) * | 2020-09-18 | 2022-10-11 | Microgem International Plc | Method and system for sample collection, storage, preparation and detection |
WO2022095924A1 (en) | 2020-11-05 | 2022-05-12 | Becton, Dickinson And Company | Multiplex detection of bacterial respiratory pathogens |
WO2022095922A1 (en) | 2020-11-05 | 2022-05-12 | Becton, Dickinson And Company | Rapid identification and typing of vibrio parahaemolyticus |
CN116507742A (zh) | 2020-11-05 | 2023-07-28 | 贝克顿迪金森公司 | 霍乱弧菌的多重检测和分型 |
USD998172S1 (en) * | 2021-03-12 | 2023-09-05 | Ultima Genomics, Inc. | Sample rack |
WO2023084369A1 (en) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 | 3M Innovative Properties Company | Method of processing polynucleic acids |
WO2023084370A1 (en) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 | 3M Innovative Properties Company | Solid support comprising ligands suitable for polynucleic acid processing, articles and methods |
KR102505472B1 (ko) * | 2022-09-05 | 2023-03-06 | 주식회사 제놀루션 | 핵산 포획용 자성 입자 및 이를 이용한 핵산 포획 또는 선별 방법 |
Family Cites Families (1046)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1434314A (en) | 1921-08-04 | 1922-10-31 | Raich Anthony | Lunch pail |
US1616419A (en) | 1925-04-03 | 1927-02-01 | Everlasting Valve Co | Automatic shut-off device for gas in case of fire |
US1733401A (en) | 1928-03-29 | 1929-10-29 | Christman Matthias | Journal box |
NL109202C (ja) | 1959-11-20 | |||
GB1095429A (ja) | 1965-05-17 | |||
US3528449A (en) | 1968-02-27 | 1970-09-15 | Trw Inc | Fluid flow control apparatus |
US3813316A (en) | 1972-06-07 | 1974-05-28 | Gen Electric | Microorganisms having multiple compatible degradative energy-generating plasmids and preparation thereof |
US4038192A (en) | 1973-12-03 | 1977-07-26 | International Biomedical Laboratories, Inc. | Device for exchange between fluids suitable for treatment of blood |
US3985649A (en) | 1974-11-25 | 1976-10-12 | Eddelman Roy T | Ferromagnetic separation process and material |
JPS5255578A (en) | 1975-10-31 | 1977-05-07 | Hitachi Ltd | Analyzing apparatus |
US4018652A (en) | 1976-01-09 | 1977-04-19 | Mcdonnell Douglas Corporation | Process and apparatus for ascertaining the concentration of microorganism in a water specimen |
US4018089A (en) | 1976-05-05 | 1977-04-19 | Beckman Instruments, Inc. | Fluid sampling apparatus |
USD249706S (en) | 1976-12-17 | 1978-09-26 | Eastman Kodak Company | Sample cup tray for chemical analysis of biological fluids |
USD252157S (en) | 1977-04-14 | 1979-06-19 | Warner-Lambert Company | Diagnostic device for measuring biochemical characteristics of microorganisms and the like |
USD252341S (en) | 1977-05-12 | 1979-07-10 | Ryder International Corporation | Testing tray |
JPS5416896A (en) | 1977-06-21 | 1979-02-07 | Asahi Medical Co | Blood dialyser |
US4139005A (en) | 1977-09-01 | 1979-02-13 | Dickey Gilbert C | Safety release pipe cap |
USD254687S (en) | 1979-01-25 | 1980-04-08 | Mcdonnell Douglas Corporation | Biochemical card for use with an automated microbial identification machine |
USD261173S (en) | 1979-02-05 | 1981-10-06 | American Optical Corporation | Bilirubinometer |
USD261033S (en) | 1979-02-05 | 1981-09-29 | American Optical Corporation | Bilirubin concentration analyzer |
US4301412A (en) | 1979-10-29 | 1981-11-17 | United States Surgical Corporation | Liquid conductivity measuring system and sample cards therefor |
JPS5766361A (en) | 1980-10-09 | 1982-04-22 | Olympus Optical Co Ltd | Plate-shaped apparatus for judging cohesion of particle |
US4472357A (en) | 1981-11-18 | 1984-09-18 | Medical Laboratory Automation, Inc. | Blood bank cuvette cassette and label therefor |
US4457329A (en) | 1981-12-04 | 1984-07-03 | Air Products And Chemicals, Inc. | Safety pressure regulator |
JPS58212921A (ja) | 1982-06-04 | 1983-12-10 | Aron Kasei Co Ltd | プラスチツクス中空成形物の成形方法 |
USD279817S (en) | 1982-07-19 | 1985-07-23 | Daryl Laboratories, Inc. | Immunoassay test slide |
US4504582A (en) | 1982-07-20 | 1985-03-12 | Genex Corporation | Vermiculite as a carrier support for immobilized biological materials |
US4439526A (en) | 1982-07-26 | 1984-03-27 | Eastman Kodak Company | Clustered ingress apertures for capillary transport devices and method of use |
EP0105194B1 (de) | 1982-09-02 | 1988-05-25 | Firma Andreas Hettich | Zentrifugationskammern zur zytodiagnostischen Präparation von Epithelzellen und deren Verwendung |
US4647432A (en) | 1982-11-30 | 1987-03-03 | Japan Tectron Instruments Corporation Tokuyama Soda Kabushiki Kaisha | Automatic analysis apparatus |
US4994373A (en) | 1983-01-27 | 1991-02-19 | Enzo Biochem, Inc. | Method and structures employing chemically-labelled polynucleotide probes |
USD282208S (en) | 1983-02-07 | 1986-01-14 | Data Packaging Corporation | Pipetter tip cartridge |
US4698302A (en) | 1983-05-12 | 1987-10-06 | Advanced Magnetics, Inc. | Enzymatic reactions using magnetic particles |
US4522786A (en) | 1983-08-10 | 1985-06-11 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Multilayered test device for detecting analytes in liquid test samples |
US4673657A (en) | 1983-08-26 | 1987-06-16 | The Regents Of The University Of California | Multiple assay card and system |
CA1220168A (en) | 1983-09-09 | 1987-04-07 | Henry J. Rahn | Magnetic separator for solid phase immunoassays |
US4599315A (en) | 1983-09-13 | 1986-07-08 | University Of California Regents | Microdroplet test apparatus |
USD292735S (en) | 1983-11-02 | 1987-11-10 | A/S Nunc | Tube for the immunological adsorption analysis |
US4724207A (en) | 1984-02-02 | 1988-02-09 | Cuno Incorporated | Modified siliceous chromatographic supports |
US4654127A (en) | 1984-04-11 | 1987-03-31 | Sentech Medical Corporation | Self-calibrating single-use sensing device for clinical chemistry and method of use |
JP2502961B2 (ja) | 1984-04-26 | 1996-05-29 | 日本碍子株式会社 | 電気化学的装置の製造方法 |
USD288478S (en) | 1984-06-21 | 1987-02-24 | Sentech Medical Corporation | Clinical chemistry analyzer |
DE3688029T2 (de) | 1985-03-13 | 1993-06-24 | Baxter Int | Sammlungssystem fuer blutplaettchen. |
US4965188A (en) | 1986-08-22 | 1990-10-23 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4612959A (en) | 1985-05-07 | 1986-09-23 | Mobil Oil Corporation | Valveless shut-off and transfer device |
US4720374A (en) | 1985-07-22 | 1988-01-19 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Container having a sonication compartment |
US4963498A (en) | 1985-08-05 | 1990-10-16 | Biotrack | Capillary flow device |
US4795698A (en) | 1985-10-04 | 1989-01-03 | Immunicon Corporation | Magnetic-polymer particles |
US4678752A (en) | 1985-11-18 | 1987-07-07 | Becton, Dickinson And Company | Automatic random access analyzer |
US4871779A (en) * | 1985-12-23 | 1989-10-03 | The Dow Chemical Company | Ion exchange/chelation resins containing dense star polymers having ion exchange or chelate capabilities |
JPS62119460U (ja) | 1986-01-22 | 1987-07-29 | ||
JPH0720010B2 (ja) | 1986-03-05 | 1995-03-06 | 沖電気工業株式会社 | 円偏波変形ビ−ムアンテナ |
DE3614955C1 (de) | 1986-05-02 | 1987-08-06 | Schulz Peter | Proben-Verteiler-System |
US4978622A (en) | 1986-06-23 | 1990-12-18 | Regents Of The University Of California | Cytophaga-derived immunopotentiator |
US4889818A (en) | 1986-08-22 | 1989-12-26 | Cetus Corporation | Purified thermostable enzyme |
US5763262A (en) | 1986-09-18 | 1998-06-09 | Quidel Corporation | Immunodiagnostic device |
USD302294S (en) | 1986-10-03 | 1989-07-18 | Biotrack, Inc. | Reagent cartridge for blood analysis |
US4935342A (en) | 1986-12-01 | 1990-06-19 | Syngene, Inc. | Method of isolating and purifying nucleic acids from biological samples |
US4978502A (en) | 1987-01-05 | 1990-12-18 | Dole Associates, Inc. | Immunoassay or diagnostic device and method of manufacture |
US5004583A (en) | 1987-01-29 | 1991-04-02 | Medtest Systems, Inc. | Universal sensor cartridge for use with a universal analyzer for sensing components in a multicomponent fluid |
US4946562A (en) | 1987-01-29 | 1990-08-07 | Medtest Systems, Inc. | Apparatus and methods for sensing fluid components |
US4997772A (en) | 1987-09-18 | 1991-03-05 | Eastman Kodak Company | Water-insoluble particle and immunoreactive reagent, analytical elements and methods of use |
ES2054797T3 (es) | 1987-03-02 | 1994-08-16 | Gen Probe Inc | Soportes policationicos para purificar, separar e hibridar acidos nucleicos. |
US5599667A (en) | 1987-03-02 | 1997-02-04 | Gen-Probe Incorporated | Polycationic supports and nucleic acid purification separation and hybridization |
US4855110A (en) | 1987-05-06 | 1989-08-08 | Abbott Laboratories | Sample ring for clinical analyzer network |
US5001417A (en) | 1987-06-01 | 1991-03-19 | Abbott Laboratories | Apparatus for measuring electrolytes utilizing optical signals related to the concentration of the electrolytes |
US5192507A (en) | 1987-06-05 | 1993-03-09 | Arthur D. Little, Inc. | Receptor-based biosensors |
JPH0354470Y2 (ja) | 1987-07-15 | 1991-12-02 | ||
EP0367795A4 (en) | 1987-07-16 | 1992-01-15 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Affinity separating using immobilized flocculating reagents |
US4827944A (en) | 1987-07-22 | 1989-05-09 | Becton, Dickinson And Company | Body fluid sample collection tube composite |
GB8720470D0 (en) | 1987-08-29 | 1987-10-07 | Emi Plc Thorn | Sensor arrangements |
US4921809A (en) | 1987-09-29 | 1990-05-01 | Findley Adhesives, Inc. | Polymer coated solid matrices and use in immunoassays |
USD312692S (en) | 1987-10-09 | 1990-12-04 | Bradley Marshall C | Pipette holder |
US4914710A (en) | 1987-11-20 | 1990-04-03 | Storage Technology Corporation | MICR document smear test machine |
US4902624A (en) | 1987-11-23 | 1990-02-20 | Eastman Kodak Company | Temperature cycling cuvette |
USD310413S (en) | 1987-12-17 | 1990-09-04 | Miles Inc. | Sample processor |
US4895650A (en) | 1988-02-25 | 1990-01-23 | Gen-Probe Incorporated | Magnetic separation rack for diagnostic assays |
JPH01219669A (ja) | 1988-02-29 | 1989-09-01 | Shimadzu Corp | 液体試料容器の類別検出方法 |
US5503803A (en) | 1988-03-28 | 1996-04-02 | Conception Technologies, Inc. | Miniaturized biological assembly |
DE3811713A1 (de) | 1988-04-08 | 1989-10-19 | Bosch Gmbh Robert | Planare polarographische sonde zur bestimmung des (lambda)-wertes von gasgemischen |
US5700637A (en) | 1988-05-03 | 1997-12-23 | Isis Innovation Limited | Apparatus and method for analyzing polynucleotide sequences and method of generating oligonucleotide arrays |
US4919892A (en) | 1988-06-07 | 1990-04-24 | Plumb Arnold D | Apparatus for detecting oil and other lighter-than-water contaminants in an effluent stream |
US5096669A (en) | 1988-09-15 | 1992-03-17 | I-Stat Corporation | Disposable sensing device for real time fluid analysis |
US5060823A (en) | 1988-09-15 | 1991-10-29 | Brandeis University | Sterile transfer system |
US6147198A (en) | 1988-09-15 | 2000-11-14 | New York University | Methods and compositions for the manipulation and characterization of individual nucleic acid molecules |
DE8813340U1 (ja) | 1988-10-24 | 1988-12-08 | Laboratorium Prof. Dr. Rudolf Berthold, 7547 Wildbad, De | |
JPH0814337B2 (ja) | 1988-11-11 | 1996-02-14 | 株式会社日立製作所 | 流体自体の相変化を利用した流路の開閉制御弁及び開閉制御方法 |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US4919829A (en) | 1988-12-30 | 1990-04-24 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Commerce | Aluminum hydroxides as solid lubricants |
US5229297A (en) | 1989-02-03 | 1993-07-20 | Eastman Kodak Company | Containment cuvette for PCR and method of use |
US4948561A (en) | 1989-02-09 | 1990-08-14 | Eastman Kodak Company | Multiple level filter device and kit containing same |
US5053199A (en) | 1989-02-21 | 1991-10-01 | Boehringer Mannheim Corporation | Electronically readable information carrier |
US5416000A (en) | 1989-03-16 | 1995-05-16 | Chemtrak, Inc. | Analyte immunoassay in self-contained apparatus |
US5234809A (en) | 1989-03-23 | 1993-08-10 | Akzo N.V. | Process for isolating nucleic acid |
US6610256B2 (en) | 1989-04-05 | 2003-08-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Image processing and analysis of individual nucleic acid molecules |
FI86229C (fi) | 1989-04-10 | 1992-07-27 | Niilo Kaartinen | Foerfarande foer formning av ett uppvaermbart och nedkylbart element vid ett system behandlande smao vaetskemaengder samt ett medelst foerfarandet framstaellt element. |
US5334499A (en) | 1989-04-17 | 1994-08-02 | Eastman Kodak Company | Methods of extracting, amplifying and detecting a nucleic acid from whole blood or PBMC fraction |
US4949742A (en) | 1989-04-26 | 1990-08-21 | Spectra-Physics, Inc. | Temperature operated gas valve |
US5135872A (en) | 1989-04-28 | 1992-08-04 | Sangstat Medical Corporation | Matrix controlled method of delayed fluid delivery for assays |
US5071531A (en) | 1989-05-01 | 1991-12-10 | Soane Technologies, Inc. | Casting of gradient gels |
US5061336A (en) | 1989-05-01 | 1991-10-29 | Soane Technologies, Inc. | Gel casting method and apparatus |
AU109440S (en) | 1989-05-03 | 1990-10-31 | Bayer Diagnostic G M B H | Diagnostic working station evaluation device |
US5089233A (en) | 1989-06-12 | 1992-02-18 | Eastman Kodak Company | Processing apparatus for a chemical reaction pack |
US5173269A (en) | 1989-06-15 | 1992-12-22 | At&T Bell Laboratories | Apparatus for reducing the reactivity of articles destined for disposal |
USD325638S (en) | 1989-07-10 | 1992-04-21 | Hach Company | Microtester or the like |
USD328794S (en) | 1989-07-19 | 1992-08-18 | Pb Diagnostic Systems, Inc. | Diagnostic instrument or similar article |
AU635314B2 (en) | 1989-09-08 | 1993-03-18 | Terumo Kabushiki Kaisha | Measuring apparatus |
US5126002A (en) | 1989-09-29 | 1992-06-30 | Glory Kogyo Kabushiki Kaisha | Leaf paper bundling apparatus |
US5275787A (en) | 1989-10-04 | 1994-01-04 | Canon Kabushiki Kaisha | Apparatus for separating or measuring particles to be examined in a sample fluid |
LU87601A1 (fr) | 1989-10-05 | 1990-02-07 | Ceodeux Sa | Robinet pour bouteille de gaz |
US5231015A (en) | 1989-10-18 | 1993-07-27 | Eastman Kodak Company | Methods of extracting nucleic acids and pcr amplification without using a proteolytic enzyme |
USD324426S (en) | 1989-10-20 | 1992-03-03 | Pacific Biotech, Inc. | Reaction unit for use in analyzing biological fluids |
US4967950A (en) | 1989-10-31 | 1990-11-06 | International Business Machines Corporation | Soldering method |
US5252743A (en) | 1989-11-13 | 1993-10-12 | Affymax Technologies N.V. | Spatially-addressable immobilization of anti-ligands on surfaces |
US5091328A (en) | 1989-11-21 | 1992-02-25 | National Semiconductor Corporation | Method of late programming MOS devices |
JP2731613B2 (ja) | 1989-12-12 | 1998-03-25 | 株式会社クラレ | 酵素免疫測定用カートリツジ、それを用いた測定方法及び測定装置 |
US5279936A (en) | 1989-12-22 | 1994-01-18 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method of separation employing magnetic particles and second medium |
USD328135S (en) | 1990-01-12 | 1992-07-21 | Pacific Biotech, Inc. | Reaction unit for use in analyzing biological fluids |
US5858188A (en) | 1990-02-28 | 1999-01-12 | Aclara Biosciences, Inc. | Acrylic microchannels and their use in electrophoretic applications |
US6054034A (en) | 1990-02-28 | 2000-04-25 | Aclara Biosciences, Inc. | Acrylic microchannels and their use in electrophoretic applications |
US5770029A (en) | 1996-07-30 | 1998-06-23 | Soane Biosciences | Integrated electrophoretic microdevices |
US5935401A (en) | 1996-09-18 | 1999-08-10 | Aclara Biosciences | Surface modified electrophoretic chambers |
US5126022A (en) | 1990-02-28 | 1992-06-30 | Soane Tecnologies, Inc. | Method and device for moving molecules by the application of a plurality of electrical fields |
US5750015A (en) | 1990-02-28 | 1998-05-12 | Soane Biosciences | Method and device for moving molecules by the application of a plurality of electrical fields |
GB9007791D0 (en) | 1990-04-06 | 1990-06-06 | Foss Richard C | High voltage boosted wordline supply charge pump and regulator for dram |
EP0478753B1 (en) | 1990-04-06 | 1997-07-02 | The Perkin-Elmer Corporation | Automated molecular biology laboratory |
CA2062808A1 (en) | 1990-05-01 | 1991-11-02 | Harry E. Petschek | Integral biomolecule preparation device |
US5667976A (en) | 1990-05-11 | 1997-09-16 | Becton Dickinson And Company | Solid supports for nucleic acid hybridization assays |
US5935522A (en) | 1990-06-04 | 1999-08-10 | University Of Utah Research Foundation | On-line DNA analysis system with rapid thermal cycling |
US5155166A (en) | 1990-06-18 | 1992-10-13 | Eastman Kodak Company | Use of 1-(1-pyrrolidinylcarbonyl)pyridinium salts to attach compounds to carboxylated particles and a kit containing same |
US5147777A (en) | 1990-06-18 | 1992-09-15 | Eastman Kodak Company | Biologically active reagents prepared from carboxy-containing polymer, analytical element and methods of use |
DE4023194A1 (de) | 1990-07-20 | 1992-01-23 | Kodak Ag | Vorrichtung mit mehreren einreihig angeordneten aufnahmen fuer mit fluessigkeit gefuellte behaelter |
US5208163A (en) | 1990-08-06 | 1993-05-04 | Miles Inc. | Self-metering fluid analysis device |
US5147606A (en) | 1990-08-06 | 1992-09-15 | Miles Inc. | Self-metering fluid analysis device |
JPH0734375Y2 (ja) | 1990-09-11 | 1995-08-02 | 株式会社シノテスト | 被検体物質の反応測定検出器具 |
WO1992005443A1 (en) | 1990-09-15 | 1992-04-02 | Medical Research Council | Reagent separation |
US5135627A (en) | 1990-10-15 | 1992-08-04 | Soane Technologies, Inc. | Mosaic microcolumns, slabs, and separation media for electrophoresis and chromatography |
US5652141A (en) | 1990-10-26 | 1997-07-29 | Oiagen Gmbh | Device and process for isolating nucleic acids from cell suspension |
US5141718A (en) | 1990-10-30 | 1992-08-25 | Millipore Corporation | Test plate apparatus |
EP0484278B1 (de) | 1990-11-01 | 1995-04-12 | Ciba-Geigy Ag | Vorrichtung zur Aufbereitung oder Vorbereitung von flüssigen Proben für eine chemische Analyse |
DE59104604D1 (de) | 1990-11-26 | 1995-03-23 | Ciba Geigy Ag | Detektorzelle. |
KR100236506B1 (ko) | 1990-11-29 | 2000-01-15 | 퍼킨-엘머시터스인스트루먼츠 | 폴리머라제 연쇄 반응 수행 장치 |
US6703236B2 (en) | 1990-11-29 | 2004-03-09 | Applera Corporation | Thermal cycler for automatic performance of the polymerase chain reaction with close temperature control |
US5273716A (en) | 1991-01-14 | 1993-12-28 | Electric Power Research Institute, Inc. | pH optrode |
FR2672301A1 (fr) | 1991-02-01 | 1992-08-07 | Larzul Daniel | Procede et dispositif pour amplifier le nombre d'une sequence definie d'acide nucleique dans un echantillon biologique. |
US5466574A (en) | 1991-03-25 | 1995-11-14 | Immunivest Corporation | Apparatus and methods for magnetic separation featuring external magnetic means |
US5384499A (en) | 1991-04-25 | 1995-01-24 | Altera Corporation | High-density erasable programmable logic device architecture using multiplexer interconnections |
US5327038A (en) | 1991-05-09 | 1994-07-05 | Rockwell International Corporation | Walking expansion actuator |
JPH05345900A (ja) | 1991-07-08 | 1993-12-27 | Fuji Oil Co Ltd | 硬質油脂の製造法 |
DE4123348A1 (de) | 1991-07-15 | 1993-01-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Elektrochemisches analysesystem |
USD333522S (en) | 1991-07-23 | 1993-02-23 | P B Diagnostic Systems, Inc. | Sample tube holder |
IT1249433B (it) | 1991-08-06 | 1995-02-23 | Pompeo Moscetta | Procedimento per il dosaggio di analiti in campioni liquidi e relativaapparecchiatura. |
US7297313B1 (en) | 1991-08-31 | 2007-11-20 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated reactor, process for manufacturing the reactor, and method of amplification |
US5474796A (en) | 1991-09-04 | 1995-12-12 | Protogene Laboratories, Inc. | Method and apparatus for conducting an array of chemical reactions on a support surface |
US5256376A (en) | 1991-09-12 | 1993-10-26 | Medical Laboratory Automation, Inc. | Agglutination detection apparatus |
CA2118912C (en) | 1991-10-04 | 1999-04-06 | Melville Douglas Ball | Peelable laminated structures and process for production thereof |
CA2074671A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-05 | Thomas Bormann | Device and method for separating plasma from a biological fluid |
USD347478S (en) | 1991-11-05 | 1994-05-31 | Hybaid Ltd. | Laboratory instrument for handling bimolecular samples |
US5632957A (en) | 1993-11-01 | 1997-05-27 | Nanogen | Molecular biological diagnostic systems including electrodes |
US5787032A (en) | 1991-11-07 | 1998-07-28 | Nanogen | Deoxyribonucleic acid(DNA) optical storage using non-radiative energy transfer between a donor group, an acceptor group and a quencher group |
US5849486A (en) | 1993-11-01 | 1998-12-15 | Nanogen, Inc. | Methods for hybridization analysis utilizing electrically controlled hybridization |
DE69233391D1 (de) | 1991-11-07 | 2004-09-02 | Nanotronics Inc | Hybridisierung von mit Chromophoren und Fluorophoren konjugierten Polynukleotiden zur Erzeugung eines Donor-Donor Energietransfersystems |
US5605662A (en) | 1993-11-01 | 1997-02-25 | Nanogen, Inc. | Active programmable electronic devices for molecular biological analysis and diagnostics |
USD340289S (en) | 1992-01-30 | 1993-10-12 | Jan Gerber | Diagnostic testing material |
US5559432A (en) | 1992-02-27 | 1996-09-24 | Logue; Delmar L. | Joystick generating a polar coordinates signal utilizing a rotating magnetic field within a hollow toroid core |
US5217694A (en) | 1992-03-25 | 1993-06-08 | Gibler W Brian | Holder for evacuated test tubes |
US5646049A (en) | 1992-03-27 | 1997-07-08 | Abbott Laboratories | Scheduling operation of an automated analytical system |
JPH07505297A (ja) | 1992-04-06 | 1995-06-15 | アボツト・ラボラトリーズ | 内面全反射を使用して核酸または被分析物質を検出する方法及び装置 |
US5223226A (en) | 1992-04-14 | 1993-06-29 | Millipore Corporation | Insulated needle for forming an electrospray |
US6235313B1 (en) | 1992-04-24 | 2001-05-22 | Brown University Research Foundation | Bioadhesive microspheres and their use as drug delivery and imaging systems |
US6953676B1 (en) | 1992-05-01 | 2005-10-11 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Mesoscale polynucleotide amplification device and method |
US5587128A (en) | 1992-05-01 | 1996-12-24 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Mesoscale polynucleotide amplification devices |
US5296375A (en) | 1992-05-01 | 1994-03-22 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Mesoscale sperm handling devices |
US5498392A (en) | 1992-05-01 | 1996-03-12 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Mesoscale polynucleotide amplification device and method |
US5726026A (en) | 1992-05-01 | 1998-03-10 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Mesoscale sample preparation device and systems for determination and processing of analytes |
US5637469A (en) | 1992-05-01 | 1997-06-10 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods and apparatus for the detection of an analyte utilizing mesoscale flow systems |
US5486335A (en) | 1992-05-01 | 1996-01-23 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Analysis based on flow restriction |
US5744366A (en) | 1992-05-01 | 1998-04-28 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Mesoscale devices and methods for analysis of motile cells |
US5304487A (en) | 1992-05-01 | 1994-04-19 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Fluid handling in mesoscale analytical devices |
US5401465A (en) | 1992-05-05 | 1995-03-28 | Chiron Corporation | Luminometer with reduced sample crosstalk |
US5364591A (en) | 1992-06-01 | 1994-11-15 | Eastman Kodak Company | Device for moving a target-bearing solid through a liquid for detection while being contained |
US5414245A (en) | 1992-08-03 | 1995-05-09 | Hewlett-Packard Corporation | Thermal-ink heater array using rectifying material |
US5639423A (en) | 1992-08-31 | 1997-06-17 | The Regents Of The University Of Calfornia | Microfabricated reactor |
DE4231966A1 (de) | 1992-09-24 | 1994-03-31 | Bosch Gmbh Robert | Planare polarograhische Sonde zur Bestimmung des Lambda-Wertes von Gasgemischen |
US5338671A (en) | 1992-10-07 | 1994-08-16 | Eastman Kodak Company | DNA amplification with thermostable DNA polymerase and polymerase inhibiting antibody |
US5422271A (en) | 1992-11-20 | 1995-06-06 | Eastman Kodak Company | Nucleic acid material amplification and detection without washing |
US5569364A (en) | 1992-11-05 | 1996-10-29 | Soane Biosciences, Inc. | Separation media for electrophoresis |
US5885432A (en) | 1992-11-05 | 1999-03-23 | Soane Biosciences | Un-crosslinked polymeric media for electrophoresis |
GB9223334D0 (en) | 1992-11-06 | 1992-12-23 | Hybaid Ltd | Magnetic solid phase supports |
US5500187A (en) | 1992-12-08 | 1996-03-19 | Westinghouse Electric Corporation | Disposable optical agglutination assay device and method for use |
US5302348A (en) | 1992-12-10 | 1994-04-12 | Itc Corporation | Blood coagulation time test apparatus and method |
US5311996A (en) | 1993-01-05 | 1994-05-17 | Duffy Thomas J | Edge protector |
DE4334834A1 (de) | 1993-10-13 | 1995-04-20 | Andrzej Dr Ing Grzegorzewski | Biosensor zum Messen von Viskositäts- und/oder Dichteänderungen |
FI932866A0 (fi) | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Labsystems Oy | Separeringsfoerfarande |
JPH0664156U (ja) | 1993-02-16 | 1994-09-09 | 株式会社ニッテク | 血液容器の保持構造 |
USD351913S (en) | 1993-02-25 | 1994-10-25 | Diametrics Medical, Inc. | Disposable electrochemical measurement cartridge for a portable medical analyzer |
US5339486A (en) | 1993-03-10 | 1994-08-23 | Persic Jr William V | Golf ball cleaner |
DE4316023A1 (de) | 1993-05-13 | 1994-11-17 | Basf Ag | Verfahren zur Herstellung von niedrigmolekularen Polymerisaten des 1-Vinylimidazols |
US5565171A (en) | 1993-05-28 | 1996-10-15 | Governors Of The University Of Alberta | Continuous biochemical reactor for analysis of sub-picomole quantities of complex organic molecules |
JP3339650B2 (ja) | 1993-07-02 | 2002-10-28 | 和光純薬工業株式会社 | 液体分注装置 |
ATE208658T1 (de) | 1993-07-28 | 2001-11-15 | Pe Corp Ny | Vorrichtung und verfahren zur nukleinsäurevervielfältigung |
USD356232S (en) | 1993-08-20 | 1995-03-14 | Flair Communications Agency, Inc. | Dual vesselled beverage container |
US5397709A (en) | 1993-08-27 | 1995-03-14 | Becton Dickinson And Company | System for detecting bacterial growth in a plurality of culture vials |
JP2948069B2 (ja) | 1993-09-20 | 1999-09-13 | 株式会社日立製作所 | 化学分析装置 |
US5374395A (en) | 1993-10-14 | 1994-12-20 | Amoco Corporation | Diagnostics instrument |
US5415839A (en) | 1993-10-21 | 1995-05-16 | Abbott Laboratories | Apparatus and method for amplifying and detecting target nucleic acids |
US5645801A (en) | 1993-10-21 | 1997-07-08 | Abbott Laboratories | Device and method for amplifying and detecting target nucleic acids |
EP0653631B1 (de) | 1993-11-11 | 2003-05-14 | Aclara BioSciences, Inc. | Vorrichtung und Verfahren zur elektrophoretischen Trennung von fluiden Substanzgemischen |
DE4343089A1 (de) | 1993-12-17 | 1995-06-29 | Bosch Gmbh Robert | Planares Sensorelement auf Festelektrolytbasis |
DE4408361C2 (de) | 1994-03-14 | 1996-02-01 | Bosch Gmbh Robert | Elektrochemischer Sensor zur Bestimmung der Sauerstoffkonzentration in Gasgemischen |
CA2143365A1 (en) | 1994-03-14 | 1995-09-15 | Hugh V. Cottingham | Nucleic acid amplification method and apparatus |
US5725831A (en) | 1994-03-14 | 1998-03-10 | Becton Dickinson And Company | Nucleic acid amplification apparatus |
WO1995025815A1 (en) | 1994-03-24 | 1995-09-28 | Gamera Bioscience Corporation | A dna meltometer and methods of use thereof |
US5580523A (en) | 1994-04-01 | 1996-12-03 | Bard; Allen J. | Integrated chemical synthesizers |
US5475487A (en) | 1994-04-20 | 1995-12-12 | The Regents Of The University Of California | Aqueous carrier waveguide in a flow cytometer |
USD366116S (en) | 1994-05-03 | 1996-01-09 | Thomas Biskupski | Electrical box for storing dental wax |
DE69527585T2 (de) | 1994-06-08 | 2003-04-03 | Affymetrix Inc | Verfahren und Vorrichtung zum Verpacken von Chips |
DE4420732A1 (de) | 1994-06-15 | 1995-12-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Vorrichtung zur Behandlung von Nukleinsäuren aus einer Probe |
US5514343A (en) | 1994-06-22 | 1996-05-07 | Nunc, As | Microtitration system |
AU2907995A (en) | 1994-06-23 | 1996-01-19 | Dade International Inc. | Method for the rapid isolation of nucleic acid |
FR2722294B1 (fr) | 1994-07-07 | 1996-10-04 | Lyon Ecole Centrale | Procede d'analyse qualitative et/ou quantitative de substances biologiques presentes dans un milieu liquide conducteur et capteurs biochimiques d'affinite utilises pour la mise en oeuvre de ce procede |
CN1069909C (zh) | 1994-07-14 | 2001-08-22 | 特恩杰特有限公司 | 固体喷墨油墨 |
US5639428A (en) | 1994-07-19 | 1997-06-17 | Becton Dickinson And Company | Method and apparatus for fully automated nucleic acid amplification, nucleic acid assay and immunoassay |
US6001229A (en) | 1994-08-01 | 1999-12-14 | Lockheed Martin Energy Systems, Inc. | Apparatus and method for performing microfluidic manipulations for chemical analysis |
CA2156226C (en) | 1994-08-25 | 1999-02-23 | Takayuki Taguchi | Biological fluid analyzing device and method |
US5627041A (en) | 1994-09-02 | 1997-05-06 | Biometric Imaging, Inc. | Disposable cartridge for an assay of a biological sample |
US5582988A (en) | 1994-09-15 | 1996-12-10 | Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, Inc. | Methods for capture and selective release of nucleic acids using weakly basic polymer and amplification of same |
JP3403839B2 (ja) | 1994-10-27 | 2003-05-06 | プレシジョン・システム・サイエンス株式会社 | カートリッジ容器 |
JP3652424B2 (ja) | 1994-10-27 | 2005-05-25 | 日本政策投資銀行 | 自動分析装置及びその方法 |
US5721136A (en) | 1994-11-09 | 1998-02-24 | Mj Research, Inc. | Sealing device for thermal cycling vessels |
US5585069A (en) | 1994-11-10 | 1996-12-17 | David Sarnoff Research Center, Inc. | Partitioned microelectronic and fluidic device array for clinical diagnostics and chemical synthesis |
AU705351B2 (en) | 1994-11-10 | 1999-05-20 | Orchid Biosciences, Inc. | Liquid distribution system |
US5603351A (en) | 1995-06-07 | 1997-02-18 | David Sarnoff Research Center, Inc. | Method and system for inhibiting cross-contamination in fluids of combinatorial chemistry device |
US5632876A (en) | 1995-06-06 | 1997-05-27 | David Sarnoff Research Center, Inc. | Apparatus and methods for controlling fluid flow in microchannels |
US5654141A (en) | 1994-11-18 | 1997-08-05 | Thomas Jefferson University | Amplification based detection of bacterial infection |
GB9425138D0 (en) | 1994-12-12 | 1995-02-08 | Dynal As | Isolation of nucleic acid |
US5731212A (en) | 1994-12-20 | 1998-03-24 | International Technidyne Corporation | Test apparatus and method for testing cuvette accommodated samples |
US5846493A (en) | 1995-02-14 | 1998-12-08 | Promega Corporation | System for analyzing a substance from a solution following filtering of the substance from the solution |
US6884357B2 (en) | 1995-02-21 | 2005-04-26 | Iqbal Waheed Siddiqi | Apparatus and method for processing magnetic particles |
US5683659A (en) | 1995-02-22 | 1997-11-04 | Hovatter; Kenneth R. | Integral assembly of microcentrifuge strip tubes and strip caps |
US5579928A (en) | 1995-03-06 | 1996-12-03 | Anukwuem; Chidi I. | Test tube holder with lock down clamp |
US6967088B1 (en) | 1995-03-16 | 2005-11-22 | Allergan, Inc. | Soluble recombinant botulinum toxin proteins |
US5674394A (en) | 1995-03-24 | 1997-10-07 | Johnson & Johnson Medical, Inc. | Single use system for preparation of autologous plasma |
US5578270A (en) | 1995-03-24 | 1996-11-26 | Becton Dickinson And Company | System for nucleic acid based diagnostic assay |
DE19512368A1 (de) | 1995-04-01 | 1996-10-02 | Boehringer Mannheim Gmbh | System zur Freisetzung und Isolierung von Nukleinsäuren |
US5700429A (en) | 1995-04-19 | 1997-12-23 | Roche Diagnostic Systems, Inc. | Vessel holder for automated analyzer |
USD382346S (en) | 1995-04-19 | 1997-08-12 | Roche Diagnostic Systems, Inc. | Vessel holder |
US5578818A (en) | 1995-05-10 | 1996-11-26 | Molecular Dynamics | LED point scanning system |
US5771902A (en) | 1995-09-25 | 1998-06-30 | Regents Of The University Of California | Micromachined actuators/sensors for intratubular positioning/steering |
DE19519015C1 (de) | 1995-05-24 | 1996-09-05 | Inst Physikalische Hochtech Ev | Miniaturisierter Mehrkammer-Thermocycler |
WO1996039547A2 (en) | 1995-06-01 | 1996-12-12 | The Regents Of The University Of California | Multiple source deposition of shape-memory alloy thin films |
KR19990022214A (ko) | 1995-06-06 | 1999-03-25 | 윌리암 제이. 버크 | 미세 전기도관 제조방법 |
WO1996039208A1 (en) | 1995-06-06 | 1996-12-12 | Quantic Biomedical Partners | Device and method for concentrating plasma |
US6228635B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-05-08 | Aastrom Bioscience, Inc. | Portable cell growth cassette for use in maintaining and growing biological cells |
JP3554612B2 (ja) | 1995-06-12 | 2004-08-18 | マツダ株式会社 | 車両用ロールカーテン |
US6521181B1 (en) | 1995-06-20 | 2003-02-18 | The Regents Of The University Of Calfornia | Microfabricated electrochemiluminescence cell for chemical reaction detection |
US5589136A (en) | 1995-06-20 | 1996-12-31 | Regents Of The University Of California | Silicon-based sleeve devices for chemical reactions |
US6524532B1 (en) | 1995-06-20 | 2003-02-25 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated sleeve devices for chemical reactions |
US5968745A (en) | 1995-06-27 | 1999-10-19 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Polymer-electrodes for detecting nucleic acid hybridization and method of use thereof |
US20020022261A1 (en) | 1995-06-29 | 2002-02-21 | Anderson Rolfe C. | Miniaturized genetic analysis systems and methods |
US5856174A (en) | 1995-06-29 | 1999-01-05 | Affymetrix, Inc. | Integrated nucleic acid diagnostic device |
US6168948B1 (en) | 1995-06-29 | 2001-01-02 | Affymetrix, Inc. | Miniaturized genetic analysis systems and methods |
US6158269A (en) | 1995-07-13 | 2000-12-12 | Bayer Corporation | Method and apparatus for aspirating and dispensing sample fluids |
US5872010A (en) | 1995-07-21 | 1999-02-16 | Northeastern University | Microscale fluid handling system |
JP3927570B2 (ja) | 1995-07-31 | 2007-06-13 | プレシジョン・システム・サイエンス株式会社 | 容器 |
JP3923968B2 (ja) | 1995-07-31 | 2007-06-06 | プレシジョン・システム・サイエンス株式会社 | 容器使用方法 |
US6143250A (en) | 1995-07-31 | 2000-11-07 | Precision System Science Co., Ltd. | Multi-vessel container for testing fluids |
US5849208A (en) | 1995-09-07 | 1998-12-15 | Microfab Technoologies, Inc. | Making apparatus for conducting biochemical analyses |
KR970706902A (ko) | 1995-09-12 | 1997-12-01 | 로드릭 리차드 제이 | Dna 증폭 및 검정 방법 및 장치(device and method for dna amplification and assay) |
US6130098A (en) | 1995-09-15 | 2000-10-10 | The Regents Of The University Of Michigan | Moving microdroplets |
US6911183B1 (en) | 1995-09-15 | 2005-06-28 | The Regents Of The University Of Michigan | Moving microdroplets |
US6057149A (en) | 1995-09-15 | 2000-05-02 | The University Of Michigan | Microscale devices and reactions in microscale devices |
US6048734A (en) | 1995-09-15 | 2000-04-11 | The Regents Of The University Of Michigan | Thermal microvalves in a fluid flow method |
GB9519346D0 (en) | 1995-09-22 | 1995-11-22 | English Glass Company The Limi | Dispensing systems |
US5658515A (en) | 1995-09-25 | 1997-08-19 | Lee; Abraham P. | Polymer micromold and fabrication process |
US5628890A (en) | 1995-09-27 | 1997-05-13 | Medisense, Inc. | Electrochemical sensor |
US20020068357A1 (en) | 1995-09-28 | 2002-06-06 | Mathies Richard A. | Miniaturized integrated nucleic acid processing and analysis device and method |
US6132580A (en) | 1995-09-28 | 2000-10-17 | The Regents Of The University Of California | Miniature reaction chamber and devices incorporating same |
DE69513658T2 (de) | 1995-09-29 | 2000-05-31 | St Microelectronics Srl | Spannungsregler für nichtflüchtige, elektrisch programmierbare Halbleiterspeicheranordnungen |
US5651839A (en) | 1995-10-26 | 1997-07-29 | Queen's University At Kingston | Process for engineering coherent twin and coincident site lattice grain boundaries in polycrystalline materials |
US5705813A (en) | 1995-11-01 | 1998-01-06 | Hewlett-Packard Company | Integrated planar liquid handling system for maldi-TOF MS |
DE19540877C2 (de) | 1995-11-02 | 1998-02-26 | Byk Sangtec Diagnostica | Modulare Reagenzienkartusche |
WO1997016835A1 (en) | 1995-11-03 | 1997-05-09 | David Sarnoff Research Center | Magnet |
JP2002503331A (ja) | 1995-12-05 | 2002-01-29 | ガメラ バイオサイエンス コーポレイション | 機内に搭載された情報科学を備えた超微量液体素子工学システムにおいて液体移動を推進するために求心性加速を使用するための装置及び方法 |
US20010055812A1 (en) | 1995-12-05 | 2001-12-27 | Alec Mian | Devices and method for using centripetal acceleration to drive fluid movement in a microfluidics system with on-board informatics |
US6068751A (en) | 1995-12-18 | 2000-05-30 | Neukermans; Armand P. | Microfluidic valve and integrated microfluidic system |
WO1997022825A1 (en) | 1995-12-18 | 1997-06-26 | Neukermans Armand P | Microfluidic valve and integrated microfluidic system |
US5872481A (en) * | 1995-12-27 | 1999-02-16 | Qualcomm Incorporated | Efficient parallel-stage power amplifier |
USD382647S (en) | 1996-01-17 | 1997-08-19 | Biomerieux Vitek, Inc. | Biochemical test card |
US5631337A (en) | 1996-01-19 | 1997-05-20 | Soane Bioscience | Thermoreversible hydrogels comprising linear copolymers and their use in electrophoresis |
US5883211A (en) | 1996-01-19 | 1999-03-16 | Aclara Biosciences, Inc. | Thermoreversible hydrogels comprising linear copolymers and their use in electrophoresis |
US5863502A (en) | 1996-01-24 | 1999-01-26 | Sarnoff Corporation | Parallel reaction cassette and associated devices |
US5726944A (en) | 1996-02-05 | 1998-03-10 | Motorola, Inc. | Voltage regulator for regulating an output voltage from a charge pump and method therefor |
US5981735A (en) | 1996-02-12 | 1999-11-09 | Cobra Therapeutics Limited | Method of plasmid DNA production and purification |
US5736102A (en) | 1996-02-21 | 1998-04-07 | Biomerieux Vitek, Inc. | Test sample positioning system |
AU715627B2 (en) | 1996-02-21 | 2000-02-03 | Biomerieux Vitek, Inc. | Automatic sample testing machine |
USD378782S (en) | 1996-03-01 | 1997-04-08 | Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, Inc. | Processor for nucleic acid detection |
US5849598A (en) | 1996-03-15 | 1998-12-15 | Washington University | Method for transferring micro quantities of liquid samples to discrete locations |
JP3316574B2 (ja) | 1996-03-25 | 2002-08-19 | ダイアシス コーポレーション | 人体物質の流体サンプルの取扱装置及び方法 |
US6114122A (en) | 1996-03-26 | 2000-09-05 | Affymetrix, Inc. | Fluidics station with a mounting system and method of using |
US5844238A (en) | 1996-03-27 | 1998-12-01 | David Sarnoff Research Center, Inc. | Infrared imager using room temperature capacitance sensor |
US7244622B2 (en) | 1996-04-03 | 2007-07-17 | Applera Corporation | Device and method for multiple analyte detection |
US7235406B1 (en) | 1996-04-03 | 2007-06-26 | Applera Corporation | Nucleic acid analysis device |
US5788814A (en) | 1996-04-09 | 1998-08-04 | David Sarnoff Research Center | Chucks and methods for positioning multiple objects on a substrate |
US6399023B1 (en) | 1996-04-16 | 2002-06-04 | Caliper Technologies Corp. | Analytical system and method |
US5885470A (en) | 1997-04-14 | 1999-03-23 | Caliper Technologies Corporation | Controlled fluid transport in microfabricated polymeric substrates |
US5942443A (en) | 1996-06-28 | 1999-08-24 | Caliper Technologies Corporation | High throughput screening assay systems in microscale fluidic devices |
US5671303A (en) | 1996-04-17 | 1997-09-23 | Motorola, Inc. | Molecular detection apparatus and method using optical waveguide detection |
US5948363A (en) | 1996-04-22 | 1999-09-07 | Gaillard; Patrick | Micro-well strip with print tabs |
US6001307A (en) | 1996-04-26 | 1999-12-14 | Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. | Device for analyzing a sample |
US6221672B1 (en) | 1996-04-30 | 2001-04-24 | Medtronic, Inc. | Method for determining platelet inhibitor response |
US6054277A (en) | 1996-05-08 | 2000-04-25 | Regents Of The University Of Minnesota | Integrated microchip genetic testing system |
US6180950B1 (en) * | 1996-05-14 | 2001-01-30 | Don Olsen | Micro heating apparatus for synthetic fibers |
JPH09304385A (ja) | 1996-05-14 | 1997-11-28 | Shionogi & Co Ltd | 磁性粒子分離装置及び物質の分離方法 |
JP3682302B2 (ja) | 1996-05-20 | 2005-08-10 | プレシジョン・システム・サイエンス株式会社 | 分注機による磁性体粒子の制御方法およびその装置 |
US6083762A (en) | 1996-05-31 | 2000-07-04 | Packard Instruments Company | Microvolume liquid handling system |
US5726404A (en) | 1996-05-31 | 1998-03-10 | University Of Washington | Valveless liquid microswitch |
US5939291A (en) | 1996-06-14 | 1999-08-17 | Sarnoff Corporation | Microfluidic method for nucleic acid amplification |
US5914229A (en) | 1996-06-14 | 1999-06-22 | Sarnoff Corporation | Method for amplifying a polynucleotide |
US5912124A (en) | 1996-06-14 | 1999-06-15 | Sarnoff Corporation | Padlock probe detection |
US5863801A (en) | 1996-06-14 | 1999-01-26 | Sarnoff Corporation | Automated nucleic acid isolation |
WO1997048818A1 (en) | 1996-06-17 | 1997-12-24 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Thermocycling apparatus and method |
WO1998000705A1 (en) | 1996-06-28 | 1998-01-08 | Caliper Technologies Corporation | Electropipettor and compensation means for electrophoretic bias |
WO1998000231A1 (en) | 1996-06-28 | 1998-01-08 | Caliper Technologies Corporation | High-throughput screening assay systems in microscale fluidic devices |
US5779868A (en) | 1996-06-28 | 1998-07-14 | Caliper Technologies Corporation | Electropipettor and compensation means for electrophoretic bias |
US5800690A (en) | 1996-07-03 | 1998-09-01 | Caliper Technologies Corporation | Variable control of electroosmotic and/or electrophoretic forces within a fluid-containing structure via electrical forces |
US5699157A (en) | 1996-07-16 | 1997-12-16 | Caliper Technologies Corp. | Fourier detection of species migrating in a microchannel |
US20020053399A1 (en) | 1996-07-30 | 2002-05-09 | Aclara Biosciences, Inc | Methods for fabricating enclosed microchannel structures |
US6074827A (en) | 1996-07-30 | 2000-06-13 | Aclara Biosciences, Inc. | Microfluidic method for nucleic acid purification and processing |
US6558916B2 (en) | 1996-08-02 | 2003-05-06 | Axiom Biotechnologies, Inc. | Cell flow apparatus and method for real-time measurements of patient cellular responses |
US6280967B1 (en) | 1996-08-02 | 2001-08-28 | Axiom Biotechnologies, Inc. | Cell flow apparatus and method for real-time of cellular responses |
US5804436A (en) | 1996-08-02 | 1998-09-08 | Axiom Biotechnologies, Inc. | Apparatus and method for real-time measurement of cellular response |
US5872623A (en) | 1996-09-26 | 1999-02-16 | Sarnoff Corporation | Massively parallel detection |
US5858187A (en) | 1996-09-26 | 1999-01-12 | Lockheed Martin Energy Systems, Inc. | Apparatus and method for performing electrodynamic focusing on a microchip |
US6110343A (en) | 1996-10-04 | 2000-08-29 | Lockheed Martin Energy Research Corporation | Material transport method and apparatus |
JP2001502319A (ja) | 1996-10-15 | 2001-02-20 | 藤沢薬品工業株式会社 | 成長ホルモンの放出を促進するベンズオキセピン誘導体 |
US6500390B1 (en) | 1996-10-17 | 2002-12-31 | David A. Boulton | Method for sealing and venting a microplate assembly |
US5874046A (en) | 1996-10-30 | 1999-02-23 | Raytheon Company | Biological warfare agent sensor system employing ruthenium-terminated oligonucleotides complementary to target live agent DNA sequences |
US6133436A (en) | 1996-11-06 | 2000-10-17 | Sequenom, Inc. | Beads bound to a solid support and to nucleic acids |
USD421653S (en) | 1996-11-18 | 2000-03-14 | Tekmar Company | Housing for a laboratory instrument |
DE19749011A1 (de) | 1996-11-19 | 1998-05-20 | Lang Volker | Mikroventil |
US6447727B1 (en) | 1996-11-19 | 2002-09-10 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic systems |
US6465257B1 (en) | 1996-11-19 | 2002-10-15 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic systems |
US6379929B1 (en) | 1996-11-20 | 2002-04-30 | The Regents Of The University Of Michigan | Chip-based isothermal amplification devices and methods |
USD399959S (en) | 1997-01-24 | 1998-10-20 | Abbott Laboratories | Housing for a device for measuring the concentration of an analyte in a sample of blood |
US5772966A (en) | 1997-01-24 | 1998-06-30 | Maracas; George N. | Assay dispensing apparatus |
USD414271S (en) | 1997-02-03 | 1999-09-21 | Eli Lilly And Company | Reaction vessel for combining chemicals |
US5972694A (en) | 1997-02-11 | 1999-10-26 | Mathus; Gregory | Multi-well plate |
DE19707226A1 (de) | 1997-02-24 | 1998-08-27 | Bodenseewerk Perkin Elmer Co | Lichtabtastvorrichtung |
US5882496A (en) | 1997-02-27 | 1999-03-16 | The Regents Of The University Of California | Porous silicon structures with high surface area/specific pore size |
US8293064B2 (en) | 1998-03-02 | 2012-10-23 | Cepheid | Method for fabricating a reaction vessel |
ES2544455T3 (es) | 1997-02-28 | 2015-08-31 | Cepheid | Montaje para reacción química con intercambio de calor, ópticamente interrogada |
CA2574107C (en) | 1997-02-28 | 2011-08-16 | Cepheid | Heat exchanging, optically interrogated chemical reaction assembly |
US5911737A (en) | 1997-02-28 | 1999-06-15 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated therapeutic actuators |
US5958349A (en) | 1997-02-28 | 1999-09-28 | Cepheid | Reaction vessel for heat-exchanging chemical processes |
US5861563A (en) | 1997-03-20 | 1999-01-19 | Bayer Corporation | Automatic closed tube sampler |
US5964997A (en) | 1997-03-21 | 1999-10-12 | Sarnoff Corporation | Balanced asymmetric electronic pulse patterns for operating electrode-based pumps |
US5747666A (en) | 1997-03-26 | 1998-05-05 | Willis; John P. | Point-of-care analyzer module |
US6235471B1 (en) | 1997-04-04 | 2001-05-22 | Caliper Technologies Corp. | Closed-loop biochemical analyzers |
US6391622B1 (en) | 1997-04-04 | 2002-05-21 | Caliper Technologies Corp. | Closed-loop biochemical analyzers |
US5964995A (en) | 1997-04-04 | 1999-10-12 | Caliper Technologies Corp. | Methods and systems for enhanced fluid transport |
US5993750A (en) | 1997-04-11 | 1999-11-30 | Eastman Kodak Company | Integrated ceramic micro-chemical plant |
DE19717085C2 (de) | 1997-04-23 | 1999-06-17 | Bruker Daltonik Gmbh | Verfahren und Geräte für extrem schnelle DNA-Vervielfachung durch Polymerase-Kettenreaktionen (PCR) |
US5976336A (en) | 1997-04-25 | 1999-11-02 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries |
EP0988529B1 (en) | 1997-04-25 | 2013-06-12 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries |
US5997708A (en) | 1997-04-30 | 1999-12-07 | Hewlett-Packard Company | Multilayer integrated assembly having specialized intermediary substrate |
CA2287962C (en) | 1997-05-02 | 2007-01-02 | Gen-Probe Incorporated | Reaction receptacle apparatus |
AU7477398A (en) | 1997-05-09 | 1998-11-27 | Regents Of The University Of California, The | Peltier-assisted microfabricated reaction chambers for thermal cycling |
US5944717A (en) | 1997-05-12 | 1999-08-31 | The Regents Of The University Of California | Micromachined electrical cauterizer |
US5980719A (en) | 1997-05-13 | 1999-11-09 | Sarnoff Corporation | Electrohydrodynamic receptor |
US6106685A (en) | 1997-05-13 | 2000-08-22 | Sarnoff Corporation | Electrode combinations for pumping fluids |
US6063589A (en) | 1997-05-23 | 2000-05-16 | Gamera Bioscience Corporation | Devices and methods for using centripetal acceleration to drive fluid movement on a microfluidics system |
JP3937107B2 (ja) | 1997-05-23 | 2007-06-27 | 東拓工業株式会社 | 環状凹凸波形管用ベルマウス |
EP1021566A4 (en) | 1997-06-09 | 2002-06-19 | Caliper Techn Corp | DEVICE AND METHOD FOR CORRECTING VARIOUS SPEEDS IN MICROFLUIDIC SYSTEMS |
ATE306324T1 (de) | 1997-06-09 | 2005-10-15 | Hoffmann La Roche | Einweg-analysevorrichtung |
US5869004A (en) | 1997-06-09 | 1999-02-09 | Caliper Technologies Corp. | Methods and apparatus for in situ concentration and/or dilution of materials in microfluidic systems |
US6190619B1 (en) | 1997-06-11 | 2001-02-20 | Argonaut Technologies, Inc. | Systems and methods for parallel synthesis of compounds |
US5900130A (en) | 1997-06-18 | 1999-05-04 | Alcara Biosciences, Inc. | Method for sample injection in microchannel device |
US5882465A (en) | 1997-06-18 | 1999-03-16 | Caliper Technologies Corp. | Method of manufacturing microfluidic devices |
US6425972B1 (en) | 1997-06-18 | 2002-07-30 | Calipher Technologies Corp. | Methods of manufacturing microfabricated substrates |
US5959291A (en) | 1997-06-27 | 1999-09-28 | Caliper Technologies Corporation | Method and apparatus for measuring low power signals |
JP3191150B2 (ja) | 1997-06-30 | 2001-07-23 | 株式会社アステックコーポレーション | 採血管ラック |
US5928161A (en) | 1997-07-03 | 1999-07-27 | The Regents Of The University Of California | Microbiopsy/precision cutting devices |
US6001231A (en) | 1997-07-15 | 1999-12-14 | Caliper Technologies Corp. | Methods and systems for monitoring and controlling fluid flow rates in microfluidic systems |
US5985217A (en) | 1997-07-17 | 1999-11-16 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated instrument for tissue biopsy and analysis |
US5932799A (en) | 1997-07-21 | 1999-08-03 | Ysi Incorporated | Microfluidic analyzer module |
US5827481A (en) | 1997-07-31 | 1998-10-27 | Hewlett-Packard Company | Cartridge system for effecting sample acquisition and introduction |
US5876675A (en) | 1997-08-05 | 1999-03-02 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices and systems |
US5916522A (en) | 1997-08-07 | 1999-06-29 | Careside, Inc. | Electrochemical analytical cartridge |
US5919711A (en) | 1997-08-07 | 1999-07-06 | Careside, Inc. | Analytical cartridge |
US6156199A (en) | 1997-08-11 | 2000-12-05 | Zuk, Jr.; Peter | Centrifugal filtration apparatus |
AU4437602A (en) | 1997-08-13 | 2002-07-11 | Cepheid | Microstructures for the manipulation of fluid samples |
WO1999009042A2 (en) | 1997-08-13 | 1999-02-25 | Cepheid | Microstructures for the manipulation of fluid samples |
AU4437702A (en) | 1997-08-13 | 2002-07-11 | Cepheid | Microstructures for the manipulation of fluid samples |
US6368871B1 (en) | 1997-08-13 | 2002-04-09 | Cepheid | Non-planar microstructures for manipulation of fluid samples |
US5916776A (en) | 1997-08-27 | 1999-06-29 | Sarnoff Corporation | Amplification method for a polynucleotide |
US5989402A (en) | 1997-08-29 | 1999-11-23 | Caliper Technologies Corp. | Controller/detector interfaces for microfluidic systems |
WO1999012016A1 (en) | 1997-09-02 | 1999-03-11 | Caliper Technologies Corporation | Microfluidic system with electrofluidic and electrothermal controls |
US5965410A (en) | 1997-09-02 | 1999-10-12 | Caliper Technologies Corp. | Electrical current for controlling fluid parameters in microchannels |
US6043880A (en) | 1997-09-15 | 2000-03-28 | Becton Dickinson And Company | Automated optical reader for nucleic acid assays |
US6597450B1 (en) | 1997-09-15 | 2003-07-22 | Becton, Dickinson And Company | Automated Optical Reader for Nucleic Acid Assays |
AU744879B2 (en) | 1997-09-19 | 2002-03-07 | Aclara Biosciences, Inc. | Apparatus and method for transferring liquids |
US20020092767A1 (en) | 1997-09-19 | 2002-07-18 | Aclara Biosciences, Inc. | Multiple array microfluidic device units |
US6902703B2 (en) | 1999-05-03 | 2005-06-07 | Ljl Biosystems, Inc. | Integrated sample-processing system |
US5961925A (en) | 1997-09-22 | 1999-10-05 | Bristol-Myers Squibb Company | Apparatus for synthesis of multiple organic compounds with pinch valve block |
US5993611A (en) | 1997-09-24 | 1999-11-30 | Sarnoff Corporation | Capacitive denaturation of nucleic acid |
US6012902A (en) | 1997-09-25 | 2000-01-11 | Caliper Technologies Corp. | Micropump |
DE69839294T2 (de) | 1997-09-29 | 2009-04-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Gerät zur Abscheidung magnetischer Teilchen |
EP1029244A4 (en) | 1997-10-02 | 2003-07-23 | Aclara Biosciences Inc | CAPILLAR ASSAY WITH SEPARATION OF FREE AND TIED SPECIES |
US5842787A (en) | 1997-10-09 | 1998-12-01 | Caliper Technologies Corporation | Microfluidic systems incorporating varied channel dimensions |
US6803019B1 (en) | 1997-10-15 | 2004-10-12 | Aclara Biosciences, Inc. | Laminate microstructure device and method for making same |
US5958694A (en) | 1997-10-16 | 1999-09-28 | Caliper Technologies Corp. | Apparatus and methods for sequencing nucleic acids in microfluidic systems |
US6132684A (en) | 1997-10-31 | 2000-10-17 | Becton Dickinson And Company | Sample tube holder |
EP1030912A4 (en) | 1997-11-14 | 2007-01-10 | California Inst Of Techn | DEVICE FOR CELL SYSE |
US6254826B1 (en) | 1997-11-14 | 2001-07-03 | Gen-Probe Incorporated | Assay work station |
ATE260458T1 (de) | 1997-11-19 | 2004-03-15 | Inoex Gmbh | Einrichtung zur fehlererfassung und/oder wanddickenmessung bei durchlaufenden bändern oder rohren aus kunststoff mit ultraschallsignalen |
US5992820A (en) | 1997-11-19 | 1999-11-30 | Sarnoff Corporation | Flow control in microfluidics devices by controlled bubble formation |
US6174675B1 (en) | 1997-11-25 | 2001-01-16 | Caliper Technologies Corp. | Electrical current for controlling fluid parameters in microchannels |
US6123205A (en) | 1997-11-26 | 2000-09-26 | Bayer Corporation | Sample tube rack |
US6197503B1 (en) | 1997-11-26 | 2001-03-06 | Ut-Battelle, Llc | Integrated circuit biochip microsystem containing lens |
USD413677S (en) | 1997-11-26 | 1999-09-07 | Bayer Corporation | Sample tube rack |
US6258264B1 (en) | 1998-04-10 | 2001-07-10 | Transgenomic, Inc. | Non-polar media for polynucleotide separations |
US6914137B2 (en) | 1997-12-06 | 2005-07-05 | Dna Research Innovations Limited | Isolation of nucleic acids |
DE69839133T2 (de) | 1997-12-06 | 2009-02-05 | Invitrogen Corp., Carlsbad | Isolierung von Nukleinsäuren |
US6074725A (en) | 1997-12-10 | 2000-06-13 | Caliper Technologies Corp. | Fabrication of microfluidic circuits by printing techniques |
DE19755479A1 (de) | 1997-12-13 | 1999-06-17 | Wolfgang Prof Dr Ing Benecke | Miniaturisiertes PCR-System zur Genanalyse |
US5948227A (en) | 1997-12-17 | 1999-09-07 | Caliper Technologies Corp. | Methods and systems for performing electrophoretic molecular separations |
CA2312102C (en) | 1997-12-24 | 2007-09-04 | Cepheid | Integrated fluid manipulation cartridge |
EP1044370B1 (en) | 1997-12-30 | 2017-08-23 | Caliper Life Sciences, Inc. | Software for the display of chromatographic separation data |
US6167910B1 (en) | 1998-01-20 | 2001-01-02 | Caliper Technologies Corp. | Multi-layer microfluidic devices |
JP3551293B2 (ja) | 1998-02-02 | 2004-08-04 | 東洋紡績株式会社 | 核酸抽出装置 |
USD413391S (en) | 1998-02-05 | 1999-08-31 | Bayer Corporation | Test tube sample rack |
US6420143B1 (en) | 1998-02-13 | 2002-07-16 | Caliper Technologies Corp. | Methods and systems for performing superheated reactions in microscale fluidic systems |
US6537432B1 (en) | 1998-02-24 | 2003-03-25 | Target Discovery, Inc. | Protein separation via multidimensional electrophoresis |
US6251343B1 (en) | 1998-02-24 | 2001-06-26 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices and systems incorporating cover layers |
US6756019B1 (en) | 1998-02-24 | 2004-06-29 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices and systems incorporating cover layers |
US6861035B2 (en) | 1998-02-24 | 2005-03-01 | Aurora Discovery, Inc. | Multi-well platforms, caddies, lids and combinations thereof |
US6100541A (en) | 1998-02-24 | 2000-08-08 | Caliper Technologies Corporation | Microfluidic devices and systems incorporating integrated optical elements |
USD417009S (en) | 1998-03-02 | 1999-11-23 | Bayer Corporation | Sample tube rack |
US6369893B1 (en) | 1998-05-19 | 2002-04-09 | Cepheid | Multi-channel optical detection system |
USD428497S (en) | 1998-03-06 | 2000-07-18 | Bayer Corporation | Test tube sample rack |
US6979424B2 (en) | 1998-03-17 | 2005-12-27 | Cepheid | Integrated sample analysis device |
EP1064090B1 (en) | 1998-03-17 | 2003-09-24 | Cepheid | Device for analyzing a sample |
AU764319B2 (en) | 1998-03-17 | 2003-08-14 | Cepheid | Chemical processing device |
US7188001B2 (en) | 1998-03-23 | 2007-03-06 | Cepheid | System and method for temperature control |
AU1357102A (en) | 1998-03-23 | 2002-03-14 | Cepheid | Multi-site reactor system with dynamic independent control of indvidual reaction sites |
JPH11295323A (ja) | 1998-04-13 | 1999-10-29 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 自動分注装置および分注方法 |
US6024920A (en) | 1998-04-21 | 2000-02-15 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Microplate scanning read head |
US7078224B1 (en) | 1999-05-14 | 2006-07-18 | Promega Corporation | Cell concentration and lysate clearance using paramagnetic particles |
EP1614475B1 (en) | 1998-05-01 | 2007-05-30 | Gen-Probe Incorporated | Device for agitating the fluid contents of a container |
JPH11316226A (ja) | 1998-05-06 | 1999-11-16 | Olympus Optical Co Ltd | 自動測定用カートリッジ及び自動測定法 |
US6123798A (en) | 1998-05-06 | 2000-09-26 | Caliper Technologies Corp. | Methods of fabricating polymeric structures incorporating microscale fluidic elements |
US6818437B1 (en) | 1998-05-16 | 2004-11-16 | Applera Corporation | Instrument for monitoring polymerase chain reaction of DNA |
EP1046032A4 (en) | 1998-05-18 | 2002-05-29 | Univ Washington | LIQUID ANALYSIS CARTRIDGE |
EP0964555A1 (de) | 1998-06-04 | 1999-12-15 | Siemens Aktiengesellschaft | Pegelregelung und adaptive Filterung in CAP-Empfängern |
US6274089B1 (en) | 1998-06-08 | 2001-08-14 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices, systems and methods for performing integrated reactions and separations |
US6306590B1 (en) | 1998-06-08 | 2001-10-23 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic matrix localization apparatus and methods |
US6149882A (en) | 1998-06-09 | 2000-11-21 | Symyx Technologies, Inc. | Parallel fixed bed reactor and fluid contacting apparatus |
USD421130S (en) | 1998-06-15 | 2000-02-22 | Bayer Corporation | Sample tube rack |
US7799521B2 (en) | 1998-06-24 | 2010-09-21 | Chen & Chen, Llc | Thermal cycling |
US6780617B2 (en) | 2000-12-29 | 2004-08-24 | Chen & Chen, Llc | Sample processing device and method |
US6375901B1 (en) | 1998-06-29 | 2002-04-23 | Agilent Technologies, Inc. | Chemico-mechanical microvalve and devices comprising the same |
US6787111B2 (en) | 1998-07-02 | 2004-09-07 | Amersham Biosciences (Sv) Corp. | Apparatus and method for filling and cleaning channels and inlet ports in microchips used for biological analysis |
USD420747S (en) | 1998-07-10 | 2000-02-15 | Bayer Corporation | Sample tube rack |
DE19833087A1 (de) | 1998-07-23 | 2000-01-27 | Bosch Gmbh Robert | Gassensor und Verfahren zu dessen Herstellung |
DE19833293C1 (de) | 1998-07-24 | 2000-01-20 | Gunther Botsch | Trennvorrichtung |
US6366924B1 (en) | 1998-07-27 | 2002-04-02 | Caliper Technologies Corp. | Distributed database for analytical instruments |
ATE303598T1 (de) | 1998-07-31 | 2005-09-15 | Tecan Trading Ag | Magnetseparator |
US6540896B1 (en) | 1998-08-05 | 2003-04-01 | Caliper Technologies Corp. | Open-Field serial to parallel converter |
US6316774B1 (en) | 1998-08-18 | 2001-11-13 | Molecular Devices Corporation | Optical system for a scanning fluorometer |
US6236456B1 (en) | 1998-08-18 | 2001-05-22 | Molecular Devices Corporation | Optical system for a scanning fluorometer |
US6740518B1 (en) | 1998-09-17 | 2004-05-25 | Clinical Micro Sensors, Inc. | Signal detection techniques for the detection of analytes |
USD439673S1 (en) | 1998-10-06 | 2001-03-27 | Sorenson Bioscience | Multi-well microcentrifuge tube |
US6958392B2 (en) | 1998-10-09 | 2005-10-25 | Whatman, Inc. | Methods for the isolation of nucleic acids and for quantitative DNA extraction and detection for leukocyte evaluation in blood products |
US6572830B1 (en) | 1998-10-09 | 2003-06-03 | Motorola, Inc. | Integrated multilayered microfludic devices and methods for making the same |
BR9914554A (pt) | 1998-10-13 | 2001-06-26 | Biomicro Systems Inc | Componentes de circuito fluido com base em dinâmica dos fluidos passiva |
US6149787A (en) | 1998-10-14 | 2000-11-21 | Caliper Technologies Corp. | External material accession systems and methods |
US6498497B1 (en) | 1998-10-14 | 2002-12-24 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic controller and detector system with self-calibration |
US6948843B2 (en) | 1998-10-28 | 2005-09-27 | Covaris, Inc. | Method and apparatus for acoustically controlling liquid solutions in microfluidic devices |
US6086740A (en) | 1998-10-29 | 2000-07-11 | Caliper Technologies Corp. | Multiplexed microfluidic devices and systems |
US5973138A (en) | 1998-10-30 | 1999-10-26 | Becton Dickinson And Company | Method for purification and manipulation of nucleic acids using paramagnetic particles |
US6441152B1 (en) | 1998-12-08 | 2002-08-27 | Boston Probes, Inc. | Methods, kits and compositions for the identification of nucleic acids electrostatically bound to matrices |
JP2000180455A (ja) | 1998-12-15 | 2000-06-30 | Sanuki Kogyo Kk | フローインジェクション自動分析装置 |
US6062261A (en) | 1998-12-16 | 2000-05-16 | Lockheed Martin Energy Research Corporation | MicrofluIdic circuit designs for performing electrokinetic manipulations that reduce the number of voltage sources and fluid reservoirs |
US7914994B2 (en) | 1998-12-24 | 2011-03-29 | Cepheid | Method for separating an analyte from a sample |
US6261431B1 (en) | 1998-12-28 | 2001-07-17 | Affymetrix, Inc. | Process for microfabrication of an integrated PCR-CE device and products produced by the same |
CA2358566A1 (en) | 1999-01-08 | 2000-07-13 | Charles S. Vann | Fiber array for contacting chemical species and methods for using and making same |
IT1306964B1 (it) | 1999-01-19 | 2001-10-11 | St Microelectronics Srl | Circuito a boosting capacitivo per la regolazione della tensione dilettura di riga in memorie non-volatili |
US6150119A (en) | 1999-01-19 | 2000-11-21 | Caliper Technologies Corp. | Optimized high-throughput analytical system |
US6416642B1 (en) | 1999-01-21 | 2002-07-09 | Caliper Technologies Corp. | Method and apparatus for continuous liquid flow in microscale channels using pressure injection, wicking, and electrokinetic injection |
US20020019059A1 (en) | 1999-01-28 | 2002-02-14 | Calvin Y.H. Chow | Devices, systems and methods for time domain multiplexing of reagents |
JP4515640B2 (ja) | 1999-02-02 | 2010-08-04 | カリパー・ライフ・サイエンシズ・インク. | タンパク質特性決定方法、装置及びシステム |
US6294063B1 (en) | 1999-02-12 | 2001-09-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and apparatus for programmable fluidic processing |
AU3372800A (en) | 1999-02-23 | 2000-09-14 | Caliper Technologies Corporation | Manipulation of microparticles in microfluidic systems |
US6143547A (en) | 1999-03-02 | 2000-11-07 | Academia Sinica | Cell line derived from Penaeus monodon and a method of growing virus using the same |
US6749814B1 (en) | 1999-03-03 | 2004-06-15 | Symyx Technologies, Inc. | Chemical processing microsystems comprising parallel flow microreactors and methods for using same |
US6171850B1 (en) | 1999-03-08 | 2001-01-09 | Caliper Technologies Corp. | Integrated devices and systems for performing temperature controlled reactions and analyses |
US6326083B1 (en) | 1999-03-08 | 2001-12-04 | Calipher Technologies Corp. | Surface coating for microfluidic devices that incorporate a biopolymer resistant moiety |
US6558945B1 (en) | 1999-03-08 | 2003-05-06 | Aclara Biosciences, Inc. | Method and device for rapid color detection |
US6148508A (en) | 1999-03-12 | 2000-11-21 | Caliper Technologies Corp. | Method of making a capillary for electrokinetic transport of materials |
JP2000266760A (ja) | 1999-03-17 | 2000-09-29 | Hitachi Ltd | 分注装置 |
JP3988306B2 (ja) | 1999-03-25 | 2007-10-10 | 東ソー株式会社 | 自動測定装置 |
EP1826572B1 (en) | 1999-03-25 | 2016-03-23 | Tosoh Corporation | Analyzer with scheduling verification |
US6194563B1 (en) | 1999-03-26 | 2001-02-27 | Vysis, Inc. | Solid phase nucleic acid labeling by transamination |
US6500323B1 (en) | 1999-03-26 | 2002-12-31 | Caliper Technologies Corp. | Methods and software for designing microfluidic devices |
US6783962B1 (en) | 1999-03-26 | 2004-08-31 | Upfront Chromatography | Particulate material for purification of bio-macromolecules |
US6303343B1 (en) | 1999-04-06 | 2001-10-16 | Caliper Technologies Corp. | Inefficient fast PCR |
US6306273B1 (en) | 1999-04-13 | 2001-10-23 | Aclara Biosciences, Inc. | Methods and compositions for conducting processes in microfluidic devices |
US6322683B1 (en) | 1999-04-14 | 2001-11-27 | Caliper Technologies Corp. | Alignment of multicomponent microfabricated structures |
US6942771B1 (en) | 1999-04-21 | 2005-09-13 | Clinical Micro Sensors, Inc. | Microfluidic systems in the electrochemical detection of target analytes |
US20040053290A1 (en) | 2000-01-11 | 2004-03-18 | Terbrueggen Robert Henry | Devices and methods for biochip multiplexing |
CA2270106C (en) | 1999-04-23 | 2006-03-14 | Yousef Haj-Ahmad | Nucleic acid purification and process |
US6773676B2 (en) | 1999-04-27 | 2004-08-10 | Agilent Technologies, Inc. | Devices for performing array hybridization assays and methods of using the same |
CA2371011C (en) | 1999-04-28 | 2009-12-22 | Eidgenossisch Technische Hochschule Zurich | Polyionic coatings in analytic and sensor devices |
US7001725B2 (en) | 1999-04-30 | 2006-02-21 | Aclara Biosciences, Inc. | Kits employing generalized target-binding e-tag probes |
US6555389B1 (en) | 1999-05-11 | 2003-04-29 | Aclara Biosciences, Inc. | Sample evaporative control |
US6458259B1 (en) | 1999-05-11 | 2002-10-01 | Caliper Technologies Corp. | Prevention of surface adsorption in microchannels by application of electric current during pressure-induced flow |
US6838680B2 (en) | 1999-05-12 | 2005-01-04 | Aclara Biosciences, Inc. | Multiplexed fluorescent detection in microfluidic devices |
JP3815969B2 (ja) | 1999-05-12 | 2006-08-30 | アクララ バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | 微量流体デバイスにおける多重方式蛍光検出 |
US6326147B1 (en) | 1999-05-13 | 2001-12-04 | The Perkin-Elmer Corporation | Methods, apparatus, articles of manufacture, and user interfaces for performing automated biological assay preparation and macromolecule purification |
US6310199B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-10-30 | Promega Corporation | pH dependent ion exchange matrix and method of use in the isolation of nucleic acids |
US6592821B1 (en) | 1999-05-17 | 2003-07-15 | Caliper Technologies Corp. | Focusing of microparticles in microfluidic systems |
WO2000070080A1 (en) | 1999-05-17 | 2000-11-23 | Caliper Technologies Corp. | Focusing of microparticles in microfluidic systems |
US6472141B2 (en) | 1999-05-21 | 2002-10-29 | Caliper Technologies Corp. | Kinase assays using polycations |
US6287774B1 (en) | 1999-05-21 | 2001-09-11 | Caliper Technologies Corp. | Assay methods and system |
JP4078073B2 (ja) | 1999-05-28 | 2008-04-23 | シーフィード | 流体試料分析装置および方法 |
US20040200909A1 (en) | 1999-05-28 | 2004-10-14 | Cepheid | Apparatus and method for cell disruption |
ATE401125T1 (de) | 1999-05-28 | 2008-08-15 | Bio Data Corp | Verfahren und vorrichtung zur direkten probenahme eines fluids für die mikrofiltration |
JP4495866B2 (ja) | 1999-05-28 | 2010-07-07 | セフィード | 化学反応を制御するためのカートリッジ |
DE29909529U1 (de) | 1999-06-01 | 1999-08-12 | Festo Ag & Co | Fluidtechnisches Steuergerät |
AU771547B2 (en) * | 1999-06-01 | 2004-03-25 | Regents Of The University Of California, The | Method of sterilizing |
EP1185871A4 (en) | 1999-06-01 | 2003-01-15 | Caliper Techn Corp | MICRO-SCALE ASSAYS AND MICROFLUIDIC DEVICES FOR THE CONTROL OF TRANSPORTER, INDUCED GRADIENT AND BINDING ACTIVITIES |
GB9913275D0 (en) | 1999-06-08 | 1999-08-04 | Dna Research Instr Limited | Sample processing device |
FR2795426A1 (fr) | 1999-06-22 | 2000-12-29 | Commissariat Energie Atomique | Support d'analyse biologique a amplification |
WO2000078455A1 (en) | 1999-06-22 | 2000-12-28 | Tecan Trading Ag | Devices and methods for the performance of miniaturized in vitro amplification assays |
US6706519B1 (en) | 1999-06-22 | 2004-03-16 | Tecan Trading Ag | Devices and methods for the performance of miniaturized in vitro amplification assays |
US6811668B1 (en) | 1999-06-22 | 2004-11-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Apparatus for the operation of a microfluidic device |
US6878540B2 (en) | 1999-06-25 | 2005-04-12 | Cepheid | Device for lysing cells, spores, or microorganisms |
US7306672B2 (en) | 2001-04-06 | 2007-12-11 | California Institute Of Technology | Microfluidic free interface diffusion techniques |
US7601270B1 (en) | 1999-06-28 | 2009-10-13 | California Institute Of Technology | Microfabricated elastomeric valve and pump systems |
AU6068300A (en) | 1999-07-06 | 2001-01-22 | Caliper Technologies Corporation | Microfluidic systems and methods for determining modulator kinetics |
US6353475B1 (en) | 1999-07-12 | 2002-03-05 | Caliper Technologies Corp. | Light source power modulation for use with chemical and biochemical analysis |
ATE411110T1 (de) | 1999-07-19 | 2008-10-15 | Biomerieux Bv | Verfahren zum mengen von magnetteilchen mit einer flüssigkeit |
USD438311S1 (en) | 1999-07-28 | 2001-02-27 | Matsushita Electric Industrial Co.,Ltd. | Strip for blood test |
US6337435B1 (en) | 1999-07-30 | 2002-01-08 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Temperature control for multi-vessel reaction apparatus |
US6242188B1 (en) | 1999-07-30 | 2001-06-05 | Applied Gene Technologies, Inc. | Sample processing to release nucleic acids for direct detection |
US6818060B2 (en) | 1999-08-02 | 2004-11-16 | Emerald Biostructures, Inc. | Robot for mixing crystallization trial matrices |
US6524456B1 (en) | 1999-08-12 | 2003-02-25 | Ut-Battelle, Llc | Microfluidic devices for the controlled manipulation of small volumes |
DE60015254T2 (de) | 1999-08-18 | 2006-02-02 | Becton, Dickinson And Co. | Verschluss bestehend aus einem Stopfen und einer Schutzkappe |
US6495104B1 (en) | 1999-08-19 | 2002-12-17 | Caliper Technologies Corp. | Indicator components for microfluidic systems |
WO2001014931A1 (en) | 1999-08-23 | 2001-03-01 | Mitsubishi Chemical Corporation | Photopolymerizable composition and photopolymerizable lithographic plate |
US6858185B1 (en) | 1999-08-25 | 2005-02-22 | Caliper Life Sciences, Inc. | Dilutions in high throughput systems with a single vacuum source |
US6613581B1 (en) | 1999-08-26 | 2003-09-02 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic analytic detection assays, devices, and integrated systems |
US6613211B1 (en) | 1999-08-27 | 2003-09-02 | Aclara Biosciences, Inc. | Capillary electrokinesis based cellular assays |
US6824663B1 (en) | 1999-08-27 | 2004-11-30 | Aclara Biosciences, Inc. | Efficient compound distribution in microfluidic devices |
US6633785B1 (en) | 1999-08-31 | 2003-10-14 | Kabushiki Kaisha Toshiba | Thermal cycler and DNA amplifier method |
AU7101000A (en) | 1999-09-10 | 2001-04-10 | Caliper Technologies Corporation | Microfabrication methods and devices |
US6906797B1 (en) | 1999-09-13 | 2005-06-14 | Aclara Biosciences, Inc. | Side light activated microfluid channels |
USD466219S1 (en) | 1999-09-13 | 2002-11-26 | Micronic B.V. | Carrier for test-tubes |
DE19945604A1 (de) | 1999-09-23 | 2003-08-07 | Aclara Biosciences Inc | Verfahren zur Verbindung von Werkstücken aus Kunststoff und seine Verwendung in der Mikro- und Nanostrukturtechnik |
US6537771B1 (en) | 1999-10-08 | 2003-03-25 | Caliper Technologies Corp. | Use of nernstein voltage sensitive dyes in measuring transmembrane voltage |
DE19948473A1 (de) | 1999-10-08 | 2001-04-12 | Nmi Univ Tuebingen | Verfahren und Vorrichtung zum Messen an in einer flüssigen Umgebung befindlichen Zellen |
US6221600B1 (en) | 1999-10-08 | 2001-04-24 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Combinatorial oligonucleotide PCR: a method for rapid, global expression analysis |
US6272939B1 (en) | 1999-10-15 | 2001-08-14 | Applera Corporation | System and method for filling a substrate with a liquid sample |
US6232072B1 (en) | 1999-10-15 | 2001-05-15 | Agilent Technologies, Inc. | Biopolymer array inspection |
US6287254B1 (en) | 1999-11-02 | 2001-09-11 | W. Jean Dodds | Animal health diagnosis |
US6908594B1 (en) | 1999-10-22 | 2005-06-21 | Aclara Biosciences, Inc. | Efficient microfluidic sealing |
USD461906S1 (en) | 1999-10-25 | 2002-08-20 | Tuan Hung Pham | Diagnostic test card |
GB2355717A (en) | 1999-10-28 | 2001-05-02 | Amersham Pharm Biotech Uk Ltd | DNA isolation method |
US6300124B1 (en) | 1999-11-02 | 2001-10-09 | Regents Of The University Of Minnesota | Device and method to directly control the temperature of microscope slides |
US6875619B2 (en) | 1999-11-12 | 2005-04-05 | Motorola, Inc. | Microfluidic devices comprising biochannels |
JP2003517591A (ja) | 1999-12-09 | 2003-05-27 | モトローラ・インコーポレイテッド | 分析試料の反応を行うための多層微量流体デバイス |
USD438633S1 (en) | 1999-12-21 | 2001-03-06 | Compucyte Corporation | Reagent cartridge for treating a sample |
DE60042370D1 (de) | 1999-12-21 | 2009-07-23 | Ortho Clinical Diagnostics Inc | Detektion von nukleinsäuren |
USD438632S1 (en) | 1999-12-21 | 2001-03-06 | Compucyte Corporation | Multi-well reagent cartridge for treating a sample |
US6936414B2 (en) | 1999-12-22 | 2005-08-30 | Abbott Laboratories | Nucleic acid isolation method and kit |
US6699713B2 (en) | 2000-01-04 | 2004-03-02 | The Regents Of The University Of California | Polymerase chain reaction system |
ATE386815T1 (de) | 2000-01-06 | 2008-03-15 | Caliper Life Sciences Inc | Methoden und syteme zur überwachung intrazellulärer bindereaktionen |
US6620625B2 (en) | 2000-01-06 | 2003-09-16 | Caliper Technologies Corp. | Ultra high throughput sampling and analysis systems and methods |
US6468761B2 (en) | 2000-01-07 | 2002-10-22 | Caliper Technologies, Corp. | Microfluidic in-line labeling method for continuous-flow protease inhibition analysis |
JP2004530860A (ja) | 2000-01-11 | 2004-10-07 | クリニカル・マイクロ・センサーズ・インコーポレイテッド | バイオチップ多重化デバイスおよび方法 |
AU2001232805A1 (en) | 2000-01-12 | 2001-07-24 | Ut-Battelle, Llc | A microfluidic device and method for focusing, segmenting, and dispensing of a fluid stream |
US7037416B2 (en) | 2000-01-14 | 2006-05-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method for monitoring flow rate using fluorescent markers |
JP3397737B2 (ja) | 2000-01-24 | 2003-04-21 | 倉敷紡績株式会社 | 核酸の抽出方法 |
US6556923B2 (en) | 2000-01-26 | 2003-04-29 | Caliper Technologies Corp. | Software for high throughput microfluidic systems |
US6589729B2 (en) | 2000-02-04 | 2003-07-08 | Caliper Technologies Corp. | Methods, devices, and systems for monitoring time dependent reactions |
EP1255984B1 (en) | 2000-02-11 | 2009-10-07 | Aclara BioSciences, Inc. | Microfluid device with sample injector and method of use |
US6685813B2 (en) | 2000-02-11 | 2004-02-03 | Aclara Biosciences, Inc. | Tandem isotachophoresis/zone electrophoresis method and system |
JP3750460B2 (ja) | 2000-02-18 | 2006-03-01 | 日立工機株式会社 | 分注装置及び分注方法 |
WO2001061054A2 (en) | 2000-02-18 | 2001-08-23 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Apparatus and methods for parallel processing of micro-volume liquid reactions |
AU2001249071B2 (en) | 2000-02-23 | 2005-09-08 | Caliper Life Sciences, Inc. | Multi-reservoir pressure control system |
US6681616B2 (en) | 2000-02-23 | 2004-01-27 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic viscometer |
US7040144B2 (en) | 2000-02-23 | 2006-05-09 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic viscometer |
AU2001249253A1 (en) | 2000-03-17 | 2001-10-03 | Aclara Biosciences, Inc. | Microfluidic device and system with improved sample handling |
US20020012971A1 (en) | 2000-03-20 | 2002-01-31 | Mehta Tammy Burd | PCR compatible nucleic acid sieving medium |
US6358387B1 (en) | 2000-03-27 | 2002-03-19 | Caliper Technologies Corporation | Ultra high throughput microfluidic analytical systems and methods |
US6927851B2 (en) | 2000-03-31 | 2005-08-09 | Neogen Corporation | Methods and apparatus to improve the sensitivity and reproducibility of bioluminescent analytical methods |
US7867763B2 (en) | 2004-01-25 | 2011-01-11 | Fluidigm Corporation | Integrated chip carriers with thermocycler interfaces and methods of using the same |
US6401552B1 (en) | 2000-04-17 | 2002-06-11 | Carlos D. Elkins | Centrifuge tube and method for collecting and dispensing mixed concentrated fluid samples |
US6733645B1 (en) | 2000-04-18 | 2004-05-11 | Caliper Technologies Corp. | Total analyte quantitation |
USD446306S1 (en) | 2000-04-26 | 2001-08-07 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Medical information communication apparatus |
US7160735B2 (en) | 2000-04-28 | 2007-01-09 | Monogram Biosciences, Inc. | Tagged microparticle compositions and methods |
US6787016B2 (en) | 2000-05-01 | 2004-09-07 | Aclara Biosciences, Inc. | Dynamic coating with linear polymer mixture for electrophoresis |
CA2406063A1 (en) | 2000-05-03 | 2001-11-08 | Caliper Technologies Corporation | Multi depth substrate fabrication processes |
US7578976B1 (en) | 2000-05-10 | 2009-08-25 | Lawrence Livermore National Security, Llc | Sleeve reaction chamber system |
EP1281002A4 (en) | 2000-05-11 | 2006-08-09 | Caliper Life Sciences Inc | MICROFLUIDIC EQUIPMENT AND METHODS FOR INFLUENCING FLOW RESISTANCE AND ELECTRICAL RESISTANCE WITH THE HELP OF VISCOSITY INCREASING ADDITIVES |
AU6152301A (en) | 2000-05-12 | 2001-11-26 | Caliper Techn Corp | Detection of nucleic acid hybridization by fluorescence polarization |
EP1282469B1 (en) | 2000-05-19 | 2009-01-07 | Becton, Dickinson and Company | System and method for manipulating magnetically responsive particles in fluid samples to collect dna or rna from a sample |
DE60134849D1 (de) | 2000-05-19 | 2008-08-28 | Aclara Biosciences Inc | Ausrichtung eines optischen detektionssystems mit einem kapillarkanal in einem mikrofluiden laborchip |
US6672458B2 (en) | 2000-05-19 | 2004-01-06 | Becton, Dickinson And Company | System and method for manipulating magnetically responsive particles fluid samples to collect DNA or RNA from a sample |
JP2004508919A (ja) | 2000-05-24 | 2004-03-25 | セルラー プロセス ケミストリー インコーポレイテッド | マイクロリアクタを組み入れたモジュラ式化学生産システム |
AU2001262483A1 (en) | 2000-05-31 | 2001-12-11 | Tepnel Medical Limited | Formulation for polymerase chain reaction and vessel containing same |
US6520197B2 (en) | 2000-06-02 | 2003-02-18 | The Regents Of The University Of California | Continuous laminar fluid mixing in micro-electromechanical systems |
US7351376B1 (en) | 2000-06-05 | 2008-04-01 | California Institute Of Technology | Integrated active flux microfluidic devices and methods |
US6790330B2 (en) | 2000-06-14 | 2004-09-14 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Systems and methods for cell subpopulation analysis |
AU2001269929B2 (en) | 2000-06-19 | 2005-11-03 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and devices for enhancing bonded substrate yields and regulating temperature |
US7169618B2 (en) | 2000-06-28 | 2007-01-30 | Skold Technology | Magnetic particles and methods of producing coated magnetic particles |
US6720187B2 (en) | 2000-06-28 | 2004-04-13 | 3M Innovative Properties Company | Multi-format sample processing devices |
US6734401B2 (en) | 2000-06-28 | 2004-05-11 | 3M Innovative Properties Company | Enhanced sample processing devices, systems and methods |
WO2002006511A2 (en) * | 2000-07-19 | 2002-01-24 | Genisphere Inc | Methods for detecting and assaying nucleic acid sequences |
US6787015B2 (en) | 2000-07-21 | 2004-09-07 | Aclara Biosciences, Inc. | Methods for conducting electrophoretic analysis |
FR2812088B1 (fr) | 2000-07-21 | 2003-01-24 | Abx Sa | Dispositif de traitement d'echantillons de produits sanguins |
US7004184B2 (en) | 2000-07-24 | 2006-02-28 | The Reagents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for liquid metering in microchannels |
CN100394171C (zh) | 2000-08-02 | 2008-06-11 | 卡钳技术有限公司 | 基于分离的高处理量分析系统 |
US20020142618A1 (en) | 2000-08-04 | 2002-10-03 | Caliper Technologies Corp. | Control of operation conditions within fluidic systems |
FR2813207B1 (fr) | 2000-08-28 | 2002-10-11 | Bio Merieux | Carte reactionnelle et utilisation d'une telle carte |
JP3993372B2 (ja) | 2000-09-13 | 2007-10-17 | 独立行政法人理化学研究所 | リアクタの製造方法 |
EP1317569B1 (en) | 2000-09-14 | 2009-11-18 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic devices and methods for performing temperature mediated reactions |
WO2002023163A1 (en) | 2000-09-15 | 2002-03-21 | California Institute Of Technology | Microfabricated crossflow devices and methods |
US6939451B2 (en) | 2000-09-19 | 2005-09-06 | Aclara Biosciences, Inc. | Microfluidic chip having integrated electrodes |
DE60125388T2 (de) | 2000-10-03 | 2007-09-27 | Minerva Biotechnologies Corp., Newton | Magnetisches in situ dilutionsverfahren |
WO2002028531A1 (en) | 2000-10-06 | 2002-04-11 | Protasis Corporation | Fluid separation conduit cartridge with encryption capability |
US6623860B2 (en) | 2000-10-10 | 2003-09-23 | Aclara Biosciences, Inc. | Multilevel flow structures |
USD463031S1 (en) | 2000-10-11 | 2002-09-17 | Aclara Biosciences, Inc. | Microvolume sample plate |
CA2423552A1 (en) | 2000-10-13 | 2002-04-18 | Irm Llc | High throughput processing system and method of using |
US6375185B1 (en) | 2000-10-20 | 2002-04-23 | Gamemax Corporation | Paper currency receiving control assembly for currency-coin exchange machine |
US7514046B2 (en) | 2000-10-31 | 2009-04-07 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for processing microscale devices for reuse |
JP2004513342A (ja) | 2000-10-31 | 2004-04-30 | カリパー・テクノロジーズ・コープ. | 現場で材料を濃縮するミクロ流体方法、装置及びシステム |
US7105304B1 (en) | 2000-11-07 | 2006-09-12 | Caliper Life Sciences, Inc. | Pressure-based mobility shift assays |
US8900811B2 (en) | 2000-11-16 | 2014-12-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method and apparatus for generating thermal melting curves in a microfluidic device |
US20050202470A1 (en) | 2000-11-16 | 2005-09-15 | Caliper Life Sciences, Inc. | Binding assays using molecular melt curves |
US6951632B2 (en) | 2000-11-16 | 2005-10-04 | Fluidigm Corporation | Microfluidic devices for introducing and dispensing fluids from microfluidic systems |
CH695544A5 (de) | 2000-11-17 | 2006-06-30 | Tecan Trading Ag | Vorrichtung zur Abgabe bzw. Aufnahme/Abgabe von Flüssigkeitsproben. |
USD468437S1 (en) | 2000-11-21 | 2003-01-07 | Acon Laboratories, Inc. | Test platform |
US6521188B1 (en) | 2000-11-22 | 2003-02-18 | Industrial Technology Research Institute | Microfluidic actuator |
SE0004296D0 (sv) | 2000-11-23 | 2000-11-23 | Gyros Ab | Device and method for the controlled heating in micro channel systems |
US20040043479A1 (en) | 2000-12-11 | 2004-03-04 | Briscoe Cynthia G. | Multilayerd microfluidic devices for analyte reactions |
US7024281B1 (en) | 2000-12-11 | 2006-04-04 | Callper Life Sciences, Inc. | Software for the controlled sampling of arrayed materials |
US6382254B1 (en) | 2000-12-12 | 2002-05-07 | Eastman Kodak Company | Microfluidic valve and method for controlling the flow of a liquid |
CA2430691A1 (en) | 2000-12-27 | 2002-07-04 | Dynavax Technologies Corporation | Immunomodulatory polynucleotides and methods of using the same |
US6453928B1 (en) | 2001-01-08 | 2002-09-24 | Nanolab Ltd. | Apparatus, and method for propelling fluids |
JP4505776B2 (ja) | 2001-01-19 | 2010-07-21 | 凸版印刷株式会社 | 遺伝子検出システム、これを備えた遺伝子検出装置、検出方法、並びに遺伝子検出用チップ |
US6878755B2 (en) | 2001-01-22 | 2005-04-12 | Microgen Systems, Inc. | Automated microfabrication-based biodetector |
JP3548858B2 (ja) | 2001-01-22 | 2004-07-28 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 流量の制御方法及びそれに用いるマイクロバルブ |
EP1355823A4 (en) | 2001-01-29 | 2005-04-20 | Caliper Life Sciences Inc | NON-MECHANICAL VALVES FOR FLUID SYSTEMS |
US6692700B2 (en) | 2001-02-14 | 2004-02-17 | Handylab, Inc. | Heat-reduction methods and systems related to microfluidic devices |
US7670559B2 (en) | 2001-02-15 | 2010-03-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic systems with enhanced detection systems |
US6432695B1 (en) | 2001-02-16 | 2002-08-13 | Institute Of Microelectronics | Miniaturized thermal cycler |
US6509186B1 (en) | 2001-02-16 | 2003-01-21 | Institute Of Microelectronics | Miniaturized thermal cycler |
US6720148B1 (en) | 2001-02-22 | 2004-04-13 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for identifying nucleotides by primer extension |
US7867776B2 (en) | 2001-03-02 | 2011-01-11 | Caliper Life Sciences, Inc. | Priming module for microfluidic chips |
US7223363B2 (en) * | 2001-03-09 | 2007-05-29 | Biomicro Systems, Inc. | Method and system for microfluidic interfacing to arrays |
US7150999B1 (en) | 2001-03-09 | 2006-12-19 | Califer Life Sciences, Inc. | Process for filling microfluidic channels |
US6576459B2 (en) | 2001-03-23 | 2003-06-10 | The Regents Of The University Of California | Sample preparation and detection device for infectious agents |
US7010391B2 (en) * | 2001-03-28 | 2006-03-07 | Handylab, Inc. | Methods and systems for control of microfluidic devices |
US6852287B2 (en) | 2001-09-12 | 2005-02-08 | Handylab, Inc. | Microfluidic devices having a reduced number of input and output connections |
US6575188B2 (en) | 2001-07-26 | 2003-06-10 | Handylab, Inc. | Methods and systems for fluid control in microfluidic devices |
US7270786B2 (en) | 2001-03-28 | 2007-09-18 | Handylab, Inc. | Methods and systems for processing microfluidic samples of particle containing fluids |
US7323140B2 (en) | 2001-03-28 | 2008-01-29 | Handylab, Inc. | Moving microdroplets in a microfluidic device |
US8895311B1 (en) | 2001-03-28 | 2014-11-25 | Handylab, Inc. | Methods and systems for control of general purpose microfluidic devices |
US7829025B2 (en) | 2001-03-28 | 2010-11-09 | Venture Lending & Leasing Iv, Inc. | Systems and methods for thermal actuation of microfluidic devices |
US20140227710A1 (en) | 2001-03-28 | 2014-08-14 | Handylab, Inc. | Moving microdroplets in a microfluidic device |
US7192557B2 (en) | 2001-03-28 | 2007-03-20 | Handylab, Inc. | Methods and systems for releasing intracellular material from cells within microfluidic samples of fluids |
JP2002355038A (ja) | 2001-03-29 | 2002-12-10 | Japan Science & Technology Corp | 遺伝子解析方法およびその解析装置 |
US20020143297A1 (en) | 2001-03-30 | 2002-10-03 | Becton, Dickinson And Company | Adaptor for use with point-of-care testing cartridge |
EP1384022A4 (en) | 2001-04-06 | 2004-08-04 | California Inst Of Techn | AMPLIFICATION OF NUCLEIC ACID USING MICROFLUIDIC DEVICES |
USD470595S1 (en) | 2001-04-10 | 2003-02-18 | Andrea Crisanti | Assay device |
USD500142S1 (en) | 2001-04-10 | 2004-12-21 | Andrea Crisanti | Assay device |
US7440684B2 (en) | 2001-04-12 | 2008-10-21 | Spaid Michael A | Method and apparatus for improved temperature control in microfluidic devices |
US20020155010A1 (en) | 2001-04-24 | 2002-10-24 | Karp Christoph D. | Microfluidic valve with partially restrained element |
US6588625B2 (en) | 2001-04-24 | 2003-07-08 | Abbott Laboratories | Sample handling system |
EP1572067A4 (en) | 2001-05-18 | 2009-05-13 | Sirna Therapeutics Inc | CONJUGATES AND COMPOSITIONS FOR CELL DELIVERY |
USD495805S1 (en) | 2001-05-25 | 2004-09-07 | Umedik, Inc. | Assay device |
US7723123B1 (en) | 2001-06-05 | 2010-05-25 | Caliper Life Sciences, Inc. | Western blot by incorporating an affinity purification zone |
US20020187557A1 (en) | 2001-06-07 | 2002-12-12 | Hobbs Steven E. | Systems and methods for introducing samples into microfluidic devices |
US7025774B2 (en) | 2001-06-12 | 2006-04-11 | Pelikan Technologies, Inc. | Tissue penetration device |
US6977163B1 (en) | 2001-06-13 | 2005-12-20 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for performing multiple reactions by interfacial mixing |
DE10128894A1 (de) | 2001-06-15 | 2002-12-19 | Basf Ag | Verfahren zur schmutzablösungsfördernden Behandlung von Oberflächen textiler und nicht-textiler Materialien |
US6859698B2 (en) | 2001-06-21 | 2005-02-22 | Snap-On Incorporated | Detachable cartridge unit and auxiliary unit for function expansion of a data processing system |
US20030211517A1 (en) | 2001-06-22 | 2003-11-13 | Carulli John P. | Gp354 nucleic acids and polypeptides |
US6709857B2 (en) | 2001-06-26 | 2004-03-23 | Becton, Dickinson And Company | System and method for optically monitoring the concentration of a gas in a sample vial using photothermal spectroscopy to detect sample growth |
US6514750B2 (en) | 2001-07-03 | 2003-02-04 | Pe Corporation (Ny) | PCR sample handling device |
US6762049B2 (en) | 2001-07-05 | 2004-07-13 | Institute Of Microelectronics | Miniaturized multi-chamber thermal cycler for independent thermal multiplexing |
AU2002316302A1 (en) | 2001-07-12 | 2003-01-29 | Aclara Biosciences, Inc. | Submersible light-directing member for material excitation in microfluidic devices |
US20040209331A1 (en) | 2001-07-16 | 2004-10-21 | Kirk Ririe | Thermal cycling system and method of use |
US7023007B2 (en) | 2001-07-17 | 2006-04-04 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for alignment of detection optics |
US6766817B2 (en) | 2001-07-25 | 2004-07-27 | Tubarc Technologies, Llc | Fluid conduction utilizing a reversible unsaturated siphon with tubarc porosity action |
US7270959B2 (en) | 2001-07-25 | 2007-09-18 | Oakville Hong Kong Company Limited | Specimen collection container |
WO2003093168A2 (en) | 2001-07-26 | 2003-11-13 | Motorola, Inc. | System and methods for mixing within a microfluidic device |
ES2683698T3 (es) | 2001-07-26 | 2018-09-27 | Handylab, Inc. | Métodos y sistemas para procesamiento microfluídico |
US20060062696A1 (en) | 2001-07-27 | 2006-03-23 | Caliper Life Sciences, Inc. | Optimized high throughput analytical systems |
US7060171B1 (en) | 2001-07-31 | 2006-06-13 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for reducing background signal in assays |
JP2003047839A (ja) | 2001-08-06 | 2003-02-18 | Yamatake Corp | マイクロリアクタ |
JP2003047840A (ja) | 2001-08-06 | 2003-02-18 | Yamatake Corp | マイクロリアクタ |
US6640981B2 (en) | 2001-08-14 | 2003-11-04 | 3088081 Canada Inc. | Modular test tube rack |
USD482796S1 (en) | 2001-09-11 | 2003-11-25 | Sysmex Corporation | Sample analyzer |
USD512155S1 (en) | 2001-09-12 | 2005-11-29 | Techno Medica Co., Ltd. | Automatic blood sampling tube preparation apparatus |
JP3996416B2 (ja) | 2001-09-21 | 2007-10-24 | Juki株式会社 | 核酸ハイブリダイゼーションにおけるb/f分離方法 |
US20030059823A1 (en) | 2001-09-21 | 2003-03-27 | Juki Corporation | Hybridization apparatus and method for detecting nucleic acid in sample using the same |
USD467349S1 (en) | 2001-09-28 | 2002-12-17 | Orasure Technologies, Inc. | Analyzer |
USD467348S1 (en) | 2001-10-15 | 2002-12-17 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Diagnostic test carrier |
US7220345B2 (en) | 2001-10-18 | 2007-05-22 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Hybrid microfluidic and nanofluidic system |
US20030156991A1 (en) | 2001-10-23 | 2003-08-21 | William Marsh Rice University | Optomechanically-responsive materials for use as light-activated actuators and valves |
US7338760B2 (en) | 2001-10-26 | 2008-03-04 | Ntu Ventures Private Limited | Sample preparation integrated chip |
US6750661B2 (en) | 2001-11-13 | 2004-06-15 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method and apparatus for controllably effecting samples using two signals |
US7247274B1 (en) | 2001-11-13 | 2007-07-24 | Caliper Technologies Corp. | Prevention of precipitate blockage in microfluidic channels |
US7069952B1 (en) | 2001-11-14 | 2006-07-04 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic devices and methods of their manufacture |
DE10156790A1 (de) | 2001-11-19 | 2003-06-18 | Chemagen Biopolymer Technologi | Vorrichtung und Verfahren zum Behandeln von Magnetpartikeln |
US20030099954A1 (en) | 2001-11-26 | 2003-05-29 | Stefan Miltenyi | Apparatus and method for modification of magnetically immobilized biomolecules |
US7635588B2 (en) | 2001-11-29 | 2009-12-22 | Applied Biosystems, Llc | Apparatus and method for differentiating multiple fluorescence signals by excitation wavelength |
AU2002351187A1 (en) | 2001-11-30 | 2003-06-17 | Fluidigm Corporation | Microfluidic device and methods of using same |
US6960235B2 (en) | 2001-12-05 | 2005-11-01 | The Regents Of The University Of California | Chemical microreactor and method thereof |
JP2003185584A (ja) | 2001-12-18 | 2003-07-03 | Fuji Photo Film Co Ltd | スキャナ |
DE10163476A1 (de) | 2001-12-21 | 2003-10-30 | Siemens Ag | Anordnung zur Trennung einer Komponente aus einem Fluid |
US20030127327A1 (en) | 2002-01-04 | 2003-07-10 | Kurnik Ronald T. | Microfluidic device and method for improved sample handling |
US7410615B2 (en) | 2002-01-24 | 2008-08-12 | Perkinelmer Las, Inc. | Precision liquid dispensing system |
US7205154B2 (en) | 2002-01-31 | 2007-04-17 | Agilent Technologies, Inc. | Calibrating array scanners |
US7288228B2 (en) | 2002-02-12 | 2007-10-30 | Gilson, Inc. | Sample injection system |
US6819027B2 (en) | 2002-03-04 | 2004-11-16 | Cepheid | Method and apparatus for controlling ultrasonic transducer |
US7101467B2 (en) | 2002-03-05 | 2006-09-05 | Caliper Life Sciences, Inc. | Mixed mode microfluidic systems |
EP2581739B1 (en) | 2002-03-05 | 2015-11-04 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic separation method with combined pressure and voltage control |
US7303727B1 (en) | 2002-03-06 | 2007-12-04 | Caliper Life Sciences, Inc | Microfluidic sample delivery devices, systems, and methods |
US7195986B1 (en) | 2002-03-08 | 2007-03-27 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic device with controlled substrate conductivity |
KR100450818B1 (ko) | 2002-03-09 | 2004-10-01 | 삼성전자주식회사 | 다챔버 pcr 칩 |
US7252928B1 (en) | 2002-03-12 | 2007-08-07 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods for prevention of surface adsorption of biological materials to capillary walls in microchannels |
US7223371B2 (en) | 2002-03-14 | 2007-05-29 | Micronics, Inc. | Microfluidic channel network device |
CA2422224A1 (en) | 2002-03-15 | 2003-09-15 | Affymetrix, Inc. | System, method, and product for scanning of biological materials |
DE10212761B4 (de) | 2002-03-22 | 2009-12-31 | Eppendorf Ag | Mikrotiterplatte |
WO2003080868A1 (en) | 2002-03-27 | 2003-10-02 | Jae-Chern Yoo | Bio-disc, bio-driver apparatus, and assay method using the same |
US7312085B2 (en) | 2002-04-01 | 2007-12-25 | Fluidigm Corporation | Microfluidic particle-analysis systems |
AU2003228395B2 (en) | 2002-04-02 | 2006-12-21 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and apparatus for separation and isolation of components from a biological sample |
USD472324S1 (en) | 2002-04-05 | 2003-03-25 | Charles River Laboratories, Inc. | Cuvette |
JP2003299485A (ja) | 2002-04-10 | 2003-10-21 | Sekisui Chem Co Ltd | 温度制御型マイクロリアクター及びマイクロリアクターシステム |
JP2005532043A (ja) | 2002-04-11 | 2005-10-27 | シークエノム, インコーポレイテッド | 固相支持体上で化学反応を実行するための方法および装置 |
US8241883B2 (en) | 2002-04-24 | 2012-08-14 | Caliper Life Sciences, Inc. | High throughput mobility shift |
EP2500076B1 (en) | 2002-04-26 | 2017-11-01 | Abbott Laboratories | Structure and method for handling magnetic particles in biological assays |
US6905612B2 (en) | 2003-03-21 | 2005-06-14 | Hanuman Llc | Plasma concentrate apparatus and method |
JP3972189B2 (ja) | 2002-05-10 | 2007-09-05 | 日本パルスモーター株式会社 | 着脱自在なカートリッジラック構造を備える分注装置 |
USD474279S1 (en) | 2002-05-15 | 2003-05-06 | Monogen, Inc. | Specimen processing instrument |
JP3839349B2 (ja) | 2002-05-15 | 2006-11-01 | 株式会社堀場製作所 | 化学発光酵素免疫測定装置 |
EP1506413B1 (en) | 2002-05-17 | 2016-07-06 | Becton Dickinson and Company | Automated system for isolating, amplyifying and detecting a target nucleic acid sequence |
ATE375823T1 (de) | 2002-05-17 | 2007-11-15 | Gen Probe Inc | Probenträger mit lösbarer sperreinrichtung |
JP4235171B2 (ja) | 2002-05-17 | 2009-03-11 | ジェン−プロウブ インコーポレイテッド | サンプルチューブブロッキング手段を備えるサンプルキャリアおよびそれと共に使用するためのドリップシールド |
US20050214172A1 (en) | 2002-05-24 | 2005-09-29 | Ernst Burgisser | Method and device for dosing small volumes of liquid |
US7161356B1 (en) | 2002-06-05 | 2007-01-09 | Caliper Life Sciences, Inc. | Voltage/current testing equipment for microfluidic devices |
USD480814S1 (en) | 2002-06-11 | 2003-10-14 | Diversa Corporation | Gigamatrix holding tray |
US7208125B1 (en) | 2002-06-28 | 2007-04-24 | Caliper Life Sciences, Inc | Methods and apparatus for minimizing evaporation of sample materials from multiwell plates |
ATE529188T1 (de) | 2002-07-15 | 2011-11-15 | Phynexus Inc | Extraktionskolonnenvorrichtung |
JP4317816B2 (ja) | 2002-07-23 | 2009-08-19 | プロテダイン・コーポレーション | 材料取り扱い工具 |
US7041258B2 (en) | 2002-07-26 | 2006-05-09 | Applera Corporation | Micro-channel design features that facilitate centripetal fluid transfer |
JP2005533652A (ja) | 2002-07-26 | 2005-11-10 | アプレラ コーポレイション | 微小流体サイズ排除デバイス、システム、および方法 |
US7214348B2 (en) | 2002-07-26 | 2007-05-08 | Applera Corporation | Microfluidic size-exclusion devices, systems, and methods |
DE10236029A1 (de) | 2002-08-02 | 2004-02-19 | Cybio Systems Gmbh | Einrichtung zum Dispensieren und Beobachten der Lumineszenz von Einzelproben in Multiprobenanordnungen |
US20040053315A1 (en) | 2002-08-12 | 2004-03-18 | Caliper Technologies Corp. | Methods and systems for monitoring molecular interactions |
GB0219457D0 (en) | 2002-08-21 | 2002-09-25 | Amersham Biosciences Uk Ltd | Fluorescence reference plate |
US7001853B1 (en) | 2002-08-30 | 2006-02-21 | Caliper Life Sciences, Inc. | Flow control of photo-polymerizable resin |
USD516221S1 (en) | 2002-09-09 | 2006-02-28 | Meso Scale Technologies, Llc. | Diagnostic instrument |
JP3756477B2 (ja) * | 2002-09-17 | 2006-03-15 | 横河電機株式会社 | デンドリマーによる核酸またはタンパク質の抽出方法およびデンドリマー組成物 |
ITTO20020808A1 (it) | 2002-09-17 | 2004-03-18 | St Microelectronics Srl | Dispositivo integrato di analisi del dna. |
USD484989S1 (en) | 2002-09-20 | 2004-01-06 | Dade Behring Inc. | Multi-well liquid container |
TW590982B (en) | 2002-09-27 | 2004-06-11 | Agnitio Science & Technology I | Micro-fluid driving device |
US6730883B2 (en) | 2002-10-02 | 2004-05-04 | Stratagene | Flexible heating cover assembly for thermal cycling of samples of biological material |
AU2003284055A1 (en) | 2002-10-09 | 2004-05-04 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Microfluidic systems and components |
US7932098B2 (en) | 2002-10-31 | 2011-04-26 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Microfluidic system utilizing thin-film layers to route fluid |
US7122384B2 (en) | 2002-11-06 | 2006-10-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Resonant light scattering microparticle methods |
AU2003291439A1 (en) | 2002-11-08 | 2004-06-03 | Irm, Llc | Apparatus and methods to process substrate surface features |
JP2004170159A (ja) | 2002-11-18 | 2004-06-17 | Hitachi Koki Co Ltd | 自動分注装置 |
EP1585756B1 (en) * | 2002-11-26 | 2010-04-21 | University of Massachusetts | Delivery of sirnas |
USD491276S1 (en) | 2002-12-09 | 2004-06-08 | Babette Langille | Plastic diagnostic card |
ATE508368T1 (de) | 2002-12-13 | 2011-05-15 | Dhr Finland Oy | Analysator, analyseverfahren und flüssigkeitskartusche |
USD491272S1 (en) | 2002-12-13 | 2004-06-08 | Immunivest Corporation | Autoprep instrument |
WO2004055492A2 (en) | 2002-12-13 | 2004-07-01 | Aclara Biosciences, Inc. | Closed-loop control of electrokinetic processes in microfludic devices based on optical readings |
SE0203781D0 (sv) | 2002-12-19 | 2002-12-19 | Alphahelix Ab | Holder and method for cooling or heating samples |
USD491273S1 (en) | 2002-12-19 | 2004-06-08 | 3M Innovative Properties Company | Hybridization cartridge |
US7648678B2 (en) | 2002-12-20 | 2010-01-19 | Dako Denmark A/S | Method and system for pretreatment of tissue slides |
JP4395133B2 (ja) | 2002-12-20 | 2010-01-06 | カリパー・ライフ・サイエンシズ・インク. | Dnaの単一分子増幅および検出 |
US20060094108A1 (en) | 2002-12-20 | 2006-05-04 | Karl Yoder | Thermal cycler for microfluidic array assays |
US7850912B2 (en) | 2003-05-14 | 2010-12-14 | Dako Denmark A/S | Method and apparatus for automated pre-treatment and processing of biological samples |
US20050042639A1 (en) | 2002-12-20 | 2005-02-24 | Caliper Life Sciences, Inc. | Single molecule amplification and detection of DNA length |
US8676383B2 (en) | 2002-12-23 | 2014-03-18 | Applied Biosystems, Llc | Device for carrying out chemical or biological reactions |
EP1583950B1 (en) | 2002-12-26 | 2017-04-05 | Meso Scale Technologies, LLC. | Assay cartridges and methods of using the same |
US20060113190A1 (en) | 2002-12-27 | 2006-06-01 | Kurnik Ronald T | Microfluidic device and method for improved sample handling |
EP1594694A4 (en) | 2002-12-30 | 2010-01-20 | Univ California | METHODS AND APPARATUS FOR DETECTION AND ANALYSIS OF PATHOGENIC AGENTS |
US20070269891A9 (en) | 2003-01-13 | 2007-11-22 | Yasunobu Tanaka | Solid surface with immobilized degradable cationic polymer for transfecting eukaryotic cells |
US7419638B2 (en) | 2003-01-14 | 2008-09-02 | Micronics, Inc. | Microfluidic devices for fluid manipulation and analysis |
US6964747B2 (en) | 2003-01-21 | 2005-11-15 | Bioarray Solutions, Ltd. | Production of dyed polymer microparticles |
US7049558B2 (en) | 2003-01-27 | 2006-05-23 | Arcturas Bioscience, Inc. | Apparatus and method for heating microfluidic volumes and moving fluids |
JP4021335B2 (ja) | 2003-01-31 | 2007-12-12 | ユニバーサル・バイオ・リサーチ株式会社 | 監視機能付分注装置および分注装置の監視方法 |
US7338637B2 (en) | 2003-01-31 | 2008-03-04 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Microfluidic device with thin-film electronic devices |
AU2004220626B2 (en) | 2003-02-05 | 2010-07-29 | Iquum Inc. | Sample processing tubule |
US20040157220A1 (en) | 2003-02-10 | 2004-08-12 | Purnima Kurnool | Methods and apparatus for sample tracking |
KR100959101B1 (ko) | 2003-02-20 | 2010-05-25 | 삼성전자주식회사 | Pcr 반응기 및 pcr 반응기의 입구와 출구의 개폐를조절하는 방법 |
US20050129580A1 (en) | 2003-02-26 | 2005-06-16 | Swinehart Philip R. | Microfluidic chemical reactor for the manufacture of chemically-produced nanoparticles |
JP4129864B2 (ja) | 2003-03-24 | 2008-08-06 | 農工大ティー・エル・オー株式会社 | 磁気微粒子の磁気分離装置 |
JP2004305009A (ja) | 2003-04-02 | 2004-11-04 | Hitachi Ltd | 核酸増幅装置及び核酸増幅方法 |
CA2521539A1 (en) | 2003-04-08 | 2004-10-28 | Irm, Llc | Material removal and dispensing devices, systems, and methods |
AU2004230592B2 (en) | 2003-04-14 | 2007-10-04 | Caliper Life Sciences, Inc. | Reduction of migration shift assay interference |
WO2004094986A2 (en) | 2003-04-16 | 2004-11-04 | Handylab, Inc. | System and method for electrochemical detection of biological compounds |
GB2401237A (en) | 2003-04-28 | 2004-11-03 | Hewlett Packard Development Co | Data transfer arrangement for disaster recovery |
US7148043B2 (en) | 2003-05-08 | 2006-12-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Systems and methods for fluorescence detection with a movable detection module |
JP4156627B2 (ja) | 2003-05-09 | 2008-09-24 | カリパー・ライフ・サイエンシズ・インコーポレーテッド | 自動サンプル分析 |
US7038472B1 (en) | 2003-05-12 | 2006-05-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for measuring internal dimensions of microscale structures |
US7374949B2 (en) | 2003-05-29 | 2008-05-20 | Bayer Healthcare Llc | Diagnostic test strip for collecting and detecting an analyte in a fluid sample |
US7055695B2 (en) | 2003-06-02 | 2006-06-06 | Caliper Life Sciencee, Inc. | Container providing a controlled hydrated environment |
JP2005009870A (ja) | 2003-06-16 | 2005-01-13 | Fuji Photo Film Co Ltd | 分析装置の吸引方法 |
JP4531698B2 (ja) | 2003-07-17 | 2010-08-25 | 三菱化学メディエンス株式会社 | 自動測定用カートリッジおよびそれを用いる測定装置 |
US7381370B2 (en) | 2003-07-18 | 2008-06-03 | Dade Behring Inc. | Automated multi-detector analyzer |
US20060177376A1 (en) * | 2003-07-21 | 2006-08-10 | Dendritic Nanotechnologies, Inc. | Stabilized and chemically functionalized nanoparticles |
USD508999S1 (en) | 2003-07-24 | 2005-08-30 | Biomerieux, Inc. | Sample testing machine |
USD500363S1 (en) | 2003-07-24 | 2004-12-28 | Biomerieux Inc. | Sample holder |
WO2005011867A2 (en) | 2003-07-31 | 2005-02-10 | Handylab, Inc. | Processing particle-containing samples |
US7744817B2 (en) | 2003-08-11 | 2010-06-29 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Manifold assembly |
US7413712B2 (en) | 2003-08-11 | 2008-08-19 | California Institute Of Technology | Microfluidic rotary flow reactor matrix |
US7347617B2 (en) | 2003-08-19 | 2008-03-25 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Mixing in microfluidic devices |
USD499813S1 (en) | 2003-08-22 | 2004-12-14 | As.Pire Bioresearch Inc. | Assay testing device |
JP2005065607A (ja) | 2003-08-26 | 2005-03-17 | Hitachi Ltd | 遺伝子処理チップおよび遺伝子処理装置 |
USD515707S1 (en) | 2003-09-01 | 2006-02-21 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Fluorescent reader |
KR100971044B1 (ko) | 2003-09-05 | 2010-07-16 | 칼리퍼 라이프 사이언시즈, 인크. | 분석물 주입 시스템 |
US7501094B2 (en) | 2003-09-15 | 2009-03-10 | Syngenta Limited | Preparation and characterization of formulations in a high throughput mode |
US20050220675A1 (en) | 2003-09-19 | 2005-10-06 | Reed Mark T | High density plate filler |
AU2004273996A1 (en) | 2003-09-19 | 2005-03-31 | University Of Rochester | Biagnostic system for otolaryngologic pathogens and use thereof |
US20050069898A1 (en) | 2003-09-25 | 2005-03-31 | Cepheid | Lyophilized beads containing mannitol |
EP1664350A4 (en) * | 2003-09-26 | 2007-10-10 | Datascope Investment Corp | PROCESS FOR SYNTHESIS OF NUCLEIC ACIDS IN SMALL VOLUME |
DE10344700A1 (de) | 2003-09-26 | 2005-04-14 | Hirschmann Laborgeräte GmbH & Co. KG | Mehrkanal-Pipettiervorrichtung |
WO2005031312A1 (en) | 2003-09-29 | 2005-04-07 | Vision Biosystems Limited | System and method for histological tissue specimen processing |
USD528215S1 (en) | 2003-09-30 | 2006-09-12 | Biacore Ab | Chip carrier for biosensor |
US7039527B2 (en) | 2003-10-01 | 2006-05-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method for measuring diffusivities of compounds using microchips |
NL1024578C2 (nl) | 2003-10-21 | 2005-04-22 | Univ Delft Tech | Inrichting voor het uitvoeren van een reactie. |
WO2005048814A2 (en) | 2003-11-12 | 2005-06-02 | Van Lue Stephen J | Magnetic devices and apparatus for medical/surgical procedures and methods for using same |
CA2545653C (en) | 2003-11-21 | 2014-07-08 | Anp Technologies, Inc. | Asymmetrically branched polymer conjugates and microarray assays |
EP1541237A3 (en) | 2003-12-10 | 2006-02-01 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Polymerase chain reaction (pcr) module and multiple pcr system using the same |
JP4595446B2 (ja) | 2003-12-12 | 2010-12-08 | Dic株式会社 | 核酸増幅方法 |
JP2005176613A (ja) * | 2003-12-16 | 2005-07-07 | Yokogawa Electric Corp | デンドリマー利用のdna抽出方法およびバイオチップ |
US7122799B2 (en) | 2003-12-18 | 2006-10-17 | Palo Alto Research Center Incorporated | LED or laser enabled real-time PCR system and spectrophotometer |
KR20070094669A (ko) | 2003-12-23 | 2007-09-20 | 칼리퍼 라이프 사이언시즈, 인크. | 분석물 주입 시스템 |
JP4750412B2 (ja) | 2003-12-25 | 2011-08-17 | モレックス インコーポレイテド | 生体由来分子、ダイオキシン類及び内分泌撹乱物質検出装置及び当該装置を使用した検出方法 |
KR100750586B1 (ko) | 2003-12-26 | 2007-08-20 | 한국전자통신연구원 | 미소유체 가열 시스템 |
JP4732683B2 (ja) | 2003-12-29 | 2011-07-27 | ユニバーサル・バイオ・リサーチ株式会社 | 標的物質の検出方法 |
US7099778B2 (en) | 2003-12-30 | 2006-08-29 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method for determining diffusivity and molecular weight in a microfluidic device |
CN101914803B (zh) | 2004-01-25 | 2012-07-04 | 弗卢丁公司 | 晶体形成设备与系统以及制造和使用该晶体形成设备与系统的方法 |
US8765454B2 (en) | 2004-02-18 | 2014-07-01 | Xiaochuan Zhou | Fluidic devices and methods for multiplex chemical and biochemical reactions |
EP1733023B1 (en) | 2004-02-24 | 2013-01-23 | Thermal Gradient | Thermal cycling device |
US20050196321A1 (en) | 2004-03-03 | 2005-09-08 | Zhili Huang | Fluidic programmable array devices and methods |
USD517554S1 (en) | 2004-03-05 | 2006-03-21 | Seiko Epson Corporation | Film scanner |
KR100552706B1 (ko) | 2004-03-12 | 2006-02-20 | 삼성전자주식회사 | 핵산 증폭 방법 및 장치 |
EP1768785A2 (en) | 2004-03-19 | 2007-04-04 | Espir Kahatt | Device for aspirating, manipulating, mixing and dispensing nano-volumes of liquids |
JP3858029B2 (ja) | 2004-03-22 | 2006-12-13 | 株式会社アイディエス | 試験管の検知装置 |
WO2005094981A1 (en) | 2004-03-29 | 2005-10-13 | Agilent Technologies, Inc. | Cyclic pcr system |
JP2005291954A (ja) | 2004-03-31 | 2005-10-20 | Olympus Corp | 使い捨て試薬パックとその試薬パックを用いる分析装置 |
CA2560513A1 (en) | 2004-04-08 | 2005-12-01 | Biomatrica, Inc. | Integration of sample storage and sample management for life science |
ES2360801T3 (es) | 2004-04-09 | 2011-06-09 | Vivebio, Llc | Dispositivos y métodos para la recogida, almacenamiento y transporte de muestras biológicas. |
US8852862B2 (en) | 2004-05-03 | 2014-10-07 | Handylab, Inc. | Method for processing polynucleotide-containing samples |
ES2553097T3 (es) | 2004-05-03 | 2015-12-04 | Handylab, Inc. | Procesamiento de muestras que contienen polinucleótidos |
JP4784508B2 (ja) | 2004-05-07 | 2011-10-05 | コニカミノルタエムジー株式会社 | 検査用マイクロリアクタおよび検査装置ならびに検査方法 |
GB2414059B (en) | 2004-05-10 | 2008-06-11 | E2V Tech Uk Ltd | Microfluidic device |
JP3952036B2 (ja) | 2004-05-13 | 2007-08-01 | コニカミノルタセンシング株式会社 | マイクロ流体デバイス並びに試液の試験方法および試験システム |
US8496875B2 (en) | 2004-05-21 | 2013-07-30 | Caliper Life Sciences, Inc. | Automated system for handling microfluidic devices |
US7553671B2 (en) | 2004-05-25 | 2009-06-30 | Vertex Pharmaceuticals, Inc. | Modular test tube rack |
JP4755588B2 (ja) | 2004-05-27 | 2011-08-24 | ユニバーサル・バイオ・リサーチ株式会社 | 反応容器、反応測定装置、および液回転処理装置 |
US20060030037A1 (en) | 2004-05-28 | 2006-02-09 | Victor Joseph | Thermo-controllable high-density chips for multiplex analyses |
US7799553B2 (en) | 2004-06-01 | 2010-09-21 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated integrated DNA analysis system |
AU2005252242A1 (en) | 2004-06-07 | 2005-12-22 | Irm Llc | Dispensing systems, software, and related methods |
JP2008504446A (ja) | 2004-06-28 | 2008-02-14 | ボイス ステート ユニバーシティ | 溶液の微小滴を使用した電気化学的方法 |
US20060002817A1 (en) | 2004-06-30 | 2006-01-05 | Sebastian Bohm | Flow modulation devices |
US7480042B1 (en) | 2004-06-30 | 2009-01-20 | Applied Biosystems Inc. | Luminescence reference standards |
US8965710B2 (en) | 2004-07-02 | 2015-02-24 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Automated sample-to-microarray apparatus and method |
JP4440020B2 (ja) | 2004-07-09 | 2010-03-24 | 株式会社神戸製鋼所 | マイクロ反応器及びその製造方法 |
USD523153S1 (en) | 2004-07-23 | 2006-06-13 | Hitachi High-Technologies Corporation | Main part for immunity analysis machine |
EP1621890A1 (en) | 2004-07-26 | 2006-02-01 | bioMerieux B.V. | Device and method for separating, mixing and concentrating magnetic particles with a fluid and use thereof in purification methods |
US7585663B2 (en) | 2004-08-26 | 2009-09-08 | Applied Biosystems, Llc | Thermal device, system, and method, for fluid processing device |
US8053214B2 (en) | 2004-09-09 | 2011-11-08 | Microfluidic Systems, Inc. | Apparatus and method of extracting and optically analyzing an analyte from a fluid-based sample |
CN101073002B (zh) | 2004-09-15 | 2012-08-08 | 英特基因有限公司 | 微流体装置 |
KR100668304B1 (ko) | 2004-09-16 | 2007-01-12 | 삼성전자주식회사 | Pcr 혼합액을 pcr 칩의 각 pcr 채널에 주입하기위한 장치 및 상기 장치를 포함하는 pcr 칩 유니트 |
CN101031801B (zh) | 2004-09-30 | 2010-12-01 | 爱科来株式会社 | 薄膜加热器和分析用具 |
USD548841S1 (en) | 2004-10-15 | 2007-08-14 | Microsulis, Ltd | Electrical equipment for ablative treatment |
JPWO2006043642A1 (ja) | 2004-10-20 | 2008-05-22 | 株式会社荏原製作所 | 流体反応装置 |
US20060094004A1 (en) | 2004-10-28 | 2006-05-04 | Akihisa Nakajima | Micro-reactor, biological material inspection device, and microanalysis system |
JP2006145458A (ja) | 2004-11-24 | 2006-06-08 | Yaskawa Electric Corp | 分注装置 |
US7785868B2 (en) | 2004-12-02 | 2010-08-31 | Microfluidic Systems, Inc. | Apparatus to automatically lyse a sample |
US7727477B2 (en) | 2004-12-10 | 2010-06-01 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Apparatus for priming microfluidics devices with feedback control |
JP4573243B2 (ja) | 2004-12-15 | 2010-11-04 | 小林クリエイト株式会社 | 試験管用トレイ |
KR101263173B1 (ko) * | 2004-12-17 | 2013-05-13 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 진핵 세포의 트랜스펙션을 위한 고정화된 분해가능한양이온성 중합체 |
US20060165558A1 (en) | 2004-12-21 | 2006-07-27 | Thomas Witty | Cartridge for diagnostic assays |
US7315376B2 (en) | 2005-01-07 | 2008-01-01 | Advanced Molecular Systems, Llc | Fluorescence detection system |
US20060183216A1 (en) | 2005-01-21 | 2006-08-17 | Kalyan Handique | Containers for liquid storage and delivery with application to microfluidic devices |
US7964380B2 (en) | 2005-01-21 | 2011-06-21 | Argylia Technologies | Nanoparticles for manipulation of biopolymers and methods of thereof |
DE102005004664B4 (de) | 2005-02-02 | 2007-06-21 | Chemagen Biopolymer-Technologie Aktiengesellschaft | Vorrichtung und Verfahren und Verwendung zum Abtrennen von magnetischen oder magnetisierbaren Partikeln aus einer Flüssigkeit sowie deren Verwendungen |
WO2006089252A2 (en) | 2005-02-16 | 2006-08-24 | Mcneely Michael R | Liquid valving using reactive or responsive materials |
CN101163800B (zh) | 2005-02-18 | 2013-04-17 | 佳能美国生命科学公司 | 鉴定生物的基因组dna的装置和方法 |
USD535403S1 (en) | 2005-02-25 | 2007-01-16 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Component extractor for biochemistry |
EP1866653A4 (en) | 2005-03-07 | 2009-08-26 | Novx Systems Inc | ANALYSIS MACHINE |
WO2006096761A1 (en) | 2005-03-08 | 2006-09-14 | Authentix, Inc. | Microfluidic device for identification, quantification, and authentication of latent markers |
CA2599576C (en) | 2005-03-10 | 2015-09-15 | Gen-Probe Incorporated | Systems and methods to perform assays for detecting or quantifying analytes within samples |
US20060228734A1 (en) | 2005-03-18 | 2006-10-12 | Applera Corporation | Fluid processing device with captured reagent beads |
JP4525427B2 (ja) | 2005-04-01 | 2010-08-18 | パナソニック株式会社 | 分析ディスク、並びに分析ディスクおよび分析装置の検査方法 |
US7507575B2 (en) | 2005-04-01 | 2009-03-24 | 3M Innovative Properties Company | Multiplex fluorescence detection device having removable optical modules |
US9097723B2 (en) | 2005-04-01 | 2015-08-04 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method and apparatus for performing peptide digestion on a microfluidic device |
US20060246493A1 (en) | 2005-04-04 | 2006-11-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method and apparatus for use in temperature controlled processing of microfluidic samples |
CA112854S (en) | 2005-04-10 | 2007-03-27 | Akubio Ltd | Microbalance analyser cartridge |
CA2603759A1 (en) | 2005-04-12 | 2006-11-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Compact optical detection system for a microfluidic device |
US20060234251A1 (en) * | 2005-04-19 | 2006-10-19 | Lumigen, Inc. | Methods of enhancing isolation of RNA from biological samples |
KR100941416B1 (ko) | 2005-04-30 | 2010-02-11 | 삼성전자주식회사 | 바이오 디스크 및 바이오 드라이버 장치 및 이들을 이용한분석방법 |
US7300631B2 (en) | 2005-05-02 | 2007-11-27 | Bioscale, Inc. | Method and apparatus for detection of analyte using a flexural plate wave device and magnetic particles |
EP1896610A2 (en) | 2005-05-03 | 2008-03-12 | Handylab, Inc. | Lyophilized pellets |
USD566291S1 (en) | 2005-05-03 | 2008-04-08 | Handylab, Inc. | Microfluidic cartridge |
USD534280S1 (en) | 2005-05-04 | 2006-12-26 | Abbott Laboratories | Reagent carrier for use in an automated analyzer |
EP1877190A1 (en) | 2005-05-06 | 2008-01-16 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microtitre plate with a relieved perimeter |
WO2006122312A2 (en) | 2005-05-11 | 2006-11-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods of testing using a microfluidic cassette |
US8273294B2 (en) | 2005-07-01 | 2012-09-25 | Honeywell International Inc. | Molded cartridge with 3-D hydrodynamic focusing |
US7527763B2 (en) | 2005-07-05 | 2009-05-05 | 3M Innovative Properties Company | Valve control system for a rotating multiplex fluorescence detection device |
US20080226502A1 (en) | 2005-07-07 | 2008-09-18 | Jacques Jonsmann | Microfluidic Methods and Support Instruments |
US20070020699A1 (en) | 2005-07-19 | 2007-01-25 | Idexx Laboratories, Inc. | Lateral flow assay and device using magnetic particles |
US20070020764A1 (en) | 2005-07-20 | 2007-01-25 | Miller Kerry L | Method for processing chemistry and coagulation test samples in a laboratory workcell |
JP4581128B2 (ja) | 2005-07-20 | 2010-11-17 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 酵素免疫測定方法及びそのための酵素免疫センサ |
EP2660482B1 (en) | 2005-08-22 | 2019-08-07 | Life Technologies Corporation | Vorrichtung, System und Verfahren unter Verwendung von nichtmischbaren Flüssigkeiten mit unterschiedlichen Volumen |
JP2007074960A (ja) | 2005-09-13 | 2007-03-29 | Shimadzu Corp | 遺伝子増幅法 |
USD549827S1 (en) | 2005-09-16 | 2007-08-28 | Horiba, Ltd. | Blood analyzer |
EP1929269A2 (en) * | 2005-09-30 | 2008-06-11 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic device for purifying a biological component using magnetic beads |
JP4656646B2 (ja) | 2005-10-04 | 2011-03-23 | キヤノン株式会社 | 表示方法と表示装置、該表示装置を備えた全自動検査装置 |
JP4827483B2 (ja) | 2005-10-04 | 2011-11-30 | キヤノン株式会社 | 核酸試料処理装置 |
JP4630786B2 (ja) | 2005-10-04 | 2011-02-09 | キヤノン株式会社 | 生化学処理装置、dna増幅精製装置、該装置を含むdna検査装置 |
US20070199821A1 (en) | 2005-10-05 | 2007-08-30 | Chow Andrea W | Automated two-dimensional gel electrophoresis |
US7727371B2 (en) | 2005-10-07 | 2010-06-01 | Caliper Life Sciences, Inc. | Electrode apparatus for use with a microfluidic device |
EP1945815A4 (en) | 2005-10-11 | 2009-02-18 | Handylab Inc | DEVICE FOR PREPARING SAMPLE OF POLYNUCLEOTIDES |
DE102005049920A1 (de) | 2005-10-17 | 2007-04-19 | Manz Automation Ag | Roboteranordnung |
USD537951S1 (en) | 2005-10-21 | 2007-03-06 | Sanyo Electric Co., Ltd. | Gene amplification apparatus |
USD556914S1 (en) | 2005-10-21 | 2007-12-04 | Sanyo Electric Co., Ltd. | Gene amplification apparatus |
US20070092403A1 (en) | 2005-10-21 | 2007-04-26 | Alan Wirbisky | Compact apparatus, compositions and methods for purifying nucleic acids |
DE102005051850A1 (de) | 2005-10-28 | 2007-05-03 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Vorrichtung zur Vervielfältigung und Detektion von Nukleinsäuren |
US20070104617A1 (en) | 2005-11-04 | 2007-05-10 | Advanced Biotechnologies Limited | Capped tubes |
US20070116613A1 (en) | 2005-11-23 | 2007-05-24 | Donat Elsener | Sample tube and system for storing and providing nucleic acid samples |
EP1792656B1 (en) | 2005-11-30 | 2011-11-02 | F. Hoffmann-La Roche AG | Integrally built, linear array of cuvettes, two dimensional array of cuvettes and system comprising two or more two-dimensional arrays of cuvettes |
WO2007064117A1 (en) | 2005-11-30 | 2007-06-07 | Electronics And Telecommunications Research Institute | Affinity chromatography microdevice and method for manufacturing the same |
JP3899360B2 (ja) | 2005-12-19 | 2007-03-28 | オリンパス株式会社 | Dna増幅装置 |
JP5175213B2 (ja) | 2005-12-22 | 2013-04-03 | ハネウェル・インターナショナル・インコーポレーテッド | 携帯用サンプル分析システム |
JP2007178328A (ja) | 2005-12-28 | 2007-07-12 | Shimadzu Corp | 反応容器キット及び反応容器処理装置 |
US20070154895A1 (en) | 2005-12-30 | 2007-07-05 | Caliper Life Sciences, Inc. | Multi-assay microfluidic chips |
WO2007079257A2 (en) | 2005-12-30 | 2007-07-12 | Caliper Life Sciences, Inc. | Integrated dissolution processing and sample transfer system |
SG134186A1 (en) | 2006-01-12 | 2007-08-29 | Nanyang Polytechnic | Smart nano-integrated system assembly |
WO2007091530A1 (ja) | 2006-02-07 | 2007-08-16 | The Furukawa Electric Co., Ltd. | 光検出装置及び測定対象読取装置 |
US8124033B2 (en) | 2006-02-17 | 2012-02-28 | Agency, Science, Technology and Research | Apparatus for regulating the temperature of a biological and/or chemical sample and method of using the same |
USD538436S1 (en) | 2006-03-06 | 2007-03-13 | Steris Inc. | Reprocessor for decontaminating medical, dental and veterinary instruments and articles |
AU2007225038B2 (en) | 2006-03-15 | 2013-08-29 | Perkinelmer Health Sciences, Inc. | Integrated nucleic acid assays |
US10900066B2 (en) | 2006-03-24 | 2021-01-26 | Handylab, Inc. | Microfluidic system for amplifying and detecting polynucleotides in parallel |
US8088616B2 (en) | 2006-03-24 | 2012-01-03 | Handylab, Inc. | Heater unit for microfluidic diagnostic system |
US7998708B2 (en) | 2006-03-24 | 2011-08-16 | Handylab, Inc. | Microfluidic system for amplifying and detecting polynucleotides in parallel |
WO2007112114A2 (en) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Handylab, Inc. | Integrated system for processing microfluidic samples, and method of using same |
US8883490B2 (en) | 2006-03-24 | 2014-11-11 | Handylab, Inc. | Fluorescence detector for microfluidic diagnostic system |
USD559995S1 (en) | 2006-03-27 | 2008-01-15 | Handylab, Inc. | Controller cartridge for a diagnostic instrument |
USD569526S1 (en) | 2006-03-27 | 2008-05-20 | Handylab, Inc. | Molecular diagnostic instrument |
EP1839756A1 (en) | 2006-03-31 | 2007-10-03 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Apparatus for separating magnetic particles from liquids containing said particles, and an array of vessels suitable for use with such an apparatus |
US8021531B2 (en) | 2006-04-14 | 2011-09-20 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method for modifying the concentration of reactants in a microfluidic device |
JP5054096B2 (ja) | 2006-04-18 | 2012-10-24 | アドヴァンスト リキッド ロジック インコーポレイテッド | 液滴に基づく生化学 |
USD554070S1 (en) | 2006-05-03 | 2007-10-30 | Data I/O Corporation | Processing apparatus |
USD554069S1 (en) | 2006-05-03 | 2007-10-30 | Data I/O Corporation | Processing apparatus |
CN101522909A (zh) | 2006-05-17 | 2009-09-02 | 加利福尼亚技术学院 | 热循环系统 |
US8232091B2 (en) | 2006-05-17 | 2012-07-31 | California Institute Of Technology | Thermal cycling system |
RU2008148143A (ru) | 2006-06-08 | 2010-06-10 | Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. (Nl) | Микроэлектронное сенсорное устройство для детектирования днк |
US7629124B2 (en) | 2006-06-30 | 2009-12-08 | Canon U.S. Life Sciences, Inc. | Real-time PCR in micro-channels |
US7858366B2 (en) | 2006-08-24 | 2010-12-28 | Microfluidic Systems, Inc | Integrated airborne substance collection and detection system |
US7633606B2 (en) | 2006-08-24 | 2009-12-15 | Microfluidic Systems, Inc. | Integrated airborne substance collection and detection system |
US7705739B2 (en) | 2006-08-24 | 2010-04-27 | Microfluidic Systems, Inc. | Integrated airborne substance collection and detection system |
EP2064346B1 (en) | 2006-09-06 | 2013-11-06 | Canon U.S. Life Sciences, Inc. | Chip and cartridge design configuration for performing micro-fluidic assays |
US8246919B2 (en) | 2006-09-21 | 2012-08-21 | Abbott Laboratories | Specimen sample rack |
WO2008147382A1 (en) | 2006-09-27 | 2008-12-04 | Micronics, Inc. | Integrated microfluidic assay devices and methods |
US20080095673A1 (en) | 2006-10-20 | 2008-04-24 | Lin Xu | Microplate with fewer peripheral artifacts |
EP2091647A2 (en) | 2006-11-14 | 2009-08-26 | Handylab, Inc. | Microfluidic system for amplifying and detecting polynucleotides in parallel |
KR101422467B1 (ko) | 2007-02-08 | 2014-07-24 | 삼성전자주식회사 | 미세유체 칩 내의 형광을 검출하기 위한 시스템 및 형광검출 방법 |
US7985375B2 (en) | 2007-04-06 | 2011-07-26 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Sample preparation system and method for processing clinical specimens |
JP2008267950A (ja) | 2007-04-19 | 2008-11-06 | Enplas Corp | 流体取扱装置 |
US20080257882A1 (en) | 2007-04-20 | 2008-10-23 | Bioinnovations Oy | Vessel for accurate analysis |
US20100129878A1 (en) * | 2007-04-25 | 2010-05-27 | Parthasarathy Ranjani V | Methods for nucleic acid amplification |
WO2008149282A2 (en) | 2007-06-06 | 2008-12-11 | Koninklijke Philips Electronics N. V. | Microfluidic device and method of operating a microfluidic device |
USD621060S1 (en) | 2008-07-14 | 2010-08-03 | Handylab, Inc. | Microfluidic cartridge |
US8105783B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-01-31 | Handylab, Inc. | Microfluidic cartridge |
US20090136385A1 (en) | 2007-07-13 | 2009-05-28 | Handylab, Inc. | Reagent Tube |
US9618139B2 (en) | 2007-07-13 | 2017-04-11 | Handylab, Inc. | Integrated heater and magnetic separator |
US8133671B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-03-13 | Handylab, Inc. | Integrated apparatus for performing nucleic acid extraction and diagnostic testing on multiple biological samples |
US8287820B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-10-16 | Handylab, Inc. | Automated pipetting apparatus having a combined liquid pump and pipette head system |
US8182763B2 (en) | 2007-07-13 | 2012-05-22 | Handylab, Inc. | Rack for sample tubes and reagent holders |
US8324372B2 (en) * | 2007-07-13 | 2012-12-04 | Handylab, Inc. | Polynucleotide capture materials, and methods of using same |
US9186677B2 (en) | 2007-07-13 | 2015-11-17 | Handylab, Inc. | Integrated apparatus for performing nucleic acid extraction and diagnostic testing on multiple biological samples |
GB0719193D0 (en) | 2007-10-02 | 2007-11-07 | Advanced Biotech Ltd | A Vessel |
US8808649B2 (en) | 2007-10-10 | 2014-08-19 | Pocared Diagnostics Ltd. | System for conducting the identification of bacteria in urine |
USD632799S1 (en) | 2008-05-15 | 2011-02-15 | The Automation Partnership | Cell dispenser |
US8647593B2 (en) | 2008-06-09 | 2014-02-11 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Magnetic microplate assembly |
USD596312S1 (en) | 2008-06-13 | 2009-07-14 | Csp Technologies, Inc. | Vial rack |
USD595423S1 (en) | 2008-06-30 | 2009-06-30 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Magnetic rack |
USD618820S1 (en) | 2008-07-11 | 2010-06-29 | Handylab, Inc. | Reagent holder |
US20100009351A1 (en) * | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Handylab, Inc. | Polynucleotide Capture Materials, and Method of Using Same |
USD787087S1 (en) | 2008-07-14 | 2017-05-16 | Handylab, Inc. | Housing |
USD598566S1 (en) | 2008-08-12 | 2009-08-18 | Diagenode Societe Anonyme | Medical instrument for laboratory use |
WO2010025302A2 (en) | 2008-08-27 | 2010-03-04 | Life Technologies Corporation | Apparatus for and method of processing biological samples |
ES2822105T3 (es) | 2009-04-15 | 2021-04-29 | Biocartis Nv | Sistema de detección óptica para monitorizar la reacción rtPCR |
USD599234S1 (en) | 2009-04-28 | 2009-09-01 | Shiseido Co., Ltd. | Auto-sampler for chromatograph |
GB2473868A (en) | 2009-09-28 | 2011-03-30 | Invitrogen Dynal As | Apparatus and method of automated processing of biological samples |
USD638953S1 (en) | 2009-05-12 | 2011-05-31 | Invitrogen Dynal As | Laboratory apparatus |
US8329117B2 (en) | 2009-05-14 | 2012-12-11 | Canon U.S. Life Sciences, Inc. | Microfluidic chip features for optical and thermal isolation |
WO2010130310A1 (en) | 2009-05-15 | 2010-11-18 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Pipette head with filter and flushing means |
EP2263802A1 (en) | 2009-05-25 | 2010-12-22 | F. Hoffmann-La Roche AG | System and method for dispensing fluids |
US9335339B2 (en) | 2009-06-04 | 2016-05-10 | Universal Bio Research Co., Ltd. | Specimen testing device and method thereof |
USD628305S1 (en) | 2009-07-14 | 2010-11-30 | Medical Research Council | Sitting-drop microwell plate for crystalization |
WO2011009073A1 (en) | 2009-07-16 | 2011-01-20 | Abbott Laboratories | A method for amplification of nucleic acids |
JP4857373B2 (ja) * | 2009-09-09 | 2012-01-18 | 国立大学法人東京農工大学 | デンドリマー被覆磁気微粒子並びにその製造方法及び用途 |
US8282895B2 (en) | 2009-09-15 | 2012-10-09 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Reagent cabinet system |
US20110097493A1 (en) | 2009-10-27 | 2011-04-28 | Kerr Roger S | Fluid distribution manifold including non-parallel non-perpendicular slots |
JP2013520643A (ja) | 2010-02-22 | 2013-06-06 | フォーティテュード リミテッド | マルチウェル・ストリップ |
EP2372367B1 (en) | 2010-04-01 | 2016-05-11 | F. Hoffmann-La Roche AG | A computer-implemented method for operating an automated sample workcell |
US20110300033A1 (en) | 2010-06-07 | 2011-12-08 | Chemence Medical, Inc. | Pipette Holder and Applicator Apparatus |
EP2749887A3 (en) | 2010-07-23 | 2014-10-01 | Beckman Coulter, Inc. | System Or Method Of Including Analytical Units |
WO2012036296A1 (ja) | 2010-09-17 | 2012-03-22 | ユニバーサル・バイオ・リサーチ株式会社 | カートリッジおよび自動分析装置 |
WO2012142516A1 (en) | 2011-04-15 | 2012-10-18 | Becton, Dickinson And Company | Scanning real-time microfluidic thermo-cycler and methods for synchronized thermocycling and scanning optical detection |
JP6080397B2 (ja) | 2011-07-05 | 2017-02-15 | キヤノン株式会社 | 圧電材料、圧電素子、積層圧電素子、液体吐出ヘッド、液体吐出装置、超音波モータ、光学機器、圧電音響部品および電子機器 |
USD692162S1 (en) | 2011-09-30 | 2013-10-22 | Becton, Dickinson And Company | Single piece reagent holder |
ES2825905T3 (es) | 2011-09-30 | 2021-05-17 | Becton Dickinson Co | Tira reactiva unificada |
CN103998921B (zh) | 2011-10-14 | 2016-04-20 | 贝克顿·迪金森公司 | 方波热循环 |
WO2013067202A1 (en) | 2011-11-04 | 2013-05-10 | Handylab, Inc. | Polynucleotide sample preparation device |
JP6205372B2 (ja) | 2012-02-02 | 2017-09-27 | コーニング インコーポレイテッド | 細胞培養のための合成接着培地 |
CN107881219B (zh) | 2012-02-03 | 2021-09-10 | 贝克顿·迪金森公司 | 用于分子诊断测试分配和测试之间兼容性确定的外部文件 |
CN104254595A (zh) * | 2012-02-13 | 2014-12-31 | 纽莫德克斯莫勒库拉尔公司 | 用于处理和检测核酸的微流体盒 |
BR112014025384B1 (pt) | 2012-04-13 | 2022-01-25 | Becton, Dickinson And Company | Sistema e métodos para executar ensaio automatizado e teste reflexivo em amostras a partir dos respectivos exemplares |
USD686749S1 (en) | 2012-04-20 | 2013-07-23 | Stratec Biomedical Ag | Rack for holding sheaths |
USD702854S1 (en) | 2012-05-18 | 2014-04-15 | Yoko Nakahana | Micro tube array container |
USD687567S1 (en) | 2012-10-22 | 2013-08-06 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Tube strip for automated processing systems |
WO2014066376A1 (en) * | 2012-10-25 | 2014-05-01 | Neumodx Molecular, Inc. | Method and materials for isolation of nucleic acid materials |
USD710024S1 (en) | 2013-03-14 | 2014-07-29 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Microplate |
BR112015022459B1 (pt) | 2013-03-15 | 2021-10-19 | Becton, Dickinson And Company | Sistema de tubo de processamento e de bandeja transportadora |
CA2906345C (en) | 2013-03-16 | 2023-06-20 | Leslie Don ROBERTS | Self-contained modular analytical cartridge and programmable reagent delivery system |
US9410977B2 (en) | 2013-08-08 | 2016-08-09 | Illumina, Inc. | Fluidic system for reagent delivery to a flow cell |
CH709054A1 (de) | 2013-12-20 | 2015-06-30 | Tecan Trading Ag | Abstandhalter für übereinandergestapelte Pipettenspitzen-Träger. |
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