JP2011102305A - 血糖値を降下させるペプチド - Google Patents
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Abstract
【解決手段】エキセンジン−4ポリペプチド配列の変異体を含む血糖レベルを低下させる新規ペプチド、およびGLP−4またはエキセンジン−4ポリペプチド配列の変異体を含む、安定性が高く、過度に高い血糖値の治療に有用な新規ペプチド結合体。
【選択図】なし
Description
本発明は、GLP-1活性に対するアゴニストである新規ペプチドアゴニストに関する。より具体的には、本発明は、エキセンジン-4ポリペプチド配列の変異体を含む血糖レベルを低下させる新規ペプチド、およびGLP-4またはエキセンジン-4ポリペプチド配列の変異体を含むペプチド結合体であって、薬理学的活性を有しかつ安定で、GLP-1活性のアゴニストとして過剰な血糖レベルの調節および/または胃内容排出の調節などが有効である疾患(糖尿病および摂食障害など)の治療に有用である上記ペプチドおよびペプチド結合体に関する。本発明はまた、上記新規ペプチドの製造方法、本発明のペプチドと生理学的に許容されうる担体とを含む組成物(例えば、医薬組成物など)、治療に使用するための該ペプチド、障害の治療方法、および治療に使用するための医薬組成物を製造するための該ペプチドの使用に関する。
血糖レベルを低下させる多くのホルモンは、腸内の栄養分の存在および吸収に応答して胃腸管粘膜から放出される。これらのホルモンには、ガストリン、セクレチン、グルコース依存性インスリン分泌刺激(insulinotropic)ポリペプチド(GIP)およびグルカゴン様ペプチド-1(GLP-1)が含まれる。公知の最も強力なものは、GLP-1である(Orskov, 1992, Diabetologia 35: 701-711)。グルカゴン様ペプチド-1(GLP-1)は、180アミノ酸からなるペプチドであるプログルカゴンの産物である(Drucker、1998、Diabetes 47: 159-169)。プログルカゴンの全配列には、グルカゴンの29アミノ酸の配列、GLP-1の36または37アミノ酸配列および腸作用性(intestinotrophic)ペプチドであるグルカゴン様ペプチド-2(GLP-2)の34アミノ酸配列が含まれる。GLP-1は多くの機能を有している。これは、正常なヒトにおいてインスリン分泌に対する作用を増強する生理学的ホルモンであり、従って内分泌性ホルモンである。さらに、GLP-1はまた、グルカゴン濃度を低下させ、胃内容排泄を遅延させ、(プロ)インスリンの生合成を刺激し、かつ、インスリン感受性を増進させる(Nauck, 1997, Horm. Metab. Res. 47: 1253-1258)。該ペプチドはまた、グルコース耐性に障害のある被験体においてはβ細胞のグルコースに対する感知能および応答能を増進させる(Byrne, 1998, Eur. J. Clin. Invest. 28: 72-78)。ヒトのGLP-1のインスリン分泌刺激作用は、グルコースの消失速度を増大させる。これは、一部には、インスリンレベルが増大するからであり、また、一部には、インスリン感受性が増大するからである(D'Alessio, 1994, Eur. J. Clin. Invest. 28: 72-78)。このことにより、GLP-1はII型糖尿病の治療に有望な物質として位置づけられてきた。GLP-1の活性断片はGLP-1(7〜36)およびGLP-1(7〜37)であることがわかっている。しかし、天然型GLP-1の薬理学的に主要とされる問題は、半減期が短いことである。ヒトおよびラットにおいては、GLP-1はジペプチジルペプチダーゼ-IV(DPP-IV)により、GLP-1(9-36)アミドに迅速に分解され、これは内因性GLP-1受容体アンタゴニストとして作用する(Deacon, 1998, Diabetologia 41: 271-278)。この問題を回避する種々のストラテジーが提唱されてきたが、その中のいくつかはDPP-IVの阻害剤および他のDPP-IV耐性のGLP-1(7-36)アミドの類似体を用いるものである(Deacon, 1998, Diabetologia 41: 271-278; Deaconら、1998, Diabetes 47: 764-769; Ritzel, 1998, J. Endocrinol. 159: 93-102;米国特許第5,545,618号; Pederson, 1998, Diabetes 47: 1253-1258)。
哺乳動物の血糖レベルを低下させる、安定かつ効果的な化合物が必要とされている。従って、本発明の目的は、哺乳動物の血糖レベルを低下させる新規化合物を提供することである。理想的には、経口投与である場合に効果的なものである。さらなる本発明の目的は、GLP-1活性および/またはエキセンジン-4活性の新規ペプチドアゴニストを提供することである。またさらに、半減期が増大し、および/もしくはクリアランスが低減された、GLP-1活性ならびに/またはエキセンジン-4活性についてのペプチドアゴニストを提供することも、さらなる本発明の目的である。
本発明は、
(a) エキセンジン(exendin)-4に対して少なくとも90%の相同性を有するエキセンジン、
(b) 34〜39位の1〜5個の欠失からなる群より選択される改変を有し、かつ40位に親油性置換基を有するLysを有する、該エキセンジンの変異体、または
(c) (i) 8位のアラニンの、D-アラニン、グリシンもしくはα-アミノイソ酪酸への置換、および
(ii) 親油性置換基
からなる群より選択される少なくとも1個の改変を有するGLP-1(7-36)またはGLP-1(7-37)、
からなる群より選択されるペプチドX(ただし、Xはエキセンジン-4またはエキセンジン-3ではない)と、
4〜20個のアミノ酸単位からなり、各アミノ酸単位が、Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Met、Ornおよび一般式I
-NH-C(R1)(R2)-C(=O)- (I)
(式中、R1およびR2は、水素、C1-6-アルキル、フェニルおよびフェニル-メチルからなる群より選択され、C1-6-アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、フェニルおよびフェニル-メチルは、C1-6-アルキル、C2-6-アルケニル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、あるいはR1とR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチル環を形成している。)
で表されるアミノ酸単位(例えば2,4-ジアミノブタン酸および2,3-ジアミノプロパン酸)からなる群より選択される、前記変異体に共有結合したペプチド配列Zと、
を含むペプチド結合体に関する。
さらに、本発明は、親エキセンジンの新規変異体であって、該親エキセンジンは、エキセンジン-4に対して少なくとも90%の相同性を有するアミノ酸配列を有し、該変異体は、哺乳動物において血糖値を降下させ、かつGLP-1受容体に結合し、かつ
(a)34〜38位の1〜5個の欠失、および
(b)εアミノ基に親油性置換基が結合している40位のLys、
からなる群より選択される少なくとも1個の改変を有する、前記変異体に関する。
本発明の化合物は、親エキセンジンの今まで知られていない欠失変異体を含む。エキセンジン-4(1-39)の既知の置換および/または末端切断変異体とは対照的に、本発明の新規化合物は、安定性に優れ、結合特性が減じられないかまたは高められた恒常的なαヘリックス構造を示すものと考えられる。さらに、新規変異体、すなわち改変型GLP-1(7-36)-NH2、および改変型GLP-1(7-37)を、特定の短いペプチド配列(Z)に結合させると、薬理学的特性を損なうことなくこれらの化合物が安定になる。これらの結合により、ペプチド分子にin vivoでの安定性および親水性が付与される。Zは、アミノ酸残基から構成され、単独ではαヘリックス構造の面でなんら構造的特徴をもたない。しかし、円偏光二色性と核磁気共鳴(NMR)分光法の両方を用いた研究から、Zの付加によって、ペプチドのαヘリックス構造の量の増大により証明されたように、いくつかのペプチドの構造的特徴が変化する。例えば、円偏光二色性により、Z-改変された(Gly8)-GLP-1は、(Gly8)-GLP-1よりもはるかに多量のαヘリックス構造を有することが示された。薬理学的結果と一緒になって、その構造分析により、Zがペプチドのコンホメーションをその能力を失うことなく改変し、より高い酵素安定性をもたらしていることが示唆される。ペプチドの物理的および化学的特性も、Z改変によってかなり変更されうるものであり、薬理学的な処方戦略に影響を及ぼすものである。
エキセンジン変異体
本発明のエキセンジン変異体は、エキセンジン-4に対して少なくとも約90%、最も好ましくは少なくとも約95%の相同性を有する、親エキセンジンペプチドの変異体であり、エキセンジン活性をもち、哺乳動物において血糖値を降下させ、GLP-1受容体に結合する。好ましい実施形態では、親エキセンジンペプチドはエキセンジン-4(1-39)のアミノ酸配列と、5個のアミノ酸残基、好ましくは4個のアミノ酸残基、より好ましくは3個のアミノ酸残基、さらにより好ましくは2個のアミノ酸残基、その上より好ましくは1個のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を有する。
化合物1:desPro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号101)、
desPro36-エキセンジン-4(1-40)-NH2、
化合物14:desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-40)-NH2 、
desPro36,Pro37-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
desAla35-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号105)、
desGly34-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号106)、
desSer39-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号107)、
desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号108)、
desAla35-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号109)、
desPro36-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号110)、ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩からなる群より選択され得る。
改変型GLP-1
本発明のペプチド結合体中にペプチドXとして含まれる好ましい改変型GLP-1は、8位のアラニンがグリシンに置換されているGLP-1(7-36)-NH2またはGLP-1(7-37)のアミノ酸配列を有する。あるいは、好ましい改変型GLP-1は、8位のアラニンがグリシンに置換されており、26位、34位または37位の1個のリジン残基に親油性置換基、好ましくはパルミトイル基を有するGLP-1(7-36)またはGLP-1(7-37)のアミノ酸配列を有する。親油性置換基は、好ましくは、該リジンのεアミノ基に結合しており、エキセンジン変異体について上記した特定の実施形態を含む。本発明の結合体中でXとして用いられる改変型GLP-1(7-36)またはGLP-1(7-37)は、親油性置換基を含むWO99/43707およびWO98/08871に引用されたもの、またはより好ましくは8位にグリシン置換基を有するそのGLP-1類似体であってもよい。好ましくはペプチドXは、
Gly8-GLP-1(7-36)、
Gly8-GLP-1(7-37)、および
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys37(パルミトイル)
である。
ペプチド結合体
ペプチド配列Zは、ペプチド配列XのC末端またはN末端に結合していてもよく、あるいは2つのペプチド配列がXのC末端とN末端の両方にそれぞれ結合していてもよい。天然の(native)ペプチドXが遊離のC末端カルボン酸を有する場合、ペプチド配列Zは、ペプチドXのC末端またはペプチドXのN末端のいずれかに結合することができ、あるいはXのC末端およびN末端が両方ともそれぞれ個々のペプチド配列Zに結合していてもよい。あるいは、Zは、ペプチド配列X内のどこかにある、リジン、ヒスチジンもしくはアルギニンの側鎖上の窒素原子またはグルタミン酸もしくはアスパラギン酸の側鎖上のカルボニル基に結合していてもよい。1つの実施形態では、Zは、Xの配列内部に結合していてもよく、XのNおよび/またはC末端に結合していてもよい。配列がペプチド配列XのC末端に、N末端に、もしくはその両方に、またはその内部に結合すべきかどうかは、その特定のペプチドXによって異なり、当業者により容易に決定され得る。好ましくは、Xは、ペプチド結合を介して、好ましくはXのC末端によりZに結合する。
(b) 34〜39位の1〜5個の欠失からなる群より選択される改変を有し、かつ40位に親油性置換基を有するLysを有する、該エキセンジンの変異体、または
(c) (i) 8位のアラニンの、D-アラニン、グリシンもしくはα-アミノイソ酪酸(Aib)への置換、および
(ii) 親油性置換基
からなる群より選択される少なくとも1個の改変を有するGLP-1(7-36)またはGLP-1(7-37)、
である哺乳動物の血糖値を降下させるペプチドXと、
4〜20個のアミノ酸単位からなり、各アミノ酸単位が、Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Met、Ornおよび一般式I
-NH-C(R1)(R2)-C(=O)- (I)
(式中、R1およびR2は、水素、C1-6-アルキル、フェニルおよびフェニル-メチルからなる群より選択され、C1-6-アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、フェニルおよびフェニル-メチルは、C1-6-アルキル、C2-6-アルケニル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、あるいはR1とR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチル環を形成している。)
で表されるアミノ酸単位(例えば2,4-ジアミノブタン酸および2,3-ジアミノプロパン酸)からなる群より選択される、Xに共有結合したペプチド配列Zと、
を含むペプチド結合体に関する。好ましくは、Xは、GLP-1受容体に結合し、エキセンジン-4またはエキセンジン-3を含まない。
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号101)、
desPro36-エキセンジン-4(1-40)-NH2、
desPro36-desPro37-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
desPro36-desPro37-desPro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
desPro36-desPro37-desPro38-エキセンジン-4(1-40)-NH2 、
desAla35-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号105)、
desGly34-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号106)、
desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号108)、
desAla35-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号109)、
desPro36-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号110)、
化合物(iii) Gly8-GLP-1(7-36)-NH2 、Gly8-GLP-1(7-37)、および
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys37(パルミトイル)-NH2、
からなる群より選択され、ペプチド結合を介して(Lys)n(式中、nは4〜8の整数であり、好ましくはnは6である)からなる群より選択されるペプチド配列ZにC末端により結合している、GLP-1および/またはエキセンジン-4活性のアゴニストであるペプチドXを含む新規ペプチド結合体に関する。
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2(配列番号88)、
(Gly8,Lys37(パルミトイル)-GLP-1(7-36)(ヒト)-Lys7-NH2(配列番号89)、
desSer39-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号91)、
エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号92)、
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号93)、
desAla35-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号94)、
desGly34-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号95)、
desSer39-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号96)、
desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号97)、
desAla35-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号98)、
desPro36-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号99)、
Lys40(パルミトイル)エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号100)、
desPro36,Pro37-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
Lys6-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
Asn(Glu)5-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
Lys6-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
Asn(Glu)5-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
Ser8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2、
Aib8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2、
Lys6-Gly8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2、
Lys6-Gly8-GLP-1(7-36)-NH2、
(Gly8,Lys26(パルミトイル)-GLP-1(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2 、
(Gly8,Lys34(パルミトイル)-GLP-1(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2 、
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys8-NH2 、
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys10-NH2 、
Gly8-GLP-1(7-37)-Lys6-NH2 、ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩、である。
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号93)、
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2(配列番号88)、
desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、および
その上記で定義した塩である。
組成物
本発明はまた、本発明のエキセンジン変異体またはペプチド結合体を生理学的に許容されうる担体と組み合わせて含有する組成物に関する。かかる組成物は、経口投与、非経口投与(皮下投与(s.c.)、静脈内投与(i.v.)、筋肉内投与(i.m.)、硬膜外投与、直接脳内投与および腹腔内投与(i.p.)を含む)、直腸投与、気管内投与、鼻腔内投与、皮膚投与、腟内投与、口腔内投与、眼内投与、または肺投与に適した形態とすることができ、皮下投与または経口投与に適した形態とすることが好ましい。そして、かかる組成物は、例えば「Remington's Pharmaceutical Sciences」(第17版、Alfonso R. Gennaro (編)、Mark Publishing Company, Easton PA, U.S.A., 1985)およびさらに新しい版、ならびに「Drugs and the Pharmaceutical Sciences」シリーズ(Marcel Dekker)中の研究論文などの一般的な記載にあるような当業者に公知の方法で調製できる。該組成物は、例えば、カプセル、錠剤、エアロゾル、局所適用形態、液状または半液状形態(溶液、懸濁液、分散液、エマルジョン、ミセルまたはリポソーム等)などの通常の形態とすることができる。皮下投与に適切な液状組成物が好ましい。好ましい実施形態では、本発明の組成物は、皮下投与される。また別の好ましい実施形態では、本発明の組成物は、経口投与され、この場合は錠剤またはカプセルが好ましい投与形態の1つとして挙げられる。
- コア:活性化合物(本発明の化合物の遊離型または塩)100 mg;コロイド状シリコン二酸化物(Aerosil)1.5 mg;セルロース、ミクロクリスト(microcryst; Avicel)70 mg;修飾セルロースガム(Ac-Di-Sol)7.5 mg;ステアリン酸マグネシウム
- コーティング:HPMC 約9 mg;*Mywacett 9-40T 約0.9 mg;フィルムコーティングの可塑剤として用いる*アセチル化モノグリセリド
を含んでよい。
定義
本明細書中で用いる「ペプチド」という用語は、1つのアミノ酸のカルボキシル基ともう1つのアミノ酸のアミノ基とでアミドを形成することのより生成するあらゆる化合物をいう。ペプチド内のアミド結合は、ペプチド結合と呼ぶこともできる。ペプチドという用語は、通常、化合物内のアミド結合が、1つのアミノ酸のC-1ともう1つのアミノ酸のN-2との間で形成されている(ユーペプチド結合(eupeptide bond)と呼ぶこともある)化合物に用いられるが、他のアミド結合(イソペプチド結合と呼ぶこともある)により結合した残基を有する化合物を含む。約10〜20残基より少数の残基からなるペプチドは、オリゴペプチドと呼ぶ場合もあり、それ以上の残基からなるペプチドは、ポリペプチドと呼ぶ場合もある。約50残基より大きい特定の配列のポリペプチドは通常、タンパク質として知られている。本明細書中で用いる「天然のポリペプチド配列」という用語は、天然のL−アミノ酸残基からなり、かつ組換え宿主細胞により発現可能なポリペプチド配列をいう。本明細書中の化合物Xは全て40アミノ酸残基以下のペプチド配列である。
変異体および結合体の調製
本発明のエキセンジン変異体およびペプチド結合体は、当技術分野に公知の方法により調製することができる。即ち、変異体ならびにペプチド配列XおよびZは、溶液合成またはMerrifield型固相合成などの標準的なペプチド調製技法により調製できる。Boc(tert.ブチルオキシカルボニル)およびFmoc(9-フルオレニルメチルオキシカルボニル)のストラテジーが適用可能であると考えられる。
a) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、活性化型であるアミノ酸またはジペプチドを固定化ペプチド配列H-Z-SSMにカップリングされることにより、N-α-保護ペプチド断片を形成させ、
b) N-α-保護基を除去して、N末端が保護されていない固定化ペプチド断片を形成させ、
c) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、カルボキシルが活性化型であるさらなるアミノ酸またはジペプチドを固定化ペプチド断片のN末端にカップリングさせ、所望のペプチド配列Xが得られるまで、ステップb)とステップc)の除去/カップリングのステップを繰り返し、そして、
d) 固相支持体材料からペプチド結合体を切り離すこと、
を含む。
a) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、活性化型であるアミノ酸またはジペプチドを固相支持体材料(SSM)にカップリングされることにより、固定化保護アミノ酸または固定化保護ジペプチドを形成させ、
b) N-α-保護基を除去して、N末端が保護されていない固定化アミノ酸または固定化ペプチド断片を形成させ、
c) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、カルボキシルが活性化型であるさらなるアミノ酸またはジペプチドを固定化アミノ酸または固定化ペプチド断片のN末端にカップリングさせ、所望のペプチド配列Xが得られるまで、ステップb)とステップc)の除去/カップリングのステップを繰り返し、そして、
d) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、カルボキシルが活性化型であるさらなるアミノ酸またはジペプチドを固定化ペプチド断片のN末端にカップリングさせ、所望のペプチド配列Zが得られるまで、ステップb)とステップd)の除去/カップリングのステップを繰り返し、そして、
e) 固相支持体材料からペプチド結合体を切り離すこと、
を含む。
a) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、カルボキシルが活性化型であるアミノ酸またはジペプチドを固定化ペプチド配列H-Z-SSMにカップリングすることにより、固定化N-α-保護ペプチド断片を形成させ、
b) 該N-α-保護基を除去して、N末端が保護されていない固定化ペプチド断片を形成させ、
c) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、カルボキシルが活性化型であるさらなるアミノ酸またはジペプチドを固定化ペプチド断片のN末端にカップリングさせ、所望のペプチド配列Xが得られるまで、ステップb)とステップc)の除去/カップリングのステップを繰り返し、そして、
d) N-α-保護基を含む適切な保護基を有する、カルボキシルが活性化型であるさらなるアミノ酸またはジペプチドを固定化ペプチド断片のN末端にカップリングさせ、所望のペプチド配列Zが得られるまで、ステップb)とステップd)の除去/カップリングのステップを繰り返し、そして、
e) 固相支持体材料からペプチド結合体を切り離すこと、
を含む。
a) 本発明のエキセンジン変異体またはペプチド結合体のペプチド配列を含んでなるポリペプチド配列をコードする核酸配列および選択マーカーを含有する核酸構築物またはベクターを宿主細胞中に導入することによって、組換え宿主細胞を得て;
b) 該組換え宿主細胞を選別し;
c) 該組換え宿主細胞を該ポリペプチド配列の産生を可能にする条件下で培養し;
d) 該ポリペプチド配列をこの培養物から単離し;さらに
e) 場合によって、適当なプロテアーゼを用いて該ポリペプチド配列を切断することによって該ペプチド結合体を得ること、
を含む方法に関する。
ペプチド合成、一般的手順
・装置および合成方法
ペプチドを、濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器で、N-α-アミノ保護基として9-フルオレニルメチルオキシカルボニル(Fmoc)を、および側鎖官能基については好適な慣用の保護基を用いて、バッチ式で合成する(Drylandら, 1986, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1: 125-137)。
・溶媒
溶媒DMF(N,N-ジメチルホルムアミド、Riedel de-Haen, Germany)を、強陽イオン交換樹脂(Lewatit S 100 MB/H 強酸、Bayer AG Leverkusen, Germany)を充填したカラムに通して精製し、使用前に3,4-ジヒドロ-3-ヒドロキシ-4-オキソ-1,2,3-ベンゾトリアジン(Dhbt-OH)を加えて遊離アミンについて分析する(遊離アミンが存在する場合には黄色(Dhbt-O-陰イオン)となる)。溶媒DCM(ジクロロメタン、分析用グレード、Riedel de-Haen, Germany)は精製せずにそのまま使用する。THF(テトラヒドロフラン、分析用グレード、Riedel de-Haen, Germany)は精製せずにそのまま使用する。
・アミノ酸
Fmoc保護アミノ酸は好適に側鎖が保護されたものをMilliGen(UK)およびPerSeptive Biosystems GmbH Hamburg, Germanyから購入する。FmocLys(パルミトイル)-OHはBachem(Switzerland)から購入する。
・リンカー
(4-ヒドロキシメチルフェノキシ)酢酸(HMPA), Novabiochem, SwitzerlandをDICによって、プレフォーム型(preformed)またはin situ生成による1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HObt)エステルのいずれかで樹脂と結合させる。
・カップリング試薬
カップリング試薬ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)はRiedel de-Haen, Germanyから購入し、使用前に蒸留する。ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)はMerck-Schuchardt, Munchen, Germanyから購入し、蒸留精製する。
・固相支持体
Fmoc法により合成されるペプチドをDMF中0.05M以上の濃度のFmoc保護活性化アミノ酸を用いて次の種類の固相支持体上で合成する。TentaGel S樹脂0.22〜0.31mmol/g(TentaGel S-Ram、TentaGel S RAM-Lys(Boc)Fmoc:Rapp polymere, Germany)。
・触媒および他の試薬
ジイソプロピルエチルアミン(DIEA)はAldrich, Germanyから、エチレンジアミンはFlukaから、ピペリジンおよびピリジンはRiedel de-Haen, Frankfurt, Germanyから購入する。4-(N,N-ジ-メチルアミノ)ピリジン(DMAP)はFluka, Switzerlandから購入し、対称無水物(symmetrical anhydrides)を伴うカップリング反応の触媒として用いる。エタンジチオールはRiedel de-Haen, Frankfurt, Germanyから購入する。3,4-ジヒドロ-3-ヒドロキシ-4-オキソ-1,2,3-ベンゾトリアジン(Dhbt-OH)および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HObt)はFluka, Switzerlandから入手する。
・カップリング手順
第1のアミノ酸をDICまたはDCCによって、好適なN-α-保護アミノ酸から生成されるDMF中の対称無水物として結合させる。次のアミノ酸はDMF中でDICによって、好適なN-α-保護アミノ酸およびHObtから作製される、プレフォームHObtエステルとして結合させる。ニンヒドリン試験を80℃で行ってアシル化を確認し、試験中のFmoc脱保護を防ぐ(Larsen. B. D.およびHolm. A., 1994. Int. J. Peptide Protein Res. 43: 1-9)。
・HObtエステルとしてのカップリング
方法a. 3当量のN-α-アミノ保護アミノ酸を3当量のHObtおよび3当量のDICとともにDMFに溶解する。この溶液を室温で10分間置いた後、予め活性化したアミノ酸を加える前にDMF中0.2%Dhbt-OHの溶液で洗浄した樹脂に加える。
・プレフォーム対称無水物
6当量のN-α-アミノ保護アミノ酸をDCMに溶解し、0℃まで冷却する。DDCまたはDIC(3当量)を加え、反応を10分間続ける。溶媒を真空で留去し、残渣をDMFに溶解する。DCCを用いた場合にはDMF溶液を濾過し、すぐに樹脂、続いて0.1当量のDMAPを加える。
・N-α-アミノFmoc保護基の脱保護
Fmoc基の脱保護は、DMF中20%ピペリジン溶液で処理(1×5および1×10分)し、続いてDhbt-OHを排液のDMFに加えて黄色(Dhbt-O-)が検出されなくなるまでDMFで洗浄して行う。
・酸による樹脂からのペプチドの切断
方法a. ペプチドは、95%トリフルオロ酢酸(TFA, Riedel de-Haen, Frankfurt, Germany)-水v/vまたは95%TFAおよび5%エタンジチオールv/vで室温で2時間処理して樹脂から切断する。濾過した樹脂を95%TFA-水v/vで洗浄し、濾液および洗液を10%酢酸を加えて希釈する。得られた混合物をエーテルで3回抽出し、最後に凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で分析し、質量分析法(MS)により同定する。
・TentaGel S-RAM上でのバッチ式ペプチド合成
TentaGel S-RAM樹脂(100〜1000mg、0.22〜0.31mmol/g)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れる。樹脂をDMF(5〜10ml)で膨潤させ、Fmoc基を上記の手順に従って除去する。その配列に従う次のアミノ酸を、上記のようにDICによって、in situ生成されるFmoc保護HObtエステル(3当量)として結合させる。特に断りのない限り、カップリングは3時間続ける。樹脂から溶媒を抜き(drained)、DMF(4×5〜10ml、各2分)で洗浄し、過剰の試薬を除去する。ニンヒドリン試験を80℃で行ってすべてのアシル化を確認する。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5〜10ml、各5分)、DCM(3×5〜10ml、各1分)、さらに最後にジエチルエーテル(3×5〜10ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。
・HPLC条件
定組成(isocratic)HPLC分析は、LC-6Aポンプ、215nmで作動させるMERCK HITACHI L-4000 UV検出器および20μlループのRheodyne 7125 注入バルブからなるShimadzu systemで行う。定組成分析に用いるカラムは、Spherisorb ODS-2(100×3mm: 5-μm粒子)(MicroLab, Aarhus, Denmark)である。グラジェントを用いるHPLC分析は、MERCK HITACHI L-6200 インテリジェントポンプ、215nmで作動させるMERCK HITACHI L-4000 UV検出器および20μlループのRheodyne 7125 注入バルブで、またはWater 996 フォトダイオードアレイ検出器を備えたWater 600 E装置で行う。用いるカラムはRescorce(商標)RPC 1ml(Waters)またはLiChroCART 125-4、LiChrospher 100 RP-18(5μm)(Merck)である。バッファーAは水中0.1容量%TFA、バッファーBは90容量%アセトニトリル、9.9容量%水および0.1容量%TFAである。バッファーは、次のペプチド分析用のグラジェント、1)0%〜100%Bの直線グラジェント(30分)または2)0%B(2分)、0%〜50%B(23分)、50%〜100%B(5分)の直線グラジェントのいずれかを用いて流速1.3〜1.5ml/分でカラムを通して供給する。分取HPLCについては、Water 996 フォトダイオードアレイ検出器を備えたWater 600 E装置で精製を行う。用いるカラムはWaters Delta-Pak C-18 15μm, 100Å, 25×100mmである。グラジェント”2)”を流速9ml/分で用いる。
・質量分析法
質量スペクトルは、エレクトロスプレー(ESI)プローブ(ES-MS)を備えたFinnigan Mat LCQ装置およびマトリックスとしてβ-シアノ-p-ヒドロキシ桂皮酸を用いるTofSpec E. Fisons Instrument(MALDI-TOF)で得る。また、Micromass LCT装置によりスペクトルを得てもよい。
先行技術ペプチドのペプチド合成
(i)化合物(i)のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2
TentaGel S-RAM上での(エキセンジン-4(1-39)-NH2)(配列番号102)
乾燥TentaGel S-RAM樹脂(0.25mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。Fmoc基を上記の手順に従って除去し、その配列に従うペプチドを、「TentaGel S-RAM樹脂上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したように構築(assembled)する。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。粗ペプチドを上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率17%。
(ii)化合物(ii)のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-NH2
TentaGel S-RAM上での(des Ser39 エキセンジン-4(1-39)-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM樹脂(0.25mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。Fmoc基を上記の手順に従って除去し、その配列に従うペプチドを、「TentaGel S-RAM樹脂上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したように構成する。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。粗ペプチドを上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が97%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率22%。
(iii)化合物(iii)のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2
TentaGel S-RAM上での(Gly8-GLP1-(7-36)(ヒト)-NH2)(配列番号87)
乾燥TentaGel S-RAM樹脂(0.25mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。Fmoc基を上記の手順に従って除去し、その配列に従うペプチドを、「TentaGel S-RAM樹脂上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したように構成する。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。粗ペプチドを上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率9%。
本発明のペプチド配列の合成
1.化合物1のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-NH2
TentaGel S-RAM上での(des-Pro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2)(配列番号101)
乾燥TentaGel S-RAM樹脂(0.25mmol/g、1500mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。Fmoc基を上記の手順に従って除去し、その配列に従うペプチドを、「TentaGel S-RAM樹脂上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したように構築する。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。粗ペプチドを上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率18.3%。
2.化合物2のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(des-Pro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2)(配列番号93)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1500mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率22.1%。
3.化合物3のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2)(配列番号92)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率20.5%。
4.化合物4のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(Gly8-GLP1-(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2)(配列番号88)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率11.7%。
4a.化合物4のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での([Gly8]hGLP-1(7-36)-(Lys)6-NH2)(配列番号88)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、2013mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたガラス容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率13%。
5.化合物5のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Lys(パルミトイル)-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での([Gly8,Lys37(パルミトイル)]GLP1-(7-36)(ヒト)-(Lys)7-NH2)(配列番号89)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。試薬Fmoc-Lys(パルミトイル)-OHはDMFにわずかしか溶解しないため、若干方法を改変して結合させる。Fmoc-Lys(パルミトイル)-OH約400mgをDMFではなくTHF約6mlに溶解させる。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法bに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率9.3%。
6.化合物6のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys(パルミトイル)-Gly-Arg-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での([Gly8,Lys34(パルミトイル)]GLP1-(7-36)(ヒト)-(Lys)6-NH2)(配列番号90)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。試薬Fmoc-Lys(パルミトイル)-OHはDMFにわずかしか溶解しないため、若干方法を改変して結合させる。Fmoc-Lys(パルミトイル)-OH約400mgをDMFではなくTHF約6mlに溶解させる。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率4.2%。
7.化合物7のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(パルミトイル)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での([Gly8,Lys26(パルミトイル)]GLP1-(7-36)(ヒト)-(Lys)6-NH2)(配列番号103)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。試薬Fmoc-Lys(パルミトイル)-OHはDMFにわずかしか溶解しないため、若干方法を改変して結合させる。Fmoc-Lys(パルミトイル)-OH約400mgをDMFではなくTHF約6mlに溶解させる。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率2.2%。
8.化合物8のペプチド合成
H-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-NH2
TentaGel S-RAM-Fmoc上での(H-(Lys)6-des Pro36 エキセンジン-4(1-39)-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Fmoc樹脂(0.23mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。樹脂のFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率26%。
9.化合物9のペプチド合成
H-Lys6-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(H-Lys6-des Pro36 エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率32%。
10.化合物10のペプチド合成
H-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-His-Gly-Glu-Gly-Thr-PheThr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-LysGly-Arg-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(H-(Lys)6-([Gly8]hGLP-1(7-36)-(Lys)6-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率18%。
11.化合物11のペプチド合成
H-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(H-(Lys)6-[Gly8]hGLP-1(7-36)-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Fmoc樹脂(0.23mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。樹脂のFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が98%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率15%。
12.化合物12のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での([Gly8]hGLP-1(7-36)-(Lys)8-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が98%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率4.2%。
13.化合物13のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での([Gly8]hGLP-1(7-36)-(Lys)10-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率2%。
14.化合物14のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Ser-NH2
TentaGel S-RAM-Fmoc上での(H-des Pro36,Pro37,Pro38エキセンジン-4(1-39)-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Fmoc樹脂(0.23mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。樹脂のFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が95%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率11%。
15.化合物15のペプチド合成
H-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Ser-NH2
TentaGel S-RAM-Fmoc上での(H-(Lys)6-des Pro36,Pro37,Pro38 エキセンジン-4(1-39)-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Fmoc樹脂(0.23mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。樹脂のFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が94%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率17%。
16.化合物16のペプチド合成
H-Asn-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-lle-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Ser-NH2
TentaGel S-RAM-Fmoc上での(H-Asn-(Glu)5-des Pro36,Pro37,Pro38 エキセンジン-4(1-39)-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Fmoc樹脂(0.23mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。樹脂のFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率9%。
17.化合物17のペプチド合成.化合物3.
H-(Lys)6-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Ser-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(H-(Lys)6-des Pro36,Pro37,Pro38 エキセンジン-4(1-39)-(Lys)6-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が90%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率10%。
18.化合物18のペプチド合成
H-Asn-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-lle-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Ser-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(H-Asn-(Glu)5-des Pro36,Pro37,Pro38 エキセンジン-4(1-39)-(Lys)6-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が92%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率14%。
19.化合物19のペプチド合成
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Ser-(Lys)6-NH2
TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc上での(des Pro36,Pro37,Pro38エキセンジン-4(1-39)-(Lys)6-NH2)
乾燥TentaGel S-RAM-Lys(Boc)Fmoc樹脂(0.22mmol/g、1000mg)を濾過用のポリプロピレンフィルターを備えたポリエチレン容器に入れ、DMF(5ml)で2時間膨潤させる。第1のリジンのFmoc基を上記のように除去し、「TentaGel S-Ram-Lys(Boc)Fmoc上でのバッチ式ペプチド合成」に記載したようにペプチド配列が完成するまで合成を続ける。合成完了後、ペプチド-樹脂をDMF(3×5ml、各1分)、DCM(3×5ml、各1分)、ジエチルエーテル(3×5ml、各1分)で洗浄し、真空乾燥する。上記の方法aに従ってペプチドを樹脂から切断し、酢酸から凍結乾燥する。凍結乾燥粗生成物を上記の手順を用いる分取HPLCにより精製する。精製した生成物が均質であり、かつ純度が97%を超えていることがわかる。ペプチドはES-MSにより同定する。収率19%。
20.化合物2の組換え調製物
pYES0010発現ベクターの構築
酵母での異種構造発現のため、合成cDNAを構築した。化合物2をコードするタンパク質配列をサッカロミセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)コドン利用表((Saccharomyces Genomeデータベース)を用いて逆翻訳した。合成cDNAの翻訳を可能にするため、付加的ATG開始コドンを5’末端に付加し、TAA停止コドンを3’末端に付加した。構築物をアンピシリン耐性遺伝子を含むpYES2シャトルベクターのHindIIIおよびEcoRI部位に挿入し、新たな構築物をpYES0010と名付けた(図6参照)。続いてpYES0010を大腸菌(E.coli)へ形質転換し、アンピシリン選択圧下に置いた。陽性クローンを選択して配列決定した。
酵母への形質転換
pYES0010を酵母ハプロイドINVSc1:MaTa his3deltal leu2 trp1-289 ura3-52へと形質転換させる目的で酵母をYPD培地(1%酵母抽出物、2%ペプトン、2%グルコースおよび0.004%硫酸アデニン)で30℃で飽和状態まで増殖させた。1mlの培養物を形質転換用に回収した。2μlの10mg/ml担体DNAを加え、1μgのpYES0010を加えて混合した。0.5ml(45%PEG 4000、1M LiOAc、0.5M EDTAおよび1M Tris-HCl(pH7.5)を加えて混合した。最後に20μl 1M DTTを加え、混合物を室温で16時間インキュベートした。インキュベーション後、細胞を42℃で10分間熱ショックを与え、選択プレート(6.7%酵母窒素ベース、2%グルコース、20μg/mlアデニン、20μg/mlアルギニン、29μg/mlイソロイシン、20μg/mlヒスチジン、60μg/mlロイシン、20μg/mlリジン、20μg/mlトリプトファン、20μg/mlメチオニン、50μg/mlフェニルアラニン、150μg/mlバリン、30μg/mlチロシンおよび2.5%寒天)に播種した。形質転換細胞が現れるまで、プレートを30℃で3〜5日間インキュベートした。
化合物2の発現および精製
形質転換細胞を選択培地(6.7%酵母窒素ベース、2%グルコース、20μg/mlアデニン、20μg/mlアルギニン、29μg/mlイソロイシン、20μg/mlヒスチジン、60μg/mlロイシン、20μg/mlリジン、20μg/mlトリプトファン、20μg/mlメチオニン、50μg/mlフェニルアラニン、150μg/mlバリン、30μg/mlチロシン)で1.5日間培養した。細胞を回収し、ガラクトース誘導培地(6.7%酵母窒素ベース、4%ガラクトース、20μg/mlアデニン、20μg/mlアルギニン、29μg/mlイソロイシン、20μg/mlヒスチジン、60μg/mlロイシン、20μg/mlリジン、20μg/mlトリプトファン、20μg/mlメチオニン、50μg/mlフェニルアラニン、150μg/mlバリン、30μg/mlチロシン)に1日間再懸濁した。細胞を回収し、プロテアーゼ阻害剤(Roche)を含む10mM Tris-HCl pH7.5でホモジナイズした。溶解物を20,000×gで30分間遠心分離して清澄化した。上清を10mM Tris-HCl(pH7.5)で平衡状態にしたSuperdex 12 HR 10/30カラム(Amersham Pharmacia Biotech)に入れた。カラムを50mM 重炭酸アンモニウムバッファーpH8.0で溶出した。組換え化合物2を含むサンプルをプールした。N末端メチオニンをメチオニンアミノペプチダーゼにより除去し、サンプルをHPLCカラムでさらに精製した。
化合物2精製のためのHPLC設定
HPLCカラム:Kromasil RP C8; K 100-10-C8 nr. CER 2230.compound
温度: 22℃
流速: 35ml/分
HPLC溶媒:
A:水中0.10%トリフルオロ酢酸
B:アセトニトリル:水 90:10中0.10%トリフルオロ酢酸
化合物2をHPLCカラムから20%〜80%アセトニトリル中0.10%トリフルオロ酢酸で40分間溶出した。
21.ペプチド注射製剤
ペプチドの静脈注射用定用量製剤は、ペプチドを無菌、等張生理食塩水に溶解し、得られた溶液を滅菌条件下で不活性ガスを充填したガラス製アンプルに入れて調製する。各用量のペプチドを、不活性ガスを充填した乾燥状態のアンプルまたはキャップ付バイアルに入れる。ペプチドの静脈注射用の複数用量製剤は、ペプチドを無菌、等張生理食塩水に溶解し、得られた溶液をキャップ付バイアルに入れて、必要に応じて保存剤(例えば、0.1%パラヒドロキシベンゾエート、1%ベンジルアルコールまたは0.1%クロロクレゾール)を加えて、調製する。
複数用量ペプチド製剤の例
化合物2 12.25mg
リン酸二水素ナトリウム 1.380g
パラヒドロキシベンゾエート 0.1g
注射水溶液 100ml
in vivoにおけるタンパク質分解からの上記ペプチドの保護について調べる手段として、選択したタンパク質分解酵素の存在下でのペプチドおよびペプチド複合体のin vitroにおける安定性試験を用いる。実施する試験のねらいは、1種以上の酵素、ロイシンアミノペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼAおよびジペプチジルアミノペプチダーゼIVの溶液中、37℃における化合物4、5、6および7のin vitroにおける安定性と先行技術の化合物、化合物(iii)H-(Gly8)-hGLP-1(7-36)-NH2)およびhGLP-1(7-36)-NH2のものを測定して比較することであった。
in vitro安定性についての材料および装置
用いた水はMilli-Q 水処理システム(Millipore, Bedford, MA, USA)から得られる最高品質のものであった。アセトニトリル(ACN)はLabscan Ltd.(Dublin, Ireland)から入手されるスーパーグラジェント級のものであった。トリフルオロ酢酸(TFA)99.9%、リン酸二水素ナトリウム(NaH2PO4)、水酸化ナトリウム(NaOH)および用いた他のすべての化学薬品は分析用のものであった。ロイシンアミノペプチダーゼ(EC 3.4.11.1)、カルボキシペプチダーゼA(EC 3.4.17.1)およびジペプチジルペプチダーゼ(ジペプチジルアミノペプチダーゼIV、EC 3.4.14.5)はすべてSigma(St. Louis, MO, USA)から入手した。HP 1100バイナリーポンプ、HP 1100オートサンプラー、HP 1100カラムサーモスタットおよびHP 1100可変波長検出器からなるHewlett Packard HP 1100 HPLCシステムを用いてHPLC分析を行った。LCソフトウェア(Rev. A. 06. 01)用のHewlett Packard Chemstationを装置の制御およびデータ取得用に用いた。5μm、C18、300Å粒子を充填したVydac 238TP54(150×4.6mm I.D.)カラムを装置に取り付けて用いた。Stuart ScientificのSHT200Dブロックヒーターを安定性試験中のペプチド/酵素溶液の加熱に用いた。ロイシンアミノペプチダーゼ(25U/ml)もしくはカルボキシペプチダーゼA(1U/ml)を含むpH7.4の50mMリン酸バッファー溶液またはジペプチジルアミノペプチダーゼIV(0.5U/ml)を含むpH8.0の100mM重炭酸アンモニウムバッファーでの試験化合物の分解を37℃で調べた。1アリコート(100μl)の水中ペプチドストック溶液(1mg/ml)をエッペンドルフマイクロバイアル中の予め熱した酵素溶液900μlに加えて試験を開始した。その際、ペプチドの開始濃度を0.1mg/ml(約1.7・10-5〜1.8・10-5M)とした。ペプチド/酵素溶液を37℃に保ち、適当な時間間隔をおいて100μlのサンプルをペプチド/酵素溶液から回収し、アセトニトリル中の25%TFA20μlと十分に混合して酵素分解の進行を止めた。不活性化したサンプルをオートサンプラーバイアルに移し、インタクトな試験化合物の含量を以下に記載するHPLCにより調べた。酵素溶液中での試験化合物の半減期(t1/2)を、自然対数のプロットないし時間に対する残留濃度(すなわち、HPLCピーク高さ)から以下の式:
t1/2=1/kobs・ln(2)
(なお、kobsは観測した分解の見かけの一次速度定数)
を用いて算出した。
HPLC分析
上記のように実施した安定性試験のサンプルを上記の装置および次の試験条件を用いてグラジェントHPLC分析により分析した。
カラム温度:30℃
注入量:10μl
移動相A:水中0.1%TFA
移動相B:アセトニトリル(ACN)中0.085%TFA
グラジェント:32〜52% B、21分
検出:215nmのUV
各安定性試験から得られた結果を以下の表1に示している。この表から、調べたすべての酵素を含む溶液中で本発明の化合物の半減期がかなり延びていることがわかる。
ヘパリンにより安定させたラット(Sprague-Dawley)血漿中で2種類の試験化合物の分解を行った後、固相抽出およびLC-MSを組み合わせて行った。分解は720分間血漿中で行った。化合物(iii)の半減期がラット血漿中では238分であることがわかった。この試験結果とラット血漿中で466分であるとわかった化合物4の半減期とを比較した。
材料および方法
ヘパリンナトリウム中のブランクラット血漿(5000単位/mL)はHarlan Sera Lab Ltd.(Loughborough, UK)から入手した。試験に用いた試験物質については以下の表に記載している。in vitro試験では100μg/ml Milli-Q水の原液を用いた(26.0μM化合物(iii)H-(Gly8)-GLP-1-NH2または17.8μM 化合物4について記載)。
24.化合物5の単回用量の経口および非経口投与の糖尿病ob/obマウスの血中グルコースレベルへの影響
本発明の化合物は血中グルコースを低減させる特性を有している。このことについて、化合物5を用いて腹膜内(i.p.)および経口(p.o.)投与後のob/ob変異体マウスの血中グルコース(BG)レベルへの影響を試験し、考察した。化合物5の腹膜内投与では110μg/マウスの用量で糖尿病マウスのBGレベルが低下した。同様に、化合物5の経口投与では、より低い用量ではないが、1100μg/マウスの用量で同様のBGレベルの低下が認められた。
試験
優性変異レプチン(Tomita, T., Doull. V., Pollock. H. G., およびKrizsan, D. 1992. Pancreatic islets of obese hyperglycemic mice(ob/ob). Pancreas 7: 367-75)が原因で肥満である、40匹の雌糖尿病ob/obマウス(Umea系統、Bomholtgaard)を12:12時間明暗周期による制御された周囲条件下で収容し(3マウス/ケージ)、水を得るための自由な通路を設けた標準Altromin no 1324 dietで餌を与えた。到着時、動物は8週齢であった。マウスを2週間、新環境に順応させた後、試験を開始した。試験時点で動物は13週齢、体重41.8±3.2g(平均±SD; n=42)であった。ストレスにより誘導されるBG変動を軽減するため、試験1日前および3日前にマウスに処置を施した。試験当日、照明をつけて2〜3時間後に尾の先から採血した。分析のため、1滴の血液(<5μl)をグルコースストリップに落とし、Elite Autoanalyser、Bayer, Denmarkにより測定した。全血中グルコース(BG)濃度を固定化グルコースオキシダーゼ法により調べた。血中グルコースレベルは正常血糖から重症高血糖症との間で(範囲: 3.6〜15.6mM; 平均±SD; 9.4±3.3mM; n=42)変動した。BG<5.8mMであった6動物を試験から除外した(全体n=36)。残りの動物をBGレベルに基づいて等級別に分類し、各群間で平均BGに差がないようにした。最初の対照血液サンプリングから1時間後に薬剤を投与し、BGをt=60分、t=120分、t=240分、t=480分に測定した。
ペプチドおよび他の材料
化合物5(バッチ番号ZP 3.12画分1-2、精製)は、Department of Chemistry, Zealand Pharmaceuticalsによって合成された。投与の直前にペプチドを滅菌等張NaClに溶解して容量を0.2mlとした。同じ溶液をp.o.およびi.p.投与の両方に使用した。各血液サンプリング時に、データ記録用紙に各動物について記入した。
薬剤投与
動物に化合物5を投与した。最大用量は1100μg/マウス、最小用量は1.1μg/マウスであった。陰性対照として生理食塩水をp.o.により投与し、陽性対照として試験化合物をi.p.により110μg/マウスの用量を与えた。
25.in vivo試験
化合物1(des Pro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号101))、
化合物2(des Pro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号93))、
化合物(ii)(Gly8-GLP1-(7-36)(ヒト)-NH2(配列番号87))、
化合物4(Gly8-GLP1-(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2(配列番号88))および
化合物5(Gly8 Lys37(パルミトイル)-GLP1-(7-36)(ヒト)-Lys7-NH2(配列番号89))
について
ob/obマウスに、各ペプチドを種々の濃度で、経口および腹腔内投与し、これらの化合物が血糖値に影響を与えるか否かを調べた。用いた試験条件は実施例24に記載したものと同じである。
ペプチドおよび他の材料
des Pro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2(化合物1. 配列番号101)およびC末端に結合した付加的配列Lys6以外は同じペプチド、des Pro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(化合物2. 配列番号93)、Gly8-GLP1-(7-36)(ヒト)-NH2(化合物(ii). 配列番号87)およびC末端に結合した付加的配列Lys6以外は同じペプチド、Gly8-GLP1-(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2(化合物4. 配列番号88)ならびにGly8 Lys37(パルミトイル)-GLP1-(7-36)(ヒト)-Lys7-NH2(化合物5. 配列番号89)は、上記の方法で合成する。溶液については、投与当日の朝、動物に投与する直前に調製する。同じ溶液を経口および腹腔内投与の両方に使用する。すべてのペプチドを滅菌等張NaClに溶解して容量を0.2mlとする。すべての試験を同じマウスで行い、表2に示すペプチドの有効量を比較する。上記のように血液サンプリングを行い、表3に示す用量を動物に投与する。陰性対照として生理食塩水を経口投与する。この結果を表4に示している。
26.覚醒ラット十二指腸における胃腸送達後の化合物4および化合物(iii)の生物学的利用性
種々のペプチドに基づくGLP-1類似体が非経口使用のために開発されてきたが、これらのうちで経口投与後に薬理学的効果を有する物質はなかった[Holst, J. J. Enteroglucagon. Annu Rev Physiol. 59: 257-271. 1997]。これについては、覚醒ラット十二指腸からの試験化合物の吸収を調べることとした。化合物(iii)(Gly8)hGLP-1(7-36)-NH2を対照として用いた。
化学物質および試薬
ヘパリンナトリウム中のブランクラット血漿(5000単位/mL)はHarlan Sera Lab Ltd.(Loughborough, UK)から入手した。OASIS(商標)HLB固相抽出カラム、1cc、30mg吸着剤はWaters(Milford, MA, USA)から入手し、ISOLUTE C18(EC)、1cc、SPEカラムはIST(Mid Glamorgan, U.K.)から入手した。LC/MS分析は、オンライン脱ガス装置、バイナリーグラジェントポンプ、オートサンプラー、カラムオーブンからなるHP 1100装置、Hewlett Packard(Wilmington, DE. USA)とMicromass(Altrincham, UK)のQuattro Ultima質量分析計とを組み合わせて行った。LCおよびMSはともにMassLynx3.3ソフトウェアで制御した。MS検出の前にVydac 218MS52(2.1×250mm)カラム(Hesperia, CA, USA)でLC分離を行った。
薬剤および用量レベル
化合物4(バッチ番号ZP 7.97-5-F、4053g/mol)および化合物(iii)(バッチ番号ZP 7.73-2-G、3854g/mol)はFmoc法により自所で合成した。質量分析法により同定を行い、RP-HPLCにより試験化合物の両方のバッチの純度をそれぞれ97および99.7%と決定した。バッチのペプチド含量はZP 7.97-5-FおよびZP 7.73-2-Gそれぞれ72%および80%であった。ペプチドをパイロジェンを含んでいない等張生理食塩水に溶解し、1,000または10,000nmol/kgの用量を100μlの容量で十二指腸内カテーテルにより投与した。
動物
体重250〜350gの14匹のSprague-Dawleyラットを試験に用いた。動脈血サンプリングのため、皮下注射(s.c.)でHypnorm(登録商標)-Dormicum(登録商標)を用いてラットに麻酔をかけ、大腿動脈にカテーテルを挿入した。さらに十二指腸にも胃を切開することによりカテーテルを挿入した。手術後1週間ラットを回復させてから試験を開始した。試験当日、手術したラットは覚醒していた。十二指腸内のカテーテルが十二指腸にあるどうかを確認するため、試験直後にラットの解剖を行った。
サンプル処理
血液サンプルをt=-5、5、10、15、20、40および60分に採取した。血液を氷冷チューブを含むEDTAに採取し、直ちに4℃で5分間遠心分離(4,000×g)した。血漿(250μl)を250μlの抽出溶液(MeCN:0.18M 炭酸アンモニウム pH9.5、10:90v/v)の入った氷冷0.75ml PLCバイアルへ移した。血漿サンプルはSPEおよびLC/MS分析まで-20℃で保存した。
固相抽出
血漿サンプル(400μl)を含有する薬剤を950μl MeCN、次に950μl水で予め調整した固相抽出カラムに載せた。カラムを950μl水中2%TFA、次に同容量のMeCN:水(20:78 v/v)中2%TFAで洗浄した。分析物を500μl MeCN:水(60:38 v/v)中2%TFAで溶出し、LC/MSにより分析した。
LC/MS
サンプルをオートサンプラートレイ中で18℃に保ち、その後LCカラム(Vydac 218MS52(2.1×250mm))に20〜50μlを注入した。分離は30℃で行い、流速250μl/分および表1のグラジェントを用いた。試験化合物および対照薬剤の両方を、それぞれm/z=676.7およびm/z=1095.2および821.8(イオン種)を用い、単一イオン記録方式(SIR)により検出した。すべての装置の条件はMassLynxソフトウェアバージョン3.3で制御した。
27.ウサギおよびブタへのi.v.投与後の化合物1、化合物2、化合物4および化合物(iii)のin vivo薬物動態
本発明者らはラット血漿でGLP-1アゴニスト化合物4のin vitro安定性が対照薬剤である化合物(iii)に比べて向上していたことを示した。この効果がin vivoにおいても維持されるかどうかを確かめるため、2種類の化合物の薬物動態パラメーターをウサギで調べることとした。同じ試験条件を用いて、化合物1および2についてのこれらのパラメーターをウサギで測定した。同じ試験条件を用いてブタでも測定した。
化学薬品および試薬
ヘパリンナトリウム中のブランクウサギ血漿(5000単位/mL)はHarlan Sera Lab Ltd.(Loughborough, UK)から入手した。OASIS(商標)HLB固相抽出カラム、1cc、30mg吸着剤はWaters(Milford, MA, USA)から入手し、ISOLUTE C18(EC)、1cc、SPEカラムはIST(Mid Glamorgan, U.K.)から入手した。LC/MS分析は、オンライン脱ガス装置、バイナリーグラジェントポンプ、オートサンプラー、カラムオーブンからなるHP 1100装置、Hewlett Packard(Wilmington, DE. USA)とMicromass(Altrincham, UK)のQuattro Ultima質量分析計とを組み合わせて行った。LCおよびMSはともにMassLynx3.3ソフトウェアで制御した。MS検出の前にVydac 218MS52(2.1×250mm)カラム(Hesperia, CA, USA)でLC分離を行った。
薬剤および用量レベル
化合物4(バッチ番号ZP 7.97-5-F、4053g/mol)および化合物(iii)(バッチ番号ZP 7.73-2-G、3854g/mol)はFmoc法により所内で合成した。質量分析法により同定を行い、RP-HPLCにより試験化合物の両方のバッチの純度をそれぞれ97および99.7%と決定した。バッチのペプチド含量はZP 7.97-5-FおよびZP 7.73-2-Gそれぞれ72%および80%であった。ペプチドをパイロジェンを含んでいない等張生理食塩水に溶解し、両方のペプチドを1,000nmol/kgの用量でウサギおよびラットにi.v.投与した。
ウサギ
体重2.5〜3.0kgの15羽のニュージーランドシロウサギ(New Zealand White rabbit)を試験に用いた。試験当日、薬剤のi.v.投与および動脈血サンプリングのため、i.m.でHypnorm(登録商標)を、次にi.v.でDormicum(登録商標)を用いてウサギに麻酔をかけ、大腿静脈および動脈にカテーテルを挿入した。試験中、ウサギは覚醒していない状態にあった。
サンプル処理
血液サンプルをt=1、3、5、10、15、20、30、40、60、90、120、150、180および240分の時点で採取した。血液をEDTAを含む氷冷チューブに採取し、直ちに4℃で5分間遠心分離(20,000×g)した。血漿(250μl)を250μlの抽出溶液(MeCN:0.18M 炭酸アンモニウム pH9.5、10:90 v/v)の入った氷冷0.75ml PLCバイアルへ移した。血漿サンプルはSPEおよびLC/MS分析まで-20℃で保存した。
固相抽出
血漿サンプル(400μl)を含有する薬剤を950μl MeCN、次に950μl水で予め調整したOASIS(商標)HLB(化合物4)またはISOLUTE(商標)(化合物(iii))固相抽出カラムに入れた。カラムを950μl水中2%TFA、次に同容量のMeCN:水(20:78 v/v)中2%TFAで洗浄した。分析物を500μl MeCN:水(60:38 v/v)中2%TFAで溶出し、LC/MSにより分析した。
LC/MS
サンプルをオートサンプラートレイで18℃に保ち、その後LCカラム(Vydac 218MS52(2.1×250mm))に20ないし50μlを注入した。分離は30℃で行い、流速250μl/分および以下の表に示す通りのグラジェントを用いた。試験化合物および対照薬剤の両方を、それぞれm/z=676.7およびm/z=1095.2および821.8(イオン種)を用い、単一イオン記録方式(SIR)により検出した。すべての装置の条件はMassLynxソフトウェアバージョン3.3で制御した。
雄の糖尿病db/dbマウス(M&B. Bomholtgaard, LI, Skensved, Denmark)を用いる。この十分に解明されているモデルマウスはレプチン受容体の変異により遺伝的にグルコース代謝不全を有している。ホモ接合体db/dbマウスは制御できないインスリン非依存型糖尿病(NIDDM)のヒト患者のように煩渇多飲症、多尿症および糖尿、ならびに高血糖症の程度にかかわらず、生涯の最初の3週間での体重の増加を経験する。しかしながら、このモデルでの高血糖症は進行性ランゲルハンス島萎縮症と関連しており、ケトン症の可能性もあって、6〜8月齢で死亡することもある。そのため、それらの病状の進行およびその程度には注意を払わねばならない。それゆえ、GLP-1類似体の薬剤試験には16週齢未満のdb/dbマウスだけを用いることが好ましい。
ペプチド
ペプチドを0.1%ウシアルブミンを含有する0.1Mリン酸緩衝溶液(PBS)(5M NaOHを加えてpHを7.4に調整)に溶解する。すべての溶液については、試験直前の朝新たに調整する。動物を処置するビヒクルは、0.1%アルブミンを含有するPBSのみとする。
グルコース負荷試験および適用
経口グルコース負荷試験の前、動物に17時間(午後4時から翌日の午前9時まで)絶食させる。午前9時から、尾の先から採血し(t=-15分)、血中グルコースを測定する。全血中グルコース(mM)濃度を、製造業者のマニュアルに従って1滴の血液(<5μl、Elite Autoanalyser、Bayer, Denmark)を用いる固定化グルコースオキシダーゼ法により調べる。重症糖尿病の動物(>10mM)は排除する。動物には、最初の血液サンプリング直後にビヒクルまたは1用量の抗糖尿病性化合物の腹腔内(i.p.)注射を施す。すべての群において注入量は200μg/体重50gマウスとする。物質のi.p.投与から15分後、水に溶解した1g/kgグルコース(Sigma, St. Louis)の経口用量を与えて(200μg/体重50g)動物をホームケージに戻す(t=0)。血中グルコースレベルをt=30分、t=60分、t=120分およびt=240分に測定する。観察期間中、動物に絶食をさせる。各血液サンプリング時には、データ記録用紙に各動物について記入した。
算出および統計値
化合物の効果を調べるため、ベースライン(t=0)との絶対および相対差を各時点について算出する。全試験の曲線下の面積(AUC 0〜240分)を台形法を用いて求める。分類化当日に、すべての群でグルコース負荷が同じようになるようにマウスを振り分ける。しかしながら、時間内での糖尿病の進行を補正するため、試験中、ビヒクルで処置した対照群を毎日試験して、薬剤に対する応答をビヒクルで処置した時間制御動物で観察される応答と比較して示す。
29.db/dbマウスにおける化合物2および化合物(i)のOGGTへの効果
図7は実施例28に記載した同じ試験条件を用いて行ったOGTTでの化合物2および化合物(i)のAUCのプロットである。この図から、化合物2の血糖の低下効果と先行技術の化合物(iii)の効果とが同等であることがわかる。
30.化合物2、100nmol/kgをOGTTの24時間前までにi.p.投与した場合の経口グルコース負荷試験(OGTT)における化合物の長期効果
この試験ではdb/dbマウス、その他に最大用量100nmol/kg i.p.を用い、実施例28に記載した同じ試験条件を用いる。結果を図8に示している。この試験から、化合物2の作用期間はdb/dbマウスでは18時間までであるという結論になる。
Claims (48)
- (a) エキセンジン-4に対して少なくとも90%の相同性を有するエキセンジン、
(b) 34〜39位の1〜5個の欠失からなる群より選択される改変を有し、かつ40位に親油性置換基を有するLysを有する、該エキセンジンの変異体、または
(c) (i) 8位のアラニンの、D-アラニン、グリシンもしくはα-アミノイソ酪酸への置換、および
(ii) 親油性置換基
からなる群より選択される少なくとも1個の改変を有するGLP-1(7-36)またはGLP-1(7-37)、
からなる群より選択されるペプチドX(ただし、Xはエキセンジン-4またはエキセンジン-3ではない)と、
4〜20個のアミノ酸単位からなり、各アミノ酸単位が、Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Met、Ornおよび一般式I
-NH-C(R1)(R2)-C(=O)- (I)
(式中、R1およびR2は、水素、C1-6-アルキル、フェニルおよびフェニル-メチルからなる群より選択され、C1-6-アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、フェニルおよびフェニル-メチルは、C1-6-アルキル、C2-6-アルケニル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、あるいはR1とR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチル環を形成している。)
で表されるアミノ酸単位(例えば2,4-ジアミノブタン酸および2,3-ジアミノプロパン酸)からなる群より選択される、前記変異体に共有結合したペプチド配列Zと、
を含むペプチド結合体、ならびに該ペプチド結合体の薬学的に許容される塩またはC末端アミド。 - ペプチドXが、糖尿病の哺乳動物におけるグルコース耐性の改善に有効であることをさらに特徴とする、請求項1に記載のペプチド結合体。
- Zが、少なくとも1個のLysアミノ酸単位、好ましくは少なくとも2個のLysアミノ酸単位、例えば少なくとも3個のLysアミノ酸単位など、例えば少なくとも4個のLysアミノ酸単位、より好ましくは少なくとも5個のLysアミノ酸単位、例えば6個または7個のLysアミノ酸単位など、を含む請求項1または2に記載のペプチド結合体。
- ペプチド結合体の最小有効量と、ペプチドXの経口最小有効量の比が少なくとも1:5であることを特徴とする、請求項1〜3のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- 親油性基が、ペプチドXのLysのεアミノ基に結合したパルミトイルである、請求項1〜4のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- Xが、Gly8-GLP-1-(7-36)(ヒト)-NH2、Gly8-GLP-1-(7-36)(ヒト)、Gly8Lys37(パルミトイル)-GLP-1-(7-36)(ヒト)、Gly8Lys34(パルミトイル)-GLP-1-(7-36)(ヒト)、desSer39-エキセンジン-4(1-39)、エキセンジン-4(1-39)、desPro36-エキセンジン-4(1-39)、desAla35-エキセンジン-4(1-39)、desGly34-エキセンジン-4(1-39)、desSer39-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)、desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)、desAla35-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)、desPro36-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)およびLys40(パルミトイル)エキセンジン-4(1-39)、ならびにその遊離酸またはC末端第1級アミドおよび薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項1〜5のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- ペプチドXが、8位のアラニンのグリシンへの置換および26位、34位または37位のリジンへの親油性パルミトイル基の結合からなる群より選択される少なくとも1個の改変を有するGLP-1(7-36)-NH2、ならびにその遊離酸および薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項1〜5のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- 親油性置換基が、GLP-1のLysのεアミノ基に結合している、請求項7に記載のペプチド結合体。
- ペプチドXが、エキセンジン-4のアミノ酸配列から36〜38位のPro残基の1個、2個または3個が欠失したアミノ酸配列を有するエキセンジン変異体からなる群より選択され、好ましくはXが、エキセンジン-4(1-39)のアミノ酸配列から36〜38位のPro残基の1個、2個または3個が欠失したアミノ酸配列を有するエキセンジン変異体、その遊離酸またはC末端第1級アミドおよび薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項1〜5のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- Xが、
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
desPro36,Pro37-エキセンジン-4(1-39)-NH2、および
desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
からなる群より選択される、請求項9に記載のペプチド結合体。 - Xがペプチド結合を介してZに結合していることを特徴とする、請求項1〜10のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- ZがXのC末端カルボニル基に共有結合しているか、またはZが該変異体のN末端窒素原子に共有結合しているか、または第1配列(Z)が該変異体のC末端カルボニル基に共有結合し、かつ第2配列(Z)がXのN末端窒素原子に共有結合しているか、またはZが該変異体のリジン、アルギニンもしくはヒスチジン残基の側鎖にある窒素原子もしくはグルタミン酸もしくはアスパラギン酸の側鎖にあるカルボニル基に共有結合している、請求項1に記載のペプチド結合体。
- Zが、4〜15個、好ましくは4〜10個、より好ましくは4〜7個、最も好ましくは6〜7個のアミノ酸単位からなる、請求項1〜12のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- ペプチド配列(Z)の全体の電荷が、pH7で0〜+15の範囲、好ましくは0〜+10の範囲、例えば0〜+8の範囲など、より好ましくは0〜+7または0〜+6の範囲である、請求項1〜13のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- Z中の各アミノ酸単位が、互いに独立に、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Orn、2,4-ジアミノブタン酸、2,3-ジアミノプロパン酸およびMetからなる群より選択される、請求項1〜14のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- Zが(Lys)n(式中、nは4〜15の整数、好ましくは4〜10の整数、例えば4〜8の整数など、例えば4〜7の整数である)である、請求項1〜15のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- ZがLys6またはLys7である、請求項1〜16のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- ZがXのC末端に結合したLys6である、請求項1に記載のペプチド結合体。
- Zがペプチド結合を介してXのN末端に結合しており、アミノ酸残基が、Asn、Asp、GluおよびGlnからなる群、好ましくはAsnおよびGluからなる群より選択され、好ましくはZがAsn-(Glu)n(式中、nは3〜7の整数、好ましくは5である)からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する、請求項1に記載のペプチド結合体。
- Zが、
〔ここで、各Xaaは、互いに独立に、Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Arg、His、Met、Orn、および式I
-NH-C(R1)(R2)-C(=O)- (I)
(式中、R1およびR2は、水素、C1-6-アルキル、フェニルおよびフェニル-メチルからなる群より選択され、C1-6-アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、フェニルおよびフェニル-メチルは、C1-6-アルキル、C2-6-アルケニル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、スルホノおよびカルボキシからなる群より選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよく、あるいはR1とR2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチル環を形成している。)
で表されるアミノ酸(例えば2,4-ジアミノブタン酸(Dbu)および2,3-ジアミノプロパン酸(Dpr))からなる群より選択されるものである。〕
である、請求項13に記載のペプチド結合体。 - アミノ酸残基がL-配置である、請求項1〜20のいずれか1項に記載のペプチド結合体。
- ペプチド結合体が、
desSer39-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号91)、
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号93)、
desAla35-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号94)、
desGly34-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号95)、
desSer39-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号96)、
desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号97)、
desAla35-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号98)、
desPro36-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号99)、
Lys40(パルミトイル)エキセンジン-4(1-39)-Lys7-NH2(配列番号100)、
desPro36,Pro37-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
Lys6-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
Asn(Glu)5-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
Lys6-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
Asn(Glu)5-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2(配列番号88)、
Lys6-Gly8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2 、
Lys6-Gly8-GLP-1(7-36)-NH2 、
(Gly8,Lys37(パルミトイル)-GLP-1(7-36)(ヒト)-Lys7-NH2(配列番号89)、
(Gly8,Lys26(パルミトイル)-GLP-1(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2 、
Gly8,Lys34(パルミトイル)-GLP-1(7-36)(ヒト)-Lys6-NH2 、
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys8-NH2 、
Gly8-GLP-1(7-36)-Lys10-NH2 、
Gly8-GLP-1(7-37)-Lys6-NH2 、ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩、
からなる群より選択される、請求項1に記載のペプチド結合体。 - GLP-1活性および/またはエキセンジン-4活性のペプチドアゴニストであるXを含む新規ペプチド結合体であって、Xが、
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号101)、
desPro36-desPro37-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
desPro36-desPro37-desPro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
desAla35-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号105)、
desGly34-エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号106)、
desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号108)、
desAla35-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号109)、
desPro36-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2(配列番号110)、
Gly8-Glp-1(7-36)-NH2 、およびGly8-Glp-1(7-36)、
からなる群より選択され、かつXがペプチド結合を介して(Lys)n(式中、nは4〜8の整数であり、好ましくはnは6である)からなる群より選択されるペプチド配列ZにC末端により結合している、前記ペプチド結合体、ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩。 - エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号92)ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩である、ペプチド結合体。
- 治療に使用するための、請求項1〜24のいずれか1項に記載の薬学的に活性な結合体。
- 請求項1〜24のいずれか1項に記載の薬学的に活性なペプチド結合体および製薬上許容される担体を含む、医薬組成物。
- 活性ペプチド結合体が、
desPro36-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2(配列番号93)、
Lys6-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、
Asn(Glu)5-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2、
Asn(Glu)5-desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、
desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-Lys6-NH2、ならびにその遊離酸および薬学的に許容される塩、
からなる群より選択される、請求項25または26に記載の医薬組成物。 - 活性ペプチド結合体が、Gly8-GLP-1(7-36)-Lys6-NH2(配列番号88)、Gly8-GLP-1(7-36)-Lys7-NH2 、ならびにその遊離酸および薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項25または26に記載の医薬組成物。
- 親エキセンジンの変異体であって、該親エキセンジンは、エキセンジン-4に対して少なくとも90%の相同性を有するアミノ酸配列を有し、該変異体は、血糖値を降下させ、かつ哺乳動物のGLP-1受容体に結合し、かつ
(a)34〜38位の1〜5個の欠失、および
(b)εアミノ基にアミド結合を介して親油性置換基が結合している40位のLys、
からなる群より選択される少なくとも1個の改変を有する、前記変異体。 - 親エキセンジンがエキセンジン-4である、請求項29に記載の変異体。
- エキセンジン-4がエキセンジン-4(1-39)である、請求項30に記載の変異体。
- 該変異体が、εアミノ基にアミド結合を介してパルミトイル基が結合している40位のLysを含む、請求項29〜31のいずれか1項に記載の変異体。
- 変異体が、desPro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2、desPro36,Pro37,Pro38-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、desPro36,Pro37-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、desAla35-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、desGly34-エキセンジン-4(1-39)-NH2 、desSer39-(Lys40(パルミトイル)エキセンジン-4(1-39)-NH2 、desGly34-(Lys40(パルミトイル))エキセンジン-4(1-39)-NH2 、desAla35-(Lys40(パルミトイル)エキセンジン-4(1-39)-NH2 、ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項29〜32のいずれか1項に記載の変異体。
- 請求項29〜33のいずれか1項に記載の親エキセンジンの変異体および生理学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
- 変異体が、desPro36-エキセンジン-4(1-39)-NH2、ならびにその遊離酸およびその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項34に記載の医薬組成物。
- 治療に使用するための請求項35に記載の組成物。
- 請求項1〜24のいずれか1項に記載のペプチド結合体または天然ポリペプチド配列を有する請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体を製造する方法であって、
f) 該エキセンジン変異体または該ペプチド結合体のペプチド配列を含むポリペプチド配列をコードする核酸配列および選択マーカーを含有する核酸構築物またはベクターを、宿主細胞に導入することによって組換え宿主細胞を得て、
g) 該組換え宿主細胞を選別し、
h) 該組換え宿主細胞を、該ポリペプチド配列の産生を可能にする条件下で培養し、
i) 該ポリペプチド配列を培養物から分離し、そして
j) 場合によって、適当なプロテアーゼを用いて該ポリペプチド配列を切断することによって該ペプチド結合体を得ること、
を含む前記方法。 - 天然ポリペプチド配列を有する、請求項1〜37のいずれか1項に記載のペプチド結合体をコードするポリペプチド配列。
- 医薬組成物の製造のための、請求項1〜24のいずれか1項に記載のペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体の使用。
- I型糖尿病またはII型糖尿病、インスリン抵抗性症候群、肥満、摂食障害、高血糖症、代謝異常および胃の疾患の治療に使用する医薬組成物を製造するための、請求項1〜24のいずれか1項に記載の薬学的に活性なペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体の使用。
- 血糖値を上昇させることが知られているホルモン、例えばアドレナリン、グルココルチコイド、成長ホルモンおよびグルカゴンを含むカテコールアミンによって誘発された血糖値の上昇に関連した疾患状態の治療に使用する医薬組成物を製造するための、請求項1〜24のいずれか1項に記載の薬学的に活性なペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体の使用。
- 血糖値の調節に使用する医薬組成物を製造するための、請求項1〜24のいずれか1項に記載の薬学的に活性なペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体の使用。
- 胃内容排出の調節に使用する医薬組成物を製造するための、請求項1〜24のいずれか1項に記載の薬学的に活性なペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体の使用。
- 哺乳動物においてインスリン放出を刺激する方法であって、インスリン分泌刺激に有効な量の請求項1〜24のいずれか1項に記載のペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体を投与することを含む、前記方法。
- 哺乳動物において血糖値を降下させる方法であって、該哺乳動物の血糖値を降下させるのに有効な量の請求項1〜24のいずれか1項に記載のペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体を投与することを含む、前記方法。
- 哺乳動物において血漿脂質レベルを降下させる方法であって、該哺乳動物の血漿脂質レベルを降下させるのに有効な量の請求項1〜24のいずれか1項に記載のペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体を投与することを含む、前記方法。
- 哺乳動物において心筋梗塞後の死亡率および罹患率を低下させる方法であって、心筋梗塞後の死亡率および罹患率を低下させるのに有効な量の請求項1〜24のいずれか1項に記載のペプチド結合体または請求項29〜33のいずれか1項に記載のエキセンジン変異体を投与することを含む、前記方法。
- エキセンジン4およびエキセンジン4変異体の血漿内半減期を増大させる方法であって、好ましくは6個のリジン残基からなるポリペプチド配列を、ペプチド結合を介して該エキセンジン4またはエキセンジン4変異体のC末端に連結させることを含む、前記方法。
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Cited By (1)
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JP2017510636A (ja) * | 2014-03-21 | 2017-04-13 | エニジェン カンパニー.,リミテッド. | 新規なエキセナチド類似体及びその用途 |
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CN1162446C (zh) * | 2001-05-10 | 2004-08-18 | 上海华谊生物技术有限公司 | 促胰岛素分泌肽衍生物 |
CN1158304C (zh) * | 2001-05-10 | 2004-07-21 | 上海华谊生物技术有限公司 | 蛙皮抗菌肽衍生物 |
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EP1494704A1 (en) * | 2002-04-04 | 2005-01-12 | Novo Nordisk A/S | Glp-1 agonist and cardiovascular complications |
CA2490564A1 (en) * | 2002-07-04 | 2004-01-15 | Zealand Pharma A/S | Glp-1 and methods for treating diabetes |
JP2006501820A (ja) * | 2002-09-06 | 2006-01-19 | バイエル・フアーマシユーチカルズ・コーポレーシヨン | 修飾glp−1受容体アゴニストおよびそれらの薬理学的使用法 |
US7273921B2 (en) | 2002-09-25 | 2007-09-25 | Novo Nordisk A/S | Method for producing acylated peptides |
BR0314996A (pt) | 2002-10-02 | 2005-08-09 | Zealand Pharma As | Composição, composição farmaceuticamente aceitável, método para produzir a composição, métodos para estabilizar a exendina-4 (1-39) ou uma sua variante, derivado ou análogo contra a degradação, antes, durante ou após o uso pretendido, para tratar doenças, para tratar de estados de doenças associados com nìveis elevados de glicose do sangue, para a regulação dos nìveis de glicose do sangue, para a regulação do esvaziamento gástrico, para estimular a liberação de insulina em um mamìfero para reduzir o nìvel de glicose do sangue em um mamìfero, para reduzir o nìvel de lipìdeos plasmáticos em um mamìfero, para reduzir a mortalidade e a morbidez após o infarto miocárdico em um mamìfero, para estimular a liberação de insulina em um mamìfero, e para produzir uma exendina (1-39) estabilizada, e, exendina (1-39) estabilizada |
CA2502118A1 (en) * | 2002-10-11 | 2004-05-06 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. | Glp-1 derivatives and transmicosal absorption preparations thereof |
US6818721B2 (en) | 2002-12-02 | 2004-11-16 | Rpo Pty Ltd. | Process for producing polysiloxanes and use of the same |
EP1688148A1 (en) * | 2002-12-03 | 2006-08-09 | Novo Nordisk A/S | Combination treatment using exendin-4 and thiazolidinediones |
EP1569682A2 (en) * | 2002-12-03 | 2005-09-07 | Novo Nordisk A/S | Combination treatment using exendin-4 and thiazolidinediones |
GB0300571D0 (en) | 2003-01-10 | 2003-02-12 | Imp College Innovations Ltd | Modification of feeding behaviour |
EP1626981A4 (en) * | 2003-03-04 | 2006-11-22 | Biorexis Pharmaceutical Corp | PROTEINS PROTECTED AGAINST DIPEPTIDYLPEPTIDASE |
DE10314610A1 (de) | 2003-04-01 | 2004-11-04 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Neues Diphenylazetidinon mit verbesserten physiologischen Eigenschaften, Verfahren zu dessen Herstellung, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und dessen Verwendung |
US8008255B2 (en) | 2003-05-30 | 2011-08-30 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for enhanced transmucosal delivery of peptides and proteins |
US7008957B2 (en) | 2003-07-25 | 2006-03-07 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Bicyclic cyanoheterocycles, process for their preparation and their use as medicaments |
US7094800B2 (en) | 2003-07-25 | 2006-08-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Cyanopyrrolidides, process for their preparation and their use as medicaments |
US7094794B2 (en) | 2003-07-28 | 2006-08-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Substituted thiazole-benzoisothiazole dioxide derivatives, process for their preparation and their use |
DE10335092B3 (de) | 2003-08-01 | 2005-02-03 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Substituierte Benzoylureido-o-benzoylamide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
TW200522976A (en) | 2003-09-19 | 2005-07-16 | Novo Nordisk As | Novel plasma protein affinity tags |
EP2932981B1 (en) * | 2003-09-19 | 2021-06-16 | Novo Nordisk A/S | Albumin-binding derivatives of GLP-1 |
CN100444898C (zh) * | 2003-09-19 | 2008-12-24 | 诺沃挪第克公司 | 治疗肽的清蛋白结合型衍生物 |
WO2005046716A1 (en) * | 2003-11-13 | 2005-05-26 | Novo Nordisk A/S | Soluble pharmaceutical compositions for parenteral administration comprising a glp-1 peptide and a insulin peptide of short time action for treatment of diabetes and bulimia |
US20060287221A1 (en) | 2003-11-13 | 2006-12-21 | Novo Nordisk A/S | Soluble pharmaceutical compositions for parenteral administration comprising a GLP-1 peptide and an insulin peptide of short time action for treatment of diabetes and bulimia |
CN104826116A (zh) | 2003-11-20 | 2015-08-12 | 诺沃挪第克公司 | 对于生产和用于注射装置中是最佳的含有丙二醇的肽制剂 |
ATE498404T1 (de) | 2003-12-09 | 2011-03-15 | Novo Nordisk As | Regulierung der nahrungspräferenz mit glp-1- agonisten |
CA2550217A1 (en) * | 2003-12-12 | 2005-07-07 | Michael A. Brownlee | Glp-1 (9-36) methods and compositions |
MXPA06006745A (es) | 2003-12-18 | 2006-08-18 | Novo Nordisk As | Compuestos glp-1 novedosos. |
WO2005077072A2 (en) | 2004-02-11 | 2005-08-25 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides with selectable properties |
US8076288B2 (en) | 2004-02-11 | 2011-12-13 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides having glucose lowering activity |
CN1318587C (zh) * | 2004-04-30 | 2007-05-30 | 成都芝田生物工程有限公司 | 酰胺化Exendin-4多肽的重组制备方法 |
US8410047B2 (en) | 2004-06-11 | 2013-04-02 | Novo Nordisk A/S | Counteracting drug-induced obesity using GLP-1 agonists |
DE102004043153B4 (de) * | 2004-09-03 | 2013-11-21 | Philipps-Universität Marburg | Erfindung betreffend GLP-1 und Exendin |
AU2012202855B2 (en) * | 2004-09-03 | 2015-02-26 | Philipps-Universitat Marburg | GLP-1 and exendin related invention |
US8030273B2 (en) | 2004-10-07 | 2011-10-04 | Novo Nordisk A/S | Protracted exendin-4 compounds |
EP1799710A2 (en) | 2004-10-07 | 2007-06-27 | Novo Nordisk A/S | Protracted glp-1 compounds |
US20090011976A1 (en) * | 2004-11-12 | 2009-01-08 | Novo Nordisk A/S | Stable Formulations Of Peptides |
DE102004058306A1 (de) * | 2004-12-01 | 2006-07-27 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Carboxy-terminal amidierten Peptiden |
US8716221B2 (en) | 2005-01-14 | 2014-05-06 | Wuxi Grandchamp Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Modified exendins and uses thereof |
EP2505207B1 (en) | 2005-01-14 | 2015-04-22 | Wuxi Grandchamp Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Modified exendins and uses thereof |
EP2390264A1 (en) | 2005-02-11 | 2011-11-30 | Amylin Pharmaceuticals Inc. | GIP analog and hybrid polypeptides with selectable propperties |
WO2007022123A2 (en) | 2005-08-11 | 2007-02-22 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides with selectable properties |
JP2008531730A (ja) | 2005-03-04 | 2008-08-14 | キュアーディーエム、インク. | I型真性糖尿病及び他の症状を治療するための方法及び薬学的組成物 |
WO2006097535A2 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Novo Nordisk A/S | Peptide agonists of the glucagon family with secretin like activity |
TWI362392B (en) | 2005-03-18 | 2012-04-21 | Novo Nordisk As | Acylated glp-1 compounds |
JP5755398B2 (ja) * | 2005-03-18 | 2015-07-29 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | 伸長されたglp−1化合物 |
EP2295452A1 (en) | 2005-05-04 | 2011-03-16 | Zealand Pharma A/S | Glucagon-like-peptide-2 (GLP-2) analogues |
US7393919B2 (en) | 2005-05-25 | 2008-07-01 | Cure Dm, Inc. | Peptides, derivatives and analogs thereof, and methods of using same |
BRPI0614649A2 (pt) | 2005-08-11 | 2011-04-12 | Amylin Pharmaceuticals Inc | polipeptìdeos hìbridos com propriedades selecionáveis |
DK1919947T3 (da) | 2005-08-26 | 2013-03-18 | Abbvie Inc | Terapeutisk aktive alfa-MSH analoger |
DE102006031955A1 (de) | 2006-07-11 | 2008-01-17 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Insulinanaloga mit dibasischem B-Kettenende |
DE102006031962A1 (de) | 2006-07-11 | 2008-01-17 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Amidiertes Insulin Glargin |
CN101511868B (zh) | 2006-07-24 | 2013-03-06 | 比奥雷克西斯制药公司 | 毒蜥外泌肽融合蛋白 |
RU2009108280A (ru) | 2006-08-08 | 2010-09-20 | Санофи-Авентис (Fr) | Ариламиноарилалкилзамещенные имидазолидин-2,4-дионы, способы их получения, содержащие эти соединения лекарственные средства и их применение |
US20100179131A1 (en) | 2006-09-07 | 2010-07-15 | Nycomed Gmbh | Combination treatment for diabetes mellitus |
EA023886B1 (ru) | 2006-11-08 | 2016-07-29 | Зеаланд Фарма А/С | Селективные аналоги глюкагонподобного пептида-2 (glp-2) |
JP2010043001A (ja) * | 2006-11-09 | 2010-02-25 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd | Glp−1誘導体とその用途 |
WO2008064306A2 (en) | 2006-11-22 | 2008-05-29 | Curedm, Inc. | Methods and compositions relating to islet cell neogenesis |
TWI428346B (zh) | 2006-12-13 | 2014-03-01 | Imp Innovations Ltd | 新穎化合物及其等對進食行為影響 |
RU2413528C2 (ru) | 2007-01-18 | 2011-03-10 | Открытое Акционерное Общество "Валента Фармацевтика" | Лекарственный препарат для лечения сахарного диабета на основе экзенатида и даларгина, применение и способ лечения |
DE102007005045B4 (de) | 2007-01-26 | 2008-12-18 | Sanofi-Aventis | Phenothiazin Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
WO2008098693A2 (en) * | 2007-02-16 | 2008-08-21 | Bayer Healthcare Ag | Convergent synthesis of glp-1 |
PT2152663E (pt) | 2007-06-04 | 2014-06-03 | Univ Ben Gurion | Compostos de triarilo e composições que compreendem os mesmos |
ATE520714T1 (de) | 2007-06-15 | 2011-09-15 | Zealand Pharma As | Glucagonanaloga |
EP2025674A1 (de) | 2007-08-15 | 2009-02-18 | sanofi-aventis | Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
NZ599756A (en) | 2007-08-30 | 2013-09-27 | Curedm Group Holdings Llc | Compositions and methods of using proislet peptides and analogs thereof |
EP2190873B1 (en) | 2007-09-05 | 2015-07-22 | Novo Nordisk A/S | Truncated glp-1 derivatives and their therapeutical use |
EP2679597A1 (en) | 2007-09-05 | 2014-01-01 | Novo Nordisk A/S | Glucagon-like peptide-1 derivatives and their pharmaceutical use |
CA2703113A1 (en) | 2007-10-27 | 2009-04-30 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Insulinotropic peptide synthesis using solid and solution phase combination techniques |
DE102007054497B3 (de) | 2007-11-13 | 2009-07-23 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate und Verfahren zu deren Herstellung |
JP5241849B2 (ja) | 2007-11-16 | 2013-07-17 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | インスリン及びインスリン分泌性ペプチドを含む薬学的組成物 |
DE102008003566A1 (de) | 2008-01-09 | 2009-07-16 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil |
DE102008025008A1 (de) | 2008-05-24 | 2009-11-26 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil |
RU2524423C2 (ru) | 2008-01-09 | 2014-07-27 | Санофи-Авентис Дойчланд Гмбх | Новые производные инсулина с чрезвычайно замедленным профилем время/действие |
DE102008025007A1 (de) | 2008-05-24 | 2009-11-26 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil |
NZ586589A (en) | 2008-01-09 | 2012-04-27 | Sanofi Aventis Deutschland | Novel insulin analogues having an extremely delayed time-action profile |
DE102008003568A1 (de) | 2008-01-09 | 2009-07-16 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Neue Insulinderivate mit extrem verzögertem Zeit-/ Wirkungsprofil |
SG192405A1 (en) * | 2008-06-17 | 2013-08-30 | Univ Indiana Res & Tech Corp | Gip-based mixed agonists for treatment of metabolic disorders and obesity |
CA2953975C (en) | 2008-06-27 | 2019-11-26 | Duke University | Therapeutic agents comprising elastin-like peptides |
WO2010003624A2 (en) | 2008-07-09 | 2010-01-14 | Sanofi-Aventis | Heterocyclic compounds, processes for their preparation, medicaments comprising these compounds, and the use thereof |
CN102112157B (zh) | 2008-08-06 | 2013-05-29 | 诺沃-诺迪斯克保健股份有限公司 | 具有延长的体内效能的缀合蛋白 |
DE102009038210A1 (de) | 2009-08-20 | 2011-03-03 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten |
ES2650621T3 (es) | 2008-10-17 | 2018-01-19 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Combinación de una insulina y un agonista de GLP-1 |
DE102008053048A1 (de) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten |
DE102008051834A1 (de) | 2008-10-17 | 2010-04-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten |
EP2344519B1 (en) | 2008-11-07 | 2016-09-28 | The General Hospital Corporation | C-terminal fragments of glucagon-like peptide-1 (glp-1) |
WO2010068601A1 (en) | 2008-12-08 | 2010-06-17 | Sanofi-Aventis | A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof |
PL2373681T3 (pl) * | 2008-12-10 | 2017-07-31 | Glaxosmithkline Llc | Kompozycje farmaceutyczne albiglutydu |
PL2370460T3 (pl) | 2008-12-15 | 2014-09-30 | Zealand Pharma As | Analogi glukagonu |
CN102292348B (zh) | 2008-12-15 | 2015-07-08 | 西兰制药公司 | 胰高血糖素类似物 |
CA2747155A1 (en) | 2008-12-15 | 2010-06-24 | Zealand Pharma A/S | Glucagon analogues |
KR20110126589A (ko) | 2008-12-15 | 2011-11-23 | 질랜드 파마 에이/에스 | 글루카곤 유사체 |
TWI504405B (zh) | 2009-01-22 | 2015-10-21 | Novo Nordisk Healthcare Ag | 穩定的生長激素化合物 |
WO2011003823A1 (de) * | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Langsamwirkende insulinzubereitungen |
CN107080836A (zh) * | 2009-07-06 | 2017-08-22 | 赛诺菲-安万特德国有限公司 | 含有甲硫氨酸的水性胰岛素制备物 |
AP3329A (en) | 2009-07-13 | 2015-06-30 | Zealand Pharma As | Acylated glucagon analogues |
CN101987868B (zh) * | 2009-07-30 | 2013-09-04 | 江苏豪森医药集团有限公司 | Glp-1类似物的衍生物或其可药用盐和用途 |
WO2011015649A1 (en) | 2009-08-06 | 2011-02-10 | Novo Nordisk Health Care Ag | Growth hormones with prolonged in-vivo efficacy |
WO2011023754A1 (en) | 2009-08-26 | 2011-03-03 | Sanofi-Aventis | Novel crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrates, pharmaceuticals comprising these compounds and their use |
US20120264685A1 (en) | 2009-10-22 | 2012-10-18 | Rajesh Bahekar | Short chain peptidomimetics based orally active glp 1 agonist and glucagon receptor antagonist |
PL2324853T3 (pl) | 2009-11-13 | 2016-01-29 | Sanofi Aventis Deutschland | Liksysenatyd jako dodatek do metforminy w leczeniu cukrzycy typu 2 |
AU2009238272B2 (en) * | 2009-11-13 | 2014-05-08 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method of treatment of diabetes type 2 comprising add-on therapy to metformin |
PE20121362A1 (es) | 2009-11-13 | 2012-10-17 | Sanofi Aventis Deutschland | Composicion farmaceutica que comprende despro36exendina-4(1-39)-lys6-nh2, insulina gly(a21)-arg(b31)-arg(b32) y metionina |
TWI468171B (zh) | 2009-11-13 | 2015-01-11 | Sanofi Aventis Deutschland | 含glp-1激動劑及甲硫胺酸之醫藥組成物 |
DK2329848T4 (da) | 2009-11-13 | 2019-09-09 | Sanofi Aventis Deutschland | Lixisenatid som supplerende behandling til insulin glargin og metformin til behandling af type 2-diabetes |
DE102010011919A1 (de) | 2010-03-18 | 2011-09-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Pharmazeutische Zusammensetzung umfassend einen GLP-1-Agonisten und Methionin |
JP2011105609A (ja) * | 2009-11-13 | 2011-06-02 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | メトホルミンへの付加療法を含む2型糖尿病の治療方法 |
CN102892425A (zh) | 2010-01-20 | 2013-01-23 | 西兰制药公司 | 心脏病症的治疗 |
BR112012018116B1 (pt) | 2010-01-22 | 2022-06-21 | Novo Nordisk Health Care Ag | Conjugados de hormônio do crescimento com eficácia in vivo prolongada |
AU2011208620B2 (en) | 2010-01-22 | 2015-04-16 | Novo Nordisk Health Care Ag | Stable growth hormone compounds |
EP2542565A1 (en) | 2010-03-01 | 2013-01-09 | Novo Nordisk A/S | Preparative rp-hplc method for purifying peptides |
WO2011107494A1 (de) | 2010-03-03 | 2011-09-09 | Sanofi | Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
WO2011123943A1 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | Mount Sinai Hospital | Methods for treating disorders of the gastrointestinal tract using a glp-1 agonist |
DE102010015123A1 (de) | 2010-04-16 | 2011-10-20 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung |
CN103003300B (zh) | 2010-04-27 | 2017-06-09 | 西兰制药公司 | Glp‑1受体激动剂和胃泌素的肽缀合物及其用途 |
US8691763B2 (en) | 2010-05-04 | 2014-04-08 | Glaxosmithkline Llc | Methods for treating or preventing cardiovascular disorders and providing cardiovascular protection |
AU2011202239C1 (en) | 2010-05-19 | 2017-03-16 | Sanofi | Long-acting formulations of insulins |
EP2389945A1 (en) | 2010-05-28 | 2011-11-30 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Pharmaceutical composition comprising AVE0010 and insulin glargine |
CN101891823B (zh) * | 2010-06-11 | 2012-10-03 | 北京东方百泰生物科技有限公司 | 一种Exendin-4及其类似物融合蛋白 |
EP2582709B1 (de) | 2010-06-18 | 2018-01-24 | Sanofi | Azolopyridin-3-on-derivate als inhibitoren von lipasen und phospholipasen |
US8530413B2 (en) | 2010-06-21 | 2013-09-10 | Sanofi | Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments |
UY33462A (es) | 2010-06-23 | 2012-01-31 | Zealand Pharma As | Analogos de glucagon |
AP2013006671A0 (en) | 2010-06-24 | 2013-01-31 | Zealand Pharma As | Glucagon analogues |
TW201221505A (en) | 2010-07-05 | 2012-06-01 | Sanofi Sa | Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament |
TW201215387A (en) | 2010-07-05 | 2012-04-16 | Sanofi Aventis | Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament |
TW201215388A (en) | 2010-07-05 | 2012-04-16 | Sanofi Sa | (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments |
RU2546520C2 (ru) | 2010-08-30 | 2015-04-10 | Санофи-Авентис Дойчланд Гмбх | Применение ave0010 для производства лекарственного средства для лечения сахарного диабета 2 типа |
WO2012061466A2 (en) | 2010-11-02 | 2012-05-10 | The General Hospital Corporation | Methods for treating steatotic disease |
BR112013014942B1 (pt) | 2010-12-16 | 2020-01-28 | Novo Nordisk As | composições sólidas para administração, e seus usos |
TW201236692A (en) | 2011-02-02 | 2012-09-16 | Sanofi Aventis Deutschland | Prevention of hypoglycaemia in diabetes mellitus type 2 patients |
EP2683702B1 (de) | 2011-03-08 | 2014-12-24 | Sanofi | Neue substituierte phenyl-oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
US8895547B2 (en) | 2011-03-08 | 2014-11-25 | Sanofi | Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof |
US8901114B2 (en) | 2011-03-08 | 2014-12-02 | Sanofi | Oxathiazine derivatives substituted with carbocycles or heterocycles, method for producing same, drugs containing said compounds, and use thereof |
EP2683699B1 (de) | 2011-03-08 | 2015-06-24 | Sanofi | Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
US8871758B2 (en) | 2011-03-08 | 2014-10-28 | Sanofi | Tetrasubstituted oxathiazine derivatives, method for producing them, their use as medicine and drug containing said derivatives and the use thereof |
WO2012120051A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Mit adamantan- oder noradamantan substituierte benzyl-oxathiazinderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
EP2683704B1 (de) | 2011-03-08 | 2014-12-17 | Sanofi | Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
WO2012120054A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
EP2683701B1 (de) | 2011-03-08 | 2014-12-24 | Sanofi | Mit benzyl- oder heteromethylengruppen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
US20120277147A1 (en) | 2011-03-29 | 2012-11-01 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Prevention of hypoglycaemia in diabetes mellitus type 2 patients |
ES2612278T3 (es) | 2011-04-12 | 2017-05-16 | Novo Nordisk A/S | Derivados de GLP-1 doble-acilados |
JP6442284B2 (ja) | 2011-05-13 | 2018-12-19 | サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | 2型糖尿病の処置のためのリキシセナチド及びメトホルミン |
US20130040878A1 (en) | 2011-05-13 | 2013-02-14 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Pharmaceutical combination for use in the treatment of diabetes type 2 patients |
US8735349B2 (en) | 2011-05-13 | 2014-05-27 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method for improving glucose tolerance in a diabetes type 2 patient of younger than 50 years and having postprandial plasma glucose concentration of at least 14 mmol/L |
US9821032B2 (en) | 2011-05-13 | 2017-11-21 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin |
WO2013006692A2 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | The General Hospital Corporation | Methods of treatment using a pentapeptide derived from the c-terminus of glucagon-like peptide 1 (glp-1) |
CN103917241A (zh) | 2011-08-29 | 2014-07-09 | 赛诺菲-安万特德国有限公司 | 用于2型糖尿病患者中的血糖控制的药物组合 |
TWI559929B (en) | 2011-09-01 | 2016-12-01 | Sanofi Aventis Deutschland | Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease |
WO2013037390A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
EP2567959B1 (en) | 2011-09-12 | 2014-04-16 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
WO2013045413A1 (en) | 2011-09-27 | 2013-04-04 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
US20130096060A1 (en) | 2011-10-04 | 2013-04-18 | Jens Stechl | Glp-1 agonist for use in the treatment of stenosis or/and obstruction in the pancreatic duct system |
WO2013050378A1 (en) | 2011-10-04 | 2013-04-11 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Glp-1 agonist for use in the treatment of stenosis or/and obstruction in the biliary tract |
BR112014010200A2 (pt) | 2011-10-28 | 2020-10-27 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | combinação farmacêutica, bem como seu uso na preparação de um medicamento para o tratamento de diabetes tipo 2 |
MX2014005351A (es) | 2011-11-03 | 2014-05-28 | Zealand Pharma As | Conjugados de gastrina peptidicos de agonistas de receptor glp-1. |
CN103087174B (zh) * | 2011-11-03 | 2015-11-18 | 华东师范大学 | 一种glp-1衍生物dlg3312及其固相化学合成方法 |
JP2015500823A (ja) | 2011-12-09 | 2015-01-08 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | Glp−1アゴニスト |
AP2014007797A0 (en) | 2011-12-23 | 2014-07-31 | Boehringer Ingelheim Int | Glucagon analogues |
KR102072202B1 (ko) | 2012-03-22 | 2020-01-31 | 노보 노르디스크 에이/에스 | Glp-1 펩티드의 조성물 및 그것의 제조 |
HUE042757T2 (hu) | 2012-03-22 | 2019-07-29 | Novo Nordisk As | Szállító szert tartalmazó készítmények és elõállításuk |
TR201802689T4 (tr) | 2012-05-03 | 2018-03-21 | Zealand Pharma As | Glukagon benzeri peptit-2 (glp-2) analogları. |
AR090937A1 (es) | 2012-05-03 | 2014-12-17 | Zealand Pharma As | Compuestos agonista duales de gip-glp-1 y metodos para usarlos |
ES2871328T3 (es) | 2012-06-20 | 2021-10-28 | Novo Nordisk As | Formulación de comprimido que comprende un péptido y un agente de suministro |
CN109456400A (zh) | 2012-07-23 | 2019-03-12 | 西兰制药公司 | 胰高血糖素类似物 |
TWI608013B (zh) | 2012-09-17 | 2017-12-11 | 西蘭製藥公司 | 升糖素類似物 |
EP2911655A1 (en) | 2012-10-24 | 2015-09-02 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Tpl2 kinase inhibitors for preventing or treating diabetes and for promoting -cell survival |
WO2014077575A1 (ko) * | 2012-11-13 | 2014-05-22 | 다인바이오 주식회사 | 덱에이 효소반응으로 조제한 항비만 및 항당뇨 효능을 갖는 한천 유래 네오아가로올리고당 복합 조성물 |
KR20140088837A (ko) * | 2013-01-03 | 2014-07-11 | 한미약품 주식회사 | N-말단 전하가 변형된 인슐린 분비 펩티드 유도체 |
TWI641381B (zh) | 2013-02-04 | 2018-11-21 | 法商賽諾菲公司 | 胰島素類似物及/或胰島素衍生物之穩定化醫藥調配物 |
HUE042381T2 (hu) | 2013-04-03 | 2019-06-28 | Sanofi Sa | Cukorbetegség kezelése hosszan ható inzulinkészítményekkel |
WO2014166836A1 (en) | 2013-04-05 | 2014-10-16 | Novo Nordisk A/S | Growth hormone compound formulation |
EP3016975B1 (en) * | 2013-07-04 | 2019-01-16 | Novo Nordisk A/S | Derivatives of glp-1 like peptides, and uses thereof |
GB201315335D0 (en) | 2013-08-29 | 2013-10-09 | Of Singapore | Amino diacids containing peptide modifiers |
PT3057984T (pt) | 2013-10-17 | 2018-10-24 | Boehringer Ingelheim Int | Análogos de glucagon acilados |
US9988429B2 (en) | 2013-10-17 | 2018-06-05 | Zealand Pharma A/S | Glucagon analogues |
JP6657101B2 (ja) | 2013-11-05 | 2020-03-04 | ベン グリオン ユニバーシティ オブ ザ ネガフ リサーチ アンド ディベロップメント オーソリティ | 糖尿病及びそれから生じる疾患合併症の治療のための化合物 |
CA2929107C (en) | 2013-11-06 | 2023-09-26 | Zealand Pharma A/S | Glucagon-glp-1-gip triple agonist compounds |
CN105849122B (zh) | 2013-11-06 | 2021-04-30 | 西兰制药公司 | Gip-glp-1双重激动剂化合物及方法 |
CN103613657B (zh) * | 2013-11-28 | 2016-01-13 | 孙玉琨 | 缩短肽链的Exendin4及其基因工程应用 |
RU2016132342A (ru) | 2014-01-09 | 2018-02-14 | Санофи | Стабилизированные фармацевтические составы на основе инсулиновых аналогов и/или инсулиновых производных |
MX2016008978A (es) | 2014-01-09 | 2016-10-04 | Sanofi Sa | Formulaciones farmaceuticas de analogos de insulina y/o derivados de insulina estabilizadas y que estan libres de glicerol. |
SG11201604706TA (en) | 2014-01-09 | 2016-07-28 | Sanofi Sa | Stabilized pharmaceutical formulations of insulin aspart |
EP3985016A1 (en) | 2014-10-29 | 2022-04-20 | Zealand Pharma A/S | Gip agonist compounds and methods |
RS64300B1 (sr) | 2014-12-12 | 2023-07-31 | Sanofi Aventis Deutschland | Formulacija fiksnog odnosa insulin glargina/liksisenatida |
US20160235818A1 (en) | 2015-01-16 | 2016-08-18 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Treatment of Pediatric Type 2 Diabetes Mellitus Patients |
TWI748945B (zh) | 2015-03-13 | 2021-12-11 | 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 | 第2型糖尿病病患治療 |
TW201705975A (zh) | 2015-03-18 | 2017-02-16 | 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 | 第2型糖尿病病患之治療 |
ES2805743T3 (es) | 2015-03-24 | 2021-02-15 | Inst Nat Sante Rech Med | Método y composición farmacéutica para uso en el tratamiento de la diabetes |
US10336802B2 (en) | 2015-04-16 | 2019-07-02 | Zealand Pharma A/S | Acylated glucagon analogue |
BR112019010624A2 (pt) | 2016-12-09 | 2019-10-22 | Zealand Pharma As | agonistas duplos de glp-1/glp-2 acilados e composição |
TWI791539B (zh) | 2017-06-16 | 2023-02-11 | 丹麥商西蘭製藥公司 | 用於投予類升糖素胜肽-2(glp-2)類似物的給藥方案 |
FR3082426A1 (fr) | 2018-06-14 | 2019-12-20 | Adocia | Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant au moins de l'insuline humaine a21g et un suppresseur de glucagon a action prandiale |
CN110996905A (zh) | 2017-07-27 | 2020-04-10 | 阿道恰公司 | 至少包含人胰岛素a21g和餐时作用胰高血糖素抑制剂的可注射水溶液形式的组合物 |
PE20211202A1 (es) | 2017-08-24 | 2021-07-05 | Novo Nordisk As | Composiciones de glp-1 y sus usos |
PL3746111T3 (pl) | 2018-02-02 | 2024-01-15 | Novo Nordisk A/S | Stałe kompozycje zawierające agonistę glp-1 i sól kwasu n-(8-(2- hydroksybenzoilo)amino kaprylowego i substancję poślizgową |
EP3774837A1 (en) | 2018-04-10 | 2021-02-17 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Method for cleavage of solid phase-bound peptides from the solid phase |
CA3096495A1 (en) | 2018-04-10 | 2019-10-17 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Lixisenatide synthesis with capping |
FR3083700B1 (fr) | 2018-07-13 | 2021-03-12 | Adocia | Formulation thermostable d'insuline humaine a21g |
EP3628683A1 (en) | 2018-09-28 | 2020-04-01 | Zealand Pharma A/S | Formulations of glucagon-like-peptide-2 (glp-2) analogues |
EP3628682A1 (en) | 2018-09-28 | 2020-04-01 | Zealand Pharma A/S | Formulations of glucagon-like-peptide-2 (glp-2) analogues |
TWI799680B (zh) * | 2019-01-29 | 2023-04-21 | 美商美國禮來大藥廠 | 製備gip/glp1雙重促效劑之方法 |
CN109721653B (zh) * | 2019-03-05 | 2023-02-03 | 嘉兴学院 | 一种胰高血糖素样肽-1片段类似物及其应用 |
US20210093698A1 (en) | 2019-09-13 | 2021-04-01 | Sanofi | Treatment of type 2 diabetes mellitus |
EP3858373A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-04 | Adocia | Compositions comprising at least an amylin receptor agonist and a glp-1 receptor agonist |
PE20221575A1 (es) | 2020-02-18 | 2022-10-06 | Novo Nordisk As | Formulaciones farmaceuticas |
EP3915571A1 (en) | 2020-05-29 | 2021-12-01 | Adocia | Pharmaceutical composition in the form of an injectable aqueous solution including at least a rapid acting insulin analog and a glucagon suppressor with prandial action |
EP3915572A1 (en) | 2020-05-29 | 2021-12-01 | Adocia | Pharmaceutical composition in the form of an injectable aqueous solution including at least a rapid acting insulin analog and a glucagon suppressor with prandial action |
KR20230125802A (ko) * | 2020-12-11 | 2023-08-29 | 아이피2아이피오 이노베이션스 리미티드 | 신규 화합물 |
EP4129324A1 (en) | 2021-08-02 | 2023-02-08 | Adocia | Compositions comprising at least an amylin receptor agonist and a glp-1 receptor agonist |
WO2023036862A1 (en) | 2021-09-10 | 2023-03-16 | Zealand Pharma A/S | Process for formulating compositions comprising glucagon-like-peptide-2 (glp-2) analogues |
WO2023118416A1 (en) | 2021-12-23 | 2023-06-29 | Zealand Pharma A/S | Processes for synthesizing glucagon-like-peptide 2 (glp-2) analogues |
WO2024068848A1 (en) | 2022-09-28 | 2024-04-04 | Zealand Pharma A/S | Methods for treating obesity |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998011126A1 (en) * | 1996-09-09 | 1998-03-19 | Zealand Pharmaceuticals A/S | Peptide prodrugs containing an alpha-hydroxyacid linker |
WO1998030231A1 (en) * | 1997-01-07 | 1998-07-16 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Use of exendins and agonists thereof for the reduction of food intake |
WO1999007404A1 (en) * | 1997-08-08 | 1999-02-18 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Novel exendin agonist compounds |
Family Cites Families (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4288627A (en) | 1980-02-12 | 1981-09-08 | Phillips Petroleum Company | Oxidation of thiols employing cobalt molybdate/triethylamine catalyst |
US5545618A (en) | 1990-01-24 | 1996-08-13 | Buckley; Douglas I. | GLP-1 analogs useful for diabetes treatment |
DE69107455T3 (de) | 1990-05-09 | 2004-09-23 | Novozymes A/S | Eine ein endoglucanase enzym enthaltende zellulasezubereitung. |
DK36392D0 (da) | 1992-03-19 | 1992-03-19 | Novo Nordisk As | Anvendelse af kemisk forbindelse |
US5424286A (en) | 1993-05-24 | 1995-06-13 | Eng; John | Exendin-3 and exendin-4 polypeptides, and pharmaceutical compositions comprising same |
JP2001501593A (ja) * | 1996-08-08 | 2001-02-06 | アミリン・ファーマシューティカルズ,インコーポレイテッド | 胃腸運動を調節するための方法 |
UA72181C2 (uk) * | 1996-08-30 | 2005-02-15 | Ново Нордіск А/С | Похідна глюкагоноподібного пептиду-1 (варіанти), фармацевтична композиція та спосіб одержання лікувального засобу (варіанти), спосіб лікування діабету (варіанти) і ожиріння |
US6006753A (en) | 1996-08-30 | 1999-12-28 | Eli Lilly And Company | Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery |
US6277819B1 (en) | 1996-08-30 | 2001-08-21 | Eli Lilly And Company | Use of GLP-1 or analogs in treatment of myocardial infarction |
UA65549C2 (uk) | 1996-11-05 | 2004-04-15 | Елі Ліллі Енд Компані | Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція |
AU5065198A (en) * | 1996-11-15 | 1998-06-10 | Maria Grazia Masucci | Fusion proteins having increased half-lives |
EP0981611A1 (en) | 1997-02-05 | 2000-03-01 | 1149336 Ontario Inc. | Polynucleotides encoding proexendin, and methods and uses thereof |
US5846937A (en) | 1997-03-03 | 1998-12-08 | 1149336 Ontario Inc. | Method of using exendin and GLP-1 to affect the central nervous system |
NZ504258A (en) * | 1997-11-14 | 2002-12-20 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Exendin 3 and 4 agonist compounds for the treatment of diabetes |
DK1032587T4 (da) * | 1997-11-14 | 2013-04-08 | Amylin Pharmaceuticals Llc | Hidtil ukendte exendinagonist-forbindelser |
ATE366115T1 (de) | 1998-02-13 | 2007-07-15 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Inotropische und diuretische effekte von exendin und glp-1 |
WO1999043708A1 (en) * | 1998-02-27 | 1999-09-02 | Novo Nordisk A/S | Glp-1 derivatives of glp-1 and exendin with protracted profile of action |
EP1062240B1 (en) | 1998-02-27 | 2010-04-28 | Novo Nordisk A/S | N-terminally modified glp-1 derivatives |
IL138214A0 (en) * | 1998-03-09 | 2001-10-31 | Zealand Pharmaceuticals As | Pharmacolgically active peptide conjugates having a reduced tendency towards enzymatic hydrolysis |
US6451974B1 (en) * | 1999-03-17 | 2002-09-17 | Novo Nordisk A/S | Method of acylating peptides and novel acylating agents |
JP2002544127A (ja) * | 1999-04-30 | 2002-12-24 | アミリン・ファーマシューティカルズ,インコーポレイテッド | 修飾されたエキセンジンおよびエキセンジン・アゴニスト |
US6528486B1 (en) * | 1999-07-12 | 2003-03-04 | Zealand Pharma A/S | Peptide agonists of GLP-1 activity |
CA2490564A1 (en) * | 2002-07-04 | 2004-01-15 | Zealand Pharma A/S | Glp-1 and methods for treating diabetes |
BR0314996A (pt) * | 2002-10-02 | 2005-08-09 | Zealand Pharma As | Composição, composição farmaceuticamente aceitável, método para produzir a composição, métodos para estabilizar a exendina-4 (1-39) ou uma sua variante, derivado ou análogo contra a degradação, antes, durante ou após o uso pretendido, para tratar doenças, para tratar de estados de doenças associados com nìveis elevados de glicose do sangue, para a regulação dos nìveis de glicose do sangue, para a regulação do esvaziamento gástrico, para estimular a liberação de insulina em um mamìfero para reduzir o nìvel de glicose do sangue em um mamìfero, para reduzir o nìvel de lipìdeos plasmáticos em um mamìfero, para reduzir a mortalidade e a morbidez após o infarto miocárdico em um mamìfero, para estimular a liberação de insulina em um mamìfero, e para produzir uma exendina (1-39) estabilizada, e, exendina (1-39) estabilizada |
-
1999
- 1999-08-09 EP EP99610043A patent/EP1076066A1/en not_active Withdrawn
-
2000
- 2000-07-12 PT PT90029372T patent/PT2112161E/pt unknown
- 2000-07-12 WO PCT/DK2000/000393 patent/WO2001004156A1/en active Application Filing
- 2000-07-12 CA CA2378431A patent/CA2378431C/en not_active Expired - Lifetime
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998011126A1 (en) * | 1996-09-09 | 1998-03-19 | Zealand Pharmaceuticals A/S | Peptide prodrugs containing an alpha-hydroxyacid linker |
WO1998030231A1 (en) * | 1997-01-07 | 1998-07-16 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Use of exendins and agonists thereof for the reduction of food intake |
WO1999007404A1 (en) * | 1997-08-08 | 1999-02-18 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Novel exendin agonist compounds |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017510636A (ja) * | 2014-03-21 | 2017-04-13 | エニジェン カンパニー.,リミテッド. | 新規なエキセナチド類似体及びその用途 |
US11103557B2 (en) | 2014-03-21 | 2021-08-31 | Anygen Co., Ltd. | Exenatide analogue and use thereof |
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