FI114983B - Menetelmä bentsimidatsoli-7-karboksylaatin C-tyyppiä olevan kiteen valmistamiseksi - Google Patents

Description

114983

Menetelmä bentsimidatsoli-7-karboksylaatin C-tyyppiä olevan kiteen valmistamiseksi Förfarande for framställning av C-typ kristall av bensimidazol- 7-karboxylat

Keksintö kohdistuu menetelmään valmistaa bensimidatsolijohdannainen, jolla on voimakas farmakologinen vaikutus. Keksinnön mukaisella yhdisteellä on tehokas verenpainetta alentava vaikutus ja vahva angiotensiini-II antagonistinen vaikutus, ja se on käyttökelpoinen terapeuttisena aineena verenkiertosairauksien, kuten verenpainetautien, sydänsairauksien (esim. hyper-kardia, sydänvika, sydäninfarkti, jne.), halvausten, aivohalvausten, munuaistaudin, jne. hoidossa.

Reniini-angiotensiinijärjestelmä liittyy kehon homeostaatti-seen toimintaan, joka kontrolloi aldosteronijärjestelmään liittyvää koko elimistöön vaikuttavaa verenpainetta, kehon nestepitoisuutta, elektrolyyttien tasapainoa, jne. Reniini-angiotensiinijärjestelmän ja kohonneen verenpaineen välinen suhde on selkiintynyt, kun on kehitetty angiotensiinin II ·· muuntavan entsyymin inhibiittoreita (ACE inhibiittori) (tämä . muuntava entsyymi tuottaa angiotensiiniä II, jolla on tehokas

t I

:> verisuonia supistava vaikutus). Koska angiotensiini II supis- • t · ’· ; taa verisuonia nostaen verenpainetta angiotensiini II-resep- ! ,* torien kautta solukalvolla, angiotensiini II :n antagonisteja, ; ; kuten ACE-inhibiittoreita, voidaan käyttää angiotensiinin ’· * aiheuttaman korkean verenpaineen hoitamisessa.

Monilla angiotensiini II :n sukuisilla aineilla, kuten sarala-siini, [Sar1, Ile8]AII ja sen kaltaisilla, on ilmoitettu ole-van tehokas angiotensiini 11-antagonismi .

t » » » » ! »

• I

Kuitenkin näiden peptidiantagonistien on ilmoitettu olevan !’· vaikutukseltaan lyhytkestoisia ruuansulatuskanavan ulkopuoli- sen annostuksen jälkeen ja olevan tehottomia suun kautta annettavassa annostuksessa (M. A. Ondetti and D. W. Cushman, 114983 2

Annual Reports in Medicinal Chemistry, 13., 82-91(1978)).

Olisi hyvin toivottavaa kehittää muuhun kuin peptidiin perustuvia angiotensiini II-antagonisteja näiden ongelmien ratkaisemiseksi. Tämän alan aikaisimpia tutkimuskohteita olivat imidatsolijohdannaiset, joilla on angiotensiini II-antagonis-mia ja jotka on esitetty JP kuulutetuissa patenttijulkaisuissa no. 71073/1981, 71074/1981, 92270/1982, ja 157768/1983, US

patentissa 4,355,040 ja US patentissa 4,340,598 jne. Myöhemmin on parannettuja imidatsolijohdannaisia esitetty julkaisuissa EP 0253310, EP 0291969, EP 0324377, JP kuulutetuissa patenttijulkaisuissa no. 23868/1988 ja 117876/1989. Lisäksi pyrroli-, pyratsoli- ja triatsolijohdannaisia on esitetty EP patentissa 0323841 ja JP kuulutetussa patenttijulkaisussa no. 287071/1989 angiotensiini II-antagonisteina.

US patentissa 4,880,804 esitetään bentsimidatsolijohdannaisia, jotka ovat antagonistisia angiotensiini II-reseptorille ja vaikuttavat in vivo rotissa munuaisen verenpaineeseen suonensisäisesti annettuina. Esimerkkejä tällaisista bentsimidatsoli j ohdannaisista ovat seuraavan kaavan (A) mukaiset johdannai-. set !: ** chz-<^)—(O^ • ; R* v nr

• TT >~B" R

/ ·’ missä substituentit, esimerkiksi 5- ja/tai 6-asemassa, ovat hydroksimetyyli, metoksi, formyyli, kloori tai karboksi. Vaik-Γ ka näistä useimmat esimerkein esitetyt yhdisteet ovat inaktii- ·. visia niitä suun kautta annettaessa, on sanottu vain 6-hydrok- , , simetyyli- ja 6-klooriyhdisteiden olevan tehokkaita niitä suun • j kautta annettaessa (100 mg/kg tai vähemmän). Uskotaan kuiten- I f I · kin, että myös näiden esitettyjen yhdisteiden vaikutus on /; riittämätön kliiniseen käyttöön.

3 114983

Keksinnössä aikaansaadaan menetelmä valmistaa uusi bentsimidat-solijohdannainen, jolla on tehokas verenpainetta alentava vaikutus ja vahva angiotensiini-II antagonismi, ja jotka ovat käytännössä arvokkaita kliinisesti käyttökelpoisina terapeuttisina aineina.

Esillä olevan keksinnön keksijät ovat sitä mieltä, että yhdisteiltä, jotka toimivat reniini-angiotensiinijärjestelmän kontrolloimiseksi ja jotka ovat kliinisesti käyttökelpoisia verenkiertosairauksien, kuten korkean verenpainetautien, sydänsairauksien (esim. hypercardia, sydänvika, sydäninfarktinne.) halvausten, aivohalvausten, jne. hoidossa, edellytetään voimakasta angiotensiini II-reseptori-antagonismia ja että niillä tulee esiintyä voimakasta ja kauan kestävää angiotensiini II-antagonismia suun kautta annettavassa annostuksessa. Perinpohjaisia tutkimuksia tehtiin tämän olettamuksen perusteella. Tutkimuksen tuloksena keksijät onnistuivat syntetisoimaan uusia 2-substituoituja bentsimidatsolijohdannaisia (I), joilla on korkea angiotensiini II-reseptori-antagonismi sekä joilla on voimakas pitkävaikutteinen angiotensiini II-antagonistinen ja verenpainetta alentava vaikutus, joka ilmenee suun kautta . annettuna.

'··' Keksintö kohdistuu menetelmään valmistaa 1-(sykloheksyylioksi- : '* karbonyylioksi)etyyli-2-etoksi-l-[[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bi- fenyl-4-yyli] metyyli] bentsimidatsoli-7-karboksylaatin C-tyyp-:,V piä oleva kide, jossa on likimain seuraavat hilavälit: :: : 3,5 Ä; kohtalainen 3.7 Ä; heikko 3.8 Ä; kohtalainen 4.0 Ä; kohtalainen • · 4.1 Ä; heikko *· '· 4,3 Ä; heikko * * 4,4 Ä; kohtalainen ; 4,6 Ä; kohtalainen 4.8 Ä; kohtalainen • » 5.1 Ä; kohtalainen 4 114983 5,2 Ä; heikko 6,9 Ä; heikko 7,6 Ä; heikko 8,8 Ä; kohtalainen 9,0 Ä; voimakas 15,9 Ä; heikko,

Menetelmä on tunnettu siitä, että kide eristetään 1-(syklohek-syylioksikarbonyylioksi)etyyli-2-etoksi-l-[[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaatin liuoksesta liuottimessa, joka on valittu metanolin, etanolin, isopropanolin, metanolin ja veden seoksen, etanolin ja veden, isopropanolin ja veden ja asetonin ja veden seoksen joukosta.

Edullisessa menetelmän suoritusmuodossa liuotinta sekoitetaan lämpötila-alueella -5°C - 40°C.

Edullisessa menetelmän suoristusmuodossa liuottimeen lisätään kidealkio kiteytymisen sallimiseksi.

Esillä oleva keksintö on jaettu hakemus suomalaisesta patentti- hakemuksesta FI 911936, joka on hyväksytty patentiksi , .·. FI 108434, joka kohdistuu kaavan (I) * · n D'-OC (I) {O^^-Y-C^-.Uqnrit missä Y on -O-, -S- tai -N(H) -; ja ,··'. D1 on hydroksi, C^.g-alkoksi, joka voi olla valinnaisesti substituoitu 5-metyyli-2-oksi-l,3-dioksolen-4-yylillä, C2-3-ί ’· alkenyylioksi, joka voi valinnaisesti olla substituoitu fenyy-

Iillä, tai ryhmä, jonka kaava on -OCH(R7)OCOR8, missä R7 on vety tai C^g-alkyyli ja R8 on C!_g-alkyyli, C5_7-sykloalkyy- 5 114983 li, fenyyli, C]__6-alkoksi tai C5 _ 7-sykloalkoksi, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi.

Patentin mukainen menetelmä on tunnettu siitä, että

(i) kaavan (II) mukainen yhdiste D'-OC

X4 (II) loi }—γ-c. -alkyyli missä Y ja D' tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty, saatetaan reagoimaan kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa

1 NH

NV (III) Z"CH2 missä Z on halogeeni; (ii) kaavan (IV) mukainen yhdiste D'-OC ^2-(0)-(p)

CsX” rv X1 2N (iv) • · • · • ·

t I

• · • · missä D' tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, saatetaan . , reagoimaan alkyyliortokarbonaatin, karbonyloivan tai tiokarbo- 2 '· nyloivan reagenssin tai isotiosyanaatin kanssa, 6 114983 (iii) kaavan (V) mukainen yhdiste

fV

D'-OC

(&-« missä kaikki ryhmät tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty, saatetaan reagoimaan nukleofiilisen reagenssin kanssa, (iv) kaavan (Ia) mukainen yhdiste

CN

D'-OC ^Η2-(θ^-(la) S -6“alkyYli missä kaikki ryhmät tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty, saatetaan reagoimaan atsidin kanssa,- (v) kaavan (Ij) mukainen yhdiste !:n i '· ΝγΝΗ tjrr&k <I]) 'aikyyi1 # · .· >. missä R5 on C^.g-alkyyli ja Y tarkoittaa samaa kuin edellä • · määriteltiin, saatetaan hydrolyysiin, jolloin saadaan kaavan '! (Ik) mukainen yhdiste I · 7 114983 n ΝγΝΗ (Ik) «°0C f2-{Ö)-Mg) (Oj^^-Y-C^.-alkyyli missä Y tarkoittaa samaa kuin edellä määriteltiin; tai (vi) kaavan (II) mukainen yhdiste /oVr D'-oc ^2-/0) (o\ (II) -alkyyli missä R on suojaava ryhmä ja muut ryhmät tarkoittavat samaa kuin edellä määriteltiin, saatetaan suojaryhmän poistoreak-, tioon, ja haluttaessa • > reaktioilla (i)-(vi) saatu yhdiste muunnetaan kaavan (I) mukai- t * : ’* seksi yhdisteeksi hydrolyysillä nukleofiilisellä reaktiolla, • * esteröinnillä ja/tai tetratsolirenkaassa olevan suojaryhmän S poistamisella tavanomaisella tavalla, kuten reaktiolla hapon : kanssa, ja haluttaessa kaavan (I) mukainen yhdiste muunnetaan sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi, ja mahdollises-ti, että lopputuote kiteytetään liuottimesta, joka on valittu ,*··. alempien alkoholien, alempien alkoholien ja veden seosten ja alempien alkyyliketonien ja veden seosten joukosta.

* * · ’·’ ’ Nämä yhdisteet ovat odottamattoman tehokkaita angiotensiini . II-antagonisteja, jotka ovat arvokkaita verenkiertojärjestel- män sairauksien, kuten verenpainetautien, sydänsairauksien, halvausten, munuaistaudin, jne. hoidossa.

8 114983

Keksinnön mukaista yhdistettä käytetään farmaseuttisissa koostumuksissa, jotka sisältävät tehokkaan määrän kaavan I mukaista bentsimidatsolijohdannaista ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan, jotka koostumukset ovat käyttökelpoisia verenkiertojärjestelmän sairauksien kuten verenpainetautien, sydänsairauksien, halvausten, munuaisvian, munuaistaudin, jne. hoidosssa ja menetelmiin tällaisten yhdisteiden ja koostumusten valmistamiseksi.

Keksinnön mukaista yhdistettä käytetään myös menetelmään mainittujen verenkiertojärjestelmän sairauksien hoitamiseksi eläimissä, joka menetelmä käsittää kaavan I mukaisten bentsimidatsoli johdannaisten tai niiden farmaseuttisten koostumusten annostuksen tehokkaana määränä mainitulle eläimelle.

Keksinnössä aikaansaadaan bentsimidatsolijohdannainen (I) , jolla on voimakas angiotensiini II-antagonismi ja joka on arvokkaita verenkiertosairauksien, kuten verenpainetautien, sydänsairauksien, halvausten, aivosairauksien, munuaistaudin, jne. hoidossa. Sitä voidaan käyttää farmaseuttisissa koostumuksissa, jotka sisältävät tehokkaan määrän kaavan I mukaista » » » · ’ * bentsimidatsolijohdannaista ja farmaseuttisesti hyväksyttävää kantajaa, ja jotka ovat käyttökelpoisia mainittujen verenkier- • ' ·. tosairauksien hoidossa.

• · • · 1- (sykloheksyylioksikarbonyylioksi) etyyli-2-etoksi-1- [ [2 1 - (1H- tetratsol-5-yyli) bifenyl-4-yyli] metyyli] bentsimidatsoli-7- karboksylaatin C-tyyppiä olevalla kiteellä on selviä etuja, ·· · kuten esimerkiksi: • · • * • 1. Se parantaa lämpöstabiilisuutta ja käytännön soveltuvuutta.

2. Jäänösliuottimen määrä voidaan minimoida kiteissä.

3. Se voi johtaa teollisiin ja kliinisiin kehitystuloksiin ja tuottaa taloudellista etua.

• * ·

Tuotteen konsentroidut jäännökset, amorfiset jauheet ja/tai 9 114983 muut kiteet, paitsi C-tyyppiä olevat kiteet, sekoitetaan sopivaan liuottimeen halutun C-tyyppiä olevan kiteen saamiseksi. Mikäli C-tyyppiä olevaa kidettä ei muodostu, liuokseen voidaan lisätä pieni määrä C-tyyppiä olevaa kidettä kidealkioksi kiteytymisen helpottamiseksi. Käytettäviä liuottimia ovat alemmat alkoholit (esim. metanoli, etanoli, isopropyylialkoholi, jne.) alempien alkoholien ja veden seokset, sekä alempien alkyylike-tonien (esim. asetoni, jne.) ja veden seokset, mutta liuottimet eivät rajoitu näihin, kunhan vain liuottimella saadaan C-tyyppiä olevia kiteitä. Käytetyn liuottimen määrä on käytännössä 2 ... 30-kertainen verrattuna kiteen painoon, vaikka se ei ole rajoittunut tähän. Alemman alkoholin ja veden sekä alemman alkyyliketonin ja veden välinen suhde on edullisesti 4:1...1:1, vaikka se ei rajoitu tähän. Sekoituslämpötila on sopivasti välillä -5...40°, edullisesti 0...25°C, vaikka se ei rajoitu tähän.

Terapeuttista käyttöä varten yhdisteet (I) ja niiden suolat voidaan antaa suun kautta, ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti, hengitettävinä sumutteina, peräaukon kautta, tai paikallisesti farmaseuttisina koostumuksina tai formulaatioina (esim. jau-, heinä, rakeina, tabletteina, pillereinä, kapseleina, ruiskei na, siirappeina, emulsioina, eliksiireinä, suspensioina, liuok- f » ·' sinä ja sen kaltaisina) , jolloin koostumukset sisältävät vähin- ' " tään yhtä tällaista yhdistettä yksin tai seoksena farmaseutti- *. *: sesti hyväksyttävien kantajien, apuaineiden, välitysaineiden, ·, täyteaineiden ja/tai laimentimien kanssa. Farmaseuttiset koos- : : tumukset voidaan valmistaa tavanomaisilla menetelmillä. Termil lä ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti tässä yhteydessä käytet-I’ ,· tynä tarkoitetaan ihonalaisia ruiskeita, laskimonsisäisiä ruiskeita, lihakseen annettavia ruiskeita, vatsaontelon sisäisiä ruiskeita tai infuusiotekniikoita. Ruiskevalmisteet, esi- ’· merkiksi steriili injektoitava vesipitoinen tai öljypitoinen « I t lii * * suspensio voidaan formuloida tunnetuilla tekniikoilla käyttäen ; sopivia dispergoivia tai kostuttavia aineita ja suspendoivia ....j aineita. Steriili injektoitava valmiste voi myös olla sterii lin injektoitavan liuoksen tai suspension muodossa myrkyttömäs- 10 114983 sä, vatsaontelon sisäisesti hyväksyttävässä laimentimessa tai liuottimessa, esimerkiksi liuoksena vedessä. Hyväksyttävistä välitysaineista tai liuottimista, joita voidaan käyttää, mainittakoon vesi, Ringer'in liuos, ja isotoninen natriumkloridi-liuos. Lisäksi liuottimina tai suspendoivina aineina käytetään tavanomaisesti steriilejä, kovetettuja öljyjä. Tähän tarkoitukseen sopivat mitkä tahansa pehmeät kovetetut öljyt tai rasvahapot, mukaan lukien luonnolliset, synteettiset tai semisyn-teettiset rasvahappoöljyt tai rasvahapot sekä luonnolliset, synteettiset ja semisynteettiset mono-, di-, tai triglyseri-dit.

Lääkeperäpuikot peräaukon kautta antamista varten voidaan valmistaa sekoittamalla lääkeainetta sopivaan ärsyttärnättömään täyteaineeseen kuten kaakaovoihin ja polyetyleeniglykoleihin, jotka ovat kiinteitä tavallisessa lämpötilassa mutta nestemäisiä peräsuolen lämpötilassa siten, että ne sulavat peräsuolessa ja vapauttavat lääkkeen. Suun kautta annettavat kiinteät annosmuodot voivat olla jauheita, rakeita, tabletteja, pillereitä ja kapseleita, kuten edellä todettiin. Tällaisissa kiinteissä annosmuodoissa aktiivinen yhdiste voi olla sekoitettuna vähintään yhteen lisäaineeseen kuten sakkaroosiin, laktoosiin, selluloosaan, mannitoliin, maltitoliin, dekstraa-niin, tärkkelyksiin, agareihin, alginaatteihin, kitiineihin, ; ·· pektiineihin, tragakanttikumeihin, arabikumeihin, kollageenei- ·’ \ hin, kaseiiniin, albumiiniin ja synteettisiin tai semisynteet- ; : tisiin polymeereihin tai glyserideihin. Kuten on tavanomaista, ; tällaiset annosmuodot voivat myös sisältää muita aineita pait si inerttejä laimentimia, esim. liukastusaineita kuten magne-;· . siumstearaattia, säilöntäaineita kuten parabenia ja sorbiini- ,· , happoa, antioksidantteja kuten askorbiinihappoa, a-tokoferolia ja kysteiiniä, hajottavia aineita, sideaineita, paksunnusainei-·. 'i ta, puskuria, makeutusaineita, aromiaineita ja hajusteita.

Tabletit ja pillerit voidaan lisäksi valmistaa suolessa sula-, villa päällysteillä.

i > · lila» 11 114983

Nestemäisiä annosmuotoja suun kautta annettavaa annostusta varten ovat esimerkiksi farmaseuttisesti hyväksyttävät emul-sioit, siirapit, eliksiirit, suspensiot, liuokset, jotka sisältävät alalla yleisesti käytettyjä inerttejä liuottimia, kuten vettä.

Tietyn potilaan erityiset annosmäärät riippuvat joukosta tekijöitä, joita ovat esimerkiksi käytetyn yhdisteen aktiivisuus, potilaan ikä, kehonpaino, yleinen terveydentila, sukupuoli, ruokavalio, annostuksen aika, annostustie, ulostusnopeus, lääkeyhdistelmä, sekä hoidettavan potilaan sairauden vakavuus. Annos vaihtelee riippuen hoidettavasta sairaudesta, oireista, kohteista ja annostusteistä riippuen, ja on suotavaa, että päivittäinen annos, joka on 1...50 mg suun kautta annettava tai 1...30 mg laskimoruiskeena annettava annostus, voidaan antaa kerralla tai jaettuna 2-3 osaan, kun sitä käytetään aineena aikuisten hoitamiseksi. Esimerkiksi kun sitä käytetään aikuisella varsinaisen verenpaineen hoitamisessa, aktiivista aineosaa annetaan edullisesti sopivana määränä, esimerkiksi noin 10 mg...100 mg päivässä suun kautta ja noin 5 mg...50 mg päivässä suonensisäisesti. Aktiivista aineosaa annetaan edul-, lisesti yhtä suurina annoksina kaksi tai kolme kertaa päiväs- ;:: sa.

$ t » : “ Edelläesitetty on ainoastaan keksintöä valaisevaa, eikä sitä » · ole tarkoitettu rajoittamaan keksintöä siinä esitettyihin yhdisteisiin.

t

Esimerkit » » . Seuraavilla muodostusesimerkeillä, suoritusesimerkeillä, koe- esimerkeillä ja viite-esimerkeillä selitetään keksintöä kon-kreettisemmin, mutta niitä ei pitäisi tulkita keksintöä mil-: '· lään tavalla rajoittavaksi.

Selityksessä käytettyjä lyhenteitä ovat esimerkiksi seuraavat: Et: etyyli, Tet: tetratsolyyli.

12 114983

Muodostusesimerkit

Kun keksinnön mukaista yhdistettä (I) käytetään terapeuttisena aineena verenkiertosairauksissa kuten verenpainetaudit, sydänsairaudet, halvaukset, munuaistaudit, jne, sitä voidaan käyttää esimerkiksi seuraavien koostumusten mukaan.

Kapselit (1) 1-(sykloheksyylioksikarbonyylioksi)etyyli 2-etoksi-l-[[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)-bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaatti 10 mg (2) laktoosi 90 mg (3) hienokiteinen selluloosa 70 mg (4) magnesiumstearaatti 10 mg 1 kapseli 180 mg

Aineet (1), (2), (3) ja puolet aineesta (4) sekoitetaan ja rakeistetaan. Rakeisiin lisätään loput aineesta (4) ja koko , seos täytetään gelatiinikapseleihin.

• » ’·!·* Tabletit

I I

\ · (1) 1-(sykloheksyylioksikarbonyylioksi)etyyli- ' 2-etoksi-l-[[2(lH-tetratsol-5-yyli)- ; : bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli- 7-karboksylaatti 10 mg !’ . (2) laktoosi 35 mg t * t , (3) maissitärkkelys 150 mg (4) hienokiteinen selluloosa 30 mg ’· : (5) magnesiumstearaatti 5 mg » '' · 1 tabletti 230 mg > > < · ,,,,· Aineet (1) , (2) , (3) , kaksi kolmasosaa ainetta (4) ja puolet I i aineesta (5) sekoitetaan ja rakeistetaan. Rakeisiin lisätään 13 114983 loput aineista (4) ja (5), mitä seuraa rakeiden saattaminen puristusmuovaukseen.

Viite-esimerkki 2

Etwli-2-karboksi-3-nitrobentsoaatti

Seosta, jossa oli 3-nitroftaalihappoa (35 g) etanolissa (300 ml), joka sisälsi kons. rikkihappoa (20 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 24 tuntia. Liuotin haihdutettiin vakuumis-sa ja jäännös kaadettiin kylmään veteen (700 ml). Seos uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja ravistettiin kaliumkarbonaatin vesilioksen kanssa. Vesikerros tehtiin happamaksi suolahapolla ja seos uutettiin metyleeni-kloridilla. Orgaaninen kerros pestiin vedellä, sitten kuivat-i tiin, mitä seurasi liuottimen haihduttaminen. Tuloksena olevaa kiinteää ainetta (29 g, 74%) käytettiin seuraavaan reaktioon ilman puhdistamista.

iH-NMR (90 MHz, CDC13) δ: 1,43(3H,t), 4,47(2H,q), 7,70(lH,t), 8,40(2H,d), 9,87(lH,br s).

* ;#* IR(Nuj oi)cm"1: 1725, 1535, 1350, 1300, 1270 * · * · '< *' Viite-esimerkki 3 ' Etvvli-2 -1-butoksikarbonvvliamino-3-nitrobentsoaatti % ·

Seosta, jossa oli etyyli-2-karboksi-3-nitrobentsoaattia (23,9 >' g) ja tionyylikloridia (12 ml) bentseenissä (150 ml) , kuumen- . ·. nettiin palautusjäähdyttäen kolme tuntia. Reaktioseos konsen troitiin kuivuuteen. Tuloksena oleva hapon kloridi (26 g, ’ ’· kvantitatiivinen) liuotettiin metyleenikloridiin (20 ml) .

• f « * ' * Liuos lisättiin tipoittain seokseen, jossa oli natriumatsidia ; (9,75 g) dimetyyliformamidissa (DMF) (20 ml), voimakkaasti . sekoittaen. Reaktioseos kaadettiin seokseen, jossa oli eette- ri-heksaania (3:1, 200 ml) ja vettä (250 ml), jolloin erottui 14 114983 kaksi kerrosta. Orgaaninen kerros pestiin vedellä, sitten kuivattiiin, mitä seurasi liuottimen haihduttaminen. Jäännös liuotettiin t-butanoliin (200 ml) ja liuosta kuumennettiin vähitellen sekoittaen, jota seurasi kuumentaminen palautus-jäähdyttäen kaksi tuntia. Reaktioseos konsentroitiin vakuumis-sa, jolloin saatiin öljymäinen tuote (30 g).

^-H-NMR (90 MHz, CDC13) δ: l,40(3H,t), 1,53 (9H,s), 4,43 (2H,q), 7,23(1H,t), 8,03-8,27(2H,m), 9,70(1H,br s).

IR(Neat) cm-1: 3320, 2980, 1740, 1585, 1535, 1500, 1440, 1375, 1265, 1155

Suoritusesimerkki 1

Etvvli-2-Γ Γ2'-svanobifenyvli)amino]-3-nitrobentsoaatti

Liuokseen, jossa oli etyyli-2-t-butoksikarbonyyliamino-3-nit-I robentsoaattia (20 g) tetrahydrofuraanissa (50 ml), lisättiin sekoittaen ja jäillä jäähdyttäen natriumhydridiä (60% dispersio mineraaliöljyssä, 2,8 g). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 20 minuuttia ja sitten seokseen lisättiin 4-(2-sya-nofenyyli)bentsyylibromidia (18 g) ja kaliumjodidia (360 mg), » 1 ' mitä seurasi kuumentaminen palautusjäähdyttäen 10 tunnin ajan.

* “ Liuotin haihdutettiin kuivuuteen ja jäännös eroteltiin veden (250 ml) ja eetterin (200 ml) väliin. Orgaaninen kerros pes-.* tiin vedellä, kuivattiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin • keltaista siirappia. Siirappi liuotettiin seokseen, jossa oli trifluorietikkahappoa (60 ml) ja metyleenikloridia (40 ml) ja liuosta sekoitettiin tunti huoneenlämpötilassa. Reaktioseos : konsentroitiin kuivuuteen ja jäännökseen lisättiin etyylieet- teriä (200 ml), jolloin saatiin kiteitä. Kiteet kerättiin • ‘ suodattamalla, pestiin eetterillä, jolloin saatiin vaalean keltaisia kiteitä (22,1 g, 85%), s.p. 118-119 °C.

'•H-NMR (90 MHz, CDCI3) δ: l,37(3H,t), 4,23(2H,s), 4,37(2H,q), 6,37(1H,t), 7,33-7,83(9H,m) , 7,97 - 8,20(2H,m) .

15 114983 IR(Nujol)cm-1: 3280, 2220, 1690, 1575, 1530, 1480, 1450, 1255, 1105, 755.

Suoritusesimerkki 2

Etvvli-3-amino-2-Γ Γ21-svanobifenvl-4-vvli)metvvlilaminolbentso-aatti

Liuokseen, jossa oli etyyli-2~[[(21-syanobifenyl-4-yyli)metyyli] amino]nitrobentsoaattia (10,4 g) etanolissa (50 ml), lisättiin tinadiklorididihydraattia (28,1 g) ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa kaksi tuntia. Liuotin haihdutettiin kuivuuteen. Jäännöksen jäillä jäähdytettyyn seokseen etyyliasetaatissa (300 ml) lisättiin tipoittain 2N NaOH:a (500 ml) sekoittaen. Vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla (200 ml x 2) . Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin haihdutettiin kuivuuteen ja jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä silikageelillä, jolloin saatiin kiteitä. Uudelleenkiteytys etyyliasetaatti-heksaanista tuotti värittömiä kiteitä (7,3 g, 79%), s.p. 104-105 °C.

· · 1-H-NMR (200 MHz,CDC13) δ: l,33(3H,t), 4,23(2H,s), 4,27(2H,q), . "* 6,83-6,93(2H,m), 7,35-7,55(7H,m), 7,64(lH,dt), 7,76(dd).

/ IR(KBr) cm"1: 3445, 3350, 2220, 1680, 1470, 1280, 1240, 1185, ' 1160, 1070, 1050, 1020, 805, 750.

Suoritusesimerkki 4 ; : Etvyli-1-f(21-syanobifenyl-4-yyli)metyylil-2-etoksibentsimidat- . . soli-7-karboksvlaatti , * Etikkahappoa (0,2 g) lisättiin liuokseen, jossa oli etyyli-3- amino-2-N- [2 1 - syanobifenyl-4-yyli) metyyli] aminobentsoaatt ia ;·· (1,0 g) etyyliortokarbonaatissa (5 ml). Seosta sekoitettiin 80 °C:ssa tunti. Reaktioseos konsentroitiin, ja konsentraatti 114983 16 liuotettiin etyyliasetaattiin. Liuos pestiin natriumvetykar-bonaatin vesiliuoksella ja vedellä. Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin kiteitä. Uudelleenkiteytys etyyliasetaatti-bentseenistä tuotti värittömiä kiteitä (0,79 g, 69%), s.p. 131-132 °C.

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C26H23N3O3: C(%) H(%) N(%)

Laskettu: 73,39; 5,45; 9,88

Havaittu: 73,36; 5,42; 9,83 1H-NMR (200MHz, CDCI3) δ: l,24(3H,t), l,49(3H,t), 4,24(2H,q), 4,68( 2H, q) , 5,72(2H,s), 7,10(2H,d), 7,19(lH,t), 7,38 -7,46 (4H, -m), 7,56-7,66(2H,m), 7,73-7,77(2H,m).

IR(KBr)cm-1: 2220, 1720, 1550, 1480, 1430, 1280, 1245, 1215, I 1040, 760, 740

Suoritusesimerkki 28

Etyyli-2-etoksi-l-f Γ2'-(lH-tetratsol-5-vvli)bifenvl-4-vvlil-metyyli) bentsimidatsoli-7-karboksylaatti • ·

Seosta, jossa oli etyyli-1-[ (2 1 -syanobifenyl-4-yyli) metyyli] - • ‘ 2-etoksibentsimidatsoli-7-karboksylaattia (0,7 g) ja trimetyy- • · '· *·* litina-atsidia (0,7 g) tolueenissa (15 ml), kuumennettiin ’ .· palautusjäähdyttäen 4 vuorokautta. Reaktioseos konsentroitiin ’ ·’ kuivuuteen ja jäännökseen lisättiin metanolia (20 ml) ja lH-HCl:a (10 ml). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 30 i minuuttia ja pH asetettiin arvoon 3-4 IN NaOH:lla. Kun liuotin , oli poistettu, jäännös erotettiin kloroformin ja veden väliin.

. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja kuivattiin, ja liuotin * | haihdutettiin kuivuuteen, jolloin saatiin siirappia. Siirappi puhdistettiin pyiväskromatografiällä silikageelillä, jolloin saatiin kiteitä. Uudelleenkiteytys etyyliasetaatti-bentseenis-• tä tuotti värittömiä kiteitä (0,35 g, 45%), s.p. 158-159 °C.

114985 17

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C26H24N5O3: C(%) H (%) N (%)

Laskettu: 66,65; 5,16; 17,94 Havaittu: 66,61; 5,05; 17,84 iH-NMR (200MHz, CDCI3) δ: l,09(3H,t), l,43(3H,t), 4,02(2H,q), 4,30(2H,q) , 5,57(2H,s), 6,71(2H,d), 6,83 - 6,96(4H,m) , 7,27-7,31(lH,m), 7,40(lH,dd), 7,55-7,66(2H,m), 8,04-8,09(1H,m) IR(KBr) cm-1: 1720, 1605, 1540, 1470, 1430, 1250, 1040, 750

Suoritusesimerkki 29 2-etoksi-l- Γ Γ2 1 - (lH-tetratsol-5-wli) bifenyyli-4-vvlil metwlil -bentsimidatsoli-7-karboksyylihappo

Liuosta, jossa oli etyyli-2-etoksi-l-[(2'-(lH-tetratsol-5-yyli)-bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaattia (0,24 g) ja IN NaOH:a (1,5 ml) etanolissa (4 ml), sekoitettiin 80 °C:ssa yksi tunti. Reaktioseos konsentroitiin ja konsen-traatti uutettiin vedellä ja etyyliasetaatilla. Vesikerroksen pH asetettiin arvoon 3-4 lN-HCl:lla, jolloin saatiin kiteitä.

* a , Kiteiden uudelleenkiteytys etyyliasetaatti-metanolista tuotti värittömiä kiteitä (0,15 g, 67%), s.p. 183-185 °C.

• · a ’! Alkuaineanalyysi yhdisteelle C24H20N6O3.I/5H2O: C(%) H (%) N (%) : Laskettu: 64,91; 4,63; 18,93

Havaittu: 65,04; 4,51; 18,77 : *: iH-NMR (200MHz, DMSO-dg) δ: l,38(3H,t), 4,58(2H,q), 5,63 (2H,s) , 6,97(4H,q) , 7,17(lH,t), 7,47-7,68(6H,m) > * a > · a * a a IR(KBr) cm-1: 1710, 1550, 1480, 1430, 1280, 1240, 1040, 760 1 a * » » a 18 114983

Suoritusesimerkki 42 2-etoksi-l-[[2'-(N-trifenvvlimetyvlitetratsol-5-vyli)-bifenyl- 4-vvIilmetvvlil bentsimidatsoli-7-karboksyylihappo

Liuokseen, jossa oli 2-etoksi-[[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bi-fenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksyylihappoa (2,07 g) metyleenikloridissa (10 ml) lisättiin trityylikloridia (1,59 g) ja trietyyliamiinia (0,8 ml). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yksi tunti. Reaktioseos pestiin vedellä, kuivattiin ja konsentroitiin kuivuuteen. Jäännös puhdistettiin pyiväskromatografiällä silikageelillä, jolloin saatiin kiteitä. Näin saatujen raakakiteiden uudelleenkiteytys etyyliase-taatti-bentseenistä tuotti värittömiä kiteitä (2,12 g, 66%), s.p. 168-170 °C.

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C43H34N5O3: C (%) H (%) N(%)

Laskettu: 75,64; 5,02; 12,31 : Havaittu: 75,37; 4,96; 12,20 iH-NMR (200 MHz, CDCI3) <5: l,40(3H,t), 4,61(2H,q), 5,58(2H,s), 6,76(2H, d) , 6,91-6,96(8H,m) , 7,12(lH,t), 7,17 - 7,41(12H,m) , i; *’ 7,60 (1H, dd) , 7,73-7,82 (2H,m) .

» · ’ Suoritusesimerkki 44 '·, * 1- (sykloheksvvlioksikarbonyvlioksi) etyvli-2-etoksi-l Γ Γ2 ' - (1H- tetratsol-5-vyli)bifenyl-4-vvlilmetvvlilbentsimidatsoli-7-: : karboksvlaatti , . Liuokseen, jossa oli 2-etoksi-1-[[2'-(N-trifenyylimetyyli- • · t I t ’ ; tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-kar- boksyylihappoa (0,5 g) DMF:ssa (5 ml), lisättiin kaliumkar-: bonaattia (0,12 g) ja sykloheksyyli-1-jodietyylikarbonaattia ;*,· (0,26 g). Seosta sekoitettiin tunti huoneenlämpötilassa. Reak- tioseokseen lisättiin vettä ja seos uutettiin etyyliasetaa- 19 114983 tiliä. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja kuivattiin. Kun liuotin oli poistettu, jäännös liuotettiin metanoliin (10 ml) ja liuokseen lisättiin lN-HCl:a (2 ml). Seosta sekoitettiin tunti huoneenlämpötilassa. Reaktioseos konsentroitiin kuivuuteen ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden väliin. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja kuivattiin. Kun liuotin oli poistettu, jäännös puhdistettiin pyiväskromatografiällä silikageelillä, jolloin saatiin väritöntä jauhetta (0,21 g, 47%), s.p. 103-106 °C.

Alkuaineanalyysi yhdisteelle 033^4^05: C(%) H (%) N (%)

Laskettu: 64,91; 5,61; 13,76

Havaittu: 64,94; 5,71; 13,66

Ylläesitetyllä tavalla saatuun jauheeseen (1 g) lisättiin I etanolia (6 ml) . Seosta sekoitettiin kolme tuntia huoneenlämpö- tilassa ja sen annettiin seistä jäillä jäähdyttäen. Sitten seosta sekoitettiin tunti lämpötiloissa, jotka eivät olleet I korkeampia kuin 10 °C. Tuloksena saadut kiteet kerättiin suo dattamalla ja pestiin kylmällä etanolilla. Kiteitä kuivattiin ,t(t; 25 °C:ssa yhdeksän tuntia alennetussa paineessa, sitten 35 • · °C:ssa edelleen 18 tuntia, jolloin saatiin valkoisia jauhemai- .1* siä kiteitä (0,94 g), s.p. 158-166 °C (hajoaa).

* t t '· Alkuaineanalyysi yhdisteelle C33H34NgOg: C(%) H (%) N (%) , * Laskettu: 64,91; 5,61; 13,76

Havaittu: 64,73; 5,66; 13,64 1 · ; l-H-NMR (200 MHz) δ: 1,13 -1,84 (16H, m) , 4,28-4,55 (3H, m) , . 5,65 (2H, d) , 6,72 (1H, q) , 6,81(2H,d), 6,93(2H,d), 7,03(lH,t), 7,22-7,23 (lH,m) , 7,31-7,36 (1H, m) , 7,52-7,60 (3H,m) , 8,02- 8,07(1H,m) » » ·:··: IR(KBr) cm-1: 2942, 1754, 1717, 154R, 1476, 1431, 1076, 1034, 750 20 114983 MS(m/z): 611 [M+H] +

Koe-esimerkki 1

Stabiili C-tyyppiä oleva kiteinen 1-(sykloheksyylioksikarbo-nyylioksi)etyyli-2-etoksi-l-[[21 -(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl- 4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaatti ja sen valmistus 1-(sykloheksyylioksikarbonyylioksi)etyyli-2-etoksi-l-[ [2 ' -(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaattia puhdistetaan yleensä pyiväskromatografiällä silikageelillä ja eluoitu fraktio konsentroidaan kuivuuteen, jolloin saadaan amorfisia jauheita. Jauhe on lämmössä pysymä-töntä ja sen valmistus on epäkäytännöllinen. Tämän ongelman ratkaisemiseksi keksinnön keksijät tekivät laajoja kokeita yhdisteen kiteytymisellä ja keksivät C-tyyppiä olevan kiteisen I muodon. C-tyyppiä oleva kide on odottamattoman stabiili läm- | j mössä ja hyvin käyttökelpoinen valmistettavaksi. Otsikkoyhdis- I teen C-tyyppiä olevalla kiteellä on lähimain seuraavat hila- välit: . 3,5 Ä; kohtalainen • ♦ ; · · , 3,7 Ä; heikko • · ]; ** 3,8 Ä; kohtalainen • 4,0 Ä; kohtalainen 4,1 Ä; heikko \ ,· 4,3 Ä; heikko • ' 4,4 Ä; kohtalainen 4,6 Ä; kohtalainen ; *; 4,8 Ä; kohtalainen ; 5,1 Ä; kohtalainen . 5,2 Ä; heikko Ί 6,9 Ä; heikko * 7,6 Ä; heikko ; 8,8 Ä; kohtalainen .;·! 9,0 Ä; vahva 15,9 Ä; heikko 21 114983 C-tyyppiä olevan kiteen IR-spektri (KBr-tabletti) on esitetty kuviossa 2, jolloin merkittävät absorptiomaksimit esiintyvät kohdissa 2942, 1754, 1717, 1615, 1549, 1476 ja 750 cm'1, ja sen sulamispiste on 158-166°C (hajoaa). Kuvioissa 1-3 on esitetty edustavat röntgensädekaaviot (jauhemenetelmä), IR-spektri (KBr-tabletti) ja differentiaalipyyhkäisykalorimetrillä saadut kaaviot.

1-(sykloheksyylioksikarbonyylioksi)etyyli-2-etoksi-l-[[2'-(1H-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaatin C-tyyppiä olevalla kiteellä on selviä etuja, kuten esimerkiksi: 1. Se parantaa lämpöstabiilisuutta ja käytännön soveltuvuutta.

! 2. Jäänösliuottimen määrä voidaan minimoida kiteissä.

3. Se voi johtaa teollisiin ja kliinisiin kehitystuloksiin ja tuottaa taloudellista etua.

Tuotteen konsentroidut jäännökset, amorfiset jauheet ja/tai muut kiteet, paitsi C-tyyppiä olevat kiteet, sekoitetaan sopi-vaan liuottimeen halutun C-tyyppiä olevan kiteen saamiseksi. Mikäli C-tyyppiä olevaa kidettä ei muodostu, liuokseen voidaan * » lisätä pieni määrä C-tyyppiä olevaa kidettä kidealkioksi kitey-’ * tymisen helpottamiseksi. Käytettäviä liuottimia ovat alemmat alkoholit (esim. metanoli, etanoli, isopropyylialkoholi, jne.) * alempien alkoholien ja veden seokset, sekä alempien alkyylike-tonien (esim. asetoni, jne.) ja veden seokset, mutta liuottimet eivät rajoitu näihin, kunhan vain liuottimena saadaan ; .· C-tyyppiä olevia kiteitä. Käytetyn liuottimen määrä on käytän- : nössä 2...30-kertainen verrattuna kiteen painoon, vaikka se ei . ole rajoittunut tähän. Alemman alkoholin ja veden sekä alemman > * | alkyyliketonin ja veden välinen suhde on edullisesti > · 4:1...1:1, vaikka se ei rajoitu tähän. Sekoituslämpötila on : sopivasti välillä -5...40°, edullisesti 0...25°C, vaikka se ei ‘S rajoitu tähän.

1 1 4983 22

Koe-esimerkki 2

Angiotensiini II:n angiotensiinireseptoriin sitoutumisen estyminen

Menetelmä

Kokeessa pyrittiin estämään angiotensiini II :n (Ali) sitoutuminen AII-reseptoriin. Koe suoritettiin muuntamalla menetelmää, jonka Douglas et ai. ovat esittäneet julkaisussa Endocrinology, 102, 685-696 (1978). AII-reseptorimembraani valmis-tettin naudan lisämunuaiskuoresta.

Keksinnön mukaista yhdistettä (10-6M tai 10‘7M) ja 125I-angio-tensiini II:a (125I-AII) (1,85 kBq/SO^l) lisättiin reseptori- membraanifraktioon ja seosta inkuboitiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Reseptoriin sitoutunut ja vapaa 125I-AII erotettiin suodattimena (Whatman GF/B suodatin) ja reseptoriin sitoutuneen 125I-AII:n radioaktiivisuus mitattiin.

Tulokset

Keksinnön mukaisilla yhdisteillä saadut tulokset on esitetty taulukossa 2.

• · ,! Koe-esimerkki 3 < · ’· ’ Keksinnön mukaisen yhdisteen estävä vaikutus AII:n verenpai- ·’ netta kohottavaan vaikutukseen

Menetelmä ; : Kokeessa käytettiin Jcl ·. SD-rottia (9 viikon ikäiset urokset).

: Koetta edeltävänä päivänä näille eläimille asetettiin natrium- , . pentobarbitaalinukutuksessa kanyyli reisivaltimoon ja -laski- ’ | moon. Eläimille ei annettu ruokaa, mutta niille annettiin i · vapaasti juomavettä kunnes koe aloitettiin. Koepäivänä valti-mokanyyli kytkettiin verenpainemittariin ja keskimääräinen * verenpaine taltioitiin piirturilla. Ennen lääkkeen antamista annettiin vertailuksi Ali:ta (100 ng/kg) laskimoon ja AII:sta 23 114983 johtuva kohonnut verenpaine mitattiin. Lääkkeitä annettiin suun kautta ja sitten, kunkin mittauksen kohdalla, Ali:ta annettiin laskimonsisäisesti, ja kohonnut verenpaine mitattiin vastaavalla tavalla. Vertaamalla verenpaineen kohoamista ennen annostusta ja lääkkeen annostuksen jälkeen, laskettiin lääkkeen inhibitioprosentti Ali .-n aiheuttamaan verenpaineen kohoamiseen.

Tulokset

Keksinnön mukaisilla yhdisteillä saadut tulokset ilmenevät taulukosta 2.

R* \_ Taulukko 2 r. CH’-®-\Q)

Suoritus- Radioreseptori- Allista aiheutuva ko- esim. R’ Y R2 R’ määritys honnut paine (p.o.)

No. 1x10 -’M 1x10 -‘H 3mg/kg 28 Et 0 Tet COOEt 46 82 -++ a) 29 Et 0 Tet C00H 61 91 +++ i CHj o I II ^ : 44 Et 0 Tet COOCH-OCO-φ 32 77 +++ a) +++ £ 7056 > ♦+ * 50% £ + > 30% > - i * . On ymmärrettävä, että alan ammattimies voi vaihdella edellä V ’ esitettyjä esimerkkejä keksinnön piirissä ja saavuttaa olen naisesti samanlaisia tuloksia.

Koska tämän keksinnön ajatuksen ja suojapiirin sisään kuuluu useita erilaisia suoritusmuotoja, on ymmärrettävä, että keksin-tö ei rajoitu erityisiin suoritusmuotoihin paitsi seuraavassa esitettävien vaatimusten määrittelemissä puitteissa.

Claims (3)

24 114983

1. Menetelmä valmistaa 1-(sykloheksyylioksikarbonyylioksi)-etyyli-2-etoksi-l-[[2'-(1H-tetratsoi-5-yyli)bifenyl-4-yyli]metyyli] bentsimidatsoli-7-karboksylaatin C-tyyppiä oleva kide, jossa on likimain seuraavat hilavälit: 3.5 Ä; kohtalainen 3.7 Ä; heikko 3.8 Ä; kohtalainen 4.0 Ä; kohtalainen 4.1 Ä; heikko 4.3 A; heikko 4.4 Ä; kohtalainen 4.6 Ä; kohtalainen 4.8 Ä; kohtalainen 5.1 Ä; kohtalainen 5.2 Ä; heikko 6.9 Ä; heikko 7.6 Ä; heikko 8,8 Ä; kohtalainen 9,0 Ä; voimakas . 15,9 A; heikko, tunnettu siitä että kide eristetään 1-(sykloheksyyli-oksikarbonyylioksi)etyyli-2-etoksi-l-[[2'-(1H-tetratsol-5-*: yyli)bifenyl-4-yyli]metyyli]bentsimidatsoli-7-karboksylaatin \* liuoksesta liuottimessa, joka on valittu metanolin, etanolin, y : isopropanolin, metanolin ja veden seoksen, etanolin ja veden, isopropanolin ja veden ja asetonin ja veden seoksen joukosta. * ·

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu ’ , siitä että liuotinta sekoitetaan lämpötila-alueella -5°C - «11· 40°C.

• · · • · ;··· 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä että liuottimeen lisätään kidealkio kiteytymisen sallimiseksi . 25 114983