ES2735987T3 - Procedimiento de extracción sin disolvente - Google Patents

Procedimiento de extracción sin disolvente Download PDF

Info

Publication number
ES2735987T3
ES2735987T3 ES10176025T ES10176025T ES2735987T3 ES 2735987 T3 ES2735987 T3 ES 2735987T3 ES 10176025 T ES10176025 T ES 10176025T ES 10176025 T ES10176025 T ES 10176025T ES 2735987 T3 ES2735987 T3 ES 2735987T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
microorganisms
lipid
light layer
lipids
fermentation broth
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES10176025T
Other languages
English (en)
Inventor
Craig M Ruecker
Swithin Patrick Adu-Peasah
Brian S Engelhardt
George T Veeder Iii
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DSM IP Assets BV
Original Assignee
DSM IP Assets BV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22647287&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2735987(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by DSM IP Assets BV filed Critical DSM IP Assets BV
Application granted granted Critical
Publication of ES2735987T3 publication Critical patent/ES2735987T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/006—Refining fats or fatty oils by extraction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
    • C11B1/02—Pretreatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/001—Refining fats or fatty oils by a combination of two or more of the means hereafter
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/06—Lysis of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P25/00—Preparation of compounds containing alloxazine or isoalloxazine nucleus, e.g. riboflavin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00—Preparation of steroids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6432—Eicosapentaenoic acids [EPA]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6463—Glycerides obtained from glyceride producing microorganisms, e.g. single cell oil
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

Un procedimiento para obtener lípido que contiene un ácido graso altamente insaturado omega-3 a partir de microorganismos, que comprende: (a) lisar células de los microorganismos para producir una mezcla celular lisada; (b) centrifugar dicha mezcla celular lisada para producir una mezcla separada en fases que comprende una capa pesada y una capa ligera, en donde dicha capa pesada comprende una solución acuosa y dicha capa ligera comprende dicho lípido; (c) separar dicha capa pesada de dicha capa ligera; y (d) obtener dicho lípido de dicha capa ligera, en donde el procedimiento se realiza sin usar un disolvente orgánico apolar.

Description

DESCRIPCIÓN
Procedimiento de extracción sin disolvente
Campo de la invención
La presente invención se dirige a un procedimiento para extraer lípidos que contienen un ácido graso altamente insaturado omega-3 procedente de microorganismos sin el uso de una cantidad significativa de un disolvente orgánico apolar.
Antecedentes de la invención
Un procedimiento típico de fabricación de lípidos de microorganismos, tal como la producción de ácido graso altamente insaturado omega-3, en particular, una mezcla de lípidos rica en ácido docosahexaenoico (DHA), implica hacer crecer microorganismos que son capaces de producir el lípido deseado en un fermentador, estanque o biorreactor, aislar la biomasa microbiana, secarla y extraer lípidos intracelulares con un disolvente orgánico apolar, p. ej., hexano. Generalmente, los lípidos intracelulares de microorganismos se extraen después de romper (es decir, lisar) células secadas de los microorganismos. Los lípidos extraídos se pueden refinar adicionalmente para producir lípidos de alta pureza y/o calidad. Generalmente, los microorganismos se aíslan al diluir el caldo de fermentación con agua y centrifugar la mezcla para aislar microorganismos. A continuación, las células se secan y, si los lípidos no se extraen inmediatamente o poco después, las células se envasan, por ejemplo, en bolsas cerradas herméticamente al vacío, para evitar la degradación de lípidos.
Desgraciadamente, el procedimiento de secado expone a los microorganismos a calor, lo que puede dañar, es decir, degradar la calidad de, los lípidos si se realiza incorrectamente. Las bolsas cerradas herméticamente al vacío pueden desarrollar fugas, lo que puede degradar adicionalmente la calidad de los lípidos debido a la exposición de los microorganismos a aire. Además, si los microorganismos secados no se tratan con un antioxidante, los lípidos se pueden degradar adicionalmente debido a la exposición a aire y/o luz. Por ejemplo, los carotenoides, las xantofilas y ácidos grasos de cadena larga tales como DHA se pueden degradar debido a la oxidación por aire y/o luz. Por otra parte, en algunos casos, los operarios que están expuestos a los microorganismos secados pueden desarrollar una reacción alérgica creando un riesgo de seguridad y/o salud para los operarios.
Por otra parte, en una producción a escala industrial, la gran cantidad de disolvente orgánico apolar volátil e inflamable usada en la extracción de lípidos puede crear condiciones de trabajo peligrosas. El uso de disolvente orgánico apolar en el procedimiento de extracción puede necesitar usar un sistema de recuperación de aceite a prueba de explosiones, que se suma de ese modo al coste de la recuperación de lípidos. Por otra parte, el uso de un disolvente orgánico apolar para extraer lípidos de microorganismos genera una corriente residual de disolvente orgánico apolar que requiere un método de eliminación apropiado, que incrementa adicionalmente el coste de producción global de la extracción de lípidos.
Por otra parte, existe una necesidad de un procedimiento para extraer lípidos de microorganismos que no requiera el uso de un disolvente orgánico apolar. También existe una necesidad de un procedimiento de extracción de lípidos a partir de microorganismos que no requiera la etapa costosa de secar los microorganismos antes de la extracción. El documento WO9704121 describe un procedimiento en el que un aceite se extrae de microrganismos que contienen aceite que comprende desintegrar los microorganismos y ponerlos en contacto en presencia de un contenido de agua de al menos 70% en peso del originalmente presente en el material celular con un disolvente inmiscible con agua para el aceite, separar el disolvente de los microorganismos y recuperar el aceite del disolvente. Sumario de la invención
La presente invención proporciona un procedimiento para obtener lípido que contiene un ácido graso altamente insaturado omega-3 de microorganismos, que comprende:
(a) lisar células de los microorganismos para producir una mezcla celular lisada;
(b) centrifugar dicha mezcla celular lisada para producir una mezcla separada en fases que comprende una capa pesada y una capa ligera, en donde dicha capa pesada comprende una solución acuosa y dicha capa ligera comprende dicho lípido;
(c) separar dicha capa pesada de dicha capa ligera; y
(d) obtener dicho lípido de dicha capa ligera,
en donde el procedimiento se realiza sin usar un disolvente orgánico apolar.
Se divulga además un procedimiento para obtener lípidos para microorganismos que comprende:
(a) hacer crecer microorganismos en un medio de cultivo;
(b) tratar dicho medio de cultivo y las células de microorganismo para liberar lípidos intercelulares;
(c) someter al medio de cultivo que contiene los lípidos intracelulares liberados a separación por gravedad para formar una fase ligera que contiene lípidos y una fase pesada;
(d) separar dicha fase ligera de dicha fase pesada;
(e) tratar dicha fase ligera para romper una emulsión formada entre dicho lípido y agua; y
(f) recuperar un lípido en bruto.
Además, se divulga un procedimiento para recuperar lípidos de microorganismos que comprende las etapas:
(a) hacer crecer dichos microorganismos en un medio de cultivo;
(b) tratar las células de microorganismo procedentes de dicho medio de cultivo sin secar dichas células para liberar lípidos intercelulares;
(c) someter al medio de cultivo que contiene los lípidos intracelulares liberados a separación por gravedad para formar una fase ligera que contiene lípidos y una fase pesada;
(d) separar dicha fase ligera de dicha fase pesada;
(e) tratar dicha fase ligera para romper una emulsión formada entre dicho lípido y agua; y
(f) recuperar un lípido en bruto.
Preferiblemente, los microorganismos se cultivan en un medio de fermentación en un fermentador. Alternativamente, los microorganismos se pueden cultivar fotosintéticamente en un fotobiorreactor o un estanque. Preferiblemente, los microorganismos son microorganismos ricos en lípidos, más preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en algas, bacterias, hongos y protistas, más preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en algas doradas, algas verdes, dinoflagelados, levaduras, hongos del género Mortierella, y Stramenopiles. Preferiblemente, los microorganismos comprenden microorganismos del género Mortierella, el género Crypthecodinium, y otros Thraustochytriales, y más preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del género Thraustochytrium, Schizochytrium o sus mezclas, más preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en microorganismos que tienen las características identificativas del número ATCC 20888, el número ATCC 20889, el número ATCC 20890, el número ATCC 20891 y el número ATCC 20892, cepas de Mortierella schmuckerii, cepas de Crypthecodinium cohnii, cepas mutantes derivadas de cualquiera de los precedentes, y sus mezclas.
El tratamiento de las células incluye un tratamiento para liberar los lípidos mediante lisis, ruptura o permeabilización. Según se usan en la presente, los términos lisar, lisis, lisado, etc., se usarán genéricamente para referirse a un tratamiento para liberar lípidos intercelulares, incluyendo romper o permeabilizar las células. Preferiblemente, el tratamiento se selecciona del grupo que consiste en calentar las células, exponer las células a condiciones básicas, exponer las células a un compuesto quelante o sus combinaciones. Más preferiblemente, la lisis o ruptura de las células comprende calentar las células hasta al menos 50°C mientras se exponen las células a condiciones básicas, un compuesto quelante o sus mezclas.
Preferiblemente, la separación por gravedad comprende hacer pasar el caldo de fermentación que contiene los lípidos intercelulares liberados a través de una centrífuga, tal como centrífugas de tipo de discos apilados, de separador o de decantador.
La mezcla celular lisada separada comprende una capa pesada que comprende una solución acuosa que contiene los materiales sólidos resultantes de las células lisadas y una capa ligera que contiene lípidos. Las capas ligera y pesada se pueden separar mediante centrifugación. Los lípidos pueden estar presentes en un estado emulsionado. La capa ligera se puede lavar adicionalmente con una solución acuosa de lavado hasta que el lípido se vuelve sustancialmente no emulsionado. Preferiblemente, el tratamiento para romper la emulsión comprende mezclar la emulsión con agua, alcohol, acetona o sus mezclas y someter la mezcla a separación por gravedad. El procedimiento se realiza sin usar disolventes orgánicos apolares tales como hexano.
Cuando el procedimiento de extracción de lípidos de la presente invención incluye usar microorganismos procedentes de un procedimiento de fermentación, el procedimiento de extracción también puede incluir solubilizar al menos parte de los compuestos proteínicos en un caldo de fermentación al añadir una base seleccionada del grupo que consiste en hidróxidos, carbonatos, bicarbonatos, fosfatos y sus mezclas.
El procedimiento de la presente invención también puede incluir calentar los microorganismos hasta una temperatura de al menos aproximadamente 50°C. Preferiblemente, un compuesto químico, tal como una base, se añade al medio de cultivo para ayudar en la lisis de las células.
Como una alternativa al calentamiento, las células se pueden lisar con la ayuda de un compuesto quelante tal como EDTA. Además de ayudar en la lisis o la ruptura de las células, los queladores ayudan a prevenir la oxidación de los lípidos durante el procesamiento mediante quelación de (unión con) iones metálicos productores de radicales libres en el caldo de fermentación, tales como hierro o cobre. Formas preferidas de queladores son las que se consideran de calidad alimentaria o GRAS (generalmente reconocidas como seguras). Compuestos quelantes eficaces incluyen EDTA, ácido cítrico o citrato, ácido láctico, fosfato trisódico, polifosfato, hexametafosfato, EGTA, DTPA, ácido fítico o CDTA y otras formas salinas de estos compuestos. En una realización, se añade EDTA sódico a las células para degradar las paredes celulares al quelar los cationes divalentes que ayudan a mantener unidas las paredes celulares. El procedimiento se puede realizar a temperaturas superiores con menos EDTA o temperaturas inferiores con concentraciones superiores de EDTA. Por ejemplo, se ha encontrado que las células ricas en DHA de Schizochytrium sp. se pueden permeabilizar y/o romper mediante la adición de EDTA a los cultivos al final del procedimiento de fermentación. Se requiere una concentración de 10.000 ppm para ayudar a romper las células a 30°C, una concentración de 5.000 ppm a 50°C y a temperaturas por encima de 70°C son eficaces concentraciones de menos de 1000 ppm.
Los queladores se pueden añadir al caldo de fermentación para hacer las células más fáciles de romper mediante procedimientos físicos tales como homogeneización. Además de un quelador, también se puede añadir agua para incrementar la presión osmótica interna a fin de lisar las células.
Preferiblemente, los microorganismos son capaces de crecer a un nivel de salinidad de menos de aproximadamente 12 g/l de cloruro sódico, más preferiblemente menos de aproximadamente 5 g/l de cloruro sódico y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 3 g/l de cloruro sódico. Preferiblemente, los microorganismos son capaces de crecer a niveles de salinidad de menos de aproximadamente 7 g/l de sodio y menos de aproximadamente 250 mg/l de cloruro. Preferiblemente, el cloruro está presente en una cantidad de aproximadamente 70 a aproximadamente 150 mg/l.
Preferiblemente, los microorganismos comprenden al menos aproximadamente 20% en peso de lípido, más preferiblemente al menos aproximadamente 30% en peso, y lo más preferiblemente al menos aproximadamente 40%. Alternativamente, al menos aproximadamente 20%, más preferiblemente, al menos aproximadamente 20% del lípido es colesterol, fitosteroles, desmosterol, tocotrienoles, tocoferoles, ubiquinonas, carotenoides y xantofilas tales como beta-caroteno, luteína, licopeno, astaxantina, zeaxantina, cantaxantina y ácidos grasos tales como ácidos linoleicos conjugados y ácidos grasos altamente insaturados omega-3 y omega-6 tales como ácido eicosapentaenoico, ácido docosapentaenoico y ácido docosahexaenoico, ácido araquidónico, ácido estearidónico, ácido dihomogammalinolénico y ácido gammalinolénico o sus mezclas, preferiblemente al menos aproximadamente 30%, y más preferiblemente al menos aproximadamente 40%.
En un aspecto particular de la presente invención, los microorganismos son capaces de producir al menos aproximadamente 0,1 gramos por litro por hora de una mezcla de lípidos, que incluye preferiblemente colesterol, fitosteroles, desmosterol, tocotrienoles, tocoferoles, ubiquinonas, carotenoides y xantofilas tales como beta-caroteno, luteína, licopeno, astaxantina, zeaxantina, cantaxantina y ácidos grasos tales como ácidos linoleicos conjugados y ácidos grasos altamente insaturados omega-3 y omega-6 tales como ácido eicosapentaenoico, ácido docosapentaenoico y ácido docosahexaenoico, ácido araquidónico, ácido estearidónico, ácido dihomogammalinolénico y ácido gammalinolénico o sus mezclas, más preferiblemente al menos aproximadamente 0,2 g/l/h, aún más preferiblemente al menos aproximadamente 0,3 g/l/h, y lo más preferiblemente al menos aproximadamente 0,4 g/l/h.
En otro aspecto de la presente invención, el microorganismo se selecciona del grupo que consiste en algas, hongos, bacterias y protistas. Preferiblemente, los microorganismos son del orden Thraustochytriales. Más preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del género Thraustochytrium, Schizochytrium y sus mezclas. Y lo más preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en microorganismos que tienen las características identificativas del número ATCC 20888, el número ATCC 20889, el número ATCC 20890, el número ATCC 20891 y el número ATCC 20892, cepas mutantes derivadas de cualquiera de los precedentes y sus mezclas. Preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en microorganismos que tienen las características identificativas del número ATCC 20888 y el número ATCC 20889, y más preferiblemente el número ATCC 20888, cepas de Mortierella schmuckeri, cepas de Crypthecodinium cohnii, cepas mutantes derivadas de cualquiera de los anteriores y sus mezclas.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 es un diagrama de flujo de una realización de un procedimiento de extracción sin disolvente de la presente invención.
Descripción detallada de la invención
La presente invención se dirige a un procedimiento para extraer, recuperar, aislar u obtener lípidos de microorganismos. El procedimiento de la presente invención es aplicable a la extracción de lípidos que contienen ácidos grasos altamente insaturados omega-3, tales como ácido docosahexaenoico (DHA), ácido eicosapentaenoico (EPA) y/o ácido docosapentaenoico (DPA) (es decir, la forma omega-3 de DPA), en particular lípidos que contienen una cantidad relativamente grande de DHA, procedentes de microorganismos que producen los mismos. Microorganismos ejemplares que producen una cantidad relativamente grande de ácidos grasos altamente insaturados omega-3 se divulgan en las Patentes de EE. UU. de cesionario común N° 5.340.594 y 5.340.742, ambas expedidas a favor de Barclay, y microorganismos ejemplares que producen una cantidad relativamente grande de ácido araquidónico se divulgan en la Patente de e E. UU. de cesionario común N° 5.583.019, expedida a favor de Barclay.
Sin embargo, por brevedad, esta descripción detallada de la invención se presenta con propósitos de comodidad e ilustración para el caso de extraer lípidos que comprenden ácido graso altamente insaturado omega-3 de microorganismos que producen los mismos, en particular extraer lípidos de microorganismos que producen una cantidad relativamente alta de DHA. Sin embargo, se ha de entender que la invención como un todo no pretende estar así limitada, y que un experto en la técnica identificará que el concepto de la presente invención será aplicable a otros microorganismos que producen una variedad de composiciones lipídicas según las técnicas analizadas en la presente. Estos microorganismos incluyen microorganismos tales como hongos, protistas, algas y bacterias, que producen una variedad de lípidos, tales como fosfolípidos; ácidos grasos libres; ésteres de ácidos grasos, incluyendo triglicéridos de ácidos grasos. Por brevedad, a menos que se indique otra cosa, el término "lípido" se refiere a lípido y/o compuestos asociados a lípidos.
Procedimientos de fabricación típicos de lípidos microbianos (en particular un aceite que contiene un ácido graso altamente insaturado omega-3 tal como DHA) implican hacer crecer microorganismos que producen DHA en un fermentador, aislar los microorganismos, secar la biomasa microbiana y extraer los lípidos intracelulares con un disolvente orgánico apolar, p. ej., hexano. Generalmente, el lípido extraído se refina adicionalmente para producir un lípido de alta pureza y/o calidad. El aislamiento de microorganismos implica diluir el caldo de fermentación con agua y centrifugar la mezcla para aislar microorganismos. Cuando los lípidos no se extraen inmediatamente o poco después de aislar los microorganismos, típicamente los microorganismos aislados se secan, por ejemplo, en una secadora de tambor, y se cierran herméticamente en un envase, p. ej., en bolsas cerradas herméticamente a vacío, para prevenir la degradación de lípidos. Desgraciadamente, el procedimiento de secado expone a los microorganismos a calor, lo que puede dañar, es decir degradar la calidad de, el lípido si se realiza incorrectamente. El envase puede desarrollar fugas, lo que puede degradar adicionalmente la calidad de los lípidos. Por otra parte, si los microorganismos secados no se tratan con un antioxidante, la exposición de microorganismos a aire y/o luz puede degradar adicionalmente los lípidos.
Recuperar el aceite en bruto directamente del caldo de fermentación evita estos problemas. Evitar la etapa de extracción con disolvente orgánico apolar reduce los costes de fabricación y también elimina la exposición del operario a los microorganismos secados, lo que puede provocar una respuesta alérgica en algunos individuos.
La presente invención proporciona un método para obtener lípidos de microorganismos usando un procedimiento de extracción sustancialmente libre de disolvente orgánico apolar, es decir un procedimiento de extracción "sin disolvente". Sin embargo, se pueden emplear disolventes en etapas aguas abajo tales como en un procedimiento de refinado. El procedimiento de la presente invención puede incluir obtener o aislar microorganismos, preferiblemente a partir de un procedimiento de fermentación. En contraste con los métodos actuales procedimientos de la técnica anterior tales como la extracción de aceites de habas de soja en los que las habas de soja se deben secar, el procedimiento de la presente invención no requiere una etapa de secado antes del procedimiento de extracción. Así, los procedimientos de la presente invención son aplicables a extraer lípidos de una biomasa microbiana que contiene al menos aproximadamente 10% en peso de agua atrapada, preferiblemente al menos aproximadamente 20%, más preferiblemente al menos aproximadamente 30%, y lo más preferiblemente al menos aproximadamente 50%. Cuando los microorganismos se obtienen a partir de un procedimiento de fermentación, el procedimiento de la presente invención puede incluir añadir una base al caldo de fermentación para disolver cualquier compuesto proteínico que pueda estar presente en el caldo. Las "bases" son sustancias que muestran reacciones alcalinas (básicas) en soluciones acuosas, es decir se ligan a protones y disocian iones hidróxido. La base debe ser suficientemente fuerte para hidrolizar o solubilizar al menos una porción de compuestos proteínicos que pueden estar presentes en el caldo. Las bases son útiles para solubilizar proteínas que son muy conocidas para un experto normal en la técnica de la química. Bases ejemplares que son útiles en los procedimientos de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, hidróxidos, carbonatos y bicarbonatos de litio, sodio, potasio, calcio y carbonato magnésico. También se pueden usar otros compuestos muy básicos como sales de fosfato básicas, tales como fosfato trisódico.
El procedimiento de la presente invención incluye romper o lisar las células de microorganismos para liberar los lípidos que estén presentes dentro de las células. Las células se pueden lisar usando cualquiera de los métodos conocidos incluyendo químicos; térmicos; mecánicos, incluyendo, pero no limitados a, prensa francesa, molinos, ultrasonidos, homogeneización y explosión de vapor de agua; y sus combinaciones. En una lisis térmica de células, el caldo de fermentación que contiene microorganismos se calienta hasta que las células, es decir, las paredes celulares, de los microorganismos se degradan o rompen. Típicamente, el caldo de fermentación se calienta hasta una temperatura de al menos aproximadamente 50°C, preferiblemente al menos aproximadamente 75°C, más preferiblemente hasta al menos aproximadamente 100°C, y lo más preferiblemente hasta al menos aproximadamente 130°C. Un aspecto importante del procedimiento es mantener la temperatura por debajo de la temperatura a la que se pueden degradar los lípidos extraídos. Lisar térmicamente las paredes celulares de los microorganismos es particularmente útil para microorganismos cuyas paredes celulares están compuestas por proteínas. Durante este procedimiento, el espacio libre del fermentador se puede rellenar con nitrógeno u otro gas inerte para prevenir la oxidación de los lípidos mediante oxígeno.
Calentar el caldo también desnaturaliza proteínas y ayuda a solubilizar materiales orgánicos, incluyendo proteínas. La etapa de calentamiento del caldo de fermentación se puede alcanzar mediante cualquiera de los métodos conocidos, incluyendo el uso de un termointercambiador en línea, y preferiblemente al rociar vapor de agua en el caldo de fermentación y mantener el caldo a una temperatura deseada durante menos de aproximadamente 90 minutos, preferiblemente menos de aproximadamente 60 minutos, y más preferiblemente menos de aproximadamente 30 minutos.
El procedimiento de extracción sin disolvente de la presente invención también puede incluir separar al menos parcialmente el caldo de fermentación gastado de los lípidos. Típicamente, esto se alcanza al centrifugar, p. ej., al hacer pasar el caldo a través de una centrífuga de discos apilados, de separador o de decantador, y recoger los lípidos como una fase en emulsión. La centrifugación de la mezcla da como resultado una mezcla bifásica que comprende una capa pesada y una capa ligera. Típicamente, la capa pesada es una fase acuosa, que contiene la mayoría de los restos celulares. La capa ligera que contiene lípidos emulsionados se diluye a continuación con agua, se separa de nuevo en la mezcla bifásica y la capa ligera se aísla de nuevo. Este procedimiento de dilución con agua, separación y aislamiento (es decir, procedimiento de lavado) se puede alcanzar continuamente al alimentar agua y retirar la capa pesada a lo largo del procedimiento o se puede efectuar en etapas discretas. El procedimiento de lavado se repite generalmente hasta que se obtiene una capa lipídica sustancialmente no emulsionada, aunque pueden quedar pequeñas cantidades de emulsión. Se cree que la interfase aceite-agua de la emulsión está estabilizada por restos celulares residuales que se retiran mediante el procedimiento de lavado. Durante el procedimiento de lavado, la cantidad sucesiva de agua añadida se reduce para incrementar el contenido de lípidos. Mientras que reducir la cantidad de agua de alimentación demasiado rápidamente puede dar como resultado una pérdida de lípidos a la fase acuosa, reducir la cantidad de agua de alimentación demasiado lentamente da como resultado un procedimiento de lavado ineficaz. Se puede determinar fácilmente un grado apropiado de reducción del agua de alimentación al observar o analizar la capa acuosa separada. Generalmente, la capa lipídica, es decir, la capa ligera, tiene color; por lo tanto, en muchos casos se puede determinar un grado apropiado de reducción del agua de alimentación simplemente al analizar u observan el color de la capa acuosa que se separa de la capa lipídica.
Alternativamente, y preferiblemente, la emulsión se puede romper y el aceite recuperarse usando el procedimiento de desaceitado esbozado en el documento WO 96/05278. En este procedimiento, un compuesto hidrosoluble, p. ej., alcohol y/o acetona, se añade a la emulsión de aceite/agua para romper la emulsión y la mezcla resultante se separa mediante centrifugación. El lípido aislado se puede refinar adicionalmente usando un procedimiento similar al usado para refinar aceites vegetales estándar. Brevemente, el procedimiento de refinado de lípidos implica generalmente hidratar fosfolípidos al añadir ácido fosfórico al lípido seguido por añadir hidróxido sódico para neutralizar ácidos grasos libres. Estos compuestos se retiran a través de centrifugación. Esto es seguido a continuación por una etapa de lavado con agua para retirar adicionalmente cualesquiera cantidades restantes de fosfolípidos hidratados ("gomas") y ácidos grasos neutralizados ("pasta oleosa") en el lípido. El lípido resultante se blanquea usando Trysil™ y una arcilla blanqueadora estándar. También se añade ácido cítrico para retirar iones metálicos divalentes mediante quelación. A continuación, el Trysil™ y la arcilla blanqueadora se retiran a través de filtración para producir lípido refinado. El lípido blanqueado se puede filtrar en frío para retirar compuestos de alto punto de fusión que pueden estar presentes en el lípido; sin embargo, esta etapa raramente se requiere.
El lípido resultante se puede refinar adicionalmente al retirar cualesquiera componentes de bajo peso molecular que puedan estar presentes. Típicamente, estos componentes se retiran al rociar con vapor de agua a altas temperaturas, bajo alto vacío. Este procedimiento también destruye cualesquiera enlaces peróxido que puedan estar presentes y reduce o elimina olores desagradables y ayuda a mejorar la estabilidad del aceite. A continuación, se puede añadir un antioxidante al lípido desodorizado resultante para mejorar la estabilidad del producto.
Durante el procedimiento de refinado, el lípido aislado se puede frigelizar para retirar compuestos de alto punto de fusión, tales como ácido grasos saturados. El procedimiento de frigelización implica generalmente disolver el lípido aislado en un disolvente orgánico, p. ej., hexano, enfriar la solución orgánica resultante, y filtrar la solución para retirar los componentes de alto punto de fusión de la fase de lípido o estearina. El procedimiento de frigelización produce generalmente un líquido transparente, especialmente cuando el lípido aislado sea turbio u opaco. Como se apreciará, el uso de un disolvente tal como hexano es aceptable en procedimientos tales como el procedimiento de "refinado" descrito anteriormente. Alternativamente, el lípido aislado se puede refrigerar y las impurezas solidificadas se pueden separar por filtración, sin emplear un disolvente.
El procedimiento de refinado, blanqueo, desodorización esbozado anteriormente se usará para mezclas lipídicas ricas en triglicéridos. Alternativamente, o además de este procedimiento, otros lípidos, por ejemplo, pigmentos o carotenoides, se pueden separar y purificar, p. ej., mediante reparto en diversos disolventes, métodos cromatográficos, etc.
Aunque el procedimiento de la presente invención puede incluir aislar microorganismos de un procedimiento de fermentación, una de las ventajas de la presente invención es que permite que la fermentación de microorganismos y el aislamiento de lípidos se lleven a cabo en un solo recipiente. Por ejemplo, después de la fermentación, se puede añadir base al recipiente de fermentación y calentar la mezcla para lisar las células. Después de separar la fase en una capa pesada y una capa ligera, la capa ligera se puede transferir a otro recipiente para un procesamiento adicional o la capa pesada se puede retirar del recipiente de fermentación, por ejemplo, al drenar a través del fondo del recipiente de fermentación, y la capa restante se puede procesar adicionalmente dentro del mismo recipiente de fermentación.
Si la concentración de lípidos en las células del cultivo microbiano es alta (p. ej., mayor de aproximadamente 20%) pero la concentración de células es baja (p. ej., menos de aproximadamente 40 g/l), como en células que crecen en sistemas de fermentación continua, o cultivos de células de crecimiento difícil (p. ej., frágiles), o cultivos producidos en sistemas de cultivo de base fotosintética, las células se pueden concentrar, p. ej., mediante centrifugación, filtración o sedimentación, antes de emplear los métodos de la invención si es necesario.
Objetivos, ventajas y nuevas particularidades adicionales de esta invención se harán evidentes para los expertos en la técnica al examinar los siguientes ejemplos de la misma.
Ejemplos
La reproducibilidad del procedimiento se caracterizaba por producir tres muestras de aceite completamente refinado usando aceite en bruto procedente del nuevo procedimiento de extracción sin disolvente. Una muestra extraída con hexano también se refinó completamente para servir como un control. Las etapas de fermentación, extracción y aislamiento de aceite se realizaron a gran escala, mientras que los estudios de refinado de aceite se realizaron a pequeña escala.
Las muestras de aceite completamente refinado se analizaron para demostrar la reproducibilidad del procedimiento. Fermentación:
Un microorganismo rico en aceite (Schizochytrium sp.) se hizo crecer en un fermentador de 4542 l (1200 galones) para producir un caldo de fermentación para los siguientes procedimientos de extracción. Se usó una sola partida para generar el caldo de partida para los tres procedimientos de extracción sin disolvente. La fermentación se dejó avanzar durante 94 horas, mientras se controlan los niveles de glucosa a 13 g/l, tiempo después del cual se terminó la alimentación de jarabe de maíz. Los niveles de glucosa residuales caían hasta <5 g/l cuatro horas más tarde. Esto daba como resultado una edad final de 98 horas. El volumen final del caldo era 3626 l (958 galones). El rendimiento final era 146 g/l de peso seco de células. Ni las comprobaciones de contaminación durante el procedimiento ni un análisis continuo de una muestra de caldo final mostraban signos de contaminación.
Muestra de Control Extraída con Hexano:
Una parte alícuota pequeña de caldo procedente de la partida de fermentación se secó en tambor y se extrajo con hexano para servir como una muestra de control. El producto intermedio de biomasa se recuperó usando una secadora de doble tambor. El análisis de este lípido se muestra en la Tabla 1.
Tabla 1. Análisis de biomasa de Schizochytrium sp. secada en tambor.
Figure imgf000008_0001
* base en peso seco celular
Procedimiento de extracción sin disolvente:
Se obtuvo aceite en bruto el tratar tres partes alícuotas de 1514 litros (400 galones) (aprox.) del caldo de fermentación. Cada parte alícuota de 1514 litros (400 galones) procedente del fermentador se procesó separadamente, partiendo de las etapas de tratamiento cáustico/térmico. Cada parte alícuota se trató con 20 gramos de KOH al 45% por litro y se calentó hasta 130°C durante aproximadamente 30 minutos al hacer pasar vapor de agua a través del caldo de fermentación. El aceite en bruto se recuperó del caldo tratado usando una centrífuga de discos apilados Westfalia HFA-100 a escala comercial. Los resultados resumidos para diversos parámetros del procedimiento se presentan en la Tabla 2, y los resultados finales del análisis del aceite en bruto se muestran en la Tabla 3.
Tabla 2. Datos del Procedimiento procedentes del Procedimiento de Extracción sin Disolvente.
Figure imgf000008_0002
Tabla 3. Análisis de Lotes de Aceite de DHA procedentes del Procedimiento de Extracción sin Disolvente.
Figure imgf000009_0001
Refinado:
Una muestra de cada parte alícuota de aceite en bruto se frigelizó, se refinó, se blanqueó y se desodorizó a pequeña escala, como una muestra del aceite en bruto procedente del control extraído con hexano. Datos diversos del procedimiento procedentes de estos experimentos a pequeña escala se muestran en la Tabla 4, incluyendo las eficacias de recuperación para las diversas etapas de procesamiento. Aunque es difícil interpretar demasiado de las eficacias de recuperación para procedimientos a escala de laboratorio, ya que las pérdidas tienden a ser desproporcionadamente grandes, los valores listados en la Tabla 4 muestran que los valores para las muestras extraídas sin disolvente tienden a encuadrar los valores medidos para el control extraído con hexano, siendo la única excepción la etapa de frigelización. Aunque la eficacia de recuperación durante la etapa de frigelización para el control de hexano era inferior que las observadas para las otras tres muestras, esta diferencia es insignificante desde una perspectiva estadística. Las altas pérdidas durante la etapa de frigelización hacían que también fuera inferior la eficacia de recuperación global para la muestra de control con hexano. No se esperaba que el rendimiento inferior tuviera un impacto significativo sobre la calidad global del aceite. Considerándolo todo, las diferencias en el procesamiento de las diversas muestras de aceite eran mínimas.
Tabla 4. Datos Diversos del Procedimiento procedentes de las Etapas de Refinado de Aceite.
Figure imgf000009_0002
Muestras de aceite completamente refinado procedentes de las tres pruebas de extracción sin disolvente, y el control extraído con hexano, se analizaron y los resultados se muestran en la Tabla 5. También se muestran las correspondientes especificaciones de liberación para cada parámetro.
Una muestra del aceite en bruto de partida procedente de la prueba de extracción sin disolvente también se analizó con respecto al contenido de hierro. El contenido de hierro de esta muestra era 0,08 ppm. La concentración de los otros metales vestigiales estaba siempre por debajo de sus límites de detección respectivos.
Tabla 5. Resultados de QC para Aceite de RBD DHA procedente del Procedimiento de Extracción sin Disolvente en comparación con Aceite Extraído con Hexano.
Figure imgf000010_0001
* El valor se redujo hasta 0,22 mg KOH/g después de repetir las etapas de refinado y blanqueamiento
** Muestra analizada por the San Diego Fermentation Sciences Analytical Group.
*** El valor se redujo hasta <0,02 ppm después de repetir las etapas de refinado y blanqueamiento
Se muestra en la Tabla 6 una comparación más directa de los resultados de análisis medios para las tres muestras procedentes del procedimiento de extracción sin disolvente frente a los del control de hexano.
Tabla 6. Comparación de Valores Medios
Figure imgf000010_0002
* Calculado usando el índice de acidez para la muestra reelaborada.
Los resultados de este experimento demuestran claramente que el procedimiento de extracción sin disolvente es reproducible y los lípidos procedentes de la extracción sin disolvente son relativamente indistinguibles de los lípidos obtenidos del procedimiento de extracción con hexano en cuanto a rendimiento del procedimiento y calidad del producto. El producto final del procedimiento de extracción sin disolvente es sustancialmente equivalente a los lípidos procedentes de un procedimiento habitual de extracción basado en hexano, según se determina por las similitudes entre los perfiles de ácidos grasos y esteroles del producto procedente de estos dos procedimientos.

Claims (22)

REIVINDICACIONES
1. Un procedimiento para obtener lípido que contiene un ácido graso altamente insaturado omega-3 a partir de microorganismos, que comprende:
(a) lisar células de los microorganismos para producir una mezcla celular lisada;
(b) centrifugar dicha mezcla celular lisada para producir una mezcla separada en fases que comprende una capa pesada y una capa ligera, en donde dicha capa pesada comprende una solución acuosa y dicha capa ligera comprende dicho lípido;
(c) separar dicha capa pesada de dicha capa ligera; y
(d) obtener dicho lípido de dicha capa ligera,
en donde el procedimiento se realiza sin usar un disolvente orgánico apolar.
2. El procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha capa ligera comprende un lípido emulsionado.
3. El procedimiento según la reivindicación 2, que comprende además:
(e) añadir una solución de extracción acuosa a dicha capa ligera de la etapa (c); y
(f) repetir dichas etapas (c), (d) y (e) hasta que dicho lípido se vuelva sustancialmente no emulsionado antes de dicha etapa (d).
4. El procedimiento según la reivindicación 2, en el que dicho lípido emulsionado comprende una suspensión de dicho lípido en una solución acuosa.
5. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicha solución acuosa comprende materiales celulares sólidos.
6. El procedimiento según una cualquiera de la reivindicación 1 a 5, en el que dichos microorganismos se obtienen a partir de un procedimiento de fermentación.
7. El procedimiento según la reivindicación 6, que comprende además añadir una base a un caldo de fermentación.
8. El procedimiento según la reivindicación 7, en el que dicha base se selecciona del grupo que consiste en hidróxidos, carbonatos, bicarbonatos, fosfatos y sus mezclas.
9. El procedimiento según la reivindicación 6, que comprende además solubilizar al menos parte de los compuestos proteínicos en un caldo de fermentación.
10. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que dicha etapa (a) comprende calentar dichos microorganismos hasta una temperatura de al menos 50°C.
11. El procedimiento según la reivindicación 10, en el que dicha etapa (a) comprende calentar el caldo de fermentación hasta una temperatura de al menos 75°C.
12. El procedimiento según la reivindicación 11, en el que dicha etapa (a) comprende calentar el caldo de fermentación hasta una temperatura de al menos 100°C.
13. El procedimiento según la reivindicación 12, en el que en el que dicha etapa (a) comprende calentar el caldo de fermentación hasta una temperatura de al menos 130°C.
14. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en el que dicho microorganismo es capaz de crecimiento a un nivel de salinidad de menos de 12 g/l de cloruro sódico.
15. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en el que dicho microorganismo comprende al menos 20% en peso de lípido.
16. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en el que dicho microorganismo se selecciona del grupo que consiste en algas, hongos, bacterias y protistas.
17. El procedimiento según la reivindicación 16, en el que dichos microorganismos comprenden microorganismos del género Mortierella, el género Crypthecodinium y el orden Thraustochytriales.
18. El procedimiento según la reivindicación 17, en el que dichos microorganismos comprenden microorganismos del orden Thraustochytriales.
19. El procedimiento según la reivindicación 18, en el que dichos microorganismos se seleccionan del género Thraustochytrium, Schizochytrium y sus mezclas.
20. El procedimiento según la reivindicación 19, en el que dichos microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en microorganismos que tienen las características de identificación de número ATCC 20888, número ATCC 20889, número ATCC 20890, número ATCC 20891 y número ATCC 20892, cepas de Mortierella smuckerii, cepas de Chrypthecodinium cohnii, cepas mutantes derivadas de cualquiera de los precedentes y sus mezclas.
21. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-20, en el que dicho ácido graso altamente insaturado omega-3 se selecciona de ácido docosahexaenoico (DHA), ácido eicosapentaenoico (EPA) y/o ácido docosapentaenoico (DPA)
22. El procedimiento según la reivindicación 21, en el que dicho ácido graso altamente insaturado omega-3 es DHA.
ES10176025T 2000-01-19 2001-01-19 Procedimiento de extracción sin disolvente Expired - Lifetime ES2735987T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17712500P 2000-01-19 2000-01-19

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2735987T3 true ES2735987T3 (es) 2019-12-23

Family

ID=22647287

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10176025T Expired - Lifetime ES2735987T3 (es) 2000-01-19 2001-01-19 Procedimiento de extracción sin disolvente
ES10176023.9T Expired - Lifetime ES2675517T3 (es) 2000-01-19 2001-01-19 Proceso de extracción sin solvente
ES01942672T Expired - Lifetime ES2352001T3 (es) 2000-01-19 2001-01-19 Procedimiento de extracción sin disolvente.

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10176023.9T Expired - Lifetime ES2675517T3 (es) 2000-01-19 2001-01-19 Proceso de extracción sin solvente
ES01942672T Expired - Lifetime ES2352001T3 (es) 2000-01-19 2001-01-19 Procedimiento de extracción sin disolvente.

Country Status (24)

Country Link
US (8) US6750048B2 (es)
EP (4) EP2302065A1 (es)
JP (5) JP4020642B2 (es)
KR (8) KR100995575B1 (es)
CN (1) CN100460513C (es)
AT (1) ATE485385T1 (es)
AU (7) AU780619B2 (es)
BR (1) BR0107699B1 (es)
CA (2) CA2772540A1 (es)
CZ (1) CZ303446B6 (es)
DE (1) DE60143287D1 (es)
DK (1) DK1252324T3 (es)
ES (3) ES2735987T3 (es)
HK (1) HK1050716A1 (es)
HU (1) HUP0300556A3 (es)
IL (5) IL150772A0 (es)
MX (4) MX350779B (es)
NO (2) NO20023449L (es)
NZ (1) NZ520287A (es)
PL (1) PL356587A1 (es)
PT (1) PT1252324E (es)
RU (1) RU2336307C2 (es)
WO (1) WO2001053512A1 (es)
ZA (1) ZA200205790B (es)

Families Citing this family (202)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7776353B1 (en) 1998-03-17 2010-08-17 Aker Biomarine Asa Conjugated linoleic acid compositions
CA2289648C (en) 1998-03-17 2004-06-01 Conlinco, Inc. Conjugated linoleic acid compositions
US7078051B1 (en) 1998-08-11 2006-07-18 Natural Asa Conjugated linoleic acid alkyl esters in feedstuffs and food
US7101914B2 (en) 1998-05-04 2006-09-05 Natural Asa Isomer enriched conjugated linoleic acid compositions
EP2302065A1 (en) * 2000-01-19 2011-03-30 Martek Biosciences Corporation Solventless extraction process
AU5144901A (en) 2000-04-06 2001-10-23 Conlinco Inc Conjugated linoleic acid compositions
WO2001078531A2 (en) 2000-04-18 2001-10-25 Natural As Conjugated linoleic acid powder
EP1178118A1 (en) 2000-08-02 2002-02-06 Dsm N.V. Isolation of microbial oils
US6677470B2 (en) 2001-11-20 2004-01-13 Natural Asa Functional acylglycerides
JP4647212B2 (ja) * 2001-12-12 2011-03-09 マーテック バイオサイエンシーズ コーポレーション 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう
CA2484334C (en) 2002-05-03 2013-01-22 Martek Biosciences Corporation High-quality lipids and methods for producing by enzymatic liberation from biomass
US6743931B2 (en) 2002-09-24 2004-06-01 Natural Asa Conjugated linoleic acid compositions
EP1702073B1 (en) 2003-10-02 2014-01-01 DSM IP Assets B.V. Production of high levels of dha in microalgae using modified amounts of chloride and potassium
AU2005209003A1 (en) 2004-01-26 2005-08-11 Martek Biosciences Corporation Method for the separation of phospholipids from phospholipid-containing materials
EP1866428A2 (en) 2005-03-18 2007-12-19 Microbia, Inc. Production of carotenoids in oleaginous yeast and fungi
EA200870001A1 (ru) * 2005-05-12 2009-10-30 Мартек Байосайенсиз Корпорейшн Гидролизат биомассы, его применение и производство
JP5886511B2 (ja) 2005-06-07 2016-03-16 ディーエスエム ニュートリショナル プロダクツ アーゲーＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ＡＧ 脂質および抗酸化剤の製造のための真核微生物
CA2614095A1 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Martek Biosciences Corporation Polyunsaturated fatty acid-containing oil product and uses and production thereof
US8277849B2 (en) 2006-01-19 2012-10-02 Solazyme, Inc. Microalgae-derived compositions for improving the health and appearance of skin
US8298548B2 (en) 2007-07-18 2012-10-30 Solazyme, Inc. Compositions for improving the health and appearance of skin
US20100242345A1 (en) 2006-05-19 2010-09-30 LS9, Inc Production of fatty acids & derivatives thereof
US8110670B2 (en) * 2006-05-19 2012-02-07 Ls9, Inc. Enhanced production of fatty acid derivatives
WO2008004900A1 (en) * 2006-07-05 2008-01-10 Photonz Corporation Limited Production of ultrapure epa and polar lipids from largely heterotrophic culture
JP4854418B2 (ja) * 2006-07-28 2012-01-18 花王株式会社 ドデカヒドロ−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチルナフト［２，１−ｂ］フラン原料の製造方法
WO2008129358A2 (en) * 2006-08-01 2008-10-30 Ocean Nutrition Canada Ltd. Oil producing microbes and methods of modification thereof
US8691555B2 (en) 2006-09-28 2014-04-08 Dsm Ip Assests B.V. Production of carotenoids in oleaginous yeast and fungi
US8262776B2 (en) * 2006-10-13 2012-09-11 General Atomics Photosynthetic carbon dioxide sequestration and pollution abatement
WO2008060571A2 (en) * 2006-11-13 2008-05-22 Aurora Biofuels, Inc. Methods and compositions for production and purification of biofuel from plants and microalgae
RU2517608C2 (ru) * 2007-04-03 2014-05-27 Е.И.Дюпон Де Немур Энд Компани Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот
CN101765661B (zh) 2007-06-01 2014-08-06 索拉兹米公司 在微生物中生产油
WO2008155410A1 (en) * 2007-06-21 2008-12-24 Novozymes A/S Production of lipids containing poly-unsaturated fatty acids
EP2173699A4 (en) * 2007-06-29 2014-04-16 Dsm Ip Assets Bv PRODUCTION AND PURIFICATION OF POLYUNSATURATED FATTY ACID ESTERS
US20090064567A1 (en) * 2007-09-12 2009-03-12 Martek Biosciences Corporation Biological oils and production and uses Thereof
CA2692266C (en) * 2007-09-27 2019-04-16 Ls9, Inc. Reduction of the toxic effect of impurities from raw materials by extractive fermentation
CA2704371A1 (en) * 2007-11-01 2009-05-07 Wake Forest University School Of Medicine Compositions and methods for prevention and treatment of mammalian diseases
US8343753B2 (en) 2007-11-01 2013-01-01 Wake Forest University School Of Medicine Compositions, methods, and kits for polyunsaturated fatty acids from microalgae
US8318482B2 (en) 2008-06-06 2012-11-27 Aurora Algae, Inc. VCP-based vectors for algal cell transformation
US20100022393A1 (en) * 2008-07-24 2010-01-28 Bertrand Vick Glyphosate applications in aquaculture
US20100236137A1 (en) * 2008-09-23 2010-09-23 LiveFuels, Inc. Systems and methods for producing eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid from algae
US20100077654A1 (en) * 2008-09-23 2010-04-01 LiveFuels, Inc. Systems and methods for producing biofuels from algae
US20100303990A1 (en) * 2008-10-14 2010-12-02 Solazyme, Inc. High Protein and High Fiber Algal Food Materials
US20100303957A1 (en) * 2008-10-14 2010-12-02 Solazyme, Inc. Edible Oil and Processes for Its Production from Microalgae
US9896642B2 (en) 2008-10-14 2018-02-20 Corbion Biotech, Inc. Methods of microbial oil extraction and separation
MX352984B (es) * 2008-10-14 2017-12-15 Terravia Holdings Inc Composiciones alimenticias a partir de biomasa de microalgas.
US20100303989A1 (en) * 2008-10-14 2010-12-02 Solazyme, Inc. Microalgal Flour
US20100303961A1 (en) * 2008-10-14 2010-12-02 Solazyme, Inc. Methods of Inducing Satiety
US20100297295A1 (en) * 2008-10-14 2010-11-25 Solazyme, Inc. Microalgae-Based Beverages
US8927522B2 (en) 2008-10-14 2015-01-06 Solazyme, Inc. Microalgal polysaccharide compositions
US20100297323A1 (en) * 2008-10-14 2010-11-25 Solazyme, Inc. Gluten-free Foods Containing Microalgae
US20100297325A1 (en) * 2008-10-14 2010-11-25 Solazyme, Inc. Egg Products Containing Microalgae
US20100297331A1 (en) * 2008-10-14 2010-11-25 Solazyme, Inc. Reduced Fat Foods Containing High-Lipid Microalgae with Improved Sensory Properties
US8809037B2 (en) 2008-10-24 2014-08-19 Bioprocessh20 Llc Systems, apparatuses and methods for treating wastewater
WO2010054322A1 (en) 2008-11-07 2010-05-14 Solazyme, Inc. Cosmetic compositions comprising microalgal components
US20110239318A1 (en) * 2008-11-18 2011-09-29 LiveFuels, Inc. Methods for producing fish with high lipid content
JP6109475B2 (ja) 2008-11-28 2017-04-05 テラヴィア ホールディングス， インコーポレイテッド 従属栄養微生物における、用途に応じた油の生産
EP2373803A4 (en) * 2008-12-08 2013-05-29 Sapphire Energy Inc REMOVAL OF NITROGEN FROM CHLOROPHYLL OR PHEOPHYTIC BIOMASS
US8940340B2 (en) * 2009-01-22 2015-01-27 Aurora Algae, Inc. Systems and methods for maintaining the dominance of Nannochloropsis in an algae cultivation system
CN104042600A (zh) 2009-02-02 2014-09-17 帝斯曼知识产权资产有限公司 改善认知功能和降低心率的方法
US8143051B2 (en) * 2009-02-04 2012-03-27 Aurora Algae, Inc. Systems and methods for maintaining the dominance and increasing the biomass production of nannochloropsis in an algae cultivation system
SE534278C2 (sv) * 2009-02-17 2011-06-28 Alfa Laval Corp Ab Ett kontinuerligt förfarande för isolering av oljor från alger eller mikroorganismer
AU2009342676B2 (en) 2009-03-19 2016-02-25 Dsm Ip Assets B.V. Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
US8207363B2 (en) 2009-03-19 2012-06-26 Martek Biosciences Corporation Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
US8476060B2 (en) * 2009-04-13 2013-07-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Process for separating lipids from a biomass
WO2010121094A1 (en) 2009-04-17 2010-10-21 Livefuels. Inc. Systems and methods for culturing algae with bivalves
US20100297749A1 (en) * 2009-04-21 2010-11-25 Sapphire Energy, Inc. Methods and systems for biofuel production
EP2421944B1 (en) * 2009-04-22 2015-06-17 Robert Fulton Fluidizable algae-based powdered fuel and methods for making and using same
CA2759273C (en) 2009-04-27 2018-01-09 Ls9, Inc. Production of fatty acid esters
US9187778B2 (en) 2009-05-04 2015-11-17 Aurora Algae, Inc. Efficient light harvesting
BRPI1012026A2 (pt) 2009-05-26 2018-07-17 Solazyme Inc fracionamento de biomassa microbiana contendo óleo
US9029137B2 (en) 2009-06-08 2015-05-12 Aurora Algae, Inc. ACP promoter
US8865468B2 (en) * 2009-10-19 2014-10-21 Aurora Algae, Inc. Homologous recombination in an algal nuclear genome
US8809046B2 (en) 2011-04-28 2014-08-19 Aurora Algae, Inc. Algal elongases
US8865452B2 (en) * 2009-06-15 2014-10-21 Aurora Algae, Inc. Systems and methods for extracting lipids from wet algal biomass
US9101942B2 (en) * 2009-06-16 2015-08-11 Aurora Algae, Inc. Clarification of suspensions
US8769867B2 (en) * 2009-06-16 2014-07-08 Aurora Algae, Inc. Systems, methods, and media for circulating fluid in an algae cultivation pond
US8747930B2 (en) * 2009-06-29 2014-06-10 Aurora Algae, Inc. Siliceous particles
US20100325948A1 (en) * 2009-06-29 2010-12-30 Mehran Parsheh Systems, methods, and media for circulating and carbonating fluid in an algae cultivation pond
CN101585759B (zh) * 2009-07-08 2012-05-23 内蒙古金达威药业有限公司 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法
US20110177061A1 (en) 2009-07-10 2011-07-21 Martek Biosciences Corporation Methods of treating and preventing neurological disorders using docosahexaenoic acid
US8709765B2 (en) * 2009-07-20 2014-04-29 Aurora Algae, Inc. Manipulation of an alternative respiratory pathway in photo-autotrophs
US20110082205A1 (en) 2009-10-01 2011-04-07 Panker Cynthia A Docosahexaenoic Acid Gel Caps
US8765983B2 (en) * 2009-10-30 2014-07-01 Aurora Algae, Inc. Systems and methods for extracting lipids from and dehydrating wet algal biomass
US8748160B2 (en) * 2009-12-04 2014-06-10 Aurora Alage, Inc. Backward-facing step
WO2011090730A1 (en) * 2009-12-28 2011-07-28 Martek Biosciences Corporation Recombinant thraustochytrids that grow on xylose, and compositions, methods of making, and uses thereof
US20110195449A1 (en) 2009-12-28 2011-08-11 Martek Biosciences Corporation Recombinant Thraustochytrids that Grow on Sucrose, and Compositions, Methods of Making, and Uses Thereof
KR20150013667A (ko) 2010-01-19 2015-02-05 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 에이코사펜타엔산 생산 미생물, 지방산 조성물 및 이의 제조방법 및 용도
US8303818B2 (en) * 2010-06-24 2012-11-06 Streamline Automation, Llc Method and apparatus using an active ionic liquid for algae biofuel harvest and extraction
MX2012011558A (es) 2010-04-06 2013-02-21 Heliae Dev Llc Metodos y sistemas para producir biocombustible.
US8211309B2 (en) 2010-04-06 2012-07-03 Heliae Development, Llc Extraction of proteins by a two solvent method
WO2011127127A2 (en) 2010-04-06 2011-10-13 Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University Extraction with fractionation of oil and co-products from oleaginous material
US8308951B1 (en) 2010-04-06 2012-11-13 Heliae Development, Llc Extraction of proteins by a two solvent method
US8273248B1 (en) 2010-04-06 2012-09-25 Heliae Development, Llc Extraction of neutral lipids by a two solvent method
US8202425B2 (en) 2010-04-06 2012-06-19 Heliae Development, Llc Extraction of neutral lipids by a two solvent method
US8475660B2 (en) 2010-04-06 2013-07-02 Heliae Development, Llc Extraction of polar lipids by a two solvent method
US8115022B2 (en) 2010-04-06 2012-02-14 Heliae Development, Llc Methods of producing biofuels, chlorophylls and carotenoids
US8313648B2 (en) 2010-04-06 2012-11-20 Heliae Development, Llc Methods of and systems for producing biofuels from algal oil
US8211308B2 (en) 2010-04-06 2012-07-03 Heliae Development, Llc Extraction of polar lipids by a two solvent method
US10125331B2 (en) * 2010-04-29 2018-11-13 Advanced Energy Development Renewable oil refining processes
CA3039432A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Corbion Biotech, Inc. Tailored oils produced from recombinant heterotrophic microorganisms
AU2011261455B2 (en) * 2010-06-01 2016-03-24 Dsm Ip Assets B.V. Extraction of lipid from cells and products therefrom
NL2004832C2 (en) * 2010-06-07 2011-12-08 Evodos B V Separating biomass from an aqueous medium.
MY163938A (en) 2010-06-14 2017-11-15 Io-Mega Holding Corp Method for the production of algae derived oils
US8906236B2 (en) 2010-07-26 2014-12-09 Sapphire Energy, Inc. Process for the recovery of oleaginous compounds and nutrients from biomass
US9028696B2 (en) 2010-07-26 2015-05-12 Sapphire Energy, Inc. Process for the recovery of oleaginous compounds from biomass
WO2012015831A1 (en) 2010-07-26 2012-02-02 Sapphire Energy, Inc. Process for the recovery of oleaginous compounds from biomass
US20140215903A1 (en) 2010-09-21 2014-08-07 Steven Daniel DOIG Process for separation of a mixture containing a microbial oil and microbial substance
SG190154A1 (en) 2010-11-03 2013-06-28 Solazyme Inc Microbial oils with lowered pour points, dielectric fluids produced therefrom, and related methods
US20120329138A1 (en) 2010-12-23 2012-12-27 Shell Oil Company Process for separation of a mixture containing a microbial substance and a liquid
US8722359B2 (en) 2011-01-21 2014-05-13 Aurora Algae, Inc. Genes for enhanced lipid metabolism for accumulation of lipids
CN102617431B (zh) * 2011-01-28 2013-09-25 天津滨海索尔特生物技术中心有限公司 用无机碱提取盐藻中的β-胡萝卜素的方法
US9249436B2 (en) 2011-02-02 2016-02-02 Solazyme, Inc. Tailored oils produced from recombinant oleaginous microorganisms
RU2605328C2 (ru) * 2011-02-16 2016-12-20 Соликс Алгредиентс, Инк. Композиция, набор и способ извлечения целевых соединений из биомассы
US8926844B2 (en) 2011-03-29 2015-01-06 Aurora Algae, Inc. Systems and methods for processing algae cultivation fluid
US8569530B2 (en) 2011-04-01 2013-10-29 Aurora Algae, Inc. Conversion of saponifiable lipids into fatty esters
JP2014519810A (ja) 2011-04-28 2014-08-21 オーロラ アルギー，インコーポレイテッド 藻類のデサチュラーゼ
US8752329B2 (en) 2011-04-29 2014-06-17 Aurora Algae, Inc. Optimization of circulation of fluid in an algae cultivation pond
US9487716B2 (en) 2011-05-06 2016-11-08 LiveFuels, Inc. Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems
KR20140033378A (ko) 2011-05-06 2014-03-18 솔라짐, 인코포레이티드 자일로오스를 대사시키는 유전자 조작된 미생물
US20140099684A1 (en) * 2011-05-26 2014-04-10 Council Of Scientific & Industrial Research Engine worthy fatty acid methyl ester (biodiesel) from naturally occuring marine microalgal mats and marine microalgae cultured in open salt pans together with value addition of co-products
FR2975705B1 (fr) 2011-05-27 2014-12-26 Roquette Freres Procede d'extraction du squalene a partir de microalgues
US8365462B2 (en) 2011-05-31 2013-02-05 Heliae Development, Llc V-Trough photobioreactor systems
USD661164S1 (en) 2011-06-10 2012-06-05 Heliae Development, Llc Aquaculture vessel
USD679965S1 (en) 2011-06-10 2013-04-16 Heliae Development, Llc Aquaculture vessel
USD682637S1 (en) 2011-06-10 2013-05-21 Heliae Development, Llc Aquaculture vessel
ES2774778T3 (es) 2011-07-21 2020-07-22 Dsm Ip Assets Bv Microorganismos productores de ácido eicosapentaenoico, composiciones de ácidos grasos y métodos de elaboración y usos de los mismos
CA2842272C (en) 2011-07-21 2020-04-28 Dsm Ip Assets B.V. Fatty acid compositions
WO2013024174A1 (en) 2011-08-18 2013-02-21 Dsm Ip Assets B.V. Dha triglyceride, dha free fatty acid, and dha ethyl ester emulsions, and methods of treating spinal cord injury
PL2773216T3 (pl) 2011-11-01 2021-05-04 Dsm Ip Assets B.V. Stabilny oksydacyjnie olej zawierający wielonienasycone kwasy tłuszczowe
WO2013075116A2 (en) 2011-11-17 2013-05-23 Heliae Development, Llc Omega 7 rich compositions and methods of isolating omega 7 fatty acids
CN103131529B (zh) * 2011-11-23 2016-02-24 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 一种提取微生物油脂的方法
KR20150001830A (ko) 2012-04-18 2015-01-06 솔라짐, 인코포레이티드 맞춤 오일
CN103421595A (zh) * 2012-05-25 2013-12-04 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 一种提取微生物油脂的方法
CN104508113A (zh) 2012-06-29 2015-04-08 Bp生物燃料英国有限公司 从微生物中分离可再生物质的方法
CN103589503B (zh) * 2012-08-13 2015-09-30 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 一种高效提取微生物油脂的方法
KR101470078B1 (ko) * 2012-08-21 2014-12-08 현대자동차주식회사 이산화탄소 포집ㆍ고정ㆍ전환을 통한 온실가스 감축 및 부가가치화 방법
US10098371B2 (en) 2013-01-28 2018-10-16 Solazyme Roquette Nutritionals, LLC Microalgal flour
US9567615B2 (en) 2013-01-29 2017-02-14 Terravia Holdings, Inc. Variant thioesterases and methods of use
US9816079B2 (en) 2013-01-29 2017-11-14 Terravia Holdings, Inc. Variant thioesterases and methods of use
EP2762009A1 (de) * 2013-02-05 2014-08-06 Evonik Industries AG Verbesserung der Bioverfügbarkeit von Wertstoffen aus Mikroorganismen
EP2953480B1 (de) * 2013-02-05 2020-06-03 Evonik Operations GmbH Verbesserung der bioverfügbarkeit von wertstoffen aus mikroorganismen
CN105189740B (zh) 2013-03-13 2019-01-15 帝斯曼营养品股份公司 工程化微生物
US9266973B2 (en) 2013-03-15 2016-02-23 Aurora Algae, Inc. Systems and methods for utilizing and recovering chitosan to process biological material
US9290749B2 (en) 2013-03-15 2016-03-22 Solazyme, Inc. Thioesterases and cells for production of tailored oils
US9783836B2 (en) 2013-03-15 2017-10-10 Terravia Holdings, Inc. Thioesterases and cells for production of tailored oils
WO2014186395A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Solazyme, Inc. Cosmetic compositions comprising microalgal oil
EP2826384A1 (de) 2013-07-16 2015-01-21 Evonik Industries AG Verfahren zur Trocknung von Biomasse
FR3009619B1 (fr) 2013-08-07 2017-12-29 Roquette Freres Compositions de biomasse de microalgues riches en proteines de qualite sensorielle optimisee
US10053715B2 (en) 2013-10-04 2018-08-21 Corbion Biotech, Inc. Tailored oils
KR102143001B1 (ko) 2013-11-01 2020-08-11 에스케이이노베이션 주식회사 초음속 분산기를 이용한 유질 미생물 파쇄 공정 및 이를 이용한 바이오 오일의 제조방법
SG11201605052XA (en) 2013-12-20 2016-07-28 Dsm Ip Assets Bv Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
EP2958982B1 (en) 2013-12-20 2019-10-02 Mara Renewables Corporation Methods of recovering oil from microorganisms
CN105960235B (zh) 2013-12-20 2021-01-08 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 用于从微生物细胞获得微生物油的方法
MX2016008220A (es) * 2013-12-20 2017-02-20 Dsm Ip Assets Bv Procedimientos para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas.
US11124736B2 (en) 2013-12-20 2021-09-21 Dsm Ip Assets B.V. Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
MX370606B (es) 2013-12-20 2019-12-18 Dsm Ip Assets Bv Procedimientos para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas.
KR102435268B1 (ko) 2013-12-20 2022-08-22 디에스엠 뉴트리셔널 프라덕츠 아게 미생물로부터 오일을 회수하는 방법
ES2764273T3 (es) 2014-07-10 2020-06-02 Corbion Biotech Inc Nuevos genes de cetoacil ACP sintasa y uso de los mismos
US9765368B2 (en) 2014-07-24 2017-09-19 Terravia Holdings, Inc. Variant thioesterases and methods of use
CN107208103A (zh) 2014-09-18 2017-09-26 泰拉瑞亚控股公司 酰基‑acp硫酯酶及其突变体
EP3200604B1 (de) 2014-10-02 2021-11-03 Evonik Operations GmbH Verfahren zur herstellung eines futtermittels
US10619175B2 (en) 2014-10-02 2020-04-14 Evonik Operations Gmbh Process for producing a PUFA-containing feedstuff by extruding a PUFA-containing biomass
CA2958457C (en) 2014-10-02 2022-10-25 Evonik Industries Ag Process for producing a pufa-containing biomass which has high cell stability
EP3200603A1 (de) 2014-10-02 2017-08-09 Evonik Degussa GmbH Pufas enthaltendes futtermittel mit hoher abriebfestigkeit und hoher wasserstabilität
BR112017012648B1 (pt) 2014-12-22 2020-12-08 Unilever N.V composição oral ou tópica e uso de um agonista de fator nuclear eritróide 2 relacionado ao fator 2 e um agonista do receptor hepático x como agentes ativos em uma composição oral ou tópica para beneficiar o crescimento da fibra capilar e/ou induzir o elemento de resposta antioxidante (are)
KR20160096478A (ko) * 2015-02-05 2016-08-16 주식회사 이코원 탄소 발열 모듈 및 이를 이용한 탄소 발열 튀김기
AR104042A1 (es) 2015-03-26 2017-06-21 Mara Renewables Corp Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto
CA2971786A1 (en) 2015-03-31 2016-10-06 Fresenius Kabi Deutschland Gmbh Emulsions for parenteral administration
US20160298104A1 (en) * 2015-04-07 2016-10-13 Decant Treatment Systems, Llc Method for electrical treatment of fluid medium containing biological matter and a system for its implementation
EP3297604B1 (en) 2015-05-22 2020-07-22 Fresenius Kabi Deutschland GmbH Vitamin a for parenteral administration
US10342775B2 (en) 2015-05-22 2019-07-09 Fresenius Kabi Deutschland Gmbh Vitamin A for parenteral administration
MX2018000502A (es) 2015-07-13 2018-09-07 Mara Renewables Corp Mejora del metabolismo de microalga de xilosa.
ITUB20152958A1 (it) 2015-08-06 2017-02-06 Eni Spa Metodo per concentrare una sospensione cellulare comprendente una biomassa mucillaginosa di lieviti oleaginosi.
KR20170119227A (ko) * 2016-04-18 2017-10-26 서울바이오시스 주식회사 공기 청정기
BR112018073164A2 (pt) 2016-05-12 2019-04-30 Dsm Ip Assets Bv método de aumento de produção de ácidos graxos poli-insaturados ômega-3 em microalgas
US10851395B2 (en) 2016-06-10 2020-12-01 MARA Renewables Corporation Method of making lipids with improved cold flow properties
US11419350B2 (en) 2016-07-01 2022-08-23 Corbion Biotech, Inc. Feed ingredients comprising lysed microbial cells
EP3485027A1 (en) * 2016-07-13 2019-05-22 DSM IP Assets B.V. Method for extracting a microbial oil comprising polyunsaturated fatty acids from a fermentation broth containing oleaginous microorganisms
US11946017B2 (en) 2016-07-13 2024-04-02 Evonik Operations Gmbh Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass
EP3525781B2 (en) 2016-10-11 2024-04-24 Fresenius Kabi Deutschland GmbH Composition comprising epa and dha for an enhanced efficacy of anticancer agents
US11352651B2 (en) 2016-12-27 2022-06-07 Evonik Operations Gmbh Method of isolating lipids from a lipids containing biomass
WO2018122057A1 (en) * 2016-12-27 2018-07-05 Evonik Degussa Gmbh Method of isolating lipids from a lipids containing biomass
US11814665B2 (en) 2017-08-17 2023-11-14 Evonik Operations Gmbh Enhanced production of lipids by limitation of at least two limiting nutrient sources
WO2019034354A1 (en) 2017-08-17 2019-02-21 Evonik Degussa Gmbh ENHANCED PRODUCTION OF LIPIDS BY LIMITING AT LEAST TWO SOURCES OF NUTRIENT LIMITING
EP3470502A1 (en) * 2017-10-13 2019-04-17 Evonik Degussa GmbH Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass
EP3527664A1 (en) 2018-02-15 2019-08-21 Evonik Degussa GmbH Method of isolating lipids from a lipids containing biomass
WO2019122030A1 (en) * 2017-12-22 2019-06-27 Dsm Ip Assets B.V. Method of separating lipids from a lysed lipids containing biomass
BR112020019920A2 (pt) * 2018-03-30 2021-01-05 Dsm Ip Assets B.V. Método de redução de emulsão por lavagem de caldo
CA3094477A1 (en) * 2018-03-30 2019-10-03 Dsm Ip Assets B.V. Method of obtaining a microbial oil and a method of reducing emulsion by maintaining a low concentration of carbohydrate
WO2019219443A1 (en) 2018-05-15 2019-11-21 Evonik Operations Gmbh Method of isolating lipids from a lipids containing biomass with aid of hydrophobic silica
US11976253B2 (en) 2018-05-15 2024-05-07 Evonik Operations Gmbh Method of isolating lipids from a lysed lipids containing biomass by emulsion inversion
WO2020007758A1 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Fresenius Kabi Deutschland Gmbh Lipid emulsion for parenteral administration
FR3085962B1 (fr) 2018-09-14 2021-06-18 Fermentalg Procede d'extracton d'une huile riche en pufa
FR3085825B1 (fr) 2018-09-14 2021-07-16 Fermentalg Huile de microorganismes riche en acide docosahexaenoique
BR112021008853A2 (pt) * 2018-11-09 2021-08-17 Evonik Operations Gmbh método para produzir uma biomassa que pode ser facilmente rompida e que tem um teor aumentado de ácidos graxos poliinsaturados
US20220017929A1 (en) 2018-11-09 2022-01-20 Evonik Operations Gmbh Method for producing a biomass with an increased content of polyunsaturated fatty acids
WO2021123117A1 (de) 2019-12-20 2021-06-24 Fresenius Kabi Austria Gmbh Verfahren zur herstellung von öl-in-wasser-emulsionen
CN111235035A (zh) * 2019-12-30 2020-06-05 嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司 一种裂殖壶菌突变株及其用于制备二十二碳六烯酸油脂的方法和应用
FR3111912A1 (fr) 2020-06-24 2021-12-31 Fermentalg Procédé de culture de microorganismes pour l’accumulation de lipides
FR3130842A1 (fr) 2021-12-22 2023-06-23 CarbonWorks Procede de captation des phytotoxines dans un reacteur biologique
WO2023175141A1 (en) * 2022-03-18 2023-09-21 Purac Biochem B.V. Method for reducing fermentation broth viscosity
WO2023220060A1 (en) * 2022-05-11 2023-11-16 C16 Biosciences, Inc. Enzymatic lysis for extraction of bioproducts from yeast
WO2024119170A2 (en) 2022-12-02 2024-06-06 Dsm Ip Assets B.V. Fermentatively-produced retinoid containing compositions, and the methdos of making and using the same

Family Cites Families (123)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2753362A (en) * 1951-05-18 1956-07-03 Standard Brands Inc Process of extracting lipids from plant and animal tissue
GB808128A (en) * 1955-12-01 1959-01-28 Nat Res Dev A method of increasing the fatty contents of such micro-organisms as yeasts, bacteria and moulds
US3089821A (en) 1959-10-28 1963-05-14 Merck & Co Inc Process for the preparation of lipids
DE2056896B2 (de) * 1970-02-18 1979-12-06 Veb Schwermaschinenbau Kombinat Ernst Thaelmann Magdeburg, Ddr 3011 Magdeburg Verfahren zur gleichzeitigen Gewinnung von Fett und Protein aus pflanzlichen, ölhaltigen Rohstoffen und Zwischenprodukten
US3878232A (en) * 1970-09-28 1975-04-15 Staley Mfg Co A E Extraction process to improve the quality and yield of crude vegetable oils
US4504473A (en) * 1982-06-30 1985-03-12 Ribi Immunochem Research, Inc. Pyridine soluble extract of a microorganism
DE3248167A1 (de) * 1982-12-27 1984-06-28 Wintershall Ag, 3100 Celle Trehaloselipidtetraester
US4792418A (en) 1985-08-14 1988-12-20 Century Laboratories, Inc. Method of extraction and purification of polyunsaturated fatty acids from natural sources
JPS6244170A (ja) 1985-08-19 1987-02-26 Agency Of Ind Science & Technol モルテイエレラ属糸状菌体の超臨界流体による抽出方法
US4680314A (en) 1985-08-30 1987-07-14 Microbio Resources, Inc. Process for producing a naturally-derived carotene/oil composition by direct extraction from algae
JPH0634730B2 (ja) * 1986-06-16 1994-05-11 鐘淵化学工業株式会社 パルミトレイン酸の製造法
DK199887D0 (da) 1987-04-15 1987-04-15 Danisco Bioteknologi As Gaerstamme
FR2621327B1 (fr) 1987-10-06 1990-01-05 Commissariat Energie Atomique Procede de production et d'extraction de polysaccharides a partir d'une culture de porphyridium cruentum et dispositif pour la mise en oeuvre du procede
JPH0198494A (ja) 1987-10-09 1989-04-17 Agency Of Ind Science & Technol バイオリアクター
US5130242A (en) * 1988-09-07 1992-07-14 Phycotech, Inc. Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
US5340594A (en) 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Food product having high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
US5340742A (en) 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
US6451567B1 (en) 1988-09-07 2002-09-17 Omegatech, Inc. Fermentation process for producing long chain omega-3 fatty acids with euryhaline microorganisms
US5173409A (en) 1989-12-08 1992-12-22 Ecogen Inc. Recovery of bt endotoxin protein from lysed cell mixtures
FR2656874B1 (fr) * 1990-01-11 1992-04-03 Commissariat Energie Atomique Procede de production et d'extraction d'anti-oxydants a partir d'une culture de micro-organismes et photobioreacteur pour la mise en óoeuvre de ce procede.
US5407957A (en) * 1990-02-13 1995-04-18 Martek Corporation Production of docosahexaenoic acid by dinoflagellates
US5658767A (en) * 1991-01-24 1997-08-19 Martek Corporation Arachidonic acid and methods for the production and use thereof
US6270828B1 (en) 1993-11-12 2001-08-07 Cargrill Incorporated Canola variety producing a seed with reduced glucosinolates and linolenic acid yielding an oil with low sulfur, improved sensory characteristics and increased oxidative stability
FR2686619B1 (fr) * 1992-01-28 1995-07-13 Commissariat Energie Atomique Procede de production selective de lipides poly-insatures a partir d'une culture de micro-algues du type porphyridium et cuve utilisee dans ce procede.
US5476787A (en) 1992-04-24 1995-12-19 Director-General Of Agency Of Industrial Science And Technology Method of removing nitrogen impurities from water using hydrocarbon-producing microalga
DE4219360C2 (de) * 1992-06-12 1994-07-28 Milupa Ag Verfahren zur Gewinnung von Lipiden mit einem hohen Anteil von langkettig-hochungesättigten Fettsäuren
JPH06340577A (ja) * 1993-03-24 1994-12-13 Nippon Sanso Kk １３ｃ標識イコサペンタエン酸とその誘導体及び製造方法
JPH072724A (ja) * 1993-03-24 1995-01-06 Nippon Sanso Kk １３ｃ標識アラキドン酸とその誘導体及び製造方法
FR2719222B1 (fr) * 1994-05-02 1996-06-21 Rocher Yves Biolog Vegetale Vésicules lipidiques, leur procédé de fabrication et leurs applications.
WO1996005278A1 (de) * 1994-08-16 1996-02-22 Dr. Frische Gmbh Verfahren zur gewinnung von nicht wasserlöslichen, nativen produkten aus nativen stoffgemengen mit hilfe der zentrifugalkraft
US5583019A (en) 1995-01-24 1996-12-10 Omegatech Inc. Method for production of arachidonic acid
EP0823475B1 (en) 1995-04-17 2009-06-17 National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Novel microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms
JP2764572B2 (ja) * 1995-04-17 1998-06-11 工業技術院長 ドコサヘキサエン酸生産能を有する新規微生物及びそれを用いたドコサヘキサエン酸の製造方法
DK0741183T3 (da) * 1995-05-04 1999-10-11 Nestle Sa Fremgangsmåde til fraktionering af fede syrer
GB9514649D0 (en) * 1995-07-18 1995-09-13 Zeneca Ltd Extraction of triglycerides from microorganisms
JP3985035B2 (ja) * 1995-09-14 2007-10-03 独立行政法人産業技術総合研究所 （ｎ−６）系ドコサペンタエン酸含有油脂ならびに該油脂の製造方法および用途
US6255505B1 (en) 1996-03-28 2001-07-03 Gist-Brocades, B.V. Microbial polyunsaturated fatty acid containing oil from pasteurised biomass
WO1998001536A1 (fr) 1996-07-03 1998-01-15 Sagami Chemical Research Center Micro-organismes produisant de l'acide docosahexanoique et procede de production de l'acide docosahexanoique
EE04063B1 (et) * 1996-07-23 2003-06-16 Nagase Biochemicals, Ltd. Meetod dokosaheksaeenhappe ning dokosapentaeenhappe valmistamiseks
US5951875A (en) 1996-12-20 1999-09-14 Eastman Chemical Company Adsorptive bubble separation methods and systems for dewatering suspensions of microalgae and extracting components therefrom
EP2175031A3 (en) * 1997-03-04 2010-07-07 Suntory Holdings Limited Process for preparing highly unsaturated fatty acid and lipid containing highly unsaturated fatty acid
RU2235783C2 (ru) * 1997-05-02 2004-09-10 ДСМ Ай Пи АССЕТС Б.В. Выделение кристаллов каротиноида из микробной биомассы
EP1905309A1 (en) 1997-05-27 2008-04-02 SemBioSys Genetics Inc. Uses of oil bodies
US7585645B2 (en) 1997-05-27 2009-09-08 Sembiosys Genetics Inc. Thioredoxin and thioredoxin reductase containing oil body based products
US6566583B1 (en) 1997-06-04 2003-05-20 Daniel Facciotti Schizochytrium PKS genes
JP3836231B2 (ja) * 1997-10-17 2006-10-25 日本化学飼料株式会社 ホタテガイ中腸腺から得られる高度不飽和脂肪酸含有油及びその製造方法
WO1999025157A1 (fr) 1997-11-12 1999-05-20 Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha Dispositif electroluminescent et structure destinee au blindage de celui-ci
JP2000041684A (ja) 1998-07-29 2000-02-15 Daicel Chem Ind Ltd 新規なｄ−アミノアシラーゼおよびその製造方法、並びに該ｄ−アミノアシラーゼを利用したｄ−アミノ酸の製造方法
FR2782921B1 (fr) 1998-09-09 2002-09-20 Dior Christian Parfums Extrait lipidique de l'algue skeletonema, procede de preparation et utilisation dans des domaines cosmetique et pharmaceutique, notamment dermatologique
US6166231A (en) 1998-12-15 2000-12-26 Martek Biosciences Corporation Two phase extraction of oil from biomass
JP2000245492A (ja) 1999-03-02 2000-09-12 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 微生物抽出脂質
US6344349B1 (en) 1999-12-06 2002-02-05 Decant Technologies Llc Process and system for electrical extraction of intracellular matter from biological matter
EP2302065A1 (en) * 2000-01-19 2011-03-30 Martek Biosciences Corporation Solventless extraction process
AU783066B2 (en) 2000-04-12 2005-09-22 Westfalia Separator Ag Method for the fractionation of oil and polar lipid-containing native raw materials
DE10018213A1 (de) 2000-04-12 2001-10-25 Westfalia Separator Ind Gmbh Verfahren zur Fraktionierung von öl-und lecithinhaltigen nativen Rohstoffen
EP1178118A1 (en) 2000-08-02 2002-02-06 Dsm N.V. Isolation of microbial oils
US20060060520A1 (en) 2001-06-25 2006-03-23 Bomberger David C Systems and methods using a solvent for the removal of lipids from fluids
WO2003017945A2 (en) 2001-08-24 2003-03-06 Martek Biosciences Boulder Corporation Products containing highly unsaturated fatty acids for use by women and their children during stages of preconception, pregnancy and lactation/post-partum
JP4647212B2 (ja) 2001-12-12 2011-03-09 マーテック バイオサイエンシーズ コーポレーション 脂肪種子および微生物供給源からの脂質の抽出および脱ろう
CA2484334C (en) 2002-05-03 2013-01-22 Martek Biosciences Corporation High-quality lipids and methods for producing by enzymatic liberation from biomass
DE60325590D1 (de) 2002-06-19 2009-02-12 Dsm Ip Assets Bv Pasteurisationsverfahren für mikrobielle zellen und mikrobielles öl
EP1702073B1 (en) 2003-10-02 2014-01-01 DSM IP Assets B.V. Production of high levels of dha in microalgae using modified amounts of chloride and potassium
JP4850060B2 (ja) 2004-03-01 2012-01-11 サントリーホールディングス株式会社 長鎖高度不飽和脂肪酸を構成要素として含むリン脂質の製造方法、およびその利用
BRPI0510291A (pt) 2004-04-27 2007-10-30 Baxter Int sistema de reator com tanque agitado
EP1597976B1 (en) 2004-05-21 2013-01-30 Nestec S.A. Use of polyol esters of fatty acids in aerated frozen confection with improved nutritional attributes
DE102004062141A1 (de) 2004-12-23 2006-07-06 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Rohöls aus Gemischen von Mikroorganismen und Pflanzen, das so hergestellte Öl sowie die spezifischen Verwendungen des so hergestellten und gegebenenfalls zusätzlich raffinierten Öls
DE102005003624A1 (de) 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Herstellung und Anwendung eines antioxidativ wirksamen Extraktes aus Crypthecodinium sp.
NZ563125A (en) 2005-06-03 2009-11-27 Mcfarlane Marketing Aust Pty L Lipid extract of mussels and method for preparation thereof
JP5886511B2 (ja) 2005-06-07 2016-03-16 ディーエスエム ニュートリショナル プロダクツ アーゲーＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ＡＧ 脂質および抗酸化剤の製造のための真核微生物
CA2614095A1 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Martek Biosciences Corporation Polyunsaturated fatty acid-containing oil product and uses and production thereof
US7527734B1 (en) 2005-11-15 2009-05-05 Shepherd Samuel L Rapid non-equilibrium decompression of microorganism-containing waste streams
US20070213298A1 (en) 2006-02-07 2007-09-13 Universitetet I Oslo Omega 3
WO2008004900A1 (en) 2006-07-05 2008-01-10 Photonz Corporation Limited Production of ultrapure epa and polar lipids from largely heterotrophic culture
EP1887011A1 (en) 2006-08-09 2008-02-13 Thermphos Trading GmbH Alpha amino acid phosphonic acid compounds, method of preparation and use thereof
WO2008130372A2 (en) 2006-09-28 2008-10-30 Microbia, Inc. Production of sterols in oleaginous yeast and fungi
US20080083352A1 (en) 2006-10-10 2008-04-10 Ernest Peter Tovani Vehicle Table System
KR100810314B1 (ko) 2006-10-11 2008-03-04 삼성전자주식회사 휴대 단말기의 키 입력 장치
WO2008060571A2 (en) 2006-11-13 2008-05-22 Aurora Biofuels, Inc. Methods and compositions for production and purification of biofuel from plants and microalgae
CN101595203A (zh) 2006-12-01 2009-12-02 北卡罗来纳州立大学 生物质转化成燃料的方法
BRPI0720852A2 (pt) 2006-12-22 2014-03-11 Danisco Us Inc Genecor Division Desemulsificação auxiliada por enzima de extratos de lipídio aquosos
CN101820743A (zh) 2007-06-14 2010-09-01 尼古拉斯·米特罗普洛斯 用于生物燃料的藻类生长
US20100226977A1 (en) 2007-08-29 2010-09-09 Aker Biomarine Asa Low viscosity phospholipid compositions
US20090064567A1 (en) 2007-09-12 2009-03-12 Martek Biosciences Corporation Biological oils and production and uses Thereof
JP4594998B2 (ja) * 2008-05-21 2010-12-08 株式会社日立製作所 エレベーターかごの速度検出装置の検査方法。
ITMI20081203A1 (it) 2008-06-30 2010-01-01 Eni Spa Procedimento per l'estrazione di acidi grassi da biomassa algale
EP2145942A1 (de) 2008-07-15 2010-01-20 Lonza Ltd. Verfahren zur Isolierung von Ölen aus Zellen und Biomasse
BRPI0917961A2 (pt) 2008-08-04 2017-04-11 Kai Bioenergy cultivo, colheita e extração contínua de óleo de culturas fotossintéticas
PT2337857T (pt) 2008-10-02 2017-06-02 Gonzalez Ramon Nieves Resumo
MX352984B (es) 2008-10-14 2017-12-15 Terravia Holdings Inc Composiciones alimenticias a partir de biomasa de microalgas.
SE534278C2 (sv) 2009-02-17 2011-06-28 Alfa Laval Corp Ab Ett kontinuerligt förfarande för isolering av oljor från alger eller mikroorganismer
US9296985B2 (en) 2009-03-10 2016-03-29 Valicor, Inc. Algae biomass fractionation
US8207363B2 (en) 2009-03-19 2012-06-26 Martek Biosciences Corporation Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
US8476060B2 (en) 2009-04-13 2013-07-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Process for separating lipids from a biomass
BRPI1012026A2 (pt) 2009-05-26 2018-07-17 Solazyme Inc fracionamento de biomassa microbiana contendo óleo
KR101659765B1 (ko) 2009-09-28 2016-09-27 삼성전자주식회사 다중 모드 휴대용 단말기에서 전력 소모를 줄이기 위한 장치 및 방법
US20110256268A1 (en) 2010-04-14 2011-10-20 Solazyme, Inc. Oleaginous Yeast Food Compositions
AU2011261455B2 (en) 2010-06-01 2016-03-24 Dsm Ip Assets B.V. Extraction of lipid from cells and products therefrom
MY163938A (en) 2010-06-14 2017-11-15 Io-Mega Holding Corp Method for the production of algae derived oils
US9028696B2 (en) 2010-07-26 2015-05-12 Sapphire Energy, Inc. Process for the recovery of oleaginous compounds from biomass
WO2012015831A1 (en) 2010-07-26 2012-02-02 Sapphire Energy, Inc. Process for the recovery of oleaginous compounds from biomass
US8192627B2 (en) 2010-08-06 2012-06-05 Icm, Inc. Bio-oil recovery methods
US20120040428A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Paul Reep Procedure for extracting of lipids from algae without cell sacrifice
US20120129244A1 (en) 2010-10-17 2012-05-24 Michael Phillip Green Systems, methods and apparatuses for dewatering, flocculating and harvesting algae cells
CN101985637B (zh) 2010-11-02 2014-05-07 嘉必优生物工程（武汉）有限公司 一种微生物油脂的提取方法
ES2490619T3 (es) 2010-11-08 2014-09-04 Neste Oil Oyj Método de extracción de lípidos a partir de biomasa
WO2012109642A1 (en) 2011-02-12 2012-08-16 Phycal, Inc. Aqueous extraction methods for high lipid microorganisms
CN103649313B (zh) 2011-03-07 2017-10-24 Dsm营养产品股份公司 工程化破囊壶菌属微生物
US20120238732A1 (en) 2011-03-15 2012-09-20 Iowa State University Research Foundation, Inc. Oil extraction from microalgae
FR2975705B1 (fr) 2011-05-27 2014-12-26 Roquette Freres Procede d'extraction du squalene a partir de microalgues
CN102433215A (zh) 2011-09-22 2012-05-02 厦门汇盛生物有限公司 一种从真菌或藻类中物理破壁提取油脂的方法
CN102388988B (zh) 2011-11-08 2013-01-23 中国农业科学院油料作物研究所 一种微生物油的分提方法
WO2013075116A2 (en) 2011-11-17 2013-05-23 Heliae Development, Llc Omega 7 rich compositions and methods of isolating omega 7 fatty acids
EP2838630A2 (fr) 2012-04-16 2015-02-25 Roquette Frères Procédé de raffinage du squalène produit par microalgues
CN104508113A (zh) 2012-06-29 2015-04-08 Bp生物燃料英国有限公司 从微生物中分离可再生物质的方法
EP2958982B1 (en) 2013-12-20 2019-10-02 Mara Renewables Corporation Methods of recovering oil from microorganisms
MX370606B (es) 2013-12-20 2019-12-18 Dsm Ip Assets Bv Procedimientos para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas.
KR102435268B1 (ko) 2013-12-20 2022-08-22 디에스엠 뉴트리셔널 프라덕츠 아게 미생물로부터 오일을 회수하는 방법
US11124736B2 (en) 2013-12-20 2021-09-21 Dsm Ip Assets B.V. Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
EP3083909A1 (en) 2013-12-20 2016-10-26 DSM IP Assets B.V. Process for extracting lipids for use in production of biofuels
CN105960235B (zh) 2013-12-20 2021-01-08 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 用于从微生物细胞获得微生物油的方法
MX2016008220A (es) 2013-12-20 2017-02-20 Dsm Ip Assets Bv Procedimientos para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas.
SG11201605052XA (en) 2013-12-20 2016-07-28 Dsm Ip Assets Bv Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
JP6882160B2 (ja) 2014-07-07 2021-06-02 コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガナイゼーション 植物脂質から工業製品を製造する工程

Also Published As

Publication number Publication date
AU2963601A (en) 2001-07-31
US20080044876A1 (en) 2008-02-21
US7351558B2 (en) 2008-04-01
ATE485385T1 (de) 2010-11-15
PL356587A1 (en) 2004-06-28
JP5722536B2 (ja) 2015-05-20
MX232239B (es) 2005-11-18
EP2295594A1 (en) 2011-03-16
JP5756137B2 (ja) 2015-07-29
KR20030013367A (ko) 2003-02-14
US9738851B2 (en) 2017-08-22
EP1252324A1 (en) 2002-10-30
JP2015133969A (ja) 2015-07-27
US7662598B2 (en) 2010-02-16
AU2016203318A1 (en) 2016-06-09
CN101463371A (zh) 2009-06-24
IL206961A (en) 2011-11-30
US20170298288A1 (en) 2017-10-19
MX297659B (en) 2012-03-29
KR20140079870A (ko) 2014-06-27
EP2302065A1 (en) 2011-03-30
KR100995575B1 (ko) 2010-11-19
AU2018200956A1 (en) 2018-03-01
AU2014203384B2 (en) 2016-03-03
AU2005202980C1 (en) 2009-04-02
MX275361B (en) 2010-04-21
EP2295595B1 (en) 2019-05-01
CA2772540A1 (en) 2001-07-26
NO20023449D0 (no) 2002-07-18
RU2002119551A (ru) 2004-02-20
KR20130032395A (ko) 2013-04-01
AU2014203384A1 (en) 2014-07-10
DK1252324T3 (da) 2010-12-20
PT1252324E (pt) 2010-12-16
KR101591834B1 (ko) 2016-02-18
NO20023449L (no) 2002-09-17
EP1252324A4 (en) 2005-02-09
IL201756A (en) 2011-06-30
IL150772A0 (en) 2003-02-12
DE60143287D1 (de) 2010-12-02
JP2005278650A (ja) 2005-10-13
JP2003520046A (ja) 2003-07-02
MX350779B (es) 2017-09-18
IL206960A0 (en) 2010-12-30
CA2397655A1 (en) 2001-07-26
US20190256797A1 (en) 2019-08-22
HUP0300556A2 (hu) 2003-06-28
KR20110000592A (ko) 2011-01-03
ES2675517T3 (es) 2018-07-11
BR0107699A (pt) 2003-01-14
US20140212936A1 (en) 2014-07-31
ZA200205790B (en) 2003-07-28
US20020001833A1 (en) 2002-01-03
KR20120070588A (ko) 2012-06-29
HK1050716A1 (en) 2003-07-04
NO20110858L (no) 2002-09-17
US20040229325A1 (en) 2004-11-18
ES2352001T3 (es) 2011-02-14
BR0107699B1 (pt) 2014-05-27
US10329515B2 (en) 2019-06-25
WO2001053512A1 (en) 2001-07-26
AU2005202980B2 (en) 2008-07-10
KR20080007279A (ko) 2008-01-17
US7781193B2 (en) 2010-08-24
KR20150020609A (ko) 2015-02-26
IL150772A (en) 2010-06-16
NZ520287A (en) 2004-01-30
AU780619B2 (en) 2005-04-07
MXPA02007092A (es) 2003-02-24
CN1416469A (zh) 2003-05-07
EP1252324B1 (en) 2010-10-20
AU2012200890B2 (en) 2014-07-31
AU2019226124A1 (en) 2019-09-26
EP2295594B1 (en) 2018-04-04
HUP0300556A3 (en) 2010-03-29
CZ303446B6 (cs) 2012-09-19
US20080044875A1 (en) 2008-02-21
EP2295595A1 (en) 2011-03-16
KR101429238B1 (ko) 2014-08-12
KR20100051131A (ko) 2010-05-14
JP2010051328A (ja) 2010-03-11
KR101180462B1 (ko) 2012-09-06
JP2013099365A (ja) 2013-05-23
CN100460513C (zh) 2009-02-11
RU2336307C2 (ru) 2008-10-20
AU2005202980A1 (en) 2005-08-04
US20080038800A1 (en) 2008-02-14
JP4020642B2 (ja) 2007-12-12
JP4537887B2 (ja) 2010-09-08
KR101429236B1 (ko) 2014-08-12
CA2397655C (en) 2012-06-05
AU2012200890A1 (en) 2012-03-08
US6750048B2 (en) 2004-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2735987T3 (es) Procedimiento de extracción sin disolvente
AU2008229885B2 (en) Solventless extraction process
TWI293648B (en) Solventless extraction process