CN101585759B - 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法 - Google Patents

从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101585759B
CN101585759B CN2009101593681A CN200910159368A CN101585759B CN 101585759 B CN101585759 B CN 101585759B CN 2009101593681 A CN2009101593681 A CN 2009101593681A CN 200910159368 A CN200910159368 A CN 200910159368A CN 101585759 B CN101585759 B CN 101585759B
Authority
CN
China
Prior art keywords
dha
unsaturated fatty
crude oil
fermentation liquor
oil phase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN2009101593681A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101585759A (zh
Inventor
詹光煌
吴轶
付志杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Inner Mongolia Kingdomway Pharmaceutical Co Ltd
Xiamen Kingdomway Group Co
Original Assignee
Inner Mongolia Kingdomway Pharmaceutical Co Ltd
Xiamen Kingdomway Group Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inner Mongolia Kingdomway Pharmaceutical Co Ltd, Xiamen Kingdomway Group Co filed Critical Inner Mongolia Kingdomway Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN2009101593681A priority Critical patent/CN101585759B/zh
Publication of CN101585759A publication Critical patent/CN101585759A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101585759B publication Critical patent/CN101585759B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Abstract

本发明公开了一种从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法，主要工艺过程是先将双鞭甲藻发酵液用盐酸溶液调节pH值，以无残留单体聚丙烯酰胺为絮凝剂絮凝，凝板框过滤得到滤饼，滤饼用复合纤维素水解酶加水配成的破壁液破壁，破壁后用离心机实现渣、水相、油相三相分离，重复2-5次后基本无油相，合并油相并水洗后即为含DHA毛油，毛油进入五级连续分子蒸馏，最终得DHA含量40-50％的不饱和脂肪酸。本发明采用转速8000-12000转/分钟的高速离心机进行分离直接得到毛油，避免了有机溶剂的使用，毛油精制采用五级分子蒸馏，可有效地达到脱色、脱酸、脱臭的作用。本发明整套工艺成本低且环保。

Description

从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法
技术领域
本发明涉及一种不饱和脂肪酸的提取方法，特别指从双鞭甲藻(Crypthecodinium cohnii)发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法。
背景技术
DHA化学名称为全顺式-4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸，是人脑和视网膜的主要组成物质之一，DHA对婴儿的神经发育起了重要的作用，婴儿的智力发育指数及神经系统的发育都与DHA呈正相关。DHA对老年人主要具有以下生理保健功能：(1)降血脂作用；(2)抑制血小板聚集，减少血栓的形成；(3)抗动脉粥样硬化，预防心肌梗塞；(4)预防老年性痴呆，延缓衰老；(5)防止癌症。从上世纪九十年代开始，DHA已成为风靡全世界的益智保健产品，FOA(世界农粮组织)和WHO(世界卫生组织)于1999年的《关于脂肪、油脂的人类营养报告》中说明，婴儿、青少年配方奶粉应含有每公斤婴儿体重40mgDHA和每公斤婴儿体重60mgAA。国家卫生部《食品添加剂使用卫生标准(2000年增补品种)》规定：DHA营养强化剂在婴儿配方奶粉中的使用量为每公斤0.4-1.8g。国内外已经给于DHA作为食品添加剂的市场准入。
传统的DHA生产工艺主要是从鱼油中提取，由于鱼油来源不稳定以及口味不佳，近年来，全球已普遍开展微生物发酵生产DHA的研究和规模化生产。其中双鞭甲藻由于脂肪酸组成较单一，DHA含量高达35-50％，是发酵法生产DHA最理想的来源之一。近几年已有数篇专利涉及微藻发酵生产DHA不饱和脂肪酸的方法(如专利号00135338.1、200710025079.3、200810047859.2)。但上述提取方法基本上是采用大量的溶剂进行提取，如氯仿、正己烷，在提取后还需浓缩去除，造成大量的能源消耗和溶剂消耗，且形成污染排放。后续的精制步骤一般采用脱色剂进行脱色，真空气提脱臭。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法，这种提取方法无需使用有机溶剂，使用的发酵液是由双鞭甲藻菌种(Crypthecodinium cohnii ATCC30556)在液体培养基中连续培养获得，发酵单位35-50g/L。本提取方法成本低且减少了污染物排放，采用分子蒸馏精炼可有效保障产品的质量。
本发明要解决的技术问题由以下方案来实现：从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法，其特征是：先将双鞭甲藻(Crypthecodinium cohnii)发酵液用质量浓度10-30％的盐酸溶液调节pH值至3-6，以发酵液体积2-5％、浓度为0.1-0.5％的无残留单体阳离子聚丙烯酰胺水溶液为絮凝剂絮凝，板框过滤得到滤饼，滤饼用5-10倍重量的破壁液破壁，破壁液由葡聚糖内切酶EC3.2.1.4、葡聚糖外切酶EC3.2.1.91、葡萄糖苷酶EC2.1.21三种酶加水配成，其中三种酶的含量都为0.1-0.5％，其余为水，破壁后用高速离心机实现渣、水相、油相三相分离，离心机转速为8000-12000转/分钟，一次分离后的渣可加入5-10倍重量的水搅拌均匀后再经8000-11000转/分钟进行高速三相分离，重复2-5次后基本无油相，合并油相并经水洗后即为含DHA毛油，DHA毛油进入五级连续分子蒸馏，前级的重组分直接进入后级进行蒸馏，绝对压力0.5-5Pa，温度120-140℃，最终得DHA含量40-50％的不饱和脂肪酸。
本发明的优点：本发明无需使用有机溶剂，使用的发酵液是由双鞭甲藻菌种(Crypthecodinium cohnii ATCC30556)在液体培养基中连续培养获得。本发明采用转速8000-12000转/分钟的高速离心机进行分离直接得到毛油，避免了有机溶剂的使用，毛油精制采用五级分子蒸馏，可有效地达到脱色、脱酸、脱臭的作用。本发明整套工艺成本低且环保，采用分子蒸馏精炼可有效保障产品的质量。
附图说明
图1是本发明的工艺流程图
图2是本发明的设备工艺示意图
具体实施方式
为了具体说明本发明的工艺，以下是一个可以实现本发明的实施例，但不作为对本发明的局限。取100L双鞭甲藻发酵液，边搅拌边加入浓度为20％的盐酸，调节pH值至5.5。继续加入3L的浓度为0.3％的无残留单体阳离子聚丙烯酰胺水溶液，充分搅拌30分钟后，停搅拌静置60分钟。将料液打到板框过滤机进行压滤，收集滤饼。往50L水中加入葡聚糖内切酶EC3.2.1.4，葡聚糖外切酶EC3.2.1.91，葡萄糖苷酶EC2.1.21各0.15Kg，搅拌均匀后加入前述滤饼，20-40℃下保温搅拌60分钟。得到破壁发酵液。将破壁发酵液打入德国westfalia高速碟式离心分离机，转速10000转/分钟，调节得到渣、水相、油相三相分离。将分离出的渣加入50L水充分搅拌60分钟后打入高速碟式离心机中再进行第二次三相分离。将分离出的渣加入50L水充分搅拌60分钟后打入高速碟式离心机中再进行第三次三相分离。合并三次离心分离得到的油相，加入10L水，加热到50℃保温搅拌20分钟后静置60分钟，分层去除水层，油层再加入10L水，加热到50℃保温搅拌20分钟后静置60分钟，分层去除水层，共得到4.56Kg的毛油。毛油打入五级连续分子蒸馏，分子蒸馏绝对压力1.0-1.5Pa，温度125-135℃。一级蒸馏的重组分进入二级蒸馏，二级蒸馏的重组分进入三级蒸馏，依次完成五级分子蒸馏，收集最终蒸馏重组分，得到3.86Kg不饱和脂肪酸，DHA含量为45.6％。

Claims (1)

1.从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法，其特征是：先将双鞭甲藻发酵液用质量浓度10-30％的盐酸溶液调节pH值至3-6，以发酵液体积2-5％、浓度为0.1-0.5％的无残留单体阳离子聚丙烯酰胺水溶液为絮凝剂絮凝，板框过滤得到滤饼，滤饼用5-10倍重量的破壁液破壁，破壁液由葡聚糖内切酶EC3.2.1.4、葡聚糖外切酶EC3.2.1.91、葡萄糖苷酶EC2.1.21三种酶加水配成，其中三种酶的含量都为0.1-0.5％，其余为水，破壁后用高速离心机实现渣、水相、油相三相分离，离心机转速为8000-12000转/分钟，一次分离后的渣可加入5-10倍重量的水搅拌均匀后再经8000-11000转/分钟进行高速三相分离，重复2-5次后基本无油相，合并油相并经水洗后即为含DHA毛油，DHA毛油进入五级连续分子蒸馏，前级的重组分直接进入后级进行蒸馏，绝对压力0.5-5Pa，温度120-140℃，最终得DHA含量40-50％的不饱和脂肪酸。
CN2009101593681A 2009-07-08 2009-07-08 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法 Active CN101585759B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009101593681A CN101585759B (zh) 2009-07-08 2009-07-08 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009101593681A CN101585759B (zh) 2009-07-08 2009-07-08 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101585759A CN101585759A (zh) 2009-11-25
CN101585759B true CN101585759B (zh) 2012-05-23

Family

ID=41370213

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009101593681A Active CN101585759B (zh) 2009-07-08 2009-07-08 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101585759B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102919512B (zh) * 2012-09-26 2015-05-27 内蒙古金达威药业有限公司 一种富含dha微藻粉及其制备方法
CN102887821B (zh) * 2012-09-29 2015-09-09 青岛琅琊台集团股份有限公司 一种萃取分离海洋微藻发酵液提取dha的方法
CN103966273B (zh) * 2014-04-29 2017-07-14 内蒙古金达威药业有限公司 一种双鞭甲藻发酵生产dha的方法
CN105670771A (zh) * 2016-02-26 2016-06-15 深圳市荣格保健品有限公司 一种藻油dha提取制备方法
CN106636235B (zh) * 2016-12-30 2020-08-04 内蒙古金达威药业有限公司 一种利用微生物发酵生产dha的方法
CN111575323A (zh) * 2017-02-23 2020-08-25 内蒙古金达威药业有限公司 一种提取ara毛油的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1358839A (zh) * 2000-12-11 2002-07-17 姜悦 利用海洋微藻异养培养生产长链多不饱和脂肪酸
CN1416469A (zh) * 2000-01-19 2003-05-07 奥米加技术公司 无溶剂的提取方法
CN1986822A (zh) * 2006-12-15 2007-06-27 湖北友芝友生物科技有限公司 用寇氏隐甲藻发酵生产二十二碳六烯酸油脂的方法
CN101168501A (zh) * 2007-07-11 2008-04-30 南京工业大学 一种从隐甲藻中提取并精制富含dha脂肪酸的工艺
CN101307341A (zh) * 2008-05-29 2008-11-19 武汉友芝友保健乳品有限公司 生物酶法破壁用于二十二碳六烯酸油脂生产方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1416469A (zh) * 2000-01-19 2003-05-07 奥米加技术公司 无溶剂的提取方法
CN1358839A (zh) * 2000-12-11 2002-07-17 姜悦 利用海洋微藻异养培养生产长链多不饱和脂肪酸
CN1986822A (zh) * 2006-12-15 2007-06-27 湖北友芝友生物科技有限公司 用寇氏隐甲藻发酵生产二十二碳六烯酸油脂的方法
CN101168501A (zh) * 2007-07-11 2008-04-30 南京工业大学 一种从隐甲藻中提取并精制富含dha脂肪酸的工艺
CN101307341A (zh) * 2008-05-29 2008-11-19 武汉友芝友保健乳品有限公司 生物酶法破壁用于二十二碳六烯酸油脂生产方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN101585759A (zh) 2009-11-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101585759B (zh) 从双鞭甲藻发酵液中提取dha不饱和脂肪酸的方法
EP2958982B1 (en) Methods of recovering oil from microorganisms
CN103030550B (zh) 长链二元酸提纯精制的方法及产品
CN102492544B (zh) 干法制取dha微藻油的方法
CN109777607B (zh) 一种纯化dha毛油的方法
CN107418995B (zh) 一种石榴皮单宁液态发酵制备的鞣花酸及其制备方法
CN107083406B (zh) (r)-3-羟基丁酸的生产方法
CN103882071B (zh) 一种微生物油及其制备方法
CN104342462B (zh) 一种利用餐厨垃圾制备的饲用二十二碳六烯酸添加剂及其制备方法
CN104004592B (zh) 一种从鲜柑橘皮中同时提取精油和果胶的方法
CN102690846A (zh) 谷氨酸生物固相酶催化合成γ-氨基丁酸的方法
CN102250981B (zh) 一种以石榴皮为原料固态发酵制备鞣花酸的方法
CN108285911B (zh) 一种发酵提取l-异亮氨酸的工艺
CN113604512B (zh) 一种从裂殖壶菌中提取角鲨烯的方法及角鲨烯在保湿抗衰老化妆品中的应用
CN102887821B (zh) 一种萃取分离海洋微藻发酵液提取dha的方法
CN103922921A (zh) 从发酵液中提取ara的方法
KR20110077719A (ko) 해조올리고당과 천연 ｇａｂａ를 함유하는 기능성 발효주의 제조방법 및 이에 의해 제조된 기능성 발효주
CN111057727B (zh) 一种生产、分离和提取l-谷氨酰胺的方法
CN102352400B (zh) 微生物发酵植物油脂脱臭馏出物生产植物甾醇的方法
CN111690462A (zh) 一种从含油的藻类或真菌细胞破壁液破乳提油的方法
CN109266698B (zh) 被孢霉属微生物油脂中脂肪酸组合物成分调整的方法
CN111607622A (zh) 一种利用小麦b淀粉生产3-羟基丁酮的工艺方法
CN103864614B (zh) 从微生物发酵的dha油脂中分离纯化dha乙酯的方法
CN110495520A (zh) 茶渣发酵液及其制备方法和用途
CN201458998U (zh) 发酵法提取芝麻粕中氨基酸的生产装置

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant