CN1921869A - 含有高分子多酚组分的脂肪酶活性抑制剂、茶提取物及其制造方法 - Google Patents

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Abstract

本发明是关于抑制对饮食中脂肪的吸收、抑制血液中中性脂肪上升的饮料食品。具体地说，将从乌龙茶中分取的高分子多酚组分作为抑制脂肪酶活性的有效成分添加于饮料食品中。因本发明的饮料食品既安全又不损坏原本的香味，所以可进行日常摄取，通过高分子多酚组分的抑制脂肪酶作用来抑制血液中中性脂肪的上升、预防肥胖。

Description

含有高分子多酚组分的脂肪酶活性抑制剂、茶提取物及其制造方法
技术领域
本发明着眼于乌龙茶等的茶中含有的高分子多酚(聚合儿茶素)在具有种种功效的同时，又与其他的丹宁、非聚合儿茶素等不同，其涩味、苦味少，涉及选择性分离茶等的聚合儿茶素的方法、浓缩通过该方法得到的聚合儿茶素后的茶提取物等的组合物、含有通过该方法得到的组分的脂肪酶活性抑制剂、及添加该组合物时既不损坏香味、嗜好性又高且以增进健康为目的的饮料食品。
背景技术
近年来，随着日本人生活方式的欧美化，对高脂肪食物的摄取也沿着增加的方向发展。根据平成11年国民营养调查的报告显示，尽管对能量的摄取量在逐年减少，可超过其脂质能量比的适合比率25％、中性脂肪值和胆固醇值比例高的60岁或超过60岁的人占5～6成(厚生劳动省平成11年国民营养调查结果的概要临床营养2001；98(5)：577-588)。
肥胖是现今社会最重大的疾病之一，其主要原因是脂肪的过剩摄取。且脂肪的过剩摄取，不仅会造成肥胖，还可由肥胖引发糖尿病、高脂血症、高血压、动脉硬化等。针对此肥胖的治疗药物，在日本国内唯一被认可的是食欲抑制剂马吲哚R(Mazindol)，但有报告指出其具有口渴、便秘、胃部不适感、恶心·呕吐等的副作用[临床评价1985；13(2)：419-459临床评价1985；13(2)：461-515]。另外，在海外，通过抑制脂肪酶活性而具有抑制肠道吸收脂肪作用的赛尼可R(Xenical)也作为肥胖改善药于市场销售，但还是有脂肪便、排便数增加、软便、腹泻、腹痛等的副作用，所以很难说是安全的(The Lancet 1998；352：67-172)。
为预防肥胖，虽然通过控制饮食减少摄取的热量是有效的手段，但必须接受严格的营养指导，在日常生活中的实行多数比较困难。因此，安全、健康地抑制来源于饮食的脂肪被体内吸收，是以肥胖及其相关疾病的治疗或增进健康为目的的现实而有效的方法。
在此背景下，引人注目的是被证明为既安全又对人体有效的指定保健食品的开发。至今为止，作为抑制餐后血清中性脂肪值上升的食品原料，已被销售的有通过抑制胰脂肪酶来抑制脂肪吸收的珠蛋白水解物[J.Nutr.1988；128：56-60，日本临床·食粮学会志1999；52(2)：71-77健康·营养食品研究2002；5(3)：131-144]、具有与甘油三酯的消化吸收特性不同的甘油二酯[J.Am.Coll.Nutr.2000；19(6)：789-796Clin.Chim.Acta.2001；11(2)：109-117]、由鱼油提炼的二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等的指定保健食品。
同时，显示乌龙茶的脂质改善效果的报告中，有每日1330ml、饮用6星期市售的乌龙茶后，血液中中性脂肪值显著降低的报告[日本营养·食粮学会志1991；44(4)：251-259]，还有以单纯性肥胖症的男性女性102名为试验对象，连续6星期经口摄取乌龙茶(2g×4/日)的结果，67％的被验者体重减少了1kg或大于1kg，而且血液中中性脂肪值呈现高值的被验者在摄取乌龙茶后表现出显著的改善效果[日本临床营养学会杂志1998；20(1)：83-90]。如此大量饮用乌龙茶虽有效果，但在日常生活中很难持续。并且，即使提供单纯浓缩的乌龙茶，也会因苦味·涩味过强、咖啡因量增加而为不现实的方法。
乌龙茶等中含有的高分子多酚(聚合儿茶素)不仅具有种种功效，同时与其他的丹宁、非聚合儿茶素等不同，涩味、苦味很少。因此，非常期望确立高效分离乌龙茶等中含有的儿茶素类中的非聚合儿茶素和聚合儿茶素的方法。
至此为止已知可通过种种树脂分离茶的种种成分。例如，用活性炭处理可除去丹宁、除去咖啡因。但通过活性炭或吸附型树脂等的吸附剂选择性分离聚合儿茶素和非聚合儿茶素的有效的方法还不为人所知。
【非专利文献1】厚生劳动省平成11年国民营养调查结果的概要临床营养2001；98(5)：577-588
【非专利文献2】临床评价1985；13(2)：419-459
【非专利文献3】临床评价1985；13(2)：461-515
【非专利文献4】The Lancet 1998；352：67-172
【非专利文献5】J.Nutr.1988；128：56-60，1988
【非专利文献6】日本临床·食粮学会志1999；52(2)：71-77
【非专利文献7】健康·营养食品研究2002；5(3)：131-144
【非专利文献8】J.Am.Coll.Nutr.2000；19(6)：789-796
【非专利文献9】Clin.Chim.Acta.2001；11(2)：109-117
【非专利文献10】日本营养·食粮学会志1991；44(4)：251-259
【非专利文献11】日本临床营养学会杂志1998；20(1)：83-90
发明内容
本发明提供抑制对饮食中脂肪的吸收、抑制血液中中性脂肪的上升及/或防止肥胖的饮料食品以及脂肪酶活性抑制剂。
本发明提供从非聚合儿茶素和聚合儿茶素的混合物、例如乌龙茶中高效分离两者的方法。
本发明提供通过使含有聚合儿茶素和非聚合儿茶素的水性液体在50℃或大于50℃的温度下与吸附剂接触，选择性地除去非聚合儿茶素，获得与原本的水性液体相比，聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率提高了的水性液体的方法，及由用该方法得到的水性液体或其浓缩物或干燥物组成的组合物。
本发明提供聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率高于通常的乌龙茶(提取液)的乌龙茶提取物。
本发明还进一步提供含有上述组合物或茶提取物的脂肪酶抑制剂及饮料食品添加剂。
定义
本说明书中的聚合儿茶素，是指与茶类中含有的高分子多酚同等含义地使用，其茶儿茶素为二聚物以上聚合的物质，是非聚合儿茶素的反义术语。茶儿茶素是指茶类中含有的儿茶素的总称，茶类中含有的儿茶素，来源于其他原料或来源于合成的儿茶素类，也包含于本说明书的茶儿茶素的定义中。
非聚合儿茶素是指单体的茶儿茶素。乌龙茶中含有的主要的非聚合儿茶素为儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯(CG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯(ECG)及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的8种。
本说明书中的高分子多酚组分，是指选择性浓缩乌龙茶等混合含有聚合儿茶素及非聚合儿茶素的材料的水提取液中的聚合儿茶素，聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率与乌龙茶提取液(水提取液)相比提高了的乌龙茶提取物。
本说明书中的吸附儿茶素，是指实施本发明的方法(例如实施例2中温度为60℃时的方法)时被吸附剂吸附的茶儿茶素，其大部分是非聚合儿茶素。本领域技术人员应知道吸附剂也会吸附若干聚合儿茶素。非吸附儿茶素是指不被该吸附剂吸附的茶儿茶素，其大部分是聚合儿茶素。本领域技术人员也应知道非吸附儿茶素中也会含有若干非聚合儿茶素。
(1)脂肪酶活性抑制剂的发明
本发明者等发现，乌龙茶中抑制脂肪吸收必须的脂肪酶、特别是胰脂肪酶的成分，是将乌龙茶用于活性炭等的吸附剂柱，存在于作为非吸附组分被回收的咖啡因、不含有或仅含有微量的非聚合儿茶素类的乌龙茶多酚组分中。基于以上发现，本发明是含有由作为抑制脂肪吸收、抑制血液中中性脂肪上升、及/或防止肥胖用的有效成分、从乌龙茶中分取(isolated)的高分子多酚组分组成的脂肪酶活性抑制剂及该高分子多酚组分的饮料食品。
在本发明中使用的从乌龙茶中分取的高分子多酚组分，含有相对于非聚合儿茶素，聚合儿茶素(高分子多酚)优选至少为4倍的量。高分子多酚组分的获得方法是本发明的一部分，在后详述。
本发明的抑制脂肪酶活性的成分，因不含或仅含微量的非聚合儿茶素类，所以基本感觉不到苦味·涩味，又因其不含咖啡因，所以在饮料食品中以任意量添加也不损坏香味，即使大量摄取也不会造成咖啡因的过量摄取。而且本发明的抑制脂肪酶活性的成分来源于乌龙茶，所以安全性高。本发明的饮料食品可连日或日常摄取，使其持续发挥期望的作用。因此，对于饮料食品的高分子多酚组分的添加量不存在实质上的上限·下限。但是，为得到抑制脂肪酶活性的效果，添加于饮料食品时，最好使每次的摄取部分(例如约250ml)中可摄取的聚合儿茶素为67mg或大于67mg。此时，添加后饮料食品中含有的聚合儿茶素量的测定，可通过实施例1中所示的高效液相色谱法，即将分取的聚合儿茶素作为标准物质用反相柱通过梯度洗脱测定。
添加作为抑制脂肪酶活性的成分的乌龙茶高分子多酚组分的饮料食品例，作为饮料时，可为液态强壮剂、保健饮料、营养补充饮料、运动饮料等。作为食品时，可为保健食品、营养补充食品等。
脂肪酶活性抑制剂，从乌龙茶中分取的高分子多酚组分，是通过使乌龙茶的水提取液与从活性炭及吸附树脂中选择的吸附剂接触，选择性地除去非聚合儿茶素，相对于非聚合儿茶素，聚合儿茶素的比率提高了的液态组分或将其浓缩或使其干燥后的产物。
(2)来源于茶的高分子多酚组分的制造方法的发明
本发明者等对非聚合儿茶素和聚合儿茶素的分离方法不断锐意研究的结果，通过使用吸附剂，此时温度管理为50℃或大于50℃，发现了只选择性浓缩聚合儿茶素，获得高分子多酚组分(聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率提高了的组合物、茶提取物)的方法。
因此，本发明方法的构成为，通过使含有聚合儿茶素和非聚合儿茶素的水性液体与从活性炭及吸附树脂中选择的吸附剂在50℃或大于50℃的液温条件下接触，选择性地除去非聚合儿茶素，可得到作为高分子多酚组分，与原有的水性液体相比，聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率提高了的水性液体。
温度
温度设定为50℃或大于50℃，是本发明中为了只使非聚合儿茶素选择性地吸附在吸附剂上而除去的必须的条件，低于此温度，例如在室温下不能选择性地分离聚合儿茶素和非聚合儿茶素。温度无特别的上限，可用到沸腾温度的任意的温度进行。根据需要，还可用压力下超过100℃的温度。
原料
含有聚合儿茶素和非聚合儿茶素的水性液体无特别限定，本发明的方法，典型的用途是对从植物提取液，例如茶、特别是乌龙茶的提取液中高效分离聚合儿茶素和非聚合儿茶素有效。以下以乌龙茶为例説明，但不限于此。
预处理
将含有聚合儿茶素和非聚合儿茶素的原料，例如乌龙茶的茶叶根据需要切细，用水适当提取。提取时水的温度无特别限定，但为在短时间内提取，从提高提取效率上，优选50～99℃，更优选80～99℃。为使提取液为微碱性，可添加使用碳酸氢钠。碳酸氢钠可以不添加～饱和状态的任意浓度添加。例如每1L温水中可添加1.0～2.0g的碳酸氢钠，或可添加使pH值为8.0～8.5，优选为约8.2的碳酸氢钠量。代替碳酸氢钠，也可使用安全性高的其他弱碱性物质。提取后，为除去固形成分，可进行静置、离心分离及/或过滤，还可添加维生素C(VC)。
与吸附剂接触的乌龙茶提取液的浓度为Brix 2.0～6.0，优选Brix约为3.7。
吸附剂
分离时使用的吸附剂，使用从活性炭及吸附树脂中选择的吸附剂。吸附剂最好用适合以色谱柱的方式使用，进行色谱柱处理的吸附剂粒径的选择也是重要的因素。为减少使用色谱柱时的压力损失，粒径越大越好，但为使分离高效进行，确保吸附剂的吸附表面积，粒径小的更为优选。选择与使用的吸附剂相符的最适粒径，可在本领域技术人员日常的技术范围内进行。粒状活性炭如实施例所示，特别优选32目～60目的大小。
代替粒状活性炭的合成吸附树脂，例如可使用以聚苯乙烯为原材料的树脂。此时细孔径为重要的因素，为有效地分离，需选定适当的树脂。市售的树脂中，可优选使用三菱化学的Sepabeads SP825(平均细孔径为57.4)、SP850(平均细孔径为38.1)等。
吸附剂的使用量
为高效进行本发明的方法，优选吸附剂的使用量越多越好。即，以色谱柱的方式进行时，流过色谱柱分离的乌龙茶提取液的量越少越有效，优选为色谱柱的5倍容量(5CV)～10倍容量(10CV)。对于乌龙茶提取液的量，其重要条件是使用一定量以上的吸附剂，与保持吸附处理时的温度为50℃或大于50℃相辅相成，对本发明均很重要。
即，一般认为聚合儿茶素和非聚合儿茶素均不会被吸附剂充分吸附，但根据本发明，通过将吸附处理温度保持在50℃或大于50℃，且使用充分量的吸附剂，可使非聚合儿茶素选择性地充分吸附在吸附剂上。
与吸附剂接触的时间
乌龙茶提取液(水提取液)与吸附剂接触的时间，只要是非聚合儿茶素充分被吸附剂吸附的时间，无特别限定。使用色谱柱进行吸附时，标准可用SV＝1～6，优选用SV＝约3的流速进行。
后处理
与吸附剂分离后的乌龙茶提取物(高分子多酚组分、组合物、茶提取物)，可作为富含高分子多酚(聚合儿茶素)的饮料直接使用，也可作为饮料食品或医药品的材料使用。必要时，可通过加热法、减压法、冷冻干燥法等作为浓缩物或干燥物使用。
(3)根据制造方法的高分子多酚组分
本发明涉及由上述本发明的方法获得的、含有聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率提高了的高分子多酚组分的、水性、湿润或干燥状態的组合物。本发明的组合物是茶提取物，优选乌龙茶提取物。组合物(茶提取物)中，优选聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率至少为4倍。
聚合儿茶素和非聚合儿茶素的比例可用后述实施例1的方法测定确认。
市售的乌龙茶抑制餐后中性脂肪上升的效果较弱，如单纯增加浓度，会由于苦味·涩味的增加及咖啡因量的增加而不适于作饮料。本发明通过分离大量含有乌龙茶中含有的聚合儿茶素的高分子多酚组分且添加于饮料食品中，可既不损坏饮料食品的香味，达到抑制中性脂肪上升的效果，还可预防肥胖。为抑制食用脂肪的吸收，最好与饮食同时摄取，所以强化了从茶中获得的有效成分的饮料意义更为重大。
且通过本发明，还可使至今为止困难的、选择性分离聚合儿茶素和非聚合儿茶素的操作容易地进行。
附图说明
图1是以60℃分离乌龙茶提取液时其成分变动为例的示意图。
图2图2-1是比较乌龙茶多酚组分添加水(2E)的摄取组与摄取水的脂肪负荷后血液中中性脂肪值的变化量(ΔTG)经时变化的示意图，图2-2表示图2-1中的曲线下面积(AUC)。
图3图3-1是比较多酚强化乌龙茶(OT+E)的摄取组与摄取水的脂肪负荷后血液中中性脂肪值的变化量(ΔTG)经时变化的示意图，图3-2表示图3-1中的曲线下面积(AUC)。
图4图4-1是比较乌龙茶(OT)及多酚强化乌龙茶(OT+0.5E)的各摄取组与摄取水的脂肪负荷后血液中中性脂肪值的变化量(ΔTG)经时变化的示意图，图4-2表示图4-1的曲线下面积(AUC)。
图5表示多酚强化乌龙茶的脂肪排泄促进作用。
实施例
实施例1
茶叶的提取
(1)比较了在90℃的1L温水中溶解碳酸氢钠1.67g(pH值为8.22)时与不加入碳酸氢钠时(pH值为6.79)对乌龙茶固形成分的提取效率。在各自的1L温水中，加入乌龙茶茶叶100g，边保持在90℃边缓慢搅拌20分钟进行提取。
测定提取液的Brix浓度及pH值时，无碳酸氢钠时Brix为3.76、pH值为5.06，加入碳酸氢钠时Brix为4.27、pH值为6.15。由于使用了碳酸氢钠，从外表上即可明显看出得到了浓的提取液，此固形成分提取的提高也可从Brix值确认。
(2)在90℃的1L温水中溶解碳酸氢钠1.67g，加入乌龙茶茶叶100g。边保持在90℃边缓慢搅拌5分钟进行提取。提取后，用140目的筛子分离茶叶和提取液，提取液再进行离心分离以去除细小的固形成分。分离液中添加溶解1.59g的VC，得到了Brix为3.7的乌龙茶提取液。
(3)聚合儿茶素、非聚合儿茶素的测定方法，使用Develosil C30 UG-3(3mm×15cm野村化学株式会社)的色谱柱，流动相：A：0.1％HCOOH/H2O、B：90％CH3CN、0.1％HCOOH/H2O、0.2ml/min，梯度：B10％→70％(15min)、B70％iso(10min)，检测用A280nm进行。
标准物质使用由从乌龙茶提取液中分取用的ODS色谱柱反复分取的聚合儿茶素组分。
提取液的成分如表1所示。
表1
聚合儿茶素；2235ppm
非聚合儿茶素*；3813ppm
*非聚合儿茶素；儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯(CG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯(ECG)及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的合计
实施例2
分离
将市售的粒状活性炭(例如kuraray公司制GW-H32/60)50ml脱气后装填入色谱柱。其中，使用实施例1得到的乌龙茶提取液以SV＝3的流速流动，进行成分的分离。此时，将提取液及色谱柱的温度设定为20、40、50、60℃，将分别分离成5CV左右的分离液的分析值用表2表示。
表2
  聚合儿茶素   非聚合儿茶素
  提取液20℃40℃50℃60℃   2235ppm1592153214701526   3813ppm1094685351267
如此，温度越高、进行分离时，越能更选择性地分离除去非聚合儿茶素。60℃分离时成分的变动例如图1所示。
实施例3
试验制造
用0.15％碳酸氢钠溶液(95℃)将600kg的乌龙茶叶用色谱柱法提取，得到提取液约6000Kg。将液温保持在60～65℃，通过400kg的粒状活性炭(kuraray公司制GW-H32/60)，选择性地除去非聚合儿茶素、咖啡因。将此通过液减压浓缩，制备了Brix为10或大于10的茶提取物约900kg。
得到的茶提取物中的聚合儿茶素(OTPP)为14648ppm，与其相应，吸附儿茶素(EGCG+GCG+ECG+CG)为366ppm。
实施例4
脂肪酶抑制活性
比较实施例1的提取液、和选择性浓缩(选择性地除去非聚合儿茶素)用实施例3得到的聚合儿茶素后的茶提取物对已知的与脂肪吸收有关的脂肪酶的抑制作用。
脂肪酶活性的测定：
脂肪酶活性的测定，底物使用荧光性的4-甲基伞形酮的油酸酯(4-UMO)，并通过测定由反应生成的4-甲基伞形酮的荧光来进行。
测定时，缓冲液使用含有150mM NaCl、1.36mM CaCl2的13mM Tris-HCl(pH 8.0)。将底物4-UMO(Sigma公司制)，其为将配制的0.1M的DMSO溶液用上述缓冲液稀释1000倍的产物，和脂肪酶，其为将猪胰脂肪酶(Sigma公司制)同样用上述缓冲液制成400U/ml溶液的产物用于酶测定。
酶反应在25℃条件下，在96孔的酶标仪中添加混合50μl的4-UMO缓冲液溶液、25μl的蒸馏水(或试样水溶液)后，通过添加25μl的脂肪酶缓冲液溶液使反应开始。反应进行30分钟后，添加100μl的0.1M柠檬酸缓冲液(pH 4.2)使反应停止，将反应生成的4-甲基伞形酮的荧光(激发波长355nm、发射波长460nm)用荧光分析仪(Labsystems公司制Fluoroskan Asent CF)测定。
被测试样的抑制活性，相对对照(蒸馏水)的活性，以抑制50％时的试样量作为IC50(μg/ml)来求出。
结果归纳为表3。
表3
  脂肪酶抑制活性(IC50，mcg/ml)
  提取液茶提取物   0.970.62
实施例5
味觉评价
将实施例1的提取液和用实施例3得到的茶提取物分别用蒸馏水调整到Brix为0.5的饮料，由11人的评委进行味觉的感官鉴定。结果归纳为表4。
表4
  提取液   茶提取物
  苦涩不能饮用虽苦涩但为可饮用范围不介意的苦涩度   920   047
根据以上结果可确认，茶提取物既可确保功效，又能抑制苦涩度。
实施例6
探讨以抑制脂肪酶作用为指标的配比
用制备例制造的高分子多酚组分的脂肪酶活性的测定，底物使用荧光性4-甲基伞形酮的油酸酯(4-UMO)，通过测定由反应生成的4-甲基伞形酮的荧光来进行。
测定中，缓冲液使用含有150mM NaCl、1.36mM CaCl2的13mM Tris-HCl(pH 8.0)。将底物4-UMO(Sigma公司制)，其为将配制的0.1M的DMSO溶液用上述缓冲液稀释1000倍的产物，和脂肪酶，其为将猪胰脂肪酶(Sigma公司制)同样用上述缓冲液制成400U/ml溶液的产物用于酶测定。
酶反应在25℃条件下，在96孔酶标仪中添加混合50μl的4-UMO缓冲液溶液、25μl的蒸馏水(或试样水溶液)后，由添加25μl的脂肪酶缓冲液溶液使反应开始。反应进行30分钟后，添加100μl的0.1M柠檬酸缓冲液(pH 4.2)使反应停止，将反应生成的4-甲基伞形酮的荧光(激发波长355nm、发射波长460nm)用荧光分析仪(Labsystems公司制Fluoroskan Asent CF)测定。
被测试样的抑制活性，相对于对照(蒸馏水)的活性，以抑制50％时的试样量作为IC50(μg/ml)求出。将IC50值的倒数作为每μg的相对活性值(unit)算出，比较试样溶液中抑制脂肪酶活性的强度。
饮料以乌龙茶(OT；Brix0.275)为基准，其2倍浓度的茶为2OT(Brix0.55)，在乌龙茶(OT；Brix为0.275)中添加用实施例3得到的茶提取物(E)，将添加到Brix为0.55时的茶作为OT+E，添加其一半浓度的茶提取物后的茶为OT+0.5E。此处的乌龙茶是指用热水提取乌龙茶茶叶后的产物。
表5
  饮料   units/ml
  OTOT+0.5EOT+E2OT   2.83×1035.04×1037.26×1035.67×103
实施例7
味觉评价(饮料)
多酚强化乌龙茶(OT+E及OT+0.5E)和通常的2倍浓度的乌龙茶(2OT)，分别由24人评委进行味觉的感官鉴定。结果如下所示。
表6
  OT+0.5E   OT+E   2OT
  苦涩不能饮用虽苦涩但为可饮用范围不介意的苦涩度   2715   21111   1950
根据以上结果，乌龙茶(OT)和茶提取物(E)的配比(固形成分的重量比)至少应为l∶1～2∶1的范围时，即可制成既确保功效，又抑制了苦涩度的饮料。
实施例8
饮料对人体作用的评价试验(食后中性脂肪降低效果的验证)
以健康成年男性女性为试验对象进行交叉试验。各试验均以7日为1周期，其中6日为清洗期，第7日进行脂肪负荷试验。试验1用乌龙茶多酚组分添加水(2E)、试验2用多酚强化乌龙茶(OT+E)、试验3用乌龙茶(OT)和多酚强化乌龙茶(OT+0.5E)进行。各用245ml的用量。脂肪负荷餐为冰淇淋(2个)和鸡蛋卷筒蛋糕(1.5个)，使脂肪摄取量为40g。负荷餐摄取后0、1、3、4、6小时后从上臂静脉采血，比较其对脂肪负荷后血液中中性脂肪值的变化量(ΔTG)的经时变化及其曲线下面积(AUC)的影响，并确认了2E、OT+0.5E、OT+E的饮料中抑制脂肪负荷后血液中中性脂肪值上升的效果。由此结果可证明，聚合儿茶素被强化到360mg/L(OT+0.5E)或大于360mg/L(OT+0.5E)时可具有效果。
结果如图2～4所示。
实施例9
饮料对人体作用的评价试验(脂肪排泄促进效果的验证)
以健康成年男性女性12人为试验对象进行交叉试验。试验饮料使用多酚强化乌龙茶(OT+0.7E)，对照饮料使用由焦糖着色且添加了香料的水。各试验均为持续摄取试验饮料样品10日，最后的3日比较粪便中排泄的总脂肪量。清洗期为7日。其结果，确认了多酚强化乌龙茶有显著的脂肪排泄促进作用。
结果如图5所示。
因本发明的组合物或茶提取物除去了非聚合儿茶素，所以苦味·涩味与除去非聚合儿茶素前相比显著降低。而且通过吸附剂处理，咖啡因也被充分除去。因此，可添加于乌龙茶、绿茶等的茶(茶的提取物)中，用于改善其口味。
而且根据本发明可证明，本发明的脂肪酶活性抑制剂、组合物或茶提取物具有显著的抑制脂肪酶活性的作用。因此，可添加于可为乌龙茶的饮料食品中，作为抑制对饮食中脂肪的吸收、抑制血液中中性脂肪的上升、及/或防止肥胖的添加剂使用。因本发明的组合物或茶提取物来源于天然物质，所以安全性高，可长期、定期地(例如，每隔数日、每日或每餐时)摄取，使其发挥作用。
进一步地说，本发明涉及含有作为抑制脂肪酶的有效成分的本发明的组合物或茶提取物，抑制对饮食中脂肪吸收、抑制血液中中性脂肪上升、及/或防止肥胖的医药品。医药品优选适合口服的剂形，例如可为能直接服用或溶解在水中饮用的粉剂、散剂或颗粒剂、或片剂、丸剂、口服避孕药、胶囊、含片、糖果或巧克力的形状。医药品中本发明的组合物或茶提取物的量，例如每次摄取的聚合儿茶素为67～5000mg。

Claims (19)

1.脂肪酶活性抑制剂，其由从乌龙茶中分取的高分子多酚组分组成。
2.权利要求1中所述的脂肪酶活性抑制剂，其中，从乌龙茶中分取的高分子多酚组分是通过使乌龙茶的水提取液与从活性炭及吸附树脂中选择的吸附剂接触，选择性地除去非聚合儿茶素，相对于非聚合儿茶素，聚合儿茶素的比率提高了的液态组分或将其浓缩或使其干燥后的产物。
3.权利要求2中所述的脂肪酶活性抑制剂，其为通过使乌龙茶的水提取液在50℃或大于50℃的液温下与吸附剂接触，选择性地除去非聚合儿茶素。
4.一种方法，其是使含有聚合儿茶素和非聚合儿茶素的水性液体与从活性炭及吸附树脂中选择的吸附剂在50℃或大于50℃的液温下接触，选择性地除去非聚合儿茶素，获得与原本的水性液体相比，聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率提高了的水性液体的方法。
5.权利要求4中所述的方法，其通过将从活性炭及吸附树脂中选择的吸附剂装填于色谱柱，使该柱容量5～10倍的茶叶水提取液通过，回收该色谱柱的流出液，必要时通过浓缩或干燥该流出液来进行。
6.权利要求5中所述的方法，其为使用微碱性温水从乌龙茶中提取的液体通过色谱柱。
7.组合物，其为用权利要求4～6中任一项所述的方法制造的，聚合儿茶素比非聚合儿茶素的比率提高了的水性、湿润或干燥状态的组合物。
8.茶提取物，其中相对于非聚合儿茶素，聚合儿茶素的量至少为4倍。
9.权利要求8中所述的茶提取物，其为乌龙茶提取物。
10.脂肪酶活性抑制剂，其含有权利要求7～9中任一项所述的茶提取物或组合物。
11.权利要求1、2、3及10中任一项所述的脂肪酶活性抑制剂，其用于抑制对饮食中脂肪的吸收、抑制血液中中性脂肪的上升。
12.饮料食品用添加剂，其由权利要求7～9中任一项所述的茶提取物或组合物组成。
13.权利要求12中所述的饮料食品用添加剂，其为了抑制对饮食中脂肪的吸收、抑制血液中中性脂肪的上升而添加于饮料食品中。
14.饮料食品，其含有权利要求7～9中任一项所述的茶提取物或组合物。
15.权利要求14中所述的饮料食品，其是保健食品或保健饮料。
16.权利要求14中所述的饮料食品，其是茶饮料。
17.权利要求16中所述的饮料食品，其混合了权利要求7～9中任一项所述的茶提取物或组合物及茶的提取液。
18.权利要求17中所述的饮料食品，其中上述提取液是乌龙茶的提取液。
19.权利要求14～18中任一项所述的饮料食品，其为强化1L饮料中的聚合儿茶素，使通过高效液相色谱法分析时的值达270～3600mg。
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