CN105358071B - 真空膨胀的干组合物和用于保留该干组合物的注射器 - Google Patents

Abstract

本公开书涉及在冷冻干燥糊剂之前真空膨胀所述糊剂以获得干糊剂组合物的方法，所述干糊剂组合物一在加入水性介质后就有效地复水以形成可流动的糊剂。本公开书进一步涉及用于将干糊剂组合物保留在真空中的注射器。

Description

真空膨胀的干组合物和用于保留该干组合物的注射器

技术领域

本公开书涉及在冷冻干燥糊剂之前真空膨胀所述糊剂以获得干糊剂组合物的方法，所述干糊剂组合物一在加入水性介质后就有效地复水以形成可流动的糊剂。本公开书进一步涉及用于将干糊剂组合物保留在真空中的注射器。

背景技术

例如胶原蛋白和明胶等基于蛋白质的止血材料可以固体海绵和松散或未包装的粉末形式从市面购得，用于外科程序中。取决于混合条件和材料的相对比率，将松散或未包装的粉末与例如盐水或凝血酶溶液等流体混合可以形成糊剂或浆料，所述糊剂或浆料可以作为止血组合物在弥漫性出血的情况下，尤其在从不平坦表面或难以到达的区域弥漫性出血的情况下使用。

常规的止血糊剂在使用时通过机械搅动和混合松散粉末与液体以提供组合物的均匀性来制备。粉末与流体的混合可以在例如烧杯等容器中进行。所述混合需要将粉末从其原始容器转移到烧杯中，将流体加入到装有粉末的烧杯中，然后揉捏所述混合物以形成糊剂。只有在如此形成糊剂之后，才可以将糊剂置于递送构件或涂料器(例如注射器)中并且施用到伤口上。

WO 03/055531涉及一种包含固定量的粉末形式的止血剂(例如明胶粉末)的容器。一在加入适量的液体后，就可通过盖上盖并且振荡容器来进行容器内的机械混合。然后可以从容器中移出得到的腻子状止血糊剂并将其施用给患者以促进止血。

或者，已经尝试对一个注射器(注射器I)预加载松散的明胶粉末，并且对另一注射器(注射器II)预加载液体。当制备糊剂时，经由鲁尔旋锁式(luer lock)连接注射器I和注射器II并且将注射器II中的溶液推入注射器I中。通过尝试使溶液和粉末在注射器I与注射器II之间反复地来回传递，最终形成均匀糊剂。通常在外科情形下，具有最佳粉末:液体比的止血糊剂需要通过混合以产生均匀糊剂来制备。粉末与液体的混合需要使干粉末水合，此举可需要较长的制备时间以获得均匀糊剂。即使所述混合方法成功形成糊剂，形成所述糊剂所必需的时间和机械力也是不合需要的或甚至不可接受的。此外，所述混合可以影响糊剂的最终密度(太强烈的混合可能导致较低密度的糊剂)，并且因此时常影响糊剂的不一致的稠度。

Haemostatic Matrix(Baxter)是一种用于制造止血明胶糊剂的试剂盒。明胶糊剂通过以下方式制造：首先制备凝血酶溶液并且然后在两个连接的注射器之间来回地转移明胶基质-凝血酶溶液混合物持续共计至少20轮。所述糊剂然后可以从注射器直接施用至出血点以促进止血。

同样，Haemostatic Matrix(Ethicon)是一种用于制造包含凝血酶的止血明胶糊剂的试剂盒，所述止血明胶糊剂通过在两个连接的注射器之间来回地转移明胶基质-凝血酶溶液混合物持续共计至少六轮来制备。

US 2005/0284809涉及一种用于制备止血糊剂的方法，所述止血糊剂较容易吸收水性液体，使得需要较小的机械力和较短的时间来形成可流动的止血糊剂。US 2005/0284809的糊剂是从压缩的止血粉末粒子制备的，并且为了制备所述糊剂，所述止血粉末粒子必须在连接的注射器之间来回地转移持续共计至少五轮。

WO 2011/151400涉及一种用于制备包含例如凝血酶等凝血诱导剂和例如明胶等生物相容性聚合物的干止血组合物的方法。混合凝血诱导剂和生物相容性聚合物以形成糊剂并且对糊剂进行冻干。得到的干组合物通过如先前所描述的在两个连接的注射器之间来回地转移组合物和稀释剂持续共计至少20轮来进行复水。

WO 2013/185776公开包含一种或多种多元醇且适合用于止血用途的干糊剂组合物，所述组合物一在加入水性介质后就自发地复水以形成可流动的糊剂，即无需任何混合。经复水的糊剂适合于直接施用给患者，例如通过注射器递送。

混合程序和操作是耗时的，这在具有出血的手术室(OR)背景中是不可接受的，因为外科医生不得不中断其手术而等待止血剂。混合也可能会损害止血糊剂的无菌性并且可不利地影响止血糊剂的稠度。合适的糊剂稠度对于令人满意的止血效果非常重要。如果可以提供消除对于所述不合需要的混合要求的需要的止血组合物，那么将是合乎需要的。提供在几秒钟内可靠且一致地复水以形成可流动的糊剂的干式糊剂产物也是合乎需要的。

发明内容

本公开书解决了上述问题，并且因此涉及一种干组合物，其一在加入适量的水性介质后就形成基本上均匀的糊剂。因此，本发明涉及一种用于制备干组合物的方法，其包括以下步骤：

a.提供粉末形式的试剂和水性介质，

b.混合所述粉末形式的试剂和所述水性介质以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，

d.冷冻所述膨胀的糊剂，以及

e.干燥所述糊剂。

膨胀且干燥的糊剂一在加入液体后就有效地复水。优选地，所述糊剂独立于外部刺激例如任何种类的混合或搅拌而形成。因此，在一个实施方案中，所述干组合物一在加入液体后就自发地复水，即形成糊剂不需要机械混合。

所述试剂优选为适合用于止血和/或伤口愈合的生物相容性聚合物。因此，在一优选方面中，本发明涉及一种用于制备干组合物的方法，其包括以下步骤：

a.提供粉末形式的生物相容性聚合物、水性介质以及任选的一种或多种亲水性化合物，例如一种或多种多元醇，

b.将所述生物相容性聚合物、所述水性介质以及任选的所述一种或多种亲水性化合物混合以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，

d.冷冻所述膨胀的糊剂，以及

e.干燥所述糊剂。

本公开书进一步涉及用于将冷冻干燥的糊剂例如本发明公开的干糊剂组合物保留在真空中的注射器，所述注射器包括空筒、压力阀、柱塞以及一个或者多个真空旁路通道，所述空筒包括：真空腔室，其用于容纳所述糊剂，具有开放近端和具有第一流体开口的远端；连接器部分，其具有第二流体开口，并且适合于连接到液体容器；以及压力腔室，其连接所述连接器部分和所述真空腔室的远端；所述压力阀位于所述压力腔室中，并且适合于在第一位置密封所述第一流体开口和/或所述第二流体开口以及在第二位置在所述第一流体开口与所述第二流体开口之间形成流体通路；所述柱塞被配置成穿过所述开放近端在所述真空腔室中轴向移位。

一在向容纳所述干燥的糊剂的注射器中加入适量水性介质后，就在几秒钟内自发地形成适合用于止血和/或伤口愈合的即用型可流动的糊剂。干糊剂组合物的真空冷冻干燥和真空储存可借助本文中公开的注射器提供。此外，与水性介质的混合、随后的复水和即用型糊剂的受控释放也可借助本文中公开的注射器提供。

附图说明

图1.实施例1的包含不同多元醇的标准冷冻干燥的明胶糊剂的平均复水时间+/-标准差，所述糊剂没有被真空膨胀。在冷冻干燥的糊剂组合物中包含不同多元醇使得糊剂在约30秒内自发复水。

图2.实施例3的标准冻干明胶糊剂和真空膨胀的冻干明胶糊剂的平均复水时间+/-标准差。真空膨胀大幅缩短包含甘露糖醇的糊剂的自发复水时间。

图3到14描绘本公开书的方法的不同实施方案和阶段。

图3示出加入糊剂之前的用作容器的注射器的两个可能实施方案。构思1涵盖标准一次性注射器，并且构思2涵盖在注射器主体上具有冻干旁路的一次性注射器。压力阀被封闭。

图4示出具有一个量的糊剂的构思1和构思2的注射器。

图5示出装配有包含旁路的冻干柱塞的注射器(冻干柱塞；构思1)或装配有标准柱塞的在注射器主体上包含旁路的注射器(构思2)。构思1和构思2两者的旁路均允许产物腔室与容器外部之间的气体连通。低真空的施加使得糊剂膨胀，即糊剂的体积大于施加真空之前。

图6示出糊剂被冷冻之后的构思1和构思2的注射器。冷冻产生锁定的膨胀糊剂结构。

图7示出经历真空冷冻干燥的构思1和构思2的注射器。冷冻干燥不改变冷冻糊剂的体积。

图8示出构思1和构思2的注射器，其中旁路已用可塌陷的架封闭。所述注射器在真空产物腔室中含有干糊剂。

图9示出冷冻干燥器中的真空被解除后的构思1和构思2的注射器。产物腔室内部的真空和产物腔室外部的大气压使柱塞位移，直到其与干糊剂产物接触。

图10示出组装柱塞杆和法兰后的构思1和构思2的注射器。

图11示出通过辐照灭菌的构思1的注射器。

图12示出用于复水干糊剂的两个不同实施方案。在第一实施方案(顶部)中，将注射器装配到容纳有无菌H₂O或盐水的塑料袋。在第二实施方案(底部)中，将注射器装配到容纳有无菌H₂O或盐水的塑料容器，其中所述塑料容器装配有可移动的柱塞。

图13示出打开阀之后的来自图12的两个实施方案。阀的打开由于产物腔室(低压)与液体容器(常压)之间的压力差而使得液体自动抽入产物腔室中。糊剂一在与液体接触后就自发复水。在使用糊剂之前不需要机械混合。

图14描绘在装配有涂料器尖端的注射器内的即用型糊剂。

图15示出用于真空膨胀明胶糊剂的压力与最终干糊剂组合物的密度之间的相关性：压力越低；干组合物的密度越低。

图16a-d示出本发明公开的注射器的一个实施方案的空筒的透视图。

图17a-b示出本发明公开的注射器的空筒的两个不同实施方案的近端透视图。

图18a-b是压力阀位于两个不同位置的本发明公开的注射器的一个实施方案的空筒的贯穿切割侧视示意图。

图19a示出压力阀的另一实施方案。

图19b示出具有图19a的压力阀的本发明公开的注射器的压力腔室的另一实施方案的正视图。

图19c-d示出图19b的压力腔室内部的图19a的压力阀的配置的贯穿切割正视图。

图20a-b是图19的压力腔室内部的图19a的压力阀的贯穿切割侧视示意图。

图20c-d是具有图19的压力阀和压力腔室的空筒的透视示意图。

图21示出在进行和不进行真空膨胀的情况下包含不同量的甘露糖醇(在湿糊剂中的重量％)的干燥明胶糊剂组合物的平均复水时间+/-标准差。真空膨胀大幅缩短了干燥糊剂的自发复水时间，所述自发复水时间通过增加干燥糊剂中甘露糖醇的浓度甚至进一步缩短。

图22示出在有和没有PEG(在湿糊剂中的重量％)的情况下真空膨胀的干燥明胶糊剂组合物的复水时间+/-标准差。与没有PEG的真空膨胀组合物相比，PEG缩短了复水时间。

附图仅为例示性的，并且不应被解释为限制本发明的范围。

具体实施方式

定义

“环境压力”在本文中可与术语“大气压”互换使用。它是周边区域中的压力，即过程发生的位置处的压力。

“巴”(单位)。巴是压力的非SI单位，其被定义为恰好等于100,000Pa。它约等于地球上海平面处的大气压。

“生物活性剂”是提供可以在体内或体外被证实的一定药理学(通常是有利的)作用的任何试剂、药物、化合物、物质的组合物(composition of matter)或混合物。因此，如果试剂与人体或动物体内的细胞组织具有相互作用或对所述细胞组织具有作用，那么将所述试剂视为生物活性的。如本文所用，这个术语还包括在个体内产生局部或全身作用的任何生理学或药理学活性物质。生物活性剂可以是蛋白质，例如酶。生物活性剂的其它实例包括但不限于包含以下各项的试剂或由以下各项组成的试剂：寡糖、多糖、任选地被糖基化的肽、任选地被糖基化的多肽、寡核苷酸、聚核苷酸、脂质、脂肪酸、脂肪酸酯和次级代谢物。所述生物活性剂可在预防上或在治疗上结合例如人或任何其它动物等个体的治疗使用。如本文所用术语“生物活性剂”不涵盖例如真核细胞或原核细胞等的细胞。

“生物相容性”是指材料执行其预期功能而不会在宿主中引起任何显著的不合需要的局部或全身作用的能力。

“生物可吸收性”或“可吸收性”是在本上下文中用于描述制备所述粉末的材料可以在体内降解成更小分子的术语，所述更小分子的大小允许它们被输送到血流中。通过所述降解和吸收，所述粉末材料将逐渐从施用部位去除。举例来说，明胶可以通过蛋白水解组织酶降解成可吸收的更小分子，由此明胶在施用于组织中时通常在约4-6周内被吸收，并且当施用于出血表面和粘膜上时通常在3-5天内被吸收。

“膨胀”在本文中被定义为体积的增加和密度的降低。因此，如果材料被描述为膨胀的，则所述材料的总体积大于膨胀之前，而不影响材料的总重量。

“凝胶”是可以具有柔软和脆弱到坚硬和强韧范围内的性质的固体胶状材料。凝胶被定义为在稳态下不展现流动的基本上稀薄的交联体系。以重量计，凝胶主要是液体，但是它们因为液体内的三维交联网络而表现得像固体。正是流体内的交联赋予了凝胶其结构(硬度)并且促成了粘度(粘性)。这样，凝胶是液体分子在固体内的分散体，其中固体是连续相并且液体是不连续相。凝胶不是糊剂或浆料。例如，非交联明胶粒子是可溶的并且一在与例如水等水性介质接触后就可形成凝胶。凝胶不具有包含可膨胀气体或空气的孔。

“止血”是一个使出血减少或停止的过程。止血在血液存在于身体或血管外部时发生并且是身体停止出血和失血的本能反应。在止血期间，以快速次序发生三个步骤。血管痉挛是第一个反应，此时血管发生收缩从而允许损失较少的血液。在第二个步骤——血小板栓形成中，血小板粘附在一起以形成暂时性密封物，从而覆盖血管壁中的破裂处。第三个并且也是最后一个步骤被称为凝血或血液凝结。凝血利用充当“分子胶”的纤维蛋白丝强化血小板栓。因此，止血化合物能够刺激止血。

“国际单位(IU)”。在药理学中，国际单位是基于生物活性或作用的针对物质的量的测量单位。其缩写成IU、UI或IE。其用于定量维生素、激素、一些药物、疫苗、血液制品和类似的生物活性物质。

根据本公开书的“糊剂”具有可塑的类似腻子的稠度，例如牙膏。糊剂是粉碎固体/粉末状固体与液体的浓稠流体混合物。糊剂是如下的物质：其表现为固体，直到施加足够大的负荷或应力，此时其像流体一样流动，即糊剂是可流动的。可流动物质一在施用后就有效地贴合不规则表面。糊剂通常由粒状材料在背景流体中的悬浮物组成。单个的颗粒像沙滩上的沙子一样挤在一起，从而形成了无序的、玻璃状或无定形结构，并且赋予了糊剂其类似固体的特性。正是这“挤在一起”赋予了糊剂其最不寻常的性质中的一些；这使糊剂表现易碎物的性质。糊剂不是凝胶/胶状物。“浆料”是粉末状/粉碎固体与液体(通常是水)的流体混合物。浆料在某些方面表现得像浓稠流体，在重力下流动并且在不太浓稠的情况下能够泵送。浆料在功能上可以被视为稀薄的水样糊剂，但浆料一般比糊剂含有更多的水。根据本公开书的糊剂具有为包含可膨胀气体例如空气的隔室的孔。基本上不溶于水的粉末粒子，例如交联的明胶粒子，一在与水性介质混合后就形成糊剂。

“百分比”。如果没有其它指示，那么百分比是重量百分比：％w/w或wt％。

比率表示为重量/重量(w:w)。

“减压”是低于环境压力的压力，即低于其中操作某一过程的周边区域中的压力的压力。

“自发”。术语“自发”用于描述由内力或内因引起的现象，所述现象与外部介质或刺激无关并且在短时期内发生，即优选在少于约30秒内、更优选在少于约20秒内、甚至更优选在少于约10秒内或在少于约5秒内、例如在少于约3秒、例如少于约2秒内发生。

“真空”在本文中被定义为气体压力低于环境压力即周边大气压的区域。在地球海平面处，在25℃下，大气压约为1巴，即1000毫巴。下表示出了地球海平面处的“低”真空、“中等”真空和“高”真空的近似压力，以毫巴(mbar)计。

	压力(毫巴)
		大气压	1000
低真空	1000到100
		中等真空	100到0.001
高真空	<0.001

本公开书涉及一种干组合物，其一在加入适量的水性介质后就形成基本上均匀的糊剂。

因此，本发明涉及一种用于制备干组合物的方法，其包括以下连续步骤：

a.提供粉末形式的试剂和水性介质，

b.混合所述粉末形式的试剂和所述水性介质以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，

d.冷冻所述膨胀的糊剂，以及

e.干燥所述糊剂。

膨胀且干燥的糊剂一在加入液体后就有效地复水以形成可流动的糊剂。优选地，所述糊剂独立于外部刺激例如任何种类的混合或搅拌而形成，因此，在一个实施方案中，所述干组合物一在向容纳该干组合物的容器中加入液体后就自发地复水，即形成糊剂不需要机械混合。

所述粉末形式的试剂可为能够在与水性介质混合时形成糊剂的粉末形式的任何试剂。所述试剂可为交联的。优选地，所述试剂是适合用于止血和/或伤口愈合的生物相容性聚合物，例如粉末形式的交联止血剂，例如交联明胶粉末。

干燥优选为冷冻干燥。步骤c)到d)可以方便地在冷冻干燥器中作为一个连续的过程直接进行。因此，可将容纳步骤b)的糊剂的合适的容器置于冷冻干燥器中，其中该糊剂通过低真空膨胀，冷冻以固定膨胀的糊剂结构，并被冷冻干燥直到干燥。图3到14示出处理步骤的不同实施方案。

在一优选方面中，本发明涉及一种用于制备适合用于止血和/或伤口愈合的干组合物的方法，其包括以下连续步骤：

a.提供粉末形式的生物相容性聚合物、水性介质以及任选的一种或多种亲水性化合物，

b.将所述生物相容性聚合物、所述水性介质以及所述任选的一种或多种亲水性化合物混合以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，

d.冷冻所述膨胀的糊剂，以及

e.干燥所述糊剂。

所述干燥的糊剂优选容纳在医用递送器件例如注射器内。一在向容纳所述干燥的糊剂的容器中加入适量水性介质后，就在几秒钟内自发地形成即用型可流动的糊剂，即形成所述糊剂不需要机械混合。所述可流动的糊剂是基本上均匀的，并且可直接施用到需要止血和/或伤口愈合的部位。

通过本公开书的方法获得的干组合物和复水的糊剂的优势有很多并且包括：

·制备糊剂所花的时间较少，例如出血可以更快地止住。

·在制备期间损害糊剂的无菌性的风险降低，因为处置步骤较少。

·在制备期间出错的风险降低，因为糊剂的制备得到简化。

·每次获得的糊剂的稠度都是最佳的。

·在短时间内可靠且一致的复水。

·在溶液中不稳定的生物活性剂可以在干燥前加入到糊剂中并且因此将存在于本发明的干组合物中。举例来说，凝血酶可以在干燥前加入到糊剂中，从而避免耗时且易于出错的凝血酶稀释步骤。

·最小化手术室成本，因为本申请描述的产物的制备如此简单且快速，没有理由在手术前预先制备可能不使用的止血可流动物质。

所有以上因素都导致患者安全性的提高。

粉末形式的试剂

所述粉末形式的试剂可为能够在与水性介质混合时形成糊剂的任何试剂。当粉末粒子不溶于水中时，即当粉末粒子基本上不溶于与其混合的水性介质中时，形成糊剂。因此，所述粉末形式的试剂由基本上不溶于水的粉末粒子组成。优选地，所述试剂是适合用于止血和/或伤口愈合的交联生物相容性聚合物，例如粉末形式的交联止血剂，例如交联明胶粉末。交联使生物相容性聚合物基本上不溶于水性介质中。

在一个实施方案中，本公开书的糊剂包含粉末形式的一种或者多种试剂，例如单一生物相容性聚合物或者两种或更多种生物相容性聚合物的组合。

在一优选实施方案中，本公开书涉及一种用于制备干组合物的方法，所述干组合物是干燥的糊剂组合物，其一在向容纳所述干组合物的容器中加入适量的水性介质后就在几秒钟内自发地复水以形成适合于止血和/或伤口愈合目的的即用型糊剂，即所述糊剂可被直接递送给患者而不需要任何进一步混合。

本公开书的生物相容性聚合物可以是生物聚合物或非生物聚合物。合适的生物聚合物包括蛋白质，例如明胶、胶原蛋白、白蛋白、血红蛋白、酪蛋白、纤维蛋白原、纤维蛋白、纤维粘连蛋白(fibronectin)、弹性蛋白、角蛋白和层粘连蛋白(laminin)；或其衍生物或组合。尤其优选使用明胶或胶原蛋白，更优选使用明胶。其它合适的生物聚合物包括多糖，例如糖胺聚糖、淀粉衍生物、木聚糖、纤维素衍生物、半纤维素衍生物、琼脂糖、海藻酸盐和壳聚糖；或其衍生物或组合。合适的非生物聚合物将被选定为可通过以下两种机制中的任一种降解，即(1)聚合物骨架的瓦解，或(2)产生水溶性的侧链的降解。示例性非生物聚合物包括合成物，例如聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚乙烯树脂、聚丙交酯-乙交酯、聚已酸内酯和聚氧乙烯；或其衍生物或组合。不同种类的聚合物的组合也是可能的。

在一个实施方案中，生物相容性聚合物是生物可吸收的。合适的生物可吸收性材料的实例包括明胶、胶原蛋白、几丁质、壳聚糖、海藻酸盐、纤维素、氧化纤维素、聚乙醇酸、聚乙酸和其组合。应了解，本公开书还涵盖其各种形式，例如线性或交联形式、盐、酯等。在本发明的一优选实施方案中，生物可吸收性材料是明胶。明胶是优选的，因为明胶具有高生物可吸收性。此外，明胶具有高生物相容性，意味着当/如果进入血流或与人组织长期接触时，明胶对动物例如人无毒。

明胶通常来源于猪来源，但也可以来源于其它动物来源，例如来自于牛或鱼来源。明胶还可以合成制得，即通过重组方式制得。

在一优选实施方案中，聚合物是交联的。交联通常使该聚合物基本上不溶于水性介质中。可以使用所属领域技术人员已知的任何合适的交联方法，包括化学和物理交联方法。

在本公开书的一个实施方案中，已经通过物理方法(例如通过干热)使聚合物交联。干热处理通常在100℃到250℃(例如约110℃到约200℃)的温度下进行。具体来说，温度范围可以是110-160℃，例如110-140℃，或120-180℃，或130-170℃，或130-160℃，或120-150℃。交联的时间段可以由所属领域技术人员优化并且通常是如下的时间段：约10分钟到约12小时，例如约1小时到约10小时，例如约2小时到约10小时，例如约4小时到约8小时，例如约5小时到约7小时，例如约6小时。

在另一实施方案中，已经通过化学方法，即通过暴露于化学交联剂，使聚合物交联。合适的化学交联剂的实例包括但不限于醛类(尤其是戊二醛和甲醛)、酰基叠氮、碳化二亚胺、六亚甲基二异氰酸酯、聚醚氧化物、1,4-丁二醇二缩水甘油醚、鞣酸、醛糖(例如D-果糖)、京尼平(genipin)和染料介导的光氧化。具体化合物包括但不限于1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)、二硫代双(丙酸二酰肼)(DTP)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)-碳化二亚胺(EDAC)。

在一优选实施方案中，生物相容性聚合物已从明胶或胶原蛋白的交联海绵、尤其明胶的交联海绵(例如市售的海绵和海绵)获得。交联海绵通过所属领域中已知的方法微粉化以获得粉末形式的交联生物相容性聚合物，例如通过旋转床、挤压、粒化和在强力混合器中处理，或研磨(例如通过使用锤式磨机或离心式磨机)来微粉化。

从Ethicon购得的是基于明胶的交联可吸收性止血海绵。其每克吸收>35g血液并且其在4-6周内被完全吸收于人体内。

在一个实施方案中，所述粉末形式的试剂包含从微粉化多孔明胶海绵获得的交联明胶粒子或由所述交联明胶粒子组成，所述海绵已经通过干热处理进行交联。

微粉化多孔明胶海绵可通过以下方式来制备：将一个量的可溶性明胶与水性介质混合以产生包含不连续气相的泡沫，干燥所述泡沫，并通过暴露于干热使干燥的泡沫交联。所获得的交联海绵可以通过本领域已知的方法微粉化。明胶泡沫的明胶浓度通常为约1重量％到70重量％，通常为3重量％到20重量％。干燥通常在约20℃到约40℃下进行约5小时到20小时。干燥的泡沫通常通过暴露于约110℃到约200℃的温度约15分钟到约8小时(例如暴露于约150℃到约170℃的温度约5小时到7小时)进行交联。

在另一实施方案中，所述粉末形式的试剂包含从明胶水凝胶获得的交联明胶粒子或由所述交联明胶粒子组成。明胶水凝胶可以通过将一个量的明胶溶解于水性缓冲液中以形成非交联水凝胶来制备，所述非交联水凝胶典型地具有1重量％到70重量％(通常具有3重量％到10重量％)的固体含量。明胶例如通过暴露于戊二醛(例如，0.01％到0.05％w/w，在0℃到15℃下在水性缓冲液中过夜)、高碘酸钠(例如0.05M，在0℃到15℃下保持48小时)或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺(“EDC”)(例如，0.5％到1.5％w/w，在室温下过夜)或者通过暴露于约0.3到3兆拉德的γ或电子束辐射进行交联。所得交联水凝胶可被破碎并干燥，以获得明胶粉末。或者，可将明胶粒子以1重量％到70重量％(通常3重量％到10重量％)的固体含量悬浮在醇优选甲醇或乙醇中，并通过暴露于交联剂(典型地为戊二醛(例如，0.01％到0.1％w/w，在室温下过夜)进行交联。当用戊二醛交联时，所述交联是通过席夫碱形成的，所述席夫碱可通过后续还原例如通过用硼氢化钠处理稳定化。交联后，可将所得颗粒在水中洗涤，任选地在醇中漂洗，并干燥，以获得明胶粉末。在一个实施方案中，交联明胶粒子基本上如US 6,066,325中所述制备。

在一个实施方案中，交联粉末粒子的尺寸小于大约1000微米，即：使得它们能够通过1×1mm筛子。

通常，至少90％的粉末粒子的直径为1μm到1200μm。

在一个实施方案中，平均粒子直径为1μm到1000μm，例如10μm到800μm，例如50μm到600μm，例如100μm到500μm，例如200μm到400μm，例如约300μm。

在一些应用中，期望具有更小的粒度，以可获得更平滑的糊剂。因此，在一个实施方案中，平均粒子直径小于100μm，例如小于50μm，例如小于30μm，例如小于20μm，例如小于10μm。其中期望更平滑的糊剂的应用的一个实例是在骨出血的控制中。

某一尺寸分布的粒子可通过使粉末组合物通过一个或多个具有某一筛目尺寸的筛子并收集通过某一筛目尺寸和/或由某一筛目尺寸保留的粉末来实现。例如，尺寸分布为约200μm到1000μm的粉末粒子可通过收集能够通过1×1mm筛子但由0.2×0.2mm筛子保留的粉末获得。

在一个实施方案中，通过将所述粉末形式的试剂和所述水性介质混合获得的糊剂包含约10％到约60％的生物相容性聚合物，例如约10％到约50％的生物相容性聚合物，例如约10％到约40％的生物相容性聚合物，例如约10％到约30％的生物相容性聚合物，例如约12％到约25％的生物相容性聚合物，例如约14％到约25％的生物相容性聚合物，例如约15％到约25％的生物相容性聚合物，例如约16％到约20％的生物相容性聚合物，例如约17％到约20％的生物相容性聚合物，例如约18％到约20％的生物相容性聚合物。

在一个实施方案中，本公开书的糊剂包含超过10％的生物相容性聚合物，例如超过15％的生物相容性聚合物，例如超过16％的生物相容性聚合物，例如超过17％的生物相容性聚合物，例如超过18％的生物相容性聚合物，例如超过19％的生物相容性聚合物，例如超过20％的生物相容性聚合物。

在一个实施方案中，本公开书的糊剂包含少于40％的生物相容性聚合物，例如少于30％的生物相容性聚合物，例如少于25％的生物相容性聚合物，例如少于20％的生物相容性聚合物。

在一优选实施方案中，本公开书的糊剂包含约10％到约30％的生物相容性聚合物，更优选约15％到约25％的生物相容性聚合物，例如约20％的生物相容性聚合物。

干燥之后，组合物包含约40％到80％的生物相容性聚合物，例如约45％到80％的生物相容性聚合物，例如约50％到80％的生物相容性聚合物，例如约55％到80％的生物相容性聚合物。

在一个实施方案中，干燥之后的组合物包含约40％到80％的生物相容性聚合物，例如约45％到75％的生物相容性聚合物，例如约50％到70％的生物相容性聚合物。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物包含超过约30％的生物相容性聚合物，例如超过约40％的生物相容性聚合物，例如超过约45％的生物相容性聚合物，例如超过约50％的生物相容性聚合物，例如超过约55％的生物相容性聚合物，例如超过约60％的生物相容性聚合物，例如超过约65％的生物相容性聚合物，例如超过约70％的生物相容性聚合物，例如超过约75％的生物相容性聚合物，例如超过约80％的生物相容性聚合物。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物包含少于约80％的生物相容性聚合物，例如少于约70％的生物相容性聚合物，例如少于约65％的生物相容性聚合物，例如少于约60％的生物相容性聚合物，例如少于约55％的生物相容性聚合物，例如少于约50％的生物相容性聚合物。

水性介质

水性介质在本公开书的方法中用于最初制备糊剂——所述糊剂随后被真空膨胀并干燥——以及用于复水干燥的糊剂。

本公开书的水性介质可以是所属领域技术人员已知的适合用于制备糊剂的任何水性介质，例如水、盐水或缓冲水性介质。水可以是WFI(注射用水)。重要的是对水性介质进行选择，使得复水的糊剂产物当打算用于人或动物受试者例如用于止血和/或伤口愈合目的时是等渗的。水性介质优选为无菌的。

在一个实施方案中，本公开书的水性介质是盐水溶液。

在一个实施方案中，水性介质是氯化钙溶液。

在其它实施方案中，水性介质是水。

水性介质还可以是适用于止血糊剂中的缓冲水性介质。可以使用所属领域技术人员已知的任何合适的缓冲剂，例如一种或多种选自由以下各项组成的组的缓冲剂：柠檬酸钠；柠檬酸、柠檬酸钠；乙酸、乙酸钠；K2HPO4、KH2PO4；Na2HPO4、NaH2PO4；CHES；硼砂、氢氧化钠；TAPS；N,N-二羟乙基甘氨酸(Bicine)；Tris；三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)；TAPSO；HEPES；TES；MOPS；PIPES；甲次砷酸盐(Cacodylate)；SSC；MES或其它。缓冲水性介质的pH应当适合于产生打算用于人类用途的止血糊剂并且可以由所属领域技术人员确定。

将水性介质与粉末形式的试剂以足量混合以获得湿糊剂。出于程序效率，有时期望干燥之前的糊剂与打算用于例如手术用途的糊剂相比含有较少的水，即较稠，使得在干燥过程中需要去除较少的水。

当复水干燥的糊剂时，根据用于形成具有合适稠度的糊剂的生物相容性聚合物的量来调节水性介质的量。

在一个实施方案中，干燥之前的本公开书的糊剂包含少于99％的水，优选少于95％的水。

在一个实施方案中，本公开书的糊剂在干燥前包含约50％到约90％的水，例如约55％到约85％的水，例如约60％到约80％的水，例如约70％的水。

在干燥后，干组合物包含少于约5％的水，例如少于约3％的水，优选少于约2％的水，更优选少于约1.5％的水，甚至更优选少于约1％的水或甚至更少。因此，在一个实施方案中，干组合物包含约0.1％到约5％的水，例如约0.1％到约2％的水。

干燥之后止血组合物中的低残余水含量是合乎需要的，因为其降低了干组合物中微生物生长的风险。此外，如果组合物包含在水性条件下不稳定的生物活性剂，例如凝血酶，那么低残余水含量是必需的。如果本公开书的组合物中存在凝血酶，那么被干燥组合物中的残余水含量优选少于约3％的水，更优选少于2％的水，例如少于1％的水。

在一个实施方案中，干组合物中的残余水含量是约0.5％或更少。例如用工业冷冻干燥装置可以实现所述低残余水含量。

亲水性化合物

在一个实施方案中，本公开书的糊剂包含一种或多种亲水性化合物。亲水性化合物通常含有极性或带电荷的官能团，从而使其可溶于水中。在膨胀和干燥所述糊剂之前所述糊剂中包含一种或多种亲水性化合物对糊剂的可湿性具有有益效果，由此提高被干燥糊剂的复水效率。

在一个实施方案中，亲水性化合物是亲水性聚合物。亲水性聚合物可以是天然或合成的、线性或支化的，并且可具有任何合适的长度。干组合物中包含亲水性化合物提高自发复水速率。

在一个实施方案中，亲水性聚合物选自由以下各项组成的组：聚乙烯亚胺(PEI)、聚(乙二醇)(PEG)、聚(环氧乙烷)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(苯乙烯磺酸盐)(PSS)、聚(丙烯酸)(PAA)、聚(烯丙胺盐酸盐)和聚(乙烯酸)。在一个实施方案中，亲水性化合物是PEG。

在一个实施方案中，亲水性化合物选自由以下各项组成的组：氯化十六烷基吡啶鎓、多库酯钠、甘氨酸、羟丙甲纤维素、羟丙甲纤维素、邻苯二甲酸酯、卵磷脂、磷脂、泊洛沙姆、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚乙烯醇、十二烷基硫酸钠、脱水山梨醇酯(脱水山梨醇脂肪酸酯)和三辛精。

在一优选实施方案中，亲水性化合物是多元醇。因此，根据本发明的一个实施方案，一种或多种多元醇可在糊剂膨胀和干燥之前纳入糊剂中。多元醇大大提高干糊剂组合物的复水速率并且在确保复水的糊剂的最佳稠度中发挥作用。

如本文所定义的多元醇是具有多个羟基官能团的化合物。多元醇包括糖(单糖、二糖和多糖)和糖醇和其衍生物。

单糖包括但不限于葡萄糖、果糖、半乳糖、木糖和核糖。

二糖包括但不限于蔗糖(sucrose/saccharose)、乳果糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖和纤维二糖。

多糖包括但不限于淀粉、糖原、纤维素和几丁质。

糖醇也被称为多元醇，是碳水化合物的氢化形式，其羰基(醛或酮、还原糖)已被还原成伯羟基或仲羟基(因此是醇)。糖醇具有通式H(HCHO)_n+1H，而糖具有H(HCHO)_nHCO。可用于本公开书的方法中的一些常见的糖醇包括但不限于：乙二醇(2-碳)、甘油(3-碳)、赤藓糖醇(4-碳)、苏糖醇(4-碳)、阿拉伯糖醇(5-碳)、木糖醇(5-碳)、核糖醇(5-碳)、甘露糖醇(6-碳)、山梨糖醇(6-碳)、半乳糖醇(6-碳)、岩藻糖醇(6-碳)、艾杜糖醇(6-碳)、肌醇(6-碳；一种环状糖醇)、庚七醇(7-碳)、异麦芽酮糖醇(isomalt,12-碳)、麦芽糖醇(12-碳)、乳糖醇(12-碳)、聚多羟基糖醇(Polyglycitol)。

在一个实施方案中，干组合物包含单一亲水性化合物，例如单一多元醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含超过一种亲水性化合物，例如两种、三种、四种、五种、六种或甚至更多种不同的亲水性化合物。

在一优选实施方案中，亲水性化合物是多元醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含两种多元醇，例如甘露糖醇与甘油或海藻糖与乙二醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含一种或多种糖醇，例如一种或多种选自由以下各项组成的组的糖醇：乙二醇、甘油、赤藓糖醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、庚七醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、聚多羟基糖醇。

在一个实施方案中，干组合物包含一种或多种糖醇和一种或多种糖，例如一种糖醇和一种糖。

在一个实施方案中，干组合物包含一种糖醇和任选的一种或多种额外的亲水性化合物，例如一种或多种多元醇，所述多元醇可以是糖醇或糖。

在一个实施方案中，干组合物不包含糖作为唯一的多元醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含甘露糖醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含山梨糖醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含甘油。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含海藻糖。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含二醇，例如丙二醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含木糖醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含麦芽糖醇。

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含山梨糖醇。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含约1％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约30％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约25％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约20％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约15％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约14％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约13％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约12％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约11％的一种或多种亲水性化合物，例如约1％到约10％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含约2％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约30％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约25％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约20％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约18％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约17％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约16％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约15％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约14％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约13％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约12％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约11％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约10％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含约3％到约40％的一种或多种多元醇，例如约3％到约30％的一种或多种多元醇，例如约3％到约25％的一种或多种多元醇，例如约3％到约20％的一种或多种多元醇，例如约3％到约18％的一种或多种多元醇，例如约3％到约17％的一种或多种多元醇，例如约3％到约16％的一种或多种多元醇，例如约3％到约15％的一种或多种多元醇，例如约3％到约14％的一种或多种多元醇，例如约3％到约13％的一种或多种多元醇，例如约3％到约12％的一种或多种多元醇，例如约3％到约11％的一种或多种多元醇，例如约3％到约10％的一种或多种多元醇。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含约4％到约40％的一种或多种多元醇，例如约4％到约30％的一种或多种多元醇，例如约4％到约25％的一种或多种多元醇，例如约4％到约20％的一种或多种多元醇，例如约4％到约18％的一种或多种多元醇，例如约4％到约17％的一种或多种多元醇，例如约4％到约16％的一种或多种多元醇，例如约4％到约15％的一种或多种多元醇，例如约4％到约14％的一种或多种多元醇，例如约4％到约13％的一种或多种多元醇，例如约4％到约12％的一种或多种多元醇，例如约4％到约11％的一种或多种多元醇，例如约4％到约10％的一种或多种多元醇。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含超过约5％的一种或多种亲水性化合物，因此在一个实施方案中根据本发明的糊剂在干燥前包含约5％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约30％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约25％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约20％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约18％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约17％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约16％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约15％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约14％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约13％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约12％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约11％的一种或多种亲水性化合物，例如约5％到约10％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含约6％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约30％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约25％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约20％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约18％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约17％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约16％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约15％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约14％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约13％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约12％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约11％的一种或多种亲水性化合物，例如约6％到约10％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含约10％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约30％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约25％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约20％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约18％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约17％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约16％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约15％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含超过约1％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约2％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约3％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约4％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约5％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约6％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约7％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约8％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约9％的一种或多种亲水性化合物，例如超过约10％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，根据本发明的糊剂在干燥前包含少于约20％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约18％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约17％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约16％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约15％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约14％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约13％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约12％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约11％的一种或多种亲水性化合物，例如少于约10％的一种或多种亲水性化合物。

在干燥后，干组合物包含约10％到约60％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约50％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约50％、例如约10％到约45％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约40％、例如约10％到约35％的一种或多种亲水性化合物，例如约10％到约30％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，干组合物包含约15％到约60％的一种或多种亲水性化合物，例如约15％到约50％的一种或多种亲水性化合物，例如约15％到约50％、例如约15％到约45％的一种或多种亲水性化合物，例如约15％到约40％、例如约15％到约35％的一种或多种亲水性化合物，例如约15％到约30％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，干组合物包含约20％到约60％的一种或多种亲水性化合物，例如约20％到约50％的一种或多种亲水性化合物，例如约20％到约50％、例如约20％到约45％的一种或多种亲水性化合物，例如约20％到约40％、例如约20％到约30％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，干组合物包含约25％到约60％的一种或多种亲水性化合物，例如约25％到约50％的一种或多种亲水性化合物，例如约25％到约45％的一种或多种亲水性化合物，例如约25％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约25％到约35％的一种或多种亲水性化合物，例如约25％到约30％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，干组合物包含约27％到约60％的一种或多种亲水性化合物，例如约27％到约50％的一种或多种亲水性化合物，例如约27％到约45％的一种或多种亲水性化合物，例如约27％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约27％到约35％的一种或多种亲水性化合物，例如约27％到约30％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，干组合物包含约30％到约60％的一种或多种亲水性化合物，例如约30％到约50％的一种或多种亲水性化合物，例如约30％到约45％的一种或多种亲水性化合物，例如约30％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约30％到约35％的一种或多种亲水性化合物。

在一个实施方案中，干组合物包含比生物相容性聚合物少的亲水性化合物，即亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率小于1:1，例如小于或约0.9:1，例如小于或约0.8:1，例如小于或约0.7:1，例如小于或约0.6:1，例如小于或约0.5:1，例如小于或约0.4:1，例如小于或约0.3:1，例如小于或约0.2:1，例如小于或约0.1:1。亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率在干燥前的糊剂中是相同的。

在一个实施方案中，亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率为约0.1:1到1:1，例如约0.2:1到1:1，例如约0.3:1到1:1，例如约0.4:1到1:1。在一个实施方案中，亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率为约0.1:1到0.8:1，例如约0.1:1到0.7:1，例如约0.1:1到0.6:1，例如约0.1:1到0.5:1，例如约0.1:1到0.45:1。甚至更优选地，亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率为约0.15:1到0.8:1，例如约0.15:1到0.7:1，例如约0.15:1到0.6:1，例如约0.15:1到0.5:1，例如约0.15:1到0.5:1，例如0.15:1到0.45:1。在一优选实施方案中，亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率为约0.2:1到0.8:1，例如约0.2:1到0.7:1，例如约0.2:1到0.6:1，例如约0.2:1到0.5:1，例如0.2:1到0.45:1。

在一个实施方案中，亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率为约0.3:1到0.8:1，例如约0.3:1到0.7:1，例如约0.3:1到0.6:1，例如约0.3:1到0.5:1，例如约0.35:1到0.5:1，例如约0.35:1到0.45:1。

在一个实施方案中，本公开书的亲水性化合物不是聚乙二醇(PEG)。

其它化合物

本发明的干组合物还可以包含一种或多种以下物质：DMSO(二甲亚砜)、2-甲基-2,4-戊二醇(MPD)和/或下表中所提到的一种或多种化合物。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物包含一种或多种抗微生物剂，例如一种或多种抗细菌剂。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物包含苯扎氯铵。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物不包含抗微生物剂。

在一个实施方案中，干组合物进一步包含挤出增强剂，即能够促进糊剂从注射器挤出的化合物。

先前已表明，提供适量的某些挤出增强剂例如白蛋白使得能够使用较高的明胶浓度，因为它降低从例如注射器挤出明胶糊剂组合物所需要的力的量。使用较高的明胶浓度可进而改善此类产物的止血性质。有必要提供适量的挤出增强剂。所述量优选足够高以获得挤出效果，即，即使对于相对高的量的生物相容性聚合物例如交联明胶，也能实现可流动的糊剂，使得止血糊剂组合物可由外科医生使用例如包含涂料器尖端的注射器准确地施用；另一方面，所述量应尽可能地低，以防止止血组合物的负面功能性质。

挤出增强剂优选为白蛋白，尤其是人血清白蛋白。

在真空膨胀和干燥之前的本发明的糊剂组合物中，挤出增强剂例如白蛋白的存在量优选为约0.1％到约10％，例如约0.2％到约8％，例如约0.3％到约7％，优选约0.5％到约5％，更优选约1％到约4％。

在本发明的干糊剂组合物中，挤出增强剂例如白蛋白的存在量优选为约0.3％到约30％，例如约0.5％到约25％，例如约1％到约20％，优选约2％到约15％。

在一个实施方案中，挤出增强剂不存在于干组合物中，而是在复水过程中被引入糊剂组合物中。例如，挤出增强剂可以存在于用于糊剂的复水的水性介质中，从而获得包含挤出增强剂的湿糊剂组合物。

在一个实施方案中，根据本发明的复水的湿糊剂组合物的平均挤出力(例如，通过采用WO 2013/060770的实施例1中所述的测试方法)为40N或低于40N，优选低于35N，尤其优选低于30N或甚至低于20N。

另一类根据本发明的挤出增强剂是磷脂，例如磷脂酰胆碱和磷脂酰丝氨酸，或者复合混合物，例如卵磷脂或大豆油。

生物活性剂

在本发明的一个实施方案中，干组合物包含一种或多种生物活性剂，即一种或多种生物活性剂包含在膨胀和干燥之前的糊剂中。必要的是生物活性剂在整个过程中保留其生物活性，即所述试剂在最终的复水糊剂中保留其生物功能。许多生物活性剂在溶液中不稳定，尤其是当存在水时可能降解或丧失二级结构的酶和其它蛋白质。

在一个实施方案中，生物活性剂刺激伤口愈合和/或止血，例如凝血酶。

常规地，在需要止血糊剂时，将凝血酶溶液与干的或预润湿的明胶粉末混合以直接在手术部位制备止血糊剂，例如通过使用市售的止血试剂盒(例如Floseal和Surgiflo)进行。凝血酶溶液必须正好在制备糊剂之前制备，因为溶液中的凝血酶非常不稳定并且将快速地自身降解。在手术部位制备凝血酶溶液是耗时的并且就正确稀释凝血酶来说存在出错的风险。

本公开书允许在干燥前将凝血酶加入到糊剂中，从而产生包含凝血酶的干止血组合物，所述干止血组合物一在用合适水性介质例如水复水后就将包含所需量的凝血酶，而无需耗时且易于出错的凝血酶稀释步骤和在手术部位加入。凝血酶可以包含在本公开书的干组合物中，因此构成优于制备止血糊剂的常规方法的明显优势。

发明人已经显示凝血酶可以包含在糊剂中并且根据本公开书通过冷冻干燥进行干燥，同时在复水后的糊剂中测量的凝血酶活性基本上没有损失。

可以在干燥前以足以确保复水的干组合物的有效止血的量将凝血酶加入到本发明的糊剂中。在一个实施方案中，以约100IU/ml糊剂到约500IU/ml糊剂(例如约150IU/ml糊剂到约450IU/ml糊剂，例如约200IU/ml糊剂到约400IU/ml糊剂，例如约250IU/ml糊剂到约350IU/ml糊剂)范围内的浓度加入凝血酶。

在一个实施方案中，在干燥前以约50IU/g糊剂到约5000IU/g糊剂、优选约100IU/g糊剂到约1000IU/g糊剂(例如约200IU/g糊剂到约800IU/g糊剂)范围的浓度将凝血酶加入糊剂中。在此类实施方案中，干组合物将包含凝血酶。在另一实施方案中，干组合物不包含凝血酶，并且凝血酶可在通过用包含凝血酶的液体复水干糊剂组合物来复水该干组合物时加入。

所述一种或多种生物活性剂可以是例如凝血酶或凝血酶与纤维蛋白原的组合，或者凝血酶和纤维蛋白原与因子XIII的组合，或者凝血酶和纤维蛋白原和因子XIII与氨甲环酸的组合。

凝血酶是在人类中由F2基因编码的“胰蛋白酶类”丝氨酸蛋白酶蛋白。凝血酶原(凝血因子II)在凝血级联中经过蛋白水解裂解以形成凝血酶，最终遏制血液损失。凝血酶进而充当将可溶性纤维蛋白原转化为不溶性的纤维蛋白链并且催化许多其它凝血相关反应的丝氨酸蛋白酶。在血液凝固途径中，凝血酶用于将因子XI转化为XIa，将VIII转化为VIIIa，将V转化为Va并且将纤维蛋白原转化为纤维蛋白。

一种根据本发明的优选生物活性剂是凝血酶。在一个实施方案中，凝血酶作为凝血酶原加入。

在一个实施方案中，干组合物包含一种或多种刺激骨头和/或肌腱和/或组织愈合的生物活性剂，例如一种或多种选自由基质金属蛋白酶(MMP)、胰岛素类生长因子1(IGF-I)、血小板源性生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子β(TGF-β)组成的组的生长因子。

在一个实施方案中，干组合物包含一种或多种骨形态生成蛋白(BMP)。骨形态生成蛋白(BMP)是TGF-β超家族的子群。骨形态生成蛋白(BMP)是一组也被称为细胞因子和代谢物原(metabologen)的生长因子。最初通过诱导骨头和软骨形成的能力发现的BMP现在被认为构成了一组关键的形态生成信号，从而精心安排整个体内的组织架构。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物包含一种或多种基质金属蛋白酶(MMP)。MMP是依赖于锌的肽链内切酶。MMP在损伤之后的愈合过程期间在细胞外基质(ECM)的降解和重塑中具有非常重要的作用。包括MMP-1、MMP-2、MMP-8、MMP-13和MMP-14在内的某些MMP具有胶原酶活性，意味着不同于许多其它酶，所述MMP能够降解胶原蛋白I原纤维。

这些生长因子在愈合过程期间都具有不同的作用。IGF-1在炎症的第一阶段期间增加胶原蛋白和蛋白聚糖的产生，并且PDGF也存在于损伤后的早期阶段期间并促进其它生长因子的合成以及DNA的合成和细胞的增殖。已知TGF-β的三种同种型(TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3)在伤口愈合和瘢痕形成中起作用。众所周知VEGF可以促进血管生成并且诱导内皮细胞增殖和迁移。

在一个实施方案中，本公开书的干组合物包含细胞外基质(ECM)薄片或粒子。ECM是动物组织的细胞外部分，其通常对动物细胞提供结构支撑，此外还执行各种其它重要功能。已显示ECM在愈合中具有非常有利的作用，因为其促进功能组织再生。

可结合本发明的糊剂使用的生物制剂的种类是庞大的。一般来说，可通过本发明的止血组合物施用的生物制剂包括但不限于：抗感染剂，例如抗生素和抗病毒剂；止痛药和止痛药组合；驱虫药；抗关节炎药；抗惊厥药；抗抑郁药；抗组胺剂；消炎药；抗偏头痛制剂；抗肿瘤药；抗帕金森病药(antiparkinsonism drug)；抗精神病药；退烧药、镇痉药；抗胆碱能药；拟交感神经药；黄嘌呤衍生物；心血管制剂，包括钙通道阻滞剂和β-阻滞剂，例如吲哚洛尔(pindolol)和抗心律失常药；抗高血压药；利尿剂；血管舒张药，包括全身冠状动脉、外周和脑；中枢神经系统兴奋剂；激素，例如雌二醇和其它类固醇，包括皮质类固醇；免疫抑制剂；肌肉松弛剂；副交感神经阻断药；精神兴奋剂；天然衍生或遗传改造的蛋白质、多糖、糖蛋白或脂蛋白；寡核苷酸、抗体、抗原、胆碱能药、化疗药、放射性试剂、骨诱导剂、细胞抑制剂、肝素中和剂、促凝血剂和止血剂，例如凝血酶原、凝血酶、纤维蛋白原、纤维蛋白、纤维粘连蛋白、肝素酶、因子X/Xa、因子VII/VIIa、因子VIII/VIIIa、因子IX/IXa、因子XI/XIa、因子XII/XIIa、因子XIII/XIIIa、组织因子、巴曲酶(batroxobin)、安克洛酶(ancrod)、蛇静脉酶(ecarin)、血管性血友病因子(von Willebrand Factor)、胶原蛋白、弹性蛋白、白蛋白、明胶、血小板表面糖蛋白、加压素、加压素类似物、肾上腺素、选择素、促凝血毒液、血纤维蛋白溶酶原活化因子抑制剂、血小板活化剂和具有止血活性的合成肽。

制备糊剂

根据本发明的方法，将诸如生物相容性聚合物的粉末形式的试剂和任选的一种或多种亲水性化合物与适量的水性介质混合以获得糊剂。混合可以用所属领域技术人员已知的任何合适方式进行，例如通过手动混合内容物或通过使用电动混合装置(例如手动混合器、厨房混合器或工业混合器)进行。

粉末粒子通常基本上不溶于水性介质中，从而允许形成糊剂。交联通常使生物相容性聚合物例如明胶不溶于水中。

在混合容器中混合糊剂引入基本上均匀地分散于整个所述糊剂当中的不连续气相，即混合的糊剂具有包含可膨胀气体例如空气的孔或隔室。

在一个实施方案中，糊剂是通过将水性介质、气体和一个量的粉末粒子在混合容器中在导致形成具有基本上均匀地分散于整个糊剂当中的不连续气相的糊剂的条件下混合来制备。气体可以是例如空气、氮气、二氧化碳、氙气、氩气或它们的混合物。

在一具体实施方案中，糊剂通过以下步骤制备：

-将一个体积的液体引入装备有用于混合所述液体的构件的混合容器中，

-将一个体积的气体引入所述体积的液体中，同时在将所述液体和所述气体有效地混合在一起以形成包含不连续气相的泡沫的条件下操作所述用于混合的构件，所述不连续气相包含分散在包含所述液体的连续液相中的所述气体，

-向所述泡沫中引入一个量的适合用于止血并且基本上不溶于所述液体中的生物相容性聚合物的粉末粒子；和

-将所述泡沫和所述粉末粒子在有效形成基本上均匀的糊剂组合物的条件下混合在一起，所述糊剂组合物包含所述不连续气相和基本上均匀地分散于整个所述液相当中的所述粒子，由此形成所述可流动的糊剂组合物。

在一个实施方案中，所述基本上均匀的糊剂组合物包含连续液相，即当糊剂被容纳在封闭空间中时，当向糊剂施加力时会被释放的液相。

在一个实施方案中，粉末粒子包含足以通过毛细管力容纳水的大小的孔和通道。当使用此类粒子制备糊剂时，当糊剂被容纳在限定空间中时，一向糊剂施加力，水就可从糊剂释放。

随后，可将获得的糊剂转移到适合于真空膨胀、冷冻和干燥糊剂的容器中。优选地，糊剂被转移到其中的容器也适合于复水以及将复水的糊剂组合物施用到例如需要止血的部位。

糊剂的混合一般可以在室温(20-25℃)下进行。然而，如果糊剂中包含凝血酶或其它敏感性试剂例如其它酶，那么明智的做法是在寒冷温度下和/或在短时期内进行糊剂的混合以避免或降低凝血酶的蛋白水解活性，因为众所周知凝血酶在湿润时容易发生自身降解。因此，当糊剂中打算包含凝血酶或其它敏感生物活性剂时，糊剂的混合通常在室温以下的温度下(例如在约2℃到约25℃下，例如在约2℃到约15℃(例如约2℃到约10℃)下，优选在约4℃下)进行。

保持糊剂中的凝血酶生物活性的另一种或额外方式是使凝血酶在湿润状态下所处的时间(即混合时间)最短。因此，当糊剂中打算包含凝血酶或其它蛋白水解酶时，糊剂的混合通常在约5分钟到约10小时(例如约5分钟到约5小时，例如约5分钟到约2小时，优选地约5分钟到约1小时)内(例如在约5分钟到约30分钟内)进行。

本申请的发明人已经发现，在低温下进行糊剂的混合以避免凝血酶活性损失并不是必需的，因为当在环境温度下进行糊剂的混合时没有发现凝血酶活性的可检测到的降低。

容器

所属领域技术人员已知的任何合适容器都可以用于制备糊剂以及在干燥时容纳本发明的糊剂，例如小瓶、罐、管、托盘、料筒或注射器。

在一个实施方案中，在一个容器中大宗制备糊剂，并将所述糊剂转移/等分到另一容器中用于膨胀、冷冻和干燥，其中所述其它容器选自涂料器，例如注射器、小瓶、罐、管、托盘和料筒。优选地，其它容器是适合于将可流动的止血组合物分配给有需要的患者的医用递送器件。在一个实施方案中，在膨胀、冷冻和干燥过程中容纳糊剂组合物的容器是注射器。

根据本发明的“罐”是具有广口开口的刚性的、大致圆柱形的容器。罐可以包括施加在罐口上的可再封闭的封闭单元/盖。

容器可以由任何合适的材料制成，例如塑料、玻璃、陶瓷或金属，例如不锈钢。

合适塑料材料的实例包括但不限于聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯和聚四氟乙烯(PTFE)。

在一个实施方案中，将糊剂填充到适合于分配可流动的止血组合物的涂料器中并在其内进行干燥。

在一个实施方案中，本发明涉及一种容器，其包括：

a.产物腔室，其包含能够一在加入水性介质后就形成糊剂的干组合物，其中所述产物腔室内的压力低于所述产物腔室外的压力，以及

b.阀。

优选地，干组合物一在向存在于容器中的干组合物中加入水性介质后就自发地复水。

在其中容器不包括旁路的实施方案中，真空膨胀和干燥期间的气体连通通过阀进行。

取决于所用容器的形状，本公开书的干组合物可以各种形状、形式和大小制备。它们例如可以呈塞状物、圆盘状物、杆状物、管状物、锥形筒、球体、半球体、片剂、丸粒、颗粒或薄片的形式。

医用递送器件

在一个实施方案中，将糊剂填充到适合于分配可流动的止血组合物的医用递送器件(例如注射器)中并在其内进行干燥。转移在糊剂的真空膨胀之前进行。

在一个实施方案中，医用递送器件是包括阀的一次性注射器。在一个实施方案中，注射器包括冻干旁路通道，所述旁路通道是注射器的产物腔室与容器外部即外部环境之间的气体连通。旁路可以处于允许产物腔室与外部之间气体连通的开放状态以及封闭状态。旁路可以位于允许产物腔室与外部环境之间气体连通的任何地方，例如，在注射器主体中或在柱塞中，如图5中所示。如果注射器在注射器主体中包括旁路(图5，构思2)，那么注射器可装配标准柱塞。

本公开书的一个实施方案涉及用于将冷冻干燥的糊剂例如本发明公开的干糊剂组合物保留在真空中的注射器，所述注射器包括：空筒、压力阀、柱塞和一个或多个真空旁路通道，所述空筒包括：真空腔室，其用于容纳所述糊剂并且具有开放近端和具有第一流体开口的远端；连接器部分，其具有第二流体开口并且适合于连接到液体容器；和压力腔室，其连接所述连接器部分和所述真空腔室的远端；所述压力阀位于所述压力腔室中并且适合于在第一位置密封所述第一流体开口和/或所述第二流体开口以及在第二位置在所述第一流体开口与所述第二流体开口之间形成流体通路；所述柱塞被配置成穿过所述开放近端在所述真空腔室中轴向移位。注射器优选为一次性用后可弃的注射器。

当冷冻干燥糊剂时，可以在真空腔室中产生的真空对于膨胀糊剂很重要。并且，通过将干糊剂保留在注射器的真空腔室中的真空中，即在低于周围环境压力的压力水平下，制备糊剂时液体的加入和糊剂的使用变得容易，因为液体由于真空腔室中的减压而被吸入到真空腔室中。

可以在空筒真空腔室的近端设置有法兰，以于在操作柱塞时容易把持注射器。此外，真空腔室和/或压力腔室的内部容积可有利地为圆柱形的。

连接器部分可以是标准类型的连接器部分，例如鲁尔旋锁式或鲁尔滑锁式连接器，优选公头鲁尔旋锁式或鲁尔滑锁式连接器。连接器部分可以设置有用于与匹配连接器的牢靠连接的带螺纹的部件。此带螺纹的部件可以设置在连接器部分的内部，如图18a、18b、20a和20b中所示。

在本发明公开的注射器的一个实施方案中，压力阀包括凹槽。该凹槽可以在压力阀的第二位置形成流体通路。一个实例示于图18a和18b中。同样如图18a和18b中所示，压力阀5可以包括两个由凹槽12轴向分开的圆柱形部分，并且其中由凹槽12形成的空隙在压力阀5的第二位置形成流体通路。在这种配置中，压力阀可以是沿压力阀的纵轴旋转对称的，如从图18看到的，即压力阀可以在压力腔室内部旋转而不会干扰压力阀的功能，即在压力阀的第一位置，真空腔室被密封，而不依赖于压力阀的旋转位置；并且在压力阀的第二位置，在真空腔室与连接器部分之间形成流体连接，而不依赖于压力阀的旋转位置。

压力阀可以以橡胶材料提供和/或设置有橡胶表面，以在压力阀的第一位置提供对第一流体开口和第二流体开口的密封。

压力腔室优选位于真空腔室和第二流体开口之间。此外，压力阀优选位于压力腔室中并适合于在压力腔室中在第一位置密封第一流体开口和第二流体开口，以及在压力腔室中在第二位置在第一流体开口与第二流体开口之间形成/产生流体通路，例如压力阀优选位于压力腔室中(例如压力腔室内部)的第一位置和第二位置两处。即，优选地，压力阀在控制第一流体开口与第二流体开口之间的流体通路的过程中停留在压力腔室的内部。

在本发明公开的注射器的一个实施方案中，压力腔室包括邻接真空腔室远端的近端和邻接连接器部分近端的远端。此外，连接器部分可以包括邻接压力腔室远端的近端和适合于连接到液体容器的远端。第二流体开口可以形成穿过连接器部分的细长通道，例如如图18和20中所示。同样如从这些图看到的，第二流体开口可以包括邻接压力腔室远端的近端和用于流体进入和排出的远端。因此，压力阀可适合于在所述第一位置密封第一流体开口的远端和第二流体开口的近端。

因此，利用本发明公开的注射器，用于复水真空腔室中的糊剂的液体可从注射器的远端经由连接器部分中的第二流体开口穿过压力腔室提供到真空腔室中。复水的糊剂的递送也通过注射器的远端提供。这种解决方案是可行的，因为为专用压力腔室设置了位于真空腔室与远端流体开口之间的压力阀，从而可控制第一流体开口与第二流体开口之间的流体通路的堵塞和开放，而不从压力腔室移除压力阀并且也不进入第二流体开口。因此，外部液体容器可以在压力阀处于第一位置即流体通路堵塞(密封)时被连接到注射器的连接器部分。将压力阀切换到第二位置打开流体通路，液体可以从液体容器前行至注射器的真空腔室中，用于复水糊剂。因此，本发明公开的注射器当复水干糊剂例如止血糊剂时使用安全、方便且快速。

在本发明公开的注射器的另一个实施方案中，压力阀的第一位置和第二位置相对于注射器的纵轴径向移位。此外，压力阀可以在压力阀的第一位置从压力腔室突出。并且进一步，压力阀可以在压力阀的第二位置与压力腔室齐平，例如完全纳入压力腔室中。压力阀可以在压力阀一端设置有自压力腔室突出的阀法兰。该阀法兰可以在所述第一位置自压力腔室突出，并且所述阀法兰可以在所述第二位置与压力腔室齐平。因此，所述阀法兰可具有作为压力阀的截止法兰的功能，即压力阀可配置为使得阀法兰在压力阀的第二位置邻接压力腔室。

在本发明公开的注射器的又一个实施方案中，例如如图3-13中所示，压力阀的第一位置和第二位置可旋转地移位，图3-12中为封闭位置并且图13中为开放位置。同样如在这些图中所例示，压力阀可包括贯穿通道，从而在压力阀的第二位置形成流体通路。此外，压力阀可包括圆柱形部分，所述圆柱形部分具有在压力阀的第二位置形成流体通路的贯穿径向通道。

在另一实施方案中，压力阀和压力腔室被配置为使得压力阀的第二位置是锁定位置。压力阀可以在该锁定位置轴向和/或可旋转地锁定。这可以帮助确保一旦压力阀已经被移动到第二位置，它就停留在那里，从而确保糊剂可以在需要时从注射器排出。压力阀和压力腔室可以进一步被配置为使得第一位置是部分锁定位置，例如压力阀不能从压力腔室移除/移出，而是只能被移动到第二位置。这可以帮助确保真空腔室的内部保持真空。

在本发明公开的注射器的另一个实施方案中，压力阀包括孔，并且该孔优选在压力阀的第二位置形成至少一部分流体通路。即，优选地，该孔穿过压力阀横向延伸，使得当插入压力腔室中时孔在空筒的纵向延伸。

在另一实施方案中，压力阀和压力腔室被配置为使得压力阀在所述第一位置径向受限，例如相对于空筒的纵轴向外径向受限。此径向限制可通过压力阀上和/或压力腔室内部的一个或多个突出部提供。例如，压力阀包括一个或多个突出部，优选侧向延伸的一个或者多个突出部，例如径向于流体通路延伸的一个或者多个突出部。所述限制也可以通过压力腔室的内侧壁的狭窄部提供，并且该狭窄部可适合于限制压力阀在第一位置的径向移位，例如该狭窄部可适合于匹配压力阀的一个或多个突出部，使得这个或这些突出部在压力阀的第一位置邻接所述狭窄部。如图19c和19d中例示性地示出，狭窄部可通过压力腔室的内侧壁的一个或多个“肩部”提供。

在另一实施方案中，压力阀在所述第一位置自压力腔室横向和/或径向突出，并且其中压力阀在所述第二位置与压力腔室齐平或完全陷入压力腔室中。压力阀可设置有顶部表面，其中所述顶部表面可在所述第一位置与压力腔室的顶部表面齐平。如图19和20中所示，这些顶部表面可以是圆形的和/或彼此匹配。

压力阀和压力腔室可以被配置为使得压力阀可以从压力腔室的一侧插入，例如仅穿过压力腔室的一侧，例如穿过压力腔室的开口，例如压力腔室的底部开口，其中压力腔室的顶部开口可以是在第一位置时压力阀延伸穿过的地方。

本发明公开的注射器优选被配置为使得干糊剂组合物可以在真空腔室内部被冷冻干燥。所述一个或多个真空旁路通道可以被配置为在真空腔室与周围/环境大气之间提供流体例如气体连通，即真空旁路通道可以用作如本文所述的冻干旁路通道。在一个实施方案中，注射器被配置为使得柱塞在真空腔室的内部在柱塞的至少第一轴向位置可密封地接合真空腔室，并且使得在真空腔室的内部在柱塞的至少第二轴向位置经由所述一个或多个真空旁路通道横跨柱塞建立流体连通。即，可以建立真空并且组合物可以在柱塞的第二位置被冷冻干燥，而真空腔室中的真空可以在柱塞的第一位置得以保留。然而，或者，所述一个或多个真空旁路通道被配置为使得可以在真空腔室和周围大气之间直接提供流体连通，而不依赖于柱塞的位置，例如经由正好位于真空腔室的(第二)压力阀。或者，所述一个或多个真空旁路通道可以形成在柱塞中。

因此，所述一个或多个真空旁路通道可以被配置为在真空腔室的内部在柱塞的预定轴向位置切断真空腔室与柱塞之间的密封。此外，所述一个或多个真空旁路通道可以形成在真空腔室中。例如，所述一个或多个真空旁路通道可以是形成在真空腔室的(例如近端处的)内表面中的一个或多个纵向凹槽。

在本发明公开的注射器的一个实施方案中，空筒以单片材料形成。空筒可有利地适合和/或适于通过单周期注射成型制造，即空筒可有利地通过单周期注射成型制造。即，例如如图16-18中所示，可以整合和/或结合真空腔室、压力腔室和连接器部分以形成单一元件。这可以帮助确保在真空腔室的内部可建立和保持真空。

然而，或者，真空腔室、压力腔室和连接器部分可以作为单独元件形成并且被配置为在注射器的制造过程中进行组装。

此外，压力腔室和连接器部分可以作为一个元件形成并且被配置为在注射器的制造过程中与真空腔室进行组装。或者，真空腔室和压力腔室可以作为一个元件形成并且被配置为在注射器的制造过程中与连接器部分进行组装。

本发明公开的注射器的空筒1,1’例示在图16-18中。图16a中的空筒1设置有以单件式形成的真空腔室、压力腔室3、连接器部分4和法兰8并且适合于通过单周期注射成型制造。插入压力腔室3中的压力阀5设置有阀法兰6。在图16a中，压力阀位于第一位置，而在图16b中，压力阀已被移位到第二位置。这在图16c(压力阀的第一位置)和16d(第二位置)中更清楚地看到。在压力阀5的第二位置，阀法兰6邻接压力腔室3。

图18a和18b中的贯穿切割示意图更清楚地示出压力阀5的配置。在图18a中的第一位置，压力阀堵塞真空腔室2的内部容积2’的出口11与连接器部分4的出口7之间的流体连通。在图18b中的压力阀5的第二位置，在周围环境与真空腔室2的内部容积2’之间经由压力腔室3和连接器部分4的出口7提供流体连通(如由虚线/箭头所示)，即液体可以进入真空腔室2’以与干组合物混合，例如以形成湿糊剂，所述湿糊剂随后可通过操作布置于空筒1,1’中的柱塞(未示出)经由出口7受控释放。图17a中的空筒1’不具有法兰。

如从图18看到的，压力阀5形成为圆柱形，其具有在压力阀的第二位置形成流体开口的圆周凹槽12。即，压力阀5形成为两个中空圆柱形，所述两个中空圆柱形通过位于中央的杆13彼此连接。尽管杆13位于流体通路的中央，但是经由出口7进入真空腔室2的液体和通过出口7从空筒1,1’释放的糊剂也可以容易地通过杆13。如图18中所示的压力阀5是旋转对称的。

连接器部分4设置有内螺纹10，在图18中最清楚地看到。在将液体抽吸到真空腔室内(此时将形成(湿)糊剂)之前，这可帮助提供与外部液体容器(具有带匹配螺纹的连接器部分)的紧固、紧密且无需填塞物(tamper-free)的连接。

真空旁路通道9在图16-18中提供为在真空腔室2的近端纵向延伸的凹槽。当柱塞(未示出)被布置在空筒1,1’中这些真空通道的下方时，柱塞可密封地接合真空腔室。然而，当柱塞的远端部分与真空旁路通道9齐平时，这种密封不紧密，因为在真空腔室2’与周围大气之间经由真空旁路通道9横跨柱塞建立流体(特别是空气)连接。即，在糊剂于真空腔室2’内部冷冻干燥的过程中，施加在空筒近端的抽吸可以在压力腔室2’内部建立真空，从而膨胀干糊剂。在冷冻干燥和膨胀过程结束时，柱塞可被移位到位于真空旁路通道下方的位置，由此可密封地接合真空腔室2，并随后将冷冻干燥的糊剂保留在真空中。

本发明公开的注射器的另一例示性空筒1”例示于图20中，其具有如图19中更详细地示出的压力阀5’和压力腔室3’的另一实施方案，其中图19a示出仅压力阀的特写。此压力阀5’是细长的并且设置为大致矩形形状。孔17在压力阀在压力腔室3’内的第二位置处形成流体通路。压力阀5’的外部形状匹配压力腔室3’的内部形状。图19b示出了在压力腔室3’内部处于压力阀5’的第一位置的压力阀5’，其中流体通路被堵塞并且真空腔室2内可保持真空。在图19b中，看到压力阀5’从压力腔室3’向上突出，即，其相对于空筒2的纵轴自压力腔室3’径向突出。在图19c和19d中，压力腔室3’已被贯穿切割，因此可以看到压力腔室3’内压力阀5’的配置。在图19c中，压力阀5’处于第一位置，即自压力腔室3’径向延伸。压力阀5’和压力腔室3’被配置为使得压力阀在所述第一位置通过压力阀5’上的突出部14径向受限，压力阀5’上的突出部14邻接压力腔室3’的内侧壁的狭窄部15，即当处于第一位置时，压力阀5’不能进一步向外延伸。这帮助确保压力阀5’不会意外地从压力腔室3’移出，由此意外移出可能破坏真空腔室2内的真空密封。在图19d中，压力阀5’处于第二位置。压力阀5’现在完全陷入压力腔室3’中。压力阀5’的圆形顶部表面匹配压力腔室3’的对应圆形顶部表面，使得压力阀5’和压力腔室3’的上表面彼此齐平。

图20a-b示出压力腔室3’内压力阀5’的贯穿切割侧视示意图，其中图20a中为压力阀的第一位置并且图20b中为第二位置。如在图20a中看到的，流体通路7由压力阀5’堵塞，而在图20b中，如图20b中的虚线水平箭头所示，压力阀5’的孔17建立流体连接。图20b还示出了压力阀5’在所述第二位置不从压力腔室3’突出的方式。这帮助确保一旦由处于第二位置的压力阀5’建立流体通路，压力阀5’的位置就不易改变，因为它陷入压力腔室3’内部。

图20a中的虚线箭头示出开口16，可通过该开口16将压力阀5’插入压力腔室3’中。空筒1”也适合于单周期注射成型。制造后，可以通过开口16插入压力阀5’。压力阀5’本身也适合于单周期注射成型。设置图19a和20c中所示的三个顶部孔18，以使压力阀5’适合于注射成型。

止血片

在一个实施方案中，干组合物呈薄片形式，即基本上平坦的组合物。

薄片形式的干组合物可以通过将本发明的糊剂薄薄地并且均匀地铺在表面上、真空膨胀所述糊剂、冷冻和干燥所述糊剂以获得基本上平坦的干薄片组合物来获得。薄片形式的干组合物一在与液体接触后就将自发地复水而形成糊剂。因此，薄片形式的干组合物既具有传统使用的外科海绵的优点，因其可以覆盖相对大的区域，还具有糊剂的优点，因其一在湿润后就容易贴合不平坦表面。

薄片形式的干组合物是柔软的和柔性的。

在一个实施方案中，本发明涉及一种用于止血和/或伤口愈合的薄片形式的干组合物。

在一个实施方案中，所述薄片在使用前、即在施用到伤口前没有经过预先湿润。在这种情况下，所述薄片一在与血液、伤口渗出物和/或其它体液接触后就会在出血伤口上原位复水。

在一个实施方案中，干薄片组合物的高度是约0.5mm到约10mm，优选地约1mm到5mm，更优选地约1mm到3mm，例如约2mm。

干薄片组合物的大小(宽度和深度)取决于薄片的预期用途并且可以由所属领域技术人员选择。干薄片材料可以是例如矩形、方形或圆形。举例来说，干薄片组合物可以例如呈大约5cm×10cm、2cm×6cm、6cm×8cm或8cm×12cm的矩形形式。

在一个实施方案中，在使用前将干薄片组合物切割成期望的形状。

真空

根据本公开书的方法，通过使糊剂经受减压，即低于环境压力的压力，即通常低于1000毫巴(低真空)，使糊剂膨胀。真空膨胀通过使所捕获的空气或者其它气体在湿糊剂的间质孔或隔室内膨胀而增加糊剂的总体积。

选择真空的压力，使得糊剂膨胀到足够程度而不塌陷。因此，压力不允许太低，否则会导致糊剂塌陷。糊剂的真空膨胀可以例如在冷冻干燥器中进行。

糊剂的真空膨胀是物理学普遍定律的结果：理想气体定律，它决定了压力下降时气体的体积会增加。理想气体定律公式为：

PV＝nRT

其中P是气体的压力，V是气体的体积，n是气体的物质的量(以摩尔计)，T是气体的温度，并且R是理想或普适气体常数。

使湿糊剂经受低于大气压的压力导致糊剂的间质空间(孔)内的空气或其它气体膨胀，进而导致糊剂总体积的增加和糊剂密度的降低。干燥糊剂组合物以获得干糊剂组合物后，增加的孔隙大小导致增加的可渗透性和可润湿性，因此导致增加的干组合物复水速率。因此，在一个实施方案中，本公开书涉及一种通过使湿糊剂经受减压调节糊剂密度来改变糊剂体积的方法。

在一个实施方案中，糊剂的密度由于真空膨胀以至少0.95的系数降低，例如由于真空膨胀至少以0.90的系数(例如以至少0.85的系数，例如以至少0.80的系数，例如以至少0.75的系数，例如以至少0.70的系数，例如以至少0.65的系数，例如以至少0.60的系数，例如以至少0.55的系数，例如以至少0.50的系数)降低。优选地，糊剂的密度由于真空膨胀以至少0.8的系数降低。

在一个实施方案中，糊剂的密度由于真空膨胀以约0.75的系数降低。

在糊剂真空膨胀之前，湿糊剂的密度范围可以例如在约0.5g/ml到约1g/ml，例如约0.6g/ml到约0.9g/ml，例如约0.7g/ml到约0.8g/ml。

例如，膨胀之前的明胶糊剂的密度通常在约0.60g/ml到约0.80g/ml的范围内，例如约0.65g/ml到约0.75g/ml的范围内，例如约0.7g/ml。

在真空膨胀之后，湿糊剂的密度范围可以例如在约0.1g/ml到约0.8g/ml，更优选约0.2g/ml到约0.7g/ml，例如约0.2g/ml到约0.6g/ml，例如约0.2g/ml到约0.5g/ml。

例如，膨胀之后的明胶糊剂的密度通常在约0.2g/ml到约0.6g/ml的范围内，更优选约0.3g/ml到约0.6g/ml，例如约0.4g/ml到约0.5g/ml。

通过使糊剂经受减压，糊剂的体积大约以下述系数增加：至少约1.05的系数，例如至少1.1的系数，例如至少1.2的系数，例如至少1.3的系数，例如至少1.4的系数，例如至少1.5的系数，例如至少1.6的系数，例如至少1.7的系数，例如至少1.8的系数，例如至少1.9的系数，例如至少2.0的系数。

在一个实施方案中，糊剂的体积由于湿糊剂的真空膨胀以下述系数增加：约1.05的系数到约2.0的系数，例如约1.1的系数到约1.8的系数，例如约1.2的系数到约1.6的系数。

干燥后，经干燥的糊剂组合物的密度由于水的去除而进一步降低。在真空膨胀的湿糊剂的干燥后，干糊剂组合物的密度因此通常在约0.1mg/ml到约100mg/ml的范围内，更优选约1mg/ml到约50mg/ml，例如约5mg/ml到约40mg/ml。

例如，通常，通过本公开书的方法制备的包含明胶的真空膨胀的干组合物的密度为约1mg/ml到约40mg/ml，例如约5mg/ml到约35mg/ml，例如约10mg/ml到约35mg/ml。

在一个实施方案中，真空膨胀的干组合物的密度在约1mg/ml到约40mg/ml的范围内，更优选约5mg/ml到约40mg/ml，例如约5mg/ml到约38mg/ml，例如约5mg/ml到约36mg/ml，例如约5mg/ml到约34mg/ml，例如约5mg/ml到约32mg/ml，例如约5mg/ml到约30mg/ml，例如约5mg/ml到约28mg/ml，例如约5mg/ml到约26mg/ml，例如约5mg/ml到约24mg/ml，例如约5mg/ml到约22mg/ml，例如约5mg/ml到约20mg/ml。

在一个实施方案中，糊剂所经受的减压比环境压力低至少10毫巴，例如比环境压力低至少50毫巴，例如比环境压力低至少100毫巴，例如比环境压力低至少150毫巴，例如比环境压力低至少200毫巴，例如比环境压力低至少250毫巴，例如比环境压力低至少300毫巴，例如比环境压力低至少350毫巴，例如比环境压力低至少400毫巴，例如比环境压力低至少450毫巴，例如比环境压力低至少500毫巴，例如比环境压力低至少550毫巴，例如比环境压力低至少600毫巴，例如比环境压力低至少650毫巴，例如比环境压力低至少700毫巴，例如比环境压力低至少750毫巴，例如比环境压力低至少800毫巴，例如比环境压力低至少850毫巴，例如比环境压力低至少900毫巴。

真空的压力优选选择为使得压力比环境压力低至少50毫巴但比环境压力低不超过900毫巴，例如比环境压力低至少100毫巴但比环境压力低不超过800毫巴。

真空的压力优选选择为使得压力比环境压力低不超过1000毫巴，例如比环境压力低不超过900毫巴，例如比环境压力低不超过800毫巴，例如比环境压力低不超过700毫巴，例如比环境压力低不超过600毫巴，例如比环境压力低不超过500毫巴。

在一个实施方案中，真空的压力为低于1000毫巴到100毫巴，例如950毫巴到100毫巴，例如900毫巴到100毫巴，例如850毫巴到100毫巴，例如800毫巴到100毫巴，例如750毫巴到100毫巴，例如700毫巴到100毫巴，例如650毫巴到100毫巴，例如600毫巴到100毫巴，例如550毫巴到100毫巴，例如500毫巴到100毫巴，例如450毫巴到100毫巴，例如400毫巴到100毫巴，例如350毫巴到100毫巴，例如300毫巴到100毫巴，例如250毫巴到100毫巴，例如200毫巴到100毫巴。

在一个实施方案中，真空的压力为低于1000毫巴到200毫巴，例如1000毫巴到250毫巴，例如1000毫巴到300毫巴，例如1000毫巴到350毫巴，例如1000毫巴到400毫巴，例如1000毫巴到450毫巴，例如1000毫巴到500毫巴，例如1000毫巴到550毫巴，例如1000毫巴到600毫巴，例如1000毫巴到650毫巴，例如1000毫巴到700毫巴，例如1000毫巴到750毫巴，例如1000毫巴到800毫巴，例如1000毫巴到850毫巴，例如1000毫巴到900毫巴，例如1000毫巴到950毫巴。

在一优选实施方案中，真空的压力为约900毫巴到500毫巴。

膨胀速率取决于真空泵和真空腔室的大小，即腔室中的压力降低到合乎需要的水平的快速程度。根据本公开书的低真空水平几乎瞬间达到，因此，糊剂的膨胀基本上在启动真空泵后瞬间发生。

真空膨胀通常在高于糊剂的冰点的温度下进行。在一个实施方案中，真空膨胀在环境温度下或在低于环境温度的温度下进行，例如在约0℃到约25℃的温度下，例如在约2℃到约20℃的温度下，例如在约2℃到约15℃的温度下，例如在约2℃到约10℃的温度下，例如在约4℃到约20℃的温度下，例如在约4℃到约15℃的温度下，例如在约4℃到约10℃的温度下。当糊剂包含敏感生物活性剂例如凝血酶时，真空膨胀优选在低于环境温度的温度下进行。

糊剂的冷冻

当本发明的糊剂已被膨胀到合乎需要的程度时，通常通过使糊剂经受低于0℃的温度达足以使糊剂冷冻的时间使糊剂冷冻。在不解除真空的情况下发生冷冻，因此，对糊剂的冷冻将膨胀的糊剂结构锁定就位。因此，此后压力的进一步变化不会影响冷冻糊剂的体积。冷冻优选在冷冻干燥器中进行。

选择用于冷冻糊剂的温度取决于糊剂的冰点和/或糊剂的玻璃化转变温度，并且可以由所属领域技术人员来确定。冷冻糊剂的合乎需要的温度比糊剂的冰点和玻璃化转变温度中的最低者低大约5℃。例如，如果糊剂的冰点为-35℃，那么应将糊剂冷却到约-40℃。

干燥糊剂

根据本发明，干燥止血糊剂以获得干止血组合物。糊剂可以通过所属领域技术人员已知的任何合适方法干燥。

在一优选实施方案中，对糊剂冷冻干燥。可以使用所属领域技术人员已知的任何合适的冷冻干燥技术和设备。当使用冷冻干燥来制备本发明的干燥糊剂组合物时，冷冻和干燥可有利地作为连续的过程在单一装置中进行。

冷冻干燥(也称为冻干和低温干燥)是通常用于保存易腐烂材料或使得所述材料更便于运输的脱水方法。冷冻干燥通过冷冻所述材料，然后降低周围压力以允许所述材料中的冷冻水直接从固相升华成气相来实现。

基本上存在三种类别的冷冻干燥器：歧管式冷冻干燥器、旋转式冷冻干燥器和托盘式冷冻干燥器。所有类型的冷冻干燥器都具有以下两个组件：真空泵，其用于降低容纳待干燥物质的容器内的环境气压；和冷凝器，其用于通过在被冷却到-40℃到-80℃的表面上冷凝来去除水分。歧管式冷冻干燥器、旋转式冷冻干燥器和托盘式冷冻干燥器的不同之处在于使被干燥物质与冷凝器接合的方法。在歧管式冷冻干燥器中，使用通常圆形的短管将具有干燥产物的多个容器连接到冷凝器。旋转式冷冻干燥器和托盘式冷冻干燥器具有单个大的储集器以用于被干燥物质。

旋转式冷冻干燥器通常用于干燥丸粒、小方块和其它可倾倒的物质。旋转式干燥器具有圆柱形储集器，所述储集器在干燥期间旋转以实现整个物质中的较均匀干燥。托盘式冷冻干燥器通常具有矩形储集器，所述矩形储集器具有搁板，所述搁板上的例如医药溶液和组织提取物等产物可以被放置于托盘、小瓶和其它容器中。

歧管式冷冻干燥器通常用于当干燥小容器中的液体物质时和当产物将在短时期内使用时的实验室环境中。歧管式干燥器将产物干燥到小于5％的水分含量。如果不使用热，那么只能实现初级干燥(去除未结合的水)。必须增加加热器以实现二级干燥，这将去除结合水并且将产生更低的水分含量。

托盘式冷冻干燥器通常大于歧管式干燥器并且更复杂。托盘式冷冻干燥器用于干燥各种材料。托盘式冷冻干燥器用于产生最干燥的产物以供长期储存。托盘式冷冻干燥器允许在适当位置冷冻产物并且进行初级(去除未结合的水)和二级(去除结合水)冷冻干燥，从而产生最干燥的可能终产物。托盘式冷冻干燥器可以干燥散装的或在小瓶或其它容器中的产物。当在小瓶中干燥时，冷冻干燥器配备有加塞机构，所述加塞机构允许塞子被按压到位，从而在小瓶暴露于大气之前将其密封。这用于长期储存，例如疫苗。

正在开发改进的冷冻干燥技术以扩展可冷冻干燥的产物的范围、改进产物质量并且以较少的人力较快地生产产物。

从1930年代开始，工业冷冻干燥就已经依赖于单一类型的设备：托盘式冷冻干燥器。在2005年，对于大宗材料开发了更快速且更低劳动强度的冷冻干燥方法。这一冷冻干燥过程被证明能够从单个容器产生自由流动的粉末。被称为“主动冷冻干燥”AFD技术的新颖方法使用连续移动来改进质量转移并且因此缩短加工时间，同时还消除了来回转移干燥托盘和下游大小缩减器件的需求。

在完整的冷冻干燥过程中存在四个阶段：预处理、冷冻、初级干燥和二级干燥。

预处理包括在冷冻前处理产物的任何方法。这可以包括浓缩产物、配方修正(即加入用于增加稳定性和/或改进加工的组分)、减少高蒸气压溶剂或增加表面积。在许多情况下，预处理产物的决定是基于关于冷冻干燥和其需求的理论知识，或者根据循环时间或产物质量考量的需要。预处理方法包括：冷冻浓缩、溶液相浓缩、进行配制以保持产物外观、进行配制以使反应性产物稳定、进行配制以增加表面积和减少高蒸气压溶剂。

在实验室中，通常通过将材料置于冷冻干燥烧瓶中并在被称为壳式冷冻器(shellfreezer)的浴中旋转所述烧瓶来进行冷冻，所述浴通过机械制冷、干冰和甲醇、或液氮进行冷却。在更大规模上，通常使用冷冻干燥机器进行冷冻。在这个步骤中，重要的是将材料冷却到低于其三相点，即材料的固相和液相可以共存的最低温度。这确保了在随后步骤中将发生升华而不是熔化。较大的晶体较易于冷冻干燥。为了产生较大的晶体，应当缓慢冷冻产物，或者可以使产物的温度上下地循环。这个循环过程被称作退火。在其它情况下，更好的是快速进行冷冻，目的是使材料迅速降到其低共熔点以下，从而避免形成冰晶。冷冻温度通常为-40℃到-80℃。冷冻阶段在整个冷冻干燥过程中是最关键的，因为如果操作不当，则可能损坏产物。

非晶材料不具有低共熔点，但是它们具有临界点，必须将产物维持在临界点以下以防止初级干燥和二级干燥期间的回熔或塌陷。

在初级干燥阶段期间，将压力降低(到几毫巴或更低的范围)，并且对材料供应足够的热以使水升华。可以使用升华分子的升华潜热来计算必需的热量。在这个初始干燥阶段中，材料中约95％的水被升华。这个阶段可能很缓慢(在工业上可以是数天)，因为如果施加太多热，则可能改变材料的结构。

在这个阶段中，通过施加中等真空来控制压力。真空加速升华，使其可用作有意的干燥过程。此外，冷的冷凝器腔室和/或冷凝器板提供了供水蒸气在上面再凝固的表面。这个冷凝器在保持材料冷冻方面不起作用；相反，其防止水蒸气到达真空泵，水蒸气到达真空泵可使泵的性能降格。冷凝器温度通常低于-50℃。

重要的是应注意到，在这个压力范围内，热主要通过传导或辐射来产生；因为空气密度很低，所以对流作用可以忽略不计。

水的蒸气压是水蒸气饱和时所处的压力。在更高压力下水将会冷凝。水的蒸气压是在经水饱和的任何气体混合物中的水蒸气的分压力。水的蒸气压决定进行冷冻干燥所必需的温度和压力。水的蒸气压(mTorr＝毫托；mB＝毫巴)在下表中示出：

温度(℃)	毫托	mB
			0	4579	6.104
-4	3280	4.372
			-8	2326	3.097
-12	1632	2.172
			-16	1132	1.506
-20	930	1.032
			-24	526	0.6985
-28	351	0.4669
			-32	231	0.3079
-36	150	0.2020
			-40	96.6	0.1238
-44	60.9	0.0809
			-48	37.8	0.0502
-52	23.0	0.0300
			-56	13.8	0.0183
-60	8.0	0.0107
			-64	4.6	0.0061
-68	2.6	0.0034
			-72	1.4	0.0018

二级干燥阶段旨在去除未冷冻的水分子，因为在初级干燥阶段中去除了冰。冷冻干燥过程的这个部分由材料的吸附等温线控制。在这个阶段中，温度被升高到高于初级干燥阶段中的温度，并且甚至可以高于0℃，以破坏在水分子与冷冻材料之间已经形成的任何物理-化学相互作用。通常还在这个阶段中降低压力以促进解吸附(通常在微巴范围内)。然而，也存在受益于压力升高的产物。

在冷冻干燥过程完成之后，可以用惰性气体例如氮气破坏真空，随后密封材料。

在一个实施方案中，产物腔室中保持真空以允许容易地加入用于复水的液体。

在操作结束时，冷冻干燥产物中的最终残余水含量通常极低，例如大约2％或更低。

冷冻干燥过程将糊剂转化成“蛋糕状”干组合物，一在加入适量的水性介质例如水后，所述组合物就将自发地形成即用型糊剂，即形成所述糊剂不需要机械混合/复水。

在本公开书的一替代性实施方案中，在干燥膨胀的糊剂之前不对所述糊剂进行冷冻。也不通过冷冻干燥对糊剂进行干燥。而是保持低真空，同时通过使膨胀的糊剂经受升高的温度直到糊剂干燥来干燥糊剂。升高的温度范围通常在约30-200℃，例如约50℃到约150℃。因此，在一替代性实施方案中，本公开书的方法是一种制备干组合物的方法，其包括以下步骤：

a.提供粉末形式的试剂和水性介质，

b.混合所述粉末形式的试剂和所述水性介质以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，以及

d.通过干热来干燥所述糊剂。

复水

本发明人已发现，在冷冻干燥之前通过真空(优选低真空)使湿糊剂组合物膨胀大大增强所述糊剂的复水速率。因此，已通过低真空膨胀的糊剂与未经低真空膨胀的相应干糊剂组合物相比复水得更快速。已通过真空膨胀并干燥的糊剂在没有任何机械混合的情况下自发地复水以形成基本上均匀的可流动糊剂。例如，存在于医用递送器件中的真空膨胀的干燥明胶糊剂组合物一在向其中布置有干燥明胶糊剂组合物的医用递送器件中加入一个量的水性介质后就复水成适合于直接递送给患者的即用型糊剂，而无需任何机械混合。

真空膨胀使糊剂内被捕获的气穴膨胀，并且此类膨胀的气穴被保留在干燥的糊剂组合物中。干组合物中存在较大的气穴由于干燥的组合物与液体之间较大的接触表面积而使得能够润湿干组合物。由于所形成的通道，这也促进液体无阻碍地分布到干组合物中。

本发明人还发现，来自单一批次糊剂的最先等分的样品中的糊剂等分试样的体积一般高于最后等分的样品中的糊剂等分试样的体积。这被认为是由于随时间流逝糊剂发生部分塌陷，从而导致糊剂密度发生变化。这样的密度变化可导致不合需要的复水时间的变化。在干燥前使糊剂真空膨胀能够减少或甚至消除这样的“批次内”糊剂密度变化，从而使得干燥糊剂始终如一地快速复水。因此，就复水时间而言，真空膨胀提供更高程度的可再现性。

干组合物可通过加入合适的水性介质进行复水。水性介质可以通过任何合适的机构加入。优选地，水性介质是无菌的。水性介质以足以获得所需稠度的湿糊剂的量加入。在一个实施方案中，加入到干组合物中的液体的体积基本上对应于通过干燥步骤去除的液体的体积。如果较稀薄的糊剂组合物是合乎需要的，则可向干燥的糊剂中加入比最初通过干燥步骤去除的液体更多的液体。优选地，通过向其中布置有干燥的糊剂组合物的容器例如医用递送器件中加入一个量的液体对糊剂进行复水，甚至更优选地，通过向在真空膨胀、冷冻和干燥步骤过程中容纳糊剂的同一容器加入一个量的液体对糊剂进行复水。

在一个实施方案中，干组合物通过将容纳一个量的水性介质的第二容器与容纳干组合物的第一容器连接进行复水。容纳干组合物的第一容器优选为注射器，例如本文所公开的注射器的真空腔室。优选地，包含复水液体的容器基本上不含空气或其它气体。这样做的优势是，复水不依赖于容器相对于彼此在空间中的定向。

在一个实施方案中，第一容器的产物腔室内部为真空，即第一容器的产物腔室内部的压力低于周围环境的压力，即低于大气压。

在一个实施方案中，第二容器中的压力高于第一容器中的压力，所述压力差允许液体从第二容器自动流动到第一容器中。例如，这可通过第一容器的压力低于大气压而第二容器内的压力约为大气压来实现。因此，一旦打开分离两个容器的阀，水性介质就由于压力差而自动被抽入第一容器的产物腔室中。由此产生复水的糊剂，参见例如图12-13。

因此，在一个实施方案中，本公开书涉及一种用于复水干糊剂组合物的方法，其包括以下步骤：

a)提供第一容器，其包括含有干糊剂组合物的产物腔室和阀，优选其中所述产物腔室内的压力低于周围大气压，

b)提供包含水性介质的第二容器，优选其中所述第二容器内的压力高于所述第一容器的所述产物腔室内的压力，

c)使用合适的连接构件连接所述第一容器和所述第二容器，以及

d)打开所述阀。

在一个实施方案中，第二容器是可塌陷的容器，例如塑料袋。如图12-13中所示，一在连接到第一容器并打开阀后，袋就由于压力差而塌陷，由此允许液体从袋流动到产物腔室中并使糊剂复水。

在一个实施方案中，第二容器是包括柱塞的不可塌陷的容器，例如刚性或半刚性塑料容器。如图12-13中所示，一在连接到第一容器并打开阀后，在不向柱塞施加手动压力的情况下，柱塞就允许液体从水性介质容器流动到产物腔室中并使糊剂复水。

优选地，一在向布置于容器内的干组合物加入液体后在少于约30秒内、优选在少于约20秒内、更优选在少于约10秒内、甚至更优选在少于约5秒、例如少于约3秒、例如少于约2秒内就自发地形成即用型糊剂。复水的糊剂在使用前通常不需要进一步混合或其它形式的操作。因此，当干燥的糊剂组合物存在于医用递送器件例如注射器中时，可将其在加入液体后即刻通过将糊剂从医用递送器件挤出到出血伤口直接施用到患者，例如用于止血目的。

在一优选实施方案中，在少于约5秒，例如少于约3秒，例如少于约2秒内，形成即用型糊剂。

复水后，如图14中所示，可给容器(例如注射器，例如本文中所公开的注射器)装配适合于以更准确的方式施用糊剂的涂料器尖端。

在一个实施方案中，涂料器尖端可弯曲或可延展，并且将保持由使用者选择的合乎需要的配置，因此其保持在最佳角度以方便获取和准确的产物放置。此外，可以用一把护士敷料剪刀或类似类型的剪刀将其切割成合乎需要的长度。这些特征允许准确和方便地施用糊剂。在一个实施方案中，涂料器尖端基本上如WO 2011/047753中所述。

外包装

在一个实施方案中，在例如注射器例如本文中所公开的注射器或其它容纳单元内所容纳的干组合物被进一步容纳在外包装中，使得产物在使用前一直保持无菌。这将允许使用者去除外包装并将止血组合物转移到无菌区中。这时可以加入适量的水性介质，随后即用型止血糊剂在数秒内自发地形成而无需机械搅动、搅拌或混合。

外包装通常由柔性的、半刚性的或刚性的材料制成并且通常由例如塑料、铝箔和/或塑料压层等材料组成，其中塑料可选自由PET、PETG、PE、LLDPE、CPP、PA、PETP、METPET、Tyvek组成的组并且任选地用粘合剂例如聚氨基甲酸酯粘结或经过共挤压。

在一个实施方案中，外包装是铝箔外包装。

外包装优选地形成针对水分的完全屏障。

外包装优选地能够耐受灭菌处理，例如辐射灭菌处理。

灭菌

本公开书的干组合物优选是无菌的。可以利用所属领域中已知的任何合适的灭菌技术。灭菌优选地在包装步骤之后，即当干组合物容纳在外包装中时进行。因此，在一优选实施方案中，灭菌是终末灭菌。

灭菌是指有效地杀死或灭除传染性病原(例如真菌、细菌、病毒、朊病毒和孢子形式等)的任何过程。干组合物的灭菌可以通过例如施加热、化学品和辐照来实现。热灭菌包括高压灭菌(使用高温蒸汽)和干热；辐射灭菌包括X射线、γ射线和β射线、UV光和亚原子粒子；化学灭菌包括使用环氧乙烷气体、臭氧、含氯漂白剂、戊二醛、甲醛、邻苯二甲醛、过氧化氢和过乙酸。

在一个实施方案中，通过辐照(例如电离辐照)对干组合物进行灭菌，以便使组合物无菌。所述辐照可以包括电子束(β辐照)或γ辐照。辐照水平和灭菌条件(包括辐照组合物的时间)是提供无菌组合物的那些。灭菌条件与当前用于制备当前可用的止血松散粉末的那些条件类似。一旦获悉本公开书的优点，所属领域技术人员就能够容易地确定提供无菌组合物所必需的辐照水平。

当干燥产物中存在凝血酶或其它敏感生物活性剂时，通常利用约25kGy或更低的β辐照或γ辐照以终末灭菌形式进行灭菌。

在一个实施方案中，用环氧乙烷进行灭菌。

利用干热进行的灭菌通常可以通过将干止血组合物加热到100℃到250℃(例如约110℃到约200℃)的温度来进行。具体来说，温度范围可以是110-160℃，例如110-140℃，或120-180℃，或130-170℃，或130-160℃，或120-150℃。当干组合物含有凝血酶时，一般不使用热灭菌，因为热处理会使凝血酶失活。

在一个实施方案中，干止血组合物在包装后不经过灭菌。当干止血组合物通过无菌生产技术制造时，产物在置入外包装中时已经是无菌的并且不需要进一步灭菌。因此，在一个实施方案中，本公开书涉及由无菌技术生产的组合物。

医学用途

本公开书进一步涉及从干组合物获得的糊剂用于促进止血和/或伤口愈合的用途。

本公开书的糊剂例如可用于其中需要出血控制的一系列外科程序中。止血糊剂贴合到不规则表面上以迅速终止出血，并且其因此可用于在止血海绵无效的粗糙或不平坦表面上提供快速止血。

止血糊剂在需要时由医护人员、即医生或护士通过向含有一个量的生物相容性聚合物的容器例如注射器中加入液体直接在手术部位制备。生物相容性聚合物可以用液体预润湿或者基本上是干的(自由流动的粉末)。因此，糊剂通常在极其紧张的情况下制备，所以用于制备糊剂的过程必需简单并且快速，以确保尽可能快地遏制出血并且在制备糊剂时不会出错，由此护士的注意力可集中于外科医生的需要而不是制备止血剂。也很重要的是，糊剂的稠度适合用作止血糊剂，并且产物的稠度不受制备间和时间流逝影响。

当前可用的可流动糊剂产品(和)需要通过将生物相容性聚合物和液体在两个连接的注射器之间移动多次以获得基本上均匀的糊剂进行机械混合。如果在手术中需要所述产品，则通常在手术前在OR中预先制备所述产品，并且未用过的产品通常被丢弃，从而造成不必要的高OR成本。

本公开书的糊剂由于其减少或避免了对于机械混合步骤的需要而优于当前可用的可流动产品。本公开书的糊剂可以通过向包含干组合物的容器中加入一个量的水性介质，随后自发地(即在少于约30秒内，优选地在少于约20秒内，更优选地在少于约10秒内，甚至更优选地在少于约5秒，例如少于约3秒或甚至少于约2秒内)形成即用型止血糊剂来简单地制备。当本发明的干组合物如本文中所述被容纳在真空下的医用递送器件内时，水性介质由于压力差而自动被抽入产物腔室中，并且干组合物自发地复水成即用型可流动组合物。可将可流动的糊剂在与水性介质接触后的数秒内从医用递送器件挤出并施用给患者，例如施用到出血伤口。

待加入到干组合物中的液体的数量可以由所属领域技术人员调节。当加入正确量的液体时，如此形成的糊剂通常具有最佳稠度。对于常规糊剂来说情况并非总是如此，其中糊剂的稠度可能依赖于施加力和耗时的混合。不需要机械混合还意味着制备糊剂所花的时间更少，这进而提高了患者安全性，这两者都是因为可以更快速地将止血糊剂施加给患者并且简单的制备方法降低了止血糊剂制备期间出错的可能性。而且，本公开书的干组合物可降低手术室成本，因为制备如此简单且快速，不需要在手术前预制备当前的产物。

当干组合物内包含凝血酶时，本发明还具有优于常规糊剂的优点，因为本发明避免了当前制备可流动物质的方法中所涉及的耗时且易于出错的凝血酶稀释和加入步骤。

本发明的干组合物的另一个显著优点是，与例如当前的止血可流动试剂盒相比，可制备由较少组件组成的试剂盒。在OR中制备可流动的糊剂组合物所有所需要的是包含在医用递送器件内的如本文所述的干组合物以及包含用于复水的水性介质的容器。一在将这两者连接后，就自发地形成含有包括凝血酶在内的用于有效止血的所有必需试剂的即用型可流动糊剂，此时水性介质被自动抽入真空膨胀的干组合物中。因此，对于根据本公开书的方法制备的产物，不需要额外的注射器、小瓶适配器、针和混合碗。这意味着制造成本可以降低，同时确保良好的患者安全性，因为在手术过程中需要OR工作人员留心的组件更少。止血剂的无针制备也确保了OR工作人员的安全。

在一个实施方案中，本公开书涉及通过将本公开书的经复水糊剂施用到出血部位而在有需要的个体中遏制出血/促进止血的方法。

本公开书的糊剂可用于任何类型的外科，包括普通外科、心胸外科、血管外科、整形外科、儿科外科、结肠直肠外科、移植外科、肿瘤外科、创伤外科、内分泌外科、乳腺外科、皮肤外科、耳鼻喉科、妇科、口腔颌面外科、牙科外科、矫形外科、神经外科、眼科、足部外科、泌尿科。

在一个实施方案中，本公开书涉及通过将本公开书的糊剂施用到伤口处而在有需要的个体中促进伤口愈合的方法。

“伤口”泛指以不同方式引发且具有不同特征的皮肤和/或深部(皮下)组织的损伤(例如因为长期卧床导致的褥疮和由外伤诱发的伤口)。取决于伤口深度，可将伤口分类为四个等级中的一个：i)第I级：仅限于上皮的伤口；ii)第II级：延伸到真皮中的伤口；iii)第III级：延伸到皮下组织中的伤口；和iv)第IV级(或全厚度伤口)：暴露骨头(例如骨头压力点，例如大转子，或骶骨)的伤口。本公开书涉及使用本公开书的糊剂治疗以上提到的任何类型的伤口。

伤口的治疗原则上可以导致伤口愈合或伤口愈合加速。加速愈合可以是由于例如施用促进伤口愈合的物质所致。或者，伤口愈合可以通过预防细菌或病毒感染，或通过降低原本会延长伤口治疗过程的此类感染的风险来促进。

在一个实施方案中，本公开书涉及通过将本公开书的糊剂施用到受伤骨头/肌腱处而在有需要的个体中促进骨头和/或肌腱愈合的方法。

本文提到的“个体”可以是任何哺乳动物，包括但不限于啮齿目(Rodentia)的哺乳动物(例如小鼠和仓鼠)和兔型目(Logomorpha)的哺乳动物(例如兔)。哺乳动物优选来自食肉目(Carnivora)，包括猫科(猫)和犬科(狗)。哺乳动物更优选来自偶蹄目(Artiodactyla)(包括牛科(母牛)和猪科(猪))或奇蹄目(Perssodactyla)(包括马科(马))。哺乳动物最优选来自灵长目(Primate)、阔鼻小目(Ceboid)或Simoid(猴)或类人猿目(Anthropoid)(人和猿)。特别优选的哺乳动物是人。

在一个实施方案中，本公开书涉及真空膨胀的冷冻干燥的糊剂，例如本发明公开的干组合物，其用于治疗伤口，例如用于遏制出血或用于促进伤口愈合。

止血试剂盒

本公开书进一步涉及一种止血试剂盒，其包含本公开书的干组合物和与所述干组合物的量匹配的量的水性介质，使得一在加入所述水性介质后，具有适合用作止血糊剂的稠度的止血糊剂就将自发地、即在几秒内形成。

因此，在一个实施方案中，本公开书涉及一种止血试剂盒，其包括：

a)包含通过本公开书的方法获得的干组合物的第一容器，

b)包含水性介质的第二容器，和

c)任选的外包装。

在另一实施方案中，本公开书涉及一种止血试剂盒，其包括：

a)本发明公开的包含干组合物的注射器，

b)包含水性介质的容器，和

c)任选的外包装。

干组合物可以是任何干组合物，特别是一在加入水性介质后就形成(例如在几秒钟内自发地形成)具有适合用作止血糊剂的稠度的止血糊剂的干组合物，例如通过本公开书的方法获得的干组合物。

用于使糊剂复水的水性介质可以例如选自水、盐水、氯化钙溶液或缓冲水溶液。

在一个实施方案中，用于使干组合物复水的水性介质是水。优选地，选择水性介质的等渗性以使得一在向干组合物中加入水性介质后就将形成等渗糊剂。

在一个实施方案中，用于使干组合物复水的水性介质是盐水或氯化钙溶液。

在一个实施方案中，干组合物包含凝血酶。

在一个实施方案中，试剂盒进一步包括一个或多个涂料器尖端。

试剂盒可以任选地含有试剂盒的使用说明书。

实施例1

材料

50g明胶粉末(研磨的交联明胶海绵)

200ml缓冲液

xg多元醇

50％苯扎氯铵(BAC)

0.9％盐水溶液

设备

冷冻干燥器：Christ Alpha 1-4LSC

混合器：Kenwood,Major KM616

方法

缓冲溶液：

将2.0g±0.1g BAC(50％)加入到250mL蓝盖瓶中。

将98.0g±0.5g水加入到BAC中

使用磁力搅拌混合2分钟—这是BAC储备溶液

加入10g±0.5g BAC储备溶液

加入水达到2000mL标记

给量瓶塞上塞子并上下倒置几次

通过磁力搅拌混合5±1分钟

糊剂：

在混合器中在搅拌下将x g多元醇溶解于200ml缓冲溶液中。加入50g明胶粉末并且与溶解的多元醇混合直到获得均匀糊剂，大约5分钟。

冷冻干燥：

将获得的糊剂装入包括冻干旁路通道的10ml一次性塑料注射器(每个注射器5.5ml)中并且在-30℃下放置最少4小时。将冷冻的糊剂转移到冷冻干燥器中并且冷冻干燥大约15小时直到干燥。在干燥周期结束时，冻干器的架塌陷，从而移动柱塞并封闭冻干旁路通道。随后，使冻干器腔室中的压力达到环境压力，使产物腔室中保持真空。

复水：

通过将包含干组合物的注射器连接到含有水的可塌陷塑料袋(8ml)来使干止血组合物复水。不使用机械混合或搅拌。通过利用产物腔室内的真空向干组合物中加入水，并且保持组合物不被触碰直到再形成糊剂。注射器的产物腔室内的真空使得水从容纳水的容器被自动抽入注射器中。

结果

测试不同配方的复水时间，即在不使用任何种类的机械搅动的情况下适用于止血目的的糊剂自发形成所需的时间。

包含不同多元醇的糊剂根据上文的指导被制备、干燥并复水。下表显示糊剂的内容物。

	湿含量[g]	干含量[g]	湿含量[％]	干含量[％]
					明胶	50.00	50.00	18.52	70.41
木糖醇	20.00	20.00	7.41	28.17
					BAC	0.01	0.01	0.00	0.01
H2O	200	1.00	74.07	1.41
					总计	270.01	71.01	100	100

	湿含量[g]	干含量[g]	湿含量[％]	干含量[％]
					明胶	50.00	50.00	18.52	70.41
海藻糖	20.00	20.00	7.41	28.17
					BAC	0.01	0.01	0.00	0.01
H2O	200	1.00	74.07	1.41
					总计	270.01	71.01	100	100

	湿含量[g]	干含量[g]	湿含量[％]	干含量[％]
					明胶	50.00	50.00	18.52	70.41
麦芽糖醇	20.00	20.00	7.41	28.17
					BAC	0.01	0.01	0.00	0.01
H2O	200	1.00	74.07	1.41
					总计	270.01	71.01	100	100

	湿含量[g]	干含量[g]	湿含量[％]	干含量[％]
					明胶	50.00	50.00	18.52	70.41
山梨糖醇	20.00	20.00	7.41	28.17
					BAC	0.01	0.01	0.00	0.01
H2O	200	1.00	74.07	1.41
					总计	270.01	71.01	100	100

干组合物中的多元醇:明胶比率是大约0.4:1。

下表和图1中显示根据上表制备的包含不同多元醇的糊剂的自发复水时间。对于每种多元醇，实验重复5次。

实验显示不同种类的多元醇都可用于制备冷冻干燥的明胶糊剂，所述明胶糊剂一在加入水性介质后就将在少于约30秒内自发地复水。经过复水的糊剂具有适合直接作为止血糊剂使用的稠度。

实施例2.凝血酶

凝血酶以2500IU/产物的理论浓度包含在下文的糊剂配方中。如实施例1中所述在室温(约20℃)下制备糊剂并对其进行混合。

干燥的糊剂的自发复水时间约为5秒。下表分别说明糊剂(湿)和经干燥组合物(干)中的糊剂配方的内容物。

总多元醇浓度(即甘露糖醇和甘油)在糊剂中是13.56％并且在干燥后是42.27％。

干组合物中的多元醇:明胶比率是大约0.75:1。

如实施例1中所述通过冷冻干燥来干燥糊剂并对其进行复水。

测量经复水糊剂中的凝血酶活性。结果显示于下表中。

没有测量到经复水糊剂中的凝血酶活性损失。

这些结果显示，在低温下进行糊剂的混合以避免凝血酶活性损失并不是严格必需的，因为当在环境温度下进行混合时没有发现凝血酶活性的降低。

实施例3.在冷冻干燥之前使糊剂真空膨胀

包含甘露糖醇的明胶糊剂基本上如实施例1中所述制备并等分到10ml一次性注射器中，每个注射器接收4g糊剂。下表分别说明糊剂(湿)和经干燥组合物(干)中的糊剂配方的内容物。

所制备的糊剂直接如实施例1中所述冷冻干燥(标准冻干)，或者先经受约850毫巴的低真空，随后在在不解除真空的情况下冷冻到-40℃的步骤，最后基本上如实施例1中所述冷冻干燥(真空膨胀冻干)。真空膨胀在环境温度即约20℃下进行。一在将糊剂暴露于降低的压力即真空后，糊剂的体积几乎瞬间膨胀。

在真空膨胀之前，明胶糊剂的密度大约为约0.7g/ml。在真空膨胀之后，糊剂的密度大约为约0.5g/ml，对应于糊剂的密度以约0.72的系数降低，同时糊剂的体积以约1.4的系数增加。

冻干的产物基本上如实施例1中所述通过向冻干的产物中加入5.5ml盐水进行复水，并测量糊剂完全吸收盐水的时间量。注射器的产物腔室内的真空自动抽入液体。真空膨胀的糊剂和标准糊剂两者在复水后均为柔软和潮湿的并且表现出相当的吸收能力。经复水的糊剂的稠度被认为适合直接用于患者。经复水的糊剂的颜色为略微灰白色/微黄色。

经干燥的糊剂组合物的复水时间示于下表和图2中。实验重复5次(n＝5)。

n	标准冻干	真空膨胀冻干
			1	7	1
2	9	2
			3	9	1
4	10	1
			5	9	1
平均复水时间[秒]	8.8	1.2
			标准差	1.1	0.4

本发明人惊讶地发现，通过使糊剂在冷冻前经受真空，干燥的止血糊剂的复水速度是未经真空膨胀的糊剂的7倍以上。复水不需要任何种类的机械搅动、混合或搅拌，并且在几秒钟内形成具有适合直接用于止血程序的稠度的即用型止血糊剂。

实施例4.真空膨胀的干糊剂的密度

包含甘露糖醇的明胶糊剂如实施例1和3中所述制备。如实施例3中所述，使用不同的真空水平(1000毫巴(非真空)、850毫巴和600毫巴)使糊剂真空膨胀，然后冷冻和冷冻干燥。

干糊剂组合物的密度示于下表和图15中。

干组合物自发地复水而形成适合止血和/或伤口愈合用途的柔软且潮湿的糊剂。

结果显示可在干燥之前使用不同的压力使糊剂膨胀。

结果进一步显示，用于膨胀的压力影响干糊剂组合物的密度。事实上，压力与干组合物的密度之间似乎具有良好的相关性，较低的压力导致最终的干糊剂组合物的较低的密度。

实施例5.真空膨胀和多元醇浓度的影响

基本上如实施例1中所述制备包含不同量的甘露糖醇(无甘露糖醇、中等甘露糖醇(大约3.9％)或高甘露糖醇(大约7.4％))的明胶糊剂，例外是使用Virtis Genesis 35冷冻干燥器。将各份糊剂等分到具有真空旁路的10ml一次性注射器中，每个注射器接收4g糊剂。下表分别说明糊剂(湿)和经干燥组合物(干)中的糊剂配方的内容物。

所制备的糊剂直接如实施例1中所述冷冻干燥(未膨胀)，或者通过先暴露于约850毫巴的低真空而真空膨胀，随后在不解除真空下冷冻到-40℃的步骤，最后基本上如实施例1中所述冷冻干燥(真空膨胀)。真空膨胀在环境温度即约20℃下进行。

冻干的产物通过向注射器中的冻干的产物中加入5.5ml盐水进行复水，并测量糊剂完全吸收盐水的时间量。未进行机械混合。经复水的糊剂是柔软和潮湿的并且表现出相当的吸收能力。然而，不含甘露糖醇的未膨胀的明胶糊剂的稠度劣于含有甘露糖醇的糊剂和/或通过真空膨胀的糊剂。经复水的糊剂的颜色为略微灰白色/微黄色。

经干燥的糊剂组合物的平均复水时间示于下表和图21中。每个实验重复5次(n＝5)。

*经复水的糊剂的稠度明显劣于含有甘露糖醇的糊剂和/或通过真空膨胀的糊剂。

冷冻干燥之前对明胶糊剂的真空膨胀大大缩短含有甘露糖醇和不含甘露糖醇的干燥明胶糊剂组合物的复水时间。事实上，真空膨胀能够将明胶糊剂的自发复水时间缩短到约1/3或更短。通过在干组合物中包含甘露糖醇进一步改善即缩短了自发复水时间。甘露糖醇还改善了经复水的糊剂的稠度。

也如上制备了含有7.4％聚乙二醇(PEG)的明胶糊剂，对其真空膨胀并冷冻干燥。下表分别说明糊剂(湿)和经干燥组合物(干)中的糊剂配方的内容物。

包含PEG的经干燥的糊剂组合物的平均复水时间是8.2+/-2.4秒(n＝5)。含有PEG的真空膨胀的干燥明胶糊剂的复水速度为对照(未加入任何亲水性化合物的真空膨胀的明胶糊剂)的约1.7倍并且具有更好的稠度。结果示于图22中。

本发明人还发现，来自单一批次糊剂的最先等分的样品中的糊剂等分试样的体积一般高于最后等分的样品中的糊剂等分试样的体积。这被认为是由于随时间流逝糊剂发生部分塌陷，从而导致糊剂密度不合需要地变化。这样的密度变化可导致不合需要的复水时间的变化。干燥之前使糊剂真空膨胀被认为能够减小或甚至消除这样的可在从单一糊剂批次等分的第一份糊剂与最后一份糊剂之间存在的糊剂密度差异。

总之，结果表明，干燥之前的真空膨胀大大提高复水速率并且就复水时间来说能够提供更一致的结果。自发复水速率可以通过在干燥的糊剂组合物中包含增加的量的多元醇进一步提高。另外，在干燥的糊剂组合物中包含亲水性化合物例如多元醇也改善经复水的糊剂的稠度。

本公开书的更多细节

在以下条项中提供本公开书的更多细节：

1.一种用于制备干组合物的方法，其包括以下连续步骤：

a.提供粉末形式的试剂和水性介质，

b.混合所述粉末形式的试剂和所述水性介质以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，

d.冷冻所述膨胀的糊剂，以及

e.干燥所述糊剂。

2.根据第1项所述的方法，其中所述减压是下述的压力：比环境压力低至少50毫巴，例如比环境压力低至少100毫巴，例如比环境压力低至少150毫巴，例如比环境压力低至少200毫巴，例如比环境压力低至少250毫巴，例如比环境压力低至少300毫巴，例如比环境压力低至少350毫巴，例如比环境压力低至少400毫巴，例如比环境压力低至少450毫巴，例如比环境压力低至少500毫巴，例如比环境压力低至少550毫巴，例如比环境压力低至少600毫巴，例如比环境压力低至少650毫巴，例如比环境压力低至少700毫巴，例如比环境压力低至少750毫巴，例如比环境压力低至少800毫巴，例如比环境压力低至少850毫巴，例如比环境压力低至少900毫巴。

3.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述糊剂的体积由于所述减压以下述系数增加：约1.05的系数到约2.0的系数，例如约1.1的系数到约1.8的系数，例如约1.2的系数到约1.6的系数。

4.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述糊剂的密度由于所述真空膨胀以至少0.95的系数降低，例如由于所述真空膨胀以至少0.90的系数(例如以至少0.85的系数，例如以至少0.80的系数，例如以至少0.75的系数，例如以至少0.70的系数，例如以至少0.65的系数，例如以至少0.60的系数，例如以至少0.55的系数，例如以至少0.50的系数)降低。

5.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是生物相容性聚合物。

6.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是交联的。

7.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是生物可吸收的。

8.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是明胶。

9.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述干燥是冷冻干燥。

10.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述干燥产生包含少于约5％的水(优选少于约2％的水)的干组合物。

11.根据前述项中任一项所述的方法，其中将所述粉末形式的试剂和所述水性介质与一种或多种亲水性化合物混合。

12.根据第11项所述的方法，其中干燥之前的所述糊剂包含约2％到约40％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约30％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约25％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约20％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约18％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约17％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约16％的一种或多种亲水性化合物，例如约2％到约15％的一种或多种亲水性化合物。

13.根据第11到12项中任一项所述的方法，其中干燥之前的所述糊剂包含：

a.约2％到约40％的一种或多种亲水性化合物，

b.约10％到约60％的所述粉末形式的试剂，和

c.约50％到约90％的水。

14.根据第11到12项中任一项所述的方法，其中干燥之前的所述糊剂包含：

a.约5％到约20％的一种或多种亲水性化合物，

b.约15％到约25％的所述粉末形式的试剂，和

c.约60％到约80％的水。

15.根据第11到14项中任一项所述的方法，其中所述一种或多种亲水性化合物是一种或多种多元醇。

16.根据第15项所述的方法，其中所述一种或多种多元醇选自糖醇、糖和/或它们的衍生物。

17.根据第16项所述的方法，其中所述一种或多种糖醇选自由乙二醇、甘油、赤藓糖醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、卫矛糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、庚七醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇和聚多羟基糖醇组成的组。

18.根据第15到17项中任一项所述的方法，其中所述一种或多种多元醇是甘露糖醇和任选的一种或多种其它亲水性化合物。

19.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述干组合物进一步包含一种或多种能够刺激止血、伤口愈合、骨头愈合、组织愈合和/或肌腱愈合的生物活性剂。

20.根据第19项所述的方法，其中所述生物活性剂是凝血酶。

21.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述水性介质选自由水、盐水、氯化钙溶液和缓冲水性介质组成的组。

22.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述方法包括将所述干组合物置于外包装例如铝箔包装中的另一步骤。

23.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述方法包括对所述干组合物进行灭菌的另一步骤。

24.根据前述项中任一项所述的方法，其中所述干组合物在少于约30秒内、优选在少于约20秒内、更优选在少于约10秒内、甚至更优选在少于约5秒、例如少于约3秒、例如少于约2秒内在无机械混合的情况下复水以形成即用型糊剂。

25.一种湿糊剂组合物，其为真空膨胀的湿糊剂，其密度为约0.2g/ml到约0.6g/ml，更优选约0.3g/ml到约0.6g/ml，例如约0.4g/ml到约0.5g/ml。

26.一种干组合物，其可通过根据第1到24项中任一项所述的方法获得。

27.一种干组合物，其为真空膨胀的冷冻干燥的糊剂，其密度为约1mg/ml到约40mg/ml，例如约5mg/ml到约35mg/ml，例如约10mg/ml到约35mg/ml。

28.一种用于将冷冻干燥的糊剂保留在真空中的注射器，其包括：

-空筒，其包括：

-真空腔室，其用于容纳所述糊剂，并且具有开放近端和具有第一流体开口的远端，

-连接器部分，其具有第二流体开口并且适合于连接到液体容器，以及

-压力腔室，其连接所述连接器部分和所述真空腔室的所述远端，

-压力阀，其位于所述压力腔室中并且适合于在第一位置密封所述第一流体开口和所述第二流体开口以及在第二位置在所述第一流体开口与所述第二流体开口之间形成/产生流体通路，

-柱塞，其被配置成穿过所述开放近端在所述真空腔室中轴向移位，以及

-一个或多个真空旁路通道。

29.根据第28项所述的注射器，其中所述空筒包括在所述真空腔室的近端的法兰。

30.根据第28到29项中任一项所述的注射器，其中所述注射器适合于保留根据第26项所述的干组合物。

31.根据第28到30项中任一项所述的注射器，其中所述冷冻干燥的糊剂是通过根据第1到24项中任一项所述的方法获得。

32.根据第28到31项中任一项所述的注射器，其中所述连接器部分是鲁尔旋锁式或鲁尔滑锁式连接器，优选公鲁尔旋锁式或鲁尔滑锁式连接器。

33.根据第28到32项中任一项所述的注射器，其中所述连接器部件包括带螺纹的部件。

34.根据第28到33项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀位于所述压力腔室中并且适合于在所述压力腔室中在第一位置密封所述第一流体开口和所述第二流体开口以及在所述压力腔室中在第二位置在所述第一流体开口与所述第二流体开口之间形成/产生流体通路。

35.根据第28到34项中任一项所述的注射器，其中所述压力腔室位于所述真空腔室与所述第二流体开口之间。

36.根据第28到35项中任一项所述的注射器，其中所述压力腔室包括邻接所述真空腔室的远端的近端和邻接所述连接器部分的近端的远端。

37.根据第28到36项中任一项所述的注射器，其中所述连接器部分包括邻接所述压力腔室的远端的近端和适合于连接到液体容器的远端。

38.根据第28到37项中任一项所述的注射器，其中所述第二流体开口形成穿过所述连接器部分的细长通道。

39.根据第28到38项中任一项所述的注射器，其中所述第二流体开口包括邻接所述压力腔室的远端的近端和用于流体进入和排出的远端。

40.根据第28到39项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀适合于在所述第一位置密封所述第一流体开口的远端和所述第二流体开口的近端。

41.根据第28到33项中任一项所述的注射器，其中所述压力腔室的内部是圆柱形的。

42.根据第28到41项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括凹槽，并且其中所述凹槽在所述压力阀的所述第二位置形成所述流体通路。

43.根据第28到42项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括两个由凹槽轴向分开的圆柱形部分，并且其中所述凹槽在所述压力阀的所述第二位置形成所述流体通路。

44.根据第28到43项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀的所述第一位置和所述第二位置相对于所述注射器的纵轴径向移位。

45.根据第28到44项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀在所述第一位置自所述压力腔室突出。

46.根据第28到45项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀在所述第二位置与所述压力腔室齐平和/或邻接所述压力腔室。

47.根据第28到46项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括在所述压力阀一端的自所述压力腔室突出的阀法兰，并且其中所述阀法兰在所述第一位置自所述压力腔室突出，并且其中所述阀法兰在所述第二位置与所述压力腔室齐平和/或邻接所述压力腔室。

48.根据第28到47项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀的所述第一位置和所述第二位置可旋转地移位。

49.根据第28到48项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括在所述压力阀的所述第二位置形成所述流体通路的贯穿通道。

50.根据第28到49项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括圆柱形部分，所述圆柱形部分具有在所述压力阀的所述第二位置形成所述流体通路的贯穿径向通道。

51.根据第28到50项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀和所述压力腔室被配置为使得所述压力阀的所述第二位置是锁定位置。

52.根据第28到51项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀和所述压力腔室被配置为使得所述压力阀在所述压力阀的所述第二位置轴向锁定。

53.根据第28到52项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀和所述压力腔室被配置为使得所述压力阀在所述压力阀的所述第二位置可旋转地锁定。

54.根据第28到53项中任一项所述的注射器，其中所述一个或多个真空旁路通道被配置为在所述真空腔室与所述环境大气之间提供流体例如气体连通。

55.根据第28到54项中任一项所述的注射器，其中所述注射器被配置为使得所述柱塞在所述真空腔室的内部在所述柱塞的至少第一轴向位置可密封地接合所述真空腔室，并且使得在所述真空腔室的内部在所述柱塞的至少第二轴向位置经由所述一个或多个真空旁路通道横跨所述柱塞建立流体连通。

56.根据第28到55项中任一项所述的注射器，其中所述一个或多个真空旁路通道被配置为在所述真空腔室的内部在所述柱塞的预定轴向位置切断所述真空腔室与所述柱塞之间的密封。

57.根据第28到56项中任一项所述的注射器，其中所述一个或多个真空旁路通道在所述真空腔室中形成。

58.根据第28到57项中任一项所述的注射器，其中所述一个或多个真空旁路通道是在所述真空腔室近端的内表面上形成的一个或多个纵向凹槽。

59.根据第28到58项中任一项所述的注射器，其中所述一个或多个真空旁路通道在所述柱塞中形成。

60.根据第28到59项中任一项所述的注射器，其中所述空筒以单片材料形成。

61.根据第28到60项中任一项所述的注射器，其中所述空筒适合于通过单周期注射成型制造。

62.根据第28到61项中任一项所述的注射器，其中所述真空腔室、所述压力腔室和所述连接器部分作为单独元件形成并且被配置为在所述注射器的制造过程中进行组装。

63.根据第28到62项中任一项所述的注射器，其中所述压力腔室和所述连接器部分作为一个元件形成并且被配置为在所述注射器的制造过程中与所述真空腔室进行组装。

64.根据第28到63项中任一项所述的注射器，其中所述真空腔室和所述压力腔室作为一个元件形成并且被配置为在所述注射器的制造过程中与所述连接器部分进行组装。

65.根据第28到64项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括孔，并且其中所述孔在所述压力阀的所述第二位置形成至少一部分所述流体通路，所述孔优选在所述空筒的纵向延伸。

66.根据第28到65项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括一个或多个突出部，优选侧向延伸的一个或者多个突出部，例如横向于所述流体通路延伸的一个或者多个突出部。

67.根据第28到66项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀在所述第一位置从所述压力腔室径向和/或横向突出，并且其中所述压力阀在所述第二位置与所述压力腔室齐平或完全陷入所述压力腔室中。

68.根据第28到67项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括顶部表面，其中所述顶部表面在所述第二位置与所述压力腔室的顶部表面齐平。

69.根据第28到68项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀包括圆形顶部表面，所述圆形顶部表面被配置为在所述压力阀的所述第二位置匹配所述压力腔室的圆形顶部表面。

70.根据第28到69项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀和所述压力腔室被配置为使得所述压力阀在所述第一位置横向和/或径向受限。

71.根据第28到70项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀和所述压力腔室被配置为使得所述压力阀在所述第一位置通过所述压力阀上的一个或多个突出部横向和/或径向受限。

72.根据第28到71项中任一项所述的注射器，其中所述压力腔室的内侧壁包括适合于限制所述压力阀在所述第一位置的横向和/或径向移位的狭窄部。

73.根据第28到72项中任一项所述的注射器，其中所述压力阀和所述压力腔室被配置为使得所述压力阀可从所述压力腔室的一侧优选仅从所述压力腔室的一侧插入。

74.一种容器，其包括：

a.产物腔室，其包含能够一在加入水性介质后就形成糊剂的干组合物，其中所述产物腔室内的压力低于所述产物腔室外的压力，以及

b.阀。

75.根据第74项所述的容器，其为注射器，例如一次性塑料注射器，例如根据第29到73项中任一项所述的注射器。

76.一种用于使干组合物复水的方法，其包括以下步骤：

a.提供根据第74到75项中任一项所述的容器，所述容器是第一容器，

b.提供包含水性介质的第二容器，其中所述第二容器内的压力高于所述第一容器的所述产物腔室内的压力，

c.使用合适的连接构件连接所述第一容器和所述第二容器，以及

d.打开所述阀。

77.一种用于使干组合物复水的方法，其包括以下步骤：

a.提供根据第29到73项中任一项所述的注射器，其包含能够一在加入水性介质后就形成糊剂的干组合物，其中所述干组合物位于所述真空腔室中并且其中所述真空腔室内的压力低于所述真空腔室外的压力，并且其中所述注射器的所述压力阀被布置在所述第一位置，

b.提供包含水性介质的第二容器，

c.使用合适的连接构件经由所述注射器的所述连接器部分连接所述注射器和所述第二容器，以及

d.将所述注射器的所述压力阀移动到所述第二位置，从而在所述注射器的所述真空腔室与所述第二容器之间提供流体连接。

78.根据第76到77项中任一项所述的方法，其中所述干组合物在少于约30秒内、优选在少于约20秒内、更优选在少于约10秒内、甚至更优选在少于约5秒、例如少于3秒、例如少于2秒内复水。

79.根据第76到78项中任一项所述的方法，其中包含所述水性介质的所述第二容器选自：i)可塌陷的容器，例如塑料袋，以及ii)包括柱塞的不可塌陷的容器。

80.一种止血试剂盒，其包含：

a)包含干组合物的根据第29到73项中任一项所述的注射器，

b)包含水性介质的容器，和

c)任选的外包装。

81.根据第80项所述的止血试剂盒，其中所述干组合物是被配置为一在加入所述水性介质后就形成(例如在几秒钟内自发形成)具有适合用作止血糊剂的稠度的止血糊剂的干组合物。

82.根据第80到81项中任一项所述的止血试剂盒，其中所述干组合物是通过根据第1到24项中任一项所述的方法获得的。

83.一种止血试剂盒，其包含：

a)包含通过根据第1到24项中任一项所述的方法获得的干组合物的容器或根据第74到75项中任一项所述的容器，

b)包含水性介质的容器，和

c)任选的外包装。

Claims (50)

1.一种用于制备干组合物的方法，其包括以下连续步骤：

a.提供粉末形式的试剂和水性介质，

b.混合所述粉末形式的试剂和所述水性介质以获得糊剂，

c.使所述糊剂经受减压，从而使所述糊剂膨胀，

d.冷冻经膨胀的糊剂，以及

e.干燥所述糊剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述减压是比环境压力低至少10毫巴的压力。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述减压是比环境压力低至少50毫巴的压力。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述减压是比环境压力低至少100毫巴的压力。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述减压是比环境压力低至少150毫巴的压力。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述减压是比环境压力低至少200毫巴的压力。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述糊剂的体积由于所述减压以1.05的系数到2.0的系数增加。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述糊剂的密度由于真空膨胀至少以0.95的系数降低。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是生物相容性聚合物。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述粉末形式的试剂由在水性介质中不溶的粉末粒子组成。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是交联的。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述粉末形式的试剂是生物可吸收的。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述粉末形式的试剂包含明胶或由明胶组成。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述明胶从已通过干热处理交联的微粉化明胶海绵获得。

15.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)中的混合引入均匀分散于整个所述糊剂当中的不连续气相。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述干燥是冷冻干燥。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述干燥产生包含少于5％的水的干组合物。

18.根据权利要求1所述的方法，其中所述干燥产生包含少于2％的水的干组合物。

19.根据权利要求1所述的方法，其中将所述粉末形式的试剂和所述水性介质进一步与一种或多种亲水性化合物混合。

20.根据权利要求19所述的方法，其中干燥之前的所述糊剂包含2％到40％的一种或多种亲水性化合物。

21.根据权利要求19所述的方法，其中干燥之前的所述糊剂包含：

a.2％到40％的一种或多种亲水性化合物，

b.10％到60％的所述粉末形式的试剂，和

c.50％到90％的水。

22.根据权利要求19所述的方法，其中亲水性化合物:生物相容性聚合物的比率为0.1:1到0.8:1。

23.根据权利要求19所述的方法，其中所述一种或多种亲水性化合物是一种或多种多元醇。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述一种或多种多元醇选自糖醇、糖和/或它们的衍生物。

25.根据权利要求23所述的方法，其中所述一种或多种多元醇是糖醇。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述一种或多种糖醇选自由乙二醇、甘油、赤藓糖醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、卫矛醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、庚七醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇和聚多羟基糖醇组成的组。

27.根据权利要求25所述的方法，其中所述糖醇是甘露糖醇。

28.根据权利要求19所述的方法，其中所述一种或多种亲水性化合物是聚乙二醇(PEG)。

29.根据权利要求1所述的方法，其中所述干组合物进一步包含一种或多种能够刺激止血、伤口愈合、骨头愈合、组织愈合和/或肌腱愈合的生物活性剂。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述生物活性剂是凝血酶。

31.根据权利要求1所述的方法，其中所述干组合物进一步包含挤出增强剂。

32.根据权利要求31所述的方法，其中所述挤出增强剂是白蛋白。

33.根据权利要求1所述的方法，其中所述水性介质选自由水、盐水、氯化钙溶液和缓冲水性介质组成的组。

34.根据权利要求1所述的方法，其中将步骤b)中获得的糊剂转移到适合所述糊剂的膨胀、冷冻和干燥的容器中。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述容器是适合用于复水所述干组合物和分配糊剂的医用递送器件。

36.根据权利要求34所述的方法，其中所述容器是注射器。

37.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括将所述干组合物置于外包装中的另一步骤。

38.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括对所述干组合物进行灭菌的另一步骤。

39.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括向所述干组合物中加入适量水性介质从而获得糊剂形式的经复水的组合物。

40.根据权利要求1所述的方法，其中所述干组合物在少于30秒内在无机械混合的情况下复水以形成即用型糊剂。

41.根据权利要求39所述的方法，其中所述糊剂形式的经复水的组合物是可流动的组合物。

42.根据权利要求39所述的方法，其中所述糊剂形式的经复水的组合物是均匀的。

43.一种通过根据权利要求1到38中任一权利要求所述的方法获得的干组合物。

44.根据权利要求43所述的干组合物用于制备用于伤口的治疗的药物中的用途。

45.一种容器，其包括：

a.产物腔室，其包含根据权利要求43所述的干组合物，其中所述产物腔室内的压力低于所述产物腔室外的压力，以及

b.阀。

46.根据权利要求45所述的容器，其为医用递送器件。

47.一种用于使干组合物复水的方法，其包括以下步骤：

a.提供权利要求45所述的容器，所述容器是第一容器，

b.提供包含水性介质的第二容器，

c.使用合适的连接构件连接所述第一容器和所述第二容器，以及

d.打开所述阀。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述干组合物在少于30秒内复水。

49.根据权利要求47所述的方法，其中包含所述水性介质的所述第二容器选自i)可塌陷的容器，以及ii)包括柱塞的不可塌陷的容器。

50.一种止血试剂盒，其包含：

a.包含通过根据权利要求1到38中任一权利要求所述的方法获得的干组合物的第一容器或根据权利要求45所述的容器，

b.包含水性介质的第二容器，和

c.任选的外包装。