CN105339389A - 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体 - Google Patents

针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体 Download PDF

Info

Publication number
CN105339389A
CN105339389A CN201480036088.0A CN201480036088A CN105339389A CN 105339389 A CN105339389 A CN 105339389A CN 201480036088 A CN201480036088 A CN 201480036088A CN 105339389 A CN105339389 A CN 105339389A
Authority
CN
China
Prior art keywords
seqidno
aminoacid sequence
residue
sequence shown
chain immunoglobulin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201480036088.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105339389B (zh
Inventor
D·J·金
M·凯瑞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anaptysbio Inc
Original Assignee
Anaptysbio Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anaptysbio Inc filed Critical Anaptysbio Inc
Publication of CN105339389A publication Critical patent/CN105339389A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105339389B publication Critical patent/CN105339389B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

本发明涉及结合程序性死亡-1(PD-1)蛋白的分离的免疫球蛋白重链多肽和分离的免疫球蛋白轻链多肽。本发明提供了PD-1结合剂，其包括上述免疫球蛋白重链多肽和免疫球蛋白轻链多肽。本发明还提供了相关的载体、组合物以及使用所述PD-1结合剂来治疗癌症或感染性疾病的方法。

Description

针对程序性死亡-1(PD-1)的抗体
对以电子形式提交的材料的参考并入
与本申请同时提交的计算机可读的核苷酸/氨基酸序列表通过引用整体并入本申请，并明确为如下：一个45,084字节的ASCII(文本)文件，命名为“716746_ST25.TXT”，创建于2014年5月1日。
发明背景
程序性死亡1(PD-1)(也称为程序性细胞死亡1)是具有268个氨基酸的I型跨膜蛋白，其最初是通过对发生凋亡的小鼠T细胞系的消减杂交而被鉴定的(Ishidaetal.,EmboJ.,11:3887-95(1992))。PD-1是T细胞调节物CD28/CTLA-4家族的成员，并且在活化的T细胞、B细胞和髓系细胞上表达(Greenwaldetal.,Annu.Rev.Immunol.,23:515-548(2005)；和Sharpeetal.,Nat.Immunol.,8:239-245(2007))。
已经鉴定了PD-1的两种配体：PD配体1(PD-L1)和PD配体2(PD-L2)，两者都属于B7蛋白超家族(Greenwaldetal.,同上)。PD-L1在多种细胞类型中表达，包括肺细胞、心脏细胞、胸腺细胞、脾细胞和肾细胞(参见，例如，Freemanetal.,J.Exp.Med.,192(7):1027-1034(2000)；和Yamazakietal.,J.Immunol.,169(10):5538-5545(2002))。用脂多糖(LPS)和GM-CSF处理后巨噬细胞和树突细胞(DC)上PD-L1的表达上调，并且经由T细胞和B细胞受体信号转导，T细胞和B细胞上PD-L1的表达得到上调。PD-L1还在多种鼠肿瘤细胞系中表达(参见，例如，Iwaietal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,99(19):12293-12297(2002)；和Blanketal.,CancerRes.,64(3):1140-1145(2004))。与此相反，PD-L2呈现出更受局限的表达模式并且主要由抗原呈递细胞(例如，树突细胞和巨噬细胞)和某些肿瘤细胞系表达(参见，例如，Latchmanetal.,Nat.Immunol.,2(3):261-238(2001))。无论在肿瘤微环境内的肿瘤细胞、间质或是其他细胞上，肿瘤中PD-L1的高表达都与较差的临床预后相关，据推测这是由于其在肿瘤中抑制效应T细胞并上调调节性T细胞(Treg)。
PD-1负调节T细胞的活化，并且这种抑制功能与胞质结构域内的基于免疫受体酪氨酸转换基序(ITSM)有联系(参见，例如，Greenwaldetal.,同上；和Parryetal.,Mol.Cell.Biol.,25:9543-9553(2005))。PD-1的缺乏会导致自身免疫。例如，已经显示PD-1敲除的C57BL/6小鼠发展出狼疮样综合症(参见，例如，Nishimuraetal.,Immunity,11:141-1151(1999)。在人类中，PD-1基因上的单核苷酸多态性与以下疾病的高发生率相关：系统性红斑狼疮、1型糖尿病、类风湿性关节炎和多发性硬化发展(参见，例如，Nielsenetal.,TissueAntigens,62(6):492-497(2003)；Bertsiasetal.,ArthritisRheum.,60(1):207-218(2009)；Nietal.,Hum.Genet.,121(2):223-232(2007)；Tahoorietal.,Clin.Exp.Rheumatol.,29(5):763-767(2011)；和Kroneretal.,Ann.Neurol.,58(1):50-57(2005))。PD-1的异常表达也参与一些病理(例如肿瘤的免疫逃逸和慢性病毒感染)中的T细胞障碍(参见，例如，Barberetal.,Nature,439:682-687(2006)；和Sharpeetal.,同上)。
最近的研究证实，PD-1诱导的T细胞抑制还参与抑制抗肿瘤免疫。例如，PD-L1在多种人和小鼠肿瘤上表达，并且在肿瘤上PD-1与PD-L1的结合导致T细胞的抑制以及肿瘤的免疫逃避和保护作用(Dongetal.,Nat.Med.,8:793-800(2002))。肿瘤细胞表达PD-L1与其在体外抵抗抗肿瘤T细胞的裂解作用直接相关(Dongetal.,同上；andBlanketal.,CancerRes.,64:1140-1145(2004))。PD-1敲除小鼠能抵抗肿瘤侵袭(Iwaietal.,Int.Immunol.,17:133-144(2005))，并且当来自PD-1敲除小鼠的T细胞被过继转移到带有肿瘤的小鼠中时，能高度有效地产生肿瘤排斥(Blanketal.,同上)。使用单克隆抗体阻断PD-1的抑制性信号能增强小鼠中宿主的抗肿瘤免疫(Iwaietal.,同上；andHiranoetal.,CancerRes.,65:1089-1096(2005))，并且肿瘤中PD-L1的高表达水平与许多人癌症类型的预后不良相关(Hamanishietal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,104:3360-335(2007),Brownetal.,J.Immunol.,170:1257-1266(2003)；andFliesetal.,YaleJournalofBiologyandMedicine,84(4):409-421(2011))。
鉴于上述情况，已经开发出了用于抑制PD-1活性来治疗各种类型癌症以及用于免疫增强(例如，来治疗感染性疾病)的策略(参见，例如，Asciertoetal.,Clin.Cancer.Res.,19(5):1009-1020(2013))。在这方面，已经开发了靶向PD-1的单克隆抗体用于治疗癌症(参见，例如，Weber,Semin.Oncol.,37(5):430-4309(2010)；和Tangetal.,CurrentOncologyReports,15(2):98-104(2013))。例如，在I期临床试验中，nivolumab(也称为BMS-936558)在非小细胞肺癌、黑素瘤和肾细胞癌中产生了完全应答或部分应答(参见，例如，Topalian,NewEnglandJ.Med.,366:2443-2454(2012))，且其目前正处于III期临床试验。MK-3575是针对PD-1的人源化单克隆抗体，其已经在I期临床试验中显示出抗肿瘤活性的证据(参见，例如，Patnaiketal.,2012AmericanSocietyofClinicalOncology(ASCO)AnnualMeeting,摘要编号2512)。另外，最近的证据表明，靶向PD-1的疗法能增强针对病原体(例如HIV)的免疫应答(参见，例如，Porichisetal.,Curr.HIV/AIDSRep.,9(1):81-90(2012))。尽管有这些进展，然而，这些潜在疗法在人体中的效力可能是有限的。
因此，需要以高亲和力结合PD-1并且有效地中和PD-1活性的PD-1结合剂(例如，抗体)。本发明提供了这样的PD-1结合剂。
发明概述
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:1所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，其中任选地，(a)SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(b)SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，(c)SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:12所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，其中任选地，(a)SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(b)SEQIDNO:13的第8位残基和/或第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(c)SEQIDNO:14的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:19所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:20所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:21所示的CDR3氨基酸序列。
本发明还提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括与SEQIDNO:4-11、SEQIDNO:15-18和SEQIDNO:22-25中的任一具有至少90％同一性的氨基酸序列。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:26所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列和SEQIDNO:27所示的CDR2氨基酸序列。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:30所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列，其中任选地，SEQIDNO:30的第12位残基被不同的氨基酸残基替换。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:35所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列，其中任选地，(a)SEQIDNO:36的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，和/或(b)SEQIDNO:37的第4位残基被不同的氨基酸残基替换。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括与SEQIDNO:28、SEQIDNO:29、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33、SEQIDNO:34、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40或者SEQIDNO:41具有至少90％同一性的氨基酸序列。
此外，本发明提供了编码前述免疫球蛋白多肽的分离的或纯化的核酸序列、包括这种核酸序列的载体、包括前述免疫球蛋白多肽的分离的PD-1结合剂、编码这种PD-1结合剂的核酸序列、包括这种核酸序列的载体、包括这种载体的分离的细胞、包括这种PD-1结合剂或者这种载体的并且具有药学上可接受的运载体的组合物、和通过向哺乳动物施用有效量的这种组合物以在哺乳动物中治疗癌症或者感染性疾病的方法。
附图简述
图1示意性地描绘了用于生成如实施例1所述的抗PD-1单克隆抗体的不同的PD-1抗原构建体。
图2显示的实验结果证实了在存在低水平的抗PD-1抗体APE2058的条件下，在人CD4+T细胞MLR测定法中抗TIM-3的拮抗剂抗体升高的活性。
图3显示的实验结果证实了在存在低水平的抗PD-1的APE2058的条件下，在人CD4+T细胞MLR测定法中抗LAG-3的拮抗剂抗体升高的活性。
发明详述
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽和/或一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，或其片段(例如，抗原结合片段)。本文使用的术语“免疫球蛋白”或“抗体”，是指见于脊椎动物血液或者其他体液中的蛋白，其被免疫系统用来识别和中和外来物体，例如细菌和病毒。所述多肽是“分离的”，是指其被移除出其天然环境。在优选的实施方案中，免疫球蛋白或抗体是包括至少一个互补决定区(CDR)的蛋白。所述CDR形成抗体的“高变区”，其负责抗原结合(在下文中进一步讨论)。完整的免疫球蛋白通常由四条多肽组成：两条具有相同拷贝数的重(H)链多肽和两条具有相同拷贝数的轻(L)链多肽。所述重链中的每一条含有一个N-末端可变(VH)区和三个C-末端恒定(CH1、CH2和CH3)区，并且每条轻链含有一个N-末端可变(VL)区和一个C-末端恒定(CL)区。基于其恒定结构域的氨基酸序列，可将抗体的轻链归入两种不同类型中的一种，kappa(κ)或lambda(λ)。在典型的免疫球蛋白中，每条轻链通过二硫键连接重链，并且所述两条重链通过二硫键彼此相互连接。所述轻链可变区与所述重链可变区对齐，并且所述轻链恒定区与所述重链的第一恒定区对齐。所述重链的其余恒定区彼此互相对齐。
每对轻链和重链的可变区形成抗体的抗原结合位点。所述VH和VL区具有相同的基本结构，其中每个区域包括四个框架(FW或FR)区。本文所用的术语“框架区”是指在所述可变区内的相对保守的氨基酸序列，其中所述框架区位于高变区或者互补决定区(CDR)之间。每个可变结构域有4个框架区，命名为FR1、FR2、FR3和FR4。所述框架区形成β片层，其提供所述可变区的结构框架(参见，例如，C.A.Janewayetal.(eds.),Immunobiology,5thEd.,GarlandPublishing,NewYork,NY(2001))。
所述框架区由三个互补决定区(CDR)相连。如上讨论，所述三个CDR，即CDR1、CDR2和CDR3，形成抗体的“高变区”，其负责抗原结合。所述CDR形成环，所述环连接，并且在某些情况下包括部分的，由框架区形成的β-片层结构。尽管所述轻链和重链的恒定区不直接参与所述抗体与抗原的结合，但是所述恒定区能影响可变区的方向。所述恒定区还显示出各种效应功能，例如通过与效应分子和细胞的相互作用参与抗体依赖的补体介导的裂解或抗体依赖的细胞毒性。
理想地，本发明所述分离的免疫球蛋白重链多肽和分离的免疫球蛋白轻链多肽结合PD-1。如上讨论，程序性死亡-1(PD-1)(也称为程序性细胞死亡1)是具有268个氨基酸的I型跨膜蛋白(Ishidaetal.,同上)。PD-1是T细胞调节物CD28/CTLA-4家族的成员，并且在活化的T细胞、B细胞和髓系细胞上表达(Greenwaldetal.,同上；andSharpeetal.,同上)。PD-1包括胞外的IgV结构域，后跟短胞外柄、跨膜区和胞内尾。所述胞内尾包含位于基于免疫受体酪氨酸抑制基序和基于免疫受体酪氨酸转换基序中的两个磷酸化位点，其在PD-1负调节T细胞受体信号的能力方面发挥作用(参见，例如，Ishidaetal.,同上；和Blanketal.,同上)。本发明所述分离的免疫球蛋白重链多肽和本发明所述分离的免疫球蛋白轻链多肽能形成这样的试剂：其结合PD-1和另一抗原，产生“双反应性”的结合剂(例如，双反应性抗体)。例如，所述试剂能结合PD-1和免疫系统的另一负调节物如，例如，淋巴细胞激活基因3(LAG-3)和/或T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3蛋白(TIM-3)。
结合PD-1的抗体及其组分在本领域是已知的(参见，例如，美国专利号8,168,757；Topalianetal.,同上；和Patnaiketal.,同上)。抗PD-1的抗体也可购自如，例如，Abcam(Cambridge,MA)等来源。
氨基酸“替换”或“取代”是指位于给定位置上的一个氨基酸或者残基被位于相同位置的另一氨基酸或者位于多肽序列内的残基替换。
氨基酸大致分为“芳香族”或“脂肪族”。芳香族氨基酸包括芳香环。“芳香族”氨基酸的实例包括组氨酸(H或His)、苯丙氨酸(F或Phe)、酪氨酸(Y或Tyr)和色氨酸(W或Trp)。非芳香族氨基酸大致归为“脂肪族”。“脂肪族”氨基酸的实例包括甘氨酸(G或Gly)、丙氨酸(A或Ala)、缬氨酸(V或Val)、亮氨酸(L或Leu)、异亮氨酸(Ⅰ或Ile)、甲硫氨酸(M或Met)、丝氨酸(S或Ser)、苏氨酸(T或Thr)、半胱氨酸(C或Cys)、脯氨酸(P或Pro)、谷氨酸(E或Glu)、天冬氨酸(A或Asp)、天冬酰胺(N或Asn)、谷氨酰胺(Q或Gln)、赖氨酸(K或Lys)和精氨酸(R或Arg)。
脂肪族氨基酸可以再分为四个亚组。“大脂肪族非极性亚组”由缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸组成。“脂肪族微极性亚组”由甲硫氨酸、丝氨酸、苏氨酸和半胱氨酸组成。“脂肪族极性/带电亚组”由谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、赖氨酸和精氨酸组成。“小残基亚组”由甘氨酸和丙氨酸组成。带电/极性氨基酸组可以再分为三个亚组：由赖氨酸和精氨酸组成的“带正电亚组”、由谷氨酸和天冬氨酸组成的“带负电亚组”、以及由天冬酰胺和谷氨酰胺组成的“极性亚组”。
芳香族氨基酸可以再分为两个亚组：由组氨酸和色氨酸组成的“氮环亚组”和由苯丙氨酸和酪氨酸组成的“苯基亚组”。
氨基酸替换或取代可以是保守的、半保守的、或者不保守的。短语“保守的氨基酸取代”或者“保守的突变”是指一个氨基酸被另一具有共同特性的氨基酸替换。一种明确个体氨基酸之间共同特性的功能性方法是分析同源生物相应蛋白之间氨基酸变化的基准化频率(SchulzandSchirmer,PrinciplesofProteinStructure,Springer-Verlag,NewYork(1979))。根据这种分析，可以定义氨基酸的组别，其中组内的氨基酸优先与彼此交换，并且因此在其对蛋白质总体结构的影响上彼此最为相似(SchulzandSchirmer,同上)。
保守的氨基酸取代的实例包括上述亚组内的氨基酸的取代，例如，赖氨酸取代精氨酸，反之亦然，使得可以保留正电荷；谷氨酸取代天冬氨酸，反之亦然，使得可以保留负电荷；丝氨酸取代苏氨酸，使得可以保留游离的-OH；以及谷氨酰胺取代天冬酰胺，使得可以保留游离的-NH2。
“半保守突变”包括上面列出的相同组、而非相同亚组中氨基酸的氨基酸取代。例如，天冬氨酸对天冬酰胺的取代，或者天冬酰胺对赖氨酸的取代，涉及同组内但在不同亚组内的氨基酸。“不保守突变”涉及不同组间的氨基酸取代，例如，赖氨酸取代色氨酸，或者苯丙氨酸取代丝氨酸等。
本发明提供了一种免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:1所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括、由、或者基本上由SEQIDNO:1所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列组成，其中任选地，(a)SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(b)SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，(c)SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。当本发明所述免疫球蛋白重链多肽基本上由SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，可以在所述多肽中包括另外的不实质性影响所述多肽的组分(例如，蛋白部分，如促进纯化或分离的生物素)。当本发明所述免疫球蛋白重链多肽由由SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，所述多肽不包括任何另外的组分(即，对于本发明所述免疫球蛋白重链多肽来说不是内源性的组分)。
在本发明的一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白多肽包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(b)SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，(c)SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。例如，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换以及SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换。或者，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，以及SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换。在另一实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换。SEQIDNO:1的第9位残基，SEQIDNO:2的第7、8和9位残基，和SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中每个都能被任意合适的氨基酸残基替换，在每个位置上，所述任意合适的氨基酸残基可以是相同或不同的。例如，在第一位的氨基酸残基能被第一不同的氨基酸残基替换，以及在第二位的氨基酸残基能被第二不同的氨基酸残基替换，其中所述第一和第二不同的氨基酸残基是相同的或者不同的。
在一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:1的第9位残基被甲硫氨酸(M)残基替换。在另一实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:2的第7位残基被天冬酰胺(N)残基替换，(b)SEQIDNO:2的第8位残基被丝氨酸(S)残基替换，(c)SEQIDNO:2的第9位残基被苏氨酸(T)残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。在另一实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:3的第1位残基被谷氨酸(E)残基替换，(b)SEQIDNO:3的第2位残基被酪氨酸(Y)残基替换，(c)SEQIDNO:3的第5位残基被丝氨酸(S)残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。
上述示例性免疫球蛋白重链多肽可以包括以下任一氨基酸序列：SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10或SEQIDNO:11。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括、基本上由、或者由SEQIDNO:12所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列组成，其中任选地，(a)SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(b)SEQIDNO:13的第8位残基和/或第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(c)SEQIDNO:14的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。当本发明所述免疫球蛋白重链多肽基本上由SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，可以在所述多肽中包括另外的不实质性影响所述多肽的组分(例如，蛋白部分如促进纯化或分离的生物素)。当本发明所述免疫球蛋白重链多肽由SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，所述多肽不包括任何另外的组分(即，对于本发明所述免疫球蛋白重链多肽来说不是内源性的组分)。
在一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(b)SEQIDNO:13的第8位残基和/或第9位残基被不同的氨基酸残基替换，(c)SEQIDNO:14的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，或者(d)(a)至(c)项的任意组合。例如，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，SEQIDNO:13的第8位残基，和SEQIDNO:13的第9位残基被不同的氨基酸残基替换。或者，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换以及SEQIDNO:14的第5位残基被不同的氨基酸残基替换。在另一实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽可以包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，SEQIDNO:13的第8位残基被不同的氨基酸残基替换，SEQIDNO:13的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，以及SEQIDNO:14的第5位残基被不同的氨基酸残基替换。SEQIDNO:12的第9位残基，SEQIDNO:13的第8和9位残基，和SEQIDNO:14的第5位残基中每个都能被任意合适的氨基酸残基替换，在每个位置上，所述任意合适的氨基酸残基可以是相同或不同的。例如，在第一位的氨基酸残基能被第一不同的氨基酸残基替换，以及在第二位的氨基酸残基能被第二不同的氨基酸残基替换，其中所述第一第二不同的氨基酸残基是相同的或者不同的。在一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:12的第9位残基被亮氨酸(L)残基替换。在另一实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:13的第8位残基被酪氨酸(Y)残基替换，和/或(b)SEQIDNO:13的第9位残基被丙氨酸(A)残基替换。在另一实施方案中，所述分离的免疫球蛋白重链多肽包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:14的第5位残基被苏氨酸(T)残基替换。
上述示例性免疫球蛋白重链多肽可以包括以下任一氨基酸序列：SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17或SEQIDNO:18。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括、基本上由、或者由SEQIDNO:19所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:20所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:21所示的CDR3氨基酸序列组成。当本发明所述免疫球蛋白重链多肽基本上由SEQIDNO:19所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:20所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:21所示的CDR3氨基酸序列组成时，可以在所述多肽中包括另外的不实质性影响所述多肽的组分(例如，蛋白部分，如促进纯化或分离的生物素)。当本发明所述免疫球蛋白重链多肽由SEQIDNO:19所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:20所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:21所示的CDR3氨基酸序列组成时，所述多肽不包括任何另外的组分(即，对于本发明所述免疫球蛋白重链多肽来说不是内源性的组分)。上述示例性免疫球蛋白重链多肽可以包括以下任一氨基酸序列：SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24或SEQIDNO:25。
此外，可以在上述免疫球蛋白重链多肽中插入一个或多个氨基酸。可以在所述免疫球蛋白重链多肽的氨基酸序列中插入任意数量的任意合适的氨基酸。在这方面，可以在所述免疫球蛋白重链多肽的氨基酸序列中插入至少一个氨基酸(例如，2个或更多个，5个或更多个，或者10个或更多个氨基酸)，但不超过20个氨基酸(例如，18个或更少，15个或更少，或者12个或更少的氨基酸)。优选地，在所述免疫球蛋白重链多肽的氨基酸序列中插入1-10个氨基酸(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)。在这方面，可以在任意上述免疫球蛋白重链多肽的任意合适的位置插入氨基酸。优选地，在所述免疫球蛋白重链多肽的CDR(例如，CDR1、CDR2或CDR3)中插入氨基酸。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括具有与SEQIDNO:4-11、SEQIDNO:15-18和SEQIDNO:22-25中的任一项至少90％同一性(例如，至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者100％同一性)的氨基酸序列。可以通过将目的核酸或者目的氨基酸的序列与参考的核酸或氨基酸序列进行比较来确定本文所述的核酸或氨基酸序列的“同一性”。同一性百分数是用目的序列和参考序列间相同的(即，同一的)核苷酸或者氨基酸残基的数量除以最长序列的长度(即，目的序列或者参考序列的长度，以较长者为准)。用于获得最佳比对以及计算两个或多个序列间同一性的一些数学算法是已知的并且结合进一些可用的软件程序中。这些程序的实例包括CLUSTAL-W、T-Coffee和ALIGN(用于比对核酸和氨基酸序列)、BLAST程序(例如，BLAST2.1、BL2SEQ及其更高版本)和FASTA程序(例如，FASTA3x、FASTM和SSEARCH)(用于序列比对和序列相似性检索)。序列比对的算法也在文献中有所公开，例如，Altschuletal.,J.MolecularBiol.,215(3):403-410(1990),Beigertetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,106(10):3770-3775(2009),Durbinetal.,eds.,BiologicalSequenceAnalysis:ProbalisticModelsofProteinsandNucleicAcids,CambridgeUniversityPress,Cambridge,UK(2009),Soding,Bioinformatics,21(7):951-960(2005),Altschuletal.,NucleicAcidsRes.,25(17):3389-3402(1997),和Gusfield,AlgorithmsonStrings,TreesandSequences,CambridgeUniversityPress,CambridgeUK(1997))。
本发明提供了一种免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:26所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列和SEQIDNO:27所示的CDR2氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽包括、基本上由、或者由SEQIDNO:26所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:27所示的CDR2氨基酸序列组成。当本发明所述免疫球蛋白轻链多肽基本上由SEQIDNO:26所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:27所示的CDR2氨基酸序列组成时，可以在所述多肽中包括另外的不实质性影响所述多肽的组分(例如，蛋白部分，如促进纯化或分离的生物素)。当本发明所述免疫球蛋白轻链多肽由SEQIDNO:26所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:27所示的CDR2氨基酸序列组成时，所述多肽不包括任何另外的组分(即，对于本发明所述免疫球蛋白轻链多肽来说不是内源性的组分)。上述示例性免疫球蛋白轻链多肽可以包括SEQIDNO:28或SEQIDNO:29。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:30所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽包括、由、基本上由SEQIDNO:30所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列组成，其中任选地，SEQIDNO:30的第12位残基被不同的氨基酸残基替换。当本发明所述免疫球蛋白轻链多肽基本上由SEQIDNO:30所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，可以在所述多肽中包括另外的不实质影响所述多肽的组分(例如，蛋白部分如促进纯化或分离的生物素)。当本发明所述免疫球蛋白轻链多肽由SEQIDNO:30所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，所述多肽不包括任何另外的组分(即，对于本发明所述免疫球蛋白轻链多肽来说不是内源性的组分)。
在这方面，例如，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽可以包括SEQIDNO:30所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列，但是SEQIDNO:30的第12位残基被不同的氨基酸残基替换。SEQIDNO:30的第12位残基可以被任意合适的氨基酸残基替换。在一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽可以包括SEQIDNO:30所示的CDR1氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列，但是SEQIDNO:30的第12位残基被苏氨酸(T)残基替换。上述示例性免疫球蛋白轻链多肽可以包括以下氨基酸序列中的任一项：SEQIDNO:32、SEQIDNO:33或SEQIDNO:34。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:35所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列。在一个实施方案中，所述免疫球蛋白轻链多肽包括、基本上由、或者由SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列组成，其中任选地，(a)SEQIDNO:36的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，和/或(b)SEQIDNO:37的第4位残基被不同的氨基酸残基替换。当本发明所述免疫球蛋白轻链多肽基本上由SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，可以在所述多肽中包括另外的其不实质性影响所述多肽的组分(例如，蛋白部分如促进纯化或分离的生物素)。当本发明所述免疫球蛋白轻链多肽由SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:,36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列和任选的氨基酸替换组成时，所述多肽不包括任何另外的组分(即，对于本发明所述免疫球蛋白轻链多肽来说不是内源性的组分)。在这方面，例如，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽可以包括SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列。或者，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽可以包括SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:36的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，和/或(b)SEQIDNO:37的第4位残基被不同的氨基酸残基替换。SEQIDNO:36的第5位残基和SEQIDNO:37的第4位残基每个都能被任意合适的氨基酸残基替换，在每个位置上，所述任意合适的氨基酸残基可以是相同或不同的。例如，在第一位的氨基酸残基能被第一位的不同的氨基酸残基替换，以及在第二位的氨基酸残基能被第二位的不同的氨基酸残基替换，其中所述第一位和第二位的不同的氨基酸残基是相同的或者不同的。
在一个实施方案中，所述分离的免疫球蛋白轻链多肽包括SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列，但是(a)SEQIDNO:36的第5位残基被亮氨酸(L)残基替换，和/或(b)SEQIDNO:37的第4位残基被天冬酰胺(N)残基替换。上述示例性免疫球蛋白轻链多肽可以包括以下任一氨基酸序列：SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40或者SEQIDNO:41。
此外，可以在上述免疫球蛋白轻链多肽中插入一个或多个氨基酸。可以在所述免疫球蛋白轻链多肽的氨基酸序列中插入任意数量的任意合适的氨基酸。在这方面，可以在所述免疫球蛋白轻链多肽的氨基酸序列中插入至少一个氨基酸(例如，2个或更多个，5个或更多个，或者10个或更多个氨基酸)，但不超过20个氨基酸(例如，18个或更少，15个或更少，或者12个或更少的氨基酸)。优选地，在所述免疫球蛋白轻链多肽的氨基酸序列中插入1-10个氨基酸(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)。在这方面，可以在上述免疫球蛋白轻链多肽的任意合适的位置插入氨基酸。优选地，在所述免疫球蛋白轻链多肽的CDR(例如，CDR1、CDR2或CDR3)中插入氨基酸。
本发明提供了一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括氨基酸序列，所述氨基酸序列具有与SEQIDNO:28、SEQIDNO:29、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33、SEQIDNO:34、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40和SEQIDNO:41中的任一项至少90％的同一性(例如，至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者100％的同一性)。可以通过使用本文所述的方法来确定本文所述的核酸或氨基酸序列的“同一性”。
本发明提供了一种分离的程序性死亡-1(PD-1)结合剂，其包括，基本上由，或者由本文所述的新的分离的氨基酸序列组成。“程序性死亡-1(PD-1)-结合剂”是指特异性结合所述程序性死亡蛋白1(PD-1)的分子，优选蛋白质分子。优选地，所述PD-1结合剂是抗体或其片段(例如，免疫原性片段)。本发明所述分离的PD-1结合剂包括、基本上由、或者由本发明所述分离的免疫球蛋白重链多肽和/或本发明所述分离的免疫球蛋白轻链多肽组成。在一个实施方案中，所述分离的PD-1结合剂包括、基本上由、或者由本发明所述免疫球蛋白重链多肽或本发明所述免疫球蛋白轻链多肽组成。在另一实施方案中，所述分离的PD-1结合剂包括、基本上由、或者由本发明所述免疫球蛋白重链多肽和本发明所述免疫球蛋白轻链多肽组成。
本发明不限于这样的分离的PD-1结合剂：其包括、基本上由、或者由免疫球蛋白重链多肽和/或免疫球蛋白轻链多肽组成，所述多肽具有本文公开的特定氨基酸残基的取代、插入、和/或缺失。事实上，只要氨基酸的取代、插入和/或删除导致增强或改善所述PD-1结合剂的生物活性，本发明所述免疫球蛋白重链多肽和/或本发明所述免疫球蛋白轻链多肽的任意氨基酸残基，可以被不同的氨基酸残基，以任意组合进行取代，或者可以被删除或插入。PD-1结合剂的“生物活性”是指，例如，对PD-1或者特定的PD-1表位的结合亲和力、对PD-1蛋白结合其配体PD-L1和PD-L1的中和或抑制、对PD-1蛋白体内活性(例如，IC50)的中和或抑制、药代动力学和交叉反应性(例如，与PD-1蛋白的非人同源物或直系同源体，或者与其他蛋白或组织的交叉反应性)。本领域中认可的抗原结合剂的其他生物特性或特征包括，例如，亲合性、选择性、可溶性、折叠性、免疫毒性、表达和制剂。可以使用以下标准技术观察、测量、和/或评估上述特性或特征，所述标准技术包括，但不限于，ELISA、竞争性ELISA、表面等离子共振分析法(BIACORETM)，或者KINEXATM、体外或体内中和测定法、受体-配体结合测定法、细胞因子或生长因子产生和/或分泌测定法、和信号转导和免疫组织化学测定法。
本文针对PD-1结合剂的活性使用的术语“抑制”或“中和”，是指基本上拮抗、阻止、防止、限制、减慢、破坏、改变、消除、停止或逆转例如，PD-1蛋白的生物活性，或者与PD-1蛋白相关的疾病或病症的进程或严重程度。优选地，本发明所述分离的PD-1结合剂将PD-1蛋白活性抑制或中和了至少约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约100％，或者由任意两个前述值界定的范围。
本发明所述分离的PD-1结合剂可以如本文所述是完整的抗体，或者抗体片段。本文中互换使用术语“抗体的片段”、“抗体片段”和“抗体的功能片段”来表示抗体的一个或多个保留特异性结合抗原的能力的片段(一般地，参见，Holligeretal.,Nat.Biotech.,23(9):1126-1129(2005))。所述分离的PD-1结合剂可以含有PD-1结合抗体的任意片段。理想地，所述抗体片段包括，例如，一个或多个CDR、可变区(或其部分)、恒定区(或其部分)、或其组合。抗体片段的实例包括，但不限于，(i)Fab片段，其是由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段，(ii)F(ab’)2片段，其是双价片段，包括两个由铰链区的二硫键相连的Fab片段，(iii)由抗体单臂的VL和VH结构域组成的Fv片段，(iv)通过使用温和的还原条件打破F(ab’)2片段的二硫键而产生的Fab'片段，(v)由二硫键稳定的Fv片段(dsFv)，和(vi)域抗体(dAb)，其是特异性结合抗原的抗体单可变区结构域(VH或VL)多肽。
在所述分离的PD-1结合剂包括所述免疫球蛋白重链或轻链多肽的片段的实施方案中，只要所述片段结合、并且优选地抑制PD-1蛋白的活性，则所述片段可以是任意大小的。在这方面，理想地，所述免疫球蛋白重链多肽的片段包括介于约5个和18个之间(例如，约5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18个，或者由任意两个前述值界定的范围)的氨基酸。同样地，理想地，所述免疫球蛋白轻链多肽的片段包括介于约5个和18个之间(例如，约5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18个，或者由任意两个前述值界定的范围)的氨基酸。
当所述PD-1结合剂是抗体或抗体片段时，理想地，所述抗体或抗体片段包括任意合适的类的重链恒定区(Fc)。优选地，所述抗体或抗体片段包括基于野生型IgG1、IgG2或IgG4抗体的重链恒定区，或其变体。
所述PD-1结合剂还可以是单链抗体片段。单链抗体片段的实例包括，但不限于，(i)单链Fv(scFv)，其是由所述Fv片段(即，VL和VH)的两个结构域组成的单价分子，所述两个结构域由合成的接头连接，其使得能够将所述两个结构域合成为单多肽链(参见，例如，Birdetal.,Science,242:423-426(1988)；Hustonetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,85:5879-5883(1988)；和Osbournetal.,Nat.Biotechnol.,16:778(1998))和(ii)双抗体，其是多肽链的二聚体，其中每条多肽链包括通过肽接头连接至VL的VH，所述肽接头短至不能允许同一多肽链上的VH和VL之间发生配对，从而驱使不同的VH-VL多肽链上的互补结构域之间发生配对，以产生具有两个功能性抗原结合位点的二聚体分子。抗体片段是本领域已知的，详细描述请见例如，美国专利公开号2009/0093024A1。
所述分离的PD-1结合剂还可以是胞内抗体或其片段。胞内抗体是在胞内表达并在胞内发挥作用的抗体。胞内抗体通常缺乏二硫键并且能够通过其特异性结合活性调节靶基因的表达或活性。胞内抗体包括单结构域片段，如分离的VH和VL结构域以及scFv。胞内抗体可以包括连接该胞内抗体的N或C末端的亚细胞运输信号，以允许在定位有靶蛋白的亚细胞室中以高浓度表达。在与靶基因相互作用时，胞内抗体调节靶蛋白的功能和/或通过例如加速靶蛋白的降解以及将所述靶蛋白隔离进非生理性亚细胞室等机制，达到表型/功能的敲除。胞内抗体介导的基因失活的其他机制会取决于所述胞内抗体所针对的表位，例如结合靶蛋白上的催化位点或者结合参与蛋白-蛋白、蛋白-DNA、或者蛋白-RNA相互作用的表位。
所述分离的PD-1结合剂还可以是抗体缀合物。在这方面，所述分离的PD-1结合剂可以是(1)抗体、替换的支架、或其片段，和(2)蛋白或者包括所述PD-1结合剂的非蛋白质部分的缀合物。例如，所述PD-1结合剂可以是完全的或部分的缀合肽、荧光分子或化学治疗剂的抗体。
所述分离的PD-1结合剂可以是，或者可以获自，人抗体、非人抗体、或者嵌合抗体。“嵌合的”是指包括人和非人区域的抗体或其片段。优选地，所述分离的PD-1结合剂是人源化抗体。“人源化”抗体是包括人抗体支架和至少一个获自或者来源于非人抗体的CDR的单克隆抗体。非人抗体包括从任意非人的动物如，例如，啮齿类动物(例如，小鼠或大鼠)分离的抗体。人源化抗体可以包括一个、两个、或者三个获自或者来源于非人抗体的CDR。在本发明优选的实施方案中，本发明所述PD-1结合剂的CDRH3获自或者来源于小鼠单克隆抗体，而本发明所述PD-1结合剂的其余可变区和恒定区获自或者来源于人单克隆抗体。
可以以任意方式，包括经由体外来源(例如，杂交瘤或者以重组的方式生成抗体的细胞系)和体内来源(例如，啮齿动物)，获得人抗体、非人抗体、嵌合抗体、或者人源化抗体。用于产生抗体的方法是本领域已知的并且描述于，例如，andMilstein,Eur.J.Immunol.,5:511-519(1976)；HarlowandLane(eds.),Antibodies:ALaboratoryManual,CSHPress(1988)；和Janewayetal.(eds.),Immunobiology,第5版,GarlandPublishing,NewYork,NY(2001)。在某些实施方案中，可以通过使用转基因动物(例如，小鼠)来产生人抗体或者嵌合抗体，其中一个或多个内源性免疫球蛋白基因被一个或多个人免疫球蛋白基因替换。内源性抗体基因被人抗体基因有效地替换的转基因小鼠的实例包括，但不限于，Medarex的HUMAB-MOUSETM、Kirin的TCMOUSETM和KyowaKirin的KM-MOUSETM(参见，例如，Lonberg,Nat.Biotechnol.,23(9):1117-25(2005)，和Lonberg,Handb.Exp.Pharmacol.,181:69-97(2008))。可以使用本领域已知的任意合适的方法(参见，例如，An,Z.(ed.),TherapeuticMonoclonalAntibodies:FromBenchtoClinic,JohnWiley&Sons,Inc.,Hoboken,NewJersey(2009))产生人源化抗体，包括，例如，将非人的CDR移植到人抗体支架上(参见，例如，Kashmirietal.,Methods,36(1):25-34(2005)；和Houetal.,J.Biochem.,144(1):115-120(2008))。在一个实施方案中，可以通过使用，例如，美国专利申请公开号2011/0287485A1中描述的方法，制备人源化抗体。
在优选的实施方案中，所述PD-1结合剂结合PD-1蛋白表位，其阻断PD-1结合PD-L1。本发明还提供了分离的或纯化的PD-1蛋白表位，其以间接的或变构的方式阻断PD-1结合PD-L1。
本发明还提供一个或多个分离的或纯化的核酸序列，其编码本发明所述免疫球蛋白重链多肽、本发明所述免疫球蛋白轻链多肽、和本发明所述PD-1结合剂。
术语“核酸序列”意在包括DNA或RNA的聚合物，即，多核苷酸，其可以是单链或者双链并且其可以含有非天然的或者改变的核苷酸。本文所用的术语“核酸”和“多核苷酸”是指任意长度的聚合形式的核苷酸、核糖核苷酸(RNA)或者脱氧核糖核苷酸(DNA)。这些术语是指分子的一级结构，并且因此包括双链和单链DNA，以及双链和单链RNA。作为等同物，所述术语包括从核苷酸类似物制成的RNA或DNA类似物和修饰的多核苷酸，例如，但不限于，甲基化的和/或封端的多核苷酸。尽管本领域已知许多其他的连接(例如，硫代磷酸酯、硼烷磷酸酯(boranophosphates)等)，但核酸通常由磷酸键连接以形成核酸序列或多核苷酸。编码本发明所述免疫球蛋白重链多肽的核酸序列包括，例如，SEQIDNO:42、SEQIDNO:43、SEQIDNO:44、SEQIDNO:45、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47、SEQIDNO:48、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:53、SEQIDNO:54和SEQIDNO:55。编码本发明所述免疫球蛋白轻链多肽的核酸序列包括，例如，SEQIDNO:56、SEQIDNO:57、SEQIDNO:58、SEQIDNO:59、SEQIDNO:60、SEQIDNO:61、SEQIDNO:62、SEQIDNO:63和SEQIDNO:64。
本发明另外提供了包括一个或多个编码本发明所述免疫球蛋白重链多肽、本发明所述免疫球蛋白轻链多肽、和/或本发明所述PD-1结合剂的核酸序列的载体。所述载体可以是，例如，质粒、附加体、粘粒、病毒载体(例如，逆转录病毒或腺病毒载体)、或噬菌体。合适的载体和制备载体的方法是本领域公知的(参见，例如，Sambrooketal.,MolecularCloning,aLaboratoryManual,第3版,ColdSpringHarborPress,ColdSpringHarbor,N.Y.(2001),和Ausubeletal.,CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenePublishingAssociatesandJohnWiley&Sons,NewYork,N.Y.(1994))。
除了编码本发明所述免疫球蛋白重多肽、本发明所述免疫球蛋白轻链多肽，和/或本发明所述PD-1结合剂的核酸序列，优选地，所述载体包括表达控制序列，例如启动子、增强子、聚腺苷酸化信号、转录终止子、内部核糖体进入位点(IRES)等，以为所述编码序列在宿主细胞中的表达做准备。示例性的表达控制序列在本领域是已知的并且描述于，例如，Goeddel,GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology,Vol.185,AcademicPress,SanDiego,Calif.(1990)。
来自各种不同来源的许多启动子，包括组成型、诱导型、和可阻遏的启动子在本领域是公知的。启动子的代表性来源包括例如，病毒、哺乳动物、昆虫、植物、酵母和细菌，并且来自这些来源的合适的启动子都是易获得的，或者可以基于从例如，保藏机构(如ATCC)以及其他商业的或者个体的来源获得的公开的序列合成制得。启动子可以是单向的(即，以一个方向起始转录)或者双向的(即，以3'或5'方向起始转录)。启动子的非限制性实例包括，例如，T7细菌表达系统、pBAD(araA)细菌表达系统、巨细胞病毒(CMV)启动子、SV40启动子、RSV启动子。诱导型启动子包括，例如，四环素(Tet)系统(美国专利号5,464,758和5,814,618)、蜕皮激素诱导系统(Noetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.,93:3346-3351(1996))、T-REXTM系统(Invitrogen,Carlsbad,CA)、LACSWITCHTM系统(Stratagene,SanDiego,CA)和Cre-ERT他莫昔芬诱导的重组酶系统(Indraetal.,Nuc.Acid.Res.,27:4324-4327(1999)；Nuc.Acid.Res.,28:e99(2000)；美国专利号7,112,715；和Kramer&Fussenegger,MethodsMol.Biol.,308:123-144(2005))。
本文所用的术语“增强子”是指DNA序列，所述DNA序列提升例如，以可操作的形式与其连接的核酸序列的转录。增强子可以位于离所述核酸序列的编码区许多千碱基的位置并且能介导与调控因子的结合、DNA甲基化模式、或者DNA结构的变化。来自各种不同来源的许多增强子是本领域公知的，并且可以克隆的多核苷酸形式得到或者在克隆的多核苷酸内(来自，例如，保藏机构如ATCC以及其他商业的或个人的来源)。一些包括启动子(例如常用的CMV启动子)的多核苷酸还包括增强子序列。增强子可以位于编码序列的上游、之内、或者下游。
所述载体还可以包括“选择标记基因”。本文所用的术语“选择标记基因”是指在存在相应的选择剂的条件下，允许细胞表达特异性选择的核酸序列或排除该核酸序列表达的核酸序列。合适的选择标记基因是本领域已知的并且描述于，例如，国际专利申请公开号WO1992/008796和WO1994/028143；Wigleretal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77:3567-3570(1980)；O'Hareetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,78:1527-1531(1981)；Mulligan&Berg,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,78:2072-2076(1981)；Colberre-Garapinetal.,J.Mol.Biol.,150:1-14(1981)；Santerreetal.,Gene,30:147-156(1984)；Kentetal.,Science,237:901-903(1987)；Wigleretal.,Cell,11:223-232(1977)；Szybalska&Szybalski,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,48:2026-2034(1962)；Lowyetal.,Cell,22:817-823(1980)；和美国专利号5,122,464和5,770,359。
在一些实施方案中，所述载体是“附加型表达载体”或“附加体”，其能够在宿主细胞中复制，并且在存在适当选择压力的条件下，作为染色体外的DNA片段持续存在于宿主细胞内(参见，例如，Coneseetal.,GeneTherapy,11:1735-1742(2004))。代表性的市售的附加型表达载体包括，但不限于，利用艾伯斯坦巴尔(EpsteinBarr)核抗原1(EBNA1)和艾伯斯坦巴尔(EpsteinBarr)病毒(EBV)的复制起点(oriP)的附加型质粒。来自Invitrogen(Carlsbad,CA)的载体pREP4、pCEP4、pREP7和pcDNA3.1以及来自Stratagene(LaJolla,CA)的pBK-CMV载体代表了使用T抗原和SV40复制起点来代替EBNA1和oriP的附加型载体的非限制性实例。
其他合适的载体包括整合的表达载体，其可以随机整合进宿主细胞的DNA，或者可以包括重组位点以使在所述表达载体和所述宿主细胞的染色体之间发生特异性重组。这种整合型表达载体可以利用宿主细胞染色体的内源性表达控制序列来实现目的蛋白的表达。以位点特异性的方式进行整合的载体实例包括，例如，来自Invitrogen(Carlsbad,CA)的flp-in系统组分(例如，pcDNATM5/FRT)，或者cre-lox系统，例如见于Stratagene(LaJolla,CA)的pExchange-6核心载体。随机整合进宿主细胞染色体的载体实例包括，例如，来自Invitrogen(Carlsbad,CA)的pcDNA3.1(在不存在T抗原的条件下进行整合)、来自Millipore(Billerica,MA)的UCOE、和来自Promega(Madison,WI)的pCI或pFN10A(ACT)FLEXITM。
还可以使用病毒载体。代表性的市售的病毒表达载体包括，但不限于，购自Crucell公司(莱顿，荷兰)的基于腺病毒的Per.C6系统、来自Invitrogen(Carlsbad,CA)的基于慢病毒的pLP1、以及来自Stratagene(LaJolla,CA)的逆转录病毒载体pFB-ERV加pCFB-EGSH。
可在相同的载体上(即，以顺式方向)将编码本发明所述氨基酸序列的核酸序列提供给细胞。单向启动子可用于控制每个核酸序列的表达。在另一实施方案中，双向和单向启动子的组合可用于控制多个核酸序列的表达。或者，可以在单独的载体上(即，以反式方向)将编码本发明所述氨基酸序列的核酸序列提供给细胞群。在每个单独载体中的每个核酸序列可以包括相同的或不同的表达控制序列。可以将所述单独的载体同时或者先后提供给细胞。
可以将包括编码本发明所述氨基酸序列的核酸序列的载体导入能够表达其编码的多肽的宿主细胞，包括任意合适的原核细胞或真核细胞。这样，本发明提供了分离的包括本发明所述载体的细胞。优选的宿主细胞能够易于且稳定地生长，具有相当快的生长速率，具有良好表征的表达系统，并且能够进行简单并有效地转化或转染的细胞。
合适的原核细胞的实例包括，但不限于，来自芽孢杆菌属(例如枯草芽孢杆菌和短芽孢杆菌)、大肠杆菌属(例如大肠杆菌)、假单胞菌属、链霉菌属、沙门氏菌属和欧文氏菌的细胞。特别有用的原核细胞包括大肠杆菌的各类菌株(例如，K12、HB101(ATCC号33694)、DH5α、DH10、MC1061(ATCC号53338)和CC102)。
优选地，将所述载体引入真核细胞。合适的真核细胞是本领域已知的并且包括，例如，酵母细胞、昆虫细胞和哺乳动物细胞。合适的酵母细胞的实例包括来自克鲁维酵母属、毕赤酵母属、鼻孢子菌属、酵母属和裂殖酵母属的细胞。优选的酵母细胞包括，例如，酿酒酵母和毕赤酵母。
合适的昆虫细胞描述于，例如，Kittsetal.,Biotechniques,14:810-817(1993)；Lucklow,Curr.Opin.Biotechnol.,4:564-572(1993)；和Lucklowetal.,J.Virol.,67:4566-4579(1993)。优选的昆虫细胞包括Sf-9和HI5(Invitrogen,Carlsbad,CA)。
优选地，本发明利用哺乳动物细胞。众多合适的哺乳动物宿主细胞是本领域已知的，并且许多可从美国标准生物保藏中心(ATCC,Manassas,VA)获得。合适的哺乳动物细胞的实例包括，但不限于，中国仓鼠卵巢细胞(CHO)(ATCC号CCL61)、CHODHFR细胞(Urlaubetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,97:4216-4220(1980))、人胚肾(HEK)293或293T细胞(ATCC号CRL1573)和3T3细胞(ATCC号CCL92)。其他合适的哺乳动物细胞系是猴COS-1(ATCC号CRL1650)和COS-7细胞系(ATCC号CRL1651)，以及CV-1细胞系(ATCC号CCL70)。另外的示例性哺乳动物宿主细胞包括灵长类细胞系和啮齿类细胞系，包括转化的细胞系。正常的二倍体细胞、来源于原代组织体外培养的细胞系、以及原代的外植体，也是合适的。其他合适的哺乳动物细胞系包括，但不限于，小鼠神经母细胞瘤N2A细胞、HeLa、小鼠L-929细胞和BHK或HaK仓鼠细胞系，所有这些均从ATCC获得。用于选择合适的哺乳动物宿主细胞的方法和用于细胞的转化、培养、扩增、筛选和纯化的方法是本领域已知的。
最优选地，所述哺乳动物细胞是人细胞。例如，所述哺乳动物细胞可以是人淋巴细胞系或者来源于人淋巴的细胞系，例如前B淋巴细胞来源的细胞系。人淋巴细胞系的实例包括，但不限于，RAMOS(CRL-1596)、Daudi(CCL-213)、EB-3(CCL-85)、DT40(CRL-2111)、18-81(Jacketal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,85:1581-1585(1988))、Raji细胞(CCL-86)及其衍生物。
可以通过“转染”、“转化”或“转导”将编码本发明所述氨基酸序列的核酸序列导入细胞。本文所用的“转染”、“转化”或“转导”，是指通过使用物理或化学方法将一个或多个外源多核苷酸引入宿主细胞。许多转染技术是本领域已知的并且包括，例如，磷酸钙-DNA共沉淀法(参见，例如，MurrayE.J.(ed.),MethodsinMolecularBiology,Vol.7,GeneTransferandExpressionProtocols,HumanaPress(1991))；DEAE-葡聚糖法；电穿孔法；阳离子脂质体介导的转染；钨颗粒微粒子轰击法(Johnston,Nature,346:776-777(1990))；和磷酸锶-DNA共沉淀法(Brashetal.,Mol.CellBiol.,7:2031-2034(1987))。可以在感染性颗粒在合适的包装细胞中生长之后，将噬菌体或病毒载体导入宿主细胞，其中所述包装细胞有很多是可商购的。
本发明提供了包括有效量的本发明所述免疫球蛋白重链多肽、本发明所述免疫球蛋白轻链多肽、本发明所述PD-1结合剂、本发明所述编码前述任意一种的核酸序列、或者本发明所述包括本发明所述核酸序列的载体的组合物。优选地，所述组合物是药学上可接受的(例如，生理学上可接受的)组合物，其包括运载体，优选药学上可接受的(例如，生理学上可接受的)运载体，和本发明所述氨基酸序列、抗原结合剂或载体。在本发明上下文中可以使用任意合适的运载体，并且这样的运载体是本领域公知的。运载体的选择将部分由所述组合物所施用的特定位点以及用于施用所述组合物的特定的方法确定。任选地，所述组合物可以是无菌的。可以将所述组合物冷冻或冻干用于储存并且临使用前在合适的无菌运载体中复原。按照描述于，例如，Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,21stEdition,LippincottWilliams&Wilkins,Philadelphia,PA(2001)中的常规技术可以产生所述组合物。
本发明还提供了用于治疗任意这样疾病或病症的方法：在所述疾病或病症中，PD-1蛋白的不当表达(例如，过表达)或者升高的活性导致或者促成所述疾病的病理效应，或者PD-1蛋白水平或活性的降低在哺乳动物(优选人)中具有治疗益处。本发明还提供了在哺乳动物中治疗癌症或者感染性疾病的方法。所述方法包括将上述组合物施用给患有癌症或感染性疾病的哺乳动物，以此在所述哺乳动物中治疗所述癌症或感染性疾病。如本文中所讨论的，PD-1在多种癌症中异常表达(参见，例如，Brownetal.,J.Immunol.,170:1257-1266(2003)；和Flieset.al.,YaleJournalofBiologyandMedicine,84:409-421(2011))，并且在一些肾细胞癌患者中PD-L1的表达与肿瘤侵袭性相关。本发明所述方法能用于治疗本领域已知的任意类型的癌症，如，例如，黑色素瘤、肾细胞癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、胆囊癌、喉癌、肝癌、甲状腺癌、胃癌、唾液腺癌、前列腺癌、胰腺癌、或者Merkel细胞癌(参见，例如，Bhatiaetal.,Curr.Oncol.Rep.,13(6):488-497(2011))。本发明所述方法能用于治疗任意类型的感染性疾病(即，由细菌、病毒、真菌、或寄生虫引起的疾病或病症)。能被本发明所述方法治疗的感染性疾病的实例包括，但不限于，由人类免疫缺陷病毒(HIV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒、登革热病毒、乙肝病毒(HBV，或者丙肝病毒(HCV))引起的疾病。对包括本发明所述免疫球蛋白重链多肽、本发明所述免疫球蛋白轻链多肽、本发明所述PD-1结合剂、本发明所述编码前述任意一种的核酸序列、或者本发明所述包括本发明所述核酸序列的载体的组合物的施用，在哺乳动物中诱导针对癌症或感染性疾病的免疫应答。“免疫应答”会需要，例如，抗体的产生和/或免疫效应细胞(例如，T细胞)的活化。
本文所用的术语“治疗(treatment)”、“治疗(treating)”等是指获得所希望的药理学和/或生理学效应。优选地，所述效应是治疗性的，即，所述效应部分地或者完全地治愈疾病和/或可归因于所述疾病的不利症状。为此，本发明所述方法包括施用“治疗有效量”的所述PD-1结合剂。“治疗有效量”是指在必要的剂量和时间段内，有效地实现所希望的治疗结果的量。所述治疗有效量可根据以下因素而变化，例如，个体的疾病状态、年龄、性别和体重，以及所述PD-1结合剂在所述个体中引发所希望的应答的能力。例如，本发明所述PD-1结合剂的治疗有效量是降低PD-1蛋白在人中的生物活性和/或增强针对癌症或感染性疾病的免疫应答的量。
或者，所述药理学和/或生理学效应可以是预防性的，即，所述效应完全地或部分地预防疾病或其症状。在这方面，本发明所述方法包括施用“预防有效量”的PD-1结合剂。“预防有效量”是指在必要的剂量和时间段上，有效地实现所希望的预防效果(例如，预防疾病发作)的量。
典型的剂量可以是，例如，在动物或人体重的1pg/kg至20pg/kg范围内；然而，低于或高于该示例性范围的剂量也在本发明范围之内。每日的肠胃外剂量可以是约0.00001μg/kg到约20mg/kg总体重(例如，约0.001μg/kg、约0.1μg/kg、约1μg/kg、约5μg/kg、约10μg/kg、约100μg/kg、约500μg/kg、约1mg/kg、约5mg/kg、约10mg/kg、或者由任意两个上述值限定的范围)，优选从约0.1μg/kg至约10mg/kg总体重(例如，约0.5μg/kg、约1μg/kg、约50μg/kg、约150μg/kg、约300μg/kg、约750μg/kg、约1.5mg/kg、约5mg/kg、或者由任意两个上述值限定的范围)，更优选从约1μg/kg至5mg/kg总体重(例如，约3μg/kg、约15μg/kg、约75μg/kg、约300μg/kg、约900μg/kg、约2mg/kg、约4mg/kg、或者由任意两个上述值限定的范围)，甚至更优选从每日约0.5至15mg/kg体重(例如，约1mg/kg、约2.5mg/kg、约3mg/kg、约6mg/kg、约9mg/kg、约11mg/kg、约13mg/kg、或者由任意两个上述值限定的范围)。可以通过定期评估所治疗的患者来监测治疗或预防效力。对于根据具体状况进行持续数天或更长时间的重复施用，可以重复治疗直至发生所希望的对疾病症状的遏制。然而，其他剂量方案也可能是有用的并且在本发明范围之内。可以通过单次推注施用所述组合物，通过多次推注施用所述组合物，或者通过连续输注施用所述组合物来递送所希望的剂量。
可以通过使用标准的施用技术，包括口服、静脉内施用、腹膜内施用、皮下施用、经肺施用、经皮施用、肌肉内施用、鼻内施用、经颊施用、舌下施用、或者栓剂施用，施用这样的组合物：其包括有效量的本发明所述免疫球蛋白重链多肽、本发明所述免疫球蛋白轻链多肽、本发明所述PD-1结合剂、本发明所述编码前述任一的核酸序列、或者本发明所述包括本发明所述核酸序列的载体。优选地，所述组合物适于肠胃外施用。本文所用的术语“肠胃外”包括静脉内施用、肌内施用、皮下施用、直肠施用、阴道施用、和腹膜内施用。更优选地，通过使用静脉内、腹膜内或皮下注射的外周全身递送方式，向哺乳动物施用所述组合物。
一旦施用给了哺乳动物(例如，人)，可通过本领域已知的任意合适的方法测定本发明所述PD-1结合剂的生物活性。例如，可以通过确定特定的PD-1结合剂的稳定性来评估生物活性。在本发明的一个实施方案中，所述PD-1结合剂(例如，抗体)具有介于约30分钟和45天之间的体内半衰期(例如，约30分钟、约45分钟、约1小时、约2小时、约4小时、约6小时、约10小时、约12小时、约1天、约5天、约10天、约15天、约25天、约35天、约40天、约45天、或者由任意两个上述值限定的范围)。在另一实施方案中，所述PD-1结合剂具有介于约2小时和20天之间的体内半衰期(例如，约5小时、约10小时、约15小时、约20小时、约2天、约3天、约7天、约12天、约14天、约17天、约19天、或者由任意两个上述值限定的范围)。在另一实施方案中，所述PD-1结合剂具有介于约10天和约40天之间的体内半衰期(例如，约10天、约13天、约16天、约18天、约20天、约23天、约26天、约29天、约30天、约33天、约37天、约38天、约39天、约40天、或者由任意两个上述值限定的范围)。
还可以通过确定与PD-1蛋白或者其表位的结合亲和力来评估特定的PD-1结合剂的生物活性。术语“亲和力”是指两个试剂可逆结合的平衡常数，并且表示为解离常数(KD)。结合剂与配体的亲和力，例如抗体对表位的亲和力，可以是，例如，从约1皮摩尔(pM)到约100微摩尔(μM)(例如，从约1皮摩尔(pM)到约1纳摩尔(nM)，从约1nM到约1微摩尔(μM)，或者从约1μM到约100μM)。在一个实施方案中，所述PD-1结合剂能够以小于或等于1纳摩尔的KD(例如，0.9nM、0.8nM、0.7nM、0.6nM、0.5nM、0.4nM、0.3nM、0.2nM、0.1nM、0.05nM、0.025nM、0.01nM、0.001nM、或者由上述任意两个数值限定的范围)结合PD-1蛋白。在另一实施方案中，所述PD-1结合剂能够以小于或等于200pM的KD(例如，190pM、175pM、150pM、125pM、110pM、100pM、90pM、80pM、75pM、60pM、50pM、40pM、30pM、25pM、20pM、15pM、10pM、5pM、1pM、或者由上述任意两个数值明确的范围)结合PD-1。可以使用任何本领域公认的测定法来测量对目的抗原或目的表位的免疫球蛋白亲和力。这样的方法包括，例如，荧光激活细胞分选法(FACS)、可分离珠法(例如，磁珠)、表面等离子体共振法(SPR)、液相竞争法(KINEXATM)、抗原筛选法和/或ELISA(参见，例如，Janewayetal.(eds.),Immunobiology,第5版,GarlandPublishing,NewYork,NY,2001)。
可以单独地或者与其他药物(例如，作为佐剂)组合施用本发明所述PD-1结合剂。例如，可以与其他试剂组合施用所述PD-1结合剂来治疗或预防本文所公开的疾病。在这方面，所述PD-1结合剂可以与至少一种其他抗癌剂组合使用，包括，例如，本领域已知的任意化疗剂，电离辐射，小分子抗癌剂，癌疫苗，生物疗法(例如，其他单克隆抗体，杀癌病毒，基因疗法，和过继T细胞转移)和/或手术。当本发明所述方法治疗感染性疾病时，所述PD-1结合剂可以与至少一种抗菌剂或者至少一种抗病毒剂组合施用。在这方面，所述抗菌剂可以是本领域已知的任意合适的抗生素。所述抗病毒试剂可以是特异性靶向特定病毒的任意合适类型的任一种疫苗(例如，减毒活疫苗、亚单位疫苗、重组载体疫苗、和小分子抗病毒疗法(例如，病毒复制抑制剂和核苷类似物))。
在另一实施方案中，本发明所述PD-1结合剂可以与抑制免疫检查点通路的其他试剂组合施用。例如，本发明所述PD-1结合剂可以与抑制或拮抗CTLA-4、TIM-3或LAG-3通路的试剂组合施用。同时靶向这些免疫检查点通路中两条或多条通路的组合治疗具有证实的增强的和潜在地协同抗肿瘤活性(参见，例如，Sakuishietal.,J.Exp.Med.,207:2187-2194(2010)；Ngiowetal.,CancerRes.,71:3540-3551(2011)；andWooetal.,CancerRes.,72:917-927(2012))。在一个实施方案中，本发明所述PD-1结合剂与结合TIM-3的抗体和/或结合LAG-3的抗体进行组合施用。在这方面，本发明所述在哺乳动物中治疗癌症或感染性疾病的方法可以进一步包括向所述哺乳动物施用包括(i)结合TIM-3蛋白的抗体和(ii)药学上可接受的运载体的组合物，或者包括(i)结合LAG-3蛋白的抗体和(ii)药学上可接受的运载体的组合物。
除治疗用途外，本文所述的PD-1结合剂可用于诊断或研究应用。在这方面，所述PD-1结合剂可用于诊断癌症或感染性疾病的方法中。所述PD-1结合剂可以类似的方式用于在进行与PD-1的异常表达相关的疾病或病症测试的受试者中监测PD-1蛋白水平的测定法中。研究的应用包括，例如，利用所述PD-1结合剂和标记物检测样品中(例如，在人的体液中或者在细胞或组织提取物中)的PD-1蛋白的方法。所述PD-1结合剂可以加以修饰或者不加修饰地使用，例如与可检测部分共价或非共价标记。例如，所述可检测部分可以是放射性同位素(例如，3H、14C、32P、35S、或125I)，荧光化合物或化学发光化合物(例如，异硫氰酸荧光素、若丹明、或萤光素)，酶(例如，碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、或辣根过氧化物酶)，或辅基。在本发明上下文中可以使用任何本领域中已知的方法分别将抗原结合剂(例如，抗体)缀合上可检测部分(参见，例如，Hunteretal.,Nature,194:495-496(1962)；Davidetal.,Biochemistry,13:1014-1021(1974)；Painetal.,J.Immunol.Meth.,40:219-230(1981)；和Nygren,J.Histochem.andCytochem.,30:407-412(1982))。
可以通过本领域已知的任意合适的方法，使用本发明所述PD-1结合剂来测量PD-1蛋白的水平。这样的方法包括，例如，放射免疫测定法(RIA)和FACS。可以使用任意合适的技术，例如，通过在适于形成抗原-抗体复合物的条件下将包括，或者疑似包括PD-1多肽的样品和PD-1特异性抗体组合在一起，来确立PD-1蛋白的正常或标准表达值。用可检测物质直接或间接地标记所述抗体，以便于检测结合的或者未被结合的抗体。合适的可检测物质包括各种酶、辅基、荧光材料、发光材料和放射性材料(参见，例如，MonoclonalAntibodies:AManualofTechniques,CRCPress,Inc.(1987))。然后将样品中表达的PD-1多肽的量与标准值进行比较。
可以在试剂盒(即，预定量的反应物和用于进行诊断测定法的说明书的封装组合)中提供所述PD-1结合剂。如果所述PD-1结合剂被酶标记，那么该试剂盒需要包括底物和所述酶所需要的辅因子(例如，提供可检测发色团或荧光团的底物前体)。此外，在试剂盒中可以包括其他添加剂，例如稳定剂、缓冲液(例如，封闭缓冲液或裂解缓冲液)等。各种反应物的相对量可以是变化的，以提供基本上优化测定法的灵敏度的反应物溶液浓度。可以以干粉形式(通常是冻干的)提供所述反应物，包括赋形剂，其在溶解时会提供具有适当浓度的反应液。
以下实施例进一步说明本发明，但是，当然不应该被理解成以任何方式限制其范围。
实施例1
本实施例展示了产生针对人PD-1的单克隆抗体的方法。
生成了一些形式的编码人PD-1及其配体PD-L1和PD-L2的基因，作为抗原用于小鼠免疫、杂交瘤筛选和移植有CDR的抗体的亲和力成熟，并且示意性地描绘于图1。使用带有潮霉素选择(Millipore,Billerica,MA)的泛染色质开放元件(UCOE)单表达载体，表达全长的人和食蟹猴PD-1基因及其天然前导序列并且不添加标签。按照制造商的说明，用LipofectamineLTX(LifeTechnologies,Carlsbad,CA)稳定转染CHO-K1细胞。在用潮霉素进行选择后，使用PE-缀合的小鼠抗人PD-1的抗体(BDBioscience,FranklinLakes,NJ)，通过流式细胞术鉴定在细胞表面上表达PD-1的细胞并对其进行亚克隆。然后选择亚克隆子用于PD-1的高水平和均匀表达。
如图1所示，将编码人和食蟹猴PD-1的可溶性单体形式胞外域(ECD)的核酸序列构建成带有附于所述ECD的C末端的His标签形式或者与小鼠IgG2aFc构建成可溶性二聚体融合蛋白。如图1所示，将编码人PD-L1和PD-L2的可溶性二聚体形式的ECD的核酸序列与小鼠IgG1Fc构建成融合蛋白。使用标准技术在HEK293细胞或者稳定的CHO细胞系中瞬时表达可溶性蛋白。通过镍亲和柱层析和随后的尺寸排阻层析从细胞培养上清液中纯化His-标记的蛋白。使用蛋白A/G亲和层析纯化IgG-Fc融合蛋白。通过SDS-PAGE和尺寸排阻层析分析纯化的蛋白，以确保同质性。此外，通过质谱法确认特征和尺寸。
对于FACS分选实验，使用标准技术，通过用NHS酯交联剂(Thermo-FisherScientific公司，Waltham,MA)或荧光染料DyLight650(Thermo-FisherScientific公司，Waltham,MA)用生物素标记纯化的蛋白。
用在细胞表面表达全长PD-1的CHO细胞或者PD-1ECDHis蛋白免疫小鼠。具体地，从HarlanLaboratories公司(Indianapolis,IN)购得雌性BALB/c小鼠(7周龄)并分成两组。适应六天后，用纯化的人PD-1ECD-His以每只小鼠50μg，与TITERMAXGOLDTM(SigmaAldrich,St.Louis,MO)以1：1的乳液形式，对一组动物进行四个周次的剂量免疫。在腋窝和腹股沟区域周围以皮下的形式进行免疫。对第二组动物，在腹股沟区域周围皮下注射四个周次剂量的稳定表达全长人PD-1(每只小鼠5×106个细胞)的CHO-K1细胞。十天后，将动物放血用于测量对PD-1的血清滴度，并且在休息3周后在用可溶性的人PD-1免疫增强各组中的一只小鼠。三天后，从每只动物收集脾脏、腋窝/肱淋巴结和腹股沟淋巴结。将从两只动物中收集的所有组织的细胞的单细胞悬浮液合并，并且使用标准技术通过细胞融合，将其用于产生杂交瘤。使用了两种不同的骨髓瘤细胞系用于融合，F0(描述于deSt.GrothandScheidegger,J.Immunol.Methods,35:1-21(1980))和P3X63Ag8.653(描述于Kearneyetal.,J.Immunol.,123:1548-1550(1979))。
从10块96孔平板中筛选杂交瘤上清液，用于结合稳定转染有表达编码全长人PD-1的核酸序列的CHO-K1细胞克隆，并与未转染的CHO-K1细胞的结合作比较。具体地，用PBS/2％FBS1:1稀释杂交瘤上清液，并将所述上清液与等体积的PD-1CHO-K1细胞(PBS中的2.5x105个细胞，2％FBS中)在4℃孵育30分钟。离心细胞，用PBS/1％FBS漂洗细胞一次，并与APC缀合的山羊抗小鼠IgG(H+L)(SouthernBiotechnology,Birmingham,AL)在4℃孵育30分钟。用PBS/2％FBS漂洗细胞两次，将所述细胞重悬于PBS、2％FBS、1％多聚甲醛，并且在BDFACSARRAYTM生物分析仪上分析荧光(BDBiosciences,FranklinLakes,NJ)。通过ELISA定量小鼠IgG水平。
在强力结合PD-1CHO细胞的基础上，扩增46个亲代孔，并且测试上清液阻断DyL650标记的PD-L1-mIgG1Fc融合蛋白结合PD-1CHO细胞的能力。具体地，以剂量效应的方式将纯化的小鼠单克隆抗体与EC30浓度的PD-L1-DyL650(10nM)孵育，并且通过流式细胞术对抑制作用进行定量。将孔中显示最佳PD-L1阻断活性和最高水平的小鼠IgG的细胞进行亚克隆用于进一步分析，包括纯化以及重链和轻链(VH和VL)的测序。选择11个最强的PD-1/PD-L1相互作用的阻断剂用于亚克隆。再次确认PD-1的结合和PD-L1的阻断后，扩大培养选定的亚克隆，并且收集上清液用于抗体纯化。对于纯化的抗体，验证其与人和食蟹猴PD-1的结合及其PD-L1的阻断活性。通过在BIACORETMT200仪器(GEHealthcare,Waukesha,WI)上进行表面等离子体共振确定KD值，并且使用BIACORET200TM评价软件(GEHealthcare,Waukesha,WI)确定动力学常数。在这方面，在GE抗小鼠IgG所偶联的BIACORETMCM5芯片上捕获抗体。从最高浓度500nM开始，使用两倍或三倍系列稀释液，使PD-1-His单体流过所捕获的抗体。使用1:1的结合模型将得到的传感图进行全局拟合(fit)，以计算结合和解离速率以及随后的亲和力(KD)。
本实施例的结果展示了生成结合人和食蟹猴PD-1并且阻断PD-1配体结合的单克隆抗体的方法。
实施例2
本实施例描述移植有CDR的、嵌合的抗PD-1单克隆抗体的设计和产生。
实施例1中所述的生产具有PD-L1阻断活性的PD-1结合抗体的杂交瘤亚克隆是同型的，对其进行了RT-PCR用于克隆抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，并且进行了测序。具体地，使用RNEASYTM试剂盒(Qiagen,Venlo,荷兰)从杂交瘤克隆的细胞团块(5×105个细胞/团块)中分离了RNA,并且使用寡-dT作为引物的SUPERSCRIPTTMIII第一链合成系统(LifeTechnologies,Carlsbad,CA)制备cDNA。VL的PCR扩增利用了9条或11条变性的小鼠VL正向引物池(参见KontermannandDubel,eds.,AntibodyEngineering,Springer-Verlag,Berlin(2001))和小鼠κ恒定区反向引物。按照SUPERSCRIPTTMIII第一链合成系统(LifeTechnologies,Carlsbad,CA)建议的方案，VH的PCR扩增利用了12条变性的小鼠VH正向引物池(KontermannandDubel,同上)和小鼠γ1或γ2a恒定区反向引物(基于从每个克隆中对纯化的抗体进行的分型)。纯化PCR产物并将其克隆进pcDNA3.3-TOPO(LifeTechnologies,Carlsbad,CA)。从每个细胞团块中选择单个集落(24条重链和48条轻链)并且使用标准的Sanger测序法(Genewiz公司,SouthPlainfield,NJ)测序。检查了可变区序列，并将其与最接近的人重链或轻链V区的种系序列进行比对。选择了3种抗体用于移植CDR：(1)包括SEQIDNO:4的VH和SEQIDNO:28的VL的9A2，(2)包括SEQIDNO:15的VH和SEQIDNO:32的VL的10B11，和(3)包括SEQIDNO:22的VH和SEQIDNO:38的VL的6E9。
通过将来自每个上述小鼠抗体的CDR残基移植进最接近的人种系同源物，设计移植有CDR的抗体序列。合成了移植有CDR的抗体可变区并与人IgG1/κ恒定区一起表达用于分析。此外，使用连接人IgG1/κ恒定区的上述小鼠抗体可变区构建了小鼠:人嵌合抗体。如上所述，对嵌合的并且移植有CDR的抗体与人和食蟹猴PD-1抗原的结合以及其在PD-1/PD-L1的阻断测定法中的活性进行表征。
还在人CD4+T细胞混合淋巴细胞反应(MLR)测定法中测试了嵌合的并且移植有CDR的抗体的功能性拮抗剂活性，其中通过测量IL-2的分泌评估CD4+T细胞在存在抗PD-1抗体的条件下的活化。由于PD-1是T细胞功能的负调节物，因此对PD-1的拮抗预计会导致T细胞活化的升高，所述T细胞活化的升高通过IL-2产量的升高而测得。移植有9A2、10B11和6E9CDR的抗体表现出拮抗活性并且被选择用于亲和力成熟。
本实施例的结果展示了产生特异性结合并抑制PD-1的嵌合的并且移植有CDR的单克隆抗体的方法。
实施例3
本实施例展示了针对PD-1的单克隆抗体的亲和力成熟。
来源于原始鼠科单克隆抗体(9A2、10B11和6E9)的移植有CDR的抗体经体外体细胞超突变进行了亲和力成熟。使用SHM-XEL落叶系统在HEK293c18细胞表面展示每种抗体(参见Bowersetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,108:20455-20460(2011)；和美国专利申请公开号2013/0035472)。如Bowersetal.,同上中所述，在建立了稳定的附加体细胞系(episomallines)后，将用于表达活化诱导的胞嘧啶脱氨酶(AID)的载体转染进所述细胞以引发体细胞超突变。在提升抗原结合严格性的条件下进行了多轮FACS分选之后，在每个抗体可变区中鉴定了一些突变，并将所述突变进行重组以生成成熟的具有改进特性的人源化抗体。
将一组六个亲和力成熟的人源化重链和轻链可变区序列进行了配对(示为APE1922、APE1923、APE1924、APE1950、APE1963和APE2058)并选其进行表征，示于表1中。使用表面等离子共振(SPR)和基于溶液的亲和力分析法测定这些抗体序列中每个的PD-1结合特性。从HEK293细胞将抗体表达成人IgG1抗体并与参考抗体(BMS-936558的人IgG1版本，命名为BMS)作比较。
使用BiacoreT200TM仪器进行SPR分析，并使用BIACORETMT200评价软件确定动力学常数。选择实验参数以确保会在最高抗原浓度处达到饱和并且Rmax值将保持低于30RU。使用EDC激活的胺偶联化学将GE抗人IgG(Fc-特异性的，约7,000RU)固定在BIACORETMCM5芯片上。然后使用该表面捕获抗体(0.5μg/mL，捕获时间为60秒)。接着，使用从500nM到2nM的三倍系列稀释液将单体的可溶性人PD1-Avi-His流过被捕获的抗体(结合300秒，解离300秒)。使用3MMgCl2(接触时间为60秒)在每个循环之间去除捕获的抗体和抗原，以确保每种浓度的抗原具有新鲜的结合表面。使用1:1的结合模型将得到的传感图进行全局拟合(fit)，以计算结合和解离速率(分别为ka和kd)，以及亲和力(KD)。
使用KINEXATM3000测定法(SapidyneInstruments,Boise,Idaho)进行基于溶液的亲和力分析，并且使用KINEXATM专业软件3.2.6分析结果。选择实验参数以在抗体单独存在时达到在0.8和1.2V之间的最大信号，同时将缓冲液单独存在时的非特异性结合信号限制在最大信号的10％以内。通过在50mMNa2CO3的溶液中稀释PD-1-Avi-His(1mL中50μg/mL)，用抗原包被吖内酯珠(50mg)。将所述溶液室温搅拌2小时，并且在picofuge中沉淀珠粒并用封闭液漂洗两次(10mg/mLBSA，1MTris-HCl，pH8.0)。将珠粒重新悬浮于封闭液(1mL)，在室温下搅拌1小时，并且在25倍体积的PBS/0.02％NaN3中稀释。对于亲和力的测量，二抗是ALEXFLUORTM647染料-抗-人IgG(500ng/mL)。将样品抗体的浓度保持恒定(50pM或75pM)，同时使用从1μM到17pM的三倍稀释液系列滴定PD1-Avi-His抗原。将所有样品在PBS、0.2％NaN3、1mg/mLBSA中稀释，并允许其在室温平衡30小时。此外，测试仅含有抗体和仅含有缓冲液的样品以分别确定最强的信号和非特异性结合信号。亲和力分析的结果示于表1中。所有选定的抗体都显示出比所述BMS参考抗体更高的PD-1亲和力，具有最高亲和力的抗体是APE2058。
表1
为了评估所述抗体与细胞表面PD-1的结合，通过上述的流式细胞术确定与表达人或食蟹猴PD-1的CHO细胞的结合。此外，通过使用上述的DyL650标记的PD-L1(小鼠IgG1Fc融合蛋白)和表达PD-1的CHO细胞评估对PD-1/PD-L1相互作用的阻断作用。观察所有测试的亲和力成熟抗体序列对细胞表面PD-1的高结合亲和力，其对食蟹猴PD-1的反应性在对人反应性的3-4倍之内。所有被测试的亲和力成熟抗体序列对PD-1/PD-L1的相互作用的阻断也是有效的，其IC50值在低nM范围内。这些结果与通过BIACORETM和KINEXATM系统测定的结合亲和力以及细胞表面的EC50值一致。
如McConnelletal.,ProteinEng.Des.Sel.,26:151(2013)中所述，使用Thermofluor测定法评估选定的抗体的热稳定性。该测定法通过疏水性荧光染料结合当蛋白展开时蛋白表面上暴露的疏水性斑块的能力来评估稳定性。确定50％所述蛋白展开时的温度(Tm)以测量热稳定性。该测定法证实，所有被测的亲和力成熟抗体序列都具有高热稳定性，并且都比参考抗体更稳定。APE2058是最稳定的抗体，显示出的Tm比IgG1版BMS-936558的Tm高出不止10℃。
通过(a)评估与靶阴性细胞的非特异性结合(参见，例如，Hotzeletal.,mAbs,4:753-760(2012))和(b)测量差异性的新生Fc受体(FcRn)解离特性(参见，例如，Wangetal.,DrugMetab.Disp.,39:1469-1477(2011))，消除与受试抗体的体内药代动力学相关的潜在问题的风险。为了评估非特异性结合，使用以流式细胞术为基础的抗体测定法测试抗体与HEK293f细胞的结合。将所述受试抗体与FDA批准的两种抗体(英夫利昔单抗(infliximab)和狄诺塞麦(denosumab))作比较。结果表明，对于所有所述抗体，非特异性结合较低。为了评估FcRn结合和解离，在基于BIACORETM的测定法中测试了人FcRn和食蟹猴FcRn。抗体在pH6.0时结合FcRn，并且在将pH调整到7.4后，确定了残留的结合的抗体。该测定法的结果示于表2中。
表2
本实施例的结果证实了产生本发明所述的表现出热稳定性和对PD-1具有高亲和力的免疫球蛋白重链和轻链多肽的方法。
实施例4
本实施例展示了本发明所述免疫球蛋白重链和轻链多肽的体外活性。
如上所述，在人CD4+T细胞MLR测定法中测试了实施例3中所述的VH和VL序列的功能性拮抗活性。对于确定功能效力，使用不同的人供体在五个分别的实验中确定了每种抗体的EC50。结果示于表3中并且证实每种选定的抗体的有效活性与参考抗体的活性很难区分。
表3
本实施例的结果证实，本发明所述免疫球蛋白重链和轻链多肽能拮抗PD-1信号，导致T细胞活化的升高。
实施例5
本实施例证实，将本发明所述PD-1结合剂与抗LAG-3抗体或者抗TIM-3抗体组合，增强了T细胞的体外活化。
为了建立用于组合研究的参数，在上述人CD4+T细胞MLR测定法中以剂量效应的方式滴定了抗PD-1的抗体APE2058。对PD-1信号的拮抗导致产生升高的T细胞活化以及相应的IL-2产量升高4到5倍。
基于在多个MLR测定法中滴定APE2058抗体得到的结果，选择20ng/mL的EC50值和代表近似EC10值的低10倍的浓度(2ng/mL)用于与抗TIM-3或LAG-3检查点分子的拮抗剂抗体进行组合研究。
在CD4+T细胞体外测定法中，将完全人源的抗TIM-3抗体表征为具有拮抗活性，所述拮抗活性是通过在存在低水平的抗CD3和抗CD28抗体的条件下升高的IL-2产量测定的。如图2和表4中所示，所述抗TIM-3抗体证实在MLR测定法中具有活性，具有近似0.3μg/mL的EC50值，其活性比单独的所述抗PD-1的APE2058抗体(EC50近似0.02μg/mL)低近似15倍。如图2和表4中所示，相较于单独的APE2058或者抗TIM-3，当与0.02μg/mL的APE2058组合时，所述抗TIM-3的拮抗剂抗体刺激了IL-2产量的升高，导致了EC50值降低10倍。这些结果证实，增强的T细胞活化在PD-1和TIM-3检查点通路的组合抑制的条件下发生。
完全人源的抗LAG-3拮抗剂抗体(描述于美国专利申请公开号2011/0150892)已经证实在阻断重组型可溶性LAG-3结合MHCII类阳性细胞方面具有有效的活性。这种抗体在本文中命名为APE03109，并且在人CD4+T细胞MLR测定法中评价了其功能性活性。如图3和表4中所示，证实了APE03109在MLR中具有活性，具有近似0.05μg/mL的EC50值，其类似于单独的抗PD-1抗体的活性。相较于单独的APE2058或者APE03109，当与0.02μg/mL的抗PD-1的APE2058抗体组合时，所述APE03109抗体刺激了IL-2产量的升高，导致了EC50值有5倍的降低。
还在人CD4+T细胞MLR测定法中表征了单独用抗LAG-3的APE03109抗体以及用APE2058和APE03109组合的条件下，IL-2产生的时间过程。如图3中所示，在培养72小时后，对于组合用0.02μg/mLAPE2058和APE03109，观察到EC50值有类似的降低。在培养96小时后，EC50值的差异不那么明显；然而，相较于经APE03109单独处理的培养物，经0.02μg/mL抗PD-1的APE2058抗体和抗LAG-3的APE03109抗体处理的培养物中生成的IL-2的水平几乎翻倍(2,200pg/mL对1,200pg/mL)。与LAG-3表达的时间过程一致的是，虽然单独的APE2058在相同的时间上产生了IL-2产量的剂量效应性升高，但是在向APE2058加入APE03109的24小时后，没有观察到升高的IL-2产量。在单独的MLR实验中还证实，48小时后，APE2058和APE03109的组合将T细胞的细胞因子IFN-γ的产量水平提高了50％以上。
为了证实抗TIM-3抗体或者抗LAG-3抗体在CD4+T细胞MLR中的组合效应归因于靶特异性，将不相关的人IgG1抗体APE0422与0.02μg/mL的抗PD-1抗体APE2058组合，进行测试。在被测的最高浓度下(30μg/mL)，相较于单独的抗PD-1抗体，APE0422抗体显示对IL-2的生成没有作用。
表4
本实施例的结果证实，本发明的PD-1结合剂与针对TIM-3或LAG-3的拮抗性抗体的组合增强CD4+T细胞的体外活化。
本文引用的所有参考文献，包括出版物、专利申请和专利，在此通过引用并入，其程度如同单独并具体地说明每个参考文献通过引用并入并整体示于本文中。
在描述本发明的上下文中(特别是在权利要求书的上下文中)，除非本文另有说明或者与上下文明显矛盾，否则使用的术语“一个(a)”和“一个(an)”和“所述”和“至少一个”等类似的所指对象，将被理解成包括单数和复数。除非本文另有说明或者与上下文明显矛盾，否则使用的术语“至少一种”后面紧跟着一项或多项的列表(例如，“A和B中的至少一种”)应被理解为表示从列出的项目(A或B)中选择一项或者所列项目的两项或多项的任意组合(A和B)。除非另有说明，否则术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”应理解为开放式术语(即，表示“包括，但不限于，”)。除非本文另有说明，否则本文中数值范围的列举仅旨在用作单独指代落在该范围内的每个单独值的便捷方法，并且每个单独值并入说明书中，正如其在本文中单独列举一样。除非本文另有说明或者与上下文明显矛盾，本文中所描述的所有方法可以以任何合适的顺序进行。任何和所有实例的使用，或者本文提供的示例性语言(例如，“例如”)，仅仅是为了更好地说明本发明并且除非另有声明，并不构成对本发明范围的限制。在说明书中的任何语言都不应该被理解成表明任何未声明的技术特征是实施本发明所必需的。
本文描述了本发明优选的实施方案，包括本发明人已知的实施本发明的最佳模式。在阅读以上描述时，那些优选的实施方案的变动对于本领域的普通技术人员来说可能是显而易见。本申请发明人期望技术人员适当地采用这些变动，并且本申请发明人希望本发明也可以以不同于本文具体描述的方式进行。因此，在适用法律允许的情况下，本发明包括对其所附的权利要求中列举的主题的所有改进和等同物。此外，除非本文另外指出或另外与上下文明显矛盾，否则本发明包括以其所有可能的变化形式存在的上述技术特征的任意组合。

Claims (52)

1.一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:1所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，其中任选地
(a)SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，
(b)SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，
(c)SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换，或者
(d)(a)至(c)项的任意组合。
2.根据权利要求1所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:1的第9位残基被不同的氨基酸残基替换。
3.根据权利要求2所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其中SEQIDNO:1的第9位残基被甲硫氨酸(M)残基替换。
4.根据权利要求1至3中的任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:2的第7、8和9位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换。
5.根据权利要求4所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其中
(a)SEQIDNO:2的第7位残基被天冬酰胺(N)残基替换，
(b)SEQIDNO:2的第8位残基被丝氨酸(S)残基替换，
(c)SEQIDNO:3的第9位残基被苏氨酸(T)残基替换，或者
(d)(a)至(c)项的任意组合。
6.根据权利要求1至5中的任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:1所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:2所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:3所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:3的第1、2和5位残基中的一个或多个被不同的氨基酸残基替换。
7.根据权利要求6所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其中
(a)SEQIDNO:3的第1位残基被谷氨酸(E)残基替换，
(b)SEQIDNO:3的第2位残基被酪氨酸(Y)残基替换，
(c)SEQIDNO:3的第5位残基被丝氨酸(S)残基替换，或者
(d)(a)至(c)项的任意组合。
8.根据权利要求1至7中的任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:4至11中任一所示的氨基酸序列。
9.一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:12所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，其中任选地
(a)SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换，
(b)SEQIDNO:13的第8位残基和/或第9位残基被不同的氨基酸残基替换，
(c)SEQIDNO:14的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，或者
(d)(a)至(c)项的任意组合。
10.根据权利要求9所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:12的第9位残基被不同的氨基酸残基替换。
11.根据权利要求10所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其中SEQIDNO:12的第9位残基被亮氨酸(L)残基替换。
12.根据权利要求9至11中的任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:13的第8位残基和/或第9位残基被不同的氨基酸残基替换。
13.根据权利要求12所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其中
(a)SEQIDNO:13的第8位残基被酪氨酸(Y)残基替换，
(b)SEQIDNO:13的第9位残基被丙氨酸(A)残基替换。
14.根据权利要求9至13中的任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:12所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:13所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:14所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:3的第5位残基被不同的残基替换。
15.根据权利要求15所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其中SEQIDNO:14的第5位残基被苏氨酸(T)残基替换。
16.根据权利要求1至7中的任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17或者SEQIDNO:18所示的氨基酸序列。
17.一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:19所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:20所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:21所示的CDR3氨基酸序列。
18.根据权利要求17所述的分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24或者SEQIDNO:25所示的氨基酸序列。
19.一种分离的免疫球蛋白重链多肽，其包括与SEQIDNO:4-11、SEQIDNO:15-18和SEQIDNO:22-25中的任一具有至少90％同一性的氨基酸序列。
20.一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:26所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列和SEQIDNO:27所示的CDR2氨基酸序列。
21.根据权利要求20所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:28或者SEQIDNO:29所示的氨基酸序列。
22.一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:30所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列和SEQIDNO:31所示的CDR2氨基酸序列，其中任选地，SEQIDNO:30的第12位残基被不同的氨基酸残基替换。
23.根据权利要求22所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其中SEQIDNO:30的第12位残基被不同的氨基酸残基替换。
24.根据权利要求23所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其中SEQIDNO:30的第12位残基被苏氨酸(T)残基替换。
25.根据权利要求22至24中的任一项所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:32、SEQIDNO:33或者SEQIDNO:34所示的氨基酸序列。
26.一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:35所示的互补决定区1(CDR)氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列，其中任选地，
(a)SEQIDNO:36的第5位残基被不同的氨基酸残基替换，和/或
(b)SEQIDNO:37的第4位残基被不同的氨基酸残基替换。
27.根据权利要求26所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:36的第5位残基被不同的氨基酸残基替换。
28.根据权利要求27所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其中SEQIDNO:36的第5位残基被亮氨酸(L)残基替换。
29.根据权利要求26至28中的任一项所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:35所示的CDR1氨基酸序列，SEQIDNO:36所示的CDR2氨基酸序列，和SEQIDNO:37所示的CDR3氨基酸序列，但是SEQIDNO:37的第4位残基被不同的氨基酸残基替换。
30.根据权利要求29所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其中SEQIDNO:37的第4位残基被天冬酰胺(N)残基替换。
31.根据权利要求26至30中的任一项所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40或者SEQIDNO:41所示的氨基酸序列。
32.一种分离的免疫球蛋白轻链多肽，其包括与SEQIDNO:28、SEQIDNO:29、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33、SEQIDNO:34、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40或者SEQIDNO:41具有至少90％同一性的氨基酸序列。
33.一种分离的或纯化的核酸序列，所述核酸序列编码权利要求1至19中任一项所述的分离的免疫球蛋白重链多肽。
34.一种分离的或纯化的核酸序列，所述核酸序列编码权利要求20至32中任一项所述的分离的免疫球蛋白轻链多肽。
35.一种载体，其包含权利要求33或者权利要求34所述的分离的或纯化的核酸分子。
36.一种分离的程序性死亡-1蛋白(PD-1)结合剂，其包括(a)权利要求1至19中任一项所述的免疫球蛋白重链多肽和(b)权利要求20至32中任一项所述的免疫球蛋白轻链多肽。
37.根据权利要求36所述的分离的PD-1结合剂，其是抗体、抗体缀合物或其抗原结合片段。
38.根据权利要求36或者权利要求37所述的分离的PD-1结合剂，其是选自F(ab’)2、Fab’、Fab、Fv、scFv、dsFv、dAb和单链结合多肽的抗体片段。
39.一种分离的或纯化的核酸序列，其编码权利要求36至38中任一项所述的PD-1结合剂。
40.一种载体，其包含权利要求39所述的分离的或纯化的核酸序列。
41.一种分离的细胞，其包含权利要求40所述的载体。
42.一种组合物，其包含权利要求36至38中任一项所述的分离的PD-1结合剂或者权利要求40所述的载体以及药学上可接受的载体。
43.一种在哺乳动物中治疗癌症或感染性疾病的方法，所述方法包括向患有癌症或感染性疾病的哺乳动物施用有效量的权利要求42所述组合物，以此在所述哺乳动物中治疗所述癌症或感染性疾病。
44.根据权利要求43所述的方法，其中将所述组合物施用给患有癌症的哺乳动物。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述癌症是黑色素瘤、肾细胞癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、胆囊癌、喉癌、肝癌、甲状腺癌、胃癌、唾液腺癌、前列腺癌、胰腺癌或者Merkel细胞瘤。
46.根据权利要求43所述的方法，其中将所述组合物施用给患有感染性疾病的哺乳动物。
47.根据权利要求46所述的方法，其中所述感染性疾病由病毒或细菌引起。
48.根据权利要求47所述的方法，其中所述病毒是人免疫缺陷病毒(HIV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒、登革热病毒或者B型肝炎病毒(HBV)。
49.根据权利要求43至48中任一项所述的方法，其中所述PD-1结合剂在所述哺乳动物中的半衰期在30分钟和45天之间。
50.根据权利要求43至49中任一项所述的方法，其中所述PD-1结合剂以在约1皮摩尔(PM)和约100微摩尔(μM)之间的KD结合PD-1。
51.根据权利要求43至50中任一项所述的方法，其还包括向所述哺乳动物施用组合物，所述组合物包括(i)结合TIM-3蛋白的抗体和(ii)药学上可接受的载体。
52.根据权利要求43至50中任一项所述的方法，其还包括向所述哺乳动物施用组合物，所述组合物包括(i)结合LAG-3蛋白的抗体和(ii)药学上可接受的载体。
CN201480036088.0A 2013-05-02 2014-05-02 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体 Active CN105339389B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361818755P 2013-05-02 2013-05-02
US61/818,755 2013-05-02
PCT/US2014/036525 WO2014179664A2 (en) 2013-05-02 2014-05-02 Antibodies directed against programmed death-1 (pd-1)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105339389A true CN105339389A (zh) 2016-02-17
CN105339389B CN105339389B (zh) 2021-04-27

Family

ID=51844119

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480036088.0A Active CN105339389B (zh) 2013-05-02 2014-05-02 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体

Country Status (24)

Country Link
US (4) US9815897B2 (zh)
EP (2) EP2992017B1 (zh)
JP (2) JP6742903B2 (zh)
KR (1) KR102243062B1 (zh)
CN (1) CN105339389B (zh)
AU (2) AU2014259719B2 (zh)
BR (1) BR112015026823A2 (zh)
CA (1) CA2910278C (zh)
CY (1) CY1123935T1 (zh)
DK (1) DK2992017T3 (zh)
ES (1) ES2845609T3 (zh)
HK (1) HK1219743A1 (zh)
HR (1) HRP20210122T1 (zh)
HU (2) HUE053069T2 (zh)
LT (2) LT2992017T (zh)
MX (1) MX2015015037A (zh)
NL (1) NL301120I2 (zh)
PL (1) PL2992017T3 (zh)
PT (1) PT2992017T (zh)
RS (1) RS61400B1 (zh)
RU (1) RU2723050C2 (zh)
SG (1) SG11201508528TA (zh)
SI (1) SI2992017T1 (zh)
WO (1) WO2014179664A2 (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018050039A1 (zh) * 2016-09-14 2018-03-22 浙江特瑞思药业股份有限公司 新的抗pd-1纳米抗体及其应用
WO2018113258A1 (zh) * 2016-12-22 2018-06-28 安源医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其用途
CN110049777A (zh) * 2016-11-01 2019-07-23 安奈普泰斯生物有限公司 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体
CN110382545A (zh) * 2017-01-09 2019-10-25 泰萨罗公司 用抗pd-1抗体治疗癌症的方法
CN113234160A (zh) * 2021-05-26 2021-08-10 广州爱思迈生物医药科技有限公司 一种抗pd-1抗体及其应用
CN113557245A (zh) * 2018-12-21 2021-10-26 Ose免疫疗法公司 人源化的抗人pd-1抗体

Families Citing this family (357)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL3409278T3 (pl) 2011-07-21 2021-02-22 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Heterocykliczne inhibitory kinazy białkowej
PT2992017T (pt) * 2013-05-02 2021-01-29 Anaptysbio Inc Anticorpos dirigidos contra a morte programada 1 (pd-1)
EP3049442A4 (en) 2013-09-26 2017-06-28 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
CN114081946A (zh) 2014-03-12 2022-02-25 耶达研究与开发有限公司 降低系统性调节性t细胞水平或活性来治疗cns疾病和损伤
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
US9982052B2 (en) 2014-08-05 2018-05-29 MabQuest, SA Immunological reagents
ES2847311T3 (es) 2014-08-05 2021-08-02 MabQuest SA Reactivos inmunológicos que se unen a PD-1
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
EP3659621A1 (en) 2014-09-13 2020-06-03 Novartis AG Combination therapies for cancer
JP6827415B2 (ja) 2014-10-31 2021-02-10 メレオ バイオファーマ ５ インコーポレイテッド 疾患の処置のための併用療法
TWI595006B (zh) * 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
MA41867A (fr) * 2015-04-01 2018-02-06 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de cellule t et protéine 3 de mucine (tim-3)
MX2017015046A (es) 2015-05-29 2018-05-17 Agenus Inc Anticuerpos anti-antigeno 4 del linfocito t citotoxico (ctla-4) y metodos para uso de los mismos.
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
TW201709929A (zh) 2015-06-12 2017-03-16 宏觀基因股份有限公司 治療癌症的聯合療法
BR112018000768A2 (pt) * 2015-07-13 2018-09-25 Cytomx Therapeutics Inc anticorpos anti-pd-1, anticorpos anti-pd-1 ativáveis e métodos de uso dos mesmos
CA2991628C (en) 2015-07-16 2020-04-07 Bioxcel Therapeutics, Inc. A novel approach for treatment of cancer using immunomodulation
EA201890296A1 (ru) * 2015-07-30 2018-08-31 Макродженикс, Инк. Pd-1-связывающие молекулы и способы их применения
WO2017024465A1 (en) 2015-08-10 2017-02-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
EP3337826A1 (en) 2015-08-20 2018-06-27 Sutro Biopharma, Inc. Anti-tim-3 antibodies, compositions comprising anti-tim-3 antibodies and methods of making and using anti-tim-3 antibodies
CN114605548A (zh) 2015-09-01 2022-06-10 艾吉纳斯公司 抗-pd-1抗体及其使用方法
CN108368175B (zh) * 2015-09-29 2021-08-06 上海张江生物技术有限公司 Pd-1抗体及其用途
AU2016332725A1 (en) 2015-09-29 2018-03-22 Celgene Corporation PD-1 binding proteins and methods of use thereof
JP2018529719A (ja) * 2015-09-30 2018-10-11 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ Ａｌｋ陰性がんを処置するためのｐｄ−１系結合アンタゴニストおよびａｌｋ阻害剤の組合せ
SG10202008325XA (en) 2015-10-02 2020-09-29 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specific for pd1 and tim3
RU2731202C2 (ru) 2015-10-08 2020-08-31 Макродженикс, Инк. Комбинированная терапия для лечения рака
MA43186B1 (fr) * 2015-11-03 2022-03-31 Janssen Biotech Inc Anticorps se liant spécifiquement à pd-1 et leurs utilisations
GEP20217328B (en) 2015-12-14 2021-12-10 Macrogenics Inc Bispecific molecules having immunoreactivity with pd-1 and ctla-4, and methods of use thereof
BR112018012352A2 (pt) 2015-12-16 2018-12-11 Merck Sharp & Dohme Corp. anticorpos anti-lag3 e fragmentos de ligação ao antígeno
US10392442B2 (en) 2015-12-17 2019-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment
CN109069628A (zh) * 2016-01-14 2018-12-21 Bps生物科学有限公司 抗pd-1抗体及其用途
EP3964529A1 (en) * 2016-01-22 2022-03-09 Mabquest SA Non-blocking pd1 specific antibodies
US11214617B2 (en) 2016-01-22 2022-01-04 MabQuest SA Immunological reagents
CU20180088A7 (es) 2016-02-17 2019-05-03 Novartis Ag Anticuerpos anti tgfbeta 2
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
TWI755395B (zh) 2016-05-13 2022-02-21 美商再生元醫藥公司 抗-pd-1抗體與輻射治療癌症之組合
DK3458478T3 (da) * 2016-05-18 2021-03-22 Boehringer Ingelheim Int Anti-pd-1- og anti-lag3-antistoffer til cancerbehandling
CN106008714B (zh) * 2016-05-24 2019-03-15 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人pd-1人源化单克隆抗体及其应用
BR112018074463A2 (pt) 2016-05-27 2019-03-06 Agenus Inc. anticorpos anti-tim-3 e métodos de uso dos mesmos.
KR20190015377A (ko) 2016-06-02 2019-02-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 불응성 호지킨 림프종에서의 니볼루맙을 사용한 pd-1 차단
PT3464368T (pt) 2016-06-02 2023-08-17 Bristol Myers Squibb Co Utilização de um anticorpo anti-pd-1 em combinação com um anticorpo anti-cd30 no tratamento de linfoma
JP2019517512A (ja) 2016-06-03 2019-06-24 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 結腸直腸癌を有する患者の処置における抗ｐｄ−１抗体の使用
EP3463454A1 (en) 2016-06-03 2019-04-10 Bristol-Myers Squibb Company Anti-pd-1 antibody for use in a method of treatment of recurrent small cell lung cancer
WO2017210624A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Anti-pd-1 antibody for use in a method of treating a tumor
WO2017214182A1 (en) * 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
JP2019517557A (ja) 2016-06-10 2019-06-24 アイオー セラピューティクス インコーポレイテッド 癌免疫療法のための受容体選択的レチノイドおよびレキシノイド化合物および免疫調節因子
AU2017283480A1 (en) 2016-06-13 2019-01-24 Torque Therapeutics, Inc. Methods and compositions for promoting immune cell function
KR102531889B1 (ko) 2016-06-20 2023-05-17 키맵 리미티드 항-pd-l1 및 il-2 사이토카인
RU2656181C1 (ru) * 2016-07-13 2018-05-31 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Анти-pd-1-антитела, способ их получения и способ применения
EP3515944A4 (en) 2016-09-19 2020-05-06 Celgene Corporation METHODS OF TREATING IMMUNE DISORDERS WITH PD-1 BINDING PROTEINS
JP2019534859A (ja) 2016-09-19 2019-12-05 セルジーン コーポレイション Ｐｄ−１結合タンパク質を使用して白斑を治療する方法
IL265800B2 (en) 2016-10-11 2023-10-01 Agenus Inc Anti-LAG-3 antibodies and methods of using them
CN110099925A (zh) 2016-10-28 2019-08-06 百时美施贵宝公司 使用抗pd-1抗体治疗尿道上皮癌的方法
CN110062885A (zh) 2016-11-01 2019-07-26 安奈普泰斯生物有限公司 针对t细胞免疫球蛋白和粘蛋白3（tim-3）的抗体
MA46708B1 (fr) 2016-11-02 2021-10-29 Jounce Therapeutics Inc Anticorps anti-pd1 et leurs utilisations
CN110072890B (zh) 2016-11-03 2022-11-29 百时美施贵宝公司 可活化的抗ctla-4抗体及其用途
US11279694B2 (en) 2016-11-18 2022-03-22 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
WO2018098352A2 (en) 2016-11-22 2018-05-31 Jun Oishi Targeting kras induced immune checkpoint expression
AU2017368155B2 (en) 2016-11-30 2022-02-24 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Methods for treatment of cancer comprising TIGIT-binding agents
LT3551660T (lt) 2016-12-07 2023-12-27 Agenus Inc. Antikūnai prieš ctla-4 ir jų naudojimo būdai
KR102603681B1 (ko) 2016-12-07 2023-11-17 아게누스 인코포레이티드 항체 및 이의 사용방법
JOP20190133A1 (ar) 2016-12-08 2019-06-02 Innovent Biologics Suzhou Co Ltd أجسام مضادة لـ Tim-3 لمزجها بأجسام مضادة لـ PD-1
WO2018119474A2 (en) * 2016-12-23 2018-06-28 Remd Biotherapeutics, Inc. Immunotherapy using antibodies that bind programmed death 1 (pd-1)
KR20190098263A (ko) 2017-01-09 2019-08-21 테사로, 인코포레이티드 항tim-3 항체로 암을 치료하는 방법
MX2019008346A (es) 2017-01-13 2019-09-09 Agenus Inc Receptores de celulas t que se unen a ny-eso-1 y metodos de uso de estos.
EP3570870A1 (en) 2017-01-20 2019-11-27 Novartis AG Combination therapy for the treatment of cancer
CN110291109B (zh) 2017-01-20 2023-01-31 大有华夏生物医药集团有限公司 人程序性死亡受体pd-1的单克隆抗体及其片段
EP3579874B1 (en) 2017-02-10 2021-07-21 Novartis AG 1-(4-amino-5-bromo-6-(1 h-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-1 h-pyrazol-4-ol and use thereof in the treatment of cancer
TWI674261B (zh) 2017-02-17 2019-10-11 美商英能腫瘤免疫股份有限公司 Nlrp3 調節劑
WO2018156740A1 (en) 2017-02-24 2018-08-30 Macrogenics, Inc. Bispecific binding molecules that are capable of binding cd137 and tumor antigens, and uses thereof
AU2018229278A1 (en) 2017-02-28 2019-10-17 Sanofi Therapeutic RNA
EP3601355A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
CN117003887A (zh) 2017-04-03 2023-11-07 豪夫迈·罗氏有限公司 抗pd-1抗体与突变体il-2或与il-15的免疫缀合物
BR112019019821A2 (pt) 2017-04-05 2020-04-22 Hoffmann La Roche anticorpo biespecífico, polinucleotídeo, célula hospedeira procariótica ou eucariótica, métodos de produção do anticorpo biespecífico, de tratamento de um indivíduo que tem câncer ou uma infecção viral crônica e de inibição do crescimento de células de tumor, composição farmacêutica e uso do anticorpo biespecífico
US11603407B2 (en) 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
KR102629972B1 (ko) 2017-04-13 2024-01-29 아게누스 인코포레이티드 항-cd137 항체 및 이의 사용 방법
CN106939049B (zh) * 2017-04-20 2019-10-01 苏州思坦维生物技术股份有限公司 拮抗抑制人pd-1抗原与其配体结合的单克隆抗体及其制备方法与应用
EP3615572A1 (en) 2017-04-27 2020-03-04 Tesaro Inc. Antibody agents directed against lymphocyte activation gene-3 (lag-3) and uses thereof
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
CA3062061A1 (en) 2017-05-01 2018-11-08 Agenus Inc. Anti-tigit antibodies and methods of use thereof
MA49144A (fr) 2017-05-18 2020-03-25 Tesaro Inc Polythérapies pour le traitement du cancer
AR111760A1 (es) 2017-05-19 2019-08-14 Novartis Ag Compuestos y composiciones para el tratamiento de tumores sólidos mediante administración intratumoral
MX2019012038A (es) 2017-05-30 2019-11-18 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden una combinacion de un anticuerpo anti gen 3 de activacion del linfocito (lag-3), un inhibidor de la trayectoria del receptor de muerte programada 1 (pd-1), y un agente inmunoterapeutico.
BR112019020610A2 (pt) 2017-05-30 2020-04-22 Bristol-Myers Squibb Company tratamento de tumores positivos para o lag-3
CA3065304A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising an anti-lag-3 antibody or an anti-lag-3 antibody and an anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody
JOP20190279A1 (ar) 2017-05-31 2019-11-28 Novartis Ag الصور البلورية من 5-برومو -2، 6-داي (1h-بيرازول -1-يل) بيريميدين -4- أمين وأملاح جديدة
BR112019025035A2 (pt) 2017-06-01 2020-06-30 Compugen Ltd. método para tratar câncer
CN110678483B (zh) 2017-06-01 2023-09-22 百时美施贵宝公司 用抗pd-1抗体治疗肿瘤的方法
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
TW201904993A (zh) 2017-06-22 2019-02-01 瑞士商諾華公司 IL-1β 結合抗體之用途
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
PE20200717A1 (es) 2017-06-22 2020-07-21 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a cd73 y usos de las mismas
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag IL-1BETA BINDING ANTIBODIES FOR USE IN THE TREATMENT OF CANCER
CA3066747A1 (en) 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
KR20200029543A (ko) 2017-07-13 2020-03-18 아이오 테라퓨틱스, 인크. 암 면역요법을 위해 면역 조절제와 조합된 수용체 서브타입 및 기능 선택적 레티노이드 및 렉시노이드 화합물
SG11202000248UA (en) 2017-07-14 2020-02-27 Innate Tumor Immunity Inc Nlrp3 modulators
JP2020527572A (ja) 2017-07-20 2020-09-10 ノバルティス アーゲー 抗ｌａｇ−３抗体の投薬量レジメンおよびその使用
ES2932354T3 (es) 2017-07-28 2023-01-18 Bristol Myers Squibb Co Dinucleótidos cíclicos como agentes anticáncer
SI3661954T1 (sl) 2017-08-03 2022-05-31 Amgen Inc. Muteini interlevkina-21 in postopki zdravljenja
JP7316263B2 (ja) 2017-08-31 2023-07-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
KR102651946B1 (ko) 2017-08-31 2024-03-26 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
WO2019046500A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
WO2019046591A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 Io Therapeutics, Inc. SELECTIVE RAR AGONISTS IN ASSOCIATION WITH IMMUNE MODULATORS IN ANTICANCER IMMUNOTHERAPY
CN111278854A (zh) 2017-09-04 2020-06-12 艾吉纳斯公司 与混合谱系白血病(mll)特异性磷酸肽结合的t细胞受体和其使用方法
US11497756B2 (en) 2017-09-12 2022-11-15 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Treatment regimen for cancers that are insensitive to BCL-2 inhibitors using the MCL-1 inhibitor alvocidib
MA50657A (fr) 2017-09-26 2020-08-05 Tesaro Inc Formulations de niraparib
MX2020003770A (es) * 2017-09-30 2020-07-29 Tesaro Inc Terapias de combinacion para tratar cancer.
US11801240B2 (en) 2017-10-06 2023-10-31 Tesaro, Inc. Combination therapies and uses thereof
KR20200061399A (ko) 2017-10-10 2020-06-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
JP7254821B2 (ja) 2017-10-16 2023-04-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗がん剤としての環状ジヌクレオチド
EP3700933A1 (en) 2017-10-25 2020-09-02 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
US20210292415A1 (en) 2017-11-06 2021-09-23 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
CN111213059B (zh) 2017-11-06 2024-01-09 豪夫迈·罗氏有限公司 用于癌症的诊断和治疗方法
CA3081602A1 (en) 2017-11-16 2019-05-23 Novartis Ag Combination therapies
TW201925782A (zh) 2017-11-30 2019-07-01 瑞士商諾華公司 靶向bcma之嵌合抗原受體及其用途
WO2019117690A1 (ko) * 2017-12-15 2019-06-20 경북대학교 산학협력단 Pd-l1에 결합하는 펩타이드 및 이의 용도
KR20200105862A (ko) 2017-12-27 2020-09-09 테사로, 인코포레이티드 암을 치료하는 방법
EP3737408A1 (en) 2018-01-08 2020-11-18 Novartis AG Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
BR112020014121A2 (pt) 2018-01-12 2020-12-01 Amgen Inc. anticorpos anti-pd-1 e métodos de tratamento
KR20200109339A (ko) 2018-01-16 2020-09-22 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tim3에 대한 항체를 사용하여 암을 치료하는 방법
WO2019144126A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
BR112020014574A2 (pt) 2018-01-22 2020-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Composições e métodos para o tratamento do câncer
CN117402114A (zh) 2018-01-26 2024-01-16 埃克塞里艾克西斯公司 用于治疗激酶依赖性病症的化合物
IL302626A (en) 2018-01-26 2023-07-01 Exelixis Inc Compounds for the treatment of kinase-dependent disorders
JP2021511357A (ja) 2018-01-26 2021-05-06 エグゼリクシス， インコーポレイテッド キナーゼ依存的障害を処置するための化合物
US20200354457A1 (en) 2018-01-31 2020-11-12 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antibodies comprising an antigen-binding site binding to lag3
EP3746116A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 Novartis AG Combination therapy using a chimeric antigen receptor
CA3090479A1 (en) 2018-02-05 2019-08-08 Tesaro, Inc Pediatric niraparib formulations and pediatric treatment methods
EP3752203A1 (en) 2018-02-13 2020-12-23 Novartis AG Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019161536A1 (en) * 2018-02-23 2019-08-29 Eucure (Beijing) Biopharma Co. , Ltd Anti-pd-1 antibodies and uses thereof
JP7250808B2 (ja) 2018-03-08 2023-04-03 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗がん剤としての環状ジヌクレオチド
AU2019236865A1 (en) 2018-03-23 2020-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against MICA and/or MICB and uses thereof
JP2021519771A (ja) 2018-03-30 2021-08-12 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 腫瘍を処置する方法
JP2021520201A (ja) 2018-04-04 2021-08-19 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 抗ｃｄ２７抗体およびその使用
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
EP3781202A4 (en) * 2018-04-15 2022-01-05 Immvira Co., Limited PD-1 BINDING ANTIBODIES AND THEIR USES
BR112020021539A2 (pt) 2018-04-25 2021-01-19 Innate Tumor Immunity, Inc. Moduladores de nlrp3
EP3784688A2 (en) 2018-04-26 2021-03-03 Agenus Inc. Heat shock protein-binding peptide compositions and methods of use thereof
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
TW202016136A (zh) 2018-06-01 2020-05-01 瑞士商諾華公司 針對ｂｃｍａ之結合分子及其用途
MA52968A (fr) 2018-06-23 2021-04-28 Hoffmann La Roche Méthodes de traitement du cancer du poumon à l'aide d'un antagoniste de liaison à l'axe pd-1, d'un agent de platine et d'un inhibiteur de la topoisomérase ii
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
AU2019301944B2 (en) 2018-07-10 2022-02-24 Novartis Ag 3-(5-hydroxy-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and their use in the treatment of IKAROS Family Zinc Finger 2 (IKZF2)-dependent diseases
KR20210034622A (ko) 2018-07-18 2021-03-30 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제, 항 대사제, 및 백금 제제를 이용한 폐암 치료 방법
US20210261665A1 (en) * 2018-07-19 2021-08-26 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-pd-1 antibodies, dosages and uses thereof
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
EP3826660A1 (en) 2018-07-26 2021-06-02 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 combination therapy for the treatment of cancer
CN112888677A (zh) 2018-08-16 2021-06-01 先天肿瘤免疫公司 被取代的4-氨基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉化合物及其改进的制备方法
CN112996567A (zh) 2018-08-16 2021-06-18 先天肿瘤免疫公司 咪唑并[4,5-c]喹啉衍生的nlrp3-调节剂
CN113038989A (zh) 2018-08-16 2021-06-25 先天肿瘤免疫公司 咪唑并[4,5-c]喹啉衍生的nlrp3调节剂
WO2020044252A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Novartis Ag Dosage regimes for anti-m-csf antibodies and uses thereof
TW202024023A (zh) 2018-09-03 2020-07-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 治療性化合物及其使用方法
TW202024638A (zh) * 2018-09-04 2020-07-01 美商泰沙羅公司 治療癌症之方法
WO2020049534A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Novartis Ag Sting agonist and combination therapy thereof for the treatment of cancer
US20210347760A1 (en) 2018-10-03 2021-11-11 Tesaro, Inc. Niraparib Salts
US20210347758A1 (en) 2018-10-03 2021-11-11 Tesaro, Inc. Crystalline Forms of Niraparib Freebase
CN112839962A (zh) 2018-10-09 2021-05-25 百时美施贵宝公司 用于治疗癌症的抗mertk抗体
CN112867803A (zh) 2018-10-16 2021-05-28 诺华股份有限公司 单独的或与免疫标志物组合的肿瘤突变负荷作为生物标志物用于预测对靶向疗法的应答
CN113286611A (zh) 2018-10-19 2021-08-20 百时美施贵宝公司 用于黑色素瘤的组合疗法
JP2022505647A (ja) 2018-10-23 2022-01-14 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍の処置方法
WO2020089811A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
AU2019380307A1 (en) 2018-11-16 2021-07-01 Bristol-Myers Squibb Company Anti-NKG2A antibodies and uses thereof
JP7469305B2 (ja) * 2018-11-19 2024-04-16 バイオサイトジェン ファーマシューティカルズ （ベイジン） カンパニー リミテッド 抗ｐｄ－１抗体およびその使用
EP3890749A4 (en) 2018-12-04 2022-08-03 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. CDK9 INHIBITORS AND POLYMORPHS THEREOF FOR USE AS CANCER TREATMENT AGENT
EP3891508A1 (en) 2018-12-04 2021-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Methods of analysis using in-sample calibration curve by multiple isotopologue reaction monitoring
EP3666905A1 (en) 2018-12-11 2020-06-17 Sanofi E. coli positive for pks island as marker of positive response to anti-pd1 therapy in colorectal cancer
US20230029213A1 (en) 2018-12-13 2023-01-26 Exelixis, Inc. Crystalline Forms and Salt Forms of a Kinase Inhibitor
EP3897637A1 (en) 2018-12-20 2021-10-27 Novartis AG Dosing regimen and pharmaceutical combination comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
CN113166762A (zh) 2018-12-21 2021-07-23 欧恩科斯欧公司 新的偶联核酸分子及其用途
US20220025036A1 (en) 2018-12-21 2022-01-27 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
US20200369762A1 (en) 2018-12-21 2020-11-26 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
KR20210108422A (ko) 2018-12-21 2021-09-02 노파르티스 아게 IL-1β 결합 항체의 용도
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
CN113228190A (zh) 2018-12-23 2021-08-06 豪夫迈·罗氏有限公司 基于预测的肿瘤突变负荷的肿瘤分类
EP3911417B1 (en) 2019-01-14 2022-10-26 Innate Tumor Immunity, Inc. Heterocyclic nlrp3 modulators , for use in the treatment of cancer
CN113286786A (zh) 2019-01-14 2021-08-20 先天肿瘤免疫公司 Nlrp3调节剂
CN113710702A (zh) 2019-01-14 2021-11-26 健泰科生物技术公司 用pd-1轴结合拮抗剂和rna疫苗治疗癌症的方法
CN113301963A (zh) 2019-01-14 2021-08-24 先天肿瘤免疫公司 用于治疗癌症的作为nlrp3调节剂的取代的喹唑啉类
JP2022517112A (ja) 2019-01-14 2022-03-04 イネイト・テューマー・イミュニティ・インコーポレイテッド Ｎｌｒｐ３モジュレーター
TW202043274A (zh) 2019-01-21 2020-12-01 法商賽諾菲公司 用於晚期實性瘤癌症之治療性ｒｎａ及抗ｐｄ１抗體
CA3126721A1 (en) 2019-01-25 2020-07-30 Exelixis, Inc. Compounds for the treatment of kinase-dependent disorders
CA3129031A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising tno155 and a pd-1 inhibitor
WO2020167990A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Formulations comprising heterocyclic protein kinase inhibitors
EA202192019A1 (ru) 2019-02-15 2021-11-02 Новартис Аг Производные 3-(1-оксо-5-(пиперидин-4-ил)изоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-диона и пути их применения
CN113329792A (zh) 2019-02-15 2021-08-31 诺华股份有限公司 取代的3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途
JP2022525149A (ja) 2019-03-20 2022-05-11 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド ベネトクラクスが失敗した急性骨髄性白血病（ａｍｌ）の処置
EP3941463A1 (en) 2019-03-22 2022-01-26 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Compositions comprising pkm2 modulators and methods of treatment using the same
KR20210146349A (ko) 2019-03-28 2021-12-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
EP3946625A1 (en) 2019-03-28 2022-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
CA3134522A1 (en) 2019-04-19 2020-10-22 Genentech, Inc. Anti-mertk antibodies and their methods of use
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
EP3966782A2 (en) 2019-05-06 2022-03-16 Tesaro, Inc. Methods for characterizing and treating a cancer type using cancer images
US20230295087A1 (en) 2019-05-13 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2020231713A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
JP2022534967A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 多腫瘍遺伝子シグネチャーおよびその使用
JP2022534981A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよび組み合わせ治療
EP3976832A1 (en) 2019-05-30 2022-04-06 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
BR112021024300A2 (pt) 2019-06-03 2022-01-11 Exelixis Inc Formas de sais cristalinas de um inibidor de quinase
AR119069A1 (es) 2019-06-04 2021-11-24 Exelixis Inc Compuestos para el tratamiento de trastornos dependientes de quinasas
KR20220041079A (ko) 2019-06-18 2022-03-31 얀센 사이언시즈 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 B형 간염 바이러스(hbv) 백신 및 항-pd-1 항체의 조합
WO2020255011A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody
WO2021003417A1 (en) 2019-07-03 2021-01-07 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (tnk1) inhibitors and uses thereof
TWI809286B (zh) 2019-07-05 2023-07-21 日商小野藥品工業股份有限公司 以pd-1/cd3雙特異性蛋白質所進行之血液性癌症治療
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
US20220306630A1 (en) 2019-08-06 2022-09-29 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
EP4011918A4 (en) 2019-08-08 2023-08-23 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. DUAL SPECIFIC PROTEIN
CR20220076A (es) 2019-08-30 2022-06-24 Agenus Inc Anticuerpos anti-cd96 y sus métodos de uso
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
EP4031578A1 (en) 2019-09-18 2022-07-27 Novartis AG Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
AU2020350795A1 (en) 2019-09-22 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for LAG-3 antagonist therapy
CA3155341A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Seagen Inc. Combination anti-cd30 adc, anti-pd-1 and chemotherapeutic for treatment of hematopoietic cancers
AU2020353079A1 (en) 2019-09-25 2022-04-14 Bristol-Myers Squibb Company Composite biomarker for cancer therapy
WO2021074695A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Avacta Life Sciences Limited PD-L1 INHIBITOR - TGFβ INHIBITOR BISPECIFIC DRUG MOIETIES.
JP2022553306A (ja) 2019-10-21 2022-12-22 ノバルティス アーゲー Ｔｉｍ－３阻害剤およびその使用
BR112022007376A2 (pt) 2019-10-21 2022-07-05 Novartis Ag Terapias de combinação com venetoclax e inibidores de tim-3
EP4055392A1 (en) 2019-11-05 2022-09-14 Bristol-Myers Squibb Company M-protein assays and uses thereof
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
BR112022008191A2 (pt) 2019-11-08 2022-07-12 Bristol Myers Squibb Co Terapia com antagonista de lag-3 para melanoma
TW202130618A (zh) 2019-11-13 2021-08-16 美商建南德克公司 治療性化合物及使用方法
EP4058465A1 (en) 2019-11-14 2022-09-21 Cohbar Inc. Cxcr4 antagonist peptides
US20230000864A1 (en) 2019-11-22 2023-01-05 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Solid dose pharmaceutical composition
JP2023506187A (ja) 2019-12-09 2023-02-15 シージェン インコーポレイテッド Ｌｉｖ１－ａｄｃおよびｐｄ－１アンタゴニストとの併用療法
MX2022007464A (es) 2019-12-18 2022-06-27 Tesaro Inc Composiciones biofarmaceuticas y metodos relacionados.
EP4077394A1 (en) 2019-12-19 2022-10-26 NGM Biopharmaceuticals, Inc. Ilt3-binding agents and methods of use thereof
MX2022006932A (es) 2019-12-19 2022-07-11 Bristol Myers Squibb Co Combinaciones de inhibidores de diacilglicerol cinasas (dgk) y antagonistas de puntos de control.
BR112022011902A2 (pt) 2019-12-20 2022-09-06 Novartis Ag Terapias de combinação
US20230348458A1 (en) 2020-01-10 2023-11-02 Innate Tumor Immunity, Inc. Nlrp3 modulators
CA3167413A1 (en) 2020-01-17 2021-07-22 Novartis Ag Combination comprising a tim-3 inhibitor and a hypomethylating agent for use in treating myelodysplastic syndrome or chronic myelomonocytic leukemia
US20230067202A1 (en) 2020-01-28 2023-03-02 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Combination Treatments and Uses and Methods Thereof
AU2021213969A1 (en) 2020-01-30 2022-09-01 ONA Therapeutics S.L. Combination therapy for treatment of cancer and cancer metastasis
AU2021212197A1 (en) 2020-01-31 2022-08-04 BioNTech SE Methods of inducing neoepitope-specific T cells with a PD-1 axis binding antagonist and an RNA vaccine
CN115362167A (zh) 2020-02-06 2022-11-18 百时美施贵宝公司 Il-10及其用途
US11577665B2 (en) 2020-02-27 2023-02-14 Cpk Interior Products Urethane and graphene interior trim panel
CA3173356A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, an erk inhibitor and a raf inhibitor or a pd-1 inhibitor.
US20230235073A1 (en) 2020-03-06 2023-07-27 Ona Therapeutics, S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
MX2022010912A (es) 2020-03-06 2022-11-09 Celgene Quanticel Res Inc Combinacion de un inhibidor de desmetilasa-1 especifica de lisina (lsd-1) y nivolumab para usarse en el tratamiento de cancer de pulmon de celulas peque?as (sclc) o cancer de pulmon de celulas no peque?as escamosas (sqnsclc).
JP2023519254A (ja) 2020-03-23 2023-05-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー がんを処置するための抗ｃｃｒ８抗体
JP2023523193A (ja) 2020-04-21 2023-06-02 ノバルティス アーゲー Ｃｓｆ－１ｒにより調節される疾患を治療するための投与レジメン
AU2021265801A1 (en) 2020-05-01 2022-11-17 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. ILt-binding agents and methods of use thereof
BR112022022335A2 (pt) 2020-05-05 2023-01-10 Teon Therapeutics Inc Moduladores de receptor canabinoide tipo 2 (cb2) e usos dos mesmos
AR122644A1 (es) 2020-06-19 2022-09-28 Onxeo Nuevas moléculas de ácido nucleico conjugado y sus usos
CA3187944A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. Lair-1-binding agents and methods of use thereof
MX2022015852A (es) 2020-06-23 2023-01-24 Novartis Ag Regimen de dosificacion que comprende derivados de 3-(1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona.
KR20230033647A (ko) 2020-06-30 2023-03-08 멘두스 비.브이. 난소암 백신에서 백혈병 유래 세포의 용도
JP2023532768A (ja) 2020-07-07 2023-07-31 バイオエヌテック エスエー Ｈｐｖ陽性癌の治療用ｒｎａ
WO2022009157A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Novartis Ag Lhc165 and spartalizumab combinations for treating solid tumors
US11787775B2 (en) 2020-07-24 2023-10-17 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
JP2023536264A (ja) 2020-07-31 2023-08-24 エグゼリクシス， インコーポレイテッド がんの治療のための組み合わせ
EP4188549A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Novartis AG Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US20230314440A1 (en) 2020-08-21 2023-10-05 Exelixis, Inc. Method of treating cancer
WO2022047189A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma
EP4204453A1 (en) 2020-08-31 2023-07-05 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
EP4204021A1 (en) 2020-08-31 2023-07-05 Advanced Accelerator Applications International S.A. Method of treating psma-expressing cancers
EP4204020A1 (en) 2020-08-31 2023-07-05 Advanced Accelerator Applications International S.A. Method of treating psma-expressing cancers
EP4208482A1 (en) 2020-09-02 2023-07-12 Pharmabcine Inc. Combination therapy of a pd-1 antagonist and an antagonist for vegfr-2 for treating patients with cancer
EP3970489A1 (en) 2020-09-18 2022-03-23 CpK Interior Products Inc. Graphene-based antiviral polymer
IL301533A (en) 2020-09-24 2023-05-01 Merck Sharp ַ& Dohme Llc Stable compositions of programmed death receptor 1 (PD-1) antibodies and hyaluronidase variants and parts thereof and methods of using them
CN116406369A (zh) 2020-10-05 2023-07-07 百时美施贵宝公司 用于浓缩蛋白质的方法
WO2022076596A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle-aso constructs targeting stat6
AR123855A1 (es) 2020-10-20 2023-01-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-mertk conjugados con peg y métodos de uso
US20240101666A1 (en) 2020-10-23 2024-03-28 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
WO2022094567A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Ikena Oncology, Inc. Combination of an ahr inhibitor with a pdx inhibitor or doxorubicine
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
AU2021374590A1 (en) 2020-11-04 2023-06-01 Genentech, Inc. Subcutaneous dosing of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4240493A2 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
IL302396A (en) 2020-11-04 2023-06-01 Genentech Inc Dosage for treatment with bispecific anti-CD20/anti-CD3 antibodies
WO2022097060A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
WO2022119830A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Genentech, Inc. Methods and compositions for neoadjuvant and adjuvant urothelial carcinoma therapy
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
CA3201844A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 William W. Bachovchin Fap-activated radiotheranostics, and uses related thereto
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
AU2021416156A1 (en) 2020-12-28 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumors
JP2024503265A (ja) 2020-12-28 2024-01-25 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗体組成物およびその使用の方法
CN116723854A (zh) 2021-01-22 2023-09-08 门德斯有限公司 肿瘤疫苗接种方法
WO2022162569A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Novartis Ag Dosage regimes for anti-cd73 and anti-entpd2 antibodies and uses thereof
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
WO2022187270A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Xilio Development, Inc. Combination of ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
AU2022230384A1 (en) 2021-03-01 2023-09-07 Xilio Development, Inc. Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
CA3212351A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Mendus B.V. Methods of vaccination and use of cd47 blockade
CN117321418A (zh) 2021-03-18 2023-12-29 诺华股份有限公司 癌症生物标志物及其使用方法
TW202304506A (zh) 2021-03-25 2023-02-01 日商安斯泰來製藥公司 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症
IL307262A (en) 2021-03-29 2023-11-01 Juno Therapeutics Inc METHODS FOR DOSAGE AND THERAPY IN COMBINATION OF CHECKPOINT INHIBITOR AND CAR T CELL THERAPY
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
KR20230170039A (ko) 2021-04-13 2023-12-18 뉴베일런트, 아이엔씨. Egfr 돌연변이를 지니는 암을 치료하기 위한 아미노-치환된 헤테로사이클
JP2024516230A (ja) 2021-04-30 2024-04-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんのための治療及び診断方法並びに組成物
EP4330282A1 (en) 2021-04-30 2024-03-06 F. Hoffmann-La Roche AG Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
WO2022234003A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Avacta Life Sciences Limited Cd33 binding polypeptides with stefin a protein
WO2022240741A1 (en) 2021-05-12 2022-11-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Lag3 and gal3 inhibitory agents, xbp1, cs1, and cd138 peptides, and methods of use thereof
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
CN117412767A (zh) 2021-05-25 2024-01-16 雪绒花免疫公司 C-x-c基序趋化因子受体6（cxcr6）结合分子及其使用方法
WO2022256538A1 (en) 2021-06-03 2022-12-08 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and cetuximab
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
BR112023026966A2 (pt) 2021-07-02 2024-03-12 Hoffmann La Roche Métodos para tratar um indivíduo com melanoma, para alcançar uma resposta clínica, para tratar um indivíduo com linfoma não hodgkin, para tratar uma população de indivíduos com linfoma não hodgkin e para tratar um indivíduo com câncer colorretal metastático
WO2023285552A1 (en) 2021-07-13 2023-01-19 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
WO2023010094A2 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
CA3224180A1 (en) 2021-07-28 2023-02-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods and compositions for treating cancer
AU2022320051A1 (en) 2021-07-30 2024-01-25 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
TW202325306A (zh) 2021-09-02 2023-07-01 美商天恩治療有限公司 改良免疫細胞之生長及功能的方法
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
WO2023057534A1 (en) 2021-10-06 2023-04-13 Genmab A/S Multispecific binding agents against pd-l1 and cd137 in combination
TW202334196A (zh) 2021-10-07 2023-09-01 英商阿法克塔生命科學有限公司 Pd-l1結合多肽
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
AU2022375806A1 (en) 2021-10-29 2023-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023081730A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Teon Therapeutics, Inc. 4-hydroxy-2-oxo-1,2-dihydro-1,8-naphthyridine-3-carboxamide derivatives as cannabinoid cb2 receptor modulators for the treatment of cancer
WO2023080900A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating kidney cancer
WO2023083439A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment
TW202319073A (zh) 2021-11-12 2023-05-16 瑞士商諾華公司 用於治療肺癌的組合療法
WO2023097211A1 (en) 2021-11-24 2023-06-01 The University Of Southern California Methods for enhancing immune checkpoint inhibitor therapy
US20230203062A1 (en) 2021-11-24 2023-06-29 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
WO2023097195A1 (en) 2021-11-24 2023-06-01 Genentech, Inc. Therapeutic indazole compounds and methods of use in the treatment of cancer
WO2023111203A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Onxeo New conjugated nucleic acid molecules and their uses
WO2023122573A1 (en) 2021-12-20 2023-06-29 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and pembrolizumab
TW202340148A (zh) 2021-12-22 2023-10-16 美商艾克塞里克斯公司 激酶抑制劑之結晶形式及鹽形式
WO2023122723A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 The Broad Institute, Inc. Panels and methods for diagnosing and treating lung cancer
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023173091A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. Osteoclast-associated ig-like receptor (oscar) and methods of use thereof
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023196987A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2023196964A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine learning identification, classification, and quantification of tertiary lymphoid structures
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023218046A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
WO2023218243A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Avacta Life Sciences Limited Lag-3/pd-l1 binding fusion proteins
WO2023230554A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Pfizer Inc. Combination of a braf inhibitor, an egfr inhibitor, and a pd-1 antagonist for the treatment of braf v600e-mutant, msi-h/dmmr colorectal cancer
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023240058A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. Prognostic and therapeutic methods for cancer
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024015372A1 (en) 2022-07-14 2024-01-18 Teon Therapeutics, Inc. Adenosine receptor antagonists and uses thereof
WO2024020432A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4310197A1 (en) 2022-07-21 2024-01-24 Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda Method for identifying lung cancer patients for a combination treatment of immuno- and chemotherapy
WO2024023740A1 (en) 2022-07-27 2024-02-01 Astrazeneca Ab Combinations of recombinant virus expressing interleukin-12 with pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2024040194A1 (en) 2022-08-17 2024-02-22 Capstan Therapeutics, Inc. Conditioning for in vivo immune cell engineering
WO2024049949A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024069009A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Alentis Therapeutics Ag Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma
WO2024077095A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating bladder cancer
WO2024077166A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating lung cancer

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008156712A1 (en) * 2007-06-18 2008-12-24 N. V. Organon Antibodies to human programmed death receptor pd-1
US8008449B2 (en) * 2005-05-09 2011-08-30 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death 1 (PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
US8168757B2 (en) * 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins

Family Cites Families (69)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
DE69128037T2 (de) 1990-11-13 1998-05-07 Immunex Corp Bifunktionelle wählbare fusionsgene
EP0804590A1 (en) 1993-05-21 1997-11-05 Targeted Genetics Corporation Bifunctional selectable fusion genes based on the cytosine deaminase (cd) gene
US5464758A (en) 1993-06-14 1995-11-07 Gossen; Manfred Tight control of gene expression in eucaryotic cells by tetracycline-responsive promoters
US5814618A (en) 1993-06-14 1998-09-29 Basf Aktiengesellschaft Methods for regulating gene expression
JP4896327B2 (ja) 1999-08-23 2012-03-14 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート，インコーポレイテッド Ｐｄ−１、ｂ７−４の受容体、およびその使用
NZ522844A (en) 2000-06-28 2005-02-25 Brigham & Womens Hospital PD-L2 molecules: novel PD-1 ligands and methods to identify compounds to modulate T cell activation
FR2814642B1 (fr) 2000-10-03 2005-07-01 Ass Pour Le Dev De La Rech En Souris transgenique pour la recombinaison ciblee mediee par la cre-er modifiee
WO2002039813A1 (fr) 2000-11-15 2002-05-23 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Souris sans pd-1 et utilisation de celle-ci
WO2002079499A1 (en) 2001-04-02 2002-10-10 Wyeth Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
AR036993A1 (es) 2001-04-02 2004-10-20 Wyeth Corp Uso de agentes que modulan la interaccion entre pd-1 y sus ligandos en la submodulacion de respuestas inmunologicas
ATE524495T1 (de) 2001-07-31 2011-09-15 Ono Pharmaceutical Co Pd-1-spezifische substanz
WO2003042402A2 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Agents that modulate immune cell activation and methods of use thereof
US7595048B2 (en) 2002-07-03 2009-09-29 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Method for treatment of cancer by inhibiting the immunosuppressive signal induced by PD-1
CN1753912B (zh) 2002-12-23 2011-11-02 惠氏公司 抗pd-1抗体及其用途
JP4532409B2 (ja) 2003-01-23 2010-08-25 小野薬品工業株式会社 ヒトｐｄ−１に対し特異性を有する物質
PL2397156T3 (pl) * 2005-06-08 2017-07-31 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Sposoby i kompozycje do leczenia uporczywych infekcji i nowotworu poprzez hamowanie ścieżki zaprogramowanej śmierci komórki 1 (PD-1)
EP2937360A1 (en) * 2005-06-17 2015-10-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Ilt3 binding molecules and uses therefor
JP5093097B2 (ja) 2006-03-03 2012-12-05 小野薬品工業株式会社 細胞表面機能分子の細胞外領域多量体
NZ629273A (en) 2006-12-27 2015-02-27 Harvard College Compositions and methods for the treatment of infections and tumors
WO2008103475A1 (en) 2007-02-20 2008-08-28 Anaptysbio, Inc. Somatic hypermutation systems
ES2623925T3 (es) 2007-05-30 2017-07-12 Postech Academy-Industry- Foundation Proteínas de fusión de inmunoglobulina
US20090028857A1 (en) * 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
US20120269806A1 (en) 2007-08-21 2012-10-25 The General Hospital Corporation Methods of inducing tolerance
US8563314B2 (en) 2007-09-27 2013-10-22 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for modulating PD1
US8460886B2 (en) 2008-07-04 2013-06-11 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Use of an efficacy marker for optimizing therapeutic efficacy of an anti-human PD-1 antibody on cancers
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
PL2350129T3 (pl) 2008-08-25 2015-12-31 Amplimmune Inc Kompozycje antagonistów PD-1 i sposoby stosowania
EP2342229A1 (en) 2008-09-12 2011-07-13 ISIS Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
CA2736816C (en) 2008-09-12 2018-05-22 Isis Innovation Limited Pd-1 specific antibodies and uses thereof
US8552154B2 (en) 2008-09-26 2013-10-08 Emory University Anti-PD-L1 antibodies and uses therefor
KR101050829B1 (ko) * 2008-10-02 2011-07-20 서울대학교산학협력단 항 ｐｄ-1 항체 또는 항 ｐｄ-ｌ1 항체를 포함하는 항암제
CA2744449C (en) 2008-11-28 2019-01-29 Emory University Methods for the treatment of infections and tumors
EP3192811A1 (en) 2009-02-09 2017-07-19 Université d'Aix-Marseille Pd-1 antibodies and pd-l1 antibodies and uses thereof
CN105693861A (zh) 2009-12-29 2016-06-22 新兴产品开发西雅图有限公司 异二聚体结合蛋白及其应用
US20130202623A1 (en) 2010-02-16 2013-08-08 Nicolas Chomont Pd-1 modulation and uses thereof for modulating hiv replication
CA2791930A1 (en) 2010-03-11 2011-09-15 Kerry Louise Tyson Pd-1 antibody
TW201134488A (en) 2010-03-11 2011-10-16 Ucb Pharma Sa PD-1 antibodies
WO2011115996A1 (en) 2010-03-17 2011-09-22 Anaptysbio, Inc. Method of producing transcripts using cryptic splice sites
WO2011159877A2 (en) 2010-06-18 2011-12-22 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
CA2805564A1 (en) * 2010-08-05 2012-02-09 Stefan Jenewein Anti-mhc antibody anti-viral cytokine fusion protein
WO2012021851A2 (en) 2010-08-12 2012-02-16 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods and compositions for diagnosing and treating lupus
US20130310266A1 (en) 2010-09-03 2013-11-21 Immport Therapeutics, Inc. Methods and Compositions For The Diagnosis And Treatment Of Cancer and Autoimmune Disorders
CN103261217B (zh) 2010-11-11 2017-04-26 港大科桥有限公司 可溶性 pd‑1变体、融合构建体及其用途
JP6130307B2 (ja) 2011-03-17 2017-05-17 ザ ユニバーシティ オブ バーミンガム 再指向性免疫療法
WO2012135408A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Stable formulations of antibodies to human programmed death receptor pd-1 and related treatments
CN107519486B (zh) 2011-06-24 2021-06-11 台北荣民总医院 于感染性与恶性疾病的治疗中提升免疫反应的方法
ES2893855T3 (es) 2011-08-11 2022-02-10 Ono Pharmaceutical Co Agente terapéutico para enfermedades autoinmunes que comprende agonista de PD-1
CA2845536A1 (en) * 2011-08-15 2013-02-21 Amplimmune, Inc. Anti-b7-h4 antibodies and their uses
GB201203442D0 (en) 2012-02-28 2012-04-11 Univ Birmingham Immunotherapeutic molecules and uses
WO2013169693A1 (en) 2012-05-09 2013-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating cancer using an il-21 polypeptide and an anti-pd-1 antibody
SG10201700698WA (en) 2012-05-15 2017-02-27 Bristol Myers Squibb Co Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
EP2852410A4 (en) 2012-05-21 2015-12-23 Mitchell S Felder TREATMENT OF CANCER BY MANIPULATING THE IMMUNE SYSTEM
WO2013174997A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of refractory haematological malignancies
ES2742379T3 (es) 2012-05-31 2020-02-14 Hoffmann La Roche Procedimientos de tratamiento del cáncer usando antagonistas de unión al eje de PD-1 y antagonistas de VEGF
PT2992017T (pt) * 2013-05-02 2021-01-29 Anaptysbio Inc Anticorpos dirigidos contra a morte programada 1 (pd-1)
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
AU2015237864B2 (en) 2014-03-24 2020-12-03 Cancer Research Technology Limited Modified antibodies containing modified IgG2 domains which elicit agonist or antagonistic properties and use thereof
CA2951278A1 (en) 2014-06-19 2015-12-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals having a humanized programmed cell death 1 gene
ES2847311T3 (es) 2014-08-05 2021-08-02 MabQuest SA Reactivos inmunológicos que se unen a PD-1
US20170209574A1 (en) 2014-10-03 2017-07-27 Novartis Ag Combination therapies
JP6827415B2 (ja) 2014-10-31 2021-02-10 メレオ バイオファーマ ５ インコーポレイテッド 疾患の処置のための併用療法
US20170340733A1 (en) 2014-12-19 2017-11-30 Novartis Ag Combination therapies
MA41218A (fr) 2014-12-19 2017-10-24 Advaxis Inc Combinaison de vaccin à base de listeria comportant des anticorps anti-ox40 ou anti-gitr
WO2016106159A1 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Enumeral Biomedical Holding, Inc. Anti-pd-1 antibodies
AU2015374385B2 (en) 2014-12-31 2020-08-06 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Combination tumor immunotherapy
TWI591075B (zh) 2015-01-16 2017-07-11 中央研究院 含胜肽核的多臂接合物
EP3666794A1 (en) * 2016-11-01 2020-06-17 AnaptysBio, Inc. Antibodies directed against programmed death- 1 (pd-1)

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8008449B2 (en) * 2005-05-09 2011-08-30 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death 1 (PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
WO2008156712A1 (en) * 2007-06-18 2008-12-24 N. V. Organon Antibodies to human programmed death receptor pd-1
US8168757B2 (en) * 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BROWN M等: "Tolerance of single, but not multiple, amino acid replacements in antibody VH CDR 2: a means of minimizing B cell wastage from somatic hypermutation?", 《JOURNAL OF IMMUNOLOGY》 *
NGIOW S F等: "Anti-TIM3 Antibody Promotes T Cell IFN-γ-Mediated Antitumor Immunity and Suppresses Established Tumors", 《CANCER RESEARCH》 *
TURNIS M E等: "Combinatorial Immunotherapy: PD-1 may not be LAG-ing behind any more", 《ONCOIMMUNOLOGY》 *
WOO S R等: "Immune Inhibitory Molecules LAG-3 and PD-1 Synergistically Regulate T-cell Function to Promote Tumoral Immune Escape", 《CANCER RESEARCH》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018050039A1 (zh) * 2016-09-14 2018-03-22 浙江特瑞思药业股份有限公司 新的抗pd-1纳米抗体及其应用
US11292841B2 (en) 2016-09-14 2022-04-05 Zhejiang Teruisi Pharmaceutical Inc. Anti-PD-1 nano-antibody and application thereof
CN110049777A (zh) * 2016-11-01 2019-07-23 安奈普泰斯生物有限公司 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体
WO2018113258A1 (zh) * 2016-12-22 2018-06-28 安源医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其用途
US11161904B2 (en) 2016-12-22 2021-11-02 Ampsource Biopharma Shanghai Inc. Anti-PD-1 antibody and use thereof
CN110382545A (zh) * 2017-01-09 2019-10-25 泰萨罗公司 用抗pd-1抗体治疗癌症的方法
CN113557245A (zh) * 2018-12-21 2021-10-26 Ose免疫疗法公司 人源化的抗人pd-1抗体
CN113557245B (zh) * 2018-12-21 2022-10-25 Ose免疫疗法公司 人源化的抗人pd-1抗体
CN113234160A (zh) * 2021-05-26 2021-08-10 广州爱思迈生物医药科技有限公司 一种抗pd-1抗体及其应用
CN113234160B (zh) * 2021-05-26 2022-05-27 广州爱思迈生物医药科技有限公司 一种抗pd-1抗体及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
KR20160034247A (ko) 2016-03-29
RU2015151505A3 (zh) 2018-03-20
CN105339389B (zh) 2021-04-27
JP2016523516A (ja) 2016-08-12
US20230331843A1 (en) 2023-10-19
US20160075783A1 (en) 2016-03-17
US20180051082A1 (en) 2018-02-22
NL301120I1 (zh) 2021-08-18
AU2014259719B2 (en) 2019-10-03
HUE053069T2 (hu) 2021-06-28
AU2014259719A1 (en) 2015-12-17
SI2992017T1 (sl) 2021-04-30
MX2015015037A (es) 2016-07-08
RU2015151505A (ru) 2017-06-07
NZ714537A (en) 2021-09-24
LTPA2021011I1 (zh) 2021-10-25
EP2992017A4 (en) 2017-03-29
JP7009543B2 (ja) 2022-01-25
HRP20210122T1 (hr) 2021-04-16
US10738117B2 (en) 2020-08-11
WO2014179664A2 (en) 2014-11-06
EP2992017B1 (en) 2020-11-18
JP6742903B2 (ja) 2020-08-19
ES2845609T3 (es) 2021-07-27
NL301120I2 (nl) 2021-11-15
WO2014179664A3 (en) 2015-02-19
DK2992017T3 (da) 2021-01-25
US9815897B2 (en) 2017-11-14
EP3770176A1 (en) 2021-01-27
PT2992017T (pt) 2021-01-29
RU2723050C2 (ru) 2020-06-08
SG11201508528TA (en) 2015-11-27
CY1123935T1 (el) 2022-03-24
JP2020115874A (ja) 2020-08-06
AU2019240593B2 (en) 2021-06-10
CA2910278C (en) 2021-09-28
EP2992017A2 (en) 2016-03-09
US20210163589A1 (en) 2021-06-03
CA2910278A1 (en) 2014-11-06
PL2992017T3 (pl) 2021-09-06
HK1219743A1 (zh) 2017-04-13
HUS2100031I1 (hu) 2021-09-28
KR102243062B1 (ko) 2021-04-21
AU2019240593A1 (en) 2019-10-24
BR112015026823A2 (pt) 2017-09-05
NZ753073A (en) 2021-11-26
LT2992017T (lt) 2021-02-25
RS61400B1 (sr) 2021-02-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105339389A (zh) 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体
JP6949713B2 (ja) 抗リンパ球活性化遺伝子３（ｌａｇ−３）抗体
US11242388B2 (en) ROR1 antibody compositions and related methods
US20240076391A1 (en) Human ccr8 binders
US20220235132A1 (en) Pd-1 agonist and method of using same
CN116888156A (zh) 非阻断性人ccr8结合剂
CN116917320A (zh) 鼠交叉反应性人ccr8结合剂
CN116964091A (zh) 人ccr8结合剂
EA040513B1 (ru) Антитела, направленные против гена-3 активации лимфоцитов (lag-3)
NZ714537B2 (en) Antibodies directed against programmed death-1 (pd-1)
NZ753073B2 (en) Antibodies directed against programmed death-1 (PD-1)

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant