CN101115761A

CN101115761A - 2,4-嘧啶二胺化合物的前药及其应用

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Publication number: CN101115761A
Application number: CNA2006800026433A
Authority: CN
Inventors: R·辛格; S·伯汉米迪帕提; E·马苏达
Original assignee: Rigel Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Rigel Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2005-01-19
Filing date: 2006-01-19
Publication date: 2008-01-30
Anticipated expiration: 2026-01-19
Also published as: JP2011236234A; BRPI0606318B1; JP2008527048A; RU2007131430A; EP1856135B1; US10577381B2; US7449458B2; US8785437B2; NL301039I2; US20120108810A1; LTPA2020507I1; ES2337496T3; US20120232036A1; HK1108896A1; AU2006206458B2; US8211889B2; BRPI0606318A2; EP2161275A1; US20190292197A1; HUS2000011I1

Abstract

本发明提供了生物活性2，4－嘧啶二胺化合物的前药，含有该前药的组合物，合成该前药的中间体和方法以及将该前药用于各种应用的方法。

Description

2，4-嘧啶二胺化合物的前药及其应用

1.交叉参考

本申请根据35 U.S.C.§119(e)要求了2005年1月19日提交的临时申请序列号60/645,424、2005年2月18日提交的临时申请序列号60/654,620的在先权利。这些临时申请的内容通过参考完整地纳入本申请书。

2.发明领域

本发明涉及生物活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药，含有该前药的药物组合物，制造该前药的中间体和合成方法，以及将该前药和组合物用于各种情况如用于治疗或预防各种疾病的方法。

3.发明背景

诸如IgE的高亲和力受体(FcεRI)和/或IgG的高亲和力受体(FcγRI)的Fc受体的交联，在肥大细胞、嗜碱细胞和其它免疫细胞中激活一个信号级联，导致产生许多不利后果的化学介质的释放。例如，这样的交联导致I类(立即)过敏性超敏反应的预形成介质(例如组胺)经由脱粒作用从小粒中的储存位置释放。它也导致其它介质(包括白三烯素，前列腺素和血小板激活因子(PAF))的合成和释放，这些介质在炎症反应中扮演重要角色。在Fc受体交联时被合成和释放的其他介质包括细胞因子和一氧化氮。

通过Fc受体(例如FcεRI与/或FcγRI)交联而激活的信号级联包含大量细胞蛋白质。酪氨酸激酶是其中最重要的细胞内信号传播剂。而且，参与跟FcεRI与/或FcγRI受体交联相关的信号转导途径及其它信号转导级联的重要酪氨酸激酶是Syk激酶(参看Valent等人，2002，Intl.J.Hematol.75(4)：257-362)。

FcεRI和FcγRI受体交联后所释放的介质是造成许多不利后果的原因，或者在其中扮演重要角色。最近，已经发现了能抑制FcεRI和/或FcγRI信号级联并具有许多治疗用途的不同种类的2，4-嘧啶二胺化合物。参见，例如，2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US 2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO 03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO 2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)。尽管这些化合物中的许多显示出良好的生物利用度性质，在一些情况下可能需要调整其溶解性或其它性质，从而使其通过特定给药途径的生物利用度实现最优化。

4.发明概述

本发明提供了具有众多生物活性的2，4-嘧啶二胺化合物的前药及其治疗用途，含有该前药的组合物，用于合成该前药的方法和中间体，以及将该前药用于各种体外和体内情况、包括治疗和/或预防至少部分由通过激活Fc受体信号级联介导的疾病的方法。

所述前药通常含有在一个或多个伯胺或仲胺基的氮原子上被前基团(progroup)Rp取代的生物活性2，4-嘧啶二胺化合物，所述前基团在使用条件下可代谢或转化以产生活性2，4-嘧啶二胺。一些实施方案中，所述前基团R^p是含磷前基团。一些实施方案中，所述前基团包括在使用条件下被代谢产生不稳定的α-羟基甲基、α-氨基甲基或α-硫代甲基中间体，然后中间体进一步在体内代谢以产生活性2，4-嘧啶二胺药物的基团或部分。一些实施方案中，所述前基团包括α-羟基烃基、α-氨基烃基或α-硫代烃基部分，例如在使用条件下代谢产生活性2，4-嘧啶二胺药物的α-羟基甲基、α-氨基甲基、α-硫代甲基部分。例如，一些实施方案中，所述前基团R^p具有结构式-CR^dR^d-AR³，式中，各R^d独立选自氢、氰基、任选取代的(C1-C20)烃基、(C1-C20)全氟烃基、任选取代的(C7-C30)芳基烃基和任选取代的6-30元杂芳基烃基，其中各任选的取代基各自独立选自氢、烃基、芳基、芳基烃基、杂芳基和杂烃基，或者，两个R^d与它们所结合的碳原子一起形成含有3-8个碳原子的环烃基；A选自O、S和NR⁵⁰，其中R⁵⁰选自氢、烃基、芳基、芳基烃基、杂芳基、杂芳基烃基和环杂烃基，或者R⁵⁰与R³以及它们所结合的氮原子一起形成3-7元环；R³表示可在体内代谢产生式-CR^dR^d-AH所示基团的基团，其中R^d和A如之前所定义。

R³不一定要相同，前提是它可在所需的使用条件下如在在胃中的酸性条件下和/或被体内的酶代谢产生式-CR^dR^d-AH所示的基团，其中A和R如之前所定义。因此，熟练的技术人员将了解，R³实质上可包括任何已知或未知的羟基、胺或硫醇保护基。合适保护基的非限制性例子可在例如《有机合成保护基》(Protective Groups in OrganicSynthesis)，Greene & Wuts，第二版，John Wiley & Sons，纽约，1991中找到(尤其是第10-142页(醇)、第277-308页(硫醇)和第309-405页(胺)，其内容通过引用纳入本文)。

在一具体实施方案中，R³和A包括醚键、硫醚键、甲硅烷醚键、甲硅烷硫醚键、酯键、硫酯键、酰胺键、碳酸酯键、硫代碳酸酯键、氨基甲酸酯键、硫代氨基甲酸酯键或脲键、-OCH₂SO₃R，其中R是氢、烃基、芳基、芳基烃基或金属盐(例如，钠盐、锂盐、钾盐)；-GCH₂ ⁺N(R⁵¹)₃M^-，其中G是不存在的、-OPO₃-、OSO₃-或-CO₂-，R⁵¹是氢、烃基、芳基、芳基烃基、环杂烃基或环杂烃基烃基，M^-是抗衡离子，通常是卤化物离子等(乙酸根、硫酸根、磷酸根等)。具体的示例性实施方案包括但不限于：其中R³选自R^f、-C(O)R^f、-C(O)OR^f、-C(O)NR^fR^f和-SiR^fR^fR^f的前基团R^p，其中各R^f各自独立选自氢、任选取代的低级烃基、任选取代的低级杂烃基、任选取代的低级环烃基、任选取代的低级杂环烃基、任选取代的(C6-C10)芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的(C7-C18)芳基烃基和任选取代的6-18元杂芳基烃基。在一具体实施方案中，各R^f是相同的。

可对前基团R^p的性质进行选择以调整基础的(underlying)活性2，4-嘧啶二胺化合物的水溶性和其它特性以实现特定给药模式下的最优化。还可对其进行选择以便从身体的特定器官和/或组织如消化道、血液和/或血清中清除，或通过特定器官如肝脏中的酶将其清除。

一些实施方案中，前基团R^p是含磷前基团，包括可在体外被如酯酶、脂肪酶和/或磷酸酶等酶切割的磷酸酯部分。这样的酶在身体中广泛存在，位于例如胃和消化道、血液和/或血清中，且实质上存在于所有组织和器官中。这种含有磷酸酯的前基团R^p通常会提高基础的活性2，4-嘧啶二胺化合物的水溶性，这使得这种含有磷酸酯的前药非常适合需要水溶性的给药模式，如口服、含服、静脉内、肌内和眼给药模式。

一些实施方案中，前药中的各含有磷酸酯的前基团R^p具有式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)(OH)或其盐，式中，R^d如之前的定义，且y是1-3之间的整数，通常是1或2。在一具体实施方案中，各R^d各自独立选自氢、取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的甲基和取代或未取代的苄基。在另一具体实施方案中，各R^d各自独立选自氢和未取代的低级烃基。含有磷酸酯的前基团R^p的具体例子包括-CH₂-O-P(O)(OH)(OH)和-CH₂CH₂-O-P(O)(OH)(OH)和/或相应的盐。

虽然不希望局限于任何操作理论，当示例性含有磷酸酯的前基团R^p中的y是1时，认为这种含有磷酸酯的前药可在体内被诸如磷酸酶、脂肪酶和/或酯酶的酶转化成相应的羟基甲基胺，它通过除去甲醛进一步在体内代谢成活性2，4-嘧啶二胺药物化合物。磷酸酯和甲醛代谢副产品是无害的。

当示例性含有磷酸酯的前基团R^p中的y是2时，认为这种前药可在体内通过除去磷酸烯醇酯(其随后再代谢成乙醛和磷酸酯)代谢成活性2，4-嘧啶二胺药物化合物。磷酸酯和甲醛代谢副产品是无害的。

熟练的技术人员将了解到，某些类型的前体可在体内转化成磷酸基团。例如，这种前体包括但不限于磷酸酯、亚磷酸盐和亚磷酸酯。例如，亚磷酸盐可在体内氧化成磷酸。磷酸酯可在体内水解成磷酸。亚磷酸酯可在体内氧化成磷酸酯，后者又可在体内水解成磷酸。这些磷酸酯前体基团能在体内转化成磷酸酯的能力导致所述前药也可含有包含这种磷酸酯前体的前基团。一些实施方案中，所述磷酸酯前体基团可直接代谢成活性2，4-嘧啶二胺药物而不用首先转化成磷酸酯前药。在其它实施方案中，含有包括这种磷酸酯前体的前基团的前药首先被代谢成相应的磷酸酯前药，后者然后再通过羟基甲基胺代谢成活性2，4-嘧啶二胺药物，如上所述。

一些实施方案中，这种磷酸盐前体基团是磷酸酯。所述磷酸酯可以是无环的或环状的，并且可以是磷酸三酯或磷酸二酯。这种酯的水溶性通常低于相应的磷酸盐前药和相应的活性2，4-嘧啶二胺化合物，因此通常适合需要低水溶性的活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药的递送模式，这包括，例如，但不限于，通过吸入给药。可通过适当选择磷酸酯中酯化基团的数目和性质以对前药的溶解性进行特殊修饰从而适合特定给药模式。

磷酸酯基代谢成相应磷酸基团的机制可通过适当选择酯化部分加以控制。例如，熟知某些酯是酸(或碱)不稳定的，在胃和消化道的酸性条件下生成相应的磷酸盐。当需要在消化道中将磷酸酯前药代谢成相应的磷酸盐前药时(例如，其中的前药是口服给予的)，可选择酸不稳定性磷酸酯前基团。其它类型的磷酸酯是酸和碱稳定的，可通过身体某些组织或器官内酶的作用转化成相应的磷酸盐{参见，例如，Erion等，2004，J.Am.Chem.Soc.126：5154-5163中描述的各种环磷酸酯，通过引用纳入本文)，当需要在身体内的所需靶组织或部位将磷酸酯前药转化成相应的磷酸盐前药时，可选择具有所需代谢特性的磷酸酯。

一些实施方案中，前药中的各含磷酸酯的前基团R^p是由式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)(OR^e)或-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^e)(OR^e)表示的无环磷酸酯或其盐，式中，各R^e各自独立选自取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基(例如，苯基、萘基、4-低级烷氧基苯基、4-甲氧基苯基)、取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基(例如，苄基、1-苯基乙烷-1-基、2-苯基乙烷-1-基)、-(CR^dR^d)_y-OR^f、-(CR^dR^d)_y-O-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_y-O-C(O)OR^f、-(CR^dR^d)_yS-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_y-S-C(O)OR^f、-(CR^dR^d)_yNH-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_yNH-C(O)OR^f和-Si(R^d)₃，其中，R^d、R^f和y如上文所定义。在一具体实施方案中，各R^d选自氢和未取代的低级烃基，和/或各R^e是未取代的低级烷基或苄基。具体的示例性磷酸酯前基团包括但不限于：-CH₂-O-P(O)(OH)(OR^e)、-CH₂CH₂-O-P(O)(OH)(OR^e)、-CH₂-O-P(O)(OR^e)(OR^e)和-CH₂CH₂-O-P(O)(OR^e)(OR^e)，其中R^e选自低级烷基、异丙基和异丁基。

在其它实施方案中，各含磷酸酯的前基团R^p是式

所示的环磷酸酯，式中，各R^g各自独立选自氢和低级烃基；各R^h各自独立选自氢、取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的低级环杂烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基、取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基和取代或未取代的5-14元杂芳基；z是0-2之间的整数；R^d和y如之前所定义。在一具体实施方案中，各含磷酸酯的前基团R^p是式所示的环磷酸酯，其中R^d、R^h和y如之前所定义。

含有这种环磷酸酯前基团的环磷酸酯前药在体内代谢成活性药物化合物的机制部分取决于R^h取代基的性质。例如，各R^h各自独立选自氢和低级烃基的环磷酸酯前基团在体内被酯酶切割。因此，一些实施方案中，选择在体内可被酯酶切割的环磷酸酯前基团。这种环磷酸酯前基团的具体实例包括但不限于选自下组的前基团：

和

或者，具有其中的R^h取代基是取代或未取代的芳基、芳基烃基和杂芳基的前基团的环磷酸酯前药通常不被酯酶切割，而被诸如肝脏中的酶如细胞色素P450酶类代谢成活性前药。例如，经历由主要在肝脏中表达的细胞色素P450酶(CYP)催化的氧化切割反应的一系列环磷酸酯核苷酸前药描述于Erion等，2004，J.Am.Chem.Soc.126：5154-5163。一些实施方案中，选择被肝脏中表达的CYP酶切割的环磷酸酯前基团。这种含环磷酸酯的前基团R^p的具体示例性实施方案包括但不限于具有式

的前基团，其中，R^h选自苯基、3-氯苯基、4-吡啶基和4-甲氧基苯基。

像熟练的技术人员将了解的那样，亚磷酸盐和亚磷酸酯可在体内被氧化产生相应的磷酸盐和磷酸酯类似物。这种反应可由例如氧化酶类、氧化还原酶(oxoreductase)类和其它氧化性酶类在体内进行。因此，所述含磷前基团R^p还可包括上述任何磷酸盐和磷酸酯前基团的亚磷酸盐和亚磷酸酯类似物。一些实施方案中，所述含磷前基团R^p包括但不限于：式-(CR^dR^d)_y-O-P(OH)(OH)、-(CR^dR^d)_y-O-P(OH)(OR^e)和-(CR^dR^d)_y-O-P(OR^e)(R^e)所示的基团或其盐，其中R^d、R^e和y如之前所定义。具体的示例性实施方案包括其中各R^d各自独立选自氢和未取代的低级烃基和/或各R^e各自独立选自未取代的低级烷基和苄基的基团。具体的示例性无环亚磷酸盐和亚磷酸酯前基团包括但不限于：-CH₂-O-P(OH)(OH)、-CH₂CH₂-O-P(OH)(OH)、-CH₂-O-P(OH)(OR^e)和-CH₂CH₂-O-P(OR^e)(OR^e)，其中各R^e选自低级烷基、异丙基和异丁基。具体的示例性环亚磷酸酯前药包括上述环磷酸酯前基团的亚磷酸盐类似物。从概念上来说，包含这种亚磷酸盐和/或亚磷酸酯前基团的前药化合物可被认为是相应的磷酸盐和磷酸酯前药的前药。

如上所述，认为某些含有磷酸根的前药在体内经相应的羟基甲基胺代谢。尽管这些羟基甲基胺在体内代谢成相应的活性2，4-嘧啶二胺化合物，它们在pH 7下稳定并可制备以及作为含有羟基烃基的前药给予。一些实施方案中，这种前药的各含有羟基烃基的前基团R^p具有式-CR^dR^d-OH，其中R^d如之前的定义。具体的示例性含有羟基烃基的前基团R^p是-CH₂OH。

实质上，任何已知的具有生物活性、因此具有治疗活性的2，4-嘧啶二胺化合物可在可用的伯胺或仲胺上用上述一个或多个前基团R^p保护。适当的活性2，4-嘧啶二胺化合物描述于，例如，2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文。在这种2，4-嘧啶二胺化合物中，前基团R^p可连接到任何可用的伯胺或仲胺，包括，例如，2，4-嘧啶二胺部分的N2氮原子、2，4-嘧啶二胺部分的N4氮原子、和/或2，4-嘧啶二胺化合物取代基中所含的伯或仲氮原子。使用含有磷酸根的前基团R^p对于在生理条件下显示出较弱水溶性(例如，溶解度低于约10μg/ml)的2，4-嘧啶二胺化合物特别有用。虽然不希望局限于任何操作理论，据信，含有磷酸根的前基团对于基础活性2，4-嘧啶二胺化合物的溶解度有帮助，这又提高了它口服给药时的生物利用度。据信，所述磷酸盐前基团R^p被消化道中的磷酸酶代谢，使所述基础活性药物被摄取。

已发现，当将下述特定生物活性2，4-嘧啶二胺化合物(化合物1)制成在用星号突出表示的环氮原子上包含式-CH₂-O-P(O)(OH)₂的前基团R^p时(化合物4)，其水溶性和口服生物利用度显著提高：

化合物1 化合物4

值得注意的是，尽管生理条件下活性药物(化合物1)在水性缓冲液中的水溶性约为1-2μg/ml，但相同条件下相应的磷酸盐前药(化合物4)的溶解度大于5mg/ml，即高出约2000倍。这种升高的水溶性使得在肠道中能更好地溶解，从而有利于口服给药。预计当将具有类似较低水溶性的其它活性2，4-嘧啶二胺化合物制成磷酸盐前药时其水溶性和口服生物利用度也显示出类似升高。

如上所述，磷酸酯前药的水溶性通常低于相应的磷酸盐前药，因此通常用于需要低水溶性的情况，如通过吸入给药。对于亚磷酸酯和亚磷酸盐前药的相对水溶性也有同样的规则。

一些实施方案中，这里所述的前药是在2，4-嘧啶二胺部分的N4氮上被取代或未取代的含氮双环取代的2，4-嘧啶二胺化合物，所述双环在下述一个或多个氮原子上含有至少一个这里所述的前基团R^p：双环的氮原子、2，4-嘧啶二胺部分的N2氮和/或2，4-嘧啶二胺部分的N4氮。在具体的示例性实施方案中，所述前药是结构式(I)所示的化合物：

包括其盐、溶剂合物、水合物和N-氧化物，式中：

Y选自CH₂、NR²⁴、O、S、S(O)和S(O)₂；

Z¹和Z²各自独立选自CH和N；

R²是任选取代的低级烃基、低级环烃基、低级杂烃基、低级环杂烃基、芳基、苯基或杂芳基；

R⁵是负电基团，如卤素、氟、氰基、硝基、三卤甲基和三氟甲基；

R¹⁷选自氢、卤素、氟、低级烃基和甲基，或者，R¹⁷可与R¹⁸一起形成氧代(＝O)基团，或者与它们所结合的碳原子一起形成含有3-7个碳原子的螺环；

R¹⁸选自氢、卤素、氟、低级烃基和甲基，或者，R¹⁸可与R¹⁷一起形成氧代(＝O)基团，或者与它们所结合的碳原子一起形成含有3-7个碳原子的螺环；

R¹⁹选自氢、低级烃基和甲基，或者，R¹⁹可与R²⁰一起形成氧代(＝O)基团，或者与它们所结合的碳原子一起形成含有3-7个碳原子的螺环；

R²⁰选自氢、低级烃基和甲基，或者，R²⁰可与R¹⁹一起形成氧代(＝O)基团，或者与它们所结合的碳原子一起形成含有3-7个碳原子的螺环；

R²¹、R²²和R²³各自独立选自氢和上述前基团R^p；和

R²⁴选自氢、低级烃基或上述前基团R^p，前提是R²¹、R²²、R²³和R²⁴中至少有一个必须是前基团R^p。一些实施方案中，R²¹、R²²和R²³各为上面列举的特定前基团之一，且R²⁴是氢。一些实施方案中，R²¹是上面列举的特定前基团之一，且R²²、R²³和R²⁴各自为氢。一些实施方案中，R²¹、R²²和R²³各自为上面列举的特定前基团之一，且R²⁴是低级烃基。

在另一方面，本发明提供了含有一种或多种这里所述的前药和合适的载体、赋形剂或稀释剂的组合物。载体、赋形剂或稀释剂的确切性质将取决于该组合物的所需用途，并可在从兽医用途适用的或可接受的直至人类用途适用的或可接受的范围内。所述组合物可任选包含一种或多种其它化合物。

再在另一方面，本发明提供了用于合成这里所述前药的中间体。对于含有磷酸根或亚磷酸根的前药，所述中间体通常包含其中的含有磷酸根和/或亚磷酸根的前基团的氧原子被在特定条件下可选择性除去的保护基屏蔽的前药。一些实施方案中，所述保护基可在微酸性条件下选择性除去。一些实施方案中，所述中间体是磷酸酯或亚磷酸酯，它们本身就是可代谢成活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药。在一个例证性实施方案中，所述中间体所包含的前药中的各R^p前基团独立为式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(ORⁱ)(ORⁱ)、-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(ORⁱ)(OH)、-(CR^dR^d)_y-O-P(OR)(ORⁱ)或-(CR^dR^d)_y-O-P(ORⁱ)(OH)，其中各Rⁱ各自独立选自低级未取代的烷基、取代或未取代的苯基和取代或未取代的苄基，R^d和y如之前所定义。在一具体实施方案中，所述中间体所包含的磷酸酯和/或亚磷酸酯中的各Rⁱ各自独立选自低级直链直链烷基、低级支链烷基、异丙基、叔丁基和低级环烷基。

一些实施方案中，所述中间体包含的活性2，4-嘧啶二胺的伯胺或仲胺基团上的氮原子被式-CR^dR^d-AH的基团取代，其中R^d和A如之前所定义。

再在另一方面，本发明提供了合成这里所述中间体和/或前药的方法。含有磷酸盐的前药可通过将活性2，4-嘧啶二胺化合物与磷酸酯卤化物，如式X-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^j)(OR^j)或X-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^j)(OH)的磷酸酯卤化物反应而合成，其中各R^j各自独立为可选择性除去的保护基；X是卤化物，如氯化物；R^d和y如之前所定义。一些实施方案中，各R^j是如之前所定义的R^e。除去所述可选择性除去的保护基R^j得到磷酸盐前药。一些实施方案中，各R^j是相同的并选自低级直链烃基、低级支链烃基和低级环烃基。一些实施方案中，各R^j是异丙基或叔丁基。在获得的是中间体混合物，例如含有不同数量的前基团或在2，4-嘧啶二胺分子的不同位置上含有前基团的中间体混合物的实施方案中，可采用标准分离和/或离析技术(例如柱层析)从混合物中分离所需中间体。或者，可采用标准分离和/或离析技术从不同前药的混合物中分离所需前药。

可用类似的方式使活性2，4-嘧啶二胺与磷酸酯卤化物，如式X-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)(OR^e)或X-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^e)(OR^e)的磷酸酯卤化物反应获得无环磷酸酯前药，其中X、R^d、y和R^e如之前所定义。此时无需除去酯化基团R^e。

可用类似的方式从相应的亚磷酸酯卤化物，如式X-(CR^dR^d)_y-O-P(OR^j)(OR^j)、X-(CR^dR^d)_y-O-P(OR^e)(OH)、X-(CR^dR^d)_y-O-P(OR^e)(OR^e)的亚磷酸酯卤化物制备无环亚磷酸盐和亚磷酸酯前药，其中X、R^d，y、R^e和R^j如之前所定义。

可将活性2，4-嘧啶二胺化合物与相应的环磷酸酯或环亚磷酸酯卤化物，如式

的环磷酸酯卤化物或式的环亚磷酸酯卤化物反应制备环磷酸酯和环亚磷酸酯前药，其中X，R，y，z、R^g和R如之前所定义。

其中R^p是-CR^dR^d-AR³的实施方案可用常规方法从相应的2，4-嘧啶二胺药物制备。例如，当A是O时，可将活性2，4-嘧啶二胺化合物与式R^d-C(O)-R^d的醛或酮反应合成中间体，以产生相应的羟基甲基胺中间体(其中R^p是-CR^dR^d-OH)，其中R^d如之前的定义。然后可采用标准技术将该羟基甲基胺中间体转化成前药。根据R^p的定义，所述羟基甲基胺中间体也是本发明的前药。例如，已将含有仲胺的其他药物加入甲醛以得到它们相应的可分离的羟基甲基胺加合物，Bansal等，J.Pharmaceutical Sci.1981，70：(8)，850-854；Bansal等，J.Pharmaceutical Sci.1981，70：(8)，855-856；Khan等，J Pharmaceutical and Biomedical Analysis 1989，7(6)，685-691。或者，可分两个步骤制备含有羟基烃基的前药，首先使活性2，4-嘧啶二胺与双官能亲电子试剂如式X¹-CR^dR^d-X²的卤化物反应，其中X¹表示第一个卤化物，X²表示第二个卤化物，R^d如之前的定义。在具体的示例性实施方案中，所述卤化物具有式I-CR^dR^d-Cl。然后用标准技术将未反应的卤化物羟基化以得到含有羟基烃基的前药。

其中A是O、S或NR⁵⁰的前药可从相应的N-甲基磷酸酯合成。根据该实施方案，磷酸酯基可用式R³-AH的基团代替，其中R³和A如之前所定义，以产生前药，下面将更加详细地讨论。

这里所述的许多前药，尤其是结构式(I)的前药，可代谢产生2，4-嘧啶二胺化合物，该化合物是免疫细胞如肥大细胞、嗜碱细胞、中性细胞和/或嗜酸性细胞脱粒的有力抑制剂。可按照这里的描述制成前药并用于这里所述的各种方法的具有类似生物活性的其它2，4-嘧啶二胺化合物描述于：2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文。因此，再在另一方面，本发明提供了调节，尤其是抑制这种细胞脱粒的方法。该方法通常包括使脱粒的细胞接触有效调节或抑制所述细胞脱粒量的这里所述的合适前药或其可接受的盐、水合物、溶剂合物、N-氧化物和/或组合物。该方法可在体外进行，前提是要在前基团可代谢生成活性2，4-嘧啶二胺化合物的条件下进行接触，或者可在体内进行作为治疗或预防以细胞脱粒为特征、由细胞脱粒造成或与其有关的疾病的治疗方法。

虽然不希望局限于任何操作理论，生化数据证实，这些活性2，4-嘧啶二胺化合物中的多数至少部分通过阻遏或抑制由高亲和性Fc受体与IgE(″FcεRI″)和/或IgG(″FcγRI″)交联启动的信号转导级联而发挥其脱粒抑制效应(参见，例如，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文)。实质上，这些活性2，4-嘧啶二胺化合物是FcεRI-介导的脱粒和FcγRI-介导的脱粒的有力抑制剂。其结果是，在表达这种FcεRI和/或FcγRI受体的任何细胞类型中，这里所述的前药可用于抑制这些Fc受体的信号级联，其中所述细胞包括但不限于巨噬细胞、肥大细胞、嗜碱细胞、中性细胞和/或嗜酸性细胞。

所述方法还能够调节，尤其是抑制作为激活这种Fc受体信号级联的结果的下游过程。这种下游过程包括但不限于：FcεRI-介导的和/或FcγRI-介导的脱粒、产生细胞因子和/或产生和/或释放脂质调质如白三烯和前列腺素。该方法通常包括使表达Fc受体的细胞(如上述细胞类型之一)接触有效调节或抑制Fc受体信号级联和/或受这种信号级联激活影响的下游过程量的这里所述的前药或其可接受的盐、水合物、溶剂合物、N-氧化物和/或组合物。该方法可在体外进行，前提是要在前基团可代谢生成活性2，4-嘧啶二胺化合物的条件下进行接触，或者可在体内进行作为治疗或预防以Fc受体信号级联为特征、由Fc受体信号级联造成或与其有关的疾病的治疗方法，所述疾病如受到下述因素影响的疾病：因脱粒而释放颗粒状特定化学调质、细胞因子的释放和/或合成、和/或脂质调质如白三烯和前列腺素的释放和/或合成。

再在另一方面，本发明提供了治疗和/或预防以作为激活Fc受体信号级联(如FcεRI和/或FcγRI-信号级联)结果的化学调质的释放为特征、由其造成或与其有关的疾病的方法。该方法可在兽医领域的动物中或在人类中进行。该方法通常包括给予动物对象或人有效治疗或预防所述疾病量的这里所述的前药或其可接受的盐、水合物、溶剂合物、N-氧化物和/或组合物。如上所述，某些免疫细胞中FcεRI或FcγRI受体信号级联的激活导致释放和/或合成作为许多疾病药理学调质的化学物质。这些疾病中的任何一种可用本发明的方法治疗或预防。

例如，在肥大细胞和嗜碱细胞中，FcεRI或FcγRI信号级联的激活导致立即(即在受体激活1-3分钟内)通过脱粒过程释放过敏性和/或I型超敏反应的预成调质(例如，组胺、蛋白酶类如类胰蛋白酶等)。这种过敏性或I型超敏反应包括但不限于：对环境和其它应变原(例如，花粉、昆虫和/或动物毒液、食物、药物、造影染料等)的过敏反应、过敏样反应、花粉症、过敏性结膜炎、过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎、湿疹、荨麻疹、粘膜病、组织疾病和某些胃肠疾病。

通过脱粒立即释放预成调质之后是释放和/或合成多种其它化学调质，其中包括血小板激活因子(PAF)、前列腺素和白三烯(例如，LTC4)以及重新合成和释放TNFα、IL-4、IL-5、IL-6、IL-13等细胞因子。这两个过程中的第一个在受体激活后约3-30分钟发生；后者在受体激活后约30分钟-7小时发生。这些“后期”调质被认为部分地负责上述过敏性和I型超敏反应的慢性症状，此外还是炎症和炎性疾病(例如，骨关节炎、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、特发性炎性肠病、肠应激综合征、痉挛性结肠等)、低级瘢痕形成(例如，硬皮病、纤维化增强、瘢痕疙瘩、手术后瘢痕、肺纤维化、血管性痉挛、偏头痛、再灌注损伤和后心肌梗死(post myocardialinfarction))以及干燥复征或综合征的化学调质。所有这些疾病可用这里所述的方法治疗或预防。

可用这里描述的方法治疗或预防的其它疾病包括与嗜碱细胞和/或肥大细胞病理学有关的疾病。这种疾病的实例包括但不限于：皮肤疾病如硬皮病，心脏疾病如后心肌梗死，肺病如肺肌改变或重塑和慢性阻塞性肺病(COPD)，肠道疾病如炎性肠综合征(痉挛性结肠)，急性髓细胞样白血病(AML)和免疫性血小板减少性紫癜。

许多活性2，4-嘧啶二胺化合物也是酪氨酸激酶Syk激酶的有力抑制剂。这种2，4-嘧啶二胺的例子描述于，例如，2003年1月31日调节的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文。因此，再在另一方面，本发明提供了调节，尤其是抑制Syk激酶活性的方法。该方法通常包括使Syk激酶或含有Syk激酶的细胞接触有效调节或抑制Syk激酶活性量的合适的前药或其可接受的盐、水合物、溶剂合物、N-氧化物和/或组合物。一实施方案中，所述Syk激酶是分离的或重组Syk激酶。另一实施方案中，所述Syk激酶是由细胞如肥大细胞或嗜碱细胞表达的内源性或重组Syk激酶。该方法可在体外进行，前提是要在前基团可代谢生成活性2，4-嘧啶二胺化合物的条件下进行接触，或者可在体内进行作为治疗或预防以Syk激酶活性为特征、由其造成或与其有关的疾病的治疗方法。

虽然不希望局限于任何操作理论，认为这种活性2，4-嘧啶二胺化合物主要通过抑制被FcεRI的γ链同源二聚体激活的Syk激酶而抑制细胞脱粒和/或释放其它化学调质。这一γ链同源二聚体由包括FcγRI、FcγRIII和FcαRI在内的其它Fc受体所共享。对于所有这些受体，胞内信号转导由共有的γ链同源二聚体介导。那些受体的结合和聚集导致酪氨酸激酶如Syk激酶的募集和激活。这些常见信号转导活动的结果是，这里所述的代谢成这种活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药可用来调节，尤其是抑制具有这种γ链同源二聚体的Fc受体如FcεRI、FcγRI、FcγRIII和FcαRI的信号级联以及由这些受体引发的细胞应答。

已知Syk激酶在其它信号级联中扮演重要角色。例如，Syk激酶是B细胞受体(BCR)信号转导的效应物(Turner等，2000，Immunology Today 21：148-154)，并且是中性白细胞中整联蛋白(integrin)β(1)、β(2)和β(3)信号转导的基本成分(Mocsai等，2002，Immunity 16：547-558)。作为Syk激酶有力抑制剂的活性2，4-嘧啶二胺化合物可用来调节，尤其是抑制Syk参与的任何信号级联，例如Fc受体、BCR和整联蛋白信号级联，以及由这些信号级联引发的细胞应答。因此，这里所述的代谢成这种活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药可用来调节这种活性。如本领域所熟知的，被调节或抑制的特定细胞应答将部分地取决于特定细胞类型和受体信号级联。可用这种前药调节或抑制的细胞应答的非限制性例子包括呼吸爆发、细胞粘附、细胞脱粒、细胞扩散、细胞迁移、吞噬作用(例如在巨噬细胞内)、钙离子流(例如在肥大细胞、嗜碱细胞、中性白细胞、嗜酸性细胞和B细胞中)、血小板聚集和细胞成熟(例如在B细胞中)。

因此，在另一方面，本发明提供了一种调节，尤其是抑制Syk在其中扮演角色的信号转导级联的方法。该方法通常包括使Syk依赖性受体或表达Syk依赖性受体的细胞接触有效调节或抑制信号转导级联量的这里所述的合适前药或其可接受的盐、水合物、溶剂合物、N-氧化物和/或组合物。该方法还可用来调节，尤其是抑制由于特定Syk依赖性信号转导级联激活而引发的下游过程或细胞应答。该方法可用于调节任何现在已知或随后发现Syk在其中扮演角色的信号转导级联。该方法可在体外进行，前提是要在前基团可代谢生成活性2，4-嘧啶二胺化合物的条件下进行接触，或者可在体内进行作为治疗或预防以Syk依赖性信号转导级联的激活为特征、由其造成或与其有关的疾病的治疗方法。

最近的研究显示，胶原对血小板的激活由与免疫受体相同的途径介导，其中FcRγ上的免疫受体酪氨酸激酶基序扮演关键角色(Watson & Gibbons，1998，Immunol.Today 19：260-264)，同时，FcRγ在小鼠泡沫化损伤后发生新内膜增生中扮演关键角色，最可能是通过胶原诱导的血小板的激活和白细胞募集(Konishi等，2002，Circulation 105：912-916)。因此，这里所述的前药也可用于抑制胶原诱导的血小板激活以及用于治疗或预防与这种血小板激活有关或由其造成的疾病，如血管损伤后的内膜增生和再狭窄。

细胞和动物数据也证实，许多这些活性2，4-嘧啶二胺化合物也可用于治疗或预防自身免疫性疾病和/或这种疾病的症状{参见，例如，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文}。其结果是，这种活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药同样可用于治疗或预防这种自身免疫性疾病和/或症状。该方法通常包括给予患有自身免疫性疾病或有发生自身免疫性疾病风险的对象有效治疗或预防所述自身免疫性疾病和/或其相关症状的量的这里所述的合适前药或其可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物或组合物。可用这种前药治疗或预防的自身免疫性疾病包括那些通常与非过敏性超敏反应(II型、III型和/或IV型超敏反应)有关的疾病和/或那些至少部分由单核细胞中FcγR信号级联的活化介导的疾病。这种自身免疫性疾病包括但不限于：那些通常称为单器官或单细胞类型自身免疫性疾病的自身免疫性疾病以及那些通常称为系统性自身免疫性疾病的自身免疫性疾病。通常称为单器官或单细胞类型自身免疫性疾病的疾病的非限制性例子包括：桥本甲状腺炎、自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血性自身免疫萎缩性胃炎、自身免疫性脑脊髓炎、自身免疫性睾丸炎、古德帕斯彻病、自身免疫性血小板减少症、交感性眼炎、重症肌无力、格雷夫斯病、原发性胆汁性肝硬变、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎和膜性肾小球病。通常称为系统性自身免疫性疾病的疾病的非限制性例子包括：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、舍格伦综合征、莱特尔综合征、多肌炎-皮肌炎、系统性硬化、结节性多动脉炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮。基于β细胞(体液)或T细胞的其它自身免疫性疾病包括自身免疫性脱发、I型或青少年糖尿病和甲状腺炎。

5.附图简述

图1提供了说明含磷前药代谢途径的过程；

图2提供了说明环磷酸酯前药代谢途径的过程；

图3说明了示例性环磷酸酯前药的示例性合成过程；和

图4-11提供了药物化合物1和/或前药化合物4各种药代动力学数据的图示。

6.发明详述

6.1定义

文中，以下术语具有以下含义：

“烃基”本身或作为另一取代基的一部分是指含有一定碳原子(例如，C1-C6是指一到六个碳原子)的饱和或非饱和的支链、直链或环状一价烃基，它们是由母体烷烃、烯烃或炔烃的单个碳原子上的一个氢原子被消去而得到的。典型的烃基包括但不限于：甲基；乙基如乙烷基、乙烯基、乙炔基；丙基如1-丙基、2-丙基、1-环丙基、1-烯-1-丙基、1-烯-2-丙基、2-烯-1-丙基、1-烯-环丙基、2-烯环丙基、1-炔-1-丙基、2-炔-1-丙基等；丁基如正丁烷基、异丁烷基、2-甲基-1-丁烷基、2-甲基-2-丁烷基、1-环丁烷基、1-烯-1-丁基、1-烯-2-丁基、2-甲基1-烯-1-丙基、2-烯-1-丁基、2-烯-2-丁基、1，3-二烯-2-丁基、1-烯-1-环丁基、1-烯-3-环丁烯、1，3-二烯-1-环丁基，1-炔-1-丁基、1-炔-3-丁基、3-炔-1-丁基等。当注明饱和水平时，使用定义如下的命名法“烷基”、“链烯基”和/或“炔基”。文中，“低级烃基”指(C1-C8)烃基。

“烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指母体烷烃上的单个碳原子上的一个氢原子被消去而得到的饱和的支链、直链或环状烃基。典型的烷基包括但不限于：甲基；乙基；丙基，如1-丙基、2-丙基(异丙基)、1-环丙基等；丁基，如1-丁基、2-丁基(仲丁基)、2-甲基-1-丙基(异丁基)、2-甲基-2-丙基(t-丁基)、1-环丁基等；等等。文中，“低级烷基”指(C1-C8)烷基。

“链烯基”本身或作为另一取代基的一部分是指由母体烯烃上的单个碳原子上的一个氢原子被消去而得到的含有至少一个碳碳双键的不饱和的支链、直链或环状烃基。围绕碳碳双键所述基团可以是顺式的也可以是反式的。典型的链烯基包括但不限于：乙烯基；丙稀基，如1-烯-1-丙基、1-烯-2-丙基、2-烯-1-丙基、2-烯-2-丙基、1-烯-1-环丙基、2-烯-1-环丙基；丁烯，如1-烯-1-丁基、1-烯-2丁基、2-甲基-1-烯-1-丙基、2-烯-1-丁基、2-烯-2-丁基、1，3-二烯-1-丁基、1，3-二烯-2-丁基、1-烯-1-环丁基、1-烯-3-环丁基、1，3-二烯-1-环丁基等；等等。文中，“低级链烯基”指(C2-C8)链烯基。

“炔基”本身或作为另一取代基的一部分，是指由母体炔烃上的单个碳原子上的一个氢原子被消去而得到的含有至少一个碳碳三键的不饱和的支链、直链或环状烃基。典型的炔基包括但不限于：乙炔基；丙炔基，如1-炔-1-丙基、2-炔-1-丙基，等；丁炔基，如1-炔-1-丁基、1-炔-3-丁基、3-炔-1-丁基等等。文中，“低级炔基”指(C2-C8)炔基。

“烃二基”本身或作为另一取代基的一部分，是指由母体烷烃、烯烃或炔烃上的两个不同碳原子上各有一个氢原子被消去而得到的、或者是由母体烷烃、烯烃或炔烃上的单个碳原子上有两个氢原子被消去而得到的、含有一定碳原子(例如，C1-C6是指一到六个碳原子)的饱和的或不饱和的支链、直链或环状二价烃基。其中，两个一价的中心原子或二价中心原子中的每一价都可以与相同的或不同的原子成键。典型的烃二基包括但不限于：甲二基；乙二基，如1，1-乙二基、1，2-乙二基、1，1-乙二烯基、1，2-乙二烯基；丙二基，如1，1-丙二基、1，2-丙二基、2，2-丙二基、1，3-丙二基、1，1-环丙二基、1，2-环丙二基、1-烯-1，1-丙二基、1-烯-1，2-丙二基、2-烯-1，2-丙二基、1-烯-1，3-丙二基，等；丁二基，如1，1-丁二基、1，2-丁二基、1，3-丁二基、1，4-丁二基、2，2-丁二基、2-甲基-1，1-丁二基、2-甲基-1，2-丁二基、1，1-环丁二基、1，2-环丁二基、1，3-环丁二基、1-烯-1，1-丁二基、1-烯-1，2-丁二基、1-烯-1，3-丁二基、1-烯-1，4-丁二基、2-甲基-1-烯-1，1-丁二基、2-甲亚磺酸基-1，1-丁二基、1，3-二烯-1，1-丁二基、1，3-二烯-1，2-丁二基、1，3-二烯-1，3-丁二基、1，3-二烯-1，4-丁二基、1-烯-1，2-环丁二基、1-烯-1，3-环丁二基、2-烯-1，2-环丁二基、1，3-二烯-1，2-环丁二基、1，3-二烯-1，3-环丁二基、1-炔-1，3-丁二基、1-炔-1，4-丁二基、1，3-二炔-1，4-丁二基等等。当表示具体饱和水平时，使用烷二基、烯二基和炔二基的命名法。当具体表示所指的两价在同一个碳原子上时，使用“亚烷基”的命名法。一些实施方案中，烃二基为(C1-C8)烃二基。具体的实施方案包括其中中心位于末端碳原子的饱和的非环状烷二基，例如，甲二基(桥亚甲基)；1，2-乙二基(桥亚乙基)；1，3-丙二基(桥亚丙基)；1，4-丁二基(桥亚丁基)；以及它们的相似物(也参考下文定义的桥烃基)。

“桥烃基”本身或作为另一取代基的一部分，是指由直链母体烷基、烯基或炔基上的两个末端碳原子中的每一个上的一个氢原子被消去而得到、含有两个末端一价的极性中心的直链的饱和的或不饱和的烷二基基团。具体桥烃基中的双键或三键的位次(如果存在)在方括号中表示。典型的桥烃基基团包括但不限于：桥亚甲基；桥乙烃基，例如桥乙基、桥乙烯基、桥乙炔基；桥丙烃基，例如桥丙基、桥丙[1]烯基、桥丙[1，2]二烯基、桥[1]炔基等；桥丁烃基，例如桥丁基，桥丁[1]烯基、桥丁[2]烯基、桥丁[1，3]二烯基、桥丁[1]炔基、桥丁[2]炔基、桥丁[1，3]二炔基等，以及它们的相似物。当表示具体饱和水平时，使用桥烷基、桥烯基和/或桥炔基命名法。一些实施方案中，桥烃基为(C1-C8)或(C1-C3)桥烃基。具体实施方案包括直链的饱和的桥亚烷基，例如，桥亚甲基、桥亚乙基、桥亚丙基、桥亚丁基等等。

“杂烃基”、“杂烷基”、“杂烯基”、“杂炔基”、“杂烃二基”“烃二基”和“杂桥烃基”本身或作为另一取代基的一部分，分别是指其中的一个或多个碳原子独自地被相同的或不同的杂原子或杂原子基团所取代的烃基、烷基、烯基、炔基、烃二基和桥烃基。典型的能取代碳原子的杂原子或杂原子基团包括但不限于：-O-、-S-、-S-O-、-NR’-、-PH-、-S(O)-、-S(O)₂-、-S(O)NR’-、-S(O)₂NR’-等等，还包括它们的联合体，其中的每一个R’都独立地表示氢或(C1-C8)烃基。

“环烃基”和“杂环烃基”本身或作为另一取代基的一部分，分别是指环状的烃基和杂烃基。对于杂烃基而言，杂原子可占据与所述分子的残余部分相连接的位置。典型的环烃基包括但不限于：环丙基；环丁基，如环丁烷基、环丁烯基、环戊基，如环戊烷基、环戊烯基；环己基，如环己烷基、环己烯基等等。典型的杂环烃基包括但不限于：四氢呋喃基(如2-四氢呋喃基、3-四氢呋喃基等)、六氢吡啶基(如1-六氢吡啶基、2-六氢吡啶基等)、吗啉基(如3-吗啉基、4-吗啉基等)、哌嗪基(如1-哌嗪基、2-哌嗪基等)等等。

“非环杂原子桥基”是指其中主链原子完全是杂原子和/或杂原子基团的二价桥基。典型的非环杂原子桥基包括但不限于：-O-、-S-、-S-O-、-NR’-、-PH-、-S(O)-、-S(O)₂-、-S(O)NR’-、-S(O)₂NR’-等等，包括它们的联合体，其中的每一个R’都独立地表示氢或(C1-C8)烃基。

“母体芳香环系统”是指不饱和的环状的或多环系统，它含有共轭的π电子体系。在“母体芳香环系统”的定义中特别包括稠环系统，其中的一个或多个环为芳香环，而且其中有一个或多个环为饱和的或不饱和的环，例如：芴、茚满、茚、苯烯、四氢化萘等。典型的母体芳香环体系包括但不限于：蒽烯、亚萘烯、菲烯、蒽、茂并芳庚、苯、1，2-苯并菲、六苯并苯、荧蒽、芴、十六碳烯、己芬、己烯、印地西(indacene)、s-印地西(indacene)、茚满、茚、萘、并八苯、八苯、八烯、卵烯、五-2，4-二烯、并五苯、并环戊二烯、戊酚、二萘嵌苯、菲那啉(phenalene)、菲、二苯并菲、七曜烯、嵌二萘、皮蒽、玉红省、四氢化萘、三苯烯、萘等等。

“芳基”本身或作为另一取代基的一部分，是指单价的芳香族碳氢化合物基团，它们含有一定数量的碳原子(例如：C6-C15表示6到15个碳原子)，是由母体芳香环体系上的单个碳原子上的一个氢原子被消去而得到的。典型的芳香基包括但不限于衍生自蒽烯、亚萘烯、菲烯、蒽、茂并芳庚、苯、1，2-苯并菲、六苯并苯、荧蒽、芴、十六碳烯、己芬、己烯、印地西(indacene)、s-印地西(indacene)、茚满、茚、萘、并八苯、八苯、八烯、卵烯、五-2，4-二烯、并五苯、并环戊二烯、戊酚、二萘嵌苯、菲那啉(phenalene)、菲、二苯并菲、七曜烯、嵌二萘、皮蒽、玉红省、四氢化萘、三苯烯、萘等等及其氢异构体的基团。在优选的实施方案中，芳基为(C6-C15)芳基，其中(C6-C10)较好。具体的示例性芳基包括苯基和萘基。

“芳基芳基”本身或作为另一取代基的一部分，是指单价的碳氢化合物基团，它们是由其中两个或更多相同或不同的母体芳香环系统通过单键直接相连的环系统中的单个碳原子上的一个氢被消去而得到的，其中的那些直接的环连接点的数量比所涉及的母体芳香环系统的数量少一个。典型的芳基芳基包括但不限于：联苯基、三苯基、苯基-萘基、联萘基、联苯基-萘基等等。当芳基芳基中的碳原子数是确定的时，该数量为包含每一个母体芳香环的碳原子数。例如，(C6-C15)芳基芳基是指其中每个母体芳香环含有6到15个碳原子的芳基芳基，如联苯基、三苯基、联萘基和苯基萘基等。一些实施方案中，芳基芳基的每一个母体芳香环各为(C6-C15)芳香基，更优选(C6-C10)芳香基。具体的示例性芳基芳基包括其中所有母体芳香环体系都相同的芳基芳基，例如：联苯基、三苯基、联萘基和三萘基等。

“二芳基”本身或作为另一取代基的一部分，是指含有两个由单键直接相连的相同的母体芳基体系的芳基芳基。典型的二芳基包括但不限于：联苯基、联萘基、联蒽基等等。一些实施方案中，所述芳香环体系为(C6-C15)芳香环，更典型的是(C6-C10)芳香环。具体的示例性二芳基是联苯基。

“芳基烃基”本身或作为另一取代基的一部分，是指一个无环的烃基，其中与一个碳原子(特别是末端或sp³碳原子)相连的一个氢被一个芳基取代。典型的芳基烷基包括但不限于：苯基、2-苯-1-乙基、2-苯基-1-乙烯基、萘甲基、2-萘基-1-乙基、2-萘基-1-乙烯基、2-萘苯基-1-乙基等等。当指明具体烃基部分时，使用芳烷基、芳烯基和/或芳炔基命名法。一些实施方案中，芳基烃基为(C7-C21)芳基烃基，例如，芳基烃基的烷基、链烯基或炔基部分为(C1-C6)且芳基部分为(C6-C15)。在一些具体的实施方案中，芳基烃基为(C7-C13)，例如，芳基烃基的烷基、链烯基或炔基部分为(C1-C3)且芳基部分为(C6-C10)。

“母体异芳香环体系”是指其中的一个或多个碳原子各自单独地被相同的或不同的杂原子或杂原子基团所取代的母体芳香环体系。典型的取代碳原子的杂原子或杂原子基团包括但不限于：N、NH、P、O、S、S(O)、S(O)₂、Si等。“母体杂芳环体系”的定义中的特别包括稠环体系，其中有一个或多个环为芳环，而且其中一个或多个环为饱和的或不饱和的，例如：苯化二氧、苯并呋喃、苯并二氢呋喃、苯并吡喃、吲哚、吲哚啉和氧杂蒽等。“母体杂芳环体系”的定义中也包括那些可识别的环，它们包括常见的取代物，如苯并呋喃酮和1-甲基-1，2，3，4-四唑。“母体杂芳环体系”的定义中特别排除与环状的聚烯基乙二醇(如环状的聚乙烯基乙二醇)融合的苯环。典型的母体杂芳环体系包括但不限于：氮蒽、苯并咪唑、苯并异唑、苯并二氧、苯并二噁烷、苯并呋喃、苯并呋喃酮、苯并噻重氮、苯并噻唑、苯并三唑、苯并噁嗪、苯并唑、唑啉、咔啉、β-咔啉、苯并二氢吡喃、苯并呋喃、邻二氮杂萘、呋喃、咪唑、吲唑、吲唑啉、二氢吲哚、异苯并呋喃、异苯并吡喃、异吲哚、异吲哚啉、异喹啉、异噻唑、异唑、吡啶、噁二唑、噁唑、菲啶、邻二氮杂菲、吩噻、二氮陆圜、蝶啶、嘌呤、吡喃、吡嗪、对苯二酚、喹喔啉、四唑、噻重氮、噻唑、噻吩、三唑、氧杂蒽等等。

“杂芳基”本身或作为另一个取代基的一部分指的是含有一定的环原子数的单价芳香杂环化合物(例如，5-14元的含义是5到14个环原子)，该化合物是从母体芳香杂环体系的单个原子上消去一个氢原子得到的。典型的杂芳基包括但不限于衍生自吖啶、苯并咪唑、苯并异噁唑、苯并二噁烷、苯并二唑、苯并呋喃、苯并吡喃酮、苯并噻二唑、苯并噻唑、苯并三唑、苯并嗪、苯并唑、苯并唑啉、咔唑、β-咔啉、苯并二氢呲喃、苯并呲喃、肉啉、呋喃、咪唑、吲唑、吲哚、二氢吲哚、吲嗪、异苯并呋喃、异苯并吡喃、异吲哚、异二氢吲哚、异喹啉、异噻唑、异噁唑、吡啶、噁二唑、噁唑、萘嵌间二氮杂苯、菲啶、邻二氮杂菲、吩嗪、酞嗪、蝶啶、嘌呤、吡喃、吡嗪、吡唑、哒嗪、吡啶、嘧啶、吡咯、吡咯嗪、噻唑啉、噻啉、噻啉嗪、噻喔嗪、四唑、噻重氮、噻唑、噻吩、三唑以及(夹)氧杂蒽等等及其加氢异构体的基团。在优选的实施方案中，杂芳基是5-14元杂芳基，尤其优选5-10元杂芳基。

“杂芳基-杂芳基”本身或作为另一个取代基的一部分是指从一个环状系统中的单个原子上消去一个氢原子得到的单价芳香杂环基团，在这个环状系统里，两个或更多相同或不同的母体芳香杂环系统直接以单键结合，其中这种直接的环交叉点数量比所涉及的母体芳香杂环体系少一个。典型的杂芳基-杂芳基包括但不限于：二吡啶基、三吡啶基、吡啶嘌呤基以及二嘌呤基等等。当原子的数量指明时，该数量是指包含每个母体芳香杂环体系的原子数量。例如，5-15元杂芳基-杂芳基是其中每一个母体芳香杂环系统都包含5-15个原子的杂芳基一杂芳基，如二吡啶基、三吡啶基等。一些实施方案中，每一个母体芳香杂环系统都是一个独立的5-15元杂芳基，更典型的是5-10元杂芳基。具体的示例性杂芳基-杂芳基包括那些其中所有母体芳香杂环系统是相同的杂芳基-杂芳基。

“二杂芳基”本身或作为另一个取代基的一部分是指含有两个相同的直接以单键结合的母体杂环芳香环系统的杂芳基-杂芳基基团。典型的二杂芳基包括但不限于：二吡啶基、二嘌呤基和二喹啉基等等。一些实施方案中，所述芳香杂环系统是5-15元芳香杂环，更典型的是5-10元芳香杂环。

“杂芳基烃基”本身或作为另一个取代基的一部分指的是无环烃基基团，其中与一个碳原子结合(典型的是末端碳sp³碳原子)的一个氢原子被杂芳基取代。当指明具体的烃基部分时，使用杂芳基烷基、杂芳基烯基和/或杂芳基炔基命名法。一些实施方案中，所述杂芳基烃基是6-21元杂芳基烃基，例如，杂芳基烃基的烷基、烯基或炔基部分是(C1-C6)烃基且杂芳基部分是5-15元杂芳基。一些具体的示例性实施方案中，所述杂芳基烃基是6-13元杂芳基烃基，例如，烷基、烯基或炔基部分是(C1-C3)烃基且杂芳基部分是5-10元杂芳基。

除非有其他说明，“卤素”或“卤代”本身或作为另一个取代基的一部分是指氟、氯、溴和碘，。

“卤代烃基”本身或作为另一个取代基的一部分指的是其中一个或更多的氢原子被卤素取代的烃基。因此，术语“卤代烃基”包括一卤代烃基、二卤代烃基和三卤代烃基等等，直到全卤代烃基。例如，短语“(C1-C2)卤代烃基”包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、1，1-二氟乙基、1，2-二氟乙基、1，1，1-三氟乙基和全氟乙基等。

以上定义的基团可以带有在本领域中通常用于创建其他易于识别取代基的前缀和/或后缀。例如，“烷氧基”指具有式-OR”的基团，“烷基胺”指具有式-NHR”的基团，“二烷基胺”指具有式-NR”R”的基团，其中每一个R”都是独立的烃基。另一个例子，“卤代烷氧基”指具有式-OR的基团，其中的R是卤代烷基。

当用来修饰具体基团或根时，“取代的”表示具体基团或根上的一个或多个氢原子各自独立地被相同或不同的取代基代替。在具体基团或根中可用于取代饱和碳原子上的氢的取代基包括但不限于：-R⁶⁰、卤素、-O^-M⁺、＝O、-OR⁷⁰、-SR⁷⁰、-S-M⁺、＝S、-NR⁸⁰R⁸⁰、-NR⁷⁰、＝N-OR⁷⁰、三卤甲基、-CF₃、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO₂、＝N₂、-N₃、-S(O)₂R⁷⁰、-S(O)₂O^-M⁺、-S(O)₂OR⁷⁰、-OS(O)₂R⁷⁰、-OS(O)₂O^-M⁺、-OS(O)₂OR⁷⁰、-P(O)(O^-)₂(M⁺)₂、-P(O)(OR⁷⁰)O^-M⁺、-P(O)(OR⁷⁰)(OR⁷⁰)、-C(O)R⁷⁰、-C(S)R⁷⁰、-C(NR⁷⁰)R⁷⁰、-C(O)O^-M⁺、-C(O)OR⁷⁰、-C(S)OR⁷⁰、-C(O)NR⁸⁰R⁸⁰、-C(NR⁷⁰)NR⁸⁰R⁸⁰、-OC(O)R⁷⁰、-OC(S)R⁷⁰、-OC(O)O^-M⁺、-OC(O)OR⁷⁰、-OC(S)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)R⁷⁰、-NR⁷⁰C(S)R⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)O^-M⁺、-NR⁷⁰C(O)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(S)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)NR⁸⁰R⁸⁰、-NR⁷⁰C(NR⁷⁰)R⁷⁰和-NR⁷⁰C(NR⁷⁰)NR⁸⁰R⁸⁰，其中R⁶⁰选自：烃基、环烃基、杂烃基、环杂烃基、芳基、芳基烃基、杂芳基和杂芳基烃基；各R⁷⁰独立为氢或R⁶⁰；各R⁸⁰独立为R⁷⁰，或者，两个R⁸⁰和它们所结合的氮原子一起形成任选含有1-4个相同或不同的选自O、N和S的其它杂原子的5、6或7元环杂烃基；且各M⁺是带有正电荷的抗衡离子，例如独立选自K⁺、Na⁺、⁺N(R⁶⁰)₄和Li⁺的正电荷，或者两个M⁺组合形成二价抗衡离子，例如选自Ca²⁺、Mg²⁺和Ba²⁺的二价抗衡离子。具体的例子是，-NR⁸⁰R⁸⁰表示包括-NH₂、-NH-烃基、N-咯烷基和N-吗啉基。

类似地，可用于在具体基团或根中取代不饱和碳原子上的氢的取代基包括但不限于：-R⁶⁰、卤素、-O^-M⁺、-OR⁷⁰、-SR⁷⁰、-SM⁺、-NR⁸⁰R⁸⁰、三卤甲基、-CF₃、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO₂、-N₃、-S(O)₂R⁷⁰、-S(O)₂O^-M⁺、-S(O)₂OR⁷⁰、-OS(O)₂R⁷⁰、-OS(O)₂OM⁺、-OS(O)₂OR⁷⁰、-P(O)(O-)₂(M⁺)₂、-P(O)(OR⁷⁰)O^-M⁺、-P(O)(OR⁷⁰)(OR⁷⁰)、-C(O)R⁷⁰、-C(S)R⁷⁰、-C(NR⁷⁰)R⁷⁰、-C(O)O^-M⁺、-C(O)OR⁷⁰、-C(S)OR⁷⁰、-C(O)NR⁸⁰R⁸⁰、-C(NR⁷⁰)NR⁸⁰R⁸⁰、-OC(O)R⁷⁰、-OC(S)R⁷⁰、-OC(O)O^-M⁺、-OC(O)OR⁷⁰、-OC(S)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)R⁷⁰、-NR⁷⁰C(S)R⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)O^-M⁺、-NR⁷⁰C(O)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(S)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)NR⁸⁰R⁸⁰、-NR⁷⁰C(NR⁷⁰)R⁷⁰和-NR⁷⁰C(NR⁷⁰)NR⁸⁰R⁸⁰，其中R⁶⁰、R⁷⁰、R⁸⁰和M⁺如之前所定义。

除R^p外，用来取代杂烃基和环杂烃基中氮原子上的氢的取代基包括但不限于：-R⁶⁰、-O^-M⁺、-OR⁷⁰、-SR⁷⁰、-S^-M⁺、-NR⁸⁰R⁸⁰、三卤甲基、-CF₃、-CN、-NO、-NO₂、-S(O)₂R⁷⁰、-S(O)₂O^-M⁺、-S(O)₂OR⁷⁰、-OS(O)₂R⁷⁰、-OS(O)₂OM⁺、-OS(O)₂OR⁷⁰、-P(O)(O-)₂(M⁺)₂、-P(O)(OR⁷⁰)O^-M⁺、-P(O)(OR⁷⁰XOR⁷⁰)、-C(O)R⁷⁰、-C(S)R⁷⁰、-C(NR⁷⁰)R⁷⁰、-C(O)OR⁷⁰、-C(S)OR⁷⁰、-C(O)NR⁸⁰R⁸⁰、-C(NR⁷⁰)NR⁸⁰R⁸⁰、-OC(O)R⁷⁰、-OC(S)R⁷⁰、-OC(O)OR⁷⁰、-OC(S)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)R⁷⁰、-NR⁷⁰C(S)R⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(S)OR⁷⁰、-NR⁷⁰C(O)NR⁸⁰R⁸⁰、-NR⁷⁰C(NR⁷⁰)R⁷⁰和-NR⁷⁰C(NR⁷⁰)NR⁸⁰R⁸⁰，其中R⁶⁰、R⁷⁰、R⁸⁰和M⁺如之前所定义。

以上所列举的被称为“取代的”可用来取代其它基团或原子的取代基的对于精通本领域的技术人员应是显而易见的。

“保护基”指的是一组原子，当它们连接到一个分子的反应性官能团上时，将会屏蔽、降低或阻止该官能团的反应性。典型的是，在合成的过程中，根据需要，可以选择性地除去一个保护基。保护基的例子在Greene和Wuts的《有机化学保护基》(Protective Groups in Organic Chemistry)，第三版，1999，John Wiley & Sons，NY和Harrison等人的《有机合成方法的概要》(Compendium of Synthetic Organic Methods)，1-8卷，1971-1996，John Wiley & Sons，NY中可以找到。具有代表性的氨基保护基的例子包括但不限于：甲酸基、醋酸基、三氟醋酸基、苯甲基、苄氧基羰基(“CBZ”)、叔丁氧基羰基(“Boc”)、三甲基甲硅烷基(“TMS”)、2-三甲基甲硅烷基-乙烷磺酰基(“TES”)、三苯甲游基和取代的三苯甲游基、烯丙氧基羰基、9-氟甲氧基羰基(“FMOC”)以及硝基-3，4-二甲氧苯甲基羰基(“NVOC”)等。具有代表性的羟基保护基的例子包括但不限于：那些羟基被酰化或烷基化的基团，如苯甲基、三苯甲基醚，以及烷基醚、四氢吡喃醚、三烷基甲硅烷基醚(例如TMS或TIPPS)和烯丙基醚。

“Fc受体”是与免疫球蛋白的Fc部分(含有特殊的恒定区)结合的细胞表面分子家族的成员。每一种Fc受体与一种具体类型的免疫球蛋白结合。例如，Fcα受体(“FcαR”)结合IgA、FcεR结合IgE以及FcγR结合IgG。

FcαR家族包括聚合的Ig受体，该受体参与IgA/IgM、髓系特异性受体(mycloidspecific receptor)RcaRI(也叫CD89)、Fcα/μR和至少两种选择性IgA受体的上皮传输，(最近的综述可参见Monteiro & van de Winkel的Annu.Rev.Immunol，2003，在先电子版)。FcαRI在中性白细胞、嗜酸性细胞、单核细胞/巨噬细胞、树突细胞和肝kupfer细胞上表达。FcαRI包括一个α链和在胞质域中携带激活基序(ITAM)并磷酸化Syk激酶的FcRγ同源二聚体。

FcεR家族包括两种类型，称为FcεRI和FcεRII(也称为CD23)。FcεRI是在肥大细胞、嗜碱细胞和嗜酸性细胞上发现的的高亲和力受体(以大约10¹⁰M^-1的亲和力结合IgE)，其将单体IgE锚定在所述细胞表面。FcεRI拥有一个α链，一个β链和上述的γ链同源二聚体。FcεRII是表达在单核吞噬细胞、B淋巴细胞、嗜酸性细胞和血小板上的低亲和力受体。FcεRII包含单独的一个多肽链且不包含γ链同源二聚体。

FcγR家族包括三种类型，FcγRI(也称为CD64)、FcγRII(也称为CD32)和FcγRIII(也叫CD16)。FcγRI是在肥大细胞、嗜碱细胞、单核细胞、中性细胞、嗜酸性细胞、树突状细胞和吞噬细胞上发现的高亲和力受体(以10⁸M^-1的亲和力结合IgG1)，其将单体IgG锚定在所述细胞表面。FcγRI由一个α链和与FcαRI，FcεRI共有的γ链二聚体组成。

FcγRII是表达在中性白细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、血小板和B淋巴细胞上的低亲和力受体。FcγRII含有一个α链，不包含上述的γ链同源二聚体。

FcγRIII是表达在NK细胞、嗜酸性细胞、巨噬细胞、中性白细胞和肥大细胞上的低亲和力受体(以5×10⁵M^-1的亲和力结合IgG1)。它由一个α链和与FcαRI、FcεRI和FcγRI共有的γ同源二聚体组成。

熟练的技术人员应当认识到，对这些多种Fc受体的亚基结构和结合特性，以及表达它们的细胞类型，没有进行完全的特征描述。上述讨论仅仅反映了对于这些受体当前技术状态(参见，如，《免疫生物学：健康和疾病的免疫系统》(Immunobiology：The Immune System in Health & Disease)，第5版，Janeway等人著，2001年，ISBN0-8153-3642-x，第371页图9.30)，并且不表示对可以用这里所述的前药来调节的各种受体信号级联加以限制。

“Fc受体介导的脱粒”或“Fc受体诱导的脱粒”是指通过由Fc受体交联引发的Fc受体信号转导级联进行的脱粒过程。

“IgE诱导的脱粒”或“FcεRI介导的脱粒”是指通过由FcεR1结合的IgE的交联引发的IgE受体信号转导级联进行的脱粒过程。所述交联可以是通过IgE特异性变应原或其他多价结合剂(如抗IgE的抗体)诱导的。在肥大细胞和嗜碱细胞中，导致脱粒的FcεRI信号级联可分成两个阶段：上游和下游。上游阶段包括发生在钙离子动员之前的所有过程。下游阶段包括钙离子动员和所有其下游过程。抑制FcεRI介导的脱粒的化合物可以在FcεRI介导的信号转导级联上的任意一个点产生作用。选择性抑制上游FcεRI介导的脱粒的化合物作用于抑制诱导钙离子活化点上游部分的FcεRI信号级联。在细胞检测中，选择性抑制上游FcεRI介导的脱粒的化合物抑制诸如肥大细胞或嗜碱细胞等通过IgE特异性变应原或结合剂(如抗IgE的抗体)激活或刺激的细胞脱粒，但是基本不会抑制由绕过FcεRI信号转导途径的脱粒剂(如钙离子载体离子霉素和A23187)活化或激发的细胞脱粒。

“IgG诱导的脱粒”或“FcγRI介导的脱粒”是指通过由FcγRI结合的IgG交联引发的FcγRI信号转导级联进行的脱粒过程。所述交联可以是由IgG特异性变应原或其他多价结合剂(如抗IgG或其片段的抗体)引发的。如FcεRI信号级联，在肥大细胞和嗜碱细胞中，FcγRI信号级联也导致可分为相同两个阶段(即上游和下游)的脱粒。与FcεRI介导的脱粒相似，选择性抑制上游FcγRI介导的脱粒的化合物作用于诱导钙离子活化点的上游。在细胞检测中，选择性抑制上游FcγRI介导的脱粒的化合物抑制诸如肥大细胞或嗜碱细胞等通过IgG特异性变应原或结合剂(如抗IgG的抗体或片段)激活或刺激的细胞脱粒，但是基本不会抑制由绕过FcγRI信号转导途径的脱粒剂(如钙离子载体离子霉素和A23187)活化或激发的细胞脱粒。

“离子载体诱导的脱粒”或“离子载体介导的脱粒”指如肥大细胞或嗜碱细胞的细胞在暴露于钙离子载体(如离子霉素或A23187)时发生的脱粒。

“Syk激酶”指的是众所周知的在B细胞和其它造血细胞中表达的72kDa的非受体(胞质)脾蛋白酪氨酸激酶。Syk激酶包括与磷酸化的免疫受体酪氨酸基激活基序(“ITAM”)结合的串联的两个一致的Src-同源性2(SH2)结构域、，一个“接头”结构域和一个催化域(Syk激酶的结构和功能的综述，可参见Sada等，J.Biochem(东京)，130：177-186；也可参见Turner等，2000，Immunology Today，21：148-154)。Syk激酶已作为B细胞受体(BCR)信号转导的效应物被广泛研究(Turner等，2000，同上)。Syk激酶对于多种蛋白质的酪氨酸磷酸化至关重要，所述多种蛋白质调节源自免疫受体的重要的途径，如钙离子动员和促有丝分裂原蛋白激酶(MAPK)级联和脱粒。Syk激酶在中性白细胞中的整联蛋白(integrin)信号转导中起了重要的作用(参见，例如，Mocsai等，2002，Immunity 16：547-558)。

文中，Syk激酶包括来自任何动物物种(包括但不限于人类、猿、牛、猪和啮齿动物等)的认为属于Syk家族的激酶。特别包括自然发生的和人造的异构体、剪切体、等位基因的变体和突变体。这些Syk激酶的氨基酸顺序是已知的并可在GENBANK上获得。编码人类Syk激酶不同异构体的mRNAs的具体例子可以在GENBANK登录号gi|21361552|ref|NM_003177.2|，gi|496899|emb|Z29630.1|HSSYKPTK[496899]和gi|15030258|gb|BC011399.1|BC011399[15030258]中找到，这些序列通过参考纳入本文。

熟练的技术人员应当认识到，属于其它家族的酪氨酸激酶可能具有在三维结构上和类似于Syk的活性部位或结合“口袋”。这种结构相似的结果是，预计这里称为“Syk模拟物”的这样的激酶能催化由Syk磷酸化的底物。因此，应当认识到，这里所述的前药可以调节，尤其是抑制这样的Syk模拟物、这样的Syk模拟物发挥作用的信号转导级联、受这样的Syk模拟物影响的生物反应、以及Syk模拟物依赖性信号级联。

“Syk依赖性信号级联”指的是Syk激酶在其中起作用的信号转导级联。这种Syk依赖性信号级联的非限制性例子有FcαRI、FcεRI、FcγRI、FcγRIII、BCR和整联蛋白信号级联。

“自身免疫性疾病”指的是那些通常与非过敏性超敏反应相关的疾病(II型、III型和IV型超敏反应)，这通常是患者自己的体液和/或细胞介导的免疫应答对一种或更多的内源和/或外源免疫原性物质产生应答的结果。这种自身免疫性疾病和过敏性(I型或IgE介导的)超敏反应相关的疾病是有区别的。

6.2前药化合物

如概述中所述，本发明提供了生物活性2，4-嘧啶二胺化合物的前药，如以下文献中描述的各种2，4-嘧啶二胺化合物：2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO 03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文。由于这些化合物能抑制上游Fc受体信号级联以及Syk激酶和Syk激酶依赖性信号级联，人们对这些2，4-嘧啶二胺化合物的前药特别感兴趣。所述前药通常包括这种其中的一个或多个可利用的伯胺或仲胺基团被前基团R^p掩蔽的活性2，4-嘧啶二胺化合物，所述前基团在体内代谢产生活性2，4-嘧啶二胺药物。如概述部分所述且将在下面更详细讨论的，所述前基团的性质可以改变，并且除了其他因素以外，会根据前药所需的水溶性、其预定给药模式和/或其代谢成活性2，4-嘧啶二胺化合物的预定机制或部位而改变。

例如，已发现特定的活性2，4-嘧啶二胺药物(下面的化合物1)当被制成磷酸盐前药(下面的化合物4)时具有极好的水溶性：

化合物结构溶解性

化合物1

1-2μg/ml

化合物4

＞5mg/ml

当口服给予试验动物时，这种前药化合物4相比相应的活性药物化合物1还显示出更好的生物利用度。实际上，不同于药物化合物1，前药化合物4的吸收与剂型无关。在对大鼠进行的药代动力学研究中，从溶液(例如，PEG-400溶液和羧甲基纤维素溶液)和粉末(包装在硬明胶胶囊中)中前药化合物4的吸收同样好。虽然不希望局限于任何操作理论，据信，前药化合物4改进的口服生物利用度及其不依赖于剂型的吸收至少部分是由于其较高的水溶性。预计具有类似的低水溶性并因此具有低口服生物利用度的其它活性2，4-嘧啶二胺化合物当配制成磷酸盐前药时也会显示出类似的水溶性和口服生物利用度的升高。

相反，预计活性药物化合物1的相应的磷酸酯前药的水溶性将低于活性化合物1。因此，预计水溶性低于相应的活性2，4-嘧啶二胺化合物的活性2，4-嘧啶二胺化合物的磷酸酯前药有其适用于需要低水溶性的应用和剂型，如适用于吸入递送的剂型。

预计将受益于作为前药、尤其是作为磷酸盐前药的剂型的一类活性2，4-嘧啶二胺化合物包括其中2，4-嘧啶二胺部分的N4-取代基是式

所示的取代或未取代的含氮杂芳环的2，4-嘧啶二胺，其中，Z¹和Z²各自独立选自CH，N和Y选自CH₂、NH、O、S、S(O)和S(O)₂。这种前药可在以下位置含有前基团R^p：杂芳环非芳环氮之一或两者，2，4-嘧啶二胺部分的N2-氮，2，4-嘧啶二胺部分的N4-氮原子和/或附于2，4-嘧啶二胺部分N2氮原子的取代基中的任何可利用的氮原子。

在一个例证性实施方案中，所述前药是结构式(I)所示的化合物：

包括其盐、溶剂合物、水合物和N-氧化物，式中：

Y选自CH₂、NR²⁴、O、S、S(O)和S(O)₂；

Z¹和Z²各自独立选自CH和N；

R²选自被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的低级烃基、被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代低级环烃基、被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的环己基、被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的3-8元环杂烃基、被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的(C6-C14)芳基、被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的苯基以及被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的5-15元杂芳基；

R⁵选自卤素、氟、氰基、硝基、三卤甲基和三氟甲基；

R⁸选自R^a、R^b、被一个或多个(例如1到4个)相同或不同的R^a或R^b取代的R^a、被一个或多个相同或不同的R^a或R^b取代的-OR^a、-B(OR^a)₂、-B(NR^cR^c)₂、-(CH₂)_m-R^b、-(CHR^a)_m-R^b、-O-(CH₂)_m-R^b、-S-(CH₂)_m-R^b、-O-CHR^aR^b、-O-CR^a(R^b)₂、-O-(CHR^a)_m-R^b、-O-(CH₂)_m-CH[(CH₂)_mR^b]R^b、-S-(CHR^a)_m-R^b、-C(O)NH-(CH₂)_m-R^b、-C(O)NH-(CHR^a)_mR^b、-O-(CH₂)_m-C(O)NH-(CH₂)_m-R^b、-S-(CH₂)_m-C(O)NH-(CH₂)_m-R^b、-O-(CHR^a)_m-C(O)NH-(CHR^a)_m-R^b、-S-(CHR^a)_m-C(O)NH-(CHR^a)_m-R^b、-NH-(CH₂)_m-R^b、-NH-(CHR^a)_m-R^b-、-NH[(CH₂)_mR^b]、-N[(CH₂)_mR^b]₂、-NH-C(O)-NH-(CH₂)_m-R^b、-NH-C(O)-(CH₂)_m-CHR^bR^b和-NH-(CH₂)_m-C(O)-NH-(CH₂)_m-R^b；

各R^a各自独立选自氢、低级烃基、低级环烃基、环己基、(C4-C11)环烃基烃基、(C6-C10)芳基、苯基、(C7-C16)芳基烃基、苄基、2-6元杂烃基、3-8元环杂烃基、吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基、哌啶基、4-11元环杂烃基烃基、5-10元杂芳基和6-16元杂芳基烃基；

各R^b是独立选自下组的适当基团：＝O、-OR^a、(C1-C3)卤烷氧基、＝S、-SR^a、＝NR^a、＝NOR^a、-NR^cR^c、卤素、-CF₃、-CN、-NC、-OCN、-SCN、-NO、-NO₂、＝N₂、-N₃、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-S(O)₂OR^a、-S(O)NR^cR^c、-S(O)₂NR^cR^c、-OS(O)R^a、-OS(O)₂R^a、-OS(O)₂OR^a、-OS(O)₂NR^cR^c、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^cR^c、-C(NH)NR^cR^c、-C(NR^a)NR^cR^c、-C(NOH)R^a、-C(NOH)NR^cR^c、-OC(O)R^a、-OC(O)OR^a、-OC(O)NR^cR^c、-OC(NH)NR^cR^c、-OC(NR^a)NR^cR^c、-[NHC(O)]_nR^a、-[NR^aC(O)]_nR^a、-[NHC(O)]_nOR^a、-[NR^aC(O)]_nOR^a、-[NHC(O)]_nNR^cR^c、-[NR^aC(O)]_nNR^cR^c、-[NHC(NH)]_nNR^cR^c和-[NR^aC(NR^a)]_nNR^cR^c；

各R^c各自独立选自保护基和R^a，或者，结合到相同氮原子的两个R^c与该氮原子一起形成5-8元环杂烃基或杂芳基，该基团可任选含有一个或多个相同或不同的其它杂原子并可被一个或多个(例如1到4个)相同或不同的R^a基团任选取代；

R²¹、R²²和R²³各自独立选自氢和前基团R^p；

R²⁴选自氢、低级烃基和前基团R^p；

各m各自独立为1-3的整数；和

各n各自独立为0-3个整数，前提是R²¹、R²²、R²³和R²⁴中至少有一个是前基团。

在这里所述的前药尤其是结构式(I)的前药中，R²¹、R²²和R²³各自表示氢或前基团R^p。同时，R²⁴表示氢、低级烃基或前基团R^p。因此，所述前药可包含单个R^p前基团、两个R^p前基团、三个R^p前基团或者更多个R^p前基团，这部分取决于Y的性质以及R²取代基是否含有任何R前基团。一些实施方案中，优选这里所述的前药尤其是结构式(I)的前药仅含有一个R^p基团。不局限于任何操作理论，含有一个以上R^p前基团的前药中的不同R^p可能以不同速度代谢。含有单个R^p前基团的前药将避免这种差异性的代谢动力学。含有一个R^p前基团的结构式(I)所示前药的具体实施方案是结构式(Ia)所示的化合物：

式中，Y¹选自CH₂、NR²⁴、O、S、S(O)和S(O)₂；且Z²、R²、R⁵、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹、R²⁰、R²⁴和R^p如上文的定义，前提是R²不包含任何R^p基团。

这里所述的前药中存在的任何R^p前基团的性质不是成功的关键，前提是它在使用条件下水解产生活性2，4-嘧啶二胺化合物。最近发现，以下结构所示的含有磷酸根的前药：

在体内代谢成如下所示的相应的活性2，4-嘧啶二胺化合物(化合物1)：

尽管不希望局限于任何操作理论，据信，这种前药经下述相应的羟基甲基胺中间体代谢成活性化合物1：

已知这种羟基甲基胺化合物在其体内水解产生甲醛和所述活性药物的生理条件和各种pH范围下不稳定。基于这种发现，据信，含有可在体内代谢(例如通过胃的酸性条件和/或通过消化道或身体内的其它器官和/或组织或体液中存在的酶)以产生上述羟基甲基胺中间体的羟基“保护”基的前药会同样代谢成活性2，4-嘧啶二胺药物。

此外，预计这种羟基甲基胺中间体的氨基和硫代类似物在生理条件下也不稳定，并也会在体内水解成活性2，4-嘧啶二胺(2，4-pyrimdiendiamine)药物。因此，还预计相应的氨基和硫代化合物以及其中的α-氨基和α-硫代基团被可在生理使用条件下被除去以产生α-氨基和α-硫代基团的“保护”基掩蔽的化合物将同样是合适的前药。

因此，一些实施方案中，结构式(I)和(Ia)的前药中的前基团R^p具有式-CR^dR^d-A-R³，其中各R^d独立选自氢、氰基、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)NR^eR^e、-C(OR^e)(OR^e)、任选取代的(C1-C20)烃基、(C1-C20)全氟烃基、任选取代的(C7-C30)芳基烃基和任选取代的6-30元杂芳基烃基，其中各R^e各自独立选自氢、烃基(例如低级烃基)、芳基(例如苯基或萘基)、芳基烃基(例如苄基)、杂芳基和杂芳基烃基；A选自O、S和NR⁵⁰，其中R⁵⁰选自R^d和环烃基，或者与R³一起即R⁵⁰和R³以及它们所结合的氮原子形成一3-7元环；R³与A一起在使用条件下代谢成式-CR^dR^dAH的中间体基团，其中R^d和A如之前所定义。如上所述，R^p基团为式-CR^dR^d-AH的结构式(I)和(Ia)的化合物在体内自发水解以产生活性2，4-嘧啶二胺药物。

R³基团代谢以产生中间体基团-CR^dR^d-A-H的机制并不重要，并可通过例如在胃的酸性条件下和/或通过身体的消化道和/或组织或器官中存在的酶的水解而引起。实际上，可选择在身体内的特定部位代谢的R³基团。例如，许多酯可在胃中的酸性条件下被切割。设计成在胃中被化学切割成活性2，4-嘧啶二胺的前药可采用包含这种酯的前基团。或者，可将前基团设计成在酶如酯酶、酰胺酶、脂肪酶(lipolase)、磷酸酶(包括ATP酶和激酶等)存在时被代谢以产生式-CR^dR^d-A-H中间体基团。包含能够在体内代谢以产生这种中间体基团的联接的前基团是已知的，包括，例如但不限于，醚、硫醚、甲硅烷醚、甲硅烷硫醚、酯、硫酯、碳酸酯、硫代碳酸酯、氨基甲酸酯、硫代氨基甲酸酯、脲、硫脲、氨甲酰等。一些情况下，可选择被氧化酶类如肝脏中的细胞色素P450氧化成可代谢的基团的“前体”基团。

可对R³基团的性质进行选择以赋予前药所需特性。例如，亲脂基团可用来降低水溶性而亲水基团可用来提高水溶性。采用这种方法可获得对所选给药模式进行具体调整的前药。也可将R³基团设计成赋予前药其它特性，如改进的被动肠吸收、改进的转运(transport)介导的的肠吸收、保护免遭快速代谢(缓释前药)、组织选择性递送、靶组织中被动富集、靶向特异性运载体等。能够赋予前药这些特性的基团是熟知的，并描述于，例如，Ettmayer等，2004，J.Med.Chem.47(10：2393-2404)，其内容通过引用纳入本文。这些参考资料中描述的所有基团可用于这里所述的前药。

一些实施方案中，R³选自-R^f、-C(O)R^f、-C(O)NR^fR^f和-SiR^fR^fR^f，其中的R^f基团经过选择以赋予前药所需的生物利用度、切割和/或寻靶特性。在一具体实施方案中，R^f基团经过选择以赋予前药高于基础活性2，4-嘧啶二胺药物的水溶性。因此，一些实施方案中，R^f基团经过选择以使它们与它们所结合的杂原子或基团一起具有亲水特性。如本领域所熟知的，这种亲水基团可带电或不带电。一个具体的例子是，R^f基团可选自氢、任选取代的低级烃基、任选取代的低级杂烃基、任选取代的低级环烃基、任选取代的低级杂环烃基、任选取代的(C6-C10)芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的(C7-C18)芳基烃基和任选取代的6-18元杂芳基烃基。如本领域所熟知的，任何所述取代基的性质可有很大变化。一些实施方案中，任何所述取代基独立选自上文定义的R^b。

在一具体实施方案中，式(I)和/或(Ia)的前药的前基团具有式-CR^dR^d-A-R³，其中，R³选自-(CH₂)_i-R^b、-C(O)R^a、-C(O)-(CH₂)_i-R^b、-C(O)O-R^a和-C(O)O-(CH₂)_i-R^b，其中X、R^a、R^b和R^d如之前所定义，i是0-6的整数。提高水溶性的示例性前基团的具体的非限制性例子包括，例如但不限于，亲水基团，如被胺、醇、羧酸、磷酸、亚砜、糖、氨基酸、硫醇、多元醇、醚、硫醚和季铵盐中的一个或多个取代的烃基、芳基(arylk)、芳基烃基或环杂烃基。

一类重要的前基团包括含有磷酸基的前基团，例如，式-(R^dR^d)_y-O-P(O)(OH)₂所示的含有磷酸盐的前基团，其中R^d如上文所定义，y是1-3的整数，通常为1或2。在一具体实施方案中，各R^d各自独立选自氢，取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基和取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基。

虽然不希望局限于任何操作理论，据信，这种含有磷酸盐的前基团R^p同时作为碱性和酸性磷酸酶的底物，使得它们在生理使用条件下从前药中除去。由于在人类的消化道中富含碱性磷酸酶，在存在碱性磷酸酶时可被切割的含有磷酸根的前基团Rp特别适合配制供口服给药的含有磷酸根的前药。适用于供口服给药的前药的含有磷酸盐的前基团R^p的具体例子包括但不限于式-(R^dR^d)_y-O-P(O)(OH)₂的基团，其中，各R^d各自独立选自氢和未取代的低级烷基。这种含有磷酸盐的前基团的示例性实施方案包括但不限于：-CH₂-O-P(O)(OH)₂和-CH₂CH₂-O-P(O)(OH)₂。

尽管人们对适合口服给药的含有磷酸盐的前药感兴趣，熟练的技术人员将了解，由于磷酸酶在体内广泛分布，含有含磷酸根前基团，的前药可通过其它给药途径给予。例如，在用大鼠血浆以及大鼠肝和肠微粒体制品进行的体外试验中发现，示例性前药化合物4可代谢成活性药物化合物1，这说明磷酸酶也存在于血浆中。因此，唯一的要求是，所选择的具体的含有磷酸盐的前基团R^p应在所需使用条件下可除去。

虽然不希望局限于任何操作理论，据信，当y是1时，含有磷酸根的前药，如结构式(Ia)所示的前药，可经由相应的羟基甲基胺代谢成活性2，4-嘧啶二胺化合物。代谢过程示于图1A。参考图1A，通过酶水解从磷酸盐前药16上除去磷酸得到相应的羟基甲基胺18，该物质再在体内经水解产生甲醛和活性2，4-嘧啶二胺化合物10。

参考图1B，当y为2时，据信，磷酸盐前药26体内水解产生活性2，4-嘧啶二胺10和磷酸烯醇酯，后者再体内水解成乙醛和磷酸。

再参考图1A，熟练的技术人员将了解，尽管羟基甲基胺18在生理条件下代谢产生活性2，4-嘧啶二胺化合物10，它在pH7下稳定，并因此可以作为活性化合物10的含羟基烃基的前药制备及给药。因此，在结构式(I)的前药的一些实施方案中，R^p是式-CR^dR^d-OH所示的含羟基烃基的前基团，其中R如之前的定义。在具体的示例性实施方案中，R^p是-CH₂OH。

再参考图1A，熟练的技术人员还将了解，可在体内水解磷酸酯前药如磷酸酯前药20和/或通过体内氧化亚磷酸盐前药如亚磷酸盐前药24来产生磷酸盐前药。这种磷酸酯和亚磷酸盐前药可通过体内氧化或水解亚磷酸酯前药如亚磷酸酯前药22而产生。相应的磷酸盐前药26的磷酸酯、亚磷酸盐和亚磷酸酯前药在图1B中分别用化合物30、34和32表示。因此，熟练的技术人员将了解，含有可在体内代谢成磷酸基的磷酸盐前体的前药也包括在本发明之内。

在这种前药的一些实施方案中，含磷前基团R^p包括亚磷酸基。这种含有亚磷酸基的前药的具体的示例性实施方案包括其中的前基团R^p为式-(CR^dR^d)_y-O-P(OH)(OH)的前药化合物，其中R^d和y如之前所定义。

在这种前药的其它实施方案中，含磷前基团R^p包括无环磷酸酯或亚磷酸酯基。这种无环磷酸酯和亚磷酸酯前药的具体的示例性实施方案包括前基团R^p为式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)(OR^e)、-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^e)₂、-(CR^dR^d)_y-O-P(OH)(OR^e)和-(CR^dR^a)_y-O-P(OR^e)₂的前药，其中R^e选自取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基(例如，苯基、萘基、4-低级烷氧基苯基、4-甲氧基苯基)、取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基(例如，苄基、1-苯基乙烷-1-基、2-苯基乙烷-1-基)、-(CR^dR^d)_yOR^f、-(CR^dR^d)_y-O-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_y-O-C(O)OR^f、-(CR^dR^d)_yS-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_yS-C(O)OR^f、-(CR^dR^d)_yNH-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_y-NH-C(O)OR^f和-Si(R^d)₃，其中各R^f各自独立选自氢、未取代的或取代的低级烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基和取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基，R^d和y如之前所定义。

再在其它实施方案中，含磷酸盐前体的含磷前药是其中的含磷前基团R^p包含式

的环磷酸酯的前药，其中各R^g各自独立选自氢和低级烃基；各R^h各自独立选自氢、取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的低级环杂烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基、取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基和取代或未取代的5-14元杂芳基；z是0-2的整数；R^d和y如之前所定义。

再在其它实施方案中，含有磷酸盐前体的含磷前药是其中的含磷前基团R^p包含式

的环亚磷酸酯的前药，其中的R^g、R^h、R^d、y和z如之前所定义。

一些实施方案中，对这种环磷酸酯和亚磷酸酯前药上的取代基R^h进行选择以使前基团在体外被酯酶代谢。这种磷酸酯和亚磷酸酯前基团的具体例子包括那些其中各R^h各自独立选自氢、低级烃基、甲基、乙基和丙基的基团。一些实施方案中，这种前基团选自：

这些磷酸酯和亚磷酸酯许多都是酸不稳定的(acid label)，当口服给予时可在胃和/或肠的酸性条件下代谢成相应的磷酸盐和亚磷酸盐。

因此，在这里所述的含磷前药中，可对所用具体含磷前基团R^p的性质进行选择以使该前药配合特定送药模式，等等。

任何特定前基团R^p用于所需给药模式的适用性可通过生化试验确定。例如，如果要通过注射将前药给予特定组织或器官，且在该组织或器官中表达的各种磷酸酶的性质是已知的，则可在生化试验中用分离的磷酸酶对所述具体前药的代谢进行检测。或者可用组织和/或器官提取物对所述特定前药代谢成活性2，4-嘧啶二胺化合物进行检测。当在靶组织或器官中表达的磷酸酶的性质未知，或者当通常不方便获得分离的磷酸酶时，使用组织和/或器官提取物特别方便。熟练的技术人员将能够用这种体外试验方便地选择具有适合特定应用的代谢特性(如动力学)的前基团R^p。当然，也可在体外动物模型中对特定前药的合适代谢进行检测。

一些实施方案中，所述前药是结构式(I)或(Ia)所示的前药，其具有选自下组的一个或多个特征：

(i)R⁵是氟；

(ii)R²是被一个或多个相同或不同的R⁸基团任选取代的苯基；

(iii)R²是3，4，5-三(低级烷氧基)苯基；

(iv)R²是3，4，5-三甲氧基苯基；

(v)Y或Y¹是O；Z¹是CH，Z²是N；R¹⁷和R¹⁸各自为甲基；R¹⁹和R²⁰一起形成氧代基团；和

(vi)R^p是式-CH₂OH的含有羟基烃基的前基团，或是式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)₂的含有磷酸根的前基团，或其磷酸酯、亚磷酸盐或亚磷酸酯类似物，其中的y是1或2，且各R^d各自独立选自氢和未取代的低级烃基，或

(vii)R^p选自-CH₂OH、CH₂-SH、-CH₂-NH₂、-CH₂-NHR⁵⁰、-CH₂-N(R⁵⁰)₂、-CH₂-A-R^f、-CH₂-A-C(O)R^f、-CH₂-A-C(O)OR^f和-CH₂-A-C(O)NR^fR^f，其中的A、R⁵⁰和R^f如之前所定义。

一些实施方案中，结构式(I)和(Ia)的前药具有两个或三个上述特征。在一具体实施方案中，所述前药具有特征(i)、(iii)和(v)。在另一具体实施方案中，所述前药具有特征(i)、(iv)和(v)。再在另一具体实施方案中，所述前药具有特征(i)、(iii)、(v)和(vi)或(vii)。再在另一具体实施方案中，所述前药具有特征(i)、(iv)、(v)和(vi)或(vii)。再在另一具体实施方案中，R^p是式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)₂的含有磷酸盐的前基团。

在这里所述的所有含有可被取代的取代基替代物(如一些取代基替代物可表示为R^d、R^e、R^f、R^g、R^h、Rⁱ和R^j)的化合物中，所述取代基通常各自独立选自上文结合结构式(I)所述的R^b基团。在一具体实施方案中，任何所述取代基各自独立选自羟基、低级烷氧基、(C6-C14)芳氧基、低级烷氧基烃基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基和卤素。

精通本领域的技术人员将了解，许多这里所述的前药以及这里特别描述和/或例举的各种前药种类可显示出互变异构、构象异构、几何异构和/或光学异构现象。例如，前药可包含一个或多个手性中心和/或双键，结果可能以立体异构体出现，如双键异构体(也就是几何异构体)、对映结构体、非对映异构体和它们的混合物，如外消旋混合物。另一个例子是，前药可能以多种互变异构体形式存在，包括烯醇式、酮式和它们的混合物。同许多化合物的命名一样，在说明书和权利要求中提出的式和图，只代表可能的互变异构体、构象异构体、光学异构体或几何异构体中的一种，应该清楚本发明包括这里描述的具有一种或多种应用的前药的任何互变异构体、构象异构体、光学异构体和/或几何异构体，以及这些不同异构体的各种混合物。如果围绕2，4-嘧啶二胺部分的旋转受到限制，也可能存在阻转异构体并同样具体包含在本发明的化合物里。

此外，精通本领域的技术人员认同，当由于化合价要求或其他原因导致供选择的取代基列表包括不能取代一个特殊的基团的成员时，则认为文中的取代基列表含有那些适合取代特殊基团的取代基。例如，精通本领域的技术人员认同，虽然所有列出的供选择的R^b可用于取代一个烷基，某些供选择的取代物，如＝O，不能用来取代苯基。应当理解只意味着有可能的取代基组合。

这里所述的前药可以通过它们的化学结构或化学名称来确定。化学结构和化学名称相冲突时，化学结构对具体前药的确定起决定性作用。

依据各种取代物的特性，这里所述的前药可以是盐的形式。这种盐包括药物用盐(“药学上可接受的盐”)和适于兽医使用的盐等等。如本领域内所熟知的，这样的盐可以是从酸或碱衍生而来的。

一实施方案中，所述盐是药学上可接受的盐。通常，药学上可接受的盐是充分保留母体化合物一个或多个所需要的医药活性，并且适合对人体给药的盐。药学上可接受的盐包括由无机酸或有机酸形成的酸加成盐。适合形成药学上可接受的酸加成盐的无机酸包括但不限于氢卤酸(例如，盐酸、氢溴酸、碘化氢等等)、硫磺酸、硝酸和磷酸等。适合形成药学上可接受的酸加成盐的有机酸包括但不限乙酸、三氟乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、草酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、羟基丁二酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、棕榈酸、安息香酸、3-(4-羟苯甲酸)安息香酸、苯乙烯酸、苯基乙醇酸、烷基磺酸(例如，甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸等)、芳基磺酸(例如，苯基磺酸、4-氯苯基磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯基磺酸、环烷基磺酸(如樟脑磺酸)、4-甲基二环[2.2.2]-辛烷-2-烯-1-羧酸辛烷、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷醇基磺酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘酸、水杨酸、硬脂酸和粘康酸等)。

药学上可接受的盐也包括存在于母体化合物中的酸质子被金属离子(如碱性金属离子、碱性稀土金属离子或铝离子)取代、或者与有机碱(如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺、吗啉、哌啶、二甲胺和二乙胺等)配位形成的盐。

如本领域熟知的，这里所述的前药以及其盐也可以是水合物、溶剂合物和N-氧化物的形式。除非另有说明，短语“前药”是指包括这种盐、水合物、溶剂合物和/或N-氧化物。具体的示例性盐包括但不限于：单钠盐和二钠盐、单钾盐和二钾盐、单锂盐和二锂盐、单烃基氨基和二烃基氨基盐、单镁盐、单钙盐以及铵盐。

6.3合成方法

这里所述的前药及其中间体可用市售原料和/或用常规合成方法制备的原料通过各种不同合成途径合成。通常可用于和/或适用于合成活性2，4-嘧啶二胺化合物的合适的示例性方法可在以下文献中找到：美国专利No.5,958,935，2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO 03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)，其内容通过引用纳入本文。这些活性2，4-嘧啶二胺化合物可用作合成所述前药的原料。描述合成磷酸盐前药化合物4及其合成中间体的具体例子提供于实施例部分。所有这里所述的前药可通过常规使用该方法而合成。

例如，结构式(I)和/或(Ia)所示前药的一些实施方案可将相应的活性2，4-嘧啶二胺(即结构式(I)和/或(Ia)所示的其中各R^p是氢的化合物)与醛或酮反应得到α-羟基甲基胺，然后再使其与亲电子试剂反应以产生前药而制备。一种示例性的这种类型的合成示于下面的方案(I)：

方案(I)

在方案(I)中，Y¹、Z¹、Z²、R²、R⁵、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹和R²⁰如对结构式(I)或(Ia)的定义。R³和R^d如上文中的定义。根据方案(I)，活性2，4-嘧啶二胺10与酮12反应产生以下四种产物的混合物：未反应的原料10(未显示)和化合物14a、14b和14c。在这个阶段，可用标准色谱技术将产物相互分离。与疏电R³反应产生前药15a、15b和15c。

如上所述，α-羟基甲基胺14a、14b和14c可转化成各种不同类型的前药15a、15b和15c。例如，α-羟基甲基胺可在存在强酸催化剂或含碳卤化物(例如，CH₃Br)时与醇反应以产生相应的醚衍生物(例如，其中的R³是R^f的化合物，其中R^f如之前的定义)。

在存在强酸催化剂或羧酸酐或羧酸卤化物(例如带有合适的酸中和剂)时使α-羟基甲基胺14a、14b和14c与羧酸反应产生相应的酯衍生物(例如，其中的R³是-C(O)R^f的化合物，其中R^f如上文所定义)。

使α-羟基甲基胺14a、14b和14c与卤代甲酸酯(例如，Cl-C(O)OCH₃)反应产生相应的碳酸酯衍生物(例如，其中的R³是-C(O)OR^f的化合物，其中R^f如之前的定义)。

使α-羟基甲基胺14a、14b和14c与卤代甲酰胺(例如，Cl-C(O)N(CH₃)₂)反应产生相应的氨基甲酸酯或氨基甲酸乙酯衍生物(例如，其中的R³是-C(O)NR^fR^f的化合物，其中R^f如之前的定义)。

熟练的技术人员将了解，也可使用其它羟基保护基，其中包括例如Greene和Wuts的《有机化学保护基》，第二版，John Wiley & Sons，纽约，第10-142页中描述的各种不同羟基保护基，其内容通过引用纳入本文。

或者，结构式(I)和(Ia)所示的前药可通过相应的磷酸酯的亲核取代合成。这种合成途径的一个例子示于下面的方案(II)：

方案II

根据方案(II)，在存在碳酸铯时使活性2，4-嘧啶二胺10与氯甲基磷酸二叔丁酯13反应产生以下四种产物的混合物：未反应的原料10(未显示)和磷酸酯17a、17b和17c，这些本身是这里所述的前药。当R²是3，4，5-三甲氧基苯基时，磷酸酯17a是主要产物。该磷酸酯17a与R³-AH(其中A是O、S或NR⁵⁰)反应产生前药19。少量磷酸酯17b和17c可类似地反应产生相应的前药。

如下述方案(III)所述，氯甲基磷酸二叔丁酯13可从磷酸二叔丁酯制备：

方案(III)

根据方案(III)，如Krise等，1990，J.Med.Chem.42：3793-3794的描述，磷酸二叔丁酯9获自相应的亚磷酸二叔丁酯7。如Mantyla等，2002，Tet.Lett.43：3793-3794所述，磷酸盐9与氯甲基氯硫酸酯11(购自Synergetica，Inc.，Sicklerville，NJ 08081)反应生成氯甲基磷酸二叔丁酯13，后者无需纯化即可用于上述方案(II)。

尽管上述方案描述了含有单个前基团的前药的合成，也可通过调节所用试剂12或13的当量数而获得含有多个前基团的前药。

作为方案(I)的另一种替代方案，羟基甲基胺14a可分两个步骤制备，首先使活性2，4-嘧啶二胺10与双官能亲电子试剂如氯-碘代甲烷(1-CH₂Cl)反应产生氯-甲基中间体，然后通过其与碱性氢氧化物或与各种亲核试剂如醇盐、胺或硫化物反应将其羟基化以产生R^p。进行这种类型可用来合成这里所述前药的反应的具体条件描述于，例如，Bansal等，1981，J.Pharm.Sci.70(8)：850-854和Bansal等，1981，J.Pharm.Sci.70(8)：855-857，其内容通过引用纳入本文。

可用来合成结构式(Ia)所示示例性磷酸盐前药16的示例性合成途径示于下面的方案(IV)。该方法通常适合合成这里所述的所有磷酸盐前药。

方案(IV)

在方案(IV)中，Y¹、Z¹、Z²、R²、R⁵、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹和R²⁰如对结构式(I)或(Ia)的定义。根据方案(IV)，在存在碳酸铯时使活性2，4-嘧啶二胺10与氯甲基磷酸二叔丁酯13反应生成以下四种产品的混合物：未反应的原料10(未显示)和化合物17a、17b和17c。当R²是3，4，5-三甲氧基苯基时，化合物17a是主要产物。在这个阶段，可用标准色谱技术将主要产物与次要产物分离。除去叔丁基产生所述产物16和杂质18与10的混合物。可用标准技术分离所需产物16。

获得磷酸盐前药16的另一种方法示于下面的方案(V)。

方案(V)

根据方案(V)，活性2，4-嘧啶二胺10反应再次产生以下四种产物的混合物：未反应的嘧啶二胺10(未显示)、主要产物17a和次要产物17b和17c。主要产物17a可通过结晶分离(见实施例章节中的适当条件)，将其溶于乙酸和水的混合物(4∶1AcOH∶H₂O)并在65℃加热约3小时以产生作为主要产物的磷酸酯前药16。

尽管方案(IV)和(V)例举了其中的磷酸盐前基团为-CH₂-O-P(O)(OH)₂的磷酸盐前药的合成，熟练的技术人员将了解，含有其它磷酸盐前基团的磷酸盐前药可采用相同的方法用合适的试剂13方便地获得。磷酸酯前药、亚磷酸盐前药和亚磷酸酯前药也可通过常规适用方法用合适的磷酸酯、亚磷酸盐和亚磷酸酯卤化物13合成。合成环磷酸酯前药的示例性方法示于图3，该前药可作为前药用于这里所述的各种方法或者可转化成磷酸盐前药。此外，虽然方案(I)和(III)以化合物16作为所需产物进行描述，但在前药分子的其它位置具有前基团的前药也可通过分离例如次产物17a或17b和/或通过调节所用试剂13的当量数方便地获得。

参考图3，用文献中描述的方法可将二醇21转化成相应的环磷酸盐23。可用所描述的三种方法中的任何一种将环磷酸盐23转化成相应的氯甲基磷酸酯25。可在之前描述的合成化合物17a-c的条件下通过与25加成而将化合物1转化成环磷酸酯衍生物27、29和31。可在如合成化合物16所述的酸性条件下进行处理或者用例如钯催化剂通过氢化将环磷酸酯衍生物27、29和31转化成相应的磷酸盐衍生物。

熟练的技术人员将了解，一些情况下，用作原料的活性2，4-嘧啶二胺化合物可含有在合成中需要保护的官能团。所用保护基的准确性质将取决于要保护的官能团的性质，并且对于精通本领域的技术人员是显而易见的。选择合适保护基的指导以及其连接和除去的合成方案可在例如Greene和Wuts的《有机合成保护基》，第三版，John Wiley & Sons，Inc.，纽约(1999)以及其中引用的参考资料(以后称为“Greene &Wuts”)中找到。

6.4抑制Fc受体信号级联

许多这里所述的前药，尤其是结构式(I)和(Ia)的前药，可代谢成活性2，4-嘧啶二胺化合物，该化合物除了其他作用，抑制导致细胞脱粒的Fc受体信号级联。一个具体的例子是，这些活性化合物抑制导致免疫细胞如中性白细胞、嗜酸性细胞、肥大细胞和/或嗜碱细胞脱粒的FcεRI和/或FcγRI信号级联。肥大细胞和嗜碱细胞在变应原诱导的疾病(包括例如过敏性鼻炎和哮喘)中都扮演中心角色。接触变应原(例如可以是花粉或寄生虫)后，被IL-4(或IL-13)以及触发IgE类特异性抗体合成的其它信使激活的B细胞合成变应原特应性IgE抗体。这些变应原特应性IgE结合到高亲和性FcεRI。与抗原结合后，FcεRI结合的IgE发生交联并激活IgE受体信号转导途径，从而导致细胞脱粒及随后释放和/或合成许多化学调质，其中包括组胺、蛋白酶(例如类胰蛋白酶和糜蛋白酶)、脂质调质如白三烯(例如LTC4)、血小板激活因子(PAF)和前列腺素(例如PGD2)和包括TNF-α、IL-4、IL-13、IL-5、IL-6、IL-8、GMCSF、VEGF和TGF-β在内的一系列细胞因子。肥大细胞和/或嗜碱细胞释放和/或合成的这些调质负责变应原诱导的早期和晚期应答，并与导致持续炎症状态的下游事件直接关联。

FcεRI信号转导途径中发生的导致经脱粒而释放预成调质及释放和/或合成其它化学调质的分子事件是熟知的。FcεRI是一种杂四聚受体，它由结合IgE的α亚单位、β亚单位和两个γ亚单位(γ同二聚体)构成。FcεRI结合的IgE在多价结合剂(包括，例如，IgE特应性变应原或抗IgE抗体或片段)作用下交联诱导Src相关激酶Lyn的快速结合和活化。Lyn使胞内β和γ亚单位上基于免疫受体酪氨酸的激活基序(ITAM)磷酸化，从而导致其它Lyn向β亚单位募集及Syk激酶向γ同二聚体募集。这些通过分子内和分子间磷酸化作用激活的受体相关的激酶使该途径的其它组分如Btk激酶、LAT和磷脂酶C-γ(PLC-γ)磷酸化。激活的PLC-γ启动导致蛋白激酶C激活和Ca²⁺活动化的途径，这两者都是脱粒所需的。FcεRI交联还激活三类主要的促分裂原激活蛋白(MAP)激酶，即ERK1/2、JNK1/2和p38。这些途径的激活对于促炎症介质如TNF-α和IL-6以及脂质调质白三烯C4(LTC4)的转录调节是重要的。

FcγRI信号级联被认为与FceRI信号级联共享某些通用元件。重要的是，像FcεRI一样，FcγRI包含被磷酸化并募集Syk的γ同二聚体，并和FcεRI一样，FcγRI信号级联激活导致脱粒(以及其他事件)。其它共享γ同二聚体并可被活性2，4-嘧啶二胺化合物调节的Fc受体包括但不限于FcαRI和FcγRIII。

适合证实特定2，4-嘧啶二胺化合物活性的体外和细胞试验描述于2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO 03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)。

如上所述，可在体外和/或体内试验中证实特定药物在所需使用条件下代谢成活性2，4-嘧啶二胺化合物的能力。

6.5用途和组合物

如上所述，当将这里所述的前药，如结构式(I)和(Ia)的前药，给予动物和人类时代谢成能抑制Fc受体信号级联(尤其是那些包含γ同二聚体的Fc受体如FcεRI和/或FcγRI的信号级联)的活性化合物，这种信号级联导致细胞经脱粒或其它过程而释放和/或合成化学调质。还讨论过，该活性化合物也是Syk激酶的有力抑制剂。作为这些活性的结果，这些活性化合物的前药可在体外、体内和离体使用以调节或抑制Syk激酶、Syk激酶发挥作用的信号级联、Fc受体信号级联以及受到这种信号级联影响的生物反应。例如，一实施方案中，该前药可用来在体外或体内抑制Syk激酶，事实上可抑制任何表达Syk激酶的细胞类型。还可用它们来调节Syk激酶在其中发挥作用的信号转导级联。这种Syk依赖性信号转导级联包括但不限于FcεRI、FcγRI、FcγRIII、BCR和整联蛋白信号转导级联。所述前药可用来在体外或体内调节，尤其是抑制受这种Syk依赖性信号转导级联影响的细胞或生物反应。这种细胞或生物反应包括但不限于：呼吸爆发、细胞粘附、细胞脱粒、细胞扩散、细胞迁移、细胞聚集、吞噬作用、细胞因子的合成和释放、细胞成熟和Ca²⁺流。重要的是，该前药可作为治疗或预防完全或部分由Syk激酶活性介导的疾病的治疗方法用来在体内抑制Syk激酶。可用所述前药治疗或预防的由Syk激酶介导的疾病的非限制性例子是下文中详细讨论的那些。

另一实施方案中，所述前药可作为治疗或预防以这种Fc受体信号级联的化学调质的释放或合成或者脱粒为特征、由其造成和/或与其有关的疾病的治疗方法用来调节或抑制Fc受体信号级联和/或FcεRI-和/或FcγRI-介导的脱粒。这种治疗可给予动物或人类。以这种调质的释放、合成或者脱粒为特征、由其造成或与其有关并因此可用该活性化合物治疗或预防的疾病包括，例如但不限于，特应性或过敏性超敏或过敏反应、过敏(例如过敏性结膜炎、过敏性鼻炎、特应性哮喘、特应性皮炎和食物过敏)、低级瘢痕形成(例如硬皮病、纤维化增强、瘢痕疙瘩、手术后瘢痕、肺纤维化、血管性痉挛、偏头痛、再灌注损伤和后心肌梗死)、与组织破坏有关的疾病(例如COPD、心支气管炎(cardiobronchitis)和后心肌梗死)、与组织发炎有关的疾病(例如肠应激综合征、痉挛性结肠和炎性肠病)、炎症和瘢痕形成。

最近的研究显示，胶原对血小板的激活由与免疫受体相同的途径介导，其中FcRγ上的免疫受体酪氨酸激酶基序扮演关键角色(Watson & Gibbons，1998，Immunol.Today 19：260-264)，同时，FcRγ在小鼠泡沫化损伤后发生新内膜增生中扮演关键角色，很可能是通过胶原诱导的血小板的激活和白细胞募集(Konishi等，2002，Circulaion 105：912-916)。因此，这里所述的前药可用来抑制胶原诱导的血小板激活并用来治疗或预防与这种血小板激活有关或由其造成的疾病，如血管损伤后的内膜增生和再狭窄。

除了上述众多疾病，细胞和动物实验数据证实，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)中描述的活性2，4-嘧啶二胺化合物也可用于治疗或预防自身免疫性疾病以及与这种疾病有关的各种症状。因此，这些活性化合物的前药可用于治疗或预防此类疾病和/或症状。可用这种前药治疗或预防的自身免疫性疾病的类型通常包括那些与作为体液和/或细胞介导的对内源和/或外源免疫原或抗原的反应的结果发生的组织损伤有关的疾病。这种疾病通常被称为与非过敏型(即II型、III型和/或IV型)超敏反应有关的疾病。

如上所述，I型超敏反应通常由于肥大细胞和/或嗜碱细胞在接触特定外源抗原后释放药理学活性物质如组胺而导致。如上所述，这种I型反应在包括过敏性哮喘、过敏性鼻炎等在内的许多疾病中扮演角色。

当免疫球蛋白与细胞或组织的抗原性组分或与已经变得与细胞或组织密切结合的抗原或半抗原发生反应时发生II型超敏反应(也称为细胞毒、依赖于溶细胞补体或细胞刺激的超敏反应)。通常与II型超敏反应有关的疾病包括但不限于自身免疫性溶血性贫血、胎儿溶血症和古德帕斯彻病。

III型超敏反应(也称为毒性复合物、可溶性复合物或免疫复合物超敏反应)由于可溶性循环抗原-免疫球蛋白复合物在血管或组织中沉积而导致，并伴有免疫复合物沉积部位的急性炎症反应。原型III型反应疾病的非限制性例子包括Arthus反应、类风湿性关节炎、血清病、系统性红斑狼疮、某些类型的肾小球肾炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮(bullous pemphingoid)。

IV型超敏反应(通常称为细胞、细胞介导的、延迟型、或结核菌素型超敏反应)由因接触特定抗原而致敏T-淋巴细胞造成。与IV型反应有关的疾病的非限制性例子是接触性皮炎和同种异体移植物排斥。

与上述任何一种非过敏性超敏反应有关的自身免疫性疾病可用结构式(I)和(Ia)的前药治疗或预防。具体地说，该方法可用来治疗或预防那些通常以单器官或单细胞类型的自身免疫性疾病为特征的自身免疫性疾病，其中包括但不限于：桥本甲状腺炎、自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血性自身免疫性萎缩性胃炎、自身免疫性脑脊髓炎、自身免疫性睾丸炎、古德帕斯彻病、自身免疫性血小板减少症、交感性眼炎、重症肌无力、格雷夫斯病、原发性胆汁性肝硬变、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎和膜性肾小球病，以及那些通常涉及系统性自身免疫性疾病的自身免疫性疾病，其中包括但不限于：系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎、舍格伦综合征、莱特尔综合征、多肌炎-皮肌炎、系统性硬化、结节性多动脉炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮。

熟练的技术人员会看到上面列出的许多自体免疫的疾病有严重的并发症，症状的改善显示了很重要的治疗效果，甚至在潜在的自身免疫性疾病不能改善的病例中也是如此。许多症状，和它们潜在的疾病状态都是单核细胞中活化FcγR信号级联的结果。由于结构式(I)和(Ia)的前药被代谢成2，4-嘧啶二胺化合物，该物质是单核细胞和其他细胞中这样的FcγR信号的有效抑制剂，这些方法找到了其与上述自身免疫性疾病相关的许多不利症状的治疗和/或预防中的使用价值。

一个特例是，类风湿性关节炎(RA)一般会导致全身性红肿、疼痛、丧失运动能力和关节软弱。类风湿性关节炎的特点是与淋巴细胞密集的滑膜慢性红肿。通常只有一个细胞层厚的滑膜剧烈细胞化，呈现一种类似于淋巴组织的形式，包括树状细胞、T-、B-和NK细胞、巨噬细胞和浆细胞群。这个过程和包括免疫抗原-免疫球蛋白复合体形成的免疫病理机制的积累，最终导致了关节完整性的破坏，导致关节处或附近的畸形、永久的功能丧失和/或骨侵蚀。这种方法可能用于治疗或改善任何一个、几个或所有这些类风湿性关节炎症状。因此，对于类风湿性关节炎，当与类风湿性关节炎相关的症状有所减少或改善时，不管治疗有没有导致对潜在类风湿性关节炎的伴随治疗和/或循环类风湿因子(“RF”)数量的减少，所述方法被认为提供了治疗收益(下文中讨论的更多)。

美国风湿病学协会(ACR)已经开发了定义RA改善和临床症状缓解的标准。参数ACR20(获得20％临床改进的ACR标准)要求关节的触痛和肿胀计数得到20％的改善，并要求以下5种参数中有3种得到20％的改善：患者的整体评价、医师的整体评价、患者对疼痛的评价、失能程度以及急性阶段反应物的水平。这些标准已扩展到改善50％和70％，分别表示为ACR50和ACR70。其它标准包括Paulu标准和X光片改善(radiographic progression)(例如Sharp评分)。

一些实施方案中，当患者显示出ARC20时，实现了对RA患者的治疗益处。在具体的实施方案中，ARC可以达到ARC50或者甚至ARC70。

系统性红斑狼疮(“SLE”)通常伴有如发烧、关节疼痛(关节痛)、关节炎和浆膜炎(胸膜炎或心包炎)的症状。对于SLE，当伴随SLE的症状有所减少或改善时，不管治疗有没有导致潜在SLE的伴随治疗，认为这些方法提供了治疗收益。

多发性硬化(“MS”)通过扰乱视觉灵敏度、刺激复视觉、扰乱运动功能以影响行走和手的使用、产生大小便失禁、痉挛和感官欠缺(触觉，疼痛和温度敏感度)来弱化病人。对于多发性硬化，当伴随多发性硬化的弱化有所改善或减少时，不管治疗有没有导致潜在多发性硬化的伴随治疗，认为这些方法提供了治疗收益。

当用来治疗或预防这样的疾病时，这里所述的前药可单独给予、作为一种或多种前药的混合物给予、或者与用于治疗这种疾病和/或与这种疾病有关的症状的其它药剂混合或联合给予。所述前药也可与用于治疗其它症状或疾病的药剂混合或联合给予，如类固醇、膜稳定剂、5LO抑制剂、白三烯合成和受体抑制剂、IgE同种型转换抑制剂或IgE合成抑制剂、IgG同种型转换抑制剂或IgG合成抑制剂、β-激动剂、类胰蛋白酶抑制剂、阿司匹林、COX抑制剂、氨甲叶酸、抗-TNF药物、瑞涂辛(retuxin)、PD4抑制剂、p38抑制剂、PDE4抑制剂和抗组胺剂等等。所述前药可以化合物本身的形式或作为含有前药的药物组合物给予。

含有所述前药的药物组合物可以通过传统的混合、消溶、粒化、做成糖衣丸、研磨、乳化、形成胶囊、诱捕或冻干的过程进行生产。这些组合物可以以传统的方式使用一种或多种生理上可接受的载体、稀释液、赋形剂或有助于将前药处理成制药中可使用的制剂的辅助剂调配出来。

如上所述，所述前药可被制成药物组合物本身或被制成水合物、溶剂合物、N-氧化物或药学上可接受的盐的形式。典型地，这种盐在水溶液中的溶解性比在相应的自由酸和碱中的溶解性更好，但是也有可能形成比在相应的自由酸和碱中的溶解性差的盐。

药物组合物可以采用适合任何一种给药方式的形式，包括，如局部的、眼睛的、口服的、口腔的、身体组织的、鼻子的、注射的、皮肤的、直肠的、阴道的给药方式等等，或者是适合吸入或吹入给药的形式。

对于局部使用，所述前药剂型可以是本领域内熟知的溶液、凝胶体、药膏、乳膏、悬浮液等等。

全身性剂型包括那些为注射用(如皮下、静脉内、肌内、胸内的或腹膜内的)设计的剂型，以及那些为透皮、透粘膜口服或肺部给药设计的剂型。

有用的可注射制剂包括水性或油性介质中活性化合物的无菌悬浮液、溶液或乳剂。所述组合物也可以包括调配剂，如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。注射用剂型可以是单位剂量的形式，如安瓿或多剂量容器的形式，并可以包含其他防腐剂。

或者，注射用剂型可以以粉末的形式提供，用于使用前与适当的介质重构，所述介质包括但不限于，无菌的无热原水、缓冲液、葡萄糖溶液等等。最后，任何本领域已知的技术(如冻干)可用于所述活性化合物的干燥，并在使用前重构。

对于透粘膜给药，在该剂型中使用适合透过这个屏障的渗透剂。这样的渗透剂是本领域内已知的。

对于口服给药，药物组合物可采取如锭剂、药片或胶囊的形式，这些是通过传统的方式，用制药学上可接受的赋形剂如接合剂(预糊化玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮或者羟丙基甲基纤维素)、填充剂(如乳糖，微晶纤维素或磷酸氢钙)、滑润剂(如硬脂酸镁、滑石粉或硅石粉)、分解剂(如马铃薯淀粉或羟基乙酸淀粉钠)、润湿剂(如十二烷醇硫酸钠)来制备的。所述片剂可以通过本领域内熟知的方法，用例如糖、薄膜或肠衣包被。其中的前基团具有式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)₂，其中各R^d各自独立选自氢和低级烃基且y为1或2，且在生理pH下显示出的水溶性约为0.1-1000mg/ml的磷酸盐前药尤其适合以药片或胶囊的形式口服给药。当给Sprague-Dawley大鼠口服胶囊时，前药化合物4显示出约为30％的药物1的生物利用度(见图5)，其吸收与活性药物化合物1的吸收几乎相等(见图6)。预计水溶性特性类似于那些前药化合物4的其它磷酸盐前药也具有类似的药代动力学特性。

前药化合物4(以及其它含有磷酸根的前药)的具体的示例性片剂配方含有约50-400mg前药化合物(或其盐)、约0.05-0.5重量％胶体二氧化硅、约0.5-5.0重量％交联羧甲基纤维素钠、0.25-5.0重量％硬脂酸镁和约20-80重量％微晶纤维素。如果需要，片剂可用膜如羟丙甲基纤维素膜、羧甲基纤维素或果糖包衣，所述膜中可任选含有着色剂如FD&C蓝#1、PD&C绿#3、FD&C黄#6和二氧化钛。

用于口服给药的液体制剂可以采取如酏剂、溶液、糖浆或悬浮液的形式，或者可以以干燥产物的形式存在，使用与水或其他合适的介质重构。这种液体制剂可以通过传统的方法，用药学上可接受的添加剂如悬浮剂(如山梨糖醇糖浆、纤维素衍生物或硬化食用脂肪)、乳化剂(卵磷脂或阿拉伯树胶)、非水介质(如杏仁油、油脂、普通酒精，聚乙二醇类化合物或者分馏的植物油)、防腐剂(如甲基或丙基-p-羟基安息香酸或山梨酸)来制备。该组合物也可按需含有缓冲盐、防腐剂、调味剂、色素和甜味剂。

众所周知，可适当配制口服给药的制剂以实现可控的前药释放。

用于口腔的组合物可以采取传统形式的片剂或锭剂剂型。

对于直肠和阴道给药路径，所述前药可以制备成含有传统栓剂碱如可可脂或其他甘油酯的溶液(为了灌肠剂的持久)栓剂或药膏剂型。

对于鼻给药或通过吸入或吹入给药，所述前药可以通过使用适当压缩气体(如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氟碳化合物、二氧化碳或其他气体)从加压袋或喷雾器中以气雾喷射的方式很方便地递送。在加压气雾的情况下，剂量单位可以通过提供释放计量量的阀来确定。在吸入器或吹药器中使用的胶囊和药筒(如由凝胶组成的胶囊和药筒)可以配制成含有所述化合物和适当的粉末基础物(如乳糖或淀粉)的粉末混合物的剂型。

对于眼给药，所述前药可以是适合眼用的溶液、乳状液、悬浮液等等的剂型。本领域内已知各种适合将化合物对眼给药的介质。具体的非限制性例子描述于美国专利No.6,261,547；美国专利No.6,197,934；美国专利No.6,056,950；美国专利No.5,800,807；美国专利No.5,776,445；美国专利No.5,698,219；美国专利No.5,521,222；美国专利No.5,403,841；美国专利No.5,077,033；美国专利No.4,882,150；和美国专利No.4,738,851。

对于缓释投药，所述前药可以配制成作为储备制剂通过植入或肌内注射给药的剂型。所述前药可以与合适的聚合或疏水材料(如在可接受的油中以乳剂形式)或离子交换树脂配制剂型，或是低溶解性的衍生物形式(如低溶解性盐)。或者，可以利用透皮投药系统，它被制成用于透皮吸收的缓慢释放所述前药的具有粘性的盘或片。最后，可以使用渗透加强剂提高前药穿过皮肤的渗透性能。合适的透皮贴描述于，例如，美国专利No.5,407,713.；美国专利No.5,352,456；美国专利No.5,332,213；美国专利No.5,336,168；美国专利No.5,290,561；美国专利No.5,254,346；美国专利No.5,164,189；美国专利No.5,163,899；美国专利No.5,088,977；美国专利No.5,087,240；美国专利No.5,008,110；和美国专利No.4,921,475。

另外，也可以使用其他药物传输系统。脂质体和乳剂是熟知的可以用于前药传输的投药载体的例子。虽然通常以较高的毒性为代价，也可以使用某些有机溶剂如二甲亚砜(DMSO)。

如果需要，所述药物组合物可以存在于在可以包含一个或多个含有前药的单位剂量的包装或分配器中。所述包装可以例如由金属或塑料薄片组成，如水泡眼包装。所述包装或分配器可以带有服用说明。

6.6有效剂量

通常使用一定有效剂量的这里所述的前药或其组合物以达到预期的效果，例如，用有效治疗或预防正在治疗的具体疾病的剂量的药物。该前药可以治疗性给药以实现治疗收益，或是预防性给药以实现预防收益。治疗收益是指根除或改善正在被治疗的疾病的潜在病症，和/或根除或改善一个或更多伴随潜在疾病的症状，使得患者报告感觉或症状好转，尽管患者可能仍然受到潜在疾病的折磨。例如，用一种化合物对患有过敏症的患者给药，不仅当过敏反应根除或改善时，而且当患者声称在接触变应原后与过敏反应有关的症状的严重性或持续时间减轻时，所述给药提供了治疗收益。另一个例子是，对哮喘的治疗收益包括在哮喘发作后呼吸状况改善或者发生哮喘的频率或严重性降低。对RA的治疗收益也包括上述ACR20、ACR50或ACR70。无论是否实现改善，治疗收益通常也包括疾病进程的停止或延缓。

对于预防性给药，前药被给予具有先前描述的疾病之一发病风险的患者。例如，如果不知道病人是否对一种具体药物过敏，可以在给予所述药物之前给予所述前药以避免或改善对该药物的过敏反应。或者，预防性给药可以用于避免被诊断有潜在疾病病人的病情发作。例如，所述前药可在预期接触变应原之前给予过敏症患者。前药也可预防性地给予重复接触已知会造成上述疾病之一的物质的健康个体以预防这种疾病的发作。例如，前药可给予经常接触到会引起过敏症的变应原(如橡胶)的健康个体，以预防过敏症的发生。或者，前药可以在参与引发哮喘的活动之前给哮喘患者服用以减轻或完全避免哮喘症状的严重性。

前药的用量取决于多种因素，包括如所要治疗具体症状、给药模式、所需收益是否是预防性或治疗性，所要治疗的症状的严重程度以及病人的年龄和体重，具体前药的生物利用度、所选给药途径下转化成活性药物的转化率和效率等等。如何确定具体应用和给药模式下前药的有效剂量是精通本领域的技术人员熟知的。

有效剂量开始可从体外活性和代谢试验估算。例如，用于动物的前药的初始剂量可以是使代谢物活性化合物的循环血液或血浆浓度达到或超过体外试验中测得的特定化合物的IC₅₀，所述体外试验如体外CHMC或BMMC以及以下文献中描述的其它体外试验：2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)。考虑到特定前药在所需给药途径下的生物利用度，计算达到这种循环血液或血浆浓度的循环剂量是熟练的技术人员熟知的。为得到指导，读者可参考Goodman和Gilman的《治疗的药物基础》(Goodman and Gilman′s The Pharmaceutical Basis ofTherapeutics，最新版本，Pagamonon Press)第1章第1-46页Fingl和Woodbury写的“一般原则”(General Principles)及其中引用的参考文献。

前药的初始剂量也可从体内数据如动物模型估算。用于测试活性代谢物治疗或预防上述各种疾病的功效的动物模型是本领域熟知的。超敏或过敏反应的合适动物模型描述于Foster，1995，Allergy 50(增刊21)：6-9，讨论34-38和Tumas等，2001，J.Allergy Clin.Immunol.107(6)：1025-1033。过敏性鼻炎的合适动物模型描述于Szelenyi等，2000，Arzneimittelforschung 50(11)：1037-42；Kawaguchi等，1994，Clin.Exp.Allergy 24(3)：238-244和Sugimoto等，2000，Immunopharmacology 48(1)：1-7。过敏性结膜炎的合适动物模型描述于Carreras等，1993，Br.J.Ophthalmol.77(8)：509-514；Saiga等，1992，Ophthalmic Res.24(1)：45-50；and Kunert等，2001，Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.42(11)：2483-2489。系统性肥大细胞增多症的合适动物模型描述于O′Keefe等，1987，J.Vet.Intern.Med.l(2)：75-80和Bean-Knudsen等，1989，Vet.Pathol.26(1)：90-92。超IgE综合征的合适动物模型描述于Claman等，1990，Clin.Immunol.Immunopathol.56(1)：46-53。B细胞淋巴瘤的合适动物模型描述于Hough等，1998，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95：13853-13858和Hakim等，1996，J.Immunol.157(12)：5503-5511。特应性疾病如特应性皮炎、特应性湿疹和特应性哮喘的合适动物模型描述于Chan等，2001，J.Invest.Dermatol.117(4)：977-983和Suto等，1999，Int.Arch.Allergy Immunol.120(Suppl 1)：70-75。测试生物利用度和/或前药代谢成活性代谢物的合适动物模型也是熟知的。一般技术人员通常可根据这种信息确定适合对人给药的特定前药的剂量。其它合适的动物模型描述于实施例部分。

剂量范围通常为约0.0001mg/kg/天、0.001mg/kg/天或0.01mg/kg/天到约100mg/kg/天，但可以更高或更低，这除了其他因素以外，取决于活性代谢物的活性、前药的生物利用度、其代谢动力学或其它药代动力学特性、给药模式以及上述各种其它因素。可根据个人调节剂量和间隔以提供足以维持治疗或预防效果的前药和/或活性代谢物的血浆水平。例如，前药可每周给予一次、每周给予若干次(例如每两天一次)、每天一次或每天多次，这除了其他因素以外，取决于给药模式、所治疗的具体病症以及处方医生的判断。当局部给药或选择性摄入时，如局部给药时，前药和/或活性代谢物的有效局部浓度可能与血浆浓度无关。熟练的技术人员不需要过度实验就能够最佳化有效的局部剂量。

优选地，所述前药将代谢成会提供治疗或预防收益而不会造成实质性毒性的活性化合物。活性代谢物和其它代谢物以及未代谢的前药的毒性可用标准药学程序确定。毒性效应和治疗(或预防)效应的剂量比是治疗指数。优选具有高治疗指数的前药。

已经描述了本发明，下面的实施例仅是为了例证而非限制。

7.实施例

7.1前药化合物4的合成

7.1.1 N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物3)

将N4-(2，2-二甲基-3-氧代-4H-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(1，1.0g，2.12mmol)，Cs₂CO₃(1.0g，3.07mmol)和氯甲基磷酸二叔丁酯(2，0.67g，2.59mmol)的丙酮(20mL)溶液在氮气下室温搅拌。通过LC/MS监测反应过程。除了原料(化合物1)，粗制反应混合物显示出三个保留时间接近的产物峰，其M⁺+H为693(次要-1)，693(主要：3)和477(次要-2)。将内容物搅拌4天(70％消耗)后浓缩反应混合物并用水稀释。通过过滤收集所形成的淡黄色沉淀并将其干燥。粗制固体通过硅胶柱层析纯化(用10％NEt₃/CH₂Cl₂预处理然后用己烷洗脱)，用70％EtOAc/己烷-100％EtOAc梯度洗脱。将含有化合物1、M⁺+H 693的组分收集并浓缩。用与上文所述类似的方式再纯化所得粗制白色固体，但用30％-50％-75％-100％EtOAc/己烷洗脱。收集到的M⁺+H 693的主要产物峰为白色固体(270mg，18％)，它被定性为N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物3)。¹H NMR(DMSO-d6)：δ9.21(s，1H)，9.17(s，1H)，8.16(d，1H，J＝2.6Hz)，7.76(d，1H，J＝8.5Hz)，7.44(d，1H，J＝8.5Hz)，7.02(s，2H)，5.78(d，1H，J³PH＝6.1Hz)，3.64(s，6H)，3.58(s，3H)，1.45(s，6H)，1.33(s，9H)。LCMS：保留时间：14.70min.；纯度：95％；MS(m/e)：693(MH⁺)。³¹PNMR(DMSO-d6)：-11.36。

7.1.2 N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物4)

0℃氮气下，用5分钟将三氟乙酸(1.5mL)逐滴加入溶于CH₂Cl₂(10mL)的N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物3，120mg，0.173mmol)。将内容物搅拌1.5小时。通过LC/MS监测反应混合物的反应过程。原料被完全消耗之后将反应混合物浓缩、干燥并用乙醚研磨。将醚层倾析出并干燥以得到粗制固体。对粗制固体进行LC/MS分析显示出三个峰，其M⁺+H分别为581、471和501。通过制备型HPLC层析纯化收集对应于M⁺+H 581的峰。将各组分冻干并干燥以提供53mg(52％)乳白色絮状固体，其被定性为N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物4)。¹H NMR(DMSO-d6)：δ9.21(br s，2H)，8.16(d，1H，J＝2.6Hz)，7.93(d，1H，J＝8.5Hz)，7.39(d，1H，J＝8.5Hz)，7.05(s，2H)，5.79(d，1H，J³PH＝6.6Hz)，3.67(s，6H)，3.59(s，3H)，1.44(s，6H)。LCMS：保留时间：8.52min.；纯度：95％；MS(m/e)：581(MH⁺)。³¹P NMR(DMSO-d6)：-2.17。

7.2前药化合物4的其它合成方法

下面提供了另一种减轻对柱层析和HPLC纯化需求的合成前药化合物4的方法。

7.2.1合成N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物3)

将N4-(2，2-二甲基-3-氧代-4H-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物1，19.73g，41.97mmol)、Cs₂CO₃(15.04g，46.16mmol)和氯甲基磷酸二叔丁酯(13.0g，50.38mmol)的DMF(100mL)溶液在氮气下室温搅拌。通过在线LC/MS监测反应过程。除了原料(化合物1)，粗制反应混合物显示出两个保留时间接近的产物峰(比例为1∶6.5)，其M⁺+H为693(次要-1)和693(主要)。随着反应的进行，最初的黄色反应混合物变为橄榄绿色。如下进行操作：

1).将内容物搅拌30小时之后(92％消耗)将反应混合物倒在冰水(400mL)上并加入盐水溶液(200mL)搅拌内容物。滤出所形成的暗黄色细颗粒，用水洗涤并干燥过夜。

2).将固体(35g)溶于MTBE(500mL)并用水(400mL)洗涤。含水层用MTBE(2×350mL)萃取直到TLC上无UV。将合并的有机层用无水Na₂SO₄干燥并倾析出。注意：步骤2可直接进行，但萃取回溶液的DMF会对结晶步骤造成困难。

3).暗红色清澈溶液用10g活性碳处理，将其煮沸并过滤。

4).通过常规加热将暗红色清澈溶液浓缩至体积为400mL并用于结晶。过滤结晶成颗粒的固体，将此颗粒碾成粉末，用MTBE(400mL)洗涤并在高真空下干燥。母液的操作见步骤7。固体的重量：17g；纯度：90％(化合物3)，6.26％(化合物1)，1.8％(少量，M+693)。

5).在此阶段，将固体溶于500ml乙醚并加热至沸。冷却并过滤以除去未溶解的材料。将滤液浓缩。

6).将上述浓缩液在MTBE(300mL)中结晶。滤出形成的白色固体，用MTBE(100mL)洗涤并在高真空下干燥以提供所需的N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物3)，其纯度为97％。¹H NMR(DMSO-d6)：δ9.21(s，1H)，9.17(s，1H)，8.16(d，1H，J＝2.6Hz)，7.76(d，1H，J＝8.5Hz)，7.44(d，1H，J＝8.5Hz)，7.02(s，2H)，5.78(d，1H，J³PH＝6.1Hz)，3.64(s，6H)，3.58(s，3H)，1.45(s，6H)，1.33(s，9H)。LCMS：保留时间：14.70min.；纯度：95％；MS(m/e)：693(MH⁺)。³¹P NMR(DMSO-d6)：-11.36。固体的重量：15.64g(产率：55％)；纯度：97％(R935787)，3％(化合物1)。

7).将母液浓缩并重复步骤5和6以得到化合物3。

7.2.2合成N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物4)

将溶于AcOH∶H₂O(225mL，4∶1)的N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物3)(15.0g，21.67mmol)在65℃(油浴温度)加热。通过在线LC/MS监测反应过程。加热1小时后反应混合物转变成淡棕白色固体。此时大部分化合物3转变成单去叔丁基(mono des t-butyl)产物。加热3小时后观察到SM被消耗且中间体(单去叔丁基化的)完全转化成产物。

将反应混合物冷却，倒在冰水(200mL)上，搅拌20分钟并过滤。干净的白色滤饼依次用水(600ml)和丙酮(200mL)洗涤，干燥2小时，然后在干燥器中的P₂O₅上以高真空干燥。固体的重量：12.70g；纯度：97％(化合物3)和3％(化合物1)¹H NMR表明存在乙酸(1∶1)

为除去乙酸，将该固体置于乙腈(300mL)并通过rotovap真空浓缩。该过程用乙腈和甲苯(3×300mL)重复2次。所得固体于50℃在高真空下干燥。

最后将固体置于丙酮(400mL)，过滤并干燥以提供N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物4)。¹H NMR(DMSO-d6)：δ9.21(br s，2H)，8.16(d，1H，J＝2.6Hz)，7.93(d，1H，J＝8.5Hz)，7.39(d，1H，J＝8.5Hz)，7.05(s，2H)，5.79(d，1H，J³PH＝6.6Hz)，3.67(s，6H)，3.59(s，3H)，1.44(s，6H)。LCMS：保留时间：8.52min.；纯度：95％；MS(m/e)：581(MH⁺)。³¹PNMR(DMSO-d6)：-2.17。

7.3合成N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺单钙盐(化合物6)

室温下，边搅拌内容物边将NaHCO₃(0.17g，2.02mmol)的水(10mL)溶液逐滴加入N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]噁嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(0.5g，0.86mmol)的水(5mL)悬浮液中。形成的澄清溶液在室温下用逐滴加入的CaCl₂的水(10mL)溶液(0.11g溶于10mL水，0.99mmol)处理。加入导致反应混合物中沉淀出白色固体。完全加入后，将内容物搅拌30分钟，过滤，用水(40mL)洗涤并干燥。将干净的白色固体置于水(30mL)中并在搅拌板(stir plate)上加热至沸。将溶液冷却，过滤并干燥。收集白色固体并再在80℃于高真空下干燥32小时以得到0.41g(83％)N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺单钙盐(化合物6)。

7.4合成前药化合物8

将N4-(2，2-二甲基-4-[(二-叔丁基膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(按上述方法制备)(0.2g，0.29mmol)加入MeOH(5mL)和Et₂O(5mL)的混合物。室温下边搅拌内容物边一次性加入2NNaOH水溶液(0.023g，0.58mmol)。通过LC/MS监测反应过程。搅拌8小时后滤出沉淀的固体并干燥以得到N4-(2，2-二甲基-4-甲氧基甲基-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺(化合物8)，其为白色固体(0.11g，74％)。¹H NMR(DMSO-d6)：δ9.47(s，1H)，9.15(s，1H)，8.16(d，1H，J＝3.8Hz)，7.87(d，1H，J-8.5Hz)，7.37(d，1H，J＝8.5Hz)，7.03(s，2H)，5.40(s，2H)，3.66(s，6H)，3.59(s，3H)，3.27(s，3H)，1.44(s，6H)。LCMS：保留时间：12.88min.；纯度：92％；MS(m/e)：515(MH⁺)。

7.5活性2，4-嘧啶二胺化合物在动物中耐受

之前已经证实了许多生物活性2，4-嘧啶二胺化合物在低于它们显示出毒性的剂量下在动物中发挥其活性的能力(参见，例如，2003年1月31日提交的美国申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)，2003年1月31日提交的国际申请序列号PCT/US03/03022(WO 03/063794)，2003年7月29日提交的美国申请序列号10/631,029(＿＿)，国际申请序列号PCT/US03/24087(WO2004/014382)，2004年7月30日提交的美国申请序列号10/903,263(US2005/0234049)，以及国际申请序列号PCT/US2004/24716(＿＿)。

在一组核心研究(呼吸、CNS、心血管和HERG)中研究了活性化合物1的安全药理学。在心血管研究中发现，当剂量为50mg/kg时心率略微降低同时RR间隔升高，在CNS(Irwin)研究中还发现，当剂量为50mg/kg时对少数行为参数有轻微影响。另外，安全药理学研究证明化合物1被良好耐受。GLP毒理学研究包括消极致突变性和致畸性研究(Ames、染色体畸变和小鼠微核)。在对大鼠和猴子进行的28天的毒性研究中，已证实较高剂量会对血液学、肝转氨酶(仅在大鼠中产生轻微影响)、脾和胸腺的大小(仅大鼠)和骨髓细胞构成(大鼠和猴子)产生可逆影响。对大鼠进行的免疫表型研究显示，高剂量大鼠中CD3+细胞的比例显著降低，而恢复之后CD45RA+细胞显著升高。在组织病理学中值得关注的只有高剂量时骨髓细胞构成的轻微减少。在抗KLH抗体评价中没有证据表明对体液免疫产生不良影响。未观测到不良影响水平(NOAEL)为，大鼠10-30mg/kg/天，猴子100mg/kg/天。

7.6药物化合物1在体外试验中具有生物活性

化合物1以剂量依赖性方式阻断FcεRI依赖的脐带血衍生的原代人肥大细胞(CHMC)的活化，通过测量脱粒时释放的类胰蛋白酶的活性得知，其EC₅₀约为43nM。化合物1不抑制离子霉素诱导的CHMC的脱粒。离子霉素是一种绕过早期FcR信号转导诱导CHMC脱粒的钙离子载体，从而说明化合物1是FcR信号特异的且本身不针对脱粒。化合物1还抑制依赖于FcεRI的LTC4(EC₅₀＝39nM)及所有测试的细胞因子(EC₅₀从158nM到462nM)的产生和释放。

7.7药物化合物1对类风湿性关节炎的动物模型有效

化合物1在IC-介导的血管水肿(大鼠中的Arthus反应)、小鼠中的胶原抗体诱导的关节炎以及胶原诱导的关节炎的大鼠模型中的生物活性。

7.7.1 Arthus反应

包括血管炎、血清病、系统性红斑狼疮、RA和肾小球肾炎在内的许多人自身免疫性疾病中会发生IC-介导的急性炎性组织损伤。IC-介导的组织损伤的经典实验模型是反向被动Arthus(RPA)反应。真皮内注射OVA特异性抗体(兔抗OVA IgG)之后再静脉内注射抗原(卵清蛋白，OVA)导致IC在血管周围沉积并发生以注射部位的水肿、中性白细胞浸润和出血为特征的快速炎症反应(Szalai等，2000，J.Immunol.164(1)：463-468)。

在给予抗原/抗体前1小时使大鼠口服一次化合物1以剂量依赖性方式减轻了皮肤RPA反应和炎性水肿。从组织活检可知，相比载体对照，口服给予10mg/kg化合物1对Evans蓝色染料的血管外渗漏(OD₆₁₀)产生80％抑制。

7.7.2胶原抗体诱导的关节炎

在小鼠胶原抗体诱导的关节炎(CAIA)模型中评价了化合物1的抗炎活性，该模型中，给予小鼠抗II型胶原抗体鸡尾酒以诱导关节炎(Teroto等，1992，J.Immunol.148(7)：2103-2108；McCoy等，2002，J.Clin.Invest.110(5)：651-658；Kagari等，2002，J.Immunol.169(3)：1459-1466)。这种被动模型不同于传统的迅速出现疾病症状的啮齿动物胶原诱导的关节炎(CIA)模型(在IV注射抗体24-48小时内出现)，可在CIA易感性小鼠品系和CIA抗性小鼠品系中诱导关节炎，并且能够评价不依赖于抗体产生的炎症。

通过尾静脉静脉内注射Arthrogen-CIA单克隆抗体混合物(Chemicon International，Inc.，Temecula，CA)，2天后再腹膜内注射LPS以在Balb/c小鼠中诱导CAIA。给予抗体4小时内开始口服化合物1治疗(第0天)。每日评价后爪关节炎的严重性(每只爪0-4分，计算两只后爪的总分)。在第5天，盐水和载体对照组都达到它们的临床评分峰值，发病率为100％。

在用化合物1治疗的动物中明显发现炎症和肿胀减轻，同时关节炎发展得更加缓慢。相比仅用载体治疗的动物，用化合物1治疗(b.i.d.)明显减轻了临床关节炎(p＜0.05)，尽管更低剂量水平的化合物1表现出降低关节炎严重性、发病率和发病时间的趋势，但差异并不显著(p＞0.05)。

7.7.3胶原诱导的关节炎

IC介导的组织损伤的一种实验模型是啮齿动物的CIA(Kleinau等，2000，J.Exp.Med.191：1611-1616)。将II型胶原(CII)注射到啮齿动物造成以远端关节软骨和骨的炎性破坏并伴随周围组织的肿胀为特征的免疫反应。大鼠的CIA通常被用来评价可能被用作治疗类风湿性关节炎以及其他慢性炎性症状的药物的化合物并是通过给小鼠或大鼠的易感品系注射用不完全弗氏佐剂(IFA)配制的CII而诱导的。给予这种乳剂会引起以滑液增生、单核细胞浸润、血管翳形成以及软骨和骨破坏为特征的多关节炎。已经证实，由于B细胞缺陷小鼠不会发生关节炎，因此CII抗体是小鼠中CIA的先决条件(Svensson等，1998，Clin.Exp.Immunol.111：521-526)。

在第0天用天然鸡CII/IFA免疫同基因LOU大鼠。在关节炎症状发作时(第10天)开始进行口服药物治疗。用四种剂量水平(1、3、10和30mg/kg，每天通过p.o.管饲法给予)之一的载体对照或化合物1处理总共59只大鼠。用基于关节炎症程度的标准化方法每天评价后肢的临床关节炎严重性。在研究结束时(第28天)获得后肢的高分辨率数字式X光照片。还对这些肢进行组织病理学变化分析。通过ELISA一式四份测量天然CII的IgG抗体。在高剂量(30mg/kg)组中发现，治疗开始7天内关节炎的严重性显著降低(p＜0.05)，且在研究中持续改善。在第28天时，用载体处理的动物的临床评分为6.08±0.67，而用30mg/kg化合物1处理的组为2.54±0.98(p＜0.001)。在研究结束时(第28天)进行盲试X光照片，证明关节损伤显著减轻：3.66±0.71(载体)比1.63±0.67(化合物1)(p＜0.02)(E.Brahn.2004)。盲试组合物组织病理学研究证实了血管翳和糜烂的消退：经过修正的平均Mankin评分为11.8±0.9(载体)比3.7±0.9(30mg/kg化合物1)(p＜0.001)。在化合物1治疗的大鼠中天然CII抗体未减少。

7.8前药化合物具有口服生物利用度

测试了前药化合物4的口服生物利用度。对于该研究，将前药溶于各种载体用于大鼠中静脉内和口服给药(例如PEG 400溶液和CMC悬浮液)。在注明的情况下，用相同的载体配制及给予活性代谢物化合物1化合物(药物)。给予前药和/或药物之后，获得并提取血浆样品。通过高效液相色谱/串联质谱(LC/MS/MS)法测定前药和/或药物的血浆浓度。基于血浆浓度数据进行药代动力学分析。感兴趣的药代动力学参数包括清除率(CL)、稳态分布容积(Vss)、终末半衰期(t_1/2)和口服生物利用度(％F)。

这些不同药代动力学实验的结果示于图4-12。

参考图4，显示了对Spraque-Dawley大鼠进行IV和PO给药的PK曲线。对于IV给药，将化合物4溶于PEG-400并以1mg/kg的剂量给予。观察到前药化合物4迅速消失并在颈静脉血浆样品中发现药物1。用相同载体口服给予，不存在全身性前药化合物4，但观察到高水平药物代谢物化合物1。

图5总结了图4所述研究的PK参数。前药化合物4被迅速清除并部分转变为药物化合物1。以4mg/kg的剂量口服，测定生物利用度为29.9％。这种生物利用度数值是基于之前以1mg/kg的IV注射剂量给予药物1的研究中获得的数据(数据未显示)。

图6比较了Sprague-Dawley大鼠口服药物化合物1(2.5mg/kg，用PEG-400配制)或前药化合物4(4mg/kg，用PEG-400配制)后的药物1的出现量。AUC/剂量值几乎相等，说明前药化合物4与药物化合物1同样吸收。

图7显示了对化合物1和化合物4进行原位预测计算出的cLogD对pH的图。化合物1高度亲脂(liphophyllic)且仅可微弱电离(在pH＝7.5的磷酸缓冲液中测得的溶解度小于1mcg/ml，数据未显示)。相反，化合物4在中性pH值下有高极性。测得的溶解度值与pH＝7.5时预测的cLogD值一致。

图8证明前药化合物4在37℃时在酸性和中性条件下稳定。

图9图示了微粒体制品中前药化合物4向药物1的转变。在获自Xenotech的微粒体制品中前药化合物4不能转变为药物1。在随后用获自不同来源的肠和肝微粒体进行的研究中，观察到化合物4转化为化合物1(数据未显示)。

图10图示了前药化合物4在大鼠血浆中不稳定-观察到水解成药物1，并认为转化成化合物1由磷酸酶催化。用对-硝基苯基磷酸酯-一种已知的磷酸酶底物证实大鼠血浆中存在磷酸酶活性。

图11图示了用不同载体配制的前药化合物4的吸收。不同于药物化合物1，前药化合物4的吸收与剂型无关。溶液剂型(PEG-400和羧甲基纤维素(CMC))中前药化合物4和硬明胶胶囊中的粉末同样吸收。

基于药代动力学数据，用三种测试载体(PEG-400溶液；CMC溶液；以及胶囊中的粉末)配制的前药化合物4的口服生物利用度(％F)测定为约为30％。

Claims

1.含有2，4-嘧啶二胺部分和至少一个前基团R^p的前药化合物或其盐、溶剂合物、水合物或N-氧化物，所述前基团R^p共价连接到2，4-嘧啶二胺部分的伯或仲氨基氮原子上。

2.如权利要求1所述的前药化合物，其为如结构式(I)所示的化合物：

包括其盐、溶剂合物、水合物和N-氧化物，式中：

Y选自CH₂、NR²⁴、O、S、S(O)和S(O)₂；

Z¹和Z²各自独立选自CH和N；

R²选自任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的(C1-C6)烃基、任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的(C3-C8)环烃基、任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的环己基、任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的3-8元环杂烃基、任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的(C6-C14)芳基、任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的苯基以及任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的5-15元杂芳基；

R⁵选自卤素、氟、氰基、硝基、三卤甲基和三氟甲基；

R⁸选自R^a、R^b、被一个或多个相同或不同的R^a或R^b取代的R^a、被一个或多个相同或不同的R^a或R^b取代的-OR^a、-B(OR^a)₂、-B(NR^cR^c)₂、-(CH₂)_m-R^b、-(CHR^a)_m-R^b、-O-(CH₂)_m-R^b、-S-(CH₂)_m-R^b、-O-CHR^aR^b、-O-CR^a(R^b)₂、-O-(CHR^a)_m-R^b、-O-(CH₂)_m-CH[(CH₂)_mR^b]R^b、-S-(CHR^a)_m-R^b、-C(O)NH-(CH₂)_m-R^b、-C(O)NH-(CHR^a)_mR^b、-O-(CH₂)_m-C(O)NH-(CH₂)_m-R^b、-S-(CH₂)_m-C(O)NH-(CH₂)_m-R^b、-O-(CHR^a)_m-C(O)NH-(CHR^a)_m-R^b、-S-(CHR^a)_m-C(O)NH-(CHR^a)_m-R^b、-NH-(CH₂)_m-R^b、-NH-(CHR^a)_m-R^b-、-NH[(CH₂)_mR^b]、-N[(CH₂)_mR^b]₂、-NH-C(O)-NH-(CH₂)_m-R^b、-NH-C(O)-(CH₂)_m-CHR^bR^b和-NH-(CH₂)_m-C(O)-NH-(CH₂)_m-R^b；

各R^c各自独立选自保护基和R^a，或者，结合到相同氮原子的两个R^c与该氮原子一起形成5-8元环杂烃基或杂芳基，该基团可任选含有一个或多个相同或不同的其它杂原子并可任选被一个或多个相同或不同的R^a基团取代；

R²¹、R²²和R²³各自独立选自氢和前基团R^p；

R²⁴选自氢、低级烃基和前基团R^p；

各m各自独立为1-3的整数；和

3.如权利要求2所述的前药化合物，其特征在于，R⁵是氟。

4.如权利要求2所述的前药化合物，其特征在于，R²是任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的苯基。

5.如权利要求4所述的前药化合物，其特征在于，R²是3，4，5-三(低级烷氧基)苯基。

6.如权利要求5所述的前药化合物，其特征在于，R²是3，4，5-(三甲氧基)苯基。

7.如权利要求2所述的前药化合物，其特征在于，Y是O，Z¹是CH，Z²是N，R¹⁷和R¹⁸各自为甲基，且R¹⁹和R²⁰一起形成氧代基团。

8.如权利要求7所述的前药化合物，其特征在于，R²是任选被一个或多个相同或不同的R⁸基团取代的苯基。

9.如权利要求8所述的前药化合物，其特征在于，R²是3，4，5-三(低级烷氧基)苯基。

10.如权利要求9所述的前药化合物，其特征在于，R²是3，4，5-(三甲氧基)苯基。

11.如权利要求10所述的前药化合物，其特征在于，仅R²¹是前基团R^p。

12.如权利要求11所述的前药化合物，其特征在于，所述前基团R^p包括酯键、硫酯键、醚键、硫醚键、甲硅烷醚键、硫代甲硅烷醚键、碳酸酯键、硫脲键、酰胺键、硫代酰胺键、氨基甲酸酯键和脲键中的至少一个。

13.如权利要求11所述的前药化合物，其特征在于，所述前基团R^p包括磷酸基。

14.如权利要求13所述的前药化合物，其特征在于，所述前基团R^p具有式-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OH)₂或其盐，式中，y是1-3的整数；各R^d各自独立选自氢、任选取代的低级烃基、任选取代的(C6-C14)芳基或任选取代的(C7-C20)芳基烃基；其中，任选的取代基各自独立选自羟基、低级烷氧基、(C6-C14)芳氧基、低级烷氧基烃基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基和卤素，或者，结合到相同碳原子的两个R^d与它们所结合的碳原子一起形成含有3-8个碳原子的环烃基。

15.如权利要求14所述的前药化合物，其特征在于，所述前基团R^p选自-CH₂-O-P(O)(OH)₂和-CH₂CH₂-O-P(O)(OH₂)以及它们的盐。

16.如权利要求11所述的前药化合物，其特征在于，所述前基团R^p包括磷酸酯基。

17.如权利要求16所述的前药化合物，其特征在于，所述前基团R^p选自-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^e)(OH)、-(CR^dR^d)_y-O-P(O)(OR^e)(OR^e)、

或其盐，式中，各R^e各自独立选自取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基(例如，苯基、萘基、4-低级烷氧基苯基、4-甲氧基苯基)、取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基(例如，苄基、1-苯乙烷-1-基、2-苯乙烷-1-基)、-(CR^dR^d)_yOR^f、-(CR^dR^d)_y-O-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_y-O-C(O)OR^f、-(CR^dR^d)_yS-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_yS-C(O)OR^f、-(CR^dR^d)_yNH-C(O)R^f、-(CR^dR^d)_yNH-C(O)OR^f和-Si(R^d)₃，其中，各R^f各自独立选自氢、未取代的或取代的低级烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基和取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基；

各R^g各自独立选自氢或低级烃基；各R^h各自独立选自氢、取代或未取代的低级烃基、取代或未取代的低级环杂烃基、取代或未取代的(C6-C14)芳基、取代或未取代的(C7-C20)芳基烃基和取代或未取代的5-14元杂芳基；z是0-2的整数；R^d和y如权利要求14所定义。

18.如权利要求11所述的前药化合物，其特征在于，R^p选自-CH₂-O-P(O)(OH)₂、-CH₂CH₂-O-P(O)(OH)₂、-CH₂OH和其盐。

19.如权利要求2所述的前药化合物，其具有结构(III)：

式中，各R³⁰、R³¹和R³²各自独立选自氢、低级烃基、低级链烯基、低级炔基、(C6-C14)芳基、苯基、5-14元杂芳基、(C7-C20)芳基烃基、苄基、7-20元杂芳基烃基、-OR、氯、氟、溴、氰基、硝基、-C(O)R、-C(O)OR、-NRR、-S(O)₂NRR、-C(O)NRR、-N(R)S(O)₂R和-NC(O)OR，其中，各R各自独立选自氢和低级烃基；且R^p选自-CH₂-O-P(O)(OH)₂、-CH₂CH₂-O-P(O)(OH)₂、-CH₂OH和其盐。

20.如权利要求19所述的前药化合物，其特征在于，R³⁰、R³¹和R³²各自为甲氧基。

21.一种含有权利要求1所述前药化合物和可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂的组合物。

22.一种给予对象如结构式(IV)所示的2，4-嘧啶二胺化合物，包括其盐、水合物、溶剂合物和N-氧化物的方法：

式中，Z¹、Z²、R²、R⁵、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹和R²⁰如权利要求2所定义，Y²选自CH₂、NH、O和S，所述方法包括给予所述对象如权利要求2所述的前药化合物。

23.一种在对象中抑制细胞脱粒的方法，所述方法包括给予所述对象有效抑制脱粒量的如权利要求2所述的前药化合物。

24.如权利要求23所述的方法，其特征在于，所述疾病选自过敏性疾病，低级瘢痕形成，与组织破坏有关的疾病，与组织发炎有关的疾病、炎症和瘢痕形成。

25.如权利要求23所述的方法，其特征在于，所述疾病是类风湿性关节炎。

26.一种在对象中抑制Syk激酶活性的方法，所述方法包括给予所述对象抑制Syk激酶活性有效量的如权利要求2所述的前药化合物。

27.一种在对象中抑制Fc受体信号转导级联的方法，所述方法包括给予所述对象抑制Fc受体信号转导级联有效量的如权利要求2所述的前药化合物。

28.如权利要求27所述的方法，其特征在于，所述Fc受体选自FcαRI、FcγRI、FcγRIII和FcεRI。

29.一种在对象中治疗或预防自身免疫性疾病和/或一种或多种与其相关的症状的方法，所述方法包括给予所述对象治疗或预防所述自身免疫性疾病有效量的如权利要求1所述的前药化合物。

30.如权利要求29所述的方法，其特征在于，所述自身免疫性疾病选自通常称为单器官或单细胞类型自身免疫性疾病的自身免疫性疾病以及通常认为与系统性自身免疫性紊乱相关的自身免疫性疾病。

31.如权利要求29所述的方法，其特征在于，所述自身免疫性疾病选自桥本甲状腺炎、自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血性自身免疫萎缩性胃炎、自身免疫性脑脊髓炎、自身免疫性睾丸炎、古德帕斯彻病、自身免疫性血小板减少症、交感性眼炎、重症肌无力、格雷夫斯病、原发性胆汁性肝硬变、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎、膜性肾小球病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、舍格伦综合征、莱特尔综合征、多肌炎-皮肌炎、系统性硬化、结节性多动脉炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮。

32.一种在对象中治疗类风湿性关节炎的方法，所述方法包括给予所述对象治疗有效量的如权利要求2所述的前药化合物。

33.如权利要求32所述的方法，其特征在于，所给予的前药化合物的量可有效地使相应药物的血浆浓度达到或超过在体外试验中测定的药物抑制Syk的IC₅₀。

34.如权利要求32所述的方法，其特征在于，所述前药化合物是如结构式(V)所示的化合物，和/或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物和/或N-氧化物：

35.一种用于合成如权利要求2所述前药的化合物，该化合物具有结构式(VI)所示的结构：

包括其盐、溶剂合物、水合物和N-氧化物，式中：

Y³选自CH₂、NR²⁶、O、S、S(O)和S(O)₂；

R²、R⁵、R¹⁷、R¹⁹、R¹⁹、R²⁰，Z¹和Z²如权利要求2所定义；和各R²⁶各自独立选自氢和含磷前基团，前提是，至少一个R²⁶不是氢。

36.如权利要求35所述的化合物，该化合物是结构式(VII)所示的化合物：

包括其盐、水合物、溶剂合物和N-氧化物，式中，R²、R⁵、Z²、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹、R²⁰和R²¹如之前所定义，且Y⁴选自CH₂、NH、O和S。

37.如权利要求35所述的化合物，其特征在于，R²⁶选自-CH₂-O-P(O)(OR^f)₂、-CH₂CH₂-O-P(O)(OR^f)₂和其盐，其中，各R^f是相同或不同的低级烃基。

38.如权利要求37所述的化合物，其具有结构(VIII)：

式中，R²⁶选自-CH₂-O-P(O)(OtBu)₂、-CH₂CH₂-O-P(O)(OtBu)₂和其盐。

39.N4-(2，2-二甲基-4-[(二氢膦酰氧基)甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺及其盐和溶剂合物。

40.N4-(2，2-二甲基-4-[羟基甲基]-3-氧代-5-吡啶并[1，4]嗪-6-基)-5-氟-N2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，4-嘧啶二胺及其盐和溶剂合物。