BR112017019559B1 - Anticorpos anti-pdl1, anticorpos anti-pdl1 ativáveis, e métodos de uso destes - Google Patents
Anticorpos anti-pdl1, anticorpos anti-pdl1 ativáveis, e métodos de uso destes Download PDFInfo
- Publication number
- BR112017019559B1 BR112017019559B1 BR112017019559-3A BR112017019559A BR112017019559B1 BR 112017019559 B1 BR112017019559 B1 BR 112017019559B1 BR 112017019559 A BR112017019559 A BR 112017019559A BR 112017019559 B1 BR112017019559 B1 BR 112017019559B1
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- acid sequence
- amino acid
- sequence
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 99
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 22
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 432
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 348
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 247
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 claims description 232
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 195
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 157
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 157
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 156
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 150
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 132
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 89
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 claims description 66
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 56
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 53
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 51
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 48
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 claims description 40
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 39
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 26
- BLUGYPPOFIHFJS-UUFHNPECSA-N (2s)-n-[(2s)-1-[[(3r,4s,5s)-3-methoxy-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-1-methoxy-2-methyl-3-oxo-3-[[(1s)-2-phenyl-1-(1,3-thiazol-2-yl)ethyl]amino]propyl]pyrrolidin-1-yl]-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-3-methyl-2-(methylamino)butanamid Chemical group CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 BLUGYPPOFIHFJS-UUFHNPECSA-N 0.000 claims description 25
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 25
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 25
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 23
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 23
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 15
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical group CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 claims description 13
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 claims description 13
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 12
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 7
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 7
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 6
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical group CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 claims description 5
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 claims description 5
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical group CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 claims description 5
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 5
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 5
- 206010066476 Haematological malignancy Diseases 0.000 claims description 4
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 229940122255 Microtubule inhibitor Drugs 0.000 claims description 4
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 4
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical group C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 claims description 4
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 claims description 4
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical group COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 claims description 4
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 claims description 4
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 claims description 4
- 231100000782 microtubule inhibitor Toxicity 0.000 claims description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 3
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims description 3
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 3
- 206010044412 transitional cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008385 Urogenital Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000002458 carcinoid tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000008443 lung non-squamous non-small cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 2
- 201000006037 primary mediastinal B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000037964 urogenital cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims 1
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 claims 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims 1
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 abstract description 229
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 101100463133 Caenorhabditis elegans pdl-1 gene Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 abstract 1
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 333
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 200
- 102100035361 Cerebellar degeneration-related protein 2 Human genes 0.000 description 194
- 101000737793 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related antigen 1 Proteins 0.000 description 194
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 description 194
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 167
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 160
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 156
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 150
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 109
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 81
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 81
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 81
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 60
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 60
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 48
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 40
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 39
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 39
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 36
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 34
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 34
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 34
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 34
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 32
- 102000048776 human CD274 Human genes 0.000 description 32
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 32
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 30
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 30
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 29
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 29
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 27
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 27
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 26
- -1 ICOS Proteins 0.000 description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 24
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 24
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 24
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 24
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 24
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 21
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 21
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 20
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 18
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 17
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 16
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 15
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 15
- 230000006870 function Effects 0.000 description 15
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 15
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 15
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 15
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 14
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 14
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 14
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 14
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 14
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 14
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 14
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 14
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 13
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 13
- 241000894007 species Species 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 12
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 12
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 11
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 11
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 11
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 11
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 11
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 11
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 11
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 11
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 11
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 10
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 10
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 10
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 10
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 10
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 10
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 10
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 9
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 9
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 9
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 9
- 102100037942 Suppressor of tumorigenicity 14 protein Human genes 0.000 description 9
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 9
- 108010091175 Matriptase Proteins 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 8
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 8
- 102100031358 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 8
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 8
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 8
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M sodium;1-hydroxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].ON1C(=O)CC(S([O-])(=O)=O)C1=O RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 description 7
- 101710094902 Legumin Proteins 0.000 description 7
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 description 7
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 7
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 7
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- NEKNNCABDXGBEN-UHFFFAOYSA-L disodium;4-(4-chloro-2-methylphenoxy)butanoate;4-(2,4-dichlorophenoxy)butanoate Chemical compound [Na+].[Na+].CC1=CC(Cl)=CC=C1OCCCC([O-])=O.[O-]C(=O)CCCOC1=CC=C(Cl)C=C1Cl NEKNNCABDXGBEN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 6
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 6
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 6
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 6
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 6
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 6
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 6
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 102000048362 human PDCD1 Human genes 0.000 description 6
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 6
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 6
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical group C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 5
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 5
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 5
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 5
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 description 5
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 description 5
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 description 5
- 101000831007 Homo sapiens T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Proteins 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100024834 T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Human genes 0.000 description 5
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100038929 V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1 Human genes 0.000 description 5
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 5
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 5
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 5
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 5
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 5
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 5
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 5
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 5
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 4
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 description 4
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 description 4
- 101001011906 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-14 Proteins 0.000 description 4
- 101001109501 Homo sapiens NKG2-D type II integral membrane protein Proteins 0.000 description 4
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 4
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 102100030216 Matrix metalloproteinase-14 Human genes 0.000 description 4
- 101100407306 Mus musculus Cd274 gene Proteins 0.000 description 4
- 102100022680 NKG2-D type II integral membrane protein Human genes 0.000 description 4
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 4
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 4
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 4
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 4
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 4
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 4
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 4
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 4
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 4
- 208000007934 ACTH-independent macronodular adrenal hyperplasia Diseases 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 3
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 3
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 3
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 3
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 3
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 3
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 3
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 3
- 101000666896 Homo sapiens V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation Proteins 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 3
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 3
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 3
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010079206 V-Set Domain-Containing T-Cell Activation Inhibitor 1 Proteins 0.000 description 3
- 102100038282 V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation Human genes 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 3
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 3
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 3
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 3
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 3
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 125000005442 diisocyanate group Chemical group 0.000 description 3
- IJJVMEJXYNJXOJ-UHFFFAOYSA-N fluquinconazole Chemical compound C=1C=C(Cl)C=C(Cl)C=1N1C(=O)C2=CC(F)=CC=C2N=C1N1C=NC=N1 IJJVMEJXYNJXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 3
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 3
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 3
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 3
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N (2r)-2-amino-5-[[(2r)-1-(carboxymethylamino)-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrobromide Chemical compound Br.OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCC(O)=O JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 102100034452 Alternative prion protein Human genes 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 229940124291 BTK inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 239000012623 DNA damaging agent Substances 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 102100031509 Fibrillin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 2
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000595925 Homo sapiens Plasminogen-like protein B Proteins 0.000 description 2
- 101000955999 Homo sapiens V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1 Proteins 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- 102100040061 Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 Human genes 0.000 description 2
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N Iron oxide Chemical compound [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 239000002146 L01XE16 - Crizotinib Substances 0.000 description 2
- 239000002177 L01XE27 - Ibrutinib Substances 0.000 description 2
- 230000005723 MEK inhibition Effects 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 2
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 2
- 108091008877 NK cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100021462 Natural killer cells antigen CD94 Human genes 0.000 description 2
- 102100035195 Plasminogen-like protein B Human genes 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 2
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 2
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 2
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 2
- 229940028652 abraxane Drugs 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 2
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 2
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 2
- YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L carboplatin Chemical compound O=C1O[Pt](N)(N)OC(=O)C11CCC1 YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 150000007942 carboxylates Chemical group 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000005081 chemiluminescent agent Substances 0.000 description 2
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 2
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- KTEIFNKAUNYNJU-GFCCVEGCSA-N crizotinib Chemical group O([C@H](C)C=1C(=C(F)C=CC=1Cl)Cl)C(C(=NC=1)N)=CC=1C(=C1)C=NN1C1CCNCC1 KTEIFNKAUNYNJU-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- 229960005061 crizotinib Drugs 0.000 description 2
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 2
- 108010082025 cyan fluorescent protein Proteins 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 108010044804 gamma-glutamyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 2
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 2
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- 108700026078 glutathione trisulfide Proteins 0.000 description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 2
- XYFPWWZEPKGCCK-GOSISDBHSA-N ibrutinib Chemical compound C1=2C(N)=NC=NC=2N([C@H]2CN(CCC2)C(=O)C=C)N=C1C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 XYFPWWZEPKGCCK-GOSISDBHSA-N 0.000 description 2
- 229960001507 ibrutinib Drugs 0.000 description 2
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 108091005446 macrophage receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 229940125374 mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 210000004985 myeloid-derived suppressor cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 2
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 2
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 2
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 108091005957 yellow fluorescent proteins Proteins 0.000 description 2
- LLXVXPPXELIDGQ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoate Chemical compound C=1C=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=CC=1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O LLXVXPPXELIDGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JSHOVKSMJRQOGY-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(pyridin-2-yldisulfanyl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCSSC1=CC=CC=N1 JSHOVKSMJRQOGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[1-(pyridin-2-yldisulfanyl)ethyl]benzoate Chemical compound C=1C=C(C(=O)ON2C(CCC2=O)=O)C=CC=1C(C)SSC1=CC=CC=N1 GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 1
- AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=O AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KUHSEZKIEJYEHN-BXRBKJIMSA-N (2s)-2-amino-3-hydroxypropanoic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.OC[C@H](N)C(O)=O KUHSEZKIEJYEHN-BXRBKJIMSA-N 0.000 description 1
- XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-5-ethoxy-5-oxopentanoic acid Chemical compound CCOC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N (6-azaniumylidene-1,6-dimethoxyhexylidene)azanium;dichloride Chemical compound Cl.Cl.COC(=N)CCCCC(=N)OC IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(F)C=C1F VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUHCFUVCWLZEDQ-UHFFFAOYSA-N 1-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-1-oxo-4-(pyridin-2-yldisulfanyl)butane-2-sulfonic acid Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)C(S(=O)(=O)O)CCSSC1=CC=CC=N1 FUHCFUVCWLZEDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 2,2-diamino-1,4-bis(4-azidophenyl)-3-butylbutane-1,4-dione Chemical compound C=1C=C(N=[N+]=[N-])C=CC=1C(=O)C(N)(N)C(CCCC)C(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASNTZYQMIUCEBV-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxo-1-[6-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]hexanoyloxy]pyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 ASNTZYQMIUCEBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVJXGCIPWAVXJP-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxo-1-oxoniopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound ON1C(=O)CC(S(O)(=O)=O)C1=O GVJXGCIPWAVXJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C(C)CN(CC(O)=O)CC(N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-methyl-7h-purine-6-thione Chemical compound S=C1N(C)C(N)=NC2=C1NC=N2 FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBBVURRQGJPTHH-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyacetic acid;2-hydroxypropanoic acid Chemical compound OCC(O)=O.CC(O)C(O)=O XBBVURRQGJPTHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQXXYOLFJXSRMT-UHFFFAOYSA-N 5-diazocyclohexa-1,3-diene Chemical class [N-]=[N+]=C1CC=CC=C1 CQXXYOLFJXSRMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 108010012934 Albumin-Bound Paclitaxel Proteins 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 101000669426 Aspergillus restrictus Ribonuclease mitogillin Proteins 0.000 description 1
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 101800001415 Bri23 peptide Proteins 0.000 description 1
- 101800000655 C-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000107 C-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 239000012275 CTLA-4 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 101100454808 Caenorhabditis elegans lgg-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100033620 Calponin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 1
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 1
- 102100027995 Collagenase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010060123 Conjugate Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108020003215 DNA Probes Proteins 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 230000007018 DNA scission Effects 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 150000000918 Europium Chemical class 0.000 description 1
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 101710089384 Extracellular protease Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000945318 Homo sapiens Calponin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000577887 Homo sapiens Collagenase 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001013150 Homo sapiens Interstitial collagenase Proteins 0.000 description 1
- 101001011887 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-17 Proteins 0.000 description 1
- 101001011896 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-19 Proteins 0.000 description 1
- 101000990902 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 101001117312 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000990915 Homo sapiens Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000577877 Homo sapiens Stromelysin-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000661807 Homo sapiens Suppressor of tumorigenicity 14 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 1
- 101000638251 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Proteins 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 1
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 1
- 229940125563 LAG3 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101150030213 Lag3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010028275 Leukocyte Elastase Proteins 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100030219 Matrix metalloproteinase-17 Human genes 0.000 description 1
- 102100030218 Matrix metalloproteinase-19 Human genes 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 1
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 1
- 108090000143 Mouse Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- 101100519207 Mus musculus Pdcd1 gene Proteins 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N N-acetyl-L-serine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical compound CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N N-formyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC=O PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 101800000597 N-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000108 N-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 208000001894 Nasopharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100033174 Neutrophil elastase Human genes 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 239000012270 PD-1 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000012668 PD-1-inhibitor Substances 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 101100413173 Phytolacca americana PAP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 101710094000 Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 1
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100028847 Stromelysin-3 Human genes 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 229940126547 T-cell immunoglobulin mucin-3 Drugs 0.000 description 1
- 229940125555 TIGIT inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- 102100032101 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Human genes 0.000 description 1
- 108091005906 Type I transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940127174 UCHT1 Drugs 0.000 description 1
- HSRXSKHRSXRCFC-WDSKDSINSA-N Val-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HSRXSKHRSXRCFC-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- NDLSPGQRPWVKJS-UHFFFAOYSA-N [3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino] hexanoate Chemical compound CCCCCC(=O)ONC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 NDLSPGQRPWVKJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- OFLXLNCGODUUOT-UHFFFAOYSA-N acetohydrazide Chemical class C\C(O)=N\N OFLXLNCGODUUOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 239000007825 activation reagent Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005599 alkyl carboxylate group Chemical group 0.000 description 1
- 108010001818 alpha-sarcin Proteins 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001946 anti-microtubular Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011230 antibody-based therapy Methods 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 1
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 1
- 201000009613 breast lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010021331 carfilzomib Proteins 0.000 description 1
- BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N carfilzomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)[C@]1(C)OC1)NC(=O)CN1CCOCC1)CC1=CC=CC=C1 BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N 0.000 description 1
- 229960002438 carfilzomib Drugs 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 201000010897 colon adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 229940031670 conjugate vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- PGUYAANYCROBRT-UHFFFAOYSA-N dihydroxy-selanyl-selanylidene-lambda5-phosphane Chemical compound OP(O)([SeH])=[Se] PGUYAANYCROBRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N disuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 1
- 229950009791 durvalumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 108010028531 enomycin Proteins 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001433 erlotinib Drugs 0.000 description 1
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002222 fluorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940075613 gadolinium oxide Drugs 0.000 description 1
- 229910001938 gadolinium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical group 0.000 description 1
- 125000005179 haloacetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 101150107276 hpd-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 150000002429 hydrazines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002443 hydroxylamines Chemical class 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 1
- 230000002687 intercalation Effects 0.000 description 1
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 208000025848 malignant tumor of nasopharynx Diseases 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- VPKDCDLSJZCGKE-UHFFFAOYSA-N methanediimine Chemical compound N=C=N VPKDCDLSJZCGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 201000004058 mixed glioma Diseases 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000003990 molecular pathway Effects 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 201000011216 nasopharynx carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 1
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- FVFZSVRSDNUCGG-UHFFFAOYSA-M p-mercuribenzoate Chemical group [O-]C(=O)C1=CC=C([Hg])C=C1 FVFZSVRSDNUCGG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940121655 pd-1 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 description 1
- HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N phenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC=C1 HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940067157 phenylhydrazine Drugs 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 238000011518 platinum-based chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000003653 radioligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- DUIOPKIIICUYRZ-UHFFFAOYSA-N semicarbazide Chemical compound NNC(N)=O DUIOPKIIICUYRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical class O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 1
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium atom Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007970 thio esters Chemical class 0.000 description 1
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- BRWIZMBXBAOCCF-UHFFFAOYSA-N thiosemicarbazide group Chemical group NNC(=S)N BRWIZMBXBAOCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Substances CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000024033 toxin binding Effects 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229930013292 trichothecene Natural products 0.000 description 1
- 150000003327 trichothecene derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 229960003862 vemurafenib Drugs 0.000 description 1
- GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N vemurafenib Chemical group CCCS(=O)(=O)NC1=CC=C(F)C(C(=O)C=2C3=CC(=CN=C3NC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1F GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0058—Antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
a invenção geralmente se refere a anticorpos que se ligam a ligante de morte programada 1 (pdl1), anticorpos ativáveis que especificamente se ligam a pdl1 e métodos de fabricar e usar estes anticorpos anti-pdl1 e anticorpos ativáveis anti-pdl1 em uma variedade de indicações terapêuticas, diagnósticas e profiláticas.
Description
[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório dos EUA N^ 62/133.231, depositado em 31 de março de 2015; Pedido Provisório dos EUA N^ 62/139.596, depositado em 27 de março de 2015; e Pedido Provisório dos EUA N^ 62/218.883, depositado em 15 de setembro de 2015; os conteúdos de cada um dos quais são incorporados aqui por referência em sua totalidade.
[002]A invenção geralmente se refere a anticorpos que se ligam ao ligante de morte programada 1 (PDL1), anticorpos ativáveis que especificamente se ligam a PDL1 e métodos de fabricar e usar estes anticorpos anti-PDL1 e anticorpos ativáveis anti-PDL1 em uma variedade de indicações terapêuticas, diagnósticas e profiláticas.
[003]Terapias com base em anticorpo provaram ser tratamentos eficazes para várias doenças, mas em alguns casos, toxicidades devido à expressão alvo ampla têm limitado sua efetividade terapêutica. Além disso, produtos terapêuticos com base em anticorpo exibiram outras limitações tais como liberação rápida da circulação a seguir da administração.
[004]No âmbito de produtos terapêuticos de molécula pequena, estratégias foram desenvolvidas para fornecer pró-fármacos de uma entidade química ativa. Tais pró-fármacos são administrados em uma forma relativamente inativa (ou significativamente menos ativa). Uma vez administrado, o pró-fármaco é metabolizado in vivo no composto ativo. Tais estratégias de pró-fármaco podem levar em consideração a seletividade aumentada do fármaco quanto ao seu alvo intencionado e quanto a uma redução de efeitos adversos.
[005]Consequentemente, existe uma necessidade contínua no campo de produtos terapêuticos com base em anticorpo de anticorpos que imitam as características desejáveis do pró-fármaco de molécula pequena.
[006]A divulgação fornece anticorpos ou fragmentos de ligação a antígeno destes que especificamente se ligam ao ligante de morte programada 1 (PDL1), também conhecido como PD-L1, CD274, homólogo 1 de B7 e/ou B7-H1. O uso do termo “PDL1” é intencionado a abranger qualquer variação deste, tal como, por via de exemplo não limitante, PD-L1 e/ou PDL-1, todas as variações são usadas aqui permutavelmente.
[007]Em algumas formas de realização, o anticorpo inclui um anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que especificamente se ligam ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga ao PDL1 é um anticorpo monoclonal, anticorpo de domínio, cadeia única, fragmento Fab, um fragmento F(ab’)2, um scFv, um scAb, um dAb, um anticorpo de cadeia pesada de domínio único, ou um anticorpo de cadeia leve de domínio único. Em algumas formas de realização, um tal anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga ao PDL1 é um anticorpo monoclonal de camundongo, outro roedor, quimérico, humanizado ou completamente humano.
[008]Em algumas formas de realização, o anticorpo é um anticorpo isolado ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1 de mamífero, em que o AB tem uma ou mais das características seguintes: (a) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano e PDL1 de murino; (b) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano e PDL1 de macaco cinomolgo; (c) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano, PDL1 de murino, e PDL1 de macaco cinomolgo; (d) o AB inibe a ligação de B7-1 humano e PD1 humano ao PDL1 humano com um valor de ECso menor do que 10 nM; (e) o AB inibe a ligação de B7-1 de murino e PD1 de murino ao PDL1 de murino com um valor de ECso menor do que 10 nM; e (f) o AB inibe a ligação de B7-1 de macaco cinomolgo e PD1 de macaco cinomolgo ao PDL1 de macaco cinomolgo com um valor de ECso menor do que 10 nM.
[009]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação que é menos do que ou igual a 0,01 nM, menos do que ou igual a 0,05 nM, menos do que ou igual a 0,1 nM, menos do que ou igual a 0,2 nM, menos do que ou igual a 0,3 nM, menos do que ou igual a 0,4 nM, menos do que ou igual a 0,5 nM, menos do que ou igual a 0,75 nM, e menos do que ou igual a 1 nM.
[010]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação na faixa de 0,01 nM a 1 nM, 0,05 nM a 1 nM, 0,1 nM a 1 nM, 0,2 nM a 1 nM, 0,3 nM a 1 nM, 0,4 nM a 1 nM, 0,5 nM a 1 nM, 0,75 nM a 1 nM, 0,01 nM a 0,75 nM, 0,05 nM a 0,75 nM, 0,1 nM a 0,75 nM, 0,2 nM a 0,75 nM, 0,3 nM a 0,75 nM, 0,4 nM a 0,75 nM, 0,5 nM a 0,75 nM, 0,01 nM a 0,5 nM, 0,05 nM a 0,5 nM, 0,1 nM a 0,5 nM, 0,2 nM a 0,5 nM, 0,3 nM a 0,5 nM, 0,4 nM a 0,5 nM, 0,01 nM a 0,4 nM, 0,05 nM a 0,4 nM, 0,1 nM a 0,4 nM, 0,2 nM a 0,4 nM, 0,3 nM a 0,4 nM, 0,01 nM a 0,3 nM, 0,05 nM a 0,3 nM, 0,1 nM a 0,3 nM, 0,2 nM a 0,3 nM, 0,01 nM a 0,2 nM, 0,05 nM a 0,2 nM, 0,1 nM a 0,2 nM, 0,01 nM a 0,1 nM, 0,05 nM a 0,1 nM, ou 0,01 nM a 0,05 nM.
[011]Em algumas formas de realização, o PDL1 de mamífero é selecionado do grupo consistindo em um PDL1 humano, um PDL1 de murino, um PDL1 de rato, e um PDL1 de macaco cinomolgo.
[012]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste especificamente se liga ao PDL1 humano, PDL1 de murino ou PDL1 de macaco cinomolgo com uma constante de dissociação de menos do que 1 nM.
[013]Em algumas formas de realização, o PDL1 de mamífero é um PDL1 humano.
[014]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste tem uma ou mais das características seguintes: (a) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano, PDL1 de murino, e PDL1 de macaco cinomolgo; (b) o AB inibe a ligação de B7-1 humano e PD1 humano ao PDL1 humano; (c) o AB inibe a ligação de B7-1 de murino e PD1 de murino ao PDL1 de murino; e (d) o AB inibe a ligação de B7-1 de macaco cinomolgo e PD1 de macaco cinomolgo ao PDL1 de macaco cinomolgo.
[015]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste bloqueia a capacidade de um ligante natural de se ligar ao PDL1 de mamífero com uma ECso menor do que ou igual a 0,5 nM, menor do que ou igual a 1 nM, menor do que ou igual a 2 nM, menor do que ou igual a 3 nM, menor do que ou igual a 4 nM, menor do que ou igual a 5 nM, menor do que ou igual a 6 nM, menor do que ou igual a 7 nM, menor do que ou igual a 8 nM, menor do que ou igual a 9nM, e/ou menor do que ou igual a 10 nM.
[016]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste bloqueia a capacidade de um ligante natural de se ligar ao PDL1 de mamífero com uma ECso na faixa de 0,5 nM a 10 nM, 0,5 nM a 5 nM, 0,5 nM a 3 nM, 0,5 nM a 2 nM, 0,5 nM a 1 nM, 1 nM a 10 nM, 1 nM a 5 nM, 1 nM a 3 nM, 1 nM a 2 nM,2 nM a 10 nM, 2 nM a 5 nM, 2 nM a 3 nM, 3 nM a 10 nM, 3 nM a 5 nM, ou 5 nM a 10 nM. Em algumas formas de realização, o ligante natural é um PD1 de mamífero. Em algumas formas de realização, o ligante natural é selecionado do grupo consistindo em: um PD1 humano, um PD1 de murino, e um PD1 de macaco cinomolgo.
[017]Em algumas formas de realização, o ligante natural é urn B7-1 de mamífero. Em algumas formas de realização, o ligante natural é selecionado do grupo consistindo em: um B7-1 humano, um B7-1 de murino, e um B7-1 de macaco cinomolgo.
[018]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12 ou SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[019]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[020]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12.
[021]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[022]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46 e a sequência de aminoácido de cadeia leve da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46 e a sequência de aminoácido de cadeia leve da SEQ ID NO: 12.
[023]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica ao aminoácido da SEQ ID NO: 46. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de aminoácido selecionada da SEQ ID NO: 46, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de aminoácido selecionada da SEQ ID NO: 46, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[024]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (VH CDR1, também referida aqui como CDRH1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (VH CDR2, também referida aqui como CDRH2), uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (VH CDR3, também referida aqui como CDRH3), uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (VL CDR1, também referida aqui como CDRL1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (VL CDR2, também referida aqui como CDRL2), e uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (VL CDR3, também referida aqui como CDRL3), em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[025]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CD2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[026]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[027]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia leve que compreende uma combinação de uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia leve (VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[028]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[029]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[030]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação de três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[031]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia leve que compreende uma combinação de uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação das três sequências de CDR de cadeia leve (VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[032]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[033]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246). Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235). Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246), e a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[034]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação compreende uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[035]Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12 ou SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58 Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12.
[036]Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[037]Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado pela sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado pela sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21,23, 25, 27, 29, 31,33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11.
[038]Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51,53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31,33, 35, 37, 39, 41,43, 45, 47, 49, 51,53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11.
[039]Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste é incorporado em um anticorpo multiespecífico ou fragmento de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico especificamente se liga ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste é incorporado em um anticorpo biespecífico ou fragmento de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um braço do anticorpo biespecífico especificamente se liga ao PDL1.
[040]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12 ou SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[041]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[042]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12.
[043]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[044]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46 e a sequência de aminoácido de cadeia leve da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46 e a sequência de aminoácido de cadeia leve da SEQ ID NO: 12.
[045]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica ao aminoácido da SEQ ID NO: 46. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de aminoácido selecionada da SEQ ID NO: 46, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de aminoácido selecionada da SEQ ID NO: 46, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[046]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (VH CDR1, também referida aqui como CDRH1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (VH CDR2, também referida aqui como CDRH2), uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (VH CDR3, também referida aqui como CDRH3), uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (VL CDR1, também referida aqui como CDRL1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (VL CDR2, também referida aqui como CDRL2), e uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (VL CDR3, também referida aqui como CDRL3), em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[047]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CD2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[048]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[049]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[050]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[051]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação de três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[052]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[053]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246). Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235). Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246), e a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[054]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo multiespecífico, por exemplo, um anticorpo biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação compreende uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[055]A divulgação também fornece anticorpos ativáveis que incluem um anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que especificamente se liga ao PDL1 ligado a uma porção de mascaramento (MM), tal que a ligação da MM reduz a capacidade do anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste de se ligar ao PDL1. Em algumas formas de realização, a MM é ligada por intermédio de uma sequência que inclui um substrato para uma protease, por exemplo, uma protease que é ativa no tecido doente e/ou uma protease que é co-localizada com PDL1 em um sítio de tratamento em um sujeito. Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis fornecidos aqui, também referidos aqui como anticorpos ativáveis anti-PDL1 ou anticorpos ativáveis de PDL1, são estáveis em circulação, ativados em sítios intencionados de terapia e/ou diagnose mas não no tecido normal, por exemplo, saudável ou outro tecido não alvejado para tratamento e/ou diagnose, e, quando ativados, exibem ligação ao PDL1 que é pelo menos comparável ao anticorpo não modificado, correspondente.
[056]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável que, em um estado ativado, especificamente se liga ao PDL1 de mamífero, inclui um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1 de mamífero; uma porção de mascaramento (MM) que inibe a ligação do AB ao PDL1 de mamífero quando o anticorpo ativável está em um estado não clivado; e uma porção clivável (CM) ligada ao AB, em que a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para uma protease.
[057]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável que, em um estado ativado, tem uma ou mais das características seguintes: (a) especificamente se liga ao PDL1 de mamífero; e(b) especificamente bloqueia um ligante natural de PDL1 a partir da ligação ao PDL1 de mamífero, em que o anticorpo ativável compreende: um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1 de mamífero; uma porção de mascaramento (MM) que inibe a ligação do AB ao PDL1 de mamífero quando o anticorpo ativável está em um estado não clivado; e uma porção clivável (CM) ligada ao AB, em que a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para uma protease.
[058]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável em um estado não clivado especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação menor do que ou igual a 1 nM, menor do que ou igual a 2 nM, menor do que ou igual a 3 nM, menor do que ou igual a 4 nM, menor do que ou igual a 5 nM, menor do que ou igual a 10 nM, menor do que ou igual a 15 nM, menor do que ou igual a 20 nM, e/ou menor do que ou igual a 25 nM.
[059]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável em um estado não clivado especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação maior do que ou igual a 1 nM, maior do que ou igual a 2 nM, maior do que ou igual a 3 nM, maior do que ou igual a 4 nM, maior do que ou igual a 5 nM, maior do que ou igual a 10 nM, maior do que ou igual a 15 nM, maior do que ou igual a 20 nM, e/ou maior do que ou igual a 25 nM.
[060]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável em um estado não clivado especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação na faixa de 1 a 2 nM, 1 a 5 nM, 1 a 10 nM, 1 a 15 nM, 1 a 20 nM, 1 a 25 nM, 2 nM a 5 nM, 2 nM a 10 nM, 2 nM a 15 nM, 2 a 20 nM, 2 a 25 nM, 5 nM a 10 nM, 5 nM a 15 nM, 5 a 20 nM, 5 a 25 nM, 10 nM a 15 nM, 10 a 20 nM, 10 a 25 nM, 15 a 20 nM, 15 a 25 nM, ou 20 a 25 nM.
[061]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável em um estado ativado especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação que é menos do que ou igual a 0,01 nM, menos do que ou igual a 0,05 nM, menos do que ou igual a 0,1 nM, menos do que ou igual a 0,2 nM, menos do que ou igual a 0,3 nM, menos do que ou igual a 0,4 nM, menos do que ou igual a 0,5 nM, menos do que ou igual a 0,75 nM, e menos do que ou igual a 1 nM.
[062]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável em um estado ativado especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação na faixa de 0,01 nM a 1 nM, 0,05 nM a 1 nM, 0,1 nM a 1 nM, 0,2 nM a 1 nM, 0,3 nM a 1 nM, 0,4 nM a 1 nM, 0,5 nM a 1 nM, 0,75 nM a 1 nM, 0,01 nM a 0,75 nM, 0,05 nM a 0,75 nM, 0,1 nM a 0,75 nM, 0,2 nM a 0,75 nM, 0,3 nM a 0,75 nM, 0,4 nM a 0,75 nM, 0,5 nM a 0,75 nM, 0,01 nM a 0,5 nM, 0,05 nM a 0,5 nM, 0,1 nM a 0,5 nM, 0,2 nM a 0,5 nM, 0,3 nM a 0,5 nM, 0,4 nM a 0,5 nM, 0,01 nM a 0,4 nM, 0,05 nM a 0,4 nM, 0,1 nM a 0,4 nM, 0,2 nM a 0,4 nM, 0,3 nM a 0,4 nM, 0,01 nM a 0,3 nM, 0,05 nM a 0,3 nM, 0,1 nM a 0,3 nM, 0,2 nM a 0,3 nM, 0,01 nM a 0,2 nM, 0,05 nM a 0,2 nM, 0,1 nM a 0,2 nM, 0,01 nM a 0,1 nM, 0,05 nM a 0,1 nM, ou 0,01 nM a 0,05 nM.
[063]Em algumas formas de realização, o AB especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação que é menos do que ou igual a 0,01 nM, menos do que ou igual a 0,05 nM, menos do que ou igual a 0,1 nM, menos do que ou igual a 0,2 nM, menos do que ou igual a 0,3 nM, menos do que ou igual a 0,4 nM, menos do que ou igual a 0,5 nM, menos do que ou igual a 0,75 nM, e menos do que ou igual a 1 nM.
[064]Em algumas formas de realização, o AB especificamente se liga ao PDL1 de mamífero com uma constante de dissociação na faixa de 0,01 nM a 1 nM, 0,05 nM a 1 nM, 0,1 nM a 1 nM, 0,2 nM a 1 nM, 0,3 nM a 1 nM, 0,4 nM a 1 nM, 0,5 nM a 1 nM, 0,75 nM a 1 nM, 0,01 nM a 0,75 nM, 0,05 nM a 0,75 nM, 0,1 nM a 0,75 nM, 0,2 nM a 0,75 nM, 0,3 nM a 0,75 nM, 0,4 nM a 0,75 nM, 0,5 nM a 0,75 nM, 0,01 nM a 0,5 nM, 0,05 nM a 0,5 nM, 0,1 nM a 0,5 nM, 0,2 nM a 0,5 nM, 0,3 nM a 0,5 nM, 0,4 nM a 0,5 nM, 0,01 nM a 0,4 nM, 0,05 nM a 0,4 nM, 0,1 nM a 0,4 nM, 0,2 nM a 0,4 nM, 0,3 nM a 0,4 nM, 0,01 nM a 0,3 nM, 0,05 nM a 0,3 nM, 0,1 nM a 0,3 nM, 0,2 nM a 0,3 nM, 0,01 nM a 0,2 nM, 0,05 nM a 0,2 nM, 0,1 nM a 0,2 nM, 0,01 nM a 0,1 nM, 0,05 nM a 0,1 nM, ou 0,01 nM a 0,05 nM.
[065]Em algumas formas de realização, o PDL1 de mamífero é selecionado do grupo consistindo em um PDL1 humano, um PDL1 de murino, um PDL1 de rato, e um PDL1 de macaco cinomolgo. Em algumas formas de realização, o AB especificamente se liga ao PDL1 humano, PDL1 de murino ou PDL1 de macaco cinomolgo com uma constante de dissociação de menos do que 1 nM. Em algumas formas de realização, o PDL1 de mamífero é um PDL1 humano.
[066]Em algumas formas de realização, o AB tem uma ou mais das características seguintes: (a) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano e PDL1 de murino; (b) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano e PDL1 de macaco cinomolgo; e (c) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano, PDL1 de murino, e PDL1 de macaco cinomolgo.
[067]Em algumas formas de realização, o AB tem uma ou mais das características seguintes: (a) o AB especificamente se liga ao PDL1 humano, PDL1 de murino, e PDL1 de macaco cinomolgo; (b) o AB inibe a ligação de B7-1 humano e PD1 humano ao PDL1 humano; (c) o AB inibe a ligação de B7-1 de murino e PD1 de murino ao PDL1 de murino; e (d) o AB inibe a ligação de B7-1 de macaco cinomolgo e PD1 de macaco cinomolgo ao PDL1 de macaco cinomolgo.
[068]Em algumas formas de realização, o AB bloqueia a capacidade de um ligante natural de se ligar ao PDL1 de mamífero com uma ECso menor do que ou igual a 0,5 nM, menor do que ou igual a 1 nM, menor do que ou igual a 2 nM, menor do que ou igual a 3 nM, menor do que ou igual a 4 nM, menor do que ou igual a 5 nM, menor do que ou igual a 6 nM, menor do que ou igual a 7 nM, menor do que ou igual a 8 nM, menor do que ou igual a 9nM, e/ou menor do que ou igual a 10 nM.
[069]Em algumas formas de realização, o AB bloqueia a capacidade de um ligante natural de se ligar ao PDL1 de mamífero com uma ECso de 0,5 nM a 10 nM, 0,5 nM a 5 nM, 0,5 nM a 3 nM, 0,5 nM a 2 nM, 0,5 nM a 1 nM, 1 nM a 10 nM, 1 nM a 5 nM, 1 nM a 3 nM, 1 nM a 2 nM, 2 nM a 10 nM, 2 nM a 5 nM, 2 nM a 3 nM, 3 nM a 10 nM, 3 nM a 5 nM, ou 5 nM a 10 nM.
[070]Em algumas formas de realização, o ligante natural é um PD1 de mamífero. Em algumas formas de realização, o ligante natural é selecionado do grupo consistindo em: um PD1 humano, um PD1 de murino, e um PD1 de macaco cinomolgo.
[071]Em algumas formas de realização, o ligante natural é um B7-1 de mamífero. Em algumas formas de realização, o ligante natural é selecionado do grupo consistindo em: um B7-1 humano, um B7-1 de murino, e um B7-1 de macaco cinomolgo.
[072]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável tem uma ou mais das características seguintes (a) o AB induz diabete tipo 1 em um camundongo diabético não obeso (NOD); e (b) o anticorpo ativável em um estado não clivado inibe a indução de diabete tipo 1 em um camundongo NOD.
[073]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inibe a indução de diabete tipo 1 no camundongo NOD depois da administração do anticorpo ativável em uma dose única de 0,1 mg/kg a 3 mg/kg, 0,5 mg/kg a 3 mg/kg, 1 mg/kg a 3 mg/kg, 2 mg/kg a 3 mg/kg, 0,1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,5 mg/kg a 2 mg/kg, 1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,1 mg/kg a 1 mg/kg, 0,5 mg/kg a 1 mg/kg, ou 0,1 mg/kg a 0,5 mg/kg.
[074]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável induz diabete tipo 1 em um sujeito depois da administração do anticorpo ativável em uma dose única de 1 mg/kg. Em algumas formas de realização, o sujeito é um camundongo NOD.
[075]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável induz diabete tipo 1 em um sujeito depois da administração do anticorpo ativável em dose única menor do que ou igual a 3 mg/kg, menor do que ou igual a 2 mg/kg, menor do que ou igual a 1 mg/kg, menor do que ou igual a 0,5 mg/kg, e/ou menor do que ou igual a 0,1 mg/kg.
[076]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável induz diabete tipo 1 em um sujeito depois da administração do anticorpo ativável em dose única na faixa selecionada do grupo consistindo em 0,1 mg/kg a 3 mg/kg, 0,5 mg/kg a 3 mg/kg, 1 mg/kg a 3 mg/kg, 2 mg/kg a 3 mg/kg, 0,1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,5 mg/kg a 2 mg/kg, 1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,1 mg/kg a 1 mg/kg, 0,5 mg/kg a 1 mg/kg, e 0,1 mg/kg a 0,5 mg/kg. Em algumas formas de realização, o sujeito é um camundongo NOD.
[077]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável tem uma ou mais das características seguintes (a) o anticorpo ativável em um estado não clivado não induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % de uma população de camundongos diabéticos não obesos (NOD), e o AB induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % de uma população de camundongos NOD.
[078]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % da população de camundongos NOD depois da administração a cada camundongo na população de uma dose única menor do que ou igual a 3 mg/kg, menordo que ou igual a 2 mg/kg, menordo que ou igual a 1 mg/kg, menor do que ou igual a 0,5 mg/kg, e/ou menor do que ou igual a 0,1 mg/kg.
[079]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % da população de camundongos NOD depois da administração a cada camundongo na população de uma dose única do anticorpo ativável em uma dosagem de: 0,1 mg/kg a 3 mg/kg, 0,5 mg/kg a 3 mg/kg, 1 mg/kg a 3 mg/kg, 2 mg/kg a 3 mg/kg, 0,1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,5 mg/kg a 2 mg/kg, 1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,1 mg/kg a 1 mg/kg, 0,5 mg/kg a 1 mg/kg, ou 0,1 mg/kg a 0,5 mg/kg.
[080]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável tem uma ou mais das características seguintes (a) o anticorpo ativável em um estado não clivado não induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % de uma população de camundongos diabéticos não obesos (NOD) quando administrado em uma dose única de 1 mg/kg; e (b) o AB induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % de uma população de camundongos NOD, quando administrado em uma dose única de 1 mg/kg.
[081]Em algumas formas de realização, o AB induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % da população dos camundongos NOD depois da administração a cada camundongo na população de uma dose única do AB em uma dosagem menor do que ou igual a 3 mg/kg, menor do que ou igual a 2 mg/kg, menor do que ou igual a 1 mg/kg, menordo que ou igual a 0,5 mg/kg, e/ou menordo que ou igual a 0,1 mg/kg.
[082]Em algumas formas de realização, o AB induz diabete tipo 1 em mais do que 50 % da população dos camundongos NOD depois da administração a cada camundongo na população de uma dose única do AB em uma dosagem de: 0,1 mg/kg a 3 mg/kg, 0,5 mg/kg a 3 mg/kg, 1 mg/kg a 3 mg/kg, 2 mg/kg a 3 mg/kg, 0,1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,5 mg/kg a 2 mg/kg, 1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,1 mg/kg a 1 mg/kg, 0,5 mg/kg a 1 mg/kg, ou 0,1 mg/kg a 0,5 mg/kg.
[083]Em algumas formas de realização, o camundongo NOD é uma subcepa de camundongo NOD/ShiLtJ fêmea.
[084]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inibe a indução de diabete tipo 1 em um camundongo NOD em pelo menos 3 vezes comparado ao AB.
[085]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável exibe uma margem de segurança que é pelo menos uma margem de segurança de três vezes em relação ao AB.
[086]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável em um estado não clivado se liga a uma menor porcentagem de uma população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico do que o AB.
[087]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não se liga a mais do que 50 % da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico depois da administração de uma dose única do anticorpo ativável em uma dosagem menor do que ou igual a 5 mg/kg, menor do que ou igual a 4 mg/kg, menor do que ou igual a 3 mg/kg, menor do que ou igual a 2 mg/kg, menor do que ou igual a 1 mg/kg, menor do que ou igual a 0,5 mg/kg, e/ou menor do que ou igual a 0,1 mg/kg.
[088]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não se liga a mais do que 50 % da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico depois da administração de uma dose única do anticorpo ativável em uma dosagem de: 0,1 mg/kg a 5 mg/kg, 0,5 mg/kg a 5 mg/kg, 1 mg/kg a 5 mg/kg, 2 mg/kg a 5 mg/kg, 3 mg/kg a 5 mg/kg, 0,1 mg/kg a 3 mg/kg, 0,5 mg/kg a 3 mg/kg, 1 mg/kg a 3 mg/kg, 2 mg/kg a 3 mg/kg, 0,1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,5 mg/kg a 2 mg/kg, 1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,1 mg/kg a 1 mg/kg, 0,5 mg/kg a 1 mg/kg, ou 0,1 mg/kg a 0,5 mg/kg.
[089]Em algumas formas de realização, o AB se liga à mais do que 50 % da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico depois da administração de uma dose única do AB em uma dosagem de: 0,1 mg/kg a 5 mg/kg, 0,5 mg/kg a 5 mg/kg, 1 mg/kg a 5 mg/kg, 2 mg/kg a 5 mg/kg, 3 mg/kg a 5 mg/kg, 0,1 mg/kg a 3 mg/kg, 0,5 mg/kg a 3 mg/kg, 1 mg/kg a 3 mg/kg, 2 mg/kg a 3 mg/kg, 0,1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,5 mg/kg a 2 mg/kg, 1 mg/kg a 2 mg/kg, 0,1 mg/kg a 1 mg/kg, 0,5 mg/kg a 1 mg/kg, ou 0,1 mg/kg a 0,5 mg/kg.
[090]Em algumas formas de realização, os linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico são de murino. Em algumas formas de realização, os linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico de murino são derivados de um camundongo portador de tumor.
[091]Em algumas formas de realização, a porcentagem da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico à qual o AB se liga é menos do que 60 % quando o anticorpo ativável é administrado em uma dose entre 1 mg/kg e 5 mg/kg. Em algumas formas de realização, a porcentagem da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico à qual o AB se liga é menos do que 50 % quando o anticorpo ativável é administrado em uma dose entre 1 mg/kg e 5 mg/kg. Em algumas formas de realização, a porcentagem da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico à qual o AB se liga é entre 30 e 60 % quando o anticorpo ativável é administrado em uma dose entre 1 mg/kg e 5 mg/kg. Em algumas formas de realização, a porcentagem da população de linfócitos T CD4+ CD8+ do sangue periférico à qual o AB se liga é entre 30 e 50 % quando o anticorpo ativável é administrado em uma dose entre 1 mg/kg e 5 mg/kg.
[092]A invenção também fornece métodos de tratar, prevenir e/ou retardar o início ou progressão de, ou aliviar um sintoma associado com a expressão e/ou atividade aberrantes de PDL1 em um sujeito usando anticorpos ativáveis que se ligam ao PDL1, particularmente anticorpos ativáveis que se ligam a e neutralizam ou de outro modo inibem pelo menos uma atividade biológica de PDL1 e/ou sinalização mediada por PDL1.
[093]Os anticorpos ativáveis em um estado ativado se ligam ao PDL1 e incluem (i) um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1; (ii) uma porção de mascaramento (MM) que, quando o anticorpo ativável está em um estado não clivado, inibe a ligação do AB ao PDL1; e (c) uma porção clivável (CM) ligada ao AB, em que a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para uma protease.
[094]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM.
[095]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um peptídeo de ligação entre a MM e a CM.
[096]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um peptídeo de ligação entre a CM e a AB.
[097]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um primeiro peptídeo de ligação (LP1) e um segundo peptídeo de ligação (LP2), e em que o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-LP1-CM-LP2-AB ou AB-LP2-CM-LP1-MM. Em algumas formas de realização, os dois peptídeos de ligação não precisam ser idênticos um ao outro.
[098]Em algumas formas de realização, pelo menos um de LP1 ou LP2 compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em (GS)n, (GGS)n, (GSGGS)n (SEQ ID NO: 191) e (GGGS)n (SEQ ID NO: 192), onde n é um número inteiro de pelo menos um.
[099]Em algumas formas de realização, pelo menos um de LP1 ou LP2 compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em GGSG (SEQ ID NO: 193), GGSGG (SEQ ID NO: 194), GSGSG (SEQ ID NO: 195), GSGGG (SEQ ID NO: 196), GGGSG (SEQ ID NO: 197), e GSSSG (SEQ ID NO: 198).
[0100]Em algumas formas de realização, LP1 compreende a sequência de aminoácido GSSGGSGGSGGSG (SEQ ID NO: 199), GSSGGSGGSGG (SEQ ID NO: 200), GSSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 201), GSSGGSGGSGGSGGGS (SEQ ID NO: 202), GSSGGSGGSG (SEQ ID NO: 203), ou GSSGGSGGSGS (SEQ ID NO: 204).
[0101]Em algumas formas de realização, LP2 compreende a sequência de aminoácido GSS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 205), GSSGT (SEQ ID NO: 206) ou GSSG (SEQ ID NO: 207).
[0102]Em algumas formas de realização, o AB tem uma constante de dissociação de cerca de 100 nM ou menos para ligação ao PDL1.
[0103]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga ao PDL1 é um anticorpo monoclonal, anticorpo de domínio, cadeia única, fragmento Fab, um fragmento F(ab’)2, um scFv, um scAb, um dAb, um anticorpo de cadeia pesada de domínio único, ou um anticorpo de cadeia leve de domínio único. Em algumas formas de realização, um tal anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga ao PDL1 é um anticorpo monoclonal de camundongo, outro roedor, quimérico, humanizado ou completamente humano.
[0104]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12 ou SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[0105]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[0106]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12.
[0107]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[0108]Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia pesada mostradas na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia leve mostradas na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia pesada mostradas na Tabela 15 e uma sequência de aminoácido de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia leve mostradas na Tabela 15.
[0109]Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia pesada mostradas na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo anti- PDLl ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia leve mostradas na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia pesada mostradas na Tabela 15 e uma sequência de aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas sequências de cadeia leve mostradas na Tabela 15.
[0110]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (VH CDR1, também referida aqui como CDRH1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (VH CDR2, também referida aqui como CDRH2), uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (VH CDR3, também referida aqui como CDRH3), uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (VL CDR1, também referida aqui como CDRL1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (VL CDR2, também referida aqui como CDRL2), e uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (VL CDR3, também referida aqui como CDRL3), em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[0111]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CD2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[0112]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0113]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0114]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0115]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação de três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0116]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0117]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246). Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235). Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246), e a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0118]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação compreende uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0119]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (VH CDR1, também referida aqui como CDRH1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (VH CDR2, também referida aqui como CDRH2), uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (VH CDR3, também referida aqui como CDRH3), uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (VL CDR1, também referida aqui como CDRL1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (VL CDR2, também referida aqui como CDRL2), e uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (VL CDR3, também referida aqui como CDRL3), em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 17; e uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 17.
[0120]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VH CD2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VH CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VL CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 17; uma sequência de VL CDR2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 17; e uma sequência de VL CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 17.
[0121]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação mostrada na Tabela 17.
[0122]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação mostrada na Tabela 17.
[0123]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941,943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201, e uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56.
[0124]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931,933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931,933, 935, 937, 939, 941,943, 945, 947, 949, 951,953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971,973, 975, 977, 979, 981,983, 985, 987, 989, 991,993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144a 1191, 1200, e 1201, e uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56.
[0125]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931,933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1145, 1147, 1149, 1151, 1153, 1155, 1157, 1159, 1161, 1163, 1165, 1167, 1169, 1171,1173, 1175, 1177, 1179, 1181, 1183, 1185, 1187, 1189, 1191, e 1201. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971,973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001,1003, 100, 1145, 1147, 1149, 1151, 1153, 1155, 1157, 1159, 1161, 1163, 1165, 1167, 1169, 1171, 1173, 1175, 1177, 1179, 1181,1183, 1185, 1187, 1189, 1191, e 1201, e uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56.
[0126]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 83, 85, 87, 89, 91,93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961,963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981,983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 83, 85, 87, 89, 91,93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961,963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56.
[0127]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931,933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56.
[0128]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991,993, 995,997, 999, 1001, 1003, 1005, 1145, 1147, 1149, 1151, 1153, 1155, 1157, 1159, 1161,1163, 1165, 1167, 1169, 1171,1173, 1175, 1177, 1179, 1181,1183, 1185, 1187, 1189, 1191, 1200, e 1201. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951,953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1145, 1147, 1149, 1151,1153, 1155, 1157, 1159, 1161, 1163, 1165, 1167, 1169, 1171, 1173, 1175, 1177, 1179, 1181, 1183, 1185, 1187, 1189, 1191, e 1201, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56.
[0129]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941,943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001,1003,1005, 1144a 1191, 1200, e 1201, e a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46.
[0130]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931,933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001,1003,1005, 1144a 1191, 1200, e 1201, e a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46.
[0131]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931,933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1145, 1147, 1149, 1151, 1153, 1155, 1157, 1159, 1161, 1163, 1165, 1167, 1169, 1171,1173, 1175, 1177, 1179, 1181, 1183, 1185, 1187, 1189, 1191, e 1201, e a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46.
[0132]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 83, 85, 87, 89, 91,93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961,963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981,983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46.
[0133]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46.
[0134]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991,993, 995,997, 999, 1001, 1003, 1005, 1145, 1147, 1149, 1151, 1153, 1155, 1157, 1159, 1161,1163, 1165, 1167, 1169, 1171,1173, 1175, 1177, 1179, 1181,1183, 1185, 1187, 1189, 1191, e 1201, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46.
[0135]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 428. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 428, e uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, e 434.
[0136]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 1008. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 1008, e uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202.
[0137]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 428. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 428, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202.
[0138]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 1008. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 1008, e um aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 430, 432, 434, e 1202.
[0139]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 59 a 81,208, e 426; uma porção clivável (CM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 341, 352, 359, 364, 372, 377, 379, 383, 394, 437, 883 a 893, 901 a 920, e 921; e uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação compreende uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0140]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 60, 62, 63, 66 a 68, 71, 75, e 76; uma porção clivável (CM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 341,364, 377, 394, 437, 883 a 893, 901 a 911, e 920; e uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação compreende uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0141]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 59 a 81,208, e 426; uma porção clivável (CM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 341, 352, 359, 364, 372, 377, 379, 383, 394, 437, 883 a 893, 901 a 920, e 921; e de uma cadeia leve variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58 e uma cadeia pesada variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 46.
[0142]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 60, 62, 63, 66 a 68, 71, 75, e 76; uma porção clivável (CM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 341,364, 377, 394, 437, 883 a 893, 901 a 911, e 920; e de uma cadeia leve variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58 e uma cadeia pesada variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 46.
[0143]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 59 a 81,208, e 426; uma porção clivável (CM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 341, 352, 359, 364, 372, 377, 379, 383, 394, 437, 883 a 893, 901 a 920, e 921; e de uma cadeia leve variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12 e uma cadeia pesada variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 46.
[0144]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 60, 62, 63, 66 a 68, 71, 75, e 76; uma porção clivável (CM) compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 341,364, 377, 394, 437, 883 a 893, 901 a 11, e 920; e de uma cadeia leve variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12 e uma cadeia pesada variável compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 46.
[0145]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12.
[0146]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[0147]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41,43, 45, 47, 49, 51,53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51,53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado pela sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado pela sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11.
[0148]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41,43, 45, 47, 49, 51,53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51,53, e 55. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve da SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21,23, 25, 27, 29, 31,33, 35, 37, 39, 41,43, 45, 47, 49, 51,53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 13, 15, 17, 21,23, 25, 27, 29, 31,33, 35, 37, 39, 41,43, 45, 47, 49, 51,53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 57. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é codificado por uma sequência de ácido nucleico que compreende uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 45, 47, 49, 51, 53, e 55, e uma sequência de ácido nucleico que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a sequência de ácido nucleico de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 11.
[0149]Em algumas formas de realização, a MM tem uma constante de dissociação para a ligação ao AB que é maior do que a constante de dissociação do AB ao PDL1.
[0150]Em algumas formas de realização, a MM tem uma constante de dissociação para a ligação ao AB que é não mais do que a constante de dissociação do AB ao PDL1.
[0151]Em algumas formas de realização, a MM tem uma constante de dissociação para a ligação ao AB que é menos do que a constante de dissociação do AB ao PDL1.
[0152]Em algumas formas de realização, a MM tem uma constante de dissociação para a ligação ao AB que é aproximadamente igual à constante de dissociação do AB ao PDL1.
[0153]Em algumas formas de realização, a MM não interfere ou compete com o AB pela ligação ao PDL1 quando o anticorpo ativável está em um estado clivado.
[0154]Em algumas formas de realização, a MM é um polipeptídeo de cerca de 2 a 40 aminoácidos em comprimento. Em algumas formas de realização, a MM é um polipeptídeo de até cerca de 40 aminoácidos em comprimento.
[0155]Em algumas formas de realização, a sequência de polipeptídeo de MM é diferente daquela de PDL1. Em algumas formas de realização, a sequência de polipeptídeo de MM é não mais do que 50 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a sequência de polipeptídeo de MM é diferente daquela de PDL1 e é não mais do que 40 %, 30 %, 25 %, 20 %, 15 %, ou 10 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB.
[0156]Em algumas formas de realização, a MM compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 59 a 81, 208, e 426. Em algumas formas de realização, a MM compreende uma sequência de aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID NOs: 59 a 81, 208, e 426.
[0157]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos duas vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0158]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos cinco vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0159]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos 10 vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0160]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos 20 vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0161]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos 40 vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0162]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos 100 vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0163]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos 1000 vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0164]Em algumas formas de realização, a ligação da MM ao AB reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 tal que a constante de dissociação (Kd) do AB quando ligado à MM para PDL1 é pelo menos 10.000 vezes maior do que a Kd do AB quando não ligado à MM para PDL1.
[0165]Em algumas formas de realização, na presença de PDL1, a MM reduz a capacidade do AB de se ligar ao PDL1 em pelo menos 90 % quando a CM é não clivada, quando comparado a quando a CM é clivada quando avaliada in vitrousando um ensaio de deslocamento alvo tal como, por exemplo, o ensaio descrito na Publicação PCT l\K WO 2010/081173, os conteúdos da qual são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade.
[0166]Em algumas formas de realização, a protease que cliva a CM é ativa, por exemplo, supra-regulada, no tecido doente, e a protease cliva a CM no anticorpo ativável quando o anticorpo ativável é exposto à protease.
[0167]Em algumas formas de realização, a protease é co-localizada com PDL1 em um tecido, e a protease cliva a CM no anticorpo ativável quando o anticorpo ativável é exposto à protease.
[0168]Em algumas formas de realização, a protease está presente em níveis relativamente mais altos em ou em proximidade imediata ao tecido contendo alvo de um sítio de tratamento ou sítio de diagnóstico do que em tecido de sítio que não de tratamento (por exemplo em tecido saudável), e a protease cliva a CM no anticorpo ativável quando o anticorpo ativável é exposto à protease.
[0169]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos duas vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado (isto é, quando o anticorpo ativável está no estado clivado), o AB se liga ao PDL1.
[0170]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos cinco vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado (isto é, quando o anticorpo ativável está no estado clivado), o AB se liga ao PDL1.
[0171]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos 10 vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado (isto é, quando o anticorpo ativável está no estado clivado), o AB se liga ao PDL1.
[0172]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos 20 vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado (isto é, quando o anticorpo ativável está no estado clivado), o AB se liga ao PDL1.
[0173]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos 40 vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado, o AB se liga ao PDL1.
[0174]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos 50 vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado, o AB se liga ao PDL1.
[0175]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos 100 vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado, o AB se liga ao PDL1.
[0176]Em algumas formas de realização, a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, a ligação do anticorpo ativável ao PDL1 é reduzida para ocorrer com uma constante de dissociação que é pelo menos 200 vezes maior do que a constante de dissociação de um AB não modificado que se liga ao PDL1, ao passo que no estado clivado, o AB se liga ao PDL1.
[0177]Em algumas formas de realização, a CM é um polipeptídeo de até 15 aminoácidos em comprimento.
[0178]Em algumas formas de realização, a CM é um polipeptídeo que inclui uma primeira porção clivável (CM1) que é um substrato para pelo menos uma metaloprotease de matriz (MMP) e uma segunda porção clivável (CM2) que é um substrato para pelo menos uma serina protease (SP). Em algumas formas de realização, cada uma da sequência de substrato de CM1 e a sequência de substrato de CM2 do substrato de CM1-CM2 é independentemente um polipeptídeo de até 15 aminoácidos em comprimento.
[0179]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos uma protease que é ou acredita-se que seja supra-regulada no câncer. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos uma protease que é ou acredita-se que seja supra-regulada na inflamação. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos uma protease que é ou acredita-se que seja supra-regulada em autoimunidade.
[0180]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos uma protease selecionada do grupo consistindo em uma metaloprotease de matriz (MMP), uma trombina, uma elastase neutrofílica, uma cisteína protease, uma legumina, e uma serina protease, tal como uma matriptase (MT-SP1), e uma urocinase (uPA). Sem ser ligado pela teoria, acredita-se que estas proteases sejam supra- reguladas em pelo menos um de câncer, inflamação e/ou autoimunidade.
[0181]Substratos exemplares incluem mas não são limitados a substratos cliváveis por uma ou mais das seguintes enzimas ou proteases listadas na Tabela 12.
[0182]Em algumas formas de realização, a CM é selecionada para o uso com uma protease específica, por exemplo uma protease que é conhecida ser co- localizada com o alvo do anticorpo ativável.
[0183]Em algumas formas de realização, a CM é selecionada para o uso com uma protease específica, por exemplo uma protease que é conhecida estar em proximidade imediata ao alvo do anticorpo ativável.
[0184]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos uma MMP. Exemplos de MMPs incluem as MMPs listadas na Tabela 12. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uma protease selecionada do grupo consistindo em MMP 9, MMP14, MMP1, MMP3, MMP13, MMP17, MMP11 e MMP19. Em algumas formas de realização a CM é um substrato para MMP9. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para MMP14.
[0185]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato que inclui a sequência TGRGPSWV (SEQ ID NO: 338); SARGPSRW (SEQ ID NO: 339); TARGPSFK (SEQ ID NO: 340); LSGRSDNH (SEQ ID NO: 341); GGWHTGRN (SEQ ID NO: 342); HTGRSGAL (SEQ ID NO: 343); PLTGRSGG (SEQ ID NO: 344); AARGPAIH (SEQ ID NO: 345); RGPAFNPM (SEQ ID NO: 346); SSRGPAIL (SEQ ID NO: 347); RGPATPIM (SEQ ID NO: 348); RGPA (SEQ ID NO: 349); GGQPSGMWGW (SEQ ID NO: 350); FPRPLGITGL (SEQ ID NO: 351); VHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 352); SPLTGRSG (SEQ ID NO: 353); SAGFSLPA (SEQ ID NO: 354); LAPLGLQRR (SEQ ID NO: 355); SGGPLGVR (SEQ ID NO: 356); PLGL (SEQ ID NO: 357); LSGRSGNH (SEQ ID NO: 883); SGRSANPRG (SEQ ID NO: 884); LSGRSDDH (SEQ ID NO: 885); LSGRSDIH (SEQ ID NO: 886); LSGRSDQH (SEQ ID NO: 887); LSGRSDTH (SEQ ID NO: 888); LSGRSDYH (SEQ ID NO: 889); LSGRSDNP (SEQ ID NO: 890); LSGRSANP (SEQ ID NO: 891); LSGRSANI (SEQ ID NO: 892); e/ou LSGRSDNI (SEQ ID NO: 893).
[0186]Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDNH (SEQ ID NO: 341). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido TGRGPSWV (SEQ ID NO: 338). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido PLTGRSGG (SEQ ID NO: 344). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido GGQPSGMWGW (SEQ ID NO: 350). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido FPRPLGITGL (SEQ ID NO: 351). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido VHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 352). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido PLGL (SEQ ID NO: 357). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido SARGPSRW (SEQ ID NO: 339). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido TARGPSFK (SEQ ID NO: 340). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido GGWHTGRN (SEQ ID NO: 342). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido HTGRSGAL (SEQ ID NO: 343). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido AARGPAIH (SEQ ID NO: 345). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido RGPAFNPM (SEQ ID NO: 346). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido SSRGPAIL (SEQ ID NO: 347). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido RGPATPIM (SEQ ID NO: 348). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido RGPA (SEQ ID NO: 349). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSGNH (SEQ ID NO: 883). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido SGRSANPRG (SEQ ID NO: 884). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDDH (SEQ ID NO: 885). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDIH (SEQ ID NO: 886). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDQH (SEQ ID NO: 887). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDTH (SEQ ID NO: 888). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDYH (SEQ ID NO: 889). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDNP (SEQ ID NO: 890). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSANP (SEQ ID NO: 891). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSANI (SEQ ID NO: 892). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LSGRSDNI (SEQ ID NO: 893)
[0187]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uma MMP e inclui a sequência ISSGLSS (SEQ ID NO: 358); QNQALRMA (SEQ ID NO: 359); AQNLLGMV (SEQ ID NO: 360); STFPFGMF (SEQ ID NO: 361); PVGYTSSL (SEQ ID NO: 362); DWLYWPGI (SEQ ID NO: 363), ISSGLLSS (SEQ ID NO: 364), LKAAPRWA (SEQ ID NO: 365); GPSHLVLT (SEQ ID NO: 366); LPGGLSPW (SEQ ID NO: 367); MGLFSEAG (SEQ ID NO: 368); SPLPLRVP (SEQ ID NO: 369); RMHLRSLG (SEQ ID NO: 370); LAAPLGLL (SEQ ID NO: 371); AVGLLAPP (SEQ ID NO: 372); LLAPSHRA (SEQ ID NO: 373); PAGLWLDP (SEQ ID NO: 374); MIAPVAYR (SEQ ID NO: 894); RPSPMWAY (SEQ ID NO: 895); WATPRPMR (SEQ ID NO: 896); FRLLDWQW (SEQ ID NO: 897); ISSGL (SEQ ID NO: 898); ISSGLLS (SEQ ID NO: 899); e/ou ISSGLL (SEQ ID NO: 900).
[0188]Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido ISSGLSS (SEQ ID NO: 358). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido QNQALRMA (SEQ ID NO: 359). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido AQNLLGMV (SEQ ID NO: 360). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido STFPFGMF (SEQ ID NO: 361). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido PVGYTSSL (SEQ ID NO: 362). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido DWLYWPGI (SEQ ID NO: 363). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido ISSGLLSS (SEQ ID NO: 364). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LKAAPRWA (SEQ ID NO: 365). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido GPSHLVLT (SEQ ID NO: 366). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LPGGLSPW (SEQ ID NO: 367). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido MGLFSEAG (SEQ ID NO: 368). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido SPLPLRVP (SEQ ID NO: 369). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido RMHLRSLG (SEQ ID NO: 370). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LAAPLGLL (SEQ ID NO: 371). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido AVGLLAPP (SEQ ID NO: 372). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido LLAPSHRA (SEQ ID NO: 373). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido PAGLWLDP (SEQ ID NO: 374). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido MIAPVAYR (SEQ ID NO: 894). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido RPSPMWAY (SEQ ID NO: 895). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido WATPRPMR (SEQ ID NO: 896). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido FRLLDWQW (SEQ ID NO: 897). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido ISSGL (SEQ ID NO: 898). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido ISSGLLS (SEQ ID NO: 899). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido ISSGLL (SEQ ID NO: 900).
[0189]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para trombina. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para trombina e inclui a sequência GPRSFGL (SEQ ID NO: 375) ou GPRSFG (SEQ ID NO: 376). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido GPRSFGL (SEQ ID NO: 375). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido GPRSFG (SEQ ID NO: 376).
[0190]Em algumas formas de realização, a CM compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em NTLSGRSENHSG (SEQ ID NO: 435); NTLSGRSGNHGS (SEQ ID NO: 436); TSTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 437); TSGRSANP (SEQ ID NO: 438); VAGRSMRP (SEQ ID NO: 439); WPEGRRS (SEQ ID NO: 440); ILPRSPAF (SEQ ID NO: 441); MVLGRSLL (SEQ ID NO: 442); QGRAITFI (SEQ ID NO: 443); SPRSIMLA (SEQ ID NO: 444); e SMLRSMPL (SEQ ID NO: 445).
[0191]Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido NTLSGRSENHSG (SEQ ID NO: 435). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido NTLSGRSGNHGS (SEQ ID NO: 436). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido TSTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 437). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido TSGRSANP (SEQ ID NO: 438). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido VAGRSMRP (SEQ ID NO: 439). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido WPEGRRS (SEQ ID NO: 440). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido ILPRSPAF (SEQ ID NO: 441). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido MVLGRSLL (SEQ ID NO: 442). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido QGRAITFI (SEQ ID NO: 443). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido SPRSIMLA (SEQ ID NO: 444). Em algumas formas de realização, a CM compreende a sequência de aminoácido SMLRSMPL (SEQ ID NO: 445).
[0192]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uma elastase neutrofilica. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uma serina protease. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uPA. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para legumina. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para matriptase. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uma cisteina protease. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para uma cisteina protease, tal como uma catepsina.
[0193]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato de CM 1-CM2 e inclui a sequência ISSGLLSGRSDNH (SEQ ID NO: 377); ISSGLLSSGGSGGSLSGRSDNH (SEQ ID NO: 378); AVGLLAPPGGTSTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 379); TSTSGRSANPRGGGAVGLLAPP (SEQ ID NO: 380); VHMPLGFLGPGGTSTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 381); TSTSGRSANPRGGGVHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 382); AVGLLAPPGGLSGRSDNH (SEQ ID NO: 383); LSGRSDNHGGAVGLLAPP (SEQ ID NO: 384); VHMPLGFLGPGGLSGRSDNH (SEQ ID NO: 385); LSGRSDNHGGVHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 386); LSGRSDNHGGSGGSISSGLLSS (SEQ ID NO: 387); LSGRSGNHGGSGGSISSGLLSS (SEQ ID NO: 388); ISSGLLSSGGSGGSLSGRSGNH (SEQ ID NO: 389); LSGRSDNHGGSGGSQNQALRMA (SEQ ID NO: 390); QNQALRMAGGSGGSLSGRSDNH (SEQ ID NO: 391); LSGRSGNHGGSGGSQNQALRMA (SEQ ID NO: 392); QNQALRMAGGSGGSLSGRSGNH (SEQ ID NO: 393); ISSGLLSGRSGNH (SEQ ID NO: 394); ISSGLLSGRSANPRG (SEQ ID NO: 901); AVGLLAPPTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 902); AVGLLAPPSGRSANPRG (SEQ ID NO: 903); ISSGLLSGRSDDH (SEQ ID NO: 904); ISSGLLSGRSDIH (SEQ ID NO: 905); ISSGLLSGRSDQH (SEQ ID NO: 906); ISSGLLSGRSDTH (SEQ ID NO: 907); ISSGLLSGRSDYH (SEQ ID NO: 908); ISSGLLSGRSDNP (SEQ ID NO: 909); ISSGLLSGRSANP (SEQ ID NO: 910); ISSGLLSGRSANI (SEQ ID NO: 911); AVGLLAPPGGLSGRSDDH (SEQ ID NO: 912); AVGLLAPPGGLSGRSDIH (SEQ ID NO: 913); AVGLLAPPGGLSGRSDQH (SEQ ID NO: 914); AVGLLAPPGGLSGRSDTH (SEQ ID NO: 915); AVGLLAPPGGLSGRSDYH (SEQ ID NO: 916); AVGLLAPPGGLSGRSDNP (SEQ ID NO: 917); AVGLLAPPGGLSGRSANP (SEQ ID NO: 918); AVGLLAPPGGLSGRSANI (SEQ ID NO: 919); ISSGLLSGRSDNI (SEQ ID NO: 920); AVGLLAPPGGLSGRSDNI (SEQ ID NO: 921); GLSGRSDNHGGAVGLLAPP (SEQ ID NO: 1009); e/ou GLSGRSDNHGGVHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 1010).
[0194]Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDNH (SEQ ID NO: 377), que também é referido aqui como substrato 2001. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSSGGSGGSLSGRSDNH (SEQ ID NO: 378), que também é referido aqui como substrato 1001/LP70001, onde LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGTSTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 379), que também é referido aqui como substrato 2015 e/ou substrato 1004/LP70003, onde LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência TSTSGRSANPRGGGAVGLLAPP (SEQ ID NO: 380), que também é referido aqui como substrato 0003/LP71004, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência VHMPLGFLGPGGTSTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 381), que também é referido aqui como substrato 1003/LP70003, onde LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência TSTSGRSANPRGGGVHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 382), que também é referido aqui como substrato 0003/LP71003, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSDNH (SEQ ID NO: 383), que também é referido aqui como substrato 3001 e/ou substrato 1004/LP70001, onde LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência LSGRSDNHGGAVGLLAPP (SEQ ID NO: 384), que também é referido aqui como substrato 0001/LP71004, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1- CM2 inclui a sequência VHMPLGFLGPGGLSGRSDNH (SEQ ID NO: 385), que também é referido aqui como substrato 1003/LP70001, em que LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência LSGRSDNHGGVHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 386), que também é referido aqui como substrato 0001/LP71003, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1- CM2 inclui a sequência LSGRSDNHGGSGGSISSGLLSS (SEQ ID NO: 387), que também é referido aqui como substrato 0001ZLP71001, onde LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência LSGRSGNHGGSGGSISSGLLSS (SEQ ID NO: 388), que também é referido aqui como substrato 0002/LP71001, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSSGGSGGSLSGRSGNH (SEQ ID NO: 389), que também é referido aqui como substrato 1001/LP70002, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência LSGRSDNHGGSGGSQNQALRMA (SEQ ID NO: 390), que também é referido aqui como substrato 0001ZLP71002, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência QNQALRMAGGSGGSLSGRSDNH (SEQ ID NO: 391), que também é referido aqui como substrato 1002/LP70001, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência LSGRSGNHGGSGGSQNQALRMA (SEQ ID NO: 392), que também é referido aqui como substrato 0002/LP71002, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência QNQALRMAGGSGGSLSGRSGNH (SEQ ID NO: 393), que também é referido aqui como substrato 1002/LP70002, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GGSGGS (SEQ ID NO: 922). Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSGNH (SEQ ID NO: 394), que também é referido aqui como substrato 2002. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSANPRG (SEQ ID NO: 901), que também é referido aqui como substrato 2003. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPTSGRSANPRG (SEQ ID NO: 902), que também é referido aqui como substrato 2004. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPSGRSANPRG (SEQ ID NO: 903), que também é referido aqui como substrato 2005. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDDH (SEQ ID NO: 904), que também é referido aqui como substrato 2006. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDIH (SEQ ID NO: 905), que também é referido aqui como substrato 2007. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDQH (SEQ ID NO: 906), que também é referido aqui como substrato 2008. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDTH (SEQ ID NO: 907), que também é referido aqui como substrato 2009. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDYH (SEQ ID NO: 908), que também é referido aqui como substrato 2010. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDNP (SEQ ID NO: 909), que também é referido aqui como substrato 2011. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSANP (SEQ ID NO: 910), que também é referido aqui como substrato 2012. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSANI (SEQ ID NO: 911), que também é referido aqui como substrato 2013. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLI_APPGGLSGRSDDH (SEQ ID NO: 912), que também é referido aqui como substrato 3006. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLI_APPGGLSGRSDIH (SEQ ID NO: 913), que também é referido aqui como substrato 3007. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSDQH (SEQ ID NO: 914), que também é referido aqui como substrato 3008. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSDTH (SEQ ID NO: 915), que também é referido aqui como substrato 3009. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSDYH (SEQ ID NO: 916), que também é referido aqui como substrato 3010. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSDNP (SEQ ID NO: 917), que também é referido aqui como substrato 3011. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSANP (SEQ ID NO: 918), que também é referido aqui como substrato 3012. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSANI (SEQ ID NO: 919), que também é referido aqui como substrato 3013. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência ISSGLLSGRSDNI (SEQ ID NO: 920), que também é referido aqui como substrato 2014. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência AVGLLAPPGGLSGRSDNI (SEQ ID NO: 921), que também é referido aqui como substrato 3014. Em algumas formas de realização, o substrato de CM1-CM2 inclui a sequência GLSGRSDNHGGAVGLLAPP (SEQ ID NO: 1009), que também é referido aqui como substrato 0001/LP71004, onde LP’ como usado neste substrato de CM1-CM2 é a sequência de aminoácido GG. Em algumas formas de realização, o substrato de CM 1-CM2 inclui a sequência GLSGRSDNHGGVHMPLGFLGP (SEQ ID NO: 1010), que também é referido aqui como substrato 0001/LP71003, onde LP’ como usado neste substrato de CM 1-CM2 é a sequência de aminoácido GG.
[0195]Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos duas proteases. Em algumas formas de realização, cada protease é selecionada do grupo consistindo naquela mostrada na Tabela 12. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos duas proteases, em que uma das proteases é selecionada do grupo consistindo em uma MMP, uma trombina, uma elastase neutrofílica, uma cisteína protease, um uPA, uma legumina e uma matriptase e outras serina proteases e a outra protease é selecionada do grupo consistindo naquela mostrada na Tabela 12. Em algumas formas de realização, a CM é um substrato para pelo menos duas proteases selecionadas do grupo consistindo em uma MMP, uma trombina, uma elastase neutrofílica, uma cisteína protease, um uPA, uma legumina e uma matriptase e outras serina proteases.
[0196]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui pelo menos uma primeira CM e uma segunda CM. Em algumas formas de realização, a primeira CM e a segunda CM são todas polipeptídeos de não mais do que 15 aminoácidos de comprimento. Em algumas formas de realização, a primeira CM e a segunda CM no anticorpo ativável no estado não clivado têm o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM1-CM2-AB ou AB-CM2-CM1-MM. Em algumas formas de realização, pelo menos uma da primeira CM e da segunda CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para uma protease selecionada do grupo consistindo em uma MMP, uma trombina, uma elastase neutrofílica, uma cisteína protease, um uPA, uma legumina, e uma matriptase e outras serina proteases. Em algumas formas de realização, a primeira CM é clivada por um primeiro agente de clivagem selecionado do grupo consistindo em uma MMP, uma trombina, uma elastase neutrofílica, uma cisteína protease, um uPA, uma legumina, e uma matriptase e outras serina proteases em um tecido alvo e a segunda CM é clivada por um segundo agente de clivagem em um tecido alvo. Em algumas formas de realização, a outra protease é selecionada do grupo consistindo naquela mostrada na Tabela 12. Em algumas formas de realização, o primeiro agente de clivagem e o segundo agente de clivagem são a mesma protease selecionada do grupo consistindo em uma MMP, uma trombina, uma elastase neutrofílica, uma cisteína protease, um uPA, uma legumina, e uma matriptase e outras serina proteases, e a primeira CM e a segunda CM são substratos diferentes para a enzima. Em algumas formas de realização, o primeiro agente de clivagem e o segundo agente de clivagem são a mesma protease selecionada do grupo consistindo naquela mostrada na Tabela 12. Em algumas formas de realização, o primeiro agente de clivagem e o segundo agente de clivagem são proteases diferentes. Em algumas formas de realização, o primeiro agente de clivagem e o segundo agente de clivagem são co-localizados no tecido alvo. Em algumas formas de realização, a primeira CM e a segunda CM são clivadas em pelo menos um agente de clivagem no tecido alvo.
[0197]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é exposto a e clivado por uma protease tal que, no estado ativado ou clivado, o anticorpo ativado inclui uma sequência de aminoácido de cadeia leve que inclui pelo menos uma porção de sequência de LP2 e/ou CM depois que a protease clivou a CM.
[0198]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável também inclui um agente conjugado ao AB. Em algumas formas de realização, o agente conjugado ao AB ou o AB de um anticorpo ativável é um agente terapêutico. Em algumas formas de realização, o agente é um agente antineoplásico. Em algumas formas de realização, o agente é uma toxina ou fragmento desta. Como usado aqui, um fragmento de uma toxina é um fragmento que mantém a atividade tóxica. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado ao AB por intermédio de um ligador clivável. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado ao AB por intermédio de um ligador que inclui pelo menos uma sequência de substrato de CM1- CM2. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado ao AB por intermédio de um ligador não clivável. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado ao AB por intermédio de um ligador que é clivável em um ambiente intracelular ou lisossômico. Em algumas formas de realização, o agente é um inibidor de microtúbulo. Em algumas formas de realização, o agente é um agente danificador de ácido nucleico, tal como um alquilador de DNA, um agente de clivagem de DNA, um reticulador de DNA, ou intercaladorde DNA, ou outro agente danificador de DNA. Em algumas formas de realização, o agente é um agente selecionado do grupo listado na Tabela 11. Em algumas formas de realização, o agente é uma dolastatina. Em algumas formas de realização, o agente é uma auristatina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é auristatina E ou um derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina E (MMAE). Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina D (MMAD). Em algumas formas de realização, o agente é um maitansinoide ou derivado de maitansinoide. Em algumas formas de realização, o agente é DM1 ou DM4. Em algumas formas de realização, o agente é uma duocarmicina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é uma caliqueamicina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é uma pirrolobenzodiazepina. Em algumas formas de realização, o agente é um dímero de pirrolobenzodiazepina.
[0199]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é conjugado a um ou mais equivalentes de um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é conjugado a um equivalente do agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é conjugado a dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez, ou maior do que dez equivalentes do agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é parte de uma mistura de anticorpos ativáveis tendo um número homogêneo de equivalentes de agentes conjugados. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é parte de uma mistura de anticorpos ativáveis tendo um número heterogêneo de equivalentes de agentes conjugados. Em algumas formas de realização, a mistura de anticorpos ativáveis é tal que o número médio de agentes conjugados a cada anticorpo ativável é entre zero e um, entre um e dois, entre dois e três, entre três e quatro, entre quatro e cinco, entre cinco e seis, entre seis e sete, entre sete e oito, entre oito e nove, entre nove e dez, e dez e maior. Em algumas formas de realização, a mistura de anticorpos ativáveis é tal que o número médio de agentes conjugado a cada anticorpo ativável é um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez ou maior.
[0200]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma ou mais modificações de sequência de aminoácido específicas de sítio tal que o número de resíduos de lisina e/ou cisteína é aumentado ou diminuído com respeito à sequência de aminoácido original do anticorpo ativável, assim em algumas formas de realização aumentando ou diminuindo correspondentemente o número de agentes que podem ser conjugados ao anticorpo ativável, ou em algumas formas de realização limitando a conjugação dos agentes ao anticorpo ativável em uma maneira específica de sítio. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável modificado é modificado com um ou mais aminoácidos não naturais em uma maneira específica de sítio, assim em algumas formas de realização limitando a conjugação dos agents apenas aos sítios dos aminoácidos não naturais.
[0201]Em algumas formas de realização, o agente é um agente anti- inflamatório.
[0202]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável também inclui uma porção detectável. Em algumas formas de realização, a porção detectável é um agente de diagnóstico.
[0203]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável também inclui um peptídeo de sinal. Em algumas formas de realização, o peptídeo de sinal é conjugado ao anticorpo ativável por intermédio de um espaçador. Em algumas formas de realização, o espaçador é conjugado ao anticorpo ativável na ausência de um peptídeo de sinal. Em algumas formas de realização, o espaçador é unido diretamente à MM do anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, o espaçador é unido diretamente à MM do anticorpo ativável no arranjo estrutural do término N ao término C do espaçador-MM-CM-AB. Um exemplo de um espaçador unido diretamente ao término N de MM do anticorpo ativável é selecionado do grupo consistindo em QGQSGS (SEQ ID NO: 923); GQSGS (SEQ ID NO: 1192); QSGS (SEQ ID NO: 1193); SGS (SEQ ID NO: 1194); GS (SEQ ID NO: 1195); S; QGQSGQG (SEQ ID NO: 924); GQSGQG (SEQ ID NO: 395); QSGQG (SEQ ID NO: 925); SGQG (SEQ ID NO: 926); GQG (SEQ ID NO: 927); QG (SEQ ID NO: 928); G; QGQSGQ (SEQ ID NO: 1196); GQSGQ (SEQ ID NO: 1197); QSGQ (SEQ ID NO: 616); SGQ (SEQ ID NO: 616); GQ (SEQ ID NO: 1199); e Q. Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QGQSGS (SEQ ID NO: 923). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido GQSGS (SEQ ID NO: 1192). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QSGS (SEQ ID NO: 1193). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido SGS (SEQ ID NO: 1194). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido GS (SEQ ID NO: 1195). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido S. Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QGQSGQG (SEQ ID NO: 924). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido GQSGQG (SEQ ID NO: 395). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QSGQG (SEQ ID NO: 925). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido SGQG (SEQ ID NO: 926). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido GQG (SEQ ID NO: 927). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QG (SEQ ID NO: 928). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido G. Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QGQSGQ (SEQ ID NO: 1196). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido GQSGQ (SEQ ID NO: 616). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido QSGQ (SEQ ID NO: 1198). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido SGQ (SEQ ID NO: 616). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido GQ (SEQ ID NO: 1199). Em algumas formas de realização, o espaçador inclui pelo menos a sequência de aminoácido Q. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não inclui uma sequência com espaçador.
[0204]Em algumas formas de realização, o AB do anticorpo ativável naturalmente contém uma ou mais ligações de dissulfeto. Em algumas formas de realização, o AB pode ser engendrado para incluir uma ou mais ligações de dissulfeto.
[0205]Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é mais longa do que aquela do anticorpo correspondente; por exemplo, a pK do anticorpo ativável é mais longa do que aquela do anticorpo correspondente. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é similar àquela do anticorpo correspondente. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 15 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 12 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 11 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 10 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 9 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 8 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 7 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 6 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 5 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 4 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 3 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 2 dias quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 24 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 20 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 18 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 16 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 14 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 12 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 10 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 8 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 6 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 4 horas quando administrado a um organismo. Em algumas formas de realização, a meia-vida do soro do anticorpo ativável é pelo menos 3 horas quando administrado a um organismo.
[0206]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é monoespecífico. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é multiespecífico, por exemplo, por via de exemplo não limitante, biespecífico ou trifuncional. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é formulado como parte de uma molécula de pró-Ligador Biespecífico de Célula T (BITE), isto é, o BITE inclui uma porção de mascaramento e uma porção clivável. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é formulado como parte de uma célula T, célula NK ou outra célula efetora imune modificadas por pró- Receptor de Antígeno Quimérico (CAR). Em algumas formas de realização, um anticorpo anti-PDL1 ativável é formulado como parte de um outro receptor engendrado em uma célula efetora imune; isto é, o pró-CAR ou outro pró-receptor engendrado inclui uma porção de mascaramento e uma porção clivável.
[0207]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste é incorporado em um anticorpo ativável multiespecífico ou fragmento de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico especificamente se liga ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste é incorporado em um anticorpo biespecífico ou fragmento de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um braço do anticorpo ativável biespecífico especificamente se liga ao PDL1.
[0208]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12 ou SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[0209]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[0210]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma sequência de aminoácido de cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12.
[0211]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica a uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[0212]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46 e a sequência de aminoácido de cadeia leve da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende a sequência de aminoácido de cadeia pesada da SEQ ID NO: 46 e a sequência de aminoácido de cadeia leve da SEQ ID NO: 12.
[0213]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica ao aminoácido da SEQ ID NO: 46. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de aminoácido selecionada da SEQ ID NO: 46, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 58. Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma sequência de aminoácido de cadeia pesada que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntica à sequência de aminoácido selecionada da SEQ ID NO: 46, e um aminoácido de cadeia leve que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % idêntico à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12.
[0214]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (VH CDR1, também referida aqui como CDRH1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (VH CDR2, também referida aqui como CDRH2), uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (VH CDR3, também referida aqui como CDRH3), uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (VL CDR1, também referida aqui como CDRL1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (VL CDR2, também referida aqui como CDRL2), e uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (VL CDR3, também referida aqui como CDRL3), em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[0215]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CD2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VH CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR1 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 16; uma sequência de VL CDR2 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 16; e uma sequência de VL CDR3 que inclui uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica a uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 16.
[0216]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0217]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0218]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0219]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que cada sequência de CDR na combinação compreende uma sequência que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de CDR correspondente em uma combinação de três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 16.
[0220]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0221]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246). Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235). Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a sequência de VH CDR2 compreende SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246), e a sequência de VH CDR3 compreende WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0222]Em algumas formas de realização, pelo menos um braço do anticorpo ativável multiespecífico, por exemplo, um anticorpo ativável biespecífico, compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação compreende uma sequência de VL CDR1 compreendendo RASQSISSYLN (SEQ ID NO: 209); uma sequência de VL CDR2 compreendendo AASSLQS (SEQ ID NO: 215); uma sequência de VL CDR3 compreendendo DNGYPST (SEQ ID NO: 228); uma sequência de VH CDR1 compreendendo SYAMS (SEQ ID NO: 212); uma sequência de VH CDR2 compreendendo SSIWRNGIVTVYADS (SEQ ID NO: 246); e uma sequência de VH CDR3 compreendendo WSAAFDY (SEQ ID NO: 235).
[0223]Em algumas formas de realização, os anticorpos anti-PDL1, anticorpos anti-PDL1 conjugados, anticorpos anti-PDL1 ativáveis e/ou anticorpos anti-PDL1 ativáveis conjugados descritos aqui são usados como agentes ativos exclusivos. Em algumas formas de realização, os anticorpos anti-PDL1, anticorpos anti-PDL1 conjugados, anticorpos anti-PDL1 ativáveis e/ou anticorpos anti-PDL1 ativáveis conjugados descritos aqui são usados em combinação com um ou mais agentes adicionais ou uma combinação de agentes adicionais. Agentes adicionais adequados incluem terapias farmacêuticas e/ou cirúrgicas correntes para uma aplicação intencionada, tais como, por exemplo, câncer. Por exemplo, os anticorpos anti-PDL1, anticorpos anti-PDL1 conjugados, anticorpos anti-PDL1 ativáveis e/ou anticorpos anti- PDL1 ativáveis conjugados podem ser usados em combinação com um agente quimioterapêutico ou antineoplásico adicional.
[0224]Em algumas formas de realização, o(s) agente(s) adicional(is) é(são) um agente quimioterapêutico, tal como um agente quimioterapêutico selecionado do grupo consistindo em docetaxel, paclitaxel, abraxane (isto é, paclitaxel conjugado à albumina), doxorrubicina, oxaliplatina, carboplatina, cisplatina, irinotecano, e gencitabina.
[0225]Em algumas formas de realização, o(s) agente(s) adicional(is) é(são) um inibidor de ponto de controle, um inibidor de cinase, um inibidor de alvejamento de agente no microambiente tumoral, e/ou um agonista de célula T ou NK. Em algumas formas de realização, o(s) agente(s) adicional(is) é(são) terapia de radiação, sozinho(s) ou em combinação com outro(s) agente(s) adicional(is) tal como um agente quimioterapêutico ou antineoplásico. Em algumas formas de realização, o(s) agente(s) adicional(is) é(são) uma vacina, um oncovirus, e/ou um agente ativador de DC tal como, por via de exemplo não limitante, um agonista de receptor semelhante a toll (TLR) e/ou O-CD40. Em algumas formas de realização, o(s) agente(s) adicional(is) é(são) um anticorpo alvejado por tumor designado para exterminar o tumor por intermédio de ADCC ou por intermédio de conjugação direta a uma toxina (por exemplo, um conjugado de anticorpo-fármaco (ADC).
[0226]Em algumas formas de realização, o inibidor de ponto de controle é um inibidor de um alvo selecionado do grupo consistindo em CTLA-4, LAG-3, PD1 (também referido como PD-1), PDL1, TIGIT, TIM-3, B7H4, e Vista. Em algumas formas de realização, o inibidor de cinase é selecionado do grupo consistindo em inibidores de B-RAFi, MEKi, e Btk, tal como ibrutinibe. Em algumas formas de realização, o inibidor de cinase é crizotinibe. Em algumas formas de realização, o inibidor de microambiente tumoral é selecionado do grupo consistindo em um inibidor de IDO, um inibidor de a-CSFIR, um inibidor de a-CCR4, um TGF-beta, uma célula supressora derivada de mieloide, ou uma célula T reguladora. Em algumas formas de realização, o agonista é selecionado do grupo consistindo em 0x40, GITR, CD137, ICOS, CD27 e HVEM.
[0227]Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de CTLA-4. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de LAG-3. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de PD1. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de PDL1. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de TIGIT. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de TIM-3. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de B7H4. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de Vista. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de B-RAFi. Em algumas formas de realização, o inibidor de B-RAFi é vemurafenibe. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de MEKi. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de Btk. Em algumas formas de realização, o inibidor é ibrutinibe. Em algumas formas de realização, o inibidor é crizotinibe. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de IDO. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de a-CSF1 R. Em algumas formas de realização, o inibidor é um inibidor de a- CCR4. Em algumas formas de realização, o inibidor é um TGF-beta. Em algumas formas de realização, o inibidor é uma célula supressora derivada de mieloide. Em algumas formas de realização, o inibidor é uma célula T reguladora.
[0228]Em algumas formas de realização, o agonista é 0x40. Em algumas formas de realização, o agonista é GITR. Em algumas formas de realização, o agonista é CD137. Em algumas formas de realização, o agonista é ICOS. Em algumas formas de realização, o agonista é CD27. Em algumas formas de realização, o agonista é HVEM.
[0229]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo conjugado, anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado é administrado antes e/ou durante e/ou depois do tratamento em combinação com um ou mais agentes adicionais tais como, por exemplo, um agente quimioterapêutico, um agente anti- inflamatório, e/ou um agente imunossupressivo. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o agente adicional são formulados em uma única composição terapêutica, e o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e agente adicional são administrados simultaneamente. Alternativamente, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e agente adicional são separados um do outro, por exemplo, cada um é formulado em uma composição terapêutica separada, e o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o agente adicional são administrados simultaneamente, ou o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o agente adicional são administrados em tempos diferentes durante um regime de tratamento. Por exemplo, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é administrado antes da administração do agente adicional, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é administrado subsequente à administração do agente adicional, ou o anticorpo anti- PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o agente adicional são administrados em uma forma alternada. Como descrito aqui, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e agente adicional são administrados em doses únicas ou em doses múltiplas.
[0230]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o(s) agente(s) adicional(is) são administrados simultaneamente. Por exemplo, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o(s) agente(s) adicional(is) podem ser formulados em uma única composição ou administrados como duas ou mais composições separadas. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti- PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o(s) agente(s) adicional(is) são administrados sequencialmente, ou o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o agente adicional são administrados em tempos diferentes durante um regime de tratamento.
[0231]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é administrado antes e/ou durante e/ou depois do tratamento em combinação com um ou mais agentes adicionais tais como, por via de exemplo não limitante, um agente quimioterapêutico, um agente anti-inflamatório, e/ou um agente imunossupressivo, tal como um agente alquilante, um anti-metabólito, um agente anti- microtubular, um inibidor de topoisomerase, um antibiótico citotóxico, e/ou qualquer outro agente danificador de ácido nucleico. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um taxano, tal como paclitaxel (por exemplo, Abraxane®). Em algumas formas de realização, o agente adicional é um anti-metabólito, tal como gencitabina. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um agente alquilante, tal como quimioterapia com base em platina, tal como carboplatina ou cisplatina. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um agente alvejado, tal como um inibidor de cinase, por exemplo, sorafenibe ou erlotinibe. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um agente alvejado, tal como um outro anticorpo, por exemplo, um anticorpo monoclonal (por exemplo, bevacizumabe), um anticorpo biespecífico, ou um anticorpo multiespecífico. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um inibidor de proteossomo, tal como bortezomibe ou carfilzomibe. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um agente imunomodulador, tal como lenolidominde ou IL-2. Em algumas formas de realização, o agente adicional é radiação. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um agente considerado padrão de cuidado por aqueles habilitados na técnica. Em algumas formas de realização, o agente adicional é um agente quimioterapêutico bem conhecido àqueles habilitados na técnica.
[0232]Em algumas formas de realização, o agente adicional é um outro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste, um outro anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, um outro anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou um outro anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste. Em algumas formas de realização o agente adicional é um outro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste, um outro anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, um outro anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou um outro anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste contra o mesmo alvo como o primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste, o primeiro anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou um anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, por exemplo, contra PDL1. Em algumas formas de realização o agente adicional é um outro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste, um outro anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, um outro anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou um outro anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste contra um alvo diferente do que o alvo do primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste, o primeiro anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou um anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste (isto é, alvo exceto PDL1). Em algumas formas de realização, o agente adicional é uma célula T, célula NK ou outra célula efetora imune modificadas por receptor de antígeno quimérico ou é uma outra célula efetora imune modificada por receptor engendrado. Em algumas formas de realização, o agente adicional é uma célula T, célula NK ou outra célula efetora imune modificadas por pró-receptor de antígeno quimérico ou é uma outra célula efetora imune modificada por pró-receptor engendrado.
[0233]Como um exemplo não limitante, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno e/ou o AB de um anticorpo ativável é um parceiro de ligação para qualquer alvo listado na Tabela 22. Em algumas formas de realização este agente adicional é ipilimumabe, um fragmento de ligação a CTLA4 de ipilimumabe, e/ou um anticorpo ativável de ipilimumabe. Tabela 22: Alvos exemplars
[0234]Como um exemplo não limitante, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno e/ou o AB de um anticorpo ativável é ou é derivado de um anticorpo listado na Tabela 23. Tabela 23: Fontes exemplares para Abs
[0235]Em algumas formas de realização, o anticorpo adicional ou fragmento de ligação a antígeno deste, anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste, e/ou anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste é um anticorpo monoclonal, anticorpo de domínio, cadeia única, fragmento Fab, um fragmento F(ab’)2, um scFv, um scAb, um dAb, um anticorpo de cadeia pesada de domínio único, ou um anticorpo de cadeia leve de domínio único. Em algumas formas de realização, o anticorpo adicional ou fragmento de ligação a antígeno deste, anticorpo conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste, anticorpo ativável ou fragmento de ligação a antígeno deste, e/ou anticorpo ativável conjugado ou fragmento de ligação a antígeno deste é um anticorpo monoclonal de camundongo, outro roedor, quimérico, humanizado ou completamente humano.
[0236]A divulgação também fornece métodos de produzir um polipeptídeo de anticorpo anti-PDL1 e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável cultivando-se uma célula sob condições que levam à expressão do polipeptídeo, em que a célula compreende uma molécula de ácido nucleico isolada que codifica um anticorpo e/ou um anticorpo ativável descrito aqui, e/ou vetores que incluem estas sequências de ácido nucleico isoladas. A divulgação fornece métodos de produzir um anticorpo e/ou anticorpo ativável cultivando-se uma célula sob condições que levam à expressão do anticorpo e/ou anticorpo ativável, em que a célula compreende uma molécula de ácido nucleico isolada que codifica um anticorpo e/ou um anticorpo ativável descrito aqui, e/ou vetores que incluem estas sequências de ácido nucleico isoladas.
[0237]A invenção também fornece um método de fabricar anticorpos ativáveis que em um estado ativado se liga ao PDL1 (a) cultivando-se uma célula compreendendo uma construção de ácido nucleico que codifica o anticorpo ativável sob condições que levam à expressão do anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM), e um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1, (i) em que a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para uma protease; e (ii) em que a CM é posicionada no anticorpo ativável tal que, quando o anticorpo ativável está em um estado não clivado, a MM interfere coma ligação específica do AB ao PDL1 e em um estado clivado a MM não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao PDL1; e (b) recuperando-se o anticorpo ativável. AB, MM, e/ou CM adequados incluem qualquer um do AB, MM, e/ou CM divulgados aqui.
[0238]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um peptídeo de ligação entre a MM e a CM. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um peptídeo de ligação entre a CM e o AB. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um primeiro peptídeo de ligação (LP1) e um segundo peptídeo de ligação (LP2), e em que o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-LP1-CM-LP2-AB ou AB-LP2-CM-LP1-MM. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: espaçador-MM-LP1 -CM-LP2-AB ou AB-LP2-CM- LP1-MM-espaçador. Em algumas formas de realização, os dois peptídeos de ligação não precisam ser idênticos um ao outro.
[0239]Em algumas formas de realização, pelo menos um de LP1 ou LP2 compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em (GS)n, (GGS)n, (GSGGS)n (SEQ ID NO: 191) e (GGGS)n (SEQ ID NO: 192), onde n é um número inteiro de pelo menos um.
[0240]Em algumas formas de realização, pelo menos um de LP1 ou LP2 compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em GGSG (SEQ ID NO: 193), GGSGG (SEQ ID NO: 194), GSGSG (SEQ ID NO: 195), GSGGG (SEQ ID NO: 196), GGGSG (SEQ ID NO: 197), e GSSSG (SEQ ID NO: 198).
[0241]Em algumas formas de realização, LP1 compreende a sequência de aminoácido GSSGGSGGSGGSG (SEQ ID NO: 199), GSSGGSGGSGG (SEQ ID NO: 200), GSSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 201), GSSGGSGGSGGSGGGS (SEQ ID NO: 202), GSSGGSGGSG (SEQ ID NO: 203), ou GSSGGSGGSGS (SEQ ID NO: 204).
[0242]Em algumas formas de realização, LP2 compreende a sequência de aminoácido GSS, GGS, GGGS (SEQ ID NO: 205), GSSGT (SEQ ID NO: 206) ou GSSG (SEQ ID NO: 207).
[0243]A invenção fornece métodos de prevenir, retardar a progressão de, tratar, aliviar um sintoma de, ou de outro modo melhorar uma doença mediada por PDL1 em um sujeito administrando-se uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado descrito aqui a um sujeito em necessidade deste.
[0244]A invenção também fornece métodos de prevenir, retardara progressão de, tratar, aliviar um sintoma de, ou de outro modo melhorar o câncer em um sujeito administrando-se uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti- PDLl, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado descrito aqui a um sujeito em necessidade deste. PDL1 é conhecido ser expressado em uma variedade de cânceres, tais como, por via de exemplo não limitante, melanoma, câncer de pulmão de células não pequenas, câncer de nasofaringe, glioblastoma/glioma misto, adenocarcinoma de cólon, carcinoma hepatocelular, câncer urotelial, mieloma múltiplo, câncerovariano, carcinoma gástrico, câncer esofágico, câncer pancreático, carcinoma de células renais (RCC), câncer de mama, linfomas, e leucemias. (Ver por exemplo, Chen et al., “Molecular Pathways: Next-Generation Immunotherapy - Inhibiting Programmed Death-Ligand 1 and Programmed Death-1”, Clin. Can. Res., vol. 18: 6580 - 6587 (2012), os conteúdos do qual são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade).
[0245]Em algumas formas de realização, o câncer é um câncer de bexiga, um câncer ósseo, um câncer de mama, um carcinoide, um câncer cervical, um câncer de cólon, um câncer do endométrio, um glioma, um câncer de cabeça e pescoço, um câncer de fígado, um câncer de pulmão, um linfoma, um melanoma, um câncer ovariano, um câncer pancreático, um câncer de próstata, um câncer renal, um sarcoma, um câncer de pele, um câncer de estômago, um câncer de testículo, um câncer da tireoide, um câncer urogenital, e/ou um câncer urotelial.
[0246]Em algumas formas de realização, o câncer é selecionado do grupo consistindo em melanoma (MEL), carcinoma de células renais (RCC), câncer de pulmão de células não pequenas escamoso (NSCLC), NSCLC não escamoso, câncer de colorreto (CRC), câncer de próstata resistente à castração (CRPC), carcinoma hepatocelular (HCC), carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço, carcinomas do esôfago, ovário, trato gastrointestinal e mama, ou uma malignidade hematológica tal como mieloma múltiplo, linfoma de célula B, linfoma de célula T, linfoma de Hodgkin/linfoma de célula B mediastinal primário, e leucemia mielógena crônica. Em algumas formas de realização, o câncer é devido a um tumor que expressa PDL1.
[0247]A invenção também fornece métodos de tratar pacientes com câncer com uma doença autoimune ou inflamatória administrando-se uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado descrito aqui a um sujeito em necessidade deste. Em algumas formas de realização, a doença autoimune é colite, RA, pancreatite, diabete, ou pneumonite.
[0248]Um anticorpo anti-PDL1, um anticorpo anti-PDL1 conjugado, um anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou um anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado usado em qualquer uma das formas de realização destes métodos e usos pode ser administrado em qualquer estágio da doença. Por exemplo, um tal anticorpo anti- PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado pode ser administrado a um paciente sofrendo câncer de qualquer estágio, do inicial ao metastático. Os termos sujeito e paciente são usados permutavelmente aqui.
[0249]Em algumas formas de realização, o sujeito é um mamífero, tal como um ser humano, primata não humano, animal de estimação (por exemplo, gato, cão, cavalo), animal de criação, animal de trabalho, ou animal de zoológico. Em algumas formas de realização, o sujeito é um ser humano. Em algumas formas de realização, o sujeito é um animal de estimação. Em algumas formas de realização, o sujeito é um animal no cuidado de um veterinário.
[0250]O anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti- PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e formulações terapêuticas destes são administrados a um sujeito sofrendo de ou suscetível a uma doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade de PDL1 aberrante. Um sujeito sofrendo de ou suscetível a uma doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade de PDL1 aberrante é identificado usando qualquer um de uma variedade de métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, sujeitos sofrendo de câncer ou outra condição neoplásica são identificados usando qualquer um de uma variedade de testes clínicos e/ou laboratoriais tais como, examinação física e análise de sangue, urina e/ou fezes para avaliar o estado de saúde. Por exemplo, sujeitos sofrendo de inflamação e/ou um transtorno inflamatório são identificados usando qualquer um de uma variedade de testes clínicos e/ou laboratoriais tais como examinação física e/ou análise de fluido corporal, por exemplo, análise de sangue, urina e/ou fezes, para avaliar o estado de saúde.
[0251]A administração de um anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado a um paciente sofrendo de uma doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade de PDL1 aberrante é considerada bem sucedida se qualquer um de uma variedade de propósitos laboratoriais ou clínicos for obtida. Por exemplo, a administração de um anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado a um paciente sofrendo de uma doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade de PDL1 aberrante é considerada bem sucedida se um ou mais dos sintomas associados com a doença ou transtorno forem aliviados, reduzidos, inibidos ou não progredirem para um outro estado, isto é, pior. A administração de um anticorpo anti- PDLl, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado a um paciente sofrendo de uma doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade de PDL1 aberrante é considerada bem sucedida se a doença ou transtorno entram em remissão ou não progridem para um outro estado, isto é, pior.
[0252]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado é administrado antes e/ou durante e/ou depois do tratamento em combinação com um ou mais agentes adicionais tais como, por exemplo, um agente quimioterapêutico, um agente anti-inflamatório, e/ou um agente imunossupressivo. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o(s) agente(s) adicional(is) são administrados simultaneamente. Por exemplo, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o(s) agente(s) adicional(is) podem ser formulados em uma única composição ou administrados como duas ou mais composições separadas. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1, anticorpo anti-PDL1 conjugado, anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado e o(s) agente(s) adicional(is) são administrados sequencialmente.
[0253]A invenção também fornece métodos e kits para usar os anticorpos anti- PDL1 ativáveis e/ou anticorpos anti-PDL1 ativáveis conjugados em uma variedade de indicações diagnósticas e/ou profiláticas. Por exemplo, a invenção fornece métodos e kits para detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e um alvo de interesse em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra com um anticorpo anti-PDL1 ativável, em que o anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo de interesse, em que o anticorpo anti-PDL1 ativável em um estado não ativado, não clivado compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao PDL1, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB e não é uma forma modificada de um parceiro de ligação natural do AB; e (b) em que, quando o AB está em um estado não ativado, não clivado, a MM interfere com a ligação específica do AB ao PDL1, e quando o AB está em um estado ativado, clivado a MM não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao PDL1; e (ii) medindo-se um nível de anticorpo anti-PDL1 ativável ativado no sujeito ou amostra, em que um nível detectável de anticorpo anti-PDL1 ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem e PDL1 estão presentes no sujeito ou amostra e em que nenhum nível detectável de anticorpo anti-PDL1 ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem, PDL1 ou tanto o agente de clivagem quanto PDL1 estão ausentes no sujeito ou amostra.
[0254]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável é um anticorpo anti-PDL1 ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo anti-PDL1 ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0255]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui um rótulo detectável. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo detectável inclui um agente de imagiologia, um agente de contraste, uma enzima, um rótulo fluorescente, um cromóforo, um corante, um ou mais ions metálicos, ou um rótulo com base em ligante. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o agente de imagiologia compreende um radioisótopo. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o radioisótopo é índio ou tecnécio. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o agente de contraste compreende iodo, gadolínio ou óxido de ferro. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a enzima compreende peroxidase de raiz forte, fosfatase alcalina, ou β-galactosidase. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo fluorescente compreende proteína fluorescente amarela (YFP), proteína fluorescente ciano (CFP), proteína fluorescente verde (GFP), proteína fluorescente vermelha modificada (mRFP), proteína fluorescente vermelha tdimer2 (RFP tdimer2), HCRED, ou um derivado de európio. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo luminescente compreende um derivado de N- metilacrídio. Em algumas formas de realização destes métodos, o rótulo compreende um rótulo Alexa Fluor®, tai como Alex Fluor® 680 ou Alexa Fluor® 750. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo com base em ligante compreende biotina, avidina, estreptavidina ou um ou mais haptenos.
[0256]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o sujeito é um mamífero. Em algumas formas de realização destes métodos, o sujeito é um ser humano. Em algumas formas de realização, o sujeito é um mamífero não humano, tal como um primata não humano, animal de estimação (por exemplo, gato, cão, cavalo), animal de criação, animal de trabalho, ou animal de zoológico. Em algumas formas de realização, o sujeito é um roedor.
[0257]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o método é um método in vivo. Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método in situ.Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método ex vivo. Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método in vitro.
[0258]Em algumas formas de realização dos métodos e kits, o método é usado para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo anti-PDL1 ativável da divulgação, seguido por tratamento administrando-se este anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti- PDLl ativável conjugado a um sujeito em necessidade deste. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para o alvo (por exemplo, PDL1) quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo anti-PDL1 ativável sendo testado nestes métodos são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo anti-PDL1 ativável compreendendo uma tal CM, e o paciente depois é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável conjugado que foi testado. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo tanto para o alvo (por exemplo, PDL1) quanto para a protease que cliva o substrato na CM no anticorpo ativável sendo testado usando estes métodos poderiam ser identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia. Em algumas formas de realização, tais pacientes podem ser testados com outros anticorpos ativáveis anti- PDL1 até que um anticorpo anti-PDL1 ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo anti-PDL1 ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença). Em algumas formas de realização, o paciente depois é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo anti-PDL1 ativável e/ou conjugado para o qual o paciente testou positivo. AB, MM, e/ou CM adequados incluem qualquer um do AB, MM, e/ou CM divulgado aqui.
[0259]Composições farmacêuticas de acordo com a invenção podem incluir um anticorpo da invenção e um portador. Estas composições farmacêuticas podem ser incluídas em kits, tais como, por exemplo, kits de diagnóstico.
[0260]A Figura 1 é gráfico descrevendo por ligação com base em ELISA que o fago ScFv c60 de PDL1 se liga especificamente ao PDL1 humano e de camundongo.
[0261]A Figura 2 é um gráfico descrevendo que hPD1 inibe a ligação de clones 12, 18 e 60 ao hPDL1 em um formato ELISA, e, além disso mPD1 inibe a ligação de clone 60 ao mPDL1.
[0262]A Figura 3 é um gráfico descrevendo os dados de ligação de saturação e demonstra que o clone 60 anti-PDL1 :lgG se liga ao PDL1 humano com uma afinidade de ligação ~ 1 nM, e ao PDL1 de camundongo em 30 nM.
[0263]As Figuras 4A e 4B são uma série de gráficos descrevendo especificidade e reatividade cruzada de H2 (Figura 4A) e especificidade e reatividade cruzada de H3W (Figura 4B).
[0264]As Figuras 5A e 5B são uma série de gráficos descrevendo que a combinação dos domínios de CDR3 variáveis pesados maduros com os domínios de CDR2 variáveis pesados resulta em anticorpos com afinidade realçada para PDL1 humano.
[0265]As Figuras 6A, 6B, 6C, e 6D são uma série de gráficos descrevendo que este anticorpo anti-PDL1 C5H9 se liga ao PDL1 humano e de camundongo com afinidade quase igual e estes anticorpos anti-PDL1 C5B10 e C5E10 apenas se ligam ao PDL1 humano.
[0266]A Figura 7 é um gráfico descrevendo a capacidade do anticorpo anti- PDL1 C5H9 de se ligar com afinidade alta e igual ao PDL1 humano, de camundongo e cyno.
[0267]As Figuras 8A e 8B são uma série de gráficos descrevendo que este anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 tem potencial de imunogenicidade mais baixo e realçada. Estes gráficos demonstram imunogenicidade prognosticada diminuída, níveis de expressão aumentados (3X), e porcentagem de monômero aumentada em formato de lgG1 humana.
[0268]As Figuras 9A, 9B, e 9C são uma série de gráficos descrevendo a capacidade do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 de se ligar com afinidade alta a PDL1 de (A) camundongo, (B) cyno, e (C) humano. As Figuras 9A a 9C mostram que ambos os anticorpos anti-PDL1 C5H9 e C5H9v2 se ligam ao PDL1 humano, de camundongo e cyno com afinidades quase iguais.
[0269]A Figura 10 é um gráfico descrevendo a especificidade de C5H9v2 para um painel de proteínas humanas e de camundongo. A Figura 10 demonstra que este anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 se liga apenas ao PDL1 humano e de camundongo demonstrando especificidade para PDL1.
[0270]A Figura 11 é uma série de gráficos descrevendo o bloqueio de B7-1 e PD1. A Figura 11 demonstra que tanto o anticorpo anti-PDL1 C5H9 quanto o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 são bloqueadores potentes da ligação de B7-1 ou PD1 ao PDL1, e este bloqueio inclui todas três espécies, ser humano, cyno e camundongo com ECso de nM de dígito único.
[0271]A Figura 12 é um gráfico descrevendo que este anticorpo anti-PDL1 C5H9 acelera o início de diabete em camundongos NOD similar ao anticorpo anti- PDLl de controle positivo 10F9G2.
[0272]A Figura 13 é um gráfico descrevendo que este anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 acelera o início de diabete em camundongos NOD em uma matéria dependente de dose.
[0273]A Figura 14 é um gráfico descrevendo que um anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 inibe o crescimento de tumores singênicos de MC38 similar ao anticorpo anti- PDLl de controle positivo 10F9G2.
[0274]A Figura 15 é um gráfico descrevendo isotermas de ligação para anticorpos ativáveis anti-PDL1 que incluem o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0275]A Figura 16 é um gráfico descrevendo isotermas de ligação para anticorpos ativáveis anti-PDL1 que incluem o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0276]A Figura 17 é um gráfico descrevendo isotermas de ligação para anticorpos ativáveis anti-PDL1 que incluem o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0277]As Figuras 18A e 18B são uma série de gráficos descrevendo que este anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2, quando administrado em uma dose de 1 mg/kg, tem uma ausência de indução de diabete e anticorpo anti-PDL1 ativável PL18-0003-C5H9v2, quando administrado em uma dose de 1 mg/kg, tem um retardo na indução de diabete comparado ao anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 administrado em uma dose de 1 mg/kg em camundongos NOD (Figura 18A); além disso, o anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2, quando administrado em uma dose de 3 mg/kg induziu diabete em 2 de 8 camundongos NOD (75 % não diabético), comparado a 1 mg/kg de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 que levou a camundongos NOD 38 % não diabéticos (Figura 18B).
[0278]A Figura 19 é um gráfico descrevendo que estes anticorpos anti-PDL1 ativáveis PL15-0003-C5H9v2 e PL18-0003-C5H9v2 inibem o crescimento de tumores singênicos de MC38 similar ao anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0279]As Figuras 20A, 20B, 20C, e 20D são uma série de gráficos descrevendo a porcentagem de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 ligado a células T CD4+ e CD8+ do sangue periférico (Figuras 20A, 20B) ou baço (Figuras 20C, 20D). Em todos os gráficos, o círculo representa isótipo, o quadrado representa o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, e o triângulo representa o anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2.
[0280]As Figuras 21A e 21B são uma série de gráficos descrevendo que a presença de proteases derivadas de tumor capazes de clivar o anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 (representado por quadrados) não levou a níveis altos de anticorpo ativável ativado no sangue comparado ao anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 (representado por círculos) ou um anticorpo isótipo (representado por triângulos) (Figura 21 A) apesar das concentrações plasmáticas do anticorpo ativável sendo mais altas do que aquelas do anticorpo (Figura 21B).
[0281]A Figura 22 é um gráfico descrevendo a capacidade do anticorpo anti- PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2 de aumentara secreção de INF-gama estimulada por CMV quando comparado a hlgG4 de controle, mas com potência diminuída em relação ao anticorpo precursor anti-PDL1 C5H9v2.
[0282]As Figuras 23A, 23B, 23C, e 23D são uma série de imagens mostrando a capacidade do anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 de ser ativado e de se ligar a tecidos cancerosos de camundongo MC38 congelados usando um método de imagiologia in situ.
[0283]A Figura 24 descreve que este anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003- C5H9v2 exibiu uma ECso mais alta para ligação de PDL1 e bloqueio de PD1 do que o anticorpo anti-PDL1 como medido por ELISA. A figura demonstra ainda que a ativação do anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 por matriptase completamente restaurou as atividades de ligação de PDL1 e bloqueio de PD1 a níveis comparáveis àqueles do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0284]As Figuras 25A e 25B são uma série de gráficos descrevendo a capacidade de anticorpos ativáveis anti-PDL1 referidos aqui como PL07-2001- C5H9v2 e PF07-3001-C5H9v2 e do anticorpo anti-PDL1 referido aqui como C5H9 de se ligar a PDL1 humano ou de murino.
[0285]As Figuras 26A, 26B, e 26C são uma série de gráficos descrevendo as capacidades do anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti- PDL1 ativável ativado por uPA PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 ativável ativado por MMP14 PL07-2001-C5H9v2, e anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 de bloquear PD1 humano (PD-1) ao PDL1 humano (Figura 26A), ligar PD1 de cinomolgo (PD-1) ao PDL1 de cinomolgo (Figura 26B), ou ligar PD1 de rato (PD-1) ao PDL1 de rato (Figura 26C).
[0286]As Figuras 27A e 27B são uma série de gráficos descrevendo a capacidade do anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 ativável ativado poruPA PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 ativável ativado por MMP14 PL07-2001-C5H9v2, ou anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 de ligar B7-1 humano ao PDL1 humano (Figura 27A) ou ligar B7-1 de cinomolgo ao PDL1 de cinomolgo (Figura 27B).
[0287]A Figura 28 é um gráfico descrevendo a capacidade dos anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL15-0003-C5H9v2, PL15-2001-C5H9v2, e PL15-3001-C5H9v2 de inibir o crescimento de tumores singênicos de MC38 similar ao anticorpo anti-PDL1 de controle positivo C5H9v2.
[0288]As Figuras 29A, 29B, e 29C são uma série de gráficos descrevendo que a presença de proteases derivadas de tumor capazes de clivar os anticorpos ativáveis, anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 ou anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2, PL15-2001-C5H9v2, ou PL15-3001-C5H9v2 não levou a níveis altos de anticorpos ativáveis ativados no sangue.
[0289]A Figura 30 é uma ilustração descrevendo a capacidade de proteases em um tumor implantado em um camundongo de ativar o anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2.
[0290]A presente invenção fornece anticorpos monoclonais (mAbs) e anticorpos monoclonais ativáveis que especificamente se ligam ao ligante de morte programada 1 humano (PDL1). PDL1 é uma proteína de transmembrana do tipo I de 40 kDa que forma um complexo com sua proteína 1 de morte celular programada de receptor (PD1), também conhecida como CD279. O envolvimento de PDL1 com sua PD1 de receptor em células T libera um sinal que inibe a ativação mediada por TCR de produção de IL-2 e proliferação de célula T. A expressão e/ou atividade aberrante de PDL1 e sinalização relacionada a PDL1 foi implicada na patogênese de muitas doenças e transtornos, tais como câncer, inflamação, e autoimunidade.
[0291]Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis são usados em métodos de tratar, prevenir, retardar a progressão de, melhorar e/ou aliviar um sintoma de uma doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade de PDL1 aberrante. Por exemplo, os anticorpos anti-PDL1 ativáveis são usados em métodos de tratar, prevenir, retardar a progressão de, melhorar e/ou aliviar um sintoma de um câncer ou outra condição neoplásica.
[0292]Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis incluem um anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que especificamente se liga ao PDL1 ligado a uma porção de mascaramento (MM), tal que a ligação da MM reduz a capacidade do anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste de se ligar ao PDL1. Em algumas formas de realização, a MM é ligada por intermédio de uma sequência que inclui um substrato para uma protease, por exemplo, uma protease que é co-localizada com PDL1 em um sítio de tratamento em um sujeito.
[0293] Anti corpos anti-PDL1 ativáveis exemplares da invenção incluem, por exemplo, anticorpos ativáveis que incluem uma cadeia pesada e uma cadeia leve que são, ou são derivadas de, anticorpos descritos nos Exemplos, por exemplo no Exemplo 3 e Exemplo 4.
[0294]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma cadeia pesada que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo na SEQ ID NO: 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, e 56, e uma cadeia leve que compreende ou é derivada da sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 12 ou SEQ ID NO: 58.
[0295]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável compreende uma combinação de uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (VH CDR1, também referida aqui como CDRH1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (VH CDR2, também referida aqui como CDRH2), uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (VH CDR3, também referida aqui como CDRH3), uma sequência de região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (VL CDR1, também referida aqui como CDRL1), uma sequência de região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (VL CDR2, também referida aqui como CDRL2), e uma sequência de região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (VL CDR3, também referida aqui como CDRL3), em que pelo menos uma sequência de CDR é selecionada do grupo consistindo em uma sequência de VH CDR1 mostrada na Tabela 15; uma sequência de VH CDR2 mostrada na Tabela 15; uma sequência de VH CDR3 mostrada na Tabela 15; uma sequência de VL CDR1 mostrada na Tabela 15; uma sequência de VL CDR2 mostrada na Tabela 15; e uma sequência de VL CDR3 mostrada na Tabela 15.
[0296]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, uma sequência de VH CDR3, uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das seis sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, e VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 15.
[0297]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia pesada que compreende uma combinação de uma sequência de VH CDR1, uma sequência de VH CDR2, e uma sequência de VH CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia pesada (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 15.
[0298]Em algumas formas de realização, o anticorpo compreende uma cadeia leve que compreende uma combinação de uma sequência de VL CDR1, uma sequência de VL CDR2, e uma sequência de VL CDR3, em que a combinação é uma combinação das três sequências de CDR de cadeia leve (VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3) mostradas em uma única fileira na Tabela 15.
[0299]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma cadeia pesada que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido de cadeia pesada mostrada na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma cadeia leve que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido de cadeia leve mostrada na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma cadeia pesada que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido de cadeia pesada mostrada na Tabela 15, e uma cadeia leve que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido de cadeia leve mostrada na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve das combinações mostradas no Grupo A na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo B na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo C na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo D na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo E na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo F na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo G na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo H na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo I na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de cadeia pesada e cadeia leve mostradas no Grupo J na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo K na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de cadeia pesada e cadeia leve mostradas no Grupo K na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo L na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo M na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo N na Tabela 15. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui a combinação de sequências de região variável de cadeia pesada e região variável de cadeia leve mostradas no Grupo O na Tabela 15. Tabela 15. Sequências de região variável de cadeia pesada (VH) e região variável de cadeia leve (VL) para anticorpos ativáveis que se ligam ao PDL1 (sequências de CDR são sublinhadas; sequências de CDR divulgadas aqui foram identificadas de acordo com as definições de Kabat, Sequences of Proteins of mmunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987 e 1991)))
Note que as sequências fornecidas para o Grupo J são sequências de aminoácido de cadeia pesada e cadeia leve; as sequências fornecidas para o Grupo K incluem sequências de aminoácido de cadeia pesada variável, cadeia leve variável, cadeia pesada, e cadeia leve; todas as outras sequências apresentadas na Tabela 15 são sequências de cadeia pesada variável e cadeia leve variável
[0300]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma cadeia pesada que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido de cadeia pesada mostrada nas Patentes dos EUA 7.943.743; 8.779.108; 8.217.149; 8.460.927; 7.794.710; 8.741.295; e 8.981.063; nas Publicações do Pedido de Patente dos EUA 2014356353; 20130323249; 2014341917; 20130309250; 20110280877; e 20090317368 (agora publicada como Patente dos EUA 8.981.063 listada acima); e nas Publicações PCT WO2014/100483; WO2012/145493; WO2014/100439; WO2014/195852; WO2014/100079; WO2013/173223; e WO2014/55897, os conteúdos de cada um dos quais são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti- PDL1 ativável inclui uma cadeia leve que compreende ou é derivada de uma sequência de aminoácido de cadeia leve mostrada nas Patentes dos EUA 7.943.743; 8.779.108; 8.217.149; 8.460.927; 7.794.710; 8.741.295; e 8.981.063; nas Publicações do Pedido de Patente dos EUA 2014356353; 20130323249; 2014341917; 20130309250; 20110280877; e 20090317368 (agora publicada como Patente dos EUA 8.981.063); e nas Publicações PCT WO2014/100483; WO2012/145493; WO2014/100439; WO2014/195852; WO2014/100079; WO2013/173223; e WO2014/55897, os conteúdos de cada um dos quais são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma cadeia pesada e uma cadeia leve que compreendem ou são derivadas de uma sequência de aminoácido de cadeia pesada e uma sequência de aminoácido de cadeia leve mostradas nas Patentes dos EUA 7.943.743; 8.779.108; 8.217.149; 8.460.927; 7.794.710; 8.741.295; e 8.981.063; nas Publicações do Pedido de Patente dos EUA 2014356353; 20130323249; 2014341917; 20130309250; 20110280877; e 20090317368 (agora publicada como Patente dos EUA N2 8.981.063); e nas Publicações PCT WO2014/100483; WO2012/145493; WO2014/100439; WO2014/195852; WO2014/100079; WO2013/173223; e WO2014/55897, os conteúdos de cada um dos quais são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade.
[0301]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que inclui pelo menos uma sequência de CDR selecionada das sequências de CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3) das sequências de CDR relatadas na Patente dos EUA N2 7.943.743. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que inclui pelo menos uma CDR, pelo menos duas, pelo menos três, pelo menos quatro, pelo menos cinco, e/ou seis sequências de CDR selecionadas das sequências seguintes na Patente dos EUA N^7.943.743: SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 61, e SEQ ID NO: 71. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que inclui pelo menos uma CDR, pelo menos duas, pelo menos três, pelo menos quatro, pelo menos cinco, e/ou seis sequências de CDR selecionadas da SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 62, e SEQ ID NO: 72. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que inclui pelo menos uma CDR, pelo menos duas, pelo menos três, pelo menos quatro, pelo menos cinco, e/ou seis sequências de CDR selecionadas da SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 63, e SEQ ID NO: 73.
[0302]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que inclui pelo menos uma CDR, pelo menos duas, pelo menos três, pelo menos quatro, pelo menos cinco, e/ou seis sequências de CDR selecionadas das sequências seguintes na Patente dos EUA N^ 7.943.743: uma sequência de VH CDR1 compreendendo a SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, ou SEQ ID NO: 23; uma sequência de VH CDR2 compreendendo a SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, ou SEQ ID NO: 33; uma sequência de VH CDR3 compreendendo a SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 42, ou SEQ ID NO: 43; uma sequência de VL CDR1 compreendendo a SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52, ou SEQ ID NO: 53; uma sequência de VL CDR2 compreendendo a SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, ou SEQ ID NO: 63; e uma sequência de VL CDR3 compreendendo a SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, ou SEQ ID NO: 73.
[0303]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que se liga a um polipeptídeo que compreende ou é derivado da SEQ ID NO: 1 ou SEQ ID NO: 3 da Patente dos EUA N2 8.460.927.
[0304]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que se liga a um polipeptídeo de PDL1 humano que compreende ou é derivado da SEQ ID NO: 1 da Patente dos EUA 8.460.927: MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYWEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWE MEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRC MISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSD HQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELP LAHPPNERTHLVILGAILLCLGVALTFIFRLRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLE ET (SEQ ID NO: 585)
[0305]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que se liga a um polipeptídeo de PDL1 de murino que compreende ou é derivado da SEQ ID NO: 3 da Patente dos EUA N^ 8.460.927: MRIFAGIIFTACCHLLRAFTITAPKDLYWEYGSNVTMECRFPVERELDLLALWYWE KEDEQVIQFVAGEEDLKPQHSNFRGRASLPKDQLLKGNAALQITDVKLQDAGVYCCI ISYGGADYKRITLKVNAPYRKINQRISVDPATSEHELICQAEGYPEAEVIWTNSDHQP VSGKRSVTTSRTEGMLLNVTSSLRVNATANDVFYCTFWRSQPGQNHTAELIIPELPA THPPQNRTHWVLLGSILLFLIVVSTVLLFLRKQVRMLDVEKCGVEDTSSKNRNDTQF EET (SEQ ID NO: 586)
[0306]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que se liga a um polipeptídeo que compreende ou é derivado da SEQ ID NO: 36 ou SEQ ID NO: 38 da Publicação PCT N^ WO 2014/10079.
[0307]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que se liga a um polipeptídeo de PDL1 humano que compreende ou é derivado da SEQ ID NO: 36 da Publicação PCT N2 WO 2014/10079. MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYWEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWE MEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRC MISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSD HQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELP LAHPPNERTHLVILGAILLCLGVALTFIFRLRKGRMMDVKCGIQDTNSKQSDTHLEET (SEQ ID NO: 587)
[0308]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que se liga a um polipeptídeo de domínio extracelular de PDL1 humano que compreende ou é derivado da SEQ ID NO: 38 da Publicação PCT N^ WO 2014/10079. FTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNIIQFVHGEEDLKV QHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITVKVNA PYNKINQRILWDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEK LFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERT (SEQ ID NO: 588)
[0309]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que é ou é derivado de BMS-936559 (MDX-1 105). Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que é ou é derivado de MPDL3280A (RG7446). Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que é ou é derivado de MEDI4736. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que é ou é derivado de AMP224. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável inclui um anticorpo anti-PDL1 que é ou é derivado de MSB0010718C.
[0310]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável compreende ou é derivado de um anticorpo que é fabricado, secretado ou de outro modo produzido por um hibridoma, tal como, por exemplo, o(s) hibridoma(s) divulgado(s) na Patente dos EUA N^ 8.779.108 e depositado(s) nas National Collections of Industrial and Marine Bacteria (NCIMB) sob o número de depósito 41598, assim como o(s) hibridoma(s) divulgado(s) na Patente dos EUA N^ 8.741.295 e depositado(s) na Collection Nationale De Cultures De Microorganismes (CNCM) sob o número de depósito I-4080, 1-4081, e/ou 1-4122.
[0311]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma sequência de CDR mostrada na Tabela 16, uma combinação de sequências de VL CDR (VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3) selecionada do grupo consistindo naquelas combinações mostradas em uma única fileira da Tabela 16, uma combinação de sequências de VH CDR (VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) selecionada do grupo consistindo naquelas combinações mostradas na Tabela 16, ou uma combinação de sequências de VL CDR e VH CDR (VL CDR1, VL CDR2, VL CDR3, VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3) selecionada do grupo consistindo naquelas combinações mostradas na Tabela 16. Tabela 16. Sequências de CDR para anticorpos e anticorpos ativáveis que se ligam ao PDL1
[0312]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma sequência de CDR mostrada na Tabela 17, uma combinação de sequências de VL CDR selecionada do grupo consistindo naquelas combinações mostradas na Tabela 17, e/ou uma combinação de sequências de VH CDR selecionada do grupo consistindo naquelas combinações mostradas na Tabela 17.
[0313]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo A na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo A na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo A na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo A na Tabela 17.
[0314]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo B na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo B na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo B na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo B na Tabela 17.
[0315]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo C na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo C na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo C na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo C na Tabela 17.
[0316]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo D na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo D na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo D na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo D na Tabela 17.
[0317]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo E na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo E na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo E na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo E na Tabela 17.
[0318]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo F na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo F na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo F na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo F na Tabela 17.
[0319]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo G na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo G na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo G na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo G na Tabela 17.
[0320]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo H na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo H na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo H na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo H na Tabela 17.
[0321]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo I na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo I na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo I na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo I na Tabela 17.
[0322]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo J na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo J na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo J na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo J na Tabela 17.
[0323]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo K na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo Kna Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo K na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo K na Tabela 17.
[0324]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo L na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo L na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo L na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo L na Tabela 17.
[0325]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo M na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo M na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo M na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo M na Tabela 17.
[0326]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo N na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo N na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo N na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo N na Tabela 17.
[0327]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo O na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo O na Tabela 17. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma combinação de sequências de CDR de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo O na Tabela 17, e uma combinação de sequências de CDR de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas combinações mostradas no Grupo O na Tabela 17.
[0328]Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui uma sequência de CDR1 de cadeia pesada selecionada do grupo consistindo nas sequências mostradas no Grupo P na Tabela 17. Tabela 17. Sequências de CDR adicionais para anticorpos e anticorpos ativáveis que se ligam ao PDL1
[0329]Os ABs nos anticorpos ativáveis da divulgação especificamente se ligam a um alvo de PDL1, tal como, por exemplo, PDL1 de mamífero, e/ou PDL1 humano. Também incluídos na divulgação são ABs que se ligam ao mesmo epítopo de PDL1 como um anticorpo da divulgação e/ou um anticorpo ativável ativado descrito aqui. Também incluídos na divulgação são ABs que competem com um anticorpo anti- PDL1 e/ou um anticorpo anti-PDL1 ativável ativado descrito aqui pela ligação a um alvo de PDL1, por exemplo, PDL1 humano. Também incluídos na divulgação são ABs que competem cruzado com um anticorpo anti-PDL1 e/ou um anticorpo anti-PDL1 ativável ativado descrito aqui pela ligação a um alvo de PDL1, por exemplo, PDL1 humano.
[0330]0s anticorpos anti-PDL1 ativáveis fornecidos aqui incluem uma porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, a porção de mascaramento é uma sequência de aminoácido que é ligada ou de outro modo ligada ao anticorpo anti- PDL1 e é posicionada dentro da construção de anticorpo anti-PDL1 ativável tal que a porção de mascaramento reduz a capacidade do anticorpo anti-PDL1 de especificamente se ligar ao PDL1. Porções de mascaramento adequadas são identificadas usando qualquer uma de uma variedade de técnicas conhecidas. Por exemplo, porções de mascaramento de peptídeo são identificadas usando os métodos descritos na Publicação PCT N2- WO 2009/025846 de Daugherty et al., os conteúdos da qual são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade.
[0331]Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis fornecidos aqui incluem uma porção clivável. Em algumas formas de realização, a porção clivável inclui uma sequência de aminoácido que é um substrato para uma protease, usualmente uma protease extracelular. Substratos adequados são identificados usando qualquer uma de uma variedade de técnicas conhecidas. Por exemplo, substratos de peptídeo são identificados usando os métodos descritos na Patente dos EUA N2 7.666.817 de Daugherty et al.; na Patente dos EUA N2 8.563.269 de Stagliano et al.; e na Publicação PCT N2 WO 2014/026136 de La Porte et al., os conteúdos de cada um dos quais são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade. (Ver também Boulware et al.“Evolutionary optimization of peptide substrates for proteases that exhibit rapid hydrolysis kinetics.” Biotechnol Bioeng. 106,3 (2010): 339 - 46).
[0332]Substratos exemplares incluem mas não são limitados a substratos cliváveis por uma ou mais das seguintes enzimas ou proteases listadas na Tabela 12. Tabela 12: Prol teases e/ou Enzimas Exemplares
[0333]Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis descritos aqui superam uma limitação de produtos terapêuticos de anticorpo, particularmente produtos terapêuticos de anticorpo que são conhecidos como sendo tóxicos a pelo menos algum grau in vivo. A toxicidade mediada por alvo constitui uma principal limitação para o desenvolvimento de anticorpos terapêuticos. Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis fornecidos aqui são designados para tratar a toxicidade associada com a inibição do alvo em tecidos normais por anticorpos terapêuticos tradicionais. Estes anticorpos anti-PDL1 ativáveis permanecem mascarados até proteoliticamente ativados no sítio de doença. Partindo com um anticorpo anti-PDL1 como um anticorpo terapêutico precursor, os anticorpos anti-PDL1 ativáveis da invenção foram engendrados ligando- se o anticorpo a uma máscara inibitória através de um ligador que incorpora um substrato de protease.
[0334]Quando o AB é modificado com uma MM e está na presença do alvo, a ligação específica do AB ao seu alvo é reduzida ou inibida, quando comparada à ligação específica do AB não modificado com uma MM ou a ligação específica ao AB precursor ao alvo.
[0335]A Kd do AB modificado com uma MM para o alvo é pelo menos 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000, 50.000, 100.000, 500.000, 1.000.000, 5.000.000, 10.000.000, 50.000.000 ou maior, ou entre 5 e 10, 10 e 100, 10 e 1.000, 10 e 10.000, 10 e 100.000, 10 e 1.000.000, 10 e 10.000.000, 100 e 1.000, 100 e 10.000, 100 e 100.000, 100 e 1.000.000, 100 e 10.000.000, 1.000 e 10.000, 1.000 e 100.000, 1.000 e 1.000.000, 1000 e 10.000.000, 10.000 e 100.000, 10.000 e 1.000.000, 10.000 e 10.000.000, 100.000 e 1.000.000, ou 100.000 e 10.000.000 vezes maior do que a Kd do AB não modificado com uma MM ou do AB precursor para o alvo. Reciprocamente, a afinidade de ligação do AB modificado com uma MM para o alvo é pelo menos 2, 3, 4, 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000, 50.000, 100.000, 500.000, 1.000.000, 5.000.000, 10.000.000, 50.000.000 ou maior, ou entre 5 e 10, 10 e 100, 10 e 1.000, 10 e 10.000, 10 e 100.000, 10 e 1.000.000, 10 e 10.000.000, 100 e 1.000, 100 e 10.000, 100 e 100.000, 100 e 1.000.000, 100 e 10.000.000, 1.000 e 10.000, 1.000 e 100.000, 1.000 e 1.000.000, 1000 e 10.000.000, 10.000 e 100.000, 10.000 e 1.000.000, 10.000 e 10.000.000, 100.000 e 1.000.000, ou 100.000 e 10.000.000 vezes mais baixa do que a afinidade de ligação do AB não modificado com uma MM ou do AB precursor para o alvo.
[0336]Em algumas formas de realização, a constante de dissociação (Kd) da MM para o AB é geralmente maior do que a Kd do AB para o alvo. A Kd da MM para o AB pode ser pelo menos 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000, 100.000, 1.000.000 ou ainda 10.000.000 vezes maior do que a Kd do AB para o alvo. Reciprocamente, a afinidade de ligação da MM para o AB é geralmente mais baixa do que a afinidade de ligação do AB para o alvo. A afinidade de ligação de MM para o AB pode ser pelo menos 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000, 100.000, 1.000.000 ou ainda 10.000.000 vezes mais baixa do que a afinidade de ligação do AB para o alvo.
[0337]Em algumas formas de realização, a constante de dissociação (Kd) da MM para o AB é aproximadamente igual à Kd do AB para o alvo. Em algumas formas de realização, a constante de dissociação (Kd) da MM para o AB é não mais do que a constante de dissociação do AB para o alvo.
[0338]Em algumas formas de realização, a constante de dissociação (Kd) da MM para o AB é menos do que a constante de dissociação do AB para o alvo.
[0339]Em algumas formas de realização, a constante de dissociação (Kd) da MM para o AB é maior do que a constante de dissociação do AB para o alvo.
[0340]Em algumas formas de realização, a MM tern uma Ka para a ligação ao AB que é não mais do que a Kd para ligação do AB ao alvo.
[0341]Em algumas formas de realização, a MM tern uma Ka para a ligação ao AB que é não menos do que a Kd para a ligação do AB ao alvo.
[0342]Em algumas formas de realização, a MM tern uma Ka para a ligação ao AB que é aproximadamente igual à Kd para a ligação do AB ao alvo.
[0343]Em algumas formas de realização, a MM tem uma Ka para a ligação ao AB que é menos do que a Kd para a ligação do AB ao alvo.
[0344]Em algumas formas de realização, a MM tem uma Kd para a ligação ao AB que é maior do que a Kd para a ligação do AB ao alvo.
[0345]Em algumas formas de realização, a MM tem uma Kd para a ligação ao AB que é não mais do que 2, 3, 4, 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, ou 1.000 vezes maior do que a Kd para a ligação do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, a MM tem uma Kd para a ligação ao AB que é entre 1 a 5, 2 a 5, 2 a 10, 5 a 10, 5 a 20, 5 a 50, 5 a 100, 10 a 100, 10 a 1.000, 20 a 100, 20 a 1000, ou 100 a 1.000 vezes maior do que a Kd para a ligação do AB ao alvo.
[0346]Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é menos do que a afinidade de ligação do AB ao alvo.
[0347]Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é não mais do que a afinidade de ligação do AB ao alvo.
[0348]Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é aproximadamente igual à afinidade de ligação do AB ao alvo.
[0349]Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é não menos do que a afinidade de ligação do AB ao alvo.
[0350]Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é maior do que a afinidade de ligação do AB ao alvo.
[0351]Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é 2, 3, 4, 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, ou 1.000 menos do que a afinidade de ligação do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é entre 1 a 5, 2 a 5, 2 a 10, 5 a 10, 5 a 20, 5 a 50, 5 a 100, 10 a 100, 10 a 1.000, 20 a 100, 20 a 1000, ou 100 a 1.000 vezes menos do que a afinidade de ligação do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, a MM tem uma afinidade para a ligação ao AB que é 2 a 20 vezes menos do que a afinidade de ligação do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, uma MM não covalentemente ligada ao AB e em concentração equimolar ao AB não inibe a ligação do AB ao alvo.
[0352]Quando o AB é modificado com uma MM e está na presença do alvo a ligação específica do AB ao seu alvo é reduzida ou inibida, quando comparada à ligação específica do AB não modificado com uma MM ou a ligação específica do AB precursor ao alvo. Quando comparada à ligação do AB não modificado com uma MM ou à ligação do AB precursor ao alvo a capacidade do AB de se ligar ao alvo quando modificado com um MM pode ser reduzida em pelo menos 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % e ainda 100 % por pelo menos 2, 4, 6, 8, 12, 28, 24, 30, 36, 48, 60, 72, 84, ou 96 horas, ou 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, ou 180 dias, ou 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, ou 12 meses ou mais quando medida in vivo ou em um ensaio in vitro.
[0353]A MM inibe a ligação do AB ao alvo. A MM se liga ao domínio de ligação a antígeno do AB e inibe a ligação do AB ao alvo. A MM pode inibir estericamente a ligação do AB ao alvo. A MM pode inibir alostericamente a ligação do AB ao seu alvo. Nestas formas de realização quando o AB é modificado ou ligado a uma MM e na presença de alvo não existe nenhuma ligação ou substancialmente nenhuma ligação do AB ao alvo, ou não mais do que 0,001 %, 0,01 %, 0,1 %, 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5 %, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, ou 50 % de ligação do AB ao alvo, quando comparada à ligação do AB não modificado com uma MM, do AB precursor, ou do AB não ligado a uma MM ao alvo, por pelo menos 2, 4, 6, 8, 12, 28, 24, 30, 36, 48, 60, 72, 84, ou 96 horas, ou 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, ou 180 dias, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, ou 12 meses ou mais quando medida in vivo ou em um ensaio in vitro.
[0354]Quando urn AB é ligado a ou modificado por uma MM, a MM ‘mascara’ ou reduz ou de outro modo inibe a ligação específica do AB ao alvo. Quando um AB é ligado a ou modificado por uma MM, tal ligação ou modificação podem efetuar uma mudança estrutural que reduz ou inibe a capacidade do AB de especificamente se ligar ao seu alvo.
[0355]Um AB ligado a ou modificado com uma MM pode ser representado pelas fórmulas seguintes (na ordem de uma região terminal amino (N) à região terminal carboxila (C): (MM)-(AB) (AB)-(MM) (MM)-L-(AB) (AB)-L-(MM) onde MM é uma porção de mascaramento, o AB é um anticorpo ou fragmento de anticorpo deste, e o L é um ligador. Em muitas formas de realização, pode ser desejável inserir um ou mais ligadores, por exemplo, ligadores flexíveis, na composição de modo a levarem consideração a flexibilidade.
[0356]Em certas formas de realização, a MM não é um parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM contém nenhuma ou substancialmente nenhuma homologia a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, ou 80 % similar a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, ou 80 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 25 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 50 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 20 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 10 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB.
[0357]Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis incluem um AB que é modificado por uma MM e também inclui uma ou mais porções cliváveis (CM). Tais anticorpos ativáveis exibem ligação ativável/permutável, ao alvo de AB. Anticorpos ativáveis geralmente incluem um anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB), modificado por ou ligado a uma porção de mascaramento (MM) e uma porção modificável ou clivável (CM). Em algumas formas de realização, a CM contém uma sequência de aminoácido que serve como um substrato para pelo menos uma protease.
[0358]Os elementos dos anticorpos ativáveis são arranjados de modo que a MM e CM sejam posicionadas tal que em um estado clivado (ou relativamente ativo) e na presença de um alvo, o AB se liga a um alvo enquanto o anticorpo ativável está em um estado não clivado (ou relativamente inativo) na presença do alvo, a ligação específica do AB ao seu alvo é reduzida ou inibida. A ligação específica do AB ao seu alvo pode ser reduzida devido à inibição ou mascaramento da capacidade do AB de especificamente se ligar ao seu alvo pela MM.
[0359]A Kd do AB modificado com uma MM e uma CM para o alvo é pelo menos 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000, 50.000, 100.000, 500.000, 1.000.000, 5.000.000, 10.000.000, 50.000.000 ou maior, ou entre 5 a 10, 10 a 100, 10 a 1.000, 10 a 10.000, 10 a 100.000, 10 a 1.000.000, 10 a 10.000.000, 100 a 1.000, 100 a 10.000, 100 a 100.000, 100 a 1.000.000, 100 a 10.000.000, 1.000 a 10.000, 1.000 a 100.000, 1.000 a 1.000.000, 1000 a 10.000.000, 10.000 a 100.000, 10.000 a 1.000.000, 10.000 a 10.000.000, 100.000 a 1.000.000, ou 100.000 a 10.000.000 vezes maior do que a Kd do AB não modificado com uma MM e uma CM ou do AB precursor para o alvo. Reciprocamente, a afinidade de ligação do AB modificado com uma MM e uma CM para o alvo é pelo menos 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000, 50.000, 100.000, 500.000, 1.000.000, 5.000.000, 10.000.000, 50.000.000 ou maior, ou entre 5 a 10, 10 a 100, 10 a 1.000, 10 a 10.000, 10 a 100.000, 10 a 1.000.000, 10 a 10.000.000, 100 a 1.000, 100 a 10.000, 100 a 100.000, 100 a 1.000.000, 100 a 10.000.000, 1.000 a 10.000, 1.000 a 100.000, 1.000 a 1.000.000, 1000 a 10.000.000, 10.000 a 100.000, 10.000 a 1.000.000, 10.000 a 10.000.000, 100.000 a 1.000.000, ou 100.000 a 10.000.000 vezes mais baixa do que a afinidade de ligação do AB não modificado com uma MM e uma CM ou do AB precursor para o alvo.
[0360]Quando o AB é modificado com uma MM e uma CM e está na presença do alvo mas não na presença de um agente de modificação (por exemplo pelo menos uma protease), a ligação específica do AB ao seu alvo é reduzida ou inibida, quando comparada à ligação específica do AB não modificado com uma MM e uma CM ou do AB precursor ao alvo. Quando comparada à ligação do AB precursor ou à ligação de um AB não modificado com uma MM e uma CM ao seu alvo, a capacidade do AB de se ligar ao alvo quando modificado com uma MM e uma CM pode ser reduzida em pelo menos 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % e ainda 100 % por pelo menos 2, 4, 6, 8, 12, 28, 24, 30, 36, 48, 60, 72, 84, ou 96 horas ou 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, ou 180 dias, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, ou 12 meses ou mais quando medida in vivo ou em um ensaio in vitro.
[0361]Como usado aqui, o termo estado clivado se refere à condição dos anticorpos ativáveis a seguir da modificação da CM em pelo menos uma protease. O termo estado não clivado, como usado aqui, se refere à condição dos anticorpos ativáveis na ausência de clivagem da CM por uma protease. Como debatido acima, o termo “anticorpos ativáveis” é usado aqui para se referir a um anticorpo ativável tanto em seu estado não clivado (nativo), assim como em seu estado clivado. Estará evidente ao técnico comumente habilitado que em algumas formas de realização um anticorpo ativável clivado pode carecer de uma MM devido à clivagem da CM por protease, resultando na liberação pelo menos da MM (por exemplo, onde a MM não é unida aos anticorpos ativáveis por uma ligação covalente (por exemplo, uma ligação de dissulfeto entre resíduos de cisteína).
[0362]Por ativável ou permutável é significado que o anticorpo ativável exibe um primeiro nível de ligação a um alvo quando o anticorpo ativável está em um estado inibido, mascarado ou não clivado (isto é, uma primeira conformação), e um segundo nível de ligação ao alvo no estado não inibido, não mascarado e/ou clivado (isto é, uma segunda conformação), onde o segundo nível de ligação ao alvo é maior do que o primeiro nível de ligação. Em geral, o acesso do alvo ao AB do anticorpo ativável é maior na presença de um agente de clivagem capaz de clivar a CM, isto é, uma protease, do que na ausência de um tal agente de clivagem. Assim, quando o anticorpo ativável está no estado não clivado, o AB é inibido da ligação ao alvo e pode ser mascarado da ligação ao alvo (isto é, a primeira conformação é tal que o AB não pode se ligar ao alvo), e no estado clivado o AB não é inibido ou é não mascarado para ligação ao alvo.
[0363]A CM e AB dos anticorpos ativáveis são selecionados de modo que o AB representa uma porção de ligação para um alvo dado, e a CM representa um substrato para uma protease. Em algumas formas de realização, a protease é co- localizada com o alvo em um sítio de tratamento ou sítio de diagnóstico em um sujeito. Como usado aqui, co-localizado se refere a estar no mesmo sítio ou relativamente próximo. Em algumas formas de realização, uma protease cliva uma CM que produz um anticorpo ativado que se liga a um alvo localizado próximo ao sítio de clivagem. Os anticorpos ativáveis divulgados aqui encontram uso particular onde, por exemplo, uma protease capaz de clivar um sítio na CM, isto é, uma protease, está presente em níveis relativamente mais altos em ou em proximidade imediata ao tecido contendo alvo de um sítio de tratamento ou sítio de diagnóstico do que em tecido de sítio que não de tratamento (por exemplo em tecido saudável). Em algumas formas de realização, uma CM da divulgação também é clivada por uma ou mais outras proteases. Em algumas formas de realização, isto é, uma ou mais outras proteases que são co-localizadas com o alvo e que são responsáveis pela clivagem da CM in vivo.
[0364]Em algumas formas de realização anticorpos ativáveis levam em consideração a toxicidade reduzida e/ou efeitos colaterais adversos que podem de outro modo resultar da ligação do AB no sítio que não de tratamento se o AB não for mascarado ou de outro modo inibido a partir da ligação ao alvo.
[0365]Em geral, um anticorpo ativável pode ser designado selecionando-se um AB de interesse e construindo-se o restante do anticorpo ativável de modo que, quando conformacionalmente limitada, a MM leva em consideração o mascaramento do AB ou redução da ligação do AB ao seu alvo. Critérios de projeto estrutural podem ter que ser levados em conta para levar em consideração esta característica funcional.
[0366]Anticorpos ativáveis que exibem um fenótipo permutável de uma faixa dinâmica desejada para ligação ao alvo em uma conformação inibida versusnão inibida são fornecidos. Faixa dinâmica geralmente se refere a uma razão de (a) um nível detectado máximo de um parâmetro sob um primeiro conjunto de condições para (b) um valor detectado mínimo deste parâmetro sob um segundo conjunto de condições. Por exemplo, no contexto de um anticorpo ativável, a faixa dinâmica se refere à razão de (a) um nível detectado máximo de ligação de proteína alvo a um anticorpo ativável na presença de pelo menos uma protease capaz de clivar a CM dos anticorpos ativáveis para (b) um nível detectado mínimo de ligação de proteína alvo a um anticorpo ativável na ausência da protease. A faixa dinâmica de um anticorpo ativável pode ser calculada como a razão da constante de dissociação de um tratamento de agente de divagem de anticorpo ativável (por exemplo, enzima) para a constante de dissociação do tratamento de agente de divagem de anticorpos ativáveis. Quanto maior a faixa dinâmica de um anticorpo ativável, melhor o fenótipo permutável do anticorpo ativável. Anticorpos ativáveis tendo valores de faixa dinâmica relativamente mais altos (por exemplo, maiores do que 1) exibem fenótipos de permutação mais desejáveis tal que a ligação de proteína alvo pelos anticorpos ativáveis ocorre a um maior grau (por exemplo, predominantemente ocorre) na presença de um agente de divagem (por exemplo, enzima) capaz de clivar a CM dos anticorpos ativáveis do que na ausência de um agente de divagem.
[0367]Anticorpos ativáveis podem ser fornecidos em uma variedade de configurações estruturais. Fórmulas exemplares para anticorpos ativáveis são fornecidas abaixo. É especificamente considerado que a ordem de terminal N a C do AB, MM e CM pode ser invertida dentro de um anticorpo ativável. Também é especificamente considerado que a CM e MM podem sobrepor em sequência de aminoácido, por exemplo, tal que a CM está contida dentro da MM.
[0368]Por exemplo, anticorpos ativáveis podem ser representados pela fórmula seguinte (na ordem de uma região terminal amino (N) à região terminal carboxila (C): (MM)-(CM)-(AB) (AB)-(CM)-(MM) onde MM é uma porção de mascaramento, CM é uma porção clivável, e AB é um anticorpo ou fragmento deste. Deve ser observado que embora MM e CM sejam indicadas como componentes distintos nas fórmulas acima, em todas as formas de realização exemplares (incluindo fórmulas) divulgadas aqui é considerado que as sequências de aminoácido da MM e a CM podem sobrepor, por exemplo, tal que a CM esteja completamente ou parcialmente contida dentro da MM. Além disso, as fórmulas acima levam em consideração sequências de aminoácido adicionais que podem ser posicionadas no terminal N ou terminal C aos elementos de anticorpos ativáveis.
[0369]Em certas formas de realização, a MM não é um parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM contém nenhuma ou substancialmente nenhuma homologia a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, ou 80 % similar a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, ou 80 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 50 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 25 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 20 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB. Em algumas formas de realização, a MM é não mais do que 10 % idêntica a qualquer parceiro de ligação natural do AB.
[0370]Em muitas formas de realização pode ser desejável inserir um ou mais ligadores, por exemplo, ligadores flexíveis, na construção de anticorpo ativável de modo a levar em consideração a flexibilidade em uma ou mais da junção MM-CM, da junção CM-AB, ou ambas. Por exemplo, o AB, MM, e/ou CM podem não conter um número suficiente de resíduos (por exemplo, Gly, Ser, Asp, Asn, especialmente Gly e Ser, particularmente Gly) para fornecer a flexibilidade desejado. Como tal, o fenótipo permutável de tais construções de anticorpo ativável pode se beneficiar da introdução de um ou mais aminoácidos para levar em consideração um ligador flexível. Além disso, como descrito abaixo, onde o anticorpo ativável é fornecido como uma construção conformacionalmente limitada, um ligador flexível pode seroperavelmente inserido para facilitara formação e manutenção de uma estrutura cíclica no anticorpo ativável não clivado.
[0371]Por exemplo, em certas formas de realização um anticorpo ativável compreende uma das fórmulas seguintes (onde a fórmula abaixo representa uma sequência de aminoácido na direção de terminal N a C ou direção de terminal C a N): (MM)-L1-(CM)-(AB) (MM)-(CM)-L2-(AB) (MM)-L1-(CM)-L2-(AB) em que MM, CM, e AB são como definidos acima; em que L1 e L2 são todos independentemente e opcionalmente presentes ou ausentes, são os mesmos ligadores flexíveis ou diferentes que incluem pelo menos 1 aminoácido flexível (por exemplo, Gly). Além disso, as fórmulas acima levam em consideração sequências de aminoácido adicionais que podem ser posicionadas no terminal N ou terminal C aos elementos de anticorpos ativáveis. Exemplos incluem, mas não são limitados a, porções de alvejamento (por exemplo, um ligante para um receptor de uma célula presente em um tecido alvo) e porções de prolongamento da meia-vida do soro (por exemplo, polipeptídeos que se ligam a proteínas séricas, tais como imunoglobulina (por exemplo, IgG) ou albumina sérica (por exemplo, albumina sérica humana (HAS)).
[0372]A CM é especificamente clivada em pelo menos uma protease em uma taxa de cerca de 0,001 a 1500 x 104 M'1S'1 ou pelo menos 0,001, 0,005, 0,01, 0,05, 0,1,0,5, 1,2,5, 5, 7,5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 125, 150, 200, 250, 500, 750, 1000, 1250, ou 1500 x 104 M’1S’1. Em algumas formas de realização, a CM é especificamente clivada em uma taxa de cerca de 100.000 M'1S'1. Em algumas formas de realização, a CM é especificamente clivada em uma taxa de cerca de 1x10E2 a cerca de 1x10E6 M'1S'1 (isto é, de cerca de 1x102 a cerca de 1x106 M'1S'1).
[0373]Para a clivagem específica por uma enzima, o contato entre a enzima e CM é feito. Quando o anticorpo ativável compreendendo um AB ligado a uma MM e uma CM está na presença de alvo e atividade enzimática suficiente, a CM pode ser clivada. Atividade enzimática suficiente pode se referir à capacidade da enzima de fazer contato com a CM e efetuar a clivagem. Pode ser facilmente visionado que uma enzima pode estar na vizinhança da CM mas ser incapaz de clivar por causa de outros fatores celulares ou modificação proteica da enzima.
[0374]Ligadores adequados para o uso em composições descritas aqui são geralmente aqueles que fornecem flexibilidade do AB modificado ou dos anticorpos ativáveis para facilitar a inibição da ligação do AB ao alvo. Tais ligadores são geralmente referidos como ligadores flexíveis. Ligadores adequados podem ser facilmente selecionados e podem ser de qualquer um de comprimentos diferentes adequados, tais como de 1 aminoácido (por exemplo, Gly) a 20 aminoácidos, de 2 aminoácidos a 15 aminoácidos, de 3 aminoácidos a 12 aminoácidos, incluindo 4 aminoácidos a 10 aminoácidos, 5 aminoácidos a 9 aminoácidos, 6 aminoácidos a 8 aminoácidos, ou 7 aminoácidos a 8 aminoácidos, e podem ser de 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ou 20 aminoácidos em comprimento.
[0375]Ligadores flexíveis exemplares incluem polímeros de glicina (G)n, polímeros de glicina-serina (incluindo, por exemplo, (GS)n, (GSGGS)n (SEQ ID NO: 191) e (GGGS)n (SEQ ID NO: 192), onde n é um número inteiro de pelo menos um), polímeros de glicina-alanina, polímeros de alanina-serina, e outros ligadores flexíveis conhecidos na técnica. Polímeros de glicina e glicina-serina são relativamente desestruturados, e portanto podem ser capazes de servir como uma corrente neutra entre os componentes. Glicina acessa significativamente mais espaço fi-psi do que ainda alanina, e é muito menos restrita do que resíduos com cadeias laterais mais longas (ver Scheraga, Rev. Computational Chem. 11173 - 142 (1992)). Ligadores flexíveis exemplares incluem, mas não são limitados a Gly-Gly-Ser-Gly (SEQ ID NO: 193), Gly-Gly-Ser-Gly-Gly (SEQ ID NO: 194), Gly-Ser-Gly-Ser-Gly (SEQ ID NO: 195), Gly-Ser-Gly-Gly-Gly (SEQ ID NO: 196), Gly-Gly-Gly-Ser-Gly (SEQ ID NO: 197), Gly-Ser-Ser-Ser-Gly (SEQ ID NO: 198), e semelhantes. O técnico comumente habilitado reconhecerá que o projeto de um anticorpo ativável pode incluir ligadores que são todos flexíveis ou parcialmente, tal que o ligador pode incluir um ligador flexível assim como uma ou mais porções que conferem menos estrutura flexível para levar em consideração uma estrutura de anticorpos ativáveis desejada.
[0376]A divulgação também fornece composições e métodos que incluem um anticorpo anti-PDL1 ativável que inclui um anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB) que especificamente se liga ao PDL1, onde o AB é ligado a uma porção de mascaramento (MM) que diminui a capacidade do AB de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo anti-PDL1 ativável inclui ainda uma porção clivável (CM) que é um substrato para uma protease. As composições e métodos fornecidos aqui permitem a ligação de um ou mais agentes a um ou mais resíduos de cisteína no AB sem comprometer a atividade (por exemplo, a atividade de mascaramento, ativação ou ligação) do anticorpo anti-PDL1 ativável. Em algumas formas de realização, as composições e métodos fornecidos aqui permitem a ligação de um ou mais agentes a um ou mais resíduos de cisteína no AB sem reduzir ou de outro modo interromper uma ou mais ligações de dissulfeto dentro da MM. As composições e métodos fornecidos aqui produzem um anticorpo anti-PDL1 ativável que é conjugado a um ou mais agentes, por exemplo, qualquer um de uma variedade de agentes terapêuticos, diagnósticos e/ou profiláticos, por exemplo, em algumas formas de realização, sem nenhum do(s) agente(s) sendo conjugado à MM do anticorpo anti-PDL1 ativável. As composições e métodos fornecidos aqui produzem anticorpos anti-PDL1 ativáveis conjugados em que a MM mantém a capacidade de mascarar eficazmente e eficientemente o AB do anticorpo ativável em um estado não clivado. As composições e métodos fornecidos aqui produzem anticorpos anti-PDL1 ativáveis conjugados em que o anticorpo ativável ainda é ativado, isto é, clivado, na presença de uma protease que pode clivar a CM.
[0377]Os anticorpos anti-PDL1 ativáveis têm pelo menos um ponto de conjugação para um agente, mas nos métodos e composições fornecidos aqui menos do que todos os pontos possíveis de conjugação estão disponíveis para a conjugação a um agente. Em algumas formas de realização, o um ou mais pontos de conjugação são átomos de enxofre envolvidos em ligações de dissulfeto. Em algumas formas de realização, o um ou mais pontos de conjugação são átomos de enxofre envolvidos nas ligações de dissulfeto intercadeia. Em algumas formas de realização, o um ou mais pontos de conjugação são átomos de enxofre envolvidos em ligações de sulfeto intercadeia, mas não átomos de enxofre envolvidos em ligações de dissulfeto intracadeia. Em algumas formas de realização, o um ou mais pontos de conjugação são átomos de enxofre de cisteína ou outros resíduos de aminoácido contendo um átomo de enxofre. Tais resíduos podem ocorrer naturalmente na estrutura do anticorpo ou podem ser incorporados no anticorpo por mutagênese sítio-dirigida, conversão química, ou má-incorporação de aminoácidos não naturais.
[0378]Também fornecidos são métodos de preparar um conjugado de um anticorpo anti-PDL1 ativável tendo uma ou mais ligações de dissulfeto intercadeia no AB e uma ou mais ligações de dissulfeto intracadeia na MM, e um fármaco reativo com tióis livres é fornecido. O método geralmente inclui reduzir parcialmente ligações de dissulfeto intercadeia no anticorpo ativável com um agente redutor, tal como, por exemplo, TCEP; e conjugar o fármaco reativo com tióis livres ao anticorpo ativável parcialmente reduzido. Como usado aqui, o termo redução parcial se refere às situações onde um anticorpo anti-PDL1 ativável é contatado com um agente redutor e menos do que todas as ligações de dissulfeto, por exemplo, menos do que todos os sítios possíveis de conjugação são reduzidos. Em algumas formas de realização, menos do que 99 %, 98 %, 97 %, 96 %, 95 %, 90 %, 85 %, 80 %, 75 %, 70 %, 65 %, 60 %, 55 %, 50 %, 45 %, 40 %, 35 %, 30 %, 25 %, 20 %, 15 %, 10 % ou menos do que 5 % de todos os sítios possíveis de conjugação são reduzidos.
[0379]Ainda em outras formas de realização, um método de reduzir e conjugar um agente, por exemplo, um fármaco, a um anticorpo anti-PDL1 ativável resultando em seletividade na disposição do agente é fornecido. O método geralmente inclui reduzir parcialmente o anticorpo anti-PDL1 ativável com um agente redutor tal que quaisquer sítios de conjugação na porção de mascaramento ou outra porção do anticorpo ativável que não AB não são reduzidos, e conjugar o agente a tióis intercadeia no AB. O(s) sítio(s) de conjugação é(são) selecionado(s) de modo a permitir a disposição desejada de um agente para permitir que a conjugação ocorra em um sítio desejado. O agente redutor é, por exemplo, TCEP. As condições de reação de redução tais como, por exemplo, a razão de agente redutor para anticorpo ativável, a duração da incubação, a temperatura durante a incubação, o pH da solução de reação de redução, etc., são determinadas identificando-se as condições que produzem um anticorpo ativável conjugado em que a MM mantém a capacidade de mascarar eficazmente e eficientemente o AB do anticorpo ativável em um estado não clivado. A razão de agente de redução para anticorpo anti-PDL1 ativável variará dependendo do anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, a razão de agente redutor para anticorpo anti-PDL1 ativável estará em uma faixa de cerca de 20:1 a 1:1, de cerca de 10:1 a 1:1, de cerca de 9:1 a 1:1, de cerca de 8:1 a 1:1, de cerca de 7:1 a 1:1, de cerca de 6:1 a 1:1, de cerca de 5:1 a 1:1, de cerca de 4:1 a 1:1, de cerca de 3:1 a 1:1, de cerca de 2:1 a 1:1, de cerca de 20:1 a 1:1,5, de cerca de 10:1 a 1:1,5, de cerca de 9:1 a 1:1,5, de cerca de 8:1 a 1:1,5, de cerca de 7:1 a 1:1,5, de cerca de 6:1 a 1:1,5, de cerca de 5:1 a 1:1,5, de cerca de 4:1 a 1:1,5, de cerca de 3:1 a 1:1,5, de cerca de 2:1 a 1:1,5, de cerca de 1,5:1 a 1:1,5, ou de cerca de 1:1 a 1:1,5. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 5:1 a 1:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 5:1 a 1,5:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 4:1 a 1:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 4:1 a 1,5:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 8:1 a cerca de 1:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 2,5:1 a 1:1.
[0380]Em algumas formas de realização, um método de reduzir ligações de dissulfeto intercadeia no AB de um anticorpo anti-PDL1 ativável e conjugar um agente, por exemplo, um agente contendo tiol tal como um fármaco, aos tióis intercadeia resultantes para localizar seletivamente o(s) agente(s) no AB é fornecido. O método geralmente inclui reduzir parcialmente o AB com um agente redutor para formar pelo menos dois tióis intercadeia sem formar todos os tióis intercadeia possíveis no anticorpo ativável; e conjugar o agente aos tióis intercadeia do AB parcialmente reduzido. Por exemplo, o AB do anticorpo ativável é parcialmente reduzido por cerca de 1 hora em torno de 37 °C em uma razão desejada de agente redutoranticorpo ativável. Em algumas formas de realização, a razão de agente redutor para anticorpo ativável estará em uma faixa de cerca de 20:1 a 1:1, de cerca de 10:1 a 1:1, de cerca de 9:1 a 1:1, de cerca de 8:1 a 1:1, de cerca de 7:1 a 1:1, de cerca de 6:1 a 1:1, de cerca de 5:1 a 1:1, de cerca de 4:1 a 1:1, de cerca de 3:1 a 1:1, de cerca de 2:1 a 1:1, de cerca de 20:1 a 1:1,5, de cerca de 10:1 a 1:1,5, de cerca de 9:1 a 1:1,5, de cerca de 8:1 a 1:1,5, de cerca de7:1 a 1:1,5, de cerca de 6:1 a 1:1,5, de cerca de5:1 a 1:1,5, de cerca de 4:1 a 1:1,5, de cerca de 3:1 a 1:1,5, de cerca de 2:1 a 1:1,5, de cerca de 1,5:1 a 1:1,5, ou de cerca de 1:1 a 1:1,5. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 5:1 a 1:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 5:1 a 1,5:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 4:1 a 1:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 4:1 a 1,5:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 8:1 a cerca de 1:1. Em algumas formas de realização, a razão está em uma faixa de cerca de 2,5:1 a 1:1.
[0381]O reagente contendo tiol pode ser, por exemplo, cisteína ou N-acetil cisteína. O agente redutor pode ser, por exemplo, TCEP. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável reduzido pode ser purificado antes da conjugação, usando por exemplo, cromatografia em coluna, diálise, ou diafiltração. Alternativamente, o anticorpo reduzido não é purificado depois da redução parcial e antes da conjugação.
[0382]A invenção também fornece anticorpos anti-PDL1 ativáveis parcialmente reduzidos em que pelo menos uma ligação de dissulfeto intercadeia no anticorpo ativável foi reduzida com um agente redutor sem interromper quaisquer ligações de dissulfeto intracadeia no anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável inclui um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1, uma porção de mascaramento (MM) que inibe a ligação do AB do anticorpo ativável em um estado não clivado ao alvo de PDL1, e uma porção clivável (CM) ligada ao AB, em que a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para uma protease. Em algumas formas de realização a MM é ligada ao AB por intermédio da CM. Em algumas formas de realização, uma ou mais ligações de dissulfeto intracadeia do anticorpo ativável não são interrompidas pelo agente redutor. Em algumas formas de realização, uma ou mais ligações de dissulfeto intracadeia da MM dentro de o anticorpo ativável não é interrompida pelo agente redutor. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB- CM-MM. Em algumas formas de realização, o agente redutor é TCEP.
[0383]A divulgação também fornece anticorpos ativáveis parcialmente reduzidos em que pelo menos uma ligação de dissulfeto intercadeia no anticorpo ativável foi reduzida com um agente redutor sem interromper quaisquer ligações de dissulfeto intracadeia no anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável inclui um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao alvo, por exemplo, PDL1, uma porção de mascaramento (MM) que inibe a ligação do AB do anticorpo ativável em um estado não clivado ao alvo, e uma porção clivável (CM) ligada ao AB, em que a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para pelo menos uma protease. Em algumas formas de realização, a MM é ligada ao AB por intermédio da CM. Em algumas formas de realização, uma ou mais ligações de dissulfeto intracadeia do anticorpo ativável não são interrompidas pelo agente redutor. Em algumas formas de realização, uma ou mais ligações de dissulfeto intracadeia da MM dentro de o anticorpo ativável não são interrompidas pelo agente redutor. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB- CM-MM. Em algumas formas de realização, o agente redutor é TCEP.
[0384]Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis descritos aqui também incluem um agente conjugado ao anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, o agente conjugado é um agente terapêutico, tal como um agente anti- inflamatório e/ou um agente antineoplásico. Em tais formas de realização, o agente é conjugado a uma porção carboidrato do anticorpo ativável, por exemplo, em algumas formas de realização, onde a porção carboidrato é localizada fora da região de ligação ao antígeno do anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno no anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado a um grupo sulfidrila do anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno no anticorpo ativável.
[0385]Em algumas formas de realização, o agente é um agente citotóxico tal como uma toxina (por exemplo, uma toxina enzimaticamente ativa de origem bacteriana, fúngica, vegetal ou animal, ou fragmentos desta), ou um isótopo radioativo (isto é, um radioconjugado).
[0386]Em algumas formas de realização, o agente é uma porção detectável tal como, por exemplo, um rótulo ou outro marcador. Por exemplo, o agente é ou inclui um aminoácido radiorrotulado, uma ou mais porções biotinila que podem ser detectadas poravidina marcada (por exemplo, estreptavidina contendo um marcador fluorescente ou atividade enzimática que pode ser detectada por métodos ópticos ou calorimétricos), um ou mais radioisótopos ou radionuclídeos, um ou mais rótulos fluorescentes, um ou mais rótulos enzimáticos, e/ou um ou mais agentes quimioluminescentes. Em algumas formas de realização, porções detectáveis são ligadas por moléculas espaçadoras.
[0387]A divulgação também pertence a imunoconjugados compreendendo um anticorpo conjugado a um agente citotóxico tal como uma toxina (por exemplo, uma toxina enzimaticamente ativa de origem bacteriana, fúngica, vegetal ou animal, ou fragmentos desta), ou um isótopo radioativo (isto é, um radioconjugado). Agentes citotóxicos adequados incluem, por exemplo, dolastatinas e derivados destas (por exemplo, auristatina E, AFP, MMAF, MMAE, MMAD, DMAF, DMAE). Por exemplo, o agente é monometil auristatina E (MMAE) ou monometil auristatina D (MMAD). Em algumas formas de realização, o agente é um agente selecionado do grupo listado na Tabela 11. Em algumas formas de realização, o agente é uma dolastatina. Em algumas formas de realização, o agente é uma auristatina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é auristatina E ou um derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina E (MMAE). Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina D (MMAD). Em algumas formas de realização, o agente é um maitansinoide ou derivado de maitansinoide. Em algumas formas de realização, o agente é DM1 ou DM4. Em algumas formas de realização, o agente é um duocarmicina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é um caliqueamicina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é um pirrolobenzodiazepina. Em algumas formas de realização, o agente é um dímero de pirrolobenzodiazepina.
[0388]Em algumas formas de realização, o agente é ligado ao AB usando um ligador de maleimida caproil-valina-citrulina ou um ligador de maleimida PEG-valina- citruliπa. Em algumas formas de realização, o agente é ligado ao AB usando um ligador de maleimida caproil-valina-citrulina. Em algumas formas de realização, o agente é ligado ao AB usando um ligador de maleimida PEG-valina-citrulina. Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina D (MMAD) ligado ao AB usando um ligador de maleimida PEG-valina-citrulina-para- aminobenziloxicarbonila, e esta construção de carga útil de ligador é referida aqui como “vc-MMAD.” Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina E (MMAE) ligada ao AB usando um ligador de maleimida PEG-valina-citrulina-para- aminobenziloxicarbonila, e esta construção de carga útil de ligador é referida aqui como “vc-MMAE.” As estruturas de vc-MMAD e vc-MMAE são mostradas abaixo: vc-MMAD: vc-MMAE:
[0389]A divulgação também fornece anticorpos ativáveis conjugados que incluem um anticorpo ativável ligado à carga útil de monometil auristatina D (MMAD), em que o anticorpo ativável inclui um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno deste (AB) que especificamente se liga a um alvo, uma porção de mascaramento (MM) que inibe a ligação do AB do anticorpo ativável em um estado não clivado ao alvo, e porção clivável (CM) ligada ao AB, e a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para pelo menos uma MMP protease.
[0390]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável conjugado a MMAD pode ser conjugado usando qualquer um de vários métodos para ligar agentes aos ABs: (a) ligação às porções carboidrato do AB, ou (b) ligação aos grupos sulfidrila do AB, ou (c) ligação aos grupos amino do AB, ou (d) ligação aos grupos carboxilato do AB.
[0391]Em algumas formas de realização, a carga útil de MMAD é conjugada ao AB por intermédio de um ligador. Em algumas formas de realização, a carga útil de MMAD é conjugada a uma cisteína no AB por intermédio de um ligador. Em algumas formas de realização, a carga útil de MMAD é conjugada a uma lisina no AB por intermédio de um ligador. Em algumas formas de realização, a carga útil de MMAD é conjugada a um outro resíduo do AB por intermédio de um ligador, tais como aqueles resíduos divulgados aqui. Em algumas formas de realização, o ligador é um ligador contendo tiol. Em algumas formas de realização, o ligador é um ligador clivável. Em algumas formas de realização, o ligador é um ligador não clivável. Em algumas formas de realização, o ligador é selecionado do grupo consistindo nos ligadores mostrados nas Tabelas 13 e 14. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável e a carga útil de MMAD são ligados por intermédio de um ligador de maleimida caproil-valina- citrulina. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável e a carga útil de MMAD são ligados por intermédio de um ligador de maleimida PEG-valina-citrulina. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável e a carga útil de MMAD são ligados por intermédio de um ligador de maleimida caproil-valina-citrulina-para- aminobenziloxicarbonila. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável e a carga útil de MMAD são ligados por intermédio de um ligador de maleimida PEG- valina-citrulina-para-aminobenziloxicarbonila. Em algumas formas de realização, a carga útil de MMAD é conjugada ao AB usando a tecnologia de redução parcial e conjugação divulgada aqui.
[0392]Em algumas formas de realização, o componente de polietilenoglicol (PEG) de um ligador da presente divulgação é formado de 2 monômeros de etileno glicol, 3 monômeros de etileno glicol, 4 monômeros de etileno glicol, 5 monômeros de etileno glicol, 6 monômeros de etileno glicol, 7 monômeros de etileno glicol 8 monômeros de etileno glicol, 9 monômeros de etileno glicol, ou pelo menos 10 monômeros de etileno glicol. Em algumas formas de realização da presente divulgação, o componente de PEG é um polímero ramificado. Em algumas formas de realização da presente divulgação, o componente de PEG é um polímero não ramificado. Em algumas formas de realização, o componente polimérico de PEG é funcionalizado com um grupo amino ou derivado deste, um grupo carboxila ou derivado deste, ou tanto um grupo amino ou derivado deste quanto um grupo carboxila ou derivado deste.
[0393]Em algumas formas de realização, o componente de PEG de um ligador da presente divulgação é um grupo amino-tetra-etileno glicol-carboxila ou derivado deste. Em algumas formas de realização, o componente de PEG de um ligador da presente divulgação é um grupo amino-tri-etileno glicol-carboxila ou derivado deste. Em algumas formas de realização, o componente de PEG de um ligador da presente divulgação é um grupo amino-di-etileno glicol-carboxila ou derivado deste. Em algumas formas de realização, um derivado de amino é a formação de uma ligação amida entre o grupo amino e um grupo carboxila aos quais ele é conjugado. Em algumas formas de realização, um derivado de carboxila é a formação de uma ligação amida entre o grupo carboxila e um grupo amino aos quais ele é conjugado. Em algumas formas de realização, um derivado de carboxila é a formação de uma ligação de éster entre o grupo carboxila e um grupo hidroxila aos quais ele é conjugado.
[0394]Toxinas enzimaticamente ativas e fragmentos destas que podem ser usados incluem cadeia A de difteria, fragmentos alvos que não de ligação de toxina de difteria, cadeia A de exotoxina (de Pseudomonas aeruginosa),cadeia A de ricina, cadeia A de abrina, cadeia A de modecina, alfa-sarcina, proteínas de Aleurites fordii, proteínas de diantina, proteínas de Phytolaca americana (PAPI, PAPII, e PAP-S), inibidor de Momordica charantia, curcina, crotina, inibidor de Sapaonaria officinalis, gelonina, mitogelina, restrictocina, fenomicina, enomicina, e os tricotecenos. Uma variedade de radionuclídeos está disponível pra a produção de anticorpos radioconjugados. Os exemplos incluem 212Bi, 131l, 131 In, 90Y, e 186Re.
[0395]Conjugados do anticorpo e agente citotóxico são fabricados usando uma variedade de agentes de ligação à proteína bifuncional tais como propionato de N-succinimidil-3-(2-piridilditiol) (SPDP), iminotiolano (IT), derivados bifuncionais de imidoésteres (tais como adipimidato de dimetila HCL), ésteres ativos (tais como suberato de dissuccinimidila), aldeídos (tais como glutaraldeído), compostos de bis- azido (tais como bis (p-azidobenzoil) hexanodiamina), derivados de bis-diazônio (tais como bis-(p-diazôniobenzoil)-etilenodiamino), diisocianatos (tais como 2,6- diisocianato de tolieno), e compostos de flúor bis-ativo (tais como 1,5-difluoro-2,4- dinitrobenzeno). Por exemplo, uma imunotoxina de ricina pode ser preparada como descrito em Vitetta et al., Science 238: 1098 (1987). Ácido 1-isotiocianatobenzil-3- metildietileno triaminapentaacético rotulado com Carbono 14 (MX-DTPA) é um agente quelante exemplar para a conjugação de radionucleotídeo ao anticorpo. (Ver WO94/11026).
[0396]A Tabela 11 lista alguns dos agentes farmacêuticos exemplares que podem ser utilizados na divulgação aqui descrita mas em nenhum modo é significada como sendo uma lista exaustiva. Tabela 11: Agentes farmacêuticos exemplares para conjugação
[0397]Aqueles de habilidade comum na técnica reconhecerão que uma variedade grande de porções possíveis pode ser ligada aos anticorpos resultantes da divulgação. (Ver, por exemplo, “Conjugate Vaccines”, Contributions to Microbiology and Immunology, J. M. Cruse e R. E. Lewis, Jr(eds), Carger Press, New York, (1989), os conteúdos inteiros do qual são incorporados aqui por referência).
[0398]A ligação pode ser realizada por qualquer reação química que ligará as duas moléculas contanto que o anticorpo e a outra porção mantenham suas atividades respectivas. Esta ligação pode incluir muitos mecanismos químicos, por exemplo ligação covalente, ligação de afinidade, intercalação, ligação coordenada e complexação. Em algumas formas de realização, a ligação é, entretanto, ligação covalente. A ligação covalente pode ser obtida por condensação direta de cadeias laterais existentes ou pela incorporação de moléculas de ligação em ponte externas. Muitos agentes de ligação bivalentes ou polivalentes são úteis em moléculas de proteína de ligação, tais como os anticorpos da presente divulgação, a outras moléculas. Por exemplo, agentes de ligação representativos podem incluir compostos orgânicos tais como tioésteres, carbodiimidas, ésteres de succinimida, diisocianatos, glutaraldeído, diazobenzenos e hexametileno diaminas. Esta listagem não é intencionada a ser exaustiva das várias classes de agentes de ligação conhecidos na técnica mas, preferivelmente, é exemplar dos agentes de ligação mais comuns. (Ver Killen e Lindstrom, Jour. Immun. 133:1335 - 2549 (1984); Jansen etal.,Immunological Reviews 62:185-216 (1982); e Vitetta et al., Science 238:1098 (1987).
[0399]Em algumas formas de realização, além das composições e métodos fornecidos aqui, o anticorpo ativável conjugado também pode ser modificado para conjugação específica de sítio através de sequências de aminoácido modificadas inseridas ou de outro modo incluídas na sequência de anticorpo ativável. Estas sequências de aminoácido modificadas são designadas para levar em consideração a disposição e/ou dosagem controladas do agente conjugado dentro de um anticorpo ativável conjugado. Por exemplo, o anticorpo ativável pode ser engendrado para incluir substituições de cisteína nas posições nas cadeias leves e pesadas que fornecem grupos tiol reativos e não impactam negativamente a dobragem e montagem de proteína, nem alterar a ligação ao antígeno. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável pode ser engendrado para incluir ou de outro modo introduzir um ou mais resíduos de aminoácido não naturais dentro do anticorpo ativável para fornecer sítios adequados para conjugação. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável pode ser engendrado para incluir ou de outro modo introduzir sequências de peptídeo enzimaticamente ativáveis dentro da sequência de anticorpo ativável.
[0400]Ligadores adequados são descritos na literatura. (Ver, por exemplo, Ramakrishnan, S. etal.,Cancer Res. 44:201 - 208 (1984) que descreve o uso de MBS (éster de M-maleimidobenzoil-N-hidroxissuccinimida). Ver também, Patente dos EUA N2 5.030.719, que descreve o uso de derivado de acetil hidrazida halogenado ligado a um anticorpo por via de um ligador de oligopeptídeo. Em algumas formas de realização, ligadores adequados incluem: (i) EDC cloridrato de (1 -etil-3-(3- dimetilamino-propil) carbodiimida; (ii) SMPT (4-succinimidiloxicarbonil-alfa-metil-alfa- (2-pridil-ditio)-tolueno (Pierce Chem. Co., Cat. (21558G); (iii) SPDP (succinimidil-6 [3- (2-piridilditio) propionamido]hexanoato (Pierce Chem. Co., Cat#21651G); (iv) Sulfo- LC-SPDP (sulfosuccinimidil 6 [3-(2-piridilditio)-propianamida] hexanoato (Pierce Chem. Co. Cat. #2165-G); e (v) sulfo-NHS (N-hidroxissulfo-succinimida: Pierce Chem. Co., Cat. #24510) conjugado a EDC. Ligadores adicionais incluem, mas não são limitados a, SMCC, sulfo-SMCC, SPDB, ou sulfo-SPDB.
[0401]Os ligadores descritos acima contêm componentes que têm atributos diferentes, levando assim a conjugados com propriedades físico-químicas diferentes. Por exemplo, ésteres de sulfo-NHS de carboxilatos de alquila são mais estáveis do que ésteres de sulfo-NHS de carboxilatos aromáticos. Ligadores contendo éster de NHS são menos solúveis do que ésteres de sulfo-NHS. Além disso, o ligador SMPT contém uma ligação de dissulfeto estericamente impedida, e pode formar conjugados com estabilidade aumentada. Ligações de dissulfeto, são em geral, menos estáveis do que outras ligações porque a ligação de dissulfeto é clivada in vitro,resultando em menos conjugado disponível. Sulfo-NHS, em particular, pode realçara estabilidade de ligações de carbodimida. Ligações de carbodimida (tais como EDC) quando usadas em combinação com sulfo-NHS, formam ésteres que são mais resistentes à hidrólise do que a reação de ligação de carbodimida sozinha.
[0402]Em algumas formas de realização, os ligadores são cliváveis. Em algumas formas de realização, os ligadores são não cliváveis. Em algumas formas de realização, dois ou mais ligadores estão presentes. Os dois ou mais ligadores são todos os mesmos, isto é, cliváveis ou não cliváveis, ou os dois ou mais ligadores são diferentes, isto é, pelo menos um clivável e pelo menos um não clivável.
[0403]A presente divulgação utiliza vários métodos para ligar agentes aos ABs: (a) ligação às porções carboidrato do AB, ou (b) ligação aos grupos sulfidrila do AB, ou (c) ligação aos grupos amino do AB, ou (d) ligação aos grupos carboxilato do AB. De acordo com a divulgação, ABs pode ser covalentemente ligados a um agente através de um ligador intermediário tendo pelo menos dois grupos reativos, um para reagir com AB e um para reagir com o agente. O ligador, que pode incluir qualquer composto orgânico compatível, pode ser escolhido tal que a reação com AB (ou agente) não afeta adversamente a reatividade e seletividade de AB. Além disso, a ligação do ligador ao agente poderia não destruir a atividade do agente. Ligadores adequados para reação com anticorpos oxidados ou fragmentos de anticorpo oxidado incluem aqueles contendo uma amina selecionada do grupo consistindo em grupos amina primária, amina secundária, hidrazina, hidrazida, hidroxilamina, fenilhidrazina, semicarbazida e tiossemicarbazida. Tais grupos funcionais reativos podem existir como parte da estrutura do ligador, ou podem ser introduzidos por modificação química adequada de ligadores não contendo tais grupos.
[0404]De acordo com a presente divulgação, ligadores adequados para ligação a ABs reduzidos incluem aqueles tendo certos grupos reativos capazes de reação com um grupo sulfidrila de um anticorpo reduzido ou fragmento. Tais grupos reativos incluem, mas não são limitados a: grupos haloalquila reativos (incluindo, por exemplo, grupos haloacetila), grupos p-mercuribenzoato e grupos capazes de reações de adição do tipo Michael (incluindo, por exemplo, maleimidas e grupos do tipo descrito por Mitra e Lawton, 1979, J. Amer. Chem. Soc. 101: 3097 - 3110).
[0405]De acordo com a presente divulgação, ligadores adequados para ligação nem a Abs oxidados nem reduzidos incluem aqueles tendo certos grupos funcionais capazes de reação com os grupos amino primário presentes em resíduos de lisina não modificados no Ab. Tais grupos reativos incluem, mas não são limitados a, ésteres carboxílicos ou carbônicos de NHS, ésteres carboxílicos ou carbônicos de sulfo-NHS, ésteres carboxílicos ou carbônicos de 4-nitrofenila, ésteres carboxílicos ou carbônicos de pentafluorofenila, acil imidazóis, isocianatos, e isotiocianatos.
[0406]De acordo com a presente divulgação, ligadores adequados para ligação nem a Abs oxidados nem reduzidos incluem aqueles tendo certos grupos funcionais capazes de reação com os grupos ácido carboxílico presentes em resíduos de aspartato ou glutamato no Ab, que foram ativados com reagentes adequados. Reagentes de ativação adequados incluem EDC, com ou sem NHS ou sulfo-NHS adicionados, e outros agentes desidratantes utilizados para a formação de carboxamida. Nestes exemplos, os grupos funcionais presentes nos ligadores adequados incluiriam aminas primárias e secundárias, hidrazinas, hidroxilaminas, e hidrazidas.
[0407]0 agente pode ser ligado ao ligador antes ou depois que o ligador é ligado ao AB. Em certas aplicações pode ser desejável primeiro produzir um ligador intermediário de AB em que o ligador é livre de um agente associado. Dependendo da aplicação particular, um agente específico depois pode ser covalentemente ligado ao ligador. Em algumas formas de realização, o AB é primeiro ligado à MM, CM e ligadores associados e depois ligado ao ligador para propósitos de conjugação.
[0408]ügadores ramificados'. Em formas de realização específicas, ligadores ramificados que têm sítios múltiplos para a ligação de agentes são utilizados. Para ligadores de sítios múltiplos, uma única ligação covalente a um AB resultaria em um ligador intermediário de AB capaz de ligação um agente em vários sítios. Os sítios podem ser grupos aldeído ou sulfidrila ou qualquer sítio químico ao qual os agentes podem ser ligados.
[0409]Em algumas formas de realização, atividade específica mais alta (ou razão mais alta de agentes para AB) pode ser obtida por ligação de um ligador de sítio único em uma pluralidade de sítios no AB. Esta pluralidade de sítios pode ser introduzida no AB por qualquer um dos dois métodos. Primeiro, um pode gerar grupos aldeído e/ou grupos sulfidrila múltiplos no mesmo AB. Segundo, um pode ligar a um aldeído ou sulfidrila do AB um “ligador ramificado” tendo sítios funcionais múltiplos para ligação subsequente aos ligadores. Os sítios funcionais do ligador ramificado ou ligador de sítios múltiplos podem ser grupos aldeído ou sulfidrila, ou podem ser qualquer sítio químico ao qual ligadores podem ser ligados. Atividades específicas ainda mais altas podem ser obtidas combinando-se estes dois métodos, isto é, ligando ligadores de sítios múltiplos em vários sítios no AB.
[0410]Ligadores cliváveis:Ligadores de peptídeo que são suscetíveis à clivagem por enzimas do sistema de complemento, tais como mas não limitados a ativador de u-plasminogênio, ativador de plasminogênio tecidual, tripsina, plasmina, ou um outra enzima tendo atividade proteolítica podem ser usados em uma forma de realização da presente divulgação. De acordo com um método da presente divulgação, um agente é ligado por intermédio de um ligador suscetível à clivagem por complemento. O anticorpo é selecionado de uma classe que pode ativar o complemento. O conjugado de anticorpo-agente, assim, ativa a cascata de complemento e libera o agente no sítio alvo. De acordo com um outro método da presente divulgação, um agente é ligado por intermédio de um ligador suscetível à clivagem por enzimas tendo uma atividade proteolítica tal como um ativador de u- plasminogênio, um ativador de plasminogênio tecidual, plasmina, ou tripsina. Estes ligadores cliváveis são úteis em anticorpos ativáveis conjugados que incluem uma toxina extracelular, por exemplo, por via de exemplo não limitante, qualquer uma das toxinas extracelulares mostradas na Tabela 11.
[0411]Exemplos não limitantes de sequências de ligador clivável são fornecidos na Tabela 13.Tabela 13: Sequências de ligador exemplares para conjugação
[0412]Além disso, agentes podem ser ligados por intermédio de ligações de dissulfeto (por exemplo, as ligações de dissulfeto em uma molécula de cisteína) ao AB. Visto que muitos tumores naturalmente liberam níveis altos de glutationa (um agente redutor) isto pode reduziras ligações de dissulfeto com liberação subsequente do agente no sítio de liberação. Em algumas formas de realização, o agente redutor que modificaria uma CM também modificaria o ligador do anticorpo ativável conjugado.
[0413]Espaçadores e Elementos Cliváveis'.Em algumas formas de realização, pode ser necessário construir o ligador em um tal modo como para otimizar o espaçamento entre o agente e o AB do anticorpo ativável. Isto pode ser realizado pelo uso de um ligador da estrutura geral: W-(CH2)n-Q em que W é -NH-CH2- ou -CH2-; Q é um aminoácido, peptídeo; e n é um número inteiro de 0 a 20.
[0414]Em algumas formas de realização, 0 ligador pode compreender um elemento espaçador e um elemento clivável. O elemento espaçador serve para posicionar 0 elemento clivável longe do núcleo do AB tal que 0 elemento clivável é mais acessível à enzima responsável pela clivagem. Alguns dos ligadores ramificados descritos acima podem servir como elementos espaçadores.
[0415]Por todo este debate, deve ser entendido que a ligação do ligador ao agente (ou do elemento espaçador ao elemento clivável, ou elemento clivável ao agente) não precisa ser modo particular de ligação ou reação. Qualquer reação fornecendo um produto de estabilidade e compatibilidade biológica adequadas é aceitável.
[0416]Complemento Sérico e Seleção de Ligadores’. De acordo com um método da presente divulgação, quando a liberação de um agente é desejada, um AB que é um anticorpo de uma classe que pode ativar 0 complemento é usado. O conjugado resultante mantém tanto a capacidade de se ligar ao antígeno quanto de ativara cascata de complemento. Assim, de acordo com esta forma de realização da presente divulgação, um agente é unido a uma extremidade do ligador clivável ou elemento clivável e a outra extremidade do grupo ligador é ligada a um sítio específico no AB. Por exemplo, se 0 agente tem um grupo hidróxi ou um grupo amino, ele pode ser ligado ao término carbóxi de um peptídeo, aminoácido ou outro ligador adequadamente escolhido por intermédio de uma ligação de éster ou amida, respectivamente. Por exemplo, tais agentes podem ser ligados ao peptídeo ligador por intermédio de uma reação de carbodimida. Se o agente contém grupos funcionais que interferiam com a ligação ao ligador, estes grupos funcionais de interferência podem ser bloqueados antes da ligação e desbloqueados uma vez que o conjugado ou intermediário de produto é feito. O término oposto ou amino do ligador depois é usado diretamente ou depois de modificação adicional para a ligação a um AB que é capaz de ativação de complemento.
[0417]Ligadores (ou elementos espaçadores de ligadores) podem ser de qualquer comprimento desejado, uma extremidade do qual pode ser covalentemente ligada a sítios específicos no AB do anticorpo ativável. A outra extremidade do elemento ligador ou espaçador pode ser ligada a um ligador de aminoácido ou peptídeo.
[0418]Assim quando estes conjugados se ligam ao antígeno na presença de complemento a ligação de amida ou éster que liga o agente ao ligador será clivada, resultando na liberação do agente em sua forma ativa. Estes conjugados, quando administrados a um sujeito, realizarão entrega e liberação do agente no sítio alvo, e são particularmente eficazes para a liberação in vivo de agentes farmacêuticos, antibióticos, antimetabólitos, agentes antiproliferatives e semelhantes como apresentado em, mas não limitados àqueles na Tabela 11.
[0419]Ligadores para Release sem Ativação de Complemento: Ainda em uma outra aplicação de entrega alvejada, a liberação do agente sem ativação de complemento é desejada visto que a ativação da cascata de complemento basicamente lisará a célula alvo. Consequentemente, este método é útil quando entrega e liberação do agente deve ser realizada sem exterminar a célula alvo. Tal é o objetivo quando a liberação de mediadores celulares tais como hormônios, enzimas, corticosteroides, neurotransmissores, genes ou enzimas a células alvos é desejada. Estes conjugados podem ser preparados ligando-se o agente a um AB que não é capaz de ativação de complemento por intermédio de um ligador que é suavemente suscetível à clivagem por proteases séricas. Quando este conjugado é administrado a um indivíduo, complexos de antígeno-anticorpo se formarão prontamente ao passo que a clivagem do agente ocorrerá lentamente, reduzindo assim na liberação do composto no sítio alvo.
[0420]Ligadores Cruzados Bioquímicos’. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável pode ser conjugado a um ou mais agentes terapêuticos usando certos ligadores cruzados bioquímicos. Reagentes de ligação cruzada formam pontes moleculares que interligam grupos funcionais de duas moléculas diferentes. Para ligar duas proteínas diferentes em uma maneira escalonada, ligadores cruzados hetero- bifuncionais podem ser usados que eliminam a formação de homopolímero indesejada.
[0421]Ligadores de peptidila cliváveis por proteases lisossômicas também são úteis, por exemplo, Val-Cit, Val-Ala ou outros dipeptídeos. Além disso, ligadores lábeis em ácido cliváveis no ambiente de pH baixo do lisossomo podem ser usados, por exemplo: éter bis-sialílico. Outros ligadores adequados incluem substratos lábeis em catepsina, particularmente aqueles que mostram função ideal em um pH ácido.
[0422]Ligadores cruzados hetero-bifuncionais exemplares são referenciados na Tabela 14. Tabela 14: Ligadores Cruzados Hetero-Bifuncionais Exemplares
[0423]Ligadores não Cliváveis ou Ligação Direta: Em algumas formas de realização da divulgação, o conjugado pode ser designado de modo que o agente é entregue ao alvo mas não liberado. Isto pode ser realizado ligando-se um agente a um AB diretamente ou por intermédio de um ligador não clivável.
[0424]Estes ligadores não cliváveis podem incluir aminoácidos, peptídeos, D- aminoácidos ou outros compostos orgânicos que podem ser modificados para incluir grupos funcionais que podem subsequentemente ser utilizados na ligação aos ABs pelos métodos descritos aqui. Uma fórmula geral para um tal ligador orgânico pode ser W-(CH2)n-Q em que W é -NH-CH2- ou -CH2-; Q é um aminoácido, peptídeo; e n é um número inteiro de 0 a 20.
[0425]Conjugados não Cliváveis: Em algumas formas de realização, um composto pode ser ligado aos ABs que não ativam 0 complemento. Quando do uso de ABs que são incapazes de ativação de complemento, esta ligação pode ser realizada usando ligadores que são suscetíveis à clivagem por complemento ativado ou usando ligadores que não são suscetíveis à clivagem por complemento ativado.
[0426]Os anticorpos divulgados aqui também podem ser formulados como imunolipossomos. Lipossomos contendo 0 anticorpo são preparados por métodos conhecidos na técnica, tal como descrito em Epstein etal.,Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 82: 3688 (1985); Hwang et al.,Proc. Natl Acad. Sei. USA, 77: 4030 (1980); e Pat. dos EUA 4.485.045 e 4.544.545. Lipossomos com tempo de circulação realçado são divulgados na Patente dos EUA 5.013.556.
[0427]Lipossomos particularmente úteis podem ser gerados pelo método de evaporação de fase reversa com uma composição de lipídeo compreendendo fosfatidileolina, colesterol, e fosfatidiletanolamina derivada de PEG (PEG-PE). Lipossomos são extrusados através de filtros de tamanho de poro definido para produzir lipossomos com o diâmetro desejado. Fragmentos Fab’ do anticorpo da presente divulgação podem ser conjugados aos lipossomos como descrito em Martin et al.,J. Biol. Chem., 257: 286 - 288 (1982) por intermédio de uma reação de permuta de dissulfeto.
[0428]A menos que de outro modo definido, termos científicos e técnicos usados em relação à presente divulgação devem ter os significados que são comumente entendidos por aqueles de habilidade comum na técnica. O termo “uma” entidade se refere a uma ou mais desta entidade. Por exemplo, um composto se refere a um ou mais compostos. Como tal, os termos “um”, “um ou mais” e “pelo menos um” podem ser usados permutavelmente. Além disso, a menos que de outro modo necessário pelo contexto, termos singulares devem incluir pluralidades e termos no plural devem incluir o singular. Geralmente, nomenclaturas utilizadas em relação a, e técnicas de, cultura de célula e tecido, biologia molecular, e química de proteína e oligo- ou polinucleotídeo e hibridização descritas aqui são aquelas bem conhecidas e comumente usadas na técnica. Técnicas padrão são usadas para DNA recombinante, síntese de oligonucleotídeo, e cultura de tecido e transformação (por exemplo, eletroporação, lipofecção). Reações enzimáticas e técnicas de purificação são realizadas de acordo com especificações do fabricante ou como comumente realizado na técnica ou como descrito aqui. As técnicas e procedimentos precedentes são geralmente realizados de acordo com métodos convencionais bem conhecidos na técnica e como descrito em várias referências gerais e mais específicas que são citadas e debatidas por todo o presente relatório descritivo. Ver por exemplo, Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2a ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)). As nomenclaturas utilizadas em relação a, e os procedimentos e técnicas laboratoriais de, química analítica, química orgânica sintética, e química medicinal e farmacêutica descritos aqui são aqueles bem conhecidos e comumente usados na técnica. Técnicas padrão são usadas para sínteses químicas, análises químicas, preparação farmacêutica, formulação, e liberação, e tratamento de pacientes.
[0429]Como utilizado de acordo com a presente divulgação, os termos seguintes, a menos que de outro modo indicado, devem ser entendidos como tendo os significados seguintes:
[0430]Como usado aqui, o termo “anticorpo” se refere a moléculas de imunoglobulina e porções imunologicamente ativas de moléculas de imunoglobulina (lg), isto é, moléculas que contêm um sítio de ligação a antígeno que especificamente se liga a (imunorreage com) um antígeno. Por “especificamente se liga a” ou “imunorreage com” ou “imunoespecificamente se liga a” é significado que o anticorpo reage com um ou mais determinantes antigênicos do antígeno desejado e não reage com outros polipeptídeos ou se liga em afinidade muito mais baixa (Kd > 10 a 6). Anticorpos incluem, mas não são limitados a, anticorpo policlonal, monoclonal, quimérico, de domínio, fragmentos de cadeia única, Fab, e F(ab’)2, scFvs, e uma biblioteca de expressão de Fab.
[0431]A unidade estrutural de anticorpo básica é conhecida como compreendendo um tetrâmero. Cada tetrâmero é composto de dois pares idênticos de cadeias de polipeptídeo, cada par tendo uma cadeia “leve” (cerca de 25 kDa) e uma cadeia “pesada” (cerca de 50 a 70 kDa). A porção amino-terminal de cada cadeia inclui uma região variável de cerca de 100 a 110 ou mais aminoácidos principalmente responsáveis pelo reconhecimento de antígeno. A porção carbóxi-terminal de cada cadeia define uma região constante principalmente responsável pela função efetora. Em geral, moléculas de anticorpo obtidas de seres humanos se referem a qualquer uma das classes IgG, IgM, IgA, IgE e IgD, que diferem uma da outra pela natureza da cadeia pesada presente na molécula. Certas classes também têm subclasses, tais como IgGi, lgG2, e outras. Além disso, em seres humanos, a cadeia leve pode ser uma cadeia capa ou uma cadeia lambda.
[0432]O termo “anticorpo monoclonal” (mAb) ou “composição de anticorpo monoclonal”, como usado aqui, se refere a uma população de moléculas de anticorpo que contêm apenas uma espécie molecular de molécula de anticorpo consistindo em um único produto genético de cadeia leve e um único produto genético de cadeia pesada. Em particular, as regiões determinantes de complementaridade (CDRs) do anticorpo monoclonal são idênticas em todas as moléculas da população. MAbs contêm um sítio de ligação a antígeno capaz de imunorreagir com um epítopo particular do antígeno caracterizado por uma única afinidade de ligação pelo mesmo.
[0433]O termo “sítio de ligação a antígeno” ou “porção de ligação” se refere à parte da molécula de imunoglobulina que participa da ligação ao antígeno. O sítio de ligação a antígeno é formado por resíduos de aminoácido das regiões variáves de terminal N (“V”) das cadeias pesadas (“H”) e leves (“L”). Três trechos altamente divergentes dentro das regiões V das cadeias pesadas e leves, referidas como “regiões hipervariáveis”, são interpostas entre trechos de flanqueamento mais conservados conhecidos como “regiões de estrutura”, ou “FRs”. Assim, o termo “FR” se refere às sequências de aminoácido que são naturalmente encontradas entre, e adjacentes a, regiões hipervariáveis em imunoglobulinas. Em uma molécula de anticorpo, as três regiões hipervariáveis de uma cadeia leve e as três regiões hipervariáveis de uma cadeia pesada são dispostas em relação uma à outra em espaço tridimensional para formar uma superfície de ligação a antígeno. A superfície de ligação a antígeno é complementar à superfície tridimensional de um antígeno ligado, e as três regiões hipervariáveis de cada uma das cadeias pesadas e leves são referidas como “regiões determinantes de complementaridade” ou “CDRs”. A designação de aminoácidos a cada domínio é de acordo com as definições de Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987 e 1991)), ou Chothia & Lesk J. Mol. Biol. 196:901 - 917 (1987), Chothia etal. Nature 342:878 - 883 (1989).
[0434]Como usado aqui, o termo “epítopo” inclui qualquer determinante proteico capaz de ligação específica a uma imunoglobulina, um scFv, ou um receptor de célula T. O termo “epítopo” inclui qualquer determinante proteico capaz de ligação específica a uma imunoglobulina ou receptor de célula T. Determinantes epitópicos usualmente consistem em agrupamentos de superfície quimicamente ativos de moléculas tais como aminoácidos ou cadeias laterais de açúcar e usualmente têm características estruturais tridimensionais específicas, assim como características específicas de carga. Por exemplo, anticorpos podem ser incitados contra peptídeos de terminal N ou terminal C de um polipeptídeo. Um anticorpo é dito como especificamente se ligando a um antígeno quando a constante de dissociação é < 1 pM; em algumas formas de realização, < 100 nM e em algumas formas de realização, < 10 nM.
[0435]Como usado aqui, os termos “ligação específica”, “ligação imunológica”, e “propriedades de ligação imunológica” se referem às interações não covalentes do tipo que ocorre entre uma molécula de imunoglobulina e um antígeno para o qual a imunoglobulina é específica. A força, ou afinidade de ligação de interações imunológicas pode ser expressada em termos da constante de dissociação (Kd) da interação, em que uma Kd menor representa uma maior afinidade. Propriedades de ligação imunológica de polipeptídeos selecionados podem ser quantificadas usando métodos bem conhecidos na técnica. Um tal método envolve medir as taxas de formação de complexo de sítio de ligação a antígeno/antígeno e dissociação, em que estas taxas dependem das concentrações dos parceiros complexos, a afinidade da interação, e parâmetros geométricos que igualmente influenciam a taxa em ambas as direções. Assim, tanto a “constante de taxa de associação” (Kon) quanto a “constante de taxa de dissociação” (Koff) podem ser determinadas pelo cálculo das concentrações e das taxas reais de associação e dissociação. (Ver, Nature 361:186 - 87 (1993)). A razão de KOff/KOn permite o cancelamento de todos os parâmetros não relacionados à afinidade, e é igual à constante de dissociação Kd. (Ver, geralmente, Davies et al. (1990) Annual Rev Biochem 59:439 - 473). Um anticorpo da presente divulgação é dito como especificamente se ligando ao alvo, quando a constante de ligação (Kd) é < 1 pM, em algumas formas de realização < 100 nM, em algumas formas de realização < 10 nM, e em algumas formas de realização < 100 pM a cerca de 1 pM, como medido por ensaios tais como ensaios de ligação a radioligante ou ensaios similares conhecidos àqueles habilitados na técnica.
[0436]O termo “polinucleotídeo isolado” como usado aqui deve significar um polinucleotídeo de origem genômica, cDNA, ou sintética ou alguma combinação desta, que em virtude de sua origem o “polinucleotídeo isolado” (1) não é associado com todo ou uma porção de um polinucleotídeo em que o “polinucleotídeo isolado” é encontrado em natureza, (2) é operavelmente ligado a um polinucleotídeo de modo que ele não seja ligado em natureza, ou (3) não ocorre em natureza como parte de uma sequência maior. Polinucleotídeos de acordo com a divulgação incluem as moléculas de ácido nucleico que codificam as moléculas de imunoglobulina de cadeia pesada mostradas aqui, e moléculas de ácido nucleico que codificam as moléculas de imunoglobulina de cadeia leve mostradas aqui.
[0437]O termo “proteína isolada” referido aqui significa uma proteína de cDNA, RNA recombinante, ou origem sintética ou alguma combinação destes, que em virtude de sua origem, ou fonte de derivação, a “proteína isolada” (1) não é associada com proteínas encontradas em natureza, (2) é livre de outras proteínas da mesma fonte, por exemplo, livre de proteínas de murino, (3) é expressada por uma célula de uma espécie diferente, ou (4) não ocorre em natureza.
[0438]O termo “polipeptídeo” é usado aqui como um termo genérico para se referirá proteína nativa, fragmentos, ou análogos de uma sequência de polipeptídeo. Consequentemente, fragmentos de proteína nativa, e análogos são espécies do gênero de polipeptídeo. Polipeptídeos de acordo com a divulgação compreendem as moléculas de imunoglobulina de cadeia pesada mostradas aqui, e as moléculas de imunoglobulina de cadeia leve mostradas aqui, assim como moléculas de anticorpo formadas por combinações compreendendo as moléculas de imunoglobulina de cadeia pesada com moléculas de imunoglobulina de cadeia leve, tais como moléculas de imunoglobulina de cadeia leve capa, e vice-versa,assim como fragmentos e análogos destas.
[0439]O termo “que ocorre naturalmente” como usado aqui como aplicado a um objetivo se refere ao o fato de que um objetivo pode ser encontrado em natureza. Por exemplo, uma sequência de polipeptídeo ou polinucleotídeo que está presente em um organismo (incluindo vírus) que pode ser isolado de uma fonte em natureza e que não foi intencionalmente modificado pelo ser humano no laboratório ou de outro modo é de ocorrência natural.
[0440]0 termo “operavelmente ligado” como usado aqui se refere às posições de componentes assim descritos estão em uma relação que permite que eles funcionem em sua maneira intencionada. Uma sequência de controle “operavelmente ligada” a uma sequência de codificação é ligada em um tal modo que a expressão da sequência de codificação é obtida sob condições compatíveis com as sequências de controle.
[0441]O termo “sequência de controle” como usado aqui se refere às sequências de polinucleotídeo que são necessárias para efetuar a expressão e processamento de sequências de codificação às quais elas são ligadas. A natureza de tais sequências de controle difere dependendo do organismo hospedeiro em procariotas, tais sequências de controle geralmente incluem promotor, sítio de ligação ao ribossomo, e sequência de terminação de transcrição em eucariotas, geralmente, tais sequências de controle incluem promotores e sequência de terminação de transcrição. O termo “sequências de controle” é intencionado a incluir, no mínimo, todos os componentes cuja presença é essencial para a expressão e processamento, e também podem incluir componentes adicionais cuja presença é vantajosa, por exemplo, sequências líderes e sequências parceiras de fusão. O termo “polinucleotídeo” como referido aqui significa nucleotídeos de pelo menos 10 bases em comprimento, ribonucleotídeos ou desoxinucleotídeos ou uma forma modificada de qualquer tipo de nucleotídeo. O termo inclui formas de filamento único e duplo de DNA.
[0442]O termo oligonucleotídeo referido aqui inclui nucleotídeos que ocorrem naturalmente e modificados ligados juntos por ligações de oligonucleotídeo que ocorrem naturalmente e que não ocorrem naturalmente. Oligonucleotídeos são um subconjunto de polinucleotídeo geralmente compreendendo um comprimento de 200 bases ou menos. Em algumas formas de realização, oligonucleotídeos são de 10 a 60 bases em comprimento e em algumas formas de realização, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ou 20 a 40 bases em comprimento. Oligonucleotídeos são usualmente de filamento único, por exemplo, para sondas, embora oligonucleotídeos possam ser de filamento duplo, por exemplo, para o uso na construção de um mutante de gene. Oligonucleotídeos da divulgação são oligonucleotídeos de sentido ou anti-sentido.
[0443]O termo “nucleotídeos que ocorrem naturalmente” referidos aqui inclui desoxirribonucleotídeos e ribonucleotídeos. O termo “nucleotídeos modificados” referidos aqui inclui nucleotídeos com grupos açúcar modificados ou substituídos e semelhantes. O termo “ligações de oligonucleotídeo” referidas aqui inclui ligações de oligonucleotídeo tais como fosforotioato, fosforoditioato, fosforoselerloato, fosforodiselenoato, fosforoanilotioato, fosforaniladato, fosforonmidato, e semelhantes. Ver por exemplo, LaPlanche et al. Nucl. Acids Res. 14:9081 (1986); Stec et al. J. Am. Chem. Soc. 106:6077 (1984), Stein et al. Nucl. Acids Res. 16:3209 (1988), Zon et al. Anti Cancer Drug Design 6:539 (1991); Zon et al.Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, páginas 87-108 (F. Eckstein, Ed., Oxford University Press, Oxford England (1991)); Stec et al.Patente dos EUA 5.151.510; Uhlmann and Peyman Chemical Reviews 90:543 (1990). Um oligonucleotideo pode incluir um rótulo para detecção, se desejado.
[0444]Como usado aqui, os vinte aminoácidos convencionais e suas abreviações seguem uso convencional. Ver Immunology - A Synthesis (2â Edição, E.S. Golub e D.R. Green, Eds., Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991)). Estereoisômeros (por exemplo, D-aminoácidos) dos vinte aminoácidos convencionais, aminoácidos não naturais tais como aminoácidos a-, a-dissubstituídos, aminoácidos de N-alquila, ácido láctico, e outros aminoácidos não convencionais também podem ser componentes adequados para os polipeptídeos da presente divulgação. Exemplos de aminoácidos não convencionais incluem: 4 hidroxiprolina, y-carboxiglutamato, ε- N,N,N-trimetillisina, ε-N-acetillisina, O-fosfoserina, N-acetilserina, N-formilmetionina, 3-metilhistidina, 5-hidroxilisina, σ-N-metilarginina, e outros aminoácidos similares e iminoácidos (por exemplo, 4- hidroxiprolina). Na notação de polipeptídeo usada aqui, a direção para a esquerda é a direção amino terminal e a direção para a direita é a direção carbóxi-terminal, de acordo com uso e convenção padrão.
[0445]Similarmente, a menos que especificado de outro modo, a extremidade à esquerda de sequências de polinucleotídeo de filamento único é a extremidade 5’ a direção para a esquerda de sequências de polinucleotídeo de filamento duplo é referida como a direção 5’. A direção da adição 5’ a 3’ de transcritos de RNA nascentes é referida como as regiões de sequência de direção de transcrição no filamento de DNA tendo a mesma sequência como o RNA e que são 5’ para a extremidade 5’ do transcrito de RNA são referidas como “sequências a montante”, regiões de sequência no filamento de DNA tendo a mesma sequência como o RNA e que são 3’ para a extremidade 3’ do transcrito de RNA são referidas como “sequências a jusante”.
[0446]Como aplicado aos polipeptídeos, o termo “identidade substancial” significa que duas sequências de peptídeo, quando idealmente alinhadas, tal como pelos programas GAP ou BESTFIT usando pesos de intervalo padrão, compartilham pelo menos 80 por cento de identidade de sequência, em algumas formas de realização, pelo menos 90 por cento de identidade de sequência, em algumas formas de realização, pelo menos 95 por cento de identidade de sequência, e em algumas formas de realização, pelo menos 99 porcento de identidade de sequência.
[0447]Em algumas formas de realização, posições de resíduo que não são idênticas diferem por substituições de aminoácido conservatives.
[0448]Como debatido aqui, variações menores nas sequências de aminoácido de anticorpos ou moléculas de imunoglobulina são consideradas como sendo abrangidas pela presente divulgação, contanto que as variações na sequência de aminoácido mantenham pelo menos 75 %, em algumas formas de realização, pelo menos 80 %, 90 %, 95 %, e em algumas formas de realização, 99 %. Em particular, substituições de aminoácido conservatives são consideradas. Substituições conservatives são aquelas que ocorre dentro de uma família de aminoácidos que são relacionados em suas cadeias laterais. Aminoácidos geneticamente codificados são geralmente divididos em famílias: (1) aminoácidos ácidos são aspartate, glutamate; (2) aminoácidos básicos são lisina, arginina, histidina; (3) aminoácidos não polares são alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptofano, e (4) aminoácidos polares não carregados são glicina, asparagina, glutamina, cisteína, serina, treonina, tirosina. Os aminoácidos hidrofílicos incluem arginina, asparagina, aspartate, glutamina, glutamate, histidina, lisina, serina, e treonina. Os aminoácidos hidrofóbicos incluem alanina, cisteína, isoleucina, leucina, metionina, fenilalanina, prolina, triptofano, tirosina e valina. Outras famílias de aminoácidos incluem (i) serina e treonina, que são a família alifática-hidróxi; (ii) asparagina e glutamina, que são a família contendo amida; (iii) alanina, valina, leucina e isoleucina, que são a família alifática; e (iv) fenilalanina, triptofano, e tirosina, que são a família aromática. Por exemplo, é razoável esperar que uma substituição isolada de uma leucina com uma isoleucina ou valina, um aspartate com um glutamate, uma treonina com uma serina, ou uma substituição similar de um aminoácido com um aminoácido estruturalmente relacionado não terá um efeito principal sobre a ligação ou propriedades da molécula resultante, especialmente se a substituição não envolve um aminoácido dentro de um sítio de estrutura. Se uma mudança de aminoácido resulta em um peptídeo funcional pode ser facilmente determinado avaliando-se a atividade específica do derivado de polipeptídeo. Ensaios são descritos em detalhe aqui. Fragmentos ou análogos de anticorpos ou moléculas de imunoglobulina podem ser facilmente preparados por aqueles de habilidade comum na técnica. Términos amino e carbóxi adequados de fragmentos ou análogos ocorrem próximo aos limites de domínios funcionais. Domínios estruturais e funcionais podem ser identificados por comparação dos dados de sequência de nucleotídeo e/ou aminoácido a bases de dados de sequência públicos ou proprietárias. Em algumas formas de realização, métodos de comparação computadorizados são usados para identificar motivos de sequência ou domínios de conformação de proteína prognosticados que ocorrem em outras proteínas de estrutura e/ou função conhecidas. Métodos para identificar sequências de proteína que dobram em uma estrutura tridimensional conhecida são conhecidos. Bowie et al. Science 253:164 (1991). Assim, os exemplos precedentes demonstram que aqueles de habilidade na técnica podem reconhecer motivos de sequência e conformações estruturais que podem ser usados para definir domínios estruturais e funcionais de acordo com a divulgação.
[0449]Substituições de aminoácido adequadas são aquelas que: (1) reduzem a suscetibilidade à proteólise, (2) reduzem a suscetibilidade à oxidação, (3) alteram a afinidade de ligação para formar complexos de proteína, (4) alteram as afinidades de ligação, e (5) conferem ou modificam outras propriedades físico-químicas ou funcionais de tais análogos. Análogos podem incluir várias muteínas de uma sequência exceto a sequência de peptídeo que ocorre naturalmente. Por exemplo, substituições de aminoácido únicas ou múltiplas (por exemplo, substituições de aminoácido conservatives) podem ser feitas na sequência que ocorre naturalmente (por exemplo, na porção do polipeptídeo fora do(s) domínio(s) formando contatos intermoleculares. Uma substituição de aminoácido conservative não deve substancialmente mudar as características estruturais da sequência precursora (por exemplo, uma substituição aminoácido não deve tender a quebrar uma hélice que ocorre na sequência precursora, ou romper outros tipos de estrutura secundária que caracteriza a sequência precursora). Exemplos de estruturas secundárias e terciárias de polipeptídeo reconhecidas na técnica são descritos em Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton, Ed., W. H. Freeman and Company, New York (1984)); Introduction to Protein Structure (C. Branden e J. Tooze, eds., Garland Publishing, New York, N.Y. (1991)); e Thornton et al. Nature 354:105 (1991).
[0450]0 termo “fragmento de polipeptídeo” como usado aqui se refere a um polipeptídeo que tem uma supressão amino terminal e/ou carbóxi terminal e/ou uma ou mais supressões internas, mas onde a sequência de aminoácido remanescente é idêntica às posições correspondentes na sequência que ocorre naturalmente deduzida, por exemplo, de uma sequência de cDNA de tamanho natural. Fragmentos tipicamente são pelo menos de 5, 6, 8 ou 10 aminoácidos de comprimento, em algumas formas de realização, pelo menos 14 aminoácidos de comprimento, em algumas formas de realização, pelo menos 20 aminoácidos de comprimento, usualmente pelo menos 50 aminoácidos de comprimento, e em algumas formas de realização, pelo menos 70 aminoácidos de comprimento. O termo “análogo” como usado aqui se refere ao polipeptídeos que é compreendido de um segmento de pelo menos 25 aminoácidos que tem identidade substancial a uma porção de uma sequência de aminoácido deduzida e que tem ligação específica ao alvo, sob condições de ligação adequadas. Tipicamente, análogos de polipeptídeo compreendem uma substituição de aminoácido conservative (ou adição ou supressão) com respeito à sequência que ocorre naturalmente. Análogos tipicamente são de pelo menos 20 aminoácidos de comprimento, em algumas formas de realização, pelo menos 50 aminoácidos de comprimento ou mais longo, e podem frequentemente ser tão longos quanto um polipeptídeo que ocorre naturalmente de tamanho natural.
[0451]O termo “agente” é usado aqui para denotar um composto químico, uma mistura de compostos químicos, uma macromolécula biológica, ou um extrato fabricado de materiais biológicos.
[0452]Como usado aqui, os termos “rótulo” ou “rotulado” se referem à incorporação de um marcador detectável, por exemplo, por incorporação de um aminoácido radiorrotulado ou ligação a um polipeptídeo de porções biotinila que podem ser detectadas poravidina marcada (por exemplo, estreptavidina contendo um marcador fluorescente ou atividade enzimática que pode ser detectada por métodos ópticos ou calorimétricos). Em certas situações, o rótulo ou marcador também podem ser terapêuticos. Vários métodos de rotular polipeptídeos e glicoproteínas são conhecidos na técnica e podem ser usados. Exemplos de rótulos para polipeptídeos incluem, mas não são limitados aos seguintes: radioisótopos ou radionuclídeos (por exemplo, 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, "Tc, 111ln, 125l, 131l), rótulos fluorescentes (por exemplo, FITC, rodamina, lantanídeo fósforos), rótulos enzimáticos (por exemplo, peroxidase de raiz forte, p-galactosidase, luciferase, fosfatase alcalina), grupos biotinila, quimioluminescentes, epítopos de polipeptídeo predeterminados reconhecidos por um repórter secundário (por exemplo, sequências de par de zíper de leucina, sítios de ligação para anticorpos secundários, domínios de ligação a metal, rótulos de epítopo). Em algumas formas de realização, rótulos são ligados por braços de espaçador de vários comprimentos para reduzir o impedimento estérico potencial. O termo “agente farmacêutico ou fármaco” como usado aqui se refere a um composto ou composição químicos capazes de induzir um efeito terapêutico desejado quando devidamente administrados a um paciente.
[0453]Outros termos químicos aqui são usados de acordo com o uso convencional na técnica, como exemplificado pelo McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (Parker, S., Ed., McGraw-Hill, San Francisco (1985)).
[0454]Como usado aqui, “substancialmente puro” significa que uma espécie objeto é a espécie predominante presente (isto é, em uma base molar ela é mais abundante do que qualquer outra espécie individual na composição), e em algumas formas de realização, uma fração substancialmente purificada é uma composição em que a espécie objeto compreende pelo menos cerca de 50 por cento (em uma base molar) de todas as espécies macromoleculares presentes.
[0455]Geralmente, uma composição substancialmente pura compreenderá mais do que cerca de 80 por cento de todas as espécies macromoleculares presentes na composição, em algumas formas de realização, mais do que cerca de 85 %, 90 %, 95 %, e 99 %. Em algumas formas de realização, a espécie objeto é purificada à homogeneidade essencial (a espécie concomitante não pode ser detectada na composição por métodos de detecção convencionais) em que a composição consiste essencialmente em uma única espécie macromolecular.
[0456]O termo paciente inclui sujeitos humanos e veterinários.
[0457]Anticorpos e/ou anticorpos ativáveis da divulgação especificamente se ligam a um alvo dado, por exemplo, uma proteína alvo humana tal como PDL1 humano. Também incluídos na divulgação são anticorpos e/ou anticorpos ativáveis que se ligam ao mesmo epítopo como os anticorpos e/ou anticorpos ativáveis descritos aqui. Também incluídos na divulgação são anticorpos e/ou anticorpos anticorpos ativáveis que competem com um anticorpo anti-PDL1 e/ou um anticorpo anti-PDL1 ativável descrito aqui pela ligação ao PDL1, por exemplo, PDL1 humano. Também incluídos na divulgação são anticorpos e/ou anticorpos anticorpos ativáveis que competem cruzado com um anticorpo anti-PDL1 e/ou um anticorpo anti-PDL1 ativável descrito aqui pela ligação ao PDL1, por exemplo, PDL1 humano.
[0458]Aqueles habilitados na técnica reconhecerão que é possível determinar, sem experimentação indevida, se um anticorpo monoclonal (por exemplo, um anticorpo monoclonal de murino ou humanizado) tem a mesma especificidade como um anticorpo monoclonal usado nos métodos descritos aqui avaliando-se se o primeiro impede o último a partir da ligação ao alvo. Se o anticorpo monoclonal sendo testado compete com o anticorpo monoclonal da divulgação, como mostrado por uma diminuição na ligação pelo anticorpo monoclonal da divulgação, então os dois anticorpos monoclonais se ligam ao mesmo epítopo, ou um intimamente relacionado. Um método alternativo para determinar se um anticorpo monoclonal tem a especificidade de um anticorpo monoclonal da divulgação deve pré-incubar o anticorpo monoclonal da divulgação com o alvo e depois adicionar o anticorpo monoclonal sendo testado para determinar se o anticorpo monoclonal sendo testado é inibido em sua capacidade de se ligar ao alvo. Se o anticorpo monoclonal sendo testado é inibido depois, em toda probabilidade, ele tem a mesma especificidade epitópica, ou funcionalmente equivalente como o anticorpo monoclonal da divulgação.
[0459]A divulgação também fornece anticorpos ativáveis anti-PDL1 multiespecíficos. Os anticorpos ativáveis multiespecíficos fornecidos aqui são anticorpos multiespecíficos que reconhecem PDL1 e pelo menos um ou mais antígenos ou epítopos diferentes e que incluem pelo menos uma porção de mascaramento (MM) ligada a pelo menos um domínio de ligação a antígeno ou epítopo do anticorpo multiespecífico tal que a ligação da MM reduz a capacidade do domínio de ligação a antígeno ou epítopo de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização, a MM é ligada ao domínio de ligação a antígeno ou epítopo do anticorpo multiespecífico por intermédio de uma porção clivável (CM) que funciona como um substrato para pelo menos uma protease. Os anticorpos ativáveis multiespecíficos fornecidos aqui são estáveis na circulação, ativados em sítios intencionados de terapia e/ou diagnose mas não em tecido normal, isto é, saudável, e, quando ativados, exibem ligação a um alvo que é pelo menos comparável ao anticorpo não modificado, correspondente multiespecífico.
[0460]Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis multiespecíficos são designados para integrar células efetoras imunes, também referidos aqui como anticorpos ativáveis multiespecíficos de integração de célula efetora imune. Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis multiespecíficos são designados para integrar leucócitos, também referidos aqui como anticorpos ativáveis multiespecíficos de integração de leucócito. Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis multiespecíficos são designados para integrar células T, também referidos aqui como anticorpos ativáveis multiespecíficos de integração de célula T. Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis multiespecíficos integram um antígeno de superfície em um leucócito, tal como em uma célula T, em uma célula exterminadora natural (NK), em uma célula mononuclear mieloide, em um macrófago, e/ou em uma outra célula efetora imune. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é um leucócito. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é uma célula T. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é uma célula NK. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é uma célula mononuclear, tal como uma célula mononuclear mieloide. Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis multiespecíficos são designados para se ligar ou de outro modo interagir com mais do que um alvo e/ou mais do que um epítopo, também referidos aqui como anticorpos ativáveis de alvejamento de antígeno múltiplo. Como usado aqui, os termos “alvo” e “antígeno” são usados permutavelmente.
[0461]Em algumas formas de realização, anticorpos ativáveis multiespecíficos de integração de célula efetora imune da divulgação incluem um anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga ao PDL1 e um anticorpo de integração de célula efetora imune ou porção de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um do anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou do anticorpo de integração de célula efetora imune ou porção de ligação a antígeno deste é mascarado. Em algumas formas de realização, o anticorpo de integração de célula efetora imune ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que se liga a um primeiro alvo de integração de célula efetora imune, onde o AB1 é ligado a uma porção de mascaramento (MM1) tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao primeiro alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um segundo anticorpo ou fragmento deste que inclui um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga ao PDL1, onde o AB2 é ligado a uma porção de mascaramento (MM2) tal que a ligação da MM2 reduz a capacidade do AB2 de se ligar ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo de integração de célula efetora imune ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que se liga a um primeiro alvo de integração de célula efetora imune, onde o AB1 é ligado a uma porção de mascaramento (MM1) tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao primeiro alvo, e o anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um segundo anticorpo ou fragmento deste que inclui um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga ao PDL1, onde o AB2 é ligado a uma porção de mascaramento (MM2) tal que a ligação da MM2 reduz a capacidade do AB2 de se ligar ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo de integração de célula efetora não imune é um anticorpo de alvejamento de câncer. Em algumas formas de realização o anticorpo de célula efetora não imune é uma IgG. Em algumas formas de realização o anticorpo de integração de célula efetora imune é um scFv. Em algumas formas de realização o anticorpo de alvejamento de PDL1 (por exemplo, anticorpo de célula efetora não imune) é uma IgG e o anticorpo de integração de célula efetora imune é um scFv. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é um leucócito. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é uma célula T. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é uma célula NK. Em algumas formas de realização, a célula efetora imune é uma célula mononuclear mieloide.
[0462]Em algumas formas de realização, os anticorpos ativáveis multiespecíficos de integração de célula T da divulgação incluem um anticorpo de alvejamento de PDL1 ou fragmento de ligação a antígeno deste e um anticorpo de integração de célula T ou porção de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um do anticorpo de alvejamento de PDL1 ou fragmento de ligação a antígeno deste e/ou do anticorpo de integração de célula T ou porção de ligação a antígeno deste é mascarado. Em algumas formas de realização, o anticorpo de integração de célula T ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que se liga a um primeiro alvo de integração de célula T, onde o AB1 é ligado a uma porção de mascaramento (MM1) tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao primeiro alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um segundo anticorpo ou fragmento deste que inclui um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga ao PDL1, onde o AB2 é ligado a uma porção de mascaramento (MM2) tal que a ligação da MM2 reduz a capacidade do AB2 de se ligar ao PDL1. Em algumas formas de realização, o anticorpo de integração de célula T ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que se liga a um primeiro alvo de integração de célula T, onde o AB1 é ligado a uma porção de mascaramento (MM1) tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao primeiro alvo, e o anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um segundo anticorpo ou fragmento deste que inclui um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga ao PDL1, onde o AB2 é ligado a uma porção de mascaramento (MM2) tal que a ligação da MM2 reduz a capacidade do AB2 de se ligar ao PDL1.
[0463]Em algumas formas de realização de um anticorpo de integração de célula efetora imune ativável multiespecífico, um antígeno é PDL1, e um outro antígeno é tipicamente um receptor estimulador ou inibitório presente na superfície de uma célula T, célula exterminadora natural (NK), célula mononuclear mieloide, macrófago, e/ou outra célula efetora imune, tal como, mas não limitado a, B7-H4, BTLA, CD3, CD4, CD8, CD16a, CD25, CD27, CD28, CD32, CD56, CD137, CTLA-4, GITR, HVEM, ICOS, LAG3, NKG2D, 0X40, PD1, TIGIT, TIM3, ou VISTA. Em algumas formas de realização, o antígeno é um receptor estimulador presente na superfície de uma célula T ou célula NK; exemplos de tais receptores estimuladores incluem, mas não são limitados a, CD3, CD27, CD28, CD137 (também referido como 4-1 BB), GITR, HVEM, ICOS, NKG2D, e 0X40. Em algumas formas de realização, o antígeno é um receptor inibitório presente na superfície de uma célula T; exemplos de tais receptores inibitórios incluem, mas não são limitados a, BTLA, CTLA-4, LAG3, PD1, TIGIT, TI M3, e Kl Rs expressados por NK. O domínio de anticorpo que confere especificidade ao antígeno de superfície de célula T também pode ser substituído por um ligante ou domínio de ligante que se liga a um receptor de célula T, um receptor de célula NK, um receptor de macrófago, e/ou outro receptor de célula efetora imune, tal como, mas não limitado a, B7-1, B7-2, B7H3, PDL1, PDL2, ou TNFSF9.
[0464]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico de integração de célula T inclui um scFv anti-CD3 épsilon (CD3ε, também referido aqui como CD3e e CD3) e um anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste, onde pelo menos um do scFv anti-CD3ε e/ou do anticorpo de alvejamento ou porção de ligação a antígeno deste é mascarado. Em algumas formas de realização, o scFv de CD3ε inclui um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que se liga ao CD3ε, onde o AB1 é ligado a uma porção de mascaramento (MM1) tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao CD3ε. Em algumas formas de realização, o anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um segundo anticorpo ou fragmento deste que inclui um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga ao PDL1, onde o AB2 é ligado a uma porção de mascaramento (MM2) tal que a ligação da MM2 reduz a capacidade do AB2 de se ligar ao PDL1. Em algumas formas de realização, o scFv de CD3ε inclui um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que se liga ao CD3ε, onde o AB1 é ligado to uma porção de mascaramento (MM1) tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao CD3ε, e o anticorpo de alvejamento ou fragmento de ligação a antígeno deste inclui um segundo anticorpo ou fragmento deste que inclui um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga ao PDL1, onde o AB2 é ligado a uma porção de mascaramento (MM2) tal que a ligação da MM2 reduz a capacidade do AB2 de se ligar ao PDL1.
[0465]Em algumas formas de realização, os anticorpos de alvejamento de antígeno múltiplo e/ou anticorpos ativáveis de alvejamento de antígeno múltiplo incluem pelo menos um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga a um primeiro alvo e/ou primeiro epítopo e um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga a um segundo alvo e/ou um segundo epítopo. Em algumas formas de realização, os anticorpos de alvejamento de antígeno múltiplo e/ou anticorpos ativáveis de alvejamento de antígeno múltiplo se ligam a dois ou mais alvos diferentes. Em algumas formas de realização, os anticorpos de alvejamento de antígeno múltiplo e/ou anticorpos ativáveis de alvejamento de antígeno múltiplo se ligam a dois ou mais epítopos diferentes no mesmo alvo. Em algumas formas de realização, os anticorpos de alvejamento de antígeno múltiplo e/ou anticorpos ativáveis de alvejamento de antígeno múltiplo se ligam a uma combinação de dois ou mais alvos diferentes e dois ou mais epítopos diferentes no mesmo alvo.
[0466]Em algumas formas de realização, um anticorpo ativável multiespecífico compreendendo uma IgG tem os domínios variáveis de IgG mascarados. Em algumas formas de realização, um anticorpo ativável multiespecífico compreendendo um scFv tem os domínios de scFv mascarados. Em algumas formas de realização, um anticorpo ativável multiespecífico tem tanto os domínios variáveis de IgG quanto os domínios de scFv, onde pelo menos um dos domínios variáveis de IgG é ligado a uma porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, um anticorpo ativável multiespecífico tem tanto domínios variáveis de IgG quanto domínios de scFv, onde pelo menos um dos domínios de scFv é ligado a uma porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, um anticorpo ativável multiespecífico tem tanto domínios variáveis de IgG quanto domínios de scFv, onde pelo menos um dos domínios variáveis de IgG é ligado a uma porção de mascaramento e pelo menos um dos domínios de scFv é ligado a uma porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, um anticorpo ativável multiespecífico tem tanto domínios variáveis de IgG quanto domínios de scFv, onde cada um dos domínios variáveis de IgG e dos domínios de scFv é ligado à sua própria porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, um domínio de anticorpo de um anticorpo ativável multiespecífico tem especificidade para um antígeno alvo e um outro domínio de anticorpo tem especificidade para um antígeno de superfície de célula T. Em algumas formas de realização, um domínio de anticorpo de um anticorpo ativável multiespecífico tem especificidade para um antígeno alvo e um outro domínio de anticorpo tem especificidade para um outro antígeno alvo. Em algumas formas de realização, um domínio de anticorpo de um anticorpo ativável multiespecífico tem especificidade para um epítopo de um antígeno alvo e um outro domínio de anticorpo tem especificidade para um outro epítopo do antígeno alvo.
[0467]Em um anticorpo ativável multiespecífico, um scFv pode ser fundido ao término carboxila da cadeia pesada de um anticorpo ativável de IgG, ao término carboxila da cadeia leve de um anticorpo ativável de IgG, ou aos términos carboxila de ambas as cadeias pesadas e leves de um anticorpo ativável de IgG. Em um anticorpo ativável multiespecífico, um scFv pode ser fundido ao término amino da cadeia pesada de um anticorpo ativável de IgG, ao término amino da cadeia leve de um anticorpo ativável de IgG, ou aos términos amino de ambas as cadeias pesadas e leves de um anticorpo ativável de IgG. Em um anticorpo ativável multiespecífico, um scFv pode ser fundido a qualquer combinação de um ou mais términos carboxila e um ou mais términos amino de um anticorpo ativável de IgG. Em algumas formas de realização, uma porção de mascaramento (MM) ligada a uma porção clivável (CM) é ligada a e mascara um domínio de ligação a antígeno da IgG. Em algumas formas de realização, uma porção de mascaramento (MM) ligada a uma porção clivável (CM) é ligada a e mascara um domínio de ligação a antígeno de pelo menos um scFv. Em algumas formas de realização, uma porção de mascaramento (MM) ligada a uma porção clivável (CM) é ligada a e mascara um domínio de ligação a antígeno de uma IgG e uma porção de mascaramento (MM) ligada a uma porção clivável (CM) é ligada a e mascara um domínio de ligação a antígeno de pelo menos um scFv.
[0468]A divulgação fornece exemplos de estruturas de anticorpo ativável multiespecífico que incluem, mas não são limitados aos seguintes: (VL-CL)2:(VH-CH1- CH2-CH3-L4-VH*-L3-VL*-L2-CM-L1-MM)2; (VL-CL)2:(VH-CH1-CH2-CH3-L4-VL*-L3- VH*-L2-CM-L1-MM)2; (MM-L1-CM-L2-VL-CL)2:(VH-CH1-CH2-CH3-L4-VH*-L3-VL*)2; (MM-L1-CM-L2-VL-CL)2:(VH-CH1-CH2-CH3-L4-VL*-L3-VH*)2; (VL-CL)2:(MM-L1-CM- L2-VL*-L3-VH*-L4-VH-CH1-CH2-CH3)2; (VL-CL)2:(MM-L1-CM-L2-VH*-L3-VL*-L4- VH-CH1-CH2-CH3)2; (MM-L1-CM-L2-VL-CL)2:(VL*-L3-VH*-L4-VH-CH1-CH2-CH3)2; (MM-L1-CM-L2-VL-CL)2:(VH*-L3-VL*-L4-VH-CH1-CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VH*-L3- VL*-L2-CM-L1-MM)2:(VH-CH1-CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*-L2-CM-L1- MM)2:(VH-CH1-CH2-CH3)2; (MM-L1-CM-L2-VL*-L3-VH*-L4-VL-CL)2:(VH-CH1-CH2- CH3)2; (MM-L1-CM-L2-VH*-L3-VL*-L4-VL-CL)2:(VH-CH1-CH2-CH3)2, (VL-CL-L4- VH*-L3-VL*-L2-CM-L1-MM)2: (MM-L1-CM-L2-VL*-L3-VH*-L4-VH-CH1-CH2-CH3)2, (VL-CL-L4-VH*-L3-VL*-L2-CM-L1-MM)2: (MM-L1-CM-L2-VH*-L3-VL*-L4-VH-CH1- CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*-L2-CM-L1-MM)2: (MM-L1-CM-L2-VL*-L3-VH*-L4- VH-CH1-CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*-L2-CM-L1-MM)2: (MM-L1-CM-L2-VH*- L3-VL*-L4-VH-CH 1 -CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VH*-L3-VL*)2: (MM-L1 -CM-L2-VL*-L3- VH*-L4-VH-CH 1 -CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VH*-L3-VL*)2: (MM-L1 -CM-L2-VH*-L3-VL*- L4-VH-CH1 -CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*)2: (M M-L1 -CM-L2-VL*-L3-VH*-L4- VH-CH1-CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*)2: (MM-L1-CM-L2-VH*-L3-VL*-L4-VH- CH1 -CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VH*-L3-VL*-L2-CM-L1 -MM)2: (VL*-L3-VH*-L4-VH-CH 1 - CH2-CH3)2; (VL-CL-L4-VH*-L3-VL*-L2-CM-L1-MM)2: (VH*-L3-VL*-L4-VH-CH1-CH2- CH3)2; (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*-L2-CM-L1-MM)2: (VL*-L3-VH*-L4-VH-CH1-CH2- CH3)2; OU (VL-CL-L4-VL*-L3-VH*-L2-CM-L1-MM)2: (VH*-L3-VL*-L4-VH-CH1-CH2- CH3)2, em que: VL e VH representam os domínios variáveis de cadeia leve e pesada da primeira especificidade, contidos na IgG; VL* e VH* representam os domínios variáveis da segunda especificidade, contidos no scFv; L1 é um peptídeo ligador que conecta a porção de mascaramento (MM) e a porção clivável (CM); L2 é um peptídeo ligador que conecta a porção clivável (CM), e o anticorpo; L3 é um peptídeo ligador que conecta os domínios variáveis do scFv; L4 é um peptídeo ligador que conecta o anticorpo da primeira especificidade ao anticorpo da segunda especificidade; CL é o domínio constante de cadeia leve; e CH1, CH2, CH3 são os domínios constantes de cadeia pesada. As primeiras e segundas especificidades podem ser para qualquer antígeno ou epítopo.
[0469]Em algumas formas de realização de um anticorpo ativável multiespecífico de integração de célula T, um antígeno é PDL1, e um outro antígeno é tipicamente um receptor estimulador (também referido aqui como de ativação) ou inibitório presente na superfície de uma célula T, célula exterminadora natural (NK), célula mononuclear mieloide, macrófago, e/ou outra célula efetora imune, tal como, não limitado a, B7-H4, BTLA, CD3, CD4, CD8, CD16a, CD25, CD27, CD28, CD32, CD56, CD137 (também referido como TNFRSF9), CTLA-4, GITR, HVEM, ICOS, LAG3, NKG2D, 0X40, PD1, TIGIT, TIM3, ou VISTA. O domínio de anticorpo que confere especificidade ao antígeno de superfície de célula T também pode ser substituído por um ligante ou domínio de ligante que se liga a um receptor de célula T, um receptor de célula NK, um receptor de macrófago, e/ou outro receptor de célula efetora imune, tal como, mas não limitado a, PDL1.
[0470]Em algumas formas de realização, o anticorpo de alvejamento é um anticorpo anti-PDL1 divulgado aqui. Em algumas formas de realização, o anticorpo de alvejamento pode estar na forma um anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, o(s) scFv(s) pode(m) estar na forma de um Pro-scFv (ver, por exemplo, WO 2009/025846, WO 2010/081173).
[0471]Em algumas formas de realização, o scFv é específico para a ligação a CD3ε, e compreende ou é derivado de um anticorpo ou fragmento deste que se liga ao CD3ε, por exemplo, CH2527, FN18, H2C, OKT3, 2C11, UCHT1, ou V9. Em algumas formas de realização, o scFv é específico para a ligação ao CTLA-4 (também referido aqui como CTLA e CTLA4).
[0472]Em algumas formas de realização, o scFv anti-CTLA-4 inclui a sequência de aminoácido: GGGSGGGGSGSGGGSGGGGSGGGEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSS SYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYY CQQYGSSPLTFGGGTKVEIKRSGGSTITSYNVYYTKLSSSGTQVQLVQTGGGVVQP GRSLRLSCAASGSTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFT ISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATNSLYWYFDLWGRGTLVTVSSAS (SEQ ID NO: 424)
[0473]Em algumas formas de realização, o scFv anti-CTLA-4 inclui a sequência de aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 424.
[0474]Em algumas formas de realização, o scFv anti-CD3ε inclui a sequência de aminoácido: GGGSGGGGSGSGGGSGGGGSGGGQVQLQQSGAELARPGASVKMSCKASGYTF TRYTMHWVKQRPGQGLEWIGYINPSRGYTNYNQKFKDKATLTTDKSSSTAYMQLS SLTSEDSAVYYCARYYDDHYCLDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQIVL TQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMNWYQQKSGTSPKRWIYDTSKLASGVPA HFRGSGSGTSYSLTISGMEAEDAATYYCQQWSSNPFTFGSGTKLEINR (SEQ ID NO: 425)
[0475]Em algumas formas de realização, o scFv anti-CD3ε inclui a sequência de aminoácido que é pelo menos 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou mais idêntica à sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 425.
[0476]Em algumas formas de realização, a scFv é específica para a ligação a uma ou mais células T, uma ou mais células NK e/ou um ou mais macrófagos. Em algumas formas de realização, o scFv é específico para a ligação a um alvo selecionado do grupo consistindo em B7-H4, BTLA, CD3, CD4, CD8, CD16a, CD25, CD27, CD28, CD32, CD56, CD137, CTLA-4, GITR, HVEM, ICOS, LAG3, NKG2D, 0X40, PD1, TIGIT, TIM3, ou VISTA.
[0477]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico também inclui um agente conjugado ao AB. Em algumas formas de realização, o agente é um agente terapêutico. Em algumas formas de realização, o agente é um agente antineoplásico. Em algumas formas de realização, o agente é uma toxina ou fragmento desta. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado ao anticorpo ativável multiespecífico por intermédio de um ligador. Em algumas formas de realização, o agente é conjugado ao AB por intermédio de um ligador clivável. Em algumas formas de realização, o ligador é um ligador não clivável. Em algumas formas de realização, o agente é um inibidor de microtúbulo. Em algumas formas de realização, o agente é um agente danificadorde ácido nucleico, tal como um alquilador de DNA ou intercalador de DNA, ou outro agente danificador de DNA. Em algumas formas de realização, o ligador é um ligador clivável. Em algumas formas de realização, o agente é um agente selecionado do grupo listado na Tabela 11. Em algumas formas de realização, o agente é uma dolastatina. Em algumas formas de realização, o agente é uma auristatina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é auristatina E ou um derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina E (MMAE). Em algumas formas de realização, o agente é monometil auristatina D (MMAD). Em algumas formas de realização, o agente é um maitansinoide ou derivado de maitansinoide. Em algumas formas de realização, o agente é DM1 ou DM4. Em algumas formas de realização, o agente é uma duocarmicina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é um caliqueamicina ou derivado desta. Em algumas formas de realização, o agente é uma pirrolobenzodiazepina. Em algumas formas de realização, o agente é um dímero de pirrolobenzodiazepina.
[0478]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico também inclui uma porção detectável. Em algumas formas de realização, a porção detectável é um agente de diagnóstico.
[0479]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico naturalmente contém uma ou mais ligações de dissulfeto. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico pode ser engendrado para incluir uma ou mais ligações de dissulfeto.
[0480]A divulgação também fornece uma molécula de ácido nucleico isolada que codifica um anticorpo ativável multiespecífico descrito aqui, assim como vetores que incluem estas sequências de ácido nucleico isoladas. A divulgação fornece métodos de produzir um anticorpo ativável multiespecífico cultivando-se uma célula sob condições que levam à expressão do anticorpo ativável, em que a célula compreende uma tal molécula de ácido nucleico. Em algumas formas de realização, a célula compreende um tal vetor.
[0481]A divulgação também fornece um método de fabricar anticorpos ativáveis multiespecíficos da divulgação (a) cultivando-se uma célula compreendendo uma construção de ácido nucleico que codifica o anticorpo ativável multiespecífico sob condições que levam à expressão do ativável multiespecífico, e (b) recuperando-se o anticorpo ativável multiespecífico. AB, MM, e/ou CM adequados incluem qualquer um do AB, MM, e/ou CM divulgado aqui.
[0482]A divulgação também fornece anticorpos ativáveis multiespecíficos e/ou composições de anticorpo ativável multiespecífico que incluem pelo menos um primeiro anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB1) que especificamente se liga a um primeiro alvo ou primeiro epítopo e um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno deste (AB2) que se liga a um segundo alvo ou um segundo epítopo, onde pelo menos AB1 é ligado ou de outro modo ligado a uma porção de mascaramento (MM1), tal que a ligação da MM1 reduz a capacidade do AB1 de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização, a MM1 é ligada a AB1 por intermédio de uma primeira sequência de porção clivável (CM1) que inclui um substrato para uma protease, por exemplo, uma protease que é co-localizada com o alvo de AB1 em um sítio de tratamento ou um sítio de diagnóstico em um sujeito. Os anticorpos ativáveis multiespecíficos fornecidos aqui são estáveis em circulação, ativados em sítios intencionados de terapia e/ou diagnose mas não em tecido normal, isto é, saudável, e, quando ativados, exibem ligação ao alvo de AB1 que é pelo menos comparável ao anticorpo não modificado, correspondente multiespecífico. AB, MM, e/ou CM adequados incluem qualquer um do AB, MM, e/ou CM divulgado aqui.
[0483]A divulgação também fornece composições e métodos que incluem um anticorpo ativável multiespecífico que inclui pelo menos um primeiro anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB1) que especificamente se liga a um alvo e um segundo anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB2), onde pelo menos o primeiro AB no anticorpo ativável multiespecífico é ligado a uma porção de mascaramento (MM1) que diminui a capacidade do AB1 de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização, cada AB é ligado a uma MM que diminui a capacidade de seu AB correspondente a cada alvo. Por exemplo, em formas de realização de anticorpo ativável biespecífico, o AB1 é ligado a uma primeira porção de mascaramento (MM1) que diminui a capacidade do AB1 de se ligar ao seu alvo, e o AB2 é ligado a uma segunda porção de mascaramento (MM2) que diminui a capacidade do AB2 de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico compreende mais do que duas regiões de AB; em tais formas de realização, o AB1 é ligado a uma primeira porção de mascaramento (MM1) que diminui a capacidade do AB1 de se ligar ao seu alvo, o AB2 é ligado a uma segunda porção de mascaramento (MM2) que diminui a capacidade do AB2 de se ligar ao seu alvo, o AB3 é ligado a uma terceira porção de mascaramento (MM3) que diminui a capacidade do AB3 de se ligar ao seu alvo, e assim por diante para cada AB no anticorpo ativável multiespecífico. AB, MM, e/ou CM adequados incluem qualquer um do AB, MM, e/ou CM divulgado aqui.
[0484]Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico inclui ainda pelo menos uma porção clivável (CM) que é um substrato para uma protease, onde a CM liga uma MM a um AB. Por exemplo, em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico inclui pelo menos um primeiro anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB1) que especificamente se liga a um alvo e um segundo anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB2), onde pelo menos o primeiro AB no anticorpo ativável multiespecífico é ligado por intermédio de uma primeira porção clivável (CM1) a uma porção de mascaramento (MM1) que diminui a capacidade do AB1 de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização de anticorpo ativável biespecífico, o AB1 é ligado por intermédio de CM1 à MM1, e o AB2 é ligado por intermédio de uma segunda porção clivável (CM2) a uma segunda porção de mascaramento (MM2) que diminui a capacidade do AB2 de se ligar ao seu alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável multiespecífico compreende mais do que duas regiões de AB; em algumas destas formas de realização, o AB1 é ligado por intermédio de CM1 à MM1, o AB2 é ligado por intermédio de CM2 à MM2, e o AB3 é ligado por intermédio de uma terceira porção clivável (CM3) a uma terceira porção de mascaramento (MM3) que diminui a capacidade do AB3 de se ligar ao seu alvo, e assim por diante para cada AB no anticorpo ativável multiespecífico. AB, MM, e/ou CM adequados incluem qualquer um do AB, MM, e/ou CM divulgado aqui.
[0485]A divulgação também fornece anticorpos ativáveis que incluem porções estéricas que não de ligação (NB) ou parceiros de ligação (BP) para porções estéricas que não de ligação, onde o BP recruta ou de outro modo atrai a NB ao anticorpo ativável. Os anticorpos ativáveis fornecidos aqui incluem, por exemplo, um anticorpo ativável que inclui uma porção estérica que não de ligação (NB), um ligador clivável (CL) e anticorpo ou fragmento de anticorpo (AB) que se liga a um alvo; um anticorpo ativável que inclui um parceiro de ligação para uma porção estérica que não de ligação (BP), um CL e um AB; e um anticorpo ativável que inclui um BP ao qual uma NB foi recrutada, um CL e um AB que se ligam ao alvo. Anticorpos ativáveis em que a NB é covalentemente ligada ao CL e AB do anticorpo ativável ou é associada por interação com um BP que é covalentemente ligado ao CL e AB do anticorpo ativável são referidos aqui como “anticorpos ativáveis contendo NB.” Por ativável ou permutável é significado que o anticorpo ativável exibe um primeiro nível de ligação a um alvo quando o anticorpo ativável está em um estado inibido, mascarado ou não clivado (isto é, uma primeira conformação), e um segundo nível de ligação ao alvo quando o anticorpo ativável está em um estado não inibido, não mascarado e/ou clivado (isto é, uma segunda conformação, isto é, anticorpo ativado), onde o segundo nível de ligação ao alvo é maior do que o primeiro nível de ligação ao alvo. As composições de anticorpo ativável podem exibir biodisponibilidade aumentada e biodistribuição mais favorável comparado a produtos terapêuticos de anticorpo convencionais.
[0486]Em algumas formas de realização, anticorpos ativáveis levam em consideração toxicidade reduzida e/ou efeitos colaterais adversos que podem de outro modo resultar da ligação no sítio que não de tratamento e/ou sítios que não de diagnóstico se o AB não for mascarado ou de outro modo inibido da ligação a um tal sítio.
[0487]Anticorpos ativáveis anti-PDL1 que incluem uma porção estérica que não de ligação (NB) podem ser fabricados usando os métodos apresentados na Publicação PCT WO 2013/192546, os conteúdos da qual são por meio deste incorporados por referência em sua totalidade.
[0488]Será avaliado que a administração de entidades terapêuticas de acordo com a divulgação será administrada com portadores, excipientes, e outros agentes adequados que são incorporados em formulações para fornecer transferência, liberação, tolerância melhoradas, e semelhantes. Uma grande quantidade de formulações apropriadas pode ser encontrada em formulário conhecido a todos os químicos farmacêuticos: Remington’s Pharmaceutical Sciences (15â ed, Mack Publishing Company, Easton, PA (1975)), particularmente Capítulo 87 de Blaug, Seymour, neste. Estas formulações incluem, por exemplo, pós, pastas, unguentos, geleias, ceras, óleos, lipídeos, vesículas contendo lipídeo (catiônico ou aniônico) (tal como Lipofectin™), conjugados de DNA, pastas de absorção anidras, emulsões óleo- em-água e água-em-óleo, emulsões carbowax (polietilenoglicóis de vários pesos moleculares), géis semissólidos, e misturas semissólidas contendo carbowax. Qualquer uma das misturas precedentes pode ser apropriada em tratamentos e terapias de acordo com a presente divulgação, contanto que o ingrediente ativo na formulação não seja inativado pela formulação e a formulação é fisiologicamente compatível e tolerável com a via de administração. Ver também Baldrick P. “Pharmaceutical excipient development: the need for preclinical guidance.” Regul. Toxicol Pharmacol. 32(2):210 - 8 (2000), Wang W. “Lyophilization and development of solid protein pharmaceuticals.” Int. J. Pharm. 203(1 - 2): 1 - 60 (2000), Charman WN “Lipids, lipophilic drugs, and oral drug delivery-some emerging concepts.” J Pharm Sci,89(8):967 - 78 (2000), Powell et al. “Compendium of excipients for parenteral formulations” PDA J Pharm Sci Technol. 52:238 - 311 (1998) e as citações neste para informação adicional relacionada a formulações, excipientes e portadores bem conhecidos aos químicos farmacêuticos.
[0489]Formulações terapêuticas da divulgação, que incluem um anticorpo anti-PDL1 e/ou anticorpo anti-PDL1 ativável, tais como por via de exemplo não limitante, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado, são usadas para prevenir, tratar ou de outro modo melhorar uma doença ou transtorno associados com expressão e/ou atividade alvos aberrantes. Por exemplo, formulações terapêuticas da divulgação, que incluem um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado, são usadas para tratar ou de outro modo melhorar um câncer ou outra condição neoplásica, inflamação, um transtorno inflamatório, e/ou uma doença autoimune. Em algumas formas de realização, o câncer é um tumor sólido ou uma malignidade hematológica onde o alvo é expressado. Em algumas formas de realização, o câncer é um tumor sólido onde o alvo é expressado. Em algumas formas de realização, o câncer é uma malignidade hematológica onde o alvo é expressado. Em algumas formas de realização, o alvo é expressado no parênquima (por exemplo, no câncer, a porção de um órgão ou tecido que frequentemente realiza função(ões) do órgão ou tecido). Em algumas formas de realização, o alvo é expressado em uma célula, tecido, ou órgão. Em algumas formas de realização, o alvo é expressado no estroma (isto é, a estrutura de suporte conectiva de uma célula, tecido, ou órgão). Em algumas formas de realização, o alvo é expressado em um osteoblasto. Em algumas formas de realização, o alvo é expressado no endotélio (vasculatura). Em algumas formas de realização, o alvo é expressado em uma célula-tronco cancerígena. Em algumas formas de realização, o agente ao qual o anticorpo e/ou o anticorpo ativável é conjugado é um inibidor de microtúbulo. Em algumas formas de realização, o agente ao qual o anticorpo e/ou o anticorpo ativável é conjugado é um agente danificadorde ácido nucleico.
[0490]A eficácia de prevenção, melhora ou tratamento é determinada em associação com qualquer método conhecido para diagnosticar ou tratar a doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade alvos, tais como, por exemplo, expressão e/ou atividade alvos aberrantes. Prolongar a sobrevivência de um sujeito ou de outro modo retardar a progressão da doença ou transtorno associados com a expressão e/ou atividade alvos, por exemplo, expressão e/ou atividade alvos aberrantes, em um sujeito indica que o anticorpo, anticorpo conjugado, anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado confere um benefício clínico.
[0491]Um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado podem ser administrados na forma de composições farmacêuticas. Princípios e considerações envolvidos em preparar tais composições, assim como orientação na escolha de componentes são fornecidos, por exemplo, em Remington: The Science And Practice Of Pharmacy 19âed. (Alfonso R. Gennaro, et al., editors) Mack Pub. Co., Easton, Pa.: 1995; Drug Absortion Enhancement: Concepts, Possibilities, Limitations, And Trends, Harwood Academic Publishers, Langhorne, Pa., 1994; e Peptide And Protein Drug Delivery (Advances In Parenteral Sciences, Vol. 4), 1991, M. Dekker, New York.
[0492]Em algumas formas de realização onde fragmentos de anticorpo são usados, o menor fragmento que especificamente se liga ao domínio de ligação da proteína alvo é selecionado. Por exemplo, com base nas sequências de região variável de um anticorpo, moléculas de peptídeo podem ser designadas que mantêm a capacidade de se ligar à sequência de proteína alvo. Tais peptídeos podem ser sintetizados quimicamente e/ou produzidos por tecnologia de DNA recombinante. (Ver, por exemplo, Marasco eta!., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 7889-7893(1993)). A formulação também pode conter mais do que um composto ativo conforme necessário para a indicação particular sendo tratada, por exemplo, em algumas formas de realização, aqueles com atividades complementares que não afetam adversamente entre si. Em algumas formas de realização, ou além disso, a composição pode compreender um agente que realça sua função, tal como, por exemplo, um agente citotóxico, citocina, agente quimioterapêutico, ou agente inibitório de crescimento. Tais moléculas estão adequadamente presentes em combinação em quantidades que são eficazes para o propósito intencionado.
[0493]Os ingredientes ativos também podem ser capturados em microcápsulas preparadas, por exemplo, por técnicas de coacervação ou por polimerização interfacial, por exemplo, hidroximetilcelulose ou microcápsulas de gelatina e microcápsulas de poli(metilmetacrilato), respectivamente, em sistemas de liberação de fármaco coloidal (por exemplo, lipossomos, microesferas de albumina, microemulsões, nanopartículas, e nanocápsulas) ou em macroemulsões.
[0494]As formulações a serem usadas para administração in vivo devem ser estéreis. Isto é facilmente realizado por filtração através de membranas de filtração estéreis.
[0495]Preparações de liberação prolongada podem ser preparadas. Exemplos adequados de preparações de liberação prolongada incluem matrizes semipermeáveis de polímeros hidrofóbicos sólidos contendo o anticorpo, matrizes estas que estão na forma de artigos formados, por exemplo, películas, ou microcápsulas. Exemplos de matrizes de liberação prolongada incluem poliésteres, hidrogéis (por exemplo, poli(2-hidroxietil-metacrilato), ou poli(vinilálcool)), polilactídeos (Pat dos EUA 3.773.919), copolímeros de ácido L-glutâmico e y etil- L-glutamato, etileno-acetato de vinila não degradável, copolímeros de ácido láctico- ácido glicólico degradável tais como o LUPRON DEPOT™ (microesferas injetáveis compostas de copolímero de ácido láctico-ácido glicólico e acetato de leuprolida), e ácido poli-D-(-)-3-hidroxibutírico. Embora polímeros tais como etileno-acetato de vinila e ácido láctico-ácido glicólico permitam a liberação de moléculas por mais de 100 dias, certos hidrogéis liberam proteínas por períodos de tempo mais curtos.
[0496]Em algumas formas de realização, o anticorpo, o anticorpo conjugado, anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado contêm um rótulo detectável. Um anticorpo intacto, ou um fragmento deste (por exemplo, Fab, scFv, ou F(ab)2) é usado. O termo “rotulado”, quanto à sonda ou anticorpo, é intencionado a abranger a rotulagem direta da sonda ou anticorpo ligando-se (isto é, fisicamente) uma substância detectável à sonda ou anticorpo, assim como rotulagem indireta da sonda ou anticorpo por reatividade com um outro reagente que é diretamente rotulado. Exemplos de rotulagem indireta incluem detecção de um anticorpo primário usando um anticorpo secundário fluorescentemente rotulado e marcação final de uma sonda de DNA com biotina tal que ele pode ser detectado com estreptavidina fluorescentemente rotulada. O termo “amostra biológica” é intencionado a incluir tecidos, células e fluidos biológicos isolados de um sujeito, assim como tecidos, células e fluidos presentes dentro de um sujeito. Incluídos dentro do uso do termo “amostra biológica”, portanto, é sangue e uma fração ou componente do sangue incluindo soro sanguíneo, plasma sanguíneo, ou linfa. Isto é, o método de detecção da divulgação pode ser usado para detectar um mRNA, proteína, ou DNA genômico de analito em uma amostra biológica in vitroassim como in vivo. Por exemplo, técnicas in vitro para a detecção de urn mRNA de analito incluem hibridizações Northern e hibridizações in situ.Técnicas in vitro para a detecção de uma proteína de analito incluem ensaios imunossorventes ligados à enzima (ELISAs), Western blots, imunoprecipitações, manchamento imunoquímico, e imunofluorescência. Técnicas in vitropara a detecção de um DNA genômico de analito incluem hibridizações Southern. Procedimentos para conduzir os imunoensaios são descritos, por exemplo em “ELISA: Theory and Practice: Methods in Molecular Biology”, Vol. 42, J. R. Crowther (Ed.) Human Press, Totowa, NJ, 1995; “Immunoassay”, E. Diamandis e T. Christopoulus, Academic Press, Inc., San Diego, CA, 1996; e “Practice and Theory of Enzyme Immunoassays”, P. Tijssen, Elsevier Science Publishers, Amsterdam, 1985. Além disso, técnicas in vivo para a detecção de uma proteína de analito incluem introduzirem um sujeito um anticorpo anti-proteína de analito rotulado. Por exemplo, o anticorpo pode ser rotulado com um marcador radioativo cuja presença e local em um sujeito podem ser detectados por técnicas de imagiologia padrão.
[0497]Os anticorpos, anticorpos conjugados, anticorpos ativáveis e/ou anticorpos ativáveis conjugados da divulgação também são úteis em uma variedade de formulações diagnósticas e profiláticas. Em uma forma de realização, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado é administrado a pacientes que estão em risco de desenvolver um ou mais dos transtornos anteriormente mencionados. A predisposição de um paciente ou órgão a um ou mais dos transtornos anteriormente mencionados pode ser determinada usando marcadores genotípicos, sorológicos ou bioquímicos.
[0498]Em algumas formas de realização da divulgação, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado é administrado a indivíduos humanos diagnosticados com uma indicação clínica associada com um ou mais dos transtornos anteriormente mencionados. Durante a diagnose, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado é administrado para aliviar ou reverter os efeitos da indicação clínica.
[0499]Um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável, e/ou um anticorpo ativável conjugado da divulgação também são úteis na detecção de um alvo em amostras de paciente e consequentemente são úteis como diagnósticos. Por exemplo, os anticorpos e/ou anticorpos ativáveis, e versões conjugadas destes, da divulgação são usados em ensaios in vitro,por exemplo, ELISA, para detectar níveis de alvo em uma amostra de paciente.
[0500]Em uma forma de realização, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado da divulgação é imobilizado em um suporte sólido (por exemplo, o(s) reservatório(s) de uma placa microtituladora). O anticorpo, anticorpo conjugado, anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado imobilizado serve como um anticorpo de captura para qualquer alvo que pode estar presente em uma amostra de teste. Antes de contatar o anticorpo imobilizado e/ou anticorpo ativável, e/ou versões conjugadas destes, com uma amostra de paciente, o suporte sólido é enxaguado e tratado com um agente de bloqueio tal como proteína do leite ou albumina para impedir a adsorção não específica do analito.
[0501]Subsequentemente os reservatórios são tratados com uma amostra de teste suspeita de conter o antígeno, ou com uma solução contendo uma quantidade padrão do antígeno. Uma tal amostra é, por exemplo, uma amostra de soro de um sujeito suspeito de ter níveis de antígeno circulante considerado como sendo diagnóstico de uma patologia. Depois de remover por enxágue a amostra de teste ou padrão, o suporte sólido é tratado com um segundo anticorpo que é detectavelmente rotulado. O segundo anticorpo rotulado serve como um anticorpo de detecção. O nível de rótulo detectável é medido, e a concentração de antígeno alvo na amostra de teste é determinada por comparação com uma curva padrão desenvolvida a partir de amostras padrão.
[0502]Será avaliado que com base nos resultados obtidos usando os anticorpos e anticorpos ativáveis da divulgação, e versões conjugadas destes, em um ensaio de diagnóstico in vitro,é possível definir o estágio de uma doença em um sujeito com base nos níveis de expressão do antígeno alvo. Para uma doença dada, amostras de sangue são tomadas de sujeitos diagnosticados como estando em vários estágios na progressão da doença, e/ou em vários pontos no tratamento terapêutico da doença. Usando uma população de amostras que fornece resultados estatisticamente significantes para cada estágio de progressão ou terapia, uma faixa de concentrações do antígeno que pode ser considerada característica de cada estágio é designada.
[0503]Um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado também pode ser usado em métodos de diagnóstico e/ou imagiologia. Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos in vitro. Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos in vivo. Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos in situ.Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos ex vivo. Por exemplo, anticorpos ativáveis tendo uma CM enzimaticamente clivável podem ser usados para detectara presença ou ausência de uma enzima que é capaz de clivar a CM. Tais anticorpos ativáveis podem ser usados em diagnósticos, que podem incluir detecção in vivo (por exemplo, qualitativa ou quantitativa) de atividade enzimática (ou, em algumas formas de realização, um ambiente de potencial de redução aumentado tal como aquele que pode levar em consideração a redução de uma ligação de dissulfeto) através do acúmulo medido de anticorpos ativados (isto é, anticorpos que resultam da divagem de um anticorpo ativável) em uma célula ou tecido dados de um organismo hospedeiro dado. Tal acúmulo de anticorpos ativados indica não apenas que o tecido expressa atividade enzimática (ou um potencial de redução aumentado dependendo da natureza da CM) mas também que o tecido expressa o alvo ao qual o anticorpo ativado se liga.
[0504]Por exemplo, a CM pode ser selecionada como sendo substrato para pelo menos uma protease encontrada no sítio de um tumor, no sítio de uma infecção virai ou bacteriana em um sítio biologicamente confinado (por exemplo, tal como em um abscesso, em um órgão, e semelhantes), e semelhantes. O AB pode ser um que se liga a um antígeno alvo. Usando métodos como divulgado aqui, ou quando apropriado, métodos familiares a uma pessoa habilitada na técnica, um rótulo detectável (por exemplo, um rótulo fluorescente ou rótulo radioativo ou radiotraçador) pode ser conjugado a um AB ou outra região de um anticorpo e/ou anticorpo ativável. Rótulos detectáveis adequados são debatidos no contexto dos métodos de triagem acima e exemplos específicos adicionais são fornecidos abaixo. Usando um AB específico para uma proteína ou peptídeo do estado de doença, junto com pelo menos uma protease cuja atividade é elevada no tecido doente de interesse, anticorpos ativáveis exibirão uma taxa aumentada de ligação ao tecido doente em relação a tecidos onde a enzima específica de CM não está presente em um nível detectável ou está presente em um nível mais baixo do que no tecido doente ou é inativa (por exemplo, na forma de zimogênio ou em complexo com um inibidor). Visto que proteínas e peptídeos pequenos são rapidamente depurados do sangue pelo sistema de filtração renal, e porque a enzima específica para a CM não está presente em um nível detectável (ou está presente em níveis mais baixos em tecidos não doentes ou está presente em conformação inativa), o acúmulo de anticorpos ativados no tecido doente é realçado em relação aos tecidos não doentes.
[0505]Em um outro exemplo, anticorpos ativáveis podem ser usados para detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em uma amostra. Por exemplo, onde os anticorpos ativáveis contêm uma CM suscetível à clivagem por uma enzima, os anticorpos ativáveis podem ser usados para detectar (qualitativamente ou quantitativamente) a presença de uma enzima na amostra. Em um outro exemplo, onde os anticorpos ativáveis contêm uma CM suscetível à clivagem por agente redutor, os anticorpos ativáveis podem ser usados para detectar (qualitativamente ou quantitativamente) a presença de condições de redução em uma amostra. Para facilitar a análise nestes métodos, os anticorpos ativáveis podem ser detectavelmente rotulados, e podem ser ligados a um suporte (por exemplo, um suporte sólido, tal como uma lâmina ou pérola). O rótulo detectável pode ser posicionado em uma porção do anticorpo ativável que não é liberada a seguir da clivagem, por exemplo, o rótulo detectável pode ser um rótulo fluorescente temperado ou outro rótulo que não é detectável até que a clivagem tenha ocorrido. O ensaio pode ser conduzido, por exemplo, contatando-se os anticorpos ativáveis imobilizados, detectavelmente rotulados com uma amostra suspeita de conter uma enzima e/ou agente redutor por um tempo suficiente para que a clivagem ocorra, depois lavando-se para remover a amostra em excesso e contaminantes. A presença ou ausência do agente de clivagem (por exemplo, enzima ou agente redutor) na amostra depois é avaliada por uma mudança em sinal detectável dos anticorpos ativáveis antes do contato com a amostra por exemplo, a presença de e/ou um aumento no sinal detectável devido à clivagem do anticorpo ativável pelo agente de clivagem na amostra.
[0506]Tais métodos de detecção podem ser adaptados para também levarem consideração a detecção da presença ou ausência de um alvo que é capaz de se ligar ao AB dos anticorpos ativáveis quando clivado. Assim, os ensaios podem ser adaptados para avaliar a presença ou ausência de um agente de clivagem e a presença ou ausência de um alvo de interesse. A presença ou ausência do agente de clivagem pode ser detectada pela presença de e/ou um aumento no rótulo detectável dos anticorpos ativáveis como descrito acima, e a presença ou ausência do alvo pode ser detectada por detecção de um complexo de alvo-AB, por exemplo, pelo uso de um anticorpo anti-alvo detectavelmente rotulado.
[0507]Anticorpos ativáveis também são úteis em imagiologia in situpara a validação da ativação do anticorpo ativável, por exemplo, por clivagem de protease, e ligação a um alvo particular. A imunologia in situé uma técnica que permite a localização da atividade proteolítica e alvo em amostras biológicas tais como culturas celulares ou seções teciduais. Usando esta técnica, é possível confirmar tanto a ligação a um alvo dado quanto a atividade proteolítica com base na presença de um rótulo detectável (por exemplo, um rótulo fluorescente).
[0508]Estas técnicas são úteis com quaisquer células ou tecido congelados derivados de um sítio de doença (por exemplo, tecido tumoral) ou tecidos saudáveis. Estas técnicas também são úteis com amostras de célula ou tecido frescas.
[0509]Nestas técnicas, um anticorpo ativável é rotulado com um rótulo detectável. O rótulo detectável pode ser um corante fluorescente, (por exemplo, um fluoróforo, Isotiocianato de Fluoresceína (FITC), Isotiocianato de Rodamina (TRITC), um rótulo Alexa Fluor®), um corante próximo do infravermelho (NIR) (por exemplo, nanocristais Qdot®), um metal coloidal, um hapteno, um marcador radioativo, biotina e um reagente de amplificação tal como estreptavidina, ou uma enzima (por exemplo, peroxidase de raiz forte ou fosfatase alcalina).
[0510]A detecção do rótulo em uma amostra que foi incubada com o anticorpo ativável, rotulado indica que a amostra contém o alvo e contém uma protease que é específica para a CM do anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, a presença da protease pode ser confirmada usando inibidores de protease de espectro amplo tais como aqueles descritos aqui, e/ou usando-se um agente que é específico para a protease, por exemplo, um anticorpo tal como A11, que é específico para a protease matriptase e inibe a atividade proteolítica da matriptase; ver por exemplo, a Publicação Internacional Número WO 2010/129609, publicada em 11 de novembro de 2010. O mesmo método de usar inibidores de protease de espectro amplo tais como aqueles descritos aqui, e/ou usar um agente inibitório mais seletivo pode ser usado para identificar uma protease que é específica para a CM do anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, a presença do alvo pode ser confirmada usando um agente que é específico para o alvo, por exemplo, um outro anticorpo, ou o rótulo detectável pode ser competido com alvo não rotulado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não rotulado pode ser usado, com detecção por um anticorpo secundário rotulado ou sistema de detecção mais complexo.
[0511]Técnicas similares também são úteis para imagiologia in vivo onde a detecção do sinal fluorescente em um sujeito, por exemplo, um mamífero, incluindo um ser humano, indica que o sítio de doença contém o alvo e contém uma protease que é específica para a CM do anticorpo ativável.
[0512]Estas técnicas também são úteis em kits e/ou como reagentes para a detecção, identificação ou caracterização da atividade de protease em uma variedade de células, tecidos, e organismos com base na CM específica de protease no anticorpo ativável.
[0513]A divulgação fornece métodos de usar os anticorpos e/ou anticorpos ativáveis em uma variedade de indicações diagnósticas e/ou profiláticas. Por exemplo, a divulgação fornece métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e um alvo de interesse em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra com um anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, por exemplo, uma protease, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo de interesse, em que o anticorpo ativável em um estado não ativado, não clivado compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB e não é uma forma modificada de um parceiro de ligação natural do AB; e (b) em que, em um estado não ativado, não clivado, a MM interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em um estado ativado, clivado a MM não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo; e (ii) medindo-se um nível de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem e o alvo estão presentes no sujeito ou amostra e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem, o alvo ou tanto o agente de clivagem quanto o alvo estão ausentes e/ou não suficientemente presentes no sujeito ou amostra. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0514]A divulgação também fornece métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra com um anticorpo ativável na presença de um alvo de interesse, por exemplo, o alvo, em que o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, por exemplo, uma protease, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo de interesse, em que o anticorpo ativável em um estado não ativado, não clivado compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tern uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB e não é uma forma modificada de um parceiro de ligação natural do AB; e (b) em que, em um estado não ativado, não clivado, a MM interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em um estado ativado, clivado a MM não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo; e (ii) medindo-se um nível de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0515]A divulgação também fornece kits para o uso em métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e do alvo em um sujeito ou uma amostra, onde os kits incluem pelo menos um anticorpo ativável compreendendo uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, por exemplo, uma protease, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo de interesse, em que o anticorpo ativável em um estado não ativado, não clivado compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB e não é uma forma modificada de um parceiro de ligação natural do AB; e (b) em que, em um estado não ativado, não clivado, a MM interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em um estado ativado, clivado a MM não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo; e (ii) medindo-se um nível de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0516]A divulgação também fornece métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra com um anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável compreende uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, por exemplo, uma protease, um domínio de ligação a antígeno (AB) que especificamente se liga ao alvo, e um rótulo detectável, em que o anticorpo ativável em um estado não ativado, não clivado compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB e não é uma forma modificada de um parceiro de ligação natural do AB; em que, em um estado não ativado, não clivado, a MM interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em um estado ativado, clivado a MM não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo; e em que o rótulo detectável é posicionado em uma porção do anticorpo ativável que é liberada a seguir da clivagem da CM; e (ii) medindo-se um nível de rótulo detectável no sujeito ou amostra, em que um nível detectável do rótulo detectável no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra e em que nenhum nível detectável do rótulo detectável no sujeito ou amostra indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0517]A divulgação também fornece kits para o uso em métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e do alvo em um sujeito ou uma amostra, onde os kits incluem pelo menos um anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado (por exemplo, um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado) descrito aqui para o uso em contatar um sujeito ou amostra biológica e meios para detectar o nível de anticorpo ativável ativado e/ou anticorpo ativável conjugado no sujeito ou amostra biológica, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem e o alvo estão presentes no sujeito ou amostra biológica e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem, o alvo ou tanto o agente de clivagem quanto o alvo estão ausentes e/ou não suficientemente presentes no sujeito ou amostra biológica, tal que a ligação ao alvo e/ou clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica.
[0518]A divulgação também fornece métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra biológica com um anticorpo ativável na presença do alvo, e (ii) medindo-se um nível de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra biológica e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra biológica em um nível detectável, tal que a clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica. Um tal anticorpo ativável inclui uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, por exemplo, uma protease, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo, em que o anticorpo ativável em um estado não clivado (isto é, não ativado) compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB; e (b) em que a MM do anticorpo ativável em um estado não clivado interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em que a MM de um anticorpo ativável em um estado clivado (isto é, ativado) não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é ligado à porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é ligado à porção clivável terminal N ao sítio de clivagem de protease. Em algumas formas de realização, um único sítio de ligação a antígeno do AB é mascarado. Em algumas formas de realização em que um anticorpo da divulgação tem pelo menos dois sítios de ligação a antígeno, pelo menos um sítio de ligação a antígeno é mascarado e pelo menos um sítio de ligação a antígeno não é mascarado. Em algumas formas de realização todos os sítios de ligação a antígeno são mascarados. Em algumas formas de realização, a etapa de medição inclui o uso de um reagente secundário compreendendo um rótulo detectável.
[0519]A divulgação também fornece kits para o uso em métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e do alvo em um sujeito ou uma amostra, onde os kits incluem pelo menos um anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado descrito aqui para o uso em contatar um sujeito ou amostra biológica com um anticorpo ativável na presença do alvo, e medir um nível de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra biológica e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra biológica em um nível detectável, tal que a clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica. Um tal anticorpo ativável inclui uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, por exemplo, uma protease, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo, em que o anticorpo ativável em um estado não clivado (isto é, não ativado) compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB; e (b) em que a MM do anticorpo ativável em um estado não clivado interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em que a MM de um anticorpo ativável em um estado clivado (isto é, ativado) não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é ligado à porção de mascaramento. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é ligado à porção clivável terminal N ao sítio de clivagem de protease. Em algumas formas de realização, um único sítio de ligação a antígeno do AB é mascarado. Em algumas formas de realização em que um anticorpo da divulgação tem pelo menos dois sítios de ligação a antígeno, pelo menos um sítio de ligação a antígeno é mascarado e pelo menos um sítio de ligação a antígeno não é mascarado. Em algumas formas de realização todos os sítios de ligação a antígeno são mascarados. Em algumas formas de realização, a etapa de medição inclui o uso de um reagente secundário compreendendo um rótulo detectável.
[0520]A divulgação também fornece kits para o uso em métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em um sujeito ou uma amostra, onde os kits incluem pelo menos um anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado descrito aqui para o uso em contatar um sujeito ou amostra biológica e meios para detectar o nível de anticorpo ativável ativado e/ou anticorpo ativável conjugado no sujeito ou amostra biológica, em que o anticorpo ativável inclui um rótulo detectável que é posicionado em uma porção do anticorpo ativável que é liberada a seguir da clivagem da CM, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra biológica tal que a ligação ao alvo e/ou clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica, e em que nenhum nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra biológica em um nível detectável.
[0521]A divulgação fornece métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e do alvo em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra biológica com um anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável inclui um rótulo detectável que é posicionado em uma porção do anticorpo ativável que é liberado a seguir da clivagem da CM e (ii) medindo-se um nível de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem, o alvo ou tanto o agente de clivagem quanto o alvo estão ausentes e/ou não suficientemente presentes no sujeito ou amostra biológica, tal que a ligação ao alvo e/ou clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica, e em que um nível detectável reduzido de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem e o alvo estão presentes no sujeito ou amostra biológica. Um nível reduzido de rótulo detectável é, por exemplo, uma redução de cerca de 5 %, cerca de 10 %, cerca de 15 %, cerca de 20 %, cerca de 25 %, cerca de 30 %, cerca de 35 %, cerca de 40 %, cerca de 45 %, cerca de 50 %, cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 % e/ou cerca de 100 %. Um tal anticorpo ativável inclui uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo, em que o anticorpo ativável em um estado não clivado (isto é, não ativado) compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB; e (b) em que a MM do anticorpo ativável em um estado não clivado interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em que a MM de um anticorpo ativável em um estado clivado (isto é, ativado) não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0522]A divulgação também fornece kits para o uso em métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e do alvo em um sujeito ou uma amostra, onde os kits incluem pelo menos um anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado descrito aqui para o uso em contatar um sujeito ou amostra biológica e meios para detectar o nível de anticorpo ativável ativado e/ou anticorpo ativável conjugado no sujeito ou amostra biológica, em que um nível detectável de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem, o alvo ou tanto o agente de clivagem quanto o alvo estão ausentes e/ou não suficientemente presentes no sujeito ou amostra biológica, tal que a ligação ao alvo e/ou clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica, e em que um nível detectável reduzido de anticorpo ativável ativado no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem e o alvo estão presentes no sujeito ou amostra biológica. Um nível reduzido de rótulo detectável é, por exemplo, uma redução de cerca de 5 %, cerca de 10 %, cerca de 15 %, cerca de 20 %, cerca de 25 %, cerca de 30 %, cerca de 35 %, cerca de 40 %, cerca de 45 %, cerca de 50 %, cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 % e/ou cerca de 100 %.
[0523]A divulgação também fornece métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em um sujeito ou uma amostra (i) contatando-se um sujeito ou amostra biológica com um anticorpo ativável, em que o anticorpo ativável inclui um rótulo detectável que é posicionado em uma porção do anticorpo ativável que é liberada a seguir da clivagem da CM; e (ii) medindo-se um nível de rótulo detectável no sujeito ou amostra biológica, em que um nível detectável do rótulo detectável no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está ausente e/ou não suficientemente presente no sujeito ou amostra biológica em um nível detectável, tal que a clivagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica, e em que um nível detectável reduzido do rótulo detectável no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de clivagem está presente no sujeito ou amostra biológica. Um nível reduzido de rótulo detectável é, por exemplo, uma redução de cerca de 5 %, cerca de 10 %, cerca de 15 %, cerca de 20 %, cerca de 25 %, cerca de 30 %, cerca de 35 %, cerca de 40 %, cerca de 45 %, cerca de 50 %, cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 % e/ou cerca de 100 %. Um tal anticorpo ativável inclui uma porção de mascaramento (MM), uma porção clivável (CM) que é clivada pelo agente de clivagem, e um domínio de ligação a antígeno ou fragmento deste (AB) que especificamente se liga ao alvo, em que o anticorpo ativável em um estado não clivado (isto é, não ativado) compreende um arranjo estrutural do término N ao término C como segue: MM-CM-AB ou AB-CM-MM; (a) em que a MM é um peptídeo que inibe a ligação do AB ao alvo, e em que a MM não tem uma sequência de aminoácido de um parceiro de ligação que ocorre naturalmente do AB; e (b) em que a MM do anticorpo ativável em um estado não clivado interfere com a ligação específica do AB ao alvo, e em que a MM de um anticorpo ativável em um estado clivado (isto é, ativado) não interfere ou compete com a ligação específica do AB ao alvo. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0524]A divulgação também fornece kits para o uso em métodos de detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem de interesse em um sujeito ou uma amostra, onde os kits incluem pelo menos um anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado descrito aqui para o uso em contatar um sujeito ou amostra biológica e meios para detectar o nível de anticorpo ativável ativado e/ou anticorpo ativável conjugado no sujeito ou amostra biológica, em que o anticorpo ativável inclui um rótulo detectável que é posicionado em uma porção do anticorpo ativável que é liberada a seguir da divagem da CM, em que um nível detectável do rótulo detectável no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de divagem, o alvo, ou tanto o agente de divagem quanto o alvo estão ausentes e/ou não suficientemente presentes no sujeito ou amostra biológica, tal que a ligação ao alvo e/ou divagem de protease do anticorpo ativável não pode ser detectada no sujeito ou amostra biológica, e em que um nível detectável reduzido do rótulo detectável no sujeito ou amostra biológica indica que o agente de divagem e o alvo estão presentes no sujeito ou amostra biológica. Um nível reduzido de rótulo detectável é, por exemplo, uma redução de cerca de 5 %, cerca de 10 %, cerca de 15 %, cerca de 20 %, cerca de 25 %, cerca de 30 %, cerca de 35 %, cerca de 40 %, cerca de 45 %, cerca de 50 %, cerca de 55 %, cerca de 60 %, cerca de 65 %, cerca de 70 %, cerca de 75 %, cerca de 80 %, cerca de 85 %, cerca de 90 %, cerca de 95 % e/ou cerca de 100 %.
[0525]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o anticorpo ativável inclui um rótulo detectável. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo detectável inclui um agente de imagiologia, um agente de contraste, uma enzima, um rótulo fluorescente, um cromóforo, um corante, um ou mais íons metálicos, ou um rótulo com base em ligante. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o agente de imagiologia compreende um radioisótopo. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o radioisótopo é índio ou tecnécio. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o agente de contraste compreende iodo, gadolínio ou óxido de ferro. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a enzima compreende peroxidase de raiz forte, fosfatase alcalina, ou β-galactosidase. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo fluorescente compreende proteína fluorescente amarela (YFP), proteína fluorescente ciano (CFP), proteína fluorescente verde (GFP), proteína fluorescente vermelha modificada (mRFP), proteína fluorescente vermelha tdimer2 (RFP tdimer2), HCRED, ou um derivado de európio. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo luminescente compreende um derivado de N- metilacridio. Em algumas formas de realização destes métodos, o rótulo compreende um rótulo Alexa Fluor®, tal como Alex Fluor® 680 ou Alexa Fluor® 750. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o rótulo com base em ligante compreende biotina, avidina, estreptavidina ou um ou mais haptenos.
[0526]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o sujeito é um mamífero. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o sujeito é um ser humano. Em algumas formas de realização, o sujeito é um mamífero não humano, tal como um primata não humano, animal de estimação (por exemplo, gato, cão, cavalo), animal de criação, animal de trabalho, ou animal de zoológico. Em algumas formas de realização, o sujeito é um roedor.
[0527]Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método in vivo. Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método in situ.Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método ex vivo. Em algumas formas de realização destes métodos, o método é um método in vitro.
[0528]Em algumas formas de realização, imagiologia in situe/ou imagiologia in vivo são úteis em métodos para identificar quais os pacientes a tratar. Por exemplo, em imagiologia in situ,os anticorpos ativáveis são usados para triar amostras de paciente para identificar aqueles pacientes tendo a(s) protease(s) e alvo(s) apropriado(s) no local apropriado, por exemplo, em um sítio de tumor.
[0529]Em algumas formas de realização a imagiologia in situ é usada para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo ativável da divulgação. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para o alvo (por exemplo, o alvo) quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo ativável sendo testado (por exemplo, acumulam anticorpos ativados no sítio de doença) são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo para qualquer um ou ambos do alvo (por exemplo, o alvo) e da protease que cliva o substrato em a CM no anticorpo ativável sendo testado usando estes métodos poderiam ser identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia. Em algumas formas de realização, tais pacientes que testam negativo com respeito a um primeiro anticorpo ativável podem ser testados com outros anticorpos ativáveis compreendendo CMs diferentes até que um anticorpo ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença). Em algumas formas de realização, o paciente depois é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo ativável para o qual o paciente testou positivo.
[0530]Em algumas formas de realização a imagiologia in vivo é usada para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo ativável da divulgação. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para o alvo (por exemplo, o alvo) quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo ativável sendo testado (por exemplo, acumulam anticorpos ativados no sítio de doença) são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo poderiam ser identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia. Em algumas formas de realização, tais pacientes que testam negativo com respeito a um primeiro anticorpo ativável podem ser testados com outros anticorpos ativáveis compreendendo CMs diferentes até que um anticorpo ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença). Em algumas formas de realização, o paciente depois é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo ativável para o qual o paciente testou positivo.
[0531]Em algumas formas de realização dos métodos e kits, o método ou kit é usado para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo ativável da divulgação. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para o alvo (por exemplo, o alvo) quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo ativável sendo testado nestes métodos são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo tanto para os alvos (por exemplo, o alvo) quanto para a protease que cliva o substrato na CM no anticorpo ativável sendo testado usando estes métodos poderiam ser identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia. Em algumas formas de realização, tais pacientes podem ser testados com outros anticorpos ativáveis até que um anticorpo ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença). Em algumas formas de realização, pacientes que testam negativo para qualquer um do alvo (por exemplo, o alvo) são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Em algumas formas de realização, pacientes que testam negativo para qualquer um do alvo (por exemplo, o alvo) são identificados como não sendo candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Em algumas formas de realização, tais pacientes podem ser testados com outros anticorpos ativáveis até que um anticorpo ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença). Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável é um anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não é conjugado a um agente. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o rótulo detectável é posicionado no AB. Em algumas formas de realização, a medição do nível de anticorpo ativável no sujeito ou amostra é realizada usando um reagente secundário que especificamente se liga ao anticorpo ativado, em que o reagente compreende um rótulo detectável. Em algumas formas de realização, o reagente secundário é um anticorpo compreendendo um rótulo detectável.
[0532]Em algumas formas de realização, um método ou kit é usado para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo ativável anti-alvo e/ou anticorpo ativável conjugado (por exemplo, anticorpo ativável ao qual um agente terapêutico é conjugado) da divulgação, seguido por tratamento administrando-se este anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado a um sujeito em necessidade deste. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para os alvos (por exemplo, o alvo) quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado sendo testado nestes métodos são identificados como candidatos adequados para o tratamento com tal anticorpo e/ou um tal anticorpo ativável conjugado compreendendo uma tal CM, e o paciente depois é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado que foi testado. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo para qualquer um ou ambos do alvo (por exemplo, o alvo) e da protease que cliva o substrato na CM no anticorpo ativável sendo testado usando estes métodos poderiam ser identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia. Em algumas formas de realização, tais pacientes podem ser testados com outro anticorpo e/ou anticorpo ativável conjugado até que um anticorpo e/ou anticorpo ativável conjugado adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença). Em algumas formas de realização, o paciente depois é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado para o qual o paciente testou positivo.
[0533]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a MM é um peptídeo tendo um comprimento de cerca de 4 a 40 aminoácidos. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o anticorpo ativável compreende um peptídeo ligador, em que o peptídeo ligador é posicionado entre a MM e a CM. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o anticorpo ativável compreende um peptídeo ligador, onde o peptídeo ligador é posicionado entre o AB e a CM. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o anticorpo ativável compreende um primeiro peptídeo ligador (L1) e um segundo peptídeo ligador (L2), em que o primeiro peptídeo ligador é posicionado entre a MM e a CM e o segundo peptídeo ligador é posicionado entre o AB e a CM. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, cada um de L1 e L2 é um peptídeo de cerca de 1 a 20 aminoácidos em comprimento, e em que cada um de L1 e L2 não precisa ser o mesmo ligador. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, um ou ambos de L1 e L2 compreendem um polímero de glicina-serina. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, pelo menos um de L1 e L2 compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em (GS)n, (GSGGS)n (SEQ ID NO: 191) e (GGGS)n (SEQ ID NO: 192), onde n é um número inteiro de pelo menos um. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, pelo menos um de L1 e L2 compreende uma sequência de aminoácido tendo a fórmula (GGS)n, onde n é um número inteiro de pelo menos um. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, pelo menos um de L1 e L2 compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo consistindo em Gly-Gly-Ser-Gly (SEQ ID NO. 193), Gly-Gly Ser Gly-Gly (SEQ ID NO: 194), Gly-Ser-Gly-Ser-Gly (SEQ ID NO: 195), Gly-Ser-Gly-Gly- Gly (SEQ ID NO: 196), Gly-Gly-Gly-Ser-Gly (SEQ ID NO: 197), e Gly-Ser-Ser-Ser-Gly (SEQ ID NO: 198).
[0534]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o AB compreende uma sequência de anticorpo ou fragmento de anticorpo selecionada das sequências de anticorpo reativas cruzadas apresentadas aqui. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o AB compreende um fragmento Fab, um scFv ou um anticorpo de cadeia única (scAb).
[0535]Em algumas formas de realização destes métodos e kits, o agente de divagem é uma protease que é co-localizada no sujeito ou amostra com o alvo e a CM é um polipeptídeo que funciona como um substrato para a protease, em que a protease cliva a CM no anticorpo ativável quando o anticorpo ativável é exposto à protease. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a CM é um polipeptídeo de até 15 aminoácidos em comprimento. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a CM é ligada no término N do AB. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a CM é ligada ao término C do AB. Em algumas formas de realização destes métodos e kits, a CM é ligada ao término N de uma cadeia VL do AB.
[0536]Os anticorpos, anticorpos conjugados, anticorpos ativáveis e/ou anticorpos ativáveis conjugados da divulgação são usados em formulações diagnósticas e profiláticas. Em uma forma de realização, um anticorpo ativável é administrado a pacientes que estão em risco de desenvolver uma ou mais da inflamação, transtornos inflamatórios, câncer ou outros transtornos anteriormente mencionados.
[0537]A predisposição de um paciente ou órgão a um ou mais dos transtornos anteriormente mencionados pode ser determinada usando marcadores genotípicos, sorológicos ou bioquímicos.
[0538]Em algumas formas de realização da divulgação, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado é administrado a indivíduos humanos diagnosticados com uma indicação clínica associada com um ou mais dos transtornos anteriormente mencionados. Durante a diagnose, um anticorpo, um anticorpo conjugado, um anticorpo ativável e/ou um anticorpo ativável conjugado é administrado para aliviar ou reverter os efeitos da indicação clínica.
[0539]Anticorpos, anticorpos conjugados, anticorpos ativáveis e/ou anticorpos ativáveis conjugados da divulgação também são úteis na detecção do alvo em amostras de paciente e consequentemente são úteis como diagnósticos. Por exemplo, os anticorpos, anticorpos conjugados, o anticorpos ativáveis e/ou anticorpos ativáveis conjugados da divulgação são usados em ensaios in vitro,por exemplo, ELISA, para detectar níveis de alvo em uma amostra de paciente.
[0540]Em uma forma de realização, um anticorpo e/ou anticorpo ativável da divulgação é imobilizado em um suporte sólido (por exemplo, o(s) reservatório(s) de uma placa microtituladora). O anticorpo imobilizado e/ou anticorpo ativável serve como um anticorpo de captura para qualquer alvo que possa estar presente em uma amostra de teste. Antes de contatar o anticorpo imobilizado e/ou anticorpo ativável com uma amostra de paciente, o suporte sólido é enxaguado e tratado com um agente de bloqueio tal como proteína do leite ou albumina para impedir a adsorção não específica do analito.
[0541]Subsequentemente os reservatórios são tratados com uma amostra de teste suspeita de conter o antígeno, ou com uma solução contendo uma quantidade padrão do antígeno. Uma tal amostra é, por exemplo, uma amostra de soro de um sujeito suspeito de ter níveis de antígeno circulante considerados como sendo diagnósticos de uma patologia. Depois de remover por enxágue a amostra de teste ou padrão, o suporte sólido é tratado com um segundo anticorpo que é detectavelmente rotulado. O segundo anticorpo rotulado serve como um anticorpo de detecção. O nível de rótulo detectável é medido, e a concentração do antígeno alvo na amostra de teste é determinada por comparação com uma curva padrão desenvolvida a partir das amostras padrão.
[0542]Será avaliado que com base nos resultados obtidos usando os anticorpos e/ou anticorpos ativáveis da divulgação em um ensaio de diagnóstico in vitro, é possível definir o estágio uma doença em um sujeito com base nos níveis de expressão do antígeno alvo. Para uma doença dada, amostras de sangue são tomadas de sujeitos diagnosticados como estando em vários estágios na progressão da doença, e/ou em vários pontos no tratamento terapêutico da doença. Usando uma população de amostras que forneça resultados estatisticamente significantes para cada estágio de progressão ou terapia, uma faixa de concentrações do antígeno que pode ser considerada característica de cada estágio é designada.
[0543]Anticorpos, anticorpos conjugados, anticorpos ativáveis e/ou anticorpos ativáveis conjugados também podem ser usados em métodos de diagnóstico e/ou imagiologia. Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos in vitro. Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos in vivo. Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos in situ.Em algumas formas de realização, tais métodos são métodos ex vivo. Por exemplo, anticorpos ativáveis tendo uma CM enzimaticamente clivável podem ser usados para detectara presença ou ausência de uma enzima que é capaz de clivara CM. Tais anticorpos ativáveis podem ser usados em diagnósticos, que podem incluir a detecção in vivo (por exemplo, qualitativa ou quantitativa) de atividade enzimática (ou, em algumas formas de realização, um ambiente de potencial de redução aumentado tal como aquele que pode levar em consideração a redução de uma ligação de dissulfeto) através do acúmulo medido de anticorpos ativados (isto é, anticorpos que resultam da clivagem de um anticorpo ativável) em uma célula ou tecido dados de um organismo hospedeiro dado. Tal acúmulo de anticorpos ativados indica não apenas que o tecido expressa atividade enzimática (ou um potencial de redução aumentado dependendo da natureza da CM) mas também que o tecido expressa o alvo ao qual o anticorpo ativado se liga.
[0544]Por exemplo, a CM pode ser selecionada para ser um substrato de protease para uma protease encontrada no sítio de um tumor, no sítio de uma infecção viral ou bacteriana em um sítio biologicamente confinado (por exemplo, tal como em um abscesso, em um órgão, e semelhantes), e semelhantes. O AB pode ser um que se liga a um antígeno alvo. Usando métodos familiares a uma pessoa habilitada na técnica, um rótulo detectável (por exemplo, um rótulo fluorescente ou rótulo radioativo ou radiotraçador) pode ser conjugado a um AB ou outra região de um anticorpo ativável. Rótulos detectáveis adequados são debatidos no contexto dos métodos de triagem acima e exemplos específicos adicionais são fornecidos abaixo. Usando um AB específico para uma proteína ou peptídeo do estado de doença, junto com uma protease cuja atividade é elevada no tecido doente de interesse, anticorpos ativáveis exibirão uma taxa aumentada de ligação ao tecido doente em relação aos tecidos onde a enzima específica de CM não está presente em um nível detectável ou está presente em um nível mais baixo do que no tecido doente ou é inativa (por exemplo, em forma de zimogênio ou em complexo com um inibidor). Visto que proteínas e peptídeos pequenos são rapidamente depurados do sangue pelo sistema de filtração renal, e porque a enzima específica para a CM não está presente em um nível detectável (ou está presente em níveis mais baixos em tecidos não doentes ou está presente em conformação inativa), o acúmulo de anticorpos ativados no tecido doente é realçado em relação aos tecidos não doentes.
[0545]Em um outro exemplo, anticorpos ativáveis podem ser usados para detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem em uma amostra. Por exemplo, onde os anticorpos ativáveis contêm uma CM suscetível à clivagem por uma enzima, os anticorpos ativáveis podem ser usados para detectar (qualitativamente ou quantitativamente) a presença de uma enzima na amostra. Em um outro exemplo, onde os anticorpos ativáveis contêm uma CM suscetível à clivagem pelo agente redutor, os anticorpos ativáveis podem ser usados para detectar (qualitativamente ou quantitativamente) a presença de condições de redução em uma amostra. Para facilitar a análise nestes métodos, os anticorpos ativáveis podem ser detectavelmente rotulados, e podem ser ligados a um suporte (por exemplo, um suporte sólido, tal como uma lâmina ou pérola). O rótulo detectável pode ser posicionado em uma porção do anticorpo ativável que não é liberada a seguir da clivagem, por exemplo, o rótulo detectável pode ser um rótulo fluorescente temperado ou outro rótulo que não é detectável até que a clivagem tenha ocorrido. O ensaio pode ser conduzido, por exemplo, contatando-se os anticorpos ativáveis imobilizados, detectavelmente rotulados com uma amostra suspeita de conter uma enzima e/ou agente redutor por um tempo suficiente para que a clivagem ocorra, depois lavando-se para remover a amostra em excesso e os contaminantes. A presença ou ausência do agente de clivagem (por exemplo, enzima ou agente redutor) na amostra depois é avaliada por uma mudança em sinal detectável dos anticorpos ativáveis antes do contato com a amostra por exemplo, a presença de e/ou um aumento no sinal detectável devido à clivagem do anticorpo ativável pelo agente de clivagem na amostra.
[0546]Tais métodos de detecção podem ser adaptados para também levarem consideração a detecção da presença ou ausência de um alvo que é capaz de se ligar ao AB dos anticorpos ativáveis quando clivado. Assim, os ensaios podem ser adaptados para avaliar a presença ou ausência de um agente de clivagem e a presença ou ausência de um alvo de interesse. A presença ou ausência do agente de clivagem pode ser detectada pela presença de e/ou um aumento no rótulo detectável dos anticorpos ativáveis como descrito acima, e a presença ou ausência do alvo pode ser detectada por detecção de um complexo de alvo-AB por exemplo, pelo uso de um anticorpo anti-alvo detectavelmente rotulado.
[0547]Anticorpos ativáveis também são úteis em imagiologia in situpara a validação da ativação do anticorpo ativável, por exemplo, por clivagem de protease, e ligação a um alvo particular. A imagiologia in situé uma técnica que permite a localização da atividade proteolítica e alvo em amostras biológicas tais como culturas celulares ou seções teciduais. Usando esta técnica, é possível confirmar tanto a ligação a um alvo dado quanto a atividade proteolítica com base na presença de um rótulo detectável (por exemplo, um rótulo fluorescente).
[0548]Estas técnicas são úteis com quaisquer células ou tecido congelados derivados de um sítio de doença (por exemplo, tecido tumoral) ou tecidos saudáveis. Estas técnicas também são úteis com amostras de célula ou tecido frescas.
[0549]Nestas técnicas, um anticorpo ativável é rotulado com um rótulo detectável. O rótulo detectável pode ser um corante fluorescente, (por exemplo, Isotiocianato de Fluoresceína (FITC), Isotiocianato de Rodamina (TRITC), um corante próximo do infravermelho (NIR) (por exemplo, nanocristais Qdot®), um metal coloidal, um hapteno, um marcador radioativo, biotina e um reagente de amplificação tal como estreptavidina, ou uma enzima (por exemplo, peroxidase de raiz forte ou fosfatase alcalina).
[0550]A detecção do rótulo em uma amostra que foi incubada com o anticorpo ativável, rotulado indica que a amostra contém o alvo e contém uma protease que é específica para a CM do anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, a presença da protease pode ser confirmada usando inibidores de protease de espectro amplo tais como aqueles descritos aqui, e/ou usando-se um agente que é específico para a protease, por exemplo, um anticorpo tal como A11, que é específico para a protease matriptase e inibe a atividade proteolítica da matriptase; ver por exemplo, Publicação Internacional Número WO 2010/129609, publicada em 11 de novembro de 2010. O mesmo método de usar inibidores de protease de espectro amplo tais como aqueles descritos aqui, e/ou usando-se um agente inibitório mais seletivo pode ser usado para identificar uma protease ou classe de proteases específicas para a CM do anticorpo ativável. Em algumas formas de realização, a presença do alvo pode ser confirmada usando um agente que é específico para o alvo, por exemplo, um outro anticorpo, ou o rótulo detectável pode ser competido com o alvo não rotulado. Em algumas formas de realização, o anticorpo ativável não rotulado pode ser usado, com detecção por um anticorpo secundário rotulado ou sistema de detecção mais complexo.
[0551]Técnicas similares também são úteis para imagiologia ín vivo onde a detecção do sinal fluorescente em um sujeito, por exemplo, um mamífero, incluindo um ser humano, indica que o sítio de doença contém o alvo e contém uma protease que é específica para a CM do anticorpo ativável.
[0552]Estas técnicas também são úteis em kits e/ou como reagentes para a detecção, identificação ou caracterização da atividade de protease em uma variedade de células, tecidos, e organismos com base na CM específica de protease no anticorpo ativável.
[0553]Em algumas formas de realização, imagiologia in situe/ou imagiologia in vivo são úteis em métodos para identificar quais os pacientes a tratar. Por exemplo, na imagiologia in situ,os anticorpos ativáveis são usados para triar amostras de paciente para identificar aqueles pacientes tendo a(s) protease(s) e alvo(s) apropriado(s) no local apropriado, por exemplo, em um sítio de tumor.
[0554]Em algumas formas de realização a imagiologia in situé usada para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo ativável da divulgação. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para o alvo quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo ativável sendo testado (por exemplo, acumulam anticorpos ativados no sítio de doença) são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo para qualquer um ou ambos do alvo e da protease que cliva o substrato na CM no anticorpo ativável sendo testado usando estes métodos são identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia (isto é, não adequados para o tratamento com o anticorpo ativável sendo testado). Em algumas formas de realização, tais pacientes que testam negativo com respeito a um primeiro anticorpo ativável podem ser testados com outros anticorpos ativáveis compreendendo CMs diferentes até que um anticorpo ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença).
[0555]Em algumas formas de realização a imagiologia in vivo é usada para identificar ou de outro modo refinar uma população de pacientes adequada para o tratamento com um anticorpo ativável da divulgação. Por exemplo, pacientes que testam positivo tanto para o alvo quanto para uma protease que cliva o substrato na porção clivável (CM) do anticorpo ativável sendo testado (por exemplo, acumulam anticorpos ativados no sítio de doença) são identificados como candidatos adequados para o tratamento com um tal anticorpo ativável compreendendo uma tal CM. Do mesmo modo, pacientes que testam negativo são identificados como candidatos adequados para uma outra forma de terapia (isto é, não adequados para o tratamento com o anticorpo ativável sendo testado). Em algumas formas de realização, tais pacientes que testam negativo com respeito a um primeiro anticorpo ativável podem ser testados com outros anticorpos ativáveis compreendendo CMs diferentes até que um anticorpo ativável adequado para o tratamento seja identificado (por exemplo, um anticorpo ativável compreendendo uma CM que é clivada pelo paciente no sítio da doença).
[0556]Os anticorpos, anticorpos conjugados, anticorpos ativáveis e/ou anticorpos ativáveis conjugados da divulgação (também referidos aqui como “compostos ativos”), e derivados, fragmentos, análogos e homólogos destes, podem ser incorporados em composições farmacêuticas adequadas para a administração. Tais composições tipicamente compreendem o anticorpo, o anticorpo conjugado, anticorpo ativável e/ou anticorpo ativável conjugado e um portador farmaceuticamente aceitável. Como usado aqui, o termo “portador farmaceuticamente aceitável” é intencionado a incluir qualquer um e todos os solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e de retardo de absorção, e semelhantes, compatíveis com a administração farmacêutica. Portadores adequados são descritos na edição mais recente de Remington’s Pharmaceutical Sciences, um texto de referência padrão no campo, que é incorporado aqui por referência. Exemplos adequados de tais portadores ou diluentes incluem, mas não são limitados a, água, solução salina, soluções de Ringer, solução de dextrose, e albumina sérica humana a 5 %. Lipossomos e veículos não aquosos tais como óleos fixos também podem ser usados. O uso de tais meios e agentes para substâncias farmaceuticamente ativas é bem conhecido na técnica. Exceto na medida em que qualquer meio ou agente convencional seja incompatível com o composto ativo, o uso deste nas composições é considerado. Compostos ativos suplementares também podem ser incorporados nas composições.
[0557]Uma composição farmacêutica da divulgação é formulada para ser compatível com sua via intencionada de administração. Exemplos de vias de administração incluem administração parenteral, por exemplo, intravenosa, intradérmica, subcutânea, oral (por exemplo, inalação), transdérmica (isto é, tópica), transmucosa, e retal. Soluções ou suspensões usadas para a aplicação parenteral, intradérmica, ou subcutânea podem incluir os componentes seguintes: um diluente estéril tal como água para injeção, solução salina, óleos fixos, polietilenoglicóis, glicerina, propileno glicol ou outros solventes sintéticos; agentes antibacterianos tais como álcool benzílico ou metil parabenos; antioxidantes tais como ácido ascórbico ou bissulfito de sódio; agentes quelantes tais como ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA); tampões tais como acetatos, citratos ou fosfatos, e agentes para o ajuste de tonicidade tal como cloreto de sódio ou dextrose. O pH pode ser ajustado com ácidos ou bases, tais como ácido clorídrico ou hidróxido de sódio. A preparação parenteral pode ser incluída em ampolas, seringas descartáveis ou frascos de doses múltiplas fabricados de vidro ou plástico.
[0558]Composições farmacêuticas adequadas para uso injetável incluem soluções aquosas estéreis (onde solúvel em água) ou dispersões e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções ou dispersão injetáveis estéreis. Para a administração intravenosa, portadores adequados incluem solução salina fisiológica, água bacteriostática, Cremophor EL™ (BASF, Parsippany, N.J.) ou solução salina tamponada com fosfato (PBS). Em todos os casos, a composição deve ser estéril e deve ser fluida à medida que capacidade de injeção fácil existe. Ela deve ser estável sob as condições de fabricação e armazenamento e deve ser preservada contra a ação contaminante de microorganismos tais como bactérias e fungos. O portador pode ser um meio solvente ou de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (porexemplo, glicerol, propileno glicol, e polietilenoglicol líquido, e semelhantes), e misturas adequadas destes. A fluidez apropriada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de um revestimento tal como lecitina, pela manutenção do tamanho de partícula necessário no caso de dispersão e pelo uso de tensoativos. A prevenção da ação de microorganismos pode ser obtida por vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal e semelhantes. Em algumas formas de realização, será desejável incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, poliálcoois tais como manitol, sorbitol, cloreto de sódio na composição. A absorção prolongada das composições injetáveis pode ser ocasionada incluindo-se na composição um agente que retarda a absorção, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelatina.
[0559]Soluções injetáveis estéreis podem ser preparadas incorporando-se o composto ativo na quantidade necessária em um solvente apropriado com um ou uma combinação de ingredientes enumerados acima, conforme necessário, seguido por esterilização filtrada. Geralmente, dispersões são preparadas incorporando-se o composto ativo em um veículo estéril que contém um meio de dispersão básico e os ingredientes adicionais necessários daqueles enumerados acima. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, métodos de preparação são secagem a vácuo e liofilização que produzem um pó do ingrediente ativo mais qualquer ingrediente desejado adicional a partir de uma solução filtrada previamente estéril deste.
[0560]Composições orais geralmente incluem um diluente inerte ou um portador comestível. Elas podem ser incluídas em cápsulas de gelatina ou comprimidas em tabletes. Para o propósito de administração terapêutica oral, o composto ativo pode ser incorporado com excipientes e usado na forma de tabletes, pastilhas, ou cápsulas. Composições orais também podem ser preparadas usando um portador fluido para o uso como um colutório, em que o composto no portador fluido é aplicado oralmente e bochechado e expectorado ou engolido. Agentes de ligação, e/ou materiais adjuvantes farmaceuticamente compatíveis podem ser incluídos como parte da composição. Os tabletes, pílulas, cápsulas, pastilhas e semelhantes podem conter qualquer um dos ingredientes seguintes, ou compostos de uma natureza similar: um aglutinante tal como celulose microcristalina, goma tragacanto ou gelatina; um excipiente tal como amido ou lactose, um agente desintegrante tal como ácido algínico, Primogel, ou amido de milho; um lubrificante tal como estearato de magnésio ou Sterotes; um deslizante tal como dióxido de silício coloidal; um agente adoçante tal como sacarose ou sacarina; ou um agente flavorizante tal como hortelã-pimenta, salicilato de metila, ou flavorizante de laranja.
[0561]Para a administração por inalação, os compostos são entregues na forma de uma pulverização em aerossol a partir de recipiente pressurizado ou dispensador que contém um propelente adequado, por exemplo, um gás tal como dióxido de carbono, ou um nebulizador.
[0562]A administração sistêmica também pode ser por meios transmucosos ou transdérmicos. Para a administração transmucosa ou transdérmica, penetrantes apropriados para a barreira a ser permeada são usados na formulação. Tais penetrantes são geralmente conhecidos na técnica, e incluem, por exemplo, para a administração transmucosa, detergentes, sais biliares, e derivados de ácido fusídico. A administração transmucosa pode ser realizada através do uso de pulverizações nasais ou supositórios. Para a administração transdérmica, os compostos ativos são formulados em unguentos, pomadas, géis, ou cremes como geralmente conhecido na técnica.
[0563]Os compostos também podem ser preparados na forma de supositórios (por exemplo, com bases de supositório convencionais tais como manteiga de cacau e outros glicerídeos) ou enemas de retenção para liberação retal.
[0564]Em uma forma de realização, os compostos ativos são preparados com portadores que protegerão o composto contra a eliminação rápida do corpo, tal como uma formulação de liberação controlada, incluindo implantes e sistemas de liberação microencapsulados. Polímeros biocompatíveis, biodegradáveis podem ser usados, tais como acetato de etileno vinila, polianidridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres, e ácido poliláctico. Métodos para a preparação de tais formulações estarão evidentes àqueles habilitados na técnica. Os materiais também podem ser obtidos comercialmente da Alza Corporation and Nova Pharmaceuticals, Inc. Suspensões lipossômicas (incluindo lipossomos alvejados a células infectadas com anticorpos monoclonais a antígenos virais) também podem ser usadas como portadores farmaceuticamente aceitáveis. Estes podem ser preparados de acordo com métodos conhecidos àqueles habilitados na técnica, por exemplo, como descrito na Patente dos EUA N2 4.522.811.
[0565]É especialmente vantajoso formular composições orais ou parenterais na forma unitária de dosagem para a facilidade de administração e uniformidade da dosagem. Forma unitária de dosagem como usado aqui se refere às unidades fisicamente separadas adequadas como dosagens unitárias para o sujeito a ser tratado; cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de composto ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o portador farmacêutico necessário. O relatório descritivo para as formas unitárias de dosagem da divulgação é prescrito pore diretamente dependente das características únicas do composto ativo e do efeito terapêutico particular a ser obtido, e das limitações inerentes na técnica de compor um tal composto ativo para o tratamento de indivíduos.
[0566]As composições farmacêuticas podem ser incluídas em um recipiente, pacote, ou dispensador junto com instruções para administração.
[0567]A invenção será descrita ainda nos exemplos seguintes, que não limitam o escopo da invenção descrita nas reivindicações.n
[0568]Este Exemplo demonstra que ScFvs (fragmentos variáveis de cadeia única) das formas de realização que se ligam ao PDL1 podem ser selecionados de uma biblioteca de exibição de fago de ScFvs com sequências de CDR diversas, e que tal ligação pode inibira ligação de PDL1 a PD1 e B7-1.
[0569]ScFvs foram selecionados a partir de uma biblioteca de ScFv completamente humana exibida no bacteriófago de M13; a seleção de fago ScFv foi conduzida sob contrato com Creative Biolabs, Shirley, NY. Uma proteína de fusão compreendida do domínio extracelular (ECD) de PDL1 humano ou PDL1 de camundongo, com um rótulo de His6 carbóxi terminal (Sino Biological, Cat. 10084- H02H-200) foi usada como o antígeno em três rodadas alternadas de seleção para ScFvs exibidos no bacteriófago de M13 que se ligam ao PDL1. Na primeira rodada, os fagos ligados foram liberados por digestão com tripsina, e em rodadas subsequentes, os fagos foram eluídos por competição de proteína de fusão de PD1 humano (R&D Systems; Cat. 1080-PD-050). Cinco (5) ScFvs únicos que se ligam ao PDL1 foram isolados. A Tabela 1 lista os 5 ScFvs e as SEQ ID NOs de suas sequências de ácido nucleico e sequências de aminoácido respectivas. Tabela 1. SEQ ID NOs dos ScFvs selecionados
[0570]As sequências de ácido nucleico e aminoácido de cada um dos ScFvs anti-PDL1 (com CDRs sublinhadas) são mostradas abaixo: SEQ ID NO: 1 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGATATTACTGC GTCGGGTTAGAGGACAACGTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCT CCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCG AGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGATCGAAGATTGCTTTTGACTACTGGG GCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGG TGGCAGCGGCGGTGGCGGGTCGACGGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAG AGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAG CTCCTGATCTATAAGGCATCCCGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGT GGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAA GATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGCGTGCGCTTAAGCCTGTGACGTTCGGC CAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGG SEQ ID NO: 2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSDITASG QRTTYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARSKIAFDYWGQGTL VTVSSGGGGSGGGGSGGGGSTDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLN WYQQKPGKAPKLLIYKASRLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQ RALKPVTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 3 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTATCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTAATAAG GATGGTCATTATACAAGTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCC AGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAG GACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAAATCTTGATGAGTTTGACTACTGGGGC CAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTG GCAGCGGCGGTGGCGGGTCGACGGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTC CCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGA GCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGC TCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTG GCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAG ATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTTACAGTACCCCTAATACGTTCGGCCA AGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGG SEQ ID NO: 4 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSINKDG HYTSYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKNLDEFDYWGQGTL VTVSSGGGGSGGGGSGGGGSTDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLN WYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQ SYSTPNTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 5 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTATGGCT ACTGGTGCTGGTACATTGTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGATGGTGCGGGGTTTGACTACTGGG GCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGG TGGCAGCGGCGGTGGCGGGTCGACGGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAG AGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAG CTCCTGATCTATTCTGCATCCCAGTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGT GGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAA GATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGGCGAATTCGCGGCCTTCTACGTTCGGC CAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGG SEQ ID NO: 6 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEVWSSIMATG AGTLYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDGAGFDYWGQGT LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSTDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYL NWYQQKPGKAPKLLIYSASQLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQ QANSRPSTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 7 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGTAGTGGGTCTCAACTATTACTTCT TCTGGTGCTGCTACATATTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCC AGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAG GACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAAATTATACTGGTTTTGACTACTGGGGC CAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTG GCAGCGGCGGTGGCGGGTCGACGGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTC CCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGA GCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGC TCCTGATCTATAATGCATCCTCCTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTG GCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAG ATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGTATACTTATGGTCCTGGTACGTTCGGCCA AGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGG SEQ ID NO: 8 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLQWVSTITSSG AATYYADSVKGRFTISR DNS KNTLYLQM NS LRAE DTAVYYCAKNYTGFDYWGQGT LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSTDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYL NWYQQKPGKAPKLLIYNASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQ QYTYGPGTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 9 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGT GGCAGCGGCGGTGGCGGGTCGACGGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAG AGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAG CTCCTGATCTATTATGCATCCACTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGT GGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAA GATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGGATAATGGTTATCCTTCTACGTTCGGCC AAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGG SEQ ID NO: 10 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGRFTIS R DN S KNTLYLQM NS LRAE DTAVYYCAKSSAGFDYWGQGT LVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSTDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYL NWYQQKPGKAPKLLIYYASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQ QDNGYPSTFGQGTKVEIKR
[0571]A Figura 1 mostra por ligação com baseem ELISA que o fago ScFv c60 de PDL1 se liga especificamente ao PDL1 humano e de camundongo. Brevemente, PDL1 humano, PDL1 de camundongo, PD1 humano, PD1 de camundongo, 41BBLig humano ou Notchl (R&D Systems) foram adsorvidos para separar os reservatórios de uma placa ELISA de 96 reservatórios. Fagos foram aplicados à placa e deixados ligar. Fagos ligados foram visualizados com um conjugado anti-M13-HRP (GE Healthcare, Piscataway, NY) e desenvolvidos com o substrato cromogênico tetrametil benzidina (TMB) (Thermo Scientific, Rockford, IL).
[0572]A Figura 2 mostra que a inclusão de PD1 pode inibir a ligação do fago ScFv de PDL1 que se liga ao PDL1 em um ensaio de ligação ELISA. Brevemente, PDL1 humano ou PDL1 de camundongo (R&D Systems) foi adsorvido para separar os reservatórios de uma placa ELISA de 96 reservatórios. Fagos foram aplicados à placa na presença ou ausência de PD1-Fc humano ou de camundongo (R&D Systems) e deixados ligar. Fagos ligados foram visualizados com um conjugado anti- M13-HRP (GE Healthcare, Piscataway, NY) e desenvolvidos com o substrato cromogênico tetrametil benzidina (TMB) (Thermo Scientific, Rockford, IL). A ligação do fago foi reduzida na presença de PD1-Fc, demonstrando que o epítopo de ligação do fago sobrepõe com aquele da ligação de PD1.
[0573]Este Exemplo demonstra que o fago ScFv c60 de PDL1 que se liga ao PDL1 humano e de camundongo pode ser convertido em anticorpos IgG completamente humanos que mantêm a ligação de PDL1 humano e de camundongo.
[0574]A produção de IgGs completamente humanas compreendendo os domínios variáveis de PDL1 c60 foi realizada usando técnicas similares àquelas descritas na Publicação PCT WO 2010/081173. Moléculas de DNA que codificam os domínios variáveis do fago ScFv c60 de PDL1 foram clonadas em vetores de expressão para a expressão de IgGs completamente humanas. Domínios variáveis de cadeia leve (Lc) foram amplificado a partir dos padrões de ScFv. O vetor (LcpOP (modificado a partir de pCDNA3, Invitrogen, Carlsbad, CA)) e DNA amplificado foram cortados com fis/WI e EcoRI durante a noite, combinados por ligação e transformados em células MC1061 de E. coli. Domínios variáveis de cadeia pesada (Hc) foram amplificados a partir de padrões de ScFv. IgGs c60 anti-PDL1 completamente humanas foram expressadas a partir de células HEK-293 transitoriamente transfectadas e purificadas a partir do sobrenadante de cultura por cromatografia de Proteína A.
[0575]A Figura 3 mostra que a IgG c60 anti-PDL1 completamente humana se liga ao PDL1 humano e de camundongo, com afinidade por PDL1 humano de 1 nM e por PDL1 de camundongo de 30 nM. Brevemente PDL1-Fc humano ou PDL1-Fc de camundongo (R & D Systems, Minneapolis, MN) foi adsorvido aos reservatórios de uma placa ELISA de 96 reservatórios. c60 anti-PDL1 purificado foi aplicado à placa e deixado ligar. O anticorpo ligado foi visualizado com um conjugado de IgG anti- humana-HRP, específico de Fab, (Sigma, St Louis, MO; Cat # A0293-1ML) e desenvolvido com o substrato cromogênico TMB.
[0576]Este Exemplo demonstra o isolamento de anticorpos das formas de realização com cinética de ligação e perfil de fabricabilidade melhorados.
[0577]Anticorpos anti-PDL1 foram isolados de bibliotecas com CDRs modificadas a partir de c60 anti-PDL1. Tais bibliotecas foram designadas como mostrado nas Tabelas 2 e 3. Quatro bibliotecas de Fago Fab, com base na sequência de c60 anti-PDL1, foram construídas usando DNA sintético degenerado. Resíduos foram variados por randomização em cada nucleotídeo indicado. Além disso, dentro das bibliotecas 3 e 6, resíduos randomizados adicionais foram adicionados à CDR3 da cadeia pesada. Bibliotecas foram transfectadas em cepa TG1 de E. coli e os fagos foram preparados a seguir da super-infecção com M13KO7 (Invitrogen).
[0578]Três rodadas de seleção foram realizadas para cada biblioteca com rigor crescente. Três rodadas alternadas de seleção foram feitas misturando-se PDL1 humano biotinilado ou PDL1 de camundongo biotinilado com fagos que foram bloqueados com 100 pg/mL de IgG humana concentrada (hulgG, ou hlgG) e 2 % de leite em pó desnatado (NFDM) em solução salina tamponada com Tris (TBS; 40 mM de Tris, 129 mM de NaCI, pH 7,4). A seguir da incubação na temperatura ambiente Bio-PDLI ligado s fagos foi capturado com pérolas magnéticas de estreptavidina que foram lavadas extensivamente a 37 °C e o fago ligado remanescente eluído com 100 mM de trietanolamina (TEA) (Sigma, St. Louis, MO) e expandido através de TG1 de E. coli. Bibliotecas de Lc selecionadas foram combinadas com bibliotecas de Hc e cada uma submetida a uma das sete rodadas adicionais de seleção. Tabela 2. Sequências de CDR para bibliotecas de cadeia pesada variável de maturação de afinidade Tabela 3. Sequências de CDR para bibliotecas de cadeia leve variável de maturação de afinidade
[0579]Quarenta e sete (47) isolados concentração final. Fagos foram derivados de cada isolado e avaliados quanto à ligação ao PDL1-Fc humano, B7-1-Fc humano 961,963, 965, 967, 969, 971,973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999, 1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201 abaixo. SEQ ID NO: 11 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGA GTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTAT CAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATTATGCATCCACTTTG CAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGG ATAATGGTTATCCTTCTACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGG SEQ ID NO: 12 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYYASTLQSG VPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGQGTKVEIKR Tabela 4: Domínios variáveis anti-PDL1 maduros
SEQ ID NO: 13 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTAGTCGGCCGGGTTT TGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 14 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGQSRPGFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 15 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTCGTGGCCGGGTTT TGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 16 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGQSWPGFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 17 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTCAGTCGTTTCCGGG TTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 18 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGQSFPGFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 19 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTGCTGCTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 20 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQGT LVTVSS SEQ ID NO: 21 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTGCTGCTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 22 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSVWRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAGYDYWGQGT LVTVSS SEQ ID NO: 23 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTATTCT ACTGGTGGTGCTACAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTAAGGGTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 24 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIYSTG GATAYADSVKGR FTIS RDNS KNTLYLQM NSLRAE DTAVYYCAKWS KGFDYWGQGT LVTVSS SEQ ID NO: 25 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGAA GTAGGGTATTGTGACAGTGAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGA GCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTAC TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 26 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWKQ GIVTVYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGTL VTV SEQ ID NO: 27 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGCG GAATGGTATTGTTACAGTTAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCA TCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAG CCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 28 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGTL VTVSS SEQ ID NO: 29 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGATATTTGGAA GTAGGGTATGGTTACAGTGAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGA GCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTAC TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 30 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSDIWKQ GMVTVYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGT LVTVSS SEQ ID NO: 31 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCGATTTGGAG GTAGGGTCTGGCGACAGCGAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGA GCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTAC TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 32 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRQ GLATAYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGT LVTVSS SEQ ID NO: 33 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGAGATTGTGGC TACTGGTATTTTGACAAGTAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCA TCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAG CCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 34 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSEIVATG ILTSYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGTLV TVSS SEQ ID NO: 35 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCGATTGGTCG GTAGGGTTTGATTACAGTTAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCA TCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAG CCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 36 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIGRQ GLITVYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGTL VTVSS SEQ ID NO: 37 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTTGGTAT TAGGGTCTGGTGACAGTTAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCA TCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAG CCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 38 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWYQ GLVTVYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGT LVTVSS SEQ ID NO: 39 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGATATTTGGAA GTAGGGTTTTGCTACAGCGAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGA GCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTAC TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 40 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSDIWKQ GFATADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGTL VTVSS SEQ ID NO: 41 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGAA GTAGGGTATTGTGACAGTGAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGA GCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTAC TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 42 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWKQ GIVTVYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGTL VTVSS SEQ ID NO: 43 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCGATTTGGAG GTAGGGTCTGGCGACAGCGAGCTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGA GCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATCTTCTGCTGGTTTTGACTAC TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 44 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRQ GLATAYDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSSAGFDYWGQGT LVTVSS
[0580]Este Exemplo demonstra que fago Fab de PDL1 maduro que se ligam ao PDL1 humano e de camundongo pode ser convertido em anticorpos IgG completamente humanos que mantêm a ligação de PDL1 humano e mostram ligação de PDL1 de camundongo realçada.
[0581]A produção de IgGs completamente humanas compreendendo os domínios variáveis dos clones maduros foi realizada usando técnicas similares àquelas descritas na Publicação PCT WO 2010/081173. O DNA que codifica os domínios variáveis de clones de Fago Fab anti-PDL1 C1, D1, G7, C05, G12 e combinações de domínios de CDR3 variáveis pesados de clones de Fago Fab anti- PDL1 C05 ou G12 com domínios de CDR2 variáveis pesados de clones de Fago Fab anti-PDL1 de B10, E10 ou H9 foram clonados em vetores de expressão para a expressão de IgGs completamente humanas. Os domínios variáveis leves para cada um são idênticos àqueles de c60 (SEQ ID NO: 10). Domínios variáveis de cadeia leve (Lc) foram amplificados a partir dos padrões de Fab. Vetor (LcpOP (modificado a partir de pCDNA3, Invitrogen, Carlsbad, CA)) e DNA amplificado foram cortados com Bs/WI e EcoRI durante a noite, combinados por ligação e transformados em células MC1061 de E. coli. Domínios variáveis de cadeia pesada (Hc) foram amplificados a partir de padrões de Fab. Anticorpos anti-PDL1 de IgGs completamente humanas foram expressados a partir de células HEK-293 transitoriamente transfectadas e purificados a partir do sobrenadante de cultura por cromatografia de Proteína A.
[0582]Os anticorpos anti-PDL1 maduros por afinidade foram analisados quanto à sua capacidade de se ligar ao PDL1 humano e de camundongo. Brevemente PDL1-Fc humano ou PDL1-Fc de camundongo (R&D Systems, Minneapolis, MN) foi adsorvido aos reservatórios de uma placa ELISA de 96 reservatórios. Anticorpos anti- PDL1 purificados foram aplicados à placa e deixados ligar. O anticorpo ligado foi visualizado com um conjugado de IgG anti-humana-HRP, específico de Fab, (Sigma, St Louis, MO; Cat # A0293-1 ML) e desenvolvido com o substrato cromogênico TMB. A Figura 5 mostra que combinar os domínios de CDR3 variáveis pesados maduros com os domínios de CDR2 variáveis pesados resulta em anticorpos com afinidade realçada para PDL1 humano. Além disso, a combinação do domínio de CDR2 variável pesado maduro C05 com o domínio de CD3 variável pesado H9 resulta em um anticorpo com afinidade alta tanto por PDL1 humano quanto de camundongo. A Tabela 5 fornece as SEQ ID NOs para as sequências de ácido nucleico e sequências de aminoácidos das cadeias pesadas variáveis respectivas.
[0583]Os anticorpos anti-PDL1 C5H9, C5B10 e C5E10 foram caracterizados ainda por sua especificidade de espécie para ligação ao PDL1 e outras proteínas intimamente relacionadas. Brevemente PDL1-Fc humano, PDLI-Fc de camundongo (R & D Systems, Minneapolis, MN) ou PDL1-Fc de macaco cinomolgo (cyno) (Sino Biological) foram adsorvidos aos reservatórios de uma placa ELISA de 96 reservatórios. Anticorpos anti-PDL1 purificados foram aplicados à placa e deixados ligar. O anticorpo ligado foi visualizado com um conjugado de IgG anti-humana-HRP, específico de Fab, (Sigma, St Louis, MO; Cat # A0293-1ML) e desenvolvido com o substrato cromogênico TMB. As Figuras 6A e 6B mostram que C5H9 se liga ao PDL1 humano e de camundongo com afinidade quase igual e C5B10 e C5E10 apenas se ligam ao PDL1 humano. Nenhum dos anticorpos testados se liga a B7-1 humano (Figura 6D) ou CD28 humano (Figura 6C), dois proteínas intimamente relacionadas. A Figura 7 mostra que este anticorpo anti-PDL1 C5H9 se liga com afinidade alta e igual ao PDL1 humano, de camundongo e cyno, mas não ao B7H3 humano (também referido como B7-H3) (R&D Systems, Minneapolis, MN). Tabela 5: Domínios pesados variáveis de anticorpos PDL1 das formas de Realização
SEQ ID NO: 45 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGCG GAATGGTATTGTTACAGTTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTGCTGCTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 46 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSS SEQ ID NO: 47 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGCG GAATGGTATTGTTACAGTTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTGCTGGTTATGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 48 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAGYDYWGQG TLVTVSS SEQ ID NO: 49 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGCG GAATGGTATTGTTACAGTTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTAAGGGTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 50 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSKGFDYWGQG TLVTVSS SEQ ID NO: 51 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTTGGTAT CAGGGTCTGGTGACAGTTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTGCTGCTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 52 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWYQ GLVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSS SEQ ID NO: 53 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGCG GAATGGTATTGTTACAGTTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTGCTGGTTATGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 54 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSVWRQAPGKGLEWVSSIWYQ GLVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAGYDYWGQG TLVTVSS SEQ ID NO: 55 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCT GGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAAGTATTTGGCG GAATGGTATTGTTACAGTTTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTC CAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGTCTAAGGGTTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 56 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWYQ GLVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSKGFDYWGQG TLVTVSS
[0584]Este exemplo descreve uma forma de realização de anticorpo anti- PDLl adicional que exibe imunogenicidade prognosticada reduzida, agregação reduzida, e expressão melhorada.
[0585]O prognóstico de in silico,usando ProPred revelou um epítopo potencial forte em CDR2 do domínio variável leve de C5H9; anticorpo anti-PDL1 C5H9, também referido aqui como C5H9, compreende uma cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 12 e uma cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO: 46. O alinhamento do domínio variável leve de C5H9 com anticorpos de linha germinativa humana revelou dois aminoácidos em CDR2 que quando revertidos à linha germinativa eliminaram o epítopo prognosticado. Os resíduos são sublinhados e estão em negrito na sequência mostrada abaixo na SEQ ID NO: 12.
[0586]Além disso, a estrutura 4 da cadeia leve de C5H9 foi modificada como indicado com itálicos em negrito na SEQ ID NO: 58 substituindo a glicina (G) no lugar de glutamina (Q) na região J. Esta modificação foi visada em aumentara flexibilidade da junção entre regiões variáveis e constantes, reduzindo potencialmente a tendência de C5H9 para formar agregados. As sequências de DNA e aminoácido resultantes são descritas pela SEQ ID NO: 57 e SEQ ID NO: 58, respectivamente. O anticorpo anti-PDL1 resultante, referido aqui como anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, também referido aqui como C5H9v2, compreende uma cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 58 e uma cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO: 46. SEQ ID NO: 12 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYYASTLQSG VPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 57 GATATTCAGATGACCCAGAGCCCGAGCAGCCTGAGCGCGAGCGTGGGCGATC GCGTGACCATTACCTGCCGCGCGAGCCAGAGCATTAGCAGCTATCTGAACTGG TATCAGCAGAAACCGGGCAAAGCGCCGAAACTGCTGATTTATGCGGCGAGCAG CCTGCAGAGCGGCGTGCCGAGCCGCTTTAGCGGCAGCGGCAGCGGCACCGAT TTTACCCTGACCATTAGCAGCCTGCAGCCGGAAGATTTTGCGACCTATTATTGC CAGCAGGATAACGGCTATCCGAGCACCTTTGGCGGCGGCACCAAAGTGGAAAT TAAACGC SEQ ID NO: 58 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSG VPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR
[0587]As Figuras 8A e 8B mostram que revisões de linha germinativa descritas na SEQ ID NO: 58 reduzem a imunogenicidade prognosticada (painel de topo) e potencial de agregação, e aumentam o nível de expressão em três vezes.
[0588]Este Exemplo demonstra as especificidades de ligação e atividades biológicas de anticorpos anti-PDL1 da divulgação.
[0589]A produção de IgGs completamente humanas compreendendo os domínios variáveis dos clones maduros foi realizada usando técnicas similares àqueles descritas na Publicação PCT N^ WO 2010/081173. O DNA que codifica os domínios variáveis pesados de anticorpo anti-PDL1 C5H9 (SEQ ID NO de ácido nucleico: 45; SEQ ID NO de aminoácido: 46) foi amplificado e clonado em vetores para a expressão de IgGs completamente humanas. O DNA que codifica os domínios variáveis leves de anticorpo anti-PDL1 C5H9 (SEQ ID NO de ácido nucleico: 11; SEQ ID NO de aminoácido: 12) foi amplificado e clonado em vetores para a expressão de IgGs completamente humanas. Similarmente, o DNA que codifica os domínios variáveis pesados de anticorpo anti-PDL1 C5H9 (SEQ ID NO de ácido nucleico: 45; SEQ ID NO de aminoácido: 46) foi amplificado e clonado em vetores para a expressão de lgG2as de camundongo quimérico. O DNA que codifica os domínios variáveis leves de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 (SEQ ID NO de ácido nucleico: 57; SEQ ID NO de aminoácido: 58) foi amplificado e clonado em vetores para a expressão de lgG2as de camundongo quimérico. IgGs completamente humanas ou anticorpos anti-PDL1 de lgG2a de camundongo quimérico foram expressados a partir de células HEK-293 transitoriamente transfectadas e purificadas a partir do sobrenadante de cultura por cromatografia de Proteína A. Anticorpo IgG anti-PDL1 C5H9 compreende uma cadeia pesada compreendendo um domínio variável pesado compreendendo a SEQ ID NO: 46 e uma cadeia leve compreendendo um domínio variável leve compreendendo a SEQ ID NO: 12. Anticorpo IgG anti-PDL1 C5H9v2 compreende uma cadeia pesada compreendendo um domínio variável pesado compreendendo a SEQ ID NO: 46 e uma cadeia leve compreendendo um domínio variável leve compreendendo a SEQ ID NO: 58.
[0590]0 anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 foi caracterizado por ligação específica de espécies ao PDL1 e se este anticorpo se ligaria a um painel de proteínas humanas. Brevemente PDL1-Fc humano, PDL1-Fc de camundongo (R & D Systems, Minneapolis, MN) ou PDL1-Fc de macaco cinomolgo (cyno) (Sino Biological) foi adsorvido aos reservatórios de uma placa ELISA de 96 reservatórios. Anticorpos anti- PDLl C5H9 e C5H9v2 purificados foram aplicados à placa e deixados ligar. O anticorpo ligado foi visualizado com um conjugado de IgG anti-humana-HRP, específico de Fab, (Sigma, St Louis, MO; Cat # A0293-1ML) e desenvolvido com o substrato cromogênico TMB. A Figura 9 mostra que ambos os anticorpos anti-PDL1 C5H9 e C5H9v2 se ligam a PDL1 humano, de camundongo e cyno com afinidade quase igual. Valores de EC50 para o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 ao PDL1 humano, de cyno, rato e camundongo também foram similares: 0,25 nM, 0,28 nM, 0,31 nM, e 0,30 nM, respectivamente.
[0591]Em um experimento similar a ligação de anticorpo anti-PDL1 C5H9 foi avaliada quanto à ligação a um painel de proteínas humanas e de camundongo. Brevemente, cada proteína, listada na Figura 10, foi absorvida aos reservatórios de uma placa ELISA. Anticorpos anti-PDL1 C5H9 e C5H9v2 purificados foram aplicados à placa e deixados ligar. O anticorpo ligado foi visualizado com um conjugado de IgG anti-humana-HRP, específico de Fab, (Sigma, St Louis, MO; Cat # A0293-1ML) e desenvolvido com o substrato cromogênico TMB. O anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 se liga apenas ao PDL1 humano e de camundongo demonstrando especificidade para PDL1.
[0592]A atividade biológica de PDL1 é mediada através da ligação a PD1 e/ou a B7-1. O bloqueio da ligação é uma característica desejada para um anticorpo terapêutico; portanto, a potência de bloqueara interação de PDL1 com PD1 e B7-1 foi medida. Brevemente, PDL1 humano, de camundongo ou cyno foi adsorvido ao reservatório de uma placa ELISA. PD1 ou B7-1 humano, de camundongo ou cyno biotinilado foi aplicado aos reservatórios na ausência ou a presença de uma concentração crescente de anticorpo anti-PDL1 C5H9 ou anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e deixado ligar. PD1 ou B7-1 biotinilado ligado foi visualizado com um conjugado de Estreptavidina-HRP (Thermo Scientific, Cat. N^ 21126) e desenvolvido com o substrato cromogênico TMB. A Figura 11 mostra que tanto o anticorpo anti-PDL1 C5H9 quanto o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 são bloqueadores potentes de ligação de B7-1 ou PD1 ao PDL1, e que o bloqueio inclui todas as três espécies ser humano, cyno e camundongo com ECso’s de nM de dígito único.
[0593]Neste Exemplo, o anticorpo anti-PDL1 C5H9 foi analisado quanto à capacidade de induzira diabete em camundongos NOD.
[0594]Os camundongos NOD, subcepa NOD/ShiLtJ, foram obtidos da Jackson Laboratory em 6 semanas e aclimatados no sítio por 1 semana. Em 7 semanas, camundongos foram verificados quanto à diabete antes do registro, agrupados, e dosados como apresentado na Tabela 6. Tabela 6. Gru pos e Doses para o estudo de NOD
[0595]A Figura 12, que esboça a % de não diabético versuso número de dias após a dose inicial, mostra que este anticorpo anti-PDL1 anticorpo C5H9 (Gr2-C5H9) induz diabete em camundongos NOD similar ao anticorpo anti-PDL1 de controle positivo anticorpo 10F9G2. Um lgG2b de rato de controle não induz diabete em camundongos NOD.
[0596]O anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 também foi testado quanto à capacidade de induzir diabete em camundongos NOD em uma matéria dependente de dose, usando um método similar àquele descrito acima, com animais de 9 semanas de idade usando os grupos e doses apresentados na Tabela 7. Tabela 7. Grupos e doses para o estudo de NOD dependente de dose
[0597]A Figura 13, que esboça a % de não diabético versuso número de dias após a dose inicial, demonstra que este anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 induz diabete em camundongos NOD em uma matéria dependente de dose.
[0598]Neste Exemplo, o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 foi analisado quanto à capacidade de reduzir o crescimento de tumores singênicos de MC38.
[0599]A linhagem de célula de carcinoma de cólon de camundongo MC38 foi obtida da ATCC (American Type Culture Collection, Manassas, VA). Células MC38 foram cultivadas em RPM 1-1640 suplementado com 10 % de soro bovino fetal a 37 °C em uma atmosfera de 5 % de CO2 em ar. As células foram colhidas durante 0 período de crescimento logarítmico, recolocadas em suspensão em PBS, e mantidas em gelo para a indução de tumor.
[0600]Cada camundongo foi inoculado subcutaneamente no flanco direito com 1X106 de células MC38 em PBS para 0 desenvolvimento de tumor. Os tratamentos foram iniciados quando 0 tamanho de tumor médio atingiu aproximadamente 100 a 200 mm3 (não mais do que 200 mm3). Os tamanhos de tumor foram medidos duas vezes por semana em duas dimensões usando um calibre, e 0 volume foi expressado em mm3 usando a fórmula: V = 0,5 a x b2 onde a e b são os diâmetros longos e curtos do tumor, respectivamente.
[0601]Os camundongos foram agrupados e dosados como apresentado na Tabela 8. Tabela 8. Grupos e doses para o estudo singênico de MC38
[0602]A Figura 14, que esboça o volume de tumor versuso número de dias após a dose inicial, demonstra que este anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 inibe o crescimento de tumores singênicos de MC38 similar ao anticorpo anti-PDL1 de controle positivo 10F9G2.
[0603]Este Exemplo descreve a identificação de porções de mascaramento (MM) para reduzir a ligação de anticorpos ativáveis de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 ao seu alvo.
[0604]0 anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e Fab foram usados para triar as bibliotecas usando um método similar àquele descrito na Publicação Internacional PCT Número WO 2010/081173, publicada em 15 de julho de 2010. A triagem consistiu em uma rodada de MACS e três rodadas de classificação FACS. Os MACS iniciais foram feitos com Dynabeads de proteína A (Invitrogen) e o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 em uma concentração de 100 nM. Para MACS, aproximadamente 1x1011 células foram tríadas quanto à ligação e 6x106 células foram coletadas. O anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, diretamente rotulado com Alexafluor-488, foi usado como uma sonda para todas as seleções de FACS. Na primeira rodada de FACS, as células foram rotuladas com 100 nM de anticorpo anti-PDL1 AlexaFluorC5H9v2. Na segundo rodada de FACS, as células foram rotuladas com 10 nM de anticorpo anti-PDL1 AlexaFluor C5H9v2. Na terceira rodada de FACS, as células foram rotuladas com 1 nM de anticorpo anti-PDL1 AlexaFluor C5H9v2. A população positiva da terceira rodada de FACS foi verificada para ser inibida por proteína de PDL1 humano recombinante a partir da ligação ao anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e Fab. Clones de peptídeo individuais foram identificados por análise de sequência e subsequentemente verificados quanto à sua capacidade de se ligar ao anticorpo anti- PDL1 C5H9v2 e Fab.
[0605]As sequências das porções de mascaramento de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 são listadas na Tabela 9. Tabela 9. Porções de mascaramento (MM) de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2
[0606]Este Exemplo descreve exemplos de anticorpos ativáveis da divulgação compreendendo o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0607]Anticorpos ativáveis anti-PDL1 compreendendo uma porção de mascaramento de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, uma porção clivável, e anticorpo anti- PDL1 C5H9v2 foram produzidos de acordo com métodos similares àqueles descritos nas Publicações PCT WO 2009/025846 e WO 2010/081173. O controle de qualidade dos anticorpos ativáveis resultantes indicou que a maioria compreendeu pelo menos 95 % de monômero. As sequências de aminoácido e ácido nucleico de vários anticorpos ativáveis compreendendo anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 são fornecidas abaixo. Cada anticorpo ativável compreende o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 tendo a sequência de aminoácido de cadeia pesada variável mostrada na SEQ ID NO: 46 e uma sequência de aminoácido de cadeia leve selecionada do grupo consistindo nas sequências de aminoácido mostradas na SEQ ID NO: 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 931, 933, 935, 937, 939, 941, 943, 945, 947, 949, 951, 953, 955, 957, 959, 961, 963, 965, 967, 969, 971, 973, 975, 977, 979, 981, 983, 985, 987, 989, 991, 993, 995, 997, 999,1001, 1003, 1005, 1144 a 1191, 1200, e 1201 abaixo.
[0608]Embora as sequências mostradas abaixo incluam a sequência com espaçador da SEQ ID NO: 923, aqueles de habilidade comum na técnica avaliam que os anticorpos anti-PDL1 ativáveis da divulgação podem incluir qualquer sequência com espaçador adequada, tal como, por exemplo, uma sequência com espaçador selecionada do grupo consistindo em QGQSGS (SEQ ID NO: 923); GQSGS (SEQ ID NO: 1192); QSGS (SEQ ID NO: 1193); SGS (SEQ ID NO: 1194); GS (SEQ ID NO: 1195); S; QGQSGQG (SEQ ID NO: 924); GQSGQG (SEQ ID NO: 395); QSGQG (SEQ ID NO: 925); SGQG (SEQ ID NO: 926); GQG (SEQ ID NO: 927); QG (SEQ ID NO: 928); G; QGQSGQ (SEQ ID NO: 1196); GQSGQ (SEQ ID NO: 1197); QSGQ (SEQ ID NO: 1198); SGQ (SEQ ID NO: 616); GQ (SEQ ID NO: 1199); e Q. Embora as sequências mostradas abaixo incluam a sequência com espaçador da SEQ ID NO: 923, aqueles de habilidade comum na técnica avaliarão que estes anticorpos anti- PDLl ativáveis da divulgação em algumas formas de realização não incluem uma sequência com espaçador. Sequência de aminoácido VH de C5H9v2 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSS (SEQ ID NO: 46) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL01-0003 LC (SEQ ID NO: 930)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][TATTGCGAGGTTAGTGAGCTGTTTGTTCTTCCTTG GTGCATGGGTGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 82) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL01-0003 LC (SEQ ID NO: 931)] [QGQSGS][YCEVSELFVLPWCMGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 83) Sequência de nucleotídeo PL01-0003 LC TATTGCGAGGTTAGTGAGCTGTTTGTTCTTCCTTGGTGCATGGGTGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 930) Sequência de aminoácido PL01-0003 LC YCEVSELFVLPWCMGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 931) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL02-0003 LC (SEQ ID NO: 932)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][TCTTGCCTTATGCATCCGCATTATGCTCATGATTAT TGCTATGTTGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAG CACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGA CCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACC TGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCC CGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCG TGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATC AGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGG CTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGG CCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGT GT] (SEQ ID NO: 84) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL02-0003 LC (SEQ ID NO: 933)] [QGQSGS][SCLMHPHYAHDYCYVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 85) Sequência de nucleotfdeo PL02-0003 LC TCTTGCCTTATGCATCCGCATTATGCTCATGATTATTGCTATGTTGGAGGTGGCT CGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGCT AACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCT GTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCA TCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTG CTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGG CAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGG ACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGC GGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAAC TTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 932) Sequência de aminoácido PL02-0003 LC SCLMHPHYAHDYCYVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 933) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL03-0003 LC (SEQ ID NO: 934)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][TTGTGCGAGGTTTTGATGTTGTTGCAGCATCCGTG GTGCATGGGGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 86) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL03-0003 LC (SEQ ID NO: 935)] [QGQSGS][LCEVLMLLQHPWCMGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 87) Sequência de nucleotídeo PL03-0003 LC TTGTGCGAGGTTTTGATGTTGTTGCAGCATCCGTGGTGCATGGGGGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 934) Sequência de aminoácido PL03-0003 LC LCEVLMLLQHPWCMGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 935) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL04-0003 LC (SEQ ID NO: 936)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][ATTGCGTGCCGGCATTTTATGGAGCAGTTGCCGTT TTGCCATCATGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 88) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL04-0003 LC (SEQ ID NO: 937)] [QGQSGS][IACRHFMEQLPFCHHGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 89) Sequência de nucleotídeo PL04-0003 LC ATTGCGTGCCGGCATTTTATGGAGCAGTTGCCGTTTTGCCATCATGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 936) Sequência de aminoácido PL04-0003 LC IACRHFMEQLPFCHHGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 937) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL05-0003 LC (SEQ ID NO: 938)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][TTTGGTCCTAGGTGCGGTGAGGCTTCTACTTGCGT TCCGTATGAGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 90) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL05-0003 LC (SEQ ID NO: 939)] [QGQSGS][FGPRCGEASTCVPYEGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 91) Sequência de nucleotídeo PL05-0003 LC TTTGGTCCTAGGTGCGGTGAGGCTTCTACTTGCGTTCCGTATGAGGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 938) Sequência de aminoácido PL05-0003 LC FGPRCGEASTCVPYEGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 939) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL06-0003 LC (SEQ ID NO: 940)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][ATTCTTTATTGCGATAGTTGGGGGGCGGGGTGCT TGACGCGGCCGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTAC TAGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGA TGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATC ACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAA GCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTG GCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACC ATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAA CGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTG AGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATG AGTGT] (SEQ ID NO: 92) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL06-0003 LC (SEQ ID NO: 941)] [QGQSGS][ILYCDSWGAGCLTRPGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 93) Sequência de nucleotideo PL06-0003 LC ATTCTTTATTGCGATAGTTGGGGGGCGGGGTGCTTGACGCGGCCGGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 940) Sequência de aminoácido PL06-0003 LC ILYCDSWGAGCLTRPGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 941) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL07-0003 LC (SEQ ID NO: 942)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGGATTGCGTTGTGCCCGTCTCATTTTTGCCAGCT GCCTCAGACTGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 94) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-0003 LC (SEQ ID NO: 943)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 95) Sequência de nucleotideo PL07-0003 LC GGGATTGCGTTGTGCCCGTCTCATTTTTGCCAGCTGCCTCAGACTGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 942) Sequência de aminoácido PL07-0003 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 943) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL08-0003 LC (SEQ ID NO: 944)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GATGGGCCGCGTTGCTTTGTGTCGGGGGAGTGCT CTCCGATTGGTGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTAC TAGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGA TGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATC ACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAA GCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTG GCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACC ATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAA CGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTG AGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATG AGTGT] (SEQ ID NO: 96) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL08-0003 LC (SEQ ID NO: 945)] [QGQSGS][DGPRCFVSGECSPIGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 97) Sequência de nucleotideo PL08-0003 LC GATGGGCCGCGTTGCTTTGTGTCGGGGGAGTGCTCTCCGATTGGTGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 944) Sequência de aminoácido PL08-0003 LC DGPRCFVSGECSPIGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 945) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL09-0003 LC (SEQ ID NO: 946)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][TTGTGCTATAAGCTGGATTATGATGATAGGTCTTAT TGCCATATTGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAG CACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGA CCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACC TGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCC CGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCG TGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATC AGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGG CTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGG CCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGT GT] (SEQ ID NO: 98) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL09-0003 LC (SEQ ID NO: 947)] [QGQSGS][LCYKLDYDDRSYCHIGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 99) Sequência de nucleotideo PL09-0003 LC TTGTGCTATAAGCTGGATTATGATGATAGGTCTTATTGCCATATTGGAGGTGGCT CGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGCT AACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCT GTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCA TCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTG CTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGG CAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGG ACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGC GGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAAC TTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 946) Sequência de aminoácido PL09-0003 LC LCYKLDYDDRSYCHIGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 947) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL10-0003 LC (SEQ ID NO: 948)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 100) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL10-0003 LC (SEQ ID NO: 949)] [QGQSGS][PCHPHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR](SEQ ID NO: 101) Sequência de nucleotfdeo PL10-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 948) Sequência de aminoácido PL10-0003 LC PCHPHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR(SEQ ID NO: 949) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL11-0003 LC (SEQ ID NO: 950)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCTTGCTATTGGCATCCTTTTTTTGCGTATAGGTAT TGCAATACTGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAG CACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGA CCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACC TGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCC CGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCG TGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATC AGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGG CTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGG CCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGT GT] (SEQ ID NO: 102) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL11-0003 LC (SEQ ID NO: 951)] [QGQSGS][PCYWHPFFAYRYCNTGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 103) Sequência de nucleotídeo PL11-0003 LC CCTTGCTATTGGCATCCTTTTTTTGCGTATAGGTATTGCAATACTGGAGGTGGCT CGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGCT AACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCT GTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCA TCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTG CTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGG CAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGG ACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGC GGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAAC TTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 950) Sequência de aminoácido PL11-0003 LC PCYWHPFFAYRYCNTGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 951) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL12-0003 LC (SEQ ID NO: 952)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GTTTGCTATTATATGGATTGGTTGGGGCGGAATTG GTGCTCTTCGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 104) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL12-0003 LC (SEQ ID NO: 953)] [QGQSGS][VCYYMDWLGRNWCSSGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 105) Sequência de nucleotídeo PL12-0003 LC GTTTGCTATTATATGGATTGGTTGGGGCGGAATTGGTGCTCTTCGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 952) Sequência de aminoácido PL12-0003 LC VCYYMDWLGRNWCSSGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 953) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL13-0003 LC (SEQ ID NO: 954)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CTGTGCGATCTGTTTAAGTTGCGTGAGTTTCCTTA TTGCATGGGGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 106) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL13-0003 LC (SEQ ID NO: 955)] [QGQSGS][LCDLFKLREFPYCMGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 107) Sequência de nucleotfdeo PL13-0003 LC CTGTGCGATCTGTTTAAGTTGCGTGAGTTTCCTTATTGCATGGGGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 954) Sequência de aminoácido PL13-0003 LC LCDLFKLREFPYCMGGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 955) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL14-0003 LC (SEQ ID NO: 956)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][TATCTTCCGTGCCATTTTGTTCCGATTGGGGCTTG CAATAATAAGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 108) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL14-0003 LC (SEQ ID NO: 957)] [QGQSGS][YLPCHFVPIGACNNKGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 109) Sequência de nucleotfdeo PL14-0003 LC TATCTTCCGTGCCATTTTGTTCCGATTGGGGCTTGCAATAATAAGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 956) Sequência de aminoácido PL14-0003 LC YLPCHFVPIGACNNKGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 957) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL15-0003 LC (SEQ ID NO: 958)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][ATTTTTTGCCATATGGGTGTTGTGGTTCCTCAGTG CGCGAATTATGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 110) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL15-0003 LC (SEQ ID NO: 959)] [QGQSGS][IFCHMGWVPQCANYGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 111) Sequência de nucleotfdeo PL15-0003 LC ATTTTTTGCCATATGGGTGTTGTGGTTCCTCAGTGCGCGAATTATGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 958) Sequência de aminoácido PL15-0003 LC IFCHMGVWPQCANYGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 959) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL16-0003 LC (SEQ ID NO: 960)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 112) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL16-0003 LC (SEQ ID NO: 961)] [QGQSGS][ACHPHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 113) Sequência de nucleotídeo PL16-0003 LC GCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 960) Sequência de aminoácido PL16-0003 LC ACHPHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 961) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL17-0003 LC (SEQ ID NO: 962)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGGCTCCTTATGATGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 114) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL17-0003 LC (SEQ ID NO: 963)] [QGQSGS][PCHPAPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 115) Sequência de nucleotídeo PL17-0003 LC CCGTGCCATCCGGCTCCTTATGATGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 962) Sequência de aminoácido PL17-0003 LC PCHPAPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 963) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL18-0003 LC (SEQ ID NO: 964)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATGCTTATGATGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 116) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL18-0003 LC (SEQ ID NO: 965)] [QGQSGS][PCHPHAYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 117) Sequência de nucleotideo PL18-0003 LC CCGTGCCATCCGCATGCTTATGATGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 964) Sequência de aminoácido PL18-0003 LC PCHPHAYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 965) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL19-0003 LC (SEQ ID NO: 966)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTGCTGATGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 118) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL19-0003 LC (SEQ ID NO: 967)] [QGQSGS][PCHPHPADARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 119) Sequência de nucleotideo PL19-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTGCTGATGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 966) Sequência de aminoácido PL19-0003 LC PCHPHPADARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 967) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL20-0003 LC (SEQ ID NO: 968)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTTATGCTGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 120) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL20-0003 LC (SEQ ID NO: 969)] [QGQSGS][PCHPHPYAARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 121) Sequência de nucleotídeo PL20-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTTATGCTGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 968) Sequência de aminoácido PL20-0003 LC PCHPHPYAARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 969) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL21-0003 LC (SEQ ID NO: 970)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTGCTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 122) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL21-0003 LC (SEQ ID NO: 971)] [QGQSGS][PCHPHPYDAAPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 123) Sequência de nucleotídeo PL21-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTGCTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 970) Sequência de aminoácido PL21-0003 LC PCHPHPYDAAPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 971) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL22-0003 LC (SEQ ID NO: 972)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTGC TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 124) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL22-0003 LC (SEQ ID NO: 973)] [QGQSGS][PCHPHPYDARPACNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 125) Sequência de nucleotídeo PL22-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTGCTTGCAATGTGGGAGGTGG CTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCG CTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGC CTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAG CATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAAC TGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCC GGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGA GGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTG GCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCA ACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 972) Sequência de aminoácido PL22-0003 LC PCHPHPYDARPACNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 973) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL23-0003 LC (SEQ ID NO: 974)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTA TTGCGCTGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACT AGCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGAT GACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCA CCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAG CCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGG CGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCA TCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAAC GGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGA GGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGA GTGT] (SEQ ID NO: 126) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL23-0003 LC (SEQ ID NO: 975)] [QGQSGS][PCHPHPYDARPYCAVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 127) Sequência de nucleotideo PL23-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTATTGCGCTGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 974) Sequência de aminoácido PL23-0003 LC PCHPHPYDARPYCAVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 975) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL24-0003 LC (SEQ ID NO: 976)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATGCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 128) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL24-0003 LC (SEQ ID NO: 977)] [QGQSGS][PCHAHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 129) Sequência de nucleotídeo PL24-0003 LC CCGTGCCATGCGCATCCTTATGATGCTCGTCCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 976) Sequência de aminoácido PL24-0003 LC PCHAHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 977) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL25-0003 LC (SEQ ID NO: 978)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTGCTTA TTGCAATGTGGGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTA GCACCTCTGGTCGTTCCGCTAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATG ACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCAC CTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGC CCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGC GTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCAT CAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACG GCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAG GCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAG TGT] (SEQ ID NO: 130) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL25-0003 LC (SEQ ID NO: 979)] [QGQSGS][PCHPHPYDARAYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 131) Sequência de nucleotídeo PL25-0003 LC CCGTGCCATCCGCATCCTTATGATGCTCGTGCTTATTGCAATGTGGGAGGTGGC TCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTACTAGCACCTCTGGTCGTTCCGC TAACCCACGTGGCGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCC TGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGC ATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACT GCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCG GCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAG GACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGG CGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAA CTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 978) Sequência de aminoácido PL25-0003 LC PCHPHPYDARAYCNVGGGSSGGSGGSGGTSTSGRSANPRGGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 979) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL03-2001 LC (SEQ ID NO: 980)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 132) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL03-2001 LC (SEQ ID NO: 981)] [QGQSGS][LCEVLMLLQHPWCMGGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 133) Sequência de nucleotideo PL03-2001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 980) Sequência de aminoácido PL03-2001 LC LCEVLMLLQHPWCMGGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 981) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL04-2001 LC (SEQ ID NO: 1183)] [QGQSGS][IACRHFMEQLPFCHHGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1182) Sequência de aminoácido PL04-2001 LC IACRHFMEQLPFCHHGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1183) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL06-2001-mk LC (SEQ ID NO: 982)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 134) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL06-2001-mk LC (SEQ ID NO: 983)] [QGQSGS][ILYCDSWGAGCLTRPGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 135) Sequência de nucleotideo PL06-2001-mk LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 982) Sequência de aminoácido PL06-2001-mk LC ILYCDSWGAGCLTRPGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 983) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL07-2001 LC (SEQ ID NO: 984)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 136) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2001 LC (SEQ ID NO: 985)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 137) Sequência de nucleotfdeo PL07-2001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 984) Sequência de aminoácido PL07-2001 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 985) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL10-2001 LC (SEQ ID NO: 986)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 138) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL10-2001 LC (SEQ ID NO: 987)] [QGQSGS][PCHPHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 139) Sequência de nucleotideo PL10-2001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 986) Sequência de aminoácido PL10-2001 LC PCHPHPYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 987) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL11-2001 LC (SEQ ID NO: 1185)] [QGQSGS][PCYWHPFFAYRYCNTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1184) Sequência de aminoácido PL11-2001 LC PCYWHPFFAYRYCNTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1185) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL12-2001 LC (SEQ ID NO: 1187)] [QGQSGS][VCYYMDWLGRNWCSSGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1186) Sequência de aminoácido PL12-2001 LC VCYYMDWLGRNWCSSGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1187) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL14-2001 LC (SEQ ID NO: 988)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 140) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL14-2001 LC (SEQ ID NO: 989)] [QGQSGS][YLPCHFVPIGACNNKGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 141) Sequência de nucleotídeo PL14-2001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 988) Sequência de aminoácido PL14-2001 LC YLPCHFVPIGACNNKGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 989) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL15-2001 LC (SEQ ID NO: 990)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 142) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL15-2001 LC (SEQ ID NO: 991)] [QGQSGS][IFCHMGWVPQCANYGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 143) Sequência de nucleotideo PL15-2001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 990) Sequência de aminoácido PL15-2001 LC IFCHMGVWPQCANYGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 991) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL18-2001 LC (SEQ ID NO: 992)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCT GGTGGTATTAGCAGTGGTCTGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCT GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAG AGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGT ATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCT CTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTT CACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCC AGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATC AAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTC AACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 144) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL18-2001 LC (SEQ ID NO: 993)] [QGQSGS][PCHPHAYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 145) Sequência de nucleotídeo PL18-2001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGGCTCTGGTGGTATTAGCAGTGGTC TGTTAAGCGGTCGTAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACCCAGA GCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTAGA GCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAA GGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCA GCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCC CTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCTACCC CAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCCACTC ACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 992) Sequência de aminoácido PL18-2001 LC PCHPHAYDARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 993) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL19-2001 LC (SEQ ID NO: 1189)] [QGQSGS][PCHPHPADARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1188) Sequência de aminoácido PL19-2001 LC PCHPHPADARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1189) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL20-2001 LC (SEQ ID NO: 1191)] [QGQSGS][PCHPHPYAARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1190) Sequência de aminoácido PL20-2001 LC PCHPHPYAARPYCNVGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1191) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL03-1004/GG/0001 (também referida aqui como PL03-3001) LC (SEQ ID NO: 994)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTG GGTCTCCTGGCTCCCCCGGGCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCG GTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGC GACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAA CTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCA GCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACC GACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTAC TGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGA AATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAG CTTCAACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 146) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL03-1004/GG/0001 LC (SEQ ID NO: 995)] [QGQSGS][LCEVLMLLQHPWCMGGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSD IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 147) Sequência de nucleotfdeo PL03-1004/GG/0001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTGGGTCTCCTGGCTCCCCCGG GCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACC CAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTG TAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTG CCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAG CTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCT ACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCC ACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 994) Sequência de aminoácido PL03-1004/GG/0001 LC LCEVLMLLQHPWCMGGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 995) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL06-1004/GG/0001 (também referida aqui como PL06-3001) LC (SEQ ID NO: 996)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTG GGTCTCCTGGCTCCCCCGGGCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCG GTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGC GACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAA CTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCA GCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACC GACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTAC TGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGA AATCAAGCGTTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGA GCTTCAACAGGGGAGAGTGT] (SEQ ID NO: 148) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL06-1004/GG/0001 LC (SEQ ID NO: 997)] [QGQSGS][ILYCDSWGAGCLTRPGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 149) Sequência de nucleotídeo PL06-1004/GG/0001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTGGGTCTCCTGGCTCCCCCGG GCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACC CAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTG TAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTG CCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAG CTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCT ACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGCGAAGTC ACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTG T (SEQ ID NO: 996) Sequência de aminoácido PL06-1004/GG/0001 LC ILYCDSWGAGCLTRPGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 997) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL07-1004/GG/0001 (também referida aqui como PL07-3001) LC (SEQ ID NO: 998)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTG GGTCTCCTGGCTCCCCCGGGCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCG GTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGC GACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAA CTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCA GCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACC GACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTAC TGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGA AATCAAGCGTTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGA GCTTCAACAGGGGAGAGTGT] (SEQ ID NO: 150) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL01-1004/GG/0001 LC (SEQ ID NO: 999)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 151) Sequência de nucleotideo PL07-1004/GG/0001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTGGGTCTCCTGGCTCCCCCGG GCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACC CAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTG TAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTG CCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAG CTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCT ACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGCGAAGTC ACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTG T (SEQ ID NO: 998) Sequência de aminoácido PL07-1004/GG/0001 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 999) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL14-1004/GG/0001 (também referida aqui como PL14-3001) LC (SEQ ID NO: 1000)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTG GGTCTCCTGGCTCCCCCGGGCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCG GTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGC GACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAA CTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCA GCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACC GACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTAC TGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGA AATCAAGCGTTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGA GCTTCAACAGGGGAGAGTGT] (SEQ ID NO: 152) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL14-1004/GG/0001 LC (SEQ ID NO: 1001)] [QGQSGS][YLPCHFVPIGACNNKGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 153) Sequência de nucleotídeo PL14-1004/GG/0001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTGGGTCTCCTGGCTCCCCCGG GCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACC CAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTG TAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTG CCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAG CTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCT ACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGCGAAGTC ACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTG T (SEQ ID NO: 1000) Sequência de aminoácido PL14-1004/GG/0001 LC YLPCHFVPIGACNNKGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSS LSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1001) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL15-1004/GG/0001 (também referida aqui como PL15-3001) LC (SEQ ID NO: 1002)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTG GGTCTCCTGGCTCCCCCGGGCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCG GTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGC GACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAA CTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCA GCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACC GACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTAC TGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGA AATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAG CTTCAACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 154) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL15-1004/GG/0001 LC (SEQ ID NO: 1003)] [QGQSGS][IFCHMGWVPQCANYGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 155) Sequência de nucleotídeo PL15-1004/GG/0001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTGGGTCTCCTGGCTCCCCCGG GCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACC CAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTG TAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTG CCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAG CTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCT ACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCC ACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 1002) Sequência de aminoácido PL15-1004/GG/0001 LC IFCHMGVWPQCANYGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1003) [(SEQ ID NO: 929) com espaçador][PL18-1004/GG/0001 (também referida aqui como PL18-3001) LC (SEQ ID NO: 1004)] [CAAGGTCAGTCTGGATCC][GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTG GGTCTCCTGGCTCCCCCGGGCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCG GTTCTGACATCCAGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGC GACAGAGTGACCATCACCTGTAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAA CTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCA GCTCTCTGCAGTCTGGCGTGCCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACC GACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTAC TGCCAGCAGGACAACGGCTACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGA AATCAAGCGTTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAG CTTCAACAGGAATGAGTGT] (SEQ ID NO: 156) [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL18-1004/GG/0001 LC (SEQ ID NO: 1005)] [QGQSGS][PCHPHAYDARPYCNVGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSD IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 157) Sequência de nucleotídeo PL18-1004/GG/0001 LC GGAGGTGGCTCGAGCGGTGGCAGCGGTGCTGTGGGTCTCCTGGCTCCCCCGG GCGGCCTGTCCGGCCGCAGCGATAATCATGGCGGTTCTGACATCCAGATGACC CAGAGCCCCAGCAGCCTGTCTGCTAGCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTG TAGAGCCAGCCAGAGCATCAGCAGCTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCAAGGCCCCCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCTCTCTGCAGTCTGGCGTG CCCAGCAGATTTTCCGGCAGCGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAG CTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGACAACGGCT ACCCCAGCACCTTTGGCGGAGGTACCAAGGTGGAAATCAAGCGTTGTGAGGCC ACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGT (SEQ ID NO: 1004) Sequência de aminoácido PL18-1004/GG/0001 LC PCHPHAYDARPYCNVGGGSSGGSGAVGLLAPPGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1005) PL07-0001 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-0001 LC (SEQ ID NO: 1145)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGLSGRSDNHGGSDIQMTQS PSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1144) Sequência de aminoácido PL07-0001 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSLSASV GDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDF TLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1145) PL07-0002 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-0002 LC (SEQ ID NO: 1147)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGLSGRSGNHGGSDIQMTQS PSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1146) Sequência de aminoácido PL07-0002 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGLSGRSGNHGGSDIQMTQSPSSLSASV GDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDF TLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1147) PL07-1001 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-1001 LC (SEQ ID NO: 1149)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSSGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1148) Sequência de aminoácido PL07-1001 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSSGGSDIQMTQSPSSLSASVG DRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTL TISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1149) PL07-1002 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-1002 LC (SEQ ID NO: 1151)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGQNQALRMAGGSDIQMTQS PSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1150) Sequência de aminoácido PL07-1002 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGQNQALRMAGGSDIQMTQSPSSLSASV GDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDF TLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1151) PL07-1003 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-1003 LC (SEQ ID NO: 1153)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGVHMPLGFLGPGGSDIQMTQ SPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFS GSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1152) Sequência de aminoácido PL07-1003 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGVHMPLGFLGPGGSDIQMTQSPSSLSAS VGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTD FTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1153) PL07-1004 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-1004 LC (SEQ ID NO: 1201)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPGGSDIQMTQSP SSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGS GSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1200) Sequência de aminoácido PL07-1004 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPGGSDIQMTQSPSSLSASVG DRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTL TISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1201) PL07-2002 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2002 LC (SEQ ID NO: 1155)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSGNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1154) Sequência de aminoácido PL07-2002 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSGNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1155) PL07-2003 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2003 LC (SEQ ID NO: 1157)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSANPRGGGSD IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1156) Sequência de aminoácido PL07-2003 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSANPRGGGSDIQMTQSPS SLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1157) PL07-2004 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2004 LC (SEQ ID NO: 1159)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPTSGRSANPRGG GSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQ SGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1158) Sequência de aminoácido PL07-2004 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPTSGRSANPRGGGSDIQMT QSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRF SGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1159) PL07-2005 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2005 LC (SEQ ID NO: 1161)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPSGRSANPRGG GSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQ SGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1160) Sequência de aminoácido PL07-2005 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPSGRSANPRGGGSDIQMTQ SPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFS GSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1161) PL07-2006 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2006 LC (SEQ ID NO: 1163)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDDHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1162) Sequência de aminoácido PL07-2006 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDDHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1163) PL07-2007 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2007 LC (SEQ ID NO: 1165)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDIHGGSDIQM TQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSR FSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1164) Sequência de aminoácido PL07-2007 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDIHGGSDIQMTQSPSSLS ASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSG TDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1165) PL07-2008 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2008 LC (SEQ ID NO: 1167)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDQHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1166) Sequência de aminoácido PL07-2008 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDQHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1167) PL07-2009 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2009 LC (SEQ ID NO: 1169)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDTHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1168) Sequência de aminoácido PL07-2009 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDTHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1169) PL07-2010 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2010 LC (SEQ ID NO: 1171)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDYHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1170) Sequência de aminoácido PL07-2010 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDYHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1171) PL07-2011 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2011 LC (SEQ ID NO: 1173)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNPGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1172) Sequência de aminoácido PL07-2011 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNPGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1173) PL07-2012 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2012 LC (SEQ ID NO: 1175)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSANPGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1174) Sequência de aminoácido PL07-2012 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSANPGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1175) PL07-2013 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2013 LC (SEQ ID NO: 1177)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSANIGGSDIQM TQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSR FSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1176) Sequência de aminoácido PL07-2013 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSANIGGSDIQMTQSPSSLS ASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSG TDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1177) PL07-2014 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-2014 LC (SEQ ID NO: 1179)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNIGGSDIQM TQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSR FSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR] (SEQ ID NO: 1178) Sequência de aminoácido PL07-2014 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNIGGSDIQMTQSPSSLS ASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSG TDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1179) PL07-1004/GG/0003 [(SEQ ID NO: 923) com espaçador][PL07-1004/GG/0003 LC (SEQ ID NO: 1181)] [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPGGTSTSGRSAN PRGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAA SSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIK R] (SEQ ID NO: 1180) Sequência de aminoácido PL07-1004/GG/0003 LC GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGAVGLLAPPGGTSTSGRSANPRGGGSDI QMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGV PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 1181)
[0609]Este exemplo demonstra que estes anticorpos ativáveis anti-PDL1 podem ser fabricados em uma variedade de combinações de domínios de MM, CM, VL, e VH assim como em uma variedade de isótipos humanos distintos. Tabela 18. Componentes de anticorpo anti-PDL1 ativável
[0610]Qualquer uma das combinações descritas na Tabela 18 pode ser combinada com regiões constantes de imunoglobulina humana para resultarem IgGs completamente humanas incluindo lgG1, lgG2, lgG4 ou regiões constantes mutadas para resultar em IgGs humanas com funções alteradas tais como N297A de lgG1, N297Q de lgG1, ou S228P de lgG4. As combinações descritas na Tabela 18 não são limitadas pelas combinações particulares mostradas em qualquer fileira dada e incluem qualquer sequência de mascaramento da coluna 1 combinada com qualquer sequência de substrato da coluna 2 combinada com qualquer sequência VL da coluna 3 combinada com qualquer sequência VH da coluna 4. Além das sequências de substrato divulgadas na coluna 2, qualquer CM divulgada aqui pode ser usada.
[0611]Como um exemplo, uma sequência com espaçador (SEQ ID NO: 923) e SEQ ID NO de mascaramento: 63 pode ser combinada com ISSGLLSGRSDNH de substrato (SEQ ID NO: 377), SEQ ID NO VL: 58, e combinada com domínio constante capa humano para fornecer a SEQ ID NO: 428; ou SEQ ID NO de mascaramento: 63 pode ser combinada com ISSGLLSGRSDNH de substrato (SEQ ID NO: 377), SEQ ID NO VL: 58, e combinada com domínio constante capa humano para fornecer a SEQ ID NO: 1008. Além disso, SEQ ID NO VH: 46 pode ser combinada com domínios constantes de cadeia pesada de imunoglobulina humana para fornecer IgG 1 humana (SEQ ID NO: 430), lgG4 humana mutada S228P (SEQ ID NO: 432), lgG1 humana mutada N297A (SEQ ID NO: 434), ou lgG1 humana mutada N297Q (SEQ ID NO: 1202). A co-expressão da SEQ ID NO: 427 com SEQ ID NO: 429 produzirá um anticorpo anti-PDL1 ativável lgG1 completamente humano. A co-expressão da SEQ ID NO: 427 com a SEQ ID NO: 431 produzirá um anticorpo anti-PDL1 ativável lgG4S228P completamente humano. A co-expressão da SEQ ID NO: 427 com a SEQ ID NO: 433 produzirá um anticorpo anti-PDL1 ativável lgG1 completamente humano N297A. A co-expressão da SEQ ID NO: 427 com uma sequência de ácido nucleico que codifica a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 1202 produzirá um anticorpo anti-PDL1 ativável lgG1 completamente humano N297Q. [Sequência de cadeia leve (SEQ ID NO: 1007) com (SEQ ID NO: 1006) com espaçador] (SEQ ID NO: 427) [CAGGGCCAGTCCGGCTCA][TATCTGCCCTGCCACTTCGTGCCAATCGGGGCCT GTAACAATAAGGGCGGTGGATCTAGTGGTGGCTCAGGCGGGTCTGGCGGCATT TCCAGTGGACTCTTGTCAGGACGATCCGATAATCATGGCGGGTCCGACATCCA GATGACACAGAGCCCTTCTTCCCTCTCCGCAAGCGTTGGCGACAGGGTCACCA TTACCTGTAGGGCTTCTCAGAGCATCTCAAGCTATCTGAACTGGTACCAGCAGA AACCTGGAAAGGCTCCAAAACTGCTGATTTACGCTGCCTCCAGTCTTCAGTCAG GCGTCCCCTCCAGATTTAGCGGATCAGGTAGTGGAACTGATTTTACCCTTACAA TATCTTCTCTGCAGCCAGAGGACTTCGCCACATACTATTGTCAGCAAGACAATG GTTACCCCAGTACATTTGGCGGAGGGACAAAGGTCGAGATCAAAAGGACCGTA GCAGCACCAAGCGTCTTTATTTTCCCCCCCAGTGACGAACAGCTGAAGAGCGG AACAGCTTCAGTGGTGTGTCTCCTGAATAACTTCTATCCACGCGAGGCAAAGGT GCAGTGGAAGGTGGACAATGCACTGCAGTCTGGTAATTCCCAAGAAAGTGTTAC TGAGCAGGATTCCAAGGATTCAACTTACTCTCTGTCTAGCACCCTGACTCTTTCT AAAGCAGATTATGAGAAGCATAAGGTCTACGCTTGCGAGGTGACCCACCAGGG GCTTTCCTCTCCAGTTACCAAGTCATTCAACCGGGGTGAGTGTTGATGAGAATT C] (SEQ ID NO: 427) Sequência de cadeia leve sem espaçador TATCTGCCCTGCCACTTCGTGCCAATCGGGGCCTGTAACAATAAGGGCGGTGG ATCTAGTGGTGGCTCAGGCGGGTCTGGCGGCATTTCCAGTGGACTCTTGTCAG GACGATCCGATAATCATGGCGGGTCCGACATCCAGATGACACAGAGCCCTTCTT CCCTCTCCGCAAGCGTTGGCGACAGGGTCACCATTACCTGTAGGGCTTCTCAG AGCATCTCAAGCTATCTGAACTGGTACCAGCAGAAACCTGGAAAGGCTCCAAAA CTGCTGATTTACGCTGCCTCCAGTCTTCAGTCAGGCGTCCCCTCCAGATTTAGC GGATCAGGTAGTGGAACTGATTTTACCCTTACAATATCTTCTCTGCAGCCAGAG GACTTCGCCACATACTATTGTCAGCAAGACAATGGTTACCCCAGTACATTTGGC GGAGGGACAAAGGTCGAGATCAAAAGGACCGTAGCAGCACCAAGCGTCTTTAT TTTCCCCCCCAGTGACGAACAGCTGAAGAGCGGAACAGCTTCAGTGGTGTGTC TCCTGAATAACTTCTATCCACGCGAGGCAAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATG CACTGCAGTCTGGTAATTCCCAAGAAAGTGTTACTGAGCAGGATTCCAAGGATT CAACTTACTCTCTGTCTAGCACCCTGACTCTTTCTAAAGCAGATTATGAGAAGCA TAAGGTCTACGCTTGCGAGGTGACCCACCAGGGGCTTTCCTCTCCAGTTACCAA GTCATTCAACCGGGGTGAGTGTTGATGAGAATTC (SEQ ID NO: 1007) [Sequência de cadeia leve (SEQ ID NO: 1008) com (SEQ ID NO: 923) com espaçador] (SEQ ID NO: 428) [QGQSGS][GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFI FPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDST YSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC] (SEQ ID NO: 428) Sequência de cadeia leve sem espaçador GIALCPSHFCQLPQTGGGSSGGSGGSGGISSGLLSGRSDNHGGSDIQMTQSPSSL SASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQDNGYPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQ LKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLT LSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 1008) SEQ ID NO: 429 GAAGTGCAGCTGCTCGAAAGCGGCGGAGGCTTGGTGCAGCCAGGAGGGAGCC TGCGACTGTCTTGCGCAGCCAGCGGATTCACTTTCTCTTCCTATGCCATGAGCT GGGTTCGACAGGCACCCGGCAAAGGTCTCGAGTGGGTGTCTAGCATCTGGCGA AACGGAATAGTTACAGTGTATGCCGATAGCGTGAAGGGTCGCTTTACTATTTCA CGGGATAATTCTAAGAACACCCTCTACCTGCAAATGAATAGCCTTAGGGCAGAA GATACCGCCGTGTACTACTGTGCCAAATGGTCCGCAGCCTTTGACTACTGGGG CCAGGGGACACTGGTGACCGTGTCCTCTGCATCAACCAAGGGGCCATCAGTGT TCCCACTCGCCCCATCTTCCAAGAGTACTTCCGGCGGAACCGCAGCCCTTGGC TGCCTTGTTAAGGACTATTTCCCAGAACCCGTGACCGTAAGTTGGAACTCTGGC GCCCTTACTTCTGGGGTGCACACCTTCCCAGCAGTGTTGCAGTCCAGTGGCCTT TACTCTCTGTCTAGTGTAGTGACTGTGCCTTCCTCTAGTCTCGGTACCCAGACCT ATATTTGTAATGTTAACCATAAGCCCAGCAATACAAAGGTTGATAAGAAAGTGGA ACCCAAGAGCTGCGATAAGACACATACCTGCCCACCTTGTCCAGCTCCCGAGCT GCTGGGCGGACCCTCAGTCTTTCTCTTCCCACCTAAACCCAAGGATACCCTTAT GATCTCCAGGACTCCTGAGGTGACCTGCGTTGTGGTCGACGTGTCACATGAGG ACCCTGAGGTAAAGTTTAACTGGTACGTGGACGGTGTGGAGGTACATAACGCTA AGACTAAGCCACGAGAGGAGCAATACGCTTCCACTTACAGGGTGGTCAGCGTC CTGACCGTTCTCCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAATATAAGTGTAAGGTT AGCAACAAAGCTCTCCCTGCACCAATCGAGAAGACAATCAGCAAGGCAAAAGG GCAGCCTCGGGAACCTCAGGTCTACACCCTCCCTCCTAGCAGGGAAGAGATGA CAAAGAACCAGGTCTCTCTCACCTGCCTGGTGAAAGGCTTCTATCCATCTGACA TTGCTGTGGAGTGGGAATCCAACGGCCAGCCTGAAAATAATTATAAGACCACAC CCCCCGTCCTTGATTCCGATGGATCTTTCTTCCTGTACAGTAAACTCACCGTCGA CAAATCACGGTGGCAGCAAGGTAACGTGTTCAGCTGTTCTGTCATGCATGAGGC TCTGCATAACCATTACACACAAAAGTCTTTGTCATTGTCTCCAGGATGATGAGAA TTCATTGATCATAATCAGCCATACCAC SEQ ID NO: 430 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT HTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQY0STYRWSVL7VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 431 GAAGTGCAGCTGCTCGAAAGCGGCGGAGGCTTGGTGCAGCCAGGAGGGAGCC TGCGACTGTCTTGCGCAGCCAGCGGATTCACTTTCTCTTCCTATGCCATGAGCT GGGTTCGACAGGCACCCGGCAAAGGTCTCGAGTGGGTGTCTAGCATCTGGCGA AACGGAATAGTTACAGTGTATGCCGATAGCGTGAAGGGTCGCTTTACTATTTCA CGGGATAATTCTAAGAACACCCTCTACCTGCAAATGAATAGCCTTAGGGCAGAA GATACCGCCGTGTACTACTGTGCCAAATGGTCCGCAGCCTTTGACTACTGGGG CCAGGGGACACTGGTGACCGTGTCCTCTGCATCAACCAAGGGGCCATCAGTGT TCCCACTCGCCCCATGTAGCAGATCAACATCTGAATCCACCGCAGCCCTTGGCT GCCTTGTTAAGGACTATTTCCCAGAACCCGTGACCGTAAGTTGGAACTCTGGCG CCCTTACTTCTGGGGTGCACACCTTCCCAGCAGTGTTGCAGTCCAGTGGCCTTT ACTCTCTGTCTAGTGTAGTGACTGTGCCTTCCTCTAGTCTCGGTACCAAGACCTA TACCTGCAACGTAGATCATAAGCCCAGCAATACAAAGGTTGATAAGAGAGTAGA GTCAAAGTACGGCCCACCCTGCCCACCTTGTCCAGCTCCCGAGTTCCTGGGCG GACCCTCAGTCTTTCTCTTCCCACCTAAACCCAAGGATACCCTTATGATCTCCAG GACTCCTGAGGTGACCTGCGTTGTGGTCGACGTGTCACAAGAGGACCCTGAGG TACAGTTTAACTGGTACGTGGACGGTGTGGAGGTACATAACGCTAAGACTAAGC CACGAGAGGAGCAATTTAACTCCACTTACAGGGTGGTCAGCGTCCTGACCGTTC TCCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAATATAAGTGTAAGGTTAGCAACAAAG GTCTGCCCAGTTCTATCGAGAAGACAATCAGCAAGGCAAAAGGGCAGCCTCGG GAACCTCAGGTCTACACCCTCCCTCCTAGCCAGGAAGAGATGACAAAGAACCA GGTCTCTCTCACCTGCCTGGTGAAAGGCTTCTATCCATCTGACATTGCTGTGGA GTGGGAATCCAACGGCCAGCCTGAAAATAATTATAAGACCACACCCCCCGTCCT TGATTCCGATGGATCTTTCTTCCTGTACAGTCGCCTCACCGTCGACAAATCACG GTGGCAGGAAGGTAACGTGTTCAGCTGTTCTGTCATGCATGAGGCTCTGCATAA CCATTACACACAAAAGTCTTTGTCATTGTCTCTCGGATGATGAGAATTCATTGAT CATAATCAGCCATACCAC SEQ ID NO: 432 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPP CPgCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTI SKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 433 GAAGTGCAGCTGCTCGAAAGCGGCGGAGGCTTGGTGCAGCCAGGAGGGAGCC TGCGACTGTCTTGCGCAGCCAGCGGATTCACTTTCTCTTCCTATGCCATGAGCT GGGTTCGACAGGCACCCGGCAAAGGTCTCGAGTGGGTGTCTAGCATCTGGCGA AACGGAATAGTTACAGTGTATGCCGATAGCGTGAAGGGTCGCTTTACTATTTCA CGGGATAATTCTAAGAACACCCTCTACCTGCAAATGAATAGCCTTAGGGCAGAA GATACCGCCGTGTACTACTGTGCCAAATGGTCCGCAGCCTTTGACTACTGGGG CCAGGGGACACTGGTGACCGTGTCCTCTGCATCAACCAAGGGGCCATCAGTGT TCCCACTCGCCCCATCTTCCAAGAGTACTTCCGGCGGAACCGCAGCCCTTGGC TGCCTTGTTAAGGACTATTTCCCAGAACCCGTGACCGTAAGTTGGAACTCTGGC GCCCTTACTTCTGGGGTGCACACCTTCCCAGCAGTGTTGCAGTCCAGTGGCCTT TACTCTCTGTCTAGTGTAGTGACTGTGCCTTCCTCTAGTCTCGGTACCCAGACCT ATATTTGTAATGTTAACCATAAGCCCAGCAATACAAAGGTTGATAAGAAAGTGGA ACCCAAGAGCTGCGATAAGACACATACCTGCCCACCTTGTCCAGCTCCCGAGCT GCTGGGCGGACCCTCAGTCTTTCTCTTCCCACCTAAACCCAAGGATACCCTTAT GATCTCCAGGACTCCTGAGGTGACCTGCGTTGTGGTCGACGTGTCACATGAGG ACCCTGAGGTAAAGTTTAACTGGTACGTGGACGGTGTGGAGGTACATAACGCTA AGACTAAGCCACGAGAGGAGCAATACGCTTCCACTTACAGGGTGGTCAGCGTC CTGACCGTTCTCCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAATATAAGTGTAAGGTT AGCAACAAAGCTCTCCCTGCACCAATCGAGAAGACAATCAGCAAGGCAAAAGG GCAGCCTCGGGAACCTCAGGTCTACACCCTCCCTCCTAGCAGGGAAGAGATGA CAAAGAACCAGGTCTCTCTCACCTGCCTGGTGAAAGGCTTCTATCCATCTGACA TTGCTGTGGAGTGGGAATCCAACGGCCAGCCTGAAAATAATTATAAGACCACAC CCCCCGTCCTTGATTCCGATGGATCTTTCTTCCTGTACAGTAAACTCACCGTCGA CAAATCACGGTGGCAGCAAGGTAACGTGTTCAGCTGTTCTGTCATGCATGAGGC TCTGCATAACCATTACACACAAAAGTCTTTGTCATTGTCTCCAGGATGATGAGAA TTCATTGATCATAATCAGCCATACCAC SEQ ID NO: 434 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT HTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQY0STYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 1202 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSIWRN GIVTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWSAAFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKT HTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYgSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
[0612]Exemplos adicionais de domínios constantes de cadeia pesada incluem, mas não são limitados a, uma região constante de cadeia pesada tendo uma mutação ou supressão em um ou mais dos aminoácidos seguintes: Ser 228, Leu234, Leu235, Gly236, Gly237, Asp265, Asp270, Asn297, Lys 320, Lys 322, Glu328, Pro329, Pro331 como numerado no índice EU como apresentado em Kabat, tal que o domínio Fctem menos afinidade por um receptor de Fc-gama.
[0613]Este ensaio mede a capacidade do peptídeo de mascaramento de bloqueara ligação do anticorpo ativável ao antígeno quando comparado à ligação do anticorpo não modificado ao antígeno.
[0614]O esboço geral para este ensaio é como segue: Placas Maxisorp, Nunc são revestidas durante a noite a 4 °C com 100 pl/reservatório de uma solução a 1 pg/mL de PDL1 humano (R & D Systems) em PBS, pH 7,4. As placas são lavadas 3 vezes com PBST (PBS, pH 7,4, 0,05 % de Tween-20), e os reservatórios são bloqueados com 200 ml/reservatório de 10 mg/mL de BSA em PBST por 2 horas na temperatura ambiente. As placas são lavadas 3 vezes com PBST (PBS, pH 7,4, 0,05 % de Tween-20). Curvas de diluição são preparadas, em BSA a 10 mg/mL em PBST, como mostrado abaixo na Tabela 10. Tabela 10. Disposição da placa para o ensaio de eficiência de mascaramento, uma placa para cada ponto no tempo.
[0615]As soluções de ligação são adicionadas às placas, que depois são incubadas por 1 hora na temperatura ambiente (RT), e depois lavadas 3 vezes com PBST (PBS, pH 7,4, 0,05 % de Tween-20). Cem (100) pl/reservatório de IgG anti- humana de cabra com diluição a 1:4000 (específica de Fab, Sigma Cat # A0293) em BSA a 10 mg/mL em PBST são adicionados, e a placa é incubada por 1 hora na temperatura ambiente. A placa é desenvolvida com TMB e HCI 1N. Mostrados nas Figuras 15 a 17 são esboços de isotermas de ligação para anticorpos ativáveis anti- PDL1 que incluem o anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 descrito aqui. Esboços são gerados em Prizm (Sigma Plot) e os dados são ajustados a um modelo de saturação de sítio único e um Kd é determinado. Na Figura 17, PL03+ é um anticorpo ativável positivo para efetor, isto é, IgG 1 do tipo selvagem. PL03- é um anticorpo ativável negativo para efetor, isto é, lgG1 mutada N297Q.
[0616]A eficiência de mascaramento é calculada dividindo-se o Kd pela ligação dos anticorpos ativáveis pelo Kd do anticorpo parental. Eficiências de mascaramento são mostradas nas Figuras 15 a 17.
[0617]Neste Exemplo, anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL15-0003-C5H9v2 e PL18-0003-C5H9v2 foram analisados quanto à capacidade de induzir diabete em camundongos NOD. Os camundongos NOD, subcepa NOD/ShiLtJ, foram obtidos da Jackson Laboratory em 6 semanas e aclimatados em sítio. Em 9,5 semanas, os camundongos foram verificados quanto à diabete antes do registro, agrupados, e dosados como apresentado na Tabela 19. Tabela 19. Grupos e doses para o estudo de diabete com anticorpos ativáveis anti-PDL1
[0618]A Figura 18A, que esboça a % de não diabético versuso número de dias após a dose inicial, mostra que este anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 induziu diabete em camundongos NOD em 1 mg/kg enquanto o anticorpo anti-PDL1 ativável PL15- 0003-C5H9v2 (rotulado aqui como Gr4-PFI5) não induziu diabete e o anticorpo anti- PDL1 ativável PL18-0003-C5H9v2 (rotulado na Figura 18 como Gr5-PL18) exibiu diabete retardada em 1 mg/kg. Anticorpo mlgG2a de controle e anti-PDL1 C5H9v2 em 0,3 mg/kg não induziu diabete em camundongos NOD. Em um grupo adicional, uma única dose de 3 mg/kg de anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 administrado IP em um volume de dose de 10 mL/kg induziu diabete em 2 de 8 camundongos (75 % não diabéticos), fornecendo uma margem de segurança maior do que a margem de segurança de três vezes em relação ao anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 (Grupo 2). Os resultados são mostrados na Figura 18B.
[0619]Neste Exemplo, anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL15-0003-C5H9v2 e PL18-0003-C5H9v2 foram analisados quanto a capacidade de reduzir o crescimento de tumores singênicos de MC38.
[0620]A linhagem de célula de carcinoma de cólon de camundongo MC38 foi obtida de ATCC. MC38 foram cultivadas em RPMI-1640 suplementado com 10 % de soro bovino fetal a 37 °C em uma atmosfera de 5 % de CO2 em ar. As células foram colhidas durante 0 período de crescimento logarítmico, recolocadas em suspensão em PBS com concentração de célula apropriada, e mantidas em gelo para indução do tumor.
[0621]Cada camundongo foi inoculado subcutaneamente no flanco direito com 0,5X106 de células MC38 em PBS para 0 desenvolvimento de tumor. Os tratamentos foram iniciados quando 0 tamanho de tumor médio atingiu aproximadamente 100 a 200 mm3 (não mais do que 200 mm3). Tamanhos de tumor foram medidos duas vezes por semana em duas dimensões usando um calibre, e 0 volume foi expressado em mm3 usando a fórmula: V = 0,5 a x b2 onde a e b são os diâmetros longos e curtos do tumor, respectivamente.
[0622]Os camundongos foram agrupados e dosados como apresentado na Tabela 20. Tabela 20. Grupos e doses para estudo singênico de MC38 com anticorpos ativáveis anti-PDL1
[0623]A Figura 19, que esboça o volume de tumor versuso número de dias após a dose inicial, demonstra que estes anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL15-0003- C5H9v2 e PL18-0003-C5H9v2 inibiram o crescimento de tumores singênicos de MC38 similar ao anticorpo anti-PDL1 de controle positivo C5H9v2.
[0624]Diferente de um anticorpo que se ligaria ao antígeno alvo indiscriminadamente, um anticorpo ativável seria uma molécula que é inerte a menos que ele seja ativado no microambiente tumoral. Uma vez ativado, o anticorpo ativável clivado se ligaria ao antígeno alvejado dentro do tumor apenas, distribuindo os antígenos nas áreas periféricas. PDL1 é expressado em células tumorais assim como células T (CD4+ e CD8+) na circulação e no baço. Este exemplo demonstra que animais tratados com anticorpo anti-PDL1 ativável não tiveram anticorpo ativável detectável em células T na periferia, enquanto os animais tratados com anticorpo anti- PDL1 mostraram uma presença detectável dependente de dose de anticorpo em células T na periferia.
[0625]Para medir se o anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 é protegido de ligação às células T na circulação e no baço comparado ao anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, camundongos C57BI/6 de 14 semanas de idade (com tumores variando de 38 a 671 mm3) foram dosados como apresentado na Tabela 21. Tamanhos de tumor foram medidos em duas dimensões usando um calibre, e o volume foi expressado em mm3 usando a fórmula: V = 0,5 a x b2 onde a e b são os diâmetros longos e curtos do tumor, respectivamente. Depois de cerca de 20 horas, os animais foram submetidos à eutanásia; e sangue, baço, e plasma foram colhidos de cada animal. Tabela 21. Grupos e doses para o estudo de ocupação de PDL1
[0626]Sangue total foi processado como segue: Um volume de sangue foi adicionado a 10 volumes de Solução de Lise de RBC (130-094-183 Miltenyi Biotec) e processado usando o protocolo do fabricante. Linfócitos foram recolocados em suspensão em tampão de coloração (HBSS FBS a 2 %). Baço foi processado como segue: Baço foi colocado em um filtro de célula de 70 uM (352350 Corning/BD Falcon) com 1 mL de RPMI-1640 isento de soro. As costas de uma seringa de 3 mL foram usadas para amassar o baço em um movimento circular. O filtro foi lavado com o meio. Esplenócitos foram peletizados usando uma centrífuga e o sangue foi lisado usando 10 volumes de Solução de Lise de RBC (130-094-183 Miltenyi Biotec) de acordo com o protocolo do fabricante. Esplenócitos foram refiltrados depois de recolocar em suspensão em tampão de coloração (HBSS FBS a 2 %). Linfócitos do sangue total e linfócitos do baço foram contados e foram aliquotados aos reservatórios de uma placa de fundo redondo de 96 reservatórios (células 5e5/reservatório). As células foram peletizadas e Reagente FcR de camundongo foi adicionado em diluição a 1:10 de acordo com o protocolo do fabricante (130-092-575 Miltenyi Biotec). Um conjunto de células foi colorido com uma quantidade de saturação, 100 nM, de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 por 60 minutos para obter um valor de saturação máximo. As células foram lavadas 3 vezes e são coloridas com um anticorpo de alótipo ‘a’ biotinilado, clone anti- mlgG2a(a) 8.3 (553502 BD Biosciences) em 300 ng/mL por 60 minutos. As células foram lavadas 3 vezes e depois coloridas com 1 ug/mL (também referido aqui como “pg/mL”) de anti-CD4-Pacific Blue (558107 BD Bioscience), 1 ug/mL de anti-CD8-APC (553035 BD Bioscience) e diluição a 1:500 de SAPE (S-866 Life Technologies) por 30 minutos. As células foram lavadas 2 vezes e coloridas com 7-AAD de acordo com o protocolo do fabricante (559925 BD Bioscience). O citômetro de fluxo MACSQuantfoi usado para medira quantidade de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 ligada às células T do sangue total e do baço. Brevemente, no máximo 30.000 eventos foram coletados na porta do linfócito. Células vivas foram acionadas a partir da porta negativa para 7AAD. CD4+ e CD8+ células foram comutadas separadamente e MFI de mAb anti-PDL1 e anticorpo anti-PDL1 ativável foram registrados tanto para CD4 quanto para CD8. A porcentagem de ocupação foi determinada tomando-se o MFI da amostra comparado à média do MFI para o MFI de ligação máxima. As Figuras 20A a 20D demonstram a porcentagem do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 ligados às células T CD4+ e CD8+ do sangue periférico (Figuras 20A, 20B) ou baço (Figuras 20C, 20D). Em todos os gráficos, o círculo representa isótipo, o quadrado representa anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, e o triângulo representa anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2. A porcentagem de ocupação do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 foi refletiva da titulação de dose. A porcentagem de ocupação do anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 em 1 mg/kg foi similar a mlgG2a de controle de isótipo em 1 mg/kg.
[0627]Este exemplo demonstra que animais tratados com um anticorpo anti- PDL1 ativável da divulgação exibiram ligação reduzida a células T sanguíneas de camundongos que portam tumor comparado àquela exibida por um anticorpo anti- PDL1 da divulgação em uma variedade de doses.
[0628]O estudo foi conduzido em uma maneira similar àquela descrita no Exemplo 15. Brevemente, os camundongos que portam tumores de MC38 entre 100 e 200 mm3 foram tratados com uma dose única de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 ou anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 como indicado nas Figuras 21A e 21B, e o sangue foi analisado quanto ao anticorpo de superfície ligado por citometria de fluxo quatro dias depois da dosagem. Concentrações plasmáticas do anticorpo e anticorpo ativável foram determinadas por ELISA. As Figuras 21A e 21B demonstram que a presença de proteases derivadas de tumor capazes de clivar o anticorpo ativável não levou a níveis altos de anticorpo ativável ativado no sangue (Figura 21 A); isto é, o anticorpo ativável (representado por quadrados) demonstrou ligação de PDL1 periférica reduzida em camundongos portadores de tumor comparado ao anticorpo (representado por círculos) ou um anticorpo isotípico (representado por triângulos) apesar das concentrações plasmáticas do anticorpo ativável sendo mais altas do que aquelas do anticorpo (Figura 21B).
[0629]Neste exemplo, células mononucleares do sangue periférico de um doador positivo para CMV foram incubadas na presença de lisato viral de CMV e um anticorpo anti-PDL1 ou um anticorpo anti-PDL1 ativável da divulgação para avaliar o efeito de tal anticorpo anti-PDL1 ou anticorpo anti-PDL1 ativável sobre a secreção de citocina com interferon gama (IFN-gama).
[0630]PBMCs de um doador positivo para CMV (Hemacare Donor C) foram plaqueadas em 3,5 x 105 células por reservatório na presença de 4 pg/mL de lisato viral de CMV (Astarte) e anticorpo anti-PDL1 C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 PL07- 2001-C5H9v2 ativável, ou um anticorpo de controle de isótipo de hlgG4. Depois de quatro dias, o sobrenadante foi removido de cada reservatório e níveis de IFN-gama foram avaliados usando kit ELISA de IFN-gama (Life Technologies, Carlsbad, CA). A Figura 22 demonstra que este anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2 exibiu secreção de INF-gama estimulada por CMV aumentada comparado com hlgG4 de controle mas potência diminuída em relação ao anticorpo precursor anti-PDL1 C5H9v2 devido ao anticorpo ativável que é mascarado.
[0631]Este Exemplo demonstra a capacidade do anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 de ser ativado e de se ligar a tecidos cancerosos de camundongo MC38 congelados usando um método de imagiologia in situ.
[0632]O anticorpo anti-PDL1 ativável fluorescentemente rotulado PL15-0003- C5H9v2 ou anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 foi incubado em seções tumorais de MC38 PDL1+ congeladas por 1 hora em um tampão compatível com protease na presença ou ausência de um coquetel inibidor de espectro amplo como descrito na Publicação Internacional PCT número WO 2014/107599, publicada em 10 de julho de 2014.
[0633]Os resultados são mostrados na Figura 23. A imagem do tecido na Figura 23A demonstra a ligação do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 à seção tumoral indicando a presença de antígeno de PDL1 na seção tumoral. A imagem do tecido na Figura 23B demonstra que este anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 foi ativado por clivagem proteolítica derivada de tumor do anticorpo anti-PDL1 ativável para produzir um anticorpo anti-PDL1 que se ligou ao alvo de PDL1 na seção tumoral. A imagem do tecido na Figura 23D demonstra que o sinal fluorescente mostrado na Figura 23B foi inibido por pré-tratamento da seção tumoral com uma diluição a 1:100 de grupo III de coquetel inibidor de espectro amplo e 50 mM de EDTA, ao passo que nenhum efeito de inibidores de protease de espectro amplo foi detectado sobre a ligação de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 à seção tumoral como demonstrado na imagem do tecido na Figura 23C. Estes resultados demonstram que as seções tumorais compreendem atividade de protease suficiente para ativar os anticorpos ativáveis da divulgação.
[0634]Este Exemplo demonstra a capacidade do anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 de exibir atividade de ligação e bloqueio dependente de protease in vitro.
[0635]Estudos de ligação e bloqueio foram conduzidos no anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 e anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 em uma maneira similar àquela descrita em outra parte nos Exemplos exceto que as placas foram revestidas com 0,5 pg/mL de PDL1.
[0636]A Figura 24 descreve que este anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003- C5H9v2 exibiu uma ECso mais alta para ligação de PDL1 e bloqueio de PD1 do que o anticorpo anti-PDL1 como medido por ELISA. A figura demonstra ainda que a ativação do anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2 por matriptase restaurou completamente as atividades de ligação de PDL1 e bloqueio de PD1 a níveis comparáveis àqueles do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0637]Este Exemplo mede a capacidade de um peptídeo de mascaramento de reduzir a ligação de um anticorpo anti-PDL1 ativável da divulgação ao PDL1 comparado à capacidade do anticorpo precursor de se ligar a PDL1 in vitro.Este Exemplo também demonstra a capacidade de um anticorpo anti-PDL1 ativável da divulgação de exibir atividade de bloqueio dependente de protease in vitro.
[0638]As capacidades dos anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL07-2001-C5H9v2 e PF07-3001-C5H9v2 e anticorpo anti-PDL1 C5H9 de se ligarem a PDL1 humano ou de murino foram testadas em uma maneira similar às técnicas descritas em outra parte nos Exemplos. Os resultados são mostrados na Figura 25.
[0639]As capacidades do anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 ativável ativado por uPA PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti- PDL1 ativável ativado por MMP14 PL07-2001-C5H9v2, e anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 de bloquear a ligação de PD1 (PD-1) ou B7-1 ao PDL1 foram testadas em uma maneira similar às técnicas descritas em outra parte nos Exemplos.
[0640]Brevemente, para o ensaio de bloqueio de PD1, PDL1 humano, de cyno ou rato foi adsorvido ao reservatório de uma placa ELISA. Biotinilado PD1 humano, de cyno, ou rato foi aplicado aos reservatórios na ausência ou presença de uma concentração crescente de anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 ativável ativado por uPA PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti- PDL1 ativável ativado por MMP14 PL07-2001-C5H9v2, ou anticorpo anti-PDL1 C5H9v2. Os resultados, mostrados na Figura 26, indicam que este anticorpo ativável PF07-2001-C5H9v2 exibiu uma ECso mais alta para o bloqueio de PD1 do que o anticorpo anti-PDL1 como medido por ELISA. Entretanto, a ativação do anticorpo ativável por uPA ou MMP14 restaurou a atividade de bloqueio de PD1 a níveis comparáveis àqueles do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0641]Brevemente, para o ensaio de bloqueio de B7-1, PDL1 humano ou de cyno foi adsorvido ao reservatório de uma placa ELISA. B7-1 humano ou de cyno biotinilado foi aplicado aos reservatórios na ausência ou presença de uma concentração crescente de anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti-PDL1 ativável ativado por uPA PL07-2001-C5H9v2, anticorpo anti- PDL1 ativável ativado por MMP14 PL07-2001-C5H9v2, ou anticorpo anti-PDL1 C5H9v2. Os resultados, mostrados na Figura 27, indicam que este anticorpo ativável PF07-2001-C5H9v2 exibiu uma ECso mais alta para o bloqueio de B7-1 do que o anticorpo anti-PDL1 como medido por ELISA. Entretanto, a ativação do anticorpo ativável por uPA ou MMP14 restaurou a atividade de bloqueio de B7-1 a níveis comparáveis àqueles do anticorpo anti-PDL1 C5H9v2.
[0642]Neste Exemplo, anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL15-0003-C5H9v2, PL15-2001-C5H9v2, e PL15-3001-C5H9v2 foram analisados quanto à capacidade de reduzir o crescimento de tumores singênicos de MC38.
[0643]A linhagem de célula de carcinoma de cólon de camundongo MC38 foi obtida da ATCC. MC38 foram cultivadas em RPMI-1640 suplementado com 10 % de soro bovino fetal a 37 °C em uma atmosfera de 5 % de CO2 em ar. As células foram colhidas durante 0 período de crescimento logarítmico, recolocadas em suspensão em PBS com concentração de célula apropriada, e mantidas em gelo para a indução do tumor.
[0644]Cada camundongo foi inoculado subcutaneamente no flanco direito com 0,5X106 de células MC38 em PBS para 0 desenvolvimento de tumor. Os tratamentos foram iniciados quando 0 tamanho de tumor médio atingiu aproximadamente 100 a 200 mm3 (não mais do que 200 mm3). Tamanhos de tumor foram medidos duas vezes por semana em duas dimensões usando um calibre, e 0 volume foi expressado em mm3 usando a fórmula: V = 0,5 a x b2 onde a e b são os diâmetros longos e curtos do tumor, respectivamente.
[0645]Os camundongos foram agrupados e dosados como apresentado na Tabela 24. Tabela 24. Grupos e doses para 0 estudo singênico de MC38 com anticorpos ativáveis anti-PDL1
[0646]A Figura 28, que esboça o volume de tumor versuso número de dias após a dose inicial, demonstra que estes anticorpos ativáveis anti-PDL1 PL15-0003- C5H9v2, PL15-2001-C5H9v2, e PL15-3001-C5H9v2 inibiram o crescimento de tumores singênicos de MC38 similar ao anticorpo anti-PDL1 de controle positivo C5H9v2.
[0647]Este exemplo demonstra que animais tratados com anticorpos ativáveis anti-PDL1 da divulgação exibiram ligação reduzida a células T sanguíneas de camundongos que portam tumor comparado àquela exibida por um anticorpo anti- PDL1 da divulgação.
[0648]O estudo foi conduzido em uma maneira similar àquela descrita no Exemplo 15. Brevemente, camundongos que portam tumores de MC38 entre 100 e 200 mm3 foram tratados com uma dose única de anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 ou anticorpo anti-PDL1 ativável PL15-0003-C5H9v2, PL15-2001-C5H9v2, ou PL15-3001- C5H9v2 como indicado na Tabela 25, e o sangue foi analisado quanto ao anticorpo ligado na superfície por citometria de fluxo quatro e oito dias depois da dosagem. A porcentagem de ocupação foi calculada como descrito no Exemplo 15. Tabela 25. Grupos e doses para o estudo de ocupação de PDL1
[0649]Concentrações plasmáticas do anticorpo e anticorpos ativáveis foram determinadas por ELISA. A Figura 29 demonstra que a presença de proteases derivadas de tumor capazes de clivar os anticorpos ativáveis não levou a níveis altos de anticorpos ativados ativáveis no sangue.
[0650]Este Exemplo demonstra a capacidade de proteases em um tumor implantado em um camundongo de ativar um anticorpo anti-PDL1 ativável da divulgação.
[0651 ]Um modelo de câncer de mama de xenoenxerto ortotópico MDA-MB- 231 -Iuc2 foi usado para estes estudos. Camundongos nu/nu fêmeas foram adquiridos da Charles River Laboratories até atingir 7 semanas de idade. Depois de 1 semana de aclimatação, três milhões de células MDA-MD-231-luc2-4D3LN (Perkin Elmer) em 30 microlitros (ul, também referido aqui como “pl”) de RPMI isento de soro (matrigel a 1:1) foram injetados na quarta camada de gordura mamária abdominal esquerda. Os tumores foram cultivados a 110 a 159 mm3. Três camundongos por grupo foram administrados intravenosamente com 5 mg/kg de conjugado de Alexa750-anticorpo anti-PDL1 C5H9v2 ou anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2. Quatro camundongos foram administrados intravenosamente com 5 mg/kg de conjugado Alexa750-palivizumabe de controle de anticorpo anti-RSV (Synagis). Noventa e seis horas depois da administração, imagens ópticas foram coletadas de cada um dos camundongos. Os resultados são mostrados na Figura 30. Um sinal fluorescente de intensidade alta foi detectado apenas nos tumores de camundongos dosados com o anticorpo anti-PDL1 ou anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2, sugerindo que o anticorpo anti-PDL1 ativável foi ativado e acumulado no tumor através da ligação de PDL1.
[0652]Este Exemplo determina se um anticorpo ativável da divulgação é ativado em amostras de plasma humano.
[0653]Anticorpo anti-PDL1 ativável PL07-2001-C5H9v2 foi conjugado com corante Oregon Green (ThermoFisher Cat# 06149). A concentração e o grau de rotulagem foram determinados com um espectrofotômetro. Três uM (também referido aqui como “pM”) de anticorpo anti-PDL1 ativável rotulado PL07-2001-C5H9v2 foram adicionados em amostras de plasma obtidas de doadores saudáveis, pacientes com melanoma ou pacientes com câncer de pulmão em uma razão de anticorpo ativável para plasma final de 30:70. As amostras foram incubadas por 48 horas em uma câmara umedecedora a 37 °C. Reações de anticorpo anti-PDL1 ativável rotulado PL07-2001-C5H9v2 no plasma foram interrompidas em 0 ou 48 horas congelando-se as amostras em -80° C ou desnaturando-se em tampão de tampão de execução Wes (ProteinSimple Cat #PS-MK14). Amostras foram analisadas pelo sistema de western blot capilar Wes (ProteinSimple) usando anticorpos contra corante Oregon Green (ThermoFisher Cat# A-11095 em 100 pg/ml) seguido por anticorpo secundário conjugado a HRP (Jackson ImmunoResearch Cat# 705-035-147 em diluição a 1/40). A análise da porcentagem de ativação do anticorpo anti-PDL1 ativável rotulado PL07- 2001-C5H9v2 foi determinada usando o software Compass (ProteinSimple).
[0654]Não houve nenhuma ativação detectável do anticorpo ativável em cinco amostras de paciente normal, em cinco amostras de paciente com melanoma (três metastases em linfonodos, duas no cérebro, e uma na pele das costas), nem em cinco amostras de paciente com câncer de pulmão (uma metástase no lóbulo inferior do pulmão esquerdo (estágio IV), uma no lóbulo inferior do pulmão direito (estágio IV), uma no lóbulo superior do pulmão esquerdo (estágio IA), e duas no lóbulo superior do pulmão direito (estágios 11IA e IB).
[0655]Embora a invenção tenha sido descrita em combinação com a descrição detalhada desta, a descrição precedente é intencionada a ilustrar e não limitar o escopo da invenção, que é definido pelo escopo das reivindicações anexas. Outros aspectos, vantagens, e modificações estão dentro do escopo do seguinte.
Claims (33)
1. Anticorpo isolado ou fragmento de ligação ao antígeno deste (AB), CARACTERIZADO pelo fato de que o AB compreende: (a) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo: i. uma região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (CDR1 VH) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 212; ii. uma região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (CDR2 VH) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 246; iii. uma região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (CDR3 VH) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 235; e (b) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo: i. uma região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (CDR1 VL) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 209; ii. uma região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (CDR2 VL) compreendendo uma sequência de aminoácidos das SEQ ID NOs: 215 ou 227; e iii. uma região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (CDR3 VL) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 228; em que o AB se liga especificamente ao PDL1 de mamífero.
2. Anticorpo conjugado CARACTERIZADO pelo fato de que compreende o anticorpo, como definido na reivindicação 1, conjugado a um agente.
3. Anticorpo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a CDR2 VL compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 215.
4. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende o anticorpo, como definido na reivindicação 1, ou o anticorpo conjugado, como definido na reivindicação 2, e um veículo.
5. Anticorpo ativável CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a seguinte estrutura: (1) um anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno deste (AB) que especificamente se liga ao PDL1 de mamífero, em que o AB compreende: (a) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo: i. uma região determinante de complementaridade 1 de cadeia pesada variável (CDR1 VH) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 212; ii. uma região determinante de complementaridade 2 de cadeia pesada variável (CDR2 VH) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 246; e iii. uma região determinante de complementaridade 3 de cadeia pesada variável (CDR3 VH) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 235; e (b) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo: i. uma região determinante de complementaridade 1 de cadeia leve variável (CDR1 VL) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 209; ii. uma região determinante de complementaridade 2 de cadeia leve variável (CDR2 VL) compreendendo uma sequência de aminoácidos das SEQ ID NOs: 215 ou 227; e iii. uma região determinante de complementaridade 3 de cadeia leve variável (CDR3 VL) compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 228; (2) uma porção de mascaramento (MM) que compreende as sequências de aminoácidos selecionadas do grupo que consiste nas SEQ ID NOs: 59-81,208 e 426; e; (3) uma porção clivável (CM) que compreende as sequências de aminoácidos selecionadas do grupo que consiste nas SEQ ID NOs: 338-394, 435-445, 883-921, 1009 e 1010.
6. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a porção de mascaramento (MM) compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 63.
7. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a porção clivável (CM) compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 377.
8. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o AB é ligado a CM.
9. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que o AB é ligado diretamente a CM.
10. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que o AB é ligado à CM por meio de um peptídeo de ligação.
11. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a MM é ligada à CM tal que o anticorpo ativável em um estado não clivado compreende o arranjo estrutural do N-terminal ao C-terminal como segue: MM- CM-AB ou AB-CM-MM.
12. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo ativável compreende um peptídeo de ligação entre a MM e a CM, um peptídeo de ligação entre a CM e o AB, ou ambos um peptídeo de ligação entre a MM e a CM e um peptídeo de ligação entre a CM e o AB.
13. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo ativável compreende um primeiro peptídeo de ligação (LP1) e um segundo peptídeo de ligação (LP2), e em que o anticorpo ativável no estado não clivado tem o arranjo estrutural do N-terminal ao C-terminal como segue: MM-LP1-CM-LP2-AB ou AB-LP2-CM-LP1-MM.
14. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 13, CARACTERIZADO pelo fato de que os dois peptídeos de ligação não precisam ser idênticos um ao outro.
15. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 13, CARACTERIZADO pelo fato de que cada um de LP1 e LP2 é um peptídeo de cerca de 1 a 20 aminoácidos em comprimento.
16. Anticorpo ativável conjugado CARACTERIZADO pelo fato de que compreende o anticorpo ativável, como definido na reivindicação 6, conjugado a um agente.
17. Anticorpo ativável conjugado, de acordo com a reivindicação 16, CARACTERIZADO pelo fato de que o agente possui uma ou mais das seguintes características selecionadas a partir do grupo que consiste em: (i) o agente é uma toxina ou fragmento desta; (ii) o agente é um inibidor de microtúbulo; (iii) o agente é um agente danificadorde ácido nucleico; (iv) o agente é uma dolastatina ou um derivado desta; (v) o agente é uma auristatina ou um derivado desta; (vi) o agente é um maitansinoide ou um derivado deste; (vii) o agente é uma duocarmicina ou um derivado desta; (viii) o agente é uma caliqueamicina ou um derivado desta; (ix) o agente é auristatina E ou um derivado desta; (x) o agente é monometil auristatina E (MMAE); (xi) o agente é monometil auristatina D (MMAD); (xii) o agente é DM1 (xiii) o agente é DM4; (xiv) o agente é uma porção detectável; (xv) o agente é um agente de diagnóstico; (xvi) o agente é conjugado ao anticorpo por intermédio de um ligador; (xvii) o agente é conjugado ao anticorpo por intermédio de um ligador clivável; e (xviii) o agente é conjugado ao anticorpo por intermédio de um ligador não clivável.
18. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende o anticorpo ativável, como definido na reivindicação 6, e um veículo.
19. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um agente adicional.
20. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 19, CARACTERIZADA pelo fato de que o agente adicional é um agente terapêutico.
21. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a CDR2 VL compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 215.
22. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o AB compreende uma VH compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 46 e uma VL compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 12.
23. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o AB compreende uma VH compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 46 e uma VL compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 58.
24. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo ativável compreende uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 137 e uma VH compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 46.
25. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo ativável compreende uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 985 e uma VH compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 46.
26. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo ativável compreende uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 428 e uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 432.
27. Anticorpo ativável, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo ativável compreende uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 1008 e uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 432.
28. Molécula de ácido nucleico isolada CARACTERIZADA pelo fato de que codifica o anticorpo, como definido na reivindicação 1 ou 3, ou o anticorpo ativável, como definido em qualquer uma das reivindicações 5 a 27.
29. Vetor CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a molécula de ácido nucleico isolada, como definida na reivindicação 28, operacionalmente ligada a uma sequência promotora e uma sequência terminadora de transcrição.
30. Método para produzir um anticorpo ativável, CARACTERIZADO pelo fato de que é pelo cultivo de uma célula sob condições que levam à expressão do anticorpo ativável, em que a célula compreende a molécula de ácido nucleico, como definida na reivindicação 28.
31. Método para fabricar um anticorpo ativável que, em um estado ativado, se liga ao PDL1, o método CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: (a) cultivar uma célula compreendendo um construto de ácido nucleico que codifica o anticorpo ativável sob condições que levam à expressão do anticorpo ativável, como definido em qualquer uma das reivindicações 5 a 27; e (b) recuperar o anticorpo ativável; e/ou opcionalmente (c) conjugar um agente, como definido na reivindicação 17, ao anticorpo ativável recuperado.
32. Uso do anticorpo como definido na reivindicação 1 ou 3, ou do anticorpo ativável, como definido em qualquer uma das reivindicações 5 a 27, ou do anticorpo conjugado, como definido na reivindicação 2, ou da composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 4 e 18 a 20, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de uma formulação terapêutica para o tratamento de câncer.
33. Uso, de acordo com a reivindicação 32, CARACTERIZADO pelo fato de que o câncer é um câncer de bexiga, um câncer ósseo, um câncer de mama, um carcinoide, um câncer cervical, um câncer de cólon, um câncer do endométrio, um glioma, um câncer de cabeça e pescoço, um câncer de fígado, um câncer de pulmão, um linfoma, um melanoma, um câncer ovariano, um câncer pancreático, um câncer de próstata, um câncer renal, um sarcoma, um câncer de pele, um câncer de estômago, um câncer de testículo, um câncer da tireoide, um câncer urogenital, ou um câncer urotelial; e/ou opcionalmente, em que o câncer é selecionado do grupo que consiste em melanoma (MEL), carcinoma de células renais (RCC), câncer de pulmão de células não pequenas escamoso (NSCLC), NSCLC não escamoso, câncer colorretal (CRC), câncer de próstata resistente à castração (CRPC), carcinoma hepatocelular (HCC), carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço, carcinomas do esôfago, ovário, trato gastrointestinal e mama, ou uma malignidade hematológica tal como mieloma múltiplo, linfoma de célula B, linfoma de célula T, linfoma de Hodgkin/linfoma de célula B mediastinal primário, e leucemia mielógena crônica.
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562133231P | 2015-03-13 | 2015-03-13 | |
US62/133,231 | 2015-03-13 | ||
US201562139596P | 2015-03-27 | 2015-03-27 | |
US62/139,596 | 2015-03-27 | ||
US201562218883P | 2015-09-15 | 2015-09-15 | |
US62/218,883 | 2015-09-15 | ||
PCT/US2016/022345 WO2016149201A2 (en) | 2015-03-13 | 2016-03-14 | Anti-pdl1 antibodies, activatable anti-pdl1 antibodies, and methods of use thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
BR112017019559A2 BR112017019559A2 (pt) | 2018-05-15 |
BR112017019559B1 true BR112017019559B1 (pt) | 2020-08-04 |
Family
ID=55586463
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
BR112017019559-3A BR112017019559B1 (pt) | 2015-03-13 | 2016-03-14 | Anticorpos anti-pdl1, anticorpos anti-pdl1 ativáveis, e métodos de uso destes |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US10336824B2 (pt) |
EP (1) | EP3268392A2 (pt) |
JP (3) | JP6826055B2 (pt) |
KR (1) | KR20170135860A (pt) |
CN (2) | CN114702586A (pt) |
AU (2) | AU2016233495B2 (pt) |
BR (1) | BR112017019559B1 (pt) |
CA (1) | CA2978942A1 (pt) |
IL (2) | IL292449B2 (pt) |
MA (1) | MA42971A (pt) |
MX (2) | MX2017011644A (pt) |
MY (1) | MY194225A (pt) |
SG (2) | SG11201707383PA (pt) |
WO (1) | WO2016149201A2 (pt) |
Families Citing this family (237)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2998281C (en) | 2008-09-26 | 2022-08-16 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Human anti-pd-1 antobodies and uses therefor |
CN115093480A (zh) | 2012-05-31 | 2022-09-23 | 索伦托药业有限公司 | 与pd-l1结合的抗原结合蛋白 |
CN104994873B (zh) * | 2012-10-04 | 2017-12-22 | 达纳-法伯癌症研究所公司 | 人单克隆抗‑pd‑l1抗体和使用方法 |
CN118146306A (zh) | 2013-09-25 | 2024-06-07 | 西托姆克斯治疗公司 | 基质金属蛋白酶底物和其它可切割部分及其使用方法 |
TWI681969B (zh) | 2014-01-23 | 2020-01-11 | 美商再生元醫藥公司 | 針對pd-1的人類抗體 |
TWI680138B (zh) * | 2014-01-23 | 2019-12-21 | 美商再生元醫藥公司 | 抗pd-l1之人類抗體 |
IL302642A (en) | 2014-01-31 | 2023-07-01 | Cytomx Therapeutics Inc | Polypeptide substrates that activate matriptase and U-plasminogen and other cleavable groups, preparations containing them and their uses |
GB201403775D0 (en) | 2014-03-04 | 2014-04-16 | Kymab Ltd | Antibodies, uses & methods |
MA41374A (fr) | 2015-01-20 | 2017-11-28 | Cytomx Therapeutics Inc | Substrats clivables par métalloprotéase matricielle et clivables par sérine protéase et procédés d'utilisation de ceux-ci |
MY194225A (en) | 2015-03-13 | 2022-11-22 | Cytomx Therapeutics Inc | Anti-pdl1 antibodies, activatable anti-pdl1 antibodies, and methods of use thereof |
US11400157B2 (en) | 2015-05-13 | 2022-08-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Multiple antigen binding molecular fusion, pharmaceutical composition, method for identifying linear epitope, and method for preparing multiple antigen binding molecular fusion |
SG10201913303XA (en) * | 2015-07-13 | 2020-03-30 | Cytomx Therapeutics Inc | Anti-pd-1 antibodies, activatable anti-pd-1 antibodies, and methods of use thereof |
US10392442B2 (en) | 2015-12-17 | 2019-08-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment |
WO2017112775A1 (en) | 2015-12-22 | 2017-06-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combination of anti-pd-1 antibodies and bispecific anti-cd20/anti-cd3 antibodies to treat cancer |
CA3009661A1 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Inhibrx, Inc. | Multivalent and multispecific 41bb-binding fusion proteins |
WO2017123673A2 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Inhibrx Lp | Multivalent and multispecific ox40-binding fusion proteins |
TW202408578A (zh) | 2016-05-13 | 2024-03-01 | 美商再生元醫藥公司 | 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法 |
WO2017210453A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-12-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Pd-1 blockade with nivolumab in refractory hodgkin's lymphoma |
HUE063911T2 (hu) | 2016-06-02 | 2024-02-28 | Bristol Myers Squibb Co | Anti-PD-1 antitest felhasználása anti-CD30 atnitesttel kombinációban limfóma kezelésben |
KR102515509B1 (ko) | 2016-06-03 | 2023-03-28 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 결장직장암을 갖는 환자의 치료에서의 항-pd-1 항체의 용도 |
CN109476753A (zh) | 2016-06-03 | 2019-03-15 | 百时美施贵宝公司 | 用于治疗肿瘤的方法的抗-pd-1抗体 |
WO2017210631A1 (en) | 2016-06-03 | 2017-12-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-pd-1 antibody for use in a method of treatment of recurrent small cell lung cancer |
WO2018029474A2 (en) | 2016-08-09 | 2018-02-15 | Kymab Limited | Anti-icos antibodies |
US9567399B1 (en) | 2016-06-20 | 2017-02-14 | Kymab Limited | Antibodies and immunocytokines |
EP3471753A1 (en) | 2016-06-20 | 2019-04-24 | Kymab Limited | Anti-pd-l1 and il-2 cytokines |
SG10202100100UA (en) | 2016-06-29 | 2021-02-25 | Checkpoint Therapeutics Inc | Pd-l1-specific antibodies and methods of using the same |
EP3484518B1 (en) | 2016-07-07 | 2024-08-14 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Antibody adjuvant conjugates |
CN116640214A (zh) | 2016-08-09 | 2023-08-25 | 科马布有限公司 | 分离抗体及其应用 |
KR102650803B1 (ko) * | 2016-10-05 | 2024-03-25 | 유니버시티 오브 센트럴 플로리다 리서치 파운데이션, 인코포레이티드 | Nk 세포 및 항-pdl1 암 요법과 관련된 방법 및 조성물 |
EP3532504A1 (en) | 2016-10-28 | 2019-09-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating urothelial carcinoma using an anti-pd-1 antibody |
WO2018085555A1 (en) * | 2016-11-03 | 2018-05-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Activatable anti-ctla-4 antibodies and uses thereof |
EP3534947A1 (en) | 2016-11-03 | 2019-09-11 | Kymab Limited | Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods |
JPWO2018097308A1 (ja) | 2016-11-28 | 2019-10-17 | 中外製薬株式会社 | リガンド結合活性が調整可能なリガンド結合分子 |
EP3546574A4 (en) | 2016-11-28 | 2020-09-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | ANTIGEN AND POLYPEPTIDE BINDING AREA INCLUDING A TRANSPORT SECTION |
CN108148862B (zh) * | 2016-12-05 | 2019-03-08 | 上海优卡迪生物医药科技有限公司 | 一种封闭pdl1的用于抑制免疫逃脱的car-t转基因载体及其构建方法和应用 |
MX2019006624A (es) | 2016-12-09 | 2019-08-01 | Seattle Genetics Inc | Anticuerpos bivalentes enmascarados por helices superenrolladas. |
TWI674261B (zh) | 2017-02-17 | 2019-10-11 | 美商英能腫瘤免疫股份有限公司 | Nlrp3 調節劑 |
US11292842B2 (en) | 2017-02-21 | 2022-04-05 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-PD-1 antibodies for treatment of lung cancer |
SG11201908091QA (en) * | 2017-03-06 | 2019-10-30 | Merck Patent Gmbh | Aqueous anti-pd-l1 antibody formulation |
EP3596108A4 (en) * | 2017-03-15 | 2020-12-23 | Pandion Operations, Inc. | TARGETED IMMUNOTOLERANCE |
IL269026B1 (en) | 2017-03-31 | 2024-08-01 | Bristol Myers Squibb Co | Anti-PD-1 antibodies for the treatment of tumors in patients with a high tumor mutational burden (TMB) |
US11571459B2 (en) | 2017-04-03 | 2023-02-07 | Oncxerna Therapeutics, Inc. | Methods for treating cancer using PS-targeting antibodies with immuno-oncology agents |
US11603407B2 (en) | 2017-04-06 | 2023-03-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Stable antibody formulation |
TWI788340B (zh) | 2017-04-07 | 2023-01-01 | 美商必治妥美雅史谷比公司 | 抗icos促效劑抗體及其用途 |
RU2665790C1 (ru) | 2017-04-17 | 2018-09-04 | Закрытое Акционерное Общество "Биокад" | Моноклональное антитело к pd-l1 |
MX2019012461A (es) * | 2017-04-18 | 2019-12-11 | R Pharm Overseas Inc | Anticuerpo anti-pd-l1 y uso del mismo. |
BR112019024127A2 (pt) | 2017-05-24 | 2020-06-23 | Pandion Therapeutics, Inc. | Imunotolerância alvejada |
WO2018218076A1 (en) * | 2017-05-26 | 2018-11-29 | Janux Therapeutics, Inc. | Modified antibodies |
CA3060989A1 (en) | 2017-05-30 | 2018-12-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Compositions comprising a combination of an anti-lag-3 antibody, a pd-1 pathway inhibitor, and an immunotherapeutic agent |
MX2019012032A (es) | 2017-05-30 | 2019-10-30 | Bristol Myers Squibb Co | Tratamiento de tumores positivos a gen 3 de activacion de linfocitos (lag-3). |
MX2019012076A (es) | 2017-05-30 | 2019-12-09 | Bristol Myers Squibb Co | Composiciones que comprenden un anticuerpo anti gen-3 de activacion del linfocito (lag-3) o un anticuerpo anti-lag-3 y un anticuerpo anti muerte celular programada 1 (pd-1) o anti ligando 1 de muerte celular programada (pd-l1). |
NZ759442A (en) * | 2017-06-01 | 2024-07-05 | Cytomx Therapeutics Inc | Activatable anti-pdl1 antibodies, and methods of use thereof |
EP3630840A1 (en) | 2017-06-01 | 2020-04-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating a tumor using an anti-pd-1 antibody |
GB201709808D0 (en) | 2017-06-20 | 2017-08-02 | Kymab Ltd | Antibodies |
AU2018301681B2 (en) | 2017-07-14 | 2022-07-14 | Innate Tumor Immunity, Inc. | NLRP3 modulators |
WO2019018828A1 (en) * | 2017-07-20 | 2019-01-24 | Cytomx Therapeutics, Inc. | METHODS OF QUALITATIVE AND / OR QUANTITATIVE ANALYSIS OF ACTIVATABLE ANTIBODY PROPERTIES AND USES THEREOF |
EP3658565B1 (en) | 2017-07-28 | 2022-11-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclic dinucleotides as anticancer agents |
EP3668545A2 (en) | 2017-08-16 | 2020-06-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Prodruggable antibodies, prodrugs thereof, and methods of use and making |
CN111511762A (zh) | 2017-08-21 | 2020-08-07 | 天演药业公司 | 抗cd137分子及其用途 |
CN111051327B (zh) | 2017-08-31 | 2023-11-03 | 百时美施贵宝公司 | 作为抗癌剂的环二核苷酸 |
JP7316263B2 (ja) | 2017-08-31 | 2023-07-27 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド |
US10953032B2 (en) | 2017-08-31 | 2021-03-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclic dinucleotides as anticancer agents |
EP3470426A1 (en) * | 2017-10-10 | 2019-04-17 | Numab Therapeutics AG | Multispecific antibody |
US11660311B2 (en) | 2017-10-10 | 2023-05-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclic dinucleotides as anticancer agents |
CN111194323B (zh) | 2017-10-10 | 2024-07-09 | 努玛治疗有限公司 | 多特异性抗体 |
US11525002B2 (en) | 2017-10-11 | 2022-12-13 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Human PD-L1 antibodies and methods of use therefor |
WO2019075468A1 (en) | 2017-10-15 | 2019-04-18 | Bristol-Myers Squibb Company | TUMOR TREATMENT METHODS |
JP7254821B2 (ja) | 2017-10-16 | 2023-04-10 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | 抗がん剤としての環状ジヌクレオチド |
EP3706778A1 (en) | 2017-11-06 | 2020-09-16 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating a tumor |
US20210206845A1 (en) | 2017-11-28 | 2021-07-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Ligand-binding molecule having adjustable ligand-binding activity |
MX2020005220A (es) | 2017-11-28 | 2020-08-24 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Polipeptido que incluye dominio de union al antigeno y seccion de transporte. |
US10174092B1 (en) | 2017-12-06 | 2019-01-08 | Pandion Therapeutics, Inc. | IL-2 muteins |
US10946068B2 (en) | 2017-12-06 | 2021-03-16 | Pandion Operations, Inc. | IL-2 muteins and uses thereof |
GB201721338D0 (en) | 2017-12-19 | 2018-01-31 | Kymab Ltd | Anti-icos Antibodies |
EP3728314A1 (en) | 2017-12-19 | 2020-10-28 | Kymab Limited | Bispecific antibody for icos and pd-l1 |
AU2019205912A1 (en) | 2018-01-03 | 2020-07-16 | Palleon Pharmaceuticals Inc. | Recombinant human sialidases, sialidase fusion proteins, and methods of using the same |
JP2021510078A (ja) * | 2018-01-10 | 2021-04-15 | 江▲蘇▼恒瑞医▲薬▼股▲フン▼有限公司Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. | Pd−l1抗体、その抗原結合フラグメント、及びその製薬学的使用 |
KR20200109339A (ko) | 2018-01-16 | 2020-09-22 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | Tim3에 대한 항체를 사용하여 암을 치료하는 방법 |
CA3096287A1 (en) | 2018-01-22 | 2019-07-25 | Pascal Biosciences Inc. | Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells |
CA3088542A1 (en) | 2018-01-22 | 2019-07-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Compositions and methods of treating cancer |
WO2019148444A1 (en) | 2018-02-02 | 2019-08-08 | Adagene Inc. | Anti-ctla4 antibodies and methods of making and using the same |
WO2019148445A1 (en) * | 2018-02-02 | 2019-08-08 | Adagene Inc. | Precision/context-dependent activatable antibodies, and methods of making and using the same |
US10519187B2 (en) | 2018-02-13 | 2019-12-31 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclic dinucleotides as anticancer agents |
WO2019165143A1 (en) * | 2018-02-21 | 2019-08-29 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Positron emission tomography imaging of activatable binding polypeptides and related compositions thereof |
US11945834B2 (en) | 2018-03-08 | 2024-04-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclic dinucleotides as anticancer agents |
WO2019175328A1 (en) | 2018-03-14 | 2019-09-19 | Imba - Institut Für Molekulare Biotechnologie Gmbh | Bh4pathwayactivationandusethereoffortreatingcancer |
US20210020264A1 (en) | 2018-03-20 | 2021-01-21 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Systems and methods for quantitative pharmacological modeling of activatable antibody species in mammalian subjects |
TW202003565A (zh) | 2018-03-23 | 2020-01-16 | 美商必治妥美雅史谷比公司 | 抗mica及/或micb抗體及其用途 |
CA3092695A1 (en) | 2018-03-23 | 2019-09-26 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Human pd-l2 antibodies and methods of use therefor |
AR115320A1 (es) | 2018-03-30 | 2020-12-23 | Merus Nv | Anticuerpo multivalente |
KR20200139724A (ko) | 2018-03-30 | 2020-12-14 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 종양을 치료하는 방법 |
US12110337B2 (en) | 2018-04-04 | 2024-10-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-CD27 antibodies and uses thereof |
PE20210160A1 (es) | 2018-04-25 | 2021-01-26 | Innate Tumor Immunity Inc | Moduladores de nlrp3 |
CN113840832A (zh) | 2018-05-14 | 2021-12-24 | 狼人治疗公司 | 可活化白介素-2多肽及其使用方法 |
WO2019222294A1 (en) | 2018-05-14 | 2019-11-21 | Werewolf Therapeutics, Inc. | Activatable cytokine polypeptides and methods of use thereof |
JPWO2019230868A1 (ja) | 2018-05-30 | 2021-06-24 | 中外製薬株式会社 | 単ドメイン抗体含有リガンド結合分子 |
EP3826660A1 (en) | 2018-07-26 | 2021-06-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Lag-3 combination therapy for the treatment of cancer |
TW202019968A (zh) | 2018-08-13 | 2020-06-01 | 美商英伊布里克斯公司 | Ox40結合多肽及其用途 |
KR20210045430A (ko) | 2018-08-16 | 2021-04-26 | 인네이트 튜머 이뮤니티, 인코포레이티드 | 이미다조[4,5-c]퀴놀린 유래 NLRP3-조정제 |
CN112888677A (zh) | 2018-08-16 | 2021-06-01 | 先天肿瘤免疫公司 | 被取代的4-氨基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉化合物及其改进的制备方法 |
US20210308123A1 (en) | 2018-08-16 | 2021-10-07 | Innate Tumor Immunity, Inc. | Nlrp3 modulators |
WO2020041404A1 (en) * | 2018-08-23 | 2020-02-27 | Macrogenics, Inc. | Pd-l1-binding molecules and use of the same for the treatment of disease |
JP2022512642A (ja) | 2018-10-09 | 2022-02-07 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | がんを治療するための抗MerTK抗体 |
US20210338813A1 (en) | 2018-10-19 | 2021-11-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination Therapy for Melanoma |
WO2020086724A1 (en) | 2018-10-23 | 2020-04-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating tumor |
CN113302203A (zh) * | 2018-10-30 | 2021-08-24 | 美真达治疗公司 | 抗cd45抗体及其缀合物 |
WO2020092623A1 (en) * | 2018-10-31 | 2020-05-07 | NantOmics, Inc. | Comprehensive characterization of immune landscape in gastrointestinal cancers and head and neck cancers via computational deconvolution |
JP2022512920A (ja) * | 2018-11-02 | 2022-02-07 | シートムエックス セラピューティクス,インコーポレイテッド | 活性化可能抗cd166抗体およびその使用方法 |
JP7513604B2 (ja) | 2018-11-14 | 2024-07-09 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 皮膚がんを治療するためのpd-1阻害剤の病変内投与 |
WO2020102501A1 (en) | 2018-11-16 | 2020-05-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-nkg2a antibodies and uses thereof |
US20220099637A1 (en) | 2018-12-04 | 2022-03-31 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of analysis using in-sample calibration curve by multiple isotopologue reaction monitoring |
US12049505B2 (en) | 2018-12-06 | 2024-07-30 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Matrix metalloprotease-cleavable and serine or cysteine protease-cleavable substrates and methods of use thereof |
SG11202106768RA (en) * | 2018-12-27 | 2021-07-29 | Gigagen Inc | Anti-pd-l1 binding proteins and methods of use thereof |
US20220056481A1 (en) | 2018-12-28 | 2022-02-24 | Transgene | M2-defective poxvirus |
WO2020150113A1 (en) | 2019-01-14 | 2020-07-23 | Innate Tumor Immunity, Inc. | Substituted quinazolines as nlrp3 modulators, for use in the treatment of cancer |
US20220089572A1 (en) | 2019-01-14 | 2022-03-24 | Innate Tumor Immunity, Inc. | Nlrp3 modulators |
WO2020150116A1 (en) | 2019-01-14 | 2020-07-23 | Innate Tumor Immunity, Inc. | Nlrp3 modulators |
EP3911417B1 (en) | 2019-01-14 | 2022-10-26 | Innate Tumor Immunity, Inc. | Heterocyclic nlrp3 modulators , for use in the treatment of cancer |
CN113677372A (zh) * | 2019-02-26 | 2021-11-19 | 西托姆克斯治疗公司 | 可活化免疫检查点抑制剂和经缀合可活化抗体的组合疗法 |
CN113490529A (zh) | 2019-02-28 | 2021-10-08 | 瑞泽恩制药公司 | 用于治疗皮肤癌的pd-1抑制剂的施用 |
KR20210136071A (ko) | 2019-03-06 | 2021-11-16 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 암을 치료하는데 있어서 증진된 효능을 위한 il-4/il-13 경로 억제제 |
CN113993549A (zh) | 2019-03-15 | 2022-01-28 | 博尔特生物治疗药物有限公司 | 靶向her2的免疫缀合物 |
EP3946625A1 (en) | 2019-03-28 | 2022-02-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating tumor |
KR20210146349A (ko) | 2019-03-28 | 2021-12-03 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 종양을 치료하는 방법 |
CN111826395A (zh) * | 2019-04-18 | 2020-10-27 | 艾生命序公司 | 重组溶瘤病毒表达抗免疫检查点融合抗体及免疫刺激分子 |
EP3962926A4 (en) * | 2019-04-30 | 2022-11-23 | Institute For Cancer Research d/b/a The Research Institute of Fox Chase Cancer Center | COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODULATION OF ANTIBODY ACTIVITY |
US20230295087A1 (en) | 2019-05-13 | 2023-09-21 | Bristol-Myers Squibb Company | AGONISTS OF ROR GAMMAt |
US12012374B2 (en) | 2019-05-13 | 2024-06-18 | Bristol-Myers Squibb Company | Agonists of ROR GAMMAt |
SG11202112541RA (en) | 2019-05-14 | 2021-12-30 | Werewolf Therapeutics Inc | Separation moieties and methods and use thereof |
EP3972992A4 (en) | 2019-05-20 | 2023-07-19 | Pandion Operations, Inc. | ANTI-MADCAM IMMUNE TOLERANCE |
JP2022534889A (ja) | 2019-05-24 | 2022-08-04 | ファイザー・インコーポレイテッド | Cdk阻害剤を使用した組合せ療法 |
EP3976832A1 (en) | 2019-05-30 | 2022-04-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy |
WO2020243570A1 (en) | 2019-05-30 | 2020-12-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Cell localization signature and combination therapy |
WO2020243563A1 (en) | 2019-05-30 | 2020-12-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Multi-tumor gene signatures for suitability to immuno-oncology therapy |
MX2021014433A (es) | 2019-06-05 | 2022-03-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula de union a sitio de escision de anticuerpo. |
US20220251206A1 (en) | 2019-06-11 | 2022-08-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-ctla4 antibody prodruggable (probody) at a cdr position |
WO2020252349A1 (en) | 2019-06-13 | 2020-12-17 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Use of an activatable anti-pdl1 antibody and an anti-ctla-4 antibody in a combination therapy for the treatment of cancer |
US20220296692A1 (en) | 2019-06-13 | 2022-09-22 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Use of an activatable anti-pdl1 antibody and an anti-ctla-4 antibody in a neoadjuvant combination therapy for the treatment of cancer |
WO2021012092A1 (en) * | 2019-07-19 | 2021-01-28 | Beijing Sinotau Bio-Pharmaceuticals Technology Co., Ltd. | A novel anti-pd-l1 antibody and use thereof |
WO2021024020A1 (en) | 2019-08-06 | 2021-02-11 | Astellas Pharma Inc. | Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer |
WO2021026179A1 (en) | 2019-08-06 | 2021-02-11 | Bristol-Myers Squibb Company | AGONISTS OF ROR GAMMAt |
CN112409483B (zh) * | 2019-08-22 | 2024-08-27 | 浙江道尔生物科技有限公司 | 抗pd-l1纳米抗体 |
EP4017882A4 (en) * | 2019-08-23 | 2023-09-27 | Wuxi Biologics Ireland Limited | HUMANIZED ANTIBODIES AGAINST PD-L1 |
WO2021055994A1 (en) | 2019-09-22 | 2021-03-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Quantitative spatial profiling for lag-3 antagonist therapy |
CA3152263A1 (en) | 2019-09-25 | 2021-04-01 | Julia SANTUCCI PEREIRA DEL BUONO | Composite biomarker for cancer therapy |
EP3816185A1 (en) | 2019-11-04 | 2021-05-05 | Numab Therapeutics AG | Multispecific antibody directed against pd-l1 and a tumor-associated antigen |
WO2021092221A1 (en) | 2019-11-06 | 2021-05-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy |
WO2021092220A1 (en) | 2019-11-06 | 2021-05-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy |
AU2020380384A1 (en) | 2019-11-08 | 2022-05-26 | Bristol-Myers Squibb Company | LAG-3 antagonist therapy for melanoma |
WO2021097256A1 (en) | 2019-11-14 | 2021-05-20 | Cohbar, Inc. | Cxcr4 antagonist peptides |
KR20220101147A (ko) | 2019-11-14 | 2022-07-19 | 웨어울프 세라퓨틱스, 인크. | 활성화가능한 사이토카인 폴리펩티드 및 이의 사용 방법 |
GB201918230D0 (en) | 2019-12-11 | 2020-01-22 | Prec Therapeutics Ltd | Antibodies and their uses |
WO2021127554A1 (en) | 2019-12-19 | 2021-06-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Combinations of dgk inhibitors and checkpoint antagonists |
EP4087842A1 (en) | 2020-01-10 | 2022-11-16 | Innate Tumor Immunity, Inc. | Nlrp3 modulators |
AU2021214622A1 (en) | 2020-01-29 | 2022-07-21 | Merus N.V. | Means and method for modulating immune cell engaging effects. |
US20230086099A1 (en) | 2020-01-30 | 2023-03-23 | Ona Therapeutics, S.L. | Combination therapy for treatment of cancer and cancer metastasis |
JP2023514152A (ja) | 2020-02-06 | 2023-04-05 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | Il-10およびその使用 |
US11981715B2 (en) | 2020-02-21 | 2024-05-14 | Pandion Operations, Inc. | Tissue targeted immunotolerance with a CD39 effector |
CN116568341A (zh) | 2020-02-28 | 2023-08-08 | 百时美施贵宝公司 | 基于纤连蛋白的放射性标记的支架和抗体及其治疗诊断用途 |
MX2022010912A (es) | 2020-03-06 | 2022-11-09 | Celgene Quanticel Res Inc | Combinacion de un inhibidor de desmetilasa-1 especifica de lisina (lsd-1) y nivolumab para usarse en el tratamiento de cancer de pulmon de celulas peque?as (sclc) o cancer de pulmon de celulas no peque?as escamosas (sqnsclc). |
CN115768465A (zh) | 2020-03-06 | 2023-03-07 | Ona疗法有限公司 | 抗cd36抗体及其治疗癌症的用途 |
WO2021194942A1 (en) | 2020-03-23 | 2021-09-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-ccr8 antibodies for treating cancer |
WO2021191870A1 (en) | 2020-03-27 | 2021-09-30 | Dcprime B.V. | Ex vivo use of modified cells of leukemic origin for enhancing the efficacy of adoptive cell therapy |
AU2021254279A1 (en) | 2020-04-09 | 2022-11-10 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Compositions containing activatable antibodies |
MX2022014734A (es) | 2020-05-26 | 2023-03-15 | Regeneron Pharma | Metodos de tratamiento del cancer de cuello uterino mediante la administracion del anticuerpo inhibidor de pd-1 cemiplimab. |
EP4171617A1 (en) | 2020-06-30 | 2023-05-03 | Mendus B.V. | Use of leukemia-derived cells in ovarian cancer vaccines |
MX2023000197A (es) | 2020-07-07 | 2023-02-22 | BioNTech SE | Arn terapeutico para el cancer positivo para vph. |
CA3168743A1 (en) | 2020-08-26 | 2022-03-03 | Matthew G. Fury | Methods of treating cancer by administering a pd-1 inhibitor |
AU2021331476A1 (en) | 2020-08-28 | 2023-05-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Lag-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma |
JP2023538955A (ja) | 2020-08-31 | 2023-09-12 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | 細胞局在シグネチャーおよび免疫療法 |
CN116194142A (zh) | 2020-09-03 | 2023-05-30 | 瑞泽恩制药公司 | 通过施用pd-1抑制剂治疗癌症疼痛的方法 |
KR20230080460A (ko) | 2020-10-05 | 2023-06-07 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 단백질을 농축시키는 방법 |
WO2022076596A1 (en) | 2020-10-06 | 2022-04-14 | Codiak Biosciences, Inc. | Extracellular vesicle-aso constructs targeting stat6 |
MX2023004493A (es) | 2020-10-23 | 2023-05-10 | Bristol Myers Squibb Co | Terapia de agonista del gen-3 de activacion del linfocito (lag-3) para cancer de pulmon. |
EP4236960A1 (en) | 2020-10-28 | 2023-09-06 | Ikena Oncology, Inc. | Combination of an ahr inhibitor with a pdx inhibitor or doxorubicine |
WO2022120179A1 (en) | 2020-12-03 | 2022-06-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Multi-tumor gene signatures and uses thereof |
TW202245808A (zh) | 2020-12-21 | 2022-12-01 | 德商拜恩迪克公司 | 用於治療癌症之治療性rna |
WO2022135667A1 (en) | 2020-12-21 | 2022-06-30 | BioNTech SE | Therapeutic rna for treating cancer |
WO2022135666A1 (en) | 2020-12-21 | 2022-06-30 | BioNTech SE | Treatment schedule for cytokine proteins |
WO2022146947A1 (en) | 2020-12-28 | 2022-07-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibody compositions and methods of use thereof |
WO2022146948A1 (en) | 2020-12-28 | 2022-07-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Subcutaneous administration of pd1/pd-l1 antibodies |
KR20230131236A (ko) * | 2021-01-06 | 2023-09-12 | 팔레온 파마슈티칼스 인크. | 항-pd-l1 항체 및 이의 융합 단백질 |
KR20230135075A (ko) | 2021-01-22 | 2023-09-22 | 멘두스 비.브이. | 종양 백신접종 방법 |
US20240109899A1 (en) | 2021-02-04 | 2024-04-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Benzofuran compounds as sting agonists |
JP2024510989A (ja) | 2021-03-12 | 2024-03-12 | メンドゥス・ベスローテン・フェンノートシャップ | ワクチン接種方法及びcd47遮断薬の使用 |
CN115073599B (zh) * | 2021-03-16 | 2023-04-28 | 北京天广实生物技术股份有限公司 | 结合pd-l1的抗体及其用途 |
EP4313123A1 (en) | 2021-03-23 | 2024-02-07 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating cancer in immunosuppressed or immunocompromised patients by administering a pd-1 inhibitor |
TW202304506A (zh) | 2021-03-25 | 2023-02-01 | 日商安斯泰來製藥公司 | 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症 |
US20240181052A1 (en) | 2021-03-29 | 2024-06-06 | Juno Therapeutics, Inc. | Methods for dosing and treatment with a combination of a checkpoint inhibitor therapy and a car t cell therapy |
WO2022212876A1 (en) | 2021-04-02 | 2022-10-06 | The Regents Of The University Of California | Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof |
CA3219336A1 (en) | 2021-05-18 | 2022-11-24 | Kymab Limited | Uses of anti-icos antibodies |
GB202107994D0 (en) | 2021-06-04 | 2021-07-21 | Kymab Ltd | Treatment of cancer |
KR20240046323A (ko) | 2021-07-13 | 2024-04-08 | 비온테크 에스이 | 암에 대한 병용 요법에 있어서 cd40 및 cd137에 대한 다중특이 결합제 |
US20230139492A1 (en) | 2021-07-19 | 2023-05-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combination of checkpoint inhibitors and an oncolytic virus for treating cancer |
WO2023007472A1 (en) | 2021-07-30 | 2023-02-02 | ONA Therapeutics S.L. | Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer |
WO2023051926A1 (en) | 2021-09-30 | 2023-04-06 | BioNTech SE | Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists |
WO2023057882A1 (en) | 2021-10-05 | 2023-04-13 | Pfizer Inc. | Combinations of azalactam compounds with a pd-1 axis binding antagonist for the treatment of cancer |
US20230192798A1 (en) | 2021-10-08 | 2023-06-22 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Activatable cytokine constructs and combination methods |
TW202333802A (zh) | 2021-10-11 | 2023-09-01 | 德商拜恩迪克公司 | 用於肺癌之治療性rna(二) |
AU2022367525A1 (en) | 2021-10-15 | 2024-05-02 | Amgen Inc. | Activatable polypeptide complex |
MX2024005053A (es) | 2021-10-29 | 2024-05-10 | Bristol Myers Squibb Co | Terapia con antagonista del gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) para cancer hematologico. |
WO2023079428A1 (en) | 2021-11-03 | 2023-05-11 | Pfizer Inc. | Combination therapies using tlr7/8 agonist |
WO2023083439A1 (en) | 2021-11-09 | 2023-05-19 | BioNTech SE | Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment |
MX2024008831A (es) | 2022-01-26 | 2024-07-25 | Bristol Myers Squibb Company | Terapia combinada para carcinoma hepatocelular. |
WO2023159102A1 (en) | 2022-02-17 | 2023-08-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combinations of checkpoint inhibitors and oncolytic virus for treating cancer |
AU2023226078A1 (en) | 2022-02-25 | 2024-08-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination therapy for colorectal carcinoma. |
WO2023168404A1 (en) | 2022-03-04 | 2023-09-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating a tumor |
WO2023170606A1 (en) | 2022-03-08 | 2023-09-14 | Alentis Therapeutics Ag | Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability |
WO2023178329A1 (en) | 2022-03-18 | 2023-09-21 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of isolating polypeptides |
WO2023183888A1 (en) | 2022-03-23 | 2023-09-28 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Activatable antigen-binding protein constructs and uses of the same |
WO2023183923A1 (en) | 2022-03-25 | 2023-09-28 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Activatable dual-anchored masked molecules and methods of use thereof |
WO2023187460A1 (en) * | 2022-04-01 | 2023-10-05 | Mabtree Biologics Ag | Human antibody or antigen binding fragment thereof specific against pd-l1 to enhance t-cell function |
WO2023192973A1 (en) | 2022-04-01 | 2023-10-05 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Activatable multispecific molecules and methods of use thereof |
WO2023192606A2 (en) | 2022-04-01 | 2023-10-05 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Cd3-binding proteins and methods of use thereof |
WO2023196987A1 (en) | 2022-04-07 | 2023-10-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating tumor |
US20230326022A1 (en) | 2022-04-08 | 2023-10-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Machine Learning Identification, Classification, and Quantification of Tertiary Lymphoid Structures |
WO2023222854A1 (en) | 2022-05-18 | 2023-11-23 | Kymab Limited | Uses of anti-icos antibodies |
WO2023235847A1 (en) | 2022-06-02 | 2023-12-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibody compositions and methods of use thereof |
WO2023250122A1 (en) * | 2022-06-24 | 2023-12-28 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Molecules that bind to enpp1 polypeptides |
WO2024023740A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Astrazeneca Ab | Combinations of recombinant virus expressing interleukin-12 with pd-1/pd-l1 inhibitors |
TW202426637A (zh) | 2022-08-01 | 2024-07-01 | 美商Cytomx生物製藥公司 | 蛋白酶可切割受質及其使用方法 |
WO2024030847A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Protease-cleavable moieties and methods of use thereof |
WO2024030850A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Protease-cleavable substrates and methods of use thereof |
WO2024030843A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Protease-cleavable moieties and methods of use thereof |
WO2024030845A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Protease-cleavable moieties and methods of use thereof |
KR102534281B1 (ko) * | 2022-09-02 | 2023-05-30 | 한국생명공학연구원 | 신규한 항-pd-l1 키메릭 항원 수용체 및 이를 발현하는 면역세포 |
WO2024054992A1 (en) | 2022-09-09 | 2024-03-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of separating chelator |
WO2024069009A1 (en) | 2022-09-30 | 2024-04-04 | Alentis Therapeutics Ag | Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma |
WO2024107731A2 (en) * | 2022-11-14 | 2024-05-23 | Ablexis, Llc | Anti-pd-l1 antibodies |
WO2024115725A1 (en) | 2022-12-01 | 2024-06-06 | BioNTech SE | Multispecific antibody against cd40 and cd137 in combination therapy with anti-pd1 ab and chemotherapy |
CN116041494B (zh) * | 2022-12-12 | 2024-08-20 | 首都医科大学 | 一种针对SARS-CoV或SARS-CoV-2的单克隆抗体、其制备方法及应用 |
WO2024126457A1 (en) | 2022-12-14 | 2024-06-20 | Astellas Pharma Europe Bv | Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and immune checkpoint inhibitors |
WO2024137776A1 (en) | 2022-12-21 | 2024-06-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination therapy for lung cancer |
WO2024140996A2 (en) * | 2022-12-29 | 2024-07-04 | Shanghai Henlius Biotech, Inc. | Anti-pdl1/vegf antibodies and methods of use |
CN116063526A (zh) * | 2022-12-31 | 2023-05-05 | 合肥天港免疫药物有限公司 | 抗pdl1的抗体及其用途 |
US20240294651A1 (en) | 2023-01-30 | 2024-09-05 | Kymab Limited | Antibodies |
WO2024196952A1 (en) | 2023-03-20 | 2024-09-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Tumor subtype assessment for cancer therapy |
Family Cites Families (231)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
US4485045A (en) | 1981-07-06 | 1984-11-27 | Research Corporation | Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes |
US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
US4544545A (en) | 1983-06-20 | 1985-10-01 | Trustees University Of Massachusetts | Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting |
WO1988001513A1 (en) | 1986-08-28 | 1988-03-10 | Teijin Limited | Cytocidal antibody complex and process for its preparation |
US5013556A (en) | 1989-10-20 | 1991-05-07 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5151510A (en) | 1990-04-20 | 1992-09-29 | Applied Biosystems, Inc. | Method of synethesizing sulfurized oligonucleotide analogs |
DE69329503T2 (de) | 1992-11-13 | 2001-05-03 | Idec Pharma Corp | Therapeutische Verwendung von chimerischen und markierten Antikörpern, die gegen ein Differenzierung-Antigen gerichtet sind, dessen Expression auf menschliche B Lymphozyt beschränkt ist, für die Behandlung von B-Zell-Lymphoma |
IL147972A0 (en) | 1999-08-23 | 2002-09-12 | Dana Farber Cancer Inst Inc Ge | Pd-1, a receptor for b7-4 and uses therefor |
HUP0202882A2 (en) | 1999-08-23 | 2002-12-28 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Novel b7-4 molecules and uses therefor |
US6803192B1 (en) | 1999-11-30 | 2004-10-12 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | B7-H1, a novel immunoregulatory molecule |
DK1234031T3 (en) | 1999-11-30 | 2017-07-03 | Mayo Foundation | B7-H1, AN UNKNOWN IMMUNE REGULATORY MOLECULE |
EP1286700A2 (en) | 2000-06-01 | 2003-03-05 | Universite Catholique De Louvain | Tumor activated prodrug compounds |
JP2004501631A (ja) | 2000-06-28 | 2004-01-22 | ジェネティックス・インスチチュート・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | Pd−l2分子:新規pd−1リガンドおよびその使用 |
CA2423850C (en) | 2000-10-09 | 2017-07-04 | Isis Innovation Limited | Therapeutic antibodies |
US7465790B2 (en) | 2000-10-09 | 2008-12-16 | Isis Innovation, Inc. | Therapeutic antibodies |
CA2442066C (en) | 2001-04-02 | 2005-11-01 | Wyeth | Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor |
WO2002086083A2 (en) | 2001-04-20 | 2002-10-31 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Methods of enhancing cell responsiveness |
EP1456652A4 (en) | 2001-11-13 | 2005-11-02 | Dana Farber Cancer Inst Inc | IMMUNOCELL ACTIVATION MODULATING SUBSTANCES AND USE METHOD THEREFOR |
DE10161767T1 (de) | 2002-07-03 | 2018-06-07 | Honjo Tasuku | Immunopotenzierende Zusammensetzungen, die einen Anti-PD-L1 Antikörper enthalten |
US20040109855A1 (en) | 2002-07-23 | 2004-06-10 | Herman Waldmann | Therapeutic antibodies with reduced side effect |
AU2003265866A1 (en) | 2002-09-03 | 2004-03-29 | Vit Lauermann | Targeted release |
US7432351B1 (en) | 2002-10-04 | 2008-10-07 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | B7-H1 variants |
US7449300B2 (en) | 2002-11-21 | 2008-11-11 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Detection of antibodies specific for B7-H1 in subjects with diseases or pathological conditions mediated by activated T cells |
PT1810026T (pt) | 2004-10-06 | 2018-06-11 | Mayo Found Medical Education & Res | B7-h1 e pd-1 no tratamento do carcinona de células renais |
NZ563193A (en) | 2005-05-09 | 2010-05-28 | Ono Pharmaceutical Co | Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics |
PT2397156T (pt) | 2005-06-08 | 2016-12-23 | The President And Fellows Of Harvard College | Métodos e composições para tratamento de infeções persistentes e cancro através da inibição da via de morte celular programada 1 (pd-1) |
DK1907424T3 (en) | 2005-07-01 | 2015-11-09 | Squibb & Sons Llc | HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES TO PROGRAMMED death ligand 1 (PD-L1) |
AU2006284651C1 (en) | 2005-08-31 | 2013-09-12 | The Regents Of The University Of California | Cellular libraries of peptide sequences (CLiPS) and methods of using the same |
EP1993608A1 (en) | 2006-03-10 | 2008-11-26 | Diatos | Anticancer drugs conjugated to antibody via an enzyme cleavable linker |
EP2124998B8 (en) | 2006-12-27 | 2015-05-06 | The Johns Hopkins University | Methods for detecting inflammation and auto-immune diseases |
CN101663323A (zh) | 2006-12-27 | 2010-03-03 | 埃默里大学 | 用于治疗传染病和肿瘤的组合物和方法 |
EP2170959B1 (en) | 2007-06-18 | 2013-10-02 | Merck Sharp & Dohme B.V. | Antibodies to human programmed death receptor pd-1 |
CA2697032C (en) * | 2007-08-22 | 2021-09-14 | The Regents Of The University Of California | Activatable binding polypeptides and methods of identification and use thereof |
US8062852B2 (en) | 2007-10-01 | 2011-11-22 | The Children's Hospital And Regional Medical Center | Detection and treatment of autoimmune disorders |
CA2998281C (en) | 2008-09-26 | 2022-08-16 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Human anti-pd-1 antobodies and uses therefor |
KR101050829B1 (ko) | 2008-10-02 | 2011-07-20 | 서울대학교산학협력단 | 항 pd-1 항체 또는 항 pd-l1 항체를 포함하는 항암제 |
KR101721707B1 (ko) | 2008-11-28 | 2017-03-30 | 에모리 유니버시티 | 감염 및 종양 치료 방법 |
WO2010077643A1 (en) | 2008-12-08 | 2010-07-08 | Tegopharm Corporation | Masking ligands for reversible inhibition of multivalent compounds |
CN108997498A (zh) | 2008-12-09 | 2018-12-14 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 抗-pd-l1抗体及它们用于增强t细胞功能的用途 |
CN102482347B (zh) | 2009-01-12 | 2017-04-26 | 希托马克斯医疗有限责任公司 | 修饰抗体组合物及其制备和使用方法 |
JP5844159B2 (ja) | 2009-02-09 | 2016-01-13 | ユニヴェルシテ デクス−マルセイユUniversite D’Aix−Marseille | Pd−1抗体およびpd−l1抗体ならびにその使用 |
WO2010129609A2 (en) | 2009-05-07 | 2010-11-11 | The Regents Of The University Of California | Antibodies and methods of use thereof |
DK3279215T3 (da) | 2009-11-24 | 2020-04-27 | Medimmune Ltd | Målrettede bindemidler mod b7-h1 |
EP2523267A4 (en) | 2010-01-05 | 2014-12-24 | Mitsubishi Electric Corp | CONNECTORS |
DK2542590T4 (da) | 2010-03-05 | 2020-07-13 | Univ Johns Hopkins | Sammensætninger og fremgangsmåde til målrettede immunomodulatoriske antistof-fer og fusionproteiner |
EP2555778A4 (en) | 2010-04-06 | 2014-05-21 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING CD274 / PD-L1 GENE EXPRESSION |
US20110280877A1 (en) | 2010-05-11 | 2011-11-17 | Koji Tamada | Inhibition of B7-H1/CD80 interaction and uses thereof |
US8962804B2 (en) | 2010-10-08 | 2015-02-24 | City Of Hope | Meditopes and meditope-binding antibodies and uses thereof |
TWI838039B (zh) | 2011-03-28 | 2024-04-01 | 法商賽諾菲公司 | 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白 |
CN103608040B (zh) | 2011-04-20 | 2017-03-01 | 米迪缪尼有限公司 | 结合b7‑h1和pd‑1的抗体和其他分子 |
PE20190262A1 (es) | 2011-08-01 | 2019-02-25 | Genentech Inc | Metodos para tratar el cancer por el uso de antagonistas de union al eje pd-1 e inhibidores de mek |
US20130071403A1 (en) | 2011-09-20 | 2013-03-21 | Vical Incorporated | Synergistic anti-tumor efficacy using alloantigen combination immunotherapy |
US8956619B2 (en) | 2011-10-25 | 2015-02-17 | University Of Maryland, Baltimore County | Soluble CD80 as a therapeutic to reverse immune supression in cancer patients |
SI2785375T1 (sl) * | 2011-11-28 | 2020-11-30 | Merck Patent Gmbh | Protitelesa proti PD-L1 in uporabe le-teh |
GB201203442D0 (en) * | 2012-02-28 | 2012-04-11 | Univ Birmingham | Immunotherapeutic molecules and uses |
RU2713121C2 (ru) * | 2012-04-27 | 2020-02-03 | Сайтомкс Терапьютикс, Инк. | Активируемые антитела, которые связываются с рецептором эпидермального фактора роста, и способы их применения |
SG11201407190TA (en) | 2012-05-15 | 2014-12-30 | Bristol Myers Squibb Co | Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling |
CN115093480A (zh) | 2012-05-31 | 2022-09-23 | 索伦托药业有限公司 | 与pd-l1结合的抗原结合蛋白 |
AR091220A1 (es) * | 2012-05-31 | 2015-01-21 | Genentech Inc | Metodos para tratar cancer usando antagonistas de union a pd-1 axis y antagonistas de vegf |
WO2013192546A1 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Activatable antibodies having non-binding steric moieties and mehtods of using the same |
EP2873547B1 (en) | 2012-07-13 | 2018-06-27 | Mitsubishi Electric Corporation | Power converter, electric car and method for controlling sequence test |
JP6403166B2 (ja) | 2012-08-03 | 2018-10-10 | ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート, インコーポレイテッド | 単一抗原抗pd−l1およびpd−l2二重結合抗体およびその使用方法 |
US9309510B2 (en) | 2012-08-10 | 2016-04-12 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Protease-resistant systems for polypeptide display and methods of making and using thereof |
CN104994873B (zh) | 2012-10-04 | 2017-12-22 | 达纳-法伯癌症研究所公司 | 人单克隆抗‑pd‑l1抗体和使用方法 |
US10034939B2 (en) | 2012-10-26 | 2018-07-31 | The University Of Chicago | Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer |
WO2014074852A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | President And Fellows Of Harvard College | Compositions and methods for modulating an immune response |
KR102291355B1 (ko) | 2012-11-30 | 2021-08-19 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | Pd-l1 억제제 공동치료를 필요로 하는 환자의 식별방법 |
JP2016509582A (ja) | 2012-12-19 | 2016-03-31 | アンプリミューン, インコーポレイテッド | 抗ヒトb7−h4抗体およびその使用 |
AR093984A1 (es) | 2012-12-21 | 2015-07-01 | Merck Sharp & Dohme | Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano |
WO2014107599A2 (en) | 2013-01-04 | 2014-07-10 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for detecting protease activity in biological systems |
ES2721168T3 (es) | 2013-01-11 | 2019-07-29 | Dingfu Biotarget Co Ltd | Agentes para tratar tumores, uso y método de los mismos |
EP2948475A2 (en) | 2013-01-23 | 2015-12-02 | AbbVie Inc. | Methods and compositions for modulating an immune response |
EP2953645A4 (en) | 2013-02-07 | 2016-12-28 | Immunomedics Inc | PRO-MEDICINE FORM (P2PDOX) OF HIGHLY POWERFUL 2-PYRROLINODOXORUBICIN CONJUGATED TO ANTIBODIES FOR TARGETED CANCER THERAPY |
WO2014165082A2 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-09 | Medimmune, Llc | Antibodies and methods of detection |
NZ712314A (en) | 2013-03-15 | 2021-07-30 | Genentech Inc | Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions |
US20150071910A1 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-12 | Genentech, Inc. | Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions |
CA3175360C (en) | 2013-05-31 | 2024-05-28 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antigen binding proteins that bind pd-1 |
RU2015154275A (ru) | 2013-06-03 | 2017-07-17 | Новартис Аг | Комбинации антитела против pd-l1 и ингибитора mek и/или ингибитора braf |
CA2913490A1 (en) | 2013-06-06 | 2014-12-11 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods for identification, assessment, prevention, and treatment of cancer using pd-l1 isoforms |
CN104250302B (zh) | 2013-06-26 | 2017-11-14 | 上海君实生物医药科技股份有限公司 | 抗pd‑1抗体及其应用 |
FR3008408B1 (fr) | 2013-07-11 | 2018-03-09 | Mc Saf | Nouveaux conjugues anticorps-medicament et leur utilisation en therapie |
EP3024851B1 (en) * | 2013-07-25 | 2018-05-09 | CytomX Therapeutics, Inc. | Multispecific antibodies, multispecific activatable antibodies and methods of using the same |
US10966998B2 (en) | 2013-09-05 | 2021-04-06 | The Johns Hopkins University | Cancer therapy via a combination of epigenetic modulation and immune modulation |
WO2015038538A1 (en) | 2013-09-10 | 2015-03-19 | Medimmune, Llc | Compositions and methods for treating sepsis |
RU2701327C2 (ru) | 2013-09-11 | 2019-09-25 | Медиммьюн Лимитед | Антитела к b7-h1 для лечения опухолей |
AR097584A1 (es) | 2013-09-12 | 2016-03-23 | Hoffmann La Roche | Terapia de combinación de anticuerpos contra el csf-1r humano y anticuerpos contra el pd-l1 humano |
CN112457403B (zh) | 2013-09-13 | 2022-11-29 | 广州百济神州生物制药有限公司 | 抗pd1抗体及其作为治疗剂与诊断剂的用途 |
EP3757130A1 (en) | 2013-09-26 | 2020-12-30 | Costim Pharmaceuticals Inc. | Methods for treating hematologic cancers |
EA201991715A1 (ru) | 2013-09-27 | 2020-03-31 | Дженентек, Инк. | Композиции, содержащие антитело к pdl1 |
EP3052131B1 (en) | 2013-10-01 | 2018-12-05 | Mayo Foundation for Medical Education and Research | Methods for treating cancer in patients with elevated levels of bim |
US10202454B2 (en) | 2013-10-25 | 2019-02-12 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Anti-PD-L1 monoclonal antibodies and fragments thereof |
BR112016010224A2 (pt) | 2013-11-05 | 2018-05-02 | Cognate Bioservices, Inc. | combinações de inibidores do ponto de verificação e produtos terapêuticos para tratar o câncer. |
WO2015069697A2 (en) | 2013-11-05 | 2015-05-14 | Nkt Therapeutics Inc. | Combination therapy |
RU2697522C1 (ru) | 2013-11-25 | 2019-08-15 | СиСиЭйЭм БАЙОТЕРАПЬЮТИКС ЛТД. | Композиции, содержащие анти-сеасам 1 и анти-pd антитела для терапии рака |
WO2015081158A1 (en) | 2013-11-26 | 2015-06-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Method of treating hiv by disrupting pd-1/pd-l1 signaling |
EP3079772B1 (en) | 2013-12-10 | 2020-02-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Immunohistochemical proximity assay for pd-1 positive cells and pd-ligand positive cells in tumor tissue |
EP3079699A4 (en) | 2013-12-11 | 2017-07-19 | Glaxosmithkline LLC | Treating cancer with a combination of a pd-1 antagonist and a vegfr inhibitor |
US9045545B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-06-02 | Kymab Limited | Precision medicine by targeting PD-L1 variants for treatment of cancer |
WO2015092394A1 (en) | 2013-12-17 | 2015-06-25 | Kymab Limited | Antibodies for use in treating conditions related to specific pcsk9 variants in specific patients populations |
US9067998B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-06-30 | Kymab Limited | Targeting PD-1 variants for treatment of cancer |
RU2016128726A (ru) | 2013-12-17 | 2018-01-23 | Дженентек, Инк. | Способы лечения злокачественных опухолей с использованием антагонистов связывания по оси pd-1 и антитела против cd20 |
US8992927B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-31 | Kymab Limited | Targeting human NAV1.7 variants for treatment of pain |
KR20160089531A (ko) | 2013-12-17 | 2016-07-27 | 제넨테크, 인크. | Pd-1 축 결합 길항제 및 항-her2 항체를 사용하여 her2-양성 암을 치료하는 방법 |
US9914769B2 (en) | 2014-07-15 | 2018-03-13 | Kymab Limited | Precision medicine for cholesterol treatment |
KR20230007559A (ko) | 2013-12-20 | 2023-01-12 | 프레드 허친슨 캔서 센터 | 태그된 키메라 이펙터 분자 및 그의 리셉터 |
RU2016129959A (ru) | 2013-12-30 | 2018-02-02 | Эпимаб Биотерепьютикс Инк. | Иммуноглобулин с тандемным расположением fab-фрагментов и его применение |
CA2935375C (en) | 2014-01-06 | 2023-08-08 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Pd1 and pdl1 antibodies and vaccine combinations and use of same for immunotherapy |
CA2936611A1 (en) | 2014-01-13 | 2015-07-16 | Pieris Pharmaceuticals Gmbh | Multi-specific polypeptide useful for localized tumor immunomodulation |
CA2935804A1 (en) | 2014-01-14 | 2015-07-23 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods for identification, assessment, prevention, and treatment of melanoma using pd-l1 isoforms |
PL3094351T3 (pl) | 2014-01-15 | 2022-06-27 | Kadmon Corporation, Llc | Środki immunomodulujące |
CA2936244A1 (en) | 2014-01-21 | 2015-07-30 | Medimmune, Llc | Compositions and methods for modulating and redirecting immune responses |
TWI680138B (zh) | 2014-01-23 | 2019-12-21 | 美商再生元醫藥公司 | 抗pd-l1之人類抗體 |
MX2016010067A (es) | 2014-02-10 | 2016-10-07 | Merck Patent Gmbh | INHIBICION DIRIGIDA DEL FACTOR DE CRECIMIENTO TRANSFORMADOR ß (TGF ß). |
US10519237B2 (en) | 2014-03-12 | 2019-12-31 | Yeda Research And Development Co. Ltd | Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS |
WO2015157162A1 (en) | 2014-04-06 | 2015-10-15 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Histone deacetylase as a modulator of pdl1 expression and activity |
SG11201609370QA (en) | 2014-05-13 | 2016-12-29 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | T cell-redirected antigen-binding molecule for cells having immunosuppression function |
RU2702332C2 (ru) | 2014-05-13 | 2019-10-08 | Медиммьюн Лимитед | Антитела к в7-н1 и к ctla-4 для лечения немелкоклеточного рака легкого |
US10302653B2 (en) | 2014-05-22 | 2019-05-28 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Distinguishing antagonistic and agonistic anti B7-H1 antibodies |
KR20150135148A (ko) | 2014-05-23 | 2015-12-02 | 주식회사 제넥신 | Pd-l1 융합 단백질 및 이의 용도 |
SG11201609468WA (en) | 2014-05-29 | 2016-12-29 | Medimmune Ltd | Antagonists of pdl-1 and pd-1 for the treatment of hpv-negative cancers |
AU2015265870B2 (en) | 2014-05-29 | 2020-07-09 | Ventana Medical Systems, Inc. | PD-L1 antibodies and uses thereof |
AU2015265871B2 (en) | 2014-05-30 | 2020-01-23 | Ventana Medical Systems, Inc. | Multiplex assay for improved scoring of tumor tissues stained for PD-L1 |
WO2015195163A1 (en) | 2014-06-20 | 2015-12-23 | R-Pharm Overseas, Inc. | Pd-l1 antagonist fully human antibody |
US10449227B2 (en) | 2014-06-27 | 2019-10-22 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Conjugates for immunotherapy |
KR102130600B1 (ko) | 2014-07-03 | 2020-07-08 | 베이진 엘티디 | Pd-l1 항체와 이를 이용한 치료 및 진단 |
CN105440135A (zh) | 2014-09-01 | 2016-03-30 | 博笛生物科技有限公司 | 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物 |
CN112546230A (zh) | 2014-07-09 | 2021-03-26 | 博笛生物科技有限公司 | 用于治疗癌症的联合治疗组合物和联合治疗方法 |
JP6279733B2 (ja) | 2014-07-09 | 2018-02-14 | 日本全薬工業株式会社 | 抗イヌpd−1抗体又は抗イヌpd−l1抗体 |
EP4001311A1 (en) | 2014-07-09 | 2022-05-25 | Birdie Biopharmaceuticals Inc. | Anti-pd-l1 combinations for treating tumors |
SG11201700207WA (en) | 2014-07-11 | 2017-02-27 | Genentech Inc | Anti-pd-l1 antibodies and diagnostic uses thereof |
US9139648B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-09-22 | Kymab Limited | Precision medicine by targeting human NAV1.9 variants for treatment of pain |
KR102504758B1 (ko) | 2014-07-16 | 2023-02-28 | 트랜스진 | 종양 세포 붕괴성 바이러스와 면역 체크포인트 조절제의 배합물 |
US9907849B2 (en) | 2014-07-18 | 2018-03-06 | Advaxis, Inc. | Combination of a PD-1 antagonist and a listeria-based vaccine for treating prostate cancer |
SG10201901057UA (en) | 2014-08-05 | 2019-03-28 | Cb Therapeutics Inc | Anti-pd-l1 antibodies |
JP6245622B2 (ja) | 2014-08-07 | 2017-12-13 | 学校法人兵庫医科大学 | Il−18と分子標的抗体とを併用する癌治療薬 |
EP3180357B1 (en) | 2014-08-14 | 2019-07-03 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of antibodies activating human cd40 and antibodies against human pd-l1 |
EP3070102A1 (en) | 2015-03-18 | 2016-09-21 | F. Hoffmann-La Roche AG | Combination therapy of antibodies human cd40 activating antibodies and anti human pld-1 antibodies |
WO2016030455A1 (en) | 2014-08-28 | 2016-03-03 | Medimmune Limited | Anti-b7-h1 and anti-ctla-4 antibodies for treating non-small lung cancer |
HUE047806T2 (hu) | 2014-08-29 | 2020-05-28 | Hoffmann La Roche | Kombinációs kezelés tumort célzó IL-2-variáns immuncitokinekkel és humán PD-L1 elleni antitestekkel |
SG11201701710SA (en) * | 2014-09-08 | 2017-04-27 | Celgene Corp | Methods for treating a disease or disorder using oral formulations of cytidine analogs in combination with an anti-pd1 or anti-pdl1 monoclonal antibody |
BR112017006203A2 (pt) | 2014-09-30 | 2018-05-02 | Intervet International B.V. | anticorpos isolado, caninizado e monoclonal ou fragmento de ligação ao antígeno dos mesmos, ácido nucleico isolado, vetor de expressão, célula hospedeira, peptídeo antigênico isolado, proteína de fusão, composição farmacêutica, e, método de aumento da atividade de uma célula imune. |
CR20170143A (es) | 2014-10-14 | 2017-06-19 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas |
WO2016059602A2 (en) | 2014-10-16 | 2016-04-21 | Glaxo Group Limited | Methods of treating cancer and related compositions |
JP2017533207A (ja) | 2014-10-23 | 2017-11-09 | ファイヴ プライム セラピューティクス インク | Slamf1アンタゴニスト及びその使用 |
KR20170072928A (ko) | 2014-10-24 | 2017-06-27 | 아스트라제네카 아베 | 조합물 |
WO2016069727A1 (en) | 2014-10-29 | 2016-05-06 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Combination therapy for cancer |
US20160176962A1 (en) | 2014-10-31 | 2016-06-23 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Combination Therapy For Treatment Of Disease |
WO2016071701A1 (en) | 2014-11-07 | 2016-05-12 | Kymab Limited | Treatment of disease using ligand binding to targets of interest |
US20190076452A1 (en) | 2014-11-11 | 2019-03-14 | Medimmune Limited | Therapeutic combinations for treating neoplasia |
EP3220951A1 (en) | 2014-11-17 | 2017-09-27 | MedImmune Limited | Therapeutic combinations and methods for treating neoplasia |
CN105777906B (zh) | 2014-12-19 | 2019-04-23 | 苏州丁孚靶点生物技术有限公司 | 抗pd-l1全人抗体及其应用 |
WO2016104657A1 (ja) | 2014-12-26 | 2016-06-30 | 橋本 正 | 癌治療剤 |
WO2016109310A1 (en) | 2014-12-31 | 2016-07-07 | Checkmate Pharmaceuticals, Llc | Combination tumor immunotherapy |
GB201500319D0 (en) | 2015-01-09 | 2015-02-25 | Agency Science Tech & Res | Anti-PD-L1 antibodies |
BR112017015136A2 (pt) | 2015-01-14 | 2018-01-30 | Compass Therapeutics Llc | polipeptídeo de construto de ligação ao antígeno imunomodulador multiespecífico, construto de ligação ao antígeno imunomodulador multiespecífico, conjugado, composição farmacêutica, método para tratar um indivíduo com câncer, método para inibir ou reduzir o crescimento de câncer, composição, célula, método de fazer um polipeptídeo de construto de ligação ao antígeno imunomodulador multiespecífico, vetor ou conjunto de vetores e kit |
RU2696378C2 (ru) | 2015-01-16 | 2019-08-01 | Академиа Синика | Молекулярные конструкции с нацеливающими и эффекторными элементами |
WO2016123285A1 (en) | 2015-01-29 | 2016-08-04 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Checkpoint inhibitor and vaccine combinations and use of same for immunotherapy |
EP3254110B1 (en) | 2015-02-03 | 2020-03-18 | Ventana Medical Systems, Inc. | Histochemical assay for evaluating expression of programmed death ligand 1 (pd-l1) |
MA41460A (fr) | 2015-02-03 | 2017-12-12 | Oncomed Pharm Inc | Agents de liaison à la tnfrsf et leurs utilisations |
WO2016128912A1 (en) | 2015-02-12 | 2016-08-18 | Acerta Pharma B.V. | Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor, a pd-1 inhibitor, and/or a pd-l1 inhibitor |
AU2016222928B2 (en) | 2015-02-26 | 2021-05-13 | Merck Patent Gmbh | PD-1 / PD-L1 inhibitors for the treatment of cancer |
WO2016144673A1 (en) | 2015-03-06 | 2016-09-15 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Pd-l2 biomarkers predictive of pd-1 pathway inhibitor responses in esophagogastric cancers |
EP3067062A1 (en) | 2015-03-13 | 2016-09-14 | Ipsen Pharma S.A.S. | Combination of tasquinimod or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pd1 and/or pdl1 inhibitor, for use as a medicament |
MY194225A (en) | 2015-03-13 | 2022-11-22 | Cytomx Therapeutics Inc | Anti-pdl1 antibodies, activatable anti-pdl1 antibodies, and methods of use thereof |
WO2016154412A2 (en) | 2015-03-26 | 2016-09-29 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Combination of a pd-1 antagonist and a listeria based vaccine for treating pancreatic cancer |
US20180085398A1 (en) | 2015-03-30 | 2018-03-29 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods of treating cancer |
US20180078650A1 (en) | 2015-03-30 | 2018-03-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods of treating acute myeloid leukemia |
US10836827B2 (en) | 2015-03-30 | 2020-11-17 | Stcube, Inc. | Antibodies specific to glycosylated PD-L1 and methods of use thereof |
US20180071340A1 (en) | 2015-03-30 | 2018-03-15 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods of treating multiple myeloma |
AU2016243629B2 (en) | 2015-03-30 | 2021-02-18 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Compositions and methods of treating cancer |
US20180078626A1 (en) | 2015-03-30 | 2018-03-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods of treating renal cell cancer |
EP3277318A1 (en) | 2015-04-01 | 2018-02-07 | Medimmune Limited | Combined anti-pld-1 and anti-ctla-4 antibodies for treating non-small lung cancer |
US11149087B2 (en) | 2015-04-20 | 2021-10-19 | Etubics Corporation | Methods and compositions for combination immunotherapy |
JP2018515450A (ja) | 2015-04-23 | 2018-06-14 | エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | アンジオポイエチン2に結合する抗体のプログラムデスリガンド1に結合する抗体との併用療法 |
US10585100B2 (en) | 2015-04-30 | 2020-03-10 | Kyoto University | Method of predicting effect of treatment by PD-1/PD-L1 blockade using abnormality of PD-L1 (CD274) as index |
LT3294770T (lt) | 2015-05-12 | 2020-12-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Vėžio gydymo ir diagnostikos būdai |
TW201705955A (zh) | 2015-05-14 | 2017-02-16 | 輝瑞大藥廠 | 包含吡咯啶-2,5-二酮ido1抑制劑及抗-pd1/抗-pd-l1抗體之組合療法 |
US20160347848A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Medimmune Limited | Therapeutic combinations and methods for treating neoplasia |
WO2016196381A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Genentech, Inc. | Pd-l1 promoter methylation in cancer |
US11078278B2 (en) | 2015-05-29 | 2021-08-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Treatment of renal cell carcinoma |
WO2016197367A1 (en) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co. Ltd. | Novel anti-pd-l1 antibodies |
CN106243225B (zh) | 2015-06-11 | 2021-01-19 | 智翔(上海)医药科技有限公司 | 新型抗-pd-l1抗体 |
MY193229A (en) | 2015-06-16 | 2022-09-26 | Merck Patent Gmbh | Pd-l1 antagonist combination treatments |
CN108289892B (zh) | 2015-06-29 | 2021-11-23 | 维瑞斯特姆股份有限公司 | 治疗组合物、组合和使用方法 |
MX2017017117A (es) | 2015-07-06 | 2018-03-06 | Regeneron Pharma | Moleculas multiespecificas de union a antigenos y usos de estas. |
EP3858859A1 (en) | 2015-07-14 | 2021-08-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Method of treating cancer using immune checkpoint inhibitor; antibody that binds to programmed death-1 receptor (pd-1) or programmed death ligand 1 (pd-l1) |
AU2016297583A1 (en) | 2015-07-22 | 2018-02-01 | Hznp Limited | Combination of immunomodulatory agent with PD-1-or PD-L1 checkpoint inhibitors in the treatment of cancer |
CN106397592A (zh) | 2015-07-31 | 2017-02-15 | 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 | 针对程序性死亡配体(pd-l1)的单域抗体及其衍生蛋白 |
WO2017020291A1 (en) | 2015-08-06 | 2017-02-09 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co. Ltd. | Novel anti-pd-l1 antibodies |
US20180230431A1 (en) | 2015-08-07 | 2018-08-16 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Combination Therapy |
AR105654A1 (es) | 2015-08-24 | 2017-10-25 | Lilly Co Eli | Anticuerpos pd-l1 (ligando 1 de muerte celular programada) |
WO2017059387A1 (en) | 2015-09-30 | 2017-04-06 | Igm Biosciences, Inc. | Binding molecules with modified j-chain |
WO2017062797A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | The methods for treatment of tumors |
US10744170B2 (en) | 2015-10-15 | 2020-08-18 | Duke University | Combination treatment |
CA3001264A1 (en) | 2015-10-30 | 2017-05-04 | Affibody Ab | Pd-l1 binding polypeptide |
EP3368557A1 (en) | 2015-10-30 | 2018-09-05 | Affibody AB | New polypeptide |
US20180346571A1 (en) | 2015-11-17 | 2018-12-06 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Pd-l1-binding agents and uses thereof |
BR112018009064A8 (pt) | 2015-11-17 | 2019-02-26 | Jiangsu Hengrui Medicine Co | anticorpo de pd-l1, fragmento de ligação ao antígeno do mesmo e aplicação médica do mesmo |
AU2016355320B2 (en) | 2015-11-19 | 2023-12-07 | Genentech, Inc. | Methods of treating cancer using B-RAF inhibitors and immune checkpoint inhibitors |
RS61029B1 (sr) | 2015-12-07 | 2020-12-31 | Merck Patent Gmbh | Vodena formulacija koja sadrži avelumab antitelo na pd-1 |
CN105461808B (zh) | 2015-12-24 | 2019-03-19 | 长春金赛药业股份有限公司 | 单克隆抗体及其应用 |
WO2017120604A1 (en) | 2016-01-08 | 2017-07-13 | Biothera, Inc. | Beta-glucan immunotherapies affecting the immune microenvironment |
WO2017123673A2 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Inhibrx Lp | Multivalent and multispecific ox40-binding fusion proteins |
WO2017136562A2 (en) | 2016-02-02 | 2017-08-10 | Kadmon Corporation, Llc | Bispecific binding proteins for pd-l1 and kdr |
AU2017214692B2 (en) | 2016-02-06 | 2021-11-04 | Epimab Biotherapeutics, Inc. | Fabs-in-tandem immunoglobulin and uses thereof |
CN107922503B (zh) | 2016-03-04 | 2018-08-28 | 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 | 一种pdl-1抗体、其药物组合物及其用途 |
EP3439653B1 (en) | 2016-04-07 | 2021-01-20 | ChemoCentryx, Inc. | Reducing tumor burden by administering ccr1 antagonists in combination with pd-1 inhibitors or pd-l1 inhibitors |
WO2017177179A1 (en) | 2016-04-08 | 2017-10-12 | Gilead Sciences, Inc. | Compositions and methods for treating cancer, inflammatory diseases and autoimmune diseases |
SG11201807474SA (en) | 2016-04-25 | 2018-11-29 | Medimmune Llc | Compositions comprising coformulation of anti-pd-l1 and anti-ctla-4 antibodies |
EP3455257B1 (en) | 2016-05-09 | 2021-09-22 | IGM Biosciences Inc. | Anti-pd-l1 antibodies |
TWI794171B (zh) | 2016-05-11 | 2023-03-01 | 美商滬亞生物國際有限公司 | Hdac抑制劑與pd-l1抑制劑之組合治療 |
CN107459578B (zh) | 2016-05-31 | 2021-11-26 | 泰州迈博太科药业有限公司 | 一种靶向cd47与pd-l1的双功能融合蛋白 |
PH12018502623A1 (en) | 2016-06-13 | 2019-10-07 | I Mab | Anti-pd-l1 antibodies and uses thereof |
CN109414500B (zh) | 2016-06-13 | 2022-02-25 | 奥美药业有限公司 | 治疗和诊断用pd-l1特异性单克隆抗体 |
US20190106494A1 (en) | 2016-06-13 | 2019-04-11 | Askgene Pharma Inc. | PD-L1 Specific Monoclonal Antibodies for Disease Treatment and Diagnosis |
US9567399B1 (en) | 2016-06-20 | 2017-02-14 | Kymab Limited | Antibodies and immunocytokines |
SG10202100100UA (en) | 2016-06-29 | 2021-02-25 | Checkpoint Therapeutics Inc | Pd-l1-specific antibodies and methods of using the same |
CN106243223B (zh) | 2016-07-28 | 2019-03-05 | 北京百特美博生物科技有限公司 | 抗人pdl1抗体及其用途 |
US10919966B2 (en) | 2016-08-05 | 2021-02-16 | Y-Biologics Inc. | Antibody to programmed death-ligand 1 (PD-L1) and use thereof |
CN106977602B (zh) | 2016-08-23 | 2018-09-25 | 中山康方生物医药有限公司 | 一种抗pd1单克隆抗体、其药物组合物及其用途 |
CN106478819B (zh) | 2016-10-27 | 2018-12-07 | 常州费洛斯药业科技有限公司 | 一种针对pd-l1的单克隆抗体或抗体片段 |
MA46952A (fr) | 2016-12-01 | 2019-10-09 | Regeneron Pharma | Anticorps anti-pd-l1 radiomarqués pour imagerie immuno-pet |
CN106978400A (zh) | 2016-12-13 | 2017-07-25 | 无锡傲锐东源生物科技有限公司 | 抗pd‑l1蛋白单克隆抗体及其用途 |
CN109071656B (zh) | 2017-01-05 | 2021-05-18 | 璟尚生物制药公司 | 检查点调节物拮抗剂 |
CN106699891B (zh) | 2017-01-25 | 2019-04-09 | 北京天广实生物技术股份有限公司 | 一种抗pd-l1抗体、其药物组合物及其用途 |
RU2665790C1 (ru) | 2017-04-17 | 2018-09-04 | Закрытое Акционерное Общество "Биокад" | Моноклональное антитело к pd-l1 |
NZ759442A (en) | 2017-06-01 | 2024-07-05 | Cytomx Therapeutics Inc | Activatable anti-pdl1 antibodies, and methods of use thereof |
CN107973854B (zh) | 2017-12-11 | 2021-05-04 | 苏州银河生物医药有限公司 | Pdl1单克隆抗体及其应用 |
CN108250296B (zh) | 2018-01-17 | 2020-07-07 | 长春金赛药业有限责任公司 | 全人源抗人pd-l1单克隆抗体及其应用 |
CN108276492B (zh) | 2018-01-31 | 2021-12-14 | 中国药科大学 | 抗pd-l1单克隆抗体及其应用 |
-
2016
- 2016-03-14 MY MYPI2017001339A patent/MY194225A/en unknown
- 2016-03-14 CN CN202210054138.4A patent/CN114702586A/zh active Pending
- 2016-03-14 AU AU2016233495A patent/AU2016233495B2/en active Active
- 2016-03-14 MA MA042971A patent/MA42971A/fr unknown
- 2016-03-14 MX MX2017011644A patent/MX2017011644A/es unknown
- 2016-03-14 IL IL292449A patent/IL292449B2/en unknown
- 2016-03-14 JP JP2017567049A patent/JP6826055B2/ja active Active
- 2016-03-14 CN CN201680027483.1A patent/CN108112254B/zh active Active
- 2016-03-14 US US15/069,622 patent/US10336824B2/en active Active
- 2016-03-14 KR KR1020177029321A patent/KR20170135860A/ko active IP Right Grant
- 2016-03-14 EP EP16710662.4A patent/EP3268392A2/en active Pending
- 2016-03-14 WO PCT/US2016/022345 patent/WO2016149201A2/en active Application Filing
- 2016-03-14 BR BR112017019559-3A patent/BR112017019559B1/pt active IP Right Grant
- 2016-03-14 CA CA2978942A patent/CA2978942A1/en active Pending
- 2016-03-14 SG SG11201707383PA patent/SG11201707383PA/en unknown
- 2016-03-14 SG SG10201913297TA patent/SG10201913297TA/en unknown
-
2017
- 2017-09-11 MX MX2021013467A patent/MX2021013467A/es unknown
- 2017-09-12 IL IL254458A patent/IL254458B/en unknown
-
2019
- 2019-05-31 US US16/428,767 patent/US10669339B2/en active Active
- 2019-05-31 US US16/428,708 patent/US11174316B2/en active Active
-
2021
- 2021-01-14 JP JP2021004044A patent/JP7165217B2/ja active Active
- 2021-09-30 US US17/490,606 patent/US20220298245A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-03-15 AU AU2022201793A patent/AU2022201793A1/en active Pending
- 2022-10-21 JP JP2022168776A patent/JP2023002706A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7165217B2 (ja) | 抗pdl1抗体、活性化可能抗pdl1抗体、およびその使用方法 | |
AU2016294440B2 (en) | Anti-PD-1 antibodies, activatable anti-PD-1 antibodies, and methods of use thereof | |
CN108026170B (zh) | 抗cd71抗体、可活化抗cd71抗体及其使用方法 | |
CN110662766A (zh) | Cd147抗体、可激活cd147抗体及其制备和使用方法 | |
JP2018520092A (ja) | 抗ITGa3抗体、活性化可能抗ITGa3抗体、およびその使用方法 | |
AU2016257929A1 (en) | Anti-CD166 antibodies, activatable anti-CD166 antibodies, and methods of use thereof | |
BR112016001611B1 (pt) | Anticorpo ativável multiespecífico, uso terapêutico do mesmo, molécula de ácido nucleico isolada, vetor e método para produzir um anticorpo ativável multiespecífico | |
BR112020007302B1 (pt) | Anticorpos ativáveis conjugados anti-cd71, método para fabrica-los, composição farmacêutica e kit que compreende os mesmos, usos dos ditos anticorpos, bem como método in vitro para detectar a presença ou ausência do agente de clivagem na amostra | |
JP2024147648A (ja) | 抗cd71抗体、活性化可能抗cd71抗体、およびその使用方法 | |
NZ736142B2 (en) | Anti-pdl1 antibodies, activatable anti-pdl1 antibodies, and methods of use thereof | |
BR112016006665B1 (pt) | Polipeptídeo isolado que compreende uma região clivável (cm) que é um substrato de metaloproteinase de matriz, uso terapêutico do mesmo e método para detectar a presença ou ausência de um agente de clivagem e um alvo de interesse em uma amostra |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
B65X | Notification of requirement for priority examination of patent application | ||
B65Y | Grant of priority examination of the patent application (request complies with dec. 132/06 of 20061117) | ||
B07D | Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette] |
Free format text: DE ACORDO COM O ARTIGO 229-C DA LEI NO 10196/2001, QUE MODIFICOU A LEI NO 9279/96, A CONCESSAO DA PATENTE ESTA CONDICIONADA A ANUENCIA PREVIA DA ANVISA. CONSIDERANDO A APROVACAO DOS TERMOS DO PARECER NO 337/PGF/EA/2010, BEM COMO A PORTARIA INTERMINISTERIAL NO 1065 DE 24/05/2012, ENCAMINHA-SE O PRESENTE PEDIDO PARA AS PROVIDENCIAS CABIVEIS. |
|
B07A | Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette] | ||
B09A | Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette] | ||
B16A | Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 14/03/2016, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. |