ES2945140T3

ES2945140T3 - Dinucleótidos cíclicos como agentes anticancerosos

Info

Publication number: ES2945140T3
Application number: ES18766542T
Authority: ES
Inventors: Lan-Ying Qin; Zheming Ruan; Libing Chen; Scott Hunter Watterson; Brian E Fink
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2017-08-31
Filing date: 2018-08-30
Publication date: 2023-06-28
Anticipated expiration: 2038-08-30
Also published as: EP3676278B1; CN111051327B; KR20200042939A; CN111051327A; EP3676278A1; US10947263B2; JP2020532542A; JP7209697B2; WO2019046498A1; US20200223883A1; KR102651946B1

Abstract

La presente invención está dirigida a compuestos de fórmula (I) en la que todos los sustituyentes se definen aquí, así como composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden compuestos de la invención y métodos para usar dichas composiciones en el tratamiento de diversos trastornos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Dinucleótidos cíclicos como agentes anticancerosos

Campo de la invención

La invención proporciona nuevos compuestos, composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos y para usar, por ejemplo, para el tratamiento o la profilaxis de determinados cánceres y para su uso en terapia.

Antecedentes de la invención

La inmunoterapia es un área de tratamiento médico en rápida expansión en la que el sistema inmunitario de un paciente se activa, se suprime o de otro modo se modula deliberadamente para un efecto terapéutico positivo. Los agentes de inmunoterapia incluyen cosas tales como células, antígenos, anticuerpos, ácidos nucleicos, proteínas, péptidos, ligandos de origen natural y moléculas preparadas sintéticamente. Las citocinas son moléculas de glucoproteínas pequeñas conocidas por su papel en causar la respuesta inmunitaria a través de redes de señalización complejas. Las citocinas se han estudiado como agentes de inmunoterapia pero su administración directa está dificultada por muchos factores, que incluyen su corta semivida en la sangre, que puede compensarse solo con dosis frecuentes y a menudo elevadas. Un enfoque altamente prometedor es la inducción de citocinas, en la que el paciente se trata con un agente inmunomodulador que desencadena la producción de una o más citocinas terapéuticamente beneficiosas en su cuerpo.

Un agente en la producción de citocinas es la proteína adaptadora STING (estimuladora de genes de interferón; forma siglada de (STimulator of /Merferon Genes; también conocida como MPYS, TMEM173, MITA y ERIS). STING es un receptor intracelular situado en el retículo endoplasmático. La unión a STING por un agonista activa una ruta de señalización que culmina en la inducción de IFN de tipo I, que se secretan y protegen la secreción y las células cercanas. STINg puede activarse mediante dos rutas diferentes, implicando cada una un tipo diferente de un agonista de dinucleótido cíclico ("CDN"). En la primera ruta, el agonista es un CDN exógeno utilizado por patógenos bacterianos como un segundo mensajero (Burdette et al. 2013). En la segunda ruta, la GMP-AMP sintasa cíclica (cGAS) detecta ADN citosólico y en respuesta, sintetiza un CDN que funciona como un agonista de STING endógeno (Ablasser et al.

2013; Gao et al. 2013; Sun et al. 2013).

La activación de STING da como resultado la regulación positiva de las rutas de IRF3 y NF-^kB que conducen a la inducción de interferón-p y otras citocinas. STING es crucial para respuestas al ADN citosólico de origen patógeno o del hospedador.

Dos CDN agonistas de STING bacterianos exógenos son 3'3'-cGAMP y c-GMP. El CDN agonista de STING endógeno hecho por cGAS es 2'3'-cGAMP. Los CDN bacterianos se caracterizan por dos puentes fosfodiéster 3'5', si bien el CDN producido por cGAS se caracteriza por un puente fosfodiéster 2'5' y uno 3'5'. Como forma abreviada, los CDN anteriores se denominan CDN de 3'3' y los últimos como CDN de 2'3'. Por razones históricas, los CDN de 3'3' se denominan también como la forma "canónica" y los CDN de 2'3' se denominan como la forma "no canónica".

Además, para proteger un organismo contra una infección patógena, se ha notificado también la activación de STING como beneficiosa en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y en un área de interés particular actual, el cáncer. La administración de CDN sintético junto con la vacuna contra el cáncer STINGVAX demostró una eficacia antitumoral potenciada en modelos terapéuticos múltiples (Fu et al. 2015). Se ha notificado que la administración de agonistas de STING individualmente muestra eficacia inmunitaria antitumoral potente en un modelo de ratón (Corrales et al. 2015a). Para revisiones sobre el papel de STING en la infección, inflamación y/o cáncer, véanse Ahn et al. 2015; Corrales et al. 2015b y 2016; y Barber 2015.

Se divulgan además derivados de dinucleótidos cíclicos útiles como moduladores de STING en los documentos WO 2017/123657 A1 o WO 2016/120305 A1.

La presente invención, por tanto, proporciona dinucleótidos cíclicos nuevos que pueden ser útiles para el tratamiento del cáncer.

Sumario de la invención

Se proporciona un compuesto de fórmula (I)

en donde

cada X es independientemente O o S;

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo Ci-6 sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Rb es H, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, -C(O)Ra1, -C(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)₂NRa1Ra1;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R3 y R4 son independientemente H, CH³, halógeno, NH²u OH;

R5 es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

R5a es H o alquilo C^1-3;

R6 es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

R₈es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

o una sal farmacéuticamente aceptable, un tautómero o un estereoisómero del mismo.

En otro aspecto, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más transportadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

En otro aspecto, se proporciona un activador de STING (de Fórmula I) para usar en el tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesita.

Descripción detallada de la invención

En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I)

en donde

cada X es independientemente O o S;

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo Ci-6 sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Rb es H, alquilo C^1.6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, -C(O)Ra1, -C(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)₂NRa1Ra1;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R3 y R4 son independientemente H, CH³, halógeno, NH²u OH;

R5a es H o alquilo C^1-3;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de Fórmula (I) en donde

X es O;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R3 y R4 son independientemente H, CH³, halógeno, NH²u OH;

R5a es H o alquilo C^1-3;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z¹es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R⁵, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R⁵, CN, NO², OH, OR^a1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Rb es H, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3.6sustituido con 0-6 R5, -C(O)Ra1, -C(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)₂NRa1Ra1;

Ra1 es H o alquilo C^1-3; R3 y R4 son independientemente H, CH³, halógeno, NH²u OH;

R5a es H o alquilo C^1-3;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

X es S;

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Rb es H, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, -C(O)Ra1, -C(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)₂NRa1Ra1;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R5a es H o alquilo C^1-3;

R6 es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

X es O;

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Rb es H, alquilo C^1.6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, -C(O)Ra1, -C(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)₂NRa1Ra1;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R5a es H o alquilo C^1-3;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R5 es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

R5a es H o alquilo C^1-3;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R5a es H o alquilo C^1-3;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

en donde

Z1 es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R5a es H o alquilo C^1-3;

R6 es H, halógeno, alquilo C^1-3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula

En otro aspecto de la invención dentro del alcance de los aspectos anteriores, se proporciona un compuesto de la fórmula

o una sal farmacéuticamente aceptable, un tautómero o un estereoisómero del mismo. En otro aspecto de la invención, se proporcionan compuestos de la fórmula

o una sal o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En otro aspecto de la invención, se proporcionan compuestos de la fórmula

1-[(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12S,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[13.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida

1-[(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12S,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida. En otro aspecto de la invención, se proporcionan compuestos de la fórmula

1-[(1S,3S,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[l3.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1S,3R,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12 -dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[l3.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida,

1-[(1S,3S,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12 -dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[l3.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida,

1-[(1S,3R,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12 -dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida. En otro aspecto de la invención, se proporcionan compuestos de la fórmula

(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5, 12lA5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona

(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona.

(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona.

(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12lA5-difosfatriciclo[13.2.1.06'10]octadecan-3,12-diona.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto seleccionado de

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-3,12-dioxo-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.Í0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida, (1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazoM-il)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona,

1-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-dihidroxi-3,12-dioxo-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida, 1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-dihidroxi-3,12-dioxo-3-sulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.Í0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-17-(4-nitro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol)-9-fluoro-18-hidroxi-3-sulfaniM2-hidroxi-2,4,7,11,l3,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-17-(4-carboxamida-1H-benzo[d][1,2,3]triazol)-9,18-difluoro-3-sulfaniM2-hidroxi-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona,

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.Í0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfaniM7-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3.12- diona,

1-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida, o

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-3.12- disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona (1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3.12- disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610íoctadecan-3,12-diona (1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3.12- disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona (13);

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-difluoro-8-{3H-imidazo[2,1-f]purin-3-il}-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9-fluoro-18-hidroxi-8-{3H-imidazo[2,1-f]purin-3-il}-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazoM-il)-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona 1-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-difluoro-12-hidroxi-8-{3H-imidazo[2,1-f]purin-3-il}-3,12-dioxo-3-sulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida 1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-3,12-dioxo-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.Í0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxilato de metilo

1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazoM-il)-12-sulfaniliden-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]octadecan-3-ona (18) (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-12-sulfaniliden-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-di fosfatriddo[13.2.1.0610]octadecan-3-ona (1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazoM-il)-12-sulfaniliden-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]octadecan-3-ona (1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona 1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida o una de sus sales o estereoisómeros farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto seleccionado entre los ejemplos ilustrados dentro del alcance del primer aspecto, o una sal farmacéuticamente aceptable, un tautómero o un estereoisómero del mismo.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto seleccionado entre cualquier lista de subconjuntos de compuestos dentro del alcance de cualquiera de los anteriores aspectos.

Otras realizaciones de la invención

En otra realización, la invención proporciona una composición farmacéutica, que comprende un transportador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

En otra realización, la invención proporciona un proceso para fabricar un compuesto de la invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

En otra realización, la invención proporciona uno o más compuestos de la invención, individualmente o de forma opcional, junto con otro compuesto de la invención y/o al menos otro tipo de agente terapéutico para usar en el tratamiento y/o profilaxis de diversos tipos de cáncer en un paciente que necesita tal tratamiento y/o profilaxis.

En otra realización, la presente invención incluye compuestos para el uso en el tratamiento y/o profilaxis de diversos tipos de cáncer, incluyendo el cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer colorrectal, melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de cabeza y cuello, linfoma de Hodgkin, cáncer de vejiga, carcinoma esofágico, carcinoma gástrico, carcinoma de ovario, carcinoma de cuello uterino, carcinoma pancreático, carcinoma de próstata, cánceres de mama, carcinoma urinario, tumores cerebrales, tales como glioblastoma, linfoma no de Hodgkin, leucemia linfática aguda (LLA), leucemia linfática crónica (LLC), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia mieloide crónica (LMC), carcinoma hepatocelular, mieloma múltiple, tumores estromales gastrointestinales, mesotelioma y otros tumores sólidos u otros cánceres hematológicos.

En otra realización, la invención proporciona compuestos para su uso en un método para el tratamiento y/o profilaxis de diversos tipos de cáncer, incluyendo, sin limitación, cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer colorrectal, melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de cabeza y cuello, linfoma de Hodgkin y cáncer de vejiga.

En otra realización, la invención proporciona un compuesto de la presente invención para usar en terapia.

En otra realización, la invención proporciona una preparación combinada de un compuesto de la presente invención y uno o más agentes terapéuticos adicionales para un uso simultáneo, por separado o secuencial en terapia.

APLICACIONES TERAPÉUTICAS

Los dinucleótidos cíclicos de la invención inducen interferones de tipo I y/o citocinas proinflamatorias in vitro en células humanas, células animales y sangre humana. La actividad inductora de citocinas de estos CDN requiere la presencia de STING, según lo confirmado por experimentos in vitro en células humanas o animales.

Los CDN de la invención son agonistas del receptor STING.

El término "agonista" se refiere a cualquier sustancia que active un receptor biológico in vitro o in vivo para provocar una respuesta fisiológica.

"STING" es una abreviatura de "estimulador de genes de interferón", que también se conoce como "estimulador de interferón del retículo endoplásmico (ERIS; forma siglada de endoplasmic reticulum interferon stimulator)", "mediador de la activación de IRF3 (MITA; forma siglada de mediator of IRF3 activation)", "MPYS" o "proteína transmembrana 173 (TM173; forma siglada de transmembrane protein 173)". STING es una proteína receptora transmembrana que en seres humanos está codificada por el gen TMEM173. La activación de STING por dinucleótidos cíclicos (CDN) conduce a la activación de las rutas de IRF3 y NF-kB y, en consecuencia, a la inducción de interferones de tipo I y de citocinas proinflamatorias, respectivamente.

Otro objeto de la presente invención son los dinucleótidos cíclicos de la Fórmula (I), para usar en un tratamiento terapéutico en seres humanos o en animales. En particular, los compuestos de la presente invención pueden usarse para aplicaciones terapéuticas o de diagnóstico en la salud humana o animal.

La expresión "agente terapéutico" se refiere a una o más sustancias que se administran a un ser humano o animal para lograr algún tipo de efecto terapéutico en ese ser humano o animal, incluyendo prevenir, curar o mitigar los efectos de la infección o enfermedad y/o para mejorar la salud de ese ser humano o ese animal.

El término "monoterapia" se refiere al uso de una sola sustancia y/o estrategia para tratar a un ser humano o a un animal en cualquier contexto clínico o médico, a diferencia del uso de múltiples sustancias y/o estrategias para tratar a un ser humano o a un animal en el mismo contexto clínico o médico, independientemente de si las múltiples sustancias y/o estrategias se usan secuencialmente en cualquier orden o simultáneamente.

La expresión "agente quimioterapéutico" en el presente documento se refiere a una o más sustancias químicas que se administran a un ser humano o a un animal para destruir tumores o ralentizar o detener el crecimiento de tumores y/o ralentizar o detener la división de células cancerosas y/o prevenir o ralentizar la metástasis. Los agentes quimioterapéuticos se administran con frecuencia para tratar el cáncer, pero también están indicados para otras enfermedades.

El término "quimioterapia" se refiere al tratamiento médico de un ser humano o de un animal con uno o más agentes quimioterapéuticos (véase la definición anterior).

El término "quimioinmunoterapia" se refiere al uso combinado, ya sea secuencialmente en cualquier orden o simultáneamente, de sustancias y/o estrategias de quimioterapia y sustancias y/o estrategias de inmunoterapia. La quimioinmunoterapia se emplea con frecuencia para tratar el cáncer, pero también puede emplearse para tratar otras enfermedades.

La expresión "sistema inmunitario" se refiere al conjunto o a uno cualquiera o más componentes, de las moléculas, sustancias (por ejemplo, líquidos corporales), estructuras anatómicas (por ejemplo, células, tejidos y órganos) y procesos fisiológicos implicados en la prevención de infecciones en el cuerpo, en la protección del cuerpo durante una infección o enfermedad y/o en la asistencia al cuerpo para recuperarse después de una infección o enfermedad. Una definición completa de "sistema inmunitario" está más allá del alcance de esta patente; sin embargo, esta expresión debe ser entendida por cualquier profesional habitual en este campo.

La expresión "agente inmunitario" se refiere a cualquier sustancia endógena o exógena que pueda interactuar con uno o más componentes del sistema inmunitario. La expresión "agente inmunitario" incluye anticuerpos, antígenos, vacunas y sus componentes constituyentes, ácidos nucleicos, fármacos sintéticos, compuestos orgánicos naturales o sintéticos, citocinas, células naturales o modificadas, análogos sintéticos de los mismos y/o fragmentos de los mismos.

El término "antagonista" se refiere a cualquier sustancia que inhibe, contrarresta, regula negativamente y/o insensibiliza un receptor biológico in vitro o in vivo para provocar una respuesta fisiológica.

El término "inmunoterapia" se refiere a cualquier tratamiento médico en el que uno o más componentes del sistema inmunitario de un ser humano o de un animal se modulan deliberadamente para lograr directa o indirectamente algún beneficio terapéutico, incluyendo efectos sistémicos y/o locales y efectos preventivos y/o curativos. La inmunoterapia puede implicar la administración de uno o más agentes inmunitarios (véase la definición anterior), ya sea solos o en cualquier combinación, a un sujeto humano o animal por cualquier vía (por ejemplo, por vía oral, intravenosa, dérmica, mediante inyección, por inhalación, etc.), ya sea de manera sistémica, local o ambas.

La "inmunoterapia" puede implicar provocar, incrementar, disminuir, detener, prevenir, bloquear o modular de otro modo la producción de citocinas y/o activar o desactivar citocinas o células inmunitarias y/o modular los niveles de células inmunitarias y/o suministrar una o más sustancias terapéuticas o de diagnóstico a una localización particular en el cuerpo o a un tipo particular de célula o tejido y/o destruir células o tejidos particulares. La inmunoterapia se puede usar para lograr efectos locales, efectos sistémicos o una combinación de ambos.

El término "inmunodeprimido" describe el estado de cualquier sujeto humano o animal cuyo sistema inmunitario está funcionalmente disminuido, desactivado o comprometido de otro modo o en el que uno o más componentes inmunitarios están funcionalmente disminuidos, desactivados o comprometidos de otro modo.

La "inmunosupresión" puede ser la causa, la consecuencia o el subproducto de la enfermedad, infección, agotamiento, desnutrición, tratamiento médico o algún otro estado fisiológico o clínico.

Las expresiones "sustancia que inmunomodula", "sustancia inmunomoduladora", "agente inmunomodulador" e "inmunomodulador", usados aquí como sinónimos, se refieren a cualquier sustancia que, tras su administración a un ser humano o animal, influye directamente en el funcionamiento del sistema inmunitario de ese ser humano o animal. Los ejemplos de inmunomoduladores habituales incluyen, pero sin limitación, antígenos, anticuerpos y fármacos de molécula pequeña.

El término "vacuna" se refiere a una preparación biológica administrada a un ser humano o a un animal con el fin de provocar o mejorar una respuesta del sistema inmunológico específica y/o una protección contra uno o más antígenos en ese ser humano o en ese animal.

El término "vacunación" se refiere al tratamiento de un ser humano o de un animal con una vacuna o al acto de administrar una vacuna a un ser humano o a un animal.

El término "adyuvante" se refiere a una sustancia terapéutica secundaria que se administra junto con (ya sea secuencialmente en cualquier orden o simultáneamente) una sustancia terapéutica primaria para lograr algún tipo de efecto beneficioso complementario, sinérgico o de otro modo que no puede lograrse a través del uso de la sustancia terapéutica primaria individualmente. Un adyuvante puede utilizarse junto con una vacuna, quimioterapia o alguna otra sustancia terapéutica. Los adyuvantes pueden mejorar la eficacia de la sustancia terapéutica primaria, reducir la toxicidad o los efectos secundarios de la sustancia terapéutica primaria o proporcionar algún tipo de protección al sujeto que recibe la sustancia terapéutica primaria, tal como, pero sin limitación, funcionamiento mejorado del sistema inmunitario.

En una realización, el dinucleótido cíclico de Fórmula (I) se puede administrar como inmunoterapia a un ser humano o un animal para inducir la producción in vivo de una o más citocinas que son terapéuticamente beneficiosas para ese ser humano o animal. Este tipo de inmunoterapia podría usarse sola o junto con otras estrategias de tratamiento, ya sea secuencialmente en cualquier orden o simultáneamente. Podría usarse para prevenir, curar y/o mitigar los efectos de la infección o enfermedad en ese ser humano o en ese animal y/o modular el sistema inmunitario de ese ser humano o en ese animal para lograr algún otro beneficio terapéutico.

En una realización particular, los dinucleótidos cíclicos de la presente invención pueden usarse para inmunoterapia de inducción de citocinas de individuos inmunodeprimidos.

En este ejemplo, se administraría un dinucleótido cíclico de Fórmula (I) a un sujeto humano o animal inmunodeprimido para inducir la producción in vivo de una o más citocinas que potencian directa o indirectamente el sistema inmunitario de ese ser humano o de ese animal. Los sujetos que podrían beneficiarse de dicho tratamiento incluyen los que padecen trastornos autoinmunitarios, deficiencias o defectos del sistema inmunitario, infecciones microbianas o víricas, enfermedades infecciosas o cáncer.

Por lo tanto, la presente divulgación divulga compuestos para usar en un método para inducir citocinas en individuos inmunodeprimidos, comprendiendo dicho método administrar a un paciente que lo necesite un dinucleótido cíclico de Fórmula (I) o una sal o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra realización, los dinucleótidos cíclicos de la presente invención pueden usarse para inmunoterapia de inducción de citocinas junto con quimioterapia. En este ejemplo, se administraría un dinucleótido cíclico de fórmula (I) junto con uno o más agentes quimioterapéuticos, secuencialmente en cualquier orden o conjuntamente, a un paciente con cáncer para detener el crecimiento de, reducir y/o destruir tumores en ese paciente. La quimioinmunoterapia resultante de la combinación de la inducción de citocinas, proporcionada por el (los) compuesto(s) de la presente invención y la citotoxicidad, proporcionada por el (los) agente(s) quimioterapéuticos, podrían ser menos tóxicas para el paciente, provocar menos efectos secundarios en el paciente y/o presentar mayor eficacia antitumoral que los agentes quimioterapéuticos cuando se usan como monoterapia.

La presente invención por tanto desvela un agente quimioterapéutico; y

un dinucleótido cíclico de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usar en el tratamiento del cáncer.

Otro objeto de la presente invención son los dinucleótidos cíclicos de Fórmula (I) para usar en el tratamiento de infección bacteriana, una infección vírica o un cáncer.

Como se utiliza en el presente documento, "cáncer' se refiere a la condición fisiológica en sujetos que se caracteriza por un crecimiento o muerte celulares sin regular o mal regulados. El término "cáncer" incluye tumores sólidos y tumores de difusión hematógena, ya sean malignos o benignos.

En una realización preferida, el cáncer es del siguiente grupo: cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer colorrectal, melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de cabeza y cuello, linfoma de Hodgkin y cáncer de vejiga.

La presente divulgación por tanto desvela un método para tratar una infección bacteriana, una infección vírica o un cáncer, comprendiendo dicho método administrar a un paciente que lo necesite un dinucleótido cíclico de Fórmula (I) o una sal o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otro objeto de la presente invención son los dinucleótidos cíclicos de la Fórmula (I) para usar en el tratamiento de una patología que puede aliviarse mediante la inducción de una respuesta inmunitaria a través de la ruta de STING.

Aunque es posible que, para su uso en terapia, un compuesto de fórmula (I), así como sales farmacéuticamente aceptables del mismo, puede administrarse como el compuesto en sí, se presenta más habitualmente como una composición farmacéutica.

Las composiciones farmacéuticas pueden presentarse en formas de dosis unitarias que contienen una cantidad predeterminada de principio activo por dosis unitaria. Son composiciones de dosificaciones unitarias preferidas las que contienen una dosis o subdosis diaria o una fracción adecuada de la misma, de un principio activo. Por tanto, tales dosis unitarias pueden administrarse más de una vez al día. Las composiciones de dosificación unitarias preferidas son las que contienen una dosis o subdosis diaria (para la administración más de una vez al día), como se ha citado anteriormente en el presente documento o una fracción adecuada de la misma, de un principio activo.

Los tipos de cánceres que pueden tratarse con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, cánceres de cerebro, cánceres de piel, cánceres de vejiga, cánceres de ovario, cánceres de mama, cánceres gástricos, cánceres pancreáticos, cánceres de próstata, cánceres colorrectales, cánceres de sangre, cánceres de pulmón y cánceres de huesos. Los ejemplos de tales tipos de cáncer incluyen neuroblastoma, carcinoma intestinal, tal como carcinoma de recto, carcinomas de colon, carcinoma de poliposis adenomatosa familiar y cáncer colorrectal hereditario sin poliposis, carcinoma esofágico, carcinoma labial, carcinoma de laringe, cánceres nasofaríngeos, cánceres de la cavidad oral, carcinoma de las glándulas salivales, cánceres peritoneales, sarcoma de tejidos blandos, cánceres uroteliales, carcinoma de glándulas sudoríparas, carcinoma gástrico, adenocarcinoma, carcinoma medular de tiroides, carcinoma papilar de tiroides, carcinoma renal, carcinoma parenquimal de riñón, carcinoma de ovario, carcinoma de cuello uterino, carcinoma de cuerpo uterino, carcinoma de endometrio, carcinoma pancreático, carcinoma de próstata, carcinoma de testículo, cánceres de mama, que incluyen HER2 negativo, carcinoma urinario, melanoma, tumores cerebrales, tales como glioblastoma, astrocitoma, meningioma, meduloblastoma y tumores neuroectodérmicos periféricos, linfoma de Hodgkin, linfoma no de Hodgkin, linfoma de Burkitt, leucemia linfática aguda (LLA), leucemia linfática crónica (LLC), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia mieloide crónica (LMC), leucemia/linfoma de linfocitos T de adultos, linfoma difuso de linfocitos B grandes (LDLBG; forma siglada de diffuse large B-cell lymphoma), carcinoma hepatocelular, mieloma múltiple, seminoma, osteosarcoma, condrosarcoma, cánceres del conducto anal, carcinoma de la corteza suprarrenal, cordoma, cáncer de las trompas de Falopio, tumores estromales gastrointestinales, enfermedades mieloproliferativas, mesotelioma, cánceres del tracto biliar, sarcoma de Ewing y otros tipos de tumores raros.

Los compuestos de la invención son útiles para el tratamiento de determinados tipos de cáncer en sí mismos o junto con o en coadministración con otros agentes terapéuticos o radioterapia. Por tanto, en una realización, los compuestos de la invención se coadministran con radioterapia o un segundo agente terapéutico con actividad citostática o antineoplásica. Los compuestos quimioterapéuticos citostáticos adecuados incluyen, pero sin limitación, (i) antimetabolitos; (ii) agentes de fragmentación de ADN, (iii) agentes de reticulación de ADN, (iv) agentes intercalantes (v) inhibidores de la síntesis de proteínas, (vi) venenos de topoisomerasa I, tales como camptotecina o topotecán; (vii) venenos de topoisomerasa II, (viii) agentes dirigidos a microtúbulos, (ix) inhibidores de quinasa (x) agentes de investigación misceláneos (xi) hormonas y (xii) antagonistas de hormonas. Se contempla que los compuestos de la invención pueden ser útiles junto con cualquier agente conocido que quede en las ¹²clases anteriores así como cualquier agente futuro que esté actualmente en desarrollo. En particular, se contempla que compuestos de la invención pueden ser útiles junto con tratamientos de referencia actuales así como cualquiera que se desarrolle en el futuro cercano. Las dosificaciones y los regímenes de dosificación específicos se basarían en el conocimiento evolutivo de los médicos y la pericia general en la materia.

Además, en el presente documento se proporcionan realizaciones en donde los compuestos de la invención se administran con uno o más agentes inmunooncológicos. Los agentes inmunooncológicos usados en el presente documento, también conocidos como inmunoterapias de cáncer, son eficaces para mejorar, estimular y/o regular positivamente respuestas inmunitarias en un sujeto. En un aspecto, la administración de un compuesto de la invención con un agente inmunooncológico tiene un efecto sinérgico en la inhibición del crecimiento tumoral.

En un aspecto, el (los) compuesto(s) de la invención se administra(n) secuencialmente antes de la administración del agente inmunooncológico. En otro aspecto, el (los) compuesto(s) de la invención se administra(n) simultáneamente con el agente inmunooncológico. En otro aspecto más, el (los) compuesto(s) se administra(n) secuencialmente después de la administración del agente inmunooncológico.

En otro aspecto, los compuestos de la invención pueden formularse de forma conjunta con un agente inmunooncológico.

Los agentes inmunooncológicos incluyen, por ejemplo, un fármaco de molécula pequeña, anticuerpo u otra molécula biológica. Los ejemplos de agentes inmunooncológicos biológicos incluyen, pero sin limitación, vacunas contra el cáncer, anticuerpos y citocinas. En un aspecto, el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal. En otro aspecto, el anticuerpo monoclonal es humanizado o humano.

En un aspecto, el agente inmunooncológico es (i) un agonista de un receptor estimulante (incluyendo un coestimulante) o (ii) un antagonista de una señal inhibidora (incluyendo un coinhibidor) en linfocitos T, ambos de los cuales dan como resultado la amplificación de respuestas de linfocitos T específicas de antígeno (con frecuencia denominados reguladores de puntos de control inmunitarios).

Determinadas moléculas estimulantes e inhibidoras son miembros de la superfamilia de las inmunoglobulinas (IgSF, forma siglada de immunoglobulin super family). Otra familia importante de ligandos unidos a membrana que se unen a receptores coestimulantes o coinhibidores es la familia de B7, que incluye B7-1, B7-2, B7-H1 (PD-L1), B7-DC (PD-L2), B7-H₂(ICOS-L), B7-H3, B7-H4, B7-H5 (VISTA) y B7-H6. Otra familia de ligandos unidos a membrana que se unen a receptores coestimulantes o coinhibidores es la familia TNF de moléculas que se unen a miembros de la familia del receptor de TNF análogos, que incluye CD40 y CD40L, OX-40, OX-40L, CD70, CD27L, CD30, CD30L, 4-1BBL, CD137 (4-1BB), TRAIL/Apo2-L, TRAILR1/DR4, TRAILR2/DR5, TRAILR3, TRAILR4, OPG, RANK, RANKL, TWEAKR/Fn14, TWEAK, BAFFR, EDAR, XEDAR, TACI, APRIL, BCMA, LTpR, LIGHT, DcR3, HVEM, VEGI/TL1A, TRAMP/DR3, EDAR, EDA1, XEDAR, EDA2, TNFR1, linfotoxina a/TNFp, TNFR2, TNFa, LTpR, linfotoxina a ip2, FAS, FASL, RELT, DR⁶, TROY, NGFR.

En un aspecto, las respuestas de linfocitos T pueden estimularse mediante una combinación de un compuesto de la invención y uno o más de (i) un antagonista de una proteína que inhibe la activación de linfocitos T (por ejemplo, inhibidores del punto de control inmunitario), tal como CTLA-4, PD-1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, Galectina 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, Galectina-1, TIGIT, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1 y TIM-4 y (ii) un agonista de una proteína que estimula la activación de linfocitos T tal como B7-1, B7-2, CD28, 4-1BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, ICOS-L, OX40, OX40L, GITR, GITRL, CD70, CD27, CD40, DR3 y CD28H.

Otros agentes que pueden combinarse con compuestos de la invención para el tratamiento del cáncer incluyen antagonistas de receptores inhibidores en linfocitos NK o agonistas de receptores activadores en linfocitos NK. Por ejemplo, los compuestos de la invención pueden combinarse con antagonistas de KIR, tales como lirilumab.

Otros agentes más para terapias combinadas incluyen agentes que inhiben o reducen macrófagos o monocitos, incluyendo, pero sin limitación, antagonistas de CSF-1R, tales como anticuerpos antagonistas de CSF-1R, incluyendo RG7155 (documentos WO11/70024, WO11/107553, WO11/131407, WO13/87699, WO13/119716, WO13/132044) o FPA-008 (documentos WO11/140249; WO13169264; WO14/036357).

En otro aspecto, los compuestos de la invención pueden usarse con uno o más agentes agonistas que se ligan con receptores coestimuladores positivos, agentes bloqueantes que atenúan la señalización a través de receptores inhibidores, antagonistas y uno o más agentes que aumentan sistémicamente la frecuencia de linfocitos T antitumorales, agentes que superan distintas rutas supresoras inmunitarias dentro del microentorno tumoral (por ejemplo, bloquear la unión de receptor inhibidor (por ejemplo, interacciones PD-L1/PD-1), disminuir o inhibir Tregs (por ejemplo, usando un anticuerpo monoclonal anti-CD25 (por ejemplo, daclizumab) o mediante agotamiento de perlas anti-CD25 ex vivo), inhiben enzimas metabólicas tales como IDO o invierten/previenen la anergia o el agotamiento de linfocitos T) y agentes que desencadenan activación inmunitaria innata y/o inflamación en sitios tumorales.

En un aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de CTLA-4, tal como un anticuerpo antagonista de CTLA-4. Los anticuerpos para CTLA-4 adecuados incluyen, por ejemplo, YERVOY (ipilimumab) o tremelimumab.

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de PD-1, tal como un anticuerpo antagonista de PD-1. El anticuerpo PD-1 puede seleccionarse de Opdivo (nivolumab), Keytruda (pembrolizumab), PDR001 (Novartis; véase el documento WO2015/112900), MEDI-0680 (AMP-514) (AstraZeneca; véase el documento WO2012/145493), REGN-2810 (Sanofi/Regeneron; véase el documento WO2015/112800), JS001 (Taizhou Junshi), BGB-A317 (Beigene; véase el documento WO2015/35606), INCSHR1210 (SHR-1210) (Incyte/Jiangsu Hengrui Medicine; véase el documento WO2015/085847), TSR-042 (a Nb 001) (Tesara/AnaptysBio; véase el documento WO2014/179664), GLS-010 (Wuxi/Harbin Gloria Pharmaceuticals), AM-0001 (Armo/Ligand) o STI-1110 (Sorrento; véase el documento WO2014/194302). El agente inmunooncológico también puede incluir pidilizumab (CT-011), aunque su especificidad para la unión a PD-1 se ha puesto en duda. Otro enfoque para dirigirse al receptor de PD-1 es la proteína recombinante compuesta del dominio extracelular de PD-L2 (B7-DC) fusionado con la porción Fc de IgG1, denominada AMP-224 En un aspecto,

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de PD-L1, tal como un anticuerpo antagonista de PD-L1. El anticuerpo PD-L1 puede seleccionarse de Tecentriq (atezolizumab), durvalumab, avelumab, STI-1014 (Sorrento; véase el documento WO2013/181634) o CX-072 (CytomX; véase el documento WO2016/149201).

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de LAG-3, tal como un anticuerpo antagonista de LAG-3. Los anticuerpos para LAG3 adecuados incluyen, por ejemplo, BMS-986016 (documentos WO10/19570, WO14/08218) o IMP-731 o IMP-321 (documentos WO08/132601, WO09/44273).

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de CD137 (4-1BB), tal como un anticuerpo agonista de CD137. Los anticuerpos para CD137 adecuados incluyen, por ejemplo, urelumab y PF-05082566 (documento WO12/32433).

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de GITR, tal como un anticuerpo agonista de GITR. Los anticuerpos de GITR adecuados incluyen, por ejemplo, BMS-986153, BMS-986156, TRX-518 (documentos WO06/105021, WO09/009116) y MK-4166 (documento WO11/028683).

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de IDO. Los antagonistas de IDO adecuados incluyen, por ejemplo, INCB-024360 (documentos WO2006/122150, WO07/75598, WO08/36653, WO08/36642), indoximod o NLG-919 (documentos WO09/73620, WO09/1156652, WO11/56652, WO12/142237).

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de OX40, tal como un anticuerpo agonista de OX40. Los anticuerpos para OX40 adecuados incluyen, por ejemplo, MEDI-6383 o MEDI-6469.

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de OX40L, tal como un anticuerpo antagonista de OX40. Los antagonistas de OX40L adecuados incluyen, por ejemplo, RG-7888 (documento WO06/029879).

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de CD40, tal como un anticuerpo agonista de CD40. En otra realización más, el agente inmunooncológico es un antagonista de CD40, tal como un anticuerpo antagonista de CD40. Los anticuerpos para CD40 adecuados incluyen, por ejemplo, lucatumumab o dacetuzumab.

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de CD27, tal como un anticuerpo agonista de CD27. Los anticuerpos para CD27 adecuados incluyen, por ejemplo, varlilumab.

En otro aspecto, el agente inmunooncológico es MGA271 (para B7H3) (documento WO11/109400).

La terapia de combinación pretende abarcar la administración de estos agentes terapéuticos de manera secuencial, es decir, en donde cada agente terapéutico se administra en un momento diferente, así como la administración de estos agentes terapéuticos o de al menos dos de los agentes terapéuticos, de manera sustancialmente simultánea. La administración sustancialmente simultánea se puede lograr, por ejemplo, administrando al sujeto una forma de dosificación individual que tiene una relación fija de cada agente terapéutico o en múltiples formas de dosificación individuales para cada uno de los agentes terapéuticos. La administración secuencial o sustancialmente simultánea de cada agente terapéutico puede efectuarse por cualquier vía adecuada, incluidas, pero sin limitación, vías orales, vías intravenosas, vías intratumorales, vías intramusculares y la absorción directa a través de los tejidos de la membrana mucosa. Los agentes terapéuticos pueden administrarse por la misma vía o por vías diferentes. Por ejemplo, un primer agente terapéutico de la combinación seleccionada puede administrarse por inyección intravenosa, si bien los otros agentes terapéuticos de la combinación pueden administrarse por vía oral. Como alternativa, por ejemplo, todos los agentes terapéuticos pueden administrarse por vía oral o todos los agentes terapéuticos pueden administrarse por inyección intravenosa. La terapia de combinación también puede incluir la administración de los agentes terapéuticos tal como se ha descrito anteriormente junto con principios biológicamente activos y terapias no farmacológicas (por ejemplo, cirugía o tratamiento radiológico). Cuando la terapia de combinación comprende además un tratamiento no farmacológico, el tratamiento no farmacológico puede llevarse a cabo en cualquier momento adecuado, siempre que se consiga un efecto beneficioso de la acción conjunta de la combinación de los agentes terapéuticos y el tratamiento no farmacológico. Por ejemplo, en los casos adecuados, el efecto beneficioso todavía se logra cuando el tratamiento no farmacológico se elimina temporalmente de la administración de los agentes terapéuticos, quizás por días o incluso semanas.

Esta invención abarca todas las combinaciones de los aspectos preferidos de la invención indicados en el presente documento. Se entiende que cualquiera y todas las realizaciones de la presente invención pueden tomarse junto con cualquier otra realización o realizaciones para describir realizaciones adicionales. También ha de entenderse que cada elemento individual de las realizaciones es su propia realización independiente. Además, se entiende que cualquier elemento de una realización se combina con cualquiera y todos los demás elementos de cualquier realización para describir una realización adicional.

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Y DOSIFICACIÓN

La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos de Fórmula I, formulados junto con uno o más transportadores (aditivos) y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables y opcionalmente, uno o más agentes terapéuticos adicionales descritos anteriormente. Como se describe con detalle más adelante, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden formularse especialmente para administración en forma sólida o líquida, incluyendo aquellas adaptadas para lo siguiente: (1) administración oral, por ejemplo, brebajes (soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas), comprimidos, por ejemplo, los dirigidos a la absorción bucal, sublingual y sistémica, inyecciones en embolada, polvos, gránulos, pastas para aplicación a la lengua; (2) administración parenteral, por ejemplo, por inyección subcutánea, intramuscular, intratumoral, intravenosa o epidural en forma de, por ejemplo, una solución o suspensión estéril o una formulación de liberación sostenida; (3) aplicación tópica, por ejemplo, como una crema, pomada o un parche de liberación controlada o aerosol para aplicación a la piel; o por vía intratumoral.

La expresión "farmacéuticamente aceptable" se emplea en el presente documento para referirse a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que están, comprendidas dentro del alcance del criterio médico reconocido, adecuados para usar en contacto con los tejidos de seres humanos y de animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acordes con una relación de beneficio/riesgo razonable.

La expresión "transportador farmacéuticamente aceptable" como se utiliza en el presente documento se refiere a un material, una composición o un vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como una carga líquida o sólida, diluyente, excipiente, un adyuvante de fabricación (por ejemplo, lubricante, talco magnesio, estearato de calcio o zinc o ácido estérico) o un material encapsulante disolvente, implicado en portar o transportar el compuesto objeto de un órgano o parte del organismo, a otro órgano o parte del organismo. Cada transportador debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no ser perjudicial para el paciente.

Las formulaciones de la presente invención incluyen las adecuadas para la administración oral, intratumoral, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), rectal, vaginal y/o parenteral. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en una forma farmacéutica unitaria y se pueden preparar mediante cualquier método bien conocido en la técnica de farmacia. La cantidad de principio activo que puede combinarse con un material transportador para producir una forma de dosificación individual variarán dependiendo del paciente a tratar y del modo particular de administración. La cantidad de principio activo que puede combinarse con un material transportador para producir una forma de dosificación individual generalmente será esa cantidad del compuesto que produce un efecto terapéutico. En general, de un cien por ciento, esta cantidad variará de aproximadamente 0,1 por ciento a aproximadamente noventa y nueve por ciento de principio activo, aproximadamente de aproximadamente un 5 por ciento a aproximadamente un 70 por ciento, lo más preferentemente de aproximadamente un 10 por ciento a aproximadamente un 30 por ciento.

En determinadas realizaciones, una formulación de la presente invención comprende un excipiente seleccionado entre el grupo que consiste en ciclodextrinas, celulosas, liposomas, agentes formadores de micelas, por ejemplo, ácidos biliares y portadores poliméricos, por ejemplo, poliésteres o polianhídridos; y un compuesto de la presente invención. En determinadas realizaciones, una formulación mencionada anteriormente hace que un compuesto de la presente invención sea biodisponible por vía oral.

Los métodos para preparar estas formulaciones o composiciones incluyen la etapa de asociar un compuesto de la presente invención con el transportador y opcionalmente, uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando de manera uniforme e íntima un compuesto de la presente invención con transportadores líquidos o transportadores sólidos finamente divididos o ambos y a continuación, si es necesario, dando forma al producto.

Las formulaciones de la presente invención adecuadas para administración oral puede estar en forma de cápsulas, obleas, píldoras, comprimidos, grageas (utilizando una base aromatizada, normalmente sacarosa y acacia o tragacanto), polvos, gránulos o en forma de una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso o en forma de una emulsión líquida de aceite en agua o de agua en aceite o en forma de un elixir o jarabe o en forma de pastillas (usando una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y goma arábiga) y/o en forma de colutorios y similares, que contienen cada uno una cantidad determinada de un compuesto de la presente invención como un principio activo. Un compuesto de la presente invención también puede administrarse en forma de un bolo, electuario o pasta.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención adecuadas para la administración parenteral comprenden uno o más compuestos de la invención junto con una o más soluciones acuosas o no acuosas isotónicas estériles farmacéuticamente aceptables, dispersiones, suspensiones o emulsiones o polvos estériles que se pueden reconstituir en soluciones o dispersiones inyectables estériles justo antes de su uso, que pueden contener azúcares, alcoholes, antioxidantes, tampones, bacteriostáticos, solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor previsto o agentes de suspensión o espesantes.

En algunos casos, a fin de prolongar el efecto de un fármaco, es deseable ralentizar la absorción del fármaco mediante inyección subcutánea, intratumoral o intramuscular. Esto puede lograrse mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo que tiene poca solubilidad en agua. La velocidad de absorción del fármaco depende por tanto de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y de la forma cristalina. Como alternativa, la absorción retardada de una forma de fármaco administrada por vía parenteral se logra disolviendo o suspendiendo el fármaco en un vehículo oleoso.

Las formas de depósito inyectables pueden prepararse formando matrices microencapsuladas de los compuestos objeto en polímeros biodegradables tales como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo de la relación entre el fármaco y el polímero y de la naturaleza del polímero particular empleado, puede controlarse la velocidad de liberación del fármaco. Los ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). Las formulaciones inyectables de depósito también se preparan atrapando el fármaco en liposomas o microemulsiones que con compatibles con el tejido corporal.

Cuando los compuestos de la presente invención se administran como productos farmacéuticos, a seres humanos y a animales, pueden administrarse tal cual o en forma de una composición farmacéutica que contiene, por ejemplo, del 0,1 al 99 % (más preferentemente, del 10 al 30 %) de principio activo junto con un transportador farmacéuticamente aceptable.

Independientemente de la vía de administración seleccionada, los compuestos de la presente invención, que pueden usarse en una forma hidratada adecuada y/o las composiciones farmacéuticas de la presente invención, se formulan en formas de dosificación farmacéuticamente aceptables por métodos convencionales conocidos por los expertos en la técnica.

Los niveles reales de dosificación de los principios activos en las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden variarse para obtenerse una cantidad del principio activo que sea eficaz para conseguir la respuesta terapéutica deseada para un paciente, una composición y un modo de administración particulares, sin que sea tóxico para el paciente.

El nivel de dosificación seleccionado dependerá de diversos factores incluyendo la actividad del compuesto particular de la presente invención empleado o el éster, la sal o la amida de las mismas, la vía de administración, el momento de la administración, la tasa de excreción o metabolismo del compuesto particular que se está empleando, la velocidad y el grado de absorción, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/o materiales usados junto con el compuesto particular empleado, la edad, sexo, peso, afección, salud general e historial médico previo del paciente que se está tratando y factores similares bien conocidos en las materias médicas.

Un médico o veterinario que tenga experiencia en la materia puede determinar y prescribir fácilmente la cantidad eficaz de la composición farmacéutica necesaria. Por ejemplo, el médico o el veterinario podría empezar con dosis de los compuestos de la invención empleados en la composición farmacéutica a niveles inferiores que los requeridos para conseguir el efecto terapéutico deseado y aumentar gradualmente la dosificación hasta conseguir el efecto deseado.

En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la invención será aquella cantidad del compuesto que sea la dosis eficaz más baja para producir un efecto terapéutico. Tal dosis eficaz generalmente dependerá de los factores descritos anteriormente. En general, las dosis orales, intravenosas, intracerebroventriculares y subcutáneas de los compuestos de esta invención para un paciente variarán desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 50 mg por kilogramo de peso corporal al día.

Si bien es posible que un compuesto de la presente invención se administre solo, es preferible administrar el compuesto como una formulación farmacéutica (composición).

Definiciones

A menos que se indique específicamente otra cosa en el presente documento, las referencias hechas en singular también pueden incluir el plural. Por ejemplo, "un" y "una" pueden referirse a uno o a uno o más.

Salvo que se indique lo contrario, se supone que cualquier heteroátomo con valencias no completas tiene átomos de hidrógeno suficientes para completar las valencias.

A lo largo de la presente memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, una fórmula química o nombre dados abarcará todos los estereoisómeros e isómeros ópticos y racematos de los mismos cuando existan dichos isómeros. Salvo que se indique lo contrario, todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas están dentro del alcance de la presente invención. Muchos isómeros geométricos de dobles enlaces C=C, dobles enlaces C=N, sistemas anulares y similares también pueden estar presentes en los compuestos y todos estos isómeros estables se contemplan en la presente invención. Se describen los isómeros geométricos cis y trans (o E- y Z-) de los compuestos de la presente invención y pueden aislarse en forma de una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Los presentes compuestos pueden aislarse en formas ópticamente activas o racémicas. Las formas ópticamente activas pueden prepararse por resolución de formas racémicas o por síntesis de materiales de partida ópticamente activos. Se considera que todos los procedimientos usados para preparar los compuestos de la presente invención y los productos intermedios elaborados con los mismos son parte de la presente invención. Cuando se preparan productos enantioméricos o diastereoméricos, pueden separarse por métodos convencionales, por ejemplo, por cromatografía o cristalización fraccionada. Dependiendo de las condiciones del proceso, los productos finales de la presente invención se obtienen tanto en forma libre (neutra) como de sal. Tanto la forma libre como las sales de estos productos finales están dentro del alcance de la invención. Si así se desea, puede convertirse una forma de un compuesto en otra forma. Puede convertirse una base o un ácido libres en una sal; puede convertirse una sal en el compuesto libre u otra sal; puede separarse una mezcla de compuestos isoméricos de la presente invención en los isómeros individuales. Los compuestos de la presente invención, la forma libre y las sales de los mismos, pueden existir en múltiples formas tautoméricas, en las cuales los átomos de hidrógeno se transponen a otras partes de las moléculas y por consiguiente, se reordenan los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas. Debe entenderse que todas las formas tautoméricas, en la medida en que puedan existir, se incluyen dentro de la invención. Por razones de claridad,

puede representarse como

Con fines de claridad y según convención estándar en la técnica, el símbolo

se usa en fórmulas y tablas para mostrar el enlace que es el punto de unión del resto o sustituyente al centro/núcleo de la estructura.

Adicionalmente, por razones de claridad, donde un sustituyente tiene un guion (-) que no está entre dos letras o símbolos; este se usa para indicar un punto de unión para un sustituyente. Por ejemplo, -CONH²está unido a través del átomo de carbono.

Adicionalmente, por razones de claridad, cuando no se muestra un sustituyente al final de una línea continua, esto indica que hay un grupo metilo (CH³) conectado al enlace.

Adicionalmente, el grupo fosforotioato puede representarse como

El término "contraión" se usa para representar una especie cargada negativamente tal como cloruro, bromuro, hidróxido, acetato y sulfato o una especie cargada positivamente, tal como sodio (Na+), potasio (K+), amonio (RnNHm+ donde n = 0-4 y m = 0-4) y similares.

La expresión "grupo captador de electrones" (EWG, forma siglada de electrón withdrawing group) se refiere a un sustituyente que polariza un enlace, atrayendo la densidad de electrones hacia sí mismo y lejos de otros átomos enlazados. Los ejemplos de EWG incluyen, pero sin limitación, CF³, CF²CF³, CN, halógeno, haloalquilo, NO², sulfona, sulfóxido, éster, sulfonamida, carboxamida, alcoxi, alcoxiéter, alquenilo, alquinilo, OH, C(O)alquilo, CO²H, fenilo, heteroarilo, -O-fenilo y -O-heteroarilo. Los ejemplos preferidos de EWG incluyen, pero sin limitación, CF³, CF²CF³, CN, halógeno, SO²(alquilo C^1-4), CONH(alquilo C^1-4), CON(alquilo ^ ^-4)²y heteroarilo. Los ejemplos más preferidos de EWG incluyen, pero sin limitación, CF³y CN.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "grupo protector de amina" significa cualquier grupo conocido en la técnica de síntesis orgánica para la protección de grupos amina que sea estable a un agente reductor de éster, una hidrazina disustituida, R4-M y R₇-M, un nucleófilo, un agente reductor de hidrazina, un activador, una base fuerte, una base de amina impedida y un agente de ciclación. Tales grupos protectores de amina que encajan en estos criterios incluyen los enumerados en Wuts, P. G. M. y Greene, T. W. Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a Edición, Wiley (2007) y The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 3, Academic Press, Nueva York (1981), cuya divulgación se incorpora al presente documento por referencia. Los ejemplos de grupos protectores de amina incluyen, pero sin limitación, los siguientes: (¹) los de tipo acilo, tales como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo y p-toluenosulfonilo; (2) los de tipo carbamato aromático, tales como benciloxicarbonilo (Cbz) y benciloxicarbonilos sustituidos, 1 -(p-bifenil)-1-metiletoxicarbonilo y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); (3) los de tipo carbamato alifático, tales como terc-butiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo y aliloxicarbonilo; (4) los tipo alquil carbamato cíclicos, tales como ciclopentiloxicarbonilo y adamantiloxicarbonilo; (5) los de tipo alquilo, tales como trifenilmetilo y bencilo; (⁶) trialquilsilano tal como trimetilsilano; (7) los tipos que contienen tiol, tales como feniltiocarbonilo y ditiasuccinαlo; y (⁸) los de tipo alquilo, tales como trifenilmetilo, metilo y bencilo; y los de tipo alquilo sustituidos, tales como ²,²,²-tricloroetilo, ²-feniletilo y t-butilo; y los de tipo trialquilsilano, tales como trimetilsilano.

Como se cita en el presente documento, el término "sustituido" significa que al menos un átomo de hidrógeno se reemplaza con un grupo distinto de hidrógeno, con la condición de que las valencias normales se mantengan y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable. Los dobles enlaces de anillo, como se utiliza en el presente documento, son dobles enlaces que se forman entre dos átomos adyacentes del anillo (por ejemplo, C=C, C=N o N=N).

En los casos en donde hay átomos de nitrógeno (por ejemplo, aminas) en los compuestos de la presente invención, estos se pueden convertir en N-óxidos mediante tratamiento con un agente oxidante (por ejemplo, mCPBA y/o peróxidos de hidrógeno) para proporcionar otros compuestos de esta invención. Por tanto, se considera que los átomos de nitrógeno mostrados y reivindicados incluyen tanto el nitrógeno mostrado como su derivado de N-óxido (N^O ).

Cuando aparece cualquier variable más de una vez en cualquier constituyente o fórmula de un compuesto, su definición cada vez que aparece es independiente de su definición en cualquier otra aparición. Por tanto, por ejemplo, si se muestra que un grupo está sustituido con 0-3 R, a continuación, dicho grupo puede sustituirse opcionalmente con hasta tres grupos R y en cada caso, R se selecciona independientemente entre la definición de R. Además, solo se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables en caso de que dichas combinaciones den como resultado compuestos estables.

Cuando se muestra un enlace a un sustituyente que cruza un enlace que conecta dos átomos en un anillo, a continuación, dicho sustituyente puede unirse a cualquier átomo del anillo. Cuando se enumera un sustituyente sin indicar el átomo en donde se une dicho sustituyente al resto del compuesto de una fórmula dada, a continuación, dicho sustituyente puede unirse a través de cualquier átomo en dicho sustituyente. Solo se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables en caso de que dichas combinaciones den como resultado compuestos estables.

La presente invención pretende incluir todos los isótopos de los átomos que se encuentran en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de hidrógeno se pueden indicar como 1H (hidrógeno), 2H (deuterio) y 3H (tritio). Habitualmente también se indican como D para deuterio y T para tritio. En la solicitud, CD³representa un grupo metilo en donde todos los átomos de hidrógeno son deuterio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y ¹⁴C. Los compuestos marcados con isótopos de la invención pueden prepararse generalmente por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o por procedimientos análogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado isotópicamente adecuado en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo.

Como se utiliza en el presente documento, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos divulgados en donde el compuesto precursor se modifica para hacer sales ácidas o básicas de los mismos. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero sin limitación, sales de ácidos minerales u orgánicos de grupos básicos tales como aminas; y sales alcalinas u orgánicas de grupos ácidos tales como ácidos carboxílicos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto precursor formadas, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Por ejemplo, tales sales convencionales no tóxicas incluyen las derivadas de ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico y nítrico; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos, tales como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, ²-acetoxibenzoico, fumárico, toluenosulfónico, metanosulfónico, etanodisulfónico, oxálico e isetiónico y similares.

Pueden sintetizarse sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención a partir del compuesto precursor que contiene un resto básico o ácido por métodos químicos convencionales. En general, tales sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido o base libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren los medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se encuentran listas de sales adecuadas en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22a edición, Allen, L. V. Jr., Ed.; Pharmaceutical Press, Londres, RU (2012).

Además, los compuestos de fórmula I pueden tener formas de profármaco. Cualquier compuesto que se convierta in vivo para proporcionar el principio bioactivo (es decir, un compuesto de fórmula I) es un profármaco. Se conocen bien en la técnica diversas formas de profármaco. Para ejemplos de tales derivados de profármacos, véanse:

a) Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985) y Widder, K. et al., eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985);

b) Bundgaard, H., capítulo 5, "Design and Application of Prodrugs", A Textbook of Drug Design and Development, págs. 113-191, Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., Harwood Academic Publishers (1991);

c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev.,Rev., 8:1-38 (1992);

d) Bundgaard, H. et al., J. Pharm. Sci., 77:285 (1988);

e) Kakeya, N. et al., Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984); y

f) Rautio, J (Editor). Prodrugs and Targeted Delivery (Methods and Principles in Medicinal Chemistry), vol. 47, Wiley-VCH, 2011.

Los compuestos que contienen un grupo carboxi pueden formar ésteres fisiológicamente hidrolizables que sirven como profármacos al hidrolizarse en el cuerpo para producir los compuestos de fórmula I per se. Tales profármacos se administran preferentemente por vía oral, ya que la hidrólisis en muchos casos se produce principalmente bajo la influencia de las enzimas digestivas. Puede usarse la administración parenteral cuando el éster es activo por sí mismo o en aquellos casos en los que la hidrólisis se produce en la sangre. Los ejemplos de ésteres fisiológicamente hidrolizables de compuestos de fórmula I incluyen alquilo C^1-6, alquilbencilo C^1-6, 4-metoxibencilo, indanilo, ftalilo, metoximetilo, alcanoiloxi C^1-6-alquilo C^1-6(por ejemplo, acetoximetilo, pivaloiloximetilo o propioniloximetilo), alcoxicarboniloxi C^1-6-alquilo C^1-6(por ejemplo, metoxicarbonil-oximetilo o etoxicarboniloximetilo, gliciloximetilo, fenilgliciloximetilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)-metilo) y otros ésteres fisiológicamente hidrolizables bien conocidos usados, por ejemplo, en las técnicas de las penicilinas y cefalosporinas. Tales ésteres se pueden preparar mediante técnicas convencionales conocidas en la técnica.

La preparación de profármacos se conoce bien en la técnica y se describe en, por ejemplo, King, F. D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, R.U. (2a edición, reproducido en 2006); Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA y Wiley-VCH, Zúrich, Suiza (2003); Wermuth, C. G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry, ³a edición, Academic Press, San Diego, California (2008).

El término "solvato" significa una asociación física de un compuesto de la presente invención con una o más moléculas de disolvente, ya sean orgánicas o inorgánicas. Esta asociación física incluye enlaces de hidrógeno. En determinados casos, el solvato podrá aislarse, por ejemplo, cuando se incorporan una o más moléculas de disolvente a la red cristalina del sólido cristalino. Las moléculas de disolvente en el solvato pueden estar presentes en una disposición regular y/o una disposición no ordenada. El solvato puede comprender una cantidad tanto estequiométrica como no estequiométrica de las moléculas de disolvente. "Solvato" abarca solvatos tanto en fase de solución como aislables. Los solvatos a modo de ejemplo incluyen, pero sin limitación, hidratos, etanolatos, metanolatos e isopropanolatos. Los métodos de solvatación se conocen generalmente en la técnica.

Como se utiliza en el presente documento, el término "paciente" se refiere a organismos que se tratan mediante los métodos de la presente invención. Tales organismos incluyen, preferentemente, pero sin limitación, mamíferos (por ejemplo, murinos, simios, equinos, bovinos, porcinos, cánidos, felinos y similares) y lo más preferentemente, se refiere a seres humanos.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "cantidad eficaz" indica la cantidad de fármaco o agente farmacéutico, es decir, un compuesto de la invención, que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que se busca, por ejemplo, por un investigador o especialista clínico. Además, la expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa cualquier cantidad que, en comparación con un sujeto correspondiente que no ha recibido tal cantidad, da como resultado una mejora en el tratamiento, curación, prevención o mejoría de una enfermedad, trastorno o efecto secundario o una disminución en la velocidad de avance de una enfermedad o trastorno. Una cantidad eficaz puede administrarse en una o más administraciones, aplicaciones o dosis y no pretende limitarse a una formulación o vía de administración particular. La expresión también incluye dentro de su alcance cantidades eficaces para potenciar la función fisiológica normal.

Como se utiliza en el presente documento, el término "tratamiento" incluye cualquier efecto, por ejemplo, minimizar, reducir, modular, mejorar o eliminar, que da como resultado la mejora de la afección, enfermedad, trastorno y similar o que mejora un síntoma del mismo.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "composición farmacéutica" se refiere a la combinación de un principio activo con un transportador, inerte o activo, haciendo a la composición especialmente adecuada para su uso diagnóstico o terapéutico in vivo o ex vivo.

Los ejemplos de bases incluyen, pero sin limitación, hidróxidos de metales alcalinos (por ejemplo, sodio), metales alcalinotérreos (por ejemplo, magnesio), hidróxidos, amoniaco y compuestos de fórmula NW⁴+, en donde W es alquilo C^1-4y similares.

Para un uso terapéutico, las sales de los compuestos de la presente invención se consideran como farmacéuticamente aceptables. Sin embargo, las sales de ácidos y bases que no son farmacéuticamente aceptables también pueden usarse, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto farmacéuticamente aceptable.

MÉTODOS DE PREPARACIÓN

Los compuestos de la presente invención pueden prepararse de diversas formas bien conocidas por un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse usando los métodos descritos más adelante, junto con métodos de síntesis conocidos en la técnica de la química orgánica sintética o variaciones de los mismos según apreciarán los expertos en la materia. Los métodos preferidos incluyen, pero sin limitación, los descritos a continuación. Todos las referencias citadas en el presente documento se incorporan como referencia en su totalidad.

Los compuestos de esta invención pueden prepararse usando las reacciones y técnicas descritas en la presente sección. Las reacciones se realizan en disolventes apropiados para los reactivos y materiales empleados y son adecuados para las transformaciones que se realizan. También, en la descripción de los métodos de síntesis descritos a continuación, se entenderá que todas las condiciones de reacción propuestas, incluyendo la elección del disolvente, atmósfera de reacción, temperatura de reacción, duración del experimento y procedimientos de elaboración, se escogen para que sean las condiciones convencionales para esa reacción, lo que debe reconocer fácilmente un experto en la técnica. Un experto en la materia de la síntesis orgánica entenderá que la funcionalidad presente en diversas porciones de la molécula debe ser compatible con los reactivos y reacciones propuestos. Tales restricciones a los sustituyentes que son compatibles con las condiciones de reacción serán muy evidentes para un experto en la materia y por tanto, deben usarse métodos alternativos. En ocasiones, esto requerirá una valoración para modificar el orden de las etapas de síntesis o para seleccionar un esquema de proceso concreto frente a otro a fin de obtener un compuesto deseado de la invención. También se reconocerá que otra consideración principal en la planificación de cualquier ruta de síntesis en este campo es la elección acertada del grupo protector usado para la protección de los grupos funcionales reactivos presentes en los compuestos descritos en esta invención. Una fuente autorizada que describe las muchas alternativas para el experto capacitado es Greene y Wuts (Protective Groups In Organic Synthesis, cuarta edición, Wiley and Sons, 2007).

Los compuestos de Fórmula general (I) y Fórmula (II) pueden prepararse con referencia a los métodos ilustrados en los siguientes Esquemas. Como se muestra en el presente documento, el producto final es un compuesto que tiene la misma fórmula estructural que la Fórmula (I) y la Fórmula (II). Se entenderá que puede producirse cualquier compuesto de Fórmula (I) y Fórmula (II) mediante los esquemas y la selección adecuada de reactivos con la sustitución apropiada. Los disolventes, temperaturas, presiones y otras condiciones de reacción pueden seleccionarse fácilmente por un experto habitual en la materia. Los materiales de partida están disponibles en el mercado o se preparan fácilmente por un experto en la materia. Los constituyentes de los compuestos son como se definen en el presente documento o en cualquier otro lugar en la memoria descriptiva.

Esquema 1

Método 1

Un método para la preparación de los ejemplos de la presente divulgación se describe en el Esquema 1. El método comienza a partir de un ribonucleósido (i), en donde la nucleobase (R1 o R2) está protegida adecuadamente (PG²o PG³), tal como con un grupo benzαlo y el grupo 5'-hidroxi está protegido adecuadamente (PG¹), tal como con un DMTr éter y la posición 3' es una funcionalidad de fosforamidita. En la etapa 1, el tratamiento con reactivos adecuados, tales como trifluoroacetato de piridina seguido de butilamina, proporciona el H-fosfonato (ii). La posterior retirada del grupo protector 5'-OH en la etapa 2, en condiciones ácidas (PG¹= DMTr) produce compuestos de la fórmula iii. El compuesto resultante de la fórmula iii puede hacerse reaccionar con una 2'-fosforamidita (iv) totalmente protegida en la etapa 3 y a continuación, tiolarse inmediatamente, por ejemplo, con DDTT (X = S), para proporcionar compuestos de la fórmula v . Como alternativa, el tratamiento con un oxidante, tal como t-butil hidroperóxido proporciona compuestos de la fórmula v, donde X = O. La eliminación del grupo protector de 5' del segundo ribonucleósido en la etapa 4, en condiciones ácidas (PG¹= DMTr) proporciona compuestos de la fórmula vi. El tratamiento de los compuestos vi con un reactivo de ciclación adecuado en la etapa 5, tal como DMOCP, proporciona compuestos de la fórmula vii. A continuación, este material puede tiolarse inmediatamente con un reactivo adecuado, tal como 3H-1,2-benzoditiol-3-ona para proporcionar compuestos de la fórmula viii en la etapa ⁶. Los compuestos de la fórmula viii se pueden tratar con un reactivo adecuado para eliminar los grupos protectores de la nucleobase, por ejemplo, NH⁴OH/MeOH (PG²y PG³= benzoílo) para proporcionar compuestos de la fórmula ix. Los compuestos de la fórmula (I) pueden prepararse en la etapa ⁸mediante la eliminación del grupo protector restante del 3'-OH de los compuestos ix con, por ejemplo, anión fluoruro, donde PG⁴= un grupo protector sililo.

Esquema 2

Método 2

Otro método para la preparación de ejemplos de la presente divulgación se describe en el Esquema 2. La secuencia parte de un ribonucleósido modificado (i), en donde la nucleobase (R1 o R2) está protegida adecuadamente (PG²o PG³), tal como con un grupo benzαlo y el grupo 5'-hidroxi está protegido adecuadamente (PG¹), tal como con un DMTr éter y la posición 3' es una funcionalidad de fosforamidita. En la etapa 1, el tratamiento con prop-2-en-1-ol, seguido de oxidación inmediata (x = O), por ejemplo, con peróxido de 2-butanona, produce el fosfodiéster (x). La posterior retirada del grupo protector 5'-OH en la etapa 2, en condiciones ácidas (PG¹= DMTr) produce compuestos de fórmula xi. El compuesto resultante de fórmula xi puede reaccionar con una 2'-fosforamidita totalmente protegida (i) en la etapa 3 seguido de oxidación, por ejemplo, con peróxido de 2-butanona para proporcionar compuestos de fórmula xii (X = O) o puede ser tratado, por ejemplo con DDTT, para proporcionar compuestos adicionales de fórmula xii (X = S). La eliminación del grupo protector 5' del segundo ribonucleósido en la etapa 4, en condiciones ácidas (PG¹= DMTr) proporciona compuestos de fórmula xiii. La eliminación del grupo protector de alilo con un reactivo apropiado en la etapa 5, tal como NaI o Pd(PPh³)⁴, proporciona compuestos de fórmula xiv. El tratamiento de los compuestos xiv con un reactivo de ciclación adecuado en la etapa 6, tal como 1-(mesitilsulfonil)-3-nitro-1H-1,2,4-triazol, proporciona compuestos de fórmula xv. Los compuestos de fórmula xv pueden ser tratados con un reactivo apropiado, tal como tbutilamina, para eliminar los grupos 2-cianoetilo y proporciona compuestos de fórmula xvi. Pueden ser necesarias etapas adicionales para eliminar los grupos protectores restantes (etapa 8). Por ejemplo, el tratamiento con NH⁴OH/MeOH para eliminar los grupos alquilo o fenilcarbonilo y el tratamiento con ion fluoruro donde se han empleado grupos protectores de sililo proporciona compuestos de fórmula (I).

Método 3

Como alternativa, en el Esquema 3 se describe un método adicional para la preparación de ejemplos de la presente divulgación.

Esquema 3

El método parte de un nucleósido natural o modificado apropiadamente sustituido (xvii), en donde la nucleobase (R2) está adecuadamente protegida (PG= grupo protector), tal como con un grupo benzαlo. En la Etapa 1, el tratamiento de xvii con un reactivo organofosforado (V) apropiado, por ejemplo uno de los enumerados en la Tabla 1, en un disolvente apropiado (tal como acetonitrilo o dimetilformamida), con una base apropiada (por ejemplo, DBU) produce compuestos de fórmula xviii. El tratamiento con un alcohol adecuadamente protegido (por ejemplo xix) en la Etapa 2, en un disolvente apropiado (por ejemplo, acetonitrilo o dimetilformamida) en presencia de una base (por ejemplo, DBU) produce compuestos de fórmula xx. En la Etapa 3, ambos grupos protectores (PG¹y PG⁴) puede eliminarse en condiciones conocidas por un experto en la materia para producir como alcohol un diol (xxi). Los compuestos de fórmula xxi puede tratarse en la Etapa 4 con un reactivo de ciclación apropiado (por ejemplo, fosfito de difenilo) seguido de oxidación con, por ejemplo, hidroperóxido de t-butilo (X = O) o sulfurización con, por ejemplo DDTT (X = S) para proporcionar compuestos de fórmula xxii. En la Etapa 5, cualquier grupo protector adicional puede eliminarse para producir compuestos de fórmula general (I).

Método 4

Como alternativa, en el Esquema 4 se describe un método adicional para la preparación de ejemplos de la presente divulgación.

Esquema 4

El método parte de la resina de soporte de poliestireno de ácido 2-(3-doro-4-hidroxifenil)acético (xxiii) y un ribonucleósido (i), en donde la nucleobase (R1 o R2) está protegida adecuadamente (PG²o PG³), tal como con un grupo benzoílo y el grupo 5'-hidroxi está protegido adecuadamente (PG¹), tal como con un DMTr éter y la posición 3' es una funcionalidad de fosforamidita. En la Etapa 1, el ribo-nucleósido (i) se carga en resina (xxiii) con un reactivo adecuado (por ejemplo, 1H-tetrazol), en un disolvente apropiado (tal como acetonitrilo), y a continuación es inmediatamente oxidado, por ejemplo con un reactivo como hidroperóxido de t-butilo, para proporcionar la resina xxiv.

La retirada posterior del grupo cianoetilo con un reactivo apropiado (por ejemplo, una mezcla 1:1 de Et³N/piridina) y el grupo protector 5'-OH en condiciones ácidas (PG¹= DMTr) en la etapa 2, produce la resina xxv. La resina resultante xxv puede hacerse reaccionar con una 2-fosforamidita (iv) totalmente protegida en la etapa 3 y a continuación, tiolarse inmediatamente, por ejemplo, con DDTT (X = S), para proporcionar la resina xxvi. Como alternativa, el tratamiento con un oxidante, tal como hidroperóxido de t-butilo produce la resina xxvi de soporte donde X = O. La eliminación del grupo protector de 5' del segundo ribonucleósido en la etapa 4, en condiciones ácidas (PG¹= DMTr) proporciona xxviii. El tratamiento de xxvii con un reactivo de ciclación adecuado en la etapa 5, tal como MNST proporciona xxviii.

La eliminación del grupo cianoetilo con un reactivo apropiado (por ejemplo una mezcla 1:1 de Et³N/piridina), seguido del desprendimiento selectivo apropiado de la resina de soporte con un reactivo apropiado, por ejemplo NH⁴OH/MeOH proporciona compuestos de fórmula (I) en la etapa 6. Ambos grupos protectores (PG²y PG³= benzαlo) junto con cualquier otro grupo protector también se puede eliminar en las mismas condiciones o en una etapa posterior, mediante la selección adecuada de reactivos conocidos por los expertos en la materia.

Tabla 1. Reactivos or anofosforados

Ejemplos

La invención se define además en los siguientes ejemplos. Debe entenderse que los ejemplos se dan a modo de ilustración solamente. A partir del análisis anterior y los ejemplos, un experto en la materia puede discernir las características esenciales de la invención. Como resultado, la invención no está limitada por los ejemplos ilustrativos expuestos a continuación, sino que se define por las reivindicaciones adjuntas a la presente.

Abreviaturas

Las siguientes abreviaturas pueden usarse en la sección de ejemplos más adelante y en cualquier otro sitio en el presente documento:

continuación

Intermedios

Intermedio I-1:

Preparación del Intermedio I-1a

1H-benzo[d][1,2,3]triazol (5 g, 42,0 mmol) en H²SO⁴conc. (150 ml) se enfrió a 0 °C. Se añadió nitrato de potasio (8,49 g, 84 mmol) en pequeñas porciones durante 20 min. A continuación, la reacción se calentó a 60 °C durante 1,5 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y luego se vertió sobre 100 g de hielo. Después de calentar a temperatura ambiente, el sólido se recogió y se lavó con agua (3 x 10 ml). El sólido se trató con 50 ml de NaHCO³acuoso saturado y se agitó durante 5 min. La suciedad resultante se recogió y se lavó con agua (3 x 10 ml), hexano (3 x 10 ml) y luego se secó al vacío para proporcionar el Intermedio I-1a (5,82 g, 84 % de rendimiento). LCMS: m/z 165,00 (M+H), RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) ⁸13,10 (s a, 1H), 8,55 (d, JJ = 8,2 Hz, 1H), 8,49 (dd, J = 7,8; 0,7 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 8,1 Hz, 1H).

Preparación del Intermedio I-1b

A una solución de triacetato de (2S,3R,4R,5R)-5-(acetoximetil)tetrahidrofuran-2,3,4-triilo (10 g, 31,4 mmol) e Intermedio I-1 a (5,16 g, 31,4 mmol) en 50 ml de DCM, se añadió gota a gota perclorostanano (1,471 ml, 12,57 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. A la reacción se le añadieron lentamente 300 ml de solución acuosa saturada de NaHCO³. A continuación la mezcla de reacción se extrajo con DCM (3 x 300 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron. El residuo se purificó sobre sílice eluyendo con 0-50 % de EtOAc/hexano para dar el Intermedio I-1b (5,7 g, 43 %) deseado. LCMS: m/z 422,85 (M+H), RMN de 1H (499 MHz, DMSO-da) 88,52 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,39 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,89 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 6,97 (d, J=3,0 Hz, 1H), 6,15 (dd, J= 5,4, 3,0 Hz, 1H), 5,76-5,71 (m, 1H), 4,59-4,55 (m, 1H), 4,34 (dd, J= 12,3, 3,2 Hz, 1H), 4,13 (dd, J= 12,5, 4,6 Hz, 1H), 2,14 (s, 6H), 1,86 (s, 3H).

Preparación del Intermedio I-1:

Se burbujeó amoníaco a través de una solución de Intermedio I-1b (4 g, 9,47 mmol) en 30 ml de MeOH durante 15 min y a continuación la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. A continuación, la mezcla de reacción se concentró. Después, el residuo se destiló azeotrópicamente con 5 ml de piridina y luego se disolvió en 20 ml de piridina. Se añadió DMTr-Cl (3,85 g, 11,36 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. Después, la reacción se inactivó con 1 ml de MeOH y se agitó durante 10 minutos adicionales. Después, la mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó sobre sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc/Hexano para dar el Intermedio I-1 (3,7 g, 5,56 mmol, 58,7 % de rendimiento).

Intermedio I-2:

Preparación de los Intermedios I-2a y I-2b:

A una solución de Intermedio I-1 (3,7 g, 6,18 mmol) en 25 ml de piridina seca se añadió 1H-imidazol (1,26 g, 18,54 mmol), seguido de la adición gota a gota de terc-butilclorodimetilsilano (0,978 g, 6,49 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 h y después se inactivó con 1 ml de MeOH y se continuó agitando durante 10 min más. A continuación, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó sobre gel de sílice (0-60 % de EtOAc/Hexano) para dar dos isómeros: Intermedio I-2a (1,6 g, 2,244 mmol, 36,3 % de rendimiento), RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 89,26-9,18 (m, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,48 (d, J=7,3 Hz, 2H), 7,39-7,29 (m, 6H), 7,27-7,22 (m, 1H), 7,09-7,05 (m, 1H), 6,88-6,83 (m, 4H), 6,74 (d, J=7,0 Hz, 1H), 6,67 (d, JJ = 4,9 Hz, 1H), 4,67 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 4,34-4,31 (m, 1H), 4,27-4,22 (m, 1H), 3,81 (d, J=0,9 Hz, 6H), 3,57-3,47 (m, 2H), 2,70 (d, J=5,0 Hz, 1H), 0,92-0,87 (m, 9H), 0,07-0,04 (m, 3H), 0,02 - -0,02 (m, 3H) e Intermedio I-2b (2,1 g, 2,95 mmol, 47,7 % de rendimiento) 1RMN H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 88,28 (d, J=7,5 Hz, 1H), 8,23 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,20-7,09 (m, 9H), 6,73-6,68 (m, 4H), 6,43 (d, J=2,4 Hz, 1H), 5,15-5,11 (m, 1H), 4,91-4,87 (m, 1H), 4,33-4,29 (m, 1H), 3,78 (d, J=2,6 Hz, 6H), 3,41 (dd, J= 10,8, 2,7 Hz, 1H), 3,12-3,07 (m, 2H), 2,07 (s, 1H), 1,55 (s, 12H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 0,91 (s, 9H), 0,12 (s, 3H), 0,02 - -0,04 (m, 3H).

Preparación del Intermedio I-2:

A una solución de Intermedio I-2b (2,1 g, 2,95 mmol) en DCM anhidro (20 ml) se añadió una solución 1,0 M de 1H-imidazol-4,5-dicarbonitrilo (2,062 ml, 2,062 mmol) en acetonitrilo, seguido de la adición gota a gota de 3-((bis(diisopropilamino)fosfanil)oxi)propanonitrilo (1,065 g, 3,53 mmol). Después de que se completara la adición, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. A continuación, la mezcla se diluyó con 100 ml de DCM, se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO³, se secó sobre MgSO⁴, y luego se concentró a sequedad. El residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (EtOAc al 0-40 %/hexano/con EtOAc al 0,5 %³N) para producir el Intermedio I-2 como una mezcla de diastereoisómeros (1,8 g, 1,971 mmol, 66,9% de rendimiento). m/z 830,0 (M+H), (hidrolizado en LCMS con TFA en la fase móvil).

Intermedio I-3:

Preparación del Intermedio I-3a

A 2,3-diaminobenzoato de metilo (3 g, 18,1 mmol) en ácido acético (50 ml) se añadió nitrito de sodio (1,25 g, 18,1 mmol) en pequeñas porciones. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. A continuación, la mezcla se concentró y el residuo se agitó en 50 ml de agua durante 5 min. El sólido se recogió y se lavó con agua (10 ml x 3), éter (5 ml x 2) y luego se secó al vacío para dar el Intermedio I-3a (2,52 g, 79 % de rendimiento). RMN de 1H (499 MHz, DMSO-d6) 88,40 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,15 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H). m/z 178,4 (M+H) como un sólido blanquecino, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Preparación del Intermedio I-3b

A una solución de triacetato de (2S,3R,4R,5R)-5-(acetoximetil)tetrahidrofuran-2,3,4-triilo (4,49 g, 14,11 mmol) e Intermedio I-3a (2,5 g, 14,11 mmol) en 50 ml de ACN se añadió gota a gota perclorostanano (1,65 ml, 14,1 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. A la reacción se le añadieron lentamente 200 ml de NaHCO³. La mezcla se extrajo a continuación con EtOAc (150 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron. El residuo se purificó sobre sílice (0-100 % EtOAc/Hexano) para dar el Intermedio I-3b (4,57 g, 10,50 mmol, 74,4 % de rendimiento). RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 8 8,17 (dd, J= 7,3, 0,9 Hz, 1H), 7,91 (dd, J= 8,2, 0,9 Hz, 1H), 7,64 (dd, J= 8,4, 7,3 Hz, 1H), 6,49 (d, J=4,0 Hz, 1H), 6,23 (dd, J= 5,3, 4,1 Hz, 1H), 5,81 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,60-4,54 (m, 1H), 4,45-4,39 (m, 1H), 4,24 (dd, J= 12,3, 4,3 Hz, 1H), 4,13 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), m/z 436,5 (M+H).

Preparación del Intermedio I-3:

A una solución de Intermedio I-3b (5,5 g, 12,63 mmol) en MeOH (50 ml) se añadió metanolato de sodio (2,53 ml, 2,53 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. A la mezcla resultante se le añadieron 2 g de resina H+ Dowex 50 y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. La suspensión se filtró y el filtrado se concentró a sequedad. El residuo se recogió en 5 ml de piridina y luego se concentró a sequedad (2x). El material resultante se suspendió en 30 ml de piridina seca y se añadió DMTr-Cl (5,14 g, 15,16 mmol). La reacción se agitó a continuación a temperatura ambiente durante la noche. A continuación, la reacción se trató con 1 ml de MeOH y se agitó durante 10 min más. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo resultante se purificó en una columna de gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc en hexano para dar el Intermedio I-3 (2,5 g, 4,09 mmol, 32,4 % de rendimiento). m/z 612,0 (M+H).

Intermedio I-4:

Preparación de los Intermedios I-4a y I-4b

A una solución de Intermedio I-3 (2,5 g, 4,09 mmol) en piridina seca (10 ml) se añadió IH-imidazol (0,84 g, 12,26 mmol), seguido de la adición gota a gota de terc-butilclorodimetilsilano (1,08 g, 7,2 mmol) en DCM (5 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h y a continuación se añadió terc-butilclorodimetilsilano (0,68 g, 4,50 mmol). La reacción se agitó durante otras 3 h. A continuación, la reacción se inactivó con MeOH (2 ml) y se agitó durante 10 min. La mezcla se concentró y el residuo se purificó después por cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc en hexano para dar dos isómeros. El primer isómero de elución, Intermedio I-4a (0,8 g, 1,102 mmol, 27,0 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 726,6: RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) ó 8,11 (d, J=7,3 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,41-7,29 (m, 4H), 7,28-7,18 (m, 7H), 6,78-6,75 (m, 4H), 6,33 (d, J=5,0 Hz, 1H), 5,34-5,32 (m, 1H), 4,49-4,45 (m, 1H), 4,35-4,32 (m, 1H), 4,13 (s, 3H), 3,79 (d, J=1,1 Hz, 6H), 3,46 (dd, J= 10,7, 3,2 Hz, 1H), 3,32 (dd, J= 10,7, 4,3 Hz, 1H), 2,78 (d, J=4,4 Hz, 1H), 1,56 (s, 14H), 1,40-1,21 (m, 1H), 0,89 (s, 9H), 0,96-0,81 (m, 1H), 0,05-0,02 (m, 3H), 0,03 (s, 15H), -0,11 (s, 3H), y el segundo isómero de elución, Intermedio I-4b (2,0 g, 2,76 mmol, 42,1 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 726,7: RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) ó 8,15 (dd, J=7,3, 0,9 Hz, 1H), 8,07 (dd, J= 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,57 (dd, J= 8,2, 7,3 Hz, 1H), 7,29-7,26 (m, 2H), 7,29 (s, 3H), 7,18-7,12 (m, 7H), 6,71-6,65 (m, 4H), 6,41 (d, J=2,1 Hz, 1H), 5,09-5,06 (m, 1H), 4,90-4,87 (m, 1H), 4,33-4,27 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 4,17 4,11 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,32 (dd, J= 10,7, 2,6 Hz, 1H), 3,11-3,05 (m, 2H), 2,07 (s, 1H), 1,56 (s, 7H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 0,95-0,84 (m, 1H), 0,89 (s, 9H), 0,11 (s, 3H), -0,02 (s, 3H).

Preparación del Intermedio I-4:

El Intermedio I-4 se preparó a partir de I-4b siguiendo el procedimiento previsto para la preparación del Intermedio I-2 para dar el Intermedio I-4 (81 % de rendimiento). m/z 843,5 (M+H).

Intermedio I-5:

Preparación del Intermedio I-5a

A una solución de 2-nitro-6-(trifluorometil)anilina (5 g, 24,26 mmol) en MeOH (100 ml) se le añadió paladio sobre carbón (10 % en peso) (0,52 g, 0,49 mmol) y la reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno de 1,72 bar (25 psi) durante 2 h. A continuación, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y el filtrado se concentró. El residuo resultante se disolvió en 150 ml de ácido acético y se añadió lentamente en pequeñas porciones nitrito de sodio (1,67 g, 24,3 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. A continuación se concentró la mezcla de reacción. Al residuo resultante se añadieron 100 ml de agua y la mezcla se agitó durante 5 minutos. El sólido resultante se recogió y se lavó con agua (30 ml x 3) seguido de hexano (10 ml x 2) y a continuación se secó para dar el Intermedio I-5a (3,96 g, 21,16 mmol, 87 % de rendimiento). RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 812,63 - 12,35 (s a, 1H), 8,44-8,15 (m, 1H), 7,83 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,65 -7,52 (t, 1H).

Preparación del Intermedio I-5b

El Intermedio I-5b se preparó a partir del Intermedio I-5a y triacetato de (2S,3R,4R,5R)-5-(acetoximetil)tetrahidrofuran-2,3,4-triilo siguiendo el procedimiento para la preparación del Intermedio I-1b para obtener el producto deseado (58 % de rendimiento). RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 87,90 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,50 (d, J=3,8 Hz, 1H), 6,26 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 5,83-5,80 (m, 1H), 4,58 (d a, J = 5,3 Hz, 1H), 4,42 (dd, J= 12,5, 3,0 Hz, 1H), 4,24 (dd, J= 12,5, 4,0 Hz, 1H), 2,20-2,05 (m, 6H), 1,98 (s, 3H).

Preparación del Intermedio I-5:

El Intermedio I-5 se preparó a partir del Intermedio I-5b siguiendo el procedimiento descrito para la preparación del Intermedio I-1 para dar el producto deseado (59 % de rendimiento).

Intermedio I-6:

Preparación de los Intermedios I-6a y I-6b

A una solución de Intermedio I-5 (1,8 g, 2,90 mmol) en 15 ml de piridina seca se añadió IH-imidazol (0,591 g, 8,69 mmol), seguido de la adición gota a gota de terc-butilclorodimetilsilano (0,480 g, 3,19 mmol) en 5 ml de DCM. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. A continuación, la reacción se inactivó con MeOH (2 ml) y se agitó durante 10 min. La mezcla se concentró y el residuo se purificó después por cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc en hexano para dar dos isómeros. El primer isómero de elución, Intermedio I-6a (0,62 g, 29,1 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 736,6: RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) ó 8,06 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,39-7,29 (m, 2H), 7,28-7,18 (m, 8H), 6,79-6,74 (m, 4H), 6,33 (d, J=5,0 Hz, 1H), 5,35-5,29 (m, 1H), 4,47 (d a, J = 4,7 Hz, 1H), 4,35 (d, J=3,3 Hz, 1H), 3,79 (d, J=1,7 Hz, 7H), 3,47 (dd, J= 10,7, 3,0 Hz, 1H), 3,33 (dd, J= 10,7, 4,0 Hz, 1H), 2,76 (d, J=4,3 Hz, 1H), 0,89 (s, 9H), 0,08-0,04 (m, 3H), -0,09 (s, 3H), y el segundo isómero de elución, Intermedio I-6b (0,98 g, 46,0 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 736,6: r Mn de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) ó 8,06 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,73-7,69 (m, 1H), 7,56 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,32 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 7,28 7,25 (m, 2H), 7,20-7,13 (m, 7H), 6,73-6,68 (m, 4H), 6,41 (d, J=2,3 Hz, 1H), 5,08-5,05 (m, 1H), 4,90-4,86 (m, 1H), 3,77 (d, J=2,3 Hz, 6H), 3,37 (dd, J= 10,8, 2,7 Hz, 1H), 3,11 (dd, J= 10,7, 5,0 Hz, 2H), 0,90 (s, 9H), 0,11 (s, 3H), 0,02 --0,05 (m, 3H).

Preparación del Intermedio I-6:

El Intermedio I-6 se preparó a partir de I-6b siguiendo el procedimiento previsto para la preparación de Intermedio I-2.

Intermedio I-7:

Preparación del Intermedio I-7a

A una suspensión de Intermedio I-3a (1,5 g, 8,47 mmol) y (benzoato de (2R,3R,4S)-5-acetoxi-4-(benzoiloxi)-3-fluorotetrahidrofuran-2-il)metilo (3,41 g, 8,47 mmol) en CH³CN (30 ml) anhidro a temperatura ambiente se añadió gota a gota cloruro de estaño (IV) (0,994 ml, 8,47 mmol). La solución resultante se agitó durante 16 h. A continuación, la reacción se trató con solución acuosa saturada de NaHCO³y se extrajo con EtOAc (50 ml x 3). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con agua y después salmuera. A continuación la capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (del 0 % al 60 % de EtOAc/hexano) para dar el Intermedio I-7a (4,0 g, 7,70 mmol, 91 % de rendimiento). m/z 520,1 (M+H) RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d⁴) 88,18 - 8,12 (d, 1H), 8,10 (d, 2H), 8,05-8,00 (d, 1H), 7,84 (m, 2H), 7,68-7,61 (m, 1H), 7,60 7,54 (m, 2H), 7,53-7,36 (m, 4H), 7,02-6,90 (m, 1H), 6,71-6,53 (m, 1H), 6,03-5,74 (m, 1H), 5,09-4,91 (m, 1H), 4,83-4,71 (m, 1H), 4,61-4,51 (m, 1H), 4,02 (s, 3H).

Preparación del Intermedio I-7b

A una solución de Intermedio I-7a (4,6 g, 8,85 mmol) en MeOH (50 ml) se añadió metanolato de sodio (3,54 ml, 1,771 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió resina H+ Dowex 50 (2 g) y la mezcla se agitó durante 30 min y luego se filtró. El filtrado se concentró y a continuación se purificó usando cromatografía en columna de gel de sílice (0-10 % de MeOH/DCM) para dar el Intermedio I-7b (2,4 g, 7,71 mmol, 87 % de rendimiento). m/z 312,1 (M+H). RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,41 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 8,17 (d, J=7,1 Hz, 1H), 7,71 (dd, J= 8,4, 7,3 Hz, 1H), 6,52-6,49 (m, 1H), 5,31-5,17 (m, 2H), 4,07 (s, 3H), 3,85-3,77 (m, 2H), 3,37 (s, 1H).

Preparación del Intermedio I-7

A una solución de Intermedio I-7b (2,4 g, 7,71 mmol) en piridina (20 ml) se añadió 4,4'-(cloro(fenil)metileno)bis(metoxibenceno) (3,14 g, 9,25 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 4 h. Se añadió metanol (1 ml) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 10 min. A continuación, la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre 40 g de gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc/Hexanos para producir el Intermedio I-7 (3,2 g, 67,6 % de rendimiento). LCMS [M+H]+ = 614.

Preparación del Intermedio I-8:

El Intermedio I-8 se preparó a partir del Intermedio I-7 siguiendo el procedimiento descrito para la preparación del Intermedio I-2. LCMS, [M+H]+ = 814,1.

Preparación del Intermedio I-9:

Una solución de (2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-punn-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il 2-cianoetil diisopropilfosforamidita (Sigma-Aldrich, 2 g, 2,3 mmol) en ACN (5 ml) se trató con agua (0,05 ml, 2,7 mmol), seguido de trifluoroacetato de piridina (0,53 g, 2,7 mmol). La solución incolora se agitó durante 10 min y a continuación, se concentró al vacío para proporcionar una espuma rosa clara. El sólido resultante se disolvió en MeCN (5 ml) y se concentró hasta la sequedad. El material resultante se disolvió de nuevo en MeCN (5 ml). Se preparó una solución de DBU (2,75 ml, 18,3 mmol) en ACN (6 ml) y nitrometano (1 ml, 18,3 mmol). A esta solución de DBU se añadió la solución de ACN a partir de lo anterior en una porción y la mezcla se agitó durante 20 min. A continuación, la reacción se vertió en una solución acuosa al 15 % en peso de KH²PO⁴(25 ml) y 2-MeTHF (20 ml) y se agitó. La capa acuosa se extrajo con 2-MeTHF (20 ml) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa al 15 % en peso de KH²PO⁴(2 x 20 ml), a continuación, una solución de salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró al vacío. El gel resultante se secó mediante destilación azeotrópica con 2-MeTHF (30-40 ml/g total, cargado en cantidades de 8-10 ml). A continuación, el material en bruto se disolvió en DCM (20 ml). Se añadió metanol (1 ml), seguido de ácido dicloroacético (0,8 ml, 10,8 mmol). La reacción se agitó durante 3 h. Se añadió piridina (2 ml, 27 mmol) a esta mezcla y a continuación, la mezcla se concentró al vacío hasta un residuo similar a un gel. Se añadió dimetoxi etano (10 ml) y precipitó un sólido de color blanco. Los sólidos se recogieron por filtración y se resuspendieron en DME (2,5 ml/g) y se agitaron cuidadosamente con una espátula sobre el filtro. Los sólidos se filtraron de nuevo y el proceso se repitió dos veces más para producir el Intermedio I-9 como un polvo de color blanco. (1 g, 72 %).

Preparación del Intermedio I-10:

(2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metoxi)metil)-4-fluorotetrahidrofurano-3-il-(2 - cianoetil) diisopropilfosforamidita (5 g, 5,71 mmol) se destiló azeotrópicamente con 5 ml de acetonitrilo seco. A continuación añadieron 0,2 g de tamices moleculares de 4Á y acetonitrilo (15 ml). A esta mezcla se le añadió prop-2-en-1-ol (0,663 g, 11,42 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. A la mezcla de reacción se le añadió 1H-tetrazol (0,800 g, 11,42 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min más. A continuación, se añadió a la reacción 2-hidroperoxi-2-((2-hidroperoxibutan-2-il)peroxi)butano (2,400 g, 11,42 mmol) y se continuó agitando durante 30 min. A continuación, la reacción se filtró a través de celite y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en DCM (15 ml) y se añadió gota a gota ácido 2,2-dicloroacético (4,42 g, 34,2 mmol). Después de agitar durante 30 min, la mezcla de reacción se trató con NaHCOaacuoso saturado y luego se extrajo con DCM (30 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴y después se concentraron a continuación al vacío. El residuo se purificó sobre gel de sílice (0-10 % de MeOH/DCM) para dar el Intermedio I-10 (2,86 g, 5,23 mmol, 92 % de rendimiento) m/z 547,2 (M+H).

Ejemplo 1

H(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-ammo-9H-purm-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-3,12-dioxo-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida

Preparación del Ejemplo 1A:

Una mezcla del Intermedio I-10 (177 mg, 0,324 mmol), Se concentró a sequedad 1H-tetrazol (50 mg, 0,71 mmol) en ACN seco (5 ml) (se repitió dos veces). El Intermedio I-4 (300 mg, 0,324 mmol) se disolvió en ACN (5 ml) y se concentró a sequedad (repetir dos veces). A continuación se agregaron tamices moleculares de 4Á (0.5 g) y acetonitrilo (6 ml) al Intermedio I-4, y esta solución se añadió luego al Intermedio I-10 en ACN seco (2 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos y luego se añadió 2-hidroperoxi-2-((2-hidroperoxibutan-2-il)peroxi)butano (272 mg). La reacción se dejó en agitación durante 30 min. A continuación, la reacción se filtró a través de celite y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (5 ml) y a continuación se añadió gota a gota ácido 2,2-dicloroacético (0,321 ml, 3,89 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos y luego se neutralizó con NaHCO³acuoso saturado. La mezcla resultante se extrajo con DCM (30 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto, Ejemplo 1A, se usó directamente en la siguiente etapa. m/z 1085,6 (M+H).

Preparación del Ejemplo 1B:

A una solución del Ejemplo 1A (0,326 g, 0,3 mmol) en bruto en acetona (10 ml) se añadió yoduro de sodio (0,225 g, 1,500 mmol). La mezcla se agitó a 50 °C durante 2 horas. A continuación la mezcla se concentró a sequedad y el residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con 0-40 % de MeOH en DCM para dar el Ejemplo 1B (100 mg, 32 % de rendimiento, tres etapas). LCMS (ES, m/z): 1045,5 [M+H].

Preparación del Ejemplo 1C:

A una solución de 1-(mesitilsulfonil)-3-nitro-1H-1,2,4-triazol (142 mg, 0,478 mmol) en piridina (5 ml) se añadió gota a gota una solución de Ejemplo 1B (100 mg, 0,096 mmol) en piridina (2 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se purificó a continuación por cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc en hexano para dar el producto, Ejemplo 1C (70 mg, 71 % de rendimiento). LCMS (ES, m/z): 1027,5 [M+H]+

Preparación de Ejemplo 1:

Ejemplo 1

Ejemplo 1C (70 mg, 0,086 mmol) se disolvió en amoníaco 7 N/MeOH (3 ml) y luego se calentó a 50 °C durante 3 h. A continuación, la mezcla se concentró a sequedad en una corriente de nitrógeno. El sólido resultante se suspendió en trihidrofluoruro de trietilamina (1 ml) y se calentó a 37 °C durante 3 h. A la reacción se añadió una solución de acetato amónico 2 M (2 ml) y se continuó agitando durante 20 min. A continuación, la mezcla se filtró y se purificó mediante cromatografía HPLC preparativa (Condiciones: Columna: Xselect RP Prep C18 OBD, Columna, 5μm, 19 X150mm, Caudal: 20,0 ml/min, Fase móvil: A: NH⁴OAc 100 mM (pH 4,7); B: Acetonitrilo) para proporcionar el Ejemplo 1 (13 mg, 23% de rendimiento). m/z: 688,1 (M+H). RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d⁴) 88,36 (d, J = 8,29 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,93 (d, J=7,32 Hz, 1H), 7,41 (t, J = 7,85 Hz, 1H), 6,65 (d, J=8,39 Hz, 1H), 6,37 (d, J=14,50 Hz, 1H), 5,82 (d, J=3,80 Hz, 1H), 5,58-5,71 (m, 1H), 5,08-5,29 (m, 1H), 4,69 (d, J=4,29 Hz, 1H), 4,37-4,49 (m, 1H), 4,25-4,36 (m, 2H), 4,11 (dd, J= 1,80, 11,85 Hz, 1H), 3,49-3,72 (m, 2H).

Los Ejemplos 2 y 3, como se muestra en la Tabla 2 a continuación, se prepararon de acuerdo con procedimientos análogos a los descritos en Ejemplo 1 anterior, usando los monómeros de nucleósidos apropiados descritos como Intermedios o como se obtiene de fuentes comerciales.

Tabla 2

Ejemplos 4-1 y 4-2

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-dihidroxi-3,12-dioxo-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida

Preparación del Ejemplo 4A:

Una mezcla de Intermedio I-10, (177 mg, 0,324 mmol) y 1H-tetrazol (50 mg, 0,71 mmol) se disolvió en acetonitrilo seco (5 ml) y se concentró a sequedad (repetir dos veces). El material resultante se disolvió a continuación en acetonitrilo (6 ml). El Intermedio I-4 (300 mg, 0,324 mmol) se disolvió en acetonitrilo (5 ml) y se concentró a sequedad (repetir dos veces). El Intermedio I-4 se trató a continuación con tamices moleculares de 4Á (0,5 g) y se añadió acetonitrilo (6 ml). Esta mezcla se añadió a continuación a la solución de Intermedio I-10 y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. A continuación se añadió (E)-N,N-dimetil-N'-(3-tioxo-3H-1,2,4-ditiazol-5-il)formimidamida (266 mg) a la mezcla de reacción. La reacción se agitó durante 30 minutos más. A continuación, la reacción se filtró a través de celite y se concentró hasta sequedad. El residuo se disolvió en DCM (5 ml) y se añadió gota a gota ácido 2,2-dicloroacético (0,321 ml, 3,89 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 30 min. A continuación, la mezcla se neutralizó con solución acuosa saturada de NaHCO³y se extrajo con DCM (30 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴y se concentraron. El producto en bruto, El Ejemplo 4A (mezcla de dos diastereómeros) se usó directamente en la siguiente etapa. m/z: 1101,6 (M+H).

Preparación del Ejemplo 4B:

El Ejemplo 4B (mezcla de dos diastereómeros) se preparó siguiendo el procedimiento para la preparación del Ejemplo 1B. (95 mg, 30 % de rendimiento, tres etapas). LCMS (ES, m/z): 1061,1 [M+H]+

Preparación del Ejemplo 4C:

A una solución de 1-(mesitilsulfonil)-3-nitro-1H-1,2,4-triazol (142 mg, 0,478 mmol) en piridina (5 ml) se añadió gota a gota una solución de Ejemplo 4B (100 mg, 0,096 mmol) en piridina (2 ml). La mezcla se agitó durante una noche. A continuación la mezcla se concentró a sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con 0-100% de EtOAc en hexano para dar el producto, Ejemplo 4C (mezcla de dos diastereómeros), 60 mg (rendimiento del 64 %). LCMS (ES, m/z): 1043,5 [M+H]+

Preparación del Ejemplo 4-1 y 4-2:

Diastereoisómero 2 (4- 2)

Los Ejemplos 4-1 y 4-2 fueron preparados siguiendo los procedimientos descritos para la preparación del Ejemplo 1.

Se separaron dos diastereoisómeros (Condiciones: Columna: Columna Xselect CSH C18, 3,5 |jm, 3,0 X150mm, Caudal: 0,3 ml/min, Fase móvil: A: NH⁴OAc 100 mM (pH 4,7); B: Acetonitrilo) para producir los Ejemplos 4-1 y 4-2. Ejemplo 4-1: (3 mg, 3 % de rendimiento), LCMS (ES, m/z): 704,1 [M+H]+. RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 8 8,42-8,58 (m, 2H), 8,16-8,29 (m, 1H), 8,01 (d, J=7,21 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,69 Hz, 1H), 6,68 (d, J=8,47 Hz, 1H), 6,38 (d, J=15,47 Hz, 1H), 5,78 (d, J=7,52 Hz, 1H), 5,67 (m, 1H), 5,55-5,63 (m, 2H), 4,67 (d, 1H), 4,34-4,54 (m, 2H), 4,08-4,25 (m, 1H), 3,35 (m, 2H).

Ejemplo 4-2: (30 mg, 30 % de rendimiento), LCMS (ES, m/z): 704,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d⁴) 8 8,39 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,91 (d, J=7,22 Hz, 1H), 7,37 (dd, J= 7,41, 8,29 Hz, 1H), 6,64 (d, J=8,59 Hz, 1H), 6,35 (d, J=16,49 Hz, 1H), 5,81 (s, 1H), 5,64-5,71 (m, 2H), 5,03-5,26 (m, 1H), 4,90-4,95 (m, 1H), 4,35-4,51 (m, 2H), 4,04-4,20 (m, 1H), 3,49-3,69 (m, 2H).

Los siguientes ejemplos, mostrados en la Tabla 3 a continuación, se prepararon de acuerdo con procedimientos análogos a los descritos en el Ejemplo 4 usando los monómeros de nucleósidos apropiados descritos como Intermedios o como se obtiene de fuentes comerciales.

Tabla 3

Ejemplo 7-1, 7-2, 7-3 y 7-4

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-ammo-9H-purm-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-17-(4-mtro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-3,12-disulfaml-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

Diastereoisómero 1 (7-1)

Diastereoisómero 2 (7- 2)

Diastereoisómero 3 (7- 3)

Diastereoisómero 4 (7- 4)

Preparación del Ejemplo 7A:

Intermedio I-2, (411 mg, 0,45 mmol) se disolvió en acetonitrilo (4 ml) y a continuación se concentró hasta sequedad (repetir dos veces). Al aceite resultante se le añadió una tercera porción de acetonitrilo (4 ml) y la solución se concentró a un volumen de ~2 ml. A esta mezcla se añadieron tamices moleculares de 4Á (55 mg). Esta solución se dejó reposar, se tapó, mientras se preparaba la otra solución. El Intermedio I-9 (256 mg, 0,450 mmol) se disolvió en piridina seca (2 ml). Esta suspensión se concentró al vacío (20 mbar, baño de agua a 32 °C). A continuación se añadió 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (130 mg, 0,675 mmol). Se añadió piridina (2 ml) y la mezcla se concentró hasta sequedad (repetir dos veces). Se añadió acetonitrilo (8 ml) al residuo resultante para formar una suspensión espesa. A continuación se añadió la solución que contiene Intermedio I-2. La suspensión sólida se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. A continuación, la reacción se trató con (E)-N,N-dimetil-N'-(3-tioxo-3H-1,2,4-ditiazol-5-il)formimidamida (102 mg, 0,495 mmol). Se agitó la solución durante 15 minutos más. La solución amarilla se concentró cuidadosamente al vacío (120 mbar, baño de agua a 36 °C). El aceite espeso resultante se transfirió a un embudo de decantación que contenía bicarbonato de sodio acuoso al 6 % (m/v) (0,6 g disueltos en 10 ml de agua, 50 ml/g), usándose diclorometano para enjuagar el vial de reacción para una transferencia cuantitativa. El producto se extrajo de la fase acuosa con dos porciones de acetato de etilo (10 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío (120 mbar, baño de agua a 35 °C), a continuación se secó a alto vacío para eliminar la piridina residual.

Al producto en bruto anterior se le añadió diclorometano (10 ml) y después se añadió gota a gota trietilsilano (719 μl, 4,50 mmol) y finalmente ácido 2,2-dicloroacético (116 mg, 0,900 mmol). A la reacción se añadió metanol (5 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos y después se concentró al vacío (300 mbar, y a continuación 50 mbar, baño de agua a 35 °C) para dar un aceite viscoso. A continuación, el aceite se trituró con éter etílico. El sólido resultante se recogió y se lavó con éter dietílico (2x). A continuación el sólido se disolvió en DCM (10 ml). Tras la adición de 20 ml de éter dietílico, precipitó un sólido de color blanco. El sólido de color blanco se recogió y se lavó con éter (2X) para proporcionar el Ejemplo 7A como una mezcla de dos diastereómeros. (224 mg, 50 %) m/z: 979,6 (M+H).

Preparación del Ejemplo 7B:

El Ejemplo 7A (224 mg, 0,229 mmol) se disolvió en piridina (3 ml) y después se concentró hasta sequedad (repetir dos veces). El residuo resultante se disolvió en piridina seca (2 ml). A continuación, la solución se añadió gota a gota a un matraz que contenía 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (127 mg, 0,686 mmol) en piridina seca (40 ml) a 0 °C. Después de completar la adición, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. Se añadió (E)-N,N-dimetil-N'-(3-tioxo-3H-1,2,4-ditiazol-5-il)formimidamida (51,7 mg, 0,252 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió agua (0,050 ml) y se continuó agitando durante 30 minutos más. A continuación, la mezcla se concentró (50 mbar, baño de agua a 35 °C). El residuo se repartió entre NaHCO³acuoso saturado (10 ml) y EtOAc (15 ml). La capa orgánica se recogió y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (15 ml x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴, concentrado y purificado por cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con 0-15 % de MeOH/DCM (con 0,5 % de Et³N) para dar el Ejemplo 7B (100 mg, 0,101 mmol, 44,0 % de rendimiento) que contiene los cuatro diastereoisómeros. m/z: 993,5 (M+H).

Preparación de los Ejemplos 7-1, 7-2, 7-3 y 7-4:

Se disolvió el Ejemplo 7B (100 mg, 0,101 mmol) en NH³7 N/MeOH (5 ml) y se calentó a 50 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró en una corriente de nitrógeno hasta sequedad. A continuación el residuo se disolvió en Et³N 3HF (1 ml) y se agitó a 37 °C durante 3 h. A continuación la mezcla se trató con acetato de amoníaco 2 M (3 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. A continuación la solución se filtró y el filtrado se purificó mediante cromatografía HPLC preparativa (Condiciones: Columna: Xselect RP Prep C18 OBD, Columna, 5μm, 19 X150mm, Caudal: 20,0 ml/min, Fase móvil: A: NH⁴OAc 100 mM (pH 4,7); B: Acetonitrilo (%A=100-0 %B) 0-2 min, 0-8 %B; 2-17min, ⁸%-17 %B; 17-18 min, 14 %-95 %B; 18-20 min, 95 %b ) para proporcionar cuatro diastereoisómeros.

Ejemplo 7-1: m/z: 722,4 (M+H). RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,37-8,29 (s, 1H), 8,27-8,18 (s, 1H), 8,12 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,72 (d, J=8,7 Hz, 1H), 6,34 (dd, J= 14,5, 1,5 Hz, 1H), 5,82-5,71 (d, 1H), 5,52-5,45 (m, 1H), 5,27-5,08 (m, 1H), 4,79-4,70 (m, 1H), 4,64 (d, J=4,3 Hz, 1H), 4,60-4,52 (m, 1H), 4,52-4,38 (m, 2H), 4,14 - 4,04 (m, 2H).

Ejemplo 7-2: m/z: 722,4 (M+H). RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,73 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,89 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,69 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,27 (d, J=15,1 Hz, 1H), 5,82-5,60 (m, 1H), 5,50-5,35 (m, 1H), 5,19-5,01 (m, 1H), 4,94 (d, J=4,0 Hz, 1H), 4,70-4,59 (m, 1H), 4,57-4,43 (m, 2H), 4,42-4,35 (m, 2H), 4,17 -4,00 (m, 1H).

Ejemplo 7-3: m/z: 722,4 (M+H). RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,11-7,91 (m, 1H), 7,32 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,30 (d, J=14,8 Hz, 1H), 6,12-5,91 (m, 1H), 5,61-5,47 (m, 1H), 5,24-5,05 (m, 1H), 4,63 (d a, J = 3,8 Hz, 1H), 4,54-4,36 (m, 4H), 4,25-4,14 (m, 1H), 4,08 (d a, J = 11,7 Hz, 1H).

Ejemplo 7-4: m/z: 722,4 (M+H). RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,96 (s a, 1H), 7,85 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,69 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,23 (d, J=14,9 Hz, 1H), 6,17-5,99 (m, 1H), 5,46-5,32 (m, 1H), 5,08-4,92 (m, 2H), 4,55-4,31 (m, 5H), 4,19 (d a, J = 11,4 Hz, 1H).

Los siguientes Ejemplos, mostrados en la Tabla 4 a continuación, se prepararon de acuerdo con procedimientos análogos a los descritos en el Ejemplo 7 usando los monómeros de nucleósido apropiados descritos como preparaciones u obtenidos de fuentes comerciales.

Tabla 4

(continuación)

(continuación)

Intermedio I-11:

Preparación del Intermedio I-11a:

A una suspensión de 4-nitro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol (0,897 g, 5,47 mmol) en CH³CN anhidro (30 ml) a TA se añadió gota a gota (E)-N-(trimetilsilil)acetimidato de trimetilsililo (2,67 ml, 10,94 mmol) y después la mezcla se agitó a 70 °C durante 2 h. La reacción se enfrió a TA y se añadió una solución de ((2R,3R,4S)-5-acetoxi-4-(benzoiloxi)-3 fluorotetrahidrofuran-2-il)metilbenzoato (1,1 g, 2,73 mmol) en CH³CN (5 ml) seguido de la adición gota a gota de cloruro de estaño (IV) (1,283 ml, 10,94 mmol). La reacción homogénea se agitó a 70 °C durante 2 h. La reacción se enfrió a TA y se concentró. El residuo se disolvió en EtOAc (50 ml) y se neutralizó vertiéndolo en NaHCO³acuoso saturado (100 ml). Se separó la capa orgánica y se extrajo la capa acuosa con EtOAc (4 x 25 ml). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice ISCO (80 g, 0-100 % de EtOAc en hexano) para dar el Intermedio I-11a (937 mg, 67,7 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 507. RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) ⁸8,28-8,18 (m, 1H), 8,14-8,01 (m, 3H), 7,92-7,84 (m, 2H), 7,70-7,53 (m, 3H), 7,51-7,36 (m, 4H), 6,75 (dd, J= 4,6, 1,1 Hz, 1H), 6,54 (dt, J = 11,3, 4,6 Hz, 1H), 6,03-5,81 (m, 1H), 5,05-4,89 (m, 1H), 4,81 (dd, J= 12,5, 3,5 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 12,6, 3,4 Hz, 1H).

Preparación del Intermedio 11b:

A una solución de Intermedio I-11a (1,18 g, 2,330 mmol) en MeOH (3 ml) se añadió amoníaco (7 M en MeOH, 2,52 ml, 116 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C. Después de 16 h, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró en EtzO y el sólido se filtró, se lavó con Et²O y se secó para dar Intermedio I-11b (607 mg, 2,035 mmol, 87 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 299,4.

Preparación del Intermedio 11c:

A una solución de Intermedio I-11b (607 mg, 2,035 mmol) en piridina (20 ml) a 0 °C, se añadió 4,4'-(cloro(fenil)metileno)bis(metoxibenceno) (897 mg, 2,65 mmol) y se agitó a TA durante 1 h. Se añadió EtOH (20 ml), la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 min y después el disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con NaHCO³acuoso saturado y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. El residuo se cromatografió en gel de sílice (80 g, ^{0 - 10 0}% de EtOAc en hexano y después se lavó con 10 % de MeOH en DCM) para dar el Intermedio I-11c (1,05 g, ^{8 6}% de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 601,5.

Preparación del Intermedio I-11:

El Intermedio I-11c (1 g, 1,665 mmol) se disolvió en diclorometano anhidro (8,32 ml) y se añadió en una porción 1H-imidazol-4,5-dicarbonitrilo (0,197 g, 1,665 mmol) en diclorometano anhidro (8,32 ml) seguido de la adición gota a gota de 3-((bis(diisopropilamino)fosfanil)oxi)propanonitrilo (1,06 ml, 3,33 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante la noche en atmósfera de nitrógeno. La reacción se inactivó con metanol (3 ml), se diluyó con DCM (100 ml) y se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio (100 ml). La capa orgánica se separó, se secó (Na²SO⁴) y se evaporó al vacío para dar el material en bruto como un aceite viscoso. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ISCO (pretratado con Et³N al 5 % en DCM durante 10 minutos, EtOAc al 100 % durante 10 minutos y después se lavó con hexano al 100% durante 15 minutos), eluyendo con un gradiente de 0-100% de EtOAc/hexanos para dar el Intermedio I-11 (935 mg, 70,1 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 801,4: dos picos, tiempos de retención 1,39 min y 1,44 min: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2,1 x 50 mm), 1,7 micrómetros; Disolvente A = 95 % de agua / acetonitrilo al 5 % con acetato de amonio; Disolvente B = 95 % de acetonitrilo / agua al 5 % con acetato de amonio; Gradiente = B al 5-95 % durante 1 minuto, a continuación, una parada durante 0,5 minutos de B al 100 %; Caudal: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Ejemplo 12

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-disulfaml-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatnciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

El Ejemplo 11-1 (7 mg, 9,7 pmol) se disolvió en MeOH (5 ml) y después se hidrogenó con Pd-C (20,6 mg, 0,019 mmol) en atmósfera de hidrógeno durante 7 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se concentró a 2 ml y se purificó mediante LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Agilent Bonus RP, 200 mm x 21,2 mm, partículas de 5 μm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 20 mM; Gradiente: una parada de 6 minutos de B al 0 %, 0-60 % de B durante 20 minutos, a continuación, una parada durante 4 minutos de B al 100%; Caudal: 20 ml/min; Temperatura de la columna: 25 °C. La recogida de fracciones se activó por señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para producir el Ejemplo 12 (4,6 mg, rendimiento del 66,6%). LC/MS, m/z 694,1 (M+1). RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) 88,25 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,31 (d a, J = 8,2 Hz, 1H), 7,13-6,94 (m, 2H), 6,33 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 6,24 (dd, J= 15,0, 3,2 Hz, 1H), 5,83-5,68 (m, 1H), 5,66-5,53 (m, 1H), 5,51-5,34 (m, 1H), 5,32-5,22 (m, 1H), 4,62-4,48 (m, 2H), 4,43 (t a, J = 11,1 Hz, 1H), 4,30-4,17 (m, 1H), 3,80 (d a, J = 11,6 Hz, 2H), 3,76-3,48 (m, 2H), 3,76 - 3,43 (m, 3H).

Ejemplo 13

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona

El Ejemplo 13 se preparó a partir del Ejemplo 11-2 siguiendo el procedimiento descrito para el Ejemplo 12. El material en bruto se purificó a través de LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Agilent Bonus RP, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 20 mM; Gradiente: una parada de 6 minutos de B al 0 %, 0-60 % de B durante 20 minutos, a continuación, una parada durante 4 minutos de B al 100%; Caudal: 20 ml/min; Temperatura de la columna: 25 °C. La recogida de fracciones se activó por señales de MS. Las fracciones que contienen el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para producir el Ejemplo 13 (2,0 mg). LC/MS, m/z 694,2 (M+1). RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) 88,35-8,20 (m, 1H), 8,19-7,98 (m, 1H), 7,61 7,14 (m, 2H), 7,09-6,86 (m, 1H), 6,44-6,14 (m, 2H), 5,90-5,64 (m, 2H), 5,63-5,35 (m, 1H), 5,29-5,14 (m, 1H), 4,65-4,48 (m, 1H), 4,45-4,27 (m, 2H), 4,22-4,02 (m, 1H), 3,96 - 3,64 (m, 2H).

Ejemplo 14 (no de acuerdo con la invención)

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-difluoro-8-{3H-imidazo[2,1-f]purin-3-il}-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-3,12-disulfaml-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatnciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

El Ejemplo 11-2 (10 mg, 0,013 mmol) se disolvió en tampón NaOAc/HOAc (4 ml, pH = 4,5), se añadió 2-cloroacetaldehído (50 % en agua, (0,52 ml, 4,02 mmol) y se agitó la mezcla a TA durante la noche. El material en bruto se purificó a través de LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Agilent Bonus RP, 200 mm x 21,2 mm, partículas de 5 μm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 20 mM; Gradiente: una parada de 6 minutos de B al 0 %, 0-60 % de B durante 20 minutos, a continuación, una parada durante 4 minutos de B al 100 %; Caudal: 20 ml/min; Temperatura de la columna: 25 °C. La recogida de fracciones se activó por señales de MS. Las fracciones que contienen el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para producir el Ejemplo 14 (4,9 mg). LC/MS, m/z 748,2 (M+1). Tiempo de retención: 0,78 min, lC/MS (BEH C182,1X 50mm, 1,7u, 0 a 100 B en 1 min con tiempo de parada de 0,5 min, Caudal = 1 ml/min, detección a 254 nm, Disolvente A: agua al 100 % / TFA al 0,1 %; Disolvente B: 100% ACN/0,1 % TFA).

Los Ejemplos 15-1,15-2,16-1 y 16-2 (no de acuerdo con la invención) que se muestran en la siguiente tabla, fueron preparados a partir del Ejemplo 7-2, 7-4, 6-1 y 6-2, respectivamente, de acuerdo con procedimientos análogos a los descritos en el Ejemplo 14.

continuación

Ejemplo 17

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-3,12-dioxo-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatnciclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxNato de metilo

El Ejemplo 1C (70 mg, 0,086 mmol) se disolvió en amoníaco (7 N en MeOH, 3 ml) y se calentó a 50 °C durante 3 h. La mezcla se concentró a sequedad en una corriente de nitrógeno. El sólido resultante se suspendió en trihidrofluoruro de trietilamina (1 ml) y se calentó a 37 °C durante 3 h. A la reacción se añadió una solución de acetato de amoníaco 2 M (2 ml) y la mezcla se agitó durante 20 min. A continuación, la mezcla de reacción se filtró y se purificó mediante cromatografía HPLC preparativa (Condiciones: Columna: Xselect RP Prep C18 OBD, Columna, 5μm, 19 X150mm, Caudal: 20,0 ml/min, Fase móvil: A: NH⁴OAc 100 mM (pH 4,7); B: Acetonitrilo) para proporcionar el Ejemplo 17 (1,5 mg, 2 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 703,2.

Ejemplo 18

(1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,18-trihidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-12-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona

Etapa 1

Resina PL-FMP (2-(4-formil-3-metoxifenoxi)etilo poliestireno, 85 g, carga de 1,00 mmol/g, ~85 mmol, malla 100-200, Novabiochem) se hinchó con ~600 ml de DMF (N,N-dimetilformamida) a temperatura ambiente y después se drenó el exceso de disolvente. Después de añadirse 400 ml adicionales de DMF, se añadieron al recipiente de reacción fenilmetanamina (21,43 g, 200 mmol) y ácido acético (18 ml, 9,43 mmol) (3 % x 600 ml = 18,5 ml). Después de 10 min de agitación, se añadió triacetoxiborohidruro sódico (33,9 g, 160 mmol). La reacción se dejó en agitación durante la noche. A continuación se lavó la resina con la siguiente secuencia de lavado: DMF(1x), luego con THF/H²O/AcOH (6:3:1), DMF, DCM (3x/cada uno), tres veces con Et³N al 5 % en DCM, y finalmente con MeOH antes de secar al vacío a temperatura ambiente durante la noche para producir resina 18A (Carga: 0,87 mmol/g).

A una solución de ácido 6-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)hexanoico (14,40 g, 40,8 mmol) y HATU (15,49 g, 40,8 mmol) en DMF (60 ml) se añadió resina prehinchada 18A (Carga: 0,87 mmol/g, 23,3 g de resina) y después DIEA (11,39 ml, 65,2 mmol). La mezcla se agitó durante 10 h. El lote de resina se lavó con la siguiente secuencia de lavado: DMF, DCM, DMF, MeOH, DCM, DMF (2x cada uno). A continuación la resina se trató con piperidina al 20 % en DMF (3x, 5 min/cada uno). La resina se lavó con DMF y después con DCM (2x) y se secó para dar la resina 18B. (carga de 0,76 mmol/g).

La resina 18B (16 mmol, 25 g, carga de 0,76 mmol/g) se hinchó con DMF seca (2x) en nitrógeno, se suspendió en DMF seca adicional (100 ml) y se añadieron ácido 2-(3-cloro-4-hidroxifenil)acético (8956 mg, 48,0 mmol) y DIEA (13,97 ml, 80 mmol). La mezcla se agitó durante unos pocos minutos y después se añadió HATU (18,3 g, 48,0 mmol) y se continuó agitando durante 10 h. El lote de resina se lavó con la siguiente secuencia de lavado: DMF, DCM, THF, MeOH y THF. A continuación, la resina se trató con 20/40/40 ml de NaOH 1 N/MeOH/THF durante la noche. A continuación, la resina se lavó con MeOH/agua (2x), THF/agua (2x), THF (2x), DCM (4x), Et²O y después se secó para producir la resina 18C. (Carga: -0,70 mmol/g).

Etapa 2

(2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((fercbutildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil)diisopropilfosforamidita (4,5 g, 4,55 mmol) se coevaporó con acetonitrilo seco varias veces y después se disolvió en DCM (23 ml). En condiciones anhidras, la resina 18C (3,5 mmol, 5 g de resina, carga: 0,7 mmol/g) se hinchó con acetonitrilo seco (2 x 30 ml) en nitrógeno, después se añadió la solución anterior de fosforamidita y 1H-tetrazol (1,23 g, 17,50 mmol) en acetonitrilo seco (30 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, se lavó con DCM seco (3x) en nitrógeno y se añadió DCM anhidro (20 ml). Se añadió peróxido de 2-butanona (4,41 g, 21,00 mmol) y la mezcla se agitó durante 40 min. A continuación, la resina se lavó con DCM (4x) y se secó. La resina se protegió mediante tratamiento con Ac²O/Py (10 ml) 1:1 en DCM (20 ml) que contiene N-Me-imidazol (3 equivalentes) durante 30 min. A continuación, la resina se trató con ácido dicloroacético al 3 % en DCM (3 x 5 min/cada uno) para eliminar el grupo DMTr. La resina se lavó con DCM (3x), MeCN (2x), DCM (2x) y MeCN anhidro (2x). La resina se trató finalmente con EtsN/piridina. La resina de soporte se lavó después con DCM (3x), MeCN (2x), DCM (2x) y MeCN anhidro (2x), y después se secó al vacío para proporcionar la resina 18D.

Etapa 3

El Intermedio I-2 (0,32 g, 0,35 mmol) se coevaporó varias veces con acetonitrilo seco y después se disolvió en DCM seco (25 ml). En condiciones anhidras, la resina 18D (0,175 mmol) se hinchó con acetonitrilo seco (6 ml) dos veces en nitrógeno. A la resina se le añadió una solución de 1H-tetrazol (1,05 mmol) en CH³CN anhidro (3 ml) y después se añadió la solución anterior de Intermedio I-2. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La resina se lavó con DCM seco (3x) en nitrógeno, se suspendió en DCM seco (10 ml) y se añadió DDTT (0,52 mmol). La reacción se agitó a TA durante 40 min. A continuación la resina se lavó con DCM (2x), CH³CN (2x), DCM (3x) y Et²O (2x) y después se secó a vacío. A continuación la resina se trató con una mezcla de Ac²O/DIEA (20 eq.) 1:1 en DCM durante 20 min, después se lavó con DCM (3x) y CH³CN (3x) y después se trató con ácido dicloroacético al 3 % en DCM (3x, cada 10 min) para eliminar el grupo DMTr. La resina se lavó después con DCM, DMF, DCM, CH³CN (3x cada uno) y después se secó al vacío. A continuación la resina se trató con una solución 0,1 M de MSNT (2 x 4 h, 1 x 12 h). La resina se lavó después con DCM, piridina, DCM, CH³CN (2x cada uno) y después se trató con TENPy (1:1) (3x durante 1 h). Por último, la resina se lavó con DCM, DMF, DCM, ACN (3x cada uno) y después se secó. A continuación, la resina se trató con NH⁴OH (33 %)/MeOH (relación 1:1, 8 ml) a 55 °C durante 10 h. Se eliminó el disolvente y se trató el residuo con trihidrofluoruro de trietilamina (0,35 ml, 2,15 mmol) a 37 °C durante 3 h. La mezcla se inactivó con acetato de amonio (1,0 M, 2 ml) y a continuación la mezcla se agitó vigorosamente a 35 °C durante 30 min. Después de enfriar a ta, la solución se filtró y el filtrado se purificó mediante LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Agilent Bonus RP 21,2 x 100 mm, partículas de 5 μm; Fase móvil A: agua con acetato de amonio 20 mM; Fase móvil B: acetonitrilo; Gradiente: 0 % B espera de 0-6 minutos. 0 %-40 % de B durante 20 minutos, a continuación, una parada durante 4 minutos de B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para producir el Ejemplo 18. LCMS, [M+H]- = 705.

Los siguientes Ejemplos, mostrados en la Tabla siguiente, se prepararon de acuerdo con procedimientos análogos a los descritos en el Ejemplo 18 usando los monómeros de nucleósido apropiados descritos como preparaciones u obtenidos de fuentes comerciales.

Intermedio I-12:

(2R,3R,4R,5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((tercbutildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il-(2-cianoetil)diisopropilfosforamidita (Ark Pharm Inc, 2 g, 1,822 mmol), prop-2-en-1 -ol (0,127 g, 2,186 mmol) y tamices moleculares de 4 A (300 mg) en acetonitrilo (5 ml) en atmósfera de nitrógeno se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se añadió 1H-tetrazol (0,259 g, 3,64 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 30 min más. Se añadió 2-hidroperoxi-2-metilpropano (~6 M en dedecano, 0,397 ml, 2,186 mmol) y la reacción se agitó durante 30 min. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró. El residuo se disolvió en DCM (20 ml), se enfrió a 0 °C y se añadió gota a gota ácido 2,2-dicloroacético (2,85 ml, 34,6 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 30 min. La mezcla de reacción se vertió en NaHCO³acuoso saturado y se extrajo con DCM (3 x 30 ml). La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. El residuo se purificó sobre 24 g de sílice, 0-80 % de EtOAc/hexanos durante 10 min, a continuación se enjuagó con 1-10 % de MeOH/DCM durante 10 min, con una espera con 10 % de MeOH durante 10 min para producir el Intermedio I-12. LCMS, [M+H]+ = 659

Ejemplo 21

(1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

Preparación del Ejemplo 21A:

El Ejemplo 21A se preparó de acuerdo con procedimientos análogos a los descritos en el Ejemplo 1C usando los monómeros de nucleósidos apropiados Intermedio I-12 e Intermedio I-2. LCMS, [M+H]+ = 1126.

Preparación del Ejemplo 21B:

El Ejemplo 21A se disolvió en MeOH (2 ml) e hidróxido de amonio al 27 % (2 ml). La mezcla se calentó a 50 °C durante 5 h. La mezcla se secó en una corriente suave de nitrógeno para producir el Ejemplo 21B. LCMS, [M+H]+ = 916

Ejemplo 21

El Ejemplo 21B (50 mg, 0,055 mmol) se suspendió en MeOH (15 ml), 0,4 equiv. de Pd/C al 10 % y la mezcla se agitó en atmósfera de hidrógeno durante 2 h. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró. El material en bruto se suspendió en 0,4 ml de NEt3.3HF y se agitó a 37 °C durante la noche. Se añadió a la mezcla tampón de acetato de amonio 2 M (1,5 ml) y el material en bruto se purificó (columna Agilent Zorbax Bonus-RP con gradiente de fase móvil de acetato de amonio no tamponado 20 mM más acetonitrilo) para producir los Ejemplos 21. LCMS, [M+H]- = 655.9; Tiempo de retención; 0,17 min, Waters Acquity UPLC BEH C18 (2,1 x 50 mm), 1,7 micrómetros; Disolvente A = 95 % de agua / acetonitrilo al 5 % con acetato de amonio; Disolvente B = 95 % de acetonitrilo / agua al 5 % con acetato de amonio; Gradiente = B al 5-95 % durante 1 minuto, a continuación, una parada durante 0,5 minutos de B al 100 %; Caudal: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm).

Intermedio I-13:

Preparación del Intermedio I-13a

A una suspensión de peryodinano de Dess-Martin (3,04 g, 7,16 mmol) en DCM seco (60 ml) se añadió tBuOH (0,79 ml, 8,27 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 10 min. A continuación se añadió lentamente una solución de Intermedio I-4a (4 g, 5,51 mmol) en DCM seco (40 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, después se diluyó con EtOAc (200 ml) y se inactivó con Na²S²O³acuoso 1 M (40 ml). A continuación, la mezcla de reacción se lavó con salmuera (30 ml) y NaHCO³(30 ml). La capa orgánica se secó con Na²SO⁴y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre 80 g de gel de sílice, eluyendo con 0-100% de EtOAc en hexanos (con 0,5% de Et³N) en un gradiente de 40 min. Las fracciones que contenían el producto deseado se concentraron para proporcionar el Intermedio I-13a (3,6 g, 90 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 724.

Preparación del Intermedio I-13b

Una suspensión de bromuro de metiltrifenilfosfonio (4,29 g, 12 mmol) y amida de sodio (0,71 g, 18,28 mmol) en tolueno (60 ml) se calentó a reflujo durante 2,5 h. A continuación, la mezcla de reacción se enfrió a TA y se dejó en reposo durante 1,5 h. El sobrenadante dorado claro se utilizó tal cual (~0,2 M). A una solución del Intermedio I-l3a (400 mg, 0,553 mmol) en THF (8 ml) se añadió el reactivo de Wittig anterior (7 ml, 1,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre 24 g de gel de sílice eluyendo con 0-100 % de EtOAc/Hexano durante un gradiente de 25 min para producir el Intermedio I-13b (120 mg, 30,1 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 722. RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 88,19 (dd, J= 0,83, 8,34 Hz, 1H), 8,07 (dd, J= 0,83, 7,39 Hz, 1H), 7,45 (d, J=7,27 Hz, 2H), 7,18 7,36 (m, 8H), 7,12 (dd, J= 7,33, 8,29 Hz, 1H), 6,76-6,86 (m, 4H), 6,24 (d, J=6,68 Hz, 1H), 5,57-5,63 (m, 1H), 5,47 (t, J = 2,21 Hz, 1H), 5,24 (t, J = 2,15 Hz, 1H), 4,90-4,94 (m, 1H), 4,10-4,15 (m, 3H), 3,77-3,81 (m, 6H), 3,35-3,46 (m, 2H), 0,79-0,87 (m, 9H), -0,09--0,04 (m, 3H), -0,46--0,40 (m, 3H).

Preparación del Intermedio I-13:

A una solución del Intermedio I-13b (875 mg, 1,212 mmol) en THF (20 ml) se le añadió TBAF (0,727 ml, 0,727 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h y después se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre 24 g de gel de sílice y se eluyó con 0-100 % de EtOAc/hexanos. Las fracciones que contenían el producto deseado se concentraron para proporcionar el Intermedio I-13 (538 mg, 73,0 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 608.

Intermedio I-14:

Preparación del Intermedio I-14a

A una solución enfriada (0 °C) de N-(9-((2R,3R,4R,5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-3-fluoro-4-hidroxitetrahidrofuran-2-il)-9H-purin-6-il)benzamida (Astatech, 500 mg, 0,740 mmol) e imidazol (151 mg, 2,220 mmol) en DMF (3,7 ml) se añadió ferc-butildifenilclorosilano (285 μl, 1,11 mmol) gota a gota con una jeringa. A continuación, se retiró el baño de agua helada y la reacción se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno. Después de 22 horas, se añadió una segunda porción de imidazol (50,4 mg, 0,740 mmol) y ferc-butildifenilclorosilano (95 μl, 0,370 mmol). Después de 3 horas adicionales, se añadió una tercera porción de imidazol (50,4 mg, 0,740 mmol) y ferc-butildifenilclorosilano (95 μl, 0,370 mmol) a la reacción y la mezcla se agitó durante 24 horas. A continuación la reacción se inactivó con metanol (748 μl, 18,50 mmol), se agitó a temperatura ambiente durante 30 min y después se concentró al vacío. Los volátiles restantes se retiraron en una corriente de nitrógeno. El residuo se repartió entre EtOAc (20 ml) y agua (20 ml) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (1 x 20 ml) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (4 x 10 ml), salmuera (10 ml) y se secaron (Na²SO⁴), se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto Intermedio I-14a se llevó a la siguiente etapa sin más purificación. LCM^s, [M+H]+ = 914.

Preparación del Intermedio I-14b

A una solución de Intermedio I-14a (676 mg, 0,740 mmol) y trietilsilano (295 μl, 1,85 mmol) en CH₂Cl2 (3,7 ml) se añadió ácido trifluoroacético (114 μl, 1,480 mmol) gota a gota con una jeringa, produciendo un color rojizo. La reacción se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. Después de 1,5 horas, la reacción se inactivó con MeOH (4 ml) y se agitó durante 10 min. A continuación, la mezcla se concentró al vacío y se destiló azeotrópicamente dos veces con MeOH (2 x 4 ml). El producto en bruto se disolvió en una pequeña cantidad de CH₂Cl2, se adsorbió en un tapón de SiO², y se purificó por cromatografía ultrarrápida (SiO², columna de 40 g, 0-50 % acetona/hexanos, gradiente de 14,4 min y a continuación una parada de 14,4 min, 40 ml/min) para producir el Intermedio I-14b (384 mg, 85% de rendimiento) como un sólido de color blanco. LCMS, [M+H]+ = 612. RMN de 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 58,71 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,05-7,99 (m, 2H), 7,74-7,66 (m, 4H), 7,65-7,59 (m, 1H), 7,56-7,51 (m, 2H), 7,50-7,37 (m, 6H), 6,27 (dd, J= 11,3, 6,8 Hz, 1H), 5,62 (ddd, J = 51,8; 6,7; 4,8 Hz, 1H), 4,70-4,62 (m, 1H), 4,13 (s a, 1H), 3,68 (d, J=13,1 Hz, 1H), 3,10 (dd, J= 13,1, 1,6 Hz, 1H), 1,17 (s, 9H).

Preparación del Intermedio I-14:

El Intermedio I-14b (1,0 g, 1,635 mmol) y (2S,3aS,6R,7aS)-3a-metil-2-((perfluorofenil)tio)-6-(prop-1-en-2-il)hexahidrobenzo[d][1,3,2]oxatiofosfol2-sulfuro (documento ^uS^sN 62/657551 presentado el 13 de abril de 2018, 1,1 g, 2,45 mmol) en MeCN (15 ml) se enfrió hasta una temperatura interna de 0 °C. Se añadió DBU (0,4 ml, 2,45 mmol) en una porción y la mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min. A la mezcla de reacción se le añadió ácido acético (281 μl, 4,90 mmol) a 0 °C y a continuación se añadió gel de sílice y la mezcla se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice ISCO (80 g, 0-10 % de gradiente de MeOH/DCM). Las fracciones que contenían el producto deseado se concentraron hasta obtener una espuma blanca que se coevaporó con heptano (3 x 50 ml) para obtener el Intermedio I-14 (1,22 g, 87 % de rendimiento) como un sólido de color blanco. LCMS, [M+H]+ = 858,8: RMN de 1H (499 MHz, CLOROFORMO-d) 58,95 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,99-8,04 (m, 2H), 7,69 7,74 (m, 4H), 7,61-7,66 (m, 1H), 7,38-7,57 (m, 9H), 7,28 (s, 2H), 6,32 (d, J=2,03 Hz, 1H), 6,28-6,38 (m, 1H), 4,95 (dd, J= 2,09, 4,23 Hz, 1H), 4,85 (dd, J= 2,15, 4,29 Hz, 1H), 4,81-4,98 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 2H), 4,58-4,61 (m, 1H), 4,43 (s a, 1H), 4,25-4,37 (m, 2H), 4,15 (ddd, J = 4,23; 9,33; 11,59 Hz, 1H), 2,51 (s a, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 1,99-2,06 (m, 5H), 1,81-1,91 (m, 3H), 1,65-1,75 (m, 5H), 1,23-1,32 (m, 1H), 1,16 (s, 9H).

Ejemplos 22-1 y 22-2

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricid o[13.2.1.06'l0]octadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida

Preparación del Intermedio 22A:

A una solución de Intermedio I-13 (300 mg, 0,494 mmol) e Intermedio I-14 (635 mg, 0,741 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se añadió gota a gota DBU (223 μl, 1,481 mmol) para dar una solución de color amarillo pálido. Después de 10 min, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (4 ml) y se inactivó con ácido acético (141 μl, 2,47 mmol). La mezcla resultante se coevaporó con gel de sílice y después se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre 40 g de gel de sílice, eluyendo con 0-15 % de MeOH/DCM para producir el Intermedio 22A (650 mg) como un sólido de color blanco. LCMS, [M+H]+ = 1298.

Preparación del Intermedio 22B:

Al Intermedio 22A (641 mg, 0,494 mmol) se añadió trihidrofluoruro de trietilamina (2 ml, 12,28 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 37 °C durante 2 h, se diluyó con acetonitrilo (3,4 ml) y se inactivó con Et³N (2,56 ml, 18,4 mmol) e isopropoxitrimetilsilano (4881 mg, 36,9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 min y después se concentró al vacío. El producto en bruto se disolvió en una pequeña cantidad de MeOH, se adsorbió en un tapón de Celite y se purificó en una columna ISCO Gold 50 g C18 de fase inversa (Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 0,01M; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 0,01M; Gradiente: 0 % B parada durante 5 min, gradiente de 0-40 % B durante 20 min y parada del 100 % durante 5 min, funcionamiento a 30 ml/min) para producir el Intermedio 22B (254,7 mg, 68,1 % de rendimiento) como un sólido de color blanco después de la liofilización. LCMS, [M+H]+ = 757,7: RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,63 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,11-8,20 (m, 3H), 7,76 (d, J=7,03 Hz, 1H), 7,69 (t, J = 7,33 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,57 Hz, 2H), 7,42 (t, J = 7,87 Hz, 1H), 6,64 (d, J=3,10 Hz, 1H), 6,42 (d a, J = 11,32 Hz, 1H), 6,17 (dd, J= 1,25, 15,32 Hz, 1H), 5,86 (s a, 1H), 5,42 (s, 1H), 5,05-5,19 (m, 1H), 4,50-4,60 (m, 1H), 4,12-4,28 (m, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,60-3,67 (m, 1H), 3,43 (dd, J = 6,32, 11,92 Hz, 1H).

Preparación del Intermedio 22C:

A una solución a temperatura ambiente de Intermedio 22B (200 mg, 0,264 mmol) en piridina (26 ml) se añadió gota a gota una solución de fosfonato de difenilo (102 μl, 0,529 mmol) en DCM (1 ml) durante 20 minutos. A esta mezcla de reacción se le añadió (E)-N,N-dimetil-N'-(3-tioxo-3H-1,2,4-ditiazol-5-il)formimidamida (163 mg, 0,793 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 11 h. A continuación la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se disolvió en metanol y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó en una columna ISCO Gold 50 g C18 de fase inversa (Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 0,01M; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 0,01M; Gradiente: 0-30 % de gradiente de B durante 15 min) para producir el Intermedio 22C (161 mg, 73,0 % de rendimiento) como diastereómero 1 (87 mg) y diastereómero 2 (74 mg).

Ejemplos 22-1 y 22-2:

Diastereoisómeros 1 (22-1)

Diastereoisómeros 2 (22- 2)

Por separado, el Intermedio 22C, diastereómero 1 (87 mg, 0,104 mmol) y el Intermedio 22C, diastereómero 2 (74 mg) se trataron con amoníaco (5 ml, 35,0 mmol) y cada mezcla de reacción se agitó durante 5 ha 55 °C. Cada mezcla de reacción se concentró y los productos en bruto se purificaron mediante condiciones cromatográficas de HPLC preparativa: Instrumento: Waters Autopure; Columna: columna Xselect RP Prep C18 OBD, 5μm, 19 X150 mm; Caudal: 20,0 ml/min; Fase móvil: A: NH4OAc 100 mM (pH:6,5); B: ACN (% A =100 -% B): gradiente 3-22 % de B durante 5 min, 22-95 % de B durante 0,5 min, parada 95 % de B durante 2 min y 95-3 % de B durante 1 min para producir los Ejemplos 22-1 y 22-2, respectivamente.

Ejemplos 22-1, (12,3 mg, 15,74 % de rendimiento); tR 8,18 min, Condiciones cromatográficas de la HPLC analítica 1; Masa observada: 716,4; RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,55 (d, J = 8,82 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,86-7,95 (m, 1H), 7,31 (t, J = 7,87 Hz, 1H), 6,35-6,39 (m, 2H), 6,11-6,27 (m, 1H), 5,71 (d, J=2,38 Hz, 1H), 5,49-5,62 (m, 1H), 5,41 (dd, J= 1,31, 2,74 Hz, 1H), 4,93-4,99 (m, 1H), 4,72-4,79 (m, 1H), 4,42-4,49 (m, 1H), 4,31 4,40 (m, 2H), 4,13-4,20 (m, 1H), 3,96-4,03 (m, 1H), 3,43-3,50 (m, 0.5H), 3,16-3,23 (m, 0.5H).

Ejemplos 22-2, ((11 mg, 14,08 % de rendimiento)); tR 7,83 min, Condiciones cromatográficas de la HPLC analítica 1; Masa observada: 716,4; RMN de 1H (499 MHz, METANOL-d⁴) 88,77 (d A, J=8,23 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,81 (d a, J = 7,03 Hz, 1H), 7,18-7,26 (m, 1H), 6,28-6,34 (m, 2H), 6,08-6,15 (m, 1H), 5,88-6,06 (m, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,39 (d, J=1,43 Hz, 1H), 4,98-5,00 (m, 1H), 4,48-4,58 (m, 1H), 4,23-4,40 (m, 3H), 3,91-4,00 (m, 1H), 3,44 3,49 (m, 0.5H), 3,16-3,21 (m, 0.5H).

Condiciones cromatográficas de la HPLC analítica 1;

Instrumento: Agilent 1290; Columna: Columna Xselect CSH C18, 3,5 μm, 2,1 X150 mm;

Caudal: 0,35ml/min; Fase móvil: A: NH4OAc 20 mM (pH 6,5); B: NH4OAc 20 mM en CAN; gradiente 0-50 % de B durante 15 min, 50-100 % de B durante 1 min

EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD BIOLÓGICA

Protocolo de ensayo del indicador de STING THP1

Las células THP1-Dual™ se derivaron de la línea celular de monocitos THP-1 humanos mediante la integración estable de dos construcciones indicadoras inducibles. Para este fin, las células THP1-Dual™ permiten el estudio simultáneo de la ruta de NF-^kB, mediante el control de la actividad de SEAP y la ruta de IRF mediante el cálculo de la actividad de una luciferasa secretada (Lucia). Ambas proteínas indicadoras son fácilmente medibles en el sobrenadante de cultivo celular cuando se utiliza QUANTI-Blue™, un reactivo de detección de SEAP y QUANTI-Luc™, un reactivo de detección de luciferasa.

Las células de THP1-Dual™ inducen la activación de NF-^kB en respuesta a los agonistas de STING. También desencadenan la ruta de IRF tras la estimulación con los agonistas de STING, tales como cGAMP. En este punto, las células THP-1-Dual se utilizaron para evaluar los aglutinantes de STING para la función en el nivel celular.

Se añadieron diluciones en serie de compuestos en DMSO a placas de 384 pocillos de bajo volumen a 100nl/pocillo, utilizando un dispensador acústico ECHO (Labcyte, modelo 550) para lograr una concentración de partida final de 100 μM en suspensión celular. Se añadieron células indicadoras STING THP-1 Dual™ (Invivogen, Dual cells n.° de cat.

THPD-nfis) a las placas con compuestos a 15.000 células en 10 |jl por pocilio en medios de RPMI (Gibco, n.° de cat.

11875) que contienen plasma humano al 10 % en una placa de cultivo tisular de fondo transparente de paredes negras de 384 pocillos de bajo volumen (Corning, n.° de cat. 3542) para ensayo de SEAP y una placa blanca sólida de bajo volumen (Corning, n.° de cat. # 3826) para el ensayo de luciferasa. Una columna de la placa se reservó para el tratamiento con cGAMP a 100 jM para el cálculo de activación al 100 % y una columna para la activación basal sin tratamiento (solo DMSO). Las placas se incubaron en un incubador a 37 °C en CO²al 5 % durante 20 horas.

En el ensayo de SEAP, se añaden 5 j l de 2x QuantiBlue (Invivogen, n.° de cat. Rep-qb2) a placas negras de 384 pocillos sembradas con células THP1 e incubadas a 37 °C durante 2 horas. Las placas se leyeron en el Envision (Perkin Elmer) a una longitud de onda de 620 nm (DO620). En el ensayo de luciferasa, se añaden 5 j l de Quantiluc (Invivogen, Rep-qlc2) a las placas de 384 pocillos blancas sembradas con células THP1 y se leyeron a los 5 minutos en el Envision (Perkin Elmer) utilizando un protocolo de luminiscencia (RLU). Para ambas líneas celulares, la activación al 100% se determinó mediante el valor (RLU) de células STING THP-1 Dual estimuladas con cGAMP 100 jM (Invivogen, n. de cat. TLRL-NACGA23-5).

ENSAYOS DE UNIÓN STING HTRF

Se utilizó un ensayo de unión de competición basado en FRET resuelto en el tiempo para evaluar la unión del artículo de ensayo a STING WT y STING AQ. Se incubó el dominio citoplasmático de STING marcado con His (WT o AQ) a una concentración de 20 nM con anticuerpo anti-His marcado con Tb 2,5 nM, compuesto de ensayo y la sonda análoga de cGAMP marcada con fluoresceína (BioLog n.° de cat. C195) a una concentración de 200 nM (^sT ⁱNG WT) o 40 nM (STING AQ) en PBS que contenía Tween-20 al 0,005 % y BSA al 0,1 % durante una hora. La fluorescencia se midió a 495 nm y 520 nm utilizando un lector de microplacas EnVision para cuantificar la FRET entre el anticuerpo anti-His marcado con Tb y la sonda marcada con fluoresceína. El fondo se definió como la señal obtenida en ausencia de la proteína STING y las relaciones de FRET menos el fondo se normalizaron respecto a la señal máxima obtenida en ausencia del compuesto de ensayo. Estos valores se convirtieron en una inhibición en porcentaje. La inhibición en porcentaje se determinó para los compuestos de ensayo a ¹¹concentraciones. La CI⁵⁰, definida como la concentración del compuesto de ensayo de competición necesaria para reducir la unión específica de la sonda en un 50 %, se calculó utilizando la ecuación logística de 4 parámetros para ajustar los datos

STING WT: His-TVMV-S-hSTING(155-341)-H232R

STING AQ: His-TVMV-S-hSTING(155-341)-G230A-R293Q

continuación

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula

en la que

cada X es independientemente O o S;

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

R¹es

y R²es

Z1 es N o CRa;

Ra es H, halógeno, alquilo C^1-6sustituido con 0-6 R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-6 R5, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)²Ra1, -NRa1S(O)²NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1; Rb es H, alquilo C^1.6sustituido con ^{0 - 6}R5, cicloalquilo C^3-6sustituido con ^{0 - 6}R5, -C(O)Ra1, -C(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

Ra1 es H o alquilo C^1-3;

R3 y R4 son independientemente H, CH³, halógeno, NH²u OH;

R5 es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

R5a es H o alquilo C^1-3;

R6 es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

R₈es H, halógeno, alquilo C^1.3, CN, NO², OH, ORa1, SRa1, -C(O)NRa1Ra1, -COORa1, -OC(O)Ra1, -OC(O)NRa1Ra1, -NRa1Ra1, -NRa1 C(O)Ra1, -NRa1COORa1, -NRa1C(O)NRa1Ra1, -NRa1S(O)₂Ra1, -NRa1S(O)₂NRa1Ra1, -S(O)Ra1, -S(O)NRa1Ra1, -S(O)²Ra1 o S(O)²NRa1Ra1;

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

en la que

X es S;

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

en la que

X es O;

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

o una sal, un ta u tó m e ro o un e s te re o isó m e ro de l m ism o fa rm a c é u tic a m e n te acep tab les . 6. El co m p u e s to de a cu e rd o con la re iv ind ica c ión 1 de la fó rm u la

en la que

cada X es independientemente O o S;

X1, X2, X³y X⁴son cada uno O;

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

7. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

en la que

X es S;

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

⁸. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

en la que

X es O;

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

9. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

o una sal, un ta u tó m e ro o un e s te re o isó m e ro de l m ism o fa rm a c é u tic a m e n te acep tab les .

10. El co m p u e s to de acu e rd o con la re iv ind ica c ión 1 de la fó rm u la

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

11. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula

o una sal, un tautómero o un estereoisómero del mismo farmacéuticamente aceptables.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre los siguientes

o una sal o un e s te re o isó m e ro fa rm a cé u tica m e n te ace p ta b le s de l m ism o.

13. Un co m p u e s to de acu e rd o con la re iv ind ica c ión 12 s e le cc io n a d o en tre

1-[(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12S,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12S,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanN-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,l2A5-difosfatnddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12 seleccionado entre

1-[(1S,3S,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[l3.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida

1-[(1S,3R,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12 -dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[l3.2.1.0610]o ^d adecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida,

1-[(1S,3S,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12 -dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[l3.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida,

1-[(1S,3R,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12 -dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxa ^iTi ida.

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12 seleccionado entre

(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazoM-N]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12lA5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona

(1R,3S,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazoM-N]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona,

(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazoM-N]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona,

(1R,3R,6R,8R,9R,10R,12R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfanil-17-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazoM-N]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12lA5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3.12- diona.

16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

H(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-N)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-3,12-dioxo-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxaiTiida, (1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotnazoM-N)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona, 1 -[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-dihidroxi-3,12-dioxo-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxaiTiida, 1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-dihidroxi-3,12-dioxo-3-sulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxaiTiida, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-17-(4-nitro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol)-9-fluoro-18-hidroxi-3-sulfamM2-hidroxi-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatnddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-17-(4-carboxamida-1H-benzo[d][1,2,3]triazol)-9,18-difluoro-3-sulfamM2-hidroxi-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-N)-3,12-disulfanN-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona,

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxaiTiida, (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-N)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-disulfamM7-[4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-benzotriazoM-N]-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3.12- diona,

1-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxaiTiida, o

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-3.12- disulfanN-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3,12-disulfanN-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona (1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9,18-difluoro-3.12- disulfanN-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-3,12-diona (13);

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-3,12-dioxo-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3A5,12A5-difosfatriddo[13.2.1.0610]odadecan-17-N]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxNato de metilo

1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-12-sulfaniliden-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[13.2.1.0610]octadecan-3-ona (18) (1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-3,12,18-trihidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-12-sulfaniliden-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[13.2.1.0610]octadecan-3-ona (1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18-tetrahidroxi-17-(4-nitro-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-12-sulfaniliden-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatricido[13.2.1.0610]octadecan-3-ona (1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-17-(4-amino-1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,9,12,18 tetrahidroxi-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatridclo[13.2.1.0610]octadecan-3,12-diona

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15S,17R)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-metiliden-3,12-dioxo-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3A5,12A5-difosfatridclo[13.2.1.0610]octadecan-17-il]-1H-1,2,3-benzotriazol-4-carboxamida o una sal o un estereoisómero de los mismos farmacéuticamente aceptables.

17. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

18. Un producto farmacéutico de combinación que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto con uno o más de otros agentes terapéuticamente activos.

19. Uno o más compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del (los) mismo(s) para usar en el tratamiento del cáncer.

20. El uno o más compuestos o sal farmacéuticamente aceptable del (los) mismo(s) para usar de acuerdo con la reivindicación 19 en donde el cáncer es cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer colorrectal, melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de cabeza y cuello, linfoma de Hodgkin, cáncer de vejiga, carcinoma esofágico, carcinoma gástrico, carcinoma de ovario, carcinoma de cuello uterino, carcinoma pancreático, carcinoma de próstata, cánceres de mama, carcinoma urinario, glioblastoma, linfoma no de Hodgkin, leucemia linfática aguda (LLA), leucemia linfática crónica (LLC), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia mieloide crónica (LMC), carcinoma hepatocelular, mieloma múltiple, tumores estromales gastrointestinales, mesotelioma y otros tumores sólidos u otros cánceres hematológicos.

21. El uno o más compuestos o sal farmacéuticamente aceptable del (los) mismo(s) para usar de acuerdo con la reivindicación 20 en donde el cáncer es cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer colorrectal, melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de cabeza y cuello, linfoma de Hodgkin o cáncer de vejiga.

22. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más agentes inmuno-oncológicos para usar en el tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesite.

23. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un agente anticanceroso que es un anticuerpo o una porción de unión a antígeno del mismo que se une específicamente a un receptor de muerte programada-1 (PD-1) e inhibe la actividad de PD-1 para usar en el tratamiento de un sujeto afectado de cáncer.

24. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo y el agente anticanceroso para usar de acuerdo con la reivindicación 23, en donde el anticuerpo anti-PD-1 es nivolumab o pembrolizumab.

25. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo y el agente anticanceroso para usar de acuerdo con la reivindicación 24, en donde el anticuerpo anti-PD-1 es nivolumab.