UA122395C2 - Антитіло проти tigit - Google Patents

Антитіло проти tigit Download PDF

Info

Publication number
UA122395C2
UA122395C2 UAA201702456A UAA201702456A UA122395C2 UA 122395 C2 UA122395 C2 UA 122395C2 UA A201702456 A UAA201702456 A UA A201702456A UA A201702456 A UAA201702456 A UA A201702456A UA 122395 C2 UA122395 C2 UA 122395C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
variable region
amino acid
antibody
acid sequence
antigen
Prior art date
Application number
UAA201702456A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Сибіл М. Ґ. Вільямс
Сибил М. Г. Вильямс
Дрейк ЛАФЕЙС
Лоренс ФАЯДАТ-ДИЛМАН
Ґопалан Раґхунатхан
Гопалан Рагхунатхан
Лінда Лян
Линда ЛЯН
Вольфґанґ Сеґеці
Вольфганг Сегеци
Original Assignee
Мерк Шарп Енд Доум Корп.
Мерк Шарп энд Доум Корп.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=53938463&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA122395(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Мерк Шарп Енд Доум Корп., Мерк Шарп энд Доум Корп. filed Critical Мерк Шарп Енд Доум Корп.
Publication of UA122395C2 publication Critical patent/UA122395C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39541—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against normal tissues, cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/74—Inducing cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

Винахід стосується антитіла проти TIGIT, а також застосування такого антитіла у лікуванні захворювань, таких як злоякісна пухлина й інфекційне захворювання.

Description

СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
Дана заявка містить список послідовностей, прийнятий в електронній формі у форматі
АЗСІЇ, ії його повний зміст, таким чином, приведений як посилання. Вказана копія у форматі
АБСЇІЇ, створена 27 липня 2015 р., названа 23808-О0О5-РСТ БІ ХІ і її розмір складає 136039 байтів.
ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ, ДО ЯКОЇ НАЛЕЖИТЬ ВИНАХІД
Даний винахід стосується антитіл проти ТІСІТ, а також застосування цих антитіл у лікуванні захворювань, таких як злоякісна пухлина й інфекційне захворювання.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ ДЛЯ ВИНАХОДУ
Ключовий фактор для забезпечення імунотерапії пухлин виник у результаті відкриттів, що інгібувальні імуномодулюючі рецептори (ІМЕ), які звичайно функціонують як імунні контрольні точки для підтримки аутотолерантності, є центральними для здатності мікрооточення пухлин ухилятися від імунітету. Блокування інгібувальних МЕ, очевидно, викликає сильні пухлиноспецифічні імунні відповіді більш ефективно, ніж пряма стимуляція протипухлинного імунітету за допомогою активувальних цитокінів або протипухлинних вакцин, і цей спосіб має потенціал для трансформації терапії злоякісних пухлин людини. Важливе значення і можливість у даний час виникає для потенціалу розробки нових антитіл-антагоністів для інших ІМЕ і для комбінації антитіл-антагоністів проти більше ніж одного ІМК для збільшення частки відповідаючих в онкологічних клінічних дослідженнях, а також для розширення онкологічних показань, при яких імунотерапія пухлин є ефективною.
Важливо, що інгібувальні ІМК і ліганди, які регулюють клітинний імунітет, звичайно надекспресовані на клітинах пухлин і пухлиноасоційованих макрофагах (ТАМ). Варто уваги, що надекспресія РО-Ї1 у пухлинах асоційована з виснаженням пухлиноспецифічних Т-клітин і несприятливим прогнозом. Блокування лігування РО-1/РО-Ї1 у клінічних дослідженнях приводило до відповідей тривалої регресії пухлин у значної частки пацієнтів. У нещодавньому повідомленні показано, що спільна експресія РО-1 і іншого інгібувального ІМК (ТІМ-3) в пухлиноспецифічних СО8- Т-клітинах, отриманих від пацієнтів з меланомою, була асоційованою з фенотипами більш дисфункціонального виснаження Т-клітин у порівнянні з клітинами, які експресують будь-який з ІМК окремо. Більше того, у декількох повідомленнях з використанням доклінічних моделей пухлин показано, що блокування множини ІМК, включаючи РО-1, ТІМ-3,
І АО-3 і СТІ А-4, більш ефективно індукувало протипухлинні відповіді, ніж антагонізм одного РО- 1. Ці результати підкреслюють важливість подальшого дослідження шляхів ІМЕ.
ТІСІТ (Т-клітинний імунорецептор з доменами Ід і ІТІМ) являє собою імуномодулюючий рецептор, який експресується переважно на активованих Т-клітинах і клітинах МК. ТІСІТ відомий також як У5ІсСе9; МЗТМ3; і МИШСАМ. У його структурі показаний один позаклітинний імуноглобуліновий домен, трансмембранна область типу 1 і два мотиви ІТІМ. ТІСІТ формує частину костимулювальної мережі, що складається з позитивних (СО226) і негативних (ТІСІТ) імуномодулюючих рецепторів на Т-клітинах, і лігандів, які експресуються на АРС (СО155 і
СО112).
Важливою ознакою структури ТІСІТ є присутність імунорецепторного зв'язувального тирозин інгібувального мотиву (ІТІМ) у його цитоплазматичному хвостовому домені. Як і для РО-1 і
СТІ А-4, передбачено, що домен ІТІМ у цитоплазматичній області ТІСІТ призначений для залучення тирозинфосфатаз, таких як ЗНР-1 і БНР-2, і наступного дефосфорилування залишків тирозину за допомогою основаних на тирозині мотивів активації імунорецептора (ІТАМ) на субодиницях Т-клітинного рецептора (ТСК). Таким чином, лігування ТІСІТ за допомогою рецептора-лігандів СО155 і СО112, які експресуються клітинами пухлин, або ТАМ5, може вносити вклад у супресію передачі сигналів ТС і активації Т-клітин, що є необхідним для розвитку ефективного протипухлинного імунітету. Таким чином, антитіло-антагоніст, специфічне для ТІСІТ, може інгібувати індуковану СО155 і СО112 супресію відповідей Т-клітин і підсилювати протипухлинний імунітет. Метою даного винаходу є одержання антитіла проти ТІСІТ, яке можна використовувати для лікування злоякісних пухлин, або окремо, або в комбінації з іншими реагентами.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Винахід стосується антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів, які містять структурні і функціональні ознаки, вказані нижче.
В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83, 59, 90, 140, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166 або 167. В одному варіанті бо здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1їх1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування
ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6, 62, 74, 75, 76, 77, 78 або 93. В одному варіанті здійснення антитіло, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕБЕО ІО МО: 2; і (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 140. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (ії)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 2; і (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зХЕО ІЮ МО: 3, 79, 80, 81, 82 або 83. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга,
Зо що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 2; і (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 3. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: (ї) СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 58; і (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 59. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад,
КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію
Т-клітин; (м) стимулює продукцію ІЇ/-2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами ср1551і 20112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: (ї) СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 147; і (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: бо 153. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134 або 135; і (ї) СОМКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 90, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166 або 167. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІО МО: 90. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОВ2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; ії (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 154. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 155. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 156. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної
Зо області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 157. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 158. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 159. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 160. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 161. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 162. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність бо з 5ЕО ІЮ МО: 163. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 164. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «БЕ ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 165. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 166. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 88; (і) СОВ2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 134; і (її) СОРЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 167. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з
ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х10-2 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТї людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію І/Ї/-2 ії ІРМу антигенспецифічними Т- клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: () СОМК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 4; (ії) СОК2 варіабельної області
Зо легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 141; ї (ії) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 142. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 4; (її) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІО МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 або; і (ії) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, утримуючу амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 6, 74, 75, 76, 77 або 78. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 4; (її) СОВ2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 5; і (ії) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІЮО МО: 6. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад,
КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію
Т-клітин; (м) стимулює продукцію ІЇ-2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами ср1551і 20112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: () СОМК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 60; (ії) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 61; і (її) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 62.
В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ії) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням
КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує бо зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м)
стимулює продукцію 1І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІП зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: (|) СОМК1 варіабельної області легкого
Б ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЗЕО ІО МО: 91; (ії) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 148; і (ії) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ 10 МО: 91; (і) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗБО ІО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 або 122; і (і) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 93.
В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ 15 МО: 91; (і) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 92; і (ії) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕ ІО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до 20 приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- 25 клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язуються з ТІСІТ людини, що містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕБО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ
Зо варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 140; (м) СОК!1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮО МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легсого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 142. 35 В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ
МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 3, 79, 80, 81, 82 або 83; (м) СОМК1 варіабельної області легкого 40 ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕС ІО МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 або 73; і (м) СОМЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 6, 74, 75, 76, 77 або 78. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (| СОМ1 варіабельної області 45 важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕБЕО ІЮО МО: 1; (її) СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІЮ МО: 3; (м) СОКІ! варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить 50 амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 6. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить варіабельну область важкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з БЕО ІЮ МО: 9-24, 37-47, 143 і 144; і варіабельну 55 область легкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з 5ЕО ІЮ МО: 25-30, 48-52, 146 і 147.
В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням
КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або бо ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІП зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 2; (її) СОВЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 3, 79, 80, 81, 82 або 83; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72 або 73; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 6, 74, 75, 76, 77 або 78; де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 90 95, 95595, 9695, 97 95, 9895 або 9995 ідентичність з варіабельною областю важкого ланцюга, вибраної з групи, яка складається з ЗЕО
ІО МО: 9-24 або 37-47, і варіабельну область легкого ланцюга, що має щонайменше 90 95, 95 95, 96 9, 97 У», 98 95 або 99 95 ідентичність з варіабельною областю важкого ланцюга, вибраною з групи, яка складається з ЗЕО ІЮ МО: 25-30 або 48-52. У цьому вказаному вище варіанті здійснення, варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІї людини, що містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 2; (їі) СОМКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга,
Зо що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зБЕО ІЮ МО: 6. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або З амінокислотні заміни в СОК важкого ланцюга (ЗЕО ІЮ МО: 1-3) або в СОМ легкого ланцюга (5ЕО І МО: 3-6). В одному варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК важкого ланцюга з БЕО
ІО МО: 3, де заміна виконана в положенні 13МУ, і де залишок 13УУ замінений на: Е, М, І, М або І.
В одному варіанті здійснення антитіло містить двох амінокислотних замін у СОК легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 5, де заміни виконані в положенні 3-4, і де залишки ЗМ і 45 замінені на:
ЗМ, 55, ЗІ, ТТ, ЗМ, МО, 5, 50 і 05. В одному варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК легкого ланцюга з БЕО ІО МО: 6, де заміна виконана в положенні 7, і де залишок 7М/ замінений на: Е, М, І. М або І. Послідовності МН з 5ЕО ІЮО МО: 9-24 і 37-47 мають СОК з 5ЕО ІЮО МО:1-3; і послідовності МІ з БЕО ІЮ МО:25-30 і 48-52 мають СОК з 5БЕО І
МО: 4-6. У деяких варіантах здійснення заміни в СОК, описані вище, можна виконувати у відповідних СОК з послідовностей МН з 5БЕО ІЮ МО: 9-24 і 37-37, і в СОК з послідовностей МІ. з
ЗЕО ІЮ МО: 25-30 і 48-52. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад,
КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: (ї) СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 59; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОВ2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або З амінокислотні заміни в СОК важкого ланцюга (5ЕО ІЮ МО: 57-59) або в СОК легкого ланцюга (5ЕО ІЮ МО: 60-62), і зберігає одну або бо декілька з його функціональних характеристик. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент необов'язково має щонайменше одну з наступних функціональних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ), (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування
ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІЇ людини, що містить: () СОК!1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 153; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «БЕ ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134 або 135; (ії)
СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 90, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166 або 167; (м) СОМК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО
ІО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 або 122; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО:
Зо 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК!1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 154; (ім) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 155; (мм) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, 60 що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 156; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 157; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 158; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному
Зо варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 159; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (ї) СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 160; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (ї) СОК!1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 161; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 60 ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 162; (ім) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 163; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО 10 МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 164; (мм) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 165; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга,
Зо що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність 3 «ЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 166; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 167; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ), (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІП зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується бо з ТІСІЇ людини і містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 89; (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО: 90; (м) СОМ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЕС ІО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК2 важкого ланцюга з 5ЕБО ІО МО: 89, де заміна виконана в положенні 7, і де залишок О замінений на: Р, І, К, Е, 5, М або М. В іншому варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК2 важкого ланцюга з БЕО ІЮ МО: 89, де заміна виконана в положенні 8, і де залишок С замінений на: К, М, О, Е, Ї. К, 5, У або У. В іншому варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК2 важкого ланцюга з БЗЕО
ІО МО: 89, де заміна виконана в положенні 12, де М замінений на: А або 5. В іншому варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК2 важкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 89, де заміна виконана в положенні 13, де Е замінений на 0. В іншому варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК2 важкого ланцюга з БЕО ІЮ МО: 89, де заміна виконана в положенні 16, де К замінений на 0). В іншому варіанті здійснення антитіло містить три амінокислотних заміни в СОК2 важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 89, де амінокислотний залишок 12 замінений на: А або 5, амінокислотний залишок 13 замінений на СО, і амінокислотний залишок 16 замінений на 0). В одному варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОКЗ важкого ланцюга з БЕО ІЮО МО: 90, де амінокислотний залишок 6 замінений на: А,
Р,Е, Р, Б,1І,К, М, 0, КЕ, 5, Т М або У. В іншому варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК легкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 92, де заміна виконана в положенні 1, ї де залишок М замінений на А, У, МУ, 5, Т, ЕК, Н, 0, І або У. В іншому варіанті здійснення антитіло містить одну амінокислотну заміну в СОК легкого ланцюга з БЕО ІЮО МО: 92, де заміна виконана в положенні 2, і де залишок А замінений на М, І, І, Т, М. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є гуманізованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, необов'язково, має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно
Ко) 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ), (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування
ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить СОКІ, СОК2 ії СОМКЗ з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 124-129 і/або варіабельну область легкого ланцюга, що містить СОКІ, СОМК2 ї СОКЗ з будь-якої з БЕО
ІО МО: 130-133. В одному варіанті здійснення винахід стосується також виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІї людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з: БЕО ІЮ МО5: 124-129 і/або варіабельну область легкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з: БЕО ІЮ МО: 130- 133. В одному варіанті здійснення залишок О у положенні 56 з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 124-129 може бути замінений на К, І, К, Е, 5, М або МУ. В іншому варіанті здійснення залишок С у положенні 57 з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 124-129 може бути замінений нак, М, О,Е, І К, 5, М або
М. В одному варіанті здійснення залишок М/ у положенні 104 з будь-якої з БЗЕО ІЮ МО: 124-129 може бути замінений на: А, ОЮО, Е, Е, б, І, К, М, С, К, 5, Т, М або У. В іншому варіанті здійснення залишок М у положенні 50 з будь-якої з ФЕО ІЮ МО: 130-133 може бути замінений на А, У, МУ, 5,
Т, Габо М. В іншому варіанті здійснення залишок А у положенні 51 з будь-якої з ФЕО ІЮ МО: 130- 133 замінений на М, І, Ї, Т або М. В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО:128, або варіабельну область легкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 132. В іншому варіанті здійснення винахід стосується виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з
ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить БЕО ІЮ МО: 128 або варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО І МО: 133. В іншому варіанті здійснення винахід стосується також виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, 60 що містить ЗЕО ІЮ МО: 127, або варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ МО:
130. В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ МО: 128 і варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІО МО: 132. В іншому варіанті здійснення винахід стосується також виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 128 і варіабельну область легкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 133. В іншому варіанті здійснення винахід стосується також виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить ЗЕО
ІЮ МО:127 і варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ МО: 130. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить СОКІ, СОК2 і СОРЗ з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 124-129, де варіабельна область важкого ланцюга має щонайменше 90 95, 95 95, 96 Фо, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичність з будь-якою з ЗЕО ІЮ МО: 124-129 і/або (ії) варіабельну область легкого ланцюга, що містить СОМКІ, СОК2 ії СОКЗ з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 130-133, де варіабельна область легкого ланцюга має щонайменше 90 95, 95 95, 96 95, 97 У, 98 95 або 99 95 ідентичність з будь- якою з ЗЕО ІЮ МО: 130-133. В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІї людини, що містить: (Її) варіабельну область важкого ланцюга, що містить СОКІ, СОК2 і СОКЗ з 5ЕО ІЮО МО: 128, де варіабельна область важкого ланцюга має 90 95, 95 9», 96 95, 97 У, 98 95 або 99 95 ідентичність з
ЗЕО ІЮ МО: 128 і/або (ії) варіабельну область легкого ланцюга, що містить СОКІ, СОК2 і СОКЗ з 5ЕО ІЮО МО: 132, де варіабельна область легкого ланцюга має щонайменше 90 9», 95 9, 96 Об, 97 95, 98 956 або 99 95 ідентичність з 5ЕО ІЮО МО: 132. В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ
Зо людини, що містить: (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить СОКІ!, СОК2 і СОКЗ з
ЗЕО ІЮ МО: 128, де варіабельна область важкого ланцюга має щонайменше 90 95, 95 9, 96 9, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичність з ЗЕО ІЮО МО: 128 і/або (ії) варіабельну область легкого ланцюга, що містить СОМК1, СОК2 і СОКЗ з 5ЕО ІЮО МО: 133, де варіабельна область легкого ланцюга має щонайменше 90 95, 95 95, 96 95, 97 У», 98 95 або 99 95 ідентичність з ЕО ІЮ МО: 133. В іншому варіанті здійснення винахід стосується також антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить СОМКІ, СОМ2 і СОКЗ з 5ЕО ІЮО МО: 127, де варіабельна область важкого ланцюга має щонайменше 90 95, 95 9, 96 9», 97 У, 98 90 або 99 95 ідентичність з 5ЕО ІЮ МО: 127 і/або (ії) варіабельну область легкого ланцюга, що містить СОКІ, СОК?2 і
СОМКЗ з 5ЕО ІЮО МО: 130, де варіабельна область легкого ланцюга має щонайменше 90 95, 95 95, 96 95, 97 95, 9895 або 9995 ідентичність з 5ЕО І МО: 130. У цих варіантах здійснення, припустимі варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях варіабельних ланцюгів.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з
ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х10-2 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОРКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 7 і/або вибрану варіабельну область легкого ланцюга, що містить
БО амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 8, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 143, і/або вибрану варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 145, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ бо людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 144 і/або вибрану варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 146, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 63 і/або вибрану варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 64, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 94 і/або вибрану варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 95, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОРКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В одному варіанті здійснення винахід стосується також виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 149 і/або варіабельну область легкого
Зо ланцюга, що містить БЕО ІО МО:151. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В одному варіанті здійснення винахід стосується також виділеного антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 150 і/або варіабельну область легкого ланцюга, що містить БЕО ІЮ МО: 152. В одному варіанті здійснення антитіло зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з тим же епітопом ТІСІЇ людини, що й антитіло, яке містить варіабельну область важкого ланцюга з 5ЕО ІО МО: 7 і варіабельну область легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮ МО: 8, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109
М, до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ), (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ії) збільшує активацію Т-клітин; (їм) стимулює продукцію І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (м) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112. В одному варіанті здійснення антитіло має щонайменше 80 обо, 85 о, 90 95, 95 Уо, 96 9о, 97 Ус, 98 Уо або 9995 ідентичність послідовності з варіабельною областю важкого ланцюга і/або варіабельною областю легкого ланцюга з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 7-30 або 37-52. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2, 3,4,5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30 амінокислотних замін у варіабельній області важкого ланцюга з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 7, 9-24 і 37-47 і/або у варіабельній області легкого ланцюга з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 8, 25-30 і 48-52.
В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з епітопом ТІСІТ людини, що містить щонайменше одну з наступних 60 областей: залишки 54-57 з БЕО ІЮ МО: 31, залишки 68-70 з БЕО ІЮ МО:31 і залишки 76-81 з ЗЕО
ІЮ МО: 31. В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з епітопом ТІСІї людини, що містить залишки: 54-57, 68-70 і 76-81 з БЕО ІЮ МО:31.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з тим же епітопом ТІСІї людини, що й антитіло, яке містить варіабельну область важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 63 і варіабельну область легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮО МО: 64, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше 80 965, 8596, 9095, 9595, 9695, 97 905, 9895 або 9995 ідентичність послідовності з варіабельною областю важкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 63 і/або варіабельною областю легкого ланцюга з ЗЕО
ІЮО МО: 64. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1,2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26,27, 28, 29 або 30 амінокислотних замін у варіабельній області важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО:63 і/або у варіабельній області легкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 64. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або З амінокислотні заміни в СОК важкого ланцюга (ЗЕО ІЮО МО: 57-59) або в СОК легкого ланцюга (ЗЕО ІЮ МО: 60-62).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з тим же епітопом ТІСІї людини, що й антитіло, яке містить варіабельну область важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 94 і варіабельну область легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮ МО:95, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу
Зо (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1Ї--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше 80 965, 8596, 9095, 9595, 9695, 97 905, 9895 або 9995 ідентичність послідовності з варіабельною областю важкого ланцюга з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО:94 або 124-129, і/або з варіабельною областю легкого ланцюга з будь-якої з БЕО ІЮО МО: 95 або 130-133. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30 амінокислотних замін у варіабельній області важкого ланцюга з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 94 або 124-129, і/або у варіабельній області легсого ланцюга з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 95 або 130-133. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або 3 амінокислотні заміни в СОМ важкого ланцюга (5ЕО ІЮ МО: 88-90) і/або в СОК легкого ланцюга (ЗЕО ІЮ МО: 91-93). В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить СОК важкого ланцюга з ЗЕО ІЮО МО: 88, 134 і 90 і/або СОР. легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮ МО: 91, 92 і 93.
В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з епітопом ТІСІТ людини, що містить щонайменше одну з наступних областей: залишки 53-57, залишки 60-65, залишки 68-70, залишки 72-81, залишки 94-95, і залишки 109-119 з 5ЕО ІЮО МО: 31. В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з епітопом ТІСІТ людини, що містить залишки: 53-57, 60-65, 68-70, 72-81, 94-95 і 109-119 з БЕО ІО МО: 31.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що перехресно блокує зв'язування антитіла (або конкурує з антитілом), що містить варіабельну область важкого ланцюга з БЕО ІЮО МО: 7 і варіабельну область легкого ланцюга з
ЗБЕО ІЮ МО: 8, з ТІСІТї людини, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого 60 плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше 80 оо, 85 о, 90 95, 95 95, 96 У, 97 У, 98 95 або 99 95 ідентичність послідовності з варіабельною областю важкого ланцюга або варіабельними легкими ланцюгами з 5БЕО ІЮ МО: 7-30 або 37-52.
В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2, 3, 4,5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30 амінокислотних замін у варіабельних областях важких ланцюгів з зЗЕО ІЮ МО:7, 9-24 і 37-47 або у варіабельних областях легких ланцюгів з ЗЕО ІЮО МО: 8, 25-30 і 48-52. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або З амінокислотні заміни в СОК важкого ланцюга (5ЕО ІЮО МО: 1-3) або в СОК легкого ланцюга (ЗЕО ІЮО МО: 3-6).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що перехресно блокує зв'язування антитіла (або конкурує з антитілом), що містить варіабельну область важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 63 і варіабельну область легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮО МО: 64, з ТІСІТ людини, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше одну з наступних функціональних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад,
КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію
Т-клітин; (м) стимулює продукцію ІЇ-2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами
СОр155 ії СО112. В одному варіанті здійснення антитіло має щонайменше 80 95, 85 95, 90 Ор, 95 95, 96 9», 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичність послідовності з варіабельною областю важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 63 або з варіабельною областю легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 64. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30
Зо амінокислотних замін у варіабельній області важкого ланцюга з 5ЕО І МО: 63 або у варіабельній області легкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 64. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або З амінокислотні заміни в СОМ важкого ланцюга (ЗЕО ІЮО МО: 57-59) або в СОК легкого ланцюга (ЗЕО ІЮ МО: 60-62).
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що перехресно блокує зв'язування антитіла (або конкурує з антитілом), що містить варіабельну область важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 94 і варіабельну область легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮО МО: 95, з ТІСІТ людини, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент має щонайменше одну з наступних характеристик: (ї) зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно їх109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ).; (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (іїї) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію 1І--2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112. В одному варіанті здійснення антитіло має щонайменше 80 обо, 85 о, 90 95, 95 Уо, 96 9о, 97 Ус, 98 Уо або 99 95 ідентичність послідовності з варіабельною областю важкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 94 або з варіабельними легкими ланцюгами з ЗЕО ІО МО: 95. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30 амінокислотних замін у варіабельній області важкого ланцюга з будь-якої з 5ЗЕО ІЮ МО: 94 або 124-129, або у варіабельній області легсого ланцюга з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 95 або 130-133. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить 1, 2 або 3 амінокислотні заміни в СОМ важкого ланцюга (5ЕО ІЮ МО5: 88-90) або в СОЕК легкого ланцюга (ЗЕО ІО МО: 91-93). В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ МО: 132. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ МО: 127 і варіабельну область легкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ
МО:130. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО: 128 і варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ МО: 133.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить варіабельну область важкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 9-24 і 37-47, або варіабельну область легкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 25-30 і 48- 52. В одному варіанті здійснення антитіло містить амінокислотну заміну в ЕК4 важкого ланцюга, де заміна виконана в положенні 122 з БЕО ІЮО МО: 9-24 і 37-47, де залишок М замінений на: М, І,
А, К, М, Р, О,Е, 0, І, Н, К, Е, 5, Т, МУ або У. В одному варіанті здійснення антитіло містить дві амінокислотні заміни в ЕК4 важкого ланцюга, де заміни виконані в положеннях 122 і 123 з БЕО
ІО МО: 9-24 і 37-47, де залишки М і М замінені на 1 і Ї., відповідно.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить варіабельну область важкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з будь-якої з 5ЕО ІО МО: 9-24 і 37-47, або варіабельну область легкого ланцюга, вибрану з групи, яка складається з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 25-30 і 48- 52. В одному варіанті здійснення антитіло містить амінокислотну заміну в ЕК4 важкого ланцюга, де заміна виконана в положенні 122 з 5ЕО ІЮ МО: 9-24 і 37-47, де залишок М замінений на: М, Ї,
А, К, М, Р, О,Е, 0, І, Н, К, Е, 5, Т, МУ або У. В одному варіанті здійснення антитіло містить дві амінокислотні заміни в ЕК4 важкого ланцюга, де заміни виконані в положеннях 122 і 123 з 5ЕО
ІО МО: 9-24 і 37-47, де залишки М і М замінені на Т ії, відповідно.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного антитіла або антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ТІСІТЇ людини, що містить: важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 7 або її варіант, що містить аж до 30 амінокислотних замін, і/або легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ
МО: 8, що містить аж до 12 амінокислотних замін. В одному варіанті здійснення важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 7, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 6, 9, 12, 15, 16, 17, 23, 25, 37, 39, 40, 43, 44, 45, 48, 67, 68, 70, 71, 79, 81, 83, 87, 88, 92, 94, 119, 122 і 123. В одному варіанті здійснення важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 7, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 6, 9, 12, 15, 16, 17, 23, 25, 37, 39, 40, 43, 44, А5, 48, 67, 68, 70, 71, 79, 81, 83, 87, 88, 92, 94, 110, 119, 122 і 123, де: амінокислота в положенні б може являти собою Е або ОС, амінокислота в положенні 9 може являти собою Р або А, амінокислота в положенні 12 може являти собою У або ГІ, амінокислота в положенні 15 може являти собою 5 або Р, амінокислота в положенні 16 може являти собою О або Е або с, амінокислота в положенні 17 може являти собою 5 або Т, амінокислота в положенні 23 може являти собою 5 або Т, амінокислота в положенні 25 може являти собою Т або 5, амінокислота в положенні 37 може являти собою І або У, амінокислота в положенні 39 може являти собою К або СО, амінокислота в положенні 40 може являти собою Е або Р, амінокислота в положенні 43 може являти собою М або К, амінокислота в положенні 44 може являти собою К або С, амінокислота у положенні 45 може являти собою М або Її, амінокислота в положенні 48 може являти собою М або І, амінокислота в положенні 67 може являти собою І або У, амінокислота в положенні 68 може являти собою 5 або Т, амінокислота в положенні 70 може являти собою Т або 5, амінокислота в положенні 71 може являти собою Р або М, амінокислота в положенні 79 може являти собою Е або 5, амінокислота в положенні 81 може являти собою С або К, амінокислота в положенні 83 може являти собою Н або 5, амінокислота в положенні 87 може являти собою Т або А, амінокислота в положенні 88 може являти собою О або А, амінокислота в положенні 92 може являти собою Т або У, амінокислота в положенні 94 може являти собою 5 або У, амінокислота в положенні 110 може являти собою
У, Е, У, І, М або ГІ, амінокислота в положенні 119 може являти собою Р або СО, амінокислота в
БО положенні 122 може являти собою М, М, Ї, А, БЕ, М, Р, ОО, Е, б, І, Н,К, Е, 5, Т, УУ або У, і амінокислота в положенні 123 може являти собою У, Т або І. В одному варіанті здійснення легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність з «ЕС ІЮ МО: 8, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 10, 21, 22, 40, 42, Аб, 52, 53, 58, 77, 83, 87, 95 і 106. В одному варіанті здійснення легкий ланцюг містить амінокислотна послідовність з БЕО ІЮО МО: 8, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 10, 21, 22, 40, 42, Аб, 52, 53, 58, 77, 83, 87, 95 і 106, де: амінокислота в положенні 10 може являти собою І або 5, амінокислота в положенні 21 може являти собою І або І, амінокислота в положенні 22 може являти собою М або Т, амінокислота в положенні 40 може являти собою І або Р, амінокислота в положенні 42 60 може являти собою Е або К, амінокислота в положенні 46 може являти собою Е або Її,
амінокислота в положенні 52 може являти собою М, 5, Т, Об або 0, амінокислота в положенні 53 може являти собою 5, М, Т, У або СО), амінокислота в положенні 58 може являти собою І або М, амінокислота в положенні 77 може являти собою С або 5, амінокислота в положенні 83 може являти собою У або Е, амінокислота в положенні 87 може являти собою Е або У, амінокислота в положенні 95 може являти собою МУ, Е, У, І, М або І, і амінокислота в положенні 105 може являти собою І. або І.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІї людини, що містить: важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 9 і/або легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 25, де кожен з варіабельних ланцюгів може містити 1, 2,3,4, 5,6, 7 або 8 амінокислотних замін. В одному варіанті здійснення антитіло може містити мутації в положеннях 27, 48, 67, 71, 83, 110, 122 і 123 з БЕО ІО МО: 9. Наприклад, відносно 5ЕО ІЮО МО: 9: амінокислота в положенні 27 може являти собою С або 5; амінокислота в положенні 48 може являти собою | або М; амінокислота в положенні 67 може являти собою У або І; амінокислота в положенні 71 може являти собою М або Е; амінокислота в положенні 83 може являти собою 5 або Н; амінокислота в положенні 110 може являти собою МУ, Е, У, І, М або І: амінокислота в положенні 122 може являти собою М, М, Ї, А, БЕ, М, Р, ОО, Е, б, І, Н,К, Е, 5, Т, М або М; і амінокислота в положенні 123 може являти собою У, Т або І. В іншому варіанті здійснення антитіло може містити мутації в положеннях 46, 52, 53, 58 і 95 з 5ЕО ІЮ МО: 25. Наприклад, відносно ЗЕО ІЮО МО: 25, амінокислота в положенні 46 може являти собою І. або Е; амінокислота в положенні 52 може являти собою М, 5, Т, о або О, амінокислота в положенні 53 може являти собою 5, М, Т, М або СО); амінокислота в положенні 58 може являти собою І або У; амінокислота в положенні 58 може являти собою У або І; і амінокислота в положенні 95 може являти собою М/,
Е, М, І, М або Ї..
В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІї людини, що містить: важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 94 або її варіант, що містить аж до 30 амінокислотних замін, і легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з зХЕО ІЮ МО: 95 або її варіант, що містить аж до 18 амінокислотних замін. В одному варіанті здійснення важкий ланцюг містить
Ко) варіант амінокислотної послідовності з ЗЕО ІЮО МО: 94, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положень, вибраних із групи, яка складається з: 5, 9, 11, 12, 16, 20, 38, 40, 44,56, 57, 61, 62, 65, 67, 68, 72, 74, 76, 79, 85, 87, 89, 91, 92, 104 їі 111. В одному варіанті здійснення важкий ланцюг містить варіант амінокислотної послідовності з БЕО ІЮ МО: 94, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 5, 9, 11, 12, 16, 20, 38, 40, 44, 56, 57, 61, 62, 65, 67, 68, 72, 74, 76, 79, 85, 87, 89, 91, 92, 104 і 111, де: амінокислота в положенні 5 може являти собою СО або У, амінокислота в положенні 9 може являти собою Р або А, амінокислота в положенні 11 може являти собою У або ГІ, амінокислота в положенні 12 може являти собою МУ або К, амінокислота в положенні 16 може являти собою 5 або А, амінокислота в положенні 20 може являти собою М або У, амінокислота в положенні 38 може являти собою К або ЕР, амінокислота в положенні 40 може являти собою К або А, амінокислота в положенні 44 може являти собою с або ЕР, амінокислота в положенні 56 може являти собою О, КЕ, 1, К, Е, 5, М або У, амінокислота в положенні 57 може являти собою б, РЕ, М, О, Е, І. К, 5, У або МУ, амінокислота в положенні 61 може являти собою М,
А або 5, амінокислота в положенні 62 може являти собою Е або С), амінокислота в положенні 65 може являти собою К або О, амінокислота в положенні 67 може являти собою ЕЕ. або К, амінокислота в положенні 68 може являти собою А або У, амінокислота в положенні 72 може являти собою 5 або Е, амінокислота в положенні 74 може являти собою К або Т, амінокислота в положенні 76 може являти собою 5, І, А або Т, амінокислота в положенні 79 може являти собою А або М, амінокислота в положенні 85 може являти собою ЕЕ або 5, амінокислота в
БО положенні 87 може являти собою Т або Е, амінокислота в положенні 89 може являти собою Ю або Е, амінокислота в положенні 91 може являти собою 5 або Т, амінокислота в положенні 92 може являти собою А або У, амінокислота в положенні 104 може являти собою М, А, Ю, Е, Е, б,
І.К, М, 0, Е, 5, Т, М або У, і амінокислота в положенні 111 може являти собою А або 0. В одному варіанті здійснення легкий ланцюг містить варіант амінокислотної послідовності з «ЕО
ІО МО: 95, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 9, 17, 18, 40, 43, 45, 48, 50, 51, 70, 72, 74, 76, 83, 84, 100, 103 і 106. В одному варіанті здійснення легкий ланцюг містить варіант амінокислотної послідовності з «ЕО
ІО МО: 95, що містить амінокислотні заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 9, 17, 18, 40, 43, 45, 48, 50, 51, 70, 72, 74, 76, 83, 84, 100, 1031 106, де 60 амінокислота в положенні 9 може являти собою А або 5, амінокислота в положенні 17 може являти собою Е або 0, амінокислота в положенні 18 може являти собою Т або Е, амінокислота в положенні 40 може являти собою 0 або Р, амінокислота в положенні 43 може являти собою 5,
А або М, амінокислота в положенні 45 може являти собою 0 або К, амінокислота в положенні 48 може являти собою У або І, амінокислота в положенні 50 може являти собою М, А, У, МУ, 5, Т, або М, амінокислота в положенні 51 може являти собою А, М, І, Ї, Т або М, амінокислота в положенні 70 може являти собою О або 0, амінокислота в положенні 72 може являти собою 5 або Т, амінокислота в положенні 74 може являти собою К або Т, амінокислота в положенні 76 може являти собою М або 5, амінокислота в положенні 83 може являти собою Е або У, амінокислота в положенні 84 може являти собою С або А, амінокислота в положенні 100 може являти собою А або О, амінокислота в положенні 103 може являти собою Т або і амінокислота в положенні в положенні 106 може являти собою І. або І.
В одному варіанті здійснення винахід стосується антитіла або антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІї людини, що містить: важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 124 або її варіант, що містить аж до 10 амінокислотних замін, і/або легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 130 або її варіант, що містить аж до 5 амінокислотних замін. В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить варіабельну область важкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 124 або її варіант, де варіант містить заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається 3: 16, 44, 56, 57, 61, 72, 74, 76, 79, 85, 89, 92 і 104. В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить варіабельну область важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 124 або її варіант, де варіант містить заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається 3: 16, 44, 56, 57, 61, 72, 74, 76, 79, 85, 89, 92 і 104, де амінокислота в положенні 16 може являти собою А або 5, амінокислота в положенні 44 може являти собою ЕР або С, амінокислота в положенні 56 може являти собою О, РЕ, 1, К, Е, 5, М або М, амінокислота в положенні 57 може являти собою б, РЕ, М, О, Е, І. К, 5, М або М, амінокислота в положенні 61 може являти собою 5 або А, амінокислота у положенні 72 може являти собою ЕК або 5, амінокислота в положенні 74 може являти собою Т або К, амінокислота в положенні 76 може являти собою А або Т або її, амінокислота в положенні 79 може являти собою А або У, амінокислота в положенні 85 може являти собою 5 або Е, амінокислота в положенні 89 може являти собою Е або 0, амінокислота в положенні 92 може являти собою А або У і амінокислота в положенні 104 може являти собою
М, А,О, Е, Б, б, І, К, М, О, Е, 5, Т, М або У. В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить варіабельну область легкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 130 або її варіант, що містить заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 43, 50, 51, 70 і 83. В іншому варіанті здійснення винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, який зв'язується з ТІСІТ людини, що містить варіабельну область легкого ланцюга з
ЗЕО ІЮО МО: 130 або її варіант, що містить заміни в одному або декількох положеннях, вибраних із групи, яка складається з: 43, 50, 51, 70 і 83, де амінокислота в положенні 43 може являти собою 5, А або У, амінокислота в положенні 50 може являти собою М, А, У, М, 5, Т, І або М, амінокислота в положенні 51 може являти собою А, М, І, Г, Т або У, амінокислота в положенні 70 може являти собою О або 0, і амінокислота в положенні 83 може являти собою Е або У.
У будь-якому з вищевказаних варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є виділеним.
У будь-якому з вищевказаних варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент являє собою рекомбінантне антитіло.
У будь-якому з вищевказаних варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент являє собою повнорозмірне антитіло.
У будь-якому з вищезгаданих варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом може містити варіабельну область важкого ланцюга, що складається з: (а) будь-якої з варіабельних областей важких ланцюгів, описаних вище, і (б) лідерного пептиду (наприклад, лідерного пептиду з ЗЕО ІЮ МО: 53). У будь-якому з вищезгаданих варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом може містити варіабельну область легкого ланцюга, що складається з: (а) будь-якої з варіабельних областей легких ланцюгів, описаних вище, і (б) лідерного пептиду (наприклад, лідерного пептиду з БЕО ІЮ
МО: 54).
У будь-якому з вищезгаданих варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом являє собою антитіло, що містить будь-який з варіабельних важких 60 ланцюгів, описаних вище, і будь-який константний домен важкого ланцюга людини. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом стосується ізотипу Ід і містить константний домен важкого ланцюга Ідс1, Ідс2, дез або Ідс4 людини. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен важкого ланцюга Їде1 людини (5ЕО ІЮО МО: 86) або його варіант, де варіант містить аж до 20 модифікованих амінокислотних замін. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом являє собою антитіло, що містить константний домен важкого ланцюга ДС! людини, де константний домен містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 86. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен важкого ланцюга Ідс1 людини, де константний домен Ідо1 є афукозилованим. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен важкого ланцюга Ід054 людини або його варіант, де варіант містить аж до 20 модифікованих амінокислотних замін. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен важкого ланцюга Ідс54 людини, де амінокислота в положенні 228 (з використанням системи нумерації Е)) замінена з 5ег на Рго. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен важкого ланцюга /ідс4 людини, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 55.
У будь-якому з вищезгаданих варіантів здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом може містити будь-який з варіабельних легких ланцюгів, описаних вище, і константний домен легкого ланцюга людини. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен легкого ланцюга каппа людини або його варіант, де варіант містить аж до 20 модифікованих амінокислотних замін. В іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен легкого ланцюга лямбда людини або його варіант, де варіант містить аж до 20 модифікованих амінокислотних замін. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить константний домен легкого ланцюга каппа людини, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 56.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить повну тетрамерну
Зо структуру, яка має два легкі ланцюги і два важкі ланцюги, де кожен легкий ланцюг містить: варіабельну область, що містить ЗЕО ІЮ МО: 132, і легкий ланцюг каппа людини (ЗЕО ІЮО МО: 56); і кожен важкий ланцюг містить: варіабельну область, що містить 5ЕО ІЮ МО: 128, константну область ЇДС1 людини (5ЕО ІО МО: 86).
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить повну тетрамерну структуру, яка має два легкі ланцюги і два важкі ланцюги, де кожен легкий ланцюг містить: варіабельну область, що містить ЗЕО ІЮ МО: 130, і легкий ланцюг каппа людини (ЗЕО ІЮ МО: 56); і кожен важкий ланцюг містить: варіабельну область, що містить 5ЕО ІЮ МО: 127, константну область ЇДС1 людини (5ЕО ІЮО МО: 86).
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить повну тетрамерну структуру, яка має два легкі ланцюги і два важкі ланцюги, де кожен легкий ланцюг містить: варіабельну область, що містить БЕО ІЮО МО: 133 і легкий ланцюг каппа людини (ЗЕО ІЮ МО: 56); і кожен важкий ланцюг містить: варіабельну область, що містить 5ЕБЕО ІЮ МО: 128, константну область ЇДС1 людини (5ЕО ІЮО МО: 86).
У будь-якому з вищезгаданих варіантів здійснення, антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом може бути кон'югованим щонайменше з одним лікарським засобом. В одному варіанті здійснення, де лікарський засіб містить вторинне антитіло або його фрагмент, імуномодулятор, гормон, цитотоксичний засіб, фермент, радіоактивний ізотоп, вторинне антитіло кон'юговане щонайменше з одним імуномодулятором, ферментом, радіоактивною міткою, гормоном, антисмисловим олігонуклеотидом або цитотоксичним засобом, або їх сполученням.
Винахід стосується також виділених поліпептидів, що містять амінокислотну послідовність з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО5: 1-30, 37-52, 57-83 або 88-151, або фрагмент будь-якої з вказаних послідовностей.
Винахід стосується також виділених нуклеїнових кислот, які кодують будь-яке з антитіл проти ТІСІТ або антигензв'язувальних фрагментів за винаходом. В одному варіанті здійснення винахід стосується виділених нуклеїнових кислот, які кодують будь-який з поліпептидів з ЗЕО ІЮ
МО: 1-30, 37-52, 57-64 або 88-133, де вказані поліпептиди можуть, необов'язково, містити лідерну послідовність. Винахід стосується також експресуючих векторів, які містять нуклеїнову кислоту, яка кодує будь-який з поліпептидів 3 5ЕО ІЮ МО: 1-30, 37-52, 57-83 або 88-167 (де 60 вказані поліпептиди можуть, необов'язково, містити лідерну послідовність). Ці виділені нуклеїнові кислоти і експресуючі вектори, які містять їх, можна використовувати для експресії антитіл за винаходом або їхніх антигензв'язувальних фрагментів у рекомбінантних клітинах- хазяях. Таким чином, винахід стосується також клітин-хазяїнів, що містять виділені нуклеїнові кислоти, які кодують будь-який з поліпептидів з «ЕС ІЮ МО: 1-30, 37-52, 57-83 або 88-151 (де вказані поліпептиди можуть, необов'язково, містити лідерну послідовність). В одному варіанті здійснення клітина-хазяїн являє собою клітину яєчника китайського хом'яка. В одному варіанті здійснення клітина-хазяїн являє собою клітину дріжджів, наприклад, клітину-хазяїна Ріспіа або клітину-хазяїна Ріспіа разіогів.
Винахід стосується також фармацевтичних композицій, які містять антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом і фармацевтично прийнятний носій або розріджувач. В одному варіанті здійснення композиція містить додатковий лікарський засіб. В одному варіанті здійснення додатковий лікарський засіб вибраний із групи, яка складається з: антитіла проти РОТ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ГАЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти МІЗТА або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ВТІ А або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ТІМЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти СТІА4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти НМЕМ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО27 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
СО137 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ОХ40 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО28 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти РОЇ 1 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
РОІ2 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти ІТК або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ІСО5 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти 5ІКР;а або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ІТ2 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ТЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти 1/Т4 або його антигензв'язувальний фрагмент; і антитіла проти І-Т5 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти 4- 188 або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти
РОТ або його антигензв'язувальний фрагмент вибраний із групи, яка складається з:
Зо пембролізумабу або його антигензв'язувального фрагмента і ніволумабу або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕБО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІО МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО: 90; (м) СОМ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 3; (м) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 6.
В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну 60 послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 57; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 59; (мм) СОК!І варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зФЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 62.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО: 90; (м) СОМ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 134; (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 90; (їм) СОК!1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
В одному варіанті здійснення винахід стосується композиції, яка містить: (ї) антитіло проти
ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом; і (ії) антитіло проти РО1, що містить послідовність важкого ланцюга з ЗЕО ІЮ МО: 33 і варіабельну послідовність легкого ланцюга з
ЗБЕО ІЮО МО: 34. В іншому варіанті здійснення винахід стосується композиції, яка містить: (а) антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом; і (Б) антитіло проти
РОТ, що містить послідовність важкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 35 і варіабельну послідовність легкого ланцюга з БЕО ІЮО МО: 36. В одному варіанті здійснення антитіло проти РОТ уводять
Зо перед введенням антитіла проти ТІСІТ. В одному варіанті здійснення антитіло проти РО1 уводять за 4-10 доби до введення антитіла проти ТІСІТ. В одному варіанті здійснення попереднє лікування антитілом проти РОЇ може модулювати імуноцити, приводячи до посиленої опосередкованої Ес функції антитіл проти ТІСІТ. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 2; (їі) СОМКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОМЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІО МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга,
БО що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОМКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти
ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (її) СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІЮ МО: 3; (м) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, бо що містить амінокислотну послідовність з зБЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 57; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕС ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮО МО: 59; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕ ІЮ МО: 88; (ї) СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з хЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також комбінації яка містить антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом, у комбінації з одним, двома або більше лікарськими засобами; де другий лікарський засіб вибраний із групи, яка складається з: антитіла проти РОЇ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ГАЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти МІЗТА або його антигензв'язувального
Зо фрагмента; антитіла проти ВТІ А або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ТІМЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти СТІА4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти НМЕМ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО27 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
СО137 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ОХ40 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО28 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти РОЇ 1 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
РОІ2 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти ІТК або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ІСО5 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти 5ІКР;а або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ІТ2 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти ТЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти І/Т4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти І-Т5 або його антигензв'язувального фрагмента; і антитіла проти 4- 188 або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти
ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (її) СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЗЕО
ІО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга,
БО що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІО МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО: 90; (м) СОМ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО 60 ІО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 3; (мм) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (му СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6.
В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 57; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 59; (мм) СОК!І варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО І МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зФЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 62.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО: 90; (м) СОМ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО
ІЮ МО: 92; ї (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної
Зо області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК!1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з Ф»ЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також посудини або пристрою для ін'єкції, що містить будь-яке з антитіл до ТІСІТ або антигензв'язувальних фрагментів за винаходом. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 2; (їі) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОМКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІО МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОМКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти
ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (її) СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 2; (її) СОВЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО бо ІЮ МО: 3; (м) СОКІ! варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зБЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 57; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮО МО: 59; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (ім) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу одержання антитіла проти ТІСІТ або антигензв'язувального фрагмента за винаходом, який включає: культивування клітини-хазяїна,
Зо яка містить полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг і/або легкий ланцюг антитіла за винаходом (або його антигензв'язувальний фрагмент) в умовах, сприятливих для експресії полінуклеотиду; і необов'язково, виділення антитіла або антигензв'язувального фрагмента з клітини-хазяїна і/або середовища для культивування. В одному варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, знаходяться в одному векторі. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, знаходяться в різних векторах. В одному варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 2; (їі) СОМКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО:4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО:5, 65, 66, 67, 68,69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО:б, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: (ї) СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО:88; (ії) СОК2 варіабельної
БО області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (мі)
СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 93. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: (і)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ бо МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: (|) СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 560 ІЮ МО: 59; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з хЕО ІЮ МО:62. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: (ї) СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 89, 134 або 135; (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: (|) СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 90; (їм) СОК!1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 91;
Зо (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 93. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО:128, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮО МО:132. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять: варіабельну область важкого ланцюга, що містять ЗЕО ІЮ МО:127, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить ЗЕО ІЮ
МО:130. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид, який кодує важкий ланцюг, і полінуклеотид, який кодує легкий ланцюг, кодують антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містить: варіабельну область важкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО:128, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить 5ЕО ІЮ МО:133.
Винахід стосується також способу лікування злоякісної пухлини у суб'єкта, який потребує цього, який включає введення суб'єкту ефективної кількості антитіла проти ТІСІТ або антигензв'язувального фрагмента за винаходом, необов'язково, у сполученні з додатковим лікарським засобом або терапевтичною процедурою. В одному варіанті здійснення суб'єкт, що піддається лікуванню, являє собою суб'єкта-людину. В одному варіанті здійснення додатковий лікарський засіб вибраний із групи, яка складається 3: антитіла проти РОЇ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ГАСЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти МІЗТА або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ВТІГА або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ТІМЗ3 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти СТІ А4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти НУЕМ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
СО27 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО137 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ОХ40 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО28 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
РОЇ1 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти РОІЇ2 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти СІТК або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ІСО5 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти бо ЗІК;а або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти //Т2 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ТЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти ІІ. Т4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти ІС Т5 або його антигензв'язувальний фрагмент; і антитіла проти 4-188 або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти РО1 або його антигензв'язувальний фрагмент вибраний із групи, яка складається з: пембролізумабу або його антигензв'язувального фрагмента і ніволумабу або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІї або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зХЕО ІЮ МО:4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІО МО:5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО:6б, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО:88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну
Зо послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (мі) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮО МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 59; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (ї)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу лікування злоякісної пухлини у суб'єкта, який потребує цього, що включає введення суб'єкту ефективної кількості антитіла проти ТІСІТ або 60 антигензв'язувального фрагмента за винаходом, і додаткове введення антитіла проти РО1 або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти РОЇ або його антигензв'язувальний фрагмент вибраний із групи, яка складається з: пембролізумабу або його антигензв'язувального фрагмента і ніволумабу або його антигензв'язувального фрагмента.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 4; (м СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з Ф»ЕО
ІО МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (мі) СОКЗ варіабельної області легкого
Зо ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮО МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 59; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮО МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу лікування інфекції або інфекційного захворювання в суб'єкта, який включає введення суб'єкту ефективної кількості антитіла або антигензв'язувального фрагмента за винаходом, необов'язково, у сполученні з додатковим лікарським засобом або терапевтичною процедурою. В одному варіанті здійснення суб'єкт, що піддається лікуванню, являє собою суб'єкта-людину. В одному варіанті здійснення додатковий 60 лікарський засіб вибраний із групи, яка складається з: антитіла проти РОЇ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ГАСЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти МІ5ТА або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ВТІГА або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ТІМЗ3 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти СТІ А4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти НМЕМ або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
СО27 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО137 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ОХ40 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти СО28 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
РОЇ1 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти РОІЇ2 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти СІТК або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ІСО5 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти
ЗІК;а або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти //Т2 або його антигензв'язувального фрагмента; антитіла проти ТЗ або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти ІІ. Т4 або його антигензв'язувального фрагменти; антитіла проти І/Т5 або його антигензв'язувального фрагмента; і антитіла проти 4-188 або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти РО1 або його антигензв'язувальний фрагмент вибрані з групи, яка складається з: пембролізумабу або його антигензв'язувального фрагмента і ніволумабу або його антигензв'язувального фрагмента. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІї або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зХЕО ІЮ МО:4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІО МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну
Зо послідовність з 5ЕО ІЮ МО:88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО І МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (і) СОВ2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (мі) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮО МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО:59; (ім) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО:88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
І МО: 89, 134 або 135; (її) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого 60 ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також вакцини, яка містить антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 1401; (їм)
СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ
МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО:6б, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 93. В одному варіанті
Зо здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (мі) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 57; (її СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕО ІЮО МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 59; (ім) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 62. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК!І1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 560 ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого 60 ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення вакцина додатково містить антиген.
Винахід стосується також способу детекції присутності пептиду ТІСІТ або його фрагмента в зразку, що включає приведення зразка в контакт із антитілом або його антигензв'язувальним фрагментом за винаходом і детекцію присутності комплексу між антитілом або фрагментом і пептидом; де детекція комплексу вказує на присутність пептиду ТІСІТ. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОМКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (іїї)
СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 153; (м) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 3; (м) СОК1 варіабельної
Зо області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІЮ МО: 6. В іншому варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 57; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 59; (мм) СОК!І варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО І МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зФЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 62.
В одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (ї)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮО МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК!І варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 93.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОК!І варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОНКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу збільшення активності імуноцитів, який включає приведення імуноцитів у контакт із будь-яким з антитіл або антигензв'язувальних фрагментів за винаходом. В одному варіанті здійснення винахід стосується способу збільшення активності бо імуноцитів, що включає введення суб'єкту, який потребує цього, ефективної кількості антитіла або антигензв'язувальних фрагментів за винаходом. В одному варіанті здійснення спосіб використовують для: лікування злоякісної пухлини, лікування інфекції або інфекційного захворювання, або як ад'ювант для вакцин. В одному варіанті здійснення збільшення активності імуноцитів можна детектувати за допомогою вимірювання проліферації імуноцитів. Наприклад, збільшення активності Т-клітин можна детектувати за допомогою вимірювання проліферації Т- клітин. В одному варіанті здійснення збільшення активності імуноцитів можна детектувати за допомогою вимірювання активації Т-клітин ех мімо у зразку, отриманому від суб'єкта. В одному варіанті здійснення збільшення активності Т-клітин визначають за допомогою: (ї) вимірювання результатів реакції змішаної культури лімфоцитів або прямої стимуляції тАб проти СОЗ передачі сигналу Т-клітинного рецептора (ТСК) для індукції продукції цитокінів, вибраних із групи, яка складається з: ІІ -2, ТМЕа, 1-17, ІЄМУу, І/-1ф8, М-С5Е, ВАМТЕ5, 1-6, ІІ -8, 1-5 1-13; (ії) вимірювання індукованої ЗЕВ продукції одного або декількох цитокінів, вибраних із групи, яка складається з: ІЇ/-2, ТМЕа, 11-17, ІЕМу, ЗМ-С5Е, ВАМТЕ5, 11 -6, 1-8, 1/-5 ії 1/-13; або (іїї) вимірювання індукованої ТТ продукції цитокіну, вибраного з групи, яка складається з: І -2, ТМЕа,
І/-17, ІЕМу, ЗМ-С5Е, ВАМТЕ5, 1-6, І -8, 11 -5 ї І/-13. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІО МО: 3, 79, 80, 81, 82, 83 або 140; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 5, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 або 141; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО
ІО МО: 6, 74, 75, 76, 77, 78 або 142. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134, 135 або 147; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕБО ІЮ МО: 90; (м) СОМК1
Зо варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 148; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 3; (мм) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6.
В іншому варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОКІ1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 57; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 58; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 59; (мм) СОК!І варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО І МО: 60; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 61; і (м) СОВЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 62.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОМ! варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (і) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЕС ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОВ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що 60 містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (ї) СОК2 варіабельної області важкого
Зо ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 90; (їм) СОК!1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 92; ї (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу лікування злоякісної пухлини або інфекційного захворювання в суб'єкта який включає введення суб'єкту ефективної кількості антитіла- антагоніста проти ТІСІТ і антитіла-антагоніста проти РОТ, де антитіло проти ТІСІТ має посилену ефекторну функцію в порівнянні з вихідним антитілом. Як застосовують у даному документі, "вихідне антитіло" стосується антитіла, яке має Есо-область дикого типу і/або глікозилування дикого типу (тобто, патерн глікозилування, що виникає в результаті експресії поліпептиду в немодифікованій клітині-хазяїні ссавця). Ефекторну функцію вихідного антитіла можна підсилювати за допомогою мутагенезу його Ес-області або за допомогою зміни його глікозилування (як більш детально обговорюють нижче). В одному варіанті здійснення антитіло проти РОЇ уводять до уведення вихідного антитіла. В одному варіанті здійснення антитіло проти РОТ уводять за 4-10 діб до введення антитіла проти ТІСІТ. В одному варіанті здійснення попередня обробка антитілом проти РОЇ може модулювати імуноцити, що приводить до посиленої опосередкованої Ес функції антитіл проти ТІСІТ. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ містить константний домен ДО1 людини. В одному варіанті здійснення обробка антитілами проти ТІСІТ і антитілами проти РОЇ не приводить до виснаження Тгед. В одному варіанті здійснення антитіло проти РОЇ або його антигензв'язувальний фрагмент вибраний із групи, яка складається з: пембролізумабу і ніволумабу. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: (Її)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 1; (ї) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО І МО: З (м) СОКІ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга,
Зо що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІО МО: 5; і (мі) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зБЕО ІЮ МО: 6. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 90 (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (і)
СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ
МО: 88; (її СОМК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮО МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90; (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу лікування злоякісної пухлини або інфекційного захворювання у суб'єкта, який включає введення суб'єкту ефективної кількості антитіла- антагоніста проти ТІСІТ і антитіла-антагоніста проти РОЇ, де антитіло проти ТІСЇТ є афукозилованим. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом містить: () СОМК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з з«ЕО ІЮ МО: 1; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮО МО: 2; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: З (м) СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 4; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 5; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 6.
В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за бо винаходом містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (ії) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЕС ІЮ МО: 89, 134 або 135; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО 10 МО: 90 (їм) СОМК1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ХЕО ІЮО МО: 93. В одному варіанті здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент містить: () СОК1 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 88; (її) СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 134; (ії) СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 90; (їм) СОК!1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91; (м) СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО
ІЮ МО: 92; і (м) СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
Винахід стосується також способу збільшення протипухлинної активності антитіла проти
ТІСІТ, який включає: одержання вихідного антитіла проти ТІСІТ і посилення ефекторної функції вихідного антитіла проти ТІСІТ; де активність отриманого антитіла проти ТІСІТ збільшена в порівнянні з вихідним антитілом проти ТІСІТ. Як застосовують у даному документі, "вихідне антитіло" стосується антитіла, яке має Ес-область дикого типу і/або глікозилування дикого типу (тобто, патерн глікозилування, що виникає в результаті експресії поліпептиду в немодифікованій клітині-хазяїні ссавця). Ефекторну функцію вихідного антитіла можна підсилювати за допомогою мутагенезу його Ес-області або за допомогою зміни його глікозилування, наприклад, роблячи антитіло афукозилованим (як більш детально обговорюють нижче). В одному варіанті здійснення ефекторну функцію вихідного антитіла проти ТІСІТ підсилюють за допомогою мутагенезу в Ес-області вихідного антитіла проти ТІСІТ. В іншому варіанті здійснення ефекторну функцію вихідного антитіла проти ТІСІї підсилюють за допомогою видалення залишків фукози з антитіла, або за допомогою експресії антитіла в клітині-хазяїні, генетично модифікованій для видалення активності ферменту, що додає фукозу до глікопротеїнів.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
На фігурі 1 показане зв'язування антитіла 14А6 з ТІСІї людини і макаки-резусу (експресованими в клітинах СНО-КІ1).
На фігурі 2 показане зв'язування антитіла 28Н5 з ТІСІїЇ людини і макаки-резусу (експресованими в клітинах СНО-КІ1).
На фігурі З показано, що антитіла 14А6 і 2885 блокують взаємодію пПСО155 з ПТІСІТ, як визначено за допомогою аналізу блокування ЕГІЗА на основі клітин.
На фігурі 4 показане зв'язування антитіла 3106 з ТІСІї людини і макаки-резусу (експресованими в клітинах СНО-КТ), і показано також, що антитіло 31С6 блокує взаємодію пСО155 з пТІСІТ.
На фігурі 5 показана активність антитіл 14А6 і 28Н5 в аналізі Т-клітин іп міїго.
На фігурі 6 показана активність антитіл 14А6 і 31С6 в аналізі Т-клітин іп міїго.
На фігурі 7 показана експресія ТІСІТ, С0226, 20155 і С0роеб у лініях первинних Т-клітин людини. На добу 3, для клону ВС4-49 показана найвища підвищувальна регуляція ТІСІТ (негативного) і знижувальна регуляція СО226 (позитивного).
На фігурах 8А і 88 показана активність різних антитіл проти ТІСІТ в аналізі Т-клітин іп міїго.
Це показує, що МВ543 і антитіла проти ТІСІТ 14А6, 37010 і 28Н5 відновлюють відповіді ІЕМУу у первинних Т-клітинах людини.
На фігурах 9А-90 показаний ефект паралельного введення антитіла щура проти ТІСІТ миші (0507) і антитіла проти РО-1 миші в порівнянні з групами лікування монотерапією на протипухлинну відповідь мишей з імплантацією лінії клітин СТ26 (п-10/групу). Лікування починали, коли пухлини досягали 75 мм9-115 мм3.
На фігурі 10 показаний ефект ізотипу Ес на протипухлинну активність антитіла проти ТІСІТ (18210) у комбінації з антитілом проти РО-1 у моделі пухлини на тварин.
На фігурах 11А-11С показаний ефект ізотипу Ес на протипухлинну активність антитіла проти
ТІСІТ (18210) у комбінації з антитілом проти РО-1 у моделі пухлини на тварин.
На фігурі 12 показаний ефект ізотипу Ес на протипухлинну активність антитіла проти ТІСІТ (11А11) у комбінації з антитілом проти РО-1 у моделі пухлини на тварин.
На фігурах 13А-13С показаний ефект ізотипу Ес на протипухлинну активність антитіла проти бо ТІСІТ (11А11) у комбінації з антитілом проти РО-1 у моделі пухлини на тварин.
На фігурі 14 показана теплова карта, яка показує області ТІСІТ людини, сильно або слабко захищені від дейтерування за допомогою зв'язування антитіла 14А6. Амінокислотна послідовність, показана на тепловій карті, відповідає 5ЕО ІЮ МО: 87.
На фігурі 15 показана теплова карта, яка показує області ТІСІТ людини, сильно або слабко захищені від дейтерування за допомогою зв'язування антитіла 3106. Амінокислотна послідовність, показана на тепловій карті, відповідає ЗЕО ІЮ МО: 87.
На фігурі 16 показаний ефект різних гуманізованих клонів 31С6 у порівнянні з химерними і вихідними антитілами у функціональному аналізі модифікованих Т-клітин.
На фігурі 17 показаний ефект різних гуманізованих клонів 31С6 у порівнянні з химерними антитілами у функціональному аналізі первинних Т-клітин.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС
Скорочення
На всьому протязі детального опису і прикладів за винаходом використовують наступні скорочення:
Область, яка визначає комплементарність, у варіабельних сов областях імуноглобулінів, визначена з використанням системи нумерації Кабаї крім області СОК
Система вирівнювання і нумерації імуноглобулінів, уведена ЕЇміп
Кава! А. Каваї (1 991) зедиепсевз Годі Ргоївіп5 Годі Іттипоіодіса! Іптегеві,
БП Ей. Рибіїс Неайй 5егмісе, Маїйопаї Іпвійшез ої Неапнй,
Веїпезаа, Ма.
Ділянка ланцюгів Ідс, яка є варіабельною по послідовності між
Область М різними антитілами. Вона продовжується до залишку по Кабаї 109 у легкому ланцюзі і 113 у важкому ланцюзі.
Визначення
Щоб винахід можна було легше зрозуміти, конкретні технічні і наукові терміни конкретно визначені нижче. Якщо конкретно не визначено інакше в іншому місці цього документа, всі інші технічні і наукові терміни, застосовувані в даному документі, мають значення, загальноприйняте для фахівця в галузі, до якої належить цей винахід.
Як застосовують у даному документі, включаючи прикладену формулу винаходу, форми однини слів, такі як "а", "ап" ї "пе", включають посилання на їхню відповідну множину, якщо з контексту явно не випливає інакше. "Уведення" і "лікування", як їх застосовують до тварини, людини, експериментального суб'єкта, клітини, тканини, органу або біологічної рідини, стосується приведення в контакт екзогенного фармацевтичного, терапевтичного, діагностичного засобу або композиції з твариною, людиною, суб'єктом, клітиною, тканиною, органом або біологічною рідиною. Обробка клітин включає приведення реагенту в контакт із клітиною, а також приведення реагенту в контакт із рідиною, де рідина знаходиться в контакті з клітиною. "Уведення" і "лікування" означає також обробки іп мійго і ех мімо, наприклад, клітин, реагентом, діагностичним засобом, зв'язувальною сполукою або за допомогою інших клітин. "Лікувати" або "лікування" означає введення лікарського засобу, такого як композиція, що містить будь-які з антитіл або антигензв'язувальних фрагментів за даним винаходом, внутрішньо або зовнішньо, суб'єкту або пацієнту, який має один або декілька симптомів захворювання, або, як підозрюють, який страждає на захворювання, терапевтичну активність проти якого має засіб. Як правило, засіб вводять у кількості, ефективній для полегшення одного або декількох симптомів захворювання в суб'єкта, що піддається лікуванню, або в популяції, за допомогою або індукції регресії або інгібування прогресування такого симптому(симптомів) до будь-якого ступеня, що піддається клінічному вимірюванню. Кількість лікарського засобу, яка є ефективною для полегшення будь-якого конкретного симптому захворювання, може змінюватися відповідно до таких факторів, як стан захворювання, вік і маса пацієнта, і здатність лікарського засобу викликати бажану відповідь у суб'єкта Чи полегшений симптом захворювання, можна оцінювати за допомогою будь-якого клінічного вимірювання, звичайно використовуваного терапевтами або іншими кваліфікованими медичними працівниками для оцінки тяжкості або статусу прогресування цього симптому.
ТІСІТ
Термін ТІСІТ включає ТІСІТ людини, ТІСІТ яванської макаки і ТІСІТ макаки-резусу, а також їхні фрагменти, такі як їхні зрілі фрагменти, позбавлені сигнального пептиду. В одному з варіантів здійснення винаходу амінокислотна послідовність ТІСІТ людини містить амінокислотну послідовність, описану амінокислотними залишками 25-244 з номера доступу в Сепрапк
МР 776160.2 (ЗЕО ІЮ МО: 31) (амінокислотні залишки 1-24 з 5ЕБЕО ІО МО:31 відповідають лідерному пептиду).
В одному з варіантів здійснення винаходу амінокислотна послідовність ТІСІТ яванської макаки, наприклад, Масаса Газсісціагі5, містить амінокислотну послідовність, описану в (ЗЕО ІЮ
МО: 32); також див. номер доступу в СепеВапк ХР 005548157. Амінокислотна послідовність
ТІСІТ макаки-резусу є ідентичною амінокислотній послідовності ТІСІї яванської макаки (амінокислотні залишки 1-24 з БЕО ІЮО МО: 32 відповідають лідерному пептиду).
Антитіла проти ТІСІТ і їхні антигензв'язувальні фрагменти
Даний винахід стосується антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів, що зв'язуються з
ТІСІТ людини, і застосувань таких антитіл або фрагментів. У деяких варіантах здійснення антитіла до ТІСІТ є виділеними.
Як застосовують у даному документі, антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент стосується антитіла або антигензв'язувального фрагмента, що специфічно
Зо зв'язуються з ТІСІТ людини. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, які "специфічно зв'язуються з ТІСІТ людини", являють собою антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язуються з ТІСІТ людини з КО приблизно 1 нМ або більш високою афінністю (наприклад, 1 нМ-2 пМ, 1 нМ, 100 пМ, 10 пМ або 2 пМ), але не зв'язуються з іншими білками, позбавленими цієї послідовності. Наприклад, антитіло, яке "специфічно зв'язується" з ТІСІї людини, не зв'язується з СО226 людини, СО155 людини і СЮО112 людини. Як додатковий приклад, антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, які специфічно зв'язуються з ТІСІї людини, можуть зв'язуватися з міченою РІГ АС? формою ТІСІТ людини, але не зв'язуються з іншими міченими
ЕГ АС? білками, позбавленими епітопів ТІСІТ людини. В одному варіанті здійснення антитіло за винаходом, яке специфічно зв'язується з ТІСІЇ людини, має також перехресну реакційну здатність відносно ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу. Як застосовують у даному документі "перехресна реакційна здатність" стосується здатності антитіла вступати в реакцію з гомологічним білком з інших видів. Чи зв'язується антитіло специфічно з ТІСІТ людини, можна визначати з використанням будь-якого аналізу, відомого в даній галузі. Приклади аналізів, відомих в даній галузі для визначення афінності зв'язування, включають поверхневий плазмонний резонанс (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібний спосіб (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ).
Даний винахід стосується антитіл проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. Як застосовують у даному документі, термін "антитіло" стосується будь-якої форми антитіла, що виявляє бажану біологічну активність. Таким чином, його використовують у найширшому змісті, і він конкретно охоплює, але без обмеження, моноклональні антитіла (включаючи повнорозмірні моноклональні антитіла, що містять два легкі ланцюги і два важкі ланцюги), поліклональні антитіла, мультиспецифічні антитіла (наприклад, біспецифічні антитіла), гуманізовані антитіла, повністю людські антитіла, химерні антитіла і верблюжі однодоменні антитіла.
Даний винахід стосується вихідних антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів, які не належать до людини (наприклад, з мишей і гризунів), і способів їхнього застосування. Ці антитіла можна модифікувати для призначеного застосування, наприклад, гуманізація антитіла для застосування як терапевтичного антитіла або фрагмента для людини.
Даний винахід стосується антигензв'язувальних фрагментів проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. Як застосовують у даному документі, якщо не вказано інакше, "фрагмент бо антитіла" або "антигензв'язувальний фрагмент" стосується антигензв'язувальних фрагментів антитіл, тобто фрагментів антитіла, що зберігають здатність специфічно зв'язуватися з антигеном, який зв'язується повнорозмірним антитілом, наприклад, фрагментів, що зберігають одну або кілька областей СОК. Приклади антигензв'язувальних фрагментів включають, але без обмеження, фрагменти Раб, Раб", Е(аб)» і Ем; діатіла; лінійні антитіла; одноланцюжкові молекули антитіл, наприклад, 50-Ем; нанотіла і мультиспецифічні антитіла, сформовані з фрагментів антитіл.
Даний винахід стосується фрагментів баб проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. "Фрагмент Рар" складається з одного легкого ланцюга, і Сні і варіабельних областей одного важкого ланцюга. Важкий ланцюг молекули баб не може формувати дисульфідний зв'язок з іншою молекулою важкого ланцюга. "Фрагмент Бар" може являти собою продукт розщеплення антитіла папаїном.
Даний винахід стосується антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів, які містять Ес-область, і способів їхнього застосування. Область "Бс" містить два фрагменти важкого ланцюга, що містять домени Сні і Сн2 антитіла. Два фрагменти важкого ланцюга утримуються разом за допомогою двох або більше дисульфідних зв'язків і за допомогою гідрофобних взаємодій доменів Сн.
Даний винахід стосується фрагментів Бар' проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. "Фрагмент Рар'» містить один легкий ланцюг і частину або фрагмент одного важкого ланцюга, що містять домен Мн і домен Сні, а також область між доменами Сні і Сн2, так що міжланцюговий дисульфідний зв'язок може формуватися між двома важкими ланцюгами двох фрагментів Бар' з формуванням молекули Е(аб')».
Даний винахід стосується фрагментів Е(аб')2 проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. "Фрагмент Е(ар')г" містить два легкі ланцюги і два важкі ланцюги, що містять частину константної області між доменами Сні і Сн2, так що міжланцюговий дисульфідний зв'язок формується між двома важкими ланцюгами. Фрагмент К(аб')г, таким чином, складається з двох фрагментів Раб", утримуваних разом за допомогою дисульфідного зв'язку між двома важкими ланцюгами. "Фрагмент Е(ар')2 може являти собою продукт розщеплення антитіла пепсином.
Даний винахід стосується фрагментів антитіл проти ТІСІТ м і способів їхнього застосування. "Область Ру" містить варіабельні області як з важких, так і з легких ланцюгів, але
Зо позбавлена константних областей.
Даний винахід стосується фрагментів 5сЕм проти ТІСІТ і способів їхнього застосування.
Термін "одноланцюжкове Ем" або "5сЕму" антитіло стосується фрагментів антитіла, що містить домени Мн і Мі антитіла, де ці домени присутні в одному поліпептидному ланцюзі. Як правило, поліпептид Ем додатково містить поліпептидний лінкер між доменами Мн і Мі, що дозволяє 5сСЕмМ формувати бажану структуру для зв'язування антигену. Огляд 5СЕм, див. у Рінскійип (1994) ТНЕ
РНАВМАСОЇ ОС1М ОЄ МОМОСІ ОМА АМТІВООІЕ5, мої. 113, Возеприга апа Мооге єдв. Зргіпдег-
Мепад, Мем МоїК, рр. 269-315. Також див., Публікацію міжнародної патентної заявки Мо. УУО 88/01649 і Патенти США Мо. 4946778 і 5260203.
Даний винахід стосується доменних антитіл проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. "Доменне антитіло" являє собою імунологічно функціональний фрагмент імуноглобуліну, що містить тільки варіабельну область важкого ланцюга або варіабельну область легкого ланцюга.
У деяких випадках, дві або більше областей Мн ковалентно з'єднані за допомогою пептидного лінкера для одержання двовалентного доменного антитіла. Дві області Мн двовалентного доменного антитіла можуть бути націлені на однакові або різні антигени.
Даний винахід стосується двовалентних антитіл проти ТІСІП і способів їхнього застосування. "Двовалентне антитіло" містить дві антигензв'язувальні ділянки. У деяких випадках, дві ділянки зв'язування мають однакові антигенні специфічності. Однак, двовалентні антитіла можуть бути біспецифічними (див. нижче).
Даний винахід стосується верблюжих однодоменних антитіл проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. У конкретних варіантах здійснення антитіла в даному документі включають також верблюжі однодоменні антитіла. Див., наприклад, МиуїЇдегптпапз еї аї. (2001) Ттепаз Віоснет. 5сі. 26:230; Кеісптапп еї аї. (1999) 9. Іттипої. Способи 231:25; УМО 94/04678; УМО 94/25591; Патент
США Мо. 6005079). В одному варіанті здійснення даний винахід стосується однодоменних антитіл, що містять два домени Мн з такими модифікаціями, що формуються однодоменні антитіла.
Даний винахід стосується діатіл проти ТІСІТ і способів їхнього застосування. Як застосовують у даному документі, термін "діатіла" позначає малі фрагменти антитіл із двома антигензв'язувальними ділянками, де фрагменти містять варіабельний домен важкого ланцюга (Мн), з'єднаний з варіабельним доменом легкого ланцюга (Мі) в одному і тому ж поліпептидному 60 ланцюзі (Мн-Мі або Мі-Мн). За допомогою використання лінкеру, що є занадто коротким, щоб дозволяти спарювання між двома доменами в одному і тому ж ланцюзі, домени змушують спарюватися з комплементарними доменами іншого ланцюга й утворювати дві антигензв'язувальні ділянки. Діатіла більш повно описані, наприклад, у ЕР 404097; МО 93/11161; і Ноїдег еї аІ. (1993) Ргос. Май. Асай. Зсі. ОБА 90: 6444-6448. Загальний огляд модифікованих варіантів антитіл див. у Ноїїїдег апа Нидзоп (2005) Маї. Віотесппої. 23:1126-1136.
Як правило, антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом, модифіковані яким- небудь чином, можуть зберігати щонайменше 10 95 від його активності (у порівнянні з вихідним антитілом), коли така активність виражена на молярній основі. Переважно, антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом зберігає щонайменше 20 95, 50 9, 70 90, 80 95, 9095, 9595 або 10095 або більше від афінності зв'язування ТІСІТ вихідним антитілом.
Передбачають також, що антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом може включати консервативні або неконсервативні амінокислотні заміни (які позначаються як "консервативні варіанти" або "функціонально консервативні варіанти" антитіла), які істотно не змінюють його біологічну активність.
Даний винахід стосується виділених антитіл проти ТІСІЇТ і їх антигензв'язувальних фрагментів, і способів їхнього застосування. "Виділені" антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти є щонайменше частково вільними від інших біологічних молекул з клітин або культур клітин, у яких вони продуковані. Такі біологічні молекули включають нуклеїнові кислоти, білки, ліпіди, вуглеводи, або інші матеріали, такі як клітинний дебрис і середовище для вирощування.
Виділене антитіло або антигензв'язувальний фрагмент можуть, крім того, бути щонайменше частково вільними від компонентів експресуючої системи, таких як біологічні молекули з клітини-хазяїна або із середовища для її вирощування. Як правило, термін "виділений" не призначений для позначення повної відсутності таких біологічних молекул або відсутності води, буферів або солей, компонентів або фармацевтичного складу, що містить антитіла або фрагменти.
Даний винахід стосується моноклональних антитіл проти ТІСІТ ії їх антигензв'язувальних фрагментів, а також моноклональних композицій, що містять множину виділених моноклональних антитіл. Термін "моноклональні антитіло", як застосовують у даному документі, стосується популяції по суті гомогенних антитіл, тобто, молекули антитіл, які містяться в популяції, є ідентичними по амінокислотній послідовності, за винятком можливих природних мутацій, які можуть бути присутніми у незначних кількостях. На відміну від цього, загальноприйняті (поліклональні) препарати антитіл, як правило, включають множину різних антитіл, які мають різні амінокислотні послідовності в їхній варіабельних доменах, зокрема, у їхніх СОК, які часто є специфічними для різних епітопів. Визначення "моноклональне" указує на характер антитіла, як отриманого з по суті гомогенної популяції антитіл, і його не слід тлумачити як таке, що потребує одержання антитіла яким-небудь конкретним способом. Наприклад, моноклональні антитіла для використання відповідно до даного винаходу можна одержувати способом гібридоми, вперше описаним Копйпіег еї аї. (1975) Маїшге 256: 495, або їх можна одержувати способами рекомбінантної ДНК (див., наприклад, Патент США Мо. 4816567). "Моноклональні антитіла" можна виділяти також з фагових бібліотек антитіл з використанням способів, описаних у Сіаскзоп еї аї!. (1991) Маїшге 352: 624-628 і Магкз еї аї!. (1991) 9. Мої. Віо|. 222: 581-597, наприклад. Також див. Ргезіа (2005) У. АПегду Сіїп. Ігптипої. 116:731.
Даний винахід стосується химерним антитіл проти ТІСІТ (наприклад, людський константний домен/мишачий варіабельний домен) і способів їхнього застосування. Як застосовують у даному документі, "химерне антитіло" являє собою антитіло, яке має варіабельний домен з першого антитіла і константний домен із другого антитіла, де перше і друге антитіла походять з різних видів. (Патент США Мо. 4816567; і Могтізоп еї аї., (1984) Ргос. Май. Асай. 5сі. ОБА 81: 6851-6855). Як правило, варіабельні домени одержують з антитіла з експериментальної тварини (вихідне антитіло"), такого як гризун, і послідовності константного домена одержують з антитіл людини, так що отримане химерне антитіло з меншою імовірністю викликає несприятливу імунну відповідь у суб'єкта-людини, ніж вихідне (наприклад, мишаче) антитіло.
Даний винахід стосується гуманізованих антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів (наприклад, щурячих або мишачих антитіл, які були гуманізовані) і способів їхнього застосування. Винахід стосується гуманізованого варіанта антитіла 14А6 (що містить ЗЕО ІЮ
МО:7 і 8), антитіла 28Н5 (що містить 5ЕО ІО МО:63 і 64) і антитіла 31С6 (що містить 5ЕО ІЮ МО: 94-95). Як застосовують у даному документі, термін "гуманізоване антитіло" стосується форм антитіл, що містять послідовності як з антитіл людини, так і з антитіл, які не належать до людини (наприклад, миші або щури). Як правило, гуманізоване антитіло може містити по суті усі з щонайменше одного, і як правило, двох, варіабельних доменів, у яких усі або в основному усіх бо з гіперваріабельних петель відповідають гіперваріабельним петлям з імуноглобуліну, який не належить до людини, і всі або в основному усіх з каркасних (ЕК) областей являють собою каркасні області з послідовностей імуноглобуліну людини. Гуманізоване антитіло може, необов'язково, містити щонайменше частину константної області імуноглобуліну людини (Ес).
Як правило, основна структурна одиниця антитіла містить тетрамер. Кожен тетрамер містить дві ідентичні пари поліпептидних ланцюгів, де кожна пара має один "легкий" (приблизно 25 кДа) і один "важкий" ланцюг (приблизно 50-70 кДа). М-кінцева частина кожного ланцюга містить варіабельну область приблизно від 100 до 110 або більше амінокислот, переважно відповідальних за впізнавання антигену. Карбокси-кінцева частина важкого ланцюга може визначати константну область, переважно відповідальну за ефекторну функцію. Як правило, людські легкі ланцюги класифікують як легкі ланцюги каппа і лямбда. Крім того, людські важкі ланцюги, як правило, класифікують як мю, дельта, гамма, альфа або епсилон, і визначають ізотип антитіла як ІМ, дО, дес, ІдДА і ЧЕ, відповідно. Усередині легких і важких ланцюгів, варіабельні і константні області з'єднані за допомогою області ")" із приблизно 12 або більше амінокислот, де важкий ланцюг містить також область "0" із приблизно 10 додаткових амінокислот. Див. загалом, Еипдатепіа! Іттипоіоду Сп. 7 (Рашці, МУ., ед., 214 ей. Камеп Ргез5,
М.У. (1989).
Варіабельні області кожної пари легкоголєважкого ланцюга формують ділянку зв'язування антитіла. Таким чином, як правило, інтактне антитіло має дві ділянки зв'язування. За винятком біфункціональних або біспецифічних антитіл, дві ділянки зв'язування, як правило, є однаковими.
Як правило, варіабельні домени як важких, так і легких ланцюгів, містять три гіперваріабельні області, які називаються також областями, які визначають комплементарність (СОК), локалізовані усередині відносно консервативних каркасних областей (ЕК). СОК, як правило, вирівняні за допомогою каркасних областей, що дозволяє зв'язування зі специфічним епітопом. Як правило, від М-кінця до С-кінця, варіабельні домени як легких, так і важких ланцюгів містять ЕК1, СОКІ, ЕК2, СОК2, ЕКЗ, СОКЗ і ЕКЯ4. Віднесення амінокислот до кожного домена, як правило, відповідає визначенням з Зедиепсез ої Ргоївіп5 ої Іттипоїодіса! Іптегеві,
Кавбаї, єї а)ї.; Маїйопаї! Інзійшіев ої Неайй, Веїйезаа, Ма.; 5' ей.; МІН Рибрі. Мо. 91-3242 (1991);
Кабаї (1978) Аду. Ргої. Спет. 32:1-75; Кабаї, еї а!., (1977) 9. Віої. Спет. 252:6609-6616; Споїпіа, еї а!., (1987) У Мої. Віої!. 196:901-917 або Споїіа, еї а!., (1989) Майте 342:878-883.
Зо Як застосовують у даному документі, термін "гіперваріабельна область" стосується амінокислотних залишків антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, відповідальних за зв'язування антигену. Гіперваріабельна область містить амінокислотні залишки з "області, яка визначає комплементарність" або "СОК" (тобто СОКІ 1, СОКІ2 ї СОБІЗ у варіабельному домені легкого ланцюга і СОМКНІ, СОКНа2 і СОКНЗ у варіабельному домені важкого ланцюга).
Див. Кабаї еї аї. (1991) Зедиепсез ої Ргоївіп5 ої Іттипоіодіса! Іпіегев5і, Бій Еа. Рибріїс Неайт
Зегмісе, Маїопа! Іпбійшщев5 ої Неанйп, Веїйезаа, Ма. (визначення областей СОК антитіла по послідовності); також див. Споїйіа апа Гев5к (1987) У. Мої. ВіоЇ. 196: 901-917 (визначення областей СОР. антитіла за структурою). Як застосовують у даному документі, термін "каркасні" або "РК" залишки стосується залишків варіабельного домена, відмінних від залишків гіперваріабельної області, визначених у даному документі як залишки СОК. "Виділена молекула нуклеїнової кислоти" або "виділений полінуклеотид" позначає ДНК або
РНК геномного, мРНК, кКДНК, або синтетичного походження, або деяке їхнє сполучення, не асоційовані з усім або частиною полінуклеотиду, у якому виділений полінуклеотид виявлений у природі, або зчеплені з полінуклеотидом, з яким він не зчеплений у природі. Для цілей по цьому опису, варто розуміти, що "молекула нуклеїнової кислоти, що містить" конкретну нуклеотидну послідовність, не включає інтактні хромосоми. Виділені молекули нуклеїнової кислоти, "які містять" вказані послідовності нуклеїнової кислоти, можуть включати, на додаток до вказаних послідовностей, кодувальні послідовності для аж до десяти або навіть аж до двадцяти або більше інших білків, або їхніх частин або фрагментів, або можуть включати функціонально зв'язані регуляторні послідовності, які контролюють експресію кодувальної області вказаних послідовностей нуклеїнової кислоти, і/або можуть включати векторні послідовності.
Фраза "контрольні послідовності" стосується послідовностей ДНК, необхідних для експресії функціонально зв'язаної кодувальної послідовності у конкретному організмі-хазяїні. Контрольні послідовності, що підходять для прокаріот, наприклад, включають промотор, необов'язково, послідовність оператора і ділянку зв'язування рибосоми. Відомо, що еукаріотичні клітини використовують промотори, сигнали поліаденілювання і енхансери.
Нуклеїнова кислота або полінуклеотид є "функціонально зв'язаною", коли її вміщують у функціональний взаємозв'язок з іншою послідовністю нуклеїнової кислоти. Наприклад, ДНК для препослідовності або секреторного лідера є функціонально зв'язаною з ДНК для поліпептиду, бо якщо він експресується у формі пребілка, який бере участь у секреції поліпептиду; промотор або енхансер є функціонально зв'язаним з кодованою послідовністю, якщо він впливає на транскрипцію послідовності; або ділянка зв'язування рибосоми є функціонально зв'язаною з кодувальною послідовністю, якщо він розташований так, щоб полегшувати трансляцію. Як правило, але не завжди, "функціонально зв'язаний" означає, що зв'язані послідовності ДНК є суміжними, і, у випадку секреторного лідера, суміжними й у фазі зчитування. Однак енхансери не обов'язково повинні бути суміжними. Зв'язування виконують за допомогою лігування в зручних ділянках рестрикції. Якщо таких ділянок не існує, синтетичні олігонуклеотидні адаптори або лінкери використовують відповідно до загальноприйнятої практики.
Як застосовують у даному документі, вираз "клітина", "лінія клітин" і "культура клітин" використовують взаємозамінно, і всі такі визначення включають потомство. Таким чином, слова "трансформанти" і "трансформовані клітини" включають первинну розглянуту клітину і культури, які походять з неї, незалежно від кількості переносів. Також варто розуміти, що не все потомство буде мати точно ідентичний вміст ДНК, через навмисні або спонтанні мутації.
Включено мутантне потомство, яке має ту ж функцію або біологічну активність, по яких проводили скринінг початково трансформованих клітин. Коли передбачені відмінні визначення, це зрозуміло з контексту.
Як застосовують у даному документі, "зародкова послідовність" стосується послідовності з не перегрупованих послідовностей ДНК імуноглобулінів. Можна використовувати будь-яке прийнятне джерело не перегрупованих послідовностей імуноглобулінів. Зародкові послідовності людини можна одержувати, наприклад, з баз даних зародкових послідовностей УОІМЗОЇ МЕК на веб-сайт Маїйопаї! Іпоійше ої Агійгйі5 апа МизсшіозкКкеїенга! апа 5Кіп Різеазе5 ої Ше Опійей зіаге5
Майопаї Іпбзійшев5 ої Неакй. Зародкові послідовності миші можна одержувати, наприклад, як описано в сіцаїсеїїї еї аї. (2005) Мисієїс Асіа5 Кез. 33:0256-0261.
Фізичні і функціональні властивості ілюстративних антитіл проти ТІСІТ
Даний винахід стосується антитіл проти ТІСІТ ії їх антигензв'язувальних фрагментів, які мають вказані структурні і функціональні ознаки, і способів застосування антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів у лікуванні або запобіганні захворювань (наприклад, злоякісної пухлини або інфекційного захворювання). "Антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом"
Зо включає: будь-яке антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, обговорюваний у даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 або гуманізовані варіанти цих антитіл, описані в таблиці 4) або їхній варіант (наприклад, варіант послідовності або функціональний варіант); будь-яке антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що містять будь-яку одну або декілька з
СОК, вказаних у таблиці 4; будь-яке антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язуються з тим же епітопом у ТІСІТ людини, що й антитіла, обговорювані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5 або 31С6); і будь-яке антитіло або антигензв'язувальний Фрагмент, які перехресно блокують (частково або повністю) зв'язування з ТІСІТ антитіла, обговорюваного в даному документі, або зв'язування яких з ТІСІТ перехресно блоковано (частково або повністю) антитілом, обговорюваним у даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5 або 31С6).
Перехресне блокування антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів можна ідентифікувати на підставі їхньої здатності до перехресної конкуренції з антитілом за винаходом в стандартних аналізах зв'язування (наприклад, ВІАсцОоге, ЕГІЗА, проточна цитометрія). Наприклад, можна використовувати стандартні аналізи ЕЇГ І5А, у яких рекомбінантний білок ТІСІТ (наприклад, ТІСІТ людини) іммобілізують на планшеті, одне з антитіл піддають флуоресцентному міченню, і оцінюють здатність немічених антитіл конкурувати за зв'язування з міченим антитілом.
Додатково або альтернативно, можна використовувати аналіз ВіАсоге для оцінки здатності антитіл до перехресної конкуренції. Здатність тестованого антитіла інгібувати зв'язування іншого антитіла (наприклад, антитіла 14А6 або 28Н5 або 31С6) з ТІСІТ (наприклад, ТІСІТ людини) показує, що тестоване антитіло може конкурувати з іншим антитілом (наприклад, 14А6 або 28Н5 або 31С6) за зв'язування з ТІСІТ (наприклад, ТІСІТ людини) і таким чином, може, у деяких випадках, зв'язуватися з тим же епітопом на ТІСІТ (наприклад, ТІСІТ людини), що й антитіло 14А6 або 28Н5 або 31С6, або з епітопом, який перекривається.
Як вказано вище, антитіла і фрагменти, що зв'язуються з тим же епітопом, що і будь-яке з антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів проти ТІСІї за даним винаходом, також складають частину даного винаходу. Крім того, антитіла, які зв'язуються з епітопом, що перекривається з епітопом, що зв'язується будь-яким з антитіл проти ТІСІТ за винаходом, також складають частину даного винаходу. Існує кілька способів, доступних для картування антитіла на антигенах-мішенях, включаючи: Н/О-Ех мас-спектрометрію, рентгенівську кристалографію, аналіз рерзсап і сайт-направлений мутагенез. Наприклад, НОХ (воднево-дейтерієвий обмін) у бо сполученні з протеолізом і мас-спектрометрією можна використовувати для визначення епітопа антитіла на специфічному антигені М. НОХ-М5 основана на точному вимірюванні і порівнянні ступеня включення дейтерію антигеном при інкубації з 02О окремо й у присутності антитіла проти нього в різні часові інтервали. Дейтерій обмінюється з воднем на амідному кістяку білків в експонованих областях, у той час як області антигену, зв'язані з антитілом, захищені, і для них показаний менший обмін або відсутність обміну після аналізу протеолітичних фрагментів за допомогою ГС-М5/М5. Приклад 9 ілюструє застосування НОХ для картування епітопа, що зв'язується антитілом 14А6.
Імуноглобулінові ланцюга антитіл проти ТІСІТ за винаходом, а також їх СОК, включають, як необмежувальні приклади, описані в таблиці 4 (ЗЕО ІЮ МО: 1-30, 37-52, 57-83 або 88-167).
Даний винахід стосується будь-якого поліпептиду, що містить амінокислотні послідовності або складається з амінокислотних послідовностей з 5ЕО ІЮ МО: 1-30, 37-52, 57-83 або 88-167, і рекомбінантних нуклеотидів, які кодують такі поліпептиди.
Обсяг даного винаходу включає виділені антитіла проти ТІСІТ і їхні антигензв'язувальні фрагменти (наприклад, гуманізовані антитіла), що містять варіант імуноглобулінового ланцюга, вказаного в даному документі, наприклад, будь-якої з БЕО ІЮ МО: 7-30, 37-52, 63-64, 94-95 або 124-133; де варіант має одну або декілька з наступних властивостей: (і) зв'язує ТІСІТ людини; (і) вступає в перехресну реакцію з ТІСІї яванської макаки і макаки-резусу; (іїї) блокує зв'язування ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює продукцію Ії -2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т-клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112.
В інших варіантах здійснення винахід стосується антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів, що зв'язуються з ТІСІТ людини (наприклад, гуманізовані антитіла) і мають домени
Мі і домени Мн щонайменше з 80 95, 85 95, 90 Фо, 95 9, 96 95, 97 У», 98 95 або 99 95 ідентичністю послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 7-30, 37-52, 63-64, 94-95 або 124-133; де варіант має бажане зв'язування і властивості, наприклад, (ї) зв'язує ТІСІТ людини зі значенням КО від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ); (ії) вступає в перехресну реакцію з ТІСІТ яванської макаки і макаки-резусу; (ії) блокує зв'язування
ТІСІТ людини з СО155 людини і СО112 людини; (ім) збільшує активацію Т-клітин; (м) стимулює
Зо продукцію ІІ -2 і ІЕМу антигенспецифічними Т-клітинами; (мі) блокує індукцію супресії активації Т- клітин, індуковану лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і СО112. "Консервативно модифіковані варіанти" або "консервативна заміна" стосується замін амінокислот у білку на інші амінокислоти, що мають подібні характеристики (наприклад, заряд, розмір бічних ланцюгів, гідрофобність/гідрофільність, конформацію і твердість, і т. д.), так що зміни часто можна здійснювати без зміни біологічної активності білка. Фахівцям в даній галузі відомо, що, як правило, одиночні амінокислотні заміни в областях поліпептиду, які не є необхідними, істотно не змінюють біологічну активність (див., наприклад, Умаїхоп еї аї. (1987)
МоїІесшіаг Віоїоду ої Ше Сепе, Пе Вепіатіп/Ситітіпуд5 Рир. Со., р. 224 (АМ Еа.)). Крім того, заміни на структурно або функціонально подібні амінокислоти з меншою імовірністю порушують біологічну активність. Ілюстративні консервативні заміни вказані в таблиці 1.
Таблиця 1
Ілюстративні консервативні амінокислотні заміни еф бе Ма,7///////////
Функціонально консервативні варіанти антитіл за винаходом також включені в даний винахід. "Функціонально консервативні варіанти", як застосовують у даному документі, стосується антитіл або фрагментів, у яких один або кілька амінокислотних залишків замінені без зміни бажаної властивості, такої як афінність і/або специфічність для антигену. Такі варіанти включають, але без обмеження, заміну амінокислоти на таку, що має подібні властивості, такі як консервативні амінокислотні заміни з Таблиці 1. Представлені також виділені поліпептиди, що містять домени Мі антитіл проти ТІСІТ за винаходом (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 8, 25-30 і 48-52), і виділені поліпептиди, що містять домени Мн (наприклад, ЗЕО ІЮО МО: 7, 9-24 і 37-47) антитіл проти ТІСІТ за винаходом, що містять аж до 0, 1, 2, З, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 або більше амінокислотних замін. Представлені також виділені поліпептиди, які містять домени Мі антитіл проти ТІСІТ за винаходом (наприклад,
ЗЕО ІО МО: 64) і виділені поліпептиди, які містять домени Мн (наприклад, ЗЕО ІЮ МО:63) антитіл проти ТІСІТ за винаходом, що містять аждо 0,1,2,3,4,5,6, 7,8, 9,10, 11, 12, 13, 14,15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 або більше амінокислотних замін. Представлені також виділені поліпептиди, які містять домени Мі антитіл проти ТІСІТ за винаходом (наприклад,
ЗЕО ІЮО МО: 95 і 130-133) і виділені поліпептиди, що містять домени Мн (наприклад, ЗЕО ІЮО МО: 94 і 124-129) антитіл проти ТІСІТ за винаходом, що містять аждо0,1,2,3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 або більше амінокислотних замін.
В іншому варіанті здійснення представлене антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язуються з ТІСІТ і мають домени Мі і домени Мн щонайменше з 99 9о 98 95, 97 чо, 96 95, 95 95, 90 95, 85 У, 80 95 або 75 95 ідентичністю послідовності з одним або декількома з доменів Мі або доменів Мн, описаних у даному документі, і мають специфічне зв'язування з
ТІСІТ. В іншому варіанті здійснення зв'язувальне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом містять домени Мі і Мн (із сигнальною послідовністю і без неї), що містять аждо 0, 1,2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 або більше амінокислотних замін, і мають специфічне зв'язування з ТІСІТ.
Полінуклеотиди і поліпептиди
Даний винахід, крім того, стосується полінуклеотидів, які кодують будь-які з поліпептидів або імуноглобулінових ланцюгів антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів за винаходом. Наприклад, даний винахід стосується полінуклеотидів, які кодують амінокислоти,
описані в БЕО ІЮ МО: 1-30, 37-52, 57-83 і 88-167, а також полінуклеотидів, які гібридизуються з ними, а також будь-якого поліпептиду, який кодується таким полінуклеотидом, який гібридизується. В одному варіанті здійснення винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, що містить або складається в основному з ЗЕО ІЮ МО:84 або 5ЕО ІЮО МО: 85.
Як правило, полінуклеотиди гібридизуються в умовах низької, помірної або високої суворості, і кодують антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, що зберігають здатність зв'язування з ТІСІї (людини, макаки-резусу і/або яванської макаки, наприклад, Масаса
Тазсісціагі5). Молекула першого полінуклеотиду є "здатною до гібридизації" з молекулою другого полінуклеотиду, коли одноланцюжкова форма молекули першого полінуклеотиду може гіоридизуватися з молекулою другого полінуклеотиду в умовах прийнятних температури й іонної силу розчину (див. затбгооК, еї аІ., вище). Умови температури й іонної сили визначають "суворість" гібридизації. Типові умови низької суворості гібридизації включають 55 "С, 5Х 55, 0,1 96 5О5 і відсутність формаміду; або 30 96 формамід, 5Х З5С, 0,5 95 505 при 42 "С. Типові умови помірної суворості гібридизації являють собою 40 95 формамід, з 5Х або 6Х 55ЦТ і 0,1 95 5О5 при 42 "С. Умови високої суворості гібридизації являють собою 50 95 формамід, 5Х або бХ 5ЗС при 42 "С або, необов'язково, при більш високій температурі (наприклад, 57 "С, 59 С, 60 "С, 62 С, 63 С, 65 "С або 68 "С). Як правило, З55С являє собою 0,15М Масі ї 0,015М Ма- цитрат. Гібридизація вимагає того, щоб два полінуклеотиди містили комплементарні послідовності, хоча, залежно від суворості гібридизації, можливі невідповідності між основами.
Прийнятна суворість для гібридизації полінуклеотидів залежить від довжини полінуклеотидів і ступеня комплементарності, змінних, добре відомих в даній галузі. Чим більший ступінь подібності або гомології між двома нуклеотидними послідовностями, тим вище суворість, при якій нуклеїнові кислоти можуть гібридизуватися. Для гібридів довжиною більше 100 нуклеотидів, розроблені рівняння для розрахунку температури плавлення (див. затьгоок, еї аї., вище, 9,50- 9,51). Для гібридизації з більш короткими полінуклеотидами, наприклад, олігонуклеотидами, положення невідповідностей стають більш важливими, і довжина олігонуклеотиду визначає його специфічність (див. Ззатрьгоок, еї а!., вище, 11.7-11.8).
В іншому варіанті здійснення представлений виділений полінуклеотид, наприклад, ДНК, що кодує поліпептидні ланцюги виділених антитіл або антигензв'язувальних фрагментів, вказаних у даному документі. В одному варіанті здійснення виділений полінуклеотид кодує антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що містять щонайменше один варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга зрілого імуноглобуліну за винаходом і/або щонайменше один варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга зрілого імуноглобуліну за винаходом. У деяких варіантах здійснення виділений полінуклеотид кодує як легкий ланцюг, так і важкий ланцюг на одній полінуклеотидній молекулі, і в інших варіантах здійснення легкі і важкі ланцюги кодовані на окремих полінуклеотидних молекулах. В іншому варіанті здійснення полінуклеотид додатково кодує сигнальну послідовність.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла або його антигензв'язувальний фрагмент, що містить СОБК-НІ (ЗЕО І МО), СОВ-Н2 (ЗЕО ІС МО:2) і СОК-НЗ (ЗЕО ІЮ МОЗ або 79 або 80 або 81 або 82, 83 або 140).
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга антитіла або його антигензв'язувальний фрагмент, що містить СОК-І 1 (ЗЕО ІЮ МО:4), СОВ-12 (5ЕО ІО МО:5 або 65, або 66, або 67, або 68, або 69, або 70, або 71, або 72, або 73, або 141) і СОБК-І З (ЗЕО ІЮО МО:6 або 74, або 75, або 76, або 77, або 78).
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮО МО: 7.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 8.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 9-24 або 37- 47.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 25-30 або 48- 52
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла або його антигензв'язувальний фрагмент, що містить СОБ-НІ (ЗЕО І МО: 57), СОВ-Н2 (5ЕО І МО: 58) і СОБ-НЗ (ЗЕО ІЮ МО: 59).
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга антитіла або його антигензв'язувальний фрагмент, що містить СОК-І 1 (ЗЕО І МО: 60), СОВ-12 (ЗЕО ІО МО: 61) і СОК-Ї З (ЗЕО ІЮ МО: 62).
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 63.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 64.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла або його антигензв'язувальний фрагмент, що містить СОК-НІ (ЗЕО І МО: 88), СОВ-Н2 (ЗЕО ІЮ МО: 89, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 134 або 135) ії СОК-НЗ (ЗЕО ІО МО: 90).
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен легкого ланцюга (Мі) або антитіла його антигензв'язувальний фрагмент, що містить СОБ-І 1 (ЗЕО І МО: 91), СОВ-12 (5ЕО ІО МО: 92, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122 або 123) і СОБ-І З (5ЕО ІЮ МО: 93).
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 94.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 95.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 124-129.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 130-133.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 127.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 128.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 130.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 132.
В одному варіанті здійснення винахід стосується виділеного полінуклеотиду, що кодує варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну з ЗЕО ІЮ МО: 133.
Даний винахід стосується також векторів, наприклад, експресуючих векторів, таких як плазміди, які містить виділені полінуклеотиди за винаходом, де полінуклеотид є функціонально зв'язаним з контрольними послідовностями, які упізнаються клітиною-хазяїном, коли клітину- хазяїна трансфікують вектором. Представлені також клітини-хазяїни, що містять вектор за даним винаходом, і способи одержання антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, або поліпептиду, описаного в даному документі, що включають культивування клітини-хазяїна, що несе експресуючий вектор або нуклеїнову кислоту, які кодують імуноглобулінові ланцюги антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, у середовищі для культивування, і виділення антитіла або його антигензв'язувального фрагмента з клітини-хазяїна або середовища для культивування.
Даний винахід стосується також поліпептидів, наприклад, поліпептидів імуноглобулінів, що містять амінокислотні послідовності, які є щонайменше приблизно на 75 95 ідентичними, на 80 95 ідентичними, більш переважно, щонайменше приблизно на 90 95 ідентичними і, найбільш переважно, щонайменше приблизно на 95 95 ідентичними (наприклад, на 95 95, 96 95, 97 Об, 98 Фо, 99 95, 100 95) амінокислотним послідовностям антитіл, представлених у даному документі, коли порівняння виконують за допомогою алгоритму ВІ А5Т, де параметри алгоритму вибрані для одержання найбільшого збігу між відповідними послідовностями протягом повної довжини відповідних еталонних послідовностей (наприклад, очікуваний поріг: 10; розмір слова: 3; максимальна кількість збігів у діапазоні запиту: 0; матриця ВГОБИОМ 62; вартість пропуску: існування 11, продовження 1; умовна структурна корекція матриці балів).
Ідентичність послідовності стосується ступеня, у якому амінокислоти з двох поліпептидів є однаковими в еквівалентних положеннях, коли дві послідовності оптимально вирівняні.
Наступні посилання стосуються алгоритмів ВІ А5Т, часто використовуваним для аналізу послідовностей: ВІ АТ А СОВІТНМ5: Аїївспи! єї а. (2005) РЕВ5 9. 272(20): 5101-5109; Айвениї,
З.Е., єї аїІ., (1990) У. Мої. Віої. 215:403-410; Сів, МУ., єї аїІ., (1993) Маїшге Сепеї. 3:266-272;
Маадаен, Т.І.., єї аІ., (1996) Меїй. Епгутої. 266:131-141; Айвсйиї, 5.Е., єї аї!., (1997) Мисівїс Асіав 60 Вез. 25:3389-3402; 7Напа, 9., єї аІ., (1997) Сепоте Вевз. 7:649-656; М/оойНоп, .С., єї а!., (1993)
Сотриї. Спет. 17:149-163; НапсосК, У.М. еї аї., (1994) Сотриї. Аррі. Віовсі. 10:67-70;
АПОММЕМТ 5СОВІМОИ 5УЗТЕМ5: Баупой, М.О., єї аЇ., "А тодеї ої емоіІшіопагу спапде іп ргоїеїп5.» іп Айаз ої Ргоївіп зедиепсе апа 5ігисіиге, (1978) мої. 5, зиррі. 3. М.О. бауйоїй (еа.), рр. 345-352, Маї!. Віотед. Вез. Рошпа., УМавзпіпдіюп, ОС; Зспугагіг, В.М., евї аї., "Майгісез ог деїесііпд аїєтапі геіайопеПірв5.» іп АМа5 ої Ргоївіп Зедиепсе апа бігисіиге, (1978) мої. 5, 5!ррі. 3.» М.О.
Баупої (ед.), рр. 353-358, Маї). Віотеєд. Рез. Еоипа., Мазпіпаїоп, ОС; Айвепниї, 5.Р., (1991) У. Мої.
Віо!І. 219:555-565; єіаїезв, О.у., єї аї., (1991) Меїнодз» 3:66-70; Непікої, 5., єї а!., (1992) Ргос. Маї!.
Асад. 5сі. ОБА 89:10915-10919; Анвсепиї, 5.Р., еї аї!., (1993) У. Мої. Емої. 36:290-300; АПЕОММЕМТ
ЗТАТІБЗТІСО: Капіп, 5., єї аі!., (1990) Ргос. Маї). Асад. 5сі. ОБА 87:2264-2268; Капіп, 5., єї аї., (1993) Ргос. Маї). Асад. сі. ОБА 90:5873-5877; Оетро, А., єї а!., (1994) Апп. Ргоб. 22:2022-2039; апа АйбспиЇ, 5.Е. "ЕмаІчайпд (Ше віайеса! відпіїйсапсе ої тийіріе аїбіупсі Іюосаї аідптепів.» іп
Тпеогеїїсаї апа Сотршиїайопа! Меїйод5 іп Сепоте Незвєагсп (5. Бипаї, ей.), (1997) рр. 1-14,
Ріепит, Мем/ МоОК.
Афінність зв'язування
Як приклад, і без обмеження, антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі, можуть зв'язувати ТІСІТ людини зі значенням Ко щонайменше приблизно 1х109 М (тобто, зі значенням Ко ї1х109 М або нижче), як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або
ОСТЕТ). В одному варіанті здійснення антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі, можуть зв'язувати ТІСІТ людини зі значенням Ко щонайменше від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ). В одному варіанті здійснення антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі, можуть зв'язувати ТІСІТї людини зі значенням Ко від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (наприклад, ВІАСОКЕ) або подібного способу (наприклад, КіпЕха або ОСТЕТ). В одному варіанті здійснення антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі, можуть зв'язувати ТІСІТ людини зі значенням Ко щонайменше приблизно 50 пМ (тобто, зі значенням Ко приблизно 50 пМ або нижче), як визначено за допомогою ВІАСОКЕ або подібного
Зо способу. В одному варіанті здійснення антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі, можуть зв'язувати ТІСІТ людини зі значенням Ко щонайменше приблизно 10
ПМ (тобто, зі значенням Ко приблизно 10 пМ або нижче), як визначено за допомогою ВІАСОКЕ або подібного способу. В одному варіанті здійснення антитіла й антигензв'язувальні фрагменти за винаходом можуть зв'язувати ТІСІТ людини з Ко від приблизно від 50 пМ до приблизно 1 пМ, як визначено за допомогою ВІАСОРКЕ або подібного способу.
Активація імуноцитів
У деяких варіантах здійснення антитіла або антигензв'язувальні фрагменти за винаходом збільшують активність імуноцитів. Збільшення активності імуноцитів можна детектувати з використанням будь-якого способу, відомого в даній галузі. В одному варіанті здійснення збільшення активності імуноцитів можна детектувати за допомогою вимірювання проліферації імуноцитів. Наприклад, збільшення активності Т-клітин можна детектувати за допомогою вимірювання проліферації Т-клітин або подій передачі сигналу, таких як тирозинове фосфорилування імунних рецепторів або нижчерозташованих кіназ, які переносять сигнали до регуляторів транскрипції. В інших варіантах здійснення збільшення активності імуноцитів можна детектувати за допомогою вимірювання цитотоксичної функції клітин СТІ або МК на специфічних клітинах-мішенях або відповідей цитокіну ІЄМу, які асоційовані зі стимуляцією протипухлинного імунітету. В інших варіантах здійснення збільшення активності імуноцитів можна детектувати за допомогою вимірювання активації Т-клітин ех мімо у зразку, отриманому від суб'єкта. В одному варіанті здійснення збільшення активності Т-клітин визначають за допомогою: () вимірювання індукованої 5ЗЕВ (ентеротоксином В еіарпуіососси5) продукції одного або декількох прозапальних цитокінів, вибраних із групи, яка складається з: ІІ -2, ТМЕа,
І-17, ТЕМУ, І-18, ЗМ-С5Е, ВАМТЕ5, ЇЇ -6, ІІ -8, 11 -5 і 11-13; або (ії) вимірювання реакцій змішаної культури лімфоцитів або прямої стимуляції за допомогою тАр проти СОЗ передачі сигналу Т- клітинного рецептора (ТСК) для індукції продукції цитокіну, вибраного з групи, яка складається 3:12, ТМЕа, 1-17, ІЄМУу, І--18, ЗМ-С5Е, ВАМТЕЗ5, ЇЇ -6, ІІ -8, 1 -5 ії 1-13. У конкретних варіантах здійснення антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом може стимулювати продукцію ІІ--2 і/або І(ЕМу антигенспецифічними Т-клітинами щонайменше в 1,5 рази.
Даний винахід стосується антитіл-антагоністів проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних бо фрагментів, і способів їхнього застосування, наприклад, гуманізованих антитіл-антагоністів і фрагментів проти ТІСІТ. Антитіло-антагоніст проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент виявляють антагонізм до активності ТІСІї людини, наприклад, за допомогою інгібування зв'язування ТІСІТ з СО155 ії СО112, і інгібування передачі сигналу функціонального
ІТІМ за допомогою ТІСІТ при зв'язуванні з СО155 і СО112. Вимірювання антагоністичної активності проти ТІСІТ можна оцінювати за допомогою демонстрації блокування супресії Т- клітин після активації ТОК, індукованої лігуванням ТІСІТ зі спорідненими лігандами СО155 і
СО112. Таким чином, в одному варіанті здійснення збільшених відповідей, обробка антитілами- антагоністами проти ТІСІТ є здатною відновлювати відповіді ІІ -2 до рівнів, що спостерігаються в Т-клітинах, не репресованих шляхом індукції ТІСІТ за допомогою СО155 або СО112. При більш переважному рівні активації, відповіді, після обробки за допомогою антитіла-антагоніста проти ТІСІТ, можуть являти собою відповіді, збільшені до рівня, більш високого, ніж відповіді Т- клітин, не репресованих за допомогою СО155 або СО112.
Здатність антитіл проти ПТІСІТ блокувати зв'язування з ПСО155 і ПСО112
У деяких варіантах здійснення антитіла або антигензв'язувальні фрагменти проти ТІСІТ за винаходом є здатними блокувати зв'язування ТІСІТ людини з СЮО155 людини і СО112 людини.
Здатність блокувати зв'язування ТІСІЇ людини з СО155 людини і СО112 людини можна визначати з використанням будь-якого способу, відомого в даній галузі. В одному варіанті здійснення здатність антитіл блокувати зв'язування ТІСІТї людини з СО155 людини і СО112 людини визначають з використанням аналізу ЕГІЗА, як описано в прикладі 2.
Способи одержання антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів
Клітини гібридоми, які продукують вихідні (наприклад, щурячі або мишачі) моноклональні антитіла проти ТІСІТ або їх антигензв'язувальні фрагменти, обговорювані в даному документі, можна одержувати способами, загальновідомими в даній галузі. Такі виділені гібридоми є частиною даного винаходу. Ці способи включають, але без обмеження, спосіб гібридоми, спочатку розроблений КопПіег, еї а!., (1975) (Маїшге 256:495-497), а також спосіб триоми (Негіпод, еї аї., (1988) Віотєд. Віоспіт. Асіа. 47:211-216 і Надімага, еї аї., (1993) Нит. Апіїбод. Нубгідотав 4:15), спосіб гібридоми В-клітин людини (Ког2бог, еї аї!., (1983) Іттипоіоду Тодау 4:72 і Соїе, єї аІ,, (1983) Ргос. Май. Асад. 5сі. 0.5.А 80:2026-2030), спосіб ЕВМ-гібридоми (Соїе, еї аї., іп
Мопосіопаї! Апіїродіез апа Сапсег Тнегару, Аїап В. І івв, Іпс., рр. 77-96, 1985) і електрозлиття,
Зо обумовленого електричним полем, з використанням електропоратора для злиття клітин з великою камерою Су Риїзе (Су Риїзе Зсіепсе5, Іпс., СбІеп Вигпіе, МО). Переважно, спленоцити миші виділяють і зливають за допомогою РЕС або за допомогою електрозлиття з лінією клітин мієломи миші на основі стандартних способів. Потім можна виконувати скринінг отриманих гібридом по продукції антигенспецифічних антитіл. Наприклад, суспензії окремих клітин лімфоцитів селезінки від імунізованих мишей можна зливати з однією шостою кількості несекретуючих клітин мієломи миші РУХбЗ-А98.653 (АТСС, СК. 1580) за допомогою 50 9о ПЕГ,
Клітини можна розсівати при приблизно 2х107 клітин/мл у плоскодонний мікропланшет для титрування, з наступними двома тижнями інкубації в селективному середовищі, що містить 20 95 ембріональну сироватку Теза! СІопе, 18 95 кондиціоноване середовище "653", 5 95 огідеп (ІСЕМ), 4 мМ І-глутамін, 1 мМ І-глутамін, 1 мМ піруват натрію, 5 мМ НЕРЕ5, 0,055 мМ 2- меркаптоетанол, 50 одиниць/мл пеніцилін, 50 мг/мл стрептоміцин, 50 мг/мл гентаміцин і 1Х НАТ (Зідта; НАТ додають через 24 години після злиття). Через два тижні, клітини можна культивувати в середовищі, у якому НАТ замінений на НТ. Потім можна виконувати скринінг індивідуальних ямок за допомогою ЕГІЗА по моноклональних антитілах Ідс проти ТІСІТ. Після початку інтенсивного росту гібридоми, можна виконувати спостереження за середовищем, як правило, через 10-14 діб. Гібридоми, які секретують антитіло, можна пересівати, знову піддавати скринінгу, і якщо вони усе ще позитивні по ЇДО людини, моноклональні антитіла проти
ТІСІТ, можна субклонувати щонайменше двічі за допомогою лімітуючого розведення. Стабільні субклони можна потім культивувати іп міго для одержання невеликих кількостей антитіла в культуральному середовищі для характеризації.
Таким чином, даний винахід стосується способів одержання антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом, що включає культивування клітин гібридоми, яка експресує антитіло або фрагмент, в умовах, сприятливих для такої експресії, і, необов'язково, виділення антитіла або фрагмента з гібридоми і/або середовища для вирощування (наприклад, середовища для культивування клітин).
Антитіла проти ТІСІТ, описані в даному документі, також можна одержувати рекомбінантним чином (наприклад, у експресуючій системі Е. соїї/17, у експресуючій системі клітин ссавця або в експресуючій системі нижчих еукаріот). У цьому варіанті здійснення нуклеїнові кислоти, що кодують імуноглобулінові молекули антитіл за винаходом (наприклад, Мн або Мі), можна бо вставляти в плазміду на основі рЕТ і експресувати у системі Е. сої/Т7. Наприклад, даний винахід стосується способів експресії антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, або його імуноглобулінового ланцюга в клітині-хазяїні (наприклад, бактеріальній клітині-хазяїні, такій як Е.соїї, такій як ВГ 21 або ВІ 210ЕЗ), що включає експресію РНК-полімерази 17 у клітині, яка також містить полінуклеотид, який кодує імуноглобуліновий ланцюг, функціонально зв'язаний із промотором 17. Наприклад, в одному з варіантів здійснення винаходу бактеріальна клітина- хазяїн, така як Е. соїї, містить полінуклеотид, який кодує ген РНК-полімерази 17, функціонально зв'язаний із промотором Іас, і експресію полімерази і ланцюга індукують за допомогою інкубації клітини-хазяїна з ІРТО (ізопропіл-бета-О-тіогалактопіранозидом).
Існує кілька способів одержання рекомбінантних антитіл, відомих в даній галузі. Один приклад способу рекомбінантного одержання антитіл описаний у Патенті США Мо. 4816567.
Трансформацію можна виконувати будь-яким відомим способом уведення полінуклеотидів у клітину-хазяїна. Способи введення гетерологічних полінуклеотидів у клітини ссавців добре відомі в даній галузі і включають опосередковану декстраном трансфекцію, преципітацію фосфатом кальцію, опосередковану полібреном трансфекцію, злиття протопластів, електропорацію, інкапсуляцію полінуклеотиду(полінуклеотидів) у ліпосоми, біолістичну ін'єкцію і пряму мікроін'єкцію ДНК у ядра. Крім того, молекули нуклеїнової кислоти можна вводити в клітини ссавців за допомогою вірусних векторів. Способи трансформації клітин добре відомі в даній галузі. Див., наприклад, Патенти США Мо. 4399216; 4912040; 4740461 і 4959455.
Таким чином, даний винахід стосується рекомбінантних способів одержання антитіла проти
ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом, або його імуноглобулінового ланцюга, що включає введення полінуклеотиду, який кодує один або декілька імуноглобулінових ланцюгів антитіла або фрагмента (наприклад, важкого і/або легкого ланцюга імуноглобуліну); культивування клітини-хазяїна (наприклад, СНО або Ріспіа, або Ріспіа разіогіх) в умовах, сприятливих для такої експресії, і, необов'язково, виділення антитіла або фрагмента, або ланцюга з клітини-хазяїна і/або середовища, у якому вирощують клітину- хазяїна.
Антитіла проти ТІСІТ можна також синтезувати будь-яким зі способів, вказаних у Патенті
США Мо. 6331415.
Еукаріотичні і прокаріотичні клітини-хазяїни, включаючи клітини ссавців, як хазяїв для
Зо експресії антитіл або фрагментів, або імуноглобулінових ланцюгів, описаних у даному документі, добре відомі в даній галузі і включають множину імморталізованих ліній клітин, доступних з Американської колекції типових культур (АТСС). Вони включають, серед іншого, клітини яєчника китайського хом'яка (СНО), М5О, клітини 5Р2, клітини Неї а, клітини нирки дитинчати хом'яка (ВНК), клітини нирки мавпи (СО5), клітини печінково-клітинної карциноми людини (наприклад, Нер 02), клітини А549, клітини ЗТ3, клітини НЕК-293 і ряд інших ліній клітин. Клітини-хазяїни ссавців включають клітини людини, миші, щура, собаки, мавпи, свині, кози, бика, коня і хом'яка. Особливо переважні лінії клітин вибирають за допомогою визначення того, які лінії клітин мають високі рівні експресії. Іншими лініями клітин, які можна використовувати, є лінії клітин комах, такі як клітини 519, клітини амфібій, бактеріальні клітини, клітини рослин і клітини грибів. Клітини грибів включають клітини дріжджів і міцеліальних грибів, включаючи, наприклад, Ріспіа тіпша (Одаїаєа тіпшіа, Рісніа Ііпапегі), Рісніа орипійає, Рісніа
ІШептої!оегапв, Рісніа заїїсіапа, Ріспіа доегсиит, Рісніа ріїреті, Рісніа віїрії5, Ріспіа теїпапоїіса, види Ріспіа, Засспаготусеб5 сегемізіае, види Засспаготусе5, Напзепцшіа роіутогрпа, види
Кіпумеготусев, Кісумеготусев Іасії5, Сапаїда аїрісап5, АвзрегуйШив підшап5, Азрегадїйив5 підег,
Аврегойив огулає, Тгісподенпта геезеї, Спгузозрогіцт ІсКпоумепзе, Еивзагішт 5р., ЕРизагйт дгатіпешт, Ризагішт мепепайшт, Рпузсоптігеїа раїепз і Меигозрога сгазза, види Ріспіа, будь-які види бЗасспаготусе5, Напзепша роїутогрпа, будь-які види Кісумеготусе5, Сапаїйда аїбісапв, будь-які види Абзрегоййи5, Тгісподегта геезеї, Спгузовзрогішт ІшсКпомепзе, будь-які види
Еизагтішт, Магтом/а Ігроїуїїса і Меигозрога сгазза. Коли рекомбінантні експресуючі вектори, які кодують важкий ланцюг або його антигензв'язувальну частину, або фрагмент, легкий ланцюг мМабо його антигензв'язувальний фрагмент, вводять у клітини-хазяїни ссавців, антитіла одержують за допомогою культивування клітини-хазяїни протягом періоду часу, достатнього, щоб дозволити експресію антитіла або фрагмента, або ланцюга в клітинах-хазяях, або секрецію в середовище для культивування, у якому вирощують клітини-хазяїни.
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, і ланцюги імуноглобулінів можна виділяти із середовища для культивування з використанням стандартних способів очищення білка. Крім того, експресію антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів і ланцюгів імуноглобулінів за винаходом (або інших молекул з них) з лінії клітин-продуцентів можна поліпшувати з використанням ряду відомих способів. Наприклад, експресія генів системи глутамінсинтетази бо (системи 55) є загальнопоширеним способом поліпшення експресії у визначених умовах.
Систему 55 обговорюють повністю або частково в зв'язку з Європейськими Патентами Мо. 0216846, 0256055 і 0323997 і Європейською Патентною заявкою Мо. 89303964.4. Таким чином, в одному з варіантів здійснення винаходу клітини-хазяїни ссавців (наприклад, СНО) позбавлені гена глутамінсинтетази, і їх вирощують під час відсутності глутаміну в середовищі, де, однак, полінуклеотид, який кодує ланцюг імуноглобуліну, містить ген глутамінсинтетази, який комплементує відсутність гена в клітині-хазяїні.
Даний винахід стосується способів очищення антитіла проти ТІСІї або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом, що включає введення зразка, що містить антитіло або фрагмент, у середовище для очищення (наприклад, катіонообмінне середовище, аніонообмінне середовище, середовище для гідрофобного обміну, середовище для афінного очищення (наприклад, білок-А, білок-О, білок-А/б, білок-І)) і або збір очищеного антитіла або фрагмента з фракції фільтрату з вказаного зразка, що не зв'язується із середовищем; або відкидання фракції фільтрату і елюції зв'язаного антитіла або фрагмента із середовища і збору елюата. В одному з варіантів здійснення винаходу середовище знаходиться в колонці, на яку наносять зразок. В одному з варіантів здійснення винаходу спосіб очищення виконують після рекомбінантної експресії антитіла або фрагмента в клітині-хазяїні, наприклад, де клітину-хазяїна спочатку лізують і, необов'язково, лізат очищають від нерозчинних матеріалів перед очищенням на середовищі.
Як правило, глікопротеїни, які продукуються в конкретній лінії клітин або трансгенній тварині, мають патерн глікозилування, характерний для глікопротеїнів, які продукуються у лінії клітин або трансгеній тварині. Таким чином, конкретний патерн глікозилування антитіла залежить від конкретної лінії клітин або трансгенної тварини, використовуваних для продукції антитіло. Однак всі антитіла, які кодуються молекулами нуклеїнової кислоти, представленими в даному документі, або містять амінокислотні послідовності, представлені в даному документі, включені в даний винахід, незалежно від патерна глікозилування, який можуть мати антитіла. Подібним чином, у конкретних варіантах здійснення антитіла з патерном глікозилування, що містить тільки нефукозиловані М-глікани, можуть надавати переваги, оскільки показано, що ці антитіла як правило, мають більш сильну ефективність, ніж їхні фукозиловані еквіваленти, як іп міїго, так і їп мімо (Див., наприклад, Зпіпкама еї аї.,.). Віої. Спет. 278: 3466-3473 (2003); Патенти США Мо.
Зо 6946292 і 7214775). Ці антитіла з нефукозилованими М-гліканами малоймовірно є імуногенними, оскільки їхні вуглеводні структури є нормальним компонентом популяції, що існує в до сироватки людини.
Даний винахід стосується поліклональних антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів, наприклад, композиції, яка містить множину антитіл проти ТІСІТ ї фрагментів, що включають одне або кілька антитіл проти ТІСІТ або їх антигензв'язувальних фрагментів за даним винаходом, і способів їхнього застосування. Поліклональне антитіло являє собою антитіло, отримане разом з одним або декількома іншими, не ідентичними, антитілами або в їхній присутності. Як правило, поліклональні антитіла одержують з наборів різних В-лімфоцитів, наприклад, В-лімфоцитів від тварини, обробленої імуногеном, який представляє інтерес, які продукують популяцію різних антитіл, але які усі спрямовані проти імуногена. Як правило, поліклональні антитіла одержують безпосередньо від імунізованої тварини, наприклад, із селезінки, сироватки або асцитної рідини.
Даний винахід стосується біспецифічних і біфункціональних антитіл, і антигензв'язувальних фрагментів, які мають специфічність зв'язування для ТІСІТ і іншого антигену, наприклад, такого як РО-1 або РО-11, або | АС-3, і способів їхнього застосування. В одному з варіантів здійснення винаходу ланцюги проти ТІСІТ містять будь-яку з послідовностей УНЛ/Л/І, описаних у таблиці 4, і ланцюги проти РОЇ містять амінокислотну послідовність з зЗЕО ІЮ МО: 33 і 34, або з БЕО ІЮ МО: 35 і 36 (або антигензв'язувальний фрагмент із будь-якої з вказаних послідовностей).
Біспецифічне або біфункціональне антитіло являє собою штучне гібридне антитіло, яке має дві різні пари важких/легких ланцюгів і дві різні ділянки зв'язування. Біспецифічні антитіла можна одержувати множиною способів, включаючи злиття гібридом або зв'язування фрагментів Раб'.
Див., наприклад, зопозіміїаї, еї а!., (1990) Сііп. Ехр. Іттипої. 79: 315-321, Ковів!Іпу, єї аї., (1992)
Іттипої. 148:1547-1553. Крім того, біспецифічні антитіла можуть бути сформовані як "діатіла" (Ноїїдет, вї а!., (1993) РМАБ ОБА 90:6444-6448) або як "янусини" (Тгацйпескег, еї аї., (1991) ЕМВО у. 10:3655-3659 і Тгаипескег, єї а!., (1992) Іпі. 9. Сапсег Зиррі. 7:51-52).
Даний винахід, крім того, стосується спрямованих проти ТІСІТ антигензв'язувальних фрагментів антитіл проти ТІСІТ, описаних у даному документі. Фрагменти антитіл включають фрагменти Е(ар)», які можна одержувати за допомогою ферментативного розщеплення Ідс, наприклад, за допомогою пепсину. Фрагменти Раб можна одержувати, наприклад, за допомогою 60 відновлення Е(аб)» за допомогою дитіотреїтолу або меркаптоетиламіну.
Імуноглобуліни можна відносити до різних класів залежно від амінокислотних послідовностей константного домена їхніх важких ланцюгів. Існує щонайменше п'ять основних класів імуноглобулінів: ДА, дО, ІДЕ, дос і І9М, і декілька з них можна далі підрозділяти на підкласи (ізотипи), наприклад, Іде, Ідс2, доз і Ідея; Ід і Ідс2. Винахід стосується антитіл і антигензв'язувальних фрагментів антитіл з будь-якого з цих класів або підкласів.
В одному варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить константну область важкого ланцюга, наприклад, людську константну область, таку як константна область важкого ланцюга у1, у2, уЗ або у4 людини, або її варіант. В іншому варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить константну область легкого ланцюга, наприклад, людську константну область легкого ланцюга, таку як область легкого ланцюга лямбда або каппа людини, або його варіант. Як необмежувальний приклад, константна область важкого ланцюга людини може являти собою уй4, і константна область легкого ланцюга людини може являти собою каппа. В альтернативному варіанті здійснення, Ес-область антитіла являє собою у4 з мутацією Зег228Рго (Зспицптап, . еї. а!., Мої. Іттипої. 38: 1-8, 2001).
В одному варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить константну область важкого ланцюга підтипу Ідс1.
У деяких варіантах здійснення різні константні домени можна приєднувати до гуманізованих областей Мі і Мн, отриманих з СОР, представлених у даному документі. Наприклад, якщо конкретне намічене застосування антитіла (або фрагмента) за даним винаходом вимагає змінених ефекторних функцій, можна використовувати константний домен важкого ланцюга, відмінний від (91 людини, або можна використовувати гібрид Ідс1/Лдсоаі.
Хоча антитіла (Де1 людини забезпечують тривалий час напівжиття і ефекторні функції, такі як активація комплементу й антитілозалежна клітинна цитотоксичність, такі види активності можуть не бути бажаними для всіх застосувань антитіла. У таких випадках можна використовувати, наприклад, константний домен 954 людини. Даний винахід стосується антитіл проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальних фрагментів, які містять константний домен Ідс4, наприклад, антагоністичних, гуманізованих антитіл проти ТІСІТ ї фрагментів, і способів їхнього застосування. В одному варіанті здійснення константний домен Іде4 може відрізнятися від природного константного домена Ід54 людини (номер доступу в Зм/із5-Ргої Ассевзвіоп Мо.
Зо РО1861.1) у положенні, що відповідає положенню 228 у системі ЄЮ і положенню 241 у системі
КАВАТ, де природний 5ег 108 замінений на Рго для запобігання потенційному міжланцюговому дисульфідному зв'язку між Суз 106 і Суб5 109 (відповідними положенням Суз 226 і Суз 229 у системі БО і положенням Суз 239 і Су5 242 у системі КАВАТ), що може заважати формуванню правильного внутрішньоланцюгового дисульфідного зв'язку. Див. Ападаї еї а. (1993) Мої. Ітипої. 30:105. В інших випадках, можна використовувати модифікований константний домен Ідс1, модифікований для збільшення часу напівжиття або ослаблення ефекторної функції.
Конструювання антитіл
Далі включені варіанти здійснення, у яких антитіла проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальні фрагменти являють собою антитіла, сконструйовані для включення модифікацій у каркасні залишки усередині варіабельних доменів вихідного (наприклад, мишачого або щурячого) моноклонального антитіла, наприклад, для поліпшення властивостей антитіла або фрагмента.
Як правило, такі модифікації каркаса виконують для зменшення імуногенності антитіла або фрагмента. Це, як правило, здійснюють за допомогою заміни залишків у варіабельних доменах, які не належать до СОК (тобто каркасних залишків), у вихідному (наприклад, що належить до гризунів) антитілі або фрагменті на аналогічні залишки з імунного репертуару видів, використанню в яких підлягає антитіло, наприклад, людські залишки у випадку терапевтичного засобу для людини. Таке антитіло або фрагмент позначають як "гуманізоване" антитіло або фрагмент. У деяких випадках бажано збільшити афінність або змінити специфічність сконструйованого (наприклад, гуманізованого) антитіла. Одним зі способів є "зворотний мутагенез" одного або декількох каркасних залишків до відповідної зародкової послідовності.
Більш конкретно, антитіло або фрагмент, що піддавалися соматичній мутації, можуть містити каркасні залишки, які відрізняються від зародкової послідовності, з якої походить антитіло. Такі залишки можна ідентифікувати за допомогою порівняння каркасних послідовностей антитіла або фрагмента з зародковими послідовностями, з яких походить антитіло або фрагмент. Іншим способом є повернення до вихідного батьківського (наприклад, що належить до гризунів) залишку в одному або декількох положеннях сконструйованого (наприклад, гуманізованого) антитіла, наприклад, для відновлення афінності зв'язування, яка може бути загублена в процесі заміни каркасних залишків. (Див., наприклад, Патент США Мо. 5693762, Патент США Мо. 5585089 і Патент США Мо. 5530101.)
У конкретних варіантах здійснення антитіла проти ТІСІП і їх антигензв'язувальні фрагменти є сконструйованими (наприклад, гуманізованими), щоб включати модифікації в каркасі і/або СОК для поліпшення їхніх властивостей. Такі сконструйовані зміни можуть бути основані на молекулярному моделюванні. Молекулярну модель для варіабельної області для вихідної (яка не належить до людини) послідовності антитіла можна конструювати для розуміння структурних ознак антитіла і використовувати для ідентифікації потенційних областей на антитілі, що можуть взаємодіяти з антигеном. Загальноприйняті СОК основані на вирівнюванні послідовностей імуноглобулінів і ідентифікації варіабельних областей. Кабаї еї а!., (1991) бедиепсевз ої Ргоївіп5 ої Іттипо|одісаї! Іпіегеві, Кабаї, єї а1!.; Майопаї Іпвійціев ої Неац, Ветштезаа, Ма.; 5 єд.; МІН Рибі.
Мо. 91-3242; Кабваї (1978) Аду. Ргої. Спет. 32:1-75; Кабаї, сеї аї., (1977) 9. Віої. Спет. 252:6609- 6616. СпоїШіа і співавтори ретельно досліджували конформації петель у кристалічних структурах антитіл і запропонували гіперваріабельні петлі. Споїпіа, еї аї., (1987) У Мої. Віо|. 196:901-917 або Споїпіа, єї аї., (1989) Майшге 342:878-883. Існують відмінності між областями, класифікованими як "СО" і "гіперваріабельні петлі". У більш пізніх дослідженнях (Кадпипаїйап еї аї, (2012) 9. Мо! Несод. 25, 3, 103-113) аналізували кілька кристалічних комплексів антитіло- антиген і спостерігали, що антигензв'язувальні області в антитілах не обов'язково приймають сувору конформацію по залишках "СОК" або "гіперваріабельних" петлях. Молекулярну модель для варіабельної області антитіла, яке не належить до людини, можна використовувати як посібник для вибору областей, які потенційно можуть зв'язуватися з антигеном. На практиці потенційні антигензв'язувальні області основані на моделі, відрізняються від загальноприйнятих "СОМ" або "гіперваріабельних" петель. Комерційне наукове програмне забезпечення, таке як МОЄ (Спетіса! Сотрийпуд гоир) можна використовувати для молекулярного моделювання. Людські каркасні області можна вибирати на підставі найкращих збігів з послідовністю, яка не належить до людини, як у каркасних областях, так і в СОК. Для
ЕКА4 (каркасної області 4) у МН, області У) із зародкових послідовностей людини порівнюють з відповідною областю, яка не належить до людини. У випадку ЕКА4 (каркасної області 4) у МІ, області .-каппа і ОУ-лямбда з зародкових послідовностей людини порівнюють з відповідною областю, яка не належить до людини. Після ідентифікації прийнятних людських каркасних областей, СОК прищеплюють у вибрані людські каркасні області. У деяких випадках конкретні залишки на поверхні розділення МІ -МН можна залишати, як у послідовності (вихідній), яка не належить до людини. Молекулярні моделі можна також використовувати для ідентифікації залишків, що можуть потенційно змінювати конформації СОК, і таким чином, зв'язування з антигеном. У деяких випадках, ці залишки зберігають, як у послідовності (вихідній), яка не належить до людини. Молекулярні моделі можна також використовувати для ідентифікації експонованих для розчинника амінокислот, що можуть приводити до небажаних ефектів, таких як глікозилування, дезамідування й окиснення. Фільтри, які виявляють, можна використовувати рано на стадії розробки для виключення/мінімізації цих потенційних проблем.
Інший тип модифікації каркаса включає мутагенез одного або декількох залишків у каркасній області, або навіть в одній або декількох областях СОР, для видалення епітопів для Т-клітин, щоб у такий спосіб зменшити потенційну імуногенність антитіла. Цей спосіб позначають також як "деімунізацію", і він більш детально описаний у Патенті США Мо. 7125689.
У конкретних варіантах здійснення бажано замінювати конкретні амінокислоти, що містять експоновані бічні ланцюги, на інший амінокислотний залишок, щоб забезпечувати більшу хімічну стабільність кінцевого антитіла, так щоб виключити дезамідування або |ізомеризацію.
Дезамідування аспарагіну може відбуватися в послідовностях МО, 0, МО, М5, МА, МТ, 00 або
О5 і приводить до утворення залишку ізоаспарагінової кислоти, що вводить перегин у поліпептидний ланцюг і зменшує його стабільність (ефект ізоаспарагінової кислоти).
Ізомеризація може відбуватися в послідовностях ОО, О5, ТАК або ОТ. У конкретних варіантах здійснення антитіла за даним описом не містять ділянок дезамідування або ізомеризації аспарагіну.
Наприклад, залишок аспарагіну (Ап) можна замінювати на Сіп або Аіа для зменшення потенціалу утворення ізоаспартату в будь-якій з послідовностей А5п-Сіу, зокрема, усередині
СОК. Подібна проблема може виникати в послідовності Азр-Сі1у. Неіззпег апа Авмай (2003) Сеї.
Мої. І їйе 5сі. 60:1281. Формування ізоаспартату може послаблювати або повністю припиняти зв'язування антитіла з його антигеном-мішенню. Див., Ргебїа (2005) У. АйПегау Сіїп. Іттипої. 116:731 аї 734. В одному варіанті здійснення аспарагін заміняють на глутамін (СіІп). Також може бути бажаним змінювати амінокислоту, суміжну з залишком аспарагіну (Азп) або глутаміну (іп), для зменшення імовірності дезамідування, що відбувається з більшою частотою, коли невеликі амінокислоти виявляються суміжними з аспарагіном або глутаміном. Див., Візспой 4 КоїЇре бо (1994) У. Спготагйод. 662:261. Крім того, будь-які залишки метіоніну (як правило, експонованого для розчинника Ме) у СОК можна замінювати на ув, І ем, АІа або Ре, або інші амінокислоти, для зменшення імовірності того, що сірка метіоніну буде окиснюватися, що може зменшувати афінність зв'язування з антигеном, а також вносити вклад у молекулярну гетерогенність у кінцевому препараті антитіла, там же. Крім того, для запобігання або мінімізації потенційного розщеплення пептидних зв'язків Азп-Рго, може бути бажаним замінювати будь-які комбінації
Авп-Рго, виявлені в СОК, на СіІп-Рго, Аіа-Рго або Авп-АІа. Потім виконують скринінг антитіл з такими замінами, щоб упевнитися, що заміни не зменшують афінність або специфічність антитіла відносно ТІСІТ, або іншу бажану біологічну активність до неприйнятних рівнів.
Таблиця 2
Ілюстративні стабілізуючі СОК варіанти розчинника) (Ю, (9), (А), або (Р) (0) або (А)
У деяких варіантах здійснення даного винаходу СОКЗ з ЗЕО ІЮ МО:З3 можна модифікувати в положенні 110М/ для зменшення або виключення потенційного окиснення (де нумерація приведена відповідно до Кара). Таким чином, наприклад, 5ЕБО ІЮ МО: 3 (МРУОБІТ АБІ ЗТУМЕСУЕБОБ) можна модифікувати до будь-якої з наступних послідовностей:
МРБЗЕПТАБІ ЗТЕЕОМЕОБ (5БО 10 МО: 79), МРБОЕІТГАБІ ЗТМЕСМБОБ (5ЕБО ОО МО: 80),
МРЗРЕЇІТГАБІ ЗТІЕОМЕОБ (ЗЕБО ІЮ МО: 81), МРЗЕІТГАБІ ЗТМЕСУБОЕ (5ЕБО І МО: 82) або
МРБРЕЇІТІ АБІ ТІ ЕС МЕОЕ (5ЕО ІЮ МО: 83). Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить СОКІ з ЗЕО ІЮ МО71, СОК2 з ЗЕО ІЮ МО: 2 і СОКЗ з 5БЕО І МО: 3, 79, 80, 81, 82 або 83.
У деяких варіантах здійснення даного винаходу СОК2 з БЕО ІЮО МО: 5 можна модифікувати в положеннях 52М і 535 для зменшення або виключення потенційних ділянок дезамідування (де нумерація приведена відповідно до Кабаї). Таким чином, наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 5 (МАМІ ОТ) можна модифікувати до будь-якої з наступних послідовностей: МАМІ ОТ (5БО ІЮ МО: 65),
МАББ5І ОТ(ЗЕО ІЮ МО: 66), МАЗТІ ОТ(ЗЕО ІЮО МО: 67), МАТ ОТ (5ЕО ІЮ МО: 68), МАБМІ ОТ (ЗЕО ІО МО: 69), МАМОГОТ (5ЕО ІЮ МО: 70), МАа5ІОТ(ЗЕО 10 МО:71), МАБОГОТ(ЗЕО Ір
МО:72), МАОБІ ОТ(ЗЕО ІЮ МО:73). Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить
СОМ з 5ЕО ІЮ МО: 4, СОК2 з ЗЕО ІЮО МО: 5, 5ЕО ІЮО МО: 66, ЗЕО ІО МО: 67, ЗЕО ІЮ МО: 68,
ЗЕО ІЮО МО: 69, ЗЕО ІЮ МО: 70, 5ЕО ІЮ МО: 72, 5ЕО ІО МО: 72 або 5ЕО ІЮ МО: 73 і СОКЗ з ЗЕО
Зо ІО МО: 6.
У деяких варіантах здійснення даного винаходу СОКЗ з 5ЕО ІЮ МО: 6 можна модифікувати в положенні 95УУ для зменшення або виключення потенційного окиснення (де нумерація приведена відповідно до Кара). Таким чином, наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 6 (00ОМУБЗОМУТ) можна модифікувати до будь-якої з наступних послідовностей: ОБО (ЗБО ІЮ МО: 74),
ООМУБИаМТ (5ЕО ІЮО МО: 75), ООМУБИІТ (5ЕО І МО: 76), ООМУБаМТ (5ЕБЕО ІО МО: 77),
ООМУБаІ ТТ (5ЕО ІО МО: 78). Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить
СОМ з БЕО І МО: 4, СОМК2 з ЗЕО ІЮ МО: 5 і СОКЗ з 5ЕО ІЮ МО: 6, ЗЕО ІЮ МО: 74, ЗЕО ІЮ МО: 75, 5ЕО ІЮ МО: 76, ЗЕО ІЮ МО: 77 або 5ЕО ІЮ МО: 78.
У деяких варіантах здійснення даного винаходу антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить СОКІ з ЗЕО ІО МО: 4, СОК2 з БЕО ІЮ МО: 5,
ЗЕО ІЮ МО: 66, 5ЕО ІЮО МО: 67, 5ЕО ІЮ МО: 68, 5ЕО ІО МО: 69, 5ЕО ІО МО: 70, 5ЕО ІЮ МО: 72,
ЗЕО ІЮО МО: 72 або 5ЕО ІО МО: 73 і СОМЗ з БЕО ІЮ МО: 6, 5ЕО ІЮ МО: 74, 5ЕО ІЮ МО: 75, ЗЕО
ІО МО: 76, ЗЕО ІЮ МО: 77 або ЗЕО І МО: 78.
В іншому варіанті здійснення даного винаходу антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить область ЕК4 важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 7, 9-24 або 38-47, де М у положенні 122 заміненийнам,!, А,К, М, РО, Е, 0,1, Н, К, Е, 5, Т, М/ або І. для виключення потенційного окиснення.
В іншому варіанті здійснення даного винаходу антитіло проти ТІСІТ за винаходом містить область ЕК4 важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 7, 9-24 або 38-47, де М у положенні 122 і М у положенні 123 замінені на Т ії, відповідно, для виключення потенційного окиснення.
У деяких варіантах здійснення даного винаходу СОКЗ з БЕО ІЮ МО: 90 можна модифікувати в положенні б для зменшення або виключення потенційного окиснення. Таким чином, наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 90 (СОРМСОМУМЕОМ) можна модифікувати до будь-якої з наступних послідовностей: ЗЕО ІЮ МО: 154-167.
Конструювання Ес-області антитіла
Антитіла (наприклад, гуманізовані антитіла) і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), також можна конструювати для включення модифікацій у Ес-область, як правило, для зміни однієї або декількох властивостей антитіла, таких як час напівжиття в сироватці, фіксація комплементу, зв'язування з рецептором Ес, і/або ефекторна функція (наприклад, антигензалежна клітинна цитотоксичність). Більше того, антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 316 і їх гуманізовані варіанти), можна хімічно модифікувати (наприклад, одну або кілька хімічних груп можна приєднувати до антитіла) або модифікувати для зміни його глікозилування, також для зміни однієї або декількох властивостей антитіла або фрагмента. Кожний з цих варіантів здійснення більш детально описаний нижче. Нумерація залишків у Ес-області являє собою індекс ЄЮ по Кабаї.
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 316 і їх гуманізовані варіанти), включають також антитіла і фрагменти з модифікованими (або блокованими) Ес-областями для забезпечення змінених ефекторних функцій. Див., наприклад, Патент США Мо. 5624821; ММО2003/086310; УМО2005/120571; ММО2006/0057702. Такі модифікації можна використовувати для посилення або супресії різних реакцій імунної системи,
Зо з можливими сприятливими ефектами для діагностики і терапії. Зміни в Ес-області включають зміни амінокислот (заміни, делеції і вставки), глікозилування або деглікозилування і додавання множинних Ес-областей. Зміни в Ес можуть також змінювати час напівжиття антитіл у терапевтичних антитілах, дозволяючи менш часте дозування і таким чином, збільшену зручність і зменшене використання матеріалу. Див. Ргевзіа (2005) 9. АПегау Сіїп. Іттипої. 116:731 аї 734- 35.
В одному варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 або їх гуманізовані варіанти) являють собою антитіло або фрагмент ізотипу Ідс4, що містять мутацію серину до проліну в положенні, що відповідає положенню 228 (5228Р; індекс Е)) у шарнірній області константної області важкого ланцюга.
Опубліковано, що ця мутація виключає гетерогенність дисульфідних містків між важкими ланцюгами в шарнірній області (Апааї єї аЇ. вище; положення 241 на підставі системи нумерації
Кабай).
В одному варіанті здійснення винаходу шарнірну область Сні модифікують так, що кількість залишків цистеїну в шарнірній області збільшується або зменшується. Цей спосіб додатково описаний у Патенті США Мо. 5677425. Кількість залишків цистеїну в шарнірній області Сні змінюють, наприклад, для полегшення зборки легких і важких ланцюгів або для збільшення або зменшення стабільності антитіла.
В іншому варіанті здійснення шарнірну область Ес антитіла або антигензв'язувального фрагмента за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5 або 31С6 або їх гуманізованих варіантів) піддають мутагенезу для зменшення біологічного часу напівжиття антитіла або фрагмента.
Більш конкретно, одну або кілька амінокислотних мутацій вводять у поверхню контакту СН2-
СНЗ домена Ес-шарнірного фрагмента, так що антитіло або фрагмент мають порушене зв'язування стафілококового білка А (5рА) відносно зв'язування 5рА природним Ес-шарнірним доменом. Цей спосіб більш детально описаний у Патенті США Мо. 6165745.
В іншому варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6 або 28Н5 або його гуманізований варіант) модифікують для збільшення його біологічного часу напівжиття. Можливі різні способи. Наприклад, можна вводити одну або декілька з наступних мутацій: Т252І/, 12545, Т256Е, як описано в Патенті США Мо. 6277375.
Альтернативно, для збільшення біологічного часу напівжиття, антитіло можна змінювати 60 усередині області СНІ або Сі, щоб воно містило епітоп зв'язування рецептора порятунку, 5О0 узятий із двох петель домена СН2 Ес-області дО, як описано в Патентах США Мо. 5869046 і
В інших варіантах здійснення Ес-область змінюють за допомогою заміни щонайменше одного амінокислотного залишку на інший амінокислотний залишок для зміни ефекторно) функції(функцій) антитіла або антигензв'язувального фрагмента. Наприклад, одну або кілька амінокислот, вибраних з амінокислотних залишків 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 і 322, можна замінювати на інший амінокислотний залишок, так щоб антитіло мало змінену афінність для ефекторного ліганду і зберігало антигензв'язувальну здатність вихідного антитіла. Ефекторний ліганд, афінність для якого змінюють, може являти собою, наприклад, рецептор Ес або компонент комплементу С1. Цей спосіб більш детально описаний у Патентах США Мо. 5624821 і 5648260.
В іншому прикладі, одну або кілька амінокислот, вибраних з амінокислотних залишків 329, 331 і 322, можна замінювати на інший амінокислотний залишок, так щоб антитіло мало змінене зв'язування С14 і/або зменшену або втрачену комплементзалежну цитотоксичність (СОС). Цей спосіб більш детально описаний у Патенті США Мо. 6194551.
В іншому прикладі, один або кілька амінокислотних залишків у положеннях амінокислот 231 і 239, змінюють, щоб у такий спосіб змінити здатність антитіла фіксувати комплемент. Цей спосіб додатково описаний у публікації РСТ УМО 94/29351.
В іншому прикладі, Есо-область модифікують для зменшення здатності антитіла або антигензв'язувального фрагмента за винаходом (наприклад, 14А6 або 28Н5, або їх гуманізованого варіанта) опосередковувати антитілозалежну клітинну цитотоксичність (АЮСС) іМабо для зменшення афінності антитіла або фрагмента для рецептора Есу за допомогою модифікації однієї або декількох амінокислот у наступних положеннях: 238, 239, 243, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 264, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 або 439. Цей спосіб додатково описаний у публікації РСТ УМО 00/42072. Більше того, картовані ділянки зв'язування на Їдсе1 людини для ЕсукКл1, ЕсуКІЇї, ЕсуКІІ ї ЕсКп, і описані варіанти з поліпшеним зв'язуванням (див. Зпівїаз еї аї. (2001) 9. Віої. Спет. 276:6591-6604).
В одному варіанті здійснення винаходу Ес-область модифікують для зменшення здатності антитіла за винаходом (наприклад, 14Аб6, 28Н5, 3106 і їх гуманізованих варіантів) опосередковувати ефекторну функцію і/або збільшувати протизапальні властивості за допомогою модифікації залишків 243 і 264. В одному варіанті здійснення Ес-область антитіла або фрагмента модифікують за допомогою зміни залишків у положеннях 243 і 264 на аланін. В одному варіанті здійснення Ес-область модифікують для зменшення здатності антитіла або фрагмента опосередковувати ефекторну функцію і/або для збільшення протизапальних властивостей за допомогою модифікації залишків 243, 264, 267 і 328.
Посилення ефекторної функції
У деяких варіантах здійснення Ес-область антитіла проти ТІСІї модифікують для збільшення здатності антитіла або антигензв'язувального фрагмента опосередковувати ефекторну функцію і/або для посилення їхнього зв'язування з рецепторами Ес-гамма (Есукзв).
Термін "ефекторна функція", як застосовують у даному документі, призначений для позначення одного або декількох з антитілозалежної опосередкованої клітинами цитотоксичної активності (АЮБСС), відповідей, опосередкованих комплементзалежною цитотоксичною активністю (СОС), опосередкованого Ес або фагоцитозу антитілозалежного клітинного фагоцитозу (АОСР) і рециркуляції антитіла за допомогою рецептора ЕсКп.
Вважають, що взаємодія між константною областю антигензв'язувального білка і різних рецепторів Ес (ЕСК), включаючи Ес-гаммакіІ (СО64), Ес-гаммакі! (СО32) і Рс-гаммакн! (Ср16), опосередковує ефекторні функції, такі як АОСС і СОС, антигензв'язувального білка. Рецептор
Ес також є важливим для перехресного зв'язування антитіл, що може бути важливим для протипухлинного імунітету.
Ефекторну функцію можна вимірювати рядом способів, включаючи, наприклад, вимірювання за допомогою зв'язування Ес-гаммакКі!й! із клітинами природними кілерами або за допомогою зв'язування Есо-гаммакКІ! з моноцитами/макрофагами для вимірювання ефекторної функції АОСС. Наприклад, антигензв'язувальний білок за даним винаходом можна оцінювати по ефекторній функції АОСС в аналізі клітин природних кілерів. Приклади таких аналізів можна знайти в Зпіеїд5 еї аї, 2001 9. ВіоЇ. Спет., Мої. 276, р 6591-6604; Спарреї! єї аїЇ, 1993 У. Віої.
Спет., Мої 268, р 25124-25131; І агаг еї аі, 2006 РМАБ, 103; 4005-4010.
Властивості АЮСС або СОС антитіл за даним винаходом, або їхньої властивості бо перехресного зв'язування, можна підсилювати рядом способів.
Для константних областей ІдС1 людини, які мають специфічні мутації або змінене глікозилування на залишку Азп297, показане посилення зв'язування з рецепторами Ес. У деяких випадках показано також, що ці мутації підсилюють АЮСС і СОС (І а;аг еї ані. РМАЗ 2006, 103; 4005-4010; Зпівіаз еї аї. У Віої Снет 2001, 276; 6591-6604; МеснапекКу еї аї. Мої Іттипої, 2007, 44; 1815-1817).
В одному варіанті здійснення даного винаходу такі мутації присутні в одному або декількох з положень, вибраних з 239, 332 і 330 (91), або еквівалентних положень в інших ізотипах Ід.
Прикладами прийнятних мутацій є 52390 і ІЗ3З2Е і АЗЗОЇ. В одному варіанті здійснення антигензв'язувальний білок за винаходом, описаний у даному документі, піддають мутагенезу в положеннях 239 і 332, наприклад, 52390 і ІЗ32Е, або в наступному варіанті здійснення, його піддають мутагенезу в трьох або більше положеннях, вибраних з 239 і 332 і 330, наприклад, 2390 і І332Е і АЗЗОЇ (нумерація по індексу ЕМ).
В альтернативному варіанті здійснення даного винаходу представлене антитіло, яке містить константну область важкого ланцюга зі зміненим профілем глікозилування, так що антигензв'язувальний білок має посилену ефекторну функцію. Наприклад, де антитіло має посилену АОСС або посилену СОС, або де воно має посилені обидві ефекторні функції АОСС і
СОС. Приклади прийнятних способів одержання антигензв'язувальних білків зі зміненим профілем глікозилування описані в /О2003011878, ММО2006014679 і ЕР1229125.
У наступному аспекті, даний винахід стосується "нефукозилованих" або "афукозилованих" антитіл. Нефукозиловані антитіла несуть триманозилову корову структуру Ес з М-гліканів комплексного типу без залишків фукози. Ці глікомодифіковані антитіла, позбавлені корового фукозного залишку з М-гліканів Ес, можуть мати сильнішу АОСС, ніж фукозиловані еквіваленти через посилення здатності зв'язування з Ес-гаммак Па.
Даний винахід також стосується способу одержання антитіла за винаходом, який включає стадії: а) культивування рекомбінантної клітини-хазяїна, яка містить експресуючий вектор, що містить виділену нуклеїнову кислоту, як описано в даному документі, де рекомбінантна клітина- хазяїн не містить альфа-1,6-фукозилтрансферази; і 5) виділення антигензв'язувального білка.
Рекомбінантна клітина-хазяїн може в нормі не містити ген, що кодує альфа-1,6- фукозилтрансферазу (наприклад, клітини-хазяїни дріжджів, такі як види Ріспіа), або може бути
Зо генетично модифікованою для інактивації альфа-1,6-фукозилтрансферази. Доступні рекомбінантні клітини-хазяїни, генетично модифіковані для інактивації гена РОТ8, що кодує альфа-1,6-фукозилтрансферазу. Див., наприклад, систему технологій РОТЕГІСЕМТ "М, доступну від Віоума, Іпс. (Ргіпсеоп, М.9У.), у якій клітини СНОКІ15МУ, позбавлені функціональної копії гена ЕИТ8, продукують моноклональні антитіла, що мають посилену активність антитілозалежної опосередкованої клітинами цитотоксичності (АОСС), збільшеної відносно ідентичного моноклонального антитіла, продукованого в клітині з функціональним геном РТВ.
Аспекти системи технологій РОТЕ ГІСЕМТ М описані в 57214775, 56946292, ММО0061739 і
УМ/О00231240. Фахівцям в даній галузі відомі також інші прийнятні системи.
Фахівцям в даній галузі зрозуміло, що такі модифікації можна не тільки використовувати окремо, але можна використовувати в комбінації одну з одною для додаткового посилення ефекторної функції.
Одержання антитіл з модифікованим глікозилуванням
В іншому варіанті здійснення антитіла або антигензв'язувальні фрагменти за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти) містять конкретний патерн глікозилування. Наприклад, можна одержувати афукозиловане або аглікозиловане антитіло або фрагмент (тобто, антитіло, позбавлене фукози або глікозилування, відповідно). Патерн глікозилування антитіла або фрагмента можна змінювати, наприклад, для збільшення афінності або авідності антитіла або фрагмента відносно антигену ТІСІТ. Такі модифікації можна виконувати, наприклад, за допомогою зміни однієї або декількох з ділянок глікозилування в послідовності антитіла або фрагмента. Наприклад, можна здійснювати одну або кілька амінокислотних замін, що приводять до видалення однієї або декількох ділянок глікозилування з каркаса варіабельної області, щоб у такий спосіб виключити глікозилування в цій ділянці. Таке аглікозилування може збільшувати афінність або авідність антитіла або фрагмента для антигену. Див., наприклад, Патенти США Мо. 5714350 і 6350861.
Антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти) можуть, крім того, включати антитіла і фрагменти, продуковані в клітинах-хазяях нижчих еукаріот, зокрема, у клітинах-хазяях грибів, таких як дріжджі і міцеліальні гриби, які генетично модифіковані для продукції глікопротеїнів, що мають патерни глікозилування, подібні до патернів глікозилування ссавців або людини (Див., 60 наприклад, Спої еї аї, (2003) Ргос. Маї). Асай. Зсі. 100: 5022-5027; Натіюп еї а!., (2003) Зсієпсе
301: 1244-1246; Натійоп еї аї., (2006) Зсієпсе 313: 1441-1443; Мей єї аї., Уєаві 28(3):237-52 (2011); Натійп еї аї!., Сит Оріп ВіоїєсНнпої. Осі 18(5):387-92 (2007)). Особливою перевагою цих генетично модифікованих клітин-хазяїнів над застосовуваними в даний час лініями клітин ссавців є можливість контролю профілю глікозилування глікопротеїнів, продукованих у клітинах, так що можна одержувати композиції глікопротеїнів, де переважає конкретна структура М- глікану (див., наприклад, Патент США Мо. 7029872 і Патент США Мо. 7449308). Ці генетично модифіковані клітини-хазяїни використовували для продукції антитіл з перевагою конкретних структур М-гліканів (Див., наприклад, І і еї аї., (2006) Маї. Віотесппої. 24: 210-215).
У конкретних варіантах здійснення антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 316 і їх гуманізовані варіанти), крім того, включають антитіла і фрагменти, які продуковані в клітинах-хазяях низьких еукаріот і містять фукозиловані і нефукозиловані гібридні і комплексні М-глікани, включаючи розгалужені надвоє і мультиантенні молекули, включаючи, але без обмеження, М-глікани, такі як сісСМАси-оМапз СісМАсе2; Са(-
ЗаісМАс(и-оМапз СІСМАсг; МАМА (оба -з ас МАсіи-3Мапз СпИеМАс».
У конкретних варіантах здійснення антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), можуть містити антитіла або фрагменти, що мають щонайменше один гібридний М-глікан, вибраний із групи, яка складається з СІСМАсМап5 СісМАсг; СаійісМАсМапо5 СісМАсе; і
МАМАСсіаеМмАсМап» СісМАс». У конкретних аспектах, гібридний М-глікан є переважним видом
М-гліканів у композиції.
У конкретних варіантах здійснення антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), містять антитіла і фрагменти, що мають щонайменше один комплексний М-глікан, вибраний із групи, яка складається з СІСМАсМапз СісМАсг; СсаісісМАсМапз СісМАсг; МАМАСаійісМмАсМапз
СІсСМАсг; СІСМАсоМапз СИСМАсг; Ссза!(йісМАсаМапз СІСМАсг; Саіг СІСМАс»аМапз СИСМАсг; МАМАСс а!»
СісМАс»Мапз СісМАс»г; і МАМА» Са» СІСМАс»Мапз СісМАс». У конкретних аспектах, комплексні М- глікани є переважними видами М-гліканів у композиції. У наступних аспектах, комплексний М- глікан являє собою конкретний вид М-гліканів, що складає приблизно 30 95, 40 95, 50 Фо, 60 9, 70 9, 80 95, 90 95, 95 95, 97 Уо, 98 95, 99 95 або 100 95 з комплексних М-гліканів у композиції. В
Зо одному варіанті здійснення антитіло і його антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному документі, містять комплексні М-глікани, де щонайменше 50 95, 60 Фо, 70 95, 80 Фо, 90 Ор, 9596, 9795, 9895, 9995 або 10095 з комплексних М-гліканів містять структуру
МАМА»СтаігаієМАс»МапзаісМАсг, де така структура є афукозилованою. Такі структури можна одержувати, наприклад, у модифікованих клітинах-хазяях Ріспіа разіогів.
У конкретних варіантах здійснення М-глікан є фукозилованих. Як правило, фукоза знаходиться на а1,3-зв'язку з СІСМАс на відновлювальному кінці М-глікану, на с1,6-зв'язку з
СІСМАс на відновлювальному кінці М-глікану, на а1,2-зв'язку з Са! на невідновлювальному кінці
М-глікану, на а«1,3-зв'язку з СісМас на невідновлювальному кінці М-глікану, або на а1,4-зв'язку з
СІСМАс на невідновлювальному кінці М-глікану.
Таким чином, у конкретних аспектах вищевказаних глікопротеїнових композицій, глікоформа являє собою фукозу з а1,3-зв'язком або «а1,6-зв'язком для одержання глікоформи, вибраної з групи, яка складається з Мап5 СсіІСМАс»(ЕРис), СісМАсМап5 СісМАс»(Рис), МапзаіІсМАса(Рис),
СісмМАсМапзаісМАсг(Рис), СІсСМАсаМапз СісМАсг(Рис), СаійісМАс»Мапз СіІсМАсг(Рис), Саїг
СсісСМАсгМапз СісСМАсг(Рис), МАМАСставгаісМАсаМапзасМАсг(Рис), і
МАМА»Стага|єМАс»МапзасМАсг(Рис); фукозу з а1,3-зв'язком або «а1,4-зв'язком для одержання глікоформи, вибраної з групи, яка складається з сІСМАс(Рис)Мапо СісМАсг2, СІСМАс(Рис)Мапз
СісСМАсг, СсИіСМАсг(Рисі-2)Мапз СісМАсг, СаійісМАсг(Рисі-)Мапз СспісМАс2, Сзаі»г. СісСМАсг(Рис1- 2)Мапз СіІсМАс», МАМАСта» СспіІсМАсг(Рисі-2)Мапз СісМАс», і МАМА» Саіг СИісМАсг(Рисз- 2)МапзаісМАсг; або фукозу з а1,2-зв'язком для одержання глікоформи, вибраної з групи, яка
БО складається з Са(Рис)сІсСМАсг2МапзаісМАсг, (заЇг(Рисі-2)ІсМАс»аМапзаісМАсго, МАМАСаї!г(Рисзі- 2)сІсМАс»МапзаісМАс» і МАМАгСаІг(Рисі-2г)ІсСМАс»Мапз СИПеМАс».
У наступних аспектах, антитіла (наприклад, гуманізовані антитіла) або їх антигензв'язувальні фрагменти містять М-глікани з високим вмістом манози, включаючи, але без обмеження,
МапвасіІсМАсг, Мап7СісМАсг, МапесісМАсг, Мап5сіІсМАсг, МапаСісМАсг, або М-глікани, які складаються з М-гліканової структури МапзаІсМАс».
У наступних аспектах вищевказаного, комплексні М-глікани, крім того, включають фукозиловані і нефукозиловані розгалужені надвоє і мультиантенні молекули.
Як застосовують у даному документі, терміни "М-глікан" ії "глікоформа" використовують взаємозамінно, і вони стосуються М-зв'язаного олігосахариду, наприклад, олігосахариду, бо приєднаного за допомогою зв'язку аспарагіну-М-ацетилглюкозаміну з залишком аспарагіну поліпептиду. М-зв'язані глікопротеїни містять залишок М-ацетилглюкозаміну, зв'язаний з амідним азотом із залишку аспарагіну в білку. Переважними цукрами, виявленими на глікопротеїнах, є глюкоза, галактоза, маноза, фукоза, М-ацетилгалактозамін (сзаіІМАс), М- ацетилглюкозамін ((ІСМАс) і сіалова кислота (наприклад, М-ацетилнейрамінова кислота (МАМА)). Процесинг груп цукру відбувається котрансляційно в просвіті ЕК і продовжується посттрансляційно в комплексі Гольджі для М-зв'язаних глікопротеїнів.
М-глікани мають спільний пентасахаридний кор МапзасісМАсг ("Мап" позначає манозу; "Сіс" позначає глюкозу; і "МАс" позначає М-ацетил; СІСМАс позначає М-ацетилглюкозамін). Як правило, структури М-гліканів представляють з невідновлювальним кінцем ліворуч і відновлювальним кінцем праворуч. Відновлювальний кінець М-глікану являє собою кінець, приєднаний до залишку Авбп, що містить ділянку глікозилування, на білку. М-глікани відрізняються відносно кількості розгалужень (антен), що містять периферичні цукри (наприклад, СІСМАс, галактозу, фукозу і сіалову кислоту), які додають до корової структури Мапз
СіІСМАсг ("Мап3"), що позначається також як ""триманозний кор", "пентасахаридний кор" або "олігоманозний кор". М-глікани класифікують відповідно до їх розгалужених складових частин (наприклад, з високим вмістом манози, комплексні або гібридні). Тип М-глікану "з високим вмістом манози" має п'ять або більше залишків манози. М-глікан "комплексного" типу, як правило, має щонайменше один сІСМАс, приєднаний до 1,3-манозного плеча, і щонайменше один СІСМАс, приєднаний до 1,6-манозного плеча ""риманозного" кора. Комплексні М-глікани можуть також мати залишки галактози ("Са!") або залишки М-ацетилгалактозаміну ("ЗаїІМАс"), необов'язково, модифіковані сіаловою кислотою або похідними (наприклад, "МАМА" або "МечАс", де "Меи" позначає нейрамінову кислоту, і "Ас" позначає ацетил). Комплексні М-глікани можуть також мати внутрішньоланцюгові заміни, що включають "розгалужений надвоє" СІСМАс і корову фукозу ("Рис"). Комплексні М-глікани можуть також мати множинні антени на "гриманозному кору", які часто позначаються як "мультиантенні глікани". "Гібридний" М-глікан має щонайменше один сіІсСМАс на кінці 1,3-манозного плеча триманозного кора і нуль або більше залишків манози на 1,6-манозному плечі триманозного кора. Різні М-глікани також позначають як "глікоформи".
Відносно комплексних М-гліканів, терміни "(-2", "(3-1", "50", "51", "752", "АТ" і "А?" означають
Зо наступне. "5-2" стосується структури М-глікану, яку можна характеризувати як МапзаісМАсе; термін "с-1" стосується структури М-глікану, яку можна характеризувати як сІсСМАсМапзасМАсе; термін "50" стосується структури М-глікану, яку можна характеризувати як сІіСМАс»МапзасМАсе; термін "1" стосується структури М-глікану, яку можна характеризувати як
СаідісМАс»аМапзсісМАсг; термін "052" стосується структури М-глікану, яку можна характеризувати як саїгсісМАс»Мапз СсісМАсг; термін "А1" стосується структури М-глікану, яку можна характеризувати як МАМАСагсІсСМАс»МапзаїсМАсе; і термін "А2" стосується структури М- глікану, яку можна характеризувати як МАМАгСавгсісМАс»МапзаісМАс». Якщо не вказано інакше, терміни "5-2", "(5-17 "50", "51", "52", "АТ", ії "А2" стосуються молекул М-глікану, позбавлених фукози, приєднаної до залишку СІСМАс на відновлювальному кінці М-глікану. Коли термін включає "ЕЕ", "Р" указує на те, що молекула М-глікану містить залишок фукози на залишку
СІСМАс на відновлювальному кінці М-глікану. Наприклад, СОЕ, С1Е, 2, АТЕ, і А2Е усі вказують на те, що М-глікан, крім того, включає залишок фукози, приєднаний до залишку сіІСМАс на відновлювальному кінці М-глікану. Нижчі еукаріоти, такі як дріжджі і міцеліальні гриби, у нормі не продукують М-глікани, що містять фукозу.
Відносно мультиантенних М-гліканів, термін "мультиантенні М-глікани" стосується М-гліканів, які додатково містять залишок СІСМАс на залишку манози, що містить невідновлювальний кінець на 1,6-плечі або на 1,3-плечі М-глікану або залишок СІСМАс на кожному із залишків манози, що містять невідновлювальний кінець на 1,6-плечі і 1,3-плечі М-глікану. Таким чином, мультиантенні М-глікани можна характеризувати формулами сСіІсМАсог-оМапзаіІсМАсег, Сай(- 0 дабіІсМАсог-оМапз СісСМАсг, або МАМАц(1-у(а-у(1ІсМАсог-оМапзаісМАс». Термін "1-4" стосується 1, 2, З або 4 залишків.
Відносно розгалужених надвоє М-гліканів, термін "розгалужений надвоє М-глікан" стосується
М-гліканів, у яких залишок СІСМАс зв'язаний із залишком манози на відновлювальному кінці М- глікану. Розгалужений надвоє М-глікан можна характеризувати формулою сСісСМАсзМапзаісМАса, де кожен залишок манози зв'язаний на його невідновлювальному кінці із залишком сІСМАс. На відміну від цього, коли мультиантенний М-глікан характеризують як сІСМАсзМапзаісМАсе, формула показує, що два залишки СІСМАс зв'язані з залишком манози на невідновлювальному кінці одного з двох плечей М-гліканів, і один сІСМАс залишок зв'язаний із залишком манози на невідновлювальному кінці іншого плеча М-глікану. бо Фізичні властивості антитіла
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), можуть додатково містити одну або кілька ділянок глікозилування у варіабельній області або легкого, або важкого ланцюга імуноглобуліну. Такі ділянки глікозилування можуть приводити до збільшеної імуногенності антитіла або фрагмента, або до зміни рК антитіла через змінене зв'язування антигену (Магзгпаї! еї аї. (1972) Аппи Кем
Віоспет 41:673-702; Саїа апа Моттізоп (2004) У Іттипої 172:5489-94; МаїйїскК еї а! (1988) У Ехр
Мей 168:1099-109; бріюо (2002) Сіусовріоосду 12:438-568; Рагекн еї а! (1985) Майте 316:452-7;
Мітига єї а). (2000) Мої! Іттипо!ї 37:697-706). Відомо, що глікозилування відбувається на мотивах, що містять послідовність М-Х-5/Т.
Кожне антитіло або антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) має унікальну ізоелектричну точку (рі), як правило, яка потрапляє в діапазон рН між 6 і 9,5. рі для антитіла Ідс1, як правило, потрапляє в діапазон рН 7-9,5, і рі для антитіла Ід4, як правило, потрапляє в діапазон рН 6-8.
Кожне антитіло або антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) має характерну температуру плавлення, де більш висока температура плавлення вказує на більшу загальну стабільність іп мімо (Кгізппатигйу К апа Маппіпда МС (2002) Сит РНнапт Віоїеснпої! 3:361-71). Як правило, Тмі (температура початкового розгортання) може складати більше 60 "С, більше 65 "С або більше 70 "С. Температуру плавлення антитіла або фрагмента можна вимірювати з використанням диференціальної скануючої калориметрії (Спеп єї аІ! (2003) Рпапт Ве5 20:1952-60; СПпіпапао єї а! (1999) Іттипої Гей 68:47-52) або кругового дихроїзму (Миїттау еї а1. (2002) У. Спготайодг 5сі 40:343-9).
У наступному варіанті здійснення антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти) вибрані так, щоб не деградувати швидко.
Деградацію антитіла або фрагмента можна вимірювати з використанням капілярного електрофорезу (СЕ) і МА! 0І-М5 (АІехапаєг АУ апа Ниднез ОЕ (1995) Апа! Снет 67:3626-32).
У наступному варіанті здійснення антитіла (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) і їх антигензв'язувальні фрагменти вибрані так, щоб виявляти мінімальні ефекти агрегації, що можуть приводити до запуску небажаної імунної відповіді і/або до змінених або несприятливих фармакокінетичних властивостей. Як правило, є прийнятними антитіла і
Ко) фрагменти з агрегацією 25 95 або менше, 20 95 або менше, 15 95 або менше, 10 95 або менше, або 595 або менше. Агрегацію можна вимірювати декількома способами, включаючи ексклюзійну колонку (СІК), високоефективну рідинну хроматографію (ВЕРХ), Ф«Ф світлорозсіювання.
Кон'югати антитіл
Антитіла проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), також можна кон'югувати з хімічною групою. Хімічна група може являти собою, серед іншого, полімер, радіоактивний ізотоп або цитотоксичний фактор. У конкретних варіантах здійснення хімічна група являє собою полімер, що збільшує час напівжиття антитіла або фрагмента в організмі суб'єкта. Прийнятні полімери включають, але без обмеження, гідрофільні полімери, що включають, але без обмеження, поліетиленгліколь (ПЕГ) (наприклад, ПЕГ з молекулярною масою 2 кДа, 5 кДа, 10 кДа, 12 кДа, 20 кДа, 30 кДа або 40 кДа), декстран і монометоксиполіетиленгліколь (МПЕГ). У Ії ее, еї аї., (1999) (Віосопі. Спет. 10:973-981) описані кон'юговані з ПЕГ одноланцюжкові антитіла. У Умеп, еї аї., (2001) (Віосоп). Спет. 12:545-553) описана кон'югація антитіл з ПЕГ, приєднаних до хелатора радіоактивних металів (діеєтилентриамінпентаоцтової кислоти (ОТРА)).
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 316 і їх гуманізовані варіанти) також можна кон'югувати з мітками, такими як 99Тс, 90уУ, тп, зар, 140, 125), ЗН, 191|, 110, 1503, 13М, 18Е, 355, 510, 57То, 226Ва, 690, 59Ее, 5756, 152Еу, 675), 21761, г11дії, 212рр, 475с, 199р, 234Тр і ОК, 157330, 55Мп, 92Тт і 56Ев.
Антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) також можна пегилювати, наприклад, для збільшення їхнього біологічного часу напівжиття (наприклад, у сироватці). Для пегилювання антитіла або фрагмента, як правило, виконують реакцію антитіла або фрагмента з реакційноздатною формою поліеєтиленгліколю (ПЕГ), такою як реакційноздатний складний ефір або альдегідне похідне ПЕГ, в умовах, у яких одна або кілька груп ПЕГ приєднуються до антитіла або фрагмента антитіла. У конкретних варіантах здійснення пегилювання виконують за допомогою реакції ацилювання або реакції алкілування з реакційноздатною молекулою ПЕГ (або аналогічного реакційноздатного водорозчинного полімеру). Як застосовують у даному документі, термін "поліетиленгліколь" призначений, щоб включати будь-яку з форм ПЕГ, що бо використовують для дериватизації інших білків, таку як моно(С1-С10) алкокси- або арилокси-
поліетиленгліколь або поліетиленгліколь-малеїнімід. У конкретних варіантах здійснення антитіло або фрагмент, які підлягають пегилюванню, являють собою аглікозиловане антитіло або фрагмент. Способи пегилювання білків відомі в даній галузі, і їх можна застосовувати для антитіл за винаходом. Див., наприклад, ЕР 0154316 і ЕР 0401384.
Антитіла й антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), також можна кон'югувати із флуоресцентними або хемілюмінесцентними мітками, включаючи флуорофори, такі як хелати рідкісноземельних елементів, флуоресцеїн і його похідні, родамін і його похідні, ізотіоціанат, фікоеритрин, фікоціанін, алофікоціанін, о-фталевий альдегід, флюорескамін, 72Еи, дансил, умбеліферон, люциферин, люміналова мітка, ізолюміналова мітка, мітка на основі ароматичного складного ефіру акридинію, імідазолова мітка, мітка на основі солі акридинію, мітка на основі складного ефіру оксалату, мітка на основі екворину, 2,3-дигідрофталазиндіони, біотин/авідин, спінові мітки і стабільні вільні радикали.
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) також можна кон'югувати з цитотоксичним фактором, таким як дифтерійний токсин, ланцюг А екзотоксину Рзхендотопах аегидіпоза, ланцюг А рицину, ланцюг
А абрину, ланцюг А модецину, альфа-сарцин, білки і сполуки (наприклад, жирні кислоти)
АІецпіез огаїї, білки з діантином, білки РАРІ, РАРІЇ, ії РАР-5 Рпуюіасса атегісапа, інгібітор з тотогаїса спагапііа, курцин, кротин, інгібітор з заропагіа ойісіпаїї5, мітогелін, рестриктоцин, феноміцин і еноміцин.
Можна використовувати будь-який спосіб, відомий в даній галузі, для кон'югації антитіл і їхній антигензв'язувальних фрагментів за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їхніх гуманізованих варіантів) з різними групами, включаючи способи, описані в Нипіег, еї аї!., (1962)
Маїйге 144:945; Рамід, еї аї., (1974) Віоспетівігу 13:1014; Раїп, еї аї., (1981) У. Іттипої. Мей. 40:219; і Мудгеп, 9., (1982) Нібзіоспет. і Суюспет. 30:407. Способи кон'югації антитіл і фрагментів є загальноприйнятими і дуже добре відомими в даній галузі.
Терапевтичні застосування антитіл проти ТІСІТ
Далі представлені способи лікування суб'єктів, включаючи суб'єктів-людей, які потребують такого лікування, за допомогою виділених антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів,
Зо описаних у даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізованих варіантів). В одному варіанті здійснення винаходу такий суб'єкт страждає на інфекцію або інфекційне захворювання. В іншому варіанті здійснення винаходу такий суб'єкт страждає на злоякісну пухлину. В одному варіанті здійснення злоякісна пухлина являє собою солідну пухлину з інфільтрацією інфільтруючих у пухлину лімфоцитів, які експресують ТІСІТ. В одному варіанті здійснення злоякісна пухлина являє собою, наприклад, остеосаркому, рабдоміосаркому, нейробластому, рак нирки, лейкоз, перехідноклітинний рак нирки, рак сечового міхура, злоякісну пухлину Вільма, рак яєчника, рак підшлункової залози, рак молочної залози, рак передміхурової залози, злоякісну пухлину кісти, рак легені (наприклад, недрібноклітинний рак легені), рак шлунку, колоректальний рак, рак шийки матки, синовіальну саркому, рак голови і шиї, плоскоклітинну карциному, множинну мієлому, нирково-клітинний рак, ретинобластому, гепатобластому, печінково-клітинну карциному, меланому, рабдоїдну пухлину нирок, саркому
Юінга, хондросаркому, злоякісну пухлину мозку, гліобластому, менінгіому, аденому гіпофіза, вестибулярну шваному, примітивну нейроектодермальну пухлину, медулобластому, астроцитому, анапластичну астроцитому, олігодендрогліому, епендимому, папілому хоріоїдного сплетення, справжню поліцитемію, тромбоцитемію, ідіопатичний мієлофіброз, саркому м'яких тканин, рак щитовидної залози, рак ендометрія, карциноїдну злоякісну пухлину або рак печінки, рак молочної залози або рак шлунку. В одному з варіантів здійснення винаходу злоякісна пухлина являє собою метастазирующую злоякісну пухлину, наприклад, з варіантів, описаних вище.
В одному з варіантів здійснення винахід стосується способів лікування суб'єктів з використанням антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізованих варіантів), де суб'єкт страждає на вірусну інфекцію. В одному варіанті здійснення вірусна інфекція являє собою інфекцію вірусом, вибраним із групи, яка складається з вірусу імунодефіциту людини (ВІЛ), вірусу гепатиту (А, В або С), вірусу герпеса (наприклад, МАМ, НБМ-І, НАМ-6, НБ5У-І ії СМУ, вірусу Епштейна-Барр), аденовірусу, вірусу грипу, флавівірусів, еховірусу, риновірусу, вірусу Коксакі, коронавірусу, респіраторно-синцитіального вірусу, вірусу свинки, ротавірусу, вірусу кору, вірусу краснухи, парвовірусу, вірусу осповакцини, вірусу НТІМ, вірусу денге, папіломавірусу, вірусу молюска, вірусу поліомієліту, вірусу сказу, вірусу УС або вірусу арбовірусного енцефаліту.
В одному з варіантів здійснення винахід стосується способів лікування суб'єктів з використанням антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за винаходом, де суб'єкт страждає на бактеріальну інфекцію. В одному варіанті здійснення бактеріальна інфекція являє собою інфекцію бактеріями, вибраними з групи, яка складається з Спіатуайїа, рикетсіозних бактерій, мікобактерій, стафілококів, стрептококів, пневмококів, менінгококів і гонококів, клебсієли, протесу, серації, псевдомонад, ГІедіопеїПйа, Согупебрасіегішт аїірпегіає,
ЗаІтопеїйа, бацил, Мірго споЇегає, Сіовігідіит їеїйап, Сіовігідіит бБоїціїпит, Васіїїи5 апінгісів,
Уегвзіпіа ревзії5, Мусобасієгішт Іергає, Мусорасіегіит Іерготаїгоб5ізв і Воггіе Па.
В одному з варіантів здійснення винахід стосується способів лікування суб'єктів з використанням антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за винаходом, де суб'єкт страждає на грибкову інфекцію. В одному варіанті здійснення грибкова інфекція являє собою інфекцію грибом, вибраним із групи, яка складається з Сапаїда (аібісапв5, Кгизеї, діаргаїа, ігорісаїїє і т.д.), Стуріососси5 пеоїогтап5, АзрегдйШив (Титідагшв5, підег і т. д.), роду
Мисогаїез (тисог, арзіадіа, "пігорив), Брогоїнгіх зспепкії, Віавіотусев дегтаїйіаїів, Рагасоссідіоіде5 ргазійепвів, Соссідіоідез5 іттіїй5 і Нізіоріазта сарзшайт.
В одному з варіантів здійснення винахід стосується способів лікування суб'єктів з використанням антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за винаходом, де суб'єкт страждає на паразитичну інфекцію. В одному варіанті здійснення паразитична інфекція являє собою інфекцію паразитом, вибраним із групи, яка складається з Епіатоебра півіюїуїіса, Ваїапійдішт соїї, Маєдіегпа їоу/егі, Асапінатоера, Сіагаійа Іатбріа, Стурюзрогіаі|шт,
Рпеитосувіїв5 саїіпії, Ріазтодіит мімах, Вабезіа тістоїї, Ттурапохота Бгисві, Пурапозота сги?гі,
І еїзптапіа допомапі, Токсоріаз та допайї і Міррозігопдуїи5 Бгазійепвів.
Крім того, даний винахід стосується способу запобігання або інгібування зв'язування ТІСІТ з
МНС класу Ії, посилення активації антигенспецифічних Т-клітин або стимуляції продукції інтерлейкіну-2 Т-клітинами в суб'єкта (наприклад, людини), наприклад, де суб'єкт страждає на злоякісну пухлину або інфекційне захворювання (наприклад, як обговорюють у даному документі), що включає введення ефективної кількості антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 14А6, 28А5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), необов'язково, у сполученні з додатковим хіміотерапевтичним засобом.
Ко) "Суб'єкт" може являти собою ссавця, такого як людина, собака, кішка, кінь, корова, миша, щур, мавпа (наприклад, яванська макака, наприклад, Масаса Тавзсісцшіагіє) або кролик. У переважних варіантах здійснення винаходу суб'єкт являє собою суб'єкта-людину.
У конкретних варіантах здійснення антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти) можна використовувати окремо або в сполученні з іншими, додатковими лікарськими засобами і/або терапевтичними процедурами, для лікування або запобігання будь-якого захворювання, такого як злоякісна пухлина, наприклад, як обговорюють у даному документі, у суб'єкта, який потребує такого лікування або запобігання. Композиції, наприклад, фармацевтичні композиції, які містять фармацевтично прийнятний носій, що містять такі антитіла і фрагменти в сполученні з іншими лікарськими засобами, також є частиною даного винаходу.
У конкретних варіантах здійснення антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти), можна використовувати окремо або в сполученні з протипухлинними вакцинами.
У конкретних варіантах здійснення антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти), можна використовувати окремо або в сполученні з хіміотерапевтичними засобами.
У конкретних варіантах здійснення антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти), можна використовувати окремо або в сполученні з радіотерапією.
У конкретних варіантах здійснення антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти), можна використовувати окремо або в сполученні зі спрямованою терапією. Приклади спрямованих терапевтичних засобів включають: гормональну терапію, інгібітори передачі сигналу (наприклад, інгібітори ЕСЕРК, такі як цетуксимаб (ербітукс) і ерлотиніб (тарцева)); інгібітори
НЕКЗ (наприклад, трастузумаб (герцептин) і пертузумаб (перьєта)); інгібітори ВСК-АВІ (такі як іматиніб (глівек) і дазатиніб (спрайсел)); інгібітори АЇ.К (такі як кризотиніб (ксалкори) і церитиніб (зикадіа)); інгібітори ВКА (такі як вемурафеніб (зелбораф) і дабрафеніб (тафінлар)), модулятори експресії генів, індуктори апоптозу (наприклад, бортезоміб (велкад) і карфілзоміб (кіпроліс)), інгібітори ангіогенезу (наприклад, бевацизумаб (авастин) і рамуцирумаб (цирамза),
моноклональні антитіла, приєднані до токсинів (наприклад, брентуксимаб ведотин (адцетрис) і адо-трастузумаб емтанзин (кадсила)).
У конкретних варіантах здійснення антитіла проти ТІСІї або їх антигензв'язувальні фрагменти за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) можна використовувати в комбінації з протираковим лікарським засобом або імуномодулюючим лікарським засобом, таким як інгібітор імуномодулюючого рецептора, наприклад, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, які специфічно зв'язуються з рецептором.
Таким чином, даний винахід стосується композицій, які містять антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) у сполученні з пембролізумабом; а також способів лікування або запобігання злоякісній пухлині в суб'єкта, що включає введення ефективної кількості антитіла проти ТІСІї або його антигензв'язувального фрагмента і пембролізумабу суб'єкту.
Необов'язково, суб'єкту вводять також додатковий лікарський засіб.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з виділеним антитілом, що містить важкий ланцюг імуноглобуліну, який містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 33, і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 34. 5ЕО ІЮО МО: 33 і 34 кодують важкий і легкий ланцюги пембролізумабу.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з виділеним антитілом, що містить важкий ланцюг імуноглобуліну, який містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 35, і легкий ланцюг імуноглобуліну, який містить амінокислотну послідовність з «БО ІЮ МО: 36. 5ЕО ІЮО МО: 35 і 36 кодують важкий і легкий ланцюги ніволумабу.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з одним або декількома з: антитіла проти РО1 (наприклад, пембролізумабу, ніволумабу, підилізумабу (СТ-011)), антитіла проти РОЇ, антитіла проти
Зо СТІ А4, антитіла проти С51 (наприклад, елотузумабу), антитіла проти КІК2ОІ 1/2/3 (наприклад, лірилумабу), антитіла проти СО137 (наприклад, урелумабу), антитіла проти СІТК (наприклад,
ТЕХ518), антитіла проти РО-І/1 (наприклад, ВМ5-936559, М5ЗВО010718С або МРОЇІ 3280А), антитіла проти РО-12, антитіла проти І-Т1, антитіла проти ІІ Т2, антитіла проти ІГТ3, антитіла проти І-Т4, антитіла проти ІТ5, антитіла проти ІІ Т6, антитіла проти І-7Т7, антитіла проти І Т8, антитіла проти СО40, антитіла проти ОХ40, антитіла проти ІСО5, антитіла проти 5ІКРа, антитіла проти КІК20ОІ1, антитіла проти КІК20ОІ 2/3, антитіла проти КІК2ОІ 4, антитіла проти
КІК2ОІ 5А, антитіла проти КІК2ОІ5В, антитіла проти КІКЗОЇ1, антитіла проти КІКЗОІ2, антитіла проти КІКЗОІ З, антитіла проти МКО2А, антитіла проти МКО2С, антитіла проти МКО2Е, антитіла проти 4-188 (наприклад, РЕ-05082566), антитіла проти Т5І Р, антитіла проти 1-10, І- 10 або пегильованого 1-10, або будь-якого низькомолекулярного органічного інгібітору таких мішеней.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти РО1.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти РОЇ7 (наприклад, ВМ5-936559,
М580010718С або МРОІ 32804А).
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти СТІ А4.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти С51.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІК2О1І 1/2/3.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані бо варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти СО137 (наприклад, урелумабом).
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти СІТК (наприклад, ТЕХ518).
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти РО-1І 2.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТІ1.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТ12.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТ 3.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТІ 4.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТІ 5.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТІ 6.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТІ 7.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані
Зо варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІТІ 8.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти СО40.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ОХ40.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІК2ОІ 1.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІН2ОЇ 2/3.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІК2ОЇ 4.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІК2ОІ 5А.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІК2ОІ 58.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІКЗОЇІ 1.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІКЗОЇІ 2.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані бо варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти КІКЗОЇ 3.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти МКОЗ2А.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти МКО2С.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ІСО5.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти 5ІКРа.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти 4-188.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти 1-10.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з антитілом проти ТІ Р.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з І-10 або пегильованим 1-10.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з одним або декількома з інгібітору (наприклад, малої органічної молекули або антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента), такого як: інгібітор МТОК (мішень для рапаміцину в ссавців), цитотоксичного засобу, засобу на основі
Зо платини, інгібітору ЕСЕК, інгібітору МЕСЕ, стабілізатора мікротрубочок, таксану, інгібітору СО20О, інгібітору СО52, інгібітору СОЗ0О, інгібітору КАМК (рецептора-активатора ядерного фактора каппа-В), інгібітору КАМКІ. (ліганда рецептора-активатора ядерного фактора каппа-В), інгібітору
ЕРК, інгібітору МАР-кінази, інгібітору АКТ, інгібітору МЕК, інгібітору РІЗК, інгібітору НЕК'!, інгібітору НЕК, інгібітору НЕКЗ, інгібітору НЕКА, інгібітору Всі2, інгібітору СО22, інгібітору
СО79Б, інгібітору ЕгГЬВа2 або інгібітори фарнезил-протеїнтрансферази.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з будь-яким одним або декількома з: 13-цис-ретиноєвої кислоти, 3-(5-(метилсульфонілпіперадинметил)-індоліл|-хінолону, 4-гідрокситамоксифену, 5- дезоксіуридину, 5'-дезокси-5-фторуридину, 5-фторурацилу, б-меркаптопурину, 1- гідроксистауроспорину, А-443654, абиратеронацетату, абраксану, АВТ-578, аколбіфену, АО5- 100380, А Т-110, алтретаміну, аміфостину, аміноглутетиміду, амрубіцину, амсакрину, анагреліду, анастрозолу, ангіостатину, АР-23573, АНВО-197, арзоксифену, А5-252424, А5Б- 605240, аспарагінази, АТ-9263, атрасентану, акситинібу, А2О1152, вакцини на основі бацили
Кальметта-Герена (ВС), батабуліну, ВС-210, безодутоксу, бевацизумабу, бікалутаміду, Віо1111,
ВІО140, блеоміцину, ВМ5-214662, ВМ5-247550, ВМ5-275291, ВМ5-310705, бортезимібу, бузереліну, бусульфану, кальцитриолу, камптотецину, канертинібу, капецитабіну, карбоплатину, кармустину, СС8490, цедиранібу, СО-1521, СО-781, хламідоцину, хлорамбуцилу, хлоротоксину, циленгітиду, цимітидину, цисплатину, кладрибіну, клодронату, СО1-3, Ср-724714, циклофосфаміду, ципротерону, ацетату ципротерону, цитарабіну, цитозинарабінозиду, декарбазину, дациностату, дактиноміцину, далотузумабу, данусертибу, дазатанібу, даунорубіцину, декатанібу, дегуеєліну, денілейкіну, дезоксикоформіцину, депсипептиду, діарилпропіонітрилу, діетилстилбестролу, дифтитоксу, доцетакселу, довітинібу, доксорубіцину, дролоксифену, едотекарину, міченого ітрієм-90 едотреотиду, едотреотиду, ЕКВ-569,
ЕМО121974, ендостатину, ензалутаміду, ензастаурину, епірубіцину, епітилону В, ЕКА-923, ербітуксу, ерлотинібу, естрадіолу, естрамустину, етопозиду, еверолімусу, екземестану, фіклатузумабу, фінастериду, флавопіридолу, флоксуридину, флударабіну, флудрокортизону, флуоксиместерону, флутаміду, схеми лікування БОЇБОХ, фулвестранту, галетерону, гефітинібу, гемцитабіну, гіматекану, гозереліну, ацетату гозереліну, госсиполу, 55К461364, 60 аоКкбо0693, НМА-3339, гідроксипрогестеронкапроату, гідроксисечовини, ІС87114, ідарубіцину, бо ідоксифену, іфосфаміду, ІМ862, іматинібу, ІМСОС-1С11, ІМСВ24360, ІМО1001, інтерферону, інтерлейкіну-12, іпілімумабу, іринотекану, УМ.)-16241199, кетоконазолу, КЕХ-0402, лапатинібу, лазофоксифену, лектрозолу, лейковорину, леупроліду, ацетату леупроліду, левамізолу, поміщеного в ліпосоми паклітакселу, ломустину, лонафарнібу, лукантону, І 292223, І 292696,
І у293646, І у293684, І у294002, І У317615, маримастату, мехлоретаміну, медроксипрогестеронацетату, магестролацетату, мелфалану, меркаптопурину, месни, метотрексату, мітраміцину, мітоміцину, мітотану, мітоксантрону, тозасертибу, МІ М8054, неовастату, нератинібу, нейрадіабу, нілотинібу, нілутиміду, нолатрекседу, ММР-ВЕ7235, облімерсену, октреотиду, офатумумабу, ореговомабу, ортеронелу, оксаліплатину, паклітакселу, палбоциклібу, памідронату, панітумумабу, пазопанібу, РООЗ325901, РО184352, ПЕГ-інтерферону, пеметрекседу, пентостатину, перифозину, фенілаланініприту, Рі-103, піктилісибу, РІК-75, піпендоксифену, РКІ-166, плікаміцину, порфімеру, преднізону, прокарбазину, прогестинів, РХ- 866, В8-763, ралоксифену, ралтитрексиду, разоксину, ридафоролімусу, ритуксимабу, ромідепсину, КТА744, рубітекану, скриптейду, 5ах102, селіциклібу, селуметинібу, семаксанібу,
ЗЕ1126, сиролімусу, 5ЗМ36093, сорафенібу, спіронолактону, свкаламіну, ЗК13668, стрептозоцину, 506668, субероїланіліду гідроксамової кислоти, сунитинібу, синтетичного естрогену, талампанелу, талімогену лагерпарепвеку, тамоксифену, темозоломіду, темсиролімусу, теніпозиду, тесміліфену, тестостерону, тетрандрину, ТОХ-221, талідоміду, тіогуаніну, тіотепа, тицилімумабу, типіфарнібу, тивозанібу, ТКІ-258, ТІ К286, топотекану, цитрату тореміфену, трабектедину, трастузумабу, третиноїну, трихостатину А, моногідрату трицирибінфосфату, памоату триптореліну, Т5Е-424, урамустину, вальпроєвої кислоти, валрубіцину, вандетанібу, ваталанібу, МЕСЕ-пастки, вінбластину, вінкристину, віндезину, вінорелбіну, вітаксину, вітеспану, вориностату, МХ-745, вортманіну, Хг311, занолімумабу, 7К186619, 27К-304709, 7М336372, 751 КА474.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з одним або декількома протиблювотними засобами, включаючи, але без обмеження: касопітант (СіахобтіййКіїпе), нетупітант (МОІ-Неї5іпп) і інші антагоністи рецептора МК-1, палоносетрон (який продається як АїЇохі у МОЇ Рпагта), апрепітант
Зо (який продається як Етепа у МегекК ії Со.; Капжау, МУ), дифенгідрамін (який продається як
Вепадгу!? у Ріїгег; Мем/ Могк, МУ), гідроксизин (який продається як Аїйагах? у Ріїгег; Мем/ Хогк,
МУ), метоклопрамід (який продається як Кедіап? у АН Кобіп5 Со, ; Кісптопа, МА), лоразепам (який продається як Аїїмап? у Уууєїй; Мадізоп, МУ), альпразолам (який продається як Хапах? у
Ріїгег; Мемж/ Могк, МУ), галоперидол (який продається як НаїЇдої? у Оппо-МемМеї!; Ватйап, М), дроперидол (Іпарзіпе-), дронабінол (який продається як Магіпо!? у оЇмау Рпаптасеціїса!5, Іпс.;
Магіена, СА), дексаметазон (який продається як Юесайдгоп? у Мегок і Со.; Капулау, МУ), метилпреднізолон (який продається як Медроле у Ріїгег; Мем/ МогК, МУ), прохлорперазин (який продається як Сотраіпе? у СІахозтіййКіїпе; Кезеагсп Тгіапдіє Рагк, МС), гранізетрон (який продається як Куй у Нойтапп-іа Коспе Іпс.; МиШеу, МУ), ондансетрон (який продається як 7оїпапе у СіахозтіййКіїпе; Резеагсі Тгіапдіє Рагк, МС), долазетрон (який продається як Аплетеї? у Запоїй-Амепіїз; Мем/ Могк, МУ), тропісетрон (який продається як Мамобрбап? у Момапів; Еаві
Напомег, МУ).
Інші побічні ефекти лікування злоякісних пухлин включають дефіцит еритроцитів і лейкоцитів. Відповідно, в одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) присутнє у сполученні з засобом, що здійснює лікування або запобігання такого дефіциту, наприклад, таким як філграстим, ПЕГ-філграстим, еритропоетин, епоетин альфа або дарбепоетин альфа.
В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТї або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) вводять у сполученні з протираковою радіотерапією. Наприклад, в одному з варіантів здійснення винаходу радіотерапія являє собою зовнішню дистанційну променеву терапію (ЕВТ): спосіб доставки пучка рентгенівських променів високої енергії до локалізації пухлини. Пучок одержують поза організмом пацієнта (наприклад, за допомогою лінійного прискорювача) і націлюють на ділянку пухлини. Ці рентгенівські промені можуть руйнувати клітини злоякісних пухлин, і ретельне планування обробки дозволяє зберігати навколишні нормальні тканини.
Ніяких джерел радіоактивності не вміщують усередину організму пацієнта. В одному з варіантів здійснення винаходу радіотерапія являє собою протонну терапію: тип конформної променевої терапії з бомбардуванням ураженої захворюванням тканини протонами замість рентгенівських бо променів. В одному з варіантів здійснення винаходу радіотерапія являє собою конформну зовнішню дистанційну променеву терапію: спосіб, у якому використовують передову технологію, щоб підлаштовувати радіотерапію під будову організму індивідуума. В одному з варіантів здійснення винаходу радіотерапія являє собою брахітерапію: тимчасове вміщення радіоактивних речовин в організм, як правило, застосовуване для прикладення до області додаткової дози або додаткової інтенсивності радіації.
В одному з варіантів здійснення винаходу хірургічна процедура, яка застосовується у сполученні з антитілом проти ТІСІТ або його антигензв'язувальним фрагментом (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 або їх гуманізованими варіантами), являє собою хірургічне видалення пухлини.
Термін "у сполученні з" указує на те, що компоненти, які вводяться способом за даним винаходом (наприклад, антитіло проти ТІСІТ (наприклад, гуманізоване антитіло) або його антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їхні гуманізовані варіанти) разом з пембролізумабом) можна складати в одну композицію для одночасного введення або складати окремо в дві або більше композицій (наприклад, набір). Кожен компонент можна вводити суб'єкту в момент часу, відмінний від моменту часу, коли вводять інший компонент; наприклад, кожне введення можна виконувати не одночасно (наприклад, окремо або послідовно) у кілька інтервалів протягом даного періоду часу. Більше того, окремі компоненти можна вводити суб'єкту однаковими або різними способами.
Експериментальні і діагностичні застосування
Антитіла проти ТІСІТ ії їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 316 і їх гуманізовані варіанти) можна використовувати як засоби для афінного очищення. У цьому процесі, антитіла до ТІСІТ їі їх антигензв'язувальні фрагменти іммобілізують на твердій фазі, такій як сефадекс, скло або агарозна смола, або фільтрувальний папір, з використанням способів, добре відомих в даній галузі. Іммобілізоване антитіло або фрагмент приводять у контакт зі зразком, що містить білок ТІСІТ (або його фрагмент), що підлягає очищенню, і потім підкладку промивають прийнятним розчинником, що може видаляти по суті весь матеріал у зразку, за винятком білка ТІСІТ, який зв'язаний з іммобілізованим антитілом або фрагментом. Нарешті, підкладку промивають розчинником, який елюює зв'язаний
ТІСІТ (наприклад, білок А). Іммобілізовані антитіла і фрагменти складають частину даного винаходу.
Представлені також антигени для одержання вторинних антитіл, які можна використовувати наприклад, для проведення Вестерн-блотингу й інших імунологічних аналізів, обговорюваних у даному документі. Зокрема, описані поліпептиди, які містять варіабельні області і/або послідовності СОК терапевтичного антитіла, описаного в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5 або 31С6) і які можна використовувати для одержання антитіл проти ідіотипів для застосування в специфічній детекції присутності антитіла, наприклад, у терапевтичному контексті.
Антитіла проти ТІСІТ (наприклад, гуманізовані антитіла) і їх антигензв'язувальні фрагменти також можна використовувати в діагностичних аналізах білка ТІСІТ, наприклад, детекції його експресії в специфічних клітинах, тканинах, або сироватці, наприклад, клітинах пухлин, таких як клітини меланоми. Такі діагностичні способи можна використовувати в діагностиці різних захворювань.
Даний винахід стосується аналізів ЕГІЗА (твердофазних імуноферментних аналізів), що включають застосування антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента, описаних у даному документі (наприклад, 14А6 або його гуманізований варіант).
Наприклад, такий спосіб включає наступні стадії: (а) покриття субстрату (наприклад, поверхні ямки мікропланшета для титрування, наприклад, пластикового планшета) антитілом проти ТІСІТ або його антигензв'язувальним фрагментом; (5) нанесення зразка, що підлягає тестуванню на присутність ТІСІТ, на субстрат; (с) промивання планшета, так що віддаляється незв'язаний матеріал у зразку; (4) уведення мічених антитіл, які піддаються детекції міткою (наприклад, зв'язаних з ферментом антитіл), що також є специфічними для антигену ТІСІТ; (є) промивання субстрату, так що видаляються незв'язані, мічені антитіла; () якщо мічені антитіла є зв'язаними з ферментом, уведення хімічної речовини, яка перетворюється ферментом у флуоресцентний сигнал; і (9) детекція присутності міченого антитіла.
Детекція мітки, асоційваної із субстратом, указує на присутність білка ТІСІТ.
У наступному варіанті здійснення мічене антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент бо є міченим за допомогою пероксидази, що вступає в реакцію з АВТ5 (наприклад, 2,2'-азино-біс(3-
етилбензтиазолін-б6-сульфоновою окислотою)) або 3,3',5,5'-т-етраметилбензидином /- для одержання зміни забарвлення, що піддається детекції. Альтернативно, мічене антитіло або фрагмент є міченим за допомогою радіоактивного ізотопу, що піддається детекції (наприклад,
ЗН), який можна детектувати за допомогою сцинтиляційного лічильника в присутності сцинтилятора.
Антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 або їх гуманізовані варіанти) можна використовувати в способі Вестерн- блотингу або імуноблотингу білків. Такий спосіб є частиною даного винаходу і включає, наприклад: (1) необов'язково, перенесення білків зі зразка, що підлягає тестуванню на присутність ТІСІТ (наприклад, після електрофоретичного розділення білків у зразку за допомогою РАСЕ або 505-
РАСЕ), на мембрану або інший твердий субстрат з використанням способу, відомого в даній галузі (наприклад, напівсухого блотингу або блотингу в резервуарі); приведення мембрани або іншого твердого субстрату, що підлягає тестуванню на присутність зв'язаного ТІСІТ або його фрагмента, у контакт з антитілом проти ТІСІТ або його антигензв'язувальним фрагментом за винаходом.
Така мембрана може приймати форму мембрани на основі нітроцелюлози або вінілу (наприклад, полівініліденфториду (РМОБ)), на яку перенесені білки, що підлягають тестуванню на присутність ТІСІТ у гелі для неденатуруючого РАСЕ (електрофорезу в поліакриламідному гелі) або в гелі для 5О5-РАСЕ (електрофорезу в поліакриламідному гелі з додецилсульфатом натрію) (наприклад, після електрофоретичного розділення в гелі). Перед приведенням мембрани в контакт з антитілом проти ТІСІТї або фрагмента, мембрану, необов'язково, блокують, наприклад, за допомогою знежиреного сухого молока або т.п., щоб зв'язати неспецифічні ділянки зв'язування білка на мембрані. (2) Промивання мембрани один або кілька разів для видалення антитіла проти ТІСІТ, яке не зв'язалося, або фрагмента й інших речовин, які не зв'язалися; і (3) детекцію зв'язаного антитіла проти ТІСІТ або фрагмента.
Детекція зв'язаного антитіла або фрагмента вказує на те, що білок ТІСІТ присутній на мембрані або субстраті й у зразку. Детекцію зв'язаного антитіла або фрагмента можна
Зо виконувати за допомогою зв'язування антитіла або фрагмента з вторинним антитілом (антитілом проти імуноглобуліну), міченим міткою, яка піддається детекції, і, потім детекції присутності вторинного антитіла.
Антитіла проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти), також можна використовувати для імуногістохімії. Такий спосіб складає частину даного винаходу і включає, наприклад, (1) приведення клітини (наприклад, клітини пухлини, такої як клітина меланоми), що підлягає тестуванню на присутність білка ТІСІТ, у контакт з антитілом проти ТІСІї або його антигензв'язувальним фрагментом за винаходом; і (2) детекцію антитіла або фрагмента на або в клітині.
Якщо власне антитіло або фрагмент є міченим міткою, яка піддається детекції, його можна детектувати прямо. Альтернативно, антитіло або фрагмент можна зв'язувати з міченим міткою, яка піддається детекції, вторинним антитілом, яке детектують.
Конкретні антитіла проти ТІСІТ і їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 і їх гуманізовані варіанти), також можна використовувати для візуалізації пухлин іп мімо. Такий спосіб може включати ін'єкцію радіоактивно міченого антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента, в організм пацієнта, що підлягає тестуванню на присутність пухлини, асоційованої з експресією
ТІСІТ (наприклад, яка експресує ТІСІТ, наприклад, на поверхні клітин пухлини), з наступною радіонуклідною візуалізацією організму пацієнта для детекції присутності міченого антитіла або фрагмента, наприклад, у ділянках, що містять високу концентрацію антитіла або фрагмента, зв'язаних з пухлиною. Детекція ділянок указує на присутність ТІСІТ" пухлин і клітин пухлин.
Способи візуалізації включають візуалізацію 5РЕСТ (однофотонну емісійну комп'ютерну томографію) або візуалізацю РЕТ (позитронну емісійну томографію). Мітки включають, наприклад, иод-123 (1231) і технецій-99Ут (п"Тс), наприклад, у сполученні з візуалізацією ЗРЕСТ або "б, ЗМ, 750 або "ЗЕ, наприклад, у сполученні з візуалізацією РЕТ, або індій-111 (Див., наприклад, Согаоп еї аї., (2005) Іпіегпайопаї! Нем. Мешигобіо!. 67:385-440).
Фармацевтичні композиції і введення
Для одержання фармацевтичних або стерильних композицій антитіл проти ТІСІТ і антигензв'язувальних фрагментів за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані бо варіанти), антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент змішують з фармацевтично прийнятним носієм або наповнювачем. Див., наприклад, Кетіпдіоп'є Рпагтасеціїса! б5сієепсез і
О.5. Рпаптасореїа: Майопа! Ропттиіагу, Маск Рибіїзпіпд Сотрапу, Еазіоп, РА (1984).
Склади терапевтичних і діагностичних засобів можна одержувати за допомогою змішування з прийнятними носіями, наповнювачами, або стабілізаторами у формі, наприклад, ліофілізованих порошків, суспензій, водних розчинів або суспензій (див., наприклад, Нагатанп, єї аІ. (2001) Соодтап апа Сітап'є РНнаптасоіодіса! Вавзів ої ТПегарецшіісв, МсСтгам--НІЇЇ, Мем мМогк,
МУ; Сеппаго (2000) ВРетіпдіоп: Те Зсієпсе апа Ргасіїсе ої Ріаптасу, Іірріпсоїї, М/Патв, апа
ММИКіп5, Мем Мої, ММ; Аміб5, еї аї. (сд5.) (1993) РНпаптасешіса! Бозаде Еоптв: Рагепівгаї!
Меадісайоп5, Магсе! ЮОекКег, МУ; Перептап, єї аї. (едв5.) (1990) Рпаптасешіса! Бобзаде Еоптв:
Табівєї5, Магсе! ОекКег, МУ; ГПерептанп, сеї аї. (ва5.) (1990) Рпаптасешіса! Оозаде Рогтв: Різрегтзе
Зувівт5, Магсе! ЮекККег, ММ; М/еіпег апа Коїков5Кіє (2000) Ехсіріепі Тохісйу апа Заїеїу, Магсеї реккег, Іпс., Мем Мої, МУ).
Токсичність і терапевтичну ефективність антитіл за винаходом, уведених окремо або в комбінації з іншим лікарським засобом, можна визначати за допомогою стандартних фармацевтичних способів у культурах клітин або експериментальних тварин, наприклад, для визначення І О5о (дози, летальної для 50 95 популяції) і ЕЮОхо (дози, терапевтично ефективної для 50 95 популяції). Співвідношення доз між токсичним і терапевтичним ефектами являє собою терапевтичний індекс (ІО5о/ЕЮОво). Дані, отримані з цих аналізів культур клітин і досліджень на тваринах, можна використовувати в складанні діапазону дозування для застосування в людини.
Доза таких сполук переважно лежить у діапазоні циркулюючих концентрацій, що включає Ебзо з невеликою токсичністю або з відсутністю токсичності. Доза може змінюватися в межах цього діапазону залежно від застосовуваної лікарської форми і способу введення.
У наступному варіанті здійснення додатковий лікарський засіб уводять суб'єкту в сполученні з антитілом проти ТІСІТ або його антигензв'язувальним фрагментом за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6) відповідно до РПузісіапе" Оеб5К Кеїегепсе 2003 (Тотзоп Неайвсаге; 571п еайіоп (Мометрбег! 1, 2002)).
Спосіб уведення може змінюватися. Способи уведення включають пероральне, ректальне, трансмукозальне, кишкове, парентеральне; внутрішньом'язове, підшкірне, внутрішньошкірне, інтрамедулярне, інтратекальне, пряме інтравентрикулярне, внутрішньовенне,
Зо внутрішньоочеревинне, інтраназальне, внутрішньоочне, інгаляцію, інсуфляцію, місцеве, шкірне, черезшкірне або внутрішньоартеріальне.
У конкретних варіантах здійснення антитіла проти ТІСІї або їх антигензв'язувальні фрагменти за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) можна вводити інвазивним способом, наприклад, за допомогою ін'єкції. У наступних варіантах здійснення винаходу антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент, або його фармацевтичну композицію, уводять внутрішньовенно, підшкірно, внутрішньом'язово, внутрішньоартеріально, усередину пухлини або за допомогою інгаляції, аерозольної доставки.
Уведення неінвазивними способами (наприклад, перорально; наприклад, у пігулках, капсулах або таблетках) також включено в обсяг даного винаходу.
Даний винахід стосується посудини (наприклад, пластикового або скляного флакона, наприклад, із кришкою, або хроматографічної колонки, порожньої голки або циліндра шприца), яка містить будь-яке з антитіл або антигензв'язувальних фрагментів за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) або їхню фармацевтичну композицію. Даний винахід також стосується пристрою для ін'єкції який містить будь-яке з антитіл або антигензв'язувальних фрагментів за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) або їхню фармацевтичну композицію. Пристрій для ін'єкцій являє собою пристрій, який вводить речовину в організм пацієнта парентеральним способом, наприклад, внутрішньом'язовим, підшкірним або внутрішньовенним. Наприклад, пристрій для ін'єкції може являти собою шприц (наприклад, попередньо заповнений фармацевтичною композицією, такий як шприц для самоін'єкції), який, наприклад, включає циліндр або балон для утримування рідини, що підлягає ін'єкції (наприклад, антитіло або фрагмент, або його фармацевтична композиція), голку для проколювання шкіри і/або кровоносних судин для ін'єкції рідини; і поршень для виштовхування рідини з циліндра і через отвір голки. В одному з варіантів здійснення винаходу пристрій для ін'єкції, що містить антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом, або його фармацевтичну композицію, являє собою пристрій для внутрішньовенної (в/в) ін'єкції. Такий пристрій містить антитіло або фрагмент, або їхню фармацевтичну композицію, у канюлі або трокарі/голці, які можна приєднувати до трубки, яку можна приєднувати до пакета або резервуару для утримування рідини (наприклад, сольового розчину; або лактованого розчину Рінгера, що містить Масі, лактат натрію, КСІ, Сасі; і бо необов'язково, що включає глюкозу), яка вводиться в організм пацієнта через канюлю або трокар/голку. Антитіло або фрагмент, або їхню фармацевтичну композицію можна, в одному з варіантів здійснення винаходу, вводити в пристрій після того, як трокар і канюля вставлені у вену суб'єкта, і трокар вилучений із уставленої канюли. В/в пристрій можна, наприклад, вставляти в периферичну вену (наприклад, у руці або плечі); верхню порожнисту вену або нижню порожнисту вену, або в праве передсердя серця (наприклад, центральний внутрішньовенний катетер); або в підключичну, внутрішню яремну або стегнову вену і, наприклад, просувати в напрямку до серця, поки він не досягне верхньої порожнистої вени або правого передсердя (наприклад, центральний венозний катетер) В одному з варіантів здійснення винаходу пристрій для ін'єкції являє собою шприц для самоін'єкції; безголковий пристрій для ін'єкції або зовнішній інфузійний насос. У безголкюовому пристрої для ін'єкції використовують вузький струмінь рідини під високим тиском, що проникає в епідерміс для введення антитіла або фрагмента, або їхньої фармацевтичної композиції в організм пацієнта.
Зовнішні інфузійні насоси являють собою медичні пристрої, які доставляють антитіло або фрагмент, або їхню фармацевтичну композицію в організм пацієнта в контрольованих кількостях. Зовнішні інфузійні насоси можна пускати в хід електрично або механічно. Різні насоси діють різними способами, наприклад, шприцевий насос утримує рідину в резервуарі шприца, і рухомий поршень контролює доставку рідини, еластомерний насос утримує рідину в розтяжному балонному резервуарі, і тиск еластичних стінок балона керує доставкою рідини. У перистальтичному насосі, набір роликів здійснює стиснення по довжині гнучкої трубки, проштовхуючи рідину вперед. У багатоканальному насосі, рідини можна доставляти з множини резервуарів з різною швидкістю.
Фармацевтичні композиції, описані в даному документі, також можна вводити за допомогою гіподермічного безголкового пристрою для ін'єкції; такого як пристрої, описані в Патентах США
Мо. 6620135; 6096002; 5399163; 5383851; 5312335; 5064413; 4941880; 4790824 або 4596556.
Такі безголкові пристрої, які містять фармацевтичну композицію, також складають частину даного винаходу. Фармацевтичні композиції, описані в даному документі, також можна вводити за допомогою інфузії Приклади добре відомих імплантатів і модулів для уведення фармацевтичних композицій включають приклади, описані в: Патенті США Мо. 4487603, де описаний імплантований насос для мікроінфузії для розподілу лікарського засобу з контрольованою швидкістю; Патенті США Мо. 4447233, де описаний насос для інфузії лікарського засобу для доставки лікарського засобу з точною швидкістю інфузії; Патенті США
Мо. 4447224, де описаний імплантований пристрій для інфузії зі змінним потоком для безперервної доставки лікарського засобу; Патенті США. Мо. 4439196, де описана осмотична система доставки лікарського засобу, яка має багатокамерні відсіки. Множина інших імплантатів, систем і модулів для доставки добре відомі фахівцям в даній галузі, і ті з них, Що містять фармацевтичні композиції за даним винаходом, включені в обсяг даного винаходу.
Альтернативно, можна вводити антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 3106 або їхні гуманізовані варіанти) місцевим, а не системним способом, наприклад, за допомогою ін'єкції антитіла або фрагмента безпосередньо в пухлину, наприклад, у ТІСІТ" пухлину. Більше того, можна вводити антитіло або фрагмент у систему спрямованої доставки лікарського засобу, наприклад, у ліпосому, покриту тканиноспецифічним антитілом, націленим, наприклад, на пухлину, наприклад, на ТІСІТ" пухлину, наприклад, що характеризується імунопатологією. Ліпосоми можуть бути націлені на уражену тканину і вибірково поглинатися ураженою тканиною. Такі способи і ліпосоми складають частину даного винаходу.
Режим уведення залежить від декількох факторів, включаючи швидкість обміну терапевтичного антитіла або антигензв'язувального фрагмента в сироватці або тканині, рівень симптомів, імуногенність терапевтичного антитіла і приступність клітин-мішеней у біологічному матриксі. Переважно, режим уведення забезпечує доставку достатньої кількості терапевтичного антитіла або фрагмента для ефекту поліпшення наміченого стану захворювання, з одночасною мінімізацією небажаних побічних ефектів. Відповідно, кількість біологічного засобу, що доставляється, частково залежить від конкретного терапевтичного антитіла і тяжкості стану, що піддається лікуванню. Доступні посібники з вибору прийнятних доз терапевтичних антитіл або фрагментів (див., наприклад, УМамтупсгак (1996) Апіїбоду ТНегару, Віоз 5сіепійійс Рир. Це,
Охгогазніге, ОК; Кгезіпа (єд.) (1991) Мопосіопа! Апіїбодієз, СуїюКіпез5 апа АнйнНтйіфв, Магсе! Оеккег,
Мем Моїк, МУ; Васі (є4.) (1993) Мопосіопа! Апііродієє апа Реріїде ТПегару іп Ашоїттипе рівеазев, Магсе! Оеккег, Мем Могк, МУ; Ваенті, єї а!. (2003) Мем Епод). У. Мед. 348:601-608; Міїдгтот еї а. (1999) Мем Епоі. У. Мед. 341:1966-1973; 5іатоп еї аї. (2001) Мем Епа)ї. У. Меа. 344:783-792;
Вепіатіпомії? еї аІ. (2000) Мем Епді. у. Мед. 342:613-619; С1по5П еї аї. (2003) Мем Епод). У. Меа. 60 348:24-32; І ІреКу єї аї. (2000) Мем Епоа). У. Мей. 343:1594-1602).
Визначення прийнятної дози виконує медичний працівник, наприклад, з використанням параметрів або факторів, як відомо, або як вважають в даній галузі, що впливають на лікування.
Як правило, дозування починають з кількості, дещо меншої, ніж оптимальна доза, і потім збільшують його з невеликим кроком, поки не буде досягнутий бажаний ефект або оптимальний ефект відносно будь-яких негативних побічних ефектів. Важливі діагностичні вимірювання включають вимірювання симптомів, наприклад, запалення або рівня продукції запальних цитокінів. Як правило, є бажаним, щоб біологічний засіб, який буде використаний, походив з того ж виду, що і тварина, намічена для лікування, щоб у такий спосіб мінімізувати будь-яку імунну відповідь на реагент. У випадку суб'єктей-людей, наприклад, гуманізовані і повністю людські антитіла можуть бути бажаними.
Антитіла або їх антигензв'язувальні фрагменти, описані в даному документі (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 і їх гуманізовані варіанти) можна надавати за допомогою безперервної інфузії або за допомогою доз, що вводяться, наприклад, щодоби, 1-7 разів на тиждень, щотижня, раз на два тижні, раз на місяць, раз на два місяці, раз у квартал, раз у півроку, щорічно і т. д. Дози можна вводити, наприклад, внутрішньовенно, підшкірно, місцево, перорально, інтраназально, ректально, внутрішньом'язово, інтрацеребрально, інтраспінально, або за допомогою інгаляції.
Загальна щотижнева доза, як правило, складає щонайменше 0,05 мкг/кг маси тіла, більш звичайно, щонайменше 0,2 мкг/кг, 0,5 мкг/кг, 1 мкг/кг, 10 мкг/кг, 100 мкг/кг, 0,25 мг/кг, 1,0 мг/кг, 2,0 мг/кг, 5,0 мг/мл, 10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг або більше (див., наприклад, Уапо, еї аї. (2003) Мем/
Епаї. У. Меа. 349:427-434; Негоїд, єї а. (2002) Мем Епо)і. У. Меа. 346:1692-1698; Пи, єї а. (1999)
У. Мешгої. Мейгобзигу. Реуси. 67:451-456; Ропівї|Ї, еї аЇ. (20003) Сапсег Іттипої. Іттипоїнег. 52:151-144). Дози також можна надавати для досягнення визначеної наміченої концентрації антитіла проти ТІСІТ у сироватці суб'єкта, такій як 01, 0,3, 1, 3, 10, 30, 100, 300 мкг/мл або більше. В інших варіантах здійснення антитіло проти ТІСІї за даним винаходом вводять, наприклад, підшкірно або внутрішньовенно, на підставі введення раз на тиждень, раз на два тижні, "кожні 4 тижні", раз на місяць, раз на два місяці, або раз у квартал 10, 20, 50, 80, 100, 200, 500, 1000 або 2500 мг/суб'єкта.
Як застосовують у даному документі, термін "ефективна кількість" позначає кількість антитіла проти ТІСІТ або його антигензв'язувального фрагмента за винаходом (наприклад,
Зо гуманізованого 14А6 або гуманізованого 28Н5), що, при введенні окремо або в комбінації з додатковим лікарським засобом, у клітину, у тканину або суб'єкту, є ефективною, щоб викликати поліпшення, яке піддається вимірюванню, одного або декількох симптомів захворювання, наприклад, злоякісної пухлини або прогресування злоякісної пухлини. Ефективна доза, крім того, стосується кількості антитіла або фрагмента, достатньої, щоб приводити щонайменше до часткового поліпшення стану симптомів, наприклад, зменшення розміру або знищення пухлини, відсутності росту пухлини, збільшеної тривалості виживання. При застосуванні для індивідуального активного інгредієнта, що вводиться окремо, ефективна доза стосується одного цього інгредієнта. При застосуванні для комбінації, ефективна доза стосується об'єднаних кількостей активних інгредієнтів, що приводять до терапевтичного ефекту, що вводяться або в комбінації, або серіями, або одночасно. Ефективна кількість лікарського засобу приводить до поліпшення діагностичного вимірювання або параметра щонайменше на 10 95; як правило, щонайменше на 2095; переважно, щонайменше приблизно на 3095; більш переважно, щонайменше на 40 95, і найбільше переважно, щонайменше на 50 95. Ефективна кількість може також приводити до поліпшення суб'єктивного критерію, у випадках, коли суб'єктивні критерії використовують для оцінки тяжкості захворювання.
Набори
Далі представлені набори, які містять один або кілька компонентів, що включають, але без обмеження, антитіло проти ТІСІТ або антигензв'язувальний фрагмент, як обговорюють у даному документі (наприклад, гуманізоване 14А6 або гуманізоване 28Н5 або гуманізоване 3106) у сполученні з одним або декількома додатковими компонентами, включаючи, але без обмеження, фармацевтично прийнятний носій і/або лікарський засіб, як обговорюють у даному документі. Антитіло або фрагмент, і/або лікарський засіб можна складати у формі чистої композиції або в комбінації з фармацевтично прийнятним носієм, у фармацевтичній композиції.
В одному варіанті здійснення набір містить антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, гуманізоване 14А6 або гуманізоване 28Н5, або гуманізоване 31С6), або їхню фармацевтичну композицію в одному контейнері (наприклад, у стерильному скляному або пластиковому флаконі) і їхню фармацевтичну композицію і/або лікарський засіб в іншому контейнері (наприклад, у стерильному скляному або пластиковому флаконі).
В іншому варіанті здійснення набір містить комбінацію за винаходом, що включає антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, гуманізоване 14А6 або гуманізоване 2885 або гуманізоване 3106) разом з фармацевтично прийнятним носієм, необов'язково, у комбінації з один або декількома лікарськими засобами, складені разом, необов'язково, у фармацевтичній композиції, в одному спільному контейнері.
Якщо набір включає фармацевтичну композицію для парентерального введення суб'єкту, набір може включати пристрій для проведення такого введення. Наприклад, набір може включати одну або декілька гіподермічних голок або інших пристроїв для ін'єкції, як вказано вище.
Набір може включати вкладиш в упаковку, який містить інформацію відносно фармацевтичних композицій і лікарських форм у наборі. Як правило, така інформація допомагає пацієнтам і терапевтам, щоб використовувати вкладені фармацевтичні композиції і лікарські форми ефективно і безпечно. Наприклад, наступна інформація відносно комбінації за винаходом може бути надана на вкладиші: фармакокінетика, фармакодинаміка, клінічні дослідження, параметри ефективності, показання і застосування, протипоказання, попередження, профілактичні міри, несприятливі реакції, передозування, правильні дозування і введення, форма випуску, прийнятні умови збереження, посилання, інформація про виробника/постачальника і патентна інформація.
Набори для детекції і терапевтичні набори
Для зручності, антитіло проти ТІСІТ або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 14А6, 28Н5, 31С6 або їх гуманізовані варіанти) можна надавати в наборі, тобто, упакованій комбінації реагентів у визначених кількостях з інструкціями для проведення діагностичного або детектуючого аналізу. Коли антитіло або фрагмент є міченими за допомогою ферменту, набір може включати субстрати і кофактори, необхідні для ферменту (наприклад, попередник субстрату, що забезпечує хромофор, який піддається детекції, або флуорофор).
Крім того, можна включати інші добавки, такі як стабілізатори, буфери (наприклад, блокувальний буфер або буфер для лізису) і т. п. Відносні кількості різних реагентів можна змінювати для забезпечення концентрацій реагентів у розчині, що у значній мірі оптимізують чутливість аналізу. Зокрема, реагенти можна надавати у формі сухих порошків, як правило,
Зо ліофілізованих, включаючи наповнювачі, які при розчиненні забезпечують розчин реагентів, який має відповідну концентрацію.
Представлені також реагенти і набори для або діагностики детекції, які містять один або кілька таких реагентів для застосування в множині аналізів для детекції, включаючи, наприклад, імунологічні аналізи, такі як ЕГІБА (сендвіч-типу або конкурентного формату). Компоненти набору можна попередньо зв'язувати з твердою підкладкою, або можна наносити на поверхню твердої підкладки, коли набір використовують. У деяких варіантах здійснення винаходу засобу для одержання сигналу можуть надходити попередньо зв'язаними з антитілом або фрагментом за винаходом, або можуть вимагати комбінації з одним або декількома компонентами, наприклад, буферами, кон'югатами антитіло-фермент, субстратами для ферментів або т.п., перед використанням. Набори також можуть включати додаткові реагенти, наприклад, блокувальні реагенти для зменшення неспецифічного зв'язування з поверхнею твердої фази, реагенти для промивання, субстрати для ферментів і т. п. Поверхня твердої фази може знаходитися у формі пробірки, намистини, мікропланшета для титрування, мікросфери, або інших матеріалів, що підходять для іммобілізації білків, пептидів або поліпептидів. У конкретних аспектах, фермент, який каталізує утворення хемілюмінесцентного або хромогенного продукту або витрата хемілюмінесцентного або хромогенного субстрату, є компонентом засобів одержання сигналу. Такі ферменти добре відомі в даній галузі. Набори можуть містити будь-які з засобів для зв'язування і реагентів для детекції, описаних у даному документі. Необов'язково, набір може також містити інструкції для здійснення способів за винаходом.
Представлений також набір, який містить антитіло проти ТІСІТ (наприклад, гуманізоване антитіло) або його антигензв'язувальний фрагмент, упаковані в контейнер, такий як флакон або пляшка, і додатково містить етикетку, прикріплену до контейнера або упаковану з контейнером, де на етикетці описаний вміст контейнера і представлені показання і/або інструкції відносно застосування вмісту контейнера для лікування одного або декількох станів захворювання, як описано в даному документі.
В одному аспекті набір призначений для лікування злоякісної пухлини і містить антитіло проти ТІСІТ (наприклад, гуманізоване антитіло) або його антигензв'язувальний фрагмент і додатковий лікарський засіб або вакцину. Набір може, необов'язково, додатково містити шприц для парентерального, наприклад, внутрішньовенного, уведення. В іншому аспекті набір містить бо антитіло проти ТІСІТ (наприклад, гуманізоване антитіло) або його антигензв'язувальний фрагмент, і етикетку, прикріплену до контейнера або упаковану з контейнером, що описує застосування антитіла або фрагмента з вакциною або додатковим лікарським засобом. В іншому аспекті, набір містить вакцину або додатковий лікарський засіб і етикетку, прикріплену до контейнера або упаковану з контейнером, що описує застосування вакцини або додаткового лікарського засобу з антитілом проти ТІСІТ або фрагмента. У конкретних варіантах здійснення антитіло проти ТІСІТ і вакцина або додатковий лікарський засіб знаходяться в окремих флаконах або об'єднані разом в одній і тій же фармацевтичній композиції.
Як вказано вище в розділі комбінована терапія, паралельне введення двох лікарських засобів не вимагає того, щоб засоби вводили одночасно або за допомогою того самого способу, за умови, що існує перекривання періодів часу, під час яких засоби виявляють їхній терапевтичний ефект. Передбачене одночасне або послідовне введення, як і введення в різну добу або тижні.
Можна одержувати також терапевтичні набори і набори для детекції, описані в даному документі, які містять щонайменше одне з антитіла, пептиду, антигензв'язувального фрагмента або полінуклеотиду, описаних у даному документі, і інструкції для використання композиції як реагенту для детекції або лікарського засобу. Контейнери для застосування в таких наборах можуть, як правило, включати щонайменше один флакон, тестову пробірку, колбу, пляшку, шприц або інший прийнятний контейнер, у який можна вміщувати одну або декілька з композиції(композицій) для детекції і/або терапевтичної композиції(композицій), і переважно, прийнятним чином розділяти на аліквоти. Коли надають також другий лікарський засіб, набір може містити також другий окремий контейнер, у який можна вміщувати цю другу композицію для детекції і/або терапевтичну композицію. Альтернативно, можна одержувати множину сполук в одній фармацевтичній композиції, і можна упаковувати в один контейнерний засіб, такий як флакон, колба, шприц, пляшка, або інший прийнятний один контейнер. Набори, описані в даному документі, можуть, як правило, включати засоби для вмісту флакона(флаконів) із щільною фіксацією для комерційного продажу, наприклад, такі як відлиті або отримані за допомогою формування з роздмухуванням і розтяганням пластикові контейнери, у яких зберігають бажаний флаконії). Коли радіоактивна мітка, хромогенна, флуорогенна або інший тип мітки, що піддається детекції, або засобів для детекції включені в набір, засіб для мічення
Зо або може бути наданий в тому ж контейнері, що і сама композиція для детекції або терапевтична композиція, або альтернативно може бути вміщений в другий окремий контейнерний засіб, у якому ця друга композиція може бути вміщена і прийнятним чином розділена на аліквоти. Альтернативно, реагент для детекції і мітку можна одержувати в окремих контейнерних засобах, і в більшості випадків, набір, може також, як правило, включати засоби для вмісту флакона(флаконів) із щільною фіксацією для комерційного продажу і/або зручного упакування і доставки.
Представлені також пристрій або апарат для здійснення способів детекції або моніторування, описаних у даному документі. Такий апарат може включати камеру або пробірку, у яку можна вміщувати зразок, систему розливу рідин, необов'язково, яка включає клапани або насоси, щоб спрямовувати потік зразка через пристрій, необов'язково, фільтри для відділення плазми або сироватки від крові, змішувальні камери для додавання зв'язувальних засобів або реагентів для детекції, і необов'язково, детектуючий пристрій для детекції кількості мітки, яка піддається детекції, зв'язаної з імунокомплексом зв'язувального засобу. Потік зразка може бути пасивним (наприклад, за допомогою капілярних, гідростатичних або інших сил, що не вимагають додаткових маніпуляцій із пристроєм після нанесення зразка), або активним (наприклад, за допомогою прикладання сили, отриманої за допомогою механічних насосів, електроосмотичних насосів, відцентрової сили або збільшеного тиску повітря), або за допомогою комбінації активних і пасивних сил.
У наступних варіантах здійснення представлений також процесор, машиночитана пам'ять і стандартна послідовність дій, яка зберігається в машиночитаній пам'яті й адаптована для виконання процесором для здійснення будь-якого зі способів, описаних у даному документі.
Приклади прийнятних комп'ютерних систем, оточення і/або конфігурацій включають персональні комп'ютери, комп'ютери-сервери, портативні або переносні пристрої, багатопроцесорні системи, мікропроцесорні системи, комп'ютерні приставки, програмувальну споживчу електроніку, мережні РС, мінікомп'ютери, центральні комп'ютери, розподілене обчислювальне середовище, що включає будь-які з вищевказаних систем або пристроїв, або будь-які інші системи, відомі в даній галузі.
ЗАГАЛЬНІ СПОСОБИ
Стандартні способи молекулярної біології описані в Затрьгоок, Егйб5сп апа Мапіайі5 (1982 8 (510) 1989 279 Едйоп, 2001 39 Еайіоп) Моїесшаг Сіопіпо, А І арогаїюгу Мапиа!ї, Соїй ріпу Нагбог
І арогайюгу Ргезз, Соїй 5ргіпа Натог, МУ; Затргоок апа Виззеї! (2001) Моїесшаг Сіопіпо, 39 ед.,
Соіа бріїпуд Нагбог І арогаюгу Ргев5, Соїд бргіпа Натог, МУ; Ми (1993) Весотбріпапі ОМА, Мої. 217, Асадетіс Рге55, Зап Оіедо, СА). Стандартні способи представлені також у А!й5беї, еї аї. (2001) Степі Ргоюсої5 іп МоіІєсціаг Віоіоду, Мої!5.1-4, дУопп Уміеу апа 5опв5, Іпс. Мем МогК, МУ, де описані клонування в клітинах бактерій і мутагенез ДНК (Мої. 1), клонування в клітинах ссавців і дріжджів (Мо. 2), глікокон'югати й експресія білка (Мої. 3) і біоїнформатика (Мої. 4).
Описані способи очищення білка, включаючи імунопреципітацію, хроматографію, електрофорез, центрифугування і кристалізацію, (Соїїдап, еї аіІ. (2000) Ситепі Ргоїосої5 іп
Ргоївіп Зсіепсе, Мої. 1, допп Уміеу апа 5оп5, Іпс., Мем/ МогК). Описані хімічний аналіз, хімічна модифікація, посттрансляційна модифікація, одержання злитих білків, глікозилування білків (див., наприклад, Соїїдап, еї аІ. (2000) Сиггепі Ргоїосої!5 іп Ргоїеіп Зсіепсе, Мої. 2, хопп УмМіеу апа
Зопв, Іпс., Мем/ МоїКк; А!йзибеї, еї аі. (2001) Ситепі Ргоїосоїв іп МоїІесшіаг Віоіоду, Мої. 3, щдопп
МУйеу апа боп5, Іпс., ММ, МУ, рр. 16,0,5-16,22,17; Бідта-Аїагісн, Со. (2001) Ргодисів їог І їе
Зсієпсе ВНезеагсі, 51. Гоців, МО; рр. 45-89; Атегепат РІаптасіа Віоїесп (2001) Віобігесіогу,
Різсаїамау, М.9., рр. 384-391). Описано одержання, очищення і фрагментація поліклональних і моноклональних антитіл (Соїїдап, еї аї. (2001) Ситепі Ргоїсої5 іп Іттипоїіоду, Мої. 1, хУопп УмМіеу апа 5опв, Іпс., Мем МогКк; Напоуу апа І апе (1999) Овіпд Апіїбодієв, Соїд бргіпд Нагброг І арогаюгу
Ргез5, бої ріпу Натбог, МУ; Нагіоу/ і їапе, вище). Доступні стандартні способи для характеризації взаємодій ліганд/рецептор (див., наприклад, Соїїдап, еї аїЇ. (2001) Ситепі
Ргоїосо!5 іп Іттипоіоду, Мої. 4, дУопп УМіїеу, Іпс., Мем МогК).
Можна одержувати моноклональні, поліклональні і гуманізовані антитіла (див., наприклад,
ЗПперега апа Оєап (ед5.) (2000) Мопосіопа! Апіїродіе5, Охота Опім. Ргез5, Мем Мої, МУ;
Копівттапп апа Оибеї! (єав.) (2001) Апіїбоду Епадіпеегіпу, Зргіпдег-Мепад, Мем/ Моїк; Напом апа
І апе (1988) Апііродіеєз А І арогаїюгу Мапиаї!, Соїй 5ргіпд Натог І абогаїюгу Ргезв, Соїд 5рііпа
Натбог, МУ, рр. 139-243; Сагрепівг, єї а. (2000) 9. Іттипої. 165:6205; Не, вї а!. (1998) 9. ІттипоЇ. 160:1029; Тапд єї аї. (1999) 9. Віої. Сет. 274:27371-27378; Васа еї аї. (1997) у. ВіоЇ. Спет. 272:10678-10684; СпоїШпіа єї аї. (1989) Маїште 342:877-883; Рооїє апа Уміпієг (1992) 9. Мої. Віо1. 224:487-499; Патент США Мо. 6329511).
Альтернативним гуманізації є використання бібліотек людських антитіл, експонованих на
Зо фагах, або бібліотек людських антитіл у трансгенних мишах (Мацдпап еї аїЇ. (1996) Маїшге
Віотесппої. 14:309-314; Ваграз (1995) Маїцге Меадісіпе 1:837-839; Мепае? сеї аї. (1997) Машге
Сепеїїсв 15:146-156; Ноодепроот апа Спатез (2000) Іттипої. Тодау 21:371-377; Вагбраз 6ї аї. (2001) Рнаде бОізріау: А Іарогаїгу Мапиаї, Соїд ріпа Натог І арогаюгу Ргезв, Со брііїпд
Нарог, Мем МогїКк; Кау сеї а!. (1996) Рпаде бігріау ої Рерііде5 апа Ргоївіпв: А І арогаїогу Мапаиаї,
Асадетіс Ргезв, Зап Оієдо, СА; де Вгиїп еї аї. (1999) Маїиге Віотеснпої. 17:397-399).
Описані одноланцюжкові антитіла і діатіла (див., наприклад, Маїескі еї аї. (2002) Ргос. Май).
Асад. сі. ОБА 99:213-218; Сопгаїй єї аї. (2001) 9. Віої. Спет. 276:7346-7350; ЮОезтуїег еї аї. (2001) 9. Віої. Снет. 276:26285-26290; Ниазоп апа Копії (1999) 9. Іттипої. Меїнодв» 231:177-189; і Патент США Мо. 4946778). Представлені біфункціональні антитіла (див., наприклад, Маск, еї аІ. (1995) Ргос. Маї!. Асад. сі. ОБА 92:7021-7025; Сапег (2001) 9. Іттипої. Меїнподе» 248:7-15;
Моїкеї, еї а!. (2001) Ргоївїп Епдіпеегіпд 14:815-823; Зедаї, єї а. (2001) 9. Іттипої. Меїподз» 248:1- 6; Вгеппап, єї а!ї. (1985) бсіеєпсе 229:81-83; ВНаво, вї аї. (1997) 9. Вісі. Спет. 272:27623; Моїттівоп (1985) Зсівєпсе 229:1202-1207; ТташпескКег, еї аї. (1991) ЕМВО .). 10:3655-3659; і Патенти США
Мо. 5932448, 5532210 і 6129914).
Представлені також біспецифічні антитіла (див., наприклад, Аглопі еї аї. (1998) 9. Іттипої. 161:3493; Кіа єї аї. (1999) 9). Іттипої. 162:6901; МегсНапі еї аї. (2000) 9. Віої. Спет. 74:9115;
Рапавєу єї а!ї. (2000) 9. Віої. Снет. 275:38633; 7Пепо еї аї. (2001) 9. Віої Спет. 276:12999; Ргорві еї а. (2000) 9. Іттипої. 165:2214; І опа (1999) Апп. Нем. Іттипо)ї. 17:875).
Очищення антигену не є необхідним для одержання антитіл. Тварин можна імунізувати клітинами, які несуть антиген, що представляє інтерес. Потім спленоцити можна виділяти з імунізованих тварин, і спленоцити можна зливати з лінією клітин мієломи для одержання гібридоми (див., наприклад, Меуаага еї аї. (1997) Іттипйу 7:283-290; МУгідні еї аї. (2000)
Іттипйу 13:233-242; Ргевіоп еї аІ., вище; Кайпатапа еї аї. (1999) 9. Іттипої. 163:5157-5164).
Антитіла можна кон'югувати, наприклад, з низькомолекулярними лікарськими засобами, ферментами, ліпосомами, поліетиленгліколем (ПЕГ). Антитіла можна використовувати для терапевтичних, діагностичних цілей, у наборі або для інших цілей, і вони включають антитіла, зв'язані, наприклад, з барвниками, радіоактивними ізотопами, ферментами або металами, наприклад, колоїдним золотом (див., наприклад, Ге Юоиззаї еї аї. (1991) 9. Іттипої. 146:169- 175; Сіреїййпі еї аї. (1998) У. Іттипої. 160:3891-3898; Нвіпд апа Вівпор (1999) 9. Іттипої. 60 162:2804-2811; Ємепз еї а. (2002) 9. Іттипої. 168:883-889).
Доступні способи проточної цитометрії, включаючи активоване флуоресценцією сортування клітин (ГАС5), (див., наприклад, Оумепв5, еї аїЇ. (1994) Ріош Сутеїгу Ргіпсіріе5 ог Сііпіса!
І арогайїогу Ргасіїсе, Чопп УМієу апа боп5, НороКеп, М); Сімап (2001) Ріож Суїотеїйгу, 279 єд.;
М еу-Гів5, НороКеп, М; ЗПпаріго (2003) Ргасіїса! Ріом/ Суютаеїгу, Чопп УМієу апа 5опв5, НорокКеп,
МУ). Доступні флуоресцентні реагенти, що підходять для модифікації нуклеїнових кислот, включаючи праймери і зонди з нуклеїнової кислоти, поліпептиди, і антитіла, для використання, наприклад, як діагностичні реагенти (МоїЇІесшаг Ргорез (2003) Каталог, МоїІесшціаг Ргобев, Іпс.,
Епйдепе, ОВ; 5ідта-Аїйагісй (2003) Каталог, 51. І оці5, МО).
Описані стандартні способи гістології імунної системи (див., наприклад, МийПег-НаптвеїїнкК (єд.) (1986) Нитап Тнутив: Нізіораїпоіоду апа Раїйпоіоаду, Зргіпдег Мепад, Мем Моїк, МУ; Ніаїй, єї а!. (2000) Соїог Айаз ої Нізіюоіоду, Гірріпсой, УМ ПШіатв, апа УМїКіп5, Рийа, РА; Гоців, єї аї. (2002)
Вавзіс Нізюїоду: Техі апа Аа, МсаСтгам/-НІЇЇ, Мем/ МОК, МУ).
Доступні пакети програмного забезпечення і бази даних для визначення, наприклад, антигенних фрагментів, лідерних послідовностей, зсідання білків, функціональних доменів, ділянок глікозилування і вирівнювання послідовностей (див., наприклад, СепВапк, Месіог МТІ? зЗийе (Іпіогтах, Іпс, Вейезда, МО); бої М/івсопбзіп Раскаде (Ассеїгув, Іпс., зап Оіедо, СА);
РеСурнег!" (Тіте! одіс Согр., Стузіа! Вау, Мемада); Меппе, еї а!. (2000) Віоіптогтаїйсв 16: 741-742;
Меппе, еї аї. (2000) Віоіп'оптаїйс5 Арріїсайопе Моїє 16:741-742; М/геп, еї аї. (2002) Сотриї.
Меїноад5 Ргодгат5 Віотеа. 68:177-181; моп Неї|пе (1983) Єиг. 9. Віоспет. 133:17-21; моп Неї|пе (1986) Мисівіс Асіах Не. 14:4683-4690).
Приклад 1
Одержання антитіл щура і миші проти ПТІСІТ
Для одержання антитіл проти ТІСІТ людини, щурів І ем/і5 імунізували рекомбінантним білком - міченим Ппі5 ТІСІТ людини з 5іпо Віоіодіса!5 Кат. Ме10917-НОВН) - з використанням ад'юванта
КІВІ ї ін'єкції в подушечку стопи за розкладом раз на два тижні. Альтернативно, мишей Ва!р/С імунізували рекомбінантним білком - міченим Ес людини ТІСІї людини - з використанням ад'юванта КІВІ і ін'єкції в подушечку стопи за розкладом раз на два тижні. В імунізованих тварин відбирали кров і визначали титри сироватки для зв'язування з трансфікованими ТІСІТ людини клітинами СНОКІ з використанням ЕГІБА на основі клітин (описаного нижче). Тварин з
Зо найвищими титрами піддавали кінцевій бустер-ін'єкції рекомбінантним білком, і дренувальні підколінні лімфатичні вузли виділяли через четверо діб. Гібридоми одержували за допомогою електрозлиття виділених лімфоцитів з партнером по злиттю мієломою РЗХбЗ3-АС8.653 з використанням системи для електрозлиття Суїориїзе Нубгіттипе. Злиті клітини висівали в 96- ямкові планшети в ОМЕМ/Е12, 15 5 ВС5, НАТ, ІІ -6, добавку ОРІ і гентаміцин.
Супернатанти гібридом аналізували по зв'язуванню з експресуючими ТІСІТї людини клітинами СНОКІ1 і перехресній реакційній здатності відносно експресуючих ТІСІТ макаки- резусу клітин СНО з використанням формату ЕГІЗА на основі клітин. Експресуючі ТІСІТ людини і ТІСІТ макаки-резусу клітини СНО-КІ1 висівали в 96-ямкові планшети для культивування клітин у 50 мкл ОМЕМ/Е12, 10 95 ВО5 і гентаміцину (середовище СНО-КТ1). Клітини висівали або при 2 х 107 клітин/ямку за дві доби до аналізу, або при 4 х 107 клітин/ямку за одну добу до аналізу.
Середовище видаляли з ямок до аналізу, і додавали 50 мкл супернатанта гібридоми.
Супернатанти гібридоми інкубували протягом 30-60 хвилин при кімнатній температурі і промивали З рази за допомогою РВБЗ/0,05 95 Тмееп 20 з використанням протоколу промивання
ЕГІЗА на клітинах у промивнику для планшетів Віоїек ЕІ 405х Зеїесї СУМУ. П'ятдесят мікролітрів антитіла для детекції (кон'югованого з НЕР антитіла кози проти дО щура (ЗошпНегп Віоїесі кат.
Мо 3030-05) або кон'югованого з НЕР антитіла кози проти (дб миші (Зошійпегп Віоїесп кат. Мо 1043-05)), додавали в розведенні 1:2000 у середовищі СНО-КІ і інкубували при кімнатній температурі протягом 30-60 хвилин. Планшети для аналізу промивали, як показано вище, і виявляли з використанням ТМВ, і зупиняли реакцію за допомогою стоп-розчину для ТМВ (КРІ. кат. Мо 500-85-06) або 0,1 Н фосфорної кислоти. Визначали оптичну густину при 450 нм-620 нм.
Позитивні клони були реакційноздатними відносно клітин СНО-К1, трансфікованих як ТІСІТ людини, так і ТІСІТ макаки-резусу, і були негативними по зв'язуванню з вихідними клітинами
СНО-КІ. У цих аналізах якщо для антитіла показували зв'язування з вихідними (нетрансфікованими) клітинами СНО-К1; автори даного винаходу відкидали це антитіло при скринінгу як не специфічне для ТІСІТ.
Позитивні гібридоми субклонували за допомогою лімітуючого розведення або субклонували за допомогою розсіву гібридом на напівтверді середовища, і відбору клонів на СіопеРіх? (Сепеїїх). Два цикли субклонування здійснювали для вихідних гібридом. Кінцеві субклони вирощували в дрібномасштабних культрурах у безсироватковому середовищі для одержання бо гібридом і очищали для одержання очищеного антитіла для подальшої характеризації.
З використанням цих способів одержали приблизно 819 гібридом.
Приклад 2
Характеризація антитіл проти ПТІСІТ
Супернатанти з позитивних клонів тестували на їхню здатність блокувати зв'язування рекомбінантного білка СО155 людини - пис із клітинами СНОК'! з НТІСІТ у форматі ЕГІЗА на основі клітин. Клітини ТІБІТ-СНО-КІ1 людини висівали в 96-ямкові планшети, як описано вище.
Середовище видаляли з планшетів, і 50 мкл супернатанта гібридоми інкубували з клітинами
СНО-КІ з ТІСІТ людини при 4 "С протягом 30 хвилин. П'ятдесят мікролітрів СО155 людини - чес додавали в планшет до кінцевої концентрації 0,5 мкг/мл СО155 людини - пис і інкубували протягом 30 хвилин при 4 "С. Планшети для аналізу промивали З рази за допомогою
РВБ/0,05 95 Тмуееп-20, як вище. Зв'язування СЮО155 людини - ПиЕс із клітинами пТІСІТ-СНОК детектували з використанням кон'югата з НКР вторинного антитіла Е(аб)2 кози проти дО людини (Часкзоп 109-036-098) у розведенні 1:2000 у середовищі СНО-К1. Планшети виявляли з використанням ТМВ, і зупиняли реакцію за допомогою стоп-розчину для ТМВ, як описано вище, і визначали А450-620 нм.
Антитіло щура, отримане відповідно до вищеописаного способу, позначене як 14Аб6, і походить із клону І 8155.14А6.52.А8. Це антитіло щура (14А6) належить до ізотипу Ідс2/каппа і містить варіабельну область важкого ланцюга з ЗЕО ІО МО: 7 і варіабельну область легкого ланцюга з 5ЕО ІЮО МО: 8. Очищене антитіло 14А6 зв'язується з ТІСІТ людини і ТІСІТ макаки- резусу, як визначено по зв'язуванню з клітинами СНОК' з ТІСІТ людини їі ТІСІТ макаки-резусу за допомогою ЕГІ5А на основі клітин (фігура 1) з використанням способів, описаних вище. (Для контрольного антитіла того ж ізотипу не показано якого-небудь зв'язування (дані не представлені). Очищене антитіло 14А6 може також блокувати взаємодію ПТІСІТ Її пСО155 з використанням аналізу блокування ЕГ І5А на основі клітин (фігура 3) з використанням способу, описаного вище.
Антитіло миші, отримане відповідно до вищеописаного способу, позначене як 28НУЬ, і походить із клону ТС167.28Н5.Н5. Це антитіло миші (28Н5) належить до ізотипу Ідс1/каппа і містить варіабельну область важкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 63 і варіабельну область легкого ланцюга з 5ЕО ІЮ МО: 64. Очищене антитіло 28Н5 також зв'язується з ТІСІТ людини Її ТІСІТ
Зо макаки-резусу, як визначено по зв'язуванню з клітинами СНОК'! з ТІСІТ людини і ТІСІТ макаки- резусу за допомогою ЕГІ5БА на основі клітин (фігура 2) з використанням способів, описаних вище. Очищене антитіло 2885 також блокує взаємодію ПТІСІТ і йСО155 з використанням аналізу блокування ЕГ І5А на основі клітин (фігура 3) з використанням способу, описаного вище.
Інше антитіло миші, отримане відповідно до вищеописаного способу, позначене як 31С6, і походить із клону МЕВ125.31С06.А1.205. Це антитіло миші (3106) належить до ізотипу
ІдсС1/каппа і містить варіабельну область важкого ланцюга з 5ЗЕО ІО МО: 94 і варіабельну область легкого ланцюга з ЗЕО ІО МО: 95. Очищене антитіло 3106 також зв'язується з ТІСІТ людини і ТІСІТ макаки-резусу, як визначено по зв'язуванню з клітинами СНОК'! з ТІСІТ людини і
ТІСІТ макаки-резусу за допомогою ЕГІ5ЗА на основі клітин (фігура 4) з використанням способів, описаних вище. Очищене антитіло 3106 антитіло також блокує взаємодію НТІСІТ ії пСО155 з використанням аналізу блокування ЕГ І5А на основі клітин (фігура 4) з використанням способу, описаного вище.
Визначення афінності зв'язування вихідного (яке не належить до людини) антитіла проти
ТІСІТ з рекомбінантним білком з ТІСІТ людини: Кінетику активності зв'язування антитіл проти
ТІСІЇ людини 14А6 ії 3106 (отриманих, як описано в приклад 1), і комерційного антитіла
МВ5ЗА43, вимірювали за допомогою поверхневого плазмонного резонансу з використанням системи Віасоге 1200 (Віасоге, СЕ Неайсаге, Різсаїаужлау, МУ). Приблизно 5000 КИ антитіла проти дб миші, ЗЕ Неакйсаге, каталоговий номер ВЕК-1008-38, або приблизно 13000 КИ специфічного для фрагмента антитіла кози проти Ес-гамма ідо щура, Ччаскзоп ІттипокКезеагсі, каталоговий номер 112-006-071, іммобілізували за допомогою хімічних реакцій приєднання по аміногрупи на сенсорному чипі СМ5 серії 5, каталоговий номер ВК-1005-30. Кожний із клонів антитіл миші проти ТІСІТ людини, 31С6 і МВ5А43, ін'єктували над поверхнями іммобілізованих антитіл проти антитіл миші при 1 мк/мл до рівня зв'язування 40 КО. Клон антитіл щура проти
ТІСІТ людини 14А6 ін'єктували над поверхнями іммобілізованих антитіл проти антитіл щура при 1 мкг/мл до рівня зв'язування 40 КО. Буфер НВЗ-ЕР-- (ВА-1006-69) використовували як робочий буфер зі швидкістю потоку 30 мкл/хв. Різні концентрації білка ТІСІТ людини-Нів або білка ТІСІТ-
Ес, у діапазоні від 0,29 нМ до 40 нМ, при швидкості потоку 45 мкл/хв ін'єктували над поверхнями антитіл. Після кожного циклу ін'єкції антитіл миші проти ТІСІї людини для клонів 31С6 і
МВ5ЗА43, поверхню чипа СМ5 серії 5 регенерували з використанням однієї трихвилинної ін'єкції бо 10 мМ гліцину рН 1,7 при швидкості потоку 10 мкл/хв. Після кожного циклу ін'єкції антитіл щура проти ТІСІТї людини, поверхню чипа СМ5 серії 5 регенерували з використанням однієї 20- секундної ін'єкції 10 мМ гліцину рН 1,5 з наступними двома 10-секундними ін'єкціями 12,5 мМ
Маон при швидкості потоку 60 мкл/хв.
Сенсограми з вирахуванням фонового зв'язування використовували для аналізу константи швидкості зв'язування (Ка) і дисоціації (Ка), і рівноважної константи дисоціації Ко. Отримані набори даних приводили у відповідність з моделлю зв'язування 1:1 Ленгмюра з використанням програмного забезпечення для оцінки даних Віасоге 1200 (версії 2.0). У таблиці З узагальнені афінності антитіл проти ТІСІТ людини для білка ТІСІТ людини-Нів і білка ТІСІТ-Ес.
Таблиця З
Вимірювання афінності антитіл проти ТІСІТ людини з білком ТІСІТ людини-Нів і білком ТІСІТ-Ес з використанням ВіІАсоге 00000оклоно 000 Коло Відсоге ВІЇ людинитів) КО по Відсоге СВІТ людини Ес)
Клон тіда1
Приклад З
Аналіз активності Т-клітин іп міго для антагоністичних антитіл проти ПТІСІТ
З тестованих антитіл, приблизно для 352 моноклональних антитіл, як показано, що блокують зв'язування СО155-Ес із клітинами СНО, які експресують ПТІСІТ, здійснювали скринінг по їхній здатності підсилювати активність Т-клітин іп міго з використанням функціональних аналізів на основі клітин.
Один аналіз автори даного винаходу розробили для характеризації функціональних наслідків блокування рецептора ТІСІТ людини з використанням клітин ДЩигкаї, іморталізованої лінії клітин Т-лімфоцитів людини (клон Еб-1; АТОС ТІВ-152), сконструйованої для надекспресії
ТІСІТ людини (ПТІСІТ-УигКка), що культивували разом із клітинами ТНР-1, лінією моноцитарних клітин людини в присутності або під час відсутності одного з лігандів ТІСІТ, СО155 і СО112.
Клітини ПТІСІТ-ОигКаї, культивовані разом із клітинами ТНР-1 і стимульовані зв'язаним із планшетом тАб проти СОЗ3, продукують ІЇ-2, але коли ліганд ТІСБІТ (СО155 або СО112) додавали в спільну культуру, рівні І/-2 зменшувалися залежним від ліганда чином. Обробка антитілами, що блокують взаємодію СО155- або СО112-ТІСІТ, такими як комерційно доступне
Ар проти НПТІСІТ, клон МВБА43 (еВіозсіепсе Кат. Мо 12-9500-42), відновлює продукцію 1-2 у цьому аналізі залежним від дози чином (фігура 5). 9б-ямкові плоскодонні планшети покривали антитілом миші проти СОЗ людини (1 мкг/мл у
РВ5; клон НіІТЗа; ВО РІагтіпдеп Кат. Мо 555336) протягом ночі при 4 2С. На наступні добу,
Зо клітини ПТІСІТ-Уигкаї (50000) висівали в попередньо покриті планшети і проводили попередню інкубацію протягом 30-60 хвилин з тАБ у різних концентраціях. Клітини ТНР-1 (50000) додавали в культуру, потім або СО155-Рс (ЕСО СО155 людини, злитий з Ес людини; 1,0 мкг/мл), або
СОр112-Ес (ЕСО СО112 людини, злитий з Ес людини; 0,5 мкг/мл). Після інкубації протягом 18-24 годин при 37 2С і 5,0 95 СО», рівні І--2 оцінювали в культуральних супернатантах за допомогою
Мезо 5саїе (Набір Нитап 1-2 Тіззце Сийиге МЕЗО: Кат. МеК1ТІ51АНВ-2). Обробка МВЗА43 (10 мкг/мл) відновлювала 1-2 до рівня, який дорівнює рівню, коли активовані клітини АТІСІТ дигкаї культивують з ТНР-1 під час відсутності СО155 або СО112.
Як показано на фігурі 5, при титруванні антитіла проти ПТІСІТ, клону 14А6, від 30 мкг/мл зі зниженням до 0,04 мкг/мл, одержали ЕСзо 0,190 мкг/мл у порівнянні з МВЗА43З при 0,24 мкг/мл з використанням цього аналізу. Клон 14А6 (30 мкг/мл) відновлював рівень І/-2 до 82 905 від
МВ5ЗА43 (10 мкг/мл).
На фігурі 5 показано також, що при титруванні антитіла проти ПТІСІТ, клону 28Н5, від 30 мкг/мл зі зниженням до 0,04 мкг/мл, одержали ЕСвзо 0,24 мкг/мл у порівнянні з МВ5А43З при 0,24 мкг/мл з використанням цього аналізу.
На фігурі 6 показано також, що при титруванні антитіла проти ПТІСІТ, клону З31С6, від 30 мкг/мл зі зниженням до 0,04 мкг/мл, одержали ЕСвзо 0,14 мкг/мл у порівнянні з МВ5А43З при 0,24 мкг/мл з використанням цього аналізу. Клон 31С6 (30 мкг/мл) відновлював рівень 1-2 до 118 95 від МВЗАЯ4З (10 мкг/мл).
3 352 тестованих моноклональних антитіл, приблизно 113 були здатними підсилювати активність Т-клітин іп міго з використанням функціональних аналізів на основі клітин.
Приклад 4
Аналіз активності Т-клітин іп міго для антагоністичних антитіл проти ПТІСІТ
Автори даного винаходу далі аналізували відносний функціональний антагонізм ТІСІТ і відновлення активації Т-клітин і ефекторної функції з використанням первинної лінії Т-клітин людини, яка експресує ендогенний ТІСІТ при активації Т-клітинного рецептора (ТСК). Лінія Т- клітин людини ВС4-клону 49 являє собою специфічний для алоантигена клон СО4- Т-клітин людини, який експресує ТСК, специфічний для молекул МНС НІ А-класу ІІ, експресований на трансформованій ЕВМ лінії клітин, УМ (НГСА-ОКІ1,4). Лінія Т-клітин людини ВС4-клону 49 вимагає повторної стимуляції алоантигеном кожні два тижні, з використанням опромінених (5000 рад (50
Гру) стимулюючих клітин УМ, опромінених РВМСОС (4000 рад (40 Гр)), виділених із двох лейкоцитарних шарів, і РНА-Р (2,5 мкг/мл; Зідта), а також 10 нг/мл І-2 людини (КО), що додається кожні 3-4 доби після повторної стимуляції і розмноження. Кілька клонів Т-клітин (ВС1- 6, ВС4-27, ВС4-49) аналізували за допомогою ПЛР і потім за допомогою проточної цитометрії по відносній експресії ТІСІТ після повторної стимуляції, і вибрали ВС4-клон 49, оскільки він мав найвищу експресію ТІСІТ у порівнянні з іншими клонами. Відносну експресію і кінетику ТІСІТ, сор226, С096 і СО155 моніторували після повторної стимуляції опроміненими (5000 рад (50 Гр)) стимулюючими клітинами УУ, опроміненими РВМС ії РНА-Р, для оцінки найкращого часу для аналізу тАбр-антагоністів по відносній антагоністичній активності відносно ТІСІТ. Пік експресії
ТІСІТ спостерігали через 3-4 доби після повторної стимуляції, у той час як експресія СО226 і
С0роеоб зменшувалася протягом того ж періоду часу. Потім експресія ТІСІТ зменшувалася, у той час як експресія СО226 і С0Об знову збільшувалася на добу 6 після повторної стимуляції (фігура 7). Відповідно, тАб - кандидати на антагоністи ТІСІТ - оцінювали через 3-4 доби після повторної стимуляції. Трансфектант УМ, який надекспресує СО155 людини, одержували з використанням ретровірусних векторів РМХ-» пит як засобів для супресії відповідей Т-клітин
ВС4-клону 47 у біологічному аналізі первинних Т-клітин і для оцінки відносної здатності тАб проти ТІСІї виявляти антагонізм активації ТІСІї за допомогою СО155 і відновлювати проліферацію Т-клітин і ІРМу через три доби.
Зо Аналіз первинних Т-клітин по відносному антагонізму тАБб проти ПТІСІТ здійснювали наступним чином. Лінію СО4-Т-клітин людини ВС4-клону 49 спільно культивували з блокуючими
СОр155-Рс тАБб, специфічними для ПТІСІТ, у різних концентраціях (33, 11, 3,7,1,2, 04101 мкг/мл) протягом 30 хвилин і потім розсівали в круглодонні 96-ямкові планшети (2 х 107 клітин/'ямку). Трансфектанти УУ-пСО155, які експресують алоантиген і високі рівні НСО155, опромінювали (5000 рад (50 Гр)), промивали і потім додавали в ямки, що містять оброблені тАБ проти ТІСІТ Т-клітини ВС4-клону 49, до кінцевої концентрації 1 х 107 (у співвідношенні 2:1 Т- клітина: клітина-мішень) або 5 х 103 (у співвідношенні 1:4 Т-клітина: клітина-мішень) у загальному обсязі 200 мкл/ямку. Контроль включав відсутність обробки тАб, спільне культивування з обробленими тА того ж ізотипу Т-клітинами, тільки Т-клітини і тільки клітини
Уху-20155. Через три або чотири доби спільного культивування, супернатанти збирали для кількісної оцінки цитокіну інтерферон-гамма (ІЄМу), ії Т-клітини обробляли 6 годин тритованим тимідином для оцінки відносної проліферації.
Як показано на фігурах 8А і 88, обробка тАБ проти ПТІСІТ 14А6, 28Н5 і 3106 Т-клітин ВС4- клону 49 приводила до відновлення відповідей ІЄМу і проліферативних відповідей, як оцінено по збільшених відповідях у порівнянні з обробленими антитілом того ж ізотипу і необробленими Т- клітинами. Для комерційного антитіла МВ5А43З і антитіл 37010 ї 25010 (антитіла проти ТІСІТ, отримані, як описано в прикладі 1) також показана активність у цьому аналізі. Збільшення продукції ІЕМу після обробки 14А6, 28Н5 і 3136 було в середньому приблизно в 2 рази.
Приклад 5
Протипухлинна активність антитіл проти ТІСІТ і проти РОТ у моделі пухлини на тварин
Миші: Самиць мишей ВАЇ В/сАп у віці приблизно сім-вісім тижнів із середньою масою тіла 20 грам одержували з Тасопіс І арогаогу (Сеппапіомп, МУ). Загальноприйнятий корм для тварин і воду надавали без обмежень.
Реагенти-антитіла: моноклональне антитіло миші ізотипу ЇД1 проти РО-1 миші і контрольне антитіло того ж ізотипу одержували з зовнішніх джерел у формі заморожених (-80 С) вихідних розчинів. Антитіло щура проти ТІСІТ миші (51507) одержували з еВіозсіепсе у формі вихідного розчину при 4 "С. Контрольне антитіло ізотипу ЇД01 являло собою моноклональне антитіло миші, специфічне для аденовірусного гексону 25. Контрольне антитіло ізотипу Ї(9032а являло собою моноклональне антитіло щура, специфічне для бета-галактозидази. Ізотип (ДС1 миші є бо мишачим еквівалентом ізотипу для людського ізотипу Ідоса4і.
Склади реагентів-антитіл: Буфери складів були специфічними для кожного антитіла, щоб стабілізувати білки і запобігати осадженню. Склади були наступними: тідое1:75 мМ масі, 10 мМ фосфат натрію, З 95 сахароза, рН 7,3; антитіло проти РО-1: 20 мМ ацетат натрію, 7 95 сахароза, рН 5,5; І(до2а щура: 20 мм ацетат натрію, 9 95 сахароза рнН 5,5; і антитіло проти ТІСІТ (51507):
РВЗ рН 7,0.
Одержання й імплантація лінії клітин пухлини: клітини карциноми ободової кишки СТ26 культивували в середовищі КРМІ, доповненому 1095 інактивованою нагріванням ембріональною бичачою сироваткою. З х 105 клітин, які знаходяться в логарифмічній фазі і субконфлюентних клітин СТ26 ін'єктували підшкірно (п/ш) в об'ємі 100 мкл безсироваткової
КЕРМІ у нижню задню частину правого боку кожної миші. Мишей спочатку виголювали з використанням електронної машинки в області, що підлягає використанню для імплантації.
СТ-26 являє собою лінію клітин колоректальної аденокарциноми миші, сингенної для лінії миші ВАГ В/с. СТ-26 є прийнятною модельною системою для оцінки механізму дії антитіла проти
РО-1 завдяки трансльованому молекулярному профілю цієї пухлини після терапії антитілом проти РО-1.
Вимірювання пухлини і маси тіла: Пухлини вимірювали за добу до першої дози і двічі на тиждень після. Довжину і ширину пухлини вимірювали з використанням електронного штангенциркуля, і обсяг пухлини визначали з використанням формули обсяг (мм3)-0,5 х довжина х ширина", де довжина являє собою довше вимірювання. Мишей періодично зважували для моніторування загального стану здоров'я, а також для оцінки фактичної дози доставки в мг/кг на мишу, при необхідності. Перед обробкою, мишей зважували, і вимірювали пухлини індивідуальних мишей. Для запобігання зміщенню, будь-яких випадаючих по масі або обсягу пухлини мишей видаляли, і мишей, що залишилися, випадковим чином розподіляли по різних групах лікування з еквівалентним середнім розміром пухлини. Коли середній обсяг пухлини у мишей, які несуть пухлину СТ26, досягав «100 ммУ, приблизно через 7 діб після імплантації, тварин випадковим чином розподіляли по різних групах лікування по 10 мишей на групу, і починали дозування. Тваринам здійснювали дозування в концентраціях, вказаних нижче.
Одержання, введення й аналіз розчинів для дозування: Заморожені вихідні розчини антитіл,
Зо що підлягають тестуванню в моделі на тварин, разморожували і переносили у вологий лід. Щоб виключити повторне заморожування і розморожування, кожен флакон вихідного розчину розморожували один раз і розділяли на аліквоти в об'ємах, достатніх для однократного використання. Поліпропіленові пробірки з низькою адгезією використовували для цієї мети.
Аліквоти швидко заморожували в сухому льоді і зберігали при -80 С. Перед кожним дозуванням, одну аліквоту розморожували і розводили до номінальної концентрації в прийнятному розріджувачі і здійснювали дозування негайно. Аліквоти розчинів для дозування швидко заморожували і зберігали при -80 "С до аналізів. Розчини для дозування оцінювали з використанням платформи Мезо 5саїе Оізсомегу (МБО, БоскКміе, МО), основаної на технології множинних масивів; комбінації електрохемілюмінесцентної детекції і структурованих масивів.
Результати лікування з дозуванням антитіл проти ТІСІТ/проти РО1: Мишам ВАГ В/сАп, які несуть пухлину СТ26, вводили антитіла щура проти ТІСІТ миші (51507) у дозі 20 мг/кг, ІР, кожні 4 доби протягом кожного з 5 циклів. Антитіла проти РО-1 миші (описані вище) вводили в дозі 10 мг/кг, ІР, кожні 4 доби протягом кожного з 5 циклів. Після дозування, тварин продовжували моніторувати, і обсяги пухлин вимірювали до 36 доби. Лікування починали, коли середній розмір пухлини досягав 100 мм" (75 мм-115 мм"). Пухлини вимірювали двічі на тиждень. Як демонструють результати, показані на фігурі 9, середня протипухлинна відповідь при комбінованій терапії антагоністом РО-1 і антагоністом ТІСІТ перевищувала протипухлинну відповідь, що спостерігається при монотерапії або антитілом проти РО (ре«е0,05), або антитілом проти ТІСІТ (р«е0,005). Для монотерапії антитілом проти ТІСІТ, 21 95 інгібування росту пухлини (ТОЇ) спостерігали на добу 14. Для монотерапії антитілом проти РОТ, 52 95 ТО спостерігали на добу 14. Комбіноване лікування приводило до 85 95 ТО на добу 14, і показано 40 95 випадків повної регресії (СК), так що ніяких пухлин, що піддаються вимірюванню, не залишилося в 4 з 10 мишей на добу 36. Протипухлинна ефективність з будь-яким антитілом, що вводиться у формі монотерапії, складала 0-10 95 СВ.
Приклад 6
Гуманізація антитіл
Щуряче антитіло 14А6 і мишаче антитіло 3106 гуманізували з використанням способів, описаних в описі. З щурячого антитіла 14А6, конструювали наступні гуманізовані варіабельні важкі ланцюги: 5ЕО ІЮ МО: 9-24 і 5БО ІО МО: 37-47; і конструювали наступні гуманізовані 60 варіабельні легкі ланцюга: ЗЕО ІЮ МО: 25-30 ії 5ЕО ІЮ МО: 48-52. З мишачого антитіла 31С6,
конструювали наступні гуманізовані варіабельні важкі ланцюги: 5ЕО ІО МО: 124-129; і конструювали наступні гуманізовані варіабельні легкі ланцюги: 5ЕО ІЮ Мо: 130-133.
Приклад 7
Ефект ізотипу Ес на протипухлинну активність антитіл проти ТІСІТ у моделі пухлини на тварин
Миші: Самиць мишей ВАЇ В/сАп у віці приблизно сім-вісім тижнів із середньою масою тіла 20 грам одержували з Тасопіс І арогаогу (Сеппапіомп, МУ). Загальноприйнятий корм для тварин і воду надавали без обмежень.
Реагенти-антитіла: - Антитіло миші проти РО1 миші - підтип Ідсе1 - Антитіло щура проти ТІСІТ миші (180510) -підтип ЇД1 щура. Це антитіло описане на фігурах як вихідне 18010. Антитіло 180510 має послідовність МН з ЗЕБЕО ІЮ МО:136 і послідовністю МІ з БЕО ІЮ МО: 137. - Химерне антитіло щура проти ТІСІТ миші (18210) -яке містить мишачу Ес-область підтипу тідо1. Це антитіло описане на фігурах як 180510-52а. (Ізотип ЇД901 миші є мишачим ізотипом, еквівалентним людському ізотипу Ід4.) - Химерне антитіло щура проти ТІСІТ миші 18210 - яке містить мишачу Ес-область підтипу тідсзга. Це антитіло описане на фігурах як 18510-2а. (Ізотип ЇдДо2а миші є мишачим ізотипом, еквівалентним людському ізотипу ІдДО1.) - Контрольне антитіло для ізотипу ІдсС1 миші (яке збігається по ізотипу ІДС1 миші контрольне моноклональне антитіло, специфічне для аденовірусного гексону 25). - Контрольне антитіло для ізотипу дС1 щура (яке збігається по ізотипу ДС1 щура контрольне моноклональне антитіло, специфічне для 1-4 людини). - Контрольне антитіло для ізотипу дСга миші (яке збігається по ізотипу Ї(дб2а миші контрольне моноклональне антитіло, специфічне для аденовірусного гексона 25).
Склади реагентів-антитіл: Склади були наступними: - тіде1:75 мМ Масі, 10 мМ фосфат натрію, З 95 сахароза, рн 7 4; - антитіло проти РО-1: 20 мМ ацетат натрію, 9 9о сахароза, рН 5,5; тідсг2а: 75 мм Масі, 10
ММ фосфат натрію, З 95 сахароза, рН 7,3;
Зо - 3901 щура: 20 мМ ацетат натрію, 7 9о сахароза рН 5,5; 180510:20 мМ МаАс, 100 мм Масі,
З 96 сахароза; 18510-051:20 мМ МадАс, 9 95 сахароза, рН 5,5; 180510-с52а: 20 мМ МаАс, 9 95 сахароза, рн 5,5.
Одержання й імплантація лінії клітин пухлини: Клітини карциноми ободової кишки СТ26 культивували в середовищі КРМІ, доповненому 1095 інактивованою нагріванням ембріональною бичачою сироваткою. Зх107 клітин, які знаходяться в логарифмічній фазі і субконфлюентних клітин СТ26 ін'єктували підшкірно (п/ш) в обсязі 100 мкл безсироваткової
ЕРМІ у нижню задню частину правого боку кожної миші. Мишей спочатку виголювали з використанням електронної машинки в області, що підлягає використанню для імплантації.
СТ-26 являє собою лінію клітин колоректальної аденокарциноми миші, сингенної для лінії миші ВАСВ/с. СТ-26 є прийнятною модельною системою для оцінки механізму дії антитіла проти
РО-1 завдяки трансльованому молекулярному профілю цієї пухлини після терапії антитілом проти РО-1.
Вимірювання пухлини і маси тіла: Пухлини вимірювали за добу до першої дози і двічі на тиждень після. Довжину і ширину пухлини вимірювали з використанням електронного штангенциркуля, і обсяг пухлини визначали з використанням формули обсяг (ммУ)-0,5 х довжина х ширина?-, де довжина являє собою довше вимірювання. Мишей періодично зважували для моніторування загального стану здоров'я, а також для оцінки фактичної дози доставки в мг/кг на мишу, при необхідності. Перед обробкою, мишей зважували, і вимірювали пухлини індивідуальних мишей. Для запобігання зміщенню, будь-яких випадаючих по масі або обсягу пухлини мишей видаляли і мишей, що залишилися, випадковим чином розподіляли по різних групах лікування з еквівалентним середнім розміром пухлини.
Одержання, введення й аналіз розчинів для дозування: Заморожені вихідні розчини антитіл, що підлягають тестуванню в моделі на тваринах, розморожували і переносили у вологий лід.
Щоб виключити повторне заморожування і розморожування, кожен флакон вихідного розчину розморожували один раз і розділяли на аліквоти в об'ємах, достатніх для однократного використання. Поліпропіленові пробірки з низькою адгезією використовували для цієї мети.
Аліквоти швидко заморожували в сухому льоді і зберігали при -80 С. Перед кожним дозуванням, одну аліквоту розморожували і розводили до номінальної концентрації в прийнятному розріджувачі, і проводили дозування негайно. Аліквоти розчинів для дозування бо швидко заморожували і зберігали при -80 "С до аналізів. Розчини для дозування оцінювали з використанням платформи Мезо 5саїе Оізсомегу (МБО, БоскКміе, МО), основаної на технології множинних масивів; комбінації електрохемілюмінесцентної детекції і структурованих масивів.
Результати лікування з дозуванням антитіл проти ТІСІТ/ проти РО1Т: мишей ВАЇ В/сАп, які несуть пухлину СТ26, випадковим чином розподіляли на 10 груп лікування, коли середній обсяг пухлини цих мишей досягав середнього розміру пухлини 100 мм3 (80 мм3-119 мм): (1) контроль для ізотипу тиЇдое1 контроль для ізотипу Їде1 щура; (2) контроль для ізотипу тиЇдо1-контроль для ізотипу тиЇдо2а; (3) тиОХ400-жконтроль для ізотипу 91 щура; (4) тиОХ400жконтроль для ізотипу тиЇдсга; (5) контроль для ізотипу тидс1-180510; (6) контроль для ізотипу тиїдс1-180510-51; (7) контроль для ізотипу тиЇдое1-180510-С2га; (8) тиОхХ400-18С210; (9) тирхХ400-180210 (1; (10) тирх400-4180510 б2а. Тваринам вводили антитіла щура проти ТІСІТ миші (18010) або химерні антитіла проти ТІСІТ 18510-С1 або 18510-52а (описані вище) у дозі 18 мг/кг, ІР, кожні 4 доби протягом кожного з 6 циклів. Антитіла проти РО-1 миші (описані вище) вводили в дозі 10 мг/кг, ІР, кожні 4 доби протягом кожного з 6 циклів. Після дозування, тварин продовжували спостерігати, і обсяги пухлин вимірювали до 76 доби для деяких груп лікування.
Пухлини вимірювали двічі на тиждень. Результати показані на фігурах 10 ї 11. Для монотерапії антитілом проти ТІСІТ з використанням 18510-сС2а, показано 44 95 інгібування росту пухлини (ТОЇ) на добу 13; у той час як для вихідного антитіла 180510 показано 38 95, і для антитіла 182210-51 показано 36 95. Для монотерапії антитілом проти РОТ у комбінації з контролем для ізотипу гідс1, 5195 ТО спостерігали на добу 13. Коли антитіло проти РО-1 комбінували з контролем для ізотипу тиЇдоег2а, 50 9о ТО і 10 95 випадків повної регресії (СК) спостерігали на добу 18, так що спостерігали 1 повну відповідь з 10 тварин. Для комбінації антитіла проти РО! і вихідного 180510 показано 80 95 ТОЇ на добу 13 і показано 300 95 СЕ на добу 39. Для комбінації антитіла проти РОЇ і 180510-С1 показано 59 95Т01 на добу 13 і показано 10 95 СК на добу 13.
Для комбінації антитіла проти РО і 18510-52а показано 88 95 ТОЇ на добу 13 і показано 60 95
СЕ на добу 63. Для комбінації антитіла проти РО і 180510-52а показані більша протипухлинна активність і більш повна регресія в порівнянні з комбінаціями антитіла проти РОЇ з вихідним 18210 або 180510-С1. Не було присутньо значної втрати маси тіла, асоційованої з проведенням монотерапії або комбінованої терапії, що вказує на те, що терапія була добре переносимою.
Приклад 8
Зо Ефект ізотипу Ес на протипухлинну активність антитіл проти ТІСІТ у моделі пухлини на тварин
Повторювали експеримент, описаний у прикладі 7, за винятком того, що антитіло щура 18010 заміняли на антитіло щура 11А11.
Миші: Самиць мишей ВАЇ В/сАп у віці приблизно сім-вісім тижнів із середньою масою тіла 20 грам одержували з Тасопіс І арогаїогу (Сеппапіомп, МУ). Загальноприйнятий корм для тварин і воду надавали без обмежень.
Реагенти-антитіла: - Антитіло миші проти РОТ миші - підтип Їдсе1 - Антитіло щура проти ТІСІТ миші (11А11) -підтип д91 щура. Це антитіло описане на фігурах як вихідне 11А11. Антитіло 11А11 має послідовність МН з 5ЕБЕО ІЮ МО:138 і послідовністю МІ. з БЕО ІЮ МО:139. - Химерне антитіло щура проти ТІСІТ миші (11А11) -яке містить мишачу Ес-область підтипу тідс1. Це антитіло описане на фігурах як 11А11-52а. (Ізотип ЇДО1 миші є мишачим ізотипом, еквівалентним людському ізотипу Ід4.) - Химерне антитіло щура проти ТІСІТ миші 11А11 - яке містить мишачу Ес-область підтипу тідсзга. Це антитіло описане на фігурах як 11А11-2а. (Ізотип Їд2а миші є мишачим ізотипом, еквівалентним людському ізотипу ІдДО1.) - Контрольне антитіло для ізотипу ІдС1 миші (яке збігається по ізотипу ДС1 миші контрольне моноклональне антитіло, специфічне для аденовірусного гексону 25). - Контрольне антитіло для ізотипу ЇдС1 щура (яке збігається по ізотипу ДДС1 щура контрольне моноклональне антитіло, специфічне для 1-4 людини). - Контрольне антитіло для ізотипу дСга миші (яке збігається по ізотипу Ї(дб2а миші контрольне моноклональне антитіло, специфічне для аденовірусного гексону 25).
Склади реагентів-антитіл: Склади були наступними: - тід1:75 мМ Масі, 10 мМ фосфат натрію, З до сахароза, рн 7,4; - антитіло проти РО-1: 20 мМ ацетат натрію, 9 95 сахароза, р5,5; тідо2а: 75 мм Масі, 10 мм фосфат натрію, З 95 сахароза, рН 7,3; - 3901 щура: 20 мм ацетат натрію, 7 до сахароза рН 5,5; 11А11:20 мМ МаАс, 100 мМ Масі,
З 96 сахароза рН 5,5; 11А11-51:20 мМ МаАс, 9 95 сахароза, рН 5,5; 11А11-с2а: 20 мМ МаАс, 9 95 60 сахароза, рн 5,5.
Одержання й імплантація лінії клітин пухлини: клітини карциноми ободової кишки СТ26 культивували в середовищі КРМІ, доповненому 1095 інактивованою нагріванням ембріональною бичачою сироваткою. З х 105 клітин, які знаходяться в логарифмічній фазі, і субконфлюентних клітин СТ26 ін'єктували підшкірно (п/ш) в об'ємі 100 мкл безсироваткової
КЕРМІ у нижню задню частину правого боку кожної миші. Мишей спочатку виголювали з використанням електронної машинки в області, що підлягає використанню для імплантації.
СТ-26 являє собою лінію клітин колоректальної аденокарциноми миші, сингенної для лінії миші ВАГ В/с. СТ-26 є прийнятною модельною системою для оцінки механізму дії антитіла проти
РО-1 є прийнятною модельною системою для оцінки механізму дії антитіла проти РО-1.
Вимірювання пухлини і маси тіла: Пухлини вимірювали за добу до першої дози і двічі на тиждень після. Довжину і ширину пухлини вимірювали з використанням електронного штангенциркуля, і обсяг пухлини визначали з використанням формули обсяг (ммУ)-0,5 х довжина х ширина?-, де довжина являє собою довше вимірювання. Мишей періодично зважували для моніторування загального стану здоров'я, а також для оцінки фактичної дози доставки в мг/кг на мишу, при необхідності. Перед обробкою, мишей зважували, і вимірювали пухлини індивідуальних мишей. Для запобігання зміщенню, будь-яких випадаючих по масі або обсягу пухлини мишей видаляли і мишей, що залишилися, випадковим чином розподіляли по різних групах лікування з еквівалентним середнім розміром пухлини. Коли середній розмір пухлини у мишей, які несуть пухлину СТ26, досягав «100 мм"У, приблизно через 7 діб після імплантації, тварин випадковим чином розподіляли по групах лікування по 10 мишей на групу, і починали дозування. Тваринам здійснювали дозування при концентраціях, вказаних нижче.
Одержання, введення й аналіз розчинів для дозування: Заморожені вихідні розчини антитіл, що підлягають тестуванню в моделі на тваринах, розморожували і переносили у вологий лід.
Щоб виключити повторне заморожування і розморожування, кожен флакон вихідного розчину розморожували один раз і розділяли на аліквоти в об'ємах, достатніх для однократного використання. Поліпропіленові пробірки з низькою адгезією використовували для цієї мети.
Аліквоти швидко заморожували в сухому льоді і зберігали при -80 С. Перед кожним дозуванням, одну аліквоту розморожували і розводили до номінальної концентрації в прийнятному розріджувачі і здійснювали дозування негайно. Аліквоти розчинів для дозування
Зо швидко заморожували і зберігали при -80 "С до аналізів. Розчини для дозування оцінювали з використанням платформи Мезхо 5саїе Різсомегу (М50ОУ, КосКміІе, МО), основаної на технології множинних масивів; комбінації електрохемілюмінесцентної детекції і структурованих масивів.
Результати лікування з дозуванням антитіл проти ТІСІТ/ проти РО1Т: мишей ВАЇ В/сАп, які несуть пухлину СТ26, випадковим чином розподіляли на 10 груп лікування, коли середній обсяг пухлини цих мишей досягав середнього розміру пухлини 100 мм3 (75 мм3-115 мм): (1) контроль для ізотипу тиЇдое1 контроль для ізотипу Їде1 щура; (2) контроль для ізотипу тиЇдо1-контроль для ізотипу тиЇдо2а; (3) тиОхХ400-контроль для ізотипу ЇД1 щура; (4) тиОХ4б00Ожконтроль для ізотипу тиЇдс2га; (5) контроль для ізотипу тидос1-11А11; (б) контроль для |ізотипу тиїдс1--А11А11-51; (7) контроль для ізотипу тиЇдсе1-11А11-сЯга; (8) тиОйхХ400-11А11; (9) тирХх400-411А11 С; (10) тиОХ400-411А11 Сіга. Тваринам вводили антитіла щура проти ТІСІТ миші (11А11) або химерні антитіла проти ТІСІТ 11А11-51 або 11А11-с2а (описані вище) у дозі 20 мг/кг, ІР, кожні 4 доби протягом кожного з 6 циклів. Антитіла проти РО-1 миші (описані вище) вводили в дозі 10 мг/кг, ІР, кожні 4 доби протягом кожного з 6 циклів. Після дозування, тварин продовжували моніторувати, і обсяги пухлин вимірювали до 54 доби для деяких груп лікування.
Пухлини вимірювали двічі на тиждень. Результати показані на фігурах 12 ї 13. Для монотерапії антитілом проти ТІСІТ з використанням 11А11-с2а показано 52 95 інгібування росту пухлини (ТОЇ) на добу 14; у той час як від невеликої активності до відсутності активності спостерігали з використанням вихідного антитіла 11А11 або антитіла 11А11-241. Для монотерапії антитілом проти РОТ, 40-50 95 ТО спостерігали на добу 14. Коли антитіло проти РО-1 комбінували з контролем для ізотипу щура Ідс1, показано 10 95 випадків повної регресії (СК) на добу 28, так що спостерігали 1 повну відповідь з 10 тварин. Для комбінації антитіла проти РО! і вихідного 11А11 показано 60 95 ТО на добу 14 і показано 30 95 СК на добу 54. Для комбінації антитіла проти РОЇ ії 11А11-С51 показано 56 95 ТОЇ на добу 14 і показано 3095 СК на добу 25. Для комбінації антитіла проти РО1 і 11А11-с2а показано 94 95 ТО на добу 14 і показано 70 95 СК на добу 42. Для комбінації антитіла проти РОЇ і 11А11-52а показані більша протипухлинна активність і більш повна регресія в порівнянні з комбінаціями антитіла проти РОЇ з вихідним 11А11 або 11А11-С1. Не було присутньо значної втрати маси тіла, асоційованої з проведенням монотерапії або комбінованої терапії, що вказує на те, що терапія була добре переносимою.
Приклад 9
Епітопне картування антитіла проти ПТІСІТ 14А6 за допомогою мас-спектрометрії з воднево- дейтерієвим обміном
Області контакту між антитілом проти ТІСІТ 14А6 і ТІСІТ людини визначали з використанням аналізу мас-спектрометрії з воднево-дейтерієвим обміном (НОХ-М5). НОХ-М5 вимірює обмін водню на дейтерій в амідному кістяку білка. На швидкість обміну впливає експонування водню для розчинника. Порівнянням рівнів обміну в антигені, коли зв'язане антитіло, можна ідентифікувати області білка, де зв'язується антитіло.
Матеріали - ТІСІТ-Ні5 людини - який містить позаклітинний домен НТІСІТ (залишки 25-150 з БЕО ІЮ МО: 31) і гістидинову мітку (ЗЕО ІЮ МО: 87). - Антитіло щура проти ПТІСІТ 14А6 (яке містить послідовності МН/Л/Л. з 5ЕО ІЮО МО: 7/8 (партія Ж 78АСІ)) і Ро-область Ідсг2а щура) (птАбБ щура х (ТІСІТ НІ (18155.14А6.02.АВ)
Ідо2а/каппа (НУ)).
Рідинна хроматографія-мас-спектрометрія
Мас-спектрометр являв собою Тпепто 5сіепіййс Огбйгар-МеІо5. Для вимірювання мічених дейтерієм зразків, мас-спектрометр установлювали для одержання даних одного сканування
М5 у повному діапазоні в орбітальній іонній пастці при розрізнювальній здатності 60000, кількості іонів-мішеней 1Еб, максимальному часі ін'єкції іона 500 мілісекунд і двох мікросканах.
Для одержання даних М5/М5 для ідентифікації пептидів, мас-спектрометр установлювали для одержання одного повного спектра сканування при розрізнювальній здатності 60000 з наступними десятьма спектрами М5/М5 залежно від даних в іонній пастці.
Система рідинної хроматографії являла собою УмМаїег5? папоАСОЦІТУ для градієнта аналітичної колонки і ізократичний насос М/аїег52 515 для розщеплення і нанесення зразка. Для розщеплення і нанесення зразка, використовуваний буфер являв собою 2 95 ацетонітрил і 0,05 95 трифтороцтову кислоту при швидкості потоку 80 мкл/хв. Для аналітичного градієнта, буфери являли собою буфер А) 0,1 95 мурашина кислота у воді і буфер В) 0,1 95 мурашина кислота в ацетонітрилі.
Градієнт пропускали при 40 мкл/хв від 295 В до 3695 В за 10 хвилин, з наступним промиванням 80 95 В протягом 2 хвилин і повторним врівноважуванням у 2 95 В протягом З
Зо хвилин. Потім колонку промивали за допомогою періодичного пропускання градієнта від 2 905 до 80 95 В, три рази по 1 хвилині на кожній стадії, з наступним остаточним врівноважуванням 2 95 В протягом 5 хвилин. Уловлювальна колонка являла собою захисну колонку Умаїег5? Мапацага
С18 ВЕН 1,7 мкм, і аналітична колонка являла собою колонку Умаїег5? С18 ВЕНЗОО, 1,7 мкм 1 х 50 мм. 35 Маніпуляції зі зразком для мічення дейтерієм виконували за допомогою системи І еаріес
Н/О-Х РАЇ. У планшеті для мічення зразків установлювали температуру 25 "С, у планшеті для зупинки реакції встановлювали 1,5 С, і в камері для пастки й аналітичної колонки встановлювали 1,5 "С. Колонку з іммобілізованим пепсином (Рогозуте Ітторбіїїй:ей Рерзіп 2,1 х мм, І їе Тесппоіодієз) утримували поза камерою для колонок при кімнатній температурі.
Мічені дейтерієм
НТІСІТ-Нів (30 пмоль/мкл) змішували з однаковим обсягом антитіла (14 пмоль/мкл) або, для контролю без зв'язування, з РВ5 рН 7,6. Зв'язані з антитілом зразки і контроль без зв'язування інкубували при кімнатній температурі протягом 1 години перед початком експерименту мічення.
Для мічення зразків дейтерієм, 2 мкл зразки змішували з 25 мкл РВ5 в оксиді дейтерію рн 7,6. Часові точки мічення складали 30, 300, 1500, 4500 або 9000 секунд. Після встановленого часу, 25 мкл суміші для мічення додавали до 35 мкл холодного буфера для зупинки реакції (8 М сечовина, 100 мм ТСЕР). Зразок після зупинки реакції інкубували при 1,5 "С протягом однієї хвилини. Потім 55 мкл ін'єктували в колонки в охолоджувальній камері, де зразок пропускали через колонку з пепсином, і отримані пептиди наносили на вловлювальну колонку. Через три хвилини, переключенням клапана колонку з пепсином відключали від лінії, і пастку промивали додатково одну хвилину. Після цього пастку підключали до лінії з аналітичною колонкою, і підключали аналітичний градієнт і мас-спектрометр.
Повністю дейтерований зразок одержували за допомогою інкубації 2 мкл НТІСІТ з 108 мкл дейтерованого денатуруючого буфера (4 М сечовина, 100 мМ ТСЕР, 0,01 95 СОМ у 99,5 95 оксиді дейтерію). Зразок інкубували при кімнатній температурі протягом ночі. Потім 55 мкл прямо ін'єктували в колонки в камері, і дані одержували, як раніше.
Аналіз даних
Дані І С-М5/М5 одержували для неміченого зразка і досліджували до мічення дейтерієм для верифікації успішного розщеплення білків і для одержання списку пептидів після розщеплення бо пепсином. Проводили пошук даних у базі даних з використанням Ргоїеоте БРібсомегег 1.4 і алгоритму пошуку ЗЕОШЕЗТ НТ (ТпептоРізпег Зсіепійіс). Базу даних білків, використовувану для послідовностей ТІСІТ людини-Нів і антитіл проти ПТІСІТ, зв'язували з базою даних для дріжджів засспаготусезе сегемізіає ипіргої (5/20/13).
Дані М5 для експериментів мічення дейтерієм обробляли за допомогою НОЕхамінг (версії 1.3, Зівіта Апа|уїіс5). Масу і час утримання, вибрані за допомогою програмного забезпечення для кожного пептиду, верифікували вручну.
Результати
Пептиди ТІСІТ людини, захищені за допомогою зв'язування антитіла 14А6, проілюстровані на тепловій карті з фігури 14 і відповідають амінокислотним залишкам 54-57, 68-70 і 76-81 з
ЗЕО ІЮ МО:31. (Ці ж амінокислоти показані як залишки 30-33, 44-46 і 52-57 з «БО ІЮ МО:87.)
Приклад 10
Епітопне картування антитіла проти ПТІСІТ 31С6 за допомогою мас-спектрометрії з воднево- дейтерієвим обміном
Області контакту між антитілом проти ТІСІТ 3106 і ТІСІї людини визначали з використанням аналізу мас-спектрометрії з воднево-дейтерієвим обміном (НОХ-М5). НОХ-М5 вимірює обмін водню на дейтерій в амідному кістяку білка. Одним з факторів, що впливають на швидкість обміну, є експонування водню для розчинника. Порівнянням рівнів обміну в антигені, коли зв'язане антитіло, можна ідентифікувати області білка, де зв'язується антитіло.
Матеріали - ТІСІТ-Ні5 людини - який містить позаклітинний домен НТІСІТ (залишки 25-145 з БЕО ІЮ МО: 31) і гістидинову мітку (ЗЕО ІО МО: 87). - Антитіло миші проти апіі-пТІСІТ 3106 (партія Ж 41АНК) (тАр миші х ПІСІТ НІ (МЕВ125.31С6.А1.205) ІДС1/каппа (НУ))
Рідинна хроматографія-мас-спектрометрія
Мас-спектрометр являв собою Тпегто Зсіепійіїс Огрйгар-ЕІШе. Для вимірювання мічених дейтерієм зразків, мас-спектрометр установлювали для одержання даних одного сканування
М5 у повному діапазоні в орбітальній іонній пастці при розрізнювальній здатності 120000, кількості іонів-мішеней 1Еб, максимальному часі ін'єкції іона 500 мілісекунд і двох мікросканах.
Для одержання даних М5/М5 для ідентифікації пептидів, мас-спектрометр установлювали для
Зо одержання одного повного спектра сканування при розрізнювальній здатності 120000 з наступними десятьма спектрами М5/М5 залежно від даних в іонній пастці.
Система рідинної хроматографії являла собою Умаїег5 папоАсдийу для градієнта аналітичної колонки і ізократичний насос МУМаїег 515 для розщеплення і нанесення зразка. Для розщеплення і нанесення зразка, використовуваний буфер являв собою 2 95 ацетонітрил і 0,05 95 трифтороцтову кислоту при швидкості потоку 80 мкл/хв. Для аналітичного градієнта, буфери являли собою буфер А) 0,1 95 мурашина кислота у воді і буфер В) 0,1 965 мурашина кислота в ацетонітрилі.
Градієнт пропускали при 40 мкл/хв від 295 В до 3695 В за 10 хвилин, з наступним промиванням 80 95 В протягом 2 хвилин і повторним врівноважуванням у 2 95 В протягом З хвилин. Потім колонку промивали за допомогою періодичного пропускання градієнта від 2 905 до 80 95 В, три рази по 1 хвилині на кожній стадії, з наступним остаточним врівноважуванням 2 95 В протягом 5 хвилин. Вловлювальна колонка являла собою захисну колонку Умаїег5 Мапдцага
СН С18 1,7 мкм Сиага СоЇштп, ії аналітична колонка являла собою колонку УМаїег5 С5Н С18, 1,7 мкм 1 х 50 мм.
Маніпуляції зі зразком для мічення дейтерієм виконували за допомогою системи І еаріес
Н/О-Х РАЇ. У планшеті для мічення зразків установлювали температуру 25 "С, у планшеті для зупинки реакції встановлювали 1,5 С, і в камері для пастки й аналітичної колонки встановлювали 1,5 "С. Колонку з іммобілізованим пепсином (Епгутаїе ВЕН Рербзхіп, Умаїеге согрогайоп) утримували поза камерою для колонок при кімнатній температурі.
Мічені дейтерієм
НТІСІТ-Нів (63 пмоль/мкл) змішували з однаковим об'ємом антитіла (32 пмоль/мкл) або, для контролю без зв'язування, з РВ5 рН 7,6. Зв'язані з антитілом зразки і контроль без зв'язування інкубували при кімнатній температурі протягом 1 години перед початком експерименту мічення.
Для мічення зразків дейтерієм, 2 мкл зразки змішували з 25 мкл РВ5 в оксиді дейтерію рн 7,5. Часові точки мічення складали 30, 300, 1500, 4500, 9000 і 13500 секунд. Після встановленого часу, 25 мкл суміші для мічення додавали до 35 мкл холодного буфера для зупинки реакції (8М сечовина, 100 мМ ТСЕР). Зразок після зупинки реакції інкубували при 1,57 протягом однієї хвилини. Потім 55 мкл ін'єктгували в колонки в охолоджувальній камері, де зразок пропускали через колонку з пепсином, і отримані пептиди наносили на вловлювальну бо колонку. Через три хвилини, переключенням клапана колонку з пепсином відключали від лінії, і пастку промивали додатково одну хвилину. Після цього пастку підключали до лінії з аналітичною колонкою, і підключали аналітичний градієнт, і починали збір мас- спектрометричних даних. Кожну часову точку одержували в трьох повторах у випадковому порядку.
Повністю дейтерований зразок одержували за допомогою інкубації 2 мкл НТІСІТ (63 пмоль/мкл) з 108 мкл дейтерованого денатуруючого буфера (4 М сечовина, 100 мМ ТСЕР, 0,01 96 СОМ у 99,5 95 оксиді дейтерію). Зразок інкубували при кімнатній температурі протягом ночі. Потім 55 мкл прямо ін'єктували в колонки в камері, і дані одержували, як раніше.
Аналіз даних
Дані І С-М5/М5 одержували для неміченого зразка і виконували пошук у базі даних для верифікації успішного розщеплення білків і для одержання списку пептидів після розщеплення пепсином. Здійснювали пошук даних у базі даних з використанням Ргоїеоте бівсомегег 1.4 і алгоритму пошуку ЗЕОШЕЗТ НТ (ТпептоРізпег Зсіепійіс). Базу даних білків, використовувану для послідовностей ТІСІТ людини-Нів і антитіл проти ПТІСІТ, зв'язували з базою даних для дріжджів зЗасспаготусез сегемізіає ипіргої (5/20/13).
Дані М5 для експериментів мічення дейтерієм обробляли за допомогою НОЕхамінг (версії 1.3, бієїта Апа|уміс5). Масу і час утримання, вибрані за допомогою програмного забезпечення для кожного пептиду, верифікували вручну.
Результати
Пептиди ТІСІТ людини, захищені за допомогою зв'язування антитіла 31С6, проілюстровані на тепловій карті з фігури 15 і відповідають амінокислотним залишкам 53-57, 60-65, 68-70, 72- 81, 94-95, 109-119 з БЕО ІЮ МО: 31. (Ці ж амінокислоти показані як залишки 29-33, 36-41, 44-46, 48-57, 70-71, 85-95 з ЗЕО ІО МО: 87.)
Приклад 11
Аналіз активності Т-клітин іп міго для гуманізованих антитіл проти ПТІСІТ
Автори даного винаходу далі аналізували активність різних гуманізованих варіантів одного з антитіл за винаходом (3136). В одному з аналізів автори даного винаходу характеризували функціональні наслідки блокування рецептора ТІСІТ людини з використанням клітин ПТІСІТ-
Уигккаї. У цьому аналізі пТІСІТ-дигКкаї культивували разом із клітинами УУ, сконструйованими для
Зо експресії СО155 людини (пСО155-)М). Використовувана лінія клітин УМ являє собою іморталізовану за допомогою вірусу Епштейна-Барр (ЕВМ) лімфобластоїдну лінію В-клітин. Як в аналізі, описаному вище в прикладі 3, коли клітини ПТІСІТ дигкаї стимулюють з використанням зв'язаного з планшетом 0-СОЗ і культивують разом з вихідними клітинами .М (які не експресують СО155 людини), вони продукують 1-2. Однак коли пТІСІТ-УигКкаї культивували разом з НСО155-УМ, рівні ІЇ-2 зменшувалися залежним від ліганда чином. Обробка антитілами проти АТІСІТ відновлює продукцію 1І--2 у цьому аналізі залежним від дози чином.
У цьому аналізі 9б-ямкові плоскодонні планшети покривали антитілом миші проти СОЗ людини (1 мкг/мл у РВ5; Сіопе НіІТЗа; ВО Рпагтіпдеп Кат. Ме 555336) протягом ночі при 4 2С. На наступні добу, експресуючі ПТІСІТ клітини Уйигкаї (50000) висівали в попередньо покриті планшети і здійснювали попередню інкубацію протягом 30-60 хвилин з тАр у різних концентраціях. Експресуючі СЮО155 людини клітини УМ (50000) додавали в культуру. Після інкубації протягом 18-24 годин при 37 2С і 5,0 95 СО», рівні І-2 у культуральних супернатантах оцінювали за допомогою тезо5саіе (Набір Нитап 1Ї/-2 Тієвце Сийиге МЕ5БО Набір: Кат.
МоК151АНВ-2). Результати показані на фігурі 16. При титруванні вихідного антитіла миші проти
АТІСІТ клону 3126 (МЕВ125.31С6.А1,205 тідс1і) від 30 мкг/мл зі зниженням до 0,04 мкг/мл одержали ЕСво 0,730 мкг/мл, і при такому ж титруванні химерного мишачого-людського 3106 (мишаче-людське химерне МЕВ125.31С6.А1.205 Ідс1) одержали ЕСбзо 0,910 мкг/мл. (Мишаче- людське химерне 31С6 містило варіабельні області вихідного клону 3126 (ЗЕО ІО Мо: 94 і 95) і область ЇДО1 людини.) Подібним чином, при титруванні гуманізованих варіантів 31С6 від 30
БО мкг/мл зі зниженням до 0,04 мкг/мл одержали наступні ЕСво:
МЕВ125.31С6.А1,205 УНА/ЛІ 1 (Антитіло, яке містить МН з БЕО ІО МО: 127 їі МІ з БЕО ІЮ МО:130, і 0,620 мкг/мл
Ес-область ІЇДС1 людини)
МЕВ125.31С6.А1,205 УНБ/ЛІ А (Антитіло, яке містить МН з БЕО ІО МО: 128 і МІ з БЕО ІЮ МО:133, і 1,2 мкг/мл
Ес-область ІЇДС1 людини)
МЕВ125.31С6.А1,205 УНБ/ЛІ З (Антитіло, яке містить МН з БЕО ІО МО: 128 і МІ з БЕО ІЮ МО:132, і 1,2 мкг/мл
Ес-область ІЇДС1 людини)
Автори даного винаходу використовували також аналіз на основі первинних клітин, щоб продемонструвати, що гуманізовані антитіла проти ПТІСІТ мають активність відносно первинних клітин. Виконували скринінг декількох партій мононуклеарних клітин периферичної крові (РВМСО) людини по експресії ТІСІТ після стимуляції (стимуляція в реакції змішаної культури лімфоцитів і стимуляція а-СО3). Потім РВМС вибирали для аналізів на основі первинних клітин на підставі їхньої експресії ТІСІТ після стимуляції. З використанням НиСО155-Ес покривали планшети для культивування тканин, і РВМС стимулювали з використанням антитіла проти СОЗ.
У цьому аналізі 96-ямкові планшети з високим зв'язуванням (Согпіпд 3361) покривали з використанням СО155-Ес людини (власного виробництва, 1 мкг/мл іп РВ5) протягом ночі при 4 "б. На наступну добу, 50000 РВМС людини (Ргесізіоп Віозегмісе Кат. Ме83000С-1,0, партія 12920 у КРМІш10 95 сироватка людини Віо-уогій кат. Ме30611043-1, партія Ж М15022401, ЕВС видаляли за допомогою ВО РПагтіухе ВО кат. Ме555899), висівали в попередньо покриті планшети і проводили попередню інкубацію протягом 30-60 хвилин з тАБ проти ТІСІТ у різних концентраціях. Потім додавали антитіло проти СОЗ (еВіозсіепсе 16-0037-85) у кінцевій концентрації 1 мкг/мл. Після інкубації протягом 48 година при 37 2С і 5,0 95 СО», прозапальні цитокіни (ЕМУу, 18, б ї ТМЕо) оцінювали в культуральних супернатантах за допомогою аналізу тезозсаїе (Набір Нитап РгоіпПйаттаайогу-4 І їізвце сийиге МЕ5О: Кат. МеК150098-4). Як показано на фігурі 17, гуманізовані варіанти 3136 були здатними стимулювати ІІ -6, ТМЕа і ІЕМу залежним від дози чином, подібно до мишачого-людського химерного антитіла 31С6.
Підпису на фігурі 17 відповідають наступним антитілам: - Мишаче-людське химерне МЕВ125.31С6.А1.205 Ід051 відповідає антитілу, що містить варіабельні області вихідного 31С6 клону (ЗЕО ІЮ Мо: 94 і 95) і область ЇДС1 людини.) - МЕВ125.31С6.А1.205 УНАЛ/І 1 відповідає антитілу, що містить МН з БЕО ІЮО МО: 127 їі МІ з
ЗЕО ІЮ МО: 130, і Рс-область ЇДС1 людини, - МЕВ125.31С6.А1.205 УН5БЛ/І 4 відповідає антитілу, що містить МН з ЗЕО ІЮ МО: 128 і МІ з
ЗЕО ІЮ МО: 133, і Рс-область ЇДС1 людини, - МЕВ125.31С6.А1.205 УН5Л/І З відповідає антитілу, що містить МН з 5ЕО ІЮО МО: 1281 МІ. з
Ко) ЗЕО ІЮ МО: 133, і Рс-область ЇДС1 людини.
Зміст усіх цитируемих у даному документі посилань приведено як посилання в тому ж ступені, як якби було конкретно й індивідуально вказано, що вміст кожної індивідуальної публікації, записи в базах даних (наприклад, послідовностей у СсСепрапКк або записів Сепе!Ю), патентної заявки, або патенту, приведено як посилання. Це твердження про включення як посилання призначено заявниками, відповідно до 37 С.Р.К. 1.57(Б) (1), щоб стосуватися усіх без винятку індивідуальних публікацій, записів у базах даних (наприклад, послідовностей у зЗепрапк або записів Сепе!0р), патентних заявок, або патентів, кожна з яких явно вказана відповідно до 37
С.Р.К. 1.57(Б) (2), навіть якщо таке цитування не належить безпосередньо до оголошеного твердження про включення як посилання. Включення оголошених тверджень про включення як посилання, якщо вони присутні, в опис, ніяким чином не послаблює цього загального твердження про включення як посилання. Цитування посилань у даному документі як не призначено як визнання того, що посилання стосується попереднього рівня техніки, так і не складає якого-небудь визнання відносно змісту або дати цих публікацій або документів.
Обсяг даного винаходу не призначений для обмеження конкретними варіантами здійснення, описаними в даному документі. Дійсно, різні модифікації винаходу на додаток до описаного в даному документі, будуть очевидні фахівцям в даній галузі з вказаного вище опису і супутніх фігур. Такі модифікації призначені для включення в обсяг прикладеної формули винаходу.
Вказаний вище письмовий опис вважають достатнім, щоб дозволяти фахівцю в даній галузі для практичного здійснення винаходу. Різні модифікації винаходу на додаток до показаних і описаних у даному документі, будуть очевидні фахівцям в даній галузі з вказаного вище опису і включені в обсяг прикладеної формули винаходу.
Таблиця Кк інформація про нослідевність ж а з
ОМ
ЯАбНІСВА ОА ТТ
АБО СОКУ У УБИВ УМВ КЕ
4АенН-сСЮюЮ 3 | МРУНТСАМ АТ УЖКОУВОВ : 13АвІ СІК : З ! КАБОВЧНЕМІ А. ! нннннаннии и
ІА -СОКІ 5 ТАМ й
АБО
ПААЄВИХІДНА 507 БУОСОБОБВОГ КРОВІ ВОРСУ У ОЄВАНВК
У ТОМЕКРАСМЕМЕ УМОВ УВО УМВС
«ТАОСТЗКМОМ ОЇ НЯУТТОЮТАТУЗСАКМЕЧЕ
ГП. АЗІЕЯТУКОУКОЕКОРОТМУТУ ВВ
ТАЄ ВИМІДИХ 7 ВІЮМТОВЕЕО КАВИВВНУ ТНК АВОВНКМ м. | АЖУПЮКІСВАРКЕУУАМВІ ОТОІРЯКЕВИВО
СТОЕТІСТІВОСОРЕОУАТУВСООУУВОЖТКОСО ткУВІЖ пшТаАВНТ Ту ПЕООгОКНО ВО КРТ КСО
СПАТЕОРРОКОЇ ЕТО УВО У МР КХВУТІ
ЗУЮТЗКМОГВІ КІ ЯЗУТААОТАУУУСАВМЕВЕ
ТЕАВІДТУВОУКОВЖООСТМУТУВУ
ПеоаАВУНТЯ б ПОГОЇВОРОІС УКРНЕТ ВІ СТВО ОВУ
С МІКОВРОКОСЕОЛОВТ УВО У КРИ ЕВ УТІ
5ВІЗТЗКМОВІ КІ. ЗУ ТААЮТАУУУСАВМРЯКІ
ИЗАИНЛЬ ТАУБІОЧЕВ КВ ее
СТМІКОРРОКОКЕ УК УЧО В ТВЕН КУКИ
ЗКІТУКМОКВІ КІ З5УТААЮТАУУУСАКМЕВЕІ
ТЕАВІЗТУВОХУЕОЕЖООСТМУТУВУ
ПИеТІАКЯТЯ СЕ ВООГОвОвО КЕ кО
СПАТЕОРРОКОСЕ УМОВ УВО УМ КВ
ІЗКОТУКМОКВІ КІ ЗХУТААЮТАУТУСАНМЕК
ТАКТ УВО ХВО МООсТМУ ТУЯ
ФУКОРРОКОГ КУТОВІ УВО БТ УМРЗЬКЕКУТІ
ЗКОТУКМОРВІКІ НОУТАЛОТАУУУСЛЕМУНІ
П.АВІВТЖЕОУВОЕ ЖОМУ ТУ ВВ
ОМІКОРРОКОГЕЖТОВІТУЗОЗТВУМРЗЦ ЗВІТІ
"ЗВІТУК МОВІ КІ НВУТААОТАУУУСАВМЕВЕІ
ТАВІЗТЖЕОУВОЕМООСТМУ УВУ пвТЯАВИН 57 ЕООСОБВОВОІСИКВВ ЕТ ВЕТО СВ ВВ " ОМІВОРРОКОГЕ МОВІ УВОЗТЗУМРЕМКВВТІ " ЗКОТЕК МОРЕ КІ НЕУТААОТАУУУСАКМЕЕКІ
ТСАВІЗТУЕОХЕОК КООСТМУТУВВ еіЗАВУНЛЕ 16670 ТЕФОГОБВОРОСУКРЕВИ ЯСТСТУВОВВІВВВ
ОМТВОРРОКО КЕ УМОВІТУЗОВІХ УМАНІ КВІТ
ІЗУОТУКМОРВІ КІ НОУТААЮТАУУУСАКМЕВЕ
ППеАВЬЯТЖЕОУРОЕУООсТМУ УВУ
НеАБУНЯ 91 БУОГСОББОРОГАКЕУЕТ ВІСК УВО УВО
ОММКОРРОКОЇ ЕЖТОВІТ УВО УМЕВІКВАУТІ
ЗУОТЯКМОКВІ КІ ЗВУТААОТАУУУСАКМЕВЕІ
ТАТ УВОУЄОГ УСОСТМУТУЧВ
НЕіЯАБУНоЮ й БУОГОВБЯОРОСУКРУК НТ САУВОТ ВВ
ОМІКОРРОКСЇ ЕОР УЗОЗІ5У МР КВКУТІ око питав
ТАЗ СУКОУГОЄ УВО МУТУХХ
ПвіЗАЄМНІВ 019000 БУФІОББОРОІ УКРНЕТ ВСТАВ УВІ кру
СПАТВОРРОКОС ЕМВ ГТ УВО У МУКА
ЗКОТЕКМОКВІ КІ ЗВУТААОТАУУУСАНМЕВКІ
ПАЗИ ХЕОЕМООСТМУТУВЯ родео кА
СОЛЕОРРОКОТ ЕМ ОКУ КеВИ
ІЗКОТВКМОРВІ КІ З5УТАЛОТАУУУСАКМЕВИ
ПАВЯТЖЕОУЕрЕУСОСТМУТУВУ
ПОІЗАБУНЯ 1 БУОГСОБВИРОСУКРЯВТЬ КТ СА УВО УМО КМ
ОІКОРРОКОЇ МОВІ УВаВІ5У МРІЯВ
КОТУКМОРКІ КІ НОУТААЮТАУУУСАНМИВЕ
ТРАВСЯТУВОУЕОЕУСОСТМУТУВУ
Пилки ни ее ти АТ ХАЙ
ОМКОРРОКОЇ ВУТОВІТУЗОВІВУМРЗКАВЕ
/ | УКОТВКМОЕВІ КІ НВУТАЛОТАУУУСАЕМЕВКІ
ПАХ УВОУЕрЕЖУСОСТМУТУВЕ
ВНЯАЄУНОЯК БОССОБЯЄВН УКР С ТСАУВОВВОИМ
(00000 ожмвоРРОКоМеювІТУВОЗТ5У МВА
ЗКОТУКМОКВІКОНЯУТААОТАУХУСАКМЕЯВ
ПЕАВЕЗТУВОХВрЕ УСОСТМУТУВУ
Неї Аву ТЕ Еш БУССОБЕОРОСУКРЕВ ТВ ТСА УВО
ОЛЕОРРОКСІ ВЕЖ МОВІ УЗОВІЗУМРАІКВАТ
ПЗКОТЗК МОРІ КІ НВУТААОТАУУУСАЕМЕВЕІ
ТАЗ УВОХЕОЕ УСОСТМУТУХУ о пттхдяст ТЕ ОТО кстККя
ЖУООКРОКАРКІЛУХАМВІОТОУРБВЕОВОВ
ПЕ ПЛ ОВБОБАТУУСОСТ Уч УТ
ТКУВІК оТЯАЄКів 1567 БІОМТОВРЕКС ВАЗУ КАВОВА І
ЖУУООКРОКАРКРИУУАМВМОТОУРЗНЕВОВОВ С
ТОРТІВ ОРЕОБАТУУСОВУ УВО
КК т
НоїАЄИЮТЬ 5 ВІОМ'ОБРЕВСКАКУ ЄВА ВОВАА
ЖУООКРОКАРКЕУХАМЯСОТОТРЯАКВОВОЮ
ОТОБТІ ЛІВІ ОРБОВАТУУСОО УВО ЖОВ ткУВік
ЛіАБУЮІ ЗІ БЮМТОВРУВСВАЗУВОКИ НТ СКАВОВНЕНЬА З . | | УТООКРОКУРКЦУХАМВОТОУРЕНЕВИВИ " ОТОБТІЛІВВІОРЕОУАТУУСООУУЗОЖТЕООЮ ткУВІК
НОАВИЮВ. 55 ВІЮМТОВРЯВІВАВУЮВКУ ЙТСКАВОВНЕНА
УУООКРОКУРКРІЛУУАМВІОТОУРЧЕРВОВО
ОТОРТІЛІВБІОРЕОУАТУУСООУХВО МОВО
ТКУВІК
ЖУООКРОКУРКЕ ЛУХАМВІОТОІРЕКРВОВОВ
СТОКІВ ОРЕ УАТ СОТ УВО ТОЮ
ТКУ. підсів омани здана спе Вівна
Жогуарора дзНе вовееівіу пеуровеме пПесісхе таендайчі вивавнни сур УанеЕккві мвхееойх тквавоєеа релрерризе хдасвераві сведтвечса еНеіуїнкіє угівискй їв макакв макакня часа падтіуєтмне зіва Нків наєйох ую резуєу | | аікасуврер вівцідаві кавфвенісі урок вгійеуієязевенчагіу п какаання Гетіставіє утік ка
1 Пнйхевві декнедєео рхереррез судаеварав
Каезаас аеінбріне! купі пев важкий й 35 ОО КУКА КВ КАСУ ТНК пембролізумабу | | УМ'УЖУКОАРООЗІ У МОСІМРУМОСТМЕМЕК
ЕКМЕУТІЛТОЗВТТТАУМВІКВІОРОЮТАХУХС
АвКІУКРОМСЕТУМ СОТ ТУ ВАТКОРУ ! | ЕРІАРСВЯТВЕВТААІОСЬУКОУКРЕРУТУЮМ
ЗОАІЛВОУНТЕРАУ ОБОЇ УВІ ЗВУУ ТУРІ,
ОТКТУТСМУПНКРЕМТКУОКЕУВВКУОРРСРРС
РАРЕБІ.ООРЯУ ВІ ЕРРКРКОТІ МІХЕТРЕУТСММ
УРУВОВОРЕУ ОР МУ УЮСУВУНКАКТКРАКЕ
ОРМеТУКУУВУМТУЄНОВУСКОКЕЖКСКУВМК
СІ РУВІЕКТІЗКАКООРКЕРОУХ ТІ РРЕОБЕМТК ОО
МОУВІЛСЬУКОРУРЕРІАУВУВЯМООРЕМКУКТ
ТРРУКОВОСІКЕРІ УВК ТУКА ЖОВОМУРВСЯ
УМНЕЛІНМНУТОКВІ ЗВО
ОЯсткийсенцює 3400 БЛОВРАТСВІВРОВКАТОСНАВКОУЄ пембролізумабу | | ВУТНЖУОЮОКРООАРВІЛЛУСАЗУВЕЯОУРАККЕ оБОБОТРИ ЛІЗІ ЕРЕОВАМУУСОНЕКОСРЬХ
КОбСТКУВІКИТУААРЯУРІЕРРХ ОВО КОТА С
УУСІПМРУРВЕАК УС УК УВМА ОВО МОВУ
ТЕООЗКОВТУВІ ЗВТ ТІ ЗКАВУВКНКУХТАСКУ
ТНОФІ З5РУТКЗЕМКОВС /віволумабу |"МИЖУКОАРОКОМВУУАУГАИТООВКВУХАЮХ
УКОВЕТІЗЕОМЗКМ ТЕС ОМ МВ ВАБОТАУТУЄ
АТМОЮУЖСОЮТІ УТУЗЗАВТКОРУУЕРІ РОЗВ
"ВІЗЕЯТААМОСІ УКОУЕРЕРУТУВЖМВОАІТВО " УНТЕРАУТОЗ5ОІ УВІ ЗУ УТУРЯЯЗЬОТЕТУТС
КУОНКРЕМТКУЮКАУЕЗКУСРРСРРСРАРЕНО
ОРВУБІЕРРКРКОТІ МІЗЕТРЕУТСУУУВУВОКО
РЕУОЕМЖУХОСУВУНМАКТКРАЕЕОЕМВТУКУ
ПТ УВМ МЕ НовКСнОКвУКОКУВНКОСЬВМЕКТ
ІВКАКООРЕЕРОУ УТ РРЕОБЕМТКМОУ ВІЛ, укокУРБОІАУЕЖЕВХОСРЕКМУКТТРРУЦОВО
ОЗБРІЛЗВІЛУ КВУ ОВОМУВСВУМНЕМН
МНУТОКВІ ВІ яСОК
Лсркий ан 36 ВАЯТОВРАТС ВС ВРОВКАТЕВСВАВОВВЕУЮА ніволумабу УУООКРООАРНІЛУРАВМААТОЇВАКЕВОВОВ
ОТОРТІЛІЗВСЕРЕОВАУУУСОО5ЯМ'УРАТРОЮЮ
ТКУШКЕТУЛАРУУВІЕРРЕО КО КВОТАВУУСІ.
АІМЕУРКЕНАКУСУКУВМА ОВО МКОВХУТКОЮ
ВКОБТУВІ ЗК ТЛІЯКАВУВКИКУУАСЕУТНОЇ
ІБЯРУТКЧЕМНОКС ,
ГЕАНА зей а 370000 БУОСОББОБОСУКРЕРТСВІСТСТВОВВАВВУК 8 гуманізованнії | | ОА ВОРІКОЇ УКВ УВОТУМи ККУ мн | | БУОТВККОВІ КІ БУ ТААОТАУУУСАЕМЕВЕІ
ВІ 55чАв, | ПАБ УКОХЕОКУСОСТМУТУВВАВ
АВ УНІ ахнж всяк Ю Геого вової ик Кт б гуманізованнй | | СКОБ РОКОН КУН жа УКР КУКА ом | "ЗВІТУКМОКВІКІ У ТАЛОТАУУУСАВМЕВКІ ві ЗАЛАХ, | пане ни чооютМу туя (АВ УНІ
АНА Ей ТЯ: ! я ЕООСОБЕОРО УКР ВТС ТУБАХ 6 гуманізований | | САМЕ КРРОКСН УЮ УОЗ 5УМРН КВ УТ (мн | | ЗКОТЯКМОРВІ КІ ЗВУТААІТАУУУСАКМРВКІ, (нВізвлчлво | ЛАНЕТУВОУКОВ УСОСТМУТУВВ
ЗІХНА пЕНОМЯХ б БУФСОЕБОБОЇ УКВ ВТС ТОВ ОВ НАВ блуманізованнй | 00 ОМКОРРОККОВ ОМ УВОМВУМРЕКВКМТИ ува | | ХВОТеКМОРВЕКІУУТААОТАУУУСАЕМРВКІ
ПВІБлчАЄвКЗ. | ОПАБІЗТУТОХПИТКООСТМУТУв
Аз Уна
ЇБАНА бр Ма 4100 БООБОБЕОВОСУКРеКТ ССО АХ 6 гУуманізовиний ІВ РЕОКОИМЕ МОВ УТМР ККУ - 85 ПАСТ КМОВ ВІКІ 5 УТААОТАУУУСААМАЕЇ
МИХ АБО, ТАКТ УВОТКОЕУЧОСТМУТУВУ
АВ УНе
СУБАНА ПЕН Ма Я ОЕОВСОКеО Укр ВАЕВУ б гуманізованнії СУЛЕКРРОКК фен мне ІЗКОТЗКМОВВІ КІ ЗЯУТААОТАУХУУСАКМЕВЕІ
МВІЗЗЛЯАВАО, ТАВІЗТУВОУКРЕЖСОСТМУТУВЬ
Ай УНб шк зівновно ЯЗ 0000 БУОБОББОРОМУКРУЕТЬОМІСТУВОВВІАВОМУ 6 гуманізований | ОУШВОЕРОКСІ УК УВО УМРЕКЯВУ ТІ
ОУН ЗВОТКМОКВІ КІ З5УТАВОТАУХУСАВМЕВЕ
КВІЗЗЛААВОЗ, ТАБЛ УВИУЕОКУСОСТМУТУЯ (АВ МН? яких пас а ЕУОСОБОРОМСУКРУЕТ ВІ СТУЗОЗ АВ Ю 6 гуманізованнії | ЗУШВКРРОККМЕМІЕ УЗИ У МР КВУ
МНЕ | 5УВТУКМОВ КІ ЗУТААОТАУУУСАВМЕУГІ
Я З5Л4АВО, | | тьАВІЗТЖЕОХЕОЕУООСТМУТУ ХВ
АВ УНЕ
6 гуманізований | скоро еЕУЮИ есе Тауке КЕХхКУТІ
Не | "ЗКВОТЯКМОВКВІКІЗ5УТААЮТАУУУСАЕМЕВКІ
І.ВІЗ5Л4АвОЗ, | | тьАЗІЗТУВОУЕОВУООСТМУТУХВ
АН ТТ в гуманізованнй | | ОСАКОРРЯК УЮ УусОоТуМе КУ
ОУН | ВУПТЗКМОКВІ КІ ЯЗУТААОТАУУУСАВМРЯКІ
ВІВ, | ЛАТ ЖЕОУВОЕУВОСТМУ ТВ
АВ УНІВ
ПРУЖНА Тр ТЯ ПЕКАО ОВЕС ХАР Т ЗІ СЕТ АНВУ 8 туманізований | ОЖУВОРРОКОС КУТОК УВОВІВУМРН КАМ омни | | ПІВМОТЕКМОРВІКІЗЕУТААЮТАХУУСАВМРХ
ПІВІЗБИЯАВКВ, | ЕПСАВІЗТУВОХЕОЕУСОСТМУТУ ВУ
АЕУНИ
Є гуманізований | | ЖУЖООЕРОКАРКІ ТУ ХУ АМОСОТОУРВЕЕБИВОВ ми | | ОТОБТІ ЛІВ ОРЕОВАТУУСООУХВОЖВОСЮ С
ПІВіЗ5ляАв з, | ТКУВІК
АВ МА
ПАНА пей За 450 БІЮМТОВРУВІАВУЄВКУПТСКАВОМНЕНА 6 хуманізованнії | М УОЮКРОКАРКЕ ЛУ ХЖАМЕ ОТО УРЕВЕКОВОВ ом |" ОТОРТІЛІЗВІОРЕОБАТУУСООУ УВО ЖТвОвО
ІВІ55АЧАВХОЮ, | откУВІК
АВ ЛІ
ТБАНА ПЕйОа ТОМ ОВЕН КАВУН КАВОКНЕНСА 6 гуманізованнй | ЖУООКРОКАРКІЛУХАМВОТОУРЕВЕВОВОВ омз | | ТОРТІ ЛІВІ ОРЕОБАТУРСООУХВОМТТОСЮ С
ЕВ МАВОВ ТКУВІК
АВ ЯЗ
НВК БК Ж ВН мя | ОТОЕТІЛІБІОРЕОБАТУКСООУУВОВТВОСО
ІВІЗ5ІЯАБКХ Мія
АВ А б туманізенаннй | | УК РОКАРКИЦ ТАН ОТО РЗВЕОВОВ ом | | ЧТО ЛІЗВСОРЕОВАТУУСОЮКУВО МТС в І55Л4АВХЮ, | ткУвЖ
АВ МА послідовність важких ланцюгів | | !
Явна ЗТ МЕУРТОЄОІ ЖИВА послідовністьлегких лавин
Копевантний 01350000 ТКОРБУРРСАРСЗНУ ТВО ТААЦОССУКВУТЬВЕ домен зажкога | /УТУВУМВОЛІЛВОМНТЕРАМОВВОЇ У У щ5УУ ланцюга я ТБ, | і ТУВУ5ВІОТКТУТСМУЮНКРЯМТКУЮКАУЮЗКУ
Б2ОВР | ОРЕСЕРСРАРЕКЕОСРУУК ЕРРЕРКОММІЗВ ТР
ЕУТСУУУВУВОКОРЕУСТМУУУВОУВУНМАК
ТКРЕЕКОРМУТУНУУЧУЄ ТУ НОВУ МОКЕУК
СКУЗМКОЇ РЯОБІВКТІЗКАКОСОРВЕРОУХУТЬРРЯ
ОБЕМТКМОУ ВТС УКОРУРАУВЖУВВМОЮР
ЕММУКТТРРУСОВРОВЕВІ УВІ ТУрКВЮКОКО
МУКЧСЯУМНЕАСНМНУТОКИ ОК ккститий 5 РУК Коко сттхКтиНК" домен легкого | | АКУОЖКУЮМАОВОМ5ОВЗУТЕОЮЗКОВТУВІ. ваншюга капна | ЗеТЛІЗКАВУЕКНКЕУХАСЕУТНОСІ З5РУТКУ
ЕМВОВС
ЗВНУНОСЮОКІ 137 ОТОЖ ВОТАУМО ши
НН: СБК 5 УМОВАМ
ЩНІНІОЄВКО15900ИИОАМН
НИЗ СОБ я- КАВОДУВИМА тн ЗНУ ши ванні НИ ші
ВИХІДНА Б БУОСОБЗОРОГ КРОВІ ІТС УТОУ ВОК А ун | ЖМУВОРРОМКІ ЕЖМОУІЗМЗОВАЗУМРНІКУ
ВІЧТЕОТУКМОКЕОЇ МЗУТТЕОТАТУУСАТЬГУ
УВУООАММЕУСОСТЗУТУ ВВ
ГНЕ ВИХІДНА БОРТ ОВЕН РВС КАВОВА м. | АЖУООКРООВРКІІ1УВАВУКУТОУРОВЕТОВО
ЗОТОРТЕТІВВУОВЕОАУУУСОНУУЄТЬУТЕО
'аоткІ ВІК лсова
ЯН: варіяни ТТЖАВЕЮ ТТ /сова
ЯНЄЇ- варівнх Б ЯАЮНОЇ З осовІ сов во сн ес полон (сою
З4НеЇ. «варіант УМОВОЮ о сою
ЯН ссвран АТ
Сово
Чет сваранк 390000 ЖАВОЇЮЮ сок
Б АН; в са МИ ПОН
ОННБі. сварант /74 000 О0УУВОРІ й г ср в нн сов
ПЕТ вд ОА "ср 'срвз
СІЯНЕТ с варіно ЯК ЩІ пли: о пана аа сова те текс тис тет пн союз ро а в р 'совз лет свист пт оон
СІЯНО й: варіянк Я МРЕНКАВСЯКУВОУВВЕ осріз нн пнів г оХтотоскосттекаоко топос кнолетьяка ООТОАААССТІСТСАВТСТСТОТОССТСАЄСТ колує вихідну ОСАСТОТСАСТООСТАСТСАЛАТСАССАСТОАТ
УН ЯН ТАТОССТОСААСТОСАТОСОАСАОТТТОСАОЮ
АААСАЛАСТОСАСТОСАТОООСТАСАТААОС С
ААСАСТОСТАОСОСТАОСТАСААСССАТСТСТ
САЛААЛОТСОСАТСТСТАТСАСТОВАВАСАСАТ
ССЛАОААССАСТТСТТОСТОСАСТТОААТТСТ
ОТОАСТАСТОАОВАСАСАОССАСАТАТТАЄТО
ТОСААСССТОАТСТАСТАТОАТТАСОСОВОСЮ
СТАТОААСТІСТОСОСТСААООВААССТСАЮТС
Ши шШ АНТЕСА ТТ киселю, Яка | СТОСАСАТСАСТТАОВАВАСАКТНКСАОССАТС кадте вихідну | АССТОСЛАСВОССАСТОСАОСЮТОТОАОТАСТА
М. ЗБНе | СТаТаОССТОЗОТАТСААСАСАЛАССАКАСА
АТСТЄСТАЛАСТАСТОАТТТАСТОВОСАТОСТ
АСОСДОТАСАСТОПВАСТСССТОАТСОСТТСАСТ
ООСАСТОСАТСТООСАСОСАТТТСАСТІ САС
САТСАВСАСТОТОСАФТСТОЛАПВАССТОСА
СТІТАТТАСТОТСАОСАТТАТТАТАСТАЄСТОС ааАСОТ ТС ПОЛА СОСАССАЛОСТОСТА,
АТСАДА домен важкого | ЕРУТУВИУ МАСА ТТУНТЕРАМУСОВБОМУч ях наншкна «1 | УУТУРН ОТО ГГ ИСМУМИНКРУМТКУЮКЕУЄР
КеЯСОКТНТСРВРСРАРЕСОСРАУКСЕРРКРКОТІ,
МІ5ВТРЕУТСУУУЮВУЗНЕЮРЕУКЕМ ХХ УВОМВ ! | Мате имя УА Кн
ОКЕУКСКУЗЕКАСРАРІЕЕТІЗКАКСОРКЕРОУ
УТЕРРВВОВЕТККОУВІЛСТУКОРУРВОІ ЛУ
ЕКО ОРЕМКУКТТРАУСОКОСБРРС ЗКУ
(зачюднутвовуМнЕ АННУ ТОК іч я ваш аеро: побу ввамо Не Нх завер
І ніуравете тет їєяв увейкагіці вва ВВВОВОННВхоу жит Я вен
Се. сок | 93 АКА
МСбВИХІДНА б ЕУОСООВОРЕСКРО ВЕК МВС КАВИ не | МЕЛЖУКОКРООСІ ВТ ОУЮРУМОСАКУМЕКЕ підкресленими | КОКАТІЛЯРКУВУТАУМВІ ЗВІЛТЯНОВАУТУСА
СОЮ | ОО Ж ВОУКСАСТТУ УЧ
Уа | | ЖУООКООКЗРОГІУУМАКТІ.АЕСУРБВЕЗОВО опідкресленнмн | | ЗаТОРВІИМВІОРЕЮТОТУУСОННКОЗРЬ ТЕКА сю | о отпліЖ
ВАРІАНТ СОВО певно лю З яБРУМеАКЯШЕЮОЮ
ВАВІАНТ СОЮ
ВАРІАНТ СОВО
(рябк) жи: 15 ЯУЮРУНЮАКУНЕКО
ВАРІАНТСОВІ ен: о рев УкаАКУНЕЕВИЙИ
ВАРІАНТ СОВІ со5бв)
ПИсвйТ в ББУнуВАКМЕКЕИ
ВАРІАНТ СОВІ ян ше нин
ВАМАНТСОКО долю яти ЇЩ БР УМОМАКУМЕВЕЕЦО
ВАРІАНТ СОВО І важ)
ПИбЕнІ й ТУБРУМАКУШЕВКИ
ВАРІАНТ СОЮ міс й: ЯБРУМОАКУНЕО "ВАРІАНТ СОВО (57в)
ВАМАНТ сок 57 в ебнт6К ИБРуккАюк
ВАМАНТСОВО аю пен вк т нин
ВАРІАНТ СОЮ
БНО 16 ОО МБРУМОУАКУМЕКЕНКЄ ТТ
ВАРІАНТ СОКО
(ато зе цІ ті друк сАКУЕКИ я "ВАРІАНТ СОВО ом
МСЕ веріне Я ВАША ОО Що
Сова (мол) | І
МСЕ. варі 3 СЖАКШАВ ТТ сового сова (мм
ЗІСБІ. варіант пн те НИ ще т
СОВІ (МО)
Се «варіант ее ЖЕАЮ ТТ осоваЮт сроюмюю
СК: паріант ЕСЕ ТАЮТТТТ
СОВІ (МЮУ
ЗІСВ 1, « варіянт 319 | МЕТА
Сов АН
ТЕЗ - варівнт | 150 | МАЮ ТТ
Сова (АЗИ)
ЗІСБ ЇЇ. - варіює І МЕЛЕАЮ т сова сов (АНІХ не | | УМИУКОАРСОВІ. ЕУЛОУТОРУМОСАКУЗОК підкресленими | ЕОДВУТІЛТКОТЗАЗТАУМКІ ВІ АВЕОТАУТУЄ сою | | АВООРУОЖУКрУЖООСТТУТУВЕ
ІС НОМУ У 1 БУС АКУККРОАВУК ВКА ТИ но | ше МОСАКУЖОК підкресленими | ЕОСКУТТЧОКВАЗТАУМЕСЕН КОТА ТС сов) | | АКОСРУОЖУКОУ М ООСТТУТУВВ во | | УМНЖУКОЛРООСІЕУМЛОГОРУМОВАКУЛОК,
"підкресленнми ГООКУТТКОЇВІ ТУ ХМК
СІ АВОКІВУЄУ ТУ КСО ТУГУНЕ та | УМНУУВОАРООСІ УЮ КЮРУМООАКУ ОК підкресленнми ЕС УТСТЗОКУТУТУ МЕ БИ КАТА С со | АВПОРХОЖУУВОУ ХУЗОСТТУТУВЕ
Пе НОМА У ЧО БУОГСУОЗСАВУККРОЗВУКУВСКАВОУ ТЕКУ на | МЕ ЖУВОАРООСІ ЕМО ХКЮРУМОВАКХАОКЕ
ІНДЕреСЛениМи | | ОСКУТТяОКЯ ТО ТА УМО ЯК ВЯКОТАУ УТА,
СІЖ | КОСУ УВУ МОСС ТУТУВХ
Не їз | УМИЖУКОАРООСОСЕУЮЮВОСАТАОК нідкресленимно | ОСКУТІТЗОКВІЗТАУМНІ ЗНІАЗПОТУУХУС сою | | АКООРУСУХУЕВУЖООСТТУТУВУ
СБ Пен БО1В ТБІЮМТОВЕЕВВАВОСВКОТТСВАВЕ НЯ із підкресленинми | | УУООКРОКАРКСТУЧМАКТЬАССУРЕВЕОСВОВ
СОЮ | ОПО ТЛІ ОРЕЮКАТУ СОНЕТ твІВІК
СВ йанх 513 БІЮМТОРЕВ ЗАВУСВК ТКА ШУ (з пікресленими | | КХТООСКРОКАРКСТЕМАКТАВОМУРУКЕВОВОВ
СІЮ) |" ОТОРГІЛІЗВІОРБОВАТУУСОННЕОЗВІ ТРОС
ТІК
ІС Наня 3 ТЮМІТО5РУМ БАВУСЮКУ ПІСКА; ЕН із підкресленнми | УК РОКУРКО ТУ МАК АВТУРЧКЕ СНО сою | ОТО РЕОЧАТ СОН ТЕНКЮ тик піски БІЮМТОВРЕВІ ХАВУВОКУ ТС ВАВЕШУВУЯ
С підкресленнми | | УТОСКРОКУРЮ ТУ МАКТ.АКСУРЗКЕВОВО сов | | ОТОБПЕЛІЯВІ ОРЕЮУАТУУСОННЕСЗРІТЕООЮ ро о в п Й сОоКо
ЗЇСЕН- варіант 135 ОО МОРУМОСАКУЮЮВЕОЮ сок ет мн КЕ ки сп ска КЕН послідовність | | УНЖУКОРРОКОЇ ЕМІОАГУВЗОВТОУМЯАЇКУ ун | | КІЛІМКОБЕКВОУРІ КММЗІОТЕЮТАТУЕСТКВО
МАБЕОУЖООСУМУТУ ВУ плен | аханитюннанотннок», послідовність МУ КІОБАРКІЛУМАМВІ ОАСІРВВЕКОВОЮ м. | | ОТОРАСЛІВОСОРЕЮУАТУРСООУВОСУТЕОАО ше | квІЖ
ПА: 3 БОбІХВЕОвоСоОРОВ КІВСУАВОРИВ ска послідовність | МАЖУВІ АРОКОПЕУУАВІЗУВОВАТНУСОВУВ. т | | ОКЕПЕВІМРЮМИ УТОММІОБЕОТАТУКСАКНО
ЛопоМУУЖООЮТМ МВ пен нн я послідювність ТАЖУОЮКРООЗРКІ ЛЕТ АВМ УВОУРОВИТОС м | | ОУСТОЕТІЛІКЗУОАВОЛАКУУСОВГУМЕРТКОВ з аткиК
КОНСЕНСУЄ | хе ВМ. сов | | .
ОКОНСЕНСУЄ | хм, 8. Т.О, о сою Що Хе Му, т. ХО
КОНСЕНСУЄ Хе, У. сою
Аркас соскикюхтекх
І КОНСЕНСУЄН | охо КО ХХХ ех ОХ ех ах М
А ВИХІДНА УН | ОБПУВОВІЗУМРЗКУВХ ех іх ах ТЯМ
ХніХніХо8УТХ»ХнОТАХ»Х
ХесСАКМРУЕТЬ АВ ЗТ ХВО УКВ КОХ» стХ»ХнТУХВ і ХеБао азер айо А і Хех або,
Хебабо? о Хебабоваюс
Хе-Забої
Хо або Т або А жа збо 5 і ХееК або 0 . | ЖиеЕ в Р
Хі Майо
З Н
ХиоеК або 0
ХиеМ збої.
ХиеМ айаї . | Хе або У
Аек аб
ХаеТ або 8
Кік аю У
Хичвабо Кк . Хе: або З і | | Хе айо А
Ха йо А
Же або У о її Хв або її,
ЩІ : Хе МУ Щ Щі о ХаеМ, М, А.В. М, Р.О БО, Я ТИХ або у
ХюеУ, Табої.
Хиеа або та у
АнеаА о 5
Хие бод
Я БОБІВ ОО КР А
: І Її " КОНСВНСУСНА | ОІВ У КО Ух пвх п ХхоРОКХ ХНЕУ
ГУМАНВОВАНА З | ОБІТУХОЗТВУМРВІ КАХ КТІВХ ОВК МОВ
М 1 Ха5УТАХВОТАУУУСАКМЕЗЕ АВТО
ОУЕОЕЖООСТтхнХитУва
ХеЕвоо : | Ху У вої. о Хевабор і Хекабо
Хе або А аба 8 о Хибабот
Хр або або
Ян ВО А
Хоч або у
ХО бок
Хиерабої
Ходак
НІ Н Н Н оХичЧабмМ : Хі у Ще
Хі У або В хиб або БІ ! | | Хата або
Хе м, В, Ж М. о НА КЕ В НН поем мА КОНЕМ і Хичу, Гайої, ення ши и пон нн нн пн в нн 1ЯАв І БЮМТОВЕЕЕЗАВУЧЬКУ КК СКАВОВНКК
КОНСЕНСУЄСНА ДАЖУОКХ»
ВИХІДНА У. | ОхХеРЮЄСИХУАХХОТОХРУВРВОВОВОТЮ
ЕПЛІЇх С ОРЕОХ нАТУХОСООЖуВаХхи ТОЮ
СТКУвХЬК
Хе. або 5
Хемабот
Ха або оХеБабок
ХееБ або.
Же М. с ава
Хечя, М. Т. Ж або 0
Хечаба у
Же або я оХием айа
Хек або у
Хие м, В, У, 1. У або,
Хичї. бої о ХизА або у палетні А орі ТАТІ" (КонсЕНсУсНА | ЖУООКРОКХІРКХИУ УА ОТОХРВНКВО
ГУМАНВОВАНА |" БОВОТОВТІ ЛІВІ ОРЕОХАТУУСООУХВХИЕ
М | ' ооотКУВІК(Хе абої
ХМ, 8, Т.О або .
Ху, М, Т, Ж або
Хм абої
Хе, Б, М м або,
у т ши Хеабоу пе: У СИЙБРУМХОСАКУЮВКИВИ 000
КОНСЕНСУЄ | хан, К. 5, У або У сою | ХО, МО ВБІК, 8, ХУ або У
ОХеМ, лабо
Хей або У)
Хе К або кози шо и нн
КОНСЕНСУЄ ХМ А, МУ, М, БТ НО або У сов | реа. М.І. Таб у ме я
КОНСЕНСУСНА : ет УМи Ух ХРООХ ЕМО МКОвУМ чикати | | ХихлакухоХиКЕх охХихЖП ТтхоОХ ЯХТ ХУ МІ ЯН
ХХ УУСАВООРУСХи КО У КОХ
ОТгУТУКХ
Хебайб у
Ху в або А
Хі» У збої,
Хаху або К
ОК або й
ХееМ або У охеКабов хек ав
Хей ак оХнер,ви Кг, 8, Ж або У оХизо, К.М. ОБ. К. Я, Ж або у
ХиеМ. А або 8
І | Хе айв
ХичКабоо ! | Ха або Кк нин нн З нн о Хиев або : | Хе ої о Хиев лабо
ХивА во У
ХнеК або в
Хичтабов жан або Є
Хиев або
Хе а або У
Хм, А БУВ. БО, К.М ОВК Та
КУА во пе ЕООГООБСАЕИККРОХ НУК УВЕКАВОУ ТУ
КОНСЕНСУЄНА | УМЕИЖУВОАРООЮ ЕМ миши | УШЕРУМХХ и АКУХО КЕ»
Що ОВУПЛюОх хх УМХ ях
ХнУХУСАКООРУОХЗУКрУЖСОСТТУТУВХ
Хек або
Хр, Л.К. В, У або у
Ха. НА М.О, Б. К. 5, Ж або У
Ха М, А вію 5
ХеЕабоо
ХеКаюо
ХВ або
Хетабок о ХиеА, Табої . | Хі або У
Хе або
Хі йо у
Хе, АЕРО, К.М ОК, Мао на КН КАН лях пік А пАаААХнн кт пккнккнкчннх пе 1 ВюМТовиквівАВУВХ У ПТСКАЕНВВХО
КОНСЕНСУСНА | | вжУВОКХ: пода ОЮСРХЯ У ХИОКПАВОСУРХВРЗОЗОВОТХ,
Ех Хаїх а ОРЕОХх ХиТУУСОННЕОвСТ ах сотхнЕхаК
ХітА або З хе Є збо
Хе Тайов
Хачдабо?
Хе я, А Що М
ХечО або К
ОХеу або
ХаеМ, А. У, Ж. 8. Т. або У
Хоча, МІ. Таб у
Хиевабот
ХизК аю
ХМ або В (ХитРабоу
ХитА або леву БІОКТОВЕЕВІ ВАК СТНТСКАКЕНИ (КОНСЕНСУСНА | ЖУОЮОКРОКХРКИУ
ПИ | | ХИОКТАБОУРЕНЕВОВОВОТ ХК ТЛІВЖОРКО й | ЖатусоннеавРітЕЗОатеЦвК
Сх М АМС М,В, або У
ХА М, Тайо У
Хачіз або)
ХЕ «бо У нн і п п К НК
ІС 0005 ТОВ УдхуювИ тт
КОНСЕНСУЄ | Хием, А СБК, БК. МО, ВВ. Мабо о сов
Пен: 14 0 ООРУБАТЕВУ т
ВАМАНТ СОВЗ
СЕТ Я оОБуУДВУВІИТ
ВАМАНТ СОВЗ
Б ШИ пт попе ші
ВАРІАНТ СОКЗ
Б птах
ВАРІАНТ СОВІВАМАНТ СОВІ пев тв Твовевттє
ВАРІАНТ СОВЗ
ОСЕНІ лис: нн
ВАРІАНТ СОВЗ ран ос п /вАмАні сок пе ко по п
ВАМАНТ СОЮЗ ян оретанан
ВАРІАНТ СІВ р мн с ст пн
ВАМАНІТСОВЗ он хз
ВАРІАНТ СОВА
ВАРІАНТ СОВІ зів айва "ВАРІАНТ СОЮЗ
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
ЄІБ» МІ ЕТАМУ, БУТІК М. б.
КАБАСЕ, ОНАКЕ
РАЧАВАТ-ЮТМАН, САОВЕМСЕ
КАОНИМАТНАМ, ПОРАСАМ
Ін, СІНСА
ЗЕБНЕЙКІ, МИ РАМ «ВО» АНТИТІЛА ПРОТИ ПІТ «їі3я» зва НАВС «дах «Зх ж» ге, 33 «Іі» 2815-Ва-8Х «кі» у азВ, их «ІЇ51» щБі4-8а-15 ків» 657 «170У Расеніїй версії 3.5 «їх «233 5 «жі «3» штучна послідовність така «зда» спас штучної послідовності: синтетичний пеаптивй СА кадах у зак ащо Тук Тер БУ і З «Оз «1із їв «аз ВТ езі1а» штучна послідавність «а» «УЗ» ЗпиЄ БтучнОїЇ песлідзвності: синтетичний пептид ОК кава»
Ре Щі їбе Ту» бек обіу хек ТВг обяег Тут Аяп Бро бек фу Бу Бвк х 5 а 15
«238 З «її 19 «13» РЕТ «213з штучна послідовність «ей» «ае3» опис штучної послідовності: синтетичний пежйтид СК «Ваз 3
Меб вго Зек бпе Ї18 Того іву дів Зевоївц Зек Те Тер ові Віу Туг 1 5 їв 15 не дз Ре «вах 4 «а11з 1 «каз вит «2132 штучна послідовність «ага» «аЗ3» опис штучної поклідовності: синтетичний пептид СІВ «ах муз діа зег піп бег Хіє Мі бує Аеп бен діа ї 5 вк «84і05 5 «8115 7 «їз РТ ка13» штучна послідовність «22Ох «ЯЗ» опис штучної послідавності: синтетичний пептид СО «авах 5
Тук Ааїа аха Зее гео Бій тТВг 1 5 «ща 6 ««іїз 8 «аійх РАТ «213 штучна послідовність кяеа» опис штучної послідовності: синтетичний пептяд СОК «а» 6
Щі бій туго тТув Бег 51уУ ТРІО Те і 5 «ща Я «іух 197 «2122 РЕТ «йі3» Наїтих погуєвісих «рах 7 піз уві бій іви бів Біб бек біу РРО біу ен уві ух вга бек бів 1 5 їв 15
Зек іем бег ім ТР Сух бег Маі ТВР ОБіУ Зег Зевк Сів дів 5ег Дер
Ку в 3
Тує тир бі ТРа Кіз АГЕ уз рве РКО біу деп ух Меж біц Тер Ме ча ак бі бе їі ТВе оТугк бБеб Шіу бек ТВг обегб Тут Айва бро Заг бен Був 5а КІ ще
Зег Ар їі Зоб 018 Твг Абе Або ТВе баб вух Аа біп БНе Ре Бе в та 75 ща
Зіп іву Ніз Бог маї ТВб Таб о Ахр о Ахр ТИК Аза Те Туб бе Сух АХА но за з5
АРЕ Мет рго бек Рне ів Твпг овен дів Зав івн бер ТВ Тев щ3 іх 38 385 її8
Ту рве Ар Ре ТР о щіу РРО бЗіу Тве меї узі Тве уді бе» баг 135 128 125 «в В чаї» 195 «аа РТ «213» йабЄтчя погуєрісв»
«баз 8
А5р тів бів Мет Те біб бек Рго бек без сю бег Аза бек уві б1У ї 5 3 її дор Ага Узі ВР Бен Аби Суз іу5 дів бе пів бегб їі Ніх руб дз
Кк 25 За ївм Аїа Тко їуб" бій бій ух іви біж біб Аіїз ко бух Риб ев Те
Ту Ту Аіа йяй его фен бів Твг обіу Ті Бго баб АгРЕ Ра Бог ЩІ
За 55 Бе а" 1у бен фу ТР дер Не ТР о ізц Те Щі6 чав б3іу ви бій его
БЕ те 5 ва ій Акв чаї Аіа Тае Тур бе Суб бів ій Тує Туг Зегб біу Теротег за ок
Бне віу Бщіу Єіу Те вує уві біш і2и ух вес. ї85 «а З хяІх 137 «ЗУ РЕ «135 штучна послідовність «ІЙВУ «йЗ3» спис штучної послідвеності: скинтатичний поліпентид ланцюга гуманізованего антитіл сеиМмІх З піс уві віп ін бів Бій Зве Щі го ім фе узі бух го Зег 9їу і З ії 5
Тег обец бег о кви ТВге Суз Тк Уві Заг" 01Уу 03У Бес ів бег хеє Ар
Ку 25 За
Лук Тер 3у Тео їі Абро бів га го Біу уз Б3іуУ ви бін ТРО 116 а ве о біу Бе Х3іе ТВг Ту беб біу бек Те бек Туг дп Рко ек цец Гуз ща 5 ща «ек АкЕ Уаі Те Г1е беб узі Ар Те бек вує дей Бій РМе 5 Бе
БЕ та 78 ва
Муз дви бег Зак уві Те АЗія Аїа Ашо ТвР Аза Уві Ту Туг був АТ 85 ко 95
Акт Маї БРО зЗек рве ф36 Таб без афв Зек бо бер Те ТР Бій 81У 188 185 119
ТУ» Вне Абе Ре Тер йіу бій бБіу ТВе Межї Узі Твге Уві Зег баг 135 138 ї45 сеефх 18 ній ЩЕ «еїщз РЕТ «А штучна послідовність ех «ваЗУ опиє штучної плеслідовності: синтетичний полинаттид давицега гуванізованого антитіла «Ядра» ща іш уві б)й бен бів бів Без біу Рго 61у Бен Уа) Суб Рге Заг бін 1 5 їв ї5
Тве фей бек іви Те Суз Те уві бе бі 6іу Берг Щів бБег бек Ар ща а за
Туг Тго біу Тер ів Абе бів бро бро 01у ух бБіу ев вій ТРо Ті 48 45 зір рве Щіе Тве тТук бЗае Б31у баг ТП щає тТук ап РРО Бе се) Був го 55 ва
Зак ага Узі Те Хі бек дгв Азр о Твг Зег кує йзп бів вве бе ге
Ве а 75 а 1У5 Гец бег бег Маї ТР Аза А)а Ар ТВг Аз уУаі Тує Туб Сув ів в ве як
АгЕ Мет рго бе ре Ще Тк оіев Аїа бег іже чає ТВР Тер бів біу 188 їі ЦО
Тук вва Ашв Рьє Тео Щ3у бів біу ТвеБ о Меб уві ТЬРгР Уві бег Зав
Ех 128 125 «2185 «жії» 1ХУ «213» АТ «к2і13У штучна пвосєпідевність «аа» «дай» опис штучної мослідовності: синтетичний поліпептид ланцюга гуманізованого антитіла кавах піш чаї бів ів) бій бів Зоб біу рго 01у ви уаї фіуз БрРо баг 81 1 5 їв 15
ТВт фев бог оіву ТВг Суб Тег Узі хаб БіУ біу баг ї3ів бег боб Аяр а и КІ їук тер 31 Тео 138 АР бій Ро РРО бір уз Бу свв 61 ТР Це за 35 біу Ре Їіє ТВг отТув бег бі1у бе ТВгб обер Тук два вро ев Ге був
ЕЕ ве ща бег вгЕ Ті Тв їі ее АгРв Ахо ТК о БеРБ бух А5а пі Бе бек ви 05 та 75 я ух іви бег заг Уві ТР бів А1з дхр Того дія Узі Тує Ту Су дів 8» за 5
АСЕ Меж Ре бе Рне їі Те ів АЇВ бе іа бЗег Те Тер бів щу
Туг Ре Ах» БНе Тр біу біз біу ТР Меж Уві Тег ув) бег бег 115 ї28 вже
«а» 12 хаїїх 137 «8133 ЕТ «233» штучна послідовність й «дай «883» опис штучної неслідовності: синтетичний поліпептид ланцюга гуманізованого знтитіла «ваз 15 щі уаі віп іви бій бін бе» Щ3іу реко біу їм Уаі Сує Бго бет іш ії 3 3 і5
Тне Бе бег ев Те Сує Тк узі зер щіу бер беБР Тів бег бег Абр
КЗ 85 за
Ту Тео біу ТРр іє дев біл ргРо рРо біу бує біУу бе ві Те Меє
ЗЕ да 45
Біу Ве 16 Те ТуУуг бек біу бег ТР озЗеак Туг Ап Рго зЗег о іву Кух а | 58 ба
Че" деки Ті ТВР ОХ1і6 чек лк Авр ОТВК бек ух Ап біп Ре 5Зег сей 55 КЕ КЗ ва іуз ву чек зеє уві Так дів Аіз АБр Те дів Уві Тує Ту Сух Аза за 95 ден Меж Бго бек Ре ї16 Ве гео 416 беб бво беб Те тРВ Б щу
Та 155 ії
Ту» Вне ар орне Тео біу бій біу Те Меж Уві ТВР Узі Хек 568 115 їі за «із 13 «ВІЇ 39 «2123 РЕ «ех штучна послідсвністів «ех «Ма3» опис штучної послідовності: синтетичний поліпевтид ланцюга гуманізованого днититіла «ках 153 біо Уві бій сек ціп бі) бегб біу Рго біу ів уаї уз РРО бак біц ї 5 3 15
ТР іа Зек івц) ТВг осух Твг УВІ бек о біу біу бег 116 5Зег зе бр 2о я за
Ту Тео бі Тер Хв ак: бій Бека Рго бі уз бі їв бін Тер Пе
Зк ча 45
ЗіУ Не їі ТОг тує баг Зіу Зег Тве бек Тув АБа ВгОо зер ів фух я за ва
Бе" Аев Уві Пе Ті бЗебБ АР Аве Те Зк ух дБа бій бе беб їв;
Бе та 75 ва цуз іч Мі бек Уаїй ТЕР Аіїа Аа Ар Те Аза Маї Туб Тує Сух лів 55 за З
АгЕ Мої Рго бег Рве Пе ТЕ ізн аіа бек їв бев Те Тер бій БІ зав 185 110
Туєс Рі. й5р рве Тео біу бій бБіУ Те Ме уві Те Уві Баг бек 115 138 і1х5 ка» «а їх «ах РТ «3133 штучна послідовність «ЯМ» «8335 опис штучної послідовності: синтетичний повіпентид ланцюга гумачізованого зититіла «а бій Уві Зіпіви бів бі бег біу Бго бзіу ви Уві уз бго бае бі)
Її 5 18 15
Те фе баб ів Тве Сує ТВ Уві баб бі біу зей Це бек Зоб дв а ке за
Ту Те б1у їгр 16 Ага бій Рго вБго бік уз 01 ів бів То Ще ча Фк
ОІУ вне лів Те Тув баг біу чае ТВе бек Тук дян Рео баг оіец ух 5а БЕ ва
Заг аАги 116 ТНБ 118 Бек АР Ащо ТК бек Гуз бал бів Ра 5ег гей
Бе 78 75 що ух івуи Ні здеб маії їТВб аа дів Ар Тнг Аїя уаї Тує Туб Суб Аа ще за з аАгРЕ Ме РРО Зеб ве 16 ТВе беи Аза бег іец зег ТВР о їврозіз 81 і8а 185 це
Тує бе дев рве Тво ШУ бій о біу ТВРоМож Узі Те Уж) баб хек 315 128 5 «ів» 15 «її» 127 «215» РЕТ «я13» штучне послідовність хщах хйа3У ЗинЄ штучної послідевностії смитетичний поліпептид ланцюка гуманізованого зититіла «аа» 15 біс уві Зій Бен бБіп бій бек о фіу го Біу ей чаї ух РРО Зеб ЩІ. 1 5 їз і5 їВе ізи Бек іви Тве Су Те уві бЗев б1у бег 5ЗВЕ Ті бек бег дев 28 85 за
Ту» Тев біу Тгр ів АгРЕ бій Бго Рго біу бух ві їв біз Тео Це р 43 цій Рна Ще їТне Ту» бек щ1у бе» Тйе бек Тук дк РРО беРб зво ух 5 5 Ба хаб Ага Се ТР Обіе бе дев Ар ТА? бек вух дев бій ВВЕ беР (ві 65 та У ва
(уз ів Мія бек Узі Тр дів діа й5р Те Аза Уві Туб Ту бух Дів
З. і 5
АГЕ МЕТ бго зЗек Ре ів ТБгбогви йіз бек сен бек Те ТР віц щі 188 185 з
Туе Рне ар Рне Тер обі бій біу Тк МОЄ узі Тнк Уа) бве Заг їжа ї75 «ія» Зв «М о «ЯВох КТ «х13» штучна послідевність «аж» «ий» пис штучної пелідовностії: синтетичний поліпеитид ланцюга гуманізованого зититіла «а» їв 5із узі біп бо іп бій бег Біу вго 01у ви маії ух Рго 5ег ЗУ ї і: їв 15
Тв ів Зевсу ТВе Су ТВг Уа) Зеб бБіу заг бег їіе б5ег Зеф" Ар
Іа 25 за
Туг тро б3іу Тго тів агш біп вго бго біу бу5 біу Бен біб Тгбо МеЄ аа ря бі рн їів їйг Ту Звг бі бЗеб Те бев Туг д5п РРО Зев се ву ща 55 ва
Зе аг їі їВе Хі Берг Уві Ахр ТБ бег Був А5а бів Бе бег Меч 63 тв 78 ва
Ку ізо Ні 5ег уві ТВг ліз йіз до г о йіз уві Тук Тує Сух дів 5 ща 5 аАгЕ Ме Рго бег Ве Хі ТБ огеб Аза бегоівев бек ТВНг оТев о біш Зіу за 35 зів
Тує Рне дер Ре Тер бі іє бБ1у те Меж Уві Те Уві бек бег 135 ї28 148
«218» 17 «жі 137 «аїаз РИТ киіЗ штучна послідовність «еащх «й3з опяс штучної послідовності: синтетичний поліпентий ланцюга гуманізованого антитіла «ваз 19 сій ві вій сви бій бій бе біж ро бі ей Ма) їв Рго баг бів ії 5 18 ї5
Те во Зег о іви ТигоСує Аза Маі бег 8іУ Тус бе" Гів Баг ер ар 28 25 їв
Тує тео бі їго ті агр обіп Бго бро 03іу ух ПІУ їв 61 Тер ї1е 35 аа а біу я жі Те Тує бЗебг щіу бег їВе бег тТук Аа бко бат іа Су
За 58 ще
Зев дгЕ уУаі Тае їі бав Уаї Аж ТВ? Бек бух йхп бій РБО ек ав 55 та У5 ва чуб іо бе" бок уві Таг Азіз дів Аза тТве із Уаі ТурР Ту" Суз ді
Ва ща З аг Меї РРО бек бе Щі ТВ" ви Аза Хоб іє беб Те їгр бів щу ї188 105 це
Туг Ре дер Вбео ТРр бі іп біу Те Меб узі Те Уві бе баг 12о 1525 «ищах їй ки У «иївУ РАТ «вії» штучна послідсовиісте каз «лаз» опис шШтучнеї песлідовностії синтетичний пеопіпенттид лану я гуманізованоге антнтіна
«яд» 18
Зім Уві піз ім ій біз бег біу Рго бі ве УЗІ ух ко бек Б) ї К їв 15
ТВ іжу бек іец Ткг осуз дів уві ек 6іу Туг Зег І3е 5еК Бог дво
Ко 55 3
Тує Трав щіу Тер Це агу іп без РРО 1у ух О1у ев бів Те Це 35 чо я а1у Рне їі ТВг о Туб бег б3)у ех ТВР бек Ту Аа Рге зек зіву Був ща 55 ва
Зав йРи Уа) ТНК І1ів беб дгРи йо ТВ бег іу5 дбав бів Ре баг Ге 78 75 за іїух се бер Зег уві ТВг Аїа АЇвВ Ар Тк Аїа Уві Ту Туг Сух дії 85 за 55 де Меє бо 5ег Ре ів ТВг мен Аїз бев ве бек Те Твробів щу 108 її 119
Туг БВе дер Ве Трр о іу бБіп 5Зфу Тег Мет Уві Тнг о Уяі бер бек 135 з2а 155 «218» 13 «ії» 17 231» ВЕ х213» штучна послідовність «жах «Жах опис штучної поснідовності: синтатичние поліпептид линцюга гуманізованого антитіва «що» 13 ваш Маї бій ее бій Бін бег біж Ро 01у бен Уві ух гео баг ЩІ; 1 В 18 15
ТЕ Бе Бек кши Те Суб діа Уві бег 1іу Тут Заг їі баг бек Авр ке За зо
Тує Тер бі» Тер Хе Акр бій Рео Бго біу уз біу во біз Тер їіє 35 а 45 біу Ре (іє ТнгР о Тує бер 01уУ Бек Тк бет Тук да Ро бек Гей кує 50 За ща
Бег Аки їі Те Ті беб Абе йбр Тне бег бух дви бій Ре бег ви 55 КЕ 5 За ух сей баг бер Уві Тіт Аїз Ата дер Тве Афа чаї Туб Тук Суб Аїа ва На 55
АгЕ Мет РРО бог РО ів Те Бе діа бебБ бен баб г От"р бій бі1у жа 195 118
Тук Рьае Аве Ра ТгРо бі бів Б1У Тве Меї Уві ТАР Уві бек бак 115 138 їх «ві» а «23115 137 «81223 РЕ «із штечна послідовність «38» «2232 опи штучної послідовнесті: синтетичний полінентид ланцюга гуманізованого антитіла ках ЗВ ій Уві бій зіву бів бід бег бі Рг іу ши узі уз Вко бет Я ї 5 18 15
Тег ів Заг ій тб оСує Аіа Уві Зег біу бек бає Щі Зак беє дер за 5 За
Тугє Ткробіу Тге 119 Абе бів Рго бго 01у уз б3іу цей біб Тгр Мек за за «5 біу Рае їі ТБ Ту? бЗеем фу бек Тне хек Ту два бо Хоб зви вух за 55 ва бе" ди їі ТВг (Бе Зег Аг АБО ТВР Бак ух дей бів Рее Заг ви та 75 ще мух іец бе» Хеб уві Те Аза Аза Абр о їВе й) ві Туг Тут сСух Вів 85 аа 5
АгЕ Ме го Зеб Ре Хі ТВг оїви Аїа бегойво бег ТВг Тер біч біу ї8а 35 їжа тТук вве Ах Ре Тебе обу Зіп б03)у ТВР оМеЄ Ущі ТВгР о Уаї его бев 115 1 125 «218 і ха 15 «18» РВЕ «213» штучна послідовність «лах «233» спис штучної послідовності: синтетичний пеліпензтна ланцюга гсуманізованого антитіла «вва» 21
Фі узі біп ін бів біз чек біу Бго біу ів ув) ух Бго бек і і 5 18 ї5
ТиБ ів бек ів ТВР о Сух Дія Маї бе БіУу Тув бек 1іе бег бок Авв за 25 зо
Туб Тер біу ТР Тів Акробій го бо 81Уу бух біу ее бій Тер Се аа ах біу не ті ТВе Тук Баг іу бе" ТВРобее Ту" а БР бев Бе Ку за 55 БО те" Аги Уаї Тве Ї1із бе» АРЕ Абр ТЕР бог фу йхи б3й Ре бек во 65 ТВ 75 зе вуз цей нії чан уві твае йзіа діз Або Тк Аза ма) тує ТУ Сух А1а 85 за 35
АРЕ Меж Рг зем Рне Бі Те без Аіаз бе фей бак ТВг Тер обіч 815
КБ 385 338
Ту Ве Аз Рве ТгРо б3іу бій б3іу Твг Мет ай ївВг Уві бек баг ра 325 «еВ» 157 «8135 ЕТ «иїїз штучна вослідовністіь сеах «аа» опис штучнеї послідовнокті: свнтетивний поліпептид ланцюга гуманізованого знтнтіла «аз а біс чаї біб іву ів біз бек бі Бе бі їои МУаі іуя реко бе 3
Тв» ви бог фе) ТР оСує Аз уві бек б3у Туєб бек Тіє бег бек Абр
КЗ Я за
Тут Тр обіу Тев ів Бе бів Бго Бго біб вуз б1у їви бі Тер Тв ла «5 фу вве 118 ТР оТуг зе аіу Зак Те Баг Туб еп Бго 5еб сен ух 5а 55 а
Чех Аги їі Те І16 баг Авш дев ТВР оба фу дхп бів Бе бег Гез 65 та КК 35
Бу ісц ніб бек уві ТВг йіз Аіз дер ТВР Аіз Уві Тує ТУР Суб АЇїа во ча 95
Аг Мет Рео Беє вве 018 ТВ? осе) Ада ев феу баб Те ої ЩО щу аа 185 а
Тує Ре Ар Би Тео Бі бій 5іу Те мет уві те уаі бек зок ца ї28 во «аа 35 «3312 399 «ах ВК
ХЖІ3» штучне послідовність «айах
«335» опис штучної послідовності: синтетичний поліпептид ланцюга гуманізованого знтитіля «а0ох 33 біз Узі бій ізн біб 52у бег біу рго біу цез Узі уз Бго бек бі
З 5 ІВ 15
ТВе іву 5ег сви Те Суз Дів Узі бе? біу бек бег Їів бег бег АБр а 25 а
Тут Тер Б1іу Тер Ті6 Ага бів Рго Ре б3у уз бу бео біб Тер ща яв 45 біу Бме Ще ТНг Ту бен бі бес Тйг бек Ту два Рго беб бе ув за в ва бек АРЕ Ще ТВ їТів6 зе" аке АбБр Тве беб кує Аби бів рве баг Кей та тв ща
Муз івз нія бог уаії ТР дів йіз йбБр ТВе Аба уаі Ту Ту Суз Аза 85 за е дме Мат рво бек ве КЗ Те із АЇа беб о іви бек ТВ отео ВШ У іо 195 КК
Туг РНе дер рве Ттр аіу біл б1у Те Меб уві Твг оУаі Хеб Зев 115 ще 1275 «2185 «ах що «Із КТ «13» штучна послідевність ха «ва» опис шщтучнеї песлідсвнесті: синтетичний поліпентид ланцюга гуманізованого антитіяа «айОоз З «із чаї 10 їв: бій 610 бег бБіу рРго бі ін Уві сув бго бек ВИ і 5 їв 15
Тк їви 5ег бе) тТве Сух Аза Уві Хег Б1іу ЗБ бег Т16 Бер зе? дво ха й за
Ту То 8іу Тер Це ага дій бга рго і у біу ізо 3) Тео Має 35 за 45 бі Рае гів Таб? оТук бек біу бег Тпг обБаб тТуг дя Вко баг о бем Був 5а 55 5 бег АгЕ КЩ1е Трб о ї10 бев Аев дев ТВ» бек іч дх» бін Бне бер г ви ва 7 75 о іух іо ніх Заг уві тае А1а Азії др Те Аза Уві Туб тук Сух ліз
НЕ ща чЕ
АгЕ Мет РгОо бек Бе Ті ТВе Бе Аіз бек іви бег Тие Трр дім бу 188 185 116
Туг Ре Ахр ВНе Тер б3у бін біу ТвВг Мет узі Те Уа бег Берг їїх за 135 «210» 25 «йіїх їа5 «8123 ВТ «аї13» штучна послідовність хвлОх «йІ3» опис штучної послідовності: синтатачний поліпнентид ланцюга гуманізованого антитіла «а» 25
Авр їіе біл Ме ТМ" бій бог Рео бек бек фе бег діа баб ма) Фу і 5 та 15
Ар АгЕ Маі ТВг жів Те Суб був Ада бек бій Зеє Щ3іе Ні бує Авп 2а 5 за ів дів те оту? ій бій бух РРО біу куб ІЗ РКО Ух ву ев 1 35 ча 45
Тут Тут йіз Аби бЗег івгц бій їйг о біу Уа) Бге бег Ака Ре бег віх 5
Заг біу Хег біу Те даже рве ТвеБ га) Те 16 бек бек іви йЩів вка по Уа 75 ча бів Акр оре діа ТВРоТук Ту" Сує Бін бін Ту Тук бек біу Тев о тве с З
КМе біж БіуУ 43іу ТАБ уз ай ів Це їує 198 ща «їз 26 «и» МЕ «йТйх БЕТ «813» штучна послідовність «АНУ «йЗ3х опис штучної послідовності: синтетичний полійситид лама гуканізованого зетитіла «ай» в дер їі біз МеЄ їне б3)ій бе» ро бек бек Геу беБ Аїз бек Узі б1У 1 5 38 135 йхр ак Уві ТР ої1в ТВРОСух бух ія бе бій бек Хі Ні Кує дай за Кк БЕ іво Аза Тер Ту бій бій сує Рге 5іу ух йіз Ро їуб Ра ве Те ча 4
ТУуБ Туг АїЇз АБ Зег іє біла Тве біу Майї Бго Беб АсЕ Ре Ззег у ща 5 Ба
Зек ді б5егб бі Так Ав Рвйа тТВе їзо ТВ їі бам о Заг беу бів вге 5 то т во бій Ар рне за Те Тук Тук Суб Ів Бій Туб Тут зе біу тТев Те
З за 5
Рне віу ЄТу 8І1У Те о буз Уаї 10 Хіє бух 198 195 «жів» й «2115 16
«аіїх РТ «213» штучна песлідааність «ав» «ЖЖ» опас штучної послідовності: синтетичний поліпентид ланцюга гуманізованого знтитіла «аа» 87
Вер СІ біл Ме пт бін бек Бо зЗек его їву зег Аівз Бек узі біу і 5 їв їй
Авр АгЕ Уві Тйк бів ївгб о Суз уз Дів бек біз Зег Їіє Ніз (уз Азп за 25 за чен АТа Тер тує піп бів уз Рго щіу уз діа реко Гує Бе ев Ше а й
Туг тує діа Аби баб сец бів пк об1у Щі РРО бЗег де Ре хег щу 5а 58 Бо аг Біу бе біу ТИР дер Ре ТВг Бевз ТР Сів бек бек іо Бій бро а та У5 за бій бер Рме Ада ТВг о Тує ТуР Суз дів бів Туз Тук бек бІу Тее о тВе
Що ча 5 бне бі іу Бі1У ТБ бух маії 62) ї1ів ух
З 185 каївх В «213» 186 «зх РАТ «813» штучна посвідовність «ЯН «жИЗ3» опис штучної песлідовнеєті: синтетичний поліпейтид ленуюга гуманізованого антитіла «чав» СВ ар (іє біл Меж Тк бій бек Рго Зег беєб рев бек Аїд бек Уві біу 3 5 ів 15 ар аг уві ТЕ ІТ) Те Суз ух із бег Ів Зег Ге Ніх Буз Ява ва Кк Зо іец дії те Ту бій бій суб Рго біу Ух Уві РКО ух сей сви Ще 48 45
Ту Тук аїа Аби бек огвць бів Тне біу Уві СРО беб яка РВЕ Бек іт за Б ща зег піу зем БіУ Тйг оачр Ре Те їеу ТВе їі баб бег Се Бій Рез к та ЩЕ а піч Абе уві Аїа тб оту Турк Суб бій бій Туг Туг б5ег Біу Тгр Тве 85 а З5
Ре піу пі БіУ їВг оїує Ууші біз Ті вух іва ї85 «хх В «і» зб «и» РТ «213» штучна послідовність «лав» «83» опис штучної послідовності: сентетечмий полінептид ланцюга гумаенізованого антитіла хава» 25 дев Гі бій Моб Те бів бев Рго бек бек іви хег дів Зеб маї бу
Аяр АгРЕ Уві Те її Тит Сух вух Аза ев Бій Зег 11 Ні вух дв 28 25 за їв діа Тео Тук бій біб іїух рго бі ух чаї рко ух ЮВе ви 138 35 ав За
Туг Тук діз йзп бе? їв бів ТВ? обі узі Бго Звег АгеЕ вва Зак БІу ща 55 ща бек Бім Зег біу Тк Ар РМе Те вжи ТНе Їів бек Зек фе бій Рез
Ба їв т ще бій Ар уві діа тТвкоТув Туб сСує бій бів Тук Туг беєг йіу Тер Те 85 в 5
Рне біу бік Біу Тіт Гуз Ма біц Т1в Гуз тва 155 «их ЗО «зі» За6 «33» РАТ «313» штучна послідавність «еВ хва3У спис втучної послідовності: синтетичний поліпвнитид ланцюга гуманізованого антитіла «ааах за
Ар Ще бій Меб Тг бій бег Рео бевм бек фе бебм Аза беє чаї 03У 1 з ів ї5 йзрв АеЕ УВІ Те їі ТаБ оСух бух вів зе" бій бег Щіе Ні уз А5В
Та 85 за іви діа їке Тук бів бій зує Рко й1у ух уві Бео вух Ве іви Тв
Тук Тук іа Ахп Зег Кен бій Твгобіу Ще го Заг дев Ре Заг біу 5а 55 ве
Заг біу чек Б3іу Те йо Бе Те без Те Ме беє бе во бів бра 85 78 в ща біз йо жа дів тТНе тує Тув суз б) зів тує тує баг біуУ Тер отТВе я а 9 вне щіу Бі Бі ТБ огфу« Уві біб Ї38 ух аа 585 «ках ЗІ «ка3іх ма «2135 НотМео завів «кадах ЗІ
Ме аг Тев Суб ів іви ее Ті Тго йіз бій біу ви Абв зів діз 1 5 із 15
Рго їви Діз хеб б31у Меї Меї Те бі Те Ї3е бі Тве Твб обфу Аа за КЕ За
Іі заг із біб фу 51у 61у берБ Ї1і6 Її16 фев бій Суб Ніж ви бе 35 За 45 аг Так Твнг діа біз Уві Тве біп Ууяі доп їкр вів 531 Бій Ахев щі
За 55 Ба їваи іїгцй АЇз Ті Сує й Аза Ар обец Зі Тер Ні Біб беб бра ще та 75 ва
Бпе вуз Ар АгЕ Маії Аза Рго бБіу Ро біу ви Біу Се ТИР ке бій
Зк за З5
Зег іви Твг Уві дев Ар Те бі бів Тук Ре Суз Яів Тут Ні ТВе їва 185 ца
Ту" Бе дер піж Те тут Те Зі» Абн Зі РВЕ іви іш Уві ев 51 315 128 155 бе? вн Уві дія зі) нія 5іу ліз Абв РНе бій іа РО в сен щу ї3а 135 148
Аіа Меж дів йіа Твге іє) узі ча) ї16 Сух Те віз уві Щі Узі Уві 345 358 155 їБо
УЖі Аіз ем Тіт АБО Суб ух ух Ді се АР Ї1а Ні Бен Уа) 515 ї655 ЗУ ї75
ІіУу Ар іє: Аг Абе о Бубз баб Аза біу іа біб бів Тгр о беб Рго бег 186 185 їз6 діз Рго Бек рео Рко Біу ев Суб уві бій Аїз бін Аіз Аїа Рко Аза ї55 аа зах
5іу іву сСух Бі біб біз РЕ біу бі йзв Сує діз іо гео Ні Або ій 215 яай
Тис Рв дка Узі зе бЗеє Ту Аг его бе БІ Аяп Сех Заг РНе Ре ваз Кк 25 ай
Тве щі тТве біу «йЯІах 35 чаї» За5 «ій КТ «аІ3» Мвсаса Таксісвізгів «авоз За меж АР ТО Суз беи Бе фей Зі Тер Аза бів БІ1у іви дев бів Але ії 5 їв 15 ге іє вія бЗес Яіу Меб Меб Те Зіу Те (1 біз ТВ отТве ау дей 88 «5 КІЗ
Іі бег дів ух іух біу бі ем узі іє без іп Суз НІВ бе баг 35 да 45
Зег ТИ» Меє ліз бій Узі ТВ бій Уві ай Тер біз Бій Ні Або нів 5 ще «аг ів іву дів їі дв дбав дів бійп іви бі ТР ніх Ті Тук РКО
Бе та 75 ща
Аіз Бе ух йзр аг Уві із рго Бі бРо біу бе біу (ви Те Це ще 55 піп бБег їву Те МОЖ Ан одер т бін бів Туб Бе бує ТВ Лук НІХ ще ї1в5 ща
Те Ту го Ар біу ТВг оТуб АгЕ 01у ев З18 Ре фен Бім Уаї Се 115 їв 125
ФМ бег Зав чаі Аіз бі Міє Зек Аза АкРЕ Ре Бій 18 ре іс їву 138 а їча піт Аів Меї із Меї Меї ів Уші Мі Хі Суз 118 Аза май Ще Уві 145 В їх 168
Уаі Узі Уві їни із йгш ух ух уз бек іву дк К16 Ніз бек Уві їа5 17 ІВ
Фів бЗеє бпіу іви піп аг іух беб Те біш ів бін віз бів Тіе Ве за 155 в
Зав дій Рко Бегб РРО Бко біу Зек сСуз Уаї віп віз Біш Аїз Ада Рко з85 зва 5 із Бі їси Суз Біу ів бів біз віу йзр айв Сує Аза ів івшз Мі
БЕК гів 22
Ар тує Ре Аби УВІ ібу бек Тук аРИ баг іви біу бе? Сух Баг РВе ке За 35 аа рн Тве бів Те щі зах «а» З «8113 47 «вій» ВИТ «ії» штучна посвідевність «аЕИх «ла3» опис штучної послідовності: сентетечний пеліпеттид ланцюга зититіва «ах 33 цій Уві чів зіву жк бів Зеб пі зі бію Уві вує вух Ро біу ліз
Е 5 їв 15
Бек уві уж УЗ 5ег сСух ух Аіз бек б1уУ Тує ТВг ре ТР аз Туг «В ваз КІ
Ту Меє Тук їв чаї др ій Аза го Бі Бій біУ Бо 36 Тер Мех я 85 щіж пі ів Аби бго бег Ах» БіуУ Щ3У ТР дя Ре дбай 3 ух вве 5 ща ух йзп дев УВІ ТВг о вБву ТВе Те дер о беє Зек ТВе Те ТВг Аза тує 55 та ТЯ ка
Меє біз ме) бух бБег їзу 630 РНе дав Азов Тве Аза Уві тує ту Кує 85 зо че
АіВ Ага дк Ар тТук АРВ РНе бор оМеє Біу рве Ахв Тує Тео бау ща за 195 ЕН ім тве Тве Уві Те Уа) беє бег Аз Бег Те фу щЩіу ро Хе УЗ) щ15 ї28 ЕІ
Ва Ре іо Дів РРО Суя зе» дев бек ТР ОбБе бін бек Ти» дів дів це 155 їа їі Біу Суб шо Маі бух ер тує Ре РРО 53 ргро чаУ Тве о Маї Бак ї5а ї55 їб8
Тгр АкМи хег б1у дів іс ТВ баб йіу жаї Мі Те Ба бго аАїа Узі 365 170 їз іеш бій баг Заг Біу Беи тує Зег гаю бег зем уаї Узі Те Уаї вра іа і185 з
Бег жа Баг іви біхЖ Те бу Те Ту» Тне Суб дей Уві Ар Мі бух 135 заа ох
РБга Бек аа ТР огсух Узі Абр ух АгЕ Майї бій бег уз Тує В3у БРо 218 315 а
Бгто КСуз Рез Ре Су Бео Аіз реко бів Бе без біу біу РРО чек Уві
КІ 3 25 КУ
Тбе цез Рва го РРО вух Рко Бу АБр ТВе Ген Меї Гі бек Агро Те го біс Узі Тк Сух Узі Уві Уаї д5ов чаї бен віп біз дер бео 5 еВ а за узі віп бне дхй Тео Тук Ма! аєр біу Уві Зі узі Мія АФа Ада ув 335 зва з85
Те рух Бо Ав бів бію бій Ре дела бег Тве Тув дед У Уві бер
Кг з БУ
Маї бен Тане Уві іеци Ніє йім Ав го іва деп З1У ух ЯМІ Тук Цу5
За ща Зі ЗВ
Ку уз Узі зе» йзп уз біу цву рео бек бег Ще Бі буб Те Пе
ЗІ що 335 аг рух Аза уз Зі віп Рго арк ів бро бій уві Те ТВе ви Рго
Зав БОБ за
Вега чЗеє бів бі) біо Меє ТВРогух два бій Уві бек фву Те Сух ву 55 3еВ8 зЗа5
У бує віу рве Тук рРге бек дер тів дів Уві бі Тез БЦ бе Дяв
ЗУ 575 зве єї ів Рго бій Аза дов Тук бує Те ТВе бро Бео узі Кей АБО бек з за 395 «а ар Біт баг Бе Ре їв) Ту бек др їец ТНБ Ма) йБр бух Бег АР ча5 аа ча тече ів із а3у аа маї Бе бек бух заг Уві Меб ніз біз із їіви
Б чай а
Ніз дян НЕ Тук ТНе бія цує Беб фе) бек ву Зб се. бі У «а за «гів «аз ІВ «її РТ «ії штучна послідовність ах «323» Ой штучнеї послідовності: свнтетичний поліпентид ланцюга антитіла «аа ЗА
Зіч Хі Уві ісц ТБ бів бек Бко Аіаз Те ій бе іо бЗег Рко бі ї 5 їв 15 іш АБЕ Аїв ТТ Без бер Сує йРЕ Вій дек іу5 Зі Уаї Зее Твгб бек 28 15 за
Біу тує ще Туг бе» Нія їго Туг бій бів бух Ро біу біл Аза Рго
З 42 45
Яги і) іву ЩТі16 Ту сви йі8 бХее Тує сви біб баг пі Уві бро від ва аа РНа Хек Б1у Зек бфу ев біу ТВР Або ве ТВР бе) ТР ОХ бак 55 а Ж БЕ) без фе Зі Рго біз Або Рпе ліз Узі Тує Тук Суб бій Міз бек АгЕ щ5 ща в йзвівю Ро ім Тве Ре бі бі йіу ТВк ух Уві бі: Гіє Гуз агЕ 1 їа5 за
Тве Уві Аіз діз Рго бег уві Ре зів бе РРО РРО бек Абр б ВІ 5 528 155
Ме ух баг щі Те дів бог Мазі Уві С5 Кен іви йхай йа5иа Бе Тут і138 135 не
Без дек біз діа ух Уві бій Те Був Уві дво ас діа ів бів баг 145 158 І55 Іва
ЗІУ дян беР пів Біб бег Узі ТВР бів бів йбо бебБ іуз йбр о чег ТНг 355 178 175
Тук зег ем ек 5ег ТИ Бе Те цез Бек ух дів йяр Тут ЗЛ (ув за Зк ща
Ні іже Уаї Ту" Аїз Суз бій узі ТР ОНіб бій Б31уУ ви бек яег га ї55 за 5 чаї ТВг вуз бек Ріе дбп дги Бі Бін Сув ж 315 «ій» 5 «її» 438 «аз РЕТ «215» штучна послідовність
СКК Кя «ай» опис втучнеї веслідовності: синтетичний педігемйтий ланцюга антитіла «Мах 35 із Маї ів бен Уві біз беб бі Бі бі Уущі У бів вро бі» АР ї 5 їв 15
Бек ве АгРЕ ву АБО сСуз ву5 йіа За" 01у Ті ТК РНЄ Бек АБ Бек 28 КЗ за іУ Меї ні ТРр Узі дРЕ ій йіз веб б3іУу іу5 81 Бви Біб: Те Уві 35 ча «5 із уві Це Тр тує дер БІіУ бек фує де Тук Тук А1З Аяв бек Уві
Бе уз У ги Бе Тве Хі Зек йкЕ Ар йхе бве уз дви Не ви Рне 5 за 5 ще
Кен Бій Меї йхп бе" Кво АРЕ ДІ біз др о Тве віз чаї Ту Ту» Сує 85 ща Б віз Те йдха дер йо Тук Тер о біу біз біу Тр оізу Уві ТВе Уві Зег що 5 Ще бее із беєб їВе Бу5 1 бго беб уві Ре бго во дів Рге сСух баг 135 ї-28 125
АгЕ бек ТВг обеє 01) бег Таб Аіз дів Се 01у Суб се Уві бує ар 138 ї35 1438
Тут Бе бгео бій Бго Мазі Те Ма) бег о Тго Аа Бек щ3іу Аза ву Те ї45 за 455 ща бег Бі чаї Ніх тнє РНе Рго Аза Уві бен бів баг бек біу гео тТук і85 ї198 5
Зак фей Заг бен Уві Узі Тне Ма) рео бен бен Зак ву Біу Пе овфує
ЗВ з85 за
Тве Ту Тве Сує Ап узі бр Ні ух Ре бе АБ Те кує Уаі ер 15 «В 95 іму дж УЗі Бі ЗВ фу Тук пі РРО РРО Суз Ро Рго бух Рво дів ів ів у
Без бів Бе беа 01у Бі го бее уві Бе бео Бе бго бро уз Вго 225 аа рах 248 іує ар Пк їси Меї є Зек Ага Те РРО бін Уа) Те Суз Уві Ма) 5 555 чаї й Узі Ме Бій бі вза бРО бід Маї Зіп Бе Аа Тго Туг Маї
Ба 263 В
Джр йіУ уві пів узі Ні йха Аза Гуз ТР обуз го ар БІВ ЯН ІЙ 275 за 255
БМе деп бер Тег тТук аг; Уаї Уаї бек омаії сцео Те уві бе нія вій
ЗО ча зва дер о Тгроіен йба Б3ЇУ бух Зі) ТУуК о іує Суб вує Маі бек Ап гу БІу зав за 5 за
Кец вро бегєб бЗег ї18 біб фу ТВгР їі бегобж5 віз вуз Біу бБіп БРО зах 330 333 агЕ Біш Бго (Да УВІ Ту Те ев Рко Рез феб ба бін бі Меб Те а 5 м зує аа бій Уа) баг івен Те Сук веб Маі фує Щіу Ре тус рро бер
Б За За дер ті із Уаі біб Тер біб бек джип бі бій Бо біб дей йжи Те
ЗВ БУ ще цу тив Тв Рго БгО Чаї ве Аве Зае Аве іу ек Ре Ве Бею тТук
За аа за» аа бек АР Це ТеР о УВІ Яр ух бер аРЕ Тео бій 3 біб АБ Уві Ре за БУ 15
Зам сСує б5ег УВІ Меб нія Бій 813 Це Ні дев ні Тук Тег біб ух я «ах ЯЗ ее жі бе іви Хек без 1у ух 435 я «аїйх за «Віз зм «135 штучна послідовна сть «зе «аа: опис штучної послідевнесті: синтетичний ема ненни ланцюее вити «а» Зв із ЕЗе Уві їеу ве бій бак ге йіз ТВР ау Хег Бу бек рка щу ії 5 їв ї5 бін аке Вів ТК во бев Суз дме Аа Жак бій бек УББ) бек бе Тек ща КЗ за аз ді їер отут бів ів бух вке У бів із во Яке іву Беа ще
Ту» дхв із щег й ав із ТВе Біб гів Реб із Ве РВЕ За ЄКу за вх Ба зве і Бек пі ТНК або вне Те ім ТВе тів ев бак ву 31 вго я Та 5 ва 51) бор не віз Мі Ту те Суб Ай іа Бе беб бхи То Рго Аге 8 за за їне вве бі віп бі Те оБуз бай бін сіє вує АР Тв чаї іа дів з ща 335
ТрРОо бер У Ре Хі Раб Р; РО его ав бів бій ем бує Бег БІК 1 128 155 їе ліз чає узі Уві Суб Без ін й" й» Ве Тук вро дата 03 ВІВ ї38 35 о їв Уві бій їв гух Уві йхр ди діа ів Вій бе 01У Аа баг БІВ ї45 ї56 ї55 158 цін бек уві Те фі) бій дев ев фу дв Зев ТИ Тук забору ев 155 ща Кк
Зае їнР іви ТК гву бек бує із Ажо ТУР Вів ух Ніх бує чаї тує зе 185 39 із Су бів УВІ Те мів Ів біу Беш Зев ее Бо бай ТВе бує Зав 195 «8 ща
Ре да аг ВІЖ Бім Сув как «ах Я сяЯЕ ЩО чаї РЕТ «13» штучна зослідвеність хи «За» опе штучнеї послідевноєті: бите тичних поніпенттид данина гуманізованега антитіна кава» ЗУ біз Уві бів ів вій б) Зев біб БРО б3іу гео чаі бух Рго бек бін ї КІ їв їз
Те вжи бет іею їне суз ТВе Маі чек бію бе" бен Ків Аза Бак Аж «В «а за
Туг Тев пі Ттр Хо ге біб Рг бго Яїу Муз 815 їз 3 Тгр Се
БІ ча 45
ТУ ре Щі6 Те Ту» бев біУ Бе» ТВР бек Ту» йшла бе бер зу ук за 5 ща
Зев агЕ чаї те тів бек уві ах їВе Зак бух а бій Ре бер (ва ех та ух да
Кує Би бек Заг Уві Те йів Аів бер Те дів Уві Тв ТУ Суз АТ ях а 5 аРЕ МОЖ Бека бер РН Їіє Те ви іа бе Кей бек тТне Тео Бі бу ха 55 38
Тує вне дев ее кр іє бій у Те мех узі ТВ" чаї Зеб бЗева вів ще їз 35
Заг «Ех Я «Т1ї» 127 «іх РА «ЕІ штучна пОослідеВНістЬь «ие «КЗ ОН шКТучней кеспідовноєті: євнтТетинний полінейтва ланцюга гумаенізованого внититіда «Я» З біс Уві (Зб се) бів бін бек біу Бео і ее МаЗ вує РРО бек біш і 5 їй ї5
Тв" бен бве іви Те бу Твгб УВІ бек БіУ баб бог жів іа бе й
КЗ 5 за
Тут? Тер бі тео хі агЕ бів вге Вго біт бу Біж Без біб Тр Ще 3 ще «5 щір вве Щів їй тує ба" Бі баб ТВе Бек Тук дев ее бек їв гу а 5 а хан аг Уві ТР ті Зав аг бо Тг о бег бух деп іл Ре бве ів в за 5 ща
Гуз їз бек бве Уві Те дія йіз дев Ве Аія Фві ТуК ЗТує бух ДІВ
АгРй МеЄ Бко бее РНе ї1е ЇНе зе) але бе себ бве Те ТР ще щу ї29 185 це
ТУ" Ре дев Ре Тк бі бій бі ТВе беж мазі Тв У) бек Зак що ща їй «ТТ В «а1їх 139 «ща ВИТ «23» штучна послідовність «В» «айО» опис вічної песнідненостії синтетичний поліпезтид ланшюга гумаенізованого антитіла «8» За із маї Бі ен сів біз бек пі рез Бі ву з Бу рго бек пів ї 5 Ще 15
Те ія зак фізи ТНК о Сує Те Узі Зег 5іу бек баг ЗіБ ів Заг Аз
КЕ 35 БЕ
Те їтв йіу Тк» 16 аг гух рго Бо Біт у бі Бей бів те Кіа ща 45 сіу Бе бів Те Ту" бен БІу бе Тк обер Тук дев БРО ев ім іч
За 55 а
ЗекК вгЕ Уві ТВе о ї16 бег о агвЕ о дяв З бек ів й іп бе баг вв 55 В 75 ща
Му оц бе" бек Узі їне діа Аії 45р Ти віз Уві Туб Бук Сех Вів щ5 за ва
АгЕ Ве бко бек бе їі Пе бен Дів баб оіви ев ТВг їв біз щу іа ії не
Тук бе азрв бе Тер Оіу Біб біу її. Мес Маї Те аж бе Хев м ща 155 «дів» «в «з 35 «віз КТ «3313» штучна послішевність «Ваз енне втучнОої еслідовнесті: єннтетичний поліпентид ланцюга гунанізованего знтитіна «аа» 48 І ін Уві бій йо бів бін бек біу БР біж во маї руб Вго бек ВН тив бен его іви ТВК Су ТР ОУді бас йіу бег бек Те Іа бек бр за Кз За
Те ТР; іх тгРв її ку бів бе ко Б1уУ уз муз ів іа Тев Ще 35 в ях 1у рве Ті6 ТВР о Тув бек б1уУ бек Те беє Тує йва РгОо баг бе Ку ще ве Ба
Зег ар УВІ ТВБ (15 бег АРЕ Або Те бе фу аби БІЙ БВе Бек цу а КЕ жа
Ку їжи бек бек Узі ТьБ олія Аза АБр Те діз Узі Ту Ту Суб АІ1В що за З аРЕ Мет РРО бек бе Сів ТПг овен із бек осею бе Тве Тед бів щу їі їж Ів
Ту РНе йхв Бе Тер іх бій біу г ЯеЄ Узі Те Уві беб бек
КІ ца їж «еїі8» 4ї «з 357 «8335 РТ «333 штучна песліцевність «3885 «айаз опис штучної послідовності: синтетичний поділений ланцюка гуманізеванео ант «ав а іш УЗА ЗАВ іо іп и Заг ау реко Бу Бе Уа фе Бе ек ЩІ 1 5 ІВ 15
Твг ізо Бек іо Тиг Сує Те УВі баб іх бЗег бек Ї1ів йів ев в за 5 За
Ту їв біУ тТРо Кіз дб бів вго бо Біу бух бі» Беж бів ТРе Ще як жа 5
Оіу Бе Щі Тезе Тугє бег біб бек Те бе Тук йзп ргео бе" ів ув ща Б3 Ба кат Ра УВІ Тв сів Бек ке Ар їйе бе» ух Яви бів Ре бек Бер ка яв Та ІЗ.
Бу іеи Бе ве уві їйг Аза аз зо Твг о аіз Уві Тут Тук бує Віа я5 ща що дев Меф го лес бе Кі Те во дія херв осв бае о тВе Те 3 у і їх 115
Тте бе дар Рье їв ЗІ біз 5іуУ Те о Мек маі Таб уві бе ек їх За 5 «ій» 83 «іїз 137 «з РЕТ «аії» втучна послідовністьв
«ах «ВАЗ» опис штучнеї песліденності: синтетичняй волівентия язнцега гуманізованего зняла «ах 5
Бі жаі бів ізн їв Бій баз Біу РРО Біу без Уві ух Бк Беб Ящ ї Ж 18 ї5
Твг іва бек ій Те бух Твгочуа) бе? бі Бегб бек їів ів бБег або 28 я Бо
Тує ТРв ії» Тео 316 йгев у Бео рго (фу іщ5 ух Мет бів Тер Ще
Зк за ак іх вве Се Те Туг баг ЗУ баг ТВР обег Тук ба без бек Бе ув 5а 5 ще бат арки УЖІі Те Іі0 бе дк лаяв ТК бебі аби бів Бе хаб ви
КЕ в ВЕ і Бек бет Зав Уві ТВге АІа біз ар ТВР із Уві ТУуг ТУуг Суз із
СЕУ а щ5
АкЕ меж Бре бек Ва (1 ТВе ів дій Боб ке бак Те Тв обі б1х
НУ і185 ма
Тум Ре йхр вне їгр ві» Бів біу ТВе Вес Уа) Те Ма) беР бог 115 ї28 155 «аз 53 «1 ХУ «іа ВИТ «ЯМ» втучна послідовність «ІВ «а» спас штучної послідовності: синтетичний поліпенттна дання гуМмаенізованеко знтитіла чаш» «я він ува бін ів бі» Бі» бек бБіу Рге бію іви Уві Ух БкОо Заг БІВ ї х КУ 15
ТР зв бек ву ТНе о Суз ТВе Уаі Звг ЗІ» бек о беб ів іа бе й
КЕ 5 а
Тує Тк бі Тер ів аг Бій Рез бро бі Муз іх іеб іш Тео Їів че за 5
Щі бе Хі ТВР оТуєб бег біб бве ТК бек Тум дев бере ЗУ із ух ке 55 ща
Зав аг УЩі Те 16 баб аРш Ак ТНК оЗек їує дк Бій бе Зее їз
БЕ 7 75 да зу і бег баг Уві Тег Аз йзв йо Те біз Уві Туг Тут суб вів ще а 95
Ага Меї бро бек рне Ге Те сен Дія Зве зе бЗеб Те ТРе б Бу
КЕ ОЗ АВ
Туєс Бе йо рве Тео Біу Біл бі Тве Веб Узі Те уаі бег баг
З ща за «аз 48 «я У «3» ВЕ «813з штучна песліднавнеєть
ЕСЕ: «003» опес втучної леслідсвностії синтетичний поліпбентнид ланцюга гуманізованего знтктіяа «а» 4 сій УВІ бій саи щіп бій бек бі Бго бі ев Уві бух РКО бег Вів і 5 18 15
ТВ фер зе фе тТне сує ТР Уві ок БЮ зак бен лів вів че" ев
КЕ ах КЗ
ТУ Тев бі Тр Сіе йрш 5 Бго реє бію зуб уз МЕЖ бій тер ще
З КУ ож щу Бе Сіс Те Туб бек біб ев Те баб Тук й ее ЗБ ів вух
З ЗУ ще чег ав Уві Тв Хів чає Уві др ТВг бев зуб дян бій ве бек це в та КЕ а їжв їец бек бек ущі Тне Аів йіз аю Те йіз Уві Ту Туг сСухє йіх як вх ЗЕ
Аги Мет Ре Бе" бе Хів Не Бо Дів его зво бер Те Тер б Біх ї9е 155 1336 їУ" ве йо Ве ТР о біу йів бІу ТВе беж уві Те Уві зве бак ме їх 155 «ил 5 «з їх «МІЯз РЕ «ВІЗ» штучна послідавность ех «33» опис штучної песлідовності: сектетичнив подійейтня яанчуюга гуманізованого вититіла «ща 45
Бін чаі бів їец бій біб бер бі» вка б1У Мео Уві бух Ро бек 53 кі - їв 15
ТВг зец бек ау ТБ о сУє зве узі ТВРобію хек озек Хі А1в Зеаб дер а 25 за
Тут тер бі Тер ів АР бій Рко Бго бі 155 Бі іез біш тев Це ж жа З
ІК ве іа те Тує бег БЕУ бег о Тве бек оТуб да РРО ев в ух
Зее аг. Уві Твг їі Зоб йгш ар Те ЖХег фу би Біб бе Хег Сем т 75 ва
Бу ву бБег Зав У їйе Аза віз бер б Азфз Узі тус Тс сух дів 85 ще К
АР Ме его бек Рв Щі Те Без біз Бек зу бек Тк ТК біз 53у
Вау їн ще
Тує Бе вер Ре Тр біу ів 0іуУ ївВе Меї уві ТвР ож бег Заг її 18 її «А» 4 «Ма У «йі»з ЕТ «Из штучна послідевність «Аа «ий» опис штУучнеї песлідевності: синтетичний полічентнай яаниюга гумаенізованогмоа антятіна «Б» Як щі маї біб се Бан бін бен Зі йів БІУ Бе: ви бух го Заг БІВ ї 5 і КУ
ТВЕР фев баг беи ТВе Сух бек узі Пр біб бек бег ЇЗа біз бек 85р за Кі за
Ту" Тер біу їгр іє Абе бів Ро Бго ЗІ; уз Біж во 836 Тев ще
За ав Б
ВІ не Се зак ту? бек бі бег Те бог Тув Аа Бо Зав сов вух ще 55 ва
Хек АРЕ Уві Те Їів беб Уві бр Те бе: уз йзв бів Ре бек ви та ї5 ва зїу5 ем ба" бек уві їБе Аіа Аза дер Те Аа Уа; Тук о Тув Сузх Аза щх За з
АРЕ МЕС РКО беєв ре Т16 ТВе Кей Аза баб Кен бег Тк ТР Щів щу аа ця її
Чек ве азо Рза ТР Бі вів бі Те Меї Уві Те щі зе бек 1Е5 що за каз Я «ії ВХ
«їз» РЕ «аХ3» штучна песлідовністе «Жах | Й «йИ3» зпнє штучнеї песлідевностії: синтетичний поліпентид лзнуюга гуманізованого внититіла 332 4У іш Уві бій без дя Бі Зег бі Ро Біж бебі ух РР РРО Бу ї 5 КЗ 35
ТВе Зез бек бец ТВг Су бег Уві ТБг бі ее Бе іш віз Бек вар з а а
Тут їтев Біб тр чаї Агв бів беа кРа Щ3іУ уз аіу без бїіч ТБ сіє 35 за 5
Оу РБе їі ТБг о ТУє Зее БІУ бек ТВК бек Тук да Беб бек ів уз ща «аг АРЕ мні Те Пе бев уеі хр їнг Зеє кує йби БМ бВе Заг Ме й КЗ: КЗ ва ж ев ще бег Уві Те із бів зо ВК Аза УВУ Тук о тТук Суб АД щ5 ща 55
АРЕ Мек бро баг Бве Тіе ТВ? озеу Аз 5ев бе беб тТВР оте бів Яру 38 195 а
Тув бе йев рве Тер бі бів бу Так Меї Уві Те УВІ бек бег 115 їжа 135 «ЇВ» 48 «їз З85 «із РЕТ «її» втучна послідовність «ЯЖЖх Й «Ка» опис штучнеї послідовності: синтетечнай поліпентня ланцюга гуманізеваного антитіла «а00з 48 дев Ще Бій беж Тве бій бек го беє ба" без бе дів дев уві Ж ії 5 38 ї5 бер ага уві Те оЗ1о ївк оСує бух йіз зе" бів Зен гів Ні Був ат за 25 а мем із Те ТУ Б БІВ Гуз бро бу Суб Аза РКО вже Бей ів Те 35 а а
Ту Тут йіз ди Заг іви бій ТК бі Узі Бко бек Авр РНе баг пі
За 5 ее бі бег дію Те Аеровне Тв. оре Те 16 ем бЗеє Бец бів бро 55 78 5 ща іш ар Бе дів Те Туб Ту був бів щій Ту Тук ба» Бі їтв їв
ВЗ за З
Тін зу біб біу їТве бує Уві 3 Бів бу о У «ЯН 4 ке «ий РЕТ «8135 штучна послідовність «а «а» опе штучней послідееності: семтетачний поліпенттий лечцюга гуманізованого антитіла «аа» 45 зв Ї1з бів Вей ТВе бів бак Рео бек бек ем Зак вів Зак уві щі ї 5 їв її вхо аРЕ УВІ Те їїів Тне Суб туз йіз Зев бій баб Ті Між губ дви «В 5 Ки іви йіз ївр Тує бів ів бух Ра бі бух Вів БР руб Ре за Т16 во З
Тут Тує Ава дв Беб іо бів їВе Зі» Маї бо Зеє Рв Бе Бе 1ж
КЗ 55 А аб ої щае бір Тв ав пе тве бе те б зе Бак без бів бео в та т ве «і: ваза Ре аа Та тує тує Суз бів бів Ту Ту бер у Тер те
Вае Бі і У Те ув Уві бів Се ев
БЕ її «В» за «о 1 ее «Бах втучна пеослідевнусть «ам» ! «Зах пес веучНОЄ послідовності: севтетечний пені кня яаНОхга тумані нене ати «ар дев їі бій ес ве бів Зеб Бео Хек бек Бо Зак афяа Зае уві аку ї їх За Ж ев Ак УВІ Те ів ТВ Сез ух А) бок біз Заг ЕВ Ні Муз бак з щ5 За іве віз ТР ОТУК Я)в бів бує ве Між БУ Аза во ге с ев Ще
БІ я Я
Ту те дія дам ем сев сія те БІ» УВі вве ще дек не бе у ща ща ща ек ді ев ім ТВ й вне ївК бе Те Ше бек бек ївоу бін Бк
ЩЕ В БЕ: а пів дер ря Аза Те Ту вне ср: 3 816 бує Ту ве БЕК Те тке я ча 5 гне біу 615 515 ТК ув Уві 5 Лів ух
ЗА 5 «ць зі «а» ща
«2135 втечна вослідовність «ах сЯаЗ» спис втучнеї послідовності: синтетичний неоліпентнид лануюга гуманізовамного антитівв «аа 5
Ар оце із Ме бе ій Бае вро бек баг Бе за із ме У у 1 х 18 їх
Акр агЕ ЧНІ ТВ» Зіє ТМ» Сує Був йія бег бів баб їі Нії ух дв аа я зе без дів їв Туг Бій Бій бух РРО ЗІУ бух із РРО бує Ре ем ще 55 я ах
Тує Ту дів а5п бек ем біп ТВг обі Уві Бео Зегб АРЕ Бе беб щу 5а 55 БО бас бі бек біу їй дер бе те без ТВ? тів беб бек ви бій рко
Уа 75 ща іо йо бе із Те Ту Бе буз ів біз Тук Тук бех БІ ТероТе 5 за Б
Бе сіу Б1У Лу ве же Ма о Ків (ух зо8 і195 ках 5 «жа» РТ «313» штучна послідовність «ЗІ сла» опис штучної песлідовностії синтетичний певівевзтив ланцюга гуманізаеаного антів «аа» За
Ар ге щів МеЄ Те бій беб БРо 5ее бев їе5 бег дів бек УВІ Бу ї я за 18 а5о йгЕ чаї Те іє Тег оКух ї5 йіз бек Бій беб За Ні гу дев ща 5 що із віз їгРо ТУ 15 біб Бу РРО БУ уз Аіа Ра фу ев Бе Ще ща 45
Тук Ту віз бзай збе беу бій Те щу Те Рео бе Аев БЕ бек ЩІ ща 55 а «ве йіу дев бі Так до РБе ТР о іез Тве їЇв бек бек о фва бів бео вк те т5 Ва щі вав Ре із ТИР оТує Тує Сув бін бін те Тук бек бію тер те 8 ща КІ
Ре бі бік Бі Те буз Уа Би ів бух зе 85 «Ме з «ех 19 «ак ЕТ «13» штучна послідовність «Жах «223» опиє штУчнОої послідовнесті: сннтетична вдідввна послідовність пеятидів важких ланцюкіє мес Бін Тео бек тт; чав) РБе бе ве рве беб бБеє чві їве Те 45 ї 5 та їЗ
УВІ ні бек «В За «3» 20 «532 ВКТ «3135 штучна неслідовність «ВУ «203» опис штучної песлідевностії «снететична дпідерна песлідеяніств» пентнидів легких люннеи ів «аа ще
Мей аг Уа) во ТВе бів хві зву ЗішЖ во Би Бей ово Тер ов Те ії КЗ їв 15 взр Аїз ги СК
Кі
ЯЗ 55 іх А «аз ВТ «ІІІ» штучна посліднвність хащах «ЯЖЯ» ейне ВТУЧНЕХ послідееностії синтетненн полпіпеттнв конетантного дену зажееге пзницюга - ЇВ ЗІІИР ав о
ТвВе Бує Бім Бго бе" уві ве ке бе вів ББо Се5 Заг ге Зав Те і 5 а 15 ак ії бає НЄ ів дів ев сію Смж без Уві Бу йо ТУ ре реа ів Бео Ма) Тве Уаі Зек ТР о й бек пі ЯЗа Се Те бе" пу Уві
З Я в
Мб ТВ бне бро Афа Уві зіец бів его бек бі рем отТеР Бек ом Бак
За 55 яв
Зате уві Уві г Узі БРо бек ер черв іво Зі Вк вух ТВг їУє Те ще КЗ 75 ща
Сує ака МВ) Я5о Біб уз Риб ев Аза Те Бех ай дер уз аг Уві : ща ща 5
Щі Зег бух Тук бі Бо Бео Сух Ро Бго Сех РКе біз го 53 рве за їв ЗІ ів» бів Біу Бго беє уві Ріє ки РЕ Ргео Бко фу Бе ік вв о Тне
В 128 355 кви Мах Ті Зегб йгЕ ТВ обге Фін о УВі Те Сух чаї чаї чУеії вав Уві 138 155 ДЯ
Зееб щі біз бер Бо біц УА (3 ЯНе да ТО тує уві БВ ім Уа зх 15 У За із уві нії вза ів уз ТИК Бу го ве бів бів бів вве й Зак 155 Мт 5
Те Тук Ак УВІ Уві Заг Узі іо Тг о Узі зеу Ні бій ар тре Без
ЗВ ІК КЕ ах ім су5 біб Ту" ух Суб іх Уві Зег й уз біж ем реє Зае
КЕ я «5
Баг щі біб вже ТНК дів баг су із су іх бій Бе АРЕ о реа зе 5 238 біз ві Туб ТР їн ро Бго бек бій біз б1ю Ме Ще вуз да ЗАВ 25 38 235 ке:
Узі хек Бецу їй сук іш Ма фу БЖ Ре Тук Бо Бек ав ге Аза
Кк 8 чаї бій їбр бів Зак Асп БІУ Ів РгРо Зіз Ява ва Тук о рув Те ТВе
Б 55 У мч го узі сви зр обзег ай біу Бегв Ре рве іеи Ту ее АРШ вай 275 ВЕ хв
ТВе Узі ази уз заг ага Тр бін «3 бі йза Маі Ре бек сСує бак ж а зва чаї ет міх Бін йіз ей Ні йки Мія ТУ ТВгбобів бух Зак ів баг
З85 За Би ЕКЗ ца бек ші Бі вуз «их 56 «2135 185 «-ї955 БЕ «833» йтучна послідовність
«ІВ» «ий» овиє штучної беслідсвнеості: синтетичних полінантна константногма домену лекнеко Язнцуюга мапна «ад 5
Узі Ака дів бе бБев Уві Бінжб діє Бе Ре ко беє бер бів іп Вже ї З 18 Ко їм Зек піну ТВР Вів Зег Уаі Уві Сух ви іч бзя йзв БЕ Тук БгО
КЗ а за акр ак АЇв іже Уві бій їРросує мМаї йбо дов дів ов бів беб біб
З да Зх
Ап бек йів 03 бас Маї Тк ій біп або ЗБ ТУ Ав обер Те Тек
ЗВ Кс Ето бек фе зем Заг Тне ія Та» рей бак ву Аза Аж Кук біз сих ніх 63 та 75 ГУ зм Ма Те іа Сх5 бі мі Те Ніз зій аМу іем бег беє Бей чаї
НУ БІ я їве суб чег рве йза аРЕ БІУ ЗіБ Ку ї85 за «ів 57 «2135 33 «ЖіЯх ЕТ «хії» штучна послідовність «ах «аа3х спис штучнОож послідовності: «НЯ ТИНИЙй пептид СВ «аВах 57
Щ1у Тук Зег Її ТВгРоБег в5р тує вів їБа вл ї 5 і «аю 58 13 15 «вія ЕТ «афЯ» штучна послідовність
«ах «аз пис штТУчнеХ песлідавнаєтії синтетичний пайтня СЕ «аа» ЗВ
Тук Ї16 ее А5и Зег Оіу Хек віз бек Ту йбов БР бе цер бе бе 1 5 їв їЗ «І» 53 «з «яз ВЕ «213» штучна послідовність «те Омлиє штучне поснідсвнеєті: синтетичний печттиа СВ «аз 55 із) ів Тує Тує дер Тут 01У Біу вія Меї деп Ба і 5 КК «и» Ба «а «аз: РЕТ «й штучна песлідеавність «ВХ «ВІВ аль втучнеаї ноєлідовнасті: кине течний пептад ЕЙ «ах «а їв дів бек З Ху чаі бек те тТве чаї Аза ї 5 їв «иа» «а «ях КТ «ах» втучна пюоснідсвність «жаЗ» олис штучнеї послідовноєті: синуетичний печтнд сок «нюх щі
Бас із Бе Тук вед Тув Те 1 5 і ВХ . «їз З «іх ЕТ «4335 втучна песлідовнієть «ЕМ «аз ЗАМ штучної послідовності: синтетичний зептняа СКОВ «ащах 83
Фів Ні Туб їТУб заєб ТВе Бра ТР Тве ї 5 че» 53 «2315 331 «аа РК «24339 Мих яввесиіие чада» 53 дев Ві бій фен бів бів Зек йіу Рг Бідюк ів Ущі зує Рко бек ЩА
З 5 їв 15
БеР ін бег мн те бух ТВ аб їВе З3у Ту бее ХМ Те бе два й а КЕ їук віз їкр дян їв; Ха Ар бій Ба БР БУ й зу без Б Тео
ЕхУ че «5
Мет бі тук 115 Заг Як 5ег бі Баг іа Бек Тук два Бра бе вед ща 5 ва (уз Зег йРе Хі хек їів ТР о йгЕ йхр ТБЕ бек бух йха бій бе бБе
З те 75 ще
Кен зів ісц аби ев узі Тр отче бін ах ТвВБ Аза Те Тув Тук Сух ща ВІ ща
Дів ТВ івши 135 Туг Туб йхю Ту БІУ біу йіз Має ди вв Тер бІХ кеЗео 5 в щів ОТу тТаР бе" Уві Твае уз) Заг хат 145 вес
«жійх ба ка «кій РТ та Ви: виБевідче «аа» ща ар іє Мі Меїб Тк бій бее Ніх уз Ре Моб беє ТВе хек уві іу
Її 5 за 15
Яр йаги Уві бек ї1е ТВ Суе рез взіз бек бів бЛу Уві бек тве тТВг о Ж Ба
Уві із та Те бів вів бує БР біу бія бег Ро рух Бер бею Щів а 45
Ту Бак дів чає ТшК дер тує Те о біу У3ї бро хр дев Ре їве щу за ще ще зак Бі зоб біу їне Ахр вве ТВР ОРНе ТР бів бе бає уві Бій З
БЕ та ї5 ща ін ав івц Аза УЗ Ту Туб Суб ів Мі Ту Тут бек ТР РКО бе
ВЕ ща 5
Тве Ве іУ БІ Бі Те Був Баш б3н бів вує їв 185 «з з «5і25 ВНТ «аа штучна послід єть «ЯЗ «ааЯз отмес вегучнеХ посіло: кувтетичний «аа: 85
Тут біз бен дп Бен Ба Те ках ве ха я ках» ВК «ліз» втучна песлідовність
«аа» пис втУчнОї послідовнестіь: смеуетнчний пенпти СОК «аа» Бе
Ту: дів Бен бе це ЩА тн» ії 5 «аі8з 57 «ам хай ВЕТ «3і1їз штучна послідевноєсть «Зав» «иаі» опис втучної послідовнесті: синтетичний пейтна СОК «а» бу
ТУ» ів бее ТНК Бе щі те ї 5 «аз БЕ «а хаї3» РЕ «а» штучна послідовні єть «ех «аЖ3» овВис штучнОї послідовнесті: сннтетичнев лпептей СОВ «ав» ва
ТУг аз Те Те іже бля ТВе і 5 «щі» во «ії 7 «й3з ВВ «її втучна вослідовність «а «аа» опис штечнОї послідовності: симтетвчней
Мептня СО «аа» в
Тук Аів бен Ту ец бій ТВе і 5
«аа» У «їх У «їз ВИТ еаї13» штучна песлцевність «Ява» «Жах спис штучної песєвідовності: синтетачний пептва СК «аз В
Тут дія йхп бів зво бів тТве «аа ії «із 7 «ій» ЕТ «2ї3з штучна вослідовність
КК
«8а3з опис штучнеї песлідовності: синтетичний пепткд СІК «щОз
Ту" віз 015 бе ів бів Тв ї Бе «ів 7 «ха» ВВ «813» штучка послідовність
ЕЕ
«аа» ци штучнеї леослідовнеості: синтетнений пентвд СОВ шах 8
Ту Діз бех бій ем бій Так ел» т ка «ЗБ» РЕ «Ії» атучна послідовністів «УВУ «ЖЖ» опис швтучнеї послідовності: симуатичний бепйтнд СК «Фах ях
ТУ Аїз в бе Бе Бій ТВ ї 5 «аа» а «гіїх В «ка» РЕТ «аї3х втучна веслідсеніств
ЕС
«Ма3» (пис штучної послідовності: синтетичний пептид СВ «хаВвах Уа пів йій ТУР Ту" Зве сту Ре ТВ ї 5 «еВ ув «ії» В «їз ЕТ «иїїх штучна песлідевність аж «иа» спнс штеУчнеї послідовності: синтетичний пейтид СО кава У5 ція бій Ту Ту бек біу Те Те 1 5 «ща ув «іх 8 «432 БЕТ ей штУучНИЕ пеослідеаність «жах «23» Опес штучної послідовності: синтетичний зептихй СО «ках У ща бій ук Тук бек бі Ще їВе ї 5 «хів Уу чаї В «3» РЕТ «йі3» штучна песлідеовність «и
«ВІЗ» омнє Втучнеї посліденностії синтетичних певтвд ОВ «аа 37 а: бій Ту Тук Заг бін Уаі Те «аа» ТВ «я В «Я» ВАТ «Я» штучна посліді єть «ЯМУ «ВИЗ езнс штучнОї лиєлідовності: синте єичний взептяд СЕ «вва» ХВ щів бів Ту Ту бат Бу ви Те «аз ха ха33 1 «155 ВЕТ «ЛВ» втуучна песліденніксть «З23з спе втжчнаї поєпідовності: синтетичний пелтий СМ каз 79
Мек реко Зеє Бі іє ТВгоієм Аза Зег оіев баб Те Бе Но і Туг і З іа їа вве дер Ра «що: 8 «а а «иіЗ» штучна песлілдевнієсть «а» ОБис Буча; Нелі дОВнНОВті: сентетичНиВ пежтяд СОЖ «ще» 88
Меб Бео ек бе ків ТВе фев дів Зеб іез бее Те Тк Бін ві Тже ї 5 Що 15
Ба дев пе каз ЩІ «Кіз Щ5 «іа: РТ «аіїї» штучна пеєлідевнікть «Ух «833» опис штучної неслідовності: сентетачний пептид СО «ваз Щщ
Меї Бо бе" ББе Т1і8 ТВР бео вія ЗБК во Зев ТМ ІЗ бів 0ЇУ Ту
Її 5 ї8 і
Бе дер рве «Я ва «хі 9 «аз Ба «Ж» штучка плідовнасть «ЗВ» «ааї» завис втучнех послідовності: сентетечний пере СОН. «авах
Мак РРО Бек бе ків Тнеоївм дів ев ів) бее ТВ УВІ бів Ще тТук ї ЕЗ їв 13 вне дк рМе «їз 83 «І» З «КАХз ВЕТ «ІЗ» штучна послідовність
ЕЕ
«аа» опис втуЧчНЕОЇ Зеєлідевностії синтетичний пептид СВ «аа» 53
Вес бго бек блє іє ТВг оце АЇя бег їв бек ТВ ев бів бі Ту ї 5 їв 15 вве дер вна «їй» 54 «ей ЗБ «25» ДНЕ «і83 Ми визсвіве сеаоб» ва насЕкесяис сссовеЕаВЕс шЕБВССТЕЕЄ стрЕсваває сСттстсввеЄ ВОТЕЕКеККЄ ще аксЕрдевесся ЕКсастімнсїЗ стеВакеакс ВЕТКаЕВаВК сскіреваєсти катссваеае за естссашЕЗа зсваастива ктКЕатИВис хасабависа всартсвівЕ светадеас за авсксаекїк Ссвававссв сасететате астсрвраса каїссааваа ссаВЕКеКТе «8 єтвсзнІсша атістктвес таствавннє зсарссесах вЕтастекиє явссстнаке зва тастажвак: зесденЕееис тОїдаасттс сЕревтсаи ваасстсВдХ сассвістсс Зще їв заз «ВНУ Ж
ДЕК» З «ЖЖ ДНЕ «13» Мих вихсміце «аву ях
ВАС свасскавкк сасвааккс зкдесснени КеМЕанн саме саве ще зїсассінсв здессаксса ВЕВІнтВаиХ зстастиквя сстдясаєса зсавзаасса ї3а дезсватскс сканасіеє касітєвестси всассстасс веїасаствк асо зва кастксаскЕ веарівнетс Тривеєвняї Стсвесєбссв ссатєвесви Бевеах я вааеагстЕЕ СеЖЕСК та стЕСсанснЄ БасїаЕвежа стссвтвЕає КессКеТвВа З
НЕКЯСеВаКК Ина Каа й 3 «Щі8У ЩЕ хи» ВВ «аа РЕК «ЖАЯУ Ноше зарівне
«ащВаз Б
Дій Зеб їВк оіїуз бі бге ее Уві бе бро ів Абе бго Зеб баг гу ї 5 ї8 ІЗ
Хее Те баг бів біу Те Аза бів їву б3у Сух із ЖІ фу Ар оТує
Ж Ме а вка ре бін Рго маї ТВе Уві хек Ткр ой яее Бу йіш ем їВк беє «а 5 іх Зі Мія їБе бе Бгто КБ уза ім ія бек бек бі бу Тук ек
Ба ще ща ви Бек Звк о Маі чі Тео) б его бе дегоівв і ТР обія тн 85 та Т5 88
Теж: Ефе Сух ба чаї Ап нів Куб Рго Зег дов ТВ іч Маї Ар був їв Уві бі: Бк ех бек Сує дов їує ТБг нів Твр оСує Бко й су їв за З3 та Аїв Рез Бі фец сем ОБУ бі бро заг ді Бе іїу ВО бра Бро
Чу Рг ух я5о Те гео мес (ів Зав ка Те о бгз бів Уві Те Сук
ЗВ не їі чаї УВІ У дер Уві ек Ні бів Абр вк Фі Уві був РНЄ бай Тре їд5 ке: 155 зе
Туг чаї бр бів Уві 5 Чаї Мі аби йіз суб Те Був ка АгЕ і 155 та ща
Щів бів тує ажа бек» Те Тут? ве УВІ Уві ек У8і ши ТК Уві ву ї88 за 138
МНЕБ бів Абр ТРо ен йха іх бух Біб Тук бух буз ух МаЇ Хег д5В їуз Аз Свв рез дів РКО їі 3. бує ТВ" х38 бе" ує віз бує Б3У біп бке ке бів Рео бій Уві Тугє Тк о фек ке реа бегв Абе а5В Це ке ЗВ «35 чав
Сен Тне бує йап бій мі бек во Те Суб сви УВІ бує Б1уУ Бе тує 45 ка 45
Ву Жак йхр Зі йів Уві біз ТРш бін Хек дя Я1у бів ро ів дей «Ба «ща и
Аяа Тук мух ЇВе Тне Без Бе УЗ) 185 зр бев джв бі Бек Бе вне 275 зна ях ве Тук зак ув іч Тбг чаї йшов ух бек Ак Тер бій бін 539 дев зва 395 за чаї ре Заг Сух бег уві Меї Ні5 біз біз іс Ні5 аж Ні Туг ТБК
Ів ЗІ5 Зав
Вій бух бек ізо Жер із бек пРО ЗУ ув «іш 87 «Зі» 338 «212» ВЕ «МБ3» штучна песлідевніякте «22Й» «Аа» (пес штучної послідевнеєтії синтетичней поіпентад злютого білка «ав» У
Зі Нж Ме бів Те Тве Біу Абп о їів бек дія Зм уз біх б4х бек ї 5 їі и їі ЇБе іже фія су Між ін За его жне їйе діз Бій ма3 ве оБая уві Ав Тв ін біп бі» зв бій зи Без Аза 36 Суб Аха вія Аза ща Б 45 ізи Бі Тев нів іє 5ег бо беб Ве кує йхв Ак Уві вів Бго щу за В ва
Фе ЗРК Бен О1у ей те» ев бій бе іви ТВе Уві АБ зв Те ОДУ ій Ту риє Суз Хфе ту Мія ТК оту бгРе др Бі Те ТУ" Тв ощіє
ЩЕ За 5 аги Ї1в РеБ їжу бів Узі ів Віз ве бен Уві віз біз Міз Біу дів іа 195 ще йгРЕ вне ща Кіє рго іез зез бік Афа Мі5 Мі Мі Ніє Мія Ні Ні 135 18 ї25 ніз ні бі бі ій 338 «35» 5 «ІЗ втеча ВеСЛІДеВНІкта ха хІй3» овнс штучне лоєлідненості: синтетичний пептид СИЯ ет Ту чі Меє нія «Яах 85 «яаїх 7 «аадз ВК «ДА» штучна пеосладавніств хо чина ОлНс штуУучнеї Зосєнідовності: єннтетячний пептид СОЕ «аво» Ве
Тук Хів аз бге Тк дхв йо Ві1К Аа бух Тує дов бів бує Ре фж5 і 5 18 15 щіу «кіз «їз 38 кіз ВЕ «5135 штучна послідовність «ее ха» опис вгучної послідовності: синтетичний пентна СОВА «аю» За
Зі Біу реа Ту бі кр оТУує Ре Ах У 1 5 18 «3» ЗЕ «ех її «аз ВК «Аї35 штучна песжілевнаєтіь «ле «Тіз опе втучної послідовності: сентетичний петтид СЕК «аз Зі аеЕ Ав зек бів Ні5 їв Тук бек Тук же бек ї 5 ії8 «ще «Щі 7 «ай БЕТ «М» штучна песліІдовність «ЖЖЯ» спис втучнеї послідевностії сентетнений зежтня СК дав АБ Був ТВ Бен йія вів ї 5 «і» 93 «ЦЗ
«кіха РЕ «ЗІЗ» штучна послідовність «ав «23 спис штучної песлідевностії: синтетичний ей ЗУ
Бін ні Ні Ре бір бек реа бец Тве ії КЗ «еїВ85 «жі її «кіз РЯТ «ЕЗХ Мих ви5еніче «ЯМ» 54
Зі: жен бів сен бів біз Бе» бі РРО бій без Узі ух га іш бек ії Ж їй їх 5ег чаї ух Ме? Заг сух іч Дів бег біу тує Те РБе бвг ев Ту
Ко 25 за уві ме Ніж їкБ Уві іУ5 щи зує Ро біу пів іх ізо іш Кв Це
БК За а
ЗУ ТуК Тіз йб5р го Ту йеа дер бі» й1з ух ТБ асп бій бує Ве вна 55 ща мує біу вух Аіва Твт їси ТвК бек й зує ев бек бер Те Аза ТУк й за їх ва
Веб біш беу беб бе» зо ТР оБев йі» бр баб йіз Узі Тугб Тув Сує
Б За Ек віз АгЕ Я1у біу Ре Ту» Біу ТР Ту" бе вер Уаі Тер 01у За 15 ке ії Кк
Тве тТнк У Тв УЗА Щек бек її5 «їх 5 «іх за
«ще» ВЕ «Я» Моз вохеніче «каша» я
Яко їі бій ще ТР бін Баг ре йіз За іа бе Аїа бек Уві Щі біз Те уві Те Кі Те сСує ги ія бек бів Ні Ї1ів Тув бек тує 2 5 КЗ іви Зав Тер оТук бів бів іже бів 53у буб5 бек бге (15 ів бец Уві їх ще 45
Тує йха Діва КУБ ЇйР іє Аза БІ БУ Ма) бро баг РЕ бе бек оБіу
Бак піу чек піуУ Те Фів РБе бек зе: бує ія йяай Зак ви БІВ РР ка та 75 ща ів Або Ре ЗУ ТНе о їре Ту Сух бів Ні ніх Бе б3у бог Вто їз ща 5
Тве вва щі вія Ф3Зу Те Те ів 3 би зу «і» 55 «8313 їв «аа втУучна послідовність «ЖАВ «ЯЖЗх опис штучне веслідовноєста: сини чний чептид СО «ВОде ЗЕ їж" Це Авр рео ТУР дей АРЕ ЗУ Аа бух Ту ди бів ух Ре ФУ ї а КУ 1і5 «Ж у «БЕХ Її «ій» Ви «213з втучна песлідовність «жах
«йИ3» овес штучнаї послідевностії снятетичний певтка ск «сад» З
ТУуе Хі дв Бо Тук дев о 3 Аа мух Тук дже Біб Суб Я1У РНе ї 5 їв 15 каїах ЗЕ «3115 15 «З1Я» РЕТ «іл» штучна послідовність «І» сша» опис штучні послідовності: сентетечниВ пев СЕ «аа» 98
Тує Те ажо бео Тук єв уз ЗКУ АЖ фе Туг йяп бі фу Ве Бу і З 18 і «а» 95 «БЕ» ЗЕ «ЖЕ» РЕТ «Я Втучна песлідевнйість хЯїВх хайаж «нс втучней послідовності: свнтетечний пептид СІВ еВ х КЕ
Туєс Тів Азв бго Туг й Ре бі дів уз Ту йхв біб їж Рі щіу ї х іа 15 «УЩіВ» Ж «15» 16 «15» ЕТ «3» ятучна послідовність «Я «иа» зас атучнеХ плюслідовнеєсєті: сентатьений пептид С «вах за
Тув Хі Аза ре Тук ла Бе» бі Аів Бу тує дози ім кує Бе іш ї 5 їв 15 «51: З «її іїБ
«й вит «8133 штучка послідовність «2505 «аа» пис штучної послідовності: севтетичний пептид СК «аа
Ту" дів дев вго Туб деп о Тув бі дів бух тТуг Аз біз бух Рве іх
Х є: ВЗ 35 «иів» МЕ «ії» з «4 Р «а» штечна вослідевнієть «ау єВИЗ» спе штучнаК пПослідовноктії: сиенужктичний газетна СК «43» 383
Ту Ше йхв Бко Тує вчи Уві іу Аза Куб Тук Ази Біб зфуя Бе Пі1у ії В. їй ї5 «з за «І 35 «553 ВКТ «І33 штучна чеоснідовність тЗаВх «Даях опис ВУчЯВЕ Вослідсвнестії сивтетичний пеглтнд СК каваз 383
Ту" КЮів яю о рго Ту йов бер аг Аа Бу тує доп Бі фуз Ре їух ї 5 ї6 і щу «УМ її «аі3з штучна посвідовність «ща «МИЗи КПНС шШтТУчнеаї песлідовноєті: євнттичнй патена
«аа НЕ.
Ту їі йзр о рге Те йчп бер йо віз вух Кук йба бів Був Ре ух ї й їй їх
Ту «Вій 185 «Бі 17 «23 штучна послідовність «ІВ «ФА3» запис штучної послідовності: снитетичкий вайтид СВ «ав» 15
Ту" Ко дбв Ро Тук ап Абр бій АзвВ губ ТуР хв бів рве Ре бух і 5 ї8 ії
У
«івх 185 «їх 17 «ах БЕ «133 штучна послідовність «аа «йа3 опиєЄ штучної послідонності: синтетичний мпезтид СВ хай» Б їУу Ще ав го ТУР Ай д5ев пі із бує Тує дев іч іш Ре ух ї 5 зе їх щіх «айви 18 «и3і5 37 кій РТ «ві3» штучна вослідеаність «ЗІЙх
«За» ойнє штТУЧчНОЇ песлідовностії: свететичний зайвих їх | Й
Тув щіе др ко ТР й Яр дез бів бує ТУк йви БИ Суб Бе уз ї В їз їз щу «ах 085 «ІІ 17 «Із «135 штучна послідовність «аа ее ЗИ БРучеву Меслідсевнаєсті: сте тичний пен СОВ «й» 188
Ту Щі б5р о вго ТУе йший Яру се Аза Буб Тугв аби біс Зуб Бве Бу ї 5 ів їх віх «Мах 85 сах Ії «ЖїяЗ ВТ «ЖАЯУ шіучна послідевність «ЯМ «Ж ОПИС БУУЧНОЇ люсвідовнесті: снететнчний чен д Сов «аа З
Туг ів бор Бр Тук зБб йо бек ойів уз Тук б5а бів бух Ре вух і 5 і 15 щу «щійвУ ТВ «її ТУ «іх РТ
ЛЯ» штучна Васжідевність
«ЕщО «Ха» опис втучнеої песлідсвностії сентетнений пептид СЕ «авах а
Тує бів Абр о бго Тує вах дев Тук ів бух Туг АБИ би із5 Ро кує ї Б їв ІЗ щу хаах Мі «ях У «их РЕТ «Аа» штучна песлідевність кеВ» «ай» ОПпИЄ втТУчнНеї послІдеВнеєтії сентетений пейтид СИХ «аваз шо
ТУ» їів вхо Бгто Ту» дхв дев Уа дів бух ТУгБ даи бін фе Ве ув ї 5 38 15 віх «їв» 35 «ча «хіх ЕТ кяіїх штучна щелідовнієсть ках «аІЯх Опис штучної песлідсвнесті: синтетичний пептна Ж «ВО 138 діз ді вуз Те сви йіа вію ї 5 «жав ІЗ «аіїїх У казав БЕР ках штучка пеожлідваність ках
«йа3: сп штучнеї послідовності: єннтетичний пептид «С «ее» 33
Те» два цує Ве ів Аза бі ї 5 «из: БЕ «2335 7 «13» РЕТ «13» втучна послідовність хлЯВЕ «аа елає пРРучнех пюєліенності: синтетичний печтид СОВ ха» ПА
Тер дів Ух Тв іо ді вів і 5 «аїах 115 «іх У «аз РЕ «ІЗ» штучна послідовність «Ех кееіїх смс втечнОої послідовнастії свнтетечни пептид СВ «аз 135 бев ід фе Те ів дів бів хазах І35 «8357 «835» РЯТ «533» втучна послідевність каоаз «аз ЗПС ШТУЧНОЇ ПОСАЛДОВНОСТі: синтетичний мента СОВ «кароз 15 ївк Аза вух Те бе вів й ї Б «а КК? «її» 7
«їх БЕ «-і3з втучна послідовність «аа «3233 опис втТуУчНОВ послідовності: синтетичний пептна СКК «аа» 117 їі віз бує ТР зви Ада вів ї Б: ей» 18 хаїй» ВТ «іі» штучна послідовність «аа» «аа» апнс втУучней послідовнаєті: синте кичнМВ дпевнтид СПЕ кайа» ща
Уві Аа СУ ТВг о іву Аів ін ї 5 каз» 119 ії ча» МЕТ кі» штеУчна ПОСЛІДОВНіСт»
ІВ У слІЗ» опис штучної пПеслідсвності: сеететичний пептид СЕ «ах 115 хи Ажа Ух ТНР' бе Аівз ів ї З кала» За «3» 7 ка РКТ кА» втУучна послідовності ках «а» знє штучна зеслідзанеаєтх: синтетичкий пежтня СА «88» 128 дез Їі8 уз ТВ іез бів бі ії Б
«ем З «її «аж» РЕК «813» втучна веслідовність
Бик «яЖЯз отпнс штучнеї пюеслідсвностії: сини тнчний пептва СО «а 353 | І аж бе во ТР оієн вів ВІ 1 КЗ «ам 3 «ах Я «іх РЕЖ «213» втучна вослідеовністів чаю «ЗЖя» елис швтучнеї песлідськокта: сматетеченм лентна Со ха 2
Аби їНг ря ТЯб Бец вія БЮ 3 5 «и 3 «АЖ «аз ВТ «13» штучна послідовність «аа» «ЗУ» спис штучної песлідовності: снвтетичний петжтна КВ «аа» 153
Вей Уві бух Тае ібен ія ів ї 5 «аій» 154 «Віїз 4313 «із ВЕТ «ії» втучна послідовність «ах «83» опис штучНОЇ послідовнеєті: сннтетичний пеліпентий азниюга гуманізеваномо ануштіаа
«ак зай
Зі Уві із івн узі біп чек Бі дів Бім Уві іує мує БРо Біх дід ї ру ї8 ї5
Заг уві їж5 Уві бек Суб бух бів бак біу Ту Тк Ре бек бер Тує
ЗВ 25 жа
Мі Меї Ніє їрр УЖ агЕ о бій Аза бе 1 бів веб без ів Тк; в ча ах
Зі Тук Бі йхр Рез ТуУук дз й Бі із іш Туг бек бій бує Рне іп бік аг уві Бе зво ТР йгЕ АБО ТР оЗег вів беє Те ояіа Ту з КЕ 85 ще
МЕЖ Бій іец бек бек іо вгЕ о бег біз аз їВе Аїа чаї тує Тук Суз
Що ща цк віз ака біу ві» га Тув ЗУ їго Тугв Реве бе Узі То щі віз і1у
КІ ща: 138
Тве Тве мі їв Уі баб Заг її «аз ЕХ «із 5 «32 БТ «а43 штучна песлідааність «ах «ай» пис штучна пеослідеввнекті: сувтетчний поліе на ланцюга гуменізовнинаго ветитіла «а» 355 шіш зай БА із уві бій Бек йіу Віа о маї фу уз Вго піу ДІ ї 5 18 ї5
Зак УВІ СЖж5 Уді 5ег суб бух ів бак БУ Тук ТВе Бе Баг бвЕ Тук
КЗ 35 За чаї Меї Ні їгб Уві Яку Зі» Абя Рг біу (38 ВкЕ ів 518 Тк ке
І 5 іт ТУ" Кіе бб5р рко Ту дб др Бі Аза ія ТУуб бек бів ух вне
БІ вк ще
Зі бі кеш Уві ТР офеі їне зер ойзр ія бек дів бек Те ДАЗВ тує
Вк та ТБ Ва
Век ім ів) бек обов фаз де баг Би бер ТР оаїв Уві Ту Тув сух
Аіа Яги ЗУ 1 рей Туг ВТ їкр Ту Бе бере Уві Тр Бім 3 і і5а 5 3
Те тав оуаф тв УВА бек ер «аа РТ «Хі» штучна послідовність «й «Ж» опис штучних послідовності: синтетичний лолінентийд ланцюга гуманізованого антитіла са» ЗІ щі чаї бів сво уві ія хек Зіу із Бім Уаі вуж зу Бео У дів
КЯ 5 їв 15
Бик Уві 1їуз Уві бер Суб Гу Афа Зее БІ1у Тук ТВЕ Бе бек Зав Буг
Чаї Меї ні5 їтю узі лев із йіж Бее Бі» із 53у зе й3в Тео Ті 5 За «5
Чіх Тук Кіз Ар кко туР ап азо Бі іш Куй тут від зій уж Ме ча що за сіп (у бкЕ Уві ТВгоїед Те й дв ТВе феєб Те обер Те уві тує я тв ТЗ ва
Мет бін ке бек бе ів аг Зее ів йо ївВе Аїш Уві Туб Тур Сух де а ща віз акЕ Ві Б3іу ве Ту ДУ Тер оТує бів хр Уущі Тео Ву бій щЩу
ЕВ 185 її
Тве їв ба) Те УВІ ее Зак 315 «і» ЦЗ «ах жтучна послідовність кадве «ВАЗІ» опис штучної послідовності: синтетични пеолібвнтий ланцюга гуманізованого антитіяз «ВО» 157 еїш уві Зіб би УЗА бій де" Бі Аїа 03 Уві Ку5 фу РР у Аа 1 З їв Ко бен Уві уз УЖІ бег Сух кує із бюг бішж Тук Те Бе бек баг Туг ко 5 ЕІ
Уаі век ніх Те; чаї гр іп Аза бро Бі віп біу іо біш тке Ті зі Ту Сів бо Бге Ту аа й бів Азія Кух ТжР йів АВ був Ве ща ях ВВ бів біу Аке ві Ве о фем Те о Зеб йхр вух Бе Те бе ТК Омаі Тук
Ме а їєю ек Бек ви ВР ЗМее біз вер о їве віз Узі Туб Яук Кух ща ск дів АРК ау 61У бго їТугб Б1У Тео тб Бе йбр Уві їв 03у ба бі»
Тве ТнНе УВА) Те ММЗ Хег бек що єиівх 158 «Ії З «із жтучна предідевніств «ІВ» «ЖИЯх опи штучної пеоєжішовностії євнтетичний полівентид леми гуманізованего знтятіна «ща» Я
Зв чаї бій цем Уві бій Беб біу із бі. МеаЗ) бує бе Бо бБіж Зак ї 5 їв їх
Зек уаї іух Уві зег Суз уз Афа Зег бі Тут Тве Ре Зак жав тує а 5 яЕк
Уві Ве Ні їев Уаі йРе БМ Аа Бе Бі бів Бію ізо біц Ткр Са ха а 45 пі Те Жів дев РКО Туб ди бо» Бі й бух ТУув дів Біл о бух Не а ща 5
Зп Біб АБ Уві Те огез тт Зак о Аве вує Зек о ївР ба» Тве о Аді тук 55 те т5 ва
Ме бів йдем бен баг їв йеРЕ бек бів й5р Те біз Уаї Ту Тув Сух
За БОБ
Віз Аве біб бі вро Ту щі Тер о Тує Бе Абе УЗ Тер щі бів Біт ща їв5 Ки їве їне узі Те У) бек ек 315 «жах «їз ма зал» ВЕ «815» штучна послідовність «ЯЯйХх
«вах сне штжчнех послішонності: синтетечний поліпегтня ланцюга гузанізеваного знтитійа «аа» 155 ім УВІ пів і Узі біп Зек біж АДВ ів Уві ух уз Ре ім Ав ба Уаї вуз Уві Яви Суз фу Аіз беє Зію Тук Те Бе бер лег ТУк я КЕз за
Узі меє ні тк; Уа де біз діз рРгРе Бір бів щі ви 530 тва ЩІ у Тує ї13і6 й вго туго йев дв біж ів фу Тук ліз бій ух РВЕ ща 55 ще чіп бі йеш зак ТНК бен Те бек обер бух ее бів Зако ТВе фа Тук а 7 да
Мет біс іш БОГ агш бе Аг беб бяв йо Те Уві і тує Тук сСух
В Бе як дів АРЕ щі БАК вгРО Тут Зі ТРЕ ТУ» РВЕ хр Уві ТО БІ» бів ОКУ зва ік ма
Тве тТаР ома3 Тег УВА дев обеє «Зі» штучна восліденність
АЛЯВх «аЖЯ» оп штучної послідовно ті: сину кичнияй
ТКА КЕ ЗЕНВЕЖНН Я КАН ЗЕЖЕЕуННКЕ хе ЗБЕ КЛІ «ж» 838
АвВ зів вів Мет те оаій Бер риб бек Зев йо) ей іа Зеє мі ВІК ї 5 їВ | І
Азов агро ві Те іє Тве Суб вв Аів зак бін Ні ее Тв ек Тук ща 5 за іжм бек Тра Тук бій бій вух РКО біж цуя Дів вРО Був і ма Ще їує вп Авіа цу ТВР Бевз дів Щі бі Уаі Рго ба" йге РНе бег іх
Ба За ІзЯ
Зак йіу За" Біж не АБО ле ТР Бе Те 836 Зеб Зег їеи бів Бе
Бе а 5 ЩО ін Або вве ів Те Туб Те Суб Бі Нія Мі БКе бі бек РКО Кей їх З о
Тег Бе Я1уУ бій біу ТВг Аг іяю Я тів зу
Кк ї185 «ії» 13 каві» 187 «БЕХ» РЕ «33» штучна послід кть «СИНУ садах бпеє влучне пелідовнаєстії сентетечние нні гнечетна ланеа гуманізованогіо антитіла «ана 15Х дев їі бі» Меї Те Бін бе Бго Зегобек ів беб віз бек М Бу
Ахр йгЕ таії ТР ОЕЗе Те сує дРЕ облв ев обБів Ні бів ТуБ баб Ту
КЗ 5 за цеа бе Тер тус Бій біз ж ве біу ух із РКО бжх ем бо хів
Туг кп Аїя фу ТБеоївз Азія бів біу Уві го баг йРЕ Вб Хак Б1у а й ща зве Бі зе Біу їй оба Бе тег о іец те 36 Зеє бер їв Вів ре ще Те 75 ще ін Ахр рве вій Те о Тує Туг Суб пів НА Ні Ре біу бек реа ви за с
ТР рве щі бів щі ТР де в оз Се ув 158 5 каїїх У «аЕда ЕТ «ИЇЯ» штучна послідовні стів «ЕЯВУ «айжх опис втучної послідовності: снететечний полмнитиа вана гузанізованого антитійх «зав» 135 дев Се бій мех ТїВе бів ев БеО бек Хек зіву ЗБ вів зе узі щу і 5 18 ї5 ев агк УВІ Те жів Те о Су5 Аве біз бек біб Ні Ті Туб беє Тук зе а» ТРИ Тут бів бів був РКО біт Куб Уві Рез ух Шеч аю ХАю
З за х
Тув айви дія їу5 ТВг ін Аів бів біу Бі Без Бек Аг РВе бег І а 55 ща
Зег Бі Зев біш те дов бе ТР бе ТВ бе ек бев бе; бій Ве ще за ть ще бів Ахе Уві віз Тйе Ту Тук Суб бій нія Ні Ре біу бе? фею їжу
Б За Зк
Твг вне аіу ів бі Те дек іев бів ЩЕ Ку з 5 «ів 333 «а: 387 «84ї» ВЕТ «315 штучна послідовність «их
«иа» спис шТУчНЕХ Вослідовнеостії сннтетичний поліпентив лзнцега гуманізованоко антитіла «аа» 133 ав Сів Бім Ме Тв» бів бе рез бек бек ши бек ДАЗВ бек М Му
Вазв Аг Уві ТВе Ті їве о Сух явЕ віз бег о біц Ні Кі Ту бек о Тук ши Зк тгО Ту ій бій Бу бе іх бух Уа рго бує без мес дж
Тут ази АБа бу Тк оіве віз біб бі Уі Бео ев Де Рів зав пів ща ц5 Ба
Бак піч дае Зі Те бій Ре Так оїеи ТК д3ів Кеєе бек о іво бій фе 85 та ТВ ще
Зі» вар Узі віз Тк Ту" ТУ» бух іп Мія Ні бе іч Зек о Бео Кеш що за 95 їВе бе бін бів пі Твк окр фей 05 Се вує «дійз КВ. «жах В «й33» штучна песлідавнЯсть
Ск ха» опис шуучзної послідевноста: єннтетичний мете (Ж «ядах 1
Туг Ще й Ре Туг АБа ар іу Ав ух ТУ вів Бій вуз Рне бів ї 5 Ів і5 щх «Ма» 535
«аЩї28 РТ «213 штучна послідеаність
В» «83» опис зтучнаї песлідовноєті: синтетичний пептид ОК «арах 135
Туг тів ахр го Тут й5а йхю» біу дів іже Тук чего бій іх РВЕ бій 3 5 за Ко «еВ: 13 «а» МВ «ЛВ» РЕТ «Ії» втучна послідовність
ЕВ
83» ов штучної песлідовнеєті: сивтетичний попіпентид песяфланнесті ун їз 135 па ві Ці ви ВеЄ 531) баг біт ргбо біб ів Узі бів вро зе бів 3 5 ве 15
Те із бае фе» Тве Сує Те УВА баб бі Бе рез фен тТве бев тує
В ЖЕ за
Твг Узі Мія Тго Уві Агшж Бал рез бео біу Ку Бі» їео 540 Тер о Тів а ак
Зіу АКа їі Тер Бе Зо» біу Бег Твге ой Буг вх Жем дів ем бує зе 55 ва
Зак йРЕ шу йща Іф8 й Би дя баб бек Бу Зае Бій Узі Бе ев ща я те за
Ух Ме йзи Зег із ів ТВ обіз аяр ПР ОАЇВ ів Тук Ре сСух ТР я а 5 їн за іх ТЕ діа Рве РВЕ аб Тує їв Біб щі су Узі меж чаї іа і85 Зх
Тве Укі Бе Щек «Во І «я» ак ка» ЕТ «ЖЕЗ» штучна песлідевність «ІЗ» опис втучної послідовності: синтетичний поліпентид леслідевнаєті У «Я» 139 шо ар Ще бів Веї Тне бій бЗеб бро Хе ів ів бее віз Бвб чаї у 1 5 їі8 15
Абе ага уві ТВ іво да Сух Хі АВ бен бів йба Їїів Тув фу ее а КЕ За
Мем АБа Тк Тув ЗІ бе) вух ія БУ А; дів БР їз ев бен Ще
За ча че
Туг йси із Аа бек ізн біз із 5іУ Ще Бго Зег АгБЕ РБе Бек щі
Бе ща ща ее щу ог б1у їйе дер бі АЗа сем Тег Хі6 баг біу би біп вро
ЕсЯ 76 У5 де і бе уві Жіз ївкЕ Ту Бе бух БІВ БІ Тв бак Бі Бу Тув ТЕ 8 за 5 ве піт 13 515 Те Був ев і бе бух з 195 «ІВ» ї38 «аю ЕВ 533 РТ «ЖАй» шкучзиа песаідевністм й «Жах ей спис штучнеї послідовнастії: сентетичний паліпелтий послідовності УН із узі бій ів Уві бів бек бі БіУ й5р фез Чаї ів Ро я1у Ага ї 5 18 15 5ег ів ух Їів бек Сеує УВІ дів бе ЗУ Ре ТВе Ре зве хр отує
Бе. ха ща
Ту» Меї дів Тк; Узі Яги їжи Аза Бте бів іїух 3у Ме бів їв Узі
КІ 45 дів баг ІЗ бЗев Тук З)в Зір беб га Тве Міз Ту бі Ажр о Зеє Ма
В 5 ва
Ага бі йкж Ре їі Іі баб дгв Абвр ода Без бух й ів Безу тує
Б а 5 ва ї2а Біб мес ва Заг інши З3У бек бів йо Те дія Те Тук на бує що Ко З5 кіз Аве нії Те щу Бюоїше дор їкр омеб У83 ТУ Тер Бі бла бІу їБг бен Маі Їфе уві Бек оЗек «дів» 153 «із зе «а1Хз БЕ «ЖА3з штучна послідавність «Оайх «вай» опис втучнеої леслідевності: скнтетичний поліпеттид послідовне стй вва Це узі мет кіз біля бет рго бує баг Веб Заг Ге ба" дія Щіх
Яр Аве таі ТНе Ме АБа сух ух АТ За" бів йхо маї бер деп Вхи а 25 зв
Ті віз То Туг іп бів був Бк пі Фів баг Вго гух ів фев Тв 35 яв 85
Бе тує АКа аг да Веш Тук Зае щіу У) Ре хр аг рве Те ЩІ
Біж іх Ту ЗіЖ Те дез Ве Те Без ТВ ЇКе фух бек чаї бій Аа
Бе КЕ. т 55. ісп йер аїз йів біб їб Те бух бій агРЕ Ії тує йха БЕ бе Те за 55 ве ср аб осіу Те ух їв В Ще ув іа ії «аа З «Фа» РКТ «2335 штучна послідовність «ех «лах опис штТучНеХ пеклідювнокта: см ТетиЯй пептни СОЯ «а «З2Іх НОДиеІКОВаННИ ЗАЛИ хай (3.. (3 «аа3» Тер, БНе, Тук, Щів, 81 Зб» Ще ча зла
Меї Рке бек Ре (36 ТР оц Аба 5 іє бек їТве Ха Б. Біу Ту ї З їв їх ве дв ве «ж» 1 «Ід? вит «135 штучна послідовність «ЖИ «вах пк штучної песлідовності: синтетичний певтва СОВ
«ОВ» «23» МОДНЕТКОВАННЯ ЗАЛЬШОЄ кала г. «й» Два, ек, їй, біш або5 дев «АЯИх «й» модиетковАний залиш «аа А.О А «Я» Бек, й, ек, ВК, тує або бів чаваз Мі
Ту» йіз Хва Ха сви бій ТР ї З «иа» 143 «їз В «дій» В «Із штучна послідовність ех «ий» Ос втучнех послідовності: семтетичний петтни СЮВ ках І «жі МОДНеТКОВАННЯ ЗАЛюЮЮК каз КУ. «аа» Те, РБе, Туг, бів, МВі абз Се «аз
Бій бів ТУ Тук бек бі жав Те ї 5 «їй» З «У 137 ее РА «З втучна послідевність «айІї» опи ВТУЧНОЇ послідовності: сектатичний коневенсуємюнй полінентна «й «ах кОолнековання ЗАЛИ «23Из КБЬ..(3 «33 й: абз» 5385
«их «з3із» МОДНОІТКОВАМиИЙ ЗАЛИЩОЄ «аа 5. «323» Бва або діа «23а» Й «а2із МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИВЮК «вааз са. «ваз» Уві збо се; кашах «З3ї» МОлдиеІКОовВаниЯ ЗАЛИШОК «3233 ї153..1153 «33» Бег зба ро
ХВ
«й2їз НОДИВІКОВАНИЙ ЗАЛИОК «ща» (353... «Вага: бів, Віз або Щ1уУ «аз «ай» МОДНеукОВАНИЙ ЗАЛИБЮК «з33з ї17..01 «Вії» бек ве Те
У
«ЖЕ» МОЛИФІКОВАННХ ЗАЛИЩОЄ «алох ї53..453 «даа» Як, ТЕ або дія «ще» «Ж2ї: Одне ТкОоВанняЯ Зак «ай (25.15 «23 ТП або Зак аа» Й «ліх МОЛИВІКОВАННЯ ЗАНИЩОК «зах їі зба Узі
ЕКС У
«иЇї» МОДНеІКОВаННИ ЗАВИШОК «аа» 38.3 кийа» ув збе бів «ай х «жі» МОдибІкКОоВаний ЗАЛюЮВОК «333» і333..13 «аа ре збо бне се «айї» МОЛОТ ХОВання ЗАЛИШ
«глаз (393.39 «а23з два аб ух
УВІ
«23їз ВОЛИВІКОВАНИЙ ЗАЛНОВ «АЯз їз, 48 «ааї» ув зба Ку «МАВ «ааї: ЗОЛИшІКОВаАННИ ЗАЛИШОК «йТІз їа3..1431 «23 Мет діжі еу «ей У «21 МОДИеІКОВАННЯ ЗАЛИШОК «Іза (44... 44 «яхяз Веб зба їв «Із «Ті» МОДНОІКОВАНИМ ЗАЛИШОК «й» (45.45) «лий» їіє він: Уві «и ВОДВЕКОВаАНИЙ ЗАЛИШОК «2325 (483..1481 «аз Зав абе Те «ІВ» «Ії НОЛИФТКОВаАНИЙ ЗАЛЕВОК «23» ів. Би «иа» їВе Вб ак аа «кайі» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИ «Ш2їз (683, БЕХ «зах КЕ збе Уві «ие «хі ВОДиВІКОНАнНЯйЙ ЗАЛИШЮК «аа СИВР,КТ «йа3» Не або б5ек «ай «елІїх МОДМОТКОВАНИЙ ЗАЛюЕЮЄ «22» 3.7 «лаз Лв або кує «аа «и8ї» ВОодиеукОовВАНИМ ЗАЛИШОК сваях УЗ. каша» іх Вб хе
Есая «й» мувеикОованиМй зАЛюОЄ «ав ВІ... «дя Тв бе Ба «ЯН «Зі» ВОДюФІКОВАНИМЙ ЗАЛИШОК «Ва» є33..і835 «223» йо збо віз «аЯВХ «7535 МОДНОЗКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «З0І» ВТ). «Фи3 ТТН бе ува «ДЖ «зі» Водне ХКОовВання ЗАЛИШОК «лай» іа. «аа» Бек або тв «лДх «дії МОДНеІКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «Здав (53. І «ЯЖ3з ТкБ. Ре, Ту, КЗ або уві «ДВ «хіх МОВНІ КОВАНИЙ ЗАЛИШОК «Ви СОМ, «ЯКІ МиЖ, Уві, із, ів, йРЕШ, й, г, піп, із, Щ3У, Ще
Ні, Су5, Бе, Зег, ТЕ, їгІ аа ТУк «лов хі» ВОДИВІКОВАНИЙ ЗАЯНШЮК хижі» ЗАКОНИ хай» маї, ТР або фе «ИЙ «ай 35, кайа» Баг, бік або тТук сах «аа МНОДИеХКОоВаннй зАлЛИОЄ «на» 183.32 «аа» віж або Баг «ааіх ВОДИеТКОВАННИ ЗАЛ «йВ25 (1231. 1323) «ках гео збе віх
«вра» З
Зі: Узі бів іви біб Хаа Звт БІ» Хаа іт ев Хве кує ге ЖХза Хаз ї 5 8 ІВ
Ха ів) беб їв ТвВе Суз Хза Уві Хва БіУ Хаз зем їі Хва бек Яр 3 5 За
ТУ їв а1у То Хаз Яеж Хза Ха Бга Бі Хв кав хХаа 5 їга хай я за с
АЖ Вве їі Те Тує бе БІ зак Тве бек Туб дез бРо бек ів ух 5 ща
Зек Ар Хаа Хва Зіє Хаз Хва Яр Те бек рух дев бів Різ Хев їеи ва а я ща
Хаз їеи Хва его Уві ТВг Ха Хав йо Тк дія Жав Ту» Хаа бух дів я ще 5
АВ МеЄ бо Бер Рнє Т15 ТИР і Аза бег ілна бек ТВе Ж Біб бу а я М
Тук Рів дар Ре їгр Біу Хва щіу ТВге Хав Хва ТБ Маі бе Заг їх МІВ 125 ха М «иї35 157 «аа ВИТ «ЙА3з штучна песлідеВнкств «ля «ЗиЗз спис штузнеї пОсліцовнОсті: єинтетений коневнсуєний пелінентий «а й «дя 53.8 «8338 вів або БІВ «ЖІ МОДМеТКОВАННИ ЗДЯВБОК «аа (ак. «ВІЗ» Веб айо їз
«ажхіз МОДиФуКОоВанННЯ ЗАЛИОК «жи» СІ. «З3їз Уві або бер
ЕК
«82їз МОДИФТКОВАННЯ ЗАЛюВОК «ий (35 «ЯЗ» ба а Ба «зав» «Ві» МОднФеікОованиМ зАЛеБОК «3» БІ або Щу ака «321» МодюиФуковАний ЗАЛИЩОК «ЗУ Са. ел їВе, Аіз або баг «Уа х «аа» МоднетюзвАННЯ ЗАННШОК «вай Бек зба Те «а моли ІкОований ЗАЗ «аз (алко «Жах іх, Зев аб ТУ «з3іх МОДНеТКОВАННЯ ЗаЛюЮК «аааз КЗ. ЗВ «Ай ер збе Віа «Жах» «еайіз МОЛНаТКОВАнНиИ ЗАЛ еайаз З, «833» Її вбо чаї «й3ї» МОДНО УКОВАНИЙ ЗАЛИШОК хаййа КЗ, З «ЯЗ Бій або вух «аз й «2» МОЛИеТКОВАННЯ ЗАЛИШОК сини (Яр. Ка «ваз» РРО зба ав «аа
«32Ях МОДИ КОВАНИЙ ЗАЛ «айах с.
СЯ «223 ЧіЖ або їУ5 «328» х22їх НОДМНЕЇКОВаАНКИ ЗАВЯЮК чада» (аві. 05 «335 ши або Має «аа8вУ Й «ййіз ВОДИФЕКОВаннИ ЗАВЩОК чай» (ай «аа а аа Мах «АаВх «Хі» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИЩОК «ХУ (Б7367) «йа3» чаї збо Щів ас В Модне конаний ЗАННВ «Вайда 031. .131 «83» Уві збо дев ех «а3іх МОДНО ТКЕВаНЯЙ ЗАЛИВОК «а» (ща. (83 «2а3х Зак в Ні «ЗВ» «ЗІ» МНОДИІКОВаАННЯ ЗАНИВОК хЖй» (НЯ... В8 «лай дія збо Або «Дав» Й са МОЛЮБІКОВАННИ ЗАДИЩОК «дл (338.8 за» Те, РНе, Туг, Щі6. Мі або йец ххх «Ії МОДМИОТКОВаНий ЗАЛНОЄ 230 К325)..0335Ї «аайх ек, ча, ів, дів.
Ягве.
АБИ ВЕ, 518, іш Зіж; їі, НІ, уж.
ВНе, ЖвРе, її, Тв ябеа Тук «а» «а8їУ МОдиеукОоВаний ЗАЙИШЩОК «алях (383..4323Х «ВЗ Заі.
Бе зба ем «888» 355 із ча) дій ів біз Ха бек бік ЖХве бі іви Хая іуз Бгто Хаа Ха
3 З її 15 їпг ісу баг ар їй о Сух Хаа Узі Хща біт Хаа бек Кі Жхза бог дв «5 за
Туб ТР; пі гр оХаа бгси Хаа Ха бро бі бух Хва Ха бін їгр о Хве
ККЗ ща я іУ Вбе Їіе КНТ їуєб хеб 1 баб Тне Бек Тег йха ко бак рев гув ща У Ба
Заг йгЕ Хай їй б ків Баг Хая хор Те бек их й бій Не его ев щ5 те те ва їв мен Ха Заг Уа ТР о йіа хХаз дер Ве Аза Уа Ту Тук Су діа ях ча 5 ака Меї Рго Зак БМе 110 ТиР ве; дів ек ем же ТР Хва 63 ві за 15 в
Туе рве аби Ре ТКр обі вік щі їбе аа Хаз ївг Уа бек вк 135 ща 5 «2318» 145 «иаїз ЗВ «аіа: ВИТ «435 втузна песиздюнність «аай» спис штучне посДедОВеесті: СВК УНчЙ консенсуєний позінентид «а «Елі» МОДНЗУКОВАННЯ ЗАЛИЩЕК «аааз гак ОК «І во або Заг «КЕ «2і: МОДНЕТКОВБАННЙ ЗАЛИ «30» (313.15 «їй3» із бе ЩТі6 «ах
«ййії» НОЛИФІКОВАННЯ ЗАЛИ «аа» 34). «2333 Ва а Те хаЗВх кайїх МОДИеТКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «аа» (аа). 0 «ЗАЗ» фе ві БР хаеВа хаті МОпиеткОоВаннИ ЗАЛЬЩОЄ «238» Бім або щує «Я» й «хлів ВОдижІКОВАаннЯ ЗАЛиИК «ваз (3). 0) «ах Зб дб ев
Уа: І 22531» МОДИОеТКОВАННЯ ЗАЛЮБОК «аа» га5)..СДЕ «3» дет, бек. ТР, ШЕУ абе йо «ла «23ї5 МОднеткОовВАННЙ ЗАЛИ «зах (ЗХ. «3235» Баг, вай, ТП, ТУ аба ців «КВ «аз» ВОД ТХОВАниИ ЗАЛИЩОК «2223 (55)..(531 «яУа» їі аб уві св гаї» МОДИОІКОВАННЯ ЗАЛИШОК «аааз ся.) «23 Щі во дек «Оз «их моде КОВАНИЙ ЗАЛИ «аайУ (УР. я «ав» Узі бе вне
СИ МОДИЖІКОВАННЯ ЗАЛЬШИ
«2233 (83..483) «ЖИ» іа бе ТУук «аж» І «Віз МОДНфІКОВаНИИ ЗАЯМОЄ.
аа Ра, Ре, Ту, ЩІв, Уа бе Бе «Во «жі» МОДИЗІКОВАМНИЙ ЗАЛИШОК «ааях (Б, 51 «223 ву вбе Це ха: «й2із НОйНФіІКОВАННЯ АЛЬО «аа» (ЗВ. 05) «353» дів абе уві «арваз 345 в5в їі: Бім Меб Те бія Зек Рез бег Хоа їБи бек діз Хег Узі бі ї 5 їй їх а5и агРе УЗЬ ТР Ха Хаз бух гр Дій бег бій ев тів Мі Був дей
Кг Як а їжи вів Тер оТує бій ій рух Хаз бі Хва Хва Бго бух Хав ів ТІВ аа 45
ТУ" Ту кіз ЖХва Хаз цез бій ТвВе бі Ха БРо бек Акв Ве бев Ху за 55 ща бБеатг Зіу Бек бію Те й5в БВе ТВБ оіем Бе Їде 5еб Хв без біб бго
РЕ ях ща ів бр хаа АХ ТВе Тв Хаа Сух бів біб бує Тук ба" БУ Хав ТВ ща а 5
Ве бі БУ БЕЖ ТР за Уві Бі Хаа ув же 185 «щих за «її» ЗБ «де РЯТ її штучна послідевність каш єоИЗ» опис втечнОї бзелідовності: синтетичний кОнеенсУусЄния повіпевнтид «аа
«айї5 НОДИОЇКОВАННЯ ЗАЛИ «аа (43,43 «2233 ів бо бе
ІІ ЯВх «й3ї» ВОДНетТКОВАННЯ ЗАЛНВОХ «ра» (ЯЗ. і48 «3» йав, ек, ТВ, Бім або й хааИ» «іх НОДНФТКОВАНИМ ЗАЙНВОК «ах (5. ЇЇ «23 Бек, Аяп, ТНК, Тук збе 15 «аа «лві» МНОДНеТКОВАНИМ ЗАЛ «ХУ (333..2331 «53» чаї ве Ме «зав» «фах МОДНФІКОВАНИЙ ЗАВ «Ваш св. 05 «кад» Тер, Рвае, Тк, Ків, Уаі 5 це «аі» нОдиеуТкОовВаниМ валиВОК «ва» І.О. кейа ій збо чаї «два «жи МОДИеЕКОВАННИ ЗАЛюЕШОЄ «ий (З. «ЯЖах Рае збе уві «аб» 146 кв Сів ля ес їве обі Бак бо бе" дев оз Зо йів Бае УЩі пі ї 5 їв і15
Ар АКЕ Уі Вб о Хіє ТНгб Суб бух із бек бів бек Те Ні г у5 дв ай «5 за ізо й18 Тер отує бів зів зх Бе бір бує Мав бке Кук Ха ізн Їі1в а р
Ттв Тук АЇя Хаз Жах їжи бів Те біу Хаа ко Бак дер Ра Бек Бу зер Ах хек Фі Твг ойхв оба Те огїезу Те Її6 беб беб ба бій Ва із дер Хаа йія ТВ Ту Тує Суз Пів Бі Ту Тук бек В1уУ жав ТЕ ях за к бе біт біж бів ТК вуз УВІ біз Се бух та з «Іще 1 «а 4 «ЖІ» КТ «ії» штучна вослідовність «ЖеНХ «дай ЗПС ШТУЧНОЇ пеосліаевності: сенеекичняВ конесежнеуєний пептид. чеВх Й «ІК» МОДИБЕКОВАННМ ЗАЛМВК «ЯЗ» Ар, агРЕ, 15, Мж5, Ре, Бек, Ту він» ві «ліз МОДНІ КОВАНИЙ ЗалюеОє «Дай» (83,8)
ФХЕЗ МІУ, КИ, дей, 5, Щі, Бе, МУ, ЕЕ, Тук бе уві
ІВ» хи» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИ «ЛЯ» ав, ій вбх; Бек «їх МОЛИВТКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «ах (3. «ЗИ» біш аб Вів «аВИх «Ії» МОЛИБУКОВАННМ ЗАЛИ «аа ІБК. .335 «й» Куб Вб З «ах ЗУ
Тує Ще й5і ре Тує Аби ва Хва віз у Ту Хаа Хай і55 Ре Хав ї 5 | іа 35 щу
«ах 148 «2 7 «ий: БЕТ «035 штучна песлідевність «БІВ» «2335 спис штучної послідовності: сиктетичний консвнеуєний пет «авг І «ай» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «ее3» йхМ, віз, Уаі, ТТГ, Бер, ТК. ГЕ, Вії, Щі, їів збе Уві «Ай» «жі» МОЛИжІКОВАННИ ЗАЛИШОК «ТІ 18 «иа» вії, йея, їі, їжи, ТЕ зб Уві кава» їй хай жав СУ Те фев Віз БМ ї х «із 385 «2115 З «ії» КВТ «і3з штучна послідовність
БК ск «853» опис вштучної песнідовнеєті: сянтетичний конесвнеуєний спеліпантид «ий» «иті» МОДНеЕКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «ТІ3 3.5 «жа» біп або Уві «МВ» «хі» МОДМФІКОВАНИЙ ЗАЛЕВОК «яааз ТЯ. «ий3» го або вів «ЕІах «й3і» МОДНеТКОВАНИИЯ ЗалЛиВОх «аая
«аз» чаї зба Кеи «23ї» НОДНФІКОВАНИЙ ЗАЛИ єВІа» ча) збо ух
Уа «ЗХїх МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИЩОЄ «Вау (361... 151 «яі3» щег зб Аїа «ЖАВ х Й «ЛА» МОЛИБТКОВАННИ ЗАМОК «ааш 3.05 «ЯЗ» МЕТ зба Уа «ЖІВх хайї» вОоднезкований зано «зах ЗИ, . 383 хай» Ух або ЯКЕ «зах «а3і» ВОДИВТКОВАНИЙ ЗАЛИВОК «лаЗ» са). .(48Е «83» Бфж5 зба АЇЗ «23» МОЛЬІКОВАНИВ ЗАЛИВОК «аа» ва... «виіз бі або АгЕ «ав» «221» МОДНеуКОВАНИЙ ЗАЛИШОК «йиЯх С. КБ «ЗІЗ» дер, йгЕ, БЕН. їж5, Ве, бег, Ту або Уді «ЛЯ «й» МОДИФІХОВАНИН ЗАЛИШЮК «ЖІ» ї5У3.. 57) «ваз Зі, Ве, вп. бів, Зіш, Кен. уз, Заг, Тук зб Уві «Я» «Яд ВОДНеХКОВАНИЙ ЗаЛююК иа В. КБ «3» хв, ВІВ або Щек «38» «йеї» МОДИФІКОВАНИМ ЗАЛИБОХ «аа (83... «Ва3з ів абз вів
«Аа» «223» МОодиетКОоВаний зали «333» 1ує зба щи «250» «ааї» Моди КуМАНИМ ЗАЛИЩОК «22 (БУ. «З» РЕ Вб Ух «328» «224» ВОДИеХКОВАННЙ ЗАЛИШОК «із й або Уві «228» І саааз (УМ. .653І «аа» Берг або Яке «3385 «ажіз МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИ «ази» іт). . 0 «2333 Цує бе пк «аа» хижі» Одне ТхОовАННИЯ ЗАЛИВОЄ «За» г, 0 «233 бек, їі, ів зба Те «ах еЖаі» МОДИФІКОВАНИХ ЗАЛИШОК «мах се..1 «ЯЖ3» Аза з уві «ав» Й «ааі» МОДИеІКОВАННИ ЗАЛІК «оз (85)... (85 зай» дев а Бак «Аа» каі» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛЕЮК «3333 (7. «ааЯаУ ТВгР о збо АКа сах «жі» молюетукованнЯ залищох «222» ї881..ї8Ох «Яйй» дер ве іш ков х «ії» ВОдиеткОовВаний зАлишюК
«жа» (811,58) «ХХІ» Зак зба ТВе ра «тах МОЛИБІХОВАНЯМ ЗАЛИШОК «ий» (3. .554 «ЖеЗУ віз збо Узі
ТЯЙх «зді» МОодеаткОваний зАЛюишюК «аа» СНМІ..1 «ах» Тер, йіз, йбр, з1іу, Не, Біу, Кі, цу, йяй, йій, АБЕ, ЗБК,
УВІ вбБа ук «а «лі» МаАДЕБІКОВАНИЙ ЗАЛИВОК сяйя» СБ, Я «Я» дів або іп кашах 4
Оін зі бій веб Хав бій Заг Біу Хва біз Хаз Хаа бує Бе біу Хай ї 5 їв 15
Бег Уаі йуз Хва бог Су бує біз зар обі Ту Тк бве бек бек Тук а КЗ Ко.
Узі Меї Ні тр Узі Хаз пік Хва Рео а1іу біпб Ха бе Б Те Ще біу Ту Ще Або БгРО ТУ» ба Ха хва йій ме Тує Ха Ха ух Ре ча щк ща
Хва бі хХаа жав її ес їй Хаз йди Хаз бег ха Зюе їв ожЖаа Тук а Кс ще
Меж Ві (ер бе» Же іс Ха ба» Хза яр Ха Хв УВІ Ту Тук Су 5 за 5 аїв бе Бім 0іу Рго Те» ШВУ Ха Тує Бе бер Уві То ЗУ Ха 19 зе ха 130
Тве те ВІ Те Уві ек о Зеє 5 самих ЩО «Т3х 135 «ай РТ «833» штучна послідовність «ІЗ» опис штучної нослідевнесті: ятати конеансусний пеліветтид
Секс «ВА» ЗОДИЯІКОВАНИ ЗАЛИШОК «35 (16Б..383 «ВІЗ» вій або Зак «Іі ВОЙНФІКОВАНКИ ЗМК чув (а. «ла3з агш аба ЩІЖ «ЖІ «лаз» і5а..155) «3» а5т, ВРЕ, Ми, БУ, РЕе, Заг, Ту збою Уді «лящ «Х3і3з НОДИШІКОВАННИЙ ЗАЛИ «ВІ гах..153) «255 іх, ЯР, зи, БЖ, Бі, їе8, вух. ЗК, Туг аа Узі хай І «із РЮДИОІКОВАНИЙ ЗАЛИ «ай» (8... «323» вх, Вій а Заг «КВ «ОХ» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛІВ «вза» ТІ 83 «аа 53: або ців кайщь «щі МОДИФІКОВАНИЙ ЗаЛИВОК «383» їу5 зба цій «ад «ад МОДИВІКОВаН ЗАЛИВЮХ
ЗВИК
«83» ВР або баг «ЕКВЕ І «їі МОДЯВІКОВАННЯ залеж
«Ех С.Я «да3» ТВе або ж «ааФ» «іх моднеткований звлиок «вад» (783. ч«авах дів, ТР зба тів «ВаВх хаіз МОДИБЕКОНАНИВ ЗАЛУ «За 783.78) кде3» АРЕ зби УВІ хааВ» «283» МОДИЕККОВаНИМЙ ЗАНИВЮЖ «лож» (вх. В «283» бен або Аге
Ех «353» МОДНЕ КОВАНИЙ ЗАЛИБОК «ай» (Ба..895 «вах Вів бо Зір «Ох й «2» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАМ «2223 (92), «аа» дів ща Уві «ас І «їз НОВЕ КОВАНИЙ ЗАЛЬШЕЖ ка» (ана у,..ї384ї «аа Тер, із, й5р, щіМм. Бе, Щіж, (12. БЖ. йяп, Баг,
Тке, ча) збо Тут «авах 5
ЗЕв Уві бій ів) мі біз барв ді дів бів УЖ рух ву ке біу Хав бек Маї бух Уві бек Суб Ку йів хек йіу Кум Тв» РЕ бек бе Ту чаї мет ніх тер Уві АРЕ Біб йія кго ХУ Вій Хай мае ів Тер її8
У тує Пі йБр о РІє Туб лава Хаа хаз із фує Тук Жаз Каз ух рве ха 5 ке
Хаа 51 Акш Уві їВе іо ТР оХБа АБО Кза бак Ха бек Тве Хва Тук а за 75 ща
Жеб піц Бво бе Хза ів бе бек Ха а5в Те Хва уві Ту Тук Су із аг ші Бі БгРО Тує Біу Ха Тук Рбе Бе Уві Те Бі біт бБіх яз 35 138
Ти» Тве Уві) тТВе Узі бек бек 115
Ж З
«із За? «Із ЕТ «23» штучна лесліденість «ех «Ії» спис штучнеї песлідевнеєті: синтетичний конеенсуєний лепіпентий «ав» Й «253 МОДМеТКОВАНИМИ ЗАЛИШОК «аж (9... «важ» аїа або дек аКВУ «З: ВОДИФУКОВАНИЙ ЗАВНШОХ «даже (ат. «Ййах Бін зба аа «здо «2И3» МОДИФІКОВАНИЙ Залиш «Майк СІВ. . 38 «аа3» Те збе ге «ах «а» МОДНЕІКОВАННИ ЗАЛИШОК «Ай» (43, «вах ій ва Бро «ой» «ЕЕ» МОДИФІКОВаННе ЗАльшеК «ака 93... «йаз» ак, йіз збо чаї «ИЩВх «аа» МОДИВІКОВАННЯ ЗАЛЯК
«Зах іа. 4 «аа пін вбБо вує хх «Ой» Са. «КІЗ» Уві зба Щїїе ка «323» МОДИОЇКОВАНИЙ зали кавах (ЗІ... 458І «й» йжм, вів, Туб, Тгр, Зег, ТВе, Її або Уді ках «йІї» МОДНетКОВаний зали «Зах (ЗБ. «Жая» аіз» ев, Ще, йБи, ТР абе чі «аа «ії» МОДИОІКОоВаНиЙ ЗаЛЯК аа (иа... УВІ «ВЗ» щі збе Або их жах ВОНРІКОМАННЯ ЗАЛ «353 (753..4231 «З0Я» Заг вба ТЕ «а «Фі» МОдНеІКОВАННИ ЗАЛИШ «ад га 38 «ВИХ» уз збе ТВЕ «жа «аз» га..їТВї «й» яв збо Зак зах «Іі МОЗНШТКОВАНВЯ ЗАЛИ «332» (х33..С83 «оз» ее збо Уві «ЙІх «ях (В, .Ї18 «323» ів ве щі «ЗЕ ВОДУІКОВаний ЗА «аж» іа. кзазх із або ів
«а» «вІїіх МОДНеІКОВАНИЙ ЗаЛюВОК «ай» (4а3. ГЦ) чаах «ілі» МОДНетКОВаннЯ ЗАЛІК «232» 35). (а) «23» їеи абе ї16 «ай: 153 ев Гі ій Ме їТВе ів Зев рРео Ха ЗБК на Зее із бек ча щіу
К З зі 15
Ява Ха УзЕ Те (ів Тк сСух дек Аза бее 38 Ні її Туб Зав Те мем хек КРО тем бій бі вує Май фі уз Хаз го Хза ер; Бей Хав 38 ще як
Тук Хаз Ха гух Тг о вБви Аза 53) БАЛУ УЧ Бко бек йРе Ре лав Фу а ще а бев ЗУ зе Оу З Хза ре Хща іє: хаа Ї) Хев бек Кей ів бе
БУ Та ТБ Ва ів ар Хаз хХав ТК бує Ту» СКує ів Ні Ні5 Ба фу бег Рго ів що за 95
Те Ба бі» хХаз БА г Хаз ім Бін Хв вух 2143 ЗУ «їз РКХ «ад штучна поспьдевніст» «ХО 23» МНС штучноХ ПпОосСліджевньеті: синтетичний ковсенсуєсний позеіплентий
Ева І «аа» МОДМеТКОВАННИ ЗАДНЄ
«да 33.3 ка іш або чаї си ттхіз МОДИ КОВАНИМЙ ЗАЛЬВЕЖ «ВШ (Ба. С
ЯІ» ван, Ав, їЖг, ТВ, Бек, ТВ, Щів зба Уві «де «хі МОДНЕ ТКОВАННЙ ЗАЛЬВЮК «аа 531.63 «вай Аїз, Ан. ЩЇіе, Баш, ТИР абе Уві «ад «іі МОДНеТКОВАННЯ ЗаЛЯЖ «аа СНІ. В) «ВІЗх дев або Бій «аКВХ «ІІ» МОДИФІКОВАНИЙ ЗАЛИШОК й (ВЕ. (БІ «ІЗ» ве збе Уві «аа 155 дер бів 5ій МебЄ ТВе бій бек Ро бег бек фещ бом дів ее Уві біх х 5 8 ї5 ахи ав Уві ТВге її Ве Су ге діа Бек ЗБ; Міє Фів ТУуб бек Тук а кВ Б іви ек Тгр о тує ів ів Куб бго бБіу Буб Ха БР іжх ів зви Ще 35 Кс й
ТуУує Хаа Ха зу ТК іє діз бін біу щі Бе бев АкЕ РВЕ бее у а ве 5 хае Біу Маг бін Те Хза Ре ївбг оіївеб їВе її бе бок го пів Без за т Ва «і АБв Хва Дія ТНК Тук Тук Ку БІВ ніх Ніж Бе йіу Зак б ів що Б
Так вне Біу ів БІК Те ака ія Біб 018 вуз їв ї55 кщійв» 353 «Бі» 18 «ах РТ «ЖАЯ» штучна послідсвність «ех «ай» опис ВтТУучнНОЇ веслідовнастії сентетичней пептид СИХ ав» кіз МОодиеткований залишок «аа ій В «йй3» Тер, йіз, й5в. бін, Рнж, йіж. Біб, бух, й3л. яп,
Же, Заг, ІВР, МІ бо ТуР «аа» з бік іх вро Ту" 61 Ха Тжг Бе Бр Уві 1 5 зв «іх 15 «і «232» вит «813» штучна послідовність «ай» «аа3» бннс штучнеї послідовності: єннтетичний пептид СВ нюх 5 щу бі Рг Туб Щі» 3 Тук На Абе чаї 3 5 38 «вій» 15 «ХА» їв «а. ЕТ «Ії» штучна послідовна
Ех «иЖЗ» сис втТичНеї песлідовноєті: симтетичний пептид С «авах 155 іч Зі РО Тут б3у аю тує вве йхр чаї «жах 155 «А» «аа» КТ
«ії» щтечна посідав сті «ей» «Я» зпис вТучнеї послідовностії сиктатичний пентид СОЙ «аз 5 бі ау рус Тує йіу біз Тут ме дхр Узі ї 5 ї8 «іа» 52 «іїз за каїйх АТ «ії» штучна неслідовність «ай» «вия» опа: ШТУЧНОЇ послідовності: сентетиченяя пезтид СК «Важ ХУ іх їх бро Те Бі» Бе ТуУує бе або маї 3 5 КЕ «и» КЕ «ії: 18 сєжіе БЕТ «813» штучна вослідовність ие «аЗ» опис штучної поснідевнесті: синтетичний дпептптнй СЕ «ас» 55
Ву Іф РКО Туе Бі ЗУ тує ве дер чаї 3 З а «ій» ї55 «і» їв «аз БЕТ «3» втучна послідовність «ТЕ хай» сне ШТУЧНОЇ Мослідовності: синтетичний пептид СІК «ах 155 51У бік бео Ту щі Щ31є тує рве йо Ві ї Е: 38
«иа за
«зії: а
«832 ВНТ
«353» штучна песлідевноєть
«ях
«ааЯх озис штУучнаї послідовності: сянтетичний щвантид С
«адаз 158
«у іх рго Тув Бі» фуб5 їув ББе й5р чаї ї 5 ї8 аа 15
«иіїз 18
«Віз ЕТ
«ЗАЗ» штучна послідани ть
«858»
«аа3з овис штечної песлідовнесті: синтетичний вечтна СО
«аз 18 щі Лу Бей Ту Б3іу дай тТук Ре йер Уві і 5 ва
«ах БУ
«жіїз Її
«аа РЕТГ
«3» штучна послідовність
«жав хаа3з опис штучної пеєлідсвноєсті: синтетичний везтия С
«із ЗБЕ щу у ве Ту біу бій тує МНЕ Ав чаї ї в за
«ах 1653
«З1їз і8
«Зах ВАТ
«ій» щуучна поса іденієсть
«КУ
«ТЯ опис шТУЧчНЕЇ МОослЛідевнОсті: сину тееня СИХ
«аваз 163 пік щі Ро Тут іу ге Ту РНе або УВІ ії 5 ї6 «ка 1 «ії» Та «тай РЕТ «ЛУ» штучна послідовнисть «аа» сЯйя» опис штучнаї послідовності: синтетичний вет СО «аа 188 пі БЩіЖ го Ту б1у бек Тук Ре йо а)
Ж 5 їй «аз 155 «Із їй «и ВЕТ «135 штучна послідевність кеВ «Я» оннє штучнеї послідовнастії: сентетнчний пежттна СОЯ
Бі Бір ва Ту Бу Те Тек Ббе дар чаї 1 З за «ах 56 «М зе «гиіиз РВЕ «ІЗ» штучна песлідевність «ЯН «ай3з опзнс штучної песлідевності: синтетичний печтна СЕ «Ва» 155
Фіу бі рео Тук бі» узі Ту бе хв У ї 5 КК. «їз У «із 8 «еВ» РИЕТ «АК» шручна меспідевнесть
«АВ стар лис штУчнаї песлідевнеєста: сввтетаенй пептид СО «ах щу сі» біу ро Ту" біт Туб ТУ вве а5в Уві ї 5 їа

Claims (28)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Моноклональне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ТІСІТ дорослої людини, при цьому антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить варіабельну область важкого ланцюга і варіабельну область легкого ланцюга, де варіабельна область важкого ланцюга містить СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 88, СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 89, СОМКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 90, і варіабельна область легкого ланцюга містить СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91, СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 92, і СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
2. Моноклональне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ТІСІТ дорослої людини, при цьому антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить варіабельну область важкого ланцюга і варіабельну область легкого ланцюга, де варіабельна область важкого ланцюга містить СОКІ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 88, СОК2 варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 134, і СОКЗ варіабельної області важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 90, і де варіабельна область легкого ланцюга містить СОКІ1 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 91, СОК2 варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з «ЕО ІЮ МО: 92, і СОКЗ варіабельної області легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 93.
З. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 1, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить а) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: Зо 94, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 95; р) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 132; с) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 127, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 130; а) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 133; е) варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність із ФЕО ІЮ МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність із ФЕО ІЮ МО: 132, де будь-які варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях антитіла; І) варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність із ФЕО ІЮО МО: 127, і варіабельну область легкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність із ФЕО ІЮ МО: 130, де будь-які варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях антитіла; або 9) варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність із ФЕО І МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність із ФЕО ІЮ МО: 133, де будь-які варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях антитіла.
4. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 3, що являє собою антитіло, де варіабельна область важкого ланцюга антитіла містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 128 і варіабельна область легкого ланцюга антитіла містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 132.
5. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 3, що являє собою антитіло, де варіабельна область важкого ланцюга антитіла містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 128 і варіабельна область легкого ланцюга антитіла містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІО МО: 133.
6. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 3, що являє собою антитіло, де варіабельна область важкого ланцюга антитіла містить амінокислотну послідовність з ЗЕО ІЮ МО: 127 і варіабельна область легкого ланцюга антитіла містить амінокислотну послідовність з ЗЕО І МО: 130.
7. Моноклональне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 3, що являє собою моноклональне антитіло, що містить варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність з ФЕО ІЮ МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність з 5ЕО ІЮ МО: 132, де будь-які варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях антитіла.
8. Моноклональне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 3, що являє собою моноклональне антитіло, що містить варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність з ФЕО ІЮ МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що має щонайменше 97 95 ідентичність з 5ЕО ІЮО МО: 133, де будь-які варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях антитіла.
9. Моноклональне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 3, що являє собою моноклональне антитіло, що містить варіабельну область важкого ланцюга, яка має щонайменше 97 95 ідентичність з ЗЕО ІЮ МО: 127, і варіабельну область легкого ланцюга, яка має щонайменше 97 95 ідентичність з 5ЕО ІЮ МО: 130, де будь-які варіанти послідовності зустрічаються в каркасних областях антитіла.
10. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за будь-яким з пп. 1-7, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з ТІСІТ людини зі значенням Ко від приблизно 1х109 М до приблизно 1х1072 М, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу.
11. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за будь-яким з пп. 1-3 або 10, що являє собою антитіло. Зо
12. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за будь-яким з пп. 1-11, що являє собою антитіло, що містить два важких ланцюги і два легких ланцюги.
13. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за будь-яким з пп. 1-12, що являє собою антитіло, де антитіло містить константний домен ді людини і константний домен каппа людини.
14. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за будь-яким з пп. 1-12, що являє собою антитіло, де антитіло містить константний домен Ід054 людини і константний домен каппа людини.
15. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 14, де константний домен Ідс1 людини містить ЗЕО ІЮ МО: 86 і константний домен каппа людини містить ЗЕО ІЮО МО: 56.
16. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за п. 14, де константний домен Ідс4 людини містить ЗЕО ІЮ МО: 55 і константний домен каппа людини містить ЗЕО ІЮО МО: 56.
17. Моноклональне антитіло, яке зв'язується з ТІСІТ дорослої людини, що містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕСО ІО МО: 128, і варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО:
132.
18. Моноклональне антитіло, що містить два важких ланцюги і два легких ланцюги, де важкі ланцюги містять (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 128, та (ії) константний домен Ідс1 людини, що містить 5ЕО ІЮ МО: 86, і де легкі ланцюги містять (ї) варіабельну область легкого ланцюга, що містить БО амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 132, та (її) константний домен каппа людини, що містить БЕО ІЮ МО: 56.
19. Моноклональне антитіло, що містить два важких ланцюги і два легких ланцюги, де важкі ланцюги містять (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮ МО: 128, та (ії) константний домен Ідеї людини, що містить 5ЕО ІЮ МО: 55, і де легкі ланцюги містять (ї) варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 132, та (ії) константний домен каппа людини, що містить ФЕО ІЮО МО: 56.
20. Виділене антитіло, що містить два важких ланцюги імуноглобулінів і два легких ланцюги імуноглобулінів, де важкий ланцюг імуноглобуліну містить (ї) варіабельну область важкого 60 ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 128, та (ії) константний домен
І3С91 людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 86, і де легкий ланцюг імуноглобуліну містить (Її) варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 132, та (ії) константний домен каппа людини, що містить 5ЕО ІЮ МО: 56.
21. Виділене антитіло, що містить два важких ланцюги імуноглобулінів і два легких ланцюги імуноглобулінів, де важкий ланцюг імуноглобуліну містить () варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 128, та (ії) константний домен І3С91 людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 86, і де легкий ланцюг імуноглобуліну містить (Її) варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 133, та (ії) константний домен каппа людини, що містить 5ЕО ІЮ МО: 56.
22. Виділене антитіло, що містить два важких ланцюги імуноглобулінів і два легких ланцюги імуноглобулінів, де важкий ланцюг імуноглобуліну містить (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з БЕО ІЮ МО: 127, та (ії) константний домен І3С91 людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 86, і де легкий ланцюг імуноглобуліну містить (Її) варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮО МО: 130, та (ії) константний домен каппа людини, що містить 5ЕО ІЮ МО: 56.
23. Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за пп. 1-16, що являє собою антитіло, де антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент продуковані в клітині яєчника китайського хом'яка (СНО).
24. Моноклональне антитіло за будь-яким з пп. 17-19, де моноклональне антитіло продуковане в клітині яєчника китайського хом'яка (СНО).
25. Виділене антитіло за будь-яким з пп. 20-22, де виділене антитіло продуковане в клітині яєчника китайського хом'яка (СНО).
26. Виділена нуклеїнова кислота, яка кодує варіабельну область важкого ланцюга або варіабельну область легкого ланцюга будь-якого з антитіл або їхніх антигензв'язувальних фрагментів за пп. 1-16, моноклональних антитіл за пп. 17-19 або виділених антитіл за пп. 20-22.
27. Експресуючий вектор, що містить виділену нуклеїнову кислоту, яка кодує варіабельну область важкого ланцюга або варіабельну область легкого ланцюга будь-якого з антитіл або їхніх антигензв'язувальних фрагментів за пп. 1-16, моноклональних антитіл за пп. 17-19 або виділених антитіл за пп. 20-22. Зо 28. Клітина-хазяїн, що не належить людині і містить експресуючий вектор за п. 27.
29. Клітина-хазяїн за п.
28, яка являє собою клітину Р/спіа або клітину яєчника китайського хом'яка (СНО).
30. Композиція, яка містить антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за будь-яким з пп. 1-16, моноклональне антитіло за пп. 17-19 або виділене антитіло за пп. 20-22 і фармацевтично прийнятний носій або розріджувач.
31. Композиція за п. 30, яка додатково містить антитіло проти РО1.
32. Композиція за п. 31, де антитіло проти РОЇ являє собою пембролізумаб або його антигензв'язувальний фрагмент або ніволумаб або його антигензв'язувальний фрагмент.
33. Композиція за п. 32, де антитіло проти РО1 являє собою пембролізумаб.
34. Композиція за п. 30, яка додатково містить антитіло проти РОЇ 1.
35. Композиція, яка містить (а) моноклональне антитіло, що містить два важких ланцюги і два легких ланцюги, де важкі ланцюги містять (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 128, та (ії) константний домен (ДС1 людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 86, і де легкі ланцюги містять (і) варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 132, та (ії) константний домен каппа людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 56, і (р) пембролізумаб.
36. Композиція, яка містить (а) моноклональне антитіло, що містить два важких ланцюги і два легких ланцюги, де важкі ланцюги містять (ї) варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з 5ЕО ІЮ МО: 128, та (ії) константний домен Ідсб4 людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 55, і де легкі ланцюги містять (і) варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність з ФЕО ІЮО МО: 132, та (ії) константний домен каппа людини, що містить ЗЕО ІЮ МО: 56, і (р) пембролізумаб.
37. Спосіб одержання антитіла або антигензв'язувального фрагмента, який включає: а) культивування клітини-хазяїна, що містить полінуклеотид, який кодує варіабельну область важкого ланцюга та варіабельну область легкого ланцюга будь-якого з антитіл або антигензв'язувальних фрагментів за пп. 1-16, в умовах, сприятливих для експресії полінуклеотиду; і р) необов'язково, виділення антитіла або антигензв'язувального фрагмента з клітини-хазяїна та/або середовища для культивування.
38. Застосування антитіла або його антигензв'язувального фрагмента за пп. 1-16, моноклонального антитіла за пп. 17-19, виділеного антитіла за пп. 20-22, 25 або композицій за пп. 30-36 для виготовлення лікарського засобу для лікування раку. Зв'яжкааноя з клетнмами ТК зводу - СК
0. ет ЕЇ п. х 04. Й Я - 03 ше о нн г ТтТтТтлтчтчтнвниние рими; 1010400 1000 10000 00000 Каунцемнанія хм ВУ ма Зв'язування з хлимнова КН закаке рю СКК 10 що дет Ко дв Й щ Й 5 о м Гл З - бач 7 Ж о І 10 чо но 0000 ною Конвенурая тАВінтичи Зв жзуваннви з вихівнвми калренама СНО-КІ па ве щі Я. В 023 в х йо Й х ч і щі й й ч в - 1 10 059 юмдо 10000 100000 Конвентевція па бен
Фк.
Зв'язування з кан нима МОЙ знан СТО Кі а Щі м - ВН ТЕ Ї с Й ак КОВІ ВВ КУТ НХ в ї84 реа ІС мирі 8 | я і ав й Б Я Що в В ефнтотфунняяф ЕХ нина син жи св Оки ЗДАНІ ЩО НО ню ро ХХ ІКенвезве ранкє вх пері Зв'язування З кіна ми ЯКОЇ махаквувеа я СЕ КІ ще -е- ФВНЯ -е І я Вовк я ТОНЕ Яд а ЇЗСЙ ема ВО али / З 0855 В ; ! й ВО О19 ЖЕ ОО ТОД КюЮ Кениснцния АБ Сну Зв'язування з вихіннвми ків ави КВК шо овес Бо Е п і шою хю З Торф Жаннев ев вав
Я. й
Влсктнання за язуваних НСТУ НКе а ТИ Е людних о СНСЬКІ ! -- 1 г ві й ї ув й ча хр а 06 ; їй | х ро вл. Кі | з діння і мо мо 000 об ююю Коннентванів АВ НиТМл оман ув зв влдеванох ВСЯ з холах С люде: я СО ща ш- й а -- - й ОАЕ мені з хо СЛНХ е ее 05. З ! роя
- й. пи се сс: ни жі я ! юЮ о Ковцентрацне п ст
Фф.
бложулніх зп кування СЯ НКе з БК людинв СНОЗКІ щі -е В і ; з а Контроль для ГххвнуУ пір дою Кежфит» Є аз х Г ме ж я пінні он піна ііі палінні: і то мюо бу НКЮ ною ВЧИВ чНІя АВІА; Зв'язування з НУК ТСНО пя- авт , - МОВ і 4 яко під а ВЕ пі я Є ва й в Л Х ! м ва ши МОм ою Ко Концерн а вьАВІ НІ) Зр'язуваниУ ЕВ макакичрюу я КК в «а НОВ : ри -в- ОС -е 58 й неканк: й Фо р рЕлни ї . Й
8. Ка ах я Е ВЕСТ ванн пОЖЛЯНОВІ 0 її КО Концентрат мАфо пахбна)
Чук. Тнтрувнення засюнекіх вурякт: ЗВСЕЮЄ локувнаюк я деку ЕВЛЯУЕ Кце оМоНКВЕ кас дк ле ї ен Що: мету ї є: - МО ж те ЩО Ж А і Ж «КЕ ї Я я ї ; се і Ж 03 Х ї- хо у; -й й ке - Я ч як - шиї на Ж що рин ! рон і; Траса ур тяту й іі рих трек щік он Ов: Бі ОО ОМ КИ о В 1 Хевмизктунівкв ЗК ятЕКу звІмани МА КК Е гати Кв вомкрних яБИЛДУ:В вух Я змагляяЕ КЗ я МЮ: Я НЕ ї см є щи и нам (реж ютер ут рттрттть ОК НИ ВОЮ Ю Жазнентнаців ки кВ МКМ мкл фр. 5
Жнгрувмим жук ов нжи ЯК дюазмни й фак ВКиВх ЗЕИЗІ і сю НкхВі КВТ ЗК 3 я - ем ї жест ща Ра: срею. ї К Я Х Їй «8 ла шк й" -е СЯ чий Я звана осв вима в мамо масо мамо маса мас ВО Я БЕ І о ЕН Кияк ря ВНТ СЯКОаЯ те 14 с з ЗХ для ложу - пое жи ; ях : т Ес ; т й як КЗ : фронннннннК БІ ОМ о і 1 не Бозинузуту хі авта ВЖИ ба т-во ші - пе с ВОЮ б сне ЖЮ ОО зеясю Н-Я8 г х Що Я жк ти ВОК ко Іва ; пі се НСБ вки 5 ЩО чу сек ВК В (Бусуниі ЖЕ о АН ВН СН зи дже . З яв еноколаюн НМ дененик В 5 КД ще ЗКЯХ уки - й Шви хе ВВ Из и г т СЯ поатнмі Я Ж г У г. х : й ь; вІнМУХ ЕК З сох м дви з яРАТЕУХ ОЛЕКЖА ОВ ШУ ДАК ЗО Р ВН о Ви Ма ЙЖ ш і В ше ВЧ Ух "Ж лк желя ся Др хх БО шин ПІ я дрснну ТЯ ШИН нав Й щ--а ї 5. х Ки М Ви- ЕБОЯ дв дтечнести знеевовабнняй БОМ еброврття ох Вк пені Ж ЩЕ: сту В ВІ НЕ те ча ей ВС рем ши подо а а ння поле в Н пов ЕЕ КУ Іри ОЕМ От ДИС (Енн 5 До ер х в : зе ваним ЖИ З дей са З М заижха и люба жи ФК РК я ВН «Я ВВ БВ,
Фі.
16. не ВВП інопрольтясі че а й сао (ніщо ще - МО. «в а о) 0 ропот дію я ре и п УНН (тд) "ж і я Ши и ї ня Нконтрюль явозв ВОВЯ БЕЖ ув нні 5 Ше; хесібюсс Ківви Тк ЖНВ Ж ЩЕ афер дгенжк Же ЕК - «ке. жосмемких ЖОВ ее тебя Тіз ТОЮ ЯХ ЩЕ сяк Тік У ше в Ява З 16 КЗ Ме вив інн «Фе кА жов - збо. я сеефеевовтровь тів УНО - | ! --жт Па) з ВМО. Щи. Я ОБ пе СИСЄ)
З у. де Ма с - КВК ін: ЗА 5 що Ж--ЯННСТ то ПОС) Е що сх Ма и :. ВИ Її 100о: І бенидй ж - й І рі ів ета імкгіжяі!
Фі. КОМ пуху ГО ХК КУ Ннаневтевісн сення РУ Жунутрнаня» Касккичме ш зав Кай МО ї з т 18 С: ОК їй Я кос КБ: ВИНИ с ДЕЙ родрооодсексукан осердя І Я БУТ й а я мін дрім: аа дікуванама ДВК після КК аз
ЗЕ. А чт. Ажентікь рота МЕНЕ КН фудевевяю преекя РЕМІ Х і св Ж ї і - ВМ Ся - ВЖК ; Її, зано В аю ЛИ зно ШИ, ї В й х ще ДЕ цх ке Й нач ДЕ зей їде В пноснно зв шк оакачан Я 5 МО дев ююсужефхсья сепллудкнкя в'я Ві 5 ОПрЯ ве Зоб пізна зісеваних ФБМНЯ хевоча: деку ванна:
Як. З г. Я
UAA201702456A 2014-08-19 2015-08-17 Антитіло проти tigit UA122395C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462038912P 2014-08-19 2014-08-19
US201562126733P 2015-03-02 2015-03-02
PCT/US2015/045447 WO2016028656A1 (en) 2014-08-19 2015-08-17 Anti-tigit antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA122395C2 true UA122395C2 (uk) 2020-11-10

Family

ID=53938463

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201702456A UA122395C2 (uk) 2014-08-19 2015-08-17 Антитіло проти tigit

Country Status (31)

Country Link
US (4) US20160355589A1 (uk)
EP (1) EP3183267A1 (uk)
JP (3) JP6920194B2 (uk)
KR (2) KR102050082B1 (uk)
CN (2) CN107148430B (uk)
AP (1) AP2017009765A0 (uk)
AU (3) AU2015305754B2 (uk)
BR (1) BR112017003108A8 (uk)
CA (1) CA2957722C (uk)
CL (2) CL2017000310A1 (uk)
CO (1) CO2017001561A2 (uk)
CR (1) CR20170060A (uk)
DO (1) DOP2017000046A (uk)
EA (1) EA036311B1 (uk)
GE (1) GEP20217331B (uk)
GT (1) GT201700033A (uk)
IL (1) IL250583B (uk)
JO (2) JO3664B1 (uk)
MA (1) MA40475A (uk)
MD (1) MD4733C1 (uk)
MX (2) MX2017002229A (uk)
MY (2) MY184288A (uk)
NI (1) NI201700019A (uk)
PE (1) PE20170289A1 (uk)
PH (1) PH12017500296B1 (uk)
SG (1) SG11201701161QA (uk)
TN (1) TN2017000024A1 (uk)
TW (2) TWI724997B (uk)
UA (1) UA122395C2 (uk)
WO (1) WO2016028656A1 (uk)
ZA (1) ZA201700955B (uk)

Families Citing this family (153)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101586617B1 (ko) 2007-06-18 2016-01-20 머크 샤프 앤 도메 비.브이. 사람 프로그램된 사멸 수용체 ｐｄ-1에 대한 항체
SG10201402815VA (en) 2008-04-09 2014-09-26 Genentech Inc Novel compositions and methods for the treatment of immune related diseases
BR112014007035B1 (pt) 2011-09-23 2021-05-04 Oncomed Pharmaceuticals, Inc anticorpos biespecíficos que se ligam a vegf/dll4, composição farmacêutica e célula procariótica, fúngica ou de levedura que compreende os mesmos, moléculas de polinucleotídeo, vetor, usos terapêuticos e método para a produção de um anticorpo
LT3081576T (lt) 2013-12-12 2019-10-25 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pd-1 antikūnas, antigeną surišantis jo fragmentas ir jų medicininis pritaikomumas
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
PL3148579T3 (pl) 2014-05-28 2021-07-19 Agenus Inc. Przeciwciała anty-gitr i sposoby ich zastosowania
PE20170289A1 (es) * 2014-08-19 2017-04-05 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos anti tigit
AU2015369683C1 (en) 2014-12-23 2024-06-20 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to TIGIT
DK3259597T3 (da) 2015-02-19 2022-05-09 Compugen Ltd Pvrig-polypeptider og fremgangsmåder til behandling
PT3295951T (pt) 2015-02-19 2020-07-21 Compugen Ltd Anticorpos anti-pvrig e métodos de utilização
US10259882B2 (en) 2015-05-07 2019-04-16 Agenus Inc. Anti-OX40 antibodies
TWI715587B (zh) 2015-05-28 2021-01-11 美商安可美德藥物股份有限公司 Ｔｉｇｉｔ結合劑和彼之用途
AU2016307845B2 (en) 2015-08-14 2020-10-15 Merck Sharp & Dohme Llc Anti-TIGIT antibodies
MX2018002315A (es) 2015-09-01 2018-04-11 Agenus Inc Anticuerpos anti muerte programada 1 (pd 1) y metodos de uso de los mismos.
EP3344658B1 (en) 2015-09-02 2022-05-11 Yissum Research Development Company of The Hebrew University of Jerusalem Ltd. Antibodies specific to human t-cell immunoglobulin and itim domain (tigit)
AU2016326609B2 (en) 2015-09-23 2023-03-09 Mereo Biopharma 5, Inc. Methods and compositions for treatment of cancer
HUE058755T2 (hu) 2015-10-01 2022-09-28 Potenza Therapeutics Inc Anti-tigit antigénkötõ proteinek és felhasználásuk módszerei
MX2018006245A (es) 2015-11-18 2018-08-01 Merck Sharp & Dohme Proteinas de union a pd1 y/o lag3.
US11447557B2 (en) 2015-12-02 2022-09-20 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
MY191649A (en) * 2016-03-04 2022-07-05 Jn Biosciences Llc Antibodies to tigit
EP3432927A4 (en) 2016-03-24 2019-11-20 Gensun Biopharma Inc. TRIPLE-SPECIFIC INHIBITORS FOR CANCER TREATMENT
JP7267012B2 (ja) 2016-05-27 2023-05-01 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｔｉｍ－３抗体及びその使用方法
KR102379464B1 (ko) 2016-06-20 2022-03-29 키맵 리미티드 항-pd-l1 항체
US9567399B1 (en) 2016-06-20 2017-02-14 Kymab Limited Antibodies and immunocytokines
TWI760352B (zh) 2016-08-09 2022-04-11 英商克馬伯有限公司 抗ｉｃｏｓ抗體
SI3347379T1 (sl) 2016-08-17 2020-04-30 Compugen Ltd. ANTI-TIGIT protitelesa, ANTI-PVRIG protitelesa in njihove kombinacije
WO2018041120A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 Beijing Biocytogen Co., Ltd Genetically modified non-human animal with human or chimeric tigit
CN107815467B (zh) 2016-08-31 2021-03-16 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司 人源化基因改造动物模型的制备方法及应用
MX2019003683A (es) 2016-10-11 2019-08-22 Agenus Inc Anticuerpos anti gen 3 de activación linfocítica (lag 3 ) y métodos para usarlos.
EP3534947A1 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
WO2018085698A1 (en) 2016-11-04 2018-05-11 Aximmune, Inc. Beta-alethine, immune modulators, and uses thereof
CA3041340A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Agenus Inc. Anti-ox40 antibodies, anti-gitr antibodies, and methods of use thereof
EP3548071A4 (en) * 2016-11-30 2020-07-15 OncoMed Pharmaceuticals, Inc. METHOD FOR TREATING CANCER WITH TIGIT-BINDING ACTIVE SUBSTANCES
US10759855B2 (en) 2016-12-02 2020-09-01 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Antigen binding molecules to TIGIT
JP7106538B2 (ja) 2016-12-07 2022-07-26 アジェナス インコーポレイテッド 抗体およびその使用方法
US10232053B2 (en) 2016-12-30 2019-03-19 Trieza Therapeutics, Inc. Immunomodulatory oncolytic adenoviral vectors, and methods of production and use thereof for treatment of cancer
EP3565839A4 (en) * 2017-01-05 2021-04-21 Gensun Biopharma Inc. CHECKPOINT REGULATOR ANTAGONISTS
AU2018226646A1 (en) * 2017-03-03 2019-09-19 Rinat Neuroscience Corp. Anti-GITR antibodies and methods of use thereof
JOP20190203A1 (ar) * 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
WO2018187191A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Jounce Therapeutics, Inc Compositions and methods for the treatment of cancer
WO2018195552A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Sillajen, Inc. Oncolytic vaccinia virus and checkpoint inhibitor combination therapy
WO2018200430A1 (en) 2017-04-26 2018-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of antibody production that minimize disulfide bond reduction
SI3618863T1 (sl) 2017-05-01 2023-12-29 Agenus Inc. Protitelesa proti tigitu in načini uporabe njih
JOP20190260A1 (ar) 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
SG11201909941QA (en) * 2017-05-02 2019-11-28 Merck Sharp & Dohme Stable formulations of anti-tigit antibodies alone and in combination with programmed death receptor 1 (pd-1) antibodies and methods of use thereof
CN110913906A (zh) 2017-05-02 2020-03-24 默沙东公司 抗lag3抗体的制剂和抗lag3抗体与抗pd-1抗体的共制剂
SG10202111336RA (en) 2017-06-01 2021-11-29 Compugen Ltd Triple combination antibody therapies
WO2018229163A1 (en) 2017-06-14 2018-12-20 King's College London Methods of activating v delta 2 negative gamma delta t cells
GB201709808D0 (en) 2017-06-20 2017-08-02 Kymab Ltd Antibodies
BE1025333B1 (fr) * 2017-07-27 2019-01-23 Iteos Therapeutics S.A. Anticorps anti-tigit
WO2019023504A1 (en) 2017-07-27 2019-01-31 Iteos Therapeutics Sa ANTI-TIGIT ANTIBODIES
BR112020001499A2 (pt) 2017-07-27 2020-09-08 Iteos Therapeutics Sa anticorpos anti-tigit
JP7317272B2 (ja) * 2017-09-29 2023-07-31 ジエンス ヘンルイ メデイシンカンパニー リミテッド Ｔｉｇｉｔ抗体、その抗原結合断片及びその医療用途 本願は、２０１９年９月２９日に出願された出願番号ｃｎ２０１７１０９０８５６５．３に基づいたものであり、その優先権を主張する。その開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
US11629189B2 (en) 2017-12-19 2023-04-18 Kymab Limited Bispecific antibody for ICOS and PD-L1
EP3732202A4 (en) * 2017-12-28 2022-06-15 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. SINGLE DOMAIN ANTIBODIES AND VARIANTS THEREOF AGAINST TIGIT
TW202400654A (zh) * 2017-12-30 2024-01-01 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 抗tigit抗體及其作為治療和診斷的用途
EP3740508A4 (en) * 2018-01-15 2022-03-23 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. ANTIBODIES AND ASSOCIATED VARIANTS DIRECTED AGAINST TIGIT
EP3746119A4 (en) * 2018-02-01 2021-11-10 Merck Sharp & Dohme Corp. METHODS FOR THE TREATMENT OF CANCER OR AN INFECTION USING A COMBINATION OF AN ANTI-PD -1 ANTIBODY, AN ANTI-LAG3 ANTIBODY AND AN ANTI-TIGIT ANTIBODY
WO2019154415A1 (en) * 2018-02-06 2019-08-15 I-Mab Antibodies to t cell immunoreceptor with ig and itim domains (tigit) and uses thereof
MX2020008795A (es) 2018-02-28 2020-10-08 Yuhan Corp Anti cuerpos anti tigit y usos de los mismos.
JP2021519298A (ja) 2018-03-27 2021-08-10 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 紫外線シグナルを使用した力価のリアルタイムモニタリング
US20190300610A1 (en) * 2018-03-29 2019-10-03 Hummingbird Bioscience Pte. Ltd. Vista antigen-binding molecules
AR114789A1 (es) * 2018-04-18 2020-10-14 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hla-g y uso de los mismos
AU2019264965A1 (en) 2018-05-09 2020-11-19 Nectin Therapeutics Ltd. Antibodies specific to human Nectin4
JP2021525087A (ja) 2018-06-01 2021-09-24 コンピュジェン リミテッド 抗ｐｖｒｉｇ／抗ｔｉｇｉｔ二重特異性抗体および使用方法
KR20210028222A (ko) 2018-06-29 2021-03-11 젠선 바이오파마, 인코포레이티드 항종양 면역 체크포인트 조절 길항제
CN112135626B (zh) * 2018-07-25 2023-05-23 信达生物制药(苏州)有限公司 抗tigit抗体及其用途
KR20210057053A (ko) 2018-08-23 2021-05-20 씨젠 인크. 항-tigit 항체
KR20210069639A (ko) 2018-08-30 2021-06-11 에이치씨더블유 바이올로직스, 인크. 단일-사슬 키메라 폴리펩타이드 및 이의 용도
AU2019328290A1 (en) 2018-08-30 2021-02-25 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
CN113015744A (zh) 2018-08-30 2021-06-22 Hcw生物科技公司 单链嵌合多肽和多链嵌合多肽以及其用途
CN110511912B (zh) * 2018-08-30 2024-03-22 浙江煦顼技术有限公司 免疫细胞的功能调节
WO2020096915A1 (en) * 2018-11-05 2020-05-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Dosing regimen of anti-tigit antibody for treatment of cancer
WO2020127377A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Ose Immunotherapeutics Bifunctional anti-pd-1/il-7 molecule
CN113993894A (zh) * 2019-01-07 2022-01-28 Iteos比利时公司 抗tigit抗体
WO2020165374A1 (en) 2019-02-14 2020-08-20 Ose Immunotherapeutics Bifunctional molecule comprising il-15ra
US20220135619A1 (en) 2019-02-24 2022-05-05 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating a protein
WO2020185739A1 (en) 2019-03-11 2020-09-17 Jounce Therapeutics, Inc. Anti-icos antibodies for the treatment of cancer
CN111744013B (zh) * 2019-03-29 2022-07-26 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗tigit抗体联合pd-1抑制剂治疗疾病的方法和药物组合
CN111744007B (zh) * 2019-03-29 2023-05-12 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种抗tigit抗体药物组合物及其用途
JP2022532930A (ja) 2019-05-23 2022-07-20 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞培養培地をモニターする方法
TWI760751B (zh) * 2019-05-29 2022-04-11 美商美國禮來大藥廠 Tigit及pd-1/tigit-結合分子
MX2021013850A (es) * 2019-06-13 2022-01-07 Green Cross Corp Anticuerpo contra tigit y uso del mismo.
CA3143035A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
EP3990116A1 (en) 2019-06-28 2022-05-04 Gensun Biopharma Inc. ANTITUMOR ANTAGONIST CONSISTING OF A MUTATED TGFß1 - RII EXTRACELLULAR DOMAIN AND AN IMMUNOGLOBULIN SCAFFOLD
EP4001308A4 (en) * 2019-07-15 2023-08-23 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. ANTI-TIGIT ANTIBODIES AND THEIR APPLICATION
JP2022546922A (ja) * 2019-07-30 2022-11-10 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー 抗ｐｄ－１／ｌａｇ３／ｔｉｇｉｔ三重特異性抗体および抗ｐｄ－１／ｌａｇ３二重特異性抗体
CN112625130B (zh) * 2019-09-24 2023-08-29 财团法人工业技术研究院 抗-tigit抗体及使用之方法
EP4034562A2 (en) * 2019-09-27 2022-08-03 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Antigen binding proteins
US20220340660A1 (en) * 2019-10-01 2022-10-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Biomarkers for anti-tigit antibody treatment
CN114728171A (zh) 2019-11-05 2022-07-08 默克专利有限公司 抗tigit抗体及其应用
US20220378909A1 (en) 2019-11-05 2022-12-01 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of Treating Cancer with Anti-PD-1 Antibodies
WO2021093849A1 (en) * 2019-11-14 2021-05-20 Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. A novel antibody against tigit
WO2021113831A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Compugen Ltd. Anti-pvrig and anti-tigit antibodies for enhanced nk-cell based tumor killing
AU2020406083A1 (en) 2019-12-17 2022-06-16 Ose Immunotherapeutics Bifunctional molecules comprising an IL-7 variant
JP2023509516A (ja) 2020-01-07 2023-03-08 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム がん治療のための改良型ヒトメチルチオアデノシン／アデノシン枯渇酵素変種
CA3169231A1 (en) 2020-02-11 2021-08-19 HCW Biologics, Inc. Methods of treating age-related and inflammatory diseases
IL295083A (en) 2020-02-11 2022-09-01 Hcw Biologics Inc Methods for activating regulatory t cells
CA3169625A1 (en) 2020-02-11 2021-08-19 HCW Biologics, Inc. Chromatography resin and uses thereof
EP4119162A4 (en) 2020-03-13 2023-08-23 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. PVRIG-BINDING PROTEIN AND ITS MEDICAL USES
WO2021216468A1 (en) * 2020-04-19 2021-10-28 Askgene Pharma Inc. Human tigit specific single domain antibodies and methods of use
CN113563470B (zh) * 2020-04-29 2023-02-10 广州昂科免疫生物技术有限公司 结合tigit抗原的抗体及其制备方法与应用
AU2021262794A1 (en) 2020-04-29 2022-11-24 HCW Biologics, Inc. Anti-CD26 proteins and uses thereof
CA3176497A1 (en) 2020-05-07 2021-11-11 Fatima MECHTA-GRIGORIOU Antxr1 as a biomarker of immunosuppressive fibroblast populations and its use for predicting response to immunotherapy
CN114507284B (zh) * 2020-05-09 2023-05-26 华博生物医药技术（上海）有限公司 抗tigit的抗体、其制备方法和应用
WO2021247003A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
JP2023527869A (ja) 2020-06-01 2023-06-30 エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド 加齢関連障害の治療法
US12024545B2 (en) 2020-06-01 2024-07-02 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
PE20231078A1 (es) 2020-06-02 2023-07-17 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos anti-tigit
WO2021257124A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Genentech, Inc. Treatment with anti-tigit antibodies and pd-1 axis binding antagonists
WO2021258337A1 (en) * 2020-06-24 2021-12-30 Huahui Health Ltd. Human monoclonal antibodies against tigit for immune related diseases
CN111718415B (zh) * 2020-07-03 2021-02-23 上海洛启生物医药技术有限公司 一种抗tigit纳米抗体及其应用
TW202216778A (zh) 2020-07-15 2022-05-01 美商安進公司 Ｔｉｇｉｔ及ｃｄ１１２ｒ阻斷
WO2022044010A1 (en) 2020-08-26 2022-03-03 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Anti-t-cell immunoglobulin and itim domain (tigit) antibodies for the treatment of fungal infections
JP2023544410A (ja) 2020-10-05 2023-10-23 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー タンパク質を濃縮するための方法
MX2023004941A (es) 2020-11-08 2023-07-12 Seagen Inc Conjugado de anticuerpo y fármaco para terapia de combinación con inhibidor de células inmunitarias.
US11028172B1 (en) * 2020-11-10 2021-06-08 Lepu Biopharma Co., Ltd. Anti-TIGIT antibodies and uses thereof
WO2022112198A1 (en) 2020-11-24 2022-06-02 Worldwide Innovative Network Method to select the optimal immune checkpoint therapies
WO2022111612A1 (zh) * 2020-11-26 2022-06-02 信达生物制药(苏州)有限公司 包含抗tigit/pd-1双特异性抗体的制剂及其制备方法和用途
US20240018248A1 (en) 2020-12-02 2024-01-18 Vib Vzw An ltbr agonist in combination therapy against cancer
WO2022124864A1 (ko) * 2020-12-10 2022-06-16 주식회사 유틸렉스 항-tigit 항체 및 이의 용도
AR124414A1 (es) 2020-12-18 2023-03-22 Century Therapeutics Inc Sistema de receptor de antígeno quimérico con especificidad de receptor adaptable
US20240050646A1 (en) * 2020-12-22 2024-02-15 Regina E. HERZLINGER Methods, systems, and apparatus for administering an antibody treatment via infusion
US11806507B2 (en) * 2020-12-22 2023-11-07 Regina E. HERZLINGER Methods, systems, and apparatus for administering an antibody treatment via infusion
AU2021409558A1 (en) * 2020-12-22 2023-07-20 Regina E. HERZLINGER Methods, systems, and apparatus for administering a monoclonal and/or polyclonal antibody treatment via rapid infusion
WO2022148781A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Institut Curie Combination of mcoln activators and immune checkpoint inhibitors
AU2022207020A1 (en) 2021-01-14 2023-08-31 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Anti-tigit antibody pharmaceutical composition and application thereof
CN114984227A (zh) * 2021-03-02 2022-09-02 百奥泰生物制药股份有限公司 抗tigit抗体在联合用药中的应用
WO2022184068A1 (zh) * 2021-03-02 2022-09-09 百奥泰生物制药股份有限公司 抗tigit抗体在治疗肿瘤或癌症中的应用
WO2022214652A1 (en) 2021-04-09 2022-10-13 Ose Immunotherapeutics Scaffold for bifunctioanl molecules comprising pd-1 or cd28 and sirp binding domains
BR112023020662A2 (pt) 2021-04-09 2024-02-06 Seagen Inc Métodos de tratamento de câncer com anticorpos anti-tigit
JP2024515263A (ja) 2021-04-09 2024-04-08 オーエスイー・イミュノセラピューティクス 改善された特性を有する二機能性分子のための新規足場構造
AR125753A1 (es) 2021-05-04 2023-08-09 Agenus Inc Anticuerpos anti-tigit, anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos
CN117916263A (zh) 2021-05-10 2024-04-19 美帝马布生物公司 抗tigit抗体及其用途
CN116940595A (zh) * 2021-05-18 2023-10-24 苏州鑫康合生物医药科技有限公司 抗tigit抗体及其用途
CN115466327A (zh) * 2021-06-10 2022-12-13 北京天广实生物技术股份有限公司 结合tigit的抗体及其用途
EP4377350A2 (en) 2021-07-28 2024-06-05 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
WO2023036340A1 (en) * 2021-09-13 2023-03-16 Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. Protein complexes targeting il21 pathway
CA3231553A1 (en) 2021-09-15 2023-03-23 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising anti-pvrig/tigit bispecific antibody
CA3231320A1 (en) 2021-09-15 2023-03-23 Zhiliang CAO Protein specifically binding to pd-1 and pharmaceutical use thereof
CN115838424A (zh) * 2021-09-22 2023-03-24 上海康岱生物医药技术股份有限公司 靶向tigit的单克隆抗体
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
CN114181310B (zh) * 2022-02-14 2022-07-05 中山康方生物医药有限公司 抗tigit抗体、其药物组合物及用途
WO2023168363A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 HCW Biologics, Inc. Method of treating pancreatic cancer
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023173011A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Bristol-Myers Squibb Company Transient expression of therapeutic proteins
WO2023178192A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
TW202409083A (zh) 2022-05-02 2024-03-01 美商阿克思生物科學有限公司 抗-tigit抗體及其用途
WO2023240058A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. Prognostic and therapeutic methods for cancer
WO2023239226A1 (ko) * 2022-06-10 2023-12-14 메디맵바이오 주식회사 Tigit에 특이적으로 결합하는 항체 및 인터류킨-15를 포함하는 융합 단백질 및 이의 용도
WO2023239228A1 (ko) * 2022-06-10 2023-12-14 메디맵바이오 주식회사 항-tigit 항체, 인터류킨-15, 및 인터류킨-15 수용체 알파 스시 도메인을 포함하는 융합 단백질 및 이의 용도
WO2024003360A1 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Institut Curie Biomarkers and uses thereof for the treatment of neuroblastoma
WO2024028386A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Ose Immunotherapeutics Multifunctional molecule directed against cd28

Family Cites Families (103)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4740461A (en) 1983-12-27 1988-04-26 Genetics Institute, Inc. Vectors and methods for transformation of eucaryotic cells
EP0154316B1 (en) 1984-03-06 1989-09-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified lymphokine and production thereof
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
JP2532858B2 (ja) 1985-04-01 1996-09-11 セルテツク リミテツド 形質転換したミエロ―マ細胞系
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US4959455A (en) 1986-07-14 1990-09-25 Genetics Institute, Inc. Primate hematopoietic growth factors IL-3 and pharmaceutical compositions
EP0281604B1 (en) 1986-09-02 1993-03-31 Enzon Labs Inc. Single polypeptide chain binding molecules
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US5260203A (en) 1986-09-02 1993-11-09 Enzon, Inc. Single polypeptide chain binding molecules
US4912040A (en) 1986-11-14 1990-03-27 Genetics Institute, Inc. Eucaryotic expression system
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
CA2006596C (en) 1988-12-22 2000-09-05 Rika Ishikawa Chemically-modified g-csf
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
DK1136556T3 (da) 1991-11-25 2005-10-03 Enzon Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multivalente antigen-bindende proteiner
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
US6129914A (en) 1992-03-27 2000-10-10 Protein Design Labs, Inc. Bispecific antibody effective to treat B-cell lymphoma and cell line
EP0640094A1 (en) 1992-04-24 1995-03-01 The Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
WO1994004678A1 (en) 1992-08-21 1994-03-03 Casterman Cecile Immunoglobulins devoid of light chains
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
ES2162863T3 (es) 1993-04-29 2002-01-16 Unilever Nv Produccion de anticuerpos o fragmentos (funcionalizados) de los mismos derivados de inmunoglobulinas de cadena pesada de camelidae.
AU691811B2 (en) 1993-06-16 1998-05-28 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
US5532210A (en) 1994-06-08 1996-07-02 E. I. Du Pont De Nemours And Company High temperature superconductor dielectric slow wave structures for accelerators and traveling wave tubes
US6121022A (en) 1995-04-14 2000-09-19 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
JP2002512624A (ja) 1997-05-21 2002-04-23 バイオベーション リミテッド 非免疫原性タンパク質の製造方法
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
GB9818110D0 (en) 1998-08-19 1998-10-14 Weston Medical Ltd Needleless injectors and other devices
US6096002A (en) 1998-11-18 2000-08-01 Bioject, Inc. NGAS powered self-resetting needle-less hypodermic jet injection apparatus and method
EP1135415B1 (en) 1998-12-01 2010-08-11 Facet Biotech Corporation Humanized antibodies to gamma-interferon
ES2694002T3 (es) 1999-01-15 2018-12-17 Genentech, Inc. Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante
US7368527B2 (en) 1999-03-12 2008-05-06 Human Genome Sciences, Inc. HADDE71 polypeptides
EP1173462A1 (en) 1999-03-26 2002-01-23 Human Genome Sciences, Inc. 50 human secreted proteins
CA2704600C (en) 1999-04-09 2016-10-25 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. A method for producing antibodies with increased adcc activity
JP4668498B2 (ja) 1999-10-19 2011-04-13 協和発酵キリン株式会社 ポリペプチドの製造方法
US7029872B2 (en) 2000-06-28 2006-04-18 Glycofi, Inc Methods for producing modified glycoproteins
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
US6374470B1 (en) 2000-10-06 2002-04-23 Milliken & Company Face plate for spun-like textured yarn
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7408041B2 (en) 2000-12-08 2008-08-05 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
CA2838062C (en) 2001-08-03 2015-12-22 Roche Glycart Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
WO2003072035A2 (en) 2002-02-22 2003-09-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
US7193069B2 (en) 2002-03-22 2007-03-20 Research Association For Biotechnology Full-length cDNA
AU2003226356A1 (en) 2002-04-12 2003-10-27 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Prevention of brain inflammation as a result of induced autoimmune response
JP2006518582A (ja) 2002-09-11 2006-08-17 ジェネンテック・インコーポレーテッド 乾癬の治療のための新規組成物と方法
EP1539228B1 (en) 2002-09-11 2010-12-29 Genentech, Inc. Novel composition and methods for the treatment of immune related diseases
CA2502367C (en) 2002-10-16 2013-12-10 Euro-Celtique S.A. Antibodies that bind cell-associated ca 125/o772p and methods of use thereof
US20090047213A1 (en) * 2003-04-14 2009-02-19 Young David S F Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of CD59
US7410483B2 (en) 2003-05-23 2008-08-12 Novare Surgical Systems, Inc. Hand-actuated device for remote manipulation of a grasping tool
US7312320B2 (en) 2003-12-10 2007-12-25 Novimmune Sa Neutralizing antibodies and methods of use thereof
DE602005022871D1 (de) 2004-06-07 2010-09-23 Univ Ramot Verfahren zur passiven immunisierung gegen eine durch amyloidaggregation gekennzeichnete krankheit oder erkrankung mit vermindertem nervenentzündungsrisiko
EP1776385A1 (en) 2004-07-21 2007-04-25 Glycofi, Inc. Immunoglobulins comprising predominantly a glcnac2man3glcnac2 glycoform
CN101023102B (zh) * 2004-09-17 2013-05-29 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗-ox40l抗体
US20070054360A1 (en) 2005-05-12 2007-03-08 Zeren Gao Compositions and methods for modulating immune responses
EP2238986A3 (en) 2005-07-08 2010-11-03 Biogen Idec MA Inc. Sp35 antibodies and uses thereof
EP2093237B1 (en) * 2006-10-20 2015-12-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-cancer agent comprising anti-hb-egf antibody as active ingredient
AR063840A1 (es) * 2006-11-15 2009-02-25 Medarex Inc Anticuerpos humanos monoclonales para btla y metodos de uso
AU2008214032B2 (en) * 2007-02-02 2012-06-28 Baylor Research Institute Vaccines based on targeting antigen to DCIR expressed on antigen-presenting cells
KR101520110B1 (ko) * 2007-02-23 2015-05-18 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 가공된 항-ＩＬ-23ｐ19 항체
PT2520590T (pt) 2007-04-03 2018-11-14 Amgen Res Munich Gmbh Domínio de ligação específico de espécies cruzadas
AU2015202123B2 (en) 2008-04-09 2017-06-15 Genentech, Inc. Novel compositions and methods for the treatment of immune related diseases
SG10201402815VA (en) * 2008-04-09 2014-09-26 Genentech Inc Novel compositions and methods for the treatment of immune related diseases
ES2624835T3 (es) 2009-08-06 2017-07-17 Immunas Pharma, Inc. Anticuerpos que se unen específicamente a los oligómeros A beta y uso de los mismos
JP2013507378A (ja) 2009-10-09 2013-03-04 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 抗ｈｅｒ３抗体の製造、特徴づけ及びその用途
EP2507259B1 (en) 2009-12-05 2016-08-24 Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg Malaria vaccines based on apicomplexan ferlins, ferlin-like proteins and other c2-domain containing proteins
WO2011130434A2 (en) * 2010-04-13 2011-10-20 Celldex Therapeutics Inc. Antibodies that bind human cd27 and uses thereof
WO2011156356A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Zymogenetics, Inc. Dimeric vstm3 fusion proteins and related compositions and methods
DK2609118T3 (en) 2010-08-23 2017-04-03 Univ Texas Anti-OX40 antibodies and methods for their use
UA112434C2 (uk) 2011-05-27 2016-09-12 Ґлаксо Ґруп Лімітед Антигензв'язувальний білок, який специфічно зв'язується з всма
US9205144B2 (en) 2011-06-03 2015-12-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Identification of conserved peptide blocks in homologous polypeptides
KR20130062168A (ko) 2011-12-02 2013-06-12 고려대학교 산학협력단 재조합 형광 단백질 나노입자
MX2014010447A (es) 2012-02-29 2015-06-23 Gilead Biologics Inc Anticuerpos contra la metaloproteinasa de matriz 9.
WO2013148316A1 (en) 2012-03-29 2013-10-03 Biogen Idec Ma Inc. Biomarkers for use in integrin therapy applications
WO2013151999A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 President And Fellows Of Harvard College Cancer treatment and immune system regulation through fat10 pathway inhibition
MX2014014951A (es) 2012-06-06 2015-03-13 Oncomed Pharm Inc Agentes aglutinantes que modulan la trayectoria hippo y sus usos.
US20150322119A1 (en) 2012-12-03 2015-11-12 Bristol-Myers Squibb Company Enhancing anti-cancer activity of immunomodulatory fc fusion proteins
KR20150090919A (ko) * 2012-12-04 2015-08-06 온코메드 파마슈티칼스, 인크. 결합제를 사용한 면역요법
CN103073644B (zh) * 2012-12-31 2014-03-12 中国科学技术大学 特异性抗小鼠tigit的单克隆抗体及其制备方法、鉴定及应用
US20140314741A1 (en) 2013-04-18 2014-10-23 Developmen Center For Biotechnology Human Antibody against Interleukin-20 and Treatment for Inflammatory Diseases
WO2015009856A2 (en) * 2013-07-16 2015-01-22 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and tigit inhibitors
RU2016137264A (ru) 2014-02-21 2018-03-26 МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи Слияния антитела к pcsk9~glp-1 и способы применения
BR112017000703A2 (pt) 2014-07-16 2017-11-14 Genentech Inc métodos para tratar ou retardar a progressão do câncer, para reduzir ou inibir a reincidência do câncer, para tratar ou retardar a progressão da imunidade tumoral e para aumentar, intensificar ou estimular uma resposta ou função imune e kit
PE20170289A1 (es) 2014-08-19 2017-04-05 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos anti tigit
WO2016073282A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and tigit inhibitors
DK3221346T3 (da) 2014-11-21 2020-10-12 Bristol Myers Squibb Co Antistoffer omfattende modificerede konstante områder af tungkæden
AU2015369683C1 (en) 2014-12-23 2024-06-20 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to TIGIT
TWI715587B (zh) 2015-05-28 2021-01-11 美商安可美德藥物股份有限公司 Ｔｉｇｉｔ結合劑和彼之用途
CA2994858C (en) 2015-09-25 2024-01-23 Genentech, Inc. Anti-tigit antibodies and methods of use

Also Published As

Publication number Publication date
JO3664B1 (ar) 2020-08-27
PE20170289A1 (es) 2017-04-05
AU2021202360A1 (en) 2021-05-13
JP2022105108A (ja) 2022-07-12
EP3183267A1 (en) 2017-06-28
MD20170032A2 (ro) 2017-08-31
TWI790593B (zh) 2023-01-21
JP6920194B2 (ja) 2021-08-18
MD4733B1 (ro) 2020-12-31
TW201609813A (zh) 2016-03-16
JP7487256B2 (ja) 2024-05-20
AU2015305754A1 (en) 2017-02-23
CA2957722A1 (en) 2016-02-25
TN2017000024A1 (en) 2018-07-04
CN113583131A (zh) 2021-11-02
AU2019200426A1 (en) 2019-02-07
JP2017532007A (ja) 2017-11-02
CA2957722C (en) 2022-05-31
MA40475A (fr) 2017-06-28
WO2016028656A1 (en) 2016-02-25
JP7066777B2 (ja) 2022-05-13
BR112017003108A2 (pt) 2017-12-05
CO2017001561A2 (es) 2017-05-19
US10618958B2 (en) 2020-04-14
KR102321168B1 (ko) 2021-11-02
MX2022001105A (es) 2022-02-14
CL2019001926A1 (es) 2019-11-29
IL250583A0 (en) 2017-04-30
CN107148430B (zh) 2021-08-27
US20160355589A1 (en) 2016-12-08
NI201700019A (es) 2017-03-08
US20200270346A1 (en) 2020-08-27
EA201790413A1 (ru) 2017-08-31
CR20170060A (es) 2017-04-18
AP2017009765A0 (en) 2017-02-28
CN107148430A (zh) 2017-09-08
MY184288A (en) 2021-03-30
MX2017002229A (es) 2017-05-09
CL2017000310A1 (es) 2017-08-18
KR20170041272A (ko) 2017-04-14
MD4733C1 (ro) 2021-07-31
JOP20200192A1 (ar) 2022-10-30
US20180066055A1 (en) 2018-03-08
KR20190133078A (ko) 2019-11-29
US20170198042A1 (en) 2017-07-13
TW202144422A (zh) 2021-12-01
SG11201701161QA (en) 2017-03-30
KR102050082B1 (ko) 2019-11-29
IL250583B (en) 2022-07-01
GT201700033A (es) 2019-09-30
TWI724997B (zh) 2021-04-21
JP2020162614A (ja) 2020-10-08
PH12017500296A1 (en) 2017-06-28
GEP20217331B (en) 2021-12-10
ZA201700955B (en) 2022-11-30
AU2015305754B2 (en) 2018-10-25
PH12017500296B1 (en) 2017-06-28
AU2019200426B2 (en) 2021-01-21
DOP2017000046A (es) 2017-08-31
MY198017A (en) 2023-07-26
BR112017003108A8 (pt) 2023-04-11
EA036311B1 (ru) 2020-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA122395C2 (uk) Антитіло проти tigit
US20220257762A1 (en) Anti-lag3 antibodies and antigen-binding fragments
KR102597989B1 (ko) 급성 골수성 백혈병을 치료하기 위한 항-cd38 항체
JP7070932B2 (ja) Ｂａｆｆ－ｒ標的化キメラ抗原受容体修飾ｔ細胞及びその使用
CN109715667A (zh) 抗-gprc5d抗体、结合gprc5d和cd3的双特异性抗原结合分子及其用途
SA517390370B1 (ar) عوامل ربط للمستقبلات المناعية من نوعية واستخداماتها (tigit)
CN109154611A (zh) 人源化抗cd73抗体
UA119319C2 (uk) Гуманізоване антитіло до cd134 (ox40) і його застосування
CN107743495A (zh) 抗ceacam6抗体及其用途
UA120102C2 (uk) АНТИТІЛО ДО CD79b І ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ
UA127516C2 (uk) Виділене антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з f-білком рсв людини
UA120753C2 (uk) Біспецифічне антитіло до сd3 та cd20
UA123774C2 (uk) Антитіла проти c5 та способи застосування
WO2015130732A2 (en) Anti-cd38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
UA115641C2 (uk) Виділене антитіло, яке зв'язує мезотелін, та імунокон'югат, що його містить
UA115046C2 (uk) Гуманізоване антитіло проти епірегуліну
SA109300216B1 (ar) أجسام مضادة جديدة مفيدة في معالجة السرطان
EP2452950B1 (en) Anti-podxl2 antibody having anti-cancer activity
US20210213055A1 (en) Compositions and methods for inducing phagocytosis
CN115996951A (zh) 抗cd103抗体
UA112157C2 (uk) МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ДО c-Mеt
NZ723538B2 (en) Anti-cd38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia