PT1411932E - Oxazolidinonas substituídas para combinações terapêuticas - Google Patents

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DESCRIÇÃO "OXAZOLIDINONAS SUBSTITUÍDAS PARA COMBINAÇÕES TERAPÊUTICAS" A presente invenção diz respeito a combinações de A) oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) com B) outros ingredientes activos, a um processo para a preparação de tais combinações e à sua utilização como medicamentos, em particular para a profilaxia e/ou para o tratamento de doenças tromboembólicas.

Em particular, as oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) actuam como inibidores selectivos do factor Xa de coagulação e como anticoagulantes.

Foi já demonstrado um efeito antitrombótico dos inibidores do factor Xa em diversos modelos de animais (veja-se os documentos WO 99/37304; WO 99/06371; J. Hauptmann, J. Sturzebecher, Thrombosis Research 1999, 93, 203; F. Al-Obeidi, J. A. Ostrem, Factor Xa inhibitors, Exp. Opin. Ther. Patents 1999, 9, 931; B.-Y. Zhu, R. M.

Scarborough, Curr. Opin. Card. Pulm. Ren. Inv. Drugs 1999, 1 (1), 63; M. Samama, J. M. Walenga, B. Kaiser, J. Fareed, Specific Factor Xa Inhibitors, Cardiovascular Thrombosis: Thrombocardiology and Thromboneurology, segunda edição, publicado por M. Verstraete, V. Fuster, E. J. Topol, Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia 1998), bem como em estudos clínicos em pacientes (The Ephesus Study, blood, Vol. 96, 490a, 2000; The Penthifra Study, blood, Vol. 96, 490a, 2000; The Pentamaks Study, blood, Vol. 96, 490a-491a, 2000; The Pentathlon 2000 Study, blood, Vol. 96, 491a, 2000). Assim, de preferência, é possível utilizar os 2 inibidores do factor Xa coo medicamentos para a profilaxia e/ou para o tratamento de doenças tromboembólicas.

As doenças vasculares tromboembólicas são a causa mais comum de morbidade e mortalidade nos países industriais (Thiemes Innere Medizin, Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nova Iorque; American Heart Association, 2000, actualização estatística do coração e de AVC, Dallas, TX: American Heart Association, 2000). A terapia anticoagulante demonstrou ser eficaz para o tratamento de distúrbios vasculares, prevenindo as oclusões vasculares trombóticas e desobstruindo vasos obstruídos tromboliticamente, e é bastante importante para a profilaxia e para o tratamento de distúrbios coronários, periféricos e cerebrais, e para a profilaxia e/ou para o tratamento de tromboses venosas e embolias pulmonares.

As complicações tromboembólicas podem ser provocadas por lesões ateroscleróticas das paredes dos vasos, em particular devido a perturbações da função endotelial, que podem provocar oclusões trombóticas agudas. A aterosclerose é um distúrbio multifactorial que depende de diversos factores cardiovasculares de risco. Estudos clínicos demonstraram que a profilaxia com anticoagulantes não influencia de forma definitiva o curso dos distúrbios arteriais-vasculares. Assim, é vantajoso efectuar um tratamento dirigido aos factores de risco em conjunto com uma terapia antitrombótica.

Como factores de risco para distúrbios vasculares coronários, periféricos e cerebrais refere-se, por exemplo: níveis elevados de colesterol no soro, hipertensão arterial, fumar cigarros, diabetes mellitus (Allgemeine und spezielle Pharmakologie und Toxikologie, W. Forth, D. 3

Henschler, W. Ruminei, K. Starke; Spektrum Akademischer Verlag Heidelberg Berlin Oxford; Thiemes Innere Medizin, Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nova Iorque). Os princípios de medicina preventiva têm por base a eliminação destes factores de risco. Para além de uma mudança no estilo de vida, também estão incluídas medidas farmacológicas, tais como, por exemplo, terapia anti-hipertensão, medicamentos para a diminuição de lípidos ou profilaxia de tromboses. Além do mais, a combinação com agentes terapêuticos coronários é adequada para o tratamento, no caso de haver um doença cardíaca coronária pré-existente.

De forma surpreendente, concluiu-se agora que as combinações de oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) com determinados ingredientes activos apresentam propriedades interessantes e que são mais adequadas para a profilaxia e/ou para o tratamento de diversas doenças do que os ingredientes activos por si sós.

Assim, a invenção diz respeito a combinações de A) oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) com B) outros ingredientes activos, em particular com inibidores da agregação de plaquetas, anticoagulantes, fibrinolíticos, agentes de diminuição de lípidos, agentes terapêuticos coronários e/ou vasodilatadores. 0 termo "combinações" não designa, no que diz respeito à invenção, apenas formas de dosagem que compreendem todos os componentes (as designadas combinações fixas) e os conjuntos de combinação que compreendem os componentes separados entre si, mas também os componentes administrados em simultâneo ou sequencialmente, desde que sejam utilizados para a profilaxia e/ou para o tratamento da mesma doença. De igual modo, também é possível combinar 4 dois ou mais ingredientes activos em conjunto, pelo que as combinações neste sentido são, para cada caso, duplas ou múltiplas.

Como oxazolidinonas adequadas da combinação de acordo com a invenção refere-se, por exemplo, os compostos de fórmula estrutural (I)

em que: o simbolo R1 representa facultativamente um tiofeno (tienilo) fundido com benzo, o qual pode ser facultativamente substituído uma ou mais vezes; o símbolo R2 representa um radical orgânico qualquer; os símbolos R3, R4, R5, R6, R7 e R8, iguais ou diferentes, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci-C6) , e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

Assim, são preferíveis os compostos de fórmula estrutural (I) em que amino; aminometilo; alquilo(Ci— o símbolo R1 representa facultativamente um tiofeno (tienilo) fundido com benzo, o qual pode ser facultativamente substituído uma ou mais vezes por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por halogéneo; ciano; nitro; 5 C8) , o qual pode ser facultativamente substituído, por sua vez, um ou mais vezes com halogéneo; cicloalquilo (C3-C7) ; alcoxi (Ci-C8) ; imidazolinilo; -C(=NH)NH2; carbonilo e mono-e di-alquil(C1-C4)-aminocarbonilo, o símbolo R2 representa um dos grupos seguintes: A-, A-M-, D-M-A-, B-M-A-, B-, B-M-, B-M-B-, D-M-B-, em que: o radical "A" representa um grupo arilo (C6-C14) , de preferência arilo (C6-Ci0), em particular fenilo ou naftilo e mais particularmente fenilo; o radical "B" representa um heterociclo aromático com 5 ou 6 membros que compreende até 3 heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, em particular até 2 heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, seleccionados entre o conjunto constituído por S, N, NO (N-óxido) e 0; o radical "D" representa um heterociclo, com 4 a 9 membros, fundido facultativamente com benzo, monocíclico ou bicíclico, saturado ou parcialmente insaturado, que compreende até três heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, os quais são seleccionados entre o conjunto constituído por S, SO, S02, N, NO (N-óxido) e 0; o radical "M" representa -NH-, -CH2-, -CH2CH2-, -0-, -NH-CH2-, -ch2-nh-, -och2-, -CH20-, -CONH-, -NHCO-, -COO-, -00C-, -S- , —S02 ou uma ligação covalente; 6 em que os símbolos "A", "B" e "D", definidos antes, podem ser facultativamente substituídos, em cada caso, uma ou mais vezes com um radical seleccionado entre o conjunto constituído por halogéneo; trifluorometilo; oxo; ciano; nitro; carbamoílo; piridilo; alcanoílo(Ci-C6) ; ciclo-alcanoílo (C3-C7) ; aril (C6-Ci4)-carbonilo; heteroaril (C5-C10) -carbonilo; alcanoiloxi (Ci-C6) -metiloxi; hidroxialquil (C1 — C4)-carbonilo; -COOR27; -S02R27; -C (NR27R28) =NR29; -CONR28R29; -S02NR28R29; -OR30; -NR30R31, alquilo (Ci-C6) e cicloalquilo (C3- C7) , em que os grupos alquilo (Cg-Cô) e cicloalquilo (C3-C7) podem ser facultativamente substituídos, por sua vez, por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por ciano; -OR27; -NR28R29; -C0 (NH) v (NR27R28) e -C (NR27R28) =NR29, em que: o símbolo v representa 0 ou 1 e cada um dos símbolos R27, R28 e R29, iguais ou diferentes, representa independentemente hidrogénio, alquilo (C1-C4) , cicloalquilo (C3-C7) , alcanoílo (C1-C4) , carbamoílo, trifluorometilo, fenilo ou piridilo, e/ou os símbolos R27 e R28 ou R27 e R29, em conjunto com o átomo de azoto ao qual se encontram ligados, formam um heterociclo, saturado ou parcialmente insaturado, com 5 a 7 membros que possui até três, de preferência até dois heteroátomos, iguais ou diferentes, seleccionados entre o conjunto constituído por N, 0 e S e os símbolos R30 e R31 representam grupos iguais ou diferentes e cada um deles representa independentemente hidrogénio, alquilo (C1-C4) , cicloalquilo (C3-C7) , alquil (C4- 7 C4)-sulfonilo, hidroxialquilo (C1-C4) , aminoalquilo (C4-C4) , di-alquil (Ci-C4)-amino-alquilo (Ci-C4) , -CH2C (NR27R28) =NR29 ou -COR33, em que o símbolo R33 representa alcoxi (Ci-C6) , alcoxi (Ci-C4) -alquilo (Ci-C4) , alcoxi (Ci-C4) -carbonil-alquilo (C1-C4) , aminoalquilo (Ci-C4) , alcoxi (C1-C4) -carbonilo, alcanoí 1 (C4-C4)- alquilo (Ci-C4) , cicloalquilo (C3-C7) , alquilo (C4-C8) que pode ser facultativamente substituído por fenilo ou acetilo, ou representa arilo (C6-Ci4) , heteroarilo (C5-C10) , trifluorometilo, tetra-hidrofuranilo ou butirolactona, os símbolos R3, R4, R5, R6, R7 e R8, iguais ou diferentes, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci-Cô) , e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

De igual modo, neste contexto, são preferíveis os compostos de fórmula estrutural (I) em que o símbolo R1 representa um tiofeno (tienilo), em particular 2-tiofeno, o qual pode ser facultativamente substituído uma ou mais vezes por halogéneo, de preferência cloro ou bromo, amino, aminometilo ou alquilo (Ci-Cs) , de preferência metilo, em que o radical alquilo (Ci-C8) pode ser facultativamente substituído, por sua vez, uma ou duas vezes com halogéneo, de preferência flúor, o símbolo R2 representa um dos grupos seguintes: A-, A-M-, D-M-A-, B-M-A-, 8 Β-, Β-Μ-, Β-Μ-Β-, D-M-B-, em que : ο radical "A" representa um grupo arilo (C6-Ci4) , de preferência arilo(C6-C10) , em particular fenilo ou naftilo e mais preferencialmente fenilo; o radical "B" representa um heterociclo aromático com 5 ou 6 membros que compreende até 3 heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, em particular até 2 heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, seleccionados entre o conjunto constituído por S, N, NO (N-óxido) e 0; o radical "D" representa um heterociclo com 4 a 7 membros, saturado ou parcialmente insaturado, que compreende até três heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, os quais são seleccionados entre o conjunto constituído por S, SO, SO2, N, NO (N-óxido) e 0; o radical "M" representa -NH-, -CH2-, -CH2CH2-, -0-, -nh-ch2-, -ch2-nh-, -och2-, -ch2o-, -conh-, -nhco-, -coo-, -00C-, -S- ou uma ligação covalente; em que os símbolos "A", "B" e "D", definidos antes, podem ser facultativamente substituídos, em cada caso, uma ou mais vezes com um radical seleccionado entre o conjunto constituído por halogéneo; trifluorometilo; oxo; ciano; nitro; carbamoílo; piridilo; alcanoílo(Ci-C6) ; ciclo- alcanoílo (C3-C7) ; aril (06-Οι4)-carbonilo; heteroaril (C5-C10) -carbonilo; alcanoiloxi (Ci-C6) -metiloxi; -C00R27; -S02R27; -C (NR27R28) =NR29; -CONR28R29; -S02NR28R29; -OR30; -NR30R31, alquilo (Ci-C6) e cicloalquilo (C3-C7) , 9 em que os grupos alquilo (Ci-C6) e cicloalquilo (C3-C7) podem ser facultativamente substituídos, por sua vez, por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por Ciano; -OR27; -NR28R29; -C0 (NH) v (NR27R28) e -C (NR27R28) =NR29, em que: o símbolo v representa 0 ou 1 e cada um dos símbolos R27, R28 e R29, iguais ou diferentes, representa independentemente hidrogénio, alquilo (C1-C4) ou cicloalquilo (C3-C7) , e/ou os símbolos R27 e R28 ou R27 e R29, em conjunto com o átomo de azoto ao qual se encontram ligados, formam um heterociclo, saturado ou parcialmente insaturado, com 5 a 7 membros que possui até três, de preferência até dois heteroátomos, iguais ou diferentes, seleccionados entre o conjunto constituído por N, 0 e S e os símbolos R e R representam grupos iguais ou diferentes e cada um deles representa independentemente hidrogénio, alquilo (C1-C4) , cicloalquilo(C3-C7) , alquil(Ci-C4)-sulfonilo, hidroxialquilo (C1-C4) , aminoalquilo (C1-C4) , di-alquil (C1-C4) -amino-alquilo (C1-C4) , alcanoílo (C1-C4) , aril (C6-C14) -carbonilo, heteroaril (C5-C10) -carbonilo, alquil (C1-C4) -aminocarbonilo ou -CH2C (NR27R28) =NR29, os símbolos R3, R4, R5, R6, R7 e R8, iguais ou diferentes, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci-C6) , e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

Neste contexto, são mais preferíveis os compostos de fórmula estrutural (I) em que 10 o símbolo R1 representa um tiofeno (tienilo), em particular 2-tiofeno, o qual pode ser facultativamente substituído uma ou mais vezes por halogéneo, de preferência cloro ou bromo, ou alquilo (Ci-C8) , de preferência metilo, em que o radical alquilo (Ci-C8) pode ser facultativamente substituído, por sua vez, uma ou duas vezes com halogéneo, de preferência flúor, o símbolo R2 representa um dos grupos seguintes: A-, A-M-, D-M-A-, B-M-A-, B-, B-M-, B-M-B-, D-M-B-, em que: o radical "A" representa fenilo ou naftilo e em particular fenilo; o radical "B" representa um heterociclo aromático com 5 ou 6 membros que compreende até 2 heteroátomos seleccionados entre o conjunto constituído por S, N, NO (N-óxido) e O; o radical "D" representa um heterociclo com 5 ou 6 membros, saturado ou parcialmente insaturado, que compreende até dois heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia, os quais são seleccionados entre o conjunto constituído por S, SO, S02, N, NO (N-óxido) e 0; o radical "M" representa -NH-, -0-, -NH-CH2-, -CH2-NH-, -0CH2-, —CH20—, -CONH-, -NHCO- ou uma ligação covalente; em que 11 os grupos "A", "B" e "D", definidos antes, podem ser facultativamente substituídos, em cada caso, uma ou mais vezes com um radical seleccionado entre o conjunto constituído por halogéneo; trifluorometilo; oxo; ciano; piridilo; alcanoílo (C1-C3) ; aril (C6-Ci0) -carbonilo; hetero-aril (C5-C6) -carbonilo; alcanoiloxi (C1-C3) -metiloxi; -C(NR27R28)=NR29; -CONR28R29; -S02NR28R29; -OH; -NR30R31, alquilo(C1-C4) e ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo- hexilo, em que os grupos alquilo (C1-C4) e ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo-hexilo podem ser facultativamente substituídos, por sua vez, por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por ciano; -OH; -OCH3; -NR28R29; -C0 (NH) v (NR27R28) e -C (NR27R28) =NR29, em que: o símbolo v representa 0 ou 1, de preferência 0, e cada um dos símbolos R27, R28 e R29, iguais ou diferentes, representa independentemente hidrogénio, alquilo (C1-C4) ou ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo- hexilo, e/ou os símbolos R27 e R28 ou R27 e R29, em conjunto com o átomo de azoto ao qual se encontram ligados, podem formar um heterociclo, saturado ou parcialmente insaturado, com 5 a 7 membros que possui até dois heteroátomos, iguais ou diferentes, seleccionados entre o conjunto constituído por N, O e S e os símbolos R30 e R31 representam grupos iguais ou diferentes e cada um deles representa independentemente hidrogénio, alquilo(C1-C4) , ciclopropilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, alquil(C1-C4)-sulfonilo, hidroxialquilo(Ci- 12 C4) , aminoalquilo (C4-C4) , di-alquil (04-04) -amino-alquilo (Cχ— C4), alcanoílo (C1-C3) ou fenilcarbonilo, os símbolos R3, R4, R5, R6, R7 e R8, iguais ou diferentes, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci-C6) , e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

Neste contexto, são particularmente preferíveis os compostos de fórmula estrutural (I) em que o símbolo R1 representa 2-tiofeno que pode ser facultativamente substituído na posição 5 por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por cloro, bromo, metilo ou trifluorometilo, o símbolo R2 representa um dos grupos seguintes: A-, A-M-, D-M-A-, B-M-A-, B-, B-M-, B-M-B-, D-M-B-, em que: o radical "A" representa fenilo ou naftilo e em particular fenilo; o radical "B" representa um heterociclo aromático com 5 ou 6 membros que compreende até 2 heteroátomos seleccionados entre o conjunto constituído por S, N, NO (N-óxido) e 0; 13 o radical "D" representa um heterociclo com 5 ou 6 membros, saturado ou parcialmente insaturado, que compreende um átomo de azoto e facultativamente um outro heteroátomo e/ou membro hetero da cadeia seleccionado entre o conjunto constituído por S, SO, S02 e 0; ou até dois heteroátomos e/ou membros hetero da cadeia seleccionados entre o conjunto constituído por S, SO, S02 e 0; o radical "M" representa -NH-, -0-, -NH-CH2-, -CH2-NH-, -0CH2-, -CH20-, -CONH-, -NHCO- ou uma ligação covalente; em que os grupos "A", "B" e "D", definidos antes, podem ser facultativamente substituídos, em cada caso, uma ou mais vezes com um radical seleccionado entre o conjunto constituído por halogéneo; trifluorometilo; oxo; ciano; piridilo; alcanoílo (C1-C3) ; aril (C6-Ci0) -carbonilo; hetero-aril (C5-C6) -carbonilo; alcanoiloxi (Ci-C3) -metiloxi; -CONR28R29; -S02NR28R29; -OH; -NR30R31, alquilo (Ci-C4) e ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo-hexilo, em que os grupos alquilo (C1-C4) e ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo-hexilo podem ser facultativamente substituídos, por sua vez, por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por ciano; -OH; -0CH3; -NR28R29; -C0 (NH) V (NR27R28) e -C (NR27R28) =NR29, em que: o símbolo v representa 0 ou 1, de preferência 0, e cada um dos símbolos R27, R28 e R29, iguais ou diferentes, representa independentemente hidrogénio, alquilo(C1-C4) ou ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo- hexilo, e/ou 14 os símbolos R27 e R28 ou R27 e R29, em conjunto com o átomo de azoto ao qual se encontram ligados, podem formar um heterociclo, saturado ou parcialmente insaturado, com 5 a 7 membros que possui até dois heteroátomos, iguais ou diferentes, seleccionados entre o conjunto constituído por N, 0 e S e os símbolos R30 e R31 representam grupos iguais ou diferentes e cada um deles representa independentemente hidrogénio, alquilo (Ci-C4) , ciclopropilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, alquil(Ci-C4)-sulfonilo, hidroxialquilo(C i — C4) , aminoalquilo (Ci-C4) , di-alquil (Ci-C4) -amino-alquilo (C4-C4), alcanoílo (Ci-C3) ou fenilcarbonilo, os símbolos R3, R4, R5, R6, R7 e R8, iguais ou diferentes, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci~C4) , e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

Neste contexto, são ainda mais particularmente preferíveis os compostos de fórmula estrutural (I) em que o símbolo R1 representa 2-tiofeno que é substituído na posição 5 por um radical seleccionado entre o conjunto constituído por cloro, bromo, metilo ou trifluorometilo, o símbolo R2 representa D-A-: em que: o radical "A" representa fenileno; o radical "D" representa um heterociclo saturado com 5 ou 6 membros, o qual está ligado por meio de um átomo de azoto a "A", 15 o qual possui um grupo carbonilo na vizinhança directa do átomo de azoto da ligação e no qual um átomo de carbono do anel pode ser substituído por um heteroátomo seleccionado entre o conjunto constituído por S, N e 0; em que o grupo "A", definidos antes, pode ser facultativamente substituído uma ou mais vezes, na posição meta relativamente à ligação à oxazolidinona, com um radical seleccionado entre o conjunto constituído por flúor, cloro, nitro, amino, trifluorometilo, metilo ou ciano, os símbolos R3, R4, R5, R6, R7 e R8 representam um átomo de hidrogénio, e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

De igual modo, neste contexto, são ainda mais particularmente preferíveis o composto que satisfaz a fórmula estrutural seguinte

e seus sais, hidratos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

Até à data, as oxazolidinonas têm sido descritas praticamente apenas como antibióticos e em alguns casos também como inibidores de MAO e antagonistas de fibrinogénio (ver: Riedl, B., Endermann, R., Exp. Opin. 16

Ther. Patents 1999, 9 (5), 625), em que um pequeno grupo 5-[acilaminometilo] (de preferência 5-[acetilaminometilo]) parece ser essencial para o efeito antibacteriano.

As aril- e as heteroaril-feniloxazolidinonas substituídas, em que o radical fenilo monossubstituído ou polissubstituído pode estar ligado ao átomo de azoto do anel oxazolidinona e que pode compreender na posição 5 do anel oxazolidinona um resíduo N-metil-2-tiofenocarboxamida insubstituído, bem como a sua utilização enquanto substância que possui uma actividade antibacteriana encontram-se descritas nas patentes de invenção norte-americanas nos US-A-5 929 248, US-A-5 801 246, US-A-5 756 732, US-A-5 654 435, US-A-5 654 428 e US-A-5 565 571.

Além disso, as oxazolidinonas que contêm benzamidina são conhecidas como intermediários sintéticos para a síntese de inibidores do factor Xa ou como antagonistas de fibrinogénio (documentos WO-A-99/31092 e EP-A-623615).

Os compostos de fórmula estrutural (I) podem, em função do seu padrão de substituição, existir sob formas esteoisoméricas, as quais estão relacionadas com a sua imagem ou com a imagem no espelho (enantiómeros) ou então não estão relacionadas com a imagem e com a imagem no espelho (diastereómeros). Tanto os enantiómeros ou os diastereómeros como as suas respectivas misturas estão incluídas. Tal como os diastereómeros, as formas racémicas podem ser separadas por métodos conhecidos nos seus constituintes estereoisomericamente puros. Há determinados compostos de fórmula estrutural (I) que podem existir sob formas tautoméricas. Tal é do conhecimento dos especialistas na matéria, estando incluídos também tais compostos. 17

Os sais fisiologicamente aceitáveis, isto é, sais farmaceuticamente aceitáveis, podem ser sais dos compostos da invenção com ácidos inorgânicos ou orgânicos. Como sais preferidos refere-se os sais com ácidos inorgânicos, tais como, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico ou ácido sulfúrico, ou sais com ácidos orgânicos, tais como, por exemplo, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiónico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido láctico, ácido benzóico, ácido metano-sulfónico, ácido etano-sulfónico, ácido benzeno-sulfónico, ácido tolueno-sulfónico ou ácido naftaleno-sulfónico.

Também é possível referir como sais farmaceuticamente aceitáveis os sais com bases convencionais, tais como, por exemplo, sais de metais alcalinos (v.g., sais de sódio ou potássio), sais de metais alcalino-terrosos (v.g., sais de cálcio ou magnésio) ou sais de amónio obtidos a partir de amónia ou de aminas orgânicas, tais como, por exemplo, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, procaína, dibenzilamina, N-metilmorfolina, di-hidroabietilamina ou metilpiperidina. 0 termo "hidratos" designa as formas dos compostos da fórmula estrutural (I) anterior que formam um composto molecular (solvato) no estado sólido ou líquido por meio de hidratação com água. Nos hidratos, as moléculas de água estão ligadas através de valências secundárias por forças intermoleculares e em particular por pontes de hidrogénio. Os hidratos sólidos contêm água, designada por água de cristalização, em proporções estequiométricas e as moléculas de água não têm que ser equivalentes em termos do seu estado de ligação. Como exemplos de hidratos refere-se 18 os semi-hidratos, mono-hidratos, di-hidratos ou tri-hidratos. Também são igualmente adequados os hidratos dos sais dos compostos da invenção. 0 termo "pró-farmacos" designa as formas dos compostos de fórmula estrutural (I) anterior que podem ser, eles próprios, biologicamente activos ou inactivos, mas que possam ser convertidos na correspondente forma biologicamente activa (por exemplo, metabolicamente, solvoliticamente ou de um outro modo). 0 termo halogéneo designa átomos de flúor, cloro, bromo e iodo. São preferíveis os átomos de cloro ou flúor. 0 termo alquilo(Ci~C8) designa um radical alquilo, de cadeia linear ou ramificada, que possui entre 1 e 8 átomos de carbono. Como exemplos que é possível mencionar refere-se: metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, terc-butilo, n-pentilo e n-hexilo. Os grupos alquilo correspondentes com menos átomos de carbono são obtidos de forma análoga a partir desta definição, tais como, por exemplo, alquilo (Ci-C6) e alquilo (C1-C4) . De um modo geral, é preferível alquilo (C1-C4) . 0 significado dos constituintes correspondentes noutros substituintes mais complexos também é derivado desta definição, tal como, por exemplo, no caso de alquilsulfonilo, hidroxialquilo, hidroxialquilcarbonilo, alcoxi-alquilo, alcoxicarbonil-alquilo, alcanoilalquilo, aminoalguilo ou alquilaminoalguilo. 0 termo cicloalquilo(C3-C7) designa um radical alquilo cíclico que possui entre 3 e 7 átomos de carbono. Como exemplos é possível referir: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo ou ciclo-heptilo. Os grupos cicloalquilo correspondentes com menos átomos de carbono 19 são obtidos de forma análoga a partir desta definição, tais como, por exemplo, cicloalquilo (C3-C5) . São preferíveis os grupos ciclopropilo, ciclopentilo e ciclo-hexilo. 0 significado dos constituintes correspondentes noutros substituintes mais complexos, tais como, por exemplo, cicloalcanoílo, também é derivado desta definição. 0 termo alcenilo(C2-C6) designa um radical alcenilo de cadeia linear ou ramificada que possui entre 2 e 6 átomos de carbono. É preferível um radical alcenilo de cadeia linear ou ramificada que possui entre 2 e 4 átomos de carbono. Como exemplos é possível referir: vinilo, alilo, isopropenilo e n-but-2-eno-l-ilo. 0 termo alcoxi(Ci-Cs) designa um radical alcoxi de cadeia linear ou ramificada que possui entre 1 e 8 átomos de carbono. Como exemplos é possível referir: metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, terc-butoxi, n-pentoxi, n-hexoxi, n-heptoxi e n-octoxi. Os grupos alcoxi correspondentes com menos átomos de carbono são obtidos de forma análoga a partir desta definição, tais como, por exemplo, alcoxi (Ci-Cô) e alcoxi (C1-C4) . De um modo geral, é preferível alcoxi(C1-C4) . 0 significado dos constituintes correspondentes noutros substituintes mais complexos, tais como, por exemplo, alcoxi-alquilo, alcoxicarbonil-alquilo e alcoxicarbonilo, também é derivado desta definição. 0 termo mono- ou di-alquil(C1-C4)-aminocarbonil designa um grupo amino que está ligado por meio de um grupo carbonilo e que possui um ou dois substituintes alquilo de cadeia linear ou ramificada, iguais ou diferentes, em que cada um dos quais possui entre 1 e 4 átomos de carbono. Como exemplos é possível referir: metilamino, etilamino, n- 20 propilamino, isopropilamino, t-butilamino, N,N-dimetilamino, N,N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil-N-n-propilamino, N-isopropil-N-npropilamino e N-t-butil-N-metilamino. O termo alcanoílo(Ci~C6) designa um radical alquilo de cadeia linear ou ramificada que possui entre 1 e 6 átomos de carbono e que possui uma ligação dupla a um átomo de oxigénio na posição 1 e está ligado por meio da posição 1. Como exemplos é possível referir: formilo, acetilo, propionilo, n-butirilo, i-butirilo, pivaloílo, n-hexanoílo. Os grupos alcanoílo correspondentes com menos átomos de carbono são obtidos de forma análoga a partir desta definição, tais como, por exemplo, alcanoílo (C1-C5) , alcanoílo (C1-C4) e alcanoílo (C1-C3) . De um modo geral, é preferível o alcanoílo (C1-C3) . 0 significado dos constituintes correspondentes noutros substituintes mais complexos, tais como, por exemplo, cicloalcanoílo e alcanoiloxi, também é derivado desta definição. O termo cicloalcanoílo(C3-C7) designa um radical cicloalcanoílo tal como definido antes que possui entre 3 e 7 átomos de carbono e que está ligado através de um grupo carbonilo. O termo alcanoiloxi(Ci-Ce)-metiloxi designa um radical alcanoiloximetiloxi de cadeia linear ou ramificada que possui entre 1 e 6 átomos de carbono. Como exemplos é possível referir: acetoximetiloxi, propionoximetiloxi, n-butiroximetiloxi, i-butiroximetiloxi, pivaloiloximetiloxi, n-hexanoilmetiloxi. Os grupos alcanoiloximetiloxi correspondentes com menos átomos de carbono, tais como, por exemplo, alcanoiloxi (C1-C3) -metiloxi, são obtidos de forma 21 análoga a partir desta definição. De um modo geral, é preferível o alcanoiloxi (C1-C3) -metiloxi . 0 termo aril (C6-Ci4) designa um radical aromático que possui entre 6 e 14 átomos de carbono. Como exemplos é possível referir: fenilo, naftilo, fenantrenilo e antracenilo. Os grupos arilo correspondentes com menos átomos de carbono, tais como, por exemplo, arilo (C6-Ci0) , são obtidos de forma análoga a partir desta definição. De um modo geral, é preferível o arilo (Cô-Cio) . 0 significado dos constituintes correspondentes noutros substituintes mais complexos, tais como, por exemplo, arilcarbonilo, também é derivado desta definição. A expressão heteroarilo (C5-C10) ou um heterociclo aromático com 5 a 10 membros que possui até 3 heteroátomos e/ou membros hetero na cadeia seleccionados entre o conjunto constituído por S, O, N e7ou NO (N-óxido) designa um sistema heteroaromático monocíclico ou bicíclico que está ligado através de uma átomo de carbono do anel do sistema heteroaromático, e também facultativamente através de um átomo de azoto do anel do sistema heteroaromático. Como exemplos é possível referir: piridilo, N-óxido de piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinilo, tienilo, furilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, indolizinilo, indolilo, benzo[b]tienilo, benzo[b]furilo, indazolilo, quinolilo, isoquinolilo, naftiridinilo, quinazolinilo. Os heterociclos correspondentes com um tamanho de anel inferior, tais como, por exemplo, heterociclos aromáticos com 5 ou 6 membros, são obtidos de forma análoga a partir desta definição. De um modo geral são preferíveis os heterociclos aromáticos com 5 ou 6 membros, tais como, por exemplo, piridilo, N- 22 óxido de piridilo, pirimidilo, piridazinilo, furilo e tienilo. 0 significado dos constituintes correspondentes noutros substituintes mais complexos, tais como, por exemplo, heteroaril(C5-Ci0)-carbonilo, também é derivado desta definição. A expressão heterociclo facultativamente fundido com benzo, monocíclico ou bicíclico, saturado ou parcialmente insaturado, com 3 a 9 membros, que possui até 3 heteroátomos e/ou membros hetero na cadeia seleccionados entre o conjunto constituído por S, SO, S02, N, NO (N- óxido) e/ou 0 designa um heterociclo que pode conter uma ou várias ligações duplas, que pode ser monocíclico ou bicíclico, em que pode existir um anel benzo fundido a dois átomos adjacentes de carbono do anel e que está ligado através de um átomo de carbono do anel ou de uma átomo de azoto do anel. Como exemplos é possível referir: tetra-hidrofurilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, piperidinilo, 1,2-di-hidropiridinilo, 1,4-di-hidropiridinilo, piperazinilo, morfolinilo, N-óxido de morfolinilo, tiomorfolinilo, azepinilo, 1,4-diazepinilo e ciclo-hexilo. São preferíveis os grupos piperidinilo, morfolinilo e pirrolidinilo.

Os sistemas cíclicos correspondentes com um tamanho pequeno de anel, tais como, por exemplo, sistemas cíclicos com 5 a 7 membros são obtidos de um modo análogo a partir desta definição.

Os compostos de fórmula estrutural (I) podem ser preparados, num processo alternativo, [A] fazendo reagir os compostos de fórmula estrutural (II) 23 23

cm, em que os radicais R2, R3, R4, R5, significações definidas antes, com os ácidos carboxilicos de R6, R7 e R8 possuem as fórmula estrutural (III)

0 em que o radical R1 possui as significações definidas antes, ou então com os halogenetos de carbonilo correspondentes e de preferência com os cloretos de carbonilo, ou então com os correspondentes anidridos carboxilicos simétricos ou mistos dos ácidos carboxilicos de fórmula estrutural (III) , tal como definidos antes, em solventes inertes e, se adequado, na presença de um agente de activação ou de acoplamento e/ou de uma base, para se obter os compostos de fórmula estrutural (I)

R*-N O R* R?

em que 24 os radicais R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 e R8 possuem as significações definidas antes, ou então num processo alternativo [B] fazendo a conversão de compostos de fórmula estrutural (IV)

em que os radicais R1, R3, R4, R5, R6, R7 e R8 possuem as significações definidas antes, com um agente de oxidação selectivo num solvente inerte para se obter o correspondente epóxido de fórmula estrutural (V)

em que os radicais R1, R3, R4, R5, R6, R7 e R8 possuem as significações definidas antes, e fazendo reagir num solvente inerte e, se adequado, na presença de um catalisador, com uma amina de fórmula estrutural (VI) R2-NH2 (VI), em que o radical R2 possui as significações definidas antes, preparando inicialmente os compostos de fórmula estrutural (VII) 25

em que os radicais R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 e R8 possuem as significações definidas antes, e depois efectuando a ciclização num solvente inerte e na presença de fosgénio ou de equivalentes de fosgénio, tais como, por exemplo, carbonildiimidazole (CDI), para se obter os compostos de fórmula estrutural (I)

em que os radicais R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 e R8 possuem as significações definidas antes, em que, tanto para o processo alternativo [A] como para o processo alternativo [B] , no caso de o símbolo R2 representar um radical hidrocarboneto cíclico, saturado ou parcialmente insaturado, com 3 a 7 membros, que possui um ou vários heteroátomos, iguais ou diferentes, seleccionados entre o conjunto constituído por N e S, então é possível efectuar subsequentemente uma oxidação com uma agente de oxidação selectivo para se obter a correspondente sulfona, sulfóxido ou N-óxido, e/ou 26 em que, tanto para o processo alternativo [A] como para o processo alternativo [B] , no caso de o composto preparado deste modo conter um grupo ciano na molécula, então é possível efectuar subsequentemente uma amidação deste grupos ciano recorrendo a métodos convencionais, e/ou em que, tanto para o processo alternativo [A] como para o processo alternativo [B] , no caso de o composto preparado deste modo conter um grupo protector BOC de amino na molécula, então é possível efectuar sequentemente uma eliminação deste grupo protector BOC de amino recorrendo a métodos convencionais, e/ou em que, tanto para o processo alternativo [A] como para o processo alternativo [B] , no caso de o composto preparado deste modo conter um resíduo anilina ou benzilamina na molécula, então é possível efectuar subsequentemente uma reacção deste grupo amino com vários reagentes, tais como ácidos carboxílicos, anidridos carboxílicos, cloretos de carbonilo, isocianatos, cloretos de sulfonilo ou halogenetos de alquilo, para se obter os correspondentes derivados, e/ou em que, tanto para o processo alternativo [A] como para o processo alternativo [B] , no caso de o composto preparado deste modo conter um anel fenilo na molécula, então é possível efectuar subsequentemente uma reacção com ácido clorossulfónico e subsequente reacção com aminas para se obter as correspondentes sulfonamidas. 0 processo pode ser ilustrado, a título exemplificativo, pelos seguintes esquemas de reacção: 27

0 passo de oxidação descrito antes, o qual é efectuado quando adequado, pode ser ilustrado, a titulo exemplificativo, pelos seguintes esquemas de reacção: 28 /“Λ

>**"N

Nestes casos, como solventes adequados para os processos descritos antes refere-se solventes orgânicos que sejam inertes nas condições de reacção. Tais solventes incluem halo-hidrocarbonetos, tais como diclorometano, triclorometano, tetraclorometano. 1,2-dicloroetano, tricloroetano, tetracloroetano, 1,2-dicloroetileno ou tricloroetileno, éteres, tais como éter dietílico, dioxano, tetra-hidrofurano, éter dimetilico de glicol ou éter dimetilico de etileno-glicol, álcoois, tais como metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol ou terc-butanol, hidrocarbonetos, tais como benzeno, xileno, tolueno ou ciclo-hexano, dimetilformamida, sulfóxido de dimetilo, acetonitrilo, piridina, triamida hexametilfosfórica ou água.

De igual modo, também é possível utilizar misturas de solventes constituídas pelos solventes supramencionados.

Nestes casos, como reagentes de activação ou de acoplamento adequados para os processos descritos antes refere-se os reagentes normalmente utilizados para tal fim, por exemplo, N'- (3-dimetilaminopropil)-N-etilcarbodiimida*HCl, N, Ν' -diciclo-hexilcarbodiimida, 1-hidroxi-lH-benzotriazole·Η20 e semelhantes. 29

Como bases adequadas refere-se as bases inorgânicas e orgânicas comuns. De preferência, como bases refere-se hidróxidos de matais alcalinos, tais como, por exemplo, hidróxido de sódio ou de potássio, ou carbonatos de metais alcalinos, tais como carbonato de sódio ou de potássio ou metanolato de sódio ou de potássio ou etanolato de sódio ou de potássio ou terc-butóxido de potássio, ou amidas, tais como sodamida, bis-(trimetilsilil)-amida de litio ou diisopropilamida de litio, ou aminas, tais como trietilamina, diisopropiletilamina, diisopropilamina, 4-N,N-dimetilamino-piridina ou piridina.

Nestes casos, a base pode ser utilizada numa quantidade compreendida entre 1 e 5 mol e de preferência entre 1 e 2 mol, com base em 1 mol dos compostos de fórmula estrutural (I).

De um modo geral, as reacções têm lugar a uma temperatura compreendida entre -78°C e a temperatura de refluxo e de preferência entre 0°C e a temperatura de refluxo.

As reacções podem ser efectuadas sob uma pressão atmosférica ou sob pressão reduzida ou elevada (v.g., a uma pressão compreendida entre 0,5 bar e 5 bar) . De um modo geral, são efectuadas à pressão atmosférica.

Como agentes de oxidação selectivos adequados, tanto para a preparação de epóxidos como para a oxidação que é efectuada para se obter sulfonas, sulfóxidos ou N-óxidos, refere-se, por exemplo, ácido m-cloroperbenzóico (MCPBA), metaperiodato de sódio, N-óxido de N-metilmorfolina, ácido monoperoxiftálico ou tetróxido de ósmio.

As condições utilizadas para a preparação dos epóxidos são as condições habituais para tais preparações. 30

Para condições minuciosas para o processo de oxidação, o qual é efectuado caso seja adequado, para se obter sulfonas, sulfóxidos ou N-óxidos, é possível referir às seguintes obras: M. R. Barbachyn et âl · f J . Med. Chem. 1996, 39, 680 e o documento WO-A-97/10223. É ainda possível referir os exemplos 14 a 16 descritos na parte experimental. A reacção de amidação, a qual é efectuada caso seja adequado, tem lugar sob as condições habituais. Para uma descrição mais minuciosa, é possível referir os exemplos 31 a 35 e 140 a 147.

Os compostos de fórmulas estruturais (II), (III), (IV) e (VI) são conhecidos per si para os especialistas na matéria ou então podem ser preparados por métodos convencionais. Conforme descritos nos documentos WO-A-98/01446; WO-A-93/23384; WO-A-97/03072; ou nas obras de J. A. Tucker et al., J. Med. Chem. 1998, 41, 3727; S. J. Brickner et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 673; W. A. Gregory et al., J. Med. Chem. 1989, 32, 1673, no caso das oxazolidinonas, em particular para as 5-(aminometil)-2-oxooxazolidinas necessárias.

Como composto A) de fórmula estrutural (I) preferível para utilização nas combinações refere-se a 5-cloro-N-({ (5S) -2-oxo-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida, o composto do exemplo 44.

Em particular, as combinações de acordo com a invenção são adequadas para a profilaxia e/ou para o tratamento de tromboses arteriais e embolias associadas a doenças cardíacas coronárias, perturbações do fluxo sanguíneo cerebrovascular e perturbações do fluxo sanguíneo arterial 31 periférico. As combinações de oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) com inibidores da agregação de plaquetas, anticoagulantes e/ou fibrinoliticos são particularmente adequadas para a profilaxia e/ou para o tratamento de tromboses venosas e embolias pulmonares.

Os ingredientes activos individuais das combinações são conhecidos da literatura e encontram-se, a maior parte, comercialmente disponíveis. Se adequado, podem ser utilizados, tal como as oxazolidinonas de fórmula estrutural (I), em doses subterapêuticas eficazes.

Para a profilaxia e/ou para o tratamento de distúrbios arteriais-vasculares é adequada a utilização de combinações terapêuticas de oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) em conjunto com agentes de diminuição de lípidos, em particular com inibidores de HMG-CoA (inibidores de 3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A) reductase, tais como, por exemplo, cerivastatina ( 'Rivastatin', Baycol; US 5 177 080), lovastatina ('Mevacor' ; US 4 231 938), simvastatina ( 'Zocor'; US 4 444 784), pravastatina ( 'Pravachol' ; US 4 346 227), fluvastatina ('Lescol'; US 5 354 772), atorvastatina ( 'Lipitor'; US 5 273 995), ou com outros agentes/vasodilatadores coronários terapêuticos, em particular inibidores de ECA (enzima conversora de angiotensina), tais como, por exemplo, captopril, lisinopril, enalapril, ramipril, cilazapril, benazepril, fosinopril, quinapril, perindopril; antagonistas do receptor de AII (angiotensina II), tais como, por exemplo, embusartano (US 5 863 930), losartana, valsartano, irbesartano, candesartano, eprosartano, temisartano; antagonistas do adrenorreceptor β, tais como, por exemplo, carvedilol, alprenolol, bisoprolol, acebutolol, atenolol, 32 betaxolol, carteolol, metoprolol, nadolol, penbutolol, pindolol, propanolol, timolol; antagonistas dos adrenorreceptores alfa-1, tais como, por exemplo, prazosina, bunazosina, doxazosina, terazosina; diuréticos, tais como, por exemplo, hidroclorotiazida, furosemida, bumetanida, piretanida, torasemida, amilorida; di-hidralazina; bloqueadores dos canais de cálcio, tais como, por exemplo, verapamil, diltiazem ou derivados de di-hidropiridina, tais como, por exemplo, nifedipina ('Adalat') ou nitrendipina ('Bayotensin'); substâncias que proporcionam um aumento em monofosfato de guanosina cíclica (cGMP), tais como, por exemplo, estimuladores de guanilato-

ciclase solúvel (WO 98/16223, WO 98/16507, WO 98/23619, WO 00/06567, WO 00/06568, WO 00/06569, WO 00/21954, WO 00/66582, WO 01/17998, WO 01/19776, WO 01/19355, WO 01/19780, WO 01/19778). O objectivo farmacoterapêutico do tratamento de uma doença cardíaca coronária pré-existente consiste na eliminação do desequilíbrio entre o fornecimento de oxigénio e a necessidade de oxigénio nas áreas do miocárdio afectadas pela isquemia. Assim, para o tratamento de uma doença cardíaca coronária pré-existente é adequada a utilização de combinações terapêuticas de uma oxazolidinona de fórmula estrutural (I) com agentes coronários terapêuticos, em particular com antagonistas do adrenorreceptor β; inibidores de ECA (enzima conversora de angiotensina) ; antagonistas do receptor de A-II (angiotensina II); nitratos, tais como, por exemplo, 5-mononitrato de isossorbida, dinitrato de isossorbida, trinitrato de glicerol; substâncias que proporcionam um aumento de monofosfato de guanosina cíclica (cGMP); 33 bloqueadores dos canais de cálcio. A maioria destes compostos também é utilizada na terapia para a hipertensão. A terapia trombolitica com activadores de plasminogénio (agentes tromboliticos/fibrinolíticos) , tais como, por exemplo, o activador do plasminogénio tecidual (APT), estreptocinase, reteplase ou uroquinase, demonstrou ser eficaz para a reabertura de vasos com oclusões tromboliticas. No entanto, a administração de activadores de plasminogénio por si sós não previne o crescimento subsequente do trombo. Além disso, as doses elevadas de activadores de plasminogénio podem significar um aumento do risco de hemorragia. A administração combinada de um agente trombolitico com uma oxazolidinona de fórmula estrutural (I) para a abertura de vasos com oclusões tromboliticas associadas a doença cardíaca coronária, ataques isquémicos transientes, AVC, doenças oclusivas arteriais periféricas e embolias pulmonares evita o crescimento subsequente do trombo durante a inibição da formação de trombina, reduzindo assim o risco de uma nova oclusão. Além do mais, utilizando combinações terapêuticas com um agente trombolitico e com uma oxazolidinona de fórmula estrutural (I) é possível reduzir a dose de agente trombolitico necessária para a terapia, proporcionando uma redução nas complicações hemorrágicas, factos estes que constituem uma vantagem considerável em relação à monoterapia.

As oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) também podem ser utilizadas em combinação com outras substâncias que possuam actividade anticoagulante (anticoagulantes) para a profilaxia e/ou para o tratamento de distúrbios tromboembólicos arteriais, intracardíacos e venosos. Em particular, a terapia de combinação de oxazolidinonas de 34 fórmula estrutural (I) com heparina (UFH), com heparinas de baixo peso molecular (HBPM), tais como, por exemplo, tinzaparina, certoparina, parnaparina, nadroparina, ardeparina, enoxaparina, reviparina, dalteparina, ou com inibidores directos de trombina, tais como, por exemplo, hirudina, proporciona um efeito antitrombótico aumentado. Além disso, as oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) também podem ser utilizadas em combinação com substâncias que inibem a agregação de plaquetas (inibidores da agregação de plaquetas) para a profilaxia e/ou para o tratamento de distúrbios tromboembólicos arteriais, intracardiacos e venosos. Uma lesão endotelial está associada à adesão às paredes e à activação das plaquetas sanguíneas e à estimulação simultânea da coagulação. Tal facto dá origem à formação de trombos que contêm plaquetas e fibrina, em que as plaquetas contribuem para a estabilização da matriz de fibrina (J. Hirsh, E. W. Salzman, V. J. Marder, R. W. Colman, OverView of the

Thrombotic Process and its Therapy, páginas 1151 a 1163, na obra Hemostasis and Thrombosis: Basic Principies and Clinicai Practice, Terceira edição, publicado por R. W. Colman, J. Hirsh, V. J. Marder, E. W. Salzman. J. B. Lippincott Company, Philadelphia, 1994). Assim, a inibição simultânea da coagulação e da agregação das plaquetas proporciona um efeito antitrombótico aumentado. São particularmente adequadas para a terapia de combinação as combinações de uma oxazolidinona de fórmula estrutural (I) com inibidores da agregação de plaquetas, tais como, por exemplo, aspirina, ticlopidina ('Ticlid'), clopidogrel ('Plavix'); antagonistas do receptor de fibrinogénio; (antagonistas Ilb/IIIa de glicoproteínas), tais como, por 35 exemplo, abciximab, eptifibatida, tirofiban, lamifiban, lefradafiban.

Todas as formas de administração convencionais são adequadas para a administração das combinações de acordo com a invenção. De preferência, a administração é efectuada por via oral, lingual, sublingual, bucal, rectal, tópica ou parentérica (isto é, evitando o trato intestinal, isto é, intravenosa, intra-arterial, intracardiaca, intracutânea, subcutânea, transdermal, intraperitoneal ou intramuscular). A presente invenção abrange preparações farmacêuticas que compreendem, para além de excipientes e/ou veículos inertes e não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, uma ou várias combinações da invenção ou que sejam constituídas por uma combinação da invenção, e também processos para a produção de tais preparações.

Nas preparações farmacêuticas supramencionadas, as combinações da invenção deverão estar numa concentração compreendida entre cerca de 0,1% e 99,5% e de preferência entre cerca de 0,5% e 95% em peso da mistura completa.

As preparações farmacêuticas supramencionadas podem ainda compreender, para além das combinações da invenção, outros ingredientes farmaceuticamente activos.

As preparações farmacêuticas supramencionadas podem ser preparadas de um modo convencional por métodos conhecidos, v.g., por mistura do ingrediente ou dos ingredientes activos com o(s) veículo(s).

Provou-se ser geralmente vantajoso administrar as combinações da invenção numa quantidade total compreendida entre cerca de 0,001 mg/kg e 100 mg/kg, de preferência entre 0,01 mg/kg e 100 mg/kg e mais preferencialmente entre cerca de 0,1 mg/kg e 10 mg/kg de peso corporal a cada 24 36 horas, e, se adequado, sob a forma de diversas doses individuais, para se alcançar os resultados desejados.

No entanto, caso seja adequado, poderá ser necessário utilizar quantidades diferentes das referidas antes, em particular em função da massa corporal, da natureza da via de administração, do tipo e da gravidade da doença, do comportamento individual face ao medicamento, da natureza da formulação e do tempo ou do intervalo ao longo do qual a administração tem lugar. Assim, poderá ser suficiente utilizar uma dose inferior à quantidade mínima supramencionada, ao passo que em outros casos poderá ser necessário exceder a quantidade o limite superior. Por exemplo, no caso da administração de doses relativamente elevadas, é aconselhável distribuí-las ao longo do dia, em particular em diversas doses individuais ou sob uma infusão contínua.

Assim, a invenção diz ainda respeito às combinações definidas antes para a profilaxia e/ou para o tratamento de distúrbios. A invenção diz ainda respeito a medicamentos que compreendem pelo menos uma das combinações definidas antes e, se adequado, outros ingredientes activos farmacêuticos. A invenção diz ainda respeito à utilização das combinações definidas antes para a produção de medicamentos para a profilaxia e/ou para o tratamento dos distúrbios descritos antes, de preferência dos distúrbios tromboembólicos e em particular para o enfarte do miocárdio, angina de peito (incluindo angina instável), morte súbita cardíaca, reoclusões e restenoses após angioplastia ou bypass aortocoronário, AVC, ataques isquémicos transientes, doenças oclusivas arteriais 37 periféricas, embolias pulmonares e tromboses venosas agudas.

Os dados percentuais nos exemplos seguintes são efectuados, para cada caso, com por base no peso; as partes são partes em peso.

Exemplos A Determinação da actividade fisiológica 1. Actividade fisiológica dos compostos de fórmula estrutural (I)

Os compostos de fórmula estrutural (I) são utilizados particularmente como inibidores selectivos do factor Xa de coagulação e não inibem, ou inibem apenas em concentrações bastante elevadas, outras serina-proteases, tais como trombina, plasmina ou tripsina.

Os inibidores do factor Xa de coagulação são designados como "selectivos" quando os seus valores CI50 para a inibição do factor Xa são 100 vezes, de preferência 500 vezes e mais preferencialmente 1000 vezes inferiores aos valores CI50 para a inibição de outras serina-proteases, em particular trombina, plasmina e tripsina, sendo referidos como métodos de teste de selectividade os métodos de testes dos exemplos A-l) a.l) e a.2) a seguir descritos.

As propriedades biológicas particularmente vantajosas dos compostos de fórmula estrutural (I) podem ser determinadas pelos métodos seguintes. 38 a) Descrição dos testes (in vitro) a.l) Determinação da inibição do factor Xa

Determinou-se a actividade enzimática do factor Xa humano (FXa) por meio da conversão de um substrato cromogénico especifico do FXa. Neste caso, o factor Xa elimina a p-nitroanilina a partir do substrato cromogénico. As determinações foram efectuadas em placas de microtitulação do seguinte modo.

Dissolveu-se as substâncias de teste em diversas concentrações em DMSO e manteve-se a incubar com FXa humano (0,5 nmol/L, dissolvidos em tampão tris 50 mmol/L [C,C,C-tris(hidroximetil)-aminometano], NaCl 150 mmol/L, BSA 0,1% (albumina do soro de bovino) a 25°C durante 10 minutos. Utilizou-se DMSO puro como controlo. Adicionou-se então o substrato cromogénico (150 pmol/L Pefachrome® FXa da 'Pentapharm'). Depois de se incubar a 25°C durante 20 minutos, determinou-se a extinção a 405 nm. Comparou-se as extinções das misturas de teste com a substância de teste com as misturas de controlo na ausência da substância de teste e calculou-se os valores CI50 a partir desses dados. a.2) Determinação da selectividade

Demonstrou-se a inibição selectiva de FXa a partir do estudo da inibição por parte das substâncias de teste de outras serina-proteases humanas, tais como trombina, tripsina, plasmina. Determinou-se a actividade enzimática de trombina (75 um/mL), tripsina (500 um/mL) e plasmina (3,2 nmol/L) por dissolução destas enzimas em tampão tris (100 mmol/L, CaCl2 20 mmol/L, pH ~ 8,0) e incubação a cm a substância de teste ou com solvente durante 10 minutos. 39

Iniciou-se então a reacção enzimática por adição de substratos cromogénicos específicos adequados ('Chromozym Thrombin®' de Boehringer Mannheim, 'Chromozym Trypsin®' de Boehringer Mannheim, 'Chromozym Plasmin®' de Boehringer Mannheim) e determinou-se a extinção a 405 nm decorridos 20 minutos. Todas as determinações foram efectuadas a 37°C. Comparou-se as extinções das misturas de teste com a substância de teste com as amostras de controlo na ausência de substância de teste e determinou-se os valores CI50 a partir desses dados. a.3) Determinação do efeito anticoagulante O efeito anticoagulante das substâncias de teste foi determinado in vitro em plasma humano. Para este fim, recolheu-se sangue humano numa solução de citrato de sódio 0,11 M, utilizando uma proporção de mistura de citrato de sódio/sangue de 1/9. Misturou-se minuciosamente o sangue após a recolha e centrifugou-se a cerca de 2000 g durante 10 minutos. Removeu-se o sobrenadante recorrendo a uma pipeta. Determinou-se o tempo de protrombina (TP, sinónimo: teste 'Quick') na presença de concentrações variáveis da substância de teste ou do solvente adequado utilizando um estojo de teste comercialmente disponível (Neoplastin® da Boehringer Mannheim). Manteve-se a incubar os compostos de teste com o plasma durante 10 minutos a 37°C. induziu-se então a coagulação por adição de tromboplastina e determinou-se o tempo do início da coagulação. Determinou-se a concentração da substância de teste que proporciona o dobro do tempo de protrombina. 40 b) Determinação do efeito antitrombótico (in vivo) b.l) Modelo de derivação arteriovenoso (rato)

Anestesiou-se ratos machos em jejum (estirpe: HSD CPB:WU) , com um peso de 200-250 g, com uma solução de Rompum/Ketavet (12 mg/kg/50 mg/kg). Induziu-se a formação de trombos numa derivação arteriovenosa utilizando um método de acordo com o descrito por Christopher N. Berry et al., Br. J. Pharmacol. (1994), 113, 1209-1214. Para este fim, expôs-se a veia jugular esquerda e a artéria carótida direita. Formou-se uma derivação extracorpórea entre os dois vasos utilizando um tubo de polietileno com 10 cm de comprimento (PE 60) . Fixou-se este tubo de polietileno no meio, atando-o a um tubo de polietileno com 3 cm de comprimento (PE 160) , o qual continha fio de nylon endurecido, formando um laço para se produzir uma superfície trombogénica. Manteve-se a circulação extracorpórea durante 15 minutos. Removeu-se então a derivação e o fio de nylon, sendo o trombo imediatamente pesado. 0 peso do fio de nylon tinha sido determinado antes do início da experiência. Administrou-se as substâncias de teste, por via intravenosa na veia caudal ou por via oral através de uma sonda esofágica, aos animais conscientes antes de se montar a circulação extracorpórea. Os resultados estão agrupados no quadro 1. 41

Quadro 1: efeito antitrombótico no modelo de derivação arteriovenoso (rato) após administração por via oral ou intravenosa

Exemplo DE50 [mg/kg] p.o. DE50 [mg/kg] i.v. 1 10 17 6 44 3 95 3 114 3 115 3 123 3 162 3 b.2) Modelo de trombose arterial (rato)

Anestesiou-se ratos machos em jejum (estirpe: HSD CPB: WU) tal como descrito antes. Os ratos tinham um peso médio de cerca de 200 g. Expôs-se a artéria carótida esquerda (cerca de 2 cm). Induziu-se a formação de um trombo arterial por lesão mecânica do vaso por meio de um método de acordo com o descrito por K. Meng et al., Naunyn-Schmiedeberg' s Arch. Pharmacol. (1977), 301, 115-119. Para este fim, interrompeu-se o fluxo sanguíneo da artéria carótida exposta com o auxílio de grampos, arrefeceu-se até -12 °C num canal metálico durante 2 minutos e, para se normalizar o tamanho do trombo, comprimiu-se simultaneamente com um peso de 200 g. Depois, reduziu-se ainda mais o fluxo sanguíneo por meio de uma pinça colocada à volta da artéria carótida distai a partir da secção lesionada do vaso. Removeu-se o grampo proximal, fechou-se a ferida e abriu-se novamente decorridas 4 horas para se remover a secção lesionada do vaso. Abriu-se 42 longitudinalmente a secção do vaso e removeu-se o trombo a partir da secção lesionada do vaso. Determinou-se imediatamente o peso liquido do trombo. Administrou-se as substâncias de teste, por via intravenosa na veia caudal ou por via oral através de uma sonda esofágica, a animais conscientes para se dar inicio à experiência. b.3) Modelo de trombose venosa (rato)

Anestesiou-se ratos machos em jejum (estirpe: HSD CPB: WU) tal como descrito antes. Os ratos tinham um peso médio de cerca de 200 g. Expôs-se a veia jugular esquerda (cerca de 2 cm) . Induziu-se a formação de um trombo arterial por lesão mecânica do vaso por meio de um método de acordo com o descrito por K. Meng et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. (1977), 301, 115-119. Para este fim, interrompeu-se o fluxo sanguíneo da veia jugular exposta com o auxílio de grampos, arrefeceu-se até -12°C num canal metálico durante 2 minutos e, para se normalizar o tamanho do trombo, comprimiu-se simultaneamente com um peso de 200 g. Depois reabriu-se o fluxo sanguíneo e fechou-se a ferida. Decorridas 4 horas, reabriu-se a ferida para se remover o trombo das secções lesionadas dos vasos. Determinou-se imediatamente o peso líquido do trombo. Administrou-se as substâncias de teste, por via intravenosa na veia caudal ou por via oral através de uma sonda esofágica, a animais conscientes para se dar início à experiência. 43 2. Actividade fisiológica das combinações de compostos de fórmula estrutural (I) a) Estudo in vivo num modelo animal de tromboses em ratos

Sob anestesia, expôs-se a artéria carótida de ratos (estirpe: HSD CPB:WU, Harlan Winkelmann). Impregnou-se um bocado de um papel de filtro com uma solução aquosa de FeCl3 a 10% (dissolvida numa solução aquosa de ácido clorídrico IN) e colocou-se cuidadosamente por baixo do vaso exposto, em conformidade com o método descrito por Kurz et al. (Rat Model of Arterial Thrombosis Induced by Ferric Chloride, Thrombosis Research 60, 269-280, 1990).

Decorridos 3 minutos, removeu-se o bocado de papel de filtro. Decorridos 15 minutos, removeu-se a artéria carótida, separou-se o trombo e pesou-se imediatamente. Os animais (10 ratos por grupo) tinham sido pré-tratados com 1 mg/kg de cada um dos ingredientes activos individuais (a oxazolidinona de fórmula estrutural (I) e a combinação do ingrediente activo) ou com a combinação de 1 mg/kg de oxazolidinona de fórmula estrutural (I) e 1 mg/kg de da combinação de ingrediente activo. Os animais do grupo de controlo foram tratados com o solvente correspondente. Calculou-se a significância estatística utilizando a análise de t-Student. Os valores que apresentam p < 0,05 são considerados como tendo um efeito estatisticamente significativo (Medicai Statistics, MJ Campbell, D.Machin, Segunda edição, John Wiley & Sons) . Os resultados estão apresentados no quadro 2. 44

Quadro 2: efeito trombótico sinergístico da combinação de uma oxazolidinona de fórmula estrutural (I) com um inibidor da agregação de plaquetas

Redução do peso do trombo após tratamento por via oral com Composto do exemplo 44 Clopidrogel Combinação do composto do [1 mg/kg] [1 mg/kg] exemplo 44 [1 mg/kg] com clopidrogel [1 mg/kg] 22% 28% 39% nenhum efeito nenhum efeito com efeito (P > 0,05) (P > 0,05) (P < 0,05)

Tal como ilustrado no quadro 2, é alcançado um efeito sinergístico com a combinação de uma oxazolidinona de fórmula estrutural (I) , tal como o composto do exemplo 44, com um inibidor da agregação de plaquetas, tal como clopidrogel, isto é, os dois componentes potenciam mutuamente o seu efeito. Numa dosagem individual, os compostos demonstraram ser inactivos para a dose estudada. Pelo contrário, a combinação dos dois compostos proporcionou uma redução significativa no peso do trombo. Assim, a combinação de oxazolidinonas de fórmula estrutural (I) com substâncias que inibem a agregação de plaquetas melhora consideravelmente a terapia antitrombótica. B Exemplos de preparação

Compostos de partida A preparação de 3-morfolinona encontra-se descrita no documento US 5 349 045, A preparação de N-(2,3-epoxipropil)-ftalimida encontra-se descrita por J.-W. Chern et al. Tetrahedron Lett. 1998, 39, 8483. 45

As anilinas substituídas podem ser obtidas fazendo reagir, por exemplo, 4-fluoronitrobenzeno, 2,4-difluoronitrobenzeno ou 4-cloronitrobenzeno com as aminas ou amidas adequadas na presença de uma base. Esta reacção também pode ser efectuada utilizando um catalisador de Pd, tal como Pd (OAc)2/DPPF/NaOt-Bu (Tetrahedron Lett. 1999, 40, 2035) ou cobre (Renger, Synthesis 1985, 856; Aebischer et al., Heterocycles 1998, 48, 2225). Os compostos haloaromáticos que não tenham um grupo nitro também podem ser convertidos inicialmente nas amidas correspondentes da mesma forma, sendo depois submetidas a nitração na posição 4 (US 3279880). I. 4-(4-Morfolina-3-onil)-nitrobenzeno

Dissolve-se 2 mol (202 g) de morfolina-3-ona (E. Pfeil, U. Harder, Angew. Chem. 79, 1967, 188) em 2 L de N-metilpirrolidona. Adiciona-se progressivamente 88 g (2,2 mol) de hidreto de sódio (60% em parafina) ao longo de um período de 24 horas. Depois de cessar a libertação de hidrogénio, adiciona-se, gota a gota, 282 g (2 mol) de 4-fluoronitrobenzeno, arrefecendo à temperatura ambiente durante 1 hora, e depois agita-se a mistura de reacção de um dia para o outro. Depois, remove-se por destilação 1,7 L do volume de líquido a 12 mbar e 76°C, verte-se o resíduo em 2 L de água e extrai-se esta mistura duas vezes com 1 L 46 de acetato de etilo de cada vez. Lava-se as fases combinadas orgânicas com água, depois seca-se sobre sulfato de sódio e remove-se o solvente por destilação sob uma pressão hipobárica. Submete-se a purificação por cromatografia através de gel de sílica com hexano/acetato de etilo (1:1) e depois deixa-se cristalizar a partir de acetato de etilo. Obtém-se 78 g do produto com o aspecto de um sólido incolor a acastanhado com um rendimento teórico de 17,6%. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,86 (m, 2 H, CH2CH2) , 4,08 (m, 2 H, CH2C H2) , 4,49 (s , 2 H, CH2CO) , 7,61 (d, 2 H, 3J= 8,95 Hz, CHCH) , 8,28 (d, 2 H, 3J=8,95 Hz, CHCH) MS (r.I.%) = 222 (74, M+) , 193 (100), 164 (28) , 150 (21), 136 (61), 117 (22), 106 (24), 90 (37), 76 (38) , 63 (32), 50 (25)

Os compostos seguintes foram sintetizados de um modo análogo: 3- fluór-4-(4-morfolina-3-onil)-nitrobenzeno 4- (N-piperidonil)-nitrobenzeno 3- fluór-4- (N-piperidonil)-nitrobenzeno 4- (N-pirrolidonil)-nitrobenzeno 3-fluór-4- (N-pirrolidonil)-nitrobenzeno II. 4-(4-Morfolina-3-onil)-anilina

47

Numa autoclave, dissolve-se 63 g (0,275 mol) de 4-(4-morfolina-3-onil)-nitrobenzeno em 200 mL de tetra-hidrofurano, adiciona-se 3,1 g de Pd/C (5%) e submete-se a mistura a hidrogenação sob uma atmosfera de hidrogénio à pressão de 50 bar e a 70°C, durante 8 horas. Depois de se filtrar o catalisador, remove-se o solvente por destilação sob uma pressão hipobárica e purifica-se o produto por cristalização a partir de acetato de etilo. Obtém-se 20 g de produto com o aspecto de um sólido incolor a azulado e com um rendimento teórico de 37,6%. A purificação também pode ser efectuada por cromatografia através de gel de silica com hexano/acetato de etilo. 3η- -NMR (300 MHz, CDCls) : 3,67 (m, 2 H, CH2CH2), 3, 99 2 H, CR2CH2) , 4,27 (s, 2 H, CH2CO) , 6,68 (d, 2 H, 71 Hz, CfíCH) , 7,03 (d, 2 H, 3J=8,71 Hz, CHCH) MS (r.I.%) = = 192 (100, M+), 163 (48), 133 (26) , 119 (76), 106 (49), 92 (38), 67 (27), 65 (45), 52 (22), 28 (22)

Os compostos seguintes foram sintetizados de um modo análogo: 3- fluór-4-(4-morfolina-3-onil)-anilina 4- (N-piperidonil)-anilina 3- fluór-4- (N-piperidonil)-anilina 4- (N-pirrolidonil)-anilina 3-fluór-4-(N-pirrolidonil)-anilina Método geral para a preparação de anilinas 4-substituidas fazendo reagir 1-fluór-4-nitrobenzenos com aminas primárias ou secundárias e subsequente redução. 48

Dissolve-se quantidades equimolares de fluoronitro-benzeno ou de cloronitrobenzeno e da amina em sulfóxido de dimetilo ou acetonitrilo (solução 0,1 M a 1M) e agita-se a 100°C de um dia para o outro. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, dilui-se a mistura de reacção com éter e lava-se com água. Seca-se a fase orgânica sobre MgS04, filtra-se e concentra-se. No caso de se obter um precipitado na mistura de reacção, então remove-se por filtração e lava-se com éter ou acetonitrilo. No caso de o produto também se encontrar nas águas-mãe, então processa-se com éter e água conforme descrito. Os produtos impuros podem ser purificados por cromatografia através de gel de silica (misturas de diclorometano/ciclo-hexano e diclorometano/etanol).

Para a subsequente redução, dissolve-se o composto nitro em metanol, etanol ou mistura de etanol/diclorometano (solução 0,01 M a 0,5 M) , mistura-se com paládio sobre carvão (10%) e agita-se em ambiente de hidrogénio à pressão atmosférica de um dia para o outro. Depois, filtra-se e concentra-se. O produto impuro pode ser purificado por cromatografia através de gel de silica (misturas de diclorometano/etanol) ou por HPLC preparativa de fase inversa (misturas de acetonitrilo/água).

Em alternativa, também é possível utilizar pó de ferro como agente de redução. Assim, dissolve-se o composto nitro em ácido acético (solução 0,1 M a 0,5 M) e adiciona-se, 49 progressivamente e a 90°C, seis equivalentes de pó de ferro e água (0,3 a 0,5 vezes o volume de ácido acético), ao longo de 10 a 15 minutos. Decorridos mais 30 minutos a 90°C, filtra-se a mistura e concentra-se o filtrado. Submete-se o resíduo a processamento por extracção com acetato de etilo e uma solução de hidróxido de sódio 2 N. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtra-se e concentra-se. O produto impuro pode ser purificado por cromatografia através de gel de sílica (misturas de diclorometano/etanol) ou por HPLC preparativa de fase inversa (misturas de acetonitrilo/água).

Os compostos de partida seguintes foram preparados de um modo análogo: III-l. Terc-butil-1-(4-aminofenil)-L-prolinato MS (ESI): m/z (%) = 304 (M+H+MeCN, 100), 263 (M+H, 20) ; HPLC (método 4): tr = 2,79 minutos. III-2. 1-(4-Aminofenil)-3-piperidinacarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 220 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,59 minutos. III-3. 1-(4-Aminofenil)-4-piperidinacarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 220 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,57 minutos. III-4. 1-(4-Aminofenil)-4-piperidinona MS (ESI): m/z (%) = 191 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,64 minutos. 50 ΙΙΙ-5. 1-(4-Aminofenil)-L-prolinamida MS (ESI): m/z (%) = 206 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,72 minutos. III-6. [1-(4-Aminofenil)-3-piperidinil]-metanol MS (ESI): m/z (%) = 207 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,60 minutos. III-7. [1-(4-Aminofenil)-2-piperidinil]-metanol MS (ESI): m/z (%) = 207 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,59 minutos. III-8. Etil-1-(4-aminofenil)-2-piperidincarboxilato MS (ESI): m/z (%) = 249 (M+H, 35), 175 (100); HPLC (método 4): tr = 2,43 minutos. III-9. [1-(4-Aminofenil)-2-pirrolidinil]-metanol MS (ESI): m/z (%) = 193 (M+H, 45); HPLC (método 4): tr = 0,79 minutos. III-10. 4-(2-Metil-hexa-hidro-5H-pirrolo[3,4-d]isoxazol-5- il)-fenilamina A partir de 2-metil-hexa-hidro-2H-pirrolo[3,4-d]-isoxazol (Ziegler, Cari B., et ai.; J. Heterocycl. Chem.; 25; 2; 1988; 719-723) MS (ESI): m/z (%) = 220 (M+H, 50), 171 (100); HPLC (método 4): tr = 0,54 minutos. III-ll. 4-(1-Pirrolidinil)-3-(trifluorometil)-anilina MS (ESI): m/z (%) = 231 (M+H, 100); HPLC (Método 7): tr = 3,40 minutos. 51 ΙΙΙ-12. 3-Cloro-4-(1-pirrolidinil)-anilina MS (ESI): m/z (%) = 197 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,78 minutos. III-13. 5-Amino-2-(4-morfolinil)-benzamida MS (ESI): m/z (%) = 222 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,77 minutos. III-14. 3-Metoxi-4-(4-morfolinil)-anilina MS (ESI): m/z (%) = 209 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,67 minutos. III-15. 1-[5-Amino-2-(4-morfolinil)-fenil]-etanona MS (ESI): m/z (%) = 221 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,77 minutos. Método geral para a preparação de anilinas 4-substituidas fazendo reagir l-flúor-4-nitrobenzenos com amidas e subsequente redução

Dissolve-se a amida em DMF e adiciona-se 1,5 equivalentes de terc-butóxido de sódio. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora e depois adiciona-se progressivamente 1,2 equivalentes de 1-flúor-4-nitrobenzeno. Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro, dilui-se com éter ou com acetato de etilo 52 e lava-se com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtra-se e concentra-se. 0 produto impuro pode ser purificado por cromatografia através de gel de sílica (misturas de diclorometano/etanol).

Para a redução subseguente, dissolve-se o composto nitro em etanol (solução 0,01 M a 0,5 M), com paládio sobre carvão (10%) e agita-se sob uma atmosfera de hidrogénio à pressão atmosférica de um dia para o outro. Depois filtra-se e concentra-se. O produto impuro pode ser purificado por cromatografia através de gel de sílica (misturas de diclorometano/etanol) ou por HPLC preparativa de fase inversa (misturas de acetonitrilo/água).

Em alternativa, também é possível utilizar pó de ferro como agente de redução. Assim, dissolve-se o composto nitro em ácido acético (solução 0,1 M a 0,5 M) e adiciona-se, progressivamente e a 90°C, seis equivalentes de pó de ferro e água (0,3 a 0,5 vezes o volume de ácido acético), ao longo de 10 a 15 minutos. Decorridos ma is 30 minutos a 90°C, filtra-se a mistura e concentra-se o filtrado.

Submete-se o resíduo a processamento por extracção com acetato de etilo e uma solução de hidróxido de sódio 2 N. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtra-se e concentra-se. O produto impuro pode ser purificado por cromatografia através de gel de sílica (misturas de diclorometano/etanol) ou por HPLC preparativa de fase inversa (misturas de acetonitrilo/água).

Os compostos de partida seguintes foram preparados de um modo análogo: 53 IV-1. 1— [4—Aitiino—2— (trif luorometil) -fenil] -2-pirrolidinona MS (ESI): m/z (%) = 245 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,98 minutos IV-2. 4-[4-Amino-2-(trifluorometil)fenil]-3-morfolinona MS (ESI): m/z (%) = 261 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,54 minutos. IV-3. 4-(4-Amino-2-clorofenil)-3-morfolinona MS (ESI): m/z (%) = 227 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 1,96 minutos. IV-4. 4-(4-Amino-2-metilfenil)-3-morfolinona MS (ESI): m/z (%) = 207 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,71 minutos. IV-5. 5-Amino-2-(3-oxo-4-morfolinil)-benzonitrilo MS (ESI): m/z (%) = 218 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 1,85 minutos. IV-6. 1-(4-Amino-2-clorofenil)-2-pirrolidinona MS (ESI): m/z (%) = 211 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,27 minutos. IV-7. 4-(4-Amino-2,6-dimetilfenil)-3-morfolinona A partir de 2-flúor-1,3-dimetil-5-nitrobenzeno (Bartoli et al., J. Org. Chem. 1975, 40, 872): MS (ESI): m/z (%) = 221 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,77 minutos. 54 IV-8. 4-(2,4-Diaminofenil)-3-morfolinona A partir de 1-flúor-2,4-dinitrobenzeno: MS (ESI): m/z (%) = 208 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 0,60 minutos. IV-9. 4-(4-Amino-2-clorofenil)-2-metil-3-morfolinona A partir de 2-metil-3-morfolinona (Pfeil, E.; Harder, U.; Angew. Chem. 1967, 79, 188): MS (ESI): m/z (%) = 241 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,27 minutos. IV-10. 4-(4-Amino-2-clorofenil)-6-metl-3-morfolinona A partir de 6-metil-3-morfolinona (EP 350 002): MS (ESI): m/z (%) = 241 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,43 minutos.

Exemplos de síntese

Os seguintes exemplos 1 a 13, 17 a 19 e 36 a 57 dizem respeito à variante [A] do processo.

Exemplo 1

Preparação de 5-cloro-N-{[(5S)-3-(3-flúor-4-morfolino-fenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofeno-carboxamida

55

Dissolve-se (5S) -5-(aminometil)-3-(3 —flúor-4-morfolino-fenil)-1,3-oxazolidina-2-ona (para a preparação veja-se S. J. Brickner et ãl., J. Med. Chem. 1996, 39, 673) (0,45 g, 1.52 mmol), ácido 5-clorotiofeno-2-carboxílico (0,25 g, 1.52 mmol) e hidrato de 1-hidroxi-lH-benzotriazol (HOBT) (0,3 g, 1,3 equivalentes) em 9,9 mL de DMF. Adiciona-se 0,31 g (1,98 mmol, 1,3 equivalentes) de Ν'-(3-dimetilaminopropil)-N-etilcarbodiimida (EDCI) e acrescenta-se, gota a gota e à temperatura ambiente, 0,39 g (0,53 mL, 3,05 mmol, 2 equivalentes) de diisopropiletilamina (DIEA). Agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro. Adiciona-se 2 g de gel de sílica e evapora-se a mistura até à secura sob uma pressão hipobárica. Submete-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica com um gradiente de tolueno/acetato de etilo. Obtém-se 0,412 g (rendimento de 61,5%) do composto em epígrafe com um ponto de fusão (p.f.) de 197°C.

Fr (S1O2, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,29 (precursor = 0,0); MS (DCI) 440,2 (M+H), padrão Cl; 1H-NMR (de-DMSO, 300 MHz) 2,95 (m, 4H) , 3,6 (t, 2H) , 3,72 (m, 4H) , 3,8 (dd, \—1 4,12 (t, 1H), 4,75-4,85 (m, 1H) , 7,05 (t, 1H), 7,15- -7,2 (m, 3H) , 7,45 (dd, 1H) , > 05 CO (d, 1H) , 8 , 95 (t, 1H) . 56

Exemplo 2 5-Cloro-N-{[(5S)-3-(4-morfolinofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo a partir de 4-morfolinofenilcarbamato de benzilo, de acordo com o passo de (5S)-5-(aminometil)-3-(3 — flúor-4-morfolinofenil)-1,3- oxazolidina-2-ona (ver Exemplo 1). P . f . : 19 8 ° C; CI50 = 43 nM;

Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,24. Exemplo 3 5-Cloro-N-({(5S)-3-[3-flúor-4-(1,4-tiazinan-4-il)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo a partir de (5S)-5-(aminometil)-3-[3-flúor-4-(1,4-tiazinan-4-il) -fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona (para a preparação ver M. R. Barbachyn et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 680). P.f.: 193 °C; 57

Rendimento: 82%;

Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo 1:1) = 0,47 (Precursor = 0,0).

Exemplo 4 5-Bromo-N-({(5S)-3-[3-flúor-4-(1,4-tiazinan-4-il)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

O 0 composto é obtido de um modo análogo a partir de ácido 5-bromotiofeno-2-carboxílico. P.f.: 200 °C.

Exemplo 5 N-({(5S) -3-[3—Flúor-4-(1,4-tiazinan-4-il)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-metil-2-tiofenocarboxamida

Q 0 composto é obtido de um modo análogo a partir de ácido 5-metiltiofeno-2-carboxílico. P.f.: 167 °C. 58

Exemplo 6 5-Cloro-N-{[(5S)-3-(6-metiltieno[2,3-b]piridina-2-il)-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida

cr 0 composto é obtido de um modo análogo a partir de (5S)-5-(aminometil)-3-(6-metiltieno[2,3-b]piridina-2-il) -1,3-oxazolidina-2-ona (para a preparação ver o documento EP-A-785 200). P . f . : 2 4 7 0 C .

Exemplo 7 5-Cloro-N-{[(5S)-3-(3-met11-2-0X0-2,3-di-hidro-l,3-benzotiazol-6-il)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo a partir de 6-[(5S)-5-(aminometil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-3-il]-3-metil- 59 1,3-benzotiazol-2(3Η)-ona (para a preparação ver o documento EP-A-738 726). P . f . : 217 0 C .

Exemplo 8 5-Cloro-N-[((5S)-3-{3-flúor-4-[4-(4-piridinil)-piperazino]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofeno-carboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo a partir de (5 S)-5-(aminometil)-3-{3-flúor-4-[4-(4-piridinil)-piperazino]-fenil}-1,3-oxazolidina-2-ona (preparado de um modo análogo ao descrito por J. A. Tucker et al., J. Med. Chem. 1998, 41, 3727) . MS (ESI) 516 (M+H), padrão Cl. 60

Exemplo 9 5-Cloro-N-({(5S)-3-[3-flúor-4-(4-metilpiperazino)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo a partir de (5S)-5-(aminometil)-3-[3-flúor-4-(4-metilpiperazino)-fenil]-1, 3-oxazolidina-2-ona.

Exemplo 10 5-Cloro-N-({(5S)-3-[3-flúor-4-(4-terc-butoxicarbonil-piperazina-l-il)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo a partir de (5S)-5-(aminometil)-3-[3-flúor-4-(4-tert-butoxicarbonil-piperazina-l-il)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona (para a preparação ver o documento WO-A-93/23384). 61 Ρ.f.: 184 °C;

Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,42. Exemplo 11 5-Cloro-N-({(5S)-3-[3-flúor-4-(piperazina-l-il)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido por reacção do composto do exemplo 12 com ácido trifluoroacético em cloreto de metileno. CI50 = 140 nM; 1H-NMR [dg-DMSO] : 3,01-3,25 (m, 8H) , 3,5-3,65 (m, 2H) , 3,7-3,9 (m, 1H), 4,05-4,2 (m, 1H), 4,75-4,9 (m, 1H), 7,05- 7,25 (m, 3H), 7,5 (dd, 1H), 7,7 (d, 1H), 8,4 (s largo, 1H), 9, 0 (t, 1H) .

Exemplo 12 5-Cloro-N-[((5S)-3-(2,4'-bipiridinil-5-il)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida

62 0 composto é obtido de um modo análogo a partir de (5S)-5-aminometil-3-(2,4'-bipiridinil-5-il)-2-oxo-l, 3-oxazolidina-2-ona (para a preparação ver o documento EP-A- 789 026) .

Fr (Si02, acetato de etilo/etanol a 1:2) = 0,6; MS (ESI) 515 (M+H), padrão Cl.

Exemplo 13 5-Cloro-N-{[(5S)-2-oxo-3-(4-piperidinofenil)-1,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida

O composto é obtido a partir de 5-(hidroximetil)-3-(4-piperidinofenil)-1,3-oxazolidina-2-ona (para a preparação ver o documento DE 2708236), após mesilação, reacção com ftalimida de potássio, hidrazinólise e reacção com ácido 5-clorotiofeno-2-carboxílico.

Fr (Si02, acetato de etilo/tolueno a 1:1) = 0,31; P.f. 205°C.

Exemplo 17 5-Cloro-N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida 63

A partir de 1-(4-aminofenil)-pirrolidina-2-ona (para a preparação ver Reppe et al., Justus Liebigs Ann. Chem.; 596; 1955; 209), utilizando um processo de acordo com um esquema sintético conhecido (ver S.J. Brickner et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 673) obteve-se a 5-Cloro-N-({(5S)-2- oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida, após reacção com cloreto de benziloxicarbonilo, subsequente reacção com butirato de R-qlicidilo, reacção de mesilação, reacção com ftalimida de potássio, hidrazinólise em metanol e, por último, reacção com ácido 5-clorotiofeno-2-carboxílico. A 5-cloro-N- ({ (5S)-2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida obtida deste modo possui um valor CI50 de 4 nM (método de teste para a determinação do valor CI50 de acordo com o exemplo A-l, a.l) "Determinação da inibição do factor Xa", descrito antes). P.f.: 229°C;

Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,05, (Precursor: = 0,0); MS (ESI): 442,0 (21%, M+Na, padrão Cl), 420,0 (72%, M+H, padrão Cl), 302,3 (12%), 215 (52%), 145 (100%); 1H-NMR (dg-DMSO, 300 MHz) : 2,05 (m, 2H) , 2,45 (m, 2H), 3,6 (t, 2H), 3,77-3, 85 (m, 3H) , 4,15 (t, 1H) , 4,75-4, 85 (m, 1H) , 7,2 (d, 1H), 7,5 (d, 2H) , 7,65 (d, 2H) , 7,69 (d, 1H) , 8,96 (t, 1H) . 64

Os passos individuais para a síntese do exemplo 17, descrito antes, bem como os precursores respectivos, foram os seguintes.

Adiciona-se lentamente 4,27 g (25,03 mmol) de cloroformato de benzilo a 4 g (22,7 mmol) de 1—(4 — aminofenil)-pirrolidina-2-ona e a 3, 6 mL (28,4 mmol) de N, N-dimetilanilina em 107 mL de tetra-hidrofurano a -20°C. Agita-se a mistura a -20°C durante 30 minutos e depois deixa-se aquecer até à temperatura ambiente. Adiciona-se O, 5 L de acetato de etilo e lava-se a fase orgânica com 0,5 L de uma solução saturada de NaCl. Seca-se a fase orgânica removida sobre MgS04 e evapora-se o solvente sob uma pressão hipobárica. Obtém-se 5,2 g (rendimento de 73,8%) de 4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil-carbamato de benzilo com o aspecto de cristais bege pálido, com um ponto de fusão de 17 4 0 C .

Adiciona-se, gota a gota, 7,27 mL de uma solução 2,5 M de n-butil-lítio (BuLi) em hexano a 1,47 g (16,66 mmol) de álcool isoamílico em 200 mL de tetra-hidrofurano, sob uma atmosfera de árgon a -10°C, acrescentando-se mais 8 mL da solução de BuLi até se observar uma mudança da cor do indicador N-benzilidenobenzilamina adicionado. Agita-se a mistura a -10°C durante 10 minutos, arrefece-se até -78°C e adiciona-se lentamente uma solução de 4,7 g (15,14 mmol) de 4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenilcarbamato de benzilo. Depois adiciona-se mais 4 mL da solução de BuLi até se observar a mudança de cor do indicador para cor-de-rosa. Agita-se a mistura a -78°C durante 10 minutos, adiciona-se 2,62 g (18,17 mmol) de butirato de R-glicidilo e agita-se a mistura a -78°C durante 30 minutos. 65

Deixa-se a mistura aquecer até à temperatura ambiente de um dia para o outro, adiciona-se à mistura 200 mL de água e evapora-se o resíduo de THF sob uma pressão hipobárica. Extrai-se o resíduo aquoso com acetato de etilo, seca-se a fase orgânica sobre MgS04 e concentra-se sob uma pressão hipobárica. Tritura-se o resíduo com 500 mL de éter dietílico e remove-se por filtração os cristais que se tinham separado, com sucção e sob uma pressão hipobárica.

Obtém-se 3,76 g (rendimento teórico de 90%) de (5R)-5-(hidroximetil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona com um ponto de fusão de 148°C e um Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,04, (precursor = 0,3) .

Introduz-se 3,6 g (13,03 mmol) de (5R)-5-(hidroxi-metil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona e 2,9 g (28, 67 mmol) de trietilamina em 160 mL de diclorometano a 0°C, sob agitação. Adiciona-se 1,79 g (15,64 mmol) de cloreto de metano-sulfonilo, sob agitação, e agita-se a mistura a 0°C durante 1,5 horas e à temperatura ambiente durante 3 horas.

Lava-se a mistura de reacção com água e extrai-se a fase aquosa uma vez mais com cloreto de metileno. Seca-se os extractos orgânicos combinados sobre MgS04 e evapora-se. Dissolve-se então o resíduo (1,67 g) em 70 mL de acetonitrilo, adiciona-se 2,62 g (14,16 mmol) de ftalimida de potássio e agita-se a mistura num recipiente fechado a 180°C, num forno de microondas durante 45 minutos.

Remove-se por filtração a mistura a partir do resíduo insolúvel, concentra-se o filtrado sob uma pressão hipobárica, dissolve-se o resíduo (1,9 g) em metanol e 66 adiciona-se 0,47 g (9,37 mmol) de hidrato de hidrazina. Mantém-se a mistura em ebulição durante 2 horas, arrefece-se, adiciona-se uma solução saturada de bicarbonato de sódio e extrai-se a mistura seis vezes com um total de 2 L de cloreto de metileno. Seca-se os extractos orgânicos de (5S)-5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil) -fenil] -1,3-oxazolidina-2-ona impuros sobre MgS04 e concentra-se sob uma pressão hipobárica.

No último passo, prepara-se 5-cloro-N-({ (5S)-2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida por dissolução de 0,32 g (1,16 mmol) de (5S)-5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona, preparada antes, ácido 5-clorotiofeno-2-carboxílico (0,19 g; 1,16 mmol) e hidrato de 1-hidroxi-lH-benzotriazol (HOBT) (0,23 g, 1,51 mmol) em 7,6 ml de DMF. Adiciona-se 0,29 g (1,51 mmol) de Ν'-(3-dimetilaminopropil)-N-etilcarbodiimida (EDCI) e acrescenta-se, gota a gota e à temperatura ambiente, 0,3 g (0,4 mL; 2,32 mmol, 2 equivalentes) de diisopropiletilamina (DIEA). Agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro.

Evapora-se a mistura até à secura sob uma pressão hipobárica, dissolve-se o resíduo em 3 mL de DMSO e submete-se a cromatografia em RP-MPLC com gradientes de acetonitrilo/água/0,5% de TFA. Remove-se por evaporação o teor em acetonitrilo a partir das fracções adequadas e remove-se por filtração o composto precipitado com sucção. Obtém-se 0,19 g (rendimento teórico de 39%) do composto em epígrafe. 67

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 18 5-Cloro-N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(1-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

De um modo análogo ao descrito no exemplo 17, a partir de 4-pirrolidina-l-il-anilina (Reppe et ai., Justus Liebigs Ann. Chem.; 596; 1955; 151) obteve-se a 5-cloro-N-({ (5S)-2-oxo-3-[4-(1-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida. CI50 = 40 nM; P.f.: 216°C;

Fr (S1O2, tolueno/acetato de etilo a 1: 1) = 0,31 [Precursor: = 0,0].

Exemplo 19 5-Cloro-N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(dietilamino)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

De um modo análogo, a partir de N,N-dietilfenil-1,4-diamina (documento US-A-2 811 555; 1955) obtém-se 5-cloro- N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(dietilamino)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida. CI50 = 270 nM; P.f.: 181 °C;

Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,25 [Precursor: = 0,0]. 68

Exemplo 36 5-Cloro-N-({(5S)-3-[2-metil-4-(4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 2-metil-4-(4-morfolinil)-anilina (J.E LuValle et ai. J. Am. Chem. Soc. 1948, 70, 2223) : MS (ESI): m/z (%) = 436 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 1): tr (%) = 3,77 (98). CI50 : 1,2 6 μΜ

Exemplo 37 5-Cloro-W-{[(5S)-3-(3-cloro-4-morfolinofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-met11}-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 3-cloro-4-(4-morfolinil)-anilina (H.R Snyder et al. J. Pharm. Sei. 1977, 66, 1204) : MS (ESI): m/z (%) = 456 ([M+H]+, 100), padrão Cl2; HPLC (método 2) : tr (%) = 4,31 (100) .

CI50 : 33 nM

Exemplo 38 5-Cloro-Jí- ({ (5S) -3- [4- ( 4-morpholinylsulfonil) -fenil] -2 oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 4-(4-Morpholinylsulfonil)-anilina (Adams et al J.Am.Chem.Soc. 1939, 61, 2342): MS (ESI): m/z (%) = 486 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 4,07 (100). CI50: 2 μΜ

Exemplo 39 5-Cloro-W-({(5S)-3-[4-(1-azetidinilsulfonil)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 4-(1-azetidinilsulfonil)-anilina: 69 MS (DCI, NH3) : m/z (%) = 473 ([M+NH4]+, 100), padrão

Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 4,10 (100). CI50: 0,84 μΜ

Exemplo 40 5-Cloro-W-[((5S)-3-{4-[(dimetilamino)-sulfonil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 4-amino-JV, JV-dimet ilbenzolsulf onamida (I.K. Khanna et al. J. Med. Chem. 1997, 40, 1619): MS (ESI): m/z (%) = 444 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 4,22 (100).

CI50: 90 nM Método geral para a acilação de 5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona com cloretos de carbonilo.

O

Adiciona-se, gota a gota, uma solução aproximadamente 0,1 M de 5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil] -1,3-oxazolidina-2-ona (do exemplo 45) (1,0 eq.) e piridina absoluta (cerca de 6 eq) em diclorometano absoluto ao cloreto de ácido adequado (2,5 eq.), sob uma atmosfera de árgon e à temperatura ambiente. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante cerca de 4 horas e depois 70 adiciona-se cerca de 5,5 eq. de PS-trisamina ('Argonaut Technologies'). Agita-se cuidadosamente a suspensão durante 2 horas, após diluição com diclorometano/DMF (3:1), filtra-se (lava-se a resina com diclorometano/DMF) e concentra-se o filtrado. Caso seja adequado, purifica-se o produto resultante por RP-HPLC preparativa.

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 41 N- ({2-OXO-3- [4- (2-oxo-l-pirrolidi.nil) -fenil] -1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida LC-MS (método 6): m/z (%) = 386 (M+H, 100); LC-MS: tr (%) = 3, 04 (100) . CI50: 1,3 μΜ Método geral para a preparação de derivados acilo a partir de 5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona e de ácidos carboxilicos

Adiciona-se o ácido carboxilico adequado (aprox. 2 eq.) e uma mistura de diclorometano absoluto/DMF (aprox. a 9:1) a 2,9 eq. de carbodiimida ligada a resina (PS-carbodiimida, 'Argonaut Technologies'). Depois de se agitar lentamente à temperatura ambiente durante cerca de 15 71 minutos, adiciona-se 5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l- pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-2-ona (do exemplo 45) (1,0 eq.), agita-se a de um dia para o outro, depois remove-se a resina por filtração (lavando com diclorometano) e concentra-se o filtrado. Caso seja adequado, purifica-se o produto resultante por RP-HPLC preparativa.

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 42 5-Metil-W-({2-OXO-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida LC-MS: m/z (%) = 400 (M+H, 100); LC-MS (método 6) : tr (%) = 3,23 (100) . CI50: 0,16 μΜ

Exemplo 43 5-Bromo-N- ({2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida LC-MS : m/z (%) = 466 (M+H, 100); LC-MS (método 5) : tr (%) = 3, 48 (78) . CI50 : 0, 014 μΜ

Exemplo 44 5-Cloro-N-({(5S)-2-OXO-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

72

a) 2-((2R)-2-hidroxi-3-{[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-propil)-lff-isoindol-1,3(2H) -diona

Durante 14 horas, mantém-se ao refluxo uma suspensão de 2-[(2S)-2-oxiranilmetil]-lH-isoindol-1,3(2H)-diona (A. Gutcait et al. Tetrahedron Asym. 1996, 7, 1641) (5, 68 g, 27,9 mmol) e 4-(4-aminofenil)-3-morfolinona (5,37 g, 27,9 mmol) em etanol-água (a 9:1, 140 mL) (o precipitado dissolve-se e, após algum tempo, ocorre uma nova formação de precipitado). Remove-se por filtração o precipitado (produto desejado), lava-se três vezes com éter dietilico e seca-se. Concentra-se as águas-mãe de filtragem combinadas sob uma pressão hipobárica, depois adiciona-se uma segunda 73 porção de 2-[(2S)-2-oxiranilmetil]-lH-isoindol-1,3(2H) - diona (2,84 g, 14,0 mmol) em etanol-água (a 9:1, 70 mL) , coloca-se novamente em suspensão e mantém-se ao refluxo durante 13 horas (o precipitado dissolve-se e, após algum tempo, ocorre uma nova formação de precipitado) . Remove-se por filtração o precipitado (produto desejado), lava-se três vezes com éter dietilico e seca-se. Rendimento total: 10,14, rendimento teórico 92%. MS (ESI): m/z (%) = 418 ([M+Na]+, 84), 396 ([M+H]+, 93) ; HPLC (método 3): tr (%) = 3,34 (100). b) 2-({(5S)-2-Oxo-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-1,3- oxazolidina-5-il}-metil)-lH-isoindol-l,3(2H)-diona

Adiciona-se N,N'-carbonildiimidazol (2,94 g, 18,1 mmol) e dimetilaminopiridina (quantidade catalítica) a uma suspensão do álcool amínico (3,58 g, 9,05 mmol) em tetra-hidrofurano (90 mL), sob uma atmosfera de árgon e à temperatura ambiente. Agita-se a suspensão de reacção a 60°C durante 12 horas (o precipitado dissolve-se e, após algum tempo, ocorre uma nova formação de precipitado), adiciona-se uma segunda porção de N,N'-carbonildiimidazol (2,94 g, 18,1 mmol) e agita-se a mistura a 60°C durante mais 12 horas. Remove-se por filtração o precipitado (produto desejado), lava-se com tetra-hidrofurano e seca-se. Concentra-se o filtrado sob uma pressão hipobárica e purifica-se o produto por cromatografia rápida (mistura de diclorometano-metanol). Rendimento total: 3,32 g, rendimento teórico de 87%. MS (ESI): m/z (%) = 422 ([M+H]+, 100); HPLC (método 4): tr (%) = 3,37 (100). 74 c) 5-Cloro-N- ({(5S)-2-oxo-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Adiciona-se metilamina (solução a 40% em água, 10,2 mL, 0,142 mol) a uma suspensão de oxazolidinona (4,45 g, 10,6 mmol) em etanol (102 mL) à temperatura ambiente. Mantém-se a mistura de reacção ao refluxo durante 1 hora e concentra-se sob uma pressão hipobárica. Utiliza-se o produto impuro na reacção subsequente sem mais purificação.

Adiciona-se, gota a gota, cloreto de 5-Clorotiofeno-2-carbonilo (2,29 g, 12,7 mmol) a uma solução da amina em piridina (90 mL) , sob uma atmosfera de árgon e a 0°C. Remove-se o banho de gelo, agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora e adiciona-se água. Depois adiciona-se diclorometano, separa-se as fases e extrai-se a fase aquosa com diclorometano. Seca-se (sulfato de sódio) as fases orgânicas combinadas, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o produto desejado por cromatografia rápida (mistura de diclorometano/metanol). Rendimento total: 3,92 g, rendimento teórico de 86%. P.f.: 232 °C-233 °C; -NMR (DMSO-d 6, 200 MHz ): 9,05 1 00 > 'vO o (t, J = 5,8 Hz, 1H) , 7, 70 (d, J = 4,1 Hz, 1H) , 7,5 6 (d, J= 9, 0 Hz, 2H) , 7,41 (d. , J= 9,C ) Hz, 2H), 7,20 (d, J= 4,1 Hz , 1H) , 4, 93- -4,75 (m, 1H) , 4,27- 4, 12 (m, 3H) , 4,02-3, 91 (m, 2H) , 3, 91- -3,79 (dd, J= 6, 1 Hz 9 f J r 2 Hz, 1H), 3,76-3 ,66 (m, - 2H), 3, 66- -3,54 (m, 2H) r MS (ESI): m/ z (%) = 436 ( [M+H] +, 100, padrão Cl) ; HPLC (método 2): tr (%) = 3,60 (100);

[a] 21d = -38° (c 0,2985, DMSO) ; e.e.: 99%. CI50: 0,7 nM 75

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 45 5-Metil-W- ({(5S) -2-OXO-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]- 1.3- oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 831 ([2M+H]+, 100), 416 ([M+H]+, 66) ; HPLC (método 3) : tr (%) = 3, 65 (100) .

CI50: 4,2 nM

Exemplo 46 5-Bromo-N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]- 1.3- oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 480 ([M+H]+, 100, padrão Br); HPLC (método 3) : tr (%) = 3, 87 (100) .

CI50: 0,3 nM

Exemplo 47 5-Cloro-N-{[(5S)-3-(3-isopropil-2-oxo-2,3-di-hidro-l, 3-benzoxazol-6-il)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida

76

Coloca-se em suspensão 200 mg (0,61 mmol) de cloridrato de 6-[ (5S)-5-(aminometil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-3-il]-3-isopropil-l,3-benzoxazol-2(3H)-ona (EP 738726) em 5 mL de tetra-hidrofurano e adiciona-se 0,26 mL (1,83 mmol) de trietilamina e 132 mg (0,73 mmol) de cloreto de 5-clorotiofeno-2-carbonilo. Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro e depois concentra-se. Isola-se o produto por cromatografia em coluna (gel de sílica, cloreto de metileno/etanol = 50/1 até 20/1) . Obtém-se 115 mg (rendimento teórico de 43%) do composto desejado. MS (ESI): m/z (%) = 436 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,78 minutos.

Os compostos seguintes foram preparados de um modo

77 (continuação)

Exemplo n° Estrutura l-h 0 o CI50 [μΜ] 50 ^ quiral ΛΛΜ, % ^ ° $-sQ 195 1, 15 51 q quiral )<kX^ W I 212 1, 19 52 quitai v\ /«v /··« ..e | I ô 160 0,19 53 a quicai \.Λ0 ι -* Ό MS (ESI) : m/z (%) = 431 ([M+H]+, 100) , padrão Cl 0,74 54 quicai νΌ. ΛΝΝ\ $ ΝΗ ^ I £·&. ^ ί Μ Μ a partir de 5-amino-2-pirrilidino-benzonitrilo (Grell, W., Hurnaus, R.; Griss, G., Sauter, R.; Rupprecht, E. et al.; J. Med. Chem. 1998, 41; 5219) 221 0,13 55 (3 Õ quicai Ó-0'ttvç, ó a partir de 3-(4-aminofenil)-oxazolidina-2-ona (Ártico, M. et al.; Farmaco Ed. Sei. 1969, 24; 179) 256 0,04 56 rt quicai o· Ã 218 0,004 78 (continuação) Exemplo n° Estrutura P.f. [°C] CI só [μΜ] 57 ------ quixal ck>^W>- 226 0,58 58 <^_£y i ^ 228-230

Os exemplos 20 a 30 e 58 a 139 seguintes dizem respeito à variante [B] do processo, em que os exemplos 20 e 21 descrevem a preparação dos precursores.

Exemplo 20

Preparação de N— alil—5—cloro-2—tiofenocarboxamida

Adiciona-se, gota a gota, cloreto de 2 clorotiofeno 2 carbonilo (7,61 g, 42 mmol) a uma solução arrefecida com gelo de 2,63 mL (35 mmol) de alilamina em 14,2 mL de piridina absoluta e 14,2 mL de THF absoluto. Remove-se o arrefecimento com gelo, agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas e concentra-se sob uma pressão hipobárica. Adiciona-se água ao resíduo e remove-se o sólido por filtração. Purifica-se o produto impuro por cromatografia rápida através de gel de sílica (diclorometano) .

Rendimento: 7,20 g (rendimento teórico de 99%); MS (DCI, NH4) : m/z (%) = 219 (M+NH4, 100), 202 (M+H, HPLC (método 1): tr (%) = 3,96 minutos (98,9). 32) ; 79

Exemplo 21

Preparação de 5-cloro-N-(2-oxiranilmetil)-2-tiofeno-carboxamida

Adiciona-se ácido meta-cloroperbenzóico (3,83 g, pureza de cerca de 60%) a uma solução arrefecida com gelo de 2,0 g (9,92 mmol) de N-alil-5-cloro-2-tiofenocarboxamida em 10 mL de diclorometano. Agita-se a mistura de um dia para o outro, aquecendo simultaneamente até à temperatura ambiente, e depois lava-se (três vezes) com uma solução de bissulfato de sódio a 10%. Lava-se a fase orgânica com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (duas vezes) e com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de magnésio e concentra-se. Purifica-se o produto por cromatografia através de gel de sílica (ciclo-hexano/acetato de etilo a 1:1).

Rendimento: 837 mg (rendimento teórico de 39%); MS (DCI, NH4) : m/z (%) = 253 (M+NH4, 100), 218 (M+H, 80) ; HPLC (método 1): tr (%) = 3,69 minutos (cerca de 80). Método geral para a preparação de derivados de N-( 3-amino-2-hidroxi-propil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida substituídos a partir de 5-cloro-W-(2-oxiranilmetil)-2-tiofenocarboxamida

R-N

Adicionou-se progressivamente 5-cloro-iV- (2-oxiranil-metil)-2-tiofenocarboxamida (1,0 eq.) a uma solução de um 80 derivado de amina primário ou anilina (1,5 eq. a 2,5 eq.) em 1,4-dioxano, misturas de 1,4-dioxano-água ou etanol, misturas de etanol-água (cerca de 0,3 mol/L a 1,0 mol/L), à temperatura ambiente ou a uma temperatura até 80°C. Agita-se a mistura durante 2 a 6 horas e depois concentra-se. É possível isolar o produto a partir da mistura de reacção por cromatografia através de gel de sílica (mistura de ciclo-hexano-acetato de etilo, mistura de diclorometano-metanol ou mistura de diclorometano-metanol-trietilamina).

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 22 N- [3-(Benzilamino)-2-hidroxipropil]-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida MS (ESI): m/z (%) = 325 (M+H, 100); HPLC (método 1): tr (%) = 3,87 minutos (97,9).

Exemplo 23 5-Cloro-N- [3-(3-cianoanilino)-2-hidroxipropil]-2-tiofeno-carboxamida MS (ESI): m/z (%) = 336 (M+H, 100); HPLC (método 2): tr (%) = 4,04 minutos (100).

Exemplo 24 5-Cloro-W- [3-(4-cianoanilino)-2-hidroxipropil]-2-thiofeno-carboxamida MS (ESI): m/z (%) = 336 (M+H, 100); HPLC (método 1) : tr (%) = 4,12 minutos (100) . 81

Exemplo 25 5-Cloro-N-{3-[4-(cianometil)-anilino]-2-hidroxipropil}-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 350 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr (%) = 3,60 minutos (95,4).

Exemplo 26 5-Cloro-N-{3-[3-(cianometil)-anilino]-2-hidroxipropil}-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 350 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr (%) = 3,76 minutos (94,2).

Exemplo 58 fcerc-Butil-4-[(3—{[(5-cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxipropil)-amino]-benzilcarbamato A partir de terc-butil-4-aminobenzilcarbamato (Bioorg. Med. Chem. Lett.; 1997; 1921-1926): MS (ES-pos) : m/z (%) = 440 (M+H, 100), (ES-neg) : m/z (%) = 438 (M-H, 100); HPLC (método 1) : tr (%) = 4,08 (100) .

Exemplo 59 terc-Butil-4-[(3—{[(5-cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxipropil)-amino]-fenil-carbamato A partir de N-terc-butiloxicarbonil-1, 4-fenilenodiamina: MS (ESI): m/z (%) = 426 (M+H, 45), 370 (100); HPLC (método 1): tr (%) = 4,06 (100). 82

Exemplo 60 terc-Butil-2-hidroxi-3-{[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-amino}-propil-carbamato A partir de 1-(4-aminofenil)-2-pirrolidinona ('Justus Liebigs Ann. Chem.; 1955; 596; 204). MS (DCI, NH3) : m/z (%) = 350 (M+H, 100); HPLC (método 1): tr (%) = 3,57 (97).

Exemplo 61 5-Cloro-N-(3—{[3-flúor-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida

Prepara-se 800 mg (3,8 mmol) de 4-(4-amino-2-fluorofenil)-3-morfolinona e 700 mg (3,22 mmol) de 5-cloro-N-(2-oxiranilmetil)-2-tiofenocarboxamida e aquece-se ao refluxo em 15 mL de etanol e 1 mL de água, durante 6 horas. Evapora-se a mistura sob uma pressão hipobárica, remove-se por filtração e sucção os cristais separados após tratamento com acetato de etilo e submete-se as águas-mãe a cromatografia para se obter 276 mg (rendimento teórico de 17%) do composto em epígrafe.

Fr (acetato de etilo): 0,25.

Exemplo 62 (N- (3-Anilino-2-hidroxipropil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Partindo de anilina: MS (DCI, NH3) : m/z (%) = 311 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3) : tr (%) = 3,79 (100) . 83

Exemplo 63 5-Cloro-N- (2-hidroxi-3-{[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-propil)-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 4-(4-aminofenil)-3-morfolinona: MS (ESI): m/z (%) = 410 ([M+H]+, 50), padrão Cl; HPLC (método 3) : tr (%) = 3, 58 (100) .

Exemplo 64 N- [3-({4-[Acetil-(ciclopropil)-amino]-fenil}-amino)-2-hidroxipropil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Partindo de N- (4-aminofenil)-N-ciclopropilacetamida: MS (ESI): m/z (%) = 408 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 3,77 (100).

Exemplo 65 N-[3-({4-[Acetil-(metil)-amino]-fenil]-amino)-2-hidroxi-propil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Partindo de N-(4-aminofenil)-N-metilacetamida: MS (ESI): m/z (%) = 382 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,31 minutos.

Exemplo 66 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[4-(1H-1,2,3-triazol-l-il)-fenil]-amino}-propil)-2-tiofenocarboxamida

Partindo de 4-(1H-1,2,3-triazol-l-il)-anilina (Bouchet et ai.; J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2; 1974; 449): MS (ESI): m/z (%) = 378 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,55 minutos. 84

Exemplo 67 1—{4—[(3—{[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxi-propil)-amino]-fenil}-L-prolinato de terc-butilo MS (ESI): m/z (%) = 480 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,40 minutos.

Exemplo 68 l-{4-[(3-{[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxi-propil)-amino]-fenil}-4-piperidinacarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 437 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,39 minutos.

Exemplo 69 1—{4—[(3—{[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxi-propil)-amino]-fenil}-3-piperidincarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 437 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,43 minutos.

Exemplo 7 0 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[4-(4-oxo-l-piperidinil)-fenil]-amino}-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 408 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,43 minutos.

Exemplo 71 1—{4—[(3—{[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxi-propil)-amino]-fenil}-L-prolinamida MS (ESI): m/z (%) = 423 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,51 minutos. 85

Exemplo 72 5-Cloro-N-[2-hidroxi-3-({4-[3-(hidroximetil)-1-piperidinil]-fenilj-amino)-propil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 424 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,43 minutos.

Exemplo 73 5-Cloro-N-[2-hidroxi-3-({4-[2-(hidroximetil)-1-piperidinil]-fenilj-amino)-propil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 424 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,49 minutos.

Exemplo 7 4 1—{4—[(3—{[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-2-hidroxi-propil)-amino]-fenil}-2-piperidinacarboxilato de etilo MS (ESI): m/z (%) = 466 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,02 minutos.

Exemplo 75 5-Cloro-N-[2-hidroxi-3-({4-[2-(hidroximetil)-1-pirrolidinil]-fenilj-amino)-propil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 410 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,48 minutos.

Exemplo 76 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[4-(2-metil-hexa-hidro-5H-pirrolo-[3,4-d]isoxazol-5-il)-fenil]-amino}-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 437 (M+H, 100). HPLC (método 5): tr = 1,74 minutos. 86

Exemplo 77 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[4-(1-pirrolidinil)-3-(tri-fluorometil)-fenil]-aminoj-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 448 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,30 minutos.

Exemplo 78 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-3-(tri-fluorometil)-fenil]-aminoj-propil)-2- tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 462 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,50 minutos.

Exemplo 7 9 5-Cloro-N-(3—{[3-cloro-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-aminoj-2-hidroxi-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 444 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,26 minutos.

Exemplo 80 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[4-(3-oxo-4-morfolinil)-3-(tri-fluorometil)-fenil]-aminoj-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 478 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,37 minutos.

Exemplo 81 5-Cloro-N-(2-hidroxi-3-{[3-metil-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-aminoj-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 424 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,86 minutos. 87

Exemplo 82 5-Cloro-N-(3-{[3-ciano-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 435 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,10 minutos.

Exemplo 83 5-Cloro-N-(3-{[3-cloro-4-(1-pirrolidinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 414 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,49 minutos.

Exemplo 84 5-Cloro-N-(3—{[3-cloro-4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 428 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,39 minutos.

Exemplo 85 5-Cloro-N-(3-{[3,5-dimetil-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 438 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,84 minutos.

Exemplo 86 N-(3—{[3-(aminocarbonil)-4-(4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-5-chloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 439 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,32 minutos. 88

Exemplo 87 5—Cloro—N—(2-hidroxi-3-{[3-metoxi-4-(4-morfolinil)-fenil]-amino}-propil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 426 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,32 minutos.

Exemplo 88 N-(3—{[3-Acetil-4-(4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxi-propil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 438 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,46 minutos.

Exemplo 89 N—(3—{[3-amino-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 425 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,45 minutos.

Exemplo 90 5-Cloro-N-(3-{[3-cloro-4-(2-metil-3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 458 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,44 minutos.

Exemplo 91 5-Cloro-N-(3—{[3-cloro-4-(2-metil-5-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxipropil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 458 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,48 minutos. 89

Exemplo 91a 5-Cloro-N-[2-hidroxi-3-({4-[(3-oxo-4-morfolinil)-metil]-fenilj-amino)-propil]-2-tiofenocarboxamida A partir de 4-(4-amino-benzil)-3-morfolinona (Surrey et al.; J. Amer. Chem. Soc. ; 77; 1955; 633). MS (ESI): m/z (%) = 424 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,66 minutos. Método geral para a preparação de derivados de 5-cloro-W-[(2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida 3-substituídos a partir de derivados de N-(3-amino-2-hidroxipropil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida substituídos

Adiciona-se carbodiimidazol (1,2 eq. a 1,8 eq.), ou um fosgénio equivalente, a uma solução de um derivado de N-(3-amino-2-hidroxipropil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida substituído (1,0 eq.) em THF absoluto (cerca de 0,1 mol/L) à temperatura ambiente. Agita-se a mistura à temperatura ambiente ou, se adequado, a uma temperatura elevada (até 70°C) durante 2 a 18 horas e depois concentra-se sob uma pressão hipobárica. 0 produto pode ser purificado por cromatografia através de gel de sílica (mistura de diclorometano-metanol ou mistura de ciclo-hexano-acetato de etilo).

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo. 90

Exemplo 27 N- [(3-Benzil-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

MS (DCI, NH4) : m/z (%) = 372 (M+Na, 100), 351 (M+H 45) ; HPLC (método 1): tr (%) = 4,33 minutos (100).

Exemplo 28 õ-Cloro-W-t[3-(3-cianofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (DCI, NH4) : m/z (%) = 362 (M+H, 42), 145 (100); HPLC (método 2) : tr (%) = 4,13 minutos (100) .

Exemplo 2 9 5-Cloro-N-({3-[4-(cianometil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina 5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 376 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 4,12 minutos

Exemplo 30 5-Cloro-N-({3-[3-(cianometil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina 5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 376 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 4,17 minutos

Exemplo 92 4-[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-benzilcarbamato de terc-butilo A partir do composto do exemplo 58: MS (ESI): m/z (%) = 488 (M+Na, 23), 349 (100); 91 HPLC (método 1): tr (%) = 4,51 (98,5).

Exemplo 93 4- [5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo- 1.3- oxazolidina-3-il]-fenilcarbamato de terc-butilo A partir do composto do exemplo 59: MS (ESI): m/z (%) = 493 (M+Na, 70), 452 (M+H, 10), 395 (100); HPLC (método 1): tr (%) = 4,41 (100).

Exemplo 94 2-Oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1, 3-oxazolidina-5-il}-metilcarbamato de terc-butilo A partir do composto do exemplo 60: MS (DCI, NH3) : m/z (%) = 393 (M+NH4, 100); HPLC (método 3): tr (%) = 3, 97 (100).

Exemplo 95 5- Cloro-N-({3-[3-flúor-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo- 1.3- oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Prepara-se 260 mg (0, 608 mmol) de 5-cloro-N-(3 —{[3-flúor-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-amino}-2-hidroxi-propil)-2-tiofenocarboxamida (do exemplo 61), 197 mg (1,22 mmol) de carbonilimidazol e 7 mg de dimetilaminopiridina e aquece-se ao refluxo em 20 mL de dioxano durante 5 horas. 92

Adiciona-se então 20 mL de acetonitrilo e agita-se a mistura num recipiente fechado num forno de microondas a 180°C durante 30 minutos. Concentra-se a solução num evaporador rotativo e submete-se a cromatografia numa coluna de RP-HPLC. Obtém-se 53 mg (rendimento teórico de 19%) do composto em epígrafe. NMR (300 MHz, d6-DMSO) : δ = 3,6-3,7 (m, 4H) , 3,85 (dd, 1H), 3,95 (m, 2H), 4,2 (m, 1H), 4,21 (s, 2H), 4,85 (m, 1H), 4,18 (s, 2H) , 7,19 (d, 1H, tiofeno) , 7,35 (dd, 1H) , 7,45 (t, 1H) , 7,55 (dd, 1H) , 7,67 (d, 1H, tiofeno), 8,95 (t, 1H, CONH).

Exemplo 96 5-Cloro-N-[(2-oxo-3-fenil-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida A partir do composto do exemplo 62: MS (ESI): m/z (%) = 359 ([M+Na]+, 71), 337 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 4,39 (100). CI50: 2 μΜ

Exemplo 97 5-Cloro-N- ({2-OXO-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida A partir do composto do exemplo 63: MS (ESI): m/z (%) = 458 ([M+Na]+, 66), 436 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 3,89 (100).

CI50: 1,4 nM 93

Exemplo 98 N- [(3-{4-[Acetil-(ciclopropil)-amino]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida A partir do composto do exemplo 64: MS (ESI): m/z (%) = 456 ([M+Na]+, 55), 434 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 3): tr (%) = 4,05 (100).

CI50: 50 nM

Exemplo 99 N-[(3—{4—[Acetil-(metil)-amino]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 408 (M+H, 30), 449 (M+H+MeCN, 100) ; HPLC (método 4): tr = 3,66 minutos.

Exemplo 100 5-Cloro-N-({2-OXO-3-[4-(1H-1,2,3-triazol-l-il)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 404 (M+H, 45), 445 (M+H+MeCN, 100) ; HPLC (método 4): tr = 3,77 minutos.

Exemplo 101 1—{4—[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino]-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il] fenil}-L-prolinato de terc-butilo MS (ESI): m/z (%) = 450 (M+H-56, 25), 506 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 5,13 minutos. 94

Exemplo 102 l-{4-[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-aminoj-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-4-piperidinacarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 463 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,51 minutos.

Exemplo 103 1—{4—[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-aminoj-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-3-piperidinacarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 463 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,67 minutos.

Exemplo 104 5-Cloro-N-({2-oxo-3-[4-(4-oxo-l-piperidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 434 (M+H, 40), 452 (M+H+H20, 100) 475 (M+H+MeCN, 60); HPLC (método 4): tr = 3,44 minutos.

Exemplo 105 l-{4-[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-aminoj-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-L-prolinamida MS (ESI): m/z (%) = 449 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,54 minutos.

Exemplo 106 5-Cloro-N-[(3—{4—[3—(hidroximetil)-1-piperidinil]-fenil}-2 oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 450 (M+H, 100); HPLC (método 5): tr = 2,53 minutos. 95

Exemplo 107 5-Cloro-N-[(3—{4—[2—(hidroximetil)-1-piperidinil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 450 (M+H, 100); HPLC (método 5): tr = 2,32 minutos.

Exemplo 108 1— {4—[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-2-piperidinacarboxilato de etilo MS (ESI): m/z (%) = 492 (M+H, 100); HPLC (método 5): tr = 4,35 minutos.

Exemplo 109 5-Cloro-N-[(3-{4-[2-(hidroximetil)-1-pirrolidinil]-fenil}- 2- oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 436 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,98 minutos.

Exemplo 110 5-Cloro-N-({2-OXO-3-[4-(1-pirrolidinil)-3-(trifluorometil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 474 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 4,63 minutos.

Exemplo 111 5-Cloro-N-({3-[4-(2-metil-hexa-hidro-5H-pirrolo[3,4-d] -isoxazol-5-il)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 463 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,56 minutos. 96

Exemplo 112 5-Cloro-N-({2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-3-(tri-fluorometil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 488 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,64 minutos.

Exemplo 113 5-Cloro-N-({3-[3-cloro-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo 1.3- oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 470 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,41 minutos.

Exemplo 114 5-Cloro-N-({2-OXO-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-3-(trifluoro-metil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 504 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,55 minutos.

Exemplo 115 5-Cloro-N-({3-[3-metil-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo 1.3- oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 450 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,23 minutos.

Exemplo 116 5-Cloro-N-({3-[3-ciano-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo 1.3- oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 461 (M+H, 100); 97 HPLC (método 4): tr = 3,27 minutos.

Exemplo 117 5-Cloro-N-({3-[3-cloro-4-(1-pirrolidinil)-fenil]-2-oxo-l,3 oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 440 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,72 minutos.

Exemplo 118 5-Cloro-N-({3-[3-cloro-4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 454 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,49 minutos.

Exemplo 119 5-Cloro-N-({3-[3,5-dimetil-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2 oxo-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 464 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,39 minutos.

Exemplo 120 N-({3-[3-(Aminocarbonil)-4-(4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-l,3 oxazolidina—5—il}—metil)—5—cloro—2—tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 465 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,07 minutos.

Exemplo 121 5-Cloro-N-({3-[3-metoxi-4-(4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina—5—il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 452 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,86 minutos. 98

Exemplo 122 N-({3-[3-Acetil-4-(4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 464 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,52 minutos.

Exemplo 123 N-({3-[3-Amino-4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 451 (M+H, 100); HPLC (método 6): tr = 3,16 minutos.

Exemplo 124 5-Cloro-N-({3-[3-cloro-4-(2-metil-3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-l,3,oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofeno-carboxamida MS (ESI): m/z (%) = 484 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,59 minutos.

Exemplo 125 5-Cloro-N-({3-[3-cloro-4-(2-metil-5-oxo-4-morfolinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofeno-carboxamida MS (ESI): m/z (%) = 484 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,63 minutos.

Exemplo 125a 5-Cloro-N-[(2-oxo-3-{4-[(3-oxo-4-morfolinil)-metil]-fenil}-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 450 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,25 minutos. 99

Além disso, os compostos seguintes foram preparados pela via da abertura do epóxido com uma amina e subsequente ciclização para se obter a oxazolidinona correspondente.

Exemplo n° Estrutura nd Hl 0 O CI50 [μΜ] 126 \yryh *' λΙ Ϊ 's ‘ F 229 decomp. 0,013 127 ? o, i SV«» o I 159 0,0007 128 o 1 198 0,002 129 0 QKHXjuQ-·, O è 196 0,001 130 ç»^luav» e o 206 0,0033 130a ,,,,, 'U % ‘MI^vKjvíi YíA« q E 194 131 O uí <5 195 0, 85 132 \ 206 0,12 133 0 V, 1 b“dJ-»Av?-a d 5 217 0,062 100 (continuação)

Exemplo n° Estrutura nd Hl 0 O CI50 [μΜ] 134 a partir de 1-(4-amino-fenil)-piperidina-3-ol (Tong, L.K.J. et al.; J. Amer. Chem. Soc 1960; 82, 1988) . 207 0,48 135 V v \ Ví W' ^ Y ;'; ·» 0 202 1,1 136 T 239 1,2 137 Τ>^-^1γζΟ, £l «Ao 219 0, 044 138 ^ ê 95 0,42 139 (3 217 1,7

Os seguintes exemplos 14 a 16 são variantes exemplificativas do passo de oxidação facultativo do processo, isto é, o qual é efectuado quando adequado. 101

Exemplo 14 5-Cloro-N- ( { (5S) -3- [3-flúor-4- (1-oxo-l [λ] 4, 4-tiazinan-4-il)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidin-5-il}-metil)-2-tiofeno-carboxamida

A 0°C, adiciona-se 5-cloro-N-({ (5S)-3-[3-flúor-4-(1,4-tiazinan-4-il)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida (0,1 g, 0,22 mmol), a partir do exemplo 3, em metanol (0,77 mL) a uma solução de periodato de sódio (0,05 g, 0,23 mmol) em água (0,54 mL) e agita-se a 0°C durante 3 horas. Depois, adiciona-se 1 L de DMF e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 8 horas. Adiciona-se mais 50 mg de periodato de sódio e agita-se novamente à temperatura ambiente de um dia para o outro. Adiciona-se então 50 mL de água à mistura e remove-se por filtração o produto insolúvel, com sucção. Lava-se com água e seca-se para se obter 60 mg (rendimento teórico de 58%) de cristais. P . f . : 2 5 7 ° C;

Fr (gel de sílica, tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,54 (Precursor = 0,46); CI50 = 1 r 1 μΜ; MS (DCI) 489 (M+NH4) , padrão Cl. 102

Exemplo 15

Preparação de 5-cloro-N-({(5S)-3-[4-(1,1-dioxo-l[λ]6, 4-tiazinan-4-il)-3-fluorofenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Adiciona-se 80 mg (0, 66 mmol) de N-óxido de N-metilmorfolina (NMO) e 0,1 mL de uma solução a 2,5% de tetróxido de ósmio em 2-metil-2-propanol a 5-cloro-N-({ (5S)-3-[3-flúor-4-(l,4-tiazinan-4-il)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida (0,1 g, 0,22 mmol), do exemplo 3, em 3,32 mL de uma mistura de 1 parte de água e 3 partes de acetona. Agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro e adiciona-se mais 40 mg de NMO. Depois de se agitar durante mais uma noite, adiciona-se a mistura a 50 mL de água e extrai-se três vezes com acetato de etilo. Seca-se e evapora-se a fase orgânica para se obter 23 mg e filtra-se com sucção o sólido insolúvel a partir da fase aquosa para se obter 19 mg do composto desejado (rendimento teórico total de 39%) . P.f.: 23 8°C;

Fr (tolueno/acetato de etilo a 1:1) = 0,14 (Precursor = 0,46); CI50 = 210 nM; MS (DCI) : 505 (M+NH4) , padrão Cl. 103

Exemplo 16 N-óxido de 5-cloro-N-{[(5S)-3-(3-flúor-4-morfolinofenil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida 0 composto foi obtido por tratamento de 5-cloro-N-{ [(5 S)-3-(3-flúor-4-morfolinofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida, do exemplo 1, com sal de magnésio do ácido monoperoxiftálico. MS (ESI): 456 (M+H, 21 %, padrão Cl), 439 (100%).

Os compostos dos exemplos 31 a 35 e 140 a 147 seguintes dizem respeito ao passo de amidação facultativo do processo, isto é, o qual é efectuado quando adequado. Método geral para a preparação de amidinas e de derivados de amidina a partir de derivados de 5-cloro-N-[(2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida substituídos com cianometilfenilo.

Agita-se o derivado particular de 5-cloro-N-[(2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida substituído com cianometilfenilo (1,0 eq.) em conjunto com trietilamina (8,0 eq.) numa solução saturada de sulfureto de hidrogénio em piridina (cerca de 0,05 mol/L a 0,1 mol/L) , à temperatura ambiente durante um a dois dias. Dilui-se a mistura de reacção com acetato de etilo (EtOAc) e lava-se com ácido clorídrico 2 N. Seca-se a fase orgânica sobre MgS04, filtra-se e evapora-se sob uma pressão hipobárica.

Dissolve-se o produto impuro em acetona (0,01-0,1 mol/L) e adiciona-se iodeto de metilo (40 eq.). Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente (TA) durante 2 a 5 horas e depois concentra-se sob uma pressão hipobárica. 104

Dissolve-se o resíduo em metanol (0,01-0,1 mol/L) e adiciona-se, para a preparação de amidinas insubstituídas, acetato de amónio (3 eq.) e cloreto de amónio (2 eq.)· Os derivados de amidina substituídos são preparados por adição de aminas primárias ou secundárias (1,5 eq.) à solução metanólica. Decorridas 5 a 30 horas, remove-se o solvente sob uma pressão hipobárica e purifica-se o resíduo por cromatografia numa coluna RP8 de gel de sílica (água/acetonitrilo a 9/1-1/1 + 0,1% de ácido trifluoroacético).

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 31: N- ({3-[4-(2-Amino-2-iminoetil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 393 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,63 minutos

Exemplo 32: 5-Cloro-N-({3-[3-(4,5-di-hidro-lH-imidazol-2-ilmetil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofeno-carboxamida MS (ESI): m/z (%) = 419 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,61 minutos

Exemplo 33: 5-Cloro-N-[(3—{3—[2-imino-2-(4-morfolinil)-etil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 463 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,70 minutos 105

Exemplo 34: 5-Cloro-N-[(3-{3-[2-imino-2-(1-pirrolidinil)-etil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 447 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,82 minutos

Exemplo 35: N-({3-[3-(2-amino-2-iminoetil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 393 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,60 minutos

Exemplo 140 5-Cloro-N-({3-[4-(4,5-di-hidro-lH-imidazol-2-ilmetil) -fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 419 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,65 minutos

Exemplo 141 5-Cloro-N-[(3—{4—[2-imino-2-(4-morfolinil)-etil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 463 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,65 minutos

Exemplo 142 5-Cloro-N-[(3—{4—[2-imino-2-(1-piperidinil)-etil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 461 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,83 minutos 106

Exemplo 143 5—Cloro—N—[(3—{4—[2-imino-2-(1-pirrolidinil)-etil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 447 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,76 minutos

Exemplo 144 5-Cloro-N-[(3—{4—[2-(ciclopentilamino)-2-iminoetil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2- tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 461 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,89 minutos

Exemplo 145 5-Cloro-N-{[3-(4-{2-imino-2-[(2,2,2-trifluoroetil)-amino]-etilj-fenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 475 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,79 minutos

Exemplo 146 N-({3-[4-(2-Anilino-2-iminoetil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 469 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,83 minutos

Exemplo 147 5-Cloro-N-[(3—{4—[2-imino-2-(2-piridinilamino)-etil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2- tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 470 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 2,84 minutos. 107

Os compostos dos exemplos 148 a 151 seguintes dizem respeito à eliminação de grupos protectores BOC de amino. Método geral para a eliminação de grupos protectores BOC (terc-butiloxicarbonilo)

Adicionou-se, gota a gota, ácido trifluoroacético aquoso (TFA, aproximadamente a 90%) a uma solução arrefecida com gelo de um composto protegido com terc-butiloxicarbonilo (Boc) em clorofórmio ou diclorometano (aproximadamente 0.1 a 0.3 mol/L). Decorridos cerca de 15 minutos, remove-se o arrefecimento com gelo, agita-se a mistura à temperatura ambiente durante cerca de 2 a 3 horas, concentra-se a solução e seca-se sob uma pressão hipobárica elevada. Retoma-se o resíduo em diclorometano ou em diclorometano/metanol e lava-se com uma solução saturada de bicarbonato de sódio ou com uma solução de hidróxido de sódio 1 N. Lava-se a fase orgânica com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre uma pequena quantidade de sulfato de magnésio e concentra-se. Se adequado, submete-se a purificação por cristalização a partir de éter ou de misturas de éter/diclorometano.

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo a partir de precursores protegidos com Boc adequados.

Exemplo 148 N- ({3-[4-(aminometil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida A partir do composto do exemplo 92: 108 MS (ESI): m/z (%) = 349 (M-NH2, 25), 305 (100); HPLC (método 1): tr (%) = 3,68 (98). CI50: 2,2 μΜ

Exemplo 149 N-{[3-(4-aminofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida A partir do composto do exemplo 93: MS (ESI): m/z (%) = 352 (M+H, 25); HPLC (método 1) : tr (%) = 3,50 (100) . CI50: 2 μΜ

Uma síntese alternativa enantiopura deste composto está ilustrada no esquema seguinte (ver também Delalande S.A., DE 2836305,1979; Chem. Abstr. 90, 186926). tsuy

2.Butirato de R-gl±c±d±lo | íEtalimida OEAP/PPhg

o 3,

Q

23 em et ajiol

3j Acido 5-cloro-2-tio£eno-carboKÍ lico, EBC/HOBT

a 109

Exemplo 150 5-Cloro-N- ({3-[4-(glicilamino)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida A partir do composto do exemplo 152: MS (ES-pos): m/z (%) = 408 (100); HPLC (método 3): tr (%) = 3,56 (97). CI50: 2 μΜ

Exemplo 151 5-(aminometil)-3-[4-(2-oxo-l-pirrolidinil)-fenil]-1, 3-oxazolidina-2-ona A partir do composto do exemplo 60: MS (ESI): m/z (%) = 276 (M+H, 100); HPLC (método 3): tr (%) = 2,99 (100) CI50: 2 μΜ.

Os compostos dos exemplos 152 a 166 seguintes dizem respeito à transformação do grupo amino de oxazolidinonas substituídas com benzilamina ou anilina, utilizando diversos reagentes.

Exemplo 152 S-Cloro-W- ({3-[4-(W-terc-butiloxicarbonil-glicilamino)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidin-5-il}-metil)-2-tiofeno-carboxamida

Adiciona-se 754 mg (2,1 mmol) de N-{[3-(4-aminofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofeno- 110 carboxamida (do exemplo 149) a uma solução de 751 mg (4,3 mmol) de Boc-glicina, 870 mg (6,4 mmol) de HOBT (1-hidroxi-ΙΗ-benzotriazol x H20) , 1790 mg (4,7 mmol) de HBTU [hexafluorofosfato de O- (benzotriazol-l-il)-N,N,Ν',N' - tetrametil-urónio] e 1,41 mL (12,9 mmol) de N- metilmorfolina em 15 mL de DMF/CH2C12 (a 1:1) a 0°C. Agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro e depois dilui-se com água. Remove-se por filtração o sólido precipitado e seca-se. Rendimento: 894 mg (rendimento teórico de 79,7%). MS (DCI, NH3) : m/z (%) = 526 (M+NH4, 100); HPLC (método 3): tr (%) = 4,17 (97).

Exemplo 153 N- [(3—{4—[(Acetilamino)-metil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Adiciona-se anidrido acético (0,015 mL, 0,164 mmol) a uma mistura de 30 mg (0,082 mmol) de IV- ({3-[4-(aminometil) -fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-t iof eno-carboxamida (do exemplo 148) em 1,5 mL de THF absoluto, 1,0 mL de diclorometano absoluto e 0,02 mL de piridina absoluta, a 0°C. Agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro. Após adição de éter e cristalização, obtém-se o produto. Rendimento: 30 mg (rendimento teórico de 87%). MS (ESI): m/z (%) = 408 (M+H, 18), 305 (85); HPLC (método 1): tr (%) = 3,78 (97). 111

Ciso: 0,6 μΜ Exemplo 154 N- {[3-(4—{[(Aminocarbonil)-amino]-metil}-fenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Adiciona-se, gota a gota, 0,19 mL (0,82 mmol) de isocianato de trimetilsililo a uma mistura de 30 mg (0,082 mmol) de JV-({ 3-[ 4-(aminometil)-fenil]-2-oxo-l, 3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida (do exemplo 148) em 1,0 mL de diclorometano, à temperatura ambiente. Agita-se a mistura de um dia para o outro, depois adiciona-se éter e obtém-se o produto por filtração. Rendimento: 21,1 mg (rendimento teórico de 52%). MS (ESI): m/z (%) = 409 (M+H, 5), 305 (72); HPLC (método 1): tr (%) = 3,67 (83). CI50: 1,3 μΜ Método geral para a reacção de acilação de W—{[3—(4— aminofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofenocarboxamida com cloretos de carbonilo

112

Sob uma atmosfera de árgon, adiciona-se, gota a gota, o cloreto de ácido adeguado (2,5 eg.) a uma solução aproximadamente 0,1 M de N-{[3-(4-aminofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofenocarboxamida (do exemplo 149) (1,0 eq.) em diclorometano absoluto/piridina (a 19:1) . Agita-se a mistura de um dia para o outro e depois adiciona-se aproximadamente 5 eq. de PS-trisamina ('Argonaut Technologies') e 2 mL de diclorometano absoluto. Agita-se lentamente durante 1 hora, depois filtra-se e concentra-se o filtrado. Se adequado, os produtos são purificados por RP-HPLC preparativa.

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 155 N- ({3-[4-(Acetilamino)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida LC-MS: m/z (%) = 394 (M+H, 100); LC-MS (método 6): tr (%) = 3,25 (100). CI50: 1,2 μΜ

Exemplo 156 5-Cloro-J/-[ (2-oxo-3-{4-[ (2-tienilcarbonil) -amino] -fenil}-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida LC-MS: m/z (%) = 462 (M+H, 100); LC-MS (método 6) : tr (%) = 3, 87 (100) . CI50: 1,3 μΜ 113

Exemplo 157 5-Cloro-N-[(3—{4—[(metoxiacetil)-amino]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida LC-MS: m/z (%) = 424 (M+H, 100); LC-MS (método 6): tr (%) = 3,39 (100). CI50: 0,73 μΜ

Exemplo 158 N-{4-[5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-3,5-dimetil-4-isoxazol-carboxamida LC-MS: m/z (%) = 475 (M+H, 100). CI50 : 0,4 6 μΜ

Exemplo 159 5-Cloro-W-{[3—(4—{[(3-cloropropil)-sulfonil]-amino}-fenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofenocarboxamida

Adiciona-se 35 mg (0,1 mmol) de N-{[3-(4-aminofenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida (do exemplo 149) a uma solução arrefecida com gelo de 26,4 mg (0,15 mmol) de cloreto de 3-cloro-l-propano-sulfonilo e 0,03 mL (0,2 mmol) de trietilamina em 3,5 mL de diclorometano absoluto. Decorridos 30 minutos, remove-se o arrefecimento com gelo, agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro e adiciona-se 150 mg (cerca de 5,5 eq.) de PS-trisamina ('Argonaut Technologies') e 0,5 mL de diclorometano. Agita-se 114 lentamente a suspensão durante 2 horas, filtra-se (lava-se a resina com diclorometano/metanol) e concentra-se o filtrado. Purifica-se o produto por RP-HPLC preparativa. Rendimento: 19,6 mg (rendimento teórico de 40%). LC-MS: m/z (%) = 492 (M+H, 100); LC-MS (método 5) : tr (%) = 3,82 (91) . CI50: 1,7 μΜ

Exemplo 160 S-Cloro-W-({3-[4-(1,l-dióxido-2-isotiazolidinil)-fenil]—2— oxo-1,3-oxaxolidin-5-il}-metil )-2-tiofenocarboxamida

Durante 2 horas, aquece-se a 100°C uma mistura de 13,5 mg (0,027 mmol) de 5-cloro-N-{ [3- (4 —{ [(3-cloropropil)-sulfonil]-amino}-fenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-2-tiofeno-carboxamida (do exemplo 159) e 7,6 mg (0,055 mmol) de carbonato de potássio em 0,2 mL de DMF. Arrefece-se, depois dilui-se com diclorometano e lava-se com água. Seca-se a fase orgânica e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia de camada fina preparativa (gel de sílica, diclorometano/metanol a 95:5). Rendimento: 1,8 mg (rendimento teórico de 14,4%). MS (ESI): m/z (%) = 456 (M+H, 15), 412 (100); LC-MS (método 4): tr (%) = 3,81 (90). CI50: 0,14 μΜ 115

Exemplo 161 5-Cloro-N-[((5S)-3-{4-[(5-cloropentanoil)-amino]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida

Dissolve-se 0,5 g (1,29 mmol) de N-{[(5S)-3-(4-amino-fenil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida (do exemplo 149) em 27 mL de tetra-hidrofurano e adiciona-se 0,2 g (1,29 mmol) de cloreto de 5-clorvalerilo e 0,395 mL (2,83 mmol) de trietilamina. Evapora-se a mistura sob uma pressão hipobárica e submete-se a cromatografia através de gel de silica com um gradiente de tolueno/acetato de etilo = 1:1 -> acetato de etilo. Obtém-se 315 mg (rendimento teórico de 52%) de um sólido. P.f.: 211 °C.

Exemplo 162 5-Cloro-N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-piperidinil)-fenil]— 1,3-oxazolidina-5-ilJ-metil)-2-tiofenocarboxamida

Sob condições inertes, adiciona-se 30 mg de NaH, a 60% em parafina liquida, a 5 mL de DMSO e aquece-se a mistura até 75°C durante 30 minutos até deixar de se observar libertação de gás. Depois, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 290 mg (0,617 mmol) de 5-cloro-N-[((5S)-3-{4- 116 [(5-cloropentanoí1)-amino]-fenil}-2-oxo-l, 3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida (do exemplo 161) em 5 mL de cloreto de metileno e agita-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro. Interrompe-se a reacção, adiciona-se a mistura a 100 mL de água e extrai-se com acetato de etilo. Submete-se a fase orgânica evaporada a cromatografia numa coluna RP-8 e efectua-se a eluição com acetonitrilo/água. Obtém-se 20 mg (rendimento teórico de 7,5%) do composto desejado. P . f. : 2 0 5 ° C; NMR (300 MHz, de-DMSO): δ = 1, 85 (m, 4H) , 2,35 (m, 2H) , 3,58 (m, 4H), 3,85 (m, 1H), 4,2 (t, 1H) , 4,82 (m, 1H), 7,18 (d, 1H, tiofeno), 7,26 (d, 2H) , 7,5 (d, 2H), 2,68 (d, 1H, tiofeno), 9,0 (t, 1H, CONH) .

CI50: 2,8 nM

Exemplo 163 5-Cloro-N-[((5S)—3—{4—[(3-bromopropionil)-amino]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida

0 composto é obtido de um modo análogo ao descrito no exemplo 149.

Exemplo 164 5-Cloro-N-({(5S)-2-oxo-3-[4-(2-oxo-l-azetidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida 117

0 composto é obtido de um modo análogo, por ciclização do composto bromopropionilo de cadeia aberta do exemplo 163, utilizando NaH/DMSO. MS (ESI): m/z (%) = 406 ([M+H]+, 100), padrão Cl.

CI50 : 380 nM

Exemplo 165 4—{4—[5—({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-3,5-dioxo-l-piperazina-carboxilato de terc-butilo

Adiciona-se 300 mg (0,85 mmol) de N- { [3-(4-amino-fenil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida em 6 mL de uma mistura de DMF e diclorometano (a 1:1) a uma solução de 199 mg (0,85 mmol) de ácido Boc-iminodiacético, 300 mg (2,2 mmol) de HOBT, 0,66 mL (6 mmol) de iV-metilmorfolina e 647 mg (1,7 mmol) de HBTU. Agita-se a mistura de um dia para o outro, depois dilui-se com diclorometano e lava-se com água, com uma solução saturada de cloreto de amónio, com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, com água e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato 118 de magnésio e concentra-se. Purifica-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (diclorometano/metanol a 98:2). Rendimento: 134 mg (rendimento teórico de 29%). MS (ESI): m/z (%) = 571 (M+Na, 82), 493 (100); HPLC (método 3): tr (%) = 4,39 (90).

Ciso: 2 μΜ

Exemplo 166

Trifluoroacetato de N—[((5S)—3—{4—[(3R)—3—amino—2—oxo—1— pirrolidinil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Q

BOCNH

O

Ô 119 Ν2-(terc-Butoxicarbonil)-Nl-{4-[(5S)-5-({[(5-cloro-2-tienil)-carbonil]-aminoj-metil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-3-il]-fenilj-D-metioninamida

Dissolve-se 429 mg (1,72 mmol) de N-BOC-D-metionina, 605 mg (1,72 mmol) de N-{ [ (5S)-3-(4-aminofenil)-2-oxo-l, 3-oxazolidina-5-il]-metil}-5-cloro-2-tiofenocarboxamida e 527 mg (3,44 mmol) de hidrato de HOBT em 35 mL de DMF e 660 mg (3,441 mmol) de cloridrato de EDCI e do adiciona-se, gota a gota, 689 mg (5,334 mmol) de N-etildiisopropilamina. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante dois dias. Filtra-se com sucção a suspensão resultante e lava-se o resíduo com DMF. Mistura-se os filtrados combinados com uma pequena quantidade de gel de sílica, evapora-se sob uma pressão hipobárica e submete-se a cromatografia através de gel de sílica com um gradiente de tolueno -> T10EE7. Obtém-se 170 mg (rendimento teórico de 17%) do composto desejado com um ponto de fusão de 183°C.

Fr (Si02, tolueno/acetato de etilo = 1:1): 0,2. 1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO) : 5 = 1,4 (s, 1H, BOC) , 1,88- 1,95 (m, 2H), 2,08 (s, 3H, SMe) , 2,4-2,5 (m, 2H, parcialmente coberto por DMSO) , 3,6 (m, 2H), 3,8 (m, 1H) , 4,15 (m, 2H) , 4,8 (m, 1H) , 7,2 (1H, tiofeno) , 7,42 (d, parte de um sistema AB, 2H) , 7,6 (d, parte de um sistema AB, 2H) , 7,7 (d, 1H, tiofeno), 8,95 (t, 1H, CH2NHCO), 9,93 (s lr, 1H, NH) . (3R)-l-{4-[(5S)-5-({[(5-Cloro-2-tienil)-carbonil]-aminoj-metil) -2-oxo-l,3-oxazolidina-3-il]-fenilJ-2-oxo-3-pirrolidinil-carbamato de terc-butilo

Dissolve-se 170 mg (0,292 mmol) de N2-(terc-butoxicarbonil)-Nl-{4-[(5S)—5—({ [(5-cloro-2-tienil)- 120 carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-D-metionina-amida em 2 mL de DMSO, adiciona-se 178,5 mg (0,875 mmol) de iodeto de trimetil-sulfónio e 60,4 mg (0,437 mmol) de carbonato de potássio e agita-se a mistura a 80°C durante 3,5 horas. Evapora-se então sob uma pressão hipobárica elevada e lava-se o residuo com etanol. Obtém-se 99 mg do composto desejado. 1H-NMR (300 MHz, d6-DMS0) : δ =1,4 (s, 1H, BOC) , 1,88-2,05 (m, 1H) , 2,3-2,4 (m, 1H) , 3,7-3,8 (m, 3H) , 3,8-3,9 (m, 1H) , 4,1-4,25 (m, 1H) , 4,25-4,45 (m, 1H) , 4,75-4, 95 (m, 1H), 7,15 (1H, tiofeno), 7,25 (d, 1H), 7,52 (d, parte de um sistema AB, 2H), 7,65 (d, parte de um sistema AB, 2H), 7,65 (d, 1H, tiofeno), 9,0 (s largo, 1H).

Trifluoroacetato de N-[((5S)-3-{4-[(3R)-3-amino-2-oxo-l-pirrolidinil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

Coloca-se em suspensão 97 mg (0,181 mmol) de (3R)-1-{4 — [ (5S)—S— ({ [ (5-cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-1,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-2-oxo-3-pirrolidinil-carbamato de terc-butilo em 4 mL de cloreto de metileno, depois adiciona-se 1,5 mL de ácido trifluoroacético e agita-se à temperatura ambiente durante 1 hora. Evapora-se então a mistura sob uma pressão hipobárica e purifica-se por RP-HPLC (gradiente de acetonitrilo/água/0,1% de TFA) . Por evaporação da fracção relevante obtém-se 29 mg (rendimento teórico de 37%) do composto desejado com um ponto de fusão de 241°C (decomposição).

Fr (Si02, EtOH/TEA = 17:1) 0,19. 1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO) : δ = 1,92-2,2 (m, 1H) , 2,4- 2,55 (m, 1H, parcialmente coberto por um pico de DMSO), 121 3,55-3, 65 (m, 2H) , 3,75-3, 95 (m, 3H) , 4,1-4,3 (m, 2H) , 4,75-4,9 (m, 1H), 7,2 (1H, tiofeno), 7,58 (d, parte de um sistema AB, 2H), 7,7 (d, parte de um sistema AB, 2H), 7,68 (d, 1H, tiofeno), 8,4 (s largo, 3H, NH3) , 8,9 (t, 1H, NHCO) .

Os compostos dos exemplos 167 a 170 seguintes dizem respeito à introdução de grupos sulfonamida em oxazolidinonas substituídas com fenilo. Método geral para a preparação de sulfonamidas substituídas a partir de 5-cloro-W-[(2-oxo-3-fenil-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida

Adiciona-se 5-cloro-iV-[ (2-oxo-3-fenil-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida (do exemplo 96) a ácido cloro-sulfónico (12 eq.), sob uma atmosfera de árgon a 5°C. Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas e depois adiciona-se gelo fundente. Filtra-se o precipitado formado, lava-se com água e seca-se.

Dissolve-se então em tetra-hidrofurano (0,1 mol/L), sob uma atmosfera de árgon e à temperatura ambiente, e adiciona-se a amina adequada (3 eq.), trietilamina (1,1 eq.) e dimetilaminopiridina (0,1 eq.). Agita-se a mistura 122 de reacção durante 1 a 2 horas e depois concentra-se sob uma pressão hipobárica. Purifica-se o produto desejado por cromatografia rápida (mistura de diclorometano-metanol).

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo.

Exemplo 167 5-Cloro-W-({2-OXO-3-[4-(1-pirrolidinilsulfonil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 492 ([M+Na]+, 100), 470 ([M+H]+, 68), padrão Cl; HPLC (método 3) : tr (%) = 4,34 (100) . CI5o: 0,5 pm

Exemplo 168 5-Cloro-N-[(3—{4—[(4-metil-l-piperazinil)-sulfonil]-fenil}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 499 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 2): tr (%) =3,3 (100).

Exemplo 169 5-Cloro-N- ({2-OXO-3-[4-(1-piperidinilsulfonil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida MS (ESI): m/z (%) = 484 ([M+H]+, 100), padrão Cl; HPLC (método 2): tr (%) =4,4 (100).

Exemplo 170 5-Cloro-N-[(3—{4—[(4-hidroxi-l-piperidinil)-sulfonil]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-2-tiofeno-carboxamida 123 MS (ESI): m/z (%) = 500 ([M+H]+, 100), padrao Cl; HPLC (método 3): tr (%) =3,9 (100).

Exemplo 171 5-Cloro-N-({2-OXO-3-[4-(1-pirrolidinil)-fenil]-1,3-oxazolidina-5—il}-metil)-2-tiofenocarboxamida

Dissolve-se 780 mg (1,54 mmol) de 1—{4—[5-({[(5-cloro-2-tienil)-carbonil]-amino}-metil)-2-oxo-l,3-oxazolidina-3-il]-fenil}-prolinato de terc-butilo em 6 mL de diclorometano e 9 mL de ácido trifluoroacético e agita-se a mistura a 40°C durante dois dias. Concentra-se então a mistura de reacção e agita-se com éter e com uma solução de hidróxido de sódio 2 N. Concentra-se a fase aguosa e agita-se com éter e com ácido clorídrico 2 N. Seca-se a fase orgânica desta extracção sobre MgSCg, filtra-se e concentra-se. Submete-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/EtOH/solução aguosa concentrada de NH3 = 100/1/0,1 até 20/1/0,1). Obtém-se 280 mg (rendimento teórico de 40%) do produto. MS (ESI): m/z (%) = 406 (M+H, 100); HPLC (método 4): tr = 3,81 minutos. 124

Parâmetros de HPLC e parâmetros de LC-MS para os dados de HPLC e LC-MS apresentados nos exemplos anteriores (a unidade do tempo de retenção (tr) é minutos) [1] Coluna: 'Kromasil C18', temperatura L-R: 30°C, caudal = 0,75 mL.min-1, eluente: A = HC104 0, 01 Μ, B = CH3CN, gradiente: -> 0,5 minuto 98% de A -> 4,5 minutos 10% de A -> 6,5 minutos 10% de A.

[2] Coluna: 'Kromasil C18 60*2', temperatura L-R: 30°C, caudal = 0,75 mL.min”1, eluente: A = H3P04 0,01 Μ, B = CH3CN, gradiente: -> 0,5 minuto 90% de A -> 4,5 minutos 10% de A -> 6,5 minutos 10% de A.

[3] Coluna: 'Kromasil C18 60*2', temperatura L-R: 30°C, caudal = 0,75 mL.min-1, eluente: A = HC104 0, 005 Μ, B = CH3CN, gradiente: -> 0,5 minuto 98% de A -> 4,5 minutos 10% de A -> 6,5 minutos 10% de A.

[4] Coluna: 'Symmetry C180, 2,1 x 150 mm, forno da coluna: 50°C, caudal = 0,6 mL.min”1, eluente: A = 0,6 g de HC1 a 30%/L de água, B = CH3CN, gradiente: 0,0 minuto 90% de A -> 4,0 minutos 10% de A -> 9 minutos 10% de A.

[5] MHZ-2Q, 'Instrument Micromass Quattro LCZ'

Coluna: 'Symmetry C18', 50 mm x 2,1 mm, 3,5 μιτι, temperatura: 40°C, caudal = 0,5 mL.min-1, eluente A = CH3CN + 0,1% de ácido fórmico, eluente B = água + 0,1% de ácido fórmico, gradiente: 0,0 minuto 10% de A -> 4 minutos 90% de A -> 6 minutos 90% de A.

[6] MHZ-2P, 'Instrument Micromass Platform LCZ'

Coluna: 'Symmetry C18', 50 mm x 2,1 mm, 3,5 pm, temperatura: 40°C, caudal = 0,5 mL.min-1, eluente A = CH3CN + 0,1% de ácido fórmico, eluente B = água + 0,1% de ácido fórmico, gradiente: 0,0 minuto 10% de A -> 4 minutos 90% de A -> 6 minutos 90% de A. 125 [7] MHZ-7Q, 'Instrument Micromass Quattro LCZ'

Coluna: 'Symmetry C18', 50 mm x 2,1 mm, 3,5 pm, temperatura: 40°C, caudal = 0,5 mL.min-1, eluente A = CH3CN + 0,1% de ácido fórmico, eluente B = água + 0,1% de ácido fórmico, gradiente: 0,0 minuto 5% de A -> 1 minuto 5% de A -> 5 minutos 90% de A -> 6 minutos 90% de A. Método geral para a preparação de oxazolidinonas de fórmula estrutural B por síntese num suporte em fase sólida

As reacções com diversos produtos ligados a resinas tiveram lugar num conjunto de recipientes de reacção separados.

Dissolve-se 5-(bromometil)-3-(4-fluór-3-nitrofenil) -1,3-oxazolidina-2-ona A (preparada a partir de epibromo-hidrina e de isocianato de 4-fluór-3-nitrofenilo com LiBr/Bu3PO em xileno, de um modo análogo ao descrito no ex. 2 do documento US 4128654) (1,20 g, 3,75 mmol) e etildiisopropilamina (DIEA, 1,91 mL, 4,13 mmol) em DMSO (70 mL) , mistura-se com uma amina secundária (1,1 eq., componente amina 1) e faz-se reagir a 55°C durante 5 horas. Adiciona-se a resina 'TentaGel SAM' (5,00 g, 0,25 mmol/g) a esta solução e faz-se reagir a 75°C durante 48 horas. Filtra-se a resina e lava-se várias vezes com metanol (MeOH), com dimetilformamida (DMF), com MeOH, com diclorometano (DCM) e com éter dietílico e seca-se. Coloca-se em suspensão a resina (5,00 g) em diclorometano (80 mL), mistura-se com DIEA (10 eq.) e com cloreto de 5-clorotiofeno-2-carbonilo [preparado por reacção do ácido 5-clorotiofeno-2-carbonilo (5 eq.) e de 1-cloro-l-dimetilamino-2-metilpropeno (5 eq.) em DCM (20 ml) à temperatura ambiente durante 15 minutos] e faz-se reagir à 126 temperatura ambiente durante 5 horas. Filtra-se a resina resultante e lava-se várias vezes com MeOH, com DCM e com éter dietilico e seca-se. Coloca-se então em suspensão a resina em DMF/água (v/v, 9:2, 80 mL), mistura-se com SnCl2.2H20 (5 eq.) e faz-se reagir à temperatura ambiente durante 18 horas. Lava-se novamente a resina várias vezes com MeOH, com DMF, com água, com MeOH, com DCM e com éter dietilico e seca-se. Coloca-se em suspensão esta resina em DCM, mistura-se, a 0°C, com DIEA (10 eq.) e com ácido clorídrico (5 eq. do derivado de ácido 1) e faz-se reagir à temperatura ambiente de um dia para o outro. Antes da reacção, converte-se os ácidos carboxílicos nos correspondentes cloretos de ácido, fazendo-os reagir com 1-dimetilamino-l-cloro-2-metilpropeno (1 eq., com base no ácido carboxílico) em DCM à temperatura ambiente durante 15 minutos. Lavou-se a resina várias vezes com DMF, com água, com DMF, com MeOH, com DCM e com éter dietilico e seca-se. No caso de terem sido utilizados aminoácidos protegidos com Fmoc enquanto derivados de ácido 1, então elimina-se o grupo protector Fmoc no último passo de reacção, fazendo reagir com piperidina/DMF (v/v, 1/4) à temperatura ambiente durante 15 minutos, lava-se a resina com DMF, com MeOH, com DCM e com éter dietilico e seca-se. Remove-se os produtos a partir da fase sólida com ácido trifluoroacético (TFA)/DCM (v/v, 1/1), remove-se a resina por filtração e evapora-se as soluções de reacção. Filtra-se os produtos impuros através de gel de sílica (DCM/MeOH, a 9:1) e evapora-se para se obter um conjunto de produtos B. 127

Compostos preparados pela síntese num suporte em fase sólida. 128

Exemplo 172 N-({3-[3-amino-4-(1-pirrolidinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

De um modo análogo ao procedimento geral para a preparação de derivados B, faz-se reagir 5 g (1,25 mmol) de resina 'TentaGel SAM' com pirrolidina enquanto derivado amina 1. Após redução com SnCl2.2H20, elimina-se a anilina obtida da fase sólida, na ausência do passo suplementar de acilação, e evapora-se. Reparte-se o produto impuro entre acetato de etilo e uma solução de NaHC03, faz-se a separação da fase orgânica com NaCl, decanta-se e evapora-se até à secura. Purifica-se este produto impuro por cromatografia rápida sob uma pressão hipobárica através de gel de silica (diclorometano/acetato de etilo, 3:1 - 1:2). 1H-NMR (300 MHz, CDC13) : 1, 95 - 2,08, lr, 4 H; 3,15- 3,30, lr, 4 H; 3,65 -3, 81, m, 2 H; 3,89, ddd, 1H; 4,05, dd, 1 H; 4,81, dddd, 1 H; 6,46, dd, 1 H; 6,72, dd, 1 H; 6,90, dd, 1H; 6,99, dd, 1 H; 7,03, dd, 1 H; 7,29, d, 1 H.

Exemplo 173 N—[(3-{3-(β-Alanilamino)-4-[(3-hidroxipropil)-amino]-fenil}-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il)-metil]-5-cloro-2-tiofeno-carboxamida 129

De um modo análogo ao procedimento geral para a preparação de derivados B, faz-se reagir 5 g (1,25 mmol) de resina 'TentaGel SAM' com azetidina, enquanto derivado de amina 1, e com Fmoc-p-alanina, enquanto derivado de ácido 1. Agita-se o produto obtido, após eliminação, em metanol à temperatura ambiente durante 48 horas e evapora- se até à secura. Purifica-se este produto impuro por HPLC de fase inversa com um gradiente de água/TFA/acetonitrilo. 1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 2,31 , tt, 2 H; 3,36, t, 2 H; 3,54, t, 2 H; 3,62, t, 2 H; 3,72, dd, 1 H; 3,79, dd, 1 H; 4,01, dd, 1 H; 4,29, dd, 2 H; 4,43 , t, 2 H; 4,85-4, r 95, m, 1 H; 7,01, d, 1 H; 4,48 - 7,55, m, 2 H; 7,61, d, 1 H; 7,84, d, 1 H.

Exemplo 174 N-({3-[4-(3-amino-l-pirrolidinil)-3-nitrofenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida a

De um modo análogo ao procedimento geral para a preparação de derivados B, faz-se reagir 130 mg (32,5 pmol) de resina 'TentaGel SAM' com 3-pirrolidinilcarbamato de terc-butilo, enquanto derivado de amina 1. Após acilação 130 com ácido 5-clorotiofenocarboxílico, elimina-se o derivado de nitrobenzeno obtido da fase sólida e evapora-se. Purifica-se este produto impuro por HPLC de fase inversa com um gradiente de água/TFA/acetonitrilo. -NMR ( 400 MHz, CD3OH): 2,07 -2, \—1 m, 1 H; 2, 39- 2,4 9, m, 1 H; 3,21- -3,40, m, 2 H; 3,45, dd, , 1 H; 3, 50 -3, 60, m, 1 H; 3, 67 , dd, 1 H; 3,76, dd, 1 H; 3, 8 OO 1 . 00 , m 7 2 H ; 4 ,14 - 4, 21, t , 1 H; 4,85 - 4, 95, m, 1 H; 7, 01, d, 1 H; 7, 11, d, 1 H; 7, 52 , d, 1 H; 7,66, dd, 1 H; 7, 93, d, 1 H.

Exemplo 175 N-({3-[3-amino-4-(1-piperidinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida

De um modo análogo ao procedimento geral para a preparação de derivados B, faz-se reagir 130 mg (32,5 pmol) de resina 'TentaGel SAM' com piperidina enquanto derivado de amina 1. Elimina-se da fase sólida a anilina, obtida após redução, na ausência do passo suplementar de acilação, e evapora-se. Purifica-se este produto impuro por HPLC de fase inversa com um gradiente de água/TFA/acetonitrilo. 1H-NMR (400 MHz , CD3OH): 1, ,65-1,75, m, 2 1—1 84-1,95, m, 4 H; 3, 20-3,28, m, 4 H; 3, 68, dd, 1 H; 3,73, dd, 1H; 3, 90, dd, 1 H; 4,17, dd, 1 H; 4 , 80-4, 90, m, 1 H; 7, 00, d, 1 H; 7, 05, dd , 1 H; 7, 30-7,38, m, 2H; 7,50, d, 1 H.

Exemplo 176 N-({3-[3-(Acetilamino)-4-(1-pirrolidinil)-fenil]-2-oxo-l,3-oxazolidina-5-il}-metil)-5-cloro-2-tiofenocarboxamida 131

De um modo análogo ao procedimento geral para a preparação de derivados B, faz-se reagir 130 mg (32,5 ymol) de resina 'TentaGel SAM' com pirrolidina, enquanto derivado de amina 1, e com cloreto de acetilo, enquanto derivado de ácido 1. Reparte-se o produto impuro entre acetato de etilo e uma solução de NaHC03, faz-se a separação da fase orgânica com NaCl, decanta-se e evapora-se até à secura. Purifica-se este produto impuro por cromatografia rápida através de gel de sílica (diclorometano/acetato de etilo, 1:1 - 0:1), sob uma pressão hipobárica. 1H-NMR (400 MHz, CD3OH) : 1, 93 - 2,03, lr, 4 H; 2,16, S, 3 H; 3, 20- -3,30, lr, 4 H; 3, ,70, d, 2 H; 3,86, dd 4, 10, dd, . 1 H; : 4,14, dd, 1 H; 4, 80-4,90, m, 1 H; 7, 00, H; 7, 07, d, 1 H; 7,31, dd, 1 H; 7,51, d, 1 H; 7, 60, d,

Os compostos seguintes foram preparados de um modo análogo ao descrito no procedimento geral.

132 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 178 g ns λ Ϊ* n ... y f Q. J S“i Γ V 0 2,49 33,7 179 J λ Ct^o 0‘ %r\J H s···/ ' ° ClA/ xJ rr%. O 4, 63 46,7 180 / 0 n „ 0"^ ,s/^°r o^o «-V hvT \jÇ N"\ O 3, 37 44, 8 181 H N ! M o ° 2, 16 83 182 ;N ) 0 0=<. ò 2,31 93,3 183 Υγ° V°\ Yy^»í (f i T y-" H 2,7 100 133 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 184 Οφ-ΟΓ’·*# 0sN\ í \ 0 3, 91 51 185 0~~\ n '‘p-pT"'τ> )*o ° â 2,72 75,2 186 0 3, 17 46 187 ίΊ"\ O 4, 61 50,2 188 W^í° °rO <^o OrN Ν-Λ i, .) 3, 89 56, 6 189 Λ A tf %rvl V cKV5, Mi O 3, 37 52,9 134 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 190 O %T jri /v, Vw"0 0 3, 6 53, 9 191 J s J? N VJ X N-# Vn ] °T> Άΐ 0 2,52 70,1 192 D 0*.;.0 n-X X 0 f^o o-O xy 0 3, 52 4 6,6 193 ,0 0“f 0^ tii 7 YH f w; s-\ ογΝ 'N W ) cr / 0 2, 87 50,1 194 ο /°γ° o ^\ s---/ í V" άλΛ %a O 3, 25 71,1 135 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 195 0”“/ 9*/ 0 c*— N 2, 66 67 196 <v° ci-73 IQ 14 2,4 52,1 197 tJirft0 o, 3, 13 48,9 198 o. ,,o V" 0 ( r %J %-U wN: Λ T CI-^V N 2, 67 75,5 199 o Yf° ov ΓΛ f 1 Y)fn V>\ fsf \ v N 2,72 65,7 136 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 200 o, w°y° o./ T $“/ N „ a \\ L 1 Cr' V· \Λ r\ V & 2,71 57,3 201 / OK f f* α-~/$γ^ίΤ\*Α r~i T V« 1 °-í Nsssf 'n 0 2,22 100 202 q wY <vO Ci-43 3, 89 75,7 203 Q .,.^0Y0 O f\ rv-° 1W ci-AJ* ví 3, 19 49,6 204 q w°r° <yQ sY^Vv* «Λ) Y u 2,55 88,2 205 n P^° A oY-n 4 W Y 0 j o /~N V-:N Y ?~4 >V cí-v vl í* 2,44 68,6 137 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 206 Γ \ r—ζ τ o / V4 ν' rru N 2, 86 71,8 207 vttvi s-/ N 2, 8 63, 6 208 i 0 π β^Λ ^ ,* HJ "Υ,Λ»^] °TÍ w χ·Λ"η o 2,41 77 209 { Q Ú55^ s J !* e'trsnpw-TWi H w a» 2,56 67,9 210 ο ,ο 0"' q Cu j Η TY a-YiS SJL n*\ 3, 67 78,4 138 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 211 N[ w 0 2,54 59, 8 212 P-f° o.J VN ^wyli α A/ S |Q 3, 84 59,2 213 rt 0 Γ\ 9¾ * yv° ^N i A ^ V N 2,41 67,8 214 /w° y^-^yí qaJ s & 2,41 75,4 215 n „ f-r\ JAlI Pi rVN csAv'·1 o 4, 01 81,3 216 «λ3 a; o 3,46 49,5 139 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 217 Oy° V0 fi YY N~# Vi w 4,4 60,2 218 0 OK tf '“Λ í N-Hf V-N > W/ \__/ o 3,79 70,9 219 o •U^pY-j jQ Y ^ Gl: y O 4,57 51,5 220 O^Q rt V 0 W T V1 %-a I tf XY Cr \/' 2, 68 100 221 Λ 0^0 0 r~\ ^ T 0yW 8>K Vjl a-Ό ÇjC O 4,53 63,5 140 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 222 q °rV' 2, 66 89,2 223 i wV o A 8-/ a-0 Cí >T"\ u 4,76 69,3 224 o^{ ? N ^ΝΎ^Ο 0 3, 45 77,4 225 i ή J* ^ X"-* I \ °t w/ W 0 3, 97 63,2 226 ' 0- I o /—< T γ· ^yyN s~( Γ f 3, 94 61,4 227 «wY O" "^"aNí ν-’Ν. .. í $~{ ΓτΗ a~^%s KX N \ 4, 15 66,3 141 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 228 j n 0^0 Γ Q Y O t h~U f y*v« VA ? > 4,41 55, 1 229 aV^YvfAn Ογ W V..../ b 2, 83 41,1 230 ,0^° oj V^<VvI ís"i νϊΛ όΓ'ΧΧ 2,7 83 231 0 W°T° O"”* Jr^N Y*N: í S-/ ): YN li L ff a~\s V-Vv, O 4,39 64,2 232 %rCí° .,Vr ci'^3 0 4, 85 74, 9 233 Q 0K ^Y°r0 o M >-n Xn VV px ciA/ γ.Χ " Y-x 4, 17 41 142 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 234 V p o 4,21 61,8 235 Λ o^o r Q W T Vv- n rrH k 2,75 100 236 s~/'N Xfí o \J( O 3, 94 50 237 trtr -4“ Η )“V* CI*''4V‘i \Λ.. *T\^ 4, 65 75, 8 238 o a'^r^N'V\JrÍ_fí'-^ wv2 0 4,4 75,3 143 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 239 P ^ Λ f r&&*ÇT*k í íí .pi F 0 o α 4,24 62,2 240 a~'\J VX D 4,76 75, 1 241 >τ£Τ vG Cr\/ VA N"\ C-D 4, 17 72,5 242 W<f °rQ α·Μ ΌΤ 4, 6 74, 8 243 j o oK S | N fiιτ\λ W , Γ «-/ V*T> Yss/ 1_/ D 4, 12 51,6 244 % wV 0 NsS£% vj θ' N""\ O 4,71 66,2 144 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 245 ^|fY0 °VO 'NwsS*Nd 4, 86 62 246 1 ^Vô CÍ~\J M O 5, 23 58,3 247 o o r n ry* crv^ VÁ 0 4, 17 72,4 248 £KÍ° 0. J ν1Γ<^ΝγγΝ K '*'%''> cr'**' t^· N 3, 35 59, 6 249 N 0-f” °γ^ vAW LJ \~J Λ 0^ 2,41 60,3 145 (continuação)

Exemplo n° Estrutura Tempo de retenção HPLC [%] 250 Λ ,0 o >°Y 0 hN x T cr^ W H Oss/ 3, 31 65,2 251 N ^ Λ 2, 86 36,5 252 _ „ í^"\ %*r\J rO Η yvN ci-Sx VA 0 A 2, 69 89,8 253 vO S *“/ V-“·' \_--N \Â N 2, 81 67,4 254 π O^r.0 n rH V-N. _ t cA) ll Ό 2, 19 75,4

Todos os produtos de síntese em suporte de fase sólida foram caracterizados por LC-MS. Para este fim, foi utilizado o seguinte sistema de separação: ΉΡ 1100' equipado com um detector UV (208 - 400 nm), temperatura do 146 forno 40°C, coluna 'Waters Symmetry C18' (50 mm x 2,1 mm, 3,5 pm) , fase móvel A: 99,9% de acetonitrilo/0, 1% de ácido fórmico, fase móvel B: 99,9% de água/0,1% de ácido fórmico; gradiente:

Tempo A: % B: % Caudal 0,00 10,0 90,0 0,50 4,00 90,0 10,0 0,50 O O 90,0 10,0 0,50 6, 10 10,0 90,0 1,00 7,50 10,0 90,0 0,50

As substâncias foram detectadas utilizando um dispositivo 'Micromass Quattro LCZ MS', ionização: ESI positiva/negativa.

Os radicais ou -O presentes nas estruturas ilustradas antes designam sempre uma função ou -OH. 147

REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO A presente listagem de referências citadas pelo requerente é apresentada meramente por razões de conveniência para o leitor. Não faz parte da patente de invenção europeia. Embora se tenha tomado todo o cuidado durante a compilação das referências, não é possível excluir a existência de erros ou omissões, pelos quais o IEP não assume nenhuma responsabilidade.

Patentes de invenção citadas na descrição wo 9937304 A [0003] wo 9906371 A [0003] us 5929248 A [0018] us 5801246 A [0018] us 5756732 A [0018] us 5654435 A [0018] us 5654428 A [0018] us 5565571 A [0018] wo 9931092 A [0019] EP 623615 A [0019] wo 9710223 A [0061] wo 9801446 A [0064] wo 9323384 A [0064] [0151] wo 9703072 A [0064] us 5177080 A [0068] us 4231938 A [0068] us 4444784 A [0068] us 4346227 A [0068] us 5354772 A [0068] us 5273995 A [0068] us 5863930 A [0068] 148 wo 9816223 A [0068] wo 9816507 A [0068] wo 9823519 A [0068] wo 0006567 A [0068] wo 0006568 A [0068] wo 0006569 A [0068] wo 0021954 A [0068] wo 0066582 A [0068] wo 0117998 A [0068] wo 0119776 A [0068] wo 0119355 A [0068] wo 0119780 A [0068] wo 0119778 A [0068] US 5349045 A [0095] US 3279880 A [0097] • ΕΡ 350002 A [0139] • ΕΡ 785200 A [0147] • ΕΡ 738726 A [0148] [0192] • ΕΡ 789026 A [0153] • DE 2708236 [0154] • US 2811555 A [0169] • DE 2836305, Delalande S.A. [0317] • US 4128654 A [0363]

Literatura citada na descrição, para além das patentes de invenção • J. Hauptmann; J. Sturzebecher. Thrombosis Research, 1999, vol. 93, 203 [0003] • F. Al-Obeidi; J. A. Ostrem. Factor Xa inhibitors. Exp. Opin. Ther. Patents, 1999, vol. 9, 931 [0003] 149 • B.-Y. Zhu; R. M. Scarborough. Curr. Opin. Card. Pulm.

Ren. Inv. Drugs, 1999, vol. 1 (1), 63 [0003] • Specific Factor Xa Inhibitors. M. Samama; J. M. Walenga; B. Kaiser; J. Fareed. Cardiovascular Thrombosis: Thrombocardiology and Thromboneurology. Lippincott-Raven Publishers, 1998 [0003] • The Ephesus Study, blood, 2000, vol. 96, 490a [0003] • The Penthifra Study, blood. 2000, vol. 96, 490a [0003] • The Pentamaks Study, blood, 2000, vol. 96, 490a-491a [0003] • The Pentathlon 2000 Study, blood, 2000, vol. 96, 491a [0003] • Thiemes Innere Medizin. Georg Thieme Verlag Stuttgart, 2000 [0004] • W. Forth; O. Henschler; W. Ruminei; K. Starke. Aligemeine und spezielle Pharmakologie und Toxikologie. Spektrum

Akademiseher Verlag [0006] • Thiemes Innere Medizin. Georg Thieme Verlag [0006] • Riedi, B.; Endermann, R. Exp. Opin. Ther. Patents, 1999, vol. 9(5), 625 [0017] • M. R. Barbachyn et al. J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 680 [0061] [0144] • J. A. Tucker et al. J. Med. Chem., 1998, vol. 41, 3727 [0064] [0149] • S. J. Brickner et al. J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 673 [0064] [0142] • W. A. Gregory et al. J. Med. Chem., 1989, vol. 32, 1673 [0064] • OverView of the Thrombotic Process and its Therapy. J. Hirsh; E. W. Salzman; V. J. Marder; R. W. Colman. 150

Hemostasis and Thrombosis: Basic Principies and Clinicai Practice. J. B. Lippincott Company, 1994, 1151 -1163 [0071] • Christopher N. Berry et al. Br. J. Pharmacol., 1994, vol. 113, 1209-1214 [0090] • K. Mengetal. Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacal., 1977, vol. 301, 115-119 [0091] [0092] • MJ Campbell; D. Machin. Medicai Statistics. John Wiley & Sons [0093] • J.-W. Chern et al. Tetrahedron Lett., 1998, vol. 39, 8483 [0096] • Tetrahedron Lett., 1999, vol. 40, 2035 [0097] • Renger. Synthesis, 1985, 856 [0097] • Aebiacher et al. Heterocycles, 1998, vol. 48, 2225 [0097] • E. Pfeil; U. Harder. Angew. Chem., 1967, vol. 79, 188 [0099] • Ziegler, Cari B. et al. J. Heterocycl. Chem., 1988, vol. 25(2), 71 9-723 [0119] • Bartoli et al. J. Org. Chem., 1975, vol.40, 872 [0136] • Pfeil, E.; Harder, U. Angew. Chem., 1967, vol. 79, 188 [0138] • Reppe et al, Justus Liebigs Ann. Chem., 1955, vol. 596, 209 [0156] • S.J. Brickner et al. J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 673 [0156] • Reppe et al. Justus Liebigs Ann. Chem., 1955, vol. 596, 151 [0168] • J.E. LuValle et al. J. Am. Chem. Soc., 1948, vol. 70, 2223 [0170] • H.R. Snyder et al. J. Pharm. Sei., 1977, vol. 66, 1204 [0171] 151 • Adams et al. J. Am. Chem. Soc., 1939, vol. 61, 2342 [0172] • LK. Khanna et al. J. Med. Chem., 1997, vol. 40, 1619 [0174] • A. Gutcait et al. Tetrahedron Asym., 1996, vol. 7, 1641 [0185] • Grell, W.; Hurnaus, R.; Griss, G.; Sauter, R.; Rupprecht, E. et al. J. Med. Chem., 1998, vol. 41, 5219 [0193] • Ártico, M. et al. Farmaco Ed. Sei., 1969, vol. 24, 179 [0193] • Bioorg. Med. Chem. Lett., 1997, 1921-1926 [0207] • Justus Liebigs Ann. Chem., 1955, vol. 596, 204 [0209] • Bouchet et al. J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1974, vol. 2, 449 [0215] • Surrey et al. J. Amer. Chem. Soc., 1955, vol. 77, 633 [0241] • Tong, L.K.J. et al., J. Amer. Chem. Soc, 1960, vol. 82, 1988 [0286] • CHEMICAL ABSTRACTS, 90, 186926 [0317]

Lisboa, 26/03/2010

Claims (8)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Combinações que compreendem A) pelo menos um composto de fórmula estrutural (I)

em que o símbolo R1 representa um grupo 2-tiofeno, o qual é substituído na posição 5 com um readical seleccionado entre o conjunto constituído por cloro, bromo, metilo ou trifluorometilo, o símbolo R2 representa D-A-: em que: o radical "A" é fenileno; o radical "D" é um heterociclo saturado com 5 ou 6 membros, o qual está ligado por meio de um átomo de azoto a "A", que possui um grupo carbonilo na vizinhança directa do átomo de azoto da ligação e no qual um átomo de carbono do anel é substituído por um heteroátomo do conjunto constituído por S, N e 0; em que o grupo "A", anteriormente definido, pode ser facultativamente substituído uma ou duas vezes na posição meta relativamente à ligação à oxazolidinona com um radical seleccionado entre o conjunto constituído por flúor, cloro, nitro, amino, trifluorometilo, metilo ou ciano, 2 os símbolos R1

2, R3, R5, R6, R7 e R8 representam um átomo de hidrogénio, os seus sais e hidratos farmaceuticamente aceitáveis ou suas misturas e B) cerivastatina (Rivastatin, Baycol), lovastatina (Mevacor), simvastatina (Zocor), pravastatina (Pravachol), fluvastatina (Lescol) , atorvastatina (Lipitor), captopril, lisinopril, enalapril, ramipril, cilazapril, benazepril, fosinopril, quinapril, perindopril, embusartano, losartano, valsartano, irbesartano, candesartano, eprosartano, temisartano, carvedilol, alprenolol, bisoprolol, acebutolol, atenolol, betaxolol, carteolol, metoprolol, nadolol, penbutolol, pindolol, propanolol, timolol, prazosina, bunazosina, doxazosina, terazosina, hidro-clorotiazida, furosemida, bumetanida, piretanida, torasemida, amilorida, di-hidralazina, verapamil, diltiazem, nifedipina (Adalat), nitrendipina (Bayotensin), 5-mononitrato de isossorbida, dinitrato de isossorbida, trinitrato de glicerol, activador do plasminogénio tecidual (APT), estreptocinase, reteplase, uroquinase, heparina (UFH), tinzaparina, certoparina, parnaparina, nadroparina, ardeparina, enoxaparina, reviparina, dalteparina, hirudina, aspirina, ticlopidina (Ticlid), clopidogrel (Plavix), abciximab, eptifibatida, tirofiban, lamifiban ou lefradafiban. 1 Combinações de acordo com a reivindicação 1, 2 caracterizadas pelo facto de o composto A) ser 5-cloro-JV- 3 ({(5S)-2-oxo-3-[4-(3-oxo-4-morfolinil)-fenil]-1,3- 3 oxazolidina-5-il}-metil)-2-tiofenocarboxamida de fórmula estrutural

os seus sais ou hidratos farmaceuticamente aceitáveis ou suas misturas.

3. Processo para a produção de combinações de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo facto de o componente A) e o componente B) serem combinados ou preparados de um modo adequado.

4. Combinações de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2 para a profilaxia e/ou para o tratamento de doenças.

5. Medicamento que compreende pelo menos uma combinação de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2 e, se adequado, outros ingredientes farmacêuticos activos.

6. Medicamento que compreende pelo menos uma combinação de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2 e um ou mais excipientes e/ou veículos farmacologicamente aceitáveis.

7. Utilização das combinações de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2 para a produção de um medicamento para a profilaxia e/ou para o tratamento de distúrbios tromboembólicos. 4

8. Utilização das combinações de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2 para a produção de um medicamento para a profilaxia e/ou para o tratamento de enfarte de miocárdio, angina de peito (incluindo angina instável), morte súbita cardíaca, reoclusões e restenoses após angioplastia ou bypass aortocoronário, AVC, ataques isquémicos transientes, doenças oclusivas arteriais periféricas, embolias pulmonares e tromboses venosas agudas. Lisboa, 26/03/2010