PL178578B1 - Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposób jej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania - Google Patents

Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposób jej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania

Info

Publication number
PL178578B1
PL178578B1 PL94310598A PL31059894A PL178578B1 PL 178578 B1 PL178578 B1 PL 178578B1 PL 94310598 A PL94310598 A PL 94310598A PL 31059894 A PL31059894 A PL 31059894A PL 178578 B1 PL178578 B1 PL 178578B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
mpl
antigen
vaccine composition
hbsag
composition
Prior art date
Application number
PL94310598A
Other languages
English (en)
Other versions
PL310598A1 (en
Inventor
Pierre Hauser
Pierre Voet
Moncef Slaoui
Nathalie M.C. Garcon-Johnson
Pierre Desmons
Original Assignee
Smithkline Beecham Biolog
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26302633&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL178578(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GB939306029A external-priority patent/GB9306029D0/en
Priority claimed from GB9403417A external-priority patent/GB9403417D0/en
Application filed by Smithkline Beecham Biolog filed Critical Smithkline Beecham Biolog
Publication of PL310598A1 publication Critical patent/PL310598A1/xx
Publication of PL178578B1 publication Critical patent/PL178578B1/pl

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7024Esters of saccharides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18Antivirals for RNA viruses for HIV
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/20Antivirals for DNA viruses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • A61P37/04Immunostimulants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505Inorganic adjuvants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511Organic adjuvants
    • A61K2039/55555Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511Organic adjuvants
    • A61K2039/55566Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511Organic adjuvants
    • A61K2039/55572Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

1. Zawiesina czastek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A (MPL), znamienna tym, ze jest wizual- nie przejrzysta i sterylizowalna przez slepa filtracje na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 µ m, korzystnie czastki zawiesiny maja rozmiar mniejszy niz 120 nm. 2. Sposób wytwarzania zawiesiny czastek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A, znamienny tym, ze sklada sie z zawieszania 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A w wodzie i poddawania otrzymanej za- wiesiny dzialaniu ultradzwieków do wytworzenia zawiesiny czastek wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez slepa filtracje na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 µ m, korzystnie o rozmiarze czastek zawiesiny generalnie mniejszym niz 120 nm. 3. Kompozycja szczepionki zawierajacej antygen w polaczeniu z zawiesina 3-0-deacylowanego mono- fosforylolipidu A (MPL) i odpowiednim nosnikiem, znamienna tym, ze zawiera MPL w postaci zawiesiny czastek wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez slepa filtracje na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 µ m, korzystnie o rozmiarze czastek zawiesiny generalnie mniejszym niz 120 nm, w ilosci 10-100 µ g na dawke i antygen. 25. Sposób wytwarzania kompozycji szczepionki zawierajacej antygen w polaczeniu z zawiesina 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A (MPL) i odpowiednim nosnikiem, znam ienny tym, ze polega na mieszaniu zawiesiny czastek MPL wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez slepa filtracje na hydrofilo- wej membranie PVDF 0,22 µ m, korzystnie o rozmiarze czastek zawiesiny generalnie mniejszym niz 120 nm, z nosnikiem i antygenem w farmaceutycznie dopuszczalnej zaróbce. PL PL

Description

Przedmiotem wynalazkujest nowa zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposóbjej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania.
3-0-deacylowany monofosforylolipid A (lub 3-de-0-acylowany monofosforylolipid A) był poprzednio nazywany 3D-MPL lub d3-MPL w celu wskazania że pozycja 3 redukującego końca glukozaminy jest de-O-acylowana. Preparatykę podaje brytyjski opis patentowy nr 2220211A. Chemicznie jest to mieszanina 3-deacylowanego monofosforylolipidu A z 4,5 lub 6 acylowanymi łańcuchami. W opisie termin 3D-MPL (lub d3-MPL) skracany jest do MPL, ponieważ „MPL” jest zastrzeżoną nazwą Ribi Immunochem,. Montana, stosowanym przez Ribi w celu jednoznacznego nazwania swojego 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A.
Brytyjski opis patentowy nr 2220211A wspomina, że endotoksyczność wcześniej stosowanych enterobakteryj nych lipopolisacharydów (LPS) zmniejsza się przy zachowaniu immunogennych właściwości. Jednak opis podaje te informacje po prostu w związku z układami bakteryjnymi (Gram-ujemnymi). Nie wspomniano o rozmiarach cząstek MPL. W istocie rozmiary cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A przekraczają 500 nm.
Publikacja WO/92/16231 opisuje szczepionkę zawierającą glikoproteinę gD wirusa opryszczki lub jej immunologiczne fragmenty w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A. Tu także nie wspomniano o rozmiarach cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A.
Publikacja WO/92/06113 opisuje szczepionkę zawierającą glikoproteinę 160 wirusa HIV lub jej immunologiczne fragmenty w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A. Nie wspomniano o rozmiarach cząstek MPL.
Przedmiotem wynalazkujest zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu
A (MPL), charakteryzująca się tym, że jest wizualnie przejrzysta i sterylizowalna przez ślepą filtrację nahydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie cząstki zawiesiny mająrozmiar generalnie mniejszy niż 120 nm.
178 578
Przedmiotem wynalazku jest też sposób wytwarzania zawiesiny cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A, charakteryzujący się tym, że składa się z zawieszania 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A w wodzie i poddawania otrzymanej zawiesiny działaniu ultra-dźwięków do wytworzenia zawiesiny cząstek wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez ślepąfiltrację nahydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie o rozmiarze cząstek zawiesiny generalnie mniejszym niż 120 nm.
Przedmiotem wynalazkujest też kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z zawiesiną 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A (MPL) i odpowiednim nośnikiem, charakteryzująca się tym, że zawiera MPL w postaci zawiesiny cząstek wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez ślepą filtrację na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie o rozmiarze cząstek zawiesiny generalnie mniejszym niż 120 nm, w ilości 10-W0 pg na dawkę i antygen.
Korzystnie kompozycja zawiera MPL o rozmiarach cząstek 60-120 nm, a szczególnie korzystnie o rozmiarach cząstek mniejszych niż 100 nm.
W innym korzystnym wykonaniu kompozycja szczepionki zawiera jako nośnik wodorotlenek glinu.
Innym korzystnym nośnikiem jest emulsja typu olej w wodzie lub inny ciekły nośnik lipidowy.
Korzystnie szczepionka według wynalazku antygen zawiera antygen wirusowy. Szczególnie korzystnymi antygenami są: antygen Hepatitis A, a zwłaszcza zdezaktywowana kompozycja pełnych komórek szczepu HM-175; antygen Hepatitis B, a zwłaszcza antygen powierzchniowy Hepatitis B (HBsAg) lubjego wariant, antygen HBsAg będący antygenem S HBsAg (226 aminokwasów), antygen HBsAg zawierający dodatkowo sekwencję pre-S, antygen HBsAg zawierający złożoną cząstkę o wzorze (L*, S), przy czym L* oznacza zmodyfikowane białko L wirusa Hepatitis B mające sekwencję aminokwasową złożoną z reszt 12-52, następnie 133-145 i 175-400 białka L, a S oznacza białko S HBsAg; antygen Hepatitis A; jeden lub wiele antygenów Hepatitis i co najmniej jeden składnik wybrany spośród związków' różnych od antygenu Hepatitis, który chroni przed jedną lub wieloma chorobami wybranymi spośród dyfterytu, tężca, kokluszu, Haemofilis influenzae b (Hib) oraz polio.
Szczególnie korzystne są kompozycje zawierające kombinację DTP (dyfteryt-tężec-koklusz)-HBsAg, kombinację Hib-HBsAg, kombinację DTP-Hib-HBsAg oraz kombinację IPV (nieaktywna szczepionka polio)-DTP-Hib-HBsAg, i ewentualnie dodatkowo antygen Hepatitis A.
W innym wykonaniu kompozycja szczepionki zawiera glikoproteinę D HSV lub jej immunologiczny fragment, a zwłaszcza glikoproteinę D o uciętej sekwencji, korzystnie HSVgD2 pozbawione kotwiczącego końca C.
Kompozycja szczepionki korzystnie zawiera HIV gp 160 lub jego immunologiczny fragment, a zwłaszcza jako pochodną gp 160 zawiera pochodną gp 120.
Przedmiotem wynalazku jest też sposób wytwarzania kompozycji szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z zawiesinąMPL polegający na mieszaniu zawiesiny MPL z nośnikiem i antygenem w farmaceutycznie dopuszczalnej zaróbce.
Korzystnym przedmiotem wynalazkujest kompozycja szczepionki zawierająca antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A (skracanym do nazwy MPL) i odpowiedni nośnik, w której rozmiar cząstek MPL jest „niewielki”, nie przekracza 120 nm.
Takie preparaty nadają się do wielu jedno- lub wielow-artościowych szczepionek.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że kompozycje szczepionek według wynalazku mają szczególnie korzystne właściwości opisane poniżej. W szczególności takie kompozycje są wysoce immunogenne. Ponadto można zapewnić sterylność kompozycji z adiuwantem, ponieważ produkt nadaje się do sterylizującej filtracji. Kolejna korzyść z „małych” cząstek MPL pojawia się w przypadku kompozycji z wodorotlenkiem glinu, ponieważ MPL oddziaływuje z wodorotlenkiem glinu i antygenem tworząc wyodrębnionąjednostkę.
W kompozycjach według wynalazku antygen jest antygenem wirusowym, np. antygenem wobec infekcji żółtaczkowej (Hepatitis A, B, C, D lub E) lub opryszczki (HSV-1 lub HSV-2)
178 578 zgodnie z poniższym opisem. Opis współczesnych szczepionek przeciwżółtaczkowych wraz z pewną liczbą odnośników- można znaleźć w Lancet z 12 maja 1990 na stronie 1142 ff (prof.
A.L.W.F. Eddleston). Patrz także „Viral Hepatitis and Liver Disease” (wyd. Vyas, B.N., Dienstag, J.L. iHoofnagle, J.H., Grune and Stratton, Inc. (1984)) oraz „Viral Hepatitis and Liver Disease” (Proceedings of the 1990 International Symposium, wyd. F.B. Hollinger, S.M. Lemon i H. Margolis, publ. Williams i Wilkins). Odnośniki dla HSV-1 i HSV-2 można znaleźć w publikacji WO92/16321.
Infekcja wirusem hepatitis A (HAV) jest szeroko występującym problemem, ale dostępne są szczepionki nadające się do masowych szczepień, np. Havrix (SmithKline Beecham Biologicals) będący martwąatenuowanąszczepionkąze szczepu HM-175 HAV [patrz „Inactivated Candidate Vaccines for Hepatitis A”, F.E. Andre, A. Hepburn i E.D'Hondt, Prog Med. Virol., tom 37, str. 72-75 (1990) i monografia produktu „Havrix” opublikowana przez SmithKline Beecham Biologicals (1991)].
Flehming i in. (loc. cit., str. 56-71) przejrzał kliniczne aspekty, wirologię, immunologię i epidemiologię Hepatitis A i przedyskutował podejście do opracowywania szczepionek wobec tej pospolitej infekcji wirusowej.
W niniejszym opisie wyrażenie „antygen HAV” odnosi się do antygenu zdolnego do neutralizacji przeciwciała HAV u ludzi. Antygen HAV może zawierać żywe atenuowane cząstki wirusa lub zdezaktywowane atenuowane cząstki wirusa, albo też może być kapsyd lub białko wirusowe HAV, dogodne do wytworzenia metodami inżynierii genetycznej.
Infekcja wirusem hepatitis B (HBV) jest szeroko występującym problemem, ale dostępne są szczepionki nadające się do masowych szczepień, np. Engerix-B (SmithKline Beecham plc) otrzymywany metodami inżynierii genetycznej.
Wytwarzanie powierzchniowego antygenu Hepatitis B (HBsAg) jest dobrze udokumentowane. Patrz np. Hartford i in., Develop. Biol. Standard 54, str. 125 (1983), Gregg i in., Biotechnology, 5, str. 479 (1987), europejskie opisy patentowe EP-A-0226846, EP-A-0299108 i odnośniki tam zawarte.
W niniejszym opisie termin „antygen powierzchniowy Hepatitis B” lub „HBsAg” obejmuje każdy antygen HBsAg lub jego fragment wykazujący antygeniczoność antygenu powierzchniowego hBv. Należy rozumieć, że poza 226 aminokwasami sekwencji antygenu HBsAg S (patrz Tiollais i in., Nature, 317,489 (1985) i odnośniki tam zawarte) HBsAg opisany tutaj może w razie potrzeby zawierać całość lub część sekwencji pre-S opisanej w powyższych odnośnikach i w europejskim opisie patentowym EP-A-0278940. W szczególności HBsAg może stanowić polipeptyd zawierający sekwencję aminokwasów zawieraj ącąreszty 12-52, a następnie 133-145 i 175-400 białka L HBsAg względem otwartej ramki odczytu wirusa B Hepatitis serotypu ad (polipeptyd ten określa się jako L*, patrz europejski opis patentowy EP 0414374). HBsAg z zakresu wynalazku może także zawierać polipeptyd preS1-preS2-s opisany w europejskim opisie patentowym EP 0198474 (Endotronics) lub jego analogi takie, jak opisano w europejskim opisie patentowym EP 0304578 (McCormick i Jones). Opisany tutaj HBsAg może się też odnosić do mutantów, np. „mutanta ucieczkowego” opisanego w publikacji WO 91/14703 lub europejskim zgłoszeniu patentowym nr 0511855A1, a szczególnie do HBsAg, w którym na pozycji 145 glicynę podstawiono argininą.
Zwykle HBsAg występuje w postaci cząstek. Cząstki mogą zawierać np. białko S samo lub w postaci złożonych cząstek, np. (L*, S), gdzie L* jest takie, jak zdefiniowano powyżej, a S oznacza białko S HBsAg. Wymieniona cząstka ma korzystnie postać, w której jest produktem ekspresji w drożdżach.
Glikoproteina D wirusa Herpex Simplex mieści się w osłonie wirusa, a także możnają znaleźć w cytoplazmie zarażonych komórek (Eisenberg R.J. i in., J. of Virol. 1980, 35, 428-435). Składa się z 393 aminokwasów, w tym peptydu sygnałowego, i ma masę cząsteczkową około 60 kD. Ze wszystkich glikoprotein osłony tajest chyba najlepiej zbadana (Cohen i in. Virology 60,157-166). Wiadomo, że in vivo gra główną rolę w łączeniu się wirusa z błoną komórkową. Ponadto glikoproteina D wydziela neutralizujące przeciwciała in vivo (Eing i in. J. Med. Virology 127, 59-65).
178 578
Jednak latentny wirus HSV2 może wciąż ożyć i indukować nawrót choroby pomimo wysokiego poziomu neutralizujących przeciwciał w osoczu pacjenta. Jest więc oczywiste, że zdolność do indukowania tylko neutralizujących przeciwciał nie wystarcza do właściwego zwalczenia choroby.
W kompozycjach szczepionek według wynalazku korzystnie stosuje się dojrzałą rekombinacyjną uciętą glikoproteinę D (rgD2t) lub równoważne białka. Równoważne białka obejmują glikoproteinę gD z HSV-1.
W korzystnym aspekcie rgD2tjest glikoproteinąD o 308 aminokwasach, zawierająca aminokwasy od 1do 306 z naturalnej glikoproteiny z dodatkiem asparaginy lub glutaminy na końcu C uciętego białka. Ta postać białka obejmuje peptyd sygnałowy, który jest ucinany dając dojrzałe białko z 238 aminokwasami. Wytarzanie takiego białka w komórkach jajnika chomików chińskich opisuje europejski opis patentowy Genetech EP-B-139417 i Science 222, str. 524, a także Biotechnology, czerwiec 1984, str. 527. Taka szczepionka, skomponowana z małym MPL według wynalazku ma znacznie większy potencjał terapeutyczny niż znane kompozycj e rgD2tChociaż pewne doświadczalne i dostępne w handlu szczepionki dają doskonałe wyniki, wiadomo dobrze, że optymalna szczepionka musi stymulować nie tylko neutralizujące przeciwciało, ale także powinna stymulować tak skutecznie, jak to możliwe, odporność komórkową mediowaną komórkami T.
Szczególnie korzystne jest, że kompozycje szczepionek według wynalazku skutecznie indukują zabezpieczającą odporność, nawet przy badzo niewielkich dawkach antygenu.
Stanowią one doskonałą ochronę przeciwko pierwotnej i nawrotowej infekcji, a także korzystnie stymulują zarówno specyficznąpozakomórkową (neutralizującąprzeciwciała), a także mediowaną komórkami efektorowymi (DTH) odpowiedź immunologiczną.
W celu wytworzenia 3-deacylowanego monofosforylolipidu A z małymi rozmiarami cząstek, zwykle nie przekraczającymi 120 nm, można stosować procedurę opisanąw brytyj skim opisie patentowym GB 2200211 uzyskuj ąc znane 3D-MPL (lub handlowe MPL o większych rozmiarach cząstek można zakupić w Ribi Immunochem) i a następnie produkt można poddać działaniu ultradźwięków aż do otrzymania przejrzystego roztworu. Rozmiary cząstek można oszacować stosując dynamiczne rozpraszanie światła opisane poniżej. W celu utrzymania rozmiarów MPL w zakresie 100 nm po połączeniu z wodorotlenkiem glinu, antygenem i buforem, można dodać Tween 80 lub sorbitol. W tych warunkach ustalono, że MPL nie ulega agregacji w obecności bufora fosforanowego, jak to jest możliwe wjego nieobecności. Postępując w ten sposób określa się dokładniej końcową kompozycję. MPL wciąż oddziaływuje z wodorotlenkiem glinu i antygenem tworząc wyodrębnionąjednostkę. Przejrzysty zawiesina MPL również stanowi aspekt wynalazku. Zawiesinę można sterylizować przepuszczając ją przez filtr.
Korzystnie rozmiary cząstek w zawiesinie wynoszą 60-120 nm.
Najkorzystniej rozmiary cząstek w zawiesinie wynoszą poniżej 100 nm.
mPl zdefiniowany powyżej występuje w ilości 10-200 pg, korzystnie 25-50 pg na dawkę, w której antygen występuje w ilości 2-50 pg lub więcej. Kompozycja szczepionki według wynalazku może zawierać ponadto immunostymulatory, a w korzystnej odmianie QS21 (nazywane niekiedy QA21). Jest to frakcja HPLC ekstraktu saponiny pochodzącego z kory drzewa Quillaja Saponaria Molina, a sposób jej wytwarzania podaje opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5057540.
Nośnik może być ewentualnie emulsjątypu olej w wodzie, nośnikiem lipidów lub wodorotlenkiem glinu (solą wodorotlenku glinu).
Nietoksyczne emulsje typu olej w wodzie korzystnie zawierają nietoksyczny olej, np. skwalen, oraz emulgator taki jak Tween 80, w wodnym nośniku. Wodny nośnik może być np. solanką buforowaną fosforanem.
Korzystnie kompozycje szczepionki będą zawierały antygen lub kompozycję antygenową mogącą wywoływać odpowiedź immunologiczną wobec ludzkich lub zwierzęcych patogenów, przy czym antygen lub antygenowa kompozycja pochodzi w HIV-1 (taki jak gp120 lub gp160, patrz publikacja WO 92/06113 i odnośniki tam umieszczone), wirusa opryszczki, takijak gD lub
178 578 jego pochodne, lub białko Immediate Early takiejak ICP27 z HSV-1 lub HSV-2, gB (lubjego pochodne) z ludzkiego cytomegalowirusa, lub gpl, II lub III z wirusa Varicella Zoster, lub z wirusa żółtaczki, takiego jak wirus hepatitis B albo wobec innych wirusowych patogenów, takich jak Respiratory Syncytial Virus, wirus ludzkiego brodawczaka lub grypy, albo też patogenów bakteryjnych, takich jak Salmonella, Neisseria, Borr^lia (np. OspA lub OspB lub jego pochodne), lub Chlamydia, lub Bordetella, np. P.69, PT lub FHA, i pasożytów takichjak plazmodium lub Toxoplasma. Kompozycje szczepionki według wynalazku mogązawierać antygen nowotworowy, i nadawać się na szczepionkę przeciwrakową.
Jednąz odmian wynalazku jest kompozycja zawierająca antygen HAV (np. jak w Havrix) w mieszaninie z MPL i wodorotlenkiem glinu zgodnie z poniższym opisem.
Kolejną odmianą wynalazku jest kompozycja zawierająca antygen powierzchniowy wirusa HB (HBsAg) (np. jak w Engerix) w mieszaninie z MPL i wodorotlenkiem glinu zgodnie z poniższym opisem.
Kolejną odmianą wynalazku jest kompozycja zawierająca antygen HBsAg jako cząstki (L8, S) w mieszaninie z MPL i wodorotlenkiem glinu.
Kombinowane szczepionki Hepatitis A z Hepatitis B można wytwarzać zgodnie ze sposobem według wynalazku.
Kolejną odmianą wynalazku jest kompozycja szczepionki zawierająca dojrzałą uciętą glikoproteinę D(rgD2)) lub równoważne białka opisane powyżej. Tak więc kolejną. odmianą wynalazku jest kompozycja według wynalazku zawierająca antygen OspA lub jego pochodną z Borelia btagdorferi. Można na przykład stosować antygeny, szczególnie antygeny OsaA ze szczepów ZS7' lub B31. Tak więc kolejną odmianą wynalazku jest kompozycja szczepionki zawierająca antygen grypy. Dzięki temu otrzymuje się z ulepszoną szczepionkę przeciw grypie, szczególnie przy zastosowaniu wirusa rozszczepionego.
Kompozycję można stosować także z lekkimi cząstkami opryszczkowymi, takimi jak opisane w międzynarodowym zgłoszeniu patentowym nr PCT/GB92/00824 i międzynarodowym zgłoszeniu patentowym nr PCT/GB/00179.
Korzystnie kompozycje szczepionki według wynalazku zawierają inne antygeny do skutecznego leczenia lub profilaktyki jednej lub wielu infekcji bakteryjnych, wirusowych lub grzybiczych.
Np. kompozycje szczepionki na żółtaczkę według wynalazku korzystnie zawierająco najmniej jeden składnik taki jak antygen nieżółtaczkowy, znany z tego, że nadaje odporność na jedną lub kilka z powyższych infekcji: defteryt, tężec, koklusz, Haemofilis influenzae b (Hib) oraz polio.
Korzystnie szczepionka według wynalazku zawiera HBsAg jak zdefiniowano powyżej. Szczególna kombinacja szczepionki według wynalazku obejmuje kombinację szczepionek DTP (dyfteryt-tężec-koklusz^hepatitis B, kombinację szczepionek Hib-hepatitis B, kombinację szczepionek DTP-Hib-hepatitis B i kombinację szczepionek IPV (nieaktywna szczepionka aoli)-DTP-Hib-hepatitis B.
Powyższe kombinacje mogą korzystnie zawiera składnik zabezpieczający przed Hepatitis A, szczególnie martwy osłabiony szczep pochodzący ze szczepu HM-175 obecny w Havrix.
Odpowiednie składniki takich szczepionek są dostępne w handlu, a szczegóły można otrzymać ze Światowej Organizacji Zdrowia. Na przykład składnik IPV może być zdeaktywowaną szczepionką przeciw polio Salka. Szczepiona przeciwko krztuścowi może zawierać całe komórki lub produkty komórkowe.
Korzystnie szczepionka przeciw hepatitis lub kombinowana jest szczepionką pediatryczną.
Kompozycje szczepionek według wynalazku mają zastosowanie w terapii medycznej, szczególnie do leczenia lub profilaktyki infekcji, w tym wirusowych i bakteryjnych, lub do immunoterapeutycznego leczenia nowotworów. W korzystnym aspekcie szczepionka według wynalazku stanowi szczepionkę terapeutyczną do leczenia istniejących infekcji, np. żółtaczki B lub opryszczki u ludzi.
178 578
Preparaty szczepionkowe są opisane ogólnie w New Trends and Developments in Vaccines, wyd. Voller i in., University Park Press, Baltimore, Maryland, USA, 1978. Kapsułkowanie liposomami opisuje np. Fullerton, opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4372945 i Armor i in., opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4474757.
Ilość antygenu w każdej dawce szczepionki dobiera się tak, indukowała immunozabezpieczającą odpowiedź bez znaczących niekorzystnych efektów ubocznych typowych szczepionek. Ilość ta będzie zmieniała się w zależności od rodzaju wykorzystanych immunogenów. Zwykle można się spodziewać, że każda będzie zawierać 1-1000 pg pełnego immunogenu, korzystnie 2-100 pg, najkorzystniej 4-40 pg. Optymalną ilość dla konkretnej szczepionki można ustalić w standardowy sposób, w tym obserwując miano przeciwciał lub inne odpowiedzi u badanych. Po wstępnym szczepieniu pacjenci mogąotrzymać wtórnąszczepionkę po około 4 tygodniach.
W kolejnym aspekcie przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania szczepionki skutecznej w zapobieganiu lub leczeniu infekcji, który to sposób polega na mieszaniu antygenu z nośnikiem i zawiesinąMPL, przy czym rozmiary cząstek MPL korzystnie nie przekraczają 120 nm, zwykle 60-120 nm, bardziej korzystnie około 100 nm lub mniej.
Następujące przykłady ilustrują wynalazek i pokazują płynące z niego korzyści.
Przykład 1: Wytwarzanie MPL o rozmiarach cząstek 60-120 nm.
Wodę do zastrzyków wprowadza się do fiolek zawierających 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A (MPL) z Ribi Immunochem, Montana, przy pomocy strzykawki do stężenia 1 do 2 mg/ml. Zawiesinę początkowąuzyskano stosując mieszanie wirowe. Zawartość fiolek przeniesiono do 25 ml okrągłodennych probówek Corex (10 ml zawiesiny na probówkę) i zawiesinę poddano działaniu ultradźwięków w łaźni ultradźwiękowej. Gdy zawiesina stała się przejrzysta, rozmiary cząstek oceniono metodą dynamicznego rozpraszania światła (Malvern Zetasizer 3). Obróbkę kontynuowano do osiągnięcia przez cząstki MPL rozmiarów 60-120 nm.
Zawiesiny można w pewnych przypadkach przechowywać w temperaturze 4°C bez znaczącej agregacji do 5 miesięcy. Izotoniczny NaCl (0,15 M) lub izotoniczny NaCl z 40 mM fosforanu indukuje gwałtowną agregację (rozmiar >3-5 pm).
Przykład 2: Wytwarzanie wielkoskalowe sterylnego rozpuszczalnego MPL o rozmiarach cząstek poniżej 100 nm.
Liofilizowany 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A (MPL) z Ribi Immunochem umieszczono w zawiesinie w wodzie do zastrzyków (WFI). Zawiesinę przepompowywano w sposób ciągły przez ultradźwiękową komorę przepływową. Komora taka jest sporządzana ze szkła lub stali nierdzewnej z uszczelnieniem z PTFE, aby spełniać wymagania praktyki ogólnolekarskiej. Ultradźwięki generuje się odpowiednim generatorem i sonotrodą z Undatim Ultrasonics (Louvain-La-Neuve, Belgia). Wymiennik ciepła dołącza się do pętli w celu uniknięcia degradacji cieplnej produktu. Temperatura MPL między wlotem a wylotem komory wynosi od +4°C do 30°C, a różnica tych temperatur nie przekracza 20°C. Należy rozumieć, że ciepło jest usuwane w miarę przechodzenia materiału przez aparat.
Aparat ten pokazano schematycznie na fig. 1.
2.1. Ultradźwięki
Proszek MPL(5 Odo 500 mg) umieszcza się w zawiesinie w WFI w stężeniu od 1do2 mg/ml.
Zawiesinę MPL (w warunkach mieszania) przepompowuje się w sposób ciągły przez pętlę ultrr^cU^^^wicęktową (fig. 1) z natężeniem od 50 do 100 ml na minutę w celu uzyskania temperatury równowagi układu wynoszącej od +4 do +15°C.
Widmo własnej częstotliwości sonotrody w układzie (moc, komora przepływowa, natężenie przepływu cieczy, temperatura) ustawia się zgodnie z instrukcją producenta. Wstępnie ustalone granice mieszczą się od 19000 do 21000 Hz dla przetwornika 20000 Hz.
Generator pozwala kontrolować optymalną wydajność obróbki ultradźwiękowej (więcej energii i mniej ciepła) w danym czasie.
Temperatura w czasie procesu wynosi poniżej 30°C, aby uniknąć degradacji MPL.
Proces jest zakończony, gdy cząstki mająrozmiary poniżej 100 nm, a roztwórjest widocznie przejrzysty. W czasie działania ultradźwiękami pobiera się próbki, aby ustalić .rozmiary cząstek
178 578 metodąfotokorekcyjnej spektroskopii (dynamiczne rozpraszanie światła) stosując Malvern Zetasizer 3 w taki sposób, jak w przykładzie 1. Całkowity czas przebywania cieczy w komorze oblicza się na od 2,5 do 3,5 minuty (patrz tabela 1) przy komorze o pojemności 20 ml i natężeniu recyrkulacji 50 ml na minutę. Daje to średni czas przebywania 25 s na cykl, a zwykle potrzeba mniej niż 10 cykli dla uzyskania pożądanego efektu - małych cząstek MPL.
2.2. Proces sterylizacji
Powstały „rozpuszczony” MPL sterylizuje się przez ślepą filtrację na hydrofitowej membranie PVDF 0,22 pm. Obserwowane ciśnienie wynosi poniżej 1 bar. Co najmniej 25 mg „rozpuszczonego” MPL z łatwością przetwarza się na 1 cm2 z odzyskiem ponad 85%.
2.3. Przechowywanie/Trwałość
Sterylny „rozpuszczony” MPL przechowuje się w temperaturze +2 do 8°C. Dane o trwałości (Malvern) nie wykazują znacznych różnic rozmiarów cząstek po 6 miesiącach przechowywani (patrz tabela 2).
Przykład 3: Kompozycja szczepionki przeciwkoHepatitis B.
MPL o rozmiarach cząstek poniżej 100 nm otrzymano jak w przykładzie 1. Wodorotlenek glinu otrzymano z Superfos (Alhydrogel).
MPL umieszczono w zawiesinie w wodzie do zastrzyków w stężeniach od 0,2 do 1 mg.ml metodą działania ultradźwiękami w łaźni wodnej, aż do osiągnięcia rozmiarów cząstek od 80 do 500 nm, według pomiaru fotokorekcyjnego rozpraszania światła.
Od 1 do 20 pg HBsAg (S-antygen, jak w Engerix B) w roztworze bufora fosforanowego (1 mg/ml)zaadsorbowanona30do 100 pg wodorotlenku glinu (roztwór 10,3 8 mg/ml Al3+) przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej z mieszaniem. Do roztworu dodano następnie 30 do 50 pg MPL (roztwór 1 mg/ml). Objętość i osmotyczność ustawiono na 600 pl wodą do zastrzyków i stężonym 5-krotnie buforem fosforanowym. Roztwór inkubowano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę i trzymano w temperaturze 4°C do użycia. Dojrzewanie kompozycji zachodzi w czasie przechowywania. Całość stanowi 10 dawek wstrzykiwanych przy testach na myszach.
Przykład 4: kompozycja szczepionki przeciwko Hepatitis A.
MPL o rozmiarach cząstek poniżej 100 nm otrzymano jak w przykładzie 1. Wodorotlenek glinu otrzymano z Superfos (Alhydrogel).
HAV (360 do 22 EU (jednostki ELISA) na dawkę) poddano wstępnej adsorpcji na 10% końcowego stężenia wodorotlenku glinu (0,5 mg/ml). Do roztworu dodano MPL (12,5 do 100 pg na dawkę).
Pozostały wodorotlenek glinu dodano do roztworu i pozostawiono na godzinę w temperaturze pokojowej. Objętości uzupełniono buforem fosforanowym i końcowąkompozycję trzymano w temperaturze 4°C do użycia.
Przykład 5: Porównanie skuteczności adiuwantów w szczepionce rekombinacyjnej podjednostki glikoproteiny D Herpes Simplex.
5.1. W studium tym określono zdolność kompozycji Al(OH)3 z MPL do polepszania odporności ochronnej obciętej glikoproteiny D wirusa Herpes Simplex typu 2. Stadia immunogeniczne przeprowadzono na naczelnych. Celem eksperymentów było zbadanie wpływu rozmiarów cząstek 3-de-O-acylowanego monofosforylolipidu A (MPL) na immunogenność i skuteczność kompozycji rgD2t, Al(OH)3 i MPL u gryzoni i naczelnych. Zbadano trzy różne kompozycje Al(OH)3 z MPL o małych rozmiarach cząstek:
Al(OH)3 z MPL 100 nm (jak opisano poprzednio)
Al(OH)3 z MPL i sorbitolem
Al(OH)3 z MPL i Tween
5.2. Kompozycje antygenowe
Wodorotlenek glinu (Al(OH)3) otrzymano z Superfos (Alhydrogel Superfod, Dania). MPL otrzymano z Ribi Immunochem Research Inc.
178 578
5.2.1.1. rgD2t z Al(OH)3/MPL i TEA (trójetyloglin)
MPL umieszczono metodą działania ultradźwiękami w łaźni wodnej otrzymując rozmiary cząstek od 200 do 600 nm. Preparaty otrzymano zgodnie ze zgłoszeniem patentowym nr WO 92/16231 i przechowywano w temperaturze 4°C przed użyciem.
Dawka zawierała 5 pg fgD2t, 0,5 mg Al(OH)3 i 50 pg MPL.
5.2.1.2. rgD2t z Al(OH)3/MPL 100 nm
MPL (rozmiary cząstek poniżej 100 nm) otrzymano jak w przykładzie 1. rgD2t adsorbowano na wodorotlenku glinu i inkubowano jeszcze przez godzinę w temperaturze pokojowej.
Preparat skompletowano dodając bufor PBS z końcowym stężeniem 10 nM PO4 i 150 mM NaCl. Końcową kompozycję inkubowano dalej przez 30 minut w temperaturze pokojowej i przechowywano w temperaturze 4°C przed użyciem.
Dawka zawierała 5 pg fgD2t, 0,5 mg Al(OH)3 i 50 pg MPL.
5.2.1.3. rgD2t z Al(OH)3/MPL 100 nm i sorbitol
MPL otrzymano jak w przykładzie 1. rgD2t adsorbowano na wodorotlenku glinu i inkubowano jeszcze przez godzinę w temperaturze pokojowej. Dodano następnie 50% roztwór sorbitolu do końcowego stężenia 5%. Dodano następnie roztwór Tris 10 mM do końcowej objętości i ihkubowano jeszcze przez godzinę w temperaturze pokojowej z mieszaniem.
Kompozycję przechowywano w temperaturze 4°C przed użyciem.
Dawka zawierała 5 pg fgD2t, 0,5 mg Al(OH)3 i 50 pg MPL.
5.2.1.4. rgD2t z Al(OH)3/MPL 100 nm i Tween
MPL otrzymano jak w przykładzie 1. W celu utrzymania rozmiarów cząstek MPL 100 nm dodano do roztworu Tween 80 w stężeniu takim, że daje stężenie 0,01 %w końcowej kompozycji. Dalej przygotowano kompozycję jak powyżej w 5.2.1.3.
Dawka zawierała 5 pg fgD2t, 0,5 mg Al (OH)3 i 50 pg MPL.
5.3. Eksperyment profilaktyczny na świnkach morskich
W eksperymentach zaszczepiono grupę świnek morskich w dniu 0 i 28 5 pg rgD2t w dwu różnych kompozycjach MPL z wodorotlenkiem glinu. Szczepiono podskórnie dawką 0,5 ml. W miesiąc po pierwszym szczepieniu prowadzono świnkom dopochwowo 105 jednostek HSV2 szczep MS. Obserwowano je codziennie szukając pierwotnej i nawrotnej choroby HSV2 (dni 4 do 39 po zarażeniu).
5.3.1. Eksperymenty terapeutyczne na świnkach morskich
W eksperymentach zarażono grupę świnek morskich 105jednostkami HSV2 szczep MS. Po wyzdrowieniu z pierwotnej infekcji obserwowano je codziennie szukając nawrotu choroby opryszczkowej (dni 13 do 21). Świnki zaszczepiono w -dniu 21 i 42 szczepionką rgDfoA/OH/./MPL. Szczepionki podawano podskórnie w dawce 0,5 ml. Zwierzęta obserwowano codziennie na obecność opryszczkowych uszkodzeń aż około do dnia 60 do 84.
5.3.2. Studia immunogenności u naczelnych
Immunogenność rgD2t/Al(OH)3/MPL w kombinacji z MPL w sorbitolu przeprowadzono na afrykańskich zielonych małpach. Grupy małp zaszczepiono w dniu 0 i 28 20 pg rgD2t i 0,5 mg Al(OH)3 z 50,20 lub 5 pg MPL w sorbitolu. Badano specyficzne pozakomórkowe (miano ELISA i zobojętniające) oraz komórek efektorowych (reakcja nadwrażliwa typu opóźnionego DTH) odpowiedzi immunologiczne. Kompozycje podawano domięśniowo w dawce 1 ml. Preparaty kompozycji przygotowywano tak, jak opisano powyżej. Badano krew zwierząt co około dwa tygodnie w celu stwierdzenia obecności przeciwciał.
Odpowiedź DTH badano w 14 dni po drugim szczepieniu. Opis testu skórnego podano poniżej.
5.4. Odczyty informacji
Przeprowadzono testy w celu określenia specyficznej odpowiedzi na przeciwciała indukowanej przez kompozycje rgD2t/Al(OH).3/MPL (określenie miana ELISA anty-rgD2t i miana zobojętniającego anty-HSV2). Skuteczność ochronną, kompozycji gD2 oceniano na modelach profilaktycznych i terapeutycznych na świnkach morskich. Przeprowadzono także na małpach studia immunogenności. Określono odpowiedzi specyficzne pozakomórkowe i DTH.
178 578
5.4.1. Miana ELISA i zobojętniające
Określono miana anty-przeciwciało rgD2t i aktywność neutralizującą anty-HSV2 zgodnie ze sposobami podanymi w zgłoszeniu patentowym WO 92/16231.
5.4.2. Nadwrażliwość typu opóźnionego (DTH)
Kompozycje rgD2t przetestowano na zdolność indukowania odpowiedzi immunologicznej specyficznej dla komórek T mierzonej przez indukcję odpowiedzi nadwrażliwości typu opóźnionego (DTH).
Afrykańskie zielone małpy zaszczepiono w dniu 0 i 28 20 pg kompozycji szczepionki gD2 podawanej domięśniowo. Wykonano na nich testy skórne w 14 dni po drugim szczepieniu metodą śródskómej iniekcji na brzuchu 15 lub 5 pg rgD2t w solance. Wykonano na nich testy skórne z solankąjako płynem kontrolnym. Miejsce iniekcji zbadano w 24 i 48 godzin później w poszukiwaniu rumienia i stwardnienia. Zmierzono rozmiary lokalnych reakcji.
5.4.3. Model dopochwowy zarażenia na śwince morskiej
Model ze świnką morską infekcji genitalnej HSV opisał L. Stanberry i in. (J. of Infectious Diseases 1982, 146:397-403); Intervirology 1985, 24: 226-231). Krótko, w eksperymentach profilaktycznych świnki morskie zarażono dopochwowo 105jednostek HSV2 szczep MS w miesiąc po ostatnim szczepieniu. Obserwowano codziennie kliniczny przebieg pierwotnej choroby i ostrość uszkodzeń skóry genitalnej w 4-12 dni po zarażeniu. Badano codziennie zwierzęta na obecność powrotnych uszkodzeń optyszczkowych w dniach od 13 do 39. W eksperymentach terapeutycznych świnki morskie zarażono w dniu 0 105jednostkami HSV2 szczep MS. Po wyzdrowieniu z pierwotnej infekcji badano je codziennie pod kątem nawrotu opryszczki (dni 13 do 21), po czym podzielono na grupy przypadkowo zgodnie z skutkami choroby pierwotnej i wtórnej (równoważny rozkład zwierząt z łagodną i ostrą infekcją w każdej grupie) w celu wykonania szczepienia lub niewykonania szczepienia. Szczepionkę podawano w dniu 20 i 41 po zarażeniu. Rozkład obecności nawrotu choroby obserwowano zwykłe w około 70 dni po zarażeniu.
Uszkodzenia opiyszczkowe oceniono ilościowo stosując skalę od 0 do 32.
Skala ocen
Typ uszkodzenia Ocena
Brak 0
Uszkodzenia pochwowe
- krwawienie 0,5
- zaczerwienienie przez 1 do 2 dni bez krwawienia 0,5
- zaczerwienienie i krwawienie przez dzień 1
- zaczerwienienie bez krwawienia przez co najmniej 3 dni 1
Zewnętrzne pęcherzyki opryszczkowe
- <4 małe pęcherzyki 2
- > 4 małe pęcherzyki lub 1 duży 4
- > 4 duże uszkodzenia 8
- zlewające się duże uszkodzenia 16
- zlewające się duże uszkodzenia na całych zewnętrzu genitaliów 32
Odczyty kliniczne
Infekcja pierwotna
- Ostrość urzkodzzkia - en arna duiennyeh odczytów yróez prz z dn do 12 po infekcji.
Ostrość uszkodzenia wyraża się jako średnią arytmetyczną ± odchylenie standardowe, a także medianę (lepsze dla testu bezparametrowego)
178 578
- Wystąpienia pierwotnej infekcji = % zwierząt mających maksymalne oceny 0,0,:5,12,4, lub 16 (rzadziej 32).
Indeks pierwotnej infekcji=Ą (maks. ocena i) x (% wystąpień) z i = 0,0,5,2,4,8 lub 16.
Nawrót choroby
- Liczba dni nawrotu = liczba dni z nawrotem dla dni od 13 do 39 po infekcji. Jeden nawrót musi być poprzedzany i musi po nim następować jeden dzień bez uszkodzeń, a w jego okresie muszą być dwa dni z rumieniem lub jeden z pęcherzykami. Liczba dni nawrotu jest wyrażana średnią arytmetyczną ± odchylenie standardowe i medianami.
- Ostrość nawrotu=suma dziennych ocen dla dni od 13 do 39 po infekcji. Wyniki sąpodane jako średnie arytmetyczne ± odchylenia standardowe i mediany.
5.5. Wyniki
Skuteczność ochronna różnych kompozycji rgD2t/Al(OH)3/MPL porównano w eksperymentach profilaktycznych na świnkach morskich. Przeprowadzono także na naczelnych studia immunogenności. Celem tych eksperymentów było porównanie immunogenności i skuteczności ochronnej ^^D2tzAl(OH)3 w połączeniu z MPL o różnych rozmiarach cząstek.
5.5.1. Eksperymenty profilaktyczne
Przeprowadzono dwa eksperymenty w celu określenia potencjału różnych szczepionek rgD2t/Al(OH)3/MPL w chronieniu przed pierwotną i powrotną chorobą HSV2 przy podawaniu świnkom morskim przed zarażeniem dopochwowym.
Eksperyment 1: Porównanie MPL 100 nm z sorbitolem z MPL z TEA
Grupę samic świnek morskich Hartleya (200-250 g) zaszczepiono w dniu 0 i 28 5 pg rgD2t/Al(OH)3 w połączeniu z MPL o małych rozmiarach cząstek (100 nm, MPL w sorbitolu) lub większych (MPL w TEA). Kontrolne zwierzęta zaszczepiono zgodnie z tym samym protokołem adiuwantem lub nie szczepiono wcale. Krew pobierano w dniu 14 i 28 po drugim szczepieniu w celu określenia przeciwciał w teście ELISA lub teście zobojętniania. Zwierzęta zarażono 29 dni po drugim szczepieniu 105jednostkami HSV2 szczep MS dopochwowo. Po zarażeniu obserwowano je codziennie szukając śladów ostrej infekcji (dni 4 do 12 po zarażeniu) i dowodów nawrotnej choroby opryszczkowej (dni 13 do 39 po zarażeniu).
a) indukcja odporności pozakomórkowej
Jak pokazano w tabeli 3, wyższe miana ELISA i zobojętniające uzyskano w przypadku stosowania MPL o małych rozmiarach cząstek w kompozycji ng.D2t/Al(OH)3.
b) Wpływ szczepienia na pierwotną infekcję HSV2 (tabela 3)
W porównaniu z grupą kontrolną zarażoną i przechodzącą ostrą pierwotną infekcję, obie szczepione grupy wykazały znacznie niższy poziom uszkodzeń (p <0,00005). Rzadsze występowanie uszkodzeń skóry zaobserwowano w przypadku grupy szczepionej rgD2t/Al(OH)3/MPL 100 nm (p<0.06).
c) Wpływ szczepienia na nawrotnąinfekcję HSV2
Wyniki podaje tabela 4. W porównaniu z kontrolną grupą obie szczepionki były w stanie wstrzymać rozwój nawrotu choroby opryszczkowej, na co wskazywała mniej sza liczba przypadków nawrotu (p <0,02 dla rgD2t/Al(OH)3MPL 100 nm).
d) Wnioski
Obie kompozycje sąw stanie zapewnić znai^^^ochronę przed pierwotnąinfekcją i zmniejszyć zakres nawrotu choroby. Wyniki pokazują, że kompozycja rgD2t/Al(OH)3/MPL z cząstkami MPL o małych rozmiarach ma bardzo dużą skuteczność profilaktyczną.
Eksperyment 2: Skuteczność Al(OH)3/MPL 100 nm
Grupę świnek morskich Hartleya (200-250 g) zaszczepiono w dniu 0 i 28 5 pg gD2 w Al(OH)3 z MPL 100 nm. Szczepienie wykonano podskórnie w dawce 0,5 ml. Kontrolne zwierzęta zaszczepiono zgodnie z tym samym protokołem adiuwantem lub nie szczepiono wcale. Krew pobierano w dniu 14 i 28 po drugim szczepieniu w celu określenia przeciwciał w teście ELISA lub teście zobojętniania. Zwierzęta zarażono 29 dni po drugim szczepieniu 105 jednostkami HSV2 szczep MS dopochwowo.
a) indukcja odporności pozakomórkowej
178 578
Jak pokazano w tabeli 3, grupa szczepiona wykazała dobre miana ELISA i zobojętniające. Grupa kontrolna nie wykazała wykrywalnej odpowiedzi pczeciwciałowej.
b) Wpływ szczepienia na pierwotną infekcję HSV2 (tabela 3)
W porównaniu z grupąkontrolnązarażoną i przechodzącą ostrąpierwotną infekcję, szczepiona grupa wykazała znacznie niższy poziom uszkodzeń (p < 0,00005) i występowania (p < 0,002). Nie zaobserwowano zewnętrznych uszkodzeń skóry u szczepionych świnek morskich.
c) Wpływ szczepienia na nawrotną infekcję HSV2 (tabela 4)
W porównaniu z kontrolną grupą szczepionka rg'D2t/Al(OH)3/MPL była w stanie zmienić rozwój nawrotu choroby opryszczkowej, na co wskazywała znaczna redukcja ostrości przypadków nawrotu (p < 0,00005) i częstości nawrotów (p < 0,01)
d) Wnioski
Kompozycja rgD2t/Al(OH)3 z cząstkami MPL o małych rozmiarach ma bardzo dużąskuteczność w zapewnianiu ochrony przed pierwotną i wtórną infekcją HSV2 u świnek morskich.
Z eksperymentów opisanych powyżej można wyciągnąć wniosek, że kompozycje Al(OH)3 z MPL o małych rozmiarach otrzymane na dwa różne sposoby indukująco najmniej tak silną odpowiedź profilaktyczną, jak kompozycje Al(OH)3 z MPL o dużych rozmiarach. Ponadto MPL o małych rozmiarach korzystnie ulega łatwej sterylizacji przed użyciem.
5.5.2. Eksperymenty terapeutyczne
Celem tych eksperymentów jest porównanie potencjału terapeutycznego różnych kompozycji rgD2t/Al(OH)3/MPL w czasie nawrotu opryszczki u świnek morskich z ustaloną infekcjąHSV2.
Świnki morskie szczepiono dopochwowo w dniu 0 105jednostkami HSV2 szczep MS. Obserwowano je codziennie szukając pierwotnej infekcji (dni 4 do 12), atakże nawrotu infekcji opryszczkowej (dni 13 do 20). Zwierzęta podzielono na grupy przypadkowo zgodnie z skutkami choroby pierwotnej i wtórnej (równoważny rozkład zwierząt z łagodną i ostrą infekcją w każdej grupie). Świnki morskie bez śladów klinicznych infekcji nie wprowadzono do protokołu. Szczepionkę podawano podskórnie w dniu 21 i 42 po zarażeniu.
Terapeutycznąinfekcję rgD2t/Al(OH)3/MPL oceniono w trzech różnych eksperymentach.
Eksperyment 1: Porównanie rgD2t/Al(OH)3 z MPL o dużych rozmiarach cząstek (MPL w TEA)
Świnki morskie z nawrotem choroby podzielono na grupy, podając im albo 20 pg rgD2t/Al(OH)3 z MPL o dużych rozmiarach cząstek (MPL w TEA), lub sam adiuwant. Szczepionki podawano podskórnie w dniu 21 i 42 po zarażeniu. Rozkład nawrotów choroby obserwowano do dnia 84.
Jak pokazuje tabela 3, kompozycja rgD2t/Al(OH)3/MPL z TEA nie była skuteczna w osłabianiu trwaaącego nawrotu infekcji;
Eksperyment 2: Skuteczność rgD2t/Al(OH)3 z MPL 100 nm
Dwie grupy świnek morskich zaszczepiono 20 pg rgD2t/Al(OH)3 z MPL o małych rozmiarach cząstek (MPL 100 nm), lub zaniechano szczepienia.
Szczepionki podawano w dniu 21 i 42 po zarażeniu.
Rozkład nawrotów choroby obserwowano do dnia 69.
Jak pokazuje tabela 5, w porównaniu z danymi z eksperymentu 1, gdzie użyto MPL o dużych rozmiarach cząstek, szczepienie rgD2t/Al(OH)3/MPL 100 nm zmieniła częstość powstawania choroby HSV2 w porównaniu z grupąkontrolną, zmniejszając ostrość nawrotu (-39%, p <0,05) i liczbę dni z nawrotem (-28%, p <0,1).
Eksperyment 3: Porównanie skuteczności Al(OH)3 w połączeniu z MPL o małych rozmiarach cząstek
W eksperymencie zastosowano trzecią strategię otrzymywania MPL o małych rozmiarach cząstek: dodanie Tween, np. Tween 80.
Grupy eksperymentalne były następujące: Grupa 1 (n = 15): 20 pg rgD2t/Al(OH)3 z MPL
100 nm z Tween
Grupa 2 (n = 15): 20 pg rgD2t/Al(OH)3 z MPL 100 nm z sorbitolem
178 578
Grupa 3 (n = 16): kontrolna
Grup kontrolnych nie poddawano szczepieniu lub szczepiono tylko Al(OH):, z MPL. Szczepionki podawano w dniu 21 i 42 po zarażeniu. Rozkład nawrotów choroby obserwowano do dnia 60.
Wyniki pokazano w tabeli 5. Znaczne, wyraźne działanie terapeutyczne zaobserwowano u zwierząt szczepionych dwoma kompozycjami rgD2t/Al(OH)3 z MPL. Obie kompozycje znacznie zmniejszały ostrość nawrotów, liczbę dni ich trwania i liczbę nawrotów.
Wnioski
Zaobserwowano bardzo silne działanie terapeutyczne wobec ustalonego nawrotu genitalnej choroby HSV2 w przypadku dwu kompozycji rgD2t/Al(OH>3 z MPL o małych rozmiarach cząstek (około 100 nm). W przeciwieństwie do tego nie zaobserwowano działania terapeutycznego w przypadku MPL o dużych rozmiarach cząstek (MPL w TEA) dodawanego do szczepionki rgD2t/Al(OH)3.
Wyniki otrzymane dla świnek morskich wyraźnie pokazują skuteczność profilaktyczną kompozycji rgD2t/Al(OH)3 z MPL o małych rozmiarach cząstek. Mają one wyższy potencjał terapeutyczny niż rgD2t/Al(OH)3 z MPL o dużych rozmiarach cząstek.
5.5.3. Studia immunogenności rgD2t/Al(OH)3 w połączeniu z MPL o małych rozmiarach cząstek u naczelnych
Dawki 50,20 lub 5 pg MPL 100 nm połączono z 20 pg rgD2t i A/OH) (0,5 mg). Wykonano dwa szczepienia w dniu 0 i po miesiącu. Mierzono specyficzne pozakomórkowe (miano ELISA i zobojętniające) oraz komórek efektorowych (DTH) odpowiedzi immunologiczne.
a) procedura doświadczalna
Trzy grupy zielonych małp afrykańskich zaszczepiono w dniu 0 i 28 20 pg gD2t z Al(OH)3 zawierającym 50,20 lub 5 pg MPL. Badano krew zwierząt co około dwa tygodnie w celu stwierdzenia obecności przeciwciał w testach ELISA (miana anty-gD2) i testach zobojętniających. Trzy kompozycje szczepionki porównano pod względem zdolności indukowania odpowiedzi immunologicznej specyficznej dla komórek T mierzonej przez indukcję odpowiedzi nadwrażliwości typu opóźnionego (DTH). Na trzech małpach z każdej grupy wykonano na nich testy skórne w 14 dni po drugim szczepieniu metodą iniekcji na brzuchu 15 lub 5 pg gD2t w solance. Wykonano na nich także testy skórne z solankąjako płynem kontrolnym. Miej sce iniekcji zbadano w 24 i 48 godzin później w poszukiwaniu rumienia i stwardnienia.
b) Wyniki
Odpowiedzi serologiczne i DTH pokazuje tabela 6. Grupy małp szczepione kompozycją rgD2t i Al(OH)3 zawierającą 50 lub 20 pg MPL wytwarzały znacznie więcej zobojętniających przeciwciał niż grupa otrzymująca dawkę 5 pg MPL (odpowiednio p <0,003 i p <0,008). Nie było wyraźnej różnicy w mianach ELISA i zobojętniającym mierzonych w grupach 50 lub 20 pg MPL. Zauważono korelację pomiędzy dawkąMPL a wpływem na odpowiedź immunologicznąkomórek efektorowych. Silnąodpowiedź DTH wykryto u większości małp (3/4) szczepionych kompozycjami z 50 lub 20 pg MPL. W przeciwieństwie do tego tylko jedna małpa z grupy 5 pg MPL wykazała odpowiedź w teście skórnym.
c) Wnioski
Dane podane powyżej pokazują, że działanie jako adiuwanta Al(OH)3 w połączeniu z MPL o małych rozmiarach cząstek jest skuteczne również u naczelnych, a nie tylko u małych gatunków zwierząt. U małp można zaobserwować korelację pomiędzy dawkąMPL i immunogenicznością kompozycji rgD2t/Al(OH)3/MPL , przy czym najlepszą odpowiedź serologiczną i DTH daje ilość 50 i 20 pg.
Przykład 6: BADANIA KLINICZNE szczepionek na Lyme i Hepatitis B oraz małych cząstek MPL
6.1. Szczepionka na chorobę Lyme zawierająca białko fuzyjne NS1(1-81)z wirusa grupy i
OspA z B. burgdorferi ZS7.
178 578
Wytwarzanie kompozycji
6.1.1. NS 1 -OspA/wodorotlenek glinu
NSl-OspA wytworzoną zgodnie z , procedurą ze zgłoszenia patentowego WO 93/04175 zaadsorbowano na wodorotlenku glinu i inkubowano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę Końcową objętość osiągnięto dodając bufor fosforanowy (PO4 10 mM, NaCl 150 mM). Kompozycję przechowywano w temperaturze 4°C do wykorzystania.
Dawka zawiera 10 pg NS1-OspA/500 pg wodorotlenku glinu.
6.1.2. NS1-OspA/wOdorotlenek glinu/MPL
NS1-OspA zaadsorbowano na wodorotlenku glinu i inkubowano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. MPL, wytworzony jak uprzednio opisano, dodano do kompozycji i ponownie inkubowano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. -Końcową objętość osiągnięto dodając bufor fosforanowy (PO4 10mM,NaCl 150 mM). Kompozycję przechowywano w temperaturze 4°C do wykorzystania.
Dawka zawiera 10 pg NSl-OspA/500 pg wodorotlenku glinu/50 pg MPL.
6.1.3. Przebieg szczepień
Ochotnicy otrzymali trzykrotnie zastrzyki domięśniowe 1 ml danej kompozycji w dniach 0, 31 i 62. Osocza pobrano w 30 dnia po I, II i III szczepieniu. Poddano je analizie ELISA na łączną zawartość IgG anty-OspA i podobnądo LA-2 odpowiedź przeciwcialową w teście inhibicji (LA-2 wykazało jako przeciwciało działanie zabezpieczające przed infekcją u myszy).
6.2. Κοιτφί^ο^ε HHsAg/'MPL dla. luuzi
6.2.1. Wytwarzanie kompozycji
HBsAg 20 pg/wodorotlenek glinu 500 pg
HBsAg zaadsorbowano 'na końcowej ilości wodorotlenku glinu i końcową objętość osiągnięto dodając bufor fosforanowy z solanką (PO4 10 mM, NaCl 150 mM) dla dawki 1 ml. Kompozycję przechowywano w temperaturze 4°C do wykorzystania.
6.2.2. HBsAg 20 pg/wodorotlenek glinu 100 pg
HBsAg skomponowano jak powyżej adsorbując na 100 pg wodorotlenku glinu. Końcowa objętość wynosiła 1 ml na dawkę.
6.2.3. HBsAg 20 pg/wodorotlenek glinu 100 pg/MPL 50 pg
HBsAg zaadsorbowano na 100 pg wodorotlenku glinu. Dodano MPL we właściwym stężeniu i inkubowano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Końcową objętość osiągnięto dodając odpowiedni bufor (jak powyżej) i przechowywano w temperaturze 4°C do wykorzystania.
6.2.4. Przebieg szczepień
Ochotnicy (20;w grupie) otrzymali zastrzyki domięśniowe 1 mljednej z danych kompozycji. Osocza pobrano w miesiącu 0, 1, 3 i 6. Poddano je analizie na przeciwciała zabezpieczające handlowo dostępnym testem Abbota.
6.3. WWNIKJ
Tabela 8 pokazuje, że MPL , stosowany w połączeniu z wodorotlenkiem glinu i NS1 -OspA w postaci cząstek 100 nm skutecznie pozwala na powstanie wyższych mian przeciwciał o naturze inhibitującej, niż antygen na wodorotlenku glinu, a kinetyka serokonwersji jest szybsza.
Wynika stąd że dla rozpuszczalnego antygenu ,takiego jak NS 1 -OspA , u ludzi MPL skomponowany w postaci małych cząstek ma własności adiuwanta wykazywane już u zwierząt w dla innych rozpuszczalnych antygenów.
Tabela 7 pokazuje, że działanie wspomagające utracone w wyniku zmniejszenia ilości wodorotlenku glinu w kompozycjach dla Hepatitis B może być odzyskane po dodaniu MPL w postaci opisanej w niniejszym opisie. MPL polepsza także szybkość serokonwersji.
Przykład 7: Połączona kompozycja szczepionki - Hepatitis B + Hepatitis A
HBsAg adsorbuje się na 90% końcowej ilości wodorotlenku glinu (0,5 mg/ml) i inkubuje w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Odczyn pH ustawia się na 6,2 i preparat pozostawia na 14 dni w temperaturze pokojowej do dojrzenia.
antygen Hepatitis A w ilości 360 do 22 UE na dawkę, w postaci zdezaktywowanej pochodnej szczepu HM-175 (jak w Havrix) poddaje się wstępnej adsorpcji na wodorotlenku glinu
178 578 w 10% końcowego stężenia (0,5 mg/ml). Resztę wodorotlenku glinu dodaje się następnie do roztworu i pozostawia na godzinę w temperaturze pokojowej z mieszaniem.
HAV zaadsorbowany na wodorotlenku glinu dodaj e się następnie do kompozycj i HBsAg.
Do roztworu HAV/HBsAg dodaje się MPL (cząstki mniejsze niż 100 nm) do końcowego stężenia 12,5 do 100 pg na 1 ml dawki, uzupełnia się do końcowej objętości i przechowuje kompozycję w temperaturze 4°C przed użyciem.
Przykład 8: Kombinowane szczepionki zawierające dodatkowe antygeny
Kombinowane szczepionki można wytwarzać dodając jeden lub kilka żądanych antygenów do kompozycji opisanych w przykładzie 2, 3 lub 4 powyżej.
Przykład 9: Wzrost odporności pozakomórkowej i indukcja odporności komórkowej metodą immunizacji myszy HBsAg skomponowanym z wodorotlenkiem glinu i MPL.
9.1. Wpływ Al(OH)3 z MPL na indukcję przeciwciał anty-HBs
Myszy Balb/c immunizowano podskórnie lub przezskórnie rekomibnacyjnym HBsAg adsorbowanym na Al(OH)3 z MPL jako adiuwantem. Myszy szczepiono dwukrotnie kompozycjami HBsAg(Al(MPL i mierzono odpowiedź przeciwciał po pierwszej i drugiej dawce. Łączną ilość Ig zmierzono testem ELISA lub AUSAB (Abbott Lab, 111.), zawierając szczególną uwagę na indukcję przeciwciał izotypu IgG2a, ponieważjest on indukowany głównie przez wydzielanie g-interferonu. Indukcja tego izotypu pośrednio odzwierciedla aktywację odporności komórkowej, konkretnie aktywację Th1.
Zbadano stosunek HBsAg/MPL i rozmiary cząstek MPL.
9.1.1. Eksperyment 1: Wpływ dawki MPL (> 500 nm) na immunogenność rec HBsAg adsorbowanego na Al(OH)3
Grupę 10 samic myszy Balb/c immunizowano podskórnie 2,5 pg recHBsAg adsorbowanego na 50 pg Alłt + (jako Al(OH>3 zawierającego rosnące ilości MPL (3,1 do 50 pg) o rozmiarach cząstek> 500 nm. Myszy szczepiono dwukrotnie 100 pl w odstępie dwutygodniowym. Pobrano próbki krwi po 2 tygodniach od pierwszego zastrzyku (częściowe) i po tygodniu od drugiego. Zmierzono łączne IgG anty-HBs i specyficzne IgG2a testem ELISA stosując recHBsAg jako antygen przechwytujący. Miana wyrażono jako odwrotności rozcieńczenia odpowiadającego 50% wartości maksymalnej (środkowe rozcieńczenie). Wyniki wskazująca wzrost ilości specyficznych IgG i IgG2a ze wzrostem dawek MPL, szczególnie przy dawce od 12,5 do 50 pg. Wpływjest widoczny dla pierwotnej i wtórnej odpowiedzi, i jest szczególnie wyraźny dla IgG2a (prawie 20-krotny wzrost), wskazując pośrednio na wydzielanie g-interferonu indukowane immunizacją MPL.
9.1.2. Eksperyment II - Porównanie klinicznych zestawów adsorbowanego recHBsAg zawierającego lub nie zawierającego MPL (> 500 nm)
Przygotowano 3 kliniczne zestawy recHBsAg adsorbowanego na A^OHty zestaw DSAH16 nie zawierał MPL i był zestawem kontrolnym. Zestawy DSAR501 i 502 przygotowano w podobny sposób (20 pg recHBsAg adsorbowano na 0,5 mg Al+++ jako Al(OH^), ale zawierały 50 pg MPL (> 500 nm).
Trzy zestawy wstrzyknięto grupom po 10 myszy (200 pl zawiera 2,5 pg HBsAg, 100 pg Al+++ i 6,25 pg MPL), dwukrotnie w odstępie dwutygodniowym. Pobrano próbki krwi po 14 dniach od pierwszego zastrzyku i po tygodniu od drugiego. Zmierzono poziom przeciwciał anty-HBs zestawem AUSAB lub domowym ELISA dla IgG lub IgG2a. Wyniki podaje tabela 2. Wyniki wskazują, że dwa tygodnie po pierwszym zastrzyku oba zestawy zawierające MPL indukując bardzo wyraźną odpowiedź anty-HBs (12,4 i 41,9 mIU/ml), a zestaw bez MPl tylko odpowiedź minimalną (0,75 mIU/ml). Liczba odpowiedzi jest także wyższa w przypadku obecności MPL (9/10 i 9/10 wobec 1/10 bez MPL). Wpływ MPL podkreśla także stan po drugim zastrzyku, ponieważ uzyskane miana dla zestawów DSAR501 i DSAR502 są około 6-krotnie wyższe niż w nieobecności MPL.
Wskazuje to, że przynajmniej w przypadku myszy MPL (> 500 nm) może polepszyć zarówno kinetykę odpowiedzi anty-HBs, jak i poziom tej odpowiedzi.
178 578
Wyniki potwierdził poziom specyficznej IgG i IgG2a po immunizacji zestawem DSAH 16 (bez MPL) i DSAR502 (z MPL): miano anty-HBs IgG wynosi 5 (pierwotna odpowiedź) i 3 (wtórna odpowiedź) razy więcej w obecności MPL.
9.1.3. Eksperyment III: Wpływ dawki MPL (< 100 nm) na immunogenność rekombinacyjnego HBsAg adsorbowanego na Al(OH)3
Grupę 10 myszy (Balb/c, samice, 7-tygodniowe) immunizowano podskórnie 1 pg rekombinacyjnego HBsAg adsorbowanego na 50 pg A+++ (jako Al(OH)3) zawierającego rosnące ilości MPL (3,1 do 25 pg) o rozmiarach cząstek< 100 nm. Myszy szczepiono dwukrotnie 200 pl w odstępie dwutygodniowym. Pobrano próbki krwi po 2 tygodniach od pierwszego zastrzyku i po tygodniu od drugiego. Zmierzono testem ELISA odpowiedź anty-HBs (łączne Ig, IgG, IgG2a) na pobranym osoczu. Miana wyrażono jako środkowe rozcieńczenie (odwrotności rozcieńczenia odpowiadającego 50% wartości maksymalnej). Wyniki wskazują, że nawet mała dawka 3,1 pg MPL indukuje silny wzrost odpowiedzi antygenu, zarówno pierwotnej, jak i wtórnej. Odpowiedź jest maksymalna dla 6,25 pg i spada do wartości w nieobecności MPL przy dużych dawkach MPL; (25 pg). Wzór odpowiedzi jest podobny dla IgG, IgG2a i łącznej Ig. Wyniki są przeciwne do wyników dla MPL o dużych rozmiarach (> 500 nm) i wskazują, że cząstki MPL o małych rozmiarach (> 100 nm) są skuteczniejsze (co najmniej w przypadku odporności pozakomórkowej), ponieważ potrzeba mniej MPL dla uzyskania maksymalnego efektu. Wyższą aktywność MPL o małych rozmiarach cząstek potwierdziło kilka doświadczeń.
Jak widać dla MPL o dużych rozmiarach cząstek (> 500 nm), działanie wspomagające MPL jest wyższe dla IgG2a niż łącznej IgG lub Ig. Przy maksymalnym efekcie wtórnej odpowiedzi (6,25 pg MPL) występuje 25-krotny wzrost zawartości IgG2a, oraz odpowiednio 7,6 i
4,3 dla IgG i łącznej Ig.
9.2. Indukcja odporności komórkowej przez recHBsAg adsorbowany na Al(OH)3 - wpływ
MPL
Jeśli odporność eozakomórkowa wystarcza do ochrony przed wirusem Hheαtjtjtd B, indukcja komórkowej odporności (CTH, Th1) powinna mieć duże znaczenie w leczeniu choroby.
Do leczniczych szczepionek konieczne są nowe kompozycje, ponieważ Al(OH)3 jest w stanie polepszyć odporność pozakomórkową, ale nie komórkową.
Zbadano wpływ MPL na indukcję komórek Th1 zdolnych do wydzielania IL-2 i g-(to jest gamma)- interferonu u myszy Balb/c immunizowanych recHBsAg adsorbowanym na Al(OHty
9.2.1. Eksperyment I - Wpływ MPL (> 500 nm) na indukcję komórek Th1eo immumzncjj myszy Balb/c HBsAg adsorbowanym na Al(OH)3
Grupę 10 myszy Balb/c (samice, 5-tygodniowe) jmmunizowαnz zastrzykiem w poduszkę stóp 30 pl roztworu zawierającego 10 pg HBsAg 15 pg Al+++ (jako Al(OHty) i 15 pg MPL. Kontrolnym myszom wstrzyknięto tę samą ilość recHBsAg zmieszanego z FCA (pozytywna kontrola) lub adsorbowanego na Al(OH)3 (negatywna kontrola).
Sześć dni po immunizacji myszy zabito i usunięto podkopowe węzły chłonne. Komórki węzłów (LNC 2,105/ml) hodowano przez różny okres (24 do 74 godzin) na pożywce RPMI uzupełnionej 1 % negatywnego osocza myszy i 5 pg/ml recHBsAg. Po zakończeniu hodowli zmierzono ilość IL-2, INF-g i IL-4 wydzielonego do pożywki. IL-2 oszacowano po zdolności do stymulacji proliferacji (miarą jej było przyłączanie 3H-tymidyny) zależnej od IL-2 linii CTL (komórki VDA2), a miano wyrażono jako wskaźnik stymulacji (SI = ilość 3H-tymidyny włączanej do stymulowanych komórełk/ilość 3H tymidyny do mestymulzwnnych komórek). Ilość IL-4 i INF-g mierzono przy pomocy handlowych zestawów ELISA (Holland Biotechnology dla IFN-g i Endogen dla IL-4). Miana wyrażono w pg IFN-g/ml.
Wyniki wskazują, LNC z myszy immunizowanych HBsAg adsorbowanym na Al(OH)3 nie wydziela znaczniej szych ilości IL-2, IL-4 lub INF-g. W przeciwieństwie do tego duże ilości IL-2 (SI = 38 po 48 godzinach) i znaczne ilości INF-g wydzielają LNC z myszy immunizowanych HBsAg adsorbowanym na Al(OH)3 z MPL. Wydzielanie to jest podobne (INF-g) lub wyższe (IL-2) w porównaniu z obserwowanym dla myszy immunizowanych HBsAg z FCA, a in vitro zachodzi wcześniej.
178 578
Nie wykryto IL-4 po immunizacj i HBsAg absorbowanym na Al(OH)3 nawet w obecności MPL.
Taki profil wydzielania wskazuje, że specyficzne komórki Th1 (IL-2, INF-g) uległy indukcji przez immunizację adsorbowanym HBsAg w obecności MPL, ale nie wjego nieobecności. Jednak nie wykryto Th2 (IL-4) w tych warunkach immunizacji.
9.2.2. Eksperyment I - Wpływ dawki MPL (<100 nm) na indukcję komórek Th1 po immunizacji myszy Balb/c HBsAg adsorbowanym na Al(OH)3.
Grupę 5 myszy Balb/c immunizowano zastrzykiem w dwie poduszki stóp 30 pl roztworu zawierającego 10 pg HBsAg adsorbowanego na 15 pg A+++ (jako Al(OH^) ze wzrastającą ilością MPL (100 nm, 0 do 15 pg).
Sześć dni po zastrzyku myszy zabito i komórki węzłów podkolanowych (LNC, 2,106 komórek/ml)) hodowano na pożywce RPMI uzupełnionej 1%negatywnego osocza myszy przez różny okres (24 godziny do 96/25) w obecności 5 pg/ml rccHBsAg.
Wydzielanie IL-2 zmierzono stymulując proliferację komórek VDA2, a stężenie IL-2 wyrażono jako wskaźnik stymulacji (SI). Wydzielanie INF-g zmierzono przy pomocy handlowych zestawów7 i wyrażono w pg/ml.
Stwierdzono, że wydzielanie IL-2 wzrasta bardzo znacznie przy niskiej dawce MPL (7,5 pg), a maksymalny efekt powstaje przy 15 pg MPL.
Wydzielanie IL-2 jest znacznie istotniejsze po 24 godzinach niż po 48 lub 72 godzinach.
Wydzielanie INF-g nie następuje w przypadku HBsAg adsorbowanego na Al(OH)3 w nieobecności MPL. Mała dawka (7,5 pg) MPL indukuje wydzielanie INF-g, a ponownie maksymalny efekt powstaj e przy 15 pg MPL. W przeciwieństwie do IL-2 wydzielanie INF-gjest w hodowli opóźnione i wzrasta z czasem do 96 godzin.
Łącznie dane te wskazują, że MPL (poniżej 100 nm) jest silnym induktorem Th1 w połączeniu z HBsAg adsorbowanym na Al(OH)3. Zbadano wpływ kompozycji zawierającej HBsAg adsorbowany na Al(OH)3 i MPL na indukcję pozakomórkowej i komórkowej odporności u myszy Balb/c. Wyniki wskazuj, że MPL wyraźnie polepsza kinetykę odpowiedzi anty-HBs, ponieważ znacznie więcej przeciwciał anty-HBs znaleziono po pierwotnym i powtórnym szczepieniu. Zmodyfikowanajest także jakość anty-HBs i obserwuje się preferowanąindukcję IgG2a, która wskazuje pośrednio na wydzielanie INF-g, a więc indukcję komórkowej odporności.
Bezpośrednie określenie indukcji komórek Th1 przez kompozycje zawierające HBsAg, Al(OH)3 i MPL wskazuje wyraźnie, że MPL bardzo silnie indukuje wydzielanie IL-2 i INF-g przez komórki Th1. Takie kompozycje stanowiąważny wkład w rozwój leczniczych szczepionek.
Najlepsze wyniki osiągnięto w przypadku MPL o rozmiarach cząstek mniejszych niż 100 nm.
Wyniki eksperymentów opisanych tutaj podają tabele 9-14.
13. Wnioski
Łączne dane sugerują, że MPL o małych rozmiarach cząstek jest ulepszonym immunostymulatorem u naczelnych, w tym i człowieka, w porównaniu z MPL o dużych rozmiarach cząstek. Cech ta połączona z możliwością wytwarzania na wielką skalę preparatów sterylizowanych powoduje, że ML o małych rozmiarach cząstekjest odpowiednim immunostymulatorem do wielu ludzkich i zwierzęcych szczepionek.
Tabela 1
Cząstki MPL i odzyskiwanie filtracyjne przy różnych parametrach działania ultradźwiękami
Próba nr Stężenie mg/ml Łączny czas przebywania w komorze (min.) Rozmiar cząstek przed filtracją (nm) Odzysk po filtracji (%)
16 1 2,5 92 104
17 1 3 79 78,5
18 1 3,5 95 86,4
19 2 2,8 77 Brak
20 1 2,8 98 Brak
178 578
Tabela 2
Stabilność rozmiarów cząstek sterylnego roztworu MPL określona metodą spektroskopii korelacji światła (Malvern), 1 mg/ml
Próba nr Rozmiar cząstek po filtracji (nm) Rozmiar cząstek po stabilizacji w temperaturze 4°C (nm)
8 dni 1 miesiąc 3 miesiące 6 miesięcy
9 94 81 74 88 82
Tabela 3
Profilaktyczna skuteczność kompozycji rgD2t/ A1(OH)3/MPL u świnek morskich Odpowiedź pozakomórkowa i wpływ szczepienia na pierwotną chorobę HSV2
Grupa Kompozycja Miana (GTM) Pierwotna infekcja
28 dni po III Ostrość Wystąpienia ocen uszkodzeń**% in-
uszkodzenia* deks
PI***
ELISA NEUTRA Śr.arytm. Mediana 0 0,5 1 2 4 8 16
±SD
Eksperyment 1
ln=12 rgD2t 5 pg Al(OH)3/MPL (sorbitol) 10439 673 2,2±311 0,5 50 17 0 33 0 0 0 75
2n=12 rgD2t 5 pg Al(OH)a/MPL TEA 5454 378 4,6±6,3 1,5 42 8 8 25 17 0 0 130
3n=11 kontrolna <100 <50 55,3±51,8 55 18 0 0 0 27 0 55 988
Eksperyment 2
1n=10 rgD2t Al(OH)3/MPL
100 nm 21039 696 0,5±0,7 0 60 30 10 0 0 0 0 25
2n=10 kontrolna <100 <50 28,5±29,1 31,5 30 0 0 0 10 40 20 680
* Suma ocen us zkzdoeń od dma 4 do 12 po io fekeji ** Oceny uszkodzeń: brak (0), pochwowe (0,5 lub 1), zewnętrzne pęcherzyki na skórze (2, 4, 8 lub 16 *** Indeks pierwotnej infekcji = Σί (maks. ocena i) x (% wystąpień); i = 0, 0,5, 1, 2, 4, 8 lub 16
Tabela 4
Profilaktyczna skuteczność kompozycji rgD2t/Al(OH)3/MPL u świnek morskich Wpływ szczepienia na nawrót choroby HSV2
Grupa Kompozycja Nawroty choroby
Ostrość nawrotu* Liczba dni nawrotów** Liczba wystąpień nawrotów (%)
Śr.arytm. ±SD Mediana Śr.arytm. ±SD Mediana 0 1 2 3 4 5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Eksperyment 1
1n=12 rgD2t 5 pg 5,44±6,2 3,5 4±5 2,5 33 42 8 8 8 0
Al(OH)3/MPL
(sorbitol)
2n=12 rgD2t 5 pg 6,5±5,9 6,5 4,3±3,9 3 27 27 9 27 9 0
Al(OH)j/MPL
TEA
3n=11 kontrolna 8±5,4 9 5,1±3,1 6 18 0 18 64 0 0
178 578
Tabela 4 - ciąg dalszy
1 2 9 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1n=10 Eksperyment 2 rgD2t 1,6±9,9 0 0,5±1,1 0 80 20 0 0 0 0
2n=10 Al(OH)3/MPL 100 nm kcnti-clna 6,1 ±6 6,75 4,9±4,9 4,5 40 0 20 20 0 20
* Suma occn uszkoddee od ddia 1 3dd3 9poinfekcji ** Liczba dni nawrotów dla dni cd 19 dc 99 pc infekcji.
Jeden nawrót jest ocorzedzany i następuje pc nim dzień bez uszOcdzeń, a cznacza cn cc najmniej dwa dni z rumieniem lub jeden dzień z pęcherzykami.
T abe1 a 5
Terapeutyczna skutecz^ć Ocmpczycji rgD2t/Al(OH)3/MPL
Grupa Kdmodzyzja Działanie terapeutyczne
Ostrość* Liczba dni nawrotu** Liczba nawrctów***
Śr.arytm.±UD Mediana (% kcnt.) Śr.arytm.±UD Mediana (% kcnt) Śr.arytm±UD Mediana (% kcnt.)
Eksperyment 1
1n=18 rgD2t 20 pg Al(OH)9/MPL TEA brak brak brak 11 brak 7
2n=18 kcnti-cina brak brak brak brak 5
Eksperyment 2
1n=14 rgD2t Al(OH)9/MPL 1ϋ0 nm 11,1±8,7 (-99%) p<0,05 10,25 (-41%) P<0,1 8,4±(-28%) P<0,1 8,5 (-29%) P<0,31 β,2±2 4
2n=19 kdftrdlfa 18,9±10,9 17,5 11,7±6,8 11 4,4±2,1 4
Eksperyment 9
1n=15 rgD2t Al(OH)9/MPL 100 nm, Tween 10,9±10,1 6 (-54%) p<0,07 6,9±5,8 4 (-49%) P<0,1 2,7±2 p<0,1 9 (-25%) p<0,1
2n=15 rgD2t Al(OH)9/MPL 100 nm, scrbitcl 8,9±6,7 6,5(-50%) p<0,09 5,4±4,4 4 (-49%) p<0,1 2,7±1,5 9 (-25%) P<0,1
9n=16 Odntrcina 12,5±8,1 19 8,5±4,5 7 9,6±1,6 4
* Suma ccen uszOcdzeń cd dnia 21 dc 60 pc infekcji ** Łączna liczba dni nawrctów u zwierząt dla dni cd 21 dc 60 pc infekcji * * * I^iizzn ρι^Γ^ΙΟ^ nnwrotów dladm od 2 2 do 66 pp> infenoii.Jenen nfwróttent i nfltępoSepo mm dzień bez uszOcdznń, a cznacza cn cc najmniej dwa dni z rumieniem (dzefa = 0,5) lub jeden dzień z pęcherzykami zewnętrznymi (ccena^ 2). Immundterapie: pdOskórne zastrzyki 21 i 42 dnia pc infekcji, analiza statystyczna: test WilccKcna z rangami względem kcntrclnych adiowantów (ninzfaczące dla p> 0,1).
178 578
Tabela 6
Immunogenność kompozycji gD2t, wodorotlenek glinu, MPL 100 nm u naczelnych Wyniki serologiczne i DTH
Szczepionka Liczba małp Odpowiedź przeciwciała* Odpowiedź DTH (stwardnienie)*
Miano ELISA Miano NEUTRA PBS GD2 5 Pg gd2 15 pg
20 μ gD2t KQ 101 5554 1600 - - -
wodorotlenek glinu KQ 102 14870 800 - ++ +++
50 pgMPL KQ 103 5846 1600 - ++ +++
KQ 104 GTM 16270 10665 1600 1213 brak brak brak
KQ 105 16170 800 - + ++
20 pg gD2t KQ 106 4389 800 - - -
wodorotlenek glinu KQ 107 20440 1600 - ++ +++
20 pg MPL KQ 108 5613 800 - + +
KQ 109 GTM 6755 8876 1600 1056 brak brak brak
KQ 110 2486 200 - - -
KQ 111 9918 800 - ++ +++
20 pg gD2t KQ 112 2526 400 - - -
wodorotlenek glinu KQ 113 7137 400 - - -
5 pgMPL KQ 114 GTM 8396 5181 400 400 brak brak brak
* mierzone w 6 cdii po IIIGTM = śrecdiie geemetryczne miano miano ELISA = miano punktu środkowego miano NEUTRA titer=odwrotność najwyższego rozcieńczenia dającego 100% ochrony przed cytopatogenią ** test na skórze 14 dnia po II stwardnienie - 24 godziny odczytu + = 1 mm ++ = 1-5 mm +++ = > 5 mm
Tabela 7
Czas N Serokonwersja % GMT Min. miano Maks. miano
wodorotlenek glinu (500 pg), HBsAg przed 20 0 0 0 0 0
PI (miesiąc 1) 20 10 50 6 1 58
PII (miesiąc 3) 20 19 95 80 7 565
wodorotlenek glinu (100 pg), HBsAg przed 20 0 0 0 0 0
PI (miesiąc 1) 18 7 36,8 4 1 56
PII (miesiąc 3) 19 18 94,7 24 2 320
wodorotlenek glinu (100
pg), HBsAg przed 20 0 0 0 0 0
PI (miesiąc 1) 20 12 60 10 1 66
PII (miesiąc 3) 20 20 100 73 6 605
178 578
Tabela 8
Immunogenność klinicznych szczepów OspA u ludzi Anty-OspA w teście inhibicji LA-2 (ng równoważniki LA-2/ml) (GTM)
Szczepionka Przed dzień 0 Po I 30 dzień 28 Po II 30 dzień 56 Po III 30 dzień 84
NS1-OspA na wodorotlenku glinu 118 233 409 768
SC (%) 2,6 77,2 86,5 100
NS1-OspA+MPL na wodorotlenku glinu 134 269 865 2424
SC (%) 2,6 88,6 97,2 100
N = 80 pg/dawkę
Domięśniowo
Tabela 9
Wpływ zwiększającej się dawki MPL (> 500 nm) na immunogenność recHBsAg adsorbowanego na Al(OH)3
Ilość MPL (pg/dawka) Odpowiedź anty-HBs
łączenie IgG IgG2a
dzień 14 dzień 21 dzień 14 dzień 21
0* 69 743 3.2 11
3.13 122 541 3.8 20
6.25 296 882 6.4 24
12.5 371 1359 10 48
25 456 1493 18 138
50 403 1776 33 242
* HBsAg on Al.
Tabela 10
Porównanie 3 klinicznych zestawów z MPL i bez MPL. Odpowiedź AUSAB
Zestaw Dawka HBsAg na Al(OH)3 (pg) Dawka MPL (pg) GMT anty-HBs (mlU/ml)
DSAH16 2,5 0 0,75 15,1
DSAR501 2,5 6,25 12,4 96,7
DSAR502 2,5 6,25 41,9 89,2
178 578
Tabela 11
Porównanie 2 klinicznych zestawów z MPL i bez MPL (> 500 nm). Odpowiedź anty-HBs IgG i IgG2a
Zestaw Dawka HBsAg na Al(OH)3 (pg) Dawka MPL (pg) Odpowiedź anty-HBs
IgG IgG2a
d15 d21 d15 d21
DSAH16 2,5 0 20 178 <5 5
DSAR502 2,5 6,25 113 641 <5 28
Tabela 12
Wpływ dawki MPL (< 100 nm) na immunogeniczność recHBsAg adsorbowanego na Al(OH)3
Dawka HBsAg adsorb, Al(OH)3 (pg) Dawka MPL <100 nm (pg) Odpowiedź anty-HBs
Łączne IG IgG IgG2a
d15 d21 d15 d21 d15 d21
1 0 30 637 67 516 15 99
1 3,12 312 2302 335 3532 167 1752
1 6,25 538 2719 856 3932 261 2521
1 12,5 396 2104 485 3625 125 139
1 25,0 38 446 141 638 28 233
Tabela 13
Wpływ MPL (> 500 nm) na indukcję komórek Th1 specyficzną dla HBsAg w myszach Balb/c
Dawka HBsAg (pg/mysz) Kompozycja Wydzielanie in vitro
IL-2 (SI) INF-γ (pg/ml) IL-4 (pg/ml)
24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h
20 FCA 1,3 2,0 8,0 <125 <125 385 NT NT NT
- FCA 0,7 1,8 0,7 <125 <125 <125 NT NT NT
20 AI(OH)3 1,0 1,4 1,2 <125 <125 <125 <40 <40 <40
20 Al(OH) + MPL (30 pg) 2 38 10 <125 280 280 <40 <40 <40
Po opisanej w tekście, komórki węzłów chłonnych hodowano z 5 monnych hodowano z 5 pg recHBsAg przez wskazany okres i mierzono wydzielanie IL-2, INF-γ i IL-4 stosując linię VDA2 komórek T i dwa handlowe zestawy ELISA
178 578
Tabela 14
Wpływ różnych dawek MPL (< 100 nm) na indukcję specyficznych dla HBsAg komórek Thi
Dawka HBsAg ( p/mysz) Dawka MPL Wydzielanie in vitro
IL-2 (SI) INF-γ (pg/ml)
24 h 48 h 72 h 24 h 48 h 72 h 96 h
20 0 2,6 28 21,8 <67 <67 <67 <67
20 7,5 207 173 58 < 67 207 522 698
20 15 270 71 36 275 878 1249 1582
20 30 41 59 36 <67 <67 <67 207
POMPA
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz.
Cena 4,00 zł.

Claims (25)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A (MPL), znamienna tym, że jest wizualnie przejrzysta i sterylizowalna przez ślepą filtrację na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie cząstki zawiesiny mają rozmiar mniejszy niż 120 nm.
  2. 2. Sposób wytwarzania zawiesiny cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A, znamienny tym, że składa się z zawieszania 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A w wodzie i poddawania otrzymanej zawiesiny działaniu ultradźwięków do wytworzenia zawiesiny cząstek wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez ślepą filtrację na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie o rozmiarze cząstek zawiesiny generalnie mniejszym niż 120 nm.
  3. 3. Kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z zawiesiną 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A (MPL) i odpowiednim nośnikiem, znamienna tym, że zawiera MPL w postaci zawiesiny cząstek wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez ślepąfiltrację na hydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie o rozmiarze cząstek zawiesiny generalnie mniejszym niż 120 nm, w ilości 10-100 pg na dawkę i antygen.
  4. 4. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3, znamienna tym, że zawiera MPL o rozmiarach cząstek 60-120 nm.
  5. 5. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3 albo 4, znamienna tym, że zawiera MPL o rozmiarach cząstek mniejszych niż 100 nm.
  6. 6. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3, znamienna tym, że jako nośnik zawiera wodorotlenek glinu.
  7. 7. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3, znamienna tym, że jako nośnik zawiera emulsję typu olej w wodzie lub inny ciekły nośnik lipidowy.
  8. 8. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3, znamienna tym, że jako antygen zawiera antygen wirusowy.
  9. 9. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3, znamienna tym, że jako antygen zawiera antygen Hepatitis A.
  10. 10. Kompozycja szczepionki według zastrz. 9, znamienna tym, że jako antygen Hepatitis A zawiera zdez.aktywowanąkompozycję pełnych komórek szczepu HM-175.
  11. 11. Kompozycja szczepionki ' według zastrz. 3 albo 4, albo 6, albo 7, albo 8, znamienna tym, że jako antygen zawiera antygen Hepatitis B.
  12. 12. Kompozycja szczepionki według zastrz. 11, znamienna tym, że jako antygen zawiera antygen powierzchniowy Hepatitis B (HBsAg) lub jego wariant.
  13. 13. Kompozycja szczepionki według zastrz. 12, znamienna tym, że jako antygen zawiera HBsAg będący antygenem S HBsAg (226 aminokwasów).
  14. 14. Kompozycja szczepionki według zastrz. 13, znamienna tym, że jako antygen zawiera HBsAg zawierający dodatkowo sekwencję pre-S.
  15. 15. Kompozycja szczepionki według zastrz. 13, znamienna tym, że jako antygen HBsAg zawiera złożoną cząstkę o wzorze (L*, S), przy czym L* oznacza zmodyfikowane białko L wirusa Hepatitis B mające sekwencję aminokwasową złożoną z reszt 12-52, następnie 133-145 i 175-400 białka L, a S oznacza białko S HBsAg.
  16. 16. Kompozycja szczepionki według zastrz. 11 albo 12, albo 13, znamienna tym, że zawiera dodatkowo antygen Hepatitis A.
  17. 17. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3, znamienna tym, że zawierajeden lub wiele antygenów Hepatitis i co najmniej jeden składnik wybrany spośród związków różnych od anty178 578 genu Hepatitis, który chroni przez jedną lub wieloma chorobami wybranymi spośród dyfterytu, tężca, kokluszu, Haemofilis influenzae b (Hib) oraz polio.
  18. 18. Kompozycja szczepionki według zastrz. 17, znamienna tym, że zawiera kombinację DTP (dyfteryt-tężec-koklusz)-HBsAg, kombinację Hib-HBsAg, kombinację DTP-Hib- HBsAg oraz kombinację IPV (nieaktywna szczepionka polio)-DTP-Hib- HBsAg.
  19. 19. Kompozycja szczepionki według zastrz. 18, znamienna tym, że zawiera dodatkowo antygen Hepatitis A.
  20. 20. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3 albo 4, albo 6, albo 7, albo 8, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę D HSV lub jej immunologiczny fragment.
  21. 21. Kompozycja szczepionki według zastrz. 20, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę D o uciętej sekwencji.
  22. 22. Kompozycja szczepionki według zastrz. 21, znamienna tym, że jako białko o uciętej sekwencji zawiera HSVgD2 pozbawione kotwiczącego końca C.
  23. 23. Kompozycja szczepionki według zastrz. 3 albo 4, albo 6, albo 7, albo 8, znamienna tym, że zawiera HIV gp 160 lub jego immunologiczny fragment.
  24. 24. Kompozycj a szczepionki według zastrz. 23, znamienna tym, że j ako pochodna gp 160 zawiera pochodną gp 120.
  25. 25. Sposób wytwarzania kompozycji szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z zawiesiną 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A (MPL). i odpowiednim nośnikiem, znamienny tym, że polega na mieszaniu zawiesiny cząstek MPL wizualnie przejrzystej i sterylizowalnej przez ślepą filtrację nahydrofilowej membranie PVDF 0,22 pm, korzystnie o rozmiarze cząstek zawiesiny generalnie mniejszym niż 120 nm, z nośnikiem i antygenem w farmaceutycznie dopuszczalnej zaróbce.
PL94310598A 1993-03-23 1994-03-14 Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposób jej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania PL178578B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB939306029A GB9306029D0 (en) 1993-03-23 1993-03-23 Vaccine compositions
GB9403417A GB9403417D0 (en) 1994-02-23 1994-02-23 Vaccine compositions
PCT/EP1994/000818 WO1994021292A1 (en) 1993-03-23 1994-03-14 Vaccine compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL310598A1 PL310598A1 (en) 1995-12-27
PL178578B1 true PL178578B1 (pl) 2000-05-31

Family

ID=26302633

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL94310598A PL178578B1 (pl) 1993-03-23 1994-03-14 Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposób jej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania

Country Status (28)

Country Link
US (1) US5776468A (pl)
EP (3) EP1175912A1 (pl)
JP (2) JP4028593B2 (pl)
KR (1) KR100310510B1 (pl)
CN (1) CN1087176C (pl)
AP (1) AP515A (pl)
AT (2) ATE204762T1 (pl)
AU (1) AU685443B2 (pl)
BR (1) BR9405957A (pl)
CZ (1) CZ289476B6 (pl)
DE (2) DE69428136T3 (pl)
DK (2) DK0812593T4 (pl)
DZ (1) DZ1763A1 (pl)
ES (2) ES2162139T5 (pl)
FI (1) FI110844B (pl)
GR (1) GR3025483T3 (pl)
HK (3) HK1011930A1 (pl)
HU (1) HU219056B (pl)
IL (1) IL109056A (pl)
MA (1) MA23143A1 (pl)
NO (2) NO322578B1 (pl)
NZ (1) NZ263538A (pl)
PL (1) PL178578B1 (pl)
PT (1) PT812593E (pl)
SA (1) SA94140762B1 (pl)
SG (1) SG48309A1 (pl)
SK (1) SK117395A3 (pl)
WO (1) WO1994021292A1 (pl)

Families Citing this family (432)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
US6620414B2 (en) * 1992-03-27 2003-09-16 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Hepatitis vaccines containing 3-0-deacylated monophoshoryl lipid A
PT835663E (pt) * 1992-05-23 2010-01-04 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacinas combinadas compreendendo o antigénio de superfície da hepatite b e outros antigénios
ATE196737T1 (de) * 1993-05-25 2000-10-15 American Cyanamid Co Adjuvantien für impfstoffe gegen das respiratorische synzitialvirus
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US6488934B1 (en) 1995-02-25 2002-12-03 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Hepatitis B vaccine
GB9503863D0 (en) * 1995-02-25 1995-04-19 Smithkline Beecham Biolog Vaccine compositions
UA56132C2 (uk) * 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
US6696065B1 (en) * 1995-05-04 2004-02-24 Aventis Pastuer Limited Acellular pertussis vaccines and methods of preparation thereof
DK0909323T3 (da) 1996-01-04 2007-05-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Helicobacter pylori-bakterioferritin
US20060024301A1 (en) * 1997-02-25 2006-02-02 Corixa Corporation Prostate-specific polypeptides and fusion polypeptides thereof
US7517952B1 (en) * 1997-02-25 2009-04-14 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
US20030185830A1 (en) * 1997-02-25 2003-10-02 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
US20060269532A1 (en) * 1997-02-25 2006-11-30 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
TR199902437T2 (xx) * 1997-04-01 2000-01-21 Corixa Corporation Monofosforil lipid A'ya ait sulu im�nolojik adjuvant terkipleri.
US6491919B2 (en) * 1997-04-01 2002-12-10 Corixa Corporation Aqueous immunologic adjuvant compostions of monophosphoryl lipid A
GB9706957D0 (en) * 1997-04-05 1997-05-21 Smithkline Beecham Plc Formulation
US6368604B1 (en) 1997-09-26 2002-04-09 University Of Maryland Biotechnology Institute Non-pyrogenic derivatives of lipid A
GB9724531D0 (en) 1997-11-19 1998-01-21 Smithkline Biolog Novel compounds
US6761888B1 (en) 2000-05-26 2004-07-13 Neuralab Limited Passive immunization treatment of Alzheimer's disease
US6787523B1 (en) 1997-12-02 2004-09-07 Neuralab Limited Prevention and treatment of amyloidogenic disease
US7588766B1 (en) 2000-05-26 2009-09-15 Elan Pharma International Limited Treatment of amyloidogenic disease
TWI239847B (en) 1997-12-02 2005-09-21 Elan Pharm Inc N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease
US6743427B1 (en) 1997-12-02 2004-06-01 Neuralab Limited Prevention and treatment of amyloidogenic disease
US6913745B1 (en) 1997-12-02 2005-07-05 Neuralab Limited Passive immunization of Alzheimer's disease
US6750324B1 (en) 1997-12-02 2004-06-15 Neuralab Limited Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies
US20080050367A1 (en) 1998-04-07 2008-02-28 Guriq Basi Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US6923964B1 (en) 1997-12-02 2005-08-02 Neuralab Limited Active immunization of AScr for prion disorders
US7790856B2 (en) 1998-04-07 2010-09-07 Janssen Alzheimer Immunotherapy Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US7964192B1 (en) * 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US7179892B2 (en) * 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
DE19803453A1 (de) * 1998-01-30 1999-08-12 Boehringer Ingelheim Int Vakzine
GB9808866D0 (en) 1998-04-24 1998-06-24 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
US20030147882A1 (en) * 1998-05-21 2003-08-07 Alan Solomon Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies
CA2332979A1 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Correlative protection using ospa antibody titers
WO2000003744A2 (en) * 1998-07-14 2000-01-27 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid a
US6306404B1 (en) 1998-07-14 2001-10-23 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
US20040213806A1 (en) * 1998-08-28 2004-10-28 Smithkline Beecham Biologicals, S.A. Salmonella typhi vaccine compositions
GB9819898D0 (en) * 1998-09-11 1998-11-04 Smithkline Beecham Plc New vaccine and method of use
US6692752B1 (en) 1999-09-08 2004-02-17 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Methods of treating human females susceptible to HSV infection
GB9820525D0 (en) * 1998-09-21 1998-11-11 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
GB9822714D0 (en) 1998-10-16 1998-12-09 Smithkline Beecham Sa Vaccines
CA2773698C (en) * 1998-10-16 2015-05-19 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvant systems comprising an immunostimulant adsorbed to a metallic salt particle and vaccines thereof
AU1580300A (en) 1998-12-08 2000-06-26 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Novel compounds
EP1163343B1 (en) 1999-03-12 2009-12-09 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Neisseria meningitidis antigenic polypeptides, corresponding polynucleotides and protective antibodies
HU228499B1 (en) 1999-03-19 2013-03-28 Smithkline Beecham Biolog Streptococcus vaccine
GB9909077D0 (en) * 1999-04-20 1999-06-16 Smithkline Beecham Biolog Novel compositions
PT1187629E (pt) 1999-04-19 2005-02-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicao adjuvante que compreende saponina e um oligonucleotido imunoestimulador
US6558670B1 (en) 1999-04-19 2003-05-06 Smithkline Beechman Biologicals S.A. Vaccine adjuvants
WO2000069456A2 (en) * 1999-05-13 2000-11-23 American Cyanamid Company Adjuvant combination formulations
US6787637B1 (en) 1999-05-28 2004-09-07 Neuralab Limited N-Terminal amyloid-β antibodies
UA81216C2 (en) * 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
US6635261B2 (en) 1999-07-13 2003-10-21 Wyeth Holdings Corporation Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
GB9921147D0 (en) * 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9923176D0 (en) 1999-09-30 1999-12-01 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
CA2721011A1 (en) 1999-10-22 2001-05-03 Aventis Pasteur Limited Modified gp100 and uses thereof
EP1104767A1 (en) 1999-11-30 2001-06-06 Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek Mono- and disaccharide derivatives containing both fatty acid ester and sulfate ester groups
GB0000891D0 (en) * 2000-01-14 2000-03-08 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
WO2001085932A2 (en) 2000-05-10 2001-11-15 Aventis Pasteur Limited Immunogenic polypeptides encoded by mage minigenes and uses thereof
US6821519B2 (en) * 2000-06-29 2004-11-23 Corixa Corporation Compositions and methods for the diagnosis and treatment of herpes simplex virus infection
GB0022742D0 (en) 2000-09-15 2000-11-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
AU2002223970A1 (en) * 2000-10-06 2002-04-15 H. Henrich Paradies Kyberdrug as autovaccines with immune-regulating effects
PT2266603E (pt) * 2000-10-18 2012-11-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacinas tumorais
EP1328543B1 (en) 2000-10-27 2009-08-12 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a & b
US7048931B1 (en) * 2000-11-09 2006-05-23 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
HUP0600589A2 (en) * 2000-11-10 2006-11-28 Wyeth Corp Adjuvant combination formulations
US7700751B2 (en) 2000-12-06 2010-04-20 Janssen Alzheimer Immunotherapy Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide
TWI255272B (en) 2000-12-06 2006-05-21 Guriq Basi Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
EP2336368A1 (en) 2000-12-07 2011-06-22 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Endogenous retroviruses up-regulated in prostate cancer
DE60239594D1 (de) 2001-02-23 2011-05-12 Glaxosmithkline Biolog Sa Influenza vakzinzusammensetzungen zur intradermaler verabreichung
US20030031684A1 (en) 2001-03-30 2003-02-13 Corixa Corporation Methods for the production of 3-O-deactivated-4'-monophosphoryl lipid a (3D-MLA)
GB0109297D0 (en) 2001-04-12 2001-05-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
US20100221284A1 (en) 2001-05-30 2010-09-02 Saech-Sisches Serumwerk Dresden Novel vaccine composition
TWI228420B (en) 2001-05-30 2005-03-01 Smithkline Beecham Pharma Gmbh Novel vaccine composition
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
US8481043B2 (en) 2001-06-22 2013-07-09 Cpex Pharmaceuticals, Inc. Nasal immunization
GB0118249D0 (en) 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
US7361352B2 (en) 2001-08-15 2008-04-22 Acambis, Inc. Influenza immunogen and vaccine
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
CA2476626A1 (en) 2002-02-20 2003-08-28 Chiron Corporation Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
US7351413B2 (en) 2002-02-21 2008-04-01 Lorantis, Limited Stabilized HBc chimer particles as immunogens for chronic hepatitis
MY139983A (en) * 2002-03-12 2009-11-30 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
GB0206360D0 (en) 2002-03-18 2002-05-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Viral antigens
US8518694B2 (en) 2002-06-13 2013-08-27 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Nucleic acid vector comprising a promoter and a sequence encoding a polypeptide from the endogenous retrovirus PCAV
CA2501812C (en) 2002-10-11 2012-07-10 Mariagrazia Pizza Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages
PL376792A1 (pl) 2002-10-23 2006-01-09 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Sposoby szczepienia przeciwko malarii
US7858098B2 (en) 2002-12-20 2010-12-28 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine
ES2411080T3 (es) 2003-01-30 2013-07-04 Novartis Ag Vacunas inyectables contra múltiples serogrupos de meningococos
TWI374893B (en) 2003-05-30 2012-10-21 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
ES2596553T3 (es) 2003-06-02 2017-01-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones inmunogénicas a base de micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido
GB0321615D0 (en) 2003-09-15 2003-10-15 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
RU2378010C2 (ru) 2003-10-02 2010-01-10 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс С.Р.Л. Жидкие вакцины для множественных серогрупп менингококков
WO2005032584A2 (en) 2003-10-02 2005-04-14 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Pertussis antigens and use thereof in vaccination
DE202005022108U1 (de) 2004-03-09 2013-11-12 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Influenza-Virus-Impfstoffe
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
BRPI0510315A (pt) 2004-04-30 2007-10-16 Chiron Srl integração de vacinação com conjugado meningocócico
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
WO2006078294A2 (en) 2004-05-21 2006-07-27 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Alphavirus vectors for respiratory pathogen vaccines
DE602005025342D1 (de) 2004-05-28 2011-01-27 Glaxosmithkline Biolog Sa Impfstoffzusammensetzungen mit virosomen und einem saponin-adjuvans
US7758866B2 (en) 2004-06-16 2010-07-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52
US20090317420A1 (en) 2004-07-29 2009-12-24 Chiron Corporation Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae
GB0417494D0 (en) 2004-08-05 2004-09-08 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
EP2305294B1 (en) 2004-09-22 2015-04-01 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic composition for use in vaccination against staphylococcei
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
CA2586690A1 (en) 2004-11-03 2006-06-15 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Influenza vaccination
TW200636066A (en) * 2004-12-15 2006-10-16 Elan Pharm Inc Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
CA2590337C (en) 2004-12-15 2017-07-11 Neuralab Limited Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition
HUE033196T2 (en) 2005-01-27 2017-11-28 Children's Hospital & Res Center At Oakland GNA1870-based vesicle vaccines for broad-spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
NZ560930A (en) * 2005-02-16 2011-06-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Hepatitis B virus vaccine comprising a hepatitis B virus surface antigen, aluminium phosphate, 3-O-deacylated monophosphoryl lipid A and a triethylammonium ion
GB0503337D0 (en) 2005-02-17 2005-03-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Compositions
ES2385045T3 (es) 2005-02-18 2012-07-17 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Inmunógenos de Escherichia coli uropatogénica
HUE027400T2 (en) 2005-02-18 2016-10-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Proteins and nucleic acids from meningitis / sepsis with Escherichia coli
GB0504436D0 (en) 2005-03-03 2005-04-06 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
HUE027837T2 (en) 2005-03-23 2016-11-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adjuvant use of influenza virus and oil-in-water emulsion to induce CD4 T-cell and / or enhanced B-cell cellular response
WO2006113528A2 (en) 2005-04-18 2006-10-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Expressing hepatitis b virus surface antigen for vaccine preparation
ATE543832T1 (de) 2005-04-29 2012-02-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Verfahren zur vorbeugung oder behandlung einer m.-tuberculosis-infektion
GB0513421D0 (en) 2005-06-30 2005-08-03 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccines
WO2007047749A1 (en) 2005-10-18 2007-04-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
NZ567978A (en) 2005-11-04 2011-09-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccine with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant
CA2628152C (en) 2005-11-04 2016-02-02 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
EP1951299B1 (en) 2005-11-04 2012-01-04 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators
CA2628158C (en) * 2005-11-04 2015-12-15 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Emulsions with free aqueous-phase surfactant as adjuvants for split influenza vaccines
AU2006310337B9 (en) 2005-11-04 2013-11-28 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
GB0522765D0 (en) * 2005-11-08 2005-12-14 Chiron Srl Combination vaccine manufacture
EP2360175B1 (en) 2005-11-22 2014-07-16 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Norovirus and Sapovirus virus-like particles (VLPs)
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
TWI457133B (zh) 2005-12-13 2014-10-21 Glaxosmithkline Biolog Sa 新穎組合物
GB0607088D0 (en) 2006-04-07 2006-05-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
LT3017827T (lt) 2005-12-22 2019-01-10 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Pneumokokinė polisacharidinė konjuguota vakcina
ZA200805602B (en) 2006-01-17 2009-12-30 Arne Forsgren A novel surface exposed haemophilus influenzae protein (protein E; pE)
PL1976559T6 (pl) 2006-01-27 2020-08-10 Novartis Influenza Vaccines Marburg Gmbh Szczepionki przeciw grypie zawierające hemaglutyninę i białka macierzy
CA2646891A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Novartis Ag Immunopotentiating compounds
EP2357184B1 (en) 2006-03-23 2015-02-25 Novartis AG Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators
JP2009534303A (ja) 2006-03-24 2009-09-24 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス ゲーエムベーハー アンド カンパニー カーゲー 冷蔵しないインフルエンザワクチンの保存
KR101541383B1 (ko) 2006-03-30 2015-08-03 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 면역원성 조성물
US9839685B2 (en) 2006-04-13 2017-12-12 The Regents Of The University Of Michigan Methods of inducing human immunodeficiency virus-specific immune responses in a host comprising nasally administering compositions comprising a naonemulsion and recombinant GP120 immunogen
US10138279B2 (en) 2006-04-13 2018-11-27 Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for Bacillus anthracis vaccination
US8784810B2 (en) 2006-04-18 2014-07-22 Janssen Alzheimer Immunotherapy Treatment of amyloidogenic diseases
US20110206692A1 (en) 2006-06-09 2011-08-25 Novartis Ag Conformers of bacterial adhesins
SI2422810T1 (sl) 2006-07-17 2015-01-30 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Influenčno cepivo
US9364525B2 (en) 2006-07-18 2016-06-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccines for malaria
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
EP2040744B1 (en) 2006-07-25 2016-03-09 The Secretary of State for Defence Live vaccine strains of francisella
EP2586790A3 (en) 2006-08-16 2013-08-14 Novartis AG Immunogens from uropathogenic Escherichia coli
CA2663196A1 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Novartis Ag Making influenza virus vaccines without using eggs
TR201807756T4 (tr) 2006-09-26 2018-06-21 Infectious Disease Res Inst Sentetik adjuvan içeren aşı bileşimi.
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
SG174845A1 (en) 2006-09-29 2011-10-28 Ligocyte Pharmaceuticals Inc Norovirus vaccine formulations
PT2086582E (pt) 2006-10-12 2013-01-25 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacina compreendendo uma emulsão adjuvante óleo em água
SI2086582T1 (sl) 2006-10-12 2013-02-28 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Cepivo, ki obsega emulzijo olja v vodi kot adjuvans
JP2011506264A (ja) 2006-12-06 2011-03-03 ノバルティス アーゲー インフルエンザウイルスの4つの株に由来する抗原を含むワクチン
MX2009009342A (es) 2007-03-02 2009-09-11 Glaxosmithkline Biolog Sa Metodo novedoso y composiciones.
US8003097B2 (en) 2007-04-18 2011-08-23 Janssen Alzheimer Immunotherapy Treatment of cerebral amyloid angiopathy
TW200908994A (en) 2007-04-20 2009-03-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
KR20100045445A (ko) 2007-06-26 2010-05-03 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 스트렙토코쿠스 뉴모니애 캡슐 다당류 컨쥬게이트를 포함하는 백신
SI2185191T1 (sl) 2007-06-27 2012-12-31 Novartis Ag Cepiva proti influenci z majhnimi dodatki
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
PT2182983E (pt) 2007-07-27 2014-09-01 Janssen Alzheimer Immunotherap Tratamento de doenças amiloidogénicas com anticorpos anti-abeta humanizados
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
HUE025149T2 (hu) * 2007-08-02 2016-01-28 Biondvax Pharmaceuticals Ltd Multimer multiepitóp influenza vakcinák
CA2695421A1 (en) 2007-08-03 2009-02-12 President And Fellows Of Harvard College Chlamydia antigens
EP2190470B1 (en) 2007-08-13 2017-12-13 GlaxoSmithKline Biologicals SA Vaccines
RU2471497C2 (ru) 2007-09-12 2013-01-10 Новартис Аг Мутантные антигены gas57 и антитела против gas57
JO3076B1 (ar) 2007-10-17 2017-03-15 Janssen Alzheimer Immunotherap نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
AU2008331800A1 (en) 2007-12-03 2009-06-11 President And Fellows Of Harvard College Chlamydia antigens
US8815253B2 (en) 2007-12-07 2014-08-26 Novartis Ag Compositions for inducing immune responses
AU2008352942B2 (en) 2007-12-19 2013-09-12 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Soluble forms of Hendra and Nipah virus F glycoprotein and uses thereof
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
CN104292312A (zh) 2007-12-21 2015-01-21 诺华股份有限公司 链球菌溶血素o的突变形式
EP4206231A1 (en) * 2007-12-24 2023-07-05 ID Biomedical Corporation of Quebec Recombinant rsv antigens
EP2245048B1 (en) 2008-02-21 2014-12-31 Novartis AG Meningococcal fhbp polypeptides
US8506966B2 (en) 2008-02-22 2013-08-13 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use
EP2265640B1 (en) 2008-03-10 2015-11-04 Children's Hospital & Research Center at Oakland Chimeric factor h binding proteins (fhbp) containing a heterologous b domain and methods of use
EP2268309B1 (en) 2008-03-18 2015-01-21 Novartis AG Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens
JP5749642B2 (ja) 2008-04-16 2015-07-15 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム ワクチン
EP2293813A4 (en) 2008-05-23 2012-07-11 Univ Michigan NANOEMULSION VACCINES
BRPI0915960A2 (pt) * 2008-07-18 2019-09-24 Id Biomedical Corp antígenos de polipeptídeos do vírus sincicial respiratório qimérico
GB0815872D0 (en) 2008-09-01 2008-10-08 Pasteur Institut Novel method and compositions
AU2009296458A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 Nanobio Corporation Nanoemulsion therapeutic compositions and methods of using the same
US9067981B1 (en) 2008-10-30 2015-06-30 Janssen Sciences Ireland Uc Hybrid amyloid-beta antibodies
EP2376089B1 (en) 2008-11-17 2018-03-14 The Regents of the University of Michigan Cancer vaccine compositions and methods of using the same
WO2010064243A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Protea Vaccine Technologies Ltd. GLUTAMYL tRNA SYNTHETASE (GtS) FRAGMENTS
EP2376108B1 (en) 2008-12-09 2017-02-22 Pfizer Vaccines LLC IgE CH3 PEPTIDE VACCINE
WO2010079081A1 (en) 2009-01-07 2010-07-15 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Methods for recovering a virus or a viral antigen produced by cell culture
MX2011007456A (es) 2009-01-12 2011-08-03 Novartis Ag Antigenos del dominio de proteina de superficie de union a colageno tipo b (can_b) en vacunas contra bacteria gram positiva.
GB0901423D0 (en) 2009-01-29 2009-03-11 Secr Defence Treatment
GB0901411D0 (en) 2009-01-29 2009-03-11 Secr Defence Treatment
US20110293660A1 (en) 2009-02-06 2011-12-01 Bruno Rene Andre Novel method
AU2010212550B2 (en) 2009-02-10 2016-03-10 Seqirus UK Limited Influenza vaccines with reduced amounts of squalene
WO2010094663A1 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Inactivated dengue virus vaccine with aluminium-free adjuvant
DK2403507T3 (en) * 2009-03-05 2018-06-06 Jenny Colleen Mccloskey TREATMENT OF INFECTION
US8568732B2 (en) 2009-03-06 2013-10-29 Novartis Ag Chlamydia antigens
SG175092A1 (en) 2009-04-14 2011-11-28 Novartis Ag Compositions for immunising against staphylococcus aerus
GB0906234D0 (en) 2009-04-14 2009-05-20 Secr Defence Vaccine
BRPI1014494A2 (pt) 2009-04-30 2016-08-02 Coley Pharm Group Inc vacina pneumocócica e usos da mesma
EP2437753B1 (en) 2009-06-05 2016-08-31 Infectious Disease Research Institute Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants and vaccine compositions containing them
GB0910046D0 (en) * 2009-06-10 2009-07-22 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compositions
DK2442826T3 (en) 2009-06-15 2015-09-21 Univ Singapore Influenza vaccine, composition and methods of using
CN102596243B (zh) 2009-06-16 2015-10-21 密执安大学评议会 纳米乳剂疫苗
WO2010149745A1 (en) 2009-06-24 2010-12-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Recombinant rsv antigens
MX2012000036A (es) 2009-06-24 2012-02-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna.
SG177533A1 (en) 2009-07-07 2012-02-28 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
HRP20220756T1 (hr) 2009-07-15 2022-09-02 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Proteinski pripravci rsv f i postupci za izradu istih
SG178035A1 (en) 2009-07-16 2012-03-29 Novartis Ag Detoxified escherichia coli immunogens
PE20120817A1 (es) 2009-07-30 2012-07-07 Pfizer Vaccines Llc Peptidos tau antigenicos y usos de los mismos
GB0913681D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
GB0913680D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
AU2010288240B2 (en) 2009-08-27 2014-03-27 Novartis Ag Hybrid polypeptides including meningococcal fHBP sequences
PE20161560A1 (es) 2009-09-03 2017-01-11 Pfizer Vaccines Llc Vacuna de pcsk9
US20120237536A1 (en) 2009-09-10 2012-09-20 Novartis Combination vaccines against respiratory tract diseases
JP5774010B2 (ja) 2009-09-25 2015-09-02 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム インフルエンザウイルスのための免疫拡散アッセイ
GB0917002D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Improved shigella blebs
GB0917003D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Purification of bacterial vesicles
JP2013506651A (ja) 2009-09-30 2013-02-28 ノバルティス アーゲー Staphylococcus.aureus5型および8型莢膜多糖の結合体
WO2011039631A2 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Novartis Ag Expression of meningococcal fhbp polypeptides
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
AU2010310985B2 (en) 2009-10-27 2014-11-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Modified meningococcal fHBP polypeptides
GB0919117D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Process
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
WO2011067758A2 (en) 2009-12-02 2011-06-09 Protea Vaccine Technologies Ltd. Immunogenic fragments and multimers from streptococcus pneumoniae proteins
DE102009056871A1 (de) * 2009-12-03 2011-06-22 Novartis AG, 4056 Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben
EP3257525A3 (en) 2009-12-22 2018-02-28 Celldex Therapeutics, Inc. Vaccine compositions
EP2519265B1 (en) 2009-12-30 2018-11-14 GlaxoSmithKline Biologicals SA Polysaccharide immunogens conjugated to e. coli carrier proteins
GB201003333D0 (en) 2010-02-26 2010-04-14 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
GB201003924D0 (en) 2010-03-09 2010-04-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
GB201003920D0 (en) 2010-03-09 2010-04-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Method of treatment
CN103221065A (zh) 2010-03-26 2013-07-24 葛兰素史密斯克莱生物公司 Hiv疫苗
CN102834410B (zh) 2010-03-30 2016-10-05 奥克兰儿童医院及研究中心 改性的h因子结合蛋白(fhbp)及其使用方法
GB201005625D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
WO2011127316A1 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Novartis Ag Method for generating a parvovirus b19 virus-like particle
WO2011130379A1 (en) 2010-04-13 2011-10-20 Novartis Ag Benzonapthyridine compositions and uses thereof
US20130039943A1 (en) 2010-05-03 2013-02-14 Bruno Rene Andre Novel method
JP2013532008A (ja) 2010-05-28 2013-08-15 テトリス オンライン インコーポレイテッド 対話式ハイブリッド非同期コンピュータ・ゲーム・インフラストラクチャ
GB201009273D0 (en) 2010-06-03 2010-07-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel vaccine
CA2798837A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Pfizer Inc. Her-2 peptides and vaccines
CA2800774A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Pfizer Vaccines Llc Ige ch3 peptide vaccine
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
US8658603B2 (en) 2010-06-16 2014-02-25 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for inducing an immune response
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
US20130171185A1 (en) 2010-07-06 2013-07-04 Ethan Settembre Norovirus derived immunogenic compositions and methods
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
AU2011310643A1 (en) 2010-09-27 2013-04-11 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vaccine
BR112013004582A2 (pt) 2010-09-27 2016-09-06 Crucell Holland Bv método para induzir uma resposta imune em um sujeito contra um antígeno de um parasita que causa a malária
GB201017519D0 (en) 2010-10-15 2010-12-01 Novartis Vaccines Inst For Global Health S R L Vaccines
AU2011315447A1 (en) 2010-10-15 2013-05-09 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Cytomegalovirus gB antigen
FR2966044B1 (fr) * 2010-10-18 2012-11-02 Sanofi Pasteur Procede de conditionnement d'un vaccin contenant un adjuvant d'aluminium
WO2012072769A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Novartis Ag Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations
NZ611176A (en) 2010-12-02 2015-07-31 Bionor Immuno As Peptide scaffold design
EP3593813A1 (en) 2010-12-14 2020-01-15 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Mycobacterium antigenic composition
CA2860331A1 (en) 2010-12-24 2012-06-28 Novartis Ag Compounds
GB201022007D0 (en) 2010-12-24 2011-02-02 Imp Innovations Ltd DNA-sensor
US9493514B2 (en) 2011-01-06 2016-11-15 Bionor Immuno As Dimeric scaffold proteins comprising HIV-1 GP120 and GP41 epitopes
TR201908715T4 (tr) 2011-01-26 2019-07-22 Glaxosmithkline Biologicals Sa Rsv immünizasyon rejimi.
WO2012114323A1 (en) 2011-02-22 2012-08-30 Biondvax Pharmaceuticals Ltd. Multimeric multiepitope polypeptides in improved seasonal and pandemic influenza vaccines
US20140004142A1 (en) 2011-03-02 2014-01-02 Pfizer Inc. Pcsk9 vaccine
GB201106357D0 (en) 2011-04-14 2011-06-01 Pessi Antonello Composition and uses thereof
AU2012243039B2 (en) 2011-04-08 2017-07-13 Immune Design Corp. Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
TW201302779A (zh) 2011-04-13 2013-01-16 Glaxosmithkline Biolog Sa 融合蛋白質及組合疫苗
PL2707385T3 (pl) 2011-05-13 2018-03-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Prefuzyjne antygeny RSV F
BR112013029514A2 (pt) 2011-05-17 2019-09-24 Glaxosmithkline Biologicals Sa composição imunogênica, vacina, e, método de tratar ou impedir uma doença
EP2726097A4 (en) 2011-07-01 2015-03-11 Univ California HERPES VIRUS VACCINE AND METHOD OF USE
US11896636B2 (en) 2011-07-06 2024-02-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic combination compositions and uses thereof
EP2729168A2 (en) 2011-07-06 2014-05-14 Novartis AG Immunogenic compositions and uses thereof
WO2013009564A1 (en) 2011-07-08 2013-01-17 Novartis Ag Tyrosine ligation process
WO2013009849A1 (en) 2011-07-11 2013-01-17 Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. Parenteral norovirus vaccine formulations
WO2013016460A1 (en) 2011-07-25 2013-01-31 Novartis Ag Compositions and methods for assessing functional immunogenicity of parvovirus vaccines
GB201114923D0 (en) 2011-08-30 2011-10-12 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
IN2014CN02152A (pl) 2011-09-01 2015-09-04 Novartis Ag
CN103917245B (zh) 2011-09-14 2017-06-06 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 用于制备糖‑蛋白质糖缀合物的方法
SG11201400193SA (en) 2011-09-16 2014-05-29 Ucb Pharma Sa Neutralising antibodies to the major exotoxins tcda and tcdb of clostridium difficile
GB201116248D0 (en) 2011-09-20 2011-11-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Liposome production using isopropanol
CA2854934A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Novartis Ag Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
WO2013074501A1 (en) 2011-11-14 2013-05-23 Crucell Holland B.V. Heterologous prime-boost immunization using measles virus-based vaccines
WO2013108272A2 (en) 2012-01-20 2013-07-25 International Centre For Genetic Engineering And Biotechnology Blood stage malaria vaccine
JP2015509520A (ja) 2012-03-07 2015-03-30 ノバルティス アーゲー 狂犬病ウイルス免疫原のアジュバント化製剤
EP2822586A1 (en) 2012-03-07 2015-01-14 Novartis AG Adjuvanted formulations of streptococcus pneumoniae antigens
JP2015509963A (ja) 2012-03-08 2015-04-02 ノバルティス アーゲー Tlr4アゴニストを含む混合ワクチン
AU2013229432A1 (en) 2012-03-08 2014-10-16 Novartis Ag Adjuvanted formulations of booster vaccines
US20150110824A1 (en) 2012-03-18 2015-04-23 Glaxosmithkline Biologicals, Sa Method of vaccination against human papillomavirus
EP3492095A1 (en) 2012-04-01 2019-06-05 Technion Research & Development Foundation Limited Extracellular matrix metalloproteinase inducer (emmprin) peptides and binding antibodies
EP2659907A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
EP2659906A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
EP2659908A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
MX359257B (es) 2012-05-04 2018-09-19 Pfizer Antígenos asociados a próstata y regímenes de inmunoterapia basados en vacuna.
RS57420B1 (sr) 2012-05-16 2018-09-28 Immune Design Corp Vakcine za hsv-2
SG11201407440WA (en) 2012-05-22 2014-12-30 Novartis Ag Meningococcus serogroup x conjugate
EP2666785A1 (en) 2012-05-23 2013-11-27 Affiris AG Complement component C5a-based vaccine
MX2014014683A (es) 2012-06-06 2015-02-24 Bionor Immuno As Peptidos derivados de proteinas virales para usarse como inmunogenos y reactivos de dosificacion.
JP2015522580A (ja) 2012-07-06 2015-08-06 ノバルティス アーゲー 免疫学的組成物およびその使用
US20140037680A1 (en) 2012-08-06 2014-02-06 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Novel method
AU2013301312A1 (en) 2012-08-06 2015-03-19 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Method for eliciting in infants an immune response against RSV and B. pertussis
EP2703483A1 (en) 2012-08-29 2014-03-05 Affiris AG PCSK9 peptide vaccine
JP6324961B2 (ja) 2012-09-06 2018-05-16 ノバルティス アーゲー 血清群b髄膜炎菌とd/t/pとの組み合わせワクチン
AU2013320313B2 (en) 2012-09-18 2018-07-12 Glaxosmithkline Biologicals Sa Outer membrane vesicles
EA201590427A1 (ru) 2012-10-02 2015-09-30 Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. Нелинейные сахаридные конъюгаты
SG11201500979RA (en) 2012-10-03 2015-07-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
EP3620172A1 (en) 2012-10-12 2020-03-11 GlaxoSmithKline Biologicals SA Non-cross-linked acellular pertussis antigens for use in combination vaccines
US9987344B2 (en) 2012-11-30 2018-06-05 Glaxosmithkline Biologicals Sa Pseudomonas antigens and antigen combinations
EP3513806B1 (en) 2012-12-05 2023-01-25 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic composition
WO2014160463A1 (en) 2013-03-13 2014-10-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Prefusion rsv f proteins and their use
AR095425A1 (es) 2013-03-15 2015-10-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vacuna, uso y procedimiento para prevenir una infección por picornavirus
CA2909221A1 (en) 2013-04-18 2014-10-23 Immune Design Corp. Gla monotherapy for use in cancer treatment
US20210145963A9 (en) 2013-05-15 2021-05-20 The Governors Of The University Of Alberta E1e2 hcv vaccines and methods of use
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
GB201310008D0 (en) 2013-06-05 2013-07-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition for use in therapy
KR20160040290A (ko) 2013-08-05 2016-04-12 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 조합 면역원성 조성물
CA2920934C (en) 2013-08-30 2022-12-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Large scale production of viruses in cell culture
JP6306700B2 (ja) 2013-11-01 2018-04-04 ユニバーシティ オブ オスロUniversity of Oslo アルブミン改変体及びその使用
EP2870974A1 (en) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella conjugate vaccines
US11452767B2 (en) 2013-11-15 2022-09-27 Oslo Universitetssykehus Hf CTL peptide epitopes and antigen-specific t cells, methods for their discovery, and uses thereof
WO2015092710A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Contralateral co-administration of vaccines
US11160855B2 (en) 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP3096785B1 (en) 2014-01-21 2020-09-09 Pfizer Inc Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2015123291A1 (en) 2014-02-11 2015-08-20 The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Pcsk9 vaccine and methods of using the same
TW201620927A (zh) 2014-02-24 2016-06-16 葛蘭素史密斯克藍生物品公司 Uspa2蛋白質構築體及其用途
SG11201607404PA (en) * 2014-03-25 2016-10-28 Government Of The Us Secretary Of The Army Methods for enhancing the immunostimulation potency of aluminum salt-adsorbed vaccines
EA037818B1 (ru) 2014-03-26 2021-05-25 Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. Мутантные стафилококковые антигены
US11571472B2 (en) 2014-06-13 2023-02-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic combinations
DK3160500T3 (da) 2014-06-25 2019-11-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Clostridium difficile immunogen sammensætning
EP3169699A4 (en) 2014-07-18 2018-06-20 The University of Washington Cancer vaccine compositions and methods of use thereof
WO2016012385A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Sanofi Pasteur Vaccine composition comprising ipv and cyclodextrins
EP4074726A3 (en) 2014-07-23 2022-11-23 Children's Hospital & Research Center at Oakland Factor h binding protein variants and methods of use thereof
WO2016057921A1 (en) 2014-10-10 2016-04-14 Baker Jr James R Nanoemulsion compositions for preventing, suppressing or eliminating allergic and inflammatory disease
AR102548A1 (es) 2014-11-07 2017-03-08 Takeda Vaccines Inc Vacunas contra la enfermedad de manos, pies y boca y métodos de fabricación y uso
AR102547A1 (es) 2014-11-07 2017-03-08 Takeda Vaccines Inc Vacunas contra la enfermedad de manos, pies y boca y métodos de fabricación y su uso
BE1023004A1 (fr) 2014-12-10 2016-10-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procede de traitement
DK3244917T5 (da) 2015-01-15 2024-10-14 Pfizer Inc Immunogene sammensætninger til anvendelse i pneumokokvacciner
WO2016141320A2 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Northwestern University Non-neuroinvasive viruses and uses thereof
JP2018511655A (ja) 2015-03-20 2018-04-26 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン ボルデテラ属に対するワクチン接種における使用のための免疫原性組成物
AU2016271857B2 (en) 2015-06-03 2020-05-28 Affiris Ag IL-23-P19 vaccines
KR20180035807A (ko) 2015-06-26 2018-04-06 세퀴러스 유케이 리미티드 항원적으로 매치된 인플루엔자 백신
EP3319988A1 (en) 2015-07-07 2018-05-16 Affiris AG Vaccines for the treatment and prevention of ige mediated diseases
PE20180657A1 (es) 2015-07-21 2018-04-17 Pfizer Composiciones inmunogenas que comprenden antigenos de sacarido capsular conjugados, kits que las comprenden y sus usos
GB201518684D0 (en) 2015-10-21 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
GB201518668D0 (en) 2015-10-21 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic Comosition
CA3005524C (en) 2015-11-20 2023-10-10 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
WO2017109698A1 (en) 2015-12-22 2017-06-29 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic formulation
WO2017158421A1 (en) 2016-03-14 2017-09-21 University Of Oslo Anti-viral engineered immunoglobulins
CR20180445A (es) 2016-03-14 2019-02-08 Univ Oslo Inmunoglobulinas diseñadas por ingeniería genética con unión alterada al fcrn
US11173207B2 (en) 2016-05-19 2021-11-16 The Regents Of The University Of Michigan Adjuvant compositions
GB201610599D0 (en) 2016-06-17 2016-08-03 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic Composition
EP3471761A2 (en) 2016-06-21 2019-04-24 University Of Oslo Hla binding vaccine moieties and uses thereof
CA3034124A1 (en) 2016-08-23 2018-03-01 Glaxosmithkline Biologicals Sa Fusion peptides with antigens linked to short fragments of invariant chain (cd74)
GB201614799D0 (en) 2016-09-01 2016-10-19 Glaxosmithkline Biologicals Sa Compositions
US11466292B2 (en) 2016-09-29 2022-10-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Compositions and methods of treatment
GB201616904D0 (en) 2016-10-05 2016-11-16 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccine
WO2018096396A1 (en) 2016-11-22 2018-05-31 University Of Oslo Albumin variants and uses thereof
CA3045952A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel process
GB201620968D0 (en) 2016-12-09 2017-01-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adenovirus polynucleotides and polypeptides
MX2019006349A (es) 2016-12-16 2019-08-22 Inst Res Biomedicine Proteinas recombinantes rsv f de prefusion nuevas y usos de las mismas.
GB201621686D0 (en) 2016-12-20 2017-02-01 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods for inducing an immune response
SI3570879T1 (sl) 2017-01-20 2022-06-30 Pfizer Inc. Imunogenska kompozicija za uporabo v pnevmokoknih cepivih
BR112019020209A2 (pt) 2017-03-31 2020-06-02 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Composição imunogênica, uso de uma composição imunogênica, método de tratamento ou prevenção de uma recorrência de uma exacerbação aguda de doença pulmonar obstrutiva crônica, e, terapia de combinação.
WO2018178265A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Immunogenic composition, use and method of treatment
CN110945022B (zh) 2017-04-19 2024-04-05 生物医学研究所 作为疫苗及新疟疾疫苗和抗体结合靶标的疟原虫子孢子npdp肽
EP3615061A1 (en) 2017-04-28 2020-03-04 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Vaccination
GB201707700D0 (en) 2017-05-12 2017-06-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Dried composition
JP7291633B2 (ja) 2017-05-30 2023-06-15 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム アジュバントを製造する方法
BR112020001768A2 (pt) 2017-08-14 2020-09-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. método de reforçar uma resposta imune pré-existente contra haemophilus influenzae e moraxella catarrhalis não tipáveis em um indivíduo, e, protocolo de vacinação.
WO2019048936A1 (en) 2017-09-07 2019-03-14 University Of Oslo VACCINE MOLECULES
WO2019048928A1 (en) 2017-09-07 2019-03-14 University Of Oslo VACCINE MOLECULES
CN111315406A (zh) 2017-09-08 2020-06-19 传染病研究所 包括皂苷的脂质体调配物及其使用方法
CA3081436A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Western Oncolytics Ltd. Platform oncolytic vector for systemic delivery
CN111511395B (zh) 2017-11-03 2024-10-15 武田疫苗股份有限公司 用于将寨卡病毒灭活和用于确定灭活完全性的方法
GB201721069D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B Immunisation regimen and compositions
GB201721068D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B immunisation regimen and compositions
GB201721582D0 (en) 2017-12-21 2018-02-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa S aureus antigens and immunogenic compositions
GB201721576D0 (en) 2017-12-21 2018-02-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hla antigens and glycoconjugates thereof
CN112638936A (zh) 2018-06-12 2021-04-09 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 腺病毒多核苷酸和多肽
EP3581201A1 (en) 2018-06-15 2019-12-18 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Escherichia coli o157:h7 proteins and uses thereof
CN110680909B (zh) * 2018-07-04 2024-09-20 辽宁成大生物股份有限公司 一种速释b型流感嗜血杆菌结合疫苗可溶性微针贴及其制备方法
WO2020026147A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigen purification method
MX2021001479A (es) 2018-08-07 2021-04-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novedosos procesos y vacunas.
CN112912097A (zh) 2018-08-23 2021-06-04 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 免疫原性蛋白和组合物
US11260119B2 (en) 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
WO2020115171A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic compositions
JP2022512345A (ja) 2018-12-12 2022-02-03 ファイザー・インク 免疫原性多重ヘテロ抗原多糖-タンパク質コンジュゲートおよびその使用
EP3897846A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 GlaxoSmithKline Biologicals SA Methods of inducing an immune response
JP7239509B6 (ja) 2019-02-22 2023-03-28 ファイザー・インク 細菌多糖類を精製するための方法
CN113573730A (zh) 2019-03-05 2021-10-29 葛兰素史密斯克莱生物公司 乙型肝炎免疫方案和组合物
US20220184199A1 (en) 2019-04-10 2022-06-16 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
US20220221455A1 (en) 2019-04-18 2022-07-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigen binding proteins and assays
EP3770269A1 (en) 2019-07-23 2021-01-27 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Quantification of bioconjugate glycosylation
EP4004018A1 (en) 2019-07-24 2022-06-01 GlaxoSmithKline Biologicals SA Modified human cytomegalovirus proteins
WO2021023691A1 (en) 2019-08-05 2021-02-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic composition
CA3148928A1 (en) 2019-08-05 2021-02-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Process for preparing a composition comprising a protein d polypeptide
EP3777884A1 (en) 2019-08-15 2021-02-17 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunogenic composition
EP4028051A1 (en) 2019-09-09 2022-07-20 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunotherapeutic compositions
IL292494A (en) 2019-11-01 2022-06-01 Pfizer Preparations of Escherichia coli and their methods
US20230045642A1 (en) 2019-12-19 2023-02-09 Glaxosmithkline Biologicals Sa S. aureus antigens and compositions thereof
NL2027383B1 (en) 2020-01-24 2022-04-06 Aim Immunotech Inc Methods, compositions, and vaccines for treating a virus infection
WO2021160887A1 (en) 2020-02-14 2021-08-19 Immunor As Corona virus vaccine
WO2021165847A1 (en) 2020-02-21 2021-08-26 Pfizer Inc. Purification of saccharides
EP4107170A2 (en) 2020-02-23 2022-12-28 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
EP4146378A1 (en) 2020-05-05 2023-03-15 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Microfluidic mixing device and methods of use
US20230293659A1 (en) 2020-08-03 2023-09-21 Glaxosmithkline Biologicals Sa Truncated fusobacterium nucleatum fusobacterium adhesin a (fada) protein and immunogenic compositions thereof
IL302362A (en) 2020-10-27 2023-06-01 Pfizer ESCHERICHIA COLI preparations and their methods
CN116744965A (zh) 2020-11-04 2023-09-12 辉瑞大药厂 用于肺炎球菌疫苗的免疫原性组合物
EP4243863A2 (en) 2020-11-10 2023-09-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP4255919A2 (en) 2020-12-02 2023-10-11 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Donor strand complemented fimh
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
WO2022147373A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibody-guided pcsk9-mimicking immunogens lacking 9-residue sequence overlap with human proteins
EP4277654A1 (en) 2021-01-18 2023-11-22 Conserv Bioscience Limited Coronavirus immunogenic compositions, methods and uses thereof
WO2022171681A1 (en) 2021-02-11 2022-08-18 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hpv vaccine manufacture
TW202245836A (zh) 2021-02-19 2022-12-01 美商賽諾菲巴斯德公司 重組b型腦膜炎球菌疫苗
JP2024510717A (ja) 2021-02-22 2024-03-11 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物、使用及び方法
JP2024516400A (ja) 2021-04-30 2024-04-15 カリヴィル イムノセラピューティクス, インコーポレイテッド 修飾されたmhc発現のための腫瘍溶解性ウイルス
JP2024522395A (ja) 2021-05-28 2024-06-19 ファイザー・インク コンジュゲートさせた莢膜糖抗原を含む免疫原性組成物およびその使用
US20220387576A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023020992A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023020993A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023020994A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
IL312890A (en) 2021-11-18 2024-07-01 Matrivax Inc Immunogenic fusion protein preparations and methods of using them
AU2023207315A1 (en) 2022-01-13 2024-06-27 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023144665A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Glaxosmithkline Biologicals Sa Modified human cytomegalovirus proteins
WO2023161817A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Pfizer Inc. Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides
WO2023218322A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Pfizer Inc. Process for producing of vaccine formulations with preservatives
GB202215634D0 (en) 2022-10-21 2022-12-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Polypeptide scaffold
WO2024110827A1 (en) 2022-11-21 2024-05-30 Pfizer Inc. Methods for preparing conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
US20240181028A1 (en) 2022-11-22 2024-06-06 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2024116096A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Pfizer Inc. Pneumococcal conjugate vaccine formulations
WO2024133160A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis b compositions
WO2024160901A1 (en) 2023-02-02 2024-08-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic composition
WO2024166008A1 (en) 2023-02-10 2024-08-15 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2024201324A2 (en) 2023-03-30 2024-10-03 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US703355A (en) * 1901-11-05 1902-06-24 Bertt H Brockway Current-motor.
US4196192A (en) * 1977-10-28 1980-04-01 American Cyanamid Company Combined Haemophilus influenzae type b and pertussis vaccine
US4620978A (en) * 1982-04-07 1986-11-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Hepatitis A virus purified and triply cloned
GB8508685D0 (en) * 1985-04-03 1985-05-09 Minor P D Peptides
US4806352A (en) * 1986-04-15 1989-02-21 Ribi Immunochem Research Inc. Immunological lipid emulsion adjuvant
US4877611A (en) * 1986-04-15 1989-10-31 Ribi Immunochem Research Inc. Vaccine containing tumor antigens and adjuvants
US5026557A (en) * 1987-09-09 1991-06-25 The Liposome Company, Inc. Adjuvant composition
JPH085804B2 (ja) * 1988-04-28 1996-01-24 財団法人化学及血清療法研究所 A型及びb型肝炎混合アジュバントワクチン
US4912094B1 (en) * 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
DE3916595A1 (de) * 1989-05-22 1990-11-29 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur nichtradioaktiven messung der nucleinsaeuresynthese in eukaryontischen zellen
DE69031556T2 (de) * 1989-07-25 1998-05-14 Smithkline Beecham Biologicals S.A., Rixensart Antigene sowie Verfahren zu deren Herstellung
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
CH678394A5 (pl) * 1990-08-22 1991-09-13 Cerny Erich H
GB9106048D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
AU654970B2 (en) * 1990-09-28 1994-12-01 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Derivatives of gp160 and vaccines based on gp160 or a derivative thereof, containing an adjuvant
WO1992011291A1 (en) * 1990-12-20 1992-07-09 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Vaccines based on hepatitis b surface antigen
GB9028038D0 (en) * 1990-12-24 1991-02-13 Nycomed Pharma As Test method and reagent kit therefor
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
MY111880A (en) * 1992-03-27 2001-02-28 Smithkline Beecham Biologicals S A Hepatitis vaccines containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a
CA2156525A1 (en) * 1993-02-19 1994-09-01 Susan Dillon Influenza vaccine compositions containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a

Also Published As

Publication number Publication date
NZ263538A (en) 1996-10-28
JP4837906B2 (ja) 2011-12-14
NO953759D0 (no) 1995-09-22
NO20054701D0 (no) 2005-10-12
DE69428136T2 (de) 2002-05-02
DE69405551T3 (de) 2005-10-20
CZ289476B6 (cs) 2002-01-16
JP2005015487A (ja) 2005-01-20
WO1994021292A1 (en) 1994-09-29
EP0812593B1 (en) 2001-08-29
IL109056A (en) 1998-06-15
ES2162139T5 (es) 2008-05-16
AU685443B2 (en) 1998-01-22
AU6426494A (en) 1994-10-11
ATE157882T1 (de) 1997-09-15
HU219056B (hu) 2001-02-28
HK1045935A1 (zh) 2002-12-20
NO20054701L (no) 1995-09-22
HK1023499A1 (en) 2000-09-15
DE69428136D1 (de) 2001-10-04
NO322578B1 (no) 2006-10-30
EP0689454B2 (en) 2005-02-23
FI110844B (fi) 2003-04-15
HK1011930A1 (en) 1999-07-23
PL310598A1 (en) 1995-12-27
ATE204762T1 (de) 2001-09-15
AP9400629A0 (en) 1994-04-30
EP0812593A1 (en) 1997-12-17
DZ1763A1 (fr) 2002-02-17
FI954514A0 (fi) 1995-09-22
SK117395A3 (en) 1996-11-06
DK0689454T3 (da) 1997-12-08
DE69405551D1 (de) 1997-10-16
EP1175912A1 (en) 2002-01-30
PT812593E (pt) 2002-01-30
EP0689454A1 (en) 1996-01-03
IL109056A0 (en) 1994-06-24
SG48309A1 (en) 1998-04-17
EP0689454B1 (en) 1997-09-10
HU9501979D0 (en) 1995-08-28
ES2109685T3 (es) 1998-01-16
DK0812593T3 (da) 2001-11-12
CN1119829A (zh) 1996-04-03
EP0812593B2 (en) 2008-01-02
KR100310510B1 (ko) 2002-07-04
US5776468A (en) 1998-07-07
ES2162139T3 (es) 2001-12-16
NO953759L (no) 1995-09-22
GR3025483T3 (en) 1998-02-27
FI954514A (fi) 1995-09-22
DK0812593T4 (da) 2008-05-13
AP515A (en) 1996-08-09
EP0812593B8 (en) 2010-11-10
CZ246795A3 (en) 1996-03-13
BR9405957A (pt) 1995-12-12
ES2109685T5 (es) 2005-09-01
CN1087176C (zh) 2002-07-10
SA94140762B1 (ar) 2005-05-31
DE69428136T3 (de) 2008-07-10
HUT72916A (en) 1996-06-28
MA23143A1 (fr) 1994-10-01
DE69405551T2 (de) 1998-03-26
JP4028593B2 (ja) 2007-12-26
DK0689454T4 (da) 2005-05-30
JPH08508722A (ja) 1996-09-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5776468A (en) Vaccine compositions containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid A
RU2121849C1 (ru) Вакцинная композиция против гепатита, способ профилактики гепатита
AP408A (en) Vaccine composition containing adjuvants.
JP3881015B2 (ja) B型肝炎ワクチン
US6893644B2 (en) Hepatitis vaccines containing 3-O-deacylated monophoshoryl lipid A
AU705739B2 (en) A method of preparing vaccine compositions containing 3-0-deacylated monophosphoryl lipid A
CA2157376C (en) Vaccine compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a
CA2555911C (en) Adjuvant compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a