FI110844B - Menetelmä 3-O-deasyloidun monofosforyylilipidin A valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä 3-O-deasyloidun monofosforyylilipidin A valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI110844B
FI110844B FI954514A FI954514A FI110844B FI 110844 B FI110844 B FI 110844B FI 954514 A FI954514 A FI 954514A FI 954514 A FI954514 A FI 954514A FI 110844 B FI110844 B FI 110844B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
mpl
vaccine
rgd2t
days
hbsag
Prior art date
Application number
FI954514A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI954514A0 (fi
FI954514A (fi
Inventor
Nathalie Marie- Garcon-Johnson
Pierre Hauser
Pierre Voet
Moncef Slaoui
Pierre Desmons
Original Assignee
Smithkline Beecham Biolog
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26302633&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=FI110844(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GB939306029A external-priority patent/GB9306029D0/en
Priority claimed from GB9403417A external-priority patent/GB9403417D0/en
Application filed by Smithkline Beecham Biolog filed Critical Smithkline Beecham Biolog
Publication of FI954514A0 publication Critical patent/FI954514A0/fi
Publication of FI954514A publication Critical patent/FI954514A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI110844B publication Critical patent/FI110844B/fi

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7024Esters of saccharides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18Antivirals for RNA viruses for HIV
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/20Antivirals for DNA viruses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • A61P37/04Immunostimulants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505Inorganic adjuvants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511Organic adjuvants
    • A61K2039/55555Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511Organic adjuvants
    • A61K2039/55566Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511Organic adjuvants
    • A61K2039/55572Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

110844
Menetelmä 3-O-deasyloidun roonofosforyylilipidin A valmistamiseksi - Förfarande för framställning av 3-O-deacylerad monofosfo-ryllipid A
5 Tämä keksintö liittyy menetelmään 3-O-deasyloidun monofosforyy-lilipidin A, jonka hiukkaskoko on alle 120 nm, valmistamiseksi. Voidaan muodostaa rokotekoostumus, jossa on antigeeni liitettynä tähän 3-0-deasyloituun monofosforyylilipidiin A sekä sopivaa 10 kantaja-ainetta.
3-O-deasyloitua monofosforyylilipidiä A (tai 3-de-O-asyloitua monofosforyylilipidiä A) on aiemmin nimitetty 3D-MPL:ksi tai d3-MPLrksi indikoimaan, että pelkistyvän pään glukosamiinin asema 3 15 on de-O-asyloitu. Valmistuksen puolesta katso GB-A-2220211. Kemiallisesti se on seos 3-deasyloitua monofosforyylilipidi A:ta ja 4,5,6-asyloituja ketjuja. Tässä termi 3D-MPL (tai d3-MPL) on lyhennetty MPL:ksi, koska 'MPL' on Ribi-yhtiön rekisteröity tavaramerkki (Ribi Immunochem, Montana), jota Ribi käyttää yksise-20 litteisesti 3-O-deasyloidusta monofosforyylilipidi A -tuottees-taan.
GB-A-2220211 mainitsee, että aiemmin käytettyjen enterobakteeri-: aalisten lipopolysakkaridien (LPS) endotoksisuus vähenee immuno- ,· · 25 geenisten ominaisuuksien pysyessä ennallaan. GB-A-2220211 mai nitsee näistä havainnoista kuitenkin vain bakteriaalisten (gram-negatiivisten) systeemien yhteydessä. MPL:n hiukkaskoosta ei ole mainintaa. Tunnetun 3-O-deasyloidun monofosforyylilipidin A hiukkaskoko on yli 500 nm.
30 :it WO-92/16231 on esittänyt rokotekoostumuksen, joka sisältää Her- .·· pes simplex -virusglykoproteiinia gD tai sen immunologisia frag- mentteja liitettynä 3-deasyloituun monof osf oryylilipidiin A.
. . Taaskaan 3-deasyloidun monofosforyylilipidin A koosta ei ole mi- 3 5 tään mainintaa.
2 110844 WO-92/06113 on esittänyt rokotekoostumuksen, jossa on HIV-gpl60:tä tai sen johdannaista kuten gpl20:tä liitettynä 3-deasy-loituun monofosforyylilipidiin A. MPL:n koosta ei ole mainintaa.
5 Tämän keksinnön kohteena on menetelmä 3-O-deasyloidun monofosfo-ryylilipidin A, jonka hiukkaskoko on alle 120 nm, valmistamiseksi, jossa menetelmässä 3-O-deasyloitu monofosforyylilipidi A (tässä lyhennetty MPL:ksi) suspensoidaan veteen ja saatu suspensio altistetaan sonikaatiolle.
10
Keksinnön mukaisesti voidaan valmistaa rokotekoostumus sekoittamalla antigeeni kantajan ja keksinnön mukaisesti valmistetun MPL:n kanssa, MPL:n hiukkaskoon ollessa alle 120 nm, normaalisti 60-120 nm, edullisesti noin 100 nm tai sitä pienempi.
15 Tällainen rokotekoostumus sopii erittäin moniin monovalentteihin tai polyvalentteihin rokotteisiin.
Yllättäen on havaittu, että tällaisella rokotekoostumuksella on 20 erityisen edullisia tässä kuvattuja ominaisuuksia. Erityisesti nämä koostumukset ovat huomattavan immunogeenisiä. Lisäksi saa-··' · daan taattua adjuvanttiformuloinnin steriliteetti, sillä tuote .sopii steriilisuodatukseen. Lisäetu 'pienestä' MPL:stä on, että :.· | aluminiumhydroksidin kanssa formuloituna MPL vaikuttaa alumini- : : 2 5 umhydroksidin ja antigeenin kanssa muodostaen yhden kokonaisuu den.
Keksinnön eräässä toteutusmuodossa antigeeni on virusantigeeni, . esimerkiksi hepatiitti-infektiota (hepatiitti A, B, C, D tai E) 30 tai herpes- (HSV-1 tai HSV-2) infektiota vastaan suunnattu anti-*; . geeni kuten jäljempänä kuvataan. Katsauksen nykyajan hepa- tiittirokotteista useiden avainviitteiden kera antaa Lancet (12.5.1990, alk. sivu 1142; prof. A.L.W.F. Eddleston) . Katso myös 'Viral Hepatitis and Liver Disease' (Vyas BN, Dienstag JL 35 and Hoofnagle JH, eds. Grune and Stratton, Inc, 1984) ja 'Viral Hepatitis and Liver Disease' (Proceedings of the 1990 Interna- 3 110844 tional Symposium, toim. FB Hollinger, SM Lemon and H Margolis, julkaissut Williams and Wilkins). Viitteitä HSV-l:stä ja HSV-2:sta antaa WO-92/16231.
5 Hepatiitti A-viruksen aiheuttama infektio (HAV) on laajalle levinnyt ongelma, mutta massaimmunisointiin käytettäväksi sopivia rokotteita on saatavilla, esimerkiksi tuote 'Havrix' (SmithKline Beecham Biologicals), joka on tapettua heikennettyä rokotetta, joka on saatu HAV-kannasta HM-175 (katso 'Inactivated Candidate 10 Vaccines for Hepatitis A, FE Andre, A Hepburn and ED Hondt, Prog Med Virol Vol 37:72-95, 1990) sekä 'Havrix'-tuotteen monografia (julkaisija SmithKline Beecham Biologicals, 1991).
Flehmig et ai (loc cit, sivut 56-71) ovat käsitelleet hepatiitti 15 A:n kliinisiä aspekteja, virologiaa, immunologiaa ja epidemiologiaa ja tuoneet esiin lähestymistapoja kehittää rokotteita tätä tavallista virusinfektiota vastaan.
Tässä ilmaisu 'HAV-antigeeni' tarkoittaa mitä tahansa antigee-—_ 20 niä, joka pystyy stimuloimaan HAV:tä neutraloivaa vasta-ainetta ihmisissä. HAV-antigeeni voi sisältää eläviä heikennettyjä vi-h: . ruspartikkeleita tai inaktivoituja heikennettyjä viruspartikke- leita tai se voi olla esimerkiksi HAV-kapsidi tai HAV-virus-j.| | proteiini, joka voidaan helposti saada yhdistelmä-DNA-teknii- : : 25 koin.
Hepatiitti B -virusinfektio (HBV) on laajalle levinnyt ongelma, mutta massaimmunisointiin käytettäväksi sopivia rokotteita on · saatavilla, esimerkiksi tuote ’Engerix-B’ (SmithKline Beecham 3 0 plc) , jota saadaan geenimanipulointitekniikoin.
Hepatiitti B -pinta-antigeenin (HBsAg) valmistus on hyvin doku-·;··.’ mentoitu. Katso esimerkiksi Harforf et ai, Develop Biol Standard 54:125, 1983, Gregg et ai, Biotechnology 5:479, 1987, EP-A-35 0226846, EP-A-0299108 sekä niissä mainitut viitteet.
4 110844 Tässä ilmaisu 'hepatiitti B -pinta-antigeeni' tai 'HBsAg' tarkoittaa mitä tahansa antigeeniä tai sen fragmenttia, joka pystyy osoittamaan HBV-pinta-antigeenin antigeenisyyttä. On selvää, että HBsAg:n S-antigeenin 226 aminohapon sekvenssin lisäksi (katso 5 Tiollais et ai, Nature 317:489, 1985 ja sen viitteet) tässä kuvattu HBsAg voi haluttaessa sisältää kokonaan tai osin pre-S-sekvenssin, kuten on kuvattu edellä mainituissa viitteissä ja EP-A-0278940:ssä. Erityisesti HBsAg voi sisältää polypeptidin, joka käsittää aminohapposekvenssin, jossa on tähteet 12-52, sen 10 jälkeen tähteet 133-145 ja sen jälkeen tähteet 175-400 HBsAg:n L-proteiinista liittyen avoimeen lukukehykseen hepatiitti B -viruksessa serotyyppiä ad (tämän polypeptidin nimitys on L*, katso EP-0414374). HBsAg voi tämän keksinnön puitteissa sisältää myös pre-Sl- tai pre-S-2-polypeptidejä, joita on kuvannut EP-15 0198474 (Endotronics) tai niiden analogeja, esimerkiksi sellai sia, joita kuvaa EP-0304578 (Mc Cormick and Jones). Tässä kuvauksessa HBsAg voi tarkoittaa myös mutantteja, esimerkiksi 'karannutta mutanttia', jota ovat kuvanneet WO-91/14703 tai EP-Al-0511855, erityisesti HBsAg, jossa aminohapposubstituutio asemas-20 sa 145 on glysiinistä arginiiniin.
:·’· · Normaalisti HBsAg on partikkelimuodossa. Hiukkaset voivat sisäl- tää esimerkiksi pelkkää S-proteiinia, tai ne voivat käsittää yh-·.: ’ distelmäpartikkeleita, esimerkiksi (L*,S), jossa L* on sama kuin 25 edellä määritettiin ja S on HBsAg:n S-proteiini. Edullisesti partikkeli saisi olla muodossa, jossa se ekspressoituu hiivassa.
Herpes simplex -viruksen glykoproteiini D sijaitsee virusvaipas-,·. sa, lisäksi sitä on löydetty infektoituneiden solujen sytoplas- 30 masta (Eisenberg RJ et ai, J of Virol 35:428-435, 1980). Se kä-'! . sittää 393 aminohappoa signaalipeptidi mukaanlukien, ja sen mo- lekyylipaino on noin 60 kD. Kaikista HSV-vaippaglykoproteiineis-ta se on todennäköisesti parhaiten karakterisoitu (Cohen et ai, ·· J Virology 60:157-166). In vivo sillä tiedetään olevaan erittäin 35 tärkeä osuus viruksen kiinnittymisessä solumembraaneihin. Lisäksi glykoproteiinin C on osoitettu pystyvän saamaaan esiin neut- 5 110844 raloivia vasta-aineita in vivo (Eing et ai, J Med Virology 127:59-65). Latentti HSV2-virus voi kuitenkin reaktivoitua ja aiheuttaa taudin uusiutumisen huolimatta korkeasta neutraloivan vasta-aineen tiitteristä potilaan seerumissa. Tämän vuoksi on 5 ilmeistä, että pelkkä neutraloivan vasta-aineen indusointi ei riitä taudin säätelyyn.
Tämän keksinnön mukaisesti aikaansaaduissa rokoteformuloinneissa on edullista käyttää kypsää rekombinanttia katkaistua glykopro-10 teiinia D (rgD2t) tai vastaavia proteiineja, jotka on eritetty nisäkässoluista. Esimerkiksi HSV-l:n glykoproteiini gD on eräs tällainen sopiva proteiini.
Eräässä edullisessa toteutusmuodossa rgD2t on 308 aminohapon 15 HSV-2-glykoproteiini D, joka käsittää luonnossa esiintyvän gly-koproteiinin aminohapot 1 - 306 katkaistun proteiinin C-termi-naalin asparagiinin ja glutamiinin lisäksi. Tämä proteiinin muoto sisältää signaalipeptidin, joka pilkkoutuu, jolloin saadaan kypsä 283 aminohapon proteiini. Tällaisen proteiinin tuottamista 20 kiinanhamsterin munasoluissa ovat kuvanneet EP-B-139417, Science 222:524, ja Biotechnology, sivu 527, kesäkuu 1984. Kun tällainen rokote formuloidaan tämän keksinnön mukaisesti pienen MPL:n kanssa, sen terapeuttinen vaikutus on suurempi verrattuna tun-·,· . nettuihin rgD2t-formulointeihin.
:Y 25
Vaikka joillain kokeilluilla ja kaupallisesti saatavilla olevilla rokotteilla päästään erinomaisiin tuloksiin, on tunnustettu tosiasia, että optimaalisen rokotteen tulee sekä stimuloida ,·, neutraloivaa vasta-ainetta että stimuloida mahdollisimman tehok- I · 30 kaasti T-soluvälitteistä soluimmuniteettia.
Eräs erityinen etu on, että keksinnön mukaisesti aikaansaadut ’rokoteformuloinnit ovat erittäin tehokkaita suojaavan immunitee-,···' tin indusoij ia, myös hyvin pieninä antigeeniannoksina.
35 6 110844
Niillä saadaan erinomainen suoja primaarista ja uusintainfektiota vastaa, ja ne stimuloivat edullisesti sekä spesifistä humo-raali- (neutraloivat vasta-aineet) että efektorisoluvälitteistä (DTH) immuunivastetta.
5
Valmistettaessa hiukkaskooltaan pientä 3-O-deasyloitua monofos-foryylilipidiä A, alle 120 nm, voidaan käyttää GB-2220211:n kuvaamaa menetelmää tunnetun 3D-MPL:n valmistamiseksi (tai hiukkaskooltaan suurempaa kaupallista MPL:ää voidaan hankkia Ribi 10 Immunochem. yhtiöltä), ja tuotetta sonikoidaan kunnes suspensio on kirkas. Hiukkaskokoa voidaan arvioida jäljempänä kuvattua dynaamista valosirontaa käyttäen. Jotta MPL:n koko pysyisi 100 nm:n alueella aluminiumhydroksidin kanssa formuloinnin jälkeen voidaan lisätä antigeeniä ja puskuriainetta, Tween 80:tä tai 15 sorbitolia. Näissä olosuhteissa vakiintuneen uskomuksen mukaan MPL ei aggregoidu fosfaattipuskurin läsnäollessa kuten saattaa tapahtua formuloinneissa ilman niitä. Näin menetellen lopullinen formulointi on edelleen määritetty ja karakterisoitu. On myös vakiintunut ajatus, että näissä olosuhteissa MPL vielä vaikuttaa 20 yhdessä aluminiumhydroksidin ja antigeenin kanssa muodostaen yhden kokonaisuuden.
. · Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä aikaansaadaan kirkas : MPL-liuos. Tämä liuos voidaan steriloida suodattamalla.
:V 25
Edullisesti hiukkaskoko saisi olla 60-120 nm.
Vielä edullisemmin hiukkaskoko saisi olla alle 100 nm.
i > I t ... 30 Edellä määritettyä MPL:ää ei normaalisti ole läsnä kuin 10- ’! . 200 μg, edullisesti 25-50 μg/annos/ jolloin antigeeniä on tyy- ·’,,, pillisesti läsnä 2-50 μg annoksessa tai enemmän. Tämän keksinnön mukaisesti aikaansaatu rokoteformulointi voi lisäksi sisältää ,···* immunostimulantteja, eräässä suositeltavassa toteutusmuodossa 35 rokotteet voivat sisältää QS21:ää (joskus siitä käytetään nimitystä QA21). Tämä on HPLC-fraktio saponiiniuutteesta, joka on 7 110844 johdettu puun kuoresta (Quillaja saponaria molina), ja menetelmä sen valmistamiseksi on esitetty US-patentissa 5057540.
Kantaja-aine voi valinnaisesti olla öljy vesiemulsiossa, lipidi-5 vehikkeli tai aluminiumhydroksidi (aluminiumhydroksidisuola).
Myrkytön öljy vesiemulsiossa saisi edullisesti sisältää myrkytöntä öljyä, esimerkiksi Squalenea, ja emulgointiainetta kuten Tween 80, vesiperustaisessa kantaja-aineessa. Vesiperustainen 10 kantaja voi olla esimerkiksi fosfaattipuskuroitu suolaliuos.
Edullisesti rokoteformuloinnit saisivat sisältää antigeeniä tai antigeenikoostumusta, joka pystyy aikaansaamaan immuunivasteen ihmisen tai eläimen patogeeniä vastaan tämän antigeenin tai an-15 tigeenikostumuksen ollessa johdettu HIV-l:stä (esimerkiksi gpl20 tai gpl60, katso WO-92/06113 ja siinä mainitut viitteet), herpesviruksesta kuten gD tai sen johdannaiset tai välittömästä aikaisesta proteiinista kuten ICP27 HSV-l:stä tai HSV-2:sta, gB
. (tai sen johdannaiset) ihmisen sytomegaloviruksesta, gpl, II tai » ‘ 20 III Varicella zoster -viruksesta tai hepatiittiviruksesta kuten hepatiitti B -virus tai muusta viraalisesta patogeenistä, joita • : ovat RS-virus, ihmisen papilloomavirus tai influessavirus, tai . d sellaisia bakteriaalisia patogeenejä vastaan kuin Salmonella, • · :,· ; Neisseria, Borrelia (esimerkiksi OspA, OspB tai niiden johdan- 25 naiset), Chlamydia tai Bordetella, esimerkiksi P.69, PT ja FHA, tai sellaisia parasiitteja vastaan kuin plasmodium tai tokso-plasma. Tämän keksinnön mukaisesti aikaansaadut rokotekoostumuk-set voivat sisältää tuumoriantigeeniä ja ne voivat olla käyttö-,kelpoisia syövän vastaisia rokotteita.
30 . Keksinnön mukaisesti voidaan muodostaa HAV-antigeeni (esimerkik- • t · ·,„ si Havrixissa) seoksena MPL:n ja aluminiumhydroksidin kanssa ku- *:* ten jäljempänä kuvataan.
• » \ % <
< I t I
8 110844
Keksinnön mukaisesti voidaan myös muodostaa HB-viruspinta-anti-geeni (HBsAg (esimerkiksi Engerix-B:ssä) seoksena MPL:n ja alu-miniumhydroksidin kanssa kuten jäljempänä kuvataan.
5 Keksinnön mukaisesti voidaan vielä muodostaa HBsAg-antigeeni (L*,S)-hiukkasina, joita jo kuvattiin edellä, seoksena MPL:n ja aluminiumhydroksidin kanssa.
Tämän keksinnön mukaan voidaan valmistaa myös hepatiitti A plus 10 hepatiitti B -yhdistelmärokotteita.
Voidaan lisäksi muodostaa formulointi, joka käsittää kypsän katkaistun glykoproteiinin D (rgD2t) tai vastaavia proteiineja kuten edellä kuvattiin. Eräs toteutusmuoto puolestaan on formu-15 lointi, joka käsittää OspP-antigeenin tai sen johdannainen Bor-relia burgdorferistä. Antigeeneistä voidaan erityisesti käyttää OSpA-antigeenejä kannoista ZS7 tai B31. Edelleen eräs toteutus-muoto on formulointi, joka käsittää influenssa-antigeenin. Tällä saadaan entistä parempi influenssarokote, erityisesti jos käyte-20 tään 'halkaistua' virusta.
: Formulointi voi sopia myös käytettäväksi herpeettisten kevyiden ·;· partikkeleiden kanssa, joita ovat kuvanneet PCT/GB92/00824 ja : .·. PCT/GB92/ 00179 .
!\\ 25
Edullisesti rokotekoostumus saisi sisältää muitakin antigeenejä, niin että sillä saadaan hoidettua tai ehkäistyä yksi tai useampi muu bakteeri-, virus- tai sieniperäinen infektio.
3 0 Esimerkkinä voidaan mainita, että hepatiittirokoteformuloinnit edullisesti sisältävät vähintään yhden muun komponentin, joka on ei-hepatiittiantigeeni, jonka alalla tiedetään suojaavaan yhdel- ____: tä tai useammalta seuraavista: difteria (kurkkumätä), tetanus • · (jäykkäkouristus), pertussis (hinkuyskä), Haemophilus influenzae ·...· 35 b (Hib) ja polio.
9 110844
Edullisesti rokote sisältää HBsAg:tä kuten edellä määriteltiin.
Erityisiä rokoteyhdistelmiä ovat DTP (difteria, tetanus, pertussis) -hepatiitti B -yhdistelmärokoteformulointi, Hib-hepatiitti B 5 -rokoteformulointi, DTP-Hib-hepatiitti B -rokoteformulointi sekä IPV (inaktivoitu poliorokote)-DTP-Hib-hepatiitti B -rokoteformu-lointi.
Edellä mainituissa yhdistelmissä saisi edullisesti olla kompo-10 nentti, joka suojaa hepatiitti A:ta vastaa, erityisesti tapettua heikennettyä kantaa, joka on johdettu kannasta HM-175, jota on läsnä Havrixissa.
Tällaisissa rokotteissa käytettäväksi sopivia komponentteja on 15 kaupallisesti saatavilla, ja yksityiskohtia voi saada WHO:lta (World Health Organisation). Esimerkiksi IPV-komponentti voi olla inaktivoitu Saikin poliorokote. Hinkuyskärokote voi sisältää kokosolutuotetta tai asellulaarituotetta.
, 20 Edullisesti tämän keksinnön mukaisesti aikaansaatu hepatiitti- tai yhdistelmärokote on pediatrinen rokote.
··· Keksinnön mukaisesti aikaansaatua rokotetta voidaan erityisesti : käyttää hoidettaessa tai ehkäistäessä infektioita kuten virus- .·,· 25 tai bakteeri-infektioita tai syövän immunoterapeuttisessa hoi dossa. Rokotteen eräs suositeltava muoto on terapeuttinen rokote, joka sopii meneillään olevien infektioiden hoitoon, esimerkiksi ihmisille, jotka sairastavat hepatiitti B:tä tai herpesinfektioita .
30 ·.. Rokotevalmisteita kuvataan yleisluontoisesti teoksessa New ... Trends and Developments in Vaccines, Eds. Voller et ai, Univer- sity Park Press, Baltimore, Maryland, USA, 1978. Liposomien kap-. . selointia kuvaa esimerkiksi US-patentti 4235877 (Fullerton) .
35 Proteiinien liittämistä makromolekyyleihin on esitetty esimer-‘:*·· kiksi US-patenteissa 4372945 (Likhite) ja 4474757 (Armor et ai).
10 110844
Rokoteannoksessa käytettävä antigeenimäärä valitaan sellaiseksi, että se saa aikaan iinmunoprotektiivisen vasteen aiheuttamatta merkittäviä sivuvaikutuksia tyypillisille rokotettaville. Täl-5 laiset määrät riippuvat siitä, mitä spesifisiä immunogeenejä käytetään. On tavallista, että annoksissa on aina 1-1000 μg totaalista immunogeeniä, edullisesti 2-100 μg ja edullisimmin 4-40 μg. Optimaalinen partikkelirokotemäärä voidaan varmistaa standarditutkimuksin, joissa havainnoidaan vasta-ainetittereitä 10 ja muita vasteita kohteissa. Alkurokotuksen jälkeen kohteet voivat saada tehosteen noin 4 viikon kuluttua.
Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä ja sen etuja.
15 Esimerkki 1
Hiukkaskooltaan 60-120 nm olevan MPL:n valmistaminen:
Injektointivettä (WFI) injektoitiin lääkepulloihin, jotka sisälsivät lyofilisoitua 3-de-O-asyloitua monofosforyylilipidiä A 20 (MPL) (Ribi Immunochem, Montana) ruiskun avulla pitoisuuteen 1-2 mg/ml. Alkususpensio saatiin sekoittamalla pyörresekoittimessa.
' Pullojen sisältö siirrettiin sitten pyöreäpohjaisiin 25 ml Co- ;· rex-putkiin (10 ml suspensio putkea kohti) ja suspensiota soni- : '. koitiin vesihaudesonikaattorin avulla. Kun suspensio oli kirkas, 2 5 hiukkaskoko arvioitiin dynaamisen valonsironnan avulla (Malvern Zetasizer 3). Käsittelyä jatkettiin kunnes MPL-hiukkasten koko oli 60 - 120 nm.
Suspensioita voidaan joskus säilyttää 4°C:ssa ilman huomattavaa * 30 aggregoitumista enimmillään viiden kuukauden ajan. Isotoninen 110844 N'aC'l (0,15M) tai isotoninen NaCl plus 10 mM fosfaattia aiheuttaa nopeaa aggregoitumista (koko >3-5μΐΐΐ) .
Esimerkki 2 h Hiukkaskooltaan alle 100 nm olevan steriilin liukoisen MPL: n suurimittainen valmistus: I.-yof ilisoitua 3-de-0-asyloitua monofosf oryy.l ilipidiä A saatiin Rifoi Immunochem -yhtiöltä, ja se suspendoitiin injektointive-10 teen (WFI). Suspensiota pumpattiin jatkuvasti ultraäänivir-tauskyvetin läpi. Virtauskyvetti on tyypillisesti valmistettu lasista tai ruostumattomasta teräksestä PTFE-sulkimin GMP-vaatimusten täyttämiseksi. Ultraääni saatiin aikaan käyttämällä ultraäänigeneraattoria ja titaania olevaa äänipäätä, jotka 15 saatiin Lindat im Ultrasonics -yhtiöltä (Louvain-La-Neuve, Belgia). Silmukkaan pantiin lämmönvaihdin, ettei tuote degradoi-tuisi kuumuuden vaikutuksesta. MPL:n lämpötila virtauskyvetin sisäänmenon ja ulostulon välillä pidettiin alueella +4”C - 30 “C, ja sisäänmenon ja ulostulon välisen lämpötilan ero alle 20 20“C:ssa. Lämpöä poistuu myös materiaalin kulkiessa laitteen läpi.
Laite on esitetty kaaviona kuviossa 1.
, 25 2.1. Sonikaatio: i · MPL-jauhetta (50-500 mg) suspendoitiin WFl:hin pitoisuuteen 1-2 • < mg/ml.
\ t ! *« fy · 30 MPL-suspensiota (samalla sekoittaen) pumpattiin jatkuvasti sonikaatiosilmukan läpi (katso kuvio 1) virtausnopeuden ollessa ; 50-100 ml/min, niin että päästiin systeemin tasapainolämpöti- . laan, joka on alueella +4 - +15“c.
; t 35 Systeemin konfiguraatiossa (teho, virtauskyvetti, nesteen virtausnopeus, T") äänipään oma frekvenssikirjo asetetaan s » 1
I k I
12 110844 laitteiston valmistajan ohjeiden mukaisesti. Ennalta määrätyt rajat ovat 19000 hertsiä ja 2Ί 000 hertsiä 20000 hertsin muutti-mella.
5 Generaattorilla saadaan kontrolloitua optimaalinen sonikaa-tioteho (enemmän siirtoenergiaa, vähemmän lämpöä) annetulla aikavälillä.
Lämpötila pidettiin prosessin aikana alle 30'-C:ssa MPL:n degra-10 doitumisen estämiseksi.
Prosessi on suoritettu kun hiukkaskoko on pienentynyt alle 100 nm:iin ja liuos on silmin tarkasteltuna kirkas. Sonikaatio-prosessin aikana otettiin näytteitä hiukkaskoon arvioimiseksi ib fotokorelaatiospektroskopian avulla (dynaaminen valonsironta) käyttämällä Malvern Zetasizer 3:a samaan tapaan kuin esimerkissä 1. Nesteen kokonaisoleiluajän virtauskyvetissä laskettiin olevan 2,5 - 3,5 minuuttia (katso taulukko 1) kun käytettiin 20 ml virtauskyvettiä ja kierrätysvirtausnopeusarvona 50 ml/min.
20 Tällä virtausnopeudella keskimääräinen oleiluaika on 2b sekuntia sykliä kohti, ja tavallisesti alle 10 sykliä riittää aikaansaamaan halutun vaikutuksen hiukkaskooltaan pieneen MPL:ään.
i i f , : 25 2.2 Sterilointiprosessi: Y Saatu "liuotettu" MPL steriloitiin umpipääsuodatuksen avulla Y’ käyttämällä hydroftilistä 0,22 mem:n PVDE-membraania. Havaittu 1 j 1 paine oli tavallisesti alle l baarin (106 dyn.cnY). Vähintään * < V ’ 30 25 mg ’'liuotettua" MPL:ä saadaan helposti käsiteltyä neliösent- timetriä kohden saannon ollessa yli 85 %.
- , I
: 2.3. Varastoitavuus/stabiilisuus: t t Y 35 steriiliä "liuotettua” MPL sää säilytettiin +2 - 8'C:ssa.
!
Stabiilisuustiedoissa (Malvern) ei ollut havaittavissa merkit- j » * t » > f i i t i k .1 3 110844 tävää hiukkaskoon muuttumista 6 kuukauden varastoinnin jälkeen (katso taulukko 2).
Esimerkki 3 b Hepatiitti B -rokoteformulointi; MPL (hiukkaskoko alle 100 nm) saatiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Aluminiumhydroksidi saatiin Superfossilta (Alhydro-gei).
3 tJ
MP.L uudelleensuspendoitiin injektointiveteen pitoisuuden vaihdellessa alueella 0,2 - 1 mg/ml sonikoimalla vesihauteessa kunnes hiukkaskoon havaittiin fotokorrelaatiovalosironnan avulla olevan 80-500 nm.
1 b 1-20 μ HBsAg (S-antigeeni kuten Engerix B:ssä) fosfaattipuskuria (liuos 1 mg/ml) adsorboitiin 30-100 μq:aan aluminiumhydrok-sidia (liuos 10,38 AI*' mg/ml) yhden tunnin ajan huoneen lämpötilassa samalla sekoittaen. Liuokseen lisättiin sitten 30-50 20 μg MPL (liuos 1 mg/ml). Tilavuus ja osmolaarisuus säädettiin arvoon 600 μΐ käyttämällä WF1 ja fosfaattipuskuria 5 x konsentroituna. Liuosta inkuboitiin huoneen lämpötilassa yhden tunnin ajan ja pidettiin 4C:ssa käyttöhetkeen asti. Formulointi
i « I
____; kypsyy varastoinnin aikana. Tästä saatiin 10 injektioannosta 25 hiirikokeita varten. Aluminiumhydroksidi saatiin Superfossilta (Alhydrogel) .
• <
Esimerkki 4 ’·' ' Hepat! itt Ä - rokotef ormulointi: 30 i MPL (hiukkaskoko alle 100 nm) saatiin esimerkissä 1 kuvatulla / : tavalla. Aluminiumhydroksidi saatiin Superfossilta (Alhydro- gel).
14 110844 HAV (360—22 KU annosta kohti) adsorboitiin etukäteen 10-prosentti .in aluminiumhydroksidin lopullisesta pitoisuudesta (0,5 mg/ml). MPL (12,5 - 100 ^ig annosta kohti) lisättiin liuokseen.
b Jäljelle jäänyt aluminiumhydroksidi lisättiin liuokseen ja annettiin olla yhden tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Tilavuudet säädettiin fosfaattipuskurin avulla (fosfaatti 10 mM, NaCl 150 mM), ja lopullista formulointia säilytettiin 4*C:ssa käyttöhetkeen asti.
10
Esimerkki b
Adjuvantin tehokkuuden vertailu rekombinantilla herpex simplex glykoproteiini D alayksikkö -rokotteella;
Ib b.l Tässä kokeessa arvioitiin erilaisten Ai(OH)3-MPL-formulointien kykyä parantaa herpes simplex -virus tyypin 2 katkaistun glykoprotei inin D (HSV2)(rgD2t) suojaavaa immuniteettia profylaktisin ja terapeuttisin marsumallein. immunogeenisyys-kokeita tehtiin myös kädellisillä. Näiden kokeiden tarkoituk-20 sena oli tutkia 3-de-O-asyloidun monofosforyylilipidin A (MLP) hiukkaskoon vaikutusta immunogeenisyyteen sekä rgD2t-Al(OH)3-MPL-formulointien suojatehoa jyrsijöillä ja kädellisillä.
. . Testattiin kolme erilaista AI(OH)3-MPL-formulointia hiukkas- ,,, : kooltaan pienellä MPL:llä: 25 AI (OH) 3-MPL 100 nm (kuvattiin edellä) *··* Ai (OH) 3-MPL ja sorbitoli : AI (OH) 3-MPL ja Tween * t · 30 5.2. Antigeeni/adjuvanttivalmisteet ja immunisointiaikataulut: 5.2.1. Antigeenif ormuloinnit;
Aluminiumhydroksidi (Ai(OH)3) saatiin SuperfOssilta (Alhydro-35 gel, Superfos, Tanska). MPL saatiin Ribi Immunochem Research inc. -yhtiöltä.
110844 .1b 5.2.1.1. rgD2t—Ai(OH)3/MPL TEA: MPL uudelleensuspendoitiin sonikoimalla vesihauteessa hiukkas-kokoon 200-600 nm. Valmiste valmistettiin tavalla, jonka on 5 esittänyt WO-92/16231, ja sitä säilytettiin 4‘C:ssa käyttöhet-keen ast i.
Yhdessä annoksessa oli b μg rgD2t, 0,b mg Ai(OH)3 ja 50 Mg MPL.
10 5» 2.1.2. rgD2t/Al(OH)3/MPL 100 nm: MPL (hiukkaskoko alle 100 nm) saatiin esimerkin 1 kuvaamalla tavalla. rgD2t adsorboitiin aluminiumhydroksidille ja inkuboi-tiin 1 tunti huoneen lämpötilassa. MPLtä lisättiin liuokseen 15 tarvittavaan pitoisuuteen ja inkuboitiin vielä 1 tunnin ajan huoneen lämpötilassa.
Valmiste täydennettiin PBSzllä, niin että lopulliseksi pitoisuudeksi tuli 10 mM: P04, 150 mM NaCl. Lopullista formulointia 20 inkuboitiin vielä 30 minuuttia huoneen lämpötilassa ja säilytettiin 4°C:ssa käyttöhetkeen asti.
Yhdessä annoksessa oli 5 μg rgD2t, 0,5 mg AI(OH)3 ja 50 pq MPL. 25 5.2.1.3. rgD2t/Al(OH)3/MPL 100 nm ja sorbitoli: » MPL valmistettiin esimerkin 1 kuvaamalla tavalla. rgD2t adsor-: boitiin aluminiumhydroksidille ja inkuboitiin i tunti huoneen : lämpötilassa. Sitten lisättiin 50 % sorbitolia lopulliseen 30 pitoisuuteen 5 %. Sen jälkeen lisättiin Tri s I o mM -liuos : lopulliseen haluttuun tilavuuteen ja liuosta inkuboitiin 1 tun- ;T. nin ajan huoneen lämpötilassa samalla sekoittaen.
I < i
Valmistetta säilytettiin 4'C:ssa käyttöhetkeen asti.
35 ;>,· Yhdessä annoksessa oli 5 μg rgD2t, 0,5 mg AI (OH) 3 ja 50 μg MPL.
1 (» 110844 5,2=,1.,4. rgD2t/Ai (OH) 3/MPL 100 nm ja Tween: MPL valmistettiin esimerkin 1 kuvaamalla tavalla. Jotta MPL:n koko olisi pysynyt. 100 nm:ssä liuokseen lisättiin Tween 80:tä 5 niin että pitoisuus lopullisessa formuloinnissa oli 0,01 %. Sitten formulointi, valmistettiin samaan tapaan kuin edellä kohdassa 5.2.1.3.
Yhdessä annoksessa oli 5 μg rgD2t, 0,5 mg AI(OH)3 ja 50 μg MPL.
.10 5.3. Profylaktiset kokeet marsuilla: Näissä kokeissa marsuryhmät rokotettiin päivinä 0 ja 28 käyttämällä 5 μg rgl)2t kahtena eri aluminiumhydroksidi/MPL-formuloin-15 tina. Immunisointiruiskeet annettiin subkutaanisesti 0,5 ml annoksena. Kuukausi toisen rokotuksen jälkeen marsut altistettiin intravaginaalisesti 10ri pfu -yksikölle HSV2 kannalle MS. Niitä tarkkailtiin päivittäin primaarisen ja uusiutuvan HSV2-taudin kehittymistä seuraten (päivät 4-39 altistuksen jälkeen).
20 5.3.1. Terapeuttiset kokeet marsuilla: . , Näissä kokeissa marsut altistettiin päivänä 0 10Ji pfu -yksikölle . HSV2 kantaa MS. Primaarisesta infektiosta toipumisen jälkeen 25 niitä tarkkailtiin päivittäin uus intaherpestauti a seuraten ' · (päivät 13-21). Marsut rokotettiin päivinä 21 ja 42 rgD2t- • ·· AI(OH)3-MPL-rokotteella. Rokotteet annettiin subkutaanisesti : 0,5 ml annoksina. Eläimiä tarkkailtiin päivittäin herpes- V ·’ leesioiden havaitsemiseksi aina päivään ±60 tai ±84.
"i r\ _»v> : 5.3.2. Immunogeenisyyskokeet kädellisillä: , MPL:iin ja sorbitoliin yhdistetyn rgD2t/Al(OH) 3 :n immungeeni- syyttä arvioitiin tantalusmarakateilla. Apinaryhmät rokotet- I ♦ *. ·' 35 tiin päivinä 0 ja 28 käyttämällä 20 μg rgD2t ja 0,5 mg Al(OH)3 yhdistettynä 50, 20 tai 5 μg:aan MPL sorbitolissa. Arvioitiin • · i / 110844 spesifiset humoraaii- (ELISA- ja neutralointititterit) ja efektorisoluvälitteiset (viivästyneen tyypin hypersensitii-isyysvaste: DTH) immuunivasteet, Kaikissa ryhmissä oli b eläintä. Formuloinnit annettiin subkutaanisesti 1 ml annok-b sena. Formuloinnit valmistettiin kuten edellä. Eläimistä otettiin verta + joka toinen viikko vasta-ainemääritystä varten.
DTH-vaste testattiin 14 päivää toisen rokotuksen jälkeen. Alla 10 on kuvaus käytetystä ihotestistä.
5.4. Näyttämät:
Suoritettiin analysointikokeet arvioitaessa rgD2t-Äl(OH)3-MPL-15 formulointien indusoimia spesifisiä vasta-ainevasteita (määritys anti--rgD2t-£LISÄ-titterein ja anti-HSV2-neutralontititte-rein). Näiden gD2-formulointien antaman suojan tehokkuutta tutkittiin profylaktisin ja terapeuttisin marsumallein. im-munogeenisyyskokeita tehtiin myös apinoilla. Arvioitiin spesi-2υ fiset humoraali- ja DTH-vasteet.
5.4.1. ELISA ja neutral.onti.titter.it: , Änti-rgD2t-vasta-ainetitterit ja anti-HSv2-neutraiointiaktiivi- 25 suudet määritettiin menetelmin, jotka on esittänyt WO-92/16231..
5.4.2. Viivästyneen tyypin hyper sensitiivisyys (DTH): ’·’ ’ rgD2t-formuloinneista tutkittiin myös niiden kyky indusoida T- 30 soluspesifinen immuunivaste apinoissa mitattuna viivästyneen ; tyyppin hypersensitiivisyys (DTH) -vasteilla.
Tantalusmarakatit rokotettiin päivinä 0 ja 28 antamalla intra-muskulaarisesti 20 μ^ gD2-rokoteformulointia. Ihostestit 3b tehtiin 14 päivää toisen rokotuksen jälkeen intradermaalisella ;ruiskeena vatsaan ib tai 5 μ rgD2t suolaliuoksessa. Injek- 110844 ίο tiokohta tarkastettiin 24 ja 4B tuntia myöhemmin etsien merkkejä punoituksesta ja kovettumisesta, ja näiden paikallisreaktioiden koko mitattiin.
5 ft . 4.3. Marsun intravaginaalinen altistusmalli: HSV-genitaali-infektion marsumallia ovat. kuvanneet L Stanberry ym (L Stanberry et ai, 3 of Infectious Diseases 146:397-403, 1982; Intervirology 24:226-231, 1985). Lyhyesti kuvaten näissä .10 profylaktisissa kokeissa marsut altistettiin intravaginaalises-ti 10'3 pfu -yksikölle HSV2 kantaa MS yhden kuukauden kuluttua viimeisestä rokotuksesta. Primaarisen taudin kliinistä kulkua seurattiin havainnoimalla päivittäin altistusta seuraavina päivinä 4-12 genitaali-iholeesioiden esiintymistihyttä ja 15 vakavuusastetta tutkien. Sitten eläimistä tutkittiin päivittäin merkkejä uusintaherpesleesioista päivinä 13-39. Terapeuttisissa kokeissa marsut altistettiin päivänä ϋ 10b pfu -yksikölle HSV2 kantaa MS. Primaarisesta infektiosta toipumisen jälkeen niitä tarkkailtiin päivittäin uusiutuvaa herpestautia 20 seuraten (päivät 13-21), ja sitten ne satunnaistettiin primaari- ja uusintapisteiden mukaan (jokaiseen ryhmään tuli vastaava jakauma elämiä, joiden leesiot olivat lievästä vakavaan) joko jäämään hoidotta tai saamaan rokotuksen. Rokotteet ; annettiin päivinä 20 ja 41 altistuksen jälkeen. Uusiutuvan 25 taudin mallia seurattiin tavallisesti päivään ±70 altistuksen jälkeen.
i s.‘ ' Herpesleesiot kvantitoitiin leesiop.isteasteikolla 0 - 32.
30 ; · ’ 35 19 110844
Pisteytyssysteemi
Leesiotyyppi Pisteet
Ei lainkaan 0 9 Vaginaalileesiot: - vuoto 0,5 - punoitusta 1 tai 2 päivää ilman vuotoa 0,5 - punoitusta ja vuotoa päivän ajan 1 - punoitusta ilman vuotoa vähintään 3 päivää 1 10 Ulkoiset herpesrakkulat - < 4 pientä rakkulaa 2 - > 4 pientä rakkulaa tai vain i suuri 4 - < 4 suurta leesiota 8 - yhteensulautuneita suuria leesioita. i 6 15 - yhteensulautuneita suuria leesioita (2 koko genitaalialueella
Kliiniset näyttämät 20
Primaari-infektio: - Leesion. vakavuus aste -- päivittäisten pisteiden sumina infek-, : tion jälkeisiltä päiviltä 4-12. Leesion vakavuusaste on ilmoi- "· tettu aritmeettisena keskiarvona ±SD samoin kuin keskusarvona : 25 (paremmin sopiva ei-parametrisissa testeissä).
: - Primaari-infektion esiintymistiheydet = % eläimiä, joilla on ·;·, ollut maksimileesiopisteet 0, 0,5, 1, 2, 4, 8 tai 16 (harvoin I ► » 32).
, , 30
Primaari-infektioindeksi - Li (maks. piste i)x(tiheys%) ja i = 0, 0,5, 2, 4, 8 tai 16.
ί t 3 5 » i 2 ϋ 110844 lJusint atauti : - IJusintapäiväluku uusintapäivien lukumäärä infektioita seuraavina päivinä 13-39. Yhtä uusiutumista edeltää leesioton päivä ja sille on tunnusomaista vähintään kahtena päivänä 5 esiintyvä punoitus tai yhden päivän esiintyvä (yksi tai useampi) rakkula. Uusintapäivien lukumäärät on ilmoitettu aritmeettisina keskiarvoina. ±SD ja keskusarvona.
- Uusiutumisen vakavuusaste - infektiota seuraavien päivien 13 10 - 39 päivittäisten pisteiden summa. Tulokset on ilmoitettu aritmeettisina keskiarvoina ±SD ja keskusarvoina.
5.5. Tulokset: 15 Eri rgl)2t-Al (OH) 3-MPL-f ormulointien antaman suo jan tehokkuutta verrattiin profylaktisilla ja terapeuttisilla marsukokeilla. Immunogeenisyyskokeita tehtiin myös kädellisillä. Näiden kokeiden tarkoituksena oli tutkia hiukkaskooltaan erilaisiin MPLrhin yhdistettyjen rgD2t-Al(OH)3:n vaikutusta immunogeeni-20 syyteen ja suojaustehokkuuteen.
5.5.1. Profylaktiset kokeet:
Suoritettiin kaksi koetta, joilla arvioitiin eri rgD2t-Al(OH)3-25 MPL-rokotteiden kykyä saada aikaan suoja primaarista ja uusiu-* tuvaa HSV2-tautia vastaan kun sitä annettiin marsuille ennen · : intravaginaalista virusinokulointia.
i * i( : Koe 1: Vertailu MPL 100 nm ja sorbitoli versus MPL ja TEA: 30 Ryhmä Hartleynaa iTcaCjiuCi jT3 Li j G. (200-250 g) immunisoitiin päivinä 0 ; ja 28 käyttämällä 5 Mg rgD2t-Al(OH)3 yhdistettynä hiukkaskool- taan pieneen MPL:ään (100 nm; MPL sorbitolissa) tai hiukkaskooltaan suurempaan MPL:ään (MPL TEA:ssa) Verrokkieläimet saivat samaan tapaan ruiskeet, jotka sisälsivät pelkkää adju-
r s I
..· 35 vanttia tai niitä ei käsitelty lainkaan. Eläimistä otettiin ;verta 14 ja 28 päivää toisen rokotteen jälkeen ja suoritettiin
» I
> ( i i » *
I I
21 110844 vasta-ainemääritykset ELISA- ja neutralointikokein. Eläimet altistettiin 29 päivää toisen rokotteen jälkeen intravaginaali-sesti 10s* pfu -yksikölle HSV2 kantaa MS. Altistamisen jälkeen eläimistä tutkittiin päivittäin kliinisiä merkkejä akuutista 5 infektiosta (päivinä 4-12 altistuksen jälkeen) samoin kuin merkkejä uusiutuvasta herpestaudista (päivät 13-39 altistuksen jälkeen).
a) Humoraali-immuniteetin indusointi: 10 Kuten taulukosta 3 ilmenee, suuremmat ELISA- ja neutralointi-titterit saavutettiin kun rgD2t-Al(OH)3-formulointi yhdistettiin hiukkaskooltaan pieneen MPL:ään.
b) Rokotteen vaikutus primaariseen HSV2-infektioon (taulukko IS 3):
Verrattuna verrokkiryhmään, joka infektoitui ja sai akuutin primaari-infektion, molemmilla rokotetuilla ryhmillä oli merkittävästi pienempi leesiovakavuusaste (p<0,00005). Merkittävästi pienempi iholeesiotiheys oli havaittavissa ryhmällä, joka 20 sai rokotteena rgD2t-Al(OH)3-MPL 100 nm (p<0,06).
c) Rokotteen vaikutus uusiutuvaan HSV2-tautiin:
Tulokset on annettu taulukossa 4. Verrokkeihin nähden molemmat rokotteet saivat aikaan muutoksen uusiutuvan herpestaudin 25 kulussa, mitattuna uusiutumisjaksojen lukumäärän vähenemisenä ( ' ' p<0,02 rgD2t~Al(OH)3-MPL 100 nm:lla).
s » t » : d) Johtopäätökset: !<-‘ Molemmilla formuloinneilla saatiin merkittävä suoja primaari- 30 infektiota vastaan ja vähennettyä taudin uusiutumista. Nämä • ; tulokset osoittavat, että pienikokoisia MPL-hiukkasia sisältä- i*: villa rgD2t~Al(OH)3-formuloinneilla on erittäin voimakas profy- taktinen vaikutus.
;· 35 110844
Koe 2: Ai (OH) 3/MPL 1.00 nro:n tehokkuus:
Hartley-marsuja (200-250 g) immunisoitiin päivinä 0 ja 28 käyttämällä 5 μη gD2 formuloituna Ai(OH)3 MPL 100 nm:iin.
5 Rokotteet annettiin subkutaanisesti 0,5 ml annoksina.
Annettiin 50 μg annos MPL:ää AI (OH) 3-MPJL,—formulointiin. Verrok-kieläimet saivat samaan tapaan ruiskeet, jotka sisälsivät pelkkää adjuvanttia tai niitä ei käsitelty lainkaan. Eläimistä otettiin verta 14 ja 28 päivää toisen rokotteen jälkeen ja 10 suoritettiin vsta-ainemääritykset ELISA- ja neutralointikokein. Eläimet altistettiin viimeisen immunisoinnin jälkeen intrava-ginaalisesti 10* pfu -yksikölle HSV2 kantaa MS.
a) Humoraali-immuniteetin indusointi: 15 Kuten taulukosta 3 ilmenee, rokotetulla ryhmällä oli hyvät ELISA- ja neutralointititterit. Verrokkiryhmä ei tuottanut lainkaan havaittavaa vasta-ainevastetta.
h) Rokotteen vaikutus primaariseen HSV2-infektioon (taulukko 20 3) :
Verrattuna verrokkiryhmään, joka infektoitui ja sai akuutin primaari-infektion, rokotetulla ryhmällä oli merkittävästi pienempi leesiovakavuusaste (p<0,00005) ja esiintymistiheys . (p<0,002). Yhdelläkään rokotetulla marsulla ei ollut merkkejä 25 ulkoisista iholeesioista.
* » < · • : c) Rokotteen vaikutus uusiutuvaan HSV2-tautiin (taulukko 4): : Verrokkeihin nähden rgD2t-Al(OH)3-MPL-rokote sai aikaan muutok- '· sen uusintaherpestaudin kulussa, mitattuna merkittävänä uusiu- 30 tumisjaksojen vakavuusasteen vähenemisenä (p<0,00005) sekä : uusiutumisjaksojen esiintymistiheyden vähenemisenä ( p<0,01).
d) Johtopäätökset:
Hiukkaskooltaan pieneen MPL:ään yhdistetty rgD2t-Al(OH)3 on 35 erittäin voimakas suojan antaja primaarista ja uusiutuvaa HSV2-r’*.· infektiota vastaan marsuilla.
‘ ! 23 110844
Edellä esitettyjen kokeiden perusteella voidaan sanoa, että pienikokoisilla MPL-Ä1(OH)3-formuloinnneilla saatiin kahdella eri tavalla indusoitua vähintään yhtä voimakas profylaktinen vaste kuin suurikoisella MPL-Al(OH)3-formuloinnilla. Pieniko-5 koisen MPL: n lisäetuna on, että se on helppo steriloida ennen käyttöä.
5.5.2. Terapeuttiseet kokeet: 10 Näiden kokeiden tarkoituksena oli verrata eri rgD2t-Al(OH)3-MPL-formalointien terapeuttista tehoa uusintaherpestaudissa marsuilla, joilla oli varmasti todettu HSV2-infektio.
Marsuihin inokuloitiin intravaginaalisesti päivänä 0 10& pfu -Ib yksikköä HSV2-kantaa MS. Niistä havainnoitiin akuutin infektion kliinisiä merkkejä päivittäin (päivät 4-12) sekä merkkejä uusintaherpestaudista (päivät 13-20). Eläimet satunnaistettiin primaari- ja uusintapisteiden mukaan eri koeryhmiin, niin että jokaiseen ryhmään tuli vastaava jakauma elämiä, joiden leesiot 20 olivat lievästä vakavaan. Mukaan ei otettu marsuja, joilla ei ilmennyt kliinisiä infektion merkkejä. Rokotteet annettiin subkutaanisesti päivinä 21 ja 42 altistuksen jälkeen.
* t > , rgD2t-Äl(OH)3-MPL-formulointien terapeuttista tehoa tutkittiin 25 kolmella eri kokeella.
1 t I I I
·; Koe 1 : rgD2t/Al (OH) 3 :n tehokkuus yhdistettynä suurikokoisten * » : ' MPL-partikkeleiden kanssa (MPL TEÄ:ssa): t » I I » * 30 Uusintatautia sairastavat marsut satunnaistettiin saamaan joko ; : I 20 rgD2t-Al (OH) 3 yhdistettynä suurikokoisiin MPL-hiukkasiin : ·(MPL TEArssa) tai pelkkää adjuvanttia. Rokotteet annettiin päivinä 21 ja 42 altistuksen jälkeen. Uusintataudin kulkua seurattiin päivään 84 asti.
I » 35 * « t / t > » i t 110844
- I A
Kuten taulukosta J ilmenee, rcji.)2t—AI (OH) 3—MPI.--TEA—formulointi ei tehonnut meneillään olevaa uusiutuvaa tautia vähentävästi.
Koe 2: rgD2t/Al(OH)3-MPL 10U nm:n tehokkuus: b
Kahdelle xnarsuryhmälle joko annettiin rokotteena 20 μg rgD2t-A1(OH)3, joka oli yhdistetty pienikokoisiin MPL-hiukkasiin (MPL 100 nm) tai jätettiin hoitamatta.
10 Rokotteet annettiin päivinä 20 ja 41 altistuksen jälkeen. Uusintataudin kulkua seurattiin päivään 69 asti.
Kuten taulukosta 5 ilmenee, toisin kuin kokeessa 1, jossa käytettiin suurikoista MPLrää, rokotus rgD2t-Äl(OH)3-MPL 100 nm 15 -rokotteella muutti varmasti todetun HSV2-taudin uusiutumista verrokkiryhmään verrattuna vähentäen merkittävästi uusiutumisen vakavuusastetta (-39%, p<0,05) sekä uusiutumispäivien lukumäärää (-28%, p<0,1).
20 Koe 3: AI(OH)3:n komparatiivinen tehokkuus yhdistettynä pienikokoisiin MPL-hiukkasiin: , Tässä kokeessa käytettiin kolmatta strategiaa pienikokoisten . MPL-hiukkasten aikaansaamiseen: lisättiin pinta-aktiivista » 25 ainetta, esimerkiksi Tween 80.
> » » Koeryhmät olivat seuraavanlaiset: i · * i V : Ryhmä 1 (n=15) 20 μg rgD2t/Al(OH)3/MPL 100 nm ja tween 30 Ryhmä 2 (n-15) 20 ^g rgD2t/Al(OH)3/MPL 100 nm ja sorbitoli | Ryhmä 1 (n=16) verrokit i r
Verrokkeja joko ei käsitelty lainkaan tai ne rokotettiin pel- * » 3' * källä AI(OH)3-MPL:llä. Rokotteet annettiin päivinä 21 ja 42 35 altistuksen jälkeen. Uusintataudin kulkua seurattiin päivään t ,! 60 asti.
t i t I l » » I * 2 b 110844
Tulokset on esitetty taulukossa 5. Aivan selvä merkittävä terapeuttinen vaikutus voitiin havaita eläimissä, joihin oli rokotettu näitä kahta rgD2t-Al(OH)3-MPL-formulointia. Molemmat formuloinnit vähensivät merkittävästi uusiutumisen vakavuusas-5 tetta, uusintapäivien lukumäärää sekä uusintajaksojen lukumäärää .
Loppupäätelmät: 10 Erittäin voimakas terapeuttinen vaikutus varmasti todettua HSV2-genitaalitautia vastaan oli havaittavissa rgD2t-Al(OH)3-MPL-formuloinneilla, jotka sisälsivät pienikokoisia MPL-hiuk-kasia (noin 100 nm). Sen sijaan tätä terapeuttista vaikutusta ei ollut havaittavissa kun suurikokoisia MPL-hiukkasia (MPL 15 TEA:ssa) lisättiin rgD2t-Al(OH)3-rokotteeseen.
Loppupäätelmänä voidaan sanoa, että marsuilla saadut tulokset osoittavat erittäin selvästi rgD2t-Al(OH)3-MPL-formulointien omaavan profylaktista tehoa kun ne on yhdistetty pienikoisiin 20 MPL-hiukkasiin. Näiden formulointien terapeuttinen teho on parempi kuin rgD2t-Al(OH)3:11a, joka on yhdistetty suurikokoisten MPL-hiukkasten kanssa.
'' ’ 5.5.3. Kädellisillä suoritetut immunogeenisyyskokeet 25 rgD2t/Al(OH)3:1la, joka on yhdistetty pienikokoisten MPL-hiuk-• ' kasten kanssa: * I I | l: : Pienikokoisten MPL-hiukkasten (MPL 100 nm sorbitoli) kanssa • t · v ·’ yhdistetyn rgD2t-Al (OH)3:n immunogeenisyyttä arvioitiin kädel- 30 lisissä (tantalusmarakateilla). 50, 20 tai 5 μq MPL (100 nm) : yhdistettiin 20 μg rgD2t ja AI (OH) 3 (0,5 mg). Annettiin kaksi ruisketta, kuukausina 0 ja 1. Mitattiin spesifiset humoraali-(ELISA- ja neutralointititterit) ja efektorisoluvälitteiset (DTH) immuunivasteet.
•.. ’ 3 5 26 110844 a) Koemenetelmä:
Kolme viiden marakatin ryhmää rokotettiin päivinä 0 ja 28 käyttämällä 20 μg gD2t/aluminiumhydroksidiformulointia, joka sisälsi 50, 20 tai 5 μq MPL. Immunisointi tehtiin intramusku-5 laarisesti 1 ml annoksin. Eläimistä otettin verta joka toinen viikko vasta-ainetutkimuksia varten ELISA- (anti-gD2-titterit) ja neutralointianalyysikokeita varten. Mitattiin myös, kuinka nämä kolme rokoteformulointia pystyivät indusoimaan T-soluvä-litteistä immuniteettia in vivo, mitattuna spesifisen viiväs-10 tyneen tyyppisen hypersensitiivisyys- (DTH-) vasteen indusoin-nin avulla. Jokaisesta ryhmästä kolmelle apinalle suoritettiin ihotesti 14 päivää toisen rokotteen jälkeen käyttämällä 15 tai 5 μg gD2t annettuna suolaliuoksessa vatsaan. Niille suoritettiin myös ihotestit pelkällä suolaliuoksella. Intradermaalisen 15 inokuloinnin aiheuttamaa punotusta ja kovettumista tarkasteltiin 24 ja 48 tuntia myöhemmin.
b) Tulokset:
Serologiset ja DTH-vasteet on esitetty taulukossa 6. Apinaryh-20 mä, joka sai rokotteena gD2t-Al(OH)3-formulointia, joka sisälsi 50 tai 20 μq MPL:ää tuottivat merkittävästi enemmän neutraloivia vasta-aineita kuin ryhmä, joka sai 5 μ<$ MPL-annoksen (p<0,003 ja p<0,008). Merkittävää eroa ei ollut havaittavissa ELISA- tai neutralointitittereissä 50 tai 20 μq MPL-ryhmissä.
25 MPL-annoksen ja efektorisoluvälitteisen immuunivasteen vaiku-* · tuksen välillä oli havaittavissa vastaavuussuhde. Suurimmalla • J osalla apinoista (3/4), jotka saivat rokotteena 50 tai 20 μg i :· MPL-formulointia oli havaittavissa voimakas DTH-vaste. Sen * * · V · sijaan vain yksi apina 5 μq MPL-ryhmästä kehitti ihotestivas- 30 teen.
c) Loppupäätelmät:
Edellä kuvatut tiedot osoittavat, että adjuvanttivaikutus, joka '·' on AI (OH) 3:11a, joka on yhdistetty pienikokoisiin MPL-hiuk- 35 kasiin, ilmenee myös kädellisillä, eikä rajoitu pienikoisiin eläinlajeihin. Korrelaatio MPL-annoksen ja rgD2t-aluminium- 2 7 110844 hydroksidi-MPL-formuloinnin immunogeenisyyden välillä eli havaittavissa apinoissa 20 ja 50 Mg antaessa parhaat serologiset ja DTH-vasteet.
5 Esimerkki............6
Kliiniset kokeet Lynte- ja hepatiitti B -rokotteilla ja pienellä MPL:liä: 6.1. Lymen tautiin tarkoitettu rokote, joka sisältää fuusio-10 proteiinin NS1(1-81) influenssaviruksesta ja OspA:n, joka on johdettu B. burgdorferistä Z27:
Formulointien valmistustavat: 15 6.1.1. Nöi-OspÄ/aluminiumhydroksidi: NS1-OspA valmistettiin menetelmällä, jonka on esittänyt WO-93/04175, adsorboitiin aluminiumhydroksidille ja inkuboitiin 1 tunti huoneen lämpötilassa. Lopullinen tilavuus säädettiin 20 fosfaattipuskurin avulla (P04 10 mM, NaCl 150 mM). Formulointi säilytettiin 4'C:sa käyttöhetkeen asti.
Yhdessä annoksessa oli 10 Mg NSl-OspA/böQMg aluminiumhydroksi- " . dia.
25 • · 6.1.2. NSl-OspA/aluminiumhydroksidi/MPL: ·,; I NSl-OspA adsorboitiin aluminiumhydroksidille ja inkuboitiin 1 : tunti huoneen lämpötilassa. Edellä kuvattuun tapaan valmistet- 30 tu MPL lisättiin formulointiin ja inkuboitiin 1 tunti huoneen lämpötilassa. Sitten formulointi säädettiin lopulliseen tila- I I I » vuuteen fosfaattipuskurin avulla (10 mM P04 , 150 mM NaCl).
; Formulointi säilytettiin 4“C:ssa käyttöhetkeen asti.
!...· 35 yhdessä annoksessa oli 10 μq OspA/bϋ0μq Al(OH)3/50 MgMPL.
2 8 110844 6.1.3. Immunisointiaikataulu:
Vapaaehtoiset ihmiset saivat ruiskeena kolme kertaa intramusku-laarisesti 1 ml annettua formulointia päivinä o, 31 ja 62.
5 Seerumit otettiin 30 päivän kuluttua, 1, II ja III.
Ne analysoitiin sitten ELISA-analyysillä kohteena kokonais-IgG-anti-OspA ja LA-2 :n kaltainen vasta-ainevaste inhibitiotestissä (LA-s-Mab:n on osoitettu olevan infektioita vastaan suojaava 10 vasta-aine hiirillä).
6.2. HBsAg/MPL-formuloinnit ihmisille: 6.2.1. Formulointien valmistaminen: 15 HBsAg 20 μg/aluminiumhydroksidi 500 μg HBsAg adsorboitiin lopulliseen aluminiumhydroksidin kokonaismäärään ja lopullinen tilavuus säädettiin fosfaattipuskuri-20 suolaliuoksella (P04 10 iriM, NaCl 150 mM) 1 ml annosta kohti. Formulointia säilytettiin 4'C:ssa käyttöhetkeen asti.
6.2.2. HBsAg 20 μg/aluminiumhydroksidi 100 μq 25 HBsAg formuloitiin kuten edellä kuvattiin, mutta adsorboitiin ‘ ·' '· vain 100 μg:aan AI (OH) 3. Lopullinen tilavuus oli 1 ml annosta kohti.
:J : 6.2.3. HBsAg 20 μg/aluminiumhydroksidi 100 μg/MPL 50 μg 30 : HBsAg adsorboitiin 100 μ aluminiumhydroksidia ja inkuboitiin 1 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Sitten lisättiin MPL vaadittuun pitoisuuteen ja inkuboitiin 1 tunti huoneen lämpötilassa.
V ’ Siiten formulointi säädettiin lopuuliseen pitoisuuteen (1 mi 35 annosta kohti) sopivalla puskurilla kuten edellä, ja säilytet-.·. : ti in 4C:ssa käyttöhetkeen asti.
29 110844 6,2.4 , I mu niso i ntlaikataul u:
Vapaaehtoisiin ihmisiin (ryhmässä 20) injektoitiin I.M. 1 ml yhtä annetuista formuloinneista.
5
Seerumit koottiin kuukausina 0, 1 3 ja 6. Niistä analysoitiin neutraloivat vasta-aineet kaupallisesti saatavan Abbotin testin avulla.
10 6.3. Tulokset:
Taulukko 8 näyttää, että MPL käytettynä yhdessä aluminiumhy-droksidin ja NSl-OspA:n kanssa 100 nm hiukkasten muodossa on tehokas korkeampien luonteeltaan inhibitoristen vasta-ainetit-15 terien tuottaja kuin antigeeni aluminiumhydroksidilla, ja että seerumikonversion kinetiikka on nopeampaa.
Tämä varmistaa, että liukoisen antigeenin kuten NSl-OspA:n ollessa kyseessä hiukkaskooltaan pieneksi formuloitu MPL säi-20 lyttää adjuvanttiominaisuutensa, joita se jo osoitti eläimissä muiden liukoisten antigeenien kanssa.
Taulukosta 7 voidaan nähdä, että adjuvanttivaikutus, joka häviää kun hepatiitti B -formuloinneissa läsnä olevan alu-25 miniumhydroksidiformuloinnin määrää vähennetään, voidaan saada : : uudestaan aikaan lisäämällä tässä patenttihakemuksessa kuvatta- vaa MPL:ää. MPL parantaa myös seerumikonversionopeutta.
r t · t a
Esimerkki 7 30 Yhdistelmärokoteformulointi: hepatiitti B + hepatiitti A: HBsAg adsorboitiin 90 prosenttiin lopullisesta aluminiumhydrok-sidimäärästä (0,5 mg/ml) ja inkuboitiin yli yön huoneen lämpö-·,' * tilassa. pH säädettiin arvoon 6,2, ja valmisteen annettiin 3 5 olla 14 päivää huoneen lämpötilassa kypsymistä varten.
110844 O o
Hepatiitti A- antigeeniä, 360-22 EU annosta kohti, inaktivoidun HM-175 -kannan johdannaisen (kuten Havrixissa) muodossa adsorboitiin etukäteen 10 prosenttiin aluminiumhydroksidin lopullisesta pitoisuudesta (0,5 mg/ml). Jäljelle jäävä aluminiumhy-5 droksidi lisättiin sitten liuokseen ja annettiin olla yhden tunnin ajan huoneen lämpötilassa samalla kuin sitä sekoitettiin.
Aluminiumhydroksidille adsorboitu HAV lisättiin sitten HBsAg-10 formulointiin.
MPL (hiukkaskoko alle 100 nm) lisättiin HAV/HBsAg-liuokseen lopulliseen pitoisuuteen 12,5 - 100 μςί per 1 ml annos, tilavuus säädettiin lopulliseen annostilavuuteen, ja formulointia säily- 15 tettiin 4‘"'C:ssa käyttöhetkeen asti.
Esimerkki 8
Lisäantigeenejä sisältävät yhdistelmärokotteet: 20 Yhdistelmärokotteet voidaan valmistaa lisäämällä yhtä tai useampaa haluttua antigeeniä edellä esimerkissä 2 tai 3 tai 4 kuvattuihin formulointeihin.
Esimerkki 9 25 Humoraali-immuniteetin lisääminen ja soluvälitteisen immunitee-: : tin indusointi immunisoimalla hiiriä aluminiumhydroksidin ja .,ϊ MPL:n kanssa formuloidulla HBsAgllä:
* I
9.1. AI(OH)3-MPL:n vaikutus anti-HBs-vasta-aineinduktioon: 30 : Balb/c-hiiriä immunisoitiin subkutaanisesti tai intradermaali- >;·. sesti rekombinantilla HBsAgrllä, joka oli adsorboitu AI(OH)3:lie MPL adjuvanttina. Hiiret immunisoitiin kahdesti .· * HBsAg/Al/MPL-formuloinneilla, ja vasta-ainevaste mitattiin 35 ensimmäisen ja toisen annoksen jälkeen. Kokonais-Ig mitattiin ,·, : ELlSA-analyysillä tai AUSAB-pakkauksen avulla (Abbott Lab, 31 110844 111.), ja erityishuomio kohdistettiin isotyypin IgG2a- vasta--aineiden indusointiin, sillä tämä isotyyppi indusoituu pääasiallisesti q-interieronin erityksen kautta. Tämän isotyypin indusoituminen siis heijastaa epäsuorasti soluvälitteisen 5 immuniteetin aktivoitumista, nimittäin Thl-aktivoitumista.
Suhdetta HBsAg/Äl/MPL tutkittiin samoin kuin MPL-hiukkasten kokoa.
10 9.1.1. Koe 1: MPL (>500 nm) annoksen vaikutus AI (OH) 3: lie adsorboidun rekoxn-binantin HBsAg:n immunogeenisyyteen: 15 Kymmenen öalb/c-naarashiiren ryhmän eläimiin injektoitiin subkutaanisesti 2,5 mcg recHBsAg adsorboituna 50 mg Alin (Ai(OH)3 ma) ja lisääntyviä MPL-määriä (3,1 - 50 mcg) hiukkas-koon ollessa >500 nm. Hiiriin ruiskutettiin kahdesti 100 mcl tilavuus, ruiskeiden välinen aika oli kaksi viiikkoa. Eläimis-20 tä otettiin verta ensimmäisen injektion jälkeen (osittainen otto), ja viikko sen jälkeen kun oli annettu tehoste. Kokonais-anti-HBsIgG ja spesifinen igG2a mitattiin ELlsA-ana-lyysin avulla recHBsAg sieppausantigeeninä. Titterit on ilmoitettu vastaamaan laimennosta, joka vastaa 50 % maksimiarvosta 25 (puolivälilaimennos). Tulokset osoittavat lisääntymistä sekä : : spesifisen IgG:n että igG2a:n kohdalla lisääntyvin MPL-annok- sin, erityisesti annoksilla 12,5 - 50 mcg. Tämä vaikutus on > * - ;; nähtävillä sekä primaari- että sekundaarivasteissa, ja on erityisen selvä IgG2a:n kohdalla (yli 20-kertainen lisääntykö iäinen), mikä osoittaa epäsuorasti, että MPL- immun i s o i n t i in-: dusoi g-interferonin erittymistä.
9.1.2. Koe II: MPL (>500 nm) sisältävän ja sisältämättömän V * adsorboidun recHBsAg:n kliinisten erien vertailu: 35 32 110844
Valmistettiin 3 kliinistä erää AI(Oli)3:een adsorboitunutta recHBsAg:tä. Erä DSAH16 ei sisältänyt MPLrää ja toimi verrokkina. Erät DSAR501 ja 502 valmistettiin samaan tapaan (20 mcg recHBsAg adsorboituna 0,5 mg A1+++ Al(OH)3:na), mutta ne sisäl-5 sivät 50 mcg MPL:ää (>500 nm).
Nämä kolme erää injektoitiin subkutaanisesti 10 hiiren ryhmille (200 mcl sisältäen 2,5 mcg HBsAg, 100 meg A1+++ ja 6,25 mcg MPL), kahdesti 2 viikon välein. Hiiriltä otettiin verta päi-10 vänä 14 ja viikko tehosteen jälkeen. Anti-HBs-vasta-aineet mitattiin apuna Ausab-pakkaus tai sisäinen ELISA Ig:tä tai IgG2a:ta varten. Tulokset on esitetty taulukossa 2. Ne osoittavat, että 2 viikkoa ensimmäisen ruiskeen jälkeen MPLrää sisältävät kaksi erää indusoivat erittäin merkittävän anti-HBs-15 vasteen (12,4 ja 41,9 miU/ml) kun taas erä, joka ei sisällä MPLrää indusoi vai marginaalisen vasteen (0,75 miU/ml). Myös vastaajien lukumäärä on suurempi MPLrää käytettäessä (9/10 ja 9/10 versus 1/10 ilman MLPrää). MPLrn vaikutus vahvistuu tehosteen jälkeen, sillä eristä DSAR5Q1 ja 502 saadut titterit 20 ovat noin 6 kertaa suuremmat kuin ilman MPLrää havaitut.
Tämä osoittaa, että ainakin hiirillä MPL (>500 nm) voi parantaa sekä anti-HBs~vasteen kinetiikkaa että anti-HBs-vasteen tasoa.
25 Nämä tulokset saadaan vahvistettua kun mitataan spesifiset IgG ! : ja IgG2a kun on suoritettu immunisointi erillä DSAH16 (ilman MPLrää) ja DSAR502 (MPLrn kanssa): anti-HBs-IgG-titteri on 5 * - * (primaarivaste) ja 3 (sekundaarivaste) kertaa suurempi kun : läsnä on MPLrää.
30 ; .lgG2a-vasteen kohdalla MPLrn vaikutus on jopa hätkähdyttävämpi, ainakin toisen annoksen jälkeen, indikoiden preferentiaalista lgG2a-induktiota. Tämä heijastuu epäsuorasti soluvälitteisen ’ immuniteetin aktivoitumiseen (gammainterferonin erittyminen) ',,,· 35 MPLrää sisältävän valmisteen vaikutuksesta.
I i I » t I i 3 3 110844 9.1.3. Koe III: Mil, {<100 nm) annoksen vaikutus AI(OH)3;lie adsorboidun rekombinantin HBsAqrn immunogeenisyyteen: 10 hiiren ryhmälle (Balb/c, 7 viikon ikäiset naaraat) injektoi-5 ti in subkutaanisesti 1 mcg HBsAgrtä adsorboituna 50 mcg:aan A1++ + (Al(0H)3:na) sekä lisääntyviä määriä (3,1 - 25 mcg) MPL (<100 nm). Hiiriin ruiskutettiin 200 mcg kahdesti 2 viikon välein. Hiiriltä otettiin verta kaksi viikkoa ensimmäisen ruiskeen ja 1 viikko tehosteen jälkeen. Anti-HBs-vaste arvioi-10 tiin ELISA-menetelmällä (kokonais-Ig, XgG, igG2a) yhdistetyistä seerumeista. Titterit on ilmoitettu laimennosten puolivälilai-mennoksina (laimennoksen käänteisarvo antaa 50% suurimmista arvoista). Tulokset osoittavat, että jo 3,1 mcg MPLrää indusoi voimakkaan vasta-ainevasteen lisääntymisen sekä primaari- että 15 sekundaarivasteissa. Vaste kulminoituu määrän ollessa 6,25 mcg ja vähenee sitten kunnes saavuttaa saman tason kuin ilman MPLrää kun käytetään suuria MPL-annoksia (25 mcg). Vasta-ainevasteen malli on samanlainen sekä IgGrllä, IgG2a:lla ja kokonais-Ig:llä. Tulokset eivät ole samoja kun käytetään 20 suurempikokoista MPLrää (>500 nm), ja ne osoittavat, että pienikokoiset (<100 nm) MPL-hiukkaset ovat tehokkaampia kuin suurikokoiset (>500 nm) MPL-hiukkaset (ainakin humoraali-im™ muniteetin osalta), sillä maksimaaliseen vaikutukseen tarvitaan vähemmän MPLrää. Pienikokoisen MPLrn suurempi aktiivisuus 25 todettiin usella kokeilla.
·’ Kuten suurikokoisen MPLrn (>5ϋϋ nm) kohdalla nähdään MPLrn ; j adjuvanttivaikutus on suurempi IgG2arn kohdalla kuin kokonais- ·': IgGrn tai Igrn. Maksimaalisella teholla sekundaariseen vastee- 30 seen (6,25 mcg MPLrllä) IgG2arn kohdalla on 25-kertainen 3i-: ,·, sääntyminen kokonais-IgGrn ja Igrn arvojen ollessa 7,6 ja 4,3.
9.2. Soluvälitteisen immuniteetin indusointi AI(OH)3 reen adsor-V · boidulla recHBsAgrllä - vaikutus MPLrään: 33 35
I I
3 ·ί 110844
Jos humoraali-immuniteetti riittää suoiaamaan hepatiitti EiItä soluvälitteisen immuniteetin (OTL, Thl) indusointi saattaa olla erityisen tärkeää taudin hoidon kannalta.
b Terapeuttisia rokotteita varten tarvitaan kuitenkin uusia formulointeja, sillä Ai(OH)3 pystyy parantamaan humoraalista immuniteettia muttei soluvälitteistä immuniteettia.
Olemme tutkineet MPL:n kykyä indusoida Thl-soluja, jotka pystyit) vät erittämään lL-2:ta ja g (eli gamma) -interferonia Balb/c-hiirissä, jotka on immunisoitu käyttämällä AI (Oil) 3 :een adsorboitua recHBsAg:tä.
9.2.1. Koe 1 : MPL (>500 nm):n vaikutus Thl-soluindusointiin Ib kun on suoritettu Balb/c-hiirien immunisointi käyttämällä AI(OH)3:een adsorboitua HBsAg:tä: 10 Baib/c-hiiren ryhmä (5 viikon ikäiset naaraat) immunisoitiin injektoimalla käpäliin 30 mcl liuosta, jossa oli 10 mcg HBsAg, 20 Ib mcg AH......H- (Al(QH)3:na) sekä 15 mgc MPL. Verraksi hi iret saivat samanlaiset ruiskeet, joissa oli sama määrä recHBsAg:tä joko sekoitettuna FCA:n kanssa (positiivinen kontrolli) tai adsorboituna AI(OH)3:lie ilman MPL:ää (negatiivinen kontrolli).
25 Kuusi päivää immunisoinnin jälkeen hiiret lopetettiin ja niistä : otettiin polvitaiveimusolmukkeet. Imusolmukesoluja (LNC
,.!: 2,105/ml) viljeltiin eripituiset ajanjaksot (24 tunnista 74 : : tuntiin) RPMI-väliaineessa, johon oli lisätty 1 % negatiivista hiiren seerumia ja joka sisälsi 5 mc g/mi recHBsAg. Viljelyn 30 loputtua mitattiin väliaineeseen erittyneet IL-2-, INF-g- ja ; ll-4-määrät. lL-2:ta arvioitiin sen kyvyn mukaan stimuloida t>;·, (arvioituna 3H-tymi di in i lisäyksen avulla) IL-2-riippuvaisen
i « I
CTL-solulinjän (VDA2-solut) proliferaatiota, ja titteri ilmais-·,· * tiin stimulointi-indeksinä (31== stimuloituihin soluihin lisätty /,/ 35 3H-tymidiinimäärä/stimuloimattomiin soluihin lisätty 3H-tyrnii- , ; diinimäärä. IL-4- ja INF-g-määrät laskettiin kaupallisten
t I
35 110844 ELISA pakkausten avulla (Holland Biotechnology INF~g:llu ja Endogen iL-4:llä), Titterit on ilmoitettu pgrammoina iFN-g/ml.
Tulosten mukaan ei huomattavia IL-2-, 1L-4- tai INF-g-määriä 5 erittynyt LNC:stä hiirillä, jotka oli immunisoitu käyttämällä AI(OH)3:lie adsorboitua HBsAg:tä. Sen sijaan korkeita 1L-2-tasoja (IS = 38, 48 h) ja merkittävä INF-g-määrä erottui LNC-soluista hiirillä, jotka oli immunisoitu AI(OH)34 MPL:iin adsorboidulla HBsAg:llä. Tämä erittyminen on samanlaista (INF-10 g) tai runsaampaa (1L~2) kuin hiirillä, jotka on immunisoitu käyttämällä HBsAg + FCÄ ja erittyminen in vitro tapahtuu aikaisemmin.
IL-4:ää ei ollut havaittavissa kun oli suoritettu immunisointi 15 Ai(OH)3:lie adsorboidulla HBsAg:1la, ei edes MPL:n läsnäollessa.
Tämä eritysprofiili viittaa siihen, että Th l -solut (IL-2, INF-g) on indusoitu immunisaatiolla adsorboidulla HBsAg:llä 20 MPL:n läsnäollessa, muttei ilman MPL:ää. Näissä immunisoin-tiolosuhteissa ei kuitenkaan havaittu Th2:ta (iL~4:ää).
9.2.2. KOE II: MPL (<100 nm) annoksen vaikutus Thl-solujen indusointiin kun on suoritettu Balb/c-hiirien immunisointi 25 Al(OH)3:een adsorboidulla recHBsAg:llä: > · t . jj‘ Viiden Balb/c-hiiren ryhmä immunisoitiin antamalla 2 polkuantu- raan 30 mcl liuosta, jossa oli 15 mc g All++:lle (Al(0H)3:na) adsorboitua recHBsAg:tä ja kasvavia määriä MPL:ää (100 nm, 0-15 t 30 mcg).
Kuusi päivää injektoinnin jälkeen hiiret lopetettiin ja polvi-
' I I
taiveimusolmukkeiden soluja viljeltiin, 2,106 solua/ml HPMl:- v · ssä, johon oli lisätty 1% negatiivista hiiren seerumia eripi- , · « ' : 35 tuisin ajanjaksoin (24 tunnista 96/25) kun läsnä oli 5 mcg/ml t ·" ; recHBsAg:tä.
’ I I
110844 J Lf lL-2:n erittymistä mitattiin VDA2-solujen proliferaution stimu-i o itämisenä, ja lL-2-ρίtoisuus on ilmoitettu stimulaatioindek-sinä (SI). lNF-g:n erittymistä mitattiin kaupallisen pakkauksen avulla, tulokset on ilmoitettu pg/ml. b
Havaittiin, että IL-2:n erittyminen lisääntyy pienemmällä MPL-annoksella (7,5 meg) hätkähdyttävästi, ja että maksimaalinen vaikutus saavutetaan käytettäessä lb meg MPL.
10 IL-2:n erittyminen on yleensä suurempaa 24 tunnin kuluttua kuin 48 tai 72 tunnin kuluttua.
INF-g-erittymistä ei tapahdu kun HBsAg adsorboidaan Al(OH)3:lle ilman MPLrää. Pieni MPL-annos (7,b meg) indusoi iNF-g-eritty-15 mistä, ja taaskin maksimaaliseen vaikutukseen päästään käytettäessä 15 meg MPL. Toisin kuin lL-2:n kohdalla, INF~g:n erittyminen viivästyy viljelyssä, ja lisääntyy ajan myötä 96 tuntiin asti, 20 Kaikki nämä tiedot yhdessä viittaavat siihen, että MPL (alle 100 nm) on voimakas Tili-indusoi ja kun se yhdistetty AI (OH) 3: lie adsorboidun HBsAg:n kanssa.
i
Ai(uh)3:Ile adsorboitua HBsAg:ta ja MPL:ää sisältävän forrau-1 25 loinnin tehoa indusoida sekä humoraali- että soluvälitteistä ; immuniteettia Balb/c-hiirissä on tutkittu. Tulokset osoitta- vat, että MPL selvästi parantaa anti-ΗΒε-vasteen kinetiikkaa, sillä paljon enemmän anti-HBs-vasta-aineita löytyy sekä primaa-ri~ että sekundaari-immunisoinnin jälkeen. Myös anti-KBs:n 30 laatu muuttuu, ja on havaittu preferentiaalista I'gG2a-1 rsdusoi-,·, tumista, mikä heijastaa epäsuorasti INF-g-erittymistä ja näin soluvälitteisen immuniteetin indusoitumista.
j ’> Arvioitaessa suoraan Thi-solujen indusoitumista formuloinneil-_i 3b la, jotka sisältävät HBsAg:tä, AI(OH)3:a ja MPL:ää ilmenee ’ > selvästi, että MPL on indusoi tehokkaasti Thl-soluja, jotka » i }
' i i I
110844 erittävät seka 1L-2:ta että INI’- g:tä. tasan ka Itäinen Itisu ]ointi on siis tärkeä terapeuttisten rokotteiden kehittämisessä.
5 Molemmat tulokset saavutettiin käyttämällä MP:ää, jonka hiuk-kaskoko oli alle 100 nm.
Edellä kuvattujen kokeiden tuloksia kuvaavat taulukot 9-14 alla.
10 13. Loppupäätelmät:
Kaiken kaikkiaan tiedot viittaavat siihen, että MPL on parempi immunostimulantti kädellisissä, ihminen mukaan lukien, kuin 15 suurikokoinen MPL. Kun tämä yhdistyy mahdollisuuteen valmistaa suuria steriilejä eriä, pienikokoista MPL:aa voidaan pitää sopivana immunostimulanttina laajalle kirjolle ihmis- ja eläin-rokotteita .
i i t f 1 > (
• I
Ϊ t ! 1 S i : t t ' i » t 110844 KPL hiukkoset ja suodatustalteenottö erilaisin sonikaatioparametrcin b
Koe n:o Pitoisuus Kokonais- Hiukkas- Saanto (mg/ml) oleiluaika koko ennen suodatuksen virtaus- suodatusta jälkeen (%) kyvet i s s ä (ma) (min) 16 1. 2,5 9 2 104 j.7 1 3 79 78,5 18 1. 3,5 95 8 6,4 10 19 2 2,8 77 NÄ 20 1 2,8 98 Nk 1 · 39 110844
Taulukko 2
Steriilin MPL-liuoksen hiukkaskokostabilointi fotonikorrelaatio-spektroskopialla (Malvern), 1 mg/ml 5 ,^========^=============^============:^======^^
Koe n:o Hiukkaskoko Hiukkaskokostabilointi 4°C:ssa (nm) suodattamisen jälkeen (nm) ____ 8 päivää 1 kk 3 kk 6 kk 9 94 81 74 88 82 t 110844 <λ te O CO o
M LA CO CO LA CO
ΰ * I f- , ( σ> es so Ä * M * |
ST lA O
rH e e lT, o ra o
CO O O O O *T
o I- f- "S
'S' O .H CS O I-H
H
W * ca t r, CO νΛ B es co rs o o o M ΰ 1 1* ti w rtE o » o X o E ^
M W
k S m ^ . <?
CL, M ^ r-i CO O CO O
Ph °
O
g O « ® o o
H O LA -1· rH CO
Hi o 52 £ w *
w S
ΓΛ * Ai »A
Γν M v> la la h4 tn v * *· »n >h
UJ O r-l lA O CO
Eh ω rt! o g 8 ;
Hl M s
Hl O S g - h pj > £ 3
Da 1 g
Ifl S3 o JS -H « ^ I- * <3 a S .£ s s ” ΐ “i r* - S D jj ' « " JJj «< ™ » m o CH p « O O H ^ i 'f S I « M CS * 3 τ'
H > g S
ΓΛ 13 CA ro O SO O ^ es
Iki f- I- lA <?| LA -H
£3 JU H B SO CO V SO V »,
WE M f» LA
CJ M <y * E 53 “ M 2 - H M H, H o £ « E ö 2 e W H h ^ 3 1! rt! pC M > rt! ff, ^ <y. t —j ^ 1 3 H Ph W CO lA O CO O _
tHttÄCO LJ O la rs rs M
E § * _:_I" h v ~ v -s -
O H |— s μ S
.: te te s « >,
Pl fc Soi
.X —- '-H
EC/) £ p ~ W D 2-2 *
; ; h b - £ ; H
* ‘ tr* t-J ,-« w <y <y SS te 3 "ώ '3 w • H H -H s ° ^ O, o rt! e c « 3 ft '* J ^ Ortlo 4)t4· » · M » ω o v w > * Ώ —- B rH «-· Ö» Ai > * * j * rt , . , Ä vi li h5 > & ;;; (¾ b eee S ^ " • P — A A A 4 o hi LLi E ^ p I lii HS K K P K -H f h • *r* h o o ή o Ai v rt
iJ H S ~ - M ~ O -H V
t* S H rS ^ O M ^ >OW
* · P4 UJ n * <t u < U -h -h* * · * S*Mh4 Ilhl4> * * Ä **o 3 rHpp(ycsp> P)4jT? * 4 * · I W K es es > es , ^ ö *** rr\ C-ι S ea ΰ Ω w a t fOE=*0 ocpo-Oö. <yo ... ^CP1*· KhPKP Sh p k r?--ΐ - ΐ .·:·. n ° > s S e
, , , M :ci 4J -H
• 0 H (J S i ... Ai f£ f£ e h p i : Ai i 3 ° ? 3 0 +j PJ S S -5
‘ r-HCNO :i< 3!Γ4Μ<3θ H)HP
.’.; dQS§ 7 V V VV si0- ’. ·: < tr D S S cS £ ,1 s -* , i , . B M Π3 J------ ... ~ - — —^il ...
’! iaolaoiaoiao H H es es CO to 110844 Οι s a ν ______ 3 ns
P
m >1 ° ra lO O O O O CM |> nj
P
m
OJ
^ «J* CO <Λ O O O χ S ~ •id* ,» -.ra rf Z. o- *3· o >
g CO CO CM A> o CM H
ta :r*
B M
H H „
4 Jfl 03 O Q
qm CM CO t?> M CM »N ,y 10 H *5 w ta fi 5 5 « 5 g ->· g g 3
Sm ocor-cooo ca ö w " ^ ^ OT ^ *
Ph p o -— ä 3 o ö, * > * P ra Λ Λ > «< «i Ui * ;* P4 s <o *x> o -a* ^ 1¾ Jrf CM μ 5 w * K ti -r> 13 i4 P * rij ^ P >
Hl H » S 5 |J EH S & £i P £ o
H C P > <?> iH rH CO
3 B 2 S m‘ o,' ,* ” M *5 .*,+,*,+, * > «< χ UJ CO M LO CO χ
3 “S H * * n ° * H
3 ö m μ H
Ξ B S r * 5 il μ a < £3 Ή O - o Λ rt· 33 E « M 5 >n 81 r_j w ιΛ P n- ra “ 3 ' ' O p | χ CO '.P <7> CC ω
M ΙΛ -H
£3 P V r< W g K g £5 ^ w h rt s g EH = g X *3 s o p
W s E
p w 3 >i tfl g * " m s ^ k
Γ k> EH * · ‘ ^ ‘ M
fta 1*5 ta α V u) * <n <* i—<
O»-* MM p ti +1 m +1 +1 r« —I
fc-' to Eh -h m* tn +i LO m ä w • QiPH P W pv.<D'£>.a tr1*^ Prt rtju'.te --n *? 3 ra * ! Pj O « m . «-- t # J3 O tl (Ti :it w m -h 7 .5 |_l _ «U 03 ra ' * r „ M P Ή a · Eh 3 ^ .
SH S a 5 S
. , , M Ö m ö o -h p
,,,: 0 3 £ β » -5 -H
p d 2 2 s ϊ S 5 Ϊ : : D EH - H rH rH v ' * ‘ * S I P !·1 P ^ 5 i * t ry^ f\i Oj Λ cl. ca -ή ra . . HH ™ V 30 s I » <a
! ! O *"> t I I 03 -H }H
. Γ 5n ro CO CO rH V 3 I *TH M a π p m -Ή C rH «
• OHeh O O -H O a: V
i s - - * - g 'J £ , . PjmJo *, *S< C-l P | i fH I t) irS O oj
At» J3 MpPtlOMp>“*·^ ^ ro h | :;: -—03 »- «£,(£«£- %, 'i % , ffi D---- r*H W-r v ,¾
' ^ O X P P
» , , M :ca «
. I · 'w^ ra > -H
’ · O H ID " ί 3 ;,, Ai rt! 3 a 5 μ . . A! l EH -S 3 2 ...· ? p p ί 5 5 -
* rH CNJ < «·ί ca M O O ^ M 3 M
' 1 ’ MMM rH rH ^3 ^
> » 0 O H s H « H « n Ö P n X
:·.: «s tn ^ ^ ^ÄSäÄ-.SiS
’ · Eh M > <— — - * * M h ' ' · · m o m o m o m
M M CM CM fO CO
110844 ... , . -.----.-.n-----, — nr^·,,. ......—.---^ · l| β Ρ <% α> Ρ X β νι Λ 3 •t Μ 3 Ρ
itS V
ΓΗ Γ~* p 71 \ s W -Η Ο Ο --4 β O V V It 4¾ ί> γλ a a at Ρ 3 Ο Ρ Κ ΙΛ - — « 3 * 3 4» Ρ ιΤ| 1Γ| β A · * X > ρ 1' LT> ·& ·*· (Ί Μ β 3 ν> qj II 3 Ui V3
o C 0* > — — PE
E C O -* O P 1-4 Γ, o ~H * W > ·—I <U O o WP v H J3 Λ
< t o -HA
P) · rH V "4 β < X Q o rs , A to se· VI V <* H Ä E +r fH - c -rt
Eg CO +1 Cn rH H t -H > H p ·. fl· 4-1 +1 xl -Γ-. p t
Uj -4 CO s f-- [— «Γ PP
E P * ' 3 P
p ri| (n Cn CO -t Φ --4 i> A X -H t P :.q Ρ Φ a <u a . p s v e o --4 : ί ? ? s § - 0 " S 5 -2 g e 5 > en ico »»i- " M ^ rt U S ~ — "-I co co J ^ r< ei « - rt m o rt x x -J,- « » e e rt mv I I S ^ £ Λ 0 3 Φ H -0. - - J c " £ O w K * 3 m ” V.» i g „ e
E g Ξ : - ' " 3 Λ X
M g * “ ~ 'n S H -
H m « 0 _ 3 .ϊ S P
» ortpc H - Ξ £ m 3 « « « S g t « t co £ : s. s £iSSx Λ et. e. C me - -m S 5 n - a Q VO rt +1 m X X 5 * 5
He-, * a s: m . r- +, * « " * 1 C M P .* O , CO LT, ιΓ ΓΙ k v s!. t 3 w r, S E P co A se tn co * 1-1 "'t· u,
g ^ Ö * -H :t t P
Jj ö .....— S» -t Ρ ·ν
W H A rH -H
(M Qj H £? v a --4 _j rtj ° ο τ» a p rij O — f" SO 4' t « TJ >w « o o i«y<y R P 3 en ' v .—i m m ρ
Wc! » — x f f- n v 3 et MH- I V ~ en a EH 3 J’ h , - , a “ " a x rt s X > P Aft LT| r-4 lT| — O P ft t 3 m 4i EE en v ^ m -H-np» B4‘ s* > V e· t- V I c, X5 W — O V r-4 in — -H ;t -H * 14 A I en M p 71 3 , ^ Ψ Ä AS r-4 M Ί*» W 4* !h >1 rt
Cj rH -rv
- t :t -P
52» * — ρ . > v> U ^ ρ ρ :r« M W O Λ --4 41 ρ β
OH > eo 71 qj M -H
p ' 3 ^ 4; a
1_J < t ~ CO rH rH 3 r-4 M, O
P5 W · r- >· > r- ' s t_? EX ÖO sO O vCCl -H ·π e Ö
SD. EE ω «n rH r4 V> -H tC :t O
> Ö 4-1 O 4-1 +1 4-1 m, S 4) S > rH
fYl rtP r4 v co CO CO » ggO--H-H
JT W —4 SO, , V en 3 -H --4 t S
fS, P r4 V e·. 0 f|H ^ 71 "4 P A
-· ’> [X-l > K -H A r4 r4 X
, M 1 ___v ö 1 j ' ' φ r-4 ή «,> ω
τ Ό r4 β Ό IP
. M * s --4 -H --4 Ä Eo * Qi g aa f a r4 > 2 2 2 g ρ-not t g " M » :t » --4 a I rf o O O "4 rH i rt t
' I K o O O AVrHPO
; fO Hr4 r4 r-4 oenp * ' -H t — » • ’ J J m J en e m m « * ιχΐ n, cv evev ^
: g 5 5 5 5 ” ·® d S
^ ίΖ O V H 4» ; * * I H- K EK SO :t :t Φ ; I ϊ n o o oo ^ rt ^ μ ^ „ 5 „ “ ϊ I < rt < ι«ί p a p a ii ^ E4 & H Ϊ7Ι -H Ö» OI X ^ 04 E 2JX ^ x ^ a -H o λΗ O C- O O Ö Or4p P-C33 f * M o enp en ρ en en o P -HOXPfi • · j p p p 41 :f4 X 3 0 0 *** Uö ^Pd^cnP 4JeopflP-H> A 0 ^ g ‘ · * ' M £ e-n > en > en 4' en ^ X 3 p
*»* Λ WAMÖ WQ4<ÖP
, t I O OO-OOi O tn > ö- o ... .· ie Kh we MURK» S-il^Sa
*----1 .. ------------- -rl > Kr 3 -H
* 4i -rl X X
ΙΟ X :r< t P en * J , r4 A TO t f , ‘ * Π ^ β -n ' t y. 4* a t -e-, » * * pb^ fi P 3 :t
, » U O « Ρ P rH
I » .H -h 3 -h en • « * rt Λ P t -H it »“ m X rH 71 A t ‘ ,-) ,¾ co CO CO eo LA se· v - c 1 ‘ rH rH H r-4 M H ^ m 41 D -P --4 , » » P K n n ti ti n π « β ui v< > rt^ ββββ βββ-Η *x-h ,1 r-H m rH on en en eo * * t :t
, t H II- I — --!] * * * x A
. * i m o in o m o m
H iH CN CN CO CO
110844
TU.U 1 Ut LO O J
gD 21 · A LUMI N i UMli Ϋ UliOKS IDI -Mi 'L· 100 nm (sorbitoli) IMMUNOGEENISVyS KÄDELLISILTÄ SEROLOGISET JA DTH—TULOKSET
ROKOTE APINA M: O VASTA-AIN E VASTE DTH..........VASTE ** (kovettuma) ELISA NEUTHL, g[)2 g 1)2 T ITT ERI TITTER I PBS 5μ g lS|ig 5 20μ gD2t KQ 1.00 1863 0 800 - + +4 i
Aluminium- KQ 1.01 5554 1600 hydroksidi KQ I o 2 14870 800 - n· Mr
öO/xg MPL
KQ 103 5486 1600 - 4 4- IM
KQ 104 16270 ! 600 N!) ND ND
GMT (1)655 1.2 1.3 2 0μ gD2t. KQ 105 16170 800 ..... + 4-4-+ 1.0 Aluminium- KQ 106 43 89 8 00 - - - hydroksidi KQ lu/ 20440 1600 - 4+ lm
20Mg MPL
KQ 108 561.3 800 + 4· 1
KQ 109 6765 1600 M) ND ND
GMT 8876 1066 2ϋμ gD2t KQ 1.1.0 2486 200
Aluminium- KQ 11.1 9918 800 - + 44·+ 15 hydroksidi KQ il2 2526 400
5/ig MPL
. i KQ 1.13 71.37 400
! · KQ 114 8396 400 ND ND ND
;Y; GMT__5181__400__ . * Mitattuna 14 pv post II/GMT-geometrinen keskiarvotitteri ELISA titteri~- keskusarvotitteri 20 NEUTR. titteri^vastaa suurinta seerumipitoisuutta, joka antaa v ; 100 % suojan sytopatogeenistä vaikutusta vastaan i : ** ihotesti päivänä 14 post il . Kesto 24 h lukemat + = Imm ++-l-5ium +++=>5mm 1 * 110844 •rl
M
• © o co m o co o vo m ra -p n ie in m o vo o X -P in tn vo
td -H
β +> _
•H
P
Φ
. +1 O rH CS O rl ID
d -P o r—i r~ H 1r| e -p__ o vo o
Es co o o <n S o st1 ti· rH r»
O
o co r~- VO Tr o o o <$> o o m <n σν vo o
ID OI rH
O
•H
Cl • u o es o I® o o öv o rr co h n
• O t> rH rH rH
: p d ® o . tfl o o o o o o o o o > CNCNCS CN CN CS es es es : 53
Oi jy» tr a s. a.
| 1 o tn o -"'tn ocu ·—· <n
; ; : O rH O rH O S rH
‘ > · · m -rl rH -rl rH -rl > . · v- -r| Dl --- -rl SI ^ -H ia i : : oi p oi ρ oi p ’ I -H P <Ö I -H P te I -H 0 «s
rv g-s <ö ,ϋ g Ό (örMgTS Κι M
·"> · „ p -rl .¾ P P -H Jipp-H X P
',1· 0 -H 01 p p -H 01 rjp-H01 PP
... ΡΡί Ρ Λί Ö Ai Ρ Λ d .¾ Ρ>ί I : Ρΐ rl0tP(DX—'-H0tP<D4;^'---t0tP4)X'~' ... Ρ Ρ g p rt! p ^ fiprijinv^
rH (ö PTJöJQi H p O 01 Qj HpOOlft H
P-η rH >j (Π M H rH PQ HHrH>,CQ H H
·· <ö rt! törpa: cupjas^n: (¾ ft ' {rl II I I -- - := ’, ’: m o in o
I—l rH CS
110844
ItiäX ils^ K ϋ 6
Kliinisten OspA-erien immunogeenisyys ihmisissä 5 Anti-OspA LA-^-inhibitiotestissä (ng vast. LA·-2 /m 1) (GMT)
Rokote Pre Post I 3 0 Post II Post III 3 0 pv 0 pv 28 pv 56 pv 84 10 NSl-OspA 118 23 3 409 768
Aluminium-hydroksidi11a SC (%) 2,6 77,2 86,5 100 N S1 —OspA+MPL 134 269 8b h 24 24 15 Aluminium- hydroks idi 1.1 a se (%)__2p5__88,6__9 7,2__100_ 20 N—80 10/ig/annos
Intramuskulaarisesti - · » 1 f I t 110844 b -
H
M
W * £
D 00 CM
fujPj :<d rH o ^ 00 fO
g g > H (N ^ sj1 H CN
h m „ :d t» C5 <N &i 11 s--
SS
° s ^ O H 0} 1-1 m jj m ra ^ Λ Κ tn :<c «.--ocofo
Cl, „ 2 > fO Π ID H H m 11 ,1j > :2 B rt! | w ta m » b e m--- w rc e o u | B ® -H .
vd S M jJ H
^ rf* rt θ\ co io |J3 5 fO r) OJ 1Λ Oi h μΐ p η:ι! 'tf^con^r·
Pj Q (j,> [-'inCOi-Hr-trH
Sh H -H
O I :<ö S ffl ta ft W « -H-- HO cd > g fi
X Q O
Eh rt! >i4 'S*
B OH
:rtj W M (N VO H ID m crtjpl :<β Οϊ <n eri r- in o m μΐ > l£) H (N fO ^
H *· -H
<n :<c » Ift_ o
I—I
< . ta o ö Ö cd • \ : : tr «n m m • ’ O H N " <Ö
g -K „ CM m O H
• o m ιο h cm m H
* Il O' :cd : : m *· ’ O :cd . -¾ :cd Cp .* Λ g 4 ... 0 Y tn H Λ ffl *. : 2 S a ; , h - J| -x • t . *: en o m
H H
110844
£ΐ i I CO
d es ΙΟ es s > ° Qi “? <0 Λ es--
—.1 ~ O
, in
, ·*4 H
S i-ι r- es TT jj m
H ^ *. W Tn iH
m κι ΰ ® ^ > m m
—. t-ho\oo 5 £m V V
S “ 2 I
s ffl j tn 3 se - Π W ®--- H · Es *
Ti UT rti t/S *
rf! +* h rf -rj tH
hj dgin^eyi >> -P es co <h
rf D *. es iH ω rti a H kD
3 H tH o >n tn cd tn s ö B rs £n B O'— C O H-- < W--B tr»
(4 Es H
tn B
B *4 ·· < ir.
·· > P! b S o ro (-? i ta a ^ ° 2 cm « O toin 20 2 *ί d es es tn ftrs in o o » «. D h D D tl ^ vo vo μ? I ---- p" pi rt! i tn h tn •4· M J U rtj tn
< cm e S K
Es 2 — B I
B__w H ta w !> Es o in > B d rs
B C d O
B :<fi «S VO
'< K i tn 2 C W dl y Γ£| en Q. g 3 B s - B «, W__
w O
“ tn «e in m in ^
E o Ή * " H
H d Ή es es es H
h d ·· j e PI f « E £ tn B es fi r° m ° ^ tn oq -h tn <ö in in K rt! 0 ή - - • d r-t es es ; d ·· tö «n I i -
tn B
rt! O
tn ·— m i B ft, ‘ '· :td tH es :oS es ’ o Mi vo o o 1-1 is voo rH H H li) in 1-1 W H in 3 S § S 3 8 ... Λ! tn tn tn -4 tn tn ; ^ Q Q q t* q o rj rj
1 f—I i—I
. : d d »e «e ; ; es 11====1=====0 h |i- ^ i I t , '; en o m
rH rH
110844 s w w
Eh >i m _ H -. ------- -
ψ :«S
W > CN H CO
w -H (Tl m N σι M
g ;<C η σι h ίο n co
O fö & CN t—I CN tH CN
£ <N-- 2 o § tP :<d 5 H > M -H m vo m co „ :cö m H y? r-i eg nj
^ Pi i-H i-H CN i-H
Cp
% ® :«S
H > CN CN m τι “ -r-ι vo co co cn oo
)ji ® lid rH rH in CP VO CO
-f (¼ cn m co co co vo . £ e,-- Ο ΐ H :« oo O 4J -H in vo m in
Sh CD T« :<Ö in vo co in oo
pj Pj Οι Η (Ί to t H
tn q cn a\
rij Γ'· O i-H O VO
n :<C co (O h h ^ W tj, > VO CN CN CN <3*
hi H -H
i-} I :cö H
·· CQ Pc <N
(Ο -H-- -- <c
EC ö CN 00 VO
O O :<ö o i-l co <P oo -- M > co co in co co
Η Ο -H
: 4! ¢4 :ctf in • Pc Ή tn __J__J__ . 3
Eh
D
¢4 rij ω • 3 o ~ cn in m o • ;_i β — hm·.·.
p< fj Cp o i - m m
: p! Cd O 0 CO VO ϊΗ CN
B I O B
o ^ cH —
O Pj V
i-I S ~ ; ; V-- ; : «s ® d — cn W -H P Cp J5 Ή Τί u . ¢4 ·· -H § . ’ ‘ o O CO O ö —
... rM 53 .— χ) i * iH 1—! tH 1—I 1“I
; % dc M Cp ra • · · 0 4! o 0 4| 0 ·—i i — ra m pj ·. : 2 t* r-ι τ! cq ö <Ö 0J dj cd EC cd ; eh s ______ - _ _ ==l •; m o m r-i i-l II I 110844
X Eh Εη O O tP
rs S H ·3< <3* O
Γ' VV β rv r-4 in ö β Ή
\ :rt -H
S1 Λ Ή P
ft 00 EH H O O · I P
:rt rt
^ VV β P
:ri! I__:<d -H
S P| P β PI H P ,
h >1 P
PJ ^ :S ® H *3* EH En O O Ai Cl H rs g g <3* -ri K V V Ö β I__-H >i υ -h -p
v. Ö P P
pQ Φ i—I -H
j rt ,rt in m m o (DM
rt; -H es oo es es co ·ηφ CD 0 Λ r» n i-ι «n rv P i >1 P VV -H "3* S3 P β--t> t H -P Id H -rl fr rt h
En P Ö4 -o ta Φ '-'Λ in in m o rt ns h > co rs rs es oo P -m rt
O O I <3* ,H r-l r-l rs O P
to P f1* VVV ei i ci CJ P is--Φ >- rt p -H H λ; I «d ta > ti h Λ h g ta Ai rt d in m m n p h td ta n rs rs rs rs O Qs W rs P P P P C)*-l P V V V V 0 | rt! D--g rs 01 σ> id -H i h rt1 O id id ω rt h w
1 Λ o rs <D
p rs - - - o φ rt rt
χ t*» co o ή ή ,¾ -m 4J
eh i—i en
--:rt - -H
ta h -r-ι rt ή (xj X id Ή
En ^ rt -n <d ω rs rt o 03 -h id ft H I 00 --*· OO rt rt {k, id <3< rs rH rH ro rt Ö id h H ·Η Φ Ai m--O -n > M 0) o rs PM -H rt ; cfl rt Ai td > l rt ro r- o rt Φ ·π tn ^ es g' -n , <| CS P O P g pj (d ; rt -H td td CD----ri -n • EC *. id rt
iS J rt "H
^ Z g -h Φ rt D H * + p rt ° H"1 rf! ~ ~ O g ® S3 O O P X g rt n En
!? g BPnrtJO H V
^ p ^ ° Ä 5 n :*· ~ £ S ~ ^ 3 , , g rt rt o rt---ra -h > li ω -rj tn o o -H P P :<d
h o pj P Cl g P
! i m pj -h a; \ p o Λ g .H ® ,,, Aistii o o o P β ; Ai tn \ rs i rs rs _ J® ·’«
rt rt ri! tr» rt ffl P
P *· 01 O Φ X P
1 rt pi ρ g p o rt S S e, rt Φ :«s EH S I - K P Ai •: m o
rH
110844
CM
S Γ' CO CO Γ' H Xj to cy» m o
H tO v Ό H N
E-* σ\ B--
H
O
tn 3 λ σ\ Q H f"- CM Γ' B fi Λ vo oi cm vo
H \ CM V LO rH V
tn r-· B &-- m 'r b >
D I
j B
0 B Γ'- Γ*-· 00
tn H Λ CO O n- VO
00 V CN 00 V
rH ^ DC-- E-l Ö Φ B ö S "ä n- r- m r- K 5L ,d vo vo n- to
“ Jj «a* V V «n V
E S M
H ·Η-- tn m M © (¾ „ 00 o tn γ oo vo to ·*"> i H xi i-i in ro o
g> -M CM CM
<! -H r- tn >__ DC Ö
H H
tn ω D '— co H ni ^ oo ή σι D I oo cm iH in K i-4 ^ H H__ g ‘ , ,-v to r- o
• · · rt *- O l'» rH
d Jj CM CM CM 'i* : o o* ' * o--- , t—f ; v b g S ö m K ö - m o
“ (C o r~- ι-l CO
vJ I
1 ^ 5 Λ : i Ξ hi--- . . a ’.· ‘ S tn — ^ O -rl •: . 1-1 s ö m
• · M Ö -H
0 E-l (ö -H O O O
X ΙΛ | rj CM CM CM
x H tn \ Π < rt! tn , , ·~i i-4 tn o 2 H (Q g . · <d K EC ^ , ; EH M 11 m o
H
FI954514A 1993-03-23 1995-09-22 Menetelmä 3-O-deasyloidun monofosforyylilipidin A valmistamiseksi FI110844B (fi)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9306029 1993-03-23
GB939306029A GB9306029D0 (en) 1993-03-23 1993-03-23 Vaccine compositions
GB9403417A GB9403417D0 (en) 1994-02-23 1994-02-23 Vaccine compositions
GB9403417 1994-02-23
PCT/EP1994/000818 WO1994021292A1 (en) 1993-03-23 1994-03-14 Vaccine compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a
EP9400818 1994-03-14

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI954514A0 FI954514A0 (fi) 1995-09-22
FI954514A FI954514A (fi) 1995-09-22
FI110844B true FI110844B (fi) 2003-04-15

Family

ID=26302633

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI954514A FI110844B (fi) 1993-03-23 1995-09-22 Menetelmä 3-O-deasyloidun monofosforyylilipidin A valmistamiseksi

Country Status (28)

Country Link
US (1) US5776468A (fi)
EP (3) EP1175912A1 (fi)
JP (2) JP4028593B2 (fi)
KR (1) KR100310510B1 (fi)
CN (1) CN1087176C (fi)
AP (1) AP515A (fi)
AT (2) ATE204762T1 (fi)
AU (1) AU685443B2 (fi)
BR (1) BR9405957A (fi)
CZ (1) CZ289476B6 (fi)
DE (2) DE69428136T3 (fi)
DK (2) DK0812593T4 (fi)
DZ (1) DZ1763A1 (fi)
ES (2) ES2162139T5 (fi)
FI (1) FI110844B (fi)
GR (1) GR3025483T3 (fi)
HK (3) HK1011930A1 (fi)
HU (1) HU219056B (fi)
IL (1) IL109056A (fi)
MA (1) MA23143A1 (fi)
NO (2) NO322578B1 (fi)
NZ (1) NZ263538A (fi)
PL (1) PL178578B1 (fi)
PT (1) PT812593E (fi)
SA (1) SA94140762B1 (fi)
SG (1) SG48309A1 (fi)
SK (1) SK117395A3 (fi)
WO (1) WO1994021292A1 (fi)

Families Citing this family (432)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
US6620414B2 (en) * 1992-03-27 2003-09-16 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Hepatitis vaccines containing 3-0-deacylated monophoshoryl lipid A
PT835663E (pt) * 1992-05-23 2010-01-04 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacinas combinadas compreendendo o antigénio de superfície da hepatite b e outros antigénios
ATE196737T1 (de) * 1993-05-25 2000-10-15 American Cyanamid Co Adjuvantien für impfstoffe gegen das respiratorische synzitialvirus
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US6488934B1 (en) 1995-02-25 2002-12-03 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Hepatitis B vaccine
GB9503863D0 (en) * 1995-02-25 1995-04-19 Smithkline Beecham Biolog Vaccine compositions
UA56132C2 (uk) * 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
US6696065B1 (en) * 1995-05-04 2004-02-24 Aventis Pastuer Limited Acellular pertussis vaccines and methods of preparation thereof
DK0909323T3 (da) 1996-01-04 2007-05-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Helicobacter pylori-bakterioferritin
US20060024301A1 (en) * 1997-02-25 2006-02-02 Corixa Corporation Prostate-specific polypeptides and fusion polypeptides thereof
US7517952B1 (en) * 1997-02-25 2009-04-14 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
US20030185830A1 (en) * 1997-02-25 2003-10-02 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
US20060269532A1 (en) * 1997-02-25 2006-11-30 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
TR199902437T2 (xx) * 1997-04-01 2000-01-21 Corixa Corporation Monofosforil lipid A'ya ait sulu im�nolojik adjuvant terkipleri.
US6491919B2 (en) * 1997-04-01 2002-12-10 Corixa Corporation Aqueous immunologic adjuvant compostions of monophosphoryl lipid A
GB9706957D0 (en) * 1997-04-05 1997-05-21 Smithkline Beecham Plc Formulation
US6368604B1 (en) 1997-09-26 2002-04-09 University Of Maryland Biotechnology Institute Non-pyrogenic derivatives of lipid A
GB9724531D0 (en) 1997-11-19 1998-01-21 Smithkline Biolog Novel compounds
US6761888B1 (en) 2000-05-26 2004-07-13 Neuralab Limited Passive immunization treatment of Alzheimer's disease
US6787523B1 (en) 1997-12-02 2004-09-07 Neuralab Limited Prevention and treatment of amyloidogenic disease
US7588766B1 (en) 2000-05-26 2009-09-15 Elan Pharma International Limited Treatment of amyloidogenic disease
TWI239847B (en) 1997-12-02 2005-09-21 Elan Pharm Inc N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease
US6743427B1 (en) 1997-12-02 2004-06-01 Neuralab Limited Prevention and treatment of amyloidogenic disease
US6913745B1 (en) 1997-12-02 2005-07-05 Neuralab Limited Passive immunization of Alzheimer's disease
US6750324B1 (en) 1997-12-02 2004-06-15 Neuralab Limited Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies
US20080050367A1 (en) 1998-04-07 2008-02-28 Guriq Basi Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US6923964B1 (en) 1997-12-02 2005-08-02 Neuralab Limited Active immunization of AScr for prion disorders
US7790856B2 (en) 1998-04-07 2010-09-07 Janssen Alzheimer Immunotherapy Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US7964192B1 (en) * 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US7179892B2 (en) * 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
DE19803453A1 (de) * 1998-01-30 1999-08-12 Boehringer Ingelheim Int Vakzine
GB9808866D0 (en) 1998-04-24 1998-06-24 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
US20030147882A1 (en) * 1998-05-21 2003-08-07 Alan Solomon Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies
CA2332979A1 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Correlative protection using ospa antibody titers
WO2000003744A2 (en) * 1998-07-14 2000-01-27 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid a
US6306404B1 (en) 1998-07-14 2001-10-23 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
US20040213806A1 (en) * 1998-08-28 2004-10-28 Smithkline Beecham Biologicals, S.A. Salmonella typhi vaccine compositions
GB9819898D0 (en) * 1998-09-11 1998-11-04 Smithkline Beecham Plc New vaccine and method of use
US6692752B1 (en) 1999-09-08 2004-02-17 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Methods of treating human females susceptible to HSV infection
GB9820525D0 (en) * 1998-09-21 1998-11-11 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
GB9822714D0 (en) 1998-10-16 1998-12-09 Smithkline Beecham Sa Vaccines
CA2773698C (en) * 1998-10-16 2015-05-19 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvant systems comprising an immunostimulant adsorbed to a metallic salt particle and vaccines thereof
AU1580300A (en) 1998-12-08 2000-06-26 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Novel compounds
EP1163343B1 (en) 1999-03-12 2009-12-09 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Neisseria meningitidis antigenic polypeptides, corresponding polynucleotides and protective antibodies
HU228499B1 (en) 1999-03-19 2013-03-28 Smithkline Beecham Biolog Streptococcus vaccine
GB9909077D0 (en) * 1999-04-20 1999-06-16 Smithkline Beecham Biolog Novel compositions
PT1187629E (pt) 1999-04-19 2005-02-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicao adjuvante que compreende saponina e um oligonucleotido imunoestimulador
US6558670B1 (en) 1999-04-19 2003-05-06 Smithkline Beechman Biologicals S.A. Vaccine adjuvants
WO2000069456A2 (en) * 1999-05-13 2000-11-23 American Cyanamid Company Adjuvant combination formulations
US6787637B1 (en) 1999-05-28 2004-09-07 Neuralab Limited N-Terminal amyloid-β antibodies
UA81216C2 (en) * 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
US6635261B2 (en) 1999-07-13 2003-10-21 Wyeth Holdings Corporation Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
GB9921147D0 (en) * 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9923176D0 (en) 1999-09-30 1999-12-01 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
CA2721011A1 (en) 1999-10-22 2001-05-03 Aventis Pasteur Limited Modified gp100 and uses thereof
EP1104767A1 (en) 1999-11-30 2001-06-06 Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek Mono- and disaccharide derivatives containing both fatty acid ester and sulfate ester groups
GB0000891D0 (en) * 2000-01-14 2000-03-08 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
WO2001085932A2 (en) 2000-05-10 2001-11-15 Aventis Pasteur Limited Immunogenic polypeptides encoded by mage minigenes and uses thereof
US6821519B2 (en) * 2000-06-29 2004-11-23 Corixa Corporation Compositions and methods for the diagnosis and treatment of herpes simplex virus infection
GB0022742D0 (en) 2000-09-15 2000-11-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
AU2002223970A1 (en) * 2000-10-06 2002-04-15 H. Henrich Paradies Kyberdrug as autovaccines with immune-regulating effects
PT2266603E (pt) * 2000-10-18 2012-11-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacinas tumorais
EP1328543B1 (en) 2000-10-27 2009-08-12 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a & b
US7048931B1 (en) * 2000-11-09 2006-05-23 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
HUP0600589A2 (en) * 2000-11-10 2006-11-28 Wyeth Corp Adjuvant combination formulations
US7700751B2 (en) 2000-12-06 2010-04-20 Janssen Alzheimer Immunotherapy Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide
TWI255272B (en) 2000-12-06 2006-05-21 Guriq Basi Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
EP2336368A1 (en) 2000-12-07 2011-06-22 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Endogenous retroviruses up-regulated in prostate cancer
DE60239594D1 (de) 2001-02-23 2011-05-12 Glaxosmithkline Biolog Sa Influenza vakzinzusammensetzungen zur intradermaler verabreichung
US20030031684A1 (en) 2001-03-30 2003-02-13 Corixa Corporation Methods for the production of 3-O-deactivated-4'-monophosphoryl lipid a (3D-MLA)
GB0109297D0 (en) 2001-04-12 2001-05-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
US20100221284A1 (en) 2001-05-30 2010-09-02 Saech-Sisches Serumwerk Dresden Novel vaccine composition
TWI228420B (en) 2001-05-30 2005-03-01 Smithkline Beecham Pharma Gmbh Novel vaccine composition
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
US8481043B2 (en) 2001-06-22 2013-07-09 Cpex Pharmaceuticals, Inc. Nasal immunization
GB0118249D0 (en) 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
US7361352B2 (en) 2001-08-15 2008-04-22 Acambis, Inc. Influenza immunogen and vaccine
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
CA2476626A1 (en) 2002-02-20 2003-08-28 Chiron Corporation Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
US7351413B2 (en) 2002-02-21 2008-04-01 Lorantis, Limited Stabilized HBc chimer particles as immunogens for chronic hepatitis
MY139983A (en) * 2002-03-12 2009-11-30 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
GB0206360D0 (en) 2002-03-18 2002-05-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Viral antigens
US8518694B2 (en) 2002-06-13 2013-08-27 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Nucleic acid vector comprising a promoter and a sequence encoding a polypeptide from the endogenous retrovirus PCAV
CA2501812C (en) 2002-10-11 2012-07-10 Mariagrazia Pizza Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages
PL376792A1 (pl) 2002-10-23 2006-01-09 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Sposoby szczepienia przeciwko malarii
US7858098B2 (en) 2002-12-20 2010-12-28 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine
ES2411080T3 (es) 2003-01-30 2013-07-04 Novartis Ag Vacunas inyectables contra múltiples serogrupos de meningococos
TWI374893B (en) 2003-05-30 2012-10-21 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
ES2596553T3 (es) 2003-06-02 2017-01-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones inmunogénicas a base de micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido
GB0321615D0 (en) 2003-09-15 2003-10-15 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
RU2378010C2 (ru) 2003-10-02 2010-01-10 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс С.Р.Л. Жидкие вакцины для множественных серогрупп менингококков
WO2005032584A2 (en) 2003-10-02 2005-04-14 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Pertussis antigens and use thereof in vaccination
DE202005022108U1 (de) 2004-03-09 2013-11-12 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Influenza-Virus-Impfstoffe
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
BRPI0510315A (pt) 2004-04-30 2007-10-16 Chiron Srl integração de vacinação com conjugado meningocócico
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
WO2006078294A2 (en) 2004-05-21 2006-07-27 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Alphavirus vectors for respiratory pathogen vaccines
DE602005025342D1 (de) 2004-05-28 2011-01-27 Glaxosmithkline Biolog Sa Impfstoffzusammensetzungen mit virosomen und einem saponin-adjuvans
US7758866B2 (en) 2004-06-16 2010-07-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52
US20090317420A1 (en) 2004-07-29 2009-12-24 Chiron Corporation Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae
GB0417494D0 (en) 2004-08-05 2004-09-08 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
EP2305294B1 (en) 2004-09-22 2015-04-01 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic composition for use in vaccination against staphylococcei
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
CA2586690A1 (en) 2004-11-03 2006-06-15 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Influenza vaccination
TW200636066A (en) * 2004-12-15 2006-10-16 Elan Pharm Inc Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
CA2590337C (en) 2004-12-15 2017-07-11 Neuralab Limited Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition
HUE033196T2 (en) 2005-01-27 2017-11-28 Children's Hospital & Res Center At Oakland GNA1870-based vesicle vaccines for broad-spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
NZ560930A (en) * 2005-02-16 2011-06-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Hepatitis B virus vaccine comprising a hepatitis B virus surface antigen, aluminium phosphate, 3-O-deacylated monophosphoryl lipid A and a triethylammonium ion
GB0503337D0 (en) 2005-02-17 2005-03-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Compositions
ES2385045T3 (es) 2005-02-18 2012-07-17 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Inmunógenos de Escherichia coli uropatogénica
HUE027400T2 (en) 2005-02-18 2016-10-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Proteins and nucleic acids from meningitis / sepsis with Escherichia coli
GB0504436D0 (en) 2005-03-03 2005-04-06 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
HUE027837T2 (en) 2005-03-23 2016-11-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adjuvant use of influenza virus and oil-in-water emulsion to induce CD4 T-cell and / or enhanced B-cell cellular response
WO2006113528A2 (en) 2005-04-18 2006-10-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Expressing hepatitis b virus surface antigen for vaccine preparation
ATE543832T1 (de) 2005-04-29 2012-02-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Verfahren zur vorbeugung oder behandlung einer m.-tuberculosis-infektion
GB0513421D0 (en) 2005-06-30 2005-08-03 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccines
WO2007047749A1 (en) 2005-10-18 2007-04-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
NZ567978A (en) 2005-11-04 2011-09-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccine with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant
CA2628152C (en) 2005-11-04 2016-02-02 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
EP1951299B1 (en) 2005-11-04 2012-01-04 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators
CA2628158C (en) * 2005-11-04 2015-12-15 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Emulsions with free aqueous-phase surfactant as adjuvants for split influenza vaccines
AU2006310337B9 (en) 2005-11-04 2013-11-28 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
GB0522765D0 (en) * 2005-11-08 2005-12-14 Chiron Srl Combination vaccine manufacture
EP2360175B1 (en) 2005-11-22 2014-07-16 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Norovirus and Sapovirus virus-like particles (VLPs)
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
TWI457133B (zh) 2005-12-13 2014-10-21 Glaxosmithkline Biolog Sa 新穎組合物
GB0607088D0 (en) 2006-04-07 2006-05-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
LT3017827T (lt) 2005-12-22 2019-01-10 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Pneumokokinė polisacharidinė konjuguota vakcina
ZA200805602B (en) 2006-01-17 2009-12-30 Arne Forsgren A novel surface exposed haemophilus influenzae protein (protein E; pE)
PL1976559T6 (pl) 2006-01-27 2020-08-10 Novartis Influenza Vaccines Marburg Gmbh Szczepionki przeciw grypie zawierające hemaglutyninę i białka macierzy
CA2646891A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Novartis Ag Immunopotentiating compounds
EP2357184B1 (en) 2006-03-23 2015-02-25 Novartis AG Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators
JP2009534303A (ja) 2006-03-24 2009-09-24 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス ゲーエムベーハー アンド カンパニー カーゲー 冷蔵しないインフルエンザワクチンの保存
KR101541383B1 (ko) 2006-03-30 2015-08-03 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 면역원성 조성물
US9839685B2 (en) 2006-04-13 2017-12-12 The Regents Of The University Of Michigan Methods of inducing human immunodeficiency virus-specific immune responses in a host comprising nasally administering compositions comprising a naonemulsion and recombinant GP120 immunogen
US10138279B2 (en) 2006-04-13 2018-11-27 Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for Bacillus anthracis vaccination
US8784810B2 (en) 2006-04-18 2014-07-22 Janssen Alzheimer Immunotherapy Treatment of amyloidogenic diseases
US20110206692A1 (en) 2006-06-09 2011-08-25 Novartis Ag Conformers of bacterial adhesins
SI2422810T1 (sl) 2006-07-17 2015-01-30 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Influenčno cepivo
US9364525B2 (en) 2006-07-18 2016-06-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccines for malaria
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
EP2040744B1 (en) 2006-07-25 2016-03-09 The Secretary of State for Defence Live vaccine strains of francisella
EP2586790A3 (en) 2006-08-16 2013-08-14 Novartis AG Immunogens from uropathogenic Escherichia coli
CA2663196A1 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Novartis Ag Making influenza virus vaccines without using eggs
TR201807756T4 (tr) 2006-09-26 2018-06-21 Infectious Disease Res Inst Sentetik adjuvan içeren aşı bileşimi.
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
SG174845A1 (en) 2006-09-29 2011-10-28 Ligocyte Pharmaceuticals Inc Norovirus vaccine formulations
PT2086582E (pt) 2006-10-12 2013-01-25 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacina compreendendo uma emulsão adjuvante óleo em água
SI2086582T1 (sl) 2006-10-12 2013-02-28 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Cepivo, ki obsega emulzijo olja v vodi kot adjuvans
JP2011506264A (ja) 2006-12-06 2011-03-03 ノバルティス アーゲー インフルエンザウイルスの4つの株に由来する抗原を含むワクチン
MX2009009342A (es) 2007-03-02 2009-09-11 Glaxosmithkline Biolog Sa Metodo novedoso y composiciones.
US8003097B2 (en) 2007-04-18 2011-08-23 Janssen Alzheimer Immunotherapy Treatment of cerebral amyloid angiopathy
TW200908994A (en) 2007-04-20 2009-03-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
KR20100045445A (ko) 2007-06-26 2010-05-03 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 스트렙토코쿠스 뉴모니애 캡슐 다당류 컨쥬게이트를 포함하는 백신
SI2185191T1 (sl) 2007-06-27 2012-12-31 Novartis Ag Cepiva proti influenci z majhnimi dodatki
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
PT2182983E (pt) 2007-07-27 2014-09-01 Janssen Alzheimer Immunotherap Tratamento de doenças amiloidogénicas com anticorpos anti-abeta humanizados
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
HUE025149T2 (hu) * 2007-08-02 2016-01-28 Biondvax Pharmaceuticals Ltd Multimer multiepitóp influenza vakcinák
CA2695421A1 (en) 2007-08-03 2009-02-12 President And Fellows Of Harvard College Chlamydia antigens
EP2190470B1 (en) 2007-08-13 2017-12-13 GlaxoSmithKline Biologicals SA Vaccines
RU2471497C2 (ru) 2007-09-12 2013-01-10 Новартис Аг Мутантные антигены gas57 и антитела против gas57
JO3076B1 (ar) 2007-10-17 2017-03-15 Janssen Alzheimer Immunotherap نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
AU2008331800A1 (en) 2007-12-03 2009-06-11 President And Fellows Of Harvard College Chlamydia antigens
US8815253B2 (en) 2007-12-07 2014-08-26 Novartis Ag Compositions for inducing immune responses
AU2008352942B2 (en) 2007-12-19 2013-09-12 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Soluble forms of Hendra and Nipah virus F glycoprotein and uses thereof
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
CN104292312A (zh) 2007-12-21 2015-01-21 诺华股份有限公司 链球菌溶血素o的突变形式
EP4206231A1 (en) * 2007-12-24 2023-07-05 ID Biomedical Corporation of Quebec Recombinant rsv antigens
EP2245048B1 (en) 2008-02-21 2014-12-31 Novartis AG Meningococcal fhbp polypeptides
US8506966B2 (en) 2008-02-22 2013-08-13 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use
EP2265640B1 (en) 2008-03-10 2015-11-04 Children's Hospital & Research Center at Oakland Chimeric factor h binding proteins (fhbp) containing a heterologous b domain and methods of use
EP2268309B1 (en) 2008-03-18 2015-01-21 Novartis AG Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens
JP5749642B2 (ja) 2008-04-16 2015-07-15 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム ワクチン
EP2293813A4 (en) 2008-05-23 2012-07-11 Univ Michigan NANOEMULSION VACCINES
BRPI0915960A2 (pt) * 2008-07-18 2019-09-24 Id Biomedical Corp antígenos de polipeptídeos do vírus sincicial respiratório qimérico
GB0815872D0 (en) 2008-09-01 2008-10-08 Pasteur Institut Novel method and compositions
AU2009296458A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 Nanobio Corporation Nanoemulsion therapeutic compositions and methods of using the same
US9067981B1 (en) 2008-10-30 2015-06-30 Janssen Sciences Ireland Uc Hybrid amyloid-beta antibodies
EP2376089B1 (en) 2008-11-17 2018-03-14 The Regents of the University of Michigan Cancer vaccine compositions and methods of using the same
WO2010064243A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Protea Vaccine Technologies Ltd. GLUTAMYL tRNA SYNTHETASE (GtS) FRAGMENTS
EP2376108B1 (en) 2008-12-09 2017-02-22 Pfizer Vaccines LLC IgE CH3 PEPTIDE VACCINE
WO2010079081A1 (en) 2009-01-07 2010-07-15 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Methods for recovering a virus or a viral antigen produced by cell culture
MX2011007456A (es) 2009-01-12 2011-08-03 Novartis Ag Antigenos del dominio de proteina de superficie de union a colageno tipo b (can_b) en vacunas contra bacteria gram positiva.
GB0901423D0 (en) 2009-01-29 2009-03-11 Secr Defence Treatment
GB0901411D0 (en) 2009-01-29 2009-03-11 Secr Defence Treatment
US20110293660A1 (en) 2009-02-06 2011-12-01 Bruno Rene Andre Novel method
AU2010212550B2 (en) 2009-02-10 2016-03-10 Seqirus UK Limited Influenza vaccines with reduced amounts of squalene
WO2010094663A1 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Inactivated dengue virus vaccine with aluminium-free adjuvant
DK2403507T3 (en) * 2009-03-05 2018-06-06 Jenny Colleen Mccloskey TREATMENT OF INFECTION
US8568732B2 (en) 2009-03-06 2013-10-29 Novartis Ag Chlamydia antigens
SG175092A1 (en) 2009-04-14 2011-11-28 Novartis Ag Compositions for immunising against staphylococcus aerus
GB0906234D0 (en) 2009-04-14 2009-05-20 Secr Defence Vaccine
BRPI1014494A2 (pt) 2009-04-30 2016-08-02 Coley Pharm Group Inc vacina pneumocócica e usos da mesma
EP2437753B1 (en) 2009-06-05 2016-08-31 Infectious Disease Research Institute Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants and vaccine compositions containing them
GB0910046D0 (en) * 2009-06-10 2009-07-22 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compositions
DK2442826T3 (en) 2009-06-15 2015-09-21 Univ Singapore Influenza vaccine, composition and methods of using
CN102596243B (zh) 2009-06-16 2015-10-21 密执安大学评议会 纳米乳剂疫苗
WO2010149745A1 (en) 2009-06-24 2010-12-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Recombinant rsv antigens
MX2012000036A (es) 2009-06-24 2012-02-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna.
SG177533A1 (en) 2009-07-07 2012-02-28 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
HRP20220756T1 (hr) 2009-07-15 2022-09-02 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Proteinski pripravci rsv f i postupci za izradu istih
SG178035A1 (en) 2009-07-16 2012-03-29 Novartis Ag Detoxified escherichia coli immunogens
PE20120817A1 (es) 2009-07-30 2012-07-07 Pfizer Vaccines Llc Peptidos tau antigenicos y usos de los mismos
GB0913681D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
GB0913680D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
AU2010288240B2 (en) 2009-08-27 2014-03-27 Novartis Ag Hybrid polypeptides including meningococcal fHBP sequences
PE20161560A1 (es) 2009-09-03 2017-01-11 Pfizer Vaccines Llc Vacuna de pcsk9
US20120237536A1 (en) 2009-09-10 2012-09-20 Novartis Combination vaccines against respiratory tract diseases
JP5774010B2 (ja) 2009-09-25 2015-09-02 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム インフルエンザウイルスのための免疫拡散アッセイ
GB0917002D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Improved shigella blebs
GB0917003D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Purification of bacterial vesicles
JP2013506651A (ja) 2009-09-30 2013-02-28 ノバルティス アーゲー Staphylococcus.aureus5型および8型莢膜多糖の結合体
WO2011039631A2 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Novartis Ag Expression of meningococcal fhbp polypeptides
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
AU2010310985B2 (en) 2009-10-27 2014-11-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Modified meningococcal fHBP polypeptides
GB0919117D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Process
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
WO2011067758A2 (en) 2009-12-02 2011-06-09 Protea Vaccine Technologies Ltd. Immunogenic fragments and multimers from streptococcus pneumoniae proteins
DE102009056871A1 (de) * 2009-12-03 2011-06-22 Novartis AG, 4056 Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben
EP3257525A3 (en) 2009-12-22 2018-02-28 Celldex Therapeutics, Inc. Vaccine compositions
EP2519265B1 (en) 2009-12-30 2018-11-14 GlaxoSmithKline Biologicals SA Polysaccharide immunogens conjugated to e. coli carrier proteins
GB201003333D0 (en) 2010-02-26 2010-04-14 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
GB201003924D0 (en) 2010-03-09 2010-04-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
GB201003920D0 (en) 2010-03-09 2010-04-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Method of treatment
CN103221065A (zh) 2010-03-26 2013-07-24 葛兰素史密斯克莱生物公司 Hiv疫苗
CN102834410B (zh) 2010-03-30 2016-10-05 奥克兰儿童医院及研究中心 改性的h因子结合蛋白(fhbp)及其使用方法
GB201005625D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
WO2011127316A1 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Novartis Ag Method for generating a parvovirus b19 virus-like particle
WO2011130379A1 (en) 2010-04-13 2011-10-20 Novartis Ag Benzonapthyridine compositions and uses thereof
US20130039943A1 (en) 2010-05-03 2013-02-14 Bruno Rene Andre Novel method
JP2013532008A (ja) 2010-05-28 2013-08-15 テトリス オンライン インコーポレイテッド 対話式ハイブリッド非同期コンピュータ・ゲーム・インフラストラクチャ
GB201009273D0 (en) 2010-06-03 2010-07-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel vaccine
CA2798837A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Pfizer Inc. Her-2 peptides and vaccines
CA2800774A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Pfizer Vaccines Llc Ige ch3 peptide vaccine
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
US8658603B2 (en) 2010-06-16 2014-02-25 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for inducing an immune response
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
US20130171185A1 (en) 2010-07-06 2013-07-04 Ethan Settembre Norovirus derived immunogenic compositions and methods
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
AU2011310643A1 (en) 2010-09-27 2013-04-11 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vaccine
BR112013004582A2 (pt) 2010-09-27 2016-09-06 Crucell Holland Bv método para induzir uma resposta imune em um sujeito contra um antígeno de um parasita que causa a malária
GB201017519D0 (en) 2010-10-15 2010-12-01 Novartis Vaccines Inst For Global Health S R L Vaccines
AU2011315447A1 (en) 2010-10-15 2013-05-09 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Cytomegalovirus gB antigen
FR2966044B1 (fr) * 2010-10-18 2012-11-02 Sanofi Pasteur Procede de conditionnement d'un vaccin contenant un adjuvant d'aluminium
WO2012072769A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Novartis Ag Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations
NZ611176A (en) 2010-12-02 2015-07-31 Bionor Immuno As Peptide scaffold design
EP3593813A1 (en) 2010-12-14 2020-01-15 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Mycobacterium antigenic composition
CA2860331A1 (en) 2010-12-24 2012-06-28 Novartis Ag Compounds
GB201022007D0 (en) 2010-12-24 2011-02-02 Imp Innovations Ltd DNA-sensor
US9493514B2 (en) 2011-01-06 2016-11-15 Bionor Immuno As Dimeric scaffold proteins comprising HIV-1 GP120 and GP41 epitopes
TR201908715T4 (tr) 2011-01-26 2019-07-22 Glaxosmithkline Biologicals Sa Rsv immünizasyon rejimi.
WO2012114323A1 (en) 2011-02-22 2012-08-30 Biondvax Pharmaceuticals Ltd. Multimeric multiepitope polypeptides in improved seasonal and pandemic influenza vaccines
US20140004142A1 (en) 2011-03-02 2014-01-02 Pfizer Inc. Pcsk9 vaccine
GB201106357D0 (en) 2011-04-14 2011-06-01 Pessi Antonello Composition and uses thereof
AU2012243039B2 (en) 2011-04-08 2017-07-13 Immune Design Corp. Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
TW201302779A (zh) 2011-04-13 2013-01-16 Glaxosmithkline Biolog Sa 融合蛋白質及組合疫苗
PL2707385T3 (pl) 2011-05-13 2018-03-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Prefuzyjne antygeny RSV F
BR112013029514A2 (pt) 2011-05-17 2019-09-24 Glaxosmithkline Biologicals Sa composição imunogênica, vacina, e, método de tratar ou impedir uma doença
EP2726097A4 (en) 2011-07-01 2015-03-11 Univ California HERPES VIRUS VACCINE AND METHOD OF USE
US11896636B2 (en) 2011-07-06 2024-02-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic combination compositions and uses thereof
EP2729168A2 (en) 2011-07-06 2014-05-14 Novartis AG Immunogenic compositions and uses thereof
WO2013009564A1 (en) 2011-07-08 2013-01-17 Novartis Ag Tyrosine ligation process
WO2013009849A1 (en) 2011-07-11 2013-01-17 Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. Parenteral norovirus vaccine formulations
WO2013016460A1 (en) 2011-07-25 2013-01-31 Novartis Ag Compositions and methods for assessing functional immunogenicity of parvovirus vaccines
GB201114923D0 (en) 2011-08-30 2011-10-12 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
IN2014CN02152A (fi) 2011-09-01 2015-09-04 Novartis Ag
CN103917245B (zh) 2011-09-14 2017-06-06 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 用于制备糖‑蛋白质糖缀合物的方法
SG11201400193SA (en) 2011-09-16 2014-05-29 Ucb Pharma Sa Neutralising antibodies to the major exotoxins tcda and tcdb of clostridium difficile
GB201116248D0 (en) 2011-09-20 2011-11-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Liposome production using isopropanol
CA2854934A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Novartis Ag Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
WO2013074501A1 (en) 2011-11-14 2013-05-23 Crucell Holland B.V. Heterologous prime-boost immunization using measles virus-based vaccines
WO2013108272A2 (en) 2012-01-20 2013-07-25 International Centre For Genetic Engineering And Biotechnology Blood stage malaria vaccine
JP2015509520A (ja) 2012-03-07 2015-03-30 ノバルティス アーゲー 狂犬病ウイルス免疫原のアジュバント化製剤
EP2822586A1 (en) 2012-03-07 2015-01-14 Novartis AG Adjuvanted formulations of streptococcus pneumoniae antigens
JP2015509963A (ja) 2012-03-08 2015-04-02 ノバルティス アーゲー Tlr4アゴニストを含む混合ワクチン
AU2013229432A1 (en) 2012-03-08 2014-10-16 Novartis Ag Adjuvanted formulations of booster vaccines
US20150110824A1 (en) 2012-03-18 2015-04-23 Glaxosmithkline Biologicals, Sa Method of vaccination against human papillomavirus
EP3492095A1 (en) 2012-04-01 2019-06-05 Technion Research & Development Foundation Limited Extracellular matrix metalloproteinase inducer (emmprin) peptides and binding antibodies
EP2659907A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
EP2659906A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
EP2659908A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
MX359257B (es) 2012-05-04 2018-09-19 Pfizer Antígenos asociados a próstata y regímenes de inmunoterapia basados en vacuna.
RS57420B1 (sr) 2012-05-16 2018-09-28 Immune Design Corp Vakcine za hsv-2
SG11201407440WA (en) 2012-05-22 2014-12-30 Novartis Ag Meningococcus serogroup x conjugate
EP2666785A1 (en) 2012-05-23 2013-11-27 Affiris AG Complement component C5a-based vaccine
MX2014014683A (es) 2012-06-06 2015-02-24 Bionor Immuno As Peptidos derivados de proteinas virales para usarse como inmunogenos y reactivos de dosificacion.
JP2015522580A (ja) 2012-07-06 2015-08-06 ノバルティス アーゲー 免疫学的組成物およびその使用
US20140037680A1 (en) 2012-08-06 2014-02-06 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Novel method
AU2013301312A1 (en) 2012-08-06 2015-03-19 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Method for eliciting in infants an immune response against RSV and B. pertussis
EP2703483A1 (en) 2012-08-29 2014-03-05 Affiris AG PCSK9 peptide vaccine
JP6324961B2 (ja) 2012-09-06 2018-05-16 ノバルティス アーゲー 血清群b髄膜炎菌とd/t/pとの組み合わせワクチン
AU2013320313B2 (en) 2012-09-18 2018-07-12 Glaxosmithkline Biologicals Sa Outer membrane vesicles
EA201590427A1 (ru) 2012-10-02 2015-09-30 Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. Нелинейные сахаридные конъюгаты
SG11201500979RA (en) 2012-10-03 2015-07-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
EP3620172A1 (en) 2012-10-12 2020-03-11 GlaxoSmithKline Biologicals SA Non-cross-linked acellular pertussis antigens for use in combination vaccines
US9987344B2 (en) 2012-11-30 2018-06-05 Glaxosmithkline Biologicals Sa Pseudomonas antigens and antigen combinations
EP3513806B1 (en) 2012-12-05 2023-01-25 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic composition
WO2014160463A1 (en) 2013-03-13 2014-10-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Prefusion rsv f proteins and their use
AR095425A1 (es) 2013-03-15 2015-10-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vacuna, uso y procedimiento para prevenir una infección por picornavirus
CA2909221A1 (en) 2013-04-18 2014-10-23 Immune Design Corp. Gla monotherapy for use in cancer treatment
US20210145963A9 (en) 2013-05-15 2021-05-20 The Governors Of The University Of Alberta E1e2 hcv vaccines and methods of use
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
GB201310008D0 (en) 2013-06-05 2013-07-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition for use in therapy
KR20160040290A (ko) 2013-08-05 2016-04-12 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 조합 면역원성 조성물
CA2920934C (en) 2013-08-30 2022-12-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Large scale production of viruses in cell culture
JP6306700B2 (ja) 2013-11-01 2018-04-04 ユニバーシティ オブ オスロUniversity of Oslo アルブミン改変体及びその使用
EP2870974A1 (en) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella conjugate vaccines
US11452767B2 (en) 2013-11-15 2022-09-27 Oslo Universitetssykehus Hf CTL peptide epitopes and antigen-specific t cells, methods for their discovery, and uses thereof
WO2015092710A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Contralateral co-administration of vaccines
US11160855B2 (en) 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP3096785B1 (en) 2014-01-21 2020-09-09 Pfizer Inc Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2015123291A1 (en) 2014-02-11 2015-08-20 The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Pcsk9 vaccine and methods of using the same
TW201620927A (zh) 2014-02-24 2016-06-16 葛蘭素史密斯克藍生物品公司 Uspa2蛋白質構築體及其用途
SG11201607404PA (en) * 2014-03-25 2016-10-28 Government Of The Us Secretary Of The Army Methods for enhancing the immunostimulation potency of aluminum salt-adsorbed vaccines
EA037818B1 (ru) 2014-03-26 2021-05-25 Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. Мутантные стафилококковые антигены
US11571472B2 (en) 2014-06-13 2023-02-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic combinations
DK3160500T3 (da) 2014-06-25 2019-11-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Clostridium difficile immunogen sammensætning
EP3169699A4 (en) 2014-07-18 2018-06-20 The University of Washington Cancer vaccine compositions and methods of use thereof
WO2016012385A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Sanofi Pasteur Vaccine composition comprising ipv and cyclodextrins
EP4074726A3 (en) 2014-07-23 2022-11-23 Children's Hospital & Research Center at Oakland Factor h binding protein variants and methods of use thereof
WO2016057921A1 (en) 2014-10-10 2016-04-14 Baker Jr James R Nanoemulsion compositions for preventing, suppressing or eliminating allergic and inflammatory disease
AR102548A1 (es) 2014-11-07 2017-03-08 Takeda Vaccines Inc Vacunas contra la enfermedad de manos, pies y boca y métodos de fabricación y uso
AR102547A1 (es) 2014-11-07 2017-03-08 Takeda Vaccines Inc Vacunas contra la enfermedad de manos, pies y boca y métodos de fabricación y su uso
BE1023004A1 (fr) 2014-12-10 2016-10-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procede de traitement
DK3244917T5 (da) 2015-01-15 2024-10-14 Pfizer Inc Immunogene sammensætninger til anvendelse i pneumokokvacciner
WO2016141320A2 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Northwestern University Non-neuroinvasive viruses and uses thereof
JP2018511655A (ja) 2015-03-20 2018-04-26 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン ボルデテラ属に対するワクチン接種における使用のための免疫原性組成物
AU2016271857B2 (en) 2015-06-03 2020-05-28 Affiris Ag IL-23-P19 vaccines
KR20180035807A (ko) 2015-06-26 2018-04-06 세퀴러스 유케이 리미티드 항원적으로 매치된 인플루엔자 백신
EP3319988A1 (en) 2015-07-07 2018-05-16 Affiris AG Vaccines for the treatment and prevention of ige mediated diseases
PE20180657A1 (es) 2015-07-21 2018-04-17 Pfizer Composiciones inmunogenas que comprenden antigenos de sacarido capsular conjugados, kits que las comprenden y sus usos
GB201518684D0 (en) 2015-10-21 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
GB201518668D0 (en) 2015-10-21 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic Comosition
CA3005524C (en) 2015-11-20 2023-10-10 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
WO2017109698A1 (en) 2015-12-22 2017-06-29 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic formulation
WO2017158421A1 (en) 2016-03-14 2017-09-21 University Of Oslo Anti-viral engineered immunoglobulins
CR20180445A (es) 2016-03-14 2019-02-08 Univ Oslo Inmunoglobulinas diseñadas por ingeniería genética con unión alterada al fcrn
US11173207B2 (en) 2016-05-19 2021-11-16 The Regents Of The University Of Michigan Adjuvant compositions
GB201610599D0 (en) 2016-06-17 2016-08-03 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic Composition
EP3471761A2 (en) 2016-06-21 2019-04-24 University Of Oslo Hla binding vaccine moieties and uses thereof
CA3034124A1 (en) 2016-08-23 2018-03-01 Glaxosmithkline Biologicals Sa Fusion peptides with antigens linked to short fragments of invariant chain (cd74)
GB201614799D0 (en) 2016-09-01 2016-10-19 Glaxosmithkline Biologicals Sa Compositions
US11466292B2 (en) 2016-09-29 2022-10-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Compositions and methods of treatment
GB201616904D0 (en) 2016-10-05 2016-11-16 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccine
WO2018096396A1 (en) 2016-11-22 2018-05-31 University Of Oslo Albumin variants and uses thereof
CA3045952A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel process
GB201620968D0 (en) 2016-12-09 2017-01-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adenovirus polynucleotides and polypeptides
MX2019006349A (es) 2016-12-16 2019-08-22 Inst Res Biomedicine Proteinas recombinantes rsv f de prefusion nuevas y usos de las mismas.
GB201621686D0 (en) 2016-12-20 2017-02-01 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods for inducing an immune response
SI3570879T1 (sl) 2017-01-20 2022-06-30 Pfizer Inc. Imunogenska kompozicija za uporabo v pnevmokoknih cepivih
BR112019020209A2 (pt) 2017-03-31 2020-06-02 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Composição imunogênica, uso de uma composição imunogênica, método de tratamento ou prevenção de uma recorrência de uma exacerbação aguda de doença pulmonar obstrutiva crônica, e, terapia de combinação.
WO2018178265A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Immunogenic composition, use and method of treatment
CN110945022B (zh) 2017-04-19 2024-04-05 生物医学研究所 作为疫苗及新疟疾疫苗和抗体结合靶标的疟原虫子孢子npdp肽
EP3615061A1 (en) 2017-04-28 2020-03-04 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Vaccination
GB201707700D0 (en) 2017-05-12 2017-06-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Dried composition
JP7291633B2 (ja) 2017-05-30 2023-06-15 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム アジュバントを製造する方法
BR112020001768A2 (pt) 2017-08-14 2020-09-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. método de reforçar uma resposta imune pré-existente contra haemophilus influenzae e moraxella catarrhalis não tipáveis em um indivíduo, e, protocolo de vacinação.
WO2019048936A1 (en) 2017-09-07 2019-03-14 University Of Oslo VACCINE MOLECULES
WO2019048928A1 (en) 2017-09-07 2019-03-14 University Of Oslo VACCINE MOLECULES
CN111315406A (zh) 2017-09-08 2020-06-19 传染病研究所 包括皂苷的脂质体调配物及其使用方法
CA3081436A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Western Oncolytics Ltd. Platform oncolytic vector for systemic delivery
CN111511395B (zh) 2017-11-03 2024-10-15 武田疫苗股份有限公司 用于将寨卡病毒灭活和用于确定灭活完全性的方法
GB201721069D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B Immunisation regimen and compositions
GB201721068D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B immunisation regimen and compositions
GB201721582D0 (en) 2017-12-21 2018-02-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa S aureus antigens and immunogenic compositions
GB201721576D0 (en) 2017-12-21 2018-02-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hla antigens and glycoconjugates thereof
CN112638936A (zh) 2018-06-12 2021-04-09 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 腺病毒多核苷酸和多肽
EP3581201A1 (en) 2018-06-15 2019-12-18 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Escherichia coli o157:h7 proteins and uses thereof
CN110680909B (zh) * 2018-07-04 2024-09-20 辽宁成大生物股份有限公司 一种速释b型流感嗜血杆菌结合疫苗可溶性微针贴及其制备方法
WO2020026147A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigen purification method
MX2021001479A (es) 2018-08-07 2021-04-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novedosos procesos y vacunas.
CN112912097A (zh) 2018-08-23 2021-06-04 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 免疫原性蛋白和组合物
US11260119B2 (en) 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
WO2020115171A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic compositions
JP2022512345A (ja) 2018-12-12 2022-02-03 ファイザー・インク 免疫原性多重ヘテロ抗原多糖-タンパク質コンジュゲートおよびその使用
EP3897846A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 GlaxoSmithKline Biologicals SA Methods of inducing an immune response
JP7239509B6 (ja) 2019-02-22 2023-03-28 ファイザー・インク 細菌多糖類を精製するための方法
CN113573730A (zh) 2019-03-05 2021-10-29 葛兰素史密斯克莱生物公司 乙型肝炎免疫方案和组合物
US20220184199A1 (en) 2019-04-10 2022-06-16 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
US20220221455A1 (en) 2019-04-18 2022-07-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigen binding proteins and assays
EP3770269A1 (en) 2019-07-23 2021-01-27 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Quantification of bioconjugate glycosylation
EP4004018A1 (en) 2019-07-24 2022-06-01 GlaxoSmithKline Biologicals SA Modified human cytomegalovirus proteins
WO2021023691A1 (en) 2019-08-05 2021-02-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic composition
CA3148928A1 (en) 2019-08-05 2021-02-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Process for preparing a composition comprising a protein d polypeptide
EP3777884A1 (en) 2019-08-15 2021-02-17 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunogenic composition
EP4028051A1 (en) 2019-09-09 2022-07-20 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunotherapeutic compositions
IL292494A (en) 2019-11-01 2022-06-01 Pfizer Preparations of Escherichia coli and their methods
US20230045642A1 (en) 2019-12-19 2023-02-09 Glaxosmithkline Biologicals Sa S. aureus antigens and compositions thereof
NL2027383B1 (en) 2020-01-24 2022-04-06 Aim Immunotech Inc Methods, compositions, and vaccines for treating a virus infection
WO2021160887A1 (en) 2020-02-14 2021-08-19 Immunor As Corona virus vaccine
WO2021165847A1 (en) 2020-02-21 2021-08-26 Pfizer Inc. Purification of saccharides
EP4107170A2 (en) 2020-02-23 2022-12-28 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
EP4146378A1 (en) 2020-05-05 2023-03-15 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Microfluidic mixing device and methods of use
US20230293659A1 (en) 2020-08-03 2023-09-21 Glaxosmithkline Biologicals Sa Truncated fusobacterium nucleatum fusobacterium adhesin a (fada) protein and immunogenic compositions thereof
IL302362A (en) 2020-10-27 2023-06-01 Pfizer ESCHERICHIA COLI preparations and their methods
CN116744965A (zh) 2020-11-04 2023-09-12 辉瑞大药厂 用于肺炎球菌疫苗的免疫原性组合物
EP4243863A2 (en) 2020-11-10 2023-09-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP4255919A2 (en) 2020-12-02 2023-10-11 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Donor strand complemented fimh
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
WO2022147373A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibody-guided pcsk9-mimicking immunogens lacking 9-residue sequence overlap with human proteins
EP4277654A1 (en) 2021-01-18 2023-11-22 Conserv Bioscience Limited Coronavirus immunogenic compositions, methods and uses thereof
WO2022171681A1 (en) 2021-02-11 2022-08-18 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hpv vaccine manufacture
TW202245836A (zh) 2021-02-19 2022-12-01 美商賽諾菲巴斯德公司 重組b型腦膜炎球菌疫苗
JP2024510717A (ja) 2021-02-22 2024-03-11 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物、使用及び方法
JP2024516400A (ja) 2021-04-30 2024-04-15 カリヴィル イムノセラピューティクス, インコーポレイテッド 修飾されたmhc発現のための腫瘍溶解性ウイルス
JP2024522395A (ja) 2021-05-28 2024-06-19 ファイザー・インク コンジュゲートさせた莢膜糖抗原を含む免疫原性組成物およびその使用
US20220387576A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023020992A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023020993A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
WO2023020994A1 (en) 2021-08-16 2023-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel methods
IL312890A (en) 2021-11-18 2024-07-01 Matrivax Inc Immunogenic fusion protein preparations and methods of using them
AU2023207315A1 (en) 2022-01-13 2024-06-27 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023144665A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Glaxosmithkline Biologicals Sa Modified human cytomegalovirus proteins
WO2023161817A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Pfizer Inc. Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides
WO2023218322A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Pfizer Inc. Process for producing of vaccine formulations with preservatives
GB202215634D0 (en) 2022-10-21 2022-12-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Polypeptide scaffold
WO2024110827A1 (en) 2022-11-21 2024-05-30 Pfizer Inc. Methods for preparing conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
US20240181028A1 (en) 2022-11-22 2024-06-06 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2024116096A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Pfizer Inc. Pneumococcal conjugate vaccine formulations
WO2024133160A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis b compositions
WO2024160901A1 (en) 2023-02-02 2024-08-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic composition
WO2024166008A1 (en) 2023-02-10 2024-08-15 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2024201324A2 (en) 2023-03-30 2024-10-03 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US703355A (en) * 1901-11-05 1902-06-24 Bertt H Brockway Current-motor.
US4196192A (en) * 1977-10-28 1980-04-01 American Cyanamid Company Combined Haemophilus influenzae type b and pertussis vaccine
US4620978A (en) * 1982-04-07 1986-11-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Hepatitis A virus purified and triply cloned
GB8508685D0 (en) * 1985-04-03 1985-05-09 Minor P D Peptides
US4806352A (en) * 1986-04-15 1989-02-21 Ribi Immunochem Research Inc. Immunological lipid emulsion adjuvant
US4877611A (en) * 1986-04-15 1989-10-31 Ribi Immunochem Research Inc. Vaccine containing tumor antigens and adjuvants
US5026557A (en) * 1987-09-09 1991-06-25 The Liposome Company, Inc. Adjuvant composition
JPH085804B2 (ja) * 1988-04-28 1996-01-24 財団法人化学及血清療法研究所 A型及びb型肝炎混合アジュバントワクチン
US4912094B1 (en) * 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
DE3916595A1 (de) * 1989-05-22 1990-11-29 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur nichtradioaktiven messung der nucleinsaeuresynthese in eukaryontischen zellen
DE69031556T2 (de) * 1989-07-25 1998-05-14 Smithkline Beecham Biologicals S.A., Rixensart Antigene sowie Verfahren zu deren Herstellung
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
CH678394A5 (fi) * 1990-08-22 1991-09-13 Cerny Erich H
GB9106048D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
AU654970B2 (en) * 1990-09-28 1994-12-01 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Derivatives of gp160 and vaccines based on gp160 or a derivative thereof, containing an adjuvant
WO1992011291A1 (en) * 1990-12-20 1992-07-09 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Vaccines based on hepatitis b surface antigen
GB9028038D0 (en) * 1990-12-24 1991-02-13 Nycomed Pharma As Test method and reagent kit therefor
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
MY111880A (en) * 1992-03-27 2001-02-28 Smithkline Beecham Biologicals S A Hepatitis vaccines containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a
CA2156525A1 (en) * 1993-02-19 1994-09-01 Susan Dillon Influenza vaccine compositions containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a

Also Published As

Publication number Publication date
NZ263538A (en) 1996-10-28
JP4837906B2 (ja) 2011-12-14
NO953759D0 (no) 1995-09-22
NO20054701D0 (no) 2005-10-12
DE69428136T2 (de) 2002-05-02
DE69405551T3 (de) 2005-10-20
CZ289476B6 (cs) 2002-01-16
JP2005015487A (ja) 2005-01-20
WO1994021292A1 (en) 1994-09-29
EP0812593B1 (en) 2001-08-29
IL109056A (en) 1998-06-15
ES2162139T5 (es) 2008-05-16
AU685443B2 (en) 1998-01-22
AU6426494A (en) 1994-10-11
ATE157882T1 (de) 1997-09-15
HU219056B (hu) 2001-02-28
HK1045935A1 (zh) 2002-12-20
NO20054701L (no) 1995-09-22
HK1023499A1 (en) 2000-09-15
DE69428136D1 (de) 2001-10-04
NO322578B1 (no) 2006-10-30
EP0689454B2 (en) 2005-02-23
HK1011930A1 (en) 1999-07-23
PL310598A1 (en) 1995-12-27
ATE204762T1 (de) 2001-09-15
AP9400629A0 (en) 1994-04-30
EP0812593A1 (en) 1997-12-17
DZ1763A1 (fr) 2002-02-17
FI954514A0 (fi) 1995-09-22
SK117395A3 (en) 1996-11-06
DK0689454T3 (da) 1997-12-08
DE69405551D1 (de) 1997-10-16
EP1175912A1 (en) 2002-01-30
PT812593E (pt) 2002-01-30
EP0689454A1 (en) 1996-01-03
IL109056A0 (en) 1994-06-24
SG48309A1 (en) 1998-04-17
EP0689454B1 (en) 1997-09-10
HU9501979D0 (en) 1995-08-28
ES2109685T3 (es) 1998-01-16
DK0812593T3 (da) 2001-11-12
CN1119829A (zh) 1996-04-03
PL178578B1 (pl) 2000-05-31
EP0812593B2 (en) 2008-01-02
KR100310510B1 (ko) 2002-07-04
US5776468A (en) 1998-07-07
ES2162139T3 (es) 2001-12-16
NO953759L (no) 1995-09-22
GR3025483T3 (en) 1998-02-27
FI954514A (fi) 1995-09-22
DK0812593T4 (da) 2008-05-13
AP515A (en) 1996-08-09
EP0812593B8 (en) 2010-11-10
CZ246795A3 (en) 1996-03-13
BR9405957A (pt) 1995-12-12
ES2109685T5 (es) 2005-09-01
CN1087176C (zh) 2002-07-10
SA94140762B1 (ar) 2005-05-31
DE69428136T3 (de) 2008-07-10
HUT72916A (en) 1996-06-28
MA23143A1 (fr) 1994-10-01
DE69405551T2 (de) 1998-03-26
JP4028593B2 (ja) 2007-12-26
DK0689454T4 (da) 2005-05-30
JPH08508722A (ja) 1996-09-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI110844B (fi) Menetelmä 3-O-deasyloidun monofosforyylilipidin A valmistamiseksi
RU2121849C1 (ru) Вакцинная композиция против гепатита, способ профилактики гепатита
Garçon et al. Development and Evaluation of AS04, a Novel and Improved Adjuvant System Containing 3-O-Desacyl-4′-Monophosphoryl Lipid A and Aluminum Salt
US20030211120A1 (en) Hepatitis vaccines containing 3-O-deacylated monophoshoryl lipid A
AU705739B2 (en) A method of preparing vaccine compositions containing 3-0-deacylated monophosphoryl lipid A
CA2555911C (en) Adjuvant compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a
CA2157376C (en) Vaccine compositions containing 3-o deacylated monophosphoryl lipid a

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired