NO332427B1 - Hepatitt C virus inhibitorer, preparat omfattende slike forbindelser samt anvendelse av slike forbindelser for fremstilling av preparat for behandling av sykdom - Google Patents

Hepatitt C virus inhibitorer, preparat omfattende slike forbindelser samt anvendelse av slike forbindelser for fremstilling av preparat for behandling av sykdom Download PDF

Info

Publication number
NO332427B1
NO332427B1 NO20044807A NO20044807A NO332427B1 NO 332427 B1 NO332427 B1 NO 332427B1 NO 20044807 A NO20044807 A NO 20044807A NO 20044807 A NO20044807 A NO 20044807A NO 332427 B1 NO332427 B1 NO 332427B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
alkyl
compound according
compound
heterocyclic group
optionally substituted
Prior art date
Application number
NO20044807A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20044807L (no
Inventor
Jeffrey Allen Campbell
Ny Sin
Xiangdong Wang
Andrew Charles Good
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=29584353&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO332427(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of NO20044807L publication Critical patent/NO20044807L/no
Publication of NO332427B1 publication Critical patent/NO332427B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/005—Enzyme inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/24—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Hepatitt C virus inhibitorer er beskrevet som har den generelle formel I; hvor R1, R2, R3, R', B, Y og X er beskrevet i beskrivelsen. Preparater omfattende forbindelser og metoder for anvendelse av forbindelsene til å hemme HCV er også beskrevet.

Description

OPPFINNELSENS OMRÅDE
Foreliggende oppfinnelse angår hepatitt C virus inhibitorer, preparat omfattende slike forbindelser samt anvendelse av slike forbindelser for fremstilling av preparat for behandling av sykdom. Anvendelsene angår behandling av en HCV-infeksjon eller hemme HCV NS3 protease hos en pasient og behandling av en hepatitt C viral infeksjon hos en pasient.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
HCV er et viktig humant patogen, som infiserer beregnet 170 millioner personer verden over - omtrent fem ganger antallet infisert med human immunsvikt-virus type 1. En vesentlig fraksjon av disse HCV-infiserte individer utvikler alvorlig progressiv leversykdom, omfattende cirrhose og hepatocellulært karsinom. (Lauer, G. M; Walker, B. D. N. Engl. J. Med. (2001), 345, 41-52).
For tiden anvender den mest effektive HCV-terapi en kombinasjon av alfa-interferon og ribavirin som gir varig effektivitet hos 40% av pasientene. (Poynard, T. et al. Lancet (1998), 352. 1426-1432). Nyere kliniske resultater demonstrerer at pegylert alfa-interferon er bedre enn umodifisert alfa-interferon som monoterapi (Zeuzem, S. et al. N. Engl. J. Med. (2000), 343,1666-1672). Imidlertid, selv med eksperimentelle terapeutiske regimer som involverer kombinasjoner av pegylert alfa-interferon og ribavirin, får en vesentlig andel av pasienter ikke en varig reduksjon i viral belastning. Således er det et klart og lenge følt behov for å utvikle effektive terapeutiske midler for behandling av HCV-infeksjon.
HCV er et positivt-trådet RNA-virus. Basert på en sammenligning av den utledede aminosyresekvens og den omfattende similaritet i den 5' utranslaterte region, er HCV klassifisert som en separat slekt i Flaviviridae-familien. Alle medlemmer av Flaviviridae-familien har innkappede virioner som inneholder et positiv-trådet RNA-genom som koder for alle kjente virus-spesifikke proteiner via translasjon av en enkel, uavbrutt, åpen leseramme.
Betraktelig heterogenitet er funnet innen nukleotidet og den kodede aminosyresekvens gjennom hele HCV-genomet. Minst seks betydelige genotyper erkarakterisertog mer enn 50 undertyper er beskrevet. De betydelige genotyper av HCV avviker i deres distribusjon verden over og den kliniske betydning av den genetiske heterogeniteten av HCV er fortsatt uklar til tross for en rekke undersøkelser av den mulige effekt av genotyper på patogenese og terapi.
Det enkeltrådete HCV RNA-genom er omtrent 9500 nukleotider i lengde og har en enkel åpen leseramme (ORF) som koder for et enkelt stort polyprotein med ca. 3000 aminosyrer. I infiserte celler blir dette polyprotein spaltet ved multiple seter av cellulære og virale proteaser for å produsere strukturelle og ikke-strukturelle (NS) proteiner. I tilfellet av HCV blir dannelse av modne ikke-strukturelle proteiner (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A og NS5B) utført av to virale proteaser. Den første, hittil dårligkarakterisert, spalter ved NS2-NS3 sammenføyningen; den andre er en serinprotease inneholdt i den N-terminale region av NS3 (fra nå av referert til som NS3 protease) og medierer alle de påfølgende spaltninger nedstrøms for NS3, både i cis, ved NS3-NS4A spaltningssetet og i trans, for de resterende NS4A- NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B seter. NS4A-proteinet synes å tjene multiple funksjoner, som virker som en kofaktor for NS3-protease og muligens assisterer i membran-lokalisering av NS3 og andre virale replikase-komponenter. Kompleks-dannelse av NS3-protein med NS4A synes nødvendig for prosessering av hendelser som øker proteolytisk effektivitet ved alle setene. NS3-protein oppviser også nukleosid-trifosfatase og RNA-helikase aktiviteter. NS5B er en RNA-avhengig RNA-polymerase som er involvert i replikasjonen av HCV.
Blant forbindelsene som har demonstrert effektivitet ved å hemme HCV-replikasjon, som selektive HCV-serinproteaseinhibitorer, er peptid-forbindelsene beskrevet i U.S. patent nr. 6,323,180.
OPPSUMMERING AV OPPFINNELSEN
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en forbindelse med formel I, omfattende farmasøytisk akseptable salter, solvater eller prodrug derav,
hvor:
(a) Ri er Ci_g alkyl, C3.7cykloalkyl eller C4.10alkylcykloalkyl; (b) m er 1 eller 2; (c) n er 1 eller 2; (d) R2er H, C1-6alkyl, C2-6alkenyl eller C3.7cykloalkyl, hver eventuelt substituert med halogen; (e) R3er Q-g alkyl eventuelt substituert med halogen, cyano, amino, d-6 dialkylamino, C6.10aryl, C7.14alkylaryl, Ci-6alkoksy, karboksy, hydroksy, aryloksy, C7.14alkylaryloksy, C2-6alkylester, Cg_isalkylarylester; C3.12alkenyl, C3.7cykloalkyl eller C4.10alkylcykloalkyl, hvor cykloalkyl eller alkylcykloalkyl eventuelt er substituert med hydroksy, Ci_6alkyl, C2-6alkenyl eller Ci_6alkoksy; eller R3sammen med karbonatomet til hvilket den er tilknyttet danner en C3.7cykloalkylgruppe eventuelt substituert med C2-6alkenyl; (f) Y er H, fenyl substituert med nitro, pyridyl substituert med nitro eller C1-6alkyl eventuelt substituert med cyano, OH eller C3.7cykloalkyl; forutsatt at hvis R4eller R5er H da er Y H; (g) B er H, Cwalkyl, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-,
R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- eller R4-N(R5)-S02-;
(h) R4er (i) d_io alkyl eventuelt substituert med fenyl, karboksyl, Q.6
alkanoyl, 1-3 halogen, hydroksy, -OC(0)Ci-6alkyl, Ci.6alkoksy, amino eventuelt substituert med C1-6alkyl, amido eller (lavere alkyl) amido; (ii) C3.7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4.10
alkylcykloalkyl, hver eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci_6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl,
amido eller (lavere alkyl)amido; (iii) C6-10aryl eller C7.16arylalkyl, hver eventuelt substituert med C1-6alkyl, halogen, nitro, hydroksy, amido, (lavere alkyl) amido eller amino eventuelt substituert med C1-6alkyl; (iv) Het; (v) bicyklo(l.l.l)pentan; eller (vi) -C(0)OCi.6alkyl, C2-6alkenyl eller C2-6alkynyl;
(i) R5er H; Ci_6alkyl eventuelt substituert med 1-3 halogenatomer; eller
C1-6alkoksy forutsatt at R4er Cmo alkyl;
0) X er O, S, SO, S02, OCH2, CH20 eller NH;
(k) R' er Het; eller C6-10aryl eller C7.14alkylaryl, eventuelt substituert med
R<a>;og
(1) Ra er C1-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-C 1.6 alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Q-6alkylamino, di-(Ci-6) alkylamino, di-(Ci-6) alkylamid, karboksyl, (C1-6) karboksyester, C1-6alkylsulfon, Ci-6alkylsulfonamid, di-(Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet
monocyklisk heterocyklisk gruppe;
hvor betegnelsen "heterocyklisk gruppe" eller "Het" betyr 7-12-leddede bicykliske, heterocykliske grupper og 5-7-leddede monocykliske heterocykliske grupper,
hvor den bicykliske heterocykliske gruppen kan inneholde en til tre substituenter på hvilken som helst av ringkarbonatomene, valgt blant Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci-6alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci_6alkylamino, di (Ci-6) alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci_6alkylsulfon, Ci.6alkylsulfonamid, Ci_6alkylsulfoksyd, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe hvor når to substituenter er bundet til nabostilte karbonatomer i den bicykliske heterocykliske gruppen, kan de sammen danne en ring inneholdende opptil to heteroatomer valgt fra oksygen og nitrogen;
hvor den monocykliske heterocykliske gruppen kan inneholde en til tre substituenter på hvilket som helst av ringatomene valgt blant Ci_6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci-6alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino,
Ci-6alkylamino, di (Ci-6) alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci-6alkylsulfon, Ci-6alkylsulfoksyd, Ci-6 alkylsulfonamid, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe;
med det forbehold at X- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også preparater omfattende forbindelsene eller farmasøytisk akseptable salter eller solvater derav og en farmasøytisk akseptabel bærer.
Spesielt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse anvendelse av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav til fremstilling av et terapeutisk preparat for behandling av en HCV-infeksjon eller hemme HCV NS3 protease hos en pasient.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også anvendelse av et preparat som beskrevet over for fremstilling av et medikament for behandling av en hepatitt C viral infeksjon hos en pasient
Ved foreliggende oppfinnelse er det nå mulig å tilveiebringe forbedrede medikamenter omfattende forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som kan være effektive ved behandling av pasienter infisert med HCV. Spesifikt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse peptid-forbindelser som kan hemme funksjonen av NS3 protease, f.eks. i kombinasjon med NS4A protease.
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Stereokjemiske definisjoner og konvensjoner anvendt her følger generelt McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms, S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Book Company, New York (1984) og Stereochemistry of Organic Compounds, Eliel, E. og Wilen, S., John Wiley & Sons, Inc., New York (1994). Mange organiske forbindelser eksisterer i optisk aktive former, dvs. de har evnen til å rotere planet av plan-polarisert lys. Ved beskrivelse av en optisk aktiv forbindelse, blir prefiksene D og L eller R og S anvendt for å angi den absolutte konfigurasjon av molekylet rundt dets chirale senter(e). Prefiksene d og 1 eller (+) og (-) blir anvendt for å angi rotasjonssporet av plan-polarisert lys av forbindelsen, hvor (-) eller 1 betyr at forbindelsen er venstreroterende og (+) eller d betyr at forbindelsen er høyreroterende. For en gitt kjemisk struktur er disse forbindelser, betegnet stereoisomerer, identiske bortsett fra at de er speilbilder av hverandre. En spesifikk stereoisomer av et speilbilde-par kan også refereres til som en enantiomer og en blanding av slike isomerer er ofte betegnet en enantiomer blanding.
Nomenklaturen anvendt for å beskrive organiske rester, f.eks. hydrokarboner og substituerte hydrokarboner, følger generelt standard nomenklatur kjent på området, hvis ikke på annen måte spesifikt definert. Kombinasjoner av grupper, f.eks. alkylalkoksyamin, omfatter alle mulige stabile konfigurasjoner, hvis ikke på annen måte spesifikt angitt. Visse rester og kombinasjoner er definert nedenfor for illustrasjonsformål.
Som beskervet her gjelder følgende definisjoner hvis ikke på annen måte angitt i kravene.
Betegnelsene "racemisk blanding" og "racemat" refererer til en ekvimolar blanding av to enantiomere arter, som mangler optisk aktivitet.
Betegnelsen "chiral" angir molekyler som har egenskapen til ikke-overleggbarhet av speilbilde-partner, mens betegnelsen "achiral" angir molekyler som er overleggbare på deres speilbilde-partner.
Betegnelsen "stereoisomerer" angir forbindelser som har identisk kjemisk sammensetning, men avviker med hensyn til arrangementet av atomene eller gruppene i rommet.
Betegnelsen "diastereomer" angir en stereoisomer som ikke er en enantiomer, f.eks. en stereoisomer med to eller flere sentere av chiralitet og hvis molekyler ikke er speilbilder av hverandre. Diastereomerene har forskjellige fysiske egenskaper, f.eks. smeltepunkter, kokepunkter, spektral-egenskaper og reaktiviteter. Blandinger av diastereomerene kan separeres under høyoppløsning analytiske prosedyrer så som elektroforese og kromatografi.
Betegnelsen "enantiomerer" angir to stereoisomerer av en forbindelse som ikke er overleggbare speilbilder av hverandre.
Betegnelsen "farmasøytisk akseptabelt salt" skal omfatte ikke toksiske salter syntetisert fra en forbindelse som inneholder en basisk eller sur gruppe ved konvensjonelle kjemiske metoder. Generelt kan slike salter fremstilles ved omsetning av de frie syre- eller baseformer av disse forbindelser med en støkiometrisk mengde av den passende base eller syre i vann eller i et organisk løsningsmiddel eller i en blanding av de to; generelt er ikke-vandige medier så som eter, etylacetat, etanol, isopropanol eller acetonitril foretrukket. Lister med egnede salter kan finnes i Remington' s Pharmaceutical Sciences, 18. ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990, s. 1445. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er anvendelige i form av den frie basen eller syren eller i form av et farmasøytisk akseptabelt salt derav. Alle former er innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse.
Betegnelsen "terapeutisk effektiv mengde" betyr den totale mengden av hver aktive komponent som er tilstrekkelig til å oppvise en meningsfull pasient-fordel, f.eks. varig reduksjon av viral belastning. Når anvendt for en individuell aktiv bestanddel, administrert alene, angir betegnelsen den bestanddel alene. Når anvendt for en kombinasjon, angir betegnelsen kombinerte mengder av de aktive bestanddelene som resulterer i den terapeutiske effekt, hvorvidt administrert i kombinasjon, serielt eller samtidig.
Betegnelsen "forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse" og ekvivalente uttrykk, skal omfatte forbindelser med formel I og farmasøytisk akseptable salter og solvater, f.eks. hydrater. Tilsvarende skal referanse til mellomprodukter, omfatte deres salter og solvater, når sammenhengen tillater dette. Referanser til forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter også de foretrukne forbindelser med formel II og III.
Betegnelsen "derivat" betyr en kjemisk modifisert forbindelse hvor modifikasjonen er betraktet rutinemessig av en fagmann, så som en ester eller et amid av en syre, beskyttelsesgrupper, så som en benzylgruppe for en alkohol eller tiol og en tert-butoksykarbonylgruppe for et amin.
Betegnelsen "solvat" betyr en fysisk assosiering av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse med ett eller flere løsningsmiddel-molekyler, hvorvidt organiske eller uorganiske. Denne fysiske assosiering omfatter hydrogenbinding. I visse tilfeller vil solvatet kunne isoleres, for eksempel når ett eller flere løsningsmiddel-molekyler er innført i krystallgitteret til det krystallinske faste stoffet. "Solvat" omfatter både løsningsfase og isolerbare solvater. Eksempler på solvater omfatter hydrater, etanolater og metanolater.
Betegnelsen "prodrug" som anvendt her betyr derivater av forbindelser som har kjemisk eller metabolsk spaltbare grupper og blir, ved solvolyse eller under fysiologiske betingelser, forbindelsene er farmasøytisk aktive in vivo. Et prodrug av en forbindelse kan dannes på konvensjonell måte med en funksjonell gruppe av forbindelsene så som med en amino-, hydroksy- eller karboksygruppe når til stede. Prodrug-deirvatformen gir ofte fordeler med oppløselighet, vevkompatibilitet eller forsinket frigjøring i en pattedyr-organisme (se Bundgard, H., Design of Prodrugs, s. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985). Prodrug omfatter syrederivater velkjente for fagfolk, så som for eksempel estere fremstilt ved omsetning av den sure stamforbindelsen med en egnet alkohol eller amid fremstilt ved omsetning av den sure stamforbindelsen med et egnet amin.
Betegnelsen "pasient" omfatter både mennesker og andre pattedyr.
Betegnelsen "farmasøytisk preparat" betyr et preparat omfattende en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse i kombinasjon med minst én ytterligere farmasøytisk bærer, dvs. adjuvans, tilsetningsmiddel eller konstituent, så som fortynningsmidler, konserveringsmidler, fyllmidler, strømnings-regulerende midler, desintegreringsmidler, fuktemidler, emulgeringsmidler, suspenderingsmidler, søtningsmidler, smaksgivende midler, parfymerende midler, antibakterielle midler, antifungale midler, smøremidler og dispenseringsmidler, avhengig av typen av administreirngsmetoden og doseformene. Bestanddeler listet opp i Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. ed., Mack Publishing Company, Easton, PA (1999) kan for eksempel anvendes.
Uttrykket "farmasøytisk akseptabel" blir anvendt her for å referere til de forbindelser, materialer, preparater og/eller doseformer som er, innenfor omfanget av sunn medisinsk bedømmelse, egnet for anvendelse i kontakt med vevet til pasienter uten for høy toksisitet, irritasjon, allergisk respons eller andre problemer eller komplikasjoner som er i samsvar med et rimelig risiko/nytte-forhold.
Betegnelsen "behandling" angir: (i) forhindring av en sykdom, lidelse eller tilstand som forekommer hos en pasient som kan være predisponert for sykdommen, lidelsen og/eller tilstanden, men ennå ikke har vært diagnostisert å ha den; (ii) hemning av sykdommen, lidelsen eller tilstanden, dvs. stans av dens utvikling; og (iii) lindring av sykdommen, lidelsen eller tilstanden, dvs. forårsaker regresjon av sykdommen, lidelsen og/eller tilstanden. Betegnelsen "substituert" som anvendt her omfatter substitusjon på fra ett til maksimalt antall av mulige bindingsseter på kjernen, f.eks. organisk rest, til hvilken subsituenten er bundet, f.eks. mono-, di-, tri-eller tetra-substituert, hvis ikke på annen måte spesifikt angitt.
Betegnelsen "halogen" som anvendt her betyr en halogensubstituent valgt fra brom, klor, fluor eller jod. Betegnelsen "halogenalkyl" betyr en alkylgruppe som er substituert med én eller flere halogensubstituenter.
Betegnelsen "alkyl" som anvendt her betyr acykliske, lineære eller forgrenede alkylsubstituenter og omfatter for eksempel metyl, etyl, propyl, butyl, tert-butyl, heksyl, 1-metyletyl, 1-metylpropyl, 2-methypropyl, 1,1-dimetyletyl. Således angir Ci-6alkyl en alkylgruppe som har fra ett til seks karbonatomer. Betegnelsen "lavere alkyl" betyr en alkylgruppe som har fra ett til seks, fortrinnsvis fra ett til fire karbonatomer. Betegnelsen "alkylester" betyr en alkylgruppe som i tillegg inneholder en estergruppe. Generelt omfatter et angitt karbonantall-område, f.eks. C2-6alkylester, alle karbonatomene i resten.
Betegnelsen "alkenyl" som anvendt her betyr en alkylrest inneholdende minst én dobbeltbinding, f.eks. etenyl (vinyl) og alkyl.
Betegnelsen "alkoksy" som anvendt her betyr en alkylgruppe med det angitte antall karbonatomer bundet til et oksygenatom. Alkoksy omfatter for eksempel metoksy, etoksy, propoksy, 1-metyletoksy, butoksy og 1,1-dimetyletoksy. Den sistnevnte rest er referert til på området som tert-butoksy. Betegnelsen "alkoksykarbonyl" betyr en alkoksygruppe som i tillegg inneholder en karbonylgruppe.
Betegnelsen "cykloalkyl" som anvendt her betyr en cykloalkylsubstituent som inneholder det angitte antall karbonatomer og omfatter for eksempel cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl, cykloheptyl og spiro-cykliske grupper så som spirocyklopropyl og spirocyklobutyl. Betegnelsen "cykloalkoksy" som anvendt her betyr en cykloalkylgruppe bundet til et oksygenatom, så som for eksempel cyklobutyloksy eller cyklopropyloksy. Betegnelsen "alkylcykloalkyl" betyr en cykloalkylgruppe bundet til en alkylgruppe. Det angitte karbonantall-område omfatter det totale antall karbonatomer i resten, hvis ikke på annen måte spesifikt angitt. Denne C4.10alkylcykloalkyl kan inneholde fra 1-7 karbonatomer i alkylgruppen og fra 3-9 karbonatomer i ringen, f.eks. cyklopropylmetyl eller cykloheksyletyl.
Betegnelsen "aryl" som anvendt her betyr en aromatisk gruppe inneholdende det angitte antall karbonatomer, så som, men ikke begrenset til fenyl, indanyl eller naftyl. For eksempel angir C6-10aryl en aromatisk gruppe som har fra seks til ti karbonatomer som kan være i form av en monocyklisk eller bicyklisk struktur. Betegnelsen "halogenaryl" som anvendt her angir aryl mono-, di- eller tri-substituert med ett eller flere halogenatomer. Betegnelsene "alkylaryl", "arylalkyl" og "aralalkyl" betyr en arylgruppe substituert med én eller flere alkylgrupper. Således har en C7.14alkylarylgruppe fra 1-8 karbonatomer i alkylgruppen for en monocyklisk aromatisk gruppe og fra 1-4 karbonatomer i alkylgruppen for en kondensert aromatisk gruppe. Arylrestene omfatter de substituert med typiske substituenter kjent for fagfolk på området, f.eks. halogen, hydroksy, karboksy, karbonyl, nitro, sulfo, amino, cyano, dialkylamino halogenalkyl, CF3, halogenalkoksy, tioalkyl, alkanoyl, SH, alkylamino, alkylamid, dialkylamid, karboksyester, alkylsulfon, alkylsulfonamid og alkyl(alkoksy)amin. Eksempler på alkylarylgrupper omfatter benzyl, butylfenyl og 1-naftylmetyl. Betegnelsene "alkylaryloksy" og "alkylarylester" betyr alkylarylgrupper inneholdende henholdsvis et oksygenatom og en estergruppe.
Betegnelsen "karboksyalkyl" som anvendt her betyr en karboksylgruppe (COOH) bundet gjennom en alkylgruppe som definert ovenfor og omfatter for eksempel smørsyre.
Betegnelsen "alkanoyl" som anvendt her betyr lineære eller forgrenede 1-oksoalkylrester inneholdende det angitte antall karbonatomer og omfatter for eksempel formyl, acetyl, 1-oksopropyl (propionyl), 2-metyl-l-oksopropyl og 1-oksoheksyl.
Betegnelsen "amino-aralkyl" som anvendt her betyr en aminogruppe substituert med en aralkylgruppe, så som den følgende amino-aralkyl
Betegnelsen "alkylamid" som anvendt her betyr et amid mono-substituert med alkyl, så som
Betegnelsen "karboksyalkyl" som anvendt her betyr en karboksylgruppe (COOH) bundet gjennom en alkylgruppe som definert ovenfor og omfatter for eksempel smørsyre.
Betegnelsen "heterocyklisk gruppe" også referert til som "Het", som anvendt her betyr 7-12-leddede bicykliske, heterocykliske grupper og 5-7-leddede monocykliske heterocykliske grupper.
Foretrukne bicykliske, heterocykliske grupper er 7-12-leddede kondenserte bicykliske ringsystemer (begge ringer deler et nabostilt par av atomer) inneholdende fra ett til fire heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel, hvor begge ringer i den heterocykliske gruppen er fullstendig umettede. Nitrogen- og svovel-heteroatomene kan eventuelt være oksydert. Den bicykliske heterocykliske gruppen kan inneholde heteroatomene i én eller begge ringer. Den bicykliske heterocykliske gruppen kan også inneholde substituenter på hvilken som helst av ringkarbonatomene, f.eks. én til tre substituenter. Eksempler på egnede substituenter omfatter Ci.6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci.6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci-6alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH,, amino, C 1.6 alkylamino, di (Ci-6) alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci.6alkylsulfon, Ci-6alkylsulfonamid, Ci.6alkylsulfoksyd, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe. Når to substituenter er bundet til nabostilte karbonatomer i den bicykliske heterocykliske gruppen, kan de sammen danne en ring, f.eks. et fem-, seks- eller syv-leddet ringsystem inneholdende opptil to heteroatomer valgt fra oksygen og nitrogen. Den bicykliske heterocykliske gruppen kan være bundet til dens vedhengende gruppe, f.eks. X i Formel I, ved hvilket som helst atom i ringen og fortrinnsvis karbon.
Eksempler på bicykliske, heterocykliske grupper omfatter de følgende ringsystemer:
Foretrukne monocykliske heterocykliske grupper er 5-7-leddede mettede, delvis mettede eller fullstendig umettede ringsystemer (denne siste underklasse her referert til som umettet heteroaromatisk) inneholdende i ringen fra ett til fire heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel, hvor svovel- og nitrogen-heteroatomene eventuelt kan være oksydert. Den monocykliske heterocykliske gruppen kan også inneholde substituenter på hvilket som helst av ringatomene, f.eks. én til tre substituenter. Eksempler på egnede substituenter omfatter Ci_6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci.6alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci-6alkylamino, di (Ci-6) alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci-6alkylsulfon, Ci-6alkylsulfoksyd, Ci-6alkylsulfonamid, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl og 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe. Den monocykliske heterocykliske gruppen kan være bundet til dens vedhengende gruppe, f.eks. X i Formel I, ved hvilket som helst atom i ringen.
Eksempler på monocykliske heterocykliske grupper omfatter de følgende:
Fagfolk på området vil forstå at de heterocykliske gruppene anvendt i forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse må være stabile. Generelt er stabile forbindelser de som kan syntetiseres, isoleres og formuleres ved anvendelse av teknikker kjent for fagfolk på området uten nedbrytning av forbindelsen.
Når anvendt i betegnelsene av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse, angir betegnelsene "Pl', Pl, P2, P3 og P4", som anvendt her, de relative stillinger av aminosyrerestene av en proteaseinhibitor-binding i forhold til bindingen av det naturlige peptidspaltning-substrat. Spaltning skjer i det naturlige substrat mellom Pl og Pl' hvor de "nonprime" posisjoner betegner aminosyrer ved å starte fra C-terminus enden av peptidets naturlige spaltningssete og strekker seg mot N-terminus; mens, "prime" posisjoner utgår fra N-terminus-enden av spaltningssete-angivelsen og strekker seg mot C-terminus. For eksempel angir Pl' den første posisjon etter den høyre siden av C-terminus av spaltningssetet (dvs. N-terminus første posisjon); mens Pl starter nummerering fra venstre side av C-terminus spaltningssetet, P2: andre posisjon fra C-terminus, etc.) (se Berger A. & Schechter I., Transactions of the Royal Society London Series (1970), B257. 249-264].
Således i forbindelsene med formel I, er "Pl' til P4" deler av molekylet angitt nedenfor:
Som anvendt her angir betegnelsen "1-aminocyklopropyl-karboksylsyre"
(Acca) en forbindelse med formelen:
Som anvendt her angir betegnelsen "tert-butylglycin" en forbindelse med formelen:
Betegnelsen "rest" med referanse til en aminosyre eller et aminosyrederivat betyr en rest avledet fra den tilsvarende a-aminosyre ved fjerning av hydroksyl i karboksygruppen og ett hydrogen i a-aminosyregruppe. For eksempel representerer betegnelsene Gin, Ala, Gly, Ile, Arg, Asp, Phe, Ser, Leu, Cys, Asn, Sar og Tyr henholdsvis "restene" av Z,-glutamin, Z,-alanin, glycin, Z,-isoleucin, Z,-arginin, Z,-asparaginsyre, Z,-fenylalanin, Z,-serin, Z,-leucin, Z,-cystein, Z,-asparagin, sarcosin og Z,-tyrosin.
Betegnelsen "sidekjede" med referanse til en aminosyre eller aminosyrerest betyr en gruppe bundet til a-karbonatomet i a-aminosyre. For eksempel er R-gruppe sidekjede for glycin hydrogen, for alanin er den metyl, for valin er den isopropyl. For spesifikke R-grupper eller sidekjeder av a-aminosyrer refereres til A.L. Lehninger's text on Biochemistry (se kapittel 4).
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse har strukturen med formel I:
hvor:
(a) Ri er Ci-g alkyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl; (b) m er 1 eller 2; (c) n er 1 eller 2; (d) R2er H, Ci-6alkyl, C2-6alkenyl eller C3.7cykloalkyl, hver eventuelt substituert med halogen; (e) R3er Ci-g alkyl eventuelt substituert med halogen, cyano, amino, Ci-6dialkylamino, C6-10aryl, C7.14alkylaryl, Ci-6alkoksy, karboksy, hydroksy, aryloksy, C7.14alkylaryloksy, C2-6alkylester, Cg.15alkylarylester; C3.12alkenyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl, hvor cykloalkyl eller alkylcykloalkyl eventuelt er substituert med hydroksy, Q.6 alkyl, C2-6alkenyl eller Ci_6alkoksy; eller R3sammen med karbonatomet til hvilket den er tilknyttet danner en C3.7cykloalkylgruppe eventuelt substituert med C2-6alkenyl; (f) Y er H, fenyl substituert med nitro, pyridyl substituert med nitro eller Ci-6alkyl eventuelt substituert med cyano, OH eller C3.7cykloalkyl; forutsatt at hvis R4eller R5er H da er Y H; (g) B er H, Cwalkyl, R4-(C=0)-, R4OOX))-, R4-N(R5)-C(=0)-,
R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- eller R4-N(R5)-S02-;
(h) R4er (i) Cmoalkyl eventuelt substituert med fenyl, karboksyl, Ci_6
alkanoyl, 1-3 halogen, hydroksy, -OC(0)C 1.6 alkyl, Ci.6alkoksy, amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl, amido eller (lavere alkyl) amido; (ii) C3.7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4-10alkylcykloalkyl, hver eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amido; (iii) C6-10aryl eller C7.16arylalkyl, hver eventuelt substituert med Ci_6alkyl, halogen, nitro, hydroksy, amido, (lavere alkyl) amido eller amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl; (iv) Het; (v) bicyklo(l.l.l)pentan; eller (vi) -C(0)OCi.6alkyl, C2-6alkenyl eller C2-6alkynyl;
(i) R5er H; Ci-6alkyl eventuelt substituert med 1-3 halogenatomer; eller
Ci-6alkoksy forutsatt at R4er Cmo alkyl;
0) X er O, S, SO, S02, OCH2, CH20 eller NH;
(k) R' er Het; eller C6-10aryl eller C7-14alkylaryl, eventuelt substituert med
Ra; og
(1) Ra er Ci^alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci_6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-C 1.6 alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci_6alkylamino, di-(Ci-6) alkylamino, di-(Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci-6alkylsulfon, Ci-6alkylsulfonamid, di-(Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet
monocyklisk heterocyklisk gruppe;
hvor betegnelsen "heterocyklisk gruppe" eller "Het" betyr 7-12-leddede bicykliske, heterocykliske grupper og 5-7-leddede monocykliske heterocykliske grupper, hvor den bicykliske heterocykliske gruppen kan inneholde en til tre substituenter på hvilken som helst av ringkarbonatomene, valgt blant Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci^
alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci-6alkylamino, di (Ci-6) alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci-6alkylsulfon, Ci.6alkylsulfonamid, Ci-6alkylsulfoksyd, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe hvor når to substituenter er bundet til nabostilte karbonatomer i den bicykliske heterocykliske gruppen, kan de sammen danne en ring inneholdende opptil to heteroatomer valgt fra oksygen og nitrogen;
hvor den monocykliske heterocykliske gruppen kan inneholde en til tre substituenter på hvilket som helst av ringatomene valgt blant Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci-6alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci-6alkylamino, di (Ci-6> alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6> karboksyester, Q.6 alkylsulfon, Ci-6 alkylsulfoksyd, alkylsulfonamid, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe;
med det forbehold at X- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav.
Fortrinnsvis er R2C2-6alkenyl; R3er Ci-g alkyl eventuelt substituert med Ci.6alkoksy eller C3.7cykloalkyl; Y er H; B er R4-(C=0)-, R40(C=0)- eller R4-N(R5)-C(=0)-; R4er Cmo alkyl eventuelt substituert med 1-3 halogen eller Ci-6alkoksy; eller C3.7cykloalkyl eller C4.10alkylcykloalklyl; R5er H; X er O eller NH; og R' er Het.
Substituentene fra hver gruppering kan velges individuelt og kombinert i hvilken som helst kombinasjon som gir en stabil forbindelse i henhold til foreliggende oppfinnelse. Mer enn én substituent fra hver gruppe kan også være substituert på kjernegruppen, forutsatt at det er tilstrekkelig tilgjengelige bindingsseter. For eksempel kan hver av de følgende Ra substituenter, Ci-6alkoksy, C6aryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe, være substituert på en bicyklisk heterocyklisk gruppe R'.
I et foretrukket aspekt har forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse strukturen med formel II:
hvor:
(a) Ri er C3.7cykloalkyl; (b) R2er Ci-6alkyl, C2-6alkenyl eller C3.7cykloalkyl; (c) R3er Ci_8alkyl eventuelt substituert med C6aryl, Ci.6alkoksy, karboksy, hydroksy, aryloksy, C7.14alkylaryloksy, C2-6alkylester, Cg.15alkylarylester; C3.12alkenyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl; (d) Y er H; (e) B er H, C^ alkyl, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- eller R4-N(R5)-S02-; (f) R4er (i) Ci-10alkyl eventuelt substituert med fenyl, karboksyl, Ci-6alkanoyl, 1-3 halogen, hydroksy, Ci_6alkoksy; (ii) C3.7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4-10alkylcykloalklyl; eller (iii) C6-10aryl eller C7.16arylalkyl, hver eventuelt substituert med Ci-6alkyl eller halogen; (g) R5er H eller Ci_6alkyl eventuelt substituert med 1 -3 halogenatomer; (h) XerOellerNH; (i) R' er Het; eller C6-10aryl eventuelt substituert med Ra; og (j) Ra er Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, halogen-Ci-6alkyl,
halogen, amino, C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk
gruppe;
med det forbehold at Xa- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav.
I ett foretrukket aspekt av foreliggende oppfinnelse er R' en bicyklisk heterocyklisk gruppe. Fortrinnsvis inneholder den bicykliske heterocykliske gruppe 1 eller 2 nitrogenatomer og eventuelt et svovelatom eller et oksygenatom i ringen. Fortrinnsvis er den heterocykliske gruppen substituert med minst én av Q.6 alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6aryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe. Mer foretrukket er R' en bicyklisk heterocyklisk gruppe inneholdende 1 nitrogenatom og substituert med metoksy og minst én av en C6aryl- og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
I et annet foretrukket aspekt av foreliggende oppfinnelse er R' en monocyklisk heterocyklisk gruppe. Fortrinnsvis inneholder den heterocykliske gruppen 1 eller 2 nitrogenatomer og eventuelt et svovelatom eller et oksygenatom i ringen. Fortrinnsvis er den heterocykliske gruppen substituert med minst én av Ci_6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe. Mer foretrukket er R' en monocyklisk heterocyklisk gruppe inneholdende 1 eller 2 nitrogenatomer og substituert med metoksy og minst én av en C6aryl- og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
I et mer foretrukket aspekt av foreliggende oppfinnelse har forbindelsene strukturen med formel III
hvor:
(a) Ri er C3.7cykloalkyl; (b) R2er C2-6alkenyl; (c) R3er C1.8alkyl; (d) Y er H; (e) B er R40(C=0)- eller R4-N(R5)-C(=0)-; (f) R4er Ci.ioalkyl; (<g>) RserH; (h) R' er en bicyklisk heterocyklisk gruppe eventuelt substituert med Ra;
og
(i) Ra er Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe; med det forbehold at O- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav.
Fortrinnsvis er Ri cyklopropyl eller cyklobutyl, R2er vinyl, R3er t-butyl, R4er t-butyl og R' er kinolin eller isokinolin eventuelt substituert med Ra. Fortrinnsvis omfatter Ra minst én av Ci_6alkoksy, C6aryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe. I et foretrukket aspekt av foreliggende oppfinnelse er Ri cyklopropyl, R2er vinyl, R3er t-butyl, R4er t-butyl og R' er isokinolin substituert med Ci-6alkoksy og minst én av C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan, i kraft av deres basiske gruppe, danne salter ved tilsetning av en farmasøytisk akseptabel syre. Syreaddisjonssaltene blir dannet fra en forbindelse med formel I og en farmasøytisk akseptabel uorganisk syre, omfattende saltsyre, bromhydrogensyre, jodhydrogensyre, svovelsyre, fosforsyre eller en organisk syre så som p-toluensulfonsyre, metansulfonsyre, eddiksyre, benzosyre, sitronsyre, malonsyre, fumarsyre, maleinsyre, oksalsyre, ravsyre, sulfaminsyre eller vinsyre. Således omfatter eksempler på slike farmasøytisk akseptable salter klorid, bromid, jodid, sulfat, fosfat, metansulfonat, citrat, acetat, malonat, fumarat, sulfamat og tartrat.
Salter av en amingruppe kan også omfatte kvaternære ammoniumsalter hvor amino-nitrogenet bærer en egnet organisk gruppe så som en alkyl-, alkenyl-, alkynyl-eller aralkylgruppe.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse, som er substituert med en sur gruppe, kan eksistere som salter dannet gjennom baseaddisjon. Slike base-addisjonssalter omfatter de avledet fra uorganiske baser som omfatter for eksempel alkalimetallsalter (f.eks. natrium og kalium), jordalkalimetallsalter (f.eks. kalsium og magnesium), aluminiumsalter og ammoniumsalter. I tillegg omfatter egnede base-addisjonssalter salter av fysiologisk akseptable organiske baser så som trimetylamin, trietylamin, morfolin, pyridin, piperidin, pikolin, dicykloheksylamin, N,N' -dibenzyletylendiamin, 2-hydroksyetylamin, bis-(2-hydroksyetyl)amin, tri-(2-hydroksyetyl)amin, prokain, dibenzylpiperidin, N-benzyl-P-fenetylamin, dehydroabietylamin, N,N'-bishydroabietylamin, glukamin, N-metylglukamin, kollidin, kinin, kinolin, etylendiamin, ornitin, cholin, N,N'-benzylfenetylamin, klorprokain, dietanolamin, dietylamin, piperazin, tris(hydroksymetyl)aminometan og tetrametylammoniumhydroksyd og basiske aminosyrer så som lysin, arginin og N-metylglutamin. Disse salter kan fremstilles ved metoder kjent for fagfolk på området.
Visse forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse og deres salter kan også eksistere i form av solvater med vann, for eksempel hydrater eller med organiske løsningsmidler så som metanol, etanol eller acetonitril for å danne henholdsvis et metanolat, etanolat eller acetonitrilat. Foreliggende oppfinnelse omfatter hvert solvat og blandinger derav.
I tillegg kan forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse eller et salt eller solvat derav, oppvise polymorfisme. Foreliggende oppfinnelse omfatter også hvilken som helst slik polymorf form.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse inneholder også to eller flere chirale sentere. For eksempel kan forbindelsene omfatte Pl cyklopropyl-elementet med formelen
hvor Ci og C2hver representerer et asymmetrisk karbonatom i stillinger 1 og 2 av cyklopropylringen. Uansett andre mulige asymmetriske sentere i andre segmenter av forbindelsene, betyr tilstedeværelsen av disse to asymmetriske sentere at forbindelsene kan eksistere som racemiske blandinger av diastereomerene, så som diastereomerene hvor R2er enten i konfigurasjonen syn til amidet eller syn til karbonylgruppen som vist nedenfor.
Foreliggende oppfinnelse omfatter begge enantiomerer og blandinger av enantiomerer så som racemiske blandinger.
Enantiomerene kan spaltes ved metoder kjent for fagfolk på området, for eksempel ved dannelse av diastereoisomere salter som kan separeres ved krystallisering, gass-væske- eller væskekromatografi, selektiv omsetning av én enantiomer med et enantiomer-spesifikt reagens. Det vil forstås at når den ønskede enantiomer blir omdannet til en annen kjemisk enhet ved en separeringsteknikk, da er et ytterligere trinn nødvendig for å danne den ønskede enantiomere form. Alternativt kan spesifikke enantiomerer syntetiseres ved asymmetrisk syntese ved anvendelse av optisk aktive reagenser, substrater, katalysatorer eller løsningsmidler eller ved omdannelse av én enantiomer til den andre ved asymmetrisk transformasjon.
Visse forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan også eksistere i forskjellige stabile konformasjonsformer som kan være separerbare. Torsjonsasymmetri på grunn av begrenset rotasjon om en asymmetrisk enkeltbinding, for eksempel på grunn av sterisk hindring eller ringspenning, kan tillate separering av forskjellige konformere former. Foreliggende oppfinnelse omfatter hver konformasjonell isomer av disse forbindelser og blandinger derav.
Visse forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan eksistere i zwitterion-form og foreliggende oppfinnelse omfatter hver zwitterion-form av disse forbindelser og blandinger derav.
Utgangsmaterialene anvendelige for å syntetisere forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er kjent for fagfolk på området og kan lett fremstilles eller er kommersielt tilgjengelige.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved metoder kjent for fagfolk på området, se for eksempel US-patent nr. 6,323,180 og US-patent søknad. 20020111313 Al. De følgende metoder angitt nedenfor er gitt for illustrative formål. Det vil forstås at det kan være foretrukket eller nødvendig å fremstille en slik forbindelse hvor en funksjonell gruppe er beskyttet ved anvendelse av en konvensjonell beskyttelsesgruppe for deretter å fjerne beskyttelsesgruppen for å tilveiebringe en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse. Detaljene angående anvendelse av beskyttelsesgrupper i henhold til foreliggende oppfinnelse er kjent for fagfolk på området.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan for eksempel syntetiseres i henhold til en generell prosess som illustrert i Skjema I (hvor CPG er en karboksyl-beskyttelsesgruppe og APG er en amino-beskyttelsesgruppe):
Kort angitt kan Pl, P2 og P3 bindes ved velkjente peptid-koblingsteknikker. Pl-, P2- og P3-grupper kan bindes sammen i hvilken som helst rekkefølge så lenge den endelige forbindelse svarer til peptider ifølge foreliggende oppfinnelse. For eksempel kan P3 bindes til P2-P1; eller Pl bindes til P3-P2.
Generelt blir peptider forlenget ved avbeskyttelse av a-aminogruppen i den N-terminale rest og kobling av den ubeskyttede karboksylgruppe med neste hensiktsmessig N-beskyttede aminosyre gjennom en peptidbinding ved anvendelse av metodene beskrevet. Denne avbeskyttelses- og koblings-prosedyre blir gjentatt inntil den ønskede sekvens blir oppnådd. Denne kobling kan utføres med aktuelle aminosyrer på trinnvis måte, som vist i Skjema I.
Kobling mellom to aminosyrer, en aminosyre og et peptid eller to peptid-fragmenter kan utføres ved anvendelse av standard koblingsprosedyrer så som azid-metode, blandet karbonsyre-karboksylsyreanhydrid (isobutylklorformiat) metode, karbodiimid (dicykloheksylkarbodiimid, diisopropylkarbodiimid eller vann-oppløselig karbodiimid) metode, aktiv ester (p-nitrofenylester, N-hydroksysuccin-imidoester) metode, Woodward reagens K-metode, karbonyldiimidazol-metode, fosfor-reagenser eller oksydasjon-reduksjon-metoder. Noen av disse metoder (spesielt karbodiimid-metoden) kan forbedres ved tilsetning av 1-hydroksybenzotriazol eller 4-DMAP. Disse koblingsreaksjoner kan utføres enten i løsning (væskefase) eller fastfase.
Mer eksplisitt involverer koblingstrinnet dehydrativ kobling av en fri karboksylgruppe med én reaktant i den frie aminogruppe med den andre reaktant i nærvær av et koblingsmiddel for å danne en lenkende amidbinding. Beskrivelser av slike koblingsmidler finnes generelt i lærebøker om peptidkjemi, for eksempel M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2. rev ed., Springer-Verlag, Berlin, Tyskland,
(1993). Eksempler på egnede koblingsmidler er N,N'-dicykloheksylkarbodiimid, 1-hydroksybenzotriazol i nærvær av N,N'-dicykloheksylkarbodiimid eller N-etyl-N'-[(3-dimetylamino)propyl]karbodiimid. Et praktisk og anvendelig koblingsmiddel er det kommersielt tilgjengelige (benzotriazol-l-yloksy)tris-(dimetylamino)fosfonium-heksafluorfosfat, enten alene eller i nærvær av 1-hydroksybenzotriazol eller 4-DMAP. Et annet praktisk og anvendelig koblingsmiddel er kommersielt tilgjengelig 2-(lH-benzotriazol-l-yl)- N,N,N',N'-tetrametyluronium-tetrafluorborat. Enda et annet praktisk og anvendelig koblingsmiddel er kommersielt tilgjengelig 0-(7-azabenzotrizol-l-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-heksafluorfosfat. Koblingsreaksjonen blir utført i et inert løsningsmiddel, f.eks. diklormetan, acetonitril eller dimetylformamid. Et overskudd av et tertiært amin, f.eks. diisopropyletylamin, N-metylmorfolin, N-metylpyrrolidin eller 4-DMAP blir tilsatt for å holde reaksjonsblandingen ved en pH på ca. 8. Reaksjonstemperaturen er vanligvis i området mellom 0°C og 50°C og reaksjonstiden er vanligvis i området mellom 15 min og 24 timer.
De funksjonelle gruppene i aminosyre-bestanddelene må generelt være beskyttet under koblingsreaksjonene for å unngå dannelse av uønskede bindinger. Beskyttelsesgrupper som kan anvendes er listet opp i for eksempel Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley & Sons, New York (1981) og "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, New York
(1981).
a-aminogruppen i hver aminosyre som skal kobles til den voksende peptidkjede må være beskyttet (APG). Hvilken som helst beskyttelsesgruppe kjent på området kan anvendes. Eksempler på slike grupper omfatter: 1) acylgrupper så som formyl, trifluoracetyl, ftalyl og p-toluensulfonyl; 2) aromatiske karbamatgrupper så som benzyloksykarbonyl (Cbz eller Z) og substituert benzyloksykarbonyl og 9-fluorenylmetyloksykarbonyl (Fmoc); 3) alifatiske karbamatgrupper så som tert-butyloksykarbonyl (Boe), etoksykarbonyl, diisopropylmetoksykarbonyl og allyloksykarbonyl; 4) cykliske alkylkarbamatgrupper så som
cyklopentyloksykarbonyl og adamantyloksykarbonyl; 5) alkylgrupper så som trifenylmetyl og benzyl; 6) trialkylsilyl så som trimetylsilyl; og 7) tiol-inneholdende grupper så som fenyltiokarbonyl og ditiasuccinoyl.
Den foretrukne a-amino-beskyttelsesgruppe er enten Boe eller Fmoc. Mange aminosyrederivater hensiktsmessig beskyttet for peptidsyntese er kommersielt tilgjengelige, a-amino-beskyttelsesgruppe i den nylig tilsatte aminosyrerest blir spaltet før koblingen av neste aminosyre. Når Boc-gruppen blir anvendt er valgte metoder trifluoreddiksyre, ren eller i diklormetan eller HC1 i dioksan eller i etylacetat. Det resulterende ammoniumsalt blir deretter nøytralisert enten før koblingen eller in situ med basiske løsninger så som vandige buffere eller tertiære aminer i diklormetan eller acetonitril eller dimetylformamid. Når Fmoc-gruppen blir anvendt er valgte reagenser piperidin eller substituert piperidin i dimetylformamid, men hvilket som helst sekundært amin kan anvendes. Avbeskyttelsen blir utført ved en temperatur mellom 0°C og romtemperatur (rt eller RT) vanligvis 20-22°C.
Hvilken som helst av aminosyrene som har sidekjede-funksjonaliteter må være beskyttet under fremstilling av peptidet ved anvendelse av hvilken som helst av gruppene beskrevet ovenfor. Fagfolk på området vil forstå at valg og anvendelse av passende beskyttelsesgrupper for disse sidekjede-funksjonaliteter avhenger av aminosyren og tilstedeværelse av andre beskyttelsesgrupper i peptidet. Valg av slike beskyttelsesgrupper er viktig ved at gruppen ikke må fjernes under avbeskyttelse og kobling av a-aminogruppen.
Når for eksempel Boe blir anvendt som a-amino-beskyttelsesgruppe, er de følgende sidekjede-beskyttelsesgrupper egnet: /?-toluensulfonyl- (tosyl) grupper kan anvendes for å beskytte aminosidekjeden av aminosyrer så som Lys og Arg; acetamidometyl, benzyl (Bn) eller ter/-butylsulfonylgrupper kan anvendes for å beskytte den sulfid-inneholdende sidekjede i cystein; benzyl- (Bn) etere kan anvendes for å beskytte de hydroksy-inneholdende sidekjeder av serin, treonin eller hydroksyprolin; og benzylestere kan anvendes for å beskytte de karboksy-inneholdende sidekjeder i asparaginsyre og glutaminsyre.
Når Fmoc er valgt for a-amin-beskyttelse, er vanligvis terf-butyl-baserte beskyttelsesgrupper akseptable. For eksempel kan Boe anvendes for lysin og arginin, tert-butyleter for serin, treonin og hydroksyprolin og tert-butylester for asparaginsyre og glutaminsyre. Trifenylmetyl- (trityl) gruppe kan anvendes for å beskytte den sulfid-inneholdende sidekjede i cystein.
Når forlengelsen av peptidet er fullført fjernes alle beskyttelsesgruppene. Når en væskefase syntese blir anvendt, fjernes beskyttelsesgruppene på hvilken som helst måte som er diktert av valg av beskyttelsesgrupper. Disse prosedyrer er velkjente for fagfolk på området.
Videre kan de følgende retningslinjer følges ved fremstilling av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse. For eksempel for å danne en forbindelse hvor
R4-C(0)-, R4-S(0)2, blir en beskyttet P3 eller hele peptidet eller et peptid-segment koblet til henholdsvis et passende acylklorid eller sulfonylklorid, som enten er kommersielt tilgjengelig eller for hvilket syntesen er velkjent på området.
Ved fremstilling av en forbindelse hvor R40-C(0)-, blir en beskyttet P3 eller hele peptidet eller et peptid-segment koblet til et passende klorformiat som enten er kommersielt tilgjengelig eller for hvilket syntesen er velkjent på området. For Boc-derivater blir (Boc)20 anvendt.
For eksempel:
Cyklopentanol blir behandlet med fosgen hvilket gir det tilsvarende klorformiat.
Klorformiatet blir behandlet med det ønskede NH2-tripeptid i nærvær av en base så som trietylamin, hvilket gir cyklopentylkarbamatet.
Ved fremstilling av en forbindelse hvor R4-N(R5)-C(0)- eller R4-NH-C(S)-, blir en beskyttet P3 eller hele peptidet eller et peptid-segment behandlet med fosgen fulgt av amin som beskrevet i SynLett. Feb 1995; (2); 142-144 eller blir omsatt med det kommersielt tilgjengelige isocyanat og en egnet base så som trietylamin.
Ved fremstilling av en forbindelse hvor R4-N(Rs)-S(02), blir en beskyttet P3 eller hele peptidet eller et peptid-segment behandlet med enten nyfremstilt eller kommersielt tilgjengelig sulfamylklorid fulgt av amin som beskrevet i tysk offentliggjørelsesskrift (1998), 84 pp. DE 19802350 eller WO 98/32748.
a-karboksylgruppen med den C-terminale resten blir vanligvis beskyttet som en ester (CPG) som kan spaltes for å gi karboksylsyren. Beskyttelsesgrupper som kan anvendes omfatter: 1) alkylestere så som metyl, trimetylsilyletyl og t-butyl, 2) aralkylestere så som benzyl og substituert benzyl eller 3) estere som kan spaltes ved
mild base behandling eller milde reduktive metoder så som trikloretyl og fenacylestere.
Den resulterende a-karboksylsyre (som er et resultat av spaltning med mild syre, mild base-behandling eller milde reduktive metoder) blir koblet med R1SO2NH2[fremstilt ved behandling av R1SO2CI i ammoniakk-mettet tetrahydrofuran-løsning] i nærvær av peptid-koblingsmiddel så som CDI eller ED AC i nærvær av en base så som 4-dimetylaminopyridin (4-DMAP) og/eller l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-en (DBU) for å innføre Pl'-gruppen, ved effektivt å samle tripeptidet P1'-P1-P2-P3-APG. Typisk, i denne prosessen blir 1-5 ekvivalenter av Pl' koblingsmidler anvendt.
Videre, hvis P3-beskyttelsesgruppen APG blir fjernet og erstattet med en B-gruppe ved metodene beskrevet ovenfor og den resulterende a-karboksylsyre som er et resultat av spaltning (som er et resultat av spaltning med mild syre, mild base-behandling eller milde reduktive metoder) blir koblet med R1SO2NH2[fremstilt ved behandling av R1SO2CI i ammoniakk-mettet tetrahydrofuran-løsning eller alternative metoder beskrevet her] i nærvær av peptid-koblingsmiddel så som CDI eller EDAC i nærvær av en base så som 4-dimetylaminopyridin (4-DMAP) og/eller l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-en (DBU) for å innføre Pl'-gruppe, blir tripeptidet Pl '-P1-P2-P3-B fremstilt. Typisk, i denne prosessen blir 1-5 ekvivalenter av Pl '-koblingsmidler anvendt.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved mange metoder omfattende de beskrevet i eksemplene nedenfor og som beskrevet i U.S.
Patent nr. 6,323,180 og U.S. Patentsøknad nr. 10/001,850 innlevert 20. november 2001.
Skjema II viser videre den generelle prosess hvor forbindelser med formel I blir konstruert ved kobling av tripeptid karboksylsyre-mellomprodukt (1) med et Pl - sulfonamid. (Det skal bemerkes at gruppene R6, R7, R», R9, Rio, Rn som vist nedenfor representerer substituenter i det heterocykliske system.). Nevnte koblingsreaksjon krever behandling av karboksylsyre (1) med et koblingsreagens så som karbonyl-diimidazol i et løsningsmiddel så som THF, som kan oppvarmes til tilbakeløp, fulgt av tilsetning av det dannede derivat av (1), til Pr-sulfonamid, i et løsningsmiddel så som THF eller metylenklorid i nærvær av en base så som DBU.
En alternativ prosess for konstruksjonen av forbindelser med formel I er vist i Skjema III. Der blir Pr-sulfonamid-elementet koblet til Pl -elementet ved anvendelse av fremgangsmåten anvendt i Skjema 1. Den resulterende Pl-P V -gruppe kan deretter avbeskyttes ved dens amino-terminus. I dette generelle eksempel blir en Boc-beskyttelsesgruppe anvendt, men fagfolk på området vil forstå at flere egnede amino-beskyttelsesgrupper kan anvendes ved denne prosessen. Nevnte Boc-beskyttelsesgruppe kan fjernes ved anvendelse av syre så som trifluoreddiksyre i et løsningsmiddel så som dikloretan for å gi det avbeskyttede amin som TFA-saltet. Nevnte TFA-aminsalt kan anvendes direkte i den påfølgende koblingsreaksjon eller som et alternativ kan TFA-aminsaltet først omdannes til HCl-aminsalt og dette HC1-aminsalt anvendes i nevnte koblingsreaksjon som vist i Skjema III. Ved kobling av nevnte HCl-aminsalt (3) med karboksyl-terminus kan et P4-P3-P2 mellomprodukt oppnås ved anvendelse av koblingsreagenser, så som HATU, i løsningsmidler så som diklormetan for å gi forbindelser med formel I (4).
En alternativ prosess for konstruksjon av forbindelser med formel I er vist i Skjema IV. Her blir hydrokloridsaltet av det Pl-P V terminale amin (1) koblet til den frie karboksylgruppen i P2-elementet ved anvendelse av koblingsmidler så som PyBOP, i nærvær av en base så som diisopropylamin og i et løsningsmiddel så som metylenklorid. Det resulterende P2-P1-P1' mellomprodukt kan omdannes til forbindelser med formel I i en totrinns prosess hvor det første trinn er avbeskyttelse av P2 amin terminus ved anvendelse av en syre så som TFA i et løsningsmiddel så som metylenklorid. Det resulterende trifluoreddiksyresalt kan kobles med karboksyl terminus av P4-P3-elementet ved anvendelse av standard koblingsmidler så som PyBop i nærvær av base så som diisopropylamin og ved anvendelse av løsningsmidler så som metylenklorid for å gi forbindelser med formel I (4).
P4-P3-P2 mellomproduktet anvendt i skjemaet ovenfor kan konstrueres som tidligere beskrevet med en ytterligere beskrivelse av denne prosessen vist generelt i Skjema V. Der kan den frie karboksyl-terminus i P4-P3 mellomprodukt (1), kobles til amino-terminus i P2-elementet for å gi P4-P3-P2 dipeptid (2). Karboksyl-terminus i P4-P3-P2 mellomproduktet kan avbeskyttes ved forsåpning av estergruppen for å gi P4-P3-P2 som den frie karboksylsyre (3). Mellomprodukter så som (3) kan omdannes til forbindelser med formel I ved anvendelse av metodene beskrevet her.
Forbindelser med formel 1 kan også omdannes til andre forbindelser med formel I som beskrevet her. Et eksempel på en slik fremgangsmåte er vist i Skjema
VI hvor en forbindelse med formel 1(1) som bærer en Boc-gruppe i P4-stilling blir omdannet til en forbindelse med formel I (3) hvor nevnte forbindelse bærer en urinstoff-gruppe i P4-stilling. Omdannelsen av (1) til (3) kan utføres i en totrinns prosess hvor det første er omdannelse av (1) til amin (2) ved behandling av (1) med en syre så som TFA i et løsningsmiddel så som metylenklorid. Det resulterende amin TFA-salt kan behandles med et isocyanat i nærvær av én ekvivalent base for å gi en forbindelse med formel I (3) hvor P3-gruppen er kappet med et urinstoff. Som tidligere bemerket vil fagfolk på området forstå at mellomprodukt (2) kan anvendes som utgangsmaterialer for fremstilling av forbindelser med formel I hvor P3-gruppen er kappet med et amid eller et sulfonamid eller tiourinstoff eller et sulfamid. Konstruksjon av nevnte forbindelser med formel I kan oppnås ved anvendelse av standard betingelser for dannelse av nevnte P4-funksjonaliteter fra aminer.
Ved konstruksjon av forbindelser med formel I blir P V -terminus innført i molekylene ved anvendelse av én av de generelle prosesser beskrevet ovenfor og beskrevet mer detaljert nedenfor. I noen eksempler er PT-elementer, som er cykloalkyl- eller alkylsulfonamider, kommersielt tilgjengelige eller kan fremstilles fra det tilsvarende alkyl- eller cykloalkyl-sulfonylklorid ved behandling av nevnte sulfonylklorid med ammoniakk. Alternativt kan disse sulfonamider syntetiseres ved anvendelse av den generelle prosess angitt i Skjema VII. Der blir kommersielt tilgjengelig 3-klor-propylsulfonylklorid (1) omdannet til et egnet beskyttet sulfonamid som for eksempel ved behandling med tert-butyl amin. Sulfonamidet oppnådd (2) blir deretter omdannet til det tilsvarende cykloalkylsulfonamid ved behandling med to ekvivalenter av en base så som butyllitium i et løsningsmiddel så som THF ved lav temperatur. Det resulterende cykloalkylsulfonamid kan avbeskyttes ved behandling med en syre for å gi det ønskede ubeskyttede cykloalkylsulfoamid.
Pl-elementene anvendt for generering av forbindelser med formel I er i noen tilfeller kommersielt tilgjengelige, men blir ellers syntetisert ved anvendelse av metodene beskrevet her og deretter innført i forbindelser med formel I ved anvendelse av metodene beskrevet her. De substituerte Pl cyklopropylaminosyrer kan syntetiseres ved å følge den generelle prosess angitt i Skjema VIII.
Behandling av kommersielt tilgjengelig eller lett syntetisert imin (1) med 1,4-dihalogenbuten (2) i nærvær av en base gir det resulterende imin (3). Syrehydrolyse av 3 gir deretter 4, som har en allyl-substituent syn til karboksylgruppen som et hoved-produkt. Amingruppen i 4 kan beskyttes ved anvendelse av en Boc-gruppe for å gi den fullstendig beskyttede aminosyre 5. Dette mellomproduktet er et racemat som kan spaltes ved en enzymatisk prosess hvor estergruppen i 5 blir spaltet av en protease for å gi den tilsvarende karboksylsyre. Uten å være bundet til noen spesiell teori, er det antatt at denne reaksjonen er selektiv ved at én av enantiomerene gjennomgår reaksjonen med en meget større hastighet enn dens speilbilde som tilveiebringer en kinetisk spaltning av mellomprodukt-racematet. I eksemplene angitt her, er den mer foretrukne stereoisomer for integrering i forbindelser med formel I, 5a som har (1R,2S) stereokjemi. I nærvær av enzymet gjennomgår denne enantiomer ikke ester-spaltning og derved blir denne enantiomer 5a gjenvunnet fra reaksjonsblandingen. Imidlertid gjennomgår den mindre foretrukne enantiomer, 5b som har (1S,2R) stereokjemi ester-spaltning, dvs. hydrolyse, for å gi den frie syren 6. Ved fullføring av denne reaksjonen kan esteren 5a separeres fra syreproduktet 6 ved rutinemetoder så som for eksempel vandig ekstraksjon eller kromotografi.
Prosedyrer for fremstilling av P2 mellomprodukter og forbindelser med formel I er vist i skjemaene nedenfor. Det skal bemerkes at i mange tilfeller er reaksjoner vist for bare én stilling av et mellomprodukt. Imidlertid skal det forstås at slike reaksjoner kan anvendes for å gi modifikasjoner til andre stillinger i dette mellomproduktet. Videre er nevnte mellomprodukter, reaksjonsbetingelser og metoder gitt i de spesifikke eksempler bredt anvendbare for forbindelser med andre substitusjonsmønstere. De generelle Skjemaer beskrevet nedenfor er fulgt av eksempler her. Både generelle og spesifikke eksempler er ikke-begrensende, for eksempel er isokinolin-kjerne vist som del av det generelle skjema, Skjema IX, imidlertid representerer denne banen en anvendelig prosess for konstruksjon av alternative heterocyklisk gruppe-substituenter som erstatninger for isokinolin-elementet, så som kinoliner eller pyridiner.
Skjema IX viser kobling av en N-beskyttet C4-hydroksyprolin-gruppe med en heterocyklisk gruppe for å danne mellomprodukt (4) og den påfølgende modifikasjon av nevnte mellomprodukt (4) til en forbindelse med formel I ved fremgangsmåten med peptidforlengelse som beskrevet her. Det skal bemerkes at i det første trinn, som er kobling av C4-hydroksy-prolin-gruppen med heteroaryl-elementet, blir en base anvendt. Fagfolk på området vil forstå at denne kobling kan utføres ved anvendelse av baser så som kalium-tert-butoksyd eller natriumhydrid, i løsningsmidler så som DMF eller DMSO eller THF. Denne kobling til isokinolin-ringsystemet skjer ved Cl stilling (nummerering for isokinolin-ringsystemet vist i mellomprodukt 2 i skjema IX) og blir dirigert av klorgruppen som blir fortrengt i denne prosessen. Det skal bemerkes at en alternativ utgående grupper kan anvendes i denne stilling så som fluor som vist i skjemaet. Nevnte fluor-mellomprodukter (3) er tilgjengelige fra de tilsvarende klorforbindelser ved anvendelse av litteratur-prosedyrer beskrevet her. Det skal også bemerkes at stillingen til den utgående gruppe (klor eller fluor) i et gitt ringsystem kan variere som vist i Skjema X, hvor den utgående gruppe (fluor i dette eksemplet) er i C6-stilling i isokinolin-ringsystemet i mellomprodukt (2).
Det skal videre bemerkes at stillingen av ring-heteroatom(er) i mellomprodukter så som (2) i skjema IX og Skjema X også er variable, som definert ved betegnelsen av heterocyklisk gruppe beskrevet her. I Skjema X kan mellomprodukt (2) kobles til et C4 hydroksy-prolinderivat for å gi P2-element (3). Dette C6-substituerte isokinolinderivat kan omdannes til forbindelser med formel I ved anvendelse av metodene beskrevet her.
Et alternativ til metoden beskrevet ovenfor for kobling av C4-hydroksyprolin til
aromatiske og heteroaromatiske grupper, er gitt ved Mitsunobu-reaksjonen som vist i trinn 1 i skjema XI. I dette generelle reaksjonsskjema blir et C4-hydroksy-prolinderivat koblet til et kinazolin-ringsystem. Denne reaksjonen anvender reagenser så som trifenylfosfin og DEAD (dietylazodikarboksylat) i aprotiske løsningsmidler så som THF eller dioksan og kan anvendes for dannelse av aryl og heteroaryletere. Bemerk at under forløpet av denne koblingsreaksjon er stereokjemien av det C4 chirale senter i C4-hydroksyprolinderivatet invertert og at det derved er nødvendig å anvende C4-hydroksyprolinderivat som har (S) stereokjemi i C4-stilling som utgangsmateriale (som vist i Skjema XI). Det skal bemerkes at en rekke modifikasjoner og forbedringer av Mitsunobu-reaksjonen er beskrevet i litteraturen, idet læren i disse er inntatt her. I en underklasse av eksempler her, blir isokinoliner innført i de endelige forbindelser og spesifikt i P2-regionen av nevnte forbindelser. Fagfolk på området vil forstå at flere generelle metoder er tilgjengelige for syntese av isokinoliner. Videre kan nevnte isokinoliner dannet ved disse metoder lett innføres i endelige forbindelser med formel I ved anvendelse av prosessene beskrevet her. Én generell metode for syntese av isokinoliner er vist i Skjema XII, hvor kanelsyrederivater, vist i generell form som struktur (2) blir
Referanse: N. Briet at al, Tetrahedron, 2002, 5761
omdannet til 1-klorisokinoliner i en firetrinns prosess. Nevnte klorisokinoliner kan deretter anvendes i koblingsreaksjoner til C4-hydroksyprolinderivater som beskrevet her. Omdannelsen av kanelsyrer til klorkinoliner begynner med behandling av kanelsyre med et alkylklorformiat i nærvær av en base. Det resulterende anhydrid blir deretter behandlet med natriumazid som resulterer i dannelse av et acylazid (3) som vist i skjemaet. Alternative metoder er tilgjengelige for dannelse av acylazider fra karboksylsyrer, for eksempel kan nevnte karboksylsyre behandles med difenylfosforylazid (DPPA) i et aprotisk løsningsmiddel så som metylenklorid i nærvær av en base. I neste trinn av reaksjonssekvensen blir acylazid (3) omdannet til det tilsvarende isokinolon (4) som vist i skjemaet. I dette tilfellet blir acylazidet oppvarmet til en temperatur på omtrent 190 grader celcius i et høytkokende løsningsmiddel så som difenylmetan. Denne reaksjonen er generell og tilveiebringer moderate til gode utbytter av substituert isokinolon fra de tilsvarende kanelsyrederivater. Det skal bemerkes at nevnte kanelsyrederivater er tilgjengelige kommersielt eller kan oppnås fira det tilsvarende benzaldehyd (1) derivat ved direkte kondensering med malonsyre eller derivater derav og også ved anvendelse av en
Wittig-reaksjon. Mellomprodukt-isokinoloner (4) i skjema XII kan omdannes til det tilsvarende 1-klorisokinolin ved behandling med fosforoksyklorid. Denne reaksjonen er generell og kan anvendes for hvilken som helst av isokinolonene, kinolonene eller ytterligere heterocykliske grupper som vist her å omdanne en hydroksy-substituent til den tilsvarende klorforbindelse når nevnte hydroksy er i konjugering med et nitrogenatom i nevnte heterocykliske ringsystemer.
En alternativ metode for syntese av isokinolin-ringsystemet er Pomeranz-Fritsh prosedyren. Denne generelle metoden er beskrevet i Skjema XIII. Fremgangsmåten begynner med omdannelse av et benzaldehyd-derivat (1) til et funksjonalisert imin (2). Nevnte imin blir deretter omdannet til isokinolin-ringsystemet ved behandling med syre ved forhøyet
temperatur. Denne isokinolin-syntese i Skjema XIII er generell og det skal bemerkes at denne prosessen er spesielt anvendelig for å frembringe isokinolin-mellomprodukter som er substituert i C8 stilling (bemerk: i mellomprodukt (3) i skjema XIII er C8-stilling av isokinolin-ringen substituert med substituent Rn). Mellomprodukt-isokinoliner (3) kan omdannes til de tilsvarende 1-klorkinoliner (5) i en totrinns prosess som vist. Det første trinn i denne sekvensen er dannelse av isokinolin-N-oksyd (4) ved behandling av isokinolin (3) med meta-klorperbenzosyre i et aprotisk løsningsmiddel så som diklormetan. Mellomproduktet (4) kan omdannes til det tilsvarende 1-klorkinolin ved behandling med fosforoksyklorid i kloroform under tilbakeløp. Bemerk at denne totrinns prosess er generell og kan anvendes for å tilveiebringe klorisokinoliner og klorkinoliner fra henholdsvis de tilsvarende isokinoliner og kinoliner. En annen metode for syntese av isokinolin-ringsystemet er vist i Skjema XIV. I denne prosessen blir et orto-alkylbenzamid-derivat (1) behandlet med en sterk
base så som tert-butyllitium i et løsningsmiddel så som THF ved lav temperatur. Til denne reaksjonsblandingen blir deretter tilsatt et nitrilderivat, som gjennomgår en addisjonsomsetning med anionet avledet fra deprotonering av (1), hvilket resulterer i dannelse av (2). Denne reaksjonen er generell og kan anvendes for dannelse av substituerte isokinoliner. Mellomprodukt (2) i skjema XIV kan omdannes til det tilsvarende 1-klorkinolin ved metodene beskrevet her.
En ytterligere metode for syntesen av isokinoliner er vist i Skjema XV.
Deprotonering av mellomprodukt (1) ved anvendelse av tert-butyllitium er beskrevet ovenfor. Ved foreliggende metode er imidlertid nevnte mellomprodukt-anion fanget opp av en ester, hvilket resulterer i dannelse av mellomprodukt (2) som vist nedenfor. I en påfølgende reaksjon blir ketonet (2) kondensert med ammonium-acetat ved forhøyet temperatur som fører til dannelse av kinolonet (3). Denne reaksjonen er generell og kan anvendes for konstruksjonen av substituerte isokinoloner som deretter kan omdannes til de tilsvarende 1-klorisokinoliner som beskrevet her.
Enda en ytterligere metode for konstruksjonen av isokinoliner finnes i Skjema XVI. I det første trinn av denne prosessen blir orto-alkylarylimin-derivater så som (1) underkastet deprotoneringsbetingelser (sek-butyllitium, THF) og det resulterende anion blir behandlet ved
L. Flippin, J. Muchowski, JOC, 1993, 2631-2632
tilsetning av et aktivert karboksylsyrederivat så som et Weinreb-amid. Det resulterende ketoimin (2) kan omdannes til det tilsvarende isokinolin ved kondensering med ammoniumacetat ved forhøyede temperaturer. Denne metoden er generell og kan anvendes for syntese av substituerte isokinoliner. Nevnte isokinoliner kan omdannes til de tilsvarende 1-klorkinoliner ved metodene beskrevet her.
De heterocykliske gruppene beskrevet her og som blir innført i forbindelsene med formel I kan funksjonaliseres ytterligere. Det er opplagt for fagfolk på området at ytterligere funksjonalisering av nevnte heterocykliske grupper kan utføres enten før eller etter innføring av disse funksjonaliteter i forbindelser med formel I. De følgende Skjemaer illustrerer dette poeng. For eksempel viser Skjema XVII omdannelse av 1-klor-
6-fluor-isokinolin til de tilsvarende l-klor-6-alkoksy-isokinolin-typer, ved behandling av (1) av (ekv,l) med natrium- eller kalium-alkoksyd-typer i alkohol-løsningsmiddel fra hvilket alkoksyd blir avledet ved romtemperatur. I noen tilfeller kan det være nødvendig å oppvarme reaksjonen for å drive den til fullførelse. Nevnte klorkinolin
kan innføres i en forbindelse med formel I ved anvendelse av teknikken beskrevet her. Modifikasjoner av et P2 heterocyklisk element kan også utføres etter dets innføring i forbindelser med formel I som vist i (ekv. 2) i skjema VXII. Spesifikt kan forbindelser så som (1) i (ekv. 2) som inneholder en utgående gruppe i ftalazin-kjernen fortrenges av en nukleofil så som et alkoksyd i løsningsmidler så som den tilsvarende alkohol fra hvilken alkoksydet er avledet. Disse reaksjoner kan utføres ved romtemperatur, men i noen tilfeller kan det være nødvendig å oppvarme reaksjonen for å drive den til fullførelse.
Skjema XVIII gir et generelt eksempel på modifikasjon av heterocykliske grupper som definert her ved anvendelse av palladium-medierte koblingsreaksjoner. Nevnte koblinger kan anvendes for å funksjonalisere en heterocyklisk gruppe ved hver stilling i ringsystemet forutsatt at nevnte ring er hensiktsmessig aktivert eller funksjonalisert, som for eksempel med et klorid som vist i skjemaet. Denne sekvensen begynner med 1-klorisokinolin (1) som etter behandling med metaklorperbenzosyre kan omdannes til det tilsvarende N-oksyd (2). Nevnte mellomprodukt (2) kan omdannes til det tilsvarende 1,3-dikloirsokinolin (3) ved behandling med fosforoksyklorid i kloroform under tilbakeløp. Mellomprodukt (3) kan kobles med N-Boc-4-hydroksyprolin ved metodene beskrevet her for å gi mellomprodukt (5) som vist i skjemaet. Mellomprodukt (5) kan gjennomgå en Suzuki-kobling med en arylboronsyre, i nærvær av et palladium-reagens og base og i et løsningsmiddel så som THF eller toluen eller DMF for å gi C3-arylisokinolin-mellomproduktet (6). Heteroarylboronsyrer kan også anvendes i denne Pd-medierte koblingsprosess for å gi C3-heteroarylisokinoliner. Mellomprodukt (6) kan omdannes til de endelige forbindelser med formel I ved metodene beskrevet her. Palladium-medierte koblinger av heteroaryl-systemer med aryl- eller heteroaryl-elementer kan også anvendes på et senere syntesetrinn ved konstruksjonen av forbindelser med Formel I som vist i Skjema IXX. Der blir tripeptid-acylsulfonamid-mellomprodukt (1) koblet til et l-klor-3-bromisokinolin (2) ved anvendelse av den tidligere beskrevne prosess med alkoksyd-fortrengning av en heteroarylhalogen-gruppe for å gi mellomprodukt (3). Kobling av (1) og (2) er mest effektiv i nærvær av en katalysator så som lantanklorid som beskrevet her. Isokinolin-ringsystemet i mellomprodukt (3) kan funksjonaliseres ytterligere ved anvendelse av enten Suzuki-koblinger (Prosess 1: (3) underkastes heteroaryl- eller aryl-boronsyrer i nærvær av en palladium-katalysator så som palladium-tetra(trifenylfosfin) og en base så som cesiumkarbonat i løsningsmidler så som DMF) eller Stille-koblinger (Prosess 2: (3) underkastes heteraryl- eller aryl-tinn-derivater i nærvær av palladium-katalysator så som palladium-tetra(trifenylfosfin i løsningsmidler så som toluen).
Palladium-reaksjoner kan også anvendes for å koble C4-amino-prolin-elementer med funksjonaliserte heterocykliske grupper. Skjema XX viser mellomprodukt (1)-kobling med et funksjonalisert isokinolin i nærvær av en palladium-katalysator og en base i et løsningsmiddel så som toluen. Mellomprodukter så som (3) kan omdannes til forbindelser med formel I ved anvendelse av metodene beskrevet her.
Konstruksjon av funksjonaliserte isokinolin-ringsystemer er også mulig ved anvendelse av [4+2] cykloaddisjonsreaksjoner. For eksempel gir (Skjema XXI) anvendelse av vinyl-isocyanter (1) i cykloaddisjonsreaksjoner med benzyn-forløpere (2), funksjonaliserte isokinoloner (3). Nevnte isokinoliner kan innføres i forbindelser med formel I ved anvendelse av metodene beskrevet her.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også preparater omfattende en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt, solvat eller prodrug derav og en farmasøytisk akseptabel bærer. Farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt, solvat eller prodrug derav og en farmasøytisk akseptabel bærer, med en farmasøytisk akseptabel bærer, f.eks. tilsetningsmiddel eller konstituent-fortynningsmiddel.
Den aktive bestanddel, dvs. forbindelsen, i slike preparater omfatter typisk fra 0,1 vektprosent til 99,9 vektprosent av preparatet og omfatter ofte fra ca. 5 til 95 vektprosent.
De farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres oralt, parenteralt eller via et implantert reservoir. Oral administrering eller administrering ved injeksjon er foretrukket. I noen tilfeller kan pH i preparatet reguleres med farmasøytisk akseptable syrer, baser eller buffere for å forbedre stabiliteten til den formulerte forbindelse eller dens leveringsform. Betegnelsen parenteral som anvendt her omfatter subkutan, intrakutan, intravenøs, intramuskulær, intra-artikulær, intrasynovial, intrasternal, intratekal og intralesjonal injeksjon eller infusjon.
De farmasøytiske preparater kan være i form av et sterilt, injiserbart preparat, for eksempel som en steril injiserbar vandig eller oljeaktig suspensjon. Denne suspensjonen kan formuleres i henhold til teknikker kjent på området ved anvendelse av egnede dispergerings- eller fuktemidler og suspenderingsmidler. Detaljene angående fremstilling av slike forbindelser er kjent for fagfolk på området.
Når oralt administrert kan de farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse administreres i hvilken som helst oralt akseptabel doseform omfattende, men ikke begrenset til, kapsler, tabletter og vandige suspensjoner og løsninger. I tilfellet av tabletter for oral anvendelse omfatter bærere som er vanlig anvendt laktose og maisstivelse. Smøremidler, så som magnesiumstearat, blir også typisk tilsatt. For oral administrering i kapselform, omfatter anvendelige fortynningsmidler laktose og tørket maisstivelse. Når vandige suspensjoner blir administrert oralt, blir den aktive bestanddel kombinert med emulgerings- og suspenderingsmidler. Om ønsket kan visse søtnings- og/eller smaks- og/eller fargemidler tilsettes.
Andre egnede bærere for de ovenfor angitte preparater kan finnes i standard farmasøytiske lærebøker, f.eks. i "Remington's Pharmaceutical Sciences", 19. ed., Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995. Ytterligere detaljer angående design og fremstilling av egnede leveringsformer av de farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse er kjent for fagfolk på området.
Dosenivåer på mellom ca. 0,01 og ca. 1000 milligram pr. kg. ("mg/kg") kroppsvekt pr. dag, fortrinnsvis mellom ca. 0,5 og ca. 250 mg/kg kroppsvekt pr. dag av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er typiske ved en monoterapi for forebygging og behandling av HCV-mediert sykdom. Typisk vil de farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse administreres fra ca. 1 til ca. 5 ganger pr. dag eller alternativt, som en kontinuerlig infusjon. Slik administrering kan anvendes som kronisk eller akutt terapi. Mengden av aktiv bestanddel som kan kombineres med bærermaterialene for å produsere en enkel doseform vil variere avhengig av verten som behandles og den spesielle administreringsmetode.
Som fagfolk vil forstå kan lavere eller høyere doser enn de angitt ovenfor være nødvendig. Spesifikk dose og behandlingsregimer for hvilken som helst spesiell pasient vil avhenge av en rekke faktorer, omfattende aktiviteten til den spesifikke forbindelse som anvendes, alder, kroppsvekt, generell helsestatus, kjønn, diett, tid for administrering, utskillingshastighet, medikamentkombinasjon, alvorlighetsgraden og forløpet av infeksjonen, pasientens disponering for infeksjonen og bedømmelsen til behandlende lege. Generelt blir behandling initiert med små doser hovedsakelig mindre enn den optimale dose av peptidet. Deretter blir dosen øket med små økninger inntil den optimale effekt under omstendighetene blir oppnådd. Generelt blir forbindelsen mest foretrukket administrert i et konsentrasjonsnivå som generelt vil gi antiviralt effektive resultater uten å forårsake noen sjenerende eller skadelige bivirkninger.
Når preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter en kombinasjon av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og ett eller flere ytterligere terapeutiske eller profylaktiske midler, er både forbindelsen og det ytterligere middel vanligvis til stede i dosenivåer mellom ca. 10 til 100% og mer foretrukket mellom ca.
10 og 80% av dosen normalt administrert ved et monoterapi-regime.
Når disse forbindelser eller deres farmasøytisk akseptable salter eller solvater blir formulert sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer, kan det resulterende preparat administreres in vivo til pattedyr, så som mennesker, for å hemme HCV NS3 protease eller for å behandle eller forhindre HCV-virusinfeksjon. Slik behandling kan også oppnås ved anvendelse av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse i kombinasjon med midler som omfatter: immunomodulerende midler, så som interferoner; andre antivirale midler så som ribavirin, amantadin; andre inhibitorer av HCV NS3 protease; inhibitorer av andre mål i HCV-livscyklus så som helicase, polymerase, metalloprotease eller indre ribosom inngangssete; eller kombinasjoner derav. De ytterligere midler kan kombineres med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse for å skape en enkel doseform. Alternativt kan disse ytterligere midler administreres separat til et pattedyr som del av en multippel doseform.
Følgelig tilveiebringer foreliggende oppfinnelse anvendelse av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav til fremstilling av et terapeutisk preparat for behandling av en HCV-infeksjon eller hemme HCV NS3 protease hos en pasient.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også anvendelse av et preparat som beskrevet over for fremstilling av et medikament for behandling av en hepatitt C viral infeksjon hos en pasient
Ved foreliggende oppfinnelse er det nå mulig å tilveiebringe forbedrede medikamenter omfattende forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som kan være effektive ved behandling av pasienter infisert med HCV. Spesifikt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse peptid-forbindelser som kan hemme funksjonen av NS3 protease, f.eks. i kombinasjon med NS4A protease.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes som laboratorium-reagenser. Forbindelsene kan tjene som instrument for å gi forskningsverktøy for utforming av virale replikasjonsforsøk, validering av dyreforsøkssystemer og strukturelle biologi- undersøkelser for ytterligere å forbedre kunnskap om HCV sykdomsmekanismer.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes for å behandle eller forhindre viral forurensning av materialer og derfor redusere risiko for viral infeksjon av laboratorium- eller medisinsk personale eller pasienter som kommer i kontakt med slike materialer, f.eks. blod, vev, kirurgiske instrumenter og klær, laboratorium-instrumenter og klær og blodoppsamlings- eller transfusjons-apparater og materialer.
EKSEMPLER
De spesifikke eksempler som følger illustrerer syntesene av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse. Metodene kan tilpasses variasjoner for å produsere forbindelser omfattet av foreliggende oppfinnelse. Videre vil variasjoner av metodene for å produsere samme forbindelser på noe forskjellig måte også være åpenbare for fagfolk på området.
Løsnings-prosentdeler uttrykker en vekt til volum relasjon og løsningsforhold uttrykker en volum til volum relasjon, hvis ikke angitt på annen måte. Kjernemagnetiske resonans- (NMR) spektra ble registrert enten på et Bruker 300,400 eller 500 MHz spektrometer; kjemiske skift (8) er angitt i deler pr. million. "Flash" kromatografi ble utført på silikagel (Si02) i henhold til Still's "flash" kromatografi teknikk (W.C. Still et al, J. Org. Chem., (1978), 43,2923).
Alle væskekromatografi- (LC) data ble registrert på en Shimadzu LC-10AS væske-kromatograf ved anvendelse av en SPD-10AV UV-Vis detektor og Massespektrometri- (MS) data ble bestemt med en Micromass Platform for LC i elektrospray-modus (ES+).
Hvis ikke på annen måte angitt, ble i de følgende eksempler hver forbindelse analysert ved LC/MS, ved anvendelse av én av syv metoder, under de følgende betingelser.
Kolonner: (Metode A) - YMC ODS S7 C18 3,0x50 mm
(Metode B) - YMC ODS-A S7 C18 3,0x50 mm
(Metode C) - YMC S7 Cl8 3,0x50 mm
(Metode D) - YMC Xterra ODS S7 3,0x50 mm (Metode E) - YMC Xterra ODS S7 3,0x50 mm (Metode F) - YMC ODS-A S7 C18 3,0x50 mm
(Metode G) - YMC Cl8 S5 4,6x50 mm]
Gradient: 100% Løsningsmiddel A/0% Løsningsmiddel B til
0% Løsningsmiddel A/100% Løsningsmiddel B
Gradient tid: 2 min. (A, B, D, F, G); 8 min. (C, E)
Holdetid: 1 min. (A, B, D, F, G); 2 min. (C, E)
Strømningshastighet: 5 ml/min
Detektor-bølgelengde: 220 nm
Løsningsmiddel A: 10% MeOH / 90% H20 / 0,1% TFA
Løsningsmiddel B: 10% H20 / 90% MeOH / 0,1% TFA.
Forkortelsene anvendt i foreliggende søknad, omfattet spesielt i de illustrative eksempler som følger, er velkjente for fagfolk på området. Noen av forkortelsene anvendt er som følger:
rt romtemperatur
Boe tert-butyloksykarbonyl
DMSO dimetylsulfoksyd
EtOAc etylacetat
t-BuOK kalium t-butoksyd
Et20 dietyleter
TBME tert-butylmetyleter
THF tetrahydrofuran
CDI karbonyldiimidazol
DBU 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en
TFA trifluoreddiksyre
NMM N-metylmorfolin
HATU O-7-azabenzotriazol-l-yl
HBTU O- {lH-benzotriazol- l-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-heksafluorfosfat
HOBT N-hydroksybenzotriazol
PyBrop brom-bis-pyrrolidin-fosfonium-heksafluorfosfat DMF dimetylformamid
MeOH metanol
EDTA etylendiamin-tetraeddiksyre
HRMS høyoppløsning massespektrometri
DMAP 4-dimetylaminopyridin
DIPEA diisopropyletylamin
DCM diklormetan
DCE dikloretan
Forbindelsene og de kjemiske mellomprodukter ifølge foreliggende oppfinnelse, beskrevet i de følgende eksempler, ble fremstilt i henhold til de følgende metoder. Det skal bemerkes at den følgende eksempeldel er presentert i seksjoner. Seksjonene er betegnet Seksjon A til K. Eksempel-nummere og forbindelse-nummere er ikke fortløpende gjennom hele Eksempeldelen av søknaden og hver seksjon angir således et "brudd" i nummereringen. Nummerering innen hver seksjon er generelt forløpende. Seksjon L beskriver den biologiske aktiviteten til forbindelsene. Seksjon M beskriver en underklasse av ytterligere forbindelser som kunne vært fremstilt ved anvendelse av metodene beskrevet her.
Seksjon A:
Fremstilling av Mellomprodukter:
Fremstilling av Pl Mellomprodukter:
Pl-mellomproduktene beskrevet i denne seksjon kan anvendes for å fremstille forbindelser med formel I ved metodene beskrevet her.
I Pl-elementer:
1. Fremstilling av racemisk (lÆ,25)/(15,2Æ)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karb oksylsyre-etylester
Glycin-etylester-hydroklorid (303,8 g, 2,16 mol) ble suspendert i tert-butylmetyleter (1,6 L). Benzaldehyd (231 g, 2,16 mol) og vannfritt natriumsulfat (154,6 g, 1,09 mol) ble tilsatt og blandingen avkjølt til 0°C ved anvendelse av et isvann-bad. Trietylamin (455 ml, 3,26 mol) ble tilsatt dråpevis over 30 min og blandingen omrørt i 48 timer ved romtemperatur. Reaksjonen ble deretter stanset ved tilsetning av iskaldt vann (1 L) og det organiske laget ble separert. Den vandige fasen ble ekstrahert med tert-butylmetyleter (0,5 L) og de samlede organiske faser vasket med en blanding av mettet vandig NaHCC«3 (1 L) og saltvann (1 L). Løsningen ble tørket over MgSC«4, konsentrert i vakuum, hvilket ga 392,4 g av N-benzylimin-produktet som en tykk gul olje som ble anvendt direkte i neste trinn. NMR (CDC13, 300 MHz) 8 1,32 (t, .7=7,1 Hz, 3H), 4,24 (q, .7=7,1 Hz, 2H), 4,41 (d, 7=1,1 Hz, 2H), 7,39-7,47 (m, 3H), 7,78-7,81 (m, 2H), 8,31 (s, 1H).
Til en suspensjon av litium-ter/-butoksyd (84,06 g, 1,05 mol) i tørr toluen (1,2 L), ble satt dråpevis en blanding av AM>enzylimin av glycinetylester (100,4 g, 0,526 mol) og trans-1,4-dibrom-2-buten (107,0 g, 0,500 mol) i tørr toluen (0,6 L) over 60 min. Etter fullføring av tilsetningen, ble den dyprøde blanding behandlet ved tilsetning av vann (1 L) og ter/-butylmetyleter (TBME, 1 L). Den vandige fasen ble separert og ekstrahert en andre gang med TBME (1 L). De organiske fasene ble samlet, IN HC1 (IL) ble tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Den organiske fasen ble separert og ekstrahert med vann (0,8 L). De vandige fasene ble deretter kombinert, mettet med salt (700 g), TBME (IL) ble tilsatt og blandingen avkjølt til 0°C. Den omrørte blandingen ble deretter gjort basisk til pH 14 ved dråpevis tilsetning av ION NaOH, det organiske laget separert og den vandige fasen ekstrahert med TBME (2 x 500 ml). De samlede organiske ekstrakter ble tørket (MgSC«4) og konsentrert til et volum på IL. Til denne løsningen av fritt amin ble satt BOC2O eller di-terr-butyldikarbonat (131,0 g, 0,6 mol) og blandingen omrørt 4 dager ved romtemperatur. Ytterligere di-te/7-butyldikarbonat (50 g, 0,23 mol) ble satt til reaksjonen, blandingen ble tilbakeløpskokt i 3 timer og fikk deretter avkjøles til romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble tørket over MgSC«4 og konsentrert i vakuum, hvilket ga 80 g råmateriale. Dette residuet ble renset ved "flash" kromatografi (2,5 kg av Si02, eluert med 1% til 2% MeOH/CH2Cl2), hvilket ga 57 g (53%) racemisk^-Boc-(l/?,25)/(15',2/?)-l-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre-etylester som en gul olje som stivnet under henstand i kjøleskap: NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 1,26 (t, 7=7,1 Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,43-1,49 (m, 1H), 1,76-1,82 (br m, 1H), 2,14 (q, 7=8,6 Hz, 1H), 4,18 (q, 7=7,2 Hz, 2H), 5,12 (dd 7=10,3, 1,7 Hz, 1H), 5,25 (br s, 1H), 5,29 (dd, 7=17,6, 1,7 Hz, 1H), 5,77 (ddd, 7=17,6, 10,3, 8,9 Hz, 1H); MS m/ z 254,16 (M-l)
Trinn 3 Fremstilling av racemisk ( IR, 2S)/( IS, 2R) l-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre-etylester-hydroklorid
N- Boc-( IR, 2S)/( IS, 2R)-1 -amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester (9,39 g, 36,8 mmol) ble oppløst i 4 N HCl/dioksan (90 ml, 360 mmol) og ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert for å gi
(l/?,25)/(15,2/?)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester-hydroklorid i kvantitativt utbytte (7 g, 100%).<J>H NMR (metanol-d4) 5 1,32 (t, 7=7,1, 3H), 1,72 (dd, 7=10,2, 6,6 Hz, 1H), 1,81 (dd, 7=8,3, 6,6 Hz, 1H), 2,38 (q, 7=8,3 Hz, 1H), 4,26-4,34 (m, 2H), 5,24 (dd, 10,3,1,3 Hz, 1H) 5,40 (d, 7=17,2,1H), 5,69-5,81 (m, 1H).
Alternativ rute for fremstilling av racemisk N-Boc-l-amino-2-vinylcyklopropankarboksylsyre-etylester-hydroklorid
Til en løsning av kalium-terf-butoksyd (11,55 g, 102,9 mmol) i THF (450 ml) ved -78°C ble satt kommersielt tilgjengelig AyV-dibenzyl-imin av glycin-etylester (25,0 g, 93,53 mmol) i THF (112 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 0°C, omrørt i 40 min og ble deretter avkjølt igjen til -78°C. Til denne løsningen ble satt/ra«5,-l,4-dibrom-2-buten (20,0 g, 93,50 mmol), blandingen ble omrørt i 1 time ved 0°C og ble avkjølt igjen til -78°C. Kalium-tetr-butoksyd (11,55 g, 102,9 mmol) ble tilsatt, blandingen ble umiddelbart oppvarmet til 0°C og ble omrørt én time til før konsentrering i vakuum. Råproduktet ble tatt opp i Et20 (530 ml), IN vandig HC1-løsning (106 ml, 106 mmol) ble tilsatt og den resulterende bifasiske blanding omrørt i 3,5 timer ved romtemperatur. Lagene ble separert og det vandige laget ble vasket med Et20 (2x) og gjort basisk med en mettet vandig NaHCC>3-løsning. Det ønskede amin ble ekstrahert med Et20 (3x) og den samlede organiske ekstrakt ble vasket med saltvann, tørket (MgSC^) og konsentrert i vakuum for å oppnå det frie amin. Dette materialet ble behandlet med en 4N HCl-løsning i dioksan (100 ml, 400 mmol) og konsentrert, hvilket ga (l/?,25')/(15',2/?)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester-hydroklorid som et brunt halvfast stoff (5,3 g, 34% utbytte) identisk med materialet oppnådd fra prosedyre A, bortsett fra tilstedeværelse av en liten uidentifisert aromatisk urenhet (8%).
Spaltning av \-Boc-(l/?,2^)/(15,2/?)-l-amino-2-vin\lc\klopropan-karb oksylsyre-etylester
Spaltning A
Til en vandig løsning av natriumfosfatbuffer (0,1 M, 4,25 liter ("L"), pH 8) inneholdt i en 12 liter reaktor med kappe, holdt ved 39°C og omrørt ved 300 rpm ble satt 511 gram Acalase 2,4L (ca. 425 ml) (Novozymes North America Inc.). Da temperaturen på blandingen nådde 39°C ble pH regulert til 8,0 ved tilsetning av 50% NaOH i vann. En løsning av den racemiske N- Boc-( lR, 2S)/( lS, 2R)- l- amino- 2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester (85 g) i 850 ml DMSO ble deretter tilsatt over en periode på 40 min. Reaksjonstemperaturen ble deretter holdt ved 40°C i 24,5 timer under hvilken tid pH i blandingen ble regulert til 8,0 etter 1,5 timer og 19,5 timer ved anvendelse av 50% NaOH i vann. Etter 24,5 timer ble enantio-overskudd av esteren funnet å være 97,2% og reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur (26°C) og omrørt natten over (16 timer) hvoretter enantio-overskudd av esteren ble funnet å være 100%. pH i reaksjonsblandingen ble deretter regulert til 8,5 med 50% NaOH og den resulterende blandingen ble ekstrahert med MTBE (2x2 L). Den samlede MTBE-ekstrakt ble deretter vasket med 5% NaHC03(3 x 100 ml), vann (3 x 100 ml) og inndampet i vakuum, hvilket ga enantiomert ren N-Boc-(l/?,25)/-l-amino- 2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester som lysegult fast stoff (42,55 g; renhet: 97% @ 210 nm, inneholdende ingen syre; 100% enantiomert overskudd ("ee").
Det vandige laget fra ekstraksjonsprosessen ble deretter surgjort til pH 2 med 50% H2SO4og ekstrahert med MTBE (2x2 L). MTBE-ekstrakten ble vasket med vann (3 x 100 ml) og inndampet, hvilket ga syren som lysegult fast stoff (42,74 g; renhet: 99% @ 210 nm, inneholdende ingen ester).
NMR observerte kjemiske skift
Løsningsmiddel: CDCI3(proton 5 7,24 ppm, C-13 5 77,0 ppm) Bruker DRX-500C: proton 500,032 MHz, karbon 125,746 MHz
Spaltning B
Til 0,5 ml 100 mM Heps«Na buffer (pH 8,5) i en brønn i en 24 brønn plate (kapasitet: 10 ml/brønn) ble satt 0,1 ml Savinase 16,0L (protease fra Bacillus clausii)
(Novozymes North America Inc.) og en løsning av den racemiske 7V-Boc-(l/?,25)/(15',2/?)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester (10 mg) i 0,1 ml DMSO. Platen ble lukket og inkubert ved 250 rpm ved 40°C. Etter 18 timer ble enantio-overskudd av esteren funnet å være 44,3% som følger: 0,1 ml av reaksjonsblandingen ble fjernet og blandet godt med 1 ml etanol; etter sentrifugering ble 10 mikroliter ("^1") av supernatanten analysert ved chiral HPLC. Til den gjenværende reaksjonsblanding ble satt 0,1 ml DMSO og platen ble inkubert i ytterligere 3 dager ved 250 rpm ved 40°C, hvoretter fire ml etanol ble satt til brønnen. Etter sentrifugering ble 10^1 av supernatanten analysert ved chiral HPLC og enantio-overskudd av esteren ble funnet å være 100%.
Spaltning C
Til 0,5 ml 100 mM Heps«Na buffer (pH 8,5) i en brønn i en 24 brønn plate (kapasitet: 10 ml/brønn) ble satt 0,1 ml Esperase 8,0L, (protease fra Bacillus halogendurans) (Novozymes North America Inc.) og en løsning av den racemiske A^-Boc-(l/?,25)/(15',2/?)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester (10 mg) i 0,1 ml DMSO. Platen ble forseglet og inkubert ved 250 rpm ved 40°C. Etter 18 timer ble enantio-overskudd av esteren funnet å være 39,6% som følger: 0,1 ml av reaksjonsblandingen ble fjernet og blandet godt med 1 ml etanol; etter sentrifugering ble 10^1 av supernatanten analysert ved chiral HPLC. Til den gjenværende reaksjonsblanding ble satt 0,1 ml DMSO og platen ble inkubert i ytterligere 3 dager ved 250 rpm ved 40°C, hvoretter fire ml etanol ble satt til brønnen. Etter sentrifugering ble 10^1 av supernatanten analysert ved chiral HPLC og enantio-overskudd av esteren ble funnet å være 100%.
Prøveanalyse ble utført på følgende måte:
1) Prøve-preparering: Ca. 0,5 ml av reaksjonsblandingen ble blandet godt med 10 volumer EtOH. Etter sentrifugering ble 10^1 av supernatanten injisert på HPLC-kolonne.
2) Omdannelse-bestemmelse:
Kolonne: YMC ODS A, 4,6 x 50 mm, S-5
Løsningsmiddel: A, 1 mM HC1 i vann; B, MeCN
Gradient: 30% B i 1 min; 30% til 45% B over 0,5 min; 45% B i 1,5 min; 45% til 30% B over 0,5 min.
Strømningshastighet: 2 ml/min
UV-deteksjon: 210 nm
Retensjonstid: syre, 1,2 min; ester, 2,8 min.
3) Enantio-overskudd-bestemmelse for esteren:
Kolonne: CHIRACEL OD-RH, 4,6 x 150 mm, S-5
Mobil fase: MeCN/50 mM HC104i vann (67/33)
Strømningshastighet: 0,75 ml/min.
UV-deteksjon: 210 nm.
Retensjonstid:
(IS, 2R)-isomer som syre: 5,2 min;
Rcaemat: 18,5 min og 20,0 min;
(IR, 2S)-isomer som ester: 18,5 min.
2. Fremstilling av Ar<->Boc-(l/f,25)-l-amino-2-cyklopropylcyklopropan-karb oksylsyre-etylester
En løsning av Af-Boc-(lÆ,25)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre (255 mg, 1,0 mmol) i eter (10 ml) ble behandlet med palladiumacetat (5 mg, 0,022 mmol). Den oransje/røde løsning ble plassert under en atmosfære av N2. Et overskudd av diazometan i eter ble tilsatt dråpevis i løpet av 1 time. Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Overskudd av diazometan ble fjernet ved anvendelse av en strøm av nitrogen. Den resulterende løsning ble konsentrert ved rotasjonsinndampning, hvilket ga råproduktet. "Flash" kromatografi (10% EtOAc/heksan) ga 210 mg (78%) av N-Boc-(lÆ,2S)-l-amino-2-cyklopropylcyklopropan-karboksylsyre-etylester som en fargeløs olje. LC-MS (retensjonstid: 2,13, lignende metode A bortsett fra: gradient-tid 3 min, Xterra MS Cl8 S7 3,0 x 50mm kolonne), MS m/e 270 (M<+>+l).
3.1-tert-butoksykarbonylamino-cyklopropan-karboksylsyre er kommersielt tilgjengelig
4. Fremstilling av l-aminocyklobutankarboksylsyre-metylesterhydroklorid 1-aminocyklobutankarboksylsyre (100 mg, 0,869 mmol) (Tocris) ble oppløst i 10 ml MeOH, HCl-gass ble boblet inn i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 18 timer og deretter konsentrert i vakuum, hvilket ga 144 mg av en gul olje. Utgnidning med 10 ml eter ga 100 mg av tittelproduktet som et hvitt, fast stoff.<J>H NMR (CDC13) 8 2,10-2,25 (m, 1H), 2,28-2,42 (m, 1H), 2,64-2,82 (m, 4H), 3,87 (s, 3H), 9,21 (br s, 3H). 5. Fremstilling av racemisk ( 1R, 2R)/( 1S, 2S) l-amino-2-etylcyklopropankarboksylsyre-tert-butylester, vist nedenfor.
Trinn 1: Fremstilling av 2-etylcyklopropan-l,l-dikarboksylsyre-di-etr/-butylester, vist nedenfor.
Til en suspensjon av benzyltrietylammoniumklorid (21,0 g, 92,2 mmol) i en 50%
vandig NaOH-løsning (92,4 g i 185 ml H20) ble satt 1,2-dibrombutan (30,0 g, 138,9 mmol) og di-tert-butylmalonat (20,0 g, 92,5 mmol). Reaksjonsblandingen ble kraftig omrørt i 18 timer ved romtemperatur, og en blanding av is og vann ble deretter tilsatt. Råproduktet ble ekstrahert med CH2CI2(3x) og sekvensielt vasket med vann (3x), saltvann og de organiske ekstrakter kombinert. Det organiske laget ble tørket (MgSQO, filtrert og konsentrert i vakuum. Det resulterende residuet ble "flash" kromatografert (100 g Si02, 3% Et20 i heksan), hvilket ga tittelproduktet (18,3 g, 67,8 mmol, 73% utbytte) som ble anvendt direkte i neste reaksjon.
Trinn 2: Fremstilling av racemisk 2-etylcyklopropan-l,l-dikarboksylsyre-tert-butylester, vist nedenfor.
Produktet fra Trinn 1 (18,3 g, 67,8 mmol) ble satt til en suspensjon av kalium-tert-butoksyd (33,55 g, 299,0 mmol) i tørr eter (500 ml) ved 0°C, fulgt av H20 (1,35 ml, 75,0 mmol) og ble kraftig omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble hellet i en blanding av is og vann og vasket med eter (3x). Det vandige laget ble surgjort med en 10% vandig sitronsyreløsning ved 0°C og ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede organiske lag ble vasket med vann (2x), saltvann, tørket (MgSC^) og konsentrert i vakuum, hvilket ga tittelproduktet som en blekgul olje (10 g, 46,8 mmol, 69% utbytte).
Trinn 3: Fremstilling av (l/?,2/?)/(15',2JS)-2-etyl-l-(2-trimetylsilanyletoksy-karbonylamino)cyklopropan-karboksylsyre-tert-butylester, vist nedenfor.
Til en suspensjon av produktet fra Trinn 2 (10 g, 46,8 mmol) og 3 g nyaktivert 4Å molekylsikter i tørr benzen (160 ml) ble satt Et3N (7,50 ml, 53,8 mmol) og DPPA (11 ml, 10,21 mmol). Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i 3,5 timer, 2-trimetylsilyl-etanol (13,5 ml, 94,2 mmol) ble deretter tilsatt og reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert, fortynnet med Et20, vasket med en 10% vandig sitronsyreløsning, vann, mettet vandig NaHCC>3, vann (2x), saltvann (2X), tørket (MgSC^) og konsentrert i vakuum. Residuet ble suspendert med 10 g Aldrich polyisocyanat oppfangerharpiks i 120 ml CH2C12, omrørt ved romtemperatur natten over og filtrert, hvilket ga tittelproduktet (8 g, 24,3 mmol; 52%) som en blekgul olje:<J>H NMR (CDC13) 5 0,03 (s, 9H), 0,97 (m, 5H), 1,20 (bm, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,40-1,70 (m, 4H), 4,16 (m, 2H), 5,30 (bs, 1H).
Trinn 4: Fremstilling av racemisk (lÆ,2Æ)/(7S,25)-l-amino-2-etylcyklopropankarboksylsyre-tert-butylester, vist nedenfor.
Til produktet fra Trinn 3 (3 g, 9 mmol) ble satt en 1,0 M TBAF-løsning i THF (9,3 ml, 9,3 mmol) og blandingen ble oppvarmet til tilbakeløp i 1,5 timer, avkjølt til romtemperatur og deretter fortynnet med 500 ml EtOAc. Løsningen ble suksessivt vasket med vann (2x100 ml), saltvann (2x100 ml), tørket (MgSC^), konsentrert i vakuum for å gi tittel-mellomproduktet.
II Plf elementer:
PT-elementer fremstilt nedenfor kan anvendes for å fremstille forbindelser med formel I ved anvendelse av metodene beskrevet her.
1. Fremstilling av cyklopropylsulfonamid:
Trinn 1: Fremstilling avN-tert-butyl-(3-klor)propylsulfonamid
tert-butylamin (3,0 mol, 315,3 ml) ble oppløst i THF (2,5 L). Løsningen ble avkjølt til -20°C. 3-klorpropansulfonylklorid (1,5 mol, 182,4 ml) ble tilsatt langsomt. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 24 timer. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i CH2C12(2,0 L). Den resulterende løsning ble vasket med IN HC1 (1,0 L), vann (1,0 L), saltvann (1,0 L) og tørket over Na2S04. Den ble filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga et svakt gult fast stoff, som ble krystallisert fra heksan, hvilket ga produktet som et hvitt, fast stoff (316,0 g, 99%).
<J>H NMR (CDCI3) 5 1,38 (s, 9H), 2,30-2,27 (m, 2H), 3,22 ( t, J= 7,35 Hz, 2H), 3,68 ( t, J= 6,2 Hz, 2H), 4,35 (b, 1H).
Trinn 2: fremstilling av cyklopropansulfonsyre-tert-butylamid
Til en løsning av N-tert-butyl-(3-klor)propylsulfonamid (2,14 g, 10,0 mmol) i THF (100 ml) ble satt n-BuLi (2,5 M i heksan, 8,0 ml, 20,0 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur over en periode på 1 time. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og vann (200 ml, 200 ml). Den separerte organiske fase ble vasket med saltvann, tørket over Na2SC«4, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra heksan, hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff (1,0 g, 56%).
<J>H NMR (CDC13) 5 0,98-1,00 (m, 2H), 1,18-1,19 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 2,48-2,51 (m, lH),4,19(b, 1H).
Trinn 3: fremstilling av cyklopropylsulfonamid
En løsning av cyklopropansulfonsyre-tert-butylamid (110,0 g, 0,62 mol) i TFA (500 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra EtOAc/heksan (60 ml/240 ml), hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff (68,5 g, 91%).
<J>H NMR (DMSO-dé) 5 0,84-0,88 (m, 2H), 0,95-0,98 (m, 2H), 2,41-2,58 (m, 1H), 6,56 (b, 2H).
2. Alternativ prosedyre for fremstilling av cyklopropylsulfonamid
Gjennom en løsning av 100 ml THF avkjølt til 0°C ble boblet gassformig ammoniakk inntil metning ble nådd. Til denne løsningen ble satt en løsning av 5 g (28,45 mmol) cyklopropylsulfonylklorid (anskaffet fra Array Biopharma) i 50 ml THF, løsningen ble oppvarmet til romtemperatur natten over og omrørt én ytterligere dag. Blandingen ble konsentrert inntil 1-2 ml løsningsmiddel var igjen, påført på 30 g plugg av Si02(eluert med 30% til 60% EtOAc/Heksaner), hvilket ga 3,45 g (100%) cyklopropylsulfonamid som et hvitt, fast stoff.<!>H NMR (Metanol-dt) 8 0,94-1,07 (m, 4H), 2,52-2,60 (m, 1H);<13>C NMR (metanol-d,) 5 5,92, 33,01.
3. Fremstilling av cyklobutylsulfonamid
Til en løsning av 5,0 g (37,0 mmol) cyklobutylbromid i 30 ml vannfri dietyleter (Et20) avkjølt til -78°C ble satt 44 ml (74,8 mmol) 1,7M tert-butyllitium i pentaner og løsningen ble langsomt oppvarmet til -35°C over 1,5 timer. Denne blandingen ble kanylert langsomt inn i en løsning av 5,0 g (37,0 mmol) nydestillert sulfurylklorid i 100 ml heksaner avkjølt til -40 °C, oppvarmet til 0°C over 1 time og forsiktig konsentrert i vakuum. Denne blandingen ble gjenoppløst i Et20, vasket én gang med noe iskaldt vann, tørket (MgS04) og konsentrert forsiktig. Denne blandingen ble gjenoppløst i 20 ml THF, satt dråpevis til 500 ml mettet NH3i THF og ble omrørt natten over. Blandingen ble konsentrert i vakuum til et rått gult fast stoff og ble omkrystallisert fra minimumsmengde av CH2CI2i heksaner med 1-2 dråper MeOH, hvilket ga 1,90 g (38%) cyklobutylsulfonamid som et hvitt, fast stoff.<!>H NMR (CDCI3) 5 1,95-2,06 (m, 2H), 2,30-2,54 (m, 4H), 3,86 (p, 7=8 Hz, 1H), 4,75 (brs, 2H);<13>C NMR (CDC13) 5 16,43,23,93, 56,29. HRMS m/z (M-H)' beregnet for C4H8NS02: 134,0276, funnet 134,0282.
4. Fremstilling av cyklopentylsulfonamid
En løsning av 18,5 ml (37,0 mmol) 2M cyklopentyl-magnesiumklorid i eter ble satt dråpevis til en løsning av 3,0 ml (37,0 mmol) nydestillert sulfurylklorid (anskaffet fra Aldrich) i 100 ml heksaner avkjølt til -78 °C. Blandingen ble oppvarmet til 0°C over 1 time og ble deretter forsiktig konsentrert i vakuum. Denne blandingen ble gjenoppløst i Et20 (200 ml), vasket én gang med noe iskaldt vann (200 ml), tørket (MgS04) og konsentrert forsiktig. Denne blandingen ble gjenoppløst i 35 ml THF, satt dråpevis til 500 ml mettet NH3i THF og ble omrørt natten over. Blandingen ble konsentrert i vakuum til et rått gult fast stoff, residuet ble filtrert gjennom 50 g silikagel ved anvendelse av 70% EtOAc-heksaner som elueringsmiddel og løsningen ble deretter konsentrert. Residuet ble omkrystallisert fra minimumsmengde av CH2CI2i heksaner med 1-2 dråper MeOH, hvilket ga 2,49 g (41%) cyklopentylsulfonamid som et hvitt, fast stoff.<*>H NMR (CDC13) 8 1,58-1,72 (m, 2H), 1,74-1,88 (m, 2H), 1,94-2,14 (m, 4H), 3,48-3,59 (m, 1H), 4,80 (bs, 2H);<13>C NMR (CDCI3) 5 25,90,28,33, 63,54; MS m/e 148 (M-H)-.
5. Fremstilling av cykloheksylsulfonamid
En løsning av 18,5 ml (37,0 mmol) 2M cykloheksylmagnesiumklorid (TCI Americas) i eter ble satt dråpevis til en løsning av 3,0 ml (37,0 mmol) nydestillert sulfurylklorid i 100 ml heksaner avkjølt til -78°C. Blandingen ble oppvarmet til 0°C over 1 time og ble deretter forsiktig konsentrert i vakuum. Denne blandingen ble gjenoppløst i Et20 (200 ml), vasket én gang med noe iskaldt vann (200 ml), tørket (MgSC«4) og konsentrert forsiktig. Denne blandingen ble gjenoppløst i 35 ml THF, satt dråpevis til 500 ml mettet NH3i THF og ble omrørt natten over. Blandingen ble konsentrert i vakuum til et rått gult fast stoff, residuet ble filtrert gjennom 50 g silikagel ved anvendelse av 70% EtOAc-heksaner som elueringsmiddel og ble konsentrert. Residuet ble omkrystallisert fra minimumsmengde av CH2CI2i heksaner med 1-2 dråper MeOH, hvilket ga 1,66 g (30%) cykloheksyl-sulfonamid som et hvitt, fast stoff:<J>H NMR (CDC13) 5 1,11-1,37 (m, 3H), 1,43-1,56 (m, 2H), 1,67-1,76 (m, 1H), 1,86-1,96 (m, 2H), 2,18-2,28 (m, 2H), 2,91 (tt, 7=12, 3,5 Hz, 1H), 4,70 (bs, 2H);<13>CH NMR (CDCI3) 5 25,04, 25,04, 26,56, 62,74; MS m/e 162 (M-l)'.
6. Fremstilling av neopentylsulfonamid
Ved å følge metoden for fremstilling av cykloheksylsulfonamid ble 49 ml (37 mmol) 0,75M neopentylmagnesiumklorid (Alfa) i eter omdannet til 1,52 g (27%) neopentylsulfonamid som et hvitt, fast stoff.<!>H NMR (CDC13) 5 1,17 (s, 9H), 3,12 (s, 2H), 4,74 (brs, 2H);<13>C NMR (CDC13) 5 29,46,31,51, 67,38; MS m/e 150 (M-l)-.
7. Fremstilling av cyklobutylkarbinyl-sulfonamid
En løsning av 12,3 g (83 mmol) cyklobutylkarbinyl-bromid (Aldrich) og 13,7 g (91 mmol) natriumjodid i 150 ml aceton ble tilbakeløpskokt natten over og deretter avkjølt til romtemperatur. De uorganiske faste stoffer ble filtrert fra og aceton og cyklopropylkarbinyljodid (8,41 g, 46%) avdestillert ved henholdsvis omgivelsesbetingelser og 150 torr ved 80°C.
En løsning av 4,0 g (21,98 mmol) cyklobutyl-karbinyljodid i 30 ml vannfri dietyleter (Et20) avkjølt til -78 °C ble kanylert inn i en løsning av 17 ml (21,98 mmol) 1,3M sek-butyllitium i cykloheksaner og løsningen ble omrørt i 5 min. Til denne blandingen ble kanylert en løsning av 3,0 g (21,98 mmol) nydestillert sulfurylklorid i 110 ml heksaner avkjølt til -78 °C, blandingen ble oppvarmet til romtemperatur over 1 time og ble deretter forsiktig konsentrert i vakuum. Denne blandingen ble gjenoppløst i Et20, vasket én gang med noe iskaldt vann, tørket (MgSC^) og konsentrert forsiktig. Denne blandingen ble gjenoppløst i 30 ml THF, satt dråpevis til 500 ml mettet NH3i THF og ble omrørt natten over. Blandingen ble konsentrert i vakuum til et rått gult fast stoff og ble omkrystallisert fra minimumsmengde av CH2C12i heksaner med 1-2 dråper MeOH, hvilket ga 1,39 g (42%) cyklobutyl-karbinylsulfonamid som et hvitt, fast stoff.<!>H NMR (CDC13) 8 1,81-2,03 (m, 4H), 2,14-2,28 (m, 2H), 2,81-2,92 (m, 1H), 3,22 (d, 7=7 Hz, 2H), 4,74 (brs, 2H);<13>C NMR (CDC13) 5 19,10,28,21, 30,64, 60,93; MS m/e 148 (M-l)',
tid: 1,73, metode B), 818 (M<+>+H)
8: Fremstilling av cyklopropylkarbinyl-sulfonamid
Ved anvendelse av metoden anvendt for fremstilling av cyklobutylkarbinyl-sulfonamid, ble cyklopropylkarbinylsulfonamid fremstilt fra cyklopropylkarbinyl-bromid (Aldrich) (se også JA CS 1981, s. 442-445).<!>H NMR (CDC13) 5 0,39-0,44 (m, 2H), 0,67-0,76 (m, 2H), 1,13-1,27 (m, 1H), 3,03 (d, 7=7,3 Hz, 2H), 4,74 (brs, 2H);<13>C NMR (CDCI3) 5 4,33, 5,61, 59,93; MS m/e 134 (M-l).
III Heterocykliske grupper som skal anvendes som utgangsmateriale for konstruksjon av P2-elementer for påfølgende innføring i forbindelser med formel I.
1. Isokinoliner
Isokinolin (1) og substituerte analoger derav, kan innføres i P2-elementer ved anvendelse av de to metoder angitt ovenfor og beskrevet i detalj her. Nevnte P2-elementer (3) kan deretter omdannes til forbindelser med formel I ved anvendelse av prosedyrer analoge med de beskrevet her for lignende isokinolin-analoger.
2. Isoksazolpyridin og oksazolpyridin(l)
Isoksazol og oksazol heterocyklisk gruppe (1) og analoger derav kan fremstilles ved anvendelse av kjent kjemi og innføres i forbindelser med formel I ved anvendelse av kjemien beskrevet her for lignende isoksazolpyridin-mellomprodukter som vist i seksjon B.
Seksjon B:
I Seksjon B ble de følgende betingelser anvendt for LC/MS analyse.
Kolonner: Metode A: YMC ODS-A C18 S7 (4,6 x 33 mm)
Metode B: YMC Xterra ODS S7 (3,0 x 50mm)
Metode C: Xterra ms Cl 8 (4,6 x 33mm)
Metode D: YMC ODS-A Cl8 S3 (4,6 x 33 mm)
Gradient: 100% løsningsmiddel A/ 0% løsningsmiddel B til 0% løsningsmiddel A/ 100% løsningsmiddel B
Gradienttid: 3 min.
Retensjonstid: 1 min.
Strømningshastighet: 5 ml/min.
Detektor-bølgelengde: 220 nm.
Løsningsmidler: Løsningsmiddel A: 10% MeOH/ 90% vann/ 0,1% TFA. Løsningsmiddel B: 90% MeOH/10% vann/ 0,1% TFA.
De følgende betingelser ble anvendt for prep-HPLC separering.
Kolonner: Phenomenex-Luna 30X100 mm, S5
Gradient: 60% løsningsmiddel AJ 40% løsningsmiddel B til 0% løsningsmiddel AJ 100% løsningsmiddel B
Gradient tid: 15 min.
Stopptid: 20 min.
Strømningshastighet: 30 ml/min.
Detektor-bølgelengde: 220 nm.
Løsningsmidler: Løsningsmiddel A: 10% MeOH/ 90% vann/ 0,1% TFA. Løsningsmiddel B: 90% MeOH/ 10% vann/ 0,1% TFA.
Eksempel 1: Fremstilling av Forbindelse 1.
Trinn 1:
En blanding av 3,5-dimetyl-4-nitro-isoksazol (1,42 g, 10,0 mmol), fenylacetaldehyd (1,32 g, 11,0 mmol) i piperidin (1 ml) og etanol (10 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 16 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble produktet utfelt oppsamlet ved filtrering. Kaken ble vasket grundig med kald etanol, hvilket ga 1,20 g (53%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CDC13) 5 2,87 (s, 3H), 7,46-7,50 (m, 3H), 7,56 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 7,7-7,80 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,19 min, metode B), MS m/ z 227 (M<+>+H).
Trinn 2:
En løsning av 3-metyl-5-fenyl-isoksazolo[4,5-b]pyridin-4-oksyd (1,00 g, 4,40 mmol) og POCI3(2,71 g, 17,7 mmol) i kloroform (10 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 1 time. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble den endelige løsningen fortynnet med kloroform (50 ml) og vasket med NaHC03(vandig) (to 50 ml porsjoner) og saltvann, tørket over MgSC«4, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi (4:1 heksan-etOAc), hvilket ga 790 mg (73%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CDCI3) 5 2,72 (s, 3H), 7,46-7,54 (m, 3H), 7,91 (s, 1H), 8,00-8,03 (m, 2H); LC-MS (retensjonstid: 1,76 min, metode B), MS m/ z 245, 247 (M<+>+H).
Trinn 3:
Til en blanding av 4-hydroksy-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (H-Hyp-OMe HC1) (1,81 g, 10,0 mmol), HATU (5,70 g, 15,0 mmol) og N-BOC-t-butyl-L-glycin (2,42 g, 10,5 mmol) i CH2C12(100 ml) ble satt DIPEA (3,47 g, 31,0 mmol) ved 0°C. Etter omrøring ved omgivelsestemperatur i 12 timer ble den dannede løsning fortynnet med CH2C12(100 ml), vasket med iset 5% sitronsyre (vandig). Det organiske laget ble vasket med henholdsvis 5% sitronsyre, IM NaOH, saltvann, tørket over MgS04og filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum for å gi 3,55 g (99%) av det ønskede produkt som et gråhvitt skum. Dette produktet ble anvendt rått for neste reaksjon uten ytterligere rensning.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,04 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 1,99-2,03 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,70-3,79 (m, 2H), 4,28 (b, 1H), 4,46 (b, 1H), 4,74-4,80 (m, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,28 min, metode B), MS m/ z 359 (M<+>+H).
Trinn 4:
En blanding av produktet fra Trinn 3 (3,55 g, 9,9 mmol) i THF ( 50 ml), MeOH ( 50 ml) og LiOH-monohydrat (0,83 g, 19,9 mmol i 50 ml H20) ble omrørt ved omgivelsestemperatur natten over. Etter fjerning av de flyktige stoffene i vakuum, ble residuet oppløst i 0,1 M NaOH (100 ml). Denne vandige løsningen ble vasket med eter (50 ml), surgjort med IM HC1 til pH 4. Ekstrahert med EtOAc (100 ml). Det organiske laget ble vasket med 5% sitronsyre og saltvann, tørket over MgS04, inndampet til tørrhet, hvilket ga 3,20 g (95%) av det ønskede produkt som et hvitt skum. Dette produktet ble anvendt rått uten ytterligere rensning.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,02 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 2,01-2,09 (m, 1H), 2,25-2,32 (m, 1H), 3,70-3,85 (m, 2H), 4,26-4,30 (m, 1H), 4,46-4,51 (m, 2H), 6,37-6,41 (m, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,14 min, metode B), MS m/ z 345 (M<+>+H).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra Trinn 4 (1,01 g, 2,93 mmol) i DMSO (30 ml) ble satt kalium-tetr-butoksyd (1,02 g, 9,08 mmol). Den dannede løsning ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time før tilsetning av 7-klor-3-metyl-5-fenyl-isoksazolo[4,5-b]pyridin (0,75 g, 3,08 mmol). Den endelige løsningen ble omrørt i 12 timer. Deretter ble den behandlet med isvann, surgjort med IM HC1 til pH 4 og ekstrahert med EtOAc (to 200 ml porsjoner). De organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved prep-HPLC (60%B—100%B, 15 min gradient), hvilket ga 305 mg (19%) av det ønskede produkt som et blekgult, fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,02 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 2,37-2,47 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,85-2,93 (m, 1H), 4,00-4,08 (m, 1H), 4,14 (b, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,70 (m, 1H), 7,45-7,53 (m, 3H), 7,56 (s, 1H), 8,03-8,06 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,89 min, metode B), MS m/ z 553 (M<+>+H).
Trinn 6a
Som beskrevet i seksjon A.
Trinn 6b:
Til en løsning av l(R)-tert-butoksykarbonylamino-2(S)-vinylcyklopropankarboksylsyre-etylester, produktet fra Trinn 6a (3,28 g, 13,2 mmol) i THF (7 ml) og metanol (7 ml) ble satt en suspensjon av LiOH (1,27 g, 53,0 mmol) i vann (14 ml). Blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur og behandlet med IN NaOH (15 ml) og vann (20 ml). Den resulterende blandingen ble vasket med EtOAc (20 ml) og den organiske fasen ble ekstrahert med 20 ml 0,5N NaOH. De samlede vandige faser ble surgjort med IN HC1 inntil pH 4 og ekstrahert med EtOAc (3 x 40 ml). De samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltvann og tørket (MgS04), hvilket ga tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff (2,62 g, 87%).
<!>H NMR: (DMSO-d6) 5 1,22-1,26 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,50-1,52 (m, 1H), 2,05 (q, J=9 Hz, 1H), 5,04 (d, J=10 Hz, 1H), 5,22 (d, J=17 Hz, 1H), 5,64-5,71 (m, 1H), 7,18,7,53 (s, NH (rotamerer), 12,4 (br s, 1H));
LC-MS (retensjonstid: 1,67 min, metode B), MS m/ z 228 (M<+>+H).
Trinn 7:
En løsning av produktet fra Trinn 6 (2,62 g, 11,5 mmol) og CDI (2,43 g, 15,0 mmol) i THF (40 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 50 min under nitrogen. Løsningen ble avkjølt til romtemperatur og overført med kanyle til en løsning av cyklopropylsulfonamid (1,82 g, 15,0 mmol) i THF (10 ml). Til den resulterende løsning ble satt DBU (2,40 ml, 16,1 mmol) og omrøring ble fortsatt i 20 timer. Blandingen ble behandlet med IN HC1 til pH 1 og THF ble inndampet i vakuum. Suspensjonen ble ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml) og de samlede organiske ekstrakter tørket (Na2S04). Rensning ved omkrystallisering fra heksaner-EtOAc (1:1) ga tittelforbindelsen (2,4 g) som et hvitt, fast stoff. Moderluten ble renset med en Biotage 40S kolonne (eluert 9% aceton i DCM), hvilket ga en andre porsjon av tittelforbindelsen (1,1 g). Begge porsjoner ble samlet (totalt utbytte 92%).
<J>H NMR: (DMSO-d6) 5 0,96-1,10 (m, 4H), 1,22 (dd, J=5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,70 (t, J=5,5 Hz, 1H), 2,19-2,24 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 5,08 (d, J=10 Hz, 1H), 5,23 (d, J=17 Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 6,85, 7,22 (s, NH (rotamerer);
LC-MS (retensjonstid: 1,70 min, metode B), MS m/ z 331 (M<+>+H).
Trinn 8:
En løsning av produktet fra Trinn 7 (3,5 g, 10,6 mmol) i DCM (35 ml) og TFA (32 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 timer. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum og residuet suspendert i IN HC1 i dietyleter (20 ml) og konsentrert i vakuum. Denne prosedyren ble gjentatt én gang. Den resulterende blandingen ble utgnidd fra pentan og filtrert, hvilket ga tittelforbindelsen som et hygroskopisk, gråhvitt fast stoff (2,60 g, 92%).
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 1,01-1,15 (m, 4H), 1,69-1,73 (m, 1H), 1,99-2,02 (m, 1H), 2,38 (q, J=9 Hz, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 5,20 (d, J=l 1 Hz, 1H), 5,33 (d, J=17 Hz, 1H), 5,52-5,59 (m, 1H), 9,17 (br s, 3H);
LC-MS (retensjonstid: 0,24 min, metode B), MS m/ z 231 (M<+>+H).
Trinn 9:
Til en avkjølt blanding av produktet fra Trinn 5 (70 mg, 0,13 mmol), ( IR, 2S)-cyklopropansulfonsyre-(l-amino-2-vinyl-cyklopropankarbonyl)amidhydroklorid, produktet fra Trinn 8 (37 mg, 0,14 mmol) og HATU (72 mg, 0,19 mmol) i DCM (2 ml) ble satt diisopropyletylamin (50 mg, 0,39 mmol). Den dannede løsning fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur i 12 timer og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved prep-HPLC (60%B— 100%B, 15 min gradient), hvilket ga 52 mg (54%) av forbindelse 1 som et gråaktig fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,96-1,09 (m, 12H), 1,16-1,25 (m, 10H), 1,44-1,48 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, 7=11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=15 Hz, 1H), 5,72-5,85 (b, 2H), 6,62 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 7,46-7,53 (m, 3H), 7,58 (s, 1H), 8,04-8,07 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,92 min, metode B), MS m/ z 765 (M<+>+H).
Eksempel 2: Fremstilling av Forbindelse 2.
Trinn 1:
En blanding av 2-amino-6-metylpyridin (1,08 g, 10,0 mmol), etyl-benzoylacetat (2,30 g, 12,0 mmol) og polyfosforsyre (6,00 g, 61,2 mmol) ble oppvarmet til 110°C i 5 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble blandingen hellet i isvann (20 ml) og nøytralisert til pH 7 med 10 M NaOH. Ekstrahert med CHCI3. Det organiske laget ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi (1:1 heksan-EtOAc), hvilket ga 510 mg (22%) av det ønskede produkt som et blekgult, fast stoff.
<!>H NMR (CDCI3) 5 3,08 (s, 3H), 6,64 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 7,42-7,52 (m, 5H), 8,04-8,06 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,21 min, metode B), MS m/ z 237 (M<+>+H).
Trinn 2:
En løsning av 6-metyl-2-fenyl-pyrido[l,2a]pyirmidin-4-on (489 mg, 2,07 mmol) i smeltet difenyleter (5 ml) ble oppvarmet til svakt tilbakeløp i 5 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble den dannede suspensjonen fortynnet med dietyleter (10 ml) og filtrert. Kaken ble vasket grundig med dietyleter, hvilket ga 450 mg (92%) av det ønskede produkt som et brunaktig fast stoff.
LC-MS (retensjonstid: 1,25 min, metode B), MS m/ z 237 (M<+>+H).
Trinn 3:
En suspensjon av 7-metyl-2-fenyl-lH-[l,8]naftyridin-4-on (450 mg, 1,91 mmol) i POCI3(10 ml) ble oppvarmet til svakt tilbakeløp i 3 timer. Inndampet i vakuum. Residuet ble ble hellet i isvann (20 ml) og nøytralisert til pH 10 med 10 M NaOH. Ekstrahert med CHCI3. Det organiske laget ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi (2:1 heksan-EtOAc), hvilket ga 450 mg (92%) av det ønskede produkt som et rosa, fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 2,80 (s, 3H), 7,54-7,56 (m, 3H), 7,61 (d, 7=8,4 Hz, 1H), 8,25-8,30 (m, 3H), 8,58 (d, 7=8,4 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,39 min, metode B), MS m/ z 255,257 (M<+>+H).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av 4-klor-7-metyl-2-fenyl-[l,8]naftyridin fra Eksempel 2, Trinn 3 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,55 min, metode B), MS m/ z 563 (M<+>+H).
Trinn 5:
Forbindelse 2 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 2, Trinn 4 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,01-1,10 (m, 12H), 1,21-1,26 (m, 10H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,86-1,91 (m, 1H), 2,20-2,29 (m, 1H), 2,39-2,49 (m, 1H), 2,72-2,81 (m, 1H), 2,92-2,95 (m, 4H), 4,10-4,16 (m, 2H), 4,55-4,65 (m, 2H), 5,14 (d, 7=12,0 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 5,67-5,82 (m, 2H), 7,60-7,80 (m, 3H), 7,78 (d, 7=8,6 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,26-8,29 (m, 2H), 8,95 (d, 7=8,4 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,62 min, metode B), MS m/ z 775 (M<+>+H).
Eksempel 3: Fremstilling av Forbindelse 3.
Trinn 1:
Til en løsning av 4-metoksyfenetylalkohol (1,52 g, 10,0 mmol) i CH2CI2(50 ml) ved 0°C ble satt Dess-Martin reagens (4,45 g, 10,5 mmol) i én porsjon. Den dannede blanding fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur i 1 time. Vasket med henholdsvis mettet Na2S2C«3 (vandig) og IM NaOH, saltvann. Tørket over MgS04og inndampet i vakuum, hvilket ga 1,50 g (100%) av det ønskede aldehyd som en viskøs olje. Dette produktet ble anvendt rått uten noen ytterligere rensning.
Trinn 2:
En løsning av 3,5-dimetyl-4-nitro-isoksazol (142 mg, 1,0 mmol), 4-metoksy-fenylacetaldehyd fra Eksempel 3, Trinn 1 (180 mg, 1,1 mmol) i piperidin (0,1 ml) og etanol (2 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 12 timer. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur ble utfelt produkt oppsamlet ved filtrering. Kaken ble vasket grundig med kald etanol, hvilket ga 130 mg (51%) av det ønskede produkt som et gråaktig fast stoff.
<J>H NMR (CDCI3) 5 2,88 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 7,02 (d, 7=8,5 Hz, 2H), 7,50 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,57 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,81 (d, 7=8,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,24 min, metode B), MS m/ z 257 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 3, Trinn 2 istedet.
<J>H NMR (CDC13) 5 2,70 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 7,00-7,03 (m, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,96-7,98 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,96 min, metode B), MS m/ z 275, 277 (M<+>+H).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 3, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,02 (s, 9H), 1,18 (s, 9H), 2,39-2,43 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,75-2,80 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 4,00-4,08 (m, 1H), 4,17 (b, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,68 (b, 1H), 7,05 (d, 7=8,5 Hz, 2H), 7,49 (s, 1H), 8,00 (d, 7=8,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,89 min, metode B), MS m/ z 583 (M<+>+H).
Trinn 5:
Forbindelse 3 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 3, Trinn 4 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 5 1,01-1,09 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, 7=11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=15,0
Hz, 1H), 5,72-5,85 (m, 2H), 7,05 (d, 7=8,5 Hz, 2H), 7,06 (s, 1H), 8,01 (d, 7=8,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,96 min, metode B), MS m/ z 795 (M<+>+H).
Eksempel 4: Fremstilling av Forbindelse 4.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 3, Trinn 1 & 2, bortsett fra anvendelse av 4-fluorfenetylalkohol istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,18 min, metode B), MS m/ z 245 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 4, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR (CDC13) 5 2,71 (s, 3H), 7,17-7,20 (m, 2H), 7,86 (s, 1H), 8,00-8,02 (m, 2H); LC-MS (retensjonstid: 1,71 min, metode B), MS m/ z 263, 265 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 4, Trinn 2 istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,91 min, metode B), MS m/ z 571 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 4 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 4, Trinn 3 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,01-1,09 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, 7=11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 5,72-5,85 (m, 2H), 7,20-7,26 (m, 2H), 7,60 (s, 1H), 8,09-8,14 (m, 2H), 9,26 (b, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,91 min, metode B), MS m/ z 783 (M<+>+H).
Eksempel 5: Fremstilling av Forbindelse 5.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 3, Trinn 1 & 2, bortsett fra anvendelse av 3-metoksy-fenetylalkohol istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,03 min, metode B), MS m/ z 257 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 5, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR (CDC13) 5 2,72 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 7,00-7,02 (m, 1H), 7,41 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,55 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,59 (d, 7=2,0 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,89 min, metode B), MS m/ z 275, 277 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 5, Trinn 2 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 5 1,02 (s, 9 H), 1,18 (s, 9H), 2,37-2,47 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,85-2,93 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 4,00-4,08 (m, 1H), 4,14 (b, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,71 (b, 1H), 7,02-7,04 (m, 1H), 7,40 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,58-7,62 (m, 3H);
LC-MS (retensjonstid: 1,90 min, metode B), MS m/ z 583 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 5 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 5, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,01-1,09 (m, 12H), 1,17-1,29 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H),
1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, 7=11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 5,72-5,85 (m, 2H), 7,02-7,05 (m, 1H), 7,41 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,55-7,61 (m, 3H);
LC-MS (retensjonstid: 1,96 min, metode B), MS m/ z 795 (M<+>+H).
Eksempel 6: Fremstilling av Forbindelse 6.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 3, Trinn 1 & 2, bortsett fra anvendelse av 2-metoksy-fenetylalkohol istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,10 min, metode B), MS m/ z 257 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 6, Trinn 1 istedet. JH NMR (CDC13) 5 2,721 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 7,03 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 7,11 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,41-7,44 (m, 1H), 7,79-7,81 (m, 1H), 8,04 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,92 min, metode B), MS m/ z 275, 277 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 6, Trinn 2 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,02 (s, 9 H), 1,20 (s, 9H), 2,37-2,47 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,85-2,93 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,00-4,08 (m, 1H), 4,14 (b, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,56 (b, 1H), 7,09 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,15 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 7,41-7,44 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,67 (d, J=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,76 min, metode B), MS m/ z 583 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 6 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 6, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,01-1,08 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,19 (b, 1H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, 7=11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 5,59 (b, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 7,09 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,15 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 7,41-7,45 (m, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,66-7,67 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,93 min, metode B), MS m/ z 795 (M<+>+H).
Eksempel 7: Fremstilling av Forbindelse 7.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av 2-klor-kinolin istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,73 min, metode B), MS m/ z 472 (M<+>+H).
Trinn 2:
Forbindelse 7 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 7, Trinn 1 istedet.<!>H NMR (CD3OD) 5 1,01-1,08 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,23-2,30 (m, 2H), 2,52-2,57 (m, 1H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,10-4,14 (m, 1H), 4,09-4,15 (m, 2H), 4,47-4,51 (m, 1H), 5,13 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,32 (d, .7=17,0 Hz, 1H), 5,73-5,78 (m, 1H), 5,92 (b, 1H), 6,90-6,92 (m, 1H), 7,42 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,64 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,78-7,82 (m, 2H), 8,13 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 9,18 (d, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,75 min, metode B), MS m/ z 684 (M<+>+H).
Eksempel 8: Fremstilling av Forbindelse 8.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 6b til 8, uten anvendelse av Trinn 6a, et enzymatisk spaltningstrinn. LC-MS (retensjonstid: 0,24 min, metode B), MS m/ z 231 (M<+>+H).
Trinn 2:
Til en avkjølt blanding av N-BOC-4-trans-hydroksy-L-prolin (1,58 g, 6,83 mmol), cyklopropansulfonsyre-( 1 -amino-2-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydroklorid (Eksempel 8, Trinn 1) (2,00 g, 7,52 mmol) og HATU (3,89 g, 10,2 mmol) i CH2CI2(100 ml) ble satt diisopropyletylamin (4,41 g, 34,2 mmol). Den dannede løsningen fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur i 12 timer. Fortynnet med EtOAc (200 ml), vasket med 5% H3PO4og saltvann, tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi (gradient, 2:1—1:1 heksan-aceton), hvilket ga 1,25 g (41%) av det ønskede produkt.
<!>H NMR (DMSO-d6) 5 1,00-1,08 (m, 4H), 1,34-1,40 (m, 1:2,10H), 1,62-1,70 (m, 1H), 1,76-1,87 (m, 1H), 2,02-2,21 (m, 2H), 2,81-2,95 (m, 1H), 3,20-3,45 (m, 2H), 4,04-4,09 (m, 1H), 4,26 (b, 1H), 5,08-5,12 (m, 1H), 5,26 (d, J=17,l Hz, 1H), 5,59-5,69 (m, 1H), 8,59, 8,87 (rotamerer, 1:2,1H), 10,48-11,15 (rotamerer, 2:1, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,25 min, metode B), MS m/e 444 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 8, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 8, Trinn 2 istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,02 min, metode B), MS m/e 344 (M<+>+H).
Trinn 4:
Til en avkjølt blanding av N-BOC-4-trans-hydroksy-L-prolin (1,58 g, 6,83 mmol), cyklopropansulfonsyre-( 1 -amino-2-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydroklorid (Eksempel 8, Trinn 3) (2,00 g, 7,52 mmol) og HATU (3,89 g, 10,2 mmol) i CH2CI2(100 ml) ble satt diisopropyletylamin (4,41 g, 34,2 mmol). Den dannede løsningen fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur i 12 timer. Fortynnet med EtOAc (200 ml), vasket med 5% H3PO4og saltvann, tørket over MgS04, filtrert, inndampet. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi (gradient, 2:1—1:1 heksan-aceton), hvilket ga 1,25 g (41%) av det ønskede produkt.
<l>H NMR (CD3OD) 8 0,99-1,07 (m, 11H), 1,35-1,44 (m, 13H), 1,75-1,87 (m, 1H), 2,09-2,22 (m, 2H), 2,88-2,94 (m, 1H), 3,74-3,82 (m, 2H), 4,28-4,30 (m, 1H), 4,33-4,38 (m, 1H), 4,48 (b, 1H), 5,11-5,13 (m, 1H), 5,30 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 5,70-5,78 (m, 1H), 6,51-6,61 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,26 min, metode B), MS m/e 557 (M<+>+H).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra eksempel 8, Trinn 4 (56 mg, 0,1 mmol) i DMSO (2 ml) ble satt kalium-tert-butoksyd (49 mg, 0,44 mmol). Den dannede løsningen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time før tilsetning av 4-klor-7-metyl-2-trifluormetyl-[l,8]naftyridin (P. Ferrarini et al, J Heterocyclic Chem, 1983, pl053) (30 mg, 0,12 mmol). Den endelige løsningen ble omrørt i 12 timer. Behandlet med isvann, surgjort med IM HC1 til pH 4, ekstrahert med EtOAc (20 ml, X2). De organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert, inndampet. Residuet ble renset ved prep-HPLC, hvilket ga 16 mg (21%) av forbindelse 8 som et rosa, fast stoff.
<!>H NMR (CD3OD) 5 0,92-0,99 (m, 11H), 1,01-1,04 (m, 11H), 1,22-1,45 (m, 2H), 1,76-1,85 (m, 1H), 2,18-2,40 (m, 2H), 2,76 (s, 3H), 2,86-2,97 (m, 1H), 4,00-4,11 (m, 2H), 4,48-4,58 (m, 2H), 5,09-5,12 (m, 1H), 5,28-5,31 (m, 1H), 5,59 (b, 1H), 5,69-5,78 (m, 1H), 6,39-6,48 (m, 1H), 7,58-7,64 (m, 2H), 8,08 (s, 1H), 8,64-8,68 (m, 1H), 8,85-8,91 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,89 min, metode B), MS m/e 767 (M<+>+H).
Eksempel 9: Fremstilling av Forbindelse 9.
Forbindelse 9 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 8, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av 7-klor-5-etyl-3-metyl-isoksazolo[4,5-b]pyridin (R. Nesi et al, Synth Comm. 1992,22(16), 2349) istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,01-1,09 (m, 11H), 1,21-1,25 (m, 11H), 1,36 (t, J=7,8 Hz, 3H), 1,38-1,47 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 1H), 2,20-2,31 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 2,90-3,00 (m, 3H), 4,01-4,18 (m, 2H), 4,41-4,51 (m, 2H), 5,11-5,15 (m, 1H), 5,27-5,32 (m, 1H), 5,58 (b, 1H), 5,70-5,80 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,72, 7,98 (1:1,1H), 9,00, 9,22 (1:1, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,75 min, metode B), MS m/e 717 (M<+>+H).
Eksempel 10: Fremstilling av Forbindelse 10.
Forbindelse 10 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 8, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av 7-klor-5-fenyl-3-metyl-isoksazolo[4,5-b]pyridin (Eksempel 1, Trinn 2) istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,00-1,09 (m, 12H), 1,16-1,25 (m, 10H), 1,44-1,48 (m, 1H), 1,79-1,89 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,64-2,66 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,08- 4,20 (m, 2H), 4,44-4,55 (m, 2H), 5,11-5,16 (m, 1H), 5,27-5,31 (m, 1H), 5,72-5,74 (m, 2H), 7,20-7,35 (m, 1H), 7,46-7,51 (m, 2H), 7,55-7,68 (m, 1H), 8,05-8,06 (m, 2H); LC-MS (retensjonstid: 1,97 min, metode B), MS m/ z 765 (M<+>+H).
Eksempel 11: Fremstilling av Forbindelse 11.
Trinn 1:
Til en løsning av 3-metoksy-kanelsyre (11,04 g, 62 mmol) og trietylamin (12,52 g, 124 mmol) i aceton (80 ml) ble satt etylklorformiat (omtrent 1,5 ekvivalenter) dråpevis ved 0°C. Etter omrøring ved denne temperatur i 1 time ble vandig NaN3(6,40 g, 100 mmol i 35 ml H2O) tilsatt dråpevis og reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer ved omgivelsestemperatur. Vann (100 ml) ble satt til blandingen og flyktig stoff ble fjernet i vakuum. Den resulterende oppslemningen ble ekstrahert med toluen (3X50 ml) og de samlede organiske lag ble tørket over MgSCv Den tørkede løsningen ble satt dråpevis til en oppvarmet løsning av difenylmetan (50 ml) og tributylamin (30 ml) ved 190°C. Toluenet ble avdestillert som tilsatt. Etter fullstendig tilsetning ble reaksjonstemperaturen hevet til 210°C i 2 timer. Etter avkjøling ble det utfelte produktet oppsamlet ved filtrering, vasket med heksan (2X50 ml) og tørket, hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff (5,53 g, 51%)
(Nicolas Briet et al, Tetrahedron, 2002, 5761-5766).
LC-MS (retensjonstid: 0,82 min, metode B), MS m/ z 176 (M<+>+H).
Trinn 2:
6-metoksy-2#-isokinolin-l-on ( 5,0 g, 28,4 mmol) i P0C13(10 ml) ble oppvarmet til svakt tilbakeløp i 3 timer og deretter inndampet i vakuum (Nicolas Briet et al, Tetrahedron, 2002, 5761-5766). Residuet ble hellet i isvann (20 ml) og nøytralisert til pH 10 med 10 M NaOH. Ekstrahert med CHC13. Det organiske laget ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi (1:1 heksan-etOAc), hvilket ga 4,41 g (80%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 3,98 (s, 3H), 7,34-7,38 (m, 2 H), 7,69 (d, 7=5,5 Hz, 1H), 8,10 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,23 (d, 7=9,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,42 min, metode B), MS m/ z 194 (M<+>+H).
Trinn 3:
Til en løsning av N-BOC-3-(Æ)-hydroksy-L-prolin (892 mg, 3,89 mmol) i DMSO (40 ml) ved omgivelsestemperatur ble satt kalium-tert-butoksyd (1,34 g, 12,0 mmol) i én porsjon. Den dannede suspensjonen ble omrørt ved denne temperatur i 30 min før den ble avkjølt til 10°C. l-klor-6-metoksy-isokinolin (eksempel 11, Trinn 2)
(785 mg, 4,05 mmol) ble tilsatt som fast stoff i én porsjon og den endelige blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 12 timer. Behandlet med avkjølt 5% sitronsyre (vandig), ekstrahert med EtOAC (100 ml). Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAC igjen. De samlede organiske lag ble vasket med henholdsvis 5% sitronsyre (vandig) og saltvann, tørket over MgS04og filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum til tørrhet, hvilket ga 1,49 g (99%) av det ønskede produkt som et gråhvitt skum. Dette materialet ble anvendt rått i neste trinn uten ytterligere rensning.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,42, 1,44 (rotamerer, 9H), 2,38-2,43 (m, 1H), 2,66-2,72 (m, 1H), 3,80-3,87 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,44-4,52 (m, 1H), 5,73 (b, 1H), 7,16-7,18 (m, 2H), 7,24-7,25 (m, 1H), 7,87-7,88 (m, 1H), 8,07 (d, 7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,62 min, metode B), MS m/ z 389 (M<+>+H).
Trinn 4:
Til en blanding av produktet fra eksempel 11, Trinn 3 (1,49 g, 3,84 mmol), HATU (2,19 g, 5,76 mmol) og cyklopropansulfonsyre-(l-(R)-amino-2-(S)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amid HCl-salt (Eksempel 1, Trinn 8) (1,12 g, 4,22 mmol) i CH2CI2(50 ml) ble satt DIPEA (1,29 g, 11,5 mmol) ved 0°C. Etter omrøring ved omgivelsestemperatur i 12 timer ble den dannede løsningen fortynnet med CH2CI2(50 ml), vasket med avkjølt 5% sitronsyre (vandig). Det organiske laget ble vasket med henholdsvis 5% sitronsyre (vandig) og saltvann, tørket over MgS04og filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum til tørrhet. Residuet ble omkrystallisert fra metanol, hvilket ga 1,60 g (70%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,05-1,08 (m, 2H), 1,16-1,20 (m, 1H), 1,24-1,27 (m, 1H), 1,42-1,45 (m, 10H), 1,88 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1H), 2,24-2,30 (m, 2H), 2,53-2,57 (m, 1H), 2,94-2,98 (m, 1H), 3,80 (d, 7=12,5 Hz, 1H), 3,86-3,89 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 4,40-4,42 (m, 1H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,72-5,81 (m, 2H), 7,17-7,20 (m, 2 H), 7,26 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,07 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,74 min, metode B), MS m/ z 601 (M<+>+H).
Trinn 5:
Til en avkjølt løsning av produktet fra eksempel 11, Trinn 4 (1,50 g, 2,50 mmol) i CH2CI2(10 ml) ble satt TFA (10 ml). Den dannede løsningen fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur i 2 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Residuet ble utgnidd med IM HC1 i eter. Filtrert, vasket med eter, hvilket ga 1,43 g (99,8%) av det ønskede produkt som et hygroskopisk hvitt fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,03-1,208 (m, 4H), 1,26-1,31 (m, 1H), 1,37-1,40 (m, 1H), 1,95-1,97 (m, 1H), 2,32-2,37 (m, 1H), 2,42-2,48 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,88 (d, 7=12,5 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H), 4,40-4,42 (m, 1H), 5,16 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,33 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,62-5,69 (m, 1H), 5,97 (b, 1H), 7,30-7,34 (m, 2H), 7,47 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,90 (d, 7=6,5 Hz, 1H), 8,34 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 9,14 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,12 min, metode B), MS m/ z 501 (M<+>+H).
Trinn 6:
Til en blanding av produktet fra eksempel 11, Trinn 5 (1,49 g, 3,84 mmol), HATU (2,19 g, 5,76 mmol) og N-BOC-t-butyl-L-glycin (1,12 g, 4,22 mmol) i CH2CI2(50 ml) ble satt DIPEA (1,29 g, 11,5 mmol) ved 0°C. Etter omrøring ved omgivelsestemperatur i 12 timer ble den dannede løsningen fortynnet med CH2CI2(50 ml), vasket med avkjølt 5% sitronsyre (vandig). Det organiske laget ble vasket med henholdsvis 5% sitronsyre (vandig) og saltvann, tørket over MgSC^og filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum til tørrhet. Residuet ble renset ved prep-HPLC (40%B til 100%B, 15 min gradient tid), hvilket ga 1,60 g (70%) av forbindelse 11 som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,00-1,08 (m, 12H), 1,23-1,25 (m, 1H), 1,27 (s, 9H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,21-4,24 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,49-4,51 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 5,81 (b, 1H), 6,60 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,25 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,75 min, metode B), MS m/ z 714 (M<+>+H);
Anal. Beregnet for C35H47N5O9S'0,5 H20: C, 58,16; H, 6,69; N, 9,69, Funnet: C, 58,01; H, 6,46; N, 9,55.
Trinn 7:
Til en løsning av Forbindelse 11 (71 mg, 0,1 mmol) i CH2CI2(5 ml) ved - 78°C ble satt IM HC1 i eter (0,2 ml, 0,2 mmol). Etter omrøring ved denne temperatur i 10 min, ble flyktig stoff fjernet i vakuum uten oppvarmningsbad. Residuet ble utgnidd med eter, filtrert, vasket med eter og tørket, hvilket ga 61 mg (85%) av det ønskede HCl-salt av Forbindelse 11 som et meget fint fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,00-1,08 (m, 12H), 1,19 (s, 9H), 1,23-1,25 (m, 1 H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,85-1,91 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,31-2,42 (m, 1 H), 2,65-2,78 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 4,10-4,16 (m, 2H), 4,51-4,64 (m, 2H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=18 Hz, 1H), 5,69-5,79 (m, 1H), 5,84 (b, 1H), 7,28 (d, 7=9,3 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,55 (d, 7=6,3 Hz, 1H), 7,89-7,92 (m, 1H), 8,29 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 9,21 (b, 1 H);
LC-MS (retensjonstid: 1,75 min, metode B), MS m/ z 714 (M<+>+H).
Anal. Beregnet for C35H47N5O9S'l,0 HC1: C, 56,02; H, 6,44; N, 9,33; Cl, 4,72: S, 4,27. Funnet: C, 55,80; H, 6,42; N, 9,15; Cl, 4,56: S, 4,09.
Trinn 8:
En 25 ml 2-halset kolbe ble utstyrt med rørestav, septa og N2gass-adapter. Forbindelse 11 (99,7 mg, 0,140 mmol) ble veiet opp og satt til reaksjonskolben. Reaksjonskolben ble spylt og plassert under en N2-atmosfære. 850 ul av aceton ble satt til kolben for å gi en klar løsning. Til denne løsningen ved romtemperatur ble satt 780 ul av en 0,179 M løsning av KOH (vandig) fremstilt ved oppløsning av fast KOH (502,8 mg, 8,97 mmol) i 50 ml H2O. Løsningen ble noe oppvarmet ved tilsetning av KOH, men forble klar. Den klare løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Produktet krystalliserte ut av løsning og ble isolert ved filtrering. Kaken ble vasket med kald aceton, hvilket ga 42 mg (40% utbytte) av det ønskede produkt som fine hvite nåler:<J>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 0.52 - 0.65
(m, 2H), 0.66 - 0.82 (m, 2H), 0.96 (s, 9H), 1.21-1.24 (m, 10H), 1.44 - 1.63 (m, 1H), 1.72 - 1.92 (m, 1H), 2.30 - 2.42 (m, 1H), 2.46 (d, 7=7.93 Hz, 1H), 2.60 - 2.85 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.93 - 4.05 (m, 1H), 4.07 - 4.24 (m, 1H), 4.41 (t, 7=8.39 Hz, 1H), 4.79 - 4.95 (m, 1H), 4.97 - 5.17 (m, 1H), 5.71 (b, 1H), 5.80 - 6.10 (m, 1H), 6.64 (d, 7=8.54 Hz, 1H), 7.10 (d, 7=8.85 Hz, 1H), 7.24 - 7.37 (m, 2H), 7.90 - 7.96 (m, 1H), 7.99 - 8.04 (b, 1H), 8.06 (d, 7=9.15 Hz, 1H). Element-analyse for C35H46KN509S'H20; calc. C, 54,60; H, 6,28; K, 5,08; N, 9,10 actual C, 54,88; H, 6,23; K, 5,05; N, 9,01; MS m/e 714 (MH<+>);
Eksempel 12: Fremstilling av Forbindelse 12.
Forbindelse 12 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6, bortsett fra anvendelse av N-BOC-L-valin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,94-0,98 (m, 6H), 1,07-1,09 (m, 3H), 1,21-1,25 (m, 10H), 1,40-1,43 (m, 1H), 1,88-1,89 (m, 1H), 2,05-2,09 (m, 1H), 2,22-2,35 (m, 2H), 2,57-2,61 (m, 1H), 2,94-2,97 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,03-4,06 (m, 2H), 4,47-4,55 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=18,1 Hz, 1H), 5,74-5,81 (m, 1H), 5,86 (b, 1H), 7,10 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,25 (d, 7=6,0 Hz, 1H ), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,10 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,71 min, metode B), MS m/ z 700 (M<+>+H).
Eksempel 13: Fremstilling av Forbindelse 13.
Forbindelse 13 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6, bortsett fra anvendelse av N-BOC-L-alloisoleucin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,89-0,96 (m, 6H), 1,07-1,18 (m, 5H), 1,28 (s, 9H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,50-1,54 (m, 1H), 1,87-1,89 (m, 2H), 2,23-2,34 (m, 2H), 2,57-2,61 (m, 1H), 2,92-2,95 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,05-4,07 (m, 1H), 4,22-4,24 (m, 1H), 4,37-4,40 (m, 1H), 4,54-4,56 (m, 1H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,75-5,82 (m, 1H), 5,86 (b, 1H), 7,12 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,24 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,10 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,77 min, metode B), MS m/ z 714 (M<+>+H).
Eksempel 14: Fremstilling av Forbindelse 14.
Trinn 1:
En blanding av Forbindelse 11 (150 mg, 0,21 mmol) og Pearlmann's katalysator (Pd(OH)2, 15 mg) i EtOAc (10 ml) ble plassert på en Parr-shaker i 20 min under 0,7 kg/cm H2. Filtrert gjennom celite. Filtratet ble inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved prep-HPLC for å gi 67 mg (45%) av forbindelse 14 som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,96-0,99 (m, 4H), 1,04 (s, 9H), 1,07-1,09 (m, 2H), 1,21-1,24
(m, 2H), 1,27 (s, 9H), 1,51-1,65 (m, 4H), 2,25-2,27 (m, 1H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,94-2,98 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,21-4,24 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,49-4,51 (m, 1H), 5,81 (b, 1H), 6,59 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 1H), 7,18 (d, 7=1,5 Hz, 1H), 7,24 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,08 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,76 min, metode B), MS m/ z 716 (M<+>+H).
Eksempel 15: Fremstilling av Forbindelse 15.
Forbindelse 15 ble isolert fra samme reaksjon som fremstilling av Forbindelse 14 med en litt lenger retensjonstid som et biprodukt i 15% utbytte.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,92-1,10 (m, 17H), 1,26-1,36 (m, 13H), 1,64-1,72 (m, 1H), 1,90-1,96 (m, 1H), 2,30-2,40 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 2,96-3,00 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,03-4,07 (m, 1H), 4,24 (b, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,49-4,51 (m, 1H), 5,83 (b, 1H), 7,08-7,11 (m, 1H), 7,19 (d, 7=2,0 Hz, 1H), 7,25 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,89 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,10 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 8,51 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,83 min, metode B), MS m/ z 718 (M<+>+H).
Eksempel 16: Fremstilling av Forbindelse 16.
Trinn 1:
Til en løsning av Forbindelse 11 (420 mg, 0,59 mmol) i DCM (5 ml) ved 0°C ble satt TFA (5 ml). Etter omrøring ved denne temperatur i 2 timer ble flyktig stoff fjernet i vakuum. Residuet ble utgnidd med IM HC1 i eter (5 ml), filtrert, vasket med eter og tørket, hvilket ga 360 mg (89%) av det ønskede HCl-salt som et meget fint fast stoff.
LC-MS (retensjonstid: 1,28 min, metode B), MS m/ z 614 (M<+>+H).
Trinn 2:
Til en suspensjon av produktet fra eksempel 16, Trinn 1 (39 mg, 0,06 mmol) og DIPEA (20 mg, 0,18 mmol) i DCM (1 ml) ved 0°C ble satt metylklorformiat (6,8 mg, 0,072 mmol). Etter omrøring ved denne temperatur i 2 timer, ble flyktig stoff fjernet i vakuum. Residuet ble renset ved prep-HPLC, hvilket ga 21 mg (58 %) av forbindelse 16 som hvite krystaller.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,05-1,09 (m, 11H), 1,22-1,25 (m, 2H), 1,41-1,44 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,22-2,32 (m, 2H), 2,59-2,63 (m, 1H), 2,89-2,93 (m, 1H), 3,48 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 4,06-4,10 (m, 1H), 4,31-4,33 (m, 1H), 4,38-4,40 (m, 1H), 4,50-4,52 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 5,85 (b, 1H), 6,95 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,13-7,16 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,25 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,54 min, metode B), MS m/ z 672 (M<+>+H).
Eksempel 17: Fremstilling av Forbindelse 17.
Forbindelse 17 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 16, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av isopropylklorformiat istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,00-1,09 (m, 15H), 1,13-1,16 (m, 2H), 1,24-1,26 (m, 2H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,31 (m, 2H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,04-4,08 (m, 1H), 4,30 (b, 1H), 4,40 (d, 7=10 Hz, 1H), 4,49-4,54 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,71-5,77 (m, 1H), 5,84 (b, 1H), 6,80 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,11 (d, 7=9,0 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1H), 7,25 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,08 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,74 min, metode B), MS m/ z 700 (M<+>+H).
Eksempel 18: Fremstilling av Forbindelse 18.
Forbindelse 18 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 16, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av neopentylklorformiat istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,61 (b, 1H), 0,84 (s, 8H), 1,05-1,09 (m, 11H), 1,23-1,25 (m, 2H), 1,39-1,44 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,56-2,62 (m, 1H),
2,91-2,97 (m, 1H), 3,38 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 3,55 (d, J=9,0 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,32 (d, J=9,5 Hz, 1H), 4,41 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 4,49-4,51 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 5,81 (b, 1H), 6,90 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 1 H), 7,19 (s, 1H), 7,26 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,88 (d,
7=6,0 Hz, 1H), 8,07 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,84 min, metode B), MS m/ z 728 (M<+>+H).
Eksempel 19: Fremstilling av Forbindelse 19.
Forbindelse 19 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 16, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av (S)-3-furanoklorformiat (J. Campbell, A. Good, WO 20020808) istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,03-1,08 (m, 11H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,38-1,46 (m, 1H), 1,64-1,71 (m, 1H), 1,85-1,90 (m, 2H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,91-
2,97 (m, 1H), 3,66-3,72 (m, 4H), 3,93 (s, 3H), 4,05-4,09 (m, 1H), 4,27-4,29 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,55-4,59 (m, 1H), 4,75-4,77 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,28 (d,7=18 Hz, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 5,85 (b, 1H), 7,06 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,13 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,25 (d, 7=6,0 Hz, 1H ), 7,89 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,07 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,52 min, metode B), MS m/ z 728 (M<+>+H).
Eksempel 20: Fremstilling av Forbindelse 20.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av 6-klor-2H-isokinolin-l-on ((Nicolas Briet et al, Tetrahedron, 2002, 5761-5766) istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,07 min, metode B), MS m/ z 180 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 20, Trinn 1 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,04 (s, 9H), 1,20 (s, 9H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,74-2,78 (m, 1H), 4,01-4,04 (m, 1H), 4,19-4,21 (m, 1H), 4,47-4,49 (m, 1H), 4,67-4,70 (m, 1H), 5,84 (b, 1H), 7,28 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,47 (d, 7=6,0 Hz, 1H ), 7,84 (s, 1H), 8,00 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,20 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,88 min, metode B), MS m/ z 506 (M<+>+H).
Trinn 3:
Forbindelse 20 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 20, Trinn 2 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,99-1,11 (m, 12H), 1,20-1,26 (m, 10H), 1,43-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,22-2,31 (m, 2H), 2,60-2,64 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,06-4,08 (m, 1H), 4,21-4,23 (m, 1H), 4,45-4,47 (m, 1H), 4,53-4,56 (m, 1H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 5,88 (b, 1H), 6,58 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,29(d, 7=6,0 Hz, 1 H), 7,47 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,01 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,18 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,94 min, metode B), MS m/ z 718 (M<+>+H).
Eksempel 21: Fremstilling av Forbindelse 21.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet fra eksempel 1, Trinn 4 (3,00 g, 8,72 mmol), HATU (4,97 g, 13,1 mmol) og produktet fra Eksempel 1, Trinn 8 (2,55 g, 9,59 mmol) i CH2C12(100 ml) ble satt DIPEA (3,02 g, 27,0 mmol) ved 0°C. Etter omrøring ved omgivelsestemperatur i 12 timer ble den dannede løsningen fortynnet med CH2CI2(100 ml), vasket med avkjølt 5% sitronsyre (vandig). Det organiske laget ble vasket med henholdsvis 5% sitronsyre (vandig) og saltvann, tørket over MgSC«4 og filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum til tørrhet. Residuet ble renset ved "flash" kolonne (1:1 heksan:aceton), hvilket ga 3,64 g (75%) av det ønskede produkt som et skum.
LC-MS (retensjonstid: 1,41 min, metode B), MS m/ z 557 (M<+>+H).
Trinn 2:
Til en avkjølt løsning av 6-bromisokinolin (4,16 g, 20 mmol) i CH2CI2(100 ml) ble satt wCPBA (9,38 g, 77% ren, 42 mmol) som fast stoff i én porsjon. Etter omrøring ved omgivelsestemperatur i 12 timer ble fortynnet med CH2CI2(100 ml) og vasket med IM NaOH (100 ml, X2) og saltvann. Det organiske laget ble tørket over MgS04, filtrert og inndampet til tørrhet, hvilket ga 3,83 g (86%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff. Dette materialet ble anvendt rått uten ytterligere rensning.
LC-MS (retensjonstid: 0,77min, metode B), MS m/ z 224,226(M<+>+H).
Trinn 3:
En blanding av 6-brom-isokinolin-2-oksyd (88 mg, 0,2 mmol), pyrazol (68 mg, 1,0 mmol), CuBr (57 mg, 0,4 mmol) og cesiumkarbonat (130 mg, 0,4 mmol) i DMF (2 ml) ble oppvarmet til 140°C i 4 timer i et lukket rør. Etter filtrering ble filtratet renset ved prep-HPLC, hvilket ga 41 mg (98%) av det ønskede produkt som et gråhvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CDCI3) 5 6,58-6,59 (m, 1H), 7,82 (d, 7=1,0 Hz, 1H), 7,89 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 8,02 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 8,11 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 8,18-8,22 (m, 2H), 8,29 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 9,07 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 0,77 min, metode B), MS m/ z 212 (M<+>+H).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som et gråhvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 6-pyrazol-isokinolin-2-oksyd istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 7,82-7,83 (m, 2H), 8,23-8,32 (m, 4H), 8,44-8,49 (m, 2H); LC-MS (retensjonstid: 1,35 min, metode B), MS m/ z 230, (M<+>+H).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra Eksempel 21, Trinn 1 (45 mg, 0,08 mmol) i DMSO (2 ml) ble satt kalium-tert-butoksyd (41 mg, 0,37 mmol). Den dannede løsningen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 30 min før tilsetning av 1 -klor-6-pyrazol-l-yl-isokinolin (17 mg, 0,07 mmol). Den endelige løsningen ble omrørt i 12 timer. Behandlet med isvann, surgjort med IM HC1 til pH 4, ekstrahert med EtOAc (20 ml, X2). De organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert, inndampet. Residuet ble renset ved prep-HPLC, hvilket ga 10 mg (16%) av forbindelse 21 som et rosa, fast stoff.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,04-1,10 (m, 12H), 1,23-1,27 (m, 10H), 1,43-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,22-2,29 (m, 2H), 2,61-2,68 (m, 1H), 2,92-2,98 (m, 1H), 4,07-4,11 (m, 1H), 4,24 (b, 1H), 4,46-4,60 (m, 2H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18 Hz, 1H), 5,70-5,83 (m, 1H), 5,89 (b, 1H), 6,59-6,61 (m, 1H), 7,40 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,80 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 8,01 (d, 7=10,0 Hz, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,31 (d, 7=15,0 Hz, 1H), 8,42 (d, 7=4,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,77 min, metode B), MS m/ z 750 (M<+>+H).
Eksempel 22: Fremstilling av Forbindelse 22.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som et gråhvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 6-brom-isokinolin-2-oksyd istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 7,73 (d, 7=5,5 Hz, 1H), 7,85-7,91 (m, 1H), 8,22-8,31 (m, 3H); LC-MS (retensjonstid: 1,53 min, metode B), MS m/ z 241,243,245 (M<+>+H). Trinn 2: Forbindelse 22 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 21, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av l-klor-6-brom-isokinolin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,99-1,09 (m, 12H), 1,22-1,27 (m, 10H), 1,40-1,47 (m, 1H), 1,86-1,91 (m, 1H), 2,20-2,34 (m, 2H), 2,57-2,66 (m, 1H), 2,90-2,97 (m, 1H), 4,05-4,09 (m, 1H), 4,21 (b 1H), 4,44-4,57 (m, 2H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,70-5,82 (m, 1H), 5,88 (b, 1H), 7,29 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 7,60-7,63 (m, 1H), 8,00-8,12 (m, 3H);
LC-MS (retensjonstid: 1,90 min, metode B), MS m/ z 762, 764 (M<+>+H).
Eksempel 23: Fremstilling av Forbindelse 23.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 3 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 1-klor-isokinolin istedet.<J>H NMR (CD3OD) 8 1,42, 1,44 (rotamerer, 9H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,80-3,87 (m, 2H), 4,44-4,52 (m, 1H), 5,78 (b, 1H), 7,32-7,33 (m, 1H), 7,58 (t, 7=7,8 Hz, 1H),), 7,71 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,81 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 7,95 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 8,19 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,61 min, metode B), MS m/ z 359 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 23, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR (DMS0-d6) 8 1,00-1,09 (m, 4H), 1,35-1,38 (m, 10H), 1,69-1,84 (m, 1H),
2,11-2,66 (m, 3H), 2,89-2,93 (m, 1H), 3,62-3,89 (m, 2H), 4,31 (t, 7=8,1 Hz, 1H), 5,12 (d, 7=10,8 Hz, 1H), 5,27 (d, 7=16,8 Hz, 1H), 5,58-5,70 (m, 1H), 5,76 (b, 1H), 7,43 (d, 7=5,7 Hz, 1H), 7,66 (t, 7=7,4 Hz, 1H), 7,79 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,92 (d, 7=8,1 Hz, 1H), 8,02 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 8,13 (d, 7=8,1 Hz, 1H), 9,02 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,72 min, metode B), MS m/ z 571 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 23, Trinn 2 istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,16 min, metode B), MS m/ z 471 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 23 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 23, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,00-1,09 (m, 12H), 1,25-1,27 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,86-1,90 (m, 1H), 2,22-2,34 (m, 2H), 2,60-2,67 (m, 1H), 2,92-2,99 (m, 1H), 4,06-4,11 (m, 1H), 4,26 (b, 1H), 4,45-4,57 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,2 Hz, 1H), 5,27 (d, 7=16,8 Hz, 1H), 5,70-5,82 (m, 1H), 5,88 (b, 1H), 7,32 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,52 (t, 7=7,4 Hz, 1H), 7,70 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,80 (d, 7=8,1 Hz, 1H), 7,97 (d, 7=6 Hz, 1H), 8,20 (d, 7=8,4 Hz, 1H), 9,18 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,80 min, metode B), MS m/ z 684 (M<+>+H).
Eksempel 24: Fremstilling av Forbindelse 24.
Trinn 1:
Til en løsning av N-BOC-3-(Æ)-hydroksy-L-prolin (6,22 g, 26,9 mmol) i DMF (250 ml) ved 0°C ble satt NaH (60%, 3,23 g, 80,8 mmol) i mange porsjoner. Den dannede suspensjon ble omrørt ved denne temperatur i 30 min. 1,3-diklor-isokinolin (5,33 g, 26,9 mmol) ble tilsatt som fast stoff i én porsjon og den endelige blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 12 timer. Behandlet med avkjølt 5% sitronsyre (vandig), ekstrahert med EtOAC (300 ml). Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAC igjen. De samlede organiske lag ble vasket med henholdsvis 5% sitronsyre (vandig) og saltvann, tørket over MgS04, filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum til tørrhet, hvilket ga 10,53 g (99,8%) av 4-(6-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester som et gråhvitt skum. Dette materialet ble anvendt rått i neste trinn uten ytterligere rensning.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,43,1,44 (rotamerer, 9H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,80-3,90 (m, 2H), 4,44-4,52 (m, 1H), 5,77 (b, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,58 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,71-7,78 (m, 2H), 8,16 (d, 7=7,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,80 min, metode B), MS m/ z 392 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 24, Trinn 1 istedet.<!>H NMR (CD3OD) 5 1,02-1,08 (m, 2H), 1,18-1,26 (m, 2H), 1,44-1,48 (m, 10H),
1,84-1,91 (m, 1H), 2,22-2,36 (m, 2H), 2,57-2,60 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,81-3,93 (m, 2H), 4,38-4,41 (m, 1H), 5,13 (d, J=10,8 Hz, 1H), 5,31 (d, J=16,8 Hz, 1H), 5,75-5,82 (m, 2H), 7,41 (s, 1H), 7,59 (t, 7=7,4 Hz, 1H), 7,74-7,79 (m, 2H), 8,16 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,82 min, metode B), MS m/ z 605 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 24, Trinn 2 istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,30 min, metode B), MS m/ z 505 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 24 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 24, Trinn 3 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 5 0,99-1,09 (m, 12H), 1,22-1,29 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,86-1,90 (m, 1H), 2,21-2,34 (m, 2H), 2,62-2,66 (m, 1H), 2,92-2,99 (m, 1H), 4,06-
4,11 (m, 1H), 4,26 (b, 1H), 4,46-4,56 (m, 2H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,2 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 5,89 (b, 1H), 7,40 (d, 7=6,0 Hz, 1H), 7,52 (t, 7=7,4 Hz, 1H), 7,72-7,76 (m, 2H), 8,18 (d, 7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,95 min, metode B), MS m/ z 718(M<+>+H).
Eksempel 25, Forbindelse 25.
Trinn 1:
En blanding av Eksempel 24, Trinn 1 (39 mg, 0,10 mmol), fenylboronsyre (14,6 mg, 0,12 mmol), natrium-tert-butoksyd (38 mg, 0,40 mmol) og ((t-Bu)2POH)2PdCl2(POPd) (5 mg, 0,01 mmol) i THF (2 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 4 timer. Etter avkjøling ble den dannede blanding behandlet med 5% sitronsyre (vandig) og ekstrahert med EtOAc (20 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved prep-HPLC, hvilket ga 36 mg (83%) av det ønskede produkt som et gråhvitt skum.
<!>H NMR (CD3OD) 5 1,43, 1,45 (rotamerer, 9H), 2,51-2,56 (m, 1H), 2,74-2,82 (m, 1H), 3,88-3,92 (m, 1H), 3,98-4,01 (m, 1H), 4,50-4,57 (m, 1H), 5,95 (b, 1H), 7,36-7,39 (m, 1H), 7,45-7,48 (m, 2H), 7,55 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,70 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,84-7,89 (m, 2H), 8,14-8,17 (m, 3H), 9,05 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,97 min, metode B), MS m/ z 435 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 25, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR (DMSO-d6) 5 0,98-1,10 (m, 4H), 1,38-1,41 (m, 10H), 1,74-1,81 (m, 1H), 2,18-2,34 (m, 2H), 2,47-2,49 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,74-3,96 (m, 2H), 4,34-4,37 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,26 (d, 7=17,8 Hz, 1H), 5,75-5,82 (m, 1H), 5,95 (b, 1H), 7,41-7,45 (m, 1H), 7,51-7,54 (m, 2H), 7,61-7,64 (m, 1H), 7,78-7,82 (m, 1H), 7,98 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,13-8,14 (m, 1H), 8,18-8,20 (m, 2H), 9,05 (b, 1H), 10,34 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,99 min, metode B), MS m/ z 647 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 25, Trinn 2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,55 min, metode B), MS m/ z 547 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 25 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 25, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,92-1,09 (m, 12H), 1,26-1,30 (m, 10H), 1,43-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,70-2,75 (m, 1H), 2,93- 2,97 (m, 1H), 4,18-4,30 (m, 2H), 4,46-4,48 (m, 1H), 4,55-4,58 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 6,10 (b, 1H), 7,37-7,40 (m, 1H), 7,46-7,49 (m, 3H), 7,70 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,85-7,89 (m, 2H), 8,16-8,20 (m, 3H);
LC-MS (retensjonstid: 2,08 min, metode B), MS m/ z 760 (M<+>+H).
Eksempel 26: Fremstilling av Forbindelse 26.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 25, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 4-metoksyfenylboronsyre istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,40,1,45 (rotamerer, 9H), 2,50-2,55 (m, 1H), 2,73-2,81 (m, 1H), 3,81-3,89 (m, 4H), 3,98-4,01 (m, 1H), 4,50-4,57 (m, 1H), 5,93 (b, 1H), 7,02 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 7,50 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,67 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,83 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=8,5 Hz, 2H), 8,15 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 2,00 min, metode B), MS m/ z 465 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 26, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,06-1,09 (m, 2H), 1,17-1,27 (m, 2H), 1,42-1,47 (m, 10H), 1,88-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,33-2,39 (m, 1H), 2,61-2,65 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,86-3,90 (m, 1H), 3,99-4,00 (m, 1H), 4,43-4,45 (m, 1H), 5,13 (d, 7=10,8 Hz, 1H), 5,31 (d, J=18,0 Hz, 1H), 5,77-5,80 (m, 1H), 5,99 (b, 1H), 7,02 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 7,51 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,68 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,84 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=8,5 Hz, 2H), 8,15 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 2,02 min, metode B), MS m/ z 677 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 26, Trinn
2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,53 min, metode B), MS m/ z 577 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 26 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 26, Trinn 3 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 0,93-1,09 (m, 12H), 1,26-1,30 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,70-2,75 (m, 1H), 2,93-2,97 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 4,18-4,25 (m, 1H), 4,30 (b, 1H), 4,46-4,48 (m, 1H), 4,55-4,58 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 6,08 (b, 1H), 7,02 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 7,44 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,66 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,83 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=8,5 Hz, 2H), 8,15 (d, 7=8,0 Hz, 1H); LC-MS (retensjonstid: 2,03 min, metode B), MS m/ z 790 (M<+>+H).
Eksempel 27: Fremstilling av Forbindelse 27.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 25, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 4-pyridylboronsyre istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,43, 1,46 (rotamerer, 9H), 2,53-2,56 (m, 1H), 2,80-2,89 (m, 1H), 3,90-3,93 (m, 1H), 4,00-4,05 (m, 1H), 4,50-4,57 (m, 1H), 6,00, 6,05(rotamerer,
1H), 7,80 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,87 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 8,08 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,32 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,84 (d, 7=6,0 Hz, 2H), 8,84 (d, 7=6,5 Hz, 2H); LC-MS (retensjonstid: 1,39 min, metode B), MS m/ z 436 (M<+>+H).
Trinn 2:
Produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 27, Trinn 1 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 5 1,06-1,09 (m, 2H), 1,17-1,27 (m, 2H), 1,42-1,46 (m, 10H), 1,88-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,33-2,39 (m, 1H), 2,61-2,65 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,88-3,90 (m, 1H), 4,01-4,08 (m, 1H), 4,43-4,45 (m, 1H), 5,15 (d, 7=10,8 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,77-5,80 (m, 1H), 6,10 (b, 1H), 7,79 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,88 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 8,08 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,31 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,79 (d, 7=7,0 Hz, 2H), 8,86 (d, 7=6,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,49 min, metode B), MS m/ z 648 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 27, Trinn
2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 0,96 min, metode B), MS m/ z 548 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 27 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 27, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,94-1,09 (m, 12H), 1,22-1,26 (m, 10H), 1,44-1,49 (m, 1H), 1,88-1,92 (m, 1H), 2,22-2,25 (m, 1H), 2,41-2,44 (m, 1H), 2,70-2,75 (m, 1H), 2,93-2,98 (m, 1H), 4,18-4,21 (m, 1H), 4,25 (b, 1H), 4,53-4,62 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=20,0 Hz, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 6,12 (b, 1H), 7,67 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,82 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 8,02 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,29 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,55 (d, 7=7,0 Hz, 2H), 8,76 (d, 7=6,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,49 min, metode B), MS m/ z 761 (M<+>+H).
Eksempel 28: Fremstilling av Forbindelse 28.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 25, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 4-N,N-dimetylamino-fenylboronsyre istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,64 min, metode B), MS m/ z 478 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 28, Trinn 1 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,70 min, metode B), MS m/ z 690 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 28, Trinn
2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,20 min, metode B), MS m/ z 590 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 28 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 28, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (de-DMSO) 5 0,92-1,10 (m, 13H), 1. 30 (s, 9H), 1,35-1,38 (m, 1H), 1,68-1,71 (m, 1H), 2,12-3,00 (m, 2H), 2,59-2,62 (m, 1H), 2,91-2,95 (m, 1H), 2,99 (s, 6H), 3,93-4,10 (m, 2H), 4,32-4,40 (m, 2H), 5,09 (d, 7=11,5 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=19,0 Hz, 1H), 5,54-5,64 (m, 1H), 5,92 (b, 1H), 6,83 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 7,42 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,70 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,87 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,04 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 8,15 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: l,72min, metode B), MS m/ z 803 (M<+>+H).
Eksempel 29: Fremstilling av Forbindelse 29.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 25, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 4-cyano-fenylboronsyre istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,87 min, metode B), MS m/ z 460 (M<+>+H).
Step2:
i
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 29, Trinn 1 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,88 min, metode B), MS m/ z 672 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 29, Trinn
2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,41 min, metode B), MS m/ z 572 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 29 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 29, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,92-1,09 (m, 12H), 1. 25-1,26 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,20-2,22 (m, 1H), 2,33-2,34 (m, 1H), 2,68-2,71 (m, 1H), 2,93-2,95 (m, 1H), 4,13-4,28 (m, 2H), 4,49-4,60 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 6,09 (b, 1H), 7,56 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,74 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,83 (d, 7=10,5 Hz, 2H), 7,93 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 8,22 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 8,37 (d, 7=10,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,87 min, metode B), MS m/ z 785 (M<+>+H).
Eksempel 30, Fremstilling av Forbindelse 30.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 25, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 3-furanoboronsyre istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,85 min, metode B), MS m/ z 425 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 30, Trinn 1 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,88 min, metode B), MS m/ z 637 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 30, Trinn 2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,38 min, metode B), MS m/ z 537 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 30 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra Eksempel 30, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,95-1,09 (m, 12H), 1. 23-1,30 (m, 10H), 1,43-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,21-2,23 (m, 1H), 2,30-2,34 (m, 1H), 2,64-2,70 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 4,11-4,29 (m, 2H), 4,41-4,44 (m, 1 H), 4,54-4,56 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 6,02 (b, 1H), 7,00 (s, 1H), 7,44 (t, 7=7,2 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,66 (t, 7=7,0 Hz, 1H), 7,79 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,14-8,17 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,93 min, metode B), MS m/ z 750 (M<+>+H).
Eksempel 31: Fremstilling av Forbindelse 31.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet for fremstilling av Eksempel 21, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-brom-isokinolin (Atkins et al, JOC, 1973,400) istedet.
<!>H NMR (CDC13) 5 7,60-7,62 (m, 2H), 7,71-7,73 (m, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,99 (s, 1H); LC-MS (retensjonstid: 0,78 min, metode B), MS m/ z 224,226 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som hvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-brom-isokinolin-2-oksyd istedet.
<!>H NMR (CDCI3) 5 7,66-7,71 (m, 1H), 7,74-7,76 (m, 2H), 7,83 (s, 1H), 8,29 (d, 7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,55 min, metode B), MS m/ z 242,244 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 3 som et skum, bortsett fra anvendelse av 3-brom-l-klor-isokinolin istedet.<!>H NMR (CD3OD) 5 1,43, 1,44 (rotamerer, 9H), 2,41-2,47 (m, 1H), 2,69-2,72 (m, 1H), 3,80-3,84 (m, 1H), 3,88-3,90 (m, 1H), 4,46-4,52 (m, 1H), 5,76 (b, 1H), 7,57-7,61 (m, 2H), 7,73-7,75 (m, 2H), 8,15 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,79 min, metode B), MS m/ z 437, 439 (M<+>+H).
Trinn 4:
En blanding av 2-tributylstannanyl-pyrazin (44 mg, 0,12 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (0) (12 mg, 0,01 mmol) og produktet fra eksempel 31, Trinn 3 (44 mg, 0,1 mmol) i toluen (1 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 3 timer. Etter fjerning av de flyktige stoffene i vakuum ble residuet renset ved prep-HPLC, hvilket ga 35 mg (80%) av det ønskede produkt som et gult, fast stoff.
LC-MS (retensjonstid: 1,77 min, metode B), MS m/ z 437 (M<+>+H).
Trinn 5:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 31, Trinn 4 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,78 min, metode B), MS m/ z 649 (M<+>+H).
Trinn 6:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 31, Trinn
5 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,26 min, metode B), MS m/ z 549 (M<+>+H).
Trinn 7:
Forbindelse 31 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 31, Trinn 6 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,95-1,10 (m, 12H), 1,24-1,27 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,19-2,22 (m, 1H), 2,38-2,44 (m, 1H), 2,71-2,76 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 4,18-4,28 (m, 2H), 4,50-4,61 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 6,12 (b, 1H), 7,60 (t, 7=7,2 Hz, 1H), 7,77 (t, 7=7,0 Hz, 1H), 7,97 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 9,61 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,84 min, metode B), MS m/ z 762 (M<+>+H).
Eksempel 32: Fremstilling av Forbindelse 32.
Trinn 1:
Dette produktet, 2-oksy-isokinolin-3-karbonitril, ble fremstilt ved samme
metode som beskrevet i Eksempel 21, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-cyano-isokinolin istedet.
<J>H NMR (DMSO-dé) 5 7,74 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,84 (t, 7=8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,03 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 8,85 (s, 1H), 9,17 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 0,48 min, metode B), MS m/ z 171 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, l-klor-isokinolin-3-karbonitril ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som hvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-cyano-isokinolin 2-oksyd istedet.
<!>H NMR (CDC13) 5 7,87-7,91 (m, 2H), 7,92-7,94 (m, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,42-8,44 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,22 min, metode B), MS m/ z 189 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av l-klor-isokinolin-3-karbonitril istedet.
<J>HNMR (CD3OD) 5 1,05 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 2,34-2,40 (m, 1H), 2,71-2,78 (m, 1H), 4,09-4,11 (m, 1H), 4,21 (b, 1H), 4,48-4,52 (m, 1H), 4,68-4,72 (m, 1H), 5,89 (b, 1H), 7,74 (t, 7=7,5 Hz, 1H ), 7,86 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,94-7,97 (m, 2H), 8,31 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,66 min, metode B), MS m/ z 497 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 32 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel
1, Trinn 9 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 32, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,04-1,09 (m, 12H), 1,20-1,27 (m, 10H), 1,39-1,45 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,63-2,71 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 4,09-4,13 (m, 1H), 4,23 (d, 7=9,3 Hz, 1H), 4,49-4,58 (m, 2H), 5,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,69-5,81 (m, 1H), 5,92 (b, 1H), 6,60 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 7,72 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,86 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,96-7,99 (m, 2H), 8,29 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,75 min, metode B), MS m/ z 714 (M<+>+H).
Eksempel 33: Fremstilling av Forbindelse 33.
Trinn 1:
Dette produktet, 3-metyl-isokinolin 2-oksyd, ble fremstilt ved samme metode
som beskrevet i Eksempel 21, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-metyl-isokinolin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 2,64 (s, 3H), 7,64-7,72 (m, 2H), 7,88-7,95 (m, 2H), 9,05 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 0,61 min, metode B), MS m/ z 160 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, l-klor-3-metyl-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som hvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-metyl-isokinolin-2-oksyd istedet.
<!>H NMR (CDC13) 5 2,65 (s, 3H), 7,25 (s, 1H), 7,61 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,69 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,74 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,27 (d, 7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,47 min, metode B), MS m/ z 178 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av l-klor-3-metyl-isokinolin istedet.<J>HNMR (CD3OD) 5 1,05 (s, 9H), 1,23 (s, 9H), 2,51 (s, 3H), 2,34-2,40 (m, 1H), 2,72-2,78 (m, 1H), 4,05-4,12 (m, 1H), 4,26 (b, 1H), 4,41 (d, 7=10 Hz, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H), 5,90 (b, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,38 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,62 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,68 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,14 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,84 min, metode B), MS m/ z 486 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 33 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 33, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,99-1,09 (m, 12H), 1,23-1,25 (m, 10H), 1,41-1,45 (m, 1H), 1,86-1,90 (m, 1H), 2,21-2,31 (m, 2H), 2,52 (s, 3H), 2,58-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,28 (b, 1H), 4,40 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 4,50-4,55 (m, 1H), 5.12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,71-5,81 (m, 1H), 5,93 (b, 1H), 7.13 (s, 1H), 7,38 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,62 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,68 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,12 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 9,12 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,85 min, metode B), MS m/ z 698 (M<+>+H).
Eksempel 34: Fremstilling av Forbindelse 34.
Trinn 1:
Dette produktet, 3-cyklopropyl-isokinolin 2-oksyd, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 21, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-cyklopropyl-isokinolin (L. Flippin, J. Muchowski, J. O. C, 1993,2631-2632) istedet.
LC-MS (retensjonstid: 0,95 min, metode B), MS m/ z 186 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, l-klor-3-cyklopropyl-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som hvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-cyklopropyl-isokinolin 2-oksyd istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 1,00-1,04 (m, 4H), 2,11-2,18 (m, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,61 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,72 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,83 (d, 7=13,5 Hz, 1H), 8,27 (d, 7=14,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,70 min, metode B), MS m/ z 204 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av l-klor-3-cyklopropyl-isokinolin istedet.
<*>HNMR (CD3OD) 5 0,93-1,05 (m, 13H), 1,29 (s, 9H), 2,06-2,10 (m, 1H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,70-2,76 (m, 1H), 4,05-4,12 (m, 1H), 4,27 (b, 1H), 4,35 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H), 5,78 (b, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,38 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,61 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,96 min, metode B), MS m/ z 512 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 34 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 34, Trinn 3 istedet.
<J>HNMR (CD3OD) 5 0,93-1,09 (m, 16H), 1,24-1,30 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,06-2,11 (m, 1H), 2,21-2,32 (m, 2H), 2,56-2,61 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,28 (b, 1H), 4,32 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 4,48-4,53 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 5,82 (b, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,36 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,60 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,67 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, 7=8,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 2,00 min, metode B), MS m/ z 724 (M<+>+H).
Eksempel 35: Fremstilling av Forbindelse 35.
Trinn 1:
En blanding av 3-hydroksy-isokinolin (725 mg, 5,0 mmol), cesiumkarbonat (4,89 g, 15,0 mmol), Mel (781 mg, 5,5 mmol) i DMF (50 ml) ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 12 timer. Blandingen ble fortynnet med EtOAc (200 ml), filtrert, vasket med henholdsvis vann (200 ml, X2) og IM NaOH (vandig), saltvann. Det organiske laget ble tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved prep-HPLC, hvilket ga 120 mg (15%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CDC13) 5 4,03 (s, 3H), 6,99 (s, 1H), 7,36 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,56 (t, 7=8,2 Hz, 1H), 7,68 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 7,87 (7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 0,54 min, metode B), MS m/ z 160 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, 3-metoksy-isokinolin 2-oksyd, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 21, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-metoksy-isokinolin istedet.
LC-MS (retensjonstid: 0,83 min, metode B), MS m/ z 176 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet, l-klor-3-metoksy-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som hvitt fast stoff, bortsett fra anvendelse av 3-metoksy-isokinolin 2-oksyd istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,62 min, metode B), MS m/ z 194 (M<+>+H).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av l-klor-3-metoksy-isokinolin istedet.
'HNMR (CD3OD) 5 1,05 (s, 9H), 1,23 (s, 9H), 2,35-2,43 (m, 1H), 2,72-2,79 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 4,01-4,11 (m, 1H), 4,26 (b, 1H), 4,48 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H), 5,83 (b, 1H), 6,61 (s, 1H), 7,25 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,54 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,63 (d, 7=8,1 Hz, 1H), 8,08 (d, 7=8,4 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,82 min, metode B), MS m/ z 502 (M<+>+H).
Trinn 5:
Forbindelse 35 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 1, Trinn 9 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 35, Trinn 4 istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 8 1,04-1,08 (m, 12H), 1,24-1,27 (m, 10H), 1,43-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,30-2,34 (m, 1H), 2,62-2,66 (m, 1H), 2,91-2.97 (m, 1H), 3,99 (s, 3H), 4,09-4,12 (m, 1H), 4,27-4,28 (m, 1H), 4,46 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 4,51-4,58 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,72-5,76
(m, 1H), 5,88 (b, 1H), 6,62 (s, 1H), 7,26 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,55 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 8,06 (d, 7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,85 min, metode B), MS m/ z 714 (M<+>+H).
Eksempel 36: Fremstilling av Forbindelse 36.
Trinn 1:
En blanding av 4-metoksy-2-metyl-benzosyre (5,00 g, 30,1 mmol) og tionylklorid (20,0 g, 0,17 mol) ble oppvarmet til tilbakeløp i 30 min.
Flyktig stoff ble fjernet i vakuum. Etter pumping natten over ble det viskøse oljeaktige syreklorid anvendt rått for neste reaksjon uten noen rensning.
Til en løsning av 4-metoksy-2-metyl-benzoylklorid i CH2CI2(60 ml) ved 0°C ble dråpevis tilsatt dietylamin. Den dannede blandingen fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur i 2 timer med omrøring. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum. Residuet ble utgnidd med EtOAc (100 ml) og filtrert. Filtratet ble vasket med IM HC1, IM NaOH og saltvann og tørket over MgS04. Avdampning av løsningsmidlet ga 6,51 g (98%) av det ønskede produkt som en viskøs olje.
LC-MS (retensjonstid: 1,20 min, metode B), MS m/ z 222 (M<+>+H).
Trinn 2:
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (221 mg, 1,0 mmol) i THF (2 ml) ved -78°C ble dråpevis satt n-BuLi (0,84 ml 2,5 M i heksan, 2,10 mmol). Den dannede oransje løsning ble holdt ved denne temperatur i ytterligere 30 min før dråpevis tilsetning av benzonitril (103 mg, 1,0 mmol). Den endelige løsning fikk oppvarmes til omgivelsestemperatur natten over med omrøring. Behandlet med avkjølt 5% sitronsyre. Filtrert, vasket med vann, tørket. Utgnidning med 2:1 heksan-EtOAc (5 ml) ga 205 mg (82%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
<!>H NMR (de-DMSO) 5 3,89 (s, 3H), 6,84 (s, 1H), 7,05-7,07 (m, 1H), 7,18 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,44-7,51 (m, 3H), 7,78 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 8,11 (d, 7=9,0 Hz, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,20 min, metode B), MS m/ z 252 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet, l-klor-6-metoksy-3-fenyl-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 6-metoksy-3-fenyl-2H-isokinolin-l-on istedet.
<J>H NMR (CDC13) 5 3,97 (s, 3H), 7,12 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,23-7,26 (m, 1H), 7,40-7,42 (m, 1H), 7,46-7,50 (m, 2H), 7,89 (s, 1H), 8,08 (d, 7=7,0 Hz, 2H), 8,21 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,90 min, metode B), MS m/ z 270, 271 (M<+>+H).
Trinn 4:
Til en løsning av produktet fra eksempel 21, Trinn 1 (320 mg, 0,57 mmol) i DMSO (5 ml) ble satt kalium-tert-butoksyd (321 mg, 2,87 mmol). Den dannede løsningen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 30 min før tilsetning av l-klor-6-metoksy-3-fenyl-isokinolin (Eksempel 36, Trinn 3) (155 mg, 0,57 mmol). Den endelige løsning ble omrørt i 12 timer. Behandlet med isvann, surgjort med IM HC1 til pH 4, ekstrahert med EtOAc (20 ml, X2). De organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert, inndampet. Residuet ble renset ved prep-HPLC (40%B til 100%B, 15 min gradient), hvilket ga 289 mg (64%) av forbindelse 36 som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,95-1,05 (m, 12H), 1,24-1,32 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m. 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,97 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 4,12-4,28 (m, 2H), 4,38-4,52 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,28 (d, 7=17,0 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 6,05 (b, 1H), 7,06-7,07 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,37-7,39 (m, 1H), 7,44-7,48 (m, 2H), 7,77 (s, 1H), 8,07 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 8,15 (d, 7=8,5 Hz, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 2,02 min, metode B), MS m/ z 790 (M<+>+H).
Eksempel 37: Fremstilling av Forbindelse 37.
Trinn 1:
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (633 mg, 2,9 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C ble dråpevis satt n-BuLi (2,3 ml 2,5 M i heksan, 5,74 mmol). Den dannede røde løsning ble holdt ved denne temperatur i ytterligere 30 min før den ble kanylert til en løsning av tiazol-2-karboksylsyre-etylester (A. Medici et al, Tetrahedron Lett. 1983, s. 2901) (450 mg, 2,9 mmol) i THF (5 ml) ved -78°C. Den endelige mørk grønne løsning ble holdt ved denne temperatur i 2 timer med omrøring. Behandlet med mettet NH4CI (vandig) og ekstrahert med EtOAc (50 ml). Det organiske laget ble vasket med mettet NH4CI (vandig) og saltvann, tørket, renset ved "flash" kolonnekromatografi, under eluering med 2:1 EtOAc:heksan, hvilket ga 405 mg (45%) av det ønskede produkt som en gråhvit viskøs olje.
<J>H NMR (CDCI3) 5 1,08 (t, 7=7,0 Hz, 6H), 3,22 (b, 2H), 3,44 (b, 2H), 3,79 (s, 3H), 4,59 (s, 2H), 6,79-6,81 (m, 1H), 6,86 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,16 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 7,66 (d, 7=3,0 Hz, 1H), 8,00 (d, 7=3,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,30 min, metode B), MS m/ z 333 (M<+>+H).
Trinn 2:
En blanding av N,N-dietyl-4-metoksy-2-(2-okso-2-tiazol-2-yl-etyl)-benzamid (405 mg, 1,22 mmol) og NH4OAc (3,0 g, 38,9 mmol) ble oppvarmet til 140°C i et lukket rør i 1 time. Den smeltede løsningen ble hellet i isvann, filtrert og kaken vasket grundig med vann. Det tørkede brunaktige faste stoff (240 mg, 76%) ble anvendt rått for neste reaksjon uten ytterligere rensning.
LC-MS (retensjonstid: 1,24 min, metode B), MS m/ z 259 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet, l-klor-6-metoksy-3-tiazol-2-yl-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 6-metoksy-3-tiazol-2-yl-2H-isokinolin-l-on istedet.
<!>H NMR (CDCI3) 5 3,97 (s, 3H), 7,16 (d, 7=4,0 Hz, 1H), 7,27-7,31 (m, 1H), 7,46 (d, 7=5,0 Hz, 1H ), 7,93 (d, 7=5,5 Hz, 1H), 8,22 (d, 7=15,5 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,66 min, metode B), MS m/ z 277 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 37 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 36, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av l-klor-6-metoksy-3-tiazol-2-yl-isokinolin istedet.<J>H NMR (CD3OD) 8 0,97-1,09 (m, 12H), 1,24-1,29 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m. 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 4,12-4,27 (m, 2H), 4,38-4,52 (m, 2H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 5,99 (b, 1H), 7,14 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,66 (d, 7=3,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J=3,0 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,11 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 9,14 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,89 min, metode B), MS m/ z 797 (M<+>+H).
Eksempel 38: Fremstilling av Forbindelse 38.
Trinn 1:
En blanding av 3-hydroksy-isoksazol-5-karboksylsyre-metylester (5,72 g, 0,04 mol), metyljodid (6,82 g, 0,044 mol) og cesiumkarbonat (39,1 g, 0,12 mol) i DMF (200 ml) ble omrørt ved omgivelsestemperatur natten over. Fortynnet med
EtOAc (IL), filtrert. Filtratet ble vasket med henholdsvis vann (IL, X2), IM NaOH og saltvann, tørket over MgS04og inndampet i vakuum, hvilket ga 4,80 g (76%) av det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff. Produktet oppnådd her ble anvendt rått uten ytterligere rensning.
<J>H NMR (CDC13) 5 3,92 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 6,51 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 0,69 min, metode B), MS m/ z 158 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, N,N-dietyl-4-metoksy-2-[2-(3-metoksy-isoksazol-5-yl)-2-okso-etyl]-benzamid, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 37, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 3-metoksy-isoksazol-5-karboksylsyre-metylester istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,28 min, metode B), MS m/ z 347 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet, 6-metoksy-3-(3-metoksy-isoksazol-5-yl)-2H-isokinolin-l-on, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 37, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av N,N-dietyl-4-metoksy-2-[2-(3-metoksy-isoksazol-5-yl)-2-okso-etyl]-benzamid istedet.
<J>H NMR (DMSO-dé) 5 3,89 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 7,01 (s, 1H), 7,14-7,16 (m, 2H), 7,43 (s, 1H), 8,13 (d, 7=8,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,31 min, metode B), MS m/ z 273 (M<+>+H).
Trinn 4:
Dette produktet, l-klor-6-metoksy-3-(3-metoksy-isoksazol-5-yl)-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 6-metoksy-3-(3-metoksy-isoksazol-5-yi)-2H-isokinolin-l-on istedet.
<J>H NMR (CDCI3) 5 3,97 (s, 3H), 4,04 (s, 3H), 6,60 (s, 1H), 7,17 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,31-7,33 (m, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,23 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,73 min, metode B), MS m/ z 291, 293 (M<+>+H).
Trinn 5:
Forbindelse 38 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 36, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av l-klor-6-metoksy-3-(3-metoksy-isoksazol-5-yi)-isokinolin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,99-1,09 (m, 12H), 1,23-1,28 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 4,13-4,14 (m, 1H), 4,24-4,26 (m, 1H), 4,41-4,42 (m, 1H), 4,52-4,55 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 5,96 (b, 1H), 6,60 (s, 1H), 7,15-7,17 (m, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,10 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,95 min, metode B), MS m/ z 811 (M<+>+H).
Eksempel 39: Fremstilling av Forbindelse 39.
Trinn 1:
Dette produktet, N,N-dietyl-4-metoksy-2-[2-(5-metoksy-oksazol-2-yl)-2-okso-etyl]-benzamid, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 37, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av 5-metoksy-oksazol-2-karboksylsyre-etylester istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,24 min, metode B), MS m/ z 347 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, 6-metoksy-3-(5-metoksy-oksazol-2-yl)-2H-isokinolin-l-on, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 37, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av N,N-dietyl-4-metoksy-2-[2-(5-metoksy-oksazol-2-yl)-2-okso-etyl]-benzamid istedet.
<!>H NMR (DMSO-dé) 5 3,94 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 6,34 (s, 1H), 6,99 (d, 7=2,0 Hz, 1H), 7,12-7,14 (m, 1H), 7,25 (s, 1H), 8,32 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,22 min, metode B), MS m/ z 21A (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet, l-klor-6-metoksy-3-(5-metoksy-oksazol-2-yl)-isokinolin, ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av 6-metoksy-3-(5-metoksy-oksazol-2-yl)-2H-isokinolin-l-on istedet.
<J>H NMR (CDC13) 5 3,96 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 6,34 (s, 1H), 7,12 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,28-7,31 (m, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,23 (d, 7=9,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,58 min, metode B), MS m/ z 291, 293 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 39 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 36, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av l-klor-6-metoksy-3-(3-metoksy-isoksazol-5-yi)-isokinolin istedet.
<!>H NMR (CD3OD) 5 0,99-1,09 (m, 12H), 1,23-1,28 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 4,13-4,14 (m, 1H), 4,25 (b, 1H), 4,41-4,42 (m, 1H), 4,52-4,55 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 6,07 (b, 1H), 6,45 (s, 1H), 7,15-7,16 (m, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,10 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 9,11 (b, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,75 min, metode B), MS m/ z 811 (M<+>+H).
Eksempel 40: Fremstilling av Forbindelse 40.
Skjema 1
Trinn 1:
Dette produktet, l-klor-6-metoksy-isokinolin 2-oksyd ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 21, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av 1-klor-6-metoksy-isokinolin (produktet fra eksempel 11, Trinn 2) istedet.
<!>H NMR (CDC13) 5 4,00 (s, 3H), 7,14 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,41-7,43 (m, 1H), 7,62 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 8,15 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 8,36 (d, 7=7,0 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 0,85 min, metode B), MS m/ z 210 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet, l,3-diklor-6-metoksy-isokinolin, ble fremstilt ved
samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 2, bortsett fra anvendelse av 1-klor-6-metoksy-isokinolin 2-oksyd istedet.
<J>H NMR (CDCI3) 5 3,94 (s, 3H), 6,98 (s, 1H), 7,25-7,26 (m, 1H), 7,52 9s, 1H), 8,16 (d, 7=9,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,54 min, metode B), MS m/ z 228, 230 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 24, Trinn 1 som et skum, bortsett fra anvendelse av l,3-diklor-6-metoksy-isokinolin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 1,43, 1,44 (rotamerer, 9H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,80-3,90 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,79-4,82 (m, 1H), 5,71 (b, 1H), 7,10-7,14 (m, 2H), 7,26 (s, 1H), 7,99-8,01 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,79 min metode B), MS m/ z 422 (M<+>+H).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 40, Trinn 3 istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,83 min, metode B), MS m/ z 635 (M<+>+H).
Trinn 5:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 40, Trinn 4 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,36 min, metode B), MS m/ z 535 (M<+>+H).
Trinn 6:
Forbindelse 40 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 40, Trinn 5 istedet.
'HNMR (CD3OD) 8 1,07-1,11 (m, 12H), 1,26-1,30 (m, 10H), 1,46-1,48 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,21-2,34 (m, 2H), 2,62-2,66 (m, 1H), 2,94-2,99 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,06-4,11 (m, 1H), 4,26-4,28 (m, 1H), 4,46-4,56 (m, 2H), 5,15 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 5,89 (b, 1H), 6,63 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,08-7,09 (m, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 8,08 (d, 7=9,5 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,99 min, metode B), MS m/ z 748 (M<+>+H).
Eksempel 41: Fremstilling av Forbindelse 41.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 30, Trinn 1, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 40, Trinn 3 istedet. LC-MS (retensjonstid: 1,85 min, metode B), MS m/ z 455 (M<+>+H).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 4 som et skum, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 41, Trinn 1 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,88 min, metode B), MS m/ z 667 (M<+>+H).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 5 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 41, Trinn 2 istedet.
LC-MS (retensjonstid: 1,38 min, metode B), MS m/ z 567 (M<+>+H).
Trinn 4:
Forbindelse 41 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet i Eksempel 11, Trinn 6 som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 41, Trinn 3 istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 5 0,99-1,04 (m, 12H), 1,22-1,31 (m, 10H), 1,43-1,45 (m, 1H), 1,87-1,89 (m, 1H), 2,22-2,24 (m, 1H), 2,30-2,34 (m, 1H), 2,65-2,68 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,11-4,14 (m, 1H), 4,28-4,30 (m, 1H), 4,38-4,42 (m, 1 H), 4,53-4,55 (m, 1H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=18,0 Hz, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 5,99 (b, 1H), 6,61 (d, J=5,0 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,99-7,02 (m, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,57 (d, 7=5,0 Hz, 1H), 8,03 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,92 min, metode B), MS m/ z 780 (M<+>+H).
Eksempel 42: Fremstilling av Forbindelse 42.
Fremstilt ved å følge metodene anvendt ved fremstilling av Eksempel 11. Forbindelse 11, bortsett fra at 6-etoksy kanelsyre ble anvendt istedenfor 6-metoksy-kanelsyre som utgangsmateriale for P2-elementet.
lU NMR (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,98-1,09 (m, 15H), 1,24-1,31 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,85-1,90 (m, 1H), 2,19-2,32 (m, 2H), 2,57-2,63 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 4,03-4,09 (m, 1H), 4,17 (q, 7=7,0 Hz, 2H), 4,42 (d, 7=11,3 Hz, 1H), 4,49-4,54 (m, 1H), 5,12 (d,7=17,4Hz, 1H), 5,72-5,78 (m, 1H), 5,83 (s, 1H), 7,07-7,10 (M, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,22 (d, 7=5,8 Hz, 1H), 7,87 (d, 7=5,8 Hz, 1H), 8,08 (d, 7=8,8 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>728.
Seksjon C:
Eksempel 45: Fremstilling av Forbindelse 45
Trinn 1:
Til en løsning av 2-brom-5-metoksybenzosyre (1,68 g, 7,27 mmol) i DMF (50 ml) i en medium trykk kolbe (Chemglass) ble tilsatt benzamidin (1,25 g, 8,00 mmol), K2CO3(6,0 g, 43,6 mmol) og kobber-pulver (336 mg, 1,45 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 180C° i 1 time. Kobber og overskudd av K2CO3ble fjernet ved vakuum-filtrering og vasket med MeOH. Filtratet ble konsentrert og det resulterende rå materialet ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (Si02, 5% MeOH i DCM), hvilket ga et lysegrønt fast stoff (1,55 g, 84% utbytte):<!>H NMR (DMSO-d6) 5 3,84 (s, 3H), 7,26 ( d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,46 (br s, 5H), 7,57 (s, 1H), 8,38 (br s, 1 H); MS m/ z (MH*) 253.
Trinn 2:
Til en 0°C oppslemning av Boc-c/s-hydroksyprolin-OMe (2,0 g, 8,15 mmol) og produktet fra Eksempel 45, Trinn 1 (2,26 g, 8,97 mmol) i THF (82 ml) ble satt Ph3P og diisopropyl-azokarboksylat (1,98 g, 8,97 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 17 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med EtOAc (100 ml) og vasket med H2O (50 ml). Det vandige laget ble separert og tilbake-ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga en viskøs olje som ble gjenoppløst i en minimal mengde av EtOAc og heksaner ble tilsatt for å bevirke utfelling av mesteparten av Ph3PO-biproduktet. Ph3PO ble fjernet ved vakuum-filtrering og det flytende filtratet ble konsentrert. Den resulterende viskøse olje ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (SiC«2,4:1 heks:EtOAc), hvilket ga et hvitt, fast produkt (1,76 g, 45% utbytte):<!>H NMR (60/40 rotomerer, CDC13) 5 1,47 (s, 9H), 2,49-2,55 (m, 1H), 2,73-2,83 (m, 1H), 3,80 (s, 1,8H), 3,81 (s, 1,2H), 3,96 (s, 3H), 4,03-4,09 (m, 1H), 4,54 (t, J = 8,0 Hz, 0,6H), 4,66 (t, 7 = 7,8 Hz), 4,96-5,06 (m, 1H), 5,97 (br s, 0,6H), 6,04 (br s, 0,4H), 7,33 (dd, 7= 6,1,2,7 Hz, 1H), 7,46-7,51 (m, 4H), 7,91 (d, 7 = 9, 2 Hz, 1H), 8,49 (t, 7= 8,5Hz, 2H);<13>C NMR (rotomers, CDC13) 5 21,7,22,0, 28,3, 28,4, 35,8, 36,8, 52,3, 52,4, 52,6, 55,8, 55,9, 57,9, 58,3, 74,5, 74,9, 80,6, 101,2, 101,3,115,7, 125,8, 126,0, 128,1, 128,5, 129,7, 130,2, 137,9, 147,8,153,8, 157,7, 158,0,158,0, 164,8, 173,1, 173,3; MS m/ z (MH<+>)480.
Trinn 3:
Produktet fra Eksempel 45, Trinn 2 (760,0 mg, 1,59 mmol) ble oppløst i 50% TFA i DCM og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Løsningsmidlet ble konsentrert og den resulterende brune viskøse olje ble tørket i vakuum natten over. Produktet ble anvendt direkte for neste reaksjon.
Trinn 4:
Til en løsning av det brune viskøse oljeprodukt fra Eksempel 45, Trinn 3 (963 mg, 1,59 mmol) og DIPEA (1,23 g, 9,54 mmol) i DCM (11 ml) ble satt N- BOC Z-fBuGly (440 mg, 1,90 mmol), HBTU (902 mg, 2,38 mmol) og HOBt (364 mg, 2,38 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble løsningsmidlet og overskudd av DIPEA konsentrert og den resulterende brune viskøse olje renset ved "flash" kolonne (Si02,4:1 heks:EtOAc), hvilket ga et hvitt, fast stoff (0,922 mg, 98% utbytte for de to trinn):<!>H NMR (CDCl3/MeOD) 5 0,94 (s, 9H), 1,15 (s, 9H), 2,38-2,42 (m, 1H), 2,60-2,73 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 4,08-4,17 (m, 2H), 4,25 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,99 (br s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,38 (s, 5H), 7,80 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 5,5 Hz, 1H);<13>C NMR (CDCl3/MeOD) 8 29,6, 31,4, 31,6, 33,04, 38,2, 39,0, 55,8, 56,9, 59,2, 61,5, 62,1, 78,3, 83,1, 105,0, 119,0, 129,4, 131,5, 131,9,132,6 , 133,8, 141,2, 151,0, 161,4,161,6,168,2,175,2, 175,7; MS m/ z (MH<+>) 593.
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra Eksempel 45, Trinn 4 (409 mg, 0,69 mmol) i THF (10 ml) ble satt IN NaOH (2 ml). Etter omrøring ved romtemperatur i 19 timer ble reaksjonsblandingen surgjort med konsentrert HC1 til omtrent pH 5 og ekstrahert med DCM (3 x 50 ml). De samlede organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga et gult, fast produkt (370 mg, 92% utbytte) som ble anvendt direkte i neste reaksjon etter tørking i vakuum:<!>H NMR (CDC13) 5 1,05 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,76-2,83 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,23-4,27 (m, 2H), 4,41 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,92 (t,7 = 7,6 Hz, 1H), 5,20 (d,7= 8,9 Hz, 1H), 6,08 (brs, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,46-7,50 (m, 5H), 7,93 (d, 7=9,15 Hz, 1H), 8,51 (d, .7=7,3 Hz, 2H); MS m/ z (MH+) 579.
Trinn 6:
Til en løsning N-Boc-vinylcyklopropankarboksylsyre ( IR, 2S/ IS, 2R 1:1 blanding)
(1,01 g, 4,46 mmol) i THF (20 ml) og DMSO (2 ml) ble satt CDI (1,08 g, 6,69 mmol) og DMAP (817 mg, 6,69 mmol). Etter omrøring ved 70°C i 1 time, fikk reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur og ble behandlet med isopropylsulfonamid (1,1 g, 8,92 mmol) og DBU (1,36 g, 8,92 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer og den ble konsentrert og renset ved "flash" kolonnekromatografi (Si02, 5% MeOH i DCM), hvilket ga en brun viskøs olje (1,4 g, 98% utbytte):<!>H NMR (Metanol-cU) 5 1,25 (m, 1H), 1,33 (d, J= 6,7 Hz, 3H), 1,36 (d, J= 6,7 Hz, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,84 (dd, J = 7,6,5,2 Hz, 1H), 2,16 (d,7= 7,6 Hz, 1H), 3,58 (brs, 1H), 5,08 (d,7= 11,6Hz, 1H), 5,27 (d,7= 15,6 Hz, 1H), 5,58-5,66 (m, 1H); MS m/ z (MH<+>) 332.
Trinn 7:
Produktet fra Eksempel 45, Trinn 6 (113 mg, 0,34 mmol) ble behandlet med en 50% løsning av trifluoreddiksyre i DCM (10 ml) og omrørt ved romtemperatur i 1,4 timer. Løsningsmiddel og overskudd av trifluoreddiksyre ble fjernet i vakuum. Den resulterende brune viskøse olje ble tørket i vakuum (1,3 g, 99% utbytte) og anvendt uten ytterligere rensning:<!>H NMR (DMSO-d6) 5 1,24 (d, J= 6,7 Hz, 3H), 1,26 ( d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,54 ( dd, J = 9,6, 6,6 Hz, 1H), 1,99 ( t, J= 6, 9 Hz, 1H), 2,24 ( d, J= 8,5 Hz, 1H), 3,58-3,63 (m, 1H), 5,18 ( d, J= 10,4 Hz, 1H), 5,33 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,61-5,69 (m, 1H), 8,83 (br s, 3H);<13>C NMR (DMSO-de) 5 15,2, 15,9, 16,5,29,9,41,6,52,1,116,0, 118,9, 132,0, 158,2, 167,3; MS m/ z (MH<+>) 233.
Trinn 8:
Til en blanding av produktet fra Eksempel 45, Trinn 5 (117 mg, 0,338 mmol) og DIPEA (174 mg, 1,35 mmol) i DCM (5 ml) ble satt HBTU (128 mg, 0,338 mmol), HOBt (52 mg, 0,338 mmol) og produktet fra Eksempel 45, Trinn 7 (130 mg, 0,225 mmol) Etter omrøring ved romtemperatur i 16 timer ble blandingen konsentrert og den resulterende brune viskøse olje ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (Si02,1:3 heks:EtOAc deretter 95:5 DCM:MeOH), hvilket ga et gråhvitt, fast produkt (150 mg, 84% utbytte) Sluttproduktet, Forbindelse 45, er en blanding av isomerer; hvor variasjonen forekommer ved Pl vin\ kyklopropyl-delen av molekylet (\ R, 2SI\ S, 2R 1:1 blanding):<J>H NMR (Metanol-oU) 5 0,92 (br s, 2H), 1,03 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 1,27-1,38 (m, 9H), 1,42-I, 46 (m, 1H), 1,83 (dd, J = 8,1, 5,3 Hz, 0,4H), 1,90 (dd, J = 7,9, 5,5 Hz, 0,6H), 2,24-2,31 (m, 1H), 2,37-2,45 (m, 1H), 2,67-2,75 (m, 1H), 3,73-3,79 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 4,21 (dd, 7= 9,3, 6,0 Hz, 2H), 4,48 (d, J =11,3 Hz, 1H), 4,61 (q,7= 8,9 Hz, 1H), 5,14 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 5,33 (t, J = 17,9 Hz, 1H), 5,70-5,76 (m, 1H), 6,06 (d, J= II, 9 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,49 (br s, 5H), 7,87 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,46 (d, J = 4,3 Hz, 2H);<13>C NMR (Metanol-d,) 8 15,7,16,1, 16,5, 16,8, 23,9,27,1, 28,6, 35,8, 36,0, 36,2, 36,3, 36,4, 42,6, 42,8, 54,7, 54,8, 55,5, 56,4, 61,1, 61,2, 80,5, 102,9, 117,0, 118,8, 118,9, 126,8, 129,4,129,6, 130,2,131,5, 134,4,139,2, 148,8, 158,0, 159,3, 159,8,166,3,171,1,175,1, 184,3; MS m/ z (MH*> 793.
Eksempel 46: Fremstilling av Forbindelse 46
Forbindelse 46 ble fremstilt ved å følge Trinn 1 til 5 og Trinn 8 i Eksempel 45 bortsett fra at de følgende modifikasjoner ble utført:
Trinn 1:
Modifikasjoner: 2-brom-4,5-dimetoksybenzosyre og cyklopropylkarbamidin-hydroklorid ble anvendt som utgangsmaterialer.
Produkt:
Data:<l>H NMR (DMSO-de) 5 0,97-1,01 (m, 2H), 1,03-1,06 (m, 2H), 1,90-1,94 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,93 (s, 1H), 7,37 (s, 3H), 12,28 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6) 5 9,03, 13,17, 55,47, 55,73, 104,81, 107,27, 113,26, 145,16,147,48, 154,44, 157,21, 160,89 ; MS m/ z (MH+) 247.
Trinn 2:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 46, Trinn 1 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 1.
Produkt:
Data:<J>H NMR (CDC13) 5 1,00-1,04 (m, 2H), 1,07-1,11 (m, 2H), 1,43 (s, 5,4H), 1,46 (s, 3,6H), 2,17-2,21 (m, 1H), 2,37-2,43 (m, 1H), 2,62-2,69 (m, 1H), 3,75 (s, 1,8H), 3,78 (s, 1,2H), 3,92 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,00 (s, 3,6H), 4,01 (s, 2,4H), 4,48 (t, J= 8,0 Hz, 0,6H), 4,59 (t,J = 7,6 Hz, 0,4H), 5,7 (br s, 0,6H), 5,74 (br s, 0,4H), 7,18 (s, 1H), 7,20 (s, 1H);<13>C NMR (CDC13) 5 9,6, 9,7,18,1, 28,3, 28,4, 35,8, 36,7, 52,2, 52,4, 56,3, 57,8, 58,2, 74,0, 74,5, 80,5, 80,6, 101,0, 101,1, 106,3, 108,6, 148,8, 149,1, 153,8,155,4,164,4, 165,9, 172,9, 173,2; LC-MS m/ z (MH+) 474.
Trinn 3 og 4:
Produktet fra Eksempel 46, Trinn 2 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 2.
Produkt:
Data:<J>H NMR (Metanol-cL,) 5 1,04 (s, 9H), 1,08-1,21 (m, 4H), 1,14 (s, 9H), 2,17-2,21 (m, 1H), 2,39-2,41 (m, 1H), 2,74-2,77 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,98 (m, 3H), 4,09 (dd, 7= 11,4, 3,8 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,76 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 5,81 (br s, 1H), 6,43 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,27 (d, J= 5,8 Hz, 1H);<13>C NMR (Metanol-cL,) 5 10,0,10,3,18,6, 26,9, 28,5, 28,8, 35,8, 36,1, 38,9, 52,8, 54,9, 56,7, 59,6, 60,5, 76,6, 80,4, 102,7, 106,2,109,9, 149,8, 150,7, 157,6, 166,0, 167,3, 173,5, 173,6; MS m/ z (MH^) 587.
Trinn 5:
Produktet fra Eksempel 46, Trinn 4 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 4.
Produkt:
Data:<J>H NMR (Metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,13 (s, 9H), 1,20-1,23 (m, 4H), 2,15-2,19 (m, 1H), 2,40-2,45 (m, 1H), 2,70-2,76 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 4,08 (dd, J= 11,4, 3,8 Hz, 1H), 4,17 (d, J= 5,8 Hz, 1H), 4,37 ( d, J= 11,3 Hz, 1H),4,71 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 5,77 (br s, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,20 (s, 1H); 13C NMR (Metanol-cL,) 5 10,2,10,5,18,6,26,9,28,5,28,8,36,0, 36,3, 54,9,56,8, 59,7, 60,4,76,8, 80,4, 102,6,105,9,109,9,126,9,127,9,149,3,150,8,157,65,157,8,166,1, 167,3,173,3, 175,1; MS m/ z (MH<+>) 573.
Trinn 8:
Produktet fra Eksempel 46, Trinn 5 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 5. Sluttproduktet, Forbindelse 46, er en blanding av isomerer; idet variasjonen forekommer ved Pl vinylcyklopropyl-delen av molekylet ( IR, 2S/ IS, 2R 1:1 blanding).
Produkt:
Data:<J>H NMR (Metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,05-1,09 (m, 4H), 1,16 (s, 4,5H), 1,17 (s, 4,5H), 1,19-1,22 (m, 1H), 1,31 (d,7=6,7 Hz, 2H), 1,33-1,38 (m, 7H), 1,18-1,89 (m, 1H), 2,15-2,20 (m, 2H), 2,35-2,44 (m, 1H), 3,23 ( q, J= 7,4 Hz, 1H), 3,70-3,75 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 4,08-4,13 (m, 2H), 4,16 (dd, J = 8,9, 3,1 Hz, 1H), 4,38 ( t, J= 13,1 Hz, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 5,29 ( t, J= 15,2 Hz, 1H), 5,83 (br s, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,27 (d, J = 4,3 Hz, 1H); MS m/ z (MH<+>) 787.
Eksempel 47: Fremstilling av Forbindelse 47
Forbindelse 47 ble fremstilt ved å følge analoge trinn anvendt for å fremstille Forbindelse 45 i Eksempel 45 . Orto-brombenzosyre ble anvendt som utgangsmateriale som også cyklopropansulfonsyre-(lR-amino-2S-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt. Forbindelse 47: MH+=761
Eksempel 48: Fremstilling av Forbindelse 48
Forbindelse 48 ble fremstilt ved å følge Trinn 1 til 5 og Trinn 8 i Eksempel 45 bortsett fra at de følgende modifikasjoner ble utført: Trinn 1: Modifikasjoner: Acetamidin-hydroklorid og 2-brom-5-metoksybenzosyre ble anvendt som utgangsmaterialer.
Produkt:
Data:<J>H NMR (DMSO) 8 2,31 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 7,36 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,51 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 12,15 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO) 8 21,11, 55,41, 105,57, 121,22, 123,59, 128,12, 143,34, 151,68, 157,00, 161,45; LC-MS m/e (MH^) 191.
Trinn 2:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 48, Trinn 1 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 1. Produkt:
Data:<J>H NMR (CDC13) 5 1,43 (s, 5,4H), 1,45 (s, 3,6H), 2,38-2,45 (m, 1H), 2,62-2,71 (m, 1H), 2,66 (s, 1,8H), 2,68 (s, 1,2H), 3,77 (1,8H), 3,79 (s, 1,2H), 3,92 (s, 3H), 3,93-3,98 (m, 2H), 4,49 (t, J = 8,0 Hz, 0,6H), 4,61 (t, J = 7,8 Hz, 0,4H), 5,82 (t, J = 2,1 Hz, 0,6H), 5,89 (t, J = 2,3 Hz, 0,4H), 7,26 (dd, J = 4,7, 3,2 Hz, 1H), 7,42 (dd, J = 6,3, 2,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 9,15 Hz, 1H);<13>C NMR (CDC13) 5 26,1, 28,3, 28,4, 35,8, 36,7, 52,2, 52,2, 52,4, 52,5, 55,755,8, 57,9, 58,2, 74,1, 74,7, 80,6, 101,0, 101,2, 114,9, 125,6, 125,9, 128,6, 147,3, 153,8, 154,5, 157,6, 157,6, 161,2, 164,6, 173,0, 173,3; LC-MS m/e (MH<+>)418.
Trinn 3 og 4:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 48, Trinn 2 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 2.
Produkt:
Data:<J>H NMR (MeOD) 8 1,03 (s, 9H), 1,07 (s, 9H), 2,38-2,42 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,80 (q, J = 7,8 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 4,07 (dd, J = 11,9, 3,4 Hz, 1H), 4,13 (br s, 1H), 4,55 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,78 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,93 (s, 1H), 7,37 (d, J = 2,75 Hz, 1H), 7,48-7,51 (m, 2H), 7,70 (d, J = 5,7 Hz, 1H);<13>C NMR (MeOD) 5 25,6, 26,9, 28,4, 28,8, 35,9, 52,8, 55,0, 56,4, 59,7, 60,6, 77,2, 80,4, 102,9, 111,6, 116,5,127,0,128,4,147,5,162,7,166,4,173,6; LC-MS m/e (MH^) 531.
Trinn 5:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 48, Trinn 4 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 4.
Produkt:
Data:<!>H NMR (MeOD) 5 1,03 (s, 9H), 1,08 (s, 9H), 2,41-2,46 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,81 (q, J = 8,1 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,07 (dd, J = 11,8, 3,2 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,74 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,93 (br s, 1H), 7,37 (d, J = 2,81 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 9,2, 2,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 9,2 Hz, 1H);<13>C NMR (MeOD) 8 25,7, 26,9, 28,5, 36,1, 55,0, 56,4, 59,7, 60,5, 77,1, 80,4, 103,0, 116,5, 127,0, 128,5, 147,7, 157,8, 159,6, 162,7, 166,4, 173,5, 174,9; LC- MS m/e (MH<+>) 517.
Eksempel 48: Fremstilling av Forbindelse 48
Trinn 8:
Til en løsning av produktet fra Eksempel 48, Trinn 5 (45,8 mg, 0,089 mmol), cyklopropansulfonsyre-(lR-amino-2S-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt (21,0 mg, 0,089 mmol) og DIEA (34,5 mg, 0,267 mmol) i DCM (1 ml) ble satt HATU (44,0 mg, 0,116 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur natten over ble reaksjonsblandingen vasket med 5% vandig NaHC03(1 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med 2x2 ml DCM. Det organiske laget ble vasket med 5% vandig sitronsyre (1 ml), saltvann, tørket over MgSC«4, konsentrert og renset ved reversert prep-HPLC. Dette rensningstrinn resulterte i tap av N-BOC-beskyttelsesgruppen ved P3 tert-leucin-delen av molekylet:<!>H NMR (MeOD) 5 1,07-1,12 (m, 2 H) 1,14 (s, 2 H) 1,14-1,16 (m, 2 H) 1,17 (s, 9 H) 1,20-1,30 (m, 3 H) 1,45 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,56 (s, 1 H) 1,92 (dd, J=8,20, 5,60 Hz, 1 H) 2,25-2.31 (m, 1 H) 2,39-2,45 (m, 1 H) 2,73 (m, 1 H) 2,76 (s, 3 H) 2,93-2,97 (m, 1 H) 3,94 (s, 1 H) 3,96 (s, 3 H) 4,07 (s, 1 H) 4,21 (d, 7=3,97 Hz, 0,4 H) 4,23 (d, 7=3,97 Hz, 0,6 H) 4,31 (m, 1 H) 4,73 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H) 5,15 (dd, 7=10,38, 1,52 Hz, 1 H) 5.32 (dd, 7=17,1, 1,52 Hz, 1 H), 5,71-5,78 (m, 1H) 6,11 (t, 7=3,51 Hz, 1 H) 7,46 (d, 7=2,75 Hz, 1 H) 7,67 (d, 7=3,06 Hz, 0,4 H) 7,69 (d, 7=3,05 Hz, 0,6 H) 7,82 (s, 0,6 H) 7,84 (s, 0,4 H).
Eksempel 49: Fremstilling av Forbindelse 49
Forbindelse 49 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet for fremstilling av Forbindelse 48, bortsett fra at produktet fra Eksempel 46, Trinn 5 og cyklopropansulfonsyre-(lR-amino-2S-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt ble anvendt som utgangsmateriale. Preparatetiv HPLC rensnings-trinn resulterte i tap av N-BOC-beskyttelsesgruppen ved P3 tert-leucin-delen av molekylet:<J>H NMR (MeOD) 8 1,09 (m, 2 H) 1,14 (d, 7=3,97 Hz, 2 H) 1,17 (s, 9 H) 1,25 (m, 3 H) 1,37 (m, 3 H) 1,44 (dd, 7=9,31, 5,65 Hz, 2 H) 1,57 (s, 1 H) 1,92 (dd, 7=8,09, 5,65 Hz, 1 H) 2,28 (dd, 7=17,70, 8,55 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,68
(dd, 7=14,19, 7,78 Hz, 1 H) 2,95 (m, 1 H) 3,98 (s, 3 H) 4,06 (s, 3 H) 4,08 (s, 1 H) 4,22 (d, 7=2,75 Hz, 1 H) 4,70 (dd, 7=9,77, 7,32 Hz, 1 H) 5,15 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H) 5,32 (dd, 7=17,40,1,22 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 6,04 (m, 1 H) 7,24 (s, 1 H) 7,37
(s, 1 H)
Eksempel 50: Fremstilling av Forbindelse 50
Forbindelse 50 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet for fremstilling av Forbindelse 48, bortsett fra at produktet fra Eksempel 45, Trinn 5 og cyklopropansulfonsyre-( 1 R-amino-2S-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt ble anvendt som utgangsmateriale. Preparativ HPLC-rensningstrinn resulterte i tap av N-BOC-beskyttelsesgruppen ved P3 tert-leucin-delen av molekylet: JH NMR (MeOD) 5 1,10 (m, 2 H) 1,14 (s, 1 H) 1,15 (d, 7=3,36 Hz, 1 H) 1,17 (d, 7=3,05 Hz, 9 H) 1,22 (m, 1 H) 1,27 (m, 2 H) 1,46 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,56 (s, 1 H) 1,93 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H) 2,29 (q, 7=8,55 Hz, 1 H) 2,48 (m, 1 H) 2,78 (dd, 7=13,89, 8,09 Hz, 1 H) 2,97 (m, 1 H) 3,96 (s, 2 H) 4,07 (s, 1 H) 4,32 (d, 7=2,14 Hz, 2 H) 4,76 (d, 7=7,02 Hz, 1 H) 4,78 (m, 1 H) 4,86 (d, 7=3,05 Hz, 1 H) 5,32 (dd, 7=17,09,1,22 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 6,24 (d, 7=2,44 Hz, 1 H) 7,45 (d, 7=2,75 Hz, 1 H) 7,52 (m, 3 H) 7,61 (dd, 7=9,16,2,75 Hz, 1 H) 7,96 (d, 7=9,16 Hz, 1
H).
Eksempel 51: Fremstilling av Forbindelse 51
Forbindelse 51 ble fremstilt ved å følge Trinn 1 til 5 og Trinn 8 av Eksempel 45 bortsett fra at de følgende modifikasjoner ble utført:
Trinn 1:
Modifikasjoner: 2-brom-4,5-dimetoksybenzosyre og trifluoramidin ble anvendt som utgangsmaterialer.
Produkt:
Data:<J>H NMR (DMSO) 5 3,92 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 7,33 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 13,40 (br s, 1H);<13>C NMR (DMSO) 5 55,8, 56,1, 104,9, 108,7, 150,2, 155,0; LC-MS m/e (MH<+>)275.
Trinn 2:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 51, Trinn 1 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 1.
Produkt:
Data:<J>H NMR (CDC13) 5 1,42 (s, 3,6H), 1,44 (s, 5,4H), 2,42-2,49 (m, 1H), 2,67-2,73 (m, 1H), 3,37 (s, 1,2H), 3,78 (s, 1,8H), 3,97 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 4,02 (s, 2,4H), 4,04 (s, 3,6H), 4,48 (t, J = 7,9 Hz, 0,6H), 4,60 (t, J = 7,7 Hz, 0,4H), 5,86 (br s, 0,6H), 5,90 (br s, 0,4H), 7,27-7,29 (m, 1H), 7,38-7,44 (m, 1H);<13>C NMR (CDC13) 5 8,2, 28,3, 35,7, 36,7, 52,1, 52,2, 52,4, 56,5, 57,8, 58,2, 75,5, 76,0, 80,7, 100,8, 107,6, 111,0, 119,7, 148,2, 150,2, 151,4, 153,8, 154,5, 156,4, 165,1, 172,7, 173,0; LC-MS m/e (MH<+>)502.
Trinn 3 og 4:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 51, Trinn 2 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 2.
Produkt:
Data:<J>H NMR (MeOD) 8 1,03 (s, 9H), 1,08 (s, 9H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,80-2,84 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 4,10-4,14 (m, 2H), 4,52 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,80 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,92 (br s, 1H), 7,35 (br s, 2H); 13C NMR (MeOD) 26,9, 28,4, 28,8, 35,7, 36,0, 52,8, 54,8, 56,9, 59,6, 60,7, 77,9, 80,3, 102,2, 107,9,112,4,120,3,149,3,153,2,157,8,158,3,173,5; LC- MS m/e (MH+) 615.
Trinn 5:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 51, Trinn 4 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 4. Produkt:
Data:<J>H NMR (MeOD) 8 1,03 (s, 9H), 1,09 (s, 9H), 2,44-2,49 (m, 1H), 2,80-2,84 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 4,10-4,24 (m, 3H), 4,50 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,76 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,93 (br s, 1H), 7,36 (br s, 2H);<13>C NMR (MeOD) 8 26,9, 28,4, 28,8, 36,0, 36,1, 54,8, 56,9, 57,0, 60,6, 77,9, 80,3, 102,3, 108,0, 112,5, 120,3, 149,3, 151,3,153,2,158,2,158,3,166,7,173,5; LC-MS m/e (MH<+>)601.
Trinn 8:
Modifikasjoner: Produktet fra Eksempel 51, Trinn 5 ble anvendt som utgangsmateriale istedenfor produktet fra Eksempel 45, Trinn 5. Sluttproduktet, Forbindelse 51, er en blanding av isomerer; hvor variasjonen forekommmer ved Pl vinylcyklopropyl-delen av molekylet ( IR, 2S/ IS, 2R 1:1 blanding).
Produkt:
Data:<J>H NMR (DMSO) 8 0,23 (s, 4,5H), 0,23 (s, 4,5H), 0,35 (s, 4,5H), 0,36 (s, 4,5H), 0,45-0,59 (m, 8H), 0,63-0,66 (m, 1H), 1,04 (dd, J= 8,2, 5,2 Hz, 1H), 1,10 (dd, J = 8,2, 5,5 Hz, 1H), 1,47-1,53 (m, 1H), 1,58-1,61 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,95-3,01 (m, 1H), 3,17 (s, 1,5H), 3,18 (s, 1,5H), 3,22 (s, 3H), 3,37 (br s, 2H), 3,68 (q, J = 5,9 Hz, 1H), 3,82 (q, J = 8,6 Hz, 1H), 4,33-4,37 (m, 1H), 4,54 (t, J = 16,5 Hz, 1H), 4,93 (q, J = 8,9 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,58 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO) 8 12,8, 13,2, 13,7, 13,9, 19,5, 20,6, 21,1, 24,3, 25,6, 32,9, 33,1, 33,4, 33,6, 36,1, 39,7, 39,9, 51,8, 51,9, 52,4, 54,0, 54,2, 57,7, 57,7, 58,1, 58,3, 75,1, 75,3, 77,5, 84,1, 99,2, 105,2, 107,9, 109,5, 116,0, 116,1,118,7, 123,9, 127,4, 131,5, 146,5, 148,6, 150,3, 155,1, 155,5, 163,7, 164,7, 168,2, 168,3, 170,7, 172,2; LC-MS m/e (MH<+>) 815.
Eksempel 52: Fremstilling av Forbindelse 52
Forbindelse 52 ble fremstilt ved samme metode som beskrevet for fremstilling av Forbindelse 48, bortsett fra at produktet fra Eksempel 51, Trinn 5 og cyklopropansulfonsyre-(lR-amino-2S-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amid-hydrokloridsalt ble anvendt som utgangsmateriale. Preparative HPLC rensningstrinn resulterte i tap av N-BOC-beskyttelsesgruppen ved P3 terMeucin-delen av molekylet:<J>H NMR (MeOD) 5 1,11 (m, 3 H) 1,17 (s, 9 H) 1,25 (m, 3 H) 1,46 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,92 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H) 2,28 (q, 7=8,95 Hz, 1 H) 2,42 (m, 1 H) 2,72 (dd, 7=14,19, 7,17 Hz, 1 H) 2,96 (m, 1 H) 4,01 (s, 3 H) 4,04 (m, 5 H) 4,24 (m, 2 H) 4,73 (dd, 7=10,22, 7,17 Hz, 1 H) 5,15 (dd, 7=10,53, 1,37 Hz, 1 H) 5,32 (d, 7=17,09 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 6,07 (s, 1 H) 7,41 (s, 1 H) 7,47 (s, 1 H).
Eksempel 53: Fremstilling av Forbindelse 53
Trinn 1:
Til en løsning av ( IR, 2S/ IS, 2R 1:1 blanding) cyklopropansulfonsyre ble (1-amino-2-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amid-trifluoreddiksyresalt (626 mg, 1,82 mmol) i DCM (17 ml) tilsatt og DIEA (555 mg, 4,29 mmol) i DCM (17 ml), HATU (754 mg, 1,98 mmol) og (2S, 4R)Fmoc-4-amino-l-boc-pyrrolidin-2-karboksylsyre (747 mg, 1,65 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 24 timer ble blandingen vasket med IN HC1 (10 ml), 5% vandig NaHC03(4 ml). Hvert vandige lag ble ekstrahert med DCM (25 ml). Samlet DCM ble tørket over MgSC«4 og konsentrert. Den resulterende brune viskøse olje ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (Si02, 95:5 DCM:MeOH), hvilket ga et gult, fast stoff 822 mg, 75% utbytte):<!>H NMR (DMSO-d6) 5 1,04-1,09 (m, 3H), 1,15-1,27 (m, 4H), 1,38-1,44 (m, 7H), 1,47 (s, 9H), 1,84 (dd, 7=8,2, 5,2 Hz, 1H), 2,01-2,30 (m, 4H), 2,90-2,98 (m, 1H), 3,64-3,71 (m, 1H), 4,16-4,22 (m, 4H), 4,39 (bs, 2H), 5,13 (dd, 7=10,7, 0,9 Hz, 1H), 3,31 (d, 7=17,1 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 7,31 (t, 7=7,3 Hz, 3H),
7,38 (t, 7=7,5 Hz, 3H), 7,64 (d, 7=7,02 Hz, 3H), 7,79 (d, 7=7,63 Hz, 3H); LC-MS m/e (Na+MH<+>)687.
Trinn 2:
Produktet fra Eksempel 53, Trinn 1 (500 mg, 0,752 mmol) ble behandlet med 50% TFA i DCM (10 ml). Etter omrøring ved romtemperatur i 0,5 time, ble den resulterende brune reaksjonsblanding konsentrert, hvilket ga et brunt, fast stoff (489 mg, 84%utbytte):<J>H NMR (DMSO-d6) 5 1,03-1,19 (m, 4H), 1,24-1,26 (m, 1H), 1,35 (dd, 7=9,5,5,5 Hz, 1H), 1,91-1,96 (m, 1H), 2,22-2,30 (m, 1H), 2,40 (bs, 1H), 2,93-2,98 (m, 1H), 3,60 (bs, 1H), 4,21 (t, 7=5,6 Hz, 2H), 4,47 (bs, 3H), 5,17 (d, 7=9,2 Hz, 1H), 5,32 (d, 7=17,1 Hz, 1H), 5,64-5,67 (m, 1H), 7,31 (t, 7=7,3 Hz, 3H), 7,39 (t, 7=7,5 Hz, 3H), 7,63 (d, 7=7,3 Hz, 2H), 7,80 (d, 7=7,3 Hz, 2H); (LC-MS m/e (MH<+>) 565.
Trinn 3:
Til en løsning av produktet fra Eksempel 53, Trinn 2 (260 mg, 0,383 mmol) i DCM (4 ml) ble satt DIPEA (218 mg, 1,69 mmol), HATU (165 mg, 0,422 mmol) og N- BOC L-tBuGly (100 mg, 0,422 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 16 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med H20 (3 ml), surgjort med IN HC1 til pH=l. Det vandige laget ble ekstrahert med DCM (2x15 ml). De samlede organiske lag ble vasket med 5% NaHC03(3 ml), saltvann (5 ml), tørket over MgS04og konsentrert. Den resulterende brune viskøse olje ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (SiC«2, 95:5 DCM:MeOH), hvilket ga et brunt skumaktig fast stoff (281 mg, 94% utbytte):<J>H NMR (DMSO-d6) 5 0,96-1,08 (m, 4H), 1,05 (s, 9H), 1,15-1,26 (m, 2H), 1,35-1,38 (m, 5H), 1,42 (s, 9H), 1,85 (dd, 7=9,5, 5,5 Hz, 1H), 2,07 (bs, 1H), 2,22 (q, 7=8,7 Hz, 1H), 2,92-2,95 (m, 1H), 3,90 (bs, 1H), 4,20 (d, 7=6,4 Hz, 3H), 4,29-4,39 (m, 5H), 5,13 (d, 7=10,7,1H), 5,31 (dd, 7=18,0, 5,8 Hz, 1H), 5,70-5,77 (m, 1H), 7,30 (t, 7=7,3 Hz, 3H), 7,39 (t, 7=7,3 Hz, 4H), 7,63 (dd, 7=6,7, 2,8 Hz, 3H), 8,80 (d, 7=7,63 Hz, 3H); LC-MS m/ z (MH<+>) 678.
Trinn 4:
Produktet fra Eksempel 53, Trinn 3 ble behandlet med 10% piperidin i DMF (3,3 ml). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble løsningsmiddel fjernet og den resulterende brune viskøse olje ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (Si02, 95:5 DCM:MeOH) for å isolere den rene høyeste Rf 1R,2S Pl diastereomer som et blekgult, fast stoff (31 mg). Den andre isomer ble isolert i en blanding og ble ikke anvendt: LC-MS m/ z (MH^) 556.
Trinn 5 og 6:
Til en løsning av produktet fra Eksempel 53, Trinn 4 i DMF (2 ml) ble satt polyvinylpyridin (13 mg) og Fmoc-isotiocyanat. Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble reaksjonsblandingen behandlet med piperidin (172 mg, 2,02 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 6 timer hvoretter den ble konsentrert og tørket under vakuum natten over. Det rå residuet ble gjenoppløst i DMF (2 ml) og behandlet med 2-bromacetofenon og omrørt ved romtemperatur i ytterligere 14 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og det resulterende residuet ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (Si02, 95:5 DCM:MeOH), hvilket ga Forbindelse 53 som et lysegult, fast stoff (21,9 mg, 50% utbytte):<!>H NMR (DMSO-d6) 5 0,87-0,92 (m, 1H), 1,05 (bs, 13H), 1,16-1,25 (m, 4H), 1,34-1,38 (m, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,87 (t, 7=6,6 Hz, 1H), 2,22-2,25 (m, 2H), 2,48 (t, 7=10,7 Hz, 1H), 2,93 (bs, 1H), 3,04 (q, 7=7,3 Hz, 1H) 3,30-3,31 (m, 2H), 3,43-3,49 (m, 1H), 4,01 (d, 7=10,4 Hz, 1H), 4,07-4,12 (m, 1H), 4,27 (t, 7=9,5 Hz, 1H), 4,44 (t, 7=7,0 Hz, 1H), 4,58 (bs, 1H), 5,11 (d, 7=10,1 Hz, 1H), 5,30 (dd, 7=16,8, 9,6 Hz, 1H), 5,73-5,78 (m, 1H), 6,69 (d, 7=8,2 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 7,25 (t, 7=7,3 Hz, 1H), 7,35 (t, 7=7,63 Hz, 2H), 7,82 (d, 7=8,2 Hz, 2H); LC-MS m/ z (MH<+>) 715.
Reversert fase Prep-HPLC-betingelser for Forbindelse 55 til 155 som angitt: Waters Xterra Prep MS Cl8 kolonne, 5 mm (dette betyr 5 mikron partikkelstørrelse), 30 mm x lOOmm
Løsningsmiddel A: 10% MeOH, 90% H20, 10 mM NH4OAc
Løsningsmiddel B: 90% MeOH, 10% H20, 10 mM NH4OAc
50 ml/min strømningshastighet
Gradient: 0%B til 100%B i 10 min, holdt ved 100%B i 4 min
Eksempel 55: Fremstilling av Forbindelse 55
Trinn 1:
Til en løsning av Forbindelse 11 (1,5 g, 2,10 mmol) i DCE (25 ml) ble satt TFA (25 ml). Etter omrøring ved romtemperatur i 15 min ble reaksjonsblandingen konsentrert. Den resulterende røde viskøse olje ble gjenoppløst i DCE (50 ml) og konsentrert påny. Den ble deretter gjenoppløst i DCM (15 ml) og behandlet med en løsning av IN HC1 i Et20 (25 ml). Den resulterende suspensjonen ble avkjølt ved 0°C, vakuum-filtrert, vasket med Et20 og tørket i vakuumovn, hvilket ga produktet fra trinn 1 som et hvitt, fast stoff (1,4 g, 97% utbytte):<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,07-11,2 (m, 3 H) 1,14 (t, 7=4,12 Hz, 1 H) 1,17 (s, 9 H) 1,22 (dd, 7=10,53,4,43 Hz, 1 H) 1,21-1,27 (m, 2 H) 1,42 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H) 1,91 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H) 2,27 (q, 7=8,85 Hz, 1 H) 2,32-2,38 (m, 1 H) 2,70 (dd, 7=13,43, 6,71 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H) 3,96 (s, 3 H) 4,09 (s, 1 H) 4,14 (dd, 7=12,21, 3,66 Hz, 1 H) 4,32-4,35 (m, 1 H) 4,69 (dd, 7=10,53, 6,87 Hz, 1 H) 5,14 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H) 5,31 (dd, 7=17,40, 1,22 Hz, 1 H) 5,70-5,77 (m, 1 H) 5,90 (t, 7=3,51 Hz, 1 H) 7,24-7,27 (m, 1 H) 7,29 (d, 7=4,27 Hz, 1 H) 7,39 (t, 7=4,88 Hz, 1 H) 7,90 (d, 7=6,10 Hz, 1 H) 8,19 (m, 1 H) 9,22 (s, 1 H).
Trinn 2:
Til en løsningsblanding av produktet fra trinn 1 i Eksempel 55 (70,0 mg, 0,108 mmol) og DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) i DCM (2 ml) ble satt eddiksyreanhydrid (33,0 mg, 0,323 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble løsningsmidlet fjernet og produktet ble renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 55 (39,1 mg, 14% utbytte): 'HNMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,00-1,03 (m, 1 H), 1,06 (s, 9 H), 1,07-1,10 (m, 1 H), 1,21-1,28 (m, 2 H), 1,43 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,55, 5,49 Hz, 1 H), 2,23 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,27-2,32 (m, 1 H), 2,59 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,51 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,61 (dd, 7=5,80, 3,05 Hz, 1 H), 4,80 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 4,88 (d, 7=3,96 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,38, 1,83 Hz, 1 H), 5,29 (dd, 7=17,24,1,37 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,84 (t, 7=3,66 Hz, 1 H), 7,15 (dd, 7=8,85,2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,49 min.), MS m/z 656 (MH<+>).
Eksempel 56: Fremstilling av Forbindelse 56
Forbindelse 56 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 55 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Cyklopentankarbonylklorid ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 56 (18,0 mg, 24% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,00-1,03 (m, 1 H), 1,05 (s, 9 H), 1,06-1,10 (m, 2 H), 1,24-1,27 (m, 2 H), 1,25-1,61
(m, 9 H), 1,80-1,83 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,22-2,31 (m, 2 H), 2,58-2,65 (m, 2 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,10 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=11,91 Hz, 1 H), 4,52 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,65 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 4,80 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 4,88 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 5,13 (dd, 7=10,37, 1,83 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=16,80, 1,22 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,84 (t, 7=4,27 Hz, 1 H), 7,11 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,05 (d, 7=9,16 Hz, 1 H) ); LC-MS (retensjonstid: 1,71 min.), MSm/z710(MH+).
Eksempel 57: Fremstilling av Forbindelse 57
Forbindelse 57 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 55 med de følgende modifikasjoner:
Modifikasjoner: 2-etylbutyrylklorid ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 57 (20,7 mg, 27% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,66 (t, 7=7,32 Hz, 3 H), 0,85 (t, 7=7,32 Hz, 3 H), 1,02-1,05 (m, 1 H), 1,07 (s, 9 H), 1,10-1,12 (m, 1 H), 1,24-1,33 (m, 4 H), 1,36-1,39 (m, 1 H), 1,43 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,48-1,51 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,12-2,14 (m, 1 H), 2,22 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,26-2,30 (m, 1 H), 2,59 (dd, 7=13,73, 6,71 Hz, 1 H), 2,94-2,97 (m, 1 H), 3,92 (s, 3H), 4,11 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,40 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,50 (dd, 7=10,68, 7,02 Hz, 1 H), 4,75 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 4,81 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,29 (dd, 7=17,09,1,22 Hz, 1 H), 5,72-5,79 (m, 1 H), 5,85 (t, 7=3,66 Hz, 1 H), 7,08 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1H), 7,98 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 8,02 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,73 min.), MS m/z712(MH<+>).
Eksempel 58: Fremstilling av Forbindelse 58
Til en løsningsblanding av produktet fra trinn 1 i eksempel 55 (70,0 mg, 0,108 mmol), DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) og cyklopropaneddiksyre (16,2 mg, 0,162 mmol) i DCM (2 ml) ble satt HATU (61,6 mg, 0,162 mmol). Etter omrøring av reaksjonsblandingen ved romtemperatur natten over ble den vasket med 5% vandig NaHCC>3 (1 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med 2x2 ml DCM. De samlede organiske lag ble vasket med 5% vandig sitronsyre (2 ml), saltvann , tørket over MgSC«4 og konsentrert. Produkt ble renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 58 (21,9 mg, 29% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,11-0,14 (m, 2 H), 0,43-0,47 (m, 2 H), 0,87-0,09 (m, 1 H), 1,01-1,04 (m, 1 H), 1,07 (s, 9 H), 1,09-1,12 (m, 1 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,45 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,03 (d, 7=7,32 Hz, 2 H), 2,23 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 2,59 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,93 (m, 3 H), 4,13 (dd, 7=11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,34 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,66 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 4,81 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,37,1,52 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=17,09,1,22 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,81 (d, 7=9,46 Hz, 1H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,63 min. ), MS m/z 696 (MH ).
Eksempel 59: Fremstilling av Forbindelse 59
Forbindelse 59 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 58 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Metoksyeddiksyre ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 59 (23,5 mg, 32% utbytte): ^NM^CDaOD, 500 MHz) 5 10,99-1,04 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,09-1,12 (m, 1 H), 1,22-1,27 (m, 2 H), 1,45 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,22 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,29-2,32 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,89, 6,87 Hz, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,35 (s, 3 H), 3,70 (d, 7=15,26 Hz, 1 H), 3,84 (d, 7=15,26 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,13 (dd, 7=11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,32 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,54 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,65 (s, 1 H), 4,81 (d, 7=7,32 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=7,32 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,74-5,81 (m, 1 H), 5,86 (t, 7=3,36 Hz, 1 H), 7,14 (dd, 7=9,00, 2,59 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,04 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,54 min.), MS m/z 686
(MH<+>).
Eksempel 60: Fremstilling av Forbindelse 60
Forbindelse 60 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 58 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: (+)-metoksyeddiksyre ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 60 (23,8 mg, 27% utbytte):<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0,78 (d, 7=7,02 Hz, 3 H), 0,83-0,88 (m, 2 H), 0,92 (t, 7=7,17 Hz, 6 H), 0,94-0,98 (m, 1 H), 1,00-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,07-1,1 l(m, 1 H), 1,22-1,26 (m, 2 H), 1,31-1,36 (m, 2 H), 1,45 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,63-1,68 (m, 2 H), 1,89 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,01-2,04 (m, 1 H), 2,17-2,21 (m, 1 H), 2,24 (q, 7=9,00 Hz, 2 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,15-3,20 (m, 1 H), 3,77 (d, 7=15,26 Hz, 1 H), 3,87 (d, 7=15,26 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,32 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,56 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,65 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 4,81 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 5,13 (dd, 7=10,22, 1,68 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=17,09, 1,53 Hz, 1 H), 5,75-5,79 (m, 1 H), 5,85 (t, 7=3,66 Hz, 1 H), 7,14 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,52 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 2,043 min.), MS m/z 810 (MH<+>).
Eksempel 61: Fremstilling av Forbindelse 61
Forbindelse 61 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 58 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: (-)-metoksyeddiksyre ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 61 (26,4 mg, 30% utbytte): ^NM^CDaOD, 500 MHz) 8 0,78 (d, 7=7,02 Hz, 3 H), 0,82-084 (m, 1 H), 0,88 (dd, 7=8,39, 3,81 Hz, 1 H), 0,91 (d, 7=7,01 Hz, 3 H), 0,92 (d, 7=6,41 Hz, 3 H), 0,94-0,99 (m, 2 H), 1,00-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,08-1,10 (m, 1 H), 1,23-1,26 (m, 2 H), 1,30-1,37 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,62-1,68 (m, 2 H), 1,89 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 1,98-2,02 (m, 1 H), 2,13-2,16 (m, 1 H), 2,24 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,28-2,32 (m, 1 H), 2,60 (dd,
7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,94-2,98 (m, 1 H), 3,08-3,13 (m, 1 H), 3,63 (d, 7=15,56 Hz, 1 H), 3,93 (S, 3H), 4,11 (dd, 7=12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,32 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,56 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,62 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 4,81 (d, 7=6,41 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=6,72 Hz, 1 H), 5,13 (dd, 7=10,38, 1,83 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=17,09,1,23 Hz, 1 H), 5,76-5,80 (m, 1 H), 5,85 (t, 7=3,51 Hz, 1 H), 7,14 (dd, 7=9,00,2,59 Hz, 1 H), 7,20 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,52 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,04 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 2,05 min.), MS m/z810(MH<+>).
Eksempel 62: Fremstilling av Forbindelse 62
Forbindelse 62 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 58 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Bicyklo[l,l,l]pentan-2-karboksylsyre ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 62 (35,1,45% utbytte): 'HNM^CDaOD, 500 MHz) 8 1,03 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 1,06 (s, 9 H), 1,08-1,11 (m, 3 H), 1,23-1,29
(m, 3 H), 1,37 (dd, 7=7,02, 3,36 Hz, 13 H), 1,46 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,65 (dd, 7=9,77,2,14 Hz, 1 H), 1,69 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 1,72 (dd, 7=7,32, 3,05 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,12 (dd, 7=9,77, 3,05 Hz, 1 H), 2,23 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 2,60 (t, 7=6,87 Hz, 1 H), 2,63 (d, 7=1,83 Hz, 2 H), 2,68 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 2,93-2,96 (m, 1 H), 3,23 (q, 7=7,43 Hz, 2 H), 3,70-3,75 (m, 2 H), 3,93 (s, 3 H), 4,11 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,53, 6,87 Hz, 1 H), 4,71 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 4,79 (d, 7=5,80 Hz, 2 H), 4,87 (d, 7=5,49 Hz, 2 H), 5,13 (dd, 7=10,38,1,83 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=17,24, 1,37 Hz, 1 H), 5,74-5,79 (m, 1 H), 5,86 (t, 7=3,20 Hz, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,72 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,05 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,16 min.), MS m/z 708
(MH<+>).
Eksempel 63: Fremstilling av Forbindelse 63
Forbindelse 63 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 58 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: pyrazin-2-karboksylsyre ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 63 (42,3, 54% utbytte): 'HNMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,00-1,04 (m, 3 H), 1,05-1,09 (m, 1 H), 1,10 (s, 9 H), 1,15 (s, 1 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,43 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,17 (q, 7=8,65 Hz, 1 H), 2,37-2,42 (m, 1 H), 2,64 (dd, 7=13,73,7,32 Hz, 1 H), 2,91-2,95 (m, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 3,93 (d, 7=3,35 Hz, 1 H), 4,13 (dd, 7=11,90, 3,36 Hz, 1 H), 4,46 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,61 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,76 (s, 1 H), 4,80 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 4,88 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 5,09 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 6,85 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,08 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,90 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,57 (d, 7=1,53 Hz, 1 H), 8,73 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 8,81 (s, 1 H).
Eksempel 64: Fremstilling av Forbindelse 64
Til en løsningsblanding av produktet fra trinn 1 i eksempel 55 (70,0 mg, 0,108 mmol) og DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) i DCM (2 ml) ble satt benzylklorformiat (55,1 mg, 0,323 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble løsningsmiddel fjernet og produktet ble renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 64 (26,9 mg, 31% utbytte): 'HNMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,00 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 1,02 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 1,04 (s, 9 H), 1,08-1,14 (m, 1 H), 1,16 (d, 7=6,71 Hz, 1 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,43 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,17-2,22 (m, 1 H), 2,30-2,35 (m, 1 H), 2,62 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,90-2,95 (m, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 4,08 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,31 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,74 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,81 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=5,79 Hz, 1 H), 5,10 (d,
7=9,16 Hz, 1 H), 5,16 (s, 1 H), 5,28 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,07 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,20 (d, 7=7,32 Hz, 2 H), 7,25 (t, 7=5,65 Hz, 3 H), 7,30-7,33 (m, 1 H), 7,34-7,37 (m, 2 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,79 min.), MS m/z 748
(MH<+>).
Eksempel 65: Fremstilling av Forbindelse 65
Forbindelse 65 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 64 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: (+)-metylklorformiat ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 65 (28,8 mg, 36% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,72 (d, 7=6,71 Hz, 3 H), 0,80 (t, 7=5,80 Hz, 6H), 0,87 (d, 7=7,02 Hz, 4 H), 0,90-0,95 (m, 6 H), 0,98-1,02 (m, 5 H), 1,05 (s, 9 H), 1,07-1,12 (m, 2 H), 1,18-1,23 (m, 2 H), 1,32-1,38 (m, 3 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,46-1,48 (m, 1 H), 1,63-1,71 (m, 5 H), 1,85 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 1,89-1,93 (m, 1 H), 2,00-2,03 (m, 1 H), 2,15 (q, 7=8,70 Hz, 1 H), 2,34-2,38 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=13,73, 7,33 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,73 (s, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 4,10 (dd, 7=11,60, 3,36 Hz, 1 H), 4,33 (s, 1 H), 4,41 (d, 7=11,29 Hz, 1 H), 4,46-4,52 (m, 1 H), 4,54 (dd, 7=9,76, 7,90 Hz, 1 H), 4,81 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 4,89 (m, 1 H), 5,08 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 5,26 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,77-5,81 (m, 1 H), 5,83 (d, 7=3,97 Hz, 1 H), 7,11 (dd, 7=11,29, 1,83 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 2,06 min.), MS m/z 796 (MH<+>).
Eksempel 66: Fremstilling av Forbindelse 66
Forbindelse 66 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 64 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: (-)-metylklorformiat ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 66 (26,9 mg, 31% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,35 (d, 7=6,41 Hz, 1 H), 0,51 (d, 7=6,71 Hz, 2 H), 0,68 (d, 7=6,71 Hz, 1 H), 0,73 (d, 7=7,02 Hz, 2 H), 0,77-0,82 (m, 4 H), 0,88-0,98 (m, 10 H), 1,0-1,03 (m, 2H), 1,05 (s, 9 H), 1,09-1,18 (m, 3 H), 1,25-1,29 (m, 1 H), 1,3-1,41 (m, 3 H), 1,60-1,71 (m, 3 H), 1,82-1,89 (m, 3 H), 2,00-2,04 (m, 7=2,14 Hz, 1 H), 2,10 (q, J=8,24 Hz, , 1 H), 2,39-2,43 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,87-2,91 (m, 1 H), 3,73 (s, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, 7=11,75, 3,51 Hz, 1 H), 4,22-4,27 (m, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 4,39 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,48-4,55 (m, 1 H), 4,79 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 4,87 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 5,05 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,22 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 7,09 (dd, 7=9,16, 1,83 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H) 8,09 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 2,05 min.), MS m/z 796 (MH<+>).
Eksempel 67: Fremstilling av Forbindelse 67
Forbindelse 67 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 64 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Di-tert-amyl-dikarbonat ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 67 (35,3 mg, 41% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,78 (t, 7=7,17 Hz, 3 H), 0,89-0,95 (m, 6 H), 1,04 (s, 9 H), 1,005-1,09 (m, 3 H), 1,15 (s, 1 H), 1,22 (d, 7=12,51 Hz, 6 H), 1,40 (s, 2 H), 1,42-1,46 (m, 1 H), 1,48 (s, 3 H), 1,56-1,66 (m, 2 H), 1,78 (q, 7=7,63 Hz, 1 H), 1,84 (q, 7=7,53 Hz, 1 H), 1,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 2,22 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,91-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,08 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,26 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 4,42 (d, 7=11,29 Hz, 1 H), 4,52 (t, 7=7,93 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,73-5,80 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 6,57 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,09 (d, 7=8,54 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80
Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,82 min.), MS m/z 728
(MH<+>).
Eksempel 68: Fremstilling av Forbindelse 68
Forbindelse 68 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 64 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: 2,2,2-triklor-1,1 -dimetylklorformiat ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 68 (30,5 mg, 37% utbytte):<!>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0,99 (s, 9 H), 1,04 (s, 6 H), 1,08-1,09 (m, 3H), 1,23-1,26 (m, 3 H), 1,44 (s, 2 H), 1,46 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 1,71 (s, 2 H), 2,23-2,33 (m, 2 H), 2,60-2,64 (m, 1 H), 2,93-2,96 (m, 1 H), 3,70 (m, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 4,04-4,06 (m, 2 H), 4,27 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 4,41 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,57 (d, 7=10,98, 6,11 Hz, 1 H), 5,14 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 5,32 (d, 7=17,70 Hz, 1 H), 5,75-5,80 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,10 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,90 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=9,16 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,95 min.), MS m/z 816 (MH<4>).
Eksempel 69: Fremstilling av Forbindelse 69
Til en løsningsblanding av produktet fra trinn 1 i eksempel 55 (102 mg, 0,149 mmol) og DIEA (48,2,0,373 mmol) i THF (2 ml) ble satt N,N'-disuccinimidylkarbonat (57,1 mg, 0,223 mmol). Den resulterende suspensjonen ble bestrålet i en mikrobølgeovn til 80°C i 15 min. Deretter ble tilsatt en oppslemnings-løsning av natrium- 1-metyl-cyklopentoksyd som ble fremstilt ved behandling av en 0°C løsning av 1-metyl-cyklopentanol (149,2 mg, 1,49 mmol) i THF (1 ml) medNaH (60% i olje, 59,6 mg, 1,49 mmol) i 15 min ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur 15 min, ble reaksjonsblandingen behandlet med mettet vandig ammoniumklorid (3 ml) og ekstrahert med EtOAc (10 ml). Det organiske laget ble deretter ført gjennom en celite hydromatriks kolonne, konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 69 (49,0 mg, 44%):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,95-0,98 (m, 3 H), 0,99-1,01 (m, 7=12,51 Hz, 1 H), 1,03 (s, 9 H), 1,14-1,18 (m, 2 H), 1,30 (s, 3 H), 1,40-1,47 (m, 3 H), 1,50-1,56 (m, 3 H), 1,60-1,64 (m, 1 H), 1,76-1,81 (m, 1 H), 1,83-1,85 (m, 1 H), 2,10-2,19 (m, 1 H), 2,36-2,43 (m, 1 H), 2,63 (dd, 7=14,50, 7,17 Hz, 1 H), 2,86-2,90 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,09 (d, 7=12,51 Hz, 1 H), 4,25 (d, 7=1,53 Hz, 1 H), 4,43 (d, 7=10,99 Hz, 1 H), 4,51-4,55 (m, 1 H), 5,06 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 5,23 (d, 7=16,78 Hz, 1 H), 5,80-5,85 (m, 7=12,67, 12,67 Hz, 2 H), 7,09 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,24 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=9,16 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,87 min.), MS m/z 740
(MH<+>).
Eksempel 70: Fremstilling av Forbindelse 70
Forbindelse 70 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 69 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Cyklopentanol ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 70 (85,1 mg, 40% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,98 (s, 1 H), 1,00 (d, 7=4,88 Hz, 1 H), 1,03 (s, 9 H), 1,06-110 (m, 2 H), 1,24-1,29 (m, 3 H), 1,36-1,40 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,31, 5,04 Hz, 2 H), 1,57-1,62 (m, 5 H), 1,69-1,73 (m, 2 H), 1,88 (dd, 7=8,09,5,65 Hz, 1 H), 2,22-29 (m, 2 H), 2,59-2,62 (m, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,07 (dd, 7=10,99, 2,44 Hz, 1 H), 4,29 (s, 1 H), 4,42 (dd, 7=12,51, 1,53 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=9,77, 7,93 Hz, 1 H), 4,68-4,71 (m, 1 H), 4,81 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 4,89 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,48 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,15, 1,83 Hz, 1 H), 7,20 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,27 (d, 7=5,80 Hz, 1H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,81 min.), MS m/z 726 (MH<+>). Eksempel 71: Fremstilling av Forbindelse 71
Forbindelse 71 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 69 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Cyklobutanol ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 71 (16,2 mg, 39% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,97 (s, 3 H), 1,03 (s, 9 H), 1,06-1,08 (m, 2 H), 1,17-1,22 (m, 3 H), 1,37-1,44 (m, 1 H), 1,82-1,85 (m, 1 H), 2,02-2,08 (m, 1 H), 2,15-2,21 (m, 1 H), 2,30-2,36 (m, 1 H), 2,49-2,54 (m, 0,4 H), 2,59-2,67 (m, 0,6 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 3,93 (s, 3H), 4,09 (dd, 7=8,09, 4,73 Hz, 1 H), 4,20 (d, 7=10,68 Hz, 0,4 H), 4,38 (d, 7=10,68 Hz, 0,6 H), 4,46 (dd, 7=10,22, 7,17 Hz, 0,4 H), 4,48-4,56 (m, 1 H), 5,07-5,11 (m, 1 H), 5,26 (d, 7=17,24 Hz, 0,4 H), 5,28 (d, 7=17,24 Hz, 0,6 H), 5,71-5,79 (m, 1 H),5,84 (s, 1H), 7,07 (dd, 7=8,39, 2,90 Hz, 1 H), 7,14 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,20 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,00 (d, 7=9,16 Hz, 0,4 H), 8,07 (d, 7=8,85 Hz, 0,6 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,25 min.), MS m/z 712 (MH<+>).
Eksempel 72: Fremstilling av Forbindelse 72
Forbindelse 72 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 69 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: 2-fenyl-2-propanol ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 72 (19,0 mg, 42% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,97 (m, 1 H), 1,03 (s, 9 H), 1,06-1,09 (m, 3 H), 1,16-1,22 (m, 4 H), 1,41-1,44 (m, 1 H), 1,57 (s, 3 H), 1,86 (t, 7=7,80 Hz, 1H), 2,14-2,18 (m, 1 H), 2,30-2,35 (m, 1 H), 2,57-2,61 (m, 1 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 3,92 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,04 (dd, 7=10,99, 3,66 Hz, 1 H), 4,18 (s, 1 H), 4,24 (d, 7=10,99 Hz, 1 H), 4,52 (s, 1 H), 5,09 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,26 (d, 7=14,95 Hz, 1 H), 5,78-5,82 (m, 2 H), 7,07-7,12 (m, 2 H), 7,16-7,20 (m, 3 H), 7,23 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 7,29 (d, 7=7,02 Hz, 2 H), 7,84 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, 7=9,46 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,84 min.), MS m/z 776 (MH<+>).
Eksempel 73: Fremstilling av Forbindelse 73
Forbindelse 73 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 69 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: 4-(trifluormetyl)fenyl-dimetyl-karbinol ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 73 (22,1 mg, 45% utbytte):<l>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,91 (s, 1 H), 0,97-1,00 (m, 7=15,56 Hz, 4 H), 1,04 (s, 9 H), 1,07-1,10 (m, 2 H), 1,16-1,20 (m, 3 H), 1,30-1,31 (m, 1 H), 1,41 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,55 (d, 7=7,32 Hz, 6 H), 1,83-1,87 (m, 1 H), 2,11-2,14 (m, 1 H), 2,34-2,39 (m, 1 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 2,89-2,92 (m, 7=11,60,4,27 Hz, 1 H), 3,92 (s, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 4,02-4,05 (m, 1 H), 4,17 (s, 1 H), 4,26 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,53 (t, 7=8,85 Hz, 1 H), 5,07 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,24 (d, 7=18,01 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 2 H), 7,08 (d, 7=7,02 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,22 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,45 (dd, 7=13,74, 7,63 Hz, 3 H), 7,60 (d, 7=6,41 Hz, 1 H), 7,67 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,02 (d, 7=8,54 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,92 min.), MS m/z 844 (MH<+>).
Eksempel 74: Fremstilling av Forbindelse 74
Til en løsningsblanding av produktet fra trinn 1 i eksempel 55 (70,0 mg, 0,108 mmol) og DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) i DCM (2 ml) ble satt t-butylisocyanat (32,0, 0,323 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur natten over ble reaksjonsblandingen konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 74 (42,3 mg, 55% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,96-1,00 (m, 1 H) 1,04 (s, 9 H) 1,08-1,10 (m, 3 H) 1,19 (s, 9 H) 1,22-1,31 (m, 2 H) 1,30 (m, 1 H) 1,41 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H) 2,20-2,29 (m, 2 H) 2,61 (dd, 7=14,04, 6,72 Hz, 1 H) 2,92-2,97 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,08 (dd, 7=11,60, 3,97 Hz, 1 H) 4,36 (s, 1 H) 4,47-4,52 (m, 2 H) 4,81 (d, 7=3,36 Hz, 1 H) 4,88 (d, 7=8,85 Hz, 1 H) 5,11 (dd, 7=10,22,1,68 Hz, 1 H) 5,28 (dd, 7=17,09,1,53 Hz, 1 H) 5,72-5,76 (m, 1 H) 5,85 (s, 1 H) 7,08 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H) 7,18 (d, 7=2,14 Hz, 1 H) 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H) 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H) 8,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,70 min.), MS m/z 713 (MH<4>).
Eksempel 75: Fremstilling av Forbindelse 75
Forbindelse 75 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 74 med de følgende modifikasjoner:
Modifikasjoner: Cyklopentyl-isocyanat ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 75 (38,5 mg, 49%):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,92 (d, J=7,63 Hz, 1 H) 0,96 (s, 9 H) 0,98-1,02 (m, 1 H) 1,05 (s, 9 H) 1,07-1,10 (m, 2 H) 1,21-1,25 (m, 3 H) 1,28-1,34 (m, 1H) 1,36-1,55 (m, 8 H) 1,58-1,65 (m, 13 H) 1,81 (m, 1 H) 1,88 (m, 6 H) 2,23 (dd, 7=18,01, 8,85 Hz, 1 H) 2,29 (m, 1 H) 2,59 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H) 2,94 (m, 1 H) 3,27 (d, 7=1,83 Hz, 1 H) 3,35 (d, 7=1,53 Hz, 1 H) 3,75 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 3,95 (d, 7=6,41 Hz, 1 H) 3,97 (s, 1 H) 4,09 (m, 2 H) 4,40 (s, 1 H) 4,45 (d, 7=11,90 Hz, 1 H) 4,52 (dd, 7=10,07, 7,02 Hz, 1 H) 4,81 (d, 7=7,02 Hz, 1 H) 4,89 (d, 7=7,02 Hz, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,29 (d, 7=17,40 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 5,85 (s, 1 H) 7,11 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H) 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H) 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H) 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H) 7,95 (m, 1 H) 8,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H) ); LC-MS (retensjonstid: 1,67 min.), MS m/z 725 (MH<+>).
Eksempel 76: Fremstilling av Forbindelse 76
Til en løsningsblanding av produktet fra trinn 1 i eksempel 55 (70 mg, 0,102 mmol) og DIEA (33,0 mg, 0,255 mmol) i THF (2 ml) ble satt N,N'-disuccinimidylkarbonat (39,2 mg, 0,153 mmol). Den resulterende suspensjonen ble bestrålet i en mikrobølgeovn til 80°C i 15 min. Deretter ble den behandlet med tert-amylamin (88,9 mg, 1,02 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 15 min. ble reaksjonsblandingen konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 76 (51 mg, 69%):<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0,76 (t, 7=7,48 Hz, 4 H), 0,97 (s, 1 H), 1,04 (s, 9 H), 1,13 (s, 6 H), 1,22-1,25 (m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,53 (dd, 7=13,89, 7,48 Hz, 1 H), 1,58-1,62 (m, 1 H), 1,87 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,20 (q, 7=8,65 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,08 (dd, 7=11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,36 (s, 1 H), 4,46 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,50 (dd, 7=10,22, 7,17 Hz, 1 H), 5,10 (dd, 7=10,22, 1,37 Hz, 1 H), 5,27 (dd, 7=16,94, 1,07 Hz, 1 H), 5,73-5,77 (m, 1 H), 5,84 (t, 7=3,51 Hz, 1 H), 7,09 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,11 (d, J=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,753 min.), MS m/z 727 (MH^).
Eksempel 77: Fremstilling av Forbindelse 77
Forbindelse 77 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: tert-butyl-metylamin ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 77 (160,7 mg, 74% utbytte): ^MR^DaOD, 500 MHz) 8 0,96-1,10 (m, 1 H), 1,06 (s, 9 H), 1,08-1,12 (m, 7=5,80 Hz, 3 H), 1,26 (s, 9 H), 1,46 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,21 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,26-2,31 (m, 1 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 2,86 (s, 3 H), 2,91-2,95 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,09 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,43 (s, 1 H), 4,46 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,52 (dd, 7=10,68, 7,02 Hz, 1 H),5,ll (dd, 7=10,22, 1,37 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,82 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,09 (dd, 7=9,16, 2,14 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,76 min.), MS m/z 727 (MH<+>).
Eksempel 78: Fremstilling av Forbindelse 78
Forbindelse 78 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: A^,(9-dimetylhydroksylamin-hydroklorid ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 78 (62,1 mg, 60% utbytte): ^NMRtCDaOD, 500 MHz) 8 0,99 (t, 7=6,10 Hz, 1 H), 1,07 (s, 11 H), 1,22-1,26 (m, 7=3,97 Hz, 2 H), 1,47 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,22 (d, 7=8,54 Hz, 1 H), 2,3-30-2,33 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,43, 7,02 Hz, 1 H), 2,92 (s, 3 H), 2,93-2,96 (m, 1 H), 3,66 (s, 3 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,34 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,44 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 4,54 (dd, 7=10,53, 6,87 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,83 (m, 1 H), 5,86 (t, 7=3,97 Hz, 1 H), 6,70 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 7,13 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=9,16 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,59 min.), MS m/z 701 (MH<+>).
Eksempel 79: Fremstilling av Forbindelse 79
Forbindelse 79 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Dietylamin ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 79 (56,5 mg, 54% utbytte):<1>HNMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,03 (q, 7=15,6 Hz, 4 H), 1,06 (d, 7=1,53 Hz, 9 H), 1,05-1,10 (m, 3 H), 1,13-1,23 (m, 4 H), 1,46 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=7,93, 5,30 Hz, 1 H), 2,17 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,32-2,36 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,16-3,24 (m, 4 H), 3,92 (s, 3 H), 4,14 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,37 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,51-4,55 (m, 2 H), 5,09 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,55 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 5,79-5,84 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,11 (dd, 7=8,85,2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,68 min.), MS m/z 713 (MH^).
Eksempel 80: Fremstilling av Forbindelse 80
Forbindelse 80 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Mettet vandig ammoniumklorid ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 76 (12,2 mg, 32% utbytte):<1>HNMR(CD3OD, 500 MHz) 5 1,00-1,03 (m, 3 H), 1,06 (s, 9 H), 1,20-1,25 (m, 2 H), 1,42 (dd, 7=9,31, 5,34 Hz, 1 H), 2,22 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 2,29-2,35 (m, 1 H), 2,59 (dd, 7=13,28, 6,87 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,14 (dd, 7=11,75, 4,12 Hz, 1 H), 4,38-4,43 (m, 1 H), 4,51 (dd, 7=9,92, 6,87 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=17,70 Hz, 1 H), 5,72-5,79 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,15 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,75 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1H), 7,87 (d, 7=7,87 Hz, 1H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1H)); LC-MS (retensjonstid: 1,43 min.), MS m/z 657 (MH<+>).
Eksempel 81: Fremstilling av Forbindelse 81
Forbindelse 81 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: tert-oktylamin ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 81 (16,1 mg, 48% utbytte): ^NM^CDaOD, 500 MHz) 8 0,88 (s, 9 H), 1,00 (d, 7=9,77 Hz, 5 H), 1,04 (s, 9 H), 1,17 (s, 3 H), 1,18-1,20 (m, 1 H), 1,21 (s, 3 H), 1,35 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 1,40-1,43 (m, 1 H), 1,57 (d, 7=14,95 Hz, 1 H), 1,67 (d, 7=14,65 Hz, 1 H), 1,85 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,15 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 2,34-2,43 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73,7,02 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, 7=11,60, 3,97 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,50 (dd, 7=9,77, 7,32 Hz, 1 H), 5,07 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,24 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,09 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,92 min.), MS m/z 769 (MH<+>).
Eksempel 82: Fremstilling av Forbindelse 82
Forbindelse 82 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: l-(4-fluorfenyl)-2-metyl-2-propylamin ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 82 (14,8 mg, 42% utbytte):<J>HNMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0,88 (s, 9 H), 1,00 (d, 7=9,46 Hz, 6 H), 1,04 (s, 9 H), 1,17 (s, 3 H), 1,21 (s, 3 H), 1,32-1,37 (m, 2 H), 1,39-1,43 (m, 1 H), 1,57 (d, 7=14,65 Hz, 1 H), 1,67 (d, 7=14,96 Hz, 1 H), 1,82-1,86 (m, 1 H), 2,15 (t, 7=9,46 Hz, 1 H), 2,33-2,43 (m, 2 H), 2,58-2,62 (dd, 7=14,50,7,78 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=12,82 Hz, 1 H), 4,49-4,52 (m, 1 H), 5,24 (d, 7=16,48 Hz, 1 H), 5,76-5,82 (m, 1 H), 5,83-5,85 (m, 1 H), 7,09 (dd, 7=9,00, 2,59 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,40 min.), MS m/z 807 (MH<+>).
Eksempel 83: Fremstilling av Forbindelse 83
Forbindelse 83 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 76 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Kumylamin ble anvendt som utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 83 (64,6 mg, 57% utbytte):<J>HNMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0,87-0,91 (m, 1 H), 0,98 (d, 7=9,46 Hz, 2 H), 1,01 (s, 9 H), 1,02-1,05 (m, 1 H), 1,17-1,21 (m, 3 H), 1,29 (s, 2 H), 1,40 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,51 (d, 7=3,05 Hz, 5 H), 1,85 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,17 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,30-2,33 (m, 1 H), 2,58 (dd, 7=13,58, 7,48 Hz, 1 H), 2,91-2,94 (m, 1 H), 3,92 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,05 (dd, 7=11,60,3,66 Hz, 1 H), 4,32 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 4,51 (dd, 7=9,92, 7,17 Hz, 1 H), 5,09 (dd, 7=11,59, 1,52 Hz, 1 H), 5,27 (dd, 7=16,71, 1,22 Hz, 1 H), 5,74-5,78 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,05-7,09 (m, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1H), 7,19 (d, J=7,33 Hz, 1H), 7,22 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,33 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=5,80 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,76 min.), MS m/z 775 (MH<+>).
Eksempel 84: Fremstilling av Forbindelse 84
Til en løsning av produktet fra trinn 5 i eksempel 11 (77,0 mg, 0,136 mmol), DIEA (70,4 mg, 0,544 mmol) og HATU (77,5 mg, 0,204 mmol) ble satt Boc-Melle-OH (43,4 mg, 0,177 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble reaksjonsblandingen vasket med 5% vandig NaHC03(1 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med 2x2 ml DCM. De samlede organiske lag ble vasket med 5% vandig sitronsyre (2 ml), saltvann, tørket over MgC«4, konsentrert og renset ved "flash" kolonnekromatografi (SiC«2, 97:3 DCM:MeOH), hvilket ga Forbindelse 84 (68,4 mg, 69% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,89 (t, 7=7,32 Hz, 3 H) 0,94 (dd, 7=5,95, 4,43 Hz, 3 H) 1,07 (d, J=7,63 Hz, 3 H) 1,13 (s, 5 H) 1,16-1,20 (m, 7=4,88 Hz, 2 H) 1,23 (s, 3 H) 1,28 (m, 1 H) 1,34-1,38 (m, 1 H) 1,41-1,47 (m, 1 H) 1,55-1,60 (m, 7=7,63 Hz, 1 H) 1,87-1,91 (m, 1 H) 2,22-2,26 (m, 2 H) 2,36-2,38 (m, 1 H) 2,56-2,62 (m, 1 H) 2,81 (d, 7=11,30 Hz, 2 H) 2,94-2,99 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,05-4,12(m, 2 H) 4,48-4,57 (m, 2 H) 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H) 5,32 (m, 1 H) 5,75-5,82 (m, 1 H) 5,84-5,88 (m, 1 H) 7,09-7,13 (m, 1 H) 7,16-7,20 (m, 1 H) 7,23-7,27 (m, 1 H) 7,88 (dd, 7=5,95, 2,29 Hz, 1 H) 8,04 (d, 7=9,16 Hz, 0,6 H) 8,09 (d, 7=9,46 Hz, 0,4 H); LC-MS (retensjonstid: 1,83 min.), MS m/z 728 (MH<+>).
Eksempel 85: Fremstilling av Eksempel 85
Forbindelse 85 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 84 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-MeVal-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 84 (72,1 mg, 74% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,84 (t, .7=5,80 Hz, 3 H), 0,96 (d, 7=6,41 Hz, 3 H), 1,08 (d, 7=7,32 Hz, 2 H), 1,13 (s, 6 H),
1,16 (s, 4 H), 1,18-1,21 (m, 1 H), 1,23-1,29 (m, 1 H), 1,44 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,88-1,92 (m, 1 H), 2,24 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 2,32-2,39 (m, 2 H), 2,58 (dd, 7=13,89, 6,26 Hz, 1 H), 2,80 (s, 3 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,01 (dd, 7=11,90, 3,36 Hz, 0,6 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 0,4 H), 4,16 (d, 7=11,29 Hz, 0,6 H), 4,38 (d,
7=10,99 Hz, 0,4 H), 4,45 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 4,47 (d, 7=10,69 Hz, 0,6 H), 4,53 (dd, 7=10,38, 7,02 Hz, 0,4 H), 4,58 (dd, 7=10,07, 7,02 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=4,28, 0,6 H), 5,14 (d, 7=4,27 Hz, 0,4 H), 5,30 (d, 7=7,32 Hz, 0,6 H), 5,34 (d, 7=7,32 Hz, 0,4 H), 5,78-5,85 (m, 1 H), 5,88 (t, 7=3,05 Hz, 0,6 H), 5,96 (t, 7=3,97 Hz, 0,4 H), 7,13 (dd, 7=9,00, 2,29 Hz, 0,6 H), 7,16 (dd, 7=9,46, 2,44 Hz, 0,4 H), 7,19 (m, 1 H), 7,24 (d, 7=6,10 Hz, 0,6 H), 7,26 (d, 7=6,10 Hz, 0,4 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,02 (d, 7=9,16 Hz, 0,6 H) 8,05 (d, 7=9,16 Hz, 0,4 H).
Eksempel 86: Fremstilling av Forbindelse 86
Forbindelse 86 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 84 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-MeLeu-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 85 (56,5 mg, 57% utbytte):<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0,94-0,96 (m, 6 H), 1,04-1,13 (m, 2 H), 1,17 (s,4,5 H), 1,18 (s, 4,5 H), 1,26-1,31 (m, 1 H), 1,42 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,46-1,51 (m, 2 H), 1,56-1,60 (m, 0,5 H), 1,69-1,72 (m, 0,5 H), 1,75-1,81 (m, 0,5 H), 1,90 (q, 7=7,50 Hz, 1 H), 2,27 (dd, 7=13,89, 7,78 Hz, 1 H), 2,32-2,38 (m, 1 H), 2,58 (dd, 7=14,80, 7,48 Hz, 1 H), 2,75 (s, 3 H), 2,95-2,99 (m,
1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,03 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,11-15 (m, 0,5 H), 4,28 (d, 7=12,21
Hz, 1 H), 4,53 (t, 7=8,50 Hz, 0,5 H), 4,59 (t, 7=8,55 Hz, 0,5 H), 4,83-4,87 (m, 7=6,41 Hz, 0,5 H), 4,96 (m, 0,5 H), 5,14 (dd, 7=11,14, 4,73 Hz, 1 H), 5,32 (dd, 7=17,70, 6,41 Hz, 1 H), 5,75-5,82 (m, 1 H), 5,90 (s, 0,5 H), 5,92 (s, 0,5 H), 7,13-7,18 m, 1 H), 7,20 (s, 1 H), 7,25-7,27 (m, 1 H), 7,87 (t, 7=4,40 Hz, 1 H) 8,05 (d, 7=8,85 Hz, 1 H).
Eksempel 87: Fremstilling av Forbindelse 87
Forbindelse 87 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 84 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-MeNle-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 87 (82,3 mg, 83% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,90-0,96 (q, 7=7,63 Hz, 3 H) 1,05-1,10 (m, 2 H) 1,18 (s, 4,5 H) 1,20 (s, 4,5 H) 1,24-1,30 (m, 3 H) 1,31-1,38 (m, 1 H) 1,42 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 2 H) 1,72-1,81 (m, 2 H) 1,88-1,92 (m, 1 H) 2,22-2,29 (m, 1 H) 2,32-2,38 (m, 1 H) 2,58 (dd, 7=13,89, 7,17 Hz, 1 H) 2,72 (s, 3 H) 2,94-2,99 (m, 1 H) 3,93 (s, 3 H) 4,02 (dd, 7=9,77, 4,27 Hz, 1 H) 4,12 (dd, 7=11,90, 3,35 Hz, 0,5 H) 4,24 (dd, 7=11,90, 0,6 Hz, 0,5 H) 4,51-4,60 (m, 1 H) 5,14 (d, 7=10,38 Hz, 1 H) 5,33 (dd, 7=17,24, 4,73 Hz, 1 H) 5,75-5,82 (m, 1 H) 5,91 (s, 1 H) 7,15 (dd, 7=14,34, 7,63 Hz, 1 H) 7,20 (d, 7=2,44 Hz, 1 H) 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H) 7,87 (t, 7=4,37 Hz, 1 H) 8,05 (d, 7=8,85 Hz, 1 H). Eksempel 88: Fremstilling av forbindelse 88
Forbindelse 88 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 84 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-N-Me-NVa-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 88 (70,5 mg, 73% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,96 (d, 7=6,41 Hz, 3 H) 1,06-1,10 (m, 2 H) 1,18 (s, 9 H) 1,27-1,30 (m, 4 H) 1,42 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,66-1,80 (m, 2 H) 1,88-1,92 (m, 1 H) 2,23-2,29 (m, 1 H)
2,30-2,37 (m, 1 H) 2,58 (dd, 7=13,58, 7,17 Hz, 1 H) 2,73 (s, 3 H) 2,94-2,98 (m, 1 H) 3,93 (s, 3 H) 4,00-4,04 (m, 1 H) 4,12 (d, 7=12,82 Hz, 0,5 H) 4,25 (d, 7=12,21 Hz, 0,5 H) 4,51-4,60 (m, 1 H) 5,13 (d, 7=10,68 Hz, 1 H) 5,32 (d, 7=17,09 Hz, 1 H) 5,75-5,81 (m, 1 H) 5,90 (s, 1 H) 7,13-7,18 (m, 1 H) 7,20 (d, 7=2,14 Hz, 1 H) 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H) 7,87 (s, 1 H) 8,05 (d, 7=9,16 Hz, 1 H).
Eksempel 89: Fremstilling av Forbindelse 89
Til en løsning av produktet fra trinn 5 i Eksempel 11 (66,0 mg, 0,123 mmol), DIEA (63,7 mg, 0,492 mmol) og HATU (70,0, 0,184 mmol) ble satt 25-tert-butoksykarbonylamino-3-hydroksy-3-metyl-smørsyre (34,0 mg, 0,147 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble reaksjonsblandingen vasket med 5% vandig NaHCC>3 (1 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med 2x2 ml DCM. De samlede organiske lag ble vasket med 5% vandig sitronsyre (2 ml), saltvann, tørket over MgC>4, konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 89 (36,1 mg, 41% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,07 (d, 7=7,93 Hz, 2 H), 1,18 (s, 1 H), 1,20 (s, 9 H), 1,24-1,27 (m, 7=11,60 Hz, 3 H), 1,30 (s, 3 H), 1,43-1,48 (m, 10 H), 1,59 (s, 1 H), 1,65 (s, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,24 (q, 7=9,16 Hz, 1 H), 2,33-2,36 (m, 1 H), 2,63 (dd, 7=12,97, 6,56 Hz, 1 H), 2,94-2,99 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,93 (s, 1 H), 4,12 (dd, 7=11,60, 3,05 Hz, 1 H),
4,27-4,31 (m, 1 H), 4,54 (t, 7=9,77 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,53, 1,37 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,79-5,83 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,11 (dd, 7=8,55, 1,83 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,24 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H)); LC-MS (retensjonstid: 1,637 min.), MS m/z 716 (MH<+>).
Eksempel 91: Fremstilling av Forbindelse 91
Forbindelse 91 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 89 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-L-Thr-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 91 (80,5 mg, 66% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,93 (dd, 7=8,24,2,14 Hz, 2 H), 1,08-1,18 (m, 4 H), 1,20 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,29 (s, 9 H), 1,32 (dd, 7=9,61, 5,04 Hz, 1 H), 1,45 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 1,84 (dd, 7=7,63, 5,19 Hz, 1 H), 2,15 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,42-2,48 (m, 1 H), 2,64 (dd, 7=14,04, 7,63 Hz, 1 H), 2,85-2,89 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,1-4,14 (m, 2 H), 4,30 (d, 7=4,88 Hz, 1 H), 4,38 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,60 (t, 7=8,55 Hz, 1 H), 5,04 (dd, 7=10,22, 1,68 Hz, 1 H), 5,80-5,84 (m, 2 H), 7,11 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,560 min.), MS m/z 702 (MH<+>).
Eksempel 92: Fremstilling av Forbindelse 92
Forbindelse 92 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 89 med de følgende modifikasjoner:
Modifikasjoner: Boc-L-Thr(Me)-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 92 (47,1 mg, 69% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,95 (d, 7=4,27 Hz, 2 H), 1,11-1,16 (m, 3 H), 1,18 (d, 7=6,10 Hz, 6 H), 1,32 (s, 9 H), 1,38 (dd, 7=9,31, 5,04 Hz, 1 H), 1,45 (s, 1 H), 1,85 (dd, 7=7,78, 5,04 Hz, 1 H), 2,13 (d, 7=9,15 Hz, 1 H), 2,46-2,51 (m, 1 H), 2,63 (dd, 7=14,19, 7,78 Hz, 1 H), 2,81-2,91 (m, 1 H), 3,68-3,73 (m, 1 H), 3,92 (s, 4 H), 4,14 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 4,42 (d, 7=11,29 Hz, 1 H), 4,60 (t, 7=8,70 Hz, 1 H), 5,05 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,24 (dd, 7=16,79, 0,92 Hz, 1 H), 5,81-5,85 (m, 2 H), 7,11 (dd, 7=9,16, 0,92 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,11 (d, 7=8,55 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,660 min.), MS m/z 716 (MH<+>).
Eksempel 93: Fremstilling av Forbindelse 93
Forbindelse 93 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 89 med de følgende modifikasjoner:
Modifikasjoner: Boc-L-Thr(tBu)-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 93 (52,7 mg, 53% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 1,09 (dd, 7=8,24, 2,44 Hz, 2 H), 1,201,24 (m, 3 H), 1,28 (s, 9 H), 1,45 (s, 9 H), 1,89 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,25 (q, 7=8,34 Hz, 1 H), 2,32-2,36 (m, 1 H), 2,59 (dd, 7=12,82, 6,41 Hz, 1 H), 2,95-3,00 (m, 1 H), 3,71 (s, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 3,93-3,99 (m, 1 H), 4,10 (d, 7=7,02 Hz, 1 H), 4,15 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,22 (dd, 7=6,10, 2,44 Hz, 2 H), 4,40 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,54 (dd, 7=10,01, 6,71 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,76-5,83 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,06 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 6,36 (d, 7=7,02 Hz, 1 H), 7,11 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,24 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H).
Eksempel 94: Fremstilling av Forbindelse 94
Forbindelse 94 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 89 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-(25',3'S)-2-amino-3-metoksybutansyre ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 94 (150,2 mg, 80% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 1,04-1,13 (m, 3 H), 1,17 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,20-1,24 (m, 2 H), 1,27 (s, 9 H), 1,44-1,48 (m, 2 H), 1,86 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,24 (q, 7=8,65 Hz, 1 H), 2,34-2,37 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=14,19, 7,17 Hz, 1 H), 2,94-2,99 (m, 1 H), 3,66 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, 7=12,36, 3,81 Hz, 1 H), 4,37 (dd, 7=22,58, 10,99 Hz, 2 H), 4,54 (dd, 7=10,38, 7,63 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,77-5,82 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,673 min.), MS m/z 716 (MH<+>).
Eksempel 95: Fremstilling av Forbindelse 95
Trinn 1
Til en blanding av H-allo-THr-OH (5,0 g, 41,98 mmol) og DIEA (10,9 g, 83,96 mmol) i DCM (150 ml) ble satt di-tert-butyl-dikarbonat (13,7 g, 62,97 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble reaksjonsblandingen vasket med 3x100 ml DCM. De samlede organiske lag ble tørket over MgSCMog konsentrert. LC/MS viste at mesteparten av produktet var i ^O-laget. Således ble vannlaget konsentrert. Produktet ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (SiC«2, 90:10 DCM:MeOH), hvilket ga Boc-allo-THr-OH ; LC-MS (retensjonstid: 0,727 min.), MS m/z 242 (MNa<+>).
Trinn 2
Til en løsning av produktet fra trinn 5 i eksempel 11 (100,0 mg, 0,174 mmol), DIEA (67,6 mg, 0,522 mmol) og HATU (106,0 mg, 0,278 mmol) ble satt produktet fra trinn 1 ovenfor (57,3 mg, 0,262 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 3 timer ble reaksjonsblandingen vasket med 5% vandig NaHC03(1 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med 2x2 ml DCM. De samlede organiske lag ble vasket med 5% vandig sitronsyre (2 ml), saltvann, tørket over MgC«4, konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 95 (39,1 mg, 32% utbytte):<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,02 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 1,18-1,23 (m, 3 H), 1,25 (s, 9 H), 1,38 (dd, 7=9,15, 6,30 Hzl H), 1,84 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,19-2,24 (m, 1 H), 2,38-2,43 (m, 1 H), 2,65 (dd, 7=14,19, 6,87 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,93 (s, 2 H), 4,16-4,19 (m, 1 H), 4,23 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 4,44 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,57-5,81 (m, 1 H), 5,09 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,83-5,85 (m, 1 H), 7,11 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=6,41 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,11 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,583 min.), MS m/z 702 (MH<+>).
Eksempel 96: Fremstilling av Forbindelse 96
Forbindelse 96 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 95 med de følgende modifikasjoner:
Modifikasjoner:
Trinn 1
(25',35)-2-amino-3-etoksybutansyre-hydroklorid ble anvendt som et utgangsmateriale i trinn 1, hvilket ga Boc-(25,,35)-2-amino-3-etoksybutansyre; LC-MS (retensjonstid: 1,067 min.), MS m/z 270 (M+Na<+>).
Trinn 2
Produktet fra trinn 1 ble deretter koblet på samme måte med produktet fra trinn 5 i Eksempel 11, hvilket ga Forbindelse 96 (55,3 mg, 44% utbytte):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,94 (t, 7=6,87 Hz, 1 H), 0,97-1,03 (m, 2 H), 1,08-1,11 (m, 2 H), 1,13-1,15 (m, 2 H), 1,17 (d, 7=6,10 Hz, 6 H), 1,29 (s, 9 H), 1,41-1,45 (m, 3 H), 1,85 (dd, 7=7,48, 5,34 Hz, 1 H), 2,12-2,19 (m, 1 H), 2,43-2,49 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73, 6,80 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,50-3,57 (m, 2 H), 3,73-3,78 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,18 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,39 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 4,53 (t, 7=7,78 Hz, 1 H), 5,07 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 5,25 (d, 7=18,01 Hz, 1 H), 5,82 (t, 7=9,85 Hz, 1 H), 5,88 (t, 7=9,80 Hz, 1H), 7,11 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,743 min.), MS m/z 730 (MH^).
Eksempel 97: Fremstilling av Forbindelse 97
Forbindelse 97 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 95 med de følgende modifikasjoner:
Modifikasjoner:
Trinn 1
H-allo-Thr(t-Bu)-OH ble anvendt som et utgangsmateriale i trinn 1, hvilket ga Boc-(2S,3S)-2-amino-3-etoksybutansyre; LC-MS (retensjonstid: 1,363 min.), MS m/z 298 (M+Na<+>).
Trinn 2
Produktet fra trinn 1 ble deretter koblet på samme måte med produktet fra trinn 5 i eksempel 11, hvilket ga Forbindelse 97 (48,2 mg, 37% utbytte): LC-MS (retensjonstid: 1,820 min.), MS m/z 758 (MH<+>).
Eksempel 99: Fremstilling av Forbindelse 99
Forbindelse 99 ble fremstilt ved samme metode som trinn 1 i Eksempel 55 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Forbindelse 84 ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 99 (60,3 mg, 98% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 1,00 (q, 7=7,12 Hz, 3 H) 1,10-113 (m, 5 H) 1,20-1,31 (m, 3 H) 1,41 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,61-1,68 (m, 1 H) 1,92 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H) 2,04-2,09 (m, 1 H) 2,28 (q, 7=8,55 Hz, 1 H) 2,34-2,39 (m, 1 H) 2,57 (s, 3 H) 2,64-2,70 (m, 1 H) 2,94-2,97 (m, 1 H) 3,93 (s, 3 H) 4,07-4,14 (dd, 7=12,05, 3,81 Hz, 1 H) 4,13 (d, 7=6,10 Hz, 1 H) 4,18 (d, 7=5,80 Hz, 1 H) 4,25 (d, 7=12,21 Hz, 1 H) 4,66-4,73 (m, 1 H) 5,15 (d, 7=10,68 Hz, 1 H) 5,32 (d, 7=17,09 Hz, 1 H) 5,70-5,79 (m, 1 H) 5,92 (t, 7=3,66 Hz, 0,4 H) 5,95 (t, 7=3,66 Hz, 0,6 H) 7,17 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H) 7,22 (d, 7=2,14 Hz, 1 H) 7,28 (dd, 7=5,80, 3,36 Hz, 1 H) 7,91 (dd, 7=5,80, 4,27 Hz, 1 H) 8,03 (d, 7=8,85 Hz, 0,6 H) 8,07 (d, 7=9,16 Hz, 0,4 H); LC-MS (retensjonstid: 1,33 min.), MS m/z 6,28 (MH^).
Eksempel 100: Fremstilling av Forbindelse 100
Til en løsning av Forbindelse 94 (0,600 g, 0,838 mmol) i DCE (3 ml) ble satt TFA (3 ml). Etter omrøring ved romtemperatur i 15 min ble reaksjonsblandingen konsentrert. Den resulterende viskøse olje ble gjenoppløst i DCE (5 ml) og rekonsentrert. Den ble deretter gjenoppløst i DCM (2 ml) og behandlet med en løsning av IN HC1 i Et20 (10 ml). Den resulterende suspensjonen ble avkjølt ved 0°C, vakuumfiltrert, vasket med Et20 og tørket i vakuumovn, hvilket ga produktet som et bis-hydrokloridsalt som et hvitt, fast stoff (527,1 g, 91% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,08-1,15 (m, 2 H), 1,21 (d, 7=6,71 Hz, 4 H), 1,28-1,33 (m, 1 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,91 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,28 (q, 7=8,65 Hz, 1 H), 2,34-2,37 (m, 1 H), 2,68 (dd, 7=13,12, 7,02 Hz, 1 H), 2,81 (s, 3 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,45 (s, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 3,96-4,00 (m, 1 H), 4,16 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,27 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,59 (d, 7=4,58 Hz, 1 H), 4,69 (dd, 7=10,07,7,02 Hz, 1 H), 5,14 (dd, 7=10,53,1,37 Hz, 1 H), 5,32 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,70-5,77 (m, 1 H), 5,94 (t, 7=3,66 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,91 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,213 min.), MS m/z 616 (MH<+>).
Eksempel 101: Fremstilling av Forbindelse 101
Til en løsningsblanding av Forbindelse 100 (80 mg, 0,116 mmol) og DIEA (31,5 mg, 0,244 mmol) i THF (2 ml) ble satt N,N'-dissuccinimidylkarbonat (44,6 mg, 0,174 mmol). Den resulterende suspensjonen ble bestrålet i en mikrobølgeovn til 80°C i 15 min. Deretter ble den behandlet med tert-amylamin (84,8 mg, 1,16 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 15 min, ble reaksjonsblandingen konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 101 (65,1 mg, 79%):<l>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,03-1,08 (m, 3 H), 1,16 (d, 7=6,41 Hz, 3 H), 1,19 (s, 9 H), 1,21-1,25 (m, 2 H), 1,27 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 1,45 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H),
1.85 (dd, 7=8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,23 (q, 7=9,46 Hz, 1 H), 2,34-2,41. (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=14,34, 7,32 Hz, 1 H), 2,94-2,97 (m, 1 H), 3,58-3,63 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,15 (dd, 7=12,05,3,81 Hz, 1 H), 4,39 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=9,92,7,48 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 5.86 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,00,2,29 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,617 min.), MS m/z 715 (MH<+>).
Eksempel 102: Fremstilling av Forbindelse 102
Forbindelse 102 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 101 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: tert-amylamin ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 102 (62,5 mg, 74% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,77 (t, 7=7,48 Hz, 2 H), 0,84 (t, 7=7,48 Hz, 1 H), 1,04-1,08 (m, 2 H), 1,13 (d, 7=1,22 Hz, 9 H), 1,16 (d, 7=6,41 Hz, 3 H), 1,21 (s, 1 H), 1,22-1,28 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,52-1,57 (m, 1 H), 1,58-1,62 (m, 1 H), 1,85 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,21-2,25 (m, 1 H), 2,34-2,39 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=13,58,7,17 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,59-3,64 (m, 1 H), 4,15 (dd, 7=11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,38 (d, 7=12,51 Hz, 1 H), 4,50 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=9,92, 7,78 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=9,77 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 5,86 (t, 7=4,73 Hz, 1 H), 7,12 (dd, 7=8,85, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, .7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,690 min.), MS m/z 729 (MH<+>).
Eksempel 103: Fremstilling av Forbindelse 103
Forbindelse 103 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 101 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: cyklopentylamin ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 103 (56,4 mg, 67% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,01-1,08 (m, 2 H), 1,07 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 1,16 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,21-1,25 (m, 3 H), 1,30-1,33 (m, 1 H), 1,44 (dd, 7=9,77, 5,19 Hz, 1 H), 1,51-1,56 (m, 2 H), 1,60-1,65 (m, 2 H), 1,71-1,75 (m, 1 H), 1,80-1,84 (m, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,20-2,25 (m, 1 H), 2,37-2,41 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,60-3,65 (m, 1 H), 3,75-3,80 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,17 (dd, 7=12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,37 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,55-4,59 (m, 2 H), 5,10 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,48 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 1 H), 5,85 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,13 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,607 min.), MS m/z 727 (MH<+>).
Eksempel 104: Fremstilling av Forbindelse 104
Til en løsningsblanding av Forbindelse 100 (80 mg, 0,116 mmol) og DIEA (31,5 mg, 0,244 mmol) i THF (2 ml) ble satt N,N'-dissuccinimidylkarbonat (44,6 mg, 0,174 mmol). Den resulterende suspensjonen ble bestrålet i en mikrobølgeovn til 80°C i 15 min. Deretter ble tilsatt en oppslemningsløsning av natrium-cyklopentoksyd som ble fremstilt ved behandling av en 0°C løsning av cyklopentanol (110 mg, 1,28 mmol) i THF (1 ml) med NaH (60% i olje, 46,4 mg, 1,16 mmol) i 15 min ved romtemperatur. Etter omrøring ved romtemperatur i 15 min, ble reaksjonsblandingen behandlet med mettet vandig ammoniumklorid (1 ml) og ekstrahert med EtOAc (5 ml). Det organiske laget ble deretter ført gjennom en celite hydromatriks kolonne, konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 104 (38,2 mg, 45%):<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,03-1,09 (m, 3 H), 1,16 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,201,25 (m, 1 H), 1,25-1,30 (m, 7=10,22, 5,34 Hz, 1 H), 1,40-1,45 (m, 7=10,83, 3,81 Hz, 1 H), 1,46 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,58-1,63 (m, 3 H), 1,70-1,75 (m, 2 H), 1,86 (dd, 7=7,63, 5,49 Hz, 1 H), 2,22-2,26 (m, 1 H), 2,34-2,39 (m, 1 H), 2,59-2,64 (m, 1 H), 2,94-2,98 (m, 1 H), 3,67 (dd, 7=7,78, 6,56 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, 7=10,83,4,12 Hz, 1 H), 4,37-4,42 (m, 1 H), 4,56 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,71-4,76 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,80 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,13 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=9,16 Hz, 1 H),; LC-MS (retensjonstid: 1,697 min.), MS m/z 728 (MH<+>).
Eksempel 105: Fremstilling av Forbindelse 105
Til en løsningsblanding av Forbindelse 100 (80,0 mg, 0,116 mmol) og DIEA (31,5 mg, 0,244 mmol) i DCM (2 ml) ble satt di-tert-amyl-dikarbonat (57,1 mg, 0,232 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 14 timer ble løsningsmiddel fjernet og produktet ble renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 105 (62,5 mg, 74% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,79 (t, 7=7,48 Hz, 3 H), 1,04-1,08 (m, 3 H), 1,17 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,19-1,23 (s, 3 H), 1,24 (s, 3 H), 1,39-1,43 (m, 1 H), 1,46 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,60-1,65 (m, 2 H), 1,86 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,22 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,35-2,40 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=14,04, 7,15 Hz, 1 H), 2,94-3,00 (m, 1 H), 3,64-4,00 (m, 1 H), 3,92 (s, 4 H), 4,14 (dd, 7=11,90, 3,05 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 4,40 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=9,31, 7,78 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,79-5,83 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,86-7,90 (m, 1 H), 8,09 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,740 min.), MS m/z 730 (MH<+>).
Eksempel 106: Fremstilling av Forbindelse 106
Forbindelse 106 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 105 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Karbonsyre-pyridin-2-ylester-2,2,2-trifluor-l,l-dimetyl-etylester ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 106 (58,1 mg, 65% utbytte):<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 1,04-1,08 (m, 3 H), 1,17 (d, 7=6,10 Hz, 3 H),
1,19,1,23 (m, 1 H), 1,23-1,27 (m, 1 H), 1,28 (s, 3 H), 1,46 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 2 H), 1,49 (s, 2 H), 1,86 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,21 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,36-2,40 (m, 1 H), 2,62 (dd, 7=13,74, 7,32 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,65-3,70 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,31 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 4,42 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,57 (dd, 7=10,07,7,32 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,00, 2,29 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,770 min.), MS m/z 770 (MH^).
Eksempel 107: Fremstilling av Forbindelse 107
Til en løsning av produktet fra trinn 3 i Eksempel 25 (100,0 mg, 0,116 mmol), DIEA (62,5 mg, 0,483 mmol) og HATU (92,0 mg, 0,242 mmol) ble satt Boc-allo-Thr-OH (43,5 mg, 0,177 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 3 timer ble reaksjonsblandingen vasket med 5% vandig NaHC03(1 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med 2x2 ml DCM. De samlede organiske lag ble vasket med 5% vandig sitronsyre (1 ml), saltvann, tørket over Mg04, konsentrert og renset ved reversert fase prep-HPLC, hvilket ga Forbindelse 107 (62,5 mg, 52% utbytte):<1>HNMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,8-1,02 (m, 1 H), 1,04-1,08 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 12 H), 1,42 (dd, .7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (t, 7=6,26 Hz, 1 H), 2,23-2,27 (m, 1 H), 2,46-2,50 (m, 1 H), 2,76 (dd, 7=14,04, 6,71 Hz, 1 H), 2,95-2,99 (m, 1 H), 3,94-3,98 (m, 1 H), 4,28 (d, 7=7,32 Hz, 2 H), 4,52 (d, 7=12,51 Hz, 1 H), 4,63 (t, 7=9,00 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 6,09 (s, 1 H), 7,36-7-41 (m, 1 H), 7,47 (t, 7=7,17 Hz, 3 H), 7,52 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,70 (t, 7=7,17 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,88 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 8,17 (d, 7=7,93 Hz, 2 H), 8,22 (d, 7=7,63 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,937 min.), MS m/z 748 (MH^).
Eksempel 108: Fremstilling av Forbindelse 108
Forbindelse 108 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 107 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-(25', 35)-amino-3-metoksybutansyreble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 108 (75,1 mg, 51% utbytte):<l>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,80-1,02 (m, 4 H), 1,18 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,28 (s, 9 H), 1,44 (dd, 7=9,77, 1,30 Hz, 1 H), 1,45-1,50 (m, 1 H), 1,85-1,90 (m, 1 H), 2,14-2,18 (m, 1 H), 2,55-2,59 (m, 1 H), 2,72-2,76 (m, 1 H), 2,91-2,95 (m, 1 H), 3,34 (s, 3 H), 3,65-3,69 (m, 1 H), 4,32 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 4,40 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 4,46 (d, 7=13,12 Hz, 1 H), 4,60 (t, 7=8,24 Hz, 1 H), 5,07 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 5,26 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,82-5,86 (m, 1 H), 6,08 (s, 1 H), 7,38 (dd, 7=7,32, 6,10 Hz, 1 H), 7,47 (t, 7=7,02 Hz, 3 H), 7,51 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,69 (t, 7=6,56 Hz, 1 H), 7,69 (t, .7=6,56 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,88 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=8,24 Hz, 3 H), 8,21 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 1,973 min.), MS m/z 762 (MH<+>).
Eksempel 109: Fremstilling av Forbindelse 109
Forbindelse 109 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 107 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-(25', 35)-amino-3-etoksybutansyre ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 109 (57,2 mg, 47% utbytte):<l>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 1,02-1,08 (m, 4 H), 1,17 (d, 7=6,10 Hz, 6 H), 1,19 (s, 1 H), 1,19-1,24 (m, 1 H), 1,23-1,27 (m, 7=3,97 Hz, 1 H), 1,30 (s, 9 H), 1,44 (dd, 7=9,77, 5,50 Hz, 1 H), 1,46 (s, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,78, 5,95 Hz, 1 H), 2,20-1,25 (m, 1 H), 2,49-2,54 (m, 1 H), 2,69-2,73 (m, 1 H), 2,93-2,97 (m, 1 H), 3,53-3,57 (m, 2 H), 3,75-3,80 (m, 1 H), 4,34 (dd, 7=11,75, 3,20 Hz, 1 H), 4,42 (t, 7=8,30 Hz, 2 H), 4,57 (t,7=8,09 Hz, 1 H), 5,11 (d,7=10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 1 H), 6,09 (s, 1 H), 7,38 (t, 7=7,32 Hz, 1 H), 7,47 (t, 7=7,63 Hz, 2 H), 7,52 (d, 7=7,02 Hz, 1 H), 7,70 (t, 7=7,93 Hz, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 7,88 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=7,32 Hz, 2 H), 8,22 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); LC-MS (retensjonstid: 2,030 min.), MS m/z 776 (MH^).
Eksempel 110: Fremstilling av Forbindelse 110
Forbindelse 110 ble fremstilt ved samme metode som Forbindelse 89 med de følgende modifikasjoner: Modifikasjoner: Boc-L-Thr(Bn)-OH ble anvendt som et utgangsmateriale, hvilket ga Forbindelse 110 (49,8 mg, 48% utbytte)); LC-MS (retensjonstid: 1,857 min.), MS m/z 792 (MH<+>).
Seksjon D:
Eksempel 120: Fremstilling av Forbindelse 120
Trinn 1:
En løsning av Forbindelse 23 (se Eksempel 23) (1,50 g, 2,19 mmol) i DCM (50 ml) og trifluoreddiksyre (50 ml) ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Blandingen ble konsentrert i vakuum til et viskøst residuum og ble deretter oppløst i 1,2-dikloretan og igjen konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede bis-trifluoreddiksyresalt-produkt som et gråhvitt glassaktig fast stoff (kvantitativt). Materialet ble anvendt direkte i neste trinn uten rensning.
Trinn 2:
Til en løsning av produktet fra Eksempel 120, Trinn 1(118 mg, 0,146 mmol)
i 1,2-dikloretan (3 ml) ble satt/Molylklorformiat (32,4 mg, 0,190 mmol) og N, N-diisopropyletylamin (94,5 mg, 0,731 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer. Reaksjonsblandingen ble vasket med pH = 4 bufferløsning (3x3 ml) og vaskingene ble tilbake-ekstrahert med 1,2-dikloretan (3 ml). De
organiske fasene ble samlet og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble deretter oppløst i MeOH og renset ved revers fase preparativ HPLC, hvilket ga
tittelforbindelsen (Forbindelse 120) som et gult glassaktig fast stoff (64,2 mg, 61,1% utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 5 1,06-1,10 (m, 3 H), 1,12 (s, 9 H), 1,24-1,28 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,31, 5,34 Hz, 1 H), 1,89 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,21-2,28 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H), 2,62-2,66 (m, 1 H), 2,93-2,99 (m, 1 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,42 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,57 (dd, 7=10,22, 7,17 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,76 (ddd, 7=17,09, 9,77, 9,46 Hz, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,79 (d, 7=8,24 Hz, 2 H), 7,07 (d, 7=8,24 Hz, 2 H), 7,30 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,40 (t, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,68 (t, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,79 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 7,93 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,17 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); MS m/ z 718 (MH<+>).
Eksempel 121: Fremstilling av Forbindelse 121
Forbindelse 121 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at fenylklorformiat ble anvendt istedenfor p-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 30 mg (0,19 mmol) fenylklorformiat anvendt, 89,0 mg produkt oppnådd som et gult glassaktig fast stoff (50% utbytte): MS m/ z 704 (MH<+>).
Eksempel 122: Fremstilling av Forbindelse 122
Forbindelse 122 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at 4-fluorfenylklorformiat ble anvendt istedenfor p-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 33 mg (0,19 mmol) 4-fluorfenylklorformiat anvendt, 83,1 mg produkt oppnådd som en klebrig gul olje (78,8% utbytte): MS m/ z 722 (MH^).
Eksempel 123: Fremstilling av Forbindelse 123
Forbindelse 123 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at 4-metoksyfenylklorformiat ble anvendt istedenfor p-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 35 mg (0,19 mmol) 4-metoksyfenylklorformiat anvendt, 70,2 mg produkt oppnådd som et gult glassaktig fast stoff (65,4% utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 5 1,06-1,10 (m, 3 H), 1,11 (s, 9 H), 1,24-1,28 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,46,
5,49 Hz, 1 H), 1,89 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,24 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,31 (ddd, 7=13,81, 10,30, 3,97 Hz, 1 H), 2,62-2,66 (m, 1 H), 2,94-2,98 (m, 1 H), 3,77 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,60, 3,66 Hz, 1 H),4,42 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,57 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,72-5,80 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,80 (d, 7=2,44 Hz, 4 H), 7,30 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,42 (t, 7=7,48 Hz, 1 H), 7,69 (t, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,80 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 7,93 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); MS m/ z 734 (MH<+>).
Eksempel 124: Fremstilling av Forbindelse 124
Forbindelse 124 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at klormaursyre-2-metoksyetylester ble anvendt istedenforp-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 26 mg (0,19 mmol) klormaursyre-2-metoksyetylester anvendt, 87,4 mg produkt oppnådd som en klebrig gul olje (87,2% utbytte):<*>H NMR (CD3OD) 8
0,96-1,02 (m, 3 H), 1,05 (s, 9 H), 1,16-1,18 (m, 2 H), 1,40 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,85 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,15 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,40 (ddd, 7=13,89,10,07, 4,12 Hz, 1 H), 2,65 (dd, 7=13,58, 7,17 Hz, 1 H), 2,90 (ddd, 7=12,89, 8,16, 4,88 Hz, 1
H), 3,27 (s, 3 H), 3,36-3,44 (m, 2 H), 3,81-3,84 (m, 1 H), 3,92-3,96 (m, 1 H), 4,12
(dd, 7=1 1,60, 3,36 Hz, 1 H), 4,44 (d, 7=1 1,60 Hz, 1 H), 4,57 (dd, 7=9,46, 7,93 Hz, 1 H), 5,07 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,25 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,80 (ddd, 7=17,32, 9,77, 9,54 Hz, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,32 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,55 (t, 7=7,32 Hz, 1 H), 7,70 (t, 7=7,48 Hz, 1 H), 7,80 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 7,96 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); MS m/ z 686 (MH<+>).
Eksempel 125: Fremstilling av Forbindelse 125
Forbindelse 125 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at neopentylklorformiat ble anvendt istedenforp-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 29 mg (0,19 mmol) neopentylklorformiat anvendt, 57,4 mg produkt oppnådd som et gult glassaktig fast stoff (56,2% utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,83 (s, 9 H), 1,05 (d, 7=2,44 Hz, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,43-1,46 (m, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 2,21-2,25 (m, 1 H), 2,29-2,33 (m, 1 H), 2,61-2,65 (m, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,42 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 3,56 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 4,09-4,11 (m, 1 H), 4,33 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 4,43 (d, 7=11,29 Hz, 1 H), 4,54-4,57 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,73-5,80 (m, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 7,33 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 7,71 (t, 7=6,87 Hz, 1 H), 7,81 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 7,97 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, 7=7,63 Hz, 1 H); MS m/ z 698
(MH<+>).
Eksempel 126: Fremstilling av Forbindelse 126
Forbindelse 126 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at 2-fluoretylklorformiat ble anvendt istedenfor p-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 24 mg (0,19 mmol) 2-fluoretylklorformiat anvendt, 58,9 mg produkt oppnådd som et gult glassaktig fast stoff (59,8% utbytte): JH NMR (CD3OD) 5 1,05 (d, 7=2,14 Hz, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,22-1,27 (m, 2 H), 1,42-1,45 (m, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 2,24 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,63 (dd, 7=13,43, 6,41 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92-4,10 (m, 3 H), 4,31-4,37 (m, 2 H), 4,42-4,46 (m, 2 H), 4,54-4,57 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,71-5,79 (m, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 7,33 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,55 (t, 7=7,17 Hz, 1 H), 7,71 (m, 1 H), 7,81 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 7,96 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, 7=7,63 Hz, 1 H); MS m/ z 61A (MH<+>).
Eksempel 127: Fremstilling av Forbindelse 127
Forbindelse 127 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at 2-metoksyfenylklorformiat ble anvendt istedenfor />-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 35 mg (0,19 mmol) 2-metoksyfenylklorformiat anvendt, 97,6 mg produkt oppnådd som en klebrig gul olje (91,0 % utbytte): MS m/ z 734 (MH<+>).
Eksempel 128: Fremstilling av Forbindelse 128
Forbindelse 128 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at 2-(-)-(7Æ^-mentylldorformiat ble anvendt istedenfor/?-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 42 mg (0,19 mmol) (-)-(7/?)-mentylklorformiat anvendt, 69,1 mg produkt oppnådd som et hvitt glassaktig fast stoff (61,7 % utbytte): MS m/ z 766
(MH<+>).
Eksempel 129: Fremstilling av Forbindelse 129
Forbindelse 129 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 120 bortsett fra at heksylklorformiat ble anvendt istedenfor p-tolylklorformiat i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 31 mg (0,19 mmol) heksylklorformiat anvendt, 66,7 mg produkt oppnådd som et gult glassaktig fast stoff (64,1 % utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 5 0,87-0,99 (m, 5 H), 1,05 (s, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,22-1,28 (m, 6 H), 1,43-1,48 (m, 3 H), 1,88 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,24 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,63 (dd, 7=14,34, 7,63 Hz, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,72 (dt, 7=10,61, 6,60 Hz, 1 H), 3,81-3,86 (m, 1 H), 4,10 (dd, 7=11,60, 3,36 Hz, 1 H), 4,32 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 4,43 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=9,77, 7,32 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,76 (ddd, 7=17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,33 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,54 (t, 7=7,48 Hz, 1 H), 7,69-7,72 (m, 1 H), 7,81 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 7,97 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,20 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); MS m/ z 712
(MH<+>).
Eksempel 130: Fremstilling av Forbindelse 130
Trinn 1:
En løsning av Forbindelse 23 (se Eksempel 23) (1,50 g, 2,19 mmol) i DCM (50 ml) og trifluoreddiksyre (50 ml) ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Blandingen ble konsentrert i vakuum til et viskøst residuum og ble deretter oppløst i 1,2-dikloretan og igjen konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede bis-trifluoreddiksyresalt-produkt som et gråhvitt glassaktig fast stoff (kvantitativt). Materialet ble anvendt direkte i neste trinn uten rensning.
Trinn 2:
En blanding av produktet fra trinn 1(118 mg, 0,146 mmol), tert-butyl-eddiksyre (22 mg, 0,19 mmol), HATU (72 mg, 0,19 mmol) og N-metylmorfolin (59 mg, 0,58 mmol) i 1,2-dikloretan ble omrørt i 24 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble vasket med pH = 4 bufferløsning (3x3 ml) og vaskene ble tilbake-ekstrahert med 1,2-dikloretan (3 ml). De organiske fasene ble samlet og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble deretter oppløst i MeOH og renset ved revers fase preparativ HPLC, hvilket ga tittelforbindelsen (Forbindelse 130) som et litt gult glassaktig fast stoff (43,4 mg, 43,5% utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,82 (d, 7=1,83 Hz, 9 H), 1,06 (d, 7=2,14 Hz, 9 H), 1,07-1,10 (m, 2 H), 1,22-1,28 (m, 2 H), 1,43-1,46 (m, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 1,99 (d, 7=1,83 Hz, 2 H), 2,20-2,26 (m, 1 H), 2,27-2,33 (m, 1 H), 2,59-2,64 (m, 1 H), 2,93-2,97 (m, 1 H), 4,12-4,14 (m, 1 H), 4,42 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,51-4,55 (m, 1 H), 4,67 (dd, 7=9,31, 1,98 Hz, 1 H), 5,11-5,14 (m, 1 H), 5,29 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,72-5,80 (m, 1 H), 5,89 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,32 (dd, 7=5,80,2,14 Hz, 1 H), 7,52-7,55 (m, 1 H), 7,69-7,72 (m, 1 H), 7,81 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 7,96 (dd, 7=5,80, 1,83 Hz, 1 H), 8,17 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); MS m/ z 682
(MH<+>).
Eksempel 131: Fremstilling av Forbindelse 131
Forbindelse 131 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 130 bortsett fra at metoksyeddiksyre ble anvendt istedenfor terr-butyl eddiksyre i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 17 mg (0,19 mmol) metoksyeddiksyre anvendt, 49,9 mg produkt
oppnådd som et litt gult glassaktig fast stoff (52,0 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 1,05-1,08 (m, 11 H), 1,24-1,26 (m, 2 H), 1,45 (ddd, 7=9,31, 5,34, 3,66 Hz, 1 H), 1,88 (ddd, 7=8,39, 5,19, 3,81 Hz, 1 H), 2,21-2,27 (m, 1 H), 2,29-2,35 (m, 1 H), 2,60-2,64 (m, 1 H), 2,91-2,97 (m, 1 H), 3,34 (d, 7=3,66 Hz, 3 H), 3,69 (dd, 7=15,26, 3,66 Hz, 1 H), 3,81-3,85 (m, 1 H), 4,15 (dt, 7=11,67, 3,62 Hz, 1 H), 4,35 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,55 (ddd, 7=10,30, 6,94, 3,20 Hz, 1 H), 4,66 (dd, 7=9,61, 3,51 Hz, 1 H), 5,11-5,14 (m, 1 H), 5,28-5,32 (m, 1 H), 5,73-5,81 (m, 1 H), 5,90 (d, 7=3,36 Hz, 1 H), 7,33 (dd, 7=5,65, 3,20 Hz, 1 H), 7,54-7,58 (m, 1 H), 7,69-7,73 (m, 1 H), 7,80-7,82 (m, 1 H), 7,95-7,97 (m, 1 H), 8,15 (dd, 7=8,39, 2,59 Hz, 1 H); MS m/ z 656 (MH<+>).
Eksempel 132: Fremstilling av Forbindelse 132
Forbindelse 132 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 130 bortsett fra at metoksypropionsyre ble anvendt istedenfor tert-butyl-eddiksyre i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 20 mg (0,19 mmol) metoksypropionsyre anvendt, 50,0 mg produkt oppnådd som et gult glassaktig fast stoff (51,1 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 5 1,06 (d, 7=1,83 Hz, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,44 (ddd, 7=9,38, 5,26, 1,83 Hz, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 2,21-2,27 (m, 1 H), 2,29-2,33 (m, 2 H), 2,40-2,46 (m, 1 H), 2,59-2,64 (m, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,25 (d, 7=1,83 Hz, 3 H), 3,45-3,54 (m, 2 H), 4,12-4,16 (m, 1 H), 4,37 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,52-4,55 (m, 1 H), 4,65 (dd, 7=9,16, 1,83 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,72-5,80 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,33 (dd, 7=5,65,1,98 Hz, 1 H), 7,54-7,58 (m, 1 H), 7,69-7,73 (m, 1 H), 7,81 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 7,96 (dd, 7=6,10, 1,83 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=8,24 Hz, 1 H); MS m/ z 670 (MH<+>).
Eksempel 133: Fremstilling av Forbindelse 133
Forbindelse 133 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 130 bortsett fra at fSy-l,4-benzodioksan-2-karboksylsyre ble anvendt istedenfor terr-butyl-eddiksyre i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 35 mg (0,19 mmol) f$-l,4-benzodioksan-2-karboksylsyre anvendt, 54,0 mg produkt oppnådd som et litt gult glassaktig fast stoff (49,5 % utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 8 0,83 (d, 7=3,36 Hz, 9 H), 1,05-1,08 (m, 2 H), 1,20-1,25 (m, 1 H), 1,26-1,31 (m, 1 H), 1,45-1,49 (m, 1 H), 1,86-1,90 (m, 1 H), 2,21-2,25 (m, 1 H), 2,28-2,34 (m, 1 H), 2,59-2,65 (m, 1 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 4,12-4,17 (m, 2 H), 4,32 (d, 7=1 1,90 Hz, 1 H), 4,35-4,39 (m, 1 H), 4,55-4,61 (m, 3 H), 5,11-5,14 (m, 1 H), 5,28-5,32 (m, 1 H), 5,75-5,83 (m, 1 H), 5,90 (d, 7=3,66 Hz, 1 H), 6,80-6,89 (m, 3 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 7,32-7,34 (m, 1 H), 7,55-7,58 (m, 1 H), 7,68-7,72 (m, 1 H), 7,80-7,82 (m, 1 H), 7,96-7,98 (m, 1 H), 8,15-8,18 (m, 1 H); MS m/ z 746 (MH<+>).
Eksempel 134: Fremstilling av Forbindelse 134
Trinn 1:
En blanding av produktet fra Eksempel 11, Trinn 5 (100 mg, 0,172 mmol), N-a-terNbutoksykarbonyl-L-fenylglycin (45,3 mg, 0,180 mmol), HATU (84,9 mg, 0,223 mmol) og N-metylmorfolin (87,0 mg, 0,859 mmol) i DMF (1,0 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Blandingen ble renset direkte ved revers fase preparativ HPLC, hvilket ga 29,7 mg (23,6% utbytte) av forbindelse 134 som et hvitt pulver:<!>H NMR (CD3OD) 5 0,97-1,07 (m, 2 H), 1,12-1,17 (m, 1 H), 1,22-1,32 (m, 2 H), 1,38 (s, 9 H), 1,90 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,20-2,28 (m, 2 H), 2,54 (dd, 7=13,58, 6,56 Hz, 1 H), 2,85-2,89 (m, 7=8,24 Hz, 1 H), 3,50 (d, 7=10,99 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,11 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,63 (dd, 7=9,46, 7,32 Hz, 1 H), 5,13 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,32 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,47 (s, 1 H), 5,74-5,84 (m, 2 H), 7,16-7,19 (m, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,32-7,43 (m, 6 H), 7,86 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,13 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 734 (MH<+>).
Eksempel 135: Fremstilling av Forbindelse 135
Forbindelse 135 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 134 bortsett fra at 7V-a-ter/-butoksykarbonyl-erytro-DL-P-metylfenylalanin ble anvendt istedenfor iV-a-tert-butoksykarbonyl-L-fenylglycin i trinn 1. Forbindelse 135 ble fremstilt fra en blanding av 7V-a-tert-butoksykarbonyl-erytro-DL-P-metylfenylalanin og de resulterende to diastereomerene ble separert ved revers fase preparativ HPLC. Denne forbindelsen er den enkle isomer som eluerte først ved preparativ HPLC kolonne. Den nøyaktige stereokjemi ved P-metyl-fenylalanin-delen av molekylet er ukjent.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 50,4 mg (0,180 mmol) N-a-tert-butoksykarbonyl-erytro-DL-P-metylfenylalanin anvendt, 29,7 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (22,7 % utbytte): JH NMR (CD3OD) 5 1,11 (d, 7=7,93 Hz, 2 H), 1,15 (d, 7=6,10 Hz, 3 H), 1,24-1,32 (m, 11 H), 1,44 (dd, 7=9,16,5,19 Hz, 1 H), 1,90-1,94 (m, 1 H), 2,25-2,29 (m, 1 H), 2,36 (t, 7=13,28 Hz, 1 H), 2,62 (dd, 7=13,58, 7,17 Hz, 1 H), 2,98-3,02 (m, 1 H), 3,20-3,24 (m, 1 H), 3,91 (s, 3 H), 4,11 (dd, 7=11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,51 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 4,57 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,63 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 5,14 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,32 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,76-5,84 (m, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 7,08 (dd, 7=8,70, 1,68 Hz, 1 H), 7,16-7,18 (m, 2 H), 7,23-7,27 (m, 5 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=9,46 Hz, 1 H); MS m/ z 762 (MH<+>).
Eksempel 136: Fremstilling av Forbindelse 136
Forbindelse 136 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 134 bortsett fra at 7V-a-ter/-butoksykarbonyl-erytro-DL-P-metylfenylalanin ble anvendt istedenfor 7V-a-ter/-butoksykarbonyl-L-fenylglycin i trinn 1. Forbindelse 136 ble fremstilt fra en blanding av 7V-tert-butoksykarbonyl-erytro-DL P-metylfenylalanin og de resulterende to diastereomerene ble separert ved revers fase preparativ HPLC. Denne forbindelsen er den enkle isomer som eluerte som nummer to ved preparativ HPLC kolonne. Den nøyaktige stereokjemi ved P-metyl-fenylalanin-delen av molekylet er ukjent.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 50,4 mg (0,180 mmol) 7V-a-tert-butoksykarbonyl-erytro-DL-P-metylfenylalanin anvendt, 26,3 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (20,1 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 5 1,04 (s, 1 H), 1,13 (d, 7=6,71 Hz, 3 H), 1,12-1,17 (m, 2 H), 1,30 (s, 9 H), 1,33-1,36 (m, 1 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,87 (dd,
7=7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,29 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,36 (ddd, 7=13,81, 9,99, 4,27 Hz, 1 H), 2,54 (dd, 7=13,58, 7,17 Hz, 1 H), 3,00-3,04 (m, 1 H), 3,05-3,08 (m, 1 H), 3,80 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,10 (dd, 7=12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,53-4,57 (m, 1 H), 4,59 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 5,14 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,34 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 6,75 (t, 7=7,32 Hz, 1 H), 7,03 (t, 7=7,48 Hz, 2 H), 7,12 (s, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,19 (dd, 7=9,31, 1,68 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,28 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); MS m/ z 762 (MH^).
Eksempel 137: Fremstilling av Forbindelse 137
Trinn 1:
En blanding av produktet fra Eksempel 11, Trinn 5 (100 mg, 0,172 mmol), iV-a-ter/-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-benzylester (59,5 mg, 0,180 mmol), HATU (84,9 mg, 0,223 mmol) og N-metylmorfolin (87,0 mg, 0,859 mmol) i DCM (3,0 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble vasket med pH = 4 bufferløsning (3x3 ml) og vaskene ble tilbake-ekstrahert med DCM (3 ml). De organiske fasene ble samlet og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble deretter oppløst i MeOH og renset ved revers fase preparativ HPLC, hvilket ga Forbindelse 137 som et litt gråhvitt glassaktig fast stoff (26,0 mg, 18,8% utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 5 0,95-1,01 (m, 2 H), 1,16 (s, 9 H), 1,22-1,29 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,26 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,32-2,37 (m, 1 H), 2,61 (dd, 7=13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,66 (dd, 7=16,48, 6,10 Hz, 1 H), 2,89 (ddd, 7=12,67, 8,09, 4,88 Hz, 1 H), 3,05 (dd, 7=16,63, 8,39 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,04-4,07 (m, 1 H), 4,47 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,52-4,56 (m, 1 H), 4,75 (dd, 7=8,24, 6,41 Hz, 1 H), 5,12-5,14 (m, 1 H), 5,14 (s, 2 H), 5,31 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,82 (m, 2 H), 7,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,31-7,33 (m, 1 H), 7,36 (t, 7=7,32 Hz, 2 H), 7,39 (s, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 806 (MH<+>).
Eksempel 138: Fremstilling av Forbindelse 138
Forbindelse 138 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 137 bortsett fira at N-tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-metylester ble anvendt istedenfor N- a- tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre 4-benzylester i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 45,5 mg (0,180 mmol) N-tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-metylester anvendt, 93,5 mg produkt oppnådd som et gråhvitt glassaktig fast stoff (74,6 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 5 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,17 (s, 9 H), 1,20-1,29 (m, 2 H), 1,41-1,44 (m, 1 H), 1,84-1,86 (m, 1 H), 2,26 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,33-2,38 (m, 1 H), 2,58-2,64 (m, 2 H), 2,92-3,02 (m, 2 H), 3,69 (s, 3 H), 3,92 (s, 3 H), 4,15 (dd, 7=11,44,2,29 Hz, 1 H), 4,49-4,56 (m, 2 H), 4,72-4,76 (m, 1 H), 5,13 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,32 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,74-5,82 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (dd, 7=5,80, 0,92 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); MS m/ z 730 (MH<+>).
Eksempel 139: Fremstilling av Forbindelse 139
Forbindelse 139 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 137 bortsett fra at N-tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-etrt-butylester ble anvendt istedenfor N- a-tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-benzylester i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 52,2 mg (0,180 mmol) N-tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-tert-butylester anvendt, 125 mg produkt oppnådd som et gråhvitt glassaktig fast stoff (99,8 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 1,08-1,10 (m, 2 H), 1,17 (s, 9 H), 1,21-1,29 (m, 2 H), 1,46 (s, 10 H), 1,82 (dd, 7=7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,26 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,32-2,38 (m, 1 H), 2,51 (dd, 7=16,33, 7,17 Hz, 1 H), 2,63 (dd, 7=14,04, 7,02 Hz, 1 H), 2,89 (dd, 7=16,48, 7,63 Hz, 1 H), 2,92-2,98 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,15 (dd, 7=11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,50-4,57 (m, 2 H), 4,70-4,75 (m, 1 H), 5,13 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,32 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,76-5,83 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,13 (dd, 7=8,85, 1,53 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 772 (MH<+>).
Eksempel 140: Fremstilling av Forbindelse 140
Forbindelse 138 (50,0 mg, 0,0685 mmol) ble oppløst i en blanding av THF (1 ml), MeOH (1 ml) og 1,0M vandig NaOH (0,137 ml, 0,137 mmol). Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen nøytralisert ved tilsetning av 1,0M vandig HC1 (0,137 ml, 0,137 mmol). Den urensede blandingen ble konsentrert i vakuum, deretter ble pH = 4 bufferløsning (3 ml) og DCM (3 ml) tilsatt og blandingen ble ristet. Lagene ble separert og det vandige laget ble videre ekstrahert med DCM (2x1 ml). De organiske fasene ble samlet, tørket over vannfri MgS04, filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga 48,0 mg (97,9% utbytte) av forbindelse 140 som et gråhvitt glassaktig fast stoff:<J>H NMR (CD3OD) 8 1,04-1,07 (m, 2 H), 1,17 (s, 9 H), 1,22-1,25 (m, 2 H), 1,38 (dd, 7=9,31, 5,34 Hz, 1 H), 1,78 (dd, 7=7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,30 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,37-2,42 (m, 1 H), 2,48 (dd, 7=15,87, 4,58 Hz, 1 H), 2,72 (dd, 7=13,12, 7,63 Hz, 1 H), 2,88 (dd, 7=15,72, 10,53 Hz, 1 H), 2,90-2,95 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,21 (dd, 7=11,44, 2,90 Hz, 1 H), 4,57 (t, 7=8,70 Hz, 1 H), 4,62-4,65 (m, 2 H), 5,10 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 5,34 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,69-5,76 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,23 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); MS m/ z 716 (MH<+>).
Eksempel 141: Fremstilling av Forbindelse 141
Trinn 1:
Produktet i Eksempel 55, Trinn 1 (65 mg, 0,0947 mmol), N, N'-disuccinimidylkarbonat (41,0 mg, 0,142 mmol) og N-diisopropyletylamin (30,6 mg, 0,237 mmol) ble blandet med vannfri THF (1 ml) og den resulterende suspensjonen ble oppvarmet til 80°C i en mikrobølgereaktor i 15 min. Etter avkjøling til romtemperatur ble denne rå blanding anvendt direkte i neste trinn.
Trinn 2:
Den rå reaksjonsblandingen fra trinn 1 ble behandlet med en blanding av L-valin-metylester-hydroklorid (159 mg, 0,947 mmol) og ^^-diisopropyletylamin (122 mg, 0,947 mmol) i vannfri THF (2 ml). Den resulterende blandingen ble omrørt i 18 timer ved romtemperatur. Løsningsmiddel ble fjernet i vakuum og residuet ble tatt opp i DCM (2 ml) og vasket med pH = 4 bufferløsning (3x2 ml). Buffer-vaskingene ble samlet og tilbake-ekstrahert med DCM (2 ml). De samlede DCM- faser ble konsentrert i vakuum og det resulterende residuet ble oppløst i MeOH og renset ved revers fase preparativ HPLC, hvilket ga 38,1 mg (52,2% utbytte) av forbindelse 141 som et hvitt pulver:<!>H NMR (CD3OD) 8 0,83 (dd, 7=6,87, 3,81 Hz, 6 H), 1,06 (s, 11 H), 1,21-1,26 (m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 1,95-2,02 (m, 1 H), 2,21 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,29 (ddd, 7=13,89, 9,92, 4,27 Hz, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73,7,02 Hz, 1 H), 2,91-2,97 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 4,00 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 4,09 (dd, 7=11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,40-4,43 (m, 2 H), 4,52 (dd, 7=10,07, 7,02 Hz, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,75 (ddd, 7=17,17, 10,15, 9,00 Hz, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,11 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); MS m/ z 771
(MH<+>).
Eksempel 142: Fremstilling av Forbindelse 142
Forbindelse 142 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at D-valin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 159 mg (0,947 mmol) D-valin-metylester-hydroklorid anvendt, 23,0 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (31,5 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,88
(dd, 7=13,89, 6,87 Hz, 6 H), 1,06 (s, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,01-2,07 (m, 1 H), 2,23 (q, 7=9,05 Hz, 1 H), 2,31 (ddd, 7=14,11, 9,99, 4,27 Hz, 1 H), 2,63 (dd, 7=13,89, 7,17 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 3,96 (s, 3 H), 4,03 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 4,09 (dd, 7=11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,48-4,54 (m, 2 H), 5,12 (dd, 7=10,38, 1,22 Hz, 1 H), 5,29 (dd, 7=17,24, 1,07 Hz, 1 H), 5,70-5,77 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,22 (dd, 7=9,00, 2,59 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,35 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,16 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 11\ (MH<+>).
Eksempel 143: Fremstilling av Forbindelse 143
Forbindelse 143 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 137 bortsett fra at N-tert-butoksykarbonyl-L-cykloheksylglycin ble anvendt istedenfor N- a- tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-benzylester i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 46,2 mg (0,180 mmol) N-tert-butoksykarbonyl-L-cykloheksylglycin anvendt, 93,9 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (73,8 % utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 8 1,04-1,08 (dd, 7=7,78, 2,29 Hz, 4 H), 1,19-1,26 (m, 4 H), 1,25 (s, 9 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,63-1,82 (m, 7 H), 1,88 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,22 (q, 7=9,05 Hz, 1 H), 2,32-2,37 (m, 1 H), 2,59 (dd, 7=13,58, 6,87 Hz, 1 H), 2,91-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (dd, 7=11,75, 3,20 Hz, 1 H), 4,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 4,47 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,22, 7,17 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,79 (ddd, 7=16,86, 9,92, 9,54 Hz, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=1,53 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); MS m/ z 740 (MH<+>).
Eksempel 144: Fremstilling av Forbindelse 144
Forbindelse 144 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at glycin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 183 mg (1,46 mmol) glycin-metylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) ^^-diisopropyletylamin anvendt, 56,3 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (52,9 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 1,01-1,04 (m, 2 H), 1,05 (s, 9 H), 1,17-1,21 (m, 2 H), 1,40 (dd, 7=9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,85 (dd, 7=7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,18
(q, 7=8,55 Hz, 1 H), 2,33 (ddd, 7=13,89, 9,92, 4,27 Hz, 1 H), 2,61 (dd, 7=13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,89-2,94 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,69-3,77 (m, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 4,10
(dd, 7=11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,40-4,42 (m, 2 H), 4,53 (dd, 7=9,92, 7,17 Hz, 1 H), 5,08 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,26 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,77 (ddd, 7=17,09,10,22, 9,00 Hz, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,13 (dd, 7=8,85,2,44 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H); MS m/ z 729 (MH<+>).
Eksempel 145: Fremstilling av Forbindelse 145
Forbindelse 145 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at L-alanin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 203 mg (1,46 mmol) L-alanin-metylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) ^^-diisopropyletylamin anvendt, 64,3 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (59,3 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,97-1,02 (m, 2 H), 1,05 (s, 9 H), 1,19
(d, 7=7,02 Hz, 3 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,19 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,32 (ddd, 7=13,81, 9,84, 4,43 Hz, 1 H), 2,61 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,93 (ddd, 7=12,82, 8,09, 4,73 Hz, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 3,99 (q, 7=7,22 Hz, 1 H), 4,08 (dd, 7=11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,42 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,09 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,27 (dd, 7=17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,77 (ddd, 7=17,09,10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,13 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 743 (MH<+>).
Eksempel 146: Fremstilling av Forbindelse 146
Forbindelse 147 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at L-tert-leucin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 265 mg (1,46 mmol) L-tert-leucin-metylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) 7V-diisopropyletylamin anvendt, 68,3 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (59,6 % utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 8 0,88 (s, 9 H), 0,97-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,18-1,24 (m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,46,5,49 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,19 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,30 (ddd, 7=13,89,10,07,4,43 Hz, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73,7,32 Hz, 1 H), 2,91-2,96 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,91 (s, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,09 (dd, 7=11,60, 3,97 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,51 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,10 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,27 (dd, 7=17,24, 1,37 Hz, 1 H), 5,76 (ddd, 7=17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,11 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 785 (MH<+>).
Eksempel 147: Fremstilling av Forbindelse 147
Forbindelse 147 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at L-histidin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2 og mengden av N,N-diisopropyletylamin anvendt i trinn 2 ble doblet.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 352 mg (1,46 mmol) L-histidin-metylester-hydroklorid, 377 mg (2,91 mmol) 7V-diisopropyletylamin anvendt, 51,0 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (43,2 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 1,04 (s, 11 H), 1,20-1,22 (m, 2 H), 1,41 (ddd, 7=9,46, 5,34,1,07 Hz, 1 H), 1,86-1,88 (m, 1 H), 2,23 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,92 (d, 7=6,41 Hz, 2 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,64 (s, 3 H), 3,91 (d, 7=1,53 Hz, 3 H), 4,04 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,35 (s, 1 H), 4,36-4,41 (m, 2 H), 4,53 (dd, 7=9,77, 7,63 Hz, 1 H), 5,10 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,81 (s, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 7,06-7,09 (m, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,63 (s, 1 H), 7,87 (dd, 7=5,80, 1,22 Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 809 (MH^).
Eksempel 148: Fremstilling av Forbindelse 148
Forbindelse 148 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fira at skalaen ble øket og at L-valin-etylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 265 mg (1,46 mmol) L-valin-etylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) ^^-diisopropyletylamin anvendt, 69,2 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (60,4 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,83 (dd, 7=6,71, 5,19 Hz, 6 H), 1,01-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,17-1,22 (m, 2 H), 1,23 (t, 7=7,17 Hz, 3 H), 1,40 (dd, 7=9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 1,95-2,02 (m, 1 H), 2,18 (q, 7=9,05 Hz, 1 H), 2,33 (ddd, 7=13,89, 9,92,4,27 Hz, 1 H), 2,60 (dd, 7=13,89, 7,17 Hz, 1 H), 2,92 (ddd, 7=12,82, 8,09,4,73 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 3,98 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 4,08-4,17 (m, 3 H), 4,41 (s, 1 H), 4,41-4,43 (m, 1 H), 4,52 (dd, 7=10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,09 (dd, 7=10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,26 (dd, 7=17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,77 (ddd, 7=17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 785 (MH^>.
Eksempel 149: Fremstilling av Forbindelse 149
Forbindelse 149 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 137 bortsett fra at N-tert-butoksykarbonyl-L-cyklopentylglycin-dicykloheksylaminsaltble anvendt istedenfor A7-a-tert-butoksykarbonyl-L-asparaginsyre-4-benzylester i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 76,2 mg (0,180 mmol) N-tert-butoksykarbonyl-L-cyklopentylglycin-dicykloheksylaminsalt anvendt, 111 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (89,3 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,98 (d, 7=8,24 Hz, 2 H), 1,15-1,18 (m, 2 H), 1,24 (s, 9 H), 1,29-1,32 (m, 7=18,01 Hz, 2 H), 1,38-1,40 (m, 1 H), 1,44 (dd, 7=4,88, 1,53 Hz, 1 H), 1,49-1,55 (m, 2 H), 1,62-1,67 (m, 2 H), 1,74-1,80 (m, 1 H), 1,85-1,88 (m, 1 H), 2,16 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,21-2,26 (m, 1 H), 2,42 (t, 7=11,90 Hz, 1 H), 2,60-2,64 (m, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,92 (d, 7=1,53 Hz, 3 H), 4,06-4,11 (m, 2 H), 4,51-4,57 (m, 2 H), 5,07 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,25 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 7,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,23 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 7,88 (dd, 7=5,95, 1,68 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 726 (MH^).
Eksempel 150: Fremstilling av Forbindelse 150
Forbindelse 150 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fira at skalaen ble øket og at L-valin-benzylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 356 mg (1,46 mmol) L-valin-benzylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) A^N-diisopropyletylamin anvendt, 41,0 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (33,2 % utbytte): MS m/ z 848 (MH^).
Eksempel 151: Fremstilling av Forbindelse 151
Forbindelse 151 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at L-isoleucin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^N-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 265 mg (1,46 mmol) L-isoleucin-metylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) A^A^diisopropyletylamin anvendt, 75,5 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (65,9 % utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 8 0,78-0,80 (m, 3 H), 0,83-0,84 (m, 3 H), 0,90-0,95 (m, 1 H), 1,01-1,03 (m, 2 H), 1,06 (d, 7=3,05 Hz, 9 H), 1,17-1,21 (m, 2 H), 1,32-1,42 (m, 2 H), 1,68-1,72 (m, 1 H), 1,84-1,87 (m, 1 H), 2,14-2,20 (m, 1 H), 2,30-2,36 (m, 1 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 2,90-2,95 (m, 1 H), 3,66 (d, 7=2,75 Hz, 3 H), 3,92 (d, 7=2,75 Hz, 3 H), 4,05-4,12 (m, 2 H), 4,39-4,42 (m, 2 H), 4,50-4,53 (m, 1 H), 5,07-5,10 (m, 1 H), 5,23-5,28 (m, 1 H), 5,73-5,79 (m, 1 H), 5,81-5,83 (m, 1 H), 7,10-7,13 (m, 1 H), 7,17 (t, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,22-7,24 (m, 1 H), 7,85-7,87 (m, 1 H), 8,10 (dd, 7=9,16, 2,75 Hz, 1 H); MS m/ z 785 (MH<+>).
Eksempel 152: Fremstilling av Forbindelse 152
Forbindelse 152 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at L-valin-etr/-butylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 306 mg (1,46 mmol) L-valin-etrt-butylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) A^A^diisopropyletylamin anvendt, 93,5 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (78,8 % utbytte): MS m/ z 814 (MH<+>).
Eksempel 153: Fremstilling av Forbindelse 153
Forbindelse 153 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fira at skalaen ble øket og at ^)-^+)-l-metoksy-2-propylamin ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 130 mg (1,46 mmol) (^-^+)-l-metoksy-2-propylamin, 188 mg (1,46 mmol) A^A^diisopropyletylamin anvendt, 50,3 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (47,3 % utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 5 0,96 (d, 7=7,02 Hz, 3 H), 0,99-1,01 (m, 2 H), 1,04 (s, 9 H), 1,15-1,18 (m, 2 H), 1,39 (dd, 7=9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,84 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 1,93 (s, 3 H), 2,15 (q, 7=9,05 Hz, 1 H), 2,37 (ddd, 7=13,96, 9,84, 4,58 Hz, 1 H), 2,61 (dd, 7=14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,90 (ddd, 7=12,89, 8,16, 4,88 Hz, 1 H), 3,19-3,28 (m, 2 H), 3,64-3,67 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,60, 3,97 Hz, 1 H), 4,40 (s, 1 H), 4,44 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=9,77, 7,32 Hz, 1 H), 5,07 (dd,7=10,22,1,68 Hz, 1 H), 5,24 (dd,7=17,24,1,37 Hz, 1 H), 5,76-5,81 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,10 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 729 (MH<+>).
Eksempel 154: Fremstilling av Forbindelse 154
Forbindelse 154 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 141 bortsett fra at skalaen ble øket og at N-metyl L-valin-metylester-hydroklorid ble anvendt istedenfor L-valin-metylester-hydroklorid i trinn 2.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 100 mg (0,146 mmol) av produktet fra eksempel 55, Trinn 1; 62,2 mg (0,219 mmol) A^A^-disuccinimidylkarbonat, 47,0 mg (0,364 mmol) N, N-diisopropyletylamin anvendt.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 265 mg (1,46 mmol) N-metyl L-valin-metylester-hydroklorid, 188 mg (1,46 mmol) A^N-diisopropyletylamin anvendt, 68,2 mg produkt oppnådd som et hvitt pulver (59,5 % utbytte):<J>H NMR (CD3OD) 8 0,70 (dd, 7=6,71, 2,14 Hz, 3 H), 0,89 (dd, 7=6,41, 2,44 Hz, 3 H), 0,96-0,98 (m, 1 H), 1,02-1,04 (m, 2 H), 1,07 (d, 7=2,14 Hz, 9 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,43-1,47 (m, 1 H), 1,84-1,87 (m, 1 H), 2,11-2,19 (m, 2 H), 2,31-2,37 (m, 1 H), 2,58-2,63 (m, 1 H), 2,87 (d, 7=2,44 Hz, 3 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 3,65 (d, 7=2,14 Hz, 3 H), 3,92 (d, 7=2,14 Hz, 3 H), 4,10-4,14 (m, 1 H), 4,25 (dd, 7=10,07,1,22 Hz, 1 H), 4,48 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 4,50-4,54 (m, 1 H), 5,08-5,10 (m, 1 H), 5,25-5,28 (dd, 7=17,09,1,53 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 7,10-7,13 (m, 1 H), 7,18-7,19 (m, 1 H), 7,24 (dd, 7=5,95, 2,59 Hz, 1 H), 7,87-7,89 (m, 1 H), 8,10 (dd, 7=9,00, 2,59 Hz, 1 H); MS m/ z 785 (MH<+>).
Eksempel 155: Fremstilling av Forbindelse 155
Trinn 1:
Til en løsning av produktet fra eksempel 55, Trinn 1 (100 mg, 0,146 mmol) i vannfri THF (2 ml) ble satt karbonsyre-pyridin-2-ylester-2,2,2-trifluor-l,l-dimetyl-etylester (44,0 mg, 0,175 mmol) og A^-metylmorfolin (59 mg, 0,58 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble vasket, konsentrert i vakuum og residuet ble oppløst i DCM (2 ml). Løsningen ble vasket med pH = 4 bufferløsning (3x3 ml) og vaskene ble tilbake-ekstrahert med DCM (3 ml). De organiske fasene ble samlet og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble deretter oppløst i MeOH og renset ved revers fase preparativ HPLC, hvilket ga Forbindelse 155 som et hvitt pulver (38,5 mg, 34,3% utbytte):<!>H NMR (CD3OD) 5 1,04 (s, 11 H), 1,19-1,22 (m, 2 H), 1,23 (s, 3 H), 1,43 (dd, 7=9,31, 5,34 Hz, 1 H), 1,46 (s, 3 H), 1,87 (dd, 7=7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,19 (q, 7=8,85 Hz, 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,62 (dd, 7=13,73,7,02 Hz, 1 H), 2,92 (ddd, 7=12,67, 8,09,4,88 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,06 (dd, 7=11,90, 3,36 Hz, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,56 (dd, 7=10,38, 7,32 Hz, 1 H), 5,10 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,80 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,10 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=9,16 Hz, 1 H); MS m/ z 768 (MH<+>).
Seksjon E:
LC-MS betingelser for seksjon E
"metode A" er 3,0X50mm Xterra @4min gradient og 4 ml/min strømning "metode B" er 3,0X50mm Xterra @3min gradient og 4 ml/min strømning "metode C" er 4,6X50mm Xterra @4min gradient og 4 ml/min strømning "metode D" er 4,6X50mm Xterra @3min gradient og 4 ml/min strømning Eksempel 180: Fremstilling av Forbindelse 180
Generelt synteseskjema
Forbindelse 180 til 183 ble fremstilt ved det generelle synteseskjema som vist ovenfor. Disse individuelle reaksjoner er beskrevet i detalj annet sted. Med unntak av det første alkyleringstrinn for hvilket kalium-tetr-butoksyd i THF (som levert av Aldrich Chemicals) i DMF ga en mer hensiktsmessig opparbeidings-prosedyre: mesteparten av DMF løsningsmiddel ble vasket vekk med vann da alkyleringen var fullstendig.
Forbindelse 180: BOCNH-P3(I-etrt-BuGly)-P2[(4/?)-(2-trifluormetyl-kinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 61% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa<+>) [metode A]: 3,35 (774).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 13 H) 1,21 (s, 9 H) 1,42 (dd, J=9,17, 5,26 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,33 (m, 1 H) 2,64 (dd, J=13,94, 6,60 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,09 (dd, J=ll,49,2,69 Hz, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,52 (m, 1 H) 4,56 (d, J=12,23 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J=10,39,1,59 Hz, 1 H) 5,27 (d, J=16,87 Hz, 1 H) 5,58 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,36 (s, 1 H) 7,61 (t, J=7,70 Hz, 1 H) 7,83 (t, J=7,34 Hz, 1 H) 8,07 (d, J=8,56 Hz, 1 H) 8,26 (d, J=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 181: Fremstilling av Forbindelse 181
BOCNH-P3(I-te^BuGly)-P2[(4/?)-(2,8-bistrifluormetyl-kinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-CONHSC>2-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 52% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa^) [metode A]: 3,60 (843).<J>H NMR
(400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 11 H) 1,16 (s, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,42 (dd, J=9,29, 5,38 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (q, J=8,97 Hz, 1 H) 2,33 (m, 1 H) 2,65 (dd, J=13,94, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,07 (dd, J=l 1,98, 2,69 Hz, 1 H) 4,17 (s, 1 H) 4,52 (dd, J=10,52, 6,85 Hz, 1 H) 4,58 (d, J=ll,98 Hz, 1 H) 5,10 (d, J=10,27 Hz, 1 H) 5,27 (d, J=17,12 Hz, 1 H) 5,60 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,46 (s, 1 H) 7,69 (t, J=7,83 Hz, 1 H) 8,18 (d, J=7,34 Hz, 1 H) 8,50 (d, J=8,31 Hz, 1 H).
Eksempel 182: Fremstilling av Forbindelse 182
BOCNH-P3(Z,-etrt-BuGly)-P2[(4/?)-(2-tirfluormetyl, 8-trifluormetoksy-kinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,2,S' Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 99% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa<+>) [metode A]: 3,62 (858).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 11 H) 1,21 (m, 11 H) 1,42 (dd, J=9,05, 5,14 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (q, J=8,64 Hz, 1 H) 2,33 (m, 1 H) 2,64 (dd, J=13,94, 6,60 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (dd, J=l 1,98, 2,69 Hz, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,51 (dd, J=10,52, 6,85 Hz, 1 H) 4,57 (d, J=12,23 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J=10,52,1,22 Hz, 1 H) 5,27 (d, J=17,12 Hz, 1 H) 5,59 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,44 (s, 1 H) 7,63 (t, J=8,07 Hz, 1 H) 7,78 (d, J=7,58 Hz, 1 H) 8,24 (d, J=8,56 Hz, 1H).
Eksempel 183: Fremstilling av Forbindelse 183
BOCNH-P3(Z,-etrt-BuGly)-P2[(4/?)-(2-tirfluormetyl, 8-klor kinolin-4-okso)-5,-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 64% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa<+>) [metode A]: 3,52 (808).<*>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,04 (m, 11 H) 1,21 (m, 11 H) 1,41 (dd, J=9,41,
5,50 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,20 (q, J=8,80 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,63 (dd, J=13,82,6,72 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,07 (dd, J=12,10,2,81 Hz, 1 H) 4,19 (s, 1 H) 4,50 (dd, J=10,52,6,85 Hz, 1 H) 4,56 (d, J=ll,98 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J=10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,26 (d, J=17,12 Hz, 1 H) 5,57 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,41 (s, 1 H) 7,52 (t, J=8,07 Hz, 1 H) 7,93 (d, J=7,58 Hz, 1 H) 8,19 (d, J=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 184: Generell prosedyre for alkylering med tripeptid (Forbindelse 184) og P2<*>
Generelt Skjema - Fremstilling av Eksempel 184 (Forbindelse 184)
Fremstilling av tripeptid-komponenten, Eksempel 184 ble oppnådd ved en sekvensiell amid-kobling ved anvendelse av HATU som koblingsmidlet. Det vil forstås at mange standard koblingsmidler kan anvendes for det følgende skjema.
Fremstilling av mellomprodukt Eksempel 184a:
Til en blanding av HATU (820 mg, 2,2 mmol), Eksempel 180a (Boc-4Æ-hydroksyprolin, 417 mg, 1,8 mmol) og Eksempel 180c (cyklopropansulfonsyre-(l(/?)-amino-2(5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt, 490 mg, 1,8 mmol) i en flammetørket kolbe ved romtemperatur ble satt tørr CH2CI2(8 ml). Blandingen ble holdt under tørr N2før den ble avkjølt til -78°C. Hunig's base (diisopropyletylamin, 625^L, 3,6 mmol) ble tilsatt langsomt over en periode på 5 min og blandingen ble en blek oransje suspensjon. Omrøring ble fortsatt i en time mens temperaturen fikk stige til omgivelsestemperatur. LC/MS viste fullstendig omdannelse til det ønskede produkt 184a. Den rå reaksjonsblanding ble opparbeidet som vanlig, vasket med tre porsjoner (5 ml) vann, organiske residuer ble ekstrahert med etylacetat (3X5 ml). Råproduktet ble oppnådd ved fjerning av organiske løsningsmidler i vakuum. Materialet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning.
Fremstilling av mellomprodukt Eksempel 184b:
Det tørkede, faste stoffet fra foregående trinn ble tatt opp i 9 ml CH2CI2ved romtemperatur. Til denne løsningen ble satt 3 ml trifluoreddiksyre som dannet en blek gulaktig løsning. Omrøring ble fortsatt i 2 timer ved romtemperatur. LC/MS viste intet utgangsmateriale 184a mens det ønskede produkt 184b ga hovedsignal sammen med et signal som svarte til et biprodukt medført fra HATU i trinnet tidligere. Løsningsmidlene ble avdampet og det faste residuet ble anvendt i neste trinn umiddelbart uten ytterligere rensning.
Fremstilling av tripeptidet, Forbindelse 184:
BOCNH-P3(I-tert-BuGly)-P2[(4/?)-hydroksy-5-prolin]-Pl(l/?,25'Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan [Notebook 46877-128]
Råproduktet fra foregående trinn (Eksempel 184b, 1,8 mmol) ble blandet med HATU (700 mg, 1,8 mmol) og BOC-L-tetr-leucin (Eksempel 180f, Fluka Chemicals, 420 mg, 1,8 mmol) i CH2CI2(10 ml) ved romtemperatur. Denne suspensjonen ble behandlet med Hunig's base (1 ml, overskudd) som dannet en noe tynnere, oransje suspensjon. LC/MS viste noe omdannelse til forbindelse 184. Fullstendig omdannelse til det ønskede produkt 184 ble observert etter at omrøring var fortsatt i to dager ved romtemperatur. Rå reaksjonsblanding ble inndampet til tørrhet. Residuet ble tatt opp i etylacetat. Mesteparten av HATU-residuet ble fjernet ved ekstraksjon med halvmettet, nyfremstilt natriumbikarbonat-løsning. De siste spor av HATU-residuet (1-hydroksy 7-azabenzotriazol) ble fjernet ved vasking med avionisert vann. Inndampning av løsningsmidler ga 990 mg (98%) av det ønskede produkt som hvitt skum. Dette materialet er egnet for den påfølgende alkylering med elektrofiler så som kinoliner og isokinoliner direkte uten ytterligere rensning. LC/MS Rt-min (MNa^ [metode A]: 2,65 (579).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 0,95 (s, 2 H) 0,99 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,21 (m, 1 H) 1,39 (m, 9 H) 1,84 (dd, 7=8,31, 5,38 Hz, 1 H) 1,96 (m, 1 H) 2,11 (m, 1 H) 2,20 (m, 1 H) 2,91 (m, 1 H) 3,80 (m, 2 H) 4,28 (d, 7=9,78 Hz, 1 H) 4,35 (dd, 7=9,90, 6,97 Hz, 1 H) 4,47 (s, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H).
Alkylering av tripeptidet (forbindelse 184) med elektrofiler:
Til en flamme-tørket 25 ml rundbunnet kolbe ble satt Forbindelse 184, (0,5 - 1,0 mmol), substituert 4-klorkinolin (1,0 ekvivalent) og lantanklorid (LaCb) vannfri kuler, anvendt som levert av Aldrich, M.V. 245 g/mol; 1,0 ekvivalent. Merk: inklusjon av slikt additiv ble funnet å være nyttig i noen tilfeller, spesielt med de mindre reaktive elektrofiler. Dette reagens kan, noen ganger, utelates hvis elektrofilene er tilstrekkelig reaktive for anionisk alkylering) i 2 ml tørr DMF. Det uorganiske saltet var bare lite oppløselig i DMF ved romtemperatur. Blandingen ble avkjølt til -78°C (tørris/aceton-bad) med omrøring under nitrogen. Til den avkjølte blanding ble satt en THF-løsning av kalium-tetr-butoksyd (1,0 M, anvendt som levert av Aldrich, 5,5 ekvivalenter) og fargen på blandingen endret seg fra fargeløs til blek gulaktig eller grønnaktig. Den ble omrørt ved -78°C i en periode avhengig av 4-klorkinolin-reaktiviteten (noen få timer ved -78°C til natten over ved romtemperatur). Det uorganiske saltet ble også funnet å forandres til en fin emulsjon til slutt. Det ble behandlet med en halvmettet vandig NH4Cl-løsning (2 ml). Organiske materialer ble ekstrahert med etylacetat (10 ml x 3). Organiske lag ble samlet, tilbakevasket med avionisert vann (10 ml x 2). Inndampning av den organiske fraksjonen ga en rå blanding rik på det ønskede produkt som funnet ved LC/MS. Det ønskede produkt ble isolert ved preparativ HPLC ved anvendelse av standard separeringsparametere (typisk: 3,0x50mm Xterra kolonne @4min gradient og 4 ml/min strømningshastighet), hvilket ga det analytisk rene ønskede produkt. Alkylering av 1-halogen-isokinolin-serien ble utført på nøyaktig samme måte.
Eksempel 185: Fremstilling av Forbindelse 185
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre som beskrevet i Eksempel 184, ble BOCNH-P3(Z,-tetr-BuGly)-P2[(4/?)-(7-trifluormetyl-kinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan oppnådd som et hvitt skum i 50% utbytte. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode B]: 2,32 (752).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (m, 11 H) 1,22 (m, 2 H) 1,43 (dd, J=9,41,
5,26 Hz, 1 H) 1,88 (dd, J=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,23 (q, J=8,80 Hz, 1 H) 2,42 (m, 1 H) 2,75 (dd, J=14,06, 6,48 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,10 (m, 2 H) 4,61 (m, 2 H) 5,12 (dd, J=10,39, 1,59 Hz, 1 H) 5,29 (d, J=17,12 Hz, 1 H) 5,72 (m, 2 H) 7,61 (d, J=6,36 Hz, 1 H) 7,96 (d, J=8,80 Hz, 1 H) 8,38 (s, 1 H) 8,59 (d, J=8,56 Hz, 1 H) 9,14 (d, J=6,36 Hz, 1H).
Eksempel 186: Fremstilling av Forbindelse 186
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre som beskrevet i Eksempel 184, BOCNH-P3(Z,-tert-BuGly)-P2[(4/?)-(8-trifluormetyl-kinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(lÆ,2£ Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: ble det ønskede produkt oppnådd som et hvitt skum i 50% utbytte. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode B]: 2,48
(752).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,02 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,13 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (dd, J=8,68, 5,50 Hz, 1 H) 1,87 (dd, J=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (q, J=8,80 Hz, 1 H) 2,36 (m, 1 H) 2,69 (dd, J=14,06, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (dd, J=l 1,98,2,93 Hz, 1 H) 4,15 (s, 1 H) 4,54 (dd, J=10,52, 7,09 Hz, 1 H) 4,60 (d, J=12,47 Hz, 1 H) 5,11 (dd, J=10,52, 1,71 Hz, 1 H) 5,28 (d, J=15,90 Hz, 1 H) 5,58 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,32 (d, J=5,87 Hz, 1 H) 7,69 (t, J=7,95 Hz, 1 H) 8,22 (d, J=7,09 Hz, 1 H) 8,55 (d, J=8,07 Hz, 1 H) 8,88 (d, J=5,62 Hz, 1 H).
Fremstilling av isokinolin-mellomprodukter for 6-F, 6-etyl, 6-isopropyl og 6-te/7-butyl-isokinolin P2<*>byggeblokker.
Generelt ble 6-fluor- og 6-alkyl-isokinoliner anvendt i de følgende forsøk fremstilt ved en Pomeranz-Fritsch syntese (Typisk prosedyre: Fremstilling av optisk aktiv 8,8-disubstituert 1,1-biisokinolin, K. Hirao, R. Tsuchiya, Y. Yano, H. Tsue, Heterocycles 42(1) 1996, 415-422) som beskrevet nedenfor. Produktene ble omdannet til 1-klor-derivatene via N-oksyd-mellomprodukter som beskrevet annet sted.
Generelt synteseskjema
Reagenser og reaksjonsbetingelser: (a) tilbakeløp i benzen, azeotrop fjerning av vann; (b) første trinn: etylklorformiat, trimetyl-fosfitt i THF, andre trinn: titantetraklorid i kloroform; (c) MCPBA i CH2C12; (d) POCl3i benzen
Eksempel 187: Fremstilling av Forbindelse 187
BOCNH-P3(I-terf-BuGly)-P2[(4Æ)-(6-fluor isokinolin-l-okso)-<5->prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 12% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa^) [metode C]: 3,81 (724).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 13 H) 1,22 (s, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (m, 1 H) 2,21 (m, 2 H) 2,61 (dd, 7=13,69, 6,60 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (d, 7=13,69 Hz, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,49 (m, 2 H) 5,11 (d, 7=10,03 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,61 Hz, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 5,86 (d, 7=4,40 Hz, 1 H) 7,31 (m, 2 H) 7,48 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 7,97 (d, 7=6,36 Hz, 1 H) 8,26 (d, 7=6,11 Hz, 1 H).
Eksempel 188: Fremstilling av Forbindelse 188
Alkyleringen beskrevet ovenfor ga 1-klorisokinolin som hovedprodukt: BOCNH-P3(I-te^BuGly)-P2[(4/?)-(l-ldorisokinolin-6-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,25'-Vinyl Acca)-CONHSC«2-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 40,2% utbytte. LC/MS Rt-min (MH^) [metode C]: 3,81 (718).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,25 (s, 11 H) 1,41 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,54 (dd, 7=12,96, 6,60 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,06 (dd, 7=11,98,2,69 Hz, 1 H) 4,20 (s, 1 H) 4,31 (d, 7=11,74 Hz, 1 H) 4,45 (dd, 7=9,78,7,58 Hz, 1 H)5,ll (dd, 7=10,27,1,71 Hz, 1 H)5,28 (dd, 7=17,36,1,47 Hz, 1 H) 5,36 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 7,35 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 7,40 (s, 1 H) 7,70 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,13 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,25 (d, 7=9,29 Hz, 1 H).
Eksempel 189: Fremstilling av Forbindelse 189
BOCNH-P3(Z,-tert-BuGly)-P2[(4/?)-(6-etylisokinolin-l-okso)-5'-prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-CONHSC«2-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 4,6 mg gult fast stoff ble oppnådd (4,2%).LC/MS rt-min (MH^) [metode B]: 2,70 (712).<J>H NMR (400 MHz, CD30D) 8 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,22 (m, 11 H) 1,28 (t, 7=7,91 Hz, 3 H) 1,41 (m, 1 H) 1,85 (m, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,60 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,80 (q, 7=7,66 Hz, 2 H) 2,93 (m, 1 H) 4,02 (d, 7=31,06 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,42 (m, 1 H) 4,54 (m, 1 H) 5,10 (d, 7=10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,84 (s, 1 H) 7,25 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 7,38 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 7,59 (s, 1 H) 7,90 (d, 7=6,24 Hz, 1 H) 8,09 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 190: Fremstilling av Forbindelse 190
BOCNH-P3(Z,-tert-BuGly)-P2 [(4Æ)-(6-isopropyl isokinolin-1 -okso)-5'-prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 69% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa^) [metode B]: 2,76 (749).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 13 H) 1,20 (m, 9 H) 1,31 (d, 7=6,85 Hz, 6 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,26 (m, 2 H) 2,62 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,07 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,52 (m, 2 H) 5,11 (d, 7=10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,84 (s, 1 H) 7,32 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 7,46 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 7,64 (s, 1 H) 7,90 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 8,13 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 191: Fremstilling av Forbindelse 191
BOCNH-P3(I-etrt-BuGly)-P2 [(4Æ)-(6-te^butyl-isokinolin-1 -okso)-5-prolin]-P1( 1R, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 81% utbytte. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode B]: 2,84 (740).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,18 (s, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,39 (s, 9 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,27 (m, 2 H) 2,63 (dd, 7=13,57, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,20 (s, 1 H) 4,52 (m, 2 H) 5,10 (d, 7=11,49 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,84 (s, 1 H) 7,36 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 7,66 (dd, 7=8,80, 1,22 Hz, 1 H) 7,78 (s, 1 H) 7,91 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,15 (d, 7=8,80 Hz, 1 H).
Fremstilling av 6-isopropoksyl- og 6-terf-butoksyl-isokinolin mellomprodukter: Noen 6-alkoksy-l-klor-isokinoliner ble fremstilt ved en direkte, ipso fortrengning av 6-fluor-l-klorisokinolin med de tilsvarende alkoksyd-metallioner så som kalium-tetr-butoksyd (53%) og natrium-isopropoksyd (54%). Generelt synteseskjema
6-fluor-l-klorisokinolinet ble underkastet en aromatisk nukleofil fortrengning med natrium-isopropoksyd og kalium-tetr-butoksyd i DMF, hvilket ga henholdsvis det tilsvarende 6-isopropoksyl (54%):<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-d) 8 ppm 1,43 (d, 7=6,11 Hz, 6 H) 4,76 (m, 7=6,11 Hz, 1 H) 7,08 (d, 7=2,45 Hz, 1 H) 7,29 (dd, 7=9,29, 2,45 Hz, 1 H) 7,50 (d, 7=5,62 Hz, 1 H) 8,18 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,24 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) og 6-tert-butoksyl-l-klor isokinoliner (55%):<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-d) 8 ppm 1,48 (s, 9 H) 7,31 (m, 2 H) 7,47 (d, J=5,62 Hz, 1 H) 8,18 (d, J=5,62 Hz, 1 H) 8,21 (d, J=9,78 Hz, 1 H) som hovedprodukt. Disse 6-alkoksyl-l-klor-isokinoliner ble alkylert med tripeptidet som beskrevet i Eksempel 184, hvilket ga de ønskede produkter vist nedenfor.
Eksempel 192: Fremstilling av Forbindelse 192
BOCNH-P3(I-ter^BuGly)-P2[(4Æ)-(6-isopropoksy isolrinolin-l-oksoVS-prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 59% utbytte. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode C]: 3,87 (742).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,99 (s, 11 H) 1,06 (m, 2 H) 1,21 (s, 9 H) 1,37 (d, 7=5,87 Hz, 6 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,61 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,04 (dd, 7=11,86, 3,30 Hz, 1 H) 4,21 (br. s, 1H) 4,49 (m, 2 H) 4,78 (h, 7=5,87 Hz, 1 H) 5,10 (dd, 7=10,39,1,35 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=16,87 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,79 (d, 7=11,25 Hz, 1 H) 7,07 (dd, 7=9,05,1,96 Hz, 1 H) 7,18 (d, 7=2,20 Hz, 1 H) 7,26 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 7,85 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 8,10 (d, 7=9,05 Hz, 1 H).
Eksempel 193: Fremstilling av Forbindelse 193
BOCNH-P3(Z,-etrt-BuGly)-P2 [(4Æ)-(6-tert-butoksy-isokinolin-1 -okso)-5'-prolin]-Pl(li?,2S Vinyl Acca)-CONHSC«2-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 39% utbytte. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode C]: 3,99 (756).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,03 (br s, 13 H) 1,19 (s, 9 H) 1,42 (m, 10 H) 1,86 (dd, 7=7,83, 5,62 Hz, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,60 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,04 (dd, 7=11,49, 2,93 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,49 (m, 2 H) 5,10 (d, 7=11,25 Hz, 1 H) 5,27 (d, 7=16,87 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 7,13 (dd, 7=8,80,1,47 Hz, 1 H) 7,25 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 7,33 (d, 7=2,20 Hz, 1 H) 7,87 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 8,10 (d, 7=9,05 Hz, 1 H).
Fremstilling av ftalazin P2<*>derivater:
Generelt gjennomgikk både 1-klorftalazin og 1,4-diklorftalazin alkylering greit, hvilket ga de ønskede produkter. Imidlertid er kommersielt tilgjengelig 1-klorftalazin og 1,4-diklorftalazin ofte forurenset med noen hydrolyserte materialer. En forhåndsbehandling med POCI3fulgt av alkylering umiddelbart etterpå ga mer konsistente resultater.
Generelt synteseskjema
Reaksjonsbetingelser: (a) POCI3i DCE; (b) Alkylering med tripeptid; (c) sodio-derivater av imidazol (R = CH), triazol (R = N) Eksempel 194: Fremstilling av Forbindelse 194
BOCNH-P3(X-tert-BuGly)-P2 [(4Æ)-(ftalazin-1 -okso)-5-prolin]-P 1( IR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 41% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa<+>) [metode B]: 2,07 (707).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,03 (m, 9 H) 1,06 (m, 4 H) 1,14 (s, 9 H) 1,20 (m, 1 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,24 (q, 7=8,80 Hz, 1 H) 2,38 (m, 1 H) 2,76 (dd, 7=14,18, 7,09 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,11 (m, 2 H) 4,62 (m, 1 H) 5,11 (dd, 7=10,27, 1,71 Hz, 1 H) 5,29 (dd, 7=17,12, 1,22 Hz, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 5,96 (s, 1 H) 8,26 (m, 2 H) 8,46 (m, 2 H) 9,84 (s, 1 H).
Eksempel 195: Fremstilling av Forbindelse 195
BOCNH-P3(L-tert-BuGly)-P2[(4Æ)-(4-klor ftalazin-l-okso)-S-prolin]-Pl(lÆ,2S' Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 23% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa<*>) [metode C]: 3,52 (742).<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,01 (s, 11 H) 1,06 (m, 2 H) 1,14 (s, 9 H) 1,22 (m, 1 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (m, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,35 (m, 7=10,27 Hz, 1 H) 2,70 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (d, 7=3,42 Hz, 1 H) 4,58 (m, 2 H) 5,11 (dd, 7=10,39,1,10 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 7,99 (m, 1 H) 8,07 (t, 7=7,70 Hz, 1 H) 8,26 (dd, 7=8,19, 2,32 Hz, 2 H).
Fremstilling av 4-(imidazo-l-yl)ftalazin og 4-(l,2,4-triazo-l-yl)ftalazin P2<*>derivater: Produktet, forbindelse 195 fra ovenfor, BOCNH-P3(I-tert-BuGly)-P2[(4Æ)-(4-klor ftalazin-l-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan, ble underkastet fortrengning med anionene av typiske azoler så som imidazol og triazol, hvilket ga 4-azol-substituerte ftalazin-derivater vist nedenfor:
Eksempel 196: Fremstilling av Forbindelse 196
Dette ble utført ved fortrengning av 4-klor-ftalazin (Forbindelse 195) med natriumsaltet av imidazol i DMF ved 55-65°C.
BOCNH-P3(X-etrt-BuGly)-P2 [(4Æ)-(4-(imidazo-1 -yl)ftalazin-1 -okso)-5-prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 23% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa<*>) [metode B]: 1,94 (773).<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,03 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,20 (m, 9 H) 1,24 (m, 1 H) 1,41 (m, 2 H) 1,88 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,23 (m, 1 H) 2,41 (m, 1 H) 2,75 (m,
7=14,92 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,14 (m, 2 H) 4,60 (dd, 7=10,15, 6,97 Hz, 2 H) 5,12 (dd, 7=10,27,1,47 Hz, 1 H) 5,29 (dd, 7=17,24, 1,35 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,85 (s, 1 H) 7,94 (m, 1 H) 8,10 (m, 2 H) 8,43 (m, 1 H) 9,17 (s, 1 H) 9,46 (s, 1 H).
Under fortrengningsreaksjonen ble små mengder av de-BOC-biprodukt (Forbindelse 197) også isolert:
NH2-P3(I-etrt-BuGly)-P2 [(4Æ)-(4-(imidazo-1 -yl)ftalazin-1 -okso)-S-prolin]-P 1( IR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 17% utbytte. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode B]: 1,22 (651).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,16 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (dd, 7=9,41, 5,50 Hz, 1 H) 1,89 (m, 1 H) 2,26 (q, 7=8,97 Hz, 1 H) 2,43 (m, 1 H) 2,78 (dd, 7=14,06, 7,21 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,74 (m, 1 H) 4,11 (s, 1 H) 4,22 (dd, 7=12,23, 3,91 Hz, 1 H) 4,47 (m, 2 H) 4,71 (dd, 7=10,27, 7,09 Hz, 1 H) 5,12 (m, 1 H) 5,29 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,71 (m, 1 H) 6,13 (t, 7=3,67 Hz, 1 H) 7,87 (s, 1 H) 7,97 (m, 1 H) 8,14 (m, 3 H) 8,41 (m, 1 H) 9,47 (s, 1 H).
Eksempel 198: Fremstilling av Forbindelse 198
Dette ble utført ved fortrengning av 4-klor-ftalazin (Forbindelse 195) med natriumsaltet av 1,2,4-triazol i DMF ved 55-65°C.
BOCNH-P3(I-tert-BuGly)-P2[( 4R)-( 4-(l ,2,4-triazo-1 -yl)ftalazin-1 -okso)-S-prolin]-P1( 1R, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 62% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa^ [metode C]: 3,35 (774).<J>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,97 (s, 9 H) 1,01 (m, 2 H) 1,10 (s, 9 H) 1,16 (m, 1 H) 1,37 (m, 2 H) 1,82 (m, 1 H) 2,18 (d, 7=8,55 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,69 (dd, 7=13,58, 6,87 Hz, 1 H) 2,88 (br s, 1 H) 4,06 (d, 7=11,60 Hz, 1 H) 4,13 (s, 1 H) 4,53 (m, 7=9,16 Hz, 1 H) 4,61 (d, 7=11,90 Hz, 1 H) 5,06 (d, 7=10,07 Hz, 1 H) 5,23 (d, 7=17,40 Hz, 1 H) 5,68 (m, 1 H) 5,98 (s, 1 H) 7,97 (m, 2 H) 8,30 (m, 7=11,90 Hz, 2 H) 8,44 (d, 7=7,63 Hz, 1 H) 9,14 (s, 1 H).
Fremstilling av 4- hydroksy- og 4- alkoksy- ftalazin P2<*>derivater
Reaksjonsbetingelser: (a) natriumalkoksyder så som metoksyd, etoksyd og isopropoksyd
Eksempel 199: Fremstilling av Forbindelse 199
4-klor-ftalazin (Eksempel 195) ble oppløst i tørr isopropylalkohol ved romtemperatur og 1,0 ekv av natrium-isoproksyd ble tilsatt, og den resulterende suspensjon ble bragt til tilbakeløp. Det ønskede produkt, 4,5 mg gult fast stoff ble oppnådd (20,0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,68 (743) [metode B].<J>H NMR (400
MHz, CD30D) 8 ppm 1,02 (m, 11 H) 1,20 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,49 (d, J=6 Hz, 6 H) 1,87 (dd, 7=7,95, 5,50 Hz, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,23 (m, 1 H) 2,66 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (q, 7=7,09 Hz, 1 H) 4,19 (s, 1 H) 4,55 (m, 2 H) 5,11 (d, 7=10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,61 Hz, 1 H) 5,48 (m, 1 H) 5,70 (d, 7=10,03 Hz, 1 H) 5,81 (m, 1 H) 7,90 (m,2H) 8,16 (m, 2 H).
Eksempel 200: Fremstilling av Forbindelse 200
Likeledes ble 4-etoksy-derivatet fremstilt: BOCNH-P3(Z,-/-BuGly)-P2[(4R)-(4-etoksyfralazin-l-okso)-S-prolin]-Pl(lÆ,2S VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan.
4,0 mg gult fast stoff ble oppnådd (16,0%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,52 (729) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD30D) 8 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,16 (s, 9 H) 1,24 (m, 2 H) 1,43 (dd, 7=9,78, 5,14 Hz, 1 H) 1,53 (t, 7=6,97 Hz, 3 H) 1,87 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,22 (q, 7=8,97 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,67 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 4,19 (s, 1 H) 4,56 (m, 4 H) 5,10 (m, 1 H) 5,30 (m, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 7,94 (m, 2 H) 8,16 (d, 7=7,83 Hz, 1 H) 8,21 (m, 1 H).
Eksempel 201: Fremstilling av Forbindelse 201
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(4-metoksyftalazin-l-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,2,S VinylAcca)-CONHS02cyklopropan ble fremstilt i 30,2% utbytte. LC/MS rt-min (MH<+>): 2,42 (715) [metode B]<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,96 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,20 (m, 11 H) 1,43 (dd, 7=9,29, 5,38 Hz, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,22 (q, 7=8,80 Hz, 1 H) 2,31 (m, 1 H) 2,66 (d, 7=8,07 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (dd, 7=11,98, 3,18 Hz, 1 H) 4,19 (d, 7=3,42 Hz, 4 H) 4,54 (m, 2 H) 5,11 (m,
1 H) 5,28 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,83 (s, 1 H) 7,95 (m, 2 H) 8,19 (m, 2
H).
Eksempel 202: Fremstilling av Forbindelse 202
Et forsøk utført på å fortrenge BOCNH-P3(L-tert-BuGly)-P2[(4Æ)-(4-klor-ftalazin-1 -okso)-5'-prolin]-P 1 ( IR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan (Eksempel 195) med natriumsaltet av tetrazol ga for det meste 4-hydroksy, hydrolysert materiale. BOCNH-P3(I^BuGly)-P2[(4R)-(4-hydroksyftalazin-l-okso)-S-prolin]Pl(l/?,25 VinylAcca)-CONHSC«2Cyklopropan ble oppnådd (44,2%) som et blekt kremaktig fast stoff. LC/MS rt-min (MH<+>): 2,18 (701) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, CD30D) 8 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,23 (m, 11 H) 1,42 (dd, 7=9,29, 5,38 Hz, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (m, 2 H) 2,63 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,00 (s, 1 H) 4,20 (s, 1 H) 4,50 (m, 2 H) 5,11 (dd, 7=10,27,1,47 Hz, 1 H) 5,29 (d, 7=16,87 Hz, 1 H) 5,59 (s, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 7,86 (dd, 7=5,75, 3,30 Hz, 2 H) 8,01 (dd, 7=5,87, 3,42 Hz, 1 H) 8,29 (dd, 7=5,87, 3,42 Hz, 1 H).
Fremstilling av 5,6-disubstituert isokinolin P2<*>-derivater via en alkylerings-protokoll.
Generelt synteseskjema
Reaksjonsbetingelser: (a) LDA i THF; (b) Alkyl-disulfid så som (n-PrS)2; (c) Natriumalkoksyd så som MeONa; (d) Tiofen-2-karboksaldehyd; (e) Mn02i benzen Eksempel 203: Fremstilling av l-klor-5-propyltio-6-fluor isokinolin:
Til en avkjølt (-78°C) løsning av l-klor-6-fluor-isokinolin (59 mg, 0,32 mmol) i 2 ml THF ble satt LDA-løsning i cykloheksan (1,5 Molar, 0,23 ml, 0,35 mmol). Den oransje løsningen ble omrørt i 2 timer før den ble behandlet med n-propyl-disulfid (60^L, rent materiale, overskudd). Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur over 30 min. Den ble behandlet med en løsning av halvmettet NH4CI, de organiske residuer ble ekstrahert med etylacetat. LC-MS analyse viste ca. 50% omdannelse til det ønskede produkt sammen med hovedsakelig utgangsmateriale. Det ønskede produkt ble renset med en kort kolonne (4 cm x 2 cm, silikagel type-H) eluert med 5% eter i heksaner, 29 mg (36% utbytte) av det ønskede produkt ble oppnådd. LC/MS Rt-min (MH<*>) [metode C]: 3,79 (256).<!>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 5 ppm 0,96 (t, 7=7,34 Hz, 3 H) 1,52 (m, 2 H) 2,86 (m, 2 H) 7,45 (dd, 7=9,29, 8,56 Hz, 1 H) 8,34 (d, 7=0,73 Hz, 2 H) 8,37 (m, 1 H). Denne forbindelsen ble alkylert med tripeptidet ved samme metode som beskrevet i Eksempel 184, hvilket ga den følgende forbindelse: Eksempel 204: Fremstilling av Forbindelse 204 BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-( l-klor-5-propyltio-isokinolin-6-okso)-S-prolin]-Pl( lR, 2S VinylAcca)-CONHS02Cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle prosedyre ble 4,6 mg gult fast stoff oppnådd (3,2%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,73 (792) (metode B).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 0,93 (t, 7=7,34 Hz, 3 H) 0,97 (s, 9 H) 1,08 (m, 2 H) 1,24 (m, 11 H) 1,43 (m, 3 H) 1,86 (m, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,56 (m, 1 H) 2,78 (q, 7=7,09 Hz, 2 H) 2,92 (m, 1 H) 4,01 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,29 (s, 1 H) 4,59 (d, 7=6,85 Hz, 1 H) 5,11 (d, 7=10,76 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,49 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 7,66 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 8,18 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 8,41 (m, 2 H).
Eksempel 205: Fremstilling av 5-propyltio-6-etoksy-isokinolin P2<*->derivater.
Den følgende prosedyre er like anvendbar for andre 5-alkyltio-6-alkoksy-isokinoliner Ved endring av reagensene vist her. Til en løsning av l-klor-6-fluor-isokinolin (88 mg, 0,48 mmol) i 2,0 ml THF under nitrogen ved -78°C ble satt LDA (1,5 Molar i cykloheksan, 0,42 ml, 0,63 mmol) hvilket dannet en mørk brunaktig løsning. Rent n-propyl-disulfid (85^L, overskudd) ble innført hvoretter det ble omrørt ved -78°C i 30 min. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur over en periode på 30 min. Den ble behandlet med en løsning av halvmettet NH4CI, og de organiske residuer ble ekstrahert med etylacetat. De organiske lag ble samlet og tørket under vakuum til 50 mikron (Hg). Råproduktet ble tatt opp i 2 ml THF, avkjølt til -78°C, og tilsatt overskudd av kalium-etoksyd (60 mg). Isokinolin-mellomprodukt ble til slutt renset med en silikagel-kolonne (type-H, Merck) eluert med en blanding av eter-heksaner; 32,2 mg (24%) av den rene forbindelse ble oppnådd. LC-MS viste 1-klor-5-propyltio-6-etoksyl-isokinolin ved Rt-min (MH<+>) [metode C]: 3,77 (282).<!>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 5 ppm 0,94 (t, 7=7,34 Hz, 3 H) 1,46 (m, 2 H) 1,55 (t, 7=6,97 Hz, 3 H) 2,83 (t, 7=7,21 Hz, 2 H) 4,32 (q, 7=6,85 Hz, 2 H) 7,36 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 8,22 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 8,32 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 8,35 (d, 7=6,11 Hz, 1 H). Etter den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre (Eksempel 184) ble dette l-klor-5-propyltio-6-etoksy-isokinolin alkylert med tripeptidet (forbindelse 184), hvilket ga 40,7 mg (44,8%) av det ønskede produkt vist nedenfor.
Eksempel 206: Fremstilling av Forbindelse 206
BOCNH-P3(Z,-/-BuGly)-P2[(4R)-(6-etoksy-5-propyltio-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-Fl( lR, 2S VinylAcca)-CONHS02cyklopropan. LC/MS rt-min ( Mit) : 2,93 (803)
[metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,93 (t, 7=7,34 Hz, 3 H) 1,01 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,21 (m, 11 H) 1,41 (m, 3 H) 1,48 (t, 7=6,85 Hz, 3 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,60 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,81 (q, 7=6,97 Hz, 2 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (m, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,27 (q, 7=7,09 Hz, 2 H) 4,43 (d, 7=11,74 Hz, 1 H) 4,52 (m, 1 H) 5,10 (d, 7=10,76 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 7,30 (d, 7=9,05 Hz, 1 H) 7,92 (d, 7=6,36 Hz, 1 H) 7,97 (m, 1 H) 8,22 (d, 7=9,05 Hz, 1 H).
Eksempel 207: Fremstilling av Forbindelse 207
Likeledes ble samme prosedyre anvendt for fremstilling av BOCNH-P3(£-?-BuGly)-P2[(4R)-(6-metoksy-5-metyltio-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25'VinylAcca)-CONHS02cyklopropan.
Til en løsning av 100 mg l-klor-6-fluor-isokinolin (0,55 mmol) i 2 ml tørr THF ved
-78°C ble satt LDA i THF (1,3 ekv). Mørkebrun løsning ble dannet, deretter ble disulfid tilsatt og fargen på løsningen ble endret til grønnaktig, deretter lysebrun. Reaksjonen ble stanset med 2 ml vann og 2 ml NH4CI, blandingen ble ekstrahert med etylacetat og tørket over natriumsulfat. Løsningsmidlet ble avdampet under vakuum og det resulterende residuet ble anvendt rått. LC/MS rt-min (MH<+>): 2,23 (228)
[metode B]. Det rå materialet ble gjenoppløst i 2 ml tørr THF ved -78°C og 1,3 ekv. KOMe ble tilsatt og deretter fikk reaksjonsblandingen oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt natten over. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med etylacetat og vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat. 104 mg ble oppnådd (79%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,04 (240) [metode B]. Mellomproduktet, l-klor-5-metyltio-6-metoksy- isokinolin ble underkastet tripeptid alkyleringsprotokollen beskrevet tidligere. Ved å følge den generelle prosedyre ble 70,0 mg gult fast stoff oppnådd (42,7%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,65 (760) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 5 ppm 0,94 (m, 11 H) 1,17 (s, 9 H) 1,26 (m, 2 H) 1,39 (m, 1 H) 1,83 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,01 (m, 2 H) 2,23 (s, 3 H) 2,45 (m, 1 H) 2,79 (m, 1 H) 3,94 (s, 3 H) 3,97 (d, 7=3,91 Hz, 1 H) 4,15 (s, 1 H) 4,25 (d, 7=11,74 Hz, 1 H) 4,36 (dd, 7=9,66, 7,21 Hz, 1 H) 4,99 (d, 7=10,27 Hz, 1 H) 5,12 (d, 7=16,87 Hz, 1 H) 5,69 (m, 1 H) 5,74 (s, 1 H) 7,08 (d, 7=9,05 Hz, 1 H) 7,83 (m, 2 H) 8,06 (d, 7=9,05 Hz, 1
H).
Eksempel 208: Fremstilling av l-klor-6-metoksy-isokinolin-5-yl-tiofen-2-yl-metanon
Ved å følge samme LDA deprotoneringsprotokoll (fremstilling av Eksempel 203) for 1- klor-6-fluor-isokinolin beskrevet tidligere, ble det innledende anion behandlet med 2- tiofenkarboksaldehyd istedet, hvilket ga l-klor-6-lfuor-isokinolin-5-yl-tiofen-2-yl-metanol. Materialet ble oksydert til l-klor-6-fluor-isokinolin-5-yl-tiofen-2-yl-metanon ved anvendelse av Mn02i benzen i 49,6% totalt utbytte etter kromatografisk rensning. LC/MS rt-min (MH<+>) [metode C]: 2,98 (292).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 7,12 (dd, 7=4,89, 3,91 Hz, 1 H) 7,40 (m, 1 H) 7,53 (m, 1 H) 7,56 (dd, 7=5,87, 0,73 Hz, 1 H) 7,82 (dd, 7=5,01,1,10 Hz, 1 H) 8,27 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,54 (ddd, 7=9,29, 5,38, 0,73 Hz, 1 H). Ipso nukleofil aromatisk fortrengning av fluoratom ble oppnådd i en løsning av overskudd av kaliummetoksyd hvilket ga hovedsakelig l-klor-6-metoksy-isokinolin-5-yl-tiofen-2-yl-metanon sammen med 25-33% av l,6-dimetoksy-isokinolin-5-yl-tiofen-2-yl-metanon. Det rå materialet (77 mg) ble anvendt i alkyleringstrinnet med tripeptidet uten ytterligere rensning.
Eksempel 209: Fremstilling av Forbindelse 209
Ved å følge den generelle prosedyre med tripeptid-alkylering (Eksempel 184) ble 35,3mgBOCNH-P3(I-r-BuGly)-P2[(4R)-6-metoksy-5-(tiofen-2-karbonyl)-isokinolin-1 -okso)-S-prolin]-P 1 ( IR , 2S VinylAcca)-CONHSC«2Cyklopropan oppnådd som blekt fast stoff (26,5%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,54 (825) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, CD30D) 5 ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,22 (m, 2 H) 1,26 (s, 9 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (dd, 7=7,95,5,50 Hz, 1 H) 2,28 (m, 2 H) 2,62 (dd, 7=13,82, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,90 (s, 3 H) 4,07 (dd, 7=11,62, 3,06 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,43 (m, 1 H) 4,55 (dd, 7=9,78, 7,34 Hz, 1 H) 5,09 (m, 1 H) 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,86 (s, 1 H) 6,93 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 7,11 (m, 1 H) 7,32 (dd, 7=3,91, 0,98 Hz, 1 H) 7,46 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 7,86 (t, 7=6,72 Hz, 1 H) 7,91 (dd, 7=4,89, 1,22 Hz, 1 H) 8,39 (d, 7=9,29 Hz, 1 H).
Fremstilling av P2<*>med kanelsyrederivater. Den generelle prosedyre vist nedenfor er beskrevet i stor utstrekning annet sted.
Eksempel 210: Fremstilling av Forbindelse 210
10,0 g meta-tolyl-akrylsyre (61,7 mmol) ble suspendert i 50 ml benzen , 12,6 ml DPPA (0,95 ekv) ble tilsatt fulgt av 10,3 ml trietylamin (1,2 ekv). Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Flyktig materiale ble fjernet under vakuum og meta-tolyl-akryloyl-azidet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga 11,5 g ren forbindelse (kvantitativt). Dette materialet, i 100 ml difenylmetan, ble
innført dråpevis i 100 ml difenylmetan tidligere oppvarmet til 200°C over en periode på en time. Den resulterende løsningen ble holdt ved denne temperatur i ytterligere 4 timer og deretter avkjølt til romtemperatur. Hvitt presipitat ble dannet; det ble filtrert
fra. Det faste stoffet ble vasket med heksaner tre ganger og tørket. Filtratet ble
fortynnet med 200 ml heksaner, løsningen fikk stå natten over for å tillate separering av den andre porsjon. Materialene ble samlet, hvilket ga 4,2 g 6-metyl-isokinolin-l-ol (50%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1,31 (160) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 2,49 (s, 3 H) 6,61 (d, 7=7,32 Hz, 1 H) 7,13 (d, 7=7,02 Hz, 1 H) 7,36 (d, 7=8,24 Hz, 1 H) 7,45 (s, 1 H) 8,18 (d, 7=8,24 Hz, 1 H). Materialet ble suspendert i 15 ml
POCI3og bragt til tilbakeløp i 3 timer. Etter fjerning av POCI3i vakuum ble residuet fordelt mellom EtOAc (IL) og kald vandig NaOH (dannet fra 1,0N 200 ml NaOH og 20 ml 10,0 N NaOH) og omrørt i 15 min. Det organiske laget ble vasket med vann (2 x 200 ml), saltvann (200 ml), tørket (MgS04) og konsentrert i vakuum hvilket ga 1-klor-6-metyl-isokinolin (67,4%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1,92 (178) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 5 ppm 2,53 (s, 3 H) 7,47 (d, 7=6,11 Hz, 2 H) 7,56 (s, 1 H) 8,18 (m, 2 H). Den endelige alkylering av l-klor-6-metyl-isokinolin med tripeptidet ble utført ved anvendelse av protokollen beskrevet tidligere (Eksempel 184).
BOCNH-P3(I-tert-BuGly)-P2[(4/?)-(6-metylisokinolin-l-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,25 Vinyl Acca)-CONHS02-cyklopropan: materialet ble oppnådd som et hvitt skum i 18% utbytte. LC/MS Rt-min (MNa^ [metode B]: 2,64 (720).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,05 (m, 13 H) 1,23 (m, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=7,95, 5,50 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,49 (s, 3 H) 2,61 (dd, 7=13,82, 6,48 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (dd, 7=11,86, 3,30 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=11,49 Hz, 1 H) 4,52 (m, 1 H) 5,10 (d, 7=11,49 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,83 (s, 1 H) 7,24 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 7,35 (d, 7=8,07 Hz, 1 H) 7,58 (s, 1 H) 7,89 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,07 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 211: Fremstilling av Forbindelse 211
Ved å følge den generelle prosedyre beskrevet tidligere ble BOCNH-P3(Z,-r-BuGly)-P2[(4R)-( 1,3-dioksa-7-aza-cyklopenta[a]naftalen-6-ol)-S-prolin]-Pl ( 1R, 2S-VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan, 51,0 mg oppnådd som et blekt fast stoff (64,9%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,57 (728) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD30D) 5 ppm 0,99 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,18 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07,
5,62 Hz, 1 H) 2,23 (m, 2 H) 2,59 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,04 (dd, 7=11,74, 2,20 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=11,74 Hz, 1 H) 4,51 (m, 1 H) 5,10 (d, 7=10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 6,18 (s, 2 H) 7,13 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 7,19 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 7,81 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 7,85 (d, 7=6,11 Hz, 1 H).
Fremstilling av 5,6,7-trisubstituerte isokinolin P2<*->derivater:
Reaksjonsbetingelser: (a) LDA i THF; (b) N-fluorbenzensulfonimid (NFSI) for R = F eller dimetylsulfid (MeS)2, for R = SMe.
5,6-metylendioksy-l-klorisokinolinet fremstilt ovenfor ble deprotonert direkte i nærvær av sterk base så som LDA for å gi det tilsvarende 7-anion uten å innvirke på l-klor-funksjonaliteten. 7-anionet ble behandlet med elektrofiler så som NFSI (N-fluorbenzensulfonimid) og dimetylsulfid for å produsere det tilsvarende 7-substituerte isokinolin-irngsystem.
Eksempel 212: Fremstilling av Forbindelse 212
Trinn 1:
Fremstilling av 5,6-metylendioksy-7-fluor-l-klor-isokinolin.Til en løsning av 5,6-metylendioksy-l-klor-isokinolin (126 mg, 0,61 mmol) i 4 ml THF under nitrogen ved -78 °C ble satt LDA-løsning i cykloheksan (1,5 Molar, 0,65 ml, 0,98 mmol). Den lyse brunaktige løsning ble omrørt i 15 min før den ble behandlet med N-fluorbenzensulfonimid (NFSI, 0,3 g, 1,5 ekvivalenter). TLC analyse viste dannelse av en ny flekk, i tillegg til det uendrede utgangsmateriale. Vandig opparbeiding fulgt av ekstraksjon med etylacetat ga et oljeaktig råprodukt som ble renset ved preparativ HPLC, hvilket ga 52 mg (38%). LC/MS rt-min ( Mit) [metode C]: 3,09 (226).<!>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 5 ppm 6,33 (s, 2 H) 7,52 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 7,71 (d, 7=10,51 Hz, 1 H) 8,16 (d, 7=5,87 Hz, 1 H). Trinn 2: Alkyleringen av 5,6-metylendioksy-7-fluor-l-klor isokinolin med tripeptidet ble utført som beskrevet tidligere (Eksempel 184) for å gi hovedproduktet som et resultat av fluor-fortrengning.
BOCNH-P3(L-/-BuGly)-P2 [(4R)-(6-klor-1,3-dioksa-7-aza-cyklopenta[a]naftalen-4-okso)-S-prolin]-Pl ( IR, 2S VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle prosedyre ble 24,3 mg gult fast stoff oppnådd (24,3%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,54 (763) [metode B],<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,20 (m, 2 H) 1,29 (s, 9 H) 1,42 (dd, 7=9,41, 5,26 Hz, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,54 (dd, 7=13,57, 6,48 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,04 (dd, 7=12,10,2,81 Hz, 1 H) 4,20 (d, 7=7,34 Hz, 1 H) 4,33 (d, 7=12,23 Hz, 1 H) 4,47 (dd, 7=10,52, 6,85 Hz, 1 H) 5,10 (dd, 7=10,39, 1,59 Hz, 1 H) 5.28 (dd, 7=17,12,1,22 Hz, 1 H) 5,46 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 6,29 (m, 2 H) 7,40 (s, 1 H) 7,56 (m, 1 H) 8,01 (d, 7=5,62 Hz, 1 H).
Eksempel 213: Fremstilling av Forbindelse 213
Til en løsning av 5,6-metylendioksy-l-klor-isokinolin (84 mg, 0,41 mmol) i 4 ml THF under nitrogen ved -78°C ble satt LDA-løsning i cykloheksan (1,5 Molar, 0,60 ml, 0,9 mmol). Den lyse brunaktige løsning ble omrørt i 15 min ved -78°C før den ble behandlet med metyl-disulfid (50 av rent reagens, 1,4 ekvivalenter). TLC-analyse viste dannelse av en ny flekk, i tillegg til det uendrede utgangsmateriale. Vandig opparbeiding fulgt av ekstraksjoner med etylacetat ga et oljeaktig råprodukt som ble renset ved preparativ HPLC, hvilket ga 51 mg (49%). LC/MS rt-min (MH<+>)
[metode C]: 3,39 (254).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 2,64 (s, 3 H) 6.29 (s, 2 H) 7,49 (d, 7=4,89 Hz, 1 H) 7,71 (s, 1 H) 8,11 (d, 7=5,87 Hz, 1 H). Alkylering av 5,6-metylendioksy-7-metyltio-l-klor-isokinolin med tripeptidet ble utført som beskrevet tidligere (Eksempel 184) for å gi det ønskede produkt vist nedenfor:
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(4-metyltio-1,3-dioksa-7-aza-cyklopenta[a]naftalen-6-yloksy)-S-prolin]-Pl(l/?,25,VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan
Ved å følge den generelle prosedyre ble 59,6 mg gult fast stoff oppnådd (42,2%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,70 (774) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 5 ppm 1,02 (m, 11 H) 1,16 (s, 9 H) 1,32 (s, 2 H) 1,45 (m, 1 H) 1,94 (m, 1 H) 2,12 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 2,56 (s, 3 H) 2,62 (m, 2 H) 2,90 (d, 7=4,40 Hz, 1 H) 4,15 (d,
7=7,83 Hz, 2 H) 4,48 (d, 7=12,47 Hz, 1 H) 4,62 (t, 7=7,83 Hz, 1 H) 5,13 (d, 7=10,52 Hz, 1 H) 5,26 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (d, 7=16,38 Hz, 1 H) 5,95 (s, 1 H) 6,28 (s, 2 H) 7,41 (s, 1 H) 7,59 (s, 1 H) 7,85 (d, 7=6,11 Hz, 1 H).
Fremstilling av 3, 4- disubstituerte isokinolin P2<*>derivater
Eksempel 215: Fremstilling av Forbindelse 215
BOCNH-P3(/^BuGly)-P2[( lR)-(23-^ yloksy)-S-prolin]-Pl(lÆ,2S' VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan, vist nedenfor ble fremstilt som vist i det følgende skjema:
Generelt synteseskjema for isokinolin-komponent forbindelse 214
Bemerkninger:
Syntesen av de nye 1 -fluor P2<*>ble utført vellykket ved teknologiene referert nedenfor: (1) Rigby, James H.; Holsworth, Daniel D.; James, Kelly. Vinyl Isocyanates I Synthesis. [4 + 2] Cycloaddition Reactions With Benzyne Addends. Journal OfOrganic Chemistry (1989), 54(17), 4019-20 (2) Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Heterocycles, 1992, 34 (8), 1507-1510 Eksempel 214: Fremstilling av Forbindelse 214, 5-klor-2,3-dihydro-l/7-4-aza-cyklopenta[a]naftalen og Forbindelse 215 i Eksempel 215
2,3-dihydro-l//-4-aza-cyklopenta[a]naftalen-5-ol ble fremstilt i henhold til metoden ifølge Rigby beskrevet i (referanse 1) angitt ovenfor. Ved anvendelse av POCI3som beskrevet annet sted, ble Forbindelse 214 syntetisert i 59,8% (430 mg). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,29 (204) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) ppm 2,28 (m, 2 H) 3,19 (q, 7=7,74 Hz, 4 H) 7,58 (m, 1 H) 7,71 (m, 2 H) 8,32 (d, 7=8,56 Hz, 1 H). Kloridet er tilstrekkelig reaktivt til å bli alkylert med tripeptidet i henhold til metoden ifølge Eksempel 184, hvilket ga det ønskede produkt Forbindelse 215. Imidlertid kunne det totale utbyttet dobles hvis kloridet ble byttet til fluoridet ved metoden ifølge Uchibori beskrevet i (referanse 2). Således ble 17,0 mg av Forbindelse 215 isolert som et blekgult, fast stoff (23,6%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,80 (724) [metode B].<!>H NMR (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,03 (s, 9 H) 1,09 (m, 2 H) 1,24 (m, 11 H) 1,44 (dd, 7=8,24,5,49 Hz, 1 H) 1,88 (dd, 7=7,93,5,49 Hz, 1 H) 2,25 (m, 4 H) 2,63 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H) 2,94 (m, 1 H) 3,05 (m, 2 H) 3,10 (m, 2 H) 4,08 (dd, 7=11,60,2,75 Hz, 1 H) 4,24 (d, 7=20,45 Hz, 1 H) 4,45 (d, 7=11,90 Hz,
1 H) 4,54 (dd, 7=9,46, 7,63 Hz, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,30 (d, 7=17,09 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 5,87 (s, 1 H) 7,44 (t, 7=7,02 Hz, 1 H) 7,69 (m, 2 H) 8,18 (d, 7=8,24 Hz, 1
H).
Fremstilling av 3,4-dihydrofuranyl- og furanyl-isokinolin P2<*>komponenter, Eksempler 217 og 218
Eksempel 217: Fremstilling av Forbindelse 217, 5-klor-2,3-dihydro-l-oksa-4-aza-cyklopenta [ a] naftalen og Forbindelse 218, 5-klor-l-oksa-4-aza-cyklopenta[a] naftalen.
Denne syntese anvendte teknologiene beskrevet, til dels, i de følgende referanser: (1) Hojo, Masaru; Masuda, Ryoichi; Sakaguchi, Syuhei; Takagawa, Makoto, Synthesis (1986), (12), 1016-17 (2) Rigby, James H.; Holsworth, Daniel D.; James, Kelly. Vinyl Isocyanates
In Synthesis. [4 + 2] Cykloaddition Reactions With Benzyne Addends. Journal OfOrganic Chemistry (1989), 54(17), 4019-20
(3) Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, FL; Heterocycles, 1992, 34 (8), 1507-1510
Både 2,3-dihydro-l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen-5-ol og l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen-5-ol ble produsert sammen når metodene (referanser 1 og 2) referert ovenfor ble fulgt. Omdannelse av paret til deres klorderivater ble oppnådd ved POCI3som vanlig: De rå hydroksyprodukter (ca. 2 g, blekgul olje) ble behandlet med 15 ml POCI3og blandingen ble bragt til tilbakeløp i 3 timer. Etter fjerning av POCI3i vakuum ble residuet omrørt med EtOAc (IL) og kald vandig NaOH (220 ml, 1,0 N) i 15 min. Det organiske laget ble separert, vasket med vann (2 x 200 ml), saltvann (200 ml) og tørket over MgS04og konsentrert i vakuum, hvilket ga 300 mg av Eksempel 217, 5-klor-2,3-dihydro-l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen (13,2%) og 100 mg av Eksempel 218, 5-klor-l-oksa-4-aza cyklopenta[a]naftalen (4,4%) som lysebrune faste stoffer etter silikagel kromatografisk separering. Forbindelse 217: LC/MS rt-min (MH<+>): 2,05 (206) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 3,46 (t, 7=9,05 Hz, 2 H) 4,82 (t, 7=9,17 Hz, 2 H) 7,58 (m, 1 H) 7,66 (m, 1 H) 7,85 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,21 (d, 7=8,56 Hz, 1 H). Forbindelse 218: LC/MS rt-min (MH<+>): 2,16 (204) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) ppm 7,15 (d, 7=2,20 Hz, 1 H) 7,70 (m, 1 H) 7,89 (m, 2 H) 8,27 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,44 (d, 7=8,80 Hz, 1 H).
Fremstilling av 5-fluor-2,3-dihydro-l-oksa-4-aza-cyklopenta [ a] naftalen og endelige P2<*>koblingsprodukter.
Klorid/fluoird-utveksling ble oppnådd ved metoden (referanse 3) angitt ovenfor. Således ble 90 mg 5-klor-2,3-dihydro-l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen (Eksempel 217) suspendert i 1,5 ml BU4PHF2og ble bestrålet under mikrobølger (Smith reaktor) til ca. 120°C i 2 timer. Etter vandig opparbeiding og kolonne-rensning, ble 22 mg fluorid-produkt oppnådd (26,9%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1,91 (190) [metode B]. Furan-derivatet (Eksempel 218), 5-klor-l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen var tilstrekkelig reaktivt til å bli alkylert med tripeptidet direkte uten fluorid-aktivering.
Eksempel 219: Fremstilling av Forbindelse 219
BOCNH-P3(I-^BuGly)-P2[(4R)-(23-a^hydro-l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen-5-ytoksy)-S-porlin]-Pl(lÆ,2S VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan. Ved å følge den generelle alkyleringsprosedyre ble 22,0 mg gult fast stoff oppnådd (26,3%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,65 (726) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD30D) 5 ppm 0,99 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,20 (m, 11 H) 1,40 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,21 (dd, 7=17,48, 8,93 Hz, 2 H) 2,60 (dd, 7=13,45, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,34 (m, 2 H) 4,04 (dd, 7=11,74,3,18 Hz, 1 H) 4,24 (s, 1 H) 4,41 (d, 7=11,49 Hz, 1 H) 4,51 (m, 1 H) 4,74 (t, 7=9,05 Hz, 2 H) 5,11 (d, 7=10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,78 (s, 1 H) 7,43 (m, 1 H) 7,65 (t, 7=7,46 Hz, 1 H) 7,74 (d, 7=8,31 Hz, 1H) 8,12 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 220: Fremstilling av Forbindelse 220
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(l-oksa-4-aza-cyklopenta[a]naftalen-5-yloksy)-S-prolin]-Pl(l.Æ,2S' VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan. Ved å følge den generelle alkyleringsprosedyre ble 13,0 mg gult fast stoff oppnådd (20%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,70 (724) [metode B].<J>H NMR (500 MHz, CD30D) 5 ppm 1,01 (S,, 9 H) 1,09 (m, 2 H) 1,22 (s, 9 H) 1,27 (m, 2 H) 1,46 (m, 1 H) 1,89 (dd, 7=7,78, 5,65 Hz, 1 H) 2,24 (d, 7=8,55 Hz, 1 H) 2,33 (t, 7=9,92 Hz, 1 H) 2,68 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H) 2,95 (m, 1 H) 4,14 (m, 1 H) 4,26 (s, 1 H) 4,50 (d, 7=11,90 Hz, 1 H) 4,57 (d, 7=17,09 Hz, 1 H) 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H) 5,30 (d, 7=17,40 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 6,97 (d, 7=2,14 Hz, 1 H) 7,51 (t, 7=7,32 Hz, 1 H) 7,81 (t, 7=7,48 Hz, 1 H) 7,92 (s, 1 H) 8,13 (d, 7=7,94 Hz, 1 H) 8,28 (d, 7=8,24 Hz, 1 H).
Fremstilling av 3-halogen- og 3-heteroaryl-4-alkoksy- og 4-hydroksy-isokinolin P2<*->derivater
Reaksjonsbetingelser: (1) MeOK i DMPU; (2) NBS i dikloretan; (3) MCPBA i CH2C12; (4) POCI3i dikloretan; (5) BBr3i CH2C12; (6) SEM-klorid og Hunig's Base i CH2CI2
4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222a) ble fremstilt fra 4-brom-isokinolin ved en ny og hensiktsmessig prosedyre ved anvendelse av vanlige laboratoriumforsøk og reagenser. En regioselektiv NBS-bromering ga 3-brom-4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222b) i gode utbytter. MCPBA-oksydasjon forløp uten hendelser, hvilket
ga det tilsvarende N-oksyd (Eksempel 222c), som ble isomerisert til l-klor-3-brom-4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222d) ved anvendelse av vanlig POCVprosedyre. 4-metoksy-isokinolinet ble alkylert med tripeptidet, hvilket ga det tilsvarende 3-brom-4-metoksy P2* -derivat egnet for Stille- og Suzuki-kobling. Alternativt ble 4-metoksy-isokinolin demetylert i BBr3, hvilket ga 4-hydroksy-3-brom-l-klorisokinolinet (Eksempel 222e). 4-hydroksygruppen ble igjen beskyttet med SEM-klorid, hvilket ga det 4-SEM-beskyttede mellomprodukt Eksempel 222. 4-hydroksy-forbindelsen ble regenerert da koblingen var oppnådd ved enten en syrefremkalt eller en fluorid-fremkalt avbeskyttelsesprotokoll.
Eksempel 222d: Fremstilling av l-klor-3-brom-4-metoksy-isokinolin
Trinn 1:
En løsning av 4-brom-isokinolin (15 g, 73 mmol, kommersielt materiale) i 200 ml dimetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(lH)-pyrimidinon (DMPU, Aldrich) ble tilsatt fast kaliummetoksyd (5,6 gm, 80 mmol). Reaksjonskaret ble nedsenket i et oljebad ved 105°C i 20 min. Fargen til blandingen endret seg raskt fra dens innledende meget bleke til mørkt grønnaktig brun umiddelbart etter oppvarmning. Reaksjonskaret ble fjernet fra oljebadet og ble fortynnet med vann, de organiske residuer ble fordelt i eter ved multippel ekstraksjon med porsjoner av eter. TLC-analyse viste to nye flekker (1:1 volum/volum blanding av heksaner og etylacetat som elueringsmiddel) med omtrent lik størrelse. Disse ble separert på silika-gel (Merck, type-H) kolonne eluert med rette heksaner, fulgt av gradvis tilsetning av eter til den mobile fasen. Det ønskede produkt, 4-metoksy-isokinolin (4,1 g, 35,3%) ble isolert etter inndampning av løsningsmidlene. Det andre produktet ble også isolert som reduksjonsbiprodukt isokinolin. Identiteten til biproduktet ble bekreftet ved NMR sammenlignet med autentisk materiale. Eksempel 222a: LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode C]: 1,16 (160).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 4,07 (s, 3 H) 7,61 (m, 1 H) 7,69 (m, 1 H) 7,93 (d, 7=8,07 Hz, 1 H) 8,08 (s, 1 H) 8,19 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 8,89 (s, 1 H). [Merk: denne forbindelsen ble tidligere fremstilt i Zoltewicz, John A.; Oestreich, Terence M.; Sale, Alan A, Journal of the American Chemical Society (1975), 97(20), 5889-96 ved en "Monel Bomb" og senere ved en "fokusert mikrobølge" initiert prosedyre i Chemg, Yie-Jia, Tetrahedron (2002), 58(6), 1125-1129. Foreliggende prosedyre trenger hverken spesielt høytrykksapparat eller preparativ skala mikrobølge-utstyr].
Trinn 2:
Materialet (Eksempel 222a) ble underkastet NBS-bromering, således ble 4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222a, 2,1 g, 13,2 mmol) i 1,2-dikloretan (DCE, 150 ml) behandlet med N-bromsuccinimid (NBS, 1,5 g, 8,4 mmol, 0,6X) ved 70°C i en time fulgt av tilsetning av en andre porsjon av 1,5 g NBS. Den mørke brunaktige blanding ble omrørt i en ytterligere time før tilsetning av en tredje porsjon av 1,0 g NBS. Bromeringen ble overvåket ved LC-MS inntil intet utgangsmateriale var igjen. Den urensede blandingen ble inndampet til tørrhet og det ønskede produkt ble filtrert over et kort sjikt av silika-gel (Type-H, Merck, 3 cm diameter med 1,5 cm høyde) eluert med lineære heksaner først fulgt av gradvis økning av mengden av eter. Det ønskede produkt (Eksempel 222b) ble isolert som et oljeaktig materiale (1,7 g, 54%). LC/MS Rt-min (MH^) [metode C]: 2,65 (238).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 4,04 (s, 3 H) 7,64 (t, 7=7,58 Hz, 1 H) 7,76 (t, 7=7,09 Hz, 1 H) 7,99 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,11 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,85 (s, 1 H). [3-brom-4-metoksy isokinolin ble tidligere fremstilt ved en forskjellig prosedyre: Finkentey, Christel; Langhals, Elke; Langhals, Heinz. Chemisene Berichte (1983), 116(6), 2394-7. NMR av produktet var identisk med den angitt].
Trinn 3:
Produktet fra NBS-bromering ble underkastet MCPBA-oksydasjon i metylenklorid ved romtemperatur. Således ble MCPBA (1,80 g, 77% ren, 8,0 mmol) tilsatt til en løsning av 3-brom-4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222b, 1,65 g, 6,9 mmol) i 35 ml CH2CI2. Løsningen ble omrørt i 4 timer og dannet en hvit suspensjon. Natriumbikarbonat-løsning (5%, nyfremstilt, 20 ml) ble tilsatt til blandingen, organiske residuer ble ekstrahert inn i CH2CI2(10 x 25 ml). Multippel ekstraksjon i organisk løsningsmiddel var nødvendig for å gjenvinne den noe vandige løsning av N-oksyd-produkt. Det rå materialet oppnådd etter inndampning av løsningsmidler ble ytterligere renset ved filtrering over silika-gel, hvilket ga 1,36 g (5,4 mmol, 78%) av N-oksydet (Eksempel 222c) som et voksaktig fast stoff. LC/MS Rt-min (MH<+>)
[metode C]: 1,79 (254).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 4,07 (s, 3 H) 7,63 (m, 2 H) 7,72 (m, 1 H) 8,00 (m, 1 H) 8,86 (s, 1 H).
Trinn 4:
Den endelige N-oksyd-omleiring ble utført som vanlig i POCb ved anvendelse av prosedyren beskrevet annet sted. Utbytte i Eksempel 222d var i det vesentlige kvantitativt. LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode D]: 2,69 (272).<*>H NMR som HCl-salt, (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 4,07 (s, 3 H) 7,81 (m, 1 H) 7,92 (m, 1 H) 8,17 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,34 (d, 7=8,31 Hz, 1 H).<J>H NMR som fri base, (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 4,03 (s, 3 H) 7,72 (m, 1 H) 7,81 (m, 1 H) 8,12 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 8,28 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Eksempel 223: Fremstilling av Forbindelse 223
Den frie basen (Eksempel 222d) oppnådd i foregående trinn ble alkylert med tripeptid-fragmentet ved anvendelse av alkyleringsprotokollen (Eksempel 184) beskrevet annet sted, hvilket ga 79% av det ønskede produkt som et papir-hvitt fast stoff. LC/MS Rt-min (MNa<+>) [metode C]: 3,91 (814).<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (dd, 7=8,07,1,47 Hz, 2 H) 1,22 (m, 11 H) 1,42 (dd, 7=9,78, 5,14 Hz, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07,5,38 Hz, 1 H) 2,22 (dd, 7=18,10, 9,29 Hz, 1 H) 2,28 (m, 1 H) 2,61 (dd, 7=13,57, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,06 (dd, 7=11,86, 2,81 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=11,49 Hz, 1 H) 4,51 (m, 1 H) 5,10 (d, 7=10,52 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 7,56 (t, .7=7,58 Hz, 1 H) 7,78 (t, 7=7,58 Hz, 1 H) 8,00 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,16 (d, 7=8,56 Hz, 1 H). Eksempel 224 og 225: Fremstilling av Forbindelse 224 og Forbindelse 225 4-metoksygruppen i l-klor-3-brom-4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222d) beskrevet tidligere ble omdannet til a-trimetylsilyl-etoksymetyl- (SEM) gruppe ved den følgende prosedyre. l-klor-3-brom-4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222d) ble demetylert ved anvendelse av BBr3(endelig regulert reaksjonskonsentrasjon var 0,2-0,3 Molar BBr3) ved romtemperatur i 12 timer. Den høye BBr3-konsentrasjon for slik demetylering ble funnet å være nødvendig og effektiv. Den rå reaksjonsblandingen ble fortynnet med 50 volumer vannfri metanol før inndampning til tørrhet. Demetyleringen var i det vesentlige kvantitativ. Eksempel 222e: LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode D]: 2,32 (258).<J>H NMR av frittt HCl-salt (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 5,83 (br. s, 1 H) 7,73 (t, 7=7,70 Hz, 1 H) 7,79 (t, 7=7,58 Hz, 1 H) 8,22 (m, 2 H). 4-hydroksy-3-brom-l-klor-isokinolin (Eksempel 222e) ble beskyttet igjen med 2-(trimetylsilyl)-etoksy-metylklorid (SEM-C1). Den rå frie base fra den tidligere fremstilling ble tørket til 40 mikron (Hg) ved romtemperatur før beskyttelse påny med SEM-klorid. Til en løsning av 4-hydroksy-forbindelsen (Eksempel 222e, 1,33 g, 5,2 mmol) i metylenklorid (50 ml) ved 0°C ble satt sekvensielt diisopropyletylamin (2 ml, 11,5 mmol) og SEM-klorid (1,8 ml, 10 mmol). Blandingen ble omrørt i 10 min før den ble vasket med nyfremstilt NaHC03-løsning (5%, 100 ml). De organiske residuer ble ekstrahert inn i mange porsjoner av metylenklorid, de samlede organiske lag ble tilbakevasket med 20 ml avionisert vann før de ble konsentrert i vakuum. SEM-beskyttelse var i det vesentlige kvantitativ. Eksempel 222: LC/MS Rt-min (MH<+>) [metode D]: 3,40 (410).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 0,03 (s, 9 H) 0,99 (m, 2 H) 3,98 (m, 2 H) 5,33 (s, 2 H) 7,72 (m, 1 H) 7,80 (m, 1 H) 8,17 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 8,27 (d, 7=8,07 Hz, 1 H). Alkylering av 4-SEM beskyttet isokinolin med tripeptid: Forbindelse 224 og Forbindelse 225 ble dannet fra samme tripeptid-alkyleringsreaksjon. 4-hydroksy-forbindelsen (Forbindelse 224) ble produsert mest sannsynlig som et resultat av TFA til stede under preparativ HPLC-rensning.
Eksempel 224 (15,4%): LC/MS Rrmin (MNa<+>) [metode D]: 2,87 (800).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (d, 7=8,31 Hz, 2 H) 1,25 (s, 9 H) 1,42 (s, 2 H) 1,86 (m, 1 H) 2,23 (m, 2 H) 2,60 (dd, 7=13,21, 7,34 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (d, 7=11,00 Hz, 1 H) 4,24 (m, 2 H) 4,38 (d, 7=11,98 Hz, 1 H) 4,49 (dd, 7=9,78, 7,09 Hz, 1 H) 5,10 (d, 7=10,03 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 5,76 (s, 1 H) 7,52 (t, 7=7,46 Hz, 1 H) 7,71 (t, 7=7,09 Hz, 1 H) 8,09 (d, 7=4,40 Hz, 1 H) 8,11 (d, 7=4,16 Hz, 1 H).
Eksempel 225 (8,0%): LC/MS Rt-min ([M-BOC]^) [metode D]: 3,46 (808).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,01 (s, 9 H) 0,96 (m, 2 H) 1,02 (s, 11 H) 1,06 (d, 7=6,60 Hz, 2 H) 1,24 (s, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=7,83, 5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H)
2,62 (dd, 7=13,69, 7,34 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,97 (m, 2 H) 4,07 (dd, 7=10,88, 3,55 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=11,25 Hz, 1 H) 4,50 (m, 1 H) 5,10 (d, 7=10,76 Hz, 1 H) 5,25 (m, 3 H) 5,74 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 7,57 (m, 1 H) 7,77 (t, 7=7,83 Hz, 1 H) 8,06 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 8,16 (d, 7=8,31 Hz, 1 H).
Fremstilling av 4//-[l,3]dioksino[5,4-c]isokinolin P2<*->derivater
Generelt synteseskjema
Reaksjonsbetingelser: (1) MeOK i DMPU; (2) MCPBA i CH2C12; (3) POCl3i DCE; (4) BBr3i CH2C12; (5) HCHO-løsning i 40% H2S04 ved prosedyre i Syntese av 1,3-oksazino[5,6-c]isokinoliner og beslektede forbindelser. Miyoko Toyama og Hirotaka Otomasu, Chem. Pharm. Bull. 33 (12), 5543-5546, 1985; (6) Fluorerings-prosedyre ifølge Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Heterocycles, 1992, 34 (8), 1507-1510.
Eksempel 227: Fremstilling av Forbindelse 227
6-klor-l,3-oksazino[5,6-c]isokinolin ble fremstilt ved metoden ifølge Miyoko Toyama og Hirotaka Otomasu ved å starte fra l-klor-4-hydroksy-isokinolin.
Utgangsmaterialet: l-klor-4-hydroksy-isokinolin (Eksempel 226c) ble fremstilt ved den syntetiske sekvens vist ovenfor. MCPBA-oksydasjon av 4-metoksy-isokinolin (Eksempel 222a) ble utført som vanlig, hvilket ga 79,1% av det tilsvarende N-oksyd (Eksempel 226a). Materialet ble omdannet til 1-klor-derivatet umiddelbart etterpå i POCI3, hvilket ga kloridet (Eksempel 226b) i det vesentlige i kvantitativt utbytte. Det rå l-klor-4-metoksy-isokinolin ble demetylert i BBr3ved romtemperatur, hvilket ga det tilsvarende 1 -klor-4-hydroksy-isokinolin (Eksempel 226c) etter behandling av den rå BBr3-blanding med vannfri metanol ved romtemperatur, fulgt av inndampning for å bli kvitt overskudd av borat-residuer. Reaksjonen ifølge Miyoko Toyama og Hirotaka Otomasu ga 266 mg av 6-klor-l,3-oksazino[5,6-c]isokinolin (Eksempel 226d, 62,3%) totalt utbytte fra 300 mg av 4-metoksy-isokinolin i 4 trinn. LC/MS Rt-min ([M-HCHO]H<+>) [metode D]: 2,45 (192).<J>H NMR (400 MHz, KLOROFORM-D) 8 ppm 5,02 (s, 2 H) 5,41 (s, 2 H) 7,68 (m, 1 H) 7,77 (ddd, 7=8,25, 6,91, 1,22 Hz, 1 H) 8,10 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,26 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Kloridet ble funnet å være ureaktivt under alkyleringsprotokollen i Eksempel 184. Det tilsvarende 6-fluor-l,3-oksazino[5,6-c]isokinolin (Eksempel 226) ble fremstilt ved metoden ifølge [Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Heterocycles, 1992,34 (8), 1507-1510] referert tidligere. Reaksjonen fikk ikke bli fullstendig og den rå reaksjonsblandingen ble gjenvunnet som en blanding av et forhold på 1:2,4 (Cl: F). Uten ytterligere rensning ble klorid/fluoird-blandingen alkylert med tripeptidet ved anvendelse av metoden ifølge Eksempel 184, hvilket ga 66 mg (50,0%) av BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(l,3-oksazino[5,6-c]isokinolin-6-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25-VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan etter preparativ HPLC-rensning. LC/MS Rt-min (MNa<+>) [metode D]: 3,03 (764).<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (dd, 7=8,07,1,96 Hz, 2 H) 1,22 (s, 10 H) 1,34 (d, 7=6,11 Hz, 1 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,23 (m, 2 H) 2,59 (dd, 7=13,82, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,03 (dd, 7=11,86, 3,06 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,41 (d, 7=11,98 Hz, 1 H) 4,50 (dd, 7=9,66, 6,97 Hz, 1 H) 4,87 (m, 2 H) 5,11 (d, 7=10,52 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,34 (s, 2 H) 5,74 (m, 2 H) 7,51 (t, 7=7,46 Hz, 1 H) 7,70 (t, 7=7,58 Hz, 1 H) 7,95 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,12 (d, 7=8,31 Hz, 1 H).
Fremstilling av 4-metoksy-3-heteroaryl og 3-azoyl-isokinolin P2<*->derivater via Suzuki- og Stille-koblingsreaksjoner
Koblingsteknologiene vist nedenfor demonstrerte den generelle nytte av bromderivatet i Eksempel 223. Det vil forstås at en lignende protokoll er like anvendbar for andre kombinasjoner av koblingsreagenser og katalysatorer forskjellig fra bor og tinn.
Eksempel 229: Fremstilling av Forbindelse 229
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(3-furan-3-yl-4-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-pTolin]- Pl( lR, 2S VinylAcca)-CONHS02-cyklopropan via Suzuki-kobling vist nedenfor:
22 mg (0,028 mmol) av Eksempel 223 ble oppløst i 1 ml DMF, og 9,4 mg av den kommersielle boronsyre (3 ekv), 3 mg katalysator (10% mmol) og 18 mg cesiumkarbonat ble tilsatt. Blandingen ble avgasset to ganger og deretter oppvarmet opptil 110°C i 3 timer. Sluttproduktet ble renset ved prep-HPLC, 13,6 mg gult fast stoff ble oppnådd (64,0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,85 (780) [metode B].<J>H NMR
(500 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,09 (m, 11 H) 1,26 (m, 12 H) 1,68 (m, 1 H) 2,27 (s, 1 H) 2,64 (m, 2 H) 2,97 (m, 1 H) 3,86 (s, 3 H) 4,15 (d, 7=10,38 Hz, 1 H) 4,28 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=10,99 Hz, 1 H) 4,56 (m, 1 H) 5,11 (m, 2 H) 5,63 (m, 1 H) 5,99 (s, 1 H) 7,20 (s, 1 H) 7,51 (m, 1 H) 7,61 (m, 1 H) 7,75 (t, 7=7,17 Hz, 1 H) 8,03 (d, 7=8,24 Hz, 1 H) 8,16 (d, 7=8,24 Hz, 1 H) 8,27 (s, 1 H).
Eksempel 230: Fremstilling av Forbindelse 230
BOCNH-P3(Z,-/-BuGly)-P2[(4R)-( 3-furan-2-yl-4-metoksy-isokinolin-1 -okso)-S-prolin]-Pl(li?,2S VinylAcca)-CONHSC>2Cyklopropan ble syntetisert via en Stille-koblingsreaksjon vist nedenfor:
40 mg (0,05 mmol) av Eksempel 223,4 mg katalysator (5% mmol) og 100^1 (4 ekv) av det kommersielle tinnreagens ble oppløst i 1 ml toluen, blandingen ble avgasset to ganger og deretter oppvarmet opptil 90°C natten over. Etter prep HPLC-separering ble 19,6 mg grønnaktig fast stoff oppnådd (50,0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,76
(780) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 0,94 (m, 2 H) 0,98 (s, 9 H) 1,09 (m, 2 H) 1,25 (s, 9 H) 1,39 (m, 1 H) 1,60 (m, 1 H) 2,35 (m, 1 H) 2,48 (m, 1 H) 2,74 (m, 1 H) 2,95 (m, 1 H) 3,87 (s, 3 H) 4,14 (m, 1 H) 4,22 (d, 7=4,16 Hz, 1 H) 4,41 (s, 1 H) 4,69 (m, 1 H) 5,26 (m, 1 H) 5,35 (m, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 6,03 (m, 1 H) 6,61 (m, 1 H) 7,16 (d, 7=3,18 Hz, 1 H) 7,50 (d, 7=7,58 Hz, 1 H) 7,67 (s, 1 H) 7,73 (t, 7=7,34 Hz, 1 H) 8,04 (m, 1 H) 8,17 (d, 7=8,31 Hz, 1 H).
Eksempel 231: Fremstilling av Forbindelse 231
BOCNH-P3(I^BuGly)-P2[(4R)-(3-pyrazin-2-yl-4-metoksy-isokinolin-l-okso) prolin]-Pl(li?,2S VinylAcca)-CONHS02Cyklopropan ble tilsvarende fremstilt ved en Stille koblingsreaksjon i 7,1% utbytte. LC/MS rt-min (MH<+>): 2,51 (792) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 0,98 (m, 9 H) 1,11 (m, 2 H) 1,19 (s, 9 H) 1,27 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 2,37 (m, 1 H) 2,48 (m, 2 H) 2,81 (m, 1 H) 2,97 (m, 1 H) 3,83 (s, 3 H) 4,07 (s, 1 H) 4,20 (d, 7=4,16 Hz, 1 H) 4,54 (d, 7=11,49 Hz, 1 H) 4,72 (m, 1 H) 5,27 (m, 1 H) 5,39 (m, 1 H) 5,96 (s, 1 H) 6,04 (m, 1 H) 7,63 (s, 1 H) 7,83 (s, 1 H) 8,17 (s, 1 H) 8,26 (s, 1 H) 8,60 (d, 7=2,20 Hz, 1 H) 8,76 (d, 7=2,20 Hz, 1 H) 9,33 (s, 1H).
Eksempel 232: Fremstilling av Forbindelse 232
BOCNH-P3(Z,-/-BuGly)-P2[(4R)-( 4-metoksy-3-tiazol-2-yl-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-Pl(li?,2S VinylAcca)-CONHSC>2cyklopropan ble tilsvarende fremstilt ved en Stille koblingsreaksjon i 32,2% utbytte. LC/MS rt-min (MH<+>): 2,42 (797) [metode B].<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,03 (S, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,13 (S, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,43 (dd, 7=9,78,5,14 Hz, 1 H) 1,88 (dd, 7=8,07,5,38 Hz, 1 H) 2,23 (q, 7=8,97 Hz, 1 H) 2,36 (m, 1 H) 2,67 (m, 1 H) 2,94 (m, 1 H) 4,10 (s, 3 H) 4,15 (m, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,53 (d, 7=25,92 Hz, 1 H) 4,59 (dd, 7=10,27, 7,09 Hz, 1 H) 5,12 (m, 1 H) 5,29 (d, 7=17,36 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,74 (t, 7=7,58 Hz, 1 H) 7,91 (t, 7=7,70 Hz, 1 H) 8,00 (d, 7=3,42 Hz, 1 H) 8,18 (d, 7=3,18 Hz, 1 H) 8,22 (d, 7=8,31 Hz, 1 H) 8,29 (d, 7=8,31 Hz, 1 H).
Eksempel 233: Fremstilling av Forbindelse 233
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med det kommersielle 4-klorfuro[3,2-c]pyridin, ble 5,7 mg gult fast stoff oppnådd (8,2%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,32 (674) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,00 (s, 9 H)
1,07 (m, 2 H) 1,21 (m, 11 H) 1,41 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,22 (dd, 7=17,61, 9,05 Hz, 2 H) 2,54 (dd, 7=13,69, 7,09 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,21 (m, 1 H) 4,32 (s, 1 H) 4,49 (m, 1 H) 5,11 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,29 (dd, 7=17,36, 1,22 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 6,83 (d, 7=1,22 Hz, 1 H) 7,19 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 7,76 (d, J=l,22Hz, 1 H) 7,97 (d,7=5,87 Hz, 1 H).
Eksempel 235: Fremstilling av Forbindelse 235
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med det kommersielle 4-klortieno[3,2-c]pyridin, ble 20,0 mg gult fast stoff oppnådd (28,1%).LC/MS rt-min (MH<+>): 2,50 (690) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,21 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,57 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (dd, 7=11,98, 3,18 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,39 (d, 7=11,74 Hz, 1 H) 4,50 (dd, 7=9,90, 7,21 Hz, 1 H) 5,10 (dd, 7=10,39, 1,34 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 7,45 (d, 7=5,62 Hz, 1 H) 7,53 (m, 2 H) 7,94 (d, 7=5,87 Hz, 1 H).
Eksempel 236: Fremstilling av Forbindelse 236
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med det kommersielle 3,5-diklor-l,2,4-tiadiazol, ble 8,0 mg gult fast stoff oppnådd (11,9%).LC/MS rt-min
(MNa<+>): 2,37 (697) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,22 (m, 2 H) 1,36 (s, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07,5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,60 (dd, 7=14,18, 6,85 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,03 (dd, 7=12,47, 3,18 Hz, 1 H) 4,17 (s, 1 H) 4,42 (m, 2 H) 5,11 (dd, 7=10,27, 1,71 Hz, 1 H) 5,29 (dd, 7=17,12, 1,47 Hz, 1 H) 5,68 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 H).
Eksempel 237: Fremstilling av Forbindelse 237
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(kinoksalin-2-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,2,S VinylAcca)-CONHSC«2Cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med kommersiell 2-klorkinoksalin, ble 113,0 mg gult fast stoff oppnådd (19,2%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,48 (707) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,22 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,24 (m, 1 H) 2,31 (m, 1 H) 2,57 (dd, 7=13,57, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,09 (dd, 7=11,98, 3,18 Hz, 1 H)4,17(s, 1 H) 4,38 (d, 7=11,74 Hz, 1 H) 4,50 (dd, 7=10,27, 7,09 Hz, 1 H) 5,11 (dd, 7=10,27,1,71 Hz, 1 H) 5,29 (dd, 7=17,12, 1,47 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,87 (s, 1 H) 7,62 (t, 7=7,46 Hz, 1 H) 7,73 (t, 7=7,70 Hz, 1 H) 7,87 (m, 1 H) 7,96 (d, 7=8,31 Hz, 1H) 8,42 (s, 1 H).
Eksempel 238: Fremstilling av Forbindelse 238
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(2-trifluor-6-fluorkinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl( lR, 2S VinylAcca)-CONHS02cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med det kommersielle 2-trifluormetyl-4-klor-6-fluor-kinolin, ble 17,0 mg gult fast stoff oppnådd
(23,2%).LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,66 (792) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,17 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (q, 7=8,64 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,63 (dd, 7=13,94, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (m, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,53 (m, 2 H) 5,10 (m, 1 H) 5,27 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,58 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,39 (s, 1 H) 7,65 (m, 1 H) 7,83 (dd, 7=9,29,2,69 Hz, 1 H) 8,12 (dd, 7=9,29, 5,14 Hz, 1 H).
Eksempel 239: Fremstilling av Forbindelse 239
BOCNH-P3(I^BuGly)-P2[(4R)-(6-fluorkinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25 VinylAcca)-CONHS02Cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med det kommersielle 4-klor-6-fluor-kinolin, ble 26,0 mg gult fast stoff oppnådd (39,0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1,98 (702) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,04 (m, 11 H) 1,14 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,23 (q, 7=8,80 Hz, 1 H) 2,41 (m, 1 H) 2,75 (dd, 7=14,43, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,09 (s, 1 H) 4,12 (d, 7=2,69 Hz, 1 H) 4,61 (m, 2 H) 5,11 (dd, 7=10,39,1,59 Hz, 1 H) 5,28 (dd, 7=17,24,1,34 Hz, 1 H) 5,70 (m, 1 H) 5,75 (s, 1 H) 7,62 (d, 7=6,60 Hz, 1 H) 7,93 (m, 1 H) 8,06 (dd, 7=8,68, 2,57 Hz, 1 H) 8,20 (dd, 7=9,29,4,40 Hz, 1 H) 9,06 (d, 7=6,60 Hz, 1 H). En liten mengde av biproduktet på grunn av F-fortrengning ble også isolert fra samme reaksjon og ble separert ved preparativ HPLC.
Eksempel 240, Isolering av forbindelse 240
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(4-klorkinolin-6-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25'-VinylAcca)-CONHSC«2-cyklopropan, vist nedenfor
Biproduktet, 8,0 mg gult fast stoff ble oppnådd (11,7%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,240 (740) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,23 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,22 (m, 1 H) 2,29 (m, 1 H) 2,55 (m, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,09 (m, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,30 (m, 1 H) 4,46 (dd, 7=10,27, 6,85 Hz, 1 H) 5,11 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,28 (dd, 7=17,36, 1,47 Hz, 1 H) 5,43 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 7,60 (dd, 7=9,29, 2,45 Hz, 1 H) 7,64 (d, 7=2,45 Hz, 1 H) 7,81 (d, 7=4,89 Hz, 1 H) 8,06 (d, 7=9,29 Hz, 1 H) 8,72 (d, 7=5,14 Hz, 1 H).
Eksempel 241: Fremstilling av Forbindelse 241
BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(8-fluorkinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25 VinylAcca)-CONHS02cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle tripeptid-alkyleringsprosedyre med det kommersielle 4-klor-8-fluor kinolin, ble 10,3 mg gult fast stoff oppnådd (14,7%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1,95 (702) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,98 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,14 (s, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1
H) 2,22 (q, 7=8,72 Hz, 1 H) 2,41 (m, 1 H) 2,74 (dd, 7=14,06, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,11 (m, 2 H) 4,57 (dd, 7=10,39, 6,97 Hz, 1 H) 4,66 (d, 7=12,23 Hz, 1 H) 5,11 (dd, 7=10,27,1,22 Hz, 1 H) 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H) 5,71 (m, 2 H) 7,59 (d, 7=6,36 Hz, 1 H) 7,75 (m, 1 H) 7,86 (m, 1 H) 8,23 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 9,02 (d, 7=6,36 Hz, 1 H). Under preparativ HPLC rensning ble et biprodukt også isolert. 4-klorkinolin-8-okso-kinolinderivatet ble dannet som et resultat av fortrengning av fluoratomet istedenfor den klor-utgående gruppe. Eksempel 242, Isolering av forbindelse 242 BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(4-klorkinolin-8-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,2,S VinylAcca)-CONHS02cyklopropan, vist nedenfor
Således ble biproduktet, 9,0 mg gult fast stoff oppnådd (13,2%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,37 (718) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,12 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,43 (dd, 7=9,41, 5,50 Hz, 1 H) 1,87 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,25 (m, 1 H) 2,35 (m, 1 H) 2,67 (dd, 7=13,94, 7,09 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,10 (m, 1 H) 4,13 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=11,98 Hz, 1 H) 4,65 (dd, 7=10,03, 7,09 Hz, 1 H) 5,12 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,30 (dd, 7=17,12, 1,22 Hz, 1 H) 5,51 (s, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 7,61 (d, 7=7,83 Hz, 1 H) 7,88 (t, 7=8,19 Hz, 1 H) 8,04 (m, 2 H) 8,91 (d, 7=5,38 Hz, 1 H).
Eksempel 243: Fremstilling av Forbindelse 243
BOCNH-P3(I-^BuGly)-P2[(4R)-(3-hya^oksykinoksalm-2-okso)-S-prolin]-Pl(l/^,2^S' VinylAcca)-CONHSC«2Cyklopropan, vist nedenfor
Ved å følge den generelle tripeptid alkyleringsprosedyre med kommersiell 2,3-diklorkinoksalin, ble mono-alkyleringsproduktet spontant hydrolysert, hvilket ga 8,0 mg blekgult fast stoff (11,4%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,42 (723) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,99 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,24 (s, 9 H) 1,40 (m, 3 H) 1,86 (m, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,53 (m, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,16 (s, 1 H) 4,40 (m, 1 H) 4,55 (dd, 7=10,39, 6,97 Hz, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,29 (m, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,78 (s, 1 H) 7,15 (s, 1 H) 7,26 (m, 2 H) 7,36 (t, 7=7,83 Hz, 1 H) 7,61 (d, 7=8,07 Hz, 1 H).
Eksempel 244: Fremstilling av Forbindelse 244
Ved anvendelse av en kombinasjon av Pd<0>koblingsskjema og en trinn etter trinn prosedyre ved å starte fra 6-brom-l-klor isokinolin, ble BOCNH-P3(£-/-BuGly)-P2[(4R)-(6-karboksylsyre-dimetylamidisokinolin-l-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25' VinylAcca)-CONHS02cyklopropan, fremstilt.
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,34 (777) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,98 (m, 11 H) 1,23 (m, 11 H) 1,35 (m, 1 H) 1,91 (m, 1 H) 2,29 (m, , 2 H) 2,47 (m, 1 H) 2,58 (m, 1 H) 2,97 (s, 3 H) 3,11 (s, 3 H) 4,09 (m, 1 H) 4,24 (s, 1 H) 4,44 (m, 1 H) 4,61 (m, 1 H) 5,16 (m, 2 H) 5,57 (m, 1 H) 5,90 (s, 1 H) 7,38 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 7,50 (d, 7=8,07 Hz, 1 H) 7,86 (s, 1 H) 8,03 (d, 7=5,87 Hz, 1 H) 8,27 (d, 7=8,56 Hz, 1 H),
Eksempel 245: Fremstilling av Forbindelse 245
Under én av de Pd°-katalyserte Stille-koblingsprepareringer (Eksempel 230), ble et biprodukt isolert som et mindre produkt som deretter ble identifisert som: BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4R)-(3-klor-4-metoksyisokinolin-l-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25' VinylAcca)-CONHS02Cyklopropan, vist nedenfor
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,62 (770) [metode B].<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,01 (s, 9 H) 1,08 (m, 2 H) 1,18 (s, 9 H) 1,27 (m, 2 H) 1,37 (m, 1 H) 1,62 (m, 1 H) 2,36 (m, 2 H) 2,73 (m, 1 H) 2,97 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,02 (m, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,48 (m, 1 H) 4,66 (m, 1 H) 5,30 (m, 2 H) 5,78 (s, 1 H) 6,04 (m, 1 H) 7,53 (t, 7=7,70 Hz, 1 H) 7,77 (t, 7=7,58 Hz, 1 H) 8,00 (d, 7=8,56 Hz, 1 H) 8,19 (d, 7=8,07 Hz, 1 H).
Seksjon F:
Eksempel 250: Fremstilling av Forbindelse 250
Trinn 1:
En løsning av 3-fenyl-but-2-ensyre (16,2 g), difenylfosforyl-azid (27,5 g) og trietylamin (10,1 g) i benzen (100 ml) ble omrørt i 1 time. Etter filtrering gjennom en silikagel-plugg med vasking med benzen og konsentrasjon, ble residuet oppløst i difenylmetan (80 ml) og tilbakeløpskokt i 3 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble faste stoffer oppsamlet gjennom en plugg med vasking med benzen og tørket, hvilket ga 10 g (63%) av det ønskede produkt som et fast stoff.<*>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 2,30 (s, 3 H), 7,00 (s, 1 H), 7,54 (m, 1 H), 7,77 (m, 2 H), 8,33 (d, 7=7,34 Hz, 1 H).
Trinn 2
En løsning av 4-metyl-2/Msokinolin-l-on (4,8 g) i POCI3(50 ml) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Etter avkjøling og konsentrasjon ble residuet gjort basisk med 5 N NaOH og ekstrahert med CH2CI2. Det organiske laget ble vasket med saltvann og tørket over MgSC>4. Etter konsentrasjon ga rensning ved "flash" kromatografi med Biotage med 5% etylacetat i heksaner 4,8 g (90%) av det ønskede produkt som et fast stoff.<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 2,59 (s, 3 H), 7,68 (t, 7=7,70 Hz, 1 H), 7,78 (m, 1 H), 7,94 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 8,35 (d, 7=8,31 Hz, 1 H).
Trinn 3:
En løsning av Boc-Hyp-OH (231 mg) og tert-BuOK (336 mg) i DMSO (10 ml) ble omrørt i 0,5 time. Til løsningen ble satt l-klor-4-metyl-isokinolin (178 mg) og den resulterende blandingen ble omrørt i 1 dag. Reaksjonen ble stanset med 5% sitronsyre og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med saltvann og tørket over MgS04. Konsentrasjon ga 350 mg (94%) av det ønskede produkt som et fast stoff som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning.<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,39,1,43 (2s, 9 H, rotamerer), 2,40 (dd, 7=17,97, 4,52 Hz, 1 H), 2,48 (s, 3 H), 2,68 (m, 1 H), 3,84 (m, 2 H), 4,46 (m, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 7,58 (t, 7=7,70 Hz, 1 H), 7,75 (m, 2 H), 7,91 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 8,19 (m, 1 H); MS:
(M+Na)<+>396.
Trinn 4:
En løsning av 4-(4-metyl-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester) (74 mg), cyklopropansulfonsyre-(l(/?)-amino-2(5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydroklorid (59 mg), PyBOP (114 mg) og /'-Pr2NEt (0,2 ml) i CH2CI2(2 ml) ble omrørt i 2 timer. Rensning ved "flash" kromatografi på Biotage med 5% MeOH i etylacetat ga 105 mg (90%) av det ønskede produkt.<!>H NMR (400 MHz, Metanol-D4) 8 ppm 1,18 (m, 5 H), 1,39 (s, 9 H), 1,87 (dd, 7=8,2, 5,3 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,54 (m, 4 H), 2,95 (m, 1 H), 3,86 (m, 2 H), 4,40 (dd, 7=9,8,6,9 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,6 Hz, 1 H), 5,79 (m, 2 H), 7,60 (t, 7=7,5 Hz, 1 H), 7,78 (m, 2 H), 7,93 (d, 7=8,3 Hz, 1 H), 8,20 (d, 7=8,1 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>607.
Trinn 5:
En løsning av 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(4-metyl-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester (100 mg) og TFA (3 ml) i CH2C12(3 ml) ble omrørt i 1 time. Etter konsentrasjon ble residuet oppløst i CH2CI2(2 ml) og Boc-L-tetr-leucin (40 mg), PyBOP (104 mg) og /'-Pr2NEt (0,2 ml) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 1 time. Etter opparbeidelse ga rensning av Prep HPLC 60 mg (52%) av den ønskede produkt-forbindelse 250 som et fast stoff.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,04 (m, 12H), 1,26 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,5, 5,1 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,26 (m, 2 H), 2,49 (s, 3 H), 2,62 (dd, 7=13,7, 7,1 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,06 (dd, 7=12,0, 3,4 Hz, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,45 (d, 7=11,3 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,3, 6,6 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 6,63 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 7,53 (t, 7=7,8 Hz, 1 H), 7,76 (t, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,91 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 8,22 (d, 7=8,3 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>720.
Eksempel 251: Fremstilling av Forbindelse 251
Forbindelse 251 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 3-metoksy-3-fenyl-akrylsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 15 g 3-metoksy-3-fenyl-akrylsyre anvendt, 250 mg produkt oppnådd (2% utbytte).
Produkt:
<J>H NMR (400 MHz, CD3COCD3) 5 ppm 3,85 (s, 3 H), 6,96 (s, 1 H), 7,54 (m, 1 H), 7,71 (m, 1 H), 7,86 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 8,31 (d, 7=8,07 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 200 mg 4-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 150 mg produkt oppnådd (68% utbytte).
Produkt:
<J>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 4,05 (s, 2 H), 7,71 (m, 1 H), 7,72 (m, 2 H), 7,80 (s, 1 H), 8,23 (dd, 7=18,71, 7,70 Hz, 2 H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 122 mg l-klor-4-metoksy-isokinolin anvendt, 218 mg produkt oppnådd (89% utbytte).
Produkt:
MS: (M+Na)+411.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 194 mg 4-(4-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester anvendt, 298 mg produkt oppnådd (99% utbytte).
Produkt:
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,17 (m, 5 H), 1,42 (s, 9 H), 1,87 (dd, 7=8,2, 5,5 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,54 (dd, 7=13,3, 6,2 Hz, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,85 (m, 2 H), 4,00 (s, 3 H), 4,39 (dd, 7=9,8, 6,9 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,52 (s, 1 H), 7,62 (t, 7=7,6 Hz, 1 H), 7,74 (t, 7=7,2 Hz, 1 H), 8,12 (t, 7=8,3 Hz,2H).
Trinn 5:
Modifikasjoner: 190 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(4-metoksy-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 - karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 270 mg produkt oppnådd (51% utbytte). Produkt:
Data:<!>H NMR (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,26 (m, 10 H), 1,43 (dd, 7=8,6,4,6 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,9,5,5 Hz, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,61 (dd, 7=13,6, 6,9 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,00 (s, 3 H), 4,06 (dd, 7=11,3, 3,1 Hz, 1 H), 4,25 (d, 7=8,9 Hz, 1 H), 4,43 (d, 7=11,3 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,1 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 6,60 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 7,55 (m, 2 H), 7,71 (t, 7=7,3 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,2 Hz, 1 H), 8,14 (d, 7=8,2 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>736.
Eksempel 252: Fremstilling av Forbindelse 252
Forbindelse 252 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 2-metylkanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 20 g 2-metylkanelsyre anvendt, 14,3 g produkt oppnådd (72% utbytte)
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 2,54 (s, 1 H), 6,69 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,39 (t, 7=7,8 Hz, 1 H), 7,50 (d, 7=7,1 Hz, 1 H), 8,30 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 11,62 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>160.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 14,4 g 5-metyl-2//-isokinolin-l-on anvendt, 10,6 g produkt oppnådd (66% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 2,67 (s, 3 H), 7,55 (m, 2 H), 7,70 (dd, 7=5,9,1,0 Hz, 1 H), 8,19 (m, 1 H), 8,28 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>178.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 533 mg l-klor-5-metyl-isokinolin anvendt, 1116 mg produkt oppnådd (100% utbytte).
Produkt:
1
Data: MS: (M+H)<+>373.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 372 mg 4-(5-metyl-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-tøV-butylester anvendt, 551 mg produkt oppnådd (94% utbytte). Produkt:
Data: MS: (M+Na)<+>607.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 551 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(5-metyl-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 274 mg produkt oppnådd (44% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,00 (m, 12 H,) 1,23 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,26 (m, 2 H), 2,62 (m, 4 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (dd, 7=11,9, 3,3 Hz, 1 H), 4,25 (d, 7=9,5 Hz, 1 H), 4,46 (d, 7=11,5 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,3, 7,1 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,9 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 6,62 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 7,39 (t, 7=7,7 Hz, 1 H), 7,44 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,53 (d, 7=7,1 Hz, 1 H), 8,00 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=8,3 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>698.
Eksempel 253: Fremstilling av Forbindelse 253
Forbindelse 253 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 2-metoksy-kanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 10 g 2-metoksy kanelsyre anvendt, 5,3 g produkt oppnådd (53% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 3,95 (s, 3 H), 6,94 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,08 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,14 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,43 (t, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,99 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 10,92 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>176.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 5,3 g 5-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 5,38 g produkt oppnådd (92% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 4,01 (s, 3 H), 7,04 (d, 7=7,8 Hz, 1 H), 7,57 (t, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 7,97 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 8,25 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>194.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 581 mg l-klor-5-metoksy-isokinolin anvendt, 1163 mg produkt oppnådd (100% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>389.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 117 mg 4-(5-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tøV-butylester anvendt, 180 mg produkt oppnådd (100% utbytte). Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>601.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 177 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(5-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l-karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 63 mg produkt oppnådd (44% utbytte). Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,00 (m, 12 H), 1,21 (m, 10 H), 1,38 (m, 1 H), 1,82 (dd, 7=8,1, 5,6 Hz, 1 H), 2,20 (m, 2 H), 2,56 (dd, 7=13,6, 6,7 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 3,08 (m, 2 H), 3,93 (s, 3 H), 4,01 (dd, 7=11,9, 3,3 Hz, 1 H), 4,20 (d, 7=9,1 Hz, 1 H), 4,39 (d, 7=12,2 Hz, 1 H), 4,47 (dd, 7=9,7, 7,0 Hz, 1 H), 5,06 (d, 7=10,0 Hz, 1 H), 5,23 (d, 7=16,9 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 6,55 (d, 7=9,5 Hz, 1 H), 7,08 (d, 7=7,6 Hz, 1 H), 7,37 (t, 7=8,0 Hz, 1 H), 7,54 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,68 (d, 7=8,3 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>714.
Eksempel 254: Fremstilling av Forbindelse 254
Forbindelse 254 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 2-klor-kanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 25 g 2-klorkanelsyre anvendt, 14,6 g produkt oppnådd (59% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD ) 8 ppm 7,22 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,42 (t, 7=7,8 Hz, 1 H), 7,73 (d, 7=7,8 Hz, 1 H), 8,34 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 10,61 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>180.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 14,2 g 5-klor-2//-isokinolin-l-on anvendt, 8,28 g produkt oppnådd (53% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 ppm 7,60 (dd, 7=8. 6, 7,6 Hz, 1 H), 7,83 (m, 1 H), 8,00 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 8,29 (dt, 7=8,9,1,0 Hz, 1 H), 8,38 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>198.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 594 mg 1,5-diklor-isokinolin anvendt, 1174 mg produkt oppnådd (100% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>393.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 118 mg 4-(5-klor-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tøV-butylester anvendt, 154 mg produkt oppnådd (85% utbytte). Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>605.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 150 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(5-klor-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l-karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 91 mg produkt oppnådd (51% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,97 (m, 12 H), 1,17 (m, 10 H), 1,38 (dd, 7=9,4, 5,3 Hz, 1 H), 1,82 (dd, 7=8,0, 5,5 Hz, 1 H), 2,21 (m, 2 H), 2,58 (dd, 7=13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 4,01 (dd, 7=11,9,2,8Hz, 1 H, 4,16 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 4,47 (m, 2 H), 5,06 (d, 7=10,3 Hz, 1 H), 5,24 (d, 7=16,9 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 6,52 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 7,42 (t, 7=8,0 Hz, 1 H), 7,57 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 7,76 (d, 7=7,6 Hz, 1 H), 8,05 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 8,13 (d, 7=8,3 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>718.
Eksempel 255: Fremstilling av Forbindelse 255
Forbindelse 255 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 2-fluorkanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 16,6 g2-fluorkanelsyre anvendt, 8,55 g produkt oppnådd (51% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3COCD3) 8 ppm 6,62 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,32 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,47 (m, 2 H), 8,09 (m, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 8,4 g 5-fluor-2//-isokinolin-l-on anvendt, 7,5 g produkt oppnådd (80% utbytte).
Produkt:
Data: lU NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,43 (ddd, 7=9,7, 7,8, 0,9 Hz, 1 H), 7,62 (td, 7=8,2, 5,4 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=5,6 Hz, 1 H), 8,14 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 8,33 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>182.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 203 mg l-klor-5-fluor-isokinolin anvendt, 384 mg produkt oppnådd (90% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3SOCD3) 8 ppm 1,34, 1,36 (2s, 9 H, rotamerer), 2,35 (m, 1 H), 2,61 (m, 1 H), 3,65 (d, 7=12,23 Hz, 1 H), 3,80 (m, 1 H), 4,35 (m, 1 H), 5,70 (s, 1 H), 7,48 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 7,63 (m, 2 H), 7,99 (m, 1 H), 8,10 (d, 7=5,87 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>399.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 76 mg 4-(5-fluor-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester anvendt, 116 mg produkt oppnådd (99% utbytte). Produkt:
Trinn 5:
Modifikasjoner: 110 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(5-fluor-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 39 mg produkt oppnådd (30% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,5, 5,4 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,63 (dd, 7=13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (dd, 7=11,9, 3,1 Hz, 1 H), 4,23 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 4,52 (m, 2 H), 5,12 (dd, 7=10,3, 1,5 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,4 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 6,59 (d, 7=9,1 Hz, 1 H), 7,47 (m, 3 H), 8,02 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=6,1 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>724.
Eksempel 256: Fremstilling av Forbindelse 256
Forbindelse 256 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 2-difluormetoksy-kanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 10,7 g 2-difluormetoksy-kanelsyre anvendt, 2 g produkt oppnådd (18% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3SOCD3) 8 ppm 6,06 (m, 2 H), 6,42 (m, 2 H), 6,71 (s, 2 H), 7,35 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>212.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 300 mg 5-difluormetoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 300 mg produkt oppnådd (92% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 6,70 (t, 7=72,87 Hz, 1 H), 7,48 (m, 1 H), 7,64 (m, 1 H), 7,92 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,21 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 8,35 (d, 7=5,62 Hz, 1H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 230 mg l-klor-5-difluormetoksy-isokinolin anvendt, 360 mg produkt oppnådd (96% utbytte).
Produkt:
Trinn 4:
Modifikasjoner: 37 mg 4-(5-hydroksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre l-tert-butylester anvendt, 57 mg produkt oppnådd (99% utbytte). Produkt:
Trinn 5:
Modifikasjoner: 57 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(5-hydroksy-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 - karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 10 mg produkt oppnådd (15% utbytte). Produkt: Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,93 (m, 4 H), 1,13 (s, 9 H), 1,31 (m, 1 H), 1,49 (s, 9H), 1,89 (dd, 7=7,8, 5,4 Hz, 1 H), 2,16 (q, 7=8,8 Hz, 1 H), 2,40 (m, 1 H), 2,81 (m, 1 H), 2,90 (m, 1 H), 3,76 (m, 2 H), 4,30 (m, 1 H), 4,59 (dd, 7=10,2, 7,7 Hz, 1 H), 5,07 (dd, 7=10,3, 1,7 Hz, 1 H), 5,26 (dd, 7=17,2, 1,3 Hz, 1 H), 5,77 (dt, 7=17,2, 9,6 Hz, 1 H), 5,93 (s, 1 H), 7,24 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 7,51 (m, 2 H), 7,63 (t, 7=8,0 Hz, 1 H), 7,98 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 8,24 (d, 7=8,3 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>700.
Eksempel 257: Fremstilling av Forbindelse 257
Forbindelse 257 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fira at 4-fluorkanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 16,6 g 4-fluorkanelsyre anvendt, 8,2 g produkt oppnådd (49% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3COCD3) 8 ppm 6,57 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,21 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,50 (m, 1 H), 7,72 (dd, 7=8,68, 5,26 Hz, 1 H), 7,90 (dd, 7=9,54, 2,93 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 8,15 g 7-fluor-2//-isokinolin-l-on anvendt, 7,6 g produkt oppnådd (84% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 ppm 7,52 (td, 7=8,6,2,6 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=5,6 Hz, 1 H), 7,86 (dd, 7=9,1, 5,4 Hz, 1 H), 7,95 (dd, 7=9,5,2,5 Hz, 1 H), 8,26 (d, 7=5,6 Hz, 1 H); MS: (M+H)+ 182.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 191 mg l-klor-7-fluor-isokinolin anvendt, 350 mg produkt oppnådd (93% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+Na)<+>399.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 75 mg 4-(7-fluor-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester anvendt, 100 mg produkt oppnådd (85% utbytte) Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,16 (m, 4 H), 1,41 (m, 10 H), 1,88 (dd, 7=8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,56 (m, 1 H,) 2,94 (m, 1 H), 3,87 (m, 2 H), 4,41 (dd, 7=9,7, 7,0 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,8 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,78 (m, 2 H), 7,36 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,54 (m, 1 H), 7,78 (dd, 7=9,3,2,5 Hz, 1 H), 7,90 (dd, 7=9,1,5,1 Hz, 1 H), 7,96 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>611.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 95 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(7-fluor-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 55 mg produkt oppnådd (44% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 12 H), 1,22 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,3,5,4 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,2,5,5 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,63 (dd, 7=13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (dd, 7=11,5,3,2 Hz, 1 H), 4,22 (d, 7=9,5 Hz, 1 H), 4,47 (d, 7=11,7 Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=10,6, 7,5 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,3 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,61 (d, 7=9,5 Hz, 1 H), 7,36 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,52 (td, 7=8,9, 2,5 Hz, 1 H), 7,79 (dd, 7=9,4, 2,6 Hz, 1 H), 7,88 (dd, 7=8,7, 5,5 Hz, 1 H), 7,96 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>724.
Eksempel 258: Fremstilling av Forbindelse 258
Forbindelse 258 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 4-klorkanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 9,13 g 4-klorkanelsyre anvendt, 4 g produkt oppnådd (44% utbytte). Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3SOCD3) 8 ppm 6,58 (d, 7=7,1 Hz, 1 H), 7,20 (dd, 7=7,1, 5,9 Hz, 1 H), 7,72 (m, 2 H), 8,10 (m, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 3,5 g 7-klor-2//-isokinolin-l-on anvendt, 2,8 g produkt oppnådd (72% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (500 MHz, CDC13) 5 ppm 7,59 (d, 7=5,5 Hz, 1 H), 7,69 (dd, 7=8,9, 2,1 Hz, 1 H), 7,80 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 8,29 (d, 7=5,5 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>198.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 208 mg 1,7-diklor-isokinolin anvendt, 350 mg produkt oppnådd (89% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+Na)<+>415.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 79 mg4-(7-klor-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tøV-butylester anvendt, 119 mg produkt oppnådd (99% utbytte). Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,17 (m, 4 H), 1,43 (m, 10 H), 1,88 (dd, 7=8,31 5,4 Hz, 1 H), 2,29 (m, 2 H), 2,57 (dd, 7=13,7, 6,9 Hz, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,87 (m, 2 H), 4,42 (dd, 7=9,9, 6,9 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,3 Hz, 1 H), 5,31 (dd, 7=17,1, 1,2 Hz, 1 H), 5,78 (m, 2 H), 7,35 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,69 (dd, 7=8,7, 2,1 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=8,8 Hz, 1 H), 7,99 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=1,7 Hz, 1 H); MS:
(M+Na)<+>627.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 115 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(7-klor-isokinolin-l -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 36 mg produkt oppnådd (25% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+Na)<+>740.
Eksempel 259: Fremstilling av Forbindelse 259
Forbindelse 259 ble fremstilt ved å følge skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fira at 4-metylkanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 25 g 4-metylkanelsyre anvendt, 15,3 g produkt oppnådd (62% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 2,50 (s, 3 H), 6,54 (d, 7=7,1 Hz, 1 H), 7,13 (d, 7=7,1 Hz, 1 H), 7,49 (m, 2 H), 8,22 (s, 1 H), 11,49 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>160.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 15,3 g 7-metyl-2//-isokinolin-l-on anvendt, 5,15 g produkt oppnådd (30% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 2,58 (s, 3 H), 7,56 (m, 2 H), 7,73 (d, 7=8,3 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 8,20 (d, 7=5,6 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>178.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 205 mg l-klor-7-metyl-isokinolin anvendt, 350 mg produkt oppnådd (89 % utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>373.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 75 mg4-(7-metyl-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tetr-butylester anvendt, 107 mg produkt oppnådd (95% utbytte). Produkt:
Data: MS: (M+Na)<+>607.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 107 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(7-metyl-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 53 mg produkt oppnådd (41% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,02 (m, 12 H), 1,18 (s, 9 H), 1,24 (m, 1 H), 1,45 (dd, 7=9,4, 5,5 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,2, 5,5 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,50 (s, 3 H), 2,61 (dd, 7=13,8, 6,7 Hz, 1 H), 3,34 (s, 1 H), 4,09 (dd, 7=11,7, 3,2 Hz, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,42 (d, 7=12,0 Hz, 1 H), 4,57 (dd, 7=10,0, 7,1 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,3, 1,5 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,28 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,55 (d, 7=8,3 Hz, 1 H), 7,71 (d, 7=8,3 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,93 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>698.
Eksempel 260: Fremstilling av Forbindelse 260
Forbindelse 260 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 4-metoksykanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 33 g 4-metoksykanelsyre anvendt, 7 g produkt oppnådd (33% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (500 MHz, CD3COCD3) 5 ppm 3,90 (s, 3 H), 6,49 (d, 7=7,0 Hz, 1 H), 7,10 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,28 (dd, 7=8,6,2,8 Hz, 1 H), 7,57 (d, 7=8,9 Hz, 1 H), 7,71 (d, 7=2,8 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 4 g 7-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 3 g produkt oppnådd (68 % utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 3,98 (s, 3 H), 7,38 (dd, 7=8,9,2,6 Hz, 1 H), 7,52 (m, 2 H), 7,73 (d, 7=8,8 Hz, 1 H), 8,16 (d, 7=5,4 Hz, 1 H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 533 mg l-klor-7-metoksy-isokinolin anvendt, 1115 mg produkt oppnådd (100 % utbytte).
Produkt:
Trinn 4:
Modifikasjoner: 78 mg 4-(7-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tetr-butylester anvendt, 108 mg produkt oppnådd (99 % utbytte). Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,17 (m, 4H), 1,40 (m, 1 H), 1,43 (s, 9 H), 1,85 (dd, 7=8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,21 (m, 2 H), 2,51 (dd, 7=13,7, 6,6 Hz, 1 H), 2,93 (s, 1 H), 3,80 (m, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 4,41 (dd, 7=10,0, 6,6 Hz, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 5,11 (d, 7=11,3 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 7,01 (d, 7=7,8 Hz, 1 H),
7,22 (d, 7=5,6 Hz, 1 H), 7,32 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,58 (t, 7=8,0 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>601.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 100 mg 2-( 1 -cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(7-metoksy-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 - karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 30 mg produkt oppnådd (25% utbytte). Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 0,90 (m, 2 H), 0,95 (s, 9 H), 1,05 (m, 1 H), 1,12 (s, 9 H), 1,35 (m, 2 H), 1,70 (m, 1 H), 2,18 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 4,00 (m, 2 H), 4,27 (d, 7=12,0 Hz, 1 H), 4,45 (t, 7=8,6 Hz, 1 H), 5,09 (d, 7=10,8 Hz, 1 H), 5,23 (d, 7=16,9 Hz, 1 H), 5,62 (m, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 6,55 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,35 (d, 7=6,6 Hz, 1 H), 7,39 (d, 7=2,5 Hz, 1 H), 7,43 (dd, 7=8,8, 2,2 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=8,8 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>714.
Eksempel 261 og 262: Fremstilling av Forbindelser 261 og 262
Forbindelser 261 og 262 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 4-fluor-3-metoksykanelsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 19,6 g 4-fluor-3-metoksykanelsyre anvendt, 9,5 g produkt oppnådd (48% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3COCD3) 5 ppm 4,00 (s, 1 H), 6,49 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,29 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,86 (d, 7=11,74 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 9 g 7-fluor-6-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 7 g produkt oppnådd (70% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 4,04 (s, 3 H), 7,17 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,48 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 7,94 (d, 7=11,49 Hz, 1 H), 8,20 (d, 7=5,62 Hz, 1 H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 222 mg l-klor-7-fluor-6-metoksy-isokinolin anvendt, 406 mg produkter oppnådd.
Produkter:
Trinn 4:
Modifikasjoner: 400 mg av en blanding av 4-(7-fluor-6-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-1 -etr/-butylester og 4-( 1 -klor-6-metoksy-isokinolin-7-yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-1 -tert-butylester anvendt, 700 mg produkter oppnådd.
Produkt:
Trinn 5:
Modifikasjoner: 700 mg av en blanding av 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(7-fluor-6-metoksy-isokinolin-l-yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester og 4-( 1 -klor-6-metoksy-isokinolin-7-yloksy)-2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-pyrrolidin-1-karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 79 mg av forbindelse 261 og 80 mg av forbindelse 262 oppnådd.
Produkt:
Data for forbindelse 261:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,07 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,1, 5,6 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,60 (dd, 7=13,7, 6,9 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,02 (m, 4 H), 4,22 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=12,2 Hz, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,3, 6,6 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,6 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,28 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,37 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,75 (d, 7=11,7 Hz, 1 H), 7,91 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>754.
Data for forbindelse 262:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,07 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, 7=9,41, 5,26 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,31, 5,38 Hz, 1 H), 2,24 (q,
7=8,72 Hz, 2 H), 2,57 (dd, 7=13,82, 7,21 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,97 (d, 7=5,14 Hz, 3 H), 4,09 (m, 7=11,00 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,32 (m, 1 H), 4,50 (m, 7=16,87 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,52,1,71 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=17,12,1,47 Hz, 1 H), 5,38 (s, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,63 (s, 1 H), 7,66 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=5,62 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>732.
Eksempel 263: Fremstilling av Forbindelse 263
Forbindelse 263 ble fremstilt ved å følge Skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra trinn 1 og trinn 2.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 176 mg 1-klor-8-metyl-isokinolin anvendt, 370 mg produkt oppnådd (100 mg % utbytte).
Produkt:
Trinn 4:
Modifikasjoner: 149 mg 8-metyl-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre- 1-tetr-butylester anvendt, 230 mg produkt oppnådd (99% utbytte) Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,13 (m, 4 H), 1,42 (m, 10 H), 1,87 (dd, 7=8,2, 5,3 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,58 (dd, 7=13,9, 6,9 Hz, 1 H), 2,83 (s, 3 H) ,2,96 (m, 1 H), 3,85 (m, 2 H), 4,38 (dd, 7=10,2, 6,7 Hz, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,4,1,6 Hz, 1 H), 5,30 (dd, 7=17,1,1,2 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,28 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,36 (d, 7=6,9 Hz, 1 H), 7,53 (t, 7=7,7 Hz, 1 H), 7,62 (m, 1 H), 7,88 (d, 7=5,6 Hz, 1 H); MS:
(M+Na)<+>607.
Trinn 5:
Modifikasjoner: 220 mg 2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(8-metyl-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 -karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 90 mg produkt oppnådd ( 35% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,3,5,4 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,1,5,4 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,60 (dd, 7=13,9, 7,3 Hz, 1 H), 2,77 (s, 3 H), 2,94 (m, 1 H), 4,04 (dd, 7=11,9, 3,1 Hz, 1 H), 4,27 (d, .7=9,5 Hz, 1 H), 4,42 (d, 7=12,0 Hz, 1 H), 4,54 (dd, 7=10,8, 7,1 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,3 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,95 (s, 1 H), 6,63 (d, 7=9,1 Hz, 1 H), 7,28 (m, 2 H), 7,50 (t, 7=7,7 Hz, 1 H), 7,60 (d, 7=7,8 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,6 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>720.
Eksempel 264: Fremstilling av Forbindelse 264
Forbindelse 264 ble fremstilt ved å følge skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fira trinn 1 og trinn 2.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 203 mg l-klor-8-metoksy-isokinolin anvendt, 340 mg produkt oppnådd (85% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 1,34, 1,36 (2s, 9 H, rotamerer), 2,26 (m, 1 H), 2,49 (m, 1H), 3,67 (m, 2 H), 3,86 (s, 3 H), 4,31 (m, 1 H), 5,67 (br s, 1 H), 7,04 (d, 7=7,8 Hz, 1 H), 7,30 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,38 (d, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,62 (t, 7=8,0 Hz, 1 H), 7,93 (d, 7=5,6 Hz, 1 H), 12,64 (s, 1 H); MS: (M+Na)<+>411.
Trinn 4:
Modifikasjoner: 78 mg 8-metoksy-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre 1-tetr-butylester anvendt, 115 mg produkt oppnådd ( 96% utbytte). Produkt:
Trinn 5:
Modifikasjoner: 110 mg 2-( 1 -cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(8-metoksy-isokinolin-1 -yloksy)-pyrrolidin-1 - karboksylsyre-tert-butylester anvendt, 45 mg produkt oppnådd ( 34% utbytte). Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>714.
Eksempel 265 og 266: Fremstilling av Forbindelser 265 og 266
Forbindelser 265 og 266 ble fremstilt ved å følge skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 3-(2,3-dihydro-benzofuran-7-yl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 3,8 g 3-(2,3-dihydro-benzofuran-7-yl)-akrylsyre anvendt, 2 g produkt oppnådd (53% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,37 (t, 7=9,05 Hz, 1 H), 4,73 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 6,67 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,10 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,37 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,81 (d, 7=8,07 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>188.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 1,87 g 2,3-dihydro-7//-furo[2,3-f]isokinolin-6-on anvendt, 1,84 g produkt oppnådd ( 90% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 3,43 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 4,82 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 7,52 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 7,66 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 8,19 (d, 7=5,62 Hz, 1 H); MS (M+H)<+>206.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 206 mg 6-klor-2,3-dmydro-furo[2,3-fjisokinolin anvendt, 300 mg produkt-blanding oppnådd.
Produkter:
Trinn 4:
Modifikasjoner: 240 mg trinn 3 produktblanding anvendt, 350 mg produkt-blanding oppnådd.
Produkter:
Trinn 5:
Modifikasjoner: 331 mg trinn 4 produktblanding anvendt, 240 mg av forbindelse 265 og 24 mg av forbindelse 266 oppnådd.
Produkter:
Data for forbindelse 265:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 0,99 (m, 12 H), 1,16 (m, 10 H), 1,36 (m, 1 H), 1,81 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,18 (m, 2 H), 2,54 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,87 (m, 1 H), 3,31 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 4,01 (m, 1 H), 4,18 (s, 1 H), 4,36 (d, 7=11,74 Hz, 1 H), 4,46 (dd, 7=10,15, 7,21 Hz, 1 H), 4,70 (m, 2 H), 5,05 (d, 7=10,27 Hz, 1 H), 5,23 (d, 7=16,87 Hz, 1 H), 5,70 (m, 2 H), 7,23 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,31 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 7,63 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 7,82 (d, 7=5,87 Hz, 1 H); MS (M+H)<+>726.
Data for forbindelse 266:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=10,03, 5,14 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,83, 5,38 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,65 (dd, 7=12,96, 6,36 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,08 (dd, 7=12,35, 3,30 Hz, 1 H), 4,25 (s, 1 H), 4,54 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=10,27 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,91 (s, 1 H), 7,05 (d, 7=1,96 Hz, 1 H), 7,72 (m, 2 H), 8,02 (m, 2 H), 8,11 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 9,19 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>724.
Eksempel 267 og 268: Fremstilling av Forbindelser 267 og 268
Forbindelser 267 og 268 ble fremstilt ved å følge skjema 1 i Eksempel 250 bortsett fra at 3-(2,3-dihydro-benzofuran-4-yl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 3-fenyl-but-2-ensyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 1,14 g 3-(2,3-dihydro-benzofuran-4-yl)-akrylsyre anvendt, 600 mg produkt oppnådd (52% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,35 (t, 7=8,93 Hz, 2 H), 4,74 (t, 7=8,93 Hz, 2 H), 6,49 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 6,95 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 7,25 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 8,13 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS (M+H)<+>188.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 560 mg l,7-dihydro-2//-furo[3,2-f]isokinolin-6-on anvendt, 380 mg produkt oppnådd (48% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 3,47 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 4,84 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 7,24 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 7,33 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,20 (m, 2 H); MS (M+H)<+>206.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 105 mg 6-klor-l,2-dihydro-furo[3,2-fJisokinolin anvendt, 390 mg produktblanding oppnådd.
Produkter:
Trinn 4:
Modifikasjoner: 216 mg trinn 3 produktblanding anvendt, 330 mg produktblanding oppnådd.
Produkter:
Trinn 5:
Modifikasjoner: 330 mg trinn 4 produktblanding anvendt, 140 mg av forbindelse 267 og 25 mg av forbindelse 268 oppnådd.
Produkter:
Data for forbindelse 267:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,07 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,43 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,26 (m, 2 H), 2,61 (dd, 7=13,69, 7,09 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,42 (t, 7=9,05 Hz, 2 H), 4,05 (dd, 7=11,86, 3,55 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,50 (m, 2 H), 4,77 (t, 7=8,93 Hz, 2 H), 5,12 (m, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,03 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 7,12 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 7,91 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>726. Data for forbindelse 268:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,19 (s, 9 H) 1,26 (m, 1 H), 1,44 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,24 (d, 7=8,56 Hz, 2 H), 2,64 (m, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 4,07 (m, 7=3,42 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,54 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,91 (s, 1 H), 7,39 (d, 7=1,47 Hz, 1 H), 7,68 (m, 2 H), 7,96 (d, 7=1,96 Hz, 1 H), 8,12 (m, 2 H); MS: (M+H)<+>724.
Eksempel 269: Fremstilling av Forbindelse 269
Trinn 1:
En løsning av 2-trifluormetoksykanelsyre (11,6 g), difenylfosforylazid (13,75
g) og trietylamin (7,07 g) i benzen ( 50 ml) ble omrørt i 1 time. Etter filtrering gjennom et silikagelsjikt, vasking med benzen og konsentrasjon, ble residuet oppløst
i difenylmetan (80 ml) og tilbakeløpskokt i 3 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble faste stoffer oppsamlet gjennom et sjikt, vasket med benzen og tørket, hvilket ga 5,1 g (44%) av det ønskede produkt som et fast stoff.<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 6,79 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,29 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 7,57 (t, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,70 (d, 7=7,8 Hz, 1 H), 8,30 (d, 7=8,1 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>230.
Trinn 2:
En løsning av 5-trifluormetoksy-2//-isokinolin-l-on (4,58 g) i POCI3(50 ml) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Etter avkjøling og konsentrasjon ble residuet gjort basisk med 5N NaOH og ekstrahert med CH2CI2. Det organiske laget ble vasket med saltvann og tørket over MgS04. Etter konsentrasjon, ga rensning ved "flash" kromatografi med Biotage med 5% etylacetat i heksaner 4,347 g (88%) av det ønskede produkt som et fast stoff.<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,66 (m, 2 H), 7,87 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 8,31 (m, 1 H), 8,37 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>248.
Trinn 3:
Til en suspensjon av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} - karbaminsyre-tert-butylester (56 mg), l-klor-5-trifluormetoksy-isokinolin (25 mg) og LaCl3(25 mg) i DMF (1 ml) ved -78°C ble satt tert-BuOK (0,5 ml, 1 M i THF) og oppvarmet til romtemperatur. Etter omrøring i 30 min ble reaksjonen stanset med mettet NH4Cl-løsning og blandingen ekstrahert med etylacetat. Etter konsentrasjon ga rensning ved prep HPLC 35 mg (46%) av den ønskede forbindelse 269 som et fast stoff.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,03 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H) ,1,44 (dd, 7=9,7, 5,3 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,1,5,6 Hz, 1 H,) 2,28 (m, 2 H), 2,64 (dd, 7=13,7, 7,1 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,09 (m, 1 H), 4,21 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=11,5 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,92 (m, 1 H), 6,60 (d, 7=9,5 Hz, 1 H), 7,49 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 7,60 (m, 1 H), 7,69 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 8,11 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 8,22 (d, 7=8,3 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>790. Eksempel 270: Fremstilling av Forbindelse 270
Forbindelse 270 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 2-trifluormetylkanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 10 g 2-trifluormetylkanelsyre anvendt, 5 g produkt oppnådd (50% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 6,83 (m, 1 H), 7,33 (d, 7=7,58 Hz, 1 H), 7,63 (t, 7=7,83 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=7,58 Hz, 1 H), 8,57 (d, 7=8,07 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 4,4 g 5-trifluormetyl-2//-isokinolin-l-on anvendt, 3,5 g produkt oppnådd (73% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,75 (t, 7=7,95 Hz, 1 H), 7,90 (m, 1 H), 8,12 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 8,41 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 8,60 (d, 7=8,56 Hz, 1 H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 46 mg l-klor-5-trifluormetyl-isokinolin og 111 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 70 mg produkt oppnådd (47% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,23 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,65 (dd, 7=13,82, 6,97 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,56 (m, 2 H), 5,12 (m, 1 H), 5,30 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,90 (s, 1 H), 6,59 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,53 (d, 7=4,40 Hz, 1 H), 7,65 (t, 7=7,83 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 8,15 (d, 7=6,36 Hz, 1 H), 8,50 (d, 7=8,31 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>774.
Eksempel 271: Fremstilling av Forbindelse 271
Forbindelse 271 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 2-klorkanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 7 g 2-klorkanelsyre anvendt, 5 g produkt oppnådd (71% utbytte). Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 3,02 (m, 4 H), 3,91 (m, 4 H), 6,97 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,18 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,44 (m, 2 H), 8,02 (d, 7=7,83 Hz, 1 H); MS (M+H)+ 231.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 2,2 g 5-morfolin-4-yl-2//-isokinolin-l-on anvendt, 2,1 g produkt oppnådd (87% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CC13D) 5 ppm 3,09 (m, 4 H), 3,97 (m, 4 H), 7,32 (d, 7=7,58 Hz, 1 H), 7,60 (m, 1 H), 7,91 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 8,26 (d, 7=5,87 Hz, 1 H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 50 mg l-klor-5-morfolin-4-yl-isokinolin og 111 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 40 mg produkt oppnådd (26% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,07 (m, 12 H), 1,26 (m, 10 H), 1,44 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,62 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,06 (d, 7=3,97 Hz, 4 H), 3,94 (m, 4 H), 4,07 (d, 7=14,04 Hz, 1 H), 4,25 (s, 1 H), 4,45 (d, 7=12,21 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,34 (d, 7=7,32 Hz, 1 H), 7,45 (t, 7=7,78 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 7,91 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 7,97 (d, 7=5,80 Hz, 1 H).
Eksempel 272: Fremstilling av Forbindelse 272
Forbindelse 272 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 2,3-dimetoksykanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 10,4 g 2,3-dimetoksykanelsyre anvendt, 4,1 g produkt oppnådd (40% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,86 (s, 3 H), 3,96 (s, 3 H), 6,82 (d, 7=7,2 Hz, 1 H), 7,10 (d, 7=7,2 Hz, 1 H), 7,28 (d, 7=8,8 Hz, 1 H), 8,07 (d, 7=8,8 Hz, 1 H); MS: (M+H)+206.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 4,1 g 5,6-dimetoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 4,03 g produkt oppnådd (90% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,97 (s, 3 H), 4,05 (s, 3 H), 7,65 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,90 (dd, 7=5,87, 0,98 Hz, 1 H), 8,12 (m, 2 H).
Trinn 3:
Modifikasjoner: 22 mg l-klor-5,6-dimetoksy-isokinolin og 56 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 31 mg produkt oppnådd (42% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,26 (m, 10 H), 1,44 (s, 1 H), 1,88 (d, 7=7,32 Hz, 1 H), 2,24 (s, 2 H), 2,60 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,99 (s, 3 H), 4,06 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=10,68 Hz, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 7,35 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,46 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,97 (d, 7=8,85 Hz, 1 H).
Eksempel 273: Fremstilling av Forbindelse 273
Forbindelse 273 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 4-klor-3-metoksykanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 2,5 g 4-klor-3-metoksykanelsyre anvendt, 1,2 g produkt oppnådd (48% utbytte).
Produkt:
Data:<J>HNMR (400 MHz, CD3OD) 8 4,00(s, 3 H), 6,64(d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,15 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 1,05 g 7-klor-6-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 0,8 g produkt oppnådd (70% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,05 (s, 3 H), 7,13 (s, 1 H), 7,48 (d, 7=5,38 Hz, 1 H), 8,21 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>229.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 44 mg l,7-diklor-6-metoksy-isokinolin og 113 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 25 mg produkt oppnådd (17% utbytte)
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,07 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,26 (m, 1 H,) 2,60 (m, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,94 (m, 2 H), 3,98 (s, 3 H), 4,06 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,42 (d, 7=12,23 Hz, 1 H), 4,57 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=11,74 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,36 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,28 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,92 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>749.
Eksempel 274: Fremstilling av Forbindelse 274
Forbindelse 274 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 2-fluor-3-kanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 3,92 g 2-fluor-3-kanelsyre anvendt, 2,4 g produkt oppnådd (61% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR(400 MHz, CD3OD) 8 ppm 4,00 (s, 3 H), 6,72 (m, 1 H), 7,16 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,35 (t, 7=8,44 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,80 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 1,93 g 5-fluor-6-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 1,688 g produkt oppnådd (80% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (CDC13) 5 ppm 4,08 (s, 3 H), 7,44 (dd, 7=9,29, 7,83 Hz, 1 H), 7,75 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 8,22 (d, 7=5,87 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>212 .
Trinn 3:
Modifikasjoner: 41 mg l-klor-5-fiuor-6-metoksy-isokinolin og 133 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 70 mg produkt oppnådd (48% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 13 H), 1,21 (s, 9 H), 1,44 (dd, 7=9,78, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H), 2,24 (d, 7=9,29 Hz, 2 H), 2,62 (d, 7=13,94 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,05 (m, 4 H), 4,22 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,54 (dd, 7=9,66, 7,21 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=16,87 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,39 (m, 2 H), 7,95 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 8,00 (d, 7=9,29 Hz, 1 H).
Eksempel 275: Fremstilling av Forbindelse 275
Forbindelse 2 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 2-klor-3-metoksykanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 658 mg 2-klor-3-metoksykanelsyre anvendt, 360 mg produkt oppnådd (54% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR(400 MHz, CD3OD) 8 ppm 4,02 (s, 3 H), 6,91 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=7,58 Hz, 1 H), 7,35 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,27 (d, 7=9,05 Hz, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 350 mg 5-klor-6-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 300 mg produkt oppnådd (80% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,09 (s, 3 H), 7,43 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,93 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 8,30 (m, 2 H); MS (M+H)<+>229.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 68 mg l,5-diklor-6-metoksy-isokinolin og 167 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 130 mg produkt oppnådd (60% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,46 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,62 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,05 (m, 4 H), 4,22 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 4,46 (d, 7=11,49 Hz, 1 H), 4,54 (dd, 7=9,78, 6,36 Hz, 1 H), 5,13 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=15,89 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,40 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,55 (d, 7=6,36 Hz, 1 H), 8,01 (d, 7=6,36 Hz, 1 H), 8,20 (d, 7=9,29 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>749.
Eksempel 276: Fremstilling av Forbindelse 276
Forbindelse 276 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-klor-2-metoksykanelsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 4,24 g 3-klor-2-metoksykanelsyre anvendt, 2,4 g produkt oppnådd (57% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 3,93 (s, 1 H), 6,85 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,52 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>210.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 2,09 g 64dor-5-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 1,9 g produkt oppnådd (83% utbytte).
Produkt:
Data:<l>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,03 (s, 2 H), 7,63 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,86 (d, 7=5,14 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,32 (d, 7=5,62 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>229.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 91 mg l,6-diklor-5-metoksy-isokinolin og 226 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 114 mg produkt oppnådd (38% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 8 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,23 (m, 10 H), 1,44 (t, 7=6,72 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,95, 5,26 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,62 (dd, 7=13,33, 6,48 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,98 (s, 3 H), 4,03 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,51 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,32 (s, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,50 (m, 2 H), 7,95 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=5,87 Hz, 1 H); MS (MH<+>) 749. Eksempel 277: Fremstilling av Forbindelse 277
Forbindelse 277 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-(4-klor-fenyl)-3-metoksy-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 4,24 g 3-(4-klor-fenyl)-3-metoksy-akrylsyre anvendt, 130 mg produkt oppnådd (3% utbytte)
Produkt:
Data: lU NMR(400 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,96 (s, 3 H), 7,19 (dd, 7=8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,28 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 8,25 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>210.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 105 mg 7-klor-4-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 60 mg produkt oppnådd (71% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,05 (s, 3 H), 7,67 (dd, 7=8,80,1,96 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 8,16 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,24 (d, 7=1,96 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>229.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 46 mg l,7-diklor-4-metoksy-isokinolin og 113 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 50 mg produkt oppnådd (31% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 11 H), 1,16 (s, 9 H), 1,24 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,59 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,00 (s, 3 H), 4,05 (d, 7=11,74 Hz, 1 H), 4,19 (s, 1 H), 4,43 (d, 7=11,49 Hz, 1 H), 4,56 (dd, 7=10,03, 6,85 Hz, 1 H), 5,12 (d, 7=11,49 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,57 (s, 1 H), 7,67 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 8,08 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>748.
Eksempel 278: Fremstilling av Forbindelse 278
Forbindelse 278 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: En blanding av 6-metoksy-2//-isokinolin-l-on (700 mg) og NCS (532 mg) i MeCN (10 ml) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Filtrering ga 600 mg (72%) av det ønskede produkt som et fast stoff.
Produkt:
Data:<J>H NMR(400 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,96 (s, 1 H), 7,19 (dd, 7=8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,28 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 8,25 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>210.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 500 mg 4-klor-6-metoksy-2H-isokinolin-l-on anvendt, 400 mg produkt oppnådd.
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,01 (s, 3 H), 7,35 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,41 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 8,24 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 8,27 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>229.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 42 mg l,4-diklor-6-metoksy-isokinolin og 117 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 70 mg produkt oppnådd (47% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,05 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,61 (dd, 7=13,82, 6,72 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 4,04 (dd, 7=11,74,2,69 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,49 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 7,19 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 8,00 (s, 1 H), 8,13 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>749.
Eksempel 279: Fremstilling av Forbindelse 279
Forbindelse 279 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-metoksy-3-(3-metoksy-fenyl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 4,24 g 3-metoksy-3-(3-metoksy-fenyl)-akrylsyre anvendt, 400 mg produkt oppnådd (10% utbytte).
Produkt:
Trinn 2:
Modifikasjoner: 400 mg 4,6 -dimetoksy-2//-isokinolin-1-on anvendt, 300 mg produkt oppnådd (69% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 3,97 (s, 3 H), 4,05 (s, 3 H), 7,31 (dd, 7=9,17, 2,57 Hz, 1 H), 7,45 (d, 7=2,69 Hz, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 8,16 (d, 7=9,29 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>224.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 89 mg l-klor-4,6-dimetoksy-isokinolin og 223 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 160 mg produkt oppnådd (54% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CD3OD) 8 ppm 1,07 (m, 12 H), 1,21 (m, 10 H), 1,43 (m, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,58 (dd, 7=13,57, 6,97 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,99 (s, 3 H), 4,04 (dd, 7=11,74,2,93 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,39 (d, 7=11,98 Hz, 1 H), 4,50 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,87 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 7,12 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,40 (d, 7=2,20 Hz, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 8,04 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>744.
Eksempel 280: Fremstilling av Forbindelse 280
Forbindelse 280 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-(3-difluormetoksy-fenyl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 4,28 g 3-(3-difluormetoksy-fenyl)-akrylsyre anvendt, 3,1 g produkt oppnådd (72% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+H)+212.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 2 g 6-difluormetoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 1,5 g produkt oppnådd (61% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 6,69 (t, 7=72,75 Hz, 1 H), 7,49 (m, 2 H), 8,28 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 8,36 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>230.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 46 mg l-klor-6-difluormetoksy-isokinolin og 113 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 8 mg produkt oppnådd (5% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,05 (m, 12 H), 1,23 (m, 10 H), 1,44 (m, 2 H), 1,88 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H), 2,30 (m, 2 H), 2,67 (d, 7=13,94 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,07 (d, 7=10,27 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,53 (d, 7=6,85 Hz, 2 H), 5,13 (m, 1 H), 5,31 (s, 1 H), 5,76 (d, 7=47,93 Hz, 2 H), 7,11 (m, 2 H), 7,26 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 7,81 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 8,16 (m, 1 H); MS: (M+H)<+>700.
Eksempel 281: Fremstilling av Forbindelse 281
Forbindelse 281 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fira at 3-klor-3-fenyl-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 11 g 3-klor-3-fenyl-akrylsyre anvendt, 3,1 g produkt oppnådd (29% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 7,34 (s, 1 H), 7,52 (t, 7=7,58 Hz, 1 H), 7,77 (t, 7=7,46 Hz, 1 H), 7,90 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 8,39 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 11,37 (s, 1H); MS:MS:(M+H)+180.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 3,1 g 4-klor-2//-isokinolin-l-on anvendt, 2,3 g produkt oppnådd
(66% utbytte)
Produkt:
Data: lU NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,77 (ddd, 7=8,31, 7,09, 1,22 Hz, 1 H), 7,88 (ddd, 7=8,31, 7,09, 1,22 Hz, 1 H), 8,23 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,36 (d, 7=8,56 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>198.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 20 mg 1,4-diklor-isokinolin og 56 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 33 mg produkt oppnådd (30% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,41, 5,26 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=7,83, 5,62 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,63 (dd, 7=13,82, 6,97 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,06 (dd, 7=11,49, 2,45 Hz, 1 H), 4,22 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=10,76 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 6,60 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 7,63 (t, 7=7,58 Hz, 1 H), 7,86 (t, 7=7,70 Hz, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 8,11 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 8,25 (d, 7=8,31 Hz, 1 H); MS: (M+H)+718.
Eksempel 282: Fremstilling av Forbindelse 282
Forbindelse 2 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-klor-3-fenyl-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 20 g 3-klor-3-fenyl-akrylsyre anvendt, 2 g produkt oppnådd (8% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>230.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 2 g 6-trifluormetoksy-2H-isokinolin-l-on anvendt, 0,7 produkt oppnådd (33% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,51 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 8,31 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 8,40 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>248.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 50 mg l-klor-6-trifluormetoksy-isokinolin og 113 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 42 mg produkt oppnådd (27% utbytte).
Produkt:
Data:.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,05 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, 7=9,17, 5,50 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,63 (dd, 7=13,45, 7,09 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,06 (dd, 7=11,25, 2,45 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,13 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,39 (m, 2 H), 7,72 (s, 1 H), 8,05 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,31 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 9,18 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>768.
Eksempel 283: Fremstilling av Forbindelse 283
Forbindelse 283 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-(4-fluor-fenyl)-3-metoksy-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 3,82 g 3-(4-fluor-fenyl)-3-metoksy-akrylsyre anvendt, 198 mg produkt oppnådd (5% utbytte).
Produkt:
Data: MS: (M+H)<+>194.
Trinn 2: Modifikasjoner: 193 mg 7-fluor-4-metoksy-2//-isokinolin-l-on anvendt, 199 mg produkt oppnådd (94% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 4,05 (s, 3 H), 7,49 (m, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,86 (dd, 7=9,66, 2,57 Hz, 1 H), 8,23 (dd, 7=9,29, 5,38 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>212.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 42 mg l-klor-7-fiuor-4-metoksy-isokinolin og 112 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 40 mg produkt oppnådd (14% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,42 (m, 1 H), 1,87 (dd, 7=7,95, 5,50 Hz, 1 H), 2,23 (m, 2 H), 2,55 (dd, 7=13,08, 6,48 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,06 (s, 3 H), 4,09 (m, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,30 (d, 7=11,49 Hz, 1 H), 4,46 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,27 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,36 Hz, 1 H), 5,40 (s, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 7,46 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,56 (d, 7=2,20 Hz, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 8,18 (d, 7=9,05 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>749.
Eksempel 284: Fremstilling av Forbindelse 284
Forbindelse 284 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: En blanding av 7-metoksy-2//-isokinolin-l-on (876 mg) og NCS (665 mg) i MeCN (10 ml) ble tilbakeløpskokt i 3 timer. Filtrering ga 500 mg (47%) av det ønskede produkt som et fast stoff.
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 4,00 (s, 3 H), 7,58 (m, 2 H), 8,14 (d, J=10,03 Hz, 1 H), 8,17 (s, 1 H).
Trinn 2:
Modifikasjoner: 418 mg 4-klor-7-metoksy-2H-isokinolin-l-on anvendt, 410 mg produkt oppnådd (90% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,00 (s, 3 H), 7,49 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,55 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 8,21 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>229.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 42 mg l,4-diklor-7-metoksy-isokinolin og 117 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 50 mg produkt oppnådd (33% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,05 (m, 20 H), 1,24 (m, 2 H), 1,44 (m, 1 H), 1,89 (dd, 7=8,19, 5,50 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,62 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,07 (dd, 7=11,98, 3,42 Hz, 1 H), 4,19 (m, 1 H), 4,44 (d, 7=11,74 Hz, 1 H), 4,58 (dd, 7=10,27, 7,09 Hz, 1 H), 5,12 (m, 1 H), 5,31 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,78 (m, 2 H), 7,49 (m, 2 H), 7,91 (s, 1 H), 8,02 (m, 1 H); MS: (M+H)<+>749. Eksempel 285: Fremstilling av Forbindelse 285
Forbindelse 285 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at ble anvendt istedenfor 2-difiuormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1 og trinn 2:
Se forbindelse 256
Trinn 3:
Modifikasjoner: 46 mg l-klor-5-difluormetoksy-isokinolin og 111 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 40 mg produkt oppnådd (27% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H, 1,89 (m, 1 H), 2,22 (m, 2 H), 2,62 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,08 (m, 1 H), 4,23 (d, .7=9,54 Hz, 1 H), 4,52 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=10,76 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,61 Hz, 1 H), 5,75 (m, 7=10,03 Hz, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 6,60 (s, 1 H), 7,02 (t, 7=73,48 Hz, 1 H), 7,52 (m, 3 H), 8,07 (m, 7=5,75, 5,75 Hz, 2 H); MS: (M+Na)<+>772.
Eksempel 286: Fremstilling av Forbindelse 286
Forbindelse 286 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fira at 3-(2,3-dihydro-benzo[l,4]dioxin-5-yl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 4,12 g 3-(2,3-dihydro-benzo[l,4]dioxin-5-yl)-akrylsyre anvendt, 2,2 g produkt oppnådd (53% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 4,37 (m, 4 H), 6,83 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,02 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 7,12 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,79 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>204.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 2,05 g 2,3-dihydro-7//-l,4-dioksa-7-aza-fenantren-8-on anvendt, 1,5 g produkt oppnådd (68% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CDC13) 5 ppm 4,42 (m, 4 H), 7,24 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,77 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=5,87 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>222.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 88 mg 8-klor-2,3-dihydro-l,4-dioksa-7-aza-fenantren og 223 mg {1-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 140 mg produkt oppnådd (47% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,43 (dd, 7=9,05, 5,14 Hz, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,22 (d, 7=9,29 Hz, 2 H), 2,60 (dd, 7=13,45, 7,09 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,05 (dd, 7=11,62,2,81 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,44 (m, 6 H), 5,13 (d, 7=17,36 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,36 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 7,04 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,44 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,69 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,11 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>742.
Eksempel 287: Fremstilling av Forbindelse 287
Forbindelse 287 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fira at 3-(2,2-difluor-benzo[l,3]dioksol-4-yl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 4,56 g 3-(2,2-difluor-benzo[l,3]dioksol-4-yl)-akrylsyre anvendt, 2,2 g produkt oppnådd (55% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3DOD) 8 ppm 6,63 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,29 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,40 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>226.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 2,2 g 2,2-difluor-7//-l,3-dioksa-7-aza-cyklopenta[a]naftalen-6-on anvendt, 2,1 g produkt oppnådd (87% utbytte).
Produkt:
Data:<!>H NMR (500 Hz, CDC13) ppm 7,51 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,65 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,22 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,32 (d, 7=5,87 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>244.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 48 mg 6-klor-2,2-difluor-l,3-dioksa-7-aza-cyklopenta[a]naftalen og 113 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} - karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 40 mg produkt oppnådd (27% utbytte). Produkt: Data:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,02 (s, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,43 (m, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,32 (d, 7=3,67 Hz, 2 H), 2,64 (d, 7=13,45 Hz, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 4,05 (d, 7=11,49 Hz, 1 H), 4,19 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,12 (d, 7=9,78 Hz, 1 H), 5,32 (s, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 7,34 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,46 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,11 (m, 2 H); MS: (M+H)<+>764. Eksempel 288: Fremstilling av Forbindelse 288
Forbindelse 288 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 269 bortsett fra at 3-(2,2-difluor-benzo[l,3]dioksol-5-yl)-akrylsyre ble anvendt istedenfor 2-trifluormetoksykanelsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Modifikasjoner: 1 g 3-(2,2-difluor-benzo[l,3]dioksol-5-yl)-akrylsyre anvendt, 0,55 g produkt oppnådd.
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 MHz, CD3DOD) 5 ppm 6,69 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=7,09 Hz, 1 H), 7,47 (s, 1 H) 7,98 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>226.
Trinn 2:
Modifikasjoner: 0,5 g 2,2-difluor-6//-[l,3]dioksolo[4,5-g]isokinolin-5-on anvendt, 0,4 g produkt oppnådd.
Produkt:
Data: JH NMR (400 Hz, CDC13) 5 7,41 (s, 1 H), 7,57 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 8,27 (d, 7=5,80 Hz, 1 H); MS (M+H)<+>244.
Trinn 3:
Modifikasjoner: 48 mg 5-klor-2,2-difluor-[l,3]dioksolo[4,5-g]isokinolin og 112 mg {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-l-karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-karbaminsyre-tert-butylester anvendt, 30 mg produkt oppnådd.
Produkt:
Data:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 5 ppm 1,06 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,42 (m, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,26 (m, 2 H), 2,61 (dd, 7=13,57, 6,97 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,07 (dd, 7=11,86,2,81 Hz, 1 H), 4,22 (m, 1 H), 4,40 (d, 7=11,98 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,11 (d, 7=10,52 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,37 (s, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,63 (d, 7=5,62 Hz, 1 H), 7,99 (d, 7=5,62 Hz, 1 H).
Eksempel 289: Fremstilling av Forbindelse 289
En suspensjon av forbindelse 287 (15 mg) og Pt(S)/C (5%, 5 mg) i etylacetat (5 ml) ble hydrogenert ved 0,7 kg/cm<2>i 30 min. Etter filtrering ga konsentrasjon kvantitativt 15 mg av forbindelse 289 som et fast stoff.<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,09 (m, 26 H), 1,57 (m, 4 H), 2,30 (m, 1 H), 2,61 (m, 7=13,82, 7,21 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,05 (m, 7=13,94 Hz, 1 H), 4,19 (d, 7=9,54 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,89 (s, 1 H), 7,34 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,46 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=8,80 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>766.
Eksempel 290: Fremstilling av Forbindelse 290
Forbindelse 290 (15 mg, 100%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 15 mg av forbindelse 286. Data:<J>H NMR (400 Hz, CD3OD) 8 ppm 1,02 (m, 14 H), 1,23 (m, 12 H), 1,58 (m, 4 H), 2,25 (m, 1 H), 2,58 (dd, 7=13,82, 7,21 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,05 (m, 7=11,25,2,93 Hz, 1 H), 4,25 (d, 7=9,54 Hz, 1 H), 4,39 (m, 5 H), 4,52 (m, 7=10,03, 7,34 Hz, 1 H), 5,81 (s, 1 H), 7,03 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,43 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 7,69 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=6,11 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>744.
Eksempel 291: Fremstilling av Forbindelse 291
Forbindelse 291 (28 mg, 100%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 28 mg av forbindelse 251. Data:<*>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,01 (m, 15 H), 1,26 (m, 11 H), 1,37 (m, 1 H), 1,58 (m, 3 H), 2,25 (m, 1 H), 2,58 (dd, 7=13,6, 7,0 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,99 (s, 3 H), 4,06 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,44 (m, 1 H), 4,53 (dd, 7=10,3, 7,6 Hz, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 6,64 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 7,55 (m, 2 H), 7,71 (t, 7=7,3 Hz, 1 H), 8,09 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 8,14 (d, 7=8,1 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>738.
Eksempel 292: Fremstilling av Forbindelse 292
Forbindelse 292 (16 mg, 84%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 19 mg av forbindelse 253.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,90 (m, 15 H), 1,15 (m, 12 H), 1,48 (m, 3 H), 2,18 (m, 1 H), 2,51 (dd, 7=13,7, 6,9 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 3,90 (s, 3 H), 3,98 (dd, 7=11,6, 3,1 Hz, 1 H), 4,18 (d, 7=9,5 Hz, 1 H), 4,36 (d, 7=11,0 Hz, 1 H), 4,45 (dd, 7=10,2, 7,2 Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 6,56 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 7,05 (d, 7=7,6 Hz, 1 H), 7,34 (t, 7=8,1 Hz, 1 H), 7,51 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,65 (d, 7=8,3 Hz, 1 H), 7,86 (d, 7=6,1 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>738.
Eksempel 293: Fremstilling av Forbindelse 293
Forbindelse 293 (7 mg, 35%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 20 mg av forbindelse 252.<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,04 (m, 15 H), 1,27 (m, 12 H), 1,58 (m, 3 H), 2,27 (m, 1 H), 2,60 (m, 4 H), 2,96 (m, 1 H), 4,07 (dd, 7=11,7, 2,9 Hz, 1 H), 4,25 (s, 1 H), 4,46 (d, 7=12,0 Hz, 1 H), 4,54 (dd, 7=10,0, 7,6 Hz, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,39 (t, 7=7,7 Hz, 1 H), 7,44 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,53 (d, 7=6,9 Hz, 1 H), 8,00 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, 7=8,6 Hz, 1 H); MS: (M+H)<+>700.
Eksempel 294: Fremstilling av Forbindelse 294
Forbindelse 294 (14 mg, 78 %) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 18 mg forbindelse 254.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 0,94 (m, 15 H), 1,13 (m, 10 H), 1,20 (m, 2 H), 1,50 (m, 3 H), 2,21 (m, 1 H), 2,53 (dd, 7=13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 3,99 (dd, 7=11,4, 2,6 Hz, 1 H), 4,14 (d, 7=9,3 Hz, 1 H), 4,45 (m, 2 H), 5,79 (s, 1 H), 6,53 (d, 7=9,1 Hz, 1 H), 7,40 (t, 7=8,0 Hz, 1 H), 7,54 (d, 7=5,9 Hz, 1 H), 7,73 (d, 7=7,3 Hz, 1 H), 8,02 (d, 7=6,1 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,6 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>742.
Eksempel 295: Fremstilling av Forbindelse 295
Forbindelse 295 (30 mg, 100%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 30 mg av forbindelse 270. MS: (M+Na)<+>776.
Eksempel 296: Fremstilling av Forbindelse 296
Forbindelse 296 (6,3 mg, 33%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 20 mg av forbindelse 259. JH NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,04 (m, 15 H), 1,24 (m, 12 H), 1,59 (m, 3 H), 2,29 (m, 1 H), 2,50 (s, 3 H), 2,60 (dd, 7=13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,97 (m, 1 H), 4,09 (dd, 7=11,74, 2,93 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,43 (d, 7=11,74 Hz, 1 H), 4,59 (dd, 7=10,27,6,85 Hz, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,30 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,57 (dd, 7=8,31, 1,47 Hz, 1 H), 7,72 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=5,87 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H); MS: (M+H)<+>700.
Eksempel 297: Fremstilling av Forbindelse 297
Forbindelse 297 (40 mg, 100%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 40 mg forbindelse 263.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 0,98 (m, 13 H) 1,07 (m, 2 H) 1,27 (m, 12 H) 1,57 (m, 3 H) 2,27 (m, 1 H) 2,58 (dd, 7=14,7, 7,1 Hz, 1 H) 2,77 (s, 3 H) 2,96 (m, 1 H) 4,04 (m, 1 H) 4,27 (m, 1 H) 4,42 (d, 7=11,5 Hz, 1 H) 4,55 (dd, 7=10,6, 7,0 Hz, 1 H) 5,94 (s, 1 H) 6,65 (d, 7=9,5 Hz, 1 H) 7,28 (m, 2 H) 7,50 (t, 7=7,6 Hz, 1 H) 7,60 (d, 7=7,6 Hz, 1 H) 7,89 (d, 7=5,6 Hz, 1 H); MS:
(M+Na)<+>722.
Eksempel 298: Fremstilling av Forbindelse 298
Forbindelse 298 (29 mg, 100%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 29 mg av forbindelse 261.<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm
0,99 (m, 15 H), 1,25 (m, 12 H), 1,60 (m, 3 H), 2,28 (m, 1 H), 2,58 (m, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,02 (m, 4 H), 4,22 (dd, 7=8,8,4,4 Hz, 1 H), 4,48 (m, 2 H), 5,83 (s, 1 H), 7,27 (d, 7=5,6 Hz, 1 H), 7,36 (d, 7=8,8 Hz, 1 H), 7,75 (d, 7=11,3 Hz, 1 H), 7,90 (d, 7=5,9 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>756.
Eksempel 299: Fremstilling av Forbindelse 299
Forbindelse 299 (34 mg, 97%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 35 mg av forbindelse 274. JH NMR (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 1,01 (m, 16 H), 1,28 (m, 12 H), 1,58 (m, 2 H), 2,27 (s, 1 H), 2,59 (dd, 7=13,82, 6,97 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,02 (s, 3 H), 4,07 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,44 (m, 7=11,98 Hz, 1 H), 4,55 (d, 7=10,27 Hz, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,39 (m, 2 H), 7,95 (d, 7=6,11 Hz, 1 H), 8,00 (d, 7=9,29 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>756.
Eksempel 300: Fremstilling av Forbindelse 300
Forbindelse 300 (30 mg, 100%) ble fremstilt ved å følge skjema 3 i Eksempel 289 ved anvendelse av 30 mg forbindelse 262.<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1,27 (m, 30 H), 2,25 (s, 1 H), 2,54 (s, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 4,20 (m, 3 H), 4,51 (m, 7=10,52, 6,85 Hz, 1 H), 5,37 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,65 (d, 7=5,38 Hz, 1 H) 8,06 (d, 7=5,62 Hz, 1 H); MS: (M+Na)<+>773.
Seksjon G:
LC/MS metoden anvendt i seksjon G er den følgende:
4,6X50mm Xterra @3min gradient og 4 ml/min strømning
Skjema 1: (Generelt Skjema)
Skjema 2: (Generelt Skjema)
Eksempel 320: Fremstilling av Forbindelse 320
Forbindelse 320 ble fremstilt ved å følge skjema 1 og Skjema 3 ovenfor. Trinn 1 (Skjema 1):
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C, ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 1,3 ml, 2,25 mmol). Den resulterende røde løsning ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble 2-cyanopyridin (156 mg, 1,5 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Reaksjonen ble stanset med mettet NH4C1- løsning og blandingen ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble tørket (MgSC^) og konsentrert. Råproduktet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga gulaktig fast stoff som TFA-salt. (85 mg, 15% utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 3,91 (m, 3 H), 7,09 (dd, 7=9,05, 2,45 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,42 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,08 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,65 (d, 7=4,89 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,14 min.), MS m/z 253 (MH^).
Trinn 2 (Skjema 3, Trinn 1):
6-metoksy-3-pyridin-2-yl-2H-isokinolin-l-on-TFA-salt (85 mg, 0,232 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCl3(3,0 ml) i 2 dager. Deretter ble POCI3avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med 10N NaOH-løsning og det brune faste stoff ble oppsamlet som rent produkt. (62 mg, 99% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,063 min.), MS m/z 271 (MH<+>).
Trinn 3 (Skjema 3, Trinn 2):
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester (82 mg, 0,148 mmol) og LaCl3(36 mg, 0,148 mmol) i DMF (1,5 ml), ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 0,74 ml, 0,74 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble l-klor-6-metoksy-3-pyridin-2-yl-isokinolin (40 mg, 0,148 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som produkt (Forbindelse 320). (23 mg, 20 % utbytte)<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 0,87-1,08 (m, 11 H), 1,20-1,30 (m, 11 H), 1,43 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,22 (m, 1 H), 2,35 (m, 1 H), 2,69 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,16 (m, 1 H), 4,27 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,56 (m, 1 H), 5,10 (d, 7=11,3 Hz, 1 H), 5,27 (d, J=15,9 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 7,12 (d, J=7,33 Hz, 1 H), 7,31 (d, 7=1,96 Hz, 1 H), 7,40 (m, 1 H), 7,94 (dd, J=7,8 Hz, 1,5 Hz, 1 H), 8,11 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 8,45 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 8,62 (m, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,393min.), MS m/z 791 (MH<+>).
Eksempel 321: Fremstilling av Forbindelse 321
Skjema 5:
Kondensering av etylbrompyruvat med etyl-tiourinstoff i dioksan under tilbakeløp ga monoalkylamino-tiazol som HBr-salt i kvantitativt utbytte. Alkylering av 2-etylamino-tiazol-4-karboksylsyre-etylester med Etl i DMF ga 2-dietylamino-tiazol-4-karboksylsyre-etylester.
LC/MS m/z 229 (MH)<+>
Forbindelse 321 ble fremstilt ved å følge Skjema 2 og Skjema 3 ovenfor ved at 2-dietylamino-tiazol-4-karboksylsyre-etylester ble anvendt i trinn 1 i skjema 2. LC/MS (Retensjonstid 2,76 min): m/z 868 (MH<+>).
Eksempel 322: Fremstilling av Forbindelse 322
Forbindelse 322 ble fremstilt ved å følge Eksempel 321, bortsett fra at 2-dimetylamino-tiazol-4-karboksylsyre-etylester (Fremstilt i henhold til Skjema 5, bortsett fra at metyl-tiourinstoff og metyljodid ble anvendt istedenfor etyl-tiourinstoff og etyljodid) ble anvendt istedenfor 2-dimetylamino-tiazol-4-karboksylsyre-etylester i trinn 1 i skjema 2.
LC/MS (Retensjonstid 2,56 min): m/z 840 (MH<+>)
Eksempel 323: Fremstilling av Forbindelse 323
Forbindelse 323 ble fremstilt ved å følge Trinn 3 i Eksempel 324, bortsett fra at 3-klor-6-metoksy-benzo[d]isoksazol ble anvendt istedenfor l-klor-6-metoksy-3-pyridin-2-yl-isokinolin.
MS m/z 702 (M-H)"
Eksempel 324: Fremstilling av Forbindelse 324
Forbindelse 324 ble fremstilt ved å følge Trinn 3 i Eksempel 324, bortsett fra at 3-klor-benzo[d]isotiazol ble anvendt istedenfor l-klor-6-metoksy-3-pyridin-2-yl-isokinolin.
LC/MS (Retensjonstid 1,83 min): m/z 688 (M-H)~
Eksempel 325: Fremstilling av Forbindelse 325
Forbindelse 325 ble fremstilt ved å følge skjema 1 og Skjema 3 ovenfor. Trinn 1 (Skjema 1):
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 1,3 ml, 2,25 mmol). Den resulterende røde løsning ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble 4-cyanopyridin (164 mg, 1,575 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Reaksjonen ble stanset med mettet NUtCl-løsning og det gule presipitat ble oppsamlet som rent produkt. (145 mg, 38% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 5 3,91 (s, 3 H), 7,18 (dd, 7=8,8 Hz, 2,8 Hz, 1 H), 7,26 (m, 2 H), 8,06 (d, 7=6,0 Hz, 2H), 8,16 (d, 7=8,8 Hz, 1H), 8,84 (d, 7=6,0 Hz, 2H). LC-MS (retensjonstid: 1,300 min.), MS m/z 253 (MH<+>).
Trinn 2 (Skjema 3, trinn 1):
6-metoksy-3-pyridin-4-yl-2H-isokinolin-l-on (134 mg, 0,531 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCI3(6,0 ml) i 5 dager. Deretter ble POCI3avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med mettet NaHCC«3-løsning og det brune faste stoffet ble oppsamlet som rent produkt. (125 mg, 87% utbytte)
<J>H NMR(DMSO-d<6>, 400 MHz) 5 3,99 (s, 3 H), 7,53 (dd, 7=9,04 Hz, 2,44 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=2,69 Hz, 1 H), 8,26 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,30 (d, 7=5,38 Hz, 2 H), 8,73 (s, 1 H), 8,85 (d, 7=6,36 Hz, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,027 min.), MS m/z 271 (MH<+>).
Trinn 3 (Skjema 3, Trinn 2):
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester (83,5 mg, 0,15 mmol) og LaCl3(36,8 mg, 0,15 mmol) i DMF (1,5 ml), ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 0,75 ml, 0,75 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble l-klor-6-metoksy-3-pyridin-4-yl-isokinolin (40,6 mg, 0,15 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som produkt (Forbindelse 325). (1,6 mg, 1,3 % utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 0,90(m, 2 H), 1,02 (s, 9 H), 1,17-1,31 (m, 11 H), 1,42 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,23 (m, 1 H), 2,35 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 4,15 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,56 (m, 1 H), 5,10 (d, 7=10,76 Hz, 1 H), 5,27 (d, J=17,61 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,06 (s, 1 H), 7,14 (d, J=8,07 Hz, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 8,12 (d, 7=8,81 Hz, 1 H), 8,19(d, 7=6,12 Hz, 2 H), 8,61 (d, 7=5,63 Hz, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,523min.), MS m/z 791 (MH<+>).
Eksempel 326: Fremstilling av Forbindelse 326
Forbindelse 326 ble fremstilt ved å følge skjema 1 og Skjema 4 ovenfor. Trinn 1 ( Skjema 1) :
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 1,3 ml, 2,25 mmol). Den resulterende røde løsning ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble 4-dimetylamino-benzonitril (219 mg, 1,5 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Reaksjonen ble stanset med mettet NUjCl-løsning og det gule presipitat ble oppsamlet og utgnidd med eter, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som rent produkt. (247 mg, 56% utbytte)
<J>H NMR(DMSO-d<6>, 400 MHz) 8 2,97 (s, 6 H), 3,87 (s, 3 H), 6,72 (s, 1 H), 6,78 (d, 7=8,80 Hz, 2 H), 6,97 (dd, 7=8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,10 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,65 (d, 7=8,80 Hz, 2 H), 8,05 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 11,11 (s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,023 min.), MS m/z 295 (MH<+>).
Trinn 2 (Skjema 4, Trinn 1):
3-(4-dimetylarnino-fenyl)-6-rnetoksy-2H-isokinolin-l-on (245 mg, 0,83 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCI3(10,0 ml) i 2 dager. Deretter ble POCI3avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med ION NaOH-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De organiske lag ble samlet og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga et oransje, fast stoff som produkt (215 mg, 83% utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 3,01 (s, 6 H), 3,96 (s, 3 H), 6,88 (d, 7=9,05 Hz, 2 H), 7,20 (dd, 7=9,17, 2,57 Hz, 1 H), 7,28 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,96 (d, 7=9,05 Hz, 2 H), 8,13 (d, 7=9,29 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,543 min.), MS m/z 313 (MH<+>).
Trinn 3 (Skjema 4, Trinn 2):
En blanding av [4-(l-klor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dimetyl-amin (110 mg, 0,35 mmol) og tetrabutylfosfonium-hydrogendifluorid (0,5 g) ble oppvarmet ved 140°C i Smith mikrobølgereaktor i 20 min. Deretter ble den tilsatt vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble separert, vasket med vann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga et brunaktig fast stoff som produkt. (85 mg, 82% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,320 min.), MS m/z 297 (MH<+>).
Trinn 4 (Skjema 4, Trinn 3):
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester (111 mg, 0,2 mmol) og LaCl3(49 mg, 0,2 mmol) i DMF (2,0 ml), ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 1,0 ml, 1,0 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble [4-(l-fluor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dimetylamin (59 mg, 0,2 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et gulaktig fast stoff som produkt (Forbindelse 326). (17,5 mg, 11 % utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 0,97-1,08 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,31 (s, 9 H), 1,44 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,22 (m, 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 2,99 (m, 6 H), 3,91 (s, 3 H), 4,17 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 4,39 (m, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,10 (d, 7=10,76 Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=17,11 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 6,83 (m, 2 H), 6,95 (m, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,59 (s, 1H), 8,01 (m, 3 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,850 min.), MS m/z 834 (MH<+>).
Eksempel 327: Fremstilling av Forbindelse 327
Forbindelse 327 ble fremstilt ved å følge skjema 1 og Skjema 4 ovenfor. Trinn 1 ( Skjema 1) :
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 1,3 ml, 2,25 mmol). Den resulterende røde løsning ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble 4-dietylamino-benzonitril (261 mg, 1,5 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Reaksjonen ble stanset med mettet NH4C1-løsning og det gule presipitat ble oppsamlet som rent produkt. (215 mg, 44% utbytte)
<J>H NMR(400 MHz, DMSO-d<6>) 5 1,12 (m, 6 H), 3,39 (m, 4H), 3,87 (s, 3 H), 6,69 (s, 1 H), 6,72 (d, 7=9,05 Hz, 2 H), 6,96 (dd, 7=8,80,2,45 Hz, 1 H), 7,09 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,61 (d, 7=9,05 Hz, 2 H), 8,04 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 11,06 (s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,883 min.), MS m/z 323 (MH<+>).
Trinn 2 (Skjema 4, Trinn 1):
3-(4-dietylamino-fenyl)-6-metoksy-2H-isokinolin-l-on (207 mg, 0,642 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCI3(8,0 ml) i én dag. Deretter ble POCI3avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med mettet NaHCCvløsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De organiske lag ble samlet og tørket (MgSQO. Inndampning av løsningsmiddel ga et brunaktig fast stoff som produkt. (180 mg, 82% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,397 min.), MS m/z 341 (MH<+>).
Trinn 3 (Skjema 4, Trinn 2):
En blanding av [4-(l-klor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dietylamin (90 mg, 0,264 mmol) og tetrabutylfosfonium-hydrogendifluorid (0,5 g) ble oppvarmet ved 140 °C i Smith mikrobølgereaktor i 20 min. Deretter ble den tilsatt vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble separert, vasket med vann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga en gulaktig olje som produkt.
(70 mg, 82% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,253 min.), MS m/z 325 (MH<+>).
Trinn 4 (Skjema 4, Trinn 3):
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester (100 mg, 0,18 mmol) og LaCl3(66 mg, 0,27 mmol) i DMF (2,0 ml), ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 0,9 ml, 0,9 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble [4-(l-fluor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dietylamin (70 mg, 0,216 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC hvilket ga hvitt, fast stoff som produkt (Forbindelse 327). (18 mg, 12 % utbytte) !H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 0,95-1,07 (m, 11H), 1,18 (m, 6H), 1,25-1,38 (m, 11 H), 1,58 (m, 1 H), 1,85 (m, 1 H), 2,19 (m, 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,42 (m, 4 H), 3,90 (s, 3 H), 4,16 (m, 1 H), 4,28 (m, 1 H), 4,37 (m, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 5,07 (d, 7=11,0 Hz, 1 H), 5,25 (d, J=17,36 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 5,99 (s, 1 H), 6,77 (d, J=8,8 Hz, 2 H), 6,94 (d, J=9,05 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,56 (s, 1H), 7,95-8,02 (m, 3 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,690 min.), MS m/z 862(MH<+>).
Eksempel 328: Fremstilling av Forbindelse 328
Forbindelse 328 ble fremstilt ved å følge skjema 2 og Skjema 3 ovenfor. Trinn 1 ( Skjema 2 , Trinn 1) :
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 2,12 ml, 3,6 mmol). Den resulterende røde løsning ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble metyl-nikotinat (206 mg, 1,5 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 2 timer. Deretter ble reaksjonen stanset med mettet NH4Cl-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble tørket (MgSQ*) og konsentrert. Råproduktet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga gulaktig tykk olje som TFA-salt.
(124 mg, 19% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 1,740 min.), MS m/z 349 (M+Na<+>).
Trinn 2 ( Skjema 2 , Trinn 2) :
N,N-dietyl-4-metoksy-2-(2-okso-2-pyridin-3-yl-etyl)-benzamid (120 mg, 0,272 mmol) ble oppvarmet med ammoniumacetat (1 g) i 3 timer. Deretter ble det avkjølt og tilsatt vann. Ekstrahert med etylacetat og det organiske laget ble separert. Det ble deretter tørket (MgSC^) og konsentrert, hvilket ga et brunaktig fast stoff som produkt.
(65 mg, 95% utbytte)
<!>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 5 3,89 (s, 3 H), 6,93 (s, 1 H), 7,10 (dd, 7=8,80,2,45 Hz, 1 H), 7,19 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,52 (dd, 7=7,46,4,77 Hz, 1 H), 8,15 (m, 2 H), 8,64 (dd, 7=4,89,1,47 Hz, 1 H), 8,96 (d, 7=1,71 Hz, 1 H), 11,51 (s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,377 min.), MS m/z 253 (MH<+>).
Trinn 3 ( Skjema 3, Trinn 1) :
6-metoksy-3-pyridin-3-yl-2H-isokinolin-l-on (65 mg, 0,258 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCI3(2,5 ml) i 7 dager. Deretter ble POCI3avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med 10N NaOH-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble tørket (MgSC^) og konsentrert hvilket ga et gult, fast stoff som produkt. (27 mg, 39% utbytte) LC-MS (retensjonstid: 2,090 min.), MS m/z 271 (MH<+>).
Trinn 4 ( Skjema 3, Trinn 2) :
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} - karbaminsyre-tert-butylester (56 mg, 0,10 mmol) og LaCl3(25 mg, 0,10 mmol) i DMF (1,5 ml) ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 0,5 ml, 0,5 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble l-klor-6-metoksy-3-pyridin-3-yl-isokinolin (27 mg, 0,10 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC hvilket ga et hvitt, fast stoff som produkt (Forbindelse 328). (17 mg, 21 % utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 0,95 (m, 2 H), 1,02 (s, 9 H), 1,20-1,30 (m, 11 H), 1,41 (m, 1 H), 1,86 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,35 (m, 1 H), 2,67 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 4,47 (d, 7=11,99 Hz, 1 H), 4,55 (m, 1 H), 5,09 (d, 7=10,02 Hz, 1 H), 5,26 (d, J=17,85 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 7,29 (d, 7=1,96 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 8,09 (d, 7=9,05 Hz, 1 H), 8,50-8,58 (m, 2 H), 9,28 (s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,453 min.), MS m/z 791 (MH<+>).
Eksempel 329: Fremstilling av Forbindelse 329
Forbindelse 329 ble fremstilt ved å følge skjema 2 og Skjema 4 ovenfor. Trinn 1 ( Skjema 2 , Trinn 1) :
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 2,2 ml, 3,75 mmol). Den resulterende røde løsning ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble N,N-dimetylantranilsyre-metylester (269 mg, 1,5 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 2 timer. Deretter ble reaksjonen stanset med mettet Nød-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble tørket (MgSQO og konsentrert. Råproduktet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga gulaktig tykk olje som produkt. (256 mg, 46% utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 0,99-1,13 (m, 6 H), 3,23-3,31 (m, 8 H), 3,39 (m, 2 H), 3,82 (s, 3 H), 4,35 (s, 2 H), 6,91 (dd, 7=8,44, 2,57 Hz, 1 H), 6,99 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,22 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 7,69 (t, 7=7,70 Hz, 1 H), 7,84 (m, 1 H), 7,96 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=7,83 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: l,557min.), MS m/z 369(MH^).
Trinn 2 ( Skjema 2, Trinn 2) :
2-[2-(2-dime1ylamino-fenyl)-2-okso-etyl]-N,N-dietyl-4-metoksy-benzamid (250 mg, 0,678 mmol) ble oppvarmet med ammoniumacetat (1,5 g) i 2 timer. Deretter ble det avkjølt og tilsatt vann. Ekstrahert med etylacetat og det organiske laget ble separert. Det ble deretter tørket (MgSC^) og konsentrert, hvilket ga et gulaktig fast stoff som produkt. (125 mg, 63% utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 2,95 (s, 6 H), 3,92 (s, 3 H), 6,92 (s, 1 H), 7,12 (dd, 7=8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,16 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,55 (m, 2 H), 7,63 (d, 7=7,83 Hz, 1 H), 8,20 (d, 7=9,05 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,097 min.), MS m/z 295 (MH<+>).
Trinn 3 ( Skjema 4, Trinn 1) :
3-(2-dimetylamino-fenyl)-6-metoksy-2H-isokinolin-l-on (125 mg, 0,425 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCI3(4,0 ml) i én dag. Deretter ble POCI3avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med 10N NaOH-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De organiske lag ble samlet og tørket (MgSCU). Inndampning av løsningsmiddel ga et brunaktig fast stoff som produkt (82 mg, 62% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,040 min.), MS m/z 313 (MH<+>).
Trinn 4 ( Skjema 4, Trinn 2) :
En blanding av [2-(l-ldor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dimetyl-amin (82 mg, 0,262 mmol) og tetrabutylfosfonium-hydrogendifluorid (1,0 g) ble oppvarmet ved 140°C i Smith mikrobølgereaktor i 20 min. Deretter ble det tilsatt vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble separert, vasket med vann og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga råproduktet som ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som produkt. (85 mg)
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 3,41 (s, 6 H), 4,00 (s, 3 H), 7,42 (dd, 7=9,05,2,45 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,71 (m, 2 H), 7,99 (m, 1 H), 8,16 (m, 2 H), 8,31 (s, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,873 min.), MS m/z 297 (MH<+>).
Trinn 5 ( Skjema 4, Trinn 3) :
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester (56 mg, 0,1 mmol) og LaCl3(25 mg, 0,1 mmol) i DMF (1,0 ml), ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 0,5 ml, 0,5 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble [2-(l-fluor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dimetyl-amin (30 mg, 0,1 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC hvilket ga et hvitt, fast stoff som produkt (Forbindelse 329). (4,0 mg, 5 % utbytte)
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 0,98-1,08 (m, 11 H), 1,16-1,32 (m, 11 H), 1,40 (m, 1 H), 1,85 (m, 1 H), 2,16- 2,32 (m, 2 H), 2,60-2,71 (m, 7 H), 2,92 (m, 1 H), 3,91 (s, 3 H), 4,08 (m, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,55 (m, 1 H), 5,10 (d, 7=10,27 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=18,09 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,05 (d, 7=6,85 Hz, 1 H), 7,10-7,20 (m, 2 H), 7,29 (m, 1 H), 7,63 (d, 7=7,58 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 8,07 (d, 7=8,56 Hz, 1H).
LC-MS (retensjonstid: 2,550 min.), MS m/z 834 (MH<+>).
Eksempel 330 : Fremstilling av Forbindelse 330
Forbindelse 330 ble fremstilt ved å følge skjema 2 og Skjema 4 ovenfor. Trinn 1 ( Skjema 2. Trinn 1 >:
Til en løsning av N,N-dietyl-4-metoksy-2-metyl-benzamid (332 mg, 1,5 mmol) i THF (15 ml) ved -78°C, ble satt t-BuLi (1,7 M løsning i pentan, 2,2 ml, 3,75 mmol). Den resulterende røde løsningen ble omrørt ved -78°C i 10 min, deretter ble (3- dimetylamino)benzosyre-metylester (269 mg, 1,5 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 2 timer. Deretter ble reaksjonen stanset med mettet NH4CI-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble tørket (MgS04) og konsentrert. Råproduktet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga gulaktig tykk olje som TFA-salt. (245 mg, 33% utbytte)
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1,01 (t, 7=6,85 Hz, 3 H), 1,09 (m, 3 H), 3,11 (s, 6H), 3,21 (m, 2 H), 3,40 (m, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 4,39 (s, 2 H), 6,84-6,91 (m, 2 H), 7,19 (d, 7=8,32 Hz, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,49 (t, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,66-7,71 (m, 2 H). LC-MS (retensjonstid: 1,930 min.), MS m/z 369(MH<+>).
Trinn 2 ( Skjema 2 , Trinn 2) :
2-[2-(3-dimetylamino-fenyl)-2-okso-etyl]-N,N-dietyl-4-metoksy-benzamid (240 mg, 0,497 mmol) ble oppvarmet med ammoniumacetat (2,0 g) i 2,5 timer. Deretter ble det avkjølt og tilsatt vann. Et brunaktig fast stoff ble oppsamlet som rent produkt. (95 mg, 65% utbytte)
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 2,98 (s, 6 H), 3,88 (s, 3 H), 6,74-6,87 (m, 2 H), 7,01-7,07 (m, 3 H), 7,18 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,28 (t, 7=7,82 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=8,80 Hz, 1H).
LC-MS (retensjonstid: 1,773 min.), MS m/z 295 (MH<+>).
Trinn 3 ( Skjema 4. Trinn 1) :
3-(3-dimetylamino-fenyl)-6-metoksy-2H-isokinolin-l-on (92 mg, 0,312 mmol) ble oppvarmet under tilbakeløp med POCl3(3,0 ml) i 2 dager. Deretter ble POCl3
avdestillert og residuet ble behandlet med is. Det ble deretter nøytralisert med mettet NaHCC«3-løsning og ekstrahert med etylacetat to ganger. De organiske lag ble samlet og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en brunaktig tykk olje som produkt. (72 mg, 74% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,297 min.), MS m/z 313 (MH<+>).
Trinn 4 ( Skjema 4, Trinn 2) :
En blanding av [3-(l-klor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dimetylamin (72 mg, 0,23 mmol) og tetrabutylfosfonium-hydrogendifluorid (0,5 g) ble oppvarmet ved 140°C i Smith mikrobølgereaktor i 20 min. Deretter ble det tilsatt vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble separert, vasket med vann og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en brunaktig olje som produkt. (58 mg, 85% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,193 min.), MS m/z 297 (MH<+>).
Trinn 5 ( Skjema 4, Trinn 3) :
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-tert-butylester (86 mg, 0,155 mmol) og LaCl3(57 mg, 0,233 mmol) i DMF (1,5 ml), ble satt kalium-t-butoksyd (1,0 M løsning i THF, 0,5 ml, 0,5 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time , deretter ble [3-(l-fluor-6-metoksy-isokinolin-3-yl)-fenyl]-dimetylamin (55 mg, 0,185 mmol) tilsatt. Den ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Deretter ble den behandlet med vann og filtrert. Filtratet ble konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som produkt (Forbindelse 330). (8,0 mg, 6 % utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 0,99-1,09 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,29 (s, 9 H), 1,42 (m, 1 H), 1,86 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,33 (m, 1 H), 2,70 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,00 (s, 6 H), 3,92 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 4,44-4,57 (m, 2 H), 5,10 (d, 7=1 1,00 Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=16,87 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,01 (s, 1 H), 6,63 (d, 7=8,80 Hz, 1 H), 7,03 (d, 7=6,85 Hz, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,28 (t, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,45 (d, 7=7,82 Hz, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,72 (s, 1 H), 8,05 (d, 7=8,80 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 2,707 min.), MS m/z 834 (MH<+>).
Eksempel 331: Fremstilling av Forbindelse 331
Forbindelse 331 ble fremstilt ved metodene beskrevet her.
Eksempel 334: Fremstilling av Forbindelse 334
Forbindelse 334 ble fremstilt på følgende måte:
Trinn 1:
Til en løsning av Boc-cis-HYP-OMe (122,6 mg, 0,5 mmol) i THF (15 ml) ved 0°C, ble satt trifenylfosfin (196,7 mg, 0,75 mmol) og benzo[d]isoksazol-3-ol (81 mg, 0,6 mmol). Deretter ble DEAD (0,118 ml, 0,75 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur, og omrørt i 3 timer. Deretter ble løsningsmiddel inndampet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs tykk olje.
(117 mg, 54% utbytte)
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 1,41 (m, 9 H), 2,38 (m, 1 H), 2,75 (m, 1 H), 3,75 (m, 3 H), 3,81 (m, 1 H), 3,90 (m, 1 H), 4,47 (m, 1 H), 5,44 (m, 1 H), 7,31 (t, 7=7,46 Hz, 1 H), 7,47 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 7,59 (t, 7=7,83 Hz, 1 H), 7,66 (d, 7=8,07 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 2,65 min.), MS m/z 363(MH<+>).
Noe av koblingsproduktet (85 mg, 0,235 mmol) ble deretter oppløst i 4N HC1 i dioksan (1,5 ml) og omrørt i 3 timer. Inndampning av løsningsmiddel ga en gulaktig olje som HCl-salt. (85 mg, >100% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 1,327 min.), MS m/z 263(MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av 4-(faenzo[d]isoksazol-3-yloksy)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester-hydrokloridsalt (85 mg, 0,285 mmol) i CH3CN (10 ml) ble satt N-boc-L-t-leucin (99 mg, 0,427 mmol), DIEA (0,25 ml, 1,425 mmol) og koblingsreagenset HOBt (65 mg, 0,427 mmol) og HBTU (162 mg, 0,427 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC«4 og konsentrert. De ble deretter renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs tykk olje som produkt. (63 mg, 46% utbytte)
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 1,01 (s, 9 H), 1,17 (s, 9 H), 2,34 (m, 1 H), 2,78 (dd, 7=14,13, 7,83 Hz, 1 H), 3,72 (s, 3 H), 4,00 (dd, 7=12,22, 3,42 Hz, 1 H), 4,19 (s, 1 H), 4,57(d, 7=12,23 Hz, 1 H), 4,68 (m, 1 H), 5,51 (m, 1 H), 7,27 (m, 1 H), 7,47 (d, 7=8,56 Hz, 1 H), 7,57 (m, 1H), 7,63 (d, 7=8,07 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,737 min.), MS m/z 498 (M+Na<+>).
Trinn 3:
Til en løsning av 4-(l3enzo[d]isoksazol-3-yloksy)-l-(2-tert-butoksykarbonylamino-33-a^metyl-butyryl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (63 mg, 0,132 mmol) i THF (3,5 ml), metanol (2,0 ml) og vann (0,5 ml) blanding, ble satt litiumhydroksyd-monohydrat (83 mg, 1,89 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den surgjort med IN HCl-løsning til pH=3 til 5 og konsentrert. Ekstrahert med etylacetat (2x30 ml) og de organiske lag ble samlet og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en gulaktig olje for videre anvendelse (61 mg, 100 % utbytte)
Til en løsning av forbindelsen ovenfor (61 mg, 0,132 mmol) i CH3CN (8 ml) ble satt (1R,2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (42 mg, 0,158 mmol), DIEA (0,115 ml, 0,66 mmol) og koblingsreagenset HOBt (30 mg, 0,198 mmol) og HBTU (75 mg, 0,198 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC«4 og konsentrert. De ble deretter renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gul film som sluttprodukt (Forbindelse 334).
(24 mg, 27% utbytte)
1H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1,01 (s, 9 H), 1,05 (m, 2 H), 1,12-1,26 (m, 11 H), 1,43 (m, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,17-2,33 (m, 2 H), 2,67 (dd, 7=12,96, 5,87 Hz, 1H), 2,93 (m, 1 H), 4,05 (m, 1 H), 4,22 (m, 1 H), 4,49 (m, 2 H), 5,11 (d, 7=10,21Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,55 (s, 1H), 5,74 (m, 1 H), 7,29 (m, 1 H), 7,48 (d, 7=8,32 Hz, 1H), 7,54-7,64 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,767 min.), MS m/z 696 (M+Na<+>).
Eksempel 335: Fremstilling av Forbindelse 335
Trinn 1: (Skjema 1, trinn 1)
Til en løsning av (2S, 4R) 4-hydroksy-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre 1-tert-butylester (0,25 g, 1,08 mmol) i CH3CN (10 ml) ble satt (1R,2S) (1-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (0,346 g, 1,30 mmol), DIEA (0,94 ml, 5,41 mmol) og koblingsreagenset HOBt (0,248 g, 1,62 mmol) og HBTU (0,615 mg, 1,62 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC^og konsentrert hvilket ga en gul olje. Den ble renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs tykk olje som deretter ble oppløst i 4N HC1 i dioksan (5 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Inndampning av løsningsmiddel ga hvitt fast stoff som produkt for anvendelse videre. (200 mg, 49% utbytte).
LC-MS (retensjonstid: 0,647 min.), MS m/z 344 (MH<+>).
Trinn 2: (Skjema 1, trinn 2)
Til en løsning av forbindelsen ovenfor (200 mg, 0,527 mmol) i CH3CN (10 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (0,15 g, 0,79 mmol), DIEA (0,46 ml, 2,63 mmol) og koblingsreagenset HOBt (0,121 g, 0,79 mmol) og HBTU (0,30 g, 0,79 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC«4 og konsentrert, hvilket ga en gulaktig olje. Den ble renset ved Prep. HPLC-kolonne hvilket ga et hvitt, fast stoff som sluttprodukt (mellomprodukt 2). (145 mg, 54% utbytte)
<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 5 0,99-1,10 (m, 11 H), l,24(m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,5, 5,5 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=7,9, 5,5 Hz, 1 H), 1,97 (m, 1 H), 2,13 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,77-3,88 (m, 2 H), 4,33-4,39 (m, 2 H), 4,49 (m, br, 1 H), 5,13(d, 7=10,4 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,1 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,590 min.), MS m/z 515 (MH<+>).
Trinn 3: (Skjema 2)
Til en løsning av 2,4-diklorpyrimidin (149 mg, 1 mmol) i THF (5 ml), ble satt tetrakis(trifenylfosfin) palladium (23 mg, 2 mol%) og 0,5M løsning av fenylsink-bromid (2,1 ml, 1,05 mmol) i THF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 50°C natten over. Deretter ble den tilsatt mettet ammoniumklorid-løsning og ekstrahert med EtOAc to ganger. De organiske lag ble samlet, vasket med vann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga et gult residuum som ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som 2-klor-4-fenyl-pyrimidin for videre anvendelse.
Til en løsning av mellomprodukt 2 (20 mg, 0,039 mmol) i DMF (3 ml) ble satt NaH (3,9 mg 60% dispersjon i mineralolje, 0,0975 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur, og omrørt i 1 time. Deretter ble 2-klor-4-fenyl-pyrimidinet fremstilt ovenfor (18 mg som rå) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Den ble deretter behandlet med vann og ekstrahert med EtOAc. Det organiske laget ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga en gulaktig olje som deretter ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en tykk fargeløs olje som sluttprodukt (Forbindelse 335) som TFA-salt.(5,5 mg, 18% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 300 MHz) 8 0,92-1,12 (m, 11 H). 1,25 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,2, 5,5 Hz, 1 H), 1,89 (dd, 7=8,1, 5,5 Hz, 1H), 2,17-2,37 (m, 2 H), 2,57 (m, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,52 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,24-4,38 (m, 2 H), 4,51 (m, 1 H), 5,13 (d, 7=10,2 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=17,2 Hz, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,48-7,60 (m, 3 H), 7,66 (d, 7=5,3 Hz, 1 H), 8,18 (m, 2 H), 8,60 (d, 7=5,1 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,947 min.), MS m/z 669 (MH<+>).
Eksempel 336: Fremstilling av Forbindelse 336
Trinn 1:
Til en løsning av 2,4-diklorpyrimidin (149 mg, 1 mmol) i THF (5 ml) ble satt tetrakis(trifenylfosfin)palladium (58 mg, 5 mol%) og 0,5M løsning av 2-pyridinylsinkbromid (2,4 ml, 1,2 mmol) i THF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 50°C natten over. Deretter ble den tilsatt mettet ammoniumklorid-løsning og ekstrahert med EtOAc to ganger. De organiske lag ble samlet, vasket med vann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga et gult residuum som ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som produkt. (11 mg, 3,6 % utbytte)<J>H NMR (500 MHz, CD3OD) 5 7,61 (m, 1 H), 8,07 (m, 1 H), 8,36 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 8,50 (d, 7=7,94 Hz, 1 H), 8,75 (d, 7=3,97 Hz, 1 H), 8,82 (d, 7=5,19 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,440 min.), MS m/z 192 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av mellomprodukt 2 fra Eksempel 335 (15 mg, 0,029 mmol) i DMF (3 ml), ble satt NaH (1,75 mg 60% dispersjon i mineralolje, 0,0728 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur, og omrørt i 1 time. Deretter ble 2-klor-4-pyridin-2-yl-pyrimidin (9,5 mg, 0,0311 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Den ble deretter behandlet med vann og ekstrahert med EtOAc. Det organiske laget ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga gulaktig olje som deretter ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en gulaktig film som sluttprodukt (Forbindelse 336) som TFA salt. (3,5 mg, 15% utbytte)
<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,03 (s, 9 H), 1,08 (m, 2 H), 1,24 (m, 2 H), 1,43 (dd, 7=9,77, 5,50 Hz, 1 H), 1,89 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,31 (m, 1 H), 2,57 (m, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 4,13 (m, 1 H), 4,29 (s, 1 H), 4,36 (d, 7=11,91 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,13 (d, 7=10,08 Hz, 1 H), 5,31 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,88 (m, 1 H), 7,64 (m, 1 H), 8,06-8,13 (m, 2 H), 8,54 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 8,73-8,76 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,787 min.), MS m/z 670 (MH<+>).
Eksempel 337: Fremstilling av Forbindelse 337
Trinn 1:
Til en løsning av 2,4-diklorpyrimidin (149 mg, 1 mmol) i DMF (5 ml) ble satt diklor-bis(trifenylfosfin) palladium (II) (35 mg, 5 mol%) og 2-(tributylstannyl)tiofen (0,38 ml, 1,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 70°C i 3 timer. Deretter ble den tilsatt mettet KF-løsning i metanol (20 ml) og omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert med en liten mengde av silikagel og residuet ble filtrert gjennom filterpapir og vasket med EtOAc. Filtratet ble deretter konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som produkt. (110 mg, 35 % utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7,20 (dd, 7=5,01, 3,79 Hz, 1 H), 7,74 (dd, 7=5,01, 1,10 Hz, 1 H), 7,77 (d, 7=5,38 Hz, 1 H), 7,98 (dd, 7=3,79, 1,10 Hz, 1 H), 8,55 (d, 7=5,38 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,453 min.), MS m/z 197 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av mellomprodukt 2 fra Eksempel 335 (20 mg, 0,039 mmol) i DMF (3 ml) ble satt NaH (7,8 mg 60% dispersjon i mineralolje, 0,195 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 1 time. Deretter ble 2-klor-4-tiofen-2-yl-pyrimidin (16,9 mg, 0,0544 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Den ble deretter behandlet med vann og ekstrahert med EtOAc. Det organiske laget ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga gulaktig olje som deretter ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga to produkter (Forbindelse 337 og mellomprodukt 3).
Forbindelse 337: (gulaktig film, 3,0 mg, 11% utbytte))
<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,98-1,07 (m, 11 H), 1,22 (m, 2 H), 1,41 (dd, 7=9,54, 5,62 Hz, 1H), 1,86 (dd, 7=8,32, 5,63 Hz, 1 H), 2,19- 2,31 (m, 2 H), 2,52 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 4,09 (m, 1 H), 4,25-4,32 (m, 2 H), 4,47 (dd, 7=10,03, 7,34 Hz, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,27,1,71 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,11,1,46 Hz, 1 H), 5,69-5,79 (m, 2 H), 7,20 (dd, 7=4,89, 3,66 Hz, 1 H), 7,51 (d, 7=5,38 Hz, 1 H), 7,70 (d, 7=4,89 Hz, 1 H), 7,95 (d, 7=3,67 Hz, 1 H), 8,54 (d, 7=5,14 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,787 min.), MS m/z 696 (M+Na<+>).
Mellomprodukt 3: (10 mg, 35% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 1,477 min.), MS m/z 617(MH<+>).
Eksempel 338: Fremstilling av Forbindelse 338
Til en løsning av l-(2-amino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(4-tiofen-2-yl-pyrimidin-2-yloksy)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl cyklopropyl)-amid (10 mg, 0,0137 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt cyklopropyleddiksyre (2,1 mg, 0,0205 mmol), DIEA (0,012 ml, 0,742 mmol) og koblingsreagenset HOBt (3,1 g, 0,0205 mmol) og HBTU (7,8 mg, 0,0205 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga en gul olje. Den ble renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig film som TFA-salt (Forbindelse 338). (4,6 mg, 41% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 0,12 (m, 2 H), 0,48 (m, 2 H), 0,90 (m, 1 H), 1,01-1,09 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,43 (dd, 7=9,29, 5,38 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,31, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 2 H), 2,19- 2,31 (m, 2 H), 2,52 (dd, 7=13,45, 6,85 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,12(dd, 7=11,98, 3,91 Hz, 1 H), 4,27 (d, 7=11,74 Hz, 1 H), 4,47 (dd, 7=10,27, 6,85 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,71-5,80 (m, 2 H), 7,20 (dd, 7=4,89, 3,67 Hz, 1 H), 7,51 (d, 7=5,38 Hz, 1 H), 7,70 (d, 7=5,20 Hz, 1 H), 7,95 (d, 7=3,67 Hz, 1 H), 8,48 (d, 7=5,13 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,833 min.), MS m/z 699 (MH<+>).
Eksempel 339: Fremstilling av Forbindelse 339
Forbindelse 342 ble fremstilt ved å følge skjemaer i Eksempel 337 og Eksempel 338, bortsett fra at 2-(tributylstannyl)furan ble anvendt istedenfor 2-(tributylstannyl)tiofen i Trinn 1 i Eksempel 337.
Til en løsning av 2,4-diklorpyrimidin (149 mg, 1 mmol) i DMF (5 ml) ble satt diklor-bis(trifenylfosfin)palladium (II) (35 mg, 5 mol%) og 2-(tributylstannyl)furan (0,35 ml, 1,1 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 70°C i 3 timer. Deretter ble den tilsatt mettet KF-løsning i metanol (20 ml) og omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert med en liten mengde av silikagel og residuet ble filtrert gjennom filterpapir og vasket med EtOAc. Filtratet ble deretter konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et brunaktig fast stoff som produkt. (80 mg, 27 % utbytte)
<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 6,68 (dd, 7=3,67, 1,71 Hz, 1 H), 7,42 (d, 7=3,67 Hz, 1 H), 7,67 (d, 7=5,13 Hz, 1 H), 7,30 (d, 7=1,71 Hz, 1 H), 8,62 (d, 7=5,14 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,233 min.), MS m/z 181 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av {l-[2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl-karbamoyl)-4-hydroksy-pyrrolidin-1 -karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl} -karbaminsyre-metylester (20 mg, 0,039 mmol) i DMF (3 ml) ble satt NaH (7,8 mg 60% dispersjon i mineralolje, 0,195 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 1 time. Deretter ble 2-klor-4-tiofen-2-yl-pyrimidin (16,0 mg, 0,0544 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Den ble deretter behandlet med vann og ekstrahert med EtOAc. Det organiske laget ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga gulaktig olje som deretter ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga "deboced" koblingsprodukt. (3 mg, 11% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 1,420 min.), MS m/z 601 (MH<+>).
Trinn 3:
Til en løsning av l-(2-amino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(4-furan-2-yl-pyrimidin-2-yloksy)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinylcyklopropyl)-amid (3 mg, 0,0042 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt cyklopropyleddiksyre (0,6 mg, 0,0063 mmol), DIEA (0,004 ml, 0,021 mmol) og koblingsreagenset HOBt (1,0 g, 0,0063 mmol) og HBTU (2,4 mg, 0,0063 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga en gul olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig film som TFA-salt (Forbindelse 339). (1,0 mg, 30% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 0,12 (m, 2 H), 0,48 (m, 2 H), 0,90 (m, 1 H), 0,99-1,09 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,43 (dd, 7=9,05, 5,31 Hz, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,05 (m, 2 H), 2,19- 2,29 (m, 2 H), 2,50 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,10 (dd, 7=12,23, 3,91 Hz, 1 H), 4,25 (d, 7=11,99 Hz, 1 H), 4,47 (dd, 7=10,52, 7,09 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,52, 1,71 Hz, 1 H), 5,29 (dd, 7=17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,71-5,79 (m, 2 H), 6,65 (dd, 7=3,67, 1,96 Hz, 1 H), 7,38 (d, 7=3,67 Hz, 1 H), 7,40 (d, 7=5,38 Hz, 1 H), 7,76 (m, 1 H), 8,54 (d, 7=5,38 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,790 min.), MS m/z 683 (MH<+>).
Eksempel 340: Fremstilling av Forbindelse 340
Trinn 1:
Til en løsning av 2,4-diklorpyrimidin (149 mg, 1 mmol) i DMF (5 ml) ble satt diklor-bis(trifenylfosfin)palladium (II) (35 mg, 5 mol%) og 2-(tributylstannyl)tiazol (412 mg, 1,1 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 80°C i 3 timer. Deretter ble den tilsatt mettet KF-løsning i metanol (20 ml) og omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert med en liten mengde av silikagel og residuet ble filtrert gjennom filterpapir og vasket med EtOAc. Filtratet ble deretter konsentrert og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga et brunaktig fast stoff som produkt. (9 mg, 3 % utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 1,320 min.), MS m/z 198 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av l-[2-(2-cyklopropyl-acetylamino)-3,3-dimetyl-butyryl]-4-hydroksy-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinylcyklopropyl)-amid (12,5 mg, 0,0232 mmol) i DMF (3 ml) ble satt NaH- (3,7 mg 60% dispersjon i mineralolje, 0,0,0928 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 1 time. Deretter ble 2-klor-4-tiazol-2-yl-pyrimidin (9,0 mg, 0,0289 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Den ble deretter behandlet med vann og ekstrahert med EtOAc. Det organiske laget ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga råproduktet som deretter ble renset ved Prep. HPLC hvilket ga et hvitt, fast stoff som sluttprodukt (Forbindelse 340). (2,8 mg, 17% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 0,12 (m, 2 H), 0,47 (m, 2 H), 0,89 (m, 1 H), 1,00-1,09 (m, 11 H), 1,22 (m, 2 H), 1,44 (dd, 7=9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,06 (m, 2 H), 2,20- 2,32 (m, 2 H), 2,52 (dd, 7=13,70, 6,85 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,13 (dd, 7=11,98, 3,91 Hz, 1 H), 4,30 (d, 7=11,98 Hz, 1 H), 4,48 (dd, 7=10,51, 7,09 Hz, 1 H), 4,63 (d, 7=9,54 Hz, 1 H), 5,11 (d, 7=10,51 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,73-5,80 (m, 2 H), 7,81 (d, 7=5,14 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=3,18 Hz, 1 H), 8,03 (d, 7=2,93 Hz, 1 H), 8,68 (d, 7=5,13 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,710 min.), MS m/z 700 (MH<+>).
Eksempel 341: Fremstilling av Forbindelse 341
Trinn 1 (Skjema 1, trinn 1):
Til en løsning av Boc-HYP-OH (1,0 g, 4,324 mmol) i DMF (20 ml) ble satt NaH (0,38 g 60% dispersjon i mineralolje, 9,513 mmol) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time. Deretter ble 2,4-diklorpyrimidin (0,709 g, 0,0289 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Den ble deretter behandlet med IN HCl-løsning og ekstrahert med EtOAc. Det organiske laget ble separert, vasket med saltvann og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga råprodukt som deretter ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs olje som produkt. (0,4 g, 27% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 300 MHz) 5 1,13 (m, 9 H), 2,37 (m, 1 H), 2,62 (m, 1 H), 3,70-3,84 (m, 2 H), 4,38 (m, 1 H), 5,65 (m, 1 H), 6,88 (d, 7=5,86 Hz, 1 H), 8,37 (d, 7=5,86 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,370 min.), MS m/z 344(MH<+>).
Trinn 2: (Skjema 1, trinn 2)
Til en løsning av (2S, 4R) 4-(2-klor-pyrimidin-4-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester (0,34 g, 0,99 mmol) i CH3CN (20 ml) ble satt (1 R,2S)/( 1 S,2R) (1 -cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre (0,511 g, 1,48 mmol), DIEA (0,86 ml, 4,95 mmol) og koblingsreagenset HOBt (0,226 g, 1,48 mmol) og HBTU (0,561 g, 1,48 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga et gult, fast stoff (mellomprodukt 4). (0,33 g, 41% utbytte)
<!>H NMR(CD3OD, 300 MHz) 5 diasteoromer-blanding.
LC-MS (retensjonstid: 2,907 min.), MS m/z 655 (MH<+>).
Trinn 3: (Skjema 2, trinn 1)
Til en løsning av mellomprodukt 4 (50 mg, 0,061 mmol) i CH2CI2(2,5 ml) ble satt 1,2,3,4-tetrahydroisokinolin (0,011 ml, 0,0915 mmol) og Et3N (0,021 ml, 0,153
mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over og ved 40°C i 1 dag. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs olje. Den ble deretter oppløst i 4N HC1 i dioksan (1 ml) og omrørt natten over. Inndampning av løsningsmiddel ga en fargeløs olje som hydrokloridsalt (20 mg, 52% utbytte).
LC-MS (retensjonstid: 1,160 min.), MS m/z 553 (MH<+>).
Trinn 4: (Skjema 2, trinn 2)
Til en løsning av 4-[2-(3,4-dihydro-lH-isokinolin-2-yl)-pyrimidin-4-yloksy]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinylcyklopropyl)-amidhydroklorid (20 mg, 0,032 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (9,1 mg, 0,048 mmol), DIEA (0,028 ml, 0,16 mmol) og koblingsreagenset HOBt (7,3 mg, 0,048 mmol) og HBTU (18,2 mg, 0,048 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga
en gulaktig olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som TFA-salt (Forbindelse 341). (16 mg, 60% utbytte)
<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 0,98-1,06 (m, 13 H), 1,13 (m, 1 H), 1,22-1,32 (m, 1 H), 1,35-1,44 (m, 1 H), 1,82 (dd, 7=8,24, 5,19 Hz, 0,5 H), 1,90 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 0,5 H), 2,26 (m, 1 H), 2,32-2,43 (m, 1 H), 2,56 (m, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,11 (m, br, 2 H), 3,56 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 4,47 (m, 1 H), 5,15 (m, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,94 (s, 1 H), 6,47 (d, 7=7,02 Hz, 1 H), 7,29 (s, 4 H), 7,49 (m, 1 H), 7,56 (m, 1 H), 7,74 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 8,11 (d, 7=7,02 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,517 min.), MS m/z 724 (MH<+>).
Eksempel 342: Fremstilling av Forbindelse 342
Forbindelse 342 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 341, bortsett fira at isoindolin ble anvendt istedenfor 1,2,3,4-tetrahydroisokinolin i trinn 1 i skjema 2.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 4 fra Eksempel 341 (50 mg, 0,061 mmol) i CH2C12(2,5 ml) ble satt isoindolin (0,013 ml, 0,115 mmol) og Et3N (0,026 ml, 0,19 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs olje. Den ble deretter oppløst i 4N HC1 i dioksan (1 ml) og omrørt natten over. Inndampning av løsningsmiddel ga råprodukt som ble renset ved Prep.HPLC igjen, hvilket ga et gulaktig fast stoff som TFA-salt. (8,5 mg, 14% utbytte) LC-MS (retensjonstid: 1,860 min.), MS m/z 539 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av 4-[2-(l,3-dihydro-isoindol-2-yl)-pyrimidin-4-yloksy]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-amidhydroklorid (8,5 mg, 0,0104 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (3,0 mg, 0,0156 mmol), DIEA (0,009 ml, 0,052 mmol) og koblingsreagenset HOBt (2,4 mg, 0,0156 mmol) og HBTU (5,9 mg, 0,0156 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga en gulaktig olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som TFA-salt (Forbindelse 342). (3 mg, 35% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 300 MHz) 5 diasteoromer-blanding.
LC-MS (retensjonstid: 2,547 min.), MS m/z 710 (MH<+>).
Eksempel 343: Fremstilling av Forbindelse 343
Forbindelse 342 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 341, bortsett fra at morfolin ble anvendt istedenfor 1,2,3,4-tetrahydroisokinolin i trinn 1 i skjema 2.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 4 fra Eksempel 341 (50 mg, 0,061 mmol) i
CH2C12(2,5 ml) ble satt morfolin (0,008 ml, 0,0915 mmol) og Et3N (0,021 ml, 0,153 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over og ved 40°C i 1 dag. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs olje. Den ble deretter oppløst i 4N HC1 i dioksan (1 ml) og omrørt natten over. Inndampning av løsningsmiddel ga en fargeløs olje som hydrokloridsalt (12,6 mg, 36% utbytte).
LC-MS (retensjonstid: 0,810 min.), MS m/z 507 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av 4-(2-morfolin-4-yl-pyrimidin-4-yloksy)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-amidhydroklorid (12,6 mg, 0,0217 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (6,2 mg, 0,0326 mmol), DIEA (0,019 ml, 0,1085 mmol) og koblingsreagenset HOBt (5,0 mg, 0,0326 mmol) og HBTU (12,4 mg, 0,0326 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga en gulaktig olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som TFA-salt (Forbindelse 343). (7 mg, 41% utbytte)
<!>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 diastereomer-blanding.
LC-MS (retensjonstid: 1,280 min.), MS m/z 678 (MH<+>).
Eksempel 344: Fremstilling av Forbindelse 344
Trinn 1: (Skjema 1)
Til en løsning av 4-p-tolylsulfanylkarbonyl-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester-2-metylester (3,0 g, 7,91 mmol) i etanol (15 ml) og THF (30 ml) blanding, ble satt natrium-borhydrid (0,6 g, 15,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med 1 N HCl-løsning og ekstrahert med EtOAc tre ganger. De organiske lag ble samlet, vasket med mettet NaHC03-løsning og tørket (MgSO^. Inndampning av løsningsmiddel ga en gulaktig olje som ble renset ved "flash" kolonnekromatografi (silikagel, 3:1 EtOAc: heksaner), hvilket ga en fargeløs olje som produkt (mellomprodukt 5). (1,77 g, 86% utbytte)<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,43 (m, 9 H), 2,00-2,13 (m, 2 H), 2,46 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,47-3,53 (m, 2 H), 3,61 (m, 1 H), 3,73 (m, 3 H), 4,31 (m, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,240 min.), MS m/z 282 (M+Na<+>).
Trinn 2: (Skjema 2, trinn 1)
Til en løsning av mellomprodukt 5 (80 mg, 0,309 mmol) i THF (10 ml) ved 0°C, ble satt trifenylfosfin (121,4 mg, 0,463 mmol) og 4-hydroksykinolin (67,2 mg, 0,463 mmol). Deretter ble DEAD (80,6 mg, 0,463 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 2 dager. Deretter ble løsningsmiddel inndampet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs olje. Den ble deretter oppløst i 4N HC1 i dioksan (3 ml) og omrørt i 2 timer. Inndampning av løsningsmiddel ga tykk fargeløs olje som bis-HCl-salt (110 mg, 99% utbytte).
<J>H NMR(500 MHz, CD3OD) 8 2,52 (m, 1 H). 2,60 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,45 (m, 1 H), 3,66 (s, 3 H), 3,86 (m, 1 H), 4,61-4,75 (m, 3 H), 7,56 (d, 7=6,7 Hz, 1 H), 7,94 (t, 7=7,3 Hz, 1 H), 8,10-8,20 (m, 2 H), 8,55 (d, 7=8,2 Hz, 1 H), 9,07 (d, 7=6,7 Hz, 1
H).
LC-MS (retensjonstid: 0,570 min.), MS m/z 287 (MH<+>).
Trinn 3: (Skjema 2, trinn 2)
Til en løsning av 4-(kinolin-4-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester-bis-hydrokloridsalt (110 mg, 0,306 mmol) i CH3CN (10 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (87 mg, 0,46 mmol), DIEA (0,27 ml, 1,53 mmol) og koblingsreagenset HOBt (70 mg, 0,46 mmol) og HBTU (174 mg, 0,46 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC«4 og konsentrert, hvilket ga en gulaktig olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som TFA-salt. (105 mg, 60% utbytte)
<!>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1,07 (s, 9 H). 2,34 (m, 1 H), 2,45 (m, 1 H), 3,14 (m, 1 H), 3,27 (s, 3 H), 3,75 (s, 3 H), 4,05 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,31 (s, 1 H), 4,57-4,63 (m, 2 H), 4,73 (m, 1 H), 7,53 (d, 7=6,7 Hz, 1 H), 7,91 (t, 7=7,6 Hz, 1 H), 8,06-8,16 (m, 2 H), 8,43 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 9,02 (d, 7=6,4 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,250 min.), MS m/z 458 (MH<+>).
Trinn 4:(Skjema 2, trinn 3)
Til en løsning av l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(kinolin-4-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (100 mg, 0,175 mmol) i THF (6 ml), metanol (3,25 ml) og vann (1,0 ml) blanding ble satt litiumhydroksyd-monohydrat (110 mg, 2,62 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den surgjort med IN HCl-løsning til pH=3 til 5 og konsentrert. Ekstrahert med etylacetat (3x40 ml) og de organiske lag ble samlet og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en tykk fargeløs olje for videre anvendelse (25 mg, 32% utbytte).
Til en løsning av forbindelsen ovenfor (25 mg, 0,056 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (1R,2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (22,5 mg, 0,085 mmol), DIEA (0,05 ml, 0,28 mmol) og koblingsreagenset HOBt (12,9 mg, 0,085 mmol) og HBTU (32 mg, 0,085 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga en gul olje. Den ble renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga fargeløs tykk olje som TFA-salt (Forbindelse 344). (20 mg, 46% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 500 MHz) 8 1,02-1,10 (m, 11 H). 1,24 (m, 2 H), 1,40 (dd, 7=9,2, 5,5 Hz, 1 H), 1,90 (dd, 7=7,9, 5,5 Hz, 1 H), 2,19-2,38 (m, 3 H), 2,95 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,28 (s, 3 H), 4,10 (m, 1 H), 4,15 (m, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,55 (m, 1 H), 4,62 (d, 7=4,6 Hz, 2 H), 5,15 (d, J=10,7 Hz, 1 H), 5,30 (d, J=17,l Hz, 1 H), 5,72 (m, 1 H), 7,54 (d, 7=6,7 Hz, 1 H), 7,93 (m, 1 H), 8,07-8,18 (m, 2 H), 8,41 (d, 7=8,6 Hz, 1 H), 9,03 (d, 7=6,7 Hz, 1 H), 9,09(s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,617 min.), MS m/z 656 (MH<+>).
Eksempel 345: Fremstilling av Forbindelse 345
Forbindelse 345 ble fremstilt ved å følge skjema 2 i Eksempel 344, bortsett fra at 3-bromfenol ble anvendt istedenfor 4-hydroksykinolin i trinn 1 i skjema 2.
Trinn 1:
Til en løsning av Mellomprodukt 5 fra Eksempel 344 (150 mg, 0,578 mmol) i THF (15 ml) ved 0°C ble satt trifenylfosfin (228 mg, 0,868 mmol) og 3-bromfenol (150 mg, 0,868 mmol). Deretter ble DEAD (0,14 ml, 0,868 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 2 dager. Deretter ble løsningsmiddel inndampet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en fargeløs olje som produkt. (105 mg, 44% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,023 min.), MS m/z 436 (M+Na<+>).
Trinn 2:
4-(3-brom-fenoksymetyl)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-1 -tert-butylester-2-metylester (35 mg, 0,085 mmol) ble oppløst i 4N HC1 i dioksan (1,5 ml) og omrørt i 2 timer. Inndampning av løsningsmiddel ga en tykk fargeløs olje. Til en løsning av denne oljen i CH3CN (10 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (21,9 mg, 0,1155 mmol), DIEA (0,067 ml, 0,385 mmol) og koblingsreagenset HOBt (17,7 mg, 0,1155 mmol) og HBTU (43,8 mg, 0,1155 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som produkt. (20 mg, 49% utbytte)
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,03 (s, 9 H), 2,15 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,83 (m, 1 H), 3,54 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,87 (m, 1 H), 3,91-3,98 (m, 3 H), 4,3 l(s, 1 H), 4,59 (dd, 7=8,80, 5,38 Hz, 1 H), 6,89 (d, 7=8,32 Hz, 1 H), 7,03-7,10 (m, 2 H), 7,15 (t, 7=8,07 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,943 min.), MS m/z 485 (MH<+>).
Trinn 3:
Til en løsning av 4-(3-brom-fenoksymetyl)-l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (17 mg, 0,035 mmol) i THF (1,5 ml) metanol (0,8 ml) og vann (0,25 ml) blanding ble satt litiumhydroksyd-monohydrat (22 mg, 0,525 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 dager. Deretter ble den surgjort med IN HCl-løsning til pH=3 til 5 og konsentrert. Ekstrahert med etylacetat (2x20 ml) og de organiske lag ble samlet og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en tykk fargeløs olje for videre anvendelse (15 mg, 91% utbytte).
Til en løsning av syren ovenfor (15 mg, 0,0318 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (1R,2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (12,7 mg, 0,0477 mmol), DIEA (0,028 ml, 0,159 mmol) og koblingsreagenset HOBt (7,3 mg, 0,0477 mmol) og HBTU (18,1 mg, 0,0477 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs tykk olje som sluttprodukt (Forbindelse 345) (14 mg, 64% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,21 (m, 2 H), 1,37 (dd, 7=9,53 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 1 H), 2,14-2,24 (m, 2 H), 2,81-2,94 (m, 2 H), 3,53 (s, 3 H), 3,91-3,97 (m, 4 H), 4,33 (s, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 7,05-7,11 (m, 2 H), 7,16 (t, 7=8,07 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 3,500 min.), MS m/z 683 (MH<+>).
Eksempel 346: Fremstilling av Forbindelse 346
Trinn 1: (Skjema 1, trinn 1)
Til en løsning av 4-hydroksymetyl-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester-2-metylester (300 mg, 1,157 mmol) i THF (15 ml) ved 0°C ble satt trifenylfosfin (455 mg, 1,735 mmol) og 5-brom-pyirdin-3-ol (fremstilt i henhold til F.E.Ziegler et al., J.Am.Chem.Soc., (1973), 95, 7458) (302 mg, 1,735 mmol). Deretter ble DEAD (0,273 ml, 1,735 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 2 dager. Deretter ble løsningsmiddel inndampet og residuet ble renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en gulaktig olje. Deretter ble den oppløst i 4N HCl-løsning i dioksan (3,0 ml) og omrørt i 4 timer. Inndampning av løsningsmiddel ga råprodukt som ble ytterligere renset ved Prep. HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som TFA-salt. (70 mg, 11% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 0,890 min.), MS m/z 315 (MH<+>).
Trinn 2: (Skjema 1, trinn 2)
Til en løsning av 4-(5-brom-pyridin-3-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (70 mg, 0,129 mmol) i CH3CN (10 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (36,5 mg, 0,193 mmol), DIEA (0,135 ml, 0,744 mmol) og koblingsreagenset HOBt (30 mg, 0,193 mmol) og HBTU (73 mg, 0,193 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som produkt. (80 mg, 100% utbytte)
<!>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,04 (s, 9 H), 2,17 (m, 1 H), 2,26 (m, 1 H), 2,87 (m, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,88-3,98 (m, 2 H), 4,04-4,12 (m, 2 H), 4,28 (s, 1 H), 4,60 (dd, 7=9,05, 5,87 Hz, 1 H), 7,86 (m, 1 H) 8,31-8,35 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,697 min.), MS m/z 486 (MH<+>).
Trinn 3: (Skjema 1, trinn 3)
Til en løsning av 4-(5-brom-pyridin-3-yloksymetyl)-l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (80 mg, 0,133 mmol) i THF (5,6 ml), metanol (3 ml) og vann (1 ml) blanding ble litiurnhydroksyd-monohydrat (84 mg, 2,0 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 dager. Deretter ble den surgjort med IN HC1-løsning til pH=3 til 5. Ekstrahert med etylacetat (2x20 ml) og de organiske lag ble samlet og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en tykk fargeløs olje som produkt (mellomprodukt 6) (50 mg, 80% utbytte).
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,04 (s, 9 H), 2,16-2,30 (m, 2 H), 2,88 (m, 1 H), 3,51 (s, 3 H), 3,92 (m, 2 H), 4,07 (m, 2 H), 4,29 (s, 1 H), 4,57 (dd, 7=8,56, 5,87 Hz, 1 H), 7,79 (m, 1 H) 8,29 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,590 min.), MS m/z 472 (MH<+>).
Trinn 4: (Skjema 2)
Til en løsning av 4-(5-brom-pyridin-3-yloksymetyl)-l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre (5 mg, 0,0106 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (4,2 mg, 0,0159 mmol), DIEA (0,009 ml, 0,053 mmol) og koblingsreagenset HOBt (2,4 mg, 0,0159 mmol) og HBTU (6,0 mg, 0,0159 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs tykk olje som sluttprodukt (Forbindelse 346) (2 mg, 24% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,37 (dd, 7=9,29 Hz, 5,14 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,08 (m, 1 H), 2,15-2,25 (m, 2 H), 2,87-2,94 (m, 2 H), 3,51 (s, 3 H), 3,92-3,97 (m, 2 H), 4,02-4,07 (m, 2 H), 4,31 (s, 1 H), 4,39 (m, 1 H), 5,10 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,12, 1,46 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 7,68 (m, 1 H), 8,24 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,727 min.), MS m/z 684 (MH<+>).
Eksempel 347: Fremstilling av Forbindelse 347
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 6 fra Eksempel 346 (16 mg, 0,0339 mmol) i DMF (1 ml) ble satt 3-tiofenboronsyre (5,6 mg, 0,044 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (2,0 mg, 0,0017 mmol) og 2M Na2C03-løsning (0,051 ml, 0,1017 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 110°C i 4 timer. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga brunaktig olje som produkt (6 mg, 37% utbytte).
<!>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,05 (s, 9 H), 2,21-2,30 (m, 2 H), 2,95 (m, 1 H), 3,42 (s, 3 H), 3,93 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,20-4,30 (m, 3 H), 4,60 (dd, 7=8,56, 5.87 Hz, 1 H), 7,64 (m, 2 H), 8,12 (m, 1 H) 8,37 (m, 1 H), 8,45 (m, 1 H), 8,75 (s, 1
H).
LC-MS (retensjonstid: 1,353 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(5-tiofen-3-yl-pyridin-3-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre (6 mg, 0,0126 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (5,0 mg, 0,0189 mmol), DIEA (0,011 ml, 0,063 mmol) og koblingsreagenset HOBt (2,9 mg, 0,0189 mmol) og HBTU (7,2 mg, 0,0189 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig film som TFA-salt (Forbindelse 347) (2,2 mg, 22% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,01-1,07 (m, 11 H), 1,19 (m, 2 H), 1,36 (m, 1 H), 1.88 (dd, 7=8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,09-2,24 (m, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,00 (m, 1 H), 3,45 (s, 3 H), 3,98 (d, 7=5,86 Hz, 2 H), 4,20-4,31 (m, 3 H), 4,43 (m, 1 H), 5,12 (dd, 7=10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,29 (dd, 7=17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,64 (m, 2 H), 8,11 (m, 1 H), 8,31 (m, 1 H), 8,43 (m, 1 H), 8,75 (s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,540 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Eksempel 348: Fremstilling av Forbindelse 348
Trinn 1: (Skjema 1)
Til en løsning av mellomprodukt 5 fra Eksempel 344 (700 mg, 2,7 mmol) i THF (90 ml), metanol (50 ml) og vann (12 ml) blanding, ble satt litiumhydroksyd-monohydrat (1700 mg, 2,0 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den surgjort med IN HCl-løsning til pH=3 til 5. Ekstrahert med etylacetat (2x20 ml) og de organiske lag ble samlet og tørket (MgSC«4). Inndampning av løsningsmiddel ga en tykk fargeløs olje som produkt (mellomprodukt 7) (0,58, 88% utbytte).
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1. 42 (m, 9 H), 2,00-2,09 (m, 2 H), 2,45 (m, 1 H), 3,17 (m, 1 H), 3,49 (m, 2 H), 3,59 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,08 min.), MS m/z 268 (M+Na<+>).
Trinn 2: (Skjema 2, trinn 1)
Til en løsning av mellomprodukt 7 (270 mg, 1,1 mmol) i DMSO (10 ml) ble satt kalium-t-butoksyd (309 mg, 2,75 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Deretter ble 2-brom-4-klor-pyridin (254 mg, 1,32 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den behandlet med vann og vasket med etylacetat. Det vandige laget ble separert og surgjort med IN HCl-løsning til pH=3. Ekstrahert med etylacetat to ganger og de organiske lag ble samlet og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga en oransje olje. Den ble deretter oppløst i metanol og HC1 (gass) ble boblet gjennom i 2 min ved -78°C. Deretter ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Inndampning av løsningsmiddel ga en rå oransje olje for videre anvendelse.
LC-MS (retensjonstid: 0,65 min.), MS m/z 315 (MH<4>).
Trinn 3: (Skjema 2, trinn 2)
Til en løsning av rå 4-(2-brom-pyridin-4-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester i CH3CN (20 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (312 mg, 1,65 mmol), DIEA (1,15 ml, 6,6 mmol) og koblingsreagenset HOBt (252 mg, 1,65 mmol) og HBTU (626 mg, 1,65 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset ved Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs olje som produkt. (270 mg, 41% utbytte to trinn)
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,03 (s, 9 H), 2,13-2,19 (m, 2 H), 2,87 (m, 1 H), 3,51 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,93 (d, 7=6,36 Hz, 2 H), 4,11 (m, 2 H), 4,27 (s, 1 H), 4,60 (dd, 7=8,80, 5,87 Hz, 1 H), 7,06 (d, 7=5,87, 2,20 Hz, 1 H) 7,32 (d, 7=2,20 Hz, 1 H), 8,18 (d, 7=6,11 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,657 min.), MS m/z 486 (MH<+>).
Trinn 4: (Skjema 2, trinn 3)
Til en løsning av 4-(2-brom-pyridin-4-yloksymetyl)-l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (270 mg, 0,45 mmol) i THF (18 ml), metanol (10 ml) og vann (3,3 ml) blanding ble satt litiumhydroksyd-monohydrat (283 mg, 6,75 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert og surgjort med IN HCl-løsning til pH=3 til 5. Det gråhvite faste stoff ble oppsamlet som produkt (mellomprodukt 8) (180 mg, 85% utbytte).
<J>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,06 (s, 9 H), 2,20-2,29 (m, 2 H), 2,89 (m, 1 H), 3,54 (s, 3 H), 3,92 (d, 7=6,4 Hz, 2 H), 4,06-4,13 (m, 2 H), 4,31 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 4,59 (dd, 7=8,85, 5,50 Hz, 1 H), 7,00 (dd, 7=6,10, 2,24 Hz, 1 H), 7,22 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=5,80 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,113 min.), MS m/z 472 (MH<+>).
Trinn 5: (Skjema 3)
Til en løsning av mellomprodukt 8 (10 mg, 0,0212 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (1 R, 2S) (1 -cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (8,5 mg, 0,00318 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,106 mmol) og koblingsreagenset HOBt (4,9 mg, 0,0318 mmol) og HBTU (12,1 mg, 0,0318 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en fargeløs tykk olje som sluttprodukt (Forbindelse 348). (9 mg, 53% utbytte)
<!>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 5 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,36 (dd, 7=9,54 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,04-2,24 (m, 3 H), 2,88-2,94 (m, 2 H), 3,52 (s, 3 H), 3,93 (d, 7=5,87 Hz, 2 H), 4,09 (m, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 4,38 (t, 7=7,58 Hz, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 7,00 (dd, 7=5,87, 2,20 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=2,20 Hz, 1 H), 8,14 (d, 7=5,87 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,670 min.), MS m/z 684 (MH<+>).
Eksempel 349: Fremstilling av Forbindelse 349
Forbindelse 349 ble fremstilt ved å følge skjema i Eksempel 347, bortsett fra at mellomprodukt 8 fra Eksempel 348 ble anvendt istedenfor mellomprodukt 6 fra Eksempel 346 i trinn 1.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 8 (20 mg, 0,0423 mmol) i DMF (1 ml) ble satt 3-tiofenboronsyre (7,0 mg, 0,055 mmol), tetrakis (trifenylfosfin)-palladium (2,4 mg, 0,00212 mmol) og 2M Na2C03-løsning (0,063 ml, 0,127 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 110°C i 30 timer. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en brunaktig olje som produkt. (10,5 mg, 42% utbytte) (50177-165)
LC-MS (retensjonstid: 1,690 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(2-tiofen-3-yl-pyridin-4-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre (10 mg, 0,017 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (6,8 mg, 0,0254 mmol), DIEA (0,015 ml, 0,085 mmol) og koblingsreagenset HOBt (3,9 mg, 0,0254 mmol) og HBTU (9,6 mg, 0,0254 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en brunaktig film som TFA-salt (Forbindelse 349). (2,2 mg, 16% utbytte) (50177-172).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,37 (dd, 7=9,04, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, 7=8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,10-2,25 (m, 3 H), 2,90 (m, 1 H), 3,04 (m, 1 H), 3,47 (s, 3 H), 3,93-4,02 (m, 2 H), 4,29 (s, 1 H), 4,35-4,45 (m, 3 H), 5,12 (d, 7=10,51 Hz, 1 H), 5,28 (d, J=17,61 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,40 (dd, 7=6,84,2,44 Hz, 1 H), 7,71-7,80 (m, 3 H), 8,38 (m, 1 H), 8,51 (d, 7=7,09 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,443 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Eksempel 350: Fremstilling av Forbindelse 350
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 8 fra Eksempel 348 (20 mg, 0,0423 mmol) i DMF (2 ml) ble satt 2-tiofenboronsyre (7,0 mg, 0,055 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (2,4 mg, 0,00212 mmol) og bariumhydroksyd (40 mg, 0,127 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 150°C i Smith mikrobølgereaktor i 110 min. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som produkt. (5,0 mg, 20% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,137 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av karboksylsyren ovenfor (5,0 mg, 0,0085 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (3,4 mg, 0,0127 mmol), DIEA (0,007 ml, 0,0424 mmol) og koblingsreagenset HOBt (1,9 mg, 0,0127 mmol) og HBTU (4,8 mg, 0,0127 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig olje som TFA-salt (Forbindelse 350) (2,6 mg, 38% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 0,99-1,07 (m, 11 H), 1,19 (m, 2 H), 1,37 (dd, 7=9,54, 5,63 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,10-2,25 (m, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,03 (m, 1 H), 3,48 (s, 3 H), 3,92-4,02 (m, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 4,32-4,45 (m, 3 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,22 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=17,11 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,30-7,38 (m, 2 H), 7,66 (d, 7=2,45 Hz, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 7,95 (m, 1 H), 8,48 (d, 7=6,85 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,067 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Eksempel 351: Fremstilling av Forbindelse 351
Forbindelse 351 ble fremstilt ved å følge skjema i Eksempel 350, bortsett fra at 3-furanboronsyre ble anvendt istedenfor 2-tiofenboronsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 8 fra Eksempel 348 (20 mg, 0,0423 mmol) i DMF (2 ml) ble satt 3-furanboronsyre (6,2 mg, 0,055 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (2,4 mg, 0,00212 mmol) og bariurnhydroksyd (40 mg, 0,127 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 150°C i Smith mikrobølgereaktor i 30 min. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som produkt. (12 mg, 49% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 1,937 min.), MS m/z 460 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av karboksylsyren ovenfor (5,0 mg, 0,0209 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)- karbaminsyre-hydroklorid (8,4 mg, 0,0314 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,1046 mmol) og koblingsreagenset HOBt (4,8 mg, 0,0314 mmol) og HBTU (11,9 mg, 0,0314 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig olje som TFA-salt (Forbindelse 351). (4,0 mg, 24% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,08 (m, 11 H), 1,21 (m, 2 H), 1,37 (dd, 7=8,80, 5,62 Hz, 1 H), 1,87 (dd, 7=8,32 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,11-2,24 (m, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,03 (m, 1 H), 3,49 (s, 3 H), 3,91-4,03 (m, 2 H), 4,29 (s, 1 H), 4,35-4,46 (m, 3 H), 5,12 (dd, 7=10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,11 (m, 1 H), 7,38 (dd, 7=7,10, 2,69 Hz, 1 H), 7,71 (d, 7=2,69 Hz, 1 H), 7,81 (m, 1 H), 8,48 (s, 1 H), 8,50 (d, 7=7,09 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,410 min.), MS m/z 672 (MH<+>).
Eksempel 352: Fremstilling av Forbindelse 352
Forbindelse 352 ble fremstilt ved å følge skjema 2 og skjema 3 i Eksempel 348, bortsett fra at 2,6-dibrompyridin ble anvendt istedenfor 2-brom-4-klor-pyridin i trinn 1 i skjema 2.
Trinn 1: (Skjema 2, trinn 1)
Til en løsning av mellomprodukt 7 fra Eksempel 348 (270 mg, 1,1 mmol) i DMSO (10 ml) ble satt kalium-t-butoksyd (309 mg, 2,75 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Deretter ble 2,6-dibrompyridin (313 mg, 1,32 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den behandlet med vann og vasket med etylacetat. Det vandige laget ble separert og surgjort med IN HCl-løsning til pH=3. Ekstrahert med etylacetat to ganger og de organiske lag ble samlet og tørket (MgS04). Inndampning av løsningsmiddel ga en oransje olje. Den ble deretter oppløst i metanol og HC1 (gass) ble boblet gjennom i 2 min ved -78°C. Deretter ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur og omrørt natten over. Inndampning av løsningsmiddel ga en rå oransje olje for videre anvendelse.
LC-MS (retensjonstid: 1,480 min.), MS m/z 315 (MH<+>).
Trinn 2: (Skjema 2, trinn 2)
Til en løsning av rå 4-(6-brom-pyridin-2-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester i CH3CN (20 ml) ble satt 2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre (312 mg, 1,65 mmol), DIEA (1,15 ml, 6,6 mmol) og koblingsreagenset HOBt (252 mg, 1,65 mmol) og HBTU (626 mg, 1,65 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset ved "flash" kolonnekromatografi (silikagel, 1:1 heksanenetylacetat), hvilket ga en fargeløs olje som produkt. (340 mg, 63% utbytte to trinn)
<!>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,03 (s, 9 H), 2,10-2,24 (m, 2 H), 2,84 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,83 (m, 1 H), 3,94 (m, 1 H), 4,20-4,29 (m, 2 H), 4,31 (s, 1 H), 4,59 (dd, 7=8,80, 5,13 Hz, 1 H), 6,76 (d, 7=8,07 Hz, 1 H) 7,11 (d, 7=7,58 Hz, 1 H),7,53 (t, 7=7,83 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,820 min.), MS m/z 486 (MH<+>).
Trinn 3: (Skjema 2, trinn 3)
Til en løsning av 4-(6-brom-pyridin-2-yloksymetyl)-l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (330 mg, 0,679 mmol) i THF (28 ml), metanol (15 ml) og vann (5 ml) blanding ble litiumhydroksyd-monohydrat (427 mg, 10,18 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager. Deretter ble den konsentrert og surgjort med IN HC1- løsning til pH=3 til 5. Det hvite, faste stoffet ble oppsamlet som produkt (mellomprodukt 9) (310 mg, 97% utbytte).
<!>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1,06 (s, 9 H), 2,18-2,25 (m, 2 H), 2,88 (m, 1 H), 3,57 (s, 3 H), 3,84 (m, 1 H), 3,96 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,28-4,35 (m, 2 H), 4,58 (m, 1 H), 6,79 (d, 7=7,94 Hz, 1 H), 7,13 (d, 7=7,32 Hz, 1 H), 7,55 (m, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 3,030 min.), MS m/z 472 (MH<+>).
Trinn 4: (Skjema 3)
Til en løsning av mellomprodukt 9 (10 mg, 0,0212 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (1 R, 2S) (1 -cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (8,5 mg, 0,00318 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,106 mmol) og koblingsreagenset HOBt (4,9 mg, 0,0318 mmol) og HBTU (12,1 mg, 0,0318 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig film som TFA-salt (Forbindelse 352). (10,2 mg, 60% utbytte).
<!>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,37 (dd, 7=9,54 Hz, 5,63 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,05 (m, 1 H), 2,12-2,25 (m, 2 H), 2,86-2,94 (m, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 3,87 (m, 1 H), 3,94 (m, 1 H), 4,18-4,27 (m, 2 H), 4,33 (s, 1 H), 4,37 (m, 1 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,72 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,76 (d, 7=8,32 Hz, 1 H), 7,11 (d, 7=7,33 Hz, 1 H), 7,53 (t, 7=7,82 Hz, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,837 min.), MS m/z 684 (MH<+>).
Eksempel 353: Fremstilling av Forbindelse 353
Forbindelse 353 ble fremstilt ved å følge skjema i Eksempel 347, bortsett fra at mellomprodukt 9 fra Eksempel 352 ble anvendt istedenfor mellomprodukt 6 fra Eksempel 346 i trinn 1.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 9 (25 mg, 0,053 mmol) i DMF (1 ml) ble satt 3-tiofenboronsyre (8,8 mg, 0,0688 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (3,1 mg, 0,00265 mmol) og 2M Na2C03-løsning (0,080 ml, 0,159 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 110°C natten over. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en brunaktig olje som produkt. (15 mg, 48% utbytte)
<!>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1,06 (s, 9 H), 2,20-2,31 (m, 2 H), 2,94 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,91 (m, 1 H), 3,98 (m,l H), 4,34 (s, 1 H), 4,37-4,46 (m, 2 H), 4,61 (dd, 7=8,85, 5,19 Hz, 1 H), 6,77 (d, 7=8,24 Hz, 1 H), 7,39 (d, 7=7,32 Hz, 1 H), 7,48 (dd, 7=5,19, 3,05 Hz, 1 H), 7,68 (dd, 7=4,88, 1,22 Hz, 1 H), 7,77(t, 7=7,93 Hz, 1H), 8,04 (m, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,857 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(6-tiofen-3-yl-pyridin-2-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre (15 mg, 0,0254 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (10,2 mg, 0,0382 mmol), DIEA (0,022 ml, 0,127 mmol) og koblingsreagenset HOBt (5,8 mg, 0,0382 mmol) og HBTU (14,5 mg, 0,0382 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig film som TFA-salt (Forbindelse 353) (6 mg, 29% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,36 (dd, 7=9,29, 5,38 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,07 (m, 1 H), 2,16-2,25 (m, 2 H), 2,87-2,99 (m, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 3,87-3,99 (m, 2 H), 4,31-4,44 (m, 4 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,46 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=17,12 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,67 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 7,33 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,44 (dd, 7=4,89,2,93 Hz, 1 H), 7,63-7,70 (m, 2 H), 7,99 (m, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 2,770 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Eksempel 354: Fremstilling av Forbindelse 354
Forbindelse 354 ble fremstilt ved å følge skjema i Eksempel 347, bortsett fra at mellomprodukt 9 fra Eksempel 352 ble anvendt istedenfor mellomprodukt 6 fra Eksempel 346 og fenyl-boronsyre ble anvendt istedenfor 3-tiofenboronsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 9 (20 mg, 0,0423 mmol) i DMF (1 ml) ble satt fenyl-boronsyre (6,7 mg, 0,0688 mmol), tetrakis(trifenylfosfin) palladium (2,4 mg, 0,00212 mmol) og CS2CO3(41 mg, 0,127 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 110°C natten over. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som produkt. (12 mg, 49% utbytte)
LC-MS (retensjonstid: 2,733 min.), MS m/z 470 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(6-fenyl-pyridin-2-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre (12 mg, 0,0206 mmol) i CH3CN
(5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (8,2 mg, 0,0308 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,1028 mmol) og koblingsreagenset HOBt (4,7 mg, 0,0308 mmol) og HBTU (11,7 mg, 0,0308 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga et hvitt, fast stoff som TFA-salt (Forbindelse 354). (1,5 mg, 9% utbytte)
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 8 1,00-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,36 (m, 1 H), 1,85 (m, 1 H), 2,09 (m, 1 H), 2,17-2,25 (m, 2 H), 2,87-3,00 (m, 2 H), 3,52 (s, 3 H), 3,84-4,00 (m, 2 H), 4,33-4,44 (m, 4 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (d , 7=17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,71 (d, 7=8,31 Hz, 1 H), 6,78 (m, 1 H), 7,34-7,44 (m, 3 H), 7,74 (m, 1 H), 7,95 (m, 1 H), 8,01 (d, J=8,31 Hz, 1H).
LC-MS (retensjonstid: 3,553 min.), MS m/z 682 (MH<+>).
Eksempel 355: Fremstilling av Forbindelse 355
Forbindelse 354 ble fremstilt ved å følge skjema i Eksempel 347, bortsett fra at mellomprodukt 9 fra Eksempel 352 ble anvendt istedenfor mellomprodukt 6 fra Eksempel 346 og 3-furan boronsyre ble anvendt istedenfor 3-tiofenboronsyre i trinn 1.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 9 (20 mg, 0,0423 mmol) i DMF (1 ml) ble satt 3-furan-boronsyre (6,2 mg, 0,055 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (2,4 mg, 0,002115 mmol) og 2M Na2C03-løsning (0,064 ml, 0,127 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 110°C i 2 dager. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en gulaktig olje som produkt. (7,0 mg, 29% utbytte)
Trinn 2:
Til en løsning av karboksylsyren ovenfor (6,0 mg, 0,0109 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (4,4 mg, 0,0163 mmol), DIEA (0,0095 ml, 0,0544 mmol) og koblingsreagenset HOBt (2,5 mg, 0,0163 mmol) og HBTU (6,2 mg, 0,0163 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC«4 og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga en gulaktig film som TFA-salt (Forbindelse 355) (1,5 mg, 18% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 5 0,98-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,35 (dd, 7=9,54, 5,87 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 1 H), 2,15-2,25 (m, 2 H), 2,85-2,98 (m, 2 H), 3,55 (s, 3 H), 3,89 (m, 1 H), 3,95 (m, 1 H), 4,28-4,42 (m, 4 H), 5,11 (dd, 7=10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 6,63 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 6,90 (m, 1 H), 7,16 (d, 7=7,33 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 7,63 (m, 1 H), 8,08 (s, 1 H).
LC-MS (retensjonstid: 3,340 min.), MS m/z 672 (MH<+>).
Eksempel 356: Fremstilling av Forbindelse 356
Forbindelse 356 ble fremstilt ved å følge skjema i Eksempel 350, bortsett fra at mellomprodukt 9 fra Eksempel 352 ble anvendt istedenfor mellomprodukt 8 fra Eksempel 348 i trinn 1.
Trinn 1:
Til en løsning av mellomprodukt 9 (20 mg, 0,0423 mmol) i DMF (2 ml) ble satt 2-tiofenboronsyre (7,0 mg, 0,055 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium (2,4 mg,
0,00212 mmol) og bariumhydroksyd (40 mg, 0,127 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 150°C i Smith mikrobølgereaktor i 30 min. Deretter ble den filtrert og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert og renset ved Prep.HPLC, hvilket ga en brunaktig olje som produkt. (13,0 mg, 52% utbytte)
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,03 (s, 9 H), 2,18-2,25 (m, 2 H), 2,93 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,83 (m, 1 H), 3,98 (m, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,38 (m, 2 H), 4,58 (dd, 7=8,05, 5,14 Hz, 1 H), 6,63 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,07 (dd, 7=4,89, 3,67 Hz, 1 H), 7,33 (d, 7=7,34 Hz, 1 H), 7,42 (d, 7=5,14 Hz, 1 H), 7,60-7,66 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 3,393 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av l-(2-metoksykarbonylamino-3,3-a'imetyl-butyryl)-4-(6-tiofen-2-yl-pyridin-2-yloksymetyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre (11,5 mg, 0,0195 mmol) i CH3CN (5 ml) ble satt (IR, 2S) (l-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (7,8 mg, 0,0293 mmol), DIEA (0,017 ml, 0,0975 mmol) og koblingsreagenset HOBt (4,5 mg, 0,0293 mmol) og HBTU (11,1 mg, 0,0293 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert. De ble deretter renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som TFA-salt (Forbindelse 356) (8,5 mg, 54% utbytte).
<J>H NMR(CD3OD, 400 MHz) 5 0,99-1,06 (m, 11 H), 1,21 (m, 2 H), 1,36 (dd, 7=9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,86 (dd, 7=8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 1 H), 2,15-2,25 (m, 2 H), 2,87-2,99 (m, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 3,89 (m, 1 H), 3,96 (m, 1 H), 4,30-4,44 (m, 4 H), 5,11 (dd, 7=10,51, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (dd, 7=17,11, 1,22 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,62 (d, 7=8,07 Hz, 1 H), 7,07 (dd, 7=4,89, 3,66 Hz, 1 H), 7,33 (d, 7=7,59 Hz, 1 H), 7,42 (d, 7=4,89 Hz, 1H), 7,60-7,66 (m, 2 H).
LC-MS (retensjonstid: 1,967 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Eksempel 357: Fremstilling av Forbindelse 357
Trinn 1:
Til en løsning av (2S, 4R)-Fmoc-4-amino-l-boc-pyrrolidin-2-karboksylsyre (400 mg, 0,884 mmol) i acetonitril (15 ml) ble satt fem dråper pyrrolidin. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Deretter ble den konsentrert og satt under høyvakuum, hvilket ga rå 4-amino-l-boc-pyrrolidin-2-karboksylsyre. I en annen rundbunnet kolbe ble en løsning av Pd2dba3(40 mg, 5% mol) og racemisk-BINAP (56 mg, 10% mol) omrørt under nitrogen i avgasset toluen (8 ml) ved romtemperatur i 1 time. Deretter ble 1-klorisokinolin (216 mg, 1,326 mmol) og natrium-t-butoksyd (340 mg, 3,536 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min. Deretter ble 4-amino-l-boc-pyrrolidin-2-karboksylsyre tilsatt og reaksjonsblandingen ble oppvarmet under tilbakeløp i 1 time. Vann ble tilsatt for å stanse reaksjonen og det vandige laget ble separert og filtrert gjennom filterpapir. Det ble deretter konsentrert og renset ved Prep. HPLC, hvilket ga koblet produkt som TFA-salt. (165 mg, 40% utbytte)
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,44 (m, 9H), 2,51-2,74 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,49 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 7,30 (d, J=6,85 Hz, 1H), 7,58 (d, J=6,85 Hz, 1H), 7,79(m, 1H), 7,91-7,99 (m, 2H), 8,56 (d, J=8,56 Hz, 1H).
LC-MS (retensjonstid: 1,707 min.), MS m/z 358 (MH<+>).
Trinn 2:
Til en løsning av 4-(isokinolin-l-ylamino)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester (115 mg, 0,244 mmol) i CH3CN (10 ml) ble satt (IR, 2S) (1-cyklopropansulfonyl-aminokarbonyl-2-vinyl-cyklopropyl)-karbaminsyre-hydroklorid (97 mg, 0,366 mmol), DIEA (0,255 ml, 1,464 mmol) og koblingsreagenset HOBt (56 mg, 0,366 mmol) og HBTU (139 mg, 0,366 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgS04og konsentrert hvilket ga en gul olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne til et gulaktig fast stoff som TFA-salt (112 mg, 67% utbytte).
<!>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 1,05 (m, 2H), 1,20 (m, 2H), 1,40-1,48 (m, 10H), 1,87 (dd, J=8,19, 5,50 Hz, 1H),2,23 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 2,50 (m, 1H),2,93 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,33 (t, J=7,09 Hz, 1H), 4,69 (m, 1H), 5,12 (d, J=10,27 Hz, 1H), 5,29 (d, J=17,12 Hz, 1H), 5,74 (m, 1H), 7,31 (d, J=6,85 Hz, 1H), 7,60 (d, J=7,09 Hz, 1H), 7,80(m, 1H), 7,93-8,00 (m, 2H), 8,56 (d, J=8,19 Hz, 1H).
LC-MS (retensjonstid: 2,023 min.), MS m/z 570 (MH<+>).
Trinn 3:
2-(l-cyklopropansulfonylaminokarbonyl-2-vinylcyklopropyl-karbamoyl)-4-(isokinolin-l-ylamino)-pyrrolidin-l-karboksylsyre-tert-butylester (31 mg, 0,0453 mmol) ble oppløst i 4N HC1 i dioksan (1,5 ml) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Inndampning av løsningsmiddel ga en gulaktig olje som bis-hydrokloridsalt. Til en løsning av bis-hydrokloridsaltet i CH3CN (5 ml) ble satt N-boc-L-t-leucin (11,5 mg, 0,0498 mmol), DIEA (0,047 ml, 0,272 mmol) og koblingsreagenset HOBt (10,4 mg, 0,068 mmol) og HBTU (25,8 mg, 0,068 mmol). Løsningen ble omrørt ved
romtemperatur natten over. Deretter ble den konsentrert, vasket med vann og ekstrahert med etylacetat to ganger. De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket over MgSC«4 og konsentrert, hvilket ga en gulaktig olje. Den ble renset med Prep. HPLC-kolonne, hvilket ga et gråhvitt, fast stoff som sluttprodukt (Forbindelse 357).(9 mg, 29% utbytte)
<J>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0,98 (m, 2H), 1,05 (s, 9H), 1,20 (m, 2H), 1,36-1,43 (m, 10H), 1,84 (m, lH),2,10-2,30 (m, 2H), 2,52 (m, 1H),2,90 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 4,17-4,27 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,79 (m, 1H), 5,07 (d, J=9,29 Hz, 1H), 5,24 (d, J=16,87 Hz, 1H), 5,72 (m, 1H), 6,62 (m, 1H), 6,98 (d, J=6,ll Hz, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,62(m, 1H), 7,69 (d, J=8,07 Hz, 1H), 7,84 (d, J=5,87 Hz, 1H), 8,20 (d, J=8,56 Hz, 1H).
LC-MS (retensjonstid: 2,043 min.), MS m/z 683 (MH<+>).
Seksjon H:
LC-MS betingelser for seksjon H
Kolonner: (Metode A) - YMC ODS S7 C18 3,0x50 mm
(Metode B) - YMC ODS-A S7 C18 3,0x50 mm (Metode C) - YMC S7 C18 3,0x50 mm
(Metode D) - YMC Xterra ODS S7 3,0x50 mm (Metode E) - YMC Xterra ODS S7 3,0x50 mm (Metode F) - YMC ODS-A S7 Cl8 3,0x50 mm (Metode H) - Xterra S7 3,0x50 mm
(Metode I) - Xterra S7 Cl8 3,0x50 mm
(Metode G) - YMC Cl8 S5 4,6x50 mm
(Metode J) - Xterra ODS S7 3,0x50 mm
(Metode K) - YMC ODS-A S7 C18 3,0x50 mm
Gradient: 100% Løsningsmiddel A/0% Løsningsmiddel B til
0% Løsningsmiddel A/100% Løsningsmiddel B
Gradient-tid: 2 min. (A, B, D, F, G, H, I); 8 min. (C, E); 4 min (J); 3 min (K) Holdetid: 1 min. (A, B, D, F, G, H, I, J, K); 2 min. (C, E)
Strømningshastighet: 5 ml/min (A, B, C, D, E, F, G)
Strømningshastighet: 4 ml/min (J, K)
Detektor bølgelengde: 220 nm
Løsningsmiddel A: 10% MeOH / 90% H20 / 0,1% TFA
Løsningsmiddel B: 10% H20 / 90% MeOH / 0,1% TFA.
Eksempel 370: Fremstilling av Forbindelse 370
Trinn 1:
En løsning av (l/?,25)/(15',2/?)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester-hydroklorid (2,54 g, 12 mmol) i CH3CN (70 ml) ble behandlet med en løsning av diisopropyletylamin (9,5 ml, 67 mmol), [(4/?)-(2-metoksykarbonyl-7-metoksylkinoluM-oksoVS-prolin] (5,9 g, 13,2 mmol) og TBTU (3,89 g, 12,21 mmol) i CH3CN (50 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 14 timer og konsentrert. Residuet oppløst i EtOAc ble gjentatte ganger vasket med NaHC03(vandig), saltvann, tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over Biotage 65M kolonne (EtOAc/heksan: 45-100%) for å gi høy Rf stereoisomer (Boc-P2[(4/?)-(2-metoksykarbonyl-7-metoksylkinolin-4-okso)-5'-prolin]-P 1 ( 1R, 2S Vinyl Acca)-syre-etylester 2,0 g (52%) som et hvitt, fast stoff:<*>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1,24 (t, 7=7,02 Hz, 3 H), 1,38 (m, 11 H), 1,76 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,45 (m, 1 H), 2,71 (m, 1 H), 3,92 (m, 2 H), 3,96 (s, 3 H), 4,03 (s, 3 H), 4,16 (q, 7=7,22 Hz, 2 H), 4,42
(m, 1 H), 5,10 (m, 1 H), 5,30 (m, 1 H), 5,44 (s, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 7,27 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 8,05 (s, 1 H).
Trinn 2:
En løsning av høy Rf produkt (3,16 g, 5,40 mmol) i Trinn 1 i Eksempel 370 {Boc-P2[(4Æ)-(2- metoksykarbonyl-7-metoksylkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-COOEt} ved 0°C oppløst i MeOH/THF (1/1,13,2 ml) ble behandlet med vandig 1,0 N NaOH (5,5 ml, 5,5 mmol), omrørt i 1 time og nøytralisert ved tilsetning av AcOH. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Residuet ble gjenoppløst i THF/CH2C12(1/1,150 ml), tørket (MgS04) og konsentrert i vakuum for å gi produktet som ble direkte anvendt i neste trinn: LC-MS (retensjonstid: 1,53 Metode D), MS m/ z 570 (M<+>+l).
Trinn 3:
Til en løsning av produktet (antatt 5,4 mmol) i trinn 2 i eksempel 370 ved 0°C oppløst i THF (35 ml) ble satt en løsning av nyfremstilt CH2N2(30 mmol) i Et20 (80 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved temperaturen i 0,5 time og omrørt ved romtemperatur i 18,5 timer. Etter bobling med nitrogen i 1 time til reaksjonsblandingen, ble løsningen inndampet i vakuum. Residuet ble gjenoppløst i EtOAc (1 L), ble vasket med mettet NaHC03(vandig), (2x200 ml), saltvann (100 ml) og tørket (MgS04). Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum, hvilket ga produktet 3,10 g (97% to trinn): LC-MS (retensjonstid: 3,06, Metode J), MS m/ z 594 (M<+>+l).
Trinn 4:
Til en løsning av produktet (3,03 g, 5,10 mmol) i trinn 3 i Eksempel 370 {Boc-P2[(4/?)-(2-diazoacetyl-7-metolcsylkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,2JS' Vinyl Acca)-COOEt} ved 0°C oppløst i THF (110 ml) ble satt 2 ml 48% HBr. Blandingen ble omrørt i 1 time, fordelt mellom EtOAc (500 ml) og mettet NaHC03(vandig)
(100 ml). EtOAc-laget ble separert og tørket (MgS04). Løsningsmidlet ble fjernet, hvilket ga produktet (3,12 g, 95%): LC-MS (retensjonstid: 1,56 Metode D). MS m/ z 648 (M<+>+l), MS m/ z 646 (MM).
Trinn 5:
Produktet (1,0 g, 1,54 mmol) fra trinn 4 i Eksempel 370 {Boc-P2[(4/?)-(2-bromacetyl-7-metoksylkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-COOEt} ble behandlet med isopropyltiourinstoff (0,365 g, 3,09 mmol) i isopropylalkohol (57 ml) i 2 timer og deretter ble løsningsmidlet fjernet. Residuet ble oppløst i vandig 1,0 N HC1 (30 ml) og EtOAC (200 ml) og ble regulert pH til 7 ved tilsetning av 1,0 N NaOH (vandig). Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (2x100 ml) og den samlede ekstrakt ble tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over Biotage 40+M kolonne (EtOAc-heksaner: 30-100%), hvilket ga produktet 870 mg (84%) og klart for neste trinn.
Trinn 6:
Produktet (0,250 g, 0,375 mmol) fra trinn 5 i Eksempel 370 {Boc-P2{(4/?)-[2-(2-isopropylaminotiazol-4-yl)-7-metoksylkinolin-4-okso]-5'-prolin} -P \{\ R, 2S Vinyl Acca)-COOEt} ble behandlet med 4N HCl/dioksan (2,5 ml, 10 mmol) i 2,5 timer og konsentrert i vakuum. Til residuet ble satt N-metylmorfolin (0,206 ml, 1,875 mmol) i DMF (3 ml), N-Boc-I-etrMeucin (0,117 g, 0,506 mmol) og HATU (0,192 g, 0,506 mmol). Blandingen ble omrørt natten over og fordelt mellom EtOAc og pH 4,0 buffer. EtOAc-laget ble vasket med vann, NaHCC>3 (vandig), tørket (MgSC^) og konsentrert. Residuet ble renset over en Biotage 40M kolonne (MeOH-CH^Cb: 0-8%), hvilket ga produktet 0,289 g (99%): LC-MS (retensjonstid: 2,53, Metode K), MS m/ z 779 (M<+>+l).
Trinn 7:
Til en suspensjon av produktet fra Trinn 6 (274 mg, 0,352 mmol) i Eksempel 370 {BOCNH-P3(Z,-/-BuGly)- {[2- (2-isopropylaminotiazol-4-yl)-7-metoksylkinolin-4-okso]-5'-prolin}-Pl(\ R, 2S Vinyl Acca)-COOEt} i THF (10,6 ml), CH3OH (2,6 ml) og H2O (5,3 ml) ble satt LiOH (0,068 g, 2,86 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 24, regulert til pH 6, og de organiske løsningsmidler ble fjernet i vakuum. Det vandige residuet ble surgjort til pH 4 og ekstrahert med CH2CI2gjentatte ganger. Kombinert organisk løsningsmiddel ble tørket (MgSC^) og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede produkt 255 mg (95%): LC-MS (retensjonstid: 2,58, Metode K), MS m/ z 751 (M<+>+l).
Trinn 8:
En løsning av CDI (0,024 g, 0,15 mmol) og produktet fra Trinn 7 i Eksempel 370 (0,0683 g, 0,09 mmol) {BOCNH-P3(L-/-BuGly)- {[2- (2-isopropylaminotiazol-4-yl)-7-metoksylkinolin-4-okso]-5-prolin}-Pl(l/?,2,S Vinyl Acca)-COOH} i THF (2 ml) ble tilbakeløpskokt i 60 min og fikk avkjøles til romtemperatur. Cyklopropansulfonamid (0,022 g. 0,18 mmol) ble tilsatt fulgt av tilsetning av ren DBU (0,027 ml, 0,18 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over, opparbeidet ved fortynning med EtOAc og vasket med pH 4,0 buffer, tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset gjentatte ganger ved preparativ HPLC (0-100% løsningsmiddel B) og over 1000^M preparativ TLC plate fra Analtech (20X40 cM), hvilket ga 0,0032 g (4%) av det ønskede produkt (Forbindelse 370) som et blekgult skum: LC-MS (Retensjonstid: 1,71, metode I) MS m/ z 854 (M<+>+l). Eksempel 371: Fremstilling av Forbindelse 371
Trinn 1:
Til en suspensjon av A7-Boc-c/5,-£-4-hydroksyprolin-metylester (10 g, 40,7 mmol) og 7-klorkinolin-4-ol (8,73 g, 49,0 mmol) i THF (200 ml) avkjølt til 0°C ble tilsatt PPh3(12,82 g, 48,9 mmol) og DIAD. (8,80 g, 42,13 mmol). Blandingen ble langsomt oppvarmet til romtemperatur natten over og omrørt i totalt 30 timer. Blandingen ble oppløst i EtOAc (800 ml), vasket med IN vandig HC1, 5% vandig K2C03(3X100 ml), saltvann (2 X 100 ml) og tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset mange ganger over Biotage 65M (MeOH-CH2Cl2: 0-10%), hvilket ga kumulativt
10,57 g (68%) av det ønskede produkt som et glass:<J>H NMR (CDC13) 5 1,40 (s, 9H), 2,33-2,42 (m, 1H), 2,61-2,72 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,91 (m, 2H), 4,45-4,59 (m, 1H), 5,13 (m, 1H), 6,61-6,64 (m, 1H), 7,41 (dd, J=9, 2 Hz, 1H), 7,98 (d, J=2 Hz, 1H), 8,03 (d,J=9 Hz, 1H), 8,67-8,71 (m, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,39, metode D), MS m/e 407 (M<+>+l).
Trinn 2: Til en løsning av produktet (10,57 g, 26,0 mmol) fra Trinn 1 i Eksempel 371 {BOC-Ar-P2[(4/?)-(7-klorkinolin-4-okso)-prolinmetylester} oppløst i MeOH (800 ml) avkjølt til 0 °C ble satt en vandig IN NaOH-løsning (44,5 ml, 44,5 mmol). Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur etter 6 timer, omrørt natten over og pH ble regulert til pH 7 ved anvendelse av 1,0 N vandig HC1. Løsningen ble konsentrert inntil bare vannlaget var igjen, pH regulert til 4 ved anvendelse av 6N vandig HC1 og blandingen ble fordelt gjentatte ganger med EtOAc (3x500 ml). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04) og konsentrert, hvilket ga 10,16 g (100%) som et hvitt, fast stoff.<J>H NMR (DMSO-d*) 8 1,32, 1,34 (to s (rotamerer) 9H), 2,31-2,40 (m, 1H), 2,58-2,69 (m, 1H), 3,65-3,81 (m, 2H), 4,33-4,40 (m, 1H), 5,34 (m, 1H) 7,10-7,11 (m, 1H), 7,57 (d,7=9 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 8,09-8,14 (m, 1H), 8,75 (d, 7=5 Hz, 1H), 12,88 (brs, 1H).<13>C NMR (DMSO- d6) 5 27,82, 35,84, 51,52, 57,75, 76,03,79,33, 102,95,119,54, 123,86, 126,34, 127,24, 134,49, 149,32, 152,88, 153,25,159,08,173,74. LC-MS (retensjonstid: 1,48, metode D), MS m/e 393 (M<+>+l) Trinn 3: Til en løsning av produktet (5,11 g, 13 mmol) fra Trinn 2 i Eksempel 371 {Boc-4(Æ)-(7-klorkinolin-4-okso) prolin}, HCl-salt (3,48 g, 18,2 mmol) vinyl Acca (eksisterer som en 1:1 blanding av diastereoisomerer ( IR, 2S/ IS, 2R hvor cyklopropyl-karboksyetylgruppen er syn til vinylgruppen) og NMM (7,1 ml 65 mmol) i DMF (30 ml) ble satt HATU (6,92 g, 18,2 mmol). Blandingen ble omrørt i 3 dager. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc (180 ml) og ble fordelt med pH 4,0 buffer (3x100 ml). Det organiske laget ble vasket med mettet vandig NaHC03(2x50 ml), vann (2x50 ml) og saltvann (2x50 ml). Den organiske løsningen ble tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over en Biotage 40M kolonne (EtOAc-heksaner: 50% til 100%), hvilket ga 2,88 g produktet som eksisterte som en diastereomer-blanding. Denne blandingen ble delvis separert ved anvendelse av en Biotage 65M kolonne (MeOH-etOAc: 0% til 9%), hvilket ga BOC-NH-P2[(4Æ)-(7-klorkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' vinyl acca Pl gruppe)-COOEt som den først eluerte høy Rf isomer (1,20 g, 17,4%).<J>H NMR (CDCb/Metanol-cL,) 5 1,16 (t, 7=7 Hz, 3H), 1,35 (s, 9H), 1,37-1,43 (m, 1H), 1,76-1,84 (m, 1H), 2,06-2,11 (m, 1H), 2,35-2,45 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 3,72-3,93 (m, 2H), 4,02-4,15 (m, 1H), 4,33-4,40 (m, 1H), 5,06 (d, 7=9 Hz, 1H), 5,16 (m, 1H), 5,24 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,63-5,70 (m, 1H), 6,74 (m, 1H), 7,39 (dd, 7=9, 2 Hz, 1H), 7,74-7,78 (m, 1H), 7,89 (d, 7=2 Hz,l H), 7,97 (d, 7=9 Hz ,1H), 8,60 (d, 7=5 Hz, 1H).<!>H NMR (metanol-d,, 60/40 Rotamerer) 8 1,24 (t, 7=7 Hz, 3H), 1,39, 1,43 (2s, 9H, forhold 4:6), 1,71-1,74 (m, 0,4H), 178-1,81 (m, 0,6H), 2,18-2,23 (m, 1H), 2,65-2,69 (m, 0,4H), 2,71-2,76 (m, 0,6H), 3,88-3,96 (m, 2H), 4,11-4,18 (m, 2H), 4,39-4,45 (m, 1H), 5,09-5,13 (m, 1H), 5,28-5,33 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,73-5,81 (m, 1H), 7,05 (d,7=5 Hz, 1H), 7,53 (d, 7=8,9 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,12 (d, 7=8,9 Hz, 1H), 8,70 (d, 7=5 Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,54, metode A) MS m/ z 530 (M<+>+l). Resten av materialet (-1,66 g, 24%) var blandede fraksjoner sterkt anriket med den lavere Rf isomer.
Trinn 4:
Produktet (0,65 g, 1,22 mmol) fra trinn 3 i Eksempel 371 {BOC-P2 [(4Æ)-(7-klorkinolin-4-okso)-5,-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca-C02Et} ble oppløst i 4N HCl/dioksan (4,5 ml, 18 mmol) og omrørt i 1 time ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og råproduktet ble direkte anvendt i neste trinn: LC-MS (retensjonstid: 0,94, metode A) LC-MS m/ z 430 (M<+>+l).
Trinn 5:
Til en suspensjon av produkt 1 (,22 mmol) fra trinn 4 i Eksempel 371 {Bis HCl-salt av NH2-P2[(4/?)-(7-klorkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25-Vinyl Acca)-COOEt), N-BOC-L-tetr-leucin (BOC L-tBuGly) (0,34 g, 1,47 mmol), DIPEA (1,0 ml, 5,74 mmol), HOBT.H20 (0,22 g, 1,47 mmol) i CH2C12(15 ml) ble satt HBTU (0,56 g, 1,47 mmol) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over, fortynnet med CH2C12(50 ml), vasket med pH 4,0 buffer (2x20 ml), mettet vandig NaHCC«3 (50 ml), saltvann (50 ml), tørket (MgSC^) og konsentrert. Residuet ble renset over en Biotage 40 M kolonne (EtOAc-heksaner: 15% til 60%), hvilket ga 607 mg (77%) av produktet som et skum.<J>H NMR (CDCVmetanol-d,) 8 1,00 (s, 9H), 1,19 (t,7=7 Hz, 1H), 1,30 (s, 9H), 1,38 (m, 1H), 1,78-1,83 (m, 1H), 2,01-2,46 (m, 2H), 2,73-2,82 (m 1H), 3,96-4,03 (m, 1H), 4,04 (d, 7=10 Hz, 1H), 4,11 (q, 7=7 Hz, 2H), 4,42 (d,7=12 Hz, 1H), 4,68-4,73 (m, 1H), 5,09-5,13 (m, 1H), 5,23-5,31 (m, 2H), 5,67-5,79 (m, 1H), 6,78 (d, 7=9 Hz, 1H), 7,38 (d, 7=9 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,08 (d,7=9 Hz, 1H), 8,68 (d,7=5 Hz ,1H). LC-MS (retensjonstid: 1,64, metode A), MS m/ z 643 (M<+>+l).
Trinn 6:
Til en suspensjon av produktet (207 mg, 0,32 mmol) fra Trinn 5 i Eksempel 371 {BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-7-klorkinolin-4-okso)-5,-prolin]-Pl(l/?,2,S Vinyl Acca)-C02Et} i THF(14 ml), CH3OH (2 ml) og H20 (8 ml) ble satt LiOH (62 mg, 2,60 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i én dag, regulert til nøytral pH og konsentrert i vakuum inntil bare det vandige laget var igjen. Det resulterende vandige residuet ble surgjort til pH 4,0 ved tilsetning av 1,0 N vandig HC1 og deretter mettet med fast NaCl. Denne vandige blandingen ble ekstrahert gjentatte ganger med EtOAc (3X60 ml), det samlede organiske løsningsmiddel ble tørket (Mg2S04) og konsentrert i vakuum, hvilket ga 107 mg (54%) av produktet {BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-(7-klorkinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,2,S Vinyl Acca)-C02H} som et hvitt, fast stoff.<J>H NMR (CDC13) 8 1,06 (s, 9H), 1,23 (2s, 9H), 1,31-1,43 (m 1H), 1,63-1,70 (m, 1H), 1,85-1,89 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 2,65-2,78 (m, 1H), 4,03-4,10 (m, 1H), 4,18-4,21 (m, 1H), 4,55-4,62 (m, 1H), 5,03-5,12 (m, 1H), 5,23-5,31 (m, 1H), 5,51 (m, 1H), 5,88-5,95 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 7,47-7,50 (m, 1H), 7,96 (m, 1H), 8,26 (d, 7=9 Hz, 1H), 8,75 (d, 7=5 Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,46, metode A), MS w/z615(M<+>+l).
Trinn 7:
Til en løsning av tripeptid-syren (0,0453 g, 0,074 mmol) fra Trinn 6 i Eksempel 371 {BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-(7-klorkinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,25 Vinyl Acca)-C02H} i THF (4 ml) ble satt CDI (17 mg, 0,10 mmol) og den resulterende løsning ble tilbakeløpskokt i 45 min og fikk avkjøles til romtemperatur. Cyklopropylsulfonamid (0,013 g, 0,10 mmol) ble tilsatt i én porsjon før tilsetning av ren DBU (0,015 ml, 0,10 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 18 timer, fortynnet med EtOAc (200 ml) og vasket med pH 4,0 buffer (3x30 ml), vann (2x30 ml), saltvann (30 ml), tørket (MgSC^) og renset ved anvendelse av én 20X40 cm 1000 Analtech PTLC plate (MeOH - CH2C12: 0 til 2%), hvilket ga det ønskede produkt (Forbindelse 371) som et skum (0,040 g, 76%):<!>H NMR 8 0,95-1,23 (m, 4H), 1,03 (s, 9H), 1,19 (s, 9H), 1,40-1,43 (m, 1H), 1,85 (dd, 7=8, 5 Hz, 1H), 2,12-2,20 (m ,1H), 2,43 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 4,07-4,19 (m, 2H), 4,51-4,57 (m, 2H), 5,07 (d, 7=10 Hz, 1H), 5,25 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,85 (m, 1H), 5,48 (s, 1H), 7,09 (d, 7=5 Hz, 1H), 7,45 (d, 7=9 Hz ,1H), 7,92 (m, 1H), 8,20 (d, 7=9 Hz, 1H), 8,72 (d, 7=5 Hz, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,52, metode B), MS m/ z 718 (M<+>+l). HRMS m/ z (M+H)<+>
beregnet for C4iH5iN5S09: 718,2677 funnet 718,2674.
Eksempel 372: Fremstilling av Forbindelse 372.
Trinn 1:
Til en løsning av L- tert- leucin (2 g, 15,25 mmol) oppløst i CH3CN (50 ml) ble satt TMSCN (7,06 ml, 56,41 mmol) og omrørt i 15 min. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 75°C i 30 min. Cyklopentylklorformiat (2,83 g, 19,06 mmol) ble satt til reaksjonsblandingen og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 80°C natten over og konsentrert i vakuum. Residuet ble behandlet med MeOH (40 ml), omrørt i 10 min og konsentrert i vakuum. Residuet ble regulert til pH 8,5 og ekstrahert med Et20 (2x200 ml). Det vandige laget ble surgjort til pH 3 og ekstrahert med CH2CI2(2x200 ml). Den samlede ekstrakt ble tørket (MgS04) og konsentrert i vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra minimal mengde av Et20/heksaner, hvilket ga produktet 3,48 g (94%):<J>H NMR (500 MHz, metanol-cL,) 5 ppm 1,00 (s, 9 H), 1,59 (m, 2 H), 1,73 (m, 4 H), 1,84 (dd, 7=5,95, 3,20 Hz, 2 H), 3,98 (s, 1 H), 5,02 (m, 1 H).
Trinn 2:
Til en løsning av produktet (530,1 mg, 1,04 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 371 {HC1-salt av P2[(4/?)-7-klorkinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,25 Vinyl Acca)-COOEt, produktet (328 mg, 1,35 mmol) fra Trinn 1 i Eksempel 372 {(L)-2-cyklopentyloksykarbonylamino-3,3-dimetyl-smørsyre}, HOBT (146 mg, 1,08 mmol) og diisopropyletylamin (0,755 ml, 4,32 mmol) i CH2C12(7 ml) ble satt HBTU (512 mg, 1,35 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og fordelt mellom CH2C12og pH 4,0 buffer. CH2Cl2-laget ble vasket med vann, mettet NaHC03(vandig), tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over en Biotage 40M kolonne (EtOAc-heksaner: 35-100%), hvilket ga produktet 640 mg (92%):<J>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm 1,02 (s, 9 H), 1,26 (m, 4 H), 1,56 (m, 10 H), 2,19 (q, 7=8,75 Hz, 1 H), 2,41 (m, 1 H), 2,70 (dd, 7=14,19, 8,09 Hz, 1 H), 4,01 (dd, 7=11,90, 3,05 Hz, 1 H), 4,13 (m, 2 H), 4,20 (s, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 4,62 (m, 1 H), 5,09 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,26 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,47 (m, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 7,07 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,47 (m, 1 H), 7,94 (m, 1 H), 8,20 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 8,72 (d, 7=5,49 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,71, Metode B), MS m/ z 655 (M<+>+l).
Trinn 3:
Tripeptid-syre ble fremstilt ved å følge Trinn 7 i Skjema 2 i Eksempel 370, bortsett fra at cyklopentoksykarbonyl - NH-P3(Z,-tetr-BuGly)-P2[(4/?)-(7-klorkinolin-4-okso)-5,-prolin]-Pl(l/?,25'Vinyl Acca)-COOEt ble anvendt istedenfor produktet fra Trinn 6 i Eksempel 370.
Modifikasjon: 0,636 g (0,97 mmol) av produktet fra Trinn 2 i Eksempel 372 anvendt, 0,424 g oppnådd (69% utbytte).
Produkt:
Data:<J>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm 1,02 (s, 9 H), 1,57 (m, 11 H), 2,14 (q, 7=9,03 Hz, 1 H),2,46 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 4,02 (dd, 7=11,89, 3,11 Hz, 1 H), 4,19 (m, 1 H), 4,50 (d, 7=26,35 Hz, 1 H), 4,64 (t, 7=8,42 Hz, 1 H), 5,04 (m, 1 H), 5,24 (d, 7=17,20 Hz, 1 H), 5,44 (s, 1 H), 5,87 (m, 1 H), 7,05 (d, 7=5,12 Hz, 1 H), 7,48 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,18 (d, 7=8,78 Hz, 1 H), 8,71 (d, 7=5,49 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 2,32, Metode A), MS m/ z 627 (M<+>+l).
Trinn 4:
En løsning av CDI (0,021 g, 0,13 mmol) og produktet fra Trinn 3 i Eksempel 372 (0,058 g, 0,09 mmol) {BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-7-klorkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(lÆ,2S' Vinyl Acca)-C02H} i THF (2 ml) ble tilbakeløpskokt i 40 min og fikk avkjøles til romtemperatur. Totalt 0,016 g (0,13 mmol) cyklopropansulfonamid, fulgt av tilsetning av en løsning av ren DBU (0,019 ml, 0,13 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over, deretter fortynnet med EtOAc (100 ml) og vasket med pH 4,0 buffer (2x), tørket (MgS04), konsentrert og renset over tre 1000^M preparativ TLC plater fra Analtech (20x40 cM, eluert sekvensielt med 50% til 0% til 2% MeOH i CH2C12) for å gi produkt (Forbindelse 372) 27,3 mg (40%):<J>H NMR (metanol-d,) 8 ppm 0,94 (m, 2 H), 1,02 (s, 9 H), 1,14 (m, 1 H), 1,49 (m, 11 H), 1,86 (m, 1 H), 2,14 (m, 1 H), 2,49 (m, 1 H), 2,68 (dd, 7=13,89, 7,48 Hz, 1 H), 2,78 (m, 1 H), 4,08 (m, 1 H), 4,22 (s, 1 H), 4,55 (m, 2 H), 5,05 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,22 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,46 (m, 1 H), 5,86 (m, 1 H), 7,07 (d, 7=5,19 Hz, 1 H), 7,46 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 8,18 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 8,72 (d, 7=5,19 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,52 Metode I), MS m/ z 730 (M<+>+l).
Eksempel 373: Fremstilling av Forbindelse 373.
Trinn 1:
En løsning av 2-amino-4-metoksylacetofenon (4,45 g, 26,94 mmol) ved 0°C oppløst i CH2CI2(100 ml) ble behandlet med cyklopropankarbonylklorid (3,1 ml, 33,68 mmol) diisopropyletylamin (19 ml, 107,8 mmol) og DMAP (0,780 g, 6,4 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over og konsentrert i vakuum. Residuet oppløst i CH2CI2(500 ml) ble vasket med vandig 1 N HC1, vann, NaHCC«3 (vandig) og tørket (MgSC^). Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og det faste residuet ble behandlet med EtOAc/heksaner (1/1) for å gi produktet (5,35 g, 85%):<J>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0,94 (m, 4 H), 1,69 (m, 7=3,97 Hz, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 3,84 (s, 3 H), 6,69 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 7,98 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 8,23 (s, 1 H). Trinn 2:
En løsning av produktet (5,35 g, 22,72 mmol) fra Trinn 1 i eksempel 373 {cyklopropankarboksylsyre-(2-acetyl-5-metoksy-fenyl)-amid} og tert-BuOK (5,45 g, 48,6 mmol) i tert-butanol (130 g) ble tilbakeløpskokt i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, hellet i iskald buffer og regulert til pH 7 og filtrert. Det faste stoffet oppsamlet ble omkrystallisert fra MeOHÆ^O for å gi produktet (lg, 20%):<!>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm 0,96 (m, 2 H), 1,15 (m, 2 H), 1,94 (m, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 5,86 (m, 1 H), 6,93 (m, 2 H), 8,04 (d, 7=8,85 Hz, 1 H).
Trinn 3:
Til en løsning av N-Boc-£-3-hydroksyprolin (1,06 g, 4,32 mmol) og trifenylfosfin (2,27 g, 8,64 mmol) ved 0°C oppløst i THF (25 ml) ble satt en løsning av produktet (0,93 g, 4,32 mmol) fra Trinn 2 i Eksempel 373 {2-cyklopropyl-7-metoksy-kinolin-4-ol}og DEAD (1,50 g, 8,64 mmol) i THF (25 ml) over 30 min. Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og konsentrert. Residuet ble renset to ganger med en Biotage 40+M kolonne (EtOAc-heksaner: 20-65%), hvilket ga produktet 1,74 g (90%): LC-MS (retensjonstid: 2,56, Metode J), MS m/ z 443 (M<+>+l).
Trinn 4:
Til en suspensjon av (1,70 g, 3,86 mmol) av produktet fra Trinn 3 i Eksempel 373 (Boc-(4R)-(2-cyklopropyl-7-metoksy-kinolin-4-okso)-S-prolin metylester} i THF (91 ml), CH3OH (18,2 ml) og H20 (27 ml) ble satt LiOH (0,73 g, 30 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer, regulert til pH 6, og det organiske løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Residuet ble surgjort til pH 4 og ekstrahert med EtOAc (4x100 ml). Den samlede organiske ekstrakt ble tørket (MgS04) og konsentrert i vakuum, hvilket ga produktet 1,64 g (100%):<*>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1,32 (m, 13 H), 2,37 (m, 2 H), 2,71 (m, 1 H), 3,86 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,43 (m, 1 H), 5,41 (s, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,30 (m, 1 H), 8,02 (dd, 7=12,63, 9,33 Hz, 1 H).
Trinn 5:
Produktet (1,61 g, 2,79 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 373 {Boc-P2{(4/?)-[2-cyklopropyl-7-metoksylkinolin-4-okso]-5,-prolin}-Pl(l/?,25'Vinyl Acca)-COOEt} ble oppløst i HCl/dioksan (15 ml; 60 mmol) og omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og azeotrop-behandlet med tørr THF, hvilket ga produktet (1,58 g, 100%): LC-MS (retensjonstid: 2,12, Metode K), MS m/ z 566 (M<+>+l).
Trinn 6:
Til en suspensjon av produktet (1,58 g, 2,79 mmol) fra Trinn 5 i Eksempel 373 {Bis-HCl-salt av P2 {( 4R)-[ 2- cyklopropyl-7-metoksylkinolin-4-okso]-5,-prolin}-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-COOEt}, diisopropyletylamin (1,65 ml, 9,25 mmol), N- Boc- L- tert-leucin (0,775 g, 3,35 mmol), HOBT.H20 (0,515 g, 3,36 mmol) i CH2C12(13 ml) ble satt HBTU (1,28 g, 3,36 mmol). Blandingen ble omrørt i 14 timer og fordelt mellom EtOAc og pH 4,0 buffer. EtOAc-laget ble tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over en Biotage 40+M kolonne (EtOAc-heksaner: 20-100%, fulgt av MeOH) og ytterligere renset med 20X40 cM 1000 Analtech PTLC-plate (MeOH-CH2C122%), hvilket ga produktet, 1,4 g (63%):<J>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1,04 (s, 9 H), 1,20 (m, 5 H), 1,28 (s, 9 H), 1,39 (m, 2 H), 1,69 (m, 1 H), 2,19 (m, 2 H), 2,36 (m, 1 H), 2,63 (dd, 7=13,54, 7,68 Hz, 1 H), 3,90 (s, 3 H), 4,08 (m, 4 H), 4,19 (d, 7=11,34 Hz, 1 H), 4,47 (d, 7=11,71 Hz, 1 H), 4,56 (t, 7=8,60 Hz, 1 H), 5,08 (m, 1 H), 5,24 (m, 1 H), 5,39 (s, 1 H), 5,78 (m, 1 H), 6,56 (s, 1 H), 6,96 (dd, 7=9,15,2,20 Hz, 1 H), 7,21 (d, 7=2,56 Hz, 1 H), 7,97 (d, 7=9,15 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 2,34, Metode K), MS m/ z 679 (M<+>+l).
Trinn 7:
Til en suspensjon av produktet fra Trinn 6 i Eksempel 373 (1,28 g, 1,89 mmol), Boe - NH-P3(Z,-etrt-BuGly)-P2[(4/?)-(2-cyklopropyl-7-metoksylkinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-COOEt, i THF(93 ml), CH3OH (23 ml) og H20 (45 ml) ble satt LiOH (0,491 g, 20,4 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 18,5 timer, regulert til pH 4 og det organiske løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble ekstrahert med EtOAc (5x 100 ml). Kombinert organisk løsningsmiddel ble tørket (MgS04) og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede produkt 1,17 g (97% ): NMR (metanol-cL,) 5 ppm 1,04 (s, 9 H), 1,24 (s, 9 H), 1,27 (m, 3 H), 1,42 (m, 2 H), 1,68 (dd, 7=8,05, 5,12 Hz, 1 H), 2,17 (m, 1 H), 2,33 (m, 1 H), 2,47 (m, 1 H), 2,66 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 4,09 (m, 2 H), 4,51 (d, 7=11,71 Hz, 1 H), 4,59 (t, 7=8,60 Hz, 1 H), 5,07 (m, 1 H), 5,26 (m, 1 H), 5,52 (s, 1 H), 5,85 (m, 1 H), 6,69 (s, 1 H), 7,10 (dd, 7=9,15, 2,20 Hz, 1 H), 7,27 (d, 7=2,20 Hz, 1 H), 8,10 (d, 7=9,15 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 2,21, Metode K), MS m/ z 651 (M<+>+l).
Trinn 8:
En løsning av CDI (0,058 g, 0,344 mmol) og produktet fra Trinn 7 i Eksempel 373 (0,160 g, 0,246 mmol) {Boe - NH-P3(L-tert-BuGly)-P2[(4Æ)-(2- cyklopropyl-7-metoksylkinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(l/?,25 Vinyl Acca)-COOH} i THF (2 ml) ble tilbakeløpskokt i 60 min og fikk avkjøles ned til romtemperatur. Cyklopropansulfonamid (0,041 g, 0,344 mmol) fulgt av tilsetning av ren DBU (0,051 ml, 0,344 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 timer og opparbeidet ved fordeling av reaksjonsblandingen mellom pH 4,0 buffer og EtOAc. Det organiske laget ble tørket (MgS04), konsentrert og renset ved preparativ HPLC (0-100% løsningsmiddel B), hvilket ga produktet (Forbindelse 373) 0,086 g (46%):<J>H NMR (TRIFLUOREDDDCSYRE-D) 8 ppm 1,04 (s, 9 H), 1,21 (m, 16 H), 1,41 (m, 1 H),
1,87 (dd, 7=8,05, 5,49 Hz, 1 H), 2,26 (m, 3 H), 2,61 (dd, 7=12,99, 6,77 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,09 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,49 (m, 2 H), 5,11 (d, 7=11,71 Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=17,20 Hz, 1 H), 5,46 (s, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 6,62 (m, 2 H), 7,01 (dd, 7=8,97, 2,01 Hz, 1 H), 7,23 (d, 7=2,56 Hz, 1 H), 8,00 (d, 7=8,78 Hz, 1 H).
Eksempel 374: Fremstilling av Forbindelse 374.
Trinn 1:
Til en løsning av w-anisidin (58 g, 471 mmol) i 800 ml CH3CN ble satt Meldrum's syre (75 g, 518 mmol) og trimetylformiat (60 g, 565 mmol). Den heterogene blanding ble tilbakeløpskokt i 2 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum, MeOH (30 ml) ble tilsatt og det resulterende utfelte stoff ble filtrert og vasket med 10-15 ml MeOH. MeOH-tilsetning/filtrerings-prosedyre ble gjentatt med den konsentrerte moderlut. Det resulterende kombinerte faste stoff ble tørket (~20 torr, 45°C natten over), hvilket ga 117,6 g (90%) av mellomproduktet 5-[(3-metoksyfenyl-amino)metylen]-2,2-dimetyl-[l,3]dioksan-4,6-dion.
Trinn 2:
Til en løsning av Ph20 (500 g) oppvarmet til 250°C ble satt 108,7 g (392 mmol) 5-[(3-metoksyfenyl-amino)metylen]-2,2-dimetyl-[l,3]dioksan-4,6-dion i porsjoner over en 30 min periode. Blandingen ble oppvarmet ytterligere 15 min, avkjølt til romtemperatur, fortynnet med heksaner (800 ml) og den resulterende oppslemningen ble omrørt natten over. Heksanene ble dekantert fra, det faste residuet oppløst i 600 ml MeOH ved tilbakeløp, avkjølt til romtemperatur og det resulterende faste stoffet ble filtrert og vasket med minimal CH2CI2. En analog omkrystalliseringsprosedyre ble fulgt, hvilket ga totalt 20,73 g (30%) av 7-metoksykinolin-4-ol som et lysebrunt, fast stoff.<1>H NMR (metanol-d,) 8 3,87 (s, 3H), 6,23 d, 7=7,3 Hz, 1H), 6,68 (d, 7=2,4 Hz, 1H), 6,96 (dd, 7=9,0, 2,4 Hz, 1H), 8,11 (d, 7=9 Hz, 1H); LC-MS (retensjonstid: 0,77, metode D), MS m/ z 176 (M<+>+l).
Trinn 3:
Til en løsning av N-Boc-cw-X-4-hydroksyprolin-metylester (12,24 g, 49,8 mmol) og PPh3(26,14 g, 99,7 mmol) i THF (200 ml) avkjølt til 0 °C ble satt en løsning av DEAD (17,36 g, 99,7 mmol) og 7-metoksykinolin-4-ol (8,73 g, 49,8 mmol) i (THF 700 ml) over en 45 min. periode. Blandingen ble langsomt oppvarmet til romtemperatur natten over og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over en Biotage 65M kolonne (MeOH-etOAc: 0-10%), hvilket ga 12,78 g (64%) av produktet som et fargeløst glass:<J>H NMR(CDC13) 8 1,36 (s, 9H), 2,26-2,35 (m, 1H), 2,57-2,68 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,75-3,92 (m, 2H), 3,86, 3,87 (to s (rotamerer) 3H), 4,41-4,53 (m, 1H), 5,09 (m, 1H), 6,52 (d, 7=5,5 Hz, 1H), 7,06-7,09 (m, 1H), 7,24-7,26 (m, 1H), 7,94 (d, 7=9,1 Hz, 1H), 8,50-8,56 (m, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,34, metode D), MS m/e 403 (M<+>+l).
Trinn 4:
Til en løsning av produktet (8,54 g, 21,2 mmol) fra trinn 3 i Eksempel 374 {BOC-A<7->P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-prolin-metylester} i 600 ml 5:1 THF/MeOH ble satt en løsning av LiOH (4,0 g, 167 mmol) i 150 ml vann. Blandingen ble omrørt natten over, pH ble regulert til pH 7 ved anvendelse av 6N vandig HC1 og løsningen ble konsentrert inntil bare vannlaget var igjen. Residuet ble regulert til pH 4 ved anvendelse av IN vandig HC1, NaCl ble tilsatt for å mette blandingen og ble fordelt gjentatte ganger med først EtOAc og deretter THF ettersom produktet ble vann-oppløselig. De samlede organiske lag ble tørket (MgS04) og konsentrert, hvilket ga produktet 8,18 g (99%) som et hvitt, fast stoff.<J>H NMR (CDCLs-metanol-cL,) 8 1,42
(s, 9H), 2,40-2,49 (m, 1H), 2,68-2,77 (m, 1H), 3,88 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,41-4,53 (m, 1H), 5,32 (m, 1H), 6,86-6,92 (m, 1H), 7,21 (dd, 7=9, 2 Hz, 1H), 7,30 (d,7=2 Hz, 1H), 8,05-8,10 (m, 1H), 8,62 (d,7=6 Hz, 1H); LC-MS (retensjonstid 1,20, metode A), MS m/ z 389 (M<+>+l).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet (4,50 g, 11,60 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 374 {Boc-4(Æ)-(7-metoksykinolin-4-okso)-prolin}, 2,66 g (13,9 mmol) av HCl-saltet av vinyl Acca (som eksisterer som en 1:1 blanding av diastereoisomerer (\ R, 2SI\ S, 2R hvor cyklopropyl-karboksyetylgruppen er syn til vinylgruppen), 10 ml (57,4 mmol) DIPEA og 2,13 g (13,9 mmol) HOBT.H20 i 150 ml CH2C12ble satt 5,27 g (13,9 mmol) HBTU og blandingen ble omrørt natten over. Løsningen ble fortynnet med 200 ml CH2C12og ble fordelt med pH 4,0 buffer (2x50 ml). Det organiske laget ble vasket med mettet vandig NaHCC«3 (2x50 ml), vann (2x50 ml) og saltvann (2x50 ml). Den organiske løsningen ble tørket (MgSC^), konsentrert og renset ved anvendelse av en Biotage 65M kolonne (eluert med 0- 9% MeOH/EtOAc) for å gi BOC-NH-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,2JS'vinyl acca Pl gruppe)-COOEt som den først eluerte isomer (2,21 g, 36% totalt), fulgt av 1,13 g (19%) av ren lavere Rf isomer BOC-NH-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5'-prolin]-P1( 1S, 2R Vinyl Acca Pl gruppe)-C02Et. Blandede fraksjoner ble også oppnådd. Data for BOCN-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25> (VinylAcca)-COOEt: JH NMR (CDC13) 8 1,16 (t, 7=7 Hz ,3H), 1,35 (s, 9H), 1,37-1,47 (m, 1H), 1,74-1,88 (m, 1H), 2,04-2,13(m, 1H), 2,32-2,46(m, 1H), 2,58-2,69 (m, 1H), 3,76 (m, 1H), 3,87 (s ,3H), 4,02-4,13 (m, 2H), 4,30-4,44 (m, 1H), 5,05-5,19 (m, 2H), 5,24 (d,7=17 Hz, 1H), 5,63-5,71 (m, 1H), 6,61 (m, 1H), 7,07 (dd, 7=9, 2Hz, 1H), 7,22 (d, 7=2 Hz, 1H), 7,76-7,83 (m, 1H), 7,92 (d, 7=9 Hz, 1H), 8,50 (d, 7=5 Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,38, metode A), MS m/ z 526 (M<+>+l).
Trinn 6:
Hele produktet (1,35 g, 2,90 mmol) fra Trinn 5 i Eksempel 374 {BOC-P2 [( 4R)-( 1-metoksykinolin-4-okso)-5,-prolin]-Pl(l/?,25'Vinyl Acca)-COOEt} ble oppløst i 4N HCl/dioksan (15 ml, 60 mmol) og ble omrørt i 2,5 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum, hvilket ga 1,3 g (100%) av produktet som et gyldenbrunt, fast stoff som ble direkte anvendt i neste trinn.<!>H NMR (metanol-d4) 5 1,25 (t, 7=7 Hz, 1H), 1,47-1,52 (m, 1H), 1,78 (dd, 7=8, 5 Hz, 1H), 2,21-2,32 (m, 1H), 2,55-2,64 (m, 1H), 2,99 (dd, 7=15, 7 Hz, 1H), 3,96 (s, 2H), 4,06 (s, 3H), 4,14 (q,7=7 Hz, 2H), 4,69-4,75 (m, 1H), 5,13 (d,7=10 Hz, 1H), 5,33 (d, 7=17 Hz ,1H), 5,71-5,83 (m, 1H), 5,89 (m, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,49-7,52 (m, 1H), 8,51-8,55 (m, 1H), 8,94-8,96 (m, 1H);<13>C NMR (metanol-cL,) 5 14,62,23,08, 30,89, 34,73, 36,97, 41,03, 52,42, 57,11, 60,17, 62,70, 81,13, 100,06, 103,07, 117,02, 118,53. 122,70, 126,86, 134,74, 143,15, 146,75,166,62, 167,71, 169,37, 171,18. LC-MS (retensjonstid: 0,94, metode D), MS m/ z 426 (M<+>+l)
Trinn 7:
Til en suspensjon av produktet (1,3 g, 2,61 mmol) fra Trinn 6 i Eksempel 374 {NH2-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25'-Vinyl Acca)-COOEt, bis-HCl-salt}, N- BOC- L- tert- lencin (BOC L-tBuGly) (0,94 g, 4,25 mmol), NMM (1,7 ml, 15,5 mmol) i DMF (20 ml) ble satt HATU (1,55 g, 3,40 mmol) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over, fortynnet med 75% EtOAc-THF (300 ml), vasket med pH 4,0 buffer (2x50 ml), mettet vandig NaHC03(50 ml), saltvann (50 ml), tørket (MgSCM) og renset med en Biotage 40 M kolonne (eluert med 15% til 100% EtOAc i heksaner), hvilket ga produktet 0,702 g (42%)
{BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl-C02Et som et skum.<J>H NMR (Metanol-cL,) 5 1,06 (s, 9H), 1,22-1,32 (m, 3H), 1,28 (s, 9H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,73 (dd, 7=8, 5 Hz, 1H), 2,19-2,25 (m, 1H), 2,67-2,72(m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,03-4,07(m, 1H), 4,10-4,18 (m, 2H), 4,20-4,24 (m, 1H), 4,54 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,60-4,63 (m, 1H), 5,11 (dd, 7=10, 2 Hz, 1H), 5,28-5,30 (m, 1H), 5,43 (m, 1H), 5,76-5,83 (m, 1H), 6,50 (d, 7=9 Hz, NH), 6,93 (d, 7=5 Hz, 1H), 7,10 (dd, 7=9, 2 Hz, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,99 (m, 1H), 8,11 (d,7=9 Hz, 1H), 8,62 (d,7=5H); LC-MS m/ z 639 (retensjonstid: 1,53 metode D).
Trinn 8:
Til en suspensjon av produktet (702 mg ,1,1 mmol) fra Trinn 7 i Eksempel 374 {BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-7-metoksykinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-COOEt} i THF (50 ml), CH3OH (7 ml) og H20 (22 ml) ble satt LiOH (211 mg, 8,80 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i én dag, surgjort til nøytral pH og konsentrert i vakuum inntil bare det vandige laget var igjen. Det resulterende vandige residuet ble surgjort til pH 4,0 ved tilsetning av 1,0 N vandig HC1 og deretter mettet med fast NaCl. Denne vandige blandingen ble ekstrahert gjentatte ganger med EtOAc og THF, det samlede organiske løsningsmiddel vasket med saltvann (50 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga produktet 631 mg (92%), BOCNH-P3(I-/-BuGly)-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,25' Vinyl Acca)-C02H, som et fast stoff.<J>H NMR (Metanol-cL;) 8 1,04 (s, 9H), 1,22 (s, 9H), 1,34-1,39 (m, 1H), 1,67 (dd, 7=8, 5 Hz, 1H), 2,03-2,13 (m, 1H), 2,43-2,49 (m, 1H), 2,67-2,73 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 4,00-4,05 (m, 1H), 4,15-4,21 (m, 1H), 4,56-4,62 (m, 2H), 5,02 (d,7=10 Hz, 1H), 5,20 (d,7=17 Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 5,87-5,99 (m, 1H), 6,47 (d, 7=8 Hz, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,12 (d, 7=5 Hz, 1H), 7,19 (dd, 7=9,2 Hz, 1H), 7,31 (d, 7=2 Hz, 1H), 8,22 (d, 7=9 Hz, 1H), 8,72 (d, 7=5 Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,44, metode D), MS m/ z 611 (M<+>+l).
Trinn 9:
Til en løsning av tripeptid-syre (0,120 g, 0,195 mmol) fra Trinn 8 i Eksempel 374 i THF (2 ml) ble satt CDI (44,3 mg, 0,27 mmol) og den resulterende løsningen ble tilbakeløpskokt i 60 min og fikk avkjøles til romtemperatur. Cyklobutylsulfonamid
(0,037 g, 0,273 mmol) ble tilsatt i én porsjon før tilsetning av ren DBU (0,041 ml, 0,273 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 timer, en andre ekvivalent av CDI og cyklobutylsulfonamid ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 48 timer til. Blandingen ble fortynnet med 50% THF/EtOAc (200 ml) og vasket med saltvann mettet pH 4,0 buffer (30 ml), tørket (MgSC^) og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i 2 ml 50% THF-CH2C12, 75 mg (0,39 mmol) EDAC, 48 mg (0,39 mmol) 4-DMAP, 58 L (0,39 mmol) DBU og 53 mg (0,39 mmol) cyklobutylsulfonamid ble tilsatt og blandingen ble omrørt 4 dager. Blandingen ble renset med én 1000 Analtech PTLC-plate (20 X 40 cM, eluert med 2% MeOH i CH2C12), hvilket ga det ønskede produkt Forbindelse 374, BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(7-metoksykinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklobutan, som et skum, 2 mg (2%):<J>H NMR (metanol-d4) 5 1,07,1,08 (to s (rotamerer) 9H), 1,20,1,21 (to s (rotamerer) 9H), 1,41-1,48 (m, 1H), 1,64-1,70 (m, 1H), 1,72-1,91 (m, 2H), 1,95-2,11 (m, 2H), 2,23-2,37 (m, 2H), 2,40-2,58 (m, 2H), 2,72-2,75 (m, 1H), 4,06 (s, 3H), 4,12-4,17 (m, 2H), 4,35-4,38 (m, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 4,65-4,70 (m, 1H), 5,16-5,18 (m, 1H), 5,24-5,37 (m, 1H), 5,69-5,76 (m, 2H), 7,40-7,46 (m, 3H), 8,35-8,40 (m, 1H), 8,92 (d, J=l Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,58 metode B), MS m/ z 728 (M<+>+l).
Eksempel 375: Fremstilling av Forbindelse 375.
Trinn 1:
Til en løsning av produktet (794 mg, 1,51 mmol) fra Trinn 5 i Eksempel 374 {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoksykinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl ( IR, 2S VinylAcca)-C02Et} i 68 ml 12% MeOH/THF ble satt en løsning av 218 mg (9,08 mmol) litiumhydroksyd i 30 ml vann og blandingen ble omrørt 16 timer. pH ble regulert til nøytral ved tilsetning av 6N vandig HC1, konsentrert inntil bare vannet var igjen, løsningen ble regulert til pH 4 ved anvendelse av vandig IN HC1 og ble deretter ekstrahert med 50% THF-EtOAc (5x200 ml porsjoner). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04) og konsentrert for å gi produktet 752 mg (100%) {N-BOC-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin^-okso)-^©!^]-?^!/?^^ VinylAcca)-C02H}:<J>H NMR (Metanol-cL,) 5 1,37-1,43 (m, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,69-1,78 (m, 1 H), 2,16-2,24 (m, 1H), 2,44-2,54 (m, 1H), 2,64-2,74 (m, 1H), 3,89-3,94 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 4,40-4,43 (m, 1H), 5,11 (d,7=10 Hz, 1H), 5,31 (d,7=17 Hz, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,79-5,87 (m, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,04 (d, 7=6 Hz, 1H), 7,25 (dd, .7=9,1,2 Hz, 1H), 7,29 (m, 1H), 8,09 (d, 7=9,1 Hz, 1H), 8,66 (d, 7=6 Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,05, metode H). MS w/z498(M<+>+l).
Trinn 2:
En løsning av produktet (399,5 mg, 0,668 mmol) fra Trinn 1 i Eksempel 375 {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoksykinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl( IR, 2S VinylAcca)-C02H} i THF (4 ml) og CDI (434 mg, 2,68 mmol) ble tilbakeløpskokt i 60 min og fikk avkjøles til romtemperatur. Cyklopropylsulfonamid (406 mg, 3,35 mmol) ble tilsatt i én porsjon før tilsetning av ren DBU (0,50 ml, 3,35 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer, fortynnet med 50% THF-EtOAc (200 ml) og vasket med saltvann mettet pH 4,0 buffer (2x40 ml). Organiske lag ble tørket (MgS04), konsentrert og renset over en Biotage 25M kolonne (MeOH i CH2C12,0% til 15%), hvilket ga 217 mg (54%) av det ønskede produkt {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoksykinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(lÆ,2S VinylAcca)-CONHS02cyklopropan}:<J>H NMR (Metanol-cL,) 5 1,01-1,10 (m, 2H), 1,11-1,18 (m, 1H), 1,20-1,27 (m, 1H), 1,39-1,48 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,87 (dd, 7=8, 5 Hz, 1H), 2,01-2,38 (m, 2H), 2,57 (dd, J=14, 7 Hz, 1H), 2,91-2.96 (m, 1H), 3,83-3,92 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,36-4,39 (m, 1H), 5,11 (d, 7=10 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,38 (m, 1H), 5,74-5,81 (m, 1H), 6,91 (d, .7=5,5 Hz, 1H), 7,20 (dd, 7=9,2, 2,4 Hz, 1H), 7,29 (m, 1H), 8,07 (d, 7=9,2 Hz, 1H), 8,60 (d, 7=5,5 Hz, 1H). LC-MS (retensjonstid: 1,28, metode I). MS m/ z 601 (M<+>+l)
Trinn 3:
Totalt produkt (198 mg, 0,33 mmol) fra Trinn 2 i Eksempel 375 {BOC-P2 [(4R)-(7-metoksykinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-CONHS02cyklopropan} ble oppløst i 4N HCl/dioksan (4 ml, 16 mmol) og omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, hvilket ga råproduktet som et gyldenbrunt, fast stoff som ble anvendt umiddelbart i neste reaksjon.
Trinn 4:
Råproduktet fra Trinn 3 i Eksempel 375 {HN-P2[(4R)-(7-metoksykinolin-4-okso)-S-prolin]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-CONHS02cyklopropan, bis-HCl-salt} ble suspendert i 10 ml diklormetan. Til denne blandingen ble satt N-BOC-L-etrt-leucin (BOC L-tBuGly) [120 mg, 0,52 mmol], HOAT (30 mg, 0,20 mmol), DIPEA (0,29 ml, 1,65 mmol) og HATU (160 mg, 0,43 mmol) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer, fortynnet med 50% EtOAc-THF (300 ml), vasket med saltvann mettet pH 4,0 buffer (3x50 ml), tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset med en Isco 35 g kolonne (eluert med 0% til 15% MeOH i CH2C12), hvilket ga produktet (130,1 mg, 47%) som et Hunning's base-salt (Forbindelse 375):<*>H NMR (metanol-cL,) 8 ppm 1,00-1,48 (m, 29 H), 1,47 (s, 9 H), 1,89 (m, 1 H), 2,26 (m, 1 H), 2,36 (m, 1 H), 2,69 (m, 1 H), 2,97 (m, 1 H), 3,25 (q, 7=7,43 Hz, 2 H), 3,74 (m, 2 H), 3.97 (s, 3 H), 4,10 (m, 1 H), 4,23 (dd, 7=19,68, 9,92 Hz, 1 H), 4,57 (m, 2 H), 5,15 (m, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 5,50 (s, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 7,01 (t, 7=5,34 Hz, 1 H), 7,16 (d, .7=9,16 Hz, 1 H), 7,31 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 8,14 (m, 1 H), 8,67 (d, 7=5,49 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,49 Metode d), MS m/ z 714 (M<+>+l).
Eksempel 376: Fremstilling av Forbindelse 376.
Trinn 1:
Forbindelse 375 (130 mg) ble oppløst i EtOAc, vasket én gang til med pH 4 buffer, saltvann og deretter tørket (MgS04). Den urensede blandingen ble renset over to 1000 PTLC plater fra Analtech (20X40 cm, eluert med 3% MeOH i CH2C12), hvilket ga produktet (Forbindelse 376) 54 mg (23% utbytte fra tripeptidsyren):<!>H NMR (Metanol-oU) 5 0,88-l,00(m, 2H), 1,01-1,14 (m, 2H), 1,03 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 1,34 (dd, 7=9, 5 Hz, 1 H), 1,81-1,89 (m, 1H), 2,06-2,13 (m,lH), 2,45-2,50 (m, 1H), 2,65-2,75 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,98-4,11 (m, 1H), 4,21-4,22 (m, 1H), 4,46-4,50 (m, 1H), 4,54-4,57 (m, 1H), 4,97-5,02 (m, 1H), 5,14-5,22 (m, 1H), 5,33-5,41 (m, 1H), 5,81-5,99 (m, 1H), 6,87-6,95 (m, 1H), 7,06-7,09 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 8,07-8,10 (m, 1H), 8,59 (d, 7=5,2 Hz, 1H). HRMS m/ z (M-H)' beregnet for CasØeNjOgS: 712,3016, funnet: 712,3024; LC-MS m/ e 714 (retensjonstid: 1,42, metode I).
Eksempel 377: Fremstilling av Forbindelse 377.
Trinn 1:
Totalt 1,0 mmol av produktet fra Trinn 2 i Eksempel 375 {Bis-HCl-saltet av HN-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-CONHS02cyklopropan} suspendert i 20 ml diklormetan ble tilsatt 352 mg (1,30 mmol) 2-(5)-ter/-butoksykarbonylamino-8-nonensyre anskaffet fra RSP Amino Acids, HOAT (82 mg, 0,60 mmol), DIPEA (0,74 ml, 5,0 mmol) og HATU (494 mg, 1,30 mmol) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt 16 timer og mesteparten av CH2CI2fjernet i vakuum. Blandingen ble fortynnet med mettet pH 4,0 buffer (150 ml) og ekstrahert inn i EtOAc (4x200 ml). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over en Biotage 40M kolonne (eluert med 0% til 15% MeOH i CH2C12), hvilket ga produktet (Forbindelse 377) 574 mg (76%): LC-MS m/ z 754 (retensjonstid: 1,64, metode I).
Eksempel 378: Fremstilling av Forbindelse 378.
Trinn 1:
Totalt 0,34 mmol av produktet fra Trinn 2 i Eksempel 375 {Bis-HCl-salt av HN-P2[(4/?)-(7-metoksykinolin-4-okso)-5-prolin]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-CONHS02cyklopropan} ble suspendert i 3 ml diklormetan. Til denne blandingen ble satt N-BOC-Z,-valin (Z,-Val) (120 mg, 0,55 mmol), HO AT (30 mg, 0,20 mmol), DIPEA (0,29 ml, 1,65 mmol) og HATU (160 mg, 0,43 mmol) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer, fortynnet med mettet pH 4,0 buffer (150 ml) og ekstrahert inn i EtOAc (3x200 ml). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann, tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over en Isco 35 g kolonne (MeOH i CH2CI2:0% til 15%). Dette materialet ble ytterligere renset over to 5 PTLC plater fra Analtech (20X40 cm, eluert med 3% MeOH i CH2C12), hvilket ga produktet 104,1 mg (44%), Forbindelse 378: HRMS m/ z (M-H)" beregnet for C34H44N509S: 698,2860, funnet: 698,2865. LC-MS m/ e 700 (retensjonstid: 1,60, metode D).
Eksempel 379: Fremstilling av Forbindelse 379
Trinn 1:
Til en suspensjon av 2-pikolinsyre (3,73 g, 30,3 mmol) og 2-amino-4-metoksybenzofenon (5,0 g, 30,3 mmol) ved -30 °C oppløst i pyridin (150 ml) ble satt POCI3(3,7 ml, 45,4 mmol) i 5 min. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 3 timer ved temperaturen og omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble hellet i kaldt vann og ekstrahert med EtOAc (3x). Den samlede ekstrakt ble tørket for å gi produktet (7,67 g, 93%):<J>H NMR (metanol-d,) 8 ppm 2,65 (s, 3 H), 3,92 (s, 3 H), 6,78 (m, 1 H), 7,60 (m, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 8,06 (m, 1 H), 8,21 (d, 7=7,63 Hz, 1 H), 8,59 (t, 7=2,29 Hz, 1 H), 8,76 (d, 7=3,97 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,56, Metode D), MS m/ z 271 (M<+>+l).
Trinn 2:
Til en suspensjon av pyridin-2-karboksylsyre-(2-acetyl-5-metoksy-fenyl)-amid (2,90 g, 10,7 mmol) i THF (50 ml) ble satt t-BuOK/THF (IM, 24 ml, 24 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 70°C i 3 timer og omrørt natten over. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Kaldt vann ble satt til residuet og regulert til pH 4,6 med vandig 1,0 N HC1 og filtrert. Det faste residuet ble renset over en Biotage 65M kolonne (MeOH/CH2Cl2: 0-15%) for å gi produktet (2,26 g, 84%): LC-MS (retensjonstid: 1,19, Metode D), MS m/ z 253 (M<+>+l).
Trinn 3:
En blanding av 7-metoksy-2-pyridin-2-yl-kinolin-4-ol (2,2 g, 8,71 mmol) i P0C13(92 ml) ble tilbakeløpskokt i 3 timer og deretter ble løsningsmidlet fjernet i vakuum. Isvann ble satt til residuet, regulert til pH >10 med 1,0 N NaOH og ekstrahert med EtOAc (2x). Den samlede ekstrakt ble vasket med vann, saltvann, tørket (MgS04), og løsningsmiddel fjernet for å gi produktet som et gult, fast stoff (89 %, 2,1 g): DMSO-D6) 8 ppm 3,97 (s, 3 H), 7,40 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 8,01 (m, 1 H), 8,09 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 8,46 (s, 1 H), 8,56 (d, 7=7,93 Hz, 1 H), 8,74 (d, 7=3,97 Hz, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,50, Metode D), MS m/ z 271 (M<+>+l). Trinn 4: Til en løsning av N-Boc-4-hydroksyprolin (1,6 g, 6,7 mmol) i DMSO (20 ml) ble satt/-BuOK (1,9 g, 16,8 mmol). Den dannede blanding ble omrørt i 1,5 timer og 4-klor-7-metoksy-2-pyridin-2-yl-kinolin (2,0 g, 7,4 mmol) og DMSO (10 ml) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 38 timer, fortynnet med kaldt vann og ekstrahert med EtOAc/eter (1/4, 2x). Det vandige laget ble surgjort til pH 4 og ekstrahert med EtOAc/THF (5x). Den samlede ekstrakt ble tørket (Na2S04/MgS04), løsningsmidlet fjernet i vakuum og residuet ble renset ved preparativ HPLC (0-80% løsningsmiddel B) for å gi produktet (1,6 g, 50%): LC-MS (retensjonstid: 1,23, Metode I), MS m/ z 466 (M<+>+l).
Trinn 5:
En løsning av produktet (0,21 g, 0,65 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 379 {N-boc-(l/?,25)-l-amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester} i HCl/dioksan (4M, 5 ml, 20 mmol) ble omrørt i 3 timer og løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Til residuet ble satt CH2C12(10 ml), diisopropyletylamin (0,4 ml, 3,23 mmol), HOBT (0,20 g, 1,35 mmol), Boc-(4R)-(2-cyklopropyl-7-metoksy-kinolin-4-okso)-S-prolin (0,20 g, 0,5 mmol) og HATU (0,415 g, 1,07 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og fortynnet med pH 4,0 buffer, og ekstrahert med EtOAc. Ekstrakten ble tørket (MgS04) og renset ved Biotage 40 M kolonne ved anvendelse av MeOH/ CH2CI2(0 til 15%) som elueringsmiddel for å gi produktet (204,7 mg, 70%):<*>H NMR (metanol-d4) 8 ppm 0,64 (m, 1 H), 0,96 (m, 2 H), 1,33 (m, 8 H), 1,39 (m, 9 H), 1,90 (m, 2 H), 2,18 (m, 1 H), 2,54 (m, 1 H), 2,81 (m, 1 H), 4,01 (m, 5 H), 4,44 (d, 7=28,99 Hz, 1 H), 5,08 (m, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 5,57 (s, 1 H), 6,03 (m, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 7,27 (d,
.7=8,24 Hz, 1 H), 7,64 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,14 (m, 2 H), 8,66 (s, 1 H), 8,74 (s, 1
H).
Trinn 6:
En oppslemning av P2 Boc-(4R)-(7-metoksy-2-pyridin-2-yl-kinolin-4-okso)-S-prolin]-P 1 ( 1R, 2S Vinyl Acca)-CONHS02( 1 -cyklopropylmetylcyklopropan-1 -yl)
(Trinn 5, Eksempel 379) (203 mg, 0,3 mmol) i 4M HCl/dioksan (3,5 ml, 14 mmol) ble omrørt i 2 timer og løsningsmidlet fjernet i vakuum. Til residuet ble satt CH2CI2(2 ml), diisopropyletylamin (0,63 ml, 3,6 mmol), Boc-Z,-terr-leucin (83 mg, 0,36 mmol), HOAt (41 mg, 0,3 mmol) og HATU (148 mg, 0,39 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 7 timer og løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble renset ved preparativ HPLC (35-85% løsningsmiddel B) for å gi det ønskede produkt (Forbindelse 379) 25,1 mg (11%):<J>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm -0,05 (m, 1 H), 0,30 (m, 1 H), 0,66 (m, 1 H), 0,91 (m, 2 H), 1,05 (s, 9 H), 1,28 (s, 9 H), 1,67 (m, 8 H), 2,15 (m, 1 H), 2,58 (m, 1 H), 2,77 (m, 1 H), 3,96 (s, 3 H), 4,19 (d, 7=40,25 Hz, 2 H), 4,51 (d, 7=16,47 Hz, 2 H), 4,95 (m, 1 H), 5,15 (m, 1 H), 5,53 (s, 1 H), 5,89 (dd, 7=16,65, 9,33 Hz, 1 H), 7,09 (d, 7=8,42 Hz, 1 H), 7,43 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,50 (m, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,99 (m, 1 H), 8,10 (d, 7=9,15 Hz, 1 H), 8,48 (d, 7=7,68 Hz, 1 H), 8,72 (s, 1 H). LC-MS (retensjonstid: 1,59, Metode I), MS m/ z 791 (M<+>+l).
Eksempel 380: Fremstilling av Forbindelse 380.
Trinn 1:
Utgangsmaterialet i Skjema 1 i foreliggende eksempel ble fremstilt ved kobling av produktet fra trinn 3 i Eksempel 11 av seksjon B med amino-terminus av Pl(li?,2S Vinyl Acca)-COOEt. En oppslemning av nevnte koblingsprodukt, P2 Boc-(4R)-(6-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-P 1( IR, 2S Vinyl Acca)-COOEt (7,88 g, 14,99 mmol) i 4M HCl/dioksan (120 ml, 480 mmol) ble omrørt i 2 timer, løsningsmidlet fjernet i vakuum og azeotrop-behandlet med tørr dioksan. Til residuet ble satt DMF (75 ml), N-metylmorfolin (6,27 ml, 57,07 mmol), Boc-I-terMeucin (5,20 g, 22,49 mmol) og HATU (8,53 g, 22,49 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over og opparbeidet ved å helle reaksjonsblandingen i isvann og regulert til pH 5 med vandig 1,0 N HC1 og ekstrahert med EtOAc. Ekstrakten ble vasket med NaHCOa(vandig), saltvann, tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset over Biotage 65M kolonne (EtOAc-heksaner: 5-100%) for å gi produktet (8,07 g, 84%): Retensjonstid: 1,88 metode I) MS m/ z 639 (M<+>+l).
Trinn 2:
Til en suspensjon av produktet (4,0 g, 6,26 mmol) fra Trinn 1 i Eksempel 384 {Boe - NH-P3(Z,-etrt-BuGly)-P2 [(4Æ)-(6-metoksyl-isokinolin-l -okso)-5'-prolin]-P \{\ R, 2S Vinyl Acca)-COOEt} i THF (250 ml), CH3OH (31 ml) og H20 (125 ml) ble satt LiOH (2,4 g, 100,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og deretter regulert til pH 7 med vandig 1,0 N HC1. De organiske løsningsmidler ble fjernet i vakuum. Det vandige residuet ble surgjort til pH 4 og ekstrahert med EtOAc (2x). Det samlede organiske løsningsmiddel ble tørket (Na2S04/MgS04) og konsentrert i vakuum, hvilket ga produktet (3,79 g, 99%):<*>H NMR (metanol-cL,) ppm 1,05 (s, 9 H), 1,25 (m, 1 H), 1,29 (s, 9 H), 1,46 (m, 1 H), 1,72 (dd, 7=8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,23 (q, 7=8,55 Hz, 1 H), 2,68 (dd, 7=13,89, 7,78 Hz, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,05 (dd, 7=11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,23 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 4,46 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,63 (t, 7=8,39 Hz, 1 H), 5,10 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,85 (m, 2 H), 7,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,26 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,91 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=9,16 Hz, 1 H). Retensjonstid: 1,81 metode I) MS m/ z 611 (M<+>+l). Trinn 3: En løsning av CDI (0,052 g, 0,32 mmol) og produktet (0,130 g, 0,21 mmol) fra Trinn 2 i Eksempel 384 {BOCNH-P3(Z,-r-BuGly)-P2[(4/?)-6-metoksy-isokinolin-l-okso)-5'-prolin]-Pl(l/?,2<5>Vinyl Acca)-C02H} i THF (2 ml) ble tilbakeløpskokt i 60 min og fikk avkjøles til romtemperatur. Cyklobutansulfonamid (0,043 g, 0,32 mmol) ble tilsatt fulgt av tilsetning av en løsning av ren DBU (0,048 ml, 0,32 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over, deretter filtrert gjennom sprøytefilter og renset ved preparativ HPLC (30% til 100% løsningsmiddel B) for å gi det ønskede produkt 0,1422 mg (92%):<J>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm 1,04 (s, 9 H), 1,26 (d, 7=13,43 Hz, 9 H), 1,39 (m, 1 H), 1,85 (dd, 7=7,63, 5,19 Hz, 1 H), 1,98 (m, 2 H), 2,26 (m, 4 H), 2,50 (m, 2 H), 2,61 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H), 4,33 (m, 1 H), 4,43 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,13 (m, 1 H), 5,30 (m, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,08 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H). Retensjonstid: 1,89 metode I) MS m/ z 728 (M<+>+l).
Trinn 4:
Eksempel 380, Trinn 3 (0,196 mg, 0,27 mmol) {(BOCNH-P3(L-r-BuGly)-P2 -( 4R)-(6-metoksy-isokinolin-1 -okso)-S-prolin]-P 1 ( IR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02Cyklobutyl} ble oppløst i HCl/dioksan (5 ml; 20 mmol) og ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum, hvilket ga tittelproduktet, 100%
(0,1887 g) som var klart for neste trinn.
Trinn 5:
Til en blanding av produktet (0,037 g, 0,053 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 380 {HCl-salt av NH2-P3(Z,-/-BuGly)-P2 -(4/?)-(6-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-P1(1Æ,2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklobutyl} og diisopropyletylamin (0,046 ml), 0,26 mmol) i CH2C12(2 ml) ble satt cyklopentylklorformiat (0,7 M, 0,151 ml, 0,069 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og renset ved preparativ HPLC
(30% til 100% av løsningsmiddel B) for å gi det ønskede produkt (Forbindelse 380)
(0,0303 g, 77%):<J>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm 1,03 (s, 9 H), 1,48 (m, 9 H), 1,86 (dd, 7=8,24, 5,49 Hz, 1 H), 1,99 (m, 2 H), 2,27 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,60 (dd, 7=13,89, 6,87 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (dd, 7=12,21, 3,97 Hz, 1 H), 4,32 (m, 2 H), 4,41 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 4,69 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,11 (d, 7=9,46 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H).
retensjonstid: 1,85 metode H), MS m/ z 740 (M<+>+l)
Eksempel 381: Fremstilling av Forbindelse 381.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet (0,037 g, 0,053 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 380 {HCl-salt av NH2-P3(Z,-/-BuGly)-P2 -(4/?)-(6-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-Pl( lR, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklobutyl} og isopropyletylamin (0,046 ml), 0,26 mmol) i CH2C12(2 ml) ble satt nytt pentylklorformiat (0,012 ml, 0,069 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og direkte renset ved preparativ HPLC (30% til 100% løsningsmiddel B) hvilket ga det ønskede produkt (Forbindelse 381)
(0,0252 g, 64%):<J>H NMR (metanol-cL,) 5 ppm 0,84 (s, 9 H), 1,05 (s, 9 H), 1,40 (m, 1 H), 1,86 (m, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 2,28 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,57 (m, 1 H), 3,39 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 3,55 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (m, 1 H), 4,33 (m, 2 H), 4,41 (d, 7=11,29 Hz, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=17,09 Hz, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,10 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,25 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 8,07 (d, 7=8,85 Hz, 1 H). retensjonstid: 1,89 metode H), MS m/ z 742 (M<+>+l).
Eksempel 382: Fremstilling av Forbindelse 382.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet (0,037 g, 0,053 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 380 {HCl-salt av NH2-P3(Z,-/-BuGly)-P2 -(4/?)-(6-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-V\(\ R, 2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklobutyl} og diisopropyletylamin (0,046 ml), 0,26 mmol) i CH2C12(2 ml) ble satt di-t-amyl-dikarbonat (0,0169 g, 0,069 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og direkte renset ved HPLC (30% til 100% løsningsmiddel B) for å gi det ønskede produkt (Forbindelse 382) (0,0175 g, 44%):<!>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0,79 (t, 7=6,87 Hz, 3 H), 1,04 (s, 8 H), 1,21 (s, 3 H), 1,23 (s, 3 H), 1,41 (m, 2 H), 1,64 (m, 2 H), 1,83 (m, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 2,26 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,60 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,07 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H), 4,33
(m, 1 H), 4,43 (d, 7=11,60 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,13 (m, 1 H), 5,29 (m, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,09 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, 7=5,49 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=8,85 Hz, 1 H). retensjonstid: 1,90, metode H), MSw/z742(M++l).
Eksempel 383: Fremstilling av Forbindelse 383.
Trinn 1
Til en blanding av produktet (0,037 g, 0,053 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 380 {HCl-salt av NH2-P3(L-/-BuGly)-P2 -(4/?)-(6-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-P1(1Æ,2S Vinyl Acca)-CONHS02-cyklobutyl} og isopropyletylamin (0,046 ml), 0,26 mmol) i CH2C12(2 ml) ble satt t-butyl-isocyanat (0,008 ml, 0,069 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og direkte renset ved preparativ HPLC (30% til 100% løsningsmiddel B), hvilket ga det ønskede produkt (Forbindelse 383)
(0,024 g, 62%):<!>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1,05 (s, 9 H), 1,19 (s, 9 H), 1,37 (m, 1 H), 1,85 (dd, 7=8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 2,26 (m, 4 H), 2,50 (m, 2 H), 2,58 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,06 (m, 1 H), 4,32 (m, 2 H), 4,49 (m, 2 H), 5,11 (d, 7=10,38
Hz, 1 H), 5,27 (d, 7=17,40 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,08 (dd, 7=9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, 7=6,10 Hz, 1 H), 8,12 (d, 7=8,85 Hz, 1 H). retensjonstid: 1,77, metode H), MS m/ z 727 (M<+>+l).
Eksempel 384: Fremstilling av Forbindelse 384.
Trinn 1:
En suspensjon av diisopropyletylamin (0,031 ml, 0,018 mmol), N,N'-disuccinimidylkarbonat (0,0274 g, 0,107 mmol) og produktet (0,050 g, 0,0714 mmol) fra Trinn 4 i Eksempel 380 {HCl-salt av NH2-P3(L-M3uGly)-P2 -(4/?)-(6-metoksy-isokinolin-l-okso)-S-prolin]-Pl(l/?,25'Vinyl Acca)-CONHS02-cyklobutyl} i THF (2 ml) ble ultralydbehandlet ved 80°C i 15 min. KH (0,046 g, 1,14 mmol) og 1-metylcyklopentanol (0,079 ml, 0,714 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 20 min og opparbeidet ved fortynning med kaldt vann, regulert til pH 4 og ekstrahert med EtOAc. Ekstrakten ble tørket (MgS04) og residuet ble renset ved preparativ HPLC (30% til 100% løsningsmiddel B) for å gi det ønskede produkt (Forbindelse 384) (0,018 g, 33%): (metanol-cL,) 5 ppm 1,04 (s, 9 H), 1,29-1,79 (m, 10 H), 1,84 (m, 2 H), 1,99 (m, 3 H), 2,26 (m, 4 H), 2,49 (m, 2 H), 2,60 (dd, 7=13,73, 7,02 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (dd, 7=11,29, 2,44 Hz, 1 H), 4,26 (s, 1 H), 4,32 (m, 1 H), 4,44 (d, 7=11,90 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,07 Hz, 1 H), 5,28 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,10 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,26 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, 7=9,16 Hz, 1 H). LC-MS retensjonstid: 1,91 metode H), MS m/ z 754 (M<+>+l).
Eksempel 385: Fremstilling av Forbindelse 385.
Trinn 1:
En suspensjon av 2-cyanometyl-4-metoksy-benzosyre-metylester (1,9 g og TsOH. H2O (0,15 g, mmol) i morfolin 5 ml) ble tilbakeløpskokt i 4 timer og løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra EtOAc/heksaner med dråper av MeOH for å gi produktet (0,43 g, 17%): LC-MS retensjonstid: 1,07 metode H), MS m/ z 266 (M++l).
Trinn 2:
En blanding av 6-metoksy-3-morfolin-4-yl-isokinolin-l-ol (0,298 g, 1,15 mmol) i POCI3(20 ml) ble tilbakeløpskokt i 2 timer, løsningsmidlet fjernet i vakuum og kaldt vann ble tilsatt. pH ble regulert til >11 ved tilsetning av 1,0 N NaOH. Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc. Ekstrakten ble tørket (MgS04) og løsningsmidlet fjernet i vakuum for å gi produktet (0,299 g, 94%): LC-MS retensjonstid: 1,68 metode H), MS m/ z 279 (M<+>+l).
Trinn 3:
En blanding av l-klor-6-metoksy-3-morfolin-4-yl-isokinolin (0,050 g, 0,18 mmol) og tetrabutylfosfonium-hydrogendifluorid (0,8 g, 2,8 mmol) [Synlett 1992, (4), 345-6] ble oppvarmet ved 140°C i mikrobølgeovn i 10 min. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc og filtrert gjennom en ISCO 25 g prekolonne med et lag av silisium-gel på toppen og løsningsmidlet fjernet for å gi produktet (0,037 mg, 77%):<!>H NMR (KLOROFORM-D) 5 ppm 3,48 (m, 4 H), 3,84 (m, 4 H), 3,89 (s, 3 H), 6,46 (d, 7=1,22 Hz, 1 H), 6,85 (s, 1 H), 6,90 (dd, 7=9,16,2,44 Hz, 1 H), 7,82 (d, 7=8,85 Hz, 1 H). LC-MS retensjonstid: 1,56 metode H), MS m/ z 263 (M<+>+l).
Trinn 4:
En blanding av l-fluor-6-metoksy-3-morfolin-4-yl-isokinolin (0,037 g, 0,14 mmol), LaCl3(0,020 g, 0,8 mmol), t-BuOK (1M/THF, 0,32 ml, 0,32 mmol) og Boe - NH-P3(L-tert-BuGly)-P2 [(4Æ)-4-hydroksyl-S-prolin]-Pl(lÆ,2S Vinyl Acca)-CONHS02cyklopropan (0,045 g, 0,08 mmol) i THF (3 ml) ble omrørt i 3 dager. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med metanol, filtrert gjennom sprøytefilter og renset ved preparativ HPLC for å gi produktet som et blekgult skum (0,0158 g, 24%):<J>H NMR (metanol-d,) 8 ppm 1,03 (s, 9 H), 1,24 (m, 4 H), 1,31 (s, 9 H), 1,43 (m, 2 H), 1,88 (m, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,59 (dd, 7=13,43, 6,71 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,47 (m, 4 H), 3,83 (m, 4 H), 3,86 (s, 3 H), 4,08 (m, 1 H), 4,28 (s, 1 H), 4,48 (m, 1 H), 5,12 (d, 7=10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, 7=16,48 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 6,74 (d, 7=9,16 Hz, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 7,85 (d, 7=8,85 Hz, 1 H), 9,19 (s, 1 H). retensjonstid: 1,86 metode H), MS m/ z 799 (M<+>+l).
Eksempel 386: Fremstilling av Forbindelse 386.
Forbindelse 386 ble fremstilt ved anvendelse av metodene beskrevet her.
Seksjon I:
Alle forbindelser i seksjon I ble analysert ved LC/MS-metodikk, under de følgende betingelser.
Metode A: Xterra C18 S7 3,0 x 50 mm
Gradient: 100% løsningsmiddel A / 0% løsningsmiddel B til 0% løsningsmiddel A / 100% løsningsmiddel B
Gradient-tid: 3 min.
Holdetid: 1 min.
Strømningshastighet: 4 ml/min.
Detektor-bølgelengde: 220 nm
Løsningsmiddel A: 10% MeOH / 90% H20 / 0,1% TFA
Løsningsmiddel B: 10% H20 / 90% MeOH / 0,1% TFA
Eksempel 410: Fremstilling av Forbindelse 410
Trinn 1:
Til en løsning av Boc-L-hydroksyprolin (0,723 g, 3,13 mmol) i DMSO ble satt KO<l>Bu (0,808 g, 7,2 mmol) under en nitrogen-atmosfære. Suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 timer og 4-klor-6-metyl-2-(trifluormetyl)kinolin (0,916 g, 3,75 mmol) ble tilsatt i to porsjoner. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i tre timer og 1,3 ekvivalent av HC1 (IN) ble anvendt for å nøytralisere reaksjonen. Bufferløsning med pH 4,0 ble tilsatt og pH ble regulert til pH 4-5. Det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (3 x 25 ml) og de samlede organiske lag ble vasket med saltvann (20 ml) og tørket over MgS04, hvilket ga tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff (urenset utbytte ikke beregnet). Råproduktet ble tatt til neste trinn.
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,48 (441,5) (metode A).
Trinn 2:
En løsning av råproduktet fra Trinn 1,4-(6-metyl-2-trifluormetyl-kinolin-4-yloksy)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester (antatt 3,13 mmol) i THF (10 ml) og metanol (10 ml) ble avkjølt til 0°C. TMSCN22M i heksaner (~1,3 ekv) ble langsomt satt til den omrørte løsningen under en nitrogen-atmosfære inntil gass ikke lenger ble emittert fra løsningen. Den fullstendig omsatte løsning ble deretter konsentrert i vakuum og rensning med en Biotage 40M kolonne (eluert 10% - 30% etylacetat i heksaner) ga den rene tittelforbindelse som et hvitt skum (976 mg, 69% over Trinn 1&2)
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,60 (477) (metode A).
Trinn 3:
En løsning av produktet fra Trinn 2 (0,976 g, 2,15 mmol) i DCM (7 ml) og TFA (6,62 ml) ble omrørt ved romtemperatur i én time. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet ble suspendert i IN HC1 i dietyleter (8 ml), forsiktig omrørt og konsentrert i vakuum. Denne prosedyren ble gjentatt og det resulterende produkt ble plassert på en oljepumpe natten over, hvilket ga et hvitt, fast stoff i kvantitativt utbytte.
<!>H NMR: (DMSO-d6) 5 2,50 (s, 3H), 2,57- 2,6 (m, 1H), 2,66-2,71 (m, 1H), 3,62-3,65 (br d, J = 15 Hz, 1H), 3,80-3,81 (m, 4H), 4,8 (br s, 1H), 5,7 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,72-7,75 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,98-7,8 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 9,54 (br s, 1H); LC/MS rt-min (MH^): 1,61 (355) (metode A).
Trinn 4:
Produktet fra Trinn 3 (antatt kvantitativt utbytte, 2,746 mmol) ble satt til en løsning av BOC-t-butyl-L-glycin (0,635 g, 2,746 mmol) i DCM (20 ml) under en nitrogen-atmosfære. Dette trinnet ble fulgt av tilsetning av HOBt (0,408 g, 3,02 mmol), DIPEA (3,35 ml, 19,2 mmol) og HBTU (1,56 g, 4,12 mmol). En ferskenfarget løsning resulterte umiddelbart og reaksjonen fikk omrøres ved romtemperatur natten over. 10 ml DCM ble satt til den fullførte reaksjon for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (25 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4,5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3 x 20 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (20 ml), mettet NaOH (25 ml) og saltvann (20 ml) og deretter tørket med MgSC«4. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 40M kolonne (eluert 10% - 40% etylacetat i heksaner). Denne rensning ga den rene tittel-forbinde Ise som et hvitt, fast stoff (1,11 g, 89%).
<!>H NMR: (DMSO-cLj) 5 0,96-1,02 (rotamerer, 3:2, s, 18H), 2,27-2,33 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 4,02-4,04 (m, 1H), 4,43-4,45 (brd,7= 15 Hz, 2H), 4,58-4,61 (t, 1H), 5,60 (br s, 1H), 6,72-6,74 (br d, J= 15 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,68-7,73 (m, 1H), 7,95-7,97 (m, 2H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,61 (590) (metode A).
Trinn 5:
LiOH (0,138 g, 5,78 mmol) ble oppløst i vann (10 ml) ved oppvarmning og ultralydbehandling. LiOH-løsningen og MeOH (10 ml) ble satt til en løsning av rent materiale fra Trinn 4 (1,09 g, 1,93 mmol) i THF (10 ml). Blandingen fikk umiddelbart en klar blå farge. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter surgjort med IN HC1 (5,78 ml, 5,78 mmol). Reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning og pH ble regulert til pH 4,5 ved anvendelse av IN vandig NaOH. Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (3 x 25 ml), vasket med saltvann (20 ml) og tørket over MgS04. Den filtrerte løsningen ble konsentrert i vakuum og satt under vakuum natten over. Råproduktet (957 mg, 90% utbytte) ble tatt til neste trinn.
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,51 (577) (metode A).
Trinn 6:
Råproduktet fra Trinn 5 (60 mg, 0,11 mmol) ble oppløst i DCM (5 ml) og cyklopropansulfonsyre (1 (Æ)-amino-2 (5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt (Eksempel 1, Trinn 8) (0,029 g, 0,11 mmol) ble tilsatt. DIPEA (0,094 ml, 0,541 mmol) og deretter ble HATU (0,0575, 0,151 mmol) tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i ca. 8 timer. 10 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (10 ml). Blandingen ble surgjort ved anvendelse av IN HC1 til en pH på 4-5 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3 x 20 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (10 ml) og saltvann (10 ml) og deretter tørket over MgS04. Den resulterende løsning ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 12M kolonne (eluert 10% - 40% aceton i heksaner). Denne rensning ga Forbindelse 410 som et hvitt pulver (29 mg, 35%).
<!>H NMR: (DMSO-cLj) 5 0,976-1,12 (m, 24 H), 1,36-1,39 (m, 1H), 1,70-1,72 (m, 1H), 2,15-2,25 (m, 2H), 2,50-2,52 (m, 4H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,97-4,01 (m, 2H), 4,40-4,47 (m, 2H), 5,09-5,11 ( d, J= 10Hz, 1H), 5,21-5,24 ( d, J= 15Hz, 1H), 5,59-5,66 (m, 2H), 6,65-6,67 (d, NH), 7,43 (s, 1H), 7,72-7,74 (d, J= 10 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,98-8,0 (d, J = 10 Hz, 1H), 8,87 (s, NH), 10,35 (s, NH);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,65 (789,61) (metode A).
Eksempel 411: Fremstilling av Forbindelse 411.
Trinn 1:
Til en løsning av Boc-L-hydroksyprolin (2,00 g, 8,65 mmol) i THF (25 ml) ble satt NaH (0,795 g, 19,87 mmol) under en nitrogen-atmosfære. Suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur i 15 minutter og 4,6-diklorpyrimidin (2,58 g, 17,30 mmol) ble tilsatt i to porsjoner. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time og 1,3 ekvivalenter av HC1 (IN) ble anvendt for å nøytralisere reaksjonsblandingen. pH 4,0 bufferløsning ble tilsatt og pH ble regulert til pH 5. Etylacetat ble anvendt for å ekstrahere den vandige fasen (3 x 25 ml) og de organiske lag ble vasket med saltvann
(20 ml) og tørket over MgSCU, hvilket ga tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff (urenset utbytte ikke beregnet). Råproduktet ble anvendt i neste trinn.
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,91 (366,2) (metode A).
Trinn 2:
En løsning av råproduktet fra Trinn 1, (antatt 8,65 mmol), i THF (40 ml) og metonal (40 ml) ble avkjølt til 0°C. TMSCN22M i heksaner (~1,3 ekv) ble langsomt satt til den omrørte løsningen under en nitrogen-atmosfære inntil gass ikke lenger strømmet fra løsningen. Den fullstendig omsatte løsningen ble deretter konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 40M kolonne (eluert 20% - 40% etylacetat i heksaner), hvilket ga den rene tittel-forbindelse som et hvitt skum (497 mg, 16% over trinn 2a - 2b).
<!>H NMR: (DMSO-d6) 5 1,34-1,38 (rotamerer, 2:1, 9H), 2,25-2,29 (m, 1H), 2,53-2,56 (m, 1H), 3,58-3,75 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 4,28-4,33 (m, 1H), 5,59 (s, 1H), 7,24 (s, 1H),8,69 (s, 1H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,08 (380,14) (metode A).
Trinn 3:
En løsning av det rene produkt fra Trinn 2 (472 mg, 1,83 mmol) i DCM (3 ml) og TFA (5,65 ml) ble omrørt ved romtemperatur i én time. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum, residuet ble suspendert i IN HC1 i dietyleter (7,33 ml), forsiktig omrørt og konsentrert i vakuum. Denne prosedyren ble gjentatt og det resulterende produkt ble plassert på en oljepumpe natten over, hvilket ga et hvitt, fast stoff i kvantitativt utbytte.
LC/MS rt-min (MH<*>): 0,55 (258,35) (metode A).
Trinn 4:
Produktet fra Trinn 3 (antatt kvantitativt utbytte, 1,83 mmol) ble satt til en løsning av BOC-t-butyl-L-glycin (0,424 g, 1,83 mmol) i DCM (11 ml) under en nitrogen-atmosfære. Dette trinnet ble fulgt av tilsetning av HOBt (0,272 g, 2,02 mmol), DIPEA (2,23 ml, 12,82 mmol) og HBTU (1,04 g, 2,75 mmol). Reaksjonen fikk omrøres ved romtemperatur i 15 timer. 15 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (15 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4,5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3 x 20 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (20 ml), mettet NaOH (25 ml), saltvann (20 ml) og tørket over MgS04. Den resulterende løsning ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 40S kolonne (eluert 20% - 50% etylacetat i heksaner). Denne rensning ga den rene tittelforbindelse som et hvitt, fast stoff (454 mg, 53%).
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,94 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,21-2,27 (m, 1H), 2,48-2,55 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,86-4,02 (m, 2H), 4,29-4,31 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,46-4,49 (t, 1H), 5,75 (br s, 1H), 6,72-6,74 (d, NH), 7,12 (s, 1H), 8,71 (s, 1H);
LC/MS rt-min (MH^): 2,27 (493,5) (metode A).
Trinn 5:
LiOH (0,0141 g, 0,589 mmol) ble oppløst i vann (7,5 ml) ved oppvarmning og ultralydbehandling. LiOH-løsning ble satt til en løsning av det rene materiale fra Trinn 4 (252 mg, 0,535 mmol) i THF (7,5 ml) og fikk stå under omrøring ved romtemperatur. Reaksjonen var fullstendig etter 3 timer. Blandingen ble behandlet med pH 4,0 buffer og surgjort til en pH på omtrent 4,5 med IN HC1. Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (3 x 25 ml) og den organiske fasen ble vasket med saltvann (20 ml) og tørket over MgS04. Den filtrerte løsningen ble konsentrert i vakuum og fikk stå under vakuum natten over. Råproduktet (231 mg, 95% utbytte) ble anvendt i neste trinn.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,94 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,14-2,22 (m, 1H), 2,50-2,54 (m, 1H), 3,84-3,876 (d, J= 150 Hz, 1H), 3,97-3,99 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,27-4,30 (d, J= 15 Hz, 1H), 4,37-4,40 (t, 1H), 5,63 (br s, 1H), 6,69-6,71 (d, NH), 7,12 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 12,56 (brs, OH);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,24 (479,5) (metode A).
Trinn 6:
Det rene materiale fra Trinn 5 (80 mg, 0,146 mmol) og fenylboronsyre (0,0178 g, 0,146 mmol) ble solvatert i DMF (2 ml). Løsningen ble plassert under en nitrogen- atmosfære og 2M vandig Na2CC«3 (0,146 ml, 0,292 mmol) ble tilsatt. Fem molprosent av tetrakis(trifenyl)fosfin)-palladium (0) ble tilsatt (8,44 mg, 0,0073 mmol) og blandingen ble oppvarmet med mikrobølgeovn ved anvendelse av Personal Chemistry Emrys Optimizer i 50 minutter ved 140°C. Palladium-sort ble utfelt fra reaksjonen etter fullføring. Blandingen ble surgjort med én ekvivalent IN HC1 og filtrert gjennom en sprøyte, ved anvendelse av MeOH for å ekstrahere produktet. Produktet ble renset ved prep HPLC (kolonne - 4 Xterra S5 30 x 75 mm, løsningsmiddel - 70% A / 30% B - 30% A / 70% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradient-tid - 15 min., holdetid - 1 min., strømningshastighet - 40 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 10,45-11,37). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble nøytralisert med IN NaOH og plassert i "speed" vakuum i omtrent 4 timer. Fraksjonene ble samlet og pH 4,0 buffer (15 ml) ble tilsatt. pH ble regulert til pH 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (3 x 20 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvann (15 ml), tørket over MgS04og konsentrert i vakuum. Produktet ble plassert på en oljepumpe for å tørke natten over og en viskøs olje ble oppnådd (37 mg, 50%).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,37 (499,3) (metode A).
Trinn 7:
Produktet fra Eksempel 411, Trinn 6 (36,7 mg, 0,061 mmol) ble oppløst i DCM (4 ml) og cyklopropansulfonsyre-(l(Æ)-amino-2 (5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt (Eksempel 1, Trinn 8) (0,0164 g, 0,161 mmol) ble tilsatt. DIPEA (0,0534 ml, 0,307 mmol) og deretter HATU (0,0326, 0,0858 mmol) ble tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i 3 timer. 10 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (10 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3x15 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (10 ml) og saltvann (10 ml) og deretter tørket over MgS04. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 12M kolonne (eluert 20% - 40% aceton i heksaner). Denne rensning ga ren Forbindelse 411 som et hvitt pulver (7 mg, 15%).
<J>H NMR: 8 1,07-1,46 (m, 24 H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,22-2,32 (m, 2H), 2,51-2,55 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,04-4,07 (d, J = 15 Hz, 1H), 4,20-4,22 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,36-4,38 ( d, J= 10 Hz, 1H), 4,47-4,50 (t, 1H), 5,12-5,14 (d,J= 10 Hz, 1H), 5,29-5,33 (d, J = 20 Hz, 1H), 5,73-5,82 (m, 2H), 6,59-6,60 (d, NH), 7,29 (s, 1H), 7,50-7,51 (m, 3H), 8,03-8,05 (m, 2H), 8,81 (s, 1H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,50 (711,4) (metode A).
Eksempel 412: Fremstilling av Forbindelse 412.
Trinn 1:
Produktet fra Eksempel 411, Trinn 5 (80 mg, 0,146 mmol) ble solvatert i DMF (2 ml) og 2-tiofenboronsyre (0,028 g, 0,219 mmol) ble satt til løsningen. Reaksjonen ble
plassert under en nitrogen-atmosfære og 2M vandig Na2CC«3 (0,146 ml, 0,292 mmol) og 5 molprosent av tetrakis(trifenyl)fosfin)-palladium (0) ble tilsatt (8,44 mg, 0,0073 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet med mikrobølger ved anvendelse av Personal Chemistry Emrys Optimizer i 30 minutter ved 150°C. Palladium-sort ble utfelt fra reaksjonsblandingen etter fullføring. Blandingen ble surgjort med én ekvivalent av IN HC1 og filtrert gjennom en sprøyte, ved anvendelse av MeOH for å
ekstrahere produktet. Produktet ble renset ved prep HPLC (kolonne - 4 Xterra S5 30 x 75 mm, løsningsmiddel - 70% A / 30% B - 30% A / 70% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradient-tid -15 min., holdetid -1 min., strømningshastighet - 40 ml/min, retensjonstid av rent produkt - 10,45-11,37). Fraksjonene inneholdende det ønskede produkt ble nøytralisert med IN NaOH og plassert i "speed" vakuum i omtrent 4 timer. Fraksjonene ble deretter kombinert og pH 4,0 buffer (15 ml) ble tilsatt. pH ble regulert til pH 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (3 x 20 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvann (15 ml), tørket over MgS04og konsentrert i vakuum. Produktet ble plassert på en oljepumpe for å tørke natten over og en oljeaktig væske ble oppnådd (37 mg, 50%). LC/MS rt-min (MH^): 2,37 (499,3) (metode A).
Trinn 2:
Produktet fra Eksempel 412, Trinn 1 (39 mg, 0,0773 mmol) ble oppløst i DCM (4 ml) og cyklopropansulfonsyre (1 (Æ)-amino-2 (5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt (Eksempel 1, Trinn 8) (0,0206 g, 0,0773 mmol) ble tilsatt. DIPEA (0,015 ml, 0,387 mmol) og deretter HATU ( 0,0411 g, 0,108 mmol) ble tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i 15 timer. 10 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (10 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3x15 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (10 ml) og saltvann (10 ml) og deretter tørket over MgS04. Den resulterende løsning ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 12M kolonne (eluert 20% - 50% aceton i heksaner). Denne rensning ga den rene Forbindelse 412 som et hvitt pulver (4 mg, 7%).
!H NMR: 8 1,04-1,29 (m, 24H), 1,45-1,47 (m, 1H), 1,89-1,91 (m, 1H), 2,26-2,31 (m, 2H), 2,51-2,53 (m, 1H), 2,92-2,95 (m, 1H), 4,05-4,07 ( d, J= 10 Hz, 1H), 4,22-4,24 ( d, J = 10 Hz, 1H), 4,38-4,40 ( d, J= 10 Hz, 1H), 4,48-4,52 (m, 1H), 5,15-5,17 (d, J = 10 Hz, 1H), 5,32-5,36 (d, J = 20 Hz, 1H), 5,76-5,83 (m, 2H), 6,65-6,67 (d, NH), 7,19-7,21 (m, 2H), 7,66-7,67 (d,7 = 5 Hz, 1H), 7,86-7,87 (d, J= 5 Hz, 1H), 8,69 (s, 1H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,45 (739,4) (metode A).
Eksempel 413: Fremstilling av Forbindelse 413
Trinn 1:
2-brom-6-klorpyridin (3,0 g, 15,55 mmol) og fenylboronsyre (1,896 g, 15,55 mmol) ble solvatert i en blanding av EtOH, toluen og vann (2:1:1; 120 ml). Vandig IM Na2C03(15,55 ml, 31,10 mmol) og 5 molprosent av tetrakis(trifenyl)fosfin)-palladium (0) (0,896 g, 0,775 mmol) ble tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt ved 90°C i én time. Vann (20 ml) ble tilsatt for å stanse reaksjonen og det vandige laget ble ekstrahert med dietyleter (4 x 25 ml). Det organiske laget ble deretter vasket med saltvann, tørket over MgSC>4 og konsentrert i vakuum. Den urensede blandingen ble renset med en Biotage 40S kolonne (eluert 2% -10% etylacetat i heksaner), hvilket ga den rene tittelforbindelse (1,45 g, 74%).
<J>H NMR: 5 7,24-7,26 (m, 1H), 7,42-7,48 (m, 3H), 7,63-7,70 (m, 2H), 7,98-8,00 (m, 2H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,04 (190,18) (metode A)
Trinn 2:
TFA (20 ml) ble satt til det rene faste stoff oppnådd i Trinn 1 (3,27 g, 17,24 mmol). En 30% løsning av H2O2(5,55 ml, 48,9 mmol) ble langsomt satt dråpevis til den omrørte løsningen under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp ved 100°C i 3 timer og 0,5 ytterligere ekvivalenter av H2O2(2,27 ml, 25 mmol) ble satt til løsningen. Reaksjonen ble fortsatt omrørt ved 100°C i 2 timer. Kolben fikk avkjøles til romtemperatur før løsningen ble konsentrert i vakuum til omtrent halvparten av det opprinnelige volum. Vann (40 ml) ble tilsatt for å stanse reaksjonen og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (5 x 30 ml). Det organiske laget ble vasket én gang med saltvann (20 ml), tørket over MgSCU og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble renset med Biotat 40M kolonne (eluert 10% - 75% etylacetat i heksaner), hvilket ga en blekgul væske (0,81 g, 23%). Rent utgangsmateriale ble også gjenvunnet for fremtidig anvendelse (1,895 g, 58%). JH NMR: 8 7,40-7,42 (t, 1H), 7,49-7,50 (m, 3H), 7,59-7,61 (d, J = 10 Hz, 1H), 7,77-7,82 (m, 3H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,12 (206,37) (metode A).
Trinn 3:
Det rensede produktet fra Trinn 2 (0,81 g, 3,94 mmol) ble satt til en løsning av SOCI2(25 ml) og omrørt ved 60°C i 2 timer. Temperaturen ble deretter øket til 80°C for å tvinge reaksjonen til fullføring og blandingen ble oppvarmet i ytterligere 30 min. Løsningen ble konsentrert i vakuum og forsiktig behandlet med is. pH ble regulert til en pH på 4-5 ved anvendelse av 10N NaOH, mens kolben ble holdt i et isbad. Den vandige fasen ble ekstrahert med eter (4 x 25 ml) og det organiske laget ble vasket med saltvann (20 ml), tørket over MgS04og konsentrert i vakuum. Den rå, gule væske ble renset med Biotage 40S kolonne (eluert 2%-10% etylacetat i heksaner). En svakt gul, viskøs væske ble oppnådd (538 mg, 61%).
<!>H NMR: 8 7,52-7,55 (m, 3H), 7,73 (s, 1H), 8,10-8,11 (m, 2H), 8,17 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2,62 (225,33) (metode A).
Trinn 4:
Til en løsning av Boc-L-hydroksyprolin (555 mg, 2,40 mmol) i DMSO (4 ml) ble satt KO<l>Bu (0,619 g, 5,52 mmol) under en nitrogen-atmosfære. Suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur i 45 min. og 2,4-diklor-6-fenyl-pyridin (renset i Trinn 3.) (538 mg, 2,40 mmol) ble tilsatt i to porsjoner. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i to timer og 1,3 ekvivalenter av HC1 (IN) ble anvendt for å nøytralisere reaksjonen. Bufferløsning med pH 4,0 ble tilsatt og pH ble regulert til pH 4-5. Etylacetat ble anvendt for å ekstrahere den vandige fasen (3 x 25 ml) og den organiske fasen ble vasket med saltvann (20 ml) og tørket over MgS04, hvilket ga tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff (urenset utbytte = 962 mg). Råproduktet ble anvendt i neste trinn. LC/MS rt-min (MH<+>): 2,55 (419,27) (metode A).
Trinn 5:
En løsning av råproduktet fra Trinn 4 (antatt 2,4 mmol) i THF (10 ml) og metonal (10 ml) ble avkjølt til 0°C. TMSCN22M i heksaner (~1,3 ekv) ble langsomt satt til den omrørte løsningen under en nitrogen-atmosfære inntil gass ikke lenger strømmet fra løsningen. Den fullstendig omsatte løsningen ble deretter konsentrert i vakuum og rensning med en Biotage 25 S kolonne (eluert 10% - 50% etylacetat i heksaner) ga den rene tittelforbindelse som et hvitt skum (503 mg, 48% over trinn 4d - 4e).
<!>H NMR: (DMSO-cLj) 5 1,35-1,38 (rotamerer, 3:2, 9H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,50-2,58 (m, 1H), 3,67-3,70 (m, 5H), 4,26-4,34 (m, 1H), 5,35 (brs, 1H), 7,14-7,15 (m, 1H), 7,47-7,55 (m, 4H), 8,05-8,09 (m, 2H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,69 (455,52) (metode A).
Trinn 6:
En løsning av det rene produkt fra Trinn 5 (503 mg, 1,16 mmol) i DCM (2,5 ml) og TFA (3,58 ml) ble omrørt ved romtemperatur i én time. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet ble suspendert i IN HC1 i dietyleter (6 ml), forsiktig omrørt og konsentrert i vakuum. Denne prosedyren ble gjentatt og det resulterende produkt ble plassert på en oljepumpe, hvilket ga et hvitt, fast stoff i kvantitativt utbytte. Råproduktet ble anvendt i neste trinn.
Trinn 7:
Produktet fra Trinn 6 (antatt kvantitativt utbytte, 1,83 mmol) ble satt til en løsning av BOC-t-butyl-L-glycin (0,424 g, 1,83 mmol) i DCM (11 ml) under en nitrogen-atmosfære. Dette trinnet ble fulgt av tilsetning av HOBt (0,272 g, 2,02 mmol), DIPEA (2,23 ml, 12,82 mmol) og HBTU (1,04 g, 2,75 mmol). Reaksjonen fikk omrøres ved romtemperatur i 15 timer. 15 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (15 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4,5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3 x 20 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (20 ml), mettet NaOH (25 ml), saltvann (20 ml) og tørket over MgS04. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 40S kolonne (eluert 20% - 50% etylacetat i heksaner). Denne rensning ga den rene tittelforbindelse som et hvitt, fast stoff (454 mg, 53%).
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,96 (s, 9H), 1,19 (s, 9H), 2,17-2,29 (m, 1H), 2,48-2,58 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,81-3,89 (m, 1H), 4,05-4,08 (m, 1H), 4,21-4,26 (m, 1H), 4,44-4,50 (t, 1H), 5,45 (brs, 1H), 6,72-6,75 ( d, J= 15 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,46-7,51 (m, 4H), 8,02-8,06 (m, 2H);
LC/MS rt-min ( Mit) : 2,27 (493,5) (metode A).
Trinn 8:
LiOH (0,0233 g, 0,973 mmol) ble oppløst i vann (10 ml) ved oppvarmning og ultralydbehandling. LiOH-løsningen ble satt til en løsning av det rene materiale fra Trinn 7 (483 mg, 0,885 mmol) i THF (10 ml) og blandingen fikk umiddelbart en blek ferskenfarge. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i 1 time og ble surgjort med IN HC1 (0,973 ml, 0,974 mmol). Reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning og pH ble regulert til en pH mellom 4 og 5. Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (3 x 20 ml), vasket med saltvann (15 ml) og tørket over MgS04. Den filtrerte løsningen ble konsentrert i vakuum og fikk stå under vakuum natten over. Råproduktet (480 mg, >95% utbytte) ble anvendt i neste trinn.
<J>H NMR: (DMSO-d6) 5 0,94 (s, 9H), 1,20 (s, 9H), 1,32-1,34 (m, 1H), 2,12-2,4 (m, 1H), 2,51-2,55 (m, 1H), 3,81-3,83 ( d, J= 10 Hz, 1H), 4,21-4,23 ( d, J= 10 Hz, 1H), 4,32-4,35 (t, 1H), 5,4 (br s, 1H), 6,63-6,65 (d, NH), 7,09 (s, 1H), 7,47-7,49 (m, 4H), 8,03-8,06 (m, 2H), 12,56 (s, 1H).
Trinn 9:
Dipeptidet fra Trinn 8 (100 mg, 0,188 mmol) og 2-tiofenboronsyre (0,0481 g, 0,376 mmol) ble solvatert i DMF (2 ml). Løsningen ble plassert under en nitrogen-atmosfære og 2M vandig KF (0,282 ml, 0,376 mmol) ble tilsatt. Fem molprosent av Tetrakis(trifenyl)fosfin)-palladium(0) ble tilsatt (0,011 mg, 0,0094 mmol) og blandingen ble oppvarmet med mikrobølger ved anvendelse av Personal Chemistry Emrys Optimizer i 30 minutter ved 150°C. Palladium-sort ble utfelt fra reaksjonen etter fullføring. Blandingen ble surgjort med én ekvivalent av IN HC1 og filtrert gjennom en sprøyte, ved anvendelse av MeOH for å ekstrahere produktet. Produktet ble renset ved prep HPLC (kolonne - 4 Xterra S5 5um 30 x 75 mm, løsningsmiddel - 85% A / 15% B - 10% A / 90% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradient-tid - 15 min., holdetid -1 min., strømningshastighet - 40 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 16,23). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble nøytralisert med IN NaOH og plassert i "speed" vakuum i omtrent 2 timer. Fraksjonene ble samlet og pH 4,0 buffer (15 ml) ble tilsatt. pH ble regulert til pH 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (3 x 20 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvann (15 ml), tørket over MgS04og konsentrert i vakuum. Produktet ble plassert på en oljepumpe for å tørke natten over og en blekgul olje ble oppnådd (44 mg, 40%).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,7 (580,54) (metode A).
Trinn 10:
Produktet fra Eksempel 413, Trinn 9 (43 mg, 0,0742 mmol) ble oppløst i DCM (2 ml) og cyklopropansulfonsyre-(l(Æ)-amino-2 (S)-vinyl-cyklopropankarbonyi)-amidhydrokloridsalt (Eksempel 1, Trinn 8) (0,0198 g, 0,0742 mmol) ble tilsatt. DIPEA (0,0646 ml, 0,371 mmol) og deretter HATU (0,039 g, 0,0104 mmol) ble tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i 4,5 timer. 10 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (10 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3x15 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (10 ml) og saltvann (10 ml) og deretter tørket over MgSC«4. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 12S kolonne (eluert 10% - 50% aceton i heksaner). Forbindelsen ble isolert og renset påny ved prep-HPLC (kolonne - YMC ODS-A 20 x 50 mm s5, løsningsmiddel - 60% A / 40% B - 10% A / 90% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradienttid - 8 min., holdetid - 2 min., strømningshastighet - 25 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 8,702). Denne rensning ga ren Forbindelse 413 som en blekoransje olje (22,3 mg, 38%).
<J>H NMR: 5 1,02-1,29 (m, 24H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,87-1,89 (m, 1H), 2,24-2,30 (m, 2H), 2,53-2,57 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,06-4,08 ( d, J= 10 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,31-4,33 ( d, J = 10 Hz, 1H), 4,45-4,49 (t, 1H), 5,12-5,14 (d,J= 10 Hz, 1H), 5,29-5,32 ( d, J = 15 Hz, 1H), 5,46 (brs, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 7,13-7,15 (m, 1H), 7,29-7,30 ( d, J= 5 Hz, 2H), 7,42-7,53 (m, 4H), 7,75-7,56 ( d, J= 5 Hz, 1H), 8,07-8,09 ( d, J= 10 Hz, 2H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,79 (792,72) (metode A).
Eksempel 414: Fremstilling av Forbindelse 414.
Trinn 1:
Det rene materiale fra Eksempel 413, Trinn 8 (100 mg, 0,188 mmol) og 4-metoksyfenylboronsyre (0,0429 g, 0,282 mmol) ble solvatert i DMF (2,5 ml). Løsningen ble plassert under en nitrogen-atmosfære og 2M vandig Na2C03(0,188 ml, 0,376 mmol) ble tilsatt. Fem molprosent av tetrakis(trifenyl)fosfin)-palladium (0) ble tilsatt (0,011 mg, 0,0094 mmol) og blandingen ble oppvarmet med mikrobølger ved anvendelse av Personal Chemistry Emrys Optimizer i 30 minutter ved 150°C. Palladium-sort ble utfelt fra reaksjonen etter fullføring. Blandingen ble surgjort med én ekvivalent IN HC1 og filtrert gjennom en sprøyte, ved anvendelse av MeOH for å ekstrahere produktet. Produktet ble renset ved prep HPLC (kolonne - Xterra MS Cl8 5um 30 x 50 mm, løsningsmiddel - 90% A /10% B -10% A / 90% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradienttid - 15 min., holdetid - 1 min., strømningshastighet - 45 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 13,72). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble nøytralisert med IN NaOH og plassert i "speed" vakuum i omtrent 2 timer. Fraksjonene ble samlet og pH 4,0 buffer (15 ml) ble tilsatt. pH ble regulert til pH 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (3 x 20 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvann (15 ml), tørket over MgSCMog konsentrert i vakuum. Produktet ble plassert på en oljepumpe for å tørke natten over og en viskøs olje ble oppnådd (44 mg, 50%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,23 (604,61) (metode A).
Trinn 2:
Produktet fra Eksempel 414, Trinn 1 (43 mg, 0,0712 mmol) ble oppløst i DCM (2 ml) og cyklopropansulfonsyre-(l(/?)-amino-2 (5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt (Eksempel 1, Trinn 8) (0,01899 g, 0,0712 mmol) ble tilsatt. DIPEA (0,062 ml, 0,356 mmol) og deretter HATU ( 0,038 g, 0,0997 mmol) ble tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonsblandingen fikk omrøres ved romtemperatur i 4,5 timer. 10 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (10 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (3x15 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (10 ml) og saltvann (10 ml) og deretter tørket over MgSC«4. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 12S kolonne (eluert 20% - 50% aceton i heksaner). Forbindelsen ble isolert og renset påny ved prep-HPLC (kolonne - YMC ODS-A 20 x 50 mm s5, løsningsmiddel - 60% A / 40% B -10% A / 90% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradienttid -10 min., holdetid - 2 min., strømningshastighet - 25 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 7,43-8,24). Denne rensning ga ren Forbindelse 414 som en blekoransje olje (19,4 mg, 34%).
<!>H NMR: 8 1,02-1,23 (m, 24H), 1,29-1,44 (m, 1H), 1,89-1,95 (m, 1H), 2,24-2,30 (q, 1H), 2,32-2,40 (m, 1H), 2,59-2,62 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 4,10-4,12 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,42-4,56 (m, 2H), 5,12-5,14 (d,7= 10 Hz, 1H), 5,28-5,31 (d,7= 15 Hz, 1H), 5,61 (brs, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 7,14-7,16 ( d, J= 10 Hz, 2H), 7,52-7,54 (d, J = 10 Hz, 2H), 7,61-7,62 (m, 2H), 7,95-7,98 (m, 4H);
LC/MS rt-min (MH^): 2,35 (816,76) (metode A).
Eksempel 415: Fremstilling av Forbindelse 415.
Trinn 1:
Dipeptidet fra Eksempel 413, Trinn 8 (174 mg, 0,327 mmol) og fenylboronsyre (0,06 g, 0,491 mmol) ble solvatert i DMF (4 ml). Løsningen ble plassert under en nitrogen-atmosfære og 2M vandig NaC03(0,33 ml, 0,654 mmol) ble tilsatt. Fem molprosent av tetrakis(trifenyl)fosfin)-palladium(0) ble tilsatt (0,019 mg, 0,0164 mmol) og blandingen ble oppvarmet med mikrobølger ved anvendelse av Personal Chemistry Emrys Optimizer i 30 minutter ved 150°C. Palladium-sort ble utfelt fra reaksjonen etter fullføring. Blandingen ble surgjort med én ekvivalent IN HC1 og filtrert gjennom en sprøyte, ved anvendelse av MeOH for å ekstrahere produktet. Produktet ble renset ved prep HPLC (kolonne - 5 Xterra c-18 5um 30 x 100 mm, løsningsmiddel - 80% A / 20% B -0% A /100% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradienttid - 20 min., holdetid -1 min., strømningshastighet - 40 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 11,28-11,72). Fraksjoner inneholdende det ønskede produkt ble nøytralisert med IN NaOH og plassert i "speed" vakuum i omtrent 2 timer. Fraksjonene ble samlet og pH 4,0 buffer (15 ml) ble tilsatt. pH ble regulert til pH 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat (4x15 ml). Det organiske laget ble vasket med saltvann (15 ml), tørket over MgSCUog konsentrert i vakuum. Produktet ble plassert på en oljepumpe for å tørke natten over. (31,5 mg, 17%).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,54 (574,37) (metode A).
Trinn 2:
Produktet fra Eksempel 415, Trinn 1 (31,5 mg, 0,055 mmol) ble oppløst i DCM (3 ml) og cyklopropansulfonsyre-(l(/?)-amino-2 (5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt (Eksempel 1, Trinn 8) (0,0147 g, 0,055 mmol) ble tilsatt. DIPEA (0,048 ml, 0,275 mmol) og deretter HATU (0,029 g, 0,077 mmol) ble tilsatt under en nitrogen-atmosfære. Reaksjonen fikk omrøres ved romtemperatur i 3,5 timer og ytterligere 0,3 ekvivalent av cyklopropansulfonsyre-(1 (/?)-amino-2(5)-vinyl-cyklopropankarbonyl)-amidhydrokloridsalt ble tilsatt. Reaksjonen fikk omrøres i ytterligere 8 timer. 10 ml DCM ble satt til løsningen for å øke volumet og reaksjonen ble stanset med pH 4,00 bufferløsning (10 ml). Blandingen ble surgjort til en pH på 4-5 ved anvendelse av IN HC1 og den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (4x10 ml). Den organiske fasen ble vasket to ganger med pH 4,00 bufferløsning (10 ml) og saltvann (10 ml) og deretter tørket over MgSC«4. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum og renset ved prep HPLC (kolonne - YMC ODS-A 30 x 50 mm, løsningsmiddel - 80% A / 20% B - 10% A / 90% B (hvor løsningsmiddel A er 10% MeOH, 90% H20, 0,1% TFA og løsningsmiddel B er 90% MeOH, 10% H20, 0,1% TFA), gradienttid - 20 min., holdetid - 3 min., strømningshastighet - 30 ml/min, retensjonstid for rent produkt - 19,6). Denne rensning ga ikke en ren forbindelse så den ble renset påny med en Biotagel2 S kolonne (eluert 10%-50% aceton i heksaner). Denne rensning ga ren tittelforbindelse som en blekoransje olje (22,3 mg, 38%).
<J>H NMR: 8 1,02-1,45 (m, 24H), 1,85-1,86 (m, 1H), 2,03-2,11 (m, 2H), 2,42-2,46 (m, 1H), 2,77-2,85 (m, 1H), 4,10-4,12 (m, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,31-4,33 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,49-4,54 (m, 1H), 5,03-5,05 (d, J = 10 Hz, 1H), 5,20-5,24 (d, J = 20 Hz, 1H), 5,44 (br s, 1H), 5,82-5,94 (m, 1H), 7,33 (s, 2H), 7,43-7,50 (m, 6 H), 8,09-8,10 (d, J= 5 Hz, 4 H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,37 (786,37) (metode A).
Seksjon J:
I seksjon J var LC/MS-metoden anvendt den følgende:
Kolonner: Metode A: YMC ODS-A C18 S7 (4,6 x 33 mm)
Metode B: YMC Xterra ODS S7 (3,0 x 50mm)
Metode C: Xterra ms Cl 8 (4,6 x 33mm)
Metode D: YMC ODS-A Cl8 S3 (4,6 x 33 mm)
Gradient: 100% løsningsmiddel AJ 0% løsningsmiddel B til 0% løsningsmiddel AJ 100% løsningsmiddel B
Gradienttid: 3 min.
Holdetid: 1 min.
Strømningshastighet: 5 ml/min.
Detektor-bølgelengde: 220 nm.
Løsningsmidler: Løsningsmiddel A: 10% MeOH/ 90% vann/ 0,1% TFA. Løsningsmiddel B: 90% MeOH/ 10% vann/ 0,1% TFA.
Eksempel 420: Fremstilling av Forbindelse 420
Trinn 1:
Til en løsning av PPli3 (16,8 g, 63,9 mmol) i THF (150 ml) ble dråpevis satt DEAD (10,1 ml, 63,9 mmol) og løsningen ble omrørt i 30 min ved romtemperatur. En løsning av Boc-cis-(Z,)-Hyp-OMe (10,5 g, 42,6 mmol) i THF (50 ml) ble tilsatt langsomt, fulgt av 5-brom-pyridin-3-ol (fremstilt i henhold til F.E. Ziegler et al., J. Am. Chem. Soc., (1973), 95, 7458) (8,90 g, 51,1 mmol) porsjonsvis. Den resulterende løsningen ble omrørt ved 45°C i 18 timer. Løsningen ble konsentrert i vakuum og residuet fordelt mellom dietyleter (200 ml) og IN NaOH (50 ml). Den organiske fasen ble tørket (MgS04) og den eteriske løsning ble etter filtrering konsentrert til halvparten av dens volum. Et presipitat ble dannet som ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble konsentrert i vakuum og renset med en Biotage 65 M kolonne (eluert med heksaner - EtOAc 2:1, 3:2,1:1) for å gi tittelforbindelsen (11,9 g, 69%) som en rød olje.
<J>H NMR: (CDC13) 5 1,42,1,45 (s, 9H (rotamerer)), 2,25-2,30 (m, 1H), 2,49-2,58 (m, 1H), 3,75, 3,81 (s, 3H (rotamerer)), 3,66-3,81 (m, 2H (skjult)), 4,42, 4,50 (t, J=8 Hz, 1H (rotamerer)), 4,92 (m, 1H), 7,36 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,32 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,26 (401, 403) (metode B).
Trinn 2:
Produktet fra Trinn 1 (2,34 g, 5,83 mmol) ble oppløst i DCM (20 ml) og TFA (18 ml, 0,23 mol) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. De flyktige stoffene ble
fjernet i vakuum og residuet fordelt mellom EtOAc og vann. Den organiske fasen ble ekstrahert med IN HC1 (25 ml) og de samlede vandige ekstrakter ble nøytralisert med mettet NaHCOa(40 ml). Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (to ganger) og de samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltvann og tørket (MgS04), hvilket ga tittelforbindelsen (1,02 g, 58%, fri base) som en fargeløs olje.
<J>H NMR: (DMSO-d6) 8 2,12-2,20 (m, 2H), 2,94 (d, 7=12 Hz, 1H), 3,19 (dd, .7=4,5, 12 Hz, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,90 (t,7=8 Hz, 1H), 5,07 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,29 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 0,78 (301, 302) (metode B).
Trinn 3:
Til en suspensjon av produktet fra Trinn 2 (1,02 g, 3,39 mmol), N- BOC- L-tert-leucin (862 mg, 3,73 mmol) og HOBt (458 mg, 3,39 mmol) i DCM (15 ml) ble satt DIPEA (2,36 ml, 13,6 mmol) fulgt av HBTU (1,61 g, 4,24 mmol). Den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 15 timer og behandlet med DCM og buffer pH 4 og noe IN HC1 for å regulere pH til 4-5. Den organiske fasen ble vasket med buffer pH 4, mettet NaHC03(to ganger), saltvann og tørket (MgS04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert heksan - EtOAc 3:2, 1:1) ga tittelforbindelsen (1,48 g, 85%) som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 8 0,94 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 2,16-2,21 (m, 1H), 2,50 (m, (skjult), 1H), 3,64 (s, 3H), 3,82 (d, .7=12 Hz, 1H), 4,06 (d, .7=9,5 Hz, 1H), 4,16 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,45 (dd, 7=8, 9,5 Hz, 1H), 5,26 (m, 1H), 6,71 (d, 7=9 Hz, NH), 7,75 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,32 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,35 (514, 516) (metode B).
Trinn 4:
Til en blanding av produktet fra Trinn 3 (98 mg, 0,19 mmol), Pd(PPh3)4(6,6 mg, 0,00573 mmol), 2M vandig Na2C03(0,191 ml, 0,381 mmol) i toluen (2 ml) ble satt en løsning av fenyl-boronsyre (29 mg, 0,24 mmol) i metanol (0,1 ml). Løsningen ble oppvarmet ved 85°C i 6 timer under nitrogen. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen behandlet med buffer pH 4 og ekstrahert med EtOAc (2x10 ml) og tørket (Na2S04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 12 M kolonne (eluert heksan - EtOAc 2:3) ga tittelforbindelsen (72 mg, 74%) som en fargeløs olje.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,05 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,29-2,35 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 4,00 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,24 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,41 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,67 (dd, 7=7,5, 10 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,51 (d, 7=9,5 Hz, NH), 7,79-7,85 (m, 3H), 8,39 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,67-8,68 (m, 2H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,16 (512) (metode B).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra Trinn 4(150 mg, 0,293 mmol) i THF (2 ml) og metanol (2 ml) ble satt LiOH (14 mg, 0,59 mmol) i vann (2 ml). Blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur og behandlet med IN HC1 inntil nøytral pH. De organiske flyktige stoffer ble fjernet i vakuum og til residuet ble satt buffer pH 4. Produktet ble ekstrahert inn i EtOAc (3x10 ml), vasket med saltvann/buffer pH 4 og tørket (MgS04), hvilket ga tittelforbindelsen i kvantitativt utbytte som et hvitt, fast stoff etter utgnidning fra pentan.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,05 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,69-2,74 (m, 1H), 3,99 (dd, 7=3,12 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,40 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,64 (dd, 7=7,5,9,5 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 7,85-7,87 (m, 3H), 8,40 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,69-8,70 (m, 2H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,03 (499) (metode B).
Trinn 6:
Til en suspensjon av produktet fra Trinn 5 (93 mg, 0,19 mmol) og produktet fra Eksempel 1, Trinn 8 (50 mg, 0,19 mmol) i DCM (2 ml) ble satt DIPEA (0,163 ml, 0,935 mmol), fulgt av HATU (92 mg, 0,243 mmol). Den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer og behandlet med DCM og buffer pH 4 og noe IN HC1 for å regulere pH til 4-5. Lagene ble separert og den vandige fasen ekstrahert med DCM (10 ml) og tørket (Na2S04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 12 M kolonne (eluert gradient heksan - aceton 20-60%) ga tittelforbindelsen (65 mg, 49%) som et hvitt pulver.
<J>H NMR: (DMSO-de) 8 0,95 (s, 9H), 1,03-1,05 (m, 2H), 1,08-1,10 (m, 2H), 1,26 (s, 9H), 1,36-1,39 (m, 1H), 1,69-1,72 (m, 1H), 2,09-2,21 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,92-2,94 (m, 1H), 3,91 (d, 7=11,5 Hz, 1H), 4,08 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 4,16 (d, 7=11,5 Hz, 1H), 4,36 (t, 7= 8,5 Hz, 1H), 5,10 (d, 7=10 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,38 (m, 1H), 5,59-5,67 (m, 1H), 6,54 (s, NH), 7,41-7,46 (m, 1H), 7,50-7,53 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,74-7,75 (m, 2H), 8,28 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,92 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,08 (710)(metode B).
Eksempel 421: Fremstilling av Forbindelse 421.
Trinn 1:
Til en kald (-5°C) 48% vandig HBr-løsning (35 ml) ble satt 4-klor-pyridin-2-ylamin (4,18 g, 32,5 mmol; fremstilt i henhold til K.S. Gudmundsson et al; Synth. Commun. (1997), 27, 861), fulgt av langsom tilsetning av brom (6,7 ml, 0,13 mol). Etter 20 min. ble natriumnitritt (8,63 g, 0,125 mol) i vann (40 ml) tilsatt ved samme temperatur og omrøring ble fortsatt i 30 min. Reaksjonen ble stanset under isavkjøling med 10N NaOH (ca 40 ml) til alkalisk pH. Produktet ble ekstrahert inn i EtOAc (2 x 100 ml) og tørket (Na2S04). Det rå materialet ble renset ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert med 10% EtOAc i heksaner), hvilket ga tittelforbindelsen (2,50 g, 40%) som en fargeløs olje som stivnet ved henstand.
<!>H NMR: (DMSO-cLj) 5 7,64 (dd, 7=1,5, 5,5 Hz, 1H), 7,94 (d, 7=1,5 Hz, 1H), 8,40 (d, 7=5,5 Hz, 1H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,65 (192,194,196) (metode B).
Trinn 2:
Til en løsning av N-BOC-trans-L-Hyp-OH (3,22 g, 13,9 mmol) i DMSO (30 ml) ble satt kalium-tert-butoksyd (3,90 g, 34,8 mmol) i porsjoner ved romtemperatur under en nitrogen-atmosfære. Etter 1,5 timer ble produktet fra Trinn 1 tilsatt i DMSO (5 ml). Blandingen ble omrørt natten over og behandlet med vann (150 ml). Løsningen ble vasket med EtOAc (100 ml). Den vandige fasen ble surgjort til pH 4 med IN HC1. Den rå karboksylsyre ble ekstrahert inn i EtOAc (tre ganger) og tørket (MgS04). Residuet, som et brunt, fast stoff, ble suspendert i THF (20 ml) og MeOH (20 ml) og avkjølt til 0°C. En løsning av trimetylsilyl-diazometan (2 M i heksan, 12 ml) ble dråpevis tilsatt og løsningen konsentrert i vakuum etter 15 min. Rensning ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert med heksaner - EtOAc 2:1,1:1) ga tittelforbindelsen (3,47 g, 62%) som et gråhvitt pulver.
<J>H NMR: (DMSO-cLj) 5 1,34,1,38 (s, 9H (rotamerer)), 2,24-2,29 (m, 1H), 2,43-2,50 (m, 1H), 3,57 (d, 7=12,5 Hz, 1H), 3,64-3,68 (m, 1H), 3,66,3,69 (s, 3H (rotamerer)), 4,27-4,34 (m, 1H), 5,21 (m, 1H), 7,06 (d, 7=6 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 8,20 (d, 7=6 Hz, 1H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,59 (401, 403)(metode B).
Trinn 3:
Produktet fra Trinn 2 (2,00 g, 4,98 mmol) ble suspendert i 4N HC1 i dioksan (10 ml) og IN HC1 i dietyleter (40 ml) og omrørt natten over ved romtemperatur. Den resulterende suspensjonen ble konsentrert i vakuum og residuet utgnidd fra pentan, hvilket ga tittelforbindelsen i kvantitativt utbytte som et hvitt pulver.
LC/MS rt-min (MH<+>): 0,24 (301, 303)(metode B).
Trinn 4:
Til en suspensjon av produktet fra Trinn 3 (antatt 4,98 mmol), N-cyklopentyloksykarbonyl-£-tert-leucin (1,24 g, 5,10 mmol) og HOBt (673 mg, 4,98 mmol) i DCM (25 ml) ble satt DIPEA (4,34 ml, 24,9 mmol) fulgt av HBTU (2,36 g, 6,23 mmol). Den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 15 timer og behandlet med DCM og buffer pH 4 og 10 ml IN HC1 for å regulere pH til 4. Den vandige fasen ble ekstrahert med DCM (to ganger). De samlede organiske ekstrakter ble vasket med mettet NaHC03(to ganger), saltvann og tørket (MgS04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert heksan - EtOAc 3:2,1:1) ga tittelforbindelsen (2,09 g, 80%) som et hvitt skum.
<!>H NMR: (DMSO-dé) 8 0,94 (s, 9H), 1,43-1,74 (m, 8H), 2,18-2,23 (m, 1H), 2,46-2,49 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,87 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,08-4,13 (m, 1H), 4,42 (dd, 7=7,5, 9,5 Hz, 1H), 4,78 (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 7,03-7,05 (m, 1H), 7,24 (s, 1H), 8,120 (d, 7=6 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,34 (526, 528) (metode C).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra Trinn 4 (206 mg, 0,391 mmol) i THF (2 ml) og metanol (2 ml) ble satt LiOH (28 mg, 1,2 mmol) i vann (2 ml). Blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur og behandlet med IN HC1 inntil nøytral pH. De organiske flyktige stoffer ble fjernet i vakuum og til residuet ble satt buffer pH 4. Produktet ble ekstrahert inn i EtOAc (2 x 20 ml) og tørket (MgS04), hvilket ga tittelforbindelsen (196 mg, 100%) som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,05 (s, 9H), 1,60-1,85 (m, 8H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,62-2,67 (m, 1H), 3,97 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,26 (s, 1H), 4,32 (d, 7=12 Hz,lH), 4,58 (dd, 7=7,5, 9,5 Hz, 1H), 4,89 (m (skjult), 1H), 5,29 (m, 1H), 7,03-7,05 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,19 (d, 7=6 Hz, 1H);
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,17 (512, 514) (metode B).
Trinn 6:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 4 (reaksjonstid 20 timer) i 20% utbytte ved å starte fra produktet fra eksempel 421, Trinn 5.
<!>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,45-1,74 (m, 8H), 2,31-2,37 (m, 1H), 2,65-2,69 (m, 1H), 3,99 (dd, 7=12, 3,0 Hz, 1H), 4,26 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,33 (d, 7=11,5 Hz,lH), 4,60 (dd, 7=8,0, 9,5 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H), 5,35 (m, 1H), 6,72 (d, 7=9,0 Hz, NH), 7,02 (dd, 7=2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,50 (m, 3H (skjult)), 7,91 (d, 7=6,5 Hz, 1H), 8,46 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,03 (510) (metode A).
Trinn 7:
Forbindelse 421 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 68% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 421, Trinn 6.
<!>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,43 (dd, 7=5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,47-1,77 (m, 8H), 1,88 (dd, 7=5,5, 8,5 Hz, 1H), 2,21-2,29 (m, 2H), 2,50-2,54 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,06 (dd, 7=3,0,11,5 Hz, 1H), 4,28-4,30 (m, 2H), 4,44 (dd, 7=7,0,10,5 Hz, 1H), 4,82 (m, 1H (skjult)), 5,12 (d, 7=10 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,92 (d, 7=9,5 Hz, NH), 6,98 (dd, 7=5,5, 2,0 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,43-7,50 (m, 3H), 7,90 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 8,45 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,37 (723) (metode A).
Eksempel 422: Fremstilling av Forbindelse 422.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet i Eksempel 420, Trinn 3 (102 mg, 0,198 mmol) og
Pd(PPh3)4(23 mg, 0,0198 mmol) i toluen (2 ml) ble satt 4-tributylstannanyl-pyridin (87 mg, 0,24 mmol). Løsningen ble oppvarmet ved 105°C i 20 timer under nitrogen. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2x10 ml) og tørket (Na2S04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 12 M kolonne (eluert gradient heksan-aceton 20-60%) ga tittelforbindelsen (49 mg, 49%) som et hvitt, fast stoff.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,05 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,29-2,35 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 4,00 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,24 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,41 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,67 (dd, 7=7,5, 10 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,51 (d, 7=9,5 Hz, NH), 7,79-7,85 (m, 3H), 8,39 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,67-8,68 (m, 2H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,77 (514) (metode C).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 420, Trinn 5 i kvantitativt utbytte, bortsett fra anvendelse av produktet fra Eksempel 422, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,05 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,69-2,74 (m, 1H), 3,99 (dd, 7=3, 12 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,40 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,64 (dd, 7=7,5,9,5 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 7,85-7,87 (m, 3H), 8,40 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,69-8,70 (m, 2H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,57 (500)(metode B).
Trinn 3:
Forbindelse 422 ble fremstilt ved samme prosedyre som beskrevet i Eksempel 420, Trinn 6 i 51% utbytte som et hvitt, fast stoff, bortsett fra anvendelse av produktet fra Eksempel 422, Trinn 2 istedet.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,95 (s, 9H), 1,03 (m, 1H), 1,08 (m, 1H), 1,23 (s, 9H), 1,34-1,37 (m, 1H), 1,68-1,70 (m, 1H), 2,12-2,18 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 3,90 (d, 7=1 1 Hz, 1H), 4,06 (d, 7=9 Hz, 1H), 4,17 (d, 7=1 1 Hz, 1H), 4,36 (dd, 7=7, 10 Hz, 1H), 5,10 (d, 7=12 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=16,5 Hz, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,59-5,66 (m, 1H), 6,60 (d, 7=9 Hz, NH), 7,81-7,82 (m, 3H), 8,38 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,68-8,70 (m, 2H), 8,93 (s, NH), 10,4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,14 (711)(metode D).
Eksempel 423: Fremstilling av Forbindelse 423.
Trinn 1:
Til en løsning av produktet i Eksempel 420, Trinn 3 (1,00 g, 1,94 mmol) i THF (5 ml) og metanol (5 ml) ble satt LiOH (140 mg, 5,83 mmol) i vann (5 ml). Blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur og behandlet med IN HC1 inntil nøytral pH. De organiske flyktige stoffer ble fjernet i vakuum, buffer pH 4 ble tilsatt og produktet ble ekstrahert inn i EtOAc (3 x 25 ml) og tørket (MgS04), hvilket ga tittelforbindelsen (1,0 g, 100%) som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 8 0,95 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 2,14-2,19 (m, 1H), 2,47-2,50 (m, 1H), 3,80 (d, 7=11,5 Hz, 1H), 3,99-4,07 (m, 2H), 4,15 (d, 7=11,5 Hz,lH), 4,36 (dd, 7=8, 10 Hz, 1H), 5,25 (m, 1H), 6,66 (d, 7=9 Hz, NH), 7,75 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 12,5 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,47 (500, 502)(metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 423 ble oppnådd i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 52% utbytte, ved å starte fra produktene i Eksempel 423, Trinn 1 og Eksempel 8, Trinn 3 (racemisk Vu ( IR, 25) og ( IS, 2R)).
<J>H NMR: (DMSO-dé) 8 0,93, 0,95 (s, 9H), 1,00-1,09 (m, 4H), 1,28, 1,29 (s, 9H), 1,37-1,39 (m, 1H), 1,69-1,72 (m, 1H), 2,09-2,22 (m, 2H), 2,36-2,46 (m, 1H), 2,88-2,94 (m, 1H), 3,82-3,87 (m, 1H), 4,02-4,04 (m, 1H), 4,10-4,15 (m, 1H), 4,31-4,34 (m, 1H), 5,10 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,22-5,28 (m, 1H), 5,54-5,66 (m, 1H), 6,56, 6,60 (d, 7=9,5 Hz, NH), 7,74, 7,76 (s, 1H), 8,28-8,29 (m, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,79, 8,89 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2,42 (712, 714)(metode B).
Eksempel 424: Fremstilling av Forbindelse 424.
Trinn 1:
Til en løsning av produktet fra eksempel 423, Trinn 1 (91 mg, 0,18 mmol), Pd(PPli3)4 (10,5 mg, 0,0091 mmol) og 3-furyl-boronsyre (25,4 mg, 0,227 mmol) i DMF (2 ml) ble satt 2M vandig Na2CC«3 (0,273 ml, 0,546 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved 110°C i 2,5 timer under nitrogen. Etter avkjøling til romtemperatur ble det faste stoffet fjernet ved filtrering og filtratet konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved preparativ HPLC (gradient 30-80% B), hvilket ga tittelforbindelsen (64 mg, 72%) som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,95 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,17-2,21 (m, 1H), 2,50 (m (skjult), 1H), 3,84-3,86 (m, 1H), 4,09-4,15 (m, 2H), 4,37 (t, 7=9 Hz, 1H), 5,28 (m, 1H), 6,67 (d, J=9 Hz, NH), 7,08 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,33 (s, 1H),8,51 (s, 1H), 12,6 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,60 (488) (metode B).
Trinn 2:
Forbindelse 424 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 55% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 424, Trinn 1.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,02 (s, 9H), 1,05-1,09 (m, 2H), 1,22-1,25 (m, 2H), 1,34 (s, 9H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,48-2,52 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,02 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,24-4,29 (m, 2H), 4,43-4,47 (dd, 7=7,5, 10,5 Hz, 1H), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,28-5,32 (m, 1H), 5,73-5,81 (m, 1H), 6,63 (d, 7=9 Hz, NH), 6,90 (s, 1H), 7,60-7,62 (m, 2H), 8,07 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,39 (s,
NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,30 (700)(metode E).
Eksempel 425: Fremstilling av Forbindelse 425.
Forbindelse 425 ble oppnådd i henhold til Eksempel 421, Trinn 7 i 45% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 421, Trinn 5.
NMR: (DMSO-de) 8 0,95 (s, 9H), 1,03-1,04 (m, 1H), 1,08-1,09 (m, 1H), 1,33-1,36 (m, 1H), 1,46-1,75 (m, 9H), 2,08-2,12 (m, 1H), 2,17 (q,7=9 Hz, 1H), 2,35-2,38 (m, 1H), 2,88-2,93 (m, 1H), 3,91 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,05-4,10 (m, 2H), 4,27 (dd, 7=10, 7 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H), 5,10 (d, 7=12 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=16,5 Hz, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,58-5,66 (m, 1H), 6,94 (d, 7=9 Hz, NH), 7,03-7,05 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,21 (d, 7=6 Hz, 1H), 8,86 (s, NH), 10,4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,56 (724, 726)(metode D).
Eksempel 426: Fremstilling av Forbindelse 426.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 6 i 65% utbytte, bortsett fra anvendelse av 3-furanoboronsyre.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,49-1,76 (m, 8H), 2,30-2,35 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H),3,98 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,26 (t, 7=9 Hz, 1H), 4,31 (d,7=12 Hz,lH), 4,58 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 5,32 (m, 1H), 6,71 (d, 7=9,5 Hz, NH), 6,92 (dd, 7=2,5, 6,0 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 7,25 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,35 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,94 (500) (metode D).
Trinn 2:
Forbindelse 426 ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 7 i 57% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 426, Trinn 1.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,95 (s, 9H), 1,03-1,04 (m, 2H), 1,08-1,09 (m, 2H), 1,34-1,71 (m, 8H), 2,09-2,20 (m, 2H), 2,37-2,41 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 3,96 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,07-4,11 (m, 2H), 4,29 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 5,10 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,34 (m, 1H), 5,59-5,66 (m, 1H), 6,87-6,91 (m, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,39 (d, 7=6 Hz, 1H), 8,90 (s, NH), 10,4 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,38 (712) (metode D).
Eksempel 427: Fremstilling av Forbindelse 427.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 6 i 86% utbytte, bortsett fra anvendelse av 4-fiuorfenylboronsyre.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,03 (s, 9H), 1,44-1,75 (m, 8H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,64-2,69 (m, 1H), 3,99 (dd, 7=12, 3,5 Hz, 1H), 4,26 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,32 (d, 7=12 Hz,lH), 4,59 (dd, 7=8,0, 9,5 Hz, 1H), 4,81 (m, 1H), 5,34 (m, 1H), 6,73 (d, 7=9,5 Hz, NH), 6,99 (dd, 7=2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,20 (t, 2H (skjult)), 7,36 (s, 1H (skjult)), 7,94-7.97 (m, 2H), 8,44 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,22 (528)(metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 427 ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 7 i 53% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 427, Trinn 1.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,03 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,43 (dd, 7=5,0, 9,5 Hz, 1H), 1,47-1,78 (m, 8H), 1,88 (dd, 7=5,5, 8,0 Hz, 1H), 2,21-2,29 (m, 2H), 2,49-2,53 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,05 (dd, 7=3,0,11,5 Hz, 1H), 4,27-4,29 (m, 2H), 4,44 (dd, 7=7,0, 10,5 Hz, 1H), 4,83 (m, 1H (skjult)), 5,12 (d, 7=10 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,93 (d, 7=9,5 Hz, NH), 6.98 (m, 1H), 7,21 (t, 7=9,0 Hz, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,94-7,97 (m, 2H), 8,44 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,42 (741) (metode A).
Eksempel 428: Fremstilling av Forbindelse 428.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 6 i 37% utbytte, bortsett fra anvendelse av 4-metoksyfenylboronsyre.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,03 (s, 9H), 1,45-1,74 (m, 8H), 2,31-2,36 (m, 1H), 2,64-2,68 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,98 (dd, 7=12, 3,5 Hz, 1H), 4,25 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 4,33 (d, 7=11,5 Hz,lH), 4,59 (dd, 7=8,0, 10 Hz, 1H), 4,77 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,72 (d, 7=9,0 Hz, NH), 7,01 (m, 1H), 7,04 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 7,37 (d, 7=2,0 Hz), 7,86 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 8,42 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,09 (540)(metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 428 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 72% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 428, Trinn 1.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,03 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,25 (m, 2H), 1,43 (dd, 7=5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,48-1,77 (m, 8H), 1,88 (dd, 7=5,0, 8,0 Hz, 1H), 2,21-2,28
(m, 2H), 2,50-2,54 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,05 (d, 7= 12 Hz, 1H), 4,27-4,29 (m, 2H), 4,44 (dd, 7=7,0,10,5 Hz, 1H), 4,84 (m, 1H (skjult)), 5,12 (d, 7=10 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 6,89 (d, 7=9,5 Hz, NH), 6,95 (dd, 7=2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,03 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 7,33 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,86 (d, 7=9,0 Hz, 2H), 8,41 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,40 (753)(metode A).
Eksempel 429: Fremstilling av Forbindelse 429.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 6 i 22% utbytte, bortsett fra anvendelse av 2-tiofenboronsyre.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,46-1,74 (m, 8H), 2,29-2,35 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 3,97 (d,7=12 Hz, 1H), 4,26 (d, .7=8,5 Hz, 1H), 4,31 (d,7=12 Hz,lH), 4,60 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 4,81 (m, 1H (skjult)), 5,31 (m, 1H), 6,87-6,89 (m, 2H), 7,13 (d, 7=5,0 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H (skjult)), 7,70 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 8,32 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,96 (516) (metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 429 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 57% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 429, Trinn 1.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,02 (s, 9H), 1,07 (m, 2H), 1,24 (m, 2H), 1,43 (dd, 7=5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,53-1,78 (m, 8H), 1,88 (dd, 7=5,5, 8,0 Hz, 1H), 2,21-2,28 (m, 2H), 2,49-2,53 (m, 1H), 2,92-2,96 (m, 1H), 4,04 (d, 7= 10 Hz, 1H), 4,26-4,29 (m, 2H), 4,43 (t, 7=9,0 Hz, 1H), 4,82 (m, 1H (skjult)), 5,12 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,89 (d, 7=4,5 Hz, 1H), 6,92 (d, 7=4,5 Hz, NH), 7,13 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,51 (d, 7=4,5 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 8,32 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,37 (728) (metode A).
Eksempel 430: Fremstilling av Forbindelse 430.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 6 i 17% utbytte, bortsett fra anvendelse av 3-tiofenboronsyre.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,03 (s, 9H), 1,43-1,74 (m, 8H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,64-2,68 (m, 1H), 3,98 (dd, 7=11,5, 3,0 Hz, 1H), 4,25 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 4,32 (d, 7=11,5 Hz,lH), 4,60 (dd, 7=8,0, 9,5 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H (skjult)), 5,33 (m, 1H), 6,96 (dd, 7=2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H (skjult)), 7,51 (s, 1H (skjult)), 7,67 (d, 7=5,0 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,39 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,94 (516) (metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 430 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 45% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 430, Trinn 1.
<!>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,02 (s, 9H), 1,06 (m, 2H), 1,29 (m, 2H), 1,43 (dd, 7=5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,43-1,75 (m, 8H), 1,87 (dd, 7=6,0, 7,5 Hz, 1H), 2,20-2,27 (m, 2H), 2,49-2,53 (m, 1H), 2,93-2,95 (m, 1H), 4,05 (d, 7= 9,0 Hz, 1H), 4,27-4,29 (m, 2H), 4,42-4,45 (m, 1H), 4,85 (m, 1H (skjult)), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,92-6,94 (m, 2H), 7,35 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,66 (d, 7=4,5 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,38 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,36 (728) (metode A).
Eksempel 431: Fremstilling av Forbindelse 431.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet i Eksempel 421, Trinn 5 (100 mg, 0,195 mmol) og Pd(PPh3)4(23 mg, 0,0195 mmol) i dioksan (3 ml) ble satt 2-tributylstannnyltiazol (95 mg, 0,254 mmol) og trietylamin (82^L, 0,585 mmol). Løsningen ble oppvarmet ved 95°C i 5 timer under nitrogen, deretter ved 105°C i 15 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved preparativ HPLC (gradient 30-80% B). De samlede fraksjoner ble fordelt mellom buffer pH 4 og diklormetan. Den vandige fasen ble ekstrahert med diklormetan og de samlede organiske ekstrakter vasket med saltvann og tørket (MgSC^). Tittelforbindelsen (31 mg) ble oppnådd som en fargeløs olje, betydelig forurenset med tributylstannyl-rest.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,4 (m, 8H (skjult)), 2,32-2,36 (m, 1H), 2,64-2,68 (m, 1H), 4,00 (d, 7=11,5 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,33 (d, 7=11,5 Hz,lH), 4,60 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H (skjult)), 5,33 (m, 1H), 7,03 (br s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 8,41 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,25 (517) (metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 431 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 41% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 431, Trinn 1.
lH NMR: (metanol-cL,) 5 1,02 (s, 9H), 1,06-1,70 (m, 13H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,22-2.31 (m, 2H), 2,51-2,55 (m, 1H), 2,92-2,94 (m, 1H), 4,06 (d,7= 11,5 Hz, 1H), 4,23-4.32 (m, 2H), 4,44-4,47 (m, 1H), 4,82 (m, 1H (skjult)), 5,12 (d, 7=11 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,73-5,81 (m, 1H), 6,90 (d, 7=9,0 Hz, NH), 7,04 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 7,93 (s, 1H), 8,42 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,46 (729)(metode A).
Eksempel 432: Fremstilling av Forbindelse 432.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet fra eksempel 423, Trinn 1 (102 mg, 0,204 mmol) og Pd(PPh3)4(24 mg, 0,0204 mmol) i dioksan (3 ml) ble satt 2-tributylstannnyltiazol (99 mg, 0,265 mmol) og trietylamin (85^L, 0,612 mmol). Løsningen ble oppvarmet ved 95°C i 5 timer under nitrogen, deretter ved 105°C i 15 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved preparativ HPLC (gradient 30-80% B). De samlede fraksjoner ble nøytralisert med kons. ammoniakk og konsentrert. Residuet ble fordelt mellom buffer pH 4 og diklormetan. Den vandige fasen ble ekstrahert med diklormetan og de samlede organiske ekstrakter vasket med saltvann og tørket (MgS04). Tittelforbindelsen (33 mg) ble oppnådd som en fargeløs olje, betydelig forurenset med tributylstannyl-inneholdende rest.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,03 (s, 9H), 1,30 (s, 9H), 2,28-2,32 (m, 1H), 2,62-2,67 (m, 1H), 3,98 (d, 7=11,5 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,34 (d, 7=11,5 Hz,lH), 4,58 (t, 7=9,0 Hz, 1H), 5,31 (m, 1H), 7,71 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 7,94-7,96 (m, 2H), 8,33 (s, 1H), 8,73 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+->Boc): 2,21 (405)(metode A).
Trinn 2:
Forbindelse 432 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 42% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 432, Trinn 1.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,02 (s, 9H), 1,07-1,08 (m, 2H), 1,24 (m, 2H), 1,32 (s, 9H), 1,44 (m, 1H (skjult)), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,29 (m, 2H), 2,51-2,55 (m, 1H), 2,93-2,95 (m, 1H), 4,04 (d, 7= 12 Hz, 1H), 4,23 (d, 7= 9,5 Hz, 1H), 4,33 (d, 7= 12 Hz, 1H), 4,47 (t, 7= 9,5 Hz, 1H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,30 (d, 7=18 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,72-5,81 (m, 1H), 6,62 (d, 7= 8,5 Hz, NH), 7,73 (s, 1H), 7,96 (m, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,74 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,42 (717)(metode A).
Eksempel 433: Fremstilling av Forbindelse 433.
Trinn 1:
Til en blanding av produktet fra eksempel 420, Trinn 3 (1,00 g, 1,94 mmol) og Pd(PPh3)4(112 mg, 0,097 mmol) i dioksan (15 ml) ble satt tributyl(l-etoksyvinyl)tinn (876 mg, 2,43 mmol). Løsningen ble oppvarmet ved 105°C i 6 timer under nitrogen. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen filtrert og konsentrert. Residuet ble fordelt mellom mettet NaHC03og etylacetat. Den vandige fasen ble ekstrahert med etylacetat og de samlede organiske ekstrakter vasket med 5% vandig KF og saltvann og tørket (MgS04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert gradient heksan - EtOAc 40-70%) ga tittelforbindelsen (624 mg, 64%) som en gul olje.
<J>H NMR: (DMSO-cLj) 5 0,95 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 1,35 (t, 7=7,0 Hz, 3H), 2,16-2,21 (m, 1H), 2,50 (m, 1H (skjult)), 3,64 (s, 3H), 3,85 (d, 7= 11 Hz, 1H), 3,90 (q, 7=7,0
Hz, 2H), 4,09 (d, 7= 9,0 Hz, 1H), 4,13 (d, 7= 11 Hz, 1H), 4,40 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 4,45 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 4,91 (d, 7=2,5 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 6,69 (d, 7= 9,0 Hz, NH), 7,48 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,46 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,14 (507) (metode B).
Trinn 2:
Til en løsning av produktet fra eksempel 433, Trinn 1 (125 mg, 0,247) i THF (3 ml) og vann (111 ^L, 6,18 mmol) ble satt NBS (44 mg, 0,247 mmol). Etter omrøring ved romtemperatur i 20 min. ble blandingen konsentrert og fordelt mellom etylacetat og saltvann. Den organiske fasen ble tørket (MgSC^), hvilket ga mellomproduktet brommetylketon. Dette mellomproduktet ble oppløst i DMF og behandlet med tioacetamid (24 mg, 0,321 mmol) og NaHCC>3 (31 mg, 0,371 mmol). Blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur, konsentrert og suspendert i mettet NaHC03. Produktet ble ekstrahert med etylacetat (2x), vasket med saltvann og tørket (MgSC^). Rensning ved anvendelse av en Biotage 12 M kolonne (eluert gradient heksan - EtOAc 50-70%) ga tittelforbindelsen (50 mg, 38%) som en blek olje.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,02 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,27-2,31 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,98 (d, 7= 10,0 Hz, 1H), 4,22 (d, 7= 9,5 Hz, 1H), 4,34 (d, 7= 10,5Hz, 1H), 4,64 (t, 7=9,0 Hz, 1H), 5,29 (m, 1H), 6,38 (s, NH), 7,87 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,71 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,96 (533) (metode B).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 433, Trinn 2 istedet.
<J>H NMR: (DMSO-d6) 5 0,96 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,18-2,23 (m, 1H), 2,50 (m, 1H (skjult)), 2,73 (s, 3H), 3,86 (d, 7= 11,5 Hz, 1H), 4,10 (d, 7= 9,0 Hz, 1H), 4,14 (d, 7= 11,5Hz, 1H), 4,39 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 5,30 (m, 1H), 6,60 (br s, NH), 7,84 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,78 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,84 (519) (metode B).
Trinn 4:
Forbindelse 433 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 46% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 433, Trinn 3.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,05 (s, 9H), 1,09-1,11 (m, 2H), 1,26-1,29 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,45-1,48 (m, 1H), 1,89-1,92 (m, 1H), 2,25-2,30 (m, 2H), 2,53-2,57 (m, 1H), 2,80 (s, 3H), 2,94-3,00 (m, 1H), 4,06 (d, 7= 10,5 Hz, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,32 (d, 7= 12 Hz, 1H), 4,48 (dd, 7= 10,5, 7,0 Hz, 1H), 5,15 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,33 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,76-5,83 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,95 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,74 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,21 (732)(metode B).
Eksempel 434: Fremstilling av Forbindelse 434.
Trinn 1:
Til en løsning av produktet fra eksempel 421, Trinn 1 (300 mg, 1,56 mmol) og Pd(PPh3)4(90 mg, 0,078 mmol) i DMF (6 ml) ble satt l-metyl-2-(tributylstannyl)-lH-pyrrol (750 mg, 2,03 mmol) og trietylamin (0,435 ml, 3,12 mmol). Løsningen ble oppvarmet ved 150°C i 30 min under nitrogen i en mikrobølgeovn (Emrys, Personal Chemistry). Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen fortynnet med dietyleter og 5% vandig KF og filtrert. Den vandige fasen ble ekstrahert med dietyleter (2x). De samlede organiske ekstrakter ble vasket med 5% vandig KF, vann og saltvann og tørket (MgS04). Rensning ved anvendelse av en Biotage 25 S kolonne (eluert gradient heksan - dietyleter 0-5%) ga tittelforbindelsen (169 mg, 56%) som en fargeløs olje.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 3,94 (s, 3H), 6,10 (s, 1H), 6,77 (d, 7=2,0 Hz, 1H), 6,93 (s, 1H), 7,27 (d, 7=4,0 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 8,49 (d, 7=5,0 Hz, 1H),
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,15 (193, 195) (metode B).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 2 i 39% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 434, Trinn 1.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,42, 1,43 (s, 9H (rotamerer)), 2,27-2,34 (m, 1H), 2,55-2,62 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,76, 3,74 (s, 3H (rotamerer)), 3,84 (s, 3H), 4,39-4,45 (m, 1H), 5,19 (m, 1H), 6,10 (m, 1H), 6,49 (m, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,80-6,82 (m, 1H), 7,07 (s, 1H), 8,35 (d, 7=6,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>, karboksylsyre): 1,49 (389) (metode B).
Trinn 3:
Produktet i Eksempel 434, Trinn 2 (90 mg, 0,22 mmol) ble oppløst i diklormetan (1,5 ml) og TFA (1,0 ml, 9,0 mmol). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 45 min. og konsentrert. Residuet ble behandlet med IN HC1 i dietyleter (5 ml) og konsentrert. Tittelforbindelsen ble oppnådd i kvantitativt utbytte som en blek olje.
LC/MS rt-min (MH<+>): 0,32 (302) (metode B).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 3 i 80% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 434, Trinn 3.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,02 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,25-2,31 (m, 1H), 2,61-2,64 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,97-3,99 (m, 1H), 4,22 (d, 7= 9,5 Hz, 1H), 4,32 (d, 7= 11,5 Hz, 1H), 4,61 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 6,10 (m, 1H), 6,42 (br d, 7= 9,0 Hz, NH), 6,49 (m, 1H), 6,78 (m, 1H), 6,81 (m, 1H), 7,07 (s, 1H), 8,34 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,81 (516) (metode B).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet fra eksempel 434, Trinn 4 (92 mg, 0,179 mmol) i THF (1 ml) og metanol (1 ml) ble satt LiOH (13 mg, 0,536 mmol) i vann (1 ml). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer ved romtemperatur og behandlet med IN HC1 inntil nøytral pH. Det organiske flyktige materialet ble fjernet i vakuum og residuet renset ved preparativ HPLC (gradient 10-80% B). De samlede fraksjoner ble nøytralisert med kons. ammoniakk og konsentrert. Residuet ble fordelt mellom buffer pH 4 og etylacetat. Den vandige fasen ble ekstrahert med etylacetat og de samlede organiske ekstrakter vasket med saltvann og tørket (MgSC^). Tittelforbindelsen (56 mg, 62%) ble oppnådd som et hvitt, fast stoff.
<!>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,03 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,31-2,35 (m, 1H), 2,62-2,67 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,98 (d, 7= 11,5 Hz, 1H), 4,21-4,23 (m, 1H), 4,33 (d, 7= 11,5 Hz, 1H), 4,58 (t,7=8,0 Hz, 1H), 5,31 (m, 1H), 6,12 (m, 1H), 6,40 (brd,7= 8,0 Hz, NH), 6,52 (m, 1H), 6,82 (m, 1H), 6,87 (m, 1H), 7,12 (s, 1H), 8,36 (d, 7=5,5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1,73 (502) (metode B).
Trinn 6:
Forbindelse 434 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 68% utbytte, ved å starte fra produktene i Eksempel 434, Trinn 5.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,02 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,33 (s, 9H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,27 (m, 2H), 2,47-2,51 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,04 (d, 7= 12 Hz, 1H), 4,24 (d, 7= 10,0 Hz, 1H), 4,28 (d, 7= 12 Hz, 1H), 4,43 (dd, 7= 10,0, 7,0 Hz, 1H), 5,12 (d, 7=10,0 Hz, 1H), 5,30 (d,7=17 Hz, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,10 (m, 1H), 6,49 (m, 1H), 6,64 (br d, 7= 9,0 Hz, NH), 6,79 (m, 1H), 6,82 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 8,35 (d, 7=5,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,08 (714) (metode B).
Eksempel 435: Fremstilling av Forbindelse 435.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 2 i 74% utbytte, ved å starte fra 2,6-dibrompyridin
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 1,34, 1,38 (s, 9H (rotamerer)), 2,23-2,31 (m, 1H), 2,43-2,47 (m, 1H (skjult)), 3,53 (d, 7=12 Hz, 1H), 3,66, 3,69 (s, 3H (rotamerer)), 3,72-3,75 (m, 1H), 4,29-4,34 (m, 1H), 5,42 (m, 1H), 6,89 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,26 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,68 (t, 7=7,5 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,62 (523,425) (metode A).
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 2 i kvantitativt utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 435, Trinn 1.
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,42 (301, 303) (metode B).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 3 i 96% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 435, Trinn 2.
<!>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,95 (s, 9H), 1,28 (s, 9H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,45-2,48 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,94 (d, 7=9,5 Hz, 1H), 4,01-4,08 (m, 2H), 4,45 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 5,53 (m, 1H), 6,66 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 6,82 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 7,25 (d, 7=7,0 Hz, 1H), 7,64-7,69 (m, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,73 (514, 516) (metode A).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 5 i kvantitativt utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 435, Trinn 2.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,95 (s, 9H), 1,28 (s, 9H), 2,19-2,25 (m, 1H), 2,43-2,47 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 4,01-4,08 (m, 2H), 4,36 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 6,65 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 6,82 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,25 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,67 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 12,6 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,51 (522, 524) (metode B)..
Trinn 4:
Til en løsning av produktet fra eksempel 435, Trinn 3 (125 mg, 0,250 mmol), Pd(PPh3)4(14,4 mg, 0,0125 mmol) og 3-furyl-boronsyre (35 mg, 0,313 mmol) i DMF (2 ml) og vann (0,025 ml) ble satt Cs2C03(244 mg, 0,750 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved 105°C i 3 timer under nitrogen. Etter avkjøling til romtemperatur ble det faste stoffet fjernet ved filtrering og filtratet konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved preparativ HPLC (gradient 30-100% B). De samlede fraksjoner ble nøytralisert med kons. ammoniakk og konsentrert. Residuet ble fordelt mellom buffer pH 4 og diklormetan. Den vandige fasen ble ekstrahert med diklormetan og de samlede organiske ekstrakter vasket med saltvann og tørket (MgS04). Tittelforbindelsen (90 mg, 76%) ble oppnådd som et hvitt skum.
<!>H NMR: (metanol-d4) 5 1,06 (s, 9H), 1,39 (s, 9H), 2,36-2,42 (m, 1H), 2,61-2,65 (m, 1H), 4,12 (dd, 7=4,0. 11 Hz, 1H), 4,19 (d, 7=11 Hz, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,62 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 5,79 (m, 1H), 6,64 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 7,22 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,66 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,53 (511) (metode B).
Trinn 5:
Forbindelse 435 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 57% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 435, Trinn 4.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,96 (s, 9H), 1,02-1,05 (m, 2H), 1,09-1,11 (m, 2H), 1,19 (s, 9H), 1,35-1,38 (m, 1H), 1,71 (dd, 7=5,5, 8,0 Hz, 1H), 2,15-2,22 (m, 2H), 2,37-2,41 (m, 1H), 2,93 (brm, 1H), 4,03-4,08 (m, 3H), 4,35 (brt, 1H), 5,10 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,24 (d, 7=17 Hz, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 5,73 (m, 1H), 6,47 (br s, 1H), 6,64 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,31 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,72 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,92 (s, NH), 10,4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,64 (723) (metode B).
Eksempel 436: Fremstilling av Forbindelse 436.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 435, Trinn 4 i 73% utbytte, bortsett fra anvendelse av fenylboronsyre istedet.
<J>H NMR: (metanol-d4) 5 1,06 (s, 9H), 1,39 (s, 9H), 2,39-2,45 (m, 1H), 2,65-2,77 (m, 1H), 4,18-4,30 (m, 3H), 4,64 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 5,72 (m, 1H), 6,74 (d, 7=8,0 Hz, 1H), 7,44-7,55 (m, 4H), 7,75 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, 7=7,5 Hz, 2H).
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,72 (521) (metode B).
Trinn 2:
Forbindelse 436 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 66% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 436, Trinn 1.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,96 (s, 9H), 1,04-1,05 (m, 2H), 1,09 (m, 2H), 1,30 (s, 9H), 1,36-1,39 (m, 1H), 1,71 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 2,16-2,24 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 4,06-4,09 (m, 3H), 4,38 (brt, 1H), 5,10 (d,7=10,5 Hz, 1H), 5,30 (d,7=17 Hz, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 5,80 (m, 1H), 6,49 (br s, 1H), 6,75 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,43-7,51 (m, 3H), 7,59 (d, 7=7,5 Hz, 1H), 7,81 (t, 7=7,5 Hz, 1H), 8,09 (d, 7=7,0 Hz, 2H), 8,91 (s, NH), 10,4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,77 (711) (metode B).
Eksempel 437: Fremstilling av Forbindelse 437.
Trinn 1:
Til en løsning av 2-brom-6-metyl-pyridin (7,65 g, 44,4 mmol) i diklormetan (50 ml) ble satt en løsning av wCPBA (77%, 12,9 g, 57,7 mmol) i diklormetan (100 ml). Løsningen ble omrørt i 18 timer ved omgivelsestemperatur. Blandingen ble nøytralisert med fast Na2C03og vann ble tilsatt. Den vandige fasen ble ekstrahert med diklormetan (2x). De samlede organiske fraksjoner ble vasket med 5% Na2S203, 5% Na2C03, saltvann og tørket (MgSQ*). Rensning ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert gradient heksan - etylacetat 40-70%) ga tittelforbindelsen (5,0 g, 60%) som en fargeløs olje som stivnet ved henstand.
<J>H NMR: (DMSO-d6) 5 2,43 (s, 3H), 7,15 (t, 7=8,0 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,78 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 0,32 (188, 190) (metode B).
Trinn 2:
Til en løsning av produktet fra eksempel 437, Trinn 1 (4,5 g, 24 mmol) i DMF (20 ml) ble satt POBr3(8,2 g, 29 mmol) i porsjoner. En sterk eksoterm reaksjon skjedde og et presipitat ble dannet. Blandingen fikk stå i 2 timer ved omgivelsestemperatur. Blandingen ble behandlet med vann og mettet NaHC03inntil nøytral pH. Den vandige fasen ble ekstrahert med dietyleter (2x). De samlede organiske fraksjoner ble vasket med saltvann og tørket (MgSC^). Rensning ved anvendelse av en Biotage 40 M kolonne (eluert gradient heksan - dietyleter 0-10%) ga tittelforbindelsen (1,78 g, 30%) som en fargeløs olje.
<J>H NMR: (DMSO-d6) 8 2,45 (s, 3H), 7,64 (s, 1H), 7,80 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,85 (250, 252, 254)(metode B).
Trinn 3:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 421, Trinn 2 i 46% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 437, Trinn 1.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 1,34, l,38(s, 9H (rotamerer)), 2,20-2,27 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,43-2,50 (m, 1H), 3,55 (d, 7=12,5 Hz, 1H), 3,64-3,67 (m, 1H), 3,66, 3,69 (s, 3H (rotamerer)), 4,26-4,32 (m, 1H), 5,17 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 7,08 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,17 (415, 417) (metode B).
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 3 i kvantitativt utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 437, Trinn 3.
Trinn 4:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 3 i 75% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 437, Trinn 3.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,94 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 2,16-2,21 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,48 (m, 1H (skjult)), 3,64 (s, 3H), 3,83 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 4,06 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 4,14 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 4,42 (t, 7=9,0 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 6,68 (br s, NH), 6,88 (s, 1H), 7,03 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,19 (528, 530) (metode B).
Trinn 5:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 5 i kvantitativt utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 437, Trinn 4.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,95 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 2,15-2,19 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,44-2,48 (m, 1H), 3,81 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 4,04-4,06 (m, 1H), 4,13 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 4,33 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 5,26 (m, 1H), 6,66 (br d, 7=9,0 Hz, NH), 6,88 (s, 1H), 7,03 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2,14 (536, 538) (metode B).
Trinn 6:
Til en løsning av produktet fra eksempel 437, Trinn 5(101 mg, 0,196 mmol), Pd(PPh3)4(11,3 mg, 0,0098 mmol) og fenyl-boronsyre (34 mg, 0,275 mmol) i DMF (2 ml) ble satt 2M vandig Na2C03(0,294 ml, 0,588 mmol). Røret ble forseglet og oppvarmet i en mikrobølgeovn (Emrys, Personal Chemistry) ved 150°C i 15 min. under nitrogen. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen surgjort med IN HC1 (0,5 ml). Det faste stoffet ble fjernet ved filtrering og filtratet konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved preparativ HPLC (gradient 20-80% B). De samlede fraksjoner ble nøytralisert med kons. ammoniakk og konsentrert. Residuet ble fordelt mellom buffer pH 4 og etylacetat. Den vandige fasen ble ekstrahert med etylacetat (2x) og de samlede organiske ekstrakter vasket med saltvann og tørket (MgS04). Tittelforbindelsen (115 mg, >100%) ble oppnådd som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,06 (s, 9H), 1,30 (s, 9H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,69 (s, 3H), 2,65-2,76 (m, 1H), 4,01 (dd, 7=3,0, 12 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,44 (d,7=12 Hz, 1H), 4,64 (dd, 7=8,0, 10 Hz, 1H), 5,46 (m, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,39 (m, 3H), 7,57 (d, 7=7,5 Hz, 2H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,84 (513) (metode B).
Trinn 7:
Forbindelse 437 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 31% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 437, Trinn 6.
<J>H NMR: (DMSO-de) 8 0,93 (s, 9H), 0,99-1,04 (m, 4H), 1,25 (s, 9H), 1,34-1,37 (m, 1H), 1,69-1,71 (m, 1H), 2,11-2,20 (m, 2H), 2,39-2,43 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,93 (m, 1H), 3,92 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 4,07 (d, 7=9,0 Hz, 1H), 4,11 (d, 7=12 Hz, 1H), 4,32 (t, 7=7,0 Hz, 1H), 5,10 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=17,5 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 6,58 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,40-7,48 (m, 3H), 8,04-8,06 (m, 2H), 8,92 (s, NH), 10,4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,10 (725) (metode B).
Eksempel 438: Fremstilling av Forbindelse 438.
Trinn 1:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til Eksempel 437, Trinn 6 i kvantitativt utbytte, ved å starte fra 2-tiofenboronsyre.
<J>H NMR: (metanol-cL,) 5 1,05 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,66-2,70 (m, 1H), 3,99 (dd, 7=3,0,12 Hz, 1H), 4,23 (s, 1H), 4,36 (d,7=12 Hz, 1H), 4,61 (t, 7=8,5 Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,86 (s, 1H), 7,16-7,18 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,56 (m, 1H), 7,72 (d, 7=3,0 Hz, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 1,80 (519) (metode B).
Trinn 2:
Forbindelse 438 ble fremstilt i henhold til Eksempel 420, Trinn 6 i 41% utbytte, ved å starte fra produktet fra eksempel 438, Trinn 1.
<J>H NMR: (DMSO-dé) 5 0,91 (s, 9H), 0,99-1,04 (m, 4H), 1,20 (s, 9H), 1,35-1,37 (m, 1H), 1,69-1,71 (m, 1H), 2,09-2,20 (m, 2H), 2,33 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,93 (m, 1H), 3,92 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 4,07-4,11 (m, 2H), 4,29-4,32 (m, 1H), 5,10 (d, 7=10,5 Hz, 1H), 5,23 (d, 7=17,0 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 6,58 (d, 7=8,5 Hz, 1H), 6,75 (s, 1H), 7,14 (t, 7=4,5 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,59 (d, 7=5,5 Hz, 1H), 7,80 (d, 7=3,5 Hz, 1H), 8,92 (s, NH), 10,4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2,06 (731) (metode B).
Seksjon K:
Eksempel 450: Fremstilling av Forbindelse 450.
Forbindelse 450 ble fremstilt i henhold til Eksempel 8, Trinn 5, bortsett fra anvendelse av 4-klor-6-fluor-2-tirfiuormetylkinolin istedet.
<J>H NMR (CD3OD) 8 0,97-1,04 (m, 12H), 1,17-1,24 (m, 10H), 1,39-1,46 (m, 1H), 1,82-1,87 (m, 1H), 2,20-2,23 (m, 1H), 2,35-2,39 9m, 1H), 2,55-2,65 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,09-4,11 (m, 1H), 4,18-4,21 (m, 1H), 4,56 (b, 2H), 5,10-5,14 (m, 1H), 5,28-5,31 (m, 1H), 5,60 (b, 1H), 5,70-5,80 (m, 1H), 7,41 (s, 1 H), 7,65-7,68 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,13-8,15 (m, 1H).
Eksempel 451: Fremstilling av Forbindelse 451.
Trinn 1:
Tosylatet ble fremstilt som beskrevet i litteraturen (Patchett, A. A.; Witkof, B. J. Am. Chem. Soc. 1957,185-192) og ble anvendt uten ytterligere rensning.
Til en oppslemning av NaH (76 mg, 1,90 mmol) i DMF (20 ml) ble satt 1-tionaftol (0,29 mg, 1,80 mmol) og blandingen ble omrørt i 30 minutter. En løsning av tosylatet (0,61 g, 1,80 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 12 timer ved 23°C. Blandingen ble konsentrert og residuet fordelt mellom EtOAc/H20. De organiske ekstrakter ble tørket (MgS04) og konsentrert. Residuet ble renset ved kolonnekromatografi (eluering med 5% EtOAc/heksaner til 30% EtOAc/heksaner, hvilket ga 261 mg (38%) av produktet som en gul olje.
<J>H NMR (CDC13, 3:2 blanding av rotamerer) 5 1,41 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 2,25-2,29 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,35-3,42 (m, 1H), 3,51-3,53 (m, 1H), 3,80-3,86 (m, 2H), 4,38-4,39 (m, 1H), 4,46-4,48 (m, 1H), 7,41-7,46 (m, 1H), 7,42-7-54 (m, 1H), 7,57-7,59 (m, 1H), 7,58 (d, J = 4 Hz, 1H), 7,82-7,88 (m, 2H), 8,46 (d, J = 5Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,93), MS m/z 388 (M<+>+l).
Trinn 2:
En blanding av 4-(naftalen-l-ylsulfanyl)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester-2-metylester (0,38 g, 0,98 mmol) og 4N HC1 (1,0 ml) ble omrørt ved 23°C i 2 timer. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet oppløst i CH3CN (20 ml) og behandlet med syre (0,37 g, 2,16 mmol), TBTU (0,23 g, 0,98 mmol) og DIPEA (0,37 g, 2,16 mmol) og omrørt i 12 timer. Blandingen ble konsentrert og residuet oppløst i EtOAc og vasket med IN HC1, mettet NaHC03og deretter tørket over MgS04og konsentrert. Residuet ble anvendt uten ytterligere rensning.
1H NMR (CDCI3,1:1 blanding av rotamerer) 5 0,99 (s, 9H), 1,02 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,46 (s, 9H)2,2-2,25(m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,82-3,86 (m, 1H), 3,89-3,92 (m, 2H)4,26 (s, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,70-4,75 (m, lH),7,40-7,48 (m, 1H), 7,54-7,55 (m, 1H), 7,59-7,62 (m, 1H), 7,72-7,74 (m, 1H), 7,86-7,89 (m, 2H), 8,48-8,50 (m, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,59), MS m/z 523 (M+Na).
Trinn 3:
Til en blanding av l-(2-tert-butolcsykarbonylamino-3,3-dimetyl-butyryl)-4-(naftalen-l-ylsulfanyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester (Eksempel 451, Trinn 2) (0,49 g, 0,98 mmol) i THF/H20 (2:1) ble satt LiOH-hydrat (0,20 g, 4,9 mmol) og blandingen ble omrørt i 12 timer. Løsningen ble konsentrert og vasket med EtOAc. Det vandige laget ble surgjort med IN HC1 og ekstrahert med EtOAc. Produktet ble observert i den første EtOAc-ekstrakt. Den første organiske ekstrakt ble tørket over MgSC«4 og konsentrert til 328 mg (71%) av et gyldenbrunt, fast stoff.
<!>H NMR (DMSO-d6,2:1 blanding av rotamerer) 5 0,88 (s, 9H), 0,92 (s, 9H), 1,34 (s, 9H), 1,38 (s, 9H), 2,18-2,25(m, 2H), 3,66-3,75 (m, 1H), 3,89-4,00 (m, 2H), 4,10-4,13 (m, 1H), 4,25-4,32 (m, 1H), 7,45-7,7,51 (m, 1H), 7,56-7,61 (m, 2H), 7,65-7,7,69 (m,lH), 7,88-7,91 (m, 1H), 7,97 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,27-8,35 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,52), MS m/z 486 (M+l).
Trinn 4:
Til en løsning av syren (Eksempel 451, Trinn 3) (0,32 g, 0,87 mmol) i CH3CN (10 ml) og DMF (2 ml) ble satt diastereomer-blanding av 1(R)-2(S) og 1-(S)-2(R) l-amino-2-vinyl-cyklopropankarboksylsyre-etylester-hydroklorid (240 mg, 0,87 mmol) og TBTU (201 mg, 0,87 mmol) og DIPEA (0,32 ml, 0,742 mmol) og blandingen ble omrørt ved 23 °C i 12 timer. Blandingen ble konsentrert og residuet fordelt mellom EtOAc og vann. Det organiske laget ble separert, tørket over MgS04og konsentrert. Residuet ble kromatografert med 30% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel, hvilket ga 240 mg (38%) av et lysegult, fast stoff.
<!>H NMR (DMSO-d6, blanding av rotamerer og diasteromerer) 8 0,87 (s, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,97-1,04 (m, 3H), 1,33 (s, 9H), l,38(s, 9H), 2,11-2,20 (m, 2H), 3,74-3,85 (m, 1H), 3,89-3,96 (m, 2H), 3,98-4,03 (m, 4H), 4,00-4,09 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 5,04-5,09 (m, 1H), 5,17-5,29 (m, 2H), 5,50-5,70 (m, 1H), 6,60-6,62 (m, 1H), 6,72-6,75 (m, 1H), 7,50-7,56 (m, 1H), 7,56-7,72 (m, 2H), 7,70-7,80 (m, 1H), 7,92-8,00 (m, 1H), 8,00-8,06 (m, 1H), 8,29-8,40 (m, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,79 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,59), MS m/z 623 (M+l).
Trinn 5:
Syren ble fremstilt som tidligere beskrevet ved anvendelse av LiOH i THF/MeOH/H20 (4/2/1) i Eksempel 451, Trinn 3, bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 451, Trinn 4 istedet.
lU NMR (DMSO-d6, blanding av rotamerer og diastereomerer) 5 0,90 (s, 9H), 1,17-1,23 (m, 2H), 1,32-1,37 (m, 9H), 2,10-2,12 (m, 1H), 2,20-2,31 (m, 2H), 3,97-4,05 (m, 2H), 4,10-4,12 (m, 1H), 4,32-4,40 (m, 1H), 4,55-4,61 (m, 1H), 4,80-4,98 (m, 2H),
5,03-5,08 (m, 1H), 5,10-5,20 (m, 1H), 5,75-5,90 (m, 1H), 6,55-6,70 (m, 1H), 7,42-7,57 (m, 1H), 7,60-7,64 (m, 2H), 7,70-7,72 (m, 1H), 7,80-7,97 (m, 1H), 7,96-7,99 (m, 1H), 8,20-8,50 (m, 2H);
LC-MS (retensjonstid: 1,52), MS m/z 595 (M+l).
Trinn 6:
En blanding av syren (Eksempel 451, Trinn 5) (172 mg, 0,29 mmol), metansulfonamid (110 mg, 1,16 mmol), EDAC (110 mg, 0,58 mmol) og DMAP (71 mg, 0,58 mmol) ble oppløst i THF (10 ml) og omrørt i 12 timer. DBU (0,087 ml, 0,58 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt i 48 timer. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet oppløst i EtOAc og vasket med vann og IN HC1, tørket over MgS04og konsentrert. Residuet ble renset ved preparativ tynnskiktskromatografi, hvilket ga 15 mg (8%) av forbindelse 451 som et gyldenbrunt, fast stoff.
lU NMR (DMSO-d6, blanding av rotamerer og diastereomerer) 8 0,98 (s, 9H), 1,27-1,42 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), l,76-l,79(m, 1H), 1,83-1,86 (m, 1H), 1,92-2,10 (m, 1H), 2,16-2,25 (m, 2H), 3,01-3,10 (m, 1H), 3,80-3,83 (m, 1H), 3,86-3,89 (m, 1H), 3,98-3,99 (m, 1H), 3,99-4,05 (m, 1H), 4,24-4-29 (m, 1H), 4,44-4,53 (m, 1H), 4,86 (s, 3H), 5,08-5,15 (m, 1H), 5,25-5,29 (m, 1H), 5,65-5,85 (m, 1H), 6,5-6,8 (m, 1H), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 7,75-7,77 (m, 1H), 7,88-7,91 (m, 2H), 8,46 (d, J = 8,25 Hz, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,52), MS m/z 672 (M+l mindre), m/z 693 (M+Na større).
Eksempel 452: Fremstilling av Forbindelse 452
Trinn 1:
Til en oppslemning av NaH (76 mg, 1,90 mmol) i DMF (20 ml) ble satt 2-tionaftol (0,29 g, 1,80 mmol) og blandingen ble omrørt i 30 minutter. En løsning av tosylatet (Eksempel 451, Trinn 1) (0,61 g, 1,79 mmol) i DMF (2 ml) ble tilsatt og blandingen omrørt i 12 timer ved 23°C. Blandingen ble konsentrert og deretter fordelt mellom EtOAcÆJ^O. Det organiske laget ble vasket med mettet NaHCC«3, tørket (MgSC^) og konsentrert. Residuet ble kromatografert med 5% EtOAc/heksaner fulgt av 30% EtOAc/heksaner, hvilket ga 261 mg (38%) av produktet som en klar olje.
<J>H NMR (DMSO-dé) 5 1,32 (s, 9H), 2,29-2,35 (m, 2H), 3,33-3,47 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,71-3,81 (m, 1H), 4,29-4,32 (s, 1H), 7,49-7,55 (m, 3H), 7,70-7,80 (m,lH), 7,81-7,97 (m, 3H);
LC-MS (retensjonstid: 1,54), MS m/z 387 (M+l).
Trinn 2:
En blanding av 4-(naftalen-2-ylsulfanyl)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester-2-metylester (310 mg, 0,80 mmol) og 4N HC1 i dioksan (1,49 ml, 2,69
mmol) ble omrørt i 2 timer ved 23°C og deretter konsentrert. Residuet ble oppløst i CH3CN (10 ml) og N-Boc-t-butylglycin (196 mg, 0,85 mmol), TBTU (0,27 g, 0,85 mmol) og DIPEA (0,32 ml, 1,85 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt natten over.
Blandingen ble konsentrert og residuet oppløst i EtOAc, vasket med IN HC1, mettet NaHC03, tørket og konsentrert, hvilket ga 300 mg (90%) av produktet som en gul olje.
<!>H NMR (Metanol-d4) 5 0,99 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 2,20-2,35 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,92-4,08 (m, 2H), 4,26 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,57 (t, J = 9,5 Hz, 1H)6,46 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,48-7,60 (m, 3H), 7,83-7,90 (m, 3H), 8,02 (s, 1H)
LC-MS (retensjonstid: 1,98), MS m/z 523 (M+Na).
Trinn 3:
En løsning av 4-(naftalen-2-ylsulfanyl)-pyrrolidin-l,2-dikarboksylsyre-l-tert-butylester-2-metylester (0,48 g, 0,96 mmol) ble oppløst i MeOH (20 ml) og omrørt med LiOH (0,2 g, 4,8 mmol) i 12 timer. Løsningen ble konsentrert og surgjort og ekstrahert med EtOAc. Den organiske ekstrakten ble tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga 418 mg (91%) av et gult, fast stoff.
<!>H NMR (DMSO-d6, 1:2 blanding av rotamerer) 8 0,86, 0,93 (s, 9H) (1:2 blanding av rotamerer), 1,35,1,38 (s, 9H) (1:2 blanding av rotamerer), 2,01-2,18,2,25-2,35 (m, 2H), 3,25-3,40 (m, 2H), 3,70-3,80 (m, 1H), 4,00-4,20 (m, J = 9,4 Hz, 2H), 4,30-4,40 (s, 1H), 5,61-5,70, 6,42-6,50 (m, 1H) (1:2 blanding av rotamerer), 7,50-7,54 (m, 3H), 7,87-7,89 (m, 3H), 7,98 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,93), MS m/z 487 (M+l).
Trinn 4:
En løsning av l-tert-butoksykarbonylamino-2-vinyl-cyklopropankarboksylsyre-etylester (4,3 g, 17,8 mmol) i MeOH (50 ml) ble behandlet med LiOH (0,84 g, 20,0 mmol) og vann (5 ml) og blandingen omrørt i 12 timer. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet surgjort og ekstrahert med EtOAc. De organiske lag ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert, hvilket ga syren 2,1 g (52%) som en gul olje. Syren (2,1 g, 9,25 mmol) ble oppløst i THF og behandlet med CDI (7,25 g, 13,8 mmol) og oppvarmet til tilbakeløp i 3 timer og deretter avkjølt til 23°C. Metansulfonamid (1,76 g, 18,5 mmol) ble tilsatt fulgt av DBU (2,77 ml, 18,5 mmol) og blandingen ble omrørt i 72 timer ved 23°C. Blandingen ble konsentrert og residuet surgjort til pH 4 (IN HC1) og ekstrahert med EtOAc. De organiske ekstrakter ble tørket over MgS04og konsentrert, hvilket ga 1,99 g (71%) av en gul olje som stivnet ved henstand.
<!>H NMR (DMSO-dé) 8 1,16-1,23 (m,lH), 1,43 (s, 9H), 1,65-1,75 (m, 1H), 2,15-2,25 (m, 2H), 3,16 (s, 3H), 5,08 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,40-5,52 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,14), MS m/z 304 (M+l).
Trinn 5:
En løsning av produktet fra eksempel 452, Trinn 4 i dioksan/4N HC1 (2 ml) ble omrørt i 2 timer og deretter konsentrert. Residuet ble oppløst i CH3CN (5 ml) og satt til en blanding av syren (Eksempel 452, Trinn 3) (120 mg, 0,25 mmol), TBTU (58 mg, 0,25 mmol) og DIPEA (0,06 ml, 0,35 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt i 12 timer. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet oppløst i EtOAc og vasket med IN HC1, mettet NaHCOa, tørket over MgS04og konsentrert. Residuet ble renset ved preparativ TLC (Analtech 20X40 cM, 1000 Si02), hvilket ga 128 mg (70%) av forbindelse 452 som et gyldenbrunt, fast stoff.
<!>H NMR (DMSO-d6, blanding av diasteromerer) 8 0,97, 0,99 (s, 9H), 1,23-1,43 (m, 2H), 1,45 (s, 9 H), 1,82-1,83 (m, 1H), 2,00-2,51 (m, 2H), 2,90-2,99 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 3,90-3,99 (m, 1H), 4,01-4,20 (m, 2H), 4,25-4,30 (m, 1H), 4,45-4,55 (m, 1H),
4,95-5,10 (m, 1H), 5,12-5,25 (m, 1H), 5,71-5,85 (m, 1H), 6,4-6,8 (br m, 1H), 7,46-7,53 (m, 3H), 7,80-7,86 (m, 3H), 7,98-7,99 (m, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,95), MS m/z 672 (M+l).
Eksempel 453: Fremstilling av Forbindelse 453.
Trinn 1:
En blanding av Eksempel 452, Trinn 3 (110 mg, 0,23 mmol) i DCM (20 ml), 3-klorperbenzosyre (121,6 mg, 0,57 mmol, 85% persyre), KHPO4(0,13 g, 0,94 mmol) og K2HPO4(0,18 g, 1,05 mmol) ble omrørt ved 23°C i 12 timer. Løsningen ble fortynnet med DCM, vasket med vann, mettet NaHC03, tørket over MgSC^og konsentrert, hvilket ga produktet, 110 mg, (92%) som en klar olje.
<J>H NMR (DMSO-dé) 8 0,91 (s, 9H), 1,48 (s, 9H), 2,23-2,28 (m, 1H), 2,65-2,80 (m, 1H), 3,88-3,90 (m, 1H), 4,12 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,27 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,70-7,80 (m, 2H), 7,88-7,95 (m, 1H), 8,11 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,71 (s, 1H); LC-MS (retensjonstid: 1,72), MS m/z 519 (M+l).
Trinn 2:
En blanding av produktet fra eksempel 453, Trinn 1(110 mg, 0,212 mmol), amin (Eksempel 452, Trinn 5a) (0,65 mg, 0,212 mmol), TBTU (48,5 mg, 0,21 mmol) fulgt av DIPEA (60,8 ml, 0,35 mmol) ble omrørt i 12 timer ved 23°C. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet oppløst i EtOAc og vasket med IN HC1, mettet NaHC03, tørket over MgS04og konsentrert. Residuet ble renset ved preparativ TLC (eluert med 10% MeOH/CH2Cl2), hvilket ga 25 mg (17%) av forbindelse 453 som et hvitt, fast stoff.
<J>H NMR (DMSO-d6, blanding av diastereomerene) 8 0,93, 0,96 (s,9H), 1,38-1,45 (m, 2H), 1,53, 1,55 (m, 9H), 1,76-1,85 (m, 1H), 2,21-2,40 (m, 2H), 3,13-3,15 (m, 2H), 3,34 (s, 3H), 3,91-3,99 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 5,09-5,12 (m, 1H), 5,26-5,31 (m, 1H), 5,72-5,76 (m, 1H), 6,65-6,68 (m, 1H), 6,71-6,76 (m, 1H), 7,67-7,76 (m, 2H), 7,91-7,95 (m, 1H), 8,03 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,7 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,76), MS m/z 705 (M+l).
Eksempel 454: Fremstilling av Forbindelse 454.
Trinn 1:
Til en oppslemning av natriumhydrid (0,91 g, 22,7 mmol) i THF( 50 ml) ble satt N-BOC-trans-4(R)-hydroksy-L-prolin (2,5 g, 10,8 mmol) og blandingen ble omrørt ved 23°C i 1 time. 2-klormetylnaftalen (1,9 g, 10,8 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt i 12 timer ved romtemperatur. Løsningsmidlet ble fjernet og residuet hellet i vann og vasket med heksaner. Det vandige laget ble surgjort (IN HC1) og ekstrahert med EtOAc. EtOAc-laget ble separert, tørket (MgS04) og konsentrert, hvilket ga et lysegult residuum. Oljen ble renset ved "flash" kromatografi med 1:1 EtOAc/heksaner med 1% eddiksyre tilsatt, hvilket ga 1,56 g (39%) av det ønskede produkt som en tykk olje.
<J>H NMR (DMSO-d6, 3:1 blanding av rotamerer) 5 1,35, 1,37 (s, 9H, henholdsvis større og mindre) 1,92-2,02, 2,15-2,20 (m, 2H, henholdsvis større og mindre), 2,35-2,50 (m, 2H), 3,41-3,49 (m, 2H), 4,12-4,16,4,20-4,21 (m, 2H), 4,65-4,68(m, 2H), 7,46-7,52 (m, 3H), 7,74-7,91 (m, 4H), (Syre OH ikke observert);
LC-MS (retensjonstid: 1,44, YMC ODS-A Cl8 S7 3,0x 50 mm, gradient 10%MeOH/H2O 0,1%TFA til 90% MeOH/H20 0,1% TFA), MS m/z 394 (M++1+Na).
Trinn 2:
Til en løsning av HCl-saltet av en 1:1 blanding av diastereoisomerer (1R,2S/1S,2R hvor karboksygruppen er syn til vinylgruppen) av 2-(l-etoksykarbonyl-2-vinyl-cyklopropylkarbamoyl)-4-(naftalen-2yl-metoksy)-pyrrolidin-l-karboksylsyre-tert-butylester (0,54 g, 1,3 mmol) [fremstilt ved omrøring av N-Boc-amin med HC1 (4N) i dioksan i 1 time deretter fjerning av løsningsmidlet i vakuum] i CH3CN (50 ml) ble satt Boc-4(R)-(2-metylnaftyl)prolin (0,5 g, 1,3 mmol), TBTU (0,45 g, 1,4 mmol) fulgt av DIPEA (0,78 ml, 4,5 mmol). Blandingen ble omrørt i 12 timer og konsentrert. Residuet ble oppløst i EtOAc/H20 og vasket med mettet NaHC03, mettet NaCl, tørket (MgSC^) og konsentrert, hvilket ga en tykk gul olje (0,6 g, 91%) av produktet som en blanding av diastereomerene.
<!>H NMR (DMSO-dé) 8: 1,08-1,22 (m, 7 H), 1,23-1,39 (m, 9 H), 2,02-2,18 (m, 1H), 2,25-2,35 (m, 1H), 3,33-3,53 (m, 2H), 3,90-4,14 (m, 4H), 4,45-4,70 (m, 2H), 5,07-5,11 (m, 1H), 5,24-5,30 (m, 1H), 5,58-5,63 (m, 1H), 7,43-7,51 (m, 4H), 7,84-7,96 (m, 3H); MS m/z 531 (M++1+Na).
Trinn 3:
En løsning av produktet i Eksempel 454, Trinn 2 (600 mg, 1,18 mmol) ble omrørt med HC1 (4N, 3 ml, 11,8 mmol) i dioksan i 1 time og deretter ble løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble oppløst i CH3CN (10 ml) behandlet med Boc-L-t-Bu-Gly (0,42 g, 1,38 mmol), TBTU (0,27 g, 1,18 mmol) fulgt av DIPEA (0,71 ml, 4,1 mmol). Blandingen ble omrørt i 12 timer og konsentrert. Residuet ble oppløst i EtOAc/H20 og vasket med IN HC1, mettet NaHC03, mettet NaCl, tørket (MgS04) og konsentrert, hvilket ga en tykk gul olje. Produktet ble renset ved "flash" kromatografi ved anvendelse av gradient-eluering 5% EtoAc/heksaner 10% EtOAc/heksaner, 30% EtOAc/heksaner og til slutt som elueringsmiddel, hvilket ga produktet som en tykk olje (0,243 g, 33%) av produktet som en blanding av diastereomerer og rotamerer.
<J>H NMR (DMSO-dé) 5: 0,83-1,00 (m, 10H), 1,34 (s, 9H), 1,58-1,59,1,65-1,67 (m, 2H), 1,95-1,99, 2,04-2,06, 2,10-2,19, 2,24-2,56 (m, 2H), 3,97-4,04 (m,3H), 4,08-4,17 (m, 3H), 4,29-4,31 (m, 2H), 4,59-4,72 (m, 3H), 5,06-5,10 (m, 1H), 5,18-5,30 (m, 1H), 5,60-5,63 (m, 1H), 6,59-6,65, 6,70-6,74 (m, 1H), 7,43-7,51 (m, 4H), 7,84-7,96 (m, 3H), 8,66, 8,76 (s, 1H);
MS m/z 531 (M++1+Na).
Trinn 4:
Til en suspensjon av produktet i Eksempel 454, Trinn 3 (240 mg, 0,39 mmol) i THF (15 ml) og H20 (2 ml) ble satt LiOH (82 mg, 1,95 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer og deretter konsentrert i vakuum inntil bare det vandige laget var igjen. Det resulterende vandige residuet ble surgjort til pH 3,0 ved tilsetning av 1,0N vandig HC1 og ekstrahert med EtOAc (2x80 ml). Kombinerte organiske ekstrakter ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga produktet som et gyldenbrunt, fast stoff (200 mg, 0,33 mmol, 85%):<!>H NMR (DMSO-cLj) 5: 0,86, 0,94 (s, 9H mindre og major henholdsvis), 1,23-1,42 (m, 2H), 1,34 (s, 9H), 1,8-2,1 (m, 2 H), 2,18-2,30 (m, 1H), 3,59-3,73 (m, 3H), 4,0-4,09 (m, 1H), 4,18-4,34 (m,3H), 4,56-4,62 (m, 1H), 4,66-4,67 (m, lH),4,82-4,92 (m, 1H), 5,0-5,20 (m, 1H), 5,91-6,08 (m, 1 H), 6,5-6,7 (m, 1H), 7,45-7,59 (m, 3H), 7,82-7,97 (m, 4H), 8,2-8,3, 8,3-8,4 (s, 1H);
LC-MS (retensjonstid: 1,50), MS m/z 593 (M++1).
Trinn 5:
Til en løsning av produktet i Eksempel 454, Trinn 4 (190 mg, 0,32 mmol) og EDAC (122 mg, 0,64 mmol) og 4-DMAP (78 mg, 0,64 mmol) i THF (20 ml) ble satt kommersielt tilgjengelig metansulfonamid (122 mg, 1,28 mmol). Den resulterende løsningen ble omrørt i 2 dager, deretter ble DBU tilsatt (95^L, 0,64 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 timer og deretter konsentrert. Residuet ble fordelt mellom EtOAc (80 ml) og vann og vasket med IN HC1), vandig NaHCOa(2x30 ml), tørket (MgS04) og renset ved preparativ HPLC (65-90% MeOH/vann/0,1% TFA) som ga 56 mg av en blanding av produkt og materiale hvor Boc-gruppen var fjernet. Materialet ble ytterligere renset ved preparativ TLC (eluert med 10% MeOH/CH2Cl2ved anvendelse av 20X40cM plater fra Analtech), hvilket ga Forbindelse 454 som et gyldenbrunt, fast stoff (12 mg, 6%).
<!>H NMR (MeOD-oU50/50 blanding av Pl diastereomerene) 8 0,88-0,99 (m, 2H), 1,01,1,02 (s, 9H henholdsvis mindre og større diastereomerer), 1,23-1,42 (m, 2H), 1,38 (s, 9H), 1,72-1,79 (m, 1H), 1,86-1,88 (m, 1H), 2,00-2,10 (m, 2H), 2,10-2,23 (m, 1H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,12,3,17 (s, 3H), 3,72-3,79 (m, 1H), 4,26-4,41 (m, 3H), 4,72 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,09-5,12 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 3,5, 17,6 Hz, 1H) 5,7-5,8 (m, 1H), 6,55-6,80 (m, 1H), 7,45-7,47 (m, 3H), 7,79-7,83 (m, 4H);
LC-MS (retensjonstid: 1,48), MS m/z 670 (M++1).
Eksempel 470: Fremstilling av Forbindelse 470.
Trinn 1:
Til en løsning av kommersielt tilgjengelig N-Boc-(4S)-(cis)-hydroksyprolin-OMe (200 mg, 0,82 mmol), trifenylfosfin (320 mg, 1,22 mmol) og 1-naftol (176 mg, 1,22 mmol) i 2,5 ml tetrahydrofuran ble dråpevis satt en løsning av dietyldiazodikarboksylat (190uL, 1,22 mmol) i 1,0 ml THF over 10 minutter. Etter omrøring i 5,5 dager ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum. Den rå gule olje ble kromatografert på en 20X40cM preparativ TLC-plate (Analtech Si02) under eluering med 6-1 heksaner-etylacetat, hvilket ga det ønskede produkt som en blekgul olje (150 mg, 33%).
JH NMR (CDC13, 500MHz) 5 1,44 (s, 9H) 2,33 (1H, m), 2,72 (1H, m), 3,77 og 3,38 (2s, 3H, rotamerer), 3,88 (dd, 1H, J= 4,3, 12,4 Hz), 3,97 (bd, 1H), 4,53 og 4,62 (2t, 1H, J=7,8Hz, rotamerer), 5,10 (bd, 1H), 6,76 (t, 1H, J=9,5 Hz), 7,37 (m, 1H), 7,46 (m, 3H), 7,80 (d, 1H, J=7,7 Hz), 8,18 (m, 1H);
LC-MS A (retensjonstid: 1,86; MS m/z 394 (M+Na)<+>
Trinn 2:
Til en omrørt løsning av Boc-(4R)-naftal-l-okso)-Pro-OEt (150 mg, 0,40 mmol) i 1,5 ml THF og 0,5 ml vann ble satt litiumhydroksyd (10 mg). Løsningen ble omrørt i 21 timer ved romtemperatur og deretter fortynnet med 0,5N NaHCC«3. Den basiske løsningen ble ekstrahert med etylacetat og deretter ble det vandige laget surgjort til pH 2 med dråpevis tilsetning av kons. HC1. Det surgjorte laget ble deretter ekstrahert igjen med etylacetat. Dette andre etylacetat-lag ble tørket med magnesiumsulfat, filtrert og deretter konsentrert i vakuum, hvilket ga Boc-(4R)-naftal-l-okso)-Pro-OH som blek-rosa krystaller (147 mg, 100%).
<J>H NMR (CDC13, 500MHz) 5 1,47 og 1,48 (2s, 9H, rotamerer), 2,40 og 2,52 (2m, 1H), 2,68 og 2,78 (2m, 1H), 3,78-4,07 (m, 2H), 4,57 og 4,69 (2t, 1H, J=7,6 og 8,0 Hz, rotamerer), 5,12 (bd, 1H), 6,77 (dd, 1H, J=7,6,21,2 Hz), 7,37 (m, 1H), 7,46 (m, 3H), 7,81 (t, 1H, J=5,8 Hz), 8,19 (m, 1H);
LC-MS A (retensjonstid: 1,79 ; MS m/z 358 (M+H)<+>
Trinn 3:
Til en løsning av Boc-((4R)-naftal-l-okso)-Pro-OH (147 mg, 0,41 mmol) og racemisk (1 R/2 S)/( 1S/2R)-1 -amino-2-vinylcyklopropan-karboksylsyre-etylester-hydrokloridsalt (79 mg, 0,41 mmol) i 2,8 ml metylenklorid ble satt DIPEA (250uL, 1,44 mmol) og TBTU (158 mg, 0,49 mmol). Den resulterende løsningen ble omrørt under nitrogen i 20 timer og deretter fortynnet med 40 ml metylenklorid. Det organiske laget ble vasket med vann, IN NaHC03, IN HC1, vann og saltvann. Løsningen ble deretter tørket med natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Rensning ved preparativ TLC ga to separate diastereomerer, høyere Rf diastereomer A (P2[Boc(4R)-(naftal-l-okso)prolin]-Pl(lR, 2S Vinyl Acca)-OEt, 78 mg, 38%) og lavere Rf diastereomer B (P2[Boc(4R)-(naftal-l-okso)prolin]-Pl(lS, 2R Vinyl Acca)-OEt, 91 mg, 45%) som gråhvitt fast stoff: Diastereomer A: P2[Boc(4R)-(naftal-l-okso)prolin]-Pl(lR, 2S Vinyl Acca)-OEt:<!>H NMR (CDCI3, 500MHz) 5 1,24 (t, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,52 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 2,81 (m, 1H), 3,88 (m, 2H), 4,11 (q, 1H, J=7,15), 4,19 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,31 (dd, 1H, J=17, 0,8 Hz), 5,77 (m, 1H), 6,83 (m, 1H), 7,36 (t, 1H, J=7,8 Hz), 7,46 (m, 3H), 7,78 (d, 1H, J=7,6 Hz), 8,14 (d, 1H, J=8,15Hz);
LC-MS B (retensjonstid: 1,85 ; MS m/z 495 (M+H)<+>
Diastereomer B, Eksempel 10B: P2[Boc(4R)-(naftal-l-okso)prolin]-Pl(lS, 2R Vinyl Acca)-OEt:<J>H NMR (dl-CHCl3,500MHz) 5 1,24 (t, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,85 (m, 1H), 2,15 (q, 1H, J=8,9Hz), 2,40 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 4,12 (m, 2H), 4,52 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,31 (m, 1H), 5,79 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 7,35 (t, 1H, J=7,6 Hz), 7,46 (m, 3H), 7,78 (d, 1H, J=7,6 Hz), 8,14 (d, 1H, J=8,10 Hz).
LC-MS B (retensjonstid: 1,85 ; MS m/z 495 (M+H)<+>
Trinn 4:
Til P2[Boc(4R)-(naftal-l-okso)prolin]-Pl(lR, 2S Vinyl Acca)-OEt (A, høyere Rf) (78 mg, 0,16 mmol) ble satt 4N HC1 i dioksan (2,0 ml) og løsningen ble omrørt i 30 minutter. Konsentrasjon i vakuum ga HCl-saltet av P2[(4R)-(naftal-4-okso) prolin)]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-OEt som en gul olje som ble anvendt direkte i neste trinn uten ytterligere rensning.
Til en løsning av BOC-L-tBuGly (73 mg, 0,32 mmol) og HCl-saltet av P2[(4R)-(naftal-4-okso) prolin)]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-OEt (0,16 mmol) i 11 ml acetonitril ble satt DIPEA (140uL, 0,79 mmol) og HATU (132 mg, 0,35 mmol). Den resulterende løsningen ble omrørt under nitrogen i 17 timer og deretter fortynnet med 100 ml etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, IN NaHCC«3, IN HC1, vann og saltvann. Løsningen ble deretter tørket med natriumsulfat og konsentrert i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen som en blek-gul oljeaktig film (92 mg, 96%).<J>H NMR (CDCI3, 500MHz) 5 1,06 (s, 9H), 1,22 (t, 3H, J=7,l), 1,38 (s, 9H), 1,41 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 2,13 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 3,92-4,2 (m, 1H), 4,12 (q, 2H, J=6,6 Hz), 4,38 (bt, 1H), 5,12 (d, 1H, J=10,3 Hz) 5,2-5,39 (m, 3H), 5,75 (m, 1H), 6,82 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,34-7,46 (m, 4H), 7,59 (bs, 1H, NH), 7,76 (d, 1H, J=7,9 Hz), 8,13 (d, 1H, J=8,3 Hz);
LC-MS C (retensjonstid: 2,82 ; MS m/z 608 (M+H)<+>
Trinn 5:
Til en løsning av produktet i Eksempel 470, Trinn 4 (92 mg, 0,15 mmol) i 750 ml tetrahydrofuran og 250 ml vann ble satt litiumhydroksyd (4 mg). Den resulterende løsningen ble omrørt i 28,5 timer, opparbeidet som vanlig og deretter igjen underkastet samme betingelser bortsett fra tilsetning av to ganger så meget litiumhydroksyd (8 mg). Etter 24 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med etylacetat og vasket med vann. Det organiske laget ble tørket med natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Det resulterende halvfaste stoffet ble renset ved "flash" kromatografi under eluering med 3-1 heksaner-etylacetat, hvilket ga BocNH-P3(tBuGly)-P2[(Boc (4R)-(naftal-l-okso) prolin)]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-OH som et klart halvfast stoff (30 mg, 34%).
<J>H NMR (oVMeOH, 500MHz) 5 1,04 (s, 9H), 1,24 (t, 1H, J=3,9 Hz), 1,32 (s, 9H), 1,66 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 4,04-4,07 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,18-5,29 (m, 2H), 5,90 (m, 1H), 6,54 (m,l H), 6,92 (m, 1H), 4,26 (m, 4H), 7,77 (m, 1H), 8,15 (m, 1H);
LC-MS C (retensjonstid: 2,65 ; MS m/z 580 (M+H)<+>
Trinn 6:
Til en løsning av Boc-NH-P3(t-BuGly)-P2[(Boc (4R)-(naftal-l-okso) prolin)]-Pl(lR,2S Vinyl Acca)-OH (Eksempel 470, Trinn 5) (65 mg, 0,11 mmol) i 3,7 ml tetrahydrofuran ble satt 1,1 '-karbonyl-diimidazol (22 mg, 0,135 mmol). Den resulterende blandingen ble tilbakeløpskokt i 30 minutter og deretter avkjølt til romtemperatur. På dette tidspunkt ble metansulfonamid (27 mg, 0,28 mmol) og DBU (34 L, 0,224 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 dager og deretter ble mer DBU (10 L) og metansulfonamid (9 mg) tilsatt. Etter 24 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med 50 ml etylacetat og vasket med 50 ml 0,25N HC1 og 50 ml saltvann. Løsningen ble tørket med natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Det rå materialet ble renset ved preparativ TLC (3-2 etylacetat-heksaner), hvilket ga Forbindelse 470 (21 mg, 28%) som et hvitt filmaktig fast stoff.
<!>H NMR (oVMeOH, 500MHz) 5 1,04 (s, 9H), 1,36 (s, 9H), 1,88 (t, 1H), 2,18 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 3,11 (bs, 3H), 4,076 (m, 1H), 4,30 (bd, 1H), 4,41 (bd, 1H), 4,52 (apparent t, 1H), 5,07 (m, 1H), 5,24-5,30 (m, 2H), 5,80 (m, 1H), 6,92 (d, 1H, J=7,45 Hz), 7,35-7,46 (m, 4H), 7,76 (d, 1H, J=8,l Hz), 8,13 (d, 1H, J=8,3 Hz);
LC-MS C (retensjonstid: 2,57; MS m/z 657 (M+H)<+>
Eksempel 471: Fremstilling av Forbindelse 471.
Trinn 1:
Til P2[Boc(4R)-(naftal-l-okso)prolin]-Pl(lS, 2R Vinyl Acca)-OEt (Eksempel 470, Trinn 3, lavere Rf) (91 mg, 0,18 mmol) ble satt 4N HC1 i dioksan (2,0 ml) og løsningen ble omrørt i 30 minutter. Konsentrasjon i vakuum ga HCl-saltet av P2[(4R)-(naftal-l-okso) prolin)]-Pl(lS,2R Vinyl Acca)-OEt som en gul olje som ble anvendt direkte i neste trinn uten ytterligere rensning.
Til en løsning av N-Boc-L-tert-leucin-OH eller BOC L-tBuGly (85 mg, 0,37 mmol) og HCl-saltet av P2[(4R)-(naftal-l-okso) prolin)]-Pl(lS,2R Vinyl Acca)-OEt (produkt oppnådd fra reaksjonen angitt ovenfor) (0,18 mmol) i 13 ml acetonitril ble satt DIPEA (160uL, 0,92 mmol) og HATU (154 mg, 0,41 mmol). Den resulterende løsning ble omrørt under nitrogen i 17 timer og deretter fortynnet med 100 ml etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, IN NaHCC>3, IN HC1, vann og saltvann. Løsningen ble deretter tørket med natriumsulfat og konsentrert i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen som en klar film (53 mg, 47%).
<!>H NMR (dl-CHCla, 500MHz) 8 1,02 (s, 9H), 1,22 (t, 3H, J=7,0 Hz), 1,39 (s, 9H), 1,47 (m, 1H), 1,88 (dd, 1H, J=8,0, 5,5 Hz), 2,07 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 2,80 (dt, J=13,8, 6,0 Hz, 1H), 3,96 (m, 1H), 4,14 (m, 2H), 4,34 (m, 2H), 4,77 (t, 1H, J= 7,2
Hz), 5,09-5,33 (m, 3H), 5,72 (m, 1H), 6,82 (d, 1H, J= 7,6 Hz), 7,34-7,50 (m, 4H), 7,77 (d, 1H, J= 8,0 Hz), 8,15 (d, 1H, J= 8,25 Hz);
LC-MS C (retensjonstid: 2,81; MS m/z 608 (M+H)<+>
Trinn 2:
Dette produktet ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i Eksempel 470, Trinn 5 (5 mg, 10%), bortsett fra anvendelse av produktet fra eksempel 471, Trinn 1 istedet.
<J>H NMR (drMeOH, 500MHz) 8 0,99 (s, 9H), 1,28 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,60 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 2,66 (m, 1H), 3,91 (m, 1H), 4,33 (m, 2H), 4,61 (bt, 1H), 4,97 (d, 1H, J=11,0 Hz), 5,19 (m 2H), 6,09 (m, 1H), 6,88 (d, 1H, J= 7,1 Hz), 7,35-7,46 (m, 4H), 7,78 (d, 1H, J= 8,2 Hz), 8,12 (d, 1H, J=8,3 Hz);
LC-MS C (retensjonstid: 2,60 ; MS m/z 580 (M+H)<+>
Trinn 3:
Til en løsning av BocN-P3(L-tBuGly)- P2[(Boc (4R)-(naftal-l-okso) prolin)]-P1(1S,2R Vinyl Acca)-COOH (38 mg, 0,066 mmol) (Eksempel 471, Trinn 2) i 2,2 ml tetrahydrofuran ble satt l,l'-karbonyl-diimidazol (13 mg, 0,079 mmol). Den resulterende blandingen ble tilbakeløpskokt i 30 minutter og deretter avkjølt til romtemperatur. På dette tidspunkt ble metansulfonamid (16 mg, 0,16 mmol) og DBU (20^L, 0,13 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 dager og deretter ble mer DBU (10^L) og metansulfonamid (9 mg) tilsatt. Etter 24 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med 50 ml etylacetat og vasket med 50 ml 0,25N HC1 og 50 ml saltvann. Løsningen ble tørket med natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble renset ved anvendelse av én 20X40cM preparativ TLC-plate fra Analtech (elueringsmiddel 3-2 etylacetat-heksaner), hvilket ga Forbindelse 471 (25 mg, 58%) som et hvitt filmaktig fast stoff.
<J>H NMR (oVMeOH, 500MHz) 8 1,03 (s, 9H), 1,34 (s, 9H), 1,80 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 3,09 (bs, 3H), 4,04 (m, 1H), 4,20-4,44 (m, 2H), 4,51 (apparent t, 1H), 5,08 (m, 1H), 5,25-5,31 (m, 2H), 5,77 (m, 1H), 6,93 (d, 1H, J=7,6 Hz), 7,36-7,45 (m, 4H), 7,77 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,15 m, 1H);
LC-MS C (retensjonstid: 2,57 ; MS m/z 657 (M+H)<+>
Seksjon L:
Eksempel 472: Biologiske undersøkelser
Rekombinant HCV NS3/ 4A protease- kompleks FRET peptid- forsøk
Formålet med dette in vitro forsøk var å måle hemning av HCV NS3 protease- komplekser, avledet fra BMS, H77C eller J416S stammer, som beskrevet nedenfor, med forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse. Dette forsøket gir en indikasjon på hvor effektive forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse vil være til å hemme HCV proteolytisk aktivitet.
Serum fra en HCV-infisert pasient ble anskaffet fra Dr. T. Wright, San Francisco Hospital. En konstruert full-lengde cDNA (komplement deoksyribonukleinsyre) templat av HCV-genomet (BMS-stamme) ble konstruert fra DNA-fragmenter oppnådd ved revers transkripsjon-PCR (RT-PCR) av serum RNA (ribonukleinsyre) og ved anvendelse av primere valgt på basis av homologi mellom andre genotype la stammer. Fra bestemmelsen av hele genom-sekvensen, ble genotype la fordelt til HCV-isolat i henhold til klassifiseringen til Simmonds et al.
(Se P Simmonds, KA Rose, S Graham, SW Chan, F McOmish, BC Dow, EA Follett, PL Yap og H Marsden, J. Clin. Microbiol, 31(6), 1493-1503 (1993)). Aminosyresekvensen av den ikke-strukturelle region, NS2-5B, ble vist å være >97% identisk med HCV genotype la (H77C) og 87% identisk med genotype lb (J4L6S). De infeksiøse kloner, H77C (la genotype) og J4L6S (lb genotype) ble anskaffet fra R. Purcell (NIH) og sekvensene er publisert i Genbank (AAB67036, se Yanagi,M, Purcell,R.H., Emerson,S.U. og Bukh,J. Proe. Nati. Acad. Sei. U.S.A. 94(16),8738-8743 (1997); AF054247, se Yanagi,M., St Claire,M., Shapiro,M., Emerson,S.U., Purcell,R.H. og Bukh, J, Virology 244 (1), 161-172. (1998)).
BMS-, H77C- og J4L6S-stammer ble anvendt for produksjon av rekombinante NS3/4A protease-komplekser. DNA som koder for det rekombinante HCV NS3/4A protease-kompleks (aminosyrer 1027 til 1711) for disse stammer ble manipulert som beskrevet av P. Gallinari et al. (se Gallinari P, Paolini C, Brennan D, Nardi C, Steinkuhler C, De Francesco R. Biochemistry. 38 (17):5620-32, (1999)). Kort angitt ble en tre-lysin solubiliserende hale tilsatt ved 3'-enden av den NS4A-kodende region. Cysteinet i Pl stilling av NS4A-NS4B spaltningssete (aminosyre 1711) ble endret til glycin for å unngå proteolytisk spaltning av lysin-merket. Videre ble en cystein til serin mutasjon innført ved PCR i aminosyre-posisjon 1454 for å forhindre autolytisk spaltning i NS3 helikase-domenet. Variant DNA-fragment ble klonet i den pET21b bakterielle ekspresjonsvektor (Novagen) og NS3/4A kompleks ble uttrykt i Escherichia. coli stamme BL21 (DE3) (Invitrogen) ved å følge protokollen beskrevet av P. Gallinari et al. (se Gallinari P, Brennan D, Nardi C, Brunetti M, Tomei L, Steinkuhler C, De Francesco R., J Virol. 72 (8):6758-69
(1998)) med modifikasjoner. Kort angitt ble NS3/4A-ekspresjon fremkalt med 0,5 mM isopropyl-P-D-l-tiogalaktopyranosid (IPTG) i 22 timer ved 20°C. En typisk fermentering (10L) ga omtrent 80 g våt celle-pasta. Cellene ble resuspendert i lyse-buffer (10 ml/g) bestående av 25mM N-(2-hydroksyetyl)piperazin-N'-(2-etansulfonsyre) (HEPES), pH 7,5, 20% glycerol, 500 mM natriumklorid (NaCl), 0,5% Triton-XlOO, 1 ug/ml lysozym, 5mM magnesiumklorid (MgCb), 1 ug/ml Dnasel, 5mM P-merkaptoetanol (PME), proteaseinhibitor - etylendiamin tetraeddiksyre (EDTA) fri (Roche), homogenisert og inkubert i 20 minutter ved 4°C. Homogenatet ble ultralydbehandlet og klaret ved ultrasentrifugering ved 235000 g i 1 time ved 4°C. Imidazol ble satt til supernatanten til en endelig konsentrasjon på 15 mM og pH regulert til 8,0. Den rå protein-ekstrakt ble lastet på en nikkel - nitrilotrieddiksyre (Ni-NTA) kolonne pre-ekvilibrert med buffer B (25mM HEPES, pH8,0,20% glycerol, 500 mM NaCl, 0,5% Triton-X100,15mM imidazol, 5mM PME). Prøven ble påfylt med en strømningshastighet på 1 ml/min. Kolonnen ble vasket med 15 kolonnevolumer av buffer C (samme som buffer B bortsett fra med 0,2% Triton-X100). Proteinet ble eluert med 5 kolonnevolumer av buffer D (samme som buffer C bortsett fra med 200 mM imidazol).
NS3/4A protease kompleks-inneholdende fraksjoner ble samlet og fylt på en avsaltingskolonne Superdex-S200 pre-ekvilibrert med buffer D (25 mM HEPES, pH7,5,20% glycerol, 300 mM NaCl, 0,2% Triton-X100,10 mM pME). Prøven ble påfylt med en strømningshastighet på 1 ml/min. NS3/4A protease-kompleks-inneholdende fraksjoner ble samlet og konsentrert til omtrent 0,5 mg/ml. Renheten av NS3/4A protease-komplekser, avledet fra BMS-, H77C- og J4L6S-stammer, ble bedømt å være større enn 90% ved SDS-PAGE og massespektrometri-analyser.
Enzymet ble lagret ved -80°C, tint på is og fortynnet før anvendelse i forsøksbuffer. Substratet anvendt for NS3/4A protease-forsøk var RET Sl
(Resonance Energy Transfer Depsipeptide Substrate; AnaSpec, Inc. kat. # 22991)
(FRET peptid), beskrevet av Taliani et al. i Anal. Biochem. 240(2):60-67 (1996). Sekvensen av dette peptid er løst basert på NS4A/NS4B naturlig spaltningssete bortsett fra at det er en ester-binding istedenfor en amidbinding ved spaltningssetet. Peptidsubstratet ble inkubert med én av de tre rekombinante NS3/4A-komplekser, i fravær eller nærvær av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og dannelse av fluorescerende reaksjonsprodukt ble fulgt i sanntid ved anvendelse av en Cytofluor Series 4000.
Reagensene var som følger: HEPES og Glycerol (Ultraren) ble oppnådd fra GIBCO-BRL. Dimetylsulfoksyd (DMSO) ble anskaffet fra Sigma, p-merkaptoetanol ble anskaffet fra Bio Rad.
Forsøksbuffer: 50mM HEPES, pH7,5; 0,15M NaCl; 0,1% Triton; 15% Glycerol; lOmM PME. Substrat: 2^M endelig konsentrasjon (fra en 2mM lagerløsning i DMSO lagret ved -20°C). HCV NS3/4A type la (lb), 2-3 nM endelig konsentrasjon (fra en 5^M lagerløsning i 25mM HEPES, pH 7,5,20% glycerol, 300 mM NaCl, 0,2% Triton-XlOO, 10 mM pME).
Forsøket ble utført i en 96-brønn polystyren sort plate fra Falcon. Hver brønn inneholdt 25^1 NS3/4A-protease-kompleks i forsøksbuffer, 50^1 av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse i 10% DMSO/forsøksbuffer og 25^1 substrat i forsøksbuffer. En kontroll (ingen forbindelse) ble også fremstilt på samme forsøks-plate. Enzymkomplekset ble blandet med forbindelse- eller kontroll-løsning i 1 min før initiering av den enzymatiske reaksjon ved tilsetning av substrat. Forsøksplaten ble lest umiddelbart ved anvendelse av Cytofluor Series 4000 (Perspective Biosystems). Instrument ble satt til å lese en emisjon på 340 nm og eksitasjon på 490 nm ved 25 °C. Reaksjoner ble generelt fulgt i omtrent 15 minutter.
Prosent hemning ble beregnet med den følgende ligning:
100 - [(5Finh/5Fcon)xl00]
hvor 5F er forandringen i fluorescens over det lineære område av kurven. En ikke-lineær kurve-tilpasning ble anvendt for hemnings-konsentrasjonsdata og 50% effektiv konsentrasjon (IC50) ble beregnet ved anvendelse av Excel Xl-fit programvare ved anvendelse av ligningen, y=A+((B-A)/(l+((C/x)<A>D))).
Alle forbindelsene testet ble funnet å ha IC50 på 10 foM eller mindre. Videre ble forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse, som ble testet mot mer enn én type NS3/4A-kompleks, funnet å ha lignende hemmende egenskaper selv om forbindelsene jevnt over demonstrerte større styrke mot lb stammer sammenlignet med la stammer.
Spesifisitetsforsøk
Spesifisitetsforsøk ble utført for å demonstrere selektiviteten av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse til å hemme HCV NS3/4A-protease sammenlignet med andre serin- eller cysteinproteaser.
Spesifisiteten av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble bestemt mot en rekke serinproteaser: human leukocytt-elastase (HLE), svin pankreatisk elastase (PPE) og human pankreatisk chymotrypsin og én cysteinprotease: human lever cathepsin B. I alle tilfeller ble en 96-brønn plate format-protokoll ved anvendelse av kolorimetrisk p-nitroanilin- (pNA) substrat spesifikt for hvert enzym, anvendt som beskrevet tidligere (Patent WO 00/09543) med noen modifikasjoner av serinprotease-forsøket. Alle enzymer ble anskaffet fra Sigma mens substratene var fra Bachem.
Hvert forsøk omfattet en 2 timers enzym-inhibitor pre-inkubering ved romtemperatur fulgt av tilsetning av substrat og hydrolyse til -30% omdannelse som målt på en Spectramax Pro mikroplateleser. Forbindelse-konsentrasjoner varierte fra 100 til 0,4 avhengig av deres styrke.
De endelige betingelser for hvert forsøk var som følger:
50 mM Tris(hydroksymetyl)aminometan-hydroklorid (Tris-HCl) pH 8, 0,5 M natriumsulfat (Na2S04), 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, 0,01% Tween-20 med: 133^M succ-AAA-pNA og 20nM HNE eller 8 nM PPE; 133^M succ-AAV-pNA og 15nM HLE; 100^M succ-AAPF-pNA og 250pM Chymotrypsin.
100 mM NaHP04(natriumhydrogenfosfat) pH 6, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, 1 mM TCEP (Tris(2-karboksyetyl)fosfin-hydroklorid), 0,01% Tween-20, 30^M Z-FR-pNA og 5nM Cathepsin B (enzym-lager aktivert i buffer inneholdende 20 mM TCEP før anvendelse).
Prosentdelen av hemning ble beregnet ved anvendelse av formelen:
En ikke-lineær kurvetilpasning ble anvendt for hemnings-konsentrasjonsdata og 50% effektiv konsentrasjon (IC50) ble beregnet ved anvendelse av Excel Xl-fit programvare.
HCV- replikon celle- basert forsøk
Et HCV-replikon helcelle-system ble etablert som beskrevet av Lohmann V, Korner F, Koch J, Herian U, Theilmann L, Bartenschlager R., Science 285(5424): 110-3 (1999). Dette systemet lot oss bedømme virkningene av våre HCV-protease-forbindelser på HCV RNA-replikasjon. Kort angitt ble, ved anvendelse av HCV stamme IB sekvens beskrevet i Lohmann-artikkelen (aksesjonsnummer :AJ238799), HCV cDNA dannet som koder for 5' indre ribosom entry sete (IRES), neomycin-resistens-gen, EMCV (encefalomyokarditt-viurs)-IRES og HCV ikke-strukturelle proteiner, NS3-NS5B og 3' ikke-translatert region (NTR). In vitro transkripter av cDNA ble transfektert inn i den humane hepatoma-cellelinje, Huh7. Seleksjon for celler som konstitutivt uttrykker HCV-replikon ble oppnådd i nærvær av den selekterbare markør neomycin (G418). Resulterende cellelinjer blekarakterisertfor positiv og negativ tråd RNA-produksjon og protein-produksjon over tid.
Huh7-celler som konstitutivt uttrykker HCV-replikon ble dyrket i Dulbecco's Modifisert Eagle Medium (DMEM) inneholdende 10% føtalt kalveserum (FCS) og 1 mg/ml G418 (Gibco-BRL). Celler ble podet natten før (1,5 x 10<4>celler/brønn) i 96-brønn vev-kultur sterile plater. Forbindelse og kontroller uten forbindelse ble fremstilt i DMEM inneholdende 4% FCS, 1:100 penicillin / streptomysin, 1:100 L-glutamin og 5% DMSO i fortynningsplaten (0,5% DMSO endelig konsentrasjon i forsøket). Forbindelse / DMSO-blandinger ble satt til cellene og inkubert i 4 dager ved 37°C. Etter 4 dager ble plater skyllet grundig med fosfat-bufret saltvann (PBS)
(3 ganger 150^1). Cellene ble lyset med 25^1 av et lyse forsøksreagens inneholdende FRET-peptid (RET Sl, som beskrevet for in vitro enzym-forsøket). Lyse-forsøksreagens ble fremstilt fra 5X celle Luciferase cellekultur lyse-reagens (Promega #E153A) fortynnet til IX med destillert vann, tilsatt NaCl til endelig 150 mM, FRET-peptid fortynnet til endelig 10^M fra et 2 mM lager i 100% DMSO. Platen ble deretter plassert i Cytofluor 4000 instrumentet som var satt til 340 nm eksitasjon / 490 emisjon, automatisk modus i 21 cykler og platen lest i kinetisk modus. ECso-bestemmelser ble utført som beskrevet for ICjo-bestemmelsene.
Som et sekundært forsøk ble ECso-bestemmelser fra replikon FRET forsøk bekreftet i et kvantitativt RNA-forsøk. Celler ble lyset ved anvendelse av Rneasy sett (Qiagen). Renset total RNA ble normalisert ved anvendelse av RiboGreen (Jones LJ, Yue ST, Cheung CY, Singer VL, Anal. Chem., 265(2):368-74 (1998)) og relativ kvantifisering av HCV RNA-ekspresjon bedømt ved anvendelse av Taqman prosedyre (Kolykhalov AA, Mihalik K, Feinston SM, Ris CM, Journal of Virology 74, 2046-2051 (2000)) og Platina Quantitative RT-PCR Thermoscript One-Step sett (Invitrogen kat. # 11731-015). Kort angitt ble RNA fremstilt til et volum på 5^1 (< 1 ng) satt til 20^1 Ready-Mix inneholdende de følgende: 1,25X Thermoscript reaksjonsblanding (inneholdende magnesiumsulfat og 2-deoksynukleosid 5'-trifosfater (dNTP)), 3 mM dNTP, 200 nM forover primer (sekvens: 5'- gggagagccatagtggtctgc-3'), 600 nM revers primer (5'-cccaaatctccaggcattga-3'), 100 nM probe (5'-6-FAM-cggaattgccaggacgaccgg-BHQ-l-3')(FAM: Fluorescein-aminoheksyl-amiditt; BHQ: Black Hole Quencher), 1 Rox referanse-farge (Invitrogen kat. # 12223-012) og Thermoscript Plus Platinum Taq polymerase blanding. Alle primere ble utformet med ABI Prism 7700 programvare og anskaffet fra Biosearch Technologies, Novato, CA. Prøver inneholdende kjente konsentrasjoner av HCV RNA-transkript ble kjørt som standarder. Ved anvendelse av den følgende cykliseringsprotokoll (50°C, 30 min; 95°C, 5 min; 40 cykler med 95°C, 15 sek, 60°C, 1 min), ble HCV RNA-ekspresjon kvantifisert som beskrevet i the Perkin Eimer manual ved anvendelse av ABI Prism 7700 Sequence Detector.
Biologiske eksempler
Representative forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble bedømt i HCV replikon celleforsøk og/eller i mange av de beskrevne spesifisitetsforsøk. For eksempel ble Forbindelse 34 funnet å ha en IC50på 23 nanomolar (nM) mot NS3/4A BMS-stamme i enzymforsøket. Lignende potens-verdier ble oppnådd med de publiserte H77C- (IC50på 3 nM) og J4L6S- (IC50på 2,9 nM) stammer. ECso-verdi i replikon-forsøket var 166 nM.
I spesifisitetsforsøket ble samme forbindelse funnet å ha den følgende aktivitet: HLE > 100^M; PPE > 200^M; Chymotrypsin > 200^M; Cathepsin B > 200^M. Disse resultater indikerer at denne familien av forbindelser er meget spesifikk for NS3 protease og mange av disse medlemmer hemmer HCV-replikon-replikasjon.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse ble testet og funnet å ha aktiviteter i områdene som følger: IC50 Aktivitetsområder (NS3/4A BMS stamme): A er 10 -100 mikromolar (uM); B er 1 - 10 uM; C er 0,1 - 1 uM; D er <0,luM
EC50 Aktivitetsområde (for forbindelser testet): A er 10 - 100 uM; B er 1 - 10 uM; C er 0,1 - 1 uM;Der<0,luM
Bemerk at ved anvendelse av Patent eksempelnummer og Patent forbindelsenummer vist i tabellen kan strukturene til forbindelsene finnes her.
I henhold til foreliggende oppfinnelse har forbindelsene fortrinnsvis en biologisk aktivitet (EC50) på 10 uM eller mindre, mer foretrukket 1 uM eller mindre og mest foretrukket 100 nM eller mindre.
Seksjon M:
Tabell 2
De følgende forbindelser kan fremstilles ved anvendelse av metodene beskrevet her og spesifikt i seksjonene A til K av eksempel-seksjonen og mer spesifikt i seksjoner B, E, F og G. Videre vil det være klar at hver av gruppene B, R-3, R-2og Ri vist nedenfor kan erstattes av hvilke som helst av gruppene eksemplifisert i seksjoner A til K og andre steder her eller angitt i Formel I. For eksempel er R3-gruppen i Tabell 2 vist som en t-butylgruppe, men fagfolk på området vil forstå at for hver av innføringene gitt nedenfor, kan denne gruppen være erstattet med en isopropylgruppe eller C1-6alkyl substituert med alkoksy. Eller B-gruppen vist nedenfor kan være erstattet med en tert-butyl-uirnstoff-gruppe for hver av innføringene angitt nedenfor.

Claims (48)

1. Forbindelse som har formelen
hvor: (a) Ri er Ci-g alkyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl; (b) m er 1 eller 2; (c) n er 1 eller 2; (d) R2er H, Ci-6alkyl, C2-6alkenyl eller C3.7cykloalkyl, hver eventuelt substituert med halogen; (e) R3er Ci-g alkyl eventuelt substituert med halogen, cyano, amino, Ci-6dialkylamino, C6-10aryl, C7.14alkylaryl, Ci_6alkoksy, karboksy, hydroksy, aryloksy, C7.14alkylaryloksy, C2-6alkylester, Cg_isalkylarylester; C3.12alkenyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl, hvor cykloalkyl eller alkylcykloalkyl eventuelt er substituert med hydroksy, d-6 alkyl, C2-6alkenyl eller Ci-6alkoksy; eller R3sammen med karbonatomet til hvilket den er tilknyttet danner en C3.7cykloalkylgruppe eventuelt substituert med C2-6alkenyl; (f) Y er H, fenyl substituert med nitro, pyridyl substituert med nitro eller Ci-6alkyl eventuelt substituert med cyano, OH eller C3.7cykloalkyl; forutsatt at hvis R4eller R5er H da er Y H; (g) B er H, Cwalkyl, R4-(C=0)-, R4OOX))-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- eller R4-N(R5)-S02-; (h) R4er (i) Cmoalkyl eventuelt substituert med fenyl, karboksyl, Ci_6alkanoyl, 1-3 halogen, hydroksy, -OC(0)C 1.6 alkyl, Ci.6alkoksy, amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl, amido eller (lavere alkyl) amido; (ii) C3.7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4-10alkylcykloalkyl, hver eventuelt substituert med hydroksy, karboksyl, (Ci.6alkoksy)karbonyl, amino eventuelt substituert med Ci.6alkyl, amido eller (lavere alkyl)amido; (iii) C6-10aryl eller C7.16arylalkyl, hver eventuelt substituert med Ci_6alkyl, halogen, nitro, hydroksy, amido, (lavere alkyl) amido eller amino eventuelt substituert med Ci_6alkyl; (iv) Het; (v) bicyklo(l.l.l)pentan; eller (vi) -C(0)OCi.6alkyl, C2-6alkenyl eller C2-6alkynyl; (i) R5er H; Ci-6alkyl eventuelt substituert med 1-3 halogenatomer; eller Ci-6alkoksy forutsatt at R4er Cmo alkyl; 0) X er O, S, SO, S02, OCH2, CH20 eller NH; (k) R' er Het; eller C6-10aryl eller C7-14alkylaryl, eventuelt substituert med Ra; og (1) Ra er Ci^alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci_6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-C 1.6 alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci_6alkylamino, di-(Ci-6) alkylamino, di-(Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci-6alkylsulfon, Ci-6alkylsulfonamid, di-(Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe; hvor betegnelsen "heterocyklisk gruppe" eller "Het" betyr 7-12-leddede bicykliske, heterocykliske grupper og 5-7-leddede monocykliske heterocykliske grupper, hvor den bicykliske heterocykliske gruppen kan inneholde en til tre substituenter på hvilken som helst av ringkarbonatomene, valgt blant Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci^alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci-6alkylamino, di (Ci-6) alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6) karboksyester, Ci-6alkylsulfon, Ci.6alkylsulfonamid, Ci-6alkylsulfoksyd, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe hvor når to substituenter er bundet til nabostilte karbonatomer i den bicykliske heterocykliske gruppen, kan de sammen danne en ring inneholdende opptil to heteroatomer valgt fra oksygen og nitrogen; hvor den monocykliske heterocykliske gruppen kan inneholde en til tre substituenter på hvilket som helst av ringatomene valgt blant Ci-6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci-6alkoksy, C3.7cykloalkoksy, halogen-Ci-6alkyl, CF3, mono- eller di-halogen-Ci-6alkoksy, cyano, halogen, tioalkyl, hydroksy, alkanoyl, NO2, SH, amino, Ci-6alkylamino, di (Ci-6> alkylamino, di (Ci-6) alkylamid, karboksyl, (Ci-6> karboksyester, Q.6 alkylsulfon, Ci-6 alkylsulfoksyd, alkylsulfonamid, di (Ci-6) alkyl(alkoksy)amin, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe; med det forbehold at X- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1 hvor Ri er C3.7cykloalkyl.
3. Forbindelse ifølge krav 1 hvor R2er Ci.6alkyl, C2-6alkenyl eller C3.7cykloalkyl.
4. Forbindelse ifølge krav 3 hvor R2er C2-6alkenyl.
5. Forbindelse ifølge krav 1 hvor R3er Ci-g alkyl eventuelt substituert med Cearyl, Ci-6alkoksy, karboksy, hydroksy, aryloksy, C7.14alkylaryloksy, C2-6alkylester, Cg-15alkylarylester; C3.12alkenyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl.
6. Forbindelse ifølge krav 5 hvor R3er Ci_g alkyl eventuelt substituert med Ci.6alkoksy; eller C3.7cykloalkyl.
7. Forbindelse ifølge krav 1 hvor Y er H.
8. Forbindelse ifølge krav 1 hvor B er H, Ci.6alkyl, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- eller R4-N(R5)-S02-.
9. Forbindelse ifølge krav 8 hvor B er R4-(C=0)-, R40(C=0)- eller R4-N(R5)-C(=0)-.
10. Forbindelse ifølge krav 9 hvor B er R40(C=0)- og R4er Ci-6alkyl.
11. Forbindelse ifølge krav 1 hvor R4er (i) Cmoalkyl eventuelt substituert med fenyl, karboksyl, Ci-6alkanoyl, 1-3 halogen, hydroksy, Ci-6alkoksy; (ii) C3.7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4-10alkylcykloalkyl; eller (iii) C6-10aryl eller C7.16arylalkyl, hver eventuelt substituert med Ci_6alkyl eller halogen.
12. Forbindelse ifølge krav 11 hvor R4er (i) Ci_ioalkyl eventuelt substituert med 1-3 halogen eller Ci_6alkoksy; eller (ii) C3.7cykloalkyl eller C4_ioalkylcykloalkyl.
13. Forbindelse ifølge krav 1 hvor R5er H eller Ci-6alkyl eventuelt substituert med 1-3 halogenatomer.
14. Forbindelse ifølge krav 13 hvor R5er H.
15. Forbindelse ifølge krav 1 hvor X er O eller NH.
16. Forbindelse ifølge krav 1 hvor R' er Het; eller C6-10aryl eventuelt substituert med Ra.
17. Forbindelse ifølge krav 16 hvor R' er Het.
18. Forbindelse ifølge krav 1 hvor den heterocykliske gruppen inneholder 1 eller 2 nitrogenatomer og eventuelt et svovelatom eller et oksygenatom i ringen.
19. Forbindelse ifølge krav 18 hvor den heterocykliske gruppen er substituert med minst én av Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
20. Forbindelse ifølge krav 1 hvor Ra er Ci_6alkyl, C3.7cykloalkyl, Ci_6alkoksy, halogen-Ci-6alkyl, halogen, amino, C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
21. Forbindelse ifølge krav 1 som har formelen
hvor: (a) Ri er C3.7cykloalkyl; (b) R2er Ci-6alkyl, C2-6alkenyl eller C3.7cykloalkyl; (c) R3er Ci-g alkyl eventuelt substituert med Cearyl, Ci.6alkoksy, karboksy, hydroksy, aryloksy, C7.14alkylaryloksy, C2-6alkylester, Cg. is alkylarylester; C3.12alkenyl, C3.7cykloalkyl eller C4-10alkylcykloalkyl; (d) Y er H; (e) B er H, Cwalkyl, R4-(C=0)-, R4CKOO)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- eller R4-N(R5)-S02-; (f) R4er (i) Ci-io alkyl eventuelt substituert med fenyl, karboksyl, Ci_6alkanoyl, 1-3 halogen, hydroksy, Ci-6alkoksy; (ii) C3.7cykloalkyl, C3.7cykloalkoksy eller C4.10alkylcykloalkyl; eller (iii) C6-10aryl eller C7.16arylalkyl, hver eventuelt substituert med Ci-6alkyl eller halogen; (g) R5er H eller Ci-6alkyl eventuelt substituert med 1 -3 halogenatomer; (h) XerOellerNH; (i) R' er Het; eller C6-10aryl eventuelt substituert med Ra; og (j) Ra er Ci^alkyl, C3.7cykloalkyl, Q-6 alkoksy, halogen-Ci-6alkyl, halogen, amino, C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe; med det forbehold at Xa- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav.
22. Forbindelse ifølge krav 21 hvor R' er en bicyklisk heterocyklisk gruppe.
23. Forbindelse ifølge krav 22 hvor den heterocykliske gruppen inneholder 1 eller 2 nitrogenatomer og eventuelt et svovelatom eller et oksygenatom i ringen.
24. Forbindelse ifølge krav 22 hvor den heterocykliske gruppen er substituert med minst én av Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6aryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
25. Forbindelse ifølge krav 21 hvor R' er en bicyklisk heterocyklisk gruppe inneholdende 1 nitrogenatom og substituert med metoksy og minst én av en C6aryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
26. Forbindelse ifølge krav 21 hvor R' er en monocyklisk heterocyklisk gruppe.
27. Forbindelse ifølge krav 26 hvor den heterocykliske gruppen inneholder 1 eller 2 nitrogenatomer og eventuelt et svovelatom eller et oksygenatom i ringen.
28. Forbindelse ifølge krav 26 hvor den heterocykliske gruppen er substituert med i det minste én av Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6-10aryl, C7.14alkylaryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
29. Forbindelse ifølge krav 21 hvor R' er en monocyklisk heterocyklisk gruppe inneholdende 1 eller 2 nitrogenatomer og substituert med metoksy og minst én av en C6aryl og en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
30. Forbindelse ifølge krav 1 som har formelen
hvor: (a) Ri er C3.7cykloalkyl; (b) R2er C2-6alkenyl; (c) R3er Ci-g alkyl; (d) Y er H; (e) B er R40(C=0)- eller R4-N(R5)-C(=0)-; (f) R4er Ci.ioalkyl; (<g>) RserH; (h) R' er en bicyklisk heterocyklisk gruppe eventuelt substituert med Ra; og (i) Ra er Ci-6alkyl, Ci-6alkoksy, halogen, C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe; med det forbehold at O- R' ikke er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat eller derav.
31. Forbindelse ifølge krav 30 hvor Ri er cyklopropyl eller cyklobutyl.
32. Forbindelse ifølge krav 30 hvor R2er vinyl.
33. Forbindelse ifølge krav 30 hvor R3er t-butyl.
34. Forbindelse ifølge krav 30 hvor R4er t-butyl.
35. Forbindelse ifølge krav 30 hvor R' er kinolin eller isokinolin eventuelt substituert med Ra.
36. Forbindelse ifølge krav 30 hvor Ri er cyklopropyl, R2er vinyl, R3er t-butyl, R4er t-butyl og R' er isokinolin substituert med Ra.
37. Forbindelse ifølge krav 36 hvor Ra er Ci.6alkoksy.
38. Forbindelse ifølge krav 37 hvor Ra videre omfatter minst én av C6aryl eller en 5-7-leddet monocyklisk heterocyklisk gruppe.
39. Forbindelse ifølge krav 1 valgt blant
40. Forbindelse ifølge krav 1 som er
41. Forbindelse ifølge krav 1 valgt blant
42. Anvendelse av forbindelsen ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav til fremstilling av et terapeutisk preparat for behandling av en HCV-infeksjon eller hemme HCV NS3 protease hos en pasient.
43. Preparat omfattende en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller solvat derav og en farmasøytisk akseptabel bærer.
44. Preparat ifølge krav 43 som videre omfatter et ytterligere immunomodulerende middel.
45. Preparat ifølge krav 44 hvor det ytterligere immunomodulerende middel er valgt fra gruppen bestående av a-, P- og 5-interferoner.
46. Preparat ifølge krav 43 som videre omfatter et antiviralt middel.
47. Preparat ifølge krav 46 hvor det antivirale middel er valgt fra gruppen bestående av ribavirin og amantadin.
48. Anvendelse av et preparat ifølge krav 43 for fremstilling av et medikament for behandling av en hepatitt C viral infeksjon hos en pasient.
NO20044807A 2002-05-20 2004-11-04 Hepatitt C virus inhibitorer, preparat omfattende slike forbindelser samt anvendelse av slike forbindelser for fremstilling av preparat for behandling av sykdom NO332427B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US38205502P 2002-05-20 2002-05-20
PCT/US2003/015755 WO2003099274A1 (en) 2002-05-20 2003-05-20 Hepatitis c virus inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20044807L NO20044807L (no) 2004-12-16
NO332427B1 true NO332427B1 (no) 2012-09-17

Family

ID=29584353

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20044807A NO332427B1 (no) 2002-05-20 2004-11-04 Hepatitt C virus inhibitorer, preparat omfattende slike forbindelser samt anvendelse av slike forbindelser for fremstilling av preparat for behandling av sykdom

Country Status (34)

Country Link
US (9) US6995174B2 (no)
EP (2) EP2340830A3 (no)
JP (1) JP4312710B2 (no)
KR (2) KR20100093140A (no)
CN (3) CN101024671B (no)
AR (3) AR040080A1 (no)
AT (1) ATE506104T1 (no)
AU (1) AU2003241510B2 (no)
BR (1) BR0311132A (no)
CA (1) CA2486308C (no)
CO (1) CO5640083A2 (no)
CY (1) CY1112108T1 (no)
DE (1) DE60336807D1 (no)
DK (1) DK1505963T3 (no)
ES (1) ES2363131T3 (no)
GE (1) GEP20063938B (no)
HK (1) HK1070287A1 (no)
HR (1) HRP20041085B1 (no)
IL (1) IL164987A (no)
IS (1) IS7530A (no)
MX (1) MXPA04011440A (no)
MY (1) MY140680A (no)
NO (1) NO332427B1 (no)
NZ (1) NZ536539A (no)
PE (1) PE20040517A1 (no)
PL (1) PL226561B1 (no)
PT (1) PT1505963E (no)
RS (1) RS52407B (no)
RU (3) RU2298001C2 (no)
SI (1) SI1505963T1 (no)
TW (1) TWI306452B (no)
UA (1) UA80973C2 (no)
WO (1) WO2003099274A1 (no)
ZA (1) ZA200409162B (no)

Families Citing this family (279)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
US20060199773A1 (en) * 2002-05-20 2006-09-07 Sausker Justin B Crystalline forms of (1R,2S)-N-[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-[(6-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy]-L-prolyl-1-amino-N-(cyclopropylsulfonyl)-2-ethenyl-cyclopropanecarboxamide, monopotassium salt
ATE486889T1 (de) * 2003-03-05 2010-11-15 Boehringer Ingelheim Int Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
JP4550824B2 (ja) * 2003-03-05 2010-09-22 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎抑制化合物
US7173004B2 (en) * 2003-04-16 2007-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis C virus
US7176208B2 (en) 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
KR101115294B1 (ko) * 2003-05-21 2012-04-12 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 Ｃ형 간염 억제제 화합물
US7273851B2 (en) 2003-06-05 2007-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tri-peptide hepatitis C serine protease inhibitors
US7491794B2 (en) * 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7309708B2 (en) * 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
ES2358333T3 (es) 2004-01-21 2011-05-09 Boehringer Ingelheim International Gmbh Péptidos macrocíclicos con acción contra el virus de la hepatitis c.
CA2552319C (en) 2004-01-30 2012-08-21 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors
SE0400199D0 (sv) * 2004-01-30 2004-01-30 Medivir Ab HCV Protease inhbitors
EP2626354A1 (en) 2004-02-20 2013-08-14 Boehringer Ingelheim International GmbH Viral polymerase inhibitors
BRPI0508867A (pt) 2004-03-15 2007-09-04 Boehringer Ingelheim Int processo para a preparação de compostos macrocìclicos
AU2005228894B9 (en) * 2004-03-30 2011-10-13 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
CA2568008C (en) 2004-05-25 2014-01-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing acyclic hcv protease inhibitors
US7705146B2 (en) 2004-06-28 2010-04-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor peptide analogs
WO2006010127A2 (en) * 2004-07-09 2006-01-26 Medisyn Technologies, Inc. Therapeutic compound and treatments
ATE516293T1 (de) * 2004-07-16 2011-07-15 Gilead Sciences Inc Antivirale verbindungen
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
JP4914355B2 (ja) * 2004-07-20 2012-04-11 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎インヒビターペプチド類似体
MX2007002371A (es) * 2004-08-27 2007-04-23 Schering Corp Compuestos de acilsulfonamida como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
CA2578441C (en) 2004-08-28 2013-01-08 Astrazeneca Ab Pyrimidine sulphonamide derivatives as chemokine receptor modulators
WO2006045096A2 (en) 2004-10-20 2006-04-27 Resverlogix Corp. Flavanoids and isoflavanoids for the prevention and treatment of cardiovascular diseases
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7297700B2 (en) 2005-03-24 2007-11-20 Renovis, Inc. Bicycloheteroaryl compounds as P2X7 modulators and uses thereof
EP1879607B1 (en) 2005-05-02 2014-11-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) * 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI389908B (zh) * 2005-07-14 2013-03-21 Gilead Sciences Inc 抗病毒化合物類
TWI387603B (zh) 2005-07-20 2013-03-01 Merck Sharp & Dohme Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑
WO2007009227A1 (en) * 2005-07-20 2007-01-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
EP2305695A3 (en) 2005-07-25 2011-07-27 Intermune, Inc. Macrocyclic inhibitors of Hepatitis C virus replication
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
NZ566180A (en) 2005-07-29 2011-04-29 Resverlogix Corp Pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of complex diseases and their delivery by insertable medical devices
AU2006274861B2 (en) 2005-07-29 2012-11-08 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
AU2006274862B2 (en) 2005-07-29 2012-03-22 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
JP4705984B2 (ja) 2005-08-01 2011-06-22 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤としての大環状ペプチド
WO2007019674A1 (en) 2005-08-12 2007-02-22 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
CN101415705B (zh) 2005-10-11 2011-10-26 因特蒙公司 抑制丙型肝炎病毒复制的化合物和方法
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) * 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
TWI464148B (zh) 2006-03-16 2014-12-11 Evotec Us Inc 作為ｐ２ｘ7調節劑之雙環雜芳基化合物與其用途
KR101059593B1 (ko) * 2006-04-11 2011-08-25 노파르티스 아게 Ｈｃｖ/ｈｉｖ 억제제 및 이들의 용도
GB0609492D0 (en) 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
US20080187516A1 (en) * 2006-06-06 2008-08-07 Ying Sun Acyclic oximyl hepatitis c protease inhibitors
US7728148B2 (en) * 2006-06-06 2010-06-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
GB0612423D0 (en) 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
PE20080992A1 (es) * 2006-06-26 2008-08-06 Enanta Pharm Inc Quinoxalinil macrociclicos inhibidores de serina proteasa del virus de la hepatitis c
RU2008152171A (ru) * 2006-07-05 2010-08-10 Интермьюн, Инк. (Us) Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с
WO2008008776A2 (en) 2006-07-11 2008-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
EP2374812B1 (en) 2006-07-13 2015-04-15 Achillion Pharmaceuticals, Inc. 4-amino-4-oxobutanoyl Peptides as Inhibitors of Viral Replication
US20090035267A1 (en) * 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
US7635683B2 (en) * 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
US20090098085A1 (en) * 2006-08-11 2009-04-16 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US20080038225A1 (en) * 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
MX2009000882A (es) 2006-08-17 2009-02-04 Boehringer Ingelheim Int Inhibidores de la polimerasa virica.
AU2007309488B2 (en) 2006-10-24 2012-10-11 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US8138164B2 (en) 2006-10-24 2012-03-20 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
WO2008051477A2 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
CN101568346B (zh) 2006-10-27 2015-11-25 默沙东公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
KR101615500B1 (ko) * 2006-10-27 2016-04-27 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Ｈｃｖ ｎｓ3 프로테아제 억제제
US20080107625A1 (en) * 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US20080107623A1 (en) * 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
TW200827364A (en) * 2006-11-02 2008-07-01 Taigen Biotechnology Co Ltd HCV protease inhibitors
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008070358A2 (en) * 2006-11-16 2008-06-12 Phenomix Corporation N-cyclopropyl-hydroxyproline-based tripeptidic hepatitis c serine protease inhibitors containing an isoindole, pyrrolopyridine, pyrrolopyrimidine or pyrrolopyrazine heterocycle in the side chain
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) * 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9828597B2 (en) 2006-11-22 2017-11-28 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Biofunctional materials
GB0625345D0 (en) 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
CA2672737A1 (en) * 2006-12-20 2008-11-06 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
AU2007335962B2 (en) 2006-12-20 2012-09-06 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa Antiviral indoles
GB0625349D0 (en) 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
US20080161254A1 (en) * 2007-01-03 2008-07-03 Virobay, Inc. Hcv inhibitors
PL2118074T3 (pl) 2007-02-01 2014-06-30 Resverlogix Corp Związki chemiczne do celów profilaktyki i leczenia chorób układu sercowo-naczyniowego
US20080207528A1 (en) * 2007-02-01 2008-08-28 Syaulan Yang Hcv protease inhibitors
AU2008212758B2 (en) * 2007-02-08 2014-01-30 Medivir Ab Pyrimidine substituted macrocyclic HCV inhibitors
US8435984B2 (en) * 2007-02-26 2013-05-07 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Tertiary amine substituted peptides useful as inhibitors of HCV replication
US20080267917A1 (en) * 2007-04-26 2008-10-30 Deqiang Niu N-functionalized amides as hepatitis c serine protease inhibitors
US8377872B2 (en) 2007-04-26 2013-02-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Cyclic P3 tripeptide hepatitis C serine protease inhibitors
US20080317712A1 (en) * 2007-04-26 2008-12-25 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
US20080292587A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-27 Ying Sun Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US7910587B2 (en) * 2007-04-26 2011-03-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl dipeptide hepatitis C virus inhibitors
US20090155209A1 (en) * 2007-05-03 2009-06-18 Blatt Lawrence M Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
EP2185524A1 (en) * 2007-05-10 2010-05-19 Intermune, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
US20090005387A1 (en) * 2007-06-26 2009-01-01 Deqiang Niu Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c virus serine protease inhibitors
WO2009005690A2 (en) * 2007-06-29 2009-01-08 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
CA2691442C (en) 2007-06-29 2014-01-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
CN101801925A (zh) 2007-06-29 2010-08-11 吉里德科学公司 抗病毒组合物
WO2009010785A1 (en) 2007-07-17 2009-01-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa Macrocyclic indole derivatives for the treatment of hepatitis c infections
CA2699891C (en) 2007-07-19 2013-10-22 Nigel Liverton Macrocyclic compounds as antiviral agents
EP2188274A4 (en) 2007-08-03 2011-05-25 Boehringer Ingelheim Int VIRAL POLYMERASE HEMMER
EP2190858A4 (en) * 2007-09-24 2013-02-13 Achillion Pharmaceuticals Inc PEPTIDES CONTAINING UREA AS INHIBITORS OF VIRAL REPLICATION
US8419332B2 (en) * 2007-10-19 2013-04-16 Atlas Bolt & Screw Company Llc Non-dimpling fastener
US20090111757A1 (en) * 2007-10-25 2009-04-30 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US8383583B2 (en) 2007-10-26 2013-02-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic, pyridazinone-containing hepatitis C serine protease inhibitors
CL2008003384A1 (es) 2007-11-14 2009-12-11 Enanta Pharm Inc Compuestos derivados de quinoxalina macrocíclica, inhibidores de serina proteasa; composicion farmaceutica que los comprende; y su uso en el tratamiento de la hepatitis c.
MX2010005261A (es) 2007-11-14 2010-10-15 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de proteasa de serina de hepatitis c de tetrazolilo.
US8030307B2 (en) * 2007-11-29 2011-10-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic, C5-substituted proline derivatives as inhibitors of the hepatitis C virus NS3 protease
US8263549B2 (en) * 2007-11-29 2012-09-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. C5-substituted, proline-derived, macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
JP2011506329A (ja) 2007-12-05 2011-03-03 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド キノキサリニル誘導体
WO2009076166A2 (en) * 2007-12-05 2009-06-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl hcv serine protease inhibitors
CA2708150A1 (en) * 2007-12-05 2009-06-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated tripeptide hcv serine protease inhibitors
US8273709B2 (en) 2007-12-14 2012-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazole-containing macrocyclic HCV serine protease inhibitors
EP2224801A4 (en) 2007-12-14 2011-09-28 Enanta Pharm Inc MACROCYCLIC INHIBITORS OF THE OXIMYL TYPE OF HEPATITIS C VIRUS SERINE PROTEASE
WO2009076747A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
MX2010006738A (es) 2007-12-21 2010-10-15 Avila Therapeutics Inc Inhibidores de proteasa del virus de la hepatitis c (hcv) y usos de los mismos.
US8293705B2 (en) 2007-12-21 2012-10-23 Avila Therapeutics, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
AU2013231052B2 (en) * 2007-12-21 2015-09-10 Bristol-Myers Squibb Holdings Ireland Unlimited Company Crystalline forms of n-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-l-valyl-(4r)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-n-((1r,2s)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-l-prolinamide
US8309685B2 (en) 2007-12-21 2012-11-13 Celgene Avilomics Research, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
US8202996B2 (en) * 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
MX2010006736A (es) * 2007-12-21 2010-10-15 Avila Therapeutics Inc Inhibidores de proteasa del virus de la hepatitis c (hcv) y usos de los mismos.
CN102036966A (zh) * 2008-01-24 2011-04-27 益安药业 作为hcv丝氨酸蛋白酶抑制剂的二氟化三肽
WO2009094438A1 (en) * 2008-01-24 2009-07-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl-containing tripeptide hcv serine protease inhibitors
CN101977915B (zh) 2008-02-04 2014-08-13 埃迪尼克斯医药公司 大环丝氨酸蛋白酶抑制剂
US8372802B2 (en) 2008-03-20 2013-02-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated macrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
MX2010011306A (es) * 2008-04-15 2010-11-09 Intermune Inc Nuevos inhibidores macrociclicos de la replicacion del virus de la hepatitis c.
US8163921B2 (en) 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2271345B1 (en) 2008-04-28 2015-05-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
US20090285773A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20090285774A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN101580535B (zh) * 2008-05-16 2012-10-03 太景生物科技股份有限公司 丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP5529120B2 (ja) 2008-05-29 2014-06-25 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
ES2532402T3 (es) 2008-06-26 2015-03-26 Resverlogix Corporation Métodos de preparación de derivados de quinazolinona
JP2011526893A (ja) 2008-07-02 2011-10-20 イデニク プハルマセウティカルス，インコーポレイテッド ウイルス感染の治療のための化合物、及び医薬組成物
CN102159285B (zh) 2008-07-22 2014-05-14 默沙东公司 作为hcv ns3蛋白酶抑制剂的大环喹喔啉化合物
US8188137B2 (en) 2008-08-15 2012-05-29 Avila Therapeutics, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
EP2322515B1 (en) * 2008-08-29 2016-04-20 JSR Corporation A process for the preparation of an N-carboxy amino acid anhydride or an amino acid carbamate
US8207341B2 (en) * 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) * 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100080770A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8383094B2 (en) * 2008-10-01 2013-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100272674A1 (en) * 2008-12-04 2010-10-28 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CA2746265A1 (en) * 2008-12-10 2010-06-17 Achillion Pharmaceuticals, Inc. 4-amino-4-oxobutanoyl peptide cyclic analogues, inhibitors of viral replication
DK2364309T3 (en) * 2008-12-10 2015-01-12 Achillion Pharmaceuticals Inc NEW 4-AMINO-4-OXOBUTANOYLPEPTIDER as inhibitors of viral replication
US8283310B2 (en) * 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
MX2011006631A (es) 2008-12-19 2011-09-06 Gilead Sciences Inc Inhibidores de proteasa ns3 del virus hcv.
TW201036612A (en) 2008-12-22 2010-10-16 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
WO2010080874A1 (en) 2009-01-07 2010-07-15 Scynexis, Inc. Cyclosporine derivative for use in the treatment of hcv and hiv infection
ES2542835T3 (es) 2009-01-08 2015-08-12 Resverlogix Corporation Compuestos para la prevención y el tratamiento de enfermedades cardiovasculares
CA2751892A1 (en) 2009-01-15 2010-07-22 Rutgers, The State University Of New Jersey Benzo [c] phenanthridines as antimicrobial agents
US8102720B2 (en) * 2009-02-02 2012-01-24 Qualcomm Incorporated System and method of pulse generation
TWI438200B (zh) 2009-02-17 2014-05-21 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
AR075584A1 (es) * 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
WO2010101967A2 (en) 2009-03-04 2010-09-10 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Phosphothiophene and phosphothiazole hcv polymerase inhibitors
EP2408454A2 (en) 2009-03-18 2012-01-25 Resverlogix Corp. Novel anti-inflammatory agents
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2010118078A1 (en) 2009-04-08 2010-10-14 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
JP5813626B2 (ja) 2009-04-22 2015-11-17 レスバーロジックス コーポレイション 新規抗炎症剤
US20120059026A1 (en) 2009-04-30 2012-03-08 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Antimicrobial agents
MX2011012155A (es) 2009-05-13 2012-02-28 Enanta Pharm Inc Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c.
US8232246B2 (en) * 2009-06-30 2012-07-31 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
US8828930B2 (en) 2009-07-30 2014-09-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis C virus NS3 protease inhibitors
JP2013501068A (ja) 2009-08-05 2013-01-10 アイディニックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 大環状セリンプロテアーゼ阻害剤
AU2009352688B2 (en) 2009-09-15 2014-04-17 Taigen Biotechnology Co., Ltd. HCV protease inhibitors
MX2012003500A (es) * 2009-09-28 2012-08-01 Intermune Inc Nuevos inhibidores macrocíclicos de la replicación de virus de la hepatitis c.
US8415374B2 (en) * 2009-10-12 2013-04-09 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of hepatitis C virus inhibitors
US9193740B2 (en) * 2009-10-19 2015-11-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bismacrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
WO2011063076A1 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis c virus with oxoacetamide compounds
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
NZ600608A (en) 2009-12-18 2015-01-30 Idenix Pharmaceuticals Inc 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20110178107A1 (en) * 2010-01-20 2011-07-21 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
CN102917585A (zh) 2010-04-01 2013-02-06 埃迪尼克斯医药公司 用于治疗病毒感染的化合物和药物组合物
US8933096B2 (en) 2010-06-09 2015-01-13 Rugers, The State University of New Jersey Antimicrobial agents
US9388370B2 (en) * 2010-06-21 2016-07-12 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Thermolysin-like protease for cleaning insect body stains
US9121016B2 (en) 2011-09-09 2015-09-01 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Coatings containing polymer modified enzyme for stable self-cleaning of organic stains
US10988714B2 (en) 2010-06-21 2021-04-27 Regents Of The University Of Minnesota Methods of facilitating removal of a fingerprint from a substrate or a coating
US8796009B2 (en) 2010-06-21 2014-08-05 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Clearcoat containing thermolysin-like protease from Bacillus stearothermophilus for cleaning of insect body stains
US11015149B2 (en) 2010-06-21 2021-05-25 Toyota Motor Corporation Methods of facilitating removal of a fingerprint
CA2803890A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
US20120196794A1 (en) * 2010-08-06 2012-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of Hepatitis C Virus Inhibitors
JP5857053B2 (ja) 2010-09-21 2016-02-10 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 大環式プロリン由来ｈｃｖセリンプロテアーゼ阻害剤
BR112013008148A2 (pt) 2010-09-24 2016-08-09 Bristol Myers Squibb Co "inibidores do vírus da hepatite c".
US8729014B2 (en) 2010-11-01 2014-05-20 Rfs Pharma, Llc Specific HCV NS3 protease inhibitors
BR112013010372A2 (pt) * 2010-12-14 2016-07-05 Merck Sharp & Dohme composto, e, método para preparar um composto
CN103649079B (zh) 2010-12-22 2016-11-16 Abbvie公司 丙型肝炎抑制剂及其用途
CN103380132B (zh) 2010-12-30 2016-08-31 益安药业 菲啶大环丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂
JP2014502620A (ja) 2010-12-30 2014-02-03 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 大環状ｃ型肝炎セリンプロテアーゼ阻害剤
AR085352A1 (es) 2011-02-10 2013-09-25 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores macrociclicos de serina proteasa, sus composiciones farmaceuticas y su uso para tratar infecciones por hcv
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
WO2012154321A1 (en) 2011-03-31 2012-11-15 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
EP2726475B1 (en) * 2011-05-27 2017-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Tripeptides incorporating deuterium as inhibitors of hepatitis c virus
AP2013007263A0 (en) * 2011-05-27 2013-11-30 Achillion Pharmaceuticals Inc Substituted aliphanes, cyclophanes, heteraphanes, heterophanes, hetero-heteraphanes and metallocenesuseful for treating HCV infections
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102911254A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 上海唐润医药科技有限公司 Hcv蛋白酶抑制剂
EP2755985B1 (en) 2011-09-12 2017-11-01 Idenix Pharmaceuticals LLC Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US9403863B2 (en) 2011-09-12 2016-08-02 Idenix Pharmaceuticals Llc Substituted carbonyloxymethylphosphoramidate compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8507460B2 (en) 2011-10-14 2013-08-13 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3′,5′-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
UY34402A (es) 2011-10-21 2013-05-31 Abbvie Inc Métodos para el tratamiento de hcv
CN104023726A (zh) 2011-10-21 2014-09-03 艾伯维公司 用于治疗hcv的一种或多种daa的联合治疗(例如，与abt-072或abt-333)
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
KR102011641B1 (ko) 2011-11-01 2019-08-19 리스버로직스 코퍼레이션 치환된 퀴나졸리논을 위한 경구 즉시 방출 제형
US9328138B2 (en) 2011-11-15 2016-05-03 Msd Italia S.R.L. HCV NS3 protease inhibitors
CN104185420B (zh) 2011-11-30 2017-06-09 埃默里大学 用于治疗或预防逆转录病毒和其它病毒感染的抗病毒jak抑制剂
US9346785B2 (en) 2012-01-11 2016-05-24 Abbvie Inc. Process for making HCV protease inhibitors
WO2013106689A1 (en) * 2012-01-12 2013-07-18 Ref Pharma, Llc. Hcv ns3 protease inhibitors
WO2013106756A2 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
WO2013133927A1 (en) 2012-02-13 2013-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions of 2'-c-methyl-guanosine, 5'-[2-[(3-hydroxy-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)thio]ethyl n-(phenylmethyl)phosphoramidate]
RU2696572C2 (ru) 2012-03-07 2019-08-05 Инститьют Оф Кансер Ресёрч: Ройял Кансер Хоспитал (Зе) 3-арил-5-замещенные соединения изохинолин-1-она и их терапевтическое применение
WO2013142712A1 (en) 2012-03-21 2013-09-26 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
JP2015516421A (ja) 2012-05-07 2015-06-11 ブリストル−マイヤーズ・スクイブ・ホールディングス・アイルランドＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ Ｉｒｅｌａｎｄ １，１−ジメチルエチル［（１ｓ）−１−｛［（２ｓ，４ｒ）−４−（７−クロロ−４メトキシイソキノリン−１−イルオキシ）−２−（｛（１ｒ，２ｓ）−１−［（シクロプロピルスルホニル）カルバモイル］−２−エテニルシクロプロピル｝カルバモイル）ピロリジン−１−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバメートの経口固形製剤
US20130302414A1 (en) * 2012-05-07 2013-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Solubilized capsule formulation of 1,1-dimethylethyl [(1s)-1-carbamoyl)pyrrolidin-1-yl]carbonyl}-2,2-dimethylpropyl]carbamate
US9296778B2 (en) 2012-05-22 2016-03-29 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphate prodrugs for HCV infection
JP6165848B2 (ja) 2012-05-22 2017-07-19 イデニク ファーマシューティカルズ エルエルシー 肝疾患のためのｄ−アミノ酸化合物
US9109001B2 (en) 2012-05-22 2015-08-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection
UA119315C2 (uk) 2012-07-03 2019-06-10 Гіліад Фармассет Елелсі Інгібітори вірусу гепатиту с
HUE047608T2 (hu) 2012-08-08 2020-05-28 Merck Patent Gmbh (AZA-)izokinolin-származékok
AU2013329521B2 (en) 2012-10-08 2018-04-19 Centre National De La Recherche Scientifique 2'-chloro nucleoside analogs for HCV infection
LT2909205T (lt) 2012-10-19 2016-12-27 Bristol-Myers Squibb Company 9-metilpakeistieji heksadekahidrociklopropa(e)pirolo (1,2-a)(1,4)diazaciklopentadecinilkarbamato dariniai, kaip nestruktūrinės 3 (ns3) proteazės inhibitoriai, skirti hepatito c viruso infekcijų gydymui
WO2014063019A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Dinucleotide compounds for hcv infection
EP2909222B1 (en) 2012-10-22 2021-05-26 Idenix Pharmaceuticals LLC 2',4'-bridged nucleosides for hcv infection
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2914598B1 (en) 2012-11-02 2017-10-18 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014070964A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014070974A1 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
EP2920195A1 (en) 2012-11-14 2015-09-23 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of rp-nucleoside analog
WO2014078436A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
CN103804208B (zh) * 2012-11-14 2016-06-08 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种丙肝药物中间体的制备方法
US9765039B2 (en) 2012-11-21 2017-09-19 Zenith Epigenetics Ltd. Biaryl derivatives as bromodomain inhibitors
WO2014080290A2 (en) 2012-11-21 2014-05-30 Rvx Therapeutics Inc. Cyclic amines as bromodomain inhibitors
WO2014099941A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
MX2015007921A (es) 2012-12-21 2016-03-03 Zenith Epigenetics Corp Compuestos heterociclicos novedosos como inhibidores de bromodominio.
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
WO2014137926A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-deoxy nucleosides for the treatment of hcv
CN105164148A (zh) 2013-03-07 2015-12-16 百时美施贵宝公司 丙型肝炎病毒抑制剂
US11484534B2 (en) 2013-03-14 2022-11-01 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
KR20160005334A (ko) 2013-03-14 2016-01-14 아칠리온 파르마세우티칼스 인코포레이티드 소바프레비르 제조 방법
US9227952B2 (en) 2013-03-15 2016-01-05 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Sovaprevir polymorphs and methods of manufacture thereof
WO2014145600A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Ach-0142684 sodium salt polymorphs, composition including the same, and method of manufacture thereof
US9006423B2 (en) 2013-03-15 2015-04-14 Achillion Pharmaceuticals Inc. Process for making a 4-amino-4-oxobutanoyl peptide cyclic analogue, an inhibitor of viral replication, and intermediates thereof
US9187515B2 (en) 2013-04-01 2015-11-17 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
WO2014197578A1 (en) 2013-06-05 2014-12-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv
EP3027636B1 (en) 2013-08-01 2022-01-05 Idenix Pharmaceuticals LLC D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
DK3044221T3 (en) 2013-09-11 2018-04-23 Institute Of Cancer Res Royal Cancer Hospital The 3-ARYL-5-SUBSTITUTED-ISOQUINOLIN-1-ON COMPOUNDS AND THERAPEUTIC APPLICATION THEREOF
US20160229866A1 (en) 2013-09-20 2016-08-11 Idenix Pharmaceuticals Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
WO2015066370A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-alanine phosphoramidate pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluoro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
US9458150B2 (en) 2013-11-08 2016-10-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
US20170198005A1 (en) 2013-11-27 2017-07-13 Idenix Pharmaceuticals Llc 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
US10683321B2 (en) 2013-12-18 2020-06-16 Idenix Pharmaceuticals Llc 4′-or nucleosides for the treatment of HCV
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
US20170135990A1 (en) 2014-03-05 2017-05-18 Idenix Pharmaceuticals Llc Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
EP3113763A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid prodrug forms of 2'-chloro-2'-methyl uridine for hcv
WO2015134560A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
WO2015161137A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
US10494400B2 (en) 2014-06-25 2019-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JO3789B1 (ar) 2015-03-13 2021-01-31 Resverlogix Corp التراكيب والوسائل العلاجية المعتمدة لمعالجة الامراض المتعلقة بالمتممة
JP6740354B2 (ja) 2015-10-05 2020-08-12 ザ トラスティーズ オブ コロンビア ユニバーシティー イン ザ シティー オブ ニューヨーク オートファジーの流れ及びホスホリパーゼｄ及びタウを含むタンパク質凝集体のクリアランスの活性化剤ならびにタンパク質症の治療方法
CA3015768A1 (en) 2016-02-25 2017-08-31 Taxis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic processes and intermediates
US11192914B2 (en) 2016-04-28 2021-12-07 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
CN107641099A (zh) * 2016-07-20 2018-01-30 广东东阳光药业有限公司 取代的4‑羟基喹啉类化合物的制备方法
US9957233B1 (en) 2016-08-05 2018-05-01 Calitor Sciences, Llc Process for preparing substituted quinolin-4-ol compounds
WO2018183917A1 (en) 2017-03-30 2018-10-04 Taxis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic processes and synthetic intermediates
US11472778B2 (en) * 2017-06-20 2022-10-18 University Of Massachusetts Hepatitis C virus NS3/4A protease inhibitors
CN110156684A (zh) * 2019-06-28 2019-08-23 珠海市柏瑞医药科技有限公司 一种去甲乌药碱及其药用盐的合成工艺
US20230218644A1 (en) 2020-04-16 2023-07-13 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
CN113402450B (zh) * 2021-01-13 2023-11-24 上海睿腾医药科技有限公司 一种2-溴-4-氯吡啶的纯化方法
TW202404583A (zh) 2022-06-08 2024-02-01 加拿大商再諾製藥公司 吡啶胺衍生物及其作為鉀通道調節劑之用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000009543A2 (en) * 1998-08-10 2000-02-24 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
NO326421B1 (no) * 2002-02-01 2008-12-01 Boehringer Ingelheim Int Heterocykiske tripeptider, farmasoytisk preparat omfattende slike samt anvendelse av slike for fremstilling av medikamenter for behandling eller forebygging av sykdom

Family Cites Families (180)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US185001A (en) 1876-12-05 Improvement in measuring-faucets
JPS57123181A (en) 1981-01-23 1982-07-31 Mitsubishi Paper Mills Ltd Preparation of pyrazolo (1,5-a) pyridine derivative
EP0475255A3 (en) 1990-09-12 1993-04-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of optically pure (s)-alpha-((tert-butylsulfonyl)methyl)hydro cinnamic acid
US5610054A (en) 1992-05-14 1997-03-11 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic RNA molecule targeted against Hepatitis C virus
US5500208A (en) 1994-06-07 1996-03-19 The Procter & Gamble Company Oral compositions comprising a novel tripeptide
MY147327A (en) 1995-06-29 2012-11-30 Novartis Ag Somatostatin peptides
GB9517022D0 (en) 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
EP0907659A1 (en) 1996-05-10 1999-04-14 Schering Corporation Synthetic inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
PL194025B1 (pl) 1996-10-18 2007-04-30 Vertex Pharma Inhibitory proteaz serynowych, a zwłaszcza proteazy wirusa NS3 zapalenia wątroby C, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie inhibitorów proteaz serynowych
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
DE69807845T2 (de) 1997-01-23 2003-06-05 Hoffmann La Roche Sulfamide-metalloprotease inhibitoren
AU7127298A (en) 1997-04-14 1998-11-11 Emory University Serine protease inhibitors
GB9707659D0 (en) 1997-04-16 1997-06-04 Peptide Therapeutics Ltd Hepatitis C NS3 Protease inhibitors
CA2294049A1 (en) * 1997-08-11 1999-02-18 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptides
DE69827956T2 (de) 1997-08-11 2005-04-14 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd., Laval Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
IT1299134B1 (it) 1998-02-02 2000-02-29 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per la produzione di peptidi con proprieta' inibitrici della proteasi ns3 del virus hcv, peptidi cosi' ottenibili e peptidi
AU3376699A (en) 1998-03-31 1999-10-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 protease
GB9812523D0 (en) 1998-06-10 1998-08-05 Angeletti P Ist Richerche Bio Peptide inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
DE69925918T2 (de) 1998-07-27 2006-05-11 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Diketosäure-derivate als hemmstoffe von polymerasen
AR022061A1 (es) 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
IL141456A0 (en) 1998-08-21 2002-03-10 Viropharma Inc Rhodanine derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
EP1109580A4 (en) 1998-09-04 2004-05-26 Viropharma Inc METHOD FOR TREATING OR PREVENTING VIRAL INFECTIONS AND RELATED DISEASES
KR20010079907A (ko) 1998-09-25 2001-08-22 비로파마 인코포레이티드 바이러스 감염 및 관련 질병의 치료 및 예방 방법
UA74546C2 (en) 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
CA2389745C (en) 1999-11-04 2010-03-23 Shire Biochem Inc. Method for the treatment or prevention of flaviviridae viral infection using nucleoside analogues
TR200103147T1 (tr) 1999-12-27 2002-06-21 Japan Tobacco Inc. Kaynaşık halkalı bileşikler ve bunların ilaç olarak kullanımı.
AU2001261377A1 (en) 2000-05-10 2001-11-20 Smith Kline Beecham Corporation Novel anti-infectives
EP1299498A1 (en) 2000-06-23 2003-04-09 General Electric Company Silicone pressure sensitive adhesive composition
US6448281B1 (en) 2000-07-06 2002-09-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
GB0017676D0 (en) 2000-07-19 2000-09-06 Angeletti P Ist Richerche Bio Inhibitors of viral polymerase
US7244721B2 (en) 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
CN102372764A (zh) 2000-07-21 2012-03-14 先灵公司 用作丙型肝炎病毒ns3-丝氨酸蛋白酶抑制剂的新型肽
PE20020506A1 (es) 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
BR0115447A (pt) 2000-11-20 2005-10-18 Bristol Myers Squibb Co Inibidores de tripeptìdeo de hepatite c
EP1372642A1 (en) 2001-03-30 2004-01-02 SmithKline Beecham Corporation Use of pyrazolopyridines as therapeutic compounds
US6867185B2 (en) 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
CA2369711A1 (en) 2002-01-30 2003-07-30 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6828301B2 (en) 2002-02-07 2004-12-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
US20060199773A1 (en) 2002-05-20 2006-09-07 Sausker Justin B Crystalline forms of (1R,2S)-N-[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-[(6-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy]-L-prolyl-1-amino-N-(cyclopropylsulfonyl)-2-ethenyl-cyclopropanecarboxamide, monopotassium salt
MY140680A (en) * 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
EP1505945B1 (en) * 2002-05-20 2008-11-05 Bristol-Myers Squibb Company Substituted cycloalkyl p1' hepatitis c virus inhibitors
US6869964B2 (en) * 2002-05-20 2005-03-22 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclicsulfonamide hepatitis C virus inhibitors
EP1506172B1 (en) * 2002-05-20 2011-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US20040033959A1 (en) 2002-07-19 2004-02-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
US20050075279A1 (en) 2002-10-25 2005-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
WO2004041201A2 (en) 2002-11-01 2004-05-21 Viropharma Incorporated Benzofuran compounds, compositions and methods for treatment and prophylaxis of hepatitis c viral infections and associated diseases
US7601709B2 (en) 2003-02-07 2009-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
WO2004072243A2 (en) 2003-02-07 2004-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
JP4550824B2 (ja) 2003-03-05 2010-09-22 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎抑制化合物
ATE486889T1 (de) 2003-03-05 2010-11-15 Boehringer Ingelheim Int Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
RS20050741A (en) 2003-04-02 2007-06-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh., Pharmaceutical compositions for hepatitis c viral protease inhibitors
US7173004B2 (en) 2003-04-16 2007-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis C virus
EP1615613B1 (en) 2003-04-18 2009-11-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
KR101115294B1 (ko) 2003-05-21 2012-04-12 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 Ｃ형 간염 억제제 화합물
WO2004113365A2 (en) 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7125845B2 (en) 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
EA200600498A1 (ru) 2003-09-22 2006-10-27 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Макроциклические пептиды, проявляющие противовирусную активность в отношении вируса гепатита с
NZ546663A (en) 2003-10-10 2010-01-29 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
AP2287A (en) 2003-10-14 2011-10-31 Intermune Inc Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of HCV replication.
US7132504B2 (en) * 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7309708B2 (en) 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2546290A1 (en) 2003-11-20 2005-06-09 Schering Corporation Depeptidized inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
ES2358333T3 (es) 2004-01-21 2011-05-09 Boehringer Ingelheim International Gmbh Péptidos macrocíclicos con acción contra el virus de la hepatitis c.
CA2552319C (en) 2004-01-30 2012-08-21 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors
BRPI0508867A (pt) 2004-03-15 2007-09-04 Boehringer Ingelheim Int processo para a preparação de compostos macrocìclicos
AU2005228894B9 (en) 2004-03-30 2011-10-13 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
WO2006016930A2 (en) 2004-05-14 2006-02-16 Intermune, Inc. Methods for treating hcv infection
CA2568008C (en) 2004-05-25 2014-01-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing acyclic hcv protease inhibitors
US7705146B2 (en) 2004-06-28 2010-04-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor peptide analogs
US7868037B2 (en) 2004-07-14 2011-01-11 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis C
ATE516293T1 (de) 2004-07-16 2011-07-15 Gilead Sciences Inc Antivirale verbindungen
JP4914355B2 (ja) 2004-07-20 2012-04-11 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎インヒビターペプチド類似体
UY29016A1 (es) 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
MX2007002371A (es) 2004-08-27 2007-04-23 Schering Corp Compuestos de acilsulfonamida como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
EP1794178A1 (en) 2004-09-17 2007-06-13 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing macrocyclic hcv protease inhibitors
WO2007001406A2 (en) 2004-10-05 2007-01-04 Chiron Corporation Aryl-containing macrocyclic compounds
MX2007004783A (es) 2004-10-21 2007-05-11 Pfizer Inhibidores de la proteasa del virus de la hepatitis c, y composiciones y tratamientos que los usan.
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7608614B2 (en) 2005-03-08 2009-10-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing macrocyclic compounds
EP1879607B1 (en) 2005-05-02 2014-11-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2611155A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Pharmaceutical formulations and methods of treatment using the same
US20070021351A1 (en) 2005-06-02 2007-01-25 Schering Corporation Liver/plasma concentration ratio for dosing hepatitis C virus protease inhibitor
WO2006130554A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis c virus
WO2006130666A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Medicaments and methods combining a hcv protease inhibitor and an akr competitor
US20060281689A1 (en) 2005-06-02 2006-12-14 Schering Corporation Method for modulating activity of HCV protease through use of a novel HCV protease inhibitor to reduce duration of treatment period
US20060276406A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis C virus
EP1898941A2 (en) 2005-06-02 2008-03-19 Schering Corporation Controlled-release formulation useful for treating disorders associated with hepatitis c virus
WO2006130627A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods for treating hepatitis c
US20060287248A1 (en) 2005-06-02 2006-12-21 Schering Corporation Asymmetric dosing methods
WO2006130686A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Hcv protease inhibitors in combination with food
WO2006130553A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Hcv protease inhibitors
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TW200738742A (en) 2005-07-14 2007-10-16 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
TWI389908B (zh) 2005-07-14 2013-03-21 Gilead Sciences Inc 抗病毒化合物類
TWI387603B (zh) 2005-07-20 2013-03-01 Merck Sharp & Dohme Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑
WO2007009227A1 (en) 2005-07-20 2007-01-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor peptide analogs
EP2305695A3 (en) 2005-07-25 2011-07-27 Intermune, Inc. Macrocyclic inhibitors of Hepatitis C virus replication
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
AU2006274861B2 (en) 2005-07-29 2012-11-08 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
EP1913015B1 (en) 2005-07-29 2013-12-11 Janssen R&D Ireland Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
MY139988A (en) 2005-07-29 2009-11-30 Tibotec Pharm Ltd Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
JP5426164B2 (ja) 2005-07-29 2014-02-26 ヤンセン・アールアンドデイ・アイルランド Ｃ型肝炎ウイルスの大環式インヒビター
PE20070210A1 (es) 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
WO2007017144A2 (en) 2005-07-29 2007-02-15 Medivir Ab Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
ES2373685T3 (es) 2005-07-29 2012-02-07 Tibotec Pharmaceuticals Inhibidores macrocíclicos del virus de la hepatitis c.
JO2768B1 (en) 2005-07-29 2014-03-15 تيبوتيك فارماسيوتيكالز ليمتد Large cyclic inhibitors of hepatitis C virus
AU2006274862B2 (en) 2005-07-29 2012-03-22 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
JP4705984B2 (ja) 2005-08-01 2011-06-22 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤としての大環状ペプチド
JP2009503084A (ja) 2005-08-01 2009-01-29 フェノミックス コーポレーション Ｃ型肝炎セリンプロテアーゼ阻害剤およびその使用
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
CN101415705B (zh) 2005-10-11 2011-10-26 因特蒙公司 抑制丙型肝炎病毒复制的化合物和方法
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20070161670A1 (en) 2006-01-09 2007-07-12 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of substituted heterocycles
WO2007106317A2 (en) 2006-03-03 2007-09-20 Schering Corporation Pharmaceutical combinations of hcv-protease and -ires inhibitors
GB0609492D0 (en) 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
US20070281884A1 (en) 2006-06-06 2007-12-06 Ying Sun Macrocyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US8268776B2 (en) 2006-06-06 2012-09-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
GB0612423D0 (en) 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
PE20080992A1 (es) 2006-06-26 2008-08-06 Enanta Pharm Inc Quinoxalinil macrociclicos inhibidores de serina proteasa del virus de la hepatitis c
RU2008152171A (ru) 2006-07-05 2010-08-10 Интермьюн, Инк. (Us) Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с
WO2008008776A2 (en) 2006-07-11 2008-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
EP2374812B1 (en) 2006-07-13 2015-04-15 Achillion Pharmaceuticals, Inc. 4-amino-4-oxobutanoyl Peptides as Inhibitors of Viral Replication
US20090035267A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008019303A2 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Pyridazinonyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7635683B2 (en) 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
WO2008019289A2 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tetrazolyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7582605B2 (en) 2006-08-11 2009-09-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus-containing hepatitis C serine protease inhibitors
WO2008022006A2 (en) 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis c virus protease inhibitors
US20080038225A1 (en) 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008021960A2 (en) 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazolyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
US7605126B2 (en) 2006-08-11 2009-10-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acylaminoheteroaryl hepatitis C virus protease inhibitors
US20090035268A1 (en) 2007-08-01 2009-02-05 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US8138164B2 (en) 2006-10-24 2012-03-20 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
WO2008051477A2 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
AU2007309488B2 (en) 2006-10-24 2012-10-11 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
KR101615500B1 (ko) 2006-10-27 2016-04-27 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Ｈｃｖ ｎｓ3 프로테아제 억제제
CN101568346B (zh) 2006-10-27 2015-11-25 默沙东公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US20080107623A1 (en) 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US20080107625A1 (en) 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
TW200827364A (en) 2006-11-02 2008-07-01 Taigen Biotechnology Co Ltd HCV protease inhibitors
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008070358A2 (en) 2006-11-16 2008-06-12 Phenomix Corporation N-cyclopropyl-hydroxyproline-based tripeptidic hepatitis c serine protease inhibitors containing an isoindole, pyrrolopyridine, pyrrolopyrimidine or pyrrolopyrazine heterocycle in the side chain
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI406660B (zh) 2006-11-17 2013-09-01 Tibotec Pharm Ltd Ｃ型肝炎病毒之巨環抑制劑
NZ577568A (en) 2007-02-01 2012-02-24 Tibotec Pharm Ltd Polymorphic forms of N-[17-[2-(4-isopropylthiazole-2-yl)-7-methoxy-8-methylquinolin-4-yloxy]-13-methyl-2,14-dioxo-3,13 -diazatricyclo[13.3.0.0^4,6]octadec-7-ene-4-carbonyl](cyclopropyl)sulfonamide
US20080207528A1 (en) 2007-02-01 2008-08-28 Syaulan Yang Hcv protease inhibitors
CL2008000322A1 (es) 2007-02-01 2008-09-05 Tibotec Pharm Ltd Proceso para la preparacion de un compuesto derivado de 2-tiazol-2-il-quinolina; compuestos intermediarios; y proceso de preparacion de dichos compuestos intermediarios.
AU2008212758B2 (en) 2007-02-08 2014-01-30 Medivir Ab Pyrimidine substituted macrocyclic HCV inhibitors
CA2677015C (en) 2007-02-08 2015-05-26 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Hcv inhibiting macrocyclic phenylcarbamates
WO2008096002A1 (en) 2007-02-08 2008-08-14 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Hcv inhibiting macrocyclic phosphonates and amidophosphates
EP2125870A4 (en) 2007-02-16 2011-04-06 Boehringer Ingelheim Int INHIBITORS OF NS3 PROTEASE OF HEPATITIS C
CN101663284A (zh) 2007-02-20 2010-03-03 诺瓦提斯公司 作为hcv ns3蛋白酶抑制剂的大环化合物
US8435984B2 (en) 2007-02-26 2013-05-07 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Tertiary amine substituted peptides useful as inhibitors of HCV replication
MX2009011370A (es) 2007-04-24 2009-11-05 Hoffmann La Roche Proceso para el intermediario del inhibidor proteasa de hcv.
US20080274080A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Yat Sun Or Aza-peptide macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US20080279821A1 (en) 2007-04-26 2008-11-13 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008134397A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
US20080292587A1 (en) 2007-04-26 2008-11-27 Ying Sun Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US20090155209A1 (en) 2007-05-03 2009-06-18 Blatt Lawrence M Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
EP2185524A1 (en) 2007-05-10 2010-05-19 Intermune, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
CA2691442C (en) * 2007-06-29 2014-01-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
CN101801925A (zh) 2007-06-29 2010-08-11 吉里德科学公司 抗病毒组合物
CA2699891C (en) 2007-07-19 2013-10-22 Nigel Liverton Macrocyclic compounds as antiviral agents
WO2009014730A1 (en) 2007-07-26 2009-01-29 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
US8202996B2 (en) * 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
CN101977915B (zh) * 2008-02-04 2014-08-13 埃迪尼克斯医药公司 大环丝氨酸蛋白酶抑制剂
US8163921B2 (en) * 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102159285B (zh) * 2008-07-22 2014-05-14 默沙东公司 作为hcv ns3蛋白酶抑制剂的大环喹喔啉化合物
US8207341B2 (en) * 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000009543A2 (en) * 1998-08-10 2000-02-24 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
NO326421B1 (no) * 2002-02-01 2008-12-01 Boehringer Ingelheim Int Heterocykiske tripeptider, farmasoytisk preparat omfattende slike samt anvendelse av slike for fremstilling av medikamenter for behandling eller forebygging av sykdom

Also Published As

Publication number Publication date
NO20044807L (no) 2004-12-16
CA2486308A1 (en) 2003-12-04
EP1505963A1 (en) 2005-02-16
US20110311482A1 (en) 2011-12-22
KR20100093140A (ko) 2010-08-24
KR20040111656A (ko) 2004-12-31
US9227940B2 (en) 2016-01-05
JP2005533028A (ja) 2005-11-04
US20040106559A1 (en) 2004-06-03
DK1505963T3 (da) 2011-08-08
EP2340830A3 (en) 2011-12-28
EP1505963B1 (en) 2011-04-20
PL373411A1 (en) 2005-08-22
NZ536539A (en) 2007-02-23
RU2317303C1 (ru) 2008-02-20
RS52407B (en) 2013-02-28
US7915291B2 (en) 2011-03-29
PL226561B1 (pl) 2017-08-31
IS7530A (is) 2004-11-16
PE20040517A1 (es) 2004-08-25
TW200403993A (en) 2004-03-16
CN1974596B (zh) 2010-07-28
KR101005958B1 (ko) 2011-01-05
US8710229B2 (en) 2014-04-29
JP4312710B2 (ja) 2009-08-12
AR040080A1 (es) 2005-03-16
US20130267713A1 (en) 2013-10-10
US20140163231A1 (en) 2014-06-12
HRP20041085B1 (hr) 2014-01-31
US8507722B2 (en) 2013-08-13
RU2315039C1 (ru) 2008-01-20
ATE506104T1 (de) 2011-05-15
AU2003241510B2 (en) 2006-11-02
IL164987A (en) 2011-06-30
CN1974596A (zh) 2007-06-06
CN1299677C (zh) 2007-02-14
US20160067302A1 (en) 2016-03-10
IL164987A0 (en) 2005-12-18
CN101024671B (zh) 2010-08-18
DE60336807D1 (en) 2011-06-01
CY1112108T1 (el) 2015-11-04
US6995174B2 (en) 2006-02-07
PT1505963E (pt) 2011-06-28
US20150005342A1 (en) 2015-01-01
EP1505963A4 (en) 2008-12-24
ES2363131T3 (es) 2011-07-21
UA80973C2 (uk) 2007-11-26
CA2486308C (en) 2012-04-10
US9636375B2 (en) 2017-05-02
RU2315039C9 (ru) 2014-02-10
AR087051A2 (es) 2014-02-12
EP1505963B9 (en) 2011-09-21
RU2004137480A (ru) 2005-08-10
US8299094B2 (en) 2012-10-30
RU2298001C2 (ru) 2007-04-27
TWI306452B (en) 2009-02-21
HRP20041085A2 (en) 2005-08-31
US20060172950A1 (en) 2006-08-03
US20090274656A1 (en) 2009-11-05
HK1070287A1 (en) 2005-06-17
CN1668297A (zh) 2005-09-14
US20120330019A1 (en) 2012-12-27
SI1505963T1 (sl) 2011-10-28
GEP20063938B (en) 2006-10-10
BR0311132A (pt) 2005-03-08
AU2003241510A1 (en) 2003-12-12
ZA200409162B (en) 2006-02-22
US8889871B2 (en) 2014-11-18
WO2003099274A1 (en) 2003-12-04
MY140680A (en) 2010-01-15
AR090649A2 (es) 2014-11-26
US7449479B2 (en) 2008-11-11
RS100504A (en) 2007-02-05
EP2340830A2 (en) 2011-07-06
CO5640083A2 (es) 2006-05-31
CN101024671A (zh) 2007-08-29
MXPA04011440A (es) 2005-02-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9636375B2 (en) Hepatitis C virus inhibitors
JP4271148B2 (ja) 置換シクロアルキルｐ１’ｃ型肝炎ウイルスインヒビター
JP4688815B2 (ja) Ｃ型肝炎ウイルスインヒビター
AU2006233208B2 (en) Hepatitis C virus inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
CHAD Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften)

Owner name: BRISTOL-MYERS SQUIBB HOLDINGS IRELAND, CH

CHAD Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften)

Owner name: BRISTOL-MYERS SQUIBB HOLDINGS IRELAND UNLIMI, CH

MM1K Lapsed by not paying the annual fees