JP5121038B2 - 狭心症のための薬草調合物、該薬草調合物を調合する方法、及びその使用法 - Google Patents
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Description
発明の詳細な説明
本発明では、以下を含むダンシェンピル(DSP)薬剤の組成を開示する。
(a)Radix Salviae Miltorrhizaeの[水溶性]抽出物、Panax Notoginsengの[水溶性]抽出物、及び[合成]ボルネオール。
(b)Radix Salviae Miltorrhizae、Notoginseng、ボルネオール、及び担体。
(c)Radix Salviae Miltorrhizae、Panax Notoginseng、ボルネオール、及び薬剤担体。
(a)冠状動脈心疾患の治療。
(b)他の薬物と併せた冠状動脈心疾患の治療。
(c)冠状動脈心疾患の一次予防。
(d)他の薬物と併せた冠状動脈心疾患の一次予防。
(e)冠状動脈心疾患の二次予防。
(f)他の薬物と併せた冠状動脈心疾患の二次予防。
(g)狭心症患者による硝酸塩の摂取の低減。
(h)血清コレステロールレベルの低減。
(a)分析手法を使用して薬剤を細分すること。
(b)関連する精製物質の分析プロフィールを基準として比較することで、薬剤に含まれる治療物質を識別及び計量すること。
(a)温度が[60乃至100℃]、[更に好ましくは89乃至93℃]である[滴下ポット][複数の滴下ポット]。
(b)温度が8℃未満である流動パラフィン冷却溶液。
(c)内径1.8mm及び外径2.35mmである滴下ヘッド。
(d)冷却溶液の表面から約[15cm]の距離にある[滴下ヘッド]。
(a)直径0.33乃至0.34cm。
(b)重さ21.25乃至28.75mg。
(c)密度1.13乃至1.40mg/mm3。
ダンシェンピル(DSP)の製造
DSPは、約25mgの小型のピルで、その治療成分にはNotoginsengの水溶性抽出物と、Salviaeの水溶性抽出物と、合成ボルネオールとが含まれる。
1.Panax Notoginsengの水溶性成分の抽出。
(a)5乃至7倍の水による薬草の稀釈。
(b)0.04乃至0.06MPaの気圧で、二時間に渡りタンク内で煮沸することによるPanaxNotoginsengの水溶性成分の抽出。
(c)同じ条件下で、1.5時間に渡り抽出を反復する。
(d)100メッシュのネットによる抽出物の濾過。
(e)エタノールによる溶出を行うマクロ細孔吸収樹脂を使用した濾過物の純化。
(f)0.04乃至0.06MPaでの空気流入及び−0.076乃至−0.088MPaの真空状態を伴う減圧条件下において、密度1.33g/cm 3 乃至1.35g/cm 3 まで溶出抽出物を濃縮する。
(a)5乃至7倍の水による薬草の稀釈。
(b)0.04乃至0.06MPaの気圧で、二時間に渡りタンク内で煮沸することによるRadixSalviae Miltorrhizaeの水溶性成分の抽出。
(c)同じ条件下で、1.5時間に渡り抽出を反復する。
(d)100メッシュのネットによる抽出物の濾過。
(e)−0.076乃至−0.088MPaの真空状態を伴う減圧条件下において、当初1kgの薬草が1リットルになるまで濾過物を濃縮する。
(f)エタノールによる濃縮物の沈殿。
(g)100メッシュのネットによるエタノール沈殿溶液の濾過。
(h)0.04乃至0.06MPaの流入空気圧及び−0.076乃至−0.088MPaの真空状態を伴う減圧条件下における濾過物を濃縮する。
(i)エタノールによる溶出を行うポリアミドクロマトグラフィにより濃縮物を純化する。
(j)密度1.33g/cm 3 乃至1.35g/cm 3 まで純化抽出物を濃縮する。
(a)Panax Notoginsengの抽出物、Radix Salviae Miltorrhizaeの抽出物、合成ボルネオール、及びポリエチレングリコール6000を4.0:20.6:1.9:79.5の比率で混合する。
(b)混合物を溶解する。
(c)以下の特徴を有する滴下機械を使用して、溶解混合物からDSPを製造する。滴下ポットの温度は常に89乃至93℃で、冷却溶液は温度8℃未満の流動パラフィンで、滴下ヘッドの内径は1.8mmで、滴下ヘッドの外径は2.4mmで、滴下ヘッドと冷却溶液の表面との間の距離は15cmである。
(d)油を除去するために、15分間に渡り、800乃至1100rpmでピルを遠心分離する。
DSPは、識別された治療成分であるプロトカテク酸アルデヒド、サポニン、及びその他の様々な成分を含む。こうした化合物の薬草中の含有量は、薬草のロットによって異なる。DSPの治療成分の含有量を標準化し、これによりDSPの品質を管理するために、薬剤中の治療剤を識別及び計量する方法が開発された。こうした手順の例は、以下を含む。
(a)DSP30個を3mlのメタノールで溶解し、10分間、超音波処理する。
(b)5分間の遠心分離。
(c)薄層クロマトグラフィ、高性能液体クロマトグラフィ、その他を用いた標準的な分析的手法を使用して上澄みを細分化する。
(d)位置、サイズ、色に関して、DSP分留物を関連する精製基準と比較することで、ナトリウムダンシェンス、プロトカテク酸アルデヒド、サポニン、その他のDSPの治療成分を識別する。
(e)DSP分留物の位置、サイズ、及び色を、関連する精製基準の位置、サイズ、及び色と比較することで、DSP中の治療成分を識別及び計量する。
(f)フィンガープリントにおけるピークの相対保持時間及び相対面積を基準フィンガープリントにおける相対保持時間及び相対面積と比較することで、DSP中の治療成分を識別する。
薄層クロマトグラフィにより、慢性安定狭心症を治療可能な薬草調合物のナトリウムダンシェンス及びプロトカテク酸アルデヒドを識別する方法は、以下のステップを含む。
i.前記調合物30ペレットを、3mlのメタノールに加え、10分間の超音波処理により溶解し、溶液を形成すること。
ii.この溶液を、5分間、遠心分離し、上澄みを収集すること。
iii.この溶液10μlを、0.5%CMC−Naを含むシリコンGゲルプレート上に接触させること。
iv.比率10:4:1.6のクロロホルム、アセトン、及びメタン酸で構成される展開溶液によりプレートを展開すること。
v.プレートを乾燥させ、アンモニアにより燻蒸消毒し、このプレートを、15分間、保管すること。
vi.紫外線光の下でプレートをチェックし、前記調合物を表すスポットが、基準の対応位置に存在し、同じ色を示すかを調べること。
i.前記調合物30ペレットを、5mlのアンモニア溶媒に加え、超音波処理により溶解し、溶液を形成すること。
ii.前記溶液をマクロ細孔吸収樹脂カラムに、0.5/分の速度で導入すること。
iii.20mlの蒸留水でマクロ細孔吸収樹脂カラムを洗浄後、マクロ細孔吸収樹脂カラムを2mlのメタノール溶液により溶出すること。
iv.溶出物を収集すること。
v.前記溶出物10μlを、0.5%CMC−Naを含むシリコンGゲルプレート上に接触させること。
vi.比率6:3:1.6のクロロホルム、アセトン、及び水の溶液を10℃で2時間経過した後の下層清澄液である展開溶液10mlによりプレートを展開すること。
v.プレートを乾燥させ、10%硫酸エタノールをスプレした後、このプレートを、105℃で数分間に渡って焼くこと。
vi.紫外線光の下でプレートをチェックし、前記調合物を表すスポットが、基準の対応位置に存在し、同じ色を示すかを調べること。
1.フィンガープリントの作成
(1)クロマトグラフィシステム及びシステムの適合性
アルキルシラン連結シリコ−18を固定相として使用し、A及びBの混合物を移動相として使用した。Aは、メタノールであり、Bは、水、「N,N−ジメチル−ホルムアミド」、及び氷酢酸(100:45:4)の混合物である。Aの濃度は、勾配溶出の時間が0乃至25分経過する時、5%乃至30%で変化する。検出波長は、281nmに設定した。理論上のカラムのプレート数は、ダンシェンスのピークにより計算する時、2000以上とするべきである。
クロマトグラフ:HP1100液体クロマトグラフ
検出器:HP VWDスタイル紫外線検出器
カラム:Alltech社、5u、250×4.6mm、ODSカラム
プレカラム:Alltech社、Alltima C18 5uプレカラム
カラムの温度:30℃
サルビア酸B、ダンシェンス、及びプロトカテク酸アルデヒドを、それぞれメタノールに溶解し、1mlにそれぞれが50μg、40μg、及び10μg含まれる三種類の対照溶液を生成した。
強心性ピル十錠を25mlメスフラスコに入れ、20mlのメタノールを加え、20分間、超音波処理し、冷却させ、この溶液をメタノールによりスケールラインまで稀釈し、遠心分離して、上澄みをテスト溶液として取り出す。
各対照溶液及びテスト溶液をそれぞれ正確に10μlずつカラムに注入し、クロマトグラフチャートを記録し、含有量を計算する。
強心性ピルの20種類のバッチを、上で説明した方法によりテストし、その統計データを表1、表2、及び表3として示す。これらのデータから、強心性ピルが独自の特定のフィンガープリントを有し、このフィンガープリントが八カ所の共通するピークを含んでおり、つまり、これらのピークがDSPの各バッチに同時に存在していることが明らかとなった。プロトカテク酸アルデヒドのピークを基準のピークとし、その相対保持時間を1とすると、八カ所のピークの相対保持時間の平均値は、0.672、1.000、1.417、1.512、2.016、2.235、2.407、2.757となった。八カ所のピークの相対保持時間及び相対面積の値は、非常に安定しており、八カ所の共通するピークにおいて、ピーク番号1はダンシェンス、ピーク番号2はプロトカテク酸アルデヒド、ピーク番号7はサルビア酸Bとなり、相対面積の値の比率は、それぞれ、0.476乃至0.558:1:0.391乃至0.641となった。
クロマトグラフィ及びシステム適応条件、装置、及び試薬
1.フィンガープリントの作成
(1)クロマトグラム及びシステム調整のパラメータ
アルキルシラン連結シリコ−18を充填剤として使用し、水−アセトニトリル−氷酢酸(87:12:1)を移動相として使用した。検出波は、281nmに設定した。理論上のプレート数は、ダンシェンスのピークにより計算する時、2500以上とし、分離の度合いは要件を満たすべきである。
クロマトグラフ:HP1100液体クロマトグラフ
検出器:HP VWDスタイル紫外線検出器
カラム:Alltech社、5u、250×4.6mm、ODSカラム
プレカラム:Alltech社、Alltima C18 5uプレカラム
カラムの温度:30℃
アセトニトリル:クロマトグラフ的に純粋、Tianjin Siyou Biomedical & Technical Co. Ltd.
氷酢酸:クロマトグラフ的に純粋、Tianjin Tianhe Reagent Company
25.0mgのサルビア酸ナトリウム(sodium salvianic acid)及び5.0mgのプロトカテク酸アルデヒドを対照試料として使用する。両試料の重量を正確に測定し、50mlメスフラスコに入れる。これを溶解するために移動相を追加し、この溶液をフラスコのスケールラインまで稀釈し、完全に振り混ぜ、原液として保管する。少量のパラアミノ安息香酸の重量を正確に測定し、移動相により溶解し0.2mg/mlの溶液とし、内部基準原液とする。適切な量のサルビア酸ナトリウムA、プロトカテク酸アルデヒド、及び内部基準溶液を、ピペットにより、体積を正確に読みとれる状態で取り、移動相により稀釈し、50μgのサルビア酸ナトリウムAと、10μgのプロトカテク酸アルデヒドと、80μgのパラアミノ安息香酸とを含む溶液を作成する。作成した溶液は、対照溶液とした。
強心性ピル十錠と内部基準原液とを取り出し、25mlメスフラスコに入れ、移動相により溶解し、この溶液をスケールラインまで稀釈する。
(1)クロマトグラフィシステム及びシステムの適合性
アルキルシラン連結シリコ−18を固定相として使用し、水とアセトニトリルとの混合物を移動相として使用した。アセトニトリルの濃度は、0乃至15分において25%で、15分より後では35%である。ネブライザのガス流量は、毎分2.5リットルで、ドリフト管の温度は、93.8℃に設定した。理論上のプレート数は、ジンセノサイドRg1のピークにより計算する時、5000以上となった。
クロマトグラフ:Agilent1100液体クロマトグラフ
検出器:Alltech ELSD2000検出器(蒸発光散乱検出器)
カラム:Alltech社、5u、250×4.6mm、ODS−C18カラム
プレカラム:Alltech社、Alltima C18 5uプレカラム
カラムの温度:30℃
ジンセノサイドRg1及びサンチノサイドR1を、それぞれメタノールで溶解し、1mlに対して、それぞれ0.98mg及び0.25mgが含まれる二種類の対照溶液を作成した。
強心性ピル50錠を5mlメスフラスコに入れ、4%アンモニアをスケールラインまで加え、20分間の超音波処理を施し、この溶液を準備済みのC18カラム(Phenomenex社のSTRATA C18−Eカラム、500mg及び3ccチューブ)に加え、10mlの水を溶出し、この溶出物を廃棄し、その後、2mlのメタノールを溶出し、この溶出物をメスフラスコに収集し、メタノールによりスケールラインまで稀釈し、この溶液をテスト試料とする。
対照溶液及びテスト溶液をそれぞれ10μlずつ正確にカラムに注入し、クロマトグラフチャートを記録し、含有量を計算する。
20バッチの強心性ピル試料を、上で説明した方法によりテストし、その統計データを表4として示す。上記の表から導くと、DSPを含むこの薬草調合物は、0.401%乃至0.712%、平均0.550%のサンチノサイドR1と、2.069%乃至4.044%、平均2.847%のジンセノサイドRg1とを含む。
(a)DSPは、b−3,4−ジヒドロキシフェニル乳酸と、ナトリウムダンシェンスと、サポニンと、ボルネオールとを含む。
(b)バクテリアに関して陰性:1,000未満のバクテリアを含む。
(c)菌類に関して陰性:100未満の菌類を含む。
(d)重金属に関して陰性:含有流は、中国政府が定めた安全な量よりも少ない
(e)DSPの保管寿命は、室温において四年間である。
狭心症は、狭心症の病歴、血清の脂質レベル、心電図記録(ECG)、運動中のECG、虚血のシンチオグラフィック(scintiographic)評価、冠状動脈の血管造影、その他によって評価される。こうしたエンドポイントを使用した治療の有効性の評価において、DSPは、狭心症の治療に有効であることが証明されている。
冠状動脈心疾患を有する157人の患者を、10DSPの一日三回の経口投与により四週間処置した。狭心症の頻度、強度、及び持続時間と、胸部の圧迫感と、動悸とについて評価したところ、95.3%の患者で、これらの症状が消失又は軽減した。
Dan Shenタブレットは、狭心症の治療のために中国で現在使用されている別の漢方薬である。DSP及びDan Shenタブレットの有効性を比較した。冠状動脈心疾患の患者を二つのグループにランダムに区分した。107人の患者をDSPにより処置し、50人の患者をDan Shenタブレットにより処置した。狭心症発作の頻度、及び硝酸塩の消費量を比較したところ、DSPは、狭心症の治療に関して、Dan Shenタブレットよりも効果的だった。下の表5を参照。
表5.DSPとDan Shenタブレットとの比較
┌──────────────┬───────────────────┐
│ │ 患者数 │
│ ├───────┬───────────┤
│ │ 合計 │反応があった患者 │
├──────────────┼───────┼───────────┤
│DSP │107 │102(95.3%) │
├──────────────┼───────┼───────────┤
│Dan Shenタブレット │50 │38(76%) │
└──────────────┴───────┴───────────┘
ニトログリセリンは、狭心症を軽減するために頻繁に使用される。DSP及びニトログリセリンが狭心症を軽減する有効性を比較した。狭心症発生時に、DSP又はニトログリセリンにより患者を処置し、狭心症が緩和されるまでに要した時間を比較した。DSP及びニトログリセリンの両方について、狭心症は、すべての患者で15分以内に緩和される。DSPの有効性は、ニトログリセリンよりも僅かに低かった、下の表6を参照。
表6.DSPとニトログリセリンとの比較
┌─────────┬─────────────────────────┐
│ │ 反応があった患者数 │
│ ├───────┬────────┬────────┤
│ │1乃至5分以 │6乃至10分以 │11乃至15分 │
│ │内 │内 │以内 │
├─────────┼───────┼────────┼────────┤
│DSP │11 │14 │5 │
├─────────┼───────┼────────┼────────┤
│ニトログリセリン │17 │12 │1 │
└─────────┴───────┴────────┴────────┘
合計:1グループ当たり30人の患者
DSPは心拍数を変化させない。
表7.DSPは心拍数に影響しない
┌──────────┬───────────────────────┐
│ │ 心拍数 │
│ ├───────────┬───────────┤
│ │ 処置前 │ 処置後 │
├──────────┼───────────┼───────────┤
│DSP │84.3±23.1 │82.8±22.8 │
└──────────┴───────────┴───────────┘
DSPがニトログリセリンと同様の有効性で狭心症を緩和することを証明した後、DSPが狭心症を予防できるかについて調査した。DSPの有効性を硝酸塩イソソルビドジニトレートと比較した。イソソルビドジニトレートは、長時間効果のある硝酸塩で、米国において慢性安定狭心症を予防するのに頻繁に使用されている。患者は、一日三回、一回当たり十錠のDSPの経口投与、又は一日三回、一回当たり10mgのイソソルビドジニトレートの経口投与により処置した。心臓機能及び心電図を調査した。
心臓機能に対するDSP及び硝酸塩の有効性は、一拍動当たりの心拍出量(CO)、一分間の拍出量(SV)、拍出血液の割合(EF)、及び左心室短軸短縮率の割合(FS)を測定することで評価した。DSPは、硝酸塩よりも効果的に心臓機能を改善した。下の表8を参照。
表8.DSP及び硝酸塩が心臓機能に与える効果
┌──────┬─────────────┬──────────────┐
│ │DSP │イソソルビドジニトレート │
│ ├──────┬──────┼──────┬───────┤
│ │前 │後 │前 │後 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼───────┤
│SV │75.38 │83.45 │74.96 │79.47 │
│ │±8.32 │±9.11 │±8.44 │±8.72 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼───────┤
│CO │5.61± │6.94 │6.54 │6.12 │
│ │1.34 │±1.36 │±1.36 │±1.41 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼───────┤
│EF │0.57 │0.79 │0.59 │0.70 │
│ │±0.02 │±0.02 │±0.03 │±0.03 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼───────┤
│FS │17.14 │16.69 │17.32 │18.46 │
│ │±3.4 │±3.6 │±3.1 │±4.2 │
└──────┴──────┴──────┴──────┴───────┘
前:処置前
後:処置後
ST−Tセグメントにおける変化の頻度を記録することで、ST−T有効率を評価した。DSP及びイソソルビドジニトレートは、両方とも、ST−Tにおける変化の頻度を大幅に減少させた。しかしながら、DSPは、より効果的だった。下の表9を参照。
表9.ECGに対するDSP及び硝酸塩の効果の比較
┌──────────────┬────────────────────┐
│ │ ST−T変化の頻度 │
│ ├──────────┬─────────┤
│ │処置前 │処置後 │
├──────────────┼──────────┼─────────┤
│DSP │131 │35 │
├──────────────┼──────────┼─────────┤
│イソソルビドジニトレート │129 │42 │
└──────────────┴──────────┴─────────┘
アテローム病変における出血は、血小板の活性化、冠状動脈血栓症、及び鬱血を誘発し、血行障害を発生させる。したがって、血流を高めるために、狭心症患者には血小板活性化阻害剤であるアスピリンの長期投与が推奨される。DSP及びアスピリンが血流を高める有効性は、[Hb、Lb、P、及び気流量]を評価することで比較した。DSPは、アスピリンと同様の有効性で血流を高めた。下の表10を参照。
表10.DSP及びアスピリンは血流を高める
┌──────┬─────────────┬─────────────┐
│ │ DSP │ アスピリン │
│ ├──────┬──────┼──────┬──────┤
│ │前 │後 │前 │後 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│Hb │6.23 │4.35 │6.12 │4.28 │
│ │±1.67 │±1.02 │±1.56 │±1.07 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│Lb │10.92 │8.30 │10.38 │8.21 │
│ │±2.21 │±1.14 │±1.96 │±0.3 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│P │1.95 │1.77 │1.89 │1.67 │
│ │±0.08 │±0.08 │±0.12 │±0.7 │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│気流量 │1.79 │1.39 │1.82 │1.40 │
│ │±0.13 │±0.11 │±0.17 │±0.10 │
└──────┴──────┴──────┴──────┴──────┘
患者合計数:DSP25人及びアスピリン28人
トロンボキサンB2は、血小板を活性化する。活性化した血小板は、鬱血を発生させるβ血小板ミクログロブリンを含め、様々な物質を放出し、これにより血流を低下させる。DSPが血小板の活性化を阻害する有効性を調査した。DSPは、トロンボキサンB2の濃度を低下させ、血小板の凝集を効果的に阻害する。血小板の活性化を阻害できないことが知られていることから対照として使用したイソソルビドジニトレートは、トロンボキサンB2を低下させず、血小板の活性化を阻害しなかった。下の表11を参照。
表11.DSPは血小板の活性化を阻害する
┌────────────┬──────────┬──────────┐
│ │処置前 │処置後 │
├────┬───────┼──────────┼──────────┤
│βPM │DSP │62.44 │46.65 │
│ │ │±14.37 │±12.25 │
│ ├───────┼──────────┼──────────┤
│ │硝酸塩 │59.89 │54.36 │
│ │ │±15.42 │±13.18 │
├────┼───────┼──────────┼──────────┤
│Txβ2│DSP │1312±535 │738±384 │
│ ├───────┼──────────┼──────────┤
│ │硝酸塩 │1315±507 │1218±445 │
└────┴───────┴──────────┴──────────┘
増加した血漿コレステロールは、アテローム性動脈硬化の発生に関係するとされている。新しいアテローム病変の形成を予防するために、食生活の修正又は薬物による血漿コレステロールの低減が推奨されている。DSPが血漿コレステロールを減少させるかについて調査した。DSPは、コレステロールレベルを0.3mmol/L低下させており、これはP値0.05において統計的に有意である。下の表12を参照。
表12.DSPは血漿コレステロールを減少させる
┌──────────┬───────────────────────┐
│ │血漿コレステロール(mmol/L) │
│ ├───────────┬───────────┤
│ │処置前 │処置後 │
├──────────┼───────────┼───────────┤
│DSP │5.15±0.16 │4.84±0.2 │
└──────────┴───────────┴───────────┘
患者数:80
方法:処置グループでは、1979年に修正された中国冠状動脈心疾患診断基準(China Reference Diagnosis Standards for Coronary Heart Disease)による24人の患者に対して、強心性ピル十錠/回を一日三回投与した。標準グループでは、健康な20人に対して、薬物療法を全く行わない。
表13.標準グループ及び処置グループにおけるSOD及びLPOの含有量
の比較(x±s)
┌──────┬────┬───────────┬──────────┐
│グループ │患者 │SOD(ng/ml) │LPO(nmol/ │
│ │ │ │ml) │
├──────┼────┼───────────┼──────────┤
│標準グルー │20 │348±106 │4.64±1.52 │
│プ │ │ │ │
├──────┼────┼───┬───────┼──────────┤
│処置グルー │24 │処置前│267±76* │7.16±1.48* │
│ │ ├───┼───────┼──────────┤
│プ │ │処置後│309±87 │4.68±1.72 │
│ │ │ │# │## │
└──────┴────┴───┴───────┴──────────┘
注:標準グループとの比較では、*p<0.05。処置前のグループとの比較では、#p<0.05、##p<0.01。
方法:被験者:48人の肺性心疾患患者を、ランダムに三グループに分割する。標準グループでは、16人の患者を、抗炎症治療、抗喘息、酸素吸入、その他といった複合治療によって処置する。強心性ピルグループでは、14人の患者を、強心性ピル十錠/回、三回/日で投与により処置する。Gantangzhiグループでは、18人の患者を、5%グルコース注射液250mlに溶解したGantangzhi200mgを、一回/日、10日/期間で点滴することにより処置した。
方法:(1)患者の選択:I期又はII期の本態性高血圧症だが、二次性高血圧症、或いは心臓、肝臓、及び腎臓の機能不全症を伴わない患者を選択する。
表17.血圧に対する強心性ピルの効果(mmEg、x±s)
┌────────────┬───────────┬─────────┐
│グループ │収縮期圧 │拡張期圧 │
├───────┬────┼───────────┼─────────┤
│強心性グループ│処置前 │155.00±8.0 │90.70±7. │
│(被験者数30) │8 │93 │
│ ├────┼───────────┼─────────┤
│ │処置後 │149.20±8.8 │86.59±8. │
│ │ │9**&& │30**&& │
├───────┼────┼───────────┼─────────┤
│合成ダンシェン│処置前 │152.93±9.5 │92.59±8. │
│タブレットグル│ │9 │30 │
│ ├────┼───────────┼─────────┤
│ープ(被験者数│処置後 │146.02±10. │88.55±7. │
│30) │ │20**&& │22**&& │
├───────┼────┼───────────┼─────────┤
│対照グループ │処置前 │154.06±7.0 │90.90±9. │
│(被験者数15) │5 │10 │
│ ├────┼───────────┼─────────┤
│ │処置後 │152.08±9.2 │91.10±8. │
│ │ │5 │70 │
└───────┴────┴───────────┴─────────┘
注:処置前の同じグループとの比較において、**p<0.01。処置後の対照グループとの比較において、&&p<0.01。
表18.高血圧の臨床症状に対する強心性ピルの効果(効果)
┌───────────┬─────┬────┬─────┬──────┐
│グループ │頭痛 │目眩 │四肢の痺 │不眠 │
│ │ │ │れ │ │
│ ├──┬──┼─┬──┼──┬──┼──┬───┤
│ │あり│なし│あ│なし│あり│なし│あり│なし │
│ │ │ │り│ │ │ │ │ │
├───────┬───┼──┼──┼─┼──┼──┼──┼──┼───┤
│強心性グルー │処置前│20│10│1│14│12│18│8 │22 │
│プ(被験者数 │ │ │ │6│ │ │ │ │ │
│ ├───┼──┼──┼─┼──┼──┼──┼──┼───┤
│30) │処置後│7 │23│2│28│3 │27│4 │26 │
│ │ │ │* │ │* │ │* │ │ │
├───────┼───┼──┼──┼─┼──┼──┼──┼──┼───┤
│合成ダンシェ │処置前│22│8 │1│13│10│20│6 │24 │
│ンタブレット │ │ │ │7│ │ │ │ │ │
│ ├───┼──┼──┼─┼──┼──┼──┼──┼───┤
│グループ(被 │処置後│15│15│8│22│3 │27│6 │24 │
│験者数30) │ │ │* │ │* │ │* │ │8 │
├───────┼───┼──┼──┼─┼──┼──┼──┼──┼───┤
│対照グループ │処置前│8 │7 │6│9 │4 │11│4 │11 │
│ ├───┼──┼──┼─┼──┼──┼──┼──┼───┤
│(被験者数1 │処置後│7 │8 │5│10│3 │12│2 │13 │
│5) │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
└───────┴───┴──┴──┴─┴──┴──┴──┴──┴───┘
注:処置前の同じグループとの比較では、*p<0.01
DSPは、安全で無毒性である。中国では、500万人を超える患者が、重度の副作用を起こすことなく、DSPにより治療されている。軽度の副作用である頭痛又は目眩は、少ない割合の患者において報告されている。
DSPは、冠状動脈心疾患を治療する新世代の漢方薬である。臨床研究では、DSPが、心臓機能を改善し、心筋虚血を低減し、血小板活性化を阻害し、これにより鬱血を低減し、血漿コレステロールを減少させることで、狭心症を緩和及び予防することが実証されている。DSPの治療有効性は、他の形態の漢方Dan Shenタブレットよりも優れている。DSPは、米国で使用される薬物と同様の有効性を有する。DSPは、ニトログリセリンと同様の有効性で狭心症を緩和し、長時間効果のある硝酸塩イソソルビドジニトレートと同様の有効性で狭心症を予防し、アスピリンと同様の有効性で血小板の凝集を阻害する。DSPは、無毒性であり、500万人を超える人々が治療されており、殆どのケースで目立った副作用はない。
臨床前研究では、DSPが狭心症を予防及び緩和するメカニズムが明らかになる。
約260gのWistarラットを、ウレタンにより麻酔し、開胸し、心臓を摘出し、37℃でランゲンドルフ法にて潅流した。冠状動脈潅流圧は、常に65cm H2Oに定めた。
表19.DSPは冠状動脈の流量を増加させる
┌────────────────┬─────────────────┐
│ │冠状動脈流量 │
├───────┬────────┼────────┬────────┤
│ │投与量(mg/ │処置前 │処置後 │
│ │l) │ │ │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│ │なし │7.0±1.1 │7.1±0.9 │
│ │ │ │7 │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│DSP │5.8 │7.2±1.1 │7.0±1.4 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │290 │6.7±1.6 │8.7±1.4 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │580 │6.7±1.5 │9.3±2.9 │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│DSタブレット│5.8 │6.7±1.4 │7.1±1.5 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │290 │7.3±1.7 │9.1±2.1 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │580 │6.8±1.4 │7.1±1.5 │
└───────┴────────┴────────┴────────┘
表20.DSPは心拍数を増加させない
┌────────────────┬─────────────────┐
│ │心拍数 │
├───────┬────────┼────────┬────────┤
│ │投与量(mg/ │処置前 │処置後 │
│ │l) │ │ │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│ │なし │194±17 │193±12 │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│DSP │5.8 │180±11 │189±9 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │290 │188±7 │184±8 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │580 │173±13 │167±13 │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│DSタブレット│5.8 │180±11 │189±9 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │290 │189±16 │183±14 │
│ ├────────┼────────┼────────┤
│ │580 │186±23 │171±8 │
└───────┴────────┴────────┴────────┘
ウサギの動脈片のカリウム誘発血管収縮に対するDSPの効果を調査した。DSPは、平滑筋を弛緩させ、血管を大幅に拡張する。同様の効果は、ブタの冠状大動脈リングを使用した実験でも観察された。
血小板凝集に対するDSPの効果を調査した。ウサギの血小板を、DSPにより処置し、凝集を調査した。DSPは、血小板の凝集を大幅に阻害した。下の表21を参照。
表21.DSPは血小板凝集を阻害する
┌────────┬──────┬─────────┬────────┐
│DSP(mg/ │動物の数 │凝集率(%) │阻害(%) │
│ml) │ │ │ │
├────────┼──────┼─────────┼────────┤
│0 │6 │6.7±4.4 │0 │
├────────┼──────┼─────────┼────────┤
│1.8 │6 │42.7±2.5 │8.3±4.5 │
├────────┼──────┼─────────┼────────┤
│3.5 │6 │33.4±3.4 │23.6±6. │
│ │ │ │7* │
├────────┼──────┼─────────┼────────┤
│7 │6 │25.3±2.1 │37.6±5. │
│ │ │ │9* │
├────────┼──────┼─────────┼────────┤
│14 │6 │15.8±3.0 │69.0±6. │
│ │ │ │9* │
└────────┴──────┴─────────┴────────┘
表22.
┌───────┬────────┬─────┬───────────┐
│時間(時) │多染性RBC │小核細胞 │小核の割合(%)(x │
│ │ │ │±SD) │
├───────┼────────┼─────┼───────────┤
│12 │6,000 │9 │1.5±0.8 │
├───────┼────────┼─────┼───────────┤
│24 │6,000 │11 │1.8±0.7 │
├───────┼────────┼─────┼───────────┤
│36 │6,000 │11 │1.8±1.2 │
├───────┼────────┼─────┼───────────┤
│48 │6,000 │11 │1.8±1.5 │
├───────┼────────┼─────┼───────────┤
│72 │6,000 │13 │2.2±0.7 │
├───────┼────────┼─────┼───────────┤
│溶媒24 │6,000 │9 │1.5±1.4 │
└───────┴────────┴─────┴───────────┘
表23.
┌──────────┬─────┬─────┬───────────┐
│投与量(mg/kg)│多染性RB│小核細胞 │小核の割合(%)(x │
│ │C │ │±SD) │
├──────────┼─────┼─────┼───────────┤
│8,400 │6,000│12 │2.0±0.6 │
├──────────┼─────┼─────┼───────────┤
│840 │6,000│9 │1.5±1.0 │
├──────────┼─────┼─────┼───────────┤
│84 │6,000│11 │1.8±1.0 │
├──────────┼─────┼─────┼───────────┤
│溶媒 │6,000│9 │1.5±1.4 │
├──────────┼─────┼─────┼───────────┤
│CP(80mg/k │6,000│138 │23.0±4.0* │
│g) │ │ │ │
└──────────┴─────┴─────┴───────────┘
*溶媒との比較、p<0.01。
表24.
┌──────┬──────┬──────┬──────┬──────┐
│パラメータ、│非常に高い │高い効果 │効果あり │効果なし │
│効果 │効果 │ │ │ │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│RBC凝集 │なし │僅か │顕著 │重度 │
│の状態 │ │ │ │ │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│発現時間 │90未満 │90乃至18│180乃至 │300超 │
│ │ │0 │300 │ │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│マイクロ血 │正常な状態 │正常な状態に│改善 │悪化 │
│流の状態 │より良好 │回復 │ │ │
├──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│持続時間 │15未満 │15乃至10│10乃至5 │5未満 │
│(分) │ │ │ │ │
└──────┴──────┴──────┴──────┴──────┘
チャイニーズハムスタにおける微小循環に対するDSPの効果を調査した。DSPは、すべての被験動物で、口腔内投与から111分以内に、微小循環を23分間改善した。下の表25を参照。
表25.DSPは微小循環を改善する
┌───────┬────────┬────────┬────────┐
│ │発現時間(分) │持続時間(分) │実効率(%) │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│DSP │111 │23 │100 │
└───────┴────────┴────────┴────────┘
表26.(n=8)
┌────┬───┬────┬────────────────────┐
│グルー │投与量│投薬前 │投薬後 │
│ │ │ ├───────┬────────────┤
│プ │ │ │ピッイトリン │ピッイトリン後(40 │
│ │ │ │前 │秒乃至15分)、異常な │
│ │ │ │ │ECGを伴ったラット │
│ │ │ │ │の数 │
├────┼───┼────┼───────┼────────────┤
│対照 │ │正常 │正常 │7 │
├────┼───┼────┼───────┼────────────┤
│DSP │0.4│正常 │正常 │3* │
│ ├───┼────┼───────┼────────────┤
│ │0.8│正常 │正常 │1** │
│ ├───┼────┼───────┼────────────┤
│ │1.2│正常 │正常 │1** │
├────┼───┼────┼───────┼────────────┤
│DST │0.4│正常 │正常 │4 │
│ ├───┼────┼───────┼────────────┤
│ │0.8│正常 │正常 │1** │
└────┴───┴────┴───────┴────────────┘
対照との比較。*p<0.05、**p<0.01。
表27.
┌──────────┬───────────┬───────────┐
│グループ │投与量(g/kg) │阻害(%) │
├──────────┼───────────┼───────────┤
│DSP │0.4 │71.4* │
│ ├───────────┼───────────┤
│ │0.8 │85.7* │
│ ├───────────┼───────────┤
│ │1.2 │71.4* │
├──────────┼───────────┼───────────┤
│DST │0.4 │42.8* │
│ ├───────────┼───────────┤
│ │0.8 │85.7* │
└──────────┴───────────┴───────────┘
対照との比較。*p<0.05。
表28.(n=8)
┌──┬────┬──────────────────────────┐
│グル│投与量 │第一期のECG−(lead II)のT−STに │
│ープ│(g/ │おける変化 │
│ │ ├─────┬────────────────────┤
│ │kg) │投薬前 │投薬後 │
│ │ │ ├────┬───────────────┤
│ │ │ │ピッイ │ピッイトリン後(0乃至40 │
│ │ │ │トリン │秒)、異常なECGを伴ったラ │
│ │ │ │前 │ットの数 │
│ │ │ │ ├─────┬────┬────┤
│ │ │ │ │T上昇 │T逆転 │合計 │
├──┼────┼─────┼────┼─────┼────┼────┤
│対照│− │正常 │正常 │4 │3 │7 │
├──┼────┼─────┼────┼─────┼────┼────┤
│DS│0.4 │正常 │正常 │3 │0 │3* │
│ ├────┼─────┼────┼─────┼────┼────┤
│P │0.8 │正常 │正常 │1 │1 │2* │
│ ├────┼─────┼────┼─────┼────┼────┤
│ │1.2 │正常 │正常 │2 │1 │3* │
├──┼────┼─────┼────┼─────┼────┼────┤
│DS│0.4 │正常 │正常 │3 │2 │5 │
│ ├────┼─────┼────┼─────┼────┼────┤
│T │0.8 │正常 │正常 │1 │1 │2* │
└──┴────┴─────┴────┴─────┴────┴────┘
対照との比較。*p<0.05。
酸素遊離基に対する強心性ピルの除去作用の研究は、電子常磁性共鳴(ERP)及びスピントラッピングを使用することで、キサンタン−キサンタン酸化酵素系及びH2O2−Fe2+系をそれぞれ使用して生成したスーパーオキシドアニオン及びヒドロキシラジカルにより実施する。
方法:30匹のSDラットを準備し、偽手術グループ(手術を実行するが、血管及び神経を結紮しない)と、脳虚血再灌流モデルグループと、強心性ピルグループ(4g/kg)との三グループにランダムに区分する。三日間の連続腹腔内(IP)投与し、三日目の投与の二時間後に、マウスを20%エチルウレタンにより麻酔し、首の両側の伝導動脈と迷走神経とを分離及び結紮する。30分間の再灌流後、頭部を切断し、脳を取り出す。約500mgの左脳の皮質組織及び両側の海馬組織を取り出し、液体窒素に入れ、均一化する。これを冷凍生理食塩水によりホモジェネートにした後、このホモジェネートを遠心分離する。上澄みを取り出し、CAT及びSODの活性及びMAD及びGSHの含有量を判定する。
方法:Wisterラットにおいて、CCL4、高脂肪、高タンパク質により誘発された軽度の肝臓損傷モデルを利用する。強心性ピルグループでは、ラットの胃に強心性ピルを投与量4g/kgで灌流させ、正常グループ及びモデルグループでは、同量の生理食塩水を灌流させる。SODの活性は、キサンタン酸化酵素法を使用して判定し、MDAの含有量は、改良したチオバルビツール酸法により判定する。
表30.慢性肝臓損傷におけるSODの活性及びMDAの含有量
┌───────┬────────┬────────┬────────┐
│グループ │ラット │SOD(NU/ │MDA(nM/ │
│ │ │mg.pr) │mg.pr) │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│正常グループ │12 │1.717±0.│15.21±4.│
│ │ │521 │35 │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│モデルグループ│12 │1.326±0.│19.39±4.│
│ │ │3218 │62* │
├───────┼────────┼────────┼────────┤
│強心性ピルグル│11 │1.710±0.│15.16±4.│
│ープ │ │415# │29# │
└───────┴────────┴────────┴────────┘
注:正常グループとの比較において、*p<0.05。モデルグループとの比較において、#p<0.05。
1.Dan Shen
(1)品質管理
生薬のDan Shenは、中国全土の生産地域からサンプリングした。こうした様々なベースからの試料を、その主成分に関して化学分析した。その結果、シャンルオという名称の地域からのDan Shenの品質が最も優れていることが分かり、シャンルオの気候がDan Shenの生育に最適であることが証明された。タンシノン及びサルビア酸AといったDan Shenの有効成分は、最適な量であることが認められた。
シャンルオは、地理的には、東経108°34’20’’、北緯33°2’20’’乃至34°24’40’’、平均海抜900メートルに位置している。この地域は、低い山及び中程度の山を伴うエリアで、汚染されていない。汚染のない清潔な空気の状況により、薬草の生育に理想的な場所となっている。
温暖でやや多湿であり、亜熱帯から温帯へ推移する山岳地帯に代表的な気候である。東南の季節風に影響を受け、四季が明確で、雨が大量に降る。この地域の年間降雨量は、推定733.9乃至899mmである。日照時間は、年間1874.1乃至2185時間で、年間の日光照射量は、119.57乃至124.36キロカロリ/cm2である。気温は、18℃乃至40.8℃の範囲で変化する。霜の降りない期間は、年間198乃至218日間継続する。
シャンルオの土壌の80%は砂質で、耕作地の大半は、pH値6.5乃至8の中性乃至弱アルカリ性の土壌を含む。0乃至20cmの耕作層において、土壌栄養素は、以下のように構成される:有機物1.36%、窒素0.085%、即効性リン18ppm、即効性カリウム136ppm、及びアルカリ性の加水分解性窒素60ppm。土壌に含まれる重金属その他の有毒物質は、国が定めた農業基準を超えていない。この地域は、植物及び動物が豊かである。現地の農家では、有機肥料を使用している。
鉛、カドミウム、水銀、ヒ素、その他を含む八種類の金属、残留農薬、空気、及び水は、すべて国の環境基準を満たしている。
Dan Shenの植え付け及び耕作は、優良農法規定(GAP)に従っている。Dan Shenの栽培に関連する技術的ノウハウは、ブックレットに編集され、ベース内のDan Shen栽培者に配布されている。植え付け時期には、専門家が、現地に派遣され、大規模なプランテーションのような規模でDan Shenの植え付けを標準化するために、現場での栽培者の研修を行い、技術的な支援を提供している。
(1)生育条件
天然ボルネオールの生育エリアは、中国湖南省新晃県で、海抜300乃至600mの中程度の高さの丘を伴う地域である。このエリアの60%は、霜に覆われる。土地は、pH5乃至6の黄砂及び赤砂土壌で構成される。空気汚染又は水質汚染は、この地域では確認されない。
極めて強い成長能力を有し、藪地においてmu(666.7m2と同等)当たり300乃至400本の木が成長し、枝の葉より上の部分が採集され、純収穫量はmu当たり1000kgとなる。
繁殖には接ぎ木及び挿し木技術を使用する。この植物は、一年目は種苗園で成長させ、二年目の春に畑地に移植する。畑地は、定期的に肥料を与え、土かきを行う必要がある。
a.植物の種子
(1)Radix Notoginsengの判定
分子量のマーキングのためのPCR反応により、Radix Notoginsengは、着色し観察可能であり、Radix Notoginsengは、特徴的なDNAフィンガープリントを有する。
(2)形状及び特性
Radix Notoginsengの種子は、丸みのある円形の本体を有する。成長期の異なる種子として、Radix Notoginsengは、二年又は三年種子を有する。二年種子は、直径0.45乃至0.55cmで、乾燥種子の重量は95乃至103グラムである。三年種子は、直径0.54乃至0.65cmで、乾燥種子の重量は98乃至109グラムである。
(3)種子の発芽に適した温度
種子の発芽に適した温度は、10乃至30℃であり、理想的な温度は15℃乃至20℃である。
(4)含水量
含まれる水の量は60乃至70%にするべきであり、含水量が長期に渡って20%を下回ると、その種子は活性を失う。
(5)休眠状態
種子は、採集後45乃至60日間は休眠状態となる傾向を有する。
(6)寿命
種子は、自然状態において、採集後15日間の寿命を有する。
(7)種子の保管に関する要件
保管する種子は、二年より長く成長した植物から採集し、採集する樹木は、地面より上の部分が順調に生育し、害虫が存在しない状態にするべきである。樹齢三年の植物から種子を採集することを推奨する。
(8)種子保留領域の管理
種子保留領域では、通常の生産領域よりも優れた管理を行い、汚染された植物は常に処分し、いかなる状況においても、害虫が芽と接触しないようにするべきである。芽及び葉の発生期には、3000ppmのYunda−120及びYang Kang生物肥料の400倍溶液を二度スプレするべきである。更に、開花結実期には、Phytokininをスプレする。
(9)種子の収穫期
Radix Notoginsengの種子の収穫期は、十月終わり乃至十二月初めである。
(10)種子の採集方法
種子の採集は、種子の成熟レベルに応じて判定する。強く成長した樹木からの種子は、別個に採集及び保管する。ベースでは、未成熟な種子の採集を厳しく禁止している。
(11)加工
植物は、採集後すぐに洗浄し、同時に果肉及び枯れた種子を選別する。洗浄後、植物を日光で乾燥させる。
(12)保管
58%メタラキシルマンガン亜鉛溶解液の300倍水溶液を使用してRadix Notoginsengの種子を30分間処理する。種子の表面を乾燥させ、20%の水を含む砂により種子を保管する。これは、このプロセスにとって非常に重要なステップである。
(13)パッケージング
最終的な製品は、汚染のない容器にパッケージする。採集日、処理日、及び製品バッチ番号を示す表示を付けるべきである。
(14)輸送
製品が有毒物質により汚染されるのを防止するために、輸送には、清潔で、水を通さない、通気式の輸送車両用器具を使用する。輸送に八時間より長くかかる場合は、製品の種子は、濡れた砂と一緒にするべきである。
(15)種子の活力のテスト
TTC法を使用する:テトラゾリウム粉末を正確に1g計量し、1000mlの蒸留水に溶解し、0.1%TTC溶液を作成する。この溶液に試料を浸し、この状態を24時間維持した後、取り出して、半分に切り、その半分を培養ディスクに置く。調合済みの0.1%TTCを使用して、試料を30分間着色する。種子の活力は、種子の色によって判定できる。
(16)害虫の検査
i.500乃至1000の試料ペレットを白いシート又は紙或いはガラス上に置き、人間の目で種子を観察する。試料表面に異常な点又は害虫が存在する場合、汚染があると判断できる。汚染されている試料は、詳しく調べ、汚染のレベルを特定するべきである。
ii.切断及び調査:外科用メスを使用して、それぞれ100個の種子を含む二つの試料セットを切断し開く。汚染された種子の数を計算し、汚染のレベルを判断する。
iii.臭いによる試料の調査:試料を手に置き、かびの臭いを鼻で感知する。或いは、温水(60乃至70℃)の入ったカップに試料を入れ、2乃至3分間、蓋をした後、温水を注ぎ出し、種子の臭いをかぐ。この種子は、ほのかな香りを発するべきであり、そうでない場合は、おそらく汚染されている。
(17)色の検査
汚染のない種子は、淡黄色及び白色である。
(18)顕微鏡検査
五つの試料セットをランダムに選び出し(各試料は50個より多くの種子を含む)、この試料を24時間に渡って培養ディスクに置く。これらを顕微鏡により観察し、病原菌の存在を調べ、存在する場合は、汚染のレベルを計算する。
(1)発芽の温度
Radix Notoginsengの発芽温度は、1乃至20℃で、理想的な温度は、15℃である。
(2)含水量
苗木に使用される土壌の含水量は、20乃至25%である。
(3)保管
休眠芽から発芽までのRadix Notoginsengの成長には、90日間の休眠期間を要する。100ppmのジベレリンにより、Radix Notoginsengの休眠期間の短縮を助けることができる。
(4)純化
Radix Notoginsengの純化時期は、十二月初め乃至一月終わりである。純化を行う際、根の取り扱いには注意するべきである。純化後は、迅速に植える。
(5)輸送
Radix Notoginsengは、長距離の輸送は不可能であり、これを行うと損傷を与えることになる。避けられない場合は、Radix Notoginsengを、通気式の容器に土と共に入れ、直射日光に当てないようにするべきである。
(6)品質検査
i.各単位の重量に関しては、300乃至500本の苗木を試料として選択し、それぞれ100本の苗木をグループとし、秤で重さを量り、単位重量を計算する。
ii.害虫検査:それぞれ100本の苗木を含む四つの試料グループを設定する。試料をガラスディスク上に置き、人間の目又は五乃至十倍の拡大鏡により試料を観察し、農薬に関してチェックする。
iii.それぞれ100本の植物を含む四つの試料グループを設定し、試料をスライスし、顕微鏡で観察する。
(1)畑地の条件
Radix Notoginsengの苗木は、最適な条件のエリアで栽培する。ベースでは、集中栽培及び大規模栽培法を使用している。
(2)環境
栽培エリアには、汚染が全く存在しない。空気品質は、GB3059−96規格のレベル2を上回る。
(3)水資源
水資源は、雨水と、自然の流水とによって構成される。このエリアの水質は、GB5084−92規格によりモニタされる。
(4)土壌
Radix Notoginsengは、泥を含む土壌に植えることは不可能であり、Radix Notoginsengのために選択した土壌中の重金属の量は、関連する国の基準以内である必要がある。
(5)理想的な土壌
予測される良好な結果を得るために、傾斜15°以下の酸性土壌(pH5.5乃至7.0)を選択する。海抜1600m以下の高さでは、8乃至12%の日光が伴うべきであり、海抜1600mを超える高さでは、10乃至20%の日光が伴うべきである。
(6)温度
発芽期には、気温が20乃至25℃となり、地温が10乃至15℃となるべきである。結実期には、最適な気温が20乃至25℃、最適な地温が15℃乃至20℃となる。
(7)含水量
土壌の含水量は、25乃至30%とするべきである。
(8)土壌の準備
土壌のプロッティングは、植樹前に三回繰り返し、土壌を日光に晒すべきであり、これは、土壌中のバクテリア物質を根絶するのを助ける。
(9) 土壌の取り扱い
根の損傷を防ぐため、移植前に、各平方メートルに75乃至100gの石灰を使用する。
(10)シェードの構造及び管理
シェードは、地面からの高さが1.8mで、地中に深さ2mのトレンチを有する。通過する日光は、海抜1600m以下のエリアの場合、8乃至10%が最適であり、或いは、海抜1600mを超える場合、10乃至15%が最適である。地面は平坦で、土地の深い層は緩く、一方、土地表面レベルは堅くなっているべきである。植え付けシーズンは、十二月終わり乃至一月終わりが最適である。植え付け前には、種子を58%メタラキシル亜鉛(500乃至800倍)又は1.5%アンチマイシン(200pm)に30乃至50分間に渡って浸し、すくい出して乾燥させる。これは、植物を病気から守るためである(コーティングされた種子には、上の手順を施す必要はない)。植え付けの密度は、4×5cm又は5×5cmとなり、mu当たり10万乃至20万個の種子となる。特殊な道具を使用して、浅い溝を作成し、機械又は手を使って、種まき及び植え付けを行う。種子は、細かい土により完全に覆い隠す。
(1)トポロジ
地面は、15°未満のなだらかな傾斜があり、日当たりの良い場所が最適である。
(2)土壌の構成
緩い砂土が深くまで存在する地面が最適である。
(3)土壌のpHは、5.5乃至7にするべきである。
(4)事前に植え付ける作物
新しい畑地では、土壌の破壊を避けるために、トウモロコシ、小麦、及び豆を事前に植え付ける。
(5)海抜
高度23.5°近くの海抜1400乃至1800mの場所が、Radix Notoginsengの栽培エリアとして最適である。
(6)日光
Radix Notoginsengは、8乃至20%の日光のみを必要とする種類の植物である。日光の量は、成長の様々な時期に合わせて増加量を変化させるべきである。しかしながら、日光への露出が多すぎると、活力のない植物が生じる。
(7)含水量
土壌の含水量は、25乃至30%にするべきである。
(8)肥料
有機肥料を、化成肥料、微量栄養素肥料、又は微量元素肥料と合わせて使用する。
(9)温度
Radix Notoginsengのエリアにおいて、年間の平均気温は、15乃至18°になると推定される。発芽期の気温は20乃至25°、地温は15°が最も相応しい。栄養生育及び開花期の温度は、25°に維持するのが良い。温度が15°を下回る場合は、開花に影響が出る。
(10)畑地の区分
栽培前には、畑地の構造が粉末状になるように、畑地を三回起こして、緩めるべきである。
(11)土壌の管理
播種及び移植の前に、殺菌の目的で、75乃至100gの生石灰を土壌に加える。
(12)苗床の基準
平坦な地面の苗床は高さ20乃至25cmとし、傾斜エリアでは15乃至20cmとする。苗床の幅は、120乃至140cmのタイル形状とする。浸透性を高めるために、ベースの底部の土壌は緩くし、最上部は堅くするべきである。
(13)種子の浸漬
移植中には、種子を58%メタラキシル(500乃至800倍)に30乃至50分間に渡って浸し、その後、乾燥させ、これにより植物を病気から保護し、害虫を駆除する。
(14)植え付けの密度
植え付け密度においては、10×12.5cm乃至10×15cmの距離を維持する。これにより、mu当たり2万6000乃至3万2000本の植物となる。
(15)移植の方法
苗は、管理の目的から、同じ方向を向くように植え付ける。傾斜地面の場合、苗は、下端から高地に向かって植え付ける。苗の第一の列が上を向き、第二の列が下を向くようにする。芽も上を向くようにし、底部は内側を向くようにする。
(16)覆土
粉末状で緩く水分を含んだ土壌を使用して、苗を完全に多い、根又は芽が露出しないようにする。
(17)肥料の追加
鶏糞、ストーブの灰、骨灰、リン酸カルシウムマグネシウム、その他を特別な肥料として使用する。
Claims (2)
- a)ラディックスサルビアミルトリザエとパナックスノトギンセンとを別々に熱水還流処理と濾過処理とで別々に抽出するステップと、
b)濾液を別々に濃縮するステップと、
c)樹脂カラムを使用して濃縮液を別々に濃縮精製し、ラディックスサルビアミルトリザエとパナックスノトギンセンの精製水溶性抽出液を別々に入手するステップと、
d)ステップ(c)から得られた精製水溶性抽出液を適量のボルネオールと共に混合するステップと、
を含むダンシェンピル(DSP)を製造する方法。 - (1)パナックスノトギンセンの水溶性成分を次のように抽出するステップと:
(a)薬草を5倍から7倍の水で薄める;
(b)空気圧0.04から0.06MPaで2時間、タンク内で沸騰させてパナックスノトギンセンの水溶性成分を抽出する;
(c)同一条件で1.5時間、工程(b)の抽出を反復する;
(d)抽出液を100−メッシュネットで濾過する;
(e)微小孔質吸着樹脂を使用してエタノールで溶出することで濾液を精製する;
(f)密度が1.33g/cm 3 から1.35g/cm 3 となるまで、空気流入を0.04から0.06MPaとし、真空状態を−0.076から−0.088MPaとした減圧条件下で溶出抽出液を濃縮する、
(2)ラディックスサルビアミルトリザエの水溶性成分を次のように抽出するステップと、:
(a)薬草を5倍から7倍の水で薄める;
(b)空気圧0.04から0.06MPaで2時間、タンク内で沸騰させてラディックスサルビアミルトリザエの水溶性成分を抽出する;
(c)同一条件で1.5時間、工程(b)の抽出を反復する;
(d)抽出液を100−メッシュネットで濾過する;
(e)1Kgの当初薬草が1リットルとなるまで、真空状態を−0.076から−0.088MPaとした減圧条件下で濾液を濃縮する;
(f)エタノールで濃縮液を沈殿させる;
(g)100−メッシュネットでエタノール沈殿溶液を濾過する;
(h)空気圧0.04から0.06MPaとし、真空状態を−0.076から−0.088MPaとした減圧条件下で濾液を濃縮する;
(i)エタノールでポリアミドクロマトグラフィ溶出することで濃縮液を精製する;
(j)密度が1.33g/cm 3 から1.35g/cm 3 になるように精製抽出液を濃縮する、
(3)錠剤を次のように製造するステップと:
(a)パナックスノトギンセンの抽出液、ラディックスサルビアミルトリザエの抽出液、合成ボルネオール及びポリエチレングリコール6000を4.0:20.6:1.9:79.5の割合で混合する;
(b)混合物を溶解させる;
(c)次の仕様の滴下機械を用いて溶解混合物を錠剤とする:
ドロップポット温度:89から93℃
冷却剤:8℃未満の流動パラフィン
ドロップヘッド内径:1.8mm
ドロップヘッド外径:2.4mm
ドロップヘッドと冷却剤表面との距離:15cm
(d)800から1100rpmで15分間錠剤を遠心分離処理してオイルを取り除く、を含むことを特徴とする、請求項1に記載の方法。
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