CN111089919B - 一种丹参药物的质量检测方法 - Google Patents

一种丹参药物的质量检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111089919B
CN111089919B CN201911385685.5A CN201911385685A CN111089919B CN 111089919 B CN111089919 B CN 111089919B CN 201911385685 A CN201911385685 A CN 201911385685A CN 111089919 B CN111089919 B CN 111089919B
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
taking
thin
methanol
test
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201911385685.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111089919A (zh
Inventor
冯世明
余渊
周燕
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GUIZHOU JINGFENG INJECTION CO Ltd
Original Assignee
GUIZHOU JINGFENG INJECTION CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GUIZHOU JINGFENG INJECTION CO Ltd filed Critical GUIZHOU JINGFENG INJECTION CO Ltd
Priority to CN201911385685.5A priority Critical patent/CN111089919B/zh
Publication of CN111089919A publication Critical patent/CN111089919A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111089919B publication Critical patent/CN111089919B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/74—Optical detectors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明涉及一种丹参药物的质量检测方法，所述检测方法具体为：丹参的性状鉴别，用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素，用高效液相色谱法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量。经方法学验证试验，结果表明本发明在不同薄层板、温度、湿度条件下，色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，不同条件下均能得到较好的鉴别色谱,验证试验表明本发明的重现性好、耐用性好。

Description

一种丹参药物的质量检测方法
技术领域
本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种丹参药物的质量检测方法。
背景技术
丹参药物的质量标准原记载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003 年版)DB52/YC388-2003中第396页，丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，质量标准除按《中国药典》一部丹参项下 检验外，还应含有含量测定项(测定丹参素)，因丹参具有活血祛瘀，通经止痛， 清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛，脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不 眠，月经不调，痛经经闭，疮痈肿痛等功效，是贵州景峰注射剂有限公司的核心 产品参芎葡萄糖注射液中主要原材料之一,因此贵州景峰注射剂有限公司长期保 持对丹参药材的相关质量研究。
《中国药典》2015年版中丹参的质量检测方法内容为：内容为性状、显微、 用薄层色谱法鉴别丹参中丹参酮、高效液相色谱法测定丹参中的丹参酮类物质的 含量，为了更好的检测丹参药材的质量，提升药材的质量标准，贵州景峰注射剂 有限公司根据公司的实际情况并结合《中国药典》2015年版所载的丹参质量标准 进行了重新修订等研究工作，在之前的基础上，制定了一种丹参药物的质量检测 方法，即改变了丹参素的薄层鉴别和丹参中的丹参素含量的检测方法，同时增加 高效液相色谱法测定丹参中的丹参素含量等检测项目，以有效的检测丹参药物的 质量，从而保证临床疗效。
发明内容
本发明的目的是提供一种丹参药物的质量检测方法，检测内容为性状，用显 微及薄层色谱法鉴别丹参，用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素、水分、总灰分、 浸出物，高效液相色谱法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量等质量检测项目， 以有效的控制丹参药物的质量，从而保证临床疗效。
本发明所述的一种丹参药物的质量检测方法内容为：性状检测，用显微及薄 层色谱法鉴别丹参，用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素、水分、总灰分、浸出物， 用高效液相色谱法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量。
本发明所述性状检测的具体方法为：本品根茎短粗，顶端有时残留茎基，根 数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并具须状细根，长10～20cm，直径0.3～1cm， 表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞 片状剥落，质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰 黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈放射状排列，气微，味微苦涩。
本发明所述的一种丹参药物的质量检测方法内容为：本品石细胞类圆形、类 三角形、类长方形或不规则形，也有延长呈纤维状，边缘不平整，直径14～17 μm，长可达257μm，孔沟明显，有的胞腔内含黄棕色物，木纤维多为纤维管胞， 长梭形，末端斜尖或钝圆，直径12～27μm，具缘纹孔点状，纹孔裂缝状或十字 形，孔沟稀疏，网纹导管和具缘纹孔导管直径11～60μm。
本发明所述的一种丹参药物的质量检测方法内容为：取本品粉末1-5g，加甲 醇10-50ml，超声处理10-40分钟，离心，取上清液作为供试品溶液，另取丹参 对照药材1-5g，同法制成对照药材溶液，照通则0502薄层色谱法试验，吸取上 述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油 醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外 光灯365nm下进行对比检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点或荧光斑点。
优选的，本发明所述薄层色谱法鉴别丹参的方法为：取本品粉末2g，加甲醇 20ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液，另取丹参对照药材 4g，同法制成对照药材溶液，照通则0502的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶 液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙 酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm 下进行对比检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点或荧光斑点。
本发明所述薄层色谱法鉴别丹参中丹参素的方法为：取本品粉末1-3g，加入 比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理10-40分钟，离心，取上清液 作为供试品溶液，再取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇 制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液，照0502 薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上， 加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾 干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视，供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
优选的，本发明所述用薄层色谱法鉴别丹参中丹参素的方法为：取本品粉末1.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，离心，取 上清液作为供试品溶液，再取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1三氯甲烷- 甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液， 照通则0502的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶 G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm， 取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视。供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
本发明所述水分检查方法为：照通则0832水分测定法第二法测定，不得过13.0％，所述总灰分检查方法为照通则2302测定不得过10.0％，所述浸出物检查 方法为照通则2201照水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定，不得少于35.0％。
本发明所述高效液相色谱法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量方法为：
主要包括以下步骤：
1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10：90：5的甲醇-水-醋酸为流动相A；以0.3％磷酸甲醇为流动相B；按下表中的规定 进行梯度洗脱；柱温为20-35℃；流速为每分钟0.5-3.0ml；检测波长为220-300nm； 理论板数按丹参素峰计算应不低于2000；
Figure BDA0002343565620000031
2)对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品适量，精密称定，加入比例为1： 1的三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于含丹参素0.0875mg)的溶液，作 为对照品溶液；
3)供试品溶液的制备：取本品粉末1.0g，精密称定，加入比例为1:1的三 氯甲烷-甲醇溶液25ml，摇匀，超声处理20min，离心，取上清液作为供试品溶 液；
4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-15μ1，注入色谱仪， 测定，即得；
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.21％。
优选的，本发明所述高效液相色谱法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量方 法为：
主要包括以下步骤：
1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇- 水-醋酸10：90：5为流动相A，以0.3％磷酸甲醇溶液为流动相B；采用如下表条件进 行梯度洗脱；柱温为20℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为280nm；理论板数按丹 参素峰计算应不低于2000；
Figure BDA0002343565620000032
2)对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品适量，精密称定，加加入比例为 1:1的三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液， 作为对照品溶液；
3)供试品溶液的制备：取本品粉末1.0g，精密称定，加入比例为1:1的三 氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液；
4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱 仪，测定，即得；
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.21％。
本发明具有以下优点：
1、本发明是为了更好的检测丹参药材的质量，在对《贵州省中药材、民族 药材质量标准》(2003年版)所载的丹参质量标准重新修订的基础上，制定了一种 丹参药物的检测方法，研究出斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，重现性好、 耐用性好的薄层鉴别与高效液相色谱测定丹参素的质量，有效的提高了丹参质量 的检测效率，从而保证临床疗效。
2、经方法学验证试验，结果表明本发明在不同薄层板、温度、湿度条件下， 色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，不同条件下均能得到较好的鉴别色 谱,验证试验表明重现性好、耐用性好。
3、本发明检测方法中，通过对薄层色谱法展开剂以及高效液相色谱条件的 优化，测定样品中的丹参素峰检测结果更准确，具有良好的重复性和耐受性。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的保护范围。
实施例1
丹参药物的质量检测方法：其检测内容为性状，用显微及薄层色谱法鉴别丹 参，用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素、水分、总灰分、浸出物，用高效液相色 谱法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量。
【性状】本品根茎短粗，顶端有时残留茎基，根数条，长圆柱形，有的分枝并具 须状细根，长10～20cm,直径0.3～1cm，表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱 纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落，质硬而脆，断面疏松，有裂 隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈放射 状排列，气微，味微苦涩。
【鉴别】
1)本品粉末红棕色，石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，也 有延长呈纤维状，边缘不平整，直径14～17μm，长可达257μm，孔沟明显，有 的胞腔内含黄棕色物，木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或钝圆，直径12～ 27μm，具缘纹孔点状，纹孔裂缝状或十字形，孔沟稀疏，网纹导管和具缘纹孔 导管直径11～60μm。
2)取本品粉末2.0g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作 为供试品溶液。另取丹参对照药材4.0g，同法制成对照药材溶液。照2015年版 中国药典第四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点 于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂， 展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视。供 试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
3)取本品粉末2.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处 理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。再取丹参素钠对照品适量，加入 比例为1:1的三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的 溶液，作为对照品溶液。照2015年版中国药典第四部通则0502薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1 的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以 及紫外光灯365nm下进行对比检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
【检查】
水分照通则0832水分测定法第二法测定，不得过13.0％。
总灰分照通则2302测定不得过10.0％。
浸出物照通则2201水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定，不得少于35.0％。
【含量测定】照高效液相色谱法测定,包括以下步骤：
1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为 10：90：5的甲醇-水-醋酸为流动相A，以0.3％磷酸甲醇溶液为流动相B；采用如下表 条件进行梯度洗脱；柱温为20℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为280nm，理论板 数按丹参素峰计算应不低于2000。
时间(单位：min) 流动相A(单位：V/V％) 流动相B(单位:V/V％)
0～4 10→41 90→59
4～18 41→80 59→20
18～21 80→21 20→79
21～25 21 79
2)对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1的三氯甲烷- 甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液。
3)供试品溶液的制备取本品粉末1.0g，精密称定，加入比例为1:1的三氯 甲烷-甲醇溶液25ml，摇匀，超声处理20min，离心，取上清液作为供试品溶液。
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.21％
饮片
【炮制】丹参除去杂质和残茎，洗净，润透，切厚片，干燥。
本品呈类圆形或椭圆形的厚片，外表皮棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹， 切面有裂隙或略平整而致密，有的呈角质样，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色， 有黄白色射状纹理，气微，味微苦涩。
【检査】水分不得过13.0％；杂质不得过2.0％；灰分不得超过10.0％。
【浸出物】不得少35％。
【鉴别】同药材
【性味与归经】苦，微寒。归心、肝经。
【功能与主治】活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛， 脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮痈肿痛。
【用法与用量】10～15g。
【注意】不宜与藜芦同用。
【贮藏】置干燥处。
实施例2
丹参药物的质量检测方法：其检测内容为性状、用显微及薄层色谱法鉴别丹 参、用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素、水分、总灰分、浸出物、高效液相色谱 法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量。
【性状】本品根茎短粗，顶端有时残留茎基，根数条，长圆柱形，有的分枝 并具须状细根，长10～20cm,直径0.3～1cm，表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具 纵皱纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落，质硬而脆，断面疏松， 有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈 放射状排列，气微，味微苦涩。
【鉴别】
1)本品粉末红棕色，石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，也 有延长呈纤维状，边缘不平整，直径14～17μm，长可达257μm，孔沟明显，有 的胞腔内含黄棕色物，木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或钝圆，直径12～ 27μm，具缘纹孔点状，纹孔裂缝状或十字形，孔沟稀疏，网纹导管和具缘纹孔 导管直径11～60μm。
2)取本品粉末1.0g，加甲醇15ml，超声处理25分钟，离心，取上清液作 为供试品溶液。另取丹参对照药材4g，同法制成对照药材溶液。照2015年版中 国药典第四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于 同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂， 展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视。供 试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
3)取本品粉末2.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液50ml，超声处 理25分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。再取丹参素钠对照品适量，加三 氯甲烷-甲醇(1:1)制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作 为对照品溶液。照2015年版中国药典第四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上 述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油 醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外 光灯365nm下进行对比检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点或荧光斑点。
【检查】
水分照通则0832水分测定法第二法测定，不得过13.0％。
总灰分照通则2302测定不得过10.0％。
浸出物照通则2201水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定，不得少于35.0％。
【含量测定】照高效液相色谱法测定，包括以下步骤：
1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为 10：90：5的甲醇-水-醋酸为流动相A，以0.3％磷酸甲醇溶液为流动相B；采用如下表 条件进行梯度洗脱；柱温为25℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为280nm，理论板 数按丹参素峰计算应不低于2000。
时间(单位：min) 流动相A(单位：V/V％) 流动相B(单位:V/V％)
0～4 10→41 90→59
4～18 41→80 59→20
18～21 80→21 20→79
21～25 21 79
2)对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1的三氯甲烷- 甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液。
3)供试品溶液的制备取本品粉末1.0g，精密称定，加入比例为1:1的三氯 甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理2min，离心，取上清液作为供试品溶液。
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.21％。
饮片
【炮制】丹参除去杂质和残茎，洗净，润透，切厚片，干燥。
本品呈类圆形或椭圆形的厚片，外表皮棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹， 切面有裂隙或略平整而致密，有的呈角质样，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色， 有黄白色射状纹理，气微，味微苦涩。
【检査】水分不得过13.0％；杂质不得过2.0％；灰分不得超过10.0％。
【浸出物】不得少35％。
【鉴别】同药材
【性味与归经】苦，微寒。归心、肝经。
【功能与主治】活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛， 脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮痈肿痛。
【用法与用量】10～15g。
【注意】不宜与藜芦同用。
【贮藏】置干燥处。
实施例3
丹参药物的质量检测方法：其检测内容为性状、用显微及薄层色谱法鉴别丹 参、用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素、水分、总灰分、浸出物、高效液相色谱 法测定丹参中的丹参素(C9H10O5)含量。
【性状】本品根茎短粗，顶端有时残留茎基，根数条，长圆柱形，有的分枝并具 须状细根，长10～20cm,直径0.3～1cm，表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱 纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落，质硬而脆，断面疏松，有裂 隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈放射 状排列，气微，味微苦涩。
【鉴别】
1)本品粉末红棕色，石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，也 有延长呈纤维状，边缘不平整，直径14～17μm，长可达257μm，孔沟明显，有 的胞腔内含黄棕色物，木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或钝圆，直径12～ 27μm，具缘纹孔点状，纹孔裂缝状或十字形，孔沟稀疏，网纹导管和具缘纹孔 导管直径11～60μm。
2)取本品粉末5g，加甲醇50ml，超声处理40分钟，离心，取上清液作为 供试品溶液。另取丹参对照药材4g，同法制成对照药材溶液。照2015年版中国 药典第四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同 一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展 开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
3)取本品粉末3.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液75ml，超声处 理40分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。再取丹参素钠对照品适量，加入 比例为1：1的三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的 溶液，作为对照品溶液。照2015年版中国药典第四部通则0502薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1 的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以 及紫外光灯365nm下进行对比检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
【检查】
水分照通则0832水分测定法第二法测定，不得过13.0％。
总灰分照通则2302测定不得过10.0％。
浸出物照通则2201水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定，不得少于35.0％。
【含量测定】照高效液相色谱法测定，包括以下步骤：
1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为 10：90：5的甲醇-水-醋酸为流动相A，以0.3％磷酸甲醇溶液为流动相B；采用如下表 条件进行梯度洗脱；柱温为35℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为280nm。理论板 数按丹参素峰计算应不低于2000。
时间(单位：min) 流动相A(单位：V/V％) 流动相B(单位:V/V％)
0～4 10→41 90→59
4～18 41→80 59→20
18～21 80→21 20→79
21～25 21 79
2)对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1的三氯甲烷- 甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液。
3)供试品溶液的制备取本品粉末1.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶 液25ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.21％。
饮片
【炮制】丹参除去杂质和残茎，洗净，润透，切厚片，干燥。
本品呈类圆形或椭圆形的厚片，外表皮棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹， 切面有裂隙或略平整而致密，有的呈角质样，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色， 有黄白色射状纹理，气微，味微苦涩。
【检査】水分不得过13.0％；杂质不得过2.0％；灰分不得超过10.0％。
【浸出物】不得少35％。
【鉴别】同药材
【性味与归经】苦，微寒。归心、肝经。
【功能与主治】活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛， 脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮痈肿痛。
【用法与用量】10～15g。
【注意】不宜与藜芦
实验例：
为了证明本发明涉及的检测方法的科学性与合现性，进行了以下方法学实验 研究：
1.性状：本品根茎呈圆柱形，表面棕褐色，具多数须根，上有1～3个丛生 的鳞茎，呈卵状圆柱形，须根棕黄色或棕褐色，细圆柱形，表面皱缩不平，质脆， 易折断，气强烈、特异，味淡。
2.成分：含丹参素(Danshensu)
3.鉴别XSP-8CC显微镜观察
3.1本品粉末红棕色。石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，也 有延长呈纤维状，边缘不平整，直径14～17μm，长可达257μm，孔沟明显，有 的胞腔内含黄μm，具缘纹孔点状，纹孔裂缝状或十字形，孔沟稀疏。网纹导管 和具缘纹孔导管直径11～60μm。
3.2鉴别方法为：本品棕色物。木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或 钝圆，直径12～27取本品粉末2g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，离心，取 上清液作为供试品溶液。另取丹参对照药材4g，同法制成对照药材溶液。照2015 年版中国药典第四部通则0502薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分 别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展 开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯(365nm)下进行对比检 视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光 斑点。
3.2.1试验方法、条件及重现性
方法来源：结合贵州景峰注射剂有限公司丹参研究的实际情况而制定了本检 测方法。
样品来源：大方20170401、沿河20170402、册亨20170403、独山20170404、 三穗20170405、黎平20170406、玉屏20170407、黔西20170408、长顺20170409、 龙里20170410。
对照药材来源：经贵阳中医学院药学院的药材植物鉴定后，自制的丹参对照 药材。
供试品溶液制备：取本品粉末2.0g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，离心， 取上清液作为供试品溶液。
对照药材溶液制备：丹参对照药材4g，同法制成对照药材溶液。
薄层板：硅胶G(规格：200×100mm)。
点样量：供试品溶液和对照药材溶液各10μ1。
展开剂：石油醚-乙酸乙酯-甲醇(4:8:1)
展距：8cm
显色及检视：喷以10％硫酸乙醇溶液，置紫外光(365nm)下检视。
结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 或荧光斑点。
用上述方法处理10批次的样品，并按规定的方法展开，结果见表1。
表1：重现性试验结果表
序号 批号 结果
1 大方20170401 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
2 沿河20170402 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
3 册亨20170403 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
4 独山20170404 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
5 三穗20170405 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
6 黎平20170406 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
7 玉屏20170407 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
8 黔西20170408 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
9 长顺20170409 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
10 龙里20170410 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
3.2.2耐用性
3.2.2.1不同薄层板的比较
比较了青岛海洋化工厂分厂硅胶板商品板和自制含0.4％羧甲基纤维素 钠为黏合剂的硅胶G薄层板(各10批次的样品)，结果见表2。
表2：不同薄层板耐用性结果表
Figure BDA0002343565620000111
Figure BDA0002343565620000121
结果：斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两种薄层板均能得到较好的鉴 别色谱。
3.2.2.2不同温度的比较
比较了低温(5℃)和室温(25℃)环境条件下自制板展开效果，结果见表3。
表3：低温(5℃)室温(25℃)环境条件下自制板展开效果表
Figure BDA0002343565620000122
结果：斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴 别色谱。
3.2.2.3不同湿度的比较
比较了低湿度(32％)和高湿度(72％)环境下自制板展开效果，结果见表4。
表4：低湿度(32％)和高湿度(72％)环境下自制板展开效果表
Figure BDA0002343565620000123
Figure BDA0002343565620000131
结果：斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴 别色谱。
经上述方法学验证试验，结果表明在不同薄层板、温度、湿度条件下，色谱 图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，不同条件下均能得到较好的鉴别色谱。 验证试验表明重现性好、耐用性好。
3.3鉴别方法为：取本品粉末1.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液 25ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。再取丹参素钠对照 品适量，加比例为1：1的三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素 0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液。照2015年版中国药典第四部通则0502薄 层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加 入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干， 分别在日光以及紫外光灯(365nm)下进行对比检视。供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
3.3.1试验方法、条件及重现性
方法来源：结合贵州景峰注射剂有限公司丹参研究的实际情况而制定了本方 法。
样品来源：大方20170401、沿河20170402、册亨20170403、独山20170404、 三穗20170405、黎平20170406、玉屏20170407、黔西20170408、长顺20170409、 龙里20170410。
对照品来源：丹参素对照品南京森贝伽生物科技有限公司，批号：201701-201901含量以98％计。
供试品溶液制备：取本品粉末1.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液 25ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。
对照品溶液制备：取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲 醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液。
薄层板：硅胶G(规格：200×200mm)。
点样量：供试品溶液和对照品溶液各10μ1。
展开剂：石油醚-乙酸乙酯-甲醇(4:8:1)
展距：8cm
显色及检视：喷以0.2％三氯化铁乙醇溶液，置紫外光(365nm)下检视。结果： 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
用上述方法处理10批次的样品，并按规定的方法展开，结果见表5。
表5：重现性试验结果表
序号 批号 结果
1 大方20170401 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
2 沿河20170402 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
3 册亨20170403 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
4 独山20170404 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
5 三穗20170405 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
6 黎平20170406 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
7 玉屏20170407 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
8 黔西20170408 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
9 长顺20170409 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
10 龙里20170410 斑点清新，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好
3.3.2.耐用性考察
3.3.2.1不同薄层板的比较
比较了青岛海洋化工厂分厂硅胶板商品板和自制含0.4％羧甲基纤维素钠为 黏合剂的硅胶G薄层板，结果见表6。
表6：不同薄层板耐用性结果表
Figure BDA0002343565620000141
Figure BDA0002343565620000151
结果斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两种薄层板均能得到较好的鉴别 色谱。
3.3.2.2不同温度的比较
比较了低温(5℃)和室温(25℃)环境条件下自制板展开效果，结果见表7。
表7：低温(5℃)室温(25℃)环境条件下自制板展开效果表
Figure BDA0002343565620000152
Figure BDA0002343565620000161
结果斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴别 色谱。
3.3.2.3不同湿度的比较
比较了低湿度(32％)和高湿度(72％)环境下自制板展开效果，结果见表8。
表8：低湿度(32％)和高湿度(72％)环境下自制板展开效果表
Figure BDA0002343565620000162
Figure BDA0002343565620000171
结果：斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴 别色谱。
经上述方法学验证试验，结果表明在不同薄层板、温度、湿度条件下，色谱 图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，不同条件下均能得到较好的鉴别色谱， 验证试验表明重现性好、耐用性好。
4.【检查】
依据《中国药典》相关内容，结合本品特性，研究制定了相应的检查项目。
4.1水分
照水分测定法(《中国药典》2015版四部通则0832第二法)测定。实测十 个不同产地样品各1批，平均值9.7％，最低测定值为8.9％，最高测定值为10.5％， 以平均测定值的130％设限，为12.6％，故暂定本品水分不得过13.0％。
表9水分结果表
Figure BDA0002343565620000172
4.2总灰分
照总灰分测定法(《中国药典》2015版四部通则2302)测定。实测十个不 同产地样品各1批，平均值7.4％，最低测定值为6.7％，最高测定值为8.9％，以 平均测定值的130％设限，为9.6％。故暂定本品总灰分不得过10.0％。
表10总灰分结果表
Figure BDA0002343565620000181
4.3重金属及有害元素
4.3.1照铅、镉、砷、汞、铜测定法(通则2321原子吸收分光光度法)， 根据我公司使用的检验仪器设备及物料的性质，研究起草出该样品的试验方法：
仪器及试剂：原子吸收分光光度计(普析TAS990)、微波消解萃取合成工作 站(新仪MDS-10)、循环水冷却器(LabTech SH150-900)、无油空气压缩机(普 析AC-1Y)。
对照品溶液的制备：依照《中国药典》2015年版四部2321铅、镉、砷、汞、 铜测定法配制，如下表11。
表11对照品溶液
Figure BDA0002343565620000182
Figure BDA0002343565620000191
供试品升温消解程序：见表12。
表12供试品消解程序
N(编号) T(℃) t(温度保持时间) W(功率)N(样品数)
1 130 10min (n+3)*100瓦
2 165 5min (n+3)*100瓦
3 195 20min (n+3)*100瓦
供试品的制备：铅：取供试品粗粉0.5g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐 内，加硝酸10ml，过氧化氢1ml,混匀，浸泡过夜，盖好内盖，旋紧外套，置新 仪MDS-10微波消解炉内，进行消解(按仪器规定的消解程序操作)。消解完全后， 取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽，并继续缓缓浓缩至2～3ml， 放冷，用水转入25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇勻，即得。同法同时制备试剂 空白溶液。
镉：同铅测定项下供试品溶液的制备。
铜：同铅测定项下供试品溶液的制备。
汞：供试品粗粉0.5g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸10ml， 过氧化氢1ml，混匀，浸泡过夜，盖好内盖，旋紧外套，置新仪MDS-10微波消解 炉内进行消解(按仪器规定的消解程序操作)。消解完全后，取消解内罐置电热 板上，于120℃缓缓加热至红棕色蒸气挥尽，并继续浓缩至2～3ml，放冷，加20％ 硫酸溶液2ml、5％高锰酸钾溶液0.5ml，摇匀，滴加5％盐酸羟胺溶液至紫红色恰 消失，转入10ml量瓶中，用水洗涤容器，洗液合并于量瓶中，并稀释至刻度， 摇匀，必要时离心，取上清液，即得。同法同时制备试剂空白溶液。
砷：同铅测定项下供试品溶液的制备。
测定方法：铅(石墨炉法)精密量取空白溶液与供试品溶液各lml，精密加 含1％磷酸二氢铵和0.2％硝酸镁的溶液0.5ml，混匀，精密吸取10～20μl，照标 准曲线的制备项下方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中铅(Pb)的 含量，计算，即得。
镉(石墨炉法)同铅测定方法进行测定。
铜(火焰法)精密吸取空白溶液与供试品溶液适量，照标准曲线的制备项下 的方法测定。从标准曲线上读出供试品溶液中铜(Cu)的含量，计算，即得。
汞(冷蒸气吸收法)精密吸取空白溶液与供试品溶液适量，照标准曲线制备 项下的方法测定。从标准曲线上读出供试品溶液中汞(Hg)的含量，计算，即得。
砷(氢化物法)精密吸取空白溶液与供试品溶液各10ml，照标准曲线的制 备项下，自“加25％碘化钾溶液(临用前配制)lml”起，依法测定。从标准曲线 上读出供试品溶液中砷(As)的含量，计算，即得。
4.3.2方法确认(回收试验)
4.3.2.1采用加样回收法。取已知铅含量的样品(批号20170401，含量：C 铅＝2.0mg/Kg)6份，每份精密称取0.25g，分别加入铅标准液(1μg/ml)0.5ml 按照供试品制备方法制备。在上述检测方法条件下测定，测得其平均回收率为 101.9％，RSD％值为4.6％，结果见表13。
Figure BDA0002343565620000201
表13加样回收试验结果表
Figure BDA0002343565620000202
4.3.2.2采用加样回收法。取已知镉含量的样品(批号20170401，含量：C 镉＝0.2mg/Kg)6份，每份精密称取0.25g，分别加入镉标准液(1μg/ml)0.05ml 按照供试品制备方法制备。在上述检测方法条件下测定，测得其平均回收率为 102.6％，RSD％值为3.9％，结果见表14。
Figure BDA0002343565620000203
表14加样回收试验结果表
Figure BDA0002343565620000204
Figure BDA0002343565620000211
4.3.2.3采用加样回收法。取已知铜含量的样品(批号20170401，含量：C 铜＝15mg/Kg)6份，每份精密称取0.25g，分别加入铜标准液(1μg/ml)3.5ml 按照供试品制备方法制备。在上述检测方法条件下测定，测得其平均回收率为 99.3％，RSD％值为2.5％，结果见表15。
Figure BDA0002343565620000212
表15加样回收试验结果表
Figure BDA0002343565620000213
4.3.2.4采用加样回收法。取已知汞含量的样品(批号20170401，含量：C 汞未检出)6份，每份精密称取0.25g，分别加入汞标准液(1μg/ml)0.1ml按 照供试品制备方法制备。在上述检测方法条件下测定，测得其平均回收率为 101.2％，RSD％值为1.3％，结果见表16。
Figure BDA0002343565620000214
表16加样回收试验结果表
Figure BDA0002343565620000215
Figure BDA0002343565620000221
4.3.2.5采用加样回收法。取已知砷含量的样品(批号20170401，含量：C 砷＝1mg/Kg)检出)6份，每份精密称取0.25g，分别加入砷标准液(1μg/ml) 0.25ml按照供试品制备方法制备。在上述检测方法条件下测定，测得其平均回收 率为104.0％，RSD％值为2.6％，结果见表6-9和表17。
Figure BDA0002343565620000222
表17加样回收试验结果表
Figure BDA0002343565620000223
4.3.3实测十个不同产地供试品各1批，铅平均值为1.8mg/kg、镉平均值为0.12mg/kg、、砷平均值为0.3mg/kg、汞未检出、铜平均值为14.5mg/kg(见表 18)；结果重金属及有害元素的量均远远低于药典要求，故未列入正文。
表18重金厲及有害元素铅、镉、砷、汞、铜测定结果表
Figure BDA0002343565620000224
Figure BDA0002343565620000231
5.【浸出物】
5.1水溶性浸出物照水溶性浸出物测定法(通则2201)项下的冷浸法测定， 实测十个不同产地样品各1批，平均值50.31％(见表19)，最低测定值为46.17％， 最高测定值为54.38％，以平均测定值的70％设限，为35.21％。故暂定本品水溶性 浸出物不得少于35.0％。
表19水溶性浸出物结果表
Figure BDA0002343565620000232
6.【含量测定】
为了有效地控制药材的质量，选取有效成分丹参素作为丹参含量测定指标， 其测定方法参照“高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参素的测定”，并结合丹 参的实际研究情况，制定了该含量的质量标准，该标准列入正文。
6.1仪器与试药
高效液相色谱仪：安捷伦1260；色谱柱：WondaSil C18 Superb 5μm 250 ×4.6mm
电子天平：(SHIMADZU:AUW120D；上海越平：FA1104)；HS-10260D型超声 波清洗机(功率250W，频率30KHZ)；
丹参素钠对照品(供含量测定用)：为南京森贝伽生物科技有限公司，批号：201701-201901含量以98％计
甲醇为色谱纯和分析纯；水为超纯水；其它试剂为分析纯。
6.2方法考察试验
6.2.1对照品溶液的制备：
精密称取丹参素钠(含量以98.0％计)对照品12.8mg，置100ml棕色量瓶中， 用三氯甲烷-甲醇(1:1)溶解制成每1ml含0.100mg的溶液，即得。
6.2.2供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约1.0g，精密称定，置具塞棕色瓶中，加入比例为 1:1的三氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理(功率140W，频率42kHz)20分钟，离 心，取上清液作为供试品溶液。
6.2.3色谱条件与系统适用性试验
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-醋酸(10:90：5)为流动相A,以0.3％磷酸甲醇的混合液为流动相B；采用如下表条件进 行梯度洗脱；柱温为20℃；流速为每分钟1.0ml,；检测波长为281nm。理论板数按丹 参素峰计算应不低于2000。
时间(单位：min) 流动相A(单位：V/V％) 流动相B(单位:V/V％)
0～4 10→41 90→59
4～18 41→80 59→20
18～21 80→21 20→79
21～25 21 79
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测 定，即得。
6.2.4线性试验
取丹参素钠对照品溶液(19.5755μg/ml)。分别精密量取4、8、16、20、30μl， 注入色谱仪，按正文色谱条件试验，以峰面积为纵坐标(Y)，进样量为横坐标 (X)绘制标准曲线，回归方程为：y＝1077.9x+3.2257，相关系数R2＝1，表明丹 参素在0.078302～0.587265ug范围内线性关系良好，见表20。
表20丹参素线性试验结果
编号 2 3 4 5 6
进样量(μg) 0.078302 0.156604 0.313208 0.39151 0.587265
峰面积(A) 85.561 174.046 341.631 425.063 635.673
6.2.5仪器精密度试验
取6.2.1项下制备的对照品溶液，在上述色谱条件下，重复进样6次，测定 丹参素峰面积，计算RSD％(丹参素)值为0.41％，表明仪器精密度良好，测定结 果见表21。
表21仪器精密度试验结果
编号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD％
面积(A) 211.591 212.217 212.525 210.202 212.399 212.187 211.8535 0.41％
6.2.6重复性试验
精密称取同一批样品(批号20170403)6份，按上述方法测定样品中丹参素 的含量，平均含量为0.127％，RSD值0.61％，表明此丹参素的测定方法具有良好 的重复性；结果见表22。
表22重复性试验结果
Figure BDA0002343565620000251
6.2.7稳定性试验
按6.2.2项下方法制备供试品溶液(批号:20170403)一份，室温放置，按 拟定色谱条件下于0，2，4，6，8，10h分别进样，测定峰面积。计算RSD％为0.79％， 表明丹参素在10h内相对稳定。稳定性试验结果见表23。
表23稳定性试验结果
编号 0h 2h 4h 6h 8h 10h 平均值 RSD％
峰面积(A) 270.106 269.268 268.441 270.090 268.769 270.995 269.612 0.36％
6.2.8回收试验
采用加样回收法。取已知含量的样品(批号20170403，含量：1.27mg/·g) 6份，每份精密称取0.5g，分别加入丹参素钠对照品溶液(0.0936mg·ml-1)5ml， 按照6.2.2项下制备方法制备。在上述色谱条件下测定，测得其平均回收率为 97.9，RSD％值为0.8％，结果见表24。
Figure BDA0002343565620000252
表24加样回收试验结果表
Figure BDA0002343565620000253
Figure BDA0002343565620000261
6.2.9样品含量测定
按正文收载的方法对十批样品进行含量测定，结果见表25。
表25十批样品(丹参素含量)
Figure BDA0002343565620000262
结论：从上表数据可以得出丹参中含丹参素(C9H10O5)平均值为0.315％。以 平均值的70％设限，暂定本品含丹参素不得少于0.20％为含量测定标准。
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.20％；或0.70％(用作生 产参芎葡萄糖注射液)
饮片
【炮制】丹参除去杂质和残茎，洗净，润透，切厚片，干燥。
本品呈类圆形或椭圆形的厚片，外表皮棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹， 切面有裂隙或略平整而致密，有的呈角质样，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色， 有黄白色射状纹理，气微，味微苦涩。
【检査】水分不得过13.0％；杂质不得过2.0％；灰分不得超过10.0％。
【浸出物】不得少35％。
【鉴别】同药材
【性味与归经】苦，微寒。归心、肝经。
【功能与主治】活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛， 脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮痈肿痛。
【用法与用量】10～15g。
【注意】不宜与藜芦同用。
【贮藏】置干燥处。
表26十批丹参饮片水分
Figure BDA0002343565620000263
Figure BDA0002343565620000271
总灰分不得过10.0％(通则2302)。
表27十批丹参饮片总灰分
Figure BDA0002343565620000272
杂质不得过2％(通则2302)
表28十批丹参饮片杂质
Figure BDA0002343565620000273
Figure BDA0002343565620000281
【浸出物】水溶性浸出物照水溶性浸出物测定法(通则2201)项下的冷浸法 测定，不得少于35.0％。
表29十批丹参饮片水溶性浸出物
Figure BDA0002343565620000282
【含量测定】同药材。
照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10：90：5甲醇-水-醋酸为流动相A，以0.3％磷酸甲醇的混合液为流动相B；采用如下表条 件进行梯度洗脱；柱温为20-35℃；流速为每分钟0.5-3.0ml；检测波长为280nm。理 论板数按丹参素峰计算应不低于2000。
时间(单位：min) 流动相A(单位：V/V％) 流动相B(单位:V/V％)
0～4 10→41 90→59
4～18 41→80 59→20
18～21 80→21 20→79
21～25 21 79
对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，精密称定，加入1:1三氯甲烷- 甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取本品粉末1.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液 25ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本品按干燥品计算，含丹参素(C9H10O5)不得少于0.21％。
按正文收载的方法对十批饮片样品进行含量测定，结果见表30。
表30十批丹参饮片含量测定
Figure BDA0002343565620000291
【性味与归经】苦，微寒。归心、肝经。
参照《中国药典》(2015年版)丹参项下拟定。
【功能与主治】活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛， 脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮痈肿痛。
参照《中国药典》(2015年版)丹参项下拟定。
【用法与用量】10～15g。
参照《中国药典》(2015年版)丹参项下拟定。
【注意】不宜与藜芦同用。
【贮藏】置干燥处。
参照《中国药典》(2015年版)丹参项下拟定。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而 言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进， 均属于本发明要求保护的范围。

Claims (3)

1.一种丹参药物的质量检测方法，其特征在于：所述检测方法具体为用薄层色谱法鉴别丹参，用薄层色谱法鉴别丹参中的丹参素；
所述薄层色谱法鉴别丹参的具体方法为：取本品粉末1-5g，加甲醇10-50ml，超声处理10-40分钟，离心，取上清液作为供试品溶液，另取丹参对照药材1-5g，同法制成对照药材溶液，照通则0502薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；
所述薄层色谱法鉴别丹参中丹参素的方法为：取本品粉末1-3g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理10-40分钟，离心，取上清液作为供试品溶液，再取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液，照0502薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的丹参药物的质量检测方法，其特征在于：所述薄层色谱法鉴别丹参的具体方法为取本品粉末2g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液，另取丹参对照药材4g，同法制成对照药材溶液，照通则0502的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
3.根据权利要求1所述的丹参药物的质量检测方法，其特征在于：所述薄层色谱法鉴别丹参中丹参素的方法为取本品粉末1.0g，加入比例为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液25ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液，再取丹参素钠对照品适量，加入比例为1:1三氯甲烷-甲醇制成每1ml含0.1mg(相当于丹参素0.0875mg)的溶液，作为对照品溶液，照通则0502的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，加入比例为4:8:1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇作为展开剂，展开约8cm，取出，晾干，分别在日光以及紫外光灯365nm下进行对比检视， 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
CN201911385685.5A 2019-12-29 2019-12-29 一种丹参药物的质量检测方法 Active CN111089919B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911385685.5A CN111089919B (zh) 2019-12-29 2019-12-29 一种丹参药物的质量检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911385685.5A CN111089919B (zh) 2019-12-29 2019-12-29 一种丹参药物的质量检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111089919A CN111089919A (zh) 2020-05-01
CN111089919B true CN111089919B (zh) 2022-09-06

Family

ID=70397554

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911385685.5A Active CN111089919B (zh) 2019-12-29 2019-12-29 一种丹参药物的质量检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111089919B (zh)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5121038B2 (ja) * 2000-12-22 2013-01-16 天士力製薬集団股分有限公司 狭心症のための薬草調合物、該薬草調合物を調合する方法、及びその使用法
US20050037094A1 (en) * 2003-07-31 2005-02-17 Xijun Yan Composition for heart disease, its active ingredients, method to prepare same and uses thereof
CN101156893B (zh) * 2005-02-07 2012-02-01 贵阳云岩西创药物科技开发有限公司 杏丹注射剂的检测方法
CN103940929B (zh) * 2014-05-05 2015-11-04 山东丹红制药有限公司 一种治疗心脑血管疾病的中药注射液的检测方法
CN108562683B (zh) * 2018-04-18 2020-06-09 贵州景诚制药有限公司 一种韭根药物质量检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111089919A (zh) 2020-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108562683B (zh) 一种韭根药物质量检测方法
CN112587642B (zh) 一种保元药物组合物的制备方法及其检测方法
CN107991425B (zh) 一种治疗跌打损伤的中药组合物的检测方法
CN112773831A (zh) 一种芍药甘草药物组合物的制备方法及其检测方法
CN113390985B (zh) 一种麻黄汤物质基准及其制备方法和质量检测方法
CN111077242A (zh) 一种中药方剂大承气汤的高效液相色谱分析方法
CN111122731B (zh) 一种赤芍药物质量检测方法
CN111089919B (zh) 一种丹参药物的质量检测方法
CN111122735B (zh) 一种川芎药物质量检测方法
CN112798701A (zh) 一种当归补血药物组合物的制备方法及其检测方法
CN110850022A (zh) 一种用于双冬胶囊质量的检测方法
CN108303491B (zh) 一种香樟根药物质量检测方法
CN111122734B (zh) 一种红花药物质量检测方法
CN114674947B (zh) 一种快速全面控制半夏厚朴汤标准汤剂质量的检测方法
CN115963192A (zh) 一种筋骨痛消丸的质量控制方法
CN112730724B (zh) 一种白前配方颗粒的薄层鉴别方法
CN112444590B (zh) 一种五倍子药材的uplc指纹图谱的构建方法、通过该方法构建的指纹图谱及其应用
CN113156010A (zh) 一种厚朴温中汤物质基准的质量控制方法
CN115201398B (zh) 一种搜山虎药材及其提取物与制剂的质量检测方法
CN111122732A (zh) 一种功劳木药材质量检测方法
CN111024877A (zh) 益肾壮骨丸中的中药成分检测方法
CN108627582A (zh) 一种用于止痛的大青木香药物
CN110031401B (zh) 一种三七粉的快速鉴别方法
CN114236034B (zh) 一种飞龙掌血药材的检测方法
CN113484428B (zh) 桃核承气汤特征图谱的构建方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: A Quality Testing Method for Danshen Drugs

Effective date of registration: 20231122

Granted publication date: 20220906

Pledgee: Qingdao Qishun Investment Management Co.,Ltd.

Pledgor: GUIZHOU JINGFENG INJECTION Co.,Ltd.

Registration number: Y2023980066820